RU2018105128A - Кэпированные и некэпированные цистеины антитела и их применение в конъюгации антитело-лекарственное средство - Google Patents

Кэпированные и некэпированные цистеины антитела и их применение в конъюгации антитело-лекарственное средство Download PDF

Info

Publication number
RU2018105128A
RU2018105128A RU2018105128A RU2018105128A RU2018105128A RU 2018105128 A RU2018105128 A RU 2018105128A RU 2018105128 A RU2018105128 A RU 2018105128A RU 2018105128 A RU2018105128 A RU 2018105128A RU 2018105128 A RU2018105128 A RU 2018105128A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
methyl
methoxy
antibody
fragment
oxoheptan
Prior art date
Application number
RU2018105128A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2742260C2 (ru
RU2018105128A3 (ru
Inventor
Сяотянь ЧЖУН
Амарнаут Шастри ПРАШАД
Лео Джозеф ЛЕТЕНДРЕ
Рональд Уильям КРИЗ
Тао ХИ
Уилл СОМЕРС
Венге ВАН
Original Assignee
Пфайзер Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Пфайзер Инк. filed Critical Пфайзер Инк.
Publication of RU2018105128A publication Critical patent/RU2018105128A/ru
Publication of RU2018105128A3 publication Critical patent/RU2018105128A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2742260C2 publication Critical patent/RU2742260C2/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/05—Dipeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
    • A61K47/6817—Toxins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6855—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from breast cancer cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/526—CH3 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Claims (29)

