PT2508170E - Lipossoma de irinotecano ou o seu cloridrato e seu método de preparação - Google Patents

Lipossoma de irinotecano ou o seu cloridrato e seu método de preparação Download PDF

Info

Publication number
PT2508170E
PT2508170E PT98517840T PT09851784T PT2508170E PT 2508170 E PT2508170 E PT 2508170E PT 98517840 T PT98517840 T PT 98517840T PT 09851784 T PT09851784 T PT 09851784T PT 2508170 E PT2508170 E PT 2508170E
Authority
PT
Portugal
Prior art keywords
liposome
injection
cholesterol
irinotecan
drug
Prior art date
Application number
PT98517840T
Other languages
English (en)
Inventor
Xinyong Tong
Guofeng Lei
Chengxia Yu
Liang Chen
Original Assignee
Shanghai Hengrui Pharm Co Ltd
Jiangsu Hengrui Medicine Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai Hengrui Pharm Co Ltd, Jiangsu Hengrui Medicine Co filed Critical Shanghai Hengrui Pharm Co Ltd
Publication of PT2508170E publication Critical patent/PT2508170E/pt

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127Liposomes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/395Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02Inorganic compounds
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/24Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127Liposomes
    • A61K9/1271Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127Liposomes
    • A61K9/1277Processes for preparing; Proliposomes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127Liposomes
    • A61K9/1277Processes for preparing; Proliposomes
    • A61K9/1278Post-loading, e.g. by ion or pH gradient
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)

