PT89267B

PT89267B - Metodo para a inibicao do virus da imunodeficiencia humana utilizando derivadod de pirrolidina ou piridina

Info

Publication number: PT89267B
Application number: PT89267A
Authority: PT
Inventors: Raymond Allen Dwek; George William John Fleet; Thomas William Rademacher
Original assignee: Monsanto Co
Priority date: 1987-12-21
Filing date: 1988-12-20
Publication date: 1993-12-31
Also published as: IE63095B1; OA08937A; FI93210C; ATE87206T1; NO885655D0; DK175113B1; FI885880A; NO172340C; PT89267A; JP2538014B2; KR890009389A; DE3879653D1; DK708188D0; AU607834B2; IL88742A; DE3879653T2; DK708188A; NZ227410A; NO172340B; US4999360A

Description

MEMÓRIA DESCRITIVA

Resumo

O presente invento diz respeito a um método para a utilização de um grupo de compostos heterocíclicos com cinco e seis membros, tendo um azoto no anel e dois ou três substituintes hidroxilo no anel os quais são

MONSANTO COMPANY

MÉTODO PARA A INIBIÇÃO DO VÍRUS DA IMUNODEFICIÊNCIA HUMANA UTILIZANDO DERIVADOS DE PIRROLIDINA OU PIPERIDINA agentes inibidores eficazes do virus da imunodeficiência humana.

presente invento diz ainda respeito a um método para a preparação dos referidos agentes. Por exemplo, o 1 , 5-d i-desox i - 1 , 5-im i no-fN-vM-met i 1 -caproatoj-L-fucitol é preparado por reacção de 1 , 5-didesoxi-1 , 5-imino -L-fucitol com 6-oxo-hexanoato, na presença de negro de paládio, seguido de hidrogenação.

Este invento refere-se a um método de inibição do vírus da imunodeficiência humana (VIH) e particularmente a compostos de cinco e seis membros heterocícU cos com potencialidades de utilização no tratamento da síndroma da imunodeficiêncía adquirida (SIDA).

A síndroma da imunodeficiência adquirida, que há alguns anos atrás era apenas uma curiosidade médica, é agora uma doença grave. Em consequência está a ser feito um grande esforço no desenvolvimento de drogas e vacinas para o combate da SIDA. 0 vírus da SIDA, identificado pela primeira vez em 1983, tem sido descrito com vários nomes. E o terceiro vírus dos T-linfócitos conhecido (HTLV-III) e tem a capacidade de se multiplicar dentro das células do sistema imunológico e consequentemente provocar a destruição das células T, T4 ⁺ (ou células CD4⁺).

Ver, por ex., Gallo et al., Science 224, 500-503 (1984) e Popovic et al., Ibid., 497-500 (1984). Este retrovírus tem sido identificado por vírus associado à 1infadenopatia (VAL) ou vírus associado à SIDA (VAS) e mais recentemente como vírus da imunodeficiência humana. Foram descritos dois vírus da SIDA diferentes, VIH-1 e VIH-2. 0 VIH-1 é o vírus inicialmente identificado em 1983 por Montagnier et, al., do Instituto Pasteur de Paris /Ann. Virol. Inst.Pasteur 135E, 1 19-134 (1984)7, enquanto que o VIH-2 foi mais recentanente isolado por Montagnier et al., em 1986/Nature 326, 662-(1987)7. Conforme se utiliza a seguir, VIH refere-se de uma forma genérica a estes dois vírus.

Apesar da biologia molecular da SIDA se ter começado a desenvolver e a definir, há muito mais sobre esta doença que tem de ser conhecido e percebido. Entretanto estão a ser investigadas numerosas hipóteses na busca de potenciais drogas e vacinas anti-SIDA. 0 desenvol-4vimento de uma vacina SIDA é retardada pelo desconhecimento dos mecanismos de protecção imunológica contra o VIH, a importância da variação genética do vírus e a falta de efectivos modelos animais para a infecção pelo VIH. Veja-se, por ex., Koff e Hoth, Science 241, 426-432 (1988).

A primeira droga para tratamento da SIDA a ser aprovada pela Administração Americana da Alimentação e Drogas foi a zidovudina, mais conhecida pelo seu nome inicial azidotimidina (AZT). Quimicamente esta droga é 3-azido-3-deoxitimidina . Esta droga foi inicialmente seleccionada como arma potencial contra a SIDA por ter sido demonstrado inibir a multiplicação do vírus i n v i tro. Estes ensaios in vitro são úteis e constituem práticamente o único método de isolar e testar na prática potênciais drogas ant i-SI DA.

Mais recentemente, alguns inibidores da glicosidase foram ensaiados como activos contra o vírus da SIDA. Três destes compostos sugeridos como potenciais drogas anti-SIDA são a castanospermina, a deo xinojiri micina (DNJ) e a di-hidroximeti1 di-hidroxipirro1idina(DMDP). Veja-se, por ex., Sunkara et al., Biochem Biophys. Res. Commun. 148 (1), 206-210 (1987); Tyms et al., Lancet Oct 31, 1987, pp. 1025-1026.

Castanospermina

Deoxinojirimicina (DNJ)

Di-hidroximetildi-hidroxipírrolidina (DMDP)

Assim, a castanospermina, que ê um alcaloide isolado das sementes do castanheiro australia no, foi descoberto como interferindo na glico silação normal dos vírus VIH, alterando assim o envelope g1icoproteico e impedindo a penetração do VIH nas células atacadas. Contudo apenas foi conseguida uma modesta redução na infecção pelo vírus.

No PCT Inter. Appln. WO 87/03903, publicado em 2 de Julho de 1987, o derivado N-metíIo da deoxinojirimicina (DNJ) foi também descoberto como sendo activo contra o VIH, baseando-se ostensivamente na actividade inibidora da sua glucosidase I. No entanto, e consequentemente, foi demonstrado por, Fleet et al., FE8S Lett, In Press, 1988, que nem todos os inibidores da glucosidase I são inibidores efectivos do VIH. Portanto, podem outros mecanismos ser responsáveis pela inibição da actividade do VIH.

Descrição do Invento

De acordo com o presente invento foi descoberto um grupo de compostos de cinco e seis membros heterocíc1icos com um azoto no anel e 2 ou 3 hidroxilos substituintes no anel, que têm actividade contra o vírus da imunodeficiência hunana (VIH). Assim sendo, estes compostos têm potencial utilização no tratamento da imunodeficiência adquirida (SIDA). Os compostos activos empregues no invento podem ser estruturalmente descritos como derivados da pirrolidina ou piperidina.

pirrolidina piperidina

-7Em alternativa podem ser descritos por nomes químicos sistémicos, como derivados do açúcar, em que os derivados do anel de cinco membros são considerados como cópias de furanoses e os derivados do anel de seis membros são considerados como cópias de piranoses, com azoto em vez de oxigénio no anel.

