PT89494B

PT89494B - Processo para a preparacao de 4-alquil-1,4-dihidropiridinas com actividade antagonista do factor activador de plaquetas

Info

Publication number: PT89494B
Application number: PT89494A
Authority: PT
Inventors: Carlos Sunkel; Miguel Fau De Casa-Juana; Luis Santos; Pilar Ortega; Jaime Priego; Mariano Sanchez-Crespo
Original assignee: Alter Sa
Priority date: 1988-01-21
Filing date: 1989-01-20
Publication date: 1994-03-31
Also published as: HUT65253A; JPH05208958A; IE922412A1; MX9204642A; KR910008348B1; EP0325187B1; AR248137A1; DK25989A; GR3006934T3; BR9203580A; CA1332838C; JPH0552827B2; ZA89519B; ES2052783T3; HU9202873D0; NO923489D0; CA2074419A1; FI924018A; FI924018A0; ZA925692B

Description

Processo para a preparação de 4-elquiI-l,4-dihidroniridinas com actividade antagonista do factor activador de rlaquetas

A nresente invenção está relacionada com a nrenaração de uma série de conroostos farmacêuticos que contêm 1,4-dihidropiridinas com um grupo alquilo na nosição 4 do anel as quais possuem actividade antagonista do Pactor Actividor de Plaquetas (^AF - aceter).

A estrutura química do ^AF - aceter foi identifica da como 1-0-hexadecil / octadecil-2-acetil-sn-glicero-3-fosfocolina. Este composto é um autacoide (mediador biológico endógeno) fosfolínido e um mediador das reacções inflamatórias extremamente potente que ó libertado ror vários tinos de células, tecidos humanos e animais de exneriência. Estas cóíulas. são nrincinalmente granulócitos basófilos, eosinófilos e neutrófilos, macrófagos tecidulares e monocitos do sangue periférico, plaquetas, células de enitélios glandulares, células endoteliais e tecido neuronal. 0 ^AF - aceter é um potente indutor da agregação e secreção nlaquetária e um potente hinotensor da circulação sistémica. Este efeito deve-se à sua capacidade para nromover a vasodilatação neriférica, mas, influencia também as suas acções sobre a circulação pulmonar e o coração, já que produz diminuição da contractibilidade miocárdica e diminuição do fluxo coronário. Outro efeito do PAF - aceter é o de induzir broncoconstrição para doses 100 vezes mais baixas do que a histamina.

-2/

I

Finalmente, deve destacar-se a sua acção pró-infla matória devida à capacidade de estimular a adesão e agregação de neutrófilos, seguida de libertação de enzimas lisossomais e activação da cascata do ácido aracuidónico. Em estudos realizados em animais de experiência, demonstrou-se que o PAF - aceter exerce um efeito sobre o endotílio vascu lar, promovendo a exsudação de miasma rico em proteínas e a adesão de leucócitos. Estes dados foram confirmados mediante experiências em que se injectou ^AF-aceter na mele de vo luntários sãos.

No coração, produz transtornos do ritmo e a já mencionada diminuição da força contráctil. No tecido hepático, estimula a glicogenólise mara concentrações 10.000 vezes menores do que as necessárias nara a eminefrina e o glucagon. Recentemente, descreveram-se acções no sistema nervoso central, na fisiologia da remrodução e na imuno-regulação.

Estes factos, juntamente com a demonstração da exis tência do PAF-aceter em fluídos biológicos em diferentes situações experimentais e clínicas e com os resultados obtidos com a utilização de antagonistas farmacológicos em modelos experimentais e em estudos clínicos, sugerem um papel matogónico do PAF-aceter em certas doenças humanas.

Nestas condições, os inibidores específicos da bio_s síntese e/ou dos efeitos do PAF-aceter moderiam representar uma nova classe de agentes terapêuticos, especialmente em doenças pulmonares como a asma brônquica, pneumonias alérgicas e stress respiratório do adulto, nas quais alguns antagonistas do PAF-aceter demonstraram efeitos favoráveis nos

-3/ primeiros ensaios clínicos realizados. Do mesmo modo, uma série de antagonistas do PAP-aceter reduziram ou aboliram reacções anafiláticas e de hirersensibilidade, choque endotóxico e ulcerações gástricas, em estudos experimentais. De monstrou-se, também, a participação do PAP-aceter em toda uma série de estados patológicos de base imunoalergica como processos inflamatórios cutâneos, psoriáse, glomerulomefrites e rejeição de transplantes.

Conhecem-se alguns compostos com actividade antagonista do recertor do PAP-aceter que rodem ser englobados em quatro tiros fundamentais:

- Antagonistas baseados em modificações da estrutura química do PAP-aceter (análogos estruturais) .

- Produtos naturais e seus derivados

- Estruturas sintéticas

- Drogas já existentes e seus derivados, por exera nlo, certas benzodiazerinas, antialérgiccs, anti-inflamatórios , - adrenérricos.

