KR20180098677A - 신규 암모늄 유도체, 이의 제조 방법 및 이를 함유하는 약학적 조성물 - Google Patents

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KR20180098677A
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아틸라 팍잘
졸탄 스즈라빅
안드라스 코츠시
마이아 찬리온
아나 레티시아 마라그노
올리비에 제네스테
디디에 데마르레스
발라즈 발린트
서볼치 시포스
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르 라보레또레 쎄르비에르
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Abstract

본 발명은 화학식(I)의 화합물에 관한 것이다:
Figure pct00027

상기 식에서, R1, R2, R3, R4, R5, R6 및 Y는 명세서에 정의된 바와 같다. 또한 본 발명은 약제에 관한 것이다.

Description

신규 암모늄 유도체, 이의 제조 방법 및 이를 함유하는 약학적 조성물
본 발명은 신규한 암모늄 유도체, 이들의 제조 방법 및 이들을 함유하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 화합물은 신규하고, 아폽토시스(apoptosis) 및 종양학(oncology) 분야에서 매우 귀중한 약리학적 특징을 갖는다.
아폽토시스 또는 예정된 세포사는 배아 발생 및 조직 항상성의 유지에 중요한 생리 과정이다.
아폽토틱-형 세포사(apoptotic-type cell death)는 형태학적 변화, 예를 들어, 핵의 응축, DNA 단편화 및 또한 세포의 주요 구조적 요소에 손상을 초래하여 이의 분해 및 치사를 유도하는 카스파제의 활성화와 같은 생화학적 현상을 포함한다. 아폽토시스 과정의 조절은 복잡하며, 여러 세포내 신호전달 경로의 활성화 또는 억제를 포함한다[Cory et al., Nature Review Cancer, 2002, 2, 647-656].
아폽토시스의 조절이상은 특정 병리학에 관여한다. 증가된 아폽토시스는 퇴행성신경 질환, 예를 들어, 파킨슨병, 알츠하이머병 및 치매와 관련된다. 반대로, 아폽토시스의 실행 결여는 암 및 이들의 화학내성의 발달, 자가면역 질환, 염증 질환 및 바이러스 감염에서 중요한 역할을 수행한다. 따라서, 아폽토시스의 부재는 암의 표현형 시그니쳐(signature) 중 하나이다[Hanahan et al., Cell 2000, 100, 57-70].
Bcl-2 패밀리의 항-아폽토시스 단백질은 많은 병리학과 관련이 있다. 많은 타입의 암, 예를 들어, 대장암(colorectal cancer), 유방암(breast cancer), 소-세포 폐암(small-cell lung cancer), 비-소-세포 폐암(non-small-cell lung cancer), 방광암(bladder cancer), 난소암(ovarian cancer), 전립선암(prostate cancer), 만성 림프 백혈병(chronic lymphoid leukaemia), 림프종(lymphoma), 골수종(myeloma), 급성 골수성 백혈병(acute myeloid leukemia), 췌장암, 등에서의 Bcl-2 패밀리 단백질의 관련성은 기술되어 있다. Bcl-2 패밀리의 항-아폽토시스 단백질의 과발현은 종양 형성, 화학요법에 대한 내성 및 암에 걸린 환자의 임상적 예후와 관련된다. 특히, 항-아폽토시스 Bcl-2 패밀리 일원인 Mcl-1은 다양한 타입의 암에서 과발현된다[Beroukhim et al., Nature 2010, 899-905]. 따라서, Bcl-2 패밀리의 단백질의 항-아폽토시스 활성을 억제하는 화합물에 대한 치료학적 요구가 있다.
최근에, 티에노피리미딘 유도체가 암 치료에 유용한 효능있는 Mcl-1 억제제로서 개시되었다(WO 2015/097123).
본 발명은 아폽토시스 결함을 포함하는 병리학 예를 들어, 이를 테면, 암, 및 면역 및 자가-면역 질환의 치료에서 이들을 사용가능하게 하는 프로-아폽토틱 특성(pro-apoptotic properties)을 갖는 신규한 암모늄 유도체를 제공한다. 또한, 본 발명의 화합물은 높은 용해도뿐만 아니라 놀랍고 예기치 못한 약리학적 효과가 있어 종양학에 매우 흥미로운 후보물질이 될 수 있다.
본 발명은 더욱 특히 하기 화학식(I)의 화합물, 이의 거울상이성질체, 부분입체이성질체 및 회전장애이성질체, 및 이의 약학적으로 허용되는 산 또는 염기와의 부가 염에 관한 것이다:
Figure pct00001
상기 식에서,
◆ Y는 -NH- 기 또는 산소 원자를 나타내고,
◆ R1은 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기, 선형 또는 분지형 (C2-C6)알케닐 기, 선형 또는 분지형 (C2-C6)알키닐 기, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알콕시 기, -S-(C1-C6)알킬 기, 선형 또는 분지형 (C1-C6)폴리할로알킬 기, 하이드록시 기, 하이드록시(C1-C6)알킬 기, 시아노 기, -NR9R9', -Cy1 또는 할로겐 원자를 나타내고,
◆ R2, R3 및 R4는 서로 독립적으로 수소 원자, 할로겐 원자, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기, 선형 또는 분지형 (C2-C6)알케닐 기, 선형 또는 분지형 (C2-C6)알키닐 기, 선형 또는 분지형 (C1-C6)폴리할로알킬, 하이드록시 기, 하이드록시(C1-C6)알킬 기, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알콕시 기, -S-(C1-C6)알킬 기, 시아노 기, 니트로 기, -알킬(C0-C6)-NR9R9', -O-알킬(C1-C6)-NR9R9', -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9', -NR9-C(O)-R9', -NR9-C(O)-OR9', -알킬(C1-C6)-NR9-C(O)-R9', -SO2-NR9R9', -SO2-알킬(C1-C6)를 나타내고,
◆ R5는 수소 원자를 나타내고,
◆ R6은
Figure pct00002
또는
Figure pct00003
를 나타내고,
◆ R7은 수소 원자 또는 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기를 나타내고,
◆ R8은 -O-P(O)(O-)(O-) 기, -O-P(O)(O-)(OR10) 기, -O-P(O)(OR10)(OR10') 기, -O-SO2-O- 기, -O-SO2-OR10 기, -Cy2, -O-C(O)-R9 기, -O-C(O)-OR9 기 또는 -O-C(O)-NR9R9' 기를 나타내고;
◆ R9 및 R9'는 서로 독립적으로 수소 원자, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기 또는 선형 또는 분지형 아미노(C1-C6)알킬 기를 나타내고,
◆ R10 및 R10'는 서로 독립적으로 수소 원자, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기 또는 아릴알킬(C1-C6) 기를 나타내고,
◆ Cy1 및 Cy2는 서로 독립적으로, 사이클로알킬 기, 헤테로사이클로알킬 기, 아릴 기 또는 헤테로아릴 기를 나타내고,
이와 같이 정의된 암모늄은 쯔비터이온 형태로서 존재하거나 일가 음이온성 상대이온을 갖는 것이 가능하고,
- "아릴"은 페닐 또는 나프틸 기를 의미하고,
- "헤테로아릴"은 적어도 하나의 방향족 모이어티를 갖고, 산소, 황 및 질소로부터 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 함유하는 5 내지 10개의 고리원으로부터 구성된 어떠한 모노- 또는 바이-사이클릭 기를 의미하고,
- "사이클로알킬"은 3 내지 10개의 고리원을 함유하는 어떠한 모노- 또는 바이-사이클릭 비방향족 카보사이클릭 기를 의미하고,
- "헤테로사이클로알킬"은 3 내지 10개의 고리원을 함유하고, 산소, 황 및 질소로부터 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 함유하는, 융합된, 브릿징된 또는 스피로 고리 시스템을 포함할 수 있는 어떠한 모노- 또는 바이-사이클릭 비방향족 카보사이클릭 기를 의미하는 것으로 이해해야 하고,
이와 같은 정의된 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬 기 및 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시 기는 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬, 선형 또는 분지형 (C2-C6)알케닐 기, 선형 또는 분지형 (C2-C6)알키닐 기, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알콕시, (C1-C6)알킬-S-, 하이드록시, 옥소(또는 적합한 경우 N-옥사이드), 니트로, 시아노, -C(O)-OR', -O-C(O)-R', -C(O)-NR'R", -NR'R", -(C=NR')-OR", 선형 또는 분지형 (C1-C6)폴리할로알킬, 트리플루오로메톡시 또는 할로겐으로부터 선택된 1 내지 4개의 기에 의해 치환되는 것이 가능하고, R' 및 R"은 서로 독립적으로 수소 원자 또는 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기를 나타내는 것으로 이해해야 한다.
약학적으로 허용되는 산 중에서, 어떠한 제한을 의미하지 않으면서, 염산, 브롬화수소산, 황산, 포스폰산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 락트산, 피루브산, 말론산, 석신산, 글루타르산, 푸마르산, 타르타르산, 말레산, 시트르산, 아스코프브산, 옥살산, 메탄설포산, 캄포르산 등이 언급될 수 있다.
약학적으로 허용되는 염기 중에서, 어떠한 제한을 의미하지 않으면서, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 트리에틸아민, 3차-부틸아민 등이 언급될 수 있다.
화학식(I)의 화합물은 이들의 전자 전하에 의거하여, 양 및 음 전기 전하를 갖는 중성 분자를 의미하는 쯔비터이온 형태를 가질 수 있다. 본 발명에 따른 화합물의 경우, 쯔비터이온 형태의 예는 하기와 같을 수 있다:
Figure pct00004
화학식(I)의 화합물은 이들의 전자 전하에 의거하여, 브로마이드, 클로라이드, 요오다이드, 아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 벤조에이트, 메실레이트, 토실레이트, 트리플레이트 등으로부터 선택될 수 있는, 어느 한 약학적으로 허용되는 일가 음이온성 상대이온 M1 -을 함유할 수 있다. 본 발명에 따른 화합물의 경우, 예는 하기와 같을 수 있다:
Figure pct00005
화학식(I)의 화합물은 이들의 전자 전하에 의거하여, 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모늄, 아미노산 등으로부터 선택될 수 있는, 어느 한 약학적으로 허용되는 일가 양이온성 상대이온 M2 +를 함유할 수 있다. 본 발명에 따른 화합물의 경우, 예는 하기와 같을 수 있다:
Figure pct00006
Figure pct00007
화학식(I)의 화합물은 이들의 전자 전하에 의거하여, 칼슘, 마그네슘, 알루미늄, 아미노산 등으로부터 선택될 수 있는, 어느 한 약학적으로 허용되는 이가 양이온성 상대이온 M3 2+ 또는 동일하거나 상이한, 두 개의 약학적으로 허용되는 일가 양이온성 상대이온들 M2 +을 함유할 수 있다. 본 발명에 따른 화합물의 경우, 예는 하기와 같을 수 있다:
Figure pct00008
Y는 바람직하게는 산소 원자를 나타낸다.
유리하게는, R2, R3 및 R4로부터 선택되는 기들 중 적어도 하나는 수소 원자를 나타내지 않는다.
본 발명의 다른 구체예에서, 유리한 가능성은 화학식(I-a)의 화합물로 이루어진다:
Figure pct00009
상기 식에서, R1, R2, R3, R4, R5, R6 및 Y는 화학식(I)에 대해 정의된 바와 같다.
본 발명의 바람직한 화합물에서, R1은 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기 또는 할로겐 원자를 나타낸다. 더욱 바람직하게는, R1은 메틸 기, 에틸 기, 염소 원자 또는 브롬 원자를 나타낸다. 더욱 더 바람직하게는, R1은 에틸 기 또는 브롬 원자를 나타낸다. 더욱 특히, R1은 브롬 원자를 나타낸다. 유리하게는, R1은 메틸 기를 나타낸다.
회전장애이성질체는 단일 결합에 대한 장애 회전으로 인해 발생하는 입체 이성질체로, 입체 변형 또는 다른 요인으로 인한 에너지 차이가 개별 컨포머(conformer)의 분리를 허용할 정도로 충분히 높은 회전에 대한 장벽을 만든다(Bringmann et al. Angew . Chem . Int . Ed. 2005, 44, 5384-5427). 본 발명에 따른 화합물의 경우, 회전장애이성질체는 하기와 같다:
Figure pct00010
바람직한 회전장애이성질체는 (5Sa)이다.
유리하게는, R2는 할로겐 원자, 하이드록시 기, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알콕시 기를 나타낸다. 더욱 바람직하게는, R2는 염소 원자를 나타낸다.
R3 및 R4는 바람직하게는 수소 원자를 나타낸다. 유리한 구체예에서, 쌍 (R1, R4)의 치환기가 동일하고, 쌍(R2, R3)의 치환기가 동일하다. 본 발명의 바람직한 화합물에서, 쌍(R1, R4)의 치환기가 동일하고, (C1-C6)알킬 기, 바람직하게는 메틸 기를 나타내는 반면, 쌍(R2, R3)의 치환기가 동일하고, 수소 원자 또는 할로겐 원자, 바람직하게는 염소 원자를 나타낸다.
유리하게는, R6은
Figure pct00011
를 나타낸다.
더욱 바람직하게는, R6은
Figure pct00012
를 나타낸다.
본 발명의 바람직한 화합물에서, R7은 메틸 기 또는 수소 원자를 나타낸다. 더욱 바람직하게는, R7은 수소 원자를 나타낸다.
유리하게는, R8은 -O-P(O)(O-)(OR10) 기를 나타내고, R10은 우선적으로 수소 원자, 벤질 기 또는 메틸 기를 나타낸다. 본 발명의 또 다른 바람직한 구체예에서, R8은 -O-SO2-O- 기를 나타내다. 바람직하게는, R8은 5-메틸-2-옥소-1,3-디옥솔-4-일 기; -O-C(O)-CH3 기; -O-C(O)-tBu 기; -O-C(O)-CH2-NH2 기; -O-C(O)-CH[CH(CH3)2]-NH2 기; -O-C(O)-O-CH2CH3 기; 또는 -O-C(O)-N(CH2CH3)2 기를 나타낸다. 더욱 더 바람직하게는, R8은 -O-P(O)(O-)(OH) 기를 나타낸다.
본 발명의 바람직한 화합물은
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- 벤질 {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 포스페이트;
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- 벤질 {4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 포스페이트;
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- N-[(5Sa)-5-{3-클로로-4-[2-(4-{[(하이드록시포스피네이토)옥시]메틸}-4-메틸피페라진-4-이움-1-일)에톡시]-2-메틸페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]-2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}-D-페닐알라닌;
- {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2,6-디클로로-3,5-디메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-3,5-디메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- {[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸](디메틸)암모니오}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- 1-{4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}에틸 하이드로겐 포스페이트;
- 1-{4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}에틸 하이드로겐 포스페이트;
- {1-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-4-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- {1-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-4-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 설페이트;
- 1-[(아세틸옥시)메틸]-4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움;
- 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-{[(에톡시카보닐)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
- 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-{[(디에틸카바모일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
- 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-[(글리실록시)메틸]-1-메틸피페라진-1-이움;
- 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-{1-[(디에틸카바모일)옥시]에틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
- 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸-1-[(5-메틸-2-옥소-1,3-디옥솔-4-일)메틸]피페라진-1-이움;
- 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸-1-[(L-발릴옥시)메틸]피페라진-1-이움;
- 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-{[(2,2-디메틸프로파노일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
- 1-[(아세틸옥시)메틸]-4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움;
- 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-{[(에톡시카보닐)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
- 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-{[(디에틸카바모일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
- 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-[(글리실록시)메틸]-1-메틸피페라진-1-이움;
- 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-{1-[(디에틸카바모일)옥시]에틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
- 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸-1-[(5-메틸-2-옥소-1,3-디옥솔-4-일)메틸]피페라진-1-이움;
- 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸-1-[(L-발릴옥시)메틸]피페라진-1-이움;
- 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-{[(2,2-디메틸프로파노일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움이다.
본 발명의 바람직한 화합물들 중에서,
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- 벤질 {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 포스페이트;
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 메틸 포스페이트;
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-에틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- {4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- 벤질 {4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 포스페이트;
- {4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 메틸 포스페이트;
- N-[(5Sa)-5-{3-클로로-4-[2-(4-{[(하이드록시포스피네이토)옥시]메틸}-4-메틸피페라진-4-이움-1-일)에톡시]-2-메틸페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]-2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}-D-페닐알라닌;
- {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2,6-디클로로-3,5-디메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-3,5-디메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- {[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸](디메틸)암모니오}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- 1-{4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}에틸 하이드로겐 포스페이트;
- 1-{4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}에틸 하이드로겐 포스페이트;
- {1-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-4-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- {1-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-4-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트가 언급될 수 있다.
본 발명의 바람직한 화합물은
- {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- {4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
- {[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸](디메틸)암모니오}메틸 하이드로겐 포스페이트이다.