A eficiência dos compostos activos no método do invento foi demonstrado pela actividade inibidora positiva contra a multiplicação do VIH in vitro. De acordo com este Ensaio, as células humanas, susceptiveis à infecção com o VIH, foram utilizadas para determinar visualmente a actividade relativa, dos compostos em análise, sobre a inibição da multiplicação das células infectadas como VIH. Como vários compostos análogos tiveram resultados substancia] mente diferentes conforme se descreve pósteriormente, parece claro que a eficiência de um dadao composto como inibidor do VIH é imprevisível. Foram propostas até agora várias teorias sobre os efeitos dos inibidores do VIH. Investigações em vários laboratórios estabeleceram que a interacção entre o envelope g1icoproteico, gp 120, e uma parte do antígeno CD4, está envolvida no reconhecimento do VIH e da maioria das células por ele infectadas, e na ligação do VIH a estas células. Assim, num relatório que compara o efeito positivo do inibidor da glicosidase deoxinojirimicina (DNJ) sobre a infecciosidade do VIH, com a ausência de efeito do inibidor manosidase I deoximanojirimicina (DMJ), que é o 2-epímero do DNJ, foi sugerido que a estrutura alterada do hidrato de carbono gp 120 ou do seu percursor imposta pelo bloqueio da via de libertação do oligosacarideo N ligado é responsável pelo efeito. Gruters et al., Nature 330, 74-77 (1987). 0 efeito imprevisível de um composto contra o VIH é demonstrado por vários estudos comparativos em derivados do açúcar estruturalmente análogos. Por exemplo, enquanto que a conhecida inibição do efeito citopático(ECP ) pelo inibidor «x-g1ucosidase I castanospermina se encontra confir-8-

mada, nem o epímero L -1 , 6-diepicastanospermina, nem o estereoisómero da castanospermina, L-6-epicastanospermina foram considerados como inibidores. Veja-se Fleet et al. ,

FEB Lett, in Press, 1988.

Assim, embora ambos os enantiómeros do 1 ,4-dideoxi- 1,4-imino-arabinito 1 sejam conhecidos como inibidores da glucosidase /Fleet et al., Tetrahedron Lett 26 31 27-31 30 ( 1985 ); Fleet et al., Chemistry Lett 1051 - 1054 (1985)7, o L-enantiómero tem uma forte actividade inibidora sobre o VIH, enquanto que o D-enantiómero tem muito pequeno efeito sobre a multiplicação do VIH. Para os dois enantióme ros, a N-metilação em vez de aumentar, reduziu a actividade anti-VIH. Foi descoberto que nem a azofuranose, análoga à glucose, nem o derivado N-benzilo têm efeito no ECP. Do mesmo modo não foi observada qualquer inibição do VIH para a fagonina, a 2-deoxig1ucose análoga, embora se saiba que tem actividade inibidora <\-glicosidase. Veja-se Fleet et al., FEBS Lett, In Press, 1988.

Com o objectivo de delinear as estruturas químicas do grupo de compostos inibidores activos, no método deste invento, estes compostos podem ser conveniein temente partidos em vários sub-grupos conforme se segue.

Para indicar o estereoisomerismo, as linhas cheias e ponteadas representam ligações directas respectivamente para cima e para baixo do plano do papel. 0 símbolo Ph representa fenil.

I. Aneis de cinco membros

A. Derivado N-metilo da dihidroximeti1 dihidroxipirro1idina

B. 1,4-Didesoxi-l,4-imino-L-arabinitol

H

C. Estereoisómeros de 1,4-didesoxi- 1,4-imino-ribito 1

-ΙΟΙ ,4-Didesoxi-l ,4-inino-L-ribitol

HO

,4-Didesoxi-l,4-imino-D-ribitol

D. Derivados N-metilo de compostos do tipo B

,4-Didesoxi-l ,4-imino-/’N-metil7-L-arabinitol

E. Derivados N-substituidos de compostos do tipo C.

CH₃ ,4-Didesoxi-l,4-imino-/N-metil7-D-ribitol

l,4-Didesoxi-l,4-benzilimino-L-ribitol

-12F. 1,4-Didesoxi-l,4-imino-D-talitol

II. Aneis de seis membros

G. Derivado N-metilo da deoximanojirimicina

I

CH₃

Η. 1 ,5-Didesoxi-l,5-imino-L-fucitol-derivados

**CH₃

H l,5-Didesoxi-l,5-imino-L-fuconolactam

-13J. Derivados N-substituidos do 1,5-didesoxi-1,5-imino-L-fucito

1,5-Didesoxi-l,5-imino-ZN-metilJ-L-fucitol

(ch₂)5co₂ ch₃ ,5-Didesoxi-l , 5 - im i no-/N-\)J-me til caproatoJ-L-fucitol

Os compostos 1, 5 10, 11 e 12, anteriores, são tidos como novos compostos.

Os compostos utilizados no método deste invento podem ser sintetizados de acordo com os procedimentos gerais de sintese orgânica apresentados nos exemplos seguintes. E reconhecido que estes compostos não se limitam aos métodos específicos de preparação indicados seguidamente.

Exemplo 1 composto 1 pode ser preparado pela N-metilação do 2R,5R-dihidroximeti1-3R,4R-dihidroxipirrolidina (DMDP). A síntese enantioespecifica evidente deste último composto encontra-se descrita por Fleet e Smith, Tetrahedron Lett. 26 (11), 1469-1472 (1985). A N-metilação foi realizada como se segue: 30 mg de DMDP foram dissolvidas em 5 ml de metanol, tendo-se juntado uma quantidade catalítica de paládio negro. A solução foi agitada sob H2 durante 5 minutos, adicionando-se simultaneamente 46 AH de formaldeido (37% em H₂0). Durante uma noite a reacção foi agitada sob hidrogénio. A mistura de reacção foi depois filtrada através de um tampão Celite^³ que foi lavado com 3 x 5 ml de metanol. Os solventes foran removidos sob pressão reduzida, produzindo um óleo incolor que foi purificado por cromatografia de permuta iónica dando 0 N-meti1-DMDP.

composto I também pode ser sintetizado a partir do 2,5-didesoxi-2₇5-imino-D-manito 1.

Exemplo 2 composto 2 pode ser preparado juntando 0 C-l e C-4 da xilose com azoto para formar 0 anel

-15pirrolidina, conforme descrito por Fleet e Smith,

Tetrahedron 42 (30), 5685-5692 (1984), ou a partir do xilitol no qual apenas os grupos hidroxilo do Cl e C4 da D-xilose são deixados desprotegidos conforme descrito por Fleet et al., Tetrahedron Lett 26(26), 3127-3130 (1985).

composto 2 pode também ser sintetizado a partir da D-manose.

