PT1979356E

PT1979356E - Carbonilaminopirrolopirazolos, inibidores potentes de cinase

Info

Publication number: PT1979356E
Application number: PT68317312T
Authority: PT
Inventors: Mary Catherine Johnson; Liming Dong; Chuangxing Guo; Yufeng Hong; Susan Elizabeth Kephart; Haitao Li; Indrawan James Mcalpine; Jayashree Girish Tikhe; Anle Yang; Junhu Zhang
Original assignee: Pfizer Prod Inc
Priority date: 2005-12-21
Filing date: 2006-12-12
Publication date: 2013-11-21
Also published as: CU20080115A7; WO2007072153A3; EP1979356B1; IL191776A; BRPI0620354A2; EA200801291A1; MEP0808A; MA30076B1; ECSP088558A; AP2369A; EP1979356A2; JP4635089B2; CU23751B7; KR20080080567A; CA2634381A1; US20090318440A1; PL1979356T3; JP2009520805A; ES2435405T3; HK1128290A1

Description

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DESCRIÇÃO "CARBONILAMINOPIRROLOPIRAZOLOS, INIBIDORES POTENTES DE CINASE"

Campo da invenção A presente invenção diz respeito, de um modo geral, a novos compostos químicos e métodos. Em particular, a invenção diz respeito a novos compostos de carbonilamino-pirrolopirazolo e seus análogos, que possuem actividade contra proteína-cinase, e a métodos para a síntese e utilização de tais compostos.

Antecedentes

As proteína-cinases constituem uma família de enzimas que catalisam a fosforilação dos grupos hidroxilo de resíduos tirosina, serina e treonina específicos em proteínas. Tipicamente, tal fosforilação pode alterar dramaticamente a função da proteína e, assim, as proteína-cinases podem ser críticas para a regulação de diversos processos celulares, incluindo o metabolismo, a proliferação celular, a diferenciação celular e a sobrevivência das células. 0 mecanismo destes processos celulares proporciona uma base para usar como alvo as proteína-cinases no tratamento de patologias provocadas por ou nas quais estejam implicados distúrbios destes processos celulares. Como exemplos de tais doenças refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação, cancro e diabetes.

As proteína-cinases podem ser divididas em dois tipos, proteína-tirosina-cinases (PTK) e serina-treonina-cinases (STK). Tanto as PTK como as STK podem ser proteína-cinases 2 receptoras ou proteína-cinases não receptoras. As PAK constituem uma família de STK não receptoras. A família de proteína-cinase activada p21 (PAK) das serina/treonina-proteína-cinases desempenha um papel importante na organização citoesquelética e morfogénese celular (Daniels et al., Trends Biochem. Sei. 24: 350-355 (1999); Sells et al., Trends Cell. Biol. 7: 162-167 (1997)). As proteínas PAK foram inicialmente identificadas pela sua interaeção com as GTPases pequenas activas, Cdc42 e Rac, e pela sua homologia com cinase Ste20 de levedura. (Manser et al., Nature 367: 40-48 (1994)). Para além de mediar a regulação de actina no citoesqueleto e da adesão celular por Cdc42 e Rac (Daniels et al., Trends Biochem. Sei. 24: 350-355 (1999) ), determinou-se que algumas proteínas PAK protegem as células contra a apoptose (Gnesutta et al., J. Biol. Chem. 276: 14414-14419 (2001); Rudel et al., Science 276: 1571-1574 (1997); Schurmann et al., Mol. Cell. Biol. 20: 453-461 (2000)); modulam as vias da proteína activada por mitogénio (MAP) cinase (Bagrodia et al., J. Biol. Chem. 270: 27995-27998. (1995); Brown et al., Curr. Biol. 6: 598-605 (1996); Chaudhary et al., Curr. Biol. 10: 551-554 (2000) ; Frost et al., EMBO J. 16: 6426-6436 (1997); King et al., Nature 396: 180-183 (1998); Sun et al., Curr. Biol. 10: 281-284 (2000)); medeiam a sinalização do receptor de antigénio de células T (TCR) (Yablonski et al., EMBO J. 17: 5647-5657 (1998)); e respondem a danos no ADN (Roig et al., J. Biol. Chem. 274: 31119-31122 (1999)). Através destas diversas funções, as proteínas PAK regulam a proliferação e a migração de células. O ácido nucleico PAK4 de comprimento completo e as sequências de aminoácidos encontram-se descritos na patente 3 de invenção norte-americana n° 6 013 500 e foram depositados no GenBank com os números de acesso AF005046 (ARNm) e AAD01210 (aminoácido). A modulação da actividade de PAK4 humana é descrita como causadora de alterações nos processos celulares que afectam o crescimento e a adesão celulares. Por exemplo, a sobre-expressão de PAK4 em fibroblastos dá origem a alterações morfológicas que são caracteristicas de transformação oncogénica através da indução de crescimento independente de ancoragem e de inibição de apoptose (Gnesutta et al., J. Biol. Chem. 276: 14414-14419 (2001); Qu et al., Mol. Cell. Biol. 21: 3523-2533 (2001)). Mais recentemente, foi também demonstrado que: a PAK4 é frequentemente sobre-expressa em linhas celulares de tumores humanos de tecidos com origens diversas; a expressão de um mutante de PAK4 activo possui um potencial de transformação, o qual dá origem ao crescimento independente de ancoragem da linha celular NIH3T3; e uma PAK4 inactiva por cinase bloqueia eficazmente a transformação por Ras activada e inibe o crescimento independente de ancoragem de células de cancro do cólon HCT116. Estes dados implicam fortemente a PAK4 na transformação oncogénica e sugerem que a activação de PAK4 é necessária para o crescimento independente de ancoragem e conduzido por Ras de células cancerígenas humanas. (Smeal, et al., J. Biol. Chem. 277, 550-558 (2002)). A eficácia in vivo em murganhos com um tumor implantado de um composto que inibe o domínio de cinase da PAK4 é demonstrada no presente pedido de patente de invenção.

Assim sendo, parece, às requerentes, que a PAK4 constitui um alvo atractivo para o desenvolvimento de agentes terapêuticos eficazes para o tratamento de 4 distúrbios que envolvam o crescimento anormal de células e, em particular, de cancro.

Para outras referências de antecedentes, ver a publicação do pedido de patente de invenção norte-americana n° 2003/0171357 e a publicação PCT n° WO 02/12242 que descrevem determinados compostos biciclo-pirazolos e a sua utilidade para o tratamento de doenças associadas a proteina-cinases desreguladas. O pedido de patente de invenção internacional publicado com o n° WO 2005/ /030776 descreve determinados compostos de pirazolopirrolo e a sua actividade enquanto inibidores de proteína-cinase AKT ou PDK1. O pedido de patente de invenção internacional publicado com o n° WO 2004/056827 descreve determinados compostos pirrolo-pirazolo substituídos e a sua utilidade para o tratamento de distúrbios proliferativos do ciclo celular.

Descrição abreviada A invenção diz respeito a compostos de fórmula estrutural I,

em que o símbolo R1 representa etilo, t-butilo, R, -L- (cicloalquilo (C3-C12) ) -L-fenilo, -L-(heteroarilo com 5 a 5 12 membros) , -L- (heterociclilo com 3 a 12 membros) e -L- (carbociclilo não aromático insaturado (C3-C12) ) ; cada um dos símbolos R2 e R3 representa, de um modo independente, H, alquilo (Ci-Cs) , alcenilo (C2-C8) , alcinilo (C2-C8) , - (alquileno (C1-C3) ) m- (cicloalquilo (C3-C12) ) ou - (perfluoroalquilo (Ci-C6) ) , e cada um dos símbolos R2 e R3 é ainda facultativamente substituído com 1 a 3 grupos seleccionados entre halogeneto, -CN, oxo, -OH, -NH2, mono-alquil (Οχ-Οε)-amino e di-alquil (C2-C8) -amino; ou então os símbolos R2 e R3, em conjunto com o átomo de carbono ao qual os símbolos R2 e R3 estão ligados, formam um anel seleccionado entre um carbociclileno não aromático com 3 a 5 membros e um heterociclileno com 3 a 5 membros, em que o referido anel é ainda facultativamente substituído com 1 a 3 grupos seleccionados entre alquilo(C1-C3), perf luoroalquilo (C1-C3) , oxo, - (alquileno (C1-C3) ) m- halogeneto, -(alquileno(C1-C3) )m-CN, -(alquileno(C1-C3) )m_0H, - (alquileno (C1-C3) )m-NH2, - (alquileno (C1-C3) )m_ (mono- alquil (C1-C6) -amino) e - (alquileno (C1-C3) ) m-(di-alquil (C2-C6) -amino) ; o símbolo R4 representa um grupo seleccionado entre -OR5, -0-R6-R7, -0-CH(R8)R9, -N (R1) -R6-R7, -N (Rfc) CH (R8) R9, - CH (R1) -R6-R7, -CH (R1)-CH (R6)-R9, -B-(alquileno (C1-C3) ) - CH(R8)R9 e -B-(alquileno (C1-C3) ) m-CH (R10) R9 e o símbolo B representa -0-, -N (R1) - ou -CH(Rt)-; o símbolo R5 representa R; o símbolo R6 representa um radical divalente seleccionado entre -(cicloalquileno(C3-C7) )-, (heterociclileno com 3 a 7 membros)- e -(heteroarileno com 5 a 7 membros)-, desde que no caso do símbolo R4 representar -CH2-R6-R7 e o símbolo R7 representar fenilo não 6 substituído, o símbolo R6 não represente tiazolileno não substituído; o símbolo R6 é ainda facultativamente substituído com 1 a 4 grupos seleccionados entre alquilo (C1-C3) / oxo, perfluoroalquilo (C1-C3) , -(alquileno- (C1-C3) ) m-halogeneto, - (alquileno (C1-C3) ) m- (alquil (C1-C3) - amino) , - (alquileno (C1-C3) ) m-NH2, - (alquileno (C1-C3) ) m-0H e - (alquileno (C1-C3) )m- (alcoxi (C1-C3) ) ; o símbolo R7 representa um grupo seleccionado entre fenilo, arilo (C10-C12) , cicloalquilo (C3-C12) , carbociclilo(C4-C12) não aromático insaturado, heterociclilo com 3 a 12 membros e heteroarilo com 5 a 12 membros; o símbolo R6 representa - (alquileno (Ci-Cô) ) m-NRpRq, em que cada um dos símbolos Rp e Rq representa, de um modo independente, H ou alquilo(Ci-Cô) ou então os símbolos Rp e Rq, em conjunto com o átomo de azoto ao qual os símbolos Rp e Rq estão ligados, formam um anel seleccionado entre heterociclilo com 3 a 7 membros e heteroarilo com 5 a 7 membros, em que o referido anel pode ser ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre halogeneto, alquilo(C1-C3), oxo e perfluoroalquilo(Ci-C3) ; o símbolo R9 representa um grupo seleccionado entre alquilo (Ci-C6) , alcenilo (C2-C8) , alcinilo (C2-C6) , alcoxilo (Ci-C6) , perf luoroalquilo (Ci-Ce) , fenilo, - (L1)- fenilo, arilo (C10-C12) , - (L1) - (arilo (C10-C12) ) , cicloalquilo (C3-C12) , (L1) - (cicloalquilo (C3-C12) ) , carbociclilo (C4-C12) não aromático insaturado, - (L1) - (carbociclilo (C4-C12) não aromático insaturado), heterociclilo com 3 a 12 membros, -(L')-(heterociclilo com 3 a 12 membros), heteroarilo com 5 a 12 membros e -(L')-( heteroarilo com 5 a 12 membros); 7 o símbolo R10 representa um grupo seleccionado entre alquilo (Ci-Ce) , perfluoroalquilo (Ci-Cô) , - (alquileno (Ci~ C6) ) m~ (alcoxilo (Ci-Cô) ) , - (alquileno (Ci-C6) ) m- (CONRjRk) , em que cada um dos símbolos Rj e Rk representa, de um modo independente, H ou alquilo (C1-C3) , -(alquileno (C1-C3) )m- (cicloalquilo (C3-C6) ) e - (alquileno (C1-C3) )m- (heterociclilo com 3 a 6 membros) , e o símbolo R10 é ainda facultativamente substituído com 1 a 3 grupos seleccionados entre halogeneto, -OH, oxo e alquilo (C1-C3) , desde que no caso do símbolo R4 representar -B-CH (R10) R9, o símbolo B representar NH ou CH2 e o símbolo R9 representar -CH3 não substituído ou fenilo não substituído, então o símbolo R10 não represente CH3 não substituído; cada um dos símbolos R representa um grupo seleccionado independentemente entre o conjunto constituído por metilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, isobutilo, alquilo (Cs-Cs) , alcenilo (C2-Cs) , alcinilo (C2-C8) , - (alquileno (C1-C3) )m_ (cicloalquilo (C3-C12) ) , - (alquileno (Cq- C3) ) m-fenilo, - (alquileno (Ci-C3) ) m-(heteroarilo com 5 a 12 membros), - (alquileno (C1-C3) ) m- (heterociclilo com 3 a 12 membros), - (alquileno (C1-C3) ) m- (carbociclilo (C3-Ci2) não aromático insaturado), - (perfluoroalquilo(Cq-Cg)), (alquileno (Ci-C3) ) m-halogeneto, - (alquileno (Ci-C3) ) m-CN, (alquileno (Ci-C3) ) m-C (0) Ra, - (alquileno (C1-C3) ) m-C (0) 0Ra, (alquileno (Ci-C3) ) m-C (0) NRaRb, - (alquileno (Cq-C3) ) m-0Ra, (alquileno (Ci-C3) )m-0C (0)Ra, - (alquileno (Ci-C3) )m-0C (0) NRaRb, - (alquileno (C1-C3) ) m-0-S (0) Ra, - (alquileno (Ci-C3) ) m-0S (0) 2Ra, - (alquileno (C1-C3) ) m-0S (0) 2NRaRb, - (alquileno (Ci-C3) ) m- OS (0) NRaRb, - (alquileno (Cq-C3) )m-N02, - (alquileno (Cq-C3) ) m- NRaRb, - (alquileno (Ci-C3) )m-N(Ra)C (0)Rb, -(alquileno(Ci-C3))m- N (Ra) C (0) 0Rb, - (alquileno (Ci-C3))m-N(Rc)C(0)NRaRb, -(alquileno- 8 (Ci-C3) )m-N(Ra) S (0)2Rb, - (alquileno (C1-C3) )m-N(Ra) S (0)Rb, (alquileno (C1-C3) )m-SRa, - (alquileno (C1-C3) )m-S (0) Ra, (alquileno (C1-C3) )m-S (0)2Ra, - (alquileno (C1-C3) ) m-S (0) NRaRb, - (alquileno (C1-C3) )m-S (0) 2NRaRb, - (alquileno (C1-C3) )m-0- (alquileno (C1-C3) )m-NRaRb e - (alquileno (C1-C3) ) m-NRa- (alquileno (C1-C3) )-0Rb; em que o referido cicloalquilo (C3-Ci2) , o referido fenilo, o referido heterociclilo com 3 a 12 membros e o referido heteroarilo com 5 a 12 membros são ainda facultativamente substituídos com 1 a 3 grupos seleccionados entre -F, alquilo(C1-C3) , perfluoroalquilo(Οχ-C3) e oxo; cada um dos símbolos Ra, Rb e Rc representa, de um modo independente, H, alquilo(Οχ-Cs) , alcenilo (C2-Cs) , (alquileno (C1-C3) ) m- (cicloalquilo (C3-C8) ) , ~ (alquileno (Οχ- C3) ) m-(cicloalcenilo (C3-C8) ) , alcinilo (C2-C8) , -(alquileno- (C1-C3) ) m-fenilo, - (alquileno (C1-C3) ) m-(heteroarilo com 5 a 7 membros) ou - (alquileno (C1-C3) ) m- (heterociclilo com 3 a 8 membros), e em que cada um dos símbolos Ra, Rb e Rc é, de um modo independente, ainda facultativamente substituído com 1 a 3 grupos seleccionados entre halogeneto, hidroxilo, -CN, alquilo (Οχ-Οε) , perf luoroalquilo (Οχ-Οε) , alcoxilo (Οχ-Οε) e alquil(Cx-C6)-amino; ou, quando ligados ao mesmo azoto, os símbolos Ra e Rb podem formar facultativamente um anel seleccionado entre -(heteroarilo com 5 a 7 membros) e -(heterociclilo com 3 a 8 membros), em que o referido anel é ainda facultativamente substituído com 1 a 3 grupos seleccionados entre halogeneto, hidroxilo, -CN, alquilo(Οχ-Οε) , perf luoroalquilo (Οχ-Οε) , alcoxilo (Οχ-Οε) e alquil (Οχ-Οε) -amino; cada um dos símbolos Rb representa, de um modo independente, H ou alquilo(C1-C3) ; 9 cada um dos símbolos R1, R5, R7 e R9 é ainda, de um modo independente, facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx; cada um dos símbolos Rx representa, de um modo independente, etilo, t-butilo ou R; cada um dos símbolos L representa, de um modo independente, um radical divalente seleccionado entre (alquileno (C1-C3) ) m- (cicloalquileno (C3-C7) ) -, - (alcenileno- (C2-C8))-, - (alcinileno (C2-C8) )-, -0-(alquileno (Ci-C3) )m-, - NH- (alquileno (Ci-C3) ) m-; cada um dos símbolos L1 representa, de um modo independente, um radical bivalente seleccionado entre (alquileno (Ci-C3) )-, -0-, - (alquileno (C1-C3) )-0-, -NÍR1)- e - (alquileno (Ci-C3) )-N (R1) - e cada um dos símbolos m representa, de um modo independente, 0 ou 1; ou um seu sal, solvato ou hidrato farmaceuticamente aceitável.

Encontram-se também descritos aspectos de compostos de fórmula estrutural I. De acordo com o Io aspecto particular desta variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, cada um dos símbolos R2 e R3 representa, de um modo independente, H, alquilo (Ci-C6) e cicloalquilo (C3-Cs) e cada um dos símbolos R2 e R3 é ainda, de um modo independente, facultativamente substituído. Mais particularmente, cada um dos símbolos R2 e R3 é ainda, de um modo independente, facultativamente substituído com 1 a 3 grupos seleccionados entre -F, oxo, alquilo (C1-C3) e perfluoroalquilo (C1-C3) . Ainda mais particularmente, cada um dos símbolos R2 e R3 representa, de um modo independente, H, alquilo (Ci-C3) não substituído 10 e cicloalquilo(C3-C5) não substituído. Muito mais particularmente, o símbolo R2 representa metilo não substituído e o símbolo R3 representa metilo não substituído.

De acordo com o 2o aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, os símbolos R2 e R3, em conjunto com o átomo de carbono ao qual os símbolos R2 e R3 estão ligados, formam um anel seleccionado entre cicloalquileno (C3-C5) e heterociclileno com 3 a 5 membros, em que o referido anel é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o referido anel é ainda facultativamente substituído com 1 a 3 grupos seleccionados entre -F, oxo, alquilo(C1-C3) e perfluoroalquilo (C1-C3) . Ainda mais particularmente, o referido anel é seleccionado entre ciclopropileno, ciclobutileno e ciclopentileno. Muito mais particularmente, o referido anel é ciclopropileno. Mais preferencialmente, o referido anel é ciclopropileno não substituído.

De acordo com a 3o aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes; em especial, com o aspecto particular um ou dois, o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre -(alquileno (C1-C3) ) m-fenilo e -L-fenilo e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx. Mais particularmente, o símbolo R1 representa fenilo facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx.

De acordo com o 4 aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes; em especial, com o aspecto particular um ou dois, o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre - 11 (alquileno (C1-C3) )m- (cicloalquilo (C3-C12) ) e -L- (ciclo-alquilo (C3-C12) ) e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx. Mais particularmente, o símbolo R1 representa cicloalquilo(C3-C12) ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx. Ainda mais particularmente, o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo e ciclo-hexilo; e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx.

De acordo com o 5o aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com o aspecto particular um ou dois, o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre - (alquileno (C1-C3) )m-(heteroarilo com 5 a 10 membros) e -L-(heteroarilo com 5 a 10 membros) e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx. Mais particularmente, o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre heteroarilo com 5 a 10 membros ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx. Ainda mais particularmente, o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre piridinilo, tiofenilo, tiazolilo e imidazolilo e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx.

De acordo com o 6o aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com o aspecto particular um ou dois, o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre - (alquileno (C1-C3) ) m-(heterociclilo com 3 a 10 membros) e -L-(heterociclilo com 3 a 10 membros) e o símbolo R1 é 12 ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx. Mais particularmente, o símbolo R1 representa um heterociclilo com 3 a 10 membros ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx. Ainda mais particularmente, o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre tetra-hidrofuranilo, tetra-hidropiranilo e morfolinilo, e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx.

De acordo com o 7o aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com o aspecto particular um ou dois, o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre - (alquileno (Ci-C3) ) m-(carbociclilo (C3-C12) não aromático insaturado) e -L- (carbociclilo (C3-C12) não aromático insaturado) e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx. Muito mais particularmente, o símbolo R1 representa um carbociclilo(C3-C12) não aromático insaturado ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx.

De acordo com o 8o aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com o aspecto particular um ou dois, o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre alquilo (Ci-C8) , alcenilo (C2-C8) e alcinilo (C2-C8) e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx.

De acordo com o 9o aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com o aspecto particular 13 um ou dois, o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre -L- (alquilo (Ci-Ce) ) , -L-(alcenilo (C2-C8) ) e -L- (alcinilo (C2-C8) ) e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx.

De acordo com o 10° aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com o aspecto particular um ou dois, o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre alquilo (Ci-Ce) , -(alquileno(C1-C3) ) m-fenilo, -(ciclo- alquileno (C3-C5) ) -fenilo, - (alquileno (C1-C3) )m- (heteroarilo com 5 ou 6 membros), - (cicloalquileno(C3-C5))-(heteroarilo com 5 ou 6 membros), - (alquileno (C1-C3) ) m- (cicloalquilo (C3-C10) ) , - (alquileno (C1-C3) )m-(cicloalcenilo (C5-C10) ) , (alquileno-(C1-C3) ) m-(heterociclilo com 3 a 8 membros) e -(cicloalquileno(C3-C5))-(heterociclilo com 3 a 8 membros) e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx.

De acordo com o 11° aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com o aspecto particular um ou dois, o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre alquilo (Ci-C8) , fenilo, - (alquileno (C1-C3) )-fenilo, -(ciclopropileno)-fenilo, piridinilo, -(alquileno (C1-C3) ) -piridinilo, -(ciclopropileno)-piridinilo, tiofenilo, tiazolilo, imidazolilo, -ciclopropilo, -ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, tetra-hidrofuranilo, tetra-hidropiranilo, morfolinilo, e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre oxo e Rx.

De acordo com o 12° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares 14 não inconsistentes, em especial, com os aspectos particulares dois a onze, o simbolo R1 é ainda facultativamente substituido com 1 a 6 grupos seleccionados entre alquilo (C1-C3) , perfluoroalquilo (C1-C3) , oxo, -(alquileno(C1-C3) )m-halogeneto, -(alquileno(C1-C3) )m-CN, - (alquileno (C1-C3) )m-0H, - (alquileno (C1-C3) )m-0Rd, -(alquileno- (C1-C3) )m-NH2, - (alquileno (C1-C3) )m- (mono-alquil (Ci-C6) - amino) , - (alquileno (C1-C3) )m- (di-alquil (C2-C8) -amino) , - (alquileno (C1-C3) ) m-CONRdRe, em que cada um dos simbolos Rd e Re representa, de um modo independente, H ou alquilo(Ci-C3) . Mais particularmente, o simbolo R1 é ainda facultativamente substituido com 1 a 3 grupos seleccionados entre -F, alquilo (C1-C3) , alcoxilo (C1-C3) e perfluoro-alquilo (C1-C3) .

De acordo com o 13° aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com os aspectos particulares dois a doze, o simbolo R4 representa -OR6-R7.

De acordo com o 14° aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com os aspectos particulares 2 a 12, o simbolo R4 representa -N(Rt)R6-R7, em que o simbolo Rd representa H ou alquilo (C1-C3) . Mais preferencialmente, o simbolo R4 representa -NH-R6-R7.

De acordo com o 15° aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com os aspectos particulares 2 a 12, o simbolo R4 representa -CH (R4) -R6-R7, em que o simbolo Rd representa H ou alquilo (C1-C3) . Mais preferencialmente, o simbolo R4 representa -CH2-R6-R7. 15

De acordo com o 16° aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com os aspectos particulares 13 a 15, o simbolo R6 representa -(hetero-ciclileno com 3 a 7 membros)-, e o simbolo R6 é facultativamente substituido. Mais preferencialmente, o simbolo R6 representa um grupo seleccionado entre aziridinilo, azitidinilo, pirrolidinilo e piperidinilo, e o simbolo R6 é ainda facultativamente substituido. Ainda mais preferencialmente, o simbolo R6 é ainda facultativamente substituido com 1 a 4 grupos seleccionados entre -F, alquilo (C1-C3) , perfluoroalquilo (C1-C3) e oxo. Muito mais preferencialmente, o simbolo R6 representa um grupo seleccionado entre aziridinilo não substituido, azitidinilo não substituido, pirrolidinilo não substituido e piperidinilo não substituido.

De acordo com o 17° aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com os aspectos particulares 13 a 15, o simbolo R6 representa um grupo seleccionado entre -ciclopropileno-, -ciclobutileno- e -ciclopentileno-, o simbolo R6 é ainda facultativamente substituido. Mais particularmente, o simbolo R6 representa -ciclopropileno- ainda facultativamente substituido com 1 a 4 grupos seleccionados entre oxo, -F, alquilo(C1-C3) e perfluoroalquilo(C1-C3). Muito mais particularmente, o simbolo R6 representa ciclopropileno não substituido.

De acordo com o 18° aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos 16 particulares treze a dezassete, o símbolo R7 representa fenilo e o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 19° aspecto particular da variante e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 13 a 17, o símbolo R7 representa heteroarilo com 5 membros que contêm 1 a 3 heteroátomos seleccionados entre N, S e 0, e o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o símbolo R7 representa heteroarilo com 5 membros que contém 1 a 2 heteroátomos N, e o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 20° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 13 a 17, o símbolo R7 representa heteroarilo com 6 membros que contém 1 a 3 heteroátomos seleccionados entre N, S e 0, e o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o símbolo R7 representa heteroarilo com 6 membros que contém 1 a 2 heteroátomos N, e o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 21° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 18 a 20, o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre -F, alquilo (C1-C3) , perfluoroalquilo (C1-C3) . Mais preferencialmente, o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre halogeneto e alquilo (C1-C3) .

De acordo com o 22° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares 17 não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 12, o símbolo R4 representa um grupo seleccionado entre -O-CH(R ) -R .

De acordo com o 23° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 12, o símbolo R4 representa -B-(alquileno (Ci-C3) )-CH (R8)-R9, em que o símbolo B representa -0-, -NRt- ou -CH(Rt)- e em que o símbolo Rt representa H ou alquilo (C1-C3) . Mais preferencialmente, o símbolo Rt representa H.

De acordo com o 24° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 12, o símbolo R4 representa um grupo seleccionado entre -N (Rfc) CH (R8) R9, em que o símbolo Rfc representa H ou alquilo(C1-C3).

De acordo com o 25° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 12, o símbolo R4 representa um grupo seleccionado entre -CH (Rt)-CH (R8)-R9, em que o símbolo Rfc representa H ou alquilo(C1-C3).

De acordo com o 26° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com o aspecto particular 23, 24 ou 25, o símbolo Rfc representa H.

De acordo com o 27° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 22 a 26, o símbolo R8 representa -(alquileno- 18 (Ci-Cs) )m-NRpRq, em que cada um dos símbolos Rp e Rq representa, de um modo independente, H ou alquilo (C1-C3) . Mais particularmente, o símbolo R8 representa um grupo seleccionado entre -CH2-N- (CH3) 2, -CH2-NH-CH3 e -CH2-NH2.

De acordo com o 28° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial, com os aspectos particulares 22 a 26, o simbolo R8 representa -(alquileno-(Ci-Cs) ) m-NRpRq, em que os símbolos Rp e Rq, em conjunto com o átomo de azoto ao qual se encontram ligados, formam um anel seleccionado entre heterociclilo com 3 a 7 membros e heteroarilo com 5 a 7 membros, em que o referido anel é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre halogeneto, alquilo(C1-C3) e perfluoro-alquilo (C1-C3) .

De acordo com o 29° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 22 a 28, o símbolo R9 representa fenilo e o símbolo R9 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 30° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 22 a 28, o símbolo R9 representa um heteroarilo com 6 membros que contém 1 a 2 heteroátomos N, e o símbolo R9 é ainda facultativamente substituído. Mais preferencialmente, o símbolo R9 representa piridinilo e o símbolo R9 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 31° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos 19 particulares 22 a 28, o símbolo R9 representa heteroarilo com 5 membros que contém 1 a 2 heteroátomos N e o símbolo R9 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 32° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 22 a 28, o símbolo R9 representa ciclo-alquilo(C5-C7) e o símbolo R9 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 33° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 22 a 28, o símbolo R9 representa heterociclilo com 5 a 7 membros que contém 1 a 2 heteroátomos seleccionados entre N, S e 0, e o símbolo R9 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 34° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 22 a 33, o símbolo R9 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre (alquileno(C1-C3))m-halogeneto, -(alquileno(C1-C3) ) m- hidroxilo, - (alquileno (C1-C3) ) m-CN, alquilo (C1-C6) , perf luoroalquilo (Ci-Cõ) , - (alquileno (C1-C3) ) m- (alcoxilo (Ci- C8) ) , - (alquileno (C1-C3) )m-NH2 e - (alquileno (C1-C3) )m- (alquil(Ci-C6)-amino). Mais particularmente, o símbolo R9 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre -F, alquilo(C1-C3) , perfluoroalquilo(Ci-C3) , alcoxilo (C1-C3) e oxo.

De acordo com o 35° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares 20 não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 1 a 12 e os aspectos particulares 29 a 34, o símbolo R4 representa -O-(alquileno (C1-C3) ) m-CH (R10) R9. Mais particularmente, o símbolo R4 representa -O-CH (R10) R9. Ainda mais particularmente, o símbolo R10 representa um grupo seleccionado entre alquilo (Ci-Cô) , - (alquileno (Cq-Ce) )m- (alcoxilo (Ci-C6) ) e - (alquileno (C1-C3) )m_ (heterociclo com 3 a 6 membros) e o símbolo R10 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 36° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 1 a 12 e os aspectos particulares 29 a 34, o símbolo R4 representa -NR1"- (alquileno (C1-C3) ) m-CH (R10) R9. Mais particularmente, o símbolo R4 representa -NRt-CH(R10)R9. Ainda mais particularmente, o símbolo Rfc representa H. Muito mais particularmente, o símbolo R10 representa um grupo seleccionado entre alquilo(Ci-Ce) , - (alquileno (Ci-C6) ) m-alcoxilo (Ci-C8) ) e - (alquileno (C1-C3) ) m-(heterociclilo com 3 a 6 membros) e o símbolo R10 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 37° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 1 a 12 e os aspectos particulares 29 a 34, o símbolo R4 representa -CHR11- (alquileno (C1-C3) ) m-CH (R10) R9. Mais particularmente, o símbolo R4 representa -CHR11-CH(R10)R9. Ainda mais particularmente, o símbolo Rfc representa H. Muito mais particularmente, o símbolo R10 representa um grupo seleccionado entre alquilo(Οχ-Οβ), - (alquileno (Ci-C6) )m-(alcoxilo (Ci-C6) ) e - (alquileno (Ci- 21 C3) ) m_ (heterociclilo com 3 a 6 membros) e o símbolo R10 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 38° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, o símbolo R2 representa metilo não substituído; o símbolo R3 representa metilo não substituído; o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre o conjunto constituído por alquilo (Ci-Cs) , -(alquileno-(C1-C3) )m-fenilo, - (cicloalquileno (C3-C7) ) -fenilo, - (alquileno (C1-C3) )m_ (cicloalquilo (C3-C12) ) , - (cicloalquileno- (C3-C7) ) - (cicloalquilo (C3-C12) ) , - (alquileno (C1-C3) )m_ (carbociclilo (C3-C12) não aromático insaturado), -(cicloalquileno (C3-C7) - (carbociclilo (C3-C12) não aromático insaturado), - (alquileno (C1-C3) ) m_ (heteroarilo com 5 a 10 membros), - (cicloalquileno(C3-C7))_(heteroarilo com 5 a 10 membros), -(alquileno(C1-C3) ) m-(heterociclilo com 3 a 10 membros) e - (cicloalquileno(C3-C7))- (heterociclilo com 3 a 10 membros), e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre o conjunto constituído por alquilo (C1-C3) , - (alquileno (C1-C3) ) m- (cicloalquilo (C3-C5) ) , - (alquileno (C1-C3) ) m-(heterociclilo com 3 a 6 membros ainda facultativamente substituído com 1 a 2 metilo), F, Cl, -CN, perfluoroalquilo(C1-C3), -(alquileno- (C1-C3) ) m-NH2, - (alquileno (C1-C3) ) m~NH (alquilo(Ci-C4)), - (alquileno (C1-C3) ) m-N (alquilo (C1-C4) ) - (alquilo (C1-C4) ) , -(alquileno(C1-C3))m-NH-(cicloalquilo(C3-C5) ) , -(alquileno- (C1-C3) )m-OH, - (alquileno (C1-C3) )m-0- (alquilo (C1-C4) ) , - (alquileno (C1-C3) )m-0- (cicloalquilo (C3-C5) ) , ~ (alquileno (Ci — C3) )m-C (O) -NH2, - (alquileno (C1-C3) )m-C (O) -NH- (alquilo (C1-C4) ) e - (alquileno (C1-C3) ) m-C (O)-N (alquilo (C1-C4) ) (alquilo (Ci- C4) ) · 22

De acordo com o 39° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, o simbolo R2 representa metilo não substituído; o símbolo R3 representa metilo não substituído; o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre o conjunto constituído por alquilo (Ci-Cs) , ciclo-alquilo (C3-C8) , fenilo, - (alquileno (C1-C3) )-fenilo, -(ciclo-propileno)-fenilo, -piridinilo, -(alquileno(Ci~C3) ) - piridinilo, -(ciclopropileno)-piridinilo, -pirimidinilo, - (alquileno (Ci-C3) ) -pirimidinilo, - (ciclopropileno) - pirimidinilo, tiofenilo, -(alquileno (Ci~C3) )-tiofenilo, (ciclopropileno)-tiofenilo, pirazolilo, -(alquileno(Ci-C3))-pirazolilo, - (ciclopropileno)-pirazolilo, tetra-hidrofuranilo, -(alquileno(C1-C3))-tetra-hidrofuranilo, -(ciclopropileno(Ci~C3))-tetra-hidrofuranilo, tetra-hidro-piranilo, -(alquileno(Ci~C3))-tetra-hidropiranilo, - (ciclopropileno (C1-C3))-tetra-hidropiranilo, morfolinilo, -(alquileno(C1-C3))-morfolinilo, - (ciclopropileno)- morfolinilo, imidazolilo, - (alquileno(Ci-C3))-imidazolilo, - (ciclopropileno)-imidazolilo, tiazolilo, -(alquileno(Ci- C3))-tiazolilo, - (ciclopropileno)-tiazolilo, isotiazolilo; -(alquileno(C1-C3))-isotiazolilo, - (ciclopropileno)- isotiazolilo, oxazolilo, - (alquileno(Ci-C3))-oxazolilo, - (ciclopropileno)-oxazolilo, isoxazolilo, -(alquileno(Ci- C3))-isoxazolilo, -(ciclopropileno)-isoxazolilo, benzotiofenilo, -(alquileno(Ci-C3))-benzotiofenilo, -(ciclo propileno) -benzotiofenilo, benzotiazolilo, -(alquileno (Ci-C3))-benzotiazolilo, -(ciclopropileno)-benzotiazolilo, di-hidrobenzofuranilo, - (alquileno (Ci~C3) ) -di-hidrobenzo- furanilo, -(ciclopropileno)-di-hidrobenzofuranilo, pirazinilo, -(alquileno(Ci-C3))-pirazinilo e - (ciclo- 23 23 o símbolo R é ainda propileno)-pirazinilo, em que facultativamente substituído com 1 a 3 grupos seleccionados entre F, Cl, alquilo (C1-C3) / perf luoroalquilo (C1-C3) e alcoxilo (C1-C3) .

De acordo com o 40° aspecto particular desta variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, os símbolos R2 e R formam um grupo ciclopropileno.

Também se encontram descritos compostos de fórmula estrutural II:

em que: o símbolo B representa -O-, -NRt- ou -CHR11-, em que o símbolo Rfc representa H ou alquilo (C1-C3) ; o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre - (alquileno (C1-C3) )m-fenilo -(alquileno(C1-C3) ) m-(cicloalcenilo(C5- alquilo (Ci-Ce) , - (al< alquileno (C3-C5) ) -fenilo alquilo (C3-C10) ) , -( !i-C3) )m-fenilo, - (ciclo- -(alquileno(C1-C3) )m-(ciclo-

Cio)), - (alquileno (C1-C3) ) m-(heterociclilo com 3 a 10 membros), -(cicloalquileno(C3-C5))-(heterociclilo com 3 a 10 membros), -(alquileno(C1-C3) )m-(heteroarilo com 5 a 12 membros) e - (cicloalquileno(C3-C5))-(heteroarilo com 5 a 12 membros), e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre -(alquileno-(C1-C3) ) m-halogeneto, - (alquileno (C1-C3) ) m-hidroxilo, - (alquileno (C1-C3) ) m-CN, alquilo (Ci-Cs) , perf luoroalquilo (Ci — 24

Ce), - (alquileno (C1-C3) ) m-(alcoxilo (Ci-Cô) ) / - (alquileno (Ci~ C3) )m-NH2, - (alquileno (C1-C3) )m- (alquil (Ci-C6) -amino) , - (alquileno (C1-C3) ) m-(cicloalquilo (C3-C5) ) e -(alquileno (Ci-C3) ) m- (heterociclilo com 3 a 5 membros), em que o referido cicloalquilo (C3-C5) e o referido heterociclilo com 3 a 5 membros são ainda facultativamente substituídos com 1 a 3 grupos seleccionados entre -F, alquilo(C1-C3), perfluoro-alquilo (C1-C3) e oxo; cada um dos símbolos R2 e R3 representa, de um modo independente, alquilo (C1-C3) ou então os símbolos R2 e R3, em conjunto com o átomo de carbono ao qual os símbolos R2 e R3 estão ligados, formam um cicloalquileno(C3-C4); o símbolo R6 representa um radical divalente seleccionado entre ciclopropileno, ciclobutileno, ciclopentileno e -(heterociclileno com 3 a 6 membros)-, o símbolo R6 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre halogeneto, alquilo (C1-C3) , oxo e perf luoroalquilo (C1-C3) , o símbolo R7 representa um grupo seleccionado entre fenilo, heteroarilo com 5 membros, piridinilo, heteroarilo com 6 membros que contém 2 a 3 heteroátomos seleccionados entre N, S e 0, heteroarilo com 7 a 10 membros e heterociclilo com 3 a 12 membros, o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre halogeneto, -perfluoroalquilo (C1-C3) , alquilo (C1-C3) , alcoxi (C1-C3) , alquil (C1-C3)-amino, -OH, -NH2 e -CN; cada um dos símbolos m representa, de um modo independente, 0 ou 1 ou um seu sal, solvato ou hidrato farmaceuticamente aceitável.

Também se encontram descritos aspectos dos compostos de fórmula estrutural II. 25

De acordo com o Io aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, o símbolo B representa -0-.

De acordo com o 2o aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, o símbolo B representa -NR11-. Mais particularmente, o símbolo Rt representa H. Ainda mais particularmente, o símbolo R1 representa alquilo(C1-C3) .

De acordo com o 3o aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, o símbolo B representa -CHRt-. Mais particularmente, o símbolo R1 representa H. Ainda mais particularmente, o símbolo Rfc representa alquilo(C1-C3) .

De acordo com o 4o aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 3, o símbolo R2 representa metilo e o símbolo R3 representa metilo.

De acordo com o 5o aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 4, o símbolo R1 representa alquilo(Ci-C8) e o símbolo R' é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 6o aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 4, o símbolo R1 representa fenilo e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 7o aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos 26 particulares 2 a 4, o símbolo R' representa -(alquileno(Ci— C3))-fenilo e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 8o aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 4, em que o símbolo R1 representa -(ciclo-alquileno (C3-C5) )-fenilo e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 9o aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 4, o símbolo R1 representa heteroarilo com 5 a 10 membros e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído, mais particularmente, o heteroarilo com 5 a 10 membros é seleccionado entre piridinilo, tiofenilo, tiazolilo e imidazolilo, e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 10° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 4, o símbolo R1 representa -(alquileno(Ci-C3) )-(heteroarilo com 5 a 10 membros) e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o heteroarilo com 5 a 10 membros é seleccionado entre piridinilo, tiofenilo, tiazolilo e imidazolilo e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 11° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 4, o símbolo R1 representa -(ciclo- 27 alquileno (C3-C5) ) - (heteroarilo com 5 a 10 membros) e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o heteroarilo com 5 a 10 membros é seleccionado entre piridinilo, tiofenilo, tiazolilo e imidazolilo e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 12° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 4, o símbolo R1 representa -(alquileno(Ci-C3) ) - (cicloalquilo (C3-C10) ) e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o cicloalquilo (C3-C10) é seleccionado entre ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo e ciclo-hexilo e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 13° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 4, o símbolo R1 representa cicloalquilo (C3-C10) e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o cicloalquilo(C3-C10) é seleccionado entre ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo e ciclo-hexilo e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 14° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 4, o símbolo R1 representa -(alquileno (Ci-C3) ) - (cicloalcenilo (C5-10) ) e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 15° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares 28 não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 4, o simbolo R1 representa ciclo-alcenilo (C5-C10) e o simbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 16° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 4, o simbolo R1 representa -(alquileno(Ci— C3) ) - (heterociclilo com 3 a 10 membros) e o simbolo R1 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o heterociclilo com 3 a 10 membros é seleccionado entre tetra-hidrofuranilo, tetra-hidropiranilo e morfolinilo e o simbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 17° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 4, o simbolo R1 representa -(ciclo-alquileno (C3-C5) )-(heterociclilo com 3 a 10 membros) e o simbolo R1 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o heterociclilo com 3 a 10 membros é seleccionado entre tetra-hidrofuranilo, tetra-hidropiranilo e morfolinilo e o simbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 18° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 4, o simbolo R1 representa heterociclilo com 3 a 10 membros e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o heterociclilo com 3 a 10 membros é seleccionado entre tetra-hidrofuranilo, tetra- 29 hidropiranilo e morfolinilo e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 19° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 18, o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre halogeneto, alquilo(C1-C3), perfluoroalquilo(C1-C3), -OH, alcoxi (C1-C3) , -NH2, alquil (C1-C3)-amino e CN.

De acordo com o 20° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 19, o símbolo R6 representa ciclopropileno ainda facultativamente substituído. Mais preferencialmente, o símbolo R6 representa ciclopropileno não substituído.

De acordo com o 21° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 to 19, o símbolo R6 representa ciclobutileno facultativamente substituído. Mais preferencialmente, o símbolo R6 representa ciclobutileno não substituído.

In the 22° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 19, o símbolo R6 representa - (heterociclileno com 3 a 6 membros)- e o símbolo R6 é facultativamente substituído. Mais preferencialmente, o símbolo R6 é seleccionado entre aziridinilo, azitidinilo, pirrolidinilo e piperidinilo e o símbolo R6 é ainda facultativamente substituído. Ainda mais preferencialmente, o símbolo R6 é ainda facultativamente substituído com 1 a 4 grupos seleccionados entre -F, 30 alquilo (C1-C3) e oxo. Muito mais preferencialmente, o simbolo R6 é seleccionado entre aziridinilo não substituído, azitidinilo não substituído, pirrolidinilo não substituído e piperidinilo não substituído.

De acordo com o 23° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 19, o simbolo R6 representa ciclopentileno e o simbolo R6 é facultativamente substituído. Mais preferencialmente, o símbolo R6 representa ciclopentileno não substituído.

De acordo com o 24° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 23, o símbolo R7 representa fenilo e o símbolo R7 é facultativamente substituído. Mais particularmente, o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre halogeneto, alquilo (C1-C3) e perfluoroalquilo (C1-C3) .

De acordo com o 25° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 23, o símbolo R7 representa piridinilo e o símbolo R7 é facultativamente substituído. Mais particularmente, o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre halogeneto, alquilo (C1-C3) e perf luoroalquilo (C1-C3) .

De acordo com o 26° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 23, o símbolo R7 representa heteroarilo 31 com 5 membros e o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre halogeneto, alquilo(Ci-C3) e perfluoroalquilo(Ci-C3) .

De acordo com o 21° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 23, o símbolo R7 representa heteroarilo com 6 membros que contém 2 a 3 heteroátomos seleccionados entre N, S e 0, e o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre halogeneto, alquilo(C1-C3) e perfluoroalquilo(C1-C3) .

De acordo com o 28° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 23, o símbolo R7 representa heteroarilo com 7 a 10 membros e o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre halogeneto, alquilo(Ci-C3) e perfluoroalquilo(Ci-C3) .

De acordo com o 29° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 2 a 23, o símbolo R7 representa heterociclilo com 3 a 12 membros e o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre halogeneto, alquilo(Ci-C3) e perfluoroalquilo(C1-C3) .

