RU2007127812A - Способы получения растворимых многопроходных трансмембранных белков - Google Patents

Способы получения растворимых многопроходных трансмембранных белков Download PDF

Info

Publication number
RU2007127812A
RU2007127812A RU2007127812/13A RU2007127812A RU2007127812A RU 2007127812 A RU2007127812 A RU 2007127812A RU 2007127812/13 A RU2007127812/13 A RU 2007127812/13A RU 2007127812 A RU2007127812 A RU 2007127812A RU 2007127812 A RU2007127812 A RU 2007127812A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
polypeptide
expression construct
promoter
seq
transmembrane
Prior art date
Application number
RU2007127812/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2441071C2 (ru
Inventor
Джеймс А. ЭРНСТ (US)
Джеймс А. ЭРНСТ
Дэниэл Г. ЯНСУРА (US)
Дэниэл Г. ЯНСУРА
Хок Сеон КИМ (US)
Хок Сеон КИМ
Original Assignee
Дженентек, Инк. (Us)
Дженентек, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Дженентек, Инк. (Us), Дженентек, Инк. filed Critical Дженентек, Инк. (Us)
Publication of RU2007127812A publication Critical patent/RU2007127812A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2441071C2 publication Critical patent/RU2441071C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/70535—Fc-receptors, e.g. CD16, CD32, CD64 (CD2314/705F)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/24—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Enterobacteriaceae (F), e.g. Citrobacter, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella, Yersinia
    • C07K14/245—Escherichia (G)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70596—Molecules with a "CD"-designation not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2887—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Claims (71)

