PT86074B

PT86074B - Processo para a preparacao de novas sulfonas de cefalosporinas substituidas uteis como agentes anti-inflamatoriase anti-degenerativos

Info

Publication number: PT86074B
Application number: PT86074A
Authority: PT
Inventors: Paul E Finke; James B Doherty; William K Hagmann; Shrenik K Shah; Raymond A Firestone; Kevan R Thompson
Original assignee: Merck & Co Inc
Priority date: 1986-11-12
Filing date: 1987-11-04
Publication date: 1990-11-07
Also published as: NO874699D0; DE3751700D1; CA1339275C; DK590787A; KR880006249A; IL84359A0; FI874839A; NO874699L; EP0267723A2; AU611104B2; HUT52511A; NZ222399A; PT86074A; ZA878467B; CN87107753A; DK590787D0; ATE133954T1; EP0267723A3; EP0267723B1; FI874839A0

Description

Não descobrimos que sulfonas dum grupo de novas cefalosporinas substituídas são inibidoras de elastase potentes e por isso são agentes anti-inflamatórios/antidegenerativos úteis.

As proteases dos granulocitos e macrofagos foram referidas como sendo responsáveis pelos mecanismos de destruição do tecido crónico associadas à inflamação, incluindo artrite reumatóide e enfisema. Deste modo, inibidores específicos e selectivos destas proteases são agentes anti-inflamatórios potentes potenciais, úteis para o tratamento de estados inflamatórios resultantes da destruição do tecido conjuntivo, p.e. artrite reumatóide, enfisema, inflamação bronquial, osteoartrite,espondilite, lúpus, psoríase e sindroma da dificuldade respiratória aguda.

A função das proteases dos granulocitos, leucócitos, ou macrófagos está relacionada com uma série rápida de acontecimentos gue ocorrem durante a progressão duma doença inflamatória:

(1) Há uma produção rápida de prostaglandinas (PG) e de compostos afins sintetizados a partir do ácido araquidónico. Esta síntese de PG mostrou ser inibida por agentes anti-inflamatórios não esteroidais relacionados com a aspirina, incluindo indometacina e fenilbutazona. Há algumas provas em como os inibidores de protease previnem a produção de PG;

(2) Há também uma variação da permeabilidade vascular que provoca uma fuga de fluído para a zona inflamatória e o edema resultante é geralmente utilizado como um indicador de medição do grau de inflama-4-

ção. Este processo mostrou ser induzido pela actividade de clivagem proteolítica ou de peptido de proteases, especialmente aquelas contidas no granulocito, e por isso pode ser inibida por vários inibidores de protease sintética, por exemplo, benzisotiazolonas de N-acilo e os 1,1-dióxidos respectivos. Morris Zimmerman et al., J. Biol. Chem., 255, 9848 (1980); e (3) Dá-se o aparecimento e/ou presença de células linfóides, especialmente macrófagos e leucócitos polimorfonucleares (PMN). É sabido que uma variedade de proteases são libertadas dos macrófagos e PMN, indicando adicionalmente que as proteases desempenham um papel importanta na inflamação.

Geralmente, as proteases são uma família importante de enzimas dentro dos enzimas de clivagem da ligação de peptido, cujos membros são essenciais para uma variedade de actividades biológicas normais, tais como digestão, formação e dissolução de coágulos sanguíneos, a formação de formas activas de hormonas, a reacção imune a células e organismos estranhos, etc., e em estados patológicos tais como a degradação das proteínas estruturais na junção cartilagem articular/panus, na artrite reumatoide, etc.

A elastase é uma das proteases. É um enzima capaz de hidrolizar a elastina componente do tecido conjuntivo, uma propriedade não incluída na maior parte das proteases existentes nos mamíferos . Ela actua nas ligações não-terminais das proteínas adjacentes dum amino ácido alifático. A elastase de neútrofil é particularmente interessante dado que tem o espectro mais amplo de actividade contra

-5τ

os substractos de tecido conjuntivo natural. Em particular, a elastase do granulócito é importante porque, como descrito anteriormente, os granulócitos participam na inflamação aguda e na irritação aguda de formas crónicas de inflamação que caracterizam muitas doenças inflamatórias clinicamente importantes.

As proteases podem ser inactivadas por inibidores que bloqueiam o sítio activo do enzima por ligação firme ao mesmo. Inibidores de protease naturais fazem parte dos mecanismos de controlo ou defesa que são cruciais para o bem estar dum organismo. Sem estes mecanismos de controlo, as proteases destruiriam qualquer proteína ao seu alcance. Os inibidores de enzima naturais mostraram ter configurações apropriadas que permitem que se liguem firmemente ao enzima. Esta configuração é uma razão em parte pela qual os inibidores se ligam ao enzima tão firmemente (ver Stroud, A Family of Protein-Cutting Proteins Sei. Am. Julho de 1974, pags. 74-88). Por exemplo, um dos inibidores naturais, df^-Antitripsina, é uma glicoproteína contida no soro humano que tem um amplo espectro inibidor que cobre, entre outras enzimas, a elastase do pancreas e dos PMN. Este inibidor é hidrolizado pelas proteases para formar um enzima de acilo estável, onde o sítio activo deixou de estar disponível. A redução acentuada de Z ^-antitripsina de soro, quer genética, quer devido a oxidantes, foi associada ao enfisema pulmunar que é uma doença caracterizada por uma perda progressiva da elasticidade dos pulmões que resulta em dificuldades respiratórias. Foi referido que esta perda da elasticidade do pulmão é causada por proteólise descontrolada progressiva, ou por destruição da estrutura do tecido do pulmão por proteases, tais como a elastase libertada dos leucócitos. J.C. Powers, TIBS, 211 (1976).

A artrite reumátôide é caracterizada por uma destruição progressiva da cartilagem articular, tanto na superfície livre contígua ao espaço da articulação, como na

frente de erosão de tecido sinovial perto da cartilagem. Este processo de destruição, por sua vez, é atribuído à elastase de enzima de corte da proteína que é uma protease neutra existente nos granulócitos humanos. Esta conclusão é confirmada pelas seguintes observações:

(1) Inventigações histoquímicas recentes mostraram a acumulação de granulócitos na junção cartilagem/panus na artrite reumatóide; e (2) uma investigação recente do comportamento mecânico da cartilagem em resposta ao ataque por elastase purificada demonstrou a participação directa de enzimas de granulócitos, especialmente elastase, na destruição da cartilagem reumatóide. H. Menninger et al., em Biological Functions of Proteinases,H. Holzer e H. Tschesche, eds. Springer-Verlag, Berlim, Heidelburg, Nova Iorque, pags. 196-206, 1979.

Deste modo, um objecto deste invento é o de descobrir novos inibidores de protease, especialmente inibidores de elastase, úteis para controlar os danos nos tecidos e várias doenças inflamatórias ou degenerativas mediadas pelas proteases, particularmente a elastase.

Um outro objectivo do presente invento é o de proporcionar composições farmacêuticas para a administração de sulfonas activas de cefalosporina substituída como inibidores de protease.

Ainda um outro objectivo deste invento é o de proporcionar um método de controlo de doenças inflamatórias por administração duma quantidade suficiente de uma

-Ί-

ου. mais das sulfonas activas de cefalosporina substituida a uma espécie mamífera com necessidade de tal tratamento.

DESCRIÇÃO DETALHADA DO INVENTO

Este invento refere-se a novas sulfonas de cefalosporina como inibidores de elastase potentes úteis na prevenção, controlo e tratamento de doenças inflamatórias, especialmente artrite e enfisema.

Alguns dos ácidos livres de cefalosporina são antibióticos conhecidos que foram descritos na Patente Norte Americana No. 4.297.488, publicada em 27 de Outubro de 1981.

A fórmula estrutural das sulfonas de cefalosporina do presente invento é representada da seguinte forma:

(D na qual M é:

(1) trifluorometilo;

(2) cloro ou flúor;

(3) -COOH;

(4) -CHO; ou (5) -CH₂A, em que A representa (a) hidrogénio;

(b) halo;

(c) hidroxi substituído ou insubstituido;

(d) alcoxi;

(e) ariloxi;

(f) aralquiloxi;

(g) um grupo mercapto insubstituido ou substituído;

(h) aciltio (i) alcanoiloxi ou arilcarboniloxi;

(j) um grupo de amónio quaternário, por exemplo © Θ 0

-NHg, -NHE₂ e -NEg, em que E representa alquilo inferior, arilo ou aralquilo;

(k) um grupo amido substituído ou insubstituido;

(l) R-SO-, em que R é alquilo ou arilo ^C6__iq » ou (m) R-SO₂~;

(6) -CH=CH-R;

Assim, CH₂A pode ser um halometilo tal como clorometilo, bromometilo ou fluorometilo.

Quando CHgA é um grupo hidroxi substituído ou mercapto substituído, este pode ser representado pela fórmula

-ch₂zr₅ na qual Z é oxigénio ou enxofre, e Rg é um grupo acilo; um grupo alquilo inferior, alquenilo ou alquinilo de cadeia linear ou ramificada; um grupo arilo; um grupo aralquilo; ou um grupo heterocíclico tal como heteroarilo, heterocicloalquilo, p.e. 1,3-dioxaciclohex-4-ilo, piperidino, morfolino,

oxaciclopropilo, pirrolidino, tetrazolo, benzotiazolo, imidazolidino, pirazolidino e piperazino; ou heterocicloalquenilo tal como pirrolino, 2-imidazolino, 3-pirazolino ou isoindolino. Estes grupos podem ser insubstituidos ou substituídos por radicais tais como alquilo, alcoxi, halo, ciano, carboxi, carbamoilo, azido, sulfo, amino, amino substituído, haloalquilo, carboxialquilo, carbamoilalquilo, carbamoilalquilo N-substituido, guanidino, guanidino N-substituido, guanido-alquilo, sulfamilo, sulfamilo substituído, etc. Grupos representativos de Cf^A são metoximetilo, n-propoximetilo, metiltiometilo, acetoximetilo, propioniloximetilo, benzoiloximetilo, (p-clorobenzóilo)oximetilo, succinoiloximetilo, (p-metilbenzoil)oximetilo, pivaloiloximetilo, (1-adamantil)-carboximetilo, butanoiloximetilo, carbamoiloximetilo, (N-metilcarbamoil)oximetil, (N-etilcarbamoil)oximetilo, /^-N-(2-cloroetil)carbamoil7oximetilo, (N-fenilcarbamoil)oximetilo, /^-N-(carboximetil)-carbamoil7oximetil,(N-p-sulfonil-carbamoil)oximetilo_r p-carboximetilfenil-carbamoiloximetilo, metoxicarboniloximetilo, isobutanoiloximetilo, ciclobutilcarboniloximetilo, carbamoiltiometilo, (etoxitiocarbonil)tiometilo, (n-propoxitiocarbonil)tiometilo, (ciclopentanoxitiocarbonil)tiometilo, metiltiometilo, N,N-dietiltiocarbamoiltiometil, N-metilpiperaziniom-l-tiocarboniltiometilo, N,N-dimetilpiperazinil-l-tiocarboniltiometilo, 2-furoiltiometilo, isotiouroniometilo, (5-metil-l,3,4-tiadiazol-2-il)tiometilo, p-tolilsulfoniltiometilo, 2-benzotiazolotiometilo, mesiloximetilo, 1-metil-l,2,3,4-tetrazolil-5-tiometilo, tosiloximetilo, sulfamoiloximetil, 1-naftoiloximetilo, 2-furilacetoximetilo, cinamoiloximetilo, p-hidroxicinamoiloximetilo, p-sulfocinamoiloximetilo e 1R:2S-epoxipropilfosfoniloximetilo.

Alternativamente, quando CH^A é hidroximetilo, e cafalosporina também pode existir como a lactona que é formada por esterificação interna com o grupo carboxi adjacente.

substitilinte CI^A pode também ser um grupo com a fórmula geral

-^CH2^Y1 em que representa amino ou amino substituído incluindo heterocidos de azoto e grupos heterocíclicos substituídos, como descrito para Rg. Y^ pode também ser azoto que faz parte do sistema heterocíclico, como é mostrado a seguir.

Exemplos destes grupos que se possam mencionar são aminometilo, acetamidometilo, carbamoilaminometilo, N,N-dimetilaminometilo, N-(2-cloroetil)aminometilo, 5-ciano-triazol-l-il-metilo, 4-metoxicarboniltriazol-l-il-metilo.

Quando A é amino, o composto de cefalosporina pode também existir na forma lactona por perda de água com o grupo carboxi adjacente.

Grupos de amónio quaternário representativos de A que possam ser mencionados são piridíniom, 3-metilpiridíniom, 4-metilpiridíniom, 3-cloropiridíniom, 3-bromopiridíniom, 3-iodopiridfniom, 4-carbamoilpiridiníom, 4-(N-hidroximetilcarbamoil)piridiníom, 4-(N-carbometoxicarbamoil)piridíniom, 4-(N-cianocarbamoil)piridiníom, 4-carboximetilpi-

ridiníom, 4-hidroximetilpiridiniom, 4-trifluorometil-piridíniom, quinolíniom, picolíniom e lutidínium.

Quando A é mercapto, este pode ser

-SH, -S-C-O0

S

alquilo, alquiltio, ariltio, aralquiltio ou heterociclotio, em que R representa alquilo inferior , arilo ^cq_j_q ou ch₂cooh.

Os grupos representativos de A preferidos são (a) hidrogénio; (b) halo; (c) hidroxi; (d) alcoxi;

(e) ariloxi; (f) aralquiloxi; (g) mercapto substituído ou insubstituido especialmente -S-C-O-R,

(h) aciltio; ou (i) aciloxi. 0 grupo acilo pode ser um grupo alcanoilinferior de 2-6 átomos de carbono tal como acetilo, -CC^Hg ou -COC^H?, carbamoilo, ou tiocarbamoilo e os seus derivados de N-alquilo ou Ν,Ν-dialquilo. 0 grupo alquilo dos substituintes anteriores contém 1-10 átomos de carbono e pode ainda ser substituído por radicais tais como alcoxi, halo, amino, ciano, carboxi, sulfo, etc.

Mais preferivelmente, A é

O (a) alcanoiloxi, especialmente -O^CH^

^CH2^CH2^C00H

-O-C-CH,NHCH ,

II ^Z

-0C-CH_oNH₉, II 2 z o

HOOC-

-CCH_nNCOOt-BU II ²1 0 ch₃

ou

(b) alcoxi especialmente metoxi, etoxi ou i- ou n-propiloxi;

(c) halo;

(d) hidrogénio;

(e) hidroxi;

(f) mercapto substituído ou insubstituido ou (g) carbamoiloxi, especialmente a forma L- ou D- de

-oÍ-NHCHCOOH, C₁_gálkyl

e.g. -OCNH-CH-COOH, -O-Çj-NHCH₂COOH, “3 O

-Otí-NHCH₂COOCH₃; -O-C-NHCH-COOH;

^C«2-^C6^H5

(h) -SOCH₃ ou -SO-CgH₅;

(i) -SO₂CH₃ ou -SO₂C₆H₅;

substituinte da fórmula (I) anterior é (a) hidrogénio;

(b) hidroxi;

(c) mercapto;

(d) oxi substituído;

(e) tio substituído;

(f) um grupo hidrocarbilo ou hidrocarbilo substituído;

(g) ciano;

(h) carbonilo ou tiocarbonilo contendo substituintes ligados pelo referido radical de carbonilo ou de tiocarbonilo;

(i ) halo;

(j) um grupo fosfono ou fosfono substituído;

O substituinte oxi ou tio representado por na fórmula (I) pode ser um grupo mercapto ou hidroxi substituído, tal como -XR£ em que X é oxigénio ou enxofre e R| é um grupo hidrocarbilo, preferivelmente um grupo alquilo inferior linear ou ramificado de 1-6 átomos de carbono, um grupo alquenilo inferior ou alquinilo inferior de cadeiz linear ou ramificada de 3 a 6 átomos de carbono, um grupo arilo monocíclico tal como fenilo, furilo, pirrilo e piridilo, ou um grupo aralquilo tal como benzilo. Estes grupos alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo ou aralquilo podem ser substituídos por grupos tais como hidroxi, halo, nitro, amino, carboxi, tio, etc. Outros substituintes específicos representados por R^ que podem ser mencionados são grupos de fórmula -OAc, -sac, -so₃h, -so₂nh₂, -so₂r₂, -so₂nr₃r₄, -ocoor₂, -sor₂, -OCOSR₂, -OCONR₃R₄, etc., em que Ac representa um grupo acilo tal como formilo ou alcanoilo inferior, R₃ e R₄ representam hidrogénio, alquilo inferior, acilo e alcoxi inferior, e R₂ representa alquilo inferior, haloalquilo inferior, ari-15-

lo, aralquilo e derivados substituídos de tais grupos.

Quando R^ é hidrocarbilo, pode ser alquilo inferior linear ou ramificado, alquenilo inferior linear ou ramificado, alquinilo inferior, aralquilo, cicloalquilo, um grupo arilo monocíclico, ou um grupo heterocíclico monocíclico que pode também ser substituído por um ou mais grupos tais como halo, hidroxi, alcoxi, amino, nitro, sulfonilo, sulfanoilo, aciloxi, carbamoiloxi, carboxi, carboxamido e carboxamido N-substituido. Exemplos representativos de tais grupos são alquilo θ tal como metilo, trifluo rometilo, etilo, n-propilo, isopropilo, t-butilo; alquenilo C? θ especialmente alilo, χ -butenilo; alquinilo ^C2_g ^tal como etinilo e metiletinilo; aralquilo inferior tal como benzilo, p-metoxibenzilo, fenetilo ; fenilo; p-aminofenilo; ciclopropilo, ciclopentilo e 4-hidroxiciclohexilo;

R^ na fórmula (I) anterior pode também representar ciano ou um grupo com a fórmula geral

X'

-C-R em que X' é oxigénio ou enxofre, e R é hidrogénio, halo, hidroxi, mercapto, amino, amino substituído, alquilo, arilo, aralquilo, aralcoxi tal como benziloxi, alcoxi ou ariloxi tal como fenoxi, pirroloxi, furiloxi, e tieniloxi, alquiltio ou ariltio. Exemplos destes substituintes são -COOH, -CSSH, -COR₂, -COOR₂, -COSR₂, -CSSR₂, -CONH₂, -CSNH₂, -CSR₂, -CONHR₂, -CSNH, -CONR^R^ e -CSNR^R^ em que R₂ representa um grupo de alquilo de cadeia linear ou ramificada de 1-6 átomos de carbono e R^ e representam hidrogénio ou R₂;

Finalmente, o substituinte R^ na fórmula (I) representa fosfono ou um seu sal metálico ou de amónio, ou um grupo de fosfono substituído com a fórmula:

1* —Ρ—Υ ¹

I

Ζ' em que Υ' e Ζ são iguais ou diferentes e representam

-or₂, -NR₃R₄, _ NR₀

-NR-CH-COOH, -NR₂-NR₃R₄, -NR₂N=CR₃R₄, -NR₂~C-NR₃R₄, x· X’

-NH-C-X’R₂, -NH-C-NR₃R₄, -NC=X·, -OCOR₂ e -N₃, em que R₂ representa hidrogénio ou um radical hidrocarbilo, Rg e R₄ representam hidrogénio, hidrocarbilo, alcoxi ou um radical acilo, e X' representa oxigénio ou enxofre.

Preferivelmente, R^ é (1) hidroxi;

(2) 0R₁, em que R^ representa um grupo hidrocarbilo ;

(3) alquiltio (4) alquilsulfinilo :

(5) alquilsulfonilo (6) halo tal como flúor, cloro, bromo ou iodo; ou;

(7) hidrogénio; ou (8) alquilo θ.

