PT90988B

PT90988B - Processo para a preparacao de derivados de progesterona 19-substituidos uteis como inibidores da 19-hidroxilase

Info

Publication number: PT90988B
Application number: PT90988A
Authority: PT
Inventors: John O'neal Johnston; Gene Warwick Holbert
Original assignee: Merrell Dow Pharma
Priority date: 1988-06-28
Filing date: 1989-06-27
Publication date: 1994-11-30
Also published as: IE892086L; IL90727A; PT90988A; NO892678L; KR910000588A; EP0348910B1; JPH0248598A; IE66338B1; HU204066B; DK318589A; FI92706C; PH25714A; NO892678D0; JP2729320B2; NZ229696A; IL90727A0; ES2075014T3; HUT51288A; EP0348910A3; DK167534B1

Description

Processo para a preparação de derivados de progesterona 19-substituídos úteis como inibidores da 19-hidroxilase

Descreve-se um processo para a preparaçao de compostos

que consistea) em reduzir um 10-(2-propinil)-20-metoxi-19-norpregna-5,

17(20)-dien-21-oato com um hidreto como agente redutor para se obter o composto 21-hidroxi correspondente e em eliminar depois qualquer grupo protector utilizando técnicas convencionais;

ou

b) em fazer reagir um 5’-V) , 10 -epoxi- 19-norpregnano apropriado com brometo de propargilmagnésio para se obter o 5'V -hi/D droxi-10 p -propargil-19-norpregnano correspondente em eliminar depois qualquer grupo protector mediante técnicas convencionais, oxidação de qualquer grupo 3-hidroxi no produto final utilizando reagentes convencionais para se obter uma cetona ou eliminação da função ãcido de qualquer grupo 5-hidroxi para se obter um composto ou

c) em fazer reagir um 10-(l-acetoxi-2-propinil)-19-norpregnano apropriado com pentinil-cobre e com butil-litio para se obter um composto comportando um grupo 10-alenilo e em eliminar depois qualquer grupo protector utilizando técnicas convencionais;

ou

d) ern fazer reagir um pregnen-19-al apropriado com ciclopropilamina para se obter o composto 19-ciclopropilimino corresponder! te, em reduzir depois por acção de um hidreto até ã obtenção de uma amina e em eliminar depois qualquer grupo protector utilizando técnicas convencionais;

ou

e) em fazer reagir um éster do trifluorometanossulfonato de um ].9-hidroxipregnano apropriado com etil-xantogenato de potãsio e em hidrolisar depois para se obter o 19-mercaptopregnano correspondente.

Estes compostos, que actuam como inibidores da 19-hidroxilase, são úteis como agentes anti-hipertensores.

(Dr. Jorge Garin)

MERREL DOW PHARMACEUTICALS INC.

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE DERIVADOS DE PROGESTERONA 19 -SUBSTITUÍDOS ÚTEIS COMO INIBIDORES DA 19-HIDROXILASE

Antecedentes da Invenção

Comparada com a desoxicorticosterona (DOC) a 19-nordesoxicorticosterona (19-norDOC) verificou-se exibir uma actividade hipertensora muito maior (Funder et al., Endocrinology, 103, 1978, p. 1514). E tão potente como a aldosterona na estimulação do transporte do Na⁺ através do epitélio da bexiga de sapo (Perrone et al., Am. J. Physiol. 41, 1981, E 406) e é duas a cinco vezes mais potente que DOC na actividade de retenção do sódio. (Kagawa et al., Soc. Exp, Biol. Med., 94, 1957, p. 444).

Isolou-se 19-norDOC a partir de ratos com hipertensão de regeneração de suprarrenais (ARH) (Gomez-Sabche et al., Endocrinology, 105, 1981, p. 708) e se seres humanos (Dale et al., Sterolds, 37, 1981, p. 103). A excreção elevada do composto foi referida para três espécies de ratos hipertensos: ratos ARH, ratos hipertensos espontâneos (SHR) e ratos Dahl com susceptibilidade congénita ao sal (Griffing et al., Endocrinology, 121, 1987, p. 645; Dale et al., Endocrinology, 110, 1982, p. 1989; Gomez-Sanchez et al.,

J. Steroid Biochem., 25, 1986, p. 106). Os niveis aumentados de 19-norDOC urinários observaram-se em várias classes de se res humanos hipertensos. (Griffing, et al., J. Clin. Endocri. nol. Metab.. 56, 1983, p. 218).

Na formação biossintética de 19-nosteróides, tais como 19-norDOC, a fase inicial é a 19-hidroxilação supra -renal de um esteróide apropriado tal como DOC. A inibição da formação biossintética de 19-norDOC pela inibição de 19-hidrc) xilação de DOC servira, portanto, para diminuir o nível de 19-norDOC presente no animal envolvido e reduzir os efeitos hipertensores atribuíveis â presença desta substância.

Demonstrou-se que a 10-(2-propinil)estr-4-ene-3,17-diona (um inibidor da aromatase conhecido e um inibidor da 19-hidroxilase) retarda o desenvolvimento da hipertensão e reduz os níveis de 19-norDOC livre na urina quando administrado a ratos.SHR recém-nascidos (Melby et al., Hypertension, 10, 1987, p. 484).

Resumo da Presente Invenção

A presente invenção refere-se a inibidores de 19-nordesoxicorticosterona que são derivados da progesterona apresentando uma diversidade de substituintes na posição 19 ou com certos grupos presentes em vez do grupo 19-metilo. Os compostos têm, eventualmente, um substituinte hidroxi ou um substituinte hidróxi esterificado na posição 21 e são, facuitativamente, oxigenados na posição 11.

Descrição pormenorizada da Invenção

A presente invenção refere-se aos compostos de fórmula geral

R na qual

R^ representa um átomo de hidrogénio, um grupo hidroxi ou um grupo de fórmula geral

II

R₆-C_O_;

R₂ representa um átomo de oxigénio, um grupo ou (H)(OH);

R3 representa um grupo de fórmula geral C=C-(CH₂)_n-, CH₂=CH-(CH₂)_n-, Y-C=C-CH₂-, CH₂=C=CH-, ciclopropilo-N(R)-(CH₂)_n-R₇-S-(CH₂)_n-, ^-( CH^-, R₆S-C(O)-S-(CH₂)_n-, R₆O-C(O)-S-(CH₂)_n ou

X

R4 representa =0, um grupo (H)(0H), ou de fórmula geral (H)(ORg) ou =CH₂;

- 4 R^ representa um átomo de hidrogénio,um grupo amino, hidroxi, oxo ou metileno;

R^ representa um grupo alquilo C^_g, cicloalquilo γ ou fenilo;

Ry representa um átomo de hidrogénio, um grupo alquilo C^_g, ciclopropilo, alcanoílo ^2-6’ ^enzoílo ou trifluoroacetilo;

Rg representa um grupo alcanoílo ^₀;

R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo;

Σ representa um átomo de oxigénio ou de enxofre ou um grupo NH;

Y representa um átomo de cloro, bromo ou iodo,

N representa um número inteiro de 1 a 4 e as linhas a ponteado representam, cada uma, facultativamente, uma ligação dupla com a condição de apenas estar presente uma ligação dupla na posição 5,6, quando R^ representa um grupo (H)(OH) ou quando não existe uma ligação dupla nas posições 4,5 ou 6,7 e com a condição de apenas poder estar presente uma ligação dupla na posição 9,11, quando R2 representa um grupo (H)(H).

Os grupos alquilo referidos anteriormente podem ser de cadeia linear ou ramificada e são exemplificados por metilo, etilo, propilo, isopropilo e butilo. Os grupos cicloalquilo ¢5-7 podem ser representados por ciclo-

- 5 pentilo, ciclo-hexilo ou ciclo-heptilo. Os grupos alcanoilo Cg g podem ser representados por acetilo, propionilo, bufanoílo e hexanoílo. Representativos dos grupos alcanoilo Cg j_q são os grupos acetilo, propinoilo, butanoilo, hexanoílo, octanoílo e decanoílo.