De acordo com o 30° aspecto particular da variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares 32 não inconsistentes, o simbolo R2 representa metilo; o srmbolo R representa metilo; o simbolo B representa -0-, -NH- ou -CH2; o simbolo R1 representa um grupo seleccionado entre o conjunto constituído por alquilo(Ci-Cg), fenilo, -(alquileno(C1-C3))-fenilo, - (ciclopropileno)-fenilo, ciclo-alquilo (C3-C10) , - (alquileno (C1-C3) ) - (cicloalquilo (C3-C10) ) , heterociclilo com 3 a 10 membros, -(alquileno(C1-C3) )-(heterociclilo com 3 a 10 membros), - (ciclopropileno)-(heterociclilo com 3 a 10 membros), heteroarilo com 5 a 12 membros, - (alquileno (C1-C3) )- (heteroarilo com 5 a 12 membros) e -(ciclopropileno)-(heteroarilo com 5 a 12 membros) e o simbolo R1 é ainda facultativamente substituido com 1 a 6 grupos seleccionados entre F, Cl, hidroxilo, CN, alquilo (Ci~Ce) , perf luoroalquilo (Ci-Ce) e -(alquileno (C1-C3) ) m-(alcoxilo (C1-C6) ) . De preferência, o simbolo R6 representa ciclopropileno não substituido ou ciclopropileno substituído com 1 a 3 grupos seleccionados entre F, Cl, alquilo (C1-C3) e perf luoroalquilo (C1-C3) . Também preferencialmente, o símbolo R7 representa um grupo seleccionado entre o conjunto constituído por fenilo, heteroarilo com 5 a 6 membros e heterociclilo com 4 a 7 membros e o símbolo R7 é ainda facultativamente substituído com 1 a 3 grupos seleccionados entre F, Cl, alquilo(C1-C3) , perf luoroalquilo (C1-C3) e alcoxilo (C1-C3) .

De acordo com o 31° aspecto particular desta variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, os símbolos R2 e R3 formam um grupo ciclopropileno não substituído.

A presente invenção proporciona um composto de fórmula estrutural III 33

em que: o símbolo B representa -0-; o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre alquilo (Ci-Cs) , (heterociclilo com 3 a 10 membros) e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre -halogeneto, -hidroxilo, -CN, alquilo (C1-C3) , perfluoroalquilo (C1-C3) , - (alcoxilo (C1-C3) ) , -NH2, - (alquil (C1-C3) -amino) ; cada um dos símbolos R2 representa metilo e o símbolo R3 representa metilo; o símbolo R8 representa um grupo seleccionado entre — CH2—N— (CH3) 2, -CH2-NH-CH3 e -CH2NH2 e o símbolo R9 representa fenilo, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

De acordo com o Io aspecto particular desta variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, o símbolo R1 representa alquilo (Οχ-Οβ) e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 2o aspecto particular desta variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 1, o símbolo R1 representa heterociclilo com 3 a 10 membros e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído. Mais particularmente, o heterociclilo com 3 a 10 membros é seleccionado entre tetra-hidrofuranilo, tetra- 34 hidropiranilo e morfolinilo e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído.

De acordo com o 3o aspecto particular desta variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 1 a 2, o composto apresente a estereoquímica do composto de fórmula estrutural Illa:

De acordo com o 4o aspecto particular desta variante, e em combinação com quaisquer outros aspectos particulares não inconsistentes, em especial com os aspectos particulares 1 a 3, o composto apresenta um enriquecimento enantiomérico do isómero enantiomérico de fórmula estrutural Illa superior a 80%. De preferência, o composto apresenta um enriquecimento enantiomérico do isómero enantiomérico de fórmula estrutural Illa superior a 90%. Mais preferencialmente, o composto apresente um enriquecimento enantiomérico do isómero enantiomérico de fórmula estrutural Illa superior a 95%.

Encontram-se descritos compostos seleccionados entre o conjunto constituído por 35 e

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ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Encontram-se descritos compostos e compostos da invenção seleccionados entre o conjunto constituído por

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ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Encontram-se descritos compostos e compostos da invenção seleccionados entre o conjunto constituído por 38

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Encontram-se descritos compostos seleccionados entre o conjunto constituído por 39 e

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De acordo com outra variante, a presente invenção proporciona um método para o tratamento de crescimento anormal de células num mamifero, o qual compreende a administração, ao mamifero, do composto da presente invenção. Mais particularmente, o crescimento anormal de células é cancro.

Ainda de acordo com outra variante, a presente invenção proporciona uma composição farmacêutica que compreende um composto da invenção.

Ainda de acordo com outra variante, a presente invenção proporciona uma composição farmacêutica que 40 compreende um composto da invenção e um veículo farmaceuticamente aceitável.

Ainda de acordo com outra variante, a presente invenção proporciona um método para o tratamento de uma doença de um mamífero mediada pela actividade de proteína-cinase, o qual compreende a administração, ao mamífero, de uma quantidade terapeuticamente aceitável de um composto, sal, hidrato ou solvato da invenção. De acordo com um aspecto desta variante, a doença do mamífero é o crescimento de um tumor ou a proliferação anormal de células.

Ainda de acordo com outra variante, a presente invenção proporciona um método para modular a actividade de uma proteína-cinase, o qual compreende fazer contactar a proteína-cinase com uma quantidade eficaz de um composto, ou de um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitável de acordo com a invenção. De acordo com um aspecto desta variante, a proteína-cinase é uma proteína-cinase PAK4.

De acordo com algumas variantes, a presente invenção proporciona composições farmacêuticas que compreendem qualquer um dos compostos aqui descritos e um veículo farmaceuticamente aceitável. Os exemplos de tais composições encontram-se descritos a seguir.

De acordo com algumas variantes, a presente invenção proporciona um método para o tratamento do crescimento anormal de células num mamífero, incluindo um ser humano, em que o método compreende a administração, ao mamífero, de um qualquer composto ou composição farmacêutica de acordo com a presente invenção.

De acordo com algumas variantes, o crescimento anormal de células é cancro, incluindo, mas sem que isso constitua 41 qualquer limitação, cancro do pulmão, cancro ósseo, cancro do pâncreas, cancro da pele, cancro da cabeça e do pescoço, melanoma cutâneo ou intraocular, cancro do útero, cancro do ovário, cancro rectal, cancro da região anal, cancro do estômago, cancro do cólon, cancro da mama, cancro uterino, carcinoma das trompas de Falópio, carcinoma de endométrio, carcinoma do colo do útero, carcinoma da vagina, carcinoma da vulva, doença de Hodgkin, cancro do esófago, cancro do intestino delgado, cancro do sistema endócrino, cancro da glândula tiróide, cancro da glândula paratiróide, cancro da glândula adrenal, sarcoma de tecido mole, cancro da uretra, cancro do pénis, cancro da próstata, leucemia crónica ou aguda, linfomas linfociticos, cancro da bexiga, cancro do rim ou ureter, carcinoma de células renais, carcinoma da bacia renal, neoplasmas do sistema nervoso central (SNC), linfoma do SNC primário, tumores da coluna, glioma do tronco cerebral, adenoma pituitário ou uma combinação de um ou vários dos cancros referidos. De acordo com algumas variantes, o referido crescimento anormal de células é uma doença proliferativa benigna, incluindo, mas sem que isso constitua qualquer limitação, psoriase, hipertrofia prostática benigna ou retinose.

De acordo com algumas variantes, o método compreende ainda a administração, a um mamífero, de uma quantidade de uma ou mais substâncias seleccionadas entre agentes anti-tumor, agentes anti-angiogénese, inibidores da transdução do sinal e agentes anti-proliferativos, quantidades essas que, em conjunto, são eficazes para o tratamento do referido crescimento anormal de células. Tais substâncias compreendem as descritas nas publicações PCT nos WO 00/38715, WO 00/38716, WO 00/38717, WO 00/38718, WO 42 00/38719, WO 00/38730, WO 00/38665, WO 00/37107 e WO 00/38786, cujas descrições se consideram aqui incorporados por referência na sua totalidade.

Como exemplos de agentes anti-tumor refere-se inibidores mitóticos, por exemplo, derivados vinca-alcalóides, tais como vinblastina, vinorelbina, vindescina e vincristina; colquinas, alocoquina, halicondrina, ácido colquicinico do éster N-benzoiltrimetil-metilico, dolastatina 10, maistansina, rizoxina, taxanos, tais como taxol (paclitaxel), docetaxel (Taxotere), 2'-N-[3-(dimetilamino)-propil]-glutaramato (derivado de taxol), tiocolquicina, tritil-cisteína, teniposido, metotrexato, azatioprina, fluorouricilo, citocina arabinosido, 2121 — difluorodesoxicitidina (gemcitabina) , adriamicina e mitamicina. Agentes de alquilação, por exemplo, cis-platina, carboplatina, oxiplatina, iproplatina, éster etilico de N-acetil-DL-sarcosil-L-leucina (Asaley ou Asalex), ácido 1,4-ciclo-hexadieno-l,4-dicarbâmico, éster 2,5-bis-(1-azirdinil)-3,6-dioxo-dietílico (diaziquona), 1,4-bis-(metano-sulfoniloxi)-butano (bisulfano ou leucosulfano), clorozotocina, clomesona, cianomorfolino-doxorubicina, ciclodisona, dianidroglactitol, fluorodopano, hepsulfam, mitomicina C, hicanteonomitomicina C, mitozolamida, dicloridrato de 1-(2-cloroetil)-4-(3-cloro-propil)-piperazina, piperazinadiona, pipobromano, porfiromicina, mostarda de espiro-hidantoina, teroxirona, tetraplatina, tiotepa, trietilenomelamina, mostarda de uracil-azoto, cloridrato de bis-(3-mesiloxipropil)-amina, mitomicina, agentes nitroso-ureias, tais como ciclo-hexil-cloroetilnitroso-ureia, metilciclo-hexil-cloroetilnitroso-ureia, 1- (2-cloroetil)-3-(2,6-dioxo-3-piperidil)-1-nitroso- 43 ureia, bis-(2-cloroetil)-nitroso-ureia, procarbazina, dacarbazina, compostos associados a mostarda de azoto, tais como mecloroetamina, ciclofosfamida, ifosamida, melfalano, clorambucilo, fosfato de estramustina-sódio, estreptozoina e temozolamida. Anti-metabolitos de ADN, por exemplo, 5-fluorouracilo, citosina arabinosido, hidroxi-ureia, 2 —[(3 — hidroxi-2-pirinodinil)-metileno]-hidrazinacarbotioamida, desoxifluorouridina, tiosemicarbazona de 5-hidroxi-2-formilpiridina, alfa-2'-desoxi-6-tioguanosina, glicinato de afidicolina, 5-azadesoxicitidina, beta-tioguanina desoxiribosido, ciclocitidina, guanazole, inosina glicodialdeido, macbecina II, pirazolimidazole, cladribina, pentostatina, tioguanina, mercaptopurina, bleomicina, 2-clorodesoxiadenosina, inibidores de timidilato sintase, tais como raltitrexed e pemetrexed dissódico, clofarabina, floxuridina e fludarabina. Anti-metabolitos de ADN/ARN, por exemplo, L-alanosina, 5-azacitidina, acivicina, aminopterina e seus derivados, tais como ácido N-[2-cloro-5-[[(2,4-diamino-5-metil-6-quinazolinil)-metil]-amino]-benzoil]-L-aspártico, ácido N-[4-[[(2,4-diamino-5-etil-6-quinazolinil)-metil]-amino]-benzoil]-L-aspártico, ácido N-[2-cloro-4-[[(2, 4-diaminopteridinil)-metil]-amino]-benzoil]-L-aspártico, antifol de Baker solúvel, dicloroalilo lawsona, brequinar, ftoraf, di-hidro-5-azacitidina, metotrexato, sal tetra-sódio do ácido N-(fosfonoacetil)-L-aspártico, pirazofurano, trimetrexato, plicamicina, actinomicina D, criptoficina e análogos, tais como criptoficina-52 ou, por exemplo, um dos anti-metabolitos preferidos descritos no pedido de patente de invenção europeia n° 239362, tais como ácido N-(5-[N-(3,4-di-hidro-2-metil-4-oxoquinazolina-6-ilmetil)-N-metilamino]-2-tenoíl)- 44 L-glutâmico; inibidores do factor de crescimento; inibidores do ciclo celular; antibióticos intercalados, por exemplo, adriamicina e bleomicina; proteínas, por exemplo, interferão; e anti-hormonas, por exemplo, anti-estrogénios, tais como Nolvadex” (tamoxifeno) ou, por exemplo, anti-androgénios, tais como Casodex™ (4'-ciano-3-(4-fluoro-fenilsulfonil)-2-hidroxi-2-metil-3'-(trifluorometil)-propionanilida). Um tal tratamento em conjunto pode ser alcançado por meio de dosagem em simultâneo, sequencial ou em separado dos componentes individuais de tratamento.

Como agentes anti-angiogénese refere-se inibidores de MMP-2 (metaloproteinase de matriz 2), inibidores de MMP-9 (metaloproteinase de matriz 9) e inibidores de COX-II (ciclo-oxigenase II). Como exemplos de inibidores de COX-II úteis refere-se CELEBREX” (alecoxib), valdecoxib e rofecoxib. Como exemplos de inibidores úteis de metaloproteinase de matriz refere-se os descritos no documento WO 96/33172 (publicado a 24 de Outubro de 1996), documento WO 96/27583 (publicado a 7 de Março de 1996), pedido de patente de invenção europeia n° 97304971.1 (depositado a 8 de Julho de 1997), pedido de patente de invenção europeia n° 99308617.2 (depositado a 29 de Outubro de 1999), documento WO 98/07697 (publicado a 26 de Fevereiro de 1998), documento WO 98/03516 (publicado a 29 de Janeiro de 1998), documento WO 98/34918 (publicado a 13 de Agosto de 1998), documento WO 98/34915 (publicado a 13 de Agosto de 1998), documento WO 98/33768 (publicado a 6 de Agosto de 1998), documento WO 98/30566 (publicado a 16 de Julho de 1998), pedido de patente de invenção europeia n° 606 046 (publicado a 13 de Julho de 1994), pedido de patente de invenção europeia n° 931 788 (publicado a 28 de 45

Julho de 1999), documento WO 90/05719 (publicado a 331 de maio de 1990), documento WO 99/52910 (publicado a 21 de Outubro de 1999), documento WO 99/52889 (publicado a 21 de Outubro de 1999), documento WO 99/29667 (publicado a 17 de Junho de 1999) , pedido de patente de invenção internacional PCT n° PCT/IB98/01113 (depositado a 21 de Julho de 1998), pedido de patente de invenção europeia n° 99302232.1 (depositado a 25 de Março de 1999), pedido de patente de invenção do reino unido n° 9912961.1 (depositado a 3 de Julho de 1999), pedido de patente de invenção provisória norte-americana n° 60/148,464 (depositado a 12 de Agosto de 1999), patente de invenção norte-americana n° 5 863 949 (emitida a 26 de Janeiro de 1999), patente de invenção norte-americana n° 5 861 510 (emitida a 19 de Janeiro de 1999) e publicação da patente de invenção norte-americana 780 386 (publicada a 25 de Junho de 1997), os quais se consideram aqui incorporados por referência na sua totalidade. Como inibidores de MMP-2 e MMP-9 preferidos refere-se aqueles que apresentam pouco ou nenhuma actividade de inibição de MMP-1. Mais preferencialmente, refere-se aqueles que inibem selectivamente MMP-2 e/ou MMP-9 em relação a outras metaloproteinases de matriz (isto é, MMP-1, MMP-3, MMP-4, MMP-5, MMP-6, MMP-7, MMP-8, MMP-10, MMP-11, MMP-12 e MMP-13).

Como exemplos de inibidores de MMP refere-se AG-3340, RO 32-3555, RS 13-0830 e os compostos seguintes: ácido 3-[[4-(4-flúor-fenoxi)-benzeno-sulfonil]-(1-hidroxicarbamoí1-ciclopentil)-amino]-propiónico; hidroxiamida do ácido 3-exo-3-[4-(4-flúor-fenoxi)-benzeno-sulfonilamino]-8-oxa-bi-ciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico; hidroxiamida do ácido (2R,3R)-1-[4-(2-cloro-4-flúor-benziloxi)-benzeno-sulfonil]- 46 3-hidroxi-3-metil-piperidina-2-carboxílico; hidroxiamida do ácido 4-[4-(4-flúor-fenoxi)-benzeno-sulfonilamino]-tetra-hidro-pirano-4-carboxílico; ácido 3-[ [4-(4-flúor-fenoxi)-benzeno-sulfonil]-(1-hidroxicarbamoíl-ciclobutil)-amino]-propiónico; hidroxiamida do ácido 4-[4-(4-cloro-fenoxi)-benzeno-sulfonilamino]-tetra-hidro-pirano-4-carboxilico; hidroxiamida do ácido 3-[4-(4-cloro-fenoxi)-benzeno-sulfonilamino] -tetra-hidro-pirano-3-carboxilico; hidroxiamida do ácido (2R,3R)-1-[4-(4-flúor-2-metil-benziloxi)-benzeno-sulfonil]-3-hidroxi-3-metil-piperidina-2-carboxilico; ácido 3-[[4-(4-flúor-fenoxi)-benzeno-sulfonil]-(1-hidroxi-carbamoil-l-metil-etil)-amino]-propiónico; ácido 3—[[4—(4— flúor-fenoxi)-benzeno-sulfonil]-(4-hidroxi-carbamoiltetra-hidro-pirano-4-il)-amino]-propiónico; hidroxiamida do ácido 3-exo-3-[4-(4-cloro-fenoxi)-benzeno-sulfonilamino]-8-oxa-biciclo[3.2.1]octano-3-carboxilico; hidroxiamida do ácido 3-endo-3-[4-(4-flúor-fenoxi)-benzeno-sulfonilamino]-8-oxa-biciclo[3.2.1]octano-3-carboxílico; hidroxiamida do ácido 3- [4- (4-flúor-fenoxi)-benzeno-sulfonilamino]-tetra-hidro-furano-3-carboxílico e seus sais, solvatos e hidratos farmaceuticamente aceitáveis.

Como exemplos de inibidores de transdução de sinal refere-se agentes que podem inibir as respostas de EGFR (receptor do factor de crescimento epidermal), tais como anticorpos de EGFR, anticorpos de EGF e moléculas que são inibidoras de EGFR; inibidores de VEGF (factor de crescimento endotelial vascular) e inibidores do receptor erbB2, tais como moléculas orgânicas ou anticorpos que se ligam ao receptor erbB2, por exemplo, HERCEPTIN” (Genentech, Inc. of South San Francisco, Califórnia, USA). 47

Os inibidores de EGFR encontram-se descritos, por exemplo, no documento WO 95/19970 (publicado a 27 de Julho de 1995), documento WO 98/14451 (publicado a 9 de Abril de 1998), documento WO 98/02434 (publicado a 22 de Janeiro de 1998) e patente de invenção norte-americana n° 5 747 498 (emitida a 5 de Maio de 1998) . Os agentes de inibição de EGFR compreendem, mas sem que isso constitua qualquer limitação, os anticorpos monoclonais C225 e anti-EGFR 22Mab (ImClone Systems Incorporated of New York, New York, USA), os compostos ZD-1839 (AstraZeneca) , BIBX-1382 (Boehringer

Ingelheim), MDX-447 (Medarex Inc. of Annandale, New Jersey, USA) e OLX-103 (Merck & Co. of Whitehouse Station, New Jersey, USA), VRCTC-310 (Ventech Research) e toxina de fusão de EGF (Seragen Inc. of Hopkinton, Massachusetts).

Os inibidores de VEGF, por exemplo, SU-5416 e SU-6668 (Sugen Inc. of South San Francisco, Califórnia, USA), também podem ser combinados ou co-administrados com a composição. Os inibidores de VEGF encontram-se descritos, por exemplo, no documento WO 99/24440 (publicado a 20 de Maio de 1999), no pedido de patente de invenção internacional PCT n° PCT/IB99/00797 (depositado a 3 de Maio de 1999), no documento WO 95/21613 (publicado a 17 de Agosto de 1995), no documento WO 99/61422 (publicado a 2 de Dezembro de 1999), na patente de invenção norte-americana n° 5 834 504 (emitida a 10 de Novembro de 1998), no documento WO 98/50356 (publicado a 12 de Novembro de 1998), na patente de invenção norte-americana n° 5 883 113 (emitida a 16 de Março de 1999), na patente de invenção norte-americana n° 5 886 020 (emitida a 23 de Março de 1999) , na patente de invenção norte-americana n° 5 792 783 (emitida a 11 de Agosto de 1998), no documento WO 99/10349 48 (publicado a 4 de Março de 1999), no documento WO 97/32856 (publicado a 12 de Setembro de 1997), no documento WO 97/22596 (publicado a 26 de Junho de 1997), no documento WO 98/54093 (publicado a 3 de Dezembro de 1998), no documento WO 98/02438 (publicado a 22 de Janeiro de 1998), no documento WO 99/16755 (publicado a 8 de Abril de 1999) e no documento WO 98/02437 (publicado a 22 de Janeiro de 1998), os quais se consideram aqui incorporados por referência na sua totalidade. Como outros exemplos de alguns inibidores específicos de VEGF refere-se IM862 (Cytran Inc. of Kirkland, Washington, USA); anticorpo monoclonal anti-VEGF bevacizumab (Genentech, Inc. of South San Francisco, Califórnia); e anglozima, uma ribozima sintética da Ribozyme (Boulder, Colorado) e Chiron (Emeryville, Califórnia).

Os inibidores do receptor erbB2, tais como GW-282974 (Glaxo Wellcome plc) e os anticorpos monoclonais AR-209 (Aronex Pharmaceuticals Inc. of The Woodlands, Texas, USA) e 2B-1 (Chiron), podem ser administrados em combinação com a composição. Tais inibidores de erbB2 compreendem aqueles descritos no documento WO 98/02434 (publicado a 22 de Janeiro de 1998), no documento WO 99/35146 (publicado a 15 de Julho de 1999), no documento WO 99/35132 (publicado a 15 de Julho de 1999), no documento WO 98/02437 (publicado a 22 de Janeiro de 1998), no documento WO 97/13760 (publicado a 17 de Abril de 1997), no documento WO 95/19970 (publicado a 27 de Julho de 1995), na patente de invenção norte-americana n° 5 587 458 (emitida a 24 de Dezembro de 1996) e na patente de invenção norte-americana n° 5 877 305 (emitida a 2 de Março de 1999), cada um dos quais se considera aqui incorporado por referência na sua 49 totalidade. Os inibidores do receptor de erbB2 úteis na presente invenção também se encontram descritos no pedido provisório de patente de invenção norte-americana n° 60/117,341, depositado a 27 de Janeiro de 1999, e no pedido provisório de patente de invenção norte-americana n° 60/117,348, depositado a 27 de Janeiro de 1999, os quais se consideram aqui incorporados por referência na sua totalidade.

Como outros agentes anti-rpoliferativos utilizáveis refere-se inibidores da enzima farnesil-proteina-transferase e inibidores do receptor de tirosina-cinase PDGFr, incluindo os compostos descritos e reivindicados nos seguintes pedidos de patente de invenção norte-americana: 09/221946 (depositado a 28 de Dezembro de 1998); 09/454058 (depositado a 2 de Dezembro de 1999); 09/501163 (depositado a 9 de Fevereiro de 2000) ; 09/539930 (depositado a 31 de Março de 2000); 09/202796 (depositado a 22 de Maio de 1997); 09/384339 (depositado a 26 de Agosto de 1999) e 09/383755 (depositado a 26 de Agosto de 1999); e os compostos descritos e reivindicados nos seguintes pedidos provisórios de patente de invenção norte-americana: 60/168207 (depositado a 30 de Novembro de 1999); 60/170119 (depositado a 10 de Dezembro de 1999); 60/177718 (depositado a 21 de Janeiro de 2000); 60/168217 (depositado a 30 de Novembro de 1999) e 60/200834 (depositado a 1 de Maio de 2000). Cada um dos pedidos de patente de invenção e pedidos provisórios de patente de invenção supramencionados é aqui incorporado por referência na sua totalidade.

As composições da invenção também podem ser utilizadas com outros agentes úteis para o tratamento de crescimento anormal de células ou cancro, incluindo, mas sem que isso 50 constitua qualquer limitação, agentes capazes de aumentar as respostas imunes anti-tumorais, tais como anticorpos CTLA4 (antigénio 4 linfócito citotóxico) e outros agentes capazes de bloquear CTLA4; e agentes anti-proliferativos, tais como outros inibidores de famesil-proteína- transferase. Como anticorpos CTLA4 específicos utilizáves na presente invenção refere-se aqueles descritos no pedido provisório de patente de invenção norte-americana n° 60/113 647 (depositado a 23 de Dezembro de 1998) , que é aqui incorporado por referência na sua totalidade.

Salvo quando indicado de outro modo, os termos seguintes utilizados na descrição e reivindicações possuem os significados a seguir descritos. As variáveis definidas nesta secção, tais como R, X, n e semelhantes, são apenas para referência nesta secção e não pretendem apresentar o mesmo significado que o utilizado para além desta secção de definições. Além disso, muitos dos grupos aqui definidos podem ser facultativamente substituídos. A listagem nesta secção de definições de substituintes típicos é exemplificativa e não pretende limitar os substituintes definidos noutro local na presente descrição e reivindicações.

Tal como aqui utilizado, o símbolo [------] , quando incorporado numa estrutura química de um substituinte, designa que o átomo ao qual [------] está ligado constitui o ponto de ligação desse substituinte a alguma posição numa outra molécula. Por exemplo, o símbolo X na molécula hipotética CH3CH2-X pode ser definido como 51 51 * f

β S 4

Neste caso, a colocação de [------] ligado à posição C—1 numerada arbitrariamente, designa que a posição C-l do anel fenilo está ligada ao carbono metileno.

Os simbolos "" e , quando utilizados em conjunto numa molécula individual sem qualquer outra indicação, por exemplo, nome químico ou descrição associada, indicam apenas a estereoquímica relativa trans ou cis, quando aplicável. 0 símbolo e 0 símbolo " r utilizados em conjunto ou em separado, em combinação com uma sua indicação de representação da esteroquímica absoluta, por exemplo, uma indicação de "S" ou "R" na correspondente estrutura química ou no nome químico associado, indicam a esteroquímica absoluta do centro quiral correspondente.

Quando um dirradical é referido como, por exemplo, -0-CH2- ou - (alquileno (C1-C3) )-NH-, é entendido que cada extremidade do dirradical pode estar igualmente ligada a um outro resíduo. Por exemplo, caso o símbolo K seja definido como A-L-B, e o símbolo L representa um dirradical seleccionado entre -0-CH2- e -(alquileno(C1-C3))-, é entendido que o símbolo K é assim seleccionado entre A-0-CH2-B, A-CH2-O-B e A-(alquileno (C1-C3) )-B. Aqui, os símbolos A e B designam resíduos orgânicos diferentes. 0 termo "alifático" designa hidrocarbonetos(C1-C12) de cadeia linear, ramificada ou cíclica que são completamente 52 saturados ou que contêm uma ou mais unidades de insaturação, mas que não são aromáticos. Como exemplos de grupos alifáticos refere-se os grupos alquilo, alcenilo, alcinilo lineares, ramificados ou cíclicos e seus híbridos, tais como (cicloalquil)-alquilo, (cicloalcenil)-alquilo, etc.. Um grupo alifático pode ser facultativamente substituído com 1 a 6 substituintes. Como substituintes adequados para um grupo alifático refere-se: heterociclilo com 3 a 12 membros, arilo (C6-C10) , heteroarilo com 5 a 12 membros, halogeneto, -NO2, NH2, NR2, -CN, -COR, -COOR, -CONR2, -OH, -0R,-OCOR, -SR, -SOR, -S02R, -SONR2, -S02NR2, em que o símbolo R representa H, alquilo (C1-C10) , heterociclilo com 3 a 10 membros, arilo(C6-C10) , heteroarilo com 5 a 12 membros. O termo "alquilo (C1-C12) " designa um radical hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificada que possui entre 1 e 12 átomos de carbono, um grupo alquilo (C1-C12) pode ser facultativamente substituído com pelo menos um substituinte. Como substituintes adequados para um grupo alquilo (C1-C12) refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação, heterociclilo com 3 a 12 membros, arilo(C6-C10), heteroarilo com 5 a 12 membros, halogeneto, -N02, -NR2, -CN, -COR, -COOR, -CONR2, -OH, -OR, -OCOR, -SR, -SOR, -SO2R, -SONR2, -SO2NR2, em que cada símbolo R representa, de um modo independente, -H, alquilo (C1-C10) , heterociclilo com 3 a 12 membros, arilo (C6-C10), heteroarilo com 5 a 12 membros. Como exemplos de grupos alquilo(C1-C12) refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação, metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, isobutilo, terc-butilo, pentilo, neopentilo, sec-pentilo, hexilo, heptilo, octilo e semelhantes, incluindo as suas 53 formas substituídas. Além disso, o termo "alquilo" designa um radical hidrocarboneto saturado de cadeia linear ou ramificada com 1 a 20 átomos de carbono ou com 1 a 12 átomos de carbono ou com 1 a 8 átomos de carbono ou com 1 a 6 átomos de carbono ou com 1 a 4 átomos de carbono. O termo "alquilo inferior" designa especificamente um grupo alquilo que possui 1 a 4 átomos de carbono. O grupo alquilo pode ser substituído ou não substituído. Como substituintes adequados de um grupo alquilo refere-se os mesmos que os descritos para um grupo alquilo (C1-C12) · O termo "cicloalquilo" designa um radical hidrocarboneto saturado cíclico que possui entre 3 e 20 átomos de carbono. um grupo cicloalquilo pode ser monocíclico e, quando permitido, pode ser bicíclico ou policíclico. Um grupo cicloalquilo pode ser facultativamente substituído com pelo menos um substituinte. Como substituintes adequados num grupo cicloalquilo refere-se os mesmos que os descritos para um grupo alquilo. Como exemplos de grupos cicloalquilo refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo, ciclooctilo, nobornilo, adamantilo, e semelhantes, incluindo as suas formas substituídas. A expressão "carbociclilo não aromático" designa um anel monocíclico com 3 a 12 membros totalmente de carbono, um sistema de anel bicíclico ou multicíclico totalmente de carbono, em que um ou mais dos anéis pode conter uma ou mais ligações duplas, mas nenhum dos anéis possui um sistema de electrões pi completamente conjugado. Como exemplos de carbociclilo, mas sem que isso constitua qualquer limitação, refere-se ciclopropilo, ciclobutilo, 54 ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclo-hexilo, ciclo-hexadienilo, adamantanilo, ciclo-heptilo, ciclo-heptatrienilo e semelhantes. Um carbociclilo não aromático pode ser substituído ou não substituído. Como grupos substituintes típicos refere-se os mesmos que aqueles do grupo alquilo, conforme aqui definido. Exemplos ilustrativos de carbociclilo não aromático são obtidos a partir dos grupos seguintes, mas sem que isso constitua qualquer limitação:

A expressão "carbociclilo não aromático insaturado" ou "carbociclilo insaturado não aromático" designa um carbociclilo não aromático, tal como aqui definido, que contém pelo menos uma ligação dupla carbono-carbono ou uma ligação tripla carbono-carbono. 0 termo "alcenilo (C2-C12) " designa um radical hidrocarboneto insaturado de cadeia linear ou ramificada que possui entre 2 e 12 átomos de carbono. Um grupo alcenilo (C2-C12) pode apresentar um ou mais pontos de insaturação (isto é, uma ou mais ligações duplas carbono-carbono) . No caso do grupo alcenilo (C2-C12) possuir mais do 55 que uma ligação dupla carbono-carbono, então as ligações duplas carbono-carbono podem ser conjugadas ou não conjugadas. Um grupo alcenilo (C2-C12) pode ser facultativamente substituído com pelo menos um substituinte. Como substituintes adequados para um grupo alcenilo (C2-C12) refere-se os mesmos que os descritos para um grupo alquilo (C1-C12) · Como exemplos de alcenilo (C2-Ci2) refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação, etenilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 1-butenilo, 2-butenilo, isobutenilo e semelhantes, incluindo as suas formas substituídas. Além disso, o termo "alcenilo" designa um radical hidrocarboneto insaturado de cadeia linear ou ramificada que possui entre 2 e 20 átomos de carbono ou entre 2 e 12 átomos de carbono ou entre 2 e 8 átomos de carbono ou entre 2 e 6 átomos de carbono ou entre 2 e 4 átomos de carbono. Um grupo alcenilo pode apresentar um ou mais pontos de insaturação (isto é uma ou mais ligações duplas carbono-carbono). No caso de um grupo alcenilo possuir mais do que uma ligação dupla carbono-carbono, então as ligações duplas carbono-carbono podem ser conjugadas ou não conjungadas. Um grupo alcenilo pode ser substituído ou não substituído. Como substituintes adequados para um grupo alcenilo refere-se os mesmos que os descritos para um grupo alquilo (C1-C12) . O termo "alcoxi" ou "alcoxilo" designa -ORc, em que o símbolo Rc representa alquilo (C1-C12) , alcenilo (C2-C12) , alcinilo (C2-C12) , cicloalquilo (C3-C12) ou (alquileno (Ci-C6) )-(cicloalquilo (C3-C12) ) . Um "alcoxi (C1-C12) " ou "alcoxilo(Ci-C12) " designa um grupo alcoxi, tal como aqui definido, em que o símbolo Rc possui um total de 1 a 12 átomos de carbono. 56 0 termo "alcoxialquilo" designa um alquilo, tal como aqui definido, que é substituído com pelo menos um grupo alcoxi, tal como aqui definido. Um "alquilalcoxi (C2-C6) " designa um alquilalcoxi em que o número total de carbonos do alquilo e dos seus substituintes alcoxi está compreendido entre 2 e 6. 0 termo "alquilamino" designa um radical -NRpRq, em que cada simbolo Rp e Rq representa independentemente H, alquilo (C1-C12) , alcenilo (C2-C12) , alcinilo (C2-Ci2) , ciclo-alquilo (C3-C12) , (alquileno (Ci-Cs) ) - (cicloalquilo (C3-C12) ) , desde que os simbolos Rp e Rq não representem ambos H. Um "monoalquilamino" designa um grupo alquilamino, tal como aqui definido, em que um dos simbolos Rp e Rq representa H. um "dialquilamino" designa um grupo alquilamino, tal como aqui definido, em que nenhum dos símbolos Rp e Rq representa H. Um "alquil (C1-12)-amino" designa um grupo alquilamino que contém 1 a 10 átomos de carbono. O termo "alcinilo (C2-C12) " designa um radical hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificada que possui entre 2 e 12 átomos de carbono e pelo menos uma ligação tripla carbono-carbono. No caso de o alcinilo(C2-C12) apresentar mais do que uma ligação dupla carbono-carbono, então as ligações duplas carbono-carbono podem ser conjugadas ou não conjugadas. Um grupo alcinilo(C2-C12) pode ser facultativamente substituído com pelo menos um substituinte. Como substituintes adequados para um grupo alcinilo (C2-C12) refere-se os mesmos que os descritos para um grupo alquilo (C1-C12) . Como exemplos de alcinilo (C2-C12) refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação, etinilo, 1-propinilo, 2-propinilo, 1-butinilo, 2-butinilo e semelhantes, incluindo as suas formas substituídas. Além 57 disso, o termo "alcinilo" designa um radical hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificada com 2 a 20 átomos de carbono ou com 2 a 12 átomos de carbono ou com 2 a 8 átomos de carbono ou com 2 a 6 átomos de carbono ou com 2 a 4 átomos de carbono, e que possui pelo menos uma ligação tripla carbono-carbono, o alcinilo pode ser substituído ou não substituído. Como substituintes adequados para um grupo alcinilo refere-se os mesmos que os descritos para um grupo alquilo (C1-C12) . O termo "amino" designa -NH2. O termo "arilo(C6-C10) " designa um anel monocíclico ou um anel policiclico totalmente de carbono que possui 6 a 10 átomos de carbono e que apresenta um sistema de electrões pi completamente conjugado. Um grupo arilo (C6-C10) pode ser facultativamente substituído com pelo menos um substituinte. Como substituintes adequados para um grupo arilo (C6-C10) refere-se os mesmos que os descritos para um grupo alquilo (C1-C12) . Como exemplos de arilo (C6-Cio) refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação, fenilo e naftilo. Além disso, o termo "arilo" designa um anel monocíclico ou um anel policiclico totalmente de carbono que possui 6 a 10 átomos de carbono e que apresenta um sistema de electrões pi completamente conjugado. O grupo arilo pode ser substituído ou não substituído. Como exemplos de arilo refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação, antracenilo, fenantrenilo e perilenilo. O termo "aralquilo" designa um alquilo, tal como aqui definido, que é substituído com um grupo arilo(C6-C10) , tal como definido antes; v.g., -CH2-fenilo, - (CH2)2-fenilo, - (CH2) 3-fenilo, CH3CH (CH3) CH2-fenilo e semelhantes e seus 58 derivados. Um aralquilo (Ci-Cô) designa um alquilo (Ci-Cô) que é substituído com um grupo arilo (C6-Cio) . 0 termo grupo "heteroaralquilo" designa alquilo, tal como aqui definido, que é substituído com um grupo heteroarilo com 5 a 12 membros; v.g., -CH2-piridinilo, (CH2) 2-pirimidinilo, - (CH2) 3-imidazolilo e semelhantes e seus derivados. Um heteroaralquilo (Ci-Cô) designa um alquilo (Ci-C6) que é substituído com um grupo heteroarilo com 5 a 12 membros. 0 termo "heteroarilo" designa um anel monocíclico ou um anel fundido de 5 a 12 átomos que contém um, dois, três ou quatro heteroátomos no anel seleccionados entre N, 0, e S, sendo os restantes átomos no anel de C, e, além disso, possui um sistema de electrões pi completamente conjugado. Como exemplos de grupos heteroarilo não substituídos refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação, pirrole, furano, tiofeno, imidazole, oxazole, tiazole, pirazolo, piridina, pirimidina, quinolina, isoquinolina, purina, tetrazole, triazina e carbazole. 0 grupo heteroarilo pode ser substituído ou não substituído. Como substituintes típicos refere-se alifático (Ci-Ci2), heterociclilo com 3 a 10 membros, arilo com 6 a 10 membros, halogeneto, -N02, NH2, NR2, -CN, -COR, -COOR, -CONR2, -OH, -OR, -OCOR, -SR, -SOR, -S02R, -S0NR2, -S02NR2, em que o símbolo R representa um alifático(C1-C10) , heterociclilo com 3 a 10 membros, arilo (C6-C10) , heteroarilo com 5 a 10 membros.

Um "heteroarilo farmaceuticamente aceitável" designa um heteroarilo que seja suficientemente estável para ser ligado a um composto da invenção, formulado numa composição 59 farmacêutica e, subsequentemente, administrado a um paciente que de tal necessite.

Como exemplos de grupos heteroarilo monociclicos tipicos refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação:

N JX. pirrolo (pirrolilo) jOl m furano (furanilo) JQl

s tiofeno (tiofenilo) JL (f H

H pirazolo (pirazolilo

isoxazol (isoxazolilo)M “N oxazol (oxazolilo) isotiazol (isotiazolilo) I1

tiazolilo (tiazolilo) JOl H

imidazol (imidazolilo)H fè w m 1,2,3-triazol (1,2,3-triazolilo) Μ M

N-Ni 1,3,4-triazol (1,3,4- triazolilo) JK l-oxa-2,3-diazol (l-oxa-2,3-diazolilo) l-oxa-2,4-diazol (l-oxa-2,3-diazolilo)

l-oxa-2,5-diazol (l-oxa-2,5-diazolilo) Η M NHSf l-oxa-3,4-diazol (l-oxa-3,4-diazolilo) l-tia-2,3-diazol (l-tia-2,3-diazolilo) l-tia-2,4-diazol (l-tia-2,4-diazolilo) l-tia-2,5-diazol (l-tia-2,5-diazolilo) f l-tia-3,4- diazol (l-tia-3,4- diazolilo)

H

N tetrazol (tetrazolilo)

piridina (piridazinilo)

piridazina (piridazinilo)

pirimidina (pirimidinilo) pirazina (pirazinilo) 1,3,5-triazina triazinilo

Como exemplos de grupos heteroarilo bicíclicos refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação:

indolo (indolilo) benzofurano (benzofuranilo) benzotiofeno (benzotiofenilo) benzimidazol (benzamidazolilo) indazol (indazolilo)

benzotriazol (benzotriazolilo) pirrolo[2,3-b]piridina (pirrolo[2,3-b]piridinilo)

pirrolo[2,3-c]piridina (pirrolo[2,3-c]piridinilo)

pirrolo[3,2-c]piridina (pirrolo[3,2-c]piridinilo)

pirrolo[3,2- b]piridina (pirrolo[3,2- b]piridinilo)

b]piridina (imidazo[4,5-b]piridinilo)

c]piridina (imidazo[4,5-c]piridinilo)

pirazolo[4,3- d]piridina (pirazolo[4,3- d]piridinilo)

pirazolo[4,3- c]piridina (pirazolo[4,3- c]piridinilo)

pirazolo[3,4-c]piridina (pirazolo[3,4-c]piridinilo)

pirazolo[3,4-b]piridina (pirazolo[3,4-b]piridinilo)

isoindolo (isoindolilo) 61

u ‘Ν'

indazol (indazolilo purina (purinilo) imidazo[1,2-indolizina a]piridina (indolizinilo) (imidazo[1,2-a]piridinilo) imidazo[1,5-a]piridina (imidazo[1,5-a]piridinilo)

pirrolo[1,2-b]piridazina (pirrolo[1,2-b]piridazinilo)

pirazolo[1,5-a]piridina (pirazolo[1,5-a]piridinilo) imidazo[1,2-c]pirimidina (imidazo[1,2-c]pirimidinilo)

tienopirimidina (tienopirimidinilo) tienopirimidina (tienopirimidinilo)

N quinolina (quinolinilo) quinoxalina (quinoxalinilo)

isoquinolina (isoquinolinilo) ftalazina (ftalazinilo)

cinolina (cinolinilo)

1,6-naftiridina (1,6- naftiridinilo)

quinazolina (azaquinazolina) 1,7-naftiridina (1,7- naftiridinilo)

1,8-naftiridina (1,8-naftiridinilo) 1,5-naftiridina (1,5- naftiridinilo)

2,6-naftiridina (2,6- naftiridinilo)

2,7-naftiridina (2,7- naftiridinilo) 62

pirido[3,2-d] pirimidina (pirido[3,2-d]pirimidinilo)

pirido[4,3-d] pirimidina (pirido[4,3-

pirido[3,4-d]pirimidina (pirido[3,4-d]pirimidinilo)

pirido[2,3-d]pirimidina (pirido[2,3-d]pirimidinilo) d]pirimidinilo)

pirido[2,3-b]pirazina (pirido[2,3-b]pirazinilo)

pirido[3,4-b]pirazina (pirido[3,4-b]pirazinilo)

pirimido[5,4-d]pirimidina (pirimido[5,4-d]pirimidinilo)

pirazino[2,3-b]pirazina (pirazino[2,3-b]pirazinilo)

pirimido[4,5-d] pirimidina (pirimido[4,5-d] pirimidinilo) 0 termo "heteroalicíclico" ou "heterociclilo" designa um grupo monocíclico ou policíclico que possui entre 3 e 12 átomos no anel, em que entre 1 e 4 átomos no anel são heteroátomos seleccionados entre N, 0 e S. 0 grupo "heteroalicíclico" ou "heterociclilo" também pode ter uma ou mais ligações duplas. No entanto, 0 grupo "heteroalicíclico" ou "heterociclilo" não possui um sistema de electrões pi completamente conjugado. 0 grupo "heteroalicíclico" ou "heterociclilo" pode ser substituído ou não substituído. Como substituintes típicos refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação, alifático (C1-C12) , arilo com 6 a 10 membros, halogeneto, 63 -νο2, νη2, nr2, -cn, -cor, -coor, -conr2, -oh, -or, -ocor, -SR, -SOR, -S02R, em que o símbolo R representa alquilo(Ci-Cio) , heterociclilo com 3 a 10 membros, arilo (C6-C10) , heteroarilo com 5 a 10 membros.

Como exemplos de grupos heterociclilo saturados refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação:

oxirano tiarano (oxiranilo) (tiaranilo) aziridina (aziridinilo) oxetano (oxetanilo) tiatano (tiatanio) azetidina (azetidinilo) tetra- hidrofurano (tetra- hidrofuranilo)

H

tetra-hidrotiofeno (tetra- pirrolidina hidrotiofenilo) (pirrolidinilo)

tetra-hidropirano (tetra-hidropiranilo) tetra-hidrotiqpirano (tetra- hldrotiopiramlo)

piperidina (piperidinilo) 1,4-dioxano 1,4-oxatiano morfolina (1,4-dioxanilo) (1,4-oxatianilo) (morfolinilo) 1,4-ditiano (1,4-diatianilo)

piperazina (piperazinilo) 1,4-azatiano (1,4-azatianilo) oxepano (oxepanilo) tiepano (tiepanilo) azepano (azepanilo) ί°Λ ..Λ. w 1,4-dioxepano 1,4-oxatiepano (1,4-dioxepanilo) (1,4-oxatiepanilo)

1,4-oxa-azepano 1,4-ditiepano (1,4-oxa-azepanilo) (1,4-ditiepanilo) 64

1,4-tieazepano (1,4-tieazepanilo)

1,4-diazepano (1,4-diazepanilo)

tropano (tropanilo)

Como exemplos de grupos heterociclilo parcialmente insaturados refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação:

(3,4-di-hidro-2H-

(5,6-di-hidro-2H-

2H-pirano (2H-piranilo) 3,4-di-hidro-2H-pirano piranilo) 5,6-di-hidro-2H-pirano piranilo)

H

1,2,3,4-tetra-hidropiridina (1,2,3,4-tetra-hidropiridinilo) 1,2,5,6-tetra-hidropiridina (1,2,5,6-tetra-hidropiridinilo) 0 termo "dirradical" designa um grupo que possui duas valências abertas e que está ainda ligado a dois grupos diferentes. Como exemplos de dirradicais refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação, -CH2, -0-.

