PT1047428E

PT1047428E - Utilização de morfolinol no tratamento da disfunção sexual

Info

Publication number: PT1047428E
Application number: PT99903200T
Authority: PT
Inventors: David Lee Musso; Phillip Frederick Morgan; John Joseph Partridge
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 1998-01-21
Filing date: 1999-01-20
Publication date: 2007-09-07
Also published as: EP1047428B1; US20020019396A1; SK10912000A3; EP1047428A4; DE69936335T2; CN1294513A; ID26334A; KR100568063B1; NO326878B1; NZ529316A; DE69936335D1; EP1047428A1; AP2000001869A0; EA002410B1; NZ520349A; CY1106828T1; EE200000438A; PL342012A1; HUP0100900A3; IL161942A0

Description

ΡΕ1047428 1 DESCRIÇÃO "UTILIZAÇÃO DE MORFOLINOL NO TRATAMENTO DA DISFUNÇÃO SEXUAL"

Esta invenção relaciona-se com a utilização de um morfolinol opticamente puro, seus sais e solvatos, para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento da disfunção sexual.

Fundamento da Invenção 0 cloridrato de bupropiona, cloridrato de (+/-)-1-(3-clorofenil)-2-[(1,1-dimetiletil)-amino]-1-propanona, é a substância activa de Wellbutrin® que está comercializado nos Estados Unidos da América para o tratamento da depressão. É também a substância activa de Zyban® que está comercializado nos Estados Unidos da América como um auxiliar da cessação tabágica. A bupropiona é um inibidor relativamente fraco da captação neuronal da noradrenalina (NA) , serotonina e dopamina (DA) e não inibe a monoaminoxidase. Uma vez que o mecanismo de acção da bupropiona, como o de outros anti-depressivos, é desconhecido, presume-se que esta acção seja mediada por mecanismos noradrenérgicos e/ou dopaminérgicos. As provas disponíveis sugerem que Wellbutrin® é um inibidor selectivo da noradrenalina (NA) em doses que profetizam a actividade antidepressiva em 2 ΡΕ1047428 modelos animais. Ver Ascher, J.A., et al., Bupropion: A Review of its Mechanism of Antidepressant Activity. Journal of Clinicai Psychiatry, 56: p. 395-401,1995.

Cl

A bupropiona é extensamente metabolizada no ser humano, bem como, nos animais de laboratório. Os metabo-litos urinários e plasmáticos incluem produtos de bio-transformação formados por via de hidroxilação do grupo terc-butilo e/ou redução do grupo carbonilo da bupropiona. Têm sido identificados quatro metabolitos principais. São eritro-amino e treo-amino álcoois da bupropiona, o eritro-amino diol da bupropiona, e um metabolito morfolinol. Estes metabolitos da bupropiona são farmacologicamente activos mas as suas potência e toxicidade relativamente à bupropiona não têm sido bem caracterizadas. Podem ter importância clinica devido ao facto das concentrações plasmáticas dos metabolitos serem superiores às da bupropiona. 3 ΡΕ1047428

Pensa-se que o metabolito morfolinol, cloridrato de (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-clorofenil)-3,5,5-trimetil-2-morfo-linol seja formado a partir da hidroxilação do grupo terc-butilo da bupropiona.

Cl

Metabolito Morfolinol de Bupropiona HC1

No Biomed. Chromatogr. (1997), 11 (3), 174-179 (Suckow, R. F et al) Pretende descrever-se a separação e quantificação dos enantiómeros individuais do metabolito morfolinol racémico (+/-)-(2RS,3RS), bem como o facto das amostras plasmáticas conterem o enantiómero (-) numa extensão de cerca de 96% do total desse metabolito. No entanto, é extremamente limitada a caracterização química dos enantiómeros individuais e não é fornecida qualquer informação a respeito das características farmacológicas de cada enantiómero e da sua subsequente relevância clínica.

Sumário da Invenção

Surpreendentemente tem sido observado que apesar da forma (-) do metabolito morfolinol ser significa- 4 ΡΕ1047428 tivamente predominante nas amostras plasmáticas no ser humano, é no enantiómero (+), (+)-(2S,3S)-2-(3-clorofenil)-3,5,5-trimetil-2-morfolinol, que reside a actividade.