또한, 본 발명은 화학식 (I)의 화합물을 제조하는 방법으로서, 출발 물질로서 하기 화학식 (II)의 화합물을 사용하고, 화학식 (II)의 화합물을 카복실산 작용기를 보호하는 반응으로 처리하여 하기 화학식 (III)의 화합물을 얻고, 화학식 (III)의 화합물을 하기 화학식 (IV)의 화합물과 커플링되도록 처리하여 하기 화학식 (V)의 화합물을 얻고, 화학식 (V)의 화합물을 카복실산 작용기를 탈보호시키는 반응으로 처리하여 화학식 (I)의 화합물을 얻는 것을 특징으로 하고, 화학식 (I)의 화합물은 통상적인 분리 기술에 따라 정제될 수 있고, 이는 요망에 따라 약제학적으로 허용되는 산 또는 염기로 이의 부가염으로 전환되고, 임의적으로 통상적인 분리 기술에 따라 이의 이성질체로 분리되고,
상기 기술된 방법의 과정 동안 적합한 것으로 간주되는 어떠한 순간에, 출발 시약 또는 합성 중간체의 일부 기(하이드록시, 아미노…)는 합성에 요구되는 바에 따라 보호되거나, 이후 탈보호되고, 작용성화될 수 있는 것으로 이해되는 방법에 관한 것이다:
Figure pct00013
Figure pct00014
Figure pct00015
Figure pct00016
상기 식에서, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 및 Y는 화학식(I)에 대해 정의된 바와 같고, R6'는 -N(CH3)2 기 또는 4-메틸-피페라지닐 기를 나타내고, T는 카복실산 작용기에 대한 보호기, 예를 들어, 파라-메톡시벤질 기이다.
화학식 (II) 및 (IV)의 화합물은 상업적으로 입수가능하거나, 문헌에 기술된 통상적인 화학 반응을 사용하여 당업자들에 의해 얻어질 수 있다.
본 발명의 화합물의 약물학적 연구는 이들 화합물이 프로-아폽토틱 특성을 가짐을 보여주었다. 암성 세포에서 아폽토시스 과정을 재활성화시키는 능력은 암, 및 면역 및 자가-면역 질환의 치료에서 주요 치료학적 관심사이다.
더욱 특히, 본 발명에 따른 화합물은 화학- 또는 방사선-내성 암의 치료에 유용할 것이다.
치료가 예견되는 암 중에서 비제한적으로, 방광암, 뇌암, 유방암 및 자궁암, 만성 림프 백혈병, 대장암, 식도암 및 간암, 림프모구성 백혈병, 급성 골수 백혈병, 림프종, 흑색종, 악성 혈액병, 골수종, 난소암, 비-소세포폐암, 전립선암, 췌장암 및 소세포폐암의 치료가 언급될 수 있다.
본 발명은 또한, 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제와 함께 조합된 적어도 하나의 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 약학적 조성물로는, 더욱 특히, 경구, 비경구, 비, 피부경유(per-cutaneous), 피부통과(trans-cutaneous), 직장, 설하, 안구 또는 호흡기 투여에 적합한 것들, 특히, 정제 또는 드라제(dragees), 설하정, 샤셰(Sachet), 파켓(paquet), 캡슐, 글로젯(glossettes), 로젠즈(lozenges), 좌약, 크림, 연고, 피부용 젤 및 음용 또는 주사용 앰플이 언급될 수 있다.
용량은 환자의 성별, 연령 및 체중, 투여 경로, 치료학적 적응증의 특성 또는 임의의 관련 처치에 따라 달라지며, 1회 이상의 투여로 24시간 당 0.01 mg 내지 1 g 범위이다.
게다가, 본 발명은 또한, 유전자독성물질, 유사분열 저해제, 대사길항물질, 프로테아좀 억제제, 키나아제 억제제 및 항체로부터 선택된 항암제와 화학식 (I)의 화합물의 조합물, 및 또한, 이러한 타입의 조합물을 포함하는 약학적 조성물 및 암 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에서의 이들의 용도에 관한 것이다.
유리하게는, 본 발명은 EGFR 억제제와 화학식 (I)의 화합물의 조합물, 및 또한, 그러한 타입의 조합물을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
다른 구체예에서, 본 발명은 mTOR/PI3K 억제제와 화학식 (I)의 화합물의 조합물, 및 또한, 그러한 타입의 조합물을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
바람직한 구체예에서, 본 발명은 MEK 억제제와 화학식 (I)의 화합물의 조합물, 및 또한, 그러한 타입의 조합물을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
바람직하게, 본 발명은 HER2 억제제와 화학식 (I)의 화합물의 조합물, 및 또한, 그러한 타입의 조합물을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
유리하게는, 본 발명은 RAF 억제제와 화학식 (I)의 화합물의 조합물, 및 또한, 그러한 타입의 조합물을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
다른 구체예에서, 본 발명은 EGFR/HER2 억제제와 화학식 (I)의 화합물의 조합물, 및 또한, 그러한 타입의 조합물을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
바람직한 구체예에서, 본 발명은 탁산과 화학식 (I)의 화합물의 조합물, 및 또한, 그러한 타입의 조합물을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
다른 구체예에서, 본 발명은 프로테아좀 억제제, 면역조절제 또는 알킬화제와 화학식 (I)의 화합물의 조합물, 및 또한, 그러한 타입의 조합물을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.
항암제와 화학식 (I)의 화합물의 조합물은 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다. 투여 경로는 바람직하게는 경구 경로이고, 상응하는 약제학적 조성물이 활성 성분의 즉각적인 방출 또는 지연된 방출을 가능하게 할 수 있다. 더욱이, 조합물 중의 화합물들은 각각이 활성 성분 중 하나를 함유하는 두 가지의 별도의 약제학적 조성물의 형태로 투여될 수 있거나, 활성 성분이 혼합되어 있는 단일의 약제학적 조성물의 형태로 투여될 수 있다.
본 발명의 화합물은 또한 암의 치료에서 방사선요법과 함께 이용될 수 있다.
마지막으로, 본 발명의 화합물은 모노클로날 항체 또는 이들의 단편과 연관될 수 있거나, 모노클로날 항체와 관련될 수 있거나 그렇지 않을 수 있는 스캐폴드 단백질(scaffold protein)과 연관될 수 있다.
항체 단편은 Fv, scFv, Fab, F(ab')2, F(ab'), scFv-Fc 타입 또는 이중체(diabodies)의 단편으로서 이해되어야 하고, 이러한 단편들은 이들이 유래되는 항체와 동일한 결합 특이성을 일반적으로 지닌다. 본 발명에 따르면, 본 발명의 항체 단편은 효소, 예를 들어, 펩신 또는 파파인에 의한 소화와 같은 방법, 및/또는 화학적 환원에 의한 이황화물 브릿지의 분해에 의해서 항체로부터 출발하여 얻어질 수 있다. 또 다른 방식으로, 본 발명에서 포함되는 항체 단편은 당업자에게는 공지된 유전자 재조합 기술에 의해서 유사하게 얻어질 수 있거나, 아니면, 예를 들어, 자동 펩티드 합성기, 예를 들어, Applied Biosystems 등의 회사에 의해서 공급되는 자동 펩티드 합성기에 의한 펩티드 합성에 의해서 얻어질 수 있다.
모노클로날 항체와 관련될 수 있거나 그렇지 않을 수 있는 스캐폴드 단백질은 면역글로불린 접힘(immunoglobulin fold)을 함유하거나 함유하지 않으며 모노클로날 항체와 유사한 결합 능력을 생성시키는 단백질을 의미하는 것으로 이해된다. 당업자라면 단백질 스캐폴드를 선택하는 방법을 알고 있다. 더욱 특히, 선택되기 위해서, 그러한 스캐폴드는 다음과 같은 몇 가지 특징을 나타내야 함이 공지되어 있다(Skerra, J. Mol . Recogn . 2000, 13, 167-187): 계통발생적으로 양호한 보존, 잘 공지된 3차원 분자 체계(예를 들어, 결정학 또는 NMR)를 지니는 강한 구조, 작은 크기, 없거나 약간 있는 번역 후 변형, 생산, 발현 및 정제의 용이. 그러한 단백질 스캐폴드는, 이로 한정하고자 하는 것은 아니지만, 피브로넥틴 및 우선적으로 제 10 피브로넥틴 타입 III 도메인(FNfn10), 리포칼린(lipocalin), 안티칼린(anticalin)(Skerra, J. Biotechnol . 2001, 74:257-75), 스태필로코컬 단백질 A(staphylococcal protein A)의 도메인 B로부터의 단백질 Z 유도체, 티오레독신 A(thioredoxin A) 또는 "안키린 리피트(ankyrin repeat)" (Kohl et al., PNAS 2003, 100, 1700-1705), "아르마딜로 리피트(armadillo repeat)", "류신-풍부 리피트(leucine-rich repeat)" 또는 "테트라트리코펩티드 리피트(tetratricopeptide repeat)"와 같은 반복 도메인을 지니는 어떠한 단백질로 이루어진 군으로부터 선택된 구조일 수 있다. 독소(예를 들어, 전갈, 곤충, 식물 또는 연체동물 독소) 또는 신경계 산화질소 합성효소의 단백질 억제제(protein inhibitors of neuronal nitric oxide synthase: PIN)로부터의 스캐폴드 유도체가 또한 언급될 수 있다.
하기 제법 및 실시예는 본 발명을 예시하는 것으로서, 어떤 식으로든 본 발명을 제한하지 않는다.
일반적인 절차
상업적 공급원으로부터 얻은 모든 시약은 추가의 정제 없이 사용하였다. 무수 용매는 상업적 공급원으로부터 얻었으며 추가의 건조 없이 사용하였다.
플래시 크로마토그래피는 사전-충진된 실리카겔 카트리지가 구비된 ISCO CombiFlash Rf 200i(RediSep ®Rf Gold High Performance)에서 수행하였다.
박층 크로마토그래피는 Merck Type 60 F254 실리카겔로 코팅된 5 × 10 cm 판으로 수행하였다.
마이크로파 가열은 Anton Parr MonoWave 또는 CEM Discover® 기기에서 수행하였다.
분취용 HPLC 정제는, 달리 명시하지 않는 한, 용리제로서 25 mM의 NH4HCO3 수용액 및 MeCN를 사용하는, UV 다이오드 어레이 검출(210 내지 400 nm)에 의해 118 mL min-1의 유속으로 실행되는 Gemini-NX® 10 μM C18, 250 mm × 50 mm i.d. 컬럼이 구비된 Armen Spot Liquid Chromatography 시스템상에서 수행하였다.
분석 LC-MS: 본 발명의 화합물은, 양성 또는 음성 이온 전자 분사 이온화 방식으로 작동하는, Agilent 6140 사중극자(quadrupole) LC/MS을 구비한 Agilent HP1200 상에서 고성능 액체 크로마토그래피-질량 분석법(HPLC-MS)에 의해서 특징지워진다. 분자량 스캔 범위는 100 내지 1350이다. 병렬 UV 검출은 210 nm 및 254 nm에서 수행되었다. 샘플은 5 ㎕ 루프 주입으로 ACN, 또는 테트라하이드로푸란/H2O(1:1) 중의 1 mM 용액으로서 공급되었다. LCMS 분석은 두 기구 상에서 수행되었으며, 그 중 하나는 염기성 용리제에 의해서 작동되었고 다른 하나는 산성 용리제에 의해서 작동되었다.
염기성 LCMS: 다양한 기간/특정의 기간에 걸쳐서 5 mM 중탄산암모늄(용매 A) 및 아세토니트릴(용매 B)를 사용하는데 100% 용매 A로부터 출발하여 100% 용매 B로 끝나는 구배로, 23℃에서 및 1 mL min-1의 유속에서의 Gemini-NX, 3 ㎛, C18, 50 mm × 3.00 mm i.d. 컬럼.
산성 LCMS: 다양한 기간/특정의 기간에 걸쳐서 0.02% v/v 수성 포름산(용매 A) 및 아세토니트릴 중의 0.02% v/v 포름산(용매 B)을 사용하는데 100% 용매 A로부터 출발하여 100% 용매 B로 끝나는 구배로, 40℃에서 및 1 mL min-1의 유속에서의 ZORBAX Eclipse XDB-C18, 1.8 ㎛, 50 mm × 4.6 mm i.d. 컬럼.
1H-NMR 측정은 용매로서 DMSO-d6 또는 CDCl3를 사용하는 Bruker Avance III 500 MHz 분광계 및 Bruker Avance III 400 MHz 분광계 상에서 수행되었다. 1H NMR 데이터는 내부 표준으로서 용매의 잔류 피크(DMSO-d6의 경우 2.50 ppm 및 CDCl3의 경우 7.26 ppm)를 사용하는, 백만분의 일(ppm)로 주어지는 델타 값의 형태이다. 분할 패턴은 s(단일선), d(이중선), t(삼중선), q(사중선), quint(오중선), m(다중선), br s(광역 단일선), dd(이중 이중선), td(삼중 이중선), dt (이중 삼중선), ddd(이중의 이중 이중선)로 지정된다.
조합 가스 크로마토그래피 및 저해상도 질량 분석법은 0.25 ㎛ HP-5MS 코팅을 지니는 15 m × 0.25 mm 컬럼 및 담체 가스로서의 헬륨을 사용하는 Agilent 6850 가스 크로마토그래피 및 Agilent 5975C 질량 분광계 상에서 수행되었다. 이온 공급원: EI+, 70 eV, 230℃, 사중극자: 150℃, 인터페이스(interface): 300℃.
HRMS는 Shimadzu IT-TOF상에서, 이온 공급원 온도 200℃, ESI +/-, 이온화 전압: (+-)4.5 kV에서 측정되었다. 질량 분해능 최소치 10000.
원소 분석은 Thermo Flash EA 1112 Elemental Analyzer 상에서 수행되었다.
실시예 1: {4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트
단계 A : 4-메톡시벤질 (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시}-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)프로파노에이트
1.75 g (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시}-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)프로판산 (2 mmol, 1 eq.; WO 2015/097123에 따라 합성됨), 1.05 g 트리페닐포스핀 (4 mmol, 2 eq.) 및 0.5 mL 4-메톡시벤질 알코올 (4 mmol, 2 eq.)을 20 mL 무수 톨루엔 중에 용해시킨 후, 0.92 g 디-3차-부틸 아조디카복실레이트 (4 mmol, 2 eq.)를 3분에 걸쳐 첨가하였다. 형성된 혼합물을 50℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 사전컨디셔닝된 120 g 실리카 컬럼 상에 직접 주입한 후, 용리제로서 에틸 아세테이트/메탄올 (1.2% NH3 함유)를 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 결정을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.63 (d, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.68 (dd, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.21-7.13 (m, 5H), 7.10-7.04 (m, 2H), 6.99-6.80 (m, 7H), 6.24 (d, 1H), 5.68 (dd, 1H), 5.25-5.16 (m, 3H), 5.09 (d, 1H), 4.29-4.18 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.38 (dd, 1H), 2.96-2.89 (m, 2H), 2.69 (br s, 4H), 2.56 (dd, 2H), 2.46 (br s, 4H), 2.28 (s, 3H), 1.90 (s, 3H)
단계 B : 3차-부틸 [4-[2-[2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-[(1R)-2-[(4-메톡시페닐)메톡시]-1-[[2-[[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시]페닐]메틸]-2-옥소-에톡시]-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3-메틸-페녹시]에틸]-1-메틸-피페라진-1-이움-1-일]메틸 포스페이트
249 mg 4-메톡시벤질 (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시}-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)프로파노에이트 (0.25 mmol, 1 eq.), 194 mg 디-3차-부틸 클로로메틸 포스페이트 (0.75 mmol, 3 eq.), 112 mg 요오드화나트륨 (0.75 mmol, 3 eq.) 및 62 mg NaHCO3 (0.75 mmol, 3 eq.)를 실온에서 밤새 3 mL 무수 아세톤에서 중에서 교반하였다(빛 차단됨). 반응 혼합물에, 2 mL 물을 첨가하고, 구배 방법으로 용리제로서 아세토니트릴/5 mM NH4HCO3를 사용하는 RP18 컬럼 상에 직접 주입하였다. 동결건조 후, 백색 고형물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.64 (d, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.68 (dd, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.21-7.16 (m, 5H), 7.11-7.05 (m, 2H), 6.98 (t, 2H), 6.89-6.79 (m, 5H), 6.22 (d, 1H), 5.66 (dd, 1H), 5.20 (dd, 2H), 5.15 (dd, 2H), 5.08 (d, 1H), 4.26-4.16 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.70-3.65 (m, 2H), 3.38 (dd, 2H), 3.32 (br s, 1H), 3.19-3.09 (m, 1H), 3.15 (s, 3H), 3.00 (t, 2H), 2.98-2.91 (m, 2H), 2.55 (dd, 1H), 1.90 (s, 3H), 1.87 (br s, 4H), 1.46 (s, 9H)
단계 C : 실시예 1
4 mL 무수 디클로로메탄 중에 용해된 150 mg 3차-부틸 [4-[2-[2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-[(1R)-2-[(4-메톡시페닐)메톡시]-1-[[2-[[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시]페닐]메틸]-2-옥소-에톡시]-(5Sa)-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3-메틸-페녹시]에틸]-1-메틸-피페라진-1-이움-1-일]메틸 포스페이트 (0.13 mmol, 1 eq.)에, 0.5 mL 트리플루오로아세트산 (6.6 mmol, 50 eq.)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 아세토니트릴/5 mM NH4HCO3을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 1을 백색 고형물로서 얻었다. C48H48ClFN6O10PS에 대한 HRMS 계산치: 984.2485; 실측치 471.1189 (M+2H)
실시예 2: 벤질 {4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 포스페이트
단계 A : 벤질 [4-(2-{2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3-메틸페녹시}에틸)-1-메틸피페라진-1-이움-1-일]메틸 포스페이트
995 mg 4-메톡시벤질 (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시}-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)프로파노에이트 (1 mmol, 1 eq.) 및 392 mg 디벤질 클로로메틸 포스페이트 (1.2 mmol, 1.2 eq.)를 80℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 5 mL 무수 아세토니트릴 중에서 교반하였다. 반응 혼합물을 사전컨디셔닝된 80 g 실리카 컬럼 상에 직접 주입한 후, 이를 용리제로서 에틸 아세테이트/메탄올 (1.2% NH3 함유)을 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 생성물을 오프-화이트 결정으로서 얻었다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 8.66 (d, 1H), 8.54 (s, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.49 (dd, 1H), 7.45 (tm, 1H), 7.34-7.2 (m, 5H), 7.29 (m, 2 H), 7.24 (d, 1H), 7.22 (m, 2H), 7.19 (m, 1H), 7.15 (m, 2H), 7.14 (m, 1H), 7.12 (d, 1H), 7.04 (m, 1H), 7.02 (tm, 1H), 6.88 (d, 2H), 6.74 (t, 1H), 6.21 (d, 1H), 5.55 (dd, 1H), 5.23 (d, 1H), 5.17 (d, 1H), 5.10 (d, 1H), 5.01 (d, 1H), 4.86 (d, 2H), 4.75 (d, 2H), 4.26-4.14 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.38-3.22 (m, 4H), 3.22-2.54 (m, 2 H), 2.96-2.74 (br s, 4H), 2.93 (s, 3H), 2.87 (t, 2H), 1.84 (s, 3H)
단계 B : 실시예 2
435 mg 벤질 [4-(2-{2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5Sa)-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3-메틸페녹시}에틸)-1-메틸피페라진-1-이움-1-일]메틸 포스페이트 (0.36 mmol, 1 eq.) 및 560 μL 트리플루오로아세트산 (7.28 mmol, 20 eq.)를 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 아세토니트릴/5 mM NH4HCO3을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 2를 백색 고형물로서 얻었다. C55H53ClFN6O10PS에 대한 HRMS 계산치: 1074.2954; 실측치 538.1565 (M+2H)
다음 실시예 3 및 4에서, 절차는 실시예 1에서와 동일하나, 화학식(IV)의 적합한 클로라이드 유도체 및 화학식(II)의 적합한 티에노피리미딘 화합물을 사용하였다.
실시예 3: {4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 메틸 포스페이트
실시예 4: {4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-에틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트
실시예 5: {4-[2-(3-브로모-4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로 겐 포스페이트
단계 A : 4-메톡시벤질 (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-브로모-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시}-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)프로파노에이트
