RU2003112700A

RU2003112700A - Гены новых сериновых протеаз, родственных dppiv

Info

Publication number: RU2003112700A
Application number: RU2003112700/13A
Authority: RU
Inventors: Стив КИ; Карен О. АКИНСАНЬЯ; Пьер Ж. М. РИВЬЕР; Жан-Луи Жюньен
Original assignee: Ферринг Бв
Priority date: 2000-10-12
Filing date: 2001-10-12
Publication date: 2004-10-27

Claims

1. Изолированная нуклеиновая кислота, которая кодирует (а) полипептид, включающий в себя аминокислотную последовательность одной из последовательностей SEQ ID NO:1, 3 и 5, или (b) полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на приблизительно 70% сходной с ней и проявляет ту же самую биологическую функцию; или которая является вариантом альтернативного сплайсинга вариантом одной из последовательностей SEQ ID NO:2, 4 и 6; или которая является зондом, содержащим по меньшей мере 14 следующих друг за другом нуклеотидов из указанной нуклеиновой кислоты, кодирующей (а) или (b); или которая является комплементарной любой из предыдущих нуклеиновых кислот.

2. Изолированная нуклеиновая кислота по п.1, которая является ДНК или РНК.

3. Изолированная нуклеиновая кислота по п.1, которая является ДНК-транскриптом, который включает в себя полную длину любой из последовательностей SEQ ID NO:2, 4 и 6 или который является комплементарным всей кодирующей области одной из последовательностей SEQ ID NO:2, 4 и 6.

4. Антисмысловой олигонуклеотид, направленный против ДНК по п.3.

5. Изолированная нуклеиновая кислота по п.1, которая является РНК-транскриптом, который включает в себя полную длину любой из последовательностей SEQ ID NO:2, 4 и 6.

6. Изолированная нуклеиновая кислота по п.1, которая является вариантом альтернативного сплайсинга одной из последовательностей SEQ ID NO:2, 4 и 6.

7. Полипептид, кодируемый нуклеиновой кислотой по п.6.

8. Изолированная нуклеиновая кислота по п.1, которая кодирует полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на приблизительно 90% сходной с одной из последовательностей SEQ ID NO:1, 3 и 5.

9. Изолированная нуклеиновая кислота по п.1, которая кодирует полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на приблизительно 95% сходной с одной из последовательностей SEQ ID NO:1, 3 и 5.

10. Изолированная нуклеиновая кислота по п.1, которая кодирует полипептид, имеющий по меньшей мере приблизительно 90% идентичность с одной из последовательностей SEQ ID NO:1, 3 и 5.

11. Нуклеиновая кислота-зонд, представляющая собой зонд по п.1, представляющая собой, по меньшей мере 14 следующих друг за другом нуклеотидов из одной из последовательностей SEQ ID NO:2, 4 и 6.

12. Изолированная рекомбинантная полинуклеотидная молекула, включающая нуклеиновую кислоту по п.1 и регулирующие экспрессию элементные, связанные функционально с указанной нуклеиновой кислотой, для управления ее экспрессией.

13. Экспрессионный вектор, включающий нуклеиновую кислоту по п.1, кодирующую полипептид, имеющий полную аминокислотную последовательность, представленную в любой из последовательностей SEQ ID NO:1, 3 и 5, функционально связанную с промотором, причем указанный экспрессионный вектор находится в совместимой клетке-хозяине.

14. Клетка-хозяин млекопитающего, насекомого или бактерии, которая генетически сконструирована введением нуклеиновой кислоты по п.1, кодирующей по меньшей мере часть зрелого белка аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1, 3 или 5.

15. Способ получения полипептида, включающего в себя часть зрелого белка одной из последовательностей SEQ ID NO:1, 3 и 5, который предусматривает культивирование клетки-хозяина по п.11 в условиях, достаточных для продуцирования указанного полипептида.

16. Способ по п.15, где указанный полипептид экспрессируется на поверхности указанной клетки, дополнительно включающий в себя стадию извлечения этого полипептида или его фрагмента из культуры.

17. Полипептид, который при необходимости может быть гликозилированным и который (а) имеет аминокислотную последовательность зрелого белка, представленную в любой из последовательностей SEQ ID NO:1, 3 и 5; (b) имеет аминокислотную последовательность зрелого белка, имеющую по меньшей мере приблизительно 70% сходство с одним из зрелых белков (а), и который проявляет ту же самую биологическую функцию; (с) имеет аминокислотную последовательность зрелого белка, имеющую по меньшей мере приблизительно 90% идентичность со зрелым белком любой из последовательностей SEQ ID NO:1, 3 и 5; или (d) является иммунологически реактивным фрагментом (а).

18. Полипептид по п.17, который является зрелым белком, имеющим по меньшей мере приблизительно 95% сходство со зрелым белком (а).

19. Полипептид по п.17, который является зрелым белком, имеющим по меньшей мере приблизительно 95% идентичность со зрелым белком (а).

20. Полипептид по п.17, имеющий аминокислотную последовательность зрелого белка одной из последовательностей SEQ ID NO:1, 3 и 5, или являющийся их фрагментом, который проявляет ту же самую биологическую функцию, что и соответствующий зрелый белок.

21. Антагонист DPRP, который ингибирует биологическую функцию одного из указанных зрелых белков по пп.18, 19 и 20.

22. Антитело, которое узнает полипептид или фрагмент по п.17.

23. Антитело по п.22, которое узнает полипептид, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1 или 3 или 5.

24. Способ скрининга, направленного на соединение, способное ингибировать ферментативную активность по меньшей мере одного зрелого белка по п.17, предусматривающий инкубирование указанного зрелого белка и подходящего субстрата для указанного зрелого белка в присутствии одного или нескольких тестируемых соединений или их солей, измерение ферментативной активности указанного зрелого белка, сравнение указанной активности с активностью, определенной в отсутствие тестируемого соединения, и отбор тестируемого соединения или соединений, которые уменьшают эту ферментативную активность.

25. Способ скрининга, направленного на соединение, способное ингибировать ферментативную активность DPPIV, которое не ингибирует ферментативную активность по меньшей мере одного из зрелых белков по п.20, предусматривающий инкубирование указанного зрелого белка и подходящего субстрата для указанного зрелого белка в присутствии одного или нескольких ингибиторов DPPIV или их солей, измерение ферментативной активности указанного зрелого белка, сравнение указанной активности с активностью, определенной в отсутствие ингибитора DPPIV, и отбор соединения, которое не уменьшает ферментативную активность указанного зрелого белка.