KR100568063B1

KR100568063B1 - 제약상 활성인 모르폴리놀

Info

Publication number: KR100568063B1
Application number: KR1020007007996A
Authority: KR
Inventors: 필립 프레데릭 모건; 데이빗 리 무소; 존 조셉 파트리지
Original assignee: 글락소 그룹 리미티드
Priority date: 1998-01-21
Filing date: 1999-01-20
Publication date: 2006-04-07
Also published as: US6274579B1; PL193622B1; CN1203858C; NO20003721L; WO1999037305A1; EP1047428A4; ES2288012T3; ID26334A; IS2494B; PL342012A1; CY1106828T1; HRP20051024A2; NZ520349A; DE69936335T2; US20020019396A1; IS5568A; IL161942A0; NO20003721D0; US6391875B2; NZ529316A

Abstract

본 발명은 (+)-(2S,3S)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염 및 용매화물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 화합물, 염, 용매화물 또는 조성물을 사용하여 우울증, 주의 결함 활동항진 장애 (ADHD), 비만, 편두통, 동통, 성기능장애, 파킨슨씨 질환, 알츠하이머 질환 또는 코카인 또는 니코틴 함유 (특히, 담배) 제품 중독을 치료하는 방법에 관한 것이다.

(+)-(2S,3S)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀

Description

제약상 활성인 모르폴리놀 {Pharmaceutically Active Morpholinol}

본 발명은 광학적으로 순수한 모르폴리놀, 그의 염 및 용매화물, 이들을 함유하는 제약 제형 및 이들의 제조 방법 및 용도에 관한 것이다.

부프로피온 염산염, (±)-1-(3-클로로페닐)-2-[(1,1-디메틸에틸)-아미노]-1-프로파논 염산염은 우울증 치료용으로 미국에서 시판중인 웰부트린 (Wellbutrin, 등록상표)의 활성 성분이다. 또한, 금연 보조제로 미국에서 시판중인 지반 (Zyban, 등록상표)의 활성 성분이다. 부프로피온은 노르아드레날린 (NA), 세로토닌 및 도파민 (DA)의 뉴런 흡수에 대한 비교적 약한 억제제이고, 모노아민 옥시다제는 억제하지 않는다. 다른 항우울제와 같이 부프로피온의 작용 메카니즘은 공지되어 있지 않지만, 이와 같은 활성이 노르아드레날린 및(또는) 도파민에 의한 메카니즘에 의해 매개되는 것으로 추측된다. 입수가능한 증거들은 웰부트린 (등록상표)이 동물 모델에서 항우울제 활성을 나타내는 복용량에서 노르아드레날린 (NA)의 선택적 억제제임을 시사하고 있다. 아셔 (Ascher, J.A.) 등의 문헌[Bupropion: A Review of its Mechanism of Antidepressant Activity. Journal of Clinical Psychiatry, 56: p. 395-401, 1995]을 참조한다.

부프로피온은 사람 뿐만 아니라 실험 동물에 있어서 광범위하게 신진 대사된다. 비뇨기 및 혈장 대사물에는 부프로피온의 3급 부틸기의 히드록실화 및(또는) 카르보닐기의 환원을 통해 형성된 생변환 생성물이 포함된다. 4종의 기본 대사물이 확인되었다. 이들은 부프로피온의 에리트로- 및 트레오-아미노 알콜, 부프로피온의 에리트로-아미노 디올 및 모르폴리놀 대사물이다. 브프로피온의 이와 같은 대사물은 약물학적으로 활성이지만, 부프로피온에 비한 이들의 효능 및 독성은 완전히 밝혀지지 않았다. 대사물의 혈장 농도가 부프로피온보다 높기 때문에, 이들은 임상학적으로 중요할 수 있다.

모르폴리놀 대사물인 (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 염산염은 부프로피온의 3급 부틸기의 히드록실화에 의해 형성되는 것으로 보인다.

문헌[Biomed. Chromatogr. (1997), 11(3), 174-179 (수코우 (Suckow, R.F.)등)]에 (+/-)-(2RS,3RS) 라세미 모르폴리놀 대사물의 개별 에난티오머의 분리 및 정량에 관해 개시하려 했을 뿐만 아니라, 혈장 샘플이 이와 같은 대사물 전체의 약 96% 정도로 (-)-에난티오머를 함유한다는 사실이 개시되어 있다. 그러나, 개별 에난티오머의 화학적 특성 규명은 극히 제한적이며, 각 에난티오머에 대한 약물학적 특성 및 그의 후속 임상학적 타당성에 관한 어떠한 정보도 주어지지 않고 있다.