1.75 g (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-브로모-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시}-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)프로판산 (2 mmol, 1 eq.; WO 2015/097123에 따라 합성됨), 1.05 g 트리페닐포스핀 (4 mmol, 2 eq.) 및 0.5 mL 4-메톡시벤질 알코올 (4 mmol, 2 eq.)을 20 mL 무수 톨루엔 중에 용해시킨 후, 0.92 g 디-3차-부틸 아조디카복실레이트 (4 mmol, 2 eq.)를 3분에 걸쳐 첨가하였다. 형성된 혼합물을 50℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 사전컨디셔닝된 120 g 실리카 컬럼 상에 직접 주입한 후, 용리제로서 에틸 아세테이트/메탄올 (1.2% NH3 함유)을 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 백색 결정을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.63 (d, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.68 (dd, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.21-7.13 (m, 5H), 7.10-7.04 (m, 2H), 6.99-6.80 (m, 7H), 6.24 (d, 1H), 5.68 (dd, 1H), 5.25-5.16 (m, 3H), 5.09 (d, 1H), 4.29-4.18 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.38 (dd, 1H), 2.96-2.89 (m, 2H), 2.69 (br s, 4H), 2.56 (dd, 2H), 2.46 (br s, 4H), 2.28 (s, 3H), 1.90 (s, 3H)
단계 B : 3차-부틸 [4-[2-[2-브로모-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-[(1R)-2-[(4-메톡시페닐)메톡시]-1-[[2-[[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시]페닐]메틸]-2-옥소-에톡시]-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3-메틸-페녹시]에틸]-1-메틸-피페라진-1-이움-1-일]메틸 포스페이트
265 mg 상기 단계 A의 화합물 (0.25 mmol, 1 eq.), 194 mg 디-3차-부틸 클로로메틸 포스페이트 (0.75 mmol, 3 eq.), 112 mg 요오드화나트륨 (0.75 mmol, 3 eq.) 및 62 mg NaHCO3 (0.75 mmol, 3 eq.)를 실온에서 밤새 3 mL 무수 아세톤 중에서 교반하였다(빛 차단됨). 반응 혼합물에, 2 mL 물을 첨가하고, 이를 구배 방법으로 용리제로서 아세토니트릴/5 mM NH4HCO3을 사용하는 RP18 컬럼 상에 직접 주입하였다. 동결건조 후, 백색 고형물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.64 (d, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.68 (dd, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.21-7.16 (m, 5H), 7.11-7.05 (m, 2H), 6.98 (t, 2H), 6.89-6.79 (m, 5H), 6.22 (d, 1H), 5.66 (dd, 1H), 5.20 (dd, 2H), 5.15 (dd, 2H), 5.08 (d, 1H), 4.26-4.16 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.70-3.65 (m, 2H), 3.38 (dd, 2H), 3.32 (br s, 1H), 3.19-3.09 (m, 1H), 3.15 (s, 3H), 3.00 (t, 2H), 2.98-2.91 (m, 2H), 2.55 (dd, 1H), 1.90 (s, 3H), 1.87 (br s, 4H), 1.46 (s, 9H)
단계 C : 실시예 5
4 mL 무수 디클로로메탄 중에 용해된 150 mg 상기 단계 B의 화합물 (0.13 mmol, 1 eq.)에, 0.5 mL 트리플루오로아세트산 (6.6 mmol, 50 eq.)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 아세토니트릴/5 mM NH4HCO3을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 5를 얻었다. C47H44ClFN6O10PS에 대한 HRMS 계산치: 1048.1433; 실측치 525.0791 (M+2H)
실시예 6: 벤질 {4-[2-(3-브로모-4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 포스페이트
단계 A : 벤질 [4-(2-{3-브로모-2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]페녹시}에틸)-1-메틸피페라진-1-이움-1-일]메틸 포스페이트
실시예 5의 단계 A에서 얻어진 318 mg의 화합물 (0.30 mmol, 1 eq.) 및 147 mg 디벤질 클로로메틸 포스페이트 (0.45 mmol, 1.5 eq)를 70℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 1.5 mL 무수 아세토니트릴 중에서 교반하였다. 반응 혼합물을 사전컨디셔닝된 80 g 실리카 컬럼 상에 직접 주입한 후, 용리제로서 에틸 아세테이트/메탄올 (1.2% NH3 함유)을 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 A의 생성물을 백색 결정으로서 얻었다. MS: M+H = 1260.6
단계 B : 실시예 6
3.5 mL 디클로로메탄 중의 275 mg 상기 단계 B의 화합물 (0.218 mmol, 1 eq.)의 용액에, 334 μL 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 미정제 생성물을 용리제로서 에틸 아세테이트/메탄올 (1.2% NH3 함유)을 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 이후, 이 생성물을 용리제로서 25 mM NH4HCO3 수용액 및 MeCN을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결 건조 후 실시예 6을 백색 고형물로서 얻었다. C54H50BrClFN6O10PS에 대한 HRMS 계산치: 1138.1903; 실측치 570.1018 (M+2H)
실시예 7: {4-[2-(3-브로모-4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 메틸 포스페이트
실시예 7에서, 절차는 실시예 1에서와 동일하나, 화학식(IV)의 적합한 클로라이드 유도체 및 화학식(II)의 적합한 티에노피리미딘 화합물을 사용하였다.
실시예 8: N-[(5S a )-5-{3-클로로-4-[2-(4-{[(하이드록시포스피네이토)옥시]메틸}-4-메틸피페라진-4-이움-1-일)에톡시]-2-메틸페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]-2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}-D-페닐알라닌
단계 A : 6- 요오도 -3H- 티에노[2,3-d]피리미딘 -4-온
기계식 교반기, 온도계 및 환류 응축기가 구비된 2 L 둥근 바닥 플라스크에 433 mL 아세트산, 13 mL 황산 및 87 mL 물의 용액을 충전하였다. 69.3 g 3H-티에노[2,3-d]피리미딘-4-온 (0.46 mol), 51.9 g 과요오드산 (0.23 mol) 및 104 g 요오드 (0.41 mol)를 교반된 용액에 첨가하고, 이를 1시간 동안 60℃로 가열하였다. 형성된 현탁액을 실온으로 냉각시키고, 여과시켜 내고, 아세트산과 물 (5:1)의 혼합물로 세척한 후, 디에틸 에테르로 세척하였다. 형성된 베이지색 결정질 고형물을 공기 건조시켰다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ12.57 (br s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.65 (s, 1H)
단계 B : 4- 클로로 -6-요오 도 - 티에노[2,3-d]피리미딘
기계식 교반기, 온도계, 환류 응축기 및 CaCl2-튜브가 구비된 1 L 둥근 바닥 플라스크에 113 mL 포스포러스 옥시클로라이드 및 35 mL N,N-디메틸아닐린 (0.29 mol)을 충전하였다. 75.54 g 상기 단계 A의 화합물 (0.27 mol)을 5분 동안 나누어 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 105℃에서 1시간 동안 교반하였다. 형성된 현탁액을 10℃로 냉각시키고, 여과시키고, 헥산으로 세척하였다. 미정제 생성물을 빙수에 첨가하고, 10분 동안 교반하고, 여과해 내고, 냉수, 디에틸 에테르로 세척하고, 공기 건조시켰다. 베이지색 결정질 고형물을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.89 (s, 1H), 7.98 (s, 1H)
단계 C : 5- 브로모 -4- 클로로 -6-요오 도 - 티에노[2,3-d]피리미딘
기계식 교반기, 온도계 및 버블러가 구비된 2 L 둥근 바닥 플라스크에 600 mL 아세토니트릴을 충전하였다. 84.9 g 상기 단계 B의 화합물 (0.29 mol), 50.9 g N-브로모석신이미드 (0.29 mol) 및 8.5 mL 테트라플루오로붕산 디에틸 에테르 착물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 추가의 22.9 g (0.12 mol) N-브로모석신이미드를 세부분으로 나누어 혼합물에 첨가하였다. 현탁액을 0℃로 냉각시키고, 추가 1시간 동안 교반한 후, 침전물을 여과해 내고, 아세토니트릴로 세척하고, 공기 건조시켰다. 생성물을 베이지색 결정질 고형물로서 얻었다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ8.88 (s, 1H)
단계 D : 5- 브로모 -4- 클로로 -6- (4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘
75.08 g 상기 단계 C의 화합물 (200 mmol), 53.63 g 2-(4-플루오로페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (240 mmol), 130 g 세슘 카보네이트 (400 mmol), 2.245 g Pd(OAc)2 (10 mmol) 및 8.50 g 2-디-3차-부틸포스피노-2',4',6'-트리이소프로필바이페닐 (20 mmol)를 2 L 플라스크에 넣었다. 600 mL 테트라하이드로푸란 및 200 mL 물을 첨가한 후, 밤새 70℃에서 아르곤 대기 하에 교반하였다. 테트라하이드로푸란을 증발시킨 후, 생성물을 여과에 의해 수거하였다. 미정제 생성물을 250 mL 아세토니트릴 중에서 초음파 처리하고, 다시 여과하였다. 이후, 5-브로모-4-클로로-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘을 에탄올/테트라하이드로푸란 (2:1)로부터 결정화시켰다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.02 (s, 1H), 7.80-7.77 (m, 2H), 7.47-7.43 (m, 2H)
단계 E : (2R)-2-[[5- 브로모 -6- (4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘 -4-일]아미노]-3-(2-하이드록시페닐)프로판산
1 eq.의 상기 단계 D의 화합물, 2 eq.의 (2R)-2-아미노-3-(2-하이드록시페닐)프로판산 및 3 eq. K2CO3를 디메틸 설폭사이드 (10 mL/mmol) 중에서 혼합하고, 50℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 이후, 혼합물을 물로 희석하고, 1M HCl 용액을 사용하여 산성화시키고(염기성 아미노 기의 존재 하에서 pH = 1, 또는 pH = 6으로) 에틸 아세테이트로 추출하거나, 산성화후 형성된 침전물을 여과에 의해 분리시켰다. 미정제 생성물을 용리제로서 25 mM NH4HCO3 수용액 및 아세토니트릴을 사용하는 분취용 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 (2R)-2-[[5-브로모-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]아미노]-3-(2-하이드록시페닐)프로판산을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.90 (br s, 1H), 9.65 (br s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.70 (m, 2H), 7.45-7.34 (m, 3H), 7.18 (dd, 1H), 7.04 (td, 1H), 6.80 (d, 1H), 6.72 (t, 1H), 4.96 (m, 1H), 3.31 (dd, 1H), 3.08 (dd, 1H)
MS (M+H): 488.0
단계 F : (4- 브로모 -2- 클로로 - 페녹시 )- 트리메틸 - 실란
20.8 g 4-브로모-2-클로로-페놀 (100 mmol)을 150 mL 무수 테트라하이드로푸란 중에 용해시킨 후, 24.2 g 헥사메틸디실라잔 (150 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃에서 아르곤 대기 하에 1.5시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 형성된 미정제 생성물을 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (200 MHz, CDCl3) δ7.49 (d, 1H), 7.23 (dd, 1H), 6.75 (d, 1H), 0.26 (s, 9H)
단계 G : 4- 브로모 -2- 클로로 -3- 메틸 -페놀
48 mL n-부틸 리튬 용액 (120 mmol, 헥산 중 2.5 M)을 -78℃에서 아르곤 대기 하에 250 mL 무수 테트라하이드로푸란 중의 12.1 g 무수 디이소프로필아민 (120 mmol)의 용액에 적가하였다. 혼합물을 30분 동안 동일 온도에 교반한 후, 28.0 g 상기 단계 F의 화합물 (100 mmol)을 적가하였다. 2.5시간 후, 21.3 g 메틸 요오다이드 (150 mmol)를 적가한 후, 냉각조를 제거하고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응물을 100 mL NH4OH 용액 및 200 mL NH4Cl 용액으로 켄칭시킨 후, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 형성된 암색 물질을 순수한 헥산으로 수회(150-150 mL 분취물)로 환류시키고, 따라내어 뒤에 검정색 타르를 남겼다. 합한 유기 상을 감압 하에 농축시켜 19.0 g 미정제 생성물을 얻고, 이를 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (200 MHz, CDCl3) δ7.32 (d, 1H), 6.76 (d, 1H), 5.62 (s, 1H), 2.49 (s, 3H)
단계 H : (4- 브로모 -2- 클로로 -3- 메틸 - 페녹시 )- 트리메틸 - 실란
20.8 g 헥사메틸디실라잔 (129 mmol)을 150 mL 무수 테트라하이드로푸란 중의 19.0 g 상기 단계 H의 화합물 (86.0 mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 85℃에서 아르곤 벌룬 하에 1.5시간 동안 교반한 후, 감압 하에 농축시켰다. 얻어진 생성물을 추가 정제 없이 사용하였다. 1H NMR (200 MHz, CDCl3) δ7.30 (d, 1H), 6.63 (d, 1H), 2.50 (s, 3H), 0.28 (s, 9H)
단계 I : 2- 클로로 -3- 메틸 -4-(4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란 -2-일)페놀
250 mL 무수 테트라하이드로푸란 중의 25.2 g 상기 단계 H의 화합물(86.0 mmol)의 용액을 아르곤 하에 -78℃로 냉각시킨 후, 38 mL n-부틸 리튬 용액 (94.6 mmol, 헥산 중 2.5M)을 적가하였다. 5분 후, 19.2 g 2-이소프로폭시-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (103 mmol)을 적가하였다. 냉각조를 제거하고, 혼합물을 서서히 실온으로 가온시켰다. 이후, 혼합물을 200 mL NH4Cl 용액에 첨가하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시키고, 용리제로서 헥산 및 에틸 아세테이트를 사용하는 실리카 겔 패드를 통과시켰다. 미정제 생성물을 에틸 아세테이트와 헥산의 혼합물로부터 재결정화시켜 2-클로로-3-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페놀을 얻었다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ10.40 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 2.49 (s, 3H), 1.27 (s, 12H)
단계 J : 1-[2-[2- 클로로 -3- 메틸 -4-(4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보롤란 -2-일)페녹시]에틸]-4-메틸-피페라진
10.0 g 상기 단계 I의 화합물(37.2 mmol), 8.7 g 2-(4-메틸피페라진-1-일)에탄올 (60.3 mmol) 및 15.8 g 트리페닐포스핀 (60.3 mmol)을 100 mL 무수 톨루엔 중에 용해시킨 후, 27 mL 디에틸 아조디카복실레이트 (60.3 mmol, 톨루엔 중의 40% 용액)를 적가하였다. 혼합물을 50℃에서 아르곤 하에 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 휘발물질을 감압 하에 증발시키고, 100 mL 디에틸 에테르를 첨가하였다. 침전된 백색 결정을 여과시켜 내고, 디에틸 에테르로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시키고, 용리제로서 클로로포름 및 메탄올을 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 정제하였다. 형성된 밝은 갈색 오일을 헥산으로부터 결정화시켜 1-[2-[2-클로로-3-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)페녹시]에틸]-4-메틸-피페라진을 오프-화이트 고형물로서 얻었다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ7.56 (d, 1H), 6.99 (d, 1H), 4.15 (t, 2H), 2.72 (t, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.50 (br s, 4H), 2.29 (br s, 4H), 2.13 (s, 3H), 1.29 (s, 12H)
단계 K : (2R)-2-[[(5S a )-5-[3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]아미노]-3-(2-하이드록시페닐)프로판산
1 eq.의 상기 단계 E의 화합물 및 3 eq.의 상기 단계 J의 화합물을 디옥산:물 2:1 혼합물 (10 mL/mmol) 중에 용해시킨 후, 2 eq. Cs2CO3, 5 mol% Pd(OAc)2 및 0.2 eq. 트리-3차-부틸포스포늄 테트라플루오로보레이트를 첨가하고, 혼합물을 마이크로파 반응기 내 120℃에서 질소 하에 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 혼합물을 1M HCl 용액으로 중화시키고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 합한 유기 상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 여액을 진공 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 용리제로서 0.1% 트리플루오로아세트산 수용액 및 아세토니트릴을 사용하는 분취용 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 (2R)-2-[[5-[3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]아미노]-3-(2-하이드록시페닐)프로판산을 부분입체이성질체의 혼합물로서 얻었다. 혼합물을 HILIC 용리제를 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 분리시켰다. 먼저 용리되는 부분입체이성질체를 (2R)-2-[[(5Ra)5-[3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]아미노]-3-(2-하이드록시페닐)프로판산으로서 수거하였다. MS (M+H): 676.2
나중에 용리되는 부분입체이성질체를 (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]아미노]-3-(2-하이드록시페닐)프로판산으로서 수거하였다. MS (M+H): 676.2
단계 L : 에틸 (2R)-2-[[( 5S a )-5-[3- 클로로 -2- 메틸 -4-[2-(4- 메틸피페라진 -1-일)에톡시] 페닐]-6- (4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘 -4-일]아미노]-3-(2-하이드록시페닐) 프로파노에이트
4.51 g의 (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]아미노]-3-(2-하이드록시페닐)프로판산 (6.67 mmol)을 에탄올 중의 85 mL 1.25M HCl 중에 용해시키고, 40℃에서 밤새 교반하였다. 이후, 혼합물을 NaHCO3 용액으로 조심스럽게 희석시키고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 합한 유기 상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 진공 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 용리제로서 디클로로메탄 및 메탄올을 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 정제하여 에틸 (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]아미노]-3-(2-하이드록시페닐)프로파노에이트를 얻었다.
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6)δ: 9.49 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.27-7.21 (m, 3H), 7.20-7.14 (m, 2H), 7.00 (td, 1H), 6.71 (dd, 1H), 6.60 (td, 1H), 6.39 (dd, 1H), 5.03 (d, 1H), 4.92 (m, 1H), 4.26 (t, 2H), 4.03 (m, 2H), 3.03 (dd, 1H), 2.78 (t, 2H), 2.54 (br, 4H), 2.36 (dd, 1H), 2.30 (br, 4H), 2.12 (s, 3H), 1.83 (s, 3H), 1.10 (t, 3H)
