PT91869B

PT91869B - Processo para a preparacao de um novo derivado da 1,4-dihidro-piridina denominado (-)2-<{2-(2-amino-etoxi)-etoxi}-metil>-4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbomil--5-metoxicarbonil-6-metil-1,4-dihidro-piridina

Info

Publication number: PT91869B
Application number: PT91869A
Authority: PT
Inventors: Jean-Louis Peglion; Yves-Michael Gargouil; Jean-Paul Vilaine
Original assignee: Adir
Priority date: 1989-07-04
Filing date: 1989-10-02
Publication date: 1995-07-18
Also published as: IE67059B1; IE893103A1; CA1327582C; PT91869A; FR2649395A1; JPH0344371A; NZ230854A; DK478989A; OA09136A; DE68922605T2; FR2649395B1; ATE122340T1; EP0406502B1; DE68922605D1; DK478989D0; AU4239089A; ZA897349B; JPH0720934B2; EP0406502A1; ES2074472T3

Description

PROCESSO PARA A PREPARAÇAO DE UM NOVO DERIVADO DA 1 , 4-DHTIDRO-P IR ID INA DENOMINADO (-) 2-j[2-( 2-AMINOETOXI)-ETOXI 3-METIlJ -4-(2,3-DICLORO-FENIL)-3-ETOXΙΟ ARBONIL-5-METOX ICARBON IL-6-MEΤ IL-1 , 4-Dí+l IDRO-P IR IDINA s'A presente invenção diz respeito a um processo para a prepa ração de um novo derivado da 1,4-di-hidro-piridina, a (-) 2- £ 2 -(2-amino-etoxi)-etoxi J-metilJ -4-(2, 3-dicloro-fenil)-3-etoxic a_r bonil-5-metoxicarbonil-6-metil-1,4-dlhidro-piridina e de composições farmacêuticas que o contêm.

Alguns derivados da 1,4-di-hidro-piridina possuindo interessantes propriedades farmacológicas foram descritos na patente de invenção europeia 259.206. Esta patente de invenção descreve e reivindica, entre um grande número de compostos, a 2-^ 2-(2-amino-etoxi)-etoxi J-metilJ - 4- (2, 5-d i-h idro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-1,4-di-hidro-piridina. 0 processo para a preparação deste composto sob a sua forma racémica encontra-se exemplificado nesta patente de invenção.

Tendo em conta os resultados terapêuticos muito interessantes obtidos com este composto, foram empreendidas pesquisas mais aprofundadas para separar os isómeros ópticos do composto e chegou-se à descoberta da (-) 2-j[^ 2 - ( 2 - am i η o - e t o x i ) - e t o x i 3 - metilj- -4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-1 ,4-di-tiidro-piridina.

Com efeito, os diferentes processos de separação de isómeros ou de sínteses estereosselectivas descritos na literatura não permitem a obtenção dos isómeros da 2-|£ 2 - ( 2 - am i η o - e t o x i ) - e t o x i3 / ² 9 .*·

-metilj-4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-1,4-di-hidro-piridina. Foi por conseguinte necessário inveq tar um novo processo.

A (-) 2-jC 2 - ( 2-am i η o - e t o x i ) - e t o x i^-me t i lj-4-( 2 , 3 - d i c 1 o ro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-1 , 4 - d i-h i d r o - p i r q dina é um potente inibidor da penetração intracelular do cálcio.

Teoricamente, o isómero activo de um composto dotado de pro priedades farmacológicas possui no máximo o dobro da actividade em relação ao produto racémico.

No presente caso, os ensaios farmacológicos demonstraram que a actividade do composto de acordo com a presente invenção é muito superior.

A presente invenção tem mais partícularmente por objectivo um processo para a preparação da (-) 2--^^ 2 - ( 2 - am i η o - e t o x i ) - e t o x ij -metilj-4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6- m e t i 1 - 1 , 4 - d i-h i d r o - p i r i d i n a composto de fórmula I:

e dos seus sais de adição com um ácido inorgânico ou orgânico aceq tável sob o ponto de vista farmacêutico.

Entre os ácidos utilizados, podem citar-se os ácidos fumár_i co, tartárico, c a n f os u 1 f ó n i c o , clorídrico, cítrico, me t a η o - s u 1 f ó n i.

co, benzeηo-su1fónico etc...

/ /

processo de acordo com a presente invenção caracteriza-se pelo facto de se condensar o 2 - £2 - ( 2-c 1 o ro-e t o x i )-e t ox ij - e t ano 1 com a ftalimida potássica, no seio de dimeti1formamid a a quente, para se obter o 2 -[2-(2-ftalimido-etoxi)-etoxiJ -etanol, composto de fórmula II:

(II) que se transforma mediante reacção com o reagente de do 2 - £2 - ( 2 - f t a 1 i m i d o - e t o x i ) - e t o x ij - a c é t i c o , composto III :

Jones no ác£ de fórmula

(III) que se trata com carbο ηi1 diimid aζo 1 e ácido de Meldrum na presença de piridina no seio de cloreto de metileno, para se obter o coni posto de fórmula IV:

o qual se faz em seguida reagir com o (R) 2-feni1-2-metoxi - etaηo 1 , composto de fórmula V:

(V) para se obter o β-cetoéster de fórmula VI:

que se condensa na presença de formato de amónio em etanol com um benzilideno de fórmula VII:

(VII) para se obter a (4R4¹R/4S4¹R) 4-(2,3 - dic1 oro-feηi1)-5-metoxicarb£ nil-3-(2-metoxi-2-fenil-etoxicarbonil)-6-metil-2-^£ 2-(2-ftalimido-etoxi)etoxij - metill-1 ,4-d í-hidro-piridina,composto de fórmula

VIII :

