RU2012136227A - Способы внутриклеточного превращения одноцепочечных белков в их двухцепочечную форму - Google Patents

Способы внутриклеточного превращения одноцепочечных белков в их двухцепочечную форму Download PDF

Info

Publication number
RU2012136227A
RU2012136227A RU2012136227/10A RU2012136227A RU2012136227A RU 2012136227 A RU2012136227 A RU 2012136227A RU 2012136227/10 A RU2012136227/10 A RU 2012136227/10A RU 2012136227 A RU2012136227 A RU 2012136227A RU 2012136227 A RU2012136227 A RU 2012136227A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
domain
clostridial toxin
bont
binding domain
translocation
Prior art date
Application number
RU2012136227/10A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2569185C2 (ru
Inventor
Санджив ГАНШАНИ
Линх К. ЛЕ
И Лю
Лэнс Э. СТЮАРД
Original Assignee
Аллерган, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Аллерган, Инк. filed Critical Аллерган, Инк.
Publication of RU2012136227A publication Critical patent/RU2012136227A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2569185C2 publication Critical patent/RU2569185C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/33—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Clostridium (G)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/503—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from viruses
    • C12N9/506—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from viruses derived from RNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/50—Fusion polypeptide containing protease site
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2799/00—Uses of viruses
    • C12N2799/02—Uses of viruses as vector
    • C12N2799/021—Uses of viruses as vector for the expression of a heterologous nucleic acid
    • C12N2799/026—Uses of viruses as vector for the expression of a heterologous nucleic acid where the vector is derived from a baculovirus

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

1. Внутриклеточный способ превращения одноцепочечного клостридиального токсина, содержащего двуцепочечный петлевой участок, в его двуцепочечную форму, включающий следующие этапы:а) выращивание клетки, содержащей двойной экспрессионный конструкт при 37°С в течение около 3,5 ч, двойной экспрессионный конструкт содержит;i) открытую рамку считывания, кодирующую одноцепочечный клостридиальный токсин, одноцепочечный клостридиальный токсин содержит энзимный домен, транслокационный домен, домен связывания и двуцепочечный петлевой участок, содержащий сайт расщепления TEV протеазой; иii) открытую рамку считывания, кодирующую TEV протеазу;б) выращивание клетки при 22°С в течение от около 16 до около 18 ч,при этом рост на этапе (б) индуцирует экспрессию одноцепочечного клостридиального токсина и TEV протеазы из двойного экспрессионного конструкта; ипроизводимая TEV протеаза расщепляет одноцепочечный клостридиальный токсин в сайте расщепления экзогенной протеазой, находящемся внутри двуцепочечного петлевого участка, тем самым превращая одноцепочечный клостридиальный токсин в его двуцепочечную форму.2. Внутриклеточный способ по п.1, отличающийся тем, что одноцепочечный клостридиальный токсин содержит следующую линейную амино-карбоксильную очередность одного полипептида порядка: 1) энзимного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого содержит сайт расщепления TEV протеазой, транслокационного домена, клостридиального токсина и связывающего домена клостридиального токсина; 2) энзимного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого содержит сайт расщепления TEV п

Claims (15)