1. Экспрессирующая конструкция для экспрессии одно- или многопроходных трансмембранных полипептидов в клетке-хозяине, содержащая:
а) полинуклеотид, кодирующий одно- или многопроходный трансмембранный полипептид;
б) строго регулируемый промотор, имеющий низкую базальную активность в клетке-хозяине;
в) лидерную последовательность, содержащую энхансер инициации трансляции.
2. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что промотор содержит:
а) по меньшей мере, один позитивный регуляторный элемент контроля;
б) по меньшей мере, один негативный регуляторный элемент контроля или
в) по меньшей мере, один позитивный регуляторный элемент контроля и, по меньшей мере, один негативный регуляторный элемент контроля, где один или более из позитивных или негативных регуляторных элементов контроля представляют собой гетерологичный регуляторный элемент контроля.
3. Экспрессирующая конструкция по п.2, отличающаяся тем, что позитивный контрольный элемент содержит pho бокс, сайт связывания ДНК MalT или сайт связывания ДНК AraC.
4. Экспрессирующая конструкция по п.2 или 3, отличающаяся тем, что негативный контрольный элемент содержит бактериальный оператор системы оператор/репрессор.
5. Экспрессирующая конструкция по п.2, отличающаяся тем, что негативный контрольный элемент содержит lac оператор, trp оператор или лямбда оператор.
6. Экспрессирующая конструкция по п.2, отличающаяся тем, что позитивный контрольный элемент содержит pho бокс, а негативный контрольный элемент содержит lac оператор.
7. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что эта конструкция дополнительно содержит один или более терминаторов транскрипции, помещенных для того, чтобы предупредить считывание при использовании "апстрим" промоторов (в 3'-5' направлении).
8. Экспрессирующая конструкция по п.7, отличающаяся тем, что терминатор транскрипции содержит лямбда последовательность AACGCTCGGTTGCCGCCGGGCGTTTTTTATT (SEQ ID NO: 17) или терминатор His оперона.
9. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что промотор представляет собой:
а) промотор phoA, phac или tphac;
б) промотор Т7, metE или лямбда PL или
в) промотор (гена) бета-лактамазы, лактозный или триптофановый промотор, сконструированные так, чтобы содержать, по меньшей мере, один гетерологичный регуляторный элемент контроля для снижения базальной активности.
10. Экспрессирующая конструкция по п.9, отличающаяся тем, что промотор представляет собой промотор phoA или его вариант и экспрессия индуцируется экспозицией с фосфатлимитирующими средами.
11. Экспрессирующая конструкция по п.9, отличающаяся тем, что промотор содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15 (phac) или SEQ ID NO: 16 (tphac).
12. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что энхансер инициации трансляции содержит примерно от 6 до 12 первых кодонов гена, высокоэкспрессируемого в клетке-хозяине.
13. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что энхансер инициации трансляции содержит примерно от 6 до 12 первых кодонов гена, кодирующего β-галактозидазу, протеин А или глутатион-S-трансферазу.
14. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что энхансер инициации трансляции содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из ATGGGCAGCAGCCATCATCATCATCATCAT (SEQ ID NO: 34), ATGAAAGCAATTTTCGTACTGAAAGGTTCA (SEQ ID NO: 35) и ATGAAACACCAACACCAA CAA (SEQ ID NO: 28).
15. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что лидерная последовательность кодирует аминокислотную последовательность MKHQHQQ (SEQ ID NO: 7).
16. Экспрессирующая конструкция по любому из пп.12-15, отличающаяся тем, что энхансер инициации трансляции расположен "апстрим" (в 3'-5' направлении) от кодона, кодирующего первую аминокислоту одно- или многопроходного трансмембранного полипептида.
17. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что лидерная последовательность дополнительно содержит спейсерную последовательность элонгации трансляции.
18. Экспрессирующая конструкция по п.17, отличающаяся тем, что спейсерная последовательность элонгации трансляции содержит, по меньшей мере, участок гена, высокоэкспрессируемого в клетке- хозяине.
19. Экспрессирующая конструкция по п.17, отличающаяся тем, что клетка-хозяин представляет собой бактериальную клетку, а спейсерная последовательность элонгации трансляции содержит около 50-120 кодонов высокоэкспрессируемого бактериального гена.