0Β₁

Ainda mais preferivelmente, R^ é (1) alquilo (2) hidroxi;

(3) 0R| em que R| é (a) alquilo θ especialmente metilo, etilo, n-propilo;

(b) -C₆H₅;

(c) -CH₂CH₂CgH₅; ou

II (d) -C-R em que R representa hidrogénio, alquilo C^_g, fenilo, benzilo substituído ou insubstituido, ou alquilamino C^_g tal como CH^NH-, C₂HgNH-;

(4) halo especialmente Cl ou F; ou (5) -SO₂R.

B de Fórmula (I) anterior representa ou NB₂B₂ em que B^ e B₂ são independentemente:

(a) alquilo de cadeia linear ou ramificada com 1 a 20 átomos de carbono, etilo, isopropilo, t-butilo, pentilo ou hexilo;

(b) arilo com 6 a 10 átomos de carbono;

(c) cicloalquilo com 3 a 8 átomos de carbono;

(d) alquenilo com 2 a 20 átomos de carbono;

(e) cicloalquenilo com 5 a 8 átomos de carbono;

(f) alquinilo com 2 a 20 átomos de carbono;

(g) alcoxi com 1 a 10 átomos de carbono;

(h) aralquilo, alcarilo, aralquenilo, aralquinilo, alquenilarilo ou alquinilarilo em que alquilo, alquenilo, e alquinilo são como préviamente definidos;

(i) alquenilalquilo inferior;

(j) alcanoilalquilo;

(k) alcanoiloxialquilo;

(l) alcoxialquilo;

(m) alcanoiloxi;

(n) um grupo heterocíclico incluindo alquilo heterocíclico ou alquenilo heterocíclico.

Os grupos anteriores (a)-(n) podem ser insubstituidos ou podem ser substituídos por radicais tais como alquilo, hidroxi, alcoxi, halo, nitro, mercapto, amino, amino substituído, ciano, carboxi, sulfoamino, carbamoilo, carbamoiloxi, sulfonilo, sulfinilo, sulfamoilo, azido, amino, amino substituído, carboxamido ou carboxàmido N-substituido;

B₃ é hidrogénio ou B^j e

B₂ e B₃ podem ser postos em conjunto e fazerem parte do grupo heterocíclico

	O ^p’^e·
₁^y,cooH_₄0__R	f /~\ _jj' o ou semelhantes • \___/

Exemplos representativos de tais grupos são alquilo θ especialmente metilo, etilo ou t-butilo, alilo, 3-butenilo, metoxietilo, benzilo, p-carbometoxibenzilo, m-carbometoxibenzilo, p-sulfonilbenzilo, m-fluorobenzilo, o,p-dinitrobenzilo, o,p-diclorobenzilo, p-metilbenzilo, m-metoxibenzilo, o-metiltiobenzilo, benzidrilo, -CH₂COOH, -CH₂COOt-Bu, CH₂CH₂CH₂COOCH₃, -Cf^COOC^Hg e semelhantes .

Preferivelmente, B^ e B₂ são independentemente substituídos ou insubstituidos

(1) aralquilo;

(2) arilo;

(3) alquilo inferior linear ou ramificado;

(4) alquenilo inferior linear ou ramificado;

(5) cicloalquilo;

(6) alcanoiloxialquilo inferior;

(7) alcanoilalquilo inferior; ou (8) alcoxialquilo inferior; ou (9) haloalquilo;

B₃ é hidrogénio ou B^ e

B^ e Bg podem ser postos em conjunto e constituírem parte do grupo heterocíclico, como definido pré viamente;

Ainda mais preferivelmente, e B₂ são independentemente (1) benzilo;

(2) metilo;

(3) t-butilo;

(4) -CH₂CH₂CH=CH₂ ou CH₂-CH=C(CH₃)₂;

(5) -CH₂COOH, (6) alcanoiloximetilo; ou (7) alcanoilmetilo;

substituídos ou insubstituidos;

Bg é hidrogénio ou ; e

B₂ e Bg podem ser postos em conjunto e constituírem parte do grupo heterocíclico seleccionado dentro dum grupo consistindo em:

Q na fórmula (I) representa (1) hidrogénio;

(2) alquilo θ especialmente metilo, etilo, isopropilo, n-pentilo ou n-hexilo;

(3) haloalquilo C^_g especialmente cloro ou flúoralquilo C^_g; ou (4) hidroxialquilo θ;

(5) metileno ou metileno substituído, especialmente alquilmetileno θ, fenilmetileno, feniltiometileno, fenilsulfinilmetileno ou fenilsulfonilmetileno substituído ou insubstituido;

(6) alcoxi g alquilo θ;

(7) aralquilo, especialmente benzilo ou fenetilo insubstituido ou substituído;

(8) feniltioalquilo C^_gsubstituido ou insubstituido, fenilsulfonilo C^_gj (9) fenoxialquiloalquilo substituído ou in- substituido; ou (10) fenilaminoalquilo C^_g substituído ou insubstituido .

Preferivelmente, Q é (1) hidrogénio;

(2) alquilo ;

(3) metileno substituido ou insubstituido;

(4) feniltio alquilo θ ou fenilsulfonilo alquilo g insubstituido ou substituido; ou (5) aralquilo.

Ainda mais preferivelmente, Q é (1) hidrogénio;

(2) metilo, etilo ou i- ou n-propilo;

(3) metileno; ou (4) feniltiometilo ou fenilsulfonil metilo.

Os ésteres de sulfona de cefalosporina de fórmula estrutural (I), na qual OB^ é diferente de hidroxi, podem ser preparados a partir do ácido correspondente de acordo com métodos convencionais de esterificação.

Por exemplo, (1) Um composto de fórmula (I) é tratado com um al canol inferior, um álcool benzílico substituido ou insubstituido, ou um benzidrol (difenilmetanol) substituido ou insubstituido na presença de qualquer um ou duma combinação dos catalisadores ilustrados a seguir no Quadro I:

QUADRO I

Catalisadores para Esterificação (1) Acido clorídrico ou bromídrico (2) Acido sulfúrico (3) Ácido alcanóico ^c ₁_3, p.e. ácido acético (4) Ácido fosfórico (5) Ácido e anidrido trifluoroacético (6) ácido tricloroacético (7) Ácido p-toluenossulfónico ou outros ácidos arils.ulfónicos (8) Resinas de permuta de iões ácidos com sulfato de cálcio (9) Cloreto de alumínio protegido por polímero, p.e., um complexo entre cloreto de alumínio anidro e difenilfosfitopiridina de copolímero de polistireno-divinil benzeno (10) Um ácido de Lewis tal como trifluoreto de boro (11) Sulfonilcloreto-piridina aromático, p.e., p-toluenossulfonilcloreto (12) Ditriflato de trifenilfosfina (13) Diciclohexilcarbodiimida (DCCD) (14) β-triclorometil-^ -pro-piolactona (15) N,N'-carbonildimidazole (16) Dietilazodicarbonilato de trifenilfosfina (17) 6-clorobenzenossulfoniloxibenzotriazole (18) Iodeto de l-metil-2-halopiridinio-amina terciária (p.e., trietilamina).

a uma temperatura entre cerca de 0^o e cerca de

O Z ÍV

150 C, com ou sem refluxo, ate a esterificação ter práticamente terminado. Facultativamente, pode-se utilizar um solvente para facilitar a reacção. Os solventes comuns utilizados são benzeno, tolueno, xileno, sulfolano-xileno,

dietiléter, tetrahidrofurano, 1,2-dimetoxietano, dioxano, etc.;

(2) Um composto de fórmula (I) é convertido num haleto ácido, tal como cloreto ou brometo ácido por meio de tratamento com um agente de halogenação tal como cloreto de tionilo; penta- ou oxicloreto fosforoso, seguido por reacção com um álcool apropriado; e (3) Outros métodos tais como alquilação de sais de carboxilato (p.e. K⁺, Na⁺, Ca⁺⁺, Ag⁺, Cu⁺, tetraalquilamónio-R₄N⁺, e sais Hg⁺⁺) de fórmula (I) com haletos de alquilo, por exemplo cloreto de benzilo, cloreto de benzidrilo; reacção com isoureias de alquilo; tratamento com diazometano ou diazofenilmetano (CgHj-CHN,/; alcóolise de anidrido derivado do ácido de cefalosporina correspondente à fórmula (I); transesterificação com ésteres t-butílicos ou isopropenilacetato; e semelhantes, podem também ser utilizados. Estes métodos são divulgados em Saul Patai, editor, The Chemistry of Functional Groups, Supplement B, The Chemistry of Acid Derivatives, pags. 411-436, Jonh Wiley & Sons, Chichester-New York-Brisbane-Toronto, 1979, e são aqui incorporados por referência.

Mais especificamente, os seguintes esquemas sintéticos são úteis para preparar os ésteres ou amidas de sulfona de cefalosporina de fórmula (I).

(1) Como exemplificado pelo Exemplo 16

(IV) em que representa alquilo C^_g tal como metilo, etilo, ίου n-propilo ou t-butilo ou aralquilo tal como m-metoxicarbonilbenzilo ou outros grupos de alquilo substituídos ou insubstituidos.

(2) Como exemplificado pelo Exemplo 18 (II)--;--------->

composto diazo p.e.

CH₂N₂

C₆H₅CHN₂

C₂H₅OOCCHN₂

(IV)

(II)

COOC(CH₃)₃ (4) Método de deslocamento como ilustrado no Exemplo 19 (II) ^Χχ~^^χ~⁵—S- (B - -CHjCOR, -CHjCOOR) ₀'^>_K M (X » halo, e.g. |

Cl, Br and I) COOCHjCOR sulfona corresDondente

(5) Aminólise dum anidrido como exemplificado no Exemplo 20 •K.

a) Cl-C-OR

II-------------

b) HNB₂Bg sulfona correspondente

em que R é alquilo inferior, p.e. isobutilo, HNBgBg é

H

CgHgCH₂NCHg ou outra amina substituída ou insubstituida.

(6) Método de ligação DCC como exemplificado no Exemplo 21 e Exemplos 32-33

II

a) DCC or DCC/

ΈΓΗΝΒ₂Β₃-----

em que DCC representa diciclohexilcarbodiimida, HNB^g é H₂NCH₂COOR (em que R é alquilo C^_g ou aralquilo) ou outra

amina substituída ou insubstituida.

Note-se que quando for conveniente, (II) pode ser oxidado em primeiro lugar numa sulfona e depois ser submetido a esterificação ou amidação de acordo com os esquemas (1) a (6). Por outro lado, (II) pode também ser um composto 7,7-dissubstituido, p.e. 7-halo-7-R-derivado.

composto de partida de fórmula II e os métodos para a sua preparação são conhecidos na maioria dos casos, dado que são antibióticos bem conhecidos e foram explorados consideravelmente. Os seguintes esquemas, contudo, ilustram a preparação de alguns precursores representativos:

(A) Modificações na posição-7-Reacções de diazotização (1) Como exemplificado pelos Exemplos 1, 7 e 8

em gue R é como definido anteriormente.

28(a)

(V)

H Cl D. -------3-----l·—>. HjO/aceton

COB

HCO-O-COCH3 piridina (b) (V) ^Et3^Bh₂o THF

Em (a) a (c) pos, como préviamente definido.

B é t-butilo ou outros gru29-

(B) Modificação na posição-3 (1) Como exemplificado no Exemplo 4, Etapas C-E

-30(2) Como exemplificado no Exemplo 5 (R^=OCHg) (VI)

TsCl

COB

c₆h₅sh (iPr)₂NEt

COB (3) Como exemplificado nos Exemplos 8-10 e 12-14

(4) Como exemplificado no Exemplo 11 (VII)

COB

-32(5) Como exemplificado no Exemplo 15

(6) Como exemplificado no Exemplo 28-31

(C) Modificação da posição 4 (introdução do substituinte 0) como exemplificado nos Exemplos 24-27

(viii)

(2) (VIII)

(IX)

(D) Síntese Específica de 3-acetiloximetil-7£Ç-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7oct-2-eno-2-(2-(S)-carboxipirrolidinocarboxamida)-5,5-dióxido (Composto A)

Este composto é preparado de acordo com o seguinte esquema. A síntese detalhada é descrita no Exemplo 34 ·

ο

Α_ο

Βη-0 Ο

------—>

ΗοΟΗ

/ h₂so₄

DIOXANO

/ Pd/C

MaOH

Ο 8

Este invento também se refere a um meé todo de tratamento de inflamação em doentes, por utilização dum composto de fórmula (I), particularmente um composto especialmente preferido como constituinte activo.

Descobriu-se que os compostos de fórmula (i) têm actividade anti-inflamatória e antidegenerativa e que são eficazes na prevenção e inibição de formação de tecidos de edema e granuloma, como mostrado a seguir no Quadro II, por inibição eficaz da função proteolítica da elastase de granulocitos humanos.

QUADRO II

R 1	M	5	0	DE 50
-0CH₃	-CH₂0C0CH₃	-och₃	H	0,08
II	II	-OCH 0	H	0,03
II	II	-00^0-( p-COOCH)	H	0,02
II	II	-OCH COtBu	H	0.02
II	II	-0CH₂CH-C(CH₃)₂	H	1.0
II	li	-0(ch₂)₃cooch₃	H	0.05
II	II	-HHCH COOtBu	H	0..9
II	II	-n(ch₃)₂	H	0.6
II	II	-OtBu	^CH3	0_r03
II	II	-OtBu	^CH2	0_f03

-OCH	-C^OCOCH	-OtBu	CH₂S0	0_f03
II	li	-OtBu	ck₂so₂0	0.02
II	II	-OtBu	ch₂0	15.0
-^C2^H5	II	OtBu	H	l_f0
II	-CH.OCONHCHCOOH ² 1 ^CH3	OtBu	H	\°
li	-CH₂0C0CH₂CH₂C00H	OtBu	H	0^8
II	-CH₂0C0CH₃	-och₂0	H	O,⁴
II	-CH OCOCH0 ² 1 NH„	-OtBu	H	O,⁴

-39*1

Cl

50---·' -N(CH₃)CH₂COOH h

CH_

och₃	CH OCOCH í. 0	-NH(CH₂)₃C00tBu	H	θ)¹
11	II	-N(CH₃)CH₂0	H	0,06
ti	tl	-OtBu	H	0,5
-OC H	II	II	H	0,8
6 5
-F	II	II	H	0,03
-Cl		tt	H	0,02

R	M	B	0	DE
1 0 II -0CH	II	II	H	0^15
0 II -OCH	11	-och₃	H	O,¹
-CCOCH₃	II	-OCH₂0	H	0,4
-och₃	-CHOH 2	.-OtBu	H	0,8
II	-OH OCOCH CH -C00H	II	H	op
II	-CH₂0C0CH₂NHCH₃	II	H	0,3
0CH₃	-CH₂OCO-0-(O-COOH)	-OtBu	H	0.6
II	-CH OCOCH NCOOtBu 2 2i	II	H	0,1
II	^H ₃ -CH₂0C00C₂H₅	II	H	°>³
II	-ch₂ci	II	H	0,15

-CH,-SCOC H || Z 5

S

-ch₂och₃

B	0	DE --------^50--
II	H	0\|9
II	H	0,7
-OtBu	H	h⁰
II	H	0,3
II	H	1,0
-OtBu	H	3,0
II	H	0j6
•1	H	0^6

*1	H	B	0	D_E_. 50
II	-CH.OCONHCHCOOH 2 2	II	H	0₍04
II	-COOH	II	H	0,01
II	-ch₂S0	ll	H	0,4 l
II	-CH₂SO0	It	H	0,08
II	-ch₂so₂0	II	H	0,2
°^CH3	-Cl	-och₃	H	0_T2
II	-ch₂so₂ch₃	-OtBu	H	θ!¹
-och₃	-ch₃	-OtBu	H	b⁰
II	-cn₃	-OCH COOC.H 2 2 5	H	0\|5
II	-^CH ₃	-OCH 0-(mCOOCH )	H	°1³

= CgHg- ou C_gH₄ i.e., fenilo

0?

0₍05

QUADRO III

Protocolo - Ensaios de enzima para.a Inibição de Elastase de Leucócitos Polimorfonucleares Humanos Via Hidrólise de

Reagentes de N-t-Boc-alanil-alanil-propilalanina-p-nitroanilida:

Tampão TES (ácido N-tris/^-hidroximetil7-2-amino-etanossulfónico) 0,05 M, pH 7,5.

N-t-Boc-alanil-alanil-propil-alanino-p-nitroanilida 0,2 mM (Boc-AAPAN).

Para preparar o substracto, o sólido (p.m. 550) foi primeiramente dissolvido em 10,0 ml de DMSO. Adicionou-se então um tampão com um pH de 7,5 para se obter um volume final de 100 ml.

Extracto em bruto de leucócitos polimorfonucleares (PMN) humanas contendo actividade de elastase.

Os inibidores (ésteres de sulfona de cefalosporina) a serem ensaiados foram dissolvidos em DMSO imediatamente antes de serem utilizados.

Procedimento de Ensaio:

A 1,0 ml de Boc-AAPAN 0,2 mM numa tina, adicionou-se 0,01-0,1 ml de DMSO com ou sem inibidor. Após mistura, efectuou-se uma medição a 410 nyi para detectar qualguer hidrólise espontânea derivada da presença do composto de ensaio. Adicionou-se então 0,5 ml de extracto de PMN e mediu-se ο Δ OD/min a 410 nyj e registou-se. Utilizou-se o espectómetro Beckman modelo 35.

Resultados:

Os resultados foram apresentados como DE₅₀, i.e., dosagem eficaz em microgramas por mililitros (^!ig/ml) para uma inibição a 50% da actividade enzimática 2 minutos após o tempo zero.

Comentários:

A actividade da elastase no extracto de PMN em bruto pode variar de uma para a outra preparação. A cada novo lote é efectuado um controlo e o volume adicionado no processo de ensaio é ajustado conforme a actividade.

Deste modo, os compostos de Fórmula (I) podem ser utilizados para reduzir a inflamação e aliviar a dor em doenças tais como enfisema, artrite reumatóide, osteoartrite, gota, inflamação bronquial, artrite infecciosa, febre reumática, etc.

Para tratamento da inflamação, febre ou dor, os compostos de Fórmula (I) podem ser administrados oralmente, tópicamente, parentéricamente, por inalação em spray ou rectalmente em formulações de unidade de dosagem contendo veículos, adjuvantes e portadores farmacêuticamente aceitáveis, não-tóxicos, convencionais. O termo parentérico, como é aqui utilizado, inclui técnicas de injecçoes subcutâneas, intravenosas, intramusculares, intra-esternal ou técnicas de infusão. Além do tratamento de animais de sangue quente tais como ratos, ratazanas, cavalos, cães, gatos, etc., os compostos do invento são eficazes para o tratamento de seres humanos.

