PL91614B1 - - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarza¬ nia nowych kwasów 2-piperazyno-5-keto-8-alkilo- -5,8-dwuwodoroipirydo(2,3-d)ipirymidynoka,rboksylo- wych-6 o wzorze ogólnym 1, w którym R' oznacza nizszy rodnik alkilowy o 1—5 atomach wegla.Sposobem wedlug wynalazku nowe zwiazki o wzorze ogólnym 1 wytwarza sie w reakcji kon¬ densacji 2-chloro-6-karboalkoksy-5,8-dwuwodoro- pirydoi(2,3-d)pirymidyny o wzorze 2, wkltórymR' ma wyzej okreslone znaczenie i Alk oznacza nizszy rodnik alkilowy o 1—5 atomach wegla, z 1-formylo- piperazyna w celu otrzymania pochodnej 2-(4'-for- -mylopiperazyno), która nastepnie odformylowuje sie etanolowym roztworem chlorowodoru do po¬ chodnej piperazyno o wzorze 3, w którym R' i Alk maja wyzej podane znaczenie, po czym zwiazek o wzorze 3 zmydla sie i uzyskuje zadany kwas o wzorze 1. * Zwiazki wytworzone sposobem wedlug wynalaz¬ ku moga byc stosowane w terapeutyce dla ludzi lub zwierzat, zwlaszcza jako srodki przeciwbakte- ryjne, w postaci farmaceutycznej pozwalajacej na podawanie doustne lub pozajelitowe.Srodki do podawania doustnego maja postac tabletek lub kapsulek zawierajacych od 5Ó do 500 mg substancji aktywnej.Mozna równiez stosowac dla form pozajelito¬ wych roztwory wodne zawierajace 5—lOfyo sub¬ stancji aktywnej; pH tych roztworów wynosi 6—7 a izotonie zapewnia ewentualny dodatek chlorku sodowego. Dla zwiazków,: fcfcórych., rozpuszczalnosc w wodzie jest nizsza,od podaflegó wyzej zakresu, stosuje sie jako rozpuszczalnik wodne roztwory glikolu polietylenowego (300 lub 600) lub glikolu propylenowego, o stezeniu 10—40%. Jako dodatki rozpuszczajace mozna równiez stosowac Il-rzed. amidy nizszych kwasów alifatycznych, takie jak N-dwumetylo- i N-dwumetyloacetamid, lakitamid, lub tez wodne 5tyo roztwory alkoholu benzylowego. !0 Tak otrzymane roztwory moga byc sterylizowane badz droga sterylnych filtracji, badz w autoklawie.Roztwory te umieszcza sie w ampulkach o pojem¬ nosci 5—10 cm3.Przyklad I. (a) Wytwarzanie kwasu 2-pipera- !5 zyno-5-keto-8-etylo-5,8-dwuwodoiropirydo<2,3-d)piry- midynokarboksylowego-6.Mieszanine 8,4 g 2-chloro-5-keto-6-karboetoksy- -8-etylo-5,8-dwuwodoropirydo(2,3-d)pirymidyny, 6,9 g formylopiperazyny i 160 cm3 chloroformu ogrza¬ no no w temperaturze wrzenia pod chlodnica zwrotna w ciagu 1 godziny. Po ochlodzeniu roztwór prze^- myto woda, wysuszono i odparowano rozpuszczal¬ nik. Oleista pozostalosc wykrystalizowala po^ do¬ daniu 100 cm3 tlenku izopropylu. Otrzymano, po odwirowaniu i rekrystalizacji osadu z 50 cm3 eta¬ nolu, 8,9 g (82%) -2-(4'-forimyiopiperazyno)-5-ke- to-6-karboetoksy-8-etylo-5,8-dwuwodoropirydo<2,3-d) pirymidyny topniejacej w dwóch etapach: w tem¬ peraturze 195°C, nastepnie krzepnacej i topniej a- ¦0 cej w temperaturze 204°C. 91 61491614 Analiza dla wzoru C17H21N504 (c.cz. 359,38) obliczono °/o C, 56,81, H, 5,89; N, 19,49; otrzymano •/• C, 56,97; H, 5,95; N, 19,59. 3,6 g forniylopochodnej otrzymanej poprzednio zawieszono w 25 cm3 alkoholowego 5% roztworu HC1. Po :lekkim ogrzaniu do temperatury 40—50°C dla ulatwienia rozpuszczenia, mieszanine pozosta¬ wiono na 8 godzin w temperaturze pokojowej. Wy¬ padal osad dwuchlorowodotrku formylo|)oc(hodnej.Osad ten polaczono ze 100 cm8 eteru, nastepnie odwirowano i zawieszono w 40 cm3 wody. Miesza¬ nine zalkalizowano przez dodanie Na2COs i ekstra¬ howano chloroformem. Po odparowaniu rozpusz¬ czalnika produkt rekrystalizowano z 40 cm3 mie¬ szaniny tlenek izopropylu (1 obj.) — benzen 1 obj.).Otrzymano 2,8 g (84M) 2-piperazymo-5-keto-6-kar- boetoksy-2-etylo-5',8-dwuwodoropkydo(2,3-d)pirymi- dyny o temperaturze topnienia 155°C.Analiza dla wzoru C^H^NgOj c.cz. 331,37 obliczono P/« C 57,99; H 6,39; N 21,14; otrzymano «/o C 57,98; H 6,23; N 21,39. 