Quando o termo "eno" é adicionado após o termo "ilo" na extremidade de qualquer um dos termos definidos antes para formar um novo termo, então o novo termo designa um dirradical formado por remoção de um átomo de hidrogénio do termo original a partir do qual é obtido o novo termo. Por exemplo, um alquileno designa um grupo dirradical formado pela remoção de um átomo de hidrogénio a partir de um grupo alquilo e, assim, um "metileno" designa um radical 65 divalente -CH2- obtido por remoção de um átomo de hidrogénio de metilo. Mais exemplos de tais dirradicais compreendem, mas sem que isso constitua qualquer limitação: alcenileno, alcinileno, cicloalquileno, fenileno, heterociclileno, heteroarileno e (carbociclileno insaturado não aromático), os quais são obtidos a partir de alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, fenilo, heterociclilo, heteroarilo e (carbociclilo insaturado não aromático), respectivamente. Por exemplo, o termo "ciclopropileno" designa

e

Por exemplo, o termo "alquileno (C1-C2) " designa todos os grupos seguintes: -CH2-, -CH(CH3)- e -CH2-CH2-. 0 termo "oxo" designa uma substituição com uma ligação dupla de oxigénio, "=0". 0 termo "hidroxi" ou "hidroxilo" designa -OH. 0 termo "perfluoroalquilo" designa um grupo alquilo no qual todos os seus átomos de hidrogénio foram substituídos por átomos de flúor. 0 termo "facultativo" ou "facultativamente" designa que o evento ou circunstância subsequentemente descrito pode ocorrer embora tal não seja necessário e que a descrição inclui casos em que o evento ou circunstância ocorre e casos em que o evento ou circunstância não ocorre. Por exemplo, a expressão "grupo heterociclilo facultativamente substituído com um grupo alquilo" designa que o alquilo pode estar presente embora tal não seja 66 necessário e que a descrição inclui situações em que o qrupo heterociclilo é substituído com um qrupo alquilo e situações em que o qrupo heterociclilo não é substituído com o grupo alquilo.

Quando um grupo é "facultativamente substituído" ou "ainda facultativamente substituído" com alguns substituintes, então tal designa que os átomos de hidrogénio desse grupo, excepto quando o próprio grupo é hidrogénio, são substituídos com alguns substituintes. Por exemplo, numa definição de um grupo "o símbolo R representa H, alquilo (C1-C3) e fenilo e o símbolo R é ainda facultativamente substituído com 1 a 3 grupos seleccionados entre -F, oxo e perfluoroalquilo (C1-C3) ", pretende-se designar que o símbolo Ré 1) H (quando o símbolo R representa Η, o símbolo R não pode ser mais substituído) ; 2) alquilo (C1-C3) ainda facultativamente substituído com 1 a 3 grupos seleccionados entre -F, oxo e perfluoro-alquilo(C1-C3) e 3) fenilo ainda facultativamente substituído com 1 a 3 grupos seleccionados entre -F e perfluoroalquilo(C1-C3) . A substituição facultativa de oxo não se aplica quando o símbolo R representa fenilo visto que nenhum átomo individual do grupo fenilo possui dois átomos de hidrogénio que possam ser substituídos por oxo, isto é, uma ligação =0. A expressão "composição farmacêutica" designa uma mistura de um ou mais dos compostos aqui descritos, ou de seus sais, solvatos, hidratos ou pró-fármacos fisiologicamente/farmaceuticamente aceitáveis, com outros compostos químicos, tais como veículos e excipientes fisiologicamente/farmaceuticamente aceitáveis. 0 propósito 67 de uma composição farmacêutica é facilitar a administração de um composto a um organismo.

Tal como aqui utilizada, a expressão "veiculo fisiologicamente/farmaceuticamente aceitável" designa um veiculo ou diluente que não cause irritação significativa a um organismo e não anule a actividade biológica e as propriedades do composto administrado. A expressão "excipiente farmaceuticamente aceitável" designa uma substância inerte adicionado a uma composição farmacêutica para facilitar a administração de um composto. Como exemplos de excipientes refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio, vários açúcares e tipos de amido, derivados de celulose, gelatina, óleos vegetais e polietileno-glicóis.

Tal como aqui utilizada, a expressão "sal farmaceuticamente aceitável" designa aqueles sais que mantêm a eficácia biológica e as propriedades do composto original. Tais sais compreendem: (1) sais de adição de ácido, os quais podem ser obtidos por meio de reacção da base livre do composto original com ácidos inorgânicos, tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico, ácido perclórico e semelhantes, ou com ácidos orgânicos, tais como ácido acético, ácido oxálico, ácido (D)- ou (L)-málico, ácido maleico, ácido metano-sulfónico, ácido etano-sulfónico, ácido p-tolueno-sulfónico, ácido salicílico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico ou ácido malónico e semelhantes; ou (2) sais formados quando um protão acídico presente no composto original é substituído por um ião metálico, v.g., 68 um ião de um metal alcalino, um ião de um metal alcalino-terroso ou um ião de aluminio; ou então é coordenado com uma base orgânica, tal como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, trometamina, N-metilglucamina e semelhantes. 0 termo "PK" designa um receptor de proteina tirosina cinase (RTK), um não receptor ou "celular" de tirosina cinase (CTK) e serina-treonina cinases (STK). 0 termo "modulação" ou "modular" designa a alteração da actividade catalítica de RTK, CTK e STK. Em particular, modular designa a activação da actividade catalítica de RTK, CTK e STK, de preferência, a activação ou inibição da actividade catalítica de RTK, CTK e STK, dependendo da concentração do composto ou sal à qual a RTK, CTK ou STK é exposta ou, mais preferencialmente, a inibição da actividade catalítica de RTK, CTK e STK. A expressão "actividade catalítica" designa a taxa de fosforilação de tirosina sob a influência, directa ou indirecta, de RTK e/ou CTK ou a fosforilação de serina e treonina sob a influencia, directa ou indirecta, de STK. 0 termo "contactar" designa faze contactar um composto da presente invenção e uma PK alvo de um modo tal que o composto possa afectar a actividade catalítica da PK, directamente, isto é, por meio da interacção com a própria cinase, ou indirectamente, isto é, por meio da interacção com outra molécula, da qual depende a actividade catalítica da cinase. Tal "contacto" pode ser efectuado " in vitro", isto é, num tubo de ensaio, numa placa de petri ou semelhante. Num tubo de ensaio, o contacto pode implicar apenas um composto e a PK relevante ou pode implicar células totais. As células também podem ser mantidas ou desenvolvidas em placas para a cultura de células, sendo o 69 contacto com um composto efectuado nesse ambiente. Neste contexto, a aptidão de um composto particular para afectar um distúrbio associado a PK, isto é, o valor CI50 do composto, pode ser determinado antes da utilização de compostos in vivo com organismos vivos mais complexos. Para células no exterior do organismo, existem múltiplos métodos, os quais são bem conhecidos pelos especialistas na matéria, para fazer o contacto das PK com os compostos, incluindo, mas sem que isso constitua qualquer limitação, microinjecção directa em células e diversas técnicas de veículos transmembranares. A expressão "in vitro" designa procedimentos realizados num ambiente artificial, tal como, v.g., mas sem que isso constitua qualquer limitação, num tubo de ensaio ou em meio de cultura. A expressão "In vivo” designa procedimentos realizados num organismo vido, tal como, mas sem que isso constitua qualquer limitação, um murganho, rato ou coelho.

As expressões "distúrbio associado a PK", "distúrbio conduzido por PK" e "actividade de PK anormal" designam, todas, uma patologia caracterizada por uma actividade catalítica de PK inapropriada, isto é, uma sub-actividade ou, mais habitualmente, uma sobre-actividade, em que a PK particular pode ser uma RTK, uma CTK ou uma STK. Uma actividade catalítica inapropriada pode ocorrer como resultado de: (1) expressão de PK em células que normalmente não expressam PK, (2) aumento da expressão de PK provocando uma proliferação, diferenciação e/ou crescimento de células indesejados ou (3) diminuição da expressão de PK provocando reduções indesejadas na proliferação, diferenciação e/ou crescimento de células. A 70 sobre-actividade de um PK designa a amplificação do gene que codifica uma PK particular ou a produção de um nivel de actividade de PK que pode estar correlacionado com um distúrbio de proliferação, diferenciação e/ou crescimento de células (isto é, à medida que o nivel de PK aumentam a gravidade de um ou mais dos sintomas do distúrbio celular aumenta). A sub-actividade é, evidentemente, o contrário, em que a gravidade de um ou mais sintomas de um distúrbio celular aumenta à medida que o nivel de actividade de PK diminui.

Os termos "tratar" e "tratamento" designam um método de aliviar ou de anular um distúrbio celular mediado por PK e/ou dos seus sintomas associados. No que diz respeito particularmente ao cancro, estes termos simplesmente designam que a esperança de vida de um indivíduo que afectado com cancro será aumentada ou que um ou mais dos sintomas da doença será reduzido. O termo "organismo" designa qualquer entidade viva constituída pelo menos por uma célula. Um organismo vivo pode ser tão simples quanto, por exemplo, uma célula eucariótica individual ou tão complexa quanto um mamífero, incluindo um ser humano. A expressão "quantidade terapeuticamente eficaz" designa uma quantidade do composto que, quando administrada, irá aliviar até alguma extensão um ou vários sintomas do distúrbio em tratamento. No que diz respeito ao tratamento de cancro, uma quantidade terapeuticamente eficaz designa uma quantidade que apresentam pelo menos um dos efeitos seguintes: (1) reduzir o tamanho do tumor; 71 (2) inibir (isto é, atrasar até algum nivel e, de preferência, parar) as metástases tumorais; (3) inibir até algum nivel (isto é, atrasar até algum nivel e, de preferência, parar) o crescimento do tumor e (4) aliviar até algum nivel (ou, de preferência, eliminar) um ou mais sintomas associados ao cancro. 0 termo "monitorizar" designa observar ou detectar o efeito do contacto de um composto com uma célula que expresse uma PK particular. 0 efeito observado ou detectado pode ser uma alteração no fenótipo da célula, na actividade catalítica de uma PK ou uma alteração na interacção de uma PK com um parceiro de ligação natural. As técnicas para a observação ou detecção de tais efeitos são bem conhecidas na especialidade. 0 efeito é seleccionado entre uma alteração ou a ausência de alteração no fenótipo da célula, uma alteração ou a ausência de alteração na actividade catalítica da referida proteína cinase ou uma alteração ou ausência de alteração na interacção da referida proteína cinase com um parceiro de ligação natural, num aspecto final da presente invenção. A expressão "fenótipo da célula" designa o aparecimento exterior de uma célula ou tecido ou a função biológica da célula ou tecido. Como exemplos de um fenótipo da célula refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação, o tamanho da célula, o crescimento da célula, a proliferação da célula, a diferenciação da célula, a sobrevivência da célula, a apoptose e a absorção e utilização de nutrientes. Tais características fenotípicas são determináveis através de técnicas bem conhecidas na especialidade. 72 A expressão "parceiro de ligação natural" designa um polipéptido que se liga a uma PK particular numa célula. Os parceiros de ligação naturais podem desempenhar um papel na propagação de um sinal num processo de transdução de sinal mediado por PK. Uma alteração na interacção de um parceiro de ligação natural com a PK pode manifestar-se como um aumento ou diminuição na concentração do complexo PK/parceiro de ligação natural e, como resultado, numa alteração observável na aptidão da PK para mediar a transdução de sinal.

Descrição breve da figura A figura 1 mostra que um composto da presente invenção apresentou inibição do crescimento de tumor in vivo e retardamento no crescimento de tumor de xenoenxertos de carcinoma colo-rectal humano HCT116 em murganhos atimicos.

Descrição minuciosa

Os compostos de fórmulas estruturais I, II, III e Illa podem ser preparados de acordo com as vias de síntese apresentadas no esquema 1 e no esquema 2. No esquema 1 e no esquema 2 e na descrição subsequente, o termo "BOC", "Boc" ou "boc" designa N-terc-butoxicarbonilo, "DCM" designa CH2CI2, "DIPEA" (também conhecida como base de Hunig) designa diisopropiletilamina, "DMA" designa dimetilamina, "DMF" designa dimetilformamida, "DMSO" designa sulfóxido de dimetilo, "Et" designa -CH2CH3, "MTBE" designa éter metil-t-butílico, "NMP" designa l-metil-2-pirrolidinona, "TEA" designa trietilamina, "TFA" designa ácido trifluoroacético, "THF" designa tetra-hidrofurano. Embora nos esquemas 1 e 2 73 e na descrição seja referido o composto I, os esquemas 1 e 2 e a descrição podem ser igualmente aplicados aos compostos II, III e lHa·

Esquema 1 'COOH m

'H*** “ΝΓ 5 >3

NO

rsg.

nJU NHSbís 0 esquema 1 ilustra a sintese do intermediário I (a) utilizado para preparar os compostos de fórmula estrutural I. 0 grupo amino do ácido amino substituído I(a) é alquilado para se obter o composto I(b). Tipicamente, tal pode ser efectuado por tratamento do composto I (a) com um agente de alquilação na presença de uma base. Um residuo electrofilico activado com ligação dupla constitui um reagente de alquilação habitualmente utilizado. Como condições de reacção tipicas para a alquilação do composto I (a) com um residuo electrofilico activado com ligação dupla refere-se o tratamento do composto I(a) com o residuo electrofilico activado com ligação dupla na presença de uma base forte. 0 processamento aquoso subsequente proporciona o composto I(b). 0 grupo amino do composto I (b) é então protegido com um grupo boc para se obter o composto I (c) . 74

Tipicamente, tal pode ser efectuado por tratamento do composto I (b) com um agente Boc na presença de uma base. Como condições típicas refere-se o tratamento do composto I (b) com (Boc) 2O na presença de Me4N0H em MeCN, como solvente. 0 grupo ácido carboxílico do composto I(c) é então convertido num éster metílico do composto I (d) . Como condições típicas para converter o grupo ácido carboxílico no grupo éster metílico refere-se o tratamento do composto I(c) com iodeto de metilo em DMF na presença de uma base. 0 composto I(d) é então submetido a uma reacção de condensação de aldol intramolecular para se obter 0 composto I (e) . Tipicamente, tal pode ser efecuada por tratamento do composto I(d) com uma base forte num solvente aprótico. Como condições típicas refere-se o tratamento do composto I(d) com t-BuOK em tolueno. 0 processamento aquoso subsequente proporciona o composto I(e). 0 composto I (e) é então submetido a uma ciclização 2+3 com um resíduo hidrazina para formar o composto I(f). Como condições típicas de ciclização refere-se o aquecimento ao refluxo do composto I (e) com hidrazina e ácido acético em EtOH. 0 azoto de pirazolo da base livre do composto I(f) é então subtido a acilação para se obter o composto I (g) . Como condições típicas de acilação refere-se o tratamento do composto I(f) com carbonato de cloroetilo em THF.

Condições de síntese mais detalhadas para o composto Kg) do esquema 1 podem ser encontradas na publicação do pedido de patente de invenção norte-americana n° 2003/0171357 e na publicação PCT n° WO 02/12242, cuja descrição se considera aqui incorporada por referência. 75

Esquema 2

0 esquema 2 ilustra duas vias a partir das quais os compostos de fórmula estrutural I podem ser preparados a partir do intermediário I(g). Na primeira via do esquema 2, o composto I(g) é submetido a uma reacção nucleofilica com um resíduo electrófilo R1. Esta reacção nucleofilica pode ser uma acilação, alquilação, sulfonilação, aminação redutiva ou uma das muitas outras reacções que uma funcionalidade amina suporta. Como condições típicas para a 76 reacção de acilação refere-se o tratamento do composto I(g) com um agente de acilação, tal como R1-C0C1, na presença de uma base, tal como 2 equivalentes de DIPEA, num solvente, tal como diclorometano. A mistura de reacção é agitada a uma temperatura entre 0°C e a temperatura ambiente, durante 12 horas. 0 processamento aquoso subsequente proporciona o composto I(h). 0 grupo Boc no azoto do pirrole do composto I(h) é então removido para se obter o composto I (1) . Tipicamente, este passo pode ser efectuado por tratamento do composto I(h) com um ácido forte. Como condições típicas de reacção refere-se o tratamento do composto I(h) com HC1 4 N em dioxano e DCM. 0 processamento aquoso subsequente proporciona o composto I (i). 0 NH do pirrole do composto I(i) é então submetido a acilação para se obter o cloroformato I(j) . Tipicamente, este passo pode ser efectuado utilizando fosgénio, trifosgénio ou algum composto equivalente. Como condições típicas de reacção refere-se o tratamento do composto I(i) com 2 equivalentes de trifosgénio em DCM, a uma temperatura de 0°C durante quatro horas. 0 subsequente processamento ligeiramente básico com uma solução saturada de NaHCCh e purificação proporciona o composto I(j). 0 composto I(j) é então tratado com uma resíduo nucleófilo R1. 0 nucleófilo pode ser um álcool, uma amina ou uma das muitas outras funcionalidades que podem reagir com o cloroformato I(j). Uma reacção típica envolve o tratamento do composto I (j) com um nucleófilo, tal como 1,5 equivalentes de um álcool, na presença de 2 equivalentes de uma base, tal como K2CO3, num solvente, tal como DME. A reacção é aquecida até 80 °C durante oito horas e o solvente é removido. Em alternativa, o composto I(j) pode ser tratado com 1,5 equivalentes de 77 uma amina na presença de 1 equivalente de uma base, tal como DIPEA, num solvente, tal com THF. 0 processamento subsequente num solvente prótico, tal como metanol, na presença de uma base, tal como TEA, seguido por purificação proporciona o composto de fórmula estrutural I.

Em alternativa, o composto I(i) pode então ser submetido a uma reacção nucleofilica com um electrófilo R4 para se obter o composto I (k) . A reacção nucleofilica efectuada para esta transformação pode ser uma alquilação, acilação, sulfonilação ou aminação redutiva. Uma reacção de acilação do composto I(i) para se obter o composto I (k) é efectuada por meio do tratamento do composto I (i) com um agente de acilação na presença de uma base. Como condições tipicas de reacção refere-se a mistura do composto I(i) com um excesso de uma base, tal como DIPEA, em DCM e adição da solução resultante a um isocianato a 0°C. A reacção é agitada durante 2 horas e o processamento aquoso subsequente proporciona o composto I(k). 0 grupo protector éster etílico no azoto do pirazolo do composto I (k) é removido para se obter o composto de fórmula estrutural I. Tipicamente, este passo pode ser efectuado por meio do tratamento do composto I (k) com uma base. Como condições típicas de reacção refere-se o aquecimento ao refluxo do composto I (k) em dioxano e DCM na presença de 2 a 3 equivalentes de LiOH. 0 processamento aquoso subsequente proporciona o composto de fórmula estrutural I.

Na segunda via do esquema 2, o grupo Boc no azoto do pirrole é removido para se obter o composto I (1) . Tipicamente, este passo pode ser efectuado por meio do tratamento do composto I(g) com um ácido forte. Como condições típicas de reacção refere-se o tratamento do 78 composto I(g) com HC1 4 N em dioxano e DCM. 0 processamento aquoso subsequente proporciona o composto 1(1). 0 composto 1(1) pode então ser submetido a uma reacção nucleofilica com uma electrófilo R4 para se obter o composto I (m) . Uma vez que o grupo -NH2 ligado ao pirazolo no composto I(1) é menos reactivo que o azoto do pirrole do composto I (1), a transformação do composto 1(1) no composto I (m) pode ser efectuada na ausência de protecção do grupo -NH2 no pirazolo do composto 1(1). A reacção nucleofilica efectuada para esta transformação pode ser uma alquilação, acilação, sulfonilação, aminação redutiva. São preferidas condições de reacção relativamente suaves para se alcançar a selectividade da reacção. Uma reacção de acilação do composto I(1) para se obter o composto I(m) é efectuada por meio do tratamento do composto 1(1) com um agente de acilação na presença de uma base. Como condições típicas de reacção refere-se a mistura do composto 1(1) com um excesso de uma base, tal como DIPEA, em DCM e a adição da solução resultante a um isocianato a 0°C. A mistura de reacção é mantida a 0°C durante cerca de duas horas e o processamento aquoso subsequente proporciona o composto I(m). 0 composto I(m) é então submetido a uma reacção nucleofilica com um resíduo electrófilo R1. Esta reacção nucleofilica pode ser uma acilação, alquilação, sulfonilação, aminação redutiva ou uma das muitas outras reacções que uma funcionalidade amina suporta. Como condições típicas para a reacção de acilação refere-se o tratamento do composto I(m) com um agente de acilação, tal como R^NCO, na presença de uma base, tal como 2 equivalentes de DIPEA, num solvente, tal como diclorometano, durante 2 horas. Em alternativa, o composto I (m) pode ser 79 tratado com um agente de acilação, tal como R1-COOR, em que 0 símbolo R representa um grupo de activação, tal como p-nitrofenilo, na presença de uma base, tal como 2 equivalentes de DIPEA, num solvente, tal como 1,2-dicloroetano. 0 processamento aquoso subsequente proporciona o composto I(n). 0 grupo protector éster metílico no azoto do pirazolo do composto I (n) é removido, tipicamente, com uma base para se obter a base livre do composto I. Como condições típicas de reacção refere-se a mistura do composto I (n) com TEA num solvente prótico, tal como metanol, seguida por purificação para se obter o composto de fórmula estrutural I.

Em alternativa, o grupo protector éster metílico no azoto no pirazolo do composto I(m) é removido para se obter a base livre do composto I(o). Tipicamente, este passo pode ser efectuado por tratamento do composto I(m) com uma base. Como condições típicas de reacção refere-se o aquecimento ao refluxo do composto I(m) em dioxano e DCM na presença de 1 a 3 equivalentes de UOH. 0 processamento aquoso subsequente proporciona o composto I(o). 0 composto I(o) é então submetido a uma reacção nucleofílica com um resíduo electrófilo. Esta reacção nucleofílica pode ser uma acilação, alquilação, sulfonilação, aminação redutiva ou uma das muitas outras reacções que a funcionalidade amina suporta. Como condições típicas para a reacção de acilação refere-se o tratamento do composto I (o) com um agente de acilação, tal como R1-C0C1, na presença de uma base, tal como 2 equivalentes de DIPEA, num solvente, tal como diclorometano. A mistura de reacção é agitada durante quatro horas e o processamento aquoso e purificação 80 subsequentes proporciona o composto de fórmula estrutural I.

Salvo quando indicado de outro modo, todas as referências aqui feitas aos compostos da invenção incluem referências aos seus sais, solvatos, hidratos e complexos e a solvatos, hidratos e complexos dos seus sais, incluindo polimorfos, estereoisómeros e suas versões isotopicamente marcadas.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis compreendem sais de adição de ácido e sais de base (incluindo dissais).

Os sais de adição de ácido adequados são formados a partir de ácidos que formam sais não tóxicos. Como exemplos refere-se os sais acetato, aspartato, benzoato, besilato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, borato, camsilato, citrato, edisilato, esilato, formato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, hexafluorofosfato, hibenzato, cloridrato/cloreto, bromidrato/brometo, iodidrato/iodeto, isetionato, lactato, malato, maleato, malonato, mesilato, metilsulfato, naftilato, 2-napsilato, nicotinato, nitrato, orotato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogeno-fosfato/di-hidrogeno-fosfato, sacarato, estearato, succinato, tartrato, tosilato e trifluoroacetato.

Faz-se observar que quando um sal particular de uma base livre do composto B ou um sal particular de um ácido livre do composto A é descrito na presente invenção, a correspondente base livre do composto B ou ácido livre do composto A também está abrangido pela presente invenção, o tratamento do sal de base livre do composto B com uma pequena quantidade de K2CO3 aquoso, seguido pela extração da solução aquosa com uma grande quantidade de solvente orgânico proporciona normalmente a base livre do composto B 81 com um bom rendimento. Caso a base livre do composto B seja extremamente solúvel em água, então é recomendada a utilização de um solvente orgânico adequado para dissolver o sal e subsequente adição de K2CO3 sólido. A subsequente filtração ou cromatografia proporciona normalmente a base livre do composto B. 0 ácido livre do composto A pode ser obtido a partir do seu sal utilizando métodos semelhantes.

Os sais de base adequados são formados a partir de bases que formam sais não tóxicos. Como exemplos refere-se os sais de alumínio, arginina, benzatina, cálcio, colina, dietilainina, diolamina, glicina, lisina, magnésio, meglumina, olamina, potássio, sódio, trometamina e zinco.

Para uma descrição sobre sais adequados, ver "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" de Stahl e Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002), cuja descrição se considera aqui incorporada por referência na sua totalidade.

Um sal farmaceuticamente aceitável dos compostos da invenção pode ser facilmente preparado por mistura de soluções do composto e do ácido ou base desejado, consoante adequado. 0 sal pode precipitar a partir da solução e ser recolhido por filtração ou então pode ser recuperado por evaporação do solvente. O grau de ionização no sal pode variar desde completamente ionizado até praticamente não ionizado.

Os compostos da invenção podem existir em formas não solvatadas ou formas solvatadas. O termo "solvato" é aqui utilizado para descrever um complexo molecular que compreende o composto da invenção e uma ou mais moléculas de solvente farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, etanol. O termo "hidrato" é utilizado quando o solvente é 82 água. Os solvatos farmaceuticamente aceitáveis de acordo com a invenção incluem hidratos e solvatos em que o solvente de cristalização pode ser isotopicamente substituído, v.g., D2O, de-acetona, d6~DMS0.

Também estão abrangidos pelo âmbito da invenção os complexos, tais como clatratos, complexos de inclusão fármaco-hospedeiro, em que, ao contrário dos solvatos supramencionados, o fármaco e o hospedeiro estão presentes em quantidades estequiométricas ou não estequiométricas. Também estão abrangidos complexos do fármaco que contêm dois ou mais componentes orgânicos e/ou inorgânicos, os quais podem estar em quantidades estequiométricas ou não estequiométricas. Os complexos resultantes podem ser ionizados, parcialmente ionizados ou não ionizados. Para uma revisão de tais complexos, ver J Pharm Sei, 64 (8), 1269-1288 de Haleblian (Agosto de 1975), cuja descrição se considera aqui incorporada por referência na sua totalidade.

Também estão abrangidos pelo âmbito da invenção polimorfos, pró-fármacos e isómeros (incluindo isómeros ópticos, geométricos e tautoméricos) dos compostos da invenção.

Os derivados dos compostos da invenção que podem apresentar pouca ou nenhuma actividade farmacológica, por eles próprios, podem, quando administrados a um paciente, ser convertidos em compostos da invenção, por exemplo, por clivagem hidrolítica. Tais derivados são designados como "pró-fármacos". Outras informações sobre a utilização de pró-fármacos pode ser encontrada em 'Prodrugs as Novel Delivery Systems', Vol. 14, ACS Symposium Series (T Higuchi e W Stella) e em 'Bioreversible Carriers in Drug Design', 83

Pergamon Press, 1987 (ed. E B Roche, American Pharmaceutical Association), cujas descrições se consideram aqui incorporadas por referência na sua totalidade.

Os pró-fármacos de acordo com a invenção podem, por exemplo, ser produzidos por substituição de funcionalidades adequadas presentes nos compostos da invenção com determinados resíduos conhecidos pelos especialistas na matéria como "pró-resíduos", conforme descrito, por exemplo, em "Design of Prodrugs" de H Bundgaard (Elsevier, 1985), cuja descrição se considera aqui incorporada por referência na sua totalidade.

Como alguns exemplos de pró-fármacos de acordo com a invenção refere-se: (i) no caso de o composto conter uma funcionalidade ácido carboxílico (-COOH), um seu éster, por exemplo, substituição do hidrogénio por alquilo(CR-Cs) ; (ii) no caso de o composto conter uma funcionalidade álcool (-0H), um seu éter, por exemplo, substituição do hidrogénio por alcanoiloxi (Ci-Ce) -metilo e (iii) no caso de o composto conter uma funcionalidade amino primário ou secundário (-NH2 ou -NHR, em que o simbolo R representa H), uma sua amida, por exemplo, substituição de um ou de ambos os hidrogénio por alcanoilo (C1-C10) ·

Outros exemplos de grupos de substituição de acordo com os exemplos seguintes e exemplos de outros tipos de pró-fármacos podem ser encontrados nas referências supramencionadas.

Por último, há determinados compostos da invenção que podem, eles próprios, actuar como pró-fármacos de outros compostos da invenção. 84

Os compostos da invenção que contêm um ou mais átomos de carbono assimétricos podem existir como dois ou mais estereoisómeros. No caso de um composto da invenção conter um grupo alcenilo ou alcenileno, então são possíveis isómeros geométricos cis/trans (ou Z/E) . No caso de o composto conter, por exemplo, um grupo ceto ou oxima ou um residuo aromático, então pode ocorrer isomerismo tautomérico ( 'tautomerismo') . Um composto individual pode exibir mais do que um tipo de isomerismo.

Também estão incluídos no âmbito da invenção todos os estereoisómeros, isómeros geométricos e formas tautoméricas dos compostos da invenção, incluindo compostos que exibem mais do que um tipo de isomerismo, bem como suas misturas de um ou mais isómeros. Também estão incluídos sais de adição de ácido ou sais de base em que o contra-ião é opticamente activo, por exemplo, D-lactato ou L-litina, ou racémico, por exemplo, DL-tartrato ou DL-arginina.

Os isómeros cis/trans podem ser separados por técnicas convencionais bem conhecidas pelos especialistas na matéria, por exemplo, cromatografia ou cristalização fraccional.

Como técnicas convencionais para a preparação/ /isolamento de enantiómeros individuais refere-se sintese quiral a partir de um precursor opticamente puro adequado ou resolução do racemato (ou do racemato de um sal ou derivado), utilizando, por exemplo, cromatografia liquida de elevado rendimento quiral (HPLC).

Em alternativa, o racemato (ou precursor racémico) pode reagir com um composto opticamente activo adequado, por exemplo, um álcool, ou, no caso de o composto conter um residuo acidico ou básico, um ácido ou base, tal como ácido 85 tartárico ou 1-feniletilamina. A mistura diastereomérica resultante pode ser separada por cromatografia e/ou cristalização fraccional e um ou ambos os diastereoisómeros convertidos no (s) correspondente(s) enantiómero(s) puro(s) por métodos bem conhecidos pelos especialistas na matéria.

Os compostos quirais da invenção (e os seus precursores quirais) podem ser obtidos numa forma enantiomericamente enriquecida utilizando cromatografia, tipicamente HPLC, sobre uma resina assimétrica com uma fase móvel constituída por um hidrocarboneto, tipicamente heptano ou hexano, que contém entre 0% e 50% de isopropanol, tipicamente entre 2% e 20%, e entre 0% e 5% de uma alquilamina, tipicamente 0,1% de dietilamina. Por concentração do eluado obtém-se a mistura enriquecida.

Os conglomerados estereoisoméricos podem ser separados por técnicas convencionais conhecidas pelos especialistas na matéria; ver, por exemplo, "Stereochemistry of Organic Compounds" de E L Eliel (Wiley, New York, 1994), cuja descrição se considera aqui incorporada por referência na sua totalidade. A invenção também compreende compostos isotopicamente marcados da invenção, em que um ou mais átomos são substituídos por um átomo que possui o mesmo número atómico mas uma massa atómica ou número de massa diferente da massa atómica ou número de massa normalmente encontrado na natureza. Como exemplos de isótopos adequados para inclusão nos compostos da invenção refere-se isótopos de hidrogénio, tais como 2H e 3H, de carbono, tais como nC, 13C e 14C, de cloro, tais como 36C1, de flúor, tais como 18F, de iodo, 1 9 9 tais como I e 125I, de azoto, tais como 13N e 15N, de oxigénio, tais como 150, 170 e 180, de fósforo, tais como 86 32P, e de enxofre, tais como 35S. Há determinados compostos isotopicamente marcados da invenção, por exemplo, aqueles que incorporam um isótopo radioactivo, que são úteis em estudos de distribuição de fármaco e/ou substrato em tecidos. Os isótopos radioactivos tritio, 3H, e carbono-14, 14C, são particularmente úteis para este propósito tendo em vista a sua facilidade de incorporação e métodos rápidos de detecção. A substituição com isótopos mais pesados, tais como deutério, 2H, pode proporcionar determinadas vantagens terapêuticas resultantes de uma estabilidade metabólica superior, por exemplo, aumento no periodo de semi-vida in vivo ou requisitos de dosagem reduzidos, pelo que poderão ser preferidos em algumas circunstâncias. A substituição com isótopos que emitem positrões, tais como 1:LC, 18F, 160 e 13N, pode ser útil em estudos de tomografia de emissão de positrões (PET) para examinar a ocupação do receptor de substrato.

Os compostos isotopicamente marcados da invenção podem ser normalmente preparados por técnicas convencionais conhecidas pelos especialistas na matéria ou por processos análogos aos aqui descritos, utilizando um reagente isotopicamente marcado adequado em vez do reagente não marcado, de outro modo utilizado.

Os solvatos farmaceuticamente aceitáveis de acordo com a invenção compreendem aqueles em que o solvente de cristalização pode ser isotopicamente substituído, v.g., D2O, d6~acetona, d6_DMS0.

Os compostos da invenção pretendidos para utilização farmacêutica podem ser administrados como produtos cristalinos ou amorfos ou como suas misturas. Por exemplo, podem ser obtidos como tampões sólidos, pós ou películas 87 por métodos, tais como precipitação, cristalização, liofilização, secagem por pulverização ou secagem por evaporação. Para este propósito, também é possivel utilizar secagem por micro-ondas ou por frequência de rádio.

Os compostos podem ser administrados por si sós ou em combinação com um ou mais compostos diferentes da invenção, ou em combinação com um ou mais fármacos diferentes (ou como uma qualquer sua combinação). De um modo geral, serão administrados sob a forma de uma formulação em associação com um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. 0 termo "excipiente" é aqui utilizado para descrever qualquer ingrediente diferente do(s) composto(s) da invenção. A escolha do excipiente irá depender, em grande parte, de factores tais como o modo particular de administração, o efeito do excipiente sobre a solubilidade e estabilidade e a natureza da forma de dosagem.

As composições farmacêuticas adequadas para a administração dos compostos da invenção e os métodos para a sua preparação serão facilmente evidentes para os especialistas na matéria. Tais composições e métodos para a sua preparação podem ser encontrados, por exemplo, em 'Remington's Pharmaceutical Sciences', 19a Edição (Mack Publishing Company, 1995), cuja descrição se considera aqui incorporada por referência na sua totalidade.

Administração por via oral

Os compostos da invenção podem ser administrados por via oral. A administração por via oral pode envolver engolir, de modo que o composto entre no tracto gastrointestinal, ou pode ser utilizada a administração por 88 via bocal ou sublingual, na qual o composto entra na corrente sanguínea directamente a partir da boca.

Como formulações adequadas para administração por via oral refere-se formulações sólidas, tais como comprimidos, cápsulas que contêm particulados, liquidos ou pós, pastilhas (incluindo carregadas com liquido), produtos mastigáveis, multi- e nano-particulados, geles, solução sólida, lipossoma, peliculas (incluindo muco-adesivas), óvulos, pulverizações e formulações liquidas.

As formulações liquidas compreendem suspensões, soluções, xaropes e elixires. Tais formulações podem ser utilizadas como cargas em cápsulas moles ou duras e compreendem, tipicamente, um veiculo, por exemplo, água, etanol, polietileno-glicol, propileno-glicol, metil-celulose ou um óleo adequado, e um ou mais agentes emulsionantes e/ou agentes de suspensão. As formulações liquidas também podem ser preparadas por reconstituição de um sólido, por exemplo, a partir de uma saqueta.

Os compostos da invenção também podem ser utilizados em formas de dosagem de dissolução rápida, desintegração rápida, tais como aquelas descritas em Expert Opinion In Therapeutic Patents, 11 (6), 981-986 por Liang e Chen (2001), cuja descrição se considera aqui incorporada por referência na sua totalidade.

Para formas de dosagem em comprimido, dependendo da dose, o fármaco pode constituir até entre 1% em peso e 80% em peso da forma de dosagem e, mais tipicamente, entre 5% em peso e 60% em peso da forma de dosagem. Para além do fármaco, os comprimidos contêm normalmente um desintegrante. Como exemplos de desintegrantes refere-se glicolato de amido de sódio, carboximetil-celulose de 89 sódio, carboximetil-celulose de cálcio, croscarmelose de sódio, crospovidona, polivinilpirrolidona, metil-celulose, celulose microcristalina, hidroxipropil-celulose substituída com alquilo inferior, amido, amido pré-gelatinizado e alginato de sódio. De um modo geral, o desintegrante irá compreender entre 1% em peso e 25% em peso e, de preferência, entre 5% em peso e 20% em peso da forma de dosagem.

Os aglutinantes são normalmente utilizados para conferir qualidades coesivas à formulação em comprimido. Como aglutinantes adequados refere-se celulose microcristalina, gelatina, açúcares, polietileno-glicol, gomas naturais e sintéticas, polivinilpirrolidona, amido pré-gelatinizado, hidroxipropil-celulose e hidroxipropil-metil-celulose. Os comprimidos podem ainda conter diluentes, tais como lactose (mono-hidrato, mono-hidrato seco por pulverização, anidra e semelhante), manitol, xilitol, dextrose, sacarose, sorbitol, celulose microcristalina, amido e di-hidrato de fosfato de cálcio dibásico.

Os comprimidos também podem conter facultativamente agentes tensioactivos, tais como lauril-sulfato de sódio e polissorbato 80, e deslizantes tais como dióxido de silício e talco. Quando presentes, os agentes tensioactivos estão tipicamente presentes em quantidades compreendidas entre 0,2% em peso e 5% em peso do comprimido e os deslizantes estão tipicamente presentes em quantidades compreendidas entre 0,2% em peso e 1% em peso do comprimido.

Os comprimidos também contêm normalmente lubrificantes, tais como estearato de magnésio, estearato de cálcio, estearato de zinco, estearil-fumarato de sódio e 90 misturas de estearato de magnésio com lauril-sulfato de sódio. De um modo geral, os lubrificantes estão presentes em guantidades compreendidas entre 0,25% em peso e 10% em peso e, de preferência, entre 0,5% em peso e 3% em peso do comprimido.

Como outros ingredientes convencionais refere-se antioxidantes, corantes, agentes edulcorantes, conservantes e agentes para disfarçar o sabor.

Os comprimidos exemplificativos contêm até cerca de 80% em peso de fármaco, entre cerca de 10% em peso e cerca de 90% em peso de aglutinante, entre cerca de 0% em peso e cerca de 85% em peso de diluente, entre cerca de 2% em peso e cerca de 10% em peso de desintegrante e entre cerca de 0,25% em peso e cerca de 10% em peso de lubrificante.

As misturas para comprimidos podem ser submetidas a compressão directamente ou por meio de um cilindro para se formar os comprimidos. Em alternativa, as misturas ou porções de misturas para comprimidos podem ser granuladas a húmido, a seco ou por fusão, podem ser submetidas a congelamento do material fundido ou podem ser extrudidas antes da preparação de comprimidos. A formulação final pode compreender uma ou mais camadas e pode ser revestida ou não revestida; ou encapsulada. A formulação de comprimidos encontra-se descrita mais minuciosamente em "Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1", de H. Lieberman e L. Lachman, Mareei Dekker, N.Y., N.Y., 1980 (ISBN 0-8247-6918-X), cuja descrição se considera aqui incorporada por referência na sua totalidade.

As formulações sólidas para administração por via oral podem ser formuladas para uma libertação imediata e/ou 91 modificada. As formulações de libertação modificada compreendem a libertação retardada, prolongada, por impulsos, controlada, dirigida e programada.

As formulações de libertação modificada adequadas encontram-se descritas na patente de invenção norte-americana n° 6 106 864. Os pormenores de outras tecnologias de libertação adequadas, tais como dispersões de energia elevada e partículas osmóticas e revestidas, podem ser encontrados em Verma et ai., Pharmaceutical Technology Online, 25(2), 1-14 (2001). A utilização de pastilha mastigável para se alcançar uma libertação controlada encontra-se descrita no documento WO 00/35298. As descrições destas referências são aqui incorporadas por referência na sua totalidade.

Administração por via parentérica

Os compostos da invenção também podem ser administrados directamente à corrente sanguinea, ao músculo ou a um órgão interno. Como meios adequados para administração por via parentérica refere-se as vias intravenosa, intra-arterial, intraperitoneal, intratecal, intraventricular, intrauretral, intrasternal, intracraniana, intramuscular e subcutânea. Como dispositivos adequados para administração por via parentérica refere-se injectores de agulha (incluindo microagulha), injectores sem agulha e técnicas de infusão.

Tipicamente, as formulações parentéricas são soluções aquosas que contêm excipiente, tais como sais, hidratos de carbono e agentes de tamponamento (de preferência ara um pH compreendido entre 3 e 9), embora, para algumas aplicações, possam ser mais adequadamente formulados como uma solução 92 não aquosa estéril ou como uma forma anidra para ser utilizada em conjunto com um veiculo adequado, tal como água isenta de pirogénio estéril. A preparação de formulações parentéricas sob condições estéreis, por exemplo, por liofilização, pode ser facilmente executada utilizando técnicas farmacêuticas convencionais bem conhecidas pelos especialistas na matéria. A solubilidade dos compostos da invenção utilizados na preparação de soluções parentéricas pode ser aumentada por meio da utilização de técnicas de formulação adequadas, tais como a incorporação de agentes para aumentar a solubilidade.

As formulações para administração por via parentérica podem ser formuladas para uma libertação imediata e/ou modificada. As formulações de libertação modificada compreendem a libertação retardada, prolongada, por impulsos, controlada, dirigida e programada. Assim, os compostos da invenção podem ser formulados como um sólido, semi-sólido ou liquido tixotrópico para administração como um depósito implantado que proporciona a libertação modificada do composto activo. Como exemplos de tais formulações refere-se endopróteses revestidas com fármaco e microesferas de PGLA.

Administração por via tópica

Os compostos da invenção também podem ser administrados por via tópica à pele ou à mucosa, isto é, por via dérmica ou transdérmica. Como formulações tipicas para este propósito refere-se geles, hidrogeles, loções, soluções, cremes, unguentos, pós para aplicação de poeiras, 93 revestimentos, espumas, películas, adesivos para a pele, bolachas, implantes, esponjas, fibras, pensos e microemulsões. Também é possível utilizar lipossomas. Como veículos típicos refere-se álcool, água, óleo mineral, petrolato líquido, petróleo branco, glicerina, polietileno-glicol e propileno-glicol. Também é possível incorporar auxiliares para aumentar a penetração; ver, por exemplo, J Pharm Sei, 88 (10), 955-958 de Finnin e Morgan (Outubro de 1999). Como outros meios para administração por via tópica refere-se a administração por electroporação, iontoforese, fonoforese, sonoforese e injecção com microagulha ou livre de agulha (v.g., Powderject™, Bioject™, etc.). As descrições destas referências são aqui incorporadas por referência na sua totalidade.

As formulações para administração por via tópica podem ser formuladas para libertação imediata e/ou modificada. As formulações de libertação modificada compreendem a libertação retardada, prolongada, por impulsos, controlada, dirigida e programada.

Administração por inalagão/intranasal

Os compostos da invenção também podem ser administrados por via intranasal ou por inalação, tipicamente sob a forma de um pó seco (por si só, como uma mistura, por exemplo, numa mistura anidra com lactose ou como uma mistura de componentes em partículas, por exemplo, misturada com fosfolípidos, tais como fosfatidileolina), a partir de um inalador de pó seco ou como uma pulverização em aerossol a partir de um recipiente pressurizado, bomba, pulverizado, atomizador (de preferência, um atomizador que utilize electro-hidrodinâmica para produzir uma neblina 94 fina), ou nebulizador, na presença ou na ausência de utilização de um propulsor, tal como 1,1,1,2-tetrafluoro-etano ou 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropano. Para utilização intranasal, o pó pode incluir um agente bioadesivo, por exemplo, quitosano ou ciclodextrina. 0 recipiente pressurizado, bomba, pulverizador, atomizador ou nebulizador contém uma solução ou suspensão do(s) composto (s) da invenção que compreende, por exemplo, etanol, etanol aquoso ou um agente alternativo adequado para dispersar, solubilizar ou estender a libertação do composto activo, um propulsor ou propulsores, enquanto solvente, e um agente tensioactivo facultativo, tal como trioleato de sorbitano, ácido oleico ou um ácido oligoláctico.

Antes da utilização numa formulação em pó seco ou em suspensão, o produto fármaco é micronizado até um tamanho adequado para administração por inalação (tipicamente inferior a 5 micron). Tal pode ser alcançado por meio de um método de redução a pó adequado, tal como moagem em jacto espiral, moagem em jacto de leito fluidificado, processamento com fluido supercrítico para formar nanoparticulas, homogeneização a pressão elevada ou secagem por pulverização.

As cápsulas (preparadas, por exemplo, a partir de gelatina ou de HPMC), ampolas ou cartuchos para utilização num inalador ou insuflador podem ser formuladas de modo a conterem uma mistura em pó do composto da invenção, uma base para pó adequada, tal com lactose ou amido, e um modificador de desempenho, tal como 1-leucina, manitol ou estearato de magnésio. A lactose pode ser anidra ou pode estar presente sob a forma de mono-hidrato e, de 95 preferência, esta última. Como outros excipientes adequados refere-se dextrano, glicose, maltose, sorbitol, xilitol, fructose, sacarose e tre-halose.

Uma formulação em solução adequado para utilização num atomizador utilizando electro-hidrodinâmica para produzir uma neblina fina pode conter entre 1 yg e 20 mg do composto da invenção por actuação e o volume de actuação pode variar entre 1 yL e 100 yL. Uma formulação típica compreende um composto da invenção, propileno-glicol, água estéril, etanol e cloreto de sódio. Como solventes alternativos utilizáveis em vez de propileno-glicol refere-se glicerol e polietileno-glicol. É possível adicionar edulcorantes adequados, tais como mentol e levomentol, ou adoçantes, tais como sacarina ou sacarina de sódio, às formulações da invenção pretendidas para administração por inalação/intranasal.

As formulações para administração por inalação/ /intranasal podem ser formuladas libertação imediata e/ou modificada, utilizando, por exemplo, ácido poli-(ácido DL-láctico-coglicólico) (PGLA). As formulações para libertação modificada compreendem a libertação retardada, prolongada, por impulsos, controlada, dirigida e programada.

No caso de inaladores e aerossóis de pó seco, a unidade de dosagem é determinada por meio de uma válvula que administra uma quantidade determinada. As unidades de acordo com a invenção são tipicamente arranjadas para administrar uma dose determinada ou "puff" que contém a quantidade desejada do composto da invenção. A dose global diária pode ser administrada numa dose individual ou, mais habitualmente, em doses divididas ao longo do dia. 96

Administração por via rectal/intravaginal

Os compostos da invenção podem ser administrados por via rectal ou vaginal, por exemplo, sob a forma de um supositório, pessário ou enema. A manteiga de cacau constitui a base tradicional para supositório, embora seja possível utilizar diversas alternativas consoante adequado.