/ - 5

(4R4'R/4S4'R) Ο (VIII) o qual em seguida:

quer :

se submete à acção de uma solução aquosa de hidrogeno carbonato de sódio, em solução em acetonitrilo, para se obter a (4R4¹R/4S4'R )

-|£ 2 - £ 2-(2-carboxi-fenilcarboxamido)-etoxi) J-e t o x i J-metilJ-4-(2,3-dicloro-fenil)-5-metoxicarbonil-3-(2-metoxi-2-fenil-etoxic ar. bonil)-6-metil-1,4-di-bidro-piridina, composto de fórmula IX:

que se trata, após separação mediante HPLC, com uma mistura de gli.

me e etilato de sódio, para se obter uma mistura contendo a (-) -

-2-yj^ 2-[ 2 - ( carbοχi-feni1carbοχamid ο)-etοχi J-etoxi ]-metilJ-4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-1,4-di-hidro-piridina, composto de fórmula X:

ζτ~· t

e o seu homólogo, substituído na posição 5 por um radical etoxicar. b o n i 1 o , quer:

se separa o composto de fórmula VIII mediante cromatografia em cq luna de sílica utilizando como eluente uma mistura de cloreto de metileno e de acetato de etilo (95:5 V/V) para se obter o isómero menos polar da 4 - ( 2 , 3 - d i c 1 o r o - f e n i 1 ) - 5-me t o x i c a r b o n i 1 - 3 - ( 2-me t o x i -2-fenil-etoxicarbonil)-6-metil-2-j [ 2-(2-ftalimido-etoxi)-etoxiJ -metilj-1,4-di-hidro-piridina, o qual se faz em seguida reagir com o etanolato de sódio na presença de glime em solução em etanol, p^a ra se obter uma mistura contendo o composto de fórmula X e o seu homólogo, substituído na posição 5 por um radical etoxicarboni1 o, o qual se faz em seguida reagir com uma solução de carboni1 diimid a zol em um alcano halogenado ã temperatura ambiente para se obter uma mistura contendo a (-) 4-(2,3-dic1 oro-feni1)-3-etoxicarboni1-5-metoxicarbonil-6-metil-2-j[ 2-(2-ftalimido-etoxi)-etoxi J-metilj

- 1 ,4 - d Rhidro-piridina composto de fórmula XI:

Cl

(XI) ch₃ o

N /^CH₂OCH₂CH₂OCH₂CH₂N

O e o seu homólogo, substituído na posição 5 por um radical etoxica£ bonilo, mistura essa que se separa em seguida mediante HPLC, para se obter a (-) 4-(2 , 3-dic 1 oro-feni1)-3-etoxicarboni1-5-metoxicarb£ ni 1-6-meti1-£-£ 2 - ( 2 - f t a 1 im i do-e t o x i )-e t o x i J-me t i 1^· - 1 , 4 - d i-h i d r o -piridina pura, a qual se aquece em seguida a refluxo no seio de etanol na presença de hidrato de hidrazina para se obter o composto de fórmula I que se pode, em seguida, salificar com um ácido o_r gânico ou inorgânico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

Obtém-se o (R) 2-feni1-2-metoxi-eta η o 1, composto de fórmula V, mediante redução do ácido correspondente, opticamente activo. Este último composto prepara-se de acordo com o processo descrito em J . Chem . Soc . , 1 962, p. 1519.

éster metílico do ácido 2 - ( 2 , 3 - d i c 1 o r o - b e η z i 1 i d e η o ) - 3 - ο χ o-butanóico, composto de fórmula VII, prepara-se mediante condensação do 2 , 3 - dic1 oro-beηza 1 deído com o acetoacetato de metilo.

composto de fórmula I, preparado pelo processo de acordo com a presente invenção, é um inibidor da penetração intracelular do cálcio nitidamente mais potente do que o seu racémico correspojq

dente. Com efeito, de maneira surpreendente, os resultados dos en saios farmacológicos demonstraram que o composto de fórmula I oos sui uma actividade que é 4 a 30 vezes superior em relação à actividade do racémico.

A concentração de cálcio intracelular desempenha um papel de mensageiro para numerosas funções biológicas: contracções, secreções; esta concentração depende largamente da penetração transmern branar em cálcio, que, muito concentrado nos meios extracelulares, transita através de canais selectivos para o cálcio situados na membrana.

E deste modo que inibidores destes anais limitando ou suprimindo a penetração do cálcio podem ter efeitos terapêuticos interessantes em um número de patologias como por exemplo vasorelaxação, para o tratamento da hipertensão arterial e a hipertensão puj monar, doenças vasculares periféricas e coronárias. (Am.J . Card . 1980, 4 6 , P· 1047-1058; Burger's Medicinal Chemistry, 4^ edição, Parte III, p. 5456 - John Wiley and Sons Inc. USA, 1981; Life Sciences, 1 983, 3 3 , p. 257 1 -2 58 1 ). Verifica-se igualmente efeitos benéficos induzidos para o tratamento das insuficiências cardíacas

A moderação da contracção miocárdica é igualmente útil em sj tuações isquémicas cardíacas. (Medicine, 1 985, 6 4 , p. 61-73). A limitação da penetração do cálcio nas células pode igualmente desempenhar um papel importante para prevenir a acumulação cálcica caracteristica do envelhecimento celular e ligada a certas doenças degenerativas vasculares - ateromatoses em particular - (Medicinal Research Review, 1985, 5, p. 394-425).

A modulação cálcica apresenta igualmente um interesse para o tratamento da epilepsia e das vertigens de origem central. A lim_i tação do cálcio ionizado nas fibras lisas das paredes do tubo di9

gestivo permite também a suspensão dos espasmos esofágicos e ao ní_ vel pulmonar do espasmo brônquico (tratamento da asma). Esta mode ração do cálcio pode igualmente ser útil como adjuvante nos Lrata mentos do cancro e da hipercoagu1ação.