C37H39ClFN5O4S에 대한 HRMS 계산치: 703.2395; 실측치 704.2450 (M+H)
단계 M : (E)-4-(디메틸아미노)-1,1- 디메톡시 - 부트 -3-엔-2-온
502.1 g 1,1-디메톡시프로판-2-온 (4.25 mol) 및 506.4 g 1,1-디메톡시-N,N-디메틸-메탄아민 (4.25 mol)을 2 L 플라스크에서 혼합하고, 105℃에서 3시간 동안 교반하였다. 형성된 메탄올을 증류를 통해 지속적으로 제거하였다. 메탄올 형성이 중단되면(65℃ 상부 온도에서), 반응 혼합물을 진공 증류시켜(압력을 30 mbar로 서서히 감소시켜) 부산물 및 미반응된 출발 물질을 제거하였다. 미정제 생성물을 0.1 mbar에서 증류시켰다. 분획을 107-118℃ 상부 온도 (배쓰 온도 160-165℃)에서 수거하여 황색 오일을 얻었다. 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ7.59 (d, 1H), 5.17 (d, 1H), 4.42 (s, 1H), 3.25 (s, 6H), 3.09 (s, 3H), 2.78 (s, 3H)
단계 N : 4-( 디메톡시메틸 )-2-(2- 메톡시페닐 )피리미딘
무수 메탄올 (0.5 mL/mmol) 중의 1.2 eq.의 2-메톡시벤즈아미딘 아세트산 염과 1 eq.의 상기 단계 M의 화합물의 혼합물에, 1.2 eq. 나트륨 메톡사이드를 적가하고, 혼합물을 75℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 물을 잔류물에 첨가하고, 이를 디클로로메탄으로 추출하였다. 합한 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 용리제로서 헵탄 및 에틸 아세테이트를 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 정제하여 4-(디메톡시메틸)-2-(2-메톡시페닐)피리미딘을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.93 (d, 1H), 7.55-7.44 (m, 3H), 7.16 (d, 1H), 7.06 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.37 (s, 6H)
단계 O : [2-(2- 메톡시페닐 )피리미딘-4-일]메탄올
261 mg 상기 단계 N의 화합물(1.0 mmol)을 2 mL 4M HCl 용액 (in 디옥산) 중에 용해시킨 후, 2 mL 물을 첨가하고, 이 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후, 320 mg NaOH (8.0 mmol)를 적가하였다. pH를 10% K2CO3 용액을 사용하여 8로 조절한 후, 76 mg 나트륨 보로하이드라이드 (2.0 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 5 mL 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 용리제로서 헵탄 및 에틸 아세테이트를 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 정제하여 [2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메탄올을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.84 (d, 1H), 7.50-7.42 (m, 3H), 7.14 (d, 1H), 7.03 (m, 1H), 5.66 (t, 1H), 4.58 (d, 2H), 3.75 (s, 3H)
단계 P : N-[(5S a )-5-{3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]-2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}-D-페닐알라닌
1 eq.의 상기 단계 L의 화합물, 2 eq.의 상기 단계 O의 화합물, 및 3 eq. 트리페닐포스핀을 질소 대기 하에 무수 톨루엔 (7 mL/mmol) 중에 용해시킨 후, 3 eq. 디-3차-부틸 아조디카복실레이트를 실온에서 첨가하였다. 이후, 혼합물을 추가 전환이 관찰되지 않을 때까지 50℃에서 교반하였다. 휘발물질을 진공 하에 제거하고, 잔류물을 용리제로서 헵탄 및 에틸을 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 정제하였다.
1 eq.의 형성된 에스테르 유도체를 테트라하이드로푸란 (15 mL/mmol) 중에 용해시킨 후, 10 eq. 수산화리튬 일수화물 및 물 (15 mL/mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. pH를 1M HCl 용액을 사용하여 6으로 조절한 후, 혼합물을 염수로 희석시키고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 용리제로서 25 mM NH4HCO3 수용액 및 아세토니트릴를 사용하는 분취용 역상 크로마토그래피를 통해 정제하여 N-[(5Sa)-5-{3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]-2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}-D-페닐알라닌을 얻었다. C47H45ClFN7O5S에 대한 HRMS 계산치: 873.2875, 실측치: 437.6498 (M+2H)
단계 Q : 4-메톡시벤질 N-[(5S a )-5-{3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]-2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}-D-페닐알라니네이트
1677 mg 상기 단계 P의 화합물 (1.92 mmol, 1 eq.), 1.51 g 트리페닐포스핀 (5.76 mmol, 3 eq.) 및 796 mg 4-메톡시벤질 알코올 (5.76 mmol, 3 eq.)을 20 mL 무수 톨루엔 중에 용해시킨 후, 1.33 g 디(3차)부틸 아조디카복실레이트 (5.76 mmol, 3 eq.)를 한번에 첨가하였다. 형성된 혼합물을 50℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 미정제 생성물을 용리제로서 에틸 아세테이트/메탄올 (1.2% NH3 함유)을 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 Q의 생성물을 오프-화이트 결정으로서 얻었다. C55H53ClFN7O6S에 대한 HRMS 계산치: 993.3450; 실측치 497.6814 (M+2H)
단계 R : 4-메톡시벤질 N-[(5S a )-5-{4-[2-(4-{[(벤질옥시)포스피네이토]옥시}-4-메틸피페라진-4-이움-1-일)에톡시]-3-클로로-2-메틸페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]-2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}-D-페닐알라니네이트
300 mg 상기 단계 Q의 화합물 (0.301 mmol, 1 eq.) 및 148 mg 디벤질 클로로메틸 포스페이트 (0.451 mmol, 1.5 eq.)를 40℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 1.5 mL 무수 아세토니트릴 중에서 교반하였다. 반응 혼합물을 사전컨디셔닝된 24 g 실리카 컬럼 상에 직접 주입한 후, 이를 용리제로서 에틸 아세테이트/메탄올 (1.2% NH3 함유)을 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 R의 화합물을 오프-화이트 결정으로서 얻었다. C63H62ClFN7O10PS에 대한 HRMS 계산치: 1193.3689; 실측치 597.6928 (M+2H)
단계 S : 실시예 8
840 μL 디클로로메탄 중의 100 mg 상기 단계 R의 화합물 (0.0837 mmol)의 용액에, 152 μL 아세트산 중 33% HBr을 첨가하고, 이를 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 0℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 용리제로서 용리제로서 에틸 아세테이트/메탄올 (1.2% NH3 함유)을 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 이후, 형성된 생성물을 용리제로서 아세토니트릴/5mM NH4HCO3을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 8을 백색 고형물로서 얻었다. C48H48BrClFN7O9PS에 대한 HRMS 계산치: 983.2645; 실측치 492.6377 (M+2H)
실시예 9: {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2,6-디클로로-3,5-디메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트
단계 A : 4- 브로모 -2,6- 디클로로 -3,5-디메틸-페놀
30.16 g 4-브로모-3,5-디메틸-페놀 (150 mmol)을 75 mL 1,2-디클로로에탄과 75 mL 아세토니트릴의 혼합물 중에 용해시킨 후, 40.06 g N-클로로석신이미드 (300 mmol, 2.0 eq.)를 적가하고, 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 디클로로메탄 중에 용해시키고, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시키고, 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 10.10 (s, 1H), 2.46 (s, 6H)
단계 B : 1- 브로모 -3,5- 디클로로 -4- 메톡시 -2,6-디메틸-벤젠
300 mL 아세토니트릴 중의 26.0 g 상기 단계 A의 화합물 (96.3 mmol, 1.0 eq.) 및 26.60 g K2CO3 (192.6 mmol, 2.0 eq.)의 용액에, 6.6 mL 메틸 요오다이드 (105.9 mmol, 1.1 eq.)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 고형물을 여과해 내고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 디클로로메탄 중에 용해시키고, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시키고, 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 3.78 (s, 3H), 2.49 (s, 6H)
단계 C : 2-(3,5- 디클로로 -4- 메톡시 -2,6-디메틸-페닐)-4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2-디옥사보롤란
10.0 g 상기 단계 B의 화합물 (35.2 mmol, 1.0 eq.)을 질소 하에 360 mL 무수 테트라하이드로푸란 중에 용해시키고, 드라이 아이스-아세톤을 사용하여 -78℃로 냉각시켰다. 23.2 mL n-부틸 리튬 (헥산 중 1.6M) (37.0 mmol, 1.05 eq.)을 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반한 후, 8.6 mL 2-이소프로폭시-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (42.24 mmol, 1.2 eq.)을 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온시켰다. 이를 염수로 켄칭시키고, 디클로로메탄으로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 용리제로서 헵탄 및 에틸 아세테이트를 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 2-(3,5-디클로로-4-메톡시-2,6-디메틸-페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란을 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 3.81 (s, 3H), 2.33 (s, 6H), 1.34 (s, 12H)
단계 D : 에틸 4-(3,5- 디클로로 -4- 메톡시 -2,6-디메틸-페닐)티오펜-3- 카복실레이트
3.92 g 에틸 4-브로모티오펜-3-카복실레이트 (16.68 mmol, 1.0 eq.) 및 9.9 g 상기 단계 C의 화합물 (30.0 mmol, 1.8 eq.)을 140 mL 디옥산 중에 용해시킨 후, 40 mL 물 중에 용해된 10.87 g Cs2CO3 (33.36 mmol, 2.0 eq.)를 첨가하였다. 이후, 590 mg 비스(디-3차-부틸(4-디메틸아미노페닐)포스핀) 디클로로팔라듐(II) (0.83 mmol, 0.05 eq.)을 첨가하고, 혼합물을 질소 하에 환류 온도에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 이후, 이를 디클로로메탄 및 염수로 희석시켰다. 상분리 후, 수성 상을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 용리제로서 헵탄 및 에틸 아세테이트를 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 에틸 4-(3,5-디클로로-4-메톡시-2,6-디메틸-페닐)티오펜-3-카복실레이트를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.53 (d, 1H), 7.47 (d, 1H), 4.02 (q, 2H), 3.83 (s, 3H), 1.95 (s, 6H), 1.00 (t, 3H)
HRMS (M+NH4)+ = 376.0538
단계 E : 에틸 4-(3,5- 디클로로 -4- 메톡시 -2,6-디메틸-페닐)-2,5- 디요오도 -티오펜-3-카복실레이트
2.65 g 상기 단계 D의 화합물 (7.38 mmol, 1.0 eq.)을 75 mL 아세토니트릴 중에 용해시킨 후, 2.2 mL 플루오로붕산 디에틸 에테르 착물 (16.23 mmol, 2.2 eq.) 및 3.65 g N-요오도석신이미드 (16.23 mmol, 2.2 eq.)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 미정제 생성물을 용리제로서 헵탄 및 에틸 아세테이트를 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 정제하여 에틸 4-(3,5-디클로로-4-메톡시-2,6-디메틸-페닐)-2,5-디요오도-티오펜-3-카복실레이트를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 3.98 (q, 2H), 3.84 (s, 3H), 1.92 (s, 6H), 0.84 (t, 3H)
단계 F : 에틸 4-(3,5- 디클로로 -4- 메톡시 -2,6-디메틸-페닐)-5-요오 도 -티오펜-3-카복실레이트
5.29 g 상기 단계 E의 화합물 (8.66 mmol, 1.0 eq.)을 90 mL 무수 테트라하이드로푸란 중에 용해시킨 후, 아르곤 대기 하에 -78℃로 냉각시켰다. 6.7 mL 이소프로필 염화마그네슘 염화리튬 착물(테트라하이드로푸란 중 1.3M) (8.66 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하고, 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. 이후, 포화된 NH4Cl 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 용리제로서 헵탄 및 에틸 아세테이트를 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 정제하여 에틸 4-(3,5-디클로로-4-메톡시-2,6-디메틸-페닐)-5-요오도-티오펜-3-카복실레이트를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.71 (s, 1H), 4.01 (q, 2H), 3.86 (s, 3H), 1.89 (s, 6H), 0.99 (t, 3H)
단계 G : 에틸 4-(3,5- 디클로로 -4- 메톡시 -2,6-디메틸-페닐)-5-(4- 플루오로페닐 )-티오펜-3-카복실레이트
4.20 g 상기 단계 F의 화합물 (8.66 mmol, 1.0 eq.) 및 1.82 g 4-플루오로페닐보론산 (13.00 mmol, 1.5 eq.)을 80 mL 디옥산 중에 용해시킨 후, 20 mL 물 중에 용해된 5.64 g Cs2CO3 (17.32 mmol, 2.0 eq.)를 첨가하였다. 이후, 500 mg 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0) (0.43 mmol, 1.15 eq.)을 첨가하고, 혼합물을 질소 하에 80℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 이후, 이를 디클로로메탄 및 염수로 희석시켰다. 상분리 후, 수성 상을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 용리제로서 헵탄 및 에틸 아세테이트를 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 정제하여 에틸 4-(3,5-디클로로-4-메톡시-2,6-디메틸-페닐)-5-(4-플루오로페닐)티오펜-3-카복실레이트를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.58 (s, 1H), 7.22-7.10 (m, 4H), 4.03 (q, 2H), 3.82 (s, 3H), 1.92 (s, 6H), 1.00 (t, 3H)
HRMS (M+H)+ = 453.0498
단계 H : 에틸 4-(3,5- 디클로로 -4- 메톡시 -2,6-디메틸-페닐)-5-(4- 플루오로페닐 )-2-니트로-티오펜-3-카복실레이트
1.97 g 상기 단계 G의 화합물 (4.34 mmol, 1.0 eq.)을 40 mL 무수 아세토니트릴 중에 용해시킨 후, 576 mg 니트로늄 테트라플루오로보레이트 (4.34 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 이후, 이를 디클로로메탄 및 염수로 희석시켰다. 상분리 후, 수성 상을 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 용리제로서 헵탄 및 에틸 아세테이트를 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 정제하여 에틸 4-(3,5-디클로로-4-메톡시-2,6-디메틸-페닐)-5-(4-플루오로페닐)-2-니트로-티오펜-3-카복실레이트를 얻었다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 7.37-7.33 (m, 2H), 7.32-7.26 (m, 2H), 4.14 (q, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.06 (s, 6H), 0.88 (t, 3H)
단계 I : 에틸 2-아미노-4-(3,5- 디클로로 -4- 메톡시 -2,6-디메틸-페닐)-5-(4- 플루오로페닐 )-티오펜-3-카복실레이트
1.85 g 상기 단계 H의 화합물 (3.71 mmol, 1.0 eq.)을 90 mL 아세트산과 18 mL 물의 혼합물 중에 용해시킨 후, 2.43 g 아연 분진 (37.1 mmol, 10 eq.)을 적가하고, 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 미정제 생성물을 용리제로서 헵탄 및 에틸 아세테이트를 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 정제하여 에틸 2-아미노-4-(3,5-디클로로-4-메톡시-2,6-디메틸-페닐)-5-(4-플루오로페닐)티오펜-3-카복실레이트를 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 7.73 (s, 2H), 7.12-7.06 (m, 2H), 7.02-6.97 (m, 2H), 3.86-3.80 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.01 (s, 6H), 0.72 (t, 3H)
HRMS (M+H)+ = 456.0598
단계 J : 5-(3,5- 디클로로 -4- 메톡시 -2,6-디메틸-페닐)-6-(4- 플루오로페닐 )-3H-티에노[2,3-d]피리미딘-4-온
1.10 g 상기 단계 I의 화합물 (2.35 mmol, 1.0 eq.)을 20 mL 포름아미드 용해, 이를 150℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 이후, 이를 물에 붓고, 침전된 생성물을 여과에 의해 수거하여 5-(3,5-디클로로-4-메톡시-2,6-디메틸-페닐)-6-(4-플루오로페닐)-3H-티에노[2,3-d]피리미딘-4-온을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.53 (br s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.23-7.16 (m, 4H), 3.84 (s, 3H), 1.96 (s, 6H)
HRMS (M+H)+ = 449.0289
단계 K : 4- 클로로 -5-(3,5- 디클로로 -4- 메톡시 -2,6-디메틸-페닐)-6-(4- 플루오로페닐 )-티에노[2,3-d]피리미딘
700 mg 상기 단계 J의 화합물 (1.56 mmol, 1.0 eq.)을 6 mL 포스포러스 옥시클로라이드 중에 용해시키고, 이를 90℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시킨 후, 미정제 생성물에 빙수를 첨가하고, 이를 10분 동안 초음파 처리하였다. 침전된 생성물을 여과에 의해 수거하여 4-클로로-5-(3,5-디클로로-4-메톡시-2,6-디메틸-페닐)-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘을 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 9.02 (s, 1H), 7.38-7.26 (m, 4H), 3.86 (s, 3H), 1.99 (s, 6H)
HRMS (M+H)+ = 466.9954
단계 L : 2,6- 디클로로 -4-[4- 클로로 -6- (4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘 -5-일]-3,5-디메틸-페놀 및 4-[4- 브로모 -6- (4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘 -5-일]-2,6-디클로로-3,5-디메틸-페놀