As composições farmacêuticas contendo o ingrediente activo podem estar numa forma adequada para utilização oral, por exemplo, como comprimidos, trociscos, pastilhas, suspensões aquosas ou oleosas, pós ou grânulos dis-46-

persíveis, emulsões, cápsulas duras e macias, ou xaropes ou elixires. As composições destinadas a utilização oral podem ser preparadas de acordo com qualquer método conhecido na especialidade para a produção de composições farmacêuticas e tais composições podem conter um ou mais agentes seleccionados dentro do grupo que consiste em agentes adocicantes, agentes aromatizantes, agentes corantes e agentes preservativos, a fim de se proporcionar uma preparação farmacêuticamente elegante e agradável. Os comprimidos contêm o ingrediente activo em mistura com excipientes farmacêuticamente aceitáveis não-tóxicos que são adequados para a manufactura de comprimidos. Estes excipientes podem ser por exemplo, diluentes inertes tais como carbonato de cálcio, carbonato de sódio, lactose, fosfato de cálcio ou fosfato de sódio; agentes de granulação e agentes desintegrantes, por exemplo, amido de milho, ou ácido algínico; agentes de ligação, por exemplo amido, gelatina ou acacia, e agentes lubrificantes, por exemplo estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco. Os comprimidos podem ser não-revestidos ou podem ser revestidos por técnicas conhecidas para atrasarem a desintegração e absorção no tracto gastrointestinal e portanto para proporcionarem uma acção sustentada durante um período superior. Por exemplo, pode-se empregar um material retardador tal como monoestearato de glicerilo ou distearato de glicerilo.

Formulações para utilização oral podem também ser apresentadas como cápsulas de gelatina dura em que o ingrediente activo é misturado com um diluente sólido inerte, por exemplo, carbonato decálcio, fosfato de cálcio ou caulino, ou como cápsulas de gelatina macia, em que o ingrediente activo é misturado com água ou com um meio oleoso, por exemplo óleo de amendoim, parafina líquida, ou óleo de oliva.

As suspensões aquosas contêm os materiais activos em mistura com excipientes adequados para a produção

de suspensões aquosas. Tais excipientes são agentes de suspensão, por exemplo carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, aginato de sódio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto e goma acácia; os agentes de dispersão ou agentes humidificantes podem ser um fosfatádeo natural, por exemplo lecitina, ou produtos de condensação dum óxido de alquileno com ácidos gordos, por exemplo estearato de polioxietileno, ou produtos de condensação de óxido de etileno com álcoois alifáticos de cadeia comprida, por exemplo heptadecaetilenooxicetanol, ou produtos de condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos gordos e um hexitol tal como monooleato de sorbitol de polioxietileno, ou produtos de condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos gordos e anidridos de hexitol, por exemplo monooleato de sorbitano de polioxietileno. As referidas suspensões aquosas podem também conter um ou mais preservativos, por exemplo etilo, ou n-propilo, p-hidroxibenzoato, um ou mais agentes corantes, um ou màis agentes aromatizantes, e um ou mais agentes adocicantes, tal como sucrose ou sacarina.

A suspensão oleosa pode ser formulada por suspensão de ingrediente activo num óleo vegetal por exemplo óleo de amendoim, óleo de oliva, óleo de sésamo ou óleo de coco, ou num ólèo mineral tal como parafina líquida. As suspensões oleosas podem conter um agente espessante, por exemplo cera de abelha, parafina dura, ou álcool cetílico. Podem-se adicionar agentes adocicantes tais como aqueles indicados anteriormente, e agentes aromatizantes para se preparar uma preparação oral saborosa. Estas composições podem ser preservadas por meio da adição dum antioxidante tal como ácido ascórbico.

Pós e grânulos dispersíveis adequados para preparação duma suspensão aquosa pela adição de água proporcionam o ingrediente activo em mistura com um agente dispersante ou humidificante, um agente de suspensão e um ou

mais preservativos. Agentes dispersantes ou humidificantes adequados e agentes de suspensão são exemplificados por aqueles já anteriormente mencionados. Excipientes adicionais, por exemplo adocicantes, aromatizantes e corantes, podem também estar presentes.

As composições farmacêuticas do invento podem também estar na forma de emulsões de óleo-em-água. A fase oleosa pode ser um óleo vegetal, por exemplo óleo de oliva ou óleo de amendoim, ou um óleo mineral, por exemplo parafina líquida, ou misturas destes. Agentes emulsionantes adequados podem ser gomas naturais , por exemplo goma acácia ou goma tragacanto, fosfatídeos naturais, por exemplo soja, lecitina, e ésteres ou ésteres parciais derivados de ácidos gordos e anidridos de hexitol, por exemplo mono-oleato de sorbitano, e produtos de condensação dos referidos ésteres parciais com óxido de etileno, por exemplo monooleato desorbitano de polioxietileno. As emulsões podem também conter agentes adocicantes ou aromatizantes.

Xaropes e elixires podem ser formulados com agentes adocicantes, por exemplo glicerol, propileno glicol, sorbitol ou sucrose. Tais formulações podem também conter um demulcente, um preservativo e agentes aromatizantes e corantes. As composições farmacêuticas podem estar na forma duma suspensão aquosa ou oleosa esterilizada e injectável. Esta suspensão pode ser formulada de acordo com atécnica conhecida, utilizando-se os agentes dispersantes ou humidificantes adequados e agentes de suspensão que foram mencionados anteriormente. A preparação injectável esterilizada pode também ser uma solução ou suspensão esterilizada injectável num diluente ou solvente não-tóxico parentéricamente aceitável, por exemplo como uma solpção em 1,3-butano diol. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregues estão água, solução de Ringer e solução de cloreto de sódio isotónica. Além disso, óleos fixos esterilizados

são convenientemente empregues como um solvente ou meio de suspensão. Para este fim, pode-se empregar qualquer óleo fixo brando, incluindo mono- ou digliceridos sintéticos. Por outro lado, ácidos gordos tais como ácido oleico encontram utilização na preparação de injectáveis.

Os compostos de Fórmula (I) podem também ser administrados na forma de supositórios para administração rectal do medicamento. Estas composições podem ser preparadas por mistura do medicamento com um excipiente não-irritante adequado, o qual é sólido a temperaturas ordinárias , mas líquido à temperatura rectal e por isso fundirá no recto para libertar o medicamento. Tais materiais são manteiga de cacau e polietileno glicois.

Para utilização topical empregam-se cremes, pomadas, geles, soluções ou suspensões, etc., contendo os agentes anti-inflamatórios.

Níveis de dosagem da ordem de 0,2 mg a 140 mg por quilograma de peso corporal por dia são úteis para o tratamento das condições atrás indicadas (10 mg a 7 g, por doente por dia). Por exemplo, a inflamação é eficazmente tratada e a actividade anti-pirética e analgésica manifestada através da administração de cerca de 0,5 a 50 mg do composto por quilograma de peso corporal por dia (25 mg a

3,5 gm doente por dia). Vantajosamente, desde cerca de 2 mg a cerca de 20 mg por quilograma de peso corporal por dosagem diária produz resultados altamente eficazes (50 mg a 1 g por doente por dia).

A quantidade de ingrediente activo que pode ser combinada com os materiais veículo para produzir uma forma de dosagem individual variará dependendo do hospedeiro tratado e do modo particular de administração. Por exemplo, uma formulação destinada a administração oral de

seres humanos contém desde 5 mg a 5 g de agente activo composto com uma quantidade apropriada e conveniente de material veículo que pode variar desde cerca de 5 a cerca de 95 por cento da composiçãototal. As formas de unidade de dosagem conterão geralmente entre cerca de 25 mg a cerca de 500 mg de ingrediente activo.

Compreenda-se, no entanto, que o nível de dose específico para qualquer doente particular dependerão duma série de factores incluindo a actividade do composto especifico empregue, a idade, o peso corporal, o estado de saúde, geral, sexo, dieta, tempo de administração, via de administração, taxa de excreção, combinação do medicamento, e a gravidade da doença especifica sob terapia.

EXEMPLO 1 t-Butil-3-acetiloximetil-7of -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato-5,5dióxido

Etapa A: Preparação de 3-acetiloximetil-7-diazo-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2,07oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo

Coloca-se num frasco Erlenmeyer de dois litros uma solução de éster 7-ACA terc-butilo (7-ACA = 3-acetiloximetil-7 β-amino-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato (22,22 g; 0,067 moles) em Cf^C^ (500 ml). A esta solução adicionou-se uma mistura de nitrito de sódio (4,68 g, 0,067 moles) em água (500 ml). A mistura de duas faces resultante foi arrefecida num banho de gelo, e depois adicionou-se gota a gota f^SO^ aquoso 2N (51 ml) durante 30 minutos, com agitação vigorosa. A agitação continuou durante uma hora a 0^o, depois as camadas foram separadas e a camada aquosa foi lavada com cloreto de metileno (200 ml).

As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (250 ml), secas sobre MgSO^, e filtradas para produzirem uma solução amarela do produto diazo que é utilizada directamente na reacção seguinte.

Etapa B: Preparação de 3-acetiloximetil-7 a(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo

A solução de 3-acetiloximetil-7-diazo-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo foi arrefecida num banho de gelo e adicionou-se metanol (525 ml). A esta mistura arrefecida adicionou-se dimero de acetato de Ródio (II) (210 mg), e a mistura reaccional foi agitada durante 45 minutos, durante cujo tempo a cor mudou de amarelo para verde-acastanhado. A mistura reaccional foi filtrada através de sílica gel, foi concentrada e seca in vacuo para produzir um óleo vermelho escuro que foi então purificado por cromatografia líquida de alta pressão preparativa para produzir 9,62 g (41,4%) de 3-acetiloximetil-7o( -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2,07oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo sob a forma dum óleo amarelo.

Etapa C: Preparação de 5,5-dióxido de t-butil-3-acetiloximetil-7< -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato

Introduziu-se num frasco de fundo redondo de 50 ml 3-acetiloximetil-7o<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo (2,07 g, 6,03 mmoles) e (25 ml). A mistura resultante foi agitada sob azoto, com arrefecimento em banho de gelo, adicionou-se depois ácido meta-cloroperbenzóico (2,0 g, 80-90% puro), o banho de gelo foi então removido, e a agitação continuou durante duas horas. A mistura reaccional foi diluída com acetato de etilo (50 com bicarbonato de sódio ml), foi filtrada e depois lavada saturado (100 ml), água (100 ml) e

salmoura saturada (50 ml). A camada orgânica foi seca sobre MgSO₄, e concentrada para produzir 2,20 g de produto em bruto. Este produto foi purificado por CLAP preparativa utilizando-se hexano:acetato de etilo (2:1) para produzir um sólido branco purificado ainda por recristalização a partir de EtOAc/Hex para produzir 1,23 g (54,3%) de 5,5-dióxido de t-butil-3-acetiloximetil-7 e(‘-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabici-

clo/~4.2,07óct-2-eno-2-carboxilato, p.f. 127°.
Calculado para C^gH	21^NO8^S		-
c(%)	H	N	s
47,99	5,64	3,73	8,54
Encontrado 48,05	5,68	3,57	8,53
	Seguindo-se	o mesmo	procedimento descri-

to anteriormente, mas substituindo 3-metil-7 J>-amino-8-oxof

-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo por éster terc-butilico de 7-ACA ali utilizado, prepararam-se 152 mg (rendimento 24%) de 3-metil-7 a^-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo.

EXEMPLO 2 t-Butil-S-acetiloximetil·^ °( -formiloxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^_4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido

Etapa: Preparação de 3-acetiloximetil-7 <>('-hidroxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo.

3-Acetiloximetil-7-diazo-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo em bruto (preparado a partir de 20,5 g, i.e. 63 mmoles de éster t-butilico de 7-ACA) foi extraído em 400 ml de acetona e adicionaram-se à temperatura ambiente 400 ml de água contendo 80 ml de ácido perclórico IN. A reacção foi agitada durante 3 horas (ou até a formação de azoto ter terminado) e foi então diluída com água e extraída duas vezes com cloreto de metileno. As fases orgânicas foram lavadas com uma solução saturada e aquosa de bicarbonato de sódio e de cloreto de sódio, foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas in vácuo. O resíduo foi cromatografado sobre sílica gel com acetato de etilo a 30%-hexano paraproduzir 2,75 g (13%) de 3-acetiloximetil-7í< -hidroxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.07 oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo sob a forma dum sólido branco, RMN (CDClg) o 1,53 (s, 9), 2,07 (s, 3), 3,35 (ABq, 2, 18 Hz), 4,5-5,0 (m, 4).

Etapa B: Preparação de 3-acetiloximetil-7oC -formiloxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo

A uma solução de 1,5 g (4,6 mmoles) de 3-acetiloximetil-7 -hidroxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.07 oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo em 50 ml de cloreto de metileno a 0°C adicionaram-se 1,5 ml de reagente de anidrido acético-fórmico (preparado por arrefecimento de 2 volumes de anidrido acético a 0°C, adição lenta de 1 volume de ácido fórmico a 96%, aquecimento a 50° durante 15 minutos e arrefe-54-

cimento), seguidos por 1,2 ml de piridina. A reacção foi deixada aquecer até à temperatura ambiente, foi agitada durante 2 horas e depois foi temperada pela adição de água gelada. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sdio e de cloreto de sódio, foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada in vacuo. 0 resíduo foi triturado com acetato de etilo a 30%-hexano para produzir 700 mg (43%) de t-butil-3-acetiloximeti1-7 q(-formiloxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato, RMN (CDCl^) & 1,53 (s, 9), 2,03 (s, 3), 3,40 (AB q, 2, 17 Hz), 4,67 (d, 1, 2 Hz) 4,78 (ABq, 2, 13 Hz), 5,49 (br d, 1, 2 Hz), 7,99 (s, 1).

Etapa C: Preparação de t-butil-3-acetiloximetil-7í^ -formiloxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido

Seguindo-se substâncialmente o mesmo procedimento descrito no Exemplo 1, Etapa C, 750 mg de 3-acetiloximetil-7 K-formiloxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo foram oxidados em 545 mg (67%) de t-butil-3-acetiloximetil-7í< -formiloxi-3-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido sob a forma dum sólido branco, p.f. 171-172°C dec.

EXEMPLO 3 t-Buti1-3-acetiloximeti1- ZK -acetiloxi-8-oxo-5-tia-1-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido

Etapa A: Preparação de 3-acetiloximetil-7 <^-acetiloxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo

A uma solução de 240 mg (0,73 mmoles) de t-butil-3-acetiloximetil-7 <-hidroxi-8-oxo-5-tia-l-azabici clo/^_4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato, em 10 ml de cloreto de metileno a 0°C, adicionaram-se 85 mg (1,1 mmoles) de cloreto de acetilo e 90 mg (1,1 mmoles) de piridina. O banho de gelo foi removido e a reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas. A reacção foi então deitada em água gelada e as camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e de cloreto de sódio, foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada. Cromatografia sobre sílica gel com acetato de etilo a 30%-hexano e trituração com hexano produziram 100 mg (37%) de t-butil-3-acetiloximetil-7 4( -acetiloxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato sob a forma dum sólido branco, p.f. 94-95°C com decomposição.

Etapa B: Preparação de t-butil-3-acetiloximetil-7 d<-acetiloxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2carboxilato-5,5-dióxido

Seguindo-se o mesmo procedimento que o descrito na Etapa C, Exemplo 1, oxidaram-se 100 mg de t-butil-3-acetiloximetil-7^lí( -acetiloxi -8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7-2-eno-2-carboxilato em t-butil-3-acetiloximetil-7 a(-acetiloxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido, p.f. 126-129°C.

EXEMPLO 4

Metil-3-cloro-7 °( -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4 .2.0 7-oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido

Etapa A: Preparação de 3-etoxicarboniltiametil-7 £>-amino-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-carboxilato de metilo

A uma suspensão vigorosamente agitada de 8 g (23,9 mmoles) de ácido 3-etoxicarbonil-tiametil-7Π

-amino-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2,0_7oct-2-eno-2-carboxílico em 300 ml de metanol adicionou-se lentamente uma solução de diazometano em éter etílico até a maior parte do sólido estar dissolvido . 0 excesso de diazometano foi temperado ao fim de 5 minutos por adição de ácido acético. A reac ção foi então deitada em água gelada e extraída duas vezes com acetato de etilo/éter etílico (1:1). As camadas orgânicas foram lavadas com água e com uma solução saturada aquosa de cloreto de sódio, foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas in vacuo.

O resíduo foi submetido a cromatografia flash eluindo-se com um gradiente de solvente de 50 a 70% de acetato de etilo/hexano para produzir 4,5 g (54%) de 3-etoxicarboniltiametil-7 /S-amino-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de metilo sob a forma dum sólido branco, RMN (CDCl^) S 1,40 (t, 3, 7 Hz), 1,73 (br s, 3,53 (ABq, Z, 19 Hz), 3,87 (s, 3), 4,30 (ABq, 2, 13 Hz), 4,5-5,0 (m, 4).

Etapa B: Preparação de 3-etoxicarboniltiametil-7 ^-metoxi-S-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de metilo

1)

Seguindo-se no essencial o mesmo procedimento que o descrito no Exemplo 1, Etapas A e B, converteram-se 4,5 g (12,9 mmoles) de 3-etoxicarboniltiametil-7β-amino-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato de metilo em 1,2 g (26%) de 3-etoxicarboniltiametil-7ô(· -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxi lato de metilo sob a forma dum sólido amarelado, RMN (CDCl^) S 1,38 (t, 3, 7 Hz), 3,43 (ABq, 2, 18 Hz), 3,51 (s, 3), 3,86 (s, 3H), 4,22 (HBq, 2, 13 Hz), 4,3-4,7 (m, 4).

Etapa C: Preparação de 3-metileno-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de metilo

A uma suspensão de 8 g de níquel de Raney em 70 ml de água sob azoto adicionaram-se 1,2 g (3,3 mmoles) de 3-etoxicarboniltiametil-7 íK-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de metilo em 70 ml de etanol.

A mistura foi hidrogenada a 2,8 kg/cm²(40 psi) num agitador de Parr, à temperatura ambiente durante 16 horas. O catalisador foi então removido por filtração e o filtrado foi diluído com água e extraído duas vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas foram lavadas com água e solução saturada aquosa de cloreto de sódio, foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas in vacuo. O resíduo foi submetido a cromatografia flash, eluindo-se com um gradiente de solvente de 30 a 40% de acetato de etilo-hexano para produzir 500 mg (62%) de 3-metileno-7<<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2,0_7oct-2-eno-2-carboxilato de metilo soba forma dum óleo incolor, RMN (CDClg) & 3,33 (ABq, 2,

Hz), 3,56 (s, 3), 3,73 (s, 3), 4,40 (br s, 1), 5,0-5,3 (m, 4) .

Etapa D: Preparação de 3-hidroxi-7 p(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de metilo

Uma solução de 200 mg (0,82 mmoles) de 3-metileno-7 oÇ-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato de metilo em 15 ml de cloreto de metileno foi arrefecida a -70°C num banho de gelo seco-acetona. Borbulhou-se ozono através da solução até se notar o primeiro sinal de coloração azul. Borbulhou-se então azoto para expulsar o excesso de ozono, adicionaram-se 2 g de bissulfito de sódio e a suspensão foi vigorosamente agitada a 0°c duran-58-

te 30 minutos.

A reacção foi filtrada e o filtrado foi evaporado in vacuo para produzir o produto em bruto que foi utilizado directamente na etapa seguinte.

Etapa E: Preparação de 3-cloro-7 \-metoxi-8-oxo-5-tia-lazabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato de metilo

O 3-hidroxi-7 o{-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.20_7oct-2-eno-2-carboxilato de metilo em bruto (aproximadamente 0,82 mmoles) foi recolhido em 10 ml de dimetilformamida e foi adicionado lentamente a uma solução de 680 mg (3,3 mmoles) de pentacloreto fosforoso em 10 ml de dimetilformamida a -60°C (preparada por agitação a -10°C durante 15 minutos e depois por arrefecimento a -60°C). A solução foi agitada a -60°C durante 30 minutos, e depois a -10°C durante 90 minutos, antes de ser temperada por mergulho em água/acetato de etilo. A camada orgânica foi lavada com solução saturada aquosa de bicarbonato de sódio e de cloreto de sódio, foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada in vacuo para produzir um resíduo em bruto de 3-cloro-7°(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7°ct-2-eno-2-carboxilato de metilo. Este foi oxidado directamente para produzir 4,9 mg de 3-cloro-7 qj-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de metilo (de acordo com os procedimentos descritos no Exemplo 1, Etapa C) RMN (CDC1₃) £ 3,57 (s, 3), 3,90 (s, 3), 4,00 (ABq, 2, 18 Hz), 4,67 (brs, 1), 5,10 (d, 1, 2 Hz).

