PT97044A

PT97044A - Processo para a preparacao de derivados de cefalosporina e de composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT97044A
Application number: PT97044A
Authority: PT
Inventors: Frederick Henri Jung
Original assignee: Ici Pharma
Priority date: 1990-03-16
Filing date: 1991-03-15
Publication date: 1991-10-31
Also published as: JPH05247058A; AU7263991A; EP0447118A2; FI911286A0; ZA911657B; NZ237351A; IL97439A0; DE69115313D1; US5200404A; ATE131484T1; CA2038411A1; EP0447118A3; EP0447118B1; GB9104238D0; IE910711A1; NO911041D0; NO911041L; KR910016762A; FI911286A; DE69115313T2

Description

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Descrição referente à patente de in venção de ICI PHARMA, francesa, industrial e comercial, com sede em "Le Galien", 1 rue des Chauffours, BP127, 95022 Cergy Cedex, França, (inventor: Frederick Henri Jung, residente na França), para: "PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE DERIVADOS DE CEFALOSPORINA E DE COMPOSI-CÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM". >

DESCRIÇÃO > A presente invenção refere-se a com postos de cefalosporina e em particular a (3-cloro-4,5-di--hidroxi-fenil)tetrazol-5-il-tio-metil-cefalosporinas que possuem um perfil particularmente desejável de actividade e duração com efeito anti-bacteriano. A presente invenção refere-se também aos processos para a sua preparação, à preparação dos respectivos intermediários, à sua utilização como agentes terapêuticos e às composições farmacêuticas que os contêm. Os compostos da presente invenção são antibióticos e podem ser utilizados para o tratamento de qualquer doença que convencionalmente seja tratada com antibióticos,por exem pio, no tratamento de infecções bacterianas em mamíferos incluindo os seres humanos. C.R. 1

0 Pedido de Patente Europeia ns. 272827 descreve compostos de cefalosporinas que possuem um substituinte na posição 3, de fórmula geral (I): (I)

- CH2 -S-Q- (Y)n-P em que Q representa um anel heterocíclico pentagonal ou hexa- gonal possuindo entre 1 a 4 heteroátomos selecciona-dos entre oxigénio, azoto e enxofre (opcionalmente fundidos com um anel de benzeno ou com outro desses anéis heterocíclicos) em que Q opcionalmente sempre que possível, pode suportar uma carga positiva e pode facultativamente ser substituído num átomo de carbono ou de azoto disponíveis por um grupo carbóxi, sulfo, alcox^C^-C^) -carbonilo ou alquilo (C^-C^) (podendo esse próprio grupo alquilo ser facultativamente substituído por um grupo carboxi ou alcoxifC^-C^)-carbonilo) : P representa: (i) um anel de benzeno (opcionalmente fundido com outro anel de benzeno (formando desse modo um grupo naftilo) ou com um grupo aromático heterocíclico pentagonal ou hexagonal contendo 1,2 ou 3 heteroátomos seleccionados entre azo to, oxigénio e enxofre) sendo esse anel de benzeno (ou no caso do grupo naftilo, qualquer anel de benzeno) substituído por grupos 1 9 . R e R que se encontram na posição orto rela tivamente um ao outro em que RI representa um grupo hidroxi ou seu ester hidrolisável in vivo e R representa um grupo hidroxi, um seu 2

ester hidrolisável in vivo, um grupo carboxi, sulfo, hidroxi-metilo, ou ureido: (ii) um grupo de fórmula: (iii) um grupo de fórmula:

0

OH em que o símbolo M representa o átomo de oxi-gemo ou um grupo NR em que o radical R representa o átomo de hidrogénio ou um grupo ai quilo(C1-C4). 0 anel P (ou no caso em que o anel P represen ta um anel de benzeno e se encontra fundido com outro anel,de benzeno, qualquer dos anéis de benzeno) é opcionalmente substituído ainda por alquilo (Ci~C4) , halo hidroxi, hidroxi-al-quilo(C1-C4), ciano, trifluoro-metilo, nitro, -amino, alquilamino, dialquil(C1-C4)--amino, amino-alquilo(C1-C4), alquil(C1~C4)-amino, alquilo(C1-C4), dialquil(C1-C4)-ami- 3 no-alquilo(C1-C4), alcanoilo(Cl-C4), alcoxi-(C1-C4) , alquil -tio, alcanoil (C^-C^) - oxi, carbamoilo, alquil(C^-C^)carbamoilo, dialquil-(C1-C4)-carbamoilo, carboxi, carbo-xi-alquilo (^-04) , sulfo, sulfo-alquiloíC.^--C4), alcano(C1-C4)sulfonamido, alcoxi-ÍC^--C4)-carbonilo, alcanoil(C1~C4)-amino, nitro-so, tioureido, amidino, amónio, mono-, di- ou tri-alquil(C^-C^) -amónio-piridino, ou por um anel heterociclico pentagonal contendo entre 1 e 4 heteroátomos seleccionados entre oxigénio, azoto e enxofre, o qual é facultativamen te substituído por 1, 2 ou 3 grupos alquilo--(C1-C4) ou alcoxi (¢^-04) . n=0 ou 1, de tal modo que no caso de n=l, Y representa uma ligação covalente entre Q e P ou um grupo alquile-no(C-L-c4) opcionalmente substituído por carboxi ou sulfo ou Y representa um grupo de fórmula -(CH2)in-Y/- em que m=l ou 2 e Y' representa um grupo de fórmula -O.CO- ou -NH.CO-; e no caso de n=0, Q e P representam ambos anéis mono-cíclicos que se encontram fundidos numa ligação dispo nível carbono-carbono ou carbono-azoto. São descritos também diversos subs-tituintes na posição 7 para esses compostos. A investigação sobre novos derivados de cefalosporina tem sido bastante intensa ao longo dos últimos 25 anos tendo sido publicados milhares de patentes e de documentos científicos. Existe um problema particular associado à maioria das cefalosporinas comercialmente disponíveis, que reside na falta de potência contra estirpes de Pseudomonas.