1. Способ связывания предварительно определенный фрагмент копирования на одном или нескольких непарных остатках цистеина на антителе, причем указанный способ включает стадию: выращивание экспрессирующей антитело клеточной линией в культуральной среде, содержащей указанный предварительно определенный фрагмент кэпирования, или предшественник указанного предварительно определенного фрагмента копирования, где указанная клеточная линия экспрессирует указанное антитело, и где указанный предварительно определенный фрагмент кэпирования присоединен посредством ковалентной связи к, по меньшей мере, одному из указанных непарных остатков цистеина на указанном экспрессированном антителе.
2. Способ по п. 1, в котором указанный предварительно определенный фрагмент кэпирования выбирают из группы, состоящей из 5-тио-2-нитробензойной кислоты (TNB), 2-меркаптопиридина, дитиодипиридина (DTDP), 4-тиобензойной кислоты, 2-тиобензойной кислоты, 4-тиобензолсульфоновой кислоты, 2-тиобензолсульфоновой кислоты, метилсульфоната (Ms), п-толуолсульфоната (Ts) и трифторметансульфоната (Tf).
3. Способ по п. 1, в котором указанный предварительно определенный фрагмент кэпирования выбирают из реакционноспособной группы, состоящей из малеимидотриокса-4-формилбензамида (MTFB), подобного молекулам с альдегидной ручкой, или малеимидоазидо-лизина, подобного молекулам с азидной ручкой, или дибензоциклооктил-полиэтиленмалеимида (DBCO-ПЭГ4-малеимида), подобного молекулам с алкиновой ручкой.
4. Способ получения конъюгата лекарственного средства с антителом (ADC) или белкового конъюгата, включающий стадии
(a) получения кэпированного антитела в клеточной культуре, причем один или несколько непарных остатков цистеина на указанном антителе являются ковалентно связанными посредством связей серы с одним или несколькими предварительно определенными фрагментами кэпирования;
(b) подвергание указанного кэпированного антитела действию восстанавливающего агента, способного удалить указанный фрагмент кэпирования из указанного антитела без восстановления межцепочечных связей серы антитела; и
(c) без введения окислительного агента, конъюгирование одного или нескольких восстановленных связей серы на указанном антителе с полезной нагрузкой посредством связывающего фрагмента.
5. Способ по п. 4, в котором указанный предварительно определенный фрагмент кэпирования выбирают из группы, состоящей из 5-тио-2-нитробензойной кислоты (TNB), и 2-меркаптопиридина, и дитиодипиридина (DTDP).
6. Способ по п. 5, в котором указанный предварительно определенный фрагмент кэпирования представляет собой 5-тио-2-нитробензойную кислоту (TNB).
7. Способ по п. 4, в котором указанное восстановление происходит, главным образом, в непарных остатках цистеина.
8. Способ по п. 4, в котором указанная полезная нагрузка представляет собой ауристатин, сплайсостатин, калихеамицин или димер, содержащий один или несколько мономеров CBI, CPI и CTI.
9. Способ по п. 8, в котором указанном ауристатин выбирают из (2-метилаланил-N-[(3R,4S,5S)-3-метокси-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-{[(1S)-2-фенил-1-(1,3-тиазол-2-ил)этил]амино}пропил]пирролидин-1-ил}-5-метил-1-оксогептан-4-ил]-N-метил-L-валинамида); (2-метилаланил-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-карбокси-2-фенилэтил]амино}-1-метокси-2-метил-3-оксопропил]пирролидин-1-ил}-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил]-N-метил-L-валинамида); (2-метил-L-пролил-N-[(3R,4S,5S)-3-метокси-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-метокси-3-{[(2S)-1-метокси-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил]амино}-2-метил-3 оксопропил]пирролидин-1-ил}-5-метил-1-оксогептан-4-ил]-N-метил-L-валинамида, соли трифторуксусной кислоты); (2-метилаланил-N-[(3R,4S,5S)-3-метокси-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-метокси-3-{[(2S)-1-метокси-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил]амино}-2-метил-3-оксопропил]пирролидин-1-ил}-5-метил-1-оксогептан-4-ил]-N-метил-L-валинамида); (2-метилаланил-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S,2R)-1-гидрокси-1-фенилпропан-2-ил]амино}-1-метокси-2-метил-3-оксопропил]пирролидин-1-ил}-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил]-N-метил-L-валинамида); (2-метил-L-пролил-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-карбокси-2-фенилэтил]амино}-1-метокси-2-метил-3-оксопропил]пирролидин-1-ил}-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил]-N-метил-L-валинамида, соли трифторуксусной кислоты); монометилдоластатина 10; (N-метилвалин-валин-долаизолейцин-долапроин-норэфидрина); и (N-метилвалин-валин-долаизолейцин-долапроин-фенилаланина).