Exemplos 3 e 4

Os compostos 3 e 4 podem ser sintetizados numa série de passos a partir respectivamente da D-manose e da D-gu1ono-1,4-1actona. A preparação do composto 3 foi realizada como se segue e a sintetização do composto 4 foi realizada de forma análoga, partindo da D-gu 1 ono-1 , 4-1actona em vez da D-manose.

(a ) 2,3 : 5,6-Di-0-i sopropi1ideno-D-manofuranose

A uma suspensão de D-(+)-manose (12 g, 66,6 mmol) em acetona (200 ml) agitada vigorosamente, juntou-se ácido sulfúrico concentrado (2,8 ml), à temperatura ambiente. Passadas 3 horas, a mistura de reacção foi neutralizada com Ν3£00₃ anidro (12 g), filtrada e evaporada sob vácuo para dar o produto bruto sob a forma de um sólido branco que foi recrista1izado a partir de acetato de etilo-hexano (1:5), dando o citado acetonídio (14g, 81%) sob a forma de cristal branco.

p.f.= 124- 125°C ZTlit. , 124- 125°c_7.

-16(b) 2,3:5,6-Di-O-isoproplIideno-D-manitol

A uma solução agitada de NaBH^ (567 mg, 15,0 mmol) em etanol (30 ml) juntou-se o acetonidio preparado anteriormente (3,9 g, 15,0 mmol), à temperatura ambiente. Passados 30 min., os hidretos em excesso foram hidrolizados com NH^Cl em excesso. 0 solvente foi depois evaporado sob vácuo e o residuo resultante foi purificado por cromatografia de flash (2:3, hexano-acetato de etilo). obtendo-se o referido diol (3,9 g, quantitativo), como um sólido branco.

p.f. 47-49°C. /x 7₀20= -9,2°(c 1,05 em CHC1₃).

(c) I,4-Bis(metanosulfoni1)-2,3:5,6-di-0-isopropi1ideno-D-man i to 1

Ao diol preparado anteriormente (3,0 g, 11,5 mmol), agitado em piridina (20 ml) a 0°C,juntou-se cloreto de metanosu1fonilo (3,5 ml, 45,8 mmol). Passa das 2 horas a piridina foi evaporada sob vácuo e o residuo foi dissolvido em CHC1₃(100 ml). A solução foi depois lavada com água (100 ml x 2), seca (MgSO^), filtrada e evapora da sob vácuo, dando o produto bruto, sob a forma de óleo amarelo, que foi purificado por cromatografia de flash (2:1 acetato de etilo-hexano)para dar o chamado composto dimesilo (4,8 g, quantitativo) como um óleo xaroposo incolor. /θ 20= + 30,7°(c, 2,12 em CHC1₃).

-17(d ) 2,3: 5,6-Di-0-isopropilideno-l,4-didesoxi-l ,4-benzilimino-D-taIi to 1

composto dimesilo preparado anteriormente (4,8 g, 11,5 mmol) foi agitado com benzilamina (10 ml) a 60-70°C durante 60 hr. A mistura foi depois fraccio nada entre uma salmoura (50 ml) e 0(401^(120 ml). A camada orgânica foi separada, lavada com água (100 ml x 2), seca (MgSO^), filtrada e evaporada sob vácuo para dar como produto bruto um óleo castanho, que foi purificado por cromatografia de flash (2:3, éter-hexano) para dar o produto tornado ciclico em título (2,7 g, 71%) com um óleo amarelo claro, fx J_D 20= +60,1° (c 1,65 em CHClg).

(e) 2,3:5,6-Di-0-isopropilideno-l,4-didesoxi-I,4-imino-D-ta1i to 1 produto tornado cíclico preparado anteriormente (336 mg, 1,01 mmol) foi agitado em metanol (20 ml) sob atmosfera de hidrogénio na presença de 10% Pd/C (150 mg), ã temperatura ambiente durante 2 hr. A mistura foi. depois filtrada através de um Celite e evaporada sob vácuo para dar um produto bruto sólido, que foi purificado por cromatografia de flash (acetato de etilo), para dar o chamado produto acteonidio (233 mg, 95%), como sólido branco.

A cor do produto alterou-se ao ar para amarelo claro, p.f. = 60°C. Z* J_D 20= -44,1° (c, 0,37 em CHC1₃) .

(f ) 1 ,4-Didesoxi-I,4-imino-D-hidroc1oreto de talitol acetonidio preparado anteriormente (233 mg, 0,96 mmol) foi agitado com ácido trifluoroacético aquoso (10 mi) à temperatura ambiente durante 15 hr. 0 solvente foi depois evaporado sob vácuo para dar um produto sólido branco (sal do ácido trif1uoroacético), que foi neutralizado com uma solução aquosa de NaOH diluida e purificada por cromatografia de permuta iónica (Dowex 50, 8-100, forma H⁺ iluido com amónia aquosa 0,5M) para dar a amina livre sob a forma de xarope. A amina livre foi dissolvida em água (5 ml) e acidificada a pH4 com ácido hidrocloridrico diluído. A solução foi depois seca por congelação para dar o chamado composto (181 mg, 95%) como um sólido branco, p.f.=144-145°C. 20= -56,3°(c, 0,41 em H₂0).

(g) 2,3-0-isopropileno-l,4-didesoxi-I,4-benzilimino-D-taIitoI composto tornado cíclico conforme preparado na parte (d) anterior (1,22 g, 3,66 mmol) foi agitado com ácido acético diluido 80%, a 50°C durante 36 hr.

solvente foi depois evaporado sob vácuo para dar o produto bruto como óleo castanho claro, que foi purificado por cromatografia de flash (acetato de etilo) para dar o produto diol puro (1,10 g, quantitativo), como óleo amarelo claro.

L* 7_d20= -15,2° (c, 1,22 em CHC1₃) .

-19(h) 2,3-0-isopropiIideno-I,4-didesoxi-l,4-benzilimino-L-rib ito 1

Ao diol preparado anteriormente (800 mg, 2,73 mmol), agitado com uma solução de etanol 80% (20 ml), juntou-se periodato de sódio (1,75 g, 8,19 mmol), â temperatura ambiente. Passados 30 min. o t.l.c. revelou a ausência de material de partida, tendo-se adicionado à mistura de reacção borohidreto de sódio (207 mg, 5,46 mmol), continuando-se a agitar durante 1 hr. Os hidretos em excesso foram depois hidrolizados com NH^Cl sólido. A mistura resultante foi filtrada e evaporada sob vácuo dando o produto bruto como óleo, que foi purificado por cromatografia de flash (8:3, acetato de eti1o-hexano), dando o álcool puro ( 557 mg, 78%) como um óleo amarelo claro. /* 7_Q20 = = + 45,7°(c, 1,0 em CHC1₃) .