Deste modo, num aspecto, a presente invenção proporciona o composto da fórmula (I), (+)-(2S,3S)-2-(3-cloro-fenil)-3,5,5-trimetil-2-morfolinol ou um seu sal ou solvato farmaceuticamente aceitáveis para a preparação de um medicamento para o tratamento da disfunção sexual num ser humano ou num animal.

Enantiómero (+) Cl

Esses sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a preparados a partir dos seguintes ácidos: clorídrico, hidrobrómico, sulfúrico, nítrico, fosfórico, salicílico, p-toluenossulfónico, tartárico, cítrico, metanossulfónico, maleico, fórmico, malónico, succí-nico, isetiónico, lactobiónico, naftaleno-2-sulfónico, sul-fâmico, etanossulfónico e benzenossulfónico. É especialmente preferido o sal do cloridrato de um composto de fórmula (I). 5 ΡΕ1047428

Descrição Detalhada da Invenção 0 composto de fórmula (I) ou os seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados pela sintetização inicial do racemato do metabolito morfo-linol da bupropiona e separação subsequente por via HPLC dos enantiómeros (+) e (-) do racemato. 0 racemato do metabolito morfolinol do cloridrato de bupropiona (cloridrato de (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-cloro-fenil)-3,5,5-trimetil-2-morfolinol) pode ser sintetizado através do seguinte processo. Foi adicionada uma solução de dibrometo de dioxano (14,9 g, 0,06 moles) em dioxano (50 mL) a 3'-cloropropiofenona (10,0 g, 0,06 moles) em dioxano (50 mL) . A mistura reaccional foi agitada durante 2 h à temperatura ambiente e vertida numa mistura de gelo e água (500 mL) . A mistura foi extraída por diversas vezes com cloreto de metileno. Os extractos combinados foram secos (Na2S04) e concentrados a vácuo para dar 14,8 g de 2-bromo-3'-cloropropiofenona (85%) como um óleo amarelo pálido. Este foi utilizado sem purificação adicional. NMR (300MHz, CDC13) ; δ 7,99 (m,1H), 7,90 (d,lH), 7,57 (d,lH), 7,44 (t,lH), 5,22 (q,1H), 1,91 (t,3H) .

Foi adicionada, gota-a-gota, uma solução de 2-amino-2-metil-l-propanol (27,8 g, 0,31 moles) em metanol (200 mL) a uma solução de 2-bromo-3'-cloropropiofenona (19,3 g, 0,08 moles) em Metanol (100 mL) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada durante 18 h e concentrada 6 ΡΕ1047428 a vácuo. O resíduo foi repartido entre água e éter dietí-lico. A fase orgânica combinada foi extraída com solução aquosa de ácido clorídrico a 10%. Os extractos ácidos aquosos combinados foram arrefecidos em banho de gelo e tornados básicos com solução aquosa de hidróxido de sódio a 40%. A mistura foi extraída com éter dietílico, os extractos combinados de éter dietílico foram lavados com água e solução saturada de cloreto de sódio, secos (K2CO3) e concentrados a vácuo para dar 15,0 g de (+/-)-(2R*,3R*) -2-(3-cloropenil)-3, 5,5-trimetil-2-morfolinol (75%) como um sólido quase branco. O (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-clorofenil)-3,5,5-trime-til-2-morfolinol pode ser convertido em cloridrato de (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-clorofenil)-3,5-trimetil-2-morfolinol através do seguinte processo. Foi dissolvida uma amostra de 6,0 g em éter metílico, arrefecida num banho de gelo e foi adicionado ácido clorídrico etérico até a mistura se tornar ácida. O sólido resultante foi filtrado e recristalizado a partir da mistura de etanol/éter dietílico/ ácido clorídrico etérico para dar 4,93 g de cloridrato de (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-clorofenil)-3,5,5-trimetil-2-morfolinol como um sólido branco: p.f. 202-203°C. NMR (80Mhz, DMSO-d6); δ 10,9 (br, 1H), 8,85 (br, 1H), 7,60-7,41 (m, 5H), 4,04 (d, 1H), 3,50 (d, 1H), 3,37 (br s, 1H), 1,58 (s, 3H), 1,34 (s, 3H) , 1,03 (d, 3H) . Anal. Cale. para C13H19CI2NO2: C, 53, 43; H, 6,55; N, 4,79. Encontrada: C, 53,54; H, 6,58; N, 4,75. O cloridrato de (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-clorofenil)- 7 ΡΕ1047428 3.5.5- trimetil-2-morfolinol pode voltar a ser convertido na sua base livre através do seguinte processo. Uma amostra de 3,0 g de cloridrato de (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-clorofenil)- 3.5.5- trimetil-2-morfolinol foi dissolvida em água (100 mL) e foi adicionado éter dietilico (200 mL) . A mistura foi arrefecida num banho de gelo e o pH foi ajustado a > 10 com solução aquosa de hidróxido de sódio 1,0 N. Após agitação durante 30 min., as fases foram separadas e a fase aquosa foi extraída com éter dietilico. Os extractos combinados de éter dietilico foram secos (Na2S04) e concentrados a vácuo para dar 2,6 g de (+/-)-(2R*,3k*)-2-(3-clorofenil)-3,5, 5-trimetil-2-morfolinol como um sólido branco. Este foi utilizado sem purificação adicional na cromatografia quiral descrita seguidamente.