Podem-se utilizar diversos processos para pre parar os compostos da presente invenção. Assim, para preparar os compostos 19-etinilo pode utilizar-se como composto intermédio apropriado um composto 5Ύ, 10 -epoxi, esteroide. Quaisquer grupos hidroxi ou ceto presentes na molécula neste momento são protegidos. Os éteres sílilicos são o método de protecção preferido para qualquer grupo hidroxi enquanto as cetonas são geralmente protegidas sob a forma do cetal correspondente, de preferência cetal etilénico. 0 esteróide 5 10 o£-epóxi, referido anteriormente reage com brometo de propargilmagnésio para se obter o composto correspondente 5 ®<-hidroxi-10 ^-propargilo, que também pode ser referido como 5°<-hidroxi-19-etinilesteróide. Quaisquer grupos protectores podem eliminar-se neste momento ou em qualquer fase subsequente apropriada, mediante aplicação de métodos convencionais. Normalmente, um grupo 3-hidroxi protegido está presente e a desprotecção proporciona o composto

3-hidroxi livre correspondente. Este composto pode ser oxidado para a 3-cetona correspondente, utilizando-se métodos e reagentes convencionais, tais como reagente de Jones ou a oxidação de Oppenauer. Qualquer grupo 5-hidroxi presente no inicio deste processo, pode desidratar-se para o composto simultaneamente com a oxidação e pode ser desidratado por tratamento específico com ácido. Na verdade, é possível

alguma flexibilidade na realização das reacções, uma vez introduzido o grupo propargilo. 0 composto 5 ot. 10 o<-epoxi inicial referido anteriormente obtém-se a partir do esteróide 5(10)-eno correspondente por oxidação com N-bromossuccinimida seguida por reacção com um hidreto tal como o boro-hidreto de sódio e em seguida com hidróxido de sódio metanólico.

composto 5(10)-eno obtêm-se, por sua vez, a partir do correspondente 1, 3,5( 10)-trieno mediante redução por fases utilizando métodos convencionais. No decorrer desta reacção ou na preparação para a redução, podem ser manipuladas várias funções contendo oxigénio, se apropriadas, para um dado composto. Assim, um grupo destes pode ser introduzido ou protegido, oxidado ou reduzido ou qualquer associação destas operações.

Numa via alternativa a estes compostos 19-eti. nilo, pode utilizar-se como composto inicial 3,3,17,17-bis(etilenodioxi)-19-etinilandrost-5-eno. Este bis-cetal é hidrolisado selectivamente na posição 17, utilizando-se ácido perclórico a 0,3% em t-butanol e diclorometano para se obter a 17-cetona correspondente. A cetona reage em seguida com metoxiacetato de metilo e diisopropilamina de litio, após o que o éster indicado, isto é, o seu grupo metileno, se adiciona por meio do grupo 17-cetona para dar o 17-3ubstitui do-17-hidroxi-esteróide. A desidratação introduz uma ligação dupla 17-exociclica e o éster -metoxi resultante é reduzido com um agente de redução hidreto, tal como o hidreto de diisobutil-alumínio para dar o 2-metoxi-etanol correspondente (éter enólico) que em seguida é tratado com ácido para hi drolisar ambas as funções éter enólico e também o 3-cetal

-⁷ Ύ para dar ο 21-hidroxi-20-oxopregnano desejado. Numa variante deste processo é possível partir de 19-etinilandrost-4-eno-3,17-diona e converter esta no 3-etoxi-3,5-dieno correspondente por meio de processos convencionais. Faz-se reagir a 17-cetona em seguida como referido anteriormente, para se obter, finalmente, após redução dos diversos grupos protectores o mesmo produto como referido antes.

Para preparar os outros compostos 10-substituídos da presente invenção, utiliza-se um esteróide apropriado com uma função na posição 19. Isto é, utiliza-se um 19-hidroxi-esteróide ou um esteróide 19-al apropriado. Assim, por exemplo, para se obter os compostos 10-(1,2-propadienilo) utiliza-se 19-hidroxiprogesterona como composto inicial. Este converte-se no correspondete 19-éster e em seguida as duas funções cetona são protegidas conto etileno-cetais. 0 19-acetato em seguida hidrolisa-se novamente para o grupo 19-hidroxi e este oxida-se para o correspondente 19-al. A reacção de 19-al com trimetilsililacetileto de lítio seguido por cloreto de acetilo e fluorato de tetrabutilamónio proporciona o composto 19-acetoxi-19-etinilo correspondente. 0 tratamento deste composto com cobre pentinílico e butil-lítio realiza a formação do grupo 10-( 1,2-propadienilo). Em seguida, nesta fase, são eliminados quaisquer grupos protectores por processos convencionais para fornecerem o composto 10-(1,2-propadienil)-esteróide desejado. Para se obterem os compostos 19-ciclopropilamino da presente invenção, faz-se reagir 3, 3,20,20-bis( etilenodioxi) pregn-5-en-19-al com ciclopropilamino para dar o composto 19-ciclopropilamino correspondente. Este composto imino reduz-se à imina correspondeu-

te utilizando-se um hidreto como agente de redução, tal como o hidreto de alumínio e lítio e removem-se os grupos protectores para se obter o composto desejado.

Podem preparar-se outros compostos a partir de 19-hidroxiprogesterona. Esta é convertida ao éster de trifluorometano-sulfonato correspondente e o sulfonato é deslocado com etilxantogenato de potássio. A hidrólise de xantogenato resultante dá depois a 19-mercapto-pregn-4-eno-3,20-diona desejada. Este composto 19-naercapto pode fazer-se reagir com o halogeneto ou anidrido de ácido apropriado para dar o éster correspondente.

Podem preparar-se outros compostos R^ substituídos da presente invenção pelos processos referidos anteriormente. Assim, para se preparar os compostos em que R^ representa um grupo azidometilo, pode utilizar-se 19-hidroxiandrost-4-eno-3,17-diona como composto inicial. 0 grupo 19-hidroxi converte-se ao merilato, tosilato, acetato ou a outro éster correspondente e o grupo 3-cetona é protegido selectivamente sob a forma de etileno-cetal com deslocamento da ligação dupla para a posição 5· A 17-cetona resultante reage em seguida com metoxiacetato de metilo e diisopropilamida de lítio na mesma série de reacções como descritas anteriormente em ligação com o composto 19-etinilo relacionado. Contudo, antes da eliminação dos grupos protectores do substituinte na posição 17, faz-se reagir o composto 19 esterificado em que o referido 19-éster é um éster reactivo, tal como mesilato ou tosilato, com azida de sódio para fornecer o composto 19-azido. Em seguida a remoção dos diversos grupos protectores por métodos convencionais dá a 19-azido- 9

-21-hidroxipregn-3-ene-3,21-diona.

Para se obterem oa compostos 10-oxiranilo e 10-tiranilo o método utilizado é semelhante ao seguido nas fases iniciais da preparaçao do composto 19-azilo. Contudo, em vez de se fazer reagir o 19-éster com azida de sódio o grupo éster é removido para dãr o composto 19-hidroxi livre que em seguida se oxida para 19-aldeído. Este aldeído fáz-se reagir em seguida com metileto de dimetilsulfónio ou com metileto de dimetiloxosulfónio para dar o composto 10-oxiranilo desejado. Em seguida, o oxirano pode utilizar-se para se preparar o tiirano correspondente mediante reacção com sulfure to de trifenilfosfina/ácido piérico.

Podem-se obter diversos outros compostos da presente invenção pelos processos específicos seguintes:

- os ésteres dos compostos 21-hidroxi podem-se obter por métodos convencionais, isto é, mediante tratamento do álcool com o cloreto ou o anidrido de ácido apropriados na presença de uma amina terciária tal como piridina ou trietilamina. A adição de dissolvente (por exemplo, diclorometano) é facultativa, assim como a adição de uma quantidade catalítica de

4-dimetilaminopiridina.

Os compostos 11-hidróxi da presente invenção preparam-se por incubação de um esteróide inicial apropriado com um microrganismo apropriado que introduzirá a substituição indicada. 0 esteróide escolhido pode ser um que proporcione o produto desejado directamente ou um esteróide que possa conter diversos substituintes ou grupos protectores que são removidos após a introdução do grupo 11-hidroxi para dar o produto desejado. Os compostos 11c<-hidroxi obtêm-se do mesmo modo. Os compostos 11-ceto obtêm-se facilmente por oxidação dos álcoois 11X- ou 11^- referidos anteriormente. Os compostos Δ^(11) obtêm-se por desidratação catalítica dos ll^³-álcoois ou dos seus precursores mediante aplicação de métodos convencionais. Entende-se por precursores dos álcoois 11os compostos que contêm um grupo 11-hidroxi com outros grupos substituintes ou protectores presentes na molécula sendo estes grupos removidos apôs a conclusão do processo descrito anteriormente.

Para se obterem os compostos 3jb-hidroxi- /\ , utiliza-se o processo seguinte. Reduz-se a 3,3-etilenodioxi-10^ -(2-propinil)-19-norandrost-5-en-17-ona com boro-hidreto de sódio e converte-se, por métodos convencionais, 17-álcool resultante do 17-acetato. 0 contacto breve deste composto com ácido acético aquoso à temperatura de 60°C elimina o c

grupo protector de cetal para dar o composto 3-ceto- ~ que contém alguma quantidade do 3-ceto- /\^-isómero correspondente. Esta cetona reduz-se com um hidreto, tal como o boro-hidreto de sódio para dar o composto 3-hidroxi correspondente que é sililado com cloreto de t-butildimetilsililo para dar o composto 3-( t_-butildimetilsililoxi) correspondente. Em seguida, hidrolisa-se o 17-éster para o álcool correspondente e este álcool é oxidado para a correspondente 17-cetona, ambos por meio de métodos convencionais. A cadeia lateral hidroxi-acetilo é introduzida na posição 17, utilizando-se o metoxiacetato de metilo e o processo geral descrito anteriormente.