Description

DESCRIÇÃO "Lipossoma de irinotecano ou o seu cloridrato e seu método de preparação"
CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a lipossoma de irinotecano ou seu cloridrato e seus métodos de preparação e a uma injeção compreendendo o referido lipossoma e seu método de preparação.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO 0 irinotecano é um derivado semissintético da camptotecina. A camptotecina pode ligar-se especificamente à topoisomerase I, que pode induzir quebras reversíveis em ADN em cadeia simples e consequentemente desenrolar a estrutura em cadeia dupla do ADN. 0 irinotecano e o seu metabolito ativo SN-38 podem ligar-se ao complexo topoisomerase I-ADN, evitando assim a religação da fratura em cadeia simples. Provou-se que a citotoxicidade do irinotecano pode ser atribuída à interação da replicase e dos complexos triplos de topoisomerase I-ADN-irinotecano (ou SN-38), que quebram a cadeia dupla do ADN durante a síntese de ADN. 0 cloridrato de irinotecano é vastamente utilizado no tratamento de tumores malignos com as vantagens de efeitos farmacológicos óbvios e de eficácia clínica. Contudo, tem o mesmo problema de outros derivados da camptotecina: o anel saturado de lactona na estrutura do irinotecano é dependente do pH e pode ser transformado na sua forma carboxilato reversivelmente em condições fisiológicas para a qual a atividade antitumor ficará enfraquecida. As formulações comerciais existentes de cloridrato de irinotecano são injeções líquidas e pós liofilizados para injeção. Após administração intravenosa na prática clínica, o fármaco livre perderá atividade dado que o anel de lactona na sua estrutura é suscetível à hidrólise para a forma de carboxilato no ambiente fisiológico alcalino, reduzindo assim indiretamente a eficácia do fármaco. E estas formulações têm efeitos secundários graves, que são principalmente neutropenia e diarreia atrasada.
Os lipossomas têm sido vastamente estudados nos últimos anos como transportadores de fármacos. As principais caracteristicas dos lipossomas incluem a proteção do fármaco encapsulado, aumento da estabilidade do fármaco, alteração do comportamento de distribuição in vivo do fármaco e transporte do fármaco para a região doente por direção ao alvo passiva ou ativa. Sendo bons transportadores de fármacos anticancro, os lipossomas podem melhorar a eficácia dos fármacos e reduzir a toxicidade dos fármacos. 0 pedido internacional WO2005/117878 divulgou uma formulação de lipossoma de irinotecano e seu método de preparação. Esta formulação compreende irinotecano ou cloridrato de irinotecano, fosfolipido selecionado do grupo que consiste de fosfatidilcolina de soja hidrogenada, fosfatidiletanolamina, lecitina e cardiolipina e colesterol. Igualmente, o pedido de patente chinês CN1994279A também divulgou uma formulação de lipossoma de irinotecano e seu método de preparação, em que se usa fosfatidilcolina como um fosfolipido para preparar lipossomas no exemplo 5.
Chou et ai (Effect of Composition on the Stability of Liposomal Irinotecan Prepared by a pH Gradient Method; Journal of Bioscience and Bioengeneering, Vol 95, N2 4, 405-408, 2003) divulga lipossomas de irinotecano com HSPC/Chol a 100:30.
As formulações mencionadas na bibliografia de patentes acima referida podem surtir um bom efeito. Contudo, quando se utilizam essas formulações em humanos, a estabilidade, tamanho de partícula e semelhantes são ainda insatisfatórios.
DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO A presente invenção proporciona um lipossoma de irinotecano ou cloridrato de irinotecano, que tem maior capacidade de carga de fármaco, alta eficácia de encapsulação, boa estabilidade e é adequado a ser preparado numa formulação.
Até ao momento, alguma literatura (e.g., pedido internacional WO2005/117878 e CN1994279A) descreveu a composição e os métodos de preparação de lipossomas de irinotecano. Em algumas das suas formulações alguns dos índices apresentam bons resultados. Contudo, não existe qualquer informação sobre a estabilidade e o controlo do tamanho de partícula. Após um estudo posterior de lipossomas, ficámos surpreendidos ao verificar que a quantidade de colesterol em particular tinha um impacto no tamanho de partícula e na estabilidade dos lipossomas quando se verificavam determinadas condições para o tipo de ingrediente inativo e para a quantidade usada na formulação. Preparámos com sucesso lipossomas com uma distribuição de tamanho de partícula pequena e uniforme e melhorámos a sua estabilidade pelo controlo da razão entre fosfolípido neutro e colesterol. Comparativamente com outras formulações, os lipossomas do presente pedido têm maior estabilidade de armazenamento e outros indicadores também melhoraram significativamente. Além disso, comparativamente com as tecnologias descritas no pedido internacional WO2005/117878 e CN1994279A, estes produtos não compreendem um composto com um grupo funcional básico e um lípido catiónico. E os lipossomas da presente invenção têm um bom efeito antitumor e algumas vantagens de formulação simples, elevada capacidade de carga de fármaco e boa estabilidade de armazenamento.
Os lipossomas da presente invenção compreendem irinotecano ou cloridrato de irinotecano, um fosfolípido neutro e colesterol e a razão em peso de colesterol para fosfolípido neutro é de 1:3-5, preferentemente 1:3,5 - 4,5, com maior preferência 1: 4, caracterizados em que a referida razão em peso de fosfolípido neutro para irinotecano ou cloridrato de irinotecano é de 2-5 : 1, preferentemente 2,5-4 : 1 e em que o referido fosfolípido neutro compreende fosfatidilcolina de soja hidrogenada. 0 fosfolípido neutro usado na presente invenção é selecionado do grupo que consiste de fosfatidilcolina de soja hidrogenada (HSPC), fosfatidilcolina de ovo (EPC), fosfatidilcolina de soja (SPC) e semelhantes. 0 efeito é maximizado quando se utiliza fosfatidilcolina de soja hidrogenada como fosfolípido neutro. A capacidade de carga de fármaco dos lipossomas pode ser grandemente melhorada quando a razão em peso entre fármaco e fosfolípido é ajustada adicionalmente tal como se segue:
Irinotecano ou cloridrato de irinotecano 1 fosfolípido neutro 2~5, preferentemente 2,5-4.
Os lipossomas da presente invenção podem ser preparados por métodos de preparação de lipossomas convencionais na especialidade, preferentemente pelo método de gradiente iónico. Quando se utiliza o método de gradiente iónico, ocorre um gradiente iónico, formado por um tampão entre a fase aquosa interna e a fase aquosa externa do referido lipossoma. Preferentemente a fase aquosa interna do referido lipossoma tem uma concentração iónica superior à fase aquosa externa, que pode melhorar a estabilidade de tamanho de partícula do lipossoma durante o período de armazenamento, mantendo uma melhor eficácia de fármaco e sendo capaz de controlar o tamanho de partícula médio do lipossoma como pequeno e uniforme, permitindo a redução ao mínimo de alterações no tamanho de partícula do lipossoma durante o período de armazenamento.
Na presente invenção, a alteração de tamanho de partícula dos lipossomas durante o período de armazenamento pode ser reduzido ao mínimo por adição de um derivado lipídico de polímero hidrofílico à formulação. 0 ciclo de vida do lipossoma in vivo pode ser prolongado através da adição à formulação de um derivado de polietilenoglicol. 0 derivado de polietilenoglicol é selecionado do grupo que consiste de polietilenoglicol 200O-distearoilfosfatidiletanolamina (DSPE-PEG2000) . Poliet ilenoglicol 5000- distearoilfosfatidiletanolamina, polietilenoglicol 2000-dipalmitoilfosfatidiletanolamina, polietilenoglicol 5000-dipalmitoilfosfatidiletanolamina. De modo a melhorar a eficácia do fármaco a longo prazo, prefere-se que um derivado lipídico de polímero hidrofílico seja adicionado ao lipossoma na presente invenção. Com base nesta razão de formulação, o DSPE-PEG2000 tem o efeito mais óbvio. A razão em peso preferida de derivado lipídico para irinotecano ou cloridrato de irinotecano é 0,2-0,4. 0 lipossoma pode compreender adicionalmente um fosfolipido carregado selecionado do grupo que consiste de dilauroilfosfatidilglicerol, dipalmitoilfosfatidilglicerol, distearoilfosfatidilglicerol, dimiristatofosfatidilglicerol, ácido dioleico de fosfatidilserina, dioleoilfosfatidilglicerol, ácido fosfatidico de dilauroil, ácido fosfatidico de dimiristato, ácido fosfatidico de distearoil e uma sua mistura e a razão em peso entre fosfolipido carregado e fosfolipido neutro é 1:5 ~ 1:100.