A presente descrição não é limitativa de modo nenhum e os tra balhos fundamentais acentuam, com efeito, o papel de primeiro pla_ no desempenhado pelo cálcio em numerosos fenómenos fisiológicos e fisiopatológicos.

Os ensaios farmacológicos no rato provaram,in vivo, que a actividade do composto de fórmula I, preparado pelo processo de acordo com a presente invenção, é superior à do seu racémico e que ele é dotado de uma duração da acção superior e confirmam o interesse da sua utilização em terapêutica.

A presente invenção diz igualmente respeito às composições farmacêuticas contendo como ingrediente activo o composto de fórmula I, ou um dos seus sais de adição com um ácido inorgânico ou orgânico com um ou vários excipientes, inertes, não tóxicos e apro p r i a dos .

As composições farmacêuticas assim obtidas são apresentadas, com vantagem, sob diversas formas tais como por exemplo comprimidos, drageias, gélulas, trociscos ou outras preparações galénicas apropriadas .

As composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção podem, além disso, conter um ingrediente activo de acção complementar ou sinérgica.

A posologia pode variar largamente em função da idade, do pe so do paciente, da natureza e da gravidade da afecção, assim como da via oral ou parenteral. De uma maneira geral, a posologia unitária está compreendida entre 0,02 e 50 mg e a posologia diária f .¾ administrada por via oral, utilizável em terapêutica humana ou aru mal, entre 0,02 e 100 mg.

Os exemplos seguintes, dados a título não limitativo, ilustram o processo de acordo com a presente invenção.

Os pontos de fusão indicadas são medidos de acordo com a téq nica micro-Kof1er .

Os espectros de ressonância magnética nuclear do protão (R.M. N.) foram registados a 200 MHz.

EXEMPLO 1

Acido 2-fí 2 - ( 2 - f t a 1 imi do-e tox i )-e t o x i ^-acético

ESTÁDIO A

2-Q 2-(2-fta 1imido-etoxi)-etoxi J-etanol

Aquecog-se até 95°C, durante 17 horas, 188g de 2-£ 2-(2-cloro-etoxi )-etoxi J-etanol e 1 A 6g de ftalimida potássica em 700 ml de dimetilformamida.

Dilui-se com cloreto de metileno, lava-se com uma solução sa turada de cloreto de sódio, seca-se e evapora-se.

Destila-se em Kugelrhor PEg₅g5_mm: 180-185°C.

Rendimento: 9 0 °á .

E§2ÊEÍ;ro_de_ressonâricia_maçjnética_nuclear_do_protão_^dissolyente_CDCl^):

AH ( m ) 7 , 5 a 8 ppm; 12H (m)3,A a A ppm; 1H (compacto permutável D2 0 ) 2 , 5 a 3 ppm.

ESTÁDIO B

Dissolve-se 3g do álcool obtido no estádio anterior em 150ml de acetona. Adiciona-se o reagente de Jones mantendo a temperatura entre 20° e 25°C. Deixa-se repousar durante uma hora à tempera, tura ambiente. Concentra-se, dilui-se em seguida com cloreto de metileno e lava-se com água. Seca-se e evapora-se o dissolvente para se obter o composto pretendido.

Ponto de fusão: 88-90°C.

Rendimento: 9 0 ?ó.

EsE?ectro_de £ÊSsonância_magnét ica_nuclear_do protão_(dissol£ente_CDCl2) ^: m (compacto permuta vel ) 8 ,8 a 9,5 ppm; 4H (m)7,6 a 8,1 ppm; 2H (s)4,1 ppm; 8H (m)3,6 a 4 ppm.

EXEMPLO 2 (R) 2-feni1-2-metoxi-etano 1

Reduzem-se 72g de ácido (R) 2-feni1-2-metoxi-acético (preparado de acordo com o método descrito em J. Chem. Soc., 1962, p. 1519), com 16,5g de hidreto de lítio e alumínio em 300ml de tetra,

-hidro furano.

Hidrolisa-se e filtra-se os sais inorgânicos e, em seguida, destila-se o óleo residual em Kugelrhor. P.E. η 5_mrn: 105°C.

Rendimento: 7 6 ?ó.

6spectro_de ressonância magnética nuc1ear_do_protão_(disso 1£eçte_CDCl 3 ) ^: 5H (m)7,35 ppm; 1H (d)4,35 ppm; 2H (m)3,65 ppm; 3H (s)3,3 ppm; 1H (d permutáve1)2,35 ppm.

Poder rotatório em solução a 1 % em etanol:

λ( nm )	_H24°C
589	- 122
578	- 127
546	- 145
436	- 249
365	- 396

2

EXEMPLO 3

Ester (R) 2-feni1 - 2-metoxi-eti1ico do ácido 5,8 - d i o x a - 3 - ο χ o -10-ftalimido-decanóico.

A uma suspensão contendo 34,7g do composto do exemplo 1 em 210 ml de cloreto de metileno adicionam-se, de uma só vez, 20g de carbonildiimidazol.

Agita-se até que termine o desprendimento gasoso. Adiciona-se, em seguida, gota a gota rápida, uma mistura constituída por 17,7g de ácido de Meldrum e 9,2g de piridina em 70 ml de cloreto de metileno. Agita-se sob atmosfera de azoto durante uma noite.

Despeja-se em uma ampola de decantação, lava-se com ácido sulfúrico N até pH ácido, depois, uma vez com água, seca-se e evapora-se o dissolvente.

Leva-se o óleo a banho-maria com 25g do álcool obtido no exemplo 2, até que termine o desprendimento gasoso.