3,3 g tego estru zmydlano za pomoca 30 cm3 wodnego 0,3N roztworu NaOH w ciagu 2 godzin w temperaturze pokojowej. Po zakwaszeniu do pH okolo 6 kwasem octowym, osad odwirowano, prze¬ myto wopla^..i,,rekrystalizowano z 60 cm3 miesza¬ niny dwumetyloformamid (1 obj.) — etanol (1 obj.).Otrzymano 1,8 g kwasu 2-piperazyno-5-keto-8- etylo-5,8-dwuwodoropirydo(2,3-d)-pirymidynokar- boksylowego-6 o temperaturze topnienia 264°C.Analiza dla wzoru C14H17N503 (c.cz. 303,32) obliczono Vo C 55,43; H 5,63; N 25,09; otrzymano °/o C 55,68; H 5,67; N 23,25.Przyklad II. Badanie aktywnosci bakterio¬ bójczej. Aktywnosc bakteriobójcza zwiazków wy¬ twarzanych sposobem wedlug wynalazku badano in vi a) podlozu tryptykaza — soja (T.S.A.) najbar¬ dziej odpowiednim do hodowli wiekszosci mikro¬ organizmów.Sklad pozywki byl nastepujacy: pepton trypsynowy z kazeina 15 g pepton papinowy zsoi 5 g chloreksodowy 5 g agar 15 g woda g.s.ad. 1000 cm3 pH po sterylizacji wynosilo 7,3 b) agarze odzywczym (M.A.), ubozszym w sklad¬ niki odzywcze, o nastepujacym skladzie: ekstraktu miesnego 3 g petonu 5 g agaru 15 g wodyg.s.ad. 1000 cm3 pH po sterylizacji w temperaturze 120°C wyno¬ silo6,8. 55 W tablicy I podano minimalne stezenia hamujace (w (ig/cm2) dla róznych bakterii testowanych na obu podlozach.Produkty testowano na trzech drobnoustrojach Graim+ (1^3) i dziesieciu Gram- (4^13). 60 Mimimalne stezenie hamujace (C.M.S.) oznaczano przez rozcienczenie, pozywek agarowych (T.SA i N.A.); stezenie wynosilo od 0,2 da 100 ptg/cm3 z po¬ stepem geometrycznym co 2. Posiewu naczyn do¬ konano przy pomocy aparatu do zaszczepiania, W:j przy rozcienczeniach hodowli bulionowej 18 go¬ dzinnej wynoszacej 10~3.Naczynia umieszczano w termostacie o tempe¬ raturze 37°; odczytów dokonywano po 18 godzi- nach hodowli. Za C.MJS:; uwazano najnizsze ste¬ zenie calkowicie hamujace hodowle. Zwiazki sa szczególnie aktywne w stosunku do bakterii Gram ujemnych; minimalne stezenia hamujace sa z re¬ guly nizsze w agarze odzywczym (N.A.)) niz w pod- io lozu soi z tryptykaza (T.S.A).Zwiazek z przykladu I jest bardzo interesujacy dla stosowania terapeutycznego. Zwiazek ten tes¬ towano na 25 szczepach bakteryjnych porównujac go z kwasem nalidyksowyin i z kwasem pirymi- w dynowym zawierajacym pierscien rt pirolidynowy z pozycji 2. Minimalne stezenia ^hamujace oznacza¬ no pieciokrotnie dla kazdego szczepu, stosujac me¬ tode rozcienczen w stalym podlozu (agar odzyw¬ czy). W tablicy II podano wartosci srednie otrzy- mane dla trzech zwiazków. Z tablicy wynika, ze zwiazek, którego sposób wytwarzania podano w przykladzie I jest bardziej aktywny w stosunku do wiekszosci bakterii Gram ujemnych niz pozo¬ stale zwiazki.Produkt ten charakteryzuje sie ponadto bardzo niska toksycznoscia: doustnie, w dawkach tak du¬ zych jak 4 g/kg nie zaobserwowano wypadków smiertelnych u gryzoni (szczurów, mysz); pies wy¬ trzymywal w ciagu 6 tygodni dawke 100 mg/dobe bez najmniejszych objawów zatrucia.Podawany doustnie, zwiazek z przykladu I jest szybko wchlaniany