PT2310095E

PT2310095E - Compostos de quinoxalina macrocílicos como inibidores da protease ns3 do hcv

Info

Publication number: PT2310095E
Application number: PT09790553T
Authority: PT
Inventors: Vincenzo Summa; Nigel J Liverton; Steven Harper; Johh A Mccauley
Original assignee: Angeletti P Ist Richerche Bio; Merck Sharp & Dohme
Priority date: 2008-07-22
Filing date: 2009-07-17
Publication date: 2012-11-16
Also published as: ME02132B; EA201170241A1; HRP20120866T1; EP2310095B1; FR16C1027I2; CY1113752T1; JP2011528713A; FR16C1027I1; PL2540350T3; IL210580A; KR20110036627A; TWI441638B; BRPI0916235B1; PL2310095T3; HK1173402A1; CY2017005I1; HN2011000209A; RS52534B; NL300857I2; AU2009274190A1

Description

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DESCRIÇÃO

"COMPOSTOS DE QUINOXALINA MACROCÍLICOS COMO INIBIDORES DA PROTEASE NS3 DO HCV"

CAMPO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a compostos macrocíclicos que são úteis como inibidores da protease NS3 do vírus da hepatite C (HCV), à síntese de tais compostos, e à utilização de tais compostos para tratar a infeção por HCV e/ou reduzir a probabilidade ou gravidade da infeção por HCV.

ANTECEDENTE DA INVENÇÃO A infeção pelo vírus da hepatite C (HCV) é um grande problema de saúde que conduz a doença crónica do fígado, tal como cirrose e carcinoma hepatocelular, num número substancial de indivíduos infetados. Os tratamentos atuais para a infeção por HCV incluem imunoterapia com interferão-a recombinante isolado ou em combinação com a ribavirina, que é um análogo de nucleosídeo.

As várias enzimas codificadas pelo vírus são alvos possíveis para uma intervenção terapêutica, incluindo uma metaloprotease (NS2-3), uma serina protease (NS3), uma helicase (NS3), e uma polimerase dependente de ARN (NS5B). A protease NS5 está localizada no domínio N-terminal da proteína NS3. A NS4A providencia um cofator para a atividade de NS3.

Possíveis tratamentos para a infeção pelo HCV foram discutidos em diferentes referências incluindo Balsano, Mini Rev. Med. Chem. 8(4):307-318, 2008, Rõnn et al.,

Current Topics in Medicinal Chemistry 8:533-562, 2008,

Sheldon et al., Expert Opin. Investig, Drugs 16(8) :1171-1181, 2007, e De Francesco et al., Antiviral Research 58:1-16, 2003. 2

SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção refere-se a um composto macrocíclico de fórmula (I) e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo. Os compostos e os seus sais são inibidores da protease NS3 do HCV. 0 composto e os seus sais têm aplicações terapêuticas e de investigação.

Assim, um primeiro aspeto da presente invenção descreve um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:

A presente invenção também inclui composições farmacêuticas que contêm um composto da presente invenção e métodos de preparar tais composições farmacêuticas. São também descritos métodos de tratar ou reduzir a probabilidade ou gravidade de infeção pelo HCV.

Outras modalidades, aspetos e caracteristicas da presente invenção são ainda descritos ou serão aparentes na descrição, exemplos e reivindicações em anexo que se seguem.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO A presente invenção inclui um composto de fórmula (I), e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo. 0 composto e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis são úteis na inibição da protease NS3 do HCV, o tratamento da infeção por HCV e/ou a redução da probabilidade ou gravidade de uma infeção por HCV. Aplicações profiláticas incluem, por exemplo, tratamento após suspeita de exposição no passado ao HCV por meios como transfusão sanguínea, troca de 3 fluídos corporais, mordidas, picada acidental de agulha, ou exposição ao sangue de um paciente durante a cirurgia.

Como ingredientes de composição farmacêutica, os compostos e sais podem ser o agente terapêutico ativo primário. Quando apropriado, o composto pode ser combinado com outros agentes terapêuticos incluindo, mas não limitado a, outros antivirais HCV, anti-infeciosos, imunomoduladores, antibióticos ou vacinas.

Os inibidores da NS3 também são úteis na preparação e execução de ensaios de classificação para compostos antivirais. Por exemplo, tais compostos podem ser utilizados para isolar mutantes de enzima, que são excelentes ferramentas de classificação para compostos antivirais mais poderosos. Além disso, os compostos podem ser utilizados para estabelecer ou determinar o local de ligação de outros antivirais à protease do HCV, por exemplo, por inibição competitiva.

Como descrito adicionalmente no Exemplo 2, o composto de fórmula (I) foi comparado com o composto dos Exemplos 110 e 118 do documento WO 2008/057209, e tem várias vantagens. 1. Composição e Métodos

Diferentes modalidades incluem o seguinte: (a) Uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I) e um veiculo farmaceuticamente aceitável. (b) A composição farmacêutica de (a) , compreendendo ainda um segundo agente terapêutico selecionado a partir do grupo que consiste em agentes antivirais do HCV, imunomoduladores, e agentes anti-infeciosos. (c) A composição farmacêutica de (b) , em que o agente antiviral HCV é um antiviral selecionado a partir do grupo que consiste em inibidores da protease do HCV e inibidores da polimerase NS5B do HCV. (d) Uma combinação farmacêutica que é (i) um composto de 4 fórmula (I) e (ίί) um segundo agente terapêutico selecionado a partir do grupo que consiste em agentes antivirais HCV, imunomoduladores, e agentes anti-infeciosos; em que o composto de fórmula (I) e o segundo agente terapêutico são cada um empregues numa quantidade que representa a combinação eficaz para inibir a protease NS3 do HCV, ou para tratar a infeção pelo HCV e/ou reduzir a probabilidade ou gravidade da infeção pelo HCV. (e) A combinação de (d), em que o agente antiviral HCV é um antiviral selecionado a partir do grupo que consiste em inibidores da protease do HCV e inibidores da polimerase NS5B do HCV.

Também é descrito: (f) Um método de inibir a protease NS3 do HCV num sujeito em necessidade do mesmo que compreende administrar ao sujeito uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I) · (g) Um método de tratar a infeção por HCV e/ou reduzir a probabilidade ou gravidade da infeção pelo HCV num sujeito em necessidade do mesmo que compreende administrar ao sujeito uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I) · (h) 0 método de (g) , em que o composto de fórmula (I) é administrado em combinação com uma quantidade eficaz de, pelo menos, um segundo agente terapêutico selecionado a partir do grupo que consiste em agentes antivirais HCV, imunomoduladores, e agentes anti-infeciosos. (i) 0 método de (h) , em que o agente antiviral HCV é um antiviral selecionado a partir do grupo que consiste em inibidores da protease do HCV e inibidores da polimerase NS5B do HCV. (j) Um método de inibir a protease NS3 do HCV num sujeito em necessidade do mesmo que compreende administrar ao sujeito a composição farmacêutica de (a) , (b) , ou (c) ou a combinação de (d) ou (e) . 5 (k) Um método de tratar a infeção pelo HCV e/ou reduzir a probabilidade ou gravidade da infeção pelo HCV num sujeito em necessidade do mesmo que compreende administrar ao sujeito a composição farmacêutica de (a) , (b) , ou (c) ou a combinação de (d) ou (e) . (l) Um composto de fórmula (I) para uso em medicina, para uso na prevenção ou tratamento da infeção pelo HCV, ou para uso (i) em, (ii) como um medicamento para, ou (iii) na preparação de um medicamento para: (a) inibir a protease NS3 do HCV, ou (b) tratar a infeção pelo HCV e/ou reduzir a probabilidade ou gravidade da infeção pelo HCV. Nestes usos, os compostos da presente invenção podem opcionalmente ser empregues em combinação com um ou mais segundos agentes terapêuticos selecionados a partir de agentes antivirais HCV, agentes anti-infeciosos, e imunomoduladores.

Em todas estas modalidades, o composto pode opcionalmente ser utilizado na forma de um sal farmaceuticamente aceitável. 0 termo "ou," como utilizado aqui, denota alternativas que podem, onde apropriado, ser combinadas. Assim, o termo "ou" inclui cada alternativa listada separadamente, bem como a sua combinação, se a combinação não é mutuamente exclusiva. A referência a um composto também inclui complexos estáveis do composto tal como um hidrato estável. Um composto "estável" é um composto que pode ser preparado e isolado e cuja estrutura e propriedades permanecem ou podem ser causadas para permanecer essencialmente inalteradas durante um período de tempo suficiente para permitir o uso do composto para os fins descritos aqui (por exemplo, administração terapêutica ou profilática a um sujeito). II. Administração e Composições 0 termo "administração" e variantes do mesmo (por exemplo, "administrar" um composto) significa providenciar o composto ou um pró-fármaco do composto ao indivíduo em 6 necessidade do tratamento. Quando um composto da invenção ou um pró-fármaco do mesmo é providenciado em combinação com um ou mais outros agentes ativos (por exemplo, agentes antivirais úteis para tratar infeção por HCV), entende-se que a "administração" e suas variantes incluem a provisão concorrente e sequencial do composto ou sal e outros agentes.

Os compostos da presente invenção podem ser administrados na forma de sais farmaceuticamente aceitáveis. 0 termo "sal farmaceuticamente aceitável" refere-se a um sal do composto parental que tem atividade e que não é biologicamente ou, de outra forma, indesejável (por exemplo, não é nem tóxico nem, de outra forma, deletério para o recetor do mesmo). Sais adequados incluem sais de adição de ácido que podem, por exemplo, ser formados misturando uma solução de um composto com uma solução de um ácido farmaceuticamente aceitável, tal como ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ou ácido benzóico. Compostos que transportam uma fração acídica podem ser misturados com sais farmaceuticamente aceitáveis adequados para providenciar, por exemplo, sais de metal alcalino (por exemplo, sais de sódio ou potássio), sais de metal alcalinoterrosos (por exemplo, sais de cálcio ou magnésio), e sais formados com ligandos orgânicos adequados, tais como sais de amónio quaternário. Além disso, no caso de estar presente um ácido (-COOH) ou grupo álcool, podem ser empregues ésteres farmaceuticamente aceitáveis para modificar as características de solubilidade ou hidrólise do composto.