Alguns antagonistas do Ca⁺⁺ apresentam também nro priedades antagonistas do PAP-aceter, como ror exemplo o Diltrazem e Galloramil; contudo, nem todos os bloquadores dos canais do Ca⁺⁺ possuem esta actividade. Assim, as 1,4-dihidroriridinas, tais como a Nifedirina, demonstraram somente uma actividade muito fraca, já que as concentrações necessárias rara obter um efeito são 1.000 000 de vezes superiores às que inibem os fluxos do cálcio em outras células e, pelo menos, 1 000 vezes superiores às dos antagonistas específicos do PAP-aceter.

-4-.

Surpreendentemente , algumas 1,4-dihidroniridinas que nossuem um gruno alifático na posição 4 do núcleo, riemons tram uma forte actividade ^AF-aceter-antagonista não descrita até agora.

objecto da nresente invenção é, rortanto, um nro cesso nara a preparação de compostos de fórmula geral

na qual

R rerresenta um grupo alquilo saturado de cadeia linear ou ramificada com 1 a 4 átomos de carbono ,

R' node representar um gruno alquilo saturado de cadeia linear ou ramificada com 1 a 6 átomos de carbono, podendo estar interrompida por um áto mo de oxigénio ou pode também representar o gru po 2-tetrahidrofurfurilo,

R^ pode representar um grupo alquilo saturado de cadeia linear com 1 a 6 átomos de carbono ou no de renresentar um gruno fenilo.

Um dos compostos incluídos na formula geral I, quando o símbolo R representa um grupo metilo, o símbolo R’ representa um grupo etilo e o símbolo representa um grupo

-5fenilo, está descrito na bibliografia /f KHITd . C-FTFROTSIKL. SOBDIN. , 219 (1982) J⁷.

A actividade farmacológica dos comrostos de fórmula geral I foi comnrovada tal como se indica a seguir.

Os comrostos de fórmula geral 1 rodem rrerarar-se de acordo com um dos seguintes processos:

a) Faz-se reagir um comrosto de fórmula geral

COOR’

R - CH = C

II í

CC-CH-j na qual R e R' têm os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral

CH,-GH=CH-COO-(CH_O)_O-S-R_O3 | 2 2 2

NH_O

III na qual R₂ tem o significado definido antes, rara se obter um comrosto de fórmula geral I; ou

b) Faz-se reagir um comrosto de fórmula geral

COO-(CH₂)₂-S-R₂

R-CH=C

I

CO-CH.

IV na qual R e R₂ têm o significa com um composto de fórmula geral definido antes,

t

CH.-C^CH-COOR' V ³ I

NH.

z na qual R' tem o significado definido antes, nara se obter um comnosto de fórmula geral I; ou

c) Faz-se reagir um comnosto de fórmula geral

CH^-CO-CH₂-GCOR' VI na qual R' tem o significado definido antes, com um comnosto de fórmula geral III, na qual o símbolo P-₂tem o significado definido antes, e um composto de fórmula geral

R-CHO VII na qual R tem o significado definido antes, nara se obter um comnosto de fórmula geral I; ou

d) Faz-se reagir um comnosto de fórmula geral ch₃-co-ch₂-cco-(ch₂)₂-s-r₂ VIII na qual R₂ tem o significado definido antes, com um comnosto de fórmula geral V, na qual o símbolo R' tem o significado definido antes, e um comnosto de fórmula geral

VII, na qual o símbolo R tem o significado definido antes, para se obter um composto de fórmula geral I; ou

e) Faz-se reagir um comnosto de fórmula geral

VIII, na qual o símbolo R₂ tem o significado definido antes, com um composto de fórmula geral VI, na qual o símbolo R' tem o significado definido antes, e um comrosto de fórmula geral VII, na oual o símbolo R tem o significado definido antes, na presença de amoníaco, rara se obter um composto de fórmula geral I.

A presente invenção diz igualmente resreito às formas de realização do processo em que se parte de um composto obtido como intermédio em qualquer fase do processo e se realizam as fases que faltam, ou se interrompe o processo em qualquer fase, ou nas quais o comrosto inicial se for ma sob as condições da reacção ou nas quais um componente da reacção se apresenta sob a forma dos seus sais.

As misturas de diastereoisómeros ou enantiómeros obtida pode separar-se devido às diferentes propriedades fí sico-químicas dos componentes, ror meio de métodos conhecidos como, ror exemplo recristalização fraccionada e/ou cromatografia, mediante reacções de indução assimétrica ou mediante a utilização de microrganismos.

Os compostos iniciais são conhecidos, ou no caso de serem novos, podem obter-se de acordo com rrocessos conhe eidos.

Os compostos de fórmula geral I rodem utilizar-se /

como medicamentos rara administração oral, rectal, torica, parentérica ou para inalação, sob a forma de uma composição farmacêutica que contenha relo menos um dos compostos de fór mula geral I em associação com um excipiente aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. As comrosições farmacêuticas ro dem apresentar-se, por exemplo, sob a forma de comprimidos, drageias, cápsulas, supositórios, xaropes ou aeressois. Normalmente, a quantidade de ingrediente activo está compreenelida entre 0,1 e 99% em neso da composição, de preferência entre 2 e 50% em reso em composições farmacêuticas orais. A dose diária do ingrediente activo depende do tino de adminis tração e, em geral, administram-se oralmente entre 25 e 100 mg ror dose nor via intravenosa ou, nor via intramuscular, entre 0,1 e 50 mg nor dose e para inalação as soluções contêm entre 0,1 e 0,5% de ingrediente activo.

