RU2399659C1 - Штамм дрожжей rhodosporidium diobovatum - продуцент каротиноидов - Google Patents

Штамм дрожжей rhodosporidium diobovatum - продуцент каротиноидов Download PDF

Info

Publication number
RU2399659C1
RU2399659C1 RU2009126300/10A RU2009126300A RU2399659C1 RU 2399659 C1 RU2399659 C1 RU 2399659C1 RU 2009126300/10 A RU2009126300/10 A RU 2009126300/10A RU 2009126300 A RU2009126300 A RU 2009126300A RU 2399659 C1 RU2399659 C1 RU 2399659C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
carotinoids
strain
carotene
producer
carotenoids
Prior art date
Application number
RU2009126300/10A
Other languages
English (en)
Inventor
Михаил Михайлович Вустин (RU)
Михаил Михайлович Вустин
Марина Александровна Великая (RU)
Марина Александровна Великая
Сергей Павлович Синеокий (RU)
Сергей Павлович Синеокий
Original Assignee
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП ГосНИИгенетика)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП ГосНИИгенетика) filed Critical Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов" (ФГУП ГосНИИгенетика)
Priority to RU2009126300/10A priority Critical patent/RU2399659C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2399659C1 publication Critical patent/RU2399659C1/ru

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к биотехнологии. Получают штамм Rhodosporidium diobovatum ВКПМ Y-3158 - продуцент каротиноидов с высоким содержанием β-каротина путем многоступенчатой селекции с использованием мутагена нитрозогуанидина. Культивируют на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли. Получают биомассу, содержащую каротиноиды в количестве 3000-4000 мкг/г сухой биомассы, в том числе β-каротина 2500-3500 мкг/г, т.е. до 90%. Изобретение обеспечивает получение каротиноидов с высоким содержанием β-каротина.

