PL181990B1 - Cyklopeptolidy, szczep grzybny i srodek terapeutyczny stanowiacy inhibitor ekspresji czasteczek adhezyjnych PL PL PL PL - Google Patents
Cyklopeptolidy, szczep grzybny i srodek terapeutyczny stanowiacy inhibitor ekspresji czasteczek adhezyjnych PL PL PL PLInfo
- Publication number
- PL181990B1 PL181990B1 PL95317349A PL31734995A PL181990B1 PL 181990 B1 PL181990 B1 PL 181990B1 PL 95317349 A PL95317349 A PL 95317349A PL 31734995 A PL31734995 A PL 31734995A PL 181990 B1 PL181990 B1 PL 181990B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- formula
- leu
- substituted
- hydrogen
- methyl
- Prior art date
Links
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 title 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 7
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 58
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 58
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 47
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 44
- -1 α-hydroxy-substituted butyric acid residue Chemical group 0.000 claims description 21
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 20
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 18
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 17
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 15
- CZCIKBSVHDNIDH-NSHDSACASA-N N(alpha)-methyl-L-tryptophan Chemical group C1=CC=C2C(C[C@H]([NH2+]C)C([O-])=O)=CNC2=C1 CZCIKBSVHDNIDH-NSHDSACASA-N 0.000 claims description 10
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 9
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 8
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical class CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 7
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 7
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims description 7
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 7
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 5
- 125000003107 substituted aryl group Chemical group 0.000 claims description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 claims description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 claims description 3
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 claims description 3
- IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N azide group Chemical group [N-]=[N+]=[N-] IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 6
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 abstract 1
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 335
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 240
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 180
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 158
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 158
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 153
- 125000000250 methylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 146
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 143
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 84
- XJODGRWDFZVTKW-LURJTMIESA-N (2s)-4-methyl-2-(methylamino)pentanoic acid Chemical compound CN[C@H](C(O)=O)CC(C)C XJODGRWDFZVTKW-LURJTMIESA-N 0.000 description 69
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 67
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 41
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 39
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 32
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 31
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 31
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 22
- 102000015271 Intercellular Adhesion Molecule-1 Human genes 0.000 description 22
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 22
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 19
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 18
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 16
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 16
- 108010000134 Vascular Cell Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 15
- 102100023543 Vascular cell adhesion protein 1 Human genes 0.000 description 15
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 15
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 14
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 14
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 14
- OXEUETBFKVCRNP-UHFFFAOYSA-N 9-ethyl-3-carbazolamine Chemical compound NC1=CC=C2N(CC)C3=CC=CC=C3C2=C1 OXEUETBFKVCRNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 102100023471 E-selectin Human genes 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 12
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 12
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 12
- 108010024212 E-Selectin Proteins 0.000 description 11
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 description 11
- SJZRECIVHVDYJC-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybutyric acid Chemical compound OCCCC(O)=O SJZRECIVHVDYJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 8
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 239000002344 surface layer Substances 0.000 description 8
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 7
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 7
- 239000008259 solid foam Substances 0.000 description 7
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 6
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 6
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 6
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 5
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 5
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 5
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 5
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 5
- HZNVUJQVZSTENZ-UHFFFAOYSA-N 2,3-dichloro-5,6-dicyano-1,4-benzoquinone Chemical compound ClC1=C(Cl)C(=O)C(C#N)=C(C#N)C1=O HZNVUJQVZSTENZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 4
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 4
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N Diazomethane Chemical compound C=[N+]=[N-] YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LCPYQJIKPJDLLB-UWVGGRQHSA-N Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C LCPYQJIKPJDLLB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 3
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 3
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- MCQRPQCQMGVWIQ-UHFFFAOYSA-N boron;methylsulfanylmethane Chemical compound [B].CSC MCQRPQCQMGVWIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000006727 cell loss Effects 0.000 description 3
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 125000001160 methoxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC(*)=O 0.000 description 3
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000351901 Bartalinia Species 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical group CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100037904 CD9 antigen Human genes 0.000 description 2
- 102000016289 Cell Adhesion Molecules Human genes 0.000 description 2
- 108010067225 Cell Adhesion Molecules Proteins 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- XGIUDIMNNMKGDE-UHFFFAOYSA-N bis(trimethylsilyl)azanide Chemical compound C[Si](C)(C)[N-][Si](C)(C)C XGIUDIMNNMKGDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950005499 carbon tetrachloride Drugs 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 2
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 108010091798 leucylleucine Proteins 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LIBASNWCFRYHQB-UHFFFAOYSA-N (2,3-dichlorophenyl)-diphenylphosphane Chemical compound ClC1=CC=CC(P(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)=C1Cl LIBASNWCFRYHQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBDJFVFTHLOSDW-DNDLZOGFSA-N (2r,3r,4r,5r)-2,3,5,6-tetrahydroxy-4-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyhexanal;hydrate Chemical compound O.O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HBDJFVFTHLOSDW-DNDLZOGFSA-N 0.000 description 1
- PTXVSDKCUJCCLC-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxyindole Chemical compound C1=CC=C2N(O)C=CC2=C1 PTXVSDKCUJCCLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RUGISKODRCWQNE-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methylphenyl)ethanol Chemical compound CC1=CC=CC=C1CCO RUGISKODRCWQNE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IOOMXAQUNPWDLL-UHFFFAOYSA-N 2-[6-(diethylamino)-3-(diethyliminiumyl)-3h-xanthen-9-yl]-5-sulfobenzene-1-sulfonate Chemical compound C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1S([O-])(=O)=O IOOMXAQUNPWDLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101001027553 Bos taurus Fibronectin Proteins 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100028791 Caenorhabditis elegans pbs-5 gene Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101100095895 Drosophila melanogaster sle gene Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000622123 Homo sapiens E-selectin Proteins 0.000 description 1
- 101000851176 Homo sapiens Pro-epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 102100022339 Integrin alpha-L Human genes 0.000 description 1
- 108010008212 Integrin alpha4beta1 Proteins 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- 101710128836 Large T antigen Proteins 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010064548 Lymphocyte Function-Associated Antigen-1 Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 208000024556 Mendelian disease Diseases 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZCIKBSVHDNIDH-UHFFFAOYSA-N Nalpha-methyl-DL-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC)C(O)=O)=CNC2=C1 CZCIKBSVHDNIDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OKJPEAGHQZHRQV-UHFFFAOYSA-N Triiodomethane Natural products IC(I)I OKJPEAGHQZHRQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ITLHXEGAYQFOHJ-UHFFFAOYSA-N [diazo(phenyl)methyl]benzene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=[N+]=[N-])C1=CC=CC=C1 ITLHXEGAYQFOHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- PQLVXDKIJBQVDF-UHFFFAOYSA-N acetic acid;hydrate Chemical compound O.CC(O)=O PQLVXDKIJBQVDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003668 acetyloxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)O[*] 0.000 description 1
- 208000037919 acquired disease Diseases 0.000 description 1
- 208000038016 acute inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006022 acute inflammation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N borane Chemical class B UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004956 cell adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- WBLIXGSTEMXDSM-UHFFFAOYSA-N chloromethane Chemical compound Cl[CH2] WBLIXGSTEMXDSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 238000004581 coalescence Methods 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011157 data evaluation Methods 0.000 description 1
- NKLCNNUWBJBICK-UHFFFAOYSA-N dess–martin periodinane Chemical compound C1=CC=C2I(OC(=O)C)(OC(C)=O)(OC(C)=O)OC(=O)C2=C1 NKLCNNUWBJBICK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N diethyl azodicarboxylate Substances CCOC(=O)\N=N\C(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N ethyl n-ethoxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CCOC(=O)N=NC(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002140 halogenating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- JUINSXZKUKVTMD-UHFFFAOYSA-N hydrogen azide Chemical compound N=[N+]=[N-] JUINSXZKUKVTMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003463 hyperproliferative effect Effects 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000005550 inflammation mediator Substances 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- LTRVAZKHJRYLRJ-UHFFFAOYSA-N lithium;butan-1-olate Chemical compound [Li+].CCCC[O-] LTRVAZKHJRYLRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 210000004924 lung microvascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960003017 maltose monohydrate Drugs 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910052987 metal hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004681 metal hydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- BKBMACKZOSMMGT-UHFFFAOYSA-N methanol;toluene Chemical compound OC.CC1=CC=CC=C1 BKBMACKZOSMMGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSEFCHWGJNHZNT-UHFFFAOYSA-M methyl(triphenyl)phosphanium;bromide Chemical compound [Br-].C=1C=CC=CC=1[P+](C=1C=CC=CC=1)(C)C1=CC=CC=C1 LSEFCHWGJNHZNT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000004925 microvascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- PVWOIHVRPOBWPI-UHFFFAOYSA-N n-propyl iodide Chemical compound CCCI PVWOIHVRPOBWPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- GVUGOAYIVIDWIO-UFWWTJHBSA-N nepidermin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(C)C)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 GVUGOAYIVIDWIO-UFWWTJHBSA-N 0.000 description 1
- 231100001221 nontumorigenic Toxicity 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 150000002902 organometallic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- YJVFFLUZDVXJQI-UHFFFAOYSA-L palladium(ii) acetate Chemical compound [Pd+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O YJVFFLUZDVXJQI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 229940076788 pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- ODZPKZBBUMBTMG-UHFFFAOYSA-N sodium amide Chemical compound [NH2-].[Na+] ODZPKZBBUMBTMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- XMVONEAAOPAGAO-UHFFFAOYSA-N sodium tungstate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][W]([O-])(=O)=O XMVONEAAOPAGAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000028070 sporulation Effects 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000003463 sulfur Chemical class 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 230000002381 testicular Effects 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHRNULOCNSKMGB-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran thf Chemical compound C1CCOC1.C1CCOC1 WHRNULOCNSKMGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 125000000430 tryptophan group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000003606 umbilical vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K11/00—Depsipeptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K11/02—Depsipeptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof cyclic, e.g. valinomycins ; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Virology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Botany (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
Abstract
1 . Cyklopeptohdy o wzorze 1, w którym A oznacza reszte a -hydroksy-podstawionego kwasu maslowego, ewen- tualnie podstawiona w polozeniu y podstawnikiem R6, który oznacza CN, COOR2, CONR 3 R 4, COR5 , CSNH 2 lub alkil, który moze byc podstawiony grupa azydowa, chlorowcem, grupa alkoksy, ewentualnie oslaniana grupa hy- droksylowa lub aminowa, winyl, który moze byc podstawiony alkilem, chlo- rowcem lub CN, cykloalkil, tetrazolil lub -C=CH, gdzie R 2 oznacza wodór lub alkil, ewentualnie podstawiony arylem, R3 i R 4 sa takie same lub rózne i ozna- czaja wodór lub alkil, albo razem wraz z azotem tworza pierscien zawierajacy od 3 do 6 czlonów i ewentualnie zawierajacy drugi heteroatom, zas R4 oznacza wodór lub nizszy alkil, B oznacza reszte a -amino-?-metylo-podstawionego kwasu kaprylowego, R1 oznacza wodór lub metyl, C oznacza reszte tryptofanowa lub N-metylo-tryptofanowao wzorze 6 , w którym R6 oznacza wodór, grupe alkoksy, alkil lub benzyl, R 9 oznacza wodór lub chlorowiec, R 1 0 oznacza wodór lub metyl, a oznacza pojedyncze lub podwójne wiazanie, X oznacza reszte a -amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C 2 do C 1 4 ), zas Y oznacza reszte a -amino lub N-metylo-a -amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2 do C 1 0 ) 6 Szczep grzybny, z n a m ie n n y t y m , ze ma oznaczenie F92-4471/08 1 jest zdeponowany jako NRRL 21123 oraz jego mutanty i pochodne. 7 Srodek terapeutyczny stanowiacy inhibitor ekspresji czasteczek adhe- zyjnych, z n a m ie n n y t y m , ze zawiera terapeutycznie skuteczne ilosci cyklo- peptolidów o wzorze 1 , w którym A oznacza reszte a -hydroksy-podstawionego kwasu maslowego, ewen- tualnie podstawiona w polozeniu y podstawnikiem R6, który oznacza CN, COOR2, CONR3R4, COR 5, CSNH 2 lub alkil, który moze byc podstawiony grupa azydowa, chlorowcem, grupa alkoksy, ewentualnie oslaniana grupa hy- droksylowa lub aminowa, winyl, który moze byc podstawiony alkilem, Wzór 1 PL PL PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku są cyklopeptolidy, szczep grzybny i środek terapeutyczny stanowiący inhibitor ekspresji cząsteczek adhezyjnych.
Adhezyjne cząsteczki komórek, takiejak ICAM-1, VCAM-1 i selektyna-E ulegają ekspresji (wypychaniu) na powierzchnię komórek śródblonkowych, a w przypadku ICAM-1 także keratynocytów, w reakcji na mediatory prozapalne TNFo, IFNy, ILI i LPS. Odpowiednie przeciwligandy, np. LFA-1, VLA-4 i SLEX, ulegają ekspresji na powierzchnie krążących krwinek. W wyniku oddziaływań między tymi cząsteczkami adhezyjnymi i ich przeciwligandami nonnalizują się podczas procesów zapalnych przezśródbłonkowa migracja leukocytów oraz pozanaczyniowe wzajemne oddziaływanie komórek. Wskutek tego inhibitory ekspresji adhezyjnych cząsteczek stwarzają możliwość leczenia wielu stanów chorobowych. Obecnie jednak brak odpowiednich niskocząsteczkowych inhibitorów ekspresji cząsteczek adhezyjnych.
181 990
Cyklopeptolidy są to cykliczne cząsteczki, zawierające reszty aminokwasów powiązane ze sobą wiązaniami peptydowymi oraz przynajmniej jedną resztą kwasu karboksylowego podstawioną hydroksylem, która przez swój podstawnik hydroksylowy wiąże się z sąsiednią resztą kwasową wiązaniem estrowym.
Cyklopeptolidy stanowiące przedmiot wynalazku sąnowąklasącyklopeptolidów, które są inhibitorami ekspresji ICAM-1, VCAM-1 i selektyny-E.
Cyklopeptolidy według wynalazku są związkami o wzorze 1, w którym
A oznacza resztę α-hydroksy-podstawionego kwasu masłowego, ewentualnie podstawioną w położeniu γ podstawnikiem R6, który oznacza CN, COOR2, CONR3R4, COR5, CSNH2 lub alkil, który może być podstawiony grupą azydową, chlorowcem, grupą alkoksy, ewentualnie osłanianą grupą hydroksylową lub aminową, winyl, który może być podstawiony alkilem, chlorowcem lub CN, cykloalkil, tetrazolil lub -C=CH, gdzie R2 oznacza wodór lub alkil, ewentualnie podstawiony arylem, R3 i R4 są takie same lub różne i oznaczają wodór lub alkil, albo razem wraz z azotem tworząpierścień zawierający od 3 do 6 członów i ewentualnie zawierający drugi heteroatom, zaś R5 oznacza wodór lub niższy alkil,
B oznacza resztę α-amino-y-metylo-podstawionego kwasu kaprylowego,
Ri oznacza wodór lub metyl,
C oznacza resztę tryptofanową lub N-metylo-tryptofanową o wzorze 6, w którym R8 oznacza wodór, grupę alkoksy, alkil lub benzyl, Rg oznacza wodór lub chlorowiec, R, 0 oznacza wodór lub metyl, a .... oznacza pojedyncze lub podwójne wiązanie,
X oznacza resztę α-amino-podstawionego kwasu karboksylowego od (C2 do Ct4), zaś
Y oznacza resztę α-amino lub N-metylo-a-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2 do C10).
We wzorze 1 orientacja od końcówki C do końcówki N w resztach aminokwasowych jest zgodna z kierunkiem ruchu wskazówek zegara, a peptolidowe wiązanie estrowe występuje między resztami A i Y. Jeśli Rt oznacza metyl, to reszty RrLeu i Leu odpowiednio oznaczająN-metylo-leucynę i leucynę.
Związki o wzorze 1 zawieraj ą asymetryczne atomy C i mogą występować w konfiguracj i R lub S.