<발명의 요약>

현재 놀랍게도 모르폴리놀 대사물의 (-) 형태가 사람의 혈장 샘플에서 현저하게 우세함에도 불구하고, 활성이 존재하는 것은 (+)-에난티오머인 (+)-(2S,3S)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀이라는 것이 밝혀졌다.

따라서, 본 발명은 한 측면에서 화학식 (I)의 화합물 (+)-(2S,3S)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀, 및 제약상 허용되는 염 및 용매화물을 제공한다.

이와 같은 제약상 허용되는 염에는 하기 산으로 제조된 것들이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다 : 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산, 살리실산, p-톨루엔술폰산, 타르타르산, 시트르산, 메탄술폰산, 말레산, 포름산, 말론산, 숙신산, 이세티온산, 락토비온산, 나프탈렌-2-술폰산, 술팜산, 에탄술폰산 및 벤젠술폰산. 화학식 (I)의 염산염이 특히 바람직하다.

본 발명의 또다른 측면은 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 용매화물과 함께 하나 이상의 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물이다.

본 발명의 또다른 측면은 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 용매화물의 치료상 용도이다.

본 발명의 또다른 측면은 유효량의 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 용매화물 또는 이들의 제약 조성물을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 사람 및 동물 환자에 있어서 우울증, 주의 결함 활동항진 장애 (ADHD), 비만, 편두통, 동통, 성기능장애, 파킨슨씨 질환, 알츠하이머 질환 또는 코카인 또는 니코틴 함유 (특히, 담배) 제품 중독을 치료하기 위한 방법을 제공한다.

본 발명의 또다른 측면은 우울증, 주의 결함 활동항진 장애 (ADHD), 비만, 편두통, 동통, 성기능장애, 파킨슨씨 질환, 알츠하이머 질환, 코카인 또는 니코틴 함유 (특히, 담배) 제품 중독을 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서 화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 용매화물 또는 이들의 제약 조성물의 용도이다.

도 1은 TBZ-유도된 우울증에 대한 25 mg/kg (ip)에서의 화합물의 효과를 나타낸다.

도 2는 TBZ-유도된 우울증에 대한 화학식 (I)의 화합물의 복용량 반응을 나타낸다 (TBZ 30분 전에 화합물을 투여, 숫놈, CD-1 마우스, 복강내 투여, n = 6).

도 3은 TBZ-유도된 우울증에 대한 화학식 (II)의 화합물의 복용량 반응을 나타낸다 (TBZ 30분 전에 화합물을 투여, 숫놈, CD-1 마우스, 복강내 투여, n = 6).

<발명의 상세한 설명>

화학식 (I)의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 용매화물은 우선 부프로피온의 모르폴리놀 대사물의 라세메이트를 합성한 후, HPLC를 통해 (+) 및 (-)-에난티오머를 분리함으로써 제조될 수 있다.

부프로피온 염산염의 모르폴리놀 대사물 ((+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 염산염)의 라세메이트는 하기 공정으로 합성될 수 있다. 디옥산 (50 ㎖) 중 3'-클로로프로피오페논 (10.0 g, 0.06 mol)에 디옥산 (50 ㎖) 중 디옥산 디브로마이드 (14.9 g, 0.06 mol)의 용액을 가했다. 반응 혼합물을 2시간 동안 주위 온도에서 교반하고 얼음과 물의 혼합물 (500 ㎖)에 부었다. 혼합물을 메틸렌 클로라이드로 수회 추출하였다. 합한 추출물을 건조하고 (Na₂SO₄) 진공중에서 농축시켜 14.8 g (85%)의 2-브로모-3'-클로로프로피오페논을 담황색 오일로 얻었다. 이를 추가로 정제하지 않고 사용하였다. NMR (300MHz, CDCl₃): δ7.99 (m,1H), 7.90 (d,1H), 7.57 (d,1H), 7.44 (t,1H), 5.22 (q,1H), 1.91 (t,3H).

MeOH (100 ㎖) 중 2-브로모-3'-클로로프로피오페논 (19.3 g, 0.08 mol)의 용액에 메탄올 (200 ㎖) 중 2-아미노-2-메틸-1-프로판올 (27.8 g, 0.31 mol)의 용액을 주위 온도에서 적가하였다. 혼합물을 18시간 동안 교반하고, 진공중에서 농축시켰다. 잔류물을 물과 디에틸 에테르 사이에 분배하였다. 합한 유기상을 10% 염산 수용액으로 추출하였다. 합한 수성산 추출물을 아이스 배스에서 냉각시키고, 40% 수성 수산화 나트륨으로 염기성화하였다. 혼합물을 디에틸 에테르로 추출하고, 합한 디에틸 에테르 추출물을 물 및 염화 나트륨 포화 용액으로 세척하고, 건조시키고 (K₂CO₃), 진공중에서 농축시켜 15.0 g (75%)의 (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀을 회백색 고체로 얻었다.