Preferentemente, os lipossomas da presente invenção compreendem as seguintes razões em pesos dos ingredientes: cloridrato de irinotecano 1 fosfatidilcolina de soja hidrogenada 3,4-3,8 polietilenoglicol 2000- distearoilfosfatidiletanolamina 0,34-0,38 colesterol 0,8-0,95 e a razão de colesterol para fosfatidilcolina de soja hidrogenada é de 1:4. A presente invenção também proporciona um método de preparação de lipossomas de irinotecano ou de cloridrato de irinotecano. Os lipossomas da presente invenção podem ser preparados por um método convencional de preparação de lipossomas. O perito na especialidade pode escolher uma variedade de métodos para preparar os lipossomas de acordo com a formulação proporcionada pela presente invenção. Para a formulação de lipossomas na presente invenção, seleciona-se preferentemente o método de preparação de gradiente iónico. O método de preparação compreende as seguintes etapas de: 1) Preparação de lipossoma em branco por qualquer um dos seguintes métodos A a D: A. Dissolver um fosfolipido neutro e colesterol em etanol anidro ou num solvente misto de etanol anidro e álcool terc-butílico de acordo com a formulação pretendida, misturar a mistura com um tampão para obter lipossoma em branco impuro após remoção do etanol através de destilação a pressão reduzida, seguido de preparação de lipossoma em branco com o tamanho de partícula pretendido usando um homogeneizador de alta pressão e/ou um equipamento de extrusão; B. Dissolver um fosfolípido neutro e colesterol em clorofórmio ou num solvente misto clorofórmio-metanol de acordo com a formulação pretendida, formando um filme lipidico através de um evaporador rotativo, adicionar um tampão para hidratação para obter lipossoma em branco impuro e seguidamente preparar um lipossoma em branco com o tamanho de partícula pretendido usando um homogeneizador de alta pressão e/ou um equipamento de extrusão: C. Misturar um fosfolípido neutro, colesterol e um tampão de acordo com a formulação pretendida e seguidamente preparar lipossoma em branco com o tamanho de partícula pretendido usando um homogeneizador de alta pressão e/ou um equipamento de extrusão; D. Dissolver um fosfolípido neutro e colesterol em etanol anidro ou num solvente misto de etanol anidro e álcool terc-butílico de acordo com a formulação pretendida, misturar a mistura com um tampão e seguidamente preparar lipossoma em branco com o tamanho de partícula pretendido usando um homogeneizador de alta pressão e/ou um equipamento de extrusão; 2) Formação de gradiente iónico entre a fase aquosa interna e a fase aquosa externa do lipossoma em branco: substituir a fase aquosa externa do lipossoma em branco para formar um gradiente iónico entre a fase aquosa interna e a fase aquosa externa do lipossoma em branco; 3) Preparação de lipossomas carregados com fármaco: preparar uma solução aquosa de cloridrato de irinotecano, adicioná-la à dispersão de lipossoma em branco com gradiente iónico e seguidamente incubar a dispersão para obter lipossomas carregados com fármaco com aquecimento e agitação. Após a referida etapa 3) de preparação de lipossomas carregados com fármaco, o referido método pode também compreender a seguinte etapa de: 4) remoção do fármaco livre e concentração da amostra: adicionar um meio de tampão aos lipossomas de cloridrato de irinotecano, remover o fármaco não encapsulado usando um dispositivo de fluxo tangencial e concentrar a amostra para um volume apropriado. A presente invenção também proporciona uma injeção de lipossomas compreendendo os lipossomas anteriores. Quando se preparam lipossomas para uma injeção adequada para uso humano, é benéfico adicionar um estabilizador. 0 estabilizador usado na presente invenção pode ser um estabilizador convencional tal como vitamina E, ácido etilenodiaminatetracético e semelhantes. 0 estabilizador é útil para a estabilidade da formulação. Para a formulação descrita anteriormente, o estudo do estabilizador mostra que o ácido etilenodiaminatetracético ou o seu sal tem o melhor efeito relativamente a outros estabilizadores. Estes são benéficos para melhorar a estabilidade dos lipossomas. Portanto o estabilizador pode ser ácido etilenodiaminatetracético, sal dissódico de ácido etilenodiaminatetracético e sal dicálcico de ácido etilenodiaminatetracético ou uma sua mistura. A razão de estabilizador adicionado é 0 ~ 0,5% (p/v) e o mínimo não é 0%. A composição da presente invenção preferentemente compreende um antioxidante selecionado do grupo que consiste de antioxidante solúvel em água e antioxidante solúvel em óleo, em que o referido antioxidante solúvel em óleo é selecionado do grupo que consiste de -tocoferol, succinato de -tocoferol, acetato de -tocoferol e uma sua mistura, em que o referido antioxidante solúvel em água é selecionado do grupo que consiste de ácido ascórbico, bissulfito de sódio, sulfito de sódio, pirossulfito de sódio, L-cisteína e uma sua mistura. A razão de antioxidante adicionada é 0 ~ 0,5% (p/v) e o mínimo não é 0%. A injeção pode estar na forma de um líquido ou pó liofilizado para injeção. A formulação pode compreender um regulador de pressão osmótica selecionado do grupo que consiste de glicose, sacarose, sorbitol, manitol, cloreto de sódio, glicerina, histidina e o seu cloridrato, glicina e o seu cloridrato, lisina, serina, ácido glutâmico, arginina, valina e uma sua mistura. A razão de regulador de pressão osmótica adicionada é 0 ~ 5% (p/v) e o minimo não é 0%.
Na formulação na forma de pó liofilizado para injeção, a injeção compreende adicionalmente um lioprotetor e seguidamente a injeção é preparada para o pó liofilizado para injeção, após liofilização. O lioprotetor é selecionado do grupo que consiste de glicose, sacarose, tre-halose, manitol, dextrano, lactose e uma sua mistura. A injeção de lipossomas preferível da presente invenção compreende a seguinte razão em peso de ingredientes: cloridrato de irinotecano 1 fosfatidilcolina de soja hidrogenada 3,4-3,8 polietilenoglicol 2000 - distearoilfosfatidiletanolamina 0,34-0,38 colesterol 0,8-0,95 sal dissódico de ácido etilenodiaminatetracético 0,05-0,09 e a razão de colesterol para fosfatidilcolina de soja hidrogenada é de 1:4. O método de preparação da injeção anteriormente descrita compreende as seguintes etapas de: 1) Preparação de lipossoma em branco por qualquer um dos seguintes métodos A a D: A. Dissolver um fosfolípido neutro e colesterol em etanol anidro ou num solvente misto de etanol anidro e álcool terc-butílico de acordo com a formulação pretendida, misturar a mistura com um tampão para obter lipossoma em branco impuro após remoção do etanol através de destilação a pressão reduzida, seguido de preparação de lipossoma em branco com o tamanho de partícula pretendido usando um homogeneizador de alta pressão e/ou um equipamento de extrusão; B. Dissolver um fosfolípido neutro e colesterol em clorofórmio ou num solvente misto clorofórmio-metanol de acordo com a formulação pretendida, formando um filme lipídico através de um evaporador rotativo, adicionar um tampão para hidratação para obter lipossoma em branco impuro e seguidamente preparar um lipossoma em branco com o tamanho de partícula pretendido usando um homogeneizador de alta pressão e/ou um equipamento de extrusão: C. Misturar um fosfolípido neutro, colesterol e um tampão de acordo com a formulação pretendida e seguidamente preparar lipossoma em branco com o tamanho de partícula pretendido usando um homogeneizador de alta pressão e/ou um equipamento de extrusão; D. Dissolver um fosfolípido neutro e colesterol em etanol anidro ou num solvente misto de etanol anidro e álcool terc-butílico de acordo com a formulação pretendida, misturar a mistura com um tampão e seguidamente preparar lipossoma em branco com o tamanho de partícula pretendido usando um homogeneizador de alta pressão e/ou um equipamento de extrusão; 2) Formação de gradiente iónico entre a fase aquosa interna e a fase aquosa externa do lipossoma em branco: substituir a fase aquosa externa do lipossoma em branco para formar um gradiente iónico entre a fase aquosa interna e a fase aquosa externa do lipossoma em branco; 3) Preparação de lipossomas carregados com fármaco: preparação de uma solução aquosa de cloridrato de irinotecano, adicioná-la à dispersão de lipossomas em branco com gradiente iónico e seguidamente incubar a dispersão para obter lipossomas carregados com fármaco com aquecimento e agitação. Após a referida etapa 3) de preparação de lipossomas carregados com fármaco, o referido método pode também compreender a seguinte etapa de: 4) remoção do fármaco livre e concentração da amostra: adicionar um meio de tampão aos lipossomas de cloridrato de irinotecano, remover o fármaco não encapsulado usando um dispositivo de fluxo tangencial e concentrar a amostra para um volume apropriado.
Após obtenção dos lipossomas, ajusta-se a concentração de fármaco por diluição para um volume medido: esteriliza-se os lipossomas por filtração e seguidamente enche-se e sela-se para obter a injeção de lipossomas. Ou adiciona-se seguidamente um lioprotetor à amostra de fármaco com lipossomas, ajusta-se a concentração de fármaco por diluição para um volume medido, esteriliza-se os lipossomas por filtração e seguidamente enche-se, sela-se e liofiliza-se para obter o pó de lipossomas liofilizado para injeção.
Efeitos benéficos da presente invenção: A formulação de lipossomas de irinotecano ou de cloridrato de irinotecano ultrapassou muitas deficiências dos produtos e tecnologias existentes. A estabilidade do fármaco pode ser melhorada pela encapsulação do fármacos na fase aquosa interna dos lipossomas. Devido ao fármaco estar na forma de anel de lactona in vivo, a concentração do metabolito ativo SN-38 mantém-se no plasma por um longo período de tempo. De um modo geral, a formulação de lipossomas de irinotecano ou de cloridrato de irinotecano pode aumentar a eficácia da formulação e reduzir os efeito secundários dos fármacos. A formulação de lipossomas de irinotecano ou de cloridrato de irinotecano da presente invenção resolveu o problema da reduzida capacidade de carga de fármaco nos lipossomas através do controlo da razão específica entre fármaco, fosfolípido e colesterol. A razão entre fármaco e lípido na injeção de lipossomas é superior a 0,25 (p/p) e a eficácia de encapsulação é superior a 90%, preferentemente superior a 95%. Os lipossomas preparados pela presente invenção têm um tamanho de partícula menor e melhoram a estabilidade por otimização da dosagem de colesterol e fosfolípido. Por rastreio do estabilizador, adiciona-se preferentemente à formulação uma determinada percentagem de sais de ácido etilenodiaminotetracético para melhorar significativamente a estabilidade dos lipossomas e a distribuição do tamanho de partícula dos lipossomas situa-se uniformemente na gama de 10 nm~220 nm. Os resultados da experiência do fator influenciador da injeção de lipossomas de irinotecano ou de cloridrato de irinotecano mostram que o tamanho de partícula e a eficácia da encapsulação da amostra não sofre alterações significativas quando colocada a 40 °C durante 10 dias e os índices verificam todos os requisitos. Comparativamente com formulações disponíveis comercialmente, a injeção de lipossomas de irinotecano ou de cloridrato de irinotecano apresenta um aumento significativo da taxa de inibição de tumor e uma redução significativa da sua toxicidade.