Para se obterem os compostos 3 2⁷-hidroxi- /\\ reduz-se a 3,3-etileno-dioxi-10-( 2-propinil)-19-norandrost-511

-en-17-ona com boro-hidreto de sódio e trata-se o 17-álcool resultante com ácido para se remover o grupo 3-cetal. 0 composto resultante é sililado com cloreto de _t-butildimetilsililo para dar o composto 17-(;t-butildimetilsiloxi) correspon dente que é reduzido com hidreto de diisobutil-alumínio para dar o composto 3 -hidroxi correspondente. Este álcool converte-se no 3-acetato correspondente e remove-se o grupo 17-sililoxi, ambos por meio de métodos convencionais para se obter o 17-álcool. Em seguida este é oxidado para a 17-cetona, por métodos convencionais e a cadeia lateral 17-hidroxiacetilo é introduzida por meio de metoxiacetato de metilo e do método geral descrito anteriormente. Podem obter-se os três ésteres por esterificação do composto 3-hidroxi apropriado.

Para se obterem os compostos da presente invenção em que R^ representa um grupo =0^, utiliza-se como compostos inicial 17 J³ -hidroxi-lO-( 2-propinil)-estr-4-en-3-ona. Este derivado da testosterona submete-se a uma reacção de Wittig para dar 3-metileno-10-( 2-propinil)-estr-4-en-17^-01. 0 grupo hidroxi é em seguida oxidado à cetona correspondente e é introduzida uma cadeia lateral hidroxi-acetilo na posição 17, mediante aplicação do processo geral descrito anteriormente e utilização de metoxiacetato de metilo. Aqueles compostos em cue n representa o número 2 ou 4 podem obter-se por métodos idênticos aos descritos anteriormente. Assim, por exemplo, um composto 5 °< , 10 o<-epoxi-esterôide pode reagir com um reagente de Grignard apropriado ou, altemativamente, é possível aplicarem-se processos idênticos aos já descritos para os compostos 19-hidroxi,

mas com 19-(hidroxialquil)-esteróides como compostos iniciais e obtendo-se os compostos hidróxialquilicos a partir dos compostos 19-hidroxi por métodos convencionais.

Podem obter-se os compostos que contém ligações duplas múltiplas no sistema de núcleos do esteróide, mediante desidrogenação do composto inicial apropriado. Assim, por exemplo, pode desidrogenar-se 21-hidroxi-10-( 2-propinil)-19-norpregn-4-ene-3,20-diona com 2,3-dicloro-5,6-diciabenzo-quinona em dioxano para se obter o 1,4-dieno correspondente. A desidrogenação daquele composto com cloranil em /-butanol dá o 4,6-dieno correspondente. 0 contacto subsequente do 4,6- dieno com 2,3-dicloro-5,6-dicianobenzoquinona em dioxano conduz à formação do 1,4,6-trieno correspondente.

Os compostos da presente invenção que contêm um substituinte 10-(3-halogeno-2-propinilo), obtêm-se a partir do composto 2-propinilo correspondente. Em seguida, trata-se este composto apropriado com _t-butóxido de potássio, seguido por tratamento com uma fonte de halogéneo positivo, tal como o hipoclorito de /-butilo, N-clorossuccinimida, N-bromossuccinimida ou N-iodossuccinimida.

Os compostos 6-amino da presente invenção preparam-se, mediante aplicação do processo seguinte, a partir de 21-hidróxi-10-(2-propinil)-19-norpregn-4-ene-3,20-diona. A 4-enediona indicada ê acetilada para dar o éster 21-acetato correspondente. Este éster faz-se reagir em seguida com ortoformato de etilo e ácido js-tolueno-sulf ónico para dár o 3-etoxi-3,5-dieno correspondente. Quando se expõe uma solução etanólica deste 3,5-dieno à luz solar na presença de ar, forma-se o composto 6 -hidroxi-3-ceto- A correspon-

dente. Este composto converte-se do correspondente 3,20-bis-etileno-cetal que em seguida é oxidado para a 6-cetona. A reacção desta 6-cetona com cloridrato de hidroxilamina origina uma oxima que em seguida se reduz com zinco e ácido acético para se produzir o composto é^^amino correspondente.

Em seguida, removem-se os vários grupos protectores de éster e cetal por métodos convencionais, para se obter o produto 6 (Z-amino desejado. Os grupos protectores também podem ser removidos do composto intermédio 6-cetona para dar o produto 3,6,2O-tri-cetónico. A 6-cetona intermédia protegida também pode ser submetida a uma reacção de Wittig para dar o composto 6-metilénico correspondente.

Os compostos da presente invenção são úteis como inibidores da 19-hidroxilase e como agentes anti-hipertensores. Especificamente, a actividade inibidora dos compostos da presente invenção em relação à 19-hidroxilase de suprarenal demonstra-se por um ensaio radioenzimático in vitro. Solubilizam-se os compostos em ensaio no meio tampão/dissolvente com concentrações que variam entre 1 nM e 50 uM, em seguida adicionam-se a tubos de ensaio contendo uma suspensão mitocondrial de supra-renal, isto é, de rato, hamster, bovino, primata ou ser humano, um sistema gerador de NADPH e desoxicosterona marcada, radioac tivamente. Os componentes do ensaio incubam-se durante vários intervalos de tempo a uma temperatura compreendida entre 25° e 37°C e interrompe-se a reacção. Extraem-se os corticóides hidroxilados /isto é, 19-H0-D0C(19-hidroxidesoxicorticosterona), 18-H0-D0C(18-hidroxidesoxicorticosterona e corticosterona/ com um dissolvente orgânico e isolam-se mediante aplicação de proces- 14

303 convencionais de cromatografia.

Avalia-se a inibição da 19-hidroxilação comparando os tubos de ensaio de controlo com tampão com os tubos de ensaio que contêm os compostos inibidores. Determinam -se as concentrações de inibidor que produzem 50% de inibição (ΟΙ^θ). Utilizando-se este teste a ΟΙ^θ (inibição de enzima dependente do tempo) observada para 21-hidroxi-10-('2-propinil)-10-norpregn-4-ene-3,20-diona foi cerca de 50 mM, o que demonstra que o composto indicado proporciona uma inibição superior à observada com o substrato (DOC), o qual exi biu uma ΟΙ^θ ou km de 600 nM. Especificando a 21-hidroxi-10-( 2-propinil)-19-norpregn-4-ene-3,20-diona tem uma afinidade 12 vezes maior para o sítio activo da 19-hidroxilase do que a do substrato natural (DOC).

Além disso, demonstrou-se a actividade anti-hipertensora dos compostos da presente invenção pelo processo seguinte. Utilizaram-se ratos machos espontaneamente hipertensos (SHR) com idade de 4 semanas e meia. Os ratos foram condicionados em gaiolas metanólicas, um rato por gai£ la e mantiveram-se com uma dieta regular de Purina Rat Chow e água num ambiente de temperatura constante e ciclos de 12 horas de luz e 12 horas de escuridão. Um grupo de 6 ratos, recebeu diariamente o composto em ensaio por injecção subcutânea de 10 mg/kg de massa corporal, preparada com azeite e etanol a 5% e sonicada. 0 grupo de controlo de 7 SHR foi injectado com o veículo. Os ratos receberam tratamento durante várias semenas com injecções diárias do composto em ensaio em SHR e com o veículo no controlo SHR.

Registaram-se as pressões sanguíneas sistóli- 15 cas (SBPs) dos animais náo em stress'’ conscientes utilizando-se um fisiôgrafo ligado a uma anilha na cauda e um transdutor de fotocélula em ambiente isolado do som e a temperatura constante iniciando-se o tratamento às 3 semanas. Os ratos foram habituados a este procedimento durante diversas sessões de treino. As primeiras determinações de SBP de confiança fizeram-se às 7-8 semanas de idade. Para se obter o efeito desejado, tal como o efeito anti-hipertensor, podem-se administrar os compostos da presente invenção por via oral, parentérica, por exemplo, intramuscular ou subcutânea a um doente necessitado de tratamento. 0 termo doente utiliza-se para significar um animal de sangue quente, por exemplo, mamíferos, tais como ratos, murganhos, cães, gatos, cavalos, suínos, vacas, carneiros e seres humanos. Os compostos da presente invenção podem-se administrar isoladamente os misturados por um modo apropriado, sob a forma de uma composição farmacêutica, ao doente. A quantidade de composto a administrar variará com a gravidade da doença, podendo ser necessário tratamento repetido. Para a administração oral ou parentérica a quantidade do composto administrado, isto é, a quantidade de anti-hipertensor eficaz, varia entre 0,1 e 150 mg/kg de massa corporal e por dia, de preferência entre 1 e 50 mg/kg de massa corporal e por dia. As doses unitárias para administração oral ou parentérica, podem conter, por exemplo, entre 5 θ 250 mg de ingrediente activo. Os compostos podem ser administrados isoladamente ou em em associação com outros.