EXEMPLO 5

3-Feniltio-(ou 3-fenilsulfonil-)-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de metilo

Etapa A: Preparação de 3-tosiloxi-7 o(’-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2,0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de metilo

Uma solução de 450 mg de 3-hidroxi-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de metilo em bruto em 5 ml de piridina foi agitada com 470 mg (2,4 mmoles) de cloreto de tosilo a 0°C durante 3 horas. A mistura reaccional foi deitada em água gelada e extraída duas vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas foram lavadas duas vezes com ácido clorídrico aquoso saturado e cloreto de sódio aquoso saturado, foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas in vacuo para produzirem um resíduo em bruto de 3-tosiloxi-7-metoxi-8-oxo-5-tio-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de metilo. Este é oxidado directamente de acordo com o mesmo procedimento do Exemplo 1, Etapa C, para produzir 180 mg (20%) de 3-tosiloxi-7oó-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7oct-2-carboxilato-5,5-dióxido de metilo sob a forma dum sólido branco, RMN (CDC1₃) á 2,47 (s, 3), 3,57 (s, 3), 3,70 (s, 3), 4,10 (ABq, 2, 18 Hz), 4,67 (m, 1), 5,07 (d, 1, 2 Hz), 7,50 (ABq, 4, 9 Hz) .

Etapa B: Preparação de 3-feniltio-7c^ -metoxi-8-oxo-5-tia-lazabiciclo/^_4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de metilo

Uma solução de 170 mg (0,40 mmoles) de 3-tosiloxi-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2,0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de metilo em 2 ml de N,N-dimetilformamida foi agitada com 50 ^iil (0,40 mmoles), de tiofenol e 50 /ul (0,40 mmoles) de N-etil-N,N-diisopropilami-60-

na a -10°C durante 30 minutos. A reacção foi deitada em água gelada e extraída duas vezes com acetato de etilo. As camadas orgânicas foram lavadas com ácido clorídrico diluído e solução saturada aquosa de cloreto de sódio, foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas. O resíduo foi cromatografado sobre placas preparativas de sílica de 2x2000 ^um, utilizando-se acetato de etilo a 40%-hexano. Dado que ainda continha alguma quantidade da impureza de Rf maior (o produto principal), a faixa de produto foi recromatografada sobre uma placa preparativa de sílica de 1000 pm para produzir 15 mg (10%) de 3-feniltio-7í>(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de metilo, RMN (CDClg) S 3,53 (s, 3), 3,57 (ABq, 2, 18 Hz), 3,87 (s, 3), 4,51 (br s, 1), 5,00 (d, 1, 2 Hz), 7,33 (br s, 5).

Etapa C: Preparação de 3-fenilsulfonil-7í<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de metilo

Uma solução de 11 mg (0,030 mmoles) de

3-feniltio-7o^-metoxi-S-oxo-S-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido em 1 ml de cloreto de metileno foi agitada com 12 mg (0,060 mmoles) de ácido m-cloroperbenzóico a 0°C durante 30 minutos. A totalidade da reacção foi então cromatografada sobre uma placa preparativa de sílica de 1000 pm, eluindo-se com acetato de etilo a 50%-hexano, para produzir 8 mg (67%) de 3-fenilsulfonil-7e^-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de metilo RMN (CDClg) £ 3,36 (d, 1, 18 Hz),

3,53 (s, 3), 3,96 (s, 3), 4,20 (br d, 1, 18 Hz), 4,70 (br s, 1), 5,06 (d, 1, 2 Hz), 7,2-7,8 (m, 5).

EXEMPLO 6

3-Acetiloximetil-7 o( -flúor-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0_7 oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Etapa A: Preparação de 3-acetiloximetil-7 -flúor-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo

3-Acetiloximetil-7-diazo-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo foi preparado a partir de 10 mmoles de derivados de 7-amino da forma descrita na Etapa A, Exemplo 1, e foi recolhido em 25 ml de cloreto de metileno seco. A este, com agitação, adicionou-se gota a gota durante 30 segundos 0,60 ml de HF a 70% em piridina. A mistura foi agitada durante 2,5 minutos e depois foi lavada com Κ^ΗΡΟ^ aq, água, H^PC^ aq e salmoura. Ela foi seca com MgSO^, foi filtrada e cromatografada sobre sílica gel 164 com hexano-acetato de etilo 1:1, produzindo 183 mg de 3-acetiloximetil-7=-flúor-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo. IV (ji): 5,57, 5,76 . RMN (CDC1₃): á 1,54 s, t-Bu; 2,08 s, Ac; 3,34 d de d, J = 18, 1,9 Hz, e 3,58 d de d, J = 18, 0,8 Hz, SCH₂; 4,75 d, J = 13 Hz e 4,97 d, J = 13 Hz, CH_₂OAc; 4,90 d de d, J = 9, 1,6 Hz, CHS; 5,32 d de d, J = 54, 1,6 Hz, CHF. EM: 332.

Etapa B: Preparação de 3-acetiloximetil-7 Oç-flúor-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^_4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

A 182 mg (0,55 mmoles) de 3-acetiloximetil-7fi( -flúor-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo em 20 ml de cloreto de metileno adi cionaram-se 261 mg (1,2 mmoles) de MCPBA. Após agitação durante 5,5 horas, a mistura foi lavada com K₂HPO₄ e salmoura, foi seca com MgSO^, foi filtrada, evaporada e cromatografada por CLP sobre sílica gel com hexano-EtOAc, produzindo 142 mg

de 3-acetiloximetil-7 %(’ -flúor-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2 .o7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo. RMN (CDCl^):

1,55 s, t-bu; 2,08 s, Ac; 3,73 d, 3,90 d, J = 18 Hz, SO₂CH₂; 4,72 d, 4,90 d, J = 13 Hz, CH₂OAc; 4,86 d de d, J = = 7, 1,6 Hz, CHSO₂; 5,84 d de d, J = 52, 1,6 Hz, CHF.MS: 307, 247.

EXEMPLO 7

3-Acetiloximetil-7 ^<’C-cloro-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Etapa A: Preparação de 3-acetiloximetil-7 °(-cloro-5-tia-l-azabiciclo/^_4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo

Seguindo-se o mesmo processo que o descrito na Etapa A, Exemplo 1, diazotizou-se o éster t-butílico de 7-AcA em 3-acetiloximetil-7-diazo-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo que foi recolhido em 2 ml de EtOH e tratado com 0,1 ml de HC1 aq. Deu-se uma forte efervescência instantânea. Ao fim de 15 segundos, adicionaram-se K₂HPO₄ aq e cloreto de metileno. A camada de cloreto de metileno foi separada, lavada com H^PO^ aq e salmoura, foi seca com MgSO^, filtrada e cromatografada por CLP sobre sílica gel, eluindo-se com CHCl^-EtOAc 25:1 para produzir 61 mg de 3-acetiloximetil-7 o^-cloro-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo puro. RMN (CDClg): <5 1,55 s, t-bu; 2,10 s, Ac; 3,40 d, 3,59 d,

J = 18 Hz, SCH₂; 4,79 d, 5,03 d, J = 13 Hz, CH₂OAc; 4,70 d, J = 1,5 Hz, CHS; 4,78 d, J = 1,5 Hz, CHC1. EM: 291 Ο1_χ, 231 ci₁.

Etapa B: Preparação de 3-acetiloximetil-7 z\-cloro-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Agitaram-se 4,5 mg (0,013 mmole) de 3-acetiloximetil-7 â(-cloro-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo com 6,0 mg de MCPBA (0,028 mmole) em 0,5 ml de cloreto de metileno durante 4 horas. Ao fim das 2 primeiras horas, e novamente ao fim de 3,5 horas, adicionou-se mais 1 mg de MCPBA. A mistura foi lavada com K2HPO4 aq, foi seca com MgSO^, filtrada e cromatografada sobre 500 mg de sílica gel, eluindo-se com hexano-EtOAc 1:1, 3,2 mg de 3-acetiloximetil-7í^-cloro-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2,0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo. EM: 379 Cl1. RMN (CDC1₃): & 1,57 s, t-bu; 2,08 s, Ac; 3,83 d, 4,00 d, J = 18, SO₂CH₂; 4,69 d, 5,00 d, J = 13 Hz, CH₂OAc; 4,80 d, J = 2 Hz, CHSO₂; 5,26 d, J = 2 Hz, CHC1.

EXEMPLO 8

3-Hidroximetil-7 <\-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo

Etapa A: Preparação de 3-acetiloximetil-7 a<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo

Colocaram-se num frasco de fundo redondo de 200 ml equipado com um agitador magnético 3-acetiloximetil-7 <\-metoxi-8-oxo-5-tio-l-azabiciclo/~4.2,0_7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo (7,46 g, 21,7 mmoles), clorofórmio (90 ml) e trietilamina (3,3 ml, 23,6 mmoles). A mistura foi então aguecida para ser sujeita a refluxo durante três horas. Análises de ^H RMN dum aliquota mostra que houve uma mistura de isómeros (-3-eno e -2-eno) segundo uma relação próxima de 3:1. A mistura reaccional foi então evapo-64-

rada e o resíduo castanho foi seco in vacuo. A mistura foi então purificada por CLAP preparativa numa Waters Prep 500, utilizando-se duas colunas de sílica gel em série e hexano: :acetato de etilo (3:1) como eluente. A fracção anterior do material parcialmente transformado foi tomada e evaporada para produzir 2,41 g (32%) de isómero de 3-acetiloximetil-7 c(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0_7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo puro sob a forma dum óleo amarelo. ¹H RMN (CDC13): S ⁶,45 (4-H, br, s), 5,05 (2-H, br s), 4,90 (7-H, d, J = 2), 4,65 (6-H, d, J = 2), 4,60 (CCH^OAc, t, J = 13 Hz), 3,52 (OCH3, s), 203 (O₂CCH₃, s), 1,50 (s, OCÍCH^).

A recolha do remanescente do material e evaporação produziram 3,66 g (49 %) duma mistura 1:1 dos isómeros 2-eno e 3-eno sob a forma dum óleo amarelo que pode ser reutilizado na reacção.

Etapa B: Preparação de 3-hidroximetil-7 oc'-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-3-eno-2-carboxilato

A uma solução de 8,88 g (25,9 mmoles) de 3-acetiloximetil-7 o( -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0 7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo em isopropanol (100 ml) adicionou-se Ti(O-ipr)^ (5,4 ml). A mistura reaccional foi aquecida até ao refluxo sob N₂ e foi monitorizado por CCF /“sílica gel, utilizando-se hexano:acetato de etilo (1:1); material de partida Rf 0,75, produto RF 0,5 7 até o material de partida ter acabado de desaparecer. A reacção foi concentrada e o resíduo foi dissolvido em acetato de etilo e lavado com Η,^ΡΟ^ aquoso 1N (50 ml). A camada aquosa foi então lavada em contra-corrente com acetato de etilo (50 ml) e as camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com água (50 ml) e salmoura (50 ml). A camada orgânica foi seca sobre MgSO^ e concentrada para produzir um óleo amarelo que foi purificado utilizando um Waters Prep 500 com hexano:acetato de etilo (2:1) como eluente para produzir 4,76 g (61%)

dum óleo amarelo claro que em repouso cristalizou em 3-hidroximetil-7 &<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0_7oct-3-eno-carboxilato de t-butilo. RMN (CDCl^): S 6,32 (4-H, m); 5,02 (2-H, s); 4,99 (6-H, J = 1 Hz), 4,60 (7-H, d J = 1 Hz); 4,22 (CCH₂OH, br s); 3,53 (OCH₃, s); 2,60 (OH, br exch.) ; 1,50 (-CO₂C(CH₃)₃,s).

EXEMPLO 9

3-(3-/~Hidroxicarbonil)propanoiloximetil-7 ff-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Etapa A: Preparação de 3-(3-/hidroxicarbonil7propanoiloximetil-7o(· -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-3-enc-2-carboxilato de t-butilo

Uma mistura de 3-hidroximetil-7 =\-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclc/~4.2.0 7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo (602 mg, 2,0 mmoles) e anidrido succínico (300 mg, 3,0 mmoles) foi dissolvido em tetraidrofurano secc (4 ml) sob azoto à temperatura ambiente, e então adicionou-se com agitação 4-/^-N,N-dimetilamino7piridina (300 mg, 2,5 mmoles). Um sólido começou a separar-se pouco tempo depois da misturação. A mistura foi deixada agitar-se durante 15 horas, a seguir adicionou-se bicarbonato de sódio aquoso saturado a 50% (10 ml, e a mistura foi extraída com éter (2x20 ml). Os extractos de éter combinados foram lavados com NaHCOg sat. aq. a 50% (10 ml), a seguir os extractos aquosos foram combinados e acidificados para pH 2,5 (utilizando-se Η₃PO1,0 M), a solução turva resultante foi extraída corr acetato de etilo (2x30 ml), depcis as camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura saturada (25 ml) e foram secas sobre Na₂SO₄. 0 solvente foi removido in vacuo para produzir 3-hidrcxicarboniletil-carboniloximetil-7 -metcxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclc/~4.2.0 7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo sob a forma dum óleo amarelo. Este material era suficientemente puro para ser passado para a etapa seguirte .

Etapa B: Preparação de 3-(3-/^_hidroxicarbonil7propanoiloximetil )-7 <X -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/'4 .2.07oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo produto em bruto de 3-hidroxicarboniletilcarboniloximetil-7o^ -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo da reacção anterior foi dissolvido em cloreto de metileno (10 ml) e arrefecido a 0° sob . 0 ácido metacloroperbenzóico (1,0 g, 5 mmoles, com 85% de pureza) foi adicionado todo de uma vez, e após agitação durante 5 minutos, o banho de arrefecimento foi removido. A agitação continuou durante 5 horas, a seguir a mistura reaccional foi filtrada e o bolo de filtragem foi lavado com gelo-CHgC^ frio (5 ml). Os filtrados combinados foram evaporados e o resíduo foi dissolvido em Cf^C^/EtOAc (3:1) (8 ml) e cromatografado sobre sílica gel (4x/~20 cm x x 20 cm7 2000 μ de sílica gel GF, utilizando-se HOAc a 1% em 1/1 EtOAc/Hex como eluente), as faixas de Rf 0,3 foram removidas, combinadas e eluídas com HOAc a 1% em EtOAc, e o eluente foi evaporado para produzir um óleo transparente. Este material foi liofilizado a partir de benzeno para remover HOAC e depois foi cristalizado a partir de éter/hexano para produzir 502 mg de produto 3-(3-/hidroxicarbonil7propanoiloximetil)-7 of-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo (58%) p.f. 112-113°.

EXEMPLO 10

3-Hidroxicarbonilmetilaminocarboniloximetil-7 o('-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2,0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Etapa A: Preparação de t-butil-3-(p-metoxibenziloxicarbonilmetilaminocarboniloximetil-7 o(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0 7oct-3-eno-2-carboxilato

A uma solução de 3-hidroximetil-7 ‘Y-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2,0_7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo (602 mg, 2,0 mmoles) em cloreto de metileno (5 ml) adicionou-se N,N¹-carbonil diimidazole (324 mg, 2,0 mmoles). A solução resultante foi agitada à temperatura ambiente durante trinta minutos, depois o solvente foi removido in vacuo e o resíduo foi dissolvido em N,N-dimetilformamida (5 ml). Então, adicionaram-se cloridrato de p-metoxibenziléster de glicina (693 mg, 3,0 mmoles) e 4-(N,N-dimetilamino)piridina (366 mg, 3,0 mmoles), e a mistura resultante foi agitada durante 18 horas. A mistura reaccional foi então deitada em água (30 ml) e extraída com acetato de etilo (2x30 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (20 ml.) e salmoura saturada (20 ml), foram secas sobre sulfato de sódio e o solvente foi removido para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia placas de sílica gel GF de 2000 ji (4x/”20 cm x 20 cm7, reveladas em acetato de etilo/hexano /1/1 7· As faixas a Rf 0,55 foram removidas e eluídas com acetato de etilo para produzirem 508 mg (51%) de t-butil-3-(p-metoxibenziloxi)-carbonilmetilaminocarboniloximeti1-7 o(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0 7oct-3-eno-2-carboxilato. RMN (CDCl^Hc) 7,25-6,85 ^(C6-4^OCÍi3' ^d' ^d' ^J = ^9Hz)í ⁶'^{40 ( C}=^C<H)S-, br. s) ; 5,40 (=NH, br, s); 5,18 (-CgH₄-CH₂-, s); 5,05 (-CH-CH=CH), s); 4,90 (C-6H, d, J = 2Hz); 4,70 (C-7H, d, J = Hz ) ; 4,65 (C-3-CH₂, t, J = 12Hz); 3,95 (-HN-CH₂CO-, d, J = 6 Hz); 3,80 (-CgH₄-OCH₃, s); 3,55 (C-7-OCH₃, _s); 1,55 /”-COO-C(CH₃)₃_7.

Etapa B: Preparação de 3-(p-metoxibenziloxi)carbonilmetilaminocarboniloximetil-7 õ(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Seguindo práticamente os mesmos procedimentos descritos no Exemplo 9, Etapa B, 278 mg (0,56 mmoles) de t-butil-3-(p-metoxibenziloxi)carbonilmetilaminocarboniloximetil-7 o(‘-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/“4.2.0_7oct-3-eno-2-carboxilato foram oxidados em t-butil-3-(p-metoxibenziloxi )carbonilmetilaminocarboniloximetil-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido (226 mg, 76%) sob a forma dum vidro. RMNc5(CDClg) 7,28-6,85 -C_gH₄OCH₃, d, d, J = 9); 5,55 (_CONH-, br t, J = = 6); 5,19 (C-6 ou 7H, d, J = 2); 5,10 (-CgHg-C^O-; s) ; 4,85 (C-3-CHO-), d de cl, J = 12, 26); 3,90 (C₂-CH₂, -4N-CH₂COO-, m); 3,79 (-CgH₄~OCH₃, s); 3,55 (C-7(OCH₃), s);

1,55 (-CO₂C(CH₃)₃, s).

Etapa C: Preparação de 3-hidroxicarbonilmetilaminocarboniloximetil-7κ -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Uma mistura de ácido trifluoroacético e anisole (5:1) foi arrefecida a 0^o, e depois adicionou-se um mililitro desta solução a um frasco sob N₂ a 0^o, contendo 3-(p-metoxibenziloxi)carbonilmetilaminocarboniloximetil-7 ΰ(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo (105 mg, 0,2 mmole). A mistura foi agitada vigorosamente com arrefecimento até se tornar homogénea. A agitação continuou durante 2 minutos e depois o frasco foi ligado por meio dum tubo de gás a uma bomba de vácuo, a fim deremover o solvente o mais depressa possível, continuando-se a efectuar o arrefecimento. O arrefecimento foi mantido até a mistura reaccional se tornar visivelmente viscosa. O banho de arrefecimento foi removido e a bombagem continuou durante uma hora, depois o resíduo foi dissolvido

em cloreto de metileno (um ml) e cromatografado placas de 20x20 cm de sílica gel GF 2000 μ, utilizando-se HOAC em etilacetato/hexano (1/1) como eluente). A faixa de Rf 0,25 foi removida e eluída com HOAC a 1% em acetato de etilo. O solvente foi removido e o resíduo foi liofilizado a partir de benzeno para remover o HOAC residual para obter 3-hidroxicarbonilmetilaminocarboniloximetil-7 p(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2,0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo sob a forma dum sólido amorfo (36 mg, 44% de rendimento), ^H RMN (CDClg); & 6,95 (CO₂H, br exch.); 5,60 (-CONHCH₂-, br exch.); 5,20 (C_g ou C_?H, J = 2);

H

5,90 (C₃(CH₂O-C-N-) br d de d, J = 12, 22) 5,78 (C_g ou C_? H, br s) 3,90 (C₄-H e HNCH₂COOH, m); 3,55 (C_?(OCH₃), s); 1,55 (co₂c(ch₃)₃,s).