EXEMPLO 1

2-c-Eimetil-4-metil-5-metoxicarbonil-l, 4-dihidropiridina-3-carboxilato de 2-(etiltio)-etilo.

C00-CH₂-CH~-S-CH₉-CH

CH

Aquece-se sob refluxo, com agitação, durante 8 horas, uma mistura de 28,54 g (0,15 mole) de acetilacetato de

2-(etiltio)-etilo, 17,27g (0,15 mole) de 3-aminocrotonato de metilo e 8,5 ml (6,61 g; 0,15 mole) de acetaldeído em 120 ml de etanol. Arrefece-se a -10°C a solução resultante, para se

obter um produto	sólido amarelo claro	de -P.F.	:84°-8ó°C (re
cristalização em	etanol). 0 rendimento	da reac	ção ó	49%.
Análise	para C^^^NO^S %C	%H	<JÍ v Λ li	% S
	Calculado 57,48	7,40	4,47	10,23
	Encontrado 57,37	7,61	4,60	10,34

/

Esrectro I.V. (KBr)

(cm 1):	3340,	32 40,	2960,	1700,	1650,
	1490,	1430,	1350,	1290,	1220,
	1200,	1140,	1090,	1050,	770,

700.

Espectro R.M.N. ( ^> , GDGl^)

n.n.m. = 6,3 (IH, s largo); 4,3 (2H, t); 3,9 a 3,7 (1H+3H, m+s); 2,9 a 2,4 (2H+2H, t+c);

2,3 (6H, s); 1,3 (3H, t); 1 (3H, d).

EXEMPLO 2

2,6-Dimetil-4-metil-5-metoxicarbonil-l,4-dihidrori ridina-3-carboxilato de 2-(metiltio)-etilo.

Aquece-se sob refluxo, con agitação, durante 8 horas, uma mistura de 20g (0,11 mole) de acetilacetato de 2-(metiltio)-etilo, 13,O7g (0,11 mole) de 3-aminocrotonato de metilo e 6,42 ml (5g; 0,11 mole) de acetaldeído em 110 ml de etanol. Após evaroração de 50 ml do dissolvente anterior e arrefecimento à temperatura de a-10°C da solução resultante, obtém-se um produto sólido branco de P.P.: 92°-95°C (recris-10-

talização em etanol). 0 rendimento	da reac	ção é	de 47/	«
Análise para C^r^NO^S	% C	% H	/ N	/ s
Calculado	56,17	7,07	4,68	10,71
Encontrado	55,85	7,36	4,76	11,03

Espectro I.V. (KBr)

3340,	2950,	2920,	1700,	1650,
1490,	1430,	1350,	1290,	1220,
1200,	1130,	1090,	1050,	980,

770, 700.

Espectro R.K.N. ( ô, CDCl^)

p.p.m. = 6,4 (IH, s largo); 4,3 (2H, t); 3,8 a 3,6 (1H+3H, m+s); 2,7 (2H, t); 2,3 (6H, s); 2,1 (3H, s); 1 (3H, d).

EXEMPLO 3

2-6-Dimetil-5-etoxicarbonil-4-metil-l,4-dihidropiridina-3-carboxilato de 2-(metiltio)-etilo

Aquece-se sob refluxo, com agitação, durante 8 horas, uma mistura de 20g (0,11 mole) de acetilacetato de 211-(metiltio)-etilo, 14,66g (0,11 mole) de 3-aminocrotanato de etilo e 6,41 ml (5g; 0,11 mole) de acetaldeído em 110 ml de etanol. Após evaporação de 50 ml do dissolvente anterior e arrefecimento à temperatura de a -10°C da solução resultante, obtém-se um produto solido amarelo claro P.F.: 87°-9O°G

(recristalização	em etanol aquoso,	70:30)	o rend;	Lmento	da
reacção é de 82%.
Análise	para C-^í^^NO^S	% C	% H	% N	% S
	Calculado	57,48	7,40	4,47	10,2 3
	Encontrado	57,69	7,48	4,48	10,37

Espectro I.V. (KBr)

U(cm^_1): 3340, 2950,	2920, 1700,	1650,
1490, 1370,	1300, 1210,	1130,
1090, 1050,	980, 770,	690.
Espectro R.M.N. (Σ, CDCl^)
p.p.m. - 6,6 (1H, s largo);	4,4 a 3,7 (5H,	m) ; 2 ,
(2H, t); 2,3 (6H, s	); 2,2 (3H, s)	í
1,3 (3H, t); 1 (3H,	d).

EXEMPLO 4

2,6-Bimetil-5-etoxicarbonil-4-metil-l, 4-dihidropiridina-3-carboxilato de 2-(etiltio)-etilo.