Para administração oral podem formular-se os compostos sob a forma de composições sólidas ou líquidas, tais como cápsulas, pílulas, comprimidos, torciscos, pós, soluções, suspensões e emulsões. As formas unitárias sólidas podem ser uma cápsula, geralmente uma cápsula de gelatina, contendo o composto activo e um veículo, por exemplo, agentes lubrificantes e um excipiente inerte tal como lactose, sacarose e amido de milho. Num outro aspecto, pode comprimir-se um composto activo da presente invenção, com bases de compressão convencionais, tais como a lactose, sacarose e amido de milho em associação com agentes de ligação tais como a acácia, o amido de milho, a gelatina, agentes de desagregação, tais como o anidrido de batata ou os ácidos algínicos e agentes lubrificantes, tais como o ácido esteárico ou estearato de magnésio.

Para a administração parentérica, os compostos podem administrar-se como formas de dosagem injectáveis de uma solução ou suspensão do composto num dissolvente aceitável sob o ponto de vista fisiológico, com um veículo farmacêutico que pode ser constituído por um líquido estéril tal como água em óleo com ou sem adição de um agente tensioactivo e de outros adjuvantes aceitáveis em farmácia.

Exemplos de óleos que se podem utilizar nestas preparações são os óleos de petróleo, os óleos animais, vegetais ou de origem sintética, por exemplo, o óleo de amendoim, o óleo de soja e óleo mineral. Em geral, para soluções injectáveis em particular, são preferidos os veículos líquidos, como a água, a solução de cloreto de sódio, dextrose aquosa e soluções de açucares relacionados, etanois e glicois, tal como propilenoglicol ou polietilenoglicol.

Podem administrar-se os compostos sob a forma

J de um penso cutâneo, de uma injecção-depósito ou de uma composição para implantação que pode ser preparada tal modo que permita uma libertação prolongada do ingrediente activo.

ingrediente activo pode comprimir-se em paletes ou em pequenos cilindros e implantar-se por via subcutânea ou intramuscular ou por injecção-depósito ou por implantes. Os implantes podem utilizar substâncias inertes, tais como os polímeros biodegradáveis e os silicones sintéticos, por exemplo, silastia,borracha de silicone preparada pela Dow-Coming Corporation. Para mais informação sobre veículos farmacêuticos apropriados e técnicas de formulação consultar os textos correntes, tais como o Remington* s Pharmaceutical Sciencs, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania.

Os exemplos que se seguem são fornecidos para ilustrar a presente invenção. Estes não foram construídos como limitantes em qualquer sentido.

EXEMPLO 1

Preparou-se uma solução de 3,14 g de 3-metoxi-20 -hidróxi-19-norpregna-l,3,5(10)-trieno em 100 ml de éter anidro e destilou-se aproximadamente 100 ml de amoníaco na solução. Em seguida, adicionou-se rapidamente 2,9 g de fio de litio, cortado em pequenos fragmentos. Após 10 minutos, adicionaram-se 35 ml de álcool absoluto, gota a gota, durante 10 a 20 minutos. Deixou-se a mistura em repouso durante a noite e a amónia evaporou-se. Adicionou-se cuidadosamente água gelada, à mistura que se extraiu com éter e lavou-se em seguida três vezes o extracto etêrico com água e uma vez com solução saturada de cloreto de sódio e secou-se depois com sulfato de magnésio. Concentrou-se a solução e recristalizou-se o resíduo com éter/hexano para se obter 3-metoxi-20 oí-hidroxi-19-norpregna-2,5(10)-dieno sob a forma de cris tais incolores.

Dissolveu-se 3,16 g do dieno obtido anteriormente, em uma mistura de 70 ml de _t-butanol, 20 ml de diclorometano, 20 ml de água e 0,1 ml de ácido perclórico a 70% e manteve-se em agitação à temperatura ambiente durante duas horas. Em seguida, verteu-se a solução de diclorometano numa solução aquosa saturada de hidrogeno carbonato de sódio e extraíu-se com diclorometano. Secou-se a solução de diclorometano com sulfato de magnésio, concentrou-se, recristalizando-se o resíduo em acetato de etilo/hexano para se obter 20 -hidroxi-19-norpregn-5(10)-en-3-ona sob a forma de cristais brancos.

Uma solução homogénea de 3,20 g da cetona 5(10)-insaturada obtida anteriormente, em 75 ml de _t-butanol 11 ml de diclorometano e 11 ml de água, arrefeceu-se para a temperatura de 0°C e tratou-se com 0,1 ml de ácido perclórico a 70% em llml de água. Em seguida adicionaram-se 2,26 g de N-bromossuccinimida e agitou-se a solução durante 15 minutos à temperatura de 0°C e depois arrefeceu-se para -10°C, antes de se adicionar 1 g de boro-hidreto de sódio. Agitou-se a mistura durante 15 minutos e adicionaram-se depois 24 ml de hidróxido de sódio metanólico IN. A mistura resultante agitou-se à temperatura de 0°C durante uma hora e concentrou-se até um pequeno volume e verteu-se em água. Separou-se por filtração o produto sólido que precipitou, lavou-

- 19 Λ.

-se com água e secou-se ao ar. A recristalizaçáo do sólido com acetato de etilo/hexano deu 5 </, 10 oi-epoxi-ig-norpregnano^ , 20 c<-diol sob a forma de cristais brancos.

epóxido obtido anteriormente, 3,20 g, em 50 ml de diclorometano foi tratado com 3,11 g de cloreto de t^-butildimetilsililo na presença de 7 ml de trietilamina e 0,12 g de 4-dimetilaminopiridina e foi agitado à temperatura ambiente durante cerca de 30 horas. Concentrou-se a solução e retomou-se o residuo com éter. Lavou-se a solução etérea três vezes com ácido clorídrico 1ΪΓ e em seguida com solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio e depois com solução saturada de cloreto de sódio. Após secagem, com sulfato de magnésio, filtrou-se a solução e concentrou-se para se obter 3j*>,20 ck-bis(_t-butildimetilsililoxi) -5 ©õ, 10 o<-epoxi-19-norpregnano sob a forma de um óleo viscoso.

Obteve-se uma solução de 5,5 g do éter bis-silílico anterior em 50 ml de éter anidro e adicionou-se-lhe brometo de propargil-magnésio preparado a partir de brometo de propargilo (0,30 g de uma solução em peso a 80% em tolueno) e aparas de magnésio (0,48 g) em 20 ml de éter à temperatura ambiente. Após agitação durante duas horas verteu-se a mistura reaccional numa mistura de gelo e solução saturada de cloreto de amónio. Extraiu-se a mistura com éter e lavou-se a fase aquosa três vezes com água e uma vez com solução saturada de cloreto de sódio e em seguida secou-se com sulfato de magnésio e concentrou-se. Submeteu-se o resíduo a cromatografia rápida em gel de sílica que se eluiu com uma mistura de acetato de etilo e hexano para se obter 3 20 o<-bis( t^-butildimetilsililoxi) -5 o<-hidroxi-10-( 2-pro20 pinil)-19-norpregnano sob a forma de um sólido branco.

Adicionou-se 5,89 g do 19-propinil esteróide obtido anteriormente, em 100 ml de tetra-hidrofurano, 25 ml de ácido clorídrico IN e agitou-se a mistura durante 24 horas. Em seguida diluiu-se a mistura com éter e eliminou-se a fase aquosa. Lavou-se a fase orgânica com solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução saturada de cloreto de sódio, secou-se com sulfato de magnésio. A evaporação do dissolvente proporcionou um resíduo que se recristalizou em acetona, fornecendo 3 3³ > 5 c<, 20 «í-tri-hidroxi-10-(2-propinil)-19-norpregnano sob a forma de cristais brancos.

Dissolveram-se 3,61 g do composto tri-hidroxi obtido anteriormente em 100 ml de acetona, arrefeceu-se para 0°C e tratou-se com excesso de reagente padrão de Jones. Quando a oxidação se apresentou completa por cromatografia em camada fina, adicionou-se isopropanol até deslocação do oxidante. Decantou-se e concentrou-se o líquido. Retomou-se o resíduo resultante com éter, lavou-se três vezes com água e uma vez com solução saturada de cloreto de sódio e secou-se. 0 resíduo proveniente da concentração da solução etérea cristalizou-se em acetato de etilo/hexano, obtendo-se 5σ<-hidroxi-10-(2-propinil)-19-norpregnano-3,20-diona.