Korzystną podgrupą związków według wynalazku są związki o wzorze Ip, w którym
Ap oznacza resztę α-hydroksy-podstawionego kwasu masłowego, ewentualnie podstawioną w położeniu γ grupą R6p, która oznacza CN, ewentualnie osłanianą grupę CH2OH, COOR2p, CONR3pR4p, COR5p lub -CH=CH2, gdzie R2p oznacza wodór lub alkil, ewentualnie podstawiony arylem, R3p i R4p są takie same lub różne i oznaczają wodór lub alkil, albo razem wraz z azotem tworząpierścień zawierający 5 lub 6 członów i ewentualnie zawierający drugi heteroatom, a R5p oznacza wodór lub niższy alkil,
Bp oznacza resztę a-amino-y-metylo-podstawionego kwasu kaprylowego,
Rlp oznacza wodór lub metyl,
Cp oznacza resztę tryptofanową lub N-metylo-tryptofanową, która ewentualnie jest podstawiona grupą N'-(od C| do C4)alkoksy,
XP oznacza resztę α-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2 do C14), zaś
Yp oznacza resztę α-amino lub N-metylo-a-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2do C10).
Innąkorzystnąpodgrupązwiązków według wynalazku sązwiązki o wzorze Γρ, w którym
A'p oznacza resztę α-hydroksy-podstawionego kwasu masłowego, ewentualnie podstawioną w położeniu γ grupą R'6p, która oznacza CN, COOR'2p, CONR'3pR'4p, COR'5p, alkil, który może być podstawiony grupą azydową, chlorowcem, grupą alkoksy, ewentualnie osłanianą grupą hydroksy lub grupą aminową, winyl, który może być podstawiony alkilem, chlorowcem lub CN, cykloalkil, tetrazolil lub -C=CH, przy czym R'2p oznacza wodór lub alkil, ewentualnie podstawiony arylem, R'3p i R'4p są takie same lub różne i oznaczają wodór lub alkil, albo razem wraz z azotem tworząpierścień zawierający od 3 do 6 członów i ewentualnie zawierający drugi heteroatom, a R'5p oznacza wodór lub niższy alkil,
B'p oznacza resztę a-amino-y-metylo-podstawionego kwasu kaprylowego,
181 990
R'i p oznacza wodór lub metyl,
C'p oznacza resztę tryptofanową lub N-metylo-tryptofanową o wzorze 6'p, w którym R'8p oznacza wodór, grupę alkoksy, alkil lub benzyl, R'^ oznacza wodór lub chlorowiec, R'| Op oznacza wodór lub metyl, a .... oznacza pojedyncze lub podwójne wiązanie,
X'P oznacza resztę α-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2 do C14), a
Y'p oznacza resztę α-amino lub N-metylo-a-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2 doC10).
Szczególnie korzystne są związki o wzorze 1, w którym
A oznacza resztę α-hydroksy-podstawionego kwasu masłowego określoną we wzorze 7 jako A', z podstawnikiem R6 w położeniu γ, oznaczającym -COO-nPr,
B oznacza resztę a-amino-y-metylo-podstawionego kwasu kaprylowego określoną we wzorze 7 jako B',
R] oznacza metyl,
C oznacza resztę N-metylo-tryptofanową o wzorze 9, w którym R8 oznacza grupę OCH3 a R9 oznacza wodór,
X oznacza resztę α-amino-podstawionego kwasu karboksylowego o wzorze 10 zaś
Y oznacza resztę α-amino lub N-metylo-a-amino-podstawionego kwasu karboksylowego o wzorze 13.
Cyklopeptolidy według wynalazku występują zarówno w postaci wolnej, jak i w postaci soli lub estru.
Niezależnie od nowych cyklopeptolidów wynalazek obejmuje również szczep grzybny oznaczony jako F92-4471/08 oraz jego mutanty i pochodne. Szczep grzybny F92-4471/08 według wynalazku jest zdeponowany w międzynarodowej kolekcji depozytowej NRRL pod numerem NRRL21123.
Środek terapeutyczny stanowiący inhibitor ekspresji cząsteczek adhezyjnych według wynalazku charakteryzuje się tym, że zawiera terapeutycznie skuteczne ilości cyklopeptolidów o wzorze 1, w którym
A oznacza resztę α-hydroksy-podstawionego kwasu masłowego, ewentualnie podstawioną w położeniu γ podstawnikiem R6, który oznacza CN, COOR2, CONR3R4, COR5, CSNH2 lub alkil, który może być podstawiony grupąazydową, chlorowcem, grupąalkoksy, ewentualnie osłanianą grupą hydroksylową lub aminową, winyl, który może być podstawiony alkilem, chlorowcem lub CN, cykloalkil, tetrazolil lub -C=CH, gdzie R2 oznacza wodór lub alkil, ewentualnie podstawiony arylem, R3 i R4 są takie same lub różne i oznaczają wodór lub alkil, albo razem wraz z azotem tworząpierścień zawierający od 3 do 6 członów i ewentualnie zawierający drugi heteroatom, zaś R5 oznacza wodór lub niższy alkil,
B oznacza resztę a-amino-y-metylo-podstawionego kwasu kaprylowego,
R] oznacza wodór lub metyl,
C oznacza resztę tryptofanową lub N-metylo-tryptofanową o wzorze 6, w którym R6 oznacza wodór, grupę alkoksy, alkil lub benzyl, Rg oznacza wodór lub chlorowiec, Rl0 oznacza wodór lub metyl, a .... oznacza pojedyncze lub podwójne wiązanie,
X oznacza resztę α-amino-podstawionego kwasu karboksylowego od (C2 do C14), zaś
Y oznacza resztę α-amino lub N-metylo-a-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2 do C)0).
Związki o wzorach 2 i 3 (dalej zwane odpowiednio związkami A i B) wydziela się z kultur grzybnego szczepu F92-4471/08, wyizolowanych z próbek ściółki liści, zebranych w pobliżu La Plata w Argentynie, i tymczasowo przypisanych do rodzaju Bartalinia. Próbki szczepu F92-4471/08 zostały złożone przez Departament Rolnictwa USA w zbiorach kultur NRRL na warunkach Umowy Budapeszteńskiej 2 lipca 1993 i oznaczone numerem depozytowym NRRL 21123. Charakterystykę grzybnego szczepu F92-4471/08 przedstawia dalej przykład I.
Związki A i B oraz związki pokrewne można wytwarzać przez hodowlę F92-4471/08/NRRL 21123 lub jego mutantów albo pochodnych, bądź też podobnych odmian
181 990 grzybów, w środowisku odżywczym i pozyskiwanie z niego tych związków w sposób np. opisany w przykładzie II.
Charakterystykę związków A i B podano w przykładzie III.
Związki według wynalazku można wytwarzać przez otrzymywanie pochodnych związków A i B, które obejmuje:
a) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R6 oznacza COOR'2, gdzie R 2 oznacza alkil ewentualnie podstawiony arylem, reakcję związków o wzorze 1, w którym R6 oznacza CN, ze związkami nukleofilnymi, korzystnie alkoholami, przy użyciu odpowiedniej, zasadowej lub kwasowej katalizy, korzystnie kwasu solnego, w rozpuszczalnikach organicznych, korzystnie w eterze, albo
b) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R6 oznacza CO-alkil, reakcję związków o wzorze 1, w których R5 oznacza CN, stosując jako związki nukleofilne związki organo-metaliczne, korzystnie związki Grignarda lub alkilolity, które poddaje się reakcji w nieprotonowych rozpuszczalnikach organicznych, korzystnie w eterach, z katalizatorami lub bez nich, albo
c) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R6 oznacza COOH, hydrolizę związków o wzorze 1, w których Rń oznacza COO-alkil, kwasem mineralnym, korzystnie kwasem solnym, w roztworze wodno-alkoholowym lub zasadą albo
d) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R6 oznacza COOR'2, estryfikację związków o wzorze 1, w których R6 oznacza COOH, typowymi sposobami, korzystnie przez konwersję do chlorku kwasowego np. chlorkiem tionylu i zadanie odpowiednim alkoholem w obecności lub w nieobecności środka wiążącego środka wiążącego kwas, albo
e) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R6 oznacza CH2OH, redukcję związków o wzorze 1, w których R6 oznacza COOR2, wodorkami metali lub wodorkami boru, korzystnie borowodorowym kompleksem siarczku dwumetylowego, w rozpuszczalnikach organicznych, albo
f) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R6 oznacza CONR3R4, przekształcanie związków o wzorze 1, w których R6 oznacza COOR2, przez reakcję z aminami, korzystnie przez konwersje wolnego kwasu w chlorek kwasowy i reakcję z aminą HNR3R4, albo
g) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R6 oznacza CHO, utlenianie związków o wzorze 1, w których R6 oznacza CH2OH, albo
h) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R6 oznacza ewentualnie podstawiony winyl, reakcję związków o wzorze 1, w których R6 oznacza CHO, z metylowanym odczynnikiem Wittiga, albo
i) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których Rg oznacza ewentualnie podstawiony alkil, reakcję związków o wzorze 1, w których R^ oznacza CH2OH, albo
j) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R6 oznacza CH2NH2, redukcję związków o wzorze 1, w których R6 oznacza CH2N3, albo
k) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R6 oznacza C=CH, reakcję związków o wzorze 1, w których R^ oznacza CH=CBr2, albo
1) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R^ oznacza cyklopropyl, reakcję związków o wzorze 1, w których 1^ oznacza winyl, z dwuazometanem, albo
m) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R6 oznacza tetrazolil, reakcję związków o wzorze 1, w których R^ oznacza CN, ze związkiem azydkowym, albo
n) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R^ oznacza wodór, usuwanie grupy metoksy ze związków o wzorze 1, w których R8 oznacza OCH3, albo
o) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których symbol... oznacza pojedyncze wiązanie, redukcję związków o wzorze 1, w których symbol.... oznacza podwójne wiązanie, albo
p) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R8 oznacza alkil lub benzyl, wprowadzanie tych grup do związków o wzorze 1, w których R8 oznacza wodór, albo
q) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R^ oznacza chlorowiec, chlorowcowanie związków o wzorze 1, w których R9 oznacza wodór, albo
181 990
r) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R8 oznacza grupę alkoksy, a symbol .... oznacza podwójne wiązanie, reakcję związków o wzorze 1, w których R8 oznacza wodór, a symbol .... oznacza pojedyncze wiązanie, z wolframianem metalu alkalicznego i nadtlenkiem wodoru oraz alkilowanie pośredniego związku N-hydroksyindolowego, albo
s) w celu wytwarzania związków o wzorze 1, w których R6 oznacza CSNH2, reakcję związków o wzorze 1 z pochodnymi siarki, korzystnie z kwasem dwufenylofosfinodwutionowym.
Związki według wynalazku można również wytwarzać na drodze syntezy chemicznej; np. stosując konwencjonalne metody syntezy peptydów. Końcowym etapem wytwarzania tych związków jest etap cyklizacji, w którym liniowe peptydy lub peptolidy, korzystnie pochodne określone jako związki o wzorach 4 i 5, zawierające reszty kwasowe A, B, R^eu, Leu, C, X i Y powiązane ze sobą w odpowiedniej kolejności, cyklizuje się (zamyka w pierścień) w reakcji tworzącej wiązanie amidowe lub estrowe.
Związki według wynalazku wykazują działanie farmakologiczne i są dzięki temu użyteczne jako leki. W szczególności są inhibitorami stymulowanej ekspresji adhezyjnych cząsteczek komórek, zwłaszcza inhibitorami VCAM-1 w odniesieniu do ekspresji selektyny-E i ICAM-1. Skutek powstrzymywania VCAM-1 występuje zarówno na poziomie powielania, jak i po powielaniu. Próby, jakie można stosować do wykrywania powstrzymywania ekspresji ICAM-1, VCAM-1 i selektyny E przez związki według niniejszego wynalazku, opisują dalej przykłady. Związki te są więc skuteczne w leczeniu lub profilaktyce procesów chorobowych, które wywołują ekspresję adhezyjnych cząsteczek komórek. Te procesy chorobowe obejmują wiele nabytych i dziedzicznych schorzeń/zaburzeń, w których poruszanie się leukocytów odgrywa istotną rolę w procesach chorobotwórczych, a zwłaszcza ostre i przewlekłe stany zapaleniowe (np. uczulenie, astma, łuszczyca, zakłócenia reperfuzji, reumatoidalne zapalenie stawów i wstrząs septyczny) oraz stany autoalergiczne (np. stwardnienie rozsiane). Inne wskazania odnośnie związków według niniejszego wynalazku obejmują przerzuty nowotworów (np. czerniaka, raka kości) oraz odrzuty aloprzeszczepów/heteroprzeszczepów, ponieważ wiadomo, że powstrzymywanie adhezyjnych cząsteczek naczyniowych może wydatnie poprawić rokowania tych procesów.
Związki według wynalazku są też potencjalnymi lekami przeciw nadrozrostowym chorobom skóry (np. łuszczycy) oraz różnych schorzeniom nowotworowym dzięki ich powstrzymującemu działaniu w submikromolowych stężeniach, jak to wykazano w 72 godz. próbach keratynocytowych i innych rozrostowych.
Związki według wynalazku działają powstrzymując© na wytwarzanie HIV wywoływanego przez TNF-α lub IL6 w linii monocytowych komórek U1, jak to oszacowano przez p24 Elisa (standardowy test wykrywający obecność białka p24 wirusa HIV-1), i są dzięki temu przydatne w leczeniu niedoborów odporności oraz chorób powodowanych przez wirusy, zwłaszcza w leczeniu AIDS. Te szczególne własności terapeutyczne nowych związków zostały ujawnione po raz pierwszy i dlatego przedmiotem wynalazku są również środki terapeutyczne zawierające nowe peptolidy o ujawnionych właściwościach.
Cyklopeptolidy według wynalazku i zawierające te nowe związki środki terapeutyczne są skuteczne, zwłaszcza w leczeniu lub zapobieganiu w przypadku chorób, które wywołują ekspresję adhezyjnych cząsteczek. Związki według wynalazku są stosowane do wytwarzania leków, w których podawane są pacjentowi w terapeutycznie lub profilaktycznie skutecznych ilościach. Leki te mogą być stosowane pozajelitowo, doustnie, w postaci aerozolu lub miejscowo i zwykle zawierają jeden lub więcej farmaceutycznie tolerowanych rozcieńczalników nośnikowych lub rozczynników oraz mogą zawierać takie dodatki, jak Stabilizatory itp.
Dawkowanie stosowanych związków zmienia się w zależności między innymi od stanu lub rodzaju powstałej choroby oraz od tego, czy stosuje się je do leczenia czy do zapobiegania i od sposobu oraz systemu podawania. Zazwyczaj jednak zadowalające wyniki uzyskuje się przy podawaniu doustnym w dawkach od około 0,05 do około 10 mg/kg/dzień, korzystnie od około 0,1 do około 7,5 mg/kg/dzień i bardziej korzystnie od około 0,1 do około 2 mg/kg/dzień, podając da
181 990 wkę jednorazową lub w dawkach podzielonych od 2 do 4 razy na dzień. Alternatywnie przy podawaniu pozajelitowym, np. przez wkraplanie dożylne lub wlew dożylny, można stosować dawki od około 0,01 do około 5 mg/kg/dzień, korzystnie od około 0,05 do około 1 mg/kg/dzień i bardziej korzystnie od około 0,1 do około 1,0 mg/kg/dzień.
Odpowiednie dzienne dawki dla ludzkich pacjentów wynoszą doustnie: od około 2,5 do około 500 mg, korzystnie od około 5 do około 250 mg i bardziej korzystnie od około 5 do około 100 mg; albo dożylnie: od około 0,5 do około 250 mg, korzystnie od około 2,5 do około 125 i bardziej korzystnie od około 2,5 do około 50 mg.
Związki według wynalazku można podawać w dowolny odpowiedni sposób, w tym dojelitowo, pozajelitowo oraz miejscowo lub przez inhalację. Odpowiednimi postaciami do podawania dojelitowego są roztwory do picia, tabletki lub kapsułki. Odpowiednimi postaciami do podawania pozajelitowego są roztwory lub zawiesiny do wstrzykiwania. Odpowiednimi postaciami do podawania miejscowego są kremy, płyny kosmetyczne itp. o zakresie stężeń od 0,01 do 10%, korzystnie od 0,1 do 1 %, w odniesieniu do masy takich kompozycji. Odpowiednie postacie dawek jednostkowych do podawania doustnego mogą zawierać od 1 do 50 mg danego związku, zwykle od 1 do 10 mg. Związek z przykładu IV jest korzystnym związkiem według wynalazku i można go podawać większym ssakom, np. ludziom, stosując podobne sposoby podawania i podobne lub niższe dawkowania, jak przy konwencjonalnym stosowaniu znanych norm dla takich wskazań.