Aquece-se sob refluxo, com agitação durante δ horas, uma mistura de 20g (0,11 mole) de acetilacetato de 2-(etiltio)-etilo, 13,55g (0,11 mole) de 3-aminocrotonato de etilo e 5,94 ml (4,63g; 0,11 mole) de acetaldeído em ICO ml de etanol. Anos evaporação de 50 ml do dissolvente e arrefecimento a -10°C da solução resultante, obtém-se um produto sólido branco de P.P.: 83°-85°C (recristalizado em acetato de etilo). 0 rendimento da reacção é de 53%·

Análises	para	^C16^H25^N°4^S	% C	% H	% N	% S
		Calculado	58,69	7,70	4,38	9,79
		Encontrado	58,51	7,98	4,66	10,24
Espectro	I.V.	(KBr)

í)(cm -¹)

3380,	2980,	1710,	1650,	1490
1380,	1300,	1220,	1140,	1100
1060,	990,	780,	7C0.

Espectro R.M.N. (ό,ΟΌΟΙ^)

p.p.m. - 6,5 (lH,s largo); 4,4 a 3,7 (4H+4H, td+m);

2,6 (2H+2H, t+t); 2,2 (6H, s); 1,3 (6H, t); 1 (3H, d).

EXEMPLO 5

2,ó-Limetil-4-metil-5-(2-metoxietoxicarbonil)-1,4-dihidroniridina-3-carboxllato de 2-(metiltio)-etilo.

-13-Ύ (

,-S-CHAquece-se sob refluxo, com agitação, durante 12 horas, uma mistura de 10,5 g (0,06 mole) de 3-aminocrotonato de 2-(metiltio)-etilo e 11,16 g (0,06 mole) deC£-etilidenacetilacetato de 2-metoxietilo em 60 ml de etanol. Anós evaporação do dissolvente sob pressão reduzida, dissolve-se o resíduo em 20 ml de acetato de etilo em ebulição e arrefece-se a 5°C a solução resultante, para se obter um produto sólido de P.P.: 58°-6O°C (recristalização em etanol). 0 rendimento da reacção é 51%·

Análises para C^gí^^NO^S	% C	% H	% N	% s
Calculado	55,96	7,34	4,08	9,34
Encontrado	56,16	7,65	3,98	9,68

Espectro I.V. (KBr)

3360,	2950,	1700,	1640, 1480,
1380,	1290,	1210,	1130, 1050,
980,	770,	690.

Espectro R.M.N. ( S,DMSO-Dg)

ρ.p.m. = 8,5	(1H,	s largo)	; 4,2	(4H, td); 3,8 a
3,4	(3H,	m) *, 3,3	(3H,	s); 2,7 (2H, t);
2,2	(6H,	s); 2,1	(3H,	s); 0,9 (3H, d).

-14f

2,6-Bimetil-4-etil-5-etoxicarbonil-l,4-dihidroririEXEMPLO 6 dina-3-carboxilato de 2-(metiltio)-etilo.

Aquece-se sob refluxo, com agitação, durante 10 horas, uma mistura de 15g (0,09 mole) de acetilacetato de 2-(metiltio)-etilo, 10,99g (0,09 mole) de 3-aminocrotonato de etilo e 6,5 ml (4,94 g; 0,09 mole) de rropionaldeído em 85 ml de etanol. Anos evaporação sob pressão reduzida do dissolvente, dissolve-se o resíduo em 10 ml de acetato de etilo em ebu lição e arrefece-se a solução resultante a -10°C. Cbtém-se, deste modo, um nroduto sólido branco P.F.: 96°-98°C (recristalização em uma mistura de dimetilformamida e água). 0 rendimento da reacção é de 65%.

Análises para C^g^^NO^S	% 0	% H	% N	% s
Calculado	58,69	7,70	4,28	9,79
Encontrado	58,94	8,00	4,21	9,80

Espectro I.V. (KBr)
(cm^-1): 3360,	3240,	2980,	2940,	2880,
1700,	1660,	1490,	1450,	1380,
1220,	1140,	1080,	1010,	890,
790,	770,	730.

Esoectro R.M.	N. (	°, cpoip
p. r>. m. = 6,9	(1H,	s); 4,4 a 3,8 (5H, m); 2,7
(2H,	t);	2,3 (ÓH, s); 2,2 (3H, s);
1,3	(5H,	td); 0,8 (3H, t).

5XENPL0 7

2,6-Dimetil-5-etoxicarbonil-4-n--oroOÍl-l, 4-dihidropiridina-3-carboxilato de 2-(metiltio)-etilo.

Aquece-se sob refluxo, com agitação, durante 10 .horas, una mistura de 15 g (0,09 mole) de acetilacetato de 2-(metiltio)-etilo, 10,99 g (0,09 mole) de 3-aminocrotonato de etilo e 7,7 ml (6,14 g; 0,09 mole) de butiraldeído em 85 ml de etanol absoluto. Após evaporação, sob pressão reduzida, de 45 ml de dissolvente, arrefece-se a solução resultante a -10°C. Obtém-se, deste modo, um produto solido cristalino de cor amarelo pálido de P.P.: 94°-96°C (recristalizado em etanol). 0 rendimento da reacção é de 56/.

