RS59622B1 - Novi amonijum derivati, postupak za njihovo dobijanje i farmaceutske kompozicije koje ih sadrže - Google Patents

Novi amonijum derivati, postupak za njihovo dobijanje i farmaceutske kompozicije koje ih sadrže

Info

Publication number
RS59622B1
RS59622B1 RS20191499A RSP20191499A RS59622B1 RS 59622 B1 RS59622 B1 RS 59622B1 RS 20191499 A RS20191499 A RS 20191499A RS P20191499 A RSP20191499 A RS P20191499A RS 59622 B1 RS59622 B1 RS 59622B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
pyrimidin
group
phenyl
ethyl
methoxy
Prior art date
Application number
RS20191499A
Other languages
English (en)
Inventor
Attila Paczal
Zoltán Szlávik
András Kotschy
Maïa Chanrion
Ana Leticia Maragno
Olivier Geneste
Didier Demarles
Balázs Bálint
Szabolcs Sipos
Original Assignee
Servier Lab
Vernalis R&D Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Servier Lab, Vernalis R&D Ltd filed Critical Servier Lab
Publication of RS59622B1 publication Critical patent/RS59622B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Cephalosporin Compounds (AREA)

Description

Opis
Ovaj pronalazak se odnosi na nove amonijum derivate, na postupak njihovog dobijanja i na farmaceutske kompozicije koje ih sadrže.
Jedinjenja ovog pronalaska su nova i imaju veoma vredna farmakološka svojstva u oblasti apoptoze i onkologije.
Apoptoza ili programirana smrt ćelije, fiziološki je proces koji je ključan u embrionalnom razvoju i održavanju homeostaze tkiva.
Smrt ćelije apoptoznog tipa obuhvata morfološke promene, kao što su kondenzacija jedra, DNA fragmentacija i, takođe, biohemijski fenomen kao što je aktivacija kaspaza, koji dovodi do oštećenja ključnih strukturnih komponenti ćelije, čime prouzrokuje demontažu ćelije i njenu smrt. Regulacija procesa apoptoze je kompleksna i obuhvata aktivaciju ili represiju nekoliko unutarćelijskih puteva signaliziranja (Cory et al. Nature Review Cancer 2002, 2, 647-656). Deregulacija apoptoze se pojavljuje u izvesnim patologijama. Pojačana apoptoza se vezuje sa neurodegenerativnim bolestima, kao što su Parkinsonova bolest, Alzheimerova bolest i ishemija. Suprotno, deficit u ispunjavanju apoptoze igra značajnu ulogu u razvoju kancera i njihove hemiorezistencije, u auto-imunim bolestima, inflamatornim bolestima i virusnim infekcijama. Prema tome, odsustvo apoptoze je jedna od fenotipskih odlika kancera (Hanahan et al. Cell 2000, 100, 57-70).
Anti-apoptotski proteini Bcl-2 familije se povezuju sa brojnim patologijama. Uključenost proteina Bcl-2 familije je opisana kod brojnih vrsta kancera, kao što su kancer debelog creva, kancer dojke, mikrocelularni kancer pluća, ne-mikrocelularni kancer pluća, kancer bešike, kancer jajnika, kancer prostate, hronična limfoidna leukemija, limfom, mijelom, akutna mijeloidna leukemija, kancer pankreasa, itd. Prekomerna ekspresija anti-apoptotskih proteina Bcl-2 familije je uključena u tumorogenezu, u rezistenciju na hemioterapiju i utiče na kliničku prognozu pacijenata pogođenih kancerom. Značajno, Mcl-1, član anti-apoptotske Bcl-2 familije, prekomerno se ekspresuje u različitim vrstama kancera (Beroukhim et al. Nature 2010, 899-905). Zbog toga, postoji terapeutska potreba za jedinjenjima koja inhibiraju antiapoptotsku aktivnost proteina Bcl-2 familije.
Nedavno, opisani su tienopirimidinski derivati kao moćni Mcl-1 inhibitori, korisni za lečenje kancera (WO 2015/097123).
Ovaj pronalazak obezbeđuje nove amonijum derivate koji imaju proapoptotska svojstva, čineći mogućom njihovu primenu u patologijama koje ispoljavaju defekt u apoptozi, kao, na primer, za lečenje kancera i imunih i auto-imunih bolesti. Povrh toga, jedinjenja ovog pronalaska imaju veliku rastvorljivost, kao i izuzetne i neočekivane farmakološke efekte, što ih može činiti veoma korisnim kandidatima u onkologiji.
Ovaj pronalazak se, preciznije, odnosi na jedinjenja koja imaju formulu (I):
u kojoj:
♦ Y predstavlja -NH- grupu ili atom kiseonika,
♦ R1predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)polihaloalkil grupu, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, -NR9R9’, -Cy1ili atom halogena,
♦ R2, R3i R4predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika, atom halogena, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6),
♦ R5predstavlja atom vodonika,
♦ R6predstavlja grupu
ili
♦ R7predstavlja atom vodonika ili linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu,
♦ R8predstavlja -O-P(O)(O-)(O-) grupu, -O-P(O)(O-)(OR10) grupu, -O-P(O)(OR10) (OR10’) grupu, -O-SO2-O grupu, -O-SO2-OR10grupu, -Cy2, -O-C(O)-R9grupu, -O-C(O)-OR9grupu ili -O-C(O)-NR9R9’ grupu;
♦ R9i R9’ predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili linearnu ili razgranatu amino(C1-C6)alkil grupu,
♦ R10i R10’ predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili arilalkil(C1-C6) grupu,
♦ Cy1i Cy2predstavljaju, nezavisno jedan od drugog cikloalkil grupu, heterocikloalkil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu,
moguće je da tako definisani amonijum postoji kao zwitter-jonski oblik ili da ima monovalentni anjonski kontrajon, pri čemu se podrazumeva da:
- "aril" označava fenil ili naftil grupu,
- "heteroaril" označava svaku mono- ili bi-cikličnu grupu izgrađenu od 5 do 10 članova prstena, sa najmanje jednim aromatičnim delom i koja sadrži od 1 do 3 heteroatoma odabrana od kiseonika, sumpora i azota,
- "cikloalkil" označava svaku mono- ili bi-cikličnu nearomatičnu karbocikličnu grupu, koja sadrži od 3 do 10 članova prstena,
- "heterocikloalkil" označava svaku mono- ili bi-cikličnu nearomatičnu karbocikličnu grupu koja sadrži od 3 do 10 članova prstena i sadrži od 1 do 3 heteroatoma odabrana od kiseonika, sumpora i azota, a može obuhvatiti spojene, premošćene ili spiro prstenaste sisteme,
moguće je da tako definisane aril, heteroaril, cikloalkil i heterocikloalkil grupe i alkil, alkenil, alkinil, alkoksi grupe, budu supstituisane sa 1 do 4 grupe, odabrane od linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkila, linearne ili razgranate (C2-C6)alkenil grupe, linearne ili razgranate (C2-C6)alkinil grupe, linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)alkil-S-, hidroksi, okso (ili N-oksida gde odgovara), nitro, cijano, -C(O)-OR’, -O-C(O)-R’, -C(O)-NR’R", -NR’R", -(C=NR’)-OR", linearnog ili razgranatog (C1-C6)polihaloalkila, trifluorometoksi ili halogena, uz to da R’ i R", nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika ili linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu,
na enantiomere, dijastereoizomere i atropizomere i, njihove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom.
Od farmaceutski prihvatljivih kiselina se mogu navesti, bez namere ograničavanja na ove, hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, fosforasta kiselina, sirćetna kiselina, trifluorosirćetna kiselina, mlečna kiselina, piruvatna kiselina, malonska kiselina, ćilibarna kiselina, glutarna kiselina, fumarna kiselina, vinska kiselina, maleinska kiselina, limunska kiselina, askorbinska kiselina, oksalna kiselina, metansulfonska kiselina, kamforna kiselina itd.
Od farmaceutski prihvatljivih baza se mogu navesti, bez namere ograničavanja na ove, natrijum hidroksid, kalijum hidroksid, trietilamin, terc-butilamin itd.
U zavisnosti od svog naelektrisanja, jedinjenja formule (I) mogu imati zwitterjonski oblik, koji označava neutralan molekul sa pozitivnim i negativnim električnim nabojem. Za jedinjenja prema pronalasku, primeri zwitteri-jonskog oblika mogu biti sledeći:
U zavisnosti od svog naelektrisanja, jedinjenja formule (I) mogu imati jedan farmaceutski prihvatljiv monovalentni anjonski kontrajon M1-, koji može biti odabran od: bromida, hlorida, jodida, acetata, trifluoroacetata, benzoata, mezilata, tozilata, triflata, ili sličnih. Za jedinjenja prema pronalasku, primeri mogu biti sledeći:
U zavisnosti od svog naelektrisanja, jedinjenja formule (I) mogu imati jedan farmaceutski prihvatljiv monovalentni katjonski kontrajon M2<+>, koji može biti odabran od: natrijuma, kalijuma, litijuma, amonijuma, aminokiseline ili sličnog. Za jedinjenja prema pronalasku, primeri mogu biti sledeći:
U zavisnosti od svog naelektrisanja, jedinjenja formule (I) mogu imati jedan farmaceutski prihvatljiv dvovalentni katjonski kontrajon M3<2+>, koji može biti odabran od: kalcijuma, magnezijuma, aluminijuma, aminokiseline ili sličnog, ili dva farmaceutski prihvatljiva monovalentna katjonska kontrajona M2<+>, ista ili različita. Za jedinjenja prema pronalasku, primeri mogu biti sledeći:
Y poželjno predstavlja atom kiseonika.
Korisno, najmanje jedna od grupa, odabranih od R2, R3i R4ne predstavlja atom vodonika.
U drugom ostvarenju pronalaska, korisna mogućnost se sastoji od jedinjenja formule (I-a):
u kojoj su R1, R2, R3, R4, R5, R6i Y, kao što su definisani za formulu (I).
U poželjnim jedinjenjima pronalaska, R1predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili halogeni atom. Poželjnije, R1predstavlja metil grupu, etil grupu, atom hlora ili bromov atom. Još poželjnije, R1predstavlja etil grupu ili atom broma. Preciznije, R1predstavlja atom broma. Korisno, R1predstavlja metil grupu.
Atropizomeri su stereoizomeri koji nastaju zbog ometane rotacije oko jednostruke veze, gde energetske razlike koje su posledica sternog naprezanja ili drugih doprinosa, stvaraju barijeru rotaciji koja je dovoljno velika da omogući izolovanje pojedinačnih konformera (Bringmann et al. Angew. Chem. Int. Ed. 2005, 44, 5384-5427). Za jedinjenja prema pronalasku, atropizomeri su kao sledeći:
Poželjni atropizomer je (5Sa).
Korisno, R2predstavlja halogeni atom, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu. Poželjnije, R2predstavlja atom hlora.
R3i R4poželjno predstavljaju atom vodonika. U korisnim ostvarenjima, supstituenti para (R1, R4) su identični i supstituenti para (R2, R3) su identični. U poželjnim ostvarenjima pronalaska, supstituenti para R1, R4) su identični i predstavljaju (C1-C6)alkil grupu, poželjno metil grupu, dok supstituenti para (R2, R3) su identični i predstavljaju atom vodonika ili halogeni atom, poželjno atom hlora.
Korisno, R6predstavlja grupu
Poželjnije, R6predstavlja grupu
U poželjnim jedinjenjima pronalaska, R7predstavlja metil grupu ili atom vodonika. Poželjnije, R7predstavlja atom vodonika.
Korisno, R8predstavlja -O-P(O)(O-)(OR10) grupu u kojoj R10poželjno predstavlja atom vodonika, benzil grupu ili metil grupu. U drugom poželjnom ostvarenju pronalaska, R8predstavlja -OSO2-O" grupu. Poželjno, R8predstavlja 5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il grupu; -O-C(O)-CH3grupu; -O-C(O)-tBu grupu; -O-C(O)-CH2-NH2grupu; -O-C(O)-CH[CH(CH3)2]-NH2grupu; -O-C(O)-O-CH2CH3grupu; ili -OC(O)-N(CH2CH3)2grupu. Čak još bolje, R8predstavlja -O-P(O)(O-)(OH) grupu.
Poželjna jedinjenja pronalaska su:
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogenfosfat;
- benzil {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilfosfat;
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilmetilfosfat;
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-etilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogenfosfat;
- {4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogenfosfat;
- benzil {4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilfosfat;
- {4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilmetilfosfat;
- N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(4-{[(hidroksifosfinato)oksi]metil}-4-metilpiperazin-4-ijum-1-il)etoksi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin;
- {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi} fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2,6-dihloro-3,5-dimetilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogenfosfat;
- {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-3,5-dimetilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogenfosfat;
- {[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil](dimetil)amonijum}metilhidrogenfosfat;
- 1-{4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}etilhidrogenfosfat;
- 1-{4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}etilhidrogenfosfat;
- {1-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-4-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogenfosfat;
- {1-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-4-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogenfosfat;
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilsulfat;
- 1-[(acetiloksi)metil]-4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum;
- 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-{[(etoksikarbonil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum;
- 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-{[(dietilkarbamoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum;
- 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-[(gliciloksi)metil]-1-metilpiperazin-1-ijum;
- 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorophenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-{1-[(dietilkarbamoil)oksi]etil}-1-metilpiperazin-1-ijum; - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metil-1-[(5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil]piperazin-1-ijum;
- 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metil-1-[(L-valiloksi)metil]piperazin-1-ijum;
- 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-{[(2,2-dimetilpropanoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum;
- 1-[(acetiloksi)metil]-4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum;
- 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-{[(etoksikarbonil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum;
- 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-{[(dietilkarbamoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum; - 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-[(gliciloksi)metil]-1-metilpiperazin-1-ijum;
- 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-{1-[(dietilkarbamoil)oksi]etil}-1-metilpiperazin-1-ijum; - 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metil-1-[(5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil]piperazin-1-ijum;
- 4-[2-(3-bromo-4- {(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metil-1-[(L-valiloksi)metil]piperazin-1-ijum;
- 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-{[(2,2-dimetilpropanoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum.
Od poželjnih jedinjenja pronalaska, mogu se navesti:
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogenfosfat;
- benzil{4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum- 1-il}metilfosfat;
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilmetilfosfat;
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-etilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogenfosfat;
- {4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogenfosfat;
- benzil{4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilfosfat;
- {4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilmetilfosfat;
- N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(4-{[(hidroksifosfinato)oksi]metil}-4-metilpiperazin-4-ijum-1-il)etoksi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin;
- {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi} fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2,6-dihloro-3,5-dimetilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogenfosfat;
- {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi} fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-3,5-dimetilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogenfosfat;
- {[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil] (dimetil)amonijum}metilhidrogenfosfat;
- 1-{4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}etilhidrogenfosfat;
- 1-{4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}etilhidrogenfosfat;
- {1-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-4-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogenfosfat;
- {1-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-4-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogenfosfat.
Poželjna jedinjenja pronalaska su:
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogenfosfat;
- {4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogenfosfat;
- {[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil](dimetil)amonijum}metil hidrogen fosfat.