(+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀은 하기 공정에 의해 (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 염산염으로 전환될 수 있다. 6.0 g 샘플을 디에틸 에테르에 용해시키고, 아이스 배스에서 냉각시키고 염화 수소 에테르 용액을 혼합물이 산성이 될때까지 가했다. 생성된 고체를 여과하고 에탄올/디에틸 에테르/염화 수소 에테르 용액 혼합물에서 재결정하여 4.93 g의 (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 염산염을 백색 고체로 얻었다. mp = 202 - 203℃. NMR (80MHz, DMSO-d₆): δ10.9 (br,1H), 8.85 (br,1H), 7.60-7.41 (m,5H), 4.04 (d,1H), 3.50 (d,1H), 3.37 (br s,1H), 1.58 (s,3H), 1.34 (s,3H), 1.03 (d,3H). C₁₃H₁₉Cl₂NO₂에 대한 계산값 : C, 53.43; H, 6.55; N 4.79. 실제값 : C, 53.54; H, 6.58; N 4.75.

(+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 염산염은 하기 공정에 의해 유리 염기로 다시 전환될 수 있다. 3.0 g의 (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 염산염 샘플을 물 (100 ㎖)에 용해시키고, 디에틸 에테르를 가했다 (200 ㎖). 혼합물을 아이스 배스에서 냉각시키고, 1.0 N 수성 수산화 나트륨으로 pH를 > 10으로 조정하였다. 30분 동안 교반한 후, 상을 분리하고 수성상을 디에틸 에테르로 추출하였다. 합한 디에틸 에테르 추출물을 건조시키고 (Na₂SO₄) 진공중에서 농축시켜 2.6 g의 (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀을 백색 고체로 얻었다. 이를 추가 정제없이 하기 기재된 키랄 크로마토그래피에 사용하였다.

(+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀의 (+) 및 (-)의 에난티오머는 하기 공정으로 분리될 수 있다. (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 (2.54 gms.)를 250 ㎖의 2:8 이소프로필알콜:헥산 (모두 HPLC 급)에 용해시켰다. 다이셀 키랄셀 OD 칼럼 (2x25 cm)을 1시간 동안 8㎖/분으로 용출 용매 1:9:0.2 이소프로판올:헥산:디에틸아민에서 평형을 유지시켰다. (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀의 용액을 Waters 510 EF 주사용 펌프를 사용하여 자동화된 Waters Prep LC 2000에 의해 1 ㎖씩 주입하였다. 앞서 나열된 조건을 사용하여 15분의 길이로 각각 수행되었다. 분리된 광학 이성체는 분획 수집기 (Waters)에 의해 240 nm에서의 두 흡수 단위의 실제 눈금을 토대로 2% 초과의 기준선 한계치에서 수집하였다 (Waters 490E UV 검출기). 각 광학 이성체 용액을 40℃에서 회전 증발기 및 진공 흡입기상에서 증발시켰다. 6시간 동안 고진공하에 실온에서 건조시킨 후, 광학 이성체 1을 1.26 gm., 광학 이성체 2를 1.26 gm. 얻었다.

각 이성체의 에난티오머 순도는 1 ㎖/분으로 1:9:0.2 이소프로필 알콜:헥산:디에틸아민으로 용출하는 다이셀 키랄셀 OD-H 칼럼 (4.6x250 mm)을 사용하는 996 광다이오드 어레이 검출기가 부착된 Waters 860 HPLC상에서 분석용 키랄 HPLC에 의해 분석되었다. 광학 이성체 1은 100% 순수하였다 (R.T. 6.117 분). 광학 이성체 2는 99.19% 순수하였고 (R.T. 6.800 분), 0.81%의 광학 이성체 1을 함유하였다 (R.T. 6.133 분).

분리된 에난티오머의 염산염은 하기 공정에 의해서 얻어졌다. 1.25 g (0.005 mol)의 광학 이성체 1 (보유 시간 6.117 분) ((-)-(2R,3R)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀)을 디에틸 에테르에 용해시켰다. 용액을 여과하고 여과액을 아이스 배스에서 냉각시키고, 용액이 산성이 될 때까지 염화 수소 에테르 용액을 가했다. 주위 온도에서 24시간 동안 방치한 후, 생성된 고체를 여과하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 60℃에서 18시간 동안 진공 오븐에서 건조시켜 1.32 g (90%)의 (-)-(2R,3R)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 염산염을 백색 고체로 얻었다. 융점 208-209℃. NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ9.72 (br,1H), 8.76 (br,1H), 7.54-7.41 (m,5H), 3.98 (d,1H), 3.52 (d,1H), 3.37 (br s,1H), 1.53 (s,3H), 1.29 (s,3H), 0.97 (d,3H). C₁₃H₁₉Cl₂NO₂에 대한 계산값 : C, 53.43; H, 6.55; N 4.79. 실제값 : C, 53.35; H, 6.57; N 4.71.