Análises para C^I^NO^S	/ 0	/ H	/ N		S
Calculado	59,80	7,97	4,10	9,	39
Encontrado	59,64	8,02	3,96	9,	35

-16Espectro I.V. (K3r)

3340,	3250,	2960,	2920,	1710,
1660,	1500,	1380,	1300,	1220,
1150,	1090,	1010,	800,	740,

680.

Esrectro R.K.N. ( £> , 0301^)

p.p.m. = 6,5 (lH,s largo); 4,4 a 3,8 (4H + lH,m);

2,7 (2H, t); 2,3 (óH, s); 2,1 (3H, s);

1,4 a 0,6 (10H, t + m).

EXEMPLO 8

2,6-3imetil-5-etoxicarbonil-4-n-pronil-l, 4-dihidropiridina-3-carboxilato de 2-(etiltio)-etilo

Aquece-se sob refluxo, com agitação, durante 10 horas, uma mistura de 15 g (0,08 mole) de acetilacetato de 2-(etiltio)-etilo, 10,18 g (0,08 mole) de 3-aminocrotonato de etilo e 7,2 ml de (5,69g; 0,08 mole) de butiraldeído em 80 ml de etanol absoluto. Após evaporação, sob pressão reduzida, de 40 ml do dissolvente, arrefece-se a solução resultante a -10°C,

para se obter um produto sólido amarelo cristalino sob a for-

ma de prismas, de P.F.:	68°-7O°C (recristalizado	em etanol)
0 rendimento da reacção	ó de 62$.
Análises para	^ΐ8“29^θ4^		$ H	< \^T	$ S
	Calculado	60,82	8,22	3,94	9,02
	Encontrado	60,92	8,44	4,03	9,25
Espectro I.V.	(KBr)

3370,	2980,	2940,	1720, 1660,
1500,	1300,	1220,	1150, 1090,
1020,	8C0,	790,	740,

Espectro R.M.N. (ò, CECip

p.p.m. = 6,5 (1H, s largo); 4,4 a 3,8 (4H + 1K, m); 2,9 a 2,5 (2H + 2H, 2t); 2,3 (6K, s);

1,4 a 0,7 (13H, t + m).

EXEMPLO 9

2,6-Dimetil-5-etoxicarbonil-4-metil-l,4-dibidropiridina-3-carboxilato de 2-(feniltio)-etilo.

H

-18/

A) Acetilacetato de 2-(feniltio)-etilo.

Adiciona-se 28,5 ml (31,24 g; 0,37 mole) de diceteno, gota a gota e com agitação, a uma mistura de 50 ml (57,30g; 0,37 mole) sulfureto de 2-hidroxietil-fenilo e 0,4 ml de trietilamina previamente aquecida a 80°C. Regula-se a velocidade de adição de forma a que a temperatura se mantenha compreendida entre 85° e 90°C. Uma vez terminada a adição, mantém-se a mistura reaccional com agitação à tem-neratura de 90°C duran te 3 horas. Isola-se o composto pretendido mediante destilação sob pressão reduzida da mistura anterior, resultando um líquido incolor de ^.E.: 143°-145°C/0,5 Torr. 0 rendimento da reacção é de 86

Esrectro I.V. (NaCl)

1 (	cm 1)	: 3060,	2950,	1750,	1720,	1650,
		1580,	1480,	1440,	1360,	1320,
		1150,	1020,	740,	690.
Espectro	R.M.	N. ( L	CDG1 )
p. p. m. =	7,2	(5H, m);	4,2 (2H,	t); 3,3 (2H,	s);
	3,1	(2H, t);	2,1 (3H,	s) .

B) 2,6-Dimeti1-5-etoxicarbonil-4-meti1-1,4-dihidroriridina-3-carboxilato de 2-(feniltio)-etilo.

Aquece-se sob refluxo, com agitação, durante 10 horas, uma mistura de lOg (0,04 mole) de acetilacetato de 2-(feniltio)-etilo, 5,42g (0,04 mole) de 3-aminocrotonato de etilo e 2,4 .ml (1,85 g; 0,04 mole) de acetaldeído em 45 ml z ~ de etanol. Apos evaporaçao de 25 ml do dissolvente sob pressão reduzida, arrefece-se a solução resultante a -10°C, para se obter um produto solido amarelo cristalino de P.E. :

80°-82°C (recristalizado em etanol). 0 rendimento da reacção é de 49

-19f i

/ i

Análise	para	C_onK.-MO,S $ C $ H 20 zo 4	$ N	$ s
		Calculado 63,98 6,71	3,73	8,54
		Encontrado 64,15 7,01	3,77	8,27
Esnectro	I.V.	(KBr)
	cm^-^)	: 3340, 2950, 1690,	1640,	1480
		1380, 1290, 1210,	1130,	1050,
		770, 720, 680.
Espectro	R.M.	N. (£>, CI>C1₃)
p.p.m. =	7,2	(5H, m); 6,8 (lH,s largo	); 4,4	a 3,8

(4K + H, m); 3,2 (2H, t); 2,2 (6H, s);

1,3 (3H, t); 1,0 (3H, d).