1. Внутриклеточный способ превращения одноцепочечного клостридиального токсина, содержащего двуцепочечный петлевой участок, в его двуцепочечную форму, включающий следующие этапы:
а) выращивание клетки, содержащей двойной экспрессионный конструкт при 37°С в течение около 3,5 ч, двойной экспрессионный конструкт содержит;
i) открытую рамку считывания, кодирующую одноцепочечный клостридиальный токсин, одноцепочечный клостридиальный токсин содержит энзимный домен, транслокационный домен, домен связывания и двуцепочечный петлевой участок, содержащий сайт расщепления TEV протеазой; и
ii) открытую рамку считывания, кодирующую TEV протеазу;
б) выращивание клетки при 22°С в течение от около 16 до около 18 ч,
при этом рост на этапе (б) индуцирует экспрессию одноцепочечного клостридиального токсина и TEV протеазы из двойного экспрессионного конструкта; и
производимая TEV протеаза расщепляет одноцепочечный клостридиальный токсин в сайте расщепления экзогенной протеазой, находящемся внутри двуцепочечного петлевого участка, тем самым превращая одноцепочечный клостридиальный токсин в его двуцепочечную форму.
2. Внутриклеточный способ по п.1, отличающийся тем, что одноцепочечный клостридиальный токсин содержит следующую линейную амино-карбоксильную очередность одного полипептида порядка: 1) энзимного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого содержит сайт расщепления TEV протеазой, транслокационного домена, клостридиального токсина и связывающего домена клостридиального токсина; 2) энзимного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого содержит сайт расщепления TEV протеазой, связывающего домена клостридиального токсина и транслокационного домена клостридиального токсина; 3) связывающего домена клостридиального токсина, транслокационного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого содержит сайт расщепления TEV протеазой, и энзимного домена клостридиального токсина; 4) связывающего домена клостридиального токсина, энзимного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого содержит сайт расщепления TEV протеазой и транслокационного домена клостридиального токсина; 5) транслокационного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого содержащит сайт расщепления TEV протеазой, энзимного домена клостридиального токсина и связывающего домена клостридиального токсина; или 6) транслокационного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого содержит сайт расщепления TEV протеазой, клостридиального связывающего домена и энзимного домена клостридиального токсина.
3. Внутриклеточный способ по п.1, отличающийся тем, что энзимный домен клостридиального токсина представляет собой энзимный домен BoNT/A, энзимный домен BoNT/B, энзимный домен BoNT/C1, энзимный домен BoNT/D, энзимный домен BoNT/E, энзимный домен BoNT/F, энзимный домен BoNT/G, энзимный домен TeNT, энзимный домен BaNT, или энзимный домен BuNT.
4. Внутриклеточный способ по п.1, отличающийся тем, что транслокационный домен клостридиального токсина представляет собой транслокационный домен BoNT/A, транслокационный домен BoNT/B, транслокационный домен BoNT/C1, транслокационный домен BoNT/D, транслокационный домен BoNT/E, транслокационный домен BoNT/F, транслокационный домен BoNT/G, транслокационный домен TeNT, транслокационный домен BaNT, или транслокационный домен BuNT.
5. Внутриклеточный способ по п.1, отличающийся тем, что связывающий домен клостридиального токсина представляет собой связывающий домен BoNT/A, связывающий домен BoNT/B, связывающий домен BoNT/C1, связывающий домен BoNT/D, связывающий домен BoNT/E, связывающий домен BoNT/F, связывающий домен BoNT/G, связывающий домен TeNT, связывающий домен BaNT, или связывающий домен BuNT.
6. Внутриклеточный способ превращения одноцепочечного белка в его двуцепочечную форму, включающий следующие этапы
а) выращивание клетки, содержащей двойной экспрессионный конструкт при 37°С в течение около 8 ч, двойной экспрессионный конструкт содержит;
i) открытую рамку считывания, кодирующую одноцепочечный белок, одноцепочечный белок содержит энзимный домен, транслокационный домен интегрированный с сайтом расщепления TEV протеазой домен связывания опиоидов; и
ii) открытую рамку считывания, кодирующую TEV протеазу;