= -33.2° (0.67, 95% EtOH)

1.26 g (0.005 mol)의 광학 이성체 2 (보유 시간 6.800 분, (+)-(2S,3S)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀)을 디에틸 에테르에 용해시켰다. 용액을 여과하고 여과액을 아이스 배스에서 냉각시키고, 용액이 산성이 될 때까지 염화 수소 에테르 용액을 가했다. 주위 온도에서 24시간 동안 방치한 후, 생성된 고체를 여과하고, 디에틸 에테르로 세척하고, 60℃에서 18시간 동안 진공 오븐에서 건조시켜 1.36 g (93%)의 (+)-(2S,3S)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 염산염을 백색 고체로 얻었다. 융점 208-209℃. NMR (300MHz, DMSO-d₆): δ9.87 (br,1H), 8.76 (br,1H), 7.54-7.41 (m,5H), 3.99 (d,1H), 3.51 (d,1H), 3.37 (br s,1H), 1.54 (s,3H), 1.30 (s,3H), 0.98 (d,3H). C₁₃H₁₉Cl₂NO₂에 대한 계산값 : C, 53.43; H, 6.55; N 4.79. 실제값 : C, 53.51; H, 6.58; N 4.73.

= +31.9° (0.64, 95% EtOH)

(+)-(2S,3S)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀의 절대 배열은 하기 x-선 결정학적 방법으로 결정되었다. 결정의 데이타: C₁₃H₁₈Cl₂NO₂, M = 291, 사방정계, 공간군 P2₁2₁2₁, a = 8.7348 (6), b = 14.9824 (10), c = 23.1605 (15) Å, V = 3031 (4) Å³, Z = 8, Dc = 1.276 Mgm^-3, F(000) = 1226.95. 12224의 반사가 측정되었다. 3764는 고유한 것이며, I > 3.0σ(I)인 2318은 후속 계산에 사용되었다. 데이타는 오메가 스캔 및 단색화된 MoKα선 (λ = 0.71073 Å)을 사용하는 Siemens SMART 회절기 상에서 수집되었다. 수소를 제외한 모든 원자의 위치는 직접 방법에 의해 측정되었고 이방적으로 정밀화하였다. 수소의 위치는 모두 합성에 따라서 상이하게 위치하고, 라이딩 (riding) 모델 및 0.96 Å의 이상적인 결합 길이를 사용하는 이후의 정밀화 주기에 포함시켰다. 절대 배열은 로저스 (Rogers') 매개변수의 정밀화에 의해 결정되고, 모델의 오류가 발생할 확률이 0.006임을 나타내는 185 최상의 비즈보엣 (Bijvoet) 세기 차이의 분석에 의해 확정된다. 최소자승 정밀화는 카운터 통계를 토대로 중량에 따른 Σw(△F)²을 최소화한다. 최종 일치 인자는 R_f = 0.064 (모든 데이타에 대하여 0.108), R_w = 0.068 (모든 데이타에 대하여 0.081) 및 GoF = 1.93이었다. 참조문헌에는 가베 (E.J. Gabe), 르 파게 (Y, Le Page), 샤랜드 (J.-P. Charland), 리 (F.L. Lee) 및 화이트 (P.S. White)의 [Journal of Applied Crystallography, 22, 384-387 (1989)] 및 로저스 (D. Rodgers)의 [Acta Crystallographica, A37, 734-741, 1981]이 포함된다.

목적하는 치료 효과를 달성하기 위해 요구되는 화학식 (I)의 화합물의 양은 물론, 예를 들면 투여 형태, 치료받을 환자 및 상태와 같은 다수의 인자에 좌우된다. 일반적으로 일일 복용량은 0.02 내지 5.0 mg/kg이다. 보다 구체적으로는 0.02 내지 2.5 mg/kg, 0.02 내지 1.0 mg/kg, 0.02 내지 0.25 mg/kg, 0.02 내지 0.15 mg/kg 및 0.02 내지 0.07 mg/kg의 범위가 포함된다.