Como utilizado aqui, o termo "pró-fármaco" pretende-se que abranja uma forma de fármaco ou composto inativo que é convertido numa forma de fármaco ou composto ativo pela ação de enzimas, químicos ou processo metabólicos no corpo de um indivíduo a quem é administrado. 7

Como utilizado aqui, o termo "composição" pretende-se que abranja um produto que compreende os ingredientes especificados, bem como qualquer produto que resulta, direta ou indiretamente, de combinar os ingredientes especificados.

Por "farmaceuticamente aceitável" entende-se que os ingredientes da composição farmacêutica têm de ser compatíveis uns com os outros e não deletérios para o recetor do mesmo. 0 termo "sujeito" (em alternativa referido aqui como "paciente"), como utilizado aqui, refere-se a um animal, preferencialmente um mamífero, mais preferencialmente um humano, que foi objeto de tratamento, observação ou experiência. 0 termo "quantidade eficaz" indica uma quantidade suficiente para exercer um efeito terapêutico ou profilático. Para um paciente infetado com HCV, uma quantidade eficaz é suficiente para alcançar um ou mais dos seguintes efeitos: reduzir a capacidade do HCV de replicar, reduzir a carga de HCV, e aumentar a libertação virai. Para um paciente não infetado com HCV, uma quantidade eficaz é suficiente para alcançar um ou mais dos seguintes: uma reduzida suscetibilidade à infeção por HCV, e uma capacidade reduzida de infetar vírus para estabelecer infeção persistente para doença crónica.

Para o fim de inibir a protease NS3 do HCV e tratar a infeção por HCV e/ou reduzir a probabilidade ou gravidade dos sintomas da infeção por HCV, os compostos da presente invenção, opcionalmente na forma de um sal, podem ser administrados por meios que produzem contacto do agente ativo com o local de ação do agente. Podem ser administrados através de meios convencionais disponíveis para uso em conjunto com produtos farmacêuticos, quer como agentes terapêuticos individuais ou em combinação de agentes terapêuticos. Podem ser administrados isoladamente, mas tipicamente são administrados com um veiculo farmacêutico selecionado na base da via de administração escolhida e prática farmacêutica padrão.

Os compostos podem, por exemplo, ser administrados por uma ou mais das seguintes vias: oral, parentérica (incluindo injeções subcutâneas, intravenosas, intramusculares, injeção intra-esternal ou técnicas de infusão), por inalação (tal como numa forma de vaporizador), ou retal, na forma de uma dosagem unitária de uma composição farmacêutica que contém uma quantidade eficaz do composto e veículos farmaceuticamente aceitáveis não tóxicos convencionais, adjuvantes e veículos. Preparações líquidas adequadas para administração oral (por exemplo, suspensões, xaropes, elixires e afns) podem ser preparadas de acordo com técnicas conhecidas na arte e podem empregar qualquer dos meios habituais, tais como água, glicóis, óleos, álcoois e afins. Preparações sólidas adequadas para administração oral (por exemplo, pós, pastilhas, cápsulas e comprimidos) podem ser preparadas de acordo com técnicas conhecidas na arte e podem empregar tais excipientes sólidos como amidos, açúcares, caulim, lubrificantes, ligantes, agentes desintegrantes e afins. As composições parentéricas podem ser preparadas de acordo com técnicas conhecidas na arte e tipicamente empregam água esterilizada como um veículo e opcionalmente outros ingredientes, tais como auxiliares de solubilidade. Soluções injetáveis podem ser preparadas de acordo com métodos conhecidos na arte, em que o veículo compreende uma solução salina, uma solução de glicose ou uma solução contendo uma mistura de solução salina e glicose. Orientação adicional para métodos adequados para uso na preparação de composições farmacêuticas da presente invenção e de ingredientes adequados para uso em ditas composições é providenciada no livro Pharmaceutical Sciences de Remington. 20a edição (editor A. R Gennaro, 9

Mack Publishing Co., 2000).

Os compostos desta invenção podem ser administrados oralmente num intervalo de dosagem entre 0,001 a 1000 mg/kg do peso corporal de um mamifero (por exemplo, humano) por dia numa única dose ou em doses divididas. Um intervalo de dosagem é 0,01 a 500 mg/kg do peso corporal por dia oralmente numa única dose ou em doses divididas. Outro intervalo de dosagem é 0,1 a 100 mg/kg do peso corporal por dia oralmente numa única dose ou em doses divididas. Para administração oral, as composições podem ser providenciadas na forma de comprimidos ou cápsulas contendo 1,0 a 500 mg do ingrediente ativo, particularmente 1, 5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 100, 150, 200, 250, 300, 400, 500, e 750 mg do ingrediente ativo para o ajuste sintomático da dosagem ao paciente a ser tratado. O nível de dose específico e frequência de dosagem para qualquer paciente particular pode ser variado e dependerá da variedade de fatores incluindo a atividade do composto específico empregue, a estabilidade metabólica e extensão da ação daquele composto, a idade, peso corporal, saúde geral, sexo, dieta, modo e momento de administração, taxa de excreção, combinação de fármaco, a gravidade da condição patológica particular, e do hospedeiro sujeito à terapêutica. III. Tratamento de combinação

Os compostos de quinoxalina macrocíclica descritos aqui podem ser utilizados num tratamento de combinação envolvendo um ou mais agentes terapêuticos adicionais. Agentes terapêuticos adicionais incluem aqueles que também têm como alvo o HCV, dirigindo-se a um agente causador de doença diferente, ou aqueles que potenciam o sistema imune. Os agentes que potenciam o sistema imune incluem aqueles que potenciam geralmente uma função do sistema imune e aqueles que produzem uma resposta imune específica contra o HCV. Agentes terapêuticos adicionais que têm como alvo o HCV incluem agents dirigidos a NS3 e agentes dirigidos a 10 outras atividades do HCV, tais como NSSA e NS5B, e agentes dirigidos a atividades da célula do hospedeiro envolvidas na replicação do HCV.

Inibidores diferentes do HCV são descritos em diferentes publicações. Compostos macrociclicos úteis como inibidores da protease do HCV são descritos nos documentos W006/119061, WO7/015785, WO7/016441, WO07/148135, WO 08/051475, WO 08/051477, WO 08/051514, WO 08/057209. Inibidores adicionais da protease NS3 do HCV são revelados nas publicações de pedido de Patente Internacional WO 98/22496, WO 98/46630, WO 99/07733, WO 99/07734, WO 99/38888, WO 99/50230, WO 99/64.442, WO 00/09543, WO 00/59929, WO 02/48116, WO 02/48172, Patente Britânica N.° GB 2 337 262, e Patente U.S. N.° 6 323 180.

Exemplos adicionais de agentes terapêuticos que podem estar presentes numa combinação incluem ribavirina, levovirina, viramidina, timosina alfa-1, interferão-β, interferão-α, interferão-α pegilado (peginterferão-α) , uma combinação de interferão-α e ribavirina, uma combinação de peginterferão-α e ribavirina, uma combinação de interferão-oí e levovirina, e uma combinação de peginterf erão-α e levovirina. O interferão-α inclui interferão-a2a recombinante (tal como interferão ROFERON disponível de Hoffmann-LaRoche, Nutley, NJ) , interferão-a2a pegilado (PEGASYS), interferão-a2b (tal como interferão INTRON-A disponível de Schering Corp., Kenilworth, NJ) , interferão-a2b pegilado (PEGINTRON), um interferão recombinante de consenso (tal como interferão alfacon-1), e um produto de interferão-α purificado. O interferão recombinante de consenso da Amgen tem o nome comercial INFERGEN. Levovirina é o L-enantiómero da ribavirina que mostrou atividade imunomoduladora semelhante à ribavirina. A viramidina representa um análogo da ribavirina revelado no documento WO 01/60379. Os componentes individuais da combinação podem ser administrados separadamente em momentos diferentes 11 durante o curso da terapêutica ou simultaneamente em formas de combinação divididas ou únicas. A ribavirina, levovirina, e viramidina podem exercer os seus efeitos anti-HCV modulando grupos intracelulares de nucleotídeos guanina através da inibição da enzima intracelular inosina monofosfato desidrogenase (IMPDH). A IMPDH é a enzima limitante da taxa na via biossintética na biossíntese de novo de nucleotideo guanina. A ribavirina é rapidamente fosforilada intracelularmente e o derivado monofosfato é um inibidor de IMPDH. Assim, a inibição de IMPDH representa outro alvo útil para a descoberta de inibidores de replicação do HCV. Logo, os compostos da presente invenção também podem ser administrados em combinação com um inibidor de IMPDH, tal como VX-497, que é revelado nas Publicações de pedido de Patente Internacional WO 97/41211 e WO 01/00622; outro inibidor de IMPDH, tal como aquele revelado no documento WO 00/25780; ou micofenolato mofetil. Ver A.C. Allison e E.M. Eugui, 44 (Suppl.) Agents Action 165 (1993).

Para o tratamento da infeção por HCV, os compostos da presente invenção também podem ser administrados em combinação com o agente antiviral amantadina (1-aminoadamantano). Para uma descrição exaustiva deste agente, ver J. Kirschbaum, 12 Anal. Profiles Drug Subs. 1-36 (1983).

Para o tratamento da infeção por HCV, os compostos da presente invenção também podem ser administrados em combinação com o agente antiviral inibidor da polimerase R7128 (Roche).