15 mL 디클로로메탄 중의 700 mg 상기 단계 K의 화합물 (1.50 mmol, 1.0 eq.)의 교반된 용액에, 3.0 mL 보론 트리브로모마이드 (디클로로메탄 중 1M) (3.0 mmol, 2.0 eq.)를 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온시키고, 이를 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 혼합물을 포화된 NH4Cl 수용액으로 켄칭시키고, 디클로로메탄으로 추출하였다. 합한 유기 상을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 용리제로서 헵탄 및 에틸 아세테이트를 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 정제하여 2,6-디클로로-4-[4-클로로-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3,5-디메틸-페놀 및 4-[4-브로모-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-2,6-디클로로-3,5-디메틸-페놀을 생성물의 37:63 혼합물로서 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 10.14 (br s, 1H), 9.01 (s, 1H), 7.40-7.23 (m, 4H), 1.95 (s, 6H) 및 10.14 (br s, 1H), 8.93 (s, 1H), 7.40-7.23 (m, 4H), 1.93 (s, 6H)
HRMS (M+H)+ = 452.9800 및 496.9287
단계 M : 4- 클로로 -5-[3,5- 디클로로 -2,6-디메틸-4-[2-(4- 메틸피페라진 -1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘 및 4- 브로모 -5-[3,5- 디클 로로-2,6-디메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘
2,6-디클로로-4-[4-클로로-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3,5-디메틸-페놀과 4-[4-브로모-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-2,6-디클로로-3,5-디메틸-페놀의 300 mg 혼합물 (0.62 mmol), 286 mg 2-(4-메틸피페라진-1-일)에탄올 (1.98 mmol, 3.0 eq.) 및 520 mg 트리페닐 포스핀 (1.98 mmol, 3.0)을 10 mL 무수 톨루엔 중에 용해시킨 후, 460 mg 디-3차-부틸 아조디카복실레이트 (1.98 mmol, 3.0 eq.)를 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 질소 하에 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 휘발물질을 감압 하에 증발시키고, 미정제 중간체를 용리제로서 에틸 아세테이트 및 메탄올을 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 정제하여 4-클로로-5-[3,5-디클로로-2,6-디메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘 및 4-브로모-5-[3,5-디클로로-2,6-디메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘을 생성물의 35:65 혼합물로서 얻었다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 9.02 (s, 1H), 7.40-7.22 (m, 4H), 4.11 (t, 2H), 2.78 (t, 2H), 2.63-2.20 (m, 8H), 2.17 (br s, 3H), 1.98 (s, 6H) 및 8.94 (s, 1H), 7.40-7.22 (m, 4H), 4.11 (t, 2H), 2.78 (t, 2H), 2.63-2.20 (m, 8H), 2.15 (br s, 3H), 1.98 (s, 6H)
HRMS (M+H)+ = 579.0968 및 623.0455
단계 N : 에틸 (2R)-2-[5-[3,5-디클로로-2,6-디메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시-3-[2-[[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시]페닐]프로파노에이트
4-클로로-5-[3,5-디클로로-2,6-디메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘과 4-브로모-5-[3,5-디클로로-2,6-디메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘의 200 mg 혼합물 (0.33 mmol, 1.0 eq.), 211 mg 에틸 (2R)-2-하이드록시-3-[2-[[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시]페닐]프로파노에이트 (0.52 mmol, 1.58 eq.) 및 202 mg Cs2CO3 (0.62 mmol, 1.88 eq.)를 5 mL 3차-부탄올 중에 용해시키고, 혼합물을 70℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 이를 에틸 아세테이트로 희석한 후, 이를 염수로 세척하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시키고, 용리제로서 에틸 아세테이트 및 메탄올을 사용하는 플래시 크로마토그래피를 통해 정제하여 에틸 (2R)-2-[5-[3,5-디클로로-2,6-디메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시-3-[2-[[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시]페닐]프로파노에이트를 얻었다. MS: (M+H) = 951.0
단계 O: (2R)-2-[5-[3,5-디클로로-2,6-디메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시-3-[2-[[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시]페닐]프로판산
200 mg의 상기 단계 N의 화합물을 5 mL 디옥산-물 1:1 중에 용해시키고, 145 mg 수산화리튬 일수화물 (3.45 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 이후, 이를 염수로 희석하고, 2M HCl로 중화시키고, 디클로로메탄으로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 5 mM NH4HCO3 수용액 및 아세토니트릴을 사용하는 분취용 역상 크로마토그래피에 의해 정제하여 (2R)-2-[5-[3,5-디클로로-2,6-디메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시-3-[2-[[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시]페닐]프로판산을 얻었다. C48H45N6O6FSCl2에 대한 HRMS 계산치: 922.2482, 실측치: 462.1310 (M+2H)
단계 P : (4- 메톡시페닐 ) 메틸 (2R)-2-[5-[3,5-디클로로-2,6-디메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시-3-[2-[[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시]페닐]프로파노에이트
400 mg 상기 단계 O의 화합물 (0.433 mmol, 1 eq.), 341 mg 트리페닐포스핀 (1.30 mmol, 3.0 eq.) 및 180 mg 4-메톡시벤질 알코올 (1.30 mmol, 3.0 eq.)을 5 mL 무수 톨루엔 중에 용해시킨 후, 300 mg 디(3차)부틸 아조디카복실레이트 (1.30 mmol, 3.0 eq.)를 한번에 첨가하였다. 형성된 혼합물을 50℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 미정제 생성물을 용리제로서 디클로로메탄/메탄올 (1.2% NH3 함유)을 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 (4-메톡시페닐)메틸 (2R)-2-[5-[3,5-디클로로-2,6-디메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시-3-[2-[[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시]페닐]프로파노에이트를 얻었다. MS: (M+H) = 1043.2
단계 Q : 벤질 [4-[2-[2,6-디클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-[(1R)-2-[(4-메톡시페닐)메톡시]-1-[[2-[[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시]페닐]메틸]-2-옥소-에톡시]티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3,5-디메틸-페녹시]에틸]-1-메틸-피페라진-1-이움-1-일]메틸 포스페이트
428 mg 상기 단계 P의 화합물 (0.62 mmol, 1.5 eq.)를 40℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 4 mL 무수 아세토니트릴 중에서 교반하였다. 반응 혼합물을 사전컨디셔닝된 24 g 실리카 컬럼 상에 직접 주입한 후, 용리제로서 에틸 아세테이트/메탄올 (1.2% NH3 함유)을 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 벤질 [4-[2-[2,6-디클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-[(1R)-2-[(4-메톡시페닐)메톡시]-1-[[2-[[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시]페닐]메틸]-2-옥소-에톡시]티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3,5-디메틸-페녹시]에틸]-1-메틸-피페라진-1-이움-1-일]메틸 포스페이트를 얻었다. MS: (M+H) = 1243.2
단계 R : 실시예 9
3 mL 디클로로메탄 중의 230 mg 상기 단계 P의 화합물 (0.185 mmol)의 용액에, 110 μL 아세트산 중 33% HBr을 첨가하고, 이를 추가 전환이 관찰되지 않을 때까지 0℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시키고, 형성된 생성물을 용리제로서 아세토니트릴/25 mM NH4HCO3를 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결 건조 후 실시예 9를 백색 고형물로서 얻었다. C49H48 Cl2FN6O10PS에 대한 HRMS 계산치: 1032.2251, 실측치: 517.1213 (M+2H)
실시예 10: {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-3,5-디메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트
실시예 10에서, 절차는 실시예 1에서와 동일하나, 화학식(IV)의 적합한 클로라이드 유도체 및 화학식(II)의 적합한 티에노피리미딘 화합물을 사용하였다.
실시예 11: {[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸](디메틸)암모니오}메틸 하이드로겐 포스페이트
단계 A : 4-메톡시벤질 (2R)-2-{[(5S a )-5-{3-클로로-4-[2-(디메틸아미노)에톡시]-2-메틸페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시}-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)프로파노에이트
928 mg (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-클로로-4-[2-(디메틸아미노)에톡시]-2-메틸페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시}-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)프로판산 (1.13 mmol, 1 eq.; WO 2015/097123에 따라 합성됨), 889 mg 트리페닐포스핀 (3.39 mmol, 3 eq.) 및 468 mg 4-메톡시벤질 알코올 (3.39 mmol, 3 eq.)을 12 mL 무수 톨루엔 중에 용해시킨 후, 781 mg 디(3차)부틸 아조디카복실레이트 (3.39 mmol, 3 eq.)를 한번에 첨가하였다. 형성된 혼합물을 50℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 미정제 생성물을 용리제로서 에틸 아세테이트/메탄올 (1.2% NH3 함유)을 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 A의 생성물을 오프-화이트 결정으로서 얻었다. C52H47ClFN5O7S에 대한 HRMS 계산치: 939.2869; 실측치 470.6511 (M+2H)
단계 B : 벤질 [(2-{2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3-메틸페녹시}에틸)(디메틸)암모니오]메틸 포스페이트
282 mg 상기 단계 A의 화합물 (0.300 mmol, 1 eq.) 및 147 mg 디벤질 클로로메틸 포스페이트 (0.450 mmol, 1.5 eq.)를 40℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 1.5 mL 무수 아세토니트릴 중에서 교반하였다. 반응 혼합물을 사전컨디셔닝된 24 g 실리카 컬럼 상에 직접 주입한 후, 용리제로서 에틸 아세테이트/메탄올 (1.2% NH3 함유)을 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 B의 화합물을 오프-화이트 결정으로서 얻었다. C60H56ClFN5O11PS에 대한 HRMS 계산치: 1139.3107; 실측치 570.6613 (M+2H)
단계 C : 실시예 11
1mL 디클로로메탄 중의 110 mg 상기 단계 B의 화합물 (0.0964 mmol)의 용액에, 175 μL 아세트산 중 33% HBr을 첨가하고, 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 0℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 용리제로서 에틸 아세테이트/메탄올 (1.2% NH3 함유)을 사용하는 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 이후, 형성된 생성물을 용리제로서 아세토니트릴/5mM NH4HCO3을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 11을 백색 고형물로서 얻었다. C45H42BrClFN5O10PS에 대한 HRMS 계산치: 929.2062; 실측치 465.6087 (M+2H)
다음 실시예 12 내지 16에서, 절차는 실시예 1에서와 동일하나, 화학식(IV)의 적합한 클로라이드 유도체 및 화학식(II)의 적합한 티에노피리미딘 화합물을 사용하였다.
실시예 12: 1-{4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}에틸 하이드로겐 포스페이트
실시예 13: 1-{4-[2-(3-브로모-4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}에틸 하이드로겐 포스페이트
실시예 14: {1-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-4-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트
실시예 15: {1-[2-(3-브로모-4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-4-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트
실시예 16: {4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 설페이트
실시예 17: 1-[(아세틸옥시)메틸]-4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
단계 A : 1-[(아세틸옥시)메틸]-4-(2-{2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3-메틸페녹시}에틸)-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
2 mL 무수 아세토니트릴 중의 149 mg 실시예 1의 단계 A에서 얻어진 화합물 (0.150 mmol, 1 eq.) 및 33 mg 클로로메틸 아세테이트 (0.300 mmol, 2.0 eq.)의 용액에, 22 mg 요오드화나트륨 (0.15 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)를 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 A의 생성물을 트리플루오로아세테이트 염으로서 얻었다. MS: M = 1067.2
단계 B : 실시예 17
4 mL 디클로로메탄 중의 73 mg 상기 단계 A의 화합물 (0.062 mmol, 1 eq.)의 용액에, 300 μL 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 17을 백색 고형물로서 얻었다. C50H49ClFN6O8S에 대한 HRMS 계산치: 947.3000; 실측치 947.3001 (M)
실시예 18: 4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-{[(에톡시카보닐)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움
단계 A : 4-(2-{2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3-메틸페녹시}에틸)-1-{[(에톡시카보닐)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
2 mL 무수 아세토니트릴 중의 200 mg 실시예 1의 단계 A에서 얻어진 화합물 (0.201 mmol, 1 eq.) 및 56 mg 에틸 클로로메틸 카보네이트 (0.402 mmol, 2.0 eq.)의 용액에, 30 mg 요오드화나트륨 (0.201 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 A의 화합물을 트리플루오로아세테이트 염으로서 얻었다. C59H59ClFN6O10S에 대한 HRMS 계산치: 1097.3680; 실측치 1097.3694 (M)
단계 B : 실시예 18
4 mL 디클로로메탄 중의 162 mg 상기 단계 A의 화합물 (0.134 mmol, 1 eq.)의 용액에, 300 μL 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 18을 백색 고형물로서 얻었다. C51H51ClFN6O9S에 대한 HRMS 계산치: 977.3105; 실측치 977.3122 (M)
실시예 19: 4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-{[(디에틸카바모일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
단계 A : 4-(2-{2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3-메틸페녹시}에틸)-1-{[(디에틸카바모일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
2 mL 무수 아세토니트릴 중의 200 mg 실시예 1의 단계 A에서 얻어진 화합물 (0.201 mmol, 1 eq.) 및 67 mg 클로로메틸 N,N-디에틸카바메이트 (0.402 mmol, 2.0 eq.)의 용액에, 30 mg 요오드화나트륨 (0.201 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 A의 화합물을 트리플루오로아세테이트 염으로서 얻었다. C61H64ClFN7O9S에 대한 HRMS 계산치: 1124.4153; 실측치 1124.4209 (M)
단계 B : 실시예 19
4 mL 디클로로메탄 중의 192 mg 상기 단계 A의 화합물 (0.155 mmol, 1 eq.)의 용액에, 300 μL 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 19를 백색 고형물로서 얻었다. C53H56ClFN7O8S에 대한 HRMS 계산치: 1004.3578; 실측치 1004.3579 (M)
실시예 20: 4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-[(글리실록시)메틸]-1-메틸피페라진-1-이움
실시예 20에서, 절차는 실시예 1에서와 동일하나, 화학식(IV)의 적합한 클로라이드 유도체 및 화학식(II)의 적합한 티에노피리미딘 화합물을 사용하였다. 얻어진 화합물은 4차 암모늄 염이었으며, 상대이온은 브로마이드, 클로라이드, 요오다이드, 아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 벤조에이트, 메실레이트, 토실레이트, 트리플레이트, 등으로부터 선택될 수 있다.
실시예 21: 4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-{1-[(디에틸카바모일)옥시]에틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
단계 A : 1- 클로로에틸 N,N - 디에틸카바메이트
테트라하이드로푸란 중의 1.828 g 디에틸아민 (25 mmol, 1.0 eq.)의 용액에, 3.574 g 1-클로로에틸 카보노클로리데이트 (25 mmol, 1.0 eq.)를 -78℃에서 적가한 후, 피리딘을 -78℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 후, 실온으로 서서히(3시간) 가온되게 하고, 이를 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 미정제 생성물을 70 mL 디클로로메탄으로 희석하고, 이후, 50 mL 1N HCl 수용액으로 세척한 후 50 mL 염수로 2회 세척하였다. 유기 층을 MgSO4 상에서 건조시키고, 이를 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켜 1-클로로에틸 N,N-디에틸카바메이트를 밝은 갈색 오일로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 6.64 (q, 1H), 3.34 (m, 4H), 1.83 (d, 3H), 1.17 (t, 6H).
단계 B : 4-(2-{2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3-메틸페녹시}에틸)-1-{1-[(디에틸카바모일)옥시]에틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
5 mL 아세토니트릴 중의 250 mg 실시예 1의 단계 A에서 얻어진 화합물 (0.251 mmol, 1.0 eq.) 및 225 mg 상기 단계 A의 화합물 (1.26 mmol, 5.0 eq.)의 용액에, 75 mg 요오드화나트륨 (0.50 mmol, 2.0 eq.)을 첨가하고, 이를 45℃에서 45분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 여과한 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 B의 화합물을 부분입체이성질체의 트리플루오로아세테이트 염으로서 얻었다(부분입체이성질체는 분리되지 않음). MS: M = 1138.4
단계 C : 실시예 21
5 mL 디클로로메탄 중의 81 mg 상기 단계 B의 화합물 (0.0647 mmol, 1 eq.)의 용액에, 800 μL 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 21을 백색 고형물로서 얻었다(부분입체이성질체는 분리되지 않음). C54H58ClFN7O8S에 대한 HRMS 계산치: 1018.3735; 실측치 509.6925 (M+H)2+