화학식 (I)의 화합물은 그 자체로서 우울증, 주의 결함 활동항진 장애 (ADHD), 비만, 편두통, 동통, 성기능장애, 파킨슨씨 질환, 알츠하이머 질환 또는 코카인 또는 니코틴 함유 (특히, 담배) 제품 중독의 치료에 사용될 수 있지만, 바람직하게는 하나 이상의 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제와 함께 제약 제형의 형태로 제공된다. 담체, 희석제 및 부형제는 물론 제형물의 다른 성분과 상용가능한 것이 허용되며, 수용자에게 유독해서는 안된다. 담체는 고체 또는 액체 또는 둘다일 수 있고, 바람직하게는, 예를 들면 정제와 같은 단위-복용 제형물로서 작용제와 제형화된다.

제형물에는 경구, 직장, 국소, 협측 (예를 들면, 설하) 및 비경구 (예를 들면, 피하, 근육내, 피(皮)내 또는 정맥내) 투여하기에 적합한 것들이 포함된다.

협측 (설하) 투여에 적합한 제형물에는 대개 수크로오스 및 아카시아 또는 트라가간트와 같은 향미 베이스내에 화학식 (I)의 화합물을 포함하는 로젠지제 및 젤라틴 및 글리세린 또는 수크로오스 및 아카시아와 같은 불활성 베이스내에 작용제를 포함하는 트로키제가 포함된다.

비경구 투여에 적합한 본 발명의 제형물은 간편하게 화학식 (I)의 화합물의 살균된 수성 제제, 바람직하게는 의도된 수용자의 혈액과 등장인 것을 포함한다. 비록 피하, 근육내, 피내 주입에 의해서도 투여 효과가 나타나지만, 이와 같은 제제는 바람직하게는 정맥내로 투여된다. 이와 같은 제제는 간편하게 작용제를 물과 예비 혼합하고, 생성된 용액을 살균시키고, 혈액과 등장이 되게 함으로써 제조될 수 있다.

직장 투여에 적합한 제형물은 바람직하게는 단위-복용 좌약으로서 제공된다. 이는 화학식 (I)의 화합물을 하나 이상의 통상적인 고체 담체, 예를 들면 코코아 버터와 예비 혼합한 후, 생성된 혼합물을 성형함으로서 제조될 수 있다.

피부의 국소 도포에 적합한 제형물은 바람직하게는 연고, 크림, 로션, 페이스트, 젤, 스프레이, 경피 패치, 에어로졸 또는 오일의 형태이다. 사용될 수 있는 담체에는 바셀린, 라놀린, 폴리에틸렌 글리콜, 알콜 및 이들의 둘 이상의 배합물이 포함된다.

특히 상기 언급한 성분에 추가하여 제형물에는 해당 제형 유형을 고려한 당분야의 통상적인 다른 작용제가 포함될 수 있다.

화학식 (I)의 화합물의 생물학적 활성은 시험관내 흡수 모델 및 테트라벤아진-유도 행동 억제 모델에 의해 설명된다. 라세미 모르폴리놀 대사물인 (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀은 본 명세서에서 "라세메이트"로 언급된다. 모르폴리놀 대사물의 (-) 형태는 (-)-(2R,3R)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 용매화물이고, 본 명세서에 화학식 (II)의 화합물로 언급된다.

<시험관내 시냅토솜 흡수 실험>

앞서 나타낸 바와 같이, 전달 기질로서 각각 [³H]-도파민, [³H]-NA 및 [³H]-세로토닌을 사용하여 쥐의 미골내피 (도파민 흡수에 대하여) 및 시상하부 (NA 및 세로토닌 흡수에 대하여)에서 제조된 시냅토솜을 사용하여 시험관내 흡수가 측정되었다. 에카르트 (Eckhardt, S.B.), 맥스웰 (R.A. Maxwell) 및 페리스 (R.M. Ferris)의 문헌[A Structure-Activity Study of the Transfort Sites for the Hypothalamic and Striatal Catecholamine Uptake Systems. Similarities and differences. Molecular Pharmacology, 21:p. 374-9, 1982]을 참조한다.