Os compostos da presente invenção também podem ser combinados para o tratamento da infeção por HCV com ribonucleosídeos antivirais 2'-C-ramifiçados revelados em R. E. Harry-0'Kuru et al., 62 J. Org. Chem. 1754-59 (1997); M. S. Wolfe et al., 36 Tet. Lett. 7611-14 (1995); Patente U.S. N.° 3 480 613; e Publicações de pedido de Patente 12

Internacional WO 01/90121, WO 01/92282, WO 02/32920, WO 04/002999, WO 04/003000 e WO 04/002422. Tais ribonucleosideos 2'-C-ramifiçados incluem, mas não se limitam a, 2'-C-metil-citidina, 2'-C-metil-uridina, 2 '-C-metil-adenosina, 2 '-C-metil-guanosina, e 9-(2-C-metil^-D-ribofuranosil)-2,6-diaminopurina, e o éster de aminoácido correspondente dos hidroxilos da ribose C-2', C-3', e C-5' e os ésteres de 1,3-propanediol cíclicos opcionalmente substituídos correspondentes dos derivados 5'-fosfato.

Os compostos da presente invenção também podem ser combinados para o tratamento da infeção por HCV com outros nucleosídeos que têm propriedades anti-HCV, tais como aqueles revelados nas Publicações de pedido de Patente Internacional WO 02/51425, WO 01/79246, WO 02/32920, WO 02/48165 e W02005/003147 (incluindo R1656, (2'R)-2'-deoxi-2'-fluoro-2'-C-metilcitidina, mostrado como compostos 3-6 na página 77); WO 01/68663; WO 99/43691; WO 02/18404 e W02006/021341, e Publicação do pedido de Patente U.S. US 2005/0038240, incluindo nucleosídeos 4'-azido tais como R1626, 4'-azidocitidina; Publicações do pedido de Patente U.S. US 2002/0019363, US 2003/0236216, US 2004/0006007 e US 2004/0063658; e Publicações de pedido de Patente Internacional WO 02/100415, WO 03/026589, WO 03/026675, WO 03/093290, WO 04/011478, WO 04/013300 e WO 04/028481.

Para o tratamento da infeção por HCV, os compostos da presente invenção também podem ser administrados em combinação com um agente que é inibidor da polimerase NS5B do HCV. Tais inibidores da polimerase NS5B do HCV que podem ser utilizados como terapêutica de combinação incluem, mas não se limitam, àqueles revelados nas Publicações de pedido de Patente Internacional WO02/057287,WO02/057425, WO 03/068244, WO 2004/000858, WO 04/003138 e WO 2004/007512; Patente U.S. N.° 6 777 392 e Publicação do pedido de Patente U.S. US2004/0067901 . Outros tais inibidores da polimerase do HCV incluem, mas não se limitam a, 13 valopicitabina (NMR-283; Idenix) e 2'-F-2'-beta-metilcitidina (ver também o documento WO 2005/003147).

Numa modalidade, os inibidores nucleosídeos da polimerase NS5B do HCV que são utilizados em combinação com os presentes inibidores de protease NS3 do HCV são selecionados a partir dos seguintes compostos: 4-amino-7-(2-C-metil^-D-arabinofuranasil) -7H-pirrolo [2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(2-C-metil^-D-r ibof uranosil)-ΊΗ-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-metilamino-7-(2-C-metil-p-D-ribofuranosil) -7i7-pirrolo [ 2,3-d] pirimidina; 4-dimetilamino-7- (2-C-metil-3-D-ribofuranosil) -7i7-pirrolo [2,3 — d]pirimidina; 4-ciclopropilamino-7-(2-C-metil-p-D- ribofuranosil) -7i7-pirrolo [ 2,3-d] pirimidina; 4-amino-7- (2—C— viηϋ-β-D-ribofuranosil) -7H-pirrolo [2,3-d] pirimidina; 4-amino-7-(2-C-hidroximetil-β-D-ribofuranosil)-ΊΗ-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(2-C-fluoromet ϋ-β-D-ribofuranosil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-5- metil-7-(2-C-metil-β-D-ribofuranosil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(2-C-metil-p-D-ribofuranosil)-ΊΗ-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-ácido carboxilico; 4-amino-5-bromo-7-(2-C-metil-p-D-ribofuranosil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-5-cloro-7-(2-C-metil-p-D- ribofuranosil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-5- fluoro-7-(2-C-metil-p-D-ribofuranosil)-7H-pirrolo[2,3— d]pirimidina; 2,4-diamino-7-(2-C-metil-p-D-ribofuranosil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 2-amino-7-(2-C-metil-3-D- ribofuranosil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 2-amino-4- ciclopropilamino-7-(2-C-metil-p-D-ribofuranosil) - ΊΗ-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 2-amino-7-(2-C-metil-p-D- ribofuranosil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4(3H)-ona; 4- amino-7- (2-C-etil-β-D-ribofuranosil) -7i7-pirrolo [2,3 — d]pirimidina; 4-amino-7-(2-C,2-0-dimetil-β-D- ribofuranosil) -7i7-pirrolo [ 2,3-d] pirimidina; 7- (2-C-metil^-D-ribofuranosil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-4(3H)-ona; 2-amino-5-metil-7-(2-C,2-0-dimetil-β-D-ribofuranosil)-7H- 14 pirrolo[2,3-d]pirimidina-4(3H)-ona; 4-amino-7-(3-deoxi-2-C-met ίΙ-β-D-ribofuranosil) -7fí-pirrolo [ 2,3-d] pirimidina; 4- amino-7-(3-deoxi-2-C-metil-3-D-arabinofuran-osil)-ΊΗ-pirrolo[2,3-d] pirimidina; 4-amino-2-f luoro-7- (2-C-metil^-D-ribofuranosil) -7H-pirrolo [2,3-d] pirimidina; 4-amino-7- (3-C-metίΙ-β-D-ribofuranosil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina; 4-amino-7- (3-C-metil^-D-xilofuranosil) -7H-pirrolo [2,3-d]pirimidina; 4-amino-7-(2,4-di-C-metil^-D-ribofuranosil)-7íí-pirrolo [2,3-d]pirimidina; 4-amino-7- (3-de-oxi-3-fluoro-2-C-metil-β-D-ribofiuanosil)-ΊΗ-pirrolo[2,3-d]pirimidina; e os 5'-trifosfatos correspondentes; ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

Os compostos da presente invenção também podem ser combinados para o tratamento da infeção por HCV com inibidores não nucleosídeos da polimerase do HCV tais como aqueles revelados nas Publicações de pedido de Patente Internacional WO 01/77091; WO 01/47883; WO 02/04425; WO 02/06246; WO 02/20497; WO 2005/016927 (em particular JTK003); e HCV-796 (Viropharma Inc.).

Numa modalidade, os inibidores não nucleosídeos da polimerase NS5B do HCV que são utilizados em combinação com os presentes inibidores da protease NS3 do HCV são selecionados a partir dos seguintes compostos: 14- ciclohexil-6-[2-(dimetilamino) etil]-7-oxo-5,6,7,8- tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocina-11-ácido carboxílico; 14-ciclohexil-6-(2-morfolin-4-il-etil)- 5.6.7.8- tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocina-11-ácido carboxílico; 14-ciclohexil-6-[2-(dimetilamino) etil]-3-metoxi-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a] [2,5]benzodiazocina- 11-ácido carboxílico; 14-ciclohexil-3-metoxi-6-metil- 5.6.7.8- tetrahidroindolo[2,1-a] [2,5]benzodiazocina-11-ácido carboxílico; metil({[(14-ciclohexil-3-metoxi-6-metil- 5.6.7.8- tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocina-ll- il)carbonil]amino}sulfonil)acetato; ácido ({[(14- ciclohexil-3-metoxi-6-metil-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1- 15 a] [2,5]benzodiazocina-11- il)carbonil]amino Jsulfonil)acético; 14-ciclohexil-N- [(dimetilamino)sulfonil]-3-metoxi-6-metil-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a] [2,5]benzodiazocina-ll-carboxamida; 3-cloro-l4-ciclohexil-6-[2-(dimetilamino)etil]-7-oxo- 5.6.7.8- tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazoc-inel1- ácido carboxilico; Ν'-(11-carboxi-l4-ciclohexil-7,8-dihidro-6H-indolo[1,2-e] [l,5]benzoxazocina-7-il)-N, N-dimetiletano-1,2-diaminio bis(trifluoroacetato); 14-ciclohexil-7,8-dihidro-6.ff-indolo[1,2-e][1,5] benzoxazocina-11-ácido carboxilico; 14-ciclohexil-6-metil-7-oxo-5,6,7,8- tetrahidroindolo [2,1-a][2,5]benzodiazocina-11-ácido carboxilico; 14-ciclohexil-3-metoxi-6-metil-7-oxo-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocina-ll-ácido carboxilico; 14-ciclohexil-6-[2-(dimetilamino)etil]-3- metoxi-7-oxo-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2, 1- a] [2,5]benzodiazocina-ll-ácido carboxilico; 14-ciclohexil- 6- [3-(dimetilamino)propil]-7-oxo-5,6,7,8-tetrahidroindolo [2,1-a][2,5]benzodiazocina-ll-ácido carboxilico; 14- ciclohexil-7-oxo-6-(2-piperidina-l-iletil)-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocina-ll-ácido carboxilico; 14-ciclohexil-6-(2-morfolin-4-iletil)-7-oxo- 5.6.7.8- tetrahidroindolo[2,1-a] [2,5]benzodiazocina-ll- ácido carboxilico; 14-ciclohexil-6-[2-(dietilamino)etil]-7-oxo-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a] [2,5]benzodiazocina-ll- ácido carboxilico; 14-ciclohexil-6-(l-metilpiperidin-4-il)- 7- oxo-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocina- ll-ácido carboxilico; 14-ciclobexil-W- [(dimetilamino)sulfonil]-7-oxo-6-(2-piperidin-l-iletil)- 5.6.7.8- tetrahidroindolo [2,1-a] [2,5]benzodiazocina-ll- carboxamida; 14-ciclohexil-6-[2-(dimetilamino)etil]-N- [(dimetilamino)sulfonil]-7-oxo-5, 6,7,8- tetrahidroindolo[2,1-a][2,5]benzodiazocina-ll-carboxamida; 14-ciclopentil-6-[2-(dimetilamino)etil]-7-oxo-5, 6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a] [2,5]benzodiazocina-ll-ácido 16 carboxílico; 14-ciclohexil-5,6,7,8-tetrahidromdolo [2,1-a] [2,5]benzodiazocina-ll-ácido carboxílico; 6-alil-14- ciclohexil-3-metoxi-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2, 1-a] [2,5] benzodiazocina-ll-ácido carboxílico; 14-ciclopentil-6-[2-(dimetilamino)etil]-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1-a] [2,5]benzodiazocina-ll-ácido carboxílico; 14-ciclohexil- 6- [2-(dimetilamino)etil]-5,6,7,8-tetrahidroindolo[2,1— a] [2,5]benzodiazocina-ll-ácido carboxílico; 13-ciclohexil- 5- metil-4,5,6,7- tetrahidrofuro[3',2':6,7][1,4]diazocino[1,8-a]indol-10-ácido carboxílico; 15-ciclohexil-6-[2- (dimetilamino)etil]- 7- οχο-β, 7, 8, 9-tetrahidro-5íí-indolo [2,1- a] [2,6]benzodiazonina-12-ácido carboxílico; 15-ciclohexil- 8- oxo-6, 7, 8, 9-tetrahidro-5íí-indolo [2,1 — a] [2,5]benzodiazonina-12-ácido carboxílico; 13-ciclohexil- 6- oxo-6, 7-dihidro-5fí- indolo [ 1,2-d] [1, 4] benzodiazepina-10-ácido carboxílico; e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. IV. Avaliação do composto