As formulações para administração por via rectal/vaginal podem ser formuladas para uma libertação imediata e/ou modificada. As formulações para libertação modificada compreendem a libertação retardada, prolongada, por impulsos, controlada, dirigida e programada.

Administração por via ocular

Os compostos da invenção também podem ser administrados directamente no olho ou no ouvido, tipicamente sob a forma de gotas de uma suspensão ou solução micronizada em soluto salino estéril, com o Ph ajustado e isotónico. Com outras formulações adequadas para administração por via ocular ou ao ouvido refere-se unguentos, implantes biodegradáveis (v.g., esponjas de gel absorvíveis, colagénio) e não biodegradáveis (v.g., silicone), bolachas, lentes e sistemas de particulados ou vesiculares, tais como niossomas ou lipossomas. É possível incorporar um polímero, tal como um ácido poliacrílico reticulado, álcool polivinílico, ácido hialurónico, um polímero celulósico, por exemplo, hidroxipropilmetil-celulose, hidroxietil-celulose ou metil-celulose, ou um polímero heteropolissacárido, por exemplo, goma de gelano, em conjunto com um conservante, tal como cloreto de benzalcónio. Tais formulações também podem ser administradas por iontoforese. 97

As formulações para administração por via ocular/ao ouvido podem ser formuladas para libertação imediata e/ou modificada. As formulações para libertação modificada compreendem a libertação retardada, prolongada, por impulsos, controlada, dirigida e programada.

Outras tecnologias

Os compostos da invenção podem ser combinados com entidades macromoleculares solúveis, tais como ciclodextrina e seus derivados adeguados ou polímeros que contêm polietileno-glicol, para melhorar a sua solubilidade, taxa de dissolução, disfarçar o sabor, biodisponibilidade e/ou estabilidade para utilização em qualquer um dos modos de administração referidos antes.

Os complexos fármaco-ciclodextrina, por exemplo, são normalmente úteis para a maior parte das formas de dosagem e vias de administração. É possível utilizar complexos de inclusão e complexos de não inclusão. Como alternativa à complexação directa com o fármaco, a ciclodextrina pode ser utilizada como aditivo auxiliar, isto é, como um veículo, diluente ou solubilizador. Para estes propósitos são mais frequentemente utilizadas alfa-, beta- e gama-ciclodextrinas, cujos exemplos podem ser encontrados nas publicações PCT nos WO 91/11172, WO 94/02518 e WO 98/55148, cujas descrições se consideram aqui incorporadas por referência na sua totalidade. A quantidade de composto activo administrado irá dependente do sujeito que se pretende tratar, da gravidade do distúrbio ou patologia, da taxa de administração, da 98 disposição do composto e da discrição do médico assistente. No entanto, uma dosagem eficaz está tipicamente compreendida entre cerca de 0,001 e cerca de 100 mg por kg de massa corporal por dia e, de preferência, entre cerca de 0,01 e cerca de 35 mg/kg/dia, numa dose individual ou em doses divididas. Para um ser humano com 70 kg, esta quantidade estaria compreendida entre cerca de 0,07 e cerca de 7000 mg/dia e, de preferência, entre cerca de 0,7 e acerca de 2500 mg/dia. Em alguns casos, poderão ser adequados niveis de dosagem inferiores ao limite inferior do intervalo supramencionado, ao passo que em outros casos poderão ser utilizadas doses superiores sem provocar quaisquer efeitos secundários prejudiciais, sendo tais doses superiores dividias em diversas doses mais pequenas para uma administração ao longo do dia.

Estojo de partes

Visto que é desejável administrar uma combinação de compostos activos, por exemplo, para o propósito de tratar uma doença ou patologia particular, pertence ao âmbito da presente invenção que duas ou mais composições farmacêuticas, em que pelo menos uma delas contém um composto de acordo com a invenção, possa ser convenientemente combinada para formar um estojo adequado para a co-administração das composições. Assim, o estojo de acordo com a invenção compreende duas ou mais composições farmacêuticas em separado, em que pelo menos uma delas contém um composto da invenção, e meios para manter em separado as referidas composições, tais como um recipiente, uma garrafa dividida ou uma embalagem dividida de folhas metálicas. Como exemplos de um tal estojo refere-se a 99 embalagem de ampolas familiar utilizada para o acondicionamento de comprimidos, cápsulas e semelhantes. 0 estojo da invenção é particularmente adequado para a administração de formas de dosagem diferentes, por exemplo, oral e parentérica, para a administração de composições separadas em intervalos de dosagem diferentes ou para determinar o titulo das composições separadas uma em relação à outra. Para garantir o cumprimento, o estojo inclui tipicamente instruções para a administração e pode ser equipado com um auxiliar de memória.

Exemplos

Nos exemplos e preparações seguintes, "BOC", "Boc" ou "boc" designa N-terc-butoxicarbonilo, "CBL" designa carbobenziloxi, "DCE" designa dicloroetano, "DCM" designa diclorometano, "DIC" designa diisopropilcarbodiimida, "DIPEA" ou "DIEA" designa diisopropil-etil-amina, "DMA" designa N,N-dimetilacetamida, "DME" designa 1,2-dimetoxi-etani, "DMF" designa dimetilformamida, "DMSO" designa sulfóxido de dimetilo, "DPPP" designa 1,3-bis-(difenil-fosfino)-propano, "HATU" designa hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzomazol-l-il)-N,N,N'N'-tetrametil-urónio, "HBTU" designa designa hexafluorofosfato de O-benzotriazol-l-il-N,N,N',N-tetrametil-urónio, "HOAc" designa ácido acético, "HOBt" designa hidrato de 1-hidroxibenzotriazole, "IPA" designa álcool isopropilico, "LAH" designa hidreto de lítio-aluminio, "LiHMDS" designa bis-(trimetilsilil)-amida de litio, "MTBE" designa éter metil-t-butílico, "NMP" designa l-metil-2-pirrolidinona, "TEA" designa trietilamina, "TFA" designa ácido trifluoroacético, "TIPS" triisopropilsililo e "Trt" designa trifenilmetilo. 100

Exemplos específicos

Via II (cauda primeiro)

Exemplo de referência 1: 3-(benzoilamino)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (lS)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo. << v-Wa .. . s íí—

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Preparação do composto la: 3-(benzoilamino)-6,6- dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. A uma solução arrefecida (0°C) e agitada do composto I (g) (12,0 g, 37,0 mmol) e DIPEA (13,0 mL, 74,0 mmol) em diclorometano (100 mL) adicionou-se, gota a gota, uma solução de cloreto de benzoilo (5,75 g, 40,7 mmol) em diclorometano (50 mL) . Agitou-se a solução limpida resultante à temperatura ambiente durante 12 horas. Lavou-se a mistura de reacção com água (2 x 75 mL) , secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna através de gel de sílica (40% de acetato de etilo em hexano) para se obter a 101 amida la (15,0 g, 95,0%) com o aspecto de um sólido esbranquiçado. 1H NMR (300 MHz, CDCI3) õ: 1,44 - 1,56 (m, 12 H) 1,69 (s, 3 H) 1,75 (s, 3 H) 4,58 (q, J=7,10 Hz, 2 H) 4,74 (s, 1 H) 4,79 (s, 1 H) 7,44 - 7, 64 (m, 3 H) 7,87 -7,96 (m, 2 H) 10,97 - 11,11 (m, 1 H) .

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários o 0 3-[(4-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]-pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. 1H NMR (300 MHz, clorof órmio-d) δ p.p.m. 1,44 - 1,58 (m, 12 H) 1,68 (s, 3 H) 1,75 (s, 3 H) 4,58 (q, 2L v-f phi r-O J= 7,16 Hz, 2 H) 4,72 (s, 1 H) 4,77 HjO· HNW CHj (s, 1 H) 7,13 - 7,24 (m, 2 H) 7,89 - 7,99 (m, 2 H) 11,01 (d, J=24,68 Hz, 1 H) . LCMS (APCI, M+H") : 447,5. a* Método do composto la: preparado com um rendimento de 94% a partir do composto I (g) e de cloreto de 4-fluór-benzoilo . Recristalização a partir de acetato de etilo e hexano. 102

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários O N,. Jv o ^—O f y 0-T"C«s *V~' CHj 3-[(2-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. 1H NMR (300 MHz, clorof órmio-d) δ p.p.m. 1,43 - 1,57 (m, 12 H) 1,69 (s, 3 H) 1,75 (s, 3 H) 4,59 (q, J= 7, 0 3 Hz, 2 H) 4,73 (s, 1 H) 4,79 (s, 1 H) 7,20 (dd, J=7,54, 4,52 3» Hz, 1 H) 7,27 - 7,37 (m, 1 H) 7,50 - 7,81 (m, 1 H) 8, 08 - 8,20 (m, 1 H) 11,34 (dd, J=17,71, 13,19 Hz, 1 H) . LCMS (APCI, M+H+) : 447, 6. Método do composto la: preparado com um rendimento de 91% a partir do composto I (g) e cloreto de 2-flúor-benzoilo. 103

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários o. P /-d Y**»s *V© e% Γ h, § í F % 3- [ (2,4-difluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c] -pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. 1H NMR (300 MHz, clorof órmio-d) δ p.p.m. 1,44 - 1,57 (m, 12 H) 1,69 (s, 3 H) 1,75 (s, 3 H) 4,58 (q, J= 7, 10 Hz, 2 H) 4,72 (s, 1 H) 4,77 (s, 1 H) 6, 89 - 7, 00 (m, 1 H) 7,04 (t, J= 8, 19 Hz, 1 H) 8,12 - 8,25 (m, 1 H) 11,29 (dd, J=18,48, 13,00 Hz, 1 H) . LCMS (APCI, M+H+) : 465,4. Método do composto la: preparado com um rendimento de 91% a partir do composto I (g) e cloreto de 2,4-diflúor-benzoílo. Recristalização a partir de hexano. 104

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários «St OM, V» ΤΓ V-€ P* / "d o- *** *v» W £ $s 6,6-dimetil-3-{[trifluorometil)-benzoil]-amino}-pirrolo[3,4-c]-pirazolo-2,5(4H,6H)-d]-carboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. 1H NMR (300 MHz, clorof órmio-d) δ p.p.m. 1,45 - 1, 60 (m, 12 H) 1,71 (s, 3 H) 1,77 (s, 3 H) 4,61 (q, J= 7,10 Hz, 2 H) 4,75 (s, 1 H) 4,81 (s, 1 H) 7,74 - 7, 87 (m 2 H) 8,00 8,10 (m 2 H) 11,15 (d, J=25, 06 Hz, 1 H) , LCMS (APCI, M+H+) : 497,5. Método do composto la: preparado com um rendimento de 72% a partir do composto I (g) e de cloreto de 4-trifluorometil-benzoilo. 105

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários r~o >'w **! U 6,6-dimetil-3-[(piridina-2-il-carbonil)-amino]-pirrolo[3,4-c]-pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. 1H NMR (300 MHz, DMS0-d&) d p.p.m. 1,38 (t, J= 7, 0 6 Hz, 3 H) 1,46 (d, J= 5,4 6 Hz, 9 H) 1,60 (d, J=4,90 Hz, 6 H) 4,47 (q, J=7,03 Hz, 2 H) vi p;4 4,61 (d, J= 8,4 8 Hz, 2 H) 7,69 -7,77 (m, 1 H) 8,09 (t, J=7,72 Hz 1 H) 8,15 - 8,22 (m, 1 H) 8,75 (d, &8 J= 4,52 Hz, 1 H) 12,10 (d, J=5,84 Hz, 1 H) . LCMS (APCI, M+H+) : 430,5. Método do composto la: preparado com um rendimento de 93% a partir do composto I (g) e de cloreto de 2-piridil-carbonilo. 106

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários f-i m. y ¢5 3-(acetilamino)-6,6-dimetil-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1,34 (t, J = 8,0 Hz, 3H). 1,42-1,45 (m, 9H), ΗΙ,Η f 1,56 (s, 3H) , 1,57 (s, 3H) , 2,12- *sC HN. „ \,^ VssO feHs t HjC fa 2,13 (d, J = 4,0 Hz, 3H) , 4,36-4,43 (m, 4H) , 10,15 (s, 1H) . LCMS [M + H]+ 367. Método do composto la: preparado com um rendimento de 54% a partir do composto I (g) e de cloreto de acetilo. 107

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários W i Vf- P** r-~é V-fr™ <Ms ^ '*'ΗγΟ '-Hg 3-(isobutirilamino)-6,6-dimetil-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1,11 (d, J = 7,1 Hz, 6H) , 1,34 (t, J = 7,1 Hz, 3H), [1,43 (s), 1,46 (s) 9H em conjunto], [1,57 (s) , 1,58 (s) 6H em conjunto], 2,70 (quint. de d, JqU1nt = 6,8 Hz, Jd = 3,5 Hz, 1H) , [4,48 (s), 4,43 (s) 2H em *S conjunto], 4,42 (q, J = 7,1 Hz, 2H) , 10,12 (s, 1H) . Anal. (C19H30N4O5) C. Η. N. LCMS (APCI, M+H+) : 395,4. Método do composto la: preparado com um rendimento de 94% a partir do composto I (g) e de cloreto de isobutirilo. 108

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários CH, r-o '«Hh-eNa « H À 3-[(ciclopropilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. NMR (dmso-de) δ: 0,85 (m, 4H) , 1 35 (t, J= 7,1 Hz, 3H), [1,42 (s), 1,45 (s) 9H em conjunto], [1,55 (s), 1,57 (s) 6H em conjunto], 1,99 (m, 1H) , [4,32 (s), 4,36 (s) 2H em conjunto], 4,42 (q, J = 7,1 Hz, 2H) 10,41 (s, 1H) . Anal. (C19H20N4O5) C Η, N. LCMS (APCI M+H+) : 393,4. Método do composto la: preparado com um rendimento de 95% a partir do composto I (g) e de cloreto de ciclopropano-carbonilo. 109

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários Ο. :Ν^ P ?*** /-o r ** “ys H H-id^Tv 3-[(2,2-dimetilpropanoil)-amino]-6,6-dimetil-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. NMR (dmso-de) δ: 1 21 (s, 9H) , 1,34 (t, J = 7,1 Hz, 3H) [1,43 (s), 1,46 (s) 9H em conjunto], [1,56 (s) , 1,58 (s) 6H em conjunto], [4,43 (s), 4 47 (s) 2H • f sT^LS .. i em conjunto], 4,43 (q, J = 7,1 Hz, 2H) , [10,21 (s), 10,25 (s) 1H em conjunto]. Anal. (C20H32N4O5) C Η N. LCMS (APCI, M+H+) : 353,2. Método do composto la: preparado com um rendimento de 95% a partir do composto I (g) e de cloreto de trimetilacetilo. 110Estrutura e exemplo de referência n°

Nome químico, dados analíticos e comentários 3-[(ciclobutilcarbonil)-amino]-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. ΧΗ NMR (DMSO-de) 1 34 (t, J = 8 0

Hz, 3H) 1,43-1,46 (m, 9H). 1,56 V/rVf /-o MSi. J3 (s, 3H) , 1,58 (s, 3H) , 1,75-1,84 (m 1H) , 1, 90-1, 99 (m, 1H) . 2,13- 2,21 (m, 4H) , 3 29-3,37 (m, 1H) , 4,38- 4,44 (m 4H) 9 9& (s, 1H) . LCMS [M + H]+ 407. Método do composto la: preparado com um rendimento de 70% a partir do composto I (g) e de cloreto de ciclobutanocarbonilo. 111

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários N3 \ /CH* 3-[(ciclopentilcarbonil)-amino]-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1,34 (t, J = 7,1 Hz, 3H) [1,43 (s), 1,45 (s) 9H em conjunto], 1 53 (m, 1H) , [1,56 a β J—H 1 ;N!—f CH.s Ky£ H[.4, Λ (s), 1 57 (s) 6H em conjunto], 1,65 (m, 5H) , 1 85 (m 2H) , 290 (m, 1H), [4,38 (s) 442 (s) 2H em 12» conjunto], 441 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1011 (s, 1H). Anal. (C21H32N4O5) C, Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 421,4. Método do composto la: preparado com um rendimento de 98% a partir do composto I (g) e de cloreto de ciclopentanocarbonilo. 112

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários "* Mv® w 3- [ (ciclo-hexilcarbonil)-amino]-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1,21-1 39 (m 5H), 1,34 (t, J = 7,1 Hz, 3H), [1,43 (s) 1,45 (s) 9H em conjunto], [1,55 (s) , 1,57 (s) 6H em conjunto]. 1,61 (m, 1H), 1,71 o (m, 2H) 1,82 (m, 2H) , 2,43 (m, 1H) , 4,42 (m, 4H) , 10,11 (s, 1H) SXa. Anál. (C22H34N4O5) C, Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 4354. Método do composto la: preparado com um rendimento de 94% a partir do composto I (g) e de cloreto de ciclo-hexanocarbonilo. 113

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários a p ' I «~4 fi&x In»' „ 3-[(metoxiacetil)-amino]-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1 34 (t, J = 7,1 Hz, 3H) [1,42 (s), 1,46 (s) 9H em conjunto], [1,57 (s) , 1,58 (s) 8H em conjunto], 3,41 (s, 3H) , [4,06 (s) , 4,07 (s) 2H em w© ò·—1* conjunto], 4,42 (q J = 7,1 Hz, £ M*P 14a 2H) , [4,46 (s), 4,49 (s) 2H em conjunto], [10,65 (s) , 10,67 (s) 1H em conjunto]. Anál. (Ci8H28N406) C, Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 397,4. Método do composto la: preparado com um rendimento de 84% a partir do composto I (g) e de cloreto de metoxiacetilo. 114

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários .CH, 6,6-dimetil-3-[(tetra-hidrofurano-2-ilcarbonil)-amino]-pirrolo[3,4-c]-pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. NMR (dmso-de) δ: 1,35 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , [1,43 (s), 1 45 (s) 43 ...>0 /* 9H em conjunto], 1,58 (dd, J = r~"0 >“v 0"'l......CH1: ^ >v w 2,8, 6,6 Hz 6H) , 1,86 (m 2H) 1,98 J T% (m 1H) , 2,23 (m, 1H) , 3,91 (m, *5* 2H), 4,45 (m, 5H), 10,80 (d, J = 2 0 Hz, 1H) . Anál. (C20H30N4O6) C, H N. LCMS (APCI, M+H+) : 423,4. Método do composto la: preparado com um rendimento de 82% a partir do composto I (g) e de cloreto de tetrahidro-furano-2-carbonilo. 115

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários m st P ^ \|ίλ1 W* 6,6-dimetil-3-[(tetra-hidro-2H-pirano-2-ilcarbonil)-amino]-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. NMR (dmso-de) δ: 1,34 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,37 (m, 1H) , [1,42 (s), 1,45 (s) 9H em conjunto], 1,52 (m 3H) , 1 57 (d, J = 6,8 Hz, H*Ci >Mws 0¾ i p-\f IBS 6H), 1,80 (m,1H), 197 (m, 1H), 3,54 (t de d, Jj = 10,8, Jd = 3,3 Hz, 1H) , 4 02 (m, 2H), 4,42 (q, J = 7,1 Hz, 2H) 4,46 (m 2H) , 10 71 (d, J = 6,8 Hz, 1H) . Anal. (C21H32N4O6-0,lEtOAc) C Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 437,4 . Método do composto la: preparado com um rendimento de 100% a partir do composto I (g) e de cloreto de tetra-hidro-pirano-2-carbonilo. 116 Estrutura e exemplo de referência n°

Nome químico, dados analíticos e comentários 6,6-dimetil-3-{[(4-metilmorfolina-2-il)-carbonil]-amino}- pirrolo[3,4-c]-pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. O. WT X **

•D / CHj θ'" tt-l NMR (dmso-de) δ: 1, r 3 4 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , [1,43 (s ) , 1 45 (s) 9H em conj unto] , 1, 57 (d, J = 6, 6 Hz, 6H) , 1,96 (t, J = 1 0, 6 Hz, 1H) , 2,05 (t of d, Jt = 11 ,4, Jd 3, 0 Hz, 1H) 2,21 (ê 5, 3H), 260 , J = = 11,6 Hz, 1H) , 2, 95 (d, J = 10, 6 Hz, 1H) , 3,97 (t of d, Jt = 10, 9, Jd = 2 0 Hz, 1H) , 3, 96 (d, J = 11, 4 Hz, 1H). 4 19 (d, J = 9, 9 Hz, 1H) , 4,42 (q, J = 7,1 Hz, 2H) , 4 48 (d, J = 13,9 Hz, 2H) . 1 0,75 (s, 1H) Anal. (C21F33N 5θδ) c, H, N. LCMS (APCI, M+H+) : 4 52, 1. Método do composto la: preparado com um rendimento de 2 9% a partir do composto I (g) e de cloreto de 4-metiimorfolina-2-carbonilo. 117

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários ** «"y* bh 3-{[(4-fluorofenil)-acetil]-amino}-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. NMR (CDC13) δ: [1,41 (t, J = 7,1 Hz), 1,42 (t, J = 7,1 Hz) 3H em conjunto], [1,47 (s) , 1,51 (s) 9H em conjunto], [1,63 (s) , 1,69 (s) 6H em conjunto], [3,89 (s) , 3,70 (s) 2H em conjunto], [4,46 (q J = Srx KA F *9» 7,1 Hz), 4 47 (q, J = 7,1 Hz), 2H em conjunto], [4,61 (s) , 4,65 (s) 2H em conjunto], 7,08 (m 2H), 7 28 (m, 2H) , [9,98 (s) , 1011 (s) 1H em conj unto] . Anál. (C23H28FN4O5 O, 15H20) C, Η, N, F. LCMS (APCI M+H+) : 461,4. Método do composto la: preparado com um rendimento de 88% a partir do composto I (g) e de cloreto de (4 — flúor-fenil)-acetilo. 118

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários V/τΗηΓ NtVo w 3-{[(4-metoxifenil)-acetil]-amino)-66-dimetil-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. NMR (CDC13) δ: [1,40 (t, J = 6,6 Hz). 1,41 (t, J = 7,1 Hz) 3H em conjunto], [1,47 (s) 1,51 (s) 9H em conjunto], [1,63 (s) , 1,69 (s) 6H em conjunto], [3,65 (s), 3,67 (s) 2H em conjunto], 3 81 (s, 3H), V\ [4,45 (q, J = 7,1 Hz), 4 46 (q, J i 1 ΐ'&ϋ = 7,1 Hz), 2H em conjunto], [4,61 (s) , 4 65 (s) 2H em conjunto] , 6 91 (m 2H) , 7 22 (m, 2H) [9, 94 (s) 10,07 (s) 1H em conjunto]. Anal. (C24H32N4O5) C, Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 473,4 . Método do composto la: preparado com um rendimento de 81% a partir do composto I (g) e de cloreto de (4-metoxifenil)-acetilo. 119

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários />% o, q /-'-0 V^f-CHs ^ w 6,6-dimetil-3-({[trans-2-fenil-ciclopropil]-carbonil}-amino)-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. NMR(dmso-de) δ: 1,32 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,38 (m, 1H) , [1,43 s), 1,46 (s) 9H em conjunto), 1,50 (m, 1H) , 1,57 (dd, J = 10,0, 6,6 Hz. 6H) , 2,44 (m, 2H), [4,37 (s), 4,41 (s) 2H em conjunto], 4,39 (q, J = O 3&* 6,8 Hz, 2H) , 7,19 (m, 2H) . 7,28 (t, J = 7,3 Hz, 3H) , 10,50 (s, 1H) . Anal. (C25H32N4O5) C, Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 469, 4. Método do composto la: preparado com um rendimento de 91% a partir do composto I (g) e de cloreto de trans-2-fenil-l-ciclopropano-carbonilo. 120

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários % # m. VHNÍ | F*k z~~o y&****? w? 6,8-dimetil-3-[(2-hienilcarbonil)-amino]-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. ΧΗ NMR (400 MHz, clorof órmio-d) δ p.p.m.: 1,45 (t,12 H). 1,87 (d, 6H) , 4,53 (q, J=7,16 Hz, 2H) . 4,07 (d, 2H) , 7,05 - 7,17 (m. 1 H) , 7,51 - 7,67 (m, 2H) . 10,87 (d, 1H) . Método do composto la n*c m3 «t iw-V o ΗΪΗ ^ κβ «ϊ* * v« Λ 3-[(l-benzotieno-2-ilcarbonil)-amino]-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]-pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo. ΧΗ NMR (400 MHz, clorof órmio-d) δ p.p.m.: 1,46-1,55 - 1,55 (m, 12 H) 1:72 (d, 6H) 4,61 (q, J=7,07 Hz, 2 C jy H) 4,75 (d. 2 H) 7,39 - 7, 53 (m, 2H) 7,83 - 7, 97 (m, 3H) 11,08 (d, 1H) . Método do composto la. Preparação do composto de referência lb: 3-(benzoilamino)- 6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. A uma pasta agitada do intermediário la (15,0 g, 35,0 mmol) em etanol (150 mL) adicionou-se, gota a gota, uma solução de HC1 4 M em hexanos (44 mL) . Agitou-se a solução 121 límpida resultante à temperatura ambiente durante 12 horas. Concentrou-se a mistura de reacção sob uma pressão hipobárica até um resíduo e agitou-se com hexano (250 mL) durante 10 minutos. Recolheu-se por filtração o produto sólido, lavou-se com hexano (100 mL) e secou-se sob uma pressão hipobárica a 40°C durante 15 horas para se obter o sal cloridrato da amina lb (13,5 g, 96,4%), com o aspecto de um sólido esbranquiçado. 1H NMR (300 MHz, DMSO-dô) δ p.p.m. 1,36 (t, J=6, 97 Hz, 3 H) 1,67 (s, 6 H) 4,47 (q, J=7,16 Hz, 2 H) 4,59 (s, 2H) 7,55 - 7,74 (m, 3 H) 7,92 (d, J=7,54 Hz. 2 H) 10,23 (s, 2 H) 10,93 (s, 1 H) . No quadro seguinte, os compostos 2b a 17b no quadro seguinte foram preparados sob a forma de sais de HC1 e os compostos 18b, 19b e 20b foram preparados sob a forma de bases livres.

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários m r-4 >**ν ' H^' HV®· y é m 3-[(4-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. 1H NMR (300 MHz, clorofórmio-d) δ p.p.m. 1 48 (t, 9 H) 2,47 (s. 1 H) 4,30 (s, 2 H) 4 56 (q, J=7,16 Hz 2 H) 7,18 (t, J= 8,38 Hz, 2 H) 7,92 (dd, J=8,48, 5,27 Hz, 2 H) 10,86 (nenhum, 1 H) 11,01 (s, 1 H) . LCMS (APCI M+H+) : 347. Método do composto lb: preparado com um rendimento de 96% a partir do composto 2a. 122

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários Í—w' "T MM f-Q / H-.-C W " Vi-o f í 3-[(2-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidro-pirrolo[3,4— c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ p.p.m. 1,36 (t, J=7, 06 Hz, 3 H) 1,66 (s, 6 H) 4,47 (q, J= 7, 16 Hz, 2 H) 4,63 (s 2 H) 7 35 - 7,55 (m, 2 H) 7,70 - 7,81 (m, 1 ‘tf H) 7, 95 - 8, 09 (m, 1 H) 10,04 (s, 2 H) 11,23 (d, J=10,74 Hz, 1 H). LCMS (APCI, M+H+) 347,3. Método do composto lb: preparado com um rendimento de 96% a partir do composto 3a. ÈfyC 3-[(2,4-difluorobenzoil)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4— c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. 1H NMR (300 MHz, clorofórmio-d) δ r-é- ' HsC « p.p.m. 141 - 1 54 (m 9 H) 205 (s, 2 H) 4,26 - 4,37 (m, 2 H) 4,49 - 4, 63 (m, 2 V4 H) 6, 88 - 7, 00 (m, 1 H) 7, 00 - 7 09 (m, 1 H) 8,10 - 8,24 (m, 1 H) . 11,29 (d, J=12,43 Hz 1 H). LCMS (APCI, M+H+) : 365,4 . Método do composto lb: preparado com um rendimento de 98% a partir do composto 4a. 123

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários % .cv·* r~á 6,6-dimetil-3-([4-(trifluoro-metil)-benzoil]-amino)-5,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. 1H NMR (300 MHz, clorof órmio-d δ p.p.m. 1,40 - 1 55 (m, 9 H) 2,72 (s. 1 ’ yeO” %J í *ϊβ' m H) 4,34 (s, 2 H) 4,57 (q, J=7,18 Hz, 2 H) 7,77 (d, J=8,2 9 Hz, 2 H) 8 02 (d, J= 8,10 Hz 2 H) 11,14 (s, 1 H) . ). LCMS (APCI, M+H+) : 397,5. Método do composto lb: preparado com um rendimento de 95% a partir do composto 5a. % | m r-ο ^'w 6,6-dimetil-3-[(piridina-2-ilcarbonil)-amino]-5,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ p.p.m. 1,39 (t, J= 7,16 Hz, 3 H) 1,62 (s, 6 H) ”* m «A O 4,49 (q, J= 7, 16 Hz, 2H) 4,64 (s, 2 H) 7, 68 - 7,82 (m, 1 H) 8,05 8,25 (m, 2 H) 8,78 (d, J= 4,71 Hz, 1 H) 12,16 (s, 1 H) . ). LCMS (APCI, M+H+) : 330 4. Método do composto lb: preparado com um rendimento de 97% a partir do composto 6a. 124

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários % •M* W 3-(acetilamino)-6,6-dimetil-5,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]-pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. NMR (dmso-de) δ 1,34 (t, J = 8,0 Hz, 3H) , 1,63 (s, 6H) , 2,16 (s, 3H) , %Ó m 4,45-4,40 (m. 4H), 10,31 (s, 1H); LCMS [M+H]+ 267. Método do composto 8b: rendimento de 99% a partir do composto 7a. * * ^v% %-íí 1 *iH Y^J 3-(isobutirilamino)-6,6-dimetil-5,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. NMR (dmso-de) δ: 1,12 (d, J = 6,8 Hz, 6H) , 1,35 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,62 (s, 6H), 2,75 (quint. J = 6,8 Hz, 1H) , 4,43 (q, J = 7,1 Hz, 2H) , 4,45 (s, 2H) , 9,99 (s lr., 2H) , 10,26 (s, Mjá „ ***\*> m 1H) , Anál. (C14H22N4O3-1, 0HC1) C, Η, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 295,4. Método modificado: agitou-se 0 intermediário 8a em HC1 4 M-dioxano (sem co-solvente) durante 2,5 horas à temperatura ambiente. Evaporou-se e triturou-se a partir de acetonitrilo para se obter 0 sal monocloridrato com um rendimento de 95%. 125

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários 3-[(ciclopropilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4— c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. NMR (dmso-de) δ: 0,89 (m, 4H) 1 35 Ílí! !<? Χ f r-o myo (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,61 (s, 6H) , 2,07 (m, 1H), 4 38 (s, 2H), 4,44 (q, J = 7,2 Hz, 2H) , 9,98 (s lr., 2H) , 10,57 m (s, 1H) . Anál. (C14H20N4O3 · 1, 0HC1) C, H, N Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 293,4. Método do composto 8b: 90% de rendimento a partir do composto 9a. n*%t^ /•-d y·*^ 3-[(2,2-dimetilpropanoil)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4— c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. XH NMR (dmso-de) δ: 1 22 (s, 9H) 1,35 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,63 (s, 6H) , Hs^ HN Μφ**Φ*<Μ* 4,45 (q, J = 7,2 Hz, 2H) 4,50 (s, 2H) 10,09 (s lr., 2H), 10,30 (s, 1H). HjS Anál. (C15H24N4O3 ' 1, 0HC1) C, Η, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 309, 4. Método do composto 8b: 9 6% de rendimento a partir do composto 10a. 126

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários X V ' 3-[(ciclobutilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4— c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. NMR (DMSO-de) 1 34 (t, J = 8,0 Hz, 3H) 1,63 (s, 6H) , 1, 68-1, 85 (m, 1H) , 1,89-2,01 (m, 1H), 2,14-2,24 (m, 4H) , 3,36-3,45 (m 1H) , 4,39-4, 48 (m, 4H), Itfe 10,12 (s, 1H). LCMS [M+H]+ 307. Método do composto 8b: 99% de rendimento a partir do composto 11a. % * $íh f~4 m _ V-ϊο i 3-[(ciclopentilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. NMR (dmso-de) δ: 1 34 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,62 (s, 6H) . 1,64 (m, 6H) , 1,86 (m 2H) 2,96 (quint., J = 7,7 Hz, 1H) , 4,43 (q, J = 7,1 Hz. 2H) , 4,44 f Λ w tífc (s, 2H) , 9,98 (s lr., 2H) , 10,24 (s, 1H) . Anál. (C15H24N4O3-1, 0HC1) C, Η. N. Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 3214. Método do composto 8b: 92% de rendimento a partir do composto 12a. 127

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários v jCV3* | HM /- ¾ y ~ «s| 3-[(ciclo-hexilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4— c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. NMR (dmso-cU) δ: 1,15-1,40 (m, 5H) , 1,34 (t, J= 7,1 Hz, 3H) 1,62 (m, 1H), 1,62 (s 6H) , 1 73 (m, 2H) , 1,83 (m, rS 2H) , 2,53 (m 1H) , 443 (q, J = 7,1 Hz, 2H) . 4,45 (s, 2H) , 10,12 (s lr., 2H) I3& 10,25 (s, 1H) . Anál. (C17H23N4O3 · 1, 0HC1) C, Η, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 335,4. Método do composto 8b: 9 6% de rendimento a partir do composto 13a. % ?w-t %->% HH s-4 3-[(metoxiacetil)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2 (4H)-carboxilato de etilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1,34 (t, J = 7,1 Hz, 3H) 1,64 (s, 6H) , 3,42 (s, 3H) , && «& Λ J 0' ( 4,10 (s, 2H) , 4,44 (q, J= 7,1 Hz, 2H) 4 50 (s, 2H), 10,30 (s lr., 2H), 10,73 m (s, 1H) . Anál. (C13H20N4O4 · 1, 0HC1) C, H, N Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 297,4. Método do composto 8b: 90% de rendimento a partir do composto 14a. 128

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários O í*.., „-V % ^ú y Ryt Híí. wo f r\ 6,6-dimetil-3-[(tetra-hidro-furano-2-ilcarbonil)-amino)-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-2(4H) -carboxilato de etilo. ΧΗ NMR (clrnso-cU) δ: 1 35 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,63 (s, 6H) , 1,86 (m, 2H) 198 (m, 1H) , 2,24 (m 1H) , 3,91 (m, 2H) , 4,44 (q, J = 7,1 Hz, 2H) , 4,51 (m, 3H) , 10,07 (s lr., 2H) , 10,87 (s, 1H) . Anál. (C13H22N4O1-1, 0HC1) C, Η, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 323,4. Método do composto 8b: 94% de rendimento a partir do composto 15a. h#; % | fáH r-4 ^V„,n 6,6-dimetil-3-[(tetra-hidro-2H-pirano-2-ilcarbonil)-amino]-5,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. XH NMR (dmso-de) δ: 1,34 (t, J = 7,2 Hz, 3H) , 1 39 (m, 1H) , 1 53 (m. 3H) , 1,63 (s, 6H) , 1,82 (d, J = 11,6 Hz, 1H) , 1 97 (d, J = 12,9 Hz, 1H) , 3,55 Y° ír"“\ O (t de d, Jt = 11,0 Hz, Jd = 3,3 Hz, 1H) , 4,05 (dd, J = 11,1, 2,3 Hz, 2H) iBte 4,44 (q, J= 7,1 Hz, 2H) 4,52 (m, 2H), 10,07 (s lr., 2H), 10,78 (s, 1H) . Anál. (C15H24N4O4-1, 0HC1) C, Η, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 337,4. Método do composto 8b: 83% de rendimento a partir do composto 16a. 129

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários % i > v.« p% ITfe 6,6-dimetil-3-{[(4-metil-morfolina-2-il)-carbonil]-amino)-5,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1 34 (t, J = 7,2 Hz, 3H) , 1,65 (s, 6H) , 2,80 (s, 3H) 3,08 (s lr., 2H) , 3,42 (m, 1H) , 3,73 (d, J = 11,9 Hz, 1H) , 4 03 (t, J = 12,2 Hz, 1H) , 4,25 (d, J = 11,6 Hz, 1H) , 4,44 (q, J= 7,1 Hz, 2H) , 4,49 (s lr., 2H) , 4,74 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 10,34 (s lr. , 1H) , 10,43 (s lr., 1H) , 10,80 (s, 1H), 11,82 (s lr., 1H). Anál. (C16H25N5O4-2,0HC1 -1, 05H2O) C, H, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 352,2. Método do composto 8b: 90% de rendimento a partir do composto 17a. 130

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários «. .cv*» —O' r ^ v> 3-([(4-fluorofenil)-acetil]-amino)-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. NMR (dmso-de) δ: 1,28 (s, 6H) , 1,31 (t, J= 7,0 Hz, 3H) , 3,76 (s, 2H) 3,83 (s. 2H) 4,35 (q. J = 7,2 Hz, 2H) 7,16 (t, J = 8,9 Hz. 2H) , 7,34 (dd, J = 5,7, 8,7 Hz, 2H), 10,10 (s, 1H). Anál. (Ci8H2iFN403 O, 1 EtOAc) C, Η, N, F. LCMS (APCI, M+H+) : 361,2. Método modificado: tratou-se o $s 1¾¾ intermediário 18a com HC1/ /dioxano à temperatura ambiente durante 3 horas, depois evaporou-se até à secura, neutralizou-se com NaOH 1 M e extraiu-se com acetato de etilo. Concentrou-se os extractos orgânicos para se obter a base livre, com um rendimento de 90%. 131

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários % ;wA / “ í NjC « V^ísy W | T 1$!? 3-([(4-metoxifenil)-acetil]-amino)-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. NMR (dmso-cU) δ: 1 26 (s 6H) 1,30 (t, J = 7,1 Hz 3H), 3,19 (s lr., 1H) , 3,67 (s, 2H) 3,72 (s, 3H) , 3,83 (s, 2H) 4 34 (q, J = 7,2 Hz, 2H) 6,89 (d, J= 8,6 Hz, 2H) , 7,22 (d, J = 8,67 Hz, 2H) , 10,04 (s, 1H) . Anál. (C10H24N4O4'0,5HC1 -0, 15EtOAc) C, Η, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 373,2. Método do composto 18b: neutralizou-se e isolou-se como base livre com um rendimento de 90% a partir do composto 19a. 132

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários IMní I &%£ h*N "ys 6.6- dimetil-3-({[trans-2-fenilciclopropil]-carbonil}-amino)- 5.6- di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2 (4ff)-carboxilato de etilo. 1H NMR (dmso-de) δ: 1,28 (s, 6H) 1,31 (t, J= 7,1 Hz 3H) , 1,35 (m, 1H) , 1,47 (m, 1H) , 2,38 (t, J= 7,3Hz, 2H) , 3,14 (s lr., 1H), 3,84 (s, 2H) , 4,36 (q. J= 4 Xjsss/· ase 7,1 Hz, 2H) 7,18 (m, 3H) , 7,28 (t, J = 7,3Hz, 2H) , 10,35 (s, 1H) . Anál. (C20H24N4O3-0,25H20-0,05dioxano) C, H, N. LCMS APCI, M+H+) : 369, 4. Método do composto 18b: neutralizou-se e isolou-se como base livre com um rendimento de 90% a partir do composto 19a. ^ ,0*8 6,6-dimetil-3[(2-tienil-carbonil)-amino]-5,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. ^drv^:: ^ HrÇa ' XH NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ p.p.m. 1,42 -1,53 (m, 9 H) 4,29 (s, Wh 2H) 4,57 (q, J"=7, 0 7 Hz, 2H) 7,15 (dd J=5,05, 3,79 Hz, 1 H) 7,60 (dd, J= 4, 93, 1,14 Hz, 1H) 7,66 (dd, J=3,79, 1,01 Hz, 1 H) 10,92 s lr., 1 H) , Método do composto lb. 133

Preparação do composto de referência lc: 3-(benzoilamino)-5-(clorocarbonil)-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazol-2(4H)-carboxilato de etilo. A uma mistura arrefecida (-10°C) e agitada de trifosgénio (7,2 g, 24,3 mmol) e sal dicloridrato lb (13,0 g, 32 5 mmol) em DCM (150 mL) adicionou-se, gota a gota, uma solução de diisopropiletilamina (28,4 mL, 162,5 mmol) em DCM (50 mL) , ao longo de um periodo de 15 minutos.