시험관내 흡수 데이타를 얻기 위해 사용되는 시냅토솜은 모노아민 옥시다제를 억제하기 위한 이프로니아지드 포스페이트를 함유하는 0.3 M의 수크로오스/25 mM의 트리스 pH 7.4 완충액에서 조직을 서서히 균질화함으로써 시상하부 또는 선조에서 제조된다. 균질화물을 4℃에서 10분 동안 1100 x g로 원심분리하고, 상청액을 흡수 연구에 사용하였다. 상청액 (~ 1 mg의 조직 단백질)을 약물의 부재 및 존재하에 37℃에서 5분 동안 개질된 크렙스-헨셀라이트 (Krebs-Henseleit) 완충액 (118 mM NaCl, 5 mM KCl, 25 mM NaHCO₃, 1.2 mM NaH₂PO₄, 1.2 mM MgSO₄, 11 mM 덱스트로스, 2.5 mM CaCl₂) 중 [³H]-도파민, [³H]-NA 및 [³H]-세로토닌을 Km 농도로 사용하여 배양하였다. 이와 같은 조건하에서 흡수는 기질 및 조직 모두에 대하여 선형적이었다 (총 < 5%의 기질이 전달됨). 비특이적 흡수는 0℃에서의 흡수로 정의되었다. 시냅토솜으로 전달된 [³H]-기질은 GF/B 필터에서 여과하고 냉각된 크렙스-헨셀라이트 완충액으로 세척함으로써 유리 [³H]-기질과 분리하였다. 필터를 액체 섬광 분광기에서 삼중수소에 대해 계수하였다.

시험관내 시냅토솜의 흡수에 대한 데이타를 표 1에 나타낸다. 부프로피온의 모르폴리놀 대사물의 두 에난티오머 중에서 화학식 (I)의 화합물인 (+) 에난티오머는 1.1 μM의 IC₅₀으로 노르아드레날린 (NA) 흡수를 억제하였다. 이와는 대조적으로, (-) 에난티오머는 30 μM의 농도에서 비효과적이었다. 도파민 (DA) 흡수에 관해서, 화학식 (I)의 화합물은 ~10 μM의 IC₅₀을 나타내는 반면 (-) 에난티오머는 30 μM에서 비활성이었다. 어떠한 화합물도 30 μM에서 세로토닌 흡수를 억제하지 못했다.

비교를 위해서, 웰부트린 (등록상표)는 1.9 내지 2.2 μM의 IC₅₀ 값으로 DA 및 노르아드레날린 흡수를 억제하기위한 동등한 힘을 갖지만, 30 μM에서 세로토닌 흡수를 억제하지 못했다. 이미프라민 (비특이적 트리시클릭 항우울제)는 각각 0.072 내지 0.24 μM의 IC₅₀ 값으로 NA 흡수 및 세로토닌 흡수를 억제하였다.

화학식 (I)의 화합물은 NA 억제제로서 웰부트린 (등록상표)보다 대략 2배정도 효과적이지만, 웰부트린과는 달리 도파민 흡수의 억제제로서는 대략 10배정도 효과가 낮았다. 이와 같은 데이타는 생체내 개별 항-TBZ 복용량에서 웰부트린 (등록상표) 및 부프로피온의 라세미 모르폴리놀 대사물 (+/-)-(2R*,3R*)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 염산염 (306U73)의 관찰된 노르아드레날린에 의한 활성과 일치하였다 (쿠퍼 (Cooper, B.R.) 등의 문헌[Neuropsychopharmacology, 11: p. 133-41, 1994]). 행동 및 전기생리학적 데이타는 웰부트린 (등록상표)의 효과가 노르아드레날린에 의한 메카니즘 (ibid)에 의해 매개된다는 것을 제시하고 있다.

<테트라벤아진-유도 행동 억제 실험>

테트라벤아진(TBZ)-유도 행동 억제는 항우울제 활성의 생체내 척도로 사용되었다. 시험은 노르아드레날린에 의한 메카니즘을 통해 활성화되는 것으로 공지된 광범위한 항우울제에 유효하였다 (쿠퍼 등의 문헌[Animal models used in the prediction of antidepressant effects in man, J. Clin. Psychiatry 44: 63-66, 1983]). 또한, 시험은 항우울제로서 웰부트린 (등록상표)을 확인하는데 사용되었다. 간략하게, 테트라벤아진 (35 mg/kg, HCl 염으로서 각 사용시 새로 제조함)을 복강내 주사하기 30분 전에, 동물에게 후보 작용제 (경구 또는 복강내 투여)를 주사하였다. 평가는 30분 후 수행되었고, 운동 활성 (1-4 척도), 안검 하수증 (1-4 척도) 및 앞서 기재된 바와 같이 체온이 포함되었다 (쿠퍼, 하워드 (J.L. Howard) 및 소로코 (F.E. Soroko)의 문헌[Animal models used in the prediction of antidepressant effects in man, J. Clin. Psychiatry 44: 63-66, 1983]). 모든 연구에서, 평가를 수행한 과학자들은 처치에 관하여 알지 못했다. 모든 매개변수는 하기 알고리즘을 통해 "총계의" 점수 (X)를 얻기위해서 동일하게 평가되었다.