EXEMPLO 10

2,6-Limetil-4-metil-5-(2-tetrahidrofurfuriloxicarbonil)-l,4-dihidroriridina-3-carboxilato de 2-(feniltio)-eti lo.

H

Aquece-se sob refluxo, com agitação, durante 12 horas, uma mistura de 15 g (0,06 mole) de acetilacetato de 2-(feniltio)-etilo (obtido de acordo com o processo descrito no exemplo 9), 3,6 ml (2,77 g; 0,06 mole) de acetaldeído e 11,66 g (0,06 mole) de etanol absoluto. Ao fim desse tempo, purifica-se a solução resultante mediante passagem através de carvão activado - terra de infusórios (l:l) e em seguida elimina-se o dissolvente sob pressão reduzida. Obtém-se,

deste modo, o produto sob a forma de um	óleo	amarelo. 0 ren-
dimento da reacção é de 65 #.
Espectro I.V. (NaCl)
*k)(cm^_1): 3360, 3100,	2980,	2880, 1700, 1670,
1630, 1500,	1450,	1390, 1310, 1280,
1230, 1150,	1110,	1060, 1000, 780,
750, 700.
Espectro R.M.N. ( E, COCl^)
p.p.m. = 7,2 (5H, m); 5,7 (lH	, sa)	; 4,4 a 3,6
(8H, m); 3,2 (2H, t)	; 2,2	(oH, s) ;
2 a 1,7 (4H, m); 1,0	(3H,	d).

EXEMPLO 11 , ó-Dimetil-5-isOT>ropoxicarbonil-4-metil-l, 4-dihidroniridina-3-carboxilato de 2-(feniltio)-etilo.

H^C

L^c

ⁿ ' —

H

Aquece-se sob refluxo, com agitação, durante 12 horas uma mistura de 15 g (0,06 mole) de acetilacetato de 2-(feniltio)-etilo (obtido de acordo com o nrocesso descrito no exemplo 9), 9,01 g (0,06 mole) de 3-aminoerotonato de isonropilo e 3,6 ml (2,77 g; 0,06 mole) de acetaldeído em 60 ml de etanol absoluto. Ao fim desse temro, rurifica-se a solução resultante mediante passagem através de carvão activado/terra de infusórios (1:1) e nor último elimina-se o dissolvente sob pressão reduzida. Obtém-se, deste modo, o ^roduto sob a forma de um óleo amarelo pálido. 0 rendimento da reacção é de 67%.

Espectro I.V. (NaCl)

U(cm^-1): 3350,	3100,	2980,	1700,	1670, 1500,
1450,	1390,	1300,	1280,	1230, 1150,
1110,	1060,	780,	7 40,	700.
Espectro R.M.N. (^,	cdci₃)
p.p.m. = 7,2 (5H, m);	6,0 (1E	q o ·	5,0 (1H	, h) ;
4,3 (2H, t);	3,8 (1H	7 C ) }	3,2 (2H,	t);
2,2 (6H, s);	1,3 (6H	, d);	1,0 (3H,	d).

EXEMPLO 12

2,6-Dimetil-4-metil-5-metoxicarboni1-1,4-dihidroriridina-3-carboxilato de 2-(feniltio)-etilo

Aquece-se sob refluxo, com agitação, durante 12 horas uma mistura de 15 g (0,06 mole) de acetilacetato de 2-(feniltio)-etilo (obtido de acordo com o processo descrito no exemplo 9), 3,6 ml (2,77 g; 0,06 mole) de acetaldeído e 7,25 g (0,06 mole) de 3-aminocrotonato de metilo em 60 ml de etanol absoluto. Ao fim desse tempo, evapora-se o dissolvente sob pressão reduzida e submete-se o óleo resultante a uma purificação mediante cromatografia em coluna /ã d sorvente:sílica gel 60, Merck; eluente : tolueno/acetona (9:1)J. Obtém -se, deste modo, um produto sólido branco de ^.F. : 69°-71,5°C. 0 rendimento da reacção é de 59 %·

Espectro I.V. (KBr)

ò (cm ^T)	: 3350,	2950,	1700,	1650, 1500,	1440,
	1300,	1220,	1140,	1100, 1060,	780,
	740,	700,	690.
Esnectro	R.M.N. (	ò, CBClJ
			0
p. p.m. =	7,2 (5H,	m) ; 6,	3 (IH,	sa); 4,3 (2H,	t);
	3,9 a 3,	6 (1K +	3H, m	+ s); 3,2 (2H,	t);
	2,2 (6H,	s); 1,	0 (3H,	d) .

ESTUDOS FARMACOLÓGICOS

1. ESTUDOS EM PLAQUETAS LAVADAS

1.1. Agregação

As suspensões de plaquetas obtiveram-se a partir de sangue de coelho (machos, albinos, Nova Zelandia) anticoa guiado com solução de ácido cítrico/dextrose na proporção de 1:6 (V:V).