Pronalazak se, isto tako, odnosi na postupak izrade jedinjenja koja imaju formulu (I), gde je postupak naznačen time što se kao polazni materijal koristi jedinjenje formule (II):
u kojoj su R1, R2, R3, R4, R5i Y, kao što su definisani za formulu (I), a R6’ predstavlja -N(CH3)2grupu ili 4-metilpiperazinil grupu,
koje se podvrgava reakciji zaštite karboksilne kisele funkcionalne grupe, kako se dobija jedinjenje formule (III):
u kojoj su R1, R2, R3, R4, R5’ i Y, kao što su ovde prethodno definisani, a T predstavlja zaštitnu grupu za karboksilnu kiselu funkcionalnu grupu, kao što je, na primer, parametoksibenzil grupa,
koje se podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem formule (IV):
u kojoj su R7i R8kao što su definisani za formulu (I),
da bi se dobilo jedinjenje formule (V):
u kojoj su R1, R2, R3, R4, T i Y, kao što su ovde prethodno definisani, a R6je definisan za formulu (I),
koje se zatim, podvrgava reakciji uklanjanja zaštite sa karboksilne funkcionalne grupe, da bi se dobilo jedinjenje formule (I), koje se može prečistiti prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja, koje se prevodi, ukoliko se želi, u svoje adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom i, koje se eventualno razdvaja u svoje izomere prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja,
razume se da u svakom trenutku, koji se smatra odgovarajućim tokom izvođenja gore opisanog procesa, neke grupe (hidroksi, amino...) u polaznim reagensima ili u intermedijerima sinteze mogu da se zaštite, potom da im se ukloni zaštita i da se funkcionalizuju, već kako je neophodno tokom sinteze.
Jedinjenja formula (II) i (IV) se ili komercijalno nabave ili ih stručna lica mogu dobiti primenom konvencionalnih hemijskih reakcija, opisanih u literaturi.
Farmakološko ispitivanje jedinjenja pronalaska je pokazalo da ona imaju proapoptotska svojstva. Sposobnost ponovnog aktiviranja procesa apoptoze u ćelijama kancera je glavni terapeutski interes u lečenju kancera i imunih i auto-imunih bolesti.
Preciznije, jedinjenja prema pronalasku će biti korisna za lečenje hemio- ili radio-rezistentnih kancera.
Od razmatranih tretmana za kancere, mogu se navesti, bez upliva bilo kakvog ograničavanja na ove, tretman kancera mokraćne bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera debelog creva, jednjaka i jetre, limfoblastne leukemije, akutne mijeloidne leukemije, limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, ne-mikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.
Ovaj pronalazak se, isto tako, odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže najmanje jedno jedinjenje formule (I) u kombinaciji sa jednom ili više farmaceutski prihvatljivih podloga.
Od farmaceutskih kompozicija prema pronalasku, mogu se najpre navesti one, koje su pogodne za oralno, parenteralno, nazalno, per- ili trans-kutano, rektalno, perlingvalno, okularno ili respiratorno primenjivanje, naročito: tablete ili dražeje, sublingvalne tablete, kesice, pakovanja, kapsule, glosete, lozenge, supozitorije, kreamovi, masti, gelovi za kožu i, ampule čiji sadržaj se guta ili injekcione ampule.
Doza je promenljiva prema polu, starosti i težini pacijenta, načina primenjivanja, prirode terapijske indikacije, ili prema svakom udruženom tretmanu i, kreće se od 0.01 mg do 1 g na 24 časa, u vidu jedne ili više primena.
Sem toga, ovaj pronalazak se takođe odnosi na kombinaciju jedinjenja formule (I) sa antikancerskim agensom, odabranim od: genotoksičnih agenasa, mitotskih otrova, antimetabolita, inhibitora proteazoma, inhibitora kinaze i antitela i, isto tako, na farmaceutske kompozicije koje sadrže takav tip kombinacije i njihovo korišćenje u izradi lekova za primenu u lečenju kancera.
Korisno, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formule (I) sa EGFR inhibitorom i, isto tako, na farmaceutske kompozicije koje sadrže takav tip kombinacije. U drugom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formule (I) sa mTOR/PI3K inhibitorom i, isto tako, na farmaceutske kompozicije koje sadrže takav tip kombinacije.
U poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formule (I) sa MEK inhibitorom i, isto tako, na farmaceutske kompozicije koje sadrže takav tip kombinacije.
Poželjno, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formule (I) sa HER2 inhibitorom i, isto tako, na farmaceutske kompozicije koje sadrže takav tip kombinacije. Korisno, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formule (I) sa RAF inhibitorom i, isto tako, na farmaceutske kompozicije koje sadrže takav tip kombinacije. U drugom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formule (I) sa EGFR/HER2 inhibitorom i, isto tako, na farmaceutske kompozicije koje sadrže takav tip kombinacije.
U poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formule (I) sa taksanom i, isto tako, na farmaceutske kompozicije koje sadrže takav tip kombinacije.
U drugom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja formule (I) sa inhibitorom proteazoma, imunomodulatorom ili alkilujućim sredstvom i, isto tako, na farmaceutske kompozicije koje sadrže takav tip kombinacije.
Kombinacija jedinjenja formule (I) sa antikancerskim agensom se može primenjivati istovremeno ili uzastopno. Način primenjivanja, poželjno je oralni put i, odgovarajuće farmaceutske kompozicije mogu omogućiti trenutno ili odloženo oslobađanje aktivnih sastojaka. Jedinjenja kombinacije, sem toga, mogu da se primene u vidu dve zasebne farmaceutske kompozicije, od kojih svaka sadrži jedan aktivan sastojak, ili u vidu jedne farmaceutske kompozicije, u kojoj su aktivni sastojci pomešani.
Jedinjenja pronalaska, takođe, mogu da se za tretman kancera koriste u kombinaciji sa radioterapijom.
Konačno, jedinjenja pronalaska mogu biti vezana na monoklonska antitela ili njihove fragmente ili, vezana na proteinske nosače, koji se mogu ili ne moraju odnositi na monoklonska antitela.
Fragmenti antitela se moraju shvatiti kao fragmenti tipa Fv, scFv, Fab, F(ab’)2, F(ab’), scFv-Fc ili diatela, koji generalno imaju istu spesifičnost vezivanja kao antitelo od kog potiču. Prema ovom pronalasku, fragmenti antitela pronalaska se mogu dobiti polazeći od antitela, postupcima kao što su digestija enzimima, kao što su pepsin ili papain, i/ili cepanjem disulfidnih mostova hemijskom redukcijom. Na drugi način, fragmenti antitela obuhvaćeni ovim pronalaskom, mogu se dobiti tehnikama genetskog rekombinovanja, isto tako dobro poznatim stručnjacima iz ove oblasti ili još, peptidnom sintezom pomoću, na primer, automatskih sintetizera peptida, kao što su oni koji se mogu nabaviti od kompanije Applied Biosystems, etc.
Proteinski nosači koji se mogu ili ne moraju odnositi na monoklonska antitela, se podrazumeva da označavaju protein koji sadrži ili ne sadrži imunoglobulinski domen i to daje kapacitet vezivanja sličan monoklonskom antitelu. Stručno lice u ovoj oblasti zna kako da odabere proteinski nosač. Preciznije, u ovoj oblasti je poznato, da bi se odabrao, takav nosač mora ispoljavati nekoliko karakteristika, kao što su (Skerra, J. Mol. Recogn.
2000, 13, 167-187): filogenetski dobra očuvanost, robustna konstrukcija sa dobro poznatom tro-dimenzionalnom organizacijom molekula (kao, na primer, kristalografija ili NMR), mala veličina, ne postojanje ili samo nizak stepen post-translacionih modifikacija, jednostavnost proizvodnje, ekspresije i prečišćavanja. Takav proteinski nosač može biti, ali bez ograničavanja, struktura odabrana iz grupe koja se sastoji od fibronektina i, pre svega desetog fibronektinskog tipa III domena (FNfn10), lipokalina, antikalina (Skerra, J. Biotechnol. 2001, 74, 257-75), derivata protein Z iz domena B stafilokoknog proteina A, tioredoksina A ili svakog proteina sa ponovljenim domenom, kao što je "ankirinski ponovak" (Kohl et al. PNAS 2003, 100, 1700-1705), "armadillo ponovak", "ponovak bogat leucinom" ili "tetratrikopeptidni ponovak". Takođe se mogu pomenuti derivati nosača iz toksina (kao što su, na primer, škorpijin, iz insekata, biljni ili toksini iz mekušaca) ili proteinski inhibitori neuronske azot oksid sintaze (PIN).
Izrade i primeri u nastavku ilustruju pronalazak, ali ga ni na koji način ne ograničavaju.
Opšte procedure
Svi reagensi, koji su nabavljeni iz komercijalnih izvora, korišćeni su bez prethodnog prečišćavanja. Anhidrovani rastvarači su dobijeni iz komercijalnih izvora i, korišćeni su bez prethodnog sušenja.
Flash hromatografija je izvođena na instrumentu: ISCO CombiFlash Rf 200i sa prethodno napakovanim kertridžima silika gela (RediSep® Rf Gold High Performance).
Tankoslojna hromatografija je izvedena na pločama dimenzija 5 x 10 cm, obloženim sa silika gelom Merck Type 60 F254.
Mikrotalasno zagrevanje je izvođeno u aparatu: Anton Parr MonoWave ili CEM Discover® instrumentu.
Prečišćavanja preparativnom HPLC su izvođena na Armen Spot Liquid hromatografskom sistemu sa Gemini-NX® 10 µM C18, 250 mm x 50 mm i.d. kolonom, puštanjem pri brzini protoka od 118 mL min<-1>sa detekcijom UV diodnim nizom (210 -400 nm), primenom 25 mM vodenog NH4HCO3rastvora i MeCN kao eluenata, sem ukoliko nije drugačije precizirano.
Analitička LC-MS: jedinjenja ovog pronalaska su opisana korišćenjem tečne hromatografije visokih performansi-masene spektroskopije (HPLC-MS) na: Agilent HP1200 sa Agilent 6140 quadrupole LC/MS, postupkom u pozitivnom ili negativnom jon elektrosprej jonizacionom modu. Pretraženi opseg molekulskih težina je 100 do 1350. Paralelna UV detekcija je izvedena na 210 nm i 254 nm. Uzorci su unošeni kao 1 mM rastvor u acetonitrilu, ili u smeši tetrahidrofuran/H2O (1:1) pomoću 5 µL-ske omčaste injekcije. LCMS analize su izvedene na dva instrumenta, jednom koji je funkcionisao sa baznim i drugom, koji je funkcionisao sa kiselim eluentima. Bazna LCMS: Gemini-NX, 3 µm, C18, 50 mm x 3.00 mm i.d. kolona na 23°C, pri brzini protoka od 1 mL min<-1>korišćenjem 5 mM amonijum bikarbonata (rastvarač A) i acetonitrila (rastvarač B) uz gradijent koji je polazio od 100 % rastvarača A i završavao sa 100 % rastvarača B tokom raznih/određenih perioda vremena. Kisela LCMS: ZORBAX Eclipse XDB-C18, 1.8 µm, 50 mm x 4.6 mm i.d. kolona na 40°C, pri brzini protoka od 1 mL.min<-1>korišćenjem 0.02 % v/v vodene mravlje kiseline (rastvarač A) i 0.02 % v/v mravlje kiseline u acetonitrilu (rastvarač B) uz gradijent koji je polazio od 100 % rastvarača A i završavao sa 100 % rastvarača B tokom raznih/određenih perioda vremena.
<1>H-NMR merenja su izvođena na Bruker Avance III 500 MHz spektrometru i Bruker Avance III 400 MHz spektrometru, korišćenjem DMSO-d6ili CDCl3kao rastvarača.<1>H NMR podaci su u vidu delta vrednosti, izraženi kao deo na milion (ppm), korišćenjem rezidualnih pikova rastvarača (2.50 ppm za DMSO-d6i 7.26 ppm za CDCl3) kao internog standarda. Profili cepanja su označeni kao: s (singlet), d (dublet), t (triplet), q (qvartet), quint (qvintet), m (multiplet), br s (široki singlet), dd (dublet dubleta), td (triplet dubleta), dt (dublet tripleta), ddd (dublet dubleta dubleta).
Kombinovana gasna hromatografija i masena spektrometrija niske rezolucije su izvedene na instrumentima: Agilent 6850 gasni hromatograf i Agilent 5975C maseni spektrometar, korišćenjem 15 m x 0.25 mm kolone sa 0.25 µm HP-5MS sloja i helijumom kao gasom nosačem. Jonski izvor: EI<+>, 70 eV, 230°C, kvadripol: 150°C, interfejs: 300°C.
HRMS su određene na instrumentu: Shimadzu IT-TOF, temperatura jonskog izvora 200°C, ESI /-, voltaža jonizacije: (+/-)4.5 kV. Masena rezolucija min. 10000.
Analiza elemenata je izvedena na analizatoru: Thermo Flash EA 1112 Elemental Analyzer.
Primer 1: {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogen fosfat
Korak A: 4-metoksibenzil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat
1.75 g (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanske kiseline (2 mmol, 1 eq.; sintetisana prema WO 2015/097123), 1.05 g trifenilfosfina (4 mmol, 2 eq.) i 0.5 mL 4-metoksibenzil alkohola (4 mmol, 2 eq.) se rastvore u 20 mL suvog toluena, zatim se dodaje 0.92 g di-terc-butil azodikarboksilata (4 mmol, 2 eq.) tokom 3 minuta. Dobijena smeša se meša na 50°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša je injektovana direktno na a prethodno kondicioniranu kolonu od 120 g silike, zatim prečišćena flash hromatografijom, uz korišćenje etil acetat/metanol (koji sadrži 1.2 % NH3) kao eluenta, kako se dobija beli kristal.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.63 (d, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.68 (dd, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.21-7.13 (m, 5H), 7.10-7.04 (m, 2H), 6.99-6.80 (m, 7H), 6.24 (d, 1H), 5.68 (dd, 1H), 5.25-5.16 (m, 3H), 5.09 (d, 1H), 4.29-4.18 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.38 (dd, 1H), 2.96-2.89 (m, 2H), 2.69 (br s, 4H), 2.56 (dd, 2H), 2.46 (br s, 4H), 2.28 (s, 3H), 1.90 (s, 3H)
Korak B: terc-butil [4-[2-[2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-[(1R)-2-[(4-metoksifenil) metoksi]-1-[[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]metil]-2-okso-etoksi]-(5Sa)-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metil-fenoksi]etil]-1-metil-piperazin-1-ijum-1-il]metil fosfat
249 mg 4-metoksibenzil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoata (0.25 mmol, 1 eq.), 194 mg di-tercbutil hlorometil fosfata (0.75 mmol, 3 eq.), 112 mg natrijum jodida (0.75 mmol, 3 eq.) i 62 mg NaHCO3(0.75 mmol, 3 eq.) se meša u 3 mL suvog acetona na sobnoj temperaturi preko noći (zaštićeno od svetla). U reakcionu smešu, doda se 2 mL vode i, direktno se injektuje na RP18 kolonu, uz korišćenje acetonitril / 5 mM NH4HCO3kao eluenata uz postupak gradijenta. Posle liofilizacije, dobija se bela čvrsta materija.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.64 (d, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.68 (dd, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.21-7.16 (m, 5H), 7.11-7.05 (m, 2H), 6.98 (t, 2H), 6.89-6.79 (m, 5H), 6.22 (d, 1H), 5.66 (dd, 1H), 5.20 (dd, 2H), 5.15 (dd, 2H), 5.08 (d, 1H), 4.26-4.16 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.70-3.65 (m, 2H), 3.38 (dd, 2H), 3.32 (br s, 1H), 3.19-3.09 (m, 1H), 3.15 (s, 3H), 3.00 (t, 2H), 2.98-2.91 (m, 2H), 2.55 (dd, 1H), 1.90 (s, 3H), 1.87 (br s, 4H), 1.46 (s, 9H)
Korak C: Primer 1
U 150 mg terc-butil [4-[2-[2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-[(1R)-2-[(4-metoksifenil)metoksi]-1-[[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]metil]-2-okso-etoksi]-(5Sa)-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metil-fenoksi]etil]-1-metil-piperazin-1-ijum-1-il]metil fosfata (0.13 mmol, 1 eq.) rastvorenog u 4 mL suvog dihlorometana, doda se 0.5 mL trifluorosirćetne kiseline (6.6 mmol, 50 eq.) i, smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog zatim, prečisti putem reverzno fazne hromatografije, korišćenjem acetonitril / 5 mM NH4HCO3kao eluenata. Nakon liofilizacije, dobija se Primer 1 u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C48H48ClFN6O10PS: 984.2485; dobijeno 471.1189 (M+2H)
Primer 2: benzil {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil fosfat
Korak A: benzil [4-(2-{2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metilfenoksi}etil)-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il]metil fosfat
995 mg 4-metoksibenzil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoata (1 mmol, 1 eq.) i 392 mg dibenzil hlorometil fosfata (1.2 mmol, 1.2 eq.) se meša u 5 mL suvog acetonitrila na 80°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša je injektovana direktno na prethodno kondicioniranu kolonu od 80 g silike zatim, prečišćena fash hromatografijom korišćenjem etil acetat/metanol (koji sadrži 1.2 % NH3) kao eluenta. Proizvod je dobijen u vidu kristala zavoreno-bele boje.