Dissolveram-se 3,57 g da diona preparada anteriormente, em 50 ml de clorofórmio, tratou-se com 95 mg de ácido para-tolueno-sulfónico 5% molar e agitou-se durante a noite. Lavou-se a mistura resultante com solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio e secou-se com sulfato de sódio e concentrou-se. 0 resíduo obtido foi recristalizado com acetato de etilo/hexano para se obter 10-(2-propinil)-1921

-norpregn-4-eno-3,20-diona sob a forma de cristais brancos. 0 composto apresenta a fórmula estrutural seguinte:

EXEMPLO 2

Dissolveram-se 3,14 g de 3-metoxi-20<-hidroxi-19-norpregna-l,3,5(10)-trieno em 55 ml de acetona, arrefeceu-se para O°C e tratou-se gota a gota com um excesso de reagente padrão de Jones. Quando se completou a reacção, controlada por cromatografia em camada fina, destruiu-se o excesso de oxidante por adição de isopropanol. Decantou-se a solução e lavaram-se os sais de crómio com um pouco de acetona. Concentrou-se a solução e dissolveu-se o resíduo em éter. A solução etérea foi lavada com água três vezes e com solução saturada de cloreto de sódio, foi seca com sulfato de magnésio e foi concentrada. Recristalizou-se o resíduo com acetato de etilo/hexano, para se obter 3-metoxi-19-norpregna-l,3,5(10)-trieno-20-ona, sob a forma de cristais brancos.

Adicionou-se a solução preparada anteriormente de 3,12 g de 20-ona, em 35 ml de tetra-hidrofurano, a uma solução de diisopropilamida de lítio que tinha sido preparada em 15 ml de tetra-hidrofurano à temperatura de -78°C a partir de 3,1 ml de diisopropilamina e e 12,5 ml de n-butil-lítio 1,6 M em hexano. Após agitação durante 30 minutos, adicionaram-se, gota a gota, 2,8 ml de clorotrimetilsilano, recentemente destilado com óxido de bário, em 10 ml de tetra -hidrofurano. Após agitação durante 10 minutos à temperatura de -78°C, aqueceu-se a solução até 0°C, diluiu-se com hexano, filtrou-se e concentrou-se. Retomou-se o resíduo com hexano/ diclorometano e filtrou-se novamente e concentrou-se até à obtenção dum óleo incolor que era o éter trimetilsililenólico da 20-ona inicial.

éter silil-enólico obtido deste modo retomou-se com 25 ml de diclorometano e 25 ml de hexano e arrefeceu-se para a temperatura de 0°C sob um tubo de secagem de sulfato de cálcio. Adicionaram-se 1,76 g de ácido m-cloroperbenzóico. Agitou-se a mistura até que o papel de iodeto de amido indicasse que todo o oxidante havia sido consumido. Em seguida filtrou-se a mistura para eliminar o ácido m-clorobenzóico precipitado. Adicionou-se éter ao filtrado e lavou-se com solução aquosa a 10% de tiossulfato de sódio e duas vezes com solução aquosa saturada de carbonato de potássio. Secou-se a solução com sulfato de magnésio e concentrou-se, retomou-se o resíduo com 100 ml de tetra-hidrofurano. Adicionaram-se 20 ml de ácido clorídrico IN â solução e agitou-se durante 1 hora. Adicionou-se éter e decantou-se a fase aquosa. Lavou-se a fase orgânica com solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio, secou-se com sulfato de magnésio e concentrou-se. A recristalização do resíduo com acetato de etilo/hexano forneceu 21-hidroxi-3-metoxi-19- 23

-norpregna-1,3,5(10)-trieno-2-ona.

Uma solução do composto obtido anteriormente em 100 ml de benzeno tratou-se cora 1,7 ml de etilenoglicol e 0,19 g de ácido jd-to lueno-sulfónico e aqueceu-se sob refluxo com um separador de água de Dean-Stark durante 18 horas. Arrefeceu-se a mistura e adicionou-se 1 ml de piridina para neutralizar o ácido. Adicionou-se éster dietilico à solução e lavou-se três vezes com água e uma vez com solução saturada de cloreto de sódio, secou-se com sulfato de magnésio e concentrou-se. Recristalizou-se o resíduo com acetato de etilo/hexano para se obter 20,20-etilenodioxi-21-hidroxi-3-metoxi-19-norpregna-l,3,5(10)-trieno.

cetal obtido anteriormente (3,73 g) foi submetido a uma redução com amoníaco e litio como descrito no Exemplo 1 para a preparação de 3-metoxi-20o<-hidroxi-19-norpregna-2,5(10)-dieno para se obter 2O,2O-etilenodioxi-21-hidroxi-3-metoxi-19-norpregna-2,5(10)-dieno sob a forma de cristais brancos.

Hidroxilaram-se selectivamente 3,75 g do 2,5(10)-dieno obtido anteriormente, como descrito para a preparação de 21-hidroxi-3-metoxi-19-norpregna-5( 10)-en-3-ona para se obter 20,20-etilenodioxi-21-hidroxi-3-metoxi-19-norpregna-5(10)-en-3-ona sob a forma de cristais brancos.

Trataram-se 3,60 g da 5(10)-en-3-ona com N-bromossuccinimida e ácido perclórico diluído, seguido da adição de boro-hidreto de sódio e base como descrito para a preparação de 5 °4-10 o<í-epoxi-19-norpregnano-3 , 20 oQ-diol. Após transformação e cristalização com acetato de etilo/hexano obteve-se 5c<-10 c<-epoxi-20,2O-et ilenodioxi-3 5^a » 21-di-hidroxi-19-norpregnano sob a forma de cristais brancos.

A sililação do composto epoxidiol obtido anteriormente como descrito no Exemplo 1 para a preparação de 3^,20 ot-bis-(_t-butildimetilsililoxi)-5 o<-10 o< -epoxi-19-norpregnano produziu 3, 21-bis(_t-butildimetilsililoxi)-5 -10°C-epoxi,20,20-etilenodioxi-19-norpregnano sob a forma dum óleo viscoso.

Trataram-se 6,0/ g do bis-sililoxi-epóxido com brometo de propargil-magnésio como descrito para a preparação de 3 J³,20 oó-bis(_t-butildimetilsililoxi) -5 «(-hidroxi-10-(2-propinil)-19-norpregnano. Após cromatografia e recristalização, obteve-se 3^,21-bis(t-butildimetilsililoxi)-20,20-etilenodioxi-5 °<-hidroxi-10-( 2-propinil)-19-norpregnano sob a forma de cristais incolores.

Dissolveram-se 6,47 g deste composto em tetra-hidrofurano, arrefeceu-se até à temperatura de 0°C e tratou-se com uma solução de fluoreto de tetrabutilamónio comercial (50 ml, 1M em tetra-hidrofurano). Quando o composto inicial se tinha consumido (controlado por cromatografia em camada fina), diluiu-se a solução com éter dietilico e lavou-se várias vezes com água e uma vez com solução saturada de cloreto de sódio e secou-se com sulfato de magnésio. A concentração e recristalização do resíduo com acetato de etilo/hexano deu 20,20-etilenodioxi-3 J³, 5 <*, 21-tri-hidroxi-10-(2-propinil)-19-norpregnano sob a forma de cristais brancos.

Trataram-se 4,19 g do composto tri-hidroxi em 75 ml de benzeno com 2,04 g de isoprópoxido de alumínio e

14,5 ml de ciclo-hexanona e aqueceram-se sob refluxo com um separador de água Dean-Stark, durante 3 horas. Arrefeceu-se a solução, lavou-se três vezes com ácido clorídrico IN e uma vez com solução saturada de cloreto de sódio, secou-se com sulfato de magnésio e concentrou-se. Submeteu-se o resíduo a uma cromatografia em gel de sílica, seguida de cristalização com acetato de etilo/hexano para se obter 20,20-etilenodioxi-21-hidroxi-10-( 2-propinil)-19-norpregn-4-en-3-ona sob a forma de cristais brancos.

Trataram-se 3,99 g da pregn-4-en-3-ona em 100 ml de tetra-hidrofurano com 20 ml de ácido clorídrico IN e agitou-se a solução â temperatura ambiente durante a noite. Adicionou-se éter dietilico e rejeitou-se a fase aquosa. Lavou-se a fase etérea com solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução saturada de cloreto de sódio, secou-se com sulfato de magnésio e concentrou-se. Recristalizou-se o resíduo com acetato de etilo/hexano para se obter 21-hidroxi-10-( 2-propinil)-19~norpregn-4-eno-3,20-diona sob a forma de cristais brancos.

EXEMPLO 3

Tratou-se uma solução de 6,12 g de 3,3,17,17-bisetilenodioxi-10-(2-propinil)-19-norandrost-5-eno em 43 ml de diclorometano e 150 ml de jt-butanol com ácido perclórico a 0,3%. Aqueceu-se a mistura sob refluxo moderado, durante duas horas com agitação, e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Decorridas duas horas, verteu-se a mistura reaccional sobre uma solução aquosa saturada de carbonato de sódio e extraiu-se com éter dietilico. Lavou-se o extracto etéreo com água e solução saturada de cloreto de sódio e secou-se com sulfato de magnésio. Obteve-se, após concentração da solução etérea, 3,3-etilenodioxi-10-(2-propinil)-19-norandrost-5-en-17-ona.