Submete-se o meio reaccional a uma cromatografia de coluna (cromatografia rápida) contendo 1,8kg de sílica e utilizando como eluente uma mistura de ciclotexano e de acetato de etilo (1:1 V/V) para se obter o composto pretendida.

Rendimento: 7 □ ?ó.

Espectro de ressonância magnética_nuc1ear_do_protão_(disso 1vente CDCl^): 4H (m)7,6 a 8,1 ppm; 5H (s)7,35 ppm; 3H (m)4 a 4,6 ppm; 2H (s)4,1 ppm; 10H (m)3,5 a 4 ppm; 3H (s)3,3 ppm.

Poder rotatório em solução a 1 % em etanol.

3

X(nm)	zv²¹°^c
589	- 35,1
578	- 36,5
546	- 41,4
436	- 69,8
365	-107,2

EXEMPLO 4

Ester metílico do ácido 2-(2,3-dicloro-benzilideno)-3-oxo-butanóico.

Aquece-se a refluxo com agitação durante 4 horas, uma mistura contendo 8,7g de 2,3-dicloro-benzaldeído, 5,8g de acetoacetato de metilo, 28 gotas de piridina e 38 gotas de ácido hexanóico em 280 ml de benzeno. Despeja-se para uma ampola, lava-se com uma solução a 10% de hidrogenocarbonato de sódio, depois com uma solução de ácido clorídrico Ne depois com água. Seca-se e evapora-se. La vam-se os cristais obtidos com éter isopropílico.

Rendimento: 65%.

EZ°Í£o_.(Dissolvente CDCl^): IH (2s)8 e 8,05 ppm; 3H (m)7,l a 7,8 ppm; 3H (2s)3,9 e 3,75 ppm; 3H (2s)2,45 e 2,2 ppm.

EXEMPLO 5 (4R4¹R/4S4¹R) 4-(2,3-dicloro-fenil)-5-metoxicarboni1-3-(2-metoxi-2-fenil-etoxicarbonil)-6-metil-2-{/2-(2-ftalimido-etoxi)-etoxi -7-metill -1,4-di-hidro-piridina.

Agita-se sob atmosfera de azoto a 40°C durante 48 horas uma mistura contendo 22,2g do composto descrito no exemplo 4, 38g do composto descrito no exemplo 3 e 6,3g de formato de amónio em 200 / - 14 ml de etanol. Evapora-se o meio residual e purifica-se em uma coluna contendo 4kg de sílica utilizando como eluente uma mistura constituída por cloreto de metileno e acetato de etilo (9:1 V/V).

?2E22Í£2 É^e_££SE°2Énçia_magnética_nuclear_do_protão_£Dissolvente CDCI3): 2H (m)7,8 ppm; 2H (m)7,7 ppm; 7H (m)7,3 a 7,1 ppm; IH (t)7,O5 ppm; IH (s)5,45 ppm; 2H (m)4,6 ppm; 11H (m)3,6 a 4,4 ppm; 3H (2s)3,6 ppm; 3H (2s)3,2 e 3,05 ppm; 3H (s)2,3 ppm; IH (s) não permutável pela D2O, 7,4 ppm.

?2^22_22Í2Í°^ri° ^e2 22Í2222_^a 1£_2ίϋ 2Í2^r2Í2£®i2^:

X(nm)	Â/²¹°^c
589	- 13,3
578	- 13,8
546	- 15,1

EXEMPLO 6 (4R4'R/4S4’R) 2- -(2-carboxi-fenilcarboxamido)-etoxi J-eLoxi _7-metilj-4-(2,3-dicloro-fenil)-5-metoxicarbonil-3-(2-metoxi-2-fenil-etoxicarbonil)-6-metil-l, 4-di-hidro-piridina.

Aquece-se a refluxo com agitação durante 24 horas uma mistura contendo 16,5g do composto do exemplo 5, 100 ml de uma solução aqu£ sa a 10$ de hidrogenocarbonato de sódio e 230 ml de acetonitrilo. Evapora-se o dissolvente, retoma-se com água, acidifica-se com áci do clorídrico N e extrai-se para se obter o composto pretendido.

Rendimento: 87$.

Espectr2_de_ressonância_magnética_nuclear_d2_protão_£Dissolvente CDCl^): IH (m)7,9 ppm; 3H (m)7,5 ppm; 7H (m)7,4 a 7,15 ppm;

IH (t)7,O5 ppm; IH (2s)5,45 ppm; 2H (m)4,8 ppm; 2H (m)4,4 a 4,1 ppm, IH (m)3,9 ppm; 8H (m)3,8 a 3,5 ppm; 3H (2s)3,6 ppm; 3H (2s) 3,2 a 3,05 ppm; 3H (s)2,3 ppm; IH (t)6,55 ppm; IH (sinal mascarado trocado pela D20)7,45 ppm; IH (sinal plano)7 a 5 ppm troca do pela D^O.

Poder rotatório era solução a 1? em clorofórmio:

X (nm)	f *7²¹°^c
589	- 14,2
578	- 14,8
546	- 16,3 ’

EXEMPLO 7

Mistura de (-) 2- 2-(2-carboxi-fenil-carboxamido)-etoxij-etoxi7-metilj -2-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-l,4-di-hidro-piridina e do seu homólogo substituído na posição 5 por um radical etoxicarbonilo. η Primeiro processo

Separa-se o composto do exemplo 6 nos seus dois isómeros mediante HPLC utilizando como coluna uma Lichroprep RP18 de 50cm de comprimento e como eluente uma mistura de metanol e de fosfato dis. sódico 0.025M (55 : 45 V/V), débito lOml/min.

Aquecem-se a refluxo 3g do segundo composto proveniente da se paração com 30 ml de glime e 28,6 ml de uma solução de etilato de sódio 0,2óM. Evapora-se, retoma-se com água, acidifica-se e extrai -se com acetato de etilo para se obter os compostos pretendidos.