DESCRIÇÃO SUCINTA DOS ESQUEMAS A figura 1 apresenta a distribuição do tamanho de partícula da injeção de lipossomas de irinotecano ou de cloridrato de irinotecano de acordo com a presente invenção. A figura 2 apresenta a morfologia da injeção de lipossomas de irinotecano ou de cloridrato de irinotecano de acordo com a presente invenção. A figura 3 apresenta os resultados do teste de efeito anticancro in vivo da injeção de lipossomas de irinotecano ou de cloridrato de irinotecano de acordo com a presente invenção.
CONCRETIZAÇÕES PREFERIDAS
Os exemplos seguintes pretendem ilustrar adicionalmente a invenção, mas não se pretende que limitem o seu âmbito de qualquer forma. EXEMPLO 1
Formulação:
Método de preparação:
Dissolveram-se fosfatidilcolina de soja hidrogenada (HSPC) e colesterol (CHOL) das quantidades para formulação numa quantidade adequada de etanol anidro, misturou-se a solução lipidica resultante com solução de sulfato de amónio (100 ml), removeu-se o etanol por destilação a pressão reduzida e seguidamente obteve-se o lipossomas em branco em bruto. Após 5 ciclos de homogeneização no homogeneizador de alta pressão (1000 bar), controlou-se o tamanho de partícula dos lipossomas por extrusão dos lipossomas num equipamento de extrusão (duas membranas de extrusão de 0,1 pm no equipamento de extrusão, extrusão cinco vezes) e seguidamente adicionou-se solução aquosa DSPE-PEG2000. Com agitação, incubou-se a mistura durante 20 minutos. Dialisou-se o lipossoma em branco por utilização de um dispositivo de ultrafiltração com fluxo tangencial com fornecimento continuo de água injetável no decurso da ultrafiltração e finalmente obteve-se o lipossoma em branco.
Preparou-se uma solução aquosa de cloridrato de irinotecano com água injetável e adicionou-se à dispersão de lipossomas em branco com o gradiente iónico anterior de acordo com a razão em peso entre cloridrato de irinotecano e HSPC de 1:3,5. Sob agitação, aqueceu-se a mistura a 60 °C e incubou-se durante 20 minutos e seguidamente obteve-se lipossomas carregados com fármaco. Removeu-se o fármaco não encapsulado por utilização de um dispositivo de ultrafiltração com fluxo tangencial. Adicionou-se 0,45 g de cloreto de sódio para ajustar a pressão osmótica após o que a amostra foi concentrada até cerca de 50 ml. Após ajuste da concentração de fármaco por diluição para o volume medido, esterilizaram-se os lipossomas por filtração com um filtro de 0,22 pm, e seguidamente encheu-se um frasquinho pequeno sob proteção de azoto e selou-se. Finalmente obteve-se a injeção de lipossomas de cloridrato de irinotecano.
Apresenta-se na tabela seguidamente a variação de tamanho de partícula de cada formulação. Os resultados indicaram que o tamanho de partícula da amostra mais pequeno se obteve quando a razão em peso entre fosfolípido e colesterol foi de 4:1,
Investigou-se a estabilidade da amostra preparada a 25 °C a diferentes razões em peso entre fosfolipido e colesterol. Apresentam-se os resultados na tabela seguidamente. Após armazenagem a 25 °C durante 60 dias, o tamanho de partícula e a eficácia da encapsulação da amostra não apresentaram alterações significativas quando a razão em peso entre fosfolipido e colesterol foi de 4:1. Contudo, para as amostras apresentando outras razões em peso de fosfolipido para colesterol, o tamanho da amostra aumentou e a eficácia da encapsulação diminuiu. Assim, a estabilidade da amostra foi melhor quando a razão em peso entre fosfolipido e colesterol foi de 4:1.
Conclusões :
Tendo em consideração todos os índices, podem obter-se melhores resultados quando a razão entre colesterol e fosfolípido foi de 1:3 ~ 5, com maior preferência de 1:4. EXEMPLO 2
Formulação: cloridrato de irinotecano 0,28 g fosfatidilcolina de soja hidrogenada (HSPC) 1 g polietilenoglicol 2000-distearoilfosfatidiletanolamina (DSPE- 0,1 g PEG2000) colesterol 0,25 g sulfato de amónio 5 g sal dissódico de ácido etilenodiaminotetracético 0,02 g cloreto de sódio 0,45 g até ao volume água injetável necessário Método de preparação:
Dissolveram-se fosfatidilcolina de soja hidrogenada e colesterol das quantidades para formulação numa quantidade adequada de etanol anidro, misturou-se a solução lipídica resultante com solução de sulfato de amónio (100 ml), removeu-se o etanol anidro por destilação a pressão reduzida e seguidamente obteve-se o lipossoma em branco impuro. Após 5 ciclos de homogeneização no homogeneizador de alta pressão (1000 bar), controlou-se o tamanho de partícula dos lipossomas por extrusão dos lipossomas num equipamento de extrusão (duas membranas de extrusão de 0,1 pm no equipamento de extrusão, extrusão cinco vezes) e seguidamente adicionou-se solução aquosa DSPE-PEG2000. Com agitação, incubou-se a mistura durante 20 minutos. Dialisou-se os lipossomas em branco por utilização de um dispositivo de ultrafiltração com fluxo tangencial com fornecimento contínuo de água injetável no decurso da ultrafiltração e finalmente obteve-se os lipossomas em branco.
Preparou-se uma solução aquosa de cloridrato de irinotecano com água injetável e adicionou-se à dispersão de lipossomas em branco com o gradiente iónico anterior de acordo com a razão em peso entre cloridrato de irinotecano e HSPC de 1:3,5. Sob agitação, aqueceu-se a mistura a 60 °C e incubou-se durante 20 minutos e seguidamente obteve-se lipossomas carregados com fármaco. Removeu-se o fármaco não encapsulado por utilização de um dispositivo de ultrafiltração com fluxo tangencial. Adicionou-se 0,45 g de cloreto de sódio para ajustar a pressão osmótica após o que a amostra foi concentrada até cerca de 50 ml. Após ajuste da concentração de fármaco por diluição para o volume medido, esterilizaram-se os lipossomas por filtração com um filtro de 0,22 pm, e seguidamente encheu-se um frasquinho pequeno sob proteção de azoto e selou-se. Finalmente obteve-se a injeção de lipossomas de cloridrato de irinotecano. EXEMPLO 3 A formulação e método de preparação de lipossomas em branco foram as mesmas do exemplo 2, exceto que a razão em peso entre cloridrato de irinotecano e HSPC foi de 1:1,5, 1:2, 1:3,5, 1:4 e 1:5 no processo de preparação de lipossomas. A eficácia de encapsulação e o tamanho de partícula da amostra de lipossomas de cloridrato de irinotecano apresentam-se na tabela seguinte:
Demonstrou-se que a eficácia de encapsulação se reduzia significativamente quando a razão em peso de cloridrato de irinotecano para HSPC era de 1:1,5 e o teor de carga de fármaco diminuiu consideravelmente quando a razão foi de 1:5. Não é adequado para preparar formulações usadas em aplicações clínicas em ambas as condições. A eficácia de encapsulação e de teor de carga de fármaco foram superiores quando a razão foi de 1:2-1:4. EXEMPLO 4 A formulação e método de preparação de lipossomas em branco e de lipossomas carregados com fármaco foram as mesmas do exemplo 2, exceto que a HSPC na formulação foi substituída por fosfatidilcolina de ovo (EPC) de elevada pureza e por fosfatidilcolina de soja (SPC) de elevada pureza, respetivamente. A estabilidade da solução de lipossomas resultante foi investigada a 25 °C e apresentam-se os resultados na tabela seguidamente. Os resultados do ensaio mostraram que a estabilidade da amostra de lipossomas preparada por HSPC foi a melhor e os principais índices não apresentaram qualquer variação significativa por armazenagem a 25 °C durante 2 meses.
EXEMPLO 5
Formulação: cloridrato de irinotecano 0,28 g fosfatidilcolina de soja hidrogenada (HSPC) 1 g polietilenoglicol 2000-distearoilfosfatidiletanolamina (DSPE- 0,1 g PEG2000) colesterol 0,25 g solução salina 50 ml até ao volume água injetável necessário Método de preparação <1>: Método de injeção de etanol: dissolveram-se f osf at idilcolina de soja hidrogenada, DSPE-PEG2000 e colesterol das quantidades para formulação numa quantidade adequada de etanol anidro e a solução lipídica resultante foi injetada numa solução salina de cloridrato de irinotecano. Removeu-se o etanol por destilação a pressão reduzida e seguidamente obteve-se lipossoma em branco impuro. Controlou-se o tamanho de partícula dos lipossomas por extrusão dos lipossomas num equipamento de extrusão (duas membranas de extrusão de 0,1 pm no equipamento de extrusão, extrusão cinco vezes) após 5 ciclos de homogeneização no homogeneizador de alta pressão (1000 bar). A concentração de fármaco foi ajustada por diluição para o volume medido, esterilizaram-se os lipossomas por filtração com um filtro de 0,22 pm, e seguidamente encheu-se um frasquinho pequeno sob proteção de azoto e selou-se. Finalmente obteve-se a injeção de lipossomas de cloridrato de irinotecano. Método de preparação <2>: Método de dispersão de filme: dissolveram-se f osf at idilcolina de soja hidrogenada, DSPE-PEG2000 e colesterol das quantidades para formulação numa quantidade adequada de clorofórmio e preparou-se a solução lipídica resultante para a forma de filme num evaporador rotativo e seguidamente removeu-se o clorofórmio. Adicionou-se solução salina de cloridrato de irinotecano e a mistura foi incubada durante 1 h. Controlou-se o tamanho de partícula dos lipossomas por extrusão dos lipossomas num equipamento de extrusão (duas membranas de extrusão de 0,1 ym no equipamento de extrusão, extrusão cinco vezes) após 5 ciclos de homogeneização no homogeneizador de alta pressão (1000 bar) . A concentração de fármaco foi ajustada por diluição para o volume medido, esterilizaram-se os lipossomas por filtração com um filtro de 0,22 ym, e seguidamente encheu-se um frasquinho pequeno sob proteção de azoto e selou-se. Finalmente obteve-se a injeção de lipossomas de cloridrato de irinotecano.