Os enantiómeros ( + ) e (-) de (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-clorofenil)-3,5,5-trimetil-2-morfolinol podem ser separados através do seguinte processo. Foi dissolvido (+/-)-(2R*, 3R*)-2-(3-clorofenil)-3,5,5-trimetil-2-morfoli-nol (2,54 g) em 250 mL de Álcool isopropílico:Hexano, 2:8 (ambos de pureza para HPLC). Uma coluna OD Daicel Chiralcel de (2 x 25 cm) foi equilibrada durante uma hora a 8 mL/min num solvente de eluição, Isopropanol:Hexano:Dietilamina, 1:9:0,2. Foram injectadas alíquotas de 1 mL da solução de (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-clorofenil)-3,5,5-trimetil-2-morfo-linol através de um Prep. LC 2000 Waters automático, utilizando uma bomba de injecção Waters 510 EF. Cada percurso foi de 15 minutos em comprimento, utilizando as condições listadas anteriormente. Os isómeros opticamente separados ΡΕ1047428 foram recolhidos através do colector de fracção (Waters) a uns 2% acima do limiar da linha de base, baseado na escala completa de 2 unidades de absorvância a 240 nm (detector UV 490E Waters). Cada solução de isómero óptico foi evaporada num evaporador rotativo a 40 graus Centígrados e vácuo por aspiração. Após secagem durante 6 horas sob um vácuo elevado à temperatura ambiente, o isómero óptico 1 pesava 1,25 g e o isómero óptico 2 pesava 1,26 g. A pureza do enantiómero de cada isómero foi dosea-da analiticamente por cromatografia quiral por HPLC num HPLC 860 Waters com detector array por fotodíodos 996, utilizando uma coluna OD-H Daicel Chiralcel (4,6 x 250 mm.) eluída com Álcool isopropílico:Hexano:Dietilamina, 1:9:0,2 a 1 mL/min. O isómero óptico 1 era 100% puro (T.R. 6,117 min.). O isómero óptico 2 era 99,19% puro (T.R. 6,800 min.), contendo 0,81% de isómero óptico 1 (T.R. 6,133 min.).