Rendimento global: 10?.

* Segundo processo

ESTÁDIO A

Submete-se o composto do exemplo 5 a uma cromatografia em coluna preparativa contendo 4kg de sílica, utilizando como eluente uma mistura de cloreto de metileno e de acetato de etilo (95 : 5). Obtém-se deste modo o primeiro composto proveniente da separação que é o menos polar.

Rendimento: 20?.

EsE£Çtro_de_ressonância_magⁿética nuclear_do protão (dissolvente CDCl-j): 2H (m)7,8 ppm; 2H (m)7,7 ppm; 7H (m)7,4 a 7,1 ppm;

IH (t)7,O5 ppm; IH (s)5»45 ppm; 2H (m)4,4 ppm; 11H (m) 4 a 3,7 ppm 3H (s)3,6 ppm; 3H (s)3,O5 ppm; 3H (s)2,3 ppm; IH (s)7,45 ppm (dificilmente permutável pela DgO).

Poder rotatório em solução a 1? em clorofórmio:

A(nm)	Ã7²¹°^c
589	- 9
578	- 9,6
546	-10,4

ESTÁDIO B

Aquece-se a refluxo 3g do composto obtido no estádio anterior com 30 ml de glime e 28,6 ml de uma solução etanólica de etanolato de sódio 0,26M. Evapora-se, retoma-se com água, acidifica-se e extbái-se com acetato de etilo para se obter os compostos pretendidos .

Rendimento: 65?·

EXEMPLO 8

Mistura de (-) 4-(2,3-dicloro-f enil)-3-etoxicarbonil-5-nietoxicarbonil-6-metil-2-^f 2-( 2-f talimido-etoxi)-etoxi _7-metil}-l, 4-di-hidro-piridina e do seu homólogo substituído na posição 5 por um radical etoxicarbonilo.

Dissolve-se l,9g da mistura obtida no exemplo 7 em 30 ml de cloreto de metileno e adiciona-se, de uma só vez, 0,9g de carbonildiimidazol; deixa-se sob agitação durante uma noite.

Despeja-se o meio reaccional em uma ampola de decantaçao, la. va-se com hidrogenocarbonato de sódio a 10$ e em seguida cora ácido clorídrico N e com água. Seca-se e evapora-se para se obter os compostos pretendidos.

Rendimento: 65$.

EXEMPLO 9 (-) 4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarboni1-6-metil-2-^/~ 2-(2-f talimido-etoxi )-etoxi _7-metil^-l, 4-dihidro-piridina.

Separa-se a mistura obtida no exemplo 8 mediante HPLC preparativa utilizando uma coluna Lichroprep RP18 de 50cm de comprimento e como eluente uma mistura de etanol, água e TFA (500 : 500 : 1 Obtém-se deste modo o composto preparado em primeiro lugar.

Rendimento: 30$.

Poder rotatório em solução a 1$ em DMSO:

A(nm)	A7^2O°^C
589	- 34,6
578	- 36,5
546	- 43,9
436	-119,0

EXEMPLO 10 (-) 2-(/2-(2-amino-etoxi)-etoxi _7-metil}-4-(2,3-dicloro-f enil)

-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-1,4-di-hidro-piridina.

Aquece-se a refluxo lg do composto preparado no exemplo 9 com 10 ml de etanol e 0,25 ml de hidrato de hidrazina durante 4 horas. Evapora-se o dissolvente, retoma-se com éter etílico, lava-se com 5 ml de hidróxido de sódio normal e esgota-se a fase etérea com ácido clorídrico N. Alcalinizam-se em seguida as fases aquosas e promove-se a sua extracção com éter etílico para se obter o compo£ to pretendido.

Rendimento: 60%.

Ponto de fusão: 69-71°C.

Espectro de ressonância magnética nuclear do protão (dissolvente CDCl^): IH (m)7,3 a 7,7 ppm permutável pela D2O; 3H (m)7,ó a 6,9 ppm; IH (s)5,5 ppm; 2H (s)4,8 ppm; 2H (q)4 ppm; 4H (s)9,7 ppm; 2H (m)3,4 a 3,7 ppm; 3H (s)3,6 ppm; 2H (t)2,9 ppm; 3H (s)2,3 ppm; 2H (m) permutáveis pela ϋ£θ 1,4 a 1,8 ppm, 3H (t)l,2 ppm.

Poder rotatório em solução a 1? em clorofórmio:

X(nm)	Zõ7^2O’⁵°^c
589	- 36,5
578	- 38,7
546	- 46,8
436	-133

EXEMPLO 11

Fumarato da (-) 2-f/~ 2-(2-amino-etoxi)-etoxi 7^>-metil)-4-(2_>3-dicloro-f enil)-3-e toxi car bonil-5-me toxi car bonil-6-me ti 1-1,4-dirhidro-piridina.

Obtém-se o fumarato da (-) 2-£/~ 2-(2-amino-etoxi )-etoxi _7-metil}-4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-1,4-dicloro-piridina após solubilização de 4,2g de base em 50 ml de uma solução etanólica de ácido fumárico 0.172M. Recristalização em acetonitrilo.

Rendimento: 92$.

Ponto de fusão: 115°C.

5£2££Í££_É£_£££££££££Í£_^m£S££Íi££ £££Í££I_É£_£££Í££_lPi£^s£i~ vente CDCl^ e DMSO-d^): 2H (2d desdobrados)7,3 ppm; IH (t)7,l ppm; 2H (s)6,7 ppm; IH (s)5,45 ppm; 2H (m)4»7 ppm; 2H (q)4 ppm; 6H (m) 5,7 ppm; 3H (s)3,6 ppm; 2H (m)3,l ppm; 3H (s)2,3 ppm; 3H (t)l,3 ppm; IH (s permutado D20)7,7 ppm; 4H (s permutado D20)5,7 ppm.