б) выращивание клетки при от около 12 до около 16°С в течение от около 16 до около 18 ч,
при этом вращивание на этапе (б) индуцирует экспрессию одноцепочечного белка и TEV протеазы из двойного экспрессионного конструкта; и
производимая TEV протеаза расщепляет одноцепочечный белок в сайте расщепления TEV протеазой, находящийся внутри интегрированного с сайтом расщепления TEV протеазой домена связывания опиоидов, тем самым превращая одноцепочечный белок в его двуцепочечную форму.
7. Внутриклеточный способ по п.6, отличающийся тем, что белок содержит следующую линейную амино-карбоксильную очередность одного полипептида порядка: 1) энзимного домена клостридиального токсина, транслокационного домена клостридиального токсина, и интегрированный с сайтом расщепления TEV протеазой домена связывания опиоидов, 2) энзимного домена клостридиального токсина, интегрированного с сайтом расщепления TEV протеазой домена связывания опиоидов, и транслокационного домена клостридиального токсина, 3) интегрированного с сайтом расщепления TEV протеазой домена связывания опиоидов, транслокационного домена клостридиального токсина, и энзимного домена клостридиального токсина, 4) интегрированный с сайтом расщепления TEV протеазой домен связывания опиоидов, энзимного домена клостридиального токсина, и транслокационного домена клостридиального токсина, 5) транслокационного домена клостридиального токсина, интегрированного с сайтом расщепления TEV протеазой домена связывания опиоидов, и энзимного домена клостридиального токсина; или 6) транслокационного домена клостридиального токсина, энзимного домена клостридиального токсина, и интегрированного с сайтом расщепления TEV протеазой домена связывания опиоидов
8. Внутриклеточный способ по п.1, отличающийся тем, что энзимный домен клостридиального токсина представляет собой энзимный домен BoNT/A, энзимный домен BoNT/B, энзимный домен BoNT/C1, энзимный домен BoNT/D, энзимный домен BoNT/E, энзимный домен BoNT/F, энзимный домен BoNT/G, энзимный домен TeNT, энзимный домен BaNT, или энзимный домен BuNT.
9. Внутриклеточный способ по п.1, отличающийся тем, что транслокационный домен клостридиального токсина представляет собой транслокационный домен BoNT/A, транслокационный домен BoNT/B, транслокационный домен BoNT/C1, транслокационный домен BoNT/D, транслокационный домен BoNT/E, транслокационный домен BoNT/F, транслокационный домен BoNT/G, транслокационный домен TeNT, транслокационный домен BaNT, или транслокационный домен BuNT.
10. Внутриклеточный способ по п.1, отличающийся тем, что интегрированный с сайтом расщепления TEV протеазой домен связывания опиоидов представляет собой интегрированный с сайтом расщепления TEV протеазой домен связывания ноцицептина, интегрированный с сайтом расщепления TEV протеазой домен связывания динорфина, интегрированный с сайтом расщепления TEV протеазой домен связывания энкефалина, интегрированный с сайтом расщепления TEV протеазой домен связывания ВАМ22, интегрированный с сайтом расщепления TEV протеазой домен связывания эндоморфина, интегрированный с сайтом расщепления TEV протеазой домен связывания эндорфина, интегрированный с сайтом расщепления TEV протеазой домен связывания геморфина, или интегрированный с сайтом расщепления TEV протеазой домен связывания риморфина.
11. Внутриклеточный способ превращения одноцепочечного белка в его двуцепочечную форму, включающий следующие этапы
а) выращивание клетки, содержащей двойной экспрессионный конструкт при 37°С в течение около 8 ч, при этом двойной экспрессионный конструкт содержит:
i) открытую рамку считывания, кодирующую одноцепочечный белок, одноцепочечный белок содержит энзимный домен, транслокационный домен, связывающий домен не клостридиального токсина и двуцепочечный петлевой участок, содержащий сайт расщепления TEV протеазой; и
ii) открытую рамку считывания, кодирующую TEV протеазу;
б) выращивание клетки при от около 12 до около 16°С в течение от около 16 до около 18 ч,
при этом выращивание на этапе (б) индуцирует экспрессию одноцепочечного белка и TEV протеазы из двойного экспрессионного конструкта; и
производимая TEV протеаза расщепляет одноцепочечный белок в сайте расщепления TEV протеазой, находящемся внутри двуцепочечного участка, тем самым превращая одноцепочечный белок в его двуцепочечную форму.