EXEMPLO 11

3-Hidroxicarbonil-7 c<'-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Etapa A: Preparação de 3-f ormil-7 0^·-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo

A um frasco de 100 ml de recolha, sob azoto, adicionou-se uma solução de 3-hidroximetil-7 o<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.0_7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo (300 mg, 1,0 mmoles) em acetona (26 ml recentemente destilados a partir de Reagente de Jones). A solução foi então arrefecida até 0^o, e adicionou-se lentamente, Reagente de Jones (1,0 mmoles, 372 /11 duma solução 2,7 M) com agitação. Deu-se uma imediata mudança de cor de amarelo para verde com formação de precipitado. Depois da adição estar completa, a agitação continuou durante dez minutos, depois

foi deitada em água (100 ml) e agitada. A solução verde resultante foi extraída com acetato de etilo (4x30 ml) e os extractos orgânicos combinados foram lavados com salmoura e depois foram secos com sulfato de sódio. O solvente foi removido para produzir um óleo amarelo (264 mg) que foi purificado por cromatografia (placa de sílica gel GF prep. 2000 μ /”20x20 cm7, utilizando-se acetato de etilo:hexano (1:1) como eluente). A faixa de Rf 0,5 foi removida para produzir 214 mg (72%) de 3-formil-7 ^-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0 7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo sob a forma dum ~ ~ ]_ óleo transparente que solidificou com arrefecimento. H RMN (CDC1₃): S ⁹,40 (-CHO, s); 7,55 (C₄~H, d, J = 1 Hz); 5,30 (C₆ ou C_?-H, d, J = 1); 5,08 (C₂~H, d, J = 1); 4,65 (Cg ou C_?-H, d, J = 1); 3,55 (C_?(OCH₃), s); 1,55 (CO₂C(CH₃)₃m s). Etapa B: Preparação de 3-hidroxicarbonil-7 oç-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0_7oct-3-eno-2-carboxilato-5,5~dióxido de t-butilo

Colocou-se num frasco de 100 ml de recolha sob azoto uma solução de 3-formil-7o^-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0_7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo (425 mg, 1,42 mmoles) em acetona destilada a partir de Reagente de Jones (35 ml). A esta solução adicionou-se Reagente de Jones (1,6 ml duma solução 2,7 M, 4,2 mmoles) gota a gota durante 15 minutos. A agitação continuou durante três horas, depois a reacção foi diluída com água (100 ml) e a solução verde resultànte foi extraída com acetato de etilo (2x75 ml). Os extractos orgânicos combinados foram lavados com salmoura saturada (50 ml) e secos sobre sulfato de magnésio. 0 solvente foi removido in vacuo para produzir um óleo amarelo que foi purificado por cromatografia de placa de sílica gel prep. (2x2000 p, utilizando-se HOAC a 1% em acetato de etilo/hexano /”1/1 7. A faixa de Rf 0,3 é removida e eluída para produzir 196 mg (44%) de 3-hidroxicarbonil-7 o(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0_7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo sob a forma dum óleo transparente. RMN (CDC1₃): 9,90 (CO₂H, br s, exch.) ; 7,72 (C₄~H, d, J = 1,5 Hz); 5,3 (C_g ou C_?-H, d, J = 1), 4,95 (C₂~H, br, s); 4,65 (Cg ou C_?-H, d, J = 1); 3,55 (Cg(OCH₃), s); 1,50 (CO₂C(CH₃)₃, s) .

Seguindo-se substâncialmente o mesmo processo que o descrito no Exemplo 9, Etapa B, oxidou-se 3-hidroxicarbonil-7 ^:\-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo (196 mg, 0,62 mmoles) para produzir 96 mg (46%) de 3-hidroxicarbonil-7a^-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo sob a forma dum sólido branco. ^XH RMN (CDC1₃):S 8,65 (CO₂H, br, s); 5,30 (Cg ou C_?-H, d, J = 3 Hz); 5,05 (Cg ou C^-H, br, d, J = 3); 4,05 (C^-H^, br, s); 3,55 (C_?(OCH₃), s); 1,58 (CO₂C(CH₃)₃,s) .

EXEMPLO 12 3-Clorometil-7Af-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Etapa A: Preparação de 3-cloro-metil-7e<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-3-eno-2-carboxilato de tbutilo

A uma solução de 0,9 g (3 mmoles) de 3-hidroximetil-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0_7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo em 20 ml de tetrahidrofurano adicionou-se 1 ml de piridina. Adicionou-se cloreto de tionilo (0,5 ml) gota a gota durante 5 minutos. Após agitação durante 0,5 horas, a mistura de reacção foi deitada em água gelada e foi extraída com acetato de etilo. O extracto foi lavado com solução de bicarbonato de sódio a 7%, e salmoura e foi seco sobre sulfato de sódio. O filtrado concentrado foi submetido a cromatografia flash com acetato de etilo a 10%-hexano para produzir 0,626 g (65% de rendimento de 3-clo9

rometil-7A -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^_4.2.0 /oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo sob a forma dum sólido amarelo pálido, p.f. 85°.

Etapa B: Preparação de 3-clorometil-7o(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Seguindo-se substâncialmente os mesmos procedimentos descritos no Exemplo 9, Etapa B, 0,32 g (1 mmole) de 3-clorometil-7 o(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2,0_7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo foi oxidado para produzir 0,301 g (86% de rendimento) de 3-clorometil-7 <X-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo, p.f. 132°C.

EXEMPLO 13

3-Feniltio (ou 3-fenilsulfonil)metil-7-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Etapa A: Preparação de 3-feniltiometil-7^-metoxi-S-oxo-S-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Uma solução de 35 mg (0,24 mmole) de tiofenóxido de potássio em 0,5 ml de água foi adicionada a uma solução de 83 mg (0,24 mmole) de 3-clorometil-7 cx -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo em 2 ml de acetona. Após agitação durante 40 horas, a mistura de reacção foi concentrada in vacuo. O resíduo foi dissolvido em acetato de etilo e deitado numa solução de bicarbonato de sódio a 7%. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de sódio. O filtrado concentrado foi cromatogra

-73fado sobre uma placa de sílica gel preparativa, utilizando-se acetato de etilo a 20%-hexano para se obter 66 mg (66% de rendimento) de 3-feniltiometil-7o(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de tbutilo, RMN (CDClg): S 1,45 (s, 9), 3,46 (s, 3), 3,58 (d, 1, 14 Hz), 3,62 (d, 1, 18 Hz), 4,08 (d, 1, 18 Hz), 4,18 (d, 1, 14 Hz), 4,4 (bs, 1), 5,02 (d, 1, 2 Hz), 7,1-7,4 (m, 5). (continuou)

Etapa B: Preparação de 3-fenilsulfinilmetil ou 3-fenilsulfonilmetil-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Adicionou-se uma solução de 40 mg (90%, 0,21 mmoles) de ácido m-cloroperbenzóico em 1 ml de diclorometano a uma solução de 60 mg (0,14 mmole) de 3-feniltiometil-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo, ao mesmo tempo que se arrefecia num banho de gelo. A mistura reaccional foi agitada durante 0,5 hora e foi aquecida até à temperatura ambiente. A solução foi deitada numa solução de bicarbonato de sódio a 7% contendo um excesso de sulfito de sódio e foi extraída com diclorometano. As camadas de diclorometano combinadas foram lavadas com salmoura e secas sobre sulfato de sódio. O filtrado concentrado foi cromatografado sobre uma placa de sílica gel preparativa com acetato de etilo a 50%-hexano para produzir duas faixas. A faixa menos polar produziu 32 mg (50% de rendimento) de 3-fenilsulfonilmetil-7 &(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo. RMN (CDClg): £ 1,46 (s, 9), 3,52 (s, 3), 3,81 (d, 2, 14 Hz), 3,82 (d, 2, 18 Hz), 4,32 (d, 1, 18Hz), 4,74 (d, 1, 14 Hz), 4,76 (bs, 1), 5,09 (d, 1, 2 Hz), 7,27,9 (m, 5).. A faixa mais polar produziu 27 mg (44% de rendimento) de 3-fenilsulfinilmetil-7íY-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo. RMN (CDC1₃):<5 1,51 (s, 9), 3,53 (s, 3), 3,3-4,1

7,3-7,7 (m, 5).

EXEMPLO 14

3-Metoximetil-7 (X-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/''4.2 .0_7—oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Agitou-se uma solução de 30 mg (0,09 mmoles) de 3-clorometil-7<V-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo em 1 ml de metanol , à temperatura ambiente durante 16 horas. A solução foi concentrada in vacuo e o resíduo foi cromatografado sobre uma coluna pequena de sílica gel com acetato de etilo a 20%-hexano para se obterem 21 mg de 3-metoximetil-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2,0_7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo. RMN (CDC1₃): 6 3,25 (s, 1,5) 3,39 (s, 1,5),

6,23 (bs, 0,5).

Seguindo-se substâncialmente o mesmo processo descrito no Exemplo 9, Etapa B, oxidaram-se 21 mg de 3-metoximetil-7 °(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0 7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo para se obterem 11 mg (34% de rendimento) de 3-metoximetil-7<\ -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo. RMN (CDC1₃): 6 1,53 (s, 9), 3,27 (s, 3), 3,53 (s, 3), 3,72 (ABq, 2, 17 Hz), 4,14 (s, 2), 4,6 (bs, 1), 5,05 (d, 1, 2 Hz).

EXEMPLO 15

3-Metil-7 sÇ-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2

-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

A uma solução de5 g (14,0 mmoles) de 3A

-acetiloximetil-7 o(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo em 100 ml de etanol adicionaram-se 15 g de 10% de paládio sobre carbono, sob atmosfera de azoto. A solução foi hidrogenada num aparelho de Parr durante 3 horas. A mistura da reacção foi filtrada e o catalizador foi lavado completamente com metanol quente. O filtrado e as lavagens foram combinadas e concentradas in vácuo . O resíduo foi submetido a cromatografia flash, utilizando-se 20% de etilacetato-hexano para se obterem 1,97 g (47% de rendimento) de 3-metil-7 °<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo. RMN (CDClg): S 1,53 (s, 9H), 2,01 (s, 3), 3,27 (ABq, 2, 18 Hz), 3,52 (s, 3), 4,4 (d, 1, 2 Hz), 4,6 (d, 1, 2 Hz).

Seguindo-se substâncialmente o mesmo processo descrito no Exemplo 1, Etapa C, oxidaram-se 11 mg (0,04 mmole) de t-butil-metil-7 <%. -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato para se obterem 6 mg (48% de rendimento) de 3-metil-7o/-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo. RMN (CDClg): 8 1,53 (s, 9), 2,0 (s, 3), 3,53 (s, 3), 3,6 (ABq, 2, 12 Hz), 4,54 (bs, 1), 5,05 (bs, 1).

EXEMPLO 16 m-Metoxicarbonilbenzil-3-acetiloximetil-7^,õC-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido

Etapa A: Preparação de Ν,Ν¹-diisopropil-O-(m-metoxicarbonilbenzil)-isoureia

Uma mistura de 4,75 g (28,6 mmoles) de álcool m-metoxicarbonilbenzílico e 3,6 g (28,6 mmoles) de N,N'-diisopropilcarbodiimida foi agitada com 50 mg (0,51 mmoles) de cloreto cúprico à temperatura ambiente durante 24 ho-76-

ras. A reacção foi então diluida com 10 ml de hexano e eluída através duma coluna pequena de alumina neutra com acetato de etilo a 20%-hexano para produzir 8,0 g (96%) de N,N-diisopropil-O-(m-metoxicarbonilbenzil)-isoureia sob a forma dum óleo incolor.

Etapa B: Preparação de m-metoxicarbonil-benzil-3-acetiloximetil-7o^-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2,0_7oct-2-eno-2-carboxilato

Uma solução de 1,0 g (3,4 mmoles) de N,Ν'-diisopropil-O-(m-metoxicarbonilbenzil)-isoureia e 1,0 g (3,4 mmoles) de ácido 3-acetiloximetil-7 t><-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilico em 2,0 ml de tetrahidrofurano (THF) foi agitada durante 24 horas à temperatura ambiente. A reacção foi então arrefecida até -10°C foi filtrada e concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia de flash utilizando-se um gradiente de solvente de 35 a 40% de acetato de etilo-hexano, para produzir 300 mg (20%) de 3-acetiloximetil-7 f<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo-/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de m-metoxicarbonilbenzilo sob a forma dum óleo, RMN (CDCl^);^ 2,04 (s, 3), 3,40 (ABq, 2, 18 Hz) 3,50 (s, 3), 3,87 (s, 3), 4,47 (d, 1, 2 Hz), 4,63 (d, 2, 2 Hz), 4,78 (ABq, 2, 13 Hz), 5,27 (ABq, 2, 13 Hz), 7,2-7,6 (m, 2), 7,7-8,0 (m, 2).

Etapa C: Preparação de m-metoxicarbonilbenzil-3-acetiloximetil-7 0<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido

Seguindo-se o mesmo processo descrito no Exemplo 1, Etapa C, oxidaram-se 250 mg (0,57 mmoles) de m-metoxicarbonilbenzil-3-acetiloximetil-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato em 210 mg (78%) de 3-acetiloximetil-7o<^,-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/“4.2,0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de M-metoxicarbonilbenzilo, RMN (CDCl^); £ 2,03 (s, 3), 3,52 (s, 3), 3,87 (ABq, 2, 19 Hz), 3,90 (s, 3), 4,67 (d, 1, 2 Hz), 4,80

-ΊΊ(ABq, 2, 14 Hz), 5,11 (d, 1, 2 Hz), 5,30 (br, s, 2), 7,1-7,6 (m, 2), 7,8-8,1 (m, 2).

Seguindo-se substâncialmente o mesmo processo que o descrito anteriormente, mas substituindo N,N'-diisopropil-O-(p-(p-metoxibenziloxi)carbonilbenzil)isoureia por N,N¹-diisopropil-O-(m-metoxicarbonilbenzil)-isoureia ali utilizada, preparou-se 3-acetiloximetil-7 ^-πΐθΐοχϊ-8-οχο-5-tia-l-azabiciclo/“4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de p-(p-metoxibenziloxi)carbonilbenzilo sob a forma dum óleo. RMN (CDC1₃):6 2,02 (s, 3), 3,42 (ABq, 2, 19 Hz), 3,53 (s, 3), 3,73 (s, 3), 4,44 (d, 1, 2 Hz), 4,62 (d, 1, 2 Hz), 4,80 (ABq, 2, 13 Hz), 5,27 (ABq, 2, 13 Hz), 6,7-8,1 (m, 8).

Subsequentemente, seguindo-se o processo descrito anteriormente, oxidaram-se 80 mg.(0,15 mmole) do éster anterior para produzir 40 mg (47%) de 3-acetiloximetil-7 e< -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 Joct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de p-(p-metoxibenziloxi)carbonilbenzilo sob a forma dum óleo; RMN (CDClg): d 2,03 (s, 3), 3,53 (s, 3), 3,81 (ABq, 2, 18 Hz), 4,4-5,2 (m, 4), 5,26 (br s, 2), 6,7-8,1 (m, 8).

EXEMPLO 17

3-Acetiloximetil-7 eó-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de p-hidroxicarbonilbenzilo

Uma solução de 35 mg (0,061 mmoles) de 3-acetiloximetil-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de p-(p-metoxibenzil)oxicarbonilbenzilo em 0,8 ml de ácido trifluoroacético foi agitada com 0,2 ml de anisole a 0°C durante 15 minutos. A reacção foi concentrada in vacuo e o resíduo foi purificado so-78-

bre uma placa de sílica preparativa 1000 μ, utilizando-se ácido acético a 1% em 50% de acetato de etilo-hexano como solvente, para produzir 24 mg (87%) de 3-acetiloximetil-7°(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de p-hidroxicarbonilbenzilo sob a forma dum sólido branco, RMN (CDCl^): S 2,02 (s, 3), 3,53 (s, 3), 3,83 (ABq, 2, 10 Hz), 4,67 (br s, 1), 4,83 (ABq, 2, 14 Hz), 5,12 (d, 1, 2 Hz), 5,33 (br, s, 2), 7,68 (ABq, 4, 8 Hz).

EXEMPLO 18

3-Acetiloximetil-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2,0_7 -oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de etoxicarbonilmetilo

Uma solução de 1,0 (3,5 mmoles) de ácido 3-acetiloximetil-7 ^-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.07oct—2-eno-2-carboxílico e 4 ml de diazoacetato de etilo em 25 ml de cloreto de metileno foi agitada com 10 mg de dímero de acetato de ródio (II) a 35°C durante 30 minutos. A reacção foi então concentrada in vacuo e o resíduo foi purificado por cromatografia de flash sobre sílica gel, eluindo-se com 40-50% de acetato de hexilo-hexano. As fracções contendo o produto foram combinadas, evaporadas e recromatografadas utilizando-se 10% de acetato de etilo-cloreto de metileno como eluente, para produzir 250 mg (34%) de 3-acetiloximetil-7<i( -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.0 7-oct-2-eno-2-carboxilato de etoxicarbonilmetilo, RMN (CDCl^) 2,37 (t, 3, 7 Hz), 2,06 (s, 3), 3,43 (ABq, 2, 19 Hz), 3,53 (s, 3), 4,20 (q, 2, 7 Hz), 4,43 (d, 1, 2 Hz), 4,63 (d, 1, 2 Hz), 4,73 (ABq, 2, 16 Hz), 4,87 (ABq, 2, 13 Hz).

Seguindo-se o mesmo processo que o descrito no Exemplo 1, Etapa C, oxidaram-se 250 mg (0,67 mmoles) do éster de etoxicarbonilmetilo resultante para se produzirem 190 mg (69%) de 3-acetiloximetil-7<< -metoxi-8-oxo-5-

-tia-l-azabiciclo/'4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de etoxicarbonilmetilo, RMN (CDClg); b 1,29 (t, 3, 7 Hz), 2,07 (s, 3), 3,57 (s, 3), 3,89 (ABq, 2, 18 Hz), 4,18 (t, 2,

Hz), 4,74 (m, 3), 4,89 (ABq, 2, 14 Hz), 5,11 (d, 1, 2 Hz).