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 8.66 (d, 1H), 8.54 (s, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.49 (dd, 1H), 7.45 (tm, 1H), 7.34-7.2 (m, 5H), 7.29 (m, 2 H), 7.24 (d, 1H), 7.22 (m, 2H), 7.19 (m, 1H), 7.15 (m, 2H), 7.14 (m, 1H), 7.12 (d, 1H), 7.04 (m, 1H), 7.02 (tm, 1H), 6.88 (d, 2H), 6.74 (t, 1H), 6.21 (d, 1H), 5.55 (dd, 1H), 5.23 (d, 1H), 5.17 (d, 1H), 5.10 (d, 1H), 5.01 (d, 1H), 4.86 (d, 2H), 4.75 (d, 2H), 4.26-4.14 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.38-3.22 (m, 4H), 3.22-2.54 (m, 2 H), 2.96-2.74 (br s, 4H), 2.93 (s, 3H), 2.87 (t, 2H), 1.84 (s, 3H)
Korak B: Primer 2
435 mg benzil [4-(2-{2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il] oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metilfenoksi}etil)-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il] metil fosfata (0.36 mmol, 1 eq.) i 560 µL trifluorosirćetne kiseline (7.28 mmol, 20 eq.) se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog zatim, prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem acetonitril / 5 mM NH4HCO3kao eluenata. Nakon liofilizacije, Primer 2 se dobija u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C55H53ClFN6O10PS: 1074.2954; dobijeno 538.1565 (M+2H)
U sledećim Primerima 3 i 4, procedura je kao u Primeru 1, uz korišćenje odgovarajućeg hloridnog derivata formule (IV) i odgovarajućeg tienopirimidinskog jedinjenja formule (II).
Primer 3: {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil metil fosfat
Primer 4: {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-etilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogen fosfat
Primer 5: {4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogen fosfat
Korak A: 4-metoksibenzil (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-bromo-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat
1.75 g (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-bromo-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanska kiselina (2 mmol, 1 eq.; sintetisana prema WO 2015/097123), 1.05 g trifenilfosfina (4 mmol, 2 eq.) i 0.5 mL 4-metoksibenzil alkohola (4 mmol, 2 eq.) se rastvori u 20 mL suvog toluena, zatim se dodaje 0.92 g di-terc-butil azodikarboksilata (4 mmol, 2 eq.) tokom 3 minuta. Dobijena smeša se meša na 50°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša je injektovana direktno na prethodno kondicioniranu kolonu od 120 g silike, zatim je prečišćena flash hromatografijom korišćenjem etil acetat/metanol (koji sadrži 1.2 % NH3) kao eluenta, kako se dobija beli kristal.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.63 (d, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.68 (dd, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.21-7.13 (m, 5H), 7.10-7.04 (m, 2H), 6.99-6.80 (m, 7H), 6.24 (d, 1H), 5.68 (dd, 1H), 5.25-5.16 (m, 3H), 5.09 (d, 1H), 4.29-4.18 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.38 (dd, 1H), 2.96-2.89 (m, 2H), 2.69 (br s, 4H), 2.56 (dd, 2H), 2.46 (br s, 4H), 2.28 (s, 3H), 1.90 (s, 3H)
Korak B: terc-butil [4-[2-[2-bromo-4-[6-(4-fluorofenil)-4-[(1R)-2-[(4-metoksifenil) metoksi]-1-[[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]metil]-2-okso-etoksi]-(5Sa)-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metil-fenoksi]etil]-1-metil-piperazin-1-ijum-1-il]metil fosfat
265 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (0.25 mmol, 1 eq.), 194 mg di-tercbutil hlorometil fosfata (0.75 mmol, 3 eq.), 112 mg natrijum jodida (0.75 mmol, 3 eq.) i 62 mg NaHCO3(0.75 mmol, 3 eq.) se meša u 3 mL suvog acetona, na sobnoj temperaturi preko noći (zaštićeno od svetlosti). U reakcionu smešu, doda se 2 mL vode i direktno se injektuje na RP18 kolonu, uz korišćenje acetonitril / 5 mM NH4HCO3kao eluenata po gradijent postupku. Posle liofilizacije, dobija se bela čvrsta materija.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.64 (d, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.68 (dd, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.21-7.16 (m, 5H), 7.11-7.05 (m, 2H), 6.98 (t, 2H), 6.89-6.79 (m, 5H), 6.22 (d, 1H), 5.66 (dd, 1H), 5.20 (dd, 2H), 5.15 (dd, 2H), 5.08 (d, 1H), 4.26-4.16 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.70-3.65 (m, 2H), 3.38 (dd, 2H), 3.32 (br s, 1H), 3.19-3.09 (m, 1H), 3.15 (s, 3H), 3.00 (t, 2H), 2.98-2.91 (m, 2H), 2.55 (dd, 1H), 1.90 (s, 3H), 1.87 (br s, 4H), 1.46 (s, 9H)
Korak C: Primer 5
U 150 mg jedinjenja prethodnog Koraka B (0.13 mmol, 1 eq.) rastvorenog u 4 mL suvog dihlorometana, doda se 0.5 mL trifluorosirćetne kiseline (6.6 mmol, 50 eq.) i, smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog, zatim se prečisti putem reverzno fazne hromatografije, uz korišćenje acetonitril / 5 mM NH4HCO3kao eluenata. Posle liofilizacije, dobija se Primer 5.
HRMS izračunato za C47H44ClFN6O10PS: 1048.1433; dobijeno 525.0791 (M+2H)
Primer 6: benzil {4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksi fenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil fosfat
Korak A: benzil[4-(2-{3-bromo-2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]fenoksi}etil)-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il]metil fosfat
318 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 5 (0.30 mmol, 1 eq.) i 147 mg dibenzil hlorometil fosfata (0.45 mmol, 1.5 eq) se meša u 1.5 mL suvog acetonitrila na 70°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša je injektovana direktno na prethodno kondicioniranu kolonu od 80 g silike zatim, prečišćena flash hromatografijom korišćenjem etil acetat/metanol (koji sadrži 1.2 % NH3) kao eluenta. Proizvod Koraka A se dobija u vidu belih kristala.
MS: M+H = 1260.6
Korak B: Primer 6
U rastvor od 275 mg jedinjenja prethodnog Koraka B (0.218 mmol, 1 eq.) u 3.5 mL dihlorometana, doda se 334 µL trifluorosirćetne kiseline i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše i, sirovi proizvod se prečisti flash hromatografijom korišćenjem etil acetat/metanol (koji sadrži 1.2 % NH3) kao eluenta. Ovaj proizvod se onda prečisti putem reverzno fazne hromatografije, korišćenjem 25 mM vodenog NH4HCO3rastvora i MeCN kao eluenata. Nakon liofilizacije, dobija se Primer 6 u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C54H50BrClFN6O10PS: 1138.1903; dobijeno 570.1018 (M+2H)
Primer 7: {4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil metil fosfat
U Primeru 7, procedura je ista kao u Primeru 1, uz korišćenje odgovarajućeg hloridnog derivata formule (IV) i odgovarajućeg tienopirimidinskog jedinjenja formule (II).
Primer 8: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(4-{[(hidroksifosfinato)oksi]metil}-4-metilpiperazin-4-ijum-1-il)etoksi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin
Korak A: 6-jodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on
U 2 L-ski balon, zaobljenog dna i opremljen mehaničkom mešalicom, termometrom i refluksnim kondenzatorom, stavi se rastvor od 433 mL sirćetne kiseline, 13 mL sumporne kiseline i 87 mL vode. U mešani rastvor se doda 69.3 g 3H-tieno[2,3-d] pirimidin-4-ona (0.46 mol), 51.9 g perjodne kiseline (0.23 mol) i 104 g joda (0.41 mol), što se greje na 60°C tokom 1 sata. Dobijena suspenzija je ohlađena na sobnu temperaturu, odfiltrirana, isprana sa mešavinom sirćetne kiseline i vode (5:1) i zatim, sa dietil etrom. Dobijena čvrsta materija bež boje se osuši na vazduhu.
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 12.57 (br s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.65 (s, 1H)
Korak B: 4-hloro-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin
U 1 L-ski balon, zaobljenog dna i opremljen mehaničkom mešalicom, termometrom i refluksnim kondenzatorom i CaCl2-tubom stavi se 113 mL fosfor oksihlorida i 35 mL N,N-dimetilanilina (0.29 mol). U smešu se, deo po deo, doda 75.54 g jedinjenja prethodnog Koraka A (0.27 mol) u toku 5 minuta. Reakciona smeša se meša na 105°C 1 sat. Nastala suspenzija se ohladi na 10°C, filtrira i ispere sa heksanom. Sirovi proizvod se doda ledenoj vodi i meša se 10 minuta, odfiltrira se, ispere sa hlednom vodom, dietil etrom i, osuši na vazduhu. Dobijaju se čvrsti kristali bež boje.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.89 (s, 1H), 7.98 (s, 1H)
Korak C: 5-bromo-4-hloro-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin
U 2 L-ski balon, zaobljenog dna i opremljen mehaničkom mešalicom, termometrom i sistemom za gas, stavljeno je 600 mL acetonitrila. Doda se 84.9 g jedinjenja prethodnog Koraka B (0.29 mol), 50.9 g N-bromosukcinimida (0.29 mol) i 8.5 mL kompleksa tetrafluoroborne kiseline dietil etra. Reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi 16 sati. Doda se još 22.9 g (0.12 mol) N-bromosukcinimida u smešu, iz tri porcije. Nakon hlađenja suspenzije na 0°C i mešanja u toku još 1 sata, precipitat se odfiltrira, ispere sa acetonitrilom i osuši na vazduhu. Proizvod se dobija kao čvrsti kristal bež boje.
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.88 (s, 1H)
Korak D: 5-bromo-4-hloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin
75.08 g jedinjenja prethodnog Koraka C (200 mmol), 53.63 g 2-(4-fluorofenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (240 mmol), 130 g cezijum karbonata (400 mmol), 2.245 g Pd(OAc)2(10 mmol) i 8.50 g 2-di-terc-butilfosfino-2’,4’,6’-triizopropilbifenila (20 mmol) se stavi u 2 L-ski balon. Doda se 600 mL tetrahidrofurana i 200 mL vode i, meša se preko noći na 70°C u atmosferi argona. Tetrahidrofuran se upari, a onda se proizvod sakupi filtracijom. Sirovi proizvod se ozvuči u 250 mL acetonitrila i ponovo se filtrira. Zatim, 5-bromo-4-hloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin kristališe iz smeše etanol/tetrahidrofuran (2:1).
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.02 (s, 1H), 7.80-7.77 (m, 2H), 7.47-7.43 (m, 2H)
Korak E: (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanska kiselina
1 eq. jedinjenja prethodnog Koraka D, 2 eq. (2R)-2-amino-3-(2-hidroksifenil) propanske kiseline i 3 eq. K2CO3se pomešaju u dimetil sulfoksidu (10 mL/mmol) i, meša se na 50°C sve dok se zapaža konverzija. Smeša se zatim razblaži sa vodom, zakiseli sa 1M rastvorom HCl (na pH = 1, ili na pH = 6 u prisustvu bazne amino grupe) i ekstrahuje sa etil acetatom, ili se precipitat formiran nakon zakišeljavanja izoluje filtracijom. Sirovi proizvod se prečisti putem preparativne reverzno fazne hromatografije, uz korišćenje 25 mM vodenog NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata, kako se dobija (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil) propanska kiselina.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 12.90 (br s, 1H), 9.65 (br s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.70 (m, 2H), 7.45-7.34 (m, 3H), 7.18 (dd, 1H), 7.04 (td, 1H), 6.80 (d, 1H), 6.72 (t, 1H), 4.96 (m, 1H), 3.31 (dd, 1H), 3.08 (dd, 1H) MS (M+H): 488.0
Korak F: (4-bromo-2-hloro-fenoksi)-trimetil-silan
20.8 g 4-bromo-2-hloro-fenola (100 mmol) se rastvori u 150 mL suvog tetrahidrofurana zatim, doda se 24.2 g heksametildisilazana (150 mmol). Reakciona smeša se meša na 85°C u atmosferi argona 1.5 sat, a zatim se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Dobijeni sirovi proizvod se koristi bez prethodnog prečišćavanja.
<1>H NMR (200 MHz, CDCl3) δ: 7.49 (d, 1H), 7.23 (dd, 1H), 6.75 (d, 1H), 0.26 (s, 9H) Korak G: 4-bromo-2-hloro-3-metil-fenol
48 mL rastvora n-butil litijuma (120 mmol, 2.5 M u heksanima) se, kap po kap, doda rastvoru od 12.1 g suvog diizopropilamina (120 mmol) u 250 mL suvog tetrahidrofurana na -78°C u atmosferi argona. Smeša se meša 30 minuta na istoj temperaturi zatim, kap po kap, doda se 28.0 g jedinjenja prethodnog Koraka F (100 mmol). Posle 2.5 sata, u vidu kapi se doda 21.3 g metil jodida (150 mmol), a zatim se uklanja kupatilo za hlađenje i, smeša se meša preko noći. Reakcija se ugasi sa 100 mL rastvora NH4OH i 200 mL rastvora NH4Cl i, ekstrahuje sa etil acetatom. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Dobijena tamna masa se podvrgne refluksu sa čistim heksanom, nekoliko puta (150-150 mL aliqvoti) i, dekantuje se ostavljajući crni katran. Spojene organske faze se ukoncentrišu pod sniženim pritiskom dajući 19.0 g sirovog proizvoda, koji se koristi bez prethodnog prečišćavanja.
<1>H NMR (200 MHz, CDCl3) δ: 7.32 (d, 1H), 6.76 (d, 1H), 5.62 (s, 1H), 2.49 (s, 3H)
Korak H: (4-bromo-2-hloro-3-metil-fenoksi)-trimetil-silan
20.8 g heksametildisilazana (129 mmol) se doda rastvoru od 19.0 g jedinjenja prethodnog Koraka H (86.0 mmol) u 150 mL suvog tetrahidrofurana. Smeša se meša na 85°C pod balonom argona tokom 1.5 čas i zatim, ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Dobijeni proizvod se koristi bez prethodnog prečišćavanja.