20. Экспрессирующая конструкция по п.17, отличающаяся тем, что клетка-хозяин представляет собой бактериальную клетку, а спейсерная последовательность элонгации трансляции содержит около 50-120 кодонов Е гена trp оперона.
21. Экспрессирующая конструкция по п.17, отличающаяся тем, что клетка-хозяин представляет собой бактериальную клетку, а спейсерная последовательность элонгации трансляции кодирует аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29 или 30.
22. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что трансмембранный полипептид содержит 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или 24 трансмембранных области.
23. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что трансмембранный полипептид является членом семейства MS4A гена, причем это семейство имеет четыре трансмембранных области.
24. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что трансмембранный полипептид представляет собой CD20, β цепь высокоаффинного рецептора IgE (FcεRIβ), HTm4, Ms4A4A, Ms4A6, Ms4A7, GPR73 или RA1c.
25. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что трансмембранный полипептид представляет собой CD20, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 80% идентичную SEQ ID NO: 1.
26. Экспрессирующая конструкция по п.25, отличающаяся тем, что CD20 содержит аминокислотную замену остатка Cys111, Cys220 или обоих.
27. Экспрессирующая конструкция по п.26, отличающаяся тем, что аминокислотная замена представляет собой Cys111Ser, Cys220Ser или и то, и другое.
28. Экспрессирующая конструкция по п.25, отличающаяся тем, что CD20 содержит аминокислотные замены Cys81Ala, Cys111Ser и Cys220Ser.
29. Экспрессирующая конструкция по п.25, отличающаяся тем, что полинуклеотид кодирует аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.
30. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что она кодирует фрагмент CD20, содержащий остатки с К116 по N214 SEQ ID NO: 1.
31. Экспрессирующая конструкция по п.1, дополнительно содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую метку экспрессии.
32. Экспрессирующая конструкция по п.31, отличающаяся тем, что метка экспрессии содержит поли- His метку или HisGln метку.
33. Экспрессирующая конструкция по п.1, отличающаяся тем, что клетка-хозяин представляет собой бактериальную клетку, а экспрессирующая конструкция дополнительно содержит один или более генов tPHK, кодирующих редкие кодоны бактериальной клетки.
34. Экспрессирующая конструкция по п.33, отличающаяся тем, что клетка-хозяин представляет собой Е. coli клетку, а гены tPHK редких кодонов содержат один или более из argU, glyT и pro2.
35. Способ получения трансмембранного полипептида, включающий:
а) введение экспрессирующей конструкции по любому из пп.1-34 в клетку-хозяина;
б) экспрессирование конструкции в клетке-хозяине с продуцированнием трансмембранного полипептида.
36. Способ по п.35, дополнительно содержащий:
а) дезинтеграцию клеток-хозяев, экспрессирующих полипептид;
б) разделение растворимой и нерастворимой фракций дезинтегрированных клеток и
в) суспендирование нерастворимой фракции в неионном или цвиттер-ионном детергенте для солюбилизации и, тем самым, выделения полипептида из клеток-хозяев.
37. Способ выделения экспрессированного трансмембранного полипептида из клетки-хозяина, содержащий:
а) дезинтеграцию клеток-хозяев, экспрессирующих полипептид;
б) разделение растворимой и нерастворимой фракций дезинтегрированных клеток и
в) суспендирование нерастворимой фракции в неионном или цвиттер-ионном детергенте для солюбилизации и, тем самым, выделения полипептида из клеток-хозяев.
38. Способ по п.37, отличающийся тем, что трансмембранный полипептид содержит 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или 24 трансмембранных области.
39. Способ по п.37 или 38, отличающийся тем, что клетки-хозяева содержат экспрессирующую конструкцию по любому из пп.1-38.
40. Способ по п.36, отличающийся тем, что выделенный полипептид находится в нативной конформации.
41. Способ по п.36, отличающийся тем, что детергент содержит:
а) цвиттергент® 3-08, 3-10, 3-12, 3-16, ASB-14, ASB-16 или ASBC80;
б) производное фосфохолина;
в) додецилфосфохолин (DDPC), децилмальтозид (DDM), децилмальтозид (DM), н-додецил-N,N-диметиламин N-оксид (LADO), н-децил-N,N-диметиламин N-оксид, DHPC, DLPC, МРС, LOPC, LLPG или
г) NP40.
42. Способ по п.36, отличающийся тем, что полипептид выделяют центрифугированием в градиенте плотности сахарозы.