(i) 1 , 4-Didesoxi- 1,4-imino-L-hidroc1oreto de ribitol álcool preparado anteriormente (257 mg, 0,98 mmol) foi agitado com etanol (10 ml) sob atmosfera de hidrogénio, na presença de 10% Pd/C â temperatura ambiente. Depois de 2 hr, a mistura de reacção foi filtrada através de um Celite e evaporada sob vácuo para dar a amina livre, como um sólido amarelo (nmr revelou ausência do grupo benzilo), que foi dissolvida em ácido trifluoroacético diluído 50% (6 ml) á taiperatura ambiente. Passadas 24 hr, a evaporação do solvente deixou o produto bruto, como um óleo castanho claro (sal do ácido trif 1 uoroacêtico) , que foi neutralizado com NaOH diluído e purificado por cromatografia de permuta iónica (Dowex 50 x 8-100, forma H⁺, iluido com amónia aquosa 0,5M), dando a amina livre como sólido amarelo. A amina livre foi dissolvida em água (5 ml) e acidifica-20da a ρΗ 4 com ácido hidrocloridrico diluído. A solução foi depois seca por congelação dando o referido composto (165 mg, 76%) como sólido amarelo claro.

p.f. = 126-131°C M?_d20= -59,0°(c, 0,59 m HgO).

(j ) 1 ,4-Didesoxi- 1,4-benziIimino-D-hidroc1oreto de talitol composto tornado cíclico conforme preparado na parte (d) anterior (210 mg, 0,63 mmol) foi agitado com ácido trifluoroacético diluído 50% (10 ml) â temperatura ambiente. Passadas 24 hr o solvente foi evaporado sob vácuo dando o tetraalcool (sal do ácido trifluoroacético)como um óleo, que foi neutralizado com NaOH diluído e purificado por cromatografia de permuta iónica (Dowex 50 x 80-100, forma H⁺, iluido com amónia aquosa 0,5M), dando a amina livre como um xarope. 0 xarope foi dissolvido em água (5 ml) e acidificado a pH 4 com ácido hidroc1oridrico diluído. A solução foi depois seca por congelação dando o referido composto (164 mg, 90%) como um sólido muito higroscópico. /x 7₀20 = -10,l°(£, 0,94 em H₂0).

(k ) 1 ,4-Didesoxi-l,4-benzilimino-L-ribitol álcool conforme preparado na anterior parte (h) (100 mg, 0,36 mmol) foi agitado com ácido trifluoroacético diluido 50% à temperatura ambiente. Passadas 20 hr, a evaporação do solvente deixou o produto (ácido trifluoroacético) como um óleo castanho, que foi purificado por cromatograf ia de permuta iónica (Dowex 50 x

8-100, forma H⁺, iluido com amónia aquosa 0,5M), dando o referido composto (76 mg, 90%) como sólido amarelo claro

(muito h i groscóp i co) . Ζχ7θ20= + 33,0°(£, 0,32 em F^O).

Os seguintes produtos foram preparados conforme síntese análoga à do composto enantiómeríco 4.

(a) 2,3:5,6-Di-0-isopropilideno-D-gulono-l,4-lactoba. Recuperado como agulhas incolores. p.f.=155°C (do acetato de etilo): /_* 7_d20 = -76,6°(c, 1,99 em CHC1₃).

/lit. , -67,8°(c, 4,16 em CHC1₃).

(b) 2,3:5,6-Di-0-isopropilideno-D-gulitol.

Recuperado como agulhas inco1 ores.p.f.= 73-75°C(do éter). 7_d20 = + 11,3° (c, 1,80 em CHC1₃).

(c) 1,4-Bis-(metanosulfonilo)-2,3:5,6-di-0-isopropilideno-D-gulitol. Recuperado como óleo incolor. Α7θ20= -7,3° (c, 1,82 em C HC1₃ ).

(d) 2,3:5,6-Di-0-isopropilideno-l,4-didesoxí-l,4-benzilimino-D-alitol. Recuperado como óleo amarelo claro. Z/X 7 2θ=-12,2 (c, 1,07 em CHC1₃). ^D (e) 2,3: 5,6-Di-O-isopropilideno-1,4-didesoxi-l,4-imino-D-alitol. Recuperado como óleo amarelo claro /7^-7^)20 = +34,1° (c, 0,41 em CHC1₃).

(f) 1 ,4-Didesoxi- 1,4-imino-D-hidroc1oreto de alitol

Recuperado como sólido branco, p.f. = 110-111°C 7θ20 =+29,4 (£, 0,53em l^O).

(g) 2,3-0-Isopropilideno-l,4-didesoxi-l,4-benzilimino-D-alitol. Recuperado como xarope amarelo claro. 7θ20= -48,2° (c, 2,01 em CHC 1 ₃ ).

(h ) 2,3-0-Isopropilideno-1,4-didesoxi-l,4-benzilimino-D-r i b i to 1.

Recuperado como óleo amarelo claro // 7p20= -45,9°(£, 1,0 em CHC12 ) .

(i) 1,4-Didesoxi-1,4-imino-D-hidroc1oreto de ribitol A amina livre foi recuperada como sólido castanho claro. Depois da dissolução em água e acidificação com HC1, seguida da secagem por congelação da solução, o sal de hidrocloreto foi recuperado como sólido castanho claro. 7_d20= + 57,6° (c, 0,59 em H₂0).

p.f.=128-132^UC (j) 1,4-Didesoxi- 1,4-benzi1imino-D-hidroc1oreto de alitol Recuperado como sólido muito h i gros cóp i co ./2/_7_D20 = +23,1° (£, 0,72 em H₂0).

(k) l,4-Didesoxi-l,4-benzilimino-D-ribitol

Recuperado como sólido amarelo claro (muito higroscópico). 7_d20= -37,3°(£, 0,49 em H₂0).

A síntese do composto 3 a partir da manose-D é descrita por Fleet et al., Tetrahedron 44, 2649-2655 (1988); a síntese do composto 4 a partir da gulonolactona-D é descrita por Fleet e Filha, Tetrahedron 44, 2637-2647 (1988). As sínteses dos compostos 3 e 4, respectivamente são também descritos por Setoi et al., Chem. Pharm. Buli . 35( 10 ), 3995-3999 ( 1987 ) e Chem. Absts. 106:50030 ( 1987 ).

Exemplos 5 e 6

Os compostos 5 e 6 foram preparados por N-metilação dos compostos 2 e 4 respecti varente, analogamente ao método de preparação do composto 1.

Exemplo 7 composto 7 foi preparado por N-metilação do composto 3 conforme descrito no exemplo 3(K) anterior.

Exemplo 8 composto 8 pode ser sintetizado da D-ranose conforme descrito por Setoi et al., Cfíem.Pharm. Buli. 35 (10), 3995-3999 (1987).

As sínteses dos compostos 7 e 8 a partir da D-manose são pósteriormente descritas por Fleet et al., Tetrahedron 44, 2649-2655 (1988).