Existe outro problema associado a muitas cefalosporinas comercialmente disponíveis, que reside na falta de estabilidade aos organismos produtores de beta--lactamase e â consequente redução de actividade anti-bac-teriana. 4

I

Verificou-se agora uma combinação de substituintes, a qual proporciona uma cefalosporina que possui uma actividade e uma duração particularmente desejáveis. >

Os compostos da presente invenção possuem excelente actividade anti-bacteriana e em particular contra estirpes de Pseudomonas aerucrinosa. Além disso, os compostos da presente invenção exibem boa estabilidade, de um modo geral, às betalactamase e são particularmente úteis para inibirem os organismos que são produtores de beta-lac-tamase. Esses organismos constituem uma preocupação crescen te em medicina. Além disso, os compostos da presente invenção exibem um efeito cuja duração é particularmente boa, possuindo um longo período de meia-vida in vivo.

Em consequência, a presente invenção proporciona um composto de fórmula (II): ) OC(CH )9C00H N 3 1

ou um seu sal farmacêuticamente aceitável ou um seu ester hidrolisável in vivo. • Os sais adequados englobam os sais , por adição de ácido tais como os sais formados com ácidos 5 r

clorídrico, bromídrico, cítrico, maleico, fosfórico e sulfúrico. De acordo com outro aspecto, os sais adequados são sais de bases tais como os sais de metais alcalinos, por exemplo, de sódio ou de potássio, os sais os metais alcalino-terrosos, por exemplo, de cálcio ou de magnésio, ou os sais de aminas orgânicas, por exemplo, de trietil-amina, morfolina, N-metil-piperidina, N-etil-piperidina, procaína, dibenzil-amina ou Ν,Ν-dibenzil-etil-amina. Considera-se preferencial o sal de sódio. )

Os esteres hidrolisáveis in vivo podem ser formados à custa de grupos carboxi (-COOH) e/ou grupos hidroxi (-0H).

Os esteres hidrolisáveis in vivo são os esteres farmaceuticamente aceitáveis sujeitos a hidrólise no corpo dos seres humanos ou dos animais proporcionando o composto hidroxi original. Esses esteres podem ser identificados administrando, por exemplo, intravenosamente a un animal testado, o composto de ensaio e examinan do depois os fluídos corporais do animal testado. Os esteres adequados hidrolisáveis in vivo englobam alcanoilíC^-CgX -oxi, por exemplo, acetoxi, propioniloxi, pivaloiloxi, alco-xi(C1—C4)-carboniloxi, por exemplo etoxi-carboniloxi, fenil--acetoxi e ftalídilo.

É preferível que os compostos da presente invenção possuam grupos di-hidroxi e que se encontrem na forma de ácido livre ou de sal correspondente. A presente invenção abrange todas as formas tautoméricas dos compostos da presente invenção e esses compostos são geralmente designados em conformidade com a nomenclatura "ceiem" e com o sistema de numeração proposto em "J.A.C.S. 1962, 84, 3400".

Para se poder utilizar um composto da presente invenção ou um seu sal farmaceuticamente aceitável ou um seu ester hidrolisável in vivo para o tratamento terapêutico de mamíferos incluindo os seres humanos, em particular para o tratamento de infecções, faz-se a sua formulação em conformidade com a prática farmacêutica normalizada, sob a forma de uma composição farmacêutica. 6

Em consequência, de acordo com outro dos seus aspectos, a presente invenção proporciona uma composição farmacêutica que incorpora um composto de fórmula (II) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável ou um seu es-ter hidrolisãvel in vivo e um veículo farmaceuticamente acei tável. \

As composições farmacêuticas da pre sente invenção podem ser administradas por um processo norma lizado para o estado de doença que se pretenda tratar, por exemplo, por via oral, rectal, ou parenteral. Para esse efeito, a formulação pode assumir qualquer forma conhecida na especialidade, por exemplo, pastilhas, cápsulas, soluções ou suspensões aquosas ou oleosas, emulsões, pós dis-persíveis, supositórios e soluções ou suspensões aquosas ou oleosas estéreis injectãveis. >

Para além de um derivado de cefalos porina farmaceuticamente aceitável de acordo com a presente invenção, as composições farmacêuticas segundo a presente invenção podem conter também ou ser administradas conjuntamente com um ou vários fármacos seleccionados entre outros agentes anti-bacterianos clínicamente úteis (por exemplo, ou tras beta-lactamas ou amino-glicósidos), agentes bloquea-dores dos canais renais (por exemplo, probenicida) e ini-bidores de enzimas metabolisantes (por exemplo, inibidores de peptidases, por exemplo, propenoatos de Z-2-acil-amino-3--substituídos).