Description

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способам производства каротиноидов, и касается нового штамма дрожжей, используемого для получения кормовой биомассы, обогащенной каротиноидами и применяемой в животноводстве, а также для получения чистых каротиноидов, применяемых в пищевой промышленности и медицине.
Среди дрожжей известны различные продуценты каротиноидов, отличающиеся как по уровню накопления и составу пигментного комплекса, так и по условиям культивирования и по видам используемого сырья.
Штамм дрожжей Rhodotorula glutinis 214 (SU 531844) выращивают на минеральной среде с использованием в качестве источника углерода углеводородов нефти (1,0-1,5 об.%) или углеводов (2-4 об.%). При этом удельная продуктивность дрожжей по каратиноидам составляет около 800 мкг/г сухой биомассы на среде с углеводородами нефти и около 980 мкг/г сухой биомассы на углеводной среде. Недостатком данного штамма является невысокий уровень накопления каротиноидов.
Штамм дрожжей Sporobolomyces pararosens Т (SU 391174), растущий на среде гидролизат верхового торфа, на 5-е сутки культивирования накапливает до 3200 мкг каротиноидов с 1 литра культуральной среды. Недостатками данного штамма являются невысокий уровень накопления каротиноидов и большая продолжительность процесса культивирования.
Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является штамм дрожжей Rhodosporidium diobovatum (RU 2103351), который за 72 часа культивирования на минеральной среде синтезирует каротиноиды в количестве до 2000 мкг/г сухой биомассы, 50% из которых составляет β-каротин - провитамин А, являющийся наиболее ценным для использования в животноводстве в качестве фактора роста. Недостатками данного штамма являются его невысокая удельная продуктивность по каротиноидам и недостаточное содержание β-каротина в биомассе.
Технической задачей заявляемого изобретения является получение штамма дрожжей Rhodosporidium diabovatum, продуцирующего каротиноиды с высоким содержанием β-каротина.
Поставленная задача решена путем создания штамма дрожжей Rhodosporidium diabovatum ВКПМ У - 3158, способного продуцировать каротиноиды в количестве 3000-4000 мкг/г сухой биомассы, в том числе β-каротина 2500-3600 мкг/г, т.е. до 90%.
Заявляемый штамм получен из коллекционного штамма Rhodosporidium diobovatum ВКПМ Y-305 путем обработки его нитрозогуанидином (НГ) и последующей многоступенчатой селекции (пять циклов), при которой отбор мутантов осуществлялся визуально по интенсивности окраски.
Штамм депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов ВКПМ) под регистрационным номером ВКПМ Y - 3158.
Культурально-морфологические признаки.
На жидкой среде мальтэкстракт (Difco) 3-дневная культура при 22°С имеет клетки от овальных до сильно вытянутых размером (1,0-6,0)×(2,0-9,0) мкм. Часто встречается псевдомицелий. Культура способна образовывать небольшой осадок.
На агаризованной среде мальтэкстракт (Difco) после семи дней выращивания при 25°С клетки морфологически сходны с клетками на жидком мальтэкстракте. Колонии ярко-желтого цвета с шероховатой поверхностью и неровным краем.
На среде кукурузный агар (Difco) культура через 7 суток выращивания при 25°С способна образовывать истинный мицелий.
Физиолого-биохимические признаки.
На среде YNB (Difco) культура ассимилирует галактозу, сахарозу, мальтозу, целлобиозу, трегалозу, рафинозу, D-ксилозу, L-арабинозу, D-рибозу, рибитол, янтарную кислоту, лимонную кислоту, мелицитозу, α-метил-d-глюкозид, арбутин, крахмал (медленно). Не ассимилирует лактозу, L-рамнозу, эритритол, D-манитол, инозитол, мелибиозу. Утилизирует аммонийный нитратный азот. Для роста не требует витаминов. На среде с 50%-ной глюкозой рост отсутствует. Крахмал не накапливает. Мочевину разлагает. Брожение отсутствует. При температуре 35°С не растет. Оптимальная температура роста 29-30°С. Диапазон рН для роста 2,5-7,0. Оптимум рН 5,0-5,5. Аэроб.
Штамм непатогенен.
Биотехнологическая характеристика.
Штамм способен продуцировать каротиноидов до 4,0 мг/г сухой биомассы, в том числе β-каротина до 3,6 м/г.
В ферментере на глюкозе в качестве единственного источника углерода штамм способен накапливать более 100 г сухой биомассы с 1 л питательной среды.
Штамм хранят в 10% глицерине при - 70°С в кельвинаторе или парах жидкого азота без потери жизнеспособности в течение 10 лет.
Пример 1. Культивирование штамма Rhodosporidium diobovatum ВКПМ Y - 3158 в колбах.
Штамм дрожжей культивируют в колбах на 750 мл при температуре 28°С при 250 об/мин на питательной среде следующего состава (мас.%): глюкоза - 10,0; дрожжевой экстракт - 0,6; пептон - 0,5; KH2PO4 - 0,1; MgSO4 - 0,05, NaCl - 0,01; CaCl2 - 0,01; вода - остальное. Время выращивания 72 ч.
Удельное суммарное содержание каротиноидов определяют спектрофотометрическим методом (J. Gen. Microbiol. 1979. V.115. P.173-183), для определения процентного соотношения каротиноидов в смеси используют жидкостную хроматографическую систему HPLC (колонка С-18), применяя в качестве стандарта чистый кристаллический препарат β-каротина фирмы "Sigma".
Удельная продуктивность каротиноидов составила 4000 мкг/г сухой биомассы, в том числе 87,5% β-каротина (3500 мкг/г сухой биомассы).
Пример 2. Культивирование штамма Rhodosporidium diobovatum ВКПМ Y - 3158 в ферментере.
Штамм дрожжей выращивали в 3-литровом ферментере КФ 103/4 (Россия) на питательной среде вышеописанного состава. Условия культивирования: температура культивирования - 28°С, растворимый кислород pO2 40-60%, рН 5,0, подпитка 50% глюкозой весь процесс. Время выращивания 72 ч.
Содержание каротиноидов в биомассе составило 3850 мкг/г сухой биомассы, в том числе β-каротина 3250 мкг/г сухой биомассы (84,4%). Уровень сухой биомассы составил 110 г/л питательной среды. Следовательно, съем с литра культуральной жидкости составил 0,42 г суммарных каротиноидов, в том числе 0,36 г β-каротина.
Таким образом, заявляемый штамм имеет высокую удельную продуктивность по каротиноидам, среди которых β-каротин составляет около 90%. Важной характеристикой штамма является также его способность хорошо утилизировать спирты, органические кислоты и некоторые пентозы, что позволяет выращивать его на таких дешевых субстратах как послеспиртовая барда и ферментолизат растительных отходов.