Exemplo 9 composto 9 pode ser preparado por N-metilação do l,5-didesoxi-l,5-imino-D-manitol(deoximanojirimicina ou DMJ), analogamente ao método utilizado na preparação do composto 1. A síntese da DMJ está descrita por Legler e Julish, Carbohyd.Res. 128, 61 (1984); Fleet et al., Tetrahedron Lett. 25 (36), 4029-4032 (1984); e Fleet

-24et al., Ibid.29 (23), 2871-2874 (1988).

Exemplo 10 composto 10 foi sintetizado numa série de passos a partir da diacetona-D-alose comercialmente disponível ( 1 , 2 : 5,6-d i-0-i soprop i 1 ideno χ,-D-a Iofuranose), como se segue:

(a) 3-0-Benzil-l,2:5,6-di-0-isopropilideno-% - D-furanose.

Hidreto de sódio (disperso 50% em óleo) (3,19 g, 66,3 mmol) foi lavado com hexano destilado (2 x 15 ml) sob azoto seco, e suspenso em THF seco (75 ml). Diacetona alose (15,93 g, 61,4 mmol) em THF seco (150 ml) foi adicionada durante 1 hr. Para completar juntou-se brometo de benzilo (7,96 ml, 8,4 mmol). A mistura resultante foi agitada durante três horas, até o t.l.c. (acetato de etilo/hexano 1:1) ter indicado ausência de material inicial (Rf 0,2) e um produto (Rf 0,8). A mistura de reacção foi lavada com metanol (5 ml), diluida em éter (150 ml), filtrada através de um tampão de silica tapado com Celite, sendo o filtro lavado com éter (3 x 75 ml). 0 solvente foi removido e o sólido bruto amarelo dissolvido em diclorometano (150 ml). 0 diclorometano foi lavado com água(2x150m 1) , seco (MgS0₄), filtrado e evaporado a sólido. A purificação por recristalização a partir do hexano originou o referido éter de benzilo (20,82 g, 95%) como um sólido branco, p.f. 65-66°, // 7_d20= + 105,6° (c 0,25 em CHCip.

-25(b) 3-0-Benzil-I,2-0-isopropilideno-X.-D-alofuranose

éter de benzilo preparado anteriormente (20, 28 g, 57,94 mmol) foi dissolvido em ácido acético diluído 70% (500 ml). A reacção decorreu durante 15 hr, até o t.l.c. (acetato de etilo/hexano 1:1) indicar ausência de material de partida (Rf 0,8) e um produto (Rf 0,2). A evaporação do solvente deu origem ao produto bruto sob a forma de um xarope amarelo. A purificação por cromatografia de coluna de flash (acetato de etilo/hexano 3:1) originou o diol (16,85 g, 94%) na forma de um sólido cristalino branco. Pf. 63-65°C.Zx 7θ20 = + 119.4° (c, o,25 em CHC1₃ ) .

(c) 3-0-BenziI-l,2-0-isopropilideno-6-0-p-toIueno-suIfunil-X -D-aIofuranose diol preparado anteriormente (13,91 g, 44,8 mmol) foi dissolvido em piridina seca (200ml) e foi adicionado cloreto de tosilo (9,37 g, 49,3 mmol).A reacção foi agitada à temperatura ambiente sob azoto seco durante 15 hr, até o t.l.c. (acetato de etilo/hexano 1:1) indicar ausência de material de partida por reagir (Rf 0,2) e dois produtos (Rf 0,6 e Rf 0,7). 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o produto bruto dissolvido em diclorometano (200 ml), lavado com aliquotas de 100 ml de HC1 M, salmoura e bicarbonato de sódio saturado e seco (Na2S0^). 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna de flash (acetato de etilo/hexano 1:2) dando a 3-0-benzi1-1,2-0-isopropi1ideno-6-0-p-toluenosulfoni1 - x -D-alofuranose (17,48 g, 84%). como um óleo incolor, /χ 2_β20= = +51,4° (c, 0,97 em CHC1₃).

-26(d) 3-0-Benzi 1 - 6-desoxi-1,2-0-isopropi1ideno-o<-P-alofuranose monotosilato preparado anteriormente (13,6 g, 29,3 mmol) foi dissolvido em THF seco (150ml) sob azoto seco. Juntou-se uma solução de superhidreto molar em THF e a reacção foi agitada â temperatura ambiente durante 1 hr até o t.l.c. (acetato de etilo/hexano 1:1) indicar ausência de material de partida (Rf 0,6) e um produto (RF 0,5). A reacção foi diluida em acetato de etilo (100 ml), lavada com água (3 x 100 ml) e seca (Na2S0₄). 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna de flash (acetato de etilo/hexano 3:5) para dar 3-0-benzil-6- desoxi-1,2-0-isopropi1ideno-íZ-alofuranose (10,8 g,

94%) asno um óleo incolor. Zx7q20 = +110,4°(c, 1,02 em CHC1₃).

(e) 5-Azido-3-0-benzil-5,6-didesoxi-l,2-0-isopropilideno-p-L-ta I ofuranose álcool preparado anteriormente (9,45 g, 31,85 mmol) foi dissolvido em piridina seca(150ml) tendo-se juntado uma quantidade catalizadora de 4-dimetilamino piridina. A reacção foi arrefecida a 0°C e juntou-se cloreto de metilo (4,98 ml, 67,3 mmol), A reacção foi agitada sob azoto seco e aquecida até à temperatura ambiente durante um periodo de 2 hr. Uma pequena amostra da mistura de reacção foi extraida e agitada com salmoura e éter de dietilo, a camada orgânica foi separada e o t.l.c. (acetato de etilo/hexano 1:1) nesta camada indicou a ausência de material de partida (Rf 0,5) e um produto (Rf 0,6).Juntou-se éter de dietilo (150 ml) à mistura de reacção, que foi agitada com salmoura (3 x 150 ml). A camada orgânica foi se-27-

ca e o solvente removido sob pressão reduzida dando origem ao mesilato em bruto. 0 mesilato em bruto foi imediatamente dissolvido em DMF seco (150 ml) e juntou-se azido de sódio (6,25 g, 95,6 mmol). A reacção foi agitada a 70°C durante 3 hr quando o t.l.c. (acetato de etilo/hexano 1:3) revelou a ausência de material de partida (Rf 0,6) e um produto (Rf 0,7). 0 solvente foi removido, o produto bruto dissolvido em água (150 ml) e extraído com dic 1 orometano (3 x 100 ml). Os extractos orgânicos foram secos (MgSO^) e o solvente removido sob pressão reduzida. 0 produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna de flash (acetato de etilo/hexano 1:5) dando 5-azido-3-0-benzil-5,6-didesoxi -1 , 2-0-isopropi1ideno-^-L-ta 1ofuranose (8,61 g,

84%).(Encontrado: 60,47; H, 6,84; N, 13,05%. ^cj5^H21°4^N3 requere C, 60,18; H, 6,58; N, 13,16%). Z7 2 20= + 160,0° (c, 1,21 em CHC1₃ ).