Os compostos descritos aqui podem ser avaliados em relação a diferentes atividades, tais como a capacidade de inibir a atividade da NS3 do HCV, a atividade do replicão HCV, e atividade de replicação do HCV utilizando técnicas bem conhecidas na arte. (Ver, por exemplo, Carroll et al., J. Biol. Chem. 278:11979-11984, 2003.)

Um tal ensaio é o ensaio da fluorescência resolvida no tempo da protease NS3 do HCV (TRF) como descrito a seguir e em Mao et al., Anal. Biochem. 373:1-8, 2008 e na Publicação do Pedido de Patente Internacional WO 2006/102087. O ensaio da protease NS3 pode ser realizado, por exemplo, num volume final de 100 μΐ de tampão de ensaio contendo 50 mM HEPES, pH 7,5, 150 mM NaCl, 15% glicerol, 0,15% TRITON X-100, 10 mM DTT, e 0,1% PEG 8000. Protease NS3 e NS4A é pré-incubada com várias concentrações de inibidores em DMSO durante 30 minutos. A reação é iniciada adicionando o substrato 17 peptídico TRF (concentração final de 100 nM). A hidrólise mediada por NS3 do substrato é extinta depois de 1 hora à temperatura ambiente com 100 μΐ de 500 mM MES, pH 5,5. O produto da fluorescência é detetado utilizando um VICTOR V2 ou um fluorofotómetro FUSION (Perkin Elmer Life e Analytical Sciences) com excitação a 340 nm e emissão a 615 nm com um atraso de 400 ms. As concentrações de teste de diferentes formas enzimáticas são selecionadas para resultar num sinal para razão antecedente (S/B) de 10-30. Os valores de IC5o são derivados utilizando um ajuste padrão de quatro parâmetros aos dados. Os valores de Ki são derivados dos valores de IC5o utilizando a fórmula seguinte, IC5o = Ki(l+ SI/KJ, Eqn(l), onde [S] é a concentração do substrato peptídico na reação e KM é a constante de Michaelis. Ver P. Gallinari et al., 38 BIOCHEM. 5620-32(1999); P.Gallinariet al.,72J. VIROL. 6758-69 (1998); M.Talianiet al., 240 ANAL. BIOCHEM. 60-67 (1996); Mao et al., Analytical Biochemistry 373: 1-8, 2008. V. Produção Geral do Composto A presente invenção também inclui processos para fabricar compostos de fórmula (I). Os compostos da presente invenção podem ser rapidamente preparados de acordo com os esquemas e exemplos de reação seguintes, ou modificações dos mesmos, utilizando materiais de partida prontamente disponíveis, reagentes e procedimentos de síntese convencionais. Nestas reações, também é possível utilizar variantes que são elas próprias conhecidas daqueles com habilitação comum nesta arte. Outros métodos para preparar compostos da invenção serão rapidamente aparentes à pessoa com habilitação comum na arte à luz dos esquemas e exemplos de reação seguintes. A menos que indicado em contrário, todas as variáveis são como definidas a seguir. Os esquemas e exemplos de reação seguintes servem apenas para ilustrar a invenção e a sua prática. 18

Os catalisadores de metátese de olefina incluem as seguintes espécies baseadas em ruténio: F. Miller et al., 118 J. AM. CHEM. Soc. 9606 (1996); G. Kingsbury et al., 121 J. Am. Chem. Soc. 791 (1999); H. Scholl et al., 1 ORG.

LETT. 953 (1999); Publicação do pedido de Patente U.S. US 2002/0107138; K. Furstner et al., 64 J. ORG. CHEM. 8275 (1999). A utilidade destes catalisadores na metátese de encerramento do anel é bem conhecida na literatura (por exemplo Trnka e Grubbs, 34 ACC. CHEM. RES. 18 (2001).

Os seguintes exemplos servem apenas para ilustrar a invenção e a sua prática.

Lista de Abreviações

Lista de Abreviações DCM / CH2CI2 diclorometano DCE 1,2-dicloroetano DIEA diisopropiletilamina DMF dimetilformamida DMSO dimetilsulfóxido

Dppf difenilfosfinoferroceno

Et2O dietiléter

EtOAc Acetato de etilo HATU O- (7-azabenzotriazol-l-il)-N, N, Ν', N'- HC1 TMSC1

TBAF

DMAP

MeCN tetrametiluroniohexafluorofosfato Ácido cloridrico Clorotrimetilsilano Fluoreto de tetra-butil amónio Dimetilamino piridina acetonitrilo

MeOH Pd/C

TBTU

TFA

THF

Metanol Paládio em carbon O-benzotriazol-l-il-A,N, N' ,N'-tetrametiluronio tetrafluoroborato Ácido trifluoroacetático tetrahidrofurano 19

Cromatografia Purificação utilizando Biotage Horizon Flash utilizando cartucho de gel de sílica e gradiente de fase móvel específica HPLC Cromatografia líquida de alto desempenho despoletada por UV ou massa automatizada utilizando gradientes MeCN e H20 acidificados como fase móvel MHz Megahertz Síntese de Intermediários

Intermediário A

Intermediário # AI

Estrutura Nome

HCI (1R,2S)-l-amino-N-(ciclopropilsulfonil)-2-vinilciclopropanecarboxa

Referência da Literatura Wang et al., Documento US 6 995 174

mida cloridratoIntermediário BI:_3-metil-N- ({[(IR,2R)-2-pent-4-en-l-ilciclopropil]oxijcarbonil)-L-valina H °...O-- O

Etapa 1: [(1E)-hepta-1,6-dien-l-iloxi](trimetil)silano

Uma solução (0,5 M) de brometo de butenil magnésio em THF (1,4 eq) foi tratada a -78°C com Cu(I)Br.SMe2 (0,05 eq) e HMPA (2.4 eq). A mistura foi agitada durante 10 minutos, depois foi adicionada uma solução (1 M) de acroleína (1 eq) e TMSCI (2 eq) em THF durante mais de 1 hora, de tal maneira que a temperatura interna permaneceu abaixo dos -68 °C. A mistura resultante foi agitada a -78 °C durante 2 horas, depois tratada com excesso de Et2N e diluída com hexano. Depois de atingir a temperatura ambiente a mistura foi tratada com uma pequena porção de H20 e filtrada através de CELITE. O filtrado foi lavado 10 vezes com H20 e 20 depois em salmoura. A camada orgânica foi seca e os voláteis foram removidos para dar um resíduo que foi destilado a baixa pressão (20 mbar). A fração recolhida e 80-86 °C continha o composto do título (58%) como um líquido incolor. ΧΗ NMR (400 MHz, CDC13) δ 6,19 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 5,85-5,75 (m, 1H), 5,02-4,92 (m, 3H), 2,08-2,02 (m, 2H), 1, 94-1, 88 (m, 2H) , 1,46-1,38 (m, 2H) , 0,18 (s, 9H).