12. Внутриклеточный способ по п.11, отличающийся тем, что следующую линейную амино-карбоксильную очередность одного полипептида порядка: 1) энзимного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого содержит сайт расщепления TEV протеазой, транслокационного домена клостридиального токсина и связывающего домена не клостридиального токсина; 2) энзимного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого содержит сайт расщепления TEV протеазой, связывающего домена не клостридиального токсина и транслокационного домена клостридиального токсина; 3) связывающего домена не клостридиального токсина, транслокационного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого, содержит сайт расщепления TEV протеазой и энзимного домена клостридиального токсина; 4) связывающего домена не клостридиального токсина, энзимного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого содержит сайт расщепления TEV протеазой и транслокационного домена клостридиального токсина; 5) транслокационного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого содержит сайт расщепления TEV протеазой, энзимного домена клостридиального токсина и связывающего домена не клостридиального токсина; или 6) транслокационного домена клостридиального токсина, двуцепочечный петлевой участок которого содержит сайт расщепления TEV протеазой, не клостридиального связывающиего домена и энзимного домена клостридиального токсина.
13. Внутриклеточный способ по п.11, отличающийся тем, что энзимный домен клостридиального токсина представляет собой энзимный домен BoNT/A, энзимный домен BoNT/B, энзимный домен BoNT/C1, энзимный домен BoNT/D, энзимный домен BoNT/E, энзимный домен BoNT/F, энзимный домен BoNT/G, энзимный домен TeNT, энзимный домен BaNT, или энзимный домен BuNT.
14. Внутриклеточный способ по п.11, отличающийся тем, что транслокационный домен клостридиального токсина представляет собой транслокационный домен BoNT/A, транслокационный домен BoNT/B, транслокационный домен BoNT/C1, транслокационный домен BoNT/D, транслокационный домен BoNT/E, транслокационный домен BoNT/F, транслокационный домен BoNT/G, транслокационный домен TeNT, транслокационный домен BaNT, или транслокационный домен BuNT.
15. Внутриклеточный способ по п.11, отличающийся тем, что связывающий домен не клостридиального токсина является доменом связывания пептида опиоида, доменом связывания пептида меланокортина, доменом связывания пептида галанина, доменом связывания пептида гранина, доменом связывания пептида тахикинина, доменом связывания пептида, родственного нейропептиду Y, доменом связывания пептида нейрогормона, доменом связывания пептида цитокина, доменом связывания пептида кинина, доменом связывания пептида фактора роста фибробластов, доменом связывания пептида нейротрофина, доменом связывания пептида фактора некроза опухоли, доменом связывания пептида нейротрофического фактора глии, доменом связывания пептида трансформационного фактора роста β, доменом связывания пептида костного морфогенетического белка, доменом связывания пептида фактора роста и дифференциации, доменом связывания пептида активина, доменом связывания пептида фактора роста эндотелия сосудов, доменом связывания пептида инсулин фактора роста, доменом связывания пептида эпидермального фактора роста, доменом связывания пептида глюкагон-подобного гормона, доменом связывания пептида, активирующего аденилатциклазу гипофиза, доменом связывания пептида гормона высвобождения гормона роста, доменом связывания вазоактивного кишечного пептида, доменом связывания пептида желудочного ингибиторного полипептида, доменом связывания пептида кальцитонин-связанных пептидов висцеральных органов, или связывающего домена пептида активируемого протеазой рецептора.
RU2012136227/10A 2010-01-25 2011-01-24 Способы внутриклеточного превращения одноцепочечных белков в их двухцепочечную форму RU2569185C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US28696310P 2010-01-25 2010-01-25
US61/286,963 2010-01-25
PCT/US2011/022272 WO2011091370A1 (en) 2010-01-25 2011-01-24 Methods of intracellular conversion of single-chain proteins into their di-chain form