Determinou-se a eficácia de encapsulação e o tamanho de partícula dos lipossomas de cloridrato de irinotecano preparados pelos métodos de preparação <1> e <2> e do exemplo 2 .
Demonstrou-se que o produto pretendido poderia ser preparado por métodos passivos de carga de fármaco tal como pelo método de injeção de etanol e pelo método de dispersão de filme para preparar lipossomas de cloridrato de irinotecano. Mas os lipossomas preparados por estes métodos tinham uma reduzida eficácia de encapsulação e apenas podia ser carregada nos lipossomas uma pequena quantidade do fármaco. Contrariamente, as amostras preparadas por um método de carga ativa de fármaco (exemplo 2) tinham elevada eficácia de encapsulação e teor de fármaco carregado. Além disso, a amostra preparada pelo método de carga ativa de fármaco tinha um tamanho de partícula pequeno e uniforme. Portanto, na presente invenção, usou-se o método de carga ativa de fármaco para preparar os lipossomas. Este teve resultados extremamente positivos para preparar os lipossomas de cloridrato de irinotecano pelo método do gradiente iónico. EXEMPLO 6
Método de preparação:
Lipossomas em branco: injetou-se a solução etanólica de lipidos e a solução foi homogeneizada a 1000 bar, 6 vezes; extrudida 3 vezes a 200 nm, 5 vezes a 100 nm; adicionou-se PEG2000-DSPE e incubou-se a mistura durante 30 min a 60 °C.
Seguidamente a mistura foi dialisada 3 vezes num dispositivo de fluxo tangencial, 50 ml de cada vez, em que se adicionou vitamina E(VE) ao solvente orgânico de fosfolipido e adicionou-se EDTA à solução de sulfato de amónio.
Lipossomas carregados com fármaco: preparou-se uma solução aquosa de cloridrato de irinotecano a cerca de 10 mg/ml e adicionou-se aos lipossomas em branco e seguidamente incubou-se a mistura a 60 °C durante 15 min. Concentrou-se a amostra a aproximadamente 50 ml por utilização de um dispositivo de fluxo tangencial e obteve-se a amostra a 5 mg/ml.
Os resultados de estabilidade apresentam-se na tabela seguinte. Todos os índices da amostra não apresentaram qualquer variação apreciável quando se adicionou EDTA sozinho. Melhorou significativamente a estabilidade dos lipossomas. Mas outros estabilizadores não aumentaram significativamente a estabilidade dos lipossomas.
EXEMPLO 7
Formulação (1): cloridrato de irinotecano 0,5 g fosfatidilcolina de soja hidrogenada 1,5 g colesterol 0,4 g sulfato de manganês 10 g manitol 2,5 g até ao volume água injetável necessário Método de preparação:
Dissolveu-se fosfatidilcolina de soja hidrogenada e colesterol na quantidade da formulação numa quantidade adequada de etanol anidro e misturou-se a solução de lípido resultante com solução de sulfato de manganês (100 ml) . Após remoção do etanol anidro por destilação a pressão reduzida, obteve-se o lipossoma em branco impuro. Controlou-se o tamanho de partícula do lipossoma por extrusão do lipossoma no equipamento de extrusão (extrusão de cinco vezes em duas membranas de extrusão de 0,1 pm no equipamento de extrusão). O lipossoma em branco foi dialisado através de um dispositivo de ultrafiltração de fluxo tangencial com fornecimento contínuo de água injetável no decorrer da ultrafiltração, obtendo-se seguidamente o lipossoma em branco. Preparou-se solução aquosa de cloridrato de irinotecano com água injetável, adicionou-se à dispersão do lipossoma em branco com gradiente iónico. Com agitação, aqueceu-se a mistura a 50 °C e incubou-se durante 20 minutos e seguidamente obteve-se o lipossoma carregado com fármaco. Removeu-se o fármaco não encapsulado utilizando o dispositivo de ultrafiltração de fluxo tangencial e seguidamente adicionou-se 2,5 g de manitol para ajustar a pressão osmótica. Após ajustar a concentração de fármaco por diluição a volume constante, esterilizou-se o lipossoma por filtração com filtro de 0,22 pm e seguidamente transferiu-se para um frasquinho pequeno sob proteção de azoto e selou-se. Obteve-se finalmente a injeção de lipossoma de cloridrato de irinotecano. O tamanho de partícula do lipossoma foi medido pelo analisador de tamanho de partícula nano (89,3 nm) e a eficácia de encapsulação foi de 97,5%.
Formulação (2): cloridrato de irinotecano 1 g lecitina de ovo hidrogenada (HEPC) 3,45 g colesterol 0,8 g sulfato de magnésio 10 g histidina 2,5 g até ao volume água injetável necessário Método de preparação:
Dissolveu-se lecitina de ovo hidrogenada e colesterol na quantidade da formulação numa quantidade adequada de etanol anidro e misturou-se a solução de lípido resultante com solução de sulfato de manganês (100 ml) . O tamanho de partícula do lipossoma foi controlado por extrusão do lipossoma no equipamento de extrusão (extrusão de cinco vezes com duas membranas de 0,1 pm no equipamento de extrusão). O lipossoma em branco foi dialisado através de um dispositivo de ultrafiltração de fluxo tangencial com fornecimento contínuo de água injetável no decorrer da ultrafiltração, obtendo-se seguidamente o lipossoma em branco. Preparou-se solução aquosa de cloridrato de irinotecano com água injetável e adicionou-se à dispersão do lipossoma em branco com gradiente iónico. Aqueceu-se a mistura a 50 2C, sob agitação, e incubou-se durante 20 minutos e seguidamente obteve-se o lipossoma carregado com fármaco. Removeu-se o fármaco não encapsulado usando o dispositivo de ultrafiltração de fluxo tangencial e concentrou-se a amostra a cerca de 50 ml. Seguidamente adicionou-se 2,5 g de histidina para ajustar a pressão osmótica. Após se ter ajustado a concentração de fármaco por diluição para o volume medido, esterilizou-se o lipossoma por filtração com filtro de 0,22 pm e seguidamente encheu-se um pequeno frasquinho sob proteção de azoto e selou-se. Finalmente obteve-se a injeção de lipossoma de cloridrato de irinotecano. O tamanho de partícula do lipossoma foi medido pelo analisador de tamanho de partícula nano (87,6 nm) e a eficácia de encapsulação foi de 98,1%.
Formulação (3): cloridrato de irinotecano 0,3 g fosfatidilcolina de soja hidrogenada (HSPC) 1 g polietilenoglicol 2000-distearoilfosfatidiletanolamina (DSPE- 0,05 g PEG2000) colesterol 0,25 g sulfato de amónio 5 g cloreto de sódio 0,45 g até ao volume água injetável necessário Método de preparação:
Dissolveu-se fosfatidilcolina de soja hidrogenada e colesterol na quantidade da formulação numa quantidade adequada de etanol anidro e misturou-se a solução de lípido resultante com solução de sulfato de amónio (100 ml) . Após remoção do etanol anidro por destilação a pressão reduzida, obteve-se o lipossoma em branco impuro. Após 5 ciclos de homogeneização no homogeneizador de alta pressão (1000 bar), adicionou-se solução aquosa de DSPE-PEG2000. Incubou-se a mistura durante vinte minutos sob agitação. Dialisou-se o lipossoma em branco usando o dispositivo de ultrafiltração de fluxo tangencial com fornecimento contínuo de água injetável no decorrer da ultrafiltração, seguidamente obteve-se o lipossoma em branco. Preparou-se solução aquosa de cloridrato de irinotecano com água injetável e adicionou-se à dispersão de lipossoma em branco com gradiente iónico. Aqueceu-se a mistura a 60 2C, sob agitação, e incubou-se durante 20 minutos e seguidamente obteve-se o lipossoma carregado com fármaco. Removeu-se o fármaco não encapsulado usando dispositivo de ultrafiltração de fluxo tangencial e concentrou-se a amostra a cerca de 50 ml. Seguidamente adicionou-se 0,45 g de cloreto de sódio para ajustar a pressão osmótica. Após ajustar a concentração de fármaco por diluição para o volume medido, o lipossoma foi esterilizado por filtração com filtro de 0,22 pm e seguidamente encheu-se um frasquinho pequeno sob proteção de azoto e selou-se. Finalmente obteve-se a injeção de lipossoma de cloridrato de irinotecano. O tamanho de partícula do lipossoma foi medido pelo analisador de tamanho de partícula nano (87,3 nm) e a eficácia de encapsulação foi de 99,2%. EXEMPLO 8 (não está de acordo com as reivindicações)
Formulação: cloridrato de irinotecano 0,5 g fosfatidilcolina de soja hidrogenada 1 g (HSPC) fosfolípidos de miocárdio (CL) 0,5 g polietilenoglicol 5000-distearoilfosfatidiletanolamina (DSPE- 0,5 g PEGsooo) -tocoferol 0,05 g colesterol 0,35 g ácido cítrico 5,76 g cloreto de sódio cerca de 3,6 g até ao volume água injetável necessário Método de preparação:
Dissolveu-se fosfatidilcolina de soja hidrogenada, fosfolípido de miocárdio, DSPE-PEG5000, colesterol e tocoferol na quantidade da formulação numa quantidade adequada de etanol anidro e misturou-se a solução de lípido resultante com solução de ácido cítrico (100 ml). Após remoção do etanol anidro por destilação a pressão reduzida, obteve-se o lipossoma em branco impuro. Após 5 ciclos de homogeneização num homogeneizador de alta pressão (1000 bar), dialisou-se o lipossoma em branco usando dispositivo de ultrafiltração de fluxo tangencial com fornecimento contínuo de solução de cloreto de sódio (0,9%, 400 ml) no decurso da ultrafiltração, seguidamente obteve-se o lipossoma em branco. Preparou-se solução aquosa de cloridrato de irinotecano com água injetável e adicionou-se à dispersão de lipossoma em branco com gradiente iónico. Aqueceu-se a mistura a 60 2C, sob agitação, e incubou-se durante 20 minutos e seguidamente obteve-se o lipossoma carregado com fármaco. Removeu-se o fármaco não encapsulado usando um dispositivo de ultrafiltração de fluxo tangencial e a amostra foi concentrada a cerca de 50 ml. Após ajuste da concentração do fármaco por diluição a volume constante, o lipossoma foi esterilizado por filtração com filtro de 0,22 pm e seguidamente encheu-se um frasquinho pequeno sob proteção de azoto e selou-se. Finalmente obteve-se a injeção de lipossoma de cloridrato de irinotecano. O tamanho de partícula do lipossoma foi medido pelo analisador de tamanho de partícula nano (85,8 nm) e a eficácia de encapsulação foi de 98,6%. EXEMPLO 9 (não está de acordo com as reivindicações)