Poder rotatório em solução a 1$ em DMSO:

A(nm)	az²⁰-⁵°^c
589	- 33,1
578	- 35,2
546	- 43,0
436	-134,6

EXEMPLO 12 ( + ) Tartarato da (-) 2-££~ 2-(2-amino-etoxi)-etoxi j^-metilj-4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil20

κ

-1,4-di-hidro-piridina.

Dissolve-se 0,2g do composto do exemplo 10 em 3»1 ml de uma solução etanólica de ácido (+) tartárico O,133M. Após evaporação do dissolvente, obtém-se 0,24g do sal pretendido.

Ponto de fusão: 150°C.

Poder rotatório em solução a 1% em DMSO:

\(nm)	_Z6_V21,5°C
589	- 29,9
578	- 32,5
546	- 40,5
436	-133,9

EXEMPLO 13 (-) Tartarato da (-) 2-^/2-(2-amino-etoxi)-etoxj7-metilj-4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-1,4-dihidro-plridina.

Dissolve-se 0,3g do composto obtido no exemplo 10 em 4,6 ml de uma solução etanólica de ácido (-) tartárico 0,133M. Obtém-se deste modo o sal pretendido após filtração.

Ponto de fusão: lól-l66°C (sublimação).

Poder rotatório em solução a 1% em DMSO:

\(nm)	_fo(721,5^OC
589	- 32,9
578	- 35
546	- 42,8
436	-142,4

Ç:

EXEMPLO 14

Tartarato racémico da (-) 2-^/2-(2-amino-etoxi-)-etoxí7-metilj-4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-l,4-dihidro-piridina.

Dissolve-se O,45g do composto obtido no exemplo 10 em 6,9ml de uma solução etanólica de ácido tartárico racémico O,133M.

Obtém-se deste modo o sal pretendido após filtração.

Ponto de fusão: l60-170°C.

Poder rotatório em solução a 1$ em DMSO:

\(nm)	_Z^21,5°C
589	- 31,2
578	- 33,5
546	- 41,1
436	-135,9

ESTUDO FARMACOLÓGICO

EXEMPLO 15

Afinidade para o sítio de fixação das dihidropiridinas.

estudo do deslocamento pela (-) 2-^/2-amino-etoxi)-etoxi7-metilJ' -4-(2,3-dihidro-fenil)-3-etoxi-carbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-l,4-dihidro-piridina e pelo seu racémico do PN 200-110 tritiado, fixado de modo específico ao sítio das dihidropiridinas associado ao canal cálcico lento, permitiu demonstrar que o composto preparado pelo processo de acordo com a presente invenção apresenta uma afinidade para estes sítios 30 vezes superior em re lação ao seu racémico.

Este estudo realizou-se sobre preparações de membranas micro£ somais preparadas a partir do músculo esquelético dos membros posteriores de rato (Wistar).

Os ratos são mortos por decapitação. Os músculos esqueléticos são recolhidos e lavados em tampão I (MOPS/KOH ph 7,4 20mM, sacaro se 0,3M, EDTA lmM, iodoacetamida 0,lmM, pepstatina A 1 ^M, leupeptina lmg/1 e PMSF 0,1 jiM). Em seguida os músculos são fragmentados mecanicamente, retomados em 4 volumes de tampao I por grama de tecidos e homogeneizados.

Centrifuga-se em seguida o homogeneizado, durante 10 minutos a 3.200g, eliminam-se os sedimentos e centrifugam-se em seguida os sobrenadantes durante 20 minutos a 15D00g, agitam-se os sobrenadan tes durante 15 minutos a 4°C no tampão I contendo 0,6M final de KOI e centrifugam-se, depois, durante 45 minutos a 70.000g.

Retomam-se os sedimentos no tampão I, homogeneizados em potter”. Centrifugam-se os homogeneizados a lOO.OOOg durante 45 minu tos e os sedimentos assim obtidos correspondem à fracção microssc) mal utilizada para os estudos de ligação e de deslocamento.

A actividade dos compostos de acordo com a presente invenção é apreciada pelo deslocamento do /'’η/ρΝ 200-110, fixado de modo específico ao seu receptor associado ao canal cálcico lento por concentrações crescentes dos compostos a examinar.

valor obtido (K 0,5)» para cada um dos compostos, que reo presenta a concentração do composto que desloca 50$ do £ H/PN 200-110, permite o cálculo de uma constante de dissociação verdadeira (Κ^) :

K0,5 = KjX..^{1 +} em que fa*} representa a concentração do /''íí/PN 200-110 livre e a constante de dissociação para o equilíbrio do complexo faAj

PN 200-110 determinada por fixação directa.

As Kj dos dois compostos estão reunidas no Quadro I:

QUADRO I

COMPOSTO	Kj EXPRESSA EM nM
COMPOSTO da INVENÇÃO	0,28 í 0,15
RACÉMICO	8,2 í 1,7

EXEMPLO 16

Estudo sobre o efeito mesentérico isolado de coelho contraído pelo cálcio.

Este ensaio efectua-se sobre orgãos isolados recolhidos em coelhos machos da Nova Zelândia com 2,5 a 3 Kg submetidos a dieta hídrica 18 horas antes do sacrifício.

Após sacrifício rápido do animal, recolhe-se a artéria mesen térica e disseca-se em anéis de 2 mm de comprimento; o endotélio elimina-se de modo mecânico.

Depois de um período de estabilização de 90 minutos, as preparações são submetidas a um meio despolarizante (35mM KC1) e sem cálcio (0,1 mM EGTA) durante 15 minutos.