Etapa 2: tra.ns-2-pent-4-en-l-ilciclopropanol

Uma solução (0,45 M) do composto anterior em hexano foi tratado com uma solução (15%) de Et2Zn (1,2 eq) em tolueno e a solução resultante foi arrefecida num banho de gelo. Foi adicionado diiodometano (1,2 eq) gota a gota, depois a solução foi agitada durante 1 hora antes de ser aquecida a 20 °C. Foi adicionada piridina (6 eq) e a pasta fluída foi agitada durante 15 minutos, depois vertida em éter de petróleo. A mistura foi filtrada repetidamente através de CELITE até ser obtida uma solução transparente. Esta mistura foi concentrada a 100 mbar e a solução que permaneceu (que continha trimetil{[(trans)-2-pent-4-en-l-ilciclopropil]oxi}silano, tolueno e piridina) foi ainda diluída com THF. A mistura foi arrefecida a 0°C, depois

tratada gota a gota com uma solução (1 M) de TBAF (1,2 eq) em THF. Após 10 minutos a mistura foi permitida aquecer a 20 °C, e depois de mais 1 hora foi vertida em H20. A fase aquosa foi extraída com EtOAc e os extratos orgânicos combinados foram lavados em salmoura e depois secos. A remoção dos voláteis suportou um resíduo que foi purificado por cromatografia flash (eluente 0-66% Et20/éter de petróleo) para fornecer o composto do título (71%) como um líquido incolor. ΤΗ NMR (400 MHz, CDC13) δ 5, 85-5, 75 (m, 1H), 5,00 (dd, J = 17,1, 1,6 Hz, 1H), 4,94 (br d, J =10,4 21 21 2,10-2,04 1,15-1,07 0,31 (q

Hz, 1H), 3,20 (dt aparente, J = 6,4, 2,5 Hz, 1H) , (m, 2H), 1,52-1,44 (m, 2H) , 1,29-1,19 (m, 1H) , (m, 1H), 0,95-0,87 (m, 1H), 0,71-0,66 (m,1H), aparente, J = 6,0 Hz, 1H).

Etapa 3: metil 3-metil-iV-(oxometileno)-L-valinato

O N^X 'Τ'

Uma solução (0,39 M) de metilo 3-metil-L-valinato numa mistura 2:1 de NaHC03 aquoso saturado e CH2C12 foi arrefecida num banho de gelo e agitada rapidamente. A mistura foi tratada com trifosgene (0,45 eq) numa porção e a mistura resultante foi agitada durante 0,5 h. A reação foi diluída com CH2C12 e as camadas foram separadas. A fase aquosa foi extraída com CH2C12, depois os orgânicos combinados foram lavados em salmoura e secos. A remoção do solvente deu o composto do título como um óleo claro que foi mantido durante 12 horas em vácuo (0,1 mbar), depois utilizado diretamente na etapa subsequente. ΤΗ NMR (400 MHz, CDC13) δ 3,79 (s, 3H), 3,75 (s, 1H), 1,00 (s, 9H) .

Etapa_4j_metil_3-metil-N- ({ [ (1R, 2R) -2-pent-4-en-l- ilciclopropil]oxi}carbonil)-L-valinato e metilo 3-metil-N- ({ [_(15,2 5)-2-pent-4-en-l-ilciclopropil]oxi}carbonil)-L- valinato

Uma solução (0,45 M) de trans-2-pent-4-en-l-ilciclopropanol em tolueno foi tratada com metilo 3-metil-N— (ox-ometileno)-L-valinato (1,1 eq) e depois DMAP (1 eq) . A mistura resultante foi aquecida sob refluxo durante 12 horas, depois arrefecida para 20°C. H20 e EtOAc foram adicionados e a camada orgânica foi separada e lavada com IN HC1, salmoura e seca. A remoção dos voláteis suportou um resíduo que foi purificado duas vezes por cromatografia flash (eluente 0-30% Et20/éter de petróleo). As primeiras 22 frações continham metilo 3-metil-N-({ [ (1^»-2-R) ^ pent 4 en 1-ilciclopropil]oxi}carbonil)-L-valinato (38-s) como um óleo. MS (ES+) m/z 298 (M+H)+

As frações posteriores continham metilo 3-metil-IV-({[(IS,2S)-2-pent-4-en-l-ilciclopropil]oxi}carbonil)-L-valinato (28%) como um óleo. MS (ES+) z 298 (M+H)

Etapa_5j_3-metil-N~ (I [ (2-^) -2-pent-4-en-l- ilciclopropil]oxi}carbonil)-L-valina

Uma solução (0,1 M) de metilo 3-metil-iV-({ [ (1.R, 2.R)-2-pent-4-en-l-ilciclopropil]oxi}carbonil)-L-valinato numa mistura 2:1 de Me0H/H20 foi tratada com Li0H.H20 (4 eq) e depois aquecida a 60 °C durante 4 horas. A mistura foi arrefecida e concentrada a metade do volume, depois diluída com EtOAc e acidificada com HC1 aquoso (1 N) . A camada orgânica foi separada e lavada em salmoura e depois seca. A remoção dos voláteis suportou o composto do título (98%) como um óleo. MS (ES+) m/z 284 (M+H)+

Intermediários C

Intermediário_Cl:_metil (4R) -4- [ (3-cloro-7- metoxiquinoxalina-2-il)oxi]-L-prolinato cloridrato

M HCI

Etapa 1: 6-metoxiguinoxalina-2,3-diol

OH

Uma suspensão de 4-metoxibenzeno-l,2-diamina dicloridrato em dietil oxalato (8 eq) foi tratada com Et2N 23 (2 eq) e depois aquecida a 150°C durante 2 horas. A mistura foi arrefecida e filtrada, e depois o sólido recolhido foi lavado com H20 e EtOH. O residuo foi seco para dar o composto do titulo (69%). MS (ES+) m/z 193 (M+H)+

Etapa 2: 3-cloro-6-metoxiquinoxalina-2-ol

Cl

Uma solução (1,53 M) de 6-metoxiquinoxalina-2,3-diol em DMF foi tratada com SOCI2 (1 eq) e aquecida a 110 °C. Depois de 1,5 horas a mistura da reação foi arrefecida e vertida em HC1 aquoso (1 N) . O precipitado resultante foi filtrado e lavado com H20 e Et20. O sólido seco continha predominantemente o composto do titulo como uma mistura com 6-metoxiquinoxalina-2,3-dioland-2,3-dicloro-6-metoxiquinoxalina. Este material foi utilizado diretamente na etapa subsequente. MS (ES+) m/z 211 (M+H)+

Etapa 3: 1-tert-butil 2-metil (2S,4R)-4-[(3-cloro-7- metoxiguinoxalina-2-il)oxi]pirrolidina-1,2-dicarboxilato

ΛΑ,

Uma solução (0,35 M) de 3-cloro-6-metoxiquinoxalina-2-ol em NMP foi tratada com CS2CO3 (1,5 eq) e 1-tert-butil 2-metil(2S,4S)-4-{[(4-bromofenil)sulfonil]oxi jpirrolidina-1,2-dicarboxilato (1,1 eq) . A mistura resultante foi agitada a 50°C durante 18 horas, depois uma porção adicional (0,1 eq) de 1-tert-butil 2-metil(2S,4S)-4-{[(4-bromofenil)sulfonil]oxi}pirrolidina-1,2-dicarboxilato foi adicionada. Após agitação durante 2 horas, a mistura foi 24 arrefecida e diluída com H20 e EtOAc. As fases orgânicas foram lavadas com HC1 aquoso (1 N) , NaHCC>3 aquoso saturado e salmoura. A fase orgânica seca foi concentrada a um resíduo que foi purificado por cromatografia flash (0-60% EtOAc/éter de petróleo) para dar o composto do título (35% para duas etapas) como um sólido. MS (ES+) m/z 438 (M+H)+

Etapa_4j_metil (4R) -4- [ (3-cloro-7-metoxiguinoxalina-2- il)oxi]-L-prolinato cloridrato

Uma solução (0,62 M) de 1-tert-butil 2-metil (2S,4R)-4- [ (3-cloro-7-metoxiquinoxalina-2-il)oxi]pirrolidina-l, 2-dicarboxilato em CH2C12 foi tratada com uma solução (4 M) de HC1 em dioxano (5 eq) . A mistura foi agitada a 20 °C durante 2 horas, depois tratada com uma solução (4 M) de HC1 em dioxano (2 eq). Após 5 horas, a reação foi considerada completa e a mistura foi concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi triturado com Et20 para dar o composto do título (95%) como um sólido. MS (ES + ) m/z 338 (M+H)+

Exemplo 1: Potássio {[(IR,2S)-1-({[(laR,5S,8S.10R,22aR)—5— tert-butil-14—metoxi-3,6-dioxo-l,la, 3,4,5,6,9,10,18,19,20,21,22,22a-tetradecahidro-8H-7,10-metanocicloprona[18,19][1,10,3,6]dioxadiazaciclononadecino[ 11,12-b]quinoxalina-8-il]carbonil}amino)-2-vinilciclopropil]carbonil}(ciclopropilsulfonil) azanida 25

ilciclopropil]oxi}carbonil)-L-valil-(4R)-4-[(3-cloro-7-metoxiguinoxalina-2-il)oxi]-L-prolinato

Uma solução (0,2 M) de metilo (4R)-4-[(3-cloro-7-metoxiquinoxalina-2-il)oxi]-L-prolinato cloridrato em DMF foi tratada com 3-metil-N-({[(IR,2R)-2-pent-4-en-l- ilciclopropil]oxi}carbonil)-L-valina (1,1 eq) , DIEA (5 eq) e HATU (1,2 eq) . A mistura resultante foi agitada a 20°C durante 5 horas, depois diluída com EtOAc. A camada orgânica foi separada e lavada com HC1 aquoso (1 N), NaHC03 aquoso saturado e salmoura. A fase orgânica seca foi concentrada sob baixa pressão para dar um resíduo que foi purificado por cromatografia flash (eluente 10-30% EtOAc/éter de petróleo) para fornecer o composto do título (96%) como um óleo. MS (ES+) m/z 604 (M+H)+

Etapa_2j_metil_3-metil-N- ({ [ (IR, 2R) -2-pent-4-en-l- ilciclopropil]oxi}carbonil)-L-valil-(4R)-4-[(7-metoxi-3-vinilguinoxalina-2-il)oxi]-L-prolinato 26