Formulação: cloridrato de irinotecano 0,8 g dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC) 2 g dipalmitoilfosfatidilglicerol (DPPG) 0,2 g colesterol 0,5 g ácido ascórbico 0,05 g sal dissódico de ácido 0,05 g etilenodiaminotetracético sulfato de amónio 5 g cloreto de sódio cerca de 3,6 g até ao volume água injetável necessário Método de preparação:
Dissolveu-se DPPC, DPPG e colesterol na quantidade da formulação numa quantidade adequada de etanol anidro e misturou-se a solução de lípido resultante com solução de sulfato de amónio (100 ml, contendo sal dissódico de ácido etilenodiaminotetracético). Após remoção de etanol por destilação a pressão reduzida, obteve-se o lipossoma em branco impuro. Após 5 ciclos de homogeneização num homogeneizador de alta pressão (1000 bar), dialisou-se o lipossoma em branco usando o dispositivo de ultrafiltração de fluxo tangencial com fornecimento continuo de solução de cloreto de sódio (0,9%, 400 ml) no decurso da ultrafiltração, seguidamente obteve-se o lipossoma em branco. Preparou-se solução aquosa de cloridrato de irinotecano com água injectável e adicionou-se à dispersão de lipossoma em branco com gradiente iónico. Aqueceu-se a mistura a 60 2C, sob agitação, e incubou-se durante 20 minutos e seguidamente obteve-se o lipossoma carregado com fármaco. Removeu-se o fármaco não encapsulado usando um dispositivo de ultrafiltração de fluxo tangencial e a amostra foi concentrada a cerca de 50 ml. Após ajuste da concentração do fármaco por diluição a volume constante, o lipossoma foi esterilizado por filtração com filtro de 0,22 pm e seguidamente encheu-se um frasquinho pequeno sob proteção de azoto e selou-se. Finalmente obteve-se a injeção de lipossoma de cloridrato de irinotecano. O tamanho de partícula do lipossoma foi medido pelo analisador de tamanho de partícula nano (89,4 nm) e a eficácia de encapsulação foi de 97,2%. EXEMPLO 10 (não está de acordo com as reivindicações)
Formulação: cloridrato de irinotecano 0,5 g fosfatidilcolina de soja hidrogenada (HSPC) 1 g polietilenoglicol 5000-distearoilfosfatidiletanolamina (DSPE- 0,1 g PEGsooo) -tocoferol 0,05 g colesterol 0,3 g sulfato de amónio 5 g cloreto de sódio cerca de 3,6 g sacarose 2 g manitol 1 g até ao volume água injectável necessário Método de preparação:
Dissolveu-se fosfatidilcolina de soja hidrogenada, colesterol e -tocoferol na quantidade da formulação numa quantidade adequada de etanol anidro e misturou-se a solução de lipido resultante com solução de sulfato de amónio (100 ml). Após remoção de etanol por destilação a pressão reduzida, obteve-se o lipossoma em branco impuro. Após 5 ciclos de homogeneização no homogeneizador de alta pressão (1000 bar), o lipossoma foi extrudido no equipamento de extrusão (cinco membranas de extrusão de 100 nm no equipamento de extrusão, extrusão cinco vezes). Seguidamente, adicionou-se a solução aquosa de DSPE-PEG5000 e a mistura foi incubada sob agitação durante 20 minutos. Dialisou-se o lipossoma em branco usando o dispositivo de ultrafiltração de fluxo tangencial com fornecimento continuo de solução de cloreto de sódio (0,9%, 400 ml) no decurso da ultrafiltração, seguidamente obteve-se o lipossoma em branco. Preparou-se solução aquosa de cloridrato de irinotecano com água injectável e adicionou-se à dispersão de lipossoma em branco com gradiente iónico. Aqueceu-se a mistura a 60 2C, sob agitação, e incubou-se durante 20 minutos e seguidamente obteve-se o lipossoma carregado com fármaco. Removeu-se o fármaco não encapsulado usando um dispositivo de ultrafiltração de fluxo tangencial e a amostra foi concentrada a cerca de 50 ml. Seguidamente adicionou-se sacarose e manitol à mistura e misturou-se para ficar homogénea. Após ajuste da concentração do fármaco por diluição a volume constante, o lipossoma foi esterilizado por filtração com filtro de 0,22 pm e seguidamente encheu-se um frasco para penicilina e liofilisou-se. Finalmente, obteve-se o lipossoma em pó liofilizado para injeção de cloridrato de irinotecano. Mediu-se o tamanho de partícula do lipossoma (90,8 nm) após hidratação do pó liofilizado para injeção e a eficácia de encapsulação foi de 97,5%.
Experiência 1
Assumindo o produto do exemplo 2 como um exemplo para estudar as características físico-químicas do produto obtido de acordo com a presente invenção: [Distribuição de tamanho de partícula]: Diluiu-se a quantidade adequada da amostra com água e seguidamente mediu-se pelo método de dispersão de luz dinâmica (DLS). Comprimento de onda de deteção: =633 nm:ângulo de deteção: 173°; temperatura de deteção: 25 °C. 0 tamanho de partícula foi representado pela intensidade. A distribuição de tamanho de partícula apresenta-se na figura 1. 0 tamanho de partícula médio foi de 85,9 nm.
[Morfologia]: Retirou-se uma quantidade adequada da amostra diluída, colocou-se uma rede de cobre em cima de um papel de filtro limpo, colocou-se uma gota de amostra na rede de cobre, corou-se com ácido fosfotúngstico e analisou-se no microscópio de transmissão electrónica (TEM, JEM2010, Japan Electronics Co., Ltd.) após secagem. A morfologia apresenta-se na figura 2. A aparência do lipossoma de cloridrato de irinotecano foi a típica estrutura em bicamada e a maior parte dos tamanhos das partículas foi inferior a 200 nm. É consistente com o resultado medido por dispersão de luz dinâmica.
[Eficácia de encapsulação]: Método para determinação do teor de fármaco: Coluna: Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 (4,6x150 mm, 5 pm); fase móvel: acetonitrilo - solução tampão de KH2PO4 0,05 M (valor de pH ajustado a 4, contendo trietilamina a 1%) =20:80; temperatura da coluna: 40 °C; volume de injeção: 20 pL; caudal: 1,0 mL/min. Método para detetar a eficácia de encapsulação:
Pipetou-se 1 mL de solução de amostra para um balão volumétrico de 10 mL e diluiu-se com água até à marca. Seguidamente, agitou-se até ficar homogéneo e ultrafiltrou-se com um ultrafiltro 8010 (empresa MILLIPORE). Rejeitou-se o filtrado inicial e guardou-se o filtrado subsequente como a solução de amostra. Pipetou-se 20 pL de solução da amostra e do controlo para cromatografia líquida e registou-se o cromatograma. O teor de fármaco livre da formulação foi calculado pelo método de padronização externa, registado como W. A quantidade total do fármaco neste produto foi calculada pelo método de determinação de teor, registado como Wo. A eficácia de encapsulação foi calculada pela seguinte equação:
Eficácia de encapsulação
Resultados da determinação: A eficácia de encapsulação do produto foi de 99,4%.
[Ensaio de fatores de impacto]: Analisaram-se os fatores de impacto colocando o produto em condições diferentes. Os resultados apresentam-se na seguinte tabela:
Os resultados demonstraram que a amostra é sensível à luz. Quando exposta a luz intensa, a aparência da amostra mudou para amarela, o teor diminuiu e as substâncias relacionadas aumentaram significativamente. A eficácia de encapsulação e tamanho de partícula da amostra não apresentaram mudanças significativas a 40 °C, embora as substâncias relacionadas tenham aumentado ligeiramente. Geraram-se partículas de tamanho grande na amostra em condições de baixas temperaturas ou de congelamento-descongelamento. Considerando a instabilidade do fosfolípido a elevada temperatura e os resultados de ensaio do ensaio de fatores de impacto, o produto deve ser armazenado em condições de baixa temperatura e no escuro.
[Ensaio de eficácia terapêutica antitumor in vivo]
Nome do fármaco: O lipossoma de cloridrato de irinotecano (lipossoma CPT-11) (preparado de acordo com o exemplo 2) foi proporcionado por Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co., LTD. A injeção de cloridrato de irinotecano (CPT-11) foi proporcionada por Jiangsu Hengrui Medicine Co., LTD. Métodos de preparação: O fármaco foi diluído com solução salina até à concentração pretendida.
Animais experimentais: ratinhos nus BALB/cA, 6-7 semanas, , adquiridos a Shanghai Slac Laboratory Animal Co. , LTD. Certificado No.: SCXK (Shanghai) 2007-0005. Ambiente: Nível SPF.
Protocolo experimental:
Inocularam-se subcutaneamente ratinhos nus com células de cancro de cólon humano Ls-174t. Após o crescimento dos tumores até 150-300 mm3, dividiram-se aleatoriamente os ratinhos em equipas (dO) . As dosagens e regimes de dosagem apresentam-se na tabela seguinte. Mediram-se os volumes dos tumores e o peso dos ratinhos e registaram-se 2-3 vezes por semana. Calculou-se o volume de tumor volume (V) pela seguinte equação:
em que a, b representam comprimento e largura, respetivamente.
Resultados :
Tanto o CPT-11, como o lipossoma com CPT-11 inibiram significativamente o crescimento de cancro de cólon humano Ls-174t em ratinhos nus. A inibição de crescimento de Ls-174t foi dependente da dose para lipossoma CPT-11. 4/14 dos tumores regrediram parcialmente quando se administrou lipossoma CPT-11 em dose elevada (3 mg/kg). A eficácia terapêutica de lipossoma CPT-11 foi equivalente a CPT-11 (10 mg/kg) quando se administrou lipossoma CPT-11 em dose baixa (1 mg/kg). Indicou-se que a eficácia terapêutica de lipossoma CPT-11 pode ter aumentado pelo menos 10 vezes relativamente a injeção de CPT- 11. Os resultados detalhados apresentam-se na figura 3.
Lisboa, 2015-09-17