Claims (1)

  1. Штамм дрожжей Rhodosporidium diobovatum ВКПМ Y-3158 - продуцент каротиноидов.
RU2009126300/10A 2009-07-10 2009-07-10 Штамм дрожжей rhodosporidium diobovatum - продуцент каротиноидов RU2399659C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2009126300/10A RU2399659C1 (ru) 2009-07-10 2009-07-10 Штамм дрожжей rhodosporidium diobovatum - продуцент каротиноидов

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2009126300/10A RU2399659C1 (ru) 2009-07-10 2009-07-10 Штамм дрожжей rhodosporidium diobovatum - продуцент каротиноидов

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2399659C1 true RU2399659C1 (ru) 2010-09-20

Family

ID=42939148

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2009126300/10A RU2399659C1 (ru) 2009-07-10 2009-07-10 Штамм дрожжей rhodosporidium diobovatum - продуцент каротиноидов

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2399659C1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2662964C1 (ru) * 2017-07-24 2018-07-31 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Горский государственный аграрный университет" Штамм дрожжей rhodotorula mucilaginosa вкпм y-4282- продуцент каротиноидов

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2662964C1 (ru) * 2017-07-24 2018-07-31 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Горский государственный аграрный университет" Штамм дрожжей rhodotorula mucilaginosa вкпм y-4282- продуцент каротиноидов

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102782145B (zh) 制备含有月桂酸的油脂的方法
DE2161164C3 (de) Verfahren zur mikrobiologischen Erzeugung von Proteinmassen und Verwendung des proteinhaltigen Produkts
Arafiles et al. Cultural optimization of thraustochytrids for biomass and fatty acid production
EP0051637A1 (en) Liquid culturing of sporulating, ectomycorrhizal fungi
CN116964189A (zh) 新型的裂殖壶菌属菌株和使用其的多不饱和脂肪酸生产方法
FR2531100A1 (fr) Procede de preparation d'inosine et/ou de guanosine
US11560542B2 (en) Process for producing phycocyanin-rich biomass via URA culturing
RU2399659C1 (ru) Штамм дрожжей rhodosporidium diobovatum - продуцент каротиноидов
CN1067725C (zh) 一种利用微生物发酵生产α、ω-长链二元酸的方法
RU2754686C1 (ru) Новые штаммы микроводорослей рода Thraustochytrium и способ получения полиненасыщенных жирных кислот с их использованием
Urakami et al. Production of ubiquinone and bacteriochlorophyll a by Rhodobacter sphaeroides and Rhodobacter sulfidophilus
RU2406757C1 (ru) Штамм дрожжей rhodosporidium diobovatum - продуцент каротиноидов
Kosaric et al. Submerged culture growth of edible mushrooms on waste sulphite liquors
KR100271137B1 (ko) 신규 미생물 트리코스포로노이데스 마디다 디에스911 및 이 균주를 이용한 에리스리톨의 제조방법
KR101654219B1 (ko) 고 함량의 다중불포화지방산을 함유하는 트라우스토키트리대 속 균주 및 이의 용도
US4245048A (en) Process for producing coenzyme Q10
Ghezelbash et al. Study of polyols production by Yarrowia lipolytica in batch culture and optimization of growth condition for maximum production
Bansal Mixotrophic growth of Chlorella Sp. using Glycerol for the production of Biodiesel: A Review
KR880002417B1 (ko) 구아노신의 제조법
Amanchukwu et al. Single-cell-protein production by Schizosaccharomyces pombe isolated from palmwine using hydrocarbon feedstocks
RU2096461C1 (ru) Штамм дрожжей yarrowia lipolytica - продуцент лимонной кислоты и способ получения лимонной кислоты
TACHIBANA Metabolism of riboflavin in Schizophyllum commune
RU2103350C1 (ru) Штамм дрожжей rhodotorula glutinis - продуцент каротиноидов
RU2103351C1 (ru) Штамм дрожжей rhodosporidium diabovatum - продуцент каротиноидов
CN1162644A (zh) 微生物同步发酵正十三烷生产十一烷1,11二羧酸方法

Legal Events

Date Code Title Description
PC43 Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions

Effective date: 20170327

PD4A Correction of name of patent owner