Uma solução (0,1 M) de metilo 3-metil-N-({[(IR, 2R)-2-pent-4-en-l-ilciclopropil]oxi}carbonil)-L-valil-(4R)-4-[(3- cloro-7-metoxiquinoxalina-2-il)oxi]-L-prolinato em EtOH foi tratada com trifluoro(vinil)borato de potássio (1,5 eq) e trietilamina (1,5 eq). A mistura resultante foi desgaseifiçada, depois foi adicionado aduto PdCl2(dppf)-CH2C12 (0,1 eq). A mistura foi aquecida sob refluxo durante 1 hora, depois arrefecida à temperatura ambiente e diluída com H20 e EtOAc. A fase orgânica foi separada, lavada com H20 e em salmoura, e depois seca. A remoção dos voláteis suportou um resíduo que foi purificado por cromatografia flash (20-30% EtOAc/éter de petróleo) para dar o composto do título como uma espuma amarela que foi utilizada diretamente na etapa subsequente. MS (ES+) m/z 595 (M+H)+ Etapa 3: metil(laR,5S,8S,10R,18E,22aR)-5-tert-butil-14- metoxi-3,6-dioxo-l,la,3,4,5,6,9.10,20,21,22,22a-dodecahidro-8H-7,10- metanociclopropa[18,19][1,10,3.6]dioxadiazaciclononadecino[ 11, 12-b] quinoxalina-8-carboxji p,m

27 metoxi-3-vinilquinoxalina-2-il)oxi]-L-prolinato em DCE foi aquecida a 80°C, depois tratada com catalisador Zhan 1 (0,15 eq). A mistura resultante foi agitada a 80°C durante 1 hora, depois arrefecida à temperatura ambiente e concentrada sob baixa pressão. O resíduo foi purificado por cromatografia flash (20-50% EtOAc/éter de petróleo) para dar o composto do título (25% para duas etapas) como uma espuma. MS (ES+) m/z 567 (M+H)+

Etapa 4: metil(laR,5S,8S,10R,22aR)-5-tert-butil-14-metoxi-3,6-dioxo-l,la, 3,4,5,6,9,10,18, 19,2 0,21,22,22a-tetra-decahidro-8H-7,10- metanociclopropa[18,19][1,10,3,6]dioxadiazaciclononadecino[ 11,12-b]quinoxalina-8-carboxilato

Uma solução (0,05 M) de metil(laR,5S,8S,10R,18E, 22aR)-5-tert-butil-14-metoxi-3,6-dioxo-l, 1 a, 3,4,5,6,9,10,20,21,22,22a- dodecahidro- 8H- 7,10- metanociclopropa [18,19] [1,10,3,6] dioxadiazaciclononadecino [1,12-b]quinoxalina-8-carboxilato em MeOH/dioxano (razão 1:1) foi tratado com Pd/C (8% em peso) . A mistura resultante foi agitada sob atmosfera de hidrogénio durante 4 horas. O catalisador foi filtrado para fora e o filtrado foi concentrado sob baixa pressão para dar o composto do título (98%) como um sólido. MS (ES+) m/z 569 (M+H)+

Etapa 5: (laR,5S,8S,10R,22aR)-5-tert-butil-1,4-metoxi-3,6- dioxo-1,la,3,4,5,6,9,10,18,19,20,21,22,22a-tetradecahidro-8H-7,10- metanociclopropa[18,19][1,10,3,6]dioxadiazaciclononadecino[ 28

Uma solução (0,1 M) de metil(laR,5S,8S,10R,22aR)-5-tert-butil-14-metoxi-3,6-dioxo-l, la, 3,4,5,6,9,10,18,19,20,21,22,2 2a-tetradecahidro-8H-7,10-metanociclopropa[18,19] [1,10,3,6]dioxadiazaciclonona- decino[11,12-b]quinoxalina-8-carboxilato numa mistura 1:1 de H20/THF foi tratada com Li0H.H20 (3 eq) . A mistura resultante foi aqitada a 20 "C durante 18 horas, acidificada com HC1 aquoso (0,2 M) e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi separada, lavada com HC1 aquoso (0,2 M) e em salmoura, e depois seca. A remoção dos voláteis suportou o composto do título (98%) como um sólido. MS (ES+) m/z 555 (M+H)+

Etapa 6: (laR,5S,8S,10R22aR)-5-tert-butil-N-((IR,2S)-1- { [ (ciclopropilsulf onil) amino]_carboxil} -2- vinilciclopropil)-14-metoxi-3,6-dioxo- 1,1a,3,4,5,6,9,10,18,19,20,21,22,22a-tetradecahidro-8H-7,10-metanociclopropa[18, 19] [1,10,3,6]dioxadiazaciclononadecino[11,12-b]guinoxalina-8-carboxamida

Uma solução (0,1 M) de (laR,5S,8S,10R,22aR)-5-tert- 29 butil-14-metoxi-3,6-dioxo-l, la, 3,4,5,6,9,10,18,19,20,21,22,22a- tetradecahidro- 8H-7,10- metanociclopropa[18,19] [1,10,3,6] dioxadiazaciclonona- decino[11,12-b]quinoxalina-8-ácido carboxílico em CH2CI2 foi tratada com (1R,2S)-1- { [ (ciclopropilsulfonil)amino]carbonil}-2-

vinilciclopropanaminio cloreto (1,3 eq), DIEA (3 eq) , DMAP (1,5 eq) e TBTU (1,45 eq). A mistura resultante foi agitada a 20 °C durante 18 horas e depois diluída com EtOAc. A solução foi lavada com HC1 aquoso (0,2 M) , NaHC03 aquoso saturado e em salmoura. As fases orgânicas foram secas e concentradas para dar um resíduo que foi purificado por cromatografia flash (eluente 2,5% MeOH/CH2Cl2) para dar o composto do título (89%) como um sólido. 13C NMR (100 MHz, DMSO-de) δ 172,32, 170,63, 169, 04, 159,86, 56,95, 54, 74, 148,10, 140,41, 133,55 (2 signals), 128,94, 118,21, 117,58, 105,89, 74,88, 59,75, 58,71, 55,68, 54,13, 54,01, 40,13, 34, 49, 34, 04, 33, 76, 32,68, 30, 71, 30,43, 28,55, 27, 69, 27,28, 26,38, 21,98, 18,49, 10,67, 5,69, 5,46; MS (ES+) m/z 767 (M+H)+

Etapa 7: Potássio {[(IR,2S)-1-({[(laR,5S,8S,10R, 22aR)-5-tert-butil-14-metoxi-3,6-dioxo-l, la, 3,4,5,6,9,10,18,19,20,21,22,22a-tetradecahidro-8H-7,10-metanociclopropa[18,19][1,10,3,6]dioxadiazaciclonona-decino[11,12-b]quinoxalina-8-il]carbonil}amino)-2-vinilciclopropil]carbonil}(ciclopropilsulfonil)azanida

Vo K* O material anterior foi preparado em EtOH e a solução resultante (0,025 M) foi arrefecida a 0°C. Uma solução 30 (0,02 M) de tert-BuOK (1,5 eq) em EtOH foi adicionada conduzindo à formação de um precipitado. A mistura foi agitada a 20 °C durante 18 horas, depois o sólido foi recolhido por filtração. Este material foi lavado com EtOH e seco para dar o composto do titulo (93%) como um sólido branco cristalino. MS (ES+) m/z 767 (M+H)+

Exemplo 2: Comparação de diferentes compostos O composto do Exemplo 1 foi comparado com o composto dos Exemplos 110 e 118 do documento WO 2008/057209. Os resultados são mostrados nos Quadros 1 e 2 a seguir. Como ilustrado nos quadros e na discussão dos resultados, o composto de fórmula (I) parece ter várias propriedades vantajosas comparadas com o composto do Exemplo 118 do documento WO 2008/057209 e composto do Exemplo 110 do documento WO 2008/057209.

Quadro 1

Documento WO 2008/057209 Exemplo 118 Exemplo 1 Documento WO 2008/057209 Exemplo 110 Estrutura Qpr°- Q-'-'t f75T ° # Atividade inibidora1 da NS3/4A (Ki) lb < 0,016 nM < 0,016 nM < 0,016 nM Atividade de replicão2 EC50 gt 1 b 3 nM 2 nM 5 nM AUC Plasma de ratazana aos 25mpk oral3 38,5 pM.h 20,6 μΜ.h 5,8 μΜ. h 31

Documento WO 2008/057209 Exemplo 118 Exemplo 1 Documento WO 2008/057209 Exemplo 110 Concentração de fígado de ratazana às 24 horas (25 mpk oral) 18,4 μΜ 27,9 μΜ 8,5 μΜ AUC Plasma de Cão aos 5mpk oral3 10,9 μΜ.h 48,6 μΜ.h 1,0 μΜ. h Concentração de fígado de cão às 24 horas (5mpk oral) Não disponível 120 μΜ 3, 3 μΜ Ligação Covalente de proteína In Vivo4 Plasma de ratazana às 6 horas = BLQ, fígado=3063 pmol/mp de proteína Plasma de ratazana às 6 horas = LOQ, fígado = LOQ Plasma de ratazana às 6 horas = BLQ, fígado = BLQ Propriedades físicas5 Sal de potássio não desproporciona em solução Sal de potássio não desproporciona em solução Sal de potássio desproporciona para forma neutral cristalina em solução Ki: constante de inibição, referência a < 0,016 nM indica que a atividade observada é inferior a 0,016 nM, a quantidade exata inferior a 0,016 nM não foi determinada pelo ensaio; EC50: concentração eficaz que atinge 50% de supressão da replicação virai; gt: Genótipo; AUC: Área sob a curva de concentração do plasma/tempo; LOQ: Limite de quantização (3 pmol/mg); BLQ: abaixo do limite de quantização.

Composto de Fórmula (I) comparado com o Exemplo 110 do documento WO 2008/057209

As propriedades vantajosas do composto de fórmula (I) versus o composto do Exemplo 110 do documento WO 32 2008/057209 são as seguintes: 1) propriedades fisicas (sem desproporcionação de sal para o composto de fórmula (I)); 2) perfil farmacocinético em ratazanas após administração do sal de potássio; e 3) exposição ao fígado (orgão alvo).