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2012136227A true RU2012136227A (ru) 2014-03-10
RU2569185C2 RU2569185C2 (ru) 2015-11-20

Family

ID=44146329

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012136227/10A RU2569185C2 (ru) 2010-01-25 2011-01-24 Способы внутриклеточного превращения одноцепочечных белков в их двухцепочечную форму

Country Status (24)

Country Link
US (3) US8546108B2 (ru)
EP (3) EP2684890B1 (ru)
JP (2) JP5956350B2 (ru)
KR (1) KR101930962B1 (ru)
CN (1) CN102822196B (ru)
AU (1) AU2016204285B2 (ru)
BR (1) BR112012018526A2 (ru)
CA (1) CA2788074C (ru)
CL (1) CL2012002087A1 (ru)
CY (2) CY1115341T1 (ru)
DK (1) DK2528940T3 (ru)
ES (2) ES2592856T3 (ru)
HK (1) HK1179634A1 (ru)
HU (1) HUE029962T2 (ru)
IL (2) IL221095A (ru)
MX (1) MX2012008650A (ru)
NZ (1) NZ601472A (ru)
PL (2) PL2684890T3 (ru)
PT (2) PT2528940E (ru)
RU (1) RU2569185C2 (ru)
SG (1) SG182691A1 (ru)
SI (2) SI2684890T1 (ru)
WO (1) WO2011091370A1 (ru)
ZA (1) ZA201205793B (ru)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT2528940E (pt) * 2010-01-25 2014-06-24 Allergan Inc Métodos de conversão intracelular de proteínas de cadeia única na sua forma de cadeia dupla
KR101134146B1 (ko) 2010-05-31 2012-04-19 메덱스젠 주식회사 국소 근마비 효과를 갖는 비확산형 보툴리눔 독소와 그의 정제방법
AU2012228407B2 (en) * 2011-03-11 2016-10-13 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa Method for the determination of botulinum neurotoxin biological activity
WO2012174123A1 (en) 2011-06-13 2012-12-20 Allergan, Inc. Treatment of psychological trauma
KR20180077343A (ko) 2012-11-21 2018-07-06 입센 바이오이노베이션 리미티드 단백질 가수분해 처리된 폴리펩티드의 제조방법
WO2016110662A1 (en) 2015-01-09 2016-07-14 Ipsen Bioinnovation Limited Cationic neurotoxins
RU2627181C2 (ru) * 2015-12-29 2017-08-03 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) Экспрессионный плазмидный лентивирусный вектор для гетерологичной экспрессии рекомбинантного человеческого белка cd47
US10308927B2 (en) 2017-01-17 2019-06-04 The United States of America, as Represented by the Secretary of Homeland Security Processing of a modified foot-and-mouth disease virus P1 polypeptide by an alternative protease
CN109055339B (zh) * 2018-09-19 2020-09-01 生工生物工程（上海）股份有限公司 Tev蛋白酶突变体、基因、生物材料、制备方法、试剂或试剂盒和应用
CN111019926B (zh) * 2018-10-10 2021-11-26 上饶市康可得生物科技有限公司 Tev蛋白酶变体、其融合蛋白及制备方法和用途
CN111019925B (zh) * 2018-10-10 2022-08-23 上饶市康可得生物科技有限公司 筛选蛋白酶变体的方法以及获得的蛋白酶变体
WO2020073553A1 (zh) * 2018-10-10 2020-04-16 上饶市康可得生物科技有限公司 筛选蛋白酶变体的方法以及获得的蛋白酶变体
US11919936B2 (en) 2018-10-10 2024-03-05 Shangrao Concord Pharmaceutical Co., Ltd. TEV protease variant, fusion protein thereof, preparation method therefor and use thereof
KR20200080749A (ko) * 2018-12-27 2020-07-07 주식회사 폴루스 N-말단의 메티오닌이 절단된 목적 단백질 발현용 유전자 발현 카세트 및 이를 이용하여 n-말단의 메티오닌이 절단된 목적 단백질을 생산하는 방법
JP6867452B2 (ja) * 2019-08-09 2021-04-28 イプセン バイオイノベーション リミテッド 陽イオン性神経毒
US20230067225A1 (en) * 2019-09-26 2023-03-02 Chan Zuckerberg Biohub, Inc. Improved variants of tev protease for biotechnological applications
WO2023225459A2 (en) 2022-05-14 2023-11-23 Novozymes A/S Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections
CN113801866B (zh) * 2021-09-02 2022-08-16 无锡佰翱得生物科学有限公司 一种高效表达具有高活性及稳定性的重组tev酶及其制备方法和应用
CN115896132A (zh) * 2022-04-13 2023-04-04 中国农业科学院植物保护研究所 一种小麦矮腥黑粉菌效应蛋白基因
EP4321618A1 (en) * 2022-08-09 2024-02-14 NUMAFERM GmbH Variants of tev protease and uses thereof
CN116640196B (zh) * 2023-05-10 2024-02-06 山东农业大学 囊泡相关膜蛋白的相关蛋白vap1在抗马铃薯y病毒中的应用