10. Способ по п. 4, в котором указанный восстанавливающий агент выбирают из группы, состоящей из
Figure 00000001
или R4-S-H,
где каждый из R1, R2, R3 и R4 независимо выбирают из группы, состоящей из (С1-С6)алкила, (С5-С7)арила и (С5-С7)гетероарила, где каждый из R1, R2, R3 и R4 является независимо необязательно замещенным одним или несколькими заместителями, выбранными из SO3Na, СООН, ОН, ОМе, NO2 и NH2.
11. Способ по п. 4, в котором указанном восстанавливающий агент представляет собой три(3-сульфофенил)фосфин (TSPP)
Figure 00000002
12. Способ по п. 4, в котором указанная клеточная культура содержит предшественник фрагмента кэпирования, и в котором указанный предшественник указанного фрагмента кэпирования представляет собой реагент Эллмана.
13. Способ получения антитела, содержащего один или несколько некэпированных непарных цистеинов, причем указанный способ включает стадии
(a) выращивания клетки, экспресирующей антитело, в культуральной среде, которая содержит низкий уровень цистеина, низкий уровень цистина и низкий уровень глутатиона, и
(b) сбора экспрессированного некэпированного антитела.
14. Способ по п. 13, в котором указанная культуральная среда содержит меньше, чем 5 мМ, меньше, чем 1 мМ или меньше, чем 0,2 мМ цистеина, меньше, чем 5 мМ, меньше, чем 1 мМ или меньше, чем 0,2 мМ цистина и меньше, чем 5 мМ, меньше, чем 1 мМ или меньше, чем 0,2 мМ глутатиона.
15. Способ по п. 13, в котором указанную клеточную линию выбирают из группы, состоящей из СНО, HEK293 и NSO.
16. Способ получения конъюгата лекарственного средства с антителом (ADC) или белкового конъюгата, причем указанный способ включает стадии:
(a) выращивания клетки, экспресирующей антитело в культуральной среде с низким цистеином, низким цистином и низким глутатионом,
(b) сбора экспрессированного антитела, содержащего один или несколько некэпированных непарных цистеинов, и
(c) конъюгирование указанного собранного антитела с полезной нагрузкой посредством связывающего фрагмента.
17. Способ по одному из пп. 4 и 16, в котором указанная полезная нагрузка представляет собой ауристатин, сплайсостатин, калихеамицин или димер, содержащий один или несколько мономеров CBI, CPI и CTI.
18. Способ по п. 17, в котором указанный ауристатин выбирают из (2-метилаланил-N-[(3R,4S,5S)-3-метокси-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-метокси-2-метил-3-оксо-3-{[(1S)-2-фенил-1-(1,3-тиазол-2-ил)этил]амино}пропил]пирролидин-1-ил}-5-метил-1-оксогептан-4-ил]-N-метил-L-валинамида); (2-метилаланил-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-карбокси-2-фенилэтил]амино}-1-метокси-2-метил-3-оксопропил]пирролидин-1-ил}-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил]-N-метил-L-валинамида); (2-метил-L-пролил-N-[(3R,4S,5S)-3-метокси-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-метокси-3-{[(2S)-1-метокси-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил]амино}-2-метил-3 оксопропил]пирролидин-1-ил}-5-метил-1-оксогептан-4-ил]-N-метил-L-валинамида, соли трифторуксусной кислоты); (2-метилаланил-N-[(3R,4S,5S)-3-метокси-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-метокси-3-{[(2S)-1-метокси-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил]амино}-2-метил-3-оксопропил]пирролидин-1-ил}-5-метил-1-оксогептан-4-ил]-N-метил-L-валинамида); (2-метилаланил-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S,2R)-1-гидрокси-1-фенилпропан-2-ил]амино}-1-метокси-2-метил-3-оксопропил]пирролидин-1-ил}-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил]-N-метил-L-валинамида); (2-метил-L-пролил-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-карбокси-2-фенилэтил]амино}-1-метокси-2-метил-3-оксопропил]пирролидин-1-ил}-3-метокси-5-метил-1-оксогептан-4-ил]-N-метил-L-валинамида, соли трифторуксусной кислоты); монометилдоластатина 10; (N-метилвалин-валин-долаизолейцин-долапроин-норэфидрина); и (N-метилвалин-валин-долаизолейцин-долапроин-фенилаланина).
19. Способ по одному из пп. 4 и 16, в котором указанном линкерный фрагмент представляет собой mc или mcvcPABC.
RU2018105128A 2015-08-12 2016-08-09 Кэпированные и некэпированные цистеины антитела и их применение в конъюгации антитело-лекарственное средство RU2742260C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562204005P 2015-08-12 2015-08-12
US62/204,005 2015-08-12
PCT/IB2016/054789 WO2017025897A2 (en) 2015-08-12 2016-08-09 Capped and uncapped antibody cysteines, and their use in antibody-drug conjugation