Uma composição farmacêutica particular da presente invenção é a que é adequada para administração oral numa forma de dosagem unitária, por exemplo, uma pastilha ou cápsula que contenha entre 100 mg e 1 g de composto de fórmula (II) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável ou de um seu ester hidrolisável in vivo.

Uma composição farmacêutica preferida de acordo com a presente invenção é a que é adequada para injecção intravenosa, subcutânea ou intramuscular, por exemplo, uma preparação estéril injectável que contenha entre 1 e 50% p/p de um composto de fórmula (II) ou de um 7

seu sal farmaceuticamente aceitável ou de um seu ester hidrolisável in vivo.

As composições farmacêuticas da pre sente invenção serão normalmente administradas aos seres humanos para combater infecções provocadas por bactérias, pelo mesmo processo geral utilizado para cefalotina, cefoxi tina, cefradina, ceftazidima e para outros derivados de cefa losporina conhecidos utilizados clinicamente, tendo em consi deração os níveis de dosagem em função da potência do derivado de cefalosporina da presente invenção em relação às cefalosporinas utilizadas clinicamente conhecidas. Sendo assim, cada paciente receberá uma dose diária intravenosa, subcutânea ou intramuscular compreendida entre 0,05 e 10 g e preferencialmente compreendida entre 0,1 e 5 g, de derivado de cefalosporina, sendo a composição administrada 1 a 4 vezes por dia, de preferência 1 ou 2 vezes por dia. A dose intravenosa, subcutânea e intramuscular pode ser administrada por injecção de ampola. Em alternativa, a dose intravenosa pode ser administrada por infusão contínua ao longo de um determinado período de tempo. Em alternativa, cada paciente receberá uma dose oral diária que seja aproximadamente equivalente â dose parenteral diária. Deste modo, uma dose diária preferêncial variará entre 0,5 e 5 g de derivado de cefalosporina, sendo a composição administrada 1 a 4 vezes por dia.

De acordo com outro aspecto adicional, a presente invenção proporciona um processo para a preparação de um composto de fórmula (II) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável ou de um seu ester hidrolisável in vivo, o qual consiste em: (a) fazer reagir um composto de fórmula (III) com um com posto de fórmula (IV): 8

Ν

OC(CH3)2COOH

(III)

em que L representa um grupo removível; fazer reagir um composto de fórmula (V) com um compos to de fórmula (VI) ou com um seu derivado reactivo: 9

ou (c) fazer reagir um composto de fórmula (VII) com um composto de fórmula (VIII) 10 ΝΗ2

-CO-NH Ο Ν

COOH

H2S /Ν — Ο Ν \ Ν /

ΟΗ (VII) NH2-0-C(CH3)2cooh

ou (d) fazer reagir um composto de fórmula (IX) com um composto de fórmula (X): 11

OH

m. // N Ν

CONH

O

N

COOH N —N 2“ O N N /

CH„S

.COOH (IX)

HO

CL OH l'-c(ch3)2cooh em que L' representa um grupo removível, em que quaisquer grupos funcionais são facultativamente protegidos e depois, se necessário: i) faz-se a remoção de qualquer grupo de protec-ção, ii) para a preparação de esteres hidrolisáveis in vivo, faz-se a esterificação dos corresponden tes grupos carboxi e/ou hidroxi, iii) procede-se à formação de um sal farmaceutica-mente aceitável.

Na reacção entre compostos de fórmulas (III) e (IV), o símbolo L convenientemente representa um grupo removível tal como halo, por exemplo, iodo, bromo ou cloro, ou representa alcanoil(C1-C4)-oxi, por exemplo, acetoxi. Os materiais de partida para as cefalosporinas de fórmulas (III) são conhecidos na especialidade ou podem ser • preparados por métodos análogos correspondentes; ver por , exemplo as publicações EP-A-127992 e EP-A-164944. E possí- 12 vel preparar facilmente um composto de fórmula (IV) por méto dos conhecidos pelos especialistas na matéria, por exemplo, pelos métodos descritos no Exemplo 1 que se segue mais adiante. A reacção entre compostos de fórmulas (V) e (VI) efectua-se sob condições convencionais na especialidade das cefalosporinas, por exemplo, sob condições de acilação normalizadas em que, por exemplo, o ácido é acti vado sob a forma de um brometo ácido, cloreto ácido, ou es-ter activado, ou então efectua-se a reacção em presença de um reagente de acoplamento tal como diciclo-hexil-carbo-di--imida. 0 grupo carboxi de 1-carboxi-l-metil-etoxi-imina pode ser facultativamente protegido durante a reacção de aci lação.

Os compostos de fórmula (V) podem ser preparados por um processo análogo ao descrito para os compostos de fórmula (II) estando o grupo amino da posição 7 opcionalmente protegido. A reacção entre compostos de fórmulas (VII) e NH2OC(CH3)2c°0H efectua-se sob condições normali zadas da química geral e/ou da especialidade das cefalosporinas. Os compostos de fórmula (VII) podem ser preparados por um processo análogo ao descrito para os compostos de fór mula (II). A reacção entre um composto de fórmula (IX) e um composto de fórmula L'C(CH3) 2COOH efectua-se sob condições normalizadas da química geral e/ou da especialidade das cefalosporinas.