X = (1+안검 하수증 점수)/(활성 점수*[처치후 체온/대조군 체온])

테트라벤아진-유도 행동 억제 모델에 의한 결과는 하기와 같다. 생체내 25 mg/kg (복강내 투여)으로 평가된 화학식 (I)의 화합물, 라세메이트, 웰부트린 (등록상표) 및 비교를 위한 아미트립티린 모두는 테트라벤아진-유도 행동 억제를 없앴다. 대조적으로, (-) 에난티오머는 그리 높지않은 활성 (도 1)만을 나타냈다.

행동 억제의 TBZ 모델에서, 활성은 화학식 (I)의 화합물에 존재한다. TBZ를 사용하여 복용량-효과를 분석할 경우, 활성은 3 mg/kg 내지 6 mg/kg (복강내 투여)에서 급격하게 증가한다 (도 2). 비교하여, 화학식 (II)의 화합물은 복용량-관련된 활성을 나타내지 않으며, 50 mg/kg에서 동물의 상태를 악화시키는 것으로 나타났다 (도 3). 도 2 및 3에서, AMIT (5)는 5 mg/kg 복용량의 아미트립티린을 의미하고, SHAM은 약제를 전혀 투여하지 않은 동물 대조군을 의미한다.

TBZ 시험은 노르아드레날린에 의한 메카니즘을 통해 항우울제 활성을 나타내고, 화학식 (I)의 화합물은 노르아드레날린 흡수의 억제제이고, 웰부트린 (등록상표)는 생체내에서 이와 같은 모르폴리놀로 대사하기 때문에, 데이타는 웰부트린 (등록상표)의 항우울제 활성이 화학식 (I)의 화합물의 효과인 것임을 시사하고 있다 (웰치 (Welch, R.M.), 라이 (A.A. Lai), 슈뢰더 (D.H. Scheroeder)의 문헌[Pharmacological significance of the species differences in bupropion metabolism. Xenoboitica, 17: p. 287-98, 1987]).

확장하여, 웰부트린 (등록상표)의 다른 활성도 화학식 (I)의 화합물로 인한 것일 수 있다. 특히, 노르아드레날린에 의한 메카니즘은 ADHD를 치료하는데 사용되는 작용제 (예를 들면, 메틸페니데이트 및 암페타민)에 일반적이다. 금연에 대한 웰부트린 효과를 위한 분자 메카니즘이 보다 덜 알려진 반면, 카테콜아민에 의한 경로는 니코틴의 행동 강화에 참여하는 것으로 생각된다. 웰부트린 (등록상표) (및, 확장해서 화학식 (I)의 화합물)은 뇌의 시냅스로 NA 방출을 증대시킴으로써 니코틴의 활성의 일부를 의태하고, 따라서 니코틴 금단 증상에 관련된 증상을 감소시킨다. 추가로, 암페타민은 비만을 치료하는데 사용되었다. 그러나, 암페타민의 증독 특성은 대분분의 비만 환자에 대한 사용을 불가능하게 한다. 웰부트린 (등록상표)은 체중 감소를 야기하고, 암페타민과 유사하게 노르아드레날린에 의한 메카니즘으로 활성화된다 (자린다스트 (Zarrindast, M.R.) 및 호세이니-니아 (T. Hosseini-nia)의 문헌[Anorectic and behavioural effects of bupropion. General Pharmacology. 19: p. 201-4, 1988] 및 하르토-트룩스 (Harto-Truax, N.) 등의 문헌[Effects of Bupropion on Body Weight. Journal of Clinical Psychiatry, 44: p. 183-6, 1983]). 그러나, 암페타민과는 달리 웰부트린 (등록상표)는 중독성이 아니다 (램 (Lamb, R.J.) 및 그리피스 (R.R., Griffiths)의 문헌[Self-administration in Baboons and the Discriminative Stimulus Effects in Rats of Bupropion, Nomifensine, Diclofensine and Imipramine. Psychopharmacology, 102: p. 183-90, 1990], 베르그먼 (Bergman, J.) 등의 문헌[Effects of Cocaine and Related Drugs in Nonhuman Primates. III. Self-administration by Squirrel Monkeys. Journal of Pharmacology & Experimental Therapeutics, 251: p. 150-5, 1989] 및 요한슨 (Johanson, C.E.) 및 바레트 (J.E. Barrett)의 문헌[The Discriminative Stimulus Effects of Cocaine in Pigeons. Journal of Pharmacology & Experimental Thrapeutics, 267: p. 1-8, 1993]). 확장해서, 화학식 (I)의 화합물은 또한 비만 및 코카인 중독에 효능을 나타낼 것으로 기대된다.