(f) 5-Azido-3-0-benzil-5,6-didesoxi-L-talonoIactona azido preparado anteriormente (2,39 g, 7,47 mmol) foi dissolvido em água/ácido trifluoroacêtico (50 ml, 2:3) e a reacção da mistura deixou-se ficar durante 1 hr, quando o t.l.c. (acetato de etilo/hexano 1:3) revelou um produto e ausência de material de partida (Rf 0,7), 0 solvente foi removido sob pressão reduzida, dando o lactol bruto sob a forma de um óleo. Este foi dissolvido em dioxan/água (50 ml, 2:1) e a solução foi arrefecida a 0°C. Juntou-se carbonato de bário (4,97 g; 22,4 mmol) e brometo (1,94 ml, 22,4 mmol) e a mistura de reacção foi agitada às escuras durante seis horas, quando o t.l.c. (acetato de etilo/ /hexano 1:1) revelou um produto (Rf 0,6) e ausência de materj_ al de partida (Rf 0,4), o brometo em excesso foi lavado por adição gota a gota de uma solução de tiosulfato de sódio e a mistura de reacção foi centrifugada e decantada para re-28-

mover o enxofre libertado. A mistura de reacção foi diluída com acetato de etilo (50 ml) e as fases separadas. A fase aquosa foi lavada com acetato de etilo (2 x 50 ml). Os extractos orgânicos foram juntos, secos (MgSO^) e o solvente removido sob pressão reduzida. 0 produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna de flash (acetato de etilo/hexano 1:3) dando 5-ácido-3-0-benzi1-5,6-didesoxi-L-talonolactona (1,86 g, 78%) como um óleo incolor que cristalizou comp1etamente(Encontrado: C, 56,37; H, 5,48; N, 14,36 ^C13^H15°4^N3 ^red^{uere: C}’ 56,41; H, 5,42; N, 14,60%). Z^7_D20 = =+95,5° (c, 0,99 em CH^ip.

(g) 5-Azido-3-0-benzil-5-desoxi-L-fuconolactona

A lactona preparada anteriormente (1,86 g, 67,1 mmol) foi dissolvida em diclorometano seco (100 ml), arrefecida a -30°C e agitada sob azoto seco. Juntaram-se piridina (1,53 ml, 134,2 mmol) e trifluorometanosulfunilo anidro (1,84 ml, 73,8 mmol). A reacção foi agitada durante 2 horas, quando o t.l.c. (acetato de etilo/hexano 1:1) revelou a ausência de material de partida (Rf 0,6) e um produto (Rf 0,8). A mistura de reacção foi lavada com aliquotas de 50 ml de água, HC1 3%, água, bicarbonato de sódio saturado e água. Juntou-se DMF seco (100 ml) e a maior parte do diclorometano foi removido sob pressão reduzida. Juntou-se trif1uoroacetato de sódio (3,969 g,

201 mmol) e a reacção foi agitada durante 15 horas sob azoto seco, quando o t.l.c. (acetato de etilo 1:3) indicou a ausência de material de partida (Rf 0,6) e produtos (Rf 0,4 e Rf 0,5). 0 DMF foi removido sob pressão reduzida e o produto dissolvido em diclorometano (lOOml ) , lavado com água (3 x 100 ml) e seco (MgSO^). 0 solvente foi removido sob pressão reduzida dando um óleo amarelo pálido. 0 produto impuro foi aquecido em metanol/água (2:1)(100 ml) a 50°c

durante 12 horas quando o t.l.c. (acetato de etilo/hexano 1:3) indicou apenas um produto (Rf 0,4). 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna de flash (acetato de etilo/ hexano 1:3) dando 5-azido-3-0-benzi1-5-desoxi-L-fucono1actona (1,51 g, 81%). /y7θ20 = + 171,6°(c, 1,49 em CH₂C1₂).

(h) 3-0-benziI-1,5-didesoxi-l,5-imino-L-fuconoIactam

A fuconolactona anteriormente preparada (1,51 g, 55 mmol) foi dissolvida em acetato de etilo (50 ml) e juntou-se uma quantidade catalítica de paládio sobre carbono (5%). A reacção foi agitada sob hidrogénio durante 2 horas quando t.l.c. (acetato de etilo/hexano 1:3) indicou apenas a linha base do material e t.l.c. (etanol/diclorometano 1:9) indicou dois produtos (Rf 0,5 e Rf 0,3). A mistura de reacção foi filtrada através de um tampão Celite, lavado com acetato de etilo (2 x lOml). As três porções foram juntas e o solvente foi removido sob pressão reduzida. A mistura de reacção foi dissolvida em etanol e deixada a repousar durante 12 hr, quando o t.l.c.

(eta no 1/d i c 1 oronstano 1:19) indicou apenas um produto (Rf 0,5) 0 solvente foi removido sob pressão reduzida qdando o produto bruto como sólido branco. A purificação foi feita por cromatografia de coluna de flash (etanol/diclorometano 1 : 19) dando-3-0-benzi1-1,5-didesoxi-l,5-imino-L-fuconolactam como sólido branco (1,11 g, 81%). Pf. 191 - 192°C.(encontrado: C, 62,17; H, 7,06; N, 5,45, C^Hj^O^N requere: C, 62,15; H,6,77; N, 5,58%). /°< /^20 = -70,3° (£, 0,90 em etanol).

(i) 1 ,5-Didesoxi-l,5-imino-L-fuconoIactam

Paládio· negro (15 mg) foi pre-reduz ido por agitação em etanol (25 ml) sob hidrogénio durante 20 min. A mistura agitada juntaram-se algumas gotas de HCl/etanol recentemente preparado e a solução do lactam benzilo protegido anteriormente preparado (1,11 g, 44 mmol). A solução foi agitada durante 1 hr quando o t.l.c. (etano1/dic1orometano 1:9) revelou um produto (Rf 0,1) e ausência de material de partida (Rf 0,9). A solução foi filtrada através de um tampão Celite e o solvente foi removido sob pressão reduzida dando um óleo incolor. Este foi recrista1izado da água com acetona dando 1, 5-didesoxi-1 ,5-imino-L-fuconolactam (65 mg, 91%) como sólido cristalino branco, que fundiu com decomposição a 226-227°C.(Encontrado: C, 44,96;

H, 7,12; N, 8,67. CgH^O^ requere: C, 44,72; H, 6,83;

N, 8,69%). fa/_7_D20= -137,2°(c, 0,83 em H₂0).