EXEMPLO 19

3-Acetiloximetil-7 °(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butoxicarbonilmetilo

Uma solução de 500 mg (1,7 mmoles) de ácido 3-acetiloximetil-7 c<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxílico em 2 ml de N,N-dimetilacetamida foi agitada com 300 mg (3,4 mmoles) de bicarbonato de sódio e 525 mg (3,4 mmoles) de cloroacetato de t-butilo, à temperatura ambiente durante 16 horas. A reacção foi diluída com água e extraída com cloreto de metileno. A camada orgânica foi lavada com água e solução saturada aquosa de cloreto de sódio e foi evaporada in vacuo. O resíduo foi cromatografado sobre sílica gel para produzir 20 mg do éster de t-butoxicarbonilmetilo sob a forma duma mistura dos isómeros 3-eno e 2-eno, que foi oxidada directamente, seguindo-se o processo descrito no Exemplo 1, Etapa C, para produzir 7 mg de 3-acetiloximetil-7 o( -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.07oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butoxicarbonilmetilo sob a forma dum óleo, RMN (CDCl^); o 1,48 (s, 9), 2,07 (s, 3), 3,51 (s, 3), 3,85 (AB, 2, 18 Hz), 4,5-5,0 (m, 5), 5,11 (d, 1, 2 Hz) .

EXEMPLO 20

3-Acetiloximetil-7-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.07oct-2-eno-2-carboxamida-5,5-dióxido de N-benzil-N-metilo

Uma solução de 2,0 g (7,0 mmoles) de ácido 3-acetiloximetil-7 ^'-metoxi-S-oxo-S-tia-l-azabiciclo/4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxílico em 10 ml de dioxano e 20 ml de acetona foi agitada com 1,0 g (7,0 mmoles) de cloroformato de isobutilo e 600 pl (7,0 mmoles) de piridina a -15°C. Ao fim de 20 minutos, adicionaram-se 2,5 g (21 mmoles) de N-metilbenzilamina e a reacção foi agitada a -15°C durante 1 hora e depois foi deixada aquecer até à temperatura ambiente durante 2 horas. A reacção foi temperada com ácido clorídrico diluido e extraída em cloreto de metileno. A camada orgânica foi lavada com solução saturada aquosa de bicarbonato de sódio e solução saturada aquosa de cloreto de sódio, foi seca sobre sulfato desódio e evaporada. 0 resíduo foi cromatografado sobre sílica gel para produzir 280 mg (10%) de N-benzil-N-metil-3-acetiloximetil-7 °<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxamida, RMN (CDCl^): 1,97 e 2,00 (s, 3), 2,83 e 2,90 (s, 3), 3,0 a 3,7 (m, 5), 4,3 a 4,8 (m, 6), 7,3 (br, s, 5).

Seguindo-se processos similares aos descritos no Exemplo 1, Etapa C, oxidaram-se 274 mg (0,71 mmoles) de 3-acetiloximetil-7 <<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/4.2.0 7oct-2-eno-2-formamida de N-benzil-N-metilo para produzir 170 mg (57%) de 3-acetiloximetil-7o/-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxamida-5,5-dióxido de N-benzil-N-metilo, RMN (CDClg): 1,97 e 2,00 (s, 3),

2,78 e 2,89 (s, 3), 3,4-4,1 (m, s), 4,3-4,8 (m, 5), 5,10 (d, 1, 2 Hz), 7,22 (br s, 5).

EXEMPLO 21

3-Acetiloximetil-7 \-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.07 oct-2-eno-2-carboxamida-5,5-dióxido de N-(t-Butoxicarbonil)metilo

Uma solução de 1,0 g (3,4 mmoles) de ácido 3-acetiloximetil-7 <-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxílico em 25 ml de cloreto de metileno foi agitada com 1,1 g (5,1 mmoles) de diciclohexilcarbodiimida e 450 mg (3,4 mmoles) de glicinato de terc-butilo à temperatura ambiente durante 4 horas. A reacção foi concentrada in vacuo e o resíduo foi eluido através duma coluna pequena de sílica gel utilizando-se 50-60% de acetato de etilo-hexano. As fracções contendo a amida resultante foram combinadas e evaporadas. O resíduo foi purificado adicionalmente por cromatografia sobre sílica gel para produzir 230 mg (17%) de 3-acetiloximetil-7 ^-metoxi-S-oxo-S-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxamida de N-(t-butoxicarbonil)metilo, RMN (CDC1₃): $ 1,46 (s, 9), 2,07 (s, 3), 3,1-3,6 (m, 2), 3,50 (s, 3), 3,8-4,1 (m, 2), 4,47 (br s, 1), 4,63 (br s, 1), 4,87 (ABq, 2, 13 Hz), 7,4 (br s, 1).

Seguindo-se processos semelhantes aos descritos no Exemplo 1, Etapa C, oxidou-se 3-acetiloximetil-7 o<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxamida de N-(t-butoxicarbonil)metilo para produzir 60 mg de 3-acetiloximetil-7-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxamida-5,5-dióxido de N-(t-butoxicarbonil)metilo, RMN (CDC1₃): £ 1,47 (s, 9), 2,07 (s, 3), 3,50 (s, 3) 3,5-4,1 (m, 4), 4,4-4,9 (m, 3), 5,07 (d, 1, 2 Hz), 7,3 (br s, 1) .

'

EXEMPLO 22

3-Acetiloximetil-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de benzílo

Adicionou-se ácido trifluoroacético (5 ml) a 316 mg (0,92 mm) de 3-acetiloximetil-7^e('-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo com arrefecimento num banho de gelo. Após agitação durante 0,5 horas a 0°C, evaporou-se ácido trifluoroacético in vacuo. O resíduo foi diluído com diclorometano e lavado com água fria e salmoura. A solução de diclorometano foi seca sobre sulfato de sódio. O ácido 3-acetiloximetil-7 cx -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxílico em bruto foi obtido após concentração do filtrado. Este foi dissolvido em 5 ml de tetrahidrofurano e adicionou-se N,N‘-diisopropil-O-benzil-isoureia (0,33 ml, 2,5 mmoles). Após agitação durante 80 horas, a mistura de reacção foi deitada numa coluna de bicarbonato de sódio a 7% e foi extraída com acetato de etilo. 0 extracto orgânico combinado foi lavado com salmoura e foi seco sobre sulfato de sódio. O filtrado concentrado foi submetido a cromatografia flash , utilizando-se 50% de acetato de etilo-hexano para produzir 259 mg (77% de rendimento) de 3-acetiloximetil-7 o<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7°ct-2-eno-2-carboxilato de benzilo, sob a forma duma mistura dos isómeros/\2 e £3. RMN (CDCl^): á 1,96 e 1,98 (s, 3), 3,4 (ABq, 0,8, 17 Hz), 3,43 (s, 1,8), 3,47 (s, 1,2), 4,2-5,3 (m, 6,6), 6,34 (bs, 0,6), 7-7,4 (m, 5).

Seguindo-se substâncialmente o mesmo procedimento que o descrito no Exemplo 1, Etapa C, oxidaram-se 259 mg (0,69 mmoles) de 3-acetiloximetil-7<\-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de benzilo para se obterem 226 mg (80% de rendimento) de 3-acetiloximetil-7 o<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de benzilo sob a forma dum óleo espesso. RMN (CDClg): ($2,01 (s, 3), 3,49 (s, 3),3,8 (ABq, 2, 18 Hz)

4,6 (bs, 1), 4,78 (ABq, 2, 13 Hz), 5,07 (d, 1, 2 Hz), 5,17 (ABq, 2, 11 Hz), 7,1-7,4 (m, 5 H).

EXEMPLO 23

3-Acetiloximetil-7o<-etil-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo

Um frasco de fundo redondo de 3 tubuladuras de 2 litros equipado com 2 funis de gotejamento foi carregado com 200 ml de THF e arrefecido até -78° sob . Um funil de gotejamento foi carregado com uma solução de 6,33 g (15,3 mM) de 3-acetiloximetil-7-diazo-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo em 300 ml de THF. O outro funil foi carregado com 32 ml de trietilborano-1M em THF, 1,2 ml de e 300 ml de THF. Os funis foram ajustados de maneira a que os seus conteúdos fossem adicionados ao frasco a 2,5 ml/min e a temperatura da mistura de reacção foi mantida a -78°. Depois da adição, o banho de arrefecimento foi removido e a mistura de reacção foi deixada aquecer. Quando a temperatura atingiu -45°C, adicionaram-se 6,67 ml de H2O2 ^a 30%. A -15°, a mistura de reacção foi lavada com 300 ml de salmoura, e a camada orgânica foi diluídacom 300 ml de CH^C^, lavada com 300 ml de salmoura, seca sobre MgSO^, filtrada e extraída para produzir 7,46 g de óleo amarelo, que foi cromatografado sobre uma coluna flash com CHClg/EtOAc (25:1) para produzir 1,289 g (19%) de t-butil-3-acetil-oximetil-7 *(-etil-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0Joct-2-eno-2-carboxilato, uma mistura dos isómeros < e . RMN (CDC1₃): £ 1,08, t (J=8Hz), 3H; 1,50, s, 9H; 1,8, br, qt, 2H; 2,05, s, 3H; 3,1, brm, 1H; 3,4, d, 2H; 4,35, d (J=2Hz), 1H; 4,82, AB qt (J=12, 6Hz) 2H.

EXEMPLO 24

3-Acetiloximetil-7 χ-metoxi-4-metil-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5-óxido de t-butilo

Etapa A: Preparação de 3-acetiloximetil-7 o<-metoxi-4-metileno-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5 Ê>-óxido de t-butilo

O tratamento de 3-acetiloximetil-7o(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2. O-Zoct^-eno^-carboxilato-S -óxido de t-butilo sob condições Mannich, (i.e., formaldeído aq. e dimetilamina: HC1 em DMF-dioxano) produziu 3-acetiloximetil-7 -metoxi-4-metileno-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5 -óxido de t-butilo sob a forma duma espuma, RMN (CDCl^):^ 1,60 (9H, s), 2,03 (3H, s), 3,57 (3H, s), 4,50 (1H, d, J=l,5 Hz), 4,68, 5,30, (2H, ABq, J313,5 Hz), 5,01 (1H, d, J=1,5 Hz), 6,33 (2H, s).

Etapa B: Preparação de 3-acetiloximetil-7x'-metoxi-4-metil-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5 ^>-óxido de t-butilo

Uma solução do derivado de 2-metileno obtido na Etapa A (178 mg, 0,56 mmoles) em acetato de etilo (5 ml) foi hidrogenada à pressão atmosférica sobre um excesso de 10% de paládio em carvão. O catalisador foi removido por filtração e o solvente foi removido por rotoevaporação para produzir uma mistura 1:1 dos isómeros 4 c\ e 4β -metilo de 3-acetiloximetil-7 -metoxi-4-metil-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5 β-óxido de t-butilo (170 mg). Os isómeros foram separados por cromatografia preparativa de camada fina sobre sílica gel eluída com 50% de acetato de etilo/hexano (5x). A atribuição da estereoquímica em C-4 foi feita por comparação da diferença dos deslocamentos químicos na H-RMN dos dois isómeros em CDC1₃ e Οθϋθ. O componente de movimento mais rápido foi o isómero 4a^-metilo: óleo; RMN (CDC1₃): & 1,55 (3H, d, J=7,0 Hz), 1,57 (9H, s),

2,10 (3H, s), 3,58 (3H, s), 3,88 (1H, q, J=7,0 Hz), 4,36 (1H, d, J=l,5 Hz), 4,67, 4,87 (2H, ABq, J=13,5 Hz), 4,93 (1H, d,

J=l,5 Hz). 0 segundo componente foi o isómero 4-£<: óleo; RMN (CDC1₃): 1,58 (9H, s), 1,68 (3H, d, J=7,0 Hz), 2,06 (3H, s), 3,56 (3H, s), 3,60 (1H, q, J=7,0 Hz), 4,48 (1H, d, J=l,5 Hz), 4,58, 5,15 (2H, ABq, J=13,4 Hz), 4,91 (1H, d, J=l,5 Hz).

EXEMPLO 25

3-Acetiloximetil-7 oc-metoxi-4-metileno-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

A uma solução agitada de 3-acetiloximetil-7 cK-metoxi-4-metileno-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato de t-butilo (180 mg, 0,48 mmoles) em cloreto de metileno (2 ml) a 0°C adicionou-se ácido m-cloroperbenzóico (109 mg, 0,53 mmoles). Depois de se agitar a suspensão branca à temperatura ambiente durante a noite, adicionou-se cloreto de metileno (25 ml) e a solução foi lavada sucessivamente com solução saturada de bicarbonato de sódio (3x10 ml) e água (2x10 ml). Depois de se secar sobre sulfato de sódio anidro, o solvente foi removido por rotoevaporação para produzir um sólido esbranquiçado que foi purificado por cromatografia de coluna flash sobre sílica gel eluída com 40% de acetato de etilo/hexano para produzir 128 mg (69% de rendimento) de 3-acetiloximetil-7<\-metoxi-4-metileno-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo, p.f. 155-157°C; ¹H RMN (CDClg):^ 1,58 (9H, s), 2,03 (3H, s), 3,56 (3H, s), 4,66, 5,30 (2H, ABq, J=13,5 Hz), 4,96 (1H, d, J=1,5 Hz), 5,21 (1H, d, J=l,5 Hz), 6,16 (1H, d, J=l,5 Hz), 6,53 (1H, d, J=l,5 Hz).

EXEMPLO 26

3-Ãcetiloximetil-7 aç -metoxi-4 -metil-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Oxidou-se 3-acetiloximetil-7 <-metoxi-4 o(-metil-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5^ -óxido de t-butilo da maneira usual, conforme foi descrito no Exemplo 13, para produzir 3-acetiloximetil-7 o( -metoxi-4 -metil-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo sob a forma dum óleo. ¹H-RMN (CDC1₃) :S>1,55 (9H, s), 1,64 (3H, d, J=7Hz), 2,12 (3H, s) , 3,56 (3H, s), 3,56 (1H, q, J=7 Hz), 4,71 (1H, d, J=l,5 Hz), 4,70, 4,86 (2H, ABq, J=13,5 Hz), 5,16 (1H, d, J=l,5 Hz); Espectro de massa de desabsorção de campo, m/e 389.

Oxidou-se da mesma forma 3-acetiloximetil-7 οζ-metoxi-4 o(-metil-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5β> -óxido de t-butilo em 3-acetiloximetil-7 -metoxi-4 í/-metil-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4 .2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo (sob a forma dum óleo). ¹H-RMN (CDC1₃):% 1,55 (9H,s), 1,56 (3H, d, J=7 Hz), 2,05 (3H, s), 3,56 (3H, s), 3,96 (1H, q, J-7Hz), 4,56, 5,23 (2H, ABq, J=13,5 Hz), 4,78 (1H, d, J=l,5 Hz), 5,15 (1H, d, J=l,5 Hz); espectro de massa de desabsorção de campo, m/e 389.

EXEMPLO 27

3-Acetiloximetil-7 o(-metoxi-4-f eniltiometil-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4 .2 .0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Adicionou-se tiofencl (0,02 ml, 0,15 mmoles) a uma solução agitada de 3-acetiloximetil-7 a<-metoxi-4-metileno-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo (60 mg, 0,15 mmoles) em clore87-

to de metileno (1 ml). Após agitação durante 40 minutos, o solvente foi removido por rotoevaporação e o resíduo foi purificado por cromatografia preparativa de camada espessa sobre sílica gel eluída com 30% de acetato de etilo/hexano para produzir 3-acetiloximetil-7 «-metoxi-4-feniltiometil-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxílato-5,5-dióxido de t-butilo sob a forma dum óleo amarelo pálido (38 mg, 50% de rendimento): ^H-RMN (CDCl^): £ 1,53 (9H, s), 2,00 (3H, s), 3,33 (1H, dd, J=15 e 9Hz), 3,51 (3H, s), 3,57 (1H, d, J=15Hz), 3,80 (1H, m), 4,21, 4,40 (2H, ABq, J=12 Hz), 5,10 (2H, br s); espectro de massa de desabsorção de campo, m/e 497.

EXEMPLO 28 ô<-metoxi-3-/^-/^-(1,2,5,6-tetraidro-5, 6-dioxo-2-metil-astriazin-3-il)tio7metil7-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7-oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Uma solução de 32 mg (0,2 mmoles) de

1,2,5,6-tetraidro-5,6-dioxo-3-mercapto-2-metil-astriazina em 1 ml de água foi preparada por adição de 35 mg (0,42 mmoles) de NaHCOg. Adicionou-se uma solução de 70 mg (0,2 mmoles) de 3-clorometil-7 o/-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^_4.2.0 7-oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo. Depois de se agitar durante a noite a mistura de reacção foi concentrada in vacuo. O resíduo foi dividido entre NaHCO^ a 7% e éter. A camada etérea foi extraída com solução de NaHCO^ a 7%. A camada aquosa combinada foi lavada com éter. A camada aquosa foi acidificada para pH 2 na presença de acetato de etilo, utilizando-se HC1 concentrado. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica combinada foi lavada com NaCl saturado e foi seco. O filtrado foi concentrado e o resíduo foi cristalizado a partir de acetato de etilo e éter. Obteve-se 7 c<-metoxi-3-88-

-ΓΓ (1,2,5,6-tetraidro~5,6-dioxo-2-metil-as-triazin-3-il) tio7metil7-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo (76 mg, 80% de rendimento) sob a forma dum sólido amarelo claro. HRMN (CDClg): <5^ 1,58 (s, 9H), 3,58 (s, 3), 3,77 (s, 3H), 3,8-4,5 (m, 5H), 4,74 (bs, 1H), 5,18 (bs, 1H).

EXEMPLO 29 ^/-metoxi-3-/”7“(l-carboximetil-tetrazole-5-il)-tio/~metil7-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7 oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo

Uma solução de 32 mg (0,2 mmoles) de 1-carboximetil-5-mercaptotetrazole em 1 ml de água foi preparada por adição de 35 mg (0,42 mmoles) de NaHCOg. Adicionou-se uma solução de 70 mg (0,2 mmoles) de 3- clorometil-7-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo em 2 ml de acetona. Depois de se agitar durante a noite a mistura de reacção foi concentrada in vacuo. O resíduo foi dividido entre solução de NaHCOg a 7% e éter. A camada aquosa foi neutralizada com HC1 concentrado na presença de acetato de etilo. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica combinada foi lavada com NaCl saturado e foi seca. O filtrado foi concentrado e o resíduo foi triturado com éter para se obterem 70 mg (73% de rendimento) de 7-metoxi-3-/ /”(l-carboximetil-tetrazol-5-il)-tio7metil7-8-oxo-5-tia-1-azabiciclo/ 4.2.0 7oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido de t-butilo sob a forma dum pó branco. HRMN (CDCl^): ò 1,58 (s, 9H), 3,56 (s, 3H), 3,87 (d, J=17 Hz, 1M), 4,05 (d, J=13 Hz, 1H), 4,2 (d, J=17 Hz, 1H), 4,6 (d, J=13 Hz, 1H), 4,75 (s, 1H), 5,16 (ABq, J=16 Hz, 2H), 5,16 (bs, 1M), 6,9 (amplo, 1H).

EXEMPLO 30

N-Metil n t-butoxicarbonilmetil-3-clorometil-7-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7-oct-2-eno-2-carboxilato-5,5-dióxido

A uma solução de 2,6 g (5,8 mmoles) de N-metil-N-t-butoxicarbonilmetil-3-acetiloximetil-7 o/-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7-oct-2-eno-2-carboxamida-5,5-dióxido em 13 ml de 2-propanol adicionaram-se 1,95 ml (6,5 mmoles) de isopropóxido de titânio (IV). A solução foi aquecida num banho a 55°. Ao fim de 1,5 horas, a mistura da reacção cor-de-laranja foi diluída com acetato de etilo e deitada em água. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica combinada foi lavada com água e NaCl saturado e foi seca. O filtrado foi concentrado in vacuo para se obterem 2,06 g de resíduo .