Os compostos de fórmulas (V), (VII) e (IX) são novos e por isso constituem aspectos adicionais da presente invenção.

Nos processos da presente invenção quaisquer grupos funcionais podem ser facultativamente protegidos, sempre que for adequado. Esses grupos de protecção podem ser seleccionados, de um modo geral, entre os grupos descritos na literatura ou conhecidos pelos especialistas químicos, sempre que apropriado, para a protecção do grupo em questão,podem ser introduzidos por métodos convencionais. 13

Os grupos de protecção podem ser removidos utilizando qualquer método conveniente descrito na literatura ou conhecido pelos especialistas químicos, sempre que apropriado, para a remoção do grupo de protecção em questão, sendo esses métodos seleccionados de tal modo que efectuem a remoção do grupo de protecção com o mínimo de per turbação para outros grupos existentes na molécula. A título de conveniência indica-se mais adiante exemplos específicos de grupos de protecção, nos quais o termo "inferior" significa que o grupo ao qual é aplicável possui preferencialmente entre 1 e 4 átomos de car bono. Deve subentender-se que esses exemplos não são exaustivos. Sempre que mais adiante se faça referência a exemplos de métodos para a remoção de grupos de protecção deve subentender-se também que essa referência não é exaustiva. A utilização de grupos de protecção e de métodos de des-protecção não especificamente referidos é obviamente do âmbi to da presente invenção.

Um grupo de protecção carboxilo pode ser o resíduo de um álcool alifático ou aralifático formador de ester ou de um fenol, silanol ou estananol formador de ester (contendo esse álcool, fenol, silanol ou estananol preferencialmente entre 1 e 20 átomos de carbono).

Os exemplos de grupos de protecção carboxilo englobam os grupos alquilo (cl-c12 ) de cadeia linear ou ramificada (por exemplo, isopropilo, t-butilo; grupos halo-alquilo inferior (por exemplo, 2-iodo-etilo, 2,2,2-tricloro-etilo); grupos (alcoxi-inferior)-alquilo inferior (por exemplo, meto xi-metilo, etoxi-metilo, isobutoxi-metilo); grupos alifáticos (aciloxi inferior)-alquilo inferior (por exemplo, acetoxi-metilo, propionilo-oximetilo-butiril-oxi--metilo, pivaloil-oxi-metilo); grupos (alcoxi-inferior)-carbonil-oxi-alquilo inferior (por exemplo, 1-metoxi-carbonil-oxi-etilo) , 1-étoxi-carbonil-oxi--etilo); 14

grupos aril-alquilo inferior (por exemplo, p-metoxi-benzilo, o-nitro-benzilo, p-nitro-benzilo, benzidrilo e ftalidilo); grupos (trialquil inferior)-sililo (por exemplo, trimetil--sililo (por exemplo, trimetil-sililo e t-butil-dimetil--sililo); | grupos (trialquil inferior)-silil-alquilo inferior (por exem pio, trimetil-silil-etilo); e grupos alquenilo(C2“C6) (por exemplo alilo e vinil-etilo).

Os métodos particularmente adequados para a remoção de grupos carboxilo englobam, por exemplo, a hidrólise catalizada por ácidos, bases, metais ou en-| zimas.

Como exemplos de grupos de protecção hidroxilo refere-se os grupos alcanoilo inferior (por exemplo, acetilo); grupos (alcoxi inferior)-carbonilo (por exemplo, t-butoxi--carbonilo; ! grupos halo-(alcoxi inferior)-carbonilo (por exemplo, 2-iodo -etoxi-carbonilo, 2,2,2-tricloro-etoxi-carbonilo); grupos aril-(alcoxi inferior)-carbonilo (por exemplo, ben-zoil-oxi-carbonilo, p-metoxi-benzil-oxi-carbonilo, o-nitro--benzil-oxi-carbonilo, p-nitro-benzil-oxi-carbonilo);

grupos (trialquil inferior)-sililo (por exemplo, trimetil-si lilo, t-butil-dimetil-sililo) e grupos aril-alquilo inferior (por exemplo, benzilo).

Além disso, dois grupos hidroxi substituídos em átomos de carbono adjacentes, por exemplo, o radical catechol, podem ser protegidos na forma de um acetal cíclico tal como o resíduo metileno-dioxi.

Como exemplos de grupos de protecção amino refere-se os gru pos formilo, aralquilo (por exemplo, benzilo e benzilo substituído, por exemplo p-metoxi-benzilo, nitro-benzilo e 2,4--dimetoxi-benzilo e trifenil-metilo); grupos di-p-anisil-metilo e furil-metilo; 15

grupos acilo (por exemplo, alcoxi-carbonilo e aralcoxi-car-bonilo, por exemplo, t-butoxi-carbonilo e benzil-oxi-carboni lo); grupos trialquil-sililo (por exemplo, trimetil-sililo e t--butil-dimetil-sililo) ; grupos alquilideno (por exemplo metilideno); grupos benzilideno e benzilideno substituído e o grupo fta-limido A esterificação de grupos hidroxi para proporcionar esteres hidrolisáveis in vivo efectua-se por um processo convencional.