(j ) 1 ,5-Didesoxi-I,5-imino-L-fucitoI lactam benzilo protegido preparado anteriormente na parte (h) anterior, foi usado também para sintetizar o 1 , 5-didesoxi- 1,5-imino-L-fucito I, inicialmente por conversão na amina protegida, 3-0-benz i 1 -1 ,5-d i desox i - 1 , 5-imino-L-fucito 1 , e depois removendo o grupo 3-0-benzil, como na parte (i) anterior. 0 produto citado foi recuperado como um óleo incolor (Encontrado: C, 48,76%; H, 8,82%;

N, 9,30%. C,H₁₃N0₃N requere: C, 48,98; H, 8,84; N.9,52%).

/X J_d20=-49°(c, 0,78 em H₂0).

A síntese do composto 10, também referido como L-fuconico- ^-lactam, a partir da glucose ê

descrita por Fleet et al., J. Chem. Soc. Chem. Commun., pp 483-485 (1988).

Exemplos II e 12

Os compostos 11 e 12 podem ser sin tetizados a partir de 1,5-Didesoxi- 1,5-imino-fucito 1. A síntese do último composto a partir do meti1 - <<-D-g1ucopiranósido disponível no mercado é descrita por Fleet et al.,

J. Chem. Soc. 13, 841-842 (1985). A sintese especifica cte compostos 11 e 12 foi como se segue.

,5-Didesoxi-l ,5-imino-/~N-metil7-L-fucitol

Dissolveu-se 1,5-didesoxi-l ,5-imíno-L-fucitol (90 mg, 0,61 mmol) em metanol aquoso 80% (3m 1 ).

Juntou-se paládio negro (50 mg), sendo o frasco evacuado e enchido com hidrogénio. Juntou-se formaldeido (100 /il,

37%) através de um septo e a mistura foi agitada magnéticamente durante a noite. 0 catalizador foi filtrado e o composto em titulo foi isolado numa coluna de permuta iénica (H⁺) Dowex 50 por eluição com uma solução 1M de hidróxido de amónio. Depois de evaporado e seco por congelação o resultado foi 50 mg, 52%. 0 produto cristalizado a partir de metanol/cloroformio Ζχ7_β20= +12,8 (c, 0,18, CHCl^) . Encontrado: C,52,01; H, 9,51; N, 9,00; calculado:

^C7^H15“^N03> ^C’ ^{52 * * * * *}’^{15; H) 9}’^{38; N}> ⁸’⁵⁹·

1, 5 - D i d e s o x i -1, 5 - i m i η o - Z.N - \V-met il caproatoJ-L-fucitol

1,5-Didesoxi-l,5-imino-L-fucitol (147 mg, 1 mmol) foi dissolvido em metanol (1,5 ml), Sgua (0,4 ml) e ácido acético (0,09 ml) num frasco r.b. Juntou-se paládio preto (100 mg) e 6-oxohexanoato de metilo (0,2m 1 ).

frasco foi evacuado enquanto era agitado magneticamente, introduziu-se hidrogénio e agitou-se a reacção durante a noite. T.l.c. (etano 1/metano 1/NH^OH IM, 2:2:1) revelou a reacção completa do material de partida, Rf 0,23, e um produto, Rf 0,72. A mistura foi filtrada através de um tampão de algodão directamente para uma pequena coluna de resina de permuta iónica (forma H⁺) Dowex 50 e lavada com água e metanol. A forma de amina livre do composto em titilo foi convertida na forma de sal de HCl por eluição do produto com HCl metanélico 0,5M (cerca de 40-50 ml). As fracções contendo 0 produto foram juntas e 0 solvente foi removido por evaporação do produto até à secagem num secador rotativo.

rendimento da forma de sal de HCl do composto 12,250 mg, foi de 80%.

Exemplo 13

A actividade inibidora dos compostos deste invento contra 0 VIH ê demonstrada por um sistema de ensaio in vitro no qual as células T crescem num meio de cultura nutriente apropriado, expostas á inoculação do VIH na presença ou ausência do composto a ensaiar e são comparadas com célula de controle que cresceu sózinha num meio de cultura. Depois de um período de incubação conveniente, as culturas são avaliadas pela presença das chamadas células sinciciais (células gigantes).Exemp1 os tipicos deste

teste para avaliação dos inibidores do VIH foram descritos por Fung et al., Bio/Technology 5, 940-946 (1987); Walker et al., Proc. NatI. Acad. Sei. USA 84,8120-8124 (1987); Tyms et al., Lancet, Outubro 31, 1987, pp 1025-1026; Gruters et al., Nature 330, 74-77 (1987).

No caso presente, que é descrito por Karpas, Leuk. Res. 1 , 35-49 ( 1 977 ), foi utilizada uma linha de células T humanas leucémicas. Estas células foram semeadas em cavidades de microtitu 1 ação numa concentração de 5 x 10 células por 0,2 ml de meio de cultura em cada vaso. Utilizou-se como meio de cultura RPMI-1640 complementado com 10% de soro de embrião de vitela. Juntou-se cada um dos compostos a testar a 4 ou 6 cavidades da placa de microtitu I ação. Dois ou três dos vasos foram infectados 3 com cerca de 10 partículas de VIH 1 por vaso e outros dois ou três vasos foram de igual forma infectados com partículas de VIH2. Durante as 3 semanas seguintes, durante as quais se trocou duas vezes por semana o meio efe continha os correspondentes compostos a ensaiar, as células infectadas foram controladas pelo aparecimento de formações sinciciais (células gigantes) e eventua1 mente do efeito citopático (ECP).

Do mesmo modo estimou-se a velocidade de crescimento relativamente ao crescimento das células de controle. As culturas foram classificadas numa escala de 0 a 4⁺ por exame microscópico na seguinte base:

= ECP completo + - maioria das células mortas

1+ = cerca	de	1/4	de	células	vivas
2+ = cerca	de	1/2	de	células	vivas
3+ = cerca	de	3/4	de	células	vivas

4+ = todas as células vivas.

Na Tabela I estão resumidos os resultados dos compostos activos antecedentes.

Tabela I celulas-T

Composto	Concentração do composto mg/ml	infec tadas com HIV	de control
1	0,1	1+	4+
2	0,3	4+	4+
3	0,13	1 +	4+
4	0,13	2+	4+
5	0,1	1+	4+
6	0,1	1+	4+
7	θ)¹	1 +	4+
8	0,16	1+	4+
9	0 3	1+	4+
10	0,1	1+	4+
11	0,1	1 +	4+
12	0,03	1+	4+

Como meio de comparação, no mesmo ensaio do protocolo, AZT é tóxico a 0,01 microgramas por ml. A eficiência imprevisível de qualquer um dos compostos como inibidor do VIH e portanto a não obviosidade do invento foi demonstrada por: (A) os resultados anteriores de inibição positiva com o 1,4-didesoxi- 1,4-benzi1imino-L-ribito 1 (composto 7), enquanto que o enantiómero 1,4-didesoxi- 1 , 4-benci1imino-D-ribitol /preparado no exemplo 4 (K)J estava inactivo no anterior ensaio do protocolo (classificado como zero); e (B) os resultados anteriores de inibição positiva com o 1,5-didesoxi- 1,5-imino-L-fucono1 actam (composto 10), enquanto que o correspondente 1,5-didesoxi- 1 , 5-imino-L-fuci -35-

to 1/preparado no exemplo 10(j )J estava inactivo no anterior ensaio do protocolo (c I assifieado como zero).