Agitou-se a mistura de reacção resultante a 0°C durante 30 minutos. Lavou-se a mistura de reacção com água (2 x 100 mL) , secou-se sobre Na2SC>4, filtrou-se e concentrou-se para se obter o produto impuro. Agitou-se o produto impuro com 25% de acetato de etilo em hexano. Recolheu-se por filtração e precipitado resultante e secou-se sob uma pressão hipobárica a 40°C para se obter o composto lc (12 g, 95%) com o aspecto de um sólido branco. 1H NMR (300 MHz, CDCI3) d p.p.m. 1 51 (t, J=7,06 Hz, 3 H) 1,75 - 1, 84 (m, 6 H) 4,60 (q, J=7, 03 Hz, 2 H) 5,08 (s, 2 H) 7,46 - 7, 69 (m, 3 H) 7,85 - 7, 98 (m, 2H) 11,10 (s, 1 H) . 134

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários 5-(clorocarbonil)—3—[(4— fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. Q. P-f—v f Cl V·' "y*. 1H NMR (300 MHz, clorofórmio-d) δ p.p.m. 1,50 (t, J=7,16 Hz, 3 H) 1,79 (s, 6 H) 4,60 (q J=7,10 Hz, 2 H) 5,06 rA O (s, 2 H) 7,16 - 7,24 (m 2 H) 7,89-7,98 Γ P 2s- (m, 2 H) 11,07 (s, 1 H) . ). LCMS (APCI, M+H+) : 409 3 . Método do composto lc: preparado com um rendimento de 89% a partir do composto 2b. **%JS*k ν/χ1»-<β ,-d b ** V f\ i >*s Ui..---·' 3& 5-(clorocarbonil)-3-[(2-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. 1H NMR (300 MHz, clorofórmio-d) δ p.p.m. 1,49 (t, J=7,06 Hz, 3 Η) 1 72 -1 85 (m, 6 H) 4,60 (q, J=7,10 Hz, 2 H) 5 07 (s, 2 H) 7,1-7,24 (m, 1H) 7,28-7,38 (m, 1H) 7,52 - 7, 64 (m, 1H) 8,08-8,19 (m, 1H) 11,42 (d, J=13,19Hz, 1H) . LCMS (APCI, M+H+) : 409, 3. Método do composto lc: preparado com um rendimento de 87% a partir do composto 3b. 135

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários CM, 5-(clorocarbonil)-3-[(2,4-difluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2 (4H)-carboxilato de etilo. K J 1H NMR (300 MHz, clorofórmio-d) δ p.p.m. 1,44 - 1,56 (m 3 H) 1,74 - 1 84 (m, 6 H) 4,60 (q, J=7,16 Hz, 2 H) 5,06 Çl (s, 2 H) 8,89-7,14 (m, 2 H) 8,09 - F 8,28 (m, 1 H) 11,37 (d, J=13,00 Hz, 4iÇ 1H) . LCMS (APCI, M+H+) : 427. Método do composto lc: preparado com um rendimento de 87% a partir do composto 4b. % *^aY!'\i -J* S-ci ts *& β 5-(clorocarbonil)-6,6-dimetil-3-{[4-(trifluorometil)-benzoíl]-amino}-5,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. 1H NMR(300 MHz, clorofórmio-d) δ p.p.m. 1,51 (t, <J=7,16 Hz, 3 H) 1,80 / ,«*v %J. (s, 6 H) 4,61 (q, J=7,16 Hz, 2 H) 5,08 (s, 2 H) 7,80 (d, J= 8,29 Hz, 2 H) 804 í §ç (d. J= 8, 10 Hz, 2 H) 11,20 (s, 1 H) . LCMS (APCI, M+H+) : 459. Método do composto lc: preparado com um rendimento de 56% a partir do composto 5b. 136

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários r-4 Λτ ^ hV* 5-(clorocarbonil)-6,6-dimetil-3-[(piridina-2-ilcarbonil)-amino]-5,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. 1H NMR (300 MHz, clorofórmio-d) δ p.p.m. 1,52 (t, J=7,16 Hz, 3 H) 1,77-1,83 (m, 6H) 4,63 (q, J=7,03 Hz, 2H) 4,93- 5,22 (m, 2H) 7,49 - 7,58 (m, 1 i $ H) 7,88 - 7, 99 (m, 1 H) 8,23 (d, J=7,91 Hz, 1 H) 8,73 (d, J=4,71 Hz, 1H) 12,30 (s, 1H) , LCMS (APCI, M+H+) : 392,3. Método do composto lc: preparado com um rendimento de 90% a partir do composto 6b. Γ «$e 3-(acetilamino)-5-(cloro-carbonil)-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. XH NMR (dmso-de) δ 1,69 (t, J = 8,0 Hz, 3H), 1,98 (s, 6H), 2,83 (s, 3H), 4 78 (q J = 8,0 Hz, 2H) , 5,10 (s, 2H) , 10,60 (s, 1H); LCMS [M + H]+ 329, Método do composto lc: preparado com um rendimento de 89% a partir do intermediário 7b. 137

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários KlH 4 Y+*t Cl Γ M 5-(clorocarbonil)-3-(isobutirilamino)-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. XH NMR (clrnso-cU) δ: 1,12 (d, J = 6, 8Hz, 6H) , 1 35 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,64 (s, 6H) , 2,73 (quint, J=7,0 Hz, 1H) , 4,43 (q, J=7, 1 Hz, 2H) , 4,80 (s 2H) , 10,20 (s, 1H) . Anál. (C15H21CIN4O4) C, Η, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 357,2/359, 2. Método do composto lc: preparado com um rendimento de 84% a partir do intermediário 8b. v/xH o / Á is». 5-(clorocarbonil)-3-[(ciclo-propilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. XH NMR (dmso-de) δ: 0,87 (m. 4H) 1,36 (t, J= 7,1 Hz, 3H) 1,63 (s, 6H) , 2,04 (m, 1H), 4,44 (q, J= 7,2 Hz, 2H) 4,74 (s, 2H), 10,50 (s, 1H). Anál. (Ci5H10ClN4O4) C, Η, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 355,2/357,2 . Método do composto lc: preparado com um rendimento de 81% a partir do intermediário 9b. 138

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários % . J* S-d % «ítí* HM y&® %v 5-(clorocarbonil)-3-[(2,2-dimetilpropanoíl)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1,22 (s, 9H) . 1,35 (t, J = 7,1 Hz, 3H) 1,64 (s, 6H) 4,45 (q J = 7,1 Hz, 2H), 4,85 (s, 2H) 10,28 (s, 1H) . Anál. (C19H23CIN4O4) C, Η, N, I9e. Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 371,2/373,2. Método do composto lc: preparado com um rendimento de 85% a partir do intermediário 10b. «H* & iP y /""d ci "** *<^0. 5-(clorocarbonil)-3-[(ciclo-butilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2(4H) -carboxilato de etilo. XH NMR (DMSO-de) 1 34 (t, J =8,0 Hz, 3H) , 1,64 (s, 6H) 1,76-1,85 (m, 1H) , 1,91-2,14 (m 1H), 2,14 -2,24 (m, 4H) , 3,34- 3,42 (m, 1H) , 4,42 (q, J = 8,0 %u Hz, 2H) , 4,82 (s, 2H), 10,08 (s, 1H) . LCMS [M + H]+ 369. Método do composto lc: preparado com um rendimento de 84% a partir do intermediário 11b. 139

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários % .<·? f>^M i íí"-4 ^ Y*~^s % 5-(clorocarbonil)-3-(ciclo-pentilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2 (4H)-carboxilato de etilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1,35 (t, J = 7,1 Hz, 3H) 1,57 (m, 3H) , 1,64 (s, 6H) , 1,68 (m, 3H) , 1,86 (m, 2H) 2,94 (quint., J = 7,8 Hz, 1H) , 4,43 (q, J = ó 12* 7,1 Hz, 2H) , 4,80 (s, 2H) , 10,18 (s, 1H). Anál. (C17H23CIN4O4'0, 08EtOAc-0, 02HC1) C, H, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 383,2/385,2. Método do composto lc: preparado com um rendimento de 86% a partir do intermediário 12b. HiÇ ,-ν, \/** %~d w /••••o 'a M^S tm '^íp.-w 5-(clorocarbonil)-3-[(ciclo-hexilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2(4H) -carboxilato de etilo. 1R NMR (dmso-de) δ: 1,29 (m, 6H) , 1,35 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,62 (m, 1H) , 1,63 (s, 6H) , 1,72 (d, J=12,l Hz, 2H) 1,84 (d, J =11,9 Hz, 2H) , 4,43 (q, J = ó m 7,1 Hz 2H) , 4,80 (s, 2H) , 10,19 (s, 1H) . Anál. (C18H75CIN4O4) C, Η, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 397,2/399, 2. Método do composto lc: preparado com um rendimento de 71% a partir do intermediário 13b. 140

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários 5-(clorocarbonil)-3-[(metoxi-acetil)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. ΧΗ NMR (dmso-cU) δ: 1,35 (t, J = 7,1 *'y0^**S ' '''&$ Hz, 3H) , 1,65 (s, 6H) , 3,42 (s, 3H) , Hgíi ¢#1.. Λ ^*££·\Ρ cr* Ί 4,08 (s, 2H) , 4,44 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 4,86 (s, 2H), 10,70 (s, 1H), Anál. (Ci4Hi9ClN408-0,3H20) C, Η, N, Cl. 1i4e LCMS (APCI, M+H+) : 359, 2/361,2. Método do composto lc: preparado com um rendimento de 84% a partir do intermediário 14b. i>:’\ jsh» \ / 5-(clorocarbonil)-6,6-dimetil-3-[(tetra-hidrofurano-2-ilcarbonil)-amino]-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. XH NMR (dmso-de) δ: 1,35 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,64 (d, J= 2,3 Hz, 6H) 1,86 (m, 2H) , 1,98 (m, 1H) , 2,23 (m 1H) , 3,91 (m, 2H) , 4,45 (m, 3H) 4,87 (s, W »S* 2H) , 10,84 (s, 1H) . Anál. (Ci6H2iC1N405-0, 15H20) C, Η, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 385,2/387,2 . Método do composto lc: preparado com um rendimento de 79% a partir do intermediário 15b. 141

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários •o, p j^“N. J áf > HN; 5-(clorocarbonil)-6,6-dimetil-3-[(tetra-hidro-2H-pirano-2-ilcarbonil)-amino]-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1,35 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,38 (m 1H) 1,53 (m, 3H) 1,64 (s, 6H) 1,81 (m 1H) , 1,98 (m 1H) , 3,55 (m, 1H) , 4,04 (m, 2H) 4,43 (q, J= 7,1 0 1 Hz, 2H) , 4,87 (s, 2H) 10,76 (s, 1H) , Anál. (C17H23CIN4O5) C, Η, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 399, 2/401,2, Método do composto lc: preparado com um rendimento de 77% a partir do intermediário 16b. 142

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários "V* % Λ»-* 4? «355 5-(clorocarbonil)-6,6-dimetil-3-{[(4-metilmorfolina-2-il)-carbonil]-amino}-5,6-di-hidro-pirrolo[3,6-c]pirazolo-2 (4H)-carboxilato de etilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1,35 (t, J = 7,1 Hz, 3H) 1,64 (s, 6H) , 2,04 (m, 2H) , 2,22 (s, 3H) 2,63 (d. J= 11,4 Hz, 1H), 2,97 (d J= 10, 9 Hz, 1H) , 3,68 (t, J= 10,2 Hz, 1H) , 3,96 (d, J=ll,l Hz, Ρ'Λ t-H* 1As 1H) , 4,22 (dd, J= 2,3, 9,3 Hz, 1H) , 4,44 (q, J= 7,1 Hz, 2H) , 4,87 (s, 2H) 10,78 (s, 1H) , Anál. (C17H24CIN3O5) C, Η, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 414,2/416,2. Método do composto lc: preparado com um rendimento de 60% a partir do intermediário 17b. 143

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários r-j' b 5-(clorocarbonil)3-{[(4-fluorofenil)-acetil]-amino}-6,6-dimetil-5,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1,33 (t, J =7,1 Hz, 3H) , 1,63 (s, 6H) , 3,83 (s, 2H) , 4,41 (q, J = 7,3 Hz, 2H) , 4,76 (s, t W I i i#g 2H) , 7,17 (t, J = 8,8 Hz, 2H) , 7,35 (dd J = 5,6, 8,6 Hz, 2H) , 10,33 (s, 1H) . Anál. (C10H20CIFN4O4) C, Η, N, Cl, F. LCMS (APCI, M+H+) : 423,2/425,2. Método do composto lc: preparado com um rendimento de 77% a partir do intermediário 18b. Wt CHâ % N:s.,TAf β M Tm /“d c*' <W 1J 5-(clorocarbonil)-3-{[(4-metoxifenil)-acetil]-amino}-6,6-dimetil-5,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H) -carboxilato de etilo. XH NMR (dmso-de) δ: 1,32 (t, J = 71 Hz, 3H) 1,62 (s, 6H) , 3,73 (s, 3H) , 3,74 (s, 2H) , 4,40 (q, J = 7,1 Hz, 2H) , 4,77 (s, 2H) , 6,90 (d, J = 8,6 Hz, 2H) , 7,23 (d, J = 8,6 Hz, 2H) , 10,25 (s, 1H) . Anál. (C20H25CIN4O5) C, n-i Η, N, Cl. LCMS (API-ES, M+H+) : 435,1/437,1. Método do composto lc: preparado com um rendimento de 79% a partir do intermediário 19b. 144

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários Mí Λ. /Hj P | ''&*4 r^/ m. Λ 5-(clorocarbonil)-6,6-dimetil-3-({[trans-2-fenilciclo-propil]-carbonil}-amino)-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. NMR (dmso-de) δ: 1,33 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , 1,40 (m, 1H) , 1,52 (quint, J = 4,6 Hz, 1H) , 1,64 (s, 6H) , 2,44 (m, 1H) , 2,51 (m; 1H) , 4,41 (q, J = 7,1 ”'rs XsS®^ 353« Hz, 2H) , 4,79 (s, 2H) , 7,19(m, 3H) , 7,29 (t, J = 7,3 Hz, 2H) , 10,59 (s, 1H) . Anál. (C21H23CIN4O4) C, Η, N, Cl. LCMS (APCI, M+H+) : 431,2/433,2, Método do composto lc: preparado com um rendimento de 70% a partir do intermediário 20b. ,&Μ* f-H 2 H~-<? r* I w 5-(clorocarbonil)-6,6-dimetil-3-[(2-tienilcarbonil)-amino]-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-2(4H) -carboxilato de etilo. XH NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ p.p.m.: 1,51 (t, J=7,07 Hz, 3 H) 1,56 (s, 6H) 4,60 (q, J=7,24 Hz, 2 H) 5,03 (s, 2 H) 7,17 (dd, J=4, 93, 3, 92 Hz, ST« 1H) 7,65 (dd, J=4,93, 1,14 Hz, 1H) 7,69 (dd, J= 3,7 9, 1,26 Hz, 1H) 10,98 (s ir., 1H). Método do composto lc. 145

Estrutura e exemplo de referência n° Nome quimico, dados analíticos e comentários 3-[(l-benzotieno-2-ilcarbonil) -amino]-5-(clorocarbonil)-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2(4H)- Hat carboxilato de etilo \ © 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,64 li «H. ^ (d, J=24,76 HZ, 6H) 3, 65 - 3, 75 (m, r\ 2H) 4,64 (d, J= 3,03 Hz, 2 H) 4,81 - 4,87 (m, 1H) 7,10 - 7,18 (m, 1H) 7,20 Q - 7,33 (m, 4 H) 7,33 - 7,43 (m, 2 H) 7,78 - 7, 90 (m, 2 H) 8,07 (s, 1H) . Anál. (C25H25N5O3S.I, lHOAc.O, 1H20) C, H, N. S. Método do composto lc.

Preparação do composto de referência ld: (lS)-2- (dimetilamino)-1-feniletanol.

A uma solução de (S)-(+)-2-amino-l-fenil-etanol (100,0 g, 729,0 mmol) em ácido fórmico (400 mL) adicionou-se formaldeido (800 mL, 37% em peso em água), à temperatura ambiente. Agitou-se a solução a 95°C de um dia para o outro. Depois de se arrefecer até à temperatura ambiente, utilizou-se HC1 concentrado para ajustar o pH da solução até 2. Extraiu-se com éter (3 x 500 mL) e depois ajustou-se até pH = 10 com NaOH sólido. Extraiu-se a camada aquosa resultante com CH2CI2 (3 x 500 mL) . Secou-se as camadas 146 orgânicas combinadas sobre Na2SC>4. Filtrou-se, evaporou-se e depois submeteu-se a cromatografia rápida (5% de MeOH em CH2CI2 até 4,5% de MeOH/0,5% de NEt3 em CH2CI2) para se obter (S)-2-dimetilamino-l-fenil-etanol (ld) com o aspecto de um óleo amarelo claro (68,0 g, 56%) . 1H NMR (dmso-de) δ: 2,19 (s, 6H) , 2,31 (dd, J= 4,8, 12,4 Hz, 1H) 2,41 (dd, J = 8,1, 12,4 Hz. 1H), 4,63 (dd, J= 4,8, 7,8 Hz, 1H) , 4,97 (s lr., 1H) , 7,21 (m 1H) , 7,31 (m, 4H) , LCMS (APCI, M+H+) : 166, 4 .

Preparação do composto de referência 1: 3-(benzoilamino)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo.

Preparou-se uma solução de carbonato de potássio (861 mg 6,23 mmol) , intermediário lc (1 218 g, 3,12 mmol) e álcool ld (772 mg, 4,67 mmol) em 1,2-dimetoxietano (DME, 31 mL) e agitou-se num banho de óleo a 80°C durante 7,5 horas. Depois de se arrefecer até à temperatura ambiente, evaporou-se o solvente e repartiu-se o resíduo entre acetato de etilo (25 mL) e água desionizada (20 mL) . Extraiu-se novamente a camada aquosa com acetato de etilo (2 x 15 mL) , secou-se os extractos orgânicos combinados sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se até à secura. Dissolveu-se o resíduo em metanol (10 mL) e trietilamina (10 mL) , agitou-se à temperatura ambiente durante 19 horas e concentrou-se novamente até à secura. Purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de sílica, efectuando a eluição com um gradiente de 5%-20% de (etanol + 5% de NH4OH) em acetato de etilo, para se obter o composto 1 (561,1 mg, 39%) com o aspecto de uma espuma branca. 1H NMR (dmso-d6) [alguns picos são 147 duplicados devido à presença de isómeros tautoméricos] õ: [1 54 (s) , 1 63 (s) , 1,72 (s) 6H em conjunto], [2 20 (s) ,

2,22 (s) 6H em conjunto], [2,46 (d, J = 4,8 Hz) 2 52 (d. J =48 Hz), 1H em conjunto], [2,73 (dd, J= 8,3, 13,1 Hz), 2 82 (dd, J = 8,3, 12,9 Hz) 1H em conjunto] [4,46 (m), 4,65 (s lr.) 2H em conjunto], 5,80 (dd, J = 4 6, 8,3 Hz 1H) , 7,28 (m 1H) 7,35 (m, 4H) , 7,50 (m, 3H) , 7 99 (t, J = 7,4

Hz, 2H) , 10,93 (m lr., 1H) , [12,25 (s lr.), 12,48 (s lr.) 1H em conjunto]. Anál. (C25H29N5O3 · 0, 03EtOAc · 0,35H20) C, H, N. HRMS [M+H]+ calc. 448,2343; encontrado 448,2341; erro - O, 39 p.p.m.. 148

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários n' 1 X~i w V/ yCH* Híí - \--Õ \ CH3 3-[{4-fluorobenzoil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (1S)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etilo. NMR (dmso-de) δ: [1,54 (s) , 1,63 (s) , 1,65 (s) , 1,73 (s) 6H em conjunto], [2,20 (s), 2,22 (s) 6H em conjunto], [2,45 (d, J = 5,1 Hz), 2,52 (d, J = 4,6 Hz) 1H em conjunto], [2,73 (dd, J = 8,3, 12,9 Hz), 2,82 (dd, J= 8,6, 12,9 Hz) 1H em conjunto], [4,45 (m). 4,65 (s) 2H em conjunto], 5,80 (dd, J = 4,6, 8,1 Hz, 1H), 7,35 (m, 7H) , 8,07 q lr., J = 5,0 Hz, 2H) [10,93 (s lr.), à- 10,97 (s lr.) 1H em conjunto], [12,25 (s lr.), 12,47 (s lr.), 12,50 (s lr.) 1H em conjunto]. Anál. (C25H28FN5O3 O, 35H20) C, Η, N, F. HRMS: [M+H]+ calc. 466,22489; encontrado 466,22468; erro -0,46 p.p.m.. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 44% a partir do intermediário 2c, utilizando álcool ld. 149

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários *¥i O •KL ú s-f , *v. M. 1¾. / wNa vs 3-{(2-fluorobenzoíl)-amino]-6-6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etilo. ΧΗ NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,61 (s, 3 H) , 1,72 (s, 3 H) 2,43 (s 6 H) , 2,61 (dd, J=13, 60, 3, 02 Hz, 1 H) . 2,98 - 3,10 (m, 1 H) 4,73 - 4,85 (m, 2 H) , 5,92 (dd, J=9, 57, 3, 02 Hz, 1 H) , 7,23 - 7,47 (m, 7 H) , 7,54 - * 7,67 (m, 1 H) , 7,75 - 7, 87 (m, 1 H) . Anál. (C25H26N5O3F. 0,2HOAc. 0, 1H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 33% a partir do intermediário 3c, utilizando álcool ld. 150

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários 3-[(2,4-difluorobenzoil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo-[3,4— c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etilo. ΧΗ NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m. 1,63 (s, 3 H) 1,74 (s 3 H) 2,57 (s, 6 H) V { > 2,81 (dd, J= 13,3 9, 3 03 Hz, 1 H) í p* 3,15 - 3,26 (m, 1 H) 4,75 - 4, 85 (m ^H· \ 2 H) 5,99 (dd J=9, 85, 3, 03 Hz, 1 H) M 7,11 7,21 (m, 2 H) 7,33 - 7,45 (m 5 $ f H) 7, 84 7, 96 (m, 1 H) , Anál. 4 (C25H27N503Fz. 0,4HOAc) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 7% a partir do intermediário 4c, utilizando álcool ld. 151

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários j——v, > f > V/ p** 6,6-dimetil-3-{[4-(trifluoro-metil)-benzoil]-amino}-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirrole-5(1H) -carboxilato de 1(S)-2-(dimetil-amino)-1-feniletilo. NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m., 1 64 (s, 3 H) 1,75 (s 3 H) 2,42 (nenhum, 1 H) 2,53 (s, 6 H) 2,75 (dd, J= 13,4 7; 3,49 Hz, 1 H) 3,07 / €5ij 3,21 (m, 1 H) 4,75 - 4,82 (m, 2 H) 5,91 - 6,03 (m, 1H) 7,29 - 7,50 (m, í f3c, ê 5H) 7,86 (t, J= 8, 01 Hz 2 H) 8,14 (t, J= 8,95 Hz, 2 H) . Anál. (C26H28N5O3F3, 0,5HOAc . 0,3H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 15% a partir do intermediário 5c, utilizando álcool ld. 152

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários M r* HN _ ’V---N 6,6-dimetil-3-{(piridina-2-ilcarbonil)-amino]-4,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetil-amino)-1-feniletilo. NMR (400 MHz MeOD) δ p.p.m.. 1,61 (s, 3 H) , 1,72 (s, 3 H), 2,54 (s, 6 H) , 2,77 (d, J=13,60 Hz, 1 H), 3,08 - 3,24 (m, 1 H) 4,56 - 4,79 (m, 1 H) , 4,91 - 5,03 (m 1 H) , 5,90 - 6,05 V'° \ / at, Rí;"\ kJ (m, 1 H) , 7,29 7,36 (m, 1 H) , 7,36 -7,49 (m, 4 H) 7,58 - 7, 69 (m, 1 H) $ 7, 99 - 8, 09 (m, 1 H) , 8,21 (d, J= 7,81 Hz, 1 H), 8,71 (d, J=4,78 Hz, 1 H) ; Anál. (C24H28N6O3,0,2HOAc) C, H, N. HPLC: pureza > 95%. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 39% a partir do intermediário 6c, utilizando álcool ld. 153

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários Η \/~H» f^\ ®: P f ' p% "V w\„ í m* 3-(acetilamino)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H) -carboxilato de (lS)-2-(dimetilamino)1-feniletilo- ΧΗ NMR (dmso-de) δ 1,34 (t, J = 8,0 Hz, 3H) 1,42-1,45 (m 9H), 1,56 (s, 3H) 1,57 (s, 3H) , 2,12-2,13 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 4,36-4 43 (m, 4H) 10,15 ΐ (s, 1H) ; LCMS [Μ + H]" 367. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 60% a partir do intermediário 7c, utilizando álcool ld. 154

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários « jf\ o~\ p% V:'v CHi- 3-(isobutirilamino)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5 (1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1,05 (d, J = 6, 8 Hz, 6H) , [1,50 (s) 1,59 (s), 1,61 (s), 1,69 (s) 6H em conjunto], [2,19 (s); 2,21 (s) 6H em conjunto] [2,46 (dd, J= 4,6, 12,9 Hz), 2,52 (d, J = 4,8 Hz) 1H em conjunto] 2,59 (septet., J = 6,3 Hz, 1H) , (2,73 (dd, J = 8,3 12,6 Hz) ; 2,80 (dd J = 8,3, 12,6 Hz) 1H em conjunto], [4,32 (d, J= 13,4 Hz), 4 39 (d, J= 13,4 Hz), 4,49 (s lr.), 4,57 (s) 2H em 1 conjunto], 7,57 (dd, J = 4,8, 8,3 Hz, 1H), 7,29 (m, 1H), 7,34 (m, 4H), [10,29 (s), 10,35 (s), 10,46 (s lr.), 10,51 (s lr.) 1H em conjunto], [12,14 (s lr.), 12,27 (s), 12,30 (s) 1H em conjunto]. Anál. (C22H31N5O3 · 0,2ciclo-hexano · 0, 6H20) C, Η, N. HRMS. [M+H]+ cale. 414,2500; encontrado 414,2492; erro -1,87 p.p.m. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 36% a partir do intermediário 8c, utilizando álcool ld. 155

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários Exemplo de referência 3-[(ciclopropilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 0,77 (m, 4H) , [1,49 (s), 1,59 (s), 1,68 (s) 6H em conjunto], 1,80 (m, 1H), (2,19 (s), 2,22 (s), 6H em conjunto], 2,50 (m, 1H), 2,74 (m, 1H), [4,27 (d, J = 13,4 Hz), 4,34 (d, J= 13,6 Hz), M W- A * g m‘.v 1 V-4 V-/ <*% :F \ í HK! -'N v*° \ / €% 4 4,48 (s), 4,52 (s) 2H em conjunto], 5,79 (m, 1H) , 7,34 (m, 5H) , (10,65 (s), 10,70 (s), 10,74 (s), 10,79 (s) 1H em conjunto], [12,16 (s lr.), 12,27 (s), 12,30 (s) 1H em conjunto]. Anál. (C22H31N5O3 · 0, lciclo-hexano.0,6H20) C, Η, N. HRMS: [M+H]' calc. 412,2343; encontrado 412,2345; erro 0,54 p.p.m.. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 41% a partir do intermediário 9c, utilizando álcool ld. 156

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários p fV €NS 15 3-[(2,2-dimetilpropanoil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazol-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo. ΧΗ NMR (clrnso-cU) δ: [1,16 (s) , 1,18 (s) 9H em conjunto], 1,59 (m, 6H), [2,19 (s), 2,21 (s) 6H em conjunto 2,52 (m, 1H), 2,74 (m, 1H), [4,31 (d J= 14,6 Hz), 4,38 (d, J= 12,9 Hz), 4,50 (s), 4,56 (s) 2H em conjunto) 5,79 (m, 1H) , 7,29 (m, 1H) , 7,34 (m, 1H) , [9,87 (s), 9,92 (s) , 9,96 (s lr.), 10,02 (s lr.) 1H em conjunto], [11,94 (s lr.), 11,97 (s lr.), 12,31 (s), 12,34 (s) 1H em conjunto]. Anál. (C23H33N3O3 · 0, 0 6ciclo-hexano.0,7H20) C, Η, N. HRMS: [M+H]" calc. 428,2656; encontrado 428,2649; erro -1,58 p.p.m.. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 43% a partir do intermediário 10c, utilizando álcool ld. 157

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários Exemplo de referência 3-[(ciclobutilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ ΧΗ NMR (OMSO-d6) 1,47-1,61 (m, 4H) , 1,69-1,81 (m, 2H), 1,87-1,94 (m, 1H), 2,02-2,06 (m, 1H), 2,15-2,22 (m, 7H) 2,28-2,32 f\ w V/ jm* (m, 1H); 2,39-2,54 (m, 2H) 2,71-2,83 (m, 1H) , 3,17-3,24 (m, 1H) , 3,29-3,31 (m, 1H) , 4,32-4,49 (m, 1H) , W / V^: 4,59-4 64 (m, 1H), 5,78-5 80 (m, Ú 1H), 7,27-7,40 (m, 5H), 10,19-10,25 (m, 1H), 12,25-12,29 (m, 1H); Anál. (C23H31N5O3 0,3 hexanos. 0,5 H20) C, Η, N. HRMS [M+H]+ cale. 426,2500; encontrado 426,2485. Método do exemplo 1: preparado a partir do intermediário 11c, utilizando álcool ld. 158

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários Exemplo de referência 3-[(ciclopentilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1,59 (m 12H), 1,80 (m, 2H) , [2,19 (s) 2,21 (s); 6H em conjunto], 2,53 (m 1H), 2,77 (m, 2H) , [4,31 (d, J= 13,9 Hz), 4,39 (d, J= 14,6 Hz), 4,50 (s lr.), 4,56 rir ímt> o J £«* (s) 2H em conjunto], 5,79 (m 1H), 7,29 (m, 1H) , 7,34 (m, 4H) , [10,31 (s lr.), 10,37 (s), 10,48 (s lr.) 1H em conjunto], [12,11 (s lr.), 12,28 Ó ff- (s), 12,29 (s) 1H em conjunto]. Anál. (C24H33N5O3 · 0,2ciclo-hexano · 0, 8H20) C, Η, N. HRMS: [M+-H]+ calc. 440,2656; encontrado 440,2649; erro -1,54 p.p.m.. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 48% a partir do intermediário 12c, utilizando álcool ld. 159

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários Exemplo de referência 3-[(ciclo-hexilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: 1,18 (m 4H), 1,35 (m, 2H) , [1,49 (s) 1,58 (s) 6H em conjunto], 1,73 (m 5H), [2,23 (s), 2,33 (s lr.) 6H em conjunto], 2,58-3,08 (m 2H) , [4,33 (m) , 4,56 (m) 2H Ph ^ ílJ<jp (_% h. á «-4. >=*. g-~/ js** em conjunto], 5,85 (m, 1H), 7,30 (m, 1H), 7,36 (m 4H), [10,26 (s lr.), Ktí .....VsO \ . / r\ 10,32 (s lr.) 1H em conjunto], [12,10 (s lr.), 12,29 (s lr.) 1H em li· conjunto], Anál. (C25H33N5O3 · 1,3H20) C, Η, N. HRMS: [M+H]+ (calc. 454,28127; encontrado 454,28232; erro 2,31 p.p.m.. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 26% a partir do intermediário 13c, utilizando álcool ld. 160

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários j^rÀ f Í ) V-/ P** I4N Λ kj 3-{(metoxiacetil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5 (1H) -carboxilato de (IS) -2-(dimetil-amino)-1-feniletilo. ΐ NMR (dmso-d6+D20) δ: [1,43 (s) 1,53 (s), 1,64 (s) 6H em conjunto], [2,13 (s), 2,16 (s) 6H em conjunto]; 2,41 (dd, J= 3,3 13,6 Hz, 1H) , [2,74 (dd, J= 9,4, 13,7 Hz), 2,83 (dd, J = 8,1, 12,9 Hz) 1H em conjunto], [3,28 (s), 3,31 (s) 3H em conjunto]. [3,93 (s), 3,98 (s) 2H em Γ CH, cr"·1 / HtsC 1$ conjunto]. (4,26 (d, J = 14,4 Hz), 4,34 (d, J= 13,9 Hz) 4,51 (d, J = 13,4 Hz), 4 58 (d, J= 13,4 Hz) 2H em conjunto], 5,72 (m, 1H), 7,32 (m, 5H) . Anál. (C2iH29N604 · 0,3ciclo-hexano-0,8H20) C, Η, N. HRMS: [M+H] + calc. 416,22923; encontrado 416,22917; erro -0,14 p.p.m.. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 43% a partir do intermediário 14c, utilizando álcool ld. 161

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários ;c»i: tíèSí. '""'M.' \s*0 V 6,6-dimetil-3-4-[(tetra-hidrofurano-2-ilcarbonil)-amino]-4,6-dihidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetil-amino)-1-feniletilo. NMR (dmso-de) δ: 1,60 (m, 6H) , 1,85 (m 3H) , 2,18 (m, 1H) , [2,19 (s), 2,22 (s) 6H em conjunto], 2,50 (m 1H), 2,74 (m, 1H), 3,78 (m, 1H) 3,93 (quint, J = 6,8 Hz, 1H) , [4,37 (m), 4,57 (m) 3H em conjunto], 5,79 (m 1H), 7,34 (m, 5H), [10,02 (m) , jf lH* r\ !._„/ 15 10,33 (m) 1H em conjunto], [11,91 (s), 12,39 (s) 1241 (s) 1H em conjunto]. Anál. (C23H31N5O4 Ό, 15ciclo-hexano Ό, 6H20) C, Η, N. HRMS: [M+H]+ calc. 442,2449; encontrado 442,2446; erro -0,62 p .p .m. . Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 45% a partir do intermediário 15c, utilizando álcool ld. 162

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários itv o <? Λ Φ—ν <P% 6,6-dimetil-3-[(tetra-hidro-2H-pirano-2-ilcarbonil)-amino]-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H) -carboxilato de (IS)-2-(dimetil-amino)-1-feniletilo. NMR (dmso-de) δ: 1,46 - 1, 69 (m, 10H) , 1,82 (m 2H) [2,19 (s) 2,21 (s) 6H em conjunto], 2,51 (m, 1H) [2,71 (dd, J = 8,6, 12,4 Hz), 2,80 (dd, J = 8,3, 12,6 Hz) 1H em conjunto], 3,47 (m 1H) 3 94 (m 2H) [4,35 (m) 4,54 (s) 4,57 (s) 2H em conjunto], mK γ® \h, 5,78 (m, 1H), 7,29 (m, 1H), 7 34 (m, 4H) [9,59 (s), 9,70 (s) , 10,13 (s) , 1020 (s) 1H em conjunto], [11,85 1f (s), 11,88 (s), 12,38 (s), 12,41 (s) 1H em conjunto]. Anál. (C24H33N5O4 -0, lciclo-hexano -0,5H20) C, Η, N. HRMS: [M+H]+ calc, 456,2606; encontrado 456,2597; erro -1,92 p.p.m.. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 60% a partir do intermediário 16c, utilizando álcool ld. 163

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários * /"“% ,0 f s) f/' 1| pH, í \ / ÍM·. ' "U 6,6-dimetil-3-{[(4-metilmorfolina-2-il)-carbonil]-amino}-4,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetil-amino)-1-feniletilo. NMR (dmso-de) δ: 160 (m, 6H) , 2,02 (m, 2H) , [2,19 (s), 2,21 (s) 6H em conjunto], 2,23 (m, 3H), 2,59-2,91 (m 4H) 3,59 (m, 1H) , 3,90 (m 1H) 4,11 (m, 1H) [4,33 (m) , 4,64 (m) 4,55 (s) 2H em conjunto], 5,78 (m 1H) , 7,34 (m, 5H) , [9,79 (s lr. ) , f »*&% 1 > ν-Λ C:Hí a 9,88 (s lr.), 10,27 (s lr.),10,33 (s lr.) 1H em conjunto]. [11,88 (s lr.), 11,90 (s lr.), 12,40 (s lr.), 12,43 (s lr.) 1H em conjunto]. Anál. (C24H34N5O4 · 0,3acetato de etilo-0,4H20) C, Η, N. HRMS: [M+H] + calc. 471,27143; encontrado 471,27140; erro -0,07 p.p.m. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 58% a partir do intermediário 17c, utilizando álcool ld. 164

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários Exemplo de referência 3-{[(4-fluorofenil)-acetil]-amino}-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo. ΧΗ NMR (dmso-de) δ: [1,49 (s) , 1,58 (s) , 1,59 (s) , 1,67 (s) 6H em conjunto], 2,19 (s, 6H), 2,50 (m, 1H), [2,71 (dd J= 8,8, 13,1 Hz). 2 79 (dd J = 8,6 12,6 Hz) 1H em ^»00/ !*Vo ν~Λ \y conjunto], [3,56 (s lr.), 3,59 (s lr.) 2H em conjunto], [4,32 (m) 4,52 (s) 2H em conjunto], 577 (m 1H), 7,14 (m, 2H) , 7 32 (m, 7H) 10,70 (m, 1H), 12,36 (m, 1H). Anál. (C25H30FN5O3 · 0, lacetato de etilo-0,2H20) C, Η, N, F HRMS: [M+H] + calc. 480,406; encontrado 480,2395; erro -2,24 p.p.m.. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 53% a partir do intermediário 18c, utilizando álcool ld. 165

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários $4 # % íi^ 3l W^*: f·'·'·'*"""'·7 Vnf .PMi •í \ / 3-{[(4-metoxifenil)-acetil]-amino}-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo. ΧΗ NMR (clrnso-cU) δ: [1,48 (s) 1,57 (s) , 1,59 (s) , 1,67 (s) 6H em conjunto], [2,18 (s), 2,19 (s) 6H em conjunto], 2,47 (m, 1H), [2,70 (dd J = 8,1, 12,9 Hz), 2,79 (dd, J= 8,3, 12,6 Hz) 1H em conjunto], [3,49 (s), 3,52(s) 2H em conjunto], [3,72 (s) , 3,70 (s) 3H em conjunto], [4,30 (m) 'v** •f 4,51 (s) 2H em conjunto], 5,77 (dd J = 4,5, 8,9 Hz, 1H) , 6,86 (t, J= 8,9 Hz, 2H), 7,20 (m 2H), 7,32 (m 5H), 10,63 (m lr., 1H), 12,34 (m lr., 1H) Anál. (C27H33N5O4 O, 1H20) C, Η, N. HRMS: [M+H]+ calc. 492,2605; encontrado 492,2598; erro -1,42 p.p.m.. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 39% a partir do intermediário 19c, utilizando álcool ld. 166 Estrutura e exemplo de referência n

Nome químico, dados analíticos e comentários 6,6-dimetil-3-({[trans-2-fenilciclo- propil]-carbonil}-amino)-4, 6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(lff) -carboxilato de (lS)-2-(dimetilamino)-1-feniletil. ΐ NMR (dmso-de) 5:1,48-1, 69 (m, 8H) , [2,19 (s) 2,22 (s) 6H em conjunto], 2, 36 (m, 1H) , 2,53 (m, 1H), [2,72 (dd, J = 83, 11,9 Hz), 2,80 (dd, J = 8,3, 12,4 Hz) 1H em conjunto ], [4,37 (m) 4 , 58 (s) 2H em conjunto] , 5,79 (s lr 1H) 7 ,17 (m 3H) , 7,28 (m, 3H) . 7,35 (m, 4H) , 10,74 (m 1H) 12,32 (m, 1H) . Anál (C23H33N5O3 -0, 6H20) C, Η, N. HRMS. [M+H]+calc. 488,2656; encontrado 488,2660; erro 0,87 p.p.m.. Método do exemplo 1: preparado com um rendimento de 22% a partir do intermediário 20c, utilizando álcool ld.

Exemplo de referência 21: 3-(benzoilamino)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de 2-(dimetilamino)-1-feniletilo. 167

Preparação do composto 21a

Preparou-se uma solução de (+/-)-2-feniloxirano (1 g, 8,3 mmol) 1 e 10 mL de dimetilamina em MeOH (solução 2,0 M) e aqueceu-se a 7 0°C num tubo fechado de um dia para o outro. Concentrou-se a solução até secar sob uma pressão hipobárica para se obter 1,1 g de produto impuro 21a com o aspecto de um óleo.

Preparou-se uma solução do composto lc (100 mg, 0, 25 mmol) e do composto 21a (60 mg, 0,37 mmol) em 5 mL de tolueno e aqueceu-se no micro-ondas a 100°C durante 30 minutos. Concentrou-se a solução até secar por evaporação sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em MeOH (2 mL) e adicionou-se à solução EtsN (1 mL). Agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 2 horas, concentrou-se e purificou-se por HPLC [10% — 40% de CH3CN/H2O (0,1% de TFA) ] para se obter uma forma de sal de TFA do composto 21, com um rendimento de 2 9%. A alteração do sal de TFA para HCl foi efectuada por tratamento do sal de TFA numa solução de HCl 1 N-MeOH. Preparou-se o composto 21 (32 mg) sob a forma de um sal de HCl. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ p.p.m. 1,54 (s, 3 H) 1,66 (s, 3 H) 2,86 (d, J=4,55 Hz, 3 H) 2,89 (d 168 J= 4 ,55 Hz, 3 H) 3,01 - 3 10 (m, 2 H) 4,66 (d, J=13 14 Hz, 1 H) 4,96 (d, J=13 14 Hz, 1 H) 6 18 (d, J= 9 09 Hz, 1 H) 7,33 - 7,40 (m, 1 H) 7 45 (d J=4,29 Hz, 4 H) 7,52 (t, J=7,45 Hz, 3 H) 7,60 (t, J=7,33 Hz, 1 H) 8 02 (d J=7 33 Hz, 1 H) 10,27 (s, 1 H) 11,04 (s, 1 H) MS m/z: 428,2 (M+l).

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários P \ 1 m\?.Q S""NS. f CHs 9 SF’ 3-[(4-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(1H)-carboxilato de (2-dimetilamino)-1-feniletilo. XH NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m. 1,62 (s, 3 H), 1,73 (s, 3 H), 2,45 (s, 6 H) , 2, 60 - 2,72 (m, 1 H) , 3,01 - 3,11 (m, 1 H) 4,72 - 4, 87 (m, 2 H) , 5,90 -5,99 (m, 1 H) 7,20 - 7,48 (m 7 H) , 7,95 - 8,10 (m, 2 H). Anál. (C25H23FN5O3'0, 6H20-0,35HOAc) C Η N. LCMS (M+H+) : 466, 2. Método do exemplo 21: 0 composto em epígrafe foi preparado com um rendimento de 35%. 169

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários Λ-w p F\ / 3-[(2,4-difluorobenzoíl)-amino]-6,8-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(1H)-carboxilato de 2-(dimetilamino)-1-feniletilo. ΧΗ NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,61 (s, 3 H) , 1,73 (s 3 H), 2,40 (s, 6 H) 2,56 - 2, 68 (m, 1 H) , 2, 95 - 3,08 (m, 1 H) , 4,75 - 4, 92 (m, 2 H) , 5, 89 5, 98 (m, 1 H) 7,06 - 7,51 (m, 7 H) , 7,83 - P 2Ϊ 7,95 (m, 1 H). Anál. (C25H27F2N5O3 O, 3H20-0,4HOAc) C, HN. LCMS (APCI, M+H+) : 484,2. Método do exemplo 21: 0 composto em epígrafe foi preparado com um rendimento de 20%.

Exemplo de referência 24: 3-(benzoilamino)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(lH) -carboxilato de (li?)-2-(dimetilamino)-l-piridina-2-iletilo. 170

Preparação do composto 24a: (1J?) -2-(dimetilamino)-1- piridina-2-iletanol.

Preparou-se uma mistura de (IR)-2-(metilamino)-1-piridina-2-iletanol (2,25 g, 10,0 mmol, preparado pelo método de Tanis, et. al., ver documentos WO 2004/085414, WO 2004/085058 e WO 2004/022567), 5,0 mL de ácido fórmico aquoso a 88% e 10,0 mL de uma solução aquosa de formaldeido a 37% e aqueceu-se sob agitação em banho de óleo a 95°C durante 2 horas, mantendo uma temperatura interna máxima de 85°C. Depois de se arrefecer até à temperatura ambiente, extraiu-se a solução com 20 mL de éter dietilico, depois alcalinizou-se a camada aquosa restante com NaOH aquoso (5 N, 15 mL) para se ajustar o pH a 10. Extraiu-se a solução básica com diclorometano (2 x 50 mL). Secou-se os extractos combinados de diclorometano sobre sulfato de magnésio, filtrou-se, concentrou-se e purificou-se por cromatografia através de gel de silica (efectuando a eluição com NH40H aq. conc.:EtOH:EtOAc a 1:4:20), para se obter o composto 24a (1,09 g, 66%) com o aspecto de um óleo amarelo pálido. 171 NMR (DMSO-cy δ: 2,19 (s, 6H) , 2,43 (dd, J = 8,3, 12,4

Hz, 1H) , 2,53 (dd, J= 4,3, 12,4 Hz, 1H), 4,67 (quint., J = 4,0 Hz, 1H) , 5,18 (d, J= 4,0 Hz, 1H) , 7,22 (ddd, J= 1,3, 4,8, 7,6 Hz, 1H) , 7,47 (d, J = 8,1 Hz, 1H) , 7,75 (d de t, Jd = 1,8 Hz, Jt = 7,7 Hz, 1H) , 8,46 (d de q, Jd = 4,8 Hz, Jq = 0,8 Hz, 1H) . Anál. (C9H14N20) C, Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 167,4.

Preparou-se uma solução do intermediário lc (441 mg, I, 13 mmol), álcool 24a (281,5 1,69 mmol) e carbonato de potássio (312 mg, 2,26 mmol) em 1,2-dimetoxietano (DME, II, 3 mL) e agitou-se, sob uma atmosfera de árgon, num banho de óleo a 85°C durante 4 horas. Filtrou-se então a solução ainda quente para se remover os sólidos e concentrou-se o filtrado até à secura. Dissolveu-se o resíduo restante em metanol (10,0 mL) , adicionou-se trietilamina (10,0 mL) e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 24 horas. Depois de se evaporar os solventes, purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de sílica (efectuando a eluição com NH40H aq. conc.:EtOH:EtOAc a 1:4:20), para se obter o composto 24 (163,5 mg, 32%) com o aspecto de uma espuma cor-de-laran j a. ΧΗ NMR (DMSO-d<j) δ: [1,56, (s) , 1,64 (s) , 1,67 (s) , 1,72 (s) 6H em conjunto], [2 ,21 (s) , 2, 22 (s ) 6H em conj unto] , 2,74 (m, 2H) , [4,44 (m ) , 4 , 69 (m) 2H em conjunt - 0 ] , 5, 82 (m, 1H), 7,30 (t de d, Jt = 7 , 6 Hz, Jd = 4,9 Hz, 1H), 7 ,41 (t, J = = 7,7 Hz, 1H) , 7, 49- 7 ,56 (m, 3H) , 7,80 (q de d, Jq = 7,8 Hz r Jd = 1, 5 Hz, 1 H) , 7, 9 9 (t , J = 6,8 Hz, 2H) , 8,55 (t, J · = 4,9 Hz, 1H) , 10 , 93 (m, 1H) , [12, 23 (s lr .), 12, ,46 (s lr.), 12,4 9 (s lr.) 1H em conjunto]. Anál. (C24H28N6O3 · 0, 6H20) C, Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 449, 4. HRMS: [M+H]+ cale. 449, 2296; encontrado 449,2287; error -1,95 p.p.m.. 172

173

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários jCV> O Λ νξ O 5tS- 3-[(2-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5 (1H) -carboxilato de (1J?) -2-(dimetilamino)-l-piridina-2-il-etilo. NMR (dmso-cU) δ: [1,56 (s), 1,64 (s) , 1,67 (s) , 1,72 (s) 6H em conjunto], [2,21 (s), 2,22 (s) 6H em conjunto], 2,75 (m, 2H), [4,47 (m) , 4,69 (m) 2H em conjunto], 5,81 (m; 1H), 7,29 (m, 3H), 7,41 (t, J = 8,5Hz, 1H) , 7,54 -7, 65 (m, 2H) , 7,80 (q of d, Jq = 7,6 Hz, Jd = 1,3 Hz, 1H) , 8,54 (t, J= 5,6 Hz, 1H) [10,80 (s lr.), 10,88 (s lr.), 11,04 (s mt lr.) 1H em conjunto], [12,31 (s lr.), 12,46 (s lr.), 12,49 (s lr.), 1H em conjunto] . Anál. (C24H27FN5O3 -0,5H20 · -0, lciclo-hexano) C, Η, N, F. HRMS: [M+H]+ cale. 467,2202; encontrado 467,2202; erro 0,05 p.p.m.. Método do exemplo 24: obtido com um rendimento de 15% a partir do intermediário 3c, utilizando álcool 24a. 174

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários jCV> O JMi A i st 6,6-dimetil-3-{[4-(trifluorometil)-benzoil]-amino}4,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IR)-2-(dimetilamino)-l-piridina-2-iletilo. NMR (dmso-cU) δ: [1,56 (s), 1,63 (s) , 1,67 (s) , 1,72 (s) 6H em conjunto], [2,21 (s), 2,22 (s) 6H em conjunto], 2,75 (m, 2H) , [4,45 (m) , 4,70 (m) 2H em conjunto], 5,82 (quint., J = 3,8 Hz 1H) , 7,30 (m, 1H) , 7,41 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7,79 (m, 1H) , 7,88 (s lr., 2H) , 8,17 (t, J = 8,1 Hz, 2H) . 8,55 (1, J = 5,6 Hz, 1H), 11,22 (s lr., 1H), 12,55 (s lr., 1H) . Anál. (C25H27F3N5O3 · 0,55 H20) C, Η, N, F. HRMS: [M+H]+ calc. 517,2170; encontrado 517,2169; erro -01,5 p.p.m.. Método do exemplo 24: obtido com um rendimento de 42% a partir do intermediário 5c, utilizando álcool 24a. 175

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários JLJ( # O vC !**( /**# Hí-I V-.fi/ w© v. 1 m* vi £6 3-{[(4-fluorofenil)-acetil]-amino)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H) -carboxilato de (IR)-2-(dimetilamino)-l-piridina-2-iletilo. NMR (dmso-de) δ: [1,51 (s), 1,59 (s) , 1,62 (s) , 1,67 (s) 6H em conjunto], 2,19 (s, 6H), 2,72 (m 2H) , 3,5 9 (m 2H) . [4,30 (d, J = 13, 9 Hz) 4 34 (d, J = 12,9 Hz), 4,53 (d, J = 12,9 Hz) 4,57 (d, J = 13,4 Hz) 2H em conjunto], 5,79 (dd, J = 4,3, 7,8 Hz, 1H) , 7,13 (t, J = 8,3 Hz, 2H) , 7,33 (m, 4H) , 7,78 (q, J = 7,1 Hz, 1H) , 8,53 (t, J = 5,2 Hz, 1H) , [10,65, (s lr.), 10,71 (s lr.) 1H em conjunto], [12,33 (s lr.), 12,37 (s lr.) 1H em conjunto] . HRMS: [M+H]“ calc. 481 2358, encontrado 481 2354; erro -0,78 p.p.m.. Método do exemplo 24: obtido com um rendimento de 26% a partir do intermediário 18c, utilizando álcool 24a. 176 Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários 6,6-dimetil-3-({[trans-2-fenilciclo-propil]-carbonil}-amino)-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IR)-2-(dimetil-amino)-l-piridina-2-iletilo. NMR (dmso-de) δ: 1,19-1,74 (m 8H), 2,12 (s lr., 1H) [2,20 (s), 2,22 (s) 6H em conj unto], 2, 36 (s P t / lr., 1H) , 2 75 (m 2H) , [4,38 (m) , 4,60 (s lr. ) 2H em conjunto], 5, 82 NM :fí (s lr., 1H) , 7,16 (s lr., 3H) , 7,28 4 (s lr., 3H) , 7,39 (t, J = 8 6 Hz, lr\ 1H) , 7,80 (s , 1H), 8,54 (s, 1H) , 1074 (m, 1H) , 12,33 (m, 1H) . Anál. 39 (ϋ27Η32^8θ 3*0, lEtOAc *5H20 C H N, HRMS: [M+H]" calc. 489, 26009, encontrado 489,2811: error 0,46 p.p.m.. Método do exemplo 24: obtido com um rendimento de 18% a partir do intermediário 20c, utilizando álcool 24a.