43. Способ по п.36, дополнительно включающий очистку солюбилизированного полипептида хроматографией, гель-фильтрацией или осаждением (преципитацией).
44. Способ по п.43, отличающийся тем, что хроматография включает колоночную хроматографию, аффинную хроматографию, металлхелатирующую хроматографию, ВЭЖХ, катионообменную хроматографию или хроматофокусирование.
45. Способ по п.35, отличающийся тем, что клетки-хозяева представляют собой бактериальные клетки.
46. Способ по п.45, отличающийся тем, что бактериальные клетки представляют собой грамотрицательные бактерии.
47. Способ по п.35, отличающийся тем, что клетки-хозяева представляют собой клетки Escherichia, Salmonella, Shigella, Serratia, Klebsiella или Enterobacter.
48. Мутантный phoA промотор, содержащий один или более гетерологичных негативных контрольных элементов.
49. Мутантный phoA промотор по п.48, отличающийся тем, что гетерологичный негативный регуляторный элемент содержит lac оператор.
50. Мутантный phoA промотор по п.48 или 49, дополнительно содержащий один или более гетерологичных терминаторов транскрипции, помещенных для того, чтобы предупредить считывание при использовании "апстрим" промотора (в 3'-5' направлении).
51. Мутантный phoA промотор, содержащий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 15 (phac) или SEQ ID NO: 16 (tphac).
52. Бактериальная клетка, содержащая экспрессирующую конструкцию по любому из пп.1-34.
53. Полипептид, полученный или выделенный способом по любому из пп.35-47.
54. Полипептид, экспрессированный при использовании экспрессирующей конструкции по любому из пп.1-34.
55. Полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 80% идентичную SEQ ID NO: 1, где один или более остатков Cys81, Cys11 и Cys220 заменены.
56. Полипептид по п.55, отличающийся тем, что остатки Cys111, Cys220 или оба заменены на серин.
57. Полипептид по пп.55 или 56, отличающийся тем, что Cys81 заменен на аланин.
58. Полипептид по п.55, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.
59. Выделенный растворимый рекомбинантный CD20 полипептид, имеющий нативную конформацию.
60. Полинуклеотидная последовательность, кодирующая полипептид по любому из пп.55-58.
61. Способ продуцирования антитела, которое связывает одно- или многопроходный трансмембранный полипептид, включающий:
а) инокуляцию животному-хозяину полипептида по любому из пп.53-59 и
б) сбор антител, которые связывают полипептид, у животного-хозяина.
62. Способ продуцирования антитела против CD20, включающий:
а) инокуляцию животному-хозяину полипептида по любому из пп.55-59 и
б) сбор антител, которые связывают CD20, экспрессированный на В клетках, у животного-хозяина.
63. Способ детектирования связывания антител с трансмембранным полипептидом, содержащим, по меньшей мере, 4 трансмембранных сегмента, включающий:
а) анализ связывания антитела с полипептидом по любому из пп.53-59 и
б) корреляцию связывания с полипептидом с детектированием трансмембранного полипептидсвязывающего антитела.
64. Способ детектирования связывания лиганда с CD20, включающий:
а) анализ связывания антитела с полипептидом по любому из пп.55-59 и
б) корреляцию связывания с полипептидом с детектированием лиганда, связывающего CD20.
65. Способ по п.64, отличающийся тем, что лиганд содержит антитело или фрагмент антитела.
66. Способ по п.64, отличающийся тем, что лиганд содержит антитело со зрелой аффинностью.
67. Способ по любому из пп.63-66, отличающийся тем, что анализ связывания антитела или связывания лиганда представляет собой анализ ELISA.
68. Анализируемая поверхность, содержащая иммобилизованный полипептид по любому из пп.53-59.
69. Анализируемая поверхность по п.68, отличающаяся тем, что она представляет собой микротитрационный планшет, хроматографическую смолу, биосенсорный чип или плату для анализа флюидизированного материала.
70. Способ экспрессии трансмембранного полипептида в бактериальной клетке, включающий экспрессию полинуклеотида, кодирующего трансмембранный полипептид в бактериальной клетке, причем указанная экспрессия осуществляется под контролем промотора по любому из пп.48-51.
71. Способ по п.70, отличающийся тем, что промотор активируется для экспрессии полипептида в течение менее 3 ч, в течение менее 2 ч или в течение 1-2 ч.
RU2007127812/10A 2004-12-22 2005-12-22 Способы получения растворимых многопроходных трансмембранных белков RU2441071C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US63923304P 2004-12-22 2004-12-22
US60/639,233 2004-12-22