Os métodos de ensaio biológicos, re sultados e exemplos que se seguem servem para ilustrar a pre sente invenção.

Actividade anti-bacteriana >

Os compostos de cefalosporina farma ceuticamente aceitáveis da presente invenção constituem úteis agentes anti-bacterianos que possuem um espectro largo de actividade in vitro contra microrganismos laboratoriais padrão, tanto Gram-negativos como Gram-positivos, os quais são utilizados para despistar a actividade contra bactérias patogénicas. 0 espectro anti-bacteriano e a potência de um composto particular podem ser determinados recorrendo a um sistema de ensaio normalizado. Os compostos possuem uma actividade particularmente elevada in vitro contra estirpes de Pseudomonas aeruainosa.

As propriedades anti-bacterianas dos compostos da presente invenção também podem ser demonstradas in vivo recorrendo a ensaios convencionais de estímulo agúdo letal efectuados em ratinhos.

Verificou-se que genericamente os derivados de cefalosporina eram relativamente não tóxicos para os animais de sangue quente mantendo-se esta generaza-ção verdadeira para os compostos da presente invenção . Os compostos representativos da presente invenção foram adminis trados a ratinhos em doses excessivas em relação à dose ne- 16

cessária para proporcionar protecção contra infecções bacte-rianas e não se observou qualquer sinal evidente de sintomas tóxicos ou de efeitos secundários susceptíveis de serem atri buídos aos compostos administrados.

Os resultados que adiante se indi-j cam foram obtidos com o composto do Exemplo 1 e com dois com í postos comparativos utilizando um sistema de ensaio in vitro normalizado, em meio de ágar em conformidade com o processo "Diagnostic Sensitivity Test”. A actividade anti-bacteriana é descrita em termos da concentração inibidora mínima (CIM)

I determinada pela técnica de diluição em ágar com um inóculo de dimensões de 104 CFU/mancha. O composto (A) é um composto representativo de acordo com o Exemplo 9 da publicação EP-A--272827 e o composto (B) é a ceftazidima. O composto do Exemplo 1 exibe um efeito com uma duração particularmente boa, conforme demonstrado em estudos com saguins. O período de meia-vida (^1/2) é substâncial e significativamente mais longo do que o período correspondente dos compostos representativos da publicação EP-A-272827.

Composto do Composto (A) Exemplo 1

tl/2 (horas) 20,7 4,5 quando aplicado aos saguins numa dose de 3 mg/kg.

Isto significa que comparativamente é possível administrar aos pacientes que necessitem do composto do Exemplo 1 doses menores ou ainda que é possível conseguir uma actividade antibiótica mais longa e substancialmente superior. 17

ORGANISMO CIM (μ/ml) Composto do Ex 1 Composto (A) Composto (B) P.aeruginosa 18S (Ά8101024) 0,004 0,008 2 P.aeruginosa DR 18SH(A8101020) 0,016 0,06 16 P.aeruginosa PU21 (A8101028) 0,008 0,008 1 Ent.cloacae P99-(A8401054) 0,125 0,25 0,125 Ent.cloacae P99+(A8401053) 1 1 32 Ent.cloacae DR (A8401108) 0,25 4 32 Ent.cloacae DR (A8401109) 0,125 2 32 Serr.marcesens (A8421003) 0,008 0,03 0,25 Serr.marcesens DR(A8421078) 0,008 0,03 0,5 Pr.morganii (A8433001) 0,008 0,25 0,06 Pr.morganii DR(A8433062) 0,06 4 16 E.coli DCO (A8341098) 0,002 0,008 0,125 E.coli JS3RTEM(A8341135) 0,001 0,008 0,06 Citro.freundii DR (A8382031) 0,25 1 128 Citro.freundii DR (A8382034) 0,5 2 64 A.anitratus (A8322001) 0,06 0,125 16 P.stuartii DR(A8442049) 0,03 4 4 K.oxytoca -f Kl (A8395056) 0,004 0,016 0,5 S.dublin (A8369001) 0,004 0,008 0,125 Strep.pyogenes (A8681018) 0,5 0,25 0,125 Strep.pneumoniae (A8671001) 0,03 0,03 0,125 18

Exemplo 1 Ácido 7-r2-(2-aminotiazol-4-iD-2-((Z)-1-carboxi-l-metil--etoxi-imino)acetamidol-3-Γ(1-(2-carboxi-metil-3-cloro-4.5--di-hidroxi-fenil)-tetrazol-5-il)tio-metincef-3-em-4-carbo-xílico

Tratou-se o ácido 7-[2-(2-aminotiazol-4-il)-2-((Z)-1--t-butoxi-carboxi-l-metil-etoxi-imino)acetamido]-3--[(1-(2-carboxi-metil-3-cloro-4,5-di-hidroxi-fenil)--tetrazol-5-il)tio-metil]cef-3-em-4-carboxílico (0,875 g) com ácido trifluoro-acético (10 ml) à temperatura ambiente durante 1 hora. Evaporou-se a mistura e triturou-se o resíduo com éter para proporcionar um sólido que foi recolhido por filtração e pu rifiçado por CLER (AMICON Clg 15 um), fazendo a elui-ção com metanol/água/ácido acético (35:65:1 a 40:60:--1) [foi necessário utilizar dimetil-formamida para dissolver o produto impuro]. Obteve-se deste modo o composto em epígrafe (0,38 g); RMN (DMS0-d6/CD3C02D/CF3C02D) 1,55(s,6H,-C(CH3)2~); 3,35(s,2H,-CH2COOH); 3,60 e 3,85- (2d, J= 18Hz, -SCH2-); 4,30 e 4,65 (2d, J=ll,5 Hz,2H,-CH2-S-tetrazol); 5,20 e 5,85(2d, J= 4,5-Hz, 2H, H6 e Hy); 6,85 (s,1H, aromático); 7,05 (s,1H, tiazol).