A recristalização do produto impuro com acetato de etilo forneceu 3,2 g (rendimento de 47%) do composto analiticamente puro. RMN (CDCl^): 0,94 (s, 3H, 13-CH^);

3,12 (s, 1H, HO); 3,35 (s, 3H, CH₃ de éter); 3,76 (s, 1H, H₂₀); 3,80 (s, 3H, CH-j de éter); 3,95 (m, 4H, cetal);

5,53 (m, 1H, Hg). IV (KBr): 3450, 2115, 1745 cm'¹. MS: (EI) m/z 458 (M⁺, 1,4%), 99 (100%); (CI/CH₄) m/z 459 (32%, M+H), 441 (100%).

Obteve-se maos 1,07 g após concentração das soluções-mãe, perfazendo um rendimento total de 78,7% de composto utilizável.

Adicionou-se uma solução de 12,4 ml de metoxiacetato de metilo em 40 ml de tetra-hidrofurano, durante 5 minutos, a uma solução arrefecida para -78°C de diisopropilamida de lítio preparada a partir de diisopropilamina (18 ml, 125 mmoles) e de n-butil-lítio 2,9M em hexano (12,4 ml, 125 mmoles) no mesmo dissolvente (150 ml). Agitou-se a solução durante 45 minutos â temperatura de -78°C. Em seguida adicionou-se, gota a gota, durante 5 a 10 minutos, uma solução de 3,3-etilenodioxi-10-(2-propinil)-19-norandrost-5-en-17-ona (5,55 g) em 50 ml de tetra-hidrofurano e agitou-se a solução durante 3 horas a essa temperatura. Em seguida adicionaram-se, gota a gota, 15 ml de solução aquosa saturada de cloreto de amónio e verteu-se a mistura sobre água arrefecida com gelo e extraiu-se com acetato de etilo. Lavou-se o extracto com solução saturada de cloreto de sódio, secou-se com sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se, para se obter 3,3-etilenodioxi-10-( 2-propinil)-17 jb-hidroxi-20-metoxi-19-norpregn-5-en-21-oato de metilo. Filtraram-se 9,31 g do produto impuro através duma coluna de gel de sílica e eluiu-se com acetato de etilo/hexano a 1:1 para se obterem 5,97 g (rendimento de 83%) sob a forma duma mistura de isómeros. A recristalização em acetato de etilo/hexano forneceu, de acordo com a amostra analítica, um único isómero.

P.F. 158° - 159°C. RMN (CDCl-j): 0,94 (s, 3H, 13-CH-j);

3,12 (s, 1H, HO); 3,35 (s, 3H, CH₃ de éter); 3,76 (s, 1H H_2q); 3,80 (s, 3H, CH₃ de éter); 3,95 (m, 4H, cetal);

5,53 (ra, 1H, Hg). IV (KBr): 3450, 2115, 1745 cm”¹. MS: (EI) m/z 458 (M⁺, 1,4%), 99 (100%); (CI/CH₄) m/z 459 (32%, M+H), 441 (100%).

Arrefeceu-se para a temperatura de -20°C e tratou-se, gota a gota, com 95 ml de cloreto de tionilo, durante 5 a 10 minutos, uma solução de 5,79 g de 3,3-etilenodioxi-10-( 2-propinil)-17-hidroxi-20-metoxi-19-norpregn-5-en-21-oato de metilo em 95 ml de piridina. Após agitação durante 45 minutos àquela temperatura, verteu-se a solução sobre água arrefecida com gelo. Extraiu-se o composto com acetato de etilo e lavou-se o extracto duas vezes com solução saturada de cloreto de sódio, secou-se com sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se para se obterem 5,5 g (rendimento de 96%) do composto impuro. Uma cromatografia rápida (acetato de etilo a 20%/hexano a 80%) proporcionou

2,59 g (rendimento de 45%) de (E)-3,3-etilenodioxi-10-(2-propinil)-20-metoxi-10-norpregna-5,17( 20)-dien-21-oato de metilo. A cristalização em acetato de etilo/hexano deu uma ί

amostra analítica com p.f. 188° - 190°C . RMN (CDCl^): 1,02 (s, 3H, 13-CH₃); 3,55 (S, 3H, CH₃ de éter); 3,77 (s, 3H,

CH₃ de éster); 3,95 (m, 4H, cetal); 5,54 (m, 1H, H^).

IV (KBr): 3300, 2130, 1735 cm¹. MS: (EI) m/z 440 (M⁺,

12%), 99 (100%); (CI/CH₄) m/z 441 (M+H, 100%).

Arrefeceu-se até à temperatura de -20°C e tratou-se, gota a gota, com uma solução a 20% de hidreto de diisobutil-alumínio em 11,7 ml de hexano, uma solução de

2,34 g de (E)-3,3-etilenodioxi-10-(2-propinil)-20-metoxi-19-norpregna-5,17(20)-dien-21-oato de metilo. Agitou-se a solução temperatura de -20°C durante 30 minutos. Em seguida adicionaram-se 6 ml de água e agitou-se a mistura â temperatura de 0°C durante 30 minutos, verteu-se sobre água arrefecida com gelo e extraiu-se com éter dietílico/diclorometano a 3:1. Lavaram-se os extractos com solução saturada de cloreto de sódio, secaram-se com sulfato de magnésio e concentraram-se. Submeteram-se 2,06 g do resíduo a cromatografia rápida eluindo com acetato de etilo/hexano a 1:1 para se obter (Ξ)-3,3-etilenodioxi-21-hidroxi-20-metoxi-10-( 2-propinil)-19norpregna-5,17(20)-dieno. A recristalização em acetato de etilo deu a amostra analítica de p.f. 180°C. RMN (CDC1₃):

0,96 (s, 3H, 13-CH₃); 2,01 (t, CCH, J=2,8); 3,54 (s, 3H,

CH₃ de metoxi); 3,95 (m, 4H, cetal); 4,14 (dABq, 2H, H₂₁, ^OH CH⁼5’5» Jab⁼¹³’⁰⁾’ 5,55 (m, 1H, Ηθ). A experiência de permuta de D₂0 revelou o protão do grupo hidroxilo a

1,54 ppm (t, J=5,5). IV (KBr): 3480, 3290, 2130, 1685 cm¹. MS: (EI) m/z 412 (M⁺, 7%), 99 (100%); (CI/CH₄) m/z 413 (M+H), 395 (100%).

A uma solução de 1,15 g (2,79 mmoles) de (3)-3,3-etilenodioxi-21-hidroxi-20-metóxi-10-(2-propinil-19-nor pregna-5,17(20)-dieno em 50 ml de acetona e 5 ml de água adi. cionou-se £-tolueno-sulfonato de piridínio (10 moles%, 0,07g). Aqueceu-se a solução sob refluxo durante 2 horas e nesse momento a análise por cromatografia em camada fina indicou ausência de composto inicial. Concentrou-se a solução e retomou -se o resíduo com éter dietílico/diclorometano a 3:1. Lavou-se a solução 2 vezes com água e uma vez com solução saturada de cloreto de sódio e secou-se com sulfato de magnésio. Obteve-se 3,3-etilenodioxi-21-hidroxi-10-(2-propinil)-19-norpregn-5-en-20-ona após concentração, o que foi confirmado por ressonância magnética nuclear.

Sem caracterização adicional dissolveu-se o composto em 50 ml de metanol, tratou-se com 5 ml de ácido clorídrico IN e agitou-se durante 24 horas, momento em que a análise por cromatografia em camada fina indicou a ausência de cetal. Concentrou-se a solução e retomou-se o resíduo numa mistura de éter dietílico e acetato de etilo. Lavou-se a solução sucessivamente com água, solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e com solução saturada de cloreto de sódio e secou-se com sulfato de magnésio. A concentração proporcionou 0,98 g (99% de rendimento) de composto impuro a partir do qual se isolou 21-hidroxi-10-(2-propinil) -19-norpregn-4-eno-3,20-diona (rendimento de 42%) por cromatografia rápida e cristalização em acetato de etilo. p.f. 169,5 - 171°C. RMN (CDCl^): 0,95 (s, 3H, 13-CH^);

2,02 (t, 1H, HCC, J=2,8); 3,25 (t, 1H, OH, J=4,7); 4,19 (dABq, 2H, H₂₁, ^J0H,CH⁼⁴»⁷’ ^JAB⁼¹⁹^’ ^{5,88 S lar}S°’ ^1H’ ^H4^*

IV (KBr): 3500-3300, 3275, 2130, 1700, 1670, 1650 cm^-1.

MS: (EI) m/z 354 (M⁺, 32%), 323 (100%); (CI) m/z 335 (M+H,

100%).