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2007127812A true RU2007127812A (ru) 2009-01-27
RU2441071C2 RU2441071C2 (ru) 2012-01-27

Family

ID=36096298

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007127812/10A RU2441071C2 (ru) 2004-12-22 2005-12-22 Способы получения растворимых многопроходных трансмембранных белков

Country Status (13)

Country Link
US (4) US7691989B2 (ru)
EP (4) EP2290088A1 (ru)
JP (1) JP2008525041A (ru)
KR (1) KR20070100307A (ru)
CN (1) CN101128586A (ru)
AU (1) AU2005318999B2 (ru)
CA (1) CA2592390A1 (ru)
IL (1) IL184119A0 (ru)
NZ (2) NZ556635A (ru)
RU (1) RU2441071C2 (ru)
SG (1) SG176509A1 (ru)
WO (1) WO2006069403A2 (ru)
ZA (1) ZA200704934B (ru)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1176981B1 (en) 1999-05-07 2005-11-30 Genentech, Inc. Treatment of autoimmune diseases with antagonists which bind to b cell surface markers
EP1692182B1 (en) 2003-11-05 2010-04-07 Roche Glycart AG Cd20 antibodies with increased fc receptor binding affinity and effector function
ZA200704934B (en) * 2004-12-22 2010-09-29 Genentech Inc Methods for producing soluble multi-membrane-spanning proteins
US20080160313A1 (en) * 2006-04-26 2008-07-03 Gabriel Lopez Lipid bilayers on nanotextured solid surfaces
ES2666170T3 (es) 2007-10-30 2018-05-03 Genentech, Inc. Purificación de anticuerpos mediante cromatografía de intercambio catiónico
TW201014605A (en) 2008-09-16 2010-04-16 Genentech Inc Methods for treating progressive multiple sclerosis
WO2010075249A2 (en) 2008-12-22 2010-07-01 Genentech, Inc. A method for treating rheumatoid arthritis with b-cell antagonists
AR078161A1 (es) 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
AU2011215900A1 (en) 2010-02-10 2012-07-26 Immunogen, Inc. CD20 antibodies and uses thereof
ES2364771B1 (es) * 2010-03-01 2013-01-29 Consejo Superior De Investigaciones Científicas (Csic) Bicelas encapsuladas en liposomas y su aplicación en sistemas diluidos.
CN103130866B (zh) * 2013-02-01 2014-06-25 中国科学院植物研究所 植物质膜蛋白再溶解的方法及其在双向荧光差异凝胶电泳中的应用
GB201400562D0 (en) 2014-01-14 2014-03-05 Orla Protein Technologies Ltd Protein coated polymeric substrate
WO2016025781A1 (en) 2014-08-15 2016-02-18 Cornell University Compositions and methods for making water-soluble integral membrane proteins
US10704051B2 (en) * 2014-12-29 2020-07-07 Agricultural Technology Research Institute Expression element, expression cassette, and vector containing the same
CN105294855B (zh) * 2015-11-24 2018-12-04 维亚生物科技(上海)有限公司 一种无磷脂纳米盘的制备方法
EP3387440B1 (en) * 2015-12-09 2021-05-12 F. Hoffmann-La Roche AG Method for determining the in vivo interaction mode
TWI633114B (zh) * 2015-12-28 2018-08-21 財團法人農業科技研究院 豬第二型環狀病毒之外鞘蛋白質的製備方法及含該外鞘蛋白質的醫藥組合物
US20190321443A1 (en) * 2016-02-16 2019-10-24 President And Fellows Of Harvard College Modulators of MS4A activity
US10605807B2 (en) * 2016-02-24 2020-03-31 Bio-Rad Laboratories, Inc. Methods and compositions for fluorescence detection
PL3445397T3 (pl) * 2016-04-22 2023-03-20 Vaccinex, Inc. Integralne białko błonowe prezentowane na powierzchni zewnątrzkomórkowej formy wirionu z otoczką
WO2021092562A1 (en) * 2019-11-08 2021-05-14 North Carolina State University Exon skipping of fc-epsilon-ri-beta and ms4a6a in combination for the treatment of allergic diseases
US10889742B1 (en) * 2020-05-29 2021-01-12 China University Of Petroleum (Beijing) Modified polyhistidine suitable for being used as a supramolecular shale inhibitor, method of preparing the same and its application in water-based drilling fluids