Realiza-se uma gama controlo adicionando ao banho de 6 em 6 minutos doses acumuladas de cálcio até ao efeito máximo. As preparações são então lavadas durante um período de 15 minutos e incuba-se o composto uma hora antes da renovação da gama de cálcio.

Ensaia-se uma única concentração de composto de acordo com a presente invenção por órgão.

As respostas obtidas na presenga do composto de acordo com a presente invenção são expressas em percentagem do valor máximo da gama controlo.

pD’2 calcula-se de acordo com o método de Van Rossum (1963)

Os valores de pD’2 do composto de acordo com a presente inven gão e do seu racémico figuram no quadro II. Estes dados indicam a nítida superioridade (mais que o dobro) do composto preparado pelo processo de acordo com a presente invenção, em relação ao seu racémico, para prevenir uma contracção vascular induzida pelo cájL cio.

QUADRO II

COMPOSTO	PD'2
COMPOSTO DA INVENÇÃO	7,97
RACÉMICO	7,64

EXEMPLO 17

Estudo no rato espontaneamente hipertenso (SHR) acordado.

Ratos machos SHR com 280 a 350g, com 18 a 24 semanas de idade são anestesiados com imalgène'<-' (150 mg/kg i.p.). Sao introduzidos dois cateteres de polietileno, um na aorta abdominal para o registo de parâmetros hemodinâmicos, o outro na veia jugular para a administração dos compostos de acordo com a presente invenção.

Os cateteres são tunelizados ao nível do pescoço. Os animais são utilizados pelo menos 48 horas depois da intervenção.

As pressões arteriais abdominais, sistólica e diastólica são registadas com a ajuda de um receptor Statham P23XL sobre um registador Gould ES 1000. Os compostos são administrados por via intravenosa sob um volume de 0,5 ml/kg. As doses administradas dos compostos estudados são expressas em mg/kg de base. A pressão arterial é registada em contínuo até 6 horas depois do tratamento. As variações da pressão arterial sistólica depois do tratamen to estão reunidas no quadro III.

composto de acordo com a presente invenção distingue-se do seu racémico pela sua actividade mais potente e ainda melhor manutenção no tempo, o que constitui uma vantagem considerável em terapêutica. Com efeito, para a mesma dose seis horas depois do tratamento, a actividade do composto de acordo com a presente invenção é cerca de 4 vezes superior em relaçao ao seu racémico.

QUADRO III

COMPOSTO	DOSE (mg/kg)	Variações da çressão arterial sistólica (AmmHg) após tratamento
1H30	3H	óH
COMPOSTO DA INVENÇÃO	0,1	-16Í2	-18-2	-21Í5
RACÉMICO	0,1	-11Í3	- 5-3	- 5Í2

COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA

EXEMPLO 18

Comprimidos doseados com 1 mg de (-) 2-^/2-amino-etoxi)-etoxi/ -metilj -4- (2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-1,4-dihidro-piridina (A.D.E.M.M.D.P.).

A.D.E.M.M.D.P. ------------------------------1 mg

Sacarose de amido---------------------------64 mg

Celulose excipiente -------------------------25 mg

Ácido algínico------------------------------10 mg para um comprimido com um peso teórico de 100,00 mg.

Claims

Processo para a preparação da (-) 2- A, £ 2- (2-amino-etoxi) -etoxi._7-metil > -4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-l,4-dihidro-piridina, composto de fórmula e dos seus sais de adição com um ácido inorgânico ou orgânico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, caracterizado pelo facto de se condensar o 2-/72-(2-cloro-etoxi)-etoxi_7-etanol com a ftalimida potássica, no seio de dimetilformamida a quente, para se obter o 2-/”2-(2-ftalimido-etoxi)-etoxi_7-etanol, composto de fórmula o qual se transforma, em seguida, mediante reacçao com o reagente de Jones, no ácido 2-/f2-(2-f talimido-etoxi ) -etoxi__7~acético, composto de fórmula que se trata com o carbonildiimidazol e o ácido de Meldrum na presença de piridina em cloreto de metileno, para se obter o composto de fórmula o qual se faz reagir em seguida com o (R) 2-fenil-2-metoxi-etanol, composto de fórmula para se obter o ρ-cetoéster dè fórmula

O O

OCH₃ (R) (VI) qus se condensa na presença de formato de amónio em etanol com um benzilideno de fórmula

Cl

Cl (VII) para se obter a (4R4¹R/4S4'R)4-(2,3-diclorofenil)-5-metoxicarbonil-3- (2-metoxi-2-fenil-etoxicarbonil) -6-metil-2- 2- (2-ftalimido-etoxi) -etoxi _7~nietil \ -1,4-dihidro-piridina , composto de fórmula ch₃ ch₃ooc

4R4'R/4S4'R)

O o qual em seguida:

quer:

se submete â acção de uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio, em solução em acetonitrilo, para se obter a (4R4'R/4S4'R)
2- - £ 2-(2-carboxi-fenilcarboxamido)-etoxi) J7-etoxi_7-metil^ -4-(2,
3-dicloro-fenil)-5-metoxicarbonil-3-(2-metoxi-2-fenil-etoxicarbonil)-6-metil-l,4-dihidro-piridina, composto de fórmula (4R4'R/4S4'R)

-30que se trata com uma mistura de glime e etilato de sõdio, a quente, para se obter uma mistura contendo a (-) 2-2-(2-carboxi-fenil-carboxamido)-etoxi_7~etoxi j -4-( 2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-l,4-dihidro-piridina, composto de fórmula