Niniejszy wynalazek opisują dalej, jedynie w sposób ilustracyjny, następujące przykłady, które odnoszą się do towarzyszących im wykresów, na których: fig. 1 przedstawia widma UV (w nadfiolecie) związków A (a) oraz B (b); fig. 2 przedstawia widmo IR (w podczerwieni) związku A; fig. 3 przedstawia widmo IR związku B; fig. 4 przedstawia widmo protonowe NMR (magnetycznego rezonansu jądrowego) związku A; fig. 5 przedstawia widmo protonowe NMR związku B; fig. 6 przedstawia widmo l3C NMR związku A, a fig. 7 przedstawia widmo 13C NMR związku B.
Korzystne znaczenia podstawników A, B, C, X oraz Y określają wzory 7-13.
W poniżej podanych przykładach, które ilustrują niniejszy wynalazek bez jego ograniczania, wszystkie temperatury podaje się w stopniach Celsjusza oraz stosuje się następujące skróty: Bz - benzyl, iPr - izopropyl, nPr - n-propyl, db - podwójne wiązanie, sb - pojedyncze wiązanie, br - szerokie, d - dublet, Hba - modyfikowany kwas 2-hydroksymasłowy, m - multiplet, q - kwartet, t - tryplet, TFA - kwas trójfluorooctowy, THF - czterowodorofuran.
Przykład I: Charakterystyka szczepu F/92-4471/08 (NRRL 21123).
Szczep grzybów NRRL 21123, który wytwarza związki A i B, wydziela się z próbki ściółki liści, podanej w pobliżu La Plata w Argentynie.
Podczas rośnięcia na 2% pożywce A agaru słodowego (2% ekstraktu słodowego, 0,4% ekstraktu drożdżowego, 2% agaru w dejonizowanej wodzie) szczep NRR 21123 po trzech dniach inkubacji w 27° wytwarza kolonie o średnicy od 25 do 35 mm. Kolonie zazwyczaj rozwijają krótką powierzchniową grzybnię o barwie od białej do szarej lub szarawobrązowej.
Optymalna temperatura rośnięcia, mierzona średnicami kolonii na pożywce A, wynosi od 210 do 30°, a minimaltia temperatura waha się od 0° do 6°, zaś maksymalna temperatura waha się od 33° do 38°. Po czterech dniach inkubacji w zakresie między 210 i 33° obserwuje się zarodnikowanie.
Szczep grzybny NRRL 21123 wytwarza zarodniki o barwie od szklistej do bardzo jasno brązowej na fiolkokształtnych lub pierścieniowych komórkach zarodnikotwórczych wewnątrz dobrze wykształconych zgrubień. Zarodniki te zwykle są pięciokomórkowe, cylindryczne, zazwyczaj lekko zakrzywione i w większości mają wymiary 24-26 x 2,6-4 pm. Każdy zarodnik na jednym końcu ma pojedynczy szklisty nierozgałęziony wyrostek, a na drugiej końcowej komórce ma od dwóch do czterech (zwykle trzy) szklistych i nierozgałęzionych wyrostków.
181 990
Na podstawie tej charakterystyki morfologicznej oraz klucza identyfikacyjnego podanego w pracy: B.C. Sutton (1980): The Coelomycetes (publikacja Instytutu Grzybów Wspólnoty Brytyjskiej, Survey, Anglia) szczep NRRL 21123 można przyporządkować do rodzaju Bartalinia Tassi.
Przykład II: Fermentacja
Szczep NRRL 21123 poddaje się rośnięciu przez 15 dni w 21 ° na pożywce A zawierającej skośny agar (2% ekstraktu słodowego, 0,4% ekstraktu drożdżowego, 2% agaru, dejonizowana woda). Z zarodników z jednego skosu tworzy się zawiesinę w 10 cm3 sterylnej wody z kranu. Po 1 cm3 zawiesiny zarodników posiewa się do każdej z dwóch 500 cm3 kolb Erlenmayera, zawierających po 200 cm3 pożywki B (2% ekstraktu słodowego, 0,4% ekstraktu drożdżowego w dejonizowanej wodzie). Kolby te inkubuje się przez 6 dni w 21 ° na wstrząsarce obrotowej o prędkości 200 obr/min w celu otrzymania wstępnej hodowli. Następnie po 2 cm3 tej wstępnej hodowli posiewa się do każdej z dwustu 500 cm3 kolb Erlenmayera zawierających po 200 cm3 pożywki C (2,2% jednowodzianu maltozy, 0,72% ekstraktu drożdżowego w dejonizowanej wodzie). Kolby te inkubuje się w 21° na wstrząsarce obrotowej o prędkości 200 obr/min i zbiera plon przez połączenie ich zawartości po 6 dniach dla dalszej przeróbki.
Przykład III: Wydzielanie metabolitów, związków A i B dm3 bulionu fermentacyjnego szczepu NRRL 21123, opisanego w przykładzie II, przesącza się stosując jako środek filtracyjny Clarcel (środek pomocniczy w filtracji bazujący na ziemi okrzemkowej). Zbiera się wilgotną grzybnię i ekstrahuje trzykrotnie porcjami po 15 dm3 mieszaniny metanolu i acetonu (1:1). Połączone ekstrakty zatęża się pod próżnią w wyparce obiegowej do około 3 dm3 pozostałego wodnego roztworu. Roztwór ten ekstrahuje się czterokrotnie porcjami po 1 dm3 octanu etylowego. Ekstrakty octanu etylowego łączy się i zatęża pod próżnią do 25 g oleistej pozostałości, którą następnie rozdziela się trzykrotnie w układzie rozpuszczalników: 90% wodny roztwór metanolu i heksan, przy czym dolna faza po zatężeniu w próżni daje 4,5 g surowego ciała stałego. To ciało stałe wprowadza się do kolumny o średnicy wewnętrznej 5,5 cm i wysokości 38 cm z żelem krzemionkowym (Merck, Kieselgel 60,40-63 μηι) i poddaje chromatografii z użyciem 1,4 dm3 mieszaniny eter metylo-tert-butylowy/metanol (98:2), a następnie 1 dm3 (95:5). Prędkość przepływu utrzymuje się na poziomie 110 cm3/min. Łączy się frakcje, które wykazują działanie powstrzymujące ekspresję ICAM-1 w próbach przedstawionych w przykładzie IV (każda po 90 cm3), zawierające albo związek A (nry 9-10), albo związek B (nry 11 -25).
Związek A
Połączone frakcje 9-10 z wyżej opisanej chromatografii na żelu krzemionkowym odparowuje się do sucha w próżni, otrzymując 1 g surowej substancji. Substancję tę oczyszcza się dalej na drodze preparatywnej HPLC (cieczowej chromatografii ciśnieniowej), stosując kolumnę Mercka o średnicy wewnętrznej 50 mm i wysokości 250 mm z 7 pm LiChrospher RP-18. W ciągu 60 minut stosuje się liniowy gradient 80 —>100% metanolu w wodzie. Prędkość przepływu wynosi 25 cm3/min. Zbiera się frakcje po 25 cm3 i kontroluje przy 220 nm. Łączy się frakcje 56-62 na podstawie widm UV, TLC (chromatografii cienkowarstwowej) i działania biologicznego, a następnie zatęża w próżni, otrzymując 0,6 g pozostałości. Końcowe oczyszczenie osiąga się przez chromatografię na Sephadex LH 20 w kolumnie o średnicy wewnętrznej 2,7 cm i wysokości 86 cm, stosując elucję metanolem. Te frakcje z elucji, które według oznaczeń TLC zawierają związek A w czystej postaci, łączy się i odparowuje do sucha w próżni, otrzymując 580 mg bezbarwnego proszku. Własności związku A przedstawia niżej tabela 1.
Związek B
Połączone frakcje 11 -25, po odparowaniu rozpuszczalnika w próżni dają, 2 g surowej substancji, którą dalej oczyszcza się na drodze preparatywnej HPLC, stosując kolumnę Mercka o średnicy 50 mm i wysokości 250 mm ze standardową fazą stacjonarną LiChrospher RP-18 (Merck) z cząstkami o rozmiarach 7 pm. Elucję prowadzi się z liniowym gradientem 80 —> 100% metanolu w wodzie przez 60 minut. Prędkość przepływu wynosi 25 cm3/min. Zbiera się frakcje
181 990 po 25 cm3 i sprawdza przy 220 nm. Frakcje 47-55 zawierają większość związku B na podstawie widm UV, TLC i działania biologicznego. Frakcje te łączy się, odparowuje w próżni i otrzymuje 0,4 g pozostałości. Pozostałość tę oczyszcza się dalej przez chromatografię na Sephadex LH 20 w kolumnie o wymiarach 2,7 cm x 86 cm, stosując elucję metanolem. Zbiera się frakcje po 12 cm3 i kontroluje przy 220 nm. Na podstawie widm UV, TLC i działania biologicznego łączy się frakcje 23-27, odparowuje w próżni i otrzymuje 0,3 g pozostałości. Po końcowym etapie chromatografii na żelu krzemionkowym z zastosowaniem kolumny o średnicy wewnętrznej 2,2 cm i wysokości 16 cm, wypełnionej złożem Merck Kieselgel 60, 40-63 pm, i elucji mieszaniną toluen - etanol (95:5) otrzymuje się czysty związek nr B, jak to oznaczono przez TLC. Otrzymane frakcje łączy się i odparowuje do sucha w próżni, co daje 145 mg bezbarwnego proszku. Własności związku B również przedstawia niżej tabela 1.
Poniżej przedstawiona tabela 1 odnosi się do figur od 1 do 7.
Tabela 1
| Własność | Związek A | Związek B |
| 1. Wygląd | bezbarwny proszek | bezbarwny proszek |
| 2. [a]D | -234° (MeOH, c=l,l 1) | -243° (MeOH, c=l,08) |
| 3. Widmo masowe (FAB) | m/e=977 (MH+) | m/e=949 (MH+) |
| 4. Wzór cząsteczek | C53H84N8O9 | CilHgoNgOę |
| 5. Widmo UV (MeOH) | patrz fig. la | patrz fig. Ib |
| 6. Widmo IR (KBr) | patrz fig. 2 | patrz fig. 3 |
| 7. Protonowy NMR, 500 MHz, DMSO-dó jako wzorzec wewnętrzny | w CDCI3-DMSO-d6=3:2, patrz fig. 4 | w CDCl3-DMSO-d6=4:l, patrz fig. 5 |
| 8. I3C NMR, 125,7 MHz, DMSO-d6 jako wzorzec wewnętrzny | w CDCI3-DMSO-d6=3:2, patrz, fig. 6 | w CDCl3-DMSO-d6=4:l, patrz fig. 7 |
| 9. Rozpuszczalność | rozpuszczalne w chloroformie, metanolu, DMSO, nierozpuszczalne w wodzie i heksanie | |
| 10. TLCa (wartość Rf) | 0,31 | 0,24 |
| 11. HPLCb (R,) | 4,2 minut | 3,3 minut |
a Płytka z żelu krzemionkowego 60 F254 (Merck) o wymiarach 5 cm x 20 cm; toluen-MeOH (95:5) b Merck LiChrospher 100 RP-18 (5 pm), 4x125 mm; MeOH-H2O (9:1); 1,2 cm3/min; wykrywanie przy 220 nm z zastosowaniem detektora układu z fotodiodą Waters 996
P r z y k ł a d IV. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, oznacza COOCH3, B oznacza B' we wzorze 7, R! oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza CH3, .... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Zimny roztwór HC1 w eterze (30 cm3,17% wagowo/objętościowych, -20°) dodaje się do mieszaniny 2 g związku A i 1,65 cm3 metanolu i utrzymuje w -20° przez 3 dni. Następnie tę mieszaninę reakcyjnąwlewa się do wodnego roztworu kwaśnego węglanu i ekstrahuje octanem etylowym. Organiczny ekstrakt suszy się nad siarczanem sodowym, przesącza i odparowuje w próżni. Surowy produkt rozpuszcza się w 30 cm3 mieszaniny metanol/stężony wodny roztwór HC1 (9/1) i miesza w pokojowej temperaturze przez 3 godz. Następnie roztwór ten rozcieńcza się wodą i ekstrahuje octanem etylowym. Organiczny ekstrakt suszy się nad siarczanem sodowym, przesącza i odparowuje w próżni. Surową mieszaninę reakcyjną oczyszcza się na drodze chromatografii z odwróconymi fazami na LiChroprep RP-8 (gradient: metanol/woda = od 8/2 do 10/0), a następnie chromatografii na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 100/0 do
181 990
95/5), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej pianki oraz pochodną z otwartym łańcuchem o wzorze 4 (R6 oznacza COOCH3, R7 oznacza CH3) w postaci bezbarwnego ciała stałego.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9:1, Rf=0,41 (substancja tytułowa), Rj=0,38 (pochodna z otwartym łańcuchem); odwrócona faza RP-8, metanol/woda/kwas trójfluorooctowy 95/4/1, Rj=0,34 (substancja tytułowa), Rf=0,51 (pochodna z otwartym łańcuchem).
Przykład V. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza COOH, B oznacza B' we wzorze 7, R] oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 209 mg związku o wzorze 1 z przykładu IV w 15 cm3 mieszaniny tert-butanol/stężony wodny roztwór HC1 (9/1) ogrzewa się w 60° przez 8 godz. Mieszaninę reakcyjną wlewa się do nasyconego wodnego roztworu kwaśnego węglanu i ekstrahuje octanem etylowym. Fazę organiczną przemywa się roztworem buforowym o pH 7, suszy nad siarczanem sodowym i odparowuje w próżni. Surowy produkt oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 100/0 do 95/5), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol=9/l, Rf=0,25, odwrócona faza RP-8, metanol/woda = 92/8, Rf=0,34.
Przykład VI. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CO-NH-CH3, B oznacza B' we wzorze 7, R| oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza grupę OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 10 mg związku z przykładu V w 0,5 cm3 dwuchlorometanu chłodzi się do 0° i dodaje do niego 0,05 cm3 chlorku tionylu. Mieszaninę reakcyjną utrzymuje się w 0° przez 1,5 godz., a następnie odparowuje w 0° pod próżnią. Pozostały żółty olej rozpuszcza się w 1 cm3 dwuchlorometanu w 0° i dodaje 0,1 cm3 40% wodnego roztworu metyloaminy. Po 45 min mieszaninę reakcyjną wlewa się do 0,1 m wodnego roztworu HC1, ekstrahuje octanem etylowym i rozdziela między octan etylowy i nasycony wodny roztwór kwaśnego węglanu. Fazę organiczną przemywa się roztworem soli, suszy nad siarczanem sodowym i odparowuje w próżni. Surowy produkt oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/octan etylowy/metanol wynosi od 100/0/0 do 65/25/10), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol wynosi 9/1, Rf=0,25; odwrócona faza RP-8, metanol/woda=95/5, Rf=O,33.
Analogicznie, jak podano w przykładzie VI, otrzymuje się następujące związki o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, B oznacza B' we wzorze 7, C oznacza grupę o wzorze 8, X oznacza grupę o wzorze 10, Y oznacza grupę o wzorze 13 i R, oznacza CH3.
| Przykład | r8 | ||
| VII | wzór 14 | och3 | db |
| VIII | wzór 15 | db | |
| IX | wzór 16 | db | |
| X | wzór 17 | łł | db |
| XI | wzór 18 | łl | db |
| XII | wzór 19 | db |
Przykład XIII. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza grupę COO-iPr, B oznacza B' we wzorze 7, R, oznacza grupę CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza grupę OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
181 990
Roztwór 15 mg związku z przykładu V w 0,75 cm3 dwuchlorometanu chłodzi się do 0° i dodaje do niego 0,075 cm3 chlorku tionylu. Mieszaninę reakcyjną utrzymuje się w 0° przez 2 godz., a następnie odparowuje w 0° pod próżnią. Pozostały żółty olej rozpuszcza się 1 cm3 dwuchlorometanu w 0° i dodaje 0,030 cm3 izopropanolu. Po 3 godz. utrzymywania w 0° mieszaninę reakcyjną wlewa się do 0,1 m wodnego roztworu HC1 i ekstrahuje octanem etylowym. Fazę organiczną przemywa się roztworem soli, suszy nad siarczanem sodowym i odparowuje w próżni. Surowy produkt oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 100/0 do 95/5), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej pianki.