Family Cites Families (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US802125A (en) 1903-12-15 1905-10-17 Barrett D Tillinghast Valve-gear for explosive-engines.
US3720760A (en) 1968-09-06 1973-03-13 Pharmacia Ab Method for determining the presence of reagin-immunoglobulins(reagin-ig)directed against certain allergens,in aqueous samples
US3691016A (en) 1970-04-17 1972-09-12 Monsanto Co Process for the preparation of insoluble enzymes
CA1023287A (en) 1972-12-08 1977-12-27 Boehringer Mannheim G.M.B.H. Process for the preparation of carrier-bound proteins
US4195128A (en) 1976-05-03 1980-03-25 Bayer Aktiengesellschaft Polymeric carrier bound ligands
US4330440A (en) 1977-02-08 1982-05-18 Development Finance Corporation Of New Zealand Activated matrix and method of activation
CA1093991A (en) 1977-02-17 1981-01-20 Hideo Hirohara Enzyme immobilization with pullulan gel
US4229537A (en) 1978-02-09 1980-10-21 New York University Preparation of trichloro-s-triazine activated supports for coupling ligands
ZA811368B (en) 1980-03-24 1982-04-28 Genentech Inc Bacterial polypedtide expression employing tryptophan promoter-operator
US4376110A (en) 1980-08-04 1983-03-08 Hybritech, Incorporated Immunometric assays using monoclonal antibodies
GB2103622B (en) 1981-06-16 1986-01-15 Genentech Inc Production of foot and mouth disease vaccine from microbially expressed antigens
ZA824174B (en) * 1981-06-16 1983-04-27 Genentech Inc Production of foot and mouth disease vaccine from microbially expressed antigens thereof
US4803164A (en) 1981-08-31 1989-02-07 Genentech, Inc. Preparation of hepatitis b surface antigen in yeast
US4741901A (en) 1981-12-03 1988-05-03 Genentech, Inc. Preparation of polypeptides in vertebrate cell culture
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4738921A (en) * 1984-09-27 1988-04-19 Eli Lilly And Company Derivative of the tryptophan operon for expression of fused gene products
ATE78515T1 (de) * 1984-10-05 1992-08-15 Genentech Inc Dna, zellkulturen und verfahren zur sekretion von heterologen proteinen und periplasmische proteinrueckgewinnung.
US4569794A (en) 1984-12-05 1986-02-11 Eli Lilly And Company Process for purifying proteins and compounds useful in such process
US4737456A (en) 1985-05-09 1988-04-12 Syntex (U.S.A.) Inc. Reducing interference in ligand-receptor binding assays
JPS62181785A (ja) * 1985-08-12 1987-08-10 シンテツクス（ユ−・エス・エイ）インコ−ポレイテツド 融合蛋白質の製造方法
EP0213472A1 (en) 1985-08-12 1987-03-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Method for producing fusion proteins
US5013653A (en) * 1987-03-20 1991-05-07 Creative Biomolecules, Inc. Product and process for introduction of a hinge region into a fusion protein to facilitate cleavage
DE3723992A1 (de) * 1987-07-20 1989-02-02 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur herstellung von proteinen in loeslicher form
DE3853932D1 (de) * 1987-08-17 1995-07-13 Hoffmann La Roche Hochreprimierbare Expressionskontrollsequenzen.
US6218525B1 (en) 1988-02-25 2001-04-17 The General Hospital Corporation Nucleic acid encoding CD28
JPH03123486A (ja) * 1989-10-06 1991-05-27 Hitachi Ltd 膜蛋白質の遺伝子工学的生産方法
DE69129154T2 (de) 1990-12-03 1998-08-20 Genentech Inc Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften
EP0590058B1 (en) 1991-06-14 2003-11-26 Genentech, Inc. HUMANIZED Heregulin ANTIBODy
US6329509B1 (en) 1991-08-14 2001-12-11 Genentech, Inc. Anti-IgE antibodies
US5736137A (en) 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
US5304472A (en) 1992-11-20 1994-04-19 Genentech, Inc. Method of controlling polypeptide production in bacterial cells
US5342763A (en) 1992-11-23 1994-08-30 Genentech, Inc. Method for producing polypeptide via bacterial fermentation
US5840523A (en) 1995-03-01 1998-11-24 Genetech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
US6242177B1 (en) * 1995-03-01 2001-06-05 Genentech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
AR005035A1 (es) 1995-12-11 1999-04-07 Merck Patent Ges Mit Beschränkter Haftung Procedimiento para preparar proteinas recombinantes en e. coli, mediante fermentacion con gran concentracion de celulas.
US6037454A (en) 1996-11-27 2000-03-14 Genentech, Inc. Humanized anti-CD11a antibodies
US8021666B2 (en) * 1997-02-18 2011-09-20 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Method and compositions for stimulation of an immune response to CD20 using a xenogeneic CD20 antigen
CA2286330C (en) 1997-04-07 2008-06-10 Genentech, Inc. Anti-vegf antibodies
US6172213B1 (en) 1997-07-02 2001-01-09 Genentech, Inc. Anti-IgE antibodies and method of improving polypeptides
GB9715660D0 (en) * 1997-07-25 1997-10-01 Zeneca Ltd Proteins
US6194168B1 (en) * 1997-09-30 2001-02-27 Human Genome Sciences, Inc. Expression control sequences
AU3644499A (en) * 1998-04-16 1999-11-01 Vanderbilt University Methods and compositions for high yield production of eukaryotic proteins
AU776600B2 (en) * 1999-07-28 2004-09-16 Genentech Inc. Compositions and methods for the treatment of tumors
DE19939246A1 (de) 1999-08-19 2001-02-22 Phasys Gmbh M Rückfaltung von Membranproteinen
JP2003523207A (ja) * 2000-01-25 2003-08-05 ジェネンテック・インコーポレーテッド Ｌｉｖ−１関連タンパク質、それをコードするポリヌクレオチド、及び癌の治療へのその利用
WO2001055176A2 (en) 2000-01-27 2001-08-02 University Of Southern California Methods for inhibiting smooth muscle cell proliferation
DE60143564D1 (de) * 2000-02-18 2011-01-13 Univ R Veränderte rekombinasen zur modifizierung des genoms
US20020064823A1 (en) * 2000-03-30 2002-05-30 Welcher Andrew A. CD20/IgE-receptor like molecules and uses thereof
FR2810675B1 (fr) * 2000-06-22 2002-09-27 Pf Medicament Construction modifiee en aval du codon d'initiation pour la surexpression de proteines recombinantes
DE60140966D1 (de) 2000-08-29 2010-02-11 Genentech Inc Verfahren zur Verbesserung von Krebstherapie
WO2002044379A2 (en) 2000-11-28 2002-06-06 Amgen, Inc. Transforming growth factor-beta-related molecules and uses thereof
WO2002097046A2 (en) 2001-05-25 2002-12-05 Amgen, Inc. B7 related protein-2 molecules and uses thereof
US7247426B2 (en) * 2001-08-02 2007-07-24 Agilent Technologies, Inc. Classifying cancers
US7141391B2 (en) * 2001-11-13 2006-11-28 Neurogen Corporation Monkey and canine melanin concentrating hormone receptors
KR100449639B1 (ko) * 2001-12-14 2004-09-21 주식회사 삼천리제약 피스 결합 부위와 업 엘레멘트 및 코어 프로모터로이루어진 프로모터를 포함하는 발현 벡터
CA2488441C (en) 2002-06-03 2015-01-27 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
AU2003299732A1 (en) * 2002-12-18 2004-07-14 Genpath Pharmaceuticals, Incorporated Vectors for inducible rna interference
US7252993B2 (en) * 2004-03-12 2007-08-07 Battelle Energy Alliance, Llc Plasmids encoding therapeutic agents
ZA200704934B (en) * 2004-12-22 2010-09-29 Genentech Inc Methods for producing soluble multi-membrane-spanning proteins