<1>H NMR (200 MHz, CDCl3) δ: 7.30 (d, 1H), 6.63 (d, 1H), 2.50 (s, 3H), 0.28 (s, 9H)
Korak I: 2-hloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenol
Rastvor od 25.2 g jedinjenja prethodnog Koraka H (86.0 mmol) u 250 mL suvog tetrahidrofurana je ohlađen na -78°C pod argonom i zatim, kap po kap je dodato 38 mL rastvora n-butil litijuma (94.6 mmol, 2.5M u heksanima). Posle 5 minuta, u vidu kapi je dodato 19.2 g 2-izopropoksi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (103 mmol). Uklanja se kupatilo za hlađenje i smeša ostavlja da se polako zagreje do sobne temperature. Zatim se smeša dodaje u 200 mL rastvora NH4Cl i ekstrahuje sa etil acetatom. Spojeni organski slojevi se ukoncentrišu pod sniženim pritiskom i propuste kroz sloj silika gela, korišćenjem heksana i etil acetata kao eluenata. Sirovi proizvod se rekristališe iz smeše etil acetata i heksana, kako se dobija 2-hloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioksaborolan-2-il)fenol.
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.40 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 2.49 (s, 3H), 1.27 (s, 12H)
Korak J: 1-[2-[2-hloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi] etil]-4-metil-piperazin
10.0 g jedinjenja prethodnog Koraka I (37.2 mmol), 8.7 g 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanola (60.3 mmol) i 15.8 g trifenilfosfina (60.3 mmol) se rastvori u 100 mL suvog toluena i onda se, kap po kap, doda 27 mL dietil azodikarboksilata (60.3 mmol, 40 % rastvor u toluenu). Smeša se meša na 50°C pod argonom sve dok se zapaža konverzija. Isparljive materije se upare pod sniženim pritiskom i, doda se 100 mL dietil etra. Precipitirani beli kristali se odfiltriraju i isperu sa dietil etrom. Filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i prečisti putem flash hromatografije korišćenjem hloroforma i metanola kao eluenata. Dobijeno ulje svetlo smeđe boje kristališe iz heksana, kako se dobija 1-[2-[2-hloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi]etil]-4-metil-piperazin u vidu čvrste materije zatvoreno-bele boje.
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 7.56 (d, 1H), 6.99 (d, 1H), 4.15 (t, 2H), 2.72 (t, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.50 (br s, 4H), 2.29 (br s, 4H), 2.13 (s, 3H), 1.29 (s, 12H)
Korak K: (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanska kiselina
1 eq. jedinjenja prethodnog Koraka E i 3 eq. jedinjenja prethodnog Koraka J se rastvore u dioksan:voda smeši 2:1 (10 mL/mmol), zatim se dodaju 2 eq. Cs2CO3, 5 mol% Pd(OAc)2i 0.2 eq. tri-terc-butilfosfonijum tetrafluoroborata i, smeša se meša na 120°C u mikrotalasnom reaktoru pod azotom sve dok se zapaža konverzija. Smeša se neutrališe sa 1M rastvorom HCl i ekstrahuje sa dihlorometanom. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše in vacuo. Sirovi proizvod se prečisti putem preparativne reverzno fazne hromatografije, korišćenjem 0.1 % vodenog rastvora trifluorosirćetne kiseline i acetonitrila kao eluenata, kako se dobija (2R)-2-[[5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanska kiselina kao smeša dijastereomera. Smeša se razdvaja pomoću flash hromatografije, korišćenjem HILIC kao eluenata. Dijastereoizomer koji se ranije eluira se sakuplja kao (2R)-2-[[(5Ra)5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanska kiselina.
MS (M+H): 676.2
Dijastereoizomer koji se eluira kasnije je sakupljen kao (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanska kiselina.
MS (M+H): 676.2
Korak L: etil (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi] fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanoat
4.51 g (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi] fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanske kiseline (6.67 mmol) se rastvori u 85 mL 1.25M HCl u etanolu i, meša se na 40°C preko noći. Smeša se zatim pažljivo razblaži sa rastvorom NaHCO3i ekstrahuje sa dihlorometanom. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu in vacuo. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem dihlorometana i metanola kao eluenata, kako se dobija etil (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il] amino]-3-(2-hidroksifenil)propanoat.
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.49 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.27-7.21 (m, 3H), 7.20-7.14 (m, 2H), 7.00 (td, 1H), 6.71 (dd, 1H), 6.60 (td, 1H), 6.39 (dd, 1H), 5.03 (d, 1H), 4.92 (m, 1H), 4.26 (t, 2H), 4.03 (m, 2H), 3.03 (dd, 1H), 2.78 (t, 2H), 2.54 (br, 4H), 2.36 (dd, 1H), 2.30 (br, 4H), 2.12 (s, 3H), 1.83 (s, 3H), 1.10 (t, 3H)
HRMS izračunato za C37H39ClFN5O4S: 703.2395; dobijeno 704.2450 (M+H)
Korak M: (E)-4-(dimetilamino)-1,1-dimetoksi-but-3-en-2-on
502.1 g 1,1-dimetoksipropan-2-ona (4.25 mol) i 506.4 g 1,1-dimetoksi-N,N-dimetil-metanamina (4.25 mol) se pomešaju u 2 L-skom balonu i, meša se na 105°C 3 sata. Nastali metanol se kontinuirano uklanja destilacijom. Kada prestane formiranje metanola (na 65°C gornjoj temperaturi), reakciona smeša se podvrgne destilaciji pod vakuumom (smanjujući postepeno pritisak na 30 mbar) da bi se uklonili sporedni proizvodi i neizreagovani polazni materijali. Sirovi proizvod se destiliše pri 0.1 mbar. Frakcije se sakupe između 107-118°C gornje temperature (temperatura kupatila 160-165°C) kako se dobija ulje žute boje.
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 7.59 (d, 1H), 5.17 (d, 1H), 4.42 (s, 1H), 3.25 (s, 6H), 3.09 (s, 3H), 2.78 (s, 3H)
Korak N: 4-(dimetoksimetil)-2-(2-metoksifenil)pirimidin
U smešu od 1.2 eq. 2-metoksibenzamidin soli sirćetne kiseline i 1 eq. jedinjenja prethodnog Koraka M u suvom metanolu (0.5 mL/mmol), deo po deo se doda 1.2 eq. natrijum metoksida i, smeša se meša na 75°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ohladi i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda voda i, ekstrahuje se sa dihlorometanom. Spojeni organski slojevi se osuše preko MgSO4, filtriraju i filtrat ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i etil acetata kao eluenata, kako se dobija 4-(dimetoksimetil)-2-(2-metoksifenil)pirimidin.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.93 (d, 1H), 7.55-7.44 (m, 3H), 7.16 (d, 1H), 7.06 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.37 (s, 6H)
Korak O: [2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metanol
261 mg jedinjenja prethodnog Koraka N (1.0 mmol) se rastvori u 2 mL 4M rastvora HCl (u dioksanu), zatim se doda 2 mL vode i, ova smeša se meša na 50°C 16 sati. Reakciona smeša se ohladi na 0°C zatim, deo po deo, doda se 320 mg NaOH (8.0 mmol). pH se podesi na 8, korišćenjem 10 % rastvora K2CO3zatim, doda se 76 mg natrijum borohidrida (2.0 mmol) i, smeša se meša 30 minuta na 0°C. Reakciona smeša se razblaži sa 5 mL vode i ekstrahuje sa etil acetatom. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i etil acetata kao eluenata, kako se dobija [2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metanol.
<1>H NMR (400 MHz, DMSOd6) δ: 8.84 (d, 1H), 7.50-7.42 (m, 3H), 7.14 (d, 1H), 7.03 (m, 1H), 5.66 (t, 1H), 4.58 (d, 2H), 3.75 (s, 3H)
Korak P: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin
1 eq. jedinjenja prethodnog Koraka L, 2 eq. jedinjenja prethodnog Koraka O i 3 eq. trifenilfosfina se rastvore u suvom toluenu (7 mL/mmol) u atmosferi azota, onda se doda 3 eq. di-terc-butil azodikarboksilata na sobnoj temperaturi. Smeša se onda meša na 50°C sve dok se zapaža konverzija. Isparljive materije se uklone in vacuo i, ostatak se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i etil acetata kao eluenata.
1 eq. formiranog derivata estra se rastvori u tetrahidrofuranu (15 mL/mmol) zatim, dodaju se 10 eq. litijum hidroksid monohidrata i voda (15 mL/mmol). Mešavina se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. pH se podesi na 6 sa 1M rastvorom HCl zatim, mešavina se razblaži sa slanim rastvorom, ekstrahuje sa dihlorometanom. Organski sloj se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti preparativnom reverzno faznom hromatografijom, korišćenjem 25 mM vodenog rastvora NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata, kako se dobija N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}-D-fenilalanin.
HRMS izračunato za C47H45ClFN7O5S: 873.2875, dobijeno: 437.6498 (M+2H)
Korak Q: 4-metoksibenzil N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoksilfenil)-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalaninat
1677 mg jedinjenja prethodnog Koraka P (1.92 mmol, 1 eq.), 1.51 g trifenilfosfina (5.76 mmol, 3 eq.) i 796 mg 4-metoksibenzil alkohola (5.76 mmol, 3 eq.) se rastvori u 20 mL suvog toluena, zatim se iz jednog dela doda 1.33 g di(terc)butil azodikarboksilata (5.76 mmol, 3 eq.). Dobijena smeša se meša na 50°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše i sirovi proizvod prečisti flash hromatografijom, korišćenjem etil acetat/metanol (koji sadrži 1.2 % NH3) kao eluenta. Proizvod Koraka Q se dobija u vidu kristala zatvoreno-bele boje.
HRMS izračunato za C55H53ClFN7O6S: 993.3450; dobijeno 497.6814 (M+2H)
Korak R: 4-metoksibenzil N-[(5Sa)-5-{4-[2-(4-{[(benziloksi)fosfinato]oksi}-4-metilpiperazin-4-ijum-1-il)etoksi]-3-hloro-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalaninat
300 mg jedinjenja prethodnog Koraka Q (0.301 mmol, 1 eq.) i 148 mg dibenzil hlorometil fosfata (0.451 mmol, 1.5 eq.) se meša u 1.5 mL suvog acetonitrila na 40°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša je injektovana direktno na prethodno kondicioniranu kolonu sa 24 g silike, zatim je prečišćena flash hromatografijom korišćenjem etil acetat/metanol (koji sadrži 1.2 % NH3) kao eluenta. Jedinjenje Koraka R se dobija u vidu kristala zatvoreno-bele boje.
HRMS izračunato za C63H62ClFN7O10PS: 1193.3689; dobijeno 597.6928 (M+2H)
Korak S: Primer 8
U rastvor od 100 mg jedinjenja prethodnog Koraka R (0.0837 mmol) u 840 mL dihlorometana, doda se 152 mL 33 % HBr u sirćetnoj kiselini i, meša se na 0°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše, prečisti flash hromatografijom, korišćenjem etil acetat/metanola (koji sadrži 1.2 % NH3) kao eluenta. Zatim se dobijeni proizvod prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem acetonitril / 5mM NH4HCO3kao eluenata. Posle liofilizacije, dobija se Primer 8 kao bela čvrsta materija.
HRMS izračunato za C48H48BrClFN7O9PS: 983.2645; dobijeno 492.6377 (M+2H)
Primer 9: {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2,6-dihloro-3,5-dimetilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogen fosfat
Korak A: 4-bromo-2,6-dihloro-3,5-dimetil-fenol
30.16 g 4-bromo-3,5-dimetil-fenola (150 mmol) se rastvori u smeši od 75 mL 1,2-dihloroetana i 75 mL acetonitrila, onda se, deo po deo, doda 40.06 g N-hlorosukcinimida (300 mmol, 2.0 eq.) i smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i ostatak rastvori u dihlorometanu, ispere sa vodom i slanim rastvorom. Organski sloj se osuši preko Na2SO4i ukoncentriše pod sniženim pritiskom i, u sledećem koraku se koristi bez prethodnog prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 10.10 (s, 1H), 2.46 (s, 6H)
Korak B: 1-bromo-3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-benzen
U rastvor od 26.0 g jedinjenja prethodnog Koraka A (96.3 mmol, 1.0 eq.) i 26.60 g K2CO3(192.6 mmol, 2.0 eq.) u 300 mL acetonitrila, doda se 6.6 mL metil jodida (105.9 mmol, 1.1 eq.) i smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Čvrste materije se odfiltriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se rastvori u dihlorometanu, ispere sa vodom i slanim rastvorom.