TLC: żel krzemionkowy = 9/1, Rf=0,47; odwrócona faza RP-8, metanol/woda = 95/5, Rf=0,37.
Analogicznie, jak podano w przykładzie IX, otrzymuje się następujące związki o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, B oznacza B' we wzorze 7, C oznacza grupę o wzorze 8, X oznacza grupę o wzorze 10, Y oznacza grupę o wzorze 13 i R] oznacza grupę CH3
| Przykład | Ro | r8 | HM |
| XIV | -COO-C2Hs | OCHj | db |
| XV | -COO-nPr | db |
Przykład XVI. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza grupę COCH3, B oznacza B' we wzorze 7, R] oznacza grupę CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza grupę OCH3,.... oznacza db,X oznacza grupę o wzorze lOoraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 200 mg związku A w 2 cm3 dodaje się do roztworu metylowego związku Grignarda, 2 mmole w 5 cm3 eteru, i miesza w pokojowej temperaturze przez 24 godz. Następnie dodaje się dodatkowe 2 mmole MeMgJ w eterze i znów miesza przez 24 godz. w pokojowej temperaturze. Mieszaninę reakcyjną wlewa się do 0,1 m roztworu HC1 i ekstrahuje octanem etylowym. Fazę organiczną przemywa się roztworem kwaśnego węglanu sodowego i roztworem soli, suszy nad siarczanem sodowym i odparowuje w próżni. Surową mieszaninę reakcyjną oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/octan etylowy/metanol = od 100/0/0 do 68/75/5), otrzymując tytułową substancję oraz znaczące ilości nieprzereagowanej substancj i wyj ściowej.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, R^0,30.
Przykład XVII. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza grupę CH2OH, B oznacza B' we wzorze 7, R| oznacza grupę CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, Rg oznacza grupę OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
0,5 cm3 2 m roztworu kompleksu borowodoru z siarczkiem dwumetylowym dodaje się w pokojowej temperaturze do roztworu 27 mg związku z przykładu V w 2 cm3 czterowodorofuranu. Mieszaninę reakcyjną miesza się przez 2,5 godz., wlewa do 0,1 m HC1 i ekstrahuje octanem etylowym. Fazę organiczną przemywa się fosforanowym roztworem buforowym (pH 7), suszy nad siarczanem sodowym i odparowuje w próżni. Surową substancję oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 100/0 do 95/5), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,27; odwrócona faza RP-8, metanol/woda = 92/8, bez oddzielenia od substancji wyjściowej.
Przykład XVIII. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R^ oznacza grupę CN, B oznacza B' we wzorze 7, R, oznacza grupę CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, Rg oznacza H,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
mg palladu na węglu aktywowanym (10%) dodaje się do roztworu 53 mg związku A i 66 mg octanu sodowego w 4 cm3 bezwodnika octowego. Mieszaninę reakcyjną miesza się w pokojowej temperaturze w atmosferze wodoru przez 20 godz. (według TLC 50% przemiany), a nastę
181 990 pnie wlewa się do wodnego roztworu kwaśnego węglanu sodowego i ekstrahuje octanem etylowym. Roztwór organiczny suszy się nad siarczanem sodowym i odparowuje w wysokiej próżni. Surowy produkt oczyszcza się na drodze chromatografii z odwróconymi fazami na materiale RP-8 (gradient: metanol/woda= 80/20 do 100/0), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rt=0,33; odwrócona faza RP-8, metanol/woda = 92/8, Rf=0,50 (substancja wyjściowa Rf=0,44).
Przykład XIX. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza grupę CHO, B oznacza B' we wzorze 7, Rj oznacza grupę CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza grupę OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
mg nadjodowanego odczynnika Dess-Martina (1,1,1-trój(acetyloksy)-1,1-dwuwodoro-1,2-benz-jodoksol-3( 1 H)-on) dodaje się do roztworu 50 mg związku z przykładu XVII w 4 cm3 dwuchlorometanu i zawiesinę tę miesza się w 20° przez 3 godziny. Następnie surową mieszaninę reakcyjną wlewa się na żel krzemionkowy i eluuje octanem etylowym. Frakcje zawierające produkty łączy się, odparowuje w próżni i oczyszcza przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 100/0 do 95/5), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej pianki.
Przykład XX. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, Rń oznacza grupę CH2, B oznacza B' we wzorze 7, R! oznacza grupę CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza grupę OCH3 oznacza db,X oznacza grupę o wzorze lOorazY oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór metylowego odczynnika Wittiga, otrzymany przez mieszanie mieszaniny bromku metylotrójfenylofosfoniowego i amidku sodowego w suchym THF, powoli dodaje się w 20° do roztworu 24,7 mg związku z przykładu XIX w THF, aż pozostanie zabarwienie tego odczynnika. Następnie mieszaninę reakcyjną wlewa się do 0,1 m kwasu solnego i ekstrahuje octanem etylowym. Organiczny ekstrakt odparowuje się w próżni, a pozostały surowy produkt oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 100/0 do 97/3), otrzymując związek tytułowy w postaci bezbarwnej pianki.
Przykład XXI. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CH=CH-C2H5, B oznacza B' we wzorze 7, R, oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza grupę OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Tytułowy związek otrzymuje się analogicznie, jak podano w przykładzie XX.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,44.
Przykład XXII. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CH2N3, B oznacza B' we wzorze 7, R, oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Do roztworu 30 mg związku z przykładu XVII i 12 mg trój feny lofosfiny w 3 cm3 suchego THF dodaje się 0,15 cm3 0,38 m toluenowego roztworu kwasu azotowodorowego. W pokojowej temperaturze dodaje się azodwukarboksylan dwuetylowy, aż roztwór pozostanie żółty, i miesza tę mieszaninę w pokojowej temperaturze przez lOmin. Surową mieszaninę reakcyjną wlewa się na 5 g tlenku glinowego (obojętnego) i eluuje octanem etylowym. Frakcje zawierające produkt odparowuje się w próżni i oczyszcza przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 99,5/0,5 do 95/5), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,46; odwrócona faza RP-8, metanol/woda/TFA = 95/4/1, Rf=0,41.
Przykład XXIII. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CH2-NH2, B oznacza B' we wzorze 7, Rj oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 20 mg związku z przykładu XXII w 2 cm3 metanolu miesza się w atmosferze wodoru w 4° z 4 mg palladu na węglu aktywowanym (10%) przez 20 godzin. Katalizator odsącza się i mieszaninę reakcyjną odparowuje w próżni. Surowy produkt oczyszcza się przez chromatogra
181 990 fię z odwróconymi fazami na RP-8 (gradient: metanol/woda z 0,5% TFA = od 80/20 do 100/0), otrzymując tytułowy związek w postaci bezbarwnej pianki.
TLC: odwrócona faza RP-8, metanol/woda/TFA = 95/4/1, Rf=0,69.
Przykład XXIV. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CH=CBr2, B oznacza B' we wzorze 7, R] oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 225 mg związku z przykładu XIX w 2,5 cm3 dwuchlorometanu dodaje się do mieszaniny 30 mg proszku cynkowego, 120 mg trójfenylofosfiny i 150 mg czterobromometanu i miesza się przez 30 min w pokojowej temperaturze. Mieszaninę tę następnie wlewa się na 5 g tlenku glinowego i eluuje octanem etylowym. Frakcje zawierające produkt odparowuje się w próżni i oczyszcza przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = 99,5/0,5 do 97,3), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej stałej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,27.
Przykład XXV. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, Ró oznacza OCH, B oznacza B' we wzorze 7, R] oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza OCH3, . oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór n-butanolanu litowego w heksanie (3 równoważniki molowe) dodaje się do 50 mg związku z przykładu XXIV w -78° w ciągu 2 godzin. Mieszaninę reakcyjną wlewa się do 0,1 m wodnego roztworu HC1 i ekstrahuje octanem etylowym. Fazę organiczną przemywa się roztworem kwaśnego węglanu oraz roztworem soli i odparowuje w próżni. Surowy produkt oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 99,5/0,5 do 97/3), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej stałej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,44.
Przykład XXVI. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CH=CH-CN, B oznacza B' we wzorze 7, R( oznacza grupę CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 30 mg związku z przykładu XIX i 270 mg cyjanometylenotrójfenylofosforu w 5 cm3 toluenu miesza się w pokojowej temperaturze przez 4 godz. Następnie surową mieszaninę reakcyjną nasącza się na tlenek glinowy (obojętny) i eluuje octanem etylowym. Frakcje zawierające produkt łączy się i odparowuje w próżni. Tytułowa substancja jest mieszaniną izomerów E/Z.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rt=0,39.
Przykład XXVII. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CH2C1, B oznacza B' we wzorze 7, R] oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 20 mg związku z przykładu XVII w 1 cm3 toluenu dodaje się do roztworu 10 mg dwuchlorotrójfenylofosforu w 1 cm3 toluenu i miesza w 60°. Po 2 godz. dodaje się dodatkowo 35 mgdwuchlorotrójfenylofosfmy. Po upływie 1 godz. mieszaninę reakcyjną nasącza się na obojętny tlenek glinowy i eluuje octanem etylowym. Frakcje zawierające produkt odparowuje się i surową substancję oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 100/0 do 97/3), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej stałej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,39.
Przykład XXVIII. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CH2O-CH3, B oznacza B' we wzorze 7, R] oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza grupę OCH3,..,. oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 34 mg związku z przykładu XVII w 6 cm3 dwuchlorometanu i 100 mg żelu krzemionkowego zadaje się eterowym roztworem dwuazometanu aż do wykorzystania substancji wyjściowej. W celu oczyszczenia mieszaniny od polimetylenu powstającego podczas reakcji przesącza się ją, odparowuje i dodaje świeży dwuchlorometan i żel krzemionkowy. Po ostatecznym odparowaniu w próżni surową substancję oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 99,7/03 do 97/3), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej stałej pianki.
181 990
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,34.
Przykład XXIX. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza grupę o wzorze 20, B oznacza B' we wzorze 7, R] oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 13 mg związku z przykładu XX i 2,8 mg octanu palladu 2,5 cm3 dwuchlorometanu zadaje się eterowym roztworem dwuazometanu w pokojowej temperaturze aż do wykorzystania wyjściowej substancji. Surową mieszaninę reakcyjną nasącza się na żel krzemionkowy i eluuje mieszaniną toluen/metanol. Frakcję zawierającą produkt odparowuje się i surową substancję oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 99,5/0,5 do 97/3), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej stałej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,38; odwrócona faza RP-8, metanol/fosforanowy roztwór buforowy o pH 7 = 92/8, Rf=0,27.
Przykład XXX. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza COO-CH(C6H5)2, B oznacza B' we wzorze 7, R] oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 8,2 mg związku z przykładu V i 3,1 mg dwufenylodwuazometanu w 0,5 cm3 toluenu ogrzewa się w 60° przez 3 godziny. Następnie roztwór ten bezpośrednio wprowadza się do kolumny chromatograficznej na żel krzemionkowy (gradient: toluen/metanol = od 100/0 do 97/3), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej stałej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,46.
Przykład XXXI. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R^ oznacza grupę o wzorze 21, B oznacza B' we wzorze 7, Rj oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8oznacza OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 50 mg związku A w 1 cm3 dwumetyloformamidu ogrzewa się z 125 mg chlorku trójbutylocynowego i 25 mg azydku sodowego ogrzewa w 100° przez 8 dni. Następnie mieszaninę tę wlewa się do 1 m wodnego roztworu HC1 i ekstrahuje octanem etylowym. Fazę organiczną przemywa się roztworem soli, suszy nad siarczanem sodowym i odparowuje w próżni. Surowy produkt oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 100/0,25 do 100/2,5), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,12; odwrócona faza RP-8, metanol/fosforanowy roztwór buforowy o pH 7 = 92/8, Rf=0,48.
Przykład XXXII. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CN, B oznacza B' we wzorze 7, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza CH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 20 mg związku z przykładu XVIII w 1 cm3 dwumetyloformamidu miesza się z 1 cm3 jodometanu i dodaje roztwór 5 mg dwu(trójmetylosylilo)amidku sodowego w 0,3 cm3 dwumetyloformamidu. Po wymieszaniu tej mieszaniny reakcyjnej przez 1,5 godz. w pokojowej temperaturze wlewa się jądo 0,1 m wodnego roztworu HC1, ekstrahuje octanem etylowym i rozdziela między octan etylowy oraz nasycony wodny roztwór kwaśnego węglanu. Organiczną fazę przemywa się roztworem soli, suszy nad siarczanem sodowym i odparowuje w próżni. Surowy produkt oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 100/0,25 do 100/2,5), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,43.
Analogicznie, jak podano w przykładzie ΧΧΧΠ, otrzymuje się następujące związki o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CN, B oznacza B' we wzorze 7, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
| Przykład | c | r8 | |
| ΧΧΧΙΠ | wzór 8 | c2h5 | db |
| XXXIV | wzór 8 | Bz | db |
181 990
Przykład XXXV. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CN, B oznacza B' we wzorze 7, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza CH2C(CH3)3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Do roztworu 38 mg związku z przykładu XXXVIII w 2 cm3 kwasu octowego i 0,2 cm3 aldehydu kwasu piwalowegododaje się 0,03 cm3 2 m kompleksu borowodoru z siarczkiem dwumetylowym w THF i mieszaninę tę miesza się przez 5 min w pokojowej temperaturze. Następnie mieszaninę tę wlewa się do mieszaniny kwaśnego węglanu sodowego i octanu etylowego i dodaje małą ilość wody. Organiczną fazę oddziela się, przemywa roztworem soli, suszy nad siarczanem sodowym i odparowuje w próżni. Pozostały bezbarwny olej (TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol 9/1, Rf=0,53) rozpuszcza się w 3 cm3 THF i dodaje roztwór 2,3-dwuchloro-5,6-dwucyjano-l ,4-benzochinonu w THF (DDQ, 8 mg w 0,2 cm3) w pokojowej temperaturze (RT), aż mieszanina reakcyjna ściemnieje. Mieszaninę tę nasącza się na 5 g żelu krzemionkowego i eluuje mieszaniną toluen/metanol (gradient od 100/0,5 do 95/5), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,49.
Analogicznie, jak podano w przykładzie XXXV, otrzymuje się następujące związki o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CN, B oznacza B' we wzorze 7, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
| Przykład | C | r8 | * * * * |
| 36 | wzór 8 | Bz | sb |
| 37 | wzór 8 | CH(CH3)2 | db |
Przykład XXXVIII. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CN, B oznacza B' we wzorze 7, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza H,.,,, oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Heterogeniczną mieszaninę 25 mg związku z przykładu XVIII, 1 cm3 kwasu trójfluorooctowego i 0,3 cm3 trój ety losy łanu energicznie miesza się w atmosferze argonu w 4° przez 20 godz. Mieszaninę reakcyjną wlewa się do nasyconego wodnego roztworu kwaśnego węglanu i ekstrahuje octanem etylowym. Organiczną fazę przemywa się roztworem soli, suszy siarczanem sodowym i odparowuje w próżni. Surowy produkt oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 100/0,5 do 100/5), otrzymując tytułowe substancje w postaci bezbarwnej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, indolina A R^0,16, indolina B Rf=0,10; odwrócona faza RP-8, metanol/woda/TFA = 95/4/1, indolina A+B Rf=0,71.
