RU2007104231A

RU2007104231A - Способы и системы для обнаружения, идентификации и количественного определения макролидов и их примесей

Info

Publication number: RU2007104231A
Application number: RU2007104231/15A
Authority: RU
Inventors: Джин ЛИ (US); Джин ЛИ; Жозеф ТЕРРЬЕН (US); Жозеф ТЕРРЬЕН
Original assignee: Чирон Корпорейшн (Us); Чирон Корпорейшн
Priority date: 2004-05-06
Filing date: 2005-05-06
Publication date: 2008-08-10
Also published as: KR20070011572A; US20050272166A1; CN101076727A; EP1749209A2; BRPI0510596A; WO2005108984A2; JP2007536526A; MXPA06012618A; AU2005241563A1; CA2565773A1; WO2005108984A3

Claims

1. Способ обнаружения макролида в исследуемом образце, причем главным по массе компонентом указанного исследуемого образца является макролид, причем указанный способ предусматривает:

a) нанесение указанного исследуемого образца на колонку для обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ-ВЭЖХ);

b) элюирование указанного исследуемого образца градиентом подвижной фазы, содержащей летучий буфер, воду, ацетонитрил и спирт; и

c) мониторинг элюата на выходе из указанной колонки с помощью электрохимического детектора или масс-спектрометрического детектора для обнаружения соответственно пика силы тока или пика массы, соответствующих указанному макролиду.

2. Способ по п.1, в котором указанный макролид представляет собой 9-(S)-эритромициламин.

3. Способ по п.1, в котором указанный макролид характеризуется максимальным коэффициентом поглощения в ультрафиолетовой-видимой частях спектра приблизительно при 180-220 нм.

4. Способ по п.1, в котором указанный летучий буфер представляет собой ацетат аммония.

5. Способ по п.1, в котором указанная подвижная фаза характеризуется значением pH от около 6 до около 8.

6. Способ по п.1, в котором указанный спирт содержит метанол.

7. Способ по п.1, в котором указанная подвижная фаза содержит смесь элюента А и элюента В, относительные количества которых меняются по ходу элюирования, причем элюент А состоит по существу из около 60-75 мМ ацетата аммония в воде, а элюент В состоит по существу из около 60-75 мМ ацетата аммония в смеси около 50-70 об.% ацетонитрила и около 30-50 об.% метанола.

8. Способ по п.1, дополнительно предусматривающий определение количества указанного макролида в указанном исследуемом образце путем сравнения площади или высоты указанного пика силы тока с контрольным стандартом.

9. Способ определения чистоты исследуемого образца, причем главным по массе компонентом указанного исследуемого образца является макролид, причем указанный способ предусматривает:

b) элюирование указанного образца градиентом подвижной фазы, содержащей летучий буфер, воду, ацетонитрил и спирт;

c) мониторинг элюата на выходе из указанной колонки с помощью электрохимического детектора для обнаружения:

i) пика силы тока, соответствующего указанному макролиду; и

ii) необязательно одного или нескольких дополнительных пиков силы тока, соответствующих одной или нескольким примесям в указанном исследуемом образце; и

d) измерение одной или нескольких характеристик пиков силы тока, обнаруженных с помощью детектора, для расчета содержания примеси в указанном исследуемом образце.

10. Способ по п.9, в котором указанное измерение проводят путем i) определения площади пика силы тока для каждой обнаруженной примеси и каждого макролида; и ii) расчета процентной доли общей площади пиков силы тока, обусловленных указанным макролидом.

11. Способ идентификации примеси в исследуемом образце, причем главным по массе компонентом указанного исследуемого образца является макролид, причем указанный способ предусматривает:

а) нанесение указанного исследуемого образца на колонку для обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ-ВЭЖХ);

b) элюирование указанного исследуемого образца градиентом подвижной фазы, содержащей летучий буфер, воду, ацетонитрил и спирт;

c) мониторинг элюата на выходе из указанной колонки с помощью масс-спектрометрического детектора для обнаружения:

i) пика массы, соответствующего указанному макролиду; и

ii) дополнительного пика массы, соответствующего указанной примеси в указанном исследуемом образце; и

d) определение массы указанного дополнительного пика массы, соответствующего указанной примеси.

12. Способ по п.11, в котором указанный макролид представляет собой 9-(S)-эритромициламин.

13. Способ по п.11, в котором указанная примесь представляет собой макролид.

14. Способ по п.11, в котором указанная примесь представляет собой

эритромицин В,

гидразон эритромицина В,

9-иминоэритромицин В,

эритромициламин В,

ацетоновый аддукт гидразона эритромицина,

9-гидроксииминоэритромицин,

гидроксид эритромициламина,

9-гидроксииминоэритромицин В,

гидроксид эритромициламина В,

9-(R)-эритромициламин,

эритромициламин С,

эритромициламин D или соединение, характеризующееся формулой

,

,

,

или

15. Способ по п.11, в котором указанная примесь представляет собой соединение формулы VI, VII, VIII, IX, Х или XI:

16. Способ определения количества примеси в исследуемом образце, причем главным по массе компонентом указанного исследуемого образца является макролид, причем указанный способ предусматривает:

a) идентификацию указанной примеси в соответствии со способом по п.11;

b) определение фактора отклика для указанной примеси в соответствии со способом, предусматривающим:

i) пропускание известного количества указанной примеси и известного количества указанного макролида через колонку для обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ-ВЭЖХ), оборудованной ультрафиолетовым (УФ) детектором, обнаруживающим излучения с длинами волн от около 180 до около 220 нм;

ii) элюирование указанного известного количества указанной примеси подвижной фазой, содержащей ион-парный реагент;

iii) мониторинг элюата на выходе из колонки с помощью указанного УФ детектора для обнаружения первого пика поглощения на указанной обнаруживаемой длине волны, причем первый пик поглощения соответствует указанной примеси;

iv) мониторинг элюата на выходе из колонки с помощью указанного УФ детектора для обнаружения второго пика поглощения на указанной обнаруживаемой длине волны, причем второй пик поглощения соответствует указанному макролиду; и

v) расчет фактора отклика указанной примеси с использованием значений площади пика указанного первого и указанного второго пиков поглощения; и

c) определение количества указанной примеси в указанном исследуемом образце в соответствии со способом, предусматривающим:

i) помещение указанного исследуемого образца в такие же аналитические условия, что и на стадии b) для обнаружения третьего пика поглощения, соответствующего указанной примеси; и

ii) расчет количества указанной примеси в указанном исследуемом образце с использованием указанного фактора отклика.

17. Способ по п.16, в котором указанная примесь представляет собой соединение формулы VI, VII, VIII, IX, Х или XI:

18. Система для обнаружения примесей в исследуемом образце 9-(S)-эритромициламина, содержащая:

a) колонку для обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии, содержащую:

i) колонку С18;

ii) подвижную фазу с градиентом компонентов, содержащую смесь элюента А и элюента В, относительные количества которых меняются по ходу элюирования, причем элюент А состоит по существу из около 60-75 мМ ацетата аммония в воде, а элюент В состоит по существу из около 60-75 мМ ацетата аммония в смеси около 50-70 об.% ацетонитрила и около 30-50 об.% метанола;

b) электрохимический детектор или масс-спектрометрический детектор, причем электрохимический детектор содержит запирающий электрод, экранирующий электрод и рабочий электрод.