Organski sloj se osuši preko Na2SO4i ukoncentriše pod sniženim pritiskom i u sledećem koraku se koristi bez prethodnog prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 3.78 (s, 3H), 2.49 (s, 6H)
Korak C: 2-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan
10.0 g jedinjenja iz gornjeg Koraka B (35.2 mmol, 1.0 eq.) se rastvori u 360 mL suvog tetrahidrofurana pod azotom i ohladi se na -78°C sa smešom suvi led-aceton. Doda se 23.2 mL n-butil litijuma (1.6M u heksanima) (37.0 mmol, 1.05 eq.) i, smeša se meša u toku 15 minuta, zatim se doda 8.6 mL 2-izopropoksi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (42.24 mmol, 1.2 eq.) i smeša se ostavlja da se zagreje do sobne temperature. Ugasi se sa slanim rastvorom, ekstrahuje sa dihlorometanom, osuši preko Na2SO4, filtrira i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i etil acetata kao eluenata kako bi se dobio 2-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 3.81 (s, 3H), 2.33 (s, 6H), 1.34 (s, 12H)
Korak D: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)tiofen-3-karboksilat
3.92 g etil 4-bromotiofen-3-karboksilata (16.68 mmol, 1.0 eq.) i 9.9 g jedinjenja prethodnog Koraka C (30.0 mmol, 1.8 eq.) se rastvori u 140 mL dioksana, zatim se doda 10.87 g Cs2CO3(33.36 mmol, 2.0 eq.) rastvorenog u 40 mL vode. Onda se doda 590 mg bis(di-terc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfin)dihloropaladijuma(II) (0.83 mmol, 0.05 eq.) i, smeša se meša pod azotom na temperaturi refluksa sve dok se zapaža konverzija. Zatim se razblaži sa dihlorometanom i slanim rastvorom. Kada se faze razdvoje, vodena faza se ekstrahuje sa dihlorometanom. Organski slojevi se spoje i osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i etil acetata kao eluenata kako se dobija etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetilfenil)tiofen-3-karboksilat.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.53 (d, 1H), 7.47 (d, 1H), 4.02 (q, 2H), 3.83 (s, 3H), 1.95 (s, 6H), 1.00 (t, 3H) HRMS (M+NH4)<+>= 376.0538
Korak E: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-2,5-dijodo-tiofen-3-karboksilat
2.65 g jedinjenja prethodnog Koraka D (7.38 mmol, 1.0 eq.) se rastvori u 75 mL acetonitrila, onda se doda 2.2 mL kompleksa fluoroborne kiseline dietil etra (16.23 mmol, 2.2 eq.) i 3.65 g N-jodosucinimida (16.23 mmol, 2.2 eq.) i, smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i, sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i etil acetata kao eluenata kako se dobija 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetilfenil)-2,5-dijodo-tiofen-3-karboksilat.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 3.98 (q, 2H), 3.84 (s, 3H), 1.92 (s, 6H), 0.84 (t, 3H)
Korak F: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-jodo-tiofen-3-karboksilat
5.29 g jedinjenja prethodnog Koraka E (8.66 mmol, 1.0 eq.) se rastvori u 90 mL suvog tetrahidrofurana, zatim ohladi na -78°C u atmosferi argona. Doda se 6.7 mL izopropil magnezijum hlorid litijum hlorid kompleksa (1.3M u tetrahidrofuranu) (8.66 mmol, 1.0 eq.) i, smeša se meša na -78°C 30 minuta. Zatim se doda zasićeni vodeni NH4Cl i, smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se osuši preko Na2SO4i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i etil acetata kao eluenata kako se dobija etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-jodo-tiofen-3-karboksilat.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.71 (s, 1H), 4.01 (q, 2H), 3.86 (s, 3H), 1.89 (s, 6H), 0.99 (t, 3H)
Korak G: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)-tiofen-3-karboksilat
4.20 g jedinjenja prethodnog Koraka F (8.66 mmol, 1.0 eq.) i 1.82 g 4-fluorofenilborne kiseline (13.00 mmol, 1.5 eq.) se rastvori u 80 mL dioksana, zatim se doda 5.64 g Cs2CO3(17.32 mmol, 2.0 eq.) rastvorenog u 20 mL vode. Onda se doda 500 mg tetrakis(trifenilfosfino)paladijuma(0) (0.43 mmol, 1.15 eq.) i, i, smeša se meša pod azotom na 80°C sve dok se zapaža konverzija. Potom se vrši razblaživanje sa dihlorometanom i slanim rastvorom. Kada se faze razdvoje, vodena faza se ekstrahuje sa dihlorometanom. Organski slojevi se spoje i osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i etil acetata kao eluenata kako se dobija etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetilfenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-karboksilat.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.58 (s, 1H), 7.22-7.10 (m, 4H), 4.03 (q, 2H), 3.82 (s, 3H), 1.92 (s, 6H), 1.00 (t, 3H) HRMS (M+H)<+>= 453.0498
Korak H: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)-2-nitrotiofen-3-karboksilat
1.97 g jedinjenja prethodnog Koraka G (4.34 mmol, 1.0 eq.) se rastvori u 40 mL suvog acetonitrila, pa se doda 576 mg nitronijum tetrafluoroborata (4.34 mmol, 1.0 eq.) i, smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Onda se razblaži sa dihlorometanom i slanim rastvorom. Kada se faze razdvoje, vodena faza se ekstrahuje sa dihlorometanom. Organski slojevi se spoje i osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i etil acetata kao eluenata kako se dobija etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)-2-nitro-tiofen-3-karboksilat.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 7.37-7.33 (m, 2H), 7.32-7.26 (m, 2H), 4.14 (q, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.06 (s, 6H), 0.88 (t, 3H)
Korak I: etil 2-amino-4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)-tiofen-3-karboksilat
1.85 g jedinjenja prethodnog Koraka H (3.71 mmol, 1.0 eq.) se rastvori u smeši od 90 mL sirćetne kiseline i 18 mL vode, onda se, deo po deo, doda 2.43 g cinka u prahu (37.1 mmol, 10 eq.) i, smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i, sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i etil acetata kao eluenata kako se dobija etil 2-amino-4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3 -karboksilat.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 7.73 (s, 2H), 7.12-7.06 (m, 2H), 7.02-6.97 (m, 2H), 3.86-3.80 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.01 (s, 6H), 0.72 (t, 3H) HRMS (M+H)<+>= 456.0598
Korak J: 5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)-3H-tieno[2,3-d] pirimidin-4-on
1.10 g jedinjenja prethodnog Koraka I (2.35 mmol, 1.0 eq.) se rastvori u 20 mL formamida i meša se na 150°C sve dok se zapaža konverzija. Onda se izruči na vodu i, precipitirani proizvod se sakupi filtracijom kako se dobija 5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.53 (br s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.23-7.16 (m, 4H), 3.84 (s, 3H), 1.96 (s, 6H) HRMS (M+H)<+>= 449.0289
Korak K: 4-hloro-5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)-tieno[2,3-d]pirimidin
700 mg jedinjenja prethodnog Koraka J (1.56 mmol, 1.0 eq.) se rastvori u 6 mL fosfor oksihlorida i meša se na 90°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše pod sniženim pritiskom, zatim se u sirovi proizvod doda ledena voda i ozvuči se 10 minuta. Precipitirani proizvod se sakupi filtracijom kako se dobija 4-hloro-5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetilfenil)-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 9.02 (s, 1H), 7.38-7.26 (m, 4H), 3.86 (s, 3H), 1.99 (s, 6H) HRMS (M+H)<+>= 466.9954
Korak L: 2,6-dihloro-4-[4-hloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3,5-dimetilfenol i 4-[4-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-2,6-dihloro-3,5-dimetilfenol
U mešani rastvor od 700 mg jedinjenja prethodnog Koraka K (1.50 mmol, 1.0 eq.) u 15 mL dihlorometana, doda se 3.0 mL bor tribromida (1M u dihlorometanu) (3.0 mmol, 2.0 eq.) na 0°C i, smeša se ostavlja da se zagreje do sobne temperature i meša se sve dok se zapaža konverzija. Mešavina se ugasi dodatkom zasićenog vodenog NH4Cl i ekstrahuje sa dihlorometanom. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i etil acetata kao eluenata kako se dobija 2,6-dihloro-4-[4-hloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3,5-dimetil-fenol i 4-[4-bromo-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-2,6-dihloro-3,5-dimetil-fenol u vidu smeše proizvoda 37:63.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 10.14 (br s, 1H), 9.01 (s, 1H), 7.40-7.23 (m, 4H), 1.95 (s, 6H) i 10.14 (br s, 1H), 8.93 (s, 1H), 7.40-7.23 (m, 4H), 1.93 (s, 6H) HRMS (M+H)<+>= 452.9800 and 496.9287
Korak M: 4-hloro-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin i 4-bromo-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin
300 mg smeše 2,6-dihloro-4-[4-hloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3,5-dimetil-fenola i 4-[4-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-2,6-dihloro-3,5-dimetil-fenola (0.62 mmol), 286 mg 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanola (1.98 mmol, 3.0 eq.) i 520 mg trifenil fosfina (1.98 mmol, 3.0) se rastvore u 10 mL suvog toluena, zatim se doda 460 mg di-terc-butil azodikarboksilata (1.98 mmol, 3.0 eq.). Smeša se meša na 50°C pod azotom sve dok se zapaža konverzija. Isparljive materije se upare pod sniženim pritiskom i sirovi intermedijer se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem etil acetata i metanola kao eluenata da bi se dobili 4-hloro-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin i 4-bromo-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin u vidu 35:65 smeše proizvoda.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 9.02 (s, 1H), 7.40-7.22 (m, 4H), 4.11 (t, 2H), 2.78 (t, 2H), 2.63-2.20 (m, 8H), 2.17 (br s, 3H), 1.98 (s, 6H) i 8.94 (s, 1H), 7.40-7.22 (m, 4H), 4.11 (t, 2H), 2.78 (t, 2H), 2.63-2.20 (m, 8H), 2.15 (br s, 3H), 1.98 (s, 6H) HRMS (M+H)+ = 579.0968 and 623.0455
Korak N: etil (2R)-2-[5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi]fenil]propanoat
200 mg smeše 4-hloro-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidina i 4-bromo-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidina (0.33 mmol, 1.0 eq.), 211 mg etil (2R)-2-hidroksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanoata (0.52 mmol, 1.58 eq.) i 202 mg Cs2CO3(0.62 mmol, 1.88 eq.) se rastvori u 5 mL terc-butanola i, smeša se meša na 70°C sve dok se zapaža konverzija. Razblaži se sa etil acetatom i zatim ispere sa slanim rastvorom. Organski sloj se osuši preko Na2SO4, filtrira i ukoncentriše pod sniženim pritiskom i prečisti putem flash hromatografije korišćenjem etil acetata i metanola kao eluenata da bi se dobio etil (2R)-2-[5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi] fenil]propanoat.
MS: (M+H) = 951.0
Korak O: (2R)-2-[5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi]fenil]propanska kiselina
200 mg jedinjenja prethodnog Koraka N se rastvori u 5 mL dioksan-vodi 1:1 i, doda se 145 mg litijum hidroksid monohidrata (3.45 mmol). Smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Zatim se razblaži sa slanim rastvorom, neutrališe sa 2M HCl, ekstrahuje sa dihlorometanom, osuši preko Na2SO4, filtrira i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem preparativne reverzno fazne hromatografije korišćenjem 5 mM vodenog NH4HCO3rastvora i acetonitrila, kako se dobija (2R)-2-[5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanska kiselina.
HRMS izračunato za C48H45N6O6FSCl2: 922.2482, dobijeno: 462.1310 (M+2H)
Korak P: (4-metoksifenil)metil (2R)-2-[5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanoat
400 mg jedinjenja prethodnog Koraka O (0.433 mmol, 1 eq.), 341 mg trifenilfosfina (1.30 mmol, 3.0 eq.) i 180 mg 4-metoksibenzil alkohola (1.30 mmol, 3.0 eq.) se rastvori u 5 mL suvog toluena, zatim se iz jednog dela doda 300 mg di(terc)butil azodikarboksilata (1.30 mmol, 3.0 eq.). Nastala mešavina se meša na 50°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše, sirovi proizvod se prečisti flash hromatografijom korišćenjem dihlorometan/metanol (koji sadrži 1.2 % NH3) kao eluenta kako se dobija (4-metoksifenil)metil (2R)-2-[5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanoat.
MS: (M+H) = 1043.2
Korak Q: benzil [4-[2-[2,6-dihloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-[(1R)-2-[(4-metoksifenil) metoksi]-1-[[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]metil]-2-okso-etoksi] tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3,5-dimetil-fenoksi]etil]-1-metil-piperazin-1-ijum-1-il]metil fosfat
428 mg jedinjenja prethodnog Koraka P (0.62 mmol, 1.5 eq.) se meša u 4 mL suvog acetonitrila na 40°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se direktno injektuje na prethodno kondicioniranu kolonu sa 24 g silike, zatim se prečišćava flash hromatografijom korišćenjem etil acetata/metanola (koji sadrži 1.2 % NH3) kao eluenta da bi se dobio benzil [4-[2-[2,6-dihloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-[(1R)-2-[(4-metoksifenil) metoksi]-1-[[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]metil]-2-okso-etoksi] tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3,5-dimetil-fenoksi]etil]-1-metil-piperazin-1-ijum-1-il]metil fosfat.
MS: (M+H) = 1243.2
Korak R: Primer 9
U rastvor od 230 mg jedinjenja prethodnog Koraka P (0.185 mmol) u 3 mL dihlorometana, doda se 110 µL 33 % HBr u sirćetnoj kiselini i, meša se na 0°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše do suvog i, nastali proizvod se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem acetonitrila / 25 mM NH4HCO3kao eluenata. Posle liofilizacije Primer 9 je dobijen u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C49H48Cl2FN6O10PS: 1032.2251, dobijeno: 517.1213 (M+2H)
Primer 10: {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-3,5-dimetil fenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogen fosfat
U Primeru 10, procedura je kao u Primeru 1, uz korišćenje odgovarajućeg hloridnog derivata formule (IV) i odgovarajućeg tienopirimidinskog jedinjenja formule (II).
Primer 11: {[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil](dimetil)amonijum}metil hidrogenfosfat
Korak A: 4-metoksibenzil (2R)-2-{[(5Sa-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofeniltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanoat
928 mg (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)propanske kiseline (1.13 mmol, 1 eq.; sintetisana prema WO 2015/097123), 889 mg trifenilfosfina (3.39 mmol, 3 eq.) i 468 mg 4-metoksibenzil alkohola (3.39 mmol, 3 eq.) se rastvori u 12 mL suvog toluena, zatim se iz jednog dela doda 781 mg di(terc)butil azodikarboksilata (3.39 mmol, 3 eq.). Nastala smeša se meša na 50°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše i sirovi proizvod prečisti flash hromatografijom, korišćenjem etil acetat/metanol (koji sadrži 1.2 % NH3) kao eluenta. Proizvod Koraka A se dobija u vidu kristala zatvoreno-bele boje.
HRMS izračunato za C52H47ClFN5O7S: 939.2869; dobijeno 470.6511 (M+2H)
Korak B: benzil [(2-{2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metilfenoksi}etil)(dimetil)amonijum]metil fosfat
282 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (0.300 mmol, 1 eq.) i 147 mg dibenzil hlorometil fosfata (0.450 mmol, 1.5 eq.) se meša u 1.5 mL suvog acetonitrila na 40°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se direktno injektuje na prethodno kondicioniranu kolonu sa 24 g silike, zatim se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem etil acetat/metanol (koji sadrži 1.2 % NH3) kao eluenta. Jedinjenje Koraka B je dobijeno u vidu kristala zatvoreno-bele boje.
HRMS izračunato za C60H56ClFN5O11PS: 1139.3107; dobijeno 570.6613 (M+2H)
Korak C: Primer 11
U rastvor od 110 mg jedinjenja prethodnog Koraka B (0.0964 mmol) u 1mL dihlorometana, doda se 175 µL 33 % HBr u sirćetnoj kiselini i meša se na 0°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se ukoncentriše, prečisti flash hromatografijom korišćenjem etil acetat/metanol (koji sadrži 1.2 % NH3) kao eluenta. Zatim se dobijeni proizvod prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem acetonitrila / 5mM NH4HCO3kao eluenata. Posle liofilizacije, Primer 11 je dobijen kao bela čvrsta materija. HRMS izračunato za C45H42BrClFN5O10PS: 929.2062; dobijeno 465.6087 (M+2H)
U sledećim Primerima 12 do 16, procedura je kao u Primeru 1, uz korišćenje odgovarajućeg hloridnog derivata formule (IV) i odgovarajućeg tienopirimidinskog jedinjenja formule (II).
Primer 12: 1-{4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}etil hidrogen fosfat
Primer 13: 1-{4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}etil hidrogen fosfat
Primer 14: {1-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-4-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogen fosfat
Primer 15: {1-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-4-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogen fosfat
Primer 16: {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil sulfat
Primer 17: 1-[(acetiloksi)metil]-4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
Korak A: 1-[(acetiloksi)metil]-4-(2-{2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metilfenoksi}etil)-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
U rastvor od 149 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 1 (0.150 mmol, 1 eq.) i 33 mg hlorometil acetata (0.300 mmol, 2.0 eq.) u 2 mL suvog acetonitrila, doda se 22 mg natrijum jodida (0.15 mmol, 1.0 eq.) i, reakciona smeša se meša na 70°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Jedinjenje Koraka A se dobija u vidu trifluoroacetatne soli. MS: M = 1067.2
Korak B: Primer 17
U rastvor od 73 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (0.062 mmol, 1 eq.) u 4 mL dihlorometana, doda se 300 µL trifluorosirćetne kiseline i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog i zatim prečisti putem reverzno fazne hromatografije, korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Posle liofilizacije, Primer 17 se dobija u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C50H49ClFN6O8S: 947.3000; dobijeno 947.3001 (M)
Primer 18: 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-{[(etoksikarbonil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum
Korak A: 4-(2-{2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d] pirimidin-5-il]-3-metilfenoksi}etil)-1-{[(etoksikarbonil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
U rastvor od 200 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 1 (0.201 mmol, 1 eq.) i 56 mg etil hlorometil karbonata (0.402 mmol, 2.0 eq.) u 2 mL suvog acetonitrila, doda se 30 mg natrijum jodida (0.201 mmol, 1.0 eq.) i, reakciona smeša se meša na 70°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Jedinjenje Koraka A se dobija u vidu trifluoroacetatne soli.