Przykład XXXIX. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CN, B oznacza B' we wzorze 7, C oznacza grupę o wzorze 8, R8oznacza O-(CH2)2-CH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Do roztworu 30 mg związku z przykładu XXXVIII (mieszaniny diastereoizomerów) w 1 cm3 metanolu dodaje się 100 mg wolframianu sodowego (Na2WO42H2O) i 0,1 cm3 30% roztworu nadtlenku wodoru. Mieszaninę reakcyjną miesza się w temperaturze pokojowej przez 20 min, a następnie bezpośrednio oczyszcza na drodze chromatografii z przepuszczaniem przez żel (Sephadex LH-20, metanol/octan etylowy =1:1). Frakcje zawierające produkt pośredni, N-hydroksyindol, odparowuje się, pozostałość przenosi się do 2 cm3 suchego DMF i dodaje 2 cm3 jodku propylu oraz 7,5 mg dwu(trójmetylosylilo)amidku sodowego. Po wymieszaniu przez 30 min w pokojowej temperaturze mieszaninę reakcyjną wlewa się do 0,1 m kwasu solnego i ekstrahuje octanem etylowym. Organiczną warstwę przemywa się i odparowuje w próżni. Produkt oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 100/0,5 do 98/2) i chromatografię z odwróconymi fazami (RP-8, gradient: metanol w wodzie = od 75 do 100%), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 90/10, Rf=0,51, metanol/fosforanowy roztwór buforowy o pH 7 = 92/8, Rf=0,30.
181 990
Przykład XL. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CN, B oznacza B' we wzorze 7, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza grupę O-C2H5,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Tytułowy związek otrzymuje się analogicznie, jak podano w przykładzie XXXIX.
Przykład XLI. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CN, B oznacza B' we wzorze 7, C oznacza grupę o wzorze 9, R8 oznacza O-CH3, Rq oznacza Br .... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 50 mg związku A w 2 cm3 czterochlorometanu miesza się z 3 mg sproszkowanego żelaza i dodaje w ciągu 1 godziny roztwór 10 mg bromu w czterochlorometanie. Surową mieszaninę reakcyjną wlewa się do wolnego roztworu kwaśnego węglanu i ekstrahuje octanem etylowym. Organiczną fazę przemywa się roztworem tiosiarczanu sodowego oraz roztworem soli i odparowuje w próżni. Surowy produkt oczyszcza się przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 99,5/5 do 97/3), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej stałej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,48; odwrócona faza RP-8, metanol/woda = 92/8, Rf=0,19.
Przykład XLII. Związek o wzorze 1, w którym A oznacza A' we wzorze 7, R6 oznacza CSNH2 B oznacza B' we wzorze 7, R, oznacza CH3, C oznacza grupę o wzorze 8, R8 oznacza OCH3,.... oznacza db, X oznacza grupę o wzorze 10 oraz Y oznacza grupę o wzorze 13.
Roztwór 50 mg związku A o 50 mg kwasu dwufenylofosfinodwutionowego w 4 cm3 izopropanolu ogrzewa się w 60° przez 3 dni. Mieszaninę reakcyjną chłodzi się do -20°, usuwa osad przez filtrację, rozcieńcza roztwór octanem etylowym i ekstrahuje wodnym roztworem kwaśnego węglanu sodowego. Organiczną fazę odparowuje się w próżni i surowy produkt oczyszcza przez chromatografię na żelu krzemionkowym (gradient: toluen/metanol = od 100/0,5 do 96/4), otrzymując tytułową substancję w postaci bezbarwnej pianki.
TLC: żel krzemionkowy, toluen/metanol = 9/1, Rf=0,29.
Działanie biologiczne
Działanie to związków według niniejszego wynalazku bada się na próbach cytotoksyczności oraz powstrzymywania ekspresji ICAM-1, VCAM-1 i selektyny E, a także rozrostu komórek. Stężenia związków, niezbędne dla powstrzymywania do połowy powstrzymywania maksymalnego (IC50) w każdej próbie przedstawia niżej tabela 2.
Tabela 2
| Związek | IC50 (pmol) na jedną próbę | |||||
| ICAM-1 | ICAM-1 | VCAM-1 | Selektyna E | Cytotoksyczność | Rozrost komórek | |
| (HaCat) | (HMEC) | (HMEC) | (HUVEC) | (24 godz.) | (HaCat 72 godz.) | |
| Związek A | 0,009 | 0,06 | 0,002 | 0,04 | >40 | 0,006 |
| Związek B | 0,02 | 1,3 | 0,03 | >40 | 0,05 |
Próby te przeprowadza się następująco:
Do prób rozrostu komórek oraz Elisa komórek z ICAM-1 używa się komórki HaCat, linię samorzutnie przekształconych, nienowotworogennych ludzkich komórek keratynocytowych o silnie zachowanych cechach fenotypowego różnicowania prawidłowych keratynocytów (Boukamp i in„ 1988 J. Celi Biol. 106, 761-771).
A. Próba Elisa komórek z komórek z ICAM-1
I. Próba Elisa keratynocytowych komórek z ICAM-1.
Próbę Elisa komórek z ICAM-1 stosowaną do oznaczania powstrzymywania ekspresji ICAM-1 opisali szeroko Winiski i Foster (1992, J. Invest. Dermatol., 99, 48-52). Komórki HaCaT posiewa się w płytce do mikromiareczkowania z 96 wgłębieniami (2 · 104 komórek na wgłębienie w pożywce hodowlanej: DMEM zawierającej 5%FCS, 100jednostek/cm3 penicyliny, 100 pg/cm3 streptomycyny, 2 mmol/dm3 glutaminy, 1 mmol/dm3 pirogronianu Na), pozwala wzrastać do zrastania się, a następnie inkubuje przez około 24 godz. na świeżej pożywce testowej
181 990 (jak pożywka hodowlana, ale z 0,5% FCS zamiast 5%) z pożywką pobudzającą IFN-y/TFN-a (pożywka testowa + 1000jednostek/cm3 ΙΡΝ-γ/3 ng/cm3 TNF-<x) lub bez niej zarówno w obecności, jak i w nieobecności związku A lub związku B. Następnie pożywkę wymywa się i powierzchniowe warstwy komórek utrwala 1% paraformaldehydem. Te powierzchniowe warstwy inkubuje się z nasyconymi ilościami przeciwciał pierwotnych (mysie przeciw-ICAM-1 monoklonalne) i wtórnych (kozia przeciwmysia peroksydaza sprzężona). Dalsza reakcja peroksydazy wykorzystuje 3-amino-9-etylokarbazol (AEC) jako podłoże i tworzy nierozpuszczalny, barwny produkt, który łatwo mierzy się wzorcowym czytnikiem płytek do mikromiareczkowania.
II. Pomiar cytotoksyczności
Po zakończeniu reakcji z AEC do wykrywania ICAM-1 warstwy HaCaT przepłukuje się PBS (0,2 cm3) i PBS zlewa się z płytek, które następnie osusza się przez lekkie przyciskanie z góry papierowego ręcznika w celu usunięcia nadmiaru cieczy. Dolne powierzchnie płytek do mikromiareczkowania delikatnie przeciera się wilgotną tkaniną do twarzy, a następnie ponownie suchą tkaniną do twarzy i odczytuje gęstość optycznąprzy 492 nm. Zanim powierzchniowe warstwy zdołają wyschnąć, do każdego wgłębienia dodaje się 0,1 cm3 0,1% roztworu fioletu krystalicznego w PBS (przepuszczonego uprzednio przez filtr 0,2 pm). Następnie płytki inkubuje się w pokojowej temperaturze przez 10 minut, przemywa starannie 5 razy PBS, usuwa nadmiar cieczy, jak podano wyżej, i odczytuje znów ich gęstość optycznąprzy 492 nm, zanim te warstwy powierzchniowe zdążą wyschnąć. Różnica gęstości optycznych przed i po zabarwieniu daje wartości odpowiadające zabarwieniu fioletu krystalicznego, a więc odpowiada wielkościom powierzchniowych warstw komórek we wgłębieniach. Wartości te wykorzystuje się do skorygowania wartości AEC.
B. Próba Elisa komórek dla VCAM-1, ICAM-1 i selektyny Ew komórkach śródbłonkowych
Próba ta bazuje na 96-wgłębieniowej metodzie komórek Elisa, stosującej linię ludzkich mikronaczyniowych komórek śródbłonkowych HMEC-1 oraz ludzkie komórki śródbłonkowe z żyły pępkowej (HUVEC). Komórki te wstępnie zadaje się przez 4 godziny badanym związkiem A lub związkiem B, przez następne 8-16 godzin pobudza przez TNF-α, a następnie utrwala paraformaldehydem w celu późniejszej oceny ekspresji VCAM-1, ICAM-1 i selektyny E pośrednio metodą barwienia immunoperoksydazy. Skutki cytotoksyczne oznacza się przez zliczanie względnej liczby komórek (barwnik jąder Giemsa) po zadaniu badanymi substancjami w porównaniu z zagłębieniami kontrolnymi (tylko rozpuszczalnik i pożywka). Związki uznaje się za skuteczne, jeśli wykazują> 50% powstrzymywania VCAM-1, ICAM-1 lub selektyny E przy ubytku <25% komórek.
Metodologia
I. Linia komórek: W próbie z VCAM-1 i ICAM-1 stosuje się nieuśmierconą(duży antygen T wirusa SV-40) linię ludzkich mikronaczyniowych komórek śródbłonkowych (HMEC-1, Ades i in. Jrl Invest Dermatol 99: 683-690, 1992). Komórek HMEC-1 konstytucjonalnie wywołują ekspresję niskich poziomów ICAM-1, które odchylają się od normy pod wpływem czynników pośredniczących w zapaleniach. Mogą one jednak tylko wywoływać ekspresję VCAM-1 na skutek pobudzenia cytokinicznego. W celu o^eślenia optycznych warunków wywołania ekspresji VCAM-1 i ICAM-1 przeprowadzono doświadczenia typu dawka-odpowiedź oraz czas-przebieg.
II. Warunki rozrostu: Komórki HMEC-1 poddaje się rozrostowi w kolbach T-75 (Nunc) w znormalizowanych warunkach (37°C, 5% CO2) stosując 1,5 · 106 komórek na 1 cm3 pożywki hodowlanej (CM=podstawowa pożywka komórek śródbłonkowych [EBM, Cloneties], uzupełnione 10% FCS, 10 ng/cm3 ludzkiej EGF (Boehringer), 1 pg/cm3 hydrokortizonu (Sigma # 0888), 2,2 g/dm3 NaHCO3,15 mmol/dm3 Hepes, 0,11 g/dm3 pirogronianu sodowego, 4 mmol/dm3 glutaminy, 100 jednostek na cm3 penicyliny i 100 pg/cm3 streptomycyny). Po łagodnym poddaniu działania trypsyny (0,25% trypsyny + 0,1 % EDTA przez 8 min) i ponownym utworzeniu zawiesiny komórki ponownie posiewa się co 2-3 dni przy stosunku rozdzielenia 1:3.
III. Próba Elisa komórek z VCAM-1 i ICAM-1
Płaskodenne płytki do mikromiareczkowania z 96 wgłębieniami pokrywa się wstępnie wołową fibronektyną (FN; Sigma # F1141), a następnie posiewa po 2 104 komórek na wgłębienie 0,2 cm3 pożywki rozrostowej EBM i inkubuje przez noc. Następnego dnia próbną pożywkę
181 990
0,2 cm3/wgłębienie EBM najpierw zastępuje się pożywką hodowlaną (CM, uzupełnioną5% FCS zamiast 10%), a następnie tę pożywkę zastępuje się 0,18 cm3 pożywki zawierającej albo (1) związek A lub związek B w odpowiednich stężeniach, (2) odpowiednie stężenia pożywki ekstrahowanej mieszaniną rozpuszczalnik/metanol, albo (3) samą próbną pożywkę EBM i inkubuje przez 4 godz. w 37°C. Każdą próbę w 96 zagłębieniach przeprowadza się w zdublowanych wgłębieniach. Następnie komórki pobudza się przez dodanie 0,02 cm3 stężonego roztworu cytokinicznego (2000 jednostek TNFana cm3) i inkubuje przez 16 godz. w 37°C.
Następnie powierzchniową warstwę komórek przemywa się 1% paraformaldehydem w pożywce EBM, utrwala w 2% paraformaldehydzie przez 15 min w pokojowej temperaturze (RT) i kilkakrotnie przemywa PBS. PBS usuwa się z komórek i inkubuje ich warstwę powierzchniową przez 30 min w PBS zawierającym 10% normalnej surowicy koziej (NGS). Roztwór NGS zastępuje się 0,1 cm3/wgłębienie monoklonalnym przeciwciałem przeciw VCAM-1 lubICAM-1 i inkubuje przez noc w 4°C. Następnie usuwa się roztwór monoklonalnego przeciwciała (mAb) i kilkakrotnie przemywa komórki PBS, a następnie prowadzi inkubacje z PBS, zawierającym 10% NGS, przez 30-60 min w RT. Roztwór NGS usuwa się i dodaje 0,1 cm3 sprzężonego z peroksydazą chrzanową koziego F (Ab^ przeciwmysiego przeciwciała IgG (Tago; rozcieńczenie 1:500 w PBS zawierającym 5% NGS) i płytki inkubuje się przez 1 godz. w RT. Następnie wtórne przeciwciała usuwa się i przemywa komórki PBS, który następnie zastępuje się 0,15 cm3/wgłębienie świeżo przygotowanego i przesączonego roztworu AEC (3-amino-9-etylo-karbazolu; Sigma) i inkubuje płytki przez 45-60 min w RT. Usuwa się podłoże peroksydazowe i przemywa komórki PBS. Odczytuje się wartości gęstości optycznej AEC czytnikiem płytki do mikromiareczkowania przy 550 nm i koryguje według „ślepej próby” albo wartości odniesienia przy 690 nm.
IV. Próba selektyny E. Próbę selektyny E przeprowadza się z zastosowaniem świeżo wydzielonych HUVEC, w zasadzie tak, jak podano w próbach dla VC AM-1 i ICAM-1, z wyjątkiem krótszego pobudzania przez TNFa (6-8 godzin).
V. Pomiar cytotoksyczności (Ubytek komórek na podstawie barwnika jąder):
Śródbłonkowe komórki odbarwia się, zastępując PBS 95% etanolem, przez 20 min (dwie zmiany po 10 min), kontrolując przez oględziny mikroskopowe. Następnie komórki te przemywa się wodą destylowaną i ich warstwę powierzchniową pokrywa się 33% roztworem Giemsa w wodzie destylowanej na 5 min w RT. Następnie wgłębienia przepłukuje się wodą destylowaną i suchym powietrzem przynajmniej przez 15 min. Do sprawdzenia, że tylko jądra są zabarwione przy zasadniczym braku zabarwienia cytoplazmy, stosuje się oględziny mikroskopowe. Odczytuje się gęstość optyczną roztworu Giemsa czytnikiem płytki do mikromiareczkowania przy 550 nm i koryguje według „ślepej próby” (zestawy bez komórek) przy 690 nm.
VI. Ocena danych
Wartości AEC konstytucjonalnej ekspresji VCAM-1 i selektyny E (nie pobudzane zagłębienia kontrolne) sązasadniczo równe wartościom izotypowo dobranego kontrolnego mAb i reprezentują barwę tła. W każdej płytce z 96 wgłębieniami tę średnią konstytucjonalną wartość odejmuje się od średniej wartości AEC dla każdej grupy cytokinicznie pobudzanej (EBM i kontrolne rozpuszczalniki, a także badana substancja), otrzymując liczbę, która odpowiada odchyleniom od normy ekspresji adhezyjnych cząsteczek komórkowych (CAM) ICAM-1 i zdolnej do pobudzenia VCAM-1 lub selektyny E oznaczanym jako (AEC-CAM). Każdą wartość AECCAM dzieli się następnie przez odpowiednią średnią wartość Giemsa, otrzymując liczby, które stanowią oszacowanie względnych poziomów ekspresji CAM dla danej gęstości komórek określonej na podstawie liczby jąder (oznacza się to jako stosunek AEC: Giemsa).
AEC (pobudzony) - AEC (niepobudzony = ACE-CAM
AEC-CAM/Giemsa = stosunek AEC: Giemsa
Stąd też „aktualne” wartości IC50 dla CAM określa się przez porównanie wartości AEC: Giemsa dla badanej substancji z wartościami dla pobudzonych czynników kontrolnych (EBM, rozpuszczalnik). Wartości te następnie analizuje się w odniesieniu do wartości IC50 dla samego czynnika Giemsa. Ścisłe kryteria określają czy powstrzymywanie CAM w zależności od profilu cytotoksyczności (Giemsa) wskazuje na „rzeczywisty” sukces, który należy wykorzystać.