Utilizando o ácido anterior em conjunto com material proveniente de outra experiência (32,1 g) preparou-se uma suspensão em água destilada (450 ml). Ajustou-se o valor do pH para 5 utilizando uma solução aquosa de bicarbonato de sódio, filtrou-se a solução e liofili-zou-se para proporcionar o sal de sódio (34,3 g); RMN (idêntico ao anterior); IV 1760 cm"1. 0 material de partida foi preparado do modo seguinte: 19

a) Preparou-se uma solução de ácido 3,4-dimetoxi-fenil--acético (7,84 g) em éter (100 ml) e ácido acético (20 ml). Gota a gota adicionou-se à solução ácido nítrico libertando vapores (1,68 ml). Manteve-se a agi tação à temperatura ambiente durante 16 horas. Recolheu-se o precipitado por filtração, lavou-se com éter e secou-se para proporcionar o ácido 4,5-dimeto-xi-2-nitro-fenil-acético (4,19 g); RMN (DMSO-dg) 3,88(S, 3H); 3,80(s, 3H); 3,97(s, 2H); 7,15(s, 1H); 7,70(s, 1H). b) Com o produto da alínea a) anterior (em conjunto com o material proveniente de outra experiência) (48,2 g) preparou-se uma suspensão em água (500 ml). Lentamen te adicionou-se hidróxido de potássio (78 g) e aqueceu-se a solução resultante ao refluxo durante 10 horas. Arrefeceu-se a solução e ajustou-se o valor do pH para 1 utilizando ácido clorídrico concentrado. Re colheu-se por filtração o sólido cristalino resultante, lavou-se com água fria e secou-se para proporcionar o ácido 5-hidroxi-4-metoxi-2-nitro-fenil-acé-tico (42 g); RMN (DMSO-d6/CD3COOD/CF3COOD) 3,87(s, 5H); 6,86(s, 1H); 7,7 (s,1H). c) Dissolveu-se uma parte do produto da alínea b) (20 g) em ácido acético (100 ml) à temperatura de 40SC. Fez. -se passar uma corrente de cloro através da solução observando-se a formação de um sólido cristalino decorridos 30 minutos. Fez-se passar azoto através da mistura arrefecida para a temperatura de 15QC e recolheu-se o sólido cristalino por filtração, lavou-se com ácido acético e secou-se para proporcionar o ácido 2-cloro-3-hidroxi-4-metoxi-6-nitro-fenil-acéti-co (17,3 g); p.f. 231sC; 20 RMN (DMSO-d6/CD3COOD/CF3COOD) 3,9 (s, 3H); 4,02(3, 2H); 4,67(s, 1H) . d) Tratou-se o produto da alínea c) (17,2 g) em dimetil--formamida (400 ml) com iodo-metano (20 ml) e com car bonato de potássio (19 g) . Aqueceu-se a mistura de reacção durante 4 horas à temperatura de 50sc e evaporou-se. Removeu-se o resíduo com água e extraiu-se com acetato de etilo para proporcionar, com o aspecto de um óleo avermelhado, o composto 2-cloro-3,4-dimeto xi-6-nitro-fenil-acetato de metilo (19 g); RMN (DMSO-d6/CF3COOD) 3,63(s, 3H) ; 3,88(s, 3H); 3,93 (s, 3H); 4,05(s, 2H); 7,74(s, 1H). e) A uma solução do produto da alínea d) (19 g) em metanol (250 ml) adicionou-se hidróxido de potássio (5 g) em água (250 ml). Aqueceu-se a mistura resultante ao refluxo durante 2 horas para proporcionar uma solução. Arrefeceu-se essa solução e removeu-se o metanol por evaporação. Lavou-se a camada aquosa com acetato de etilo e acidificou-se com ácido clorídrico 6N para proporcionar um sólido cor de laranja o qual foi recolhido por filtração e depois lavou-se com água e secou-se para proporcionar o ácido 2-cloro--3,4-dimetoxi-6-nitro-fenil-acético (16,5 g) ; RMN (DMSO-d6/CF3COOD) 3,86(s, 3H); 3,93(s, 3H); 3,96(s, 2H); 7,72(8, 1H), f) Hidrogenou-se uma parte do produto da alínea e) anterior (10 g) em metanol (100 ml), à pressão de 1,25 bar sobre 10% de paládio-em-carvão (100 mg) durante 1 hora. Filtrou-se a mistura através de terras de dia-tomáceas e evaporou-se o filtrado para proporcionar um resíduo. Triturou-se este resíduo com dicloro-me-tano e recolheu-se por filtração o sólido resultante, 21 lavou-se com dicloro-metano e secou-se para proporcionar o ácido 6-amino-2-cloro-3,4-dimetoxi-fenil-acé tico (7,25 g); RMN (DMSO-dg) 3,52(s, 2H): 3,6 (s, 3H); 3,72(s, 3H); 6,4 (s, 1H). g) Dissolveu-se o produto da alínea f) (7,35 g) numa mis tura de água (100 ml) e de acetonitrilo (100 ml) e arrefeceu-se para a temperatura do banho de gelo. Gota a gota adicionou-se tio-fosgéneo (2,65 ml) e deixou-se a temperatura aumentar até à temperatura ambiente. Observou-se a formação de cristais; decorrida 1 hora removeu-se o acetonitrilo por evapora-çãoe recolheu-se o sólido beje por filtração, lavou--se e secou-se para proporcionar isotiocianato de 2--carboxi-metil-3-cloro-4,5-dimetoxi-fenilo (8,2 g) ; RMN (DMSO-dg) 3,75(s, 2H): 3,77(S, 3H); 3,87(s, 3H); 7,23(s, 1H). h) A uma suspensão do isotiocianato da alínea g) (7,5 g) em água (200 ml) adicionou-se bicarbonato de sódio (3,375 g) e azida de sódio (2,625 g) . Aqueceu-se a mistura de reacção à temperatura de 80sc durante 30 minutos, arrefeceu-se, filtrou-se, lavou-se com aceta to de etilo e acidificou-se com ácido clorídrico 6N. Recolheu-se por filtração o sólido beje resultante, lavou-se e secou-se para proporcionar l-(2-carboxi--metil-3-cloro-4,5-dimetoxi-fenil)-2-mercapto-tetra-zol (7 g); RMN (DMSO-dg/CF3COOD) 3,57(s, 3H) ; 3,85(s, 6H); 7,34(s, 1H), i) A uma suspensão do produto da alínea h) (6,0 g) em dicloro-metano (450 ml) adicionou-se bis-trimetil-si-lil-aceatamida (9 ml) para proporcionar uma solução que foi arrefecida para a temperatura de -20SC. Go- 22