HRMS izračunato za C59H59ClFN6O10S: 1097.3680; dobijeno 1097.3694 (M)
Korak B: Primer 18
U rastvor od 162 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (0.134 mmol, 1 eq.) u 4 mL dihlorometana, doda se 300 µL trifluorosirćetne kiseline i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog i zatim prečisti putem reverzno fazne hromatografije, korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Posle liofilizacije, Primer 18 se dobija u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C51H51ClFN6O9S: 977.3105; dobijeno 977.3122 (M)
Primer 19: 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-{[(dietilkarbamoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
Korak A: 4-(2-{2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d] pirimidin-5-il]-3-metilfenoksi}etil)-1-{[(dietilkarbamoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
U rastvor od 200 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 1 (0.201 mmol, 1 eq.) i 67 mg hlorometil N,N-dietilkarbamata (0.402 mmol, 2.0 eq.) u 2 mL suvog acetonitrila, doda se 30 mg natrijum jodida (0.201 mmol, 1.0 eq.) i, reakciona smeša se meša na 70°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Jedinjenje Koraka A se dobija u vidu trifluoroacetatne soli.
HRMS izračunato za C61H64ClFN7O9S: 1124.4153; dobijeno 1124.4209 (M)
Korak B: Primer 19
U rastvor od 192 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (0.155 mmol, 1 eq.) u 4 mL dihlorometana, doda se 300 µL trifluorosirćetne kiseline i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog i zatim prečisti putem reverzno fazne hromatografije, korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Posle liofilizacije, Primer 19 se dobija u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C53H56ClFN7O8S: 1004.3578; dobijeno 1004.3579 (M)
Primer 20: 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-[(gliciloksi)metil]-1-metilpiperazin-1-ijum
U Primeru 20, procedura je kao u Primeru 1, uz korišćenje odgovarajućeg hloridnog derivata formule (IV) i odgovarajućeg tienopirimidinskog jedinjenja formule (II). Dobijeno jedinjenje je kvaternerna amonijum so za koju kontrajoni mogu biti odabrani od: bromida, hlorida, jodida, acetata, trifluoroacetata, benzoata, mezilata, tozilata, triflata, ili sličnih.
Primer 21: 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-{1-[(dietilkarbamoil)oksi]etil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
Korak A: 1-hloroetil N,N-dietilkarbamae
U rastvor od 1.828 g dietilamina (25 mmol, 1.0 eq.) u tetrahidrofuranu, kap po kap, doda se 3.574 g 1-hloroetil karbonohloridata (25 mmol, 1.0 eq.) na -78°C, onda se u vidu kapi doda i piridin na -78°C. Reakciona smeša se meša na ovoj temperaturi 30 minuta, onda se ostavlja da se polako zagreje na sobnu temperaturu (3 sata) i, meša se preko noći. Reakciona smeša se ukoncentriše, sirovi proizvod se razblaži sa 70 mL dihlorometana, a onda se ispere sa 50 mL 1N vodene HCl pa zatim, dva puta sa 50 mL slanog rastvora. Organski sloj se osuši preko MgSO4, filtrira se, filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom, kako se dobija 1-hloroetil N,N-dietilkarbamat u vidu ulja svetlo smeđe boje.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): 6.64 (q, 1H), 3.34 (m, 4H), 1.83 (d, 3H), 1.17 (t, 6H).
Korak B: 4-(2-{2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d] pirimidin-5-il]-3-metilfenoksi}etil)-1-{1-[(dietilkarbamoil)oksi]etil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
U rastvor od 250 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 1 (0.251 mmol, 1.0 eq.) i 225 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (1.26 mmol, 5.0 eq.) u 5 mL acetonitrila, doda se 75 mg natrijum jodida (0.50 mmol, 2.0 eq.) i meša se na 45°C 45 minuta. Reakciona smeša se ohladi, filtrira, a onda se prečisti putem reverzno fazne hromatografije, korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Jedinjenja Koraka B se dobijaju u vidu trifluoroacetatnih soli dijastereomera (dijastereomeri nisu razdvojeni).
MS: M = 1138.4
Korak C: Primer 21
U rastvor od 81 mg jedinjenja prethodnog Koraka B (0.0647 mmol, 1 eq.) u 5 mL dihlorometana, doda se 800 µL trifluorosirćetne kiseline i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog zatim, prečisti se putem reverzno fazne hromatografije, korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Posle liofilizacije, Primer 21 se dobija u vidu bele čvrste materije (dijastereomeri nisu razdvojeni).
HRMS izračunato za C54H58ClFN7O8S: 1018.3735; dobijeno 509.6925 (M+H)<2+>
Primer 22: 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metil-1-[(5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil]piperazin-1-ijum trifluoroacetat
Korak A: 4-(2-{2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d] pirimidin-5-il]-3-metilfenoksi}etil)-1-metil-1-[(5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil] piperazin-1-ijum trifluoroacetat
U rastvor od 348 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 1 (0.350 mmol, 1 eq.) i 104 mg 4-(hlorometil)-5-metil-1,3-dioksol-2-ona (0.700 mmol, 2.0 eq.) u 2 mL suvog acetonitrila, doda se 52 mg natrijum jodida (0.35 mmol, 1.0 eq.) i, reakciona smeša se meša na 70°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Jedinjenje Koraka A se dobija u vidu trifluoroacetatne soli. MS: M = 1107.2
Korak B: Primer 22
U rastvor od 250 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (0.205 mmol, 1 eq.) u 8 mL dihlorometana, doda se 600 µL trifluorosirćetne kiseline i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog i zatim prečisti putem reverzno fazne hromatografije, korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Posle liofilizacije, Primer 22 se dobija u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C52H49ClFN6O9S: 987.2949; dobijeno 987.2961 (M)
Primer 23: 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metil-1-[(L-valiloksi)metil]piperazin-1-ijum
U Primeru 23, procedura je kao u Primeru 1, uz korišćenje odgovarjućeg hloridnog derivata formule (IV) i odgovarajućeg tienopirimidinskog jedinjenja formule (II). Dobijeno jedinjenje je kvaternerna amonijum so za koju kontrajoni mogu biti odabrani od: bromida, hlorida, jodida, acetata, trifluoroacetata, benzoata, mezilata, tozilata, triflata, ili sličnih.
Primer 24: 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-{[(2,2-dimetilpropanoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
Korak A: 4-(2-{2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d] pirimidin-5-il]-3-metilfenoksi}etil)-1-{[(2,2-dimetilpropanoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
U rastvor od 249 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 1 (0.250 mmol, 1 eq.) i 75 mg hlorometil 2,2-dimetilpropanoata (0.500 mmol, 2.0 eq.) u 2 mL suvog acetonitrila, doda se 37 mg natrijum jodida (0.25 mmol, 1.0 eq.) i, reakciona smeša se meša na 70°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Jedinjenje Koraka A se dobija u vidu trifluoroacetatne soli.
HRMS izračunato za C61H63ClFN6O9S: 1109.4044; dobijeno 1109.4040 (M)
Korak B: Primer 24
U rastvor od 216 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (0.177 mmol, 1 eq.) u 8 mL dihlorometana, doda se 600 µL trifluorosirćetne kiseline i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog i zatim prečisti putem reverzno fazne hromatografije, korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Posle liofilizacije, Primer 24 se dobija u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C53H55ClFN6O8S: 989.3469; dobijeno 989.3480 (M)
Primer 25: 1-[(acetiloksi)metil]-4-[2-(3-bromo-4-[(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
Korak A: 1-[(acetiloksi)metil]-4-(2-{3-bromo-2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]fenoksi}etil)-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
U rastvor od 212 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 5 (0.20 mmol, 1 eq.) i 43 mg hlorometil acetata (0.40 mmol, 2.0 eq.) u 2 mL suvog acetonitrila, doda se 30 mg natrijum jodida (0.20 mmol, 1.0 eq.) i, reakciona smeša se meša na 70°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Jedinjenje Koraka A se dobija u vidu trifluoroacetatne soli. MS: M = 1131.0
Korak B: Primer 25
U rastvor od 105 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (0.0842 mmol, 1 eq.) u 4 mL dihlorometana, doda se 300 µL trifluorosirćetne kiseline i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog i zatim prečisti putem reverzno fazne hromatografije, korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Posle liofilizacije, Primer 25 se dobija u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C49H46BrClFN6O8S: 1011.1948; dobijeno 1011.1949 (M)
Primer 26: 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-{[(etoksikarbonil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
Korak A: 4-(2-{3-bromo-2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]fenoksi}etil)-1-{[(etoksikarbonil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
U rastvor od 252 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 5 (0.20 mmol, 1 eq.) i 55 mg etil hlorometil karbonata (0.40 mmol, 2.0 eq.) u 2 mL suvog acetonitrila, doda se 30 mg natrijum jodida (0.20 mmol, 1.0 eq.) i, reakciona smeša se meša na 70°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Jedinjenje Koraka A se dobija u vidu trifluoroacetatne soli.
HRMS izračunato za C58H56BrClFN6O10S: 1161.2629 dobijeno 1161.2674 (M) Korak B: Primer 26
U rastvor od 240 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (0.188 mmol, 1 eq.) u 4 mL dihlorometana, doda se 300 µL trifluorosirćetne kiseline i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog i zatim prečisti putem reverzno fazne hromatografije, korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Posle liofilizacije, Primer 26 se dobija u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C50H48BrClFN6O9S: 1041.2054; dobijeno 1041.2049 (M)
Primer 27: 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-{[(dietilkarbamoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
Korak A: 4-(2-{3-bromo-2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]fenoksi}etil)-1-{[(dietilkarbamoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
U rastvor od 212 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 5 (0.20 mmol, 1 eq.) i 66 mg hlorometil N,N-dietilkarbamata (0.40 mmol, 2.0 eq.) u 2 mL suvog acetonitrila, doda se 30 mg natrijum jodida (0.20 mmol, 1.0 eq.) i, reakciona smeša se meša na 70°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Jedinjenje Koraka A se dobija u vidu trifluoroacetatne soli.
HRMS izračunato za C60H61BrClFN7O9S: 1188.3102; dobijeno 1188.3101 (M)
Korak B: Primer 27
U rastvor od 208 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (0.160 mmol, 1 eq.) u 4 mL dihlorometana, doda se 300 µL trifluorosirćetne kiseline i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog i zatim prečisti putem reverzno fazne hromatografije, korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Posle liofilizacije, Primer 27 se dobija u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C52H53BrClFN7O8S: 1068.2527; dobijeno 1068.2514 (M)
Primer 28: 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-[(gliciloksi)metil]-1-metilpiperazin-1-ijum
U Primeru 28, procedura je kao u Primeru 1, uz korišćenje odgovarajućeg hloridnog derivata formule (IV) i odgovarajućeg tienopirimidinskog jedinjenja formule (II). Dobijeno jedinjenje je kvaternerna amonijum so za koju kontrajoni mogu biti odabrani od: bromida, hlorida, jodida, acetata, trifluoroacetata, benzoata, mezilata, tozilata, triflata, ili sličnih.
Primer 29: 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-{1-[(dietilkarbamoil)oksi]etil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
Korak A: 4-(2-{3-bromo-2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]fenoksi}etil)-1-{1-[(dietilkarbamoil)oksi]etil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
U rastvor od 250 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 5 (0.236 mmol, 1.0 eq.) i 212 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 21 (1.18 mmol, 5.0 eq.) u 5 mL acetonitrilu, doda se 71 mg natrijum jodida (0.471 mmol, 2.0 eq.) i, meša se na 45°C 45 minuta. Reakciona smeša se ohladi, filtrira, zatim se prečisti putem reverzno fazne hromatografije, korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Jedinjenja Koraka A se dobijaju u vidu trifluoroacetatnih soli dijastereomera (dijastereomeri nisu razdvojeni).
MS: (M+H)<2+>=602.8
Korak B: Primer 29
U rastvor od 51 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (0.0387 mmol, 1 eq.) u 5 mL dihlorometana, doda se 800 µL trifluorosirćetne kiseline i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog i zatim se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Posle liofilizacije, Primer 29 se dobija u vidu bele čvrste materije (dijastereomeri nisu razdvojeni).
HRMS izračunato za C53H55BrClFN7O8S: 1082.2683; dobijeno 541.6396 (M+H)<2+>i 541.6389 (M+H)<2+>
Primer 30: 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metil-1-[(5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil]piperazin-1-ijum trifluoroacetat
Korak A: 4-(2-{3-bromo-2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]fenoksi}etil)-1-metil-1-[(5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il) metil]piperazin-1-ijum trifluoroacetat
U rastvor od 212 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 5 (0.200 mmol, 1 eq.) i 59 mg 4-(hlorometil)-5-metil-1,3-dioksol-2-ona (0.40 mmol, 2.0 eq.) u 2 mL suvog acetonitrila, doda se 30 mg natrijum jodida (0.20 mmol, 1.0 eq.) i, reakciona smeša se meša na 70°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Jedinjenje Koraka A se dobija u vidu trifluoroacetatne soli.
HRMS izračunato za C59H54BrClFN6O10S: 1171.2473; dobijeno 1171.2461 (M)
Korak B: Primer 30
U rastvor od 225 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (0.175 mmol, 1 eq.) u 8 mL dihlorometana, doda se 600 µL trifluorosirćetne kiseline i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog i zatim se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Posle liofilizacije, Primer 30 se dobija u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C51H46BrClFN6O9S: 1051.1897; dobijeno 1051.1891 (M)
Primer 31: 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metil-1-[(L-valiloksi)metil]piperazin-1-ijum
U Primeru 31, procedura je kao u Primeru 1, uz korišćenje odgovarajućeg hloridnog derivata formule (IV) i odgovarajućeg tienopirimidinskog jedinjenja formule (II). Dobijeno jedinjenje je kvaternerna amonijum so za koju kontrajoni mogu biti odabrani od: bromida, hlorida, jodida, acetata, trifluoroacetata, benzoata, mezilata, tozilata, triflata, ili sličnih.
Primer 32: 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-{[(2,2-dimetilpropanoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
Korak A: 4-(2-{3-bromo-2-hloro-4-[6-(4-fluorofenil)-4-{[(2R)-1-[(4-metoksibenzil)oksi]-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)-1-oksopropan-2-il]oksi}-(5Sa)-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]fenoksi}etil)-1-{[(2,2-dimetilpropanoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum trifluoroacetat
U rastvor od 212 mg jedinjenja dobijenog u Koraku A Primera 5 (0.200 mmol, 1 eq.) i 60 mg hlorometil 2,2-dimetilpropanoata (0.40 mmol, 2.0 eq.) u 2 mL suvog acetonitrila, doda se 30 mg natrijum jodida (0.20 mmol, 1.0 eq.) i reakciona smeša se meša na 70°C sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Jedinjenje Koraka A se dobija u vidu trifluoroacetatne soli.
HRMS izračunato za C60H60BrClFN6O9S: 1173.2993; dobijeno 1173.2994 (M)
Korak B: Primer 32
U rastvor od 215 mg jedinjenja prethodnog Koraka A (0.167 mmol, 1 eq.) u 8 mL dihlorometana, doda se 600 µL trifluorosirćetne kiseline i, reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok se zapaža konverzija. Reakciona smeša se upari do suvog i zatim se prečisti putem reverzno fazne hromatografije korišćenjem trifluorosirćetna kiselina/acetonitril (0.5 mL/L) i trifluorosirćetna kiselina/H2O (0.5 mL/L) kao eluenata. Posle liofilizacije, Primer 32 se dobija u vidu bele čvrste materije.