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2021101009A Division RU2021101009A (ru) 2015-08-12 2016-08-09 Кэпированные и некэпированные цистеины антитела, и их применение в конъюгации антитело - лекарственное средство

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2018105128A true RU2018105128A (ru) 2019-09-12
RU2018105128A3 RU2018105128A3 (ru) 2020-07-27
RU2742260C2 RU2742260C2 (ru) 2021-02-04

Family

ID=56855760

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2021101009A RU2021101009A (ru) 2015-08-12 2016-08-09 Кэпированные и некэпированные цистеины антитела, и их применение в конъюгации антитело - лекарственное средство
RU2018105128A RU2742260C2 (ru) 2015-08-12 2016-08-09 Кэпированные и некэпированные цистеины антитела и их применение в конъюгации антитело-лекарственное средство

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2021101009A RU2021101009A (ru) 2015-08-12 2016-08-09 Кэпированные и некэпированные цистеины антитела, и их применение в конъюгации антитело - лекарственное средство

Country Status (20)

Country Link
US (2) US10653794B2 (ru)
EP (2) EP3334760B1 (ru)
JP (2) JP6865209B2 (ru)
KR (2) KR102146617B1 (ru)
CN (1) CN107849121B (ru)
AU (1) AU2016305331B2 (ru)
BR (1) BR112018001904A2 (ru)
CA (1) CA2938333A1 (ru)
DK (1) DK3334760T3 (ru)
ES (1) ES2864842T3 (ru)
HK (1) HK1252799A1 (ru)
HR (1) HRP20210579T1 (ru)
HU (1) HUE053956T2 (ru)
IL (1) IL257420B (ru)
MX (1) MX2018001686A (ru)
PL (1) PL3334760T3 (ru)
PT (1) PT3334760T (ru)
RU (2) RU2021101009A (ru)
SI (1) SI3334760T1 (ru)
WO (1) WO2017025897A2 (ru)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2864842T3 (es) * 2015-08-12 2021-10-14 Pfizer Cisteínas de anticuerpos protegidas y no protegidas, y su uso en la conjugación fármaco-anticuerpo
KR102322530B1 (ko) * 2017-02-08 2021-11-05 화이자 인코포레이티드 캡핑된 및 비-캡핑된 항체 시스테인의 대규모 제조 공정 및 치료 단백질 접합에서의 그의 용도
CN117679532A (zh) 2019-02-15 2024-03-12 上海药明合联生物技术有限公司 用于制备具有改善的同质性的抗体-药物缀合物的方法
JP2023554489A (ja) * 2020-12-22 2023-12-27 ノバルティス アーゲー 細胞培養中の分泌された組換え発現タンパク質中のシステイン残基の酸化レベルを低減するための方法
WO2023067626A1 (en) * 2021-10-20 2023-04-27 Dr. Reddy's Laboratories Limited A cell culture process to produce an antibody composition

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5241078A (en) * 1988-06-14 1993-08-31 Cetus Oncology Coupling agents and sterically hindered disulfide linked conjugates prepared therefrom
US7018809B1 (en) * 1991-09-19 2006-03-28 Genentech, Inc. Expression of functional antibody fragments
CA2359345A1 (en) * 1999-01-14 2000-07-20 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
JP4249028B2 (ja) * 2001-12-04 2009-04-02 田辺三菱製薬株式会社 蛋白質の活性化方法
EP1893632B1 (en) * 2005-06-17 2015-08-12 Novo Nordisk Health Care AG Selective reduction and derivatization of engineered factor vii proteins comprising at least one non-native cysteine
JP2009538357A (ja) * 2006-05-26 2009-11-05 ソシエテ・ドゥ・コンセイユ・ドゥ・ルシェルシュ・エ・ダプリカーション・シャンティフィック・エス・ア・エス 部位特異的ｐｅｇ化法
DE17196350T1 (de) * 2007-07-09 2018-12-27 Genentech, Inc. Verhindern der disulfid-bindungsreduktion während der rekombinanten herstellung von polypeptiden
AU2009205995B2 (en) * 2008-01-18 2014-04-03 Medimmune, Llc Cysteine engineered antibodies for site-specific conjugation
US8623598B2 (en) * 2008-03-19 2014-01-07 Intelligent Bio Systems, Inc. Methods and compositions for inhibiting undesired cleaving of labels
KR101962476B1 (ko) 2009-07-03 2019-03-26 아비펩 피티와이 리미티트 면역성 접합체 및 그 제조방법
EP2483289B1 (en) * 2009-10-02 2019-03-20 Biogen MA Inc. Methods of preventing and removing trisulfide bonds
RU2016105962A (ru) * 2009-12-04 2018-11-23 Дженентек, Инк. Мультиспецифические антитела, аналоги антител, композиции и способы
CA2799540A1 (en) * 2010-06-08 2011-12-15 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
CA2777978A1 (en) 2011-05-27 2012-11-27 Abbott Biotherapeutics Corp. Dac hyp compositions and methods
JP6067754B2 (ja) * 2012-02-24 2017-01-25 アルテオジェン インコーポレイテッドＡｌｔｅｏｇｅｎ Ｉｎｃ． システイン残基を含むモチーフが結合した修飾抗体、前記修飾抗体を含む修飾抗体−薬物複合体及びその製造方法
US9018172B2 (en) 2012-09-26 2015-04-28 Massachusetts Institute Of Technology Modification of peptides via SNAr reactions of thiols with fluorinated aromatics
WO2015065954A1 (en) * 2013-11-04 2015-05-07 Pfizer, Inc. Anti-efna4 antibody-drug conjugates
WO2015085003A1 (en) * 2013-12-04 2015-06-11 Immunogen, Inc. Compositions and methods for antibody production
SG11201605437YA (en) 2014-01-27 2016-08-30 Pfizer Bifunctional cytotoxic agents
CA2923862C (en) 2015-03-20 2024-02-13 Pfizer Inc. Bifunctional cytotoxic agents containing the cti pharmacophore
ES2864842T3 (es) * 2015-08-12 2021-10-14 Pfizer Cisteínas de anticuerpos protegidas y no protegidas, y su uso en la conjugación fármaco-anticuerpo