COOH (X) e o seu homólogo, substituído na posição 5 por um radical etoxicarbonilo, quer:

se separa mediante cromatografia em coluna de sílica utilizando como eluente uma mistura de cloreto de metileno e de acetato de etilo (95:5 V/V) para se obter o isómero.menos polar da 4-(2,3-dicloro-fenil)-5-metoxicarboni1-3-(2-metoxi-2-feni1-etoxicarbonil )-6-meti1-2-( /72-(2-ftalimido-etoxi)-etoxi _7-metil j -1,4-dihidro-piridina, o qual se submete, em seguida, ã acção do etanolato de sódio na presença de glime em solução em etanol, para se obter uma mistura contendo o composto de fórmula X e o seu homólogo, substituído na posição 5 por um radical etoxicarbonilo, /

-31o qual se submete, em seguida, à acçao do carbonildiimidazol em solução em um alcano halogenado ã temperatura ambiente para se obter uma mistura contendo a (-) 4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-2-í £ 2-(2-ftalimido-etoxi)-etoxi _/-metil r-1,4-dihidro-piridina, composto de fórmula e o seu homólogo substituído na posição 5 por um radical etoxicarbonilo, o qual se purifica, em seguida, mediante HPLC, (fase inversa) , para se obter a (-)4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-2-£ 2-(2-ftalimido-etoxi)-etoxiJ-metilj -1,4-dihidro-piridina, o qual se leva, em seguida, a refluxo em etanol na presença de hidrato de hidrazina para se obter o composto de fórmula I que se pode em seguida salificar com um ácido orgânico ou inorgânico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico

Lisboa, 02 de. Outubro de 19 3 9

RESUMO

Processo para a preparação de um novo derivado da 1,4-dihidro-piridina denominado (-) 2-, 2-(2-amino-etoxi)-etoxi J7-meti1j-4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-1,4-dihidro-piridina

Descreve-se um processo para a preparação da (-) 2- £ / 2-(2-amino-etoxi)-etoxi_7-metilj -4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxícarbonil-6-metil-l,4-dihidro-piridina, composto de fórmula e dos seus sais de adição com um ácido inorgânico ou orgânico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, gue consiste em se condensar o 2-/2-(2-cloro-etoxi)-etoxi_7~etanol com a ftalimida potãssica, no seio da dimetilformamida a quente, para se obter o 2-Z 2-(2-ftalimida-etoxi)-etoxi_/-etanol, composto de fórmula

Ο (II) ο qual se transforma, em seguida, mediante reacção com o reagente de Jones, no ãcido 2-/~ 2-(2-ftalimido-etoxi)-etoxi_7-acético, com posto de fórmula que se trata com o carbonildiimidazol e o ácido de Meldrum na presença de piridina em cloreto de metileno, para se obter o composto de fórmula o qual se faz reagir em seguida com o (R) 2-fenil-2-metoxi-etanol, composto de fórmula que se condensa na presença de formato de amónio em etanol com um benzilideno de fórmula (Vil) para se obter a (4R4 ¹ R/4S4 ' R) 4-(2,3-diclorofenil)-5-metoxicarbonil-3-(2-metoxi-2-fenil-etoxi-carbonil)-6-metil-2-^/~2-(2-ftalimi do-etoxi)-etoxi_7-metil > -1,4-dihidro-piridina, composto de fórmula
4R4'R/4S4'R) ο o qual em seguida quer:

se submete ã acção de uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio, em solução em acetonitrilo, para se obter a (4R4'R/4S4'R) 2-} /7/72-(2-carboxi-fenilcarboxamido)-etoxi_7-etoxi_7-metil J -4-(2,3-dicloro-fenil)-5-metoxicarbonil-3-(2-metoxi-2-fenil-etoxicarbonil)-6-meti1-1,4-dihidro-piridina, composto de fórmula (4R4'R/4S4’R)

-36que se trata com uma mistura de glime e etilato de sódio, a quente, para se obter uma mistura contendo a (-) 2-£ //2-(2-carboxi-fenil-carboxamido)-etoxi_7~etoxi -4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarboni1-5-metoxicarbonil-6-meti1-1,4-dihidro-piridina, composto de fórmula

COOH

O (X) e o seu homólogo, substituído na posição 5 por um radical etoxicarbonilo, querj, se separa mediante cromatografia em coluna de sílica utilizando como eluente uma mistura de cloreto de metileno e de acetato de etilo (95:5 V/V) para se obter o isómero menos polar da

4-(2,3-dicloro-fenil)-5-metoxicarboni1-3-(2-metoxi-fenil-etoxicarbonil)-6-metil-2-i Γ 2-/^_2-ftalimido-etoxi)-etoxi 7^-metil ( t ~ z

-1,4-dihidro-piridina, o qual se submete, em seguida, ã acção do etanolato de sódio na presença de glime em solução em etanol, para se obter uma mistura contendo o composto de fórmula X e o seu homólogo, substituído na posição 5 por um radical etoxicar-37- bonilo, o qual se submete, em seguida, ã acção do carbonildiimidazol em solução em um alcano halogenado ã temperatura ambiente para se obter uma mistura contendo a (-)4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-2- í 2- (2-f talimido-etoxi)-etoxi_7-metil ç-1,4-dihidro-piridina, composto de formula (XI) por um radical etoxi· e o seu hamõlogo substituído na posição 5 carbonilo, o qual se purifica, em seguida, mediante HPLC, (fase inversa), para se obter a (-)4-(2,3-dicloro-fenil)-3-etoxicarbonil-5-metoxicarbonil-6-metil-2- | /72-(2-ftalimido-etoxi)-etoxiJ-metil -1,4-dihidro-piridina, o qual se leva, em seguida, a refluxo em etanol na presença de hidrato de hidrazina para se obter o composto de fórmula I que se pode, em seguida, salificar com um ácido orgânico ou inorgânico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico .

0 composto preparado pelo processo de acordo com a presente invenção é útil como medicamento.