Family Cites Families (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0517805B1 (en) 1990-02-26 2002-07-10 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Identification and expression of insect steroid receptor dna sequences
CA2135644C (en) 1992-05-14 2009-01-27 Elisabetta Vegeto Mutated steroid hormone receptors, methods for their use and molecular switch for gene therapy
US5364791A (en) 1992-05-14 1994-11-15 Elisabetta Vegeto Progesterone receptor having C. terminal hormone binding domain truncations
ATE242330T1 (de) 1993-01-15 2003-06-15 Inst Genetics Llc Klonierung von enterokinase und verfahren zu deren verwendung
US6746859B1 (en) 1993-01-15 2004-06-08 Genetics Institute, Llc Cloning of enterokinase and method of use
US5814618A (en) 1993-06-14 1998-09-29 Basf Aktiengesellschaft Methods for regulating gene expression
US5464758A (en) 1993-06-14 1995-11-07 Gossen; Manfred Tight control of gene expression in eucaryotic cells by tetracycline-responsive promoters
GB9508204D0 (en) 1995-04-21 1995-06-07 Speywood Lab Ltd A novel agent able to modify peripheral afferent function
GB9617671D0 (en) 1996-08-23 1996-10-02 Microbiological Res Authority Recombinant toxin fragments
GB9818548D0 (en) 1998-08-25 1998-10-21 Microbiological Res Authority Treatment of mucas hypersecretion
US6776990B2 (en) 1999-04-08 2004-08-17 Allergan, Inc. Methods and compositions for the treatment of pancreatitis
BR0012693A (pt) 1999-07-22 2002-04-09 Procter & Gamble Variante, de protease tipo subtilisina; composição de limpeza; e composição de cuidado pessoal
US20090018081A1 (en) 1999-08-25 2009-01-15 Allergan, Inc. Activatable clostridial toxins
US7740868B2 (en) 1999-08-25 2010-06-22 Allergan, Inc. Activatable clostridial toxins
EP2267010B1 (en) 1999-08-25 2014-05-07 Allergan, Inc. Activatable recombinant neurotoxins
US20080032931A1 (en) 1999-08-25 2008-02-07 Steward Lance E Activatable clostridial toxins
US20030180289A1 (en) 1999-09-23 2003-09-25 Foster Keith Alan Inhibition of secretion from non-neuronal cells
US7138127B1 (en) 2000-01-19 2006-11-21 Allergan, Inc. Clostridial toxin derivatives and methods for treating pain
US6500436B2 (en) 2000-01-19 2002-12-31 Allergan, Inc. Clostridial toxin derivatives and methods for treating pain
US6903187B1 (en) 2000-07-21 2005-06-07 Allergan, Inc. Leucine-based motif and clostridial neurotoxins
US7491799B2 (en) 2000-07-21 2009-02-17 Allergan, Inc. Modified botulinum neurotoxins
US7273722B2 (en) 2000-11-29 2007-09-25 Allergan, Inc. Neurotoxins with enhanced target specificity
US7132529B2 (en) 2001-07-30 2006-11-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of stearoyl-CoA desaturase expression
US7022329B2 (en) 2002-02-25 2006-04-04 Allergan, Inc. Method for treating neurogenic inflammation pain with botulinum toxin and substance P components