Claims (21)

  1. REIVINDICAÇÕES 1. Lipossoma de irinotecano ou cloridrato de irinotecano caracterizado pelo referido lipossoma compreender irinotecano ou cloridrato de irinotecano, um fosfolípido neutro e colesterol e a razão em peso de colesterol para o fosfolípido neutro ser 1:3 ~ 5, caracterizado pela referida razão em peso do fosfolípido neutro para irinotecano ou cloridrato de irinotecano ser de 2 ~ 5:1, preferentemente 2,5 ~ 4:1 e pelo referido fosfolípido neutro compreender fosfatidilcolina de soja hidrogenada.
  2. 2. Lipossoma de acordo com a reivindicação 1 caracterizado pelo referido fosfolípido neutro ser fosfatidilcolina de soja hidrogenada.
  3. 3. Lipossoma de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pela referida razão de colesterol para o fosfolípido neutro ser 1:3,5 ~ 4,5, preferentemente 1:4.
  4. 4. Lipossoma de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo referido lipossoma ser preparado pelo método de gradiente iónico.
  5. 5. Lipossoma de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo referido lipossoma ter um gradiente iónico formado por um tampão entre a fase aquosa interna e a fase aquosa externa do lipossoma, preferentemente tendo a fase aquosa interna do referido lipossoma maior concentração iónica do que a fase aquosa externa.
  6. 6. Lipossoma de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo referido lipossoma compreender adicionalmente um derivado lipídico de polímero hidrofílico, preferentemente DSPE-PEG2000.
  7. 7. Lipossoma de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pela referida razão em peso entre o derivado lipídico de polímero hidrofílico e irinotecano ou cloridrato de irinotecano ser 0,2 ~ 0,4.
  8. 8. Lipossoma de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo referido lipossoma compreender adicionalmente um fosfolípido carregado, em que o referido fosfolípido carregado é selecionado do grupo que consiste de dilauroilfosfatidilglicerol, dipalmitoilfosfatidilglicerol, distearoilfosfatidilglicerol, dimiristato de fosfatidilglicerol, ácido dioleico de fosfatidilserina, dioleoilfosfatidilglicerol, ácido fosfatídico de dilauroil, ácido fosfatídico de dimiristato, ácido fosfatídico de distearoil e uma sua mistura e a razão em peso entre o fosfolípido carregado e o fosfolípido neutro ser 1:5 ~ 1:100.
  9. 9. Lipossoma de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo referido lipossoma compreender as seguintes razões em peso de ingredientes: cloridrato de irinotecano 1, fosfatidilcolina de soja hidrogenada 3,4-3,8. polietilenoglicol 2000- distearoilfosfatidiletanolamina 0,34-0,38. colesterol 0,8-0,95. e a razão entre colesterol e fosfatidilcolina de soja hidrogenada ser 1:4.
  10. 10. Método de preparação do referido lipossoma de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo referido método de preparação compreender as seguintes etapas de: 1) preparação de um lipossoma em branco por qualquer um dos seguintes métodos A a D: A. dissolver um fosfolípido neutro e colesterol em etanol anidro ou num solvente misto de etanol anidro e álcool terc-butílico de acordo com a formulação pretendida, misturar a mistura com um tampão para obter um lipossoma em branco impuro após remoção de etanol através de destilação a pressão reduzida e seguidamente preparar um lipossoma em branco com o tamanho de partícula pretendido, usando um homogeneizador de alta pressão e/ou um equipamento de extrusão; B. dissolver um fosfolípido neutro e colesterol em clorofórmio ou num solvente misto de clorofórmio-metanol de acordo com a formulação pretendida, formando um filme lipidico através de evaporador rotativo, adicionar um tampão para hidratação para obter um lipossoma em branco impuro e seguidamente preparar um lipossoma em branco com o tamanho de partícula pretendido usando um homogeneizador de alta pressão e/ou equipamento de extrusão; C. misturar um fosfolípido neutro, colesterol e um tampão de acordo com a formulação pretendida, seguidamente preparar um lipossoma em branco com o tamanho de partícula pretendido usando um homogeneizador de alta pressão e/ou equipamento de extrusão; D. dissolver um fosfolípido neutro e colesterol em etanol anidro ou num solvente misto de etanol anidro e álcool terc-butílico de acordo com a formulação pretendida, misturar a mistura com um tampão e seguidamente preparar um lipossoma em branco com o tamanho de partícula pretendido usando um homogeneizador de alta pressão e/ou equipamento de extrusão; 2) formação de gradiente iónico entre a fase aquosa interna e a fase aquosa externa do lipossoma em branco: substituindo a fase aquosa externa do lipossoma em branco para formar um gradiente iónico entre a fase aquosa interna e a fase aquosa externa do lipossoma em branco; 3) preparação de um lipossoma carregado com fármaco: preparando uma solução aquosa de cloridrato de irinotecano, adicionando-a à dispersão de lipossoma em branco com gradiente iónico e seguidamente incubando a dispersão para obter o lipossoma carregado com fármaco sob aquecimento e agitação.
  11. 11. Método de preparação de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por, após a etapa 3) de preparação de um lipossoma carregado com fármaco, o referido método também compreender a seguinte etapa de: 4) remoção do fármaco livre e concentração da amostra: adicionando um meio tampão ao lipossoma de cloridrato de irinotecano, removendo o fármaco não encapsulado usando um dispositivo de fluxo tangencial e concentrando a amostra para um volume adequado.
  12. 12. Método de preparação de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 11, caracterizado pelo referido tampão ser selecionado do grupo que consiste de um tampão compreendendo sais dos iões Na+, K+, Fe2+, Ca2+, Ba2+, Mn2+, Mg2+, Li+, NH4+, H+ e uma sua mistura.
  13. 13. Injeção de lipossoma compreendendo o lipossoma de irinotecano ou cloridrato de irinotecano de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9.
  14. 14. Injeção de lipossoma de acordo com a reivindicação 13, caracterizada pela referida injeção compreender um estabilizador, em que o referido estabilizador é selecionado do grupo que consiste de ácido etilenodiaminotetracético, sal dissódico de ácido etilenodiaminotetracético, sal dicálcico de ácido etilenodiaminotetracético e uma sua mistura, preferentemente sal dissódico de ácido etilenodiaminotetracético; a razão de estabilizador adicionado ser 0 ~ 0,5% (p/v) e o mínimo não ser 0%.
  15. 15. Injeção de lipossoma de acordo com a reivindicação 13, caracterizada pela referida injeção ser uma injeção líquida ou pó liofilizado para injeção.
  16. 16. Injeção de lipossoma de acordo com a reivindicação 13, caracterizada pela referida injeção compreender um regulador de pressão osmótica, em que o referido regulador de pressão osmótica é selecionado do grupo que consiste de glicose, sacarose, sorbitol, manitol, cloreto de sódio, glicerina, histidina e o seu cloridrato, glicina e o seu cloridrato, lisina, serina, ácido glutâmico, arginina, valina e uma sua mistura; a razão do referido regulador de pressão osmótica adicionado ser 0 ~ 5% (p/v) e o mínimo não ser 0%.
  17. 17. Injeção de lipossoma de acordo com a reivindicação 13, caracterizada pela referida injeção compreender adicionalmente um antioxidante, em que o referido antioxidante é selecionado do grupo que consiste de um antioxidante solúvel em água e de um antioxidante solúvel em óleo; em que o referido antioxidante solúvel em óleo é selecionado do grupo que consiste de tocoferol, succinato de -tocoferol, acetato de -tocoferol e uma sua mistura; em que o referido antioxidante solúvel em água é selecionado do grupo que consiste de ácido ascórbico, bissulfito de sódio, sulfito de sódio, pirossulfito de sódio, L-cisteína e uma sua mistura; a razão do antioxidante adicionado ser 0 ~ 0,5% (p/v) e o mínimo não ser 0%.
  18. 18. Injeção de lipossoma de acordo com a reivindicação 15 caracterizada pela referida injeção ser pó liofilizado para injeção que compreende um lioprotetor e ser preparada por liofilização.
  19. 19. Injeção de lipossoma de acordo com a reivindicação 13 caracterizada pela referida injeção compreender as seguintes razões em peso de ingredientes: cloridrato de irinotecano 1. fosfatidilcolina de soja hidrogenada 3,4-3,8. polietilenoglicol 2000- distearoilfosfatidiletanolamina 0,34-0,38. colesterol 0,8-0,95. sal dissódico de ácido etilenodiaminotetracético 0,05-0,09. e a razão de colesterol para fosfatidilcolina de soja hidrogenada ser 1:4.
  20. 20. Processo de preparação da referida injeção de lipossoma de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 19, caracterizado pelo referido processo compreender o método de preparação de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 11.
  21. 21. Processo de preparação de acordo com a reivindicação 20 caracterizado pelo referido processo de preparação compreender adicionalmente as seguintes etapas de: medição do volume, esterilização e subempacotamento: ajuste da concentração de fármaco do lipossoma, medição do volume, esterilização por filtração, enchimento de frasquinhos e selagem para obter a injeção de lipossoma; ou adição de um lioprotetor à amostra de fármaco em lipossoma, ajuste da concentração de fármaco, medição do volume, esterilização por filtração, enchimento de frasquinhos, selagem, seguido de liofilização para obter o pó liofilizado para injeção. Lisboa, 2015-09-17
PT98517840T 2009-12-03 2009-12-03 Lipossoma de irinotecano ou o seu cloridrato e seu método de preparação PT2508170E (pt)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/CN2009/075298 WO2011066684A1 (zh) 2009-12-03 2009-12-03 伊立替康或盐酸伊立替康脂质体及其制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PT2508170E true PT2508170E (pt) 2015-10-16