O resíduo foi dissolvido em 20 ml de tetraidrofurano e 1,75 ml de piridina. A solução foi arrefecida num banho de gelo e adicionaram-se 0,58 ml (7,4 mmoles) de cloreto de tionilo. Depois de se agitar durante 20 minutos, a mistura de reacção escura foi diluída com acetato de etilo e deitada em água. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica combinada foi lavada com NaHCO₃ a 7%, água, HC1 1,2 N e NaCl saturado e foi seca. O filtrado foi concentrado. O resíduo foi cromatografado sobre uma coluna flash utilizando-se acetato de etilo a 60%-hexano para se obterem 710 mg (29% de rendimento) de N-metil-N-t-butoxicarbonilmetil-3-clorometil-7^-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7-oct-2-eno-2-carboxamida-5,5-dióxido.

¹H-RMN (CDCl^:^ 1,48 e 1,52 (2s, 9H) , 3,1 e 3,12 (2s, 3H), 3,39 e 3,57 (2S, 3H), 3,6-4,8 (m, 6H), 4,92 (bs, 1H), 5,25 (d, J=2 Hz, 1H).

EXEMPLO 31

N-Metil-N-t-butoxicarbonilmetil-7 Y-metoxi-3//“(l,2,5,6-tetraidro-5,6-dioxo-2-metil-as-triazin-3-il)tio7metil7-8

-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0 7-oct-2-eno-2-carboxamida

Uma solução de 53 mg (0,33 mmoles) de

1,2,5,6-tetraidro-5,6-dicxo-3-mercapto-2-metil-as-triazina em 1 ml de água foi preparado por adição de 57 mg (o,68 mmoles) de NaHCOg. Adicionou-se uma solução de 140 mg (0,33 mmoles) de N-metil-N-t-butoxicarbonilmetil-3-clorometil-7^-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7-oct-2-eno-2-carboxamida-5,5-dióxido em 2 ml de água. Após agitação durante a noite, a mistura de reacção foi concentrada in vacuo. 0 resíduo foi dividido entre NaHCO^ a 1% e éter. A camada aquosa foi acidificada com HC1 concentrado na presença de acetato de etilo. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com acetato de etilo. A camada orgânica combinada foi lavada com NaCl saturado e foi seca. O filtrado foi concentrado e o resíduo foi triturado com éter para produzir 110 mg (60% de rendimento) de N-metil-N-t-butoxicarbonilmetil-7 o<f-metoxi-3-/ / (1,2,5,6-tetraidro-5,6-dioxo-2-metil-as-triazin-3-il)tio7metil7-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7 -oct-2-eno-2-carboxamida-5,5-dióxido, sob a forma dum sólido branco.

^H-RMN (Acetona-dg): 1,48 (s, 9H), 3,06 (amplo, 1H), 3,15 (s, 3H), 3,55 e 3,56 (2s, 3H), 3,73 e 3,75 (2s, 3H), 3,9-4,5 (m, 6H), 5,26 (s, 1H), 5,38 (s, 1H).

EXEMPLO 32

Carboxamida de 3-acetiloximetil-7 -k -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4,2.0 7-oct-2-eno-2-morfolino

Etapa A: Preparação de carboxamida de 3-acetòximetil-7-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7-oct-3-eno-2-morfolino

A uma solução de ácido 3-acetoximetil-7-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0_7-oct-2-eno-2-carboxílico (5,0 g) em dioxano (50 ml) adicionaram-se N-hidroxisuccinimida (2,4 g) e diciclohexil carbodiimida (5,4 g). Depois de se agitar durante 0,5 horas, a reacção foi arrefecida até 5°C e adicionou-se trietilamina (4 ml) e, ao fim de mais 15 minutos, morfolina (3,0 g). Depois de se agitar durante 1,5 horas à temperatura ambiente, a reacção foi diluída com éter dietílico,foi filtrada e lavada com água contendo 40 ml de HC1 2N. A camada aquosa foi extraída com acetato de etilo (3x) e cada camada foi lavada consecutivamente com água e salmoura. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas e o resíduo foi submetido a cromatografia flash (60 a 70% de acetato de etilo/hexano para produzir 2,0 g de carboxamida de 3-acetoximetil-7 p(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0 7-oct-3-eno-2-morfolino. RMN (CDCl^): £ 2,08 (s, 3H), 3,54 (s, 3H),

3,6-3,9 (m, 8H), 4,57 (AB quarteto, 2H), 4,60 (br, s, 1H), 4,92 (s, 1H) , 5,32 (br s, 1H), 6,54 (br s, 1H).

Etapa B: Preparação de carboxamida de 3-acetoximetil-7 o(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0 7-oct-2-eno-2-morfolino

Uma solução de carboxamida de 3-acetoximetil-7 o<'-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7-oct-3-eno-2-morfolino (2,0 g) e ácido m-cloroperbenzóico (3,4 g) em cloreto de metileno (100 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. Adicionou-se então resina Amberlyst A-21

(17 g) e, ao fim de 0,5 horas, a mistura foi filtrada e evaporada. Cromatografia flash (70% de acetato de etilo/hexanos) do resíduo produziu 1,85 g de carboxamida de 3-acetoximetil-7^ -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7-oct-2-eno-2-morfolino.

RMN (CDClg): S 2,13 (s, 3H), 3,4-4,1 (m, 10H), 3,58 (s, 3H), 4,57 (ABq, 2H), 4,82 (br s, 1H), 5,23 (d, 1H, J=lHz).

EXEMPLO 33

3-Acetoximetil-7o<f -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7-oct-2-eno-2-(2-(S)-carboxipirrolidinocarboxamida)-5,5-dióxido

Etapa A: Preparação de 3-acetoximetil-7c<-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7-oct-3-eno-2-(2-(S)-carboxipirrolidinocarboxamida) de t-butilo

A uma solução de ácido 3-acetoximetil-7-metoxi-2-cefem-4-carboxílico (7,4 g) em dioxano (100 ml) adicionou-se N-hidroxissuccinimida (3,5 g), seguida por diciclohexilcarbodiimida (7,9 g). Após 0,5 horas à temperatura ambiente, a reacção foi arrefecida até 5°C e adicionou-se trietilamina (7,1 ml). Ao fim de 15 minutos, adicionou-se éster t-butílico de L-prolina (6,6 g). Após 1,5 horas à temperatura ambiente, a reacção foi diluída com éter, foi filtrada e lavada com ácido clorídrico diluído. A camada aquosa foi extraída com mais 2 porções de acetato de etilo e cada camada orgânica foi lavada com água, solução a 2% de bicarbonato de sódio e salmoura. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas. O resíduo por cromatografia flash (40% de acetato de etilo/Hexanos) produziu 0,80 g de 3-acetoximetil-7< -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7-oct-3-eno-2-(2-(S)-carboxipirrolidinocarboxamida) de t-butilo. RMN (CDCl^): á 1,45 e 1,52 (2s, 9H), 2,08 e 2,08 (2s, 3H), 1,8-2,4 (m, 4H), 3,52 e 3,54 (2s, 3H),

3,75 (m, 1H), ,405 (m, 1H),4,4 (m, 1H), 4,60 (ABq, 2H), 4,66 (br, s, 1H), 4,96 (br s, 1H), 5,20 (br s, 1H), 6,44 e 6,46 (2 br s, 1H) .

A lavagem do bicarbonato de sódio anterior foi acidificada com ácido clorídrico 2N na presença de acetato de etilo e a camada de acetato de etilo foi lavada com salmoura, foi seca sobre sulfato de sódio e foi evaporada para produzir 3,4 g de ácido 3-acetoximetil-7 ^,íY-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/”4.2.0 7-oct-3-eno-2-carboxílico. RMN (CDClg): S 2,10 (s, 3H), ,3,58 (s, 3H), 4,50 (s, 1H) ,

4,55 (ABq, 2H), 5,06 (s, 1H), 5,10 (br s, 1H), 6,51 (br s, 1H), 7,06 (br s, 1H).

Etapa A: (Alternativa) Preparação de 3-acetoxi-metil-7 Qó-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7-oct-3-eno-2-(2-(S)-carboxipirrolidinocarboxamida de t-butilo

A uma solução de ácido 3-acetoximetil-7 -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7-oct-3-eno-2-carboxílico (0,5 g) em dioxano (20 ml) a 5°C adicionou-se diciclohexilcarbodiimida (0,71 g), seguida ao fim de 10 minutos por adição lenta de éster t-butílico de L-prolina (0,30 g) em 5 ml de dioxano durante 5 minutos. A reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 24 horas antes de ser diluída com éter foi filtrada e lavada com ácido clorídrico diluído. A camada aquosa foi extraída com 3 porções de acetato de etilo e cada camada orgânica foi lavada consecutivamente com água e salmoura. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas. O resíduo em cromatografia flash (40 % de acetato de etilo/hexanos) produziu 450 mg de 3-acetoximetil-7o(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7-oct-3-eno-2-(2-(S)-carboxipirrolidinocarboxamida de t-butilo. A RMN foi a mesma que anteriormente.

Etapa B: Preparação de 3-acetoximetil-7^(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^_4.2.0 7-oct-2-eno-2-(2-(S)-carboxipirrolidinocarboxamida)-5,5-dióxido de t-butilo

Uma solução de 3-acetoximetil-7 °( -metoxi-7-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0_7-oct-3-eno-2-(2-(S)-carboxipirrolidinocarboxamida) (3,1 g) e ácido m-cloroperbenzóico (4,7 g) em cloreto de metileno (150 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. A reacção foi então deitada numa solução de bicarbonato de sódio e sulfito de sódio e as camadas foram separadas. A camada orgânica foi lavada com salmoura, foi seca sobre sulfato de sódio e evaporada após a adição de 5 gotas de piridina. O resíduo por cromatografia flash (40-60% de acetato de etilo/hexanos) produziu 2,8 g de éster t-butílico de 3-acetoximetil-7o^-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7-oct-2-(2-(S)-carboxipirrolidinocarboxamida)-5,5-dióxido. RMN (CDCl^): á 1,40 e 1,44 (2s, 9H), 2,01 e 2,03 (2s, 3H), 1,8-2,4 (m, 4H) , 3,4-3,7 (m, 2H), 3,49 e 3,52 (2s, 3H), 3,80 (ABq, 2H), 4,17 e 4,38 (2 dd, 1H, J=8 Hz, J=2 Hz), 4,5-4,8 (2 ABq, 2H) , 4,80 e 4,85 (2 br s, 1H), 4,84 (2d, 1H, J=2 Hz).

Etapa C: Preparação de 3-acetoximetil-7 <X-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7-oct-2-eno-2-(2-(S)-carboxipirrolidinocarboxamida)-5,5-dióxido

Recolheu-se 3-acetoximetil-7 «Ç-metoxi-S-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-(2-(S)-carboxipirrolidinocarboxamida)-5,5-dióxido de t-butilo (400 mg) em 1 ml de anisole e 15 ml de TFA (pré-arrefecido até ΟθΟ) e agitou-se num banho de gelo durante 1/2 hora. A maioria do TFA/anisole foi removido in vacuo e depois sob uma corrente de N₂. O resíduo foi eluído sobre placas de sílica de 2x2000 jum (1% de HOAc em acetato de etilo) para produzir 250 mg de 3-acetoximetil-7 af -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7-oct-2-eno-2-(2-(S)-carboxipirroli dinocarboxamida)-5,5-dióxido . RMN (CDC1₃): X 2,08 e 2,11 (2s, 3H), 1,8-2,4 (m, 4H),

3,56 e 3,60 (2s, 3H), 3,4-4,0 (m, 2H), 3,90 (ABq, 2H), 4,4-5,0 (m, 3H), 4,90 (br s, 1H), 4,26 (br s, 1H).

EXEMPLO 34

Etapa A: Preparação de 3-acetoximetil-7(8 -amino-8-oxo-5-.tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-3-eno-2-carboxilato de t-butilo (7-ACA de t-butilo, 2)

*t-Bu pode ser substituido por qualquer outro grupo de protecção, pe., alquilo C^_g; benzidrilo, benzilo, etc.

Uma suspensão de monoidrato de ácido tósico (500 g, 2,6 mmoles) em tolueno (2L) foi desidratada por refluxo num sifão Dean-Stark durante 40 horas. Ao fim deste período, todo o ácido tósico passou a solução e recolheu-se um total de 57 ml de água. O tolueno foi então removido in vacuo para produzir uma massa sólida colorida.

O ácido tósico desidratado foi então recolhido em cloreto de metileno (2500 ml) e transferido para

um frasco de fundo redondo de 3 tubuladuras de 5 litros, que estava equipado com um agitador mecânico, tubos de entrada de N₂ e gás e um condensador de gelo seco. Adicionou-se lentamente 7-ACA sólido (1) (355 g, 1,3 moles) a um caudal tal que se obteve uma solução do 7-ACA, sem se formar uma massa gomosa. A solução foi então arrefecida até 10-15°C e destilou-se isobutilo (1000 ml) para a mistura de reacção durante 2-1/2 horas: Nota: adição rápida do isobutileno causa a formação dum precipitado gomoso. A mistura de reacção foi agitada durante a noite à temperatura ambiente.

A reacção foi temperada lentamente com agitação vigorosa num frasco de 18,9 litros (5 galões) contendo uma solução de bicarbonato de sódio (500 g) em água gelada (6 1). A camada orgânica foi separada por sucção e foi lavada com água e salmoura. As camadas aquosas foram sequêncialmente re-extraídas com duas porções de cloreto de metileno (500 ml) e as camadas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio. A maioria do cloreto de metileno foi removida in vacuo até o produto começar a solidificar. Nesta altura, adicionou-se ciclohexano (1 L) e o precipitado foi triturado para partir os sólidos. O produto foi recolhido por filtração e foi lavado com ciclohexano e foi seco durante a noite por passagem de ar através do bolo de filtragem. A produção de 7-ACA de t-butilo (2) foi de 360 g (80%) dum sólido quase branco. Rf (Et₂O)=0,3-0,5.

Etapa B: Preparação de t-butilo-3-acetiloximetil-7*(' -metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7oct-3-eno-2-carboxilato (3)

A reacção de diazotização foi levada a cabo em duas porções de 50 g e depois foi combinada para transformação e para a segunda etapa.

As soluções em duplicado de 7-ACA de t-butilo 2 (2x50 g, 0,3 moles) em cloreto de metileno adicionou-se nitrito de sódio (2x11,4 g, 0,33 moles) dissolvido em água (2x500 ml). As misturas foram arrefecidas num banho de gelo e a cada uma adicionou-se 2N (2x114 ml, 0,450 moles), em porções, durante cinco minutos e as reacções foram agitadas durante 45 minutos a 0°C. Elas foram então combinadas e a camada orgânica foi separada (alguns problemas com emulsões) e lavada com água e salmoura. As camadas aquosas foram re-extraídas com cloreto de metileno e as camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre sulfato de sódio e filtradas .

A solução de cloreto de metileno anterior adicionou-se, à temperatura ambiente metanol (800 ml) e, sob agitação vigorosa, dímero de acetato de ródio (0,64 g). Deu-se um desprendimento forte de azoto e ao fim de 1/2 hora a reacção foi filtrada através de celite e foi concentrada in vacuo a baixa temperatura. O resíduo foi recolhido em éter e foi lavada com água e salmoura para remover qualquer metanol residual. As camadas aquosas foram re-extraídas com éter e as camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre sulfato de sódio e evaporadas in vacuo. O resíduo foi purificado por CLAP preparativa em duas porções, utilizando-se 15% de EtOAc/hexano como eluente. A produção de 2 foi ãe 25-30 g (25%) sob a forma dum óleo amarelo que cristalizou lentamente sob repouso. Rf (25% de EtOAc/hex)=0,50. O produto 2 foi o primeiro componente principal por CCF.

-98-λ

Etapa C: Preparação de ácido 3-acetiloximetil-7-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/ 4.2.0 7oct-3-eno-2-carboxílico (4)

Auma solução de TFA (75 ml) e anisole (5 ml) a 0^o adicionou-se sulfito de t-butilo 2 g) sob a forma dum sólido, ou uma quantidade minima de cloreto de metileno. A reacção foi agitada a 0°C durante 1 hora, ou até se ver por CCF que estava quase completa (Nota: A reacção nunca parece ficar totalmente terminada). A solução foi então deitada numa mistura de água gelada (200 ml) e cloreto demetileno (200 ml) e a camada orgânica foi separada e lavada duas vezes com água (100 ml). Cada camada aquosa foi sequêncialmente re-extraída com mais três porções de cloreto de metileno (200 ml). As camadas de cloreto de metileno combinadas foram extraídas duas vezes com água contendo uma quantidade suficiente de solução de bicarbonato de sódio para manter o pH em 7-8 e cada extracto foi lavado com cloreto de metileno. As camadas aquosas combinadas foram acidificadas com ácido clorídrico 2N na presença de acetato de etilo. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com salmoura. As camadas aquosas foram re-extraídas com três porções de acetato de etilo (50 ml) e estas foram combinadas, secas sobre sulfato de sódio e evaporadas. O produto 4 em bruto era normalmente uma espuma pegajosa e escura, que foi utilizada logo que foi obtida. A produção de 4 foi tipicamente 12-14 g (80-90%).

Etapa D: Preparação de N-benzoxicarbonil-L-Prolina (6)

o o

Bn-0

NaOH

(L)-PRQLINA

L-Prolina 5. (100 g, 0,87 moles) foi dissolvida em hidróxido de sódio 2N (430 ml) e foi arrefecida num banho de gelo. Adicionaram-se mais 220 ml de hidróxido de sódio 4N, simultaneamente com cloroformato de benzilo (155 g, 0,90 moles) durante 2 horas. A reacção foi então deixada aquecer até à temperatura ambiente durante a noite.

A reacção foi lavada duas vezes com éter (500 ml) e a camada aquosa foi acidificada com ácido clorídrico concentrado e foi extraído duas vezes com acetato de etilo (500 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secas sobre sulfato de sódio. A evaporação in vacuo produziu 268 g de 6 em bruto sob a forma dum óleo es pesso. Este foi utilizado directamente na reacção seguinte.

100Etapa E: Preparação de N-benzoxicarbonilpirrolidina-2-carboxilato de t-butilo (7)

OIOXANO

t-Bu pode ser substituido por um grupo de protecção tal como alquilo benzilo, benzidrilo, etc.

O produto 6_ anterior foi recolhido em dioxano (1400 ml) e foi colocado em duas garrafas de pressão de 2 litros. A cada garrafa adicionou-se ácido clorídrico conc. (30 ml) e isobutileno (350 ml) condensado (banho de gelo seco).

As garrafas foram tapadas e fixadas com um arame e as reacções foram agitadas à temperatura ambiente durante a noite. As reacções tornaram-se homogéneas ao fim de cerca de 1 hora.

As soluções foram arrefecidas (até o dioxano começar a congelar), ventiladas cuidadosamente e deitadas num garrafão contendo uma solução de bicarbonato de sódio (250 g) em água gelada (4L) e éter (2L). As camadas foram separadas e o éter foi lavado com água e salmoura. As camadas aquosas foram re-extraídas com éter e as camadas etéreas foram combinadas e secas sobre sulfato de sódio. A evaporação in vacuo produziu 185 g de 7 em bruto sob a forma dum óleo transparente.. Este foi utilizado directamente na etapa seguinte.

-101-

Etapa F: Preparação de pirrolidina-2-carboxilato de t-butilo (8)

Hj /N/c

M«OH

60% ή partir de

L-

óleo anterior 7_ foi recolhido em metanol (1500 ml) e foi hidrogenado sobre 10% de pd/C (8 g) durante 20 horas (deixado durante a noite por conveniência). A reacção foi filtrada e concentrada in vacuo sem aquecimento. O resíduo foi destilado a 55-65°C/133,3 Pa (1 torr) para produzir 85 g (60% do total a partir de L-prolina) de L-prolina de t-butilo (8).