US20040018589A1 (en) * 2002-07-25 2004-01-29 Jun Zhong Method for producing biologically active botulinum neurotoxins through recombinant DNA technique
US6836976B2 (en) 2003-03-18 2005-01-04 Solveig Laura Haugland Collapsible outdoor footwear and backpack
GB0321344D0 (en) 2003-09-11 2003-10-15 Health Prot Agency Re-targeted toxin conjugates
US7811584B2 (en) 2004-06-30 2010-10-12 Allergan, Inc. Multivalent clostridial toxins
US7514088B2 (en) * 2005-03-15 2009-04-07 Allergan, Inc. Multivalent Clostridial toxin derivatives and methods of their use
WO2006011966A1 (en) 2004-06-30 2006-02-02 Allergan, Inc. Optimizing expression of active botulinum toxin type e
CA2575994A1 (en) 2004-08-04 2006-02-16 Allergan, Inc. Optimizing expression of active botulinum toxin type a
AU2005279741B2 (en) 2004-09-01 2011-10-06 Allergan, Inc. Degradable clostridial toxins
US20060099710A1 (en) * 2004-11-10 2006-05-11 Donnelly Mark I Vector for improved in vivo production of proteins
US7659092B2 (en) 2004-12-01 2010-02-09 Syntaxin, Ltd. Fusion proteins
GB0426394D0 (en) 2004-12-01 2005-01-05 Health Prot Agency Fusion proteins
DE102005002978B4 (de) * 2005-01-21 2013-04-25 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa Rekombinante Expression von Proteinen in einer disulfidverbrückten, zweikettigen Form
WO2006101809A1 (en) * 2005-03-15 2006-09-28 Allergan, Inc. Modified clostridial toxins with enhanced targeting capabilities for endogenous clostridial toxin receptor systems
WO2007109633A2 (en) 2006-03-17 2007-09-27 Andover Healthcare, Inc. Organotellurium and selenium-based antimicrobial antimicrobial formulations and articles
EP2038298A2 (en) 2006-07-11 2009-03-25 Allergan, Inc. Modified clostridial toxins with enhanced translocation capabilities and altered targeting activity for clostridial toxin target cells
EP2038299A2 (en) 2006-07-11 2009-03-25 Allergan, Inc. Modified clostridial toxins with enhanced translocation capabilities and altered targeting activity for non-clostridial toxin target cells
EP1897887A1 (de) * 2006-09-08 2008-03-12 Universitätsklinikum Freiburg Split-Core-Partikel für die Präsentation von Fremdmolekülen, insbesondere für Impfstoffanwendungen und Verfahren zu deren Herstellung
ES2425413T3 (es) * 2006-11-22 2013-10-15 Novo Nordisk A/S Método para preparar carboxipeptidasa activada
US8486422B2 (en) * 2007-07-26 2013-07-16 Allergan, Inc. Methods of activating clostridial toxins
WO2010040134A2 (en) * 2008-10-04 2010-04-08 University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey Independently inducible system of gene expression
PT2528940E (pt) * 2010-01-25 2014-06-24 Allergan Inc Métodos de conversão intracelular de proteínas de cadeia única na sua forma de cadeia dupla