181 990
C. Próba rozrostu komórek HaCaT
Komórki HaCaT hoduje się na pożywce DMEM (Gibco # 074-02100), uzupełnionej 2,2 g/dm3 NAHCO3, 0,11 g/dm3 pirogronianu sodowego, 15 mmolowym Hepes, 5% płodowej surowicy cielęcej (FCS), penicyliną (100 jednostek/cm3), streptomycyną (100 pg/cm3) i glutaminą (aby podwyższyć końcowe stężenie do 4 mmolowego). Do prób rozrostu komórki oddziela się przez poddanie działaniu trypsyny, tworzy z nich zawiesinę w świeżej pożywce i posiewa na płytkach do mikromiareczkowania z 96 wgłębieniami z końcową gęstością 4000 komórek w 0,2 cm3 na wgłębienie. Po 24 godzinach (dzień zerowy) pożywkę tę zastępuje się świeżą pożywką, zawierającą stopniowane stężenia badanego związku. Po 3 dniach inkubacji w 37°C/5% CO2 mierzy się stopień rozrostu komórek w porównaniu z kontrolnymi rozpuszczalnikami przez analizę kolorymetryczną, która mierzy względną masę komórek z zastosowaniem sulforodaminy B jako barwnika (Shekan i in., 1990, J. Natl. Cancer Inst. 82,1107-1112). „Początkowa liczbę komórek” oznacza się przez pomiar względnej masy komórek w dniu zerowym. Wyniki przedstawia się jako % powstrzymywania = 100 - % kontrolnej gęstości optycznej (gdzie kontrolny rozpuszczalnik = 100%) i reprezentują one średnią ± odchylenie standardowe z trzech pomiarów. Krzywą dawka-odpowiedź wykreśla się w układzie półlogarytmicznym i określa stężenie niezbędne do powstrzymywania równego połowie powstrzymywania maksymalnego (IC50) przez liniową interpolację. Maksymalne powstrzymywanie netto bez ubytku komórek reprezentuje „początkowa liczba komórek” i wynosi zwykle 90-98%.
Widma NMR (jądrowego rezonansu paramagnetycznego) (CDC13)
Przykład : Widmo:
(3 konformery 55:44:3, większy i mniejszy konformer oznaczony odpowiednio * lub °): 8,80* (d, J=10Hz, NH); 7,89* (d, J=10Hz);
7,78° (d, J=10Hz, NH); 7,57° (d, J=10Hz, NH); 7,50*° (d, J=7Hz, MeMeOTrp H-4’); 7,39*. 7,37° (2d, J=8Hz, MeMeOTrp H-7’); 7,20*° (m, MeMeOTrp, H-6’); 7,11°, 7,06* (2s, MeMeOTrp H-2’); 7,03*° (2dd, MeMeOTrp H-5’); 6,16° (d, J=10Hz, Leu NH); 5,95* (d, J=6Hz, Leu NH); 5,30° (m, al-H); 5,10* (dd, kwas hydroksymasłowy al-H); 5,03-4,98 (m, al-H); 4,91 (dd, al-H); 4,85 (m, al-H); 4,71° (m, al-H); 4,45* (dd, al-H); 4,29* (m, al-H); 4,03*, 4,02° (2s, N-OMe); 3,87 (dd); 3,72*, 3,64° (2s, COOMe); 3,63-3,50 (m); 3,47* (q, J=7Hz, MeAla al-H); 3,41° (s, N-Me); 3,36* (dd, MeMeOTrp β-H); 3,23-3,17 (m); 3,20* (s, MeAla N-Me); 3,19° (s, N-Me); 2,91* (s, MeMeOTrp N-Me); 2,53* (s, MeLeu N-Me); 2,51° (s, MeMeOTrp N-Me); 2,432,09 (m); 2,03-1,89 (m); 1,83-1,75 (m); 1,68-1,07 (m); 1,52* (d,
181 990
J=7Hz, MeAla β-Me); 1,48° (d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,04 (d, J=6,5Hz); 0,98-0,83 (m); 0,53* (d, J=6,6Hz, Leu Me); 0,01* (d, J=6,6, Leu Me); -0,32 (ddd, J=3,6Hz, J=11,1Hz, J=14,5Hz, Leu βCH).
(pochodna z otwartym łańcuchem o wzorze 4): (2 konformery 68:32, większy i mniejszy konformer oznaczony odpowiednio * lub °): 8,16, 8,12, 8,05, 8,00 (4d, NH); 7,58°, 7,55* (2d, J=8Hz, MeMeOTrp 4’H); 7,38*° (d, MeMeOTrp H-7’); 7,22*, 7,20° (2m, MeMeOTrp H-6’); 7,15*, 7,12° (2s, MeMeOTrp H-2’); 7,07*, 7,03° (2m, MeMeOTrp H5’); 6,57 (s br, NH); 5,10° (dd, al-H); 5,17* (dd, kwas hydroksymasłowy al-H); 5,11*° (m, MeLeu al-H); 5,04*° (dd, al-H); 4,99* (ddd, al-H); 4,88° (ddd, Leu al-H); 4,51° (dd); 4,53* (m, al-H); 4,48° (m); 4,42* (m br, MeAla al-H); 4,05*, 4,03° (2s, N-OMe); 3,88° (q, J=7Hz, MeAla al-H); 3,71°, 3,68* (2s, COOMe); 3,57*, 3,54° (2s, COOMe); 3,47* (m br, MeMeOTrp al-H); 3,27°, 3,21* (2s, NMe); 3,2 (m, MeMeOTrp p-Ha); 3,00* (s, NMe); 2,9 (m, MeMeOTrp p-Hb); 2,64° (s, NMe); 2,32*, 2,28° (2s, NMe); 2,33-2,13 (m); 2,20 (m); 1,86 (m); 1,7-1,1 (m); 1,50°, 1,48* (2d, J=7Hz, MeAla β-Me); 0,97-0,93 (m); 0,90-0,76 (m).
(3 konformery 2:2:1, mniejszy konformer oznaczony *): 8,81 (d,
J=10Hz, NH); 7,93 (d, J=10Hz, NH); 7,79 (d, J=9Hz, NH); 7,65 (m br, NH); 7,54 (m, MeMeOTrp H-4’); 7,38, 7,37, 7,34* (3d, J=8Hz, MeMeOTrp H-7’); 7,19 (m, MeMeOTrp, H-6’); 7,08-6,98 (m, MeMeOTrp H-5’); 7,02 (s, MeMeOTrp H-2’); 6,14 (d, J=10Hz, Leu NH); 6,29* (d, Hz=7Hz, Leu NH); 6,07 (d, J=6Hz, Leu NH); 5,25 (m, alH); 5,12-4,92 (al-H); 4,84 (m, al-H); 4,69 (m, al-H); 4,43 (m, al-H); 4,29 (m, al-H); 4,03*, 4,02, 4,00 (3s, N-OMe); 3,98 (m, al-H); 3,633,3 (m); 3,39-3,34* (s br NMe); 3,21 (s, NMe); 3,18* (s, NMe); 3,13
181 990 (m); 3,07* (s, NMe); 3,04* (s, NMe); 2,91 (s, N-Me); 2,53 (s, NMe); 2,37 (s br, NMe); 2,5-1,05 (m); 1,47, 1,43, 1,41* (3d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,03 (d, J=6,5Hz); 0,98-0,83 (m); 0,68*, 0,55, 0,47*, -0,02 (4d, J=6,6Hz, Leu Me); -0,32 (ddd, Leu β-ΟΗ).
(3 konformery 4:3:1, większy konformer oznaczony *): 8,82 (d,
J=10Hz, NH); 7,95* (d, J=9,3Hz, NH); 7,90 (d, J=9,8Hz, NH); 7,80 (d, J=9,4Hz, NH); 7,59, 7,53 (2d, J=8Hz, MeMeOTrp H-4’); 7,457,30 (m, MeMeOTrp H-7’); 7,23-7,15 (m, MeMeOTrp, H-6’); 7,20, 7,18 (2s, MeMeOTrp H-2’); 7,11-7,03 (m, MeMeOTrp, H-5 ); 6,86* (q, J=5Hz, NHMe); 6,23 (d, 9,5Hz, Leu NH); 5,95 (d, J=6,5Hz, Leu NH; q; NHMe); 5,84* (d, J=8,9Hz, Leu NH); 5,55 (q, 5Hz, NHMe); 5,3-4,95 (m, al-H); 4,84 (ddd, al-H), 4,69 (ddd, al-H); 4,42 (dd, MeLeu al-H); 4,34 (ddd, Leu al-H); 4,05*, 4,03, 4,02 (3s, N-OMe); 3,98 (m, al-H); 3,63-3,52 (m, al-H); 3,47 (q, Ala al-H); 3,37, 3,35*, 3,24*. 3,22, 3,20 (5s, NMe); 3,3-3,2 (m); 3,03*, 2,92 (2s, NMe); 2,85, 2,74, 2,70* (3d, J=5Hz, NH-Me), 2,53, 2,52 (2s, NMe); 2,23-1,93 (m); 1,85-1,05 (m); 1,53, 1,47, 1,44* (3d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,03 (d, J=6,5Hz); 0,98-0,80 (m); 0,57*, 0,55, 0,38*, 0,08 (4d, J=6,6Hz, Leu Me); -0,30 (ddd, Leu β-CH).
(3 konformery 40:53:7, oznaczone * 0 ’): 8,81* (d, J=10Hz, C9AA
NH); 7,88* (d, J=10Hz, CgAA NH); 7,78° (d, J=10Hz, NH); 7,57° (d, J=10Hz, NH); 7,52*° (2d, J=7Hz, MeMeOTrp H-4’); 7,39*, 7,37° (2d, J=8Hz, MeMeOTrp H-7’); 7,27* (s, MeMeOTrp H-2’); 7,20, 7,18 (2m, MeMeOTrp, H-6’); 7,17* (s, MeMeOTrp H-2’); 7,03°, 7,01* (2m, MeMeOTrp H-5’); 6,17° (d, J=10Hz, Leu NH); 5,98* (d, J=6Hz, Leu NH); 5,77’ (d, J=10Hz, Leu NH); 5,31° (ddd, MeAla al-H); 5,19* (dd, kwas hydroksymasłowy al-H); 5,05-4,94 (m, al-H); 4,88-4,83 (m, alH); 4,70-4,64 (m, al-H); 4,48* (dd, MeLeu al-H); 4,32* (m, Leu al-H);
181 990
4,03*, 4,02° (2s, N-OMe); 3,93° (m, al-H); 3,7-3,5 (m, morfolina); 3,5-3,2 (m); 3,40° (s, N-Me); 3,34° (dd, MeMeOTrp H-pa); 3,22 (m, MeMeOTrp H-pb); 3,20° (s, N-Me); 3,17* (s, N-Me); 2,93* (s, MeMeOTrp N-Me); 2,54* (s, MeLeu N-Me); 2,53° (s, N-Me); 2,4-2,35 (m); 2,2-1,9 (m); 1,83-1,05 (m); 1,53*, 1,50° (2d, J=7Hz, MeAla βMe); 1,04 (d, J=6,5Hz, MeLeu Me); 1,00-0,77 (m); 0,57* (d, J=6,6Hz, Leu Me); 0,52’; 0,34’ (2d, J=6,6Hz, Leu Me); 0,09* (d, J=6,6Hz, Leu Me); -0,25 (ddd, Leu β-CH).
(2 konformery 45:55, oznaczone * °): 8,84* (d, J=10Hz, C9AA NH);
7,87* (d, J=10Hz, C9AA NH); 7,77° (d, J=10Hz, NH); 7,57° (d, J=10Hz, NH); 7,55*, 7,52° (2d, J=7Hz, MeMeOTrp H-4’); 7,36*, 7,35° (2d, J=8Hz, MeMeOTrp H-7’); 7,36* (s, MeMeOTrp H-2’); 7,23* (s, MeMeOTrp H-2’); 7,20, 7,17 (2m, MeMeOTrp, H-6’); 7,03°, 7,01* (2m, MeMeOTrp H-5’), 6,17° (d, J=10Hz, Leu NH); 5,95* (d, J=6Hz, Leu NH); 5,31° (ddd, MeAla al-H); 5,24° (dd, kwas hydroksymasłowy al-H); 5,05-4,97 (m, al-H); 4,93 (dd, al-H); 4,87 (dd, alH); 4,88-4,83 (m, al-H); 4,66-4,60 (m, al-H); 4,48* (dd, MeLeu al-H); 4,38* (ddd, Leu al-H); 4,15-4,00 (m); 4,03*, 4,02° (2s, N-OMe); 3,98° (m, al-H); 3,7-3,2 (m); 3,40° (s, N-Me); 3,20° (s, N-Me); 3,17* (s, N-Me); 3,05-2,9 (m); 2,99, 2,98 (2s, CON-Me); 2,96 (s, 2xCONMe); 2,92* (s, MeMeOTrp N-Me); 2,54 (s, MeLeu N-Me i N-Me); 2,42,25 (m); 2,15-1,9 (m); 1,83-1,05 (m); 1,53*, 1,50° (2d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,04 (d, J=6,5Hz, MeLeu Me); 1,00-0,83 (m); 0,79°, 0,74° (2d); 0,57* (d, J=6,6Hz, Leu Me); 0,13* (d, J=6,6Hz, Leu Me); -0,25 (ddd, Leu β-CH).
(3 konformery 70:28:2, oznaczone * ° ’): 8,89* (d, 10Hz, PrLeu6
NH); 7,89* (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,77° (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,52° (d, 8Hz, indol H-4’); 7,50° (d, PrLeu2 NH); 7,48* (d, 8Hz, indol
181 990
H-4’); 7,38* (d, 8Hz, indol Η-7’); 7,37° (d, 8Hz, indol Η-7’): 7,19° (dd, indol H-6’); 7,18* (dd, indol H-6’); 7,13° (s, indol H-2’); 7,02* (s, indol H-2’); 6,99° (dd, indol H-5’); 6,90* (dd, indol H-5’); 6,18° (d br, 10Hz, Leu NH); 5,93* (d, 6Hz, Leu NH); 5,83’ (d, Leu NH); 5,30° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,30* (dd, Hba a-H); 5,02* (ddd, PrLeu6 a-H); 5,00° (ddd, PrLeu2 a-H); 4,89* (dd, MeTrp a-H); 4,84* (ddd, PrLeu2 a-H);
4,71° (ddd, a-H); 4,44* (dd, MeLeu a-H); 4,37* (ddd, Leu a-H); 4,03*, 4,02° (2s, N-OMe); 3,63-3,52; 3,49* (q, 7Hz, MeAla a-H);
3,40° (s, N-Me); 3,38* (dd, MeTrp β-Ha); 3,26-3,20; 3,23* (s, MeAla N-Me); 3,21° (s, N-Me); 2,93* (s, MeTrp N-Me); 2,53* (s, MeLeu NMe); 2,52° (s, N-Me); 2,45-1,75; 2,33; 2,15 (2m, azyrydyna); 1,561,07; 1,50* (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,47° (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,03* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,98-0,83; 0,48* (d, 6,6Hz, Leu δ'-Me); 0,13* (d, 6,6Hz, Leu δ’’-Me); -0,48* (ddd, Leu γ-CH).
(3 konformery 45:51:4, oznaczone * ° ’): 8,86* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,87* (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,75° (d, 10Hz, PrLeu6 NH);
7,57* (d, 8Hz, indol H-4’); 7,55° (d, PrLeu2 NH); 7,51° (d, 8Hz, indol H-4’); 7,41° (s, indol H-2’); 7,38* (d, 8Hz, indol H-7 ); 7,36° (d, 8Hz, indol H-7’); 7,29* (s, indol H-2’); 7,18* (dd, indol H-6’); 7,17° (dd, indol H-6’); 7,03° (dd, indol H-5’); 7,01* (dd, indol H-5’); 6,17° (d br, 10Hz, Leu NH); 5,94* (d, 6Hz, Leu NH); 5,79’ (d, Leu NH); 5,30° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,27* (dd, a-H); 5,00* (ddd, PrLeu6 a-H); 4,98° (ddd, a-H); 4,93° (dd, a-H); 4,87* (dd, a-H); 4,85* (ddd, PrLeu2 aH); 4,63° (ddd, a-H); 4,47* (dd, MeLeu a-H); 4,40 (m); 4,02* (ddd, Leu a-H); 4,02, 4,01 (2s, N-OMe); 3,68-3,22; 3,40° (s, N-Me); 3,20° (s, N-Me); 3,18* (s, MeAla N-Me); 2,91* (s, MeTrp N-Me); 2,55° (s, N-Me); 2,53* (s, MeLeu N-Me); 2,35-1,05; 1,54* (d, 7Hz, MeAla βMe); 1,50° (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,03* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me);
181 990
0,98-0,83; 0,78° (d, 6Hz, Leu δ’-Me); 0,73° (d, 6Hz, Leu δ’’-Me); 0,57* (d, 6,6Hz, Leu δ’-Me); 0,16* (d, 6,6Hz, Leu δ’’-Me); -0,27* (ddd, Leu γ-CH).