O plasma rico em plaquetas (PrT) obteve-se mediante centrifugação das amostras de sangue a lOOxg durante 10 minutos e as suspensões de plaquetas mediante centrifugação do PRP a 1.800x g durante 15 minutos a 4°C. Lava-se o sedimento, assim obtido, duas vezes com tampão Tyrode contendo ácido cícrico, PGE^ e aspirase, pH 6,5. As plaquetas assim lavadas são finalmente ressuspensas em tampão Henes-Tyrode, pH 7,35, suplementado com albumina sérica, bovina a 0,35 /; Ca⁺⁺ 2 mM.

Ajusta-se a concentração final de plaquetas a 300.000 plaquetas/^jul. Mede-se a agregação turbidimétricamen te utilizando um lumiagregómetro (Ohrono-Log Co., Haventon, PA, USA) a 37°O, sob agitação a 1 100 r.-n.m. 0 estudo realizou-se também em alíquotas de PRP nré-incubadas com os compostos em estudo a 37°C, durante 5 minutos. A concentração dos antagonistas é em todos os casos lO^pM e a agregação induz-se mediante adição de L-PAT-aceter diluído em 5^1 de / -9 tampão Kepes/albunina, concentração final de 1,9 x 10 M.

-24f

Reacção de libertação (D

A secreção plaquetaria mede-se na presença de luciferina/luciferase com libertação de AT⁷³, de acordo com o m todo descrito por Feinman et al. (1977).

2.

ESTUDCS EH RATO ANESTESIADO

Hipotensão induzida nor injecção de PAF-aceter. Utilizaram-se ratos machos, Sprague-Dawley anestesiados com pentobarbital (50 mg/kg, via intraneritoneal). Administrou-se, nor via intravenosa, 5 mg/kg dos compostos em estudo, três minutos depois da injecção de ^AF-aceter (0,66 Jig/kg). Observou-se as alterações da pressão arterial média durante 30 minutos.

QUABRO 1

EFEITO SOBRE A AGREGAÇÃO Ξ REAOÇÃO BE LIBERTAÇÃO INBUZIBA PCR l-PAF-ACETER EM PLAQUETAS BE GOELHO

GOMDOSTO		INIBIÇÃO
BE ACORBO COM 0 EXEMPLO	AGREGAÇÃO	REAC. LIBERTAÇÃO
1	44	96
2	26	75
3	21	78
4	32	89
5	-	-
6	32	89
7	14	50
8	30	69
9	100	100
10	11	49
11	33	89
12	100	100

Os dados são a média de seis experiências realizadas em triplicado. Concentração de l-PAF-ACETER = 1,92 nM. A concentração dos compostos foi em todos os casos IOjjM. Tempo de pré-incubação : 5 minutos.

EFEITO INIBIDOR SOBRE A HIFDfSNSÃO INDUZIDA PQR l-PAF-ACETER

EM RATO ANESTESIADO

C^JTADR0 2

COMPOSTO	/ INIBIÇÃO DA	HIPCNTENSÃO
DE AGORDO COM 0 EXEMPLO	3 min.*	20 min.^£
1	9	0
2	14	51
3	-19^a	0
4	5	33
5	-	-
6	21	30
7	-31^a	-82^a
8	-38^a	-115^a
9	32	30
10	8	36
11	0	18
12	61	57

Os dados são a média de cinco experiência de composto, administrado por via intravenosa, foi os casos de 5 mg/kg.

(x) 1-PAF-aceter (0,66 jig/kg injectou-se nutos antes da injecção intravenosa dos compostos.

(a) Os compostos aumentaram a hipotensão

s. A dose em todos e 20 miinduzida pelo 1-PAF-aceter.

Claims

Reivindicações idinas

Processo para a preparaçao de 4-alquil-l,4-dihidropide fórmula geral na qual

R representa um grupo alquilo saturado, de cadeia linear ou ramificada, com 1 a 4 átomos de carbono,

R' pode representar um grupo alquilo saturado de cadeia linear ou ramificada com 1 a 6 átomos de carbono, podendo estar interrompida por um átomo de oxigénio, ou pode também representar o grupo 2-tetrahidrofurfurilo,

R^ pode representar um grupo alquilo saturado de cadeia linear com 1 a 4 átomos de carbono, ou pode representar um grupo fenilo,' caracterizado pelo facto:

a) de se fazer reagir um composto de fórmula geral

COOR'

R-CH=C

II

CO-CH.

na çual R e R’ têm os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral

CH₃-C=CH-COO-(CH₂)₂-S-R₂ III

NH.

na qual R₂ tem o significado definido antes para se obter um composto de fórmula geral I;

ou

b) de se fazer reagir um composto de fórmula geral

R-CH=C

-COO-(CH₂)₂ ^_s_R2

CO - CHIV na qual R e ?₂ têm os significados definidos antes, com um composto de fórmula geral

CH₃-Ç=CH-COOR'

NH.