-102-

Etapa G: Preparação de 3-acetiloximetil-7 &<-metoxi-8-oxo-5-tia -l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-(2-(S)-carboxipirrolidinocarboxamida) (9)

Auma solução arrefecida em banho de gelo do ácido em bruto 4_ (11,5 g, 40 mmoles) em dioxano (100 ml) adicionam-se sequêncialmente N-hidroxissuccinimida (5,7 g, 50 mmoles) e DCC (12,4 g, 60 mmoles). A reacção foi então agitada sob azoto à temperatura ambiente durante 1/2 hora, durante cujo tempo se formou um precipitado espesso. A reacção foi novamente arrefecida num banho de gelo antes de se ter adicionado trietilamina seca (5,5 ml, 40 mmoles) e a agitação continuou durante mais 1/2 hora. Finalmente, adicionou-se L-prolina de t-butilo 8 (14 g, 80 mmoles), tudo de uma vez. Após mais 2 horas à temperatura ambiente, a reacção foi diluída com éter (200 ml), foi filtrada, e temperada em água gelada (200 ml), contendo 60 ml de ácido clorídrico 2N. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com água, solução de bicarbonato de sódio e salmoura. Cada camada aquosa foi novamente extraída com mais 100 ml de éter. As camadas orgânicas foram combinadas , secas sobre sulfato de sódio e evaporadas in vacuo. O produto 9. foi purificado por CLAP preparativa (45%) EtOAc/hexanos para produzir 10,5 g (60%) de 9 sob a forma dum óleo ligeiramente colorido. O pro-

duto £ foi normalmente acompanhado por uma pequena quantidade de produto , bem como por uma certa quantidade de sub-produto de DCC.

A lavagem anterior de bicarbonato de sódio foi acidificada na presença de EtOAc para um pH de 1-2 e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi novamente extraída com mais duas porções de acetato de etilo e as camadas orgânicas foram combinadas, secas sobre sulfato de sódio e evaporadas para produzirem 0,5-2,0 g de ácido Λ 10 recolhido. Este foi prontamente reciclado de forma semelhante à da reacção anterior para se obter 9^.

Etapa H: Preparação de 3-acetoximetil-7<2(-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0 7oct-2-eno-2-(2-(s)-carboxipirrolidinocarboxamida)-5,5-dióxido de t-butilo (11)

A uma solução de sulfureto- A 9 (10,5 g, 24 mmoles) em cloreto de metileno (700 ml) (Nota: a reacção deve ser mantida diluída para evitar qualquer problema com a perda de éster de t-bu) adicionou-se ácido m-cloroperben-104-

zóico a 85% (14,7 g, 72 mmoles). A solução foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A reacção foi então temperada numa mistura de bicarbonato de sódio com um excesso de sulfito de sódio. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com salmoura contendo alguns mililitros de solução saturada de sulfito de sódio. As camadas aquosas foram novamente extraídas com cloreto de metileno e as camadas orgânicas foram combinadas e secas sobre sulfato de sódio. Adicionou-se piridina (5gotas) ou resina A-21 amberlyst (5-10 g) e a mistura foi agitada durante 1/2 hora, a fim de isomerizar completamente o produto de A . Ά. filtração (para a resina A-21) e evaporação produziram um resíduo em bruto quefoi purificado por CLAP prep. (50% de EtOAc/hexanos) para produzir 9,5 g (85%) de 11 sob a forma duma espuma branca.

Etapa I: Preparação de 3-acetiloximetil-7ú(f-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/~4.2.0_7oct-2-eno-2-(2-(s)-carboxipirrolidinocarboxamida)-5,5-dióxido (composto A)

Composto A

A uma solução de TFA arrefecida num banho de gelo (75 ml) e anisole (5 ml) adicionou-se sulfona de t-butilo 11 (8,0 g). Após agitação durante 1 hora a 0°C, a reacção foi evaporada in vacuo sem muito aquecimento. 0 resíduo foi recolhido em cloreto de metileno e foi re-evaporado para remover a maioria do TFA. Os voláteis remanescentes foram extraídos por sopragem através duma corrente de azoto e o produto foi precipitado e triturado com éter e foi filtrado. 0 produto foi redissolvido numa quantidade mínima de cloreto de metileno e foi reprecipitado com éter para produzir 6,4 g de sódio quase branco. Os licores mãe combinadas foram evaporados e o resíduo foi submetido a cromatografia flash eluindo-se com um gradiente de solvente de 60% de EtOAc/hexano para 80% de EtOAc/hexano e finalmente 1% de HOAC/EtOAc, para produzir 950 mg de composto A puro após a evaporação de 50 ml de tolueno para remover qualquer ácido acético residual.

Os 6,4 g foram submetidos a cromatografia flash, como anteriormente, em 3 porções, obtendo-se 1,86 g de composto A a partir duma porção de 2,0 g. RMN (CDC1₃):<5 2,08 e 2,11 (2s, 3H) ; 1,8-2,4 (m, 4H); 3,56 e 3,6 (2s, 3H); 3,4-4,0 (m, 2H); 3,90 (ABq, 2H); 4,4-5,0 (m, 3H); 4,90 (brs, 1H); 4,26 (brs, 1H).

Claims

li. - Processo para a preparação dum composto com a fórmula estrutural (I) na qual M é:

(1) trifluorometilo;

(1) trifluorometilo;

(1) alquilo g (2) hidroxi;

(1) trifluorometilo;

(1) trifluorometilo;
(2) alquilo-C₁ θ;

(2) cloro ou fluoro;

(2) alquilo (3) halo-alquilo C^_g;

(2) cloro ou fluoro;

(2) metilo, etilo ou i- ou n-propilo;

(2) metilo;

(2) cloro ou fluoro; ou (3) -CH₂A, em que A representa:

(a) alcanoiloxi;

(b) alcoxi;

(c) halo;

(d) hidrogénio;

(e) hidroxi;

(f) mercapto substituído ou insubstituido; ou (g) carbamoiloxi;

(h) -SO-CH₃ ou -SO-CgH,-;

(i) -SO₂-CH₃ ou -SO₂-CgH₅;

2§. - Processo de acordo com a reivindicação 1 para a preparação dum composto com a fórmula estrutural na qual M é:

(2) alquilo θ;

(2) cloro ou fluoro;
(3) halo-alquilo θ;

(3) -COOH;

(3) -COOH;

(3) metileno; ou (4) feniltiometilo ou fenilsulfonilmetilo;

caracterizado por compreender (a) a esterificação dum composto de fórmula

-111- para formar um éster de fórmula na qual Q e M são como previamente definidos; e Ra é um grupo de protecção; (b) a diazotação do éster do passo (a) com NaNC>2, ou com outros reagentes de diazotação, e a conversão do derivado diazo resultante com metanol e o dimero de ace tato de ródio, para formar um éster de fórmula na qual Ra é um grupo de protecção , compreendendo alquilo θ, benzilo e benzidrilo; (c) a conversão do éster formado no passo (b) num ácido livre de fórmula

-112- (d) a reacção do ácido livre formado no passo (c) com uma amina de fórmula HNB₂B₃, na presença de N-hidroxisuccinimida, DCC e trietilamina, para formar a amida de fórmula na qual B₂ e B₃ são como definidos previamente; ou alternativamente, a esterificação do ácido livre do passo (d) para formar um éster de fórmula

OB.

113-114-

4ê. - Processo de acordo com o passo (d) da reivindicação 2 caracterizado por se obter o intermediário

5ê. - Processo de acordo com o passo (e) da reivindicação 2 caracterizado por se obter o intermediário

-115-

6i. - Processo para a preparação duma composição farmacêutica para o tratamento de doenças mediadas pela elastase caracterizado por se incluir na referida composição um veículo farmacêutico não-tóxico e uma quantidade eficaz dum composto de fórmula estrutural: na qual M é:

(3) t-butilo;

(3) 0R|, em que R| é (a) alquilo g;

(b) -CgH₅;

(c) -CH₂CH₂CgH₅; ou

O (d) -C-R, em que R representa hidrogénio, alquilo C. _c , benzilo substituído ou insubstituido no l-o fenilo, ou alquilamino C^_g, ou

-110- (4) fluoro ou cloro;

B é ΟΒ_χ ou NB₂B₃, em que Β_χ e B₂ representam independentemente (1) benzilo;

(3) halo-alquilo C^_g;

(3) -COOH;
(4) hidroxi-alquilo C^_₆;

(4) -CHO; ou (5) -CH₂A, em que A representa (a) hidrogénio;

(b) halo;

(c) hidroxi substituido ou insubstituido;

(d) alcoxi;

(e) ariloxi;

(f) aralguiloxi;

(g) um grupo mercapto insubstituido ou substituído;

(h) aciltio (i) alcanoiloxi ou arilcarboniloxi;

(j) um grupo de amónio quaternário, por exemplo, ,

-She₂ e -Se3, em que E representa alquilo inferior, arilo, ou aralquilo;

(k) um grupo amido substituído ou insubstituido;

(l) R-SO-, em que R é alquilo ou arilo Cg ; ou (m) R-SO₂~;

(4) hidroxi-alquilo C^_g;

(4) -CHO; ou (5) -CH₂A, em que A representa (a) hidrogénio;

(b) halo;

(c) hidroxi substituído ou insubstituido;

(d) alcoxi;

(e) ariloxi;

(f) aralquiloxi;

(g) um grupo mercapto insubstituido ou substituído;

(h) aciltio;

(i) alcanoiloxi ou arilcarboniloxi;

(j) um grupo amónio quaternário, por exemplo,-^Hg, -ÉÍHE₂ e ÉÍEg, em que E representa alquilo inferior, arilo ou aralquilo;

(k) um grupo amido substituído ou insubstituido;

(l) R-SO-, em que R é alquilo C^ ou arilo ^C6-10* ^ou

-116- (m) R-SO₂-;

(4) -CH₂CH₂CH=CH₂ ou -CH₂CH=(CH₃)₂;

(4) hidroxi-alquilo θ;

(4) -CHO; ou (5) -CH₂A, em que A representa (a) hidrogénio;

(b) halo;

(c) hidroxi substituído ou insubstituido;

(d) alcoxi;

(e) ariloxi;

(f) aralquiloxi;

(g) um grupo mercapto insubstituido ou substituído;

(h) aciltio;

(i) alcanoiloxi ou arilcarboniloxi;

(j) um grupo amónio quaternário, por exemplo, -^Hg-, —She₂ e -Se^, em que E representa alquilo inferior, arilo ou aralquilo;

-107- (k) um grupo amido substituído ou insubstituido;

(l) R-SO-, em que R é alquilo ou arilo ou (m) R-SO₂-;
(5) metileno substituído ou insubstituido;

(5) metileno substituído ou insubstituido;

(5) -CH₂COOH;

(5) metileno substituído ou insubstituido;
(6) alcoxi C^_g-alquilo ϋ^_θ;

(6) -CH=CH-R;

é (a) hidrogénio;

(b) hidroxi;

(c) mercapto;

(d) oxi substituído;

(e) tio substituído;

-119- (f) hidrocarbilo ou um grupo de hidrocarbilo substituído ;

(g) ciano;

(h) carbonilo ou tiocarbonilo contendo substituintes ligados pelo referido radical de carbonilo ou tiocarbonilo ;

(i) halo;

(j) fosfono ou um grupo de fosfono substituído;

B é OB^ ou NB₂Bg, em que B^ e B₂ são independentemente:

(a) alquilo de cadeia linear ou ramificada com 1 a 20 átomos de carbono, etilo, isopropilo, t-butilo, pentilo, ou hexilo;

(b) arilo com 6 a 10 átomos de carbono, (c) cicloalquilo com 3 a 8 átomos de carbono;

(d) alquenilo com 2 a 20 átomos de carbono;

(e) cicloalquenilo com 5 a 8 átomos de carbono;

(f) alquinilo com 2 a 20 átomos de carbono;

(g) alcoxi alquilo com 2 a 20 átomos de carbono;

(h) aralquilo, alcarilo, aralquenilo, aralquinilo, alquenilarilo ou alquinilarilo, em que alquilo, arilo, alquenilo e alquinilo são como previamente definidos ;

(i) alquenilalquilo inferior;

(j) alcanoilalquilo inferior;

(k) alcanoiloxialquilo inferior;

(l) alcanoilo inferior;

(m) um grupo heterociclico, incluindo alquilo heterocíclico ou alquenilo heterociclico;

sendo os grupos anteriores (a)-(m) insubstituidos ou substituídos por radicais tais como alquilo, hidroxi, alcoxi, halo, nitro mercapto, amino, amino substituído, ciano, carboxi, sulfoamino, carbamoilo, carbamoiloxi, sulfonilo, sulfinilo, sulfamoilo, azido, amino, aminosubstituido, carboxamido ou N-carboxamido substituído;

Bg é B^ ou hidrogénio; e

B£ e Bg podem-se juntar e fazer parte dum grupo heterociclico -N;

-120- (1) hidrogénio;

(6) alcoxi g-alquilo θ;

(6) -CH=CH-R;

(a) hidrogénio;

(b) hidroxi;

(c) mercapto;

(d) oxi substituído;

(e) tio substituído;

(f) hidrocarbilo ou um grupo de hidrocarbilo substituído ;

(g) ciano;

(h) carbonilo ou tiocarbonilo contendo substituintes ligados pelo referido radical de carbonilo ou tio- carbonilo ;

(i) halo;

(j) fosfono ou um grupo de fosfono substituído;

B é OB^ ou NB₂B₃, em que B₁ e B₂ são independentemente:

(a) alquilo de cadeia linear ou ramificada com 1 a 20 átomos de carbono, etilo, isopropilo, t-butilo, pentilo, ou hexilo;

(b) arilo com 6 a 10 átomos de carbono, (c) cicloalquilo com 3 a 8 átomos de carbono;

(d) alquenilo com 2 a 20 átomos de carbono;

(e) cicloalquenilo com 5 a 8 átomos de carbono;

(f) alquinilo com 2 a 20 átomos de carbono;

(g) alcoxi alquilo com 2 a 20 átomos de carbono;

(h) aralquilo, alcarilo, aralquenilo, aralquinilo, alquenilarilo ou alquinilarilo, em que alquilo,arilo, alquenilo e alquenilo e são como previamente definidos ;

(i) alquenilalquilo inferior;

(j) alcanoilalquilo inferior;

(k) alcanoiloxialquilo inferior;

(l) alcanoilo inferior;

(m) um grupo heterocíclico, incluindo alquilo heterocíclico ou alquenilo heterocíclico;

sendo os grupos anteriores (a)-(m) insubstituidos ou substituídos por radicais tais como alquilo, hidroxi, alcoxi,halo, nitro, mercapto, amino, amino substituído, ciano, carboxi, sulfoamino, carbamoilo, carbamoiloxi, sulfonilo, sulfinilo, sulfamoilo, azido, amino, aminosubstituido, carboxamido ou N-carboxamido substituído;

é B₁ ou hidrogénio; e

B₂ e Bg podem-se juntar e fazer parte dum grupo heterocíclico -Q;

e Q é (1) hidrogénio;

(6) alcanoiloximetilo; ou (7) alcanoilmetilo;

substituídos ou insubstituidos;

B₃ é hidrogénio ou B^;

B₃ e B₂ podem-se juntar e fazem parte do anel heterocíclico seleccionado dentro dum grupo consistindo em:

-o-·.

Q é (1) hidrogénio;

(6) alcoxi θ-alquilo C^_g;

(6) -CH=CH-R;

Rj_ é (a) hidrogénio;

(b) hidroxi;

(c) mercapto;

(d) oxi substituído;

(e) tio substituído;

(f) hidrocarbilo ou um grupo de hidrocarbilo substitui^ do;

(g) ciano;

(h) carbonilo ou tiocarbonilo contendo substituintes ligados pelo referido radical de carbonilo ou tiocarbonilo ;

(i) halo;

(j) fosfono ou um grupo de fosfono substituído; B é OB^ ou NB₂B₃, em que B^ e B₂ são independentemente:

(a) alquilo de cadeia linear ou ramificada com 1 a 20 átomos de carbono, etilo, isopropilo, t-butilo, pentilo ou hexilo;

(b) arilo com 6 a 10 átomos de carbono;

(c) cicloalquilo com 3 a 8 átomos de carbono;

(d) alquenilo com 2 a 20 átomos de carbono;

(e) cicloalquenilo com 5 a 8 átomos de carbono;

(f) alquinilo com 2 a 20 átomos de carbono;

(g) alcoxi-alquilo com 2 a 20 átomos de carbono;

(h) aralquilo, alcarilo, aralquenilo, aralquinilo, alquenilarilo ou alquinilarilo, em que alquilo, arilo, alquenilo e alquinilo são como previamente definidos;

(i) alquenilalquilo inferior;

(j) alcanoilalquilo inferior;

(k) alcanoiloxialquilo inferior;

(l) alcanoilo inferior;

(m) um grupo heterocíclico, incluindo alquilo heterocíclico ou alquenilo heterocíclico;

sendo os grupos anteriores (a)-(m) insubstituidos ou subs-108- tituidos por radicais tais como alquilo, hidroxi, alcoxi, halo, nitro, mercapto, amino, amino substituído, ciano, carboxi , sulfoamino, carbamoilo, carbamoiloxi , -sulfonilo, sulfinilo, sulfamoilo, azido, amino, aminosubstituido, carboxamido ou N-carboxamido substituído;

é ou hidrogénio; e

B? e B^ podem-se juntar e fazer parte dum grupo heterocíclico -n) ; e

Q é (1) hidrogénio;
(7) benzilo insubstituido ou substituído;

(7) benzilo insubstituido ou substituído;

(8) feniltio-alquilo θ, fenilsulfinil-alquilo ^Cl-6 ' ^{OU en}ilsulfonil-alquilo g;

(9) fenoxi-alquilo g insubstituido ou substituído , ou (10) fenilamino-alquilo C^_g insubstituido ou substituído .

7â. - Processo deacordo com a reivindicação 6 caracterizado por se preparar uma composição farmacêutica em que o composto activo é 3-acetiloximetil-7c\-metoxi-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo/^-4.2.0 7-oct-2-eno-2-carboxipirrolidinocarboxamida)-5,5-dióxido.

8a. - Método de tratamento ou de controlo de doenças mediadas pela elastase caracterizado por compreender a administração a uma espécie mamífero com necessidade de tratamento duma quantidade eficaz dum composto de fór mula estrutural:

-118-

R, ο. ,θ

Cl F ou

COE

H-ÍY na qual M é:

(7) benzilo insubstituido ou substituído;

(8) feniltio-alquilo θ, fenilsulfinil-alquilo ^cj__g, ou fenilsulfonil-alquilo (9) fenoxi-alquilo C^_g insubstituido ou substituído, ou (10) fenilamino-alquilo θ insubstituido ou substituído; caracterizado por compreender (a) o tratamento dum composto de fórmula com um composto de fórmula B^OH ou HNB2B₃ na presença dum catalisador; e (b) a oxidação do produto do passo (a) num composto de fórmula (I).

-109-
(8) feniltio-alquilo θ, fenilsulfinil-alquilo ^C1 6' ^{ou f}enilsulfonil-alquilo (9) fenoxi-alquilo θ insubstituido ou substituído, ou (10) fenilamino-alquilo θ insubstituido ou substituído, estando os níveis de dosagem na gama de 0,2 mg a 140 mg por quilograma de peso corporal por dia.