(3 konformery 46:51:3, oznaczone * ° ’): 8,87* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,87* (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,76° (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,56° (d, PrLeu2 NH); 7,55* (d, 8Hz,indol H-4’); 7,52° (d, 8Hz, indol H-4’); 7,37 (d, 8Hz, indol H); 7,36 (d, 8Hz, indol H); 7,36° (s, indol H2’); 7,22* (s, indol H-2’); 7,20* (dd, indol H-6 ); 7,18° (dd, H-6 ); 7,03° (dd, indol H-5’); 7,00* (dd, indol H-5’); 6,16° (d, 10Hz, Leu NH); 5,94* (d, 6Hz, Leu NH); 5,78’ (d, Leu NH); 5,31° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,27* (dd, a-H); 5,06-4,80; 4,65 (ddd, a-H); 4,47* (dd, MeLeu a-H); 4,33 (m); 4,03, 4,01 (2s, N-OMe); 4,00 (ddd, a-H); 3,75-3,20; 3,40 (s, N-Me); 3,20 (s, N-Me); 3,18* (s, MeAla N-Me); 2,91* (s, MeTrp N-Me); 2,53 (s, N-Me); 2,53° (s, MeLeu N-Me); 2,45-1,07; 1,53* (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,49° (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,03* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,98-0,83; 0,79 (d, 6Hz, Me); 0,74 (d, 6Hz, Me); 0,55* (d, 6,6Hz, Leu δ’-Me); 0,07* (d, 6,6Hz, Leu δ’’-Me); -0,36* (ddd, Leu β-CH).
(4 konformery 27:33:17:33, oznaczone * 0 ’ ”): 8,9* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 8,82’ (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,9* (d, 10Hz,PrLeu2 NH); 7,86’ (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,76° (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,75” (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,24* (s, indol); 7,03* (dd, indol); 6,17” (d br, 10Hz, Leu NH); 6,17° (d br, 10Hz, Leu NH); 6,03’ (d, 6Hz, Leu NH); 5,98* (d, 6Hz, Leu NH); 4,02” (s); 4,02° (s); 4,02* (s); 4,02’ (s); 3,40 (s, NMe); 3,40 (s, N-Me); 3,20 (s, N-Me); 3,20 (s, N-Me); 3,17 (s, N-Me); 2,97 (s, N-Me); 2,94 (s, N-Me); 2,94 (s, N-Me); 2,93 (s, N-Me); 2,91 (s, N-Me); 2,56 (s, N-Me); 2,56 (s, N-Me); 2,53’ (s, MeLeu N-Me); 2,53* (s, MeLeu N-Me); 1,53* (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,53’ (d, 7Hz,
181 990
MeAla β-Me); 1,50° (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,50” (d, 7Hz, MeAla βMe); 1,03’ (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 1,03* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,78° (d, 6,6Hz, Leu δ’-Me); 0,77” (d, 6,6Hz, Leu δ’-Me); 0,72” (6,6Hz, Leu δ’’-Me); 0,72° (d, 6,6Hz, Leu δ’’-Me); 0,61’ (d, 6,6Hz, Leu δ’-Me); 0,55* (d, 6,6Hz, Leu δ’-Me); 0,21* (d, 6,6Hz, Leu δ’’Me); 0,12* (d, 6,6Hz, δ’’-Me); -0,17’ (ddd, Leu γ-CH); -0,31* (ddd, Leu γ-CH).
(2 konfomnery 55:45, większy i mniejszy konformer oznaczony odpowiednio * lub °): 8,80* (d, J=10Hz, NH); 7,88* (d, J=10Hz, NH); 7,77° (d, J=10Hz, NH); 7,57° (d, J=10Hz, NH); 7,52*, 7,51° (2d, J=10Hz, MeMeOTrp H-4’); 7,39*, 7,37° (2d, J=8Hz, MeMeOTrp H7’); 7,20*° (m, MeMeOTrp, H-6’); 7,16°, 7,09* (2s, MeMeOTrp H-2’); 7,03*° (2dd, MeMeOTrp H-5’); 6,17° (d, J=10Hz, Leu NH); 5,97* (d, J=6Hz, Leu NH); 5,31° (m, MeAla al-H); 5,11-4,96 (m, al-H); 4,92* (dd, MeMeOTrp al-H); 4,87 (ddd, al-H); 4,69° (m, Leu al-H); 4,47* (dd, MeLeu al-H); 4,27* (dd, Leu al-H); 4,03*, 4,02° (2s, N-OMe); 3,92 (dd); 3,65-3,15 (m); 3,47* (q, J=7Hz, MeAla al-H); 3,41° (s, NMe); 3,21* (s, MeAla NMe); 3,20° (s, N-Me); 2,92* (s, MeMeOTrp NMe); 2,53* (s, MeLeu N-Me); 2,51° (s, N-Me); 2,35-2,75 (m); 1,71,05 (m); 1,53* (d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,49° (d, J=7Hz, MeAla βMe); 1,28*, 1,25*, 1,23°, 1,18° (4d, J=6Hz, COOCHMe2); 1,04 (d, J=6,5Hz, MeLeu Me); 0,98-0,83 (m); 0,55* (d, J=6,6Hz, Leu Me); 0,05* (d, J=6,6, Leu Me); -0,31 (ddd, Leu β-CH).
(3 konformery 55:43:2, oznaczone * 0 ’): 8,82* (d, J=10Hz, CgAA NH); 7,85* (d, J=10Hz, C9AA NH); 7,78° (d, J=10Hz, NH); 7,58° (d, J=10Hz, NH); 7,52*. 7,51° (2d, J=7Hz, MeMeOTrp H-4’); 7,39*, 7,37° (2d, J=8Hz, MeMeOTrp H-7’); 7,22*, 7,21° (2m, MeMeOTrp, H-6’); 7,14°, 7,08* (2s, MeMeOTrp H-2’); 7,03*° (2dd, MeMeOTrp H
181 990
5’); 6,17° (d, J=10Hz, Leu NH); 5,95* (d, J=6Hz, Leu NH); 5,78’ (d, J=10Hz, Leu NH); 5,31° (ddd, MeAla al-H); 5,12* (dd, kwas hydroksymasłowy al-H); 5,05-4,98 (m, al-H); 4,91* (dd, MeMeOTrp al-H); 4,86* (ddd, CgAA al-H); 4,73-4,68 (m, Leu al-H); 4,47* (dd, MeLeu al-H); 4,32-4,26 (m, Leu al-H); 4,25 (dq, J=11 Hz, J=7Hz, COOCH^); 4,15-4,07 (m, COOCHr); 4,04*, 4,03° (2s, N-OMe); 3,84° (m, al-H); 3,64-3,50 (m); 3,47* (q, J=7Hz, MeAla al-H); 3,41° (s, N-Me); 3,34° (dd, MeMeOTrp H-pa); 3,22 (m, MeMeOTrp H-pb); 3,20* (s, MeAla NMe); 3,19° (s, N-Me); 2,93* (s, MeMeOTrp N-Me); 2,53* (s, MeLeu N-Me); 2,52° (s, N-Me); 2,4-2,1 (m); 2,05-1,9 (m); 1,83-1,76 (m); 1,7-1,07 (m); 1,53*, 1,49° (2d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,30,1,25 (2t, J=7Hz, COOCH2CH3); 1,04 (d, J=6,5Hz, MeLeu Me); 1,00-0,84 (m); 0,55* (d, J=6,6Hz, Leu Me); 0,03* (d, J=6,6Hz, Leu Me); -0,32 (ddd, Leu β-ΟΗ).
(3 konformery 57:41:2, oznaczone * 0 ’): 8,82* (d, J=10Hz, CgAA NH); 7,90* (d, J=10Hz, CgAA NH); 7,78° (d, J=10Hz, NH); 7,58° (d, J=10Hz, NH); 7,52*° (2d, J=7Hz, MeMeOTrp H-4’); 7,39*, 7,38° (2d, J=8Hz, MeMeOTrp H-7’); 7,22*, 7,21° (2m, MeMeOTrp, H-6’); 7,14°, 7,08* (2s, MeMeOTrp H-2 ); 7,03°, 7,02* (2m, MeMeOTrp H5’); 6,17° (d, J=10Hz, Leu NH); 5,98* (d, J=6Hz, Leu NH); 5,82' (d, J=10Hz, Leu NH); 5,31° (ddd, MeAla al-H); 5,12* (dd, kwas hydroksymasłowy al-H); 5,05-4,98 (m, al-H); 4,91* (dd, MeMeOTrp al-H); 4,86* (ddd, CgAA al-H) 4,73-4,68 (m, Leu al-H); 4,47* (dd, MeLeu al-H); 4,28* (m, Leu al-H); 4,2-3,95 (m, COOCH2); 4,03*, 4,02° (2s, N-OMe); 3,90° (m, al-H); 3,64-3,42 (m); 3,47* (q, J=7Hz, MeAla alH); 3,41° (s, N-Me); 3,34° (dd, MeMeOTrp H-pa); 3,22 (m, MeMeOTrp H-pb); 3,20* (s, MeAla NMe); 3,19° (s, N-Me); 2,93* (s, MeMeOTrp N-Me); 2,53* (s, MeLeu N-Me); 2,52° (s, N-Me); 2,4-2,1
181 990 (m); 2,03-1,9 (m); 1,83-1,76 (m); 1,72-1,58 (m, COOCH2CH2CH3); 1,55-1,07 (m); 1,53*. 1,49° (2d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,04 (d J=6,5Hz, MeLeu Me); 1,00-0,84 (m); 0,54* (d, J=6,6Hz, Leu Me); 0,02* (d, J=6,6Hz, Leu Me); -0,34 (ddd, Leu β-ΟΗ).
(2 konformery 70:30, oznaczone odpowiednio * lub °): 8,92*, 7,87*, 7,75°, 7,58° (4d, J=10Hz, NH); 7,49* (d, J=8Hz, MeMeOTrp H-4’); 7,37* (d, J=8Hz, MeMeOTrp H-7’); 7,20* (dt, MeMeOTrp H-6’); 7,18°, 7,03* (2s, MeMeOTrp H-2’); 7,03°, 6,97* (2 dt, MeMeOTrp H5’); 6,20° (d, J=10Hz, Leu NH); 5,96* (d, J=7Hz, Leu NH); 5,33* (m, kwas hydroksymasłowy al-H); 5,02 (m, al-H); 4,90* (dd, al-H); 4,83* (ddd, al-H); 4,79* (dd, al-H); 4,70° (m, al-H); 4,39* (dd, al-H); 4,38° (m, al-H); 4,03* (s, N-OMe); 3,92° (m); 3,63-3,53 (m); 3,44-3,40 (m); 3,39°, 3,20° (2s, NMe); 3,32-3,18 (m); 3,17* (s, MeAla NMe); 2,94* (s, MeMeOTrp NMe); 2,53* (s, MeLeu NMe); 2,52° (s, NMe); 2,5-2,3 (m); 2,1-1,1 (m); 2,17*, 2,11° (2s, COMe); 1,51*, 1,48° (2d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,03* (d, J=6,5Hz); 0,98-0,83 (m); 0,52*, -0,11* (d, J=6,6Hz, Leu Me); -0,39* (ddd, Leu β-ΟΗ).
(3 konformery 45:40:15, oznaczone * ° ’): 8,78° (d, J=9,9Hz, NH); 7,83* (d, J=9,7Hz, NH); 7,76’ (d, NH); 7,59’ (d, J=7,8Hz, MeMeOTrp H-4’); 7,57 (d, J=9,5Hz, NH); 7,56, 7,53 (2d, J=8Hz, MeMeOTrp H4’); 7,46’ (s, MeMeOTrp H-2’); 7,42*, 7,39°, 7,34’ (3d, J=8,2Hz, MeMeOTrp H-7’); 7,24*, 7,22°, 7,18’ (3t, MeMeOTrp H-6’); 7,11*, 7,08’, 7,06° (3t, MeMeOTrp H-5’); 7,04*, 7,03° (2s, MeMeOTrp H2’); 6,25° (d, J=9,5Hz, Leu NH); 6,03* (d, J=7Hz, Leu NH); 5,99’ (d, J=8,8Hz, Leu NH); 5,28* (m, al-H); 5,13’ (t, J=4Hz, OH); 5,09-4,98 (m, al-H); 5,02 (t, J=4Hz, OH); 4,97 (dd, al-H); 4,88 (dd, al-H); 4,84 (m, al-H); 4,78-4,70 (m, al-H); 4,41 (dd, MeLeu al-H); 4,18 (ddd, Leu a|-H); 4,04, 4,02 (2s, N-Me); 3,78 (m, al-H); 3,65-3,35 (m); 3,42°,
181 990
3,32’, 3,22*, 3,20° (4s, NMe); 3,17-3,08 (m); 3,03’, 2,92’, 2,90*, 2,52*, 2,51° (5s, NMe); 2,01-1,1 (m); 1,53, 1,49, 1,40’ (3d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,04 (d, J=6,5Hz); 0,98-0,83 (m); 0,72’, 0,60*, 0,56’, 0,03’, (4d, J=6,6Hz, Leu Me); -0,16 (ddd, Leu β-CH).
(3 konformery 73:20:7, oznaczone * 0 ’): 8,54° (d, J=10Hz, NH); 8,38’ (s br, MeTrp N’-H); 8,26*, 8,17° (2d br, J=2Hz, MeTrp N’-H);
8,13 *, 8,03°, 8,01’ (3d, J=9,7Hz, NH); 7,78* (d, J=7,7Hz, MeTrp H4’); 7,74’, 7,70’, 7,63°, 7,63° (4d); 7,46*, 7,44°, 7,40’ (3d, J=8Hz MeTrp H-7’); 7,27* (dt, MeTrp H-6 ); 7,20*, 7,17° (2dt, MeTrp H-5’); 7,09°, 7,03* (2d, J=2Hz, MeTrp H-2’); 6,33° (d, J=10Hz, Leu NH);
6,17 * (d, J=7,4Hz, Leu NH); 5,97’ (d, J=9Hz, Leu NH); 5,38° (m, alH); 5,27* (dd, kwas hydroksymasłowy al-H); 5,21° (dd, al-H); 5,12* (ddd, al-H); 5,07* (dd, al-H); 4,96* (ddd, al-H); 4,87 (m); 4,55* (dd, MeLeu al-H); 4,29* (ddd, Leu al-H); 3,85-3,25 (m); 3,76* (q, J=7Hz, MeAla al-H); 3,49°, 3,36’ (2s, NMe); 3,13* (s, MeAla NMe); 3,29°, 3,13’ (2s NMe); 3,02* (s, MeTrp NMe); 2,62° (s, NMe); 2,60* (s, MeLeu NMe); 2,38-1,15 (m); 1,62*, 1,56°, 1,51’ (3d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,13* (d, J=6,5Hz MeLeu); 1,07-0,93 (m); 0,73’, 0,63*, 0,58’, 0,02* (4d, J=6,6Hz, Leu Me); -0,28* (ddd, Leu β-CH).