Os sais de cloridrato dos enantiómeros separados foram obtidos através dos seguintes processos. Foram dissolvidos 1,25 g (0,005 moles) do isómero óptico 1 (tempo de retenção 6,117 min) ((-)-(2R,3R)-2-(3-clorofenil)-3, 5, 5-trimetil-2-morfolinol) em éter dietílico. A solução foi filtrada e o filtrado foi arrefecido num banho de gelo adicionado de ácido clorídrico etérico até a solução se tornar ácida. Após repouso à temperatura ambiente durante 24 h, O sólido resultante foi filtrado, lavado com éter dietílico e seco numa estufa de vácuo a 60°C durante 18 h para dar 1,32 g de cloridrato de ( —) — (2R, 3R) —2— (3— 9 ΡΕ1047428 clorofenil)-3,5,5-trimetil-2-morfolinol (90%) como um sólido branco: pf. 208-209°C. NMR (300MHz, DMSO-d6); δ 9,72 (br, 1H), 8,76 (br, 1H) , 7,54-7,41 (m, 5H) , 3,98 (d, 1H) , 3,52 (d, 1H), 3,37 (br s,lH), 1,53 (s, 3H) , 1,29 (s, 3H) , 0,97 (d, 3H), Anal. Cale. para C13H19CI2NO2: C, 53,43; H, 6,55; N, 4,79. Encontrada: C, 53,35; H, 6,57; N, 4,71.

[α]ϋ°Βε = -33,2° (0,67, EtOH a 95%).

Foram dissolvidos 1,26 g (0,005 moles) do isómero óptico 2 (tempo de retenção 6, 800 min.) ( + )-(2S,3S)-2-(3-clorofenil)-3,5,5-trimetil-2-mofolinol) em éter dietílico. A solução foi filtrada e o filtrado foi arrefecido em banho de gelo adicionado de ácido clorídrico etérico até a solução se tornar ácida. Após repouso à temperatura ambiente durante 24 h, o sólido resultante foi filtrado, lavado com éter dietilico e seco numa estufa de vácuo a 60°C durante 18 h para dar 1,36 g do cloridrato ( + )-(2S,3S)-2- (3-clorofenil)-3,5,5-trimetil-2-morfolinol (93%) como um sólido branco: pf. 208-209°C. NMR (300Mhz,DMSO-d6) ; δ 9,87 (br, 1H) , 8,76 (br, 1H) , 7,54-7,41 (m, 5H), 3,99 (d, 1H) , 3,51 (d, 1H), 3,37 (br s, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,30 (s, 3H) , 0,98 (d, 3H) . Anal. Cale. para C13H19CI2ONO2: C, 53, 43; H, 6,55; N, 4,79. Encontrada: C, 53,51; H, 6,58; N, 4,73. Mo0*0 = +31,9° (0,64, EtOH a 95%). A configuração absoluta de ( + )-(2S,3S)-2-(3-clorofenil)-3, 5, 5-trimetil-2-morfolinol foi determinada através do seguinte método de cristalografia por raio X. Os Resultados cristalográficos: C13H18CI2NO2, M=291, Ortorrô- 10 ΡΕ1047428 mbico, grupo espacial P2i2i2i, a = 8,7348(6), b 14, 9824(10), c = 23, 1605 (15) Ã, V=3031(4)Â3, Z= 8, Dc= 1,276 Mgrrf3, F (000) = 1226, 95. Em 12224 reflexões medidas. 3764 foram originais e 2 318 que tinham I > 3,0σ(Ι) foram utilizadas em cálculos posteriormente. Os resultados foram recolhidos num difractómetro SMART Siemens utilizando varrimentos omega e radiação monocromada ΜοΚα (λ = 0,71073 Â). As posições de todos os átomos que não eram hidrogénio foram determinadas através de métodos directos e anisotro-picamente refinados. Todas as posições de hidrogénio foram localizadas em sinteses diferentes e incluídas em ciclos de refinamento subsequentes utilizando um modelo de compressão e um comprimento idealizado de ligação de 0,96 Â. A configuração absoluta foi determinada pelo refinamento dos parâmetros de Rogers e confirmado através de uma análise das 185 melhores diferenças de intensidade Bijvoet que indicaram uma probabilidade de 0,006 de que o modelo estava errado. O refinamento por mínimos quadrados minimizou Ew(AF)2 com pesos baseado na estatística de contagem. Os intervenientes finais acordados foram Rf = 0,064 (0,108 para todos os resultados), Rw = 0,068 (0,081 para todos os resultados), e GoF= 1,93. As referências incluídas foram E.J. Gabe, Y. Le Page, J.-P. Charland, F.L. Lee and P.S. White, Journal of Applied Crystallography, 22, 384-387 (1989) e D. Rogers, Acta Crystallographica, A37, 734-741,1981. A quantidade requerida do composto de fórmula (I) para se obter o efeito terapêutico desejado, dependerá 11 ΡΕ1047428 concerteza de um certo número de factores, por exemplo, da via de administração, do destinatário e da patologia a ser tratada. De um modo geral, a dose diária estará na gama de 0,02 a 5,0 mg/kg. Mais particularmente incluem as gamas de 0,02 a 2,5 mg/kg, 0,02 a 1,0 mg/kg, 0,02 a 0,25 mg/kg, 0,02 a 0,15 mg/kg e 0,02 a 0,07 mg/kg. O composto de fórmula (I) é administrado preferencialmente com um ou mais veículos, diluentes ou exci-pientes farmaceuticamente aceitáveis na forma de uma formulação farmacêutica. Os veículos, diluentes e exci-pientes, têm certamente que ser aceitáveis no sentido de serem compatíveis com os outros ingredientes da formulação e não podem ser deletérios para o destinatário. O veículo pode ser um sólido ou um líquido, ou ambas as coisas e formulado preferencialmente com o agente como uma formulação de dose unitária, por exemplo, um comprimido.