As diferenças nas propriedades são particularmente vantajosas para a formulação e administração do composto de fórmula (I) comparado com o composto do Exemplo 110 do documento WO 2008/057209. A ausência de desproporcionação de sal para o composto de fórmula (I) permite a dissolução de 1,8 mg/ml da forma do sal K+ do composto do Exemplo 1 em água. Apesar da forma do sal K+ do composto do Exemplo 110 do documento WO 2008/057209 ter solubilidade aquosa melhorada (9,7 mg/mL), o composto assim dissolvido desproporciona para dar uma forma zwiteriónica cristalina que tem baixa solubilidade aquosa (<0,009 mg/ml). A ausência deste comportamento para o composto do Exemplo 1 providencia uma vantagem inesperada na sua formulação para administração farmacêutica e resulta em propriedades farmacocinéticas melhoradas como reportado no Quadro 1 (AUC plasma e exposição ao fígado para ratazana e cão), alta exposição ao plasma e fígado em espécies pré-clínicas é vantajosa para a seleção de doses seguras e eficazes para utilização no tratamento de pacientes.

Composto de Fórmula (I) comparado com o composto do Exemplo 118 do documento WO 2008/057209

Uma vantagem observada do composto de fórmula (I) comparado com o composto do Exemplo 118 do documento W02008/057209 é no seu perfil de resistência contra diferentes enzimas mutantes. No alinhamento dos dados de estudos clínicos com agentes antivirais de classes relacionadas (por exemplo, inibidores da protease do HIV) , e também de estudos com inibidores da protease NS3 do HCV (por exemplo, VX-950, telaprevir), é esperado que a 33 resistência virai se desenvolva em resposta ao tratamento com os compostos atuais. 0 composto do Exemplo 1 mostrou maior afinidade enzimática (Ki) contra diferentes enzimas mutantes que se sabe conferirem resistência aos inibidores da protease NS3 do HCV. 0 Quadro 2 sumariza a atividade contra as diferentes enzimas mutantes. Assim, uma vantagem do composto 1 pode ser uma barreira aumentada ao desenvolvimento de virus resistente quando administrado a pacientes. Também providencia a vantagem potencial de tratar pacientes que não obtiveram resultados com outras terapêuticas por causa do desenvolvimento de resistência, uma vez que o composto 1 pode inibir este vírus resistente.

Quadro 2. Valores de Ki1 versus enzima mutante lb (nM) lb SHIFT D168T D168A D168E D168G D168V Dl 6 8 Y D168Q Exemplo 1 0, 18 0,43 0,04 0, 08 0,14 0,22 0, 12 cmp 118 0, 78 0,86 0,12 0, 45 0,65 1,5 0, 42 lb SHIFT A156S A156T A156V R155K R155Q R155G R155N Exemplo 1 0, 05 5,2 11 0,07 0,43 0,63 0, 13 cmp 118 0, 10 3,4 15 0, 08 1,9 2,3 0, 56 1Dados comparativos recolhidos na mesma corrida dos ensaios enzimáticos

Propriedades vantajosas adicionalmente esperadas do composto de fórmula (I) versus o composto do Exemplo 110 do documento WO 2008/057209 incluem as seguintes: 1) Baixa ligação covalente in vivo; e 2) alta exposição ao plasma e fígado.

Verificou-se que o composto de fórmula (I) tem características de ligação covalente in vivo e propriedades farmacocinéticas muito boas. Com base nas propriedades de ligação covalente in vivo e farmacocinéticas observadas do composto do Exemplo 1 e do composto do Exemplo 118 do documento WO 2008/057209, o composto de fórmula (I) tem características de ligação covalente in vivo e propriedades farmacocinéticas significativamente superiores. 34

Compostos que se ligam covalentemente a proteínas, ou que formam metabolitos que se tornam subsequentemente ligados covalentemente a proteínas, originam potencialmente acontecimentos adversos em pacientes, tais como toxicidades imunológicas mediadas por respostas de anticorpo ao conjugado fármaco-proteína, e outras toxicidades idiossincráticas (Ver Chem, Res, Toxicol, 2004, 17, 3-16). O composto do Exemplo 1 mostrou ligação indetetável às proteínas do plasma após a administração oral de uma única dose de 20 mg/kg a ratazanas (Ver Quadro 1) . Em condições análogas, o composto do Exemplo 118 do documento W02008/057209 demonstrou ligação detetável a proteínas de fígado de ratazana (ver Quadro I), e pode, portanto, ser considerado um composto menos vantajoso para administração a sujeitos humanos do que o composto de fórmula (I). O Quadro 3 providencia alguns dados adicionais de ligação covalente in vivo observados para compostos relacionados do documento WO 2008/057209 que contêm a fração (R,R)-trans-2-alquilciclopentanol incorporada no Exemplo 118.

Quadro 3

Dcumento WO 2008/057209 Exemplo 108 Documento WO 2008/057209 Exemplo 103 Documento WO 2008/057209 Exemplo 96 Estrutura p „9 VVíf 0(w, °ó" Ligação covalente de proteína In Vivo4 Plasma de ratazana às 6 horas = 15 pmol eq/mg fígado = 38 pmol eqJmg Plasma de ratazana às 6 horas = 6 pmol eq/mg fígado = 24 pmol eq/mg Plasma de ratazana às 6 horas = 6 pmol eq/mg fígado = 63 pmol eq/mg 35 É vantajoso ter elevada exposição ao plasma e fígado em espécies pré-clínicas para demonstrar efetivamente que o fármaco candidato potencial não despoleta toxicidades indesejadas. É também mais provável que um composto que tem elevada exposição ao plasma e fígado em animais exiba o mesmo comportamento no homem do que um que não o faz. Para um tal composto, a exposição eficaz requerida no homem pode ser atingida com uma dose baixa, vantajoso tanto pelo custo e facilidade de produção do fármaco, mas também por baixar potencialmente a probabilidade de efeitos adversos. A exposição dos órgãos alvo em múltiplas espécies pré-clínicas providencia uma lógica de que elevada exposição do orgão alvo é alcançável para o composto em pacientes, e elevada exposição do fígado tanto em ratazanas como em cães permite a avaliação confiante da toxicidade pré-clínica. Elevada exposição do fígado é especialmente vantajosa para o HCV uma vez que este é o orgão alvo para o fármaco. 0 composto do Exemplo 1 teve uma muito boa exposição ao plasma e fígado de ratazana. A exposição observada ao fígado de ratazana esteve num nível superior ao do composto 118 e composto 110 do documento WO 2008/057209 (ver Quadro 1). Com base nestes resultados e no teste de vários compostos diferentes do documento WO 2008/057209 por administração oral tanto a ratazanas (25 mpk) como a cães (5mpk), o composto de fórmula (I) também se espera que tenha exposições ao fígado de cão superiores ao composto 118 e composto 110 do documento W02008/057209. Métodos

Atividade inibidora1 da NS3/4A (Ki) : a atividade inibidora da NS3/4A foi determinada como descrito na Secção IV. Avaliação do composto supra, e em Mao el al., Anal Biochem 373: 1-8, 2008.

Atividade do Replicão2 EC50: A atividade do replicão foi determinada utilizando os procedimentos descritos em Carroll et al. , J. Biol. Chem. 278 : 11979-11984, 2003 e 36

Olsen et al., Anti Microb. Agents 48: 3944-3953, 2004. AUC de plasma de ratazana às 25 mpk oral3: compostos teste foram dissolvidos num veiculo de dosagem adequado para administração iv (por exemplo 20%:60%:20% DMSO:PEG400: água) ou administração oral (por exemplo, 10% POLISSORBATO80:90% água ou 100% PEG400). Os animais foram administrados (n = 3) utilizando um estudo de desenho cruzado para não roedores. As amostras de plasma foram recolhidas em pontos temporais entre 2 minutos e 24 horas, e os níveis do composto foram determinados por RP-HPLC. As amostras de fígado foram recolhidas post mortem em ratazanas e após a anestesia (0,5 horas antes da biópsia) em cães. As amostras de fígado foram pesadas, homogeneizadas, e diluídas utilizando técnicas conhecidas daqueles habilitados na arte, e os níveis do composto foram determinados por RP-HPLC.

Os parâmetros farmacocinéticos foram calculados com base numa análise não compartimentada (por exemplo, utilizando WATSON®, WINNOLIN®). Às concentrações pré-dose que estavam abaixo do limite de quantização (BLQ) foi-lhes atribuído um valor de 0. Para a estimativa de AUC oral, ao primeiro valor BLQ na fase terminal foi-lhe dado um valor igual a 1/2 do Limite de Quantização mais baixo, enquanto aos valores subsequentes na fase terminal foi-lhes atribuído um valor de 0. Foram calculados os parâmetros farmacocinéticos padrão CLp, Vdss, meia-vida (apenas para XV) , ~ó F, Cmax, Tmax, AUCo-úitimof AUCo-infinito· Os valores de AUC foram calculados utilizando o método trapezoidal linear para concentrações ascendentes e o método trapezoidal logarítmico para concentrações descendentes.

Ligação covalente In Vivo4: Os compostos teste foram radiomarcados adequadamente (3H) e uma dose de 2 0 mg/kg contendo radioatividade de 25-75 mCi/ratazana (pureza >98,5%) foi preparada por combinação do composto frio e solução stock radio-residual evaporada. Esta mistura foi 37 dissolvida num veiculo de dosagem adequado para administração oral (ver em cima), depois administrada oralmente a ratazana (n = 3 por ponto temporal, 2h, 6h, 24h). 0 plasma e fígado foram colhidos e congelados/armazenados rapidamente a -80°C antes da análise.