Also Published As

Publication number Publication date
US20140030759A1 (en) 2014-01-30
IL246310B (en) 2018-11-29
SG182691A1 (en) 2012-08-30
PT2684890T (pt) 2016-07-28
CL2012002087A1 (es) 2013-01-11
AU2011207445A1 (en) 2012-08-30
HK1179634A1 (en) 2013-10-04
BR112012018526A2 (pt) 2020-09-08
DK2528940T3 (da) 2014-07-14
CY1115341T1 (el) 2017-01-04
EP2684890A1 (en) 2014-01-15
NZ601472A (en) 2013-08-30
EP3034511A1 (en) 2016-06-22
ES2488217T3 (es) 2014-08-26
US9938514B2 (en) 2018-04-10
PL2528940T3 (pl) 2014-10-31
CA2788074A1 (en) 2011-07-28
WO2011091370A1 (en) 2011-07-28
PL2684890T3 (pl) 2016-11-30
ZA201205793B (en) 2013-05-29
IL221095A (en) 2017-06-29
SI2684890T1 (sl) 2016-10-28
JP2013517797A (ja) 2013-05-20
KR101930962B1 (ko) 2018-12-19
EP2528940A1 (en) 2012-12-05
CN102822196B (zh) 2014-12-17
AU2016204285B2 (en) 2018-03-29
JP6312745B2 (ja) 2018-04-18
US20120295330A1 (en) 2012-11-22
PT2528940E (pt) 2014-06-24
JP2016164205A (ja) 2016-09-08
EP2528940B1 (en) 2014-05-14
CA2788074C (en) 2016-07-12
US8546108B2 (en) 2013-10-01
EP2684890B1 (en) 2016-04-20
MX2012008650A (es) 2012-11-23
CY1117797T1 (el) 2017-05-17
KR20120134117A (ko) 2012-12-11
RU2569185C2 (ru) 2015-11-20
IL246310A0 (en) 2016-07-31
AU2016204285A1 (en) 2016-07-14
SI2528940T1 (sl) 2014-07-31
HUE029962T2 (hu) 2017-04-28
CN102822196A (zh) 2012-12-12
ES2592856T3 (es) 2016-12-01
US9340813B2 (en) 2016-05-17
JP5956350B2 (ja) 2016-07-27
US20160319265A1 (en) 2016-11-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2012136227A (ru) Способы внутриклеточного превращения одноцепочечных белков в их двухцепочечную форму
Lacroix et al. Dipeptidyl peptidase-IV inhibitory activity of dairy protein hydrolysates
JO2968B1 (en) Polypeptides are a stable insulin-like growth factor
EP1674116A3 (en) Self-assembling protein matrix prepared from natural extracellular matrices
SI1680509T1 (sl) Postopek za proizvodnjo ogljikovodikov in spojin, ki vsebujejo kisik, iz biomase, ki vključuje fermentacijo z dodatkom aminokislin (LEU, ILE, VAL)
IL209854A (en) Polypeptide, an amino acid sequence encoded for this polypeptide, and the use of this polypeptide for the preparation of a cancer suppressant
MY154826A (en) Fusion protein capable of binding vegf
ATE429445T1 (de) Verfahren zur herstellung von carboxy-terminal amidierten peptiden
AR054526A1 (es) Metodo para tartar pacientes con una vacuna de glicoproteina mucinosa (muc-1)
IL192131A0 (en) Peptides useful as cell-penetrating peptides
EP3597666A3 (en) Compositions, uses and methods for treatment of metabolic disorders and diseases
WO2010107185A2 (ko) 배아줄기세포 유래 혈관형성전구세포 배양 분비물 또는 이의 분획물을 포함하는 피부재생용 조성물 및 이의 용도
SG178797A1 (en) Oligosaccharide chain added glp-1 peptide
NO20082510L (no) En fremgangsmate for konsentrasjon av et polypeptid
CN107881187A (zh) 将大肠杆菌表达的融合蛋白转化为利拉鲁肽的制备方法及应用
WO2006097701A3 (en) Skin equivalent culture
RU2012127364A (ru) Химеры фибронектин: фактор роста
CN104789571B (zh) Retroactive基因及其dsRNA在害虫防治中的应用
NO971110L (no) Fremgangsmåte for fremstilling av en modifisert, kollagenindusert blodplateaggregeringsinhibitor, pallidipin
NO20082800L (no) Nevropeptider for dyrkning av akvatiske organismer
WO2006083516A3 (en) Modified cyanovirin-n polypeptide
Domenger et al. Bioactivities of hemorphins released from bovine haemoglobin gastrointestinal digestion: Dual effects on intestinal hormones and DPP-IV regulations
KR101871805B1 (ko) 재조합 상피세포성장인자의 제조방법
CN110325544A (zh) 来源于胰岛素a链的肽片段及包含它的用于预防或治疗糖尿病或糖尿病伤口的药物组合物
CN104725485B (zh) 一种重组活性肽及其同步制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20210125