Exemplo 14

Foram realizados mais ensaios com os compostos 1 a 12 para inibição da multiplicação do VIH para confirmar os resultados do exemplo 13. De forma a discriminar a actividade especifica anti-VIH e a citotoxicidade, foram determinados em paralelo os efeitos destes compostos em linfócitos T infectados com VIH e não infectados. Usando a linha de células T e suspensões de VIH livres de células preparadas de culturas infectadas, como no exemplo 13, estimou-se a concentração de partículas infecciosas (dose de tecido infeccioso de cu 1tura-DTIC) por titulação até à neutralização em que o número de partículas infecciosas VIH em cada preparação foi determinado pela mais alta diluição que continha VIH infeccioso, conforme detectado por formação sincicial, citotoxicidade e síntese do antigeno VIH depois de 10 dias de cultura com 10⁴ células T-45. As soluções stock de todos os compostos foram preparadas por dissolução de cada composto, numa concentração de 1 mg/ml, no meio em crescimento. Estas soluções foram filtradas e esterilizadas (0,22 yum). Inicialmente cada composto foi ensaiado em concentrações de 0,1 mg/ml e 0,5 mg/ml. Se um dado composto revelava inibição da multiplicação do VIH,sem citotoxicidade, o ensaio era repetido com diluições maiores ou, se se verificava inibição parcial, com concentrações mais elevadas.

Na tabela II, indicam-se a actividade citotóxica (% de células mortas) e a actividade anti-VIH (% redução do efeito citopático, ECP) para estes compostos.

cinalmente benéfica mas que não apresente efeitos tóxicos que se sobreponham âs vantagens da sua utilização. Seria expectável que a dose para um humano adulto se situaria em geral acima de cerca de 1 miligrama de composto activo. A via preferencial de administração ê a oral, sob a forma de cápsulas, tabletes, xaropes, elixires e similares, embora a administração parentérica possa também ser praticada.

As formulações convenientes do composto activo com diluentes e portadores farmaceuticamente aceitáveis, na forma de dose terapêutica podem ser preparadas segundo indicação dos textos gerais sobre o assunto tais como, por ex., Remington's Pharmaceutica I Sciences, Ed. Arthur Osol, 16- ed., 1980, Mack Publishing Co. , Easton,PA.

Após a leitura desta apresentação vários outros exemplos, que não se afastem do espirito e conteúdo deste invento, ficarão claros para pessoas conhecedoras do assunto. Pretende-se que todos esses exemplos sejam incluidos no conteúdo das reivindicações juntas.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1®. - Método para a inibição do vírus da imunodeficiencia humana num paciente infectado com o referido virus caracterizado por se administrar ao referido paciente uma quantidade eficaz viralmente inibidora de um composto seleccionado do grupo que consiste em:

(a) derivado N-metilo da di-hidroximetil-di-hidroxipirro1 i d i na, (b) 1 ,4-didesoxi-l ,4-imino-L-arabinitol , (c) 1,4-didesoxi-l ,4-imino-L-ribitol, (d) 1,4-didesoxi-l ,4-imino-D-ribitol, (e) 1,4-d idesox i-1,4-im ino-/N-met i lJ-L-arab i n i to 1, (f) 1 ,4-didesoxi-l ,4-imino-ZN-metil7-D-ribitol , (g) 1 ,4-dídesoxi-l ,4-benzilimino-L-ribitol (h) 1 ,4-didesoxi-l ,4-imino-D-talitol , (i) derivado N-metilo da desoximanojirimicina , (j ) 1 ,5-didesoxi-l ,5-imino-L-fuconolactama, (k) 1,5-didesoxi-l,5-imino-£N-metilJ-L-fucitol (l) 1,5-d idesoxi- 1,5-imino-/N-uJ-met i1-caproatoJ-L-fucito 1 e os seus derivados sais farmaceuticamente aceitáveis, sendo a gama de dosagem de composto activo de cerca de 1 mg até uma quantidade que apresenta efeitos tóxicos indesejáveis.
2^â. - Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o composto inibidor ser:

1.4- didesoxi-l,4-imino-L-arabinitol.
3^?. - Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o composto inibidor ser:

1.4- didesoxi-l,4-imino-D-ribitol .
4⁵. - Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o composto inibidor ser:

1.5- didesoxi-l,5-imino-L-fuconolactama.
5^?. - Método de acordo com a rei vindicação 1, caracterizado por o composto inibidor ser:

1 ,5-didesoxi-l,5-imino-ZN- uZ-met il-caproatoJ-L-fucitol.
6^â. - Processo para a preparação de um novo composto tendo actividade como inibidor do virus da imunodeficiência humana, seleccionado do grupo que consiste em:

(a) derivado N-metilo da di-hidroximeti1-di-hidroxipirro1id i na (b) 1 ,4-didesoxi-l ,4-imino-ZN-metil/-L-arabinitol , (c) 1,5-didesoxi-l,5-imino-L-fuconolactama, (d) 1,5-didesoxi-1,5-imino-ZN-meti17-L-fuci tol, (e) l,5-didesoxi-l,5-imino-ZN - uZ-met iI-caproatoj -L-fucitol, e dos seus sais derivados farmaceuticamente aceitáveis, caracterizado por:

-40i) para a preparação do composto referido em a):

1.1) se N-metilar a 2R,5R-di-hidroximetil-3R,4R-di-hidroxipirro1idina, ou

1.2) se converter o 2,5-didesoxi-2,5-imino-D-manitol no composto referido em a), ou ii) para a preparação do composto referido em b), se N-netilar o 1 ,4-didesoxi-1,4-imino-L-arabinito 1, ou iíi) paraba preparação do composto referido em c) se converter a 1,2:5,6-di-0-isopropileno- <-D-alofuranose no referido composto através de vários passos de reacção, ou iv) para a preparação do composto referido em d) se N-mstilar o 1 , 5-didesoxi- 1,5-imino-L-fucito 1, ou

v) para a preparação do composto referido em e) se fazer reagir o 1 , 5-didesoxi-1,5-imino-L-fucito 1 com 5-oxo-hexanoato de metilo na presença de negro de pa1ádio,seguido de hidrogenação.
7^?. - Processo, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado por se preparar o 1,5-didesoxi-1 ,5-imino-Z.N- vV-metil-caproatoJ-L-fucitol.

Lisboa, 20 de Dezembro de 1988

J. PEREIRA DA CRUZ