Family

ID=44114598

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PT98517840T PT2508170E (pt) 2009-12-03 2009-12-03 Lipossoma de irinotecano ou o seu cloridrato e seu método de preparação

Country Status (22)

Country Link
US (2) US20120282325A1 (pt)
EP (1) EP2508170B1 (pt)
JP (1) JP5645954B2 (pt)
KR (2) KR101780915B1 (pt)
CN (1) CN102271659B (pt)
AU (1) AU2009356132B2 (pt)
BR (1) BR112012012151B8 (pt)
CA (1) CA2782911C (pt)
CY (1) CY1116811T1 (pt)
DK (1) DK2508170T3 (pt)
ES (1) ES2547698T3 (pt)
HK (1) HK1159482A1 (pt)
HR (1) HRP20150911T1 (pt)
HU (1) HUE027467T2 (pt)
MX (1) MX2012005775A (pt)
PL (1) PL2508170T3 (pt)
PT (1) PT2508170E (pt)
RU (1) RU2526114C2 (pt)
SI (1) SI2508170T1 (pt)
SM (1) SMT201500245B (pt)
WO (1) WO2011066684A1 (pt)
ZA (1) ZA201203316B (pt)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102935066B (zh) * 2011-08-16 2014-09-17 齐鲁制药有限公司 一种伊立替康脂质体制剂及其制备方法
CA2852777C (en) 2011-10-21 2020-10-27 Celator Pharmaceuticals Inc. Lyophilized liposomes
KR101842279B1 (ko) * 2012-03-29 2018-03-26 우석대학교 산학협력단 이리노테칸의 안정성증진을 위한 주사제용 조성물
WO2013155152A1 (en) * 2012-04-10 2013-10-17 The Regents Of The University Of California Bis-polymer lipid-peptide conjugates and nanoparticles thereof
US9949927B2 (en) 2012-04-10 2018-04-24 The Regents Of The University Of California Bis-polymer lipid-peptide conjugates and nanoparticles thereof
AU2013202947B2 (en) 2012-06-13 2016-06-02 Ipsen Biopharm Ltd. Methods for treating pancreatic cancer using combination therapies comprising liposomal irinotecan
US9717724B2 (en) 2012-06-13 2017-08-01 Ipsen Biopharm Ltd. Methods for treating pancreatic cancer using combination therapies
CN102697720B (zh) * 2012-06-29 2014-01-15 海南灵康制药有限公司 盐酸伊立替康脂质纳米粒注射剂
CN103181898B (zh) * 2012-11-23 2016-03-09 杭州师范大学 一种奥沙利铂脂质体及其应用
EA023079B1 (ru) * 2012-12-24 2016-04-29 Общество С Ограниченной Ответственностью "Технология Лекарств" Способ получения липосомальной формы иринотекана (варианты)
CN104906586A (zh) * 2014-03-10 2015-09-16 中国科学院上海药物研究所 一种盐酸伊立替康复合磷脂组合物、制备方法及其应用
DK3138555T3 (da) 2014-04-30 2020-12-14 Fujifilm Corp Liposomsammensætning og fremgangsmåde til fremstilling heraf
US10098813B2 (en) * 2014-09-03 2018-10-16 Sun Pharmaceutical Industries Limited Perfusion dosage form
CN105796495B (zh) * 2014-12-29 2020-10-23 南京绿叶制药有限公司 一种盐酸伊立替康脂质体药物组合物及其制备方法
US11318131B2 (en) 2015-05-18 2022-05-03 Ipsen Biopharm Ltd. Nanoliposomal irinotecan for use in treating small cell lung cancer
JP2017008047A (ja) * 2015-06-25 2017-01-12 参天製薬株式会社 注射剤
EP3337467B1 (en) 2015-08-20 2020-12-09 Ipsen Biopharm Ltd. Combination therapy using liposomal irinotecan and a parp inhibitor for cancer treatment
AU2016310476B8 (en) 2015-08-21 2021-10-07 Ipsen Biopharm Ltd. Methods for treating metastatic pancreatic cancer using combination therapies comprising liposomal irinotecan and oxaliplatin
MA42991A (fr) * 2015-10-16 2018-08-22 Ipsen Biopharm Ltd Stabilisation de compositions pharmaceutiques de camptothécine
CN107281102A (zh) * 2016-04-11 2017-10-24 江苏竞诺择生物医药科技有限公司 一种用于结直肠肿瘤治疗的药物微粒组合物
CN107456456A (zh) * 2016-06-03 2017-12-12 江苏恒瑞医药股份有限公司 伊立替康或其可药用盐在制备治疗乳腺癌的药物中的用途
US20170368082A1 (en) * 2016-06-28 2017-12-28 Chimerix, Inc. Formulations of brincidofovir
CN106109415B (zh) * 2016-07-26 2019-01-29 金华市人民医院 一种载喜树碱类抗肿瘤药物脂质体、制备方法及其应用
CN109937046A (zh) 2016-09-09 2019-06-25 艾利西斯股份有限公司 脂质体抗癌组合物
AU2017350499B2 (en) * 2016-10-28 2023-08-10 Les Laboratoires Servier Liposomal formulation for use in the treatment of cancer
JP2019533684A (ja) * 2016-11-02 2019-11-21 イプセン バイオファーム リミティド リポソームイリノテカン、オキサリプラチン、5−フルオロウラシル(およびロイコボリン)を含む併用療法を用いる胃がんの処置
US10722465B1 (en) * 2017-12-08 2020-07-28 Quicksilber Scientific, Inc. Transparent colloidal vitamin supplement
CN109675047B (zh) * 2019-01-07 2020-12-04 中国科学院化学研究所 一种对具有游离羟基的化合物进行脂质体修饰的方法
US11291702B1 (en) 2019-04-15 2022-04-05 Quicksilver Scientific, Inc. Liver activation nanoemulsion, solid binding composition, and toxin excretion enhancement method
US11273124B2 (en) * 2019-05-23 2022-03-15 Brown University Antifungal nanoparticles for targeted treatment of fungal infections
CN114177278A (zh) * 2021-10-18 2022-03-15 山东多美康生物医药有限公司 脂质体制备

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6740335B1 (en) * 1997-09-16 2004-05-25 Osi Pharmaceuticals, Inc. Liposomal camptothecin formulations
DE69907243T2 (de) * 1998-09-16 2004-02-19 Alza Corp., Mountain View In liposomen eingeschlossene topoisomerase inhibitoren
EP1443900B1 (en) * 2001-11-13 2012-05-23 Celator Pharmaceuticals, Inc. Lipid carrier compositions with enhanced blood stability
EP1746976B1 (en) * 2004-05-03 2017-01-11 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Liposomes useful for drug delivery
GEP20094620B (en) * 2004-06-01 2009-02-25 Yakult Honsha Kk Irinotecan preparation
CN1326525C (zh) * 2004-11-26 2007-07-18 复旦大学 10-羟基喜树碱长循环脂质体及其冻干制剂
EP1976485A4 (en) * 2005-12-22 2011-10-26 Celator Pharmaceuticals Inc LIPOSOMAL FORMULATIONS COMPRISING SECONDARY AND TERTIARY AMINES AND METHODS FOR THE PREPARATION OF SAID FORMULATIONS
CN101517506B (zh) * 2006-07-17 2011-11-30 欣达公司 计算和预测发电机组的性能
CN101019834A (zh) * 2006-12-31 2007-08-22 西安力邦医药科技有限责任公司 注射用7-乙基-10羟基喜树碱脂质体的制备方法
CN1994279A (zh) * 2006-12-31 2007-07-11 西安力邦医药科技有限责任公司 注射用盐酸伊立替康脂质体的制备方法
WO2008114274A1 (en) 2007-03-19 2008-09-25 Fresenius Kabi Onclology Ltd. Proliposomal and liposomal compositions
CN101283983A (zh) * 2007-10-26 2008-10-15 南京长澳医药科技有限公司 一种稳定的喜树碱类药物脂质体组合物

Also Published As

Publication number Publication date
MX2012005775A (es) 2012-06-13
JP5645954B2 (ja) 2014-12-24
EP2508170B1 (en) 2015-07-29
JP2013512262A (ja) 2013-04-11
EP2508170A4 (en) 2014-01-15
US20170189392A1 (en) 2017-07-06
HUE027467T2 (en) 2016-10-28
AU2009356132A1 (en) 2012-06-21
SMT201500245B (it) 2015-10-30
PL2508170T3 (pl) 2015-12-31
BR112012012151A2 (pt) 2016-04-12
KR20160140992A (ko) 2016-12-07
CY1116811T1 (el) 2017-03-15
ZA201203316B (en) 2013-11-27
WO2011066684A1 (zh) 2011-06-09
BR112012012151B1 (pt) 2021-01-19
RU2526114C2 (ru) 2014-08-20
HK1159482A1 (en) 2012-08-03
SI2508170T1 (sl) 2015-12-31
CN102271659B (zh) 2013-09-18
RU2012123875A (ru) 2014-01-20
BR112012012151B8 (pt) 2021-05-25
AU2009356132B2 (en) 2015-01-22
CN102271659A (zh) 2011-12-07
ES2547698T3 (es) 2015-10-08
HRP20150911T1 (hr) 2015-10-23
CA2782911A1 (en) 2011-06-09
US10022365B2 (en) 2018-07-17
KR20120089754A (ko) 2012-08-13
US20120282325A1 (en) 2012-11-08
DK2508170T3 (en) 2015-09-21
CA2782911C (en) 2016-08-23
EP2508170A1 (en) 2012-10-10
KR101780915B1 (ko) 2017-09-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10022365B2 (en) Liposome of irinotecan or irinotecan hydrochloride and preparation method thereof
TWI355946B (en) Proliposomal and liposomal compositions of poorly
US20050238706A1 (en) Pharmaceutically active lipid based formulation of SN-38
US20070077286A1 (en) Drug-containing nanoparticle, process for producing the same and parenterally administered preparation from the nanoparticle
BRPI0720733A2 (pt) Preparação farmacêutica lipossômica e método para fabricação da mesma.
BR112020001411A2 (pt) composição farmacêutica e método para tratar uma doença respiratória
CN102188377A (zh) 包载药物脂质体的制备方法
WO2022160971A1 (zh) 一种含有难溶性药物的浓缩液以及由其制备的乳剂
JP6884783B2 (ja) リポソームの製造方法
WO2008080369A1 (fr) Composition liposomale stable
CN101953792A (zh) 伊立替康纳米长循环脂质体及其制备方法
CA2495913A1 (en) Non-vesicular cationic lipid formulations
CA3236290A1 (en) Formulated and/or co-formulated nanocarriers compositions containing immunogenic cell death (icd) inducing prodrugs useful in the treatment of cancer and methods thereof
JP5705978B2 (ja) 溶解度が向上した難溶性トリサイクリック誘導体の薬学的組成物
CN103040764B (zh) 一种盐酸平阳霉素脂质体注射剂
TWI500430B (zh) 伊立替康或鹽酸伊立替康脂質體及其製備方法
CN102716085B (zh) 一种盐酸托泊替康脂质体注射剂
BR102022000089A2 (pt) Processo para obtenção de lipossomas conjugados a anfotericina b, formulação e usos
KR20120140591A (ko) 난용성 트리사이클릭 유도체 화합물의 용해도가 향상된 약학적 조성물