As formulações incluem as adequadas para administração oral, rectal, uso tópico, administração bucal (e.g. sub-lingual) e administração parentérica (e.g. subcutânea, intramuscular, intradérmica ou intravenosa).

As formulações adequadas para administração bucal (sub-lingual) incluem pastilhas compreendendo um composto de fórmula (I) numa base aromatizada, habitualmente sacarose e acácia ou goma adragante e pastilhas moles compreendendo o agente numa base inerte tal como gelatina e glicerina ou sacarose e acácia. 12 ΡΕ1047428

As formulações da presente invenção convenientemente adequadas para administração parentérica compreendem preparações aquosas estéreis de um composto de fórmula (I), preferencialmente isotónicas com o sangue do destinatário a quem serão administradas. Estas preparações são preferencialmente administradas intravenosamente, no entanto, a administração pode também ser efectuada por meio de injecções subcutâneas, intramusculares ou intradérmicas. Tais preparações podem ser convenientemente preparadas por mistura do agente com água e esterilizar a mistura resultante e torná-la isotónica com o sangue.

As formulações adequadas para administração rectal são preferencialmente apresentadas em supositórios de dose unitária. Estes podem ser preparados por mistura de um composto de fórmula (I) com um ou mais veículos sólidos convencionais, por exemplo, manteiga de cacau, seguido da moldagem da mistura resultante.

As formulações adequadas para aplicação tópica na pele tomam preferencialmente a forma de uma pomada, creme, loção, pasta, gel, preparação para pulverização, penso transdérmico, aerossol, ou óleo. Os veículos que podem ser utilizados incluem vaselina, lanolina, polietilenglicóis, álcoois, e suas associações de dois ou mais veículos.

Deve ser entendido que em associação com os ingredientes anteriormente mencionados em particular, as 13 ΡΕ1047428 formulações podem incluir outros agentes convencionalmente utilizados na técnica relacionada com o tipo de formulação em questão. A actividade biológica do composto de fórmula (I) foi demonstrada através de modelos de captação in vitro e modelo de depressão comportamental induzida por tetrabena-zina. O metabolito morfolinol racémico, (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-clorofenil)-3,5,5-trimetil-2-morfolinol, está aqui referido como "Racemato". A forma (-) do metabolito morfolinol é (-)-(2R,3R)-2-(3-clorofenil)-3,5,5-trimetil-2-morfolinol ou seus sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis e está referida aqui como um composto de fórmula (II):

Ensaio de captação sinaptossomal in vitro. Foi determinada a captação in vitro, conforme anteriormente reportado, utilizando sinaptossomas preparadas a partir do caudoputâmen do rato (para a captação da dopamina) e hipo-tálamo (para a captação da NA e serotonina) utilizando respectivamente, [3H]dopamina, [3H]NA e [3H]serotonina como substratos de transporte. Ver Eckhardt, S.B., r.a. Maxwell, 14 ΡΕ1047428 and R.M. Ferris, A Structure-Activity Study of the Transport Sites for the Hypothalamic and Striatal Catecholamine Uptake Systems. Similarities and differences. Molecular Pharmacology, 21: p.374-9,1982.