(3 konformery 67:29:4, oznaczone * ° ’): 9,52* (t, J=1,5Hz, CHO); 9,41° (t, J=1Hz, CHO); 9,05’ (m, CHO); 8,73* (d, J=10Hz, C9AA NH); 7,86* (d, J=10Hz, C9AA NH); 7,77° (d, J=10Hz, NH); 7,60° (d, J=10Hz, NH); 7,47*° (2d, J=7Hz, MeMeOTrp H-4’); 7,38*° (2d, J=8Hz, MeMeOTrp H-7’); 7,20*° (2t, MeMeOTrp, H-6’); 7,15°, 7,04* (2s, MeMeOTrp H-2’); 7,03° (m, MeMeOTrp H-5’); 7,00* (dd, MeMeOTrp H-5); 6,22° (d, J=10Hz, Leu NH); 6,02* (d, J=6Hz, Leu NH); 5,87’ (d, J=10Hz, Leu NH); 5,29° (ddd, MeAla al-H); 5,17* (dd, kwas hydroksymasłowy al-H); 5,03-4,93 (m, al-H); 4,91* (dd, Me30
181 990
MeOTrp al-H); 4,84* (ddd, CqAA al-H); 4,79-4,64° (m, Leu al-H); 4,43* (dd, MeLeu al-H); 4,35* (ddd, Leu al-H); 4,04’, 4,03*, 4,02° (3s, N-OMe); 3,81° (m, al-H); 3,63° (dd); 3,57-3,50 (m); 3,48-3,42 (m); 3,43* (q, J=7Hz, MeAla al-H); 3,38° (s, N-Me); 3,30-3,12 (m);
3,20° (s,N-Me); 3,15* (s, MeAla NMe); 2,93* (s, MeMeOTrp N-Me); 2,58° (s, N-Me); 2,53* (s, MeLeu N-Me); 2,25 (m, CHICHO); 2,151,9 (m); 1,85-1,74 (m); 1,65-1,08 (m); 1,48*, 1,45° (2d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,04* (d, J=6,5Hz, MeLeu Me); 0,98-0,83 (m); 0,67’, 0,58*, 0,52’, 0,01* (4d, J=6,6Hz, Leu Me); -0,20* (dd, Leu β-CH).
(2 konformery 1:1): 8,77 (d, J=10Hz, CgAA NH); 7,79 (d, J=10Hz, CgAA NH); 7,73 (d, J=10Hz, NH); 7,65 (d, J=10Hz, NH); 7,44, 7,42, 7,39 (4d, MeMeOTrp H-4’ i H-7’); 7,25, 7,22 (2t, MeMeOTrp, H-6 ); 7,13-7,03 (m, MeMeOTrp H-5’); 7,02, 6,98 (2s, MeMeOTrp H-2’); 6,19 (d, J=10Hz, Leu NH); 6,00 (d, J=6Hz, Leu NH); 5,80-5,53 (m, olefin-H); 5,31 (ddd, MeAla al-H); 5,08-4,67 (m, al-H, olefm-H); 4,47 (dd, MeLeu al-H); 4,15-3,98 (m); 4,05, 4,02 (2s, N-OMe); 3,7-3,0 (m); 3,44, 3,21, 3,20, 2,92, 2,52, 2,44 (6s, N-Me); 2,15-1,90 (m); 1,90-1,08 (m); 1,55, 1,50 (2d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,05 (d, J=6,5Hz, MeLeu Me); 1,0-0,8 (m); 0,60, 0,06 (2d, J=6,6Hz, Leu Me); -0,20 (ddd, Leu β-CH).
(3 konformery 44:53:3, oznaczone * ° ’): 8,81* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,78, 7,73, 7,67 (3d, 10Hz, NH); 7,43, 7,42 (2d, 8Hz, indol H4’); 7,37 (d, 8Hz, indol H-7’); 7,28-7,00; 7,02, 6,97 (2s, indol H-2’); 6,21° (d, 10Hz, Leu NH); 5,97* (d, 6Hz, Leu NH); 5,75’ (d, Leu NH); 5,50-4,65; 4,47* (dd, MeLeu a-H); 4,05 (dd, a-H); 4,04 (s, OMe); 4,02 (s, OMe): 3,65-3,10; 3,44° (s, MeAla N-Me); 3,22 (s, MeAla NMe); 3,19 (s, N-Me); 2,93* (s, MeTrp N-Me); 2,52, 2,39 (2s, N-Me); 2,15-0,82; 1,54*, 1,50° (2d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,04* (d, 6,5Hz, Me
181 990
Leu d-Me); 0,57* (d, 6,6Hz, Leu δ’-Me); 0,48’ (d, Leu δ’-Me); 0,26’ (d, Leu δ’’-Me); -0,04* (d, 6,6Hz, Leu δ’’-Me).
(3 konformery 47:48:5, oznaczone * ° ’): 8,63, 7,87, 7,77, 7,63 (4d, 10Hz, PrLeu NH); 7,49* (d, 7Hz, indol H-4’); 4,78° (d, 7Hz, indol H4’); 7,43* (d, 8Hz, indol H-7’); 7,41° (d, 8Hz, indol H-7’); 7,27* (dd, indol H-6’); 7,23° (dd, indol H-6’); 7,13* (dd, indol H-5 ); 7,08° (dd, indol H-5’); 7,04° (s, indol H-2 ); 7,02* (s, indol H-2’); 6,98’ (s, indol H-2’); 6,2° (d, 10Hz, Leu NH); 6,01* (d, 7Hz, Leu NH); 5,79’ (d, 9Hz, Leu NH); 5,30° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,07* (dd, Hba a-H); 5,03* (ddd, PrLeu6 a-H); 4,86* (ddd, PrLeu2 a-H); 4,79 (dd, MeTrp a-H); 4,47* (dd, MeLeu a-H); 4,18* (ddd, Leu a-H); 4,06 (s, N-OMe); 4,05’ (s, N-OMe); 4,03 (s, N-OMe); 3,71-3,50; 3,42 (s, N-Me); 3,23-3,05; 3,20 (s, N-Me); 3,18 (s, N-Me); 2,92 (s, N-Me); 2,52 (s, N-Me); 2,51 (s, N-Me); 2,03-1,08; 1,54* (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,50° (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,05* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,98-0,84; 0,63* (d, 6,6Hz, Leu δ’-Me); 0,53’ (d, 7Hz, Leu δ’-Me); 0,34’ (d, 7Hz, Leu δ’’Me); 0,11* (d, 6,6Hz, Leu δ’’-Me); -0,13* (ddd, Leu γ-CH).
(3 konformery 40:40:20, oznaczone * ° ’): 8,50* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 8,20 (m); 7,98* (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,57* (d, 8Hz, indol H4’); 7,53-7,35; 7,25-7,18; 7,23* (s, indol H-2’); 7,13-7,06; 7,05° (s, indol H-2’); 6,69 (d); 6,29 (d, br); 6,22 (d, br); 6,14° (d, 7Hz, Leu NH); 6,07* (d, 9Hz, Leu NH); 5,5° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,26-4,63 (m, a-H); 4,36 (m, MeLeu a-H); 4,18* (ddd, Leu a-H); 4,04 (s, OMe); 4,03’ (s, OMe); 4,02 (s, OMe); 3,68-2,78; 3,34 (s, N-Me); 3,19 (s, NMe); 3,12 (s, N-Me); 3,03 (s, N-Me); 2,91 (s, N-Me); 2,53 (s, N-Me); 2,10-1,05; 1,03-0,78; 0,76 (d); 0,71 (d, 6,5Hz, Leu γ-Me); 0,60 (d, 6,6Hz, Leu γ-Me); 0,08 (d, 6,6Hz, Leu γ-Me); -0,10 (ddd, Leu γ-CH).
181 990 (3 konformery 43:47:5, oznaczone * ° ’): 8,68* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,87*, d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,80° (d, 10Hz, NH); 7,63° (d, 10Hz, NH); 7,55-7,37 (m, indol); 7,27-7,10 (m, indol); 7,08° (s, indol H-2’); 7,03* (s, indol H-2’); 6,58 (t, 8Hz C=C, ); 6,23 (t, 8Hz C=C, );
6,18 ° (d, 6,7Hz, Leu NH); 6,03* (d, 10Hz, Leu NH); 5,80’ (d, Leu NH); 5,31° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,08-4,91 (a-H); 4,86* (ddd, PrLeu2 a-H); 4,77-4,68 M, a-H); 4,46* (dd, MeLeu a-H); 4,14* (ddd, Leu aH); 4,05° (s, OMe); 4,03* (s, OMe); 4,02’ (s, OMe); 3,71° (q, 7Hz, MeAla a-H); 3,60* (q, 7 Hz, MeAla a-H); 3,53-3,00; 3,44° (s, MeAla N-Me); 3,23 (s, N-Me); 3,20 (s, N-Me); 2,93* (s, MeTrp N-Me); 2,52 (s, N-Me); 2,44 (s, N-Me); 2,20-0,83; 1,56* (d, 7Hz, MeAla β-Me);
1,51° (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,05* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,62* (d, 6,6Hz, Leu δ’-Me); 0,57’ (d, Leu δ’-Me); 0,40’ (d, Leu δ’’-Me); 0,10* (d, 6,6Hz, Leu δ’’-Me); -0,17* (ddd, Leu γ-CH).
(3 konformery 51:45:4, oznaczone * ° ’): 8,68* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,87* (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,81° (d, 10Hz, PrLeu6 NH);
7,63° (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,53 (d, 8Hz, indol H-4’); 7,51 (d, 8Hz, indol H-4’); 7,43 (d, 8Hz, indol H-7’); 7,40 (d, 8Hz, indol H-7’); 7,26 (dd, indol H-6’); 7,23 (dd, indol H-6’); 7,13 (dd, indol H-5’); 7,07° (s, indol H-2’); 7,07 (dd, indol H-5’); 7,03* (s, indol H-2’); 6,21° (d, 10Hz, Leu NH); 6,05* (d, 6Hz, Leu NH); 5,79’ (d, 10Hz, Leu NH);
5,32° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,14* (dd, Hba a-H); 5,03* (ddd, PrLeu6 aH); 4,87* (ddd, PrLeu2 a-H); 4,83* (dd, MeTrp a-H); 4,77° (ddd, Leu a-H); 4,51* (dd, MeLeu a-H); 4,13* (ddd, Leu a-H); 4,06° (s, OMe); 4,03* (s, OMe); 3,68 (m); 3,57* (q, 7Hz, MeAla a-H); 3,44° (s, MeAla N-Me); 3,36* (dd, MeTrp β-Ha); 3,23 (dd, MeTrp β-Hb); 3,22 (s, N-Me); 3,17 (s, N-Me); 3,14 (dd); 2,96 (m, CCH); 2,93* (s, MeTrp NMe); 2,53 (s, N-Me); 2,49 (s, N-Me); 2,25-1,97; 1,86-1,78; 1,55* (d,
181 990
7Hz, MeAla β-Me); 1,52° (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,50-1,09; 1,06* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 1,00-0,85; 0,63* (d, 6,6Hz, Leu δ’-Me); 0,58’ (d, Leu δ’’-Me); 0,38’ (d, Leu d”-Me); 0,07* (d, 6,6Hz, Leu δ’’-Me); 0,11*(ddd, Leu γ-CH).
(6:4 mieszanina izomerów E/Z, każdy z 3 konformerami, podano tylko charakterystyczne sygnały): 8,61, 8,48, 7,93, 7,84, 7,82, 7,74 (d, 10Hz, PrLeuNH); 7,52 (d, 8Hz, indol); 7,08 s (indol H-2 ); 6,44, 6,22 (2dt, CW=CHCN); 6,36-6,26 (m); 6,13, 6,07, 5,87 (3d, Leu NH); 5,33-5,28 (m); 5,24 (2dm, CH=CHCN); 5,06-4,97 (m); 4,92 (2d); 4,87-4,75 (m); 4,49, 4,46 (2dd, MeLeu a-H); 4,28, 4,18 (2ddd, Leu a-H); 4,07, 4,06, 4,05, 4,03 (4s, N-OMe); 3,88, 3,82 (2q, 7Hz, MeAla a-H); 3,43, 3,40, 3,23; 3,21; 3,19; 3,12; 2,93, 2,55, 2,53, 2,52, 2.51 (11s, N-Me); 1,54-1,49 (5d, MeAla β-Me); 1,06, 1,04 (2d, 7Hz, MeLeu d-Me); 0,74, 0,65, 0,52, 0,26, 0,08 (5d, Leu γ-Me); -0,04 (ddd, Leu γ-CH).
(3 konformery 51:46:3, oznaczone * ° ’): 8,71* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,90* (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,76° (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,6° (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,52* (d, 8Hz, indol H-4’); 7,48° (d, 8Hz, indol H-4’); 7,42 (d, 8Hz, indol); 7,40 (d, 8Hz, indol); 7,26* (dd, indol H-6’); 7,13* (dd, indol H-5’); 7,07° (dd, indol H-5’); 7,03* (s, indol H-2’); 7,02° (s, indol H-2’); 6,16° (d br, 10Hz, Leu NH); 6,01* (d, Leu NH); 5,77’ (d, Leu NH); 5,31 (ddd, a-H); 5,05-4,97; 4,86 (ddd, a-H); 4,82 (dd, a-H); 4,74 (m); 4,46* (dd, MeLeu a-H); 4,17* (ddd, a-H); 4,05* (s, N-OMe); 4,03° (s, N-OMe); 3,68 (m); 3,57 (m); 3,47* (m, CH2CI); 3,43 (s, N-Me); 3,28* (dd, MeTrp β-Ha); 3,23* (s, MeAla N-Me); 3,21 (s, N-Me); 3,20* (dd, MeTrp β-Hb); 2,92* s, MeTrp N-Me); 2,53* (s, MeLeu N-Me); 2,49 (s, N-Me); 2,23° (dd, indol H-6’); 2,05-1,1; 1,54* (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,50° (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,05* (d, 6,5Hz,
181 990
MeLeu d-Me); 0,98-0,85; 0,57* (d, 6,6Hz, Leu d’-Me); 0,52’ (d, Leu d’-Me); 0,28’ (d, Leu d”-Me); 0,06* (d, 6,6Hz, Leu d”-Me); -0,32* (ddd, Leu γ-CH).
(3 konformery 37:59:4, oznaczone * 0 ’): 8,73* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,8* (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,73° (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,63° (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,49° (d, 8Hz, indol H-4’); 7,47* (d, 8Hz, indol H-4’); 7,42* (d, 8Hz, indol H-7'); 7,38° (d, 8Hz, indol H-7’); 7,25 (dd, indol); 7,22° (dd, indol H-6’); 7,12* (dd, indol H-5’); 7,06° (dd, indol H-5’); 7,04 (s, indol H-2’); 7,03 (s, indol H-2'); 6,22° (d br, 10Hz, Leu NH); 6,00* (d, 6Hz, Leu NH); 5,78’ (d, Leu NH); 5,31° (ddd, PrLeu a-H); 5,07 (dd, a-H); 5,05-4,90; 4,87 (ddd, a-H); 4,79 (dd, a-H); 4,72 (m); 4,49* (dd, MeLeu a-H); 4,11* (ddd, Leu a-H); 4,05* (s, NOMe); 4,03° (s, N-Me); 3,75-3,50; 3,43 (s, N-Me); 3,38-3,13; 3,28 (s, OMe); 3,23 (s, N-Me); 3,21° (s, N-Me); 2,92* (s, MeTrp N-Me);
2,53* (s, MeLeu N-Me); 2,48° (s, N-Me); 2,00-1,08; 1,55* (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,50° (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,05* (d, 6,5 Hz, MeLeu d-Me); 0,98-0,85; 0,60* (d, 6,6Hz, Leu d’-Me); 0,05* (d, 6,6Hz, Leu d”-Me); -0,18* (ddd, Leu γ-CH).
(2 konformery 50:50, oznaczone * °): 8,70* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,80* (d,10Hz, PrLeu2 NH); 7,71° (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,69° (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,47-7,35; 7,24 (dd, indol); 7,21 (dd, indol); 7,04 (dd, indol); 7,01 (dd, indol); 7,01 (s, indol H-2’); 6,97 (s, indol H-2’); 6,25° (d br, 10Hz, Leu NH); 6,00* (d, 6Hz, Leu NH); 5,30° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,10-4,69; 4,49* (dd, MeLeu a-H); 4,07* (ddd, Leu a-H); 4,04* (s); 4,02°; 3,72-3,02; 3,41 (s, N-Me); 3,20 (s, N-Me); 3,20* (s, MeAla N-Me); 2,91* (s, MeTrp N-Me); 2,53 (s, N-Me); 2,45 (s, NMe); 2,07