니코틴-함유 제품에 대한 중독의 치료에는 부분적 및 완전한 중독의 완화 모두가 포함된다. 따라서, 담배 제품에 관해서는, 예를 들면 흡연과 같은 활동의 중단 뿐만 아니라, 예를 들면 주어진 기간 동안에 흡연한 담배의 수의 감소와 같은 활동의 정도 및 빈도의 감소도 포함된다. 다른 니코틴-함유 생성물에 대해서, 치료는 또한 이와 같은 생성물의 사용 중단 및 사용 정도의 감소 모두가 수반된다.

<안전성 및 독성>

추가의 복용량 범위 연구는 이성체 및 라세메이트에 대한 안전한 복용량 범위를 결정하기 위해 수행되었다. 화학식 (I), (II)의 화합물 또는 라세메이트를 경구 및 복강내 (복강내 투여) 경로에 의해 투여한 후 심각한 반작용 (예를 들면, 발작 및 사망)의 존재 여부를 관찰하였다. 데이타를 표 II에 나타냈다.

100 mg/kg으로 경구 투여된 경우, 발작이 화학식 (II)의 화합물 및 라세메이트에서 관찰되지만, 화학식 (I)의 화합물은 관찰되지 않았다. 모든 3종의 화합물이 300 mg/kg의 복용량으로 투여될 경우, 발작이 모든 동물에게서 관찰되었다. 추가로, 300 mg/kg의 경구 복용량은 화학식 (II)의 화합물 및 라세메이트에 대하여 100 및 80%의 치사율을 나타낸 반면, 화학식 (I)의 화합물은 어떠한 사망도 관찰되지 않았다.

복강내 투여된 모든 화합물은 100 mg/kg에서 발작을 나타냈다. 화학식 (I)의 화합물은 어떠한 사망도 관찰되지 않은 반면, 화학식 (II)의 화합물 및 라세메이트는 각각 100% 내지 20%의 치사율을 나타냈다. 300 mg/kg의 복강내 복용량에서 모든 화합물에 대하여 치사율이 관찰되었다.

시험관내 흡수에 대한 효과
[³H]-도파민 흡수
화합물	IC50 (μM)	SEM
부프로피온	1.9	0.15
화학식 (I)	9.3	0.41
화학식 (II)	>100
[³H]-노르아드레날린 흡수
화합물	IC50 (μM)	SEM
부프로피온	2.2	0.7
화학식 (I)	1.1	0.07
화학식 (II)	>30
이미프라민	0.072	0.020
[³H]-세로토닌 흡수
화합물	IC50 (μM)	SEM
부프로피온	>30
화학식 (I)	>30
화학식 (II)	>100
이미프라민	0.24	0.03

화학식 (I), 화학식 (II)의 화합물 및 라세메이트에 관련된 반작용
화합물	경로	복용량 (mg/kg)	발작 (%)	발작 시간 (분)	% 사망	사망 시간 (분)
화학식 (I)	복강내 투여	100	100	3.93	0	n/a
화학식 (I)	경구 투여	100	0	n/a	0	n/a
화학식 (I)	복강내 투여	300	100	3.95	100	6
화학식 (I)	경구 투여	300	100	11.23	0	n/a
화학식 (II)	복강내 투여	100	20	5	100	7
화학식 (II)	경구 투여	100	100	7.2	0	n/a
화학식 (II)	복강내 투여	300	100	1.1	100	6
화학식 (II)	경구 투여	300	100	6.8	100	7
라세메이트	복강내 투여	100	100	3	20	14
라세메이트	경구 투여	100	100	9.2	0	n/a
라세메이트	복강내 투여	300	100	3	100	3
라세메이트	경구 투여	300	100	6.8	80	7
n/a는 관찰된 효과가 없음을 의미하며, 따라서 %로 나타내지 않음

Claims

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(+)-(2S,3S)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 용매화물과 함께 하나 이상의 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는, 우울증을 치료하기 위한 제약 조성물.
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(+)-(2S,3S)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 용매화물과 함께 하나 이상의 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는, 비만을 치료하기 위한 제약 조성물.
(+)-(2S,3S)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 또는 그의 제약상 허용되는 염 및 용매화물과 함께 하나 이상의 제약상 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는, 주의 결함 활동항진 장애 (ADHD), 동통 또는 성기능장애를 치료하기 위한 제약 조성물.
제7항, 제10항 및 제11항 중 어느 한 항에 있어서, (+)-(2S,3S)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 용매화물이 광학적으로 순수한 형태인 조성물.
제12항에 있어서, 염이 (+)-(2S,3S)-2-(3-클로로페닐)-3,5,5-트리메틸-2-모르폴리놀 염산염인 조성물.