na qual R' tem o significado definido antes, para se obter um composto de fórmula geral I;

ou

c) de se fazer reagir um composto de fórmula geral

CH₃-CO-CH₂-COOR'

VI na qual R’ tem o significado definido antes, com um composto de fórmula geral III, na qual o símbolo R^ tem o significado definido antes, e um composto de fórmula geral

R-CHO VII na qual R tem o significado definido antes, para se obter um composto de fórmula geral I; ou

d) de se fazer reagir um composto de fórmula geral

CH₃-CO-CH₂-COO-(CH₂)₂-S-R₂ VIII na qual R₂ tem o significado definido antes, com um composto de fórmula geral V, na qual o símbolo R' tem o significado definido antes, e um composto de fórmula geral VII, na qual o símbolo R tem o significado definido antes, para se obter um composto de fórmula geral I;

ou

e) se fazer reagir um composto de fórmula geral VIII, na qual o símbolo R₂ tem o significado definido antes, com um composto de fórmula geral VI, na qual R' tem o significado definido antes, e um composto de fórmula geral VII, na qual o símbolo R tem o significado definido antes, na presença de amoníaco, para se obter um composto de fórmula geral I.
2.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação dos seguintes compostos:

-3·

a)

e)

2 , o-dimetil-4-netii- 5-metoxicarbonil-1,4-dinidrooi-3-carboxilato de 2-(etiitio)-etilo,

2 , 6-dimetii-4-metil-5-metoxicarbcnii-l, 4-dibidropir -3-carbcxilato de 2-(metiltio)-etiLo,

2 , 5-d imet ii-5-e toxicarbon.il-4-metil- 1,4-dihidropiri -3-carboxilato de 2-(metiltio)-etilo,

2 , □-di.-etil-5-etoxicarborii-4-metil-l, 4-dih.idropiri -3-carboxilato de 2-(etiitio)-etilo,

2, 5-dimetil-4-metil-5-(2-nstoxietoxicarbonil)-1, 4-d -hidropiridina-3-carboxilato de 2-(metiltio)-etilo, iciradiraciraf) 2,ó-dimeti1-4-etil-5-etoxicarboni1-1,4-dihidrcpiridina-3-carboxilato de 2-(metiltio)-etilo,

c) 2,o-dimetil-5-etoxicarbonil-4-r-oropil-i,4-dibidrooiridira-3-carboxilato de 2-(metiltio)-etilo,

h.) 2 , ó-dimetil-3-etoxicarbonil-4-r-propi 1-1,4 -bidropiridina-3-carboxilato de 2-(etiitio)-etilo, i ) 2,5-dimetii-4-metil-5-(2-tetrahidrozurfuriioxicarbonii)-1,4-diridropiridina-3-carbcxiiato de 2-{feniltio)-etilo,

j) 2, ó-dimetii-5-i5opropoxicarbonii-4-metil-i,4-dibicropiridina-3-carboxilato de 2-(feniltio)-etilo, !<) 2 , 6 ~ c í.γπθei!^-4 — , 4 ^— c i r.icrociridir.3.—

-3-carbcxilato de 2-(feniltio)-etilo, caracterizado pondentemente peio facto de se utilize substituídos, omoos tos iniciais corresPHsboa, 20 de Janeiro de 1989 .. _Λ / ,· · Α··α.

'χΛ'ΤΧ. CTj

-31RESUMO 'Processo para a preparação de 4-alquil-l,4-dihidropíridinas con actividade antagonista do factor activador de plaquetas

Descreve-se um processo para a preparação de 4-alquil-l, 4· -dihidropiridinas de fórmula geral

COO-CH -CH₂-S-R₂

CH.

caracterizado pelo facto:

a) de se fazer reagir um composto de fórmula geral

COOR' l

R-C = C

II

CO-CH.

com um composto de fórmula geral

CH -C=CK-COO-(CH-)_n-S-R_nJ I z Z Z

NH-.

:ii para se obter um composto de fórmula geral I; ou

b) de se fazer reagir um composto de fórmula geral

,.COO - (CH₂)2^_s~^R2

R-CH=C

CO - CH.

IV com um composto de fórmula geral oara se cb um

OmDOS

CH,-C=C~-CCO3 IsK -) o de formula ceral ou

c) ce se fazer reagir um composto ce fórmula geral ck₃-co-ch₂-coor' vi com um composto ce fórmula geral III, e um composto ce fórmula gerai
3 - C Η0 VII para se obter um composto de fórmula geral I;

ou

d) de se fazer reagir um composto de fórmula gerai

CH₃-CO-CH₇-COO-(Crt₂)₂-S-3₇ VIII com um composto de fórmula geral V e um composto de fórmula geral VII, para se obter um composto de fórmula gerai I;

ou

e) de se fazer reagir um composto ce fórmula geral VIII, com um composto de fórmula geral VI e um composto de fórmula geral VII, na presença ce amoníaco, para se obter um composto ce fórmula geral I.

Os compostos preparados pelo processo ce acordo oom a oresen te invenção têm utilização em teraoêutioa.