실시예 22: 4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸-1-[(5-메틸-2-옥소-1,3-디옥솔-4-일)메틸]피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
단계 A : 4-(2-{2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3-메틸페녹시}에틸)-1-메틸-1-[(5-메틸-2-옥소-1,3-디옥솔-4-일)메틸]피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
2 mL 무수 아세토니트릴 중의 348 mg 실시예 1의 단계 A에서 얻어진 화합물 (0.350 mmol, 1 eq.) 및 104 mg 4-(클로로메틸)-5-메틸-1,3-디옥솔-2-온 (0.700 mmol, 2.0 eq.)의 용액에, 52 mg 요오드화나트륨 (0.35 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 A의 화합물을 트리플루오로아세테이트 염으로서 얻었다. MS: M = 1107.2
단계 B : 실시예 22
8 mL 디클로로메탄 중의 250 mg 상기 단계 A의 화합물 (0.205 mmol, 1 eq.)의 용액에, 600 μL 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 22를 백색 고형물로서 얻었다. C52H49ClFN6O9S에 대한 HRMS 계산치: 987.2949; 실측치 987.2961 (M)
실시예 23: 4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸-1-[(L-발릴옥시)메틸]피페라진-1-이움
실시예 23에서, 절차는 실시예 1에서와 동일하나, 화학식(IV)의 적합한 클로라이드 유도체 및 화학식(II)의 적합한 티에노피리미딘 화합물을 사용하였다. 얻어진 화합물은 4차 암모늄 염이었고, 상대 이온은 브로마이드, 클로라이드, 요오다이드, 아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 벤조에이트, 메실레이트, 토실레이트, 트리플레이트, 등으로부터 선택될 수 있다.
실시예 24: 4-[2-(4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-{[(2,2-디메틸프로파노일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
단계 A : 4-(2-{2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]-3-메틸페녹시}에틸)-1-{[(2,2-디메틸프로파노일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
2 mL 무수 아세토니트릴 중의 249 mg 실시예 1의 단계 A에서 얻어진 화합물 (0.250 mmol, 1 eq.) 및 75 mg 클로로메틸 2,2-디메틸프로파노에이트 (0.500 mmol, 2.0 eq.)의 용액에, 37 mg 요오드화나트륨 (0.25 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 A의 화합물을 트리플루오로아세테이트 염으로서 얻었다. C61H63ClFN6O9S에 대한 HRMS 계산치: 1109.4044; 실측치 1109.4040 (M)
단계 B : 실시예 24
8 mL 디클로로메탄 중의 216 mg 상기 단계 A의 화합물 (0.177 mmol, 1 eq.)의 용액에, 600 μL 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 24를 백색 고형물로서 얻었다. C53H55ClFN6O8S에 대한 HRMS 계산치: 989.3469; 실측치 989.3480 (M)
실시예 25: 1-[(아세틸옥시)메틸]-4-[2-(3-브로모-4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
단계 A : 1-[(아세틸옥시)메틸]-4-(2-{3-브로모-2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]페녹시}에틸)-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
2 mL 무수 아세토니트릴 중의 212 mg 실시예 5의 단계 A에서 얻어진 화합물 (0.20 mmol, 1 eq.) 및 43 mg 클로로메틸 아세테이트 (0.40 mmol, 2.0 eq.)의 용액에, 30 mg 요오드화나트륨 (0.20 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 A의 화합물을 트리플루오로아세테이트 염으로서 얻었다. MS: M = 1131.0
단계 B: 실시예 25
4 mL 디클로로메탄 중의 105 mg 상기 단계 A의 화합물 (0.0842 mmol, 1 eq.)의 용액에, 300 μL 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 25를 백색 고형물로서 얻었다. C49H46BrClFN6O8S에 대한 HRMS 계산치: 1011.1948; 실측치 1011.1949 (M)
실시예 26: 4-[2-(3-브로모-4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-{[(에톡시카보닐)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
단계 A : 4-(2-{3-브로모-2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]페녹시}에틸)-1-{[(에톡시카보닐)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
2 mL 무수 아세토니트릴 중의 252 mg 실시예 5의 단계 A에서 얻어진 화합물 (0.20 mmol, 1 eq.) 및 55 mg 에틸 클로로메틸 카보네이트 (0.40 mmol, 2.0 eq.) 의 용액에, 30 mg 요오드화나트륨 (0.20 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 A의 화합물을 트리플루오로아세테이트 염으로서 얻었다. C58H56BrClFN6O10S에 대한 HRMS 계산치: 1161.2629 실측치 1161.2674 (M)
단계 B : 실시예 26
4 mL 디클로로메탄 중의 240 mg 상기 단계 A의 화합물 (0.188 mmol, 1 eq.)의 용액에, 300 μL 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 26을 백색 고형물로서 얻었다. C50H48BrClFN6O9S: 1041.2054; 실측치 1041.2049 (M)
실시예 27: 4-[2-(3-브로모-4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-{[(디에틸카바모일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
단계 A : 4-(2-{3-브로모-2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]페녹시}에틸)-1-{[(디에틸카바모일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
2 mL 무수 아세토니트릴 중의 212 mg 실시예 5의 단계 A에서 얻어진 화합물 (0.20 mmol, 1 eq.) 및 66 mg 클로로메틸 N,N-디에틸카바메이트 (0.40 mmol, 2.0 eq.)의 용액에, 30 mg 요오드화나트륨 (0.20 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 A의 화합물을 트리플루오로아세테이트 염으로서 얻었다. C60H61BrClFN7O9S에 대한 HRMS 계산치: 1188.3102; 실측치 1188.3101 (M)
단계 B : 실시예 27
4 mL 디클로로메탄 중의 208 mg 상기 단계 A의 화합물 (0.160 mmol, 1 eq.)의 용액에, 300 μL 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 27을 백색 고형물로서 얻었다. C52H53BrClFN7O8S에 대한 HRMS 계산치: 1068.2527; 실측치 1068.2514 (M)
실시예 28: 4-[2-(3-브로모-4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-[(글리실록시)메틸]-1-메틸피페라진-1-이움
실시예 28에서, 절차는 실시예 1에서와 동일하나, 화학식(IV)의 적합한 클로라이드 유도체 및 화학식(II)의 적합한 티에노피리미딘 화합물을 사용하였다. 얻어진 화합물은 4차 암모늄 염이었고, 상대이온은 브로마이드, 클로라이드, 요오다이드, 아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 벤조에이트, 메실레이트, 토실레이트, 트리플레이트, 등으로부터 선택될 수 있다.
실시예 29: 4-[2-(3-브로모-4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-{1-[(디에틸카바모일)옥시]에틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
단계 A : 4-(2-{3-브로모-2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]페녹시}에틸)-1-{1-[(디에틸카바모일)옥시]에틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
5 mL 아세토니트릴 중의 250 mg 실시예 5의 단계 A에서 얻어진 화합물 (0.236 mmol, 1.0 eq.) 및 212 mg 실시예 21의 단계 A에서 얻어진 화합물 (1.18 mmol, 5.0 eq.)의 용액에, 71 mg 요오드화나트륨 (0.471 mmol, 2.0 eq.)을 첨가하고, 이를 45℃에서 45분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 여과한 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 A의 화합물을 부분입체이성질체의 트리플루오로아세테이트 염으로서 얻었다(부분입체이성질체는 분리되지 않음). MS: (M+H)2+ =602.8
단계 B : 실시예 29
5 mL 디클로로메탄 중의 51 mg 상기 단계 A의 화합물 (0.0387 mmol, 1 eq.)의 용액에, 800 μL 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 29를 백색 고형물로서 얻었다(부분입체이성질체는 분리되지 않음). C53H55BrClFN7O8S에 대한 HRMS 계산치: 1082.2683; 실측치 541.6396 (M+H)2+ 및 541.6389 (M+H)2+
실시예 30: 4-[2-(3-브로모-4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸-1-[(5-메틸-2-옥소-1,3-디옥솔-4-일)메틸]피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
단계 A : 4-(2-{3-브로모-2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]페녹시}에틸)-1-메틸-1-[(5-메틸-2-옥소-1,3-디옥솔-4-일)메틸]피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
2 mL 무수 아세토니트릴 중의 212 mg 실시예 5의 단계 A에서 얻어진 화합물 (0.200 mmol, 1 eq.) 및 59 mg 4-(클로로메틸)-5-메틸-1,3-디옥솔-2-온 (0.40 mmol, 2.0 eq.)의 용액에, 30 mg 요오드화나트륨 (0.20 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 A의 화합물을 트리플루오로아세테이트 염으로서 얻었다. C59H54BrClFN6O10S에 대한 HRMS 계산치: 1171.2473; 실측치 1171.2461 (M)
단계 B : 실시예 30
8 mL 디클로로메탄 중의 225 mg 상기 단계 A의 화합물 (0.175 mmol, 1 eq.)의 용액에, 600 μL 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 30을 백색 고형물로서 얻었다. C51H46BrClFN6O9S에 대한 HRMS 계산치: 1051.1897; 실측치 1051.1891 (M)
실시예 31: 4-[2-(3-브로모-4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸-1-[(L-발릴옥시)메틸]피페라진-1-이움
실시예 31에서, 절차는 실시예 1에서와 동일하나, 화학식(IV)의 적합한 클로라이드 유도체 및 화학식(II)의 적합한 티에노피리미딘 화합물을 사용하였다. 얻어진 화합물은 암모늄 염이었고, 상대 이온은 브로마이드, 클로라이드, 요오다이드, 아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 벤조에이트, 메실레이트, 토실레이트, 트리플레이트, 등으로부터 선택될 수 있다.
실시예 32: 4-[2-(3-브로모-4-{(5S a )-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-{[(2,2-디메틸프로파노일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
단계 A : 4-(2-{3-브로모-2-클로로-4-[6-(4-플루오로페닐)-4-{[(2R)-1-[(4-메톡시벤질)옥시]-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)-1-옥소프로판-2-일]옥시}-(5S a )-티에노[2,3-d]피리미딘-5-일]페녹시}에틸)-1-{[(2,2-디메틸프로파노일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움 트리플루오로아세테이트
2 mL 무수 아세토니트릴 중의 212 mg 실시예 5의 단계 A에서 얻어진 화합물 (0.200 mmol, 1 eq.) 및 60 mg 클로로메틸 2,2-디메틸프로파노에이트 (0.40 mmol, 2.0 eq.)의 용액에, 30 mg 요오드화나트륨 (0.20 mmol, 1.0 eq.)을 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 단계 A의 화합물을 트리플루오로아세테이트 염으로서 얻었다. C60H60BrClFN6O9S에 대한 HRMS 계산치: 1173.2993; 실측치 1173.2994 (M)
단계 B : 실시예 32
8 mL 디클로로메탄 중의 215 mg 상기 단계 A의 화합물 (0.167 mmol, 1 eq.)의 용액에, 600 μL 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가의 전환이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다. 반응 혼합물을 증발 건조시킨 후, 이를 용리제로서 트리플루오로아세트산/아세토니트릴 (0.5 mL/L) 및 트리플루오로아세트산/H2O (0.5 mL/L)을 사용하는 역상 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 동결건조 후, 실시예 32를 백색 고형물로서 얻었다. C52H52BrClFN6O8S에 대한 HRMS 계산치: 1053.2418; 실측치 1053.2405 (M)
이들의 전자 전하 및 용액의 pH에 의거하여, 실시예 1, 4, 5 및 8 내지 15는 네 가지 이온 형태 (쯔비터이온, 2음이온, 음이온 또는 양이온)로서 존재할 수 있고; 실시예 2, 3, 6 및 7는 세 가지 형태 (쯔비터이온, 음이온 또는 양이온)로서 존재할 수 있고; 실시예 16 내지 32는 두 가지 형태 (쯔비터이온 또는 양이온)로서 존재할 수 있다.
약리학적 연구
실시예 A: 형광 편광 기술에 의한 Mcl-1의 억제
각 화합물의 상대적 결합 효능을 형광 편광(FP)을 통해 결정하였다. 본 방법은 판독기를 사용하여 밀리-편광(mP) 단위로 측정되는 이방성 증가를 야기시키는 Mcl-1 단백질(Mcl-1은 UniProtKB® 1차 수탁번호: Q07820에 대응함)에 결합하는 플루오레세인 표지된 리간드(플루오레세인-βAla-Ahx-A-REIGAQLRRMADDLNAQY-OH; mw 2,765)를 사용하였다. 리간드와 동일한 사이트에 경쟁적으로 결합하는 화합물의 첨가는 mP 단위의 감소로 표시되는 시스템에서 결합하지 않은 리간드의 보다 큰 비율을 야기시킬 것이다.
각 화합물의 11 포인트 연속 희석액을 DMSO에서 제조하고, 2 ㎕를 평평한 바닥을 갖는, 저 결합, 384-웰 플레이트(최종 DMSO 농도 5%)로 옮겼다. 이후, 플루오레세인 표지된 리간드(최종 농도 1 nM) 및 Mcl-1 단백질(최종 농도 5 nM)을 함유한 38 ㎕의 완충액(10 mM 4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라진에탄설폰산 [HEPES], 150 mM NaCl, 0.05% Tween 20, pH 7.4)을 첨가하였다.
실온에서 약 2시간 동안 검정 플레이트를 인큐베이션한 후, FP를 Biomek Synergy2 판독기(Ex. 528nm, Em. 640nm, 컷 오프 510nm) 상에서 측정하였고, mP 단위를 계산하였다. 증가하는 용량의 시험 화합물의 결합은 '5% DMSO 단독' 및 '100% 억제' 대조군 사이에 설정된 윈도우와 비교하여 mP의 감소 백분율로서 표현된다. 11-포인트 용량 반응 곡선을 4-Parameter Logistic Model (Sigmoidal Dose-Response Model)을 사용하는 XL-Fit 소프트웨어로 플롯팅하고, mP의 50% 감소를 제공하는 억제 농도(IC50)를 결정하였다. 결과는 하기 표 1에 나타내었다.
이러한 결과는, 본 발명의 화합물이 Mcl-1 단백질과 상기에 기술된 형광 펩타이드 간의 상호작용을 억제함을 나타낸다.
실시예 B: 시험관내 세포독성
세포독성 연구를 H929 다발성 골수중 종양주 상에서 수행하였다.
세포를 마이크로플레이트 상에 분포시키고, 48시간 동안 시험 화합물에 노출시켰다. 이어서, 세포 생존성을 비색 검정 및 미세배양 테트라졸리움 검정(Carmichael et al. Cancer Res., 1987, 47, 936-942)으로 정량하였다.
이러한 결과는 IC50(50%까지 세포 생존성을 억제하는 화합물의 농도)로 표현하고, 하기 표 1에 나타내었다.
이러한 결과는, 본 발명의 화합물이 세포독성임을 나타낸다.
표 1: Mcl -1 억제의 IC 50 (형광 편광 시험) 및 H929 세포에 대한 세포독성의 IC 50
Figure pct00017
ND: 측정되지 않음
실시예 C: 생체 내에서 절단된 형태의 PARP의 정량
절단된 PARP 수준을 측정함으로써 아폽토시스를 유도하는 본 발명의 화합물의 능력을 AMO-1 다발성 골수종 세포의 이종이식 모델에서 평가한다.
5.106 AMO-1 세포를 면역억제 마우스(SCID 균주)에 피하를 통해 이식하였다. 이식하고 12 내지 14일 후에, 동물을 다양한 화합물로 정맥내 경로를 통해 치료하였다. 치료 후에, 종양 물질을 회수하고, 용해시키고, 절단된 형태의 PARP를 종양 용리액에서 정량하였다.
정량은 "Meso Scale Discovery ( MSD ) ELISA 플랫폼" 시험을 사용하여 수행되었는데, 이는 특히 절단된 형태의 PARP를 검정한다. 이는 치료된 마우스로부터의 종양에서 절단된 PARP의 양을 치료되지 않은 마우스로부터의 종양에서 절단된 PARP의 양으로 나눈 비율에 해당하는 활성화 인자의 형태로 표현된다.
결과는 본 발명의 화합물이 생체 내에서 AMO-1 종양 세포의 아폽토시스를 유도할 수 있음을 보여준다.
실시예 D: 생체 내에서 항종양 활성
본 발명의 화합물의 항종양 활성을 AMO-1 다발성 골수종 세포의 이종이식 모델에서 평가하였다.
1×107 AMO-1 세포를 면역억제 마우스(SCID 균주)에 피하를 통해 이식하였다. 이식하고 6 내지 8일 후에, 종양 물질이 약 150 mm3에 도달하였을 때, 마우스를 다양한 화합물로 일일 스케쥴(5일 치료)로 치료하였다. 종양 물질을 치료 개시로부터 매주 2회 측정하였다.
ΔT/C 비율(치료된 군의 종양 부피/치료되지 않은 대조군의 종양 부피의 비율로서 정의되는, 생성물 활성의 정량 파라미터)를 사용하여 얻은 결과는 본 발명의 화합물이 치료 기간 후 오래 계속되고 현저한 완전 종양 퇴행을 유도하는 것을 나타낸다.
실시예 E: 용해도 시험
방법 1: 프로필렌 글리콜 중의 샘플 용액 (약 16.7 mg/ml)을 물(30% 프로필렌 글리콜)로 희석시켰다. 이후, 샘플을 72 시간 실온에서 진탕하였다. 진탕 기간 후, 샘플을 원심분리시키고, 이후, 액체 상을 여과시키고, UV 검출기에 결합된 HPLC를 사용하여 분석하였다. 실제 농도를 결정하기 위해, 5점 검정 곡선( 5-point calibration curve)이 확립되었다.
예를 들어, 이러한 조건들에서, 실시예 1의 화합물의 용해도는 WO 2015/097123에 개시되어 있는 (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시}-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)프로판산 (63.3 μM)와 비교하여 현저히 증가되었다(≥ 4907 μM).
방법 2: 샘플(40 mg/mL)을 수성 포스페이트 완충제 (67.7 mM, 7.4로 조절된 pH를 지님)로 희석시켰다. 샘플을 실온에서 진탕시킨 후, 여과시켰다. 가용성 분획을 LC-MS-MS 분석에 의해 정량하였다.
이러한 조건들에서, 실시예 1 및 실시예 11의 화합물은 각각 WO 2015/097123에 개시되어 있는 (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-클로로-2-메틸-4-[2-(4-메틸피페라진-1-일)에톡시]페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시}-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)프로판산 및 (2R)-2-{[(5Sa)-5-{3-클로로-4-[2-(디메틸아미노)에톡시]-2-메틸페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]옥시}-3-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)프로판산과 비교하여 더욱 가용성인 높은 용해도(> 35 mg/mL)를 나타냈다.
실시예 F: 약학적 조성물: 정제
실시예 1 내지 실시예 32로부터 선택된 5 mg의 화합물 1회 용량을 함유한 1000개의 정제 ...................................................... 5 g
밀 전분 ...................................................... 20 g
옥수수 전분 .................................................. 20 g
락토오스 ..................................................... 30 g
마그네슘 스테아레이트 ......................................... 2 g
실리카 ........................................................ 1 g
하이드록시프로필셀룰로오스 .................................... 2 g