HRMS izračunato za C52H52BrClFN6O8S: 1053.2418; dobijeno 1053.2405 (M)
U zavisnosti od elektronske izmene i pH u rastvoru, Primeri 1, 4, 5 i 8 do 15 mogu postojati u vidu četiri jonska oblika (zwitter-jonskom, di-anjonskom, anjonskom ili katjonskom); Primeri 2, 3, 6 i 7 mogu postojati u vidu tri oblika (zwitter-jonskom, anjonskom ili katjonskom); i Primeri 16 do 32 mogu postojati u vidu dva oblika (zwitterjonskom ili katjonskom).
FARMAKOLOŠKA ISPITIVANJA
PRIMER A: Inhibicija Mcl-1 pomoću tehnike polarizacije fluorescencije
Relativna moć vezivanja svakog jedinjenja je određena preko polarizacije fluorescencije (FP). Postupak koristi fluoresceinom obeleženi ligand (fluorescein-βAla-Ahx-A-REIGAQLRRMADDLNAQY-OH; mw 2,765) koji se vezuje za Mcl-1 protein (tako da Mcl-1 odgovara UniProtKB® primarni pridružni broj: Q07820) dovodeći do porasta anizotropije, koja se meri u jedinicama mili-polarizacije (mP) korišćenjem čitača. Dodavanje jedinjenja koje se kompetitivno vezuje za isti položaj kao i ligand, rezultiraće većim odnosom nevezanog liganda u sistemu, što se indikuje padom mP jedinica.
Pripremi se serijsko razblaženje u 11 tačaka za svako jedinjenje u DMSO i, prenese se 2 µl u ploču sa 384 pozicije, ravnog dna i niskog vezivanja (konačna DMSO koncentracija 5 %). Onda se doda 38 µl pufera (10 mM 4-(2-hidroksietil)-1-piperazinetansulfonska kiselina [HEPES], 150 mM NaCl, 0.05 % Tween 20, pH 7.4), koji sadrži fluoresceinom obeleženi ligand (konačna koncentracija 1 nM) i Mcl-1 protein (konačna koncentracija 5 nM).
Test ploče su inkubirane ~2 sata na sobnoj temperaturi pre nego što se meri FP na Biomek Synergy2 čitaču (Ex. 528 nm, Em. 640 nm, Cut off 510 nm) i izračunaju mP jedinice. Vezivanje rastućih doza ispitivanog jedinjenja je izraženo kao procenat sniženja mP u poređenju sa prozorom utvrđenim između kontrola ’5 % DMSO samo’ i ’100 % inhibicija’. Krive doznog odgovora u 11 tačaka su iscrtane pomoću XL-Fit software, korišćenjem 4-parametarskog logističkog modela (model sigmoidnog doznog odgovora) i, određene su inhibitorne koncentracije koje daju 50 % sniženja mP (IC50). Rezultati su predstavljeni u Tabeli 1, u nastavku.
Rezultati pokazuju da jedinjenja pronalaska inhibiraju reakciju između Mcl-1 proteina i fluorescentnog peptida, ovde opisanog prethodno.
PRIMER B: In vitro citotoksičnost
Ispitivanja citotoksičnosti su izvedena na tumorskoj liniji H929 multiplog mijeloma.
Ćelije se rasporede po mikropločama i izlože dejstvu ispitivanih jedinjenja tokom 48 sati. Ćelijska vijabilnost se zatim kvantitativno određuje kolorimetrijskim testom, Tetrazolium testom za mikrokulturu (Carmichael et al. Cancer Res. 1987, 47, 936-942).
Rezultati se izražavaju kao IC50(koncentracija jedinjenja koja inhibira preživljavanje ćelija sa 50 %) i predstavljeni su u Tabeli 1, u nastavku.
Rezultati pokazuju da su jedinjenja pronalaska citotoksična.
Tabela 1: IC50za Mcl-1 inhibiciju (test polarizacione fluorescencije) i za citotoksičnost prema H929 ćelijama
PRIMER C: Kvantitativno određivanje otcepljenog oblika PARP in vivo
Ispitana je sposobnost jedinjenja pronalaska da indukuju apoptozu, merenjem nivoa otcepljene PARP, u ksenograft modelu AMO-1 ćelija multiplog mijeloma.
5.10<6>AMO-1 ćelija se subkutano nakalemi u imunosupresovane miševe (SCID soj). 12 do 14 dana nakon kalemljenja, životinje se tretiraju intravenskim putem sa različitim jedinjenjima. Posle tretmana, tumorske mase se povraćaju i liziraju i, u lizatima tumora se kvantitativno odredi otcepljeni oblik PARP.
Kvantitativno određivanje se izvodi pomoću testa "Meso Scale Discovery (MSD) ELISA platform", koji specifično analizira otcepljeni oblik PARP. Izražava se u vidu aktivacionog faktora, koji odgovara odnosu između količine otcepljene PARP u tumorima miševa koji su lečeni koja se podeli sa količinom otcepljene PARP u tumorima od nelečenih miševa.
Rezultati pokazuju da su jedinjenja pronalaska sposobna da dovedu do apoptoze u AMO-1 tumorskim ćelijama in vivo.
PRIMER D: Anti-tumourska aktivnost in vivo
Anti-tumourska aktivnost jedinjenja pronalaska je ispitana u ksenograft modelu AMO-1 ćelija multiplog mijeloma.
1x10<7>AMO-1 ćelija se subkutano nakalemi u imunosupresovane miševe (SCID soj).6 do 8 dana nakon kalemljenja, kada masa tumora dostigne otprilike 150 mm<3>, miševi se tretiraju različitim jedinjenjima po dnevnoj šemi (5-dnevni tretman). Masa tumora se meri dva puta nedeljno od početka tretmana.
Dobijeni rezultati, korišćenjem ΔT/C odnosa (tj. kvalifikacioni parametar aktivnosti proizvoda, koji se definiše kao odnos zapremine tumora u grupi koja je lečena / zapremina tumora kontrolne grupe koja nije lečena) pokazuju da jedinjenja pronalaska dovode do produžene i značajno potpune regresije tumora nakon perioda tretmana.
PRIMER E: Ispitivanje rastvorljivosti
Postupak 1: Uzorci rastvora (otprilike 16.7 mg/ml) u propilen glikolu se razblaže sa vodom (30 % propilen glikola). Zatim, uzorci se mućkaju u toku 72 sata na sobnoj temperaturi. Nakon perioda mućkanja, uzorci se centrifugiraju, onda se tečna faza filtrira i analizira pomoću HPLC povezane sa UV detekcijom. Da bi se odredile stvarne koncentracije, napravi se kalibraciona kriva od 5 tačaka.
Recimo, u ovim uslovima, rastvorljivost jedinjenja Primera 1 je značajno veća (≥ 4907 µM) u poređenju sa (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi] fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanskom kiselinom (63.3 µM), koja je izložena u WO 2015/097123.
Postupak 2: Uzorci (40 mg/mL) se razblaže u vodenom fosfatnom puferu (67.7 mM, sa pH podešenim na 7.4) i koriste za in vivo ispitivanja. Uzorci se mućkaju na sobnoj temperaturi, zatim filtriraju. Solubilizovana frakcija se kvantitativno odredi pomoću LC-MS-MS analize.
U ovim uslovima, jedinjenja Primera 1 i Primera 11 su ispoljila visoku rastvorljivost (> 35 mg/mL) što je daleko veća rastvorljivost u poređenju sa (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)propanskom kiselinom odnosno, (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]oksi}-3-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi} fenil)propanskom kiselinom, koje su izložene u WO 2015/097123.
PRIMER F: Farmaceutska kompozicija: tablete
1000 tableta koje sadrže dozu od 5 mg jedinjenja odabranog od Primera 1 do 32 5 g Pšenični skrob 20 g Kukuruzni skrob 20 g Laktoza 30 g Magnezijum stearat 2 g Silika 1 g Hidroksipropilceluloza 2 g

Claims (31)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenja formule (I):
    gde: ♦ Y predstavlja -NH- grupu ili atom kiseonika, ♦ R1predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)polihaloalkil grupu, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, -NR9R9’, -Cy1ili atom halogena, ♦ R2, R3i R4predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika, atom halogena, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearni ili razgranati (C1-C6)polihaloalkil, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6), ♦ R5predstavlja atom vodonika, ♦ R6predstavlja grupu
    ili
    ♦ R7predstavlja atom vodonika ili linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ♦ R8predstavlja -O-P(O)(O-)(O-) grupu, -O-P(O)(O-)(OR10) grupu, -O-P(O)(OR10) (OR10’) grupu, -O-SO2-O grupu, -O-SO2-OR10grupu, -Cy2, -O-C(O)-R9grupu, -O-C(O)-OR9grupu ili -O-C(O)-NR9R9’ grupu; ♦ R9i R9’ predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili linearnu ili razgranatu amino(C1-C6)alkil grupu, ♦ R10i R10’ predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili arilalkil(C1-C6) grupu, ♦ Cy1i Cy2predstavljaju, nezavisno jedan od drugog, cikloalkil grupu, heterocikloalkil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu, moguće je da tako definisan amonijum postoji kao zwitter-jonski oblik ili da ima monovalentni anjonski kontrajon, pri čemu se podrazumeva da: - "aril" označava fenil ili naftil grupu, - "heteroaril" označava svaku mono- ili bi-cikličnu grupu izgrađenu od 5 do 10 članova prstena, sa najmanje jednim aromatičnim delom i koja sadrži od 1 do 3 heteroatoma odabrana od kiseonika, sumpora i azota, - "cikloalkil" označava svaku mono- ili bi-cikličnu nearomatičnu karbocikličnu grupu, koja sadrži od 3 do 10 članova prstena, - "heterocikloalkil" označava svaku mono- ili bi-cikličnu nearomatičnu karbocikličnu grupu koja sadrži od 3 do 10 članova prstena i sadrži od 1 do 3 heteroatoma odabrana od kiseonika, sumpora i azota, koji mogu uključivati spojene, premošćene ili spiro prstenaste sisteme, moguće je da tako definisane aril, heteroaril, cikloalkil i heterocikloalkil grupe i alkil, alkenil, alkinil, alkoksi grupe, budu supstituisane sa 1 do 4 grupe, odabrane od linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkila, linearne ili razgranate (C2-C6)alkenil grupe, linearne ili razgranate (C2-C6)alkinil grupe, linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)alkil-S-, hidroksi, okso (ili N-oksida gde odgovara), nitro, cijano, -C(O)-OR’, -O-C(O)-R’, -C(O)-NR’R", -NR’R", -(C=NR’)-OR", linearnog ili razgranatog (C1-C6)polihaloalkila, trifluorometoksi ili halogena, pri čemu se podrazumeva da R’ i R", nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika ili linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu i podrazumeva se da jedan ili više od atoma ugljenika prethodno pobrojanih mogućih supstituenata, mogu biti deuterizovani, njihovi enantiomeri, dijastereoizomeri i atropizomeri i, njihove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom.
  2. 2. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, u kom Y predstavlja atom kiseonika.
  3. 3. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, u kom bar jedna grupa, odabrana od R2, R3i R4ne predstavlja atom vodonika.
  4. 4. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, u kom R1predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili atom halogena.
  5. 5. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, u kom R2predstavlja halogeni atom, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu.
  6. 6. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, u kom R3i R4predstavljaju atom vodonika.
  7. 7. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, u kom su supstituenti para (R1, R4) identični i supstituenti para (R2, R3) su identični.
  8. 8. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, u kom R6predstavlja grupu
    u kojoj su R7i R8kao što su definisani u zahtevu 1.
  9. 9. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, u kom R6predstavlja grupu
    u kojoj su R7i R8kao što su definisani u zahtevu 1.
  10. 10. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, u kom R7predstavlja metil grupu ili atom vodonika.
  11. 11. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, u kom R8predstavlja -O-P(O)(O-)(OR10) grupu, u kojoj R10predstavlja atom vodonika, benzil grupu ili metil grupu.
  12. 12. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, u kom R8predstavlja 5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il grupu; -OC(O)-CH3grupu; -O-C(O)-tBu grupu; -O-C(O)-CH2-NH2grupu; -O-C(O)-CH[CH(CH3)2]-NH2grupu; -OC(O)-O-CH2CH3grupu; ili -O-C(O)-N(CH2CH3)2grupu.
  13. 13. Jedinjenja prema zahtevu 1, a to su: - {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogen fosfat; - benzil {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil fosfat; - {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilmetil fosfat; - {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-etilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogen fosfat; - {4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogen fosfat; - benzil {4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi) etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil fosfat; - {4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil metil fosfat; - N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(4-{[(hidroksifosfinato)oksi]metil}-4-metilpiperazin-4-ijum-1-il)etoksi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin; - {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2,6-dihloro-3,5-dimetilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogen fosfat; - {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-3,5-dimetilfenoksi) etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogenfosfat; - {[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil](dimetil)amonijum}metil hidrogenfosfat; - 1-{4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}etilhidrogen fosfat; - 1-{4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}etil hidrogen fosfat; - {1-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-4-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogen fosfat; - {1-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-4-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogen fosfat; - {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil sulfat; - 1-[(acetiloksi)metil]-4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum; - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-{[(etoksikarbonil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum; - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-{[(dietilkarbamoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum; - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-[(gliciloksi)metil]-1-metilpiperazin-1-ijum; - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-{1-[(dietilkarbamoil)oksi]etil}-1-metilpiperazin-1-ijum; - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metil-1-[(5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil]piperazin-1-ijum; - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metil-1-[(L-valiloksi)metil]piperazin-1-ijum; - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-{[(2,2-dimetilpropanoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum; - 1-[(acetiloksi)metil]-4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum; - 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-{[(etoksikarbonil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum; - 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-{[(dietilkarbamoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum; - 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-[(gliciloksi)metil]-1-metilpiperazin-1-ijum; - 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-{1-[(dietilkarbamoil)oksi]etil}-1-metilpiperazin-1-ijum; - 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metil-1-[(5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil]piperazin-1-ijum; - 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metil-1-[(L-valiloksi)metil]piperazin-1-ijum; - 4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-{[(2,2-dimetilpropanoil)oksi]metil}-1-metilpiperazin-1-ijum.
  14. 14. Jedinjenje prema zahtevu 1, koje je {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metil hidrogen fosfat.
  15. 15. Jedinjenje prema zahtevu 1, koje je {4-[2-(3-bromo-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-5-il}-2-hlorofenoksi)etil]-1-metilpiperazin-1-ijum-1-il}metilhidrogen fosfat.
  16. 16. Jedinjenje prema zahtevu 1, koje je {[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-karboksi-2-(2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}fenil)etoksi]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-5-il}-2-hloro-3-metilfenoksi)etil](dimetil)amonijum}metil hidrogen fosfat.