Also Published As

Publication number Publication date
KR20200100850A (ko) 2020-08-26
CN107849121B (zh) 2021-11-09
US11980669B2 (en) 2024-05-14
IL257420B (en) 2022-08-01
HUE053956T2 (hu) 2021-08-30
SI3334760T1 (sl) 2021-07-30
WO2017025897A2 (en) 2017-02-16
HK1252799A1 (zh) 2019-06-06
MX2018001686A (es) 2019-01-31
EP3334760A2 (en) 2018-06-20
KR102146617B1 (ko) 2020-08-20
JP2021118694A (ja) 2021-08-12
AU2016305331B2 (en) 2019-05-16
JP2018525990A (ja) 2018-09-13
DK3334760T3 (da) 2021-04-19
US20200230256A1 (en) 2020-07-23
IL257420A (en) 2018-06-28
BR112018001904A2 (pt) 2018-09-18
RU2742260C2 (ru) 2021-02-04
US10653794B2 (en) 2020-05-19
EP3334760B1 (en) 2021-03-10
PT3334760T (pt) 2021-04-23
RU2018105128A3 (ru) 2020-07-27
JP6865209B2 (ja) 2021-04-28
US20190030183A1 (en) 2019-01-31
CA2938333A1 (en) 2017-02-12
EP3808768A1 (en) 2021-04-21
HRP20210579T1 (hr) 2021-05-28
KR102319622B1 (ko) 2021-11-02
AU2016305331A1 (en) 2018-02-15
ES2864842T3 (es) 2021-10-14
KR20180038041A (ko) 2018-04-13
PL3334760T3 (pl) 2021-10-11
RU2021101009A (ru) 2021-02-20
CN107849121A (zh) 2018-03-27
WO2017025897A3 (en) 2017-04-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2018105128A (ru) Кэпированные и некэпированные цистеины антитела и их применение в конъюгации антитело-лекарственное средство
HRP20201517T1 (hr) Anti-cd3 protutijela, anti-cd123 protutijela i bispecifična protutijela koja se specifično vežu na cd3 i/ili cd123
CN103476798B (zh) 在粘合物质和可铁宁的粘合体上结合有抗‑可铁宁抗体的复合体及其用途
RU2505603C2 (ru) Антитело против рецептора il-6
ES2725852T3 (es) Eliminación selectiva de células modificadas por AGE para el tratamiento de la aterosclerosis
RU2016139340A (ru) Коньюгаты "антитело - лекарственное средство" с высокой лекарственной нагрузкой
JP2019531084A5 (ru)
JP6653884B2 (ja) 分子インプリントポリマーの製造方法、分子インプリントポリマー、および標的タンパク質の検出方法
AR048098A1 (es) Conjugados de caliqueamicina
JP2009528838A5 (ru)
WO2007140433A3 (en) Methods and reagents for detecting bioactive lipids
RU2015129813A (ru) Антитела, которые связываются с лигандом запрограммированной клеточной смерти 1 (pd-l1)
WO2007067744A3 (en) Method for assembling a polymer-biologic delivery composition
WO2007140431A3 (en) Novel bioactive lipid derivatives, immune-derived moieties reactive thereto, and methods of making and using the same
JP2012143232A5 (ru)
HRP20130883T4 (hr) Međuvrsno specifična cd3-epsilon-vežuća domena
EP2291678A4 (en) IMPROVED METHOD AND COMPOSITION FOR F-18 MARKING OF PROTEINS, PEPTIDES AND OTHER MOLECULES
WO2007062037A3 (en) Compositions and methods of producing hybrid antigen binding molecules and uses thereof
RU2015119557A (ru) Конъюгаты лекарственное вещество-белок
SI2708559T1 (en) An antigen-binding molecule capable of repeatably binding to two or more antigenic molecules
RU2012131671A (ru) Способ полипептидной модификации для очистки полипептидных мультимеров
RU2014146951A (ru) Конъюгаты типа лиганд dr5-лекарственное средство
JP2002518460A5 (ru)
JP2013519721A5 (ru)
WO2008088648A3 (en) Methods and compositions for improved f-18 labeling of proteins, peptides and other molecules