Claims (31)

  1. 하기 화학식(I)의 화합물, 이의 거울상이성질체, 부분입체이성질체 및 회전장애이성질체, 및 이의 약학적으로 허용되는 산 또는 염기와의 부가 염:
    Figure pct00018

    상기 식에서,
    ◆ Y는 -NH- 기 또는 산소 원자를 나타내고,
    ◆ R1은 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기, 선형 또는 분지형 (C2-C6)알케닐 기, 선형 또는 분지형 (C2-C6)알키닐 기, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알콕시 기, -S-(C1-C6)알킬 기, 선형 또는 분지형 (C1-C6)폴리할로알킬 기, 하이드록시 기, 하이드록시(C1-C6)알킬 기, 시아노 기, -NR9R9', -Cy1 또는 할로겐 원자를 나타내고,
    ◆ R2, R3 및 R4는 서로 독립적으로 수소 원자, 할로겐 원자, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기, 선형 또는 분지형 (C2-C6)알케닐 기, 선형 또는 분지형 (C2-C6)알키닐 기, 선형 또는 분지형 (C1-C6)폴리할로알킬, 하이드록시 기, 하이드록시(C1-C6)알킬 기, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알콕시 기, -S-(C1-C6)알킬 기, 시아노 기, 니트로 기, -알킬(C0-C6)-NR9R9', -O-알킬(C1-C6)-NR9R9', -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9', -NR9-C(O)-R9', -NR9-C(O)-OR9', -알킬(C1-C6)-NR9-C(O)-R9', -SO2-NR9R9', -SO2-알킬(C1-C6)를 나타내고,
    ◆ R5는 수소 원자를 나타내고,
    ◆ R6은
    Figure pct00019
    또는
    Figure pct00020
    를 나타내고,
    ◆ R7은 수소 원자 또는 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기를 나타내고,
    ◆ R8은 -O-P(O)(O-)(O-) 기, -O-P(O)(O-)(OR10) 기, -O-P(O)(OR10)(OR10') 기, -O-SO2-O- 기, -O-SO2-OR10 기, -Cy2, -O-C(O)-R9 기, -O-C(O)-OR9 기 또는 -O-C(O)-NR9R9' 기를 나타내고;
    ◆ R9 및 R9'는 서로 독립적으로 수소 원자, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기 또는 선형 또는 분지형 아미노(C1-C6)알킬 기를 나타내고,
    ◆ R10 및 R10'는 서로 독립적으로 수소 원자, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기 또는 아릴알킬(C1-C6) 기를 나타내고,
    ◆ Cy1 및 Cy2는 서로 독립적으로, 사이클로알킬 기, 헤테로사이클로알킬 기, 아릴 기 또는 헤테로아릴 기를 나타내고,
    이와 같이 정의된 암모늄은 쯔비터이온 형태로서 존재하거나 일가 음이온성 상대이온을 갖는 것이 가능하고,
    - "아릴"은 페닐 또는 나프틸 기를 의미하고,
    - "헤테로아릴"은 적어도 하나의 방향족 모이어티를 갖고, 산소, 황 및 질소로부터 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 함유하는 5 내지 10개의 고리원으로부터 구성된 어떠한 모노- 또는 바이-사이클릭 기를 의미하고,
    - "사이클로알킬"은 3 내지 10개의 고리원을 함유하는 어떠한 모노- 또는 바이-사이클릭 비방향족 카보사이클릭 기를 의미하고,
    - "헤테로사이클로알킬"은 3 내지 10개의 고리원을 함유하고, 산소, 황 및 질소로부터 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 함유하는, 융합된, 브릿징된 또는 스피로 고리 시스템을 포함할 수 있는 어떠한 모노- 또는 바이-사이클릭 비방향족 카보사이클릭 기를 의미하는 것으로 이해해야 하고,
    이와 같은 정의된 아릴, 헤테로아릴, 사이클로알킬 및 헤테로사이클로알킬 기 및 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시 기는 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬, 선형 또는 분지형 (C2-C6)알케닐 기, 선형 또는 분지형 (C2-C6)알키닐 기, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알콕시, (C1-C6)알킬-S-, 하이드록시, 옥소(또는 적합한 경우 N-옥사이드), 니트로, 시아노, -C(O)-OR', -O-C(O)-R', -C(O)-NR'R", -NR'R", -(C=NR')-OR", 선형 또는 분지형 (C1-C6)폴리할로알킬, 트리플루오로메톡시 또는 할로겐으로부터 선택된 1 내지 4개의 기에 의해 치환되는 것이 가능하고, R' 및 R"은 서로 독립적으로 수소 원자 또는 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기를 나타내는 것으로 이해해야 하고, 전술된 가능한 치환기의 탄소 원자 중 하나 이상은 중수소화될 수 있는 것으로 이해해야 한다.
  2. 제1항에 있어서, Y가 산소 원자를 나타내는, 화학식(I)의 화합물.
  3. 제1항에 있어서, R2, R3 및 R4로부터 선택된 기들 중 적어도 하나는 수소 원자를 나타내지 않는, 화학식(I)의 화합물.
  4. 제1항에 있어서, R1이 선형 또는 분지형 (C1-C6)알킬 기 또는 할로겐 원자를 나타내는, 화학식(I)의 화합물.
  5. 제1항에 있어서, R2가 할로겐 원자, 하이드록시 기, 선형 또는 분지형 (C1-C6)알콕시 기를 나타내는, 화학식(I)의 화합물.
  6. 제1항에 있어서, R3 및 R4가 수소 원자를 나타내는, 화학식(I)의 화합물.
  7. 제1항에 있어서, 쌍 (R1, R4)의 치환기가 동일하고, 쌍 (R2, R3)의 치환기가 동일한, 화학식(I)의 화합물.
  8. 제1항에 있어서, R6이 하기 기를 나타내는, 화학식(I)의 화합물:
    Figure pct00021