Also Published As

Publication number Publication date
US20110250639A1 (en) 2011-10-13
RU2441071C2 (ru) 2012-01-27
US20060172385A1 (en) 2006-08-03
EP2290086A3 (en) 2011-10-19
CN101128586A (zh) 2008-02-20
CA2592390A1 (en) 2006-06-29
US20100081170A1 (en) 2010-04-01
WO2006069403A2 (en) 2006-06-29
US7829684B2 (en) 2010-11-09
US20090258410A1 (en) 2009-10-15
AU2005318999A1 (en) 2006-06-29
EP1833970A2 (en) 2007-09-19
US8323902B2 (en) 2012-12-04
NZ556635A (en) 2010-11-26
AU2005318999B2 (en) 2012-07-19
EP2290088A1 (en) 2011-03-02
EP2290087A2 (en) 2011-03-02
EP2290086A2 (en) 2011-03-02
JP2008525041A (ja) 2008-07-17
ZA200704934B (en) 2010-09-29
IL184119A0 (en) 2007-10-31
EP2290087A3 (en) 2011-06-15
SG176509A1 (en) 2011-12-29
KR20070100307A (ko) 2007-10-10
NZ588430A (en) 2012-10-26
US7820806B2 (en) 2010-10-26
WO2006069403A3 (en) 2006-09-28
WO2006069403B1 (en) 2006-11-30
US7691989B2 (en) 2010-04-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2007127812A (ru) Способы получения растворимых многопроходных трансмембранных белков
EP1841874B1 (en) Leader sequences for directing secretion of polypeptides and methods for production thereof
CA2153507A1 (en) A fas ligand, a fragment thereof and dna encoding the same
US9914758B2 (en) Methods and compositions comprising human recombinant growth and differentiation factor-5 (rhGDF-5)
JP2001505783A (ja) 分泌ヒトタンパク質
US9273292B2 (en) Chinese hamster ovary cell lines
EA028790B1 (ru) Энхансеры продуцирующих клеточных линий
US5948677A (en) Reading frame independent epitope tagging
US9631003B2 (en) Host cell lines expressing human recombinant growth and differentiation factor-5 (rhGDF-5)
Schuster et al. Protein expression strategies for identification of novel target proteins
CN107746432B (zh) 一种Aβ42修饰蛋白及其表达与纯化方法
CN107936111B (zh) 一种hip/pap蛋白的制备方法
US20190270998A1 (en) Compositions and methods comprising permuted protein tags for facilitating overexpression, solubility, and purification of target proteins
CN115184603B (zh) EspC蛋白在制备结核分枝杆菌分离或富集产品中的应用
US5618695A (en) DNA encoding HEM-1, a gene expressed by sclerosing hemangioma cells
CN115960203A (zh) Cea截短体、其制备方法和应用
CN115851748A (zh) β2-MG截短体的制备方法及应用
CN115960924A (zh) 重组jo-1抗原的制备方法和应用
CA2585822A1 (en) Breast, rectal, colon and lung tumour marker pro19628 polypeptide and encoding nucleic acid
Priyatno et al. Cloning and expression of synthetic Mx1 gene involved in early maternal recognition pregnancy in cattle
CN116790643A (zh) 编码突变体的核酸分子、重组蛋白及其应用
CN115820618A (zh) Sc1-70抗原截短体、其制备方法和应用
CN115838437A (zh) 人NT-proBNP融合蛋白及其制备方法和应用
CN117736299A (zh) 重组人源CD8α蛋白及其制备方法与应用
CN112979769A (zh) 一种氨基酸序列、蛋白质及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
FA92 Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted)

Effective date: 20100112

FZ9A Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal)

Effective date: 20100819

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20131223