EXEMPLO 4

Tratou-se com 4 ml de anidrido acético e agitou-se durante 18 horas â temperatura ambiente 3,5 g de .19-hidroxiprogesterona e 0,25 g de 4-dimetilaminopiridina em 8 ml de piridina. Arrefeceu-se a solução até à temperatura de 0°C e tratou-se com 4 ml de metanol para consumir o excesso de anidrido acético. Após agitação durante 15 minutos, concentrou-se a solução até um pequeno volume sob pressão reduzida e retomou-se o resíduo com éter dietilico. A solução etérea foi lavada 3 vezes com ácido clorídrico diluído, uma vez com solução de hidrogenocarbonato de sódio e finalmente com solução saturada de cloreto de sódio. A secagem e concentração proporcionou 19-acetoxi-pregn-4-eno-3,20-diona que se obteve sob a forma dum produto sólido incolor após cristalização em etanol aquoso.

Dissolveram-se 3,73 g de 19-acetoxiprogesterona em 50 ml de benzeno anidro e trataram-se com 8,3 ml de ortoformato de trietilo, 3,7 ml de etilenoglicol e 0,19 g de monohidrato do ácido £-tolueno-sulfónico. Agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 24 horas e em seguida adicionou-se 0,1 ml de piridina. Diluiu-se a solução com éter dietilico, lavou-se 3 vezes com água e finalmente com solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a solução com sulfato de magnésio, concentrou-se e recristalizou-se o resíduo com etanol para se obter 19-acetoxi-3,3,2O,2O-bis(etile nodioxi)-pregn-5-eno sob a forma de cristais brancos.

Dissolveram-se 4,61 g do composto bis(etilenodioxi) obtido anteriormente em 50 ml de tetra-hidrofurano e tratou-se com 11 ml duma solução metanólica de hidróxido de litio 1,0 M. Após 2 horas, diluiu-se a solução com éter dietilico e lavou-se 3 vezes com água e em seguida com solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se a solução com sulfato de magnésio e concentrou-se. A recristalização do resíduo em acetato de etilo/hexano proporcionou 19-hidroxi-3,3,20,20-bis( etilenodioxi)-pregn-5-eno sob a forma de cris tais brancos.

Adicionou-se 1,6 ml de dimetilsulfóxido anidro em 10 ml de diclorometano anidro, gota a gota, durante 5 minutos, a uma solução de 0,96 ml de cloreto de oxalilo em 15 ml de diclorometano que se manteve a uma temperatura compreendida entre -50°C e -60°C. Decorridos 2 minutos adi cionou-se uma solução de 4,19 g do álcool 19-hidroxi-3,3,20,20-bis(etilenodioxi)-pregn-5-eno, obtido anteriormente, em 25 ml de diclorometano, durante 5 minutos. Continuou-se a agitação durante 15 minutos e adicionaram-se 7,0 ml de trietilamina. Em seguida, deixou-se a solução retomar a temperatura ambiente e diluiu-se com 250 ml de éter. Lavou-se a solução 3 vezes com ácido clorídrico diluído e uma vez com solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio e solução saturada de cloreto de sódio. Após secagem e concentração, submeteu-se o resíduo a cromatografia em gel de sílica e eluiu-se com acetato de etilo/hexano. A recristalização com o mesmo sistema de dissolventes proporcionou 3,3,20,20-bis(etilenodioxi) -pregn-5-en-19-al sob a forma de cristais brancos.

Adicionou-se uma solução de 4,17 g do 19-al em 25 ml de tetra-hidrofurano, gota a gota, à temperatura de -78°C a uma solução de trimetilsililacetileto de litio, que tinha sido preparado mediante tratamento de 1,87 g de bis( trimetilailil)-acetileno com metil-lítio comercial (7,9 ml, 1,4 M em éter dietilico) à temperatura de 0°C durante 3 horas. Deixou-se a solução retomar a temperatura ambiente e agitou-se durante 1 hora. Apôs arrefecimento até à temperatura de 0°C, adicionou-se 0,8 ml de cloreto de acetilo.

Após agitação durante 15 minutos, adicionou-se uma solução 1,0 M de fluoreto de tetrabutilamónio em 50 ml de tetra-hidrofurano e retirou-se o banho de gelo. Agitou-se a solução durante 30 minutos, diluiu-se com êter dietilico e verteu-se sobre cloreto de amónio aquoso. Lavou-se a fase orgânica 3 vezes com água e uma vez com solução saturada de cloreto de sódio e secou-se. Após concentração, o resíduo cromatografado em gel de sílica e eluido com acetato de etilo/hexano e recristalizado com etanol proporcionou 3,3,20,20-bis(etileno di oxi) -19-acetoxi-19-etinilpregn-5-eno.

Suspenderam-se 11,14 g de pentinil-cobre em 125 ml de éter dietilico anidro, arrefeceu-se até -40°G e tratou-se com 53 ml de n-butil-lítio 1,6 M em hexano. Agitou-se a mistura à temperatura de -40°C durante 1 hora e em seguida arrefeceu-se até -78°C. Uma solução que continha 4,85 g do composto 19-acetoxi-19-etinilo anteriormente preparado, em 250 ml de éter dietilico, foi arrefecida até -78°C num funil de adição com camisa de arrefecimento e foi rapidamente adicionada ao cuprato. Após agitação durante 15 minutos, interrompeu-se a reacção por meio da adição de 25 ml

de metanol previamente arrefecido até -78°C. A suspensão resultante foi vertida sobre uma solução de cloreto de amónio arrefecida com gelo e a mistura total foi filtrada através dum filtro auxiliar. Em seguida, separaram-se as camadas e lavou-se a fase orgânica com solução saturada de cloreto de sódio. Após secagem e concentração, submeteu-se o resíduo a cromatografia em gel de sílica utilizando-se acetato de etilo/hexano como eluente. A recristalização em etanol proporcionou 3,3,20,20-bis(etilenodioxi)-10-(1,2-propadienil)-19-norpregn-5-eno sob a forma de cristais brancos.

Tratou-se uma solução de 4,27 g do composto

1,2-propadienílico obtido anteriormente, em 50 ml de tetra-hidrofurano com 10 ml de ácido clorídrico IN e agitou-se durante 18 horas. Diluiu-se a solução com éter dietílico e retirou-se a fase aquosa. Lavou-se a fase orgânica com solução de hidrogenocarbonato de sódio, solução saturada de cloreto de sódio e secou-se. Após concentração, obteve-se um resíduo que se recristalizou em acetato de etilo/hexano para se obter 10-( 1,2-propadienil)-19-norpregn-5-eno-3,20-diona sob a forma de cristais brancos. Este composto apresenta a fórmula de estrutura seguinte

EXEMPLO 5

Uma solução de 4,17 g de 3,3,20,2O-bis( etilenodioxi)-pregn-5-en-19-al, obtido como descrito no Exemplo 4 e 25 ml de ciclopropilamina em 25 ml de metanol foi aquecida sob refluxo durante 48 horas. Em seguida concentrou-se a solução até à secura. A recristalização do resíduo em acetato de etilo/hexano proporcionou 3,3,20,20-bis(etilenodioxi)-19ciclopropilimino-pregn-5-eno.

Adicionaram-se 4,56 g do composto ciclopropilimínico obtido anteriormente, em 25 ml de tetrahidrofurano, gota a gota, a uma suspensão de 0,38 g de hidreto de alumínio e lítio em 25 ml de tetra-hidrofurano e aqueceu-se sob refluxo durante 4 horas. Arrefeceu-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente e tratou-se com pequenas porções de solução de tartarato de potássio e sódio saturada até o produto sólido cinzento ficaz branco. Adicionou-se sulfato de sódio anidro e continuou-se a agitação até à formação dum sólido granuloso branco. Então suspendeu-se a agitação e deixou-se a mistura em repouso durante a noite. Reti rou-se o produto sólido por filtração e lavou-se cuidadosamente com diversas porções de tetra-hidrofurano. Os filtrados reunidos foram concentrados e o produto sólido resultante foi recristalizado em etanol para se obter 3,3,20,20-bis(etilenodioxi)-19-ciclopropilamino-pregn-5-eno.

Dissolveram-se 4,58 g do composto 19-ciclopropilamínico, preparado como se descreveu anteriormente, em 200 ml de etanol e tratou-se com 15 ml de ácido clorídrico IN e agitou-se à temperatura ambiente durante 2 horas.