Contagem das amostras de plasma: Colocar uma aliquota de 200 pL num frasco de cintilação de 20 mL. Adicionar 500 pL de SOLVABLE™ e incubar a 1 hora com agitação a 55 °C. Remover, permitir arrefecer antes da adição de 15 mL de cocktail de cintilação, e contar. As amostras de plasma (aliquota de 200 pL) foram depois processadas como descrito em baixo para as proteínas do fígado.

Homogeneização do tecido: as amostras de fígado pesadas foram diluídas com 2 vol 100 mM de tampão fosfato (pH 7,4) e homogeneizadas em gelo.

Contagem do homogeneizado de fígado: As aliquotas foram colocadas num frasco de cintilação de 20 mL, diluídas com 1 mL de SOLVABLE™ e incubadas durante 1 hora com agitação a 55°C. Após remoção da incubadora e arrefecimento, foram adicionados 1,5 mL de cocktail de cintilação e 30% H2O2 e a radioatividade contada.

Precipitação da proteína: Tomar uma aliquota de 500 pL, adicionar homogeneizado:acetonitrilo 1:8 (se se suspeita que o composto tem baixa solubilidade em acetonitrilo, pode ser selecionado outro solvente) , vórtex e centrífuga (3500 ref durante 20 minutos). Descartar o sobrenadante.

Ressuspensão do precipitado da proteína: Sonicação (intensidade mínima, < 5 segundos) e vórtex até a bola se desintegrar em 80% MeOH:20% água.

Lavagem da bola de proteína: 2-5 mL 80 :20 MeOH:água. Se necessário, remover 1,0 mL do sobrenadante, adicionar 15 mL de cocktail de cintilação e contar. Continuar a lavar a bola de proteína até a radioatividade no sobrenadante ser < 38 200 DPM ou os DPMs cessarem de diminuir por mais de 200 em lavagens consecutivas.

Dissolução da bola final: 1 mL de 1 N NaOH ou SOLVABLE™, incubado a 50 °C durante a noite até estar completamente dissolvido.

Contagem da bola final: 1 mL da bola dissolvida, 15 mL de cocktail de cintilação (se for utilizado outro cocktail de cintilação que não o ULTIMA GOLD™, a bola pode requerer neutralização utilizando 1 N HC1), e contar.

Concentração da proteína da bola final: kit BCA ou BIO-RAD utilizando BSA como um padrão.

Contagem de amostras em branco: 15 mL de cocktail de cintilação, em duplicado.

Contagem da solução de dosagem: Contar um volume conhecido da solução de dosagem em triplicado.

Análise dos dados: Calcular a média das contagens de radioatividade (DPM) da solução de dosagem e calcular a atividade especifica da solução de dosagem em mCi/mol. Calcular a média das contagens de radioatividade das amostras em branco. Subtrair as contagens da média da amostra em branco das contagens obtidas de cada bola de figado e plasma. Calcular a quantidade de radioatividade (mCi) por unidade de volume (L) para cada bola de figado e plasma. Calcular a concentração de radioatividade em cada bola de plasma e figado dividindo o valor obtido em cima (mCi/L) pela atividade especifica (mCi/mol). Calcular a quantidade de radioatividade covalentemente ligada à proteína em pmol/mg de proteína.

Contagem das amostras em branco: 15 mL de cocktail de cintilação, em duplicado.

Propriedades físicas5: Os compostos teste cristalinos (sal de potássio, cerca de 5 mg) foram pesados num frasco para injetáveis de vidro e foi adicionado água ou tampão 39 aquoso (100 pL). A pasta fluída obtida foi agitada durante 24 horas à temperatura ambiente. Depois de centrifugar, o sobrenadante foi analisado por HPLC de fase reversa e determinada a solubilidade de equilíbrio por comparação com uma curva de calibração. O material sólido foi, em parte, transferido para uma placa XRPD, seco e depois analisado por difração de pó de raios-X. O padrão XRPD foi comparado com controlos positivos para o sal K+ cristalino, zwiteriónico cristalino (ou acídico) e formas amorfas do composto teste. Uma determinação adicional da forma do sal foi obtida a partir de uma segunda porção do material sólido que foi analisada por NMR a 400 MHz (Bruker) seguido de dissolução em DMSO-dg. Os espectros 1H-NMR foram comparados com os controlos positivos descritos em cima. 40

DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIÇÃO

Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor. Não é parte integrante do documento de patente europeia. Não obstante o cuidado na sua elaboração, o IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões. • WO 2008057209 A [0012] [0082] [0083] [0084] [0085] [0086] [0087] [0088] [0089] [0091] [0092] [0094] • WO 06119061 A [0029] WO 7015785 A [0029] WO 7016441 A [0029] WO 07148135 ) A [0029] WO 08051475 ) A [0029] WO 08051477 ' A [0029] WO 08051514 : A [0029] WO 0805720S i A [0029] WO 9822496 A [0029] WO 9846630 A [0029] WO 9907733 A [0029] WO 9907734 A [0029] WO 9938888 A [0029] WO 9950230 A [0029] WO 9964442 A [0029] WO 0009543 A [0029] WO 0059929 A [0029] WO 0248116 A [0029] WO 0248172 A [0029] GB 2337262 A [0029] us 6323180 B [0029] WO 0160379 A [0030] WO 9741211 A [0031] WO 0100622 A [0031] WO 0025780 A [0031] us 3480613 A [0034] 41 • WO 0190121 A [0034] • WO 0192282 A [0034] • WO 0232920 A [0034] [0035] • WO 04002999 A [0034] • WO 04003000 A [0034] • WO 04002422 A [0034] • WO 0251425 A [0035] • WO 0179246 A [0035] • WO 0248165 A [0035] • WO 2005003147 A [0035] [0036] • WO 0168663 A [0035] • WO 9943691 A [0035] • WO 0218404 A [0035] • WO 2006021341 A [0035] • US 20050038240 A [0035] • US 20020019363 A [0035] • US 20030236216 A [0035] • US 20040006007 A [0035] • US 20040063658 A [0035] • WO 02100415 A [0035] • WO 03026589 A [0035] • WO 03026675 A [0035] • WO 03093290 A [0035] • WO 04011478 A [0035] • WO 04013300 A [0035] • WO 04028481 A [0035] • WO 02057287 A [0036] • WO 02057425 A [0036] • WO 03068244 A [0036] • WO 2004000858 A [0036] • WO 04003138 A [0036] • WO 2004007512 A [0036] • US 6777392 B [0036] • US 20040067901 A [0036] • WO 0177091 A [0038] 42 • WO 0147883 A [0038] • WO 0204425 A [0038] • WO 0206246 A [0038] • WO 0220497 A [0038] • WO 2005016927 A [0038] • WO 2006102087 A [0041] • US 20020107138 A [0043] • US 6995174 B, Wang [0046]

Documentos de patente referidos na descrição • Balsano. Mini Rev. Med. Chem., 2008, vol. 8 (4), 307- 318 [0004] • Rõnn et al. Current Topics in Medicinal Chemistry, 2008, vol. 8, 53.3-562 [0004] • Sheldon et al. Expert Opin. Investig, Drugs, 2007, vol. 16 (8), 1171-1181 [0004] • De Francesco et al. Antiviral Research, 2003, vol. 58, 1-16 [0004] • Remington's Pharmaceutical Sciences. Mack Publishing Co, 2000 [0026] • A.C. Allison ; E.M. Eugui. Agents Action, 1993, vol. 44, 165 [0031] • J.Kirschbaum.Anal. Profiles Drug Subs.,1983, vol. 12, 1-36 [0032] • R. E. Harry-0'Kuru et al. J. Org. Chem., 199 7, vol. 17, 54-59 [0034] • M. S. Wolfe et al. Tet. Lett., 1995, vol. 36, 7611-14 [0034] • Carroll et al. J. Biol. Chem., 2003, vol. 278, 11979-11984 [0040] [0096] • Mao et al. Anal. Biochem., 2008, vol. 373, 1-8 [0041] • P. Gallinari et al. BIOCHEM., 1999, vol. 38, 5620-32 [0041] • P. Gallinari et al. J. VIROL., 1998, vol. 67, 58-69 [0041] 43 • M. Taliani et al. ANAL. BIOCHEM., 1996, vol. 240, 60- 67 [0041] • Mao et al. Analytical Biochemistry, 2008, vol. 373, 1-8 [0041] • F. Miller et al. J. AM. CHEM. Soc., 19 96, vol. 118, 9606 [0043] • G. Kingsbury et al. J. Am. Chem. Soc., 1999, vol. 121, 791 [0043] • H. Scholl et al. 1. ORG. LETT., 1999, 953 [0043] • K. Furstner et al. J. ORG. CHEM., 1999, vol. 64, 8275 [0043] • Trnka ; Grubbs. ACC. CHEM. RES., 2001, vol. 18 [0043] • Chem. Res. Toxicol., 2004, vol. 17, 3-16 [0090] • Mao. Anal Biochem, 2008, vol. 373, 1-8 [0095] • Olsen et al. Anti Microb. Agents, 2004, vol. 48, 3944-3953 [0096]

Claims

(1)

1 REIVINDICAÇÕES ou um sal 1. Um composto de fórmula (I) farmaceuticamente aceitável do mesmo:
2. Um composto de acordo com a reivindicação 1 que tem a estrutura:

O
3. Uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz do composto da reivindicação 1 ou 2 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veiculo farmaceuticamente aceitável.
4. Uma combinação de um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um segundo agente terapêutico selecionado a partir de um inibidor da protease do HCV e inibidores da polimerase NS5B do HCV. 2
5. Um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para utilização num método de tratamento do corpo humano por terapêutica.
6. 0 composto para utilização de acordo com a reivindicação 5 em que a terapêutica é a prevenção ou tratamento da infeção por HCV.
7. A utilização de um composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo na preparação de um medicamento para a prevenção ou tratamento da infeção por HCV.