ta a gota adicionou-se tribrometo de boro (8,6 ml) e deixou-se a temperatura aumentar até à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura de reacção durante 1 hora, evaporou-se, fez-se a hidrólise com gelo triturado e purificou-se por cromatografia em coluna de resina HP20SS, fazendo a eluição com metanol/-água/ácido acético (40:60:1) para proporcionar l-(2--carboxi-metil-3-cloro-4,5-di-hidroxi-fenil)-2-mer-capto-tetrazol (4,5 g); RMN (DMSO-d6/CD3COOD/CF3COOD) 3,48(s, 2H); 6,93(s, 1H) . j) A uma solução do produto da alínea i) (2,3 g) em di- metil-formamida (10 ml) adicionou-se trietil-amina (1,15 ml) e ácido 7-amino-3-iodo-metil-cef-3-em-4-car boxílico (2,67 g) . Agitou-se a mistura de reacção durante 2 horas à temperatura ambiente. Depois adicionou-se o tioester 2-aminotiazol-4-il-2-((Z)-1-t-bu toxi-carbonil-l-metil-etoxi-imino)acetil-2-benz-tia-zolllico (2,5 g) e trietil-amina (0,75 ml e agitou-se a mistura resultante durante 2 horas à temperatura am biente. Removeu-se a dimetil-formamida por evaporação e triturou-se o resíduo com éter para proporcionar um sólido que se dissolveu com um pouco de dimetil-formamida e depois purificou-se por cromatografia em coluna da resina HP20SS, fazendo a eluição com me-tanol/água/ácido acético (65:35:1) para proporcionar o ácido 7-[2-(2-amino-tiazol-4-il)-2-((Z)-1-t-butoxi--carbonil-l-metil-etoxi-imino)acetamido]-3-[(1-(2-car boxi-metil-3-cloro-4,5-di-hidroxi-fenil)-tetrazol-5--il)tiometil[cef-3-em-4-carboxílico (0,905 g) ; RMN (DMSO-d6/CF3COOD/CF3COOD) l,55(s, 6H); 3,35(s, 2H); 3,60(d, 1H); 3,85(d, 1H); 4,30(d, 1H); 4,65(d, 1H); 5,20(d, 1H); 5,85(d, 1H). 23

6,85(s, 1H); 7,05(s, 1H). O material de partida para o Exemplo 1 foi preparado por um processo alternativo a seguir descrito:

i) A uma solução de ácido 2-cloro-3-hidroxi-4-metoxi-6--nitro-fenil-acético (52 g) em metanol (600 ml) adicionou-se trietil-amina (56 ml) e 10% de paládio-em--carvão (4 g). Hidrogenou-se a mistura durante 3 horas à pressão de 1,4 bar, filtrou-se, evaporou-se e cristalizou-se o resíduo para proporcionar o sal de trietil-amina com o ácido 2-cloro-3-hidroxi-4-metoxi--6-amino-fenil-acético (64 g) . RMN (DMSO-d6/CD3COD/CF3COOD) l,17(t, 9H); 3,05(s, 6H) ; 3,54(s, 2H) . 3,73(s, 3H) ; 6,4 (s, 1H) . ) ii) A uma solução do produto da alínea i) (33g) numa mis tura de água (150 ml) e de acetonitrilo (50 ml) à tem peratura de osc adicionou-se gota a gota tiofosgéneo (8,5 ml). Agitou-se a solução à temperatura a de 02C durante 30 minutos e à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Adicionou-se água (100 ml) e recolheu-se o isotiocianato por filtração. Com esse precipitado preparou-se uma suspensão em água (150 ml), adicionou-se azida de sódio (9,7 g) e ajustou-se o valor do pH para 8,5 com bicarbonato de sódio 2N. Aqueceu-se a solução resultante â temperatura de 60 sc durante 45 minutos enquanto se mantinha em 8,5 o valor do pH por adição de hidróxido de sódio 2N. Arrefeceu-se a solução e acidificou-se para pH 2 com HC1 concentrado. Recolheu-se o precipitado por filtração e secou-se para proporcionar 1-(2-carboxi-me-til-3-cloro-4-hidroxi-5-metoxi-fenil)-2-mercapto-te-trazol (23,5 g); RMN (DMS0-d6/CF3C00D) 3,85(s, 3H) ; 7,20(s, 1H). 24

iii) Preparou-se uma suspensão do produto da alínea ii) (100 g) em dicloro-metano (1 litro) e adicionou-se--lhe bis-trimetil-silil-acetamida (240 ml) sob agitação para proporcionar uma solução. Arrefeceu-se esta solução para a temperatura de -502C, adicionou-se-lhe gota a gota tribrometo de boro (170 ml) e deixou-se a temperatura aumentar até à temperatura ambiente. Evaporou-se a mistura de reacção, fez-se a hidrólise com gelo moído e purificou-se por cromatografia em coluna de resina H020SS, fazendo a eluição com metanol/água/ãcido acético (30:70:1) para proporcionar 1-(2-carboxi-metil-3-cloro-4,5-di-hidroxi-fenilX -2-mercapto-tetrazol (73 g).

iv) Preparou-se uma solução de ácido 7-amino-3-acetoxi-me til-cef-3-em-4-carboxílico (10 g) e do produto da alí nea iii) (11,2 g) em acetonitrilo (350 ml) e agitou--se rapidamente com eterato de trifluoreto de boro (60 ml) . Agitou-se a mistura à temperatura de 402C durante 1 hora sob uma atmosfera de argon. Procedeu--se à remoção dos solventes por evaporação e purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna de resina HP20SS, fazendo a eluição com metanol/-água/ácido acético (0:100:1 a 35:65:1) para proporcionar o ácido 7-amino-3-[(l-(2-carboxi-metil-3--cloro-4,5-di-hidroxi-fenil)tetrazol-5-il)tiometil]--cef-3-em-4-carboxílico (10,9 g); RMN (DMSO-d6/CF3COOD) 3,35(s, 2H) ; 3,80(s largo,2H); 4,30 e 4,65(2d, 2H); 5,15(s, 2H); 6,90(s, 1H). v) Fez-se reagir este composto com o tioester 2-amino--tiazol-4-il-2-((Z)-1-t-butoxi-carbonil-l-metil-etoxi -imino)-acetil-2-benz-tiazolílico e com trietil-amina por um proces-so idêntico ao descrito na alínea j) anterior. 25

Claims

i

- lfl - Processo para a preparação de um composto de fórmula (II) :

(II)

ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável ou de um ester hidrolisãvel in vivo, caracterizado por: (a) se fazer reagir um composto de fórmula (III): OC(CH3)2COOH

N

ch2l 26 (III) t **

com um composto de fórmula (IV)

(IV) em que o símbolo L representa um grupo removível: ou (b) se fazer reagir um composto de fórmula (V) :

ch2cooh CL 27 (V) c com um composto de fórmula (VI):

(VI) ou um seu derivado reactivo, ou se fazer reagir um composto de fórmula (VII):

com um composto de fórmula (VIII): (VIII) nh2-o-c(ch3)2cooh 28 ou

OH (ix) com um composto de fórmula (X): L,-C(CH3)2cooh (X) em que símbolo 1/ representa um grupo removível, em que quaisquer grupos funcionais são facultativamente protegidos e depois, se necessário: i) se remover um qualquer grupo de protecção, ii) para a preparação de esteres hidrolisáveis in vivo, faz-se a esterificação dos correspondentes grupos carboxi e/ou hidroxi, iii) se preparar um sal farmaceuticamente aceitável. _ 2ã - Processo de acordo com a reivindica ção 1 caracterizado por se preparar um composto sob a forma de um sal de sódio. _ 3a _ 29 Processo de acordo com a reivindica ção 1 caracterizado por se preparar o ácido 7-[2-(2-amino--tiazol-4-il)-2-((Z)-1-carboxi-l-metil-etoxi-imino)acetami-do]-3-[(1-(2-carboxi-metil-3-cloro-4,5-di-hidroxi-fenil)-te-trazol-5-il)tiometil]cef-3-em-4-carboxílico. - 4§ - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica caracterizado por se incorporar um composto quando preparado de acordo com qualquer das reivindicações anteriores e um veículo farmaceuticamente aceitável. A requerente reivindica a prioridade do pedido de patente europeia apresentado em 16 de Março de 1990, sob o Ns. 90400724.2. Lisboa, 15 de Março de 1991

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