Exemplo de referência 30: 3-(benzoilamino)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (1S)-1-benzil-2-(dimetilamino)-etilo. 177 :κα D' tóOl15¾ mm OíSSSA, w £3% ΐ» i n%*?'

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Preparação do composto 30a: (S)-2-hidroxi-N,N-dimetil-3- fenilpropanamida. A uma solução de ácido (S)-2-hidroxi-3-fenilpropanóico (3,53 g, 21 2 mmol) , cloridrato de dimetilamina (2,07 g, 1,2 eq.), hidrato de 1-hidroxibenzotriazole (HOBt, 3,25 g, 1 eq.) e diisopropiletilamina (DIEPA, 4,43 mL, 1,2 eq.) em THF (60 mL) adicionou-se diisopropilcarbodiimida (DIC, 3,65 mL, 1,1 eq.) a 0°C. Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro e depois concentrou-se até à secura sob pressão reduzida. Repartiu-se o residuo entre acetato de etilo e HC1 1 N. Lavou-se os extractos de acetato de etilo com NaOH 1 N, secou-se sobre sulfato de magnésio, filtrou-se, concentrou-se e purificou-se por cromatografia através de gel de silica para se obter o composto 30a (2,36 g, 62%) com o aspecto de um sólido branco. 1R NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 2 83 - 2,92 (m, 7 H), 2,93 - 3,01 (m, 1 H) , 4,66 (t, J=6, 67 Hz, 1 H) , 7,15 -7,33 (m, 5 H) . 178

Preparação do composto 30b: (S)-l-dimetilamino-3-fenil- propano-2-ol. A uma suspensão agitada de hidreto de lítio-alumínio (1,99 g, 52 4 mmol) em THF (20 mL) adicionou-se uma solução do intermediário 30a (2,35 g, 13,1 mmol) em THF (10 mL) , a 0°C. Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro e do extinguiu-se com uma solução saturada de Na2CC>3 até cessar a efervescência. Filtrou-se a mistura resultante através de celite e lavou-se a massa de filtração com diclorometano. Concentrou-se o filtrado até à secura. Dissolveu-se o residuo restante em éter. Extraiu-se a solução 2 vezes com HC1 2 N. Lavou-se a camada aquosa combinada com éter e alcalinizou-se com NaOH sólido até pH = 10. Extraiu-se a solução básica duas vezes com éter.

Secou-se os extractos combinados de éter sobre K2CO3 anidro, filtrou-se e concentrou-se para se obter o composto em epígrafe com 0 aspecto de um óleo incolor (1 6 g, 74%) . ΧΗ NMR (400 MHz, MeOD) δ p .p.m.: 2,24 (s, 6 H), 2,28 - 2,39 (m, , 2 H), 2 , 63 - 2,79 (m, 2 H), 3,87 - 3,99 (m, 1 H) , 7,12 - 7,31 (m, 5 H) .

Preparou-se uma solução de intermediário lc (165 mg, 0,42 mmol), álcool 30b (104 mg, 1,5 eq.) e carbonato de potássio (117 mg, 2 eq.) em 1,2-dimetoxietano (DME, 2 mL) e aqueceu-se a 130°C durante 40 minutos num reactor de micro-ondas. Filtrou-se então a solução ainda quente para se remover os sólidos e concentrou-se o filtrado até à secura. Dissolveu-se o residuo restante em metanol (1,0 mL), adicionou-se trietilamina (1 0 mL) e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 horas. Depois de se evaporar os solventes, purificou-se o produto impuro por HPLC prep. e liofilizou-se para se obter o composto em epígrafe 30 (90 179 mg) com o aspecto de um sólido branco, com um rendimento de 46%. NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,51 (s, 3 H), 1,66 (s, 3 H) , 2 37 (s, 6 H) , 2,58 (dd, J=13, 60, 3, 02 Hz, 1 H) , 2,76 (dd, J= 13,22, 8, 69 Hz, 1 H) , 2,82 - 2, 90 (m, 1 H) , 2 92 - 3,01 (m, 1 H) , 4,49 - 4,73 (m, 2 H) , 5,18 - 5,28 (m, 1 H) , 7, 14 - 7 23 (m, 1 H) , 7,23 - 7 31 (m, 4 H) , 7,53 (t, J= 7,4 3 Hz, 2 H), 7 61 (t, J=7,30 Hz, 1 H) , 7 95 (t, J=6,42 Hz, 2 H) . Anál. (C26H31N5O3,0,2HOAc. 0,2H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%.

Exemplo de referência 31: 3-[(2-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-l-benzil-2-(dimetilamino)-etilo. O, H. ''‘ψζ·

Preparou-se o composto em epígrafe 31 com um rendimento de 56% pelo método do exemplo 30. NMR (400 MHz, MeOD) δ P .p .m .: 1,50 (s, 3 H) , 1,66 (s, , 3 H), , 2,43 (s, 6 H) , 2, 63 - 2 ,71 (m, 1 H) , 2, 79 - 2,91 ( m, 2 H), 2, 97 (dd, J=13 ,72, 5, 41 Hz, 1 H), 4 , 53 - 4, 74 (m, 2 H), 5, 21 - 5, 31 (m, 5 1 H) r 7 ,13 - 7,22 (m, 1 H) , 7,24 - 7,31 (m, 5 H) , 7,33 (t, J= =7, 55 Hz , 1 H), 7,54 - 7 , 65 (m, 1 H), 7, ,74 - 7, 88 (m, 1 H) . Anál. (C26H30N5O3F. 0,2HOAc) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%. 180

Exemplo de ref©r©nci®· 32: 3- (benzoilamino)-6,6-di.meti.1_4 6 di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (ls)-l ciclo-hexil-2-(dimetilamino)-etilo. 180

mm JCHj M*q

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KJ H

Preparação do composto 32a: (S)-2-ciclo-hexil-2-hidroxi- N,N-dimetilacetamida.

Preparou-se o composto em epígrafe 32a com um rendimento de 75% pelo método do exemplo 30a. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ p.p.m.: 1,09 - 1,30 (m, 4 H), 1,38 - 1,55 (m, 3 H) , 1,64 (d, J=ll,08 Hz, 2 H) , 1,71 -1,87 (m, 2 H) , 3,01 (d, J=6,04 Hz, 6 H) , 4,23 (d, J=2,77 Hz, 1 H) .

Preparação do composto 32b: (S)-l-ciclo-hexil-2-(dimetil- amino)-etanol.

Preparou-se o composto em epígrafe 32b com um rendimento de 47% pelo método do exemplo 30b. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ p.p.m.: 1,04 - 1,26 (m, 6 H), 1,58 -1,82 (m, 5 H) , 2,90 (d, J=5,04 Hz, 3 H) , 2,96 (d, J=5,04 Hz, 3 H), 2, 98 - 3, 03 (m, 1 H) , 3,15 - 3,26 (m, 1 H) , 3,85 - 3,94 (m, 1 H), 11,34 (s lr., 1 H). 181

Preparou-se o composto em epígrafe 32 com um rendimento de 34% pelo mé todo do exemplo 30. XH NMR (400 MHz, MeOD) δ ρ . p · : m. : 1, 06- 1,3 6 (m, 5 H), 1, 61 - 1,84 (m, 12 H) , 2,· 46 (s, 6 H), 2, 62 - 2 75 (m, 1 H), 2,88 (dd, J=13,35, 9 ,06 Hz, 1 H), 4 58 - 4,77 (m, 2 H), 4, 89 - 4 97 (m, 1 H), 7,52 (t , J=7 43 Hz, 2 H), 7 60 (t, J=7 ,30 Hz, 1 H), 7,95 (d, J=7,30 Hz, 2 H) . Anál. (C25H35N5O3,0,2HOAc. 0, 7H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%.

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários Hi<\: Ph y—S P { } h\ |j s0__/ «N; VjssO \ ?v .1 CH4 3-[(2-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-l-ciclo-hexil-2-(dimetilamino)-etilo. XH NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,07 - 1,35 (m, 5 H) , 1, 62 - 1,84 (m, 12 H) , 2 52 (s, 6 H), 2,72 - 2,84 (m, 1 H) , 2,95 (dd, J= 13,4 7, 9,19 Hz, 1 H) , 4, 60 - 4,79 (m, 2 H) , 4 90 -4,96 (m, 1 H) , 7,22 - 7 37 (m, 2 H) , 7, 53 - 7, 66 (m, 1 H) , 7,75 - 7,86 (m, 1 H). Anál. (C25H34N5O3F. 0,4HOAc . 0,3H20) C, Η, N, HPLC. pureza > 95%. Método do exemplo 32 182Estrutura e exemplo de referência n°

Nome químico, dados analíticos e comentários vsL i

\ F 34 d

3-[(2,4-difluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(lff) -carboxilato de (IS)-l-ciclo-hexil-2-(dimetilamino)-etilo. XH NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,08 - 1,37 (m, 5 H) , 1, 64 - 1,87 (m, 12 H) , 2 45 (s, 6 H) , 2, 622 - 2 74 (m, 1 H) , 2,87 (dd, J=13, 35, 9, 06 Hz, 1 H) , 4,57 - 4 79 (m, 2 H) , 4 89 - 4,96 (m, 1 H) , 7,05 - 7 22 (m, 2 H) , 7, 81 - 7, 95 (m, 1 H) . Anál. (C25H33N3O3F2, 0,3H0Ac . 0,4H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%. Método do exemplo 32

Exemplo de referência 35: 3-(benzoilamino)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (1S)-1-[(dimetilamino)-metil]-3-metilbutilo.

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183

Preparação do composto 35a. (S)-2-hidroxi-N,N,4-trimetil- pentanamida.

Preparou-se o composto em epígrafe 35a com um rendimento de 61% pelo método do exemplo 30a. ΧΗ NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ p.p.m.: 0,94 - 1,01 (m, 6 H), 1,27 - 1,36 (m, 1 H) , 1,38 - 1,48 (m, 1 H) , 1, 95 - 2,04 (m, 1 H) , 2,70 (s lr., 1 H) , 2,99 (d, J=13,35 Hz, 6 H) , 4,40 (dd, J=10,07, 2,01 Hz, 1 H).

Preparação do composto 35b: (S)-1-(dimetilamino)-4-metil- penta-2-ol.

Preparou-se o composto em epígrafe 35b com um rendimento de 63% pelo método do exemplo 30b. XH NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ p.p.m.: 0,93 (dd, J=6,55, 3,78 Hz, 6 H) , 1,05 - 1,17 (m, 1 H) , 1,32 - 1,47 (m, 1 H) , 1,75 - 1,92 (m, 1 H) , 2:16 - 2,56 (m, 8 H) , 3,73 - 3, 90 (m, 1 H) , 4,39 (s lr., 1 H).

Preparou-se o composto em epígrafe 35 com um rendimento de 54% pelo método do exemplo 30. XH NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 0, 92 - 1,00 (m, 6 H) , 1,36 - 1,48 (m, 1 H) , 1,53 - 1, 63 (m, 1 H) , 1, 67 - 1,80 (m, 7 H) , 2,37 (s, 6 H), 2,48 (dd, J=12,84, 3,27 Hz, 1 H), 2,56 - 2,74 (m, 1 H) , 4, 54 - 4,78 (m. 2H) , 5,05 - 5,16 (m, 1 H) , 7, 52 (t, J=7,55 Hz, 2 H), 7,60 (t, J=7, 18 Hz, 1H) , 7, 94 (d, J=7,30 Hz, 2 H) . Anál. (C23H33N5O3,0, IHOAc.0, 1H20) C, H , N. HPLC: pureza > 95 o O ·

Exemplo de referência 36: 3-[(4-fluorobenzoil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(lff)-carboxilato de (IS)-1-[(dimetilamino)-metil]-3-metilbutilo. 184

Preparou-se o composto em epígrafe 36 com um rendimento de 22% a partir do composto 2c, pelo método do exemplo 35. ΧΗ NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 0,97 (d, J= 6, 55 Hz, 6 H), 1,37 -1,51 (m, 1 H) ; 1,54 - 1,61 (m, 1 H) , 1, 64 - 1, 77 (m, 7 H) , 2,40 (s, 6 H) , 2, 44 - 2,57 (m, 1 H) , 2,59 - 2,79 (m, 1 H) , 4,52 - 4, 74 (m, 2 H) , 5,05 - 5,18 (m, 1 H) , 7,25 (t, J= 8,69 Hz, 2 H) , 7, 93 - 8, 09 (m, 2 H) . Anál. (C23H32N5O3F. 0,2HOAc) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%.

Exemplo de referência 37: 3-[(2,4-difluorobenzoil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H) -carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-metiletilo.

Preparou-se o composto em epígrafe 37 com um rendimento de 25% por um procedimento semelhante ao do exemplo 1, utilizando (S)-(+)-l-dimetilamino-2-propanol. NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,26 - 1,35 (m, 3 H) , 1,73 (s, B H) , 2,47 (s, 6 H) , 2,55 - 2, 66 (m, 1 H) , 2,74 - 2,91 5,17 (m, 1 H), 7,09 (m, 1 H) , 4, 60 - 4,75 (m, 2 H) , 5,02 - 185 7,18 (m, 2 Η), 7,82 - 7, 92 (m, 1 H). Anál. (C20H25F2N5O3 ·0,4H20-0,3H0Ac) C, Η, N. LCMS (M+H+) : 422,3.

Exemplo de referência 38: 3-[(4-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de 2-(dimetilamino)-1-(2-fluorofenil)-etilo.

Preparação do composto 38a: 2-dimetilamino-l-(2-fluorofenil) -etanol.

Efectuou-se a metilação de 2-amino-l-(2—fluoro-fenil)-etanol (2,18 g, 14,1 mmol) pelo procedimento utilizado para preparar o intermediário ld, obtendo-se o composto 38a (2,26 g, 12,3 mmol) com o aspecto de um óleo impuro (rendimento de 88%) . ΧΗ NMR (MeOD) δ: 2,54 (s, 6H) , 2, 66 (dd, J=9, 0 9, 12,88 Hz, 1H) , 2,81 (dd, J=9, 09, 12, 88 Hz; 1H) , 5,33 (dd, J=3 ,28, 9,09 Hz, 1H) , 7,19-7,28 (m, 1H) , 7,33-7,40 (m, 1H) , 7,43- -7,51 (m, 1H) . 7,69-7,76 (m, 1H) . LCMS (APCI, M+H+) : 184,2.

Efectuou-se o acoplamento do intermediário 2c (298 mg, 0,729 mmol) e álcool 38a (200 mg, 1,09 mmol) pelo método do exemplo 1, proporcionando o composto 38 (10 mg, 3%) com o aspecto de um sólido branco. NMR (MeOD, uma mistura de rotâmeros, apenas são apresentados os desvios químicos da forma principal) õ: 1,53 (s, 3H) , 1,65 (s, 3H) , 2,96 (s, 186 6H) , 3,37-3,47 (m, 1H) , 3,71-3,81 (m, 1H) , 4,75-4,86 (m 2H) , 6,29-6,36 (m, 1H) , 7,07-7,24 (m, 4H) , 7,30-7,40 (m 1Η) , 7,43-7,53 (m, 1H) , 7, 87-7, 97 (m, 1H) . Anál. (C25H27F2N5O3 '1, 88TFA-0, 88etanol) C, Η, N, F. LCMS (APCI, M+H+) : 484,2 .

Exemplo de referência 39: 3-[(4-fluorobenzoil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H) -carboxilato de 2-(dimetilamino)-1-(4-fluorofenil)-etilo.

Preparação do composto 39a: 2-dimetilamino-l-(4-fluorofenil) -etanol

Efectuou-se a metilação de 2-amino-l-(4-fluorofenil)-etanol (2,10 g, 13,5 irunol) pelo procedimento utilizado para preparar o intermediário ld, proporcionando o composto 39a (1,24 g, 6,78 mmol) com o aspecto de um óleo (rendimento de 50%). ΧΗ NMR (MeOD) õ: 2,55 (s, 6H) , 2,62 (dd, J=3,79, 12,88 Hz, 1H) , 2,83 (dd, J=9, 09, 12,88 Hz, 1H), 5,01 (dd, J=3, 54, 9, 09 Hz, 1H) , 7,28 (t, J=8,84 Hz, 2H) , 7,61 (dd, J=5,31, 8,59 Hz, 2H) . LCMS (APCI, M+H+) : 184,2.

Efectuou-se o acoplamento do intermediário 2c (290 mg, 0,710 mmol) e álcool 39a (260 mg, 1,42 mmol) pelo método do exemplo 1, proporcionando o composto 39 (27 mg, 7%) com o 187 aspecto de um sólido branco. NMR (MeOD, uma mistura de rotâmeros, apenas são apresentados os desvios químicos da forma principal) δ : 1,52 (s, 3H) , 1, 64 (s, 3H), 2,94 (s, 3H) , 2,97 (s, 3H), 3,32-3,40 (m, 1H) , 3,66-3,77 (m, 1H) , 4,77-4,86 (m, 2H) , 6,04-6,11 (m, 1H) , 7,04=7,23 (m, 4H) , 7,40-7,49 (m, 2H), 7,87-7,98 (m, 2H) . Anál. (C25H27F2N5O3 · •2,03TFA -0 ,8 9água) C, Η, N, F. LCMS (APCI, M+H+) : 484,2.

Exemplo de referência 40: 3-[(4-fluorobenzoil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (IS)-2-[isopropilo-(metil)-amino]-1-fenil-etilo.

Preparação do composto 40a: (S)-2-hidroxi-N-isopropil-n- metil-2-fenilacetamida.

Preparou-se o composto em epígrafe 40a com um rendimento de 44%, com o aspecto de um óleo, pelo método do exemplo 30a, utilizando isopropilmetilamina. 1H NMR (400 MHz, clorofórmio-d) δ p.p.m.: 0,55 (d, J=6,55 Hz, 1,5 H) , 1,03 (d, J= 6,80 Hz, 1,5 H) , 1,16 (t, J=6, 67 Hz, 3 H) , 2,56 188 188 H) , 3,80-3, 96 (m, 0,5 H) , 4,87 - J=31,98 Hz, 1 H), 7,28 - 7,41 (m, (s, 1,5 Η) , 2,86 (s, 1,5 4, 95 (m, 0,5 H), 5,19 (d, 5 H) .

Preparação do composto 40b: (S)-2-(isopropilo-(metil)- amino)-1-feniletanol.

Preparou-se o composto em epígrafe 40b com um rendimento de 84% pelo método do exemplo 30b. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,02 (dd, J=ll,46, 6,67 Hz, 6 H), 2,32 (s, 3 H) , 2,46 - 2, 63 (m, 2 H) , 2,86 - 2,95 (m, 1 H) , 4,70 (dd, J= 9, 0 6, 3,78 Hz, 1 H) , 7,20 - 7,28 (m, 1 H) , 7,29 - 7.39 (m, 4 H) . A uma solução de (S)-2-(isopropilo-(metil)-amino)-1-feniletanol 40b (227 mg, 1,18 mmol) em THF (2 mL) adicionou-se uma solução de butil-lítio 1,6 M em hexano (0,73 mL) , à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 20 minutos e depois adicionou-se 5-(clorocarbonil)-3-[(4 — fluorobenzoí1)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4ff)-carboxilato de etilo 2c (200 mg, 0,49 mmol). Aqueceu-se a mistura resultante ao refluxo durante uma hora e depois concentrou-se até à secura sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por HPLC prep- e liofilizou-se para se obter o composto em epígrafe 40 com um rendimento de 4% (10 mg), com o aspecto de um sólido branco. ΧΗ NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,06 (dd, J=21, 65, 6, 55 Hz, 6 H) , 1,62 (s, 3 H) , 1,72 (s, 3 H) , 2,42 (s, 3 H) , 2, 62 - 2,72 (m, 1 H) , 2,88 - 3, 04 (m, 2 H) . 4,82 (s lr., 2 H) , 5,81 (dd, J=9,19, 3.40 Hz, 1 H), 7,21 - 7,33 (m, 3 H) , 7,34 - 7,44 (m, 4 H) , 7, 97 - 8, 06 (m, 2 H) . Anál. (C27H32N5O3F. 0,2HOAc . 0,4H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%. 189

Exemplo de referência 41: 3-[(4-fluorobenzoíl)-amino]-6,6- dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H) -carboxilato de (R)-2-(dimetilamino)-2-feniletxlo.

Preparação do composto 41a: (R)-2-(dimetilamino)-2 fenil etanol.

Preparou-se o composto em epígrafe 41a com um rendimento de 90% pelo método do exemplo ld, utilizando (R)-2-amino-2-feniletanol. XH NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 2,21 (d, J=1,2 6 Hz, 6 H) ; 3,32 - 3,39 (m, 1 H) , 3,75 - 3,84 (m, 1 H), 3, 90 - 4,00 (m, 1 H) , 7,24 - 7,39 (m, 5 H) .

Preparou-se o composto em epígrafe 41 com um rendimento de 18% pelo método do exemplo 30, a partir do composto 2c. XH NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,65 (d, J=ll, 08 Hz, 6 H), 2,33 (s, 6 H) , 3, 63 - 3,75 (m, 1 H) , 4,38 - 4,56 (m, 4 H), 7,20 - 7,34 (m, 3 H) , 7,38 (t, J=4,53 Hz, 4 H) , 7, 93 - 8,07 (m, 2 H) . Anál. (C25H28N5O3F. 0,2HOAc. .0,3H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%. 190

Exemplo de referência 42: 3-[(4-fluorobenzoil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H) -carboxilato de (S)-2-(dimetilamino)-2-feniletilo.

Preparação do composto 42a: (S)-2-(dimetilamino)-2- feniletanol.

Preparou-se o composto em epígrafe 42a com um rendimento de 97% pelo método do exemplo ld, utilizando (S)-2-amino-2-feniletanol. 1H NMR (400 MHz, MeOD) p.p.m.: 2,20 (s, 6 H), 3, 35 (t, <J=6, 17 Hz, 1 H), 3,79 (dd, J=11,33, 6,29 Hz, 1 H) , : 3,94 (dd, J= 11,33, 6,04 Hz, 1 H), 7,23 - 7,37 (m, 5 H) . Preparou-se 0 composto em epígrafe 42 com um rendimento de 12 % pelo método do exemplo 30 . XH NMR (4 00 MHz, MeOD) δ p.p •m.: 1,65 (d, J=ll ,33 Hz, 6 H), 2,33 (s, 6 H) , 3, 61 - 3, 76 (m, 1 H) , 4,37 - 4,58 (m, 4 H), 7,25 (q, J= 8,64 Hz, 2 H), 7,29 - 7,34 (m, 1H) , 7,38 (t, J=4,66 Hz, 4 H), 7, 93 - 8,07 (m, 2 H) . Anál. (C25H28N5O3F. 0,4H0Ac. ) , C, H, N. HPLC: pureza > 95%. 191

Exemplo de referência 43: 3-[(4-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de l-fenil-2-pirrolidina-l-iletilo.

Preparação do composto 43a: l-fenil-2-pirrolidina-l-il-etanol.

Adicionou-se pirrolidina (1,06 mL, 12,8 mmol) a uma solução de (S)- ( + )-1-fenil-l,2-etanodiol-2-tosilato (745,8 mg, 2,55 mmol) em diclorometano (2,55 mL) . Agitou-se a mistura num banho de óleo a 40°C durante 28 horas. Evaporou-se os solventes e dissolveu-se o residuo em acetato de etilo (30 mL) . Adicionou-se uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (5 mL) e salmoura (5 mL) e separou-se as camadas. Extraiu-se novamente a camada aquosa com acetato de etilo (2 x 20 mL) . Secou-se os extractos orgânicos combinados sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se para se obter uma mistura de l-fenil-2-pirrolidina-l-il-etanol e 2-fenil-2-pirrolidina-l-il-etanol com o aspecto de um óleo amarelo (541,2 mg). Uma vez que a 192 presença de produtos isómeros sugere a formação de um intermediário epóxido, a racemização pode ter ocorrido nesta reacção. Dissolveu-se a mistura de álcoois em DMF (1,45 mL) , adicionou-se cloreto de triisopropilsililo (154 pL, 0,72 mmol) e imidazol (99 mg, 1,45 mmol) e agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 42 horas. Depois de se evaporar o solvente, repartiu-se o residuo entre acetato de etilo (20 mL) e uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (10 mL). Extraiu-se novamente a camada aquosa com acetato de etilo (2 x 10 mL) . Secou-se os extractos orgânicos combinados sobre sulfato de magnésio, filtrou-se, concentrou-se e purificou-se por cromatografia através de gel de silica (efectuando a eluição com NH4OH aq. conc./EtOH/EtOAc a 1/19/80), para se obter o álcool 43a (155,9 mg, 32%), com o aspecto de um sólido branco, e o éter sililico 43b (135,8 mg, 15%), com o aspecto de um óleo amarelo. 43a: NMR (DMSO-dg) δ: 1,64 (m, 4H) , 2,53 (m, 5H, parcialmente obscurecido pelo solvente), 2,60 (dd, J = 7,8, 12,1 Hz, 1H), 4,62 (s lr., 1H), 5,05 (s lr., 1H), 7,21 (m, 1H) , 7,32 (m, 4H) , Anál. (C12H17NO 0, 15H20) C, Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 192,4.

Efectuou-se o acoplamento do intermediário 2c (210 mg, 0,514 mmol) e álcool 43a (147,5 mg, 0,771 mmol) pelo método do exemplo 1, proporcionando o composto 43 (57,3 mg, 22%) com o aspecto de um pó esbranquiçado. ΧΗ NMR (DMSO-ds) δ: 1,53 (s lr., 2H) , 1,63 (m, 8H) . 2,52 (m, 4H, parcialmente obscurecido pelo solvente), 2,74 (m, 1H), [2,85 (m) , 3,00 (m) 1H em conjunto], [4,43 (m), 4,64 (s lr.) 2H em conjunto], 5,78 (dd, J = 5,8, 8,1 Hz, 1H) , 7,35 (m, 7H) . 8,07 (s lr., 2H) , 10,97 (m, 1H) , [12:24 (s lr.), 12,49 (s lr.) 1H em conjunto]. Anál. (C27H30FN5O3 · 0,7H20) C, Η, N, F. 193 LCMS (APCI, M+H+) : 492,4, HRMS: [M+H]+ calc. 492,24054, encontrado 492,24017, erro -0,76 p.p.m..

Exemplo de referência 44: 3.1(4-fluorobenzoíl)-aminol-6,6 dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de l-metil-3-fenilpirrolidina-3-ilo.

Preparação do composto 44a: l-metil-3-fenil-pirrolidina-3-ol.

Preparou-se uma mistura de 3-fenil-pirrolidina-3-ol (2,01 g, 11,67 mmol), 5,8 mL de ácido fórmico aquoso a 88% e 11,7 mL de uma solução aquosa de formaldeido a 37% e agitou-se num banho de óleo a 100°C durante 1,5 horas, mantendo uma temperatura interna máxima de 86°C. Depois de se arrefecer até à temperatura ambiente, extraiu-se a solução com 20 mL de éter dietílico e depois alcalinizou-se a camada aquosa restante com uma solução aquosa de hidróxido de sódio a 50% até pH = 8. Extraiu-se a solução básica com acetato de etilo (3 x 25 mL) . Secou-se os extractos combinados de acetato de etilo sobre sulfato de magnésio, filtrou-se, concentrou-se e purificou-se por 194 cromatografia através de gel de sílica (efectuando a eluição com NH4OH aq. conc./EtOH/EtOAc a 1/19/80) para se obter o composto 44a (260,4 mg, 12%) com o aspecto de um líquido amarelo. XH NMR (DMSO-de) i δ: 2,02 (m, 1H), 2,08 (m, 1H), 2,29 (s, 3H) , 2, 63 (d, J = 9, 6 Hz, 1H), 2,71 (m, 2H), 2,79 (d, J = 9,6 Hz, 1H) , 5,21 (s, 1H), 7,17 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,29 (t, J = 7, 6 Hz, 1H) , 7,47 (t, J = 7,3 Hz, 1H) . Anál . (CnHisNO-0, 16H20) C, H, N. LCMS (APCI , M+H+) : 178,4.

Efectuou-se o acoplamento do intermediário 2c (201,1 mg, 0,49 mmol) e álcool 44a (131 mg, 0,74 mmol) pelo método do exemplo 1, proporcionando 44 (72,1 mg, 30%) com o aspecto de um sólido amarelo pálido. NMR (OMSO-cfo) δ: [1,52 (d, J = 9,3 Hz), 1,76 (J = 14,4 Hz) 6H em conjunto], 2,24 (septeto, J = 7,3 Hz, 1H), [2,30 (s), 2,31 (s) 3H em conjunto], 2,39 (m, 1 H), 2,57 (quint., J = 8,1 Hz, 1 H), 2,76 (m, 1H), 2,85 (t, J= 11,1 Hz, 1H) , 3,22 (t, J= 10,0

Hz, 1H) , [4,37 (s lr.), 4,69 (s lr.) 2H em conjunto], 7,21 (m, 1H) , 7,32 (m, 6H), 8,08 (m, 2H) , 10,97 (m lr., 1H) , 12, 48 (m lr., 1H) . Anál. (C2 6H28FN503-0,45H2O) C, Η, N, F. LCMS (APCI, M+H+) : 478,4, HRMS: [M+H]+ calc. 478,2249; encontrado 478,2240; erro -1,83 p.p.m..

Exemplo de referência 45: 3-[(4-fluorobenzoil)-aminol]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(lfí) -carboxilato de (1S,2S)-2-(dimetilamino)-1-fenilpropilo. 195

A uma solução de (IS,2S)-2-dimetilamino-l-fenil-propano-l-ol (210 mg, 1,18 mmol) em THF (2 mL) adicionou-se uma solução de bis-(trimetilsilil)-amida de litio 1 M em hexano (1,17 mL), à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 20 minutos e depois adicionou-se 5-(clorocarbonil)-3-[ (4-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazol-2(4A)-carboxilato de etilo 2c (200 mg, 0,49 mmol). Agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante uma hora e depois concentrou-se até à secura sob pressão reduzida. Purificou-se ou produto impuro por HPLC prep. e liofilizou-se para se obter o composto em epígrafe 45 (20 mg), com um rendimento de 0,4%, com o aspecto de um sólido branco. XH NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 0,81 (d, J=7,05 Hz, 3 H) , 1,58 (s, 2 H) , 1,71 (s, 3 H) , 1,88 (d, J=23,42 Hz, 1 H), 2,48 (s, 6 H) 3,17 - 3,29 (m, 1 H), 4,70 (s lr., J=13, 0 9 Hz, 2 H) . 5,69 (d, J= 9,32 Hz, 1 H) , 7,20 -7,34 (m, 3 H) , 7,35 - 7,46 (m, 4 H) , 8,03 (dd, J= 8,81, 5,29 Hz. 2 H) . Anál. (C28H30N5O3F. 0,2HOAc. 0,5H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%.

Exemplo de referências 46. 3-(benzoilamino)-N-[(IS)-2- (dimetilamino)-1-feniletil]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-5(lff) -carboxamida. 196

Preparação do composto 46a: [(IS)-2-(dimetilamino)-2-oxo-l-feniletil]-carbamato de benzilo. A uma mistura de ácido (2S)-{ [ (benziloxi)-carbonil]-amino}-(fenil)-acético (196 g, 688 mmol), HBTU (261 g, 688 mmol) e diclorometano (2,8 L) adicionou-se sequencialmente carbonato de potássio (285 g, 2,06 mol) e cloridrato de dimetilamina (84,1 g, 1031 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção a 40°C de um dia para o outro. Depois de se arrefecer até à temperatura ambiente, filtrou-se os sólidos, lavou-se com acetato de etilo (2 x 500 mL) e concentrou-se o filtrado até se obter um resíduo. Adicionou-se água (1 L) ao resíduo e manteve-se a solução num purificador ultrassónico durante 2 horas. Recolheu-se os sólidos precipitados, lavou-se com água (4 χ 300 mL) e com hexano (2 χ 500 mL) e secou-se sob uma pressão hipobárica durante 24 horas. Dissolveu-se o produto impuro sólido em clorofórmio (300 mL) e removeu-se por filtração os sólidos não dissolvidos. Concentrou-se o filtrado até à 197 secura, dissolveu-se o resíduo em hexano/acetato de etilo (a 2:1) (250 mL) e manteve-se em repouso à temperatura ambiente de um dia para o outro. Recolheu-se por filtração os cristais resultantes, lavou-se com hexano/acetato de etilo (a 3:1) (100 mL) e secou-se sob uma pressão hipobárica elevada a 40°C durante 24 horas para se obter o composto 46a (100,0 g, 47%) com o aspecto de um sólido branco cristalino. NMR (CDCI3) õ: 2,88 (s, 3H), 2,98 (s, 3H), 5,01 (d, J= 12,2 Hz, 1H) , 5,11 (d, J= 12,2 Hz, 1H) , 5,58 (d, J= 7,5 Hz, 1 H) , 6,37 (d, J= 7,2 Hz, 1 H) , 7,32 (m, 10H) .

Preparação do composto 46b: (2S)-2-amino-N,N-dimetil-2- fenilacetamida. A uma solução do composto 46a (80,0 g, 256 mmol) em etanol (1,2 L) adicionou-se uma pasta de Pd/C (a 10%, 9,0 g) em acetato de etilo (50 mL) . Agitou-se a mistura de reacção num dispositivo de Parr em ambiente de hidrogénio (40 psi) de um dia para o outro. Removeu-se o catalisador através de celite. Lavou-se a almofada de filtração com etanol (2 χ 200 mL) e concentrou-se o filtrado combinado para se obter o composto 46b (40,2 g, 88%) com o aspecto de um sólido branco. ΧΗ NMR (CDCI3) δ: 2,85 (s, 3H) , 2,99 (s, 3H), 4,72 (s, 1H), 7,33 (m, 5H).

Preparação do composto 46c: N-[(2S)-2-amino-2-feniletil]-N,N-dimetilamina.

Arrefeceu-se um frasco que contém THF anidro (2300 mL), sob uma atmosfera de azoto, num banho de gelo fundente. Adicionou-se grânulos de hidreto de lítio-alumínio (59, 0 g, 1555 mmol) . A esta suspensão de LAH, 198 adicionou-se lentamente uma solução da amida 46b (123,0 g, 691 mmol) em THF anidro (800 mL) , ao longo de aproximadamente 1 hora. Aqueceu-se a mistura de reacção resultante ao refluxo durante 5 horas e depois arrefeceu-se até 10°C. Extinguiu-se lentamente a mistura de reacção arrefecida com uma solução saturada de sulfato de sódio (380 mL) e agitou-se de um dia para o outro. Removeu-se por filtração os sólidos precipitados e lavou-se com acetato de etilo (4 x 500 mL). Concentrou-se o filtrado até um residuo, o qual se submeteu a purificação numa coluna de gel de silica (10% de metanol, 5% de trietilamina em clorofórmio) para se obter o composto 46c (66,7 g, 59%) com o aspecto de um liquido amarelo claro. NMR (CDCI3) õ: 2,24 (dd, J= 3,6, 12,1 Hz, 1H) , 2,29 (s, 6H) , 2,47 (dd, J = 10,6, 12:1 Hz, 1H) , 4,07 (dd, J= 3,6, 10,4 Hz, 1H) , 7,24 (m, 1H) , 7,37 (m, 4H) . A uma solução de 3-(benzoilamino)5-(clorocarbonil)-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4c]pirazol-2(4H) -carboxilato de etilo lc (120 mug, 0,31 mmol) e N-[(2S)-2-amino-2-feniletil]-N,N-dimetilamina (76 mg, 1,5 eq.) em THF (3 mL) adicionou-se diisopropiletilamina (54 uL, 1,0 eq.), à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura de reacção ao refluxo durante 2 horas e depois evaporou-se até à secura. Dissolveu-se o residuo em metanol (1 mL) e trietilamina (1 mL) , agitou-se à temperatura ambiente durante 2 horas e evaporou-se novamente até à secura. Purificou-se o produto impuro por HPLC prep. e liofilizou-se para se obter o composto em epígrafe 46 com um rendimento de 20% (27 mg) , com o aspecto de uma espuma branca. XH NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,60 (s, 3 H), 1,67 (s, 3 H), 2,42 (s, 6 H) , 2,56 - 2,70 (m, 1 H), 2,84 - 3,02 (m, 1 H), 4,55-4,71 (m. 2 H), 199 5,01 (dd, J= 10 ,3 6, 4, 04 Hz, 1 H) , 7,16 (t, J=7,20 Hz, 1 H) , 721 - 7,34 (m, 4 H), 7,37 - 7,54 (m. 3 H), 7,82 - 7,92 (m, 2 H) . Anál. (C25H30N6O2,1, OHOAc. 0, 6H20) C, Η, N. HPLC pureza > 95%.

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários f», » V e <T\ V" Ma*"/ "'V*0 \ Q Γ $ 47 N-[(IS)2-(dimetilamino)-1-fenil-etil]-3-[(4-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamida. XH NMR (400 MHz, CDC13) δ p.p.m.: 1,63 (s, 3 H), 1,71 (s, 3 H), 2,38 (s, 6 H), 2,42 - 250 (m, 1 H), 2,79 - 2,94 (m, 1 H) , 4,57 - 4,70 (m, 2 H) , 4,81- 4, 96 (m, 1 H) , 5,85-5,95 (m, 1 H) . 6, 99 - 7,30 (m, 7 H) ; 7,86 - 7,95 (m, 2 H), 10,27 (s, 1 H) . Anál. (C25H29FN602 · -0,81HOAc) C, Η. N. LCMS (APCI . M+H+) : 465, 1. Método do exemplo 46: preparado com um rendimento de 45% a partir do intermediário 2c, utilizando a amina 46c. 200

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários N-[(IS)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etil]-3-[(2-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-5(1H) -carboxamida. ΧΗ NMR (400 MHz; MeOD) δ p.p.m.: 1,68 (s, 3 H), 1,75 (s, 3 H), 2,45 (s, 6 o H) , 262 (dd, J=12,72, 4,41 Hz, 1 H), HN ':·—H \ 2,91 - 3,03 (m, 1 H) . 4,67 - 4,82 (m, 2 H), 5,07 (dd, J=10,70, 4,41 \*A í:M3 Hz, 1 H), 7,21 - 7,43 (m, 7 H) , 7,52 vi - 7,68 (m, 1 H), 7,78 - 7,89 (m, 1 4t H) . Anál. (C25H29N6O2F. 0,2HOAc. 0, 4H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%. Método do exemplo 46: preparado com um rendimento de 37% a partir do intermediário 3c, utilizando a amina 46c. 201

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários Exemplo de 3-[(2,4-difluorobenzoíl)-amino]-N-[(IS)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etil]-6,6-dimetil-4,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)- referência carboxamida. /* f\ NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,68 (s, 3 H), 1,75 (s, 3 H), 2,44 (s, 6 H), 261 (dd; J=12,84, 4,28 Hz, 1 H), <T /•"Λ, f * 2,93 - 3,01 (m, 1 H) , 4,74 (m, 2 H) , ya \ 5,07 (dd, J= 10,5 8, 4,53 Hz, 1 H), Vy sx* 7,10 - 7,43 (m, 7 H) ; 7,85 - 7,93 v (m, 1 H) . Anál. (C25H28F2N602 · 0,2HOAc) C, Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 483,3. Método do exemplo 46: preparado com um rendimento de 35% a partir do intermediário 4c, utilizando a amina 46c. 202

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários Exemplo de N-[(IS)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etil]-6,6-dimetil-3-{[4-(trifluoro-metil)-benzoil]-amino}-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo- 5(1H)-carboxamida. referência NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,72 (s, 3 H) , 1,79 (s, 3 H) , 2,61 (s, 6 H) , 2,86 (dd, J=12,81, 4,33 Hz, 1 « \/ 1 # % / w H) , 3,16 (dd: J=12,81, 11,11 Hz, 1 / / S#<3 H) , 4,68 - 4,81 (m, 2H) , 5,17 (dd, V® \ ί' í*bÃv J= 10, 8 3, 4,24 Hz, 1 H) , 7,26 - 7,48 /*% v (m, 5 H) , 7,86 (d, J=8,10 Hz, 2 H) , 8,15 (d, J=8,10 Hz, 2 H). Anál. !§e (C26H29N6O2F3. . 0,7HOAc . 0,3H20) C, H, N, HPLC: pureza > 95%. Método do exemplo 46: 0 composto em epígrafe foi preparado com um rendimento de 24%. 203

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários Exemplo de N-[(IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletil]-6,6-dimetil-3-[(piridina-2-ilcarbonil)-amino]-4,6,di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(1H)-carboxamida. NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,69 (s, 3 H), 1,76 (s, 3 H), 2,52 (s, 6 referência H), 272 (dd, J=12, 97, 4,15 Hz, 1 H) , 3,06 (t, J= 11, 83 Hz, 1 H) , 4,72-4,85 HsC a J/ « é s Γ** m* Y m-4 / HNL ,, >**> \ l CH.Í (m, 2 H) , 5,11 (dd, J=10,83, 4,28 Hz, 1 H) , 7,23 - 7,30 (m, J=7,18, 7,18 Hz, 1 H) 7,31 - 7,44 (m, 4 H) , 7,62 (dd, J= 6, 67, 5, 67 Hz, 1 H) , o Sn 5 8,03 (t, J=7,68 Hz, 1 H) , 8,20 (d, J=7,81 Hz, 1 H), 8,71 (d, J=4,53 Hz, 1 H) , Anál. (C24H29N7O2.0,3HOAc. . 0,3H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%. Método do exemplo 46: preparado com um rendimento de 54% a partir do intermediário 6c, utilizando a amina 48c. 204

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários β f 7 à*-/ y* h?4 .. Ww; í £3% HSC 53 3-(acetilamino)-N-[(IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletil]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamida. ΧΗ NMR (DMSO-de) δ: 1,52 (s, 3H) , 1,59 (s, 3H) , 1,98 (s, 3H) , 2,20 (s, 6H) , 2,37-2,45 (m, 1H) , 2,62-2,69 (m, 1H), 4,43 (s, 2H), 4,85 (s, 1H), 6,17 (s, 1H) , 7,18 (t, J= 8,0 Hz, 1H) , 7,28 (t, J= 8,0 Hz, 2H) , 7,34 (d, J= 4,0 Hz. 2H), 10,37 (s, 1H), 12,24 (s, 1H). Anál. (C20H25N6O2 O, 75H20.0,2EtOAc) C, Η, N. HRMS [M+H]+ calc. 385,2347; encontrado 385,234S. Método do exemplo 46: preparado com um rendimento de 67% a partir do intermediário 7c, utilizando a amina 46a. 205

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários 3-[(ciclobutilcarbonil)-amino]-N-[(IS)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etil]-6,6-dimetil-di-hidropirrolo-[3,4,c]pirazolo-5(1H)-carboxamida. ΧΗ NMR (dmso-de) δ 1,52 (s, 3H) , 1,60 (s, 3H) , 1,76-1,81 (m, 1H), 1,88-1,97 (m, 1H) , 2,03-2,07 (m, 2H) , 2,14-2,23 (m, 4H), 2,26-2,45 (m, ··>. JK,y S / -PH* > " / 4H), 3,19-3,27 (m, 2H) , 4,48-4,55 (m, 2H) , 4,98 (s, 1H) , 6,38 (s, 1H) , "V V 7,21 (t, J= 8,0 Hz, 1H) , 7,31 (t, J 0 = 8,0 Hz, 2H) , 7,38 (d, J= 8,0 Hz, 2H), 10,23 (s, 1H), 12,25 (s, 1H). Anál. (C23H32N6O2-1,5 H20-0, lEtOAc) , C, Η, N. HRMS [M+H]+ calc. 425,2660; encontrado 425,2668. Método do exemplo 46: preparado com um rendimento de 84% a partir do intermediário 11c, utilizando a amina 46a. 206

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários s ( } íí. |L Hía "•"'í-i: '""VsO \ N-[(IS)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etil]-3-{[(4-fluorofenil)-acetil]-amino}-6,6-dimetil-4,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamida. NMR (dmso-de) δ: 1,50 (s, 3H) , 1,58 (s, 3H), 2,15 (s, 6H), 2,34 (dd, J= 6,3, 12,6 Hz, 1H) , 2,61 (dd, J= 9,1, 11,9 Hz, 1H) , 3,61 (s, 2H) , 4,42 (m, 2H) , 4,82 (q, J= 8,3 Hz, 1H) , 6,18 (d lr., J= 6,8 Hz, f CH., r m- 1H) , 7,15 (q, J= 9,1 Hz, 3H) , 7,26 (q, J= 7,6 Hz, 2H) , 7,32 (m, 4H) , 10,67 (s lr., 1H), 12,29 (s lr., 1H) . Anál. (C26H3iFN603 O, 6H20) C, H, N. HRMS: [M+H]+ calc. 479,2566; encontrado 479,2550; erro -3,29 p.p.m.. Método do exemplo 46: preparado com um rendimento de 45% a partir do intermediário 18c, utilizando a amina 46a. 207

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários CHj ...... VOO K', :jf íí—4 f S-W “--H N-[(IS)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etil]-3-{[(4-metoxifenil)-acetil]-amino}-6,6,dimetil-4,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamida. NMR (dmso-d5) õ: 1,50 (s, 3H) , 1,58 (s, 3H), 2,15 (s, 6H), 2,34 (dd; J =6,1, 12,1 Hz, 1H) , 260 (dd, J= 9,4, 12,1 Hz, 1H) , 3,52 (s, 2H) , 3,72 (s, 3H), 4,41 (m, 2H), 4,82 (d de t, Jd = 8,3 Hz, = 7,1 Hz, 1H) , 6,18 (d lr., J = 7,6 Hz, 1H) , 6,87 Y* \ms W O (d, J= 8,6 Hz, 2H) , 7,16 (t, J = 7,2 Hz, 1H) , 7,21 (d, J= 8,6 Hz, 2H) , 7,26 (t, J= 7,6 Hz, 2H) , 7,34 (d, J = 7,1 Hz, 2H) , 10,60 (s lr., 1H) , 12,27 (s lr., 1H) . Anál. (C27H34N6O3 · · 0,7H20) C, Η, N, HRMS: [M+H]+ calc. 491,2765; encontrado 491,2758: erro -1,42 p.p.m.. Método do exemplo 46: preparado com um rendimento de 60% a partir do intermediário 19c, utilizando a amina 46a. 208

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários ^ir-< β { ) mi Λ N-[(IS)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etil]-6,6-dimetil-3-({[trans-2-fenilciclopropil]-carbonil)-amino)-4,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5 (1H) -carboxamida. 1H MMR (dmso-de) δ: 1,34 (s lr., 1H) , 1,44 (s lr., 1H), 1,52 (s, 3H), 1,59 (s, 3H), 2,15 (m, 1H), 2,18 (s, 6H), 2,34 (m, 2H) , 2,65 (t lr., J=10,0 Hz, 1H), 4,47 (s lr., 2H), 4,85 (q, J= 7,3 Hz, 1H), 6,21 (s lr., 1H), j|F 6¾ 4 Ό Si 7,16 (m, 4H) , 7,28 (t, J = 6,6 Hz, 4H) , 7,36 (d, J= 7,6 Hz, 2H) , 10,72 (s lr., 1H), 12,27 (s lr., 1H). Anál. (C26H34N6O2· · 0,5H20) C, Η, N. HRMS: [M+H]+ calc. 487,2816; encontrado 487,2813; erro -0,62 p.p.m.. Método do exemplo 46: preparado com um rendimento de 46% a partir do intermediário 20c, utilizando a amina 46a.

