RU2001110575A

RU2001110575A - Гены из генного кластера

Info

Publication number: RU2001110575A
Application number: RU2001110575/13A
Authority: RU
Inventors: Хиродзи ЕСИКАВА; Юки АБЕ; Тихо ОНО
Original assignee: Санкио Компани Лимитед
Priority date: 2000-04-18
Filing date: 2001-04-17
Publication date: 2003-05-27

Claims

1. Полинуклеотид, выбранный из группы, состоящей из (a) полинуклеотида, кодирующего белок с аминокислотной последовательностью SEQ ID No. 38, или варианта этого полинуклеотида, кодирующего модифицированную аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну делецию, вставку, замену или изменение, причем этот вариант полинуклеотида обладает способностью ускорять биосинтез ML-236B, (b) полинуклеотида, кодирующего белок с аминокислотной последовательностью SEQ ID No. 42, или варианта этого полинуклеотида, кодирующего модифицированную аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере одну делецию, замену или изменение, причем этот вариант полинуклеотида обладает способностью ускорять биосинтез ML-236B.

2. Полинуклеотид по пункту 1, включающий SEQ ID No. 37 или включающий мутанта или вариант SEQ ID No. 37, который обладает способностью ускорять биосинтез ML-236B.

3. Полинуклеотид по п.1 или 2, включающий SEQ ID No.37.

4. Полинуклеотид по любому из пп.1-3, включающий ДНК, получаемую из трансформированной Escherichia coli pSAKexpE SANK 72499 (PERM BP-7005).

5. Полинуклеотид по п.1, включающий SEQ ID No.41 или включающий её вариант, обладащий способностью ускорять биосинтез ML-236B.

6. Полинуклеотид по п.1 или 5, включающий SEQ ID No.41.

7. Полинуклеотид по любому из п.1,5 или 6, включающий ДНК, получаемую из трансформированной Escherichia coli pSAKexpR SANK 72599 (PERM BP-7006).

8. Полинуклеотид по любому из предыдущих пунктов, применяемый в комбинации с одним или несколькими полинуклеотидами, причем эта комбинация обладает способностью повышать продукцию ML-236B в микроорганизме, продуцирующем ML-236B.

9. Полинуклеотид по п.8, включающий полинуклеотид SEQ ID No.37 или его вариант с подобной функцией, в комбинации с одной или несколькими последовательностями из числа SEQ ID No.37, 41, 43, 45, 47 или 49 или их вариантов с подобной функцией.

10. Полинуклеотид по п.8, включающий полинуклеотид SEQ ID No.41 или его вариант с подобной функцией, в комбинации с одной или несколькими последовательностями из числа SEQ ID No.37, 41, 43, 45, 47 или 49 или их вариантов с подобной функцией.

11. Полинуклеотид, способный гибридизироваться в строгих условиях с полинуклеотидом по любому из предыдущих пунктов.

12. Полинуклеотид по п.11, обладающий способностью ускорять биосинтез ML-236B в продуцирующем ML-236B микроорганизме при введении в этот микроорганизм.

13. Полинуклеотид по п.11 или 12, представляющий собой РНК.

14. Вектор, включающий полинуклеотид по любому из предыдущих пунктов.

15. Вектор по п.14, получаемый из Escherichia coli pSAKexpE SANK 72499 (FERM BP-7005) или Escherichia coli pSAKexpR SANK 72599 (FERM BP-7006).

16. Вектор по п.14 или 15, являющийся экспрессионным вектором.

17. Клетка-хозяина, трансформированная вектором по любому из пунктов 14-16.

18. Клетка-хозяина по п.17, представляющая собой микроорганизм, продуцирующий ML-236B.

19. Клетка-хозяина по п.18, представляющая собой Penicillium citrinum.

20. Клетка-хозяина по п.17, представляющая собой Escherichia coli.

21. Клетка-хозяина по п.20, представляющая собой Escherichia coli pSAKexpE SANK 72499 (FERM BP-7005).

22. Клетка-хозяина по п.20, представляющая собой Escherichia coli pSAKexpR SANK 72599 (FERM BP-7006).

23. Полипептид, кодируемый полинуклеотидом по любому из пп.1-13.

24. Полипептид, включающий последовательность SEQ ID No.38 или её вариант, по меньшей мере на 80% идентичный SEQ ID No.38 и обладающий способностью ускорять продукцию ML-236B в продуцирующем ML-236B микроорганизме.

25. Полипептид по п.24, имеющий последовательность SEQ ID No.38.

26. Полипептид, включающий последовательность SEQ ID No.42 или её вариант, по меньшей мере на 80% идентичный SEQ ID No. 42 и обладающий способностью ускорять продукцию ML-236B в продуцирующем ML-236B микроорганизме.

27. Полипептид по п.26, имеющий последовательность SEQ ID No.42.

28. Способ получения ML-236B, включающий выращивание культуры клетки-хозяина по любому из пп.17-19 и выделение ML-236B из этой культуры.

29. Способ по п.28, в котором клетка-хозяина трансформирована вектором, включающим SEQ ID No.37 или SEQ ID No.41.

30. Способ по п.29, в котором вектор не содержит других генов.

31. Способ по любому из пп.28-30, в котором получение ML-236B происходит в отсутствие рекомбинантного mlcA В, С или D, что соответствует SEQ ID No.44, 46, 48 или 50.

32. ML-236B, полученный способом по любому из пп.28-31.

33. Способ изготовления правастатина, включающий применение способа по любому из пп.28-31 и превращение ML-236B в правастатин.

34. Антитело, реагирующее на белок SEQ ID No.38 или SEQ ID No.42.

35. Полинуклеотид, кодирующий белок с аминокислотной последовательностью из числа SEQ ID No.44, 46, 48 и 50, или вариант этого полинуклеотида, кодирующий разновидность этой аминокислотной последовательности, имеющую по меньшей мере одну делецию, замену, вставку или изменение, причем этот вариант обладает способностью ускорять биосинтез ML-236B.

36. Полинуклеотид по п.35, выбранный из числа SEQ ID No.43, 45, 47 и 49.

37. Полинуклеотид по п.35 или 36, обладающий способностью ускорять биосинтез ML-236B сам по себе или вместе с Полинуклеотид ом SEQ ID No.37 или SEQ ID No.41.

38. Вектор, включающий Полинуклеотид по любому из пп.35-37.

39. Клетка - хозяина, включающая вектор по п.38.

40. Полипептид, кодируемый полинуклеотидом по любому из пп.35-37.

41. Способ получения ML-236B, включающий выращивание култьтуры клетки-хозяина по пп.39 и выделение ML-236B из этой культуры.