    상기 식에서, R7 및 R8은 제1항에서 정의된 바와 같다.
  9. 제1항에 있어서, R6이 하기 기를 나타내는, 화학식(I)의 화합물:
    Figure pct00022

    상기 식에서, R7 및 R8은 제1항에서 정의된 바와 같다.
  10. 제1항에 있어서, R7이 메틸 기 또는 수소 원자를 나타내는, 화학식(I)의 화합물.
  11. 제1항에 있어서, R8이 -O-P(O)(O-)(OR10) 기를 나타내고, 여기서 R10은 수소 원자, 벤질 기 또는 메틸 기를 나타내는, 화학식(I)의 화합물.
  12. 제1항에 있어서, R8이 5-메틸-2-옥소-1,3-디옥솔-4-일 기; -O-C(O)-CH3 기; -O-C(O)-tBu 기; -O-C(O)-CH2-NH2 기; -O-C(O)-CH[CH(CH3)2]-NH2 기; -O-C(O)-O-CH2CH3 기; 또는 -O-C(O)-N(CH2CH3)2 기를 나타내는, 화학식(I)의 화합물.
  13. 제1항에 있어서,
    - {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
    - 벤질 {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 포스페이트;
    - {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 메틸 포스페이트;
    - {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-에틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
    - {4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
    - 벤질 {4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 포스페이트;
    - {4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 메틸 포스페이트;
    - N-[(5Sa)-5-{3-클로로-4-[2-(4-{[(하이드록시포스피네이토)옥시]메틸}-4-메틸피페라진-4-이움-1-일)에톡시]-2-메틸페닐}-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-4-일]-2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}-D-페닐알라닌;
    - {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2,6-디클로로-3,5-디메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
    - {4-[2-(4-{4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-3,5-디메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
    - {[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸](디메틸)암모니오}메틸 하이드로겐 포스페이트;
    - 1-{4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}에틸 하이드로겐 포스페이트;
    - 1-{4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}에틸 하이드로겐 포스페이트;
    - {1-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-4-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
    - {1-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-4-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트;
    - {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 설페이트;
    - 1-[(아세틸옥시)메틸]-4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-{[(에톡시카보닐)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-{[(디에틸카바모일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-[(글리실록시)메틸]-1-메틸피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-{1-[(디에틸카바모일)옥시]에틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸-1-[(5-메틸-2-옥소-1,3-디옥솔-4-일)메틸]피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸-1-[(L-발릴옥시)메틸]피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-{[(2,2-디메틸프로파노일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
    - 1-[(아세틸옥시)메틸]-4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-{[(에톡시카보닐)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-{[(디에틸카바모일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-[(글리실록시)메틸]-1-메틸피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-{1-[(디에틸카바모일)옥시]에틸}-1-메틸피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸-1-[(5-메틸-2-옥소-1,3-디옥솔-4-일)메틸]피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸-1-[(L-발릴옥시)메틸]피페라진-1-이움;
    - 4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-{[(2,2-디메틸프로파노일)옥시]메틸}-1-메틸피페라진-1-이움인 화합물.
  14. 제1항에 있어서, {4-[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트인 화합물.
  15. 제1항에 있어서, {4-[2-(3-브로모-4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로페녹시)에틸]-1-메틸피페라진-1-이움-1-일}메틸 하이드로겐 포스페이트인 화합물.
  16. 제1항에 있어서, {[2-(4-{(5Sa)-4-[(1R)-1-카복시-2-(2-{[2-(2-메톡시페닐)피리미딘-4-일]메톡시}페닐)에톡시]-6-(4-플루오로페닐)티에노[2,3-d]피리미딘-5-일}-2-클로로-3-메틸페녹시)에틸](디메틸)암모니오}메틸 하이드로겐 포스페이트인 화합물.
  17. 제1항에 따른 화학식 (I)의 화합물을 제조하는 방법으로서, 출발 물질로서 하기 화학식 (II)의 화합물을 사용하고, 화학식 (II)의 화합물을 카복실산 작용기를 보호하는 반응으로 처리하여 하기 화학식 (III)의 화합물을 얻고, 화학식 (III)의 화합물을 하기 화학식 (IV)의 화합물과 커플링되도록 처리하여 하기 화학식 (V)의 화합물을 얻고, 화학식 (V)의 화합물을 카복실산 작용기를 탈보호시키는 반응으로 처리하여 화학식 (I)의 화합물을 얻는 것을 특징으로 하고, 화학식 (I)의 화합물은 통상적인 분리 기술에 따라 정제될 수 있고, 이는 요망에 따라 약제학적으로 허용되는 산 또는 염기로 이의 부가염으로 전환되고, 임의적으로 통상적인 분리 기술에 따라 이의 이성질체로 분리되고,
    상기 기술된 방법의 과정 동안 적합한 것으로 간주되는 어떠한 순간에, 출발 시약 또는 합성 중간체의 일부 기(하이드록시, 아미노…)는 합성에 요구되는 바에 따라 보호되거나, 이후 탈보호되고, 작용성화될 수 있는 것으로 이해되는 방법:
    Figure pct00023

    Figure pct00024

    Figure pct00025

    Figure pct00026

    상기 식에서, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 및 Y는 화학식(I)에 대해 정의된 바와 같고, R6'는 -N(CH3)2 기 또는 4-메틸-피페라지닐 기를 나타내고, T는 카복실산 작용기에 대한 보호기, 예를 들어, 파라-메톡시벤질 기이다.
  18. 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제와 함께, 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 화학식 (I)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 산 또는 염기를 갖는 이의 부가염을 포함하는 약학적 조성물.
  19. 제18항에 있어서, 프로-아폽토틱제(pro-apoptotic agent)로서 사용하기 위한 약학적 조성물.
  20. 제19항에 있어서, 암 및 자가-면역 및 면역계 질환의 치료에서 사용하기 위한 약학적 조성물.
  21. 제20항에 있어서, 방광암, 뇌암, 유방암 및 자궁암, 만성 림프 백혈병, 대장암, 식도암 및 간암, 림프모구성 백혈병, 급성 골수 백혈병, 림프종, 흑색종, 악성 혈액병, 골수종, 난소암, 비-소세포폐암, 전립선암, 췌장암 및 소세포폐암의 치료에서 사용하기 위한 약학적 조성물.
  22. 프로-아폽토틱제로서 사용하기 위한 약제의 제조에서의 제18항에 따른 약학적 조성물의 용도.
  23. 암 및 자가-면역 및 면역계 질환의 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에서의 제18항에 따른 약학적 조성물의 용도.
  24. 방광암, 뇌암, 유방암 및 자궁암, 만성 림프 백혈병, 대장암, 식도암 및 간암, 림프모구성 백혈병, 급성 골수 백혈병, 림프종, 흑색종, 악성 혈액병, 골수종, 난소암, 비-소세포폐암, 전립선암, 췌장암 및 소세포폐암의 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에서의 제18항에 따른 약학적 조성물의 용도.
  25. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 방광암, 뇌암, 유방암 및 자궁암, 만성 림프 백혈병, 대장암, 식도암 및 간암, 림프모구성 백혈병, 급성 골수 백혈병, 림프종, 흑색종, 악성 혈액병, 골수종, 난소암, 비-소세포폐암, 전립선암, 췌장암 및 소세포폐암의 치료에서 사용하기 위한 화학식 (I)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 산 또는 염기와의 이의 부가염.
  26. 방광암, 뇌암, 유방암 및 자궁암, 만성 림프 백혈병, 대장암, 식도암 및 간암, 림프모구성 백혈병, 급성 골수 백혈병, 림프종, 흑색종, 악성 혈액병, 골수종, 난소암, 비-소세포폐암, 전립선암, 췌장암 및 소세포폐암의 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에서의 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 화학식 (I)의 화합물 또는 약제학적으로 허용되는 산 또는 염기와의 이의 부가염의 용도.
  27. 유전자독성물질(genotoxic agent), 유사분열 저해제(mitotic poison), 대사길항물질(anti-metabolite), 프로테아좀 억제제(proteasome inhibitor), 키나아제 억제제(kinase inhibitor) 및 항체로부터 선택된 항암제와 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 화학식 (I)의 화합물의 조합물(combination).
  28. 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 부형제와 함께 제27항에 따른 조합물을 포함하는 약학적 조성물.
  29. 암의 치료에서 사용하기 위한 제27항에 따른 조합물.
  30. 암의 치료에서 사용하기 위한 약제의 제조에서의 제27항에 따른 조합물의 용도.
  31. 방사선 요법을 필요로 하는 암의 치료에서 사용하기 위한 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 화학식 (I)의 화합물.
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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR3037958B1 (fr) * 2015-06-23 2019-01-25 Les Laboratoires Servier Nouveaux derives d'hydroxy-acide, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
FR3037956B1 (fr) * 2015-06-23 2017-08-04 Servier Lab Nouveaux derives d'acide amine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
AU2018205735B2 (en) * 2017-01-06 2024-02-01 Les Laboratoires Servier Combination of a MCL-1 inhibitor and a taxane compound, uses and pharmaceutical compositions thereof
UY37560A (es) 2017-01-06 2018-07-31 Servier Lab Combinación de un inhibidor de mcl-1 y un compuesto taxano, usos y composiciones farmacéuticas de ésta
WO2018234433A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Les Laboratoires Servier COMBINATION OF MCL-1 INHIBITOR AND CARE TREATMENT STANDARD FOR HEMATOLOGICAL CANCERS, USES AND ASSOCIATED PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS
UY37843A (es) 2017-08-15 2019-03-29 Abbvie Inc Inhibidores de mcl-1 macrocíclicos y métodos de uso
WO2019035927A1 (en) * 2017-08-15 2019-02-21 Abbvie Inc. MACROCYCLIC MCL-1 INHIBITORS AND METHODS OF USE
UY37842A (es) * 2017-08-15 2019-03-29 Abbvie Inc Inhibidores de mcl-1 macrocíclicos y métodos de uso
CN108424417B (zh) * 2017-12-21 2019-09-20 河南真实生物科技有限公司 噻吩并嘧啶衍生物、其制备方法及在制备抗肿瘤药物中的应用
AR116635A1 (es) 2018-10-15 2021-05-26 Servier Lab Proceso para la síntesis de derivados de piperazinil-etoxi-bromofenilo y su aplicación en la producción de compuestos que los contienen
TW202038960A (zh) 2018-11-14 2020-11-01 法商施維雅藥廠 Mcl-1抑制劑及米哚妥林(midostaurin)之組合，其用途及醫藥組合物
BR112021010072A2 (pt) * 2018-12-06 2021-08-24 Les Laboratoires Servier Formas cristalinas de um inibidor mcl-1, processo para sua preparação e composições farmacêuticas contendo as mesmas
WO2020236825A2 (en) 2019-05-20 2020-11-26 Novartis Ag Mcl-1 inhibitor antibody-drug conjugates and methods of use
WO2020254299A1 (en) 2019-06-17 2020-12-24 Les Laboratoires Servier Combination of a mcl-1 inhibitor and a standard of care treatment for breast cancer, uses and pharmaceutical compositions thereof
KR20220099125A (ko) * 2019-10-03 2022-07-12 캘리포니아 인스티튜트 오브 테크놀로지 Mcl1 억제제 및 이의 용도
US20240042051A1 (en) 2020-11-24 2024-02-08 Francesca Rocchetti Mcl-1 inhibitor antibody-drug conjugates and methods of use
WO2022216946A1 (en) * 2021-04-07 2022-10-13 California Institute Of Technology Mcl1 inhibitors and uses thereof
US11957693B2 (en) 2021-06-11 2024-04-16 Gilead Sciences, Inc. Combination MCL-1 inhibitors with anti-cancer agents
TW202317200A (zh) 2021-06-11 2023-05-01 美商基利科學股份有限公司 Ｍｃｌ－１抑制劑與抗體藥物接合物之組合
WO2023225359A1 (en) 2022-05-20 2023-11-23 Novartis Ag Antibody-drug conjugates of antineoplastic compounds and methods of use thereof

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5650425A (en) * 1994-04-04 1997-07-22 Pharmos Corporation Permanently ionic derivatives of steroid hormones and their antagonists
AU746007B2 (en) * 1997-02-09 2002-04-11 Pharmos Corporation Enhanced anti-angiogenic activity of permanently charged derivatives of steroid hormones
JP2008505084A (ja) * 2004-06-29 2008-02-21 アムゲン インコーポレイティッド フラノピリミジン
EP2212333A1 (en) * 2007-10-16 2010-08-04 Wyeth LLC Thienopyrimidine and pyrazolopyrimidine compounds and their use as mtor kinase and pi3 kinase inhibitors
DK2276346T3 (en) * 2008-04-30 2017-02-27 Nat Health Research Institutes FUSED BICYCLIC PYRIMIDINE COMPOUNDS AS AURORAKINASE INHIBITORS
TWI385174B (zh) * 2008-11-10 2013-02-11 Nat Health Research Institutes 作為酪胺酸激酶抑制劑之稠合雙環及多環嘧啶化合物
CN102464667B (zh) * 2010-11-03 2014-06-04 中国科学院上海药物研究所 一类五元杂环并嘧啶类化合物及其制备方法和用途
CN105209461A (zh) * 2012-11-14 2015-12-30 霍夫曼-拉罗奇有限公司 咪唑并吡啶衍生物
KR20210145303A (ko) * 2013-05-02 2021-12-01 에프. 호프만-라 로슈 아게 Cb2 수용체 작용제로서의 퓨린 유도체
FR3015483B1 (fr) * 2013-12-23 2016-01-01 Servier Lab Nouveaux derives de thienopyrimidine, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent

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