  17. 17. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (I) prema zahtevu 1, naznačen time što se kao polazni materijal koristi jedinjenje formule (II):
    gde su R1, R2, R3, R4, R5i Y, kao što su definisani za formulu (I), a R6’ predstavlja -N(CH3)2grupu ili 4-metilpiperazinil grupu, koje se podvrgava reakciji zaštite karboksilne kisele funkcionalne grupe, da bi se dobilo jedinjenje formule (III):
    gde su R1, R2, R3, R4, R6’ i Y, kao što su ovde prethodno definisani, a T predstavlja zaštitnu grupu za karboksilnu kiselu funkcionalnu grupu, kao što je, na primer, parametoksibenzil grupa, koje se podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem formule (IV):
    gde su R7i R8kao što su definisani za formulu (I), da bi se dobilo jedinjenje formule (V):
    gde su R1, R2, R3, R4, T i Y, kao što su ovde prethodno definisani, a R6je kao što je definisano u zahtevu 1, koje se zatim, podvrgava reakciji uklanjanja zaštite sa karboksilne funkcionalne grupe, da bi se dobilo jedinjenje formule (I), koje se može prečistiti prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja, koje se prevodi, ukoliko se želi, u svoje adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom i, koje se opciono razdvaja u svoje izomere prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja, podrazumeva se da u svakom trenutku, koji se smatra odgovarajućim tokom izvođenja gore opisanog procesa, neke grupe (hidroksi, amino...) polaznih reagenasa ili intermedijera sinteze mogu da se zaštite, potom da im se ukloni zaštita i da se funkcionalizuju, kako to zahteva sinteza.
  18. 18. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I), prema ma kom od zahteva 1 do 16, ili njegovu adicionu so sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom zajedno sa jednom ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa.
  19. 19. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 18 za upotrebu kao pro-apoptotski agens.
  20. 20. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 19 za upotrebu u lečenju kancera i autoimunih i bolesti imunog sistema.
  21. 21. Farmaceutska kompozicija za upotrebu u lečenju kancera prema zahtevu 20, gde se kanceri: kancer mokraćne bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancer debelog creva, jednjaka i jetre, limfoblastne leukemije, akutne mijeloidne leukemije, limfomi, melanomi, maligne hemopatije, mijelomi, kancer jajnika, ne-mikrocelularni kancer pluća, kancer prostate, kancer pankreasa i mikrocelularni kancer pluća.
  22. 22. Upotreba farmaceutske kompozicije prema zahtevu 18 za proizvodnju lekova za upotrebu kao pro-apoptotskih agenasa.
  23. 23. Upotreba farmaceutske kompozicije prema zahtevu 18 za proizvodnju lekova za upotrebu u lečenju kancera i auto-imunih i bolesti imunog sistema.
  24. 24. Upotreba farmaceutske kompozicije prema zahtevu 18 za proizvodnju lekova za upotrebu u lečenju kancera mokraćne bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera debelog creva, jednjaka i jetre, limfoblastnih leukemija, akutnih mijeloidnih leukemija, limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, ne-mikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.
  25. 25. Jedinjenje formule (I), prema ma kom od zahteva 1 do 16, ili njegova adiciona so sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom, za upotrebu u lečenju kancera mokraćne bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera debelog creva, jednjaka i jetre, limfoblastnih leukemija, akutnih mijeloidnih leukemija, limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, nemikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.
  26. 26. Upotreba jedinjenja formule (I), prema ma kom od zahteva 1 do 16, ili njegove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom, za proizvodnju lekova za upotrebu u lečenju kancera mokraćne bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera debelog creva, jednjaka i jetre, limfoblastnih leukemija, akutnih mijeloidnih leukemija, limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, ne-mikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.
  27. 27. Kombinacija jedinjenja formule (I), prema ma kom od zahteva 1 do 16, sa antikancerskim agensom, odabranim od genotoksičnih sredstava, mitotičkih otrova, antimetabolita, inhibitora proteazoma, inhibitora kinaze i antitela.
  28. 28. Farmaceutska kompozicija koja sadrži kombinaciju prema zahtevu 27, u kombinaciji sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa.
  29. 29. Kombinacija prema zahtevu 27 za upotrebu u lečenju kancera.
  30. 30. Upotreba kombinacije prema zahtevu 27 u proizvodnji lekova za upotrebu u lečenju kancera.
  31. 31. Jedinjenje formule (I), prema ma kom od zahteva 1 do 16, za upotrebu u lečenju kancera koji zahtevaju radioterapiju. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20191499A 2016-01-19 2016-12-19 Novi amonijum derivati, postupak za njihovo dobijanje i farmaceutske kompozicije koje ih sadrže RS59622B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1650411A FR3046792B1 (fr) 2016-01-19 2016-01-19 Nouveaux derives d'ammonium, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
EP16816667.6A EP3405471B1 (en) 2016-01-19 2016-12-19 New ammonium derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
PCT/EP2016/081688 WO2017125224A1 (en) 2016-01-19 2016-12-19 New ammonium derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS59622B1 true RS59622B1 (sr) 2020-01-31

Family

ID=55752504

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20191499A RS59622B1 (sr) 2016-01-19 2016-12-19 Novi amonijum derivati, postupak za njihovo dobijanje i farmaceutske kompozicije koje ih sadrže

Country Status (43)

Country Link
US (1) US10457689B2 (sr)
EP (1) EP3405471B1 (sr)
JP (1) JP6871275B2 (sr)
KR (1) KR102805983B1 (sr)
CN (1) CN108602841B (sr)
AU (1) AU2016387870B2 (sr)
BR (1) BR112018014536B1 (sr)
CA (1) CA3011761C (sr)
CL (1) CL2018001908A1 (sr)
CO (1) CO2018007443A2 (sr)
CR (1) CR20180363A (sr)
CU (1) CU20180073A7 (sr)
CY (1) CY1122560T1 (sr)
DK (1) DK3405471T3 (sr)
EA (1) EA036932B1 (sr)
EC (1) ECSP18053634A (sr)
ES (1) ES2760545T3 (sr)
FR (1) FR3046792B1 (sr)
GE (2) GEAP202014858A (sr)
HR (1) HRP20192073T1 (sr)
HU (1) HUE048449T2 (sr)
IL (1) IL260550B (sr)
LT (1) LT3405471T (sr)
MA (1) MA43639B1 (sr)
MD (1) MD3405471T2 (sr)
ME (1) ME03555B (sr)
MX (1) MX376028B (sr)
MY (1) MY196352A (sr)
NI (1) NI201800076A (sr)
PE (1) PE20190336A1 (sr)
PH (1) PH12018501506A1 (sr)
PL (1) PL3405471T3 (sr)
PT (1) PT3405471T (sr)
RS (1) RS59622B1 (sr)
RU (1) RU2743098C2 (sr)
SA (1) SA518392049B1 (sr)
SG (1) SG11201805913QA (sr)
SI (1) SI3405471T1 (sr)
SV (1) SV2018005722A (sr)
TN (1) TN2018000239A1 (sr)
UA (1) UA123508C2 (sr)
WO (1) WO2017125224A1 (sr)
ZA (1) ZA201804770B (sr)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR3037956B1 (fr) * 2015-06-23 2017-08-04 Servier Lab Nouveaux derives d'acide amine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
FR3037958B1 (fr) * 2015-06-23 2019-01-25 Les Laboratoires Servier Nouveaux derives d'hydroxy-acide, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
UY37560A (es) 2017-01-06 2018-07-31 Servier Lab Combinación de un inhibidor de mcl-1 y un compuesto taxano, usos y composiciones farmacéuticas de ésta
ES2975274T3 (es) * 2017-01-06 2024-07-04 Servier Lab Combinación de un inhibidor de MCL-1 y un compuesto de taxano, sus usos y composiciones farmacéuticas
SG11201911891WA (en) 2017-06-22 2020-01-30 Servier Lab Combination of a mcl-1 inhibitor and a standard of care treatment for hematologic cancers, uses and pharmaceutical compositions thereof
US20200255451A1 (en) * 2017-08-15 2020-08-13 Abbvie Inc. Macrocyclic mcl-1 inhibitors and methods of use
CN111818917A (zh) 2017-08-15 2020-10-23 艾伯维公司 大环mcl-1抑制剂和使用方法
JP2020531457A (ja) * 2017-08-15 2020-11-05 アッヴィ・インコーポレイテッド 大環状ｍｃｌ−１阻害剤及び使用の方法
CN108424417B (zh) * 2017-12-21 2019-09-20 河南真实生物科技有限公司 噻吩并嘧啶衍生物、其制备方法及在制备抗肿瘤药物中的应用
AR116635A1 (es) 2018-10-15 2021-05-26 Servier Lab Proceso para la síntesis de derivados de piperazinil-etoxi-bromofenilo y su aplicación en la producción de compuestos que los contienen
TWI849001B (zh) 2018-11-14 2024-07-21 法商施維雅藥廠 Mcl-1抑制劑及米哚妥林(midostaurin)之組合，其用途及醫藥組合物
AU2019391329B2 (en) * 2018-12-06 2024-09-26 Les Laboratoires Servier New crystalline forms of a MCL-1 inhibitor, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them.
EP3972651A2 (en) 2019-05-20 2022-03-30 Novartis AG Mcl-1 inhibitor antibody-drug conjugates and methods of use
TW202114682A (zh) 2019-06-17 2021-04-16 法商施維雅藥廠 Mcl-1抑制劑與乳癌標準療法之組合，其用途及醫藥組合物
AU2020358967A1 (en) * 2019-10-03 2022-05-19 1200 Pharma Llc MCL1 inhibitors and uses thereof
US20240042051A1 (en) 2020-11-24 2024-02-08 Francesca Rocchetti Mcl-1 inhibitor antibody-drug conjugates and methods of use
WO2022216946A1 (en) * 2021-04-07 2022-10-13 California Institute Of Technology Mcl1 inhibitors and uses thereof
JP2024520801A (ja) 2021-06-11 2024-05-24 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｍｃｌ－１阻害剤と抗がん剤との組み合わせ
TWI861509B (zh) 2021-06-11 2024-11-11 美商基利科學股份有限公司 Mcl-1抑制劑與抗體藥物接合物之組合
WO2023225359A1 (en) 2022-05-20 2023-11-23 Novartis Ag Antibody-drug conjugates of antineoplastic compounds and methods of use thereof
WO2025111450A1 (en) 2023-11-22 2025-05-30 Les Laboratoires Servier Anti-cd74 antibody-drug conjugates and methods of use thereof
WO2025111431A1 (en) 2023-11-22 2025-05-30 Les Laboratoires Servier Anti-cd7 antibody-drug conjugates and methods of use thereof
WO2025126157A1 (en) 2023-12-15 2025-06-19 Advesya Anti-il-1rap binding domains and antibody-drug conjugates thereof

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5650425A (en) * 1994-04-04 1997-07-22 Pharmos Corporation Permanently ionic derivatives of steroid hormones and their antagonists
WO1998034583A2 (en) * 1997-02-09 1998-08-13 Pharmos Corporation Enhanced anti-angiogenic activity of permanently charged derivatives of steroid hormones
US7776867B2 (en) * 2004-06-29 2010-08-17 Amgen Inc. Furanopyrimidines
AP2010005234A0 (en) * 2007-10-16 2010-04-30 Wyeth Llc Thienopyrimidine and pyrazolopyrimidline compoundsand their use as MTOR kinase and P13 kinase inhib itors
EP2276346B1 (en) * 2008-04-30 2016-11-23 National Health Research Institutes Fused bicyclic pyrimidine compounds as aurora kinase inhibitors
TWI385174B (zh) * 2008-11-10 2013-02-11 Nat Health Research Institutes 作為酪胺酸激酶抑制劑之稠合雙環及多環嘧啶化合物
CN102464667B (zh) * 2010-11-03 2014-06-04 中国科学院上海药物研究所 一类五元杂环并嘧啶类化合物及其制备方法和用途
KR20150082308A (ko) * 2012-11-14 2015-07-15 에프. 호프만-라 로슈 아게 이미다조피리딘 유도체
HRP20181141T1 (hr) * 2013-05-02 2018-09-21 F. Hoffmann - La Roche Ag Derivati purina kao agonisti cb2 receptora
FR3015483B1 (fr) * 2013-12-23 2016-01-01 Servier Lab Nouveaux derives de thienopyrimidine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent

Also Published As

Publication number Publication date
FR3046792A1 (sr) 2017-07-21
JP2019511559A (ja) 2019-04-25
RU2018129308A (ru) 2020-02-20
PT3405471T (pt) 2019-12-05
SI3405471T1 (sl) 2020-02-28
CN108602841A (zh) 2018-09-28
US20190031677A1 (en) 2019-01-31
KR20180098677A (ko) 2018-09-04
IL260550B (en) 2021-06-30
HUE048449T2 (hu) 2020-07-28
ECSP18053634A (es) 2018-07-31
MD3405471T2 (ro) 2020-02-29
DK3405471T3 (da) 2020-01-27
CU20180073A7 (es) 2018-11-06
SA518392049B1 (ar) 2022-08-04
PE20190336A1 (es) 2019-03-07
US10457689B2 (en) 2019-10-29
KR102805983B1 (ko) 2025-05-09
NZ744408A (en) 2025-02-28
SG11201805913QA (en) 2018-08-30
GEAP202014858A (en) 2020-03-10
PL3405471T3 (pl) 2020-04-30
AU2016387870B2 (en) 2021-04-01
CL2018001908A1 (es) 2019-01-04
MX2018008808A (es) 2018-09-21
PH12018501506A1 (en) 2019-04-08
RU2018129308A3 (sr) 2020-02-20
HRP20192073T1 (hr) 2020-02-21
MA43639B1 (fr) 2020-02-28
CO2018007443A2 (es) 2018-07-19
EA201891622A1 (ru) 2019-01-31
LT3405471T (lt) 2019-12-10
CY1122560T1 (el) 2021-01-27
BR112018014536A2 (pt) 2018-12-11
UA123508C2 (uk) 2021-04-14
ZA201804770B (en) 2021-08-25
ME03555B (me) 2020-07-20
JP6871275B2 (ja) 2021-05-12
CR20180363A (es) 2018-08-22
BR112018014536B1 (pt) 2022-10-11
WO2017125224A1 (en) 2017-07-27
FR3046792B1 (fr) 2018-02-02
RU2743098C2 (ru) 2021-02-15
EP3405471A1 (en) 2018-11-28
CN108602841B (zh) 2021-03-23
GEP20207126B (en) 2020-06-25
EA036932B1 (ru) 2021-01-18
MX376028B (es) 2025-03-07
MY196352A (en) 2023-03-24
TN2018000239A1 (en) 2020-01-16
NI201800076A (es) 2018-09-20
EP3405471B1 (en) 2019-10-30
ES2760545T3 (es) 2020-05-14
SV2018005722A (es) 2018-10-10
CA3011761A1 (en) 2017-07-27
AU2016387870A1 (en) 2018-07-26
CA3011761C (en) 2020-10-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RS59622B1 (sr) Novi amonijum derivati, postupak za njihovo dobijanje i farmaceutske kompozicije koje ih sadrže
EP3313851B1 (en) New hydroxyester derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
EP3313817B1 (en) Bicyclic derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
KR102620976B1 (ko) 신규한 하이드록시산 유도체, 이를 제조하는 방법 및 이를 함유하는 약제 조성물
KR102620905B1 (ko) 신규한 아미노산 유도체, 이의 제조방법, 및 이를 함유한 약제 조성물
HK40000743B (en) New ammonium derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
HK40000743A (en) New ammonium derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
HK1254657B (en) New hydroxyester derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
BR112017027645B1 (pt) Derivados de aminoácido, processo para sua preparação,composições farmacêuticas contendoos, combinação e uso dos mesmos
HK1259781A1 (en) New ammonium derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
OA19003A (en) New ammonium derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
OA18889A (en) New Hydroxyester derivatives, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them.