Adicionou-se cuidadosamente solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio até a solução ficar básica. Concentrou-se a solução e partilhou-se o resíduo entre diclorometano e água. Separou-se a fase orgânica, lavou-se com solução saturada de cloreto de sódio, secou-se e concentrou-se. Recri£ talizou-se o resíduo em acetato de etilo/hexano para se obter 19-ciclopropilamino-pregn-4-eno-3,20-diona. Este composto tem a fórmula estrutural seguinte

EXEMPLO 6

Converteu-se a 19-hidroxiprogesterona para o éster trifluorometano-sulfonato, deslocou-se o sulfonato com etilxantogenato de potássio e o xantogenato esteróide resultante foi hidrolisado para se obter 19-mercapto-pregn-4-eno-3,20-diona, procedendo totalmente de acordo com o processo descrito por P.J. Bednarski, D.J. Porubek and S.D. Nelson,

J. Med. Chem., 28, 1985, pp. 775-779.

EXEMPLO 7

Arrefeceu-se até à temperatura de 0°C uma solução de 3,47 g de 19-mercaptopregn-4-eno-3,20-diona e

- 3é „

4-dimetilaminopiridina em 50 ml de diclorometano e tratou-se com 4,2 ml de anidrido trifluoroacético e 8,4 ml de trietilamina. Retirou-se o banho de gelo e deixou-se a solução com agitação durante 1 hora. Concentrou-se a solução. Retomou-3e o resíduo com éter dietílico e lavou-se uma vez com ácido clorídrico IN, duas vezes com água e uma vez com uma solução de hidrogenocarbonato de sódio e solução saturada de cloreto de sódio. Secou-se e concentrou-se a solução resultante. A recristalizaçâo do resíduo resultante em acetato de etilo/he xano proporcionou o trifluoroacetato de 19-mercaptopregn-4-eno-3,20-diona sob a formas de cristais brancos.

Claims

Reivindicaçoes

1.- Processo para a preparação de compostos de fórmula geral na qual

R, representa um átomo de hidrogénio, um grupo hidroxi i?

ou um grupo de formula geral R^-C-O-, na qual R^ representa um grupo alquilo C^_g, cicloalquilo ou fenilo;

R₂ representa um ãtomo de oxigénio ou um grupo (Η) (H) ou (H) (OH) ;

R^ representa um grupo CH₂=C=CH- ou um grupo de fórmula geral CH=C-(CH₂)_r-, CH₂=CH-(CH₂)_n~, Y-C=C-CH₂-, ciclopropil-N(R)-(CH₂)_n ou R^-S-(CH₂) -, em que n representa um número inteiro de 1 a 4, Y representa um ãtomo de cloro, bromo ou iodo, R representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo metilo e R? representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C^_g, ciclopropilo, alcanoílo

C_ ,, benzollo ou trifluoroacetilo;
2“ b

R^ representa um ãtomo de oxigénio, um grupo (H)(OH) ou =CH₂ ou um grupo de fórmula geral (H) (0R_g) > na qual R_g representa um grupo alcanoílo C₂ ;

R_g representa um ãtomo de hidrogénio ou um grupo amino, hidroxi, oxo ou metileno; e cada uma das linhas ponteadas indica a presença eventual de uma ligação dupla com a condição de apenas estar presente uma ligação dupla na posição 5,6 quando R^ representa um grupo (H) (OH) ou quando não exista uma ligação dupla nas posições 4,5 ou 6,7 e com a condição de apenas poder estar presente uma ligação dupla na posição 9,11 quando R₂ representa um grupo (Η) (Η), caracterizado pelo facto (a) de se reduzir um 10-(2-propinil)-20-metoxi-19-norpregna-39-

- 5,17(20)-dien-21-oato com um hidreto como agente redutor para se obter o composto 21-hidroxi correspondente e de se eliminar depois qualquer grupo protector utilizando técnicas convencionais;

ou (b) de se fazer reagir um 5¾ , 10 X. -epoxi-19-norpregnano apropriado com brometo de propargilmagnésio para se obter o 5Ύ -hidroxi—-10 -propargil-19-norpregnano correspondente e de se eliminar depois qualquer grupo protector mediante técnicas convencionais, oxidação de qualquer grupo 3-hidroxi no produto final utilizando reagentes convencionais para se obter uma cetona ou eliminação da função ácido de qualquer grupo 5-hidroxi para se obter um composto Δ ;

OU (c) de se fazer reagir um 10-(l-acetoxi-2-propinil)-19-norpregnano apropriado com pentinil-cobre e com butil-lítio para se obter um composto comportando um grupo 10-alenilo e de se eliminar depois qualquer grupo protector utilizando técnicas convencionais;

ou (d) de se fazer reagir um pregnen-19-al apropriado com ciclopropilamina para se obter o composto 19-ciclopropilimino correspondente, de se reduzir depois por acção de um hidreto atê ã obten ção de uma amina e de se eliminar depois qualquer grupo protector utilizando técnicas convencionais;

ou

-40L (e) de se fazer reagir um éster do trifluorometanossulfonato de um 19-hidroxipregnano apropriado com etil-xantogenato de potássio e de se hidrolisar depois para se obter o 19-mercaptopregnano correspondente.

2.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral na qual

R representa um átomo de hidrogénio, um grupo hidróxi ¹ O ou um grupo de fórmula geral Rg - Ò - 0 -, na qual R representa um grupo alquilo C^_g, cicloalquilo Cg_₂ ou fenilo,

R^ representa um átomo de oxigénio ou um grupo (Η) (H) ou (H) (OH);

R^ representa um átomo de oxigénio ou um grupo (H) (OH) ou =CH₂; θ cada uma das linhas ponteadas indica a presença eventual de uma ligação dupla, com a condição de a ligação dupla na posição 5,6 apenas estar presente quando R₄ representa um grupo (H)(OH) ou quando não exista uma ligação dupla na posição 4,5 e com a condição de a ligação dupla 9,11 apenas poder estar presente quando R₂ representa um grupo (Η)(Η), caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
3.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 10-(2-propinil)-19-norpregn-4-eno-3,20-diona, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais corresponden temente substituídos.
4.preparação da caracterizado pondentemente

Processo de acordo com a reivindicação 1, para a 10-(1,2-propadienil)-19-norpregn-4-eno-3,20-diona, pelo facto de se utilizar compostos iniciais corressubstituídos.
5. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 19-ciclopropilaminopregn-4-eno-3,20-diona, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
6. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação d_a 19-mercaptopregn-4-eno-3,20-diona , caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos .
7.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação do trifluoroacetato da 19-mercaptopregn-4-eno-3,20-diona, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.
8. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 21-hidroxi-10-(2-propinil)-19-norpregn-4-eno-3,20-diona, caracterizado pelo facto de se reduzir o (E)-3,3-etilenodioxi-10-(2-propinil)-20-metoxi-19-norpregna-5,17(20)-dien-21-oato de metilo com hidreto de diisobutilalumínio para se obter o composto 21-hidroxi correspondente e de se eliminar depois os grupos protec tores utilizando técnicas convencionais.
9. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da 21-hidroxi-10-(2-propinil)-19-norpregn-4-eno-3,20-diona, caracterizado pelo facto de se reduzir o (E)-3,3-etilenodioxi-10-(2-propinil)-20-metoxi-19-norpregna-5,17(20)-dien-21-oato de metilo com hidreto de diisobutilalumínio para se obter o composto 21-hidroxi correspondente e de se eliminar depois o grupo protector mediante tratamento com piridínio-paratoluenossulfonato e depois com uma solução metanólica de ãcido clorídrico,

Lisboa, 27 de Junho de 1989 β 'Mente Oficial da Preprledade Industria!*

RESUMO

Processo para a preparaçao de derivados de progesterona 19-substituídos úteis como inibidores da 19-hidroxilase'

Descreve-se um processo para a preparaçao de compostos que consiste

a) em reduzir um 10-(2-propinil)-20-metoxi-19-norpregna-5,

17(20)-dien-21-oato com um hidreto como agente redutor para se obter o composto 21-hidroxi correspondente e em eliminar depois qualquer grupo protector utilizando técnicas convencionais;

ou

b) em fazer reagir um 5'V- , 10 -epoxi-19-norpregnano apropriado com brometo de proparailmagnésio para se obter o 5^- -hidroxi-10 p -propargil-19-norpregnano correspondente em eliminar depois qualquer grupo protector mediante técnicas convencionais, oxidação de qualquer grupo 3-hidroxi no produto final utili-44- zando reagentes convencionais para se obter uma cetona ou eliminação da função ácido de qualquer grupo 5-hidroxi para se obter um composto A,;

ou

c) em fazer reagir um 10-(l-acetoxi-2-propini1)-19-norpregnano apropriado com pentinil-cobre e com butil-lítio para se obter um composto comportando um grupo 10-alenilo e en eliminar depois qualquer grupo protector utilizando técnicas convencionais;

ou

d) em fazer reagir um pregnen-19-al apropriado com ciclopropilamina para se obter o composto 19-ciclopropilimino correspondente, em reduzir depois por acção de um hidreto até ã obtenção de uma amina e em eliminar depois qualquer grupo protector utilizando técnicas convencionais;

ou

e) em fazer reagir um éster do trifluorometanossulfonato de um 19-hidroxipregnano apropriado con etil-xantogenato de potãsio e em nidrolisar depois para se obter o 19-mercaptopregnano correspondente.

Estes compostos, gue actuam como inibidores da 19-hidroxilase, são úteis como agentes anti-hipertensores.

Lisboa, 27 de Junho de 1989

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