As sinaptossomas para utilização na obtenção dos resultados de captação In vitro foram preparadas a partir do hipotálamo ou tecido estriado por homogeneização suave do tecido num tampão de sacarose a 0,3 M/ Tris a 25 mM a pH 7,4 contendo fosfato de iproniazida para inibir a mono-aminoxidase. O homogeneizado foi centrifugado a 1100 x g a 4°C durante 10 min. e o sobrenadante foi utilizado para os estudos de captação. O sobrenadante (- 1 mg de proteína de tecido) foi incubado com concentrações Km de [3H]noradre-nalina, [3H]dopamina ou [3H]serotonina a 37°C durante 5 minutos num tampão de Krebs-Henseleit modificado (NaCl a 118 mM, KC1 a 5 mM, NaHC03 a 25 mM, NaH2P04 a 1,2 mM, MgS04 a 1,2 mM, Dextrose a 11 mM, CaCl2 a 2,5 mM) na ausência e na presença do fármaco. Sob estas condições a captação é linear quer relativamente ao substrato quer relativamente ao tecido (com um total de substrato transportado < 5%). A captação a 0°C não foi definida como a captação não-específica. O [3H]substrato, que tinha sido transportado para as sinaptossomas foi separado do [3H]substrato livre por filtração sobre filtros GF/B e lavado com tampão de Krebs-Henseleit arrefecido. Os filtros foram contados para trítio num espectrómetro de cintilação líquida.

Os resultados da captação sinaptossomal in vitro 15 ΡΕ1047428 são apresentados na Tabela 1. Entre os 2 enantiómeros do metabolito morfolinol de bupropiona, o enantiómero ( + ), o composto de fórmula (I), inibiu a captação da noradrenalina (NA) num valor de CI50 de 2,2 μΜ. Pelo contrário, o enantiómero (-) foi inactivado a uma concentração de 30 μΜ. Na captação da dopamina (DA), o composto de fórmula (I) teve um CI5o de ~10 μΜ enquanto o enantiómero (-) foi inactivado a 30 μΜ. Nenhum dos compostos inibiu a captação da serotonina a 30 μΜ.

Em comparação, o Wellbutrin® foi equipotente para a inibição da captação da DA e noradrenalina com valores de CI50 de 1,9 e 2,2 μΜ, e não inibiu a captação da serotonina a 30 μΜ. A imipramina (um antidepressivo triciclico não especifico) inibiu a captação da NA e a captação da serotonina com valores de CI5o, respectivamente de 0,072 μΜ e 0,24 μΜ. O composto de fórmula (I) foi aproximadamente duas vezes mais potente do que o Wellbutrin® como um inibidor da NA mas, ao contrário do último, foi aproximadamente 10 vezes menos potente do que um inibidor de captação da dopamina. Estes resultados são consistentes com as acções noradrenérgicas do Wellbutrin® e do metabolito morfolinol racémico da bupropiona observadas; nas suas res-pectivas doses anti-TBZ, o cloridrato de (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-clorofenil)-3,5,5-trimetil-2-morfolinol, (306U73) in vivo, (Cooper, B.R., et al, Neuropsychopharmacology, 11:p.133-41,1994). Os resultados comportamentais e electro- 16 ΡΕ1047428 são fisiológicos sugerem que os efeitos de Wellbutrin® mediados por um mecanismo noradrenérgico (ibid.).

Tabela 1

Efeitos sobre a captação in vitro

Captação da [H3]Dopamina

Composto CI50 (μΜ) SEM Bupropiona 1,9 0,15 Fórmula (I) 9,3 0,41 Fórmula (II) >10 0 Captação da [H3]Noradrenalina Composto CI50 (μΜ) SEM Bupropiona 2,2 0,7 Fórmula (I) 1,1 0,07 Fórmula (II) >30 Imipramina 0,072 0,020 Captação da [H3] Serotonina Composto CI50 (μΜ) SEM Bupropiona >30 Fórmula (I) >30 Fórmula (II) >10 0 Imipramina 0,24 0,03

Lisboa, 28 de Agosto de 2007