i wydalany, glównie z mo¬ czem. Nawet przy niskich dawkach otrzymuje, sie stezenia w moczu wyzsze od minimalnych stezen hamujacych, aktywne dla wiekszosci bakterii Gram ujemnych.W doswiadczeniu z psem o wadze 20 kg podano, za pomoca sondy przelykowej, 50 mg zwiazku z przykladu I, czyli 2,5 mg/kg. Zebrano sonda 40 mocz psa po 3 i 1 godzinach i zmierzono aktyw¬ nosc przeciwbakteryjna tych próbek, przyjmujac za zwiazek odniesienia, zwiazek podany doustnie.Znaleziono odpowiednie stezenia 185 [ig/em3 (3 godz.) i 90 [ig/cm3 (7 godz.) przy czym to ostatnie 45 bylo jeszcze duzo wyzsze od minimalnego steze¬ nia hamujacego wiekszosc badanych bakterii dram ujemnych, zwlaszcza Escherichia coli i Proteus vulgaris. TablicaI 50 Lp. 1 2 .. .3 . 4 , '5 . ' 6 7 8 9 11 1 12 13 Bakterie Gronkowiec 209 P Paciorkowiec grupa A B. isubtilis bord. bronohiseptica Pyocyanigue A 22 Pyocyanigue TUR Esch. Coli 95 Klebs. pneumoniae Salm. typhi.Sch sonnei Pr. vulgaris Ir. morganii Pr. mirabilis Przyklad I T.S.A. 12,5 6,2 50 12,5 100 0,8 1,6 1,6 0,8 11,5 0,8 0,8 i N.A. 12,5 3A 12,5 .25 0,8 0,8 6,2 0,8 6,2 0,8 0,891614 Bakterie 1 Staphylocoque 209 P S/taphylocoaue 9144 Staphylocoaue SIN Streptocoaue A 561 Streptocoaue DM 19 B. subtilio 6633 Bord. bronch. 4617 Ps. aeruginosa A22 Ps. aeruginosa 75-345 Esch. coli 95 I.S.M.Esch. coli 54-127 OMS i Esch. coli LRS Esch. coli LRS 67 Esch. coli Cho Esch. coli 111 B4 Klebs. pneunioniae 10-031 Salm. tyiphi 0901 S. ente- ritidis DANYZ S. oranienburg 10-66 Arizona 6211 Providencia 0223 Sh. sonnei I.B.S.Pr. vulgaris 12-53 Pr. mirabilis Mg Pr. marganii A 236 Tablica II Kwas nelidyksowy srednie odchylenie standard. 2 16,24 56,25 18,74 100 72 60 60 21,87 2,15 3,1 2,7 4,04 2,34 1,4 j 2,7 2,75 100 3,12 100 1,58 0,88 3,42 0,36 1 3 8,4 8,84 [ 31,45 19,65 0 0,75 17,67 37,91 37,91 6,25 1,14 2,16 0,75 2,41 1,14 0,4 0,75 2,3 0 1,7 0 0,77 0,438 1,68 0,26 Kwas pirymidynowy 1 srednie odchylenie standard. 4 3,42 l ' 4,04 ' 14,98 2,82 100 1 80 100 75 32,5 ,625 ,625 12,5 32,5 ,62 1,2 23,74 21,9 100 27,5 100 ¦•"1-0,6 ,6 0,56 1,68 2,06 8,42 2,1 0 0,6 27,36 0 ,35 16,77 9,5 9,5 0 16,77 9,38 0,33 16,77 18,75 0 13,7 0 8,74 4,08 11,18 0,22 Zwiazek wytwarzany w przykladzie I srednie odchylenie standard. 6 6,22 6,22 12,48 13,74 100 8,1 75 12,5 13,74 ,14 ,66 2,04 1,2 2,66 1,64 1,88 2,06 1,2 27,5 1,26 16,24 0,56 0,36 • 1,58 • 0,4 7 3,5 3,5 3,33 6,86 0 9,54 ,35 0 6,86 4,57 3 1,019 0,565 | 2,15 1,35 1,039 2,063 0,563 7,5 1,138 8,4 0,22 0,09 0,3 0 PL

Claims (1)

Zastrzezenie patentowe 1. Sposób wytwarzania nowych kwasów 2-pipera- zyno-5-keto-8-alkilo-5,8-dwuwodoropirydo{2,3-d)pi- rymidynokarboksylowych-6 o wzorze ogólnym 1, w którym R' oznacza nizszy rodnik alkilowy o 1— 5 atomach wegla, znamienny tym, ze poddaje sie reakcji kondensacji 2-chloro-6-karboalkoksy-5- -keto-5,8-dwuwodoropirydo(2,3-d)pirymidyne o wzo¬ rze 2, w którym Alk oznacza nizszy rodnia alkilo¬ wy o 1—5 atomach wegla z 1-formylopiperazyna, 40 uzyskana w ten spos6b pochodna 2. -(4-fonmylopi- perazyno) odformylowuje etanolowym roztworem chlorowodoru do uzyskania pochodnej piperazyno o wzorze 3, która zmydla sie do uzyskania za¬ danego kwasu o wzorze

1.91 614 COOH I ' \ /Ssi^N' HN W I \ / R' Wzór', ClAV COOAlk R' Wzór 2 COOAlk N / s/ N N' HN W ^ R' hlzór3 :CJfc .:¦ ~\%. \. ¦'.¦ L(ik\\c\ i.iL.-.yi.^^iiC] Liiiiu^j j LZG Z-d ]\Tr 2 — 548/77 110 szt. A4 Cena 10 zl PL