Exemplo de referência 57: N-[(IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletil]-6,6-dimetil-3-[(2-tienilcarbonil)-amino]-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamlda. 209

Preparação do composto 57a: 5-(clorocarbonil)-3-(tiofeno-2-carboxamido)-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-2(4ff)-carboxilato de etilo. 0 composto em epígrafe foi preparado com um rendimento global de 71% a partir do intermediário I(g), utilizado cloreto de tiofeno-2-carbonilo, pelo método do exemplo lc. XH NMR (400 MHz, 0 1 -1 o rof ó rmio- d) δ P· p. m l. : 1,51 (t , J=7 ,0' Hz ; 3 H), 1, .56 (s , 6 H) , 4, 60 (q, J=7 ,24 Hz , 2 H), 5, 03 (s 2 H), 7,17 (dd, J=4, 93, 3, 92 Hz, 1 H) , 7, 65 (dd, J=4, 93 1, 14 Hz, 1 H) , 7 , 69 (dd, J= 3 ,79, 1, 26 Hz, 1 H), 10,98 ( lr 1 H) . O composto em epígrafe foi preparado com um rendimento de 53% de rendimento a partir do composto 57a através de um procedimento semelhante ao do exemplo 46: 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,70 (s, 3 H) , 1,77 (s, 3 H) , 2,89 (s, 6 H), 3,27 (dd; J=13,01, 4,17 Hz, 1 H), 3,44 - 3,53 (m, 1 H), 4,67 (d, J= 12 Hz, 1 H) , 4,76 (d, J= 12 Hz, H) , 5,33 (dd, J=11,62, 4,04 Hz, 1 H) , 7,17 - 7,22 (m, 1 H) , 7,28 - 7,47 (m, 5 H) , 7,73 - 7,78 (m, 1 H) , 7,87 - 7, 93 (m, 1 H) . Anál. (C23H28N602«lHCl*l,25H0Ac) C, Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 453, 3.

Exemplo de referência 58: 3-(benzoilamino)-6,6-dimetil-N- (trans-2-feniciclopropil]-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(1H) -carboxamida. 210

A uma solução de 3-(benzoilamino)-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo lb (85 mg, 0,26 mmol) e trietilamina (109 uL, 3 eq.) em diclorometano (3 mL) adicionou-se isocianato de trans-2-fenilciclopropilo (54 uL, 1,4 eq.)· Agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 2 horas e depois evaporou-se até à secura. Dissolveu-se o residuo em metanol (1 mL) e trietilamina (1 mL) , agitou-se à temperatura ambiente durante 19 horas e evaporou-se novamente até à secura. Purificou-se o produto impuro por HPLC prep. e liofilizou-se para se obter o composto em epígrafe 58 com um rendimento de 58% (63 mg), com o aspecto de uma espuma branca. ΧΗ NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1 01 - 1 16 (m, 2 Η), 1 66 (d, J=3 54 Hz, 6 H), 1, 92 - 2,02 (m, 1 H) , 2,64 - 2,75 (m, 1 H), 4 45 (s, 2 H) , 6, 99 - 7, 09 (m, 3 H) , 7 09 - 7,19 (m, 2 H), 7,37 - 7,55 (m, 3 H) , 7, 80 - 7, 89 (m, 2 H) .

Anál. (C24H25N5O2,0, lHOAc. 0, 6H20) C, Η, N, S HPLC: pureza > 95%.

Exemplo de referência 59: 3-(benzoilamino)-N-(1-benzil- pirrolidina-3-il)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(lff)-carboxamida. 211

Os compostos dos exemplos 59 a 63 foram gerados num formato de banco de dados utilizando um procedimento geral. A um tubo de ensaio de 10 x 95 mm, adicionou-se uma barra de agitação de 3 x 6 mm, a solução do cloreto de carbamilo adequado lc (0,1 M em THF, 80 ymol, 1,0 eq.), a solução de amina adequada (0,1 M em THF, 80 ymol, 1,0 eq.) e a solução de DIPEA (1 M em THF, 80 ymol, 1,0 equiv.) . Agitou-se a mistura de reacção a 80°C durante 16 horas. Adicionou-se MeOH (500 yL) e TEA (500 yL) e deixou-se agitar a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro. Evaporou-se os solventes e reconstituiu-se o resíduo que continha produto e DIPEA-HC1 em DMSO. Purificou-se utilizando cromatografia com fluido super-crítico (SFC) para se obter o produto desejado 59 com um rendimento de 30%. XH NMR (500 MHz, DMSO) δ p.p.m. 1 59 (s, 11 Η) 1 92 (s, 1 H) 2,48 (d, J= 2 47 Hz, 1 H) 2,50 (s, 1 H) 4,34 (s, 3 H) 4,45 (s, 4 H) 7,43 (s, 6 H) 7,96 (s, 3 H) 10 84 (s, 1 H) 12,41 (s, 1 H) . LCMS (APCI, M+H+) ; 459. 212

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários * •Hrf* shl 3-(benzoilamino)-6,6-dimetil-N-(1-fenil-2-pirrolidina-l-iletil) -4,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamida 1H NMR (500 MHz, DMS0-d6) d p.p.m. 1,55 (s, 3 Η) 1,64 (s 3 H) 1,87 (s, 2 H) 1,98 (s, 2 H) 3,44 - 3,53 (m 2 H) 3,55 - 3,65 (m 2 H) 4,53 (d 1L'J/ O f ^ < í Η M ~\j J=12,09 Hz, 1 H) 4,74 (d J=12,91 Hz, 1 H) 5,24 - 5,28 (m, 1 H) 6,72 - 6,74 (m 1 H) 7,19 - 7,27 (m 1 H) m 7,30 - 7,36 (m, 2 H) 7,39 (d, J=8,24 Hz, 2 H) 7,46 (t, J=7,83 Hz, 2 H) 7,53 (d J=7,14 Hz, 1 H) 7,98 (d J=7 42 Hz, 2 H) 10,86 (s, 1 H) 12,42 (s, 1 H) LCMS (APCI, M+H+) ; 473 . Método do exemplo 59: preparado com um rendimento de 12% a partir do composto lc. 213

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários ' ;F \/ n-β 4 JL _ΓΛ jr hJ- O 3-(benzoilamino)-N-(1-benzil-piperidina-3-il)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(1H) -carboxamida. 1H NMR (500 MHz, DMS0-d6) d p.p.m. 1.20 - 1,36 (m, 1 H) 1,38 - 148 (m 1 H) 1,57 (s 3 H) 1,58 (s, 3 H) I, 88 - 2,02 (m 2 H) 2,27 - 2,42 (m, 1 H) 2,58 2,68 (m 1 H) 3,45 (s, 1 H) 3,56 3, 67 (m 1 H) 4,33-4,47 (m, 3 H) 5, 60 - 5, 68 (m, 2 H) 7,14 - 7.21 (m, 1 H) 7,27 (d, J=3,02 Hz 3 H) 7,45 (t, J=7 55 Hz, 2 H) 7,53 (t, J=7,42, 6,32 Hz, 1 H) 7,97 (d J=7 42 Hz, 1 H) 10,80 (s, 1 H) II, 95 (s, 1 H) 12,35 (s, 1 H) LCMS (APCI, M+H+) ; 473. Método do exemplo 59: preparado com um rendimento de 27% a partir do composto lc. 214

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários 3-(benzoilamino)-6,6-dimetil-N-(1-fenilpropil)-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamida. 1H NMR (500 MHz, DMS0-d6) d p.p.m. 0 81 (t, J=7,42 Hz, 3 H) 1,48 -1,56 (m, 3 Η) 1, 60 (s, 3 Η) 1, 62 -1,67 (m, J=7,14, 7,14, 7,14 Hz, 1 u^k***® f > Si |í Vf vssss/ H) 1,71 - 1,79 (m, 1 H) 4,52 (s, 2 V-/ L·/ HM V-«:í H) 4,57 (dd, J=8,24, 7,69 Hz, 1 H) V-° A 6,28 (d J=8,52 Hz, 1 H) 7,13 (t, f > vi J=8,87 Hz, 1 H) 7,24 (t, J=7,55 Hz 2 H) 7,31 (d J-7,69 Hz, 2 H) 7,45 (t, J=7,55 Hz; 2 H) 7,53 (t, J= 7,14 Hz, 1 H) 7,98 (d, J=7,42 Hz, 2 H) 10,79 (s 1 H) 12,35 (s, 1 H) LCMS (APCI, M+H+) ; 418. Método do exemplo 59: preparado com um rendimento de 34% a partir do composto lc. 215

Exemplo de referência 64: N-[(IS)-2-amino-l-feniletil]-3-(benzoilamino)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(1H)-carboxamida. 216

Pt t i!|lt 31,«I , ΐ|*0€*,.Μ#βΙ 2· CirikiljfMelii·

Preparação do composto 64d: 2-amino-2-feniletilcarbamato de (S)-benzilo.

Adicionou-se, gota a gota, SOCI2 (785 g, 6,6 mol) a CH3OH (1,5 L) , a 0°C, depois aqueceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente e agitou-se durante 2 horas. Depois de se adicionar progressivamente ácido L-aminofenil-acético (250 g, 1,66 mol), agitou-se a mistura à temperatura ambiente de um dia para o outro. Evaporou-se a mistura até à secura para se obter o composto com o aspecto de um pó branco. Dissolveu-se então este sólido branco em 1,5 litros de tolueno. Adicionou-se então, gota a gota, NH3 ·Η20 (875 mL, a 28%). Agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 30 horas. Evaporou-se a mistura até um volume reduzido, filtrou-se o precipitado e lavou-se com éter anidro para se obter o composto 64a (120 217

g, 46%) com o aspecto de um sólido branco. Ao composto 64a (120 g, 0,81 mol) e trimetilamina (78 g, 0,77 mol) em CH2CI2 anidro (1,5 L) adicionou-se, gota a gota, uma solução de cloreto de trifenilmetilo (214 g, 0,77 mol) em CH2CI2 anidro (200 mL) . Agitou-se a mistura à temperatura ambiente de um dia para o outro e a análise por TLC

(CH2Cl2/MeOH a 10:1) indicou que a reacção estava completa. Extinguiu-se a mistura com água e extraiu-se com CH2CI2 (500 mL x 3). Lavou-se as camadas orgânicas combinadas com salmoura, secou-se sobre Na2SC>4 e evaporou-se para se obter um sólido amarelo pálido, o qual se lavou com éter para se obter o composto 64b com o aspecto de um sólido branco (300 g, 95%). Ao composto 64b (300 g, 0,76 mol) em éter etílico anidro (1,5 L) adicionou-se LiAlH4 (300 g, 7,89 mol), a 0°C e em porções, depois aqueceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente e agitou-se durante 60 horas. A análise por TLC (pentano/acetato de etilo a 1:1) indicou que a reacção estava completa. À mistura de reacção adicionou-se lentamente H2O (100 mL) , a -10°C, filtrou-se então a mistura resultante e evaporou-se para se obter um óleo amarelo pálido. A este óleo amarelo pálido e trietilamina (63, 32 g, 0,58 mol) em CH2CI2 (1,5 L) adicionou-se, gota a gota, CbzCl (98 g, 0,58 mol), a 0°C. Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro. Lavou-se a mistura com água e com salmoura. Evaporou-se a camada orgânica até à secura e purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna para se obter o composto 64c (150 g, 56%). Ao composto 64c (150 g, 0,29 mol) em CH3OH (200 L) adicionou-se, gota a gota, HCI/CH3OH (200 mL, 7 mol/L) , a 0°C, e agitou-se a mistura de um dia para o outro; a análise por TLC (CH2CI2/CH3OH a 218 20:1) indicou que a reacção estava completa. Evaporou-se a mistura de reacção até se dar a precipitação de sólido. Filtrou-se o sólido e lavou-se com éter etilico para se obter o composto 64d (58,6 g, 74%) com o aspecto de um sal de HC1. H1 NMR em dmso-d6 δ p.p.m.: 8,8-8,6 (m, 3H, b) , 7,55-7,15 (m, 10H), 4,97 (s, 2H), 4,45-4,25 (m, 1H), 3,60-3,40 (m, 2H). Preparou-se o composto em epígrafe 64 com um rendimento de 19% através de um procedimento semelhante ao do exemplo 46, com a excepção de no último passo se utilizar Pd a 10%-C em MeOH para clivar o grupo Cbz. ΧΗ NMR (400 MHz; MeOD) δ p.p.m.: 1,70 (s, 3 H) , 1,77 (s; 3 H) , 1,91 (s, 2 H), 3,21 - 3,27 (m, 2 H) , 4,68 - 4,81 (m, 2 H) , 5,10 (dd. J= 9,35, 5,31 Hz, 1 H) , 7,28 - 7,64 (m, 8 H) 7,93 - 7,99 (m, 2 H) . Anál. (C23H26N602· 1,5Η20· 1, OHOAc) C, Η, N. LCMS (M+H+) : 419,2.

Exemplo de referência 65: N-[(3R)-l-benzilpirrolidina-3-il]-3-[(ciclobutilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(lff)-carboxamida.

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Preparou-se o composto em epígrafe 65 com um rendimento de 98% através de um procedimento semelhante ao do exemplo 46, utilizando (R)-l-benzilpirrolidina_3-amina. NMR (dmso-de) δ: 1,52 (s, 3H) , 1,60 (s, 3H) , 1,76-1,81 (m, 1H) , 1,88-1,97 (m, 1H) , 2,03-2,07 (m, 2H) , 2,14-2,23 (m, 4H) , 2,26-2,45 (m, 4H) , 3,19-3,27 (m, 2H), 4,48-4,55 (m, 2H) , 4,98 (s, 1H), 6,38 (s, 1 H), 7, 21 (t, J = 8,0 Hz, 219 1H) , 7 ,31 (t, J = 8,0 Hz, 2H) , 7,38 (d, J = 8,0 Hz, 2H) , 10,23 (s, 1H) , 12,25 (s, 1H); Anál. (C23H32N6O2, 1,5 Η2θ·0,1 EtOAc) c, H, N. HRMS [M+H]+ calc. 425,2660; encontrado 425,2668.

Exemplo de referência 66: N-{5-[4-(dimetilamino)-3-fenil-butanoíl]-6,6-dimetil-l,4,5,6-tetra-hidropirrolo[3,4-c] -pirazol-3-il}-4-fluorobenzamida.

A uma mistura de ácido 4-(dimetilamino)-3-fenil-butanóico (257,1 mg, 1,24 mmol) (preparado de acordo com Iwao, Junichi, Jpn. Tokkyo Koho (1969), documento JP 44027218) e HATU (542,2 mg, 1,43 mmol) em THF (4 mL) adicionou-se uma solução de composto 2b (373,7 mg, 1,08 mmol) e Et3N (0,53 mL, 3,8 mmol) em THF (4 mL). Agitou-se a mistura resultante durante 6 horas à temperatura ambiente. Depois, removeu-se os solventes sob pressão reduzida. Dissolveu-se o residuo resultante em MeOH (5 mL) e EtsN (5 mL) e agitou-se durante 4 horas à temperatura ambiente. Depois de se remover os solventes, submeteu-se o residuo a HPLC prep. para se obter o composto 66 (100 mg, 20%) . ΧΗ NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,59 (s, 3 H) , 1,75 (s, 3 H) , 2,50 (m, 6 H) , 2,68 - 2,85 (m, 2 H), 2, . 93 - 3, 06 (m, 2 H) , 3,49 - 3,59 (m, 1 H) , 4,57 (d, J = 12 Hz, 1 H), 4,75 (d, J = 12 Hz, 1 H), 7,21 - 7,39 (m, 7 H), 7, , 98 - 8, 04 220

(m, 2 H). Anál. (C26H30FN5O2 · 0,8Η20· 0,8HOAc) C, Η, N. LCMS (M+H+) : 4 64,2.

Exemplo de referência 67: N-{5-[3-(4-clorofenil)-4- (dimetilamino)-butanoil]-6,6-dimetil-l,4,5,6-tetra-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazol-3-il}-benzamida. α

Preparou-se o composto em epígrafe 67 com um rendimento de 21% de acordo com o mesmo procedimento do exemplo 66. Preparou-se o ácido 4-(dimetilamino)-3-(4-clorofenil)-butanóico de acordo com Iwao, Junichi, Jpn. Tokkyo Koho (1969), documento JP 44027218). Composto 67: XH NMR (400 MHz, MeOD) S p.p.m.: 1,51 (s, 3 H), 1,66 (s, 3 H), 2,41 (s, 6 H) , 2,58 - 2, 65 (m, 1 H) , 2, 69 - 2,77 (m, 1 H) , 2,81 - 2,94 (m, 2 H) , 3,41 - 3,49 (m, 1 H) , 4,54 (d, J=12,38 Hz, 1 H) , 4,68 (d, J=12,38 Hz, 1 H) , 7,22 - 7,28 (m, 4 H), 7,40 - 7,54 (m, 3 H), 7,82 - 7,87 (m, 2 H). Anál. (C26H3oC1N502*0, 95H2O0,7HOAc) C, Η, N. LCMS (M+H+) : 482,2.

Exemplo de referência 68: 6,6-dimetil-3-[(l,3-tiazol-4- ilcarbonil)-amino]-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H) -carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo. 221

Preparação do composto 1(1): dicloridrato de 3-amino-6,6-dimetil-5,6-di-hidropirrolo [3,4-c]pirazolo-2 (4H) -carboxilato de etilo. A uma pasta agitada do composto I(g) (40,00 g, 123,3 mmol) em etanol (270 mL) adicionou-se, gota a gota, uma solução de HC1 4 M em dioxano (155 mL). Agitou-se a solução límpida resultante à temperatura ambiente de um dia para o outro. Concentrou-se a mistura de reacção sob uma pressão hipobárica e agitou-se o resíduo com hexanos (300 mL) durante 30 minutos. Recolheu-se por filtração o produto sólido, lavou-se com hexanos (2 x 100 mL) e secou-se sob uma pressão hipobárica a 40°C para se obter o sal dicloridrato do composto I(L) (35,80 g, 98%) com o aspecto de um sólido branco. ΧΗ NMR (300MHz, dmso-de) δ: 1,31 (t, J=7,2Hz, 3H), 1,59 (s, 6H), 4,09 (t, J=4,7Hz, 2H) , 4,36 (q, J=7,1 Hz, 2H), 10,14 (s, 2H). 222

Preparação do composto 68a: 3-amino-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4ff,6H)-dicarboxilato de 5-[(lS)-2- (dimetilamino)-1-feniletil]-2-etilo. A uma solução agitada de (S)-2-dimetilamino-l-fenil-etanol (1 d, 21,50 g, 130,0 mmol) em 1,2-dicloroetano (500 mL) adicionou-se trietilamina (26,30 g, 260,0 mmol) e cloroformato de 4-nitrofenil (27,00 g, 130,0 mmol), à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de azoto. Agitou-se a solução a 50°C de um dia para o outro. Adicionou-se então um total de 16,8 g (130,0 mmol) de diisopropiletil-amina e depois o composto I (L) (17,90 g, 60,25 mmol).

Manteve-se sob agitação a 50°C durante mais 12 horas. Depois de se arrefecer até à temperatura ambiente, diluiu-se a solução com diclorometano (1,5 L) , lavou-se com água (2 x 1,0 L) e depois com salmoura (1,0 L) e secou-se sobre sulfato de sódio. Também se preparou um outro lote com a mesma escala. Combinou-se estes dois lotes durante o processamento. Filtrou-se, evaporou-se e submeteu-se a cromatografia rápida (4,75% de MeOH/0,25% de NEt3/95% de DCM) para se obter o composto 68a (5,00 g, 10%) com o aspecto de um óleo gomoso amarelo claro. 1H NMR (CDCI3, uma mistura de rotâmeros, apenas são apresentados os desvios químicos para a forma principal) δ: 1,45 (t, J=7,l Hz, 3H), 1,63 (s, 3H) , 1,72 (s, 3H) , 2,29 (s. 3H) , 2,36 (s, 3H), 2,55-2,63 (m, 1H) , 2,88 (dd, J=13, 8,3Hz, 1H) , 4,29 (q, J=13Hz, 1H), 4,51 (q, J=7,lHz, 2H0, 5,44 (d, J=10,7Hz, 1 H) , 5,8-5,95 (m, 1 H); 7,25-7,42 (m, 5H) . LCMS (APCI, M+H+) 416. A uma solução de 3-amino-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]-pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de (S)-5-(2-(dimetil- 223 amino-feniletil)-2-etilo 68a (150 mg, 0 , 36 mmol) e trietilamina (100 uL, 2 eq.) em diclorometano (2 mL) adicionou-se cloreto de tiazole-4-carbonilo d, 5 eq.), à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 2 horas e depois evaporou-se até à secura. Dissolveu-se o residuo em metanol (1 mL) e trietilamina (1 mL) , agitou-se à temperatura ambiente durante 19 horas e evaporou-se novamente até à secura.

Purificou-se o produto impuro por HPLC prep. e liofilizou-se para se obter o composto em epigrafe 68 com um rendimento de 12% (20 mg) , com o aspecto de uma espuma branca. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,61 (s, 3 H) , 1,72 (s, 3 H), 2,43 (s, 6 H), 2,62 (dd, J=13,72, 3,15 Hz, 1 H), 3,03 (dd, J=13,60, 9,82 Hz, 1 H), 4,77 - 4,84 (m, 1 H), 4,87 - 4, 94 (m, 1 H) , 5,92 (dd, J=9, 57, 3, 02 Hz, 1 H) , 7,27 - 7,34 (m, 1 H), 7,35 - 7,48 (m, 4 H) , 8,43 (d, J=l,26 Hz, 1 H) , 9,08 (d, J= 2,01 Hz, 1 H) . Anál. (C22H26N6O3S. 0, lHOAc. .0,5H20) C, Η, N, S. HPLC: pureza > 95%.

Exemplo de referência 69: 6,6-dimetil-3-{[(1-metil-lH-imidazol-4-il)-carbonil]-amino}-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]-pirazolo-5(1H) -carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etilo. (J# d

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224

Preparação do composto 69a A 0°C, adicionou-se uma suspensão de ácido 1-metil-lH-imidazole-4-carboxílico (100,9 mg, 0,8 mmol) em CH2CI2 (8 mL) a cloreto de oxalilo (305 mg, 0,21 mL, 2,4 mmol) e depois acrescentou-se 1 gota de DMF. Agitou-se a mistura durante 2 dias a 25°C. Removeu-se a totalidade do solvente sob pressão reduzida para se obter o composto impuro 69a.

Preparou-se uma solução em CH2CI2 de 3-amino-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de (S)-5-(2-(dimetilamino)-1-feniletil)-2-etilo 68a (100 mg, 0,24 mmol) e diisopropiletilamina (0,42 mL) e adicionou-se ao composto impuro 69a. Agitou-se a mistura a 25°C durante 18 horas. Removeu-se a totalidade do solvente sob uma pressão hipobárica. Dissolveu-se novamente o resíduo em co-solvente MeOH-trietilamina (2 mL, a 1:1 v/v). Agitou-se a solução a 25°C durante 16 horas. Evaporou-se a totalidade do solvente. Purificou-se o resíduo por HPLC prep. para se obter o composto em epígrafe 69 com o aspecto de um sólido branco (40 mg, rendimento total de 37%) . 1H NMR (dmso-dô) 6: 1,44 (s, 3H), 1,57 (s, 3H), 2,83-2,86 (m, 6H) , 3,03 (m, 2H), 3,68 (s, 3H), 4,60 (d, J=13,3Hz, 1H), 4,84 (d. J=13,4Hz, 1H) , 6,08 (d, J=7,3Hz, 1H), 7,3-7,4 (m, 5H) , 7,75 (s, 1H) , 7,78 (s, 1H) . LCMS [M+H] + : 452, Anál. (C23H29N7O3· •1,75H20·1,7TFA) C, Η, N.

Exemplo de referência 70: 3-{[(4-fluorofenil)-acetil]- amino}-6,6-dimetil-N-[trans-2-fenilciclopropil]-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamida. 225

f

Preparação do composto 70a: 3-amino-6,6-dimetil-5-({[trans-2-fenilciclopropil]-amino}-carbonil)-5,6-di-hidropirrolo-[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo.

Dissolveu-se o composto I (g) (5,30 g, 16,3 mmol) em 20,4 mL de uma solução de HC1 4,0 M/dioxano (81,7 mmol) e agitou-se à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Evaporou-se então a solução até à secura e colocou-se em suspensão o residuo impuro de cloridrato de amina 1(1) em 50 mL de diclorometano. Arrefeceu-se a suspensão num banho de gelo/sal (temperatura do banho de -13°C). Adicionou-se diisopropiletilamina (9,95 mL, 57,1 mmol) e depois acrescentou-se, gota a gota, isocianato de trans-2-fenilciclopropilo (2,60 g, 16,3 mmol). Agitou-se a mistura resultante a -10°C durante 1 hora. Depois de se evaporar o diclorometano, repartiu-se o residuo entre acetato de etilo (50 mL) e uma mistura de uma solução aguosa saturada de bicarbonato de sódio (30 mL) e água desionizada (20 mL) . Extraiu-se novamente a camada aquosa com acetato de etilo (20 mL) , secou-se os extractos orgânicos combinados sobre sulfato de magnésio, filtrou-se e concentrou-se para se obter 6, 67 g do produto impuro com o aspecto de uma espuma esbranquiçada. Triturou-se a partir de acetonitrilo para se obter o composto 70a puro (5,82 g, 86%), com o aspecto de um pó branco. NMR (dmso-d6) δ: 1,03 (m, 2H) , 1,19 (m, 226 1H) , 1,31 (t, J = 7,2 Hz, 3H) r 1,55 (d, J = 2, 8 Hz, 6H) , 1, 91 (m, 1H) , 2, 74 (m, 1 H), 4, 09 (d, J = 11, 6 Hz, 1 H), 4,13 (d, J = 11, 9 Hz, 1 H), 4, 34 (q, J = 7,1 Hz, 2H) , 6, 32 (d, J = 2,8 Hz, 1H) , 6,52 (s, r 2H) , 7,10 (d, J = 7, 1 Hz, 2H) , 7,14 (d, J = 7,3 Hz, 1H) r 7,24 (t, J = 7, 4 Hz, 2H) .

Anál. (C20H25N5O3 ·0, 6 CH3CN · 0,3 Η20) C, Η, Ν. LCMS (APCI, Μ+Η+) : 384,2.

Adicionou-se diisopropiletilamina (98,2 yL, 0,56 ininol) a uma solução à temperatura ambiente do composto 70a (108,1 mg, 0,282 mmol) em diclorometano (0,9 mL) e depois acrescentou-se cloreto de (4-fluorofenil)-acetilo (54,5 mg, 0,310 mmol). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 23 horas. Adicionou-se trietilamina (2,5 mL) e etanol (2,5 mL) e manteve-se sob agitação durante 3 dias. Depois de se evaporar até à secura, purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de silica (efectuando a eluição com 70% de acetato de etilo em hexanos) para se obter o composto 70 (38, 9 mg, 30%) com o aspecto de um sólido branco. XH NMR (dmso-d6) δ: 0, 99 (q, J = 7,3 Hz , 1H), 1,21 (quint., J = 4,7 Hz, 1H), 1,58 (S, 6H) , 1, 90 (m, 1H) , 2,72 (m, 1H) , 3,59 (s, 2H) , 4,32 (s, 2H) , 6, 38 (d, J = 3,0 Hz , 1H), 7,11 (m, 5H) , 7,23 (t, J = 7,5 Hz, 2H) , 7,31 (dd, J = 5,7, 8,3 Hz, 2H) , 10,65 (s, 1H), 12,29 (s , 1H). Anál. (C25H28N5O2 *0,55 H20) C, Η, N, F. HRMS: [M+H]+ calc. 448,2143; encontrado 448,2,138; erro 1,12 p.p.m..

Exemplo de referência 71: N-[(IS)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etil]-6,6-dimetil-3-[(1,3-tiazol-2-ilcarbonil)-amino]-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(lff)-carboxamida. 227

Preparação do composto 71a: (2-isocianato-2-fenil-etil)-dimetil-amina. A uma solução arrefecida (0°C) e agita de trifosgénio (27,1 g, 91,32 mmol) em diclorometano (250 mL) adicionou-se, gota a gota, uma solução de diisopropiletilamina (23,6 g, 182,26 mmol) em diclorometano (50 mL) , ao longo de um período de 20 minutos. Adicionou-se então, gota a gota, uma solução da amina 46c (15,0 g, 91,32 mmol) em diclorometano (100 mL) à mistura de reacção castanha, mantendo a temperatura inferior a 10°C. Removeu-se a mistura resultante do arrefecimento e agitou-se durante 2 horas à temperatura ambiente. Concentrou-se a solução de reacção sob uma pressão hipobárica até um resíduo, agitou-se com 10% de DCM em hexano (50 mL), depois separou-se por filtração o precipitado sólido 71a e utilizou-se no passo de reacção subsequente sem mais purificação. (Nota: o produto sólido obtido foi armazenado sob uma atmosfera de azoto). 1H NMR (300 MHz, dmso-d6) : δ 3 29 (s, 3H) , 3 38 (s, 3H) , 3,68 (t, J=10 1Hz, 1H), 4,42 (dd, J=ll,5, 6,5Hz, 1H), 5 35 (dd, J=9, 6, 62Hz, 1H) , 7,4-7,6 (m, 5H) . 228

Preparação do composto 71b: 3-amino-5-({[(IS)-2-(dimetil-amino)-1-feniletil-]-amino}-carbonil)-6,8-dimetil-5,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo. A uma pasta arrefecida (0°C) e agitada do composto I (L) (25,0 g, 84,12 mmol) adicionou-se sequencialmente diisopropiletilamina (74 mL, 420,1 mmol) e o composto 71a (17,1 g, 75,71 mmol). Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 10 horas e sob uma atmosfera de azoto, diluiu-se a mistura com diclorometano (100 mL) e lavou-se com água (2 X 100 mL). Secou-se a solução orgânica (Na2S04) , filtrou-se e concentrou-se sob uma pressão hipobárica. Purificou-se o produto impuro obtido numa coluna de gel de silica (10% de MeOH/DCM) para se obter o composto 71b (23,0 g, 73,7 %) com o aspecto de um sólido amarelo claro. P.f.: 96°C-97°C. ΧΗ NMR (300 MHz; dmso-d6) : δ 1,32 (t, J= 7,1Hz, 3H), 1 51 (s, 3H), 1 ,57 (s, 3H) , 2 19 (s, 6H), 2,40 (m, 1H) , 2,60 (m, 1H), 4,23 (m, 2H) , 4 35 (q, J=6,7Hz, 2H), 4,78 (m, 1H), 6,00 (d, J=6 Hz, 1H) , 6, 55 (s, 2H) , 718-740 (m, 5H) LCMS (APCI, M+H+) : 415. A uma solução de 3-amino-5-({[(IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletil]-amino}-carbonil)-6,6-dimetil-5,6-di-hidro-pirrolo-[3,4-c]pirazolo-2(4H)-carboxilato de etilo 71b (150 mg, 0,36 mmol) e trietilamina (100 uL, 2 eq.) em diclorometano (2 mL) adicionou-se cloreto de tiazole-2-carbonilo (1,5 eq.), à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 2 horas e depois evaporou-se até à secura. Dissolveu-se o residuo em metanol (1 mL) e trietilamina (1 mL) , agitou-se à temperatura ambiente durante 19 horas e evaporou-se novamente até à secura. Purificou-se o produto impuro por 229 HPLC prep- e liofilizou-se para se obter o composto em epígrafe 71 com um rendimento de 43% (70 mg), com o aspecto de uma espuma branca. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,68 (S t 3 H) LO r-\—1 (s, 3 H) , 2,41 (s, 6 H) ,2,55 (dd, J=12,84 42 8 Hz, 1 H), 2, 94 (dd, J=12, 59, 10 ,83 Hz, 1 H) , 4,69 4, 82 (m, 2 H) , 5, 05 (dd, J=10 70, 4 ,41 Hz, 1 H) , 7,20 7, 28 (m, 1 H), 7,30 - - 7,42 (m, 4 H) r 7,94 (d, J= 3, 02 Hz, H) r 8,04 (d, J=3,02 Hz, 1 H) . Anál (C22H27N7O2S. .0,2HOAc . 1,2H20) C, Η, N, S. HPLC: pureza > 95%.

Exemplo de referência 72: N-[(IS)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etil]-6,6-dimetil-3-[(l,3-tiazol-4-ilcarbonil)-amino]-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamida.

A uma solução de 3-amino-5-({[(IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletil]-amino}-carbonil)-6,6-dimetil-5,6-di-hidro-pirrolo [3, 4-c] pirazolo-2 (4i7)-carboxilato de etilo 71b (150 mg, 0,36 mmol) e trietilamina (100 uL, 2 eq.) em diclorometano (2 mL) adicionou-se cloreto de tiazole-4-carbonilo (1,5 eq.), à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura de reacção á temperatura ambiente durante 2 horas e depois evaporou-se até à secura. Dissolveu-se o resíduo em metanol (1 mL) e trietilamina (1 mL) , agitou-se à temperatura ambiente durante 19 horas e evaporou-se novamente até à secura. Purificou-se o produto impuro por HPLC prep. e liofilizou-se para se obter o composto em 230 epígrafe 72 com um rendimento de 34% (55 mg), com o aspecto de um espuma branca. XH NMR (400 MHz; MeOD) δ p.p.m.: 1,68 (s, 3 H) , 1,75 (s, 3 H) , 2,49 (s, 6 H) , 2,68 (dd, J=12,97, 4,66 Hz, 1 H) , 3,01 (dd, J=12,59, 10,83 Hz, 1 H) , 4,69 - 4,81 (m, 2 H) , 5,09 (dd, J=10,70, 4,41 Hz, 1 H) , 7,25 (t, J=7,05 Hz, 1 H) ; 7,30 - 7,44 (m, 4 H) , 8,41 (d, J=l,51 Hz, 1 H) , 9,08 (d, J=2,01 Hz, 1H) . Anál. (C22H27N7O2S . 0,5HOAc . .0,5H20) C, Η, N, S. HPLC: pureza > 95%.

Os seguintes exemplos e exemplos de referência 73-95 foram preparados utilizando métodos semelhantes.

Estrutura e exemplo de referência n° Nome quimico, dados analíticos e comentários n 3-(benzoilamino)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5 (1H)-carboxilato de (IS)-2-(dimetilamino)-1-metiletilo. XH NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,24 - 1,38 (m, 3 H) , 1,66 - 1,80 (m, 6 H) , 2,44 (s, 1,5 H) , 2,53 (s. 4,5), 2,57 - 2,75 (m, 1 H) , 2,79 - 2, 98 (m, 1 H) , 4,57 - 4,76 (m, 2 H) , 5,03 - 5,20 (m, 1 H) , 7,47 - 7,83 (m, 3 H) , 7,90 - 7,99 (m, 2 H), Anál. (C20H27N5O3 0,5H20 · • 0,5HOAc) C, Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 386,2. Método do exemplo 1: utilizando (S)-(+)-1-dimetilaminopropanol em vez do composto ld. 231

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários Η··#Γ & N jC < -o > 3-(benzoilamino)-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5 (1H) -carboxilato de (IS) -1-[(dimetilamino)-metil]-2-metilpropilo. NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 0, 95 - 1, 06 (m, 6 H) 1,73 (d, J= 6,29 Hz, 6 H) 1, 89 - 1, 98 (m, 3 WvC—** w o M H) 2,41 - 2,65 (m. 6 H) 2,71 -3,09 (m, 2 H) 4, 60 - 4, 80 (m, 2 H) 4, 93 - 5, 05 (m, 1 H) 7,52 (t, J=7, 43 Hz, 2 H) 7,56-7, 64 (m, 1 H) 7, 89 - 7, 99 (m, 2 H) . Anál. (C22H31N5O3.0,2H0Ac . 0,3H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95%. Método do exemplo 30. 232

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários J? \ / i ^—4 |—* 3-[(4-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4— c]pirazolo-5(1H) -carboxilato de (IS)-l-ciclo-hexil-2-(dimetil-amino)-etilo. NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1, 08 - 1,39 (m, 5 H) 1,63 - 1,88 >m. ) X^D .......f (m, 12 H) 2,89 - 3, 00 (m. 6 H) f-M,, tH, > 3,37 (dd, J= 13,72, 1, 89 Hz, 1 H) %, li Ϊ 3,45 - 3,56 (m, 1 H) 4,62 - 4,82 F (m. 2 H) 4,98 - 5,11 (m, 1 H) 7,26 (t, J= 8, 81 Hz, 2 H) 7,92 - 8,08 (m. 2 H) . Anál. (C25H34N5O3.0, 7HOAc . . 2,5H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95% Método do exemplo 30. 233

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários jP /*\ sl i ^--"4 jr~'4 à ψΚ/ \ Γ HM > 3-[(4-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4— c]pirazolo-5(1H) -carboxilato de (IS)-l-benzil-2-(dimetilamino)-etilo. NMR (400 MHz, MEOD) δ p.p.m.: 1,48 - 1,58 (m, 3 H) 1,61 - 1,71 (m, 3 H) 2,27 - 2,39 (m, 6 H) 2,57 rs»\. / 1 (dd, J= 13,22, 3,15 Hz, 1 H) 2,64 -2,79 (m, 1 H) 2,81 - 3,05 (m, 2 H) f 4,48 - 4,72 (m, 2 H) 5,18 - 5,29 TO (m, 1 H) 7,15 - 7,22 (m, 1 H) 7,22 - 7,32 (m. 6 H) 7, 93 - 8, 07 (m, 2 H) . Anál. (C25H30N5O3F. 0,3HOAc. . 0,2H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95% Método do exemplo 30. 234

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários n \>cw3.a r\ V D—ζ SM$ 3-[(4-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4— c]pirazolo-5(1H) -carboxilato de (1J?) -2- (dimetilamino) -1- (metoxi-metil)-etilo. NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1, 68 - 1,76 (m, 6 H) 2,42 - 2,56 (m, 6 H) 2,77 - 3,00 (m. 2 H) 3,37 - 3,41 (m, 3 H) 3,50 - 3,61 (m, 2 Y'"0 í%C“iHi f P H) 4,59 - 4,75 (m, 2 H) 5,09 -5,24 (m, 1 H) 7,25 (t, J=8,44 Hz, 2 H) 7, 93 - 8, 07 (m, 2 H) . Anál. n (C21H28N5O4F . 0,5H0Ac . 0,4H20) C, H, N. HPLC: pureza > 95%. Método do exemplo 30: utilizando (R)-1-(dimetilamino)-3-metoxi-propano-2-ol em vez do composto 30b e utilizando 0 composto 2c em vez do composto lc. 235

236

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários 0—'< CHS MN } 6,6-dimetil-3-{[4-(trifluorometil)-benzoil]-amino}-4,6-di-hidro-pirrolo [3,4-c] pyrozole-5 (1H) -carboxilato de (IS)-1-[(dimetil-amino)-metil]-3-metilbutilo. NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m. 0,97 (d, J=6,55 Hz, 6 H) 1,38 1,49 (m, 1 H) 1,53 - 1, 63 (m, 1 H) fsÁ W 1, 66 - 1,77 (m, 7 H) 2,29 - 2,39 9 ?3fC (m. 6 H) 2,40 - 2,52 (m, 1 H) 2,57 - 2,73 (m, 1 H) 4,55 - 4,75 (m, 2 ?9 H) 5, 05 - 5,23 (m, 1 H) 7,84 (d, J=8,31 Hz, 2 H) 8,12 (d, J=8,06 Hz, 2 H) . Anál. (C24H32N5O3F3. .0,lHOAc.0,2H20) C, Η, N. HPLC: pureza > 95% Método do exemplo 35. 237

238

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários Λ S<—H YQ CMt 3-[(2,3-di-hidro-l-benzofurano-7-ilcarbonil)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c] -pirazolo-5(1H) -carboxilato de (IS)-1-(dimetilamino)-1-feniletil NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m. 1,58 - 1, 84 (m, 6 H) 2,35 - 2,52 (m, 6 H) 2, 64 - 273 (m, 1 H) 3,03 - 3,18 (m, 1 H) 3,32 - 3,39 (m, 2 H) 4, 80 - 4, 86 (m, 3 H) 4,90 - 8f 4,97 (m, 1 H) 5,90 - 6,01 (m, 1 H) 6, 96 - 7, 08 (m, 1 H) 7 32 (q, J=6,80 Hz, 1 H) 7,36 - 7,51 (m, 5 H) 7 75 - 7, 87 (m 1 H) . Anál. (C27H3iN5O4,0,2HOAc. 0,4H20) C, Η, N. HPLC pureza > 95% Método do exemplo 1. 239

240 Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários 2,85 (m 1H), 3,74-3,84 (m, 1H) , 3,89-3,96 (m, 1H), 4,29-4, 40 (m 2H) , 4,57 (s, 1 H) 5,79 (t, 1H, J = 4Hz), 7,09-7,25 (m, 3H) 7,37 7,44 (m 1H), 10,04 (s, 1/2H), 10,31 (s, 1/2H), 11 92 (s, 1/2H), 12,41 (s, 1 / 2 H) ; ); HRMS : calc. M+H: 460 ,23546; observado M+H: 460,23486, Anál. : (C23H20N5O4F · 1H20) C, Η, N. Diastereómero B: sólido branco; tempo de retenção 2,552 min; LCMS: M+H: 460; MMR (300 MHz, DMSO-ds) d p. p .m. 1 0 LO \—1 1, 67 (m, 6H) , 1 , 83- 1, 94 (m, 3H) , 2, 20-2, 32 (m 7H) 249- 2, 61 (m 1H) , 2, r 72-2 , 85 (m 1H) , 3,74 -3, 84 (m, 1H) , r 3,69-3, . 96 (m, 1H) , 4,29 -4,40 (m, 2H) , 4, , 57 (s, LO \—1 ,79 (t, 1H, J = 4Hz) O LD 1 7,25 (m, 3H) , 7 ,37-7,44 (m 1H) 10,04 (s, 1/2H), 10,31 (s, 1/2H), 11, 92 (s, 1/2H), 12,41 (s, 1/2H); ) : HRMS: calc. M+H: 460 ,23546; observado M+H: 460,23547; Anál.: (C23H30N5O4F • 1,25H20) C, Η, N. Método do exemplo 89. 241

242

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Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários O < T CK.; HW '‘"'íi V'0 CHi ô-\ 6,6-dimetil-3- ( (J?) -tetra-hidro-furano-2-carboxamido)-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H, 4H, 6H) -carboxilato de (S)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etilo. ^NMR (300 MHz, dmso-d6) δ 1,35 (t, J = 7,1 Hz, 3H) , [1,42 (s) , 1,45 (s) , 9H em conjunto], 1,57 (dd, J = 2,8, 6,6 Hz, 6H) , 1,86 (m, 2H) , 1,96 (m, 1H) , 2,23 (m, 1H) , 3,91 m (m, 2H) , 4,47 (m, 5H) , 10,80 (s, 1H) . LCMS (APCI, M+H+) : 423, Anál. (C20H30N4O5O, 15 EtOAc) C, Η. N. Método do exemplo 1: utilizando 0 composto 89a em vez do composto la. A preparação do com 89a é apresentada após este quadro. 246

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários HH „ \~~ft õ >> ^ cb> 93 3-((S)-2-metoxipropanamido)-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-5 (1H, 4H, 6H)-carboxilato de (S)-2-(dimetilamino)-1-fenilmetilo. 1HNMR (300 MHz, MeOD) δ: [1,38 (d, J= 6,8 Hz), 1,42 (d, J= 6,8 Hz), 3H em conjunto], [1,59 (s) , 1,66 (s), 1,70 (s), 1,80 (s), 6H em conjunto], [2,32 (s), 2,37 (s), 6H em conjunto], [2,53 (dd, J = 3,0, 13,4 Hz), 2,63 (dd, J = 4,6, 13,4 Hz), 1H em conjunto], [2,95 (dd, J = 9,6, 13,4 Hz), 3,01 (dd, J = 8,3, 13,4 Hz)], [3,42 (s), 3,45 (s), 3H em conjunto], 3,92 (m, 1H), 4,46-4,83 (m, 2H) , [5,89 (dd. J = 3,0, 9,6 Hz), 5,94 (dd, J = 4,6, 8,6 Hz), 1H em conjunto], 7,31 (m, 1H) , 7,38 (m, 4H) . LCMS (APCI, M+H+) : 430, HRMS: M+H+ cale. 430,24488, encontrado 430,24489, error 0,02 p.p.m.. Anál. (C22H31N5O4-0,5H20· 0,2ciclo-hexano) C, Η, N. Método do exemplo 89. 247

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários o~/ CHj J CH3 0 fi 6,6-dimetil-3-(tetra-hidro-2H-pirano-4-carboxamido)-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H, 4H, 6H) -carboxilato de (S)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etilo. ^NMR (30 0 MHz, MeOD) δ: [1,59 (s), 1,64 (s), 1,69 (s), 1,79 (s) 6H em conjunto], 1,76-1,90 (m, 4H) , [2,38 (s) , 2,49 (s) 6H em conjunto], 2,68 (m, 2H), 3,10 (dd, J= 9,9, 13, 6Hz, 1H) , 3,49(t de d, Jt=ll,5Hz, Jd= 2,8 Hz, 2H) , 4,00 (m, 2H) , [4,46 (d J = 13,4 Hz), 4,52 (d J = 13,4 Hz), 4,70 (d, J=13,4 Hz), 4,78(d, J=13,4 Hz), 2H em conjunto], 5,94 (dd, J = 3,0, 9,6 Hz, 1H) , 7,31 (m, 1H) , 7,38 (m, 4H) . . LCMS (APCI, M+H*) : 456, HRMS: M+H+ calc. 456,26053, encontrado 456,26051, erro -0,05 p.p.m.. Anál. (C24H33N5O4· 1,4H20* 0,4HOAc) C. HN. Método do exemplo 89. 248 Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários 6,6-dimetil-3-((S)-tetra-hidro-furano-2-carboxamido)-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H, 4H, 6H) -carboxilato de (S)-2-(dimetilamino)-1-fenil-etilo. ^NMR (300 MHz, MeOD, alguns picos duplicados devido a isomerização

tautomérica) õ: [1,59 (s) r 1, 65 (s) , 1, 69 (S), 1, 79 (s) , 6H em conjunto], 1,96 (m, 2H) . 2 , 07 (m, 1H) , 2,31- -2,40 (m, 1H) , [2, 32 (s) , 2,37 (s) , 6H em conjunto] , [ 2,53 (dd, J = 3,0, 13,4 Hz) ( , 2, 63 (dd, J - 4, 6, 13,4 Hz) 1H em conjunto], [2, 94 (dd, J = 9,4, 13,4 Hz) , 3,01 (dd, J = = 8, 3, 13,4 Hz) , 1H em conjunto], 3, 92 (m, 1H) , 4 07 (m, 1H) , [4, 43 (dd J = 5,8, 8,3 Hz, 4,46 (dd, J = 5, 8, 8,3 Hz) , 1H em conjunto] , , 4 , 50- 4,83 (m 2H) , [5,89 (dd , J = 3,3, 9, 6 Hz) , 5,94 (dd J - = 4, ,8, 8,3 Hz) , 1H em conjunto ], 7 ,31 (m 1H) , 7,38 (m, 4H) . LCMS (APCI, M+H+) : 442, HRMS : M+H+ calc. 442 !, 24488, encontrado 442,24444, erro -0,99 p.p.m.. Anál. (C23H31N5O4 · 0, 6H20 · .0,4ciclo-hexano) C, Η, N. Método do exemplo 89. 249

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários 3-(4-fluorobenzamido)-6,6- dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo- 5(1H,4H,6H)-carboxilato de 2- (dimetilamino)-1-(tiazol-2-il)- Exemplo de referência etilo. NMR (MeOD) õ: 1,64 (s, 3H) 1,68 (s 3H) , 2,94 (s, 6H) , 3,96-4,10 / °”\ ,S»9 CHj (m, 2H) 4, 60-4, 80 (m, 2H) 6,42 Y (dd, J=3,54 8,08 Hz, 1H), 7,16 (t, J=8, 8 4 Hz, 2H) , 7,70 (dd, J=3,28, F 83, 66 Hz, 2H) , 7, 88-7, 97 (m 2H) m LCMS (APCI, M+H+) : 473,2, Anál. (C22H25FN603S -1, 85TFA-0,44água) C, Η, N Método do exemplo 1. 250

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários 3-(4-fluorobenzamido)-6,6-dimetil-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H,4H,6H)-carboxilato de 2-(dimetilamino)-1-(quinolina-8-il)-etilo ΧΗ NMR (MeOD) δ: l,54(s, 3H) , 1,67 (s, 3H), 2,98 (s, 3H), 3,13 (s, 3H) , 3, 60-3,75 (m, 2H) , 4,87-4,98 (m, 2H) , 7,14-7,28 (m, 3H) , 7,51 (q, J=4,28 Hz, 1H) , 7,59 (t, J=7,5 8 Hz, 1H) , 7,83 (d, J=7,07 Hz, 1H), 7,89 (d, J=8,34, 1H), 7,95 (dd, J= 5,31, 8,84 Hz; 2H) , 8,29 (dd, J=1,77, 8,34 Hz, 1H) , 8,88-8,94 (m, 1H), LCMS(APCI, M+H+) : 517,2, Anál. (C29H23FN5O3 · •2,12TFA»0,26água) C, Η, N. Método do exemplo 1. 251

Preparação do composto de referência 89a: 6,6-dimetil-3- (tetra-hidrofurano-2-carboxamido)-pirrolo[3,4-c]pirazolo-2,5(4H,6H)-dicarboxilato de (R)-5-terc-butil-2-etilo.

Dissolveu-se ácido (R)-tetra-hidrofurano-2-carboxílico (1,39 g, 12,0 iranol) em diclorometano (24 mL) e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se, gota a gota, cloreto de oxalilo 252 (4,57 g, 36,0 mmol) e depois DMF (25 uL) . Depois de se agitar durante 3 horas a 0°C, concentrou-se a solução até à secura, depois submeteu-se a uma rotoevaporadora em DME (2 x 5 mL) para remover o cloreto de oxalilo residual, e depois dissolveu-se novamente em DME (8,0 mL) . Num outros frasco, misturou-se 3-amino-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c] -pirazolo-2,5(4H, 6H)-dicarboxilato de 5-terc-butil-2-etilo I (G) (1,95 g, 6,0 mmol) e diisopropiletilamina (2,09 mL, 12,0 mmol) em diclorometano (8,0 mL) e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se, gota a gota, a solução de cloreto de ácido, provocando a libertação de fumo e aumentando a temperatura interna para 15°C. Manteve-se sob reacção a 0°C durante 5 horas. Submeteu-se a processamento aquoso utilizando NaHC03 e DME e depois a uma coluna de gel de silica para se obter o composto 89a (2,2572 g, 86%) com o aspecto de uma espuma branca. 1HNMR (300 MHz, dmso-de) δ: 1 35 (t, J = 7 1 Hz, 3H) , [1 42 (s), 1,45 (s), 9H em conjunto] 1,57 (dd, J = 2,8, 6,6 Hz, 6H) 1,86 (m, 2H) 1,96 (m, 2H), 2,23 (m, 5 1H) 3,91 (m, 2H), 447 (m, 5H) 1080 (s, 1H) LCMS (APCI, M+H+) : 423. Anál. (C20H30N4O6· 0, 15 EtOAc) C, Η, N.

Também foram preparados os seguintes exemplos de referência. 253

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos referência n° e comentários «V- «r\ Ac5»aP - MM-f ,ch4 HM. α '-N ^ESSW C«J N- [(1S)-2-(dimetilamino)-1-feniletil]-6,6-dimetil-3-[(3-fenoxibenzoil)-amino]-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H) -carboxamida. NMR (400 MHz, CDC13) δ p.p.m.: 1,63 (s, 3 H) , 1,72 (s 3 H) , 2,10 2,55 (m, 7 H) 2,60 - 2,90 (m, 1 H) , 4,50 - 4, 97 (m, p—Vj? 3 H) , 5,55 - 4, 90 (m, 1 H) 5,55 96 - 5,95 (m, 1 H) 6, 92 7, 67 (m, 14 H) , 10,17 (s lr., 1 H) . Anál. (C31H34N6O3O, 5H2O*0,2 EtOAc) C, Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 539, 2 . Método do exemplo 46. 254

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos referência n° e comentários ês JSh r-J p (y qc-O-Ç, HV« H N-{5-[3-(4-clorofenil)-4-(dimetilamino)-butanoil]-6,6-dimetil-1,4,5,6-tetra-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazol-3-il}-tiofeno-2-carboxamida. NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,58 (s 3 H) 1,73 (s, 3 H) , 2,61 - 2,72 (m 1 H) , 2,74 -2,97 (m, 3H) , 3,46 - 3,58 (m, 1 H) , 4,59 (d, J= 12,3 8 Hz, 1 H) , 4,73 (d, J= 12,3 8 Hz, 1 H) , 7,12 - 7,22 (m, 1 H) , 7,26 - 7,40 Γ CHs Cs (m, 4 H) , 7,70 - 7,79 (m, 1 H) , 7,85 - 7, 93 (m 1 H) . Anál. st (C24H28ClN5O2S*0, 9HOAc) C. Η, N. LCMS (APCI, M+H+) : 487,2. Método do exemplo 66: utilizando o composto 97b em vez do composto 2b. 0 composto 97b foi preparado utilizando o mesmo método que o utilizado para a preparação do composto lb. 255

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos referência n° e comentários W Hí<\ CM -P Η\ jl y- ' ' h nh m 0 Jf 6,6-dimetil-W- [trans-2-fenil-ciclopropil]-3-[(2-tienil-carbonil)-amino]-4,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamida. NMR (400 MHz MeOD) δ p.p.m. 1,01 - 1,15 (m 2 H) 1,64 (d. J= 3,28 Hz 6 H) 1, 92 - 2, 00 (m, 1 H) 2, 63 - 2,72 (m, 1 H) 4,41 (s, 2H) 6, 98 - 7, 06 (m, 3 H) ó O m 7,06 - 7,17 (m, 3 H) 7,65 (dd, J=5, 05 1,26 Hz, 1 H) 7,78 (dd J=3,7 9, 1,01 Hz, 1 H) Anál. (C22H23N5O2S.O, 8HOAC.O, 8H20) C, H, N, S. Método do exemplo 58: utilizando 0 composto 97b em vez do composto lb. 0 composto 97b foi preparado seguindo 0 mesmo método do composto lb. 256

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos referência n° e comentários Cir> rv HM Λ ''—OH Va=0 3-[(l-benzotieno-2-ilcarbonil)-amino]-N- [(IS)-2-hidroxi-l-feniletil]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H) -carboxamida. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,64 (d, J=24,76 Hz, 6 H) 3, 65 - 3,75 (m, 2 H) 4,64 (d, J=3, 03 Hz, 2 H) 4,81 - 4,87 (m, 1 H) 7,10 - 7,18 (m, 1 H) 7,20 - 7,33 (m, 4 H) 7,33 -7,43 (m, 2 H) 7,78 - 7, 90 (m 2 H) $S 8,07 (s, 1 H) Anál. (C25H25N5O3S . 1, lHOAc. 0, 1H20) C, H, N S Método do exemplo 46: utilizando 0 composto 99c em vez do composto lc. 0 composto 99c foi preparado utilizando 0 método do composto lc. 257

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos referência n° e comentários P \ 7 HM ^ N- [(IS)-2-hidroxi-l-feniletil]-6,6-dimetil-3-[(2-tienil-carbonil)-amino]-4,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamida. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,62 (s, 3 H) 1,68 (s 3 H) 3, 65 - 3,76 (m, 2 H) 4,62 (d J=2,2 7 Hz, 2 H) 4,82 - 4, 90 (m 1 H) 7,08 - 7,19 (m, 2 H) 7,22 WO - 7,36 (m, 4 H) 7,68 (dd, f y J=4, 93, 0, 88 Hz, 1 H) 7,83 (dd 1S9 J=3,7 9 1,01 Hz, 1 H) . Anál. (C21H23N5O3S . 0,5HOAc . 0 , 1H20) C, H, N, S. Método do exemplo 48: utilizando 0 composto 97c em vez do composto lc. 0 composto 97c foi preparado utilizando 0 método do composto lc. 258

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos referência n° e comentários jOr, ηη>“ <Π «Η. „ \ 3-([{4-metoxifenil)-acetil]-amino}-6,6-dimetil-N-[trans-2-fenilciclopropil]-4,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamida. NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 0,99 - 1,12 (m, 2 H) 1,62 (d J= 3,28 Hz, 6 H) 1, 89 - 1, 98 (m, J= 9, 35, 9, 35 Hz, 1 H) 2,62 -2,71 (m, 1 H) 3,52 (s, 2 H) 0&Ϊ8 181 3,68 (s, 3 H) 4,31 (s, 2 H) 6,79 (d, J=8,59 Hz, 2 H) 6,99 -7,06 (m 3 H) 7,10 - 7,19 (m 4 H) . Anál. (C26H29N5O3,0,3HOAc. .0,2H20) C, Η, N. Método do exemplo 70. 259

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos referência n° e comentários H fív jí 3-[(4-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-N- (2-morfolina-4-il-l-feniletil)-4,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamida. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m.: 1,63 (d, J=22,48 Hz, 6 H) 2,36 2,45 (m, 2 H) 2,46 - \h f^o 2,60 (m, 3 H) 2,69 (dd J=12,88, 10,11 Hz, 1 H) 3,55 3, 68 (m, 4 o H) 4,63 (s, 2 H) 4,89 (dd. F 102 J= 9, 85, 4, 80 Hz 1 H) 7,10 -7,20 (m, 3 H) 7,23 (t, J=7,58 Hz, 2 H) 7,26 - 7,31 (m, 2 H) 7, 90 - 7, 98 (m, 2 H) . Anál. (C27H31N5O3F. 0,5H0Ac) C, Η, N. Método do exemplo 59: utilizando 0 composto 2c em vez do composto lc. 260

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos referência n° e comentários bJVV fS μη- y 3-(benzoilamino)-N-[(IS)-2-(dimetilamino)-1-feniletil]-N, 6,6-trimetil-4,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxamida. NMR (400 MHz, MeOD) δ p.p.m., 1,76 (d, J= 9,32 Hz 6 H) 2,45 (s, 6 H) 2,66 (s, 3 H) 3,08 (d J=6,04 Hz, 2 H) 4,73 (s lr., f Η,δΉ ch» 2H) 5,13 (t, J= 7,3 0 Hz, 1 H) 7,29 (t, J=7 30 Hz, 1 H) 7,38 tm (t, J=7,55 Hz, 2 H) 7,41 - 7,46 (m, 2 H) 7,51 (t, J=7,55 Hz, 2 H) 7,59 (t, J= 7,18 Hz, 1 H) 7,92 (d J= 7, 81 Hz, 2 H) Anál. (C25H32N6O2F. 0,3HOAc . 0,2H20) C, Η, N. Método do exemplo 59. 261

262

263

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos referência n° e comentários Y 0 Nss/ p-4 / 3 HâC Hjt'N 0“CHj C;«» tas (S)-3-(2,4-dimetoxipirimidina-6-carboxamido)-N-(2-(dimetil-amino)-1-feniletil)-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H,4H,6H)-carboxamida. Y NMR (400 MHz, DMSO) δ p.p.m. 1,59 (s, 3 H) , 1,67 (s 3 H) 2,85 (d, J=3 Hz, 1H) , 2,89 (d, 3 H J=3Hz) , 3,33 - 3,59 (m 2 H) , 3,97 (s. 3 H) , 4,06 (s, 3 H) 4,79 (m 1 H) , 5,36 (m, 1 H) , 6,82 (d, J= 6 Hz, 1H) , 7,04 (s 1H) , 7,30- 7,46 (m. 5 H) . Anál. (C25H32N5O4.1,3TFA. 2,2 8H20) C, H, N. Método do exemplo 72. 264

265

266

Exemplo de referência 110: (S)-3-(6-chloro-2-flúor-3- metilbenzamido)-N-(2-(dimetilamino)-1-feniletil)-8,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H,4H,6H)-carboxamida. 267 267

A um tubo de ensaio de 13 x 100 mm, adicionou-se uma barra de agitação de 3 x 6 mm, o composto 71b (0,1 M em CH2C12, 80 ymol, 1,0 eq.), uma solução de DIPEA (2 M em CH2CI2, 160 ymol, 2,0 equiv.) e cloreto de 6-cloro-2-flúor-3-metil-benzoí lo (0,1 M em CH2C12, 160 ymol, 2,0 eq.).

Tapou-se a reacção e agitou-se à temperatura ambiente durante 12 horas. Adicionou-se NaOH (1 M, 1000 ymol, 12,5 equiv.) e agitou-se a mistura de reacção durante 15 minutos. Após centrifugação, removeu-se a camada superior. Evaporou-se a camada orgânica. Adicionou-se MeOH (500 yL) e TEA (500 yL) e deixou-se agitar a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro. Evaporou-se os solventes e reconstituiu-se o resíduo em DMSO. XH NMR (500 MHz, D20) d p.p.m. 1,52 (s, 3 H) 1,59 (s, 3 H) 2,13 (s, 6 H) 2,21 (s, 3 H) 2,34 (dd, J=12,22, 5,63 Hz, 1 H) 2,59 (dd, J=12,91, 10,16 Hz, 1 H) 4,48 (d, J=ll,81 Hz, 1 H) 4,52 (d, J=12,09 Hz, 1 H) 4,81 (q, J=5,77 Hz, 1 H) 6,18 (s lr., 1 H) 7,14 (t, J=7,55 Hz, 1 H) 7,21 - 7,27 (m, 3 H) 7,28 - 7,38 (m, 3H) . LCMS: M+H+: 513,2. 268

269

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários vj f*. CHj n V „ 3-(2,3-di-hidrobenzo[b][1,4]-dioxina-2-carboxamido)-N-((S)-2-(dimetilamino)-1-feniletil)-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H,4H,6H)-carboxamida. NMR (500 MHz, D20) d p.p.m. 1,48 (s, 3 H) 1,55 (s, 3 H) 2,11 (s, 3 H) 2,12 (s, 3 H) 2,13 -2,21 (m, 1 H) 2,29 - 2,35 (m, 1 H) 4,29 (dd, J=11,13, 5,63 Hz, 1 v3 H) 4,37 (dd, J=11,81, 2,47 Hz, 1 H) 4,42 (d, J=9,34 Hz, 1 H) 4,75- 1« 4,83 (m, 1 H) 4, 89 - 4, 97 (m, 1 H) 6,12 - 6,21 (m, 1 H) 6,78 -6,86 (m, J=6, 4 6, 6, 46 Hz, 3 H) 6,95 (d, J=7,42 Hz, 1 H) 7,13 (t, J=7,2 8 Hz, 1 H) 7,23 (t, J=7,55 Hz, 2 H) 7,30 (d, J=7,14 Hz, 2 H); LCMS: M+H+:505,2. Método do exemplo 110. 270

271

Estrutura e exemplo de Nome químico, dados analíticos e referência n° comentários . T> rp)- 3-(4-etilbenzamido)-6,6-dimetil-N-[trans-(2-fenilciclopropil)]-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H,4H,6H)-carboxamida ΧΗ NMR (500 MHz, D20) d p.p.m. 0. 99 (dd, J=12,91, 5,77 Hz, 1 H) 1,16 (t, J=7, 6 9 Hz, 3 H) 1,19 -1,23, (m, 1 H) 1,59 (s, 6 H) 1, 86-1, 93 (m, 1 H) 2,63 (q, HqiCm J=7,51 Hz, 2 H) 2,72 (dd, J=7,14, 4,12 Hz, 1 H) 4,39 (s, 2 H) 6,37 (d, J=1, 65 Hz, 1 H) 7,04 - 7,11 1*4 (m, 3 H) 7,20 (t, J=7,55 Hz, 2 H) 7,29 (d. J=7,69 Hz, 2 H) 7,89 (d, J=7, 97 Hz, 2 H) 10,71 (s, 1 H) ; LCMS: M+H+: 444:2. Método do exemplo 110: utilizando o composto 70a em vez do composto 71b.

Os compostos seguintes também foram preparados de acordo com os métodos descritos anteriormente. 272

Estrutura e exemplo Nome químico, dados analíticos e de referência n° comentários Exemplo de N-[(IS)-2-amino-l-feniletil]-3-[(4-fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo[3,4-c]pirazolo- referência 5(1H)-carboxamida NMR (400 MHz, MeOD) □ p.p.m.: 1,69 o (s, 3 H) , 1,78 (s, 3 H) , 3,12 - 3,25 (m, 2 H) , 4,60 - 4,81 (m, 2 H) , 4,99 - 5,18 (m, 1H) , 7,17 - 7,48 (m, 7H) 0 í m 7,86 - 8,12 (m, 2 H) . Anál. (C23H25FN602* 1, 6H201, OHOAc) c, h, n. LCMS (APCI, M+H+) : 437,2. Método do exemplo 64: utilizando o composto 2c em vez do composto lc. 273Estrutura e exemplo de referência n°

Nome químico, dados analíticos e comentários 3-(2-metoxi-2-metilpropanamido)-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H,4H,6H)-carboxilato de (S)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo. 1HNMR (300 MHz, CDCI3, alguns picos em duplicado devido a isomerização

Exemplo

tautomérica) δ [1,· 46 (: 3) , 1,49 (s ) , 6H em conj unto], [ 1 , 63 1 (s) , 1,70 (s ) , 1,7 3 (s) 1,79 (s), 6H em conjunto ] , [2, 30 (s), 2,35 (s) , 6H em conjunto ] , 2, 60 (t de d, Jt = 13,4 Hz , Jd = 4 , 6 Hz, 1H), 2,89 (dd, J = 8,3 , 13, 1 H z, 1H) r [3,356 (s), 3360 (s), 3H em conjunto], [4,45 (d, J 13,1 Hz ) , 4,5 1 (d, J =13,1 Hz) , 4,7 1 (d, J = 12, 9 Hz) , 4,76 (d, J = 13 , 1 Hz ) , 2H em co nj unto], [5,93 (dd, J = 4,8 , 8 ,3 Hz) r 5,95 (dd, J = 5,3, , 8 , 3 Hz ) , 1H em conj unto], 7,37 (m, 5H) , [9, 07 (s lr. ) , 9,40 (s lr.), 1H em conj unto ] · LCMS (APCI, M+H+) : 444 HRMS: M+H+ calc. 444 26053, encontrado 444,26056, erro 0,06 p.p.m.. Anál. (C23H33N5O4· 0,5Η2Ο·0,4ciclo-hexano) C, Η, N. Método do exemplo 1. 274

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários Exemplo H λ /Γ\ P f / O—C p»t Hfí . '—N "p* CHj 0"\ H»C ^ 117 3- ( (J?) -2-metoxipropanamido) -6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-5 (1H, 4H, 6H)-carboxilato de (S)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo. 1HNMR (300 MHz, MeOD) δ [1,39 (d J = 6,8 Hz), 1,42 (d J = 6,8 Hz), 3H em conjunto], [1,59 (s) , 1,66 (s), 1,70 (s), 1,79 (s), 6H em conjunto], [2,32 (s), 2,37 (s), 6H em conjunto], [2,53 (dd J = 3,3, 13,6 Hz), 2,63 (dd, J = 4.6, 13,4 Hz), 1H em conjunto], [2,94 (dd, J = 9,6, 13,6 Hz), 3,01 (dd J = 8.6, 13,1 Hz), 1H em conjunto], [3,42 (s) , 3 45 (s) 3H em conjunto] , 3, 92 (m 1H) , 4,47-4,83 (m, 2H), [5,89 (dd, J= 3,0, 9,6 Hz), 5,94 (dd J = 4,6, 8,6 Hz) 1H em conjunto], 7,31 (m, 1H) , 7,38 (m, 4H) . LCMS (APCI, M+H+) : 430 HRMS. M+H+ calc. 430,24488, encontrado 430 24609. Método do exemplo 89. 275

Estrutura e exemplo de referência n° Nome químico, dados analíticos e comentários Exemplo » /Γ"\ fí JL J*‘ \ o~..y cn, *»t Λ cm3 HiC'" 11# 6,6-dimetil-3-propionamidopirrolo-[3,4-c] pirazolo-5 (1H, 4H, 6H) -carboxilato de (S) -2-(dimetilamino)-1-feniletilo. 1HNMR (300 MHz, MeOD) , δ [1,17 (t, J = 7,6 Hz), 1,21 (t, J = 7,6 Hz) 3H em conjunto], [1,59 (s) , 1,63 (s) , 1,70 (s), 1,79 (s), 6H em conjunto], [2,37 (q, J = 7,6 Hz), 2,41 (q, J = 7,6 Hz, 2H em conjunto], [2,43 (s), 2,57 (s) , 6H em conjunto], [2,77 (dd, J = 4,3, 13,4 Hz), 2 82 (dd, J = 3,0, 13,4 Hz), 1H em conjunto], 3,19 (dd, J = 9,9, 13,6 Hz, 1H) , [4,46 (d, J= 13,4 Hz), 4,52 (d, J = 13,4 Hz), 4,70 (d, J = 13,4 Hz), 4,79 (d, J = 13,4 Hz), 2H em conjunto], 5,97 (dd, J = 2,8, 9,9 Hz, 1H) , 7,32 (m, 1H) , 7,41 (m, 4H) . LCMS (APCI, M+H+) : 400, HRMS: M+H+ calc. 400 23432, encontrado 400,23425, Anál. (C23H25N5O3 · 1, 8H20 · • 0,5HOAc) C, Η, N. Método do exemplo 1. 276 Estrutura e exemplo de referência n°

Nome químico, dados analíticos e comentários 6,6-dimetil-3-(tetra-hidrofurano-3-carboxamido)-pirrolo[3,4-c]pirazolo- 5 (1H, 4H, 6H) -carboxilato de (S)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo.

Exemplo

1HNMR (300 MHz, MeOD) δ (1,59 (s) 1 65 (s ) , 1- , 69 (: s) , 1, 79 (s) , 6H em conjunto]; 2,21 (q; J = 7,3 Hz , 2H) . [2,32 (s) , 2,37 (s) , 6H em conj unto], 2,53 (dd, J = 3, 0, 13 ,4 Hz, 1H) , [2, 96 (dd, J = 9, 6, 13, r 4 Hz) , 3,01 (dd, J = 8, 6 r 13, 4 Hz) 1H em conjunto], 3,32 (m 1H) 3,79-4 , 04 (m 4H) 4,43-4,80 (m, 2H) [5,89 (dd J = 3,0, 9,6 Hz), 5,93 (dd J = 4,3, 8,3 Hz), 1H em conjunto], 7,38 (m 5H). LCMS (APCI, M+H+) : 442, HRMS: M+H" calc. 442,24488, encontrado 442,24397, Anál. (C23H31N5O4 · 0 , 9H20 · 1, 0 ciclo-hexano) C, Η, N. Método do exemplo 89. 277

Exemplo de referência 121: 3-(4-fluorobenzamido)-6,6-dimetilpirrolo[3,4-c]pirazolo-5(lH,4H,6H)-carboxilato de (S)-2-(metilamino)-1-feniletilo.

A uma solução de composto 2 (194 mg, 0,406 mmol) e

1,8-bis-(dimetilamino)-naftaleno (34,8 mg, 0,4 eq.) em 2 mL 278 de 1,2-dicloroetano adicionou-se cloroformato de 1-cloroetilo (133 uL, 3 eq.), a 0°C. Agitou-se a mistura de reacção ao refluxo durante 1 hora e depois evaporou-se até a secura. Dissolveu-se o residuo em 1 mL de metanol e 1 mL de LiOH 2 N, agitou-se ao refluxo durante 1 hora e evaporou-se novamente até à secura. Purificou-se o produto impuro por HPLC prep- e liofilizou-se para se obter o composto em epigrafe com um rendimento de 28% (51 mg), com 0 aspecto de uma espuma branca. 1H NMR (400 MHz, MeOD) d p.p.m. 1,62 (s, 3 Η) 1 73 (s, 3 H) 2 59 (s 3 H) 3,05 (dd, J= 13,22, 3, 40 Hz, 1 H) 3,27 (dd, J=13, 09, 9 57 Hz, 1 H) 4,75-4,83 (m, 1 H) 4,92 (m 1 H) 5,91 (dd, J=9, 57, 3, 53 Hz, 1 H) 7,22 - 7,31 (m, 2 H) 7,31 - 7,38 (m, 1 H) 7,38 - 7,48 (m, 4 H) 8,01 - 8,08 (m, 2 H) . ). Anál. (C24H26N5O3F. 0,4HOAc. .0,7H20) C, Η, N.

Testes biológicos, dados de Ki, dados do ensaio celular e dados da eficácia in vivo

Clonagem, expressão e purificação do dominio de cinase PAK4 (PAK4 KD): o ADNc que codifica a PAK4 foi amplificado a partir do clone EST (#12) (adquirido a Research Genetics) utilizando PCR. P33 (ACATATG TCC CATGAGCAGT TCCGGGCTGC CCTGCAGCT) e P34 (CTCA TGGGTGCTTC AGCAGCTCGG CTGCCGTGGC) foram utilizados como iniciador 5' e iniciador 3' na PCR, respectivamente. O produto amplificado por PCR foi clonado num vector Topo (Invitrogen Inc.) e analisado por sequenciação de ADN. Ο PAK4 KD foi então subclonado no plasmideo de expressão pET28a(+), pET24a(+) ou pGST4.5. Os plasmideos recombinantes que contêm PAK4 KD foram transformados em células BL21 (DE3) para expressão de proteínas recombinantes. A produção de PAK4 KD foi induzida 279 a 27°C por adição de IPTG nas células. As células foram então colhidas e lisadas para purificação de proteínas. Utilizou-se uma coluna de Ni-NTA (pET28a(+), pET24a ( + )) e uma coluna de glutationa (pGST4.5) para a purificação. A proteína purificada foi então submetida a trombina para clivar os marcadores no terminal N que foram herdados dos plasmídeos de expressão, proporcionando assim ο PAK4 KD que foi utilizado para o ensaio de Ki da presente invenção.

Condições do ensaio enzimático do domínio de cinase PAK4: a actividade enzimática de PAK4 KD foi medida através da sua aptidão para catalisar a transferência de um resíduo fosfato a partir de um nucleósido trifosfato para uma cadeia lateral de um aminoácido de um péptido comercialmente disponível (sequência de aminoácido EVPRRKSLVGTPYWM). A conversão de ATP em ADP acompanha a reacção catalítica. A produção catalisada por PAK4 KD de ADP a partir de ATP foi acoplada à oxidação de NADH através das actividades de piruvato-cinase (PK) e de lactato-desidrogenase (LDH). A conversão de NADH em NAD+ é monitorizada pela diminuição na absorvência a 340 nm (e340 = 6,22 cm_1mM_1) , utilizando um SPECTRAMAX 190 da Molecular Devices em conjunto com o Biomec FX. As soluções típicas de reacção contêm fosfoenolpiruvato 2 mM, NADH 0,35 mM, MgCl2 10 mM, DTT 1 mM, péptido 0,4 mM (EVPRRKSLVGTPYWM), ATP 0,04 mM, PK 1 unidade/mL, LDH 1 unidade/mL, 0,01% de Tween 20 em HEPES 50 mM, pH 7,5. OS ensaios foram iniciados por meio da adição de PAK4 KD 25 nM. O valor de Ki de PAK KD Ki de cada composto da invenção (o inibidor) foi calculado com base em múltiplos números de percentagem de inibição do inibidor para concentrações de inibidor diferentes. O péptido (sequência de amino EVPRRKSLVGTPYWM) foi adquirido a 280

American Peptide Company. NADH, MgCl2, HEPES, DTT, ATP e PK/LDH foram adquiridos a Sigma. O Tween 20 foi adquirido a Calbiochem. O método ELISA em sanduíche foi utilizado para medir a actividade da cinase PAK4 em células totais. O nível de fosforilação dependente de PAK4 de GEF-Hlb pode ser determinado por monitorização da ligação de um anticorpo fosfo-específico para GEF-Hlb. Uma linhagem de células HEK 293 é utilizada no bioensaio, tendo sido manipulada para sobre-expressar GEF-Hlb e o domínio da cinase (KD) de PAK4. 0 KD de PAK4 é indutível nesta linhagem celular por tetraciclina (Trex system, Invitrogen). O nome desta linhagem celular foi designado como TR-293-KDG. Para se estabelecer um evento de fosforilação em GEF-H1, as células são induzidas com doxiciclina para expressar ο PAK4 KD. As cavidades de controlo negativo não recebem a indução. O efeito da substância candidata é medido como a aptidão para bloquear este evento de fosforilação.

As placas de ELISA foram preparadas por pré-revestimento das placas com um anticorpo de captura (anticorpo monoclonal de murganho α-ΗΑ-marcador), bloqueadas com BSA e lavadas em 0,1% de tween 20 em soluto salino tamponado com tris (TBST). As placas para a cultura de tecidos (pré-revestidas com poli-D-lisina) foram semeadas com células TR-293-KDG. As células TR-293-KDG foram induzidas para expressar ο PAK4 KD com doxiciclina de um dia para o outro e, subsequente e concomitantemente, tratadas com substâncias candidatas ou com diluente durante mais 3 horas de exposição contínua. As células foram então submetidas a lise com um tampão RIPA modificado, suplementado com inibidores de protease. Os lisados de 281 células totais fresco foram então adicionados à placa de ELISA durante 2 horas. Entre todos os passos subsequentes, as placas foram lavadas 4 vezes com TBST. 0 anticorpo de detecção (que reconhece o epítopo fosfo-especifico em GEF-Hlb) foi adicionado durante 1 hora e depois adicionou-se um anticorpo secundário α-coelho de cabra ligado a enzima durante 45 minutos, o desenvolvimento de coloração do anticorpo ligado a enzima foi realizado com um substrato de peroxidase, ABTS (Moss, Inc.) com uma absorvência a 405 nM, lida num espectrofotómetro após 30 minutos de incubação. Os valores de CE50 foram calculados por ajustamento de uma curva sigmóide utilizando uma análise com quatro parâmetros.

Dados de Ki do dominio cinase de PAK4 e dados de CE50 do ensaio celular de PAK4 dos compostos dos exemplos e dos exemplos de referência 1 a 121.

Ex. n° Dados de Ki (nM) CE50 (nM) 1 10,1 10,7 2 16, 7 9,7 3 42,1 50,0 4 68,0 14, 6 5 14,4 271 6 30, 9 27, 9 7 314 230 8 124 7,4 9 96, 4 13,3 10 75 7,2 11 101 15,7 282 Εχ. η° Dados de Ki (nM) CE50 (nM) 12 95,5 3,27 13 109 3, 9 14 356 15 145 16, 1 16 118 17, 9 17 259 110 18 23,3 28,3 19 7,87 67,8 20 8,13 80,2 21 24,8 37, 6 22 17,4 14,8 23 122 3, 90 24 63,7 140 25 78, 6 153 26 278 244 27 82,1 79, 9 28 73,2 280 29 27,1 419 30 106 2090 31 858 230 32 57,1 162 33 220 34 510 60 35 92,3 216 36 103 315 37 564 38 43,2 113 39 47,5 15,3 40 64, 9 152 283 Εχ. η° Dados de Ki (nM) CE50 (nM) 41 786 42 955 43 58,1 439 44 800 45 318 21,1 46 33, 6 32,1 47 54,2 34,7 48 98,3 36, 4 49 193 90,8 50 33, 8 335 51 118 20,3 52 354 242 53 210 28,0 54 41 353 55 13, 6 148 56 6, 9 37,1 57 11,3 16, 0 58 96, 0 59 448 60 267 61 444 62 308 63 178 64 19, 3 4000 65 849 66 556 67 193 68 48,2 34,1 69 149 226 284 Εχ. η° Dados de Ki (ηΜ) CE50 (ηΜ) 70 223 71 101 84,1 72 93, 8 362 73 354 200 74 475 75 73, 1 115 76 468 77 345 167 78 284 79 96 2120 80 756 12 81 240 104 82 434 301 83 Α 560 83 Β 36, 2 5 84 Α 70 16 84 Β 396 85 143 4 86 68,7 18 87 67,3 88 35, 6 88 89 156 10 90 251 4 91 286 92 345 103 93 335 178 94 161 413 95 137 127 96 12,5 59 285 285 Ex. n° Dados de Ki (nM) CE50 (nM) 97 110 1510 98 19, 5 1080 99 67, 9 423 100 108 178 101 113 4000 102 621 103 512 104 89 9 105 121 4000 106 412 107 260 108 70 1150 109 176 110 81,7 111 42% de inibição a 1 μΜ 112 66% de inibição a 1 μΜ 113 65% de inibição a 1 μΜ 114 70% de inibição a ΙμΜ 115 20,8 4000 116 212 50 117 357 8,8 118 226 119 260 52 120 463 121 16, 2 124 (IS)-2-(dimetilamino)-1 0 composto do exemplo de referência 2, 3-[(4-fluoro benzoíl) -amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidropirrolo [3,4-c] -pirazolo-5(1H)-carboxilato de 286 feniletilo apresentou inibição do crescimento de tumor in vivo de xenoenxertos de tumor do carcinoma colo-rectal humano HCT116 em murganhos atimicos. Os pormenores são apresentados nos parágrafos seguintes.

Material e preparação: a linhagem celular HCT116 foi obtida na American Type Culture Collection (ATCC, Bethesda, MD) . As células foram deixadas crescer como monocamadas em meio de McCoy, cada uma suplementada com 10% de FBS (todas da empresa Life Technologies, Inc., Bethesda, MD) e foram mantidas a 37°C numa atmosfera humidificada a 5% de CO2. As células de tumor para implantação em murganhos atimicos foram colhidas próximo da confluência por incubação com 0,05% de tripsina-EDTA. As células foram aglomeradas a 450 X g durante 5 a 10 minutos e os aglomerados de células foram novamente colocados em suspensão em meio de McCoy isento de soro e suplementado com 50% de matrigel. As células de tumor (1 x 106 células/animal) foram implantadas s.c. na região do flanco posterior de cada murganho no dia 0 e foram deixadas crescer até um tamanho determinado antes da administração de composto para cada experiência.

Inibição do crescimento do tumor: o tratamento foi iniciado quando os tumores apresentavam um tamanho de aproximadamente 200 mm3. O composto do exemplo 2 ou veiculo (metil-celulose, MC) foi administrado por meio de uma sonda esofágica oral, diariamente ou com um dia de intervalo a 10 mL/kg. Os tumores foram medidos utilizando calibradores Vernier e os volumes do tumor foram calculados utilizando a fórmula comprimento X largura2 X 0,4. O volume do tumor foi medido nos dias indicados, estando o volume de tumor mediano indicado para cada grupo de 12 animais; média ± EPM. No final do estudo, a percentagem máxima de inibição 287

do crescimento do tumor foi calculada como 100 X (volumefinai de tumor - volumeiniciai de tumor) para o composto do exemplo 2-grupo tratado/ (volumefinai de tumor volumeinicai de tumor) para o grupo de veiculo no dia 39 e o retardamento do crescimento do tumor foi calculado como a média do volumetratado de tumor - média do volumecontroio de tumor, quando o volume de tumor médio atingiu 1250 mm3.

Retardamento do crescimento do tumor: o tratamento com o composto do exemplo 2 teve inicio no dia 11 quando os tumores atingiram um volume de ~200 mm3 e foi mantido durante 28 dias até os tumores de controlo atingirem o tamanho de avaliação (1250 mm3), para se avaliar o retardamento do crescimento do tumor. O composto do exemplo 2 foi administrado a murganhos com tumor por sonda esofágica oral sob a forma de uma solução em MC num volume de 10 mL/kg e foi comparado com o veiculo por si só administrado num volume idêntico. A administração por via oral do composto do exemplo 2 a 50 mg/kg/dia ou 75 mg/kg com um dia de intervalo demonstrou resultar numa inibição do crescimento do tumor estatisticamente significativa (p = 0,05) de 50% ou de 37%, respectivamente, em comparação com os controlos tratados com veiculo (figura 1). Além disso, foi observado um retardamento do crescimento do tumor de 12,2 ou de 9,8 dias para niveis de dose de 50 mg/kg/dia ou 75 mg/kg com um dia de intervalo, respectivamente (figura 1). Os murganhos, aos quais foi administrado o composto do exemplo 2 ao longo do ciclo de tratamento de 28 dias, pareceram geralmente saudáveis e mantiveram o aumento de peso.

Os resultados da inibição do crescimento do tumor e do retardamento do crescimento do tumor do composto do exemplo 288 2, 3-[(4 — fluorobenzoíl)-amino]-6,6-dimetil-4,6-di-hidro-pirrolo[3,4-c]pirazolo-5(1H)-carboxilato de (lS)-2-(dimetilamino)-1-feniletilo, são apresentados resumidamente no quadro seguinte e na figura 1.

Ponto final Parâmetro 50 mg /kg QD 75 mg/Kg/QOD Inibição do crescimento %TGImáx d3 9 50,0 36, 6 do tumor (TGI) Retardamento do T — C12 5 0min3 12,2 9,8 crescimento do tumor (dias)

Conforme mostrado na figura 1, o composto do exemplo 2 inibiu/retardou o crescimento de xenoenxertos do tumor de carcinoma colo-rectal humano HCT116 em murganhos atimicos. A administração por via oral do composto do exemplo 2 a 50 mg/kg/dia (QD) ou 75 mg/kg/com um intervalo de um dia (QOD) teve inicio quando os tumores atingiram um tamanho médio de 200 mm3 ao dia 11 e foi mantido até ao dia 39, ao fim do qual o tratamento foi cessado. O volume do tumor foi medido nos dias indicados, com o volume de tumor médio indicado para grupos de 10 animais; média ± EPM. *ANOVA p < 0,01 para ambos 50 e 75mg/kg vs. Grupos de veiculo nos pontos indicados. 289

REFERÊNCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO A presente listagem de referências citadas pela requerente é apresentada meramente por razões de conveniência para o leitor. Não faz parte da patente de invenção europeia. Embora se tenha tomado todo o cuidado durante a compilação das referências, não é possível excluir a existência de erros ou omissões, pelos quais o EPO não assume nenhuma responsabilidade.

Patentes de invenção citadas na descrição us 6013500 A [0004] us 20030171357 A [0006] [0160] wo 0212242 A [0006] [0160] wo 2005030776 A [0006] wo 2004056827 A [0006] wo 0038715 A [0098] wo 0038716 A [0098] wo 0038717 A [0098] wo 0038718 A [0098] wo 0038719 A [0098] wo 0038730 A [0098] wo 0038665 A [0098] wo 0037107 A [0098] wo 0038786 A [0098] EP 239362 A [0099] wo 9633172 A [0100] wo 9627583 A [0100] EP 97304971 . A [0100] EP 99308617 ' A [0100] wo 9807697 A [0100] 290 wo 9803516 A [0100] wo 9834918 A [0100] wo 9834915 A [0100] wo 9833768 A [0100] wo 9830566 A [0100] EP 606046 ^ A [0100] EP 931788 ; A [0100] WO 9005719 A [0100] WO 9952910 A [0100] WO 9952889 A [0100] WO 9929667 A [0100] wo IB9801113 W [0100] EP 99302232 A [0100] GB 9912961 A [0100] US 60148464 B [0100] US 5863949 A [0100] US 5861510 A [0100] EP 780386 ; A [0100] WO 9519970 A [0103] [0105] WO 9814451 A [0103] WO 9802434 A [0103] [0105] US 5747498 A [0103] WO 9924440 A [0104] WO IB99007 97 W [0104] wo 9521613 A [0104] wo 9961422 A [0104] US 5834504 A [0104] wo 9850356 A [0104] US 5883113 A [0104] US 5886020 A [0104] US 5792783 A [0104] 291 wo 9910349 A [0104] wo 9732856 A [0104] wo 9722596 A [0104] wo 9854093 A [0104] wo 9802438 A [0104] wo 9916755 A [0104] wo 9802437 A [0104] wo 9935146 A [0105] wo 9935132 A [0105] wo 9713760 A [0105] us 5587458 A [0105] us 5877305 A [0105] us 60117341 B [0105] us 60117348 B [0105] us 09221946 B [0106] us 09454058 B [0106] us 09501163 B [0106] us 09539930 B [0106] us 09202796 B [0106] us 09384339 B [0106] us 09383755 B [0106] us 60168207 B [0106] us 60170119 B [0106] us 60177718 B [0106] us 60168217 B [0106] us 60200834 B [0106] us 60113647 B [0107] us 6106864 A [0207] wo 0035298 A [0207] wo 9111172 A [0228] wo 9402518 A [0228] [0105] 292 • WO 9855148 A [0228] • WO 2004085414 A, Tanis [0245] • WO 2004085058 A [0245] • WO 2004022567 A [0245] • JP 44027218 B [0304] [0307]

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Claims

1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula estrutural III,

R® / CH m em que: o símbolo B representa -0; o símbolo R1 representa um grupo seleccionado entre alquilo (Ci-Cs) , heterociclilo com 3 a 10 membros e o símbolo R1 é ainda facultativamente substituído com 1 a 6 grupos seleccionados entre -halogeneto, -hidroxilo, -CN, alquilo (C1-C3) , perfluoroalquilo (C1-C3) , alcoxilo (C1-C3) , NH2, - (alquil (C1-C3)-amino) ; cada um dos símbolos R1 representa metilo e o símbolo R2 representa metilo, o símbolo R8 representa um grupo seleccionado entre -CH2-N- (CH3) 2, -CH2-NH-CH3 e -CH2-NH2 e o símbolo R9 representa fenilo, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

1 Composto de acordo com a reivindicação 1 seleccionado 2 entre o conjunto constituído por 2

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 seleccionado entre o conjunto constituído por

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

4. Composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e um veículo farmaceuticamente aceitável. 3

5. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para utilização como medicamento.

6. Compostos de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal f armaceuticamente aceitável, para utilização no tratamento do crescimento anormal de células num mamifero.

7. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para a produção de um medicamento para o tratamento do crescimento anormal de células num mamifero.

8. Combinação de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, com uma ou mais substâncias seleccionadas entre agentes anti-tumor, agentes anti-angiogénese, inibidores da transdução de sinal e agentes anti-proliferativos, para utilização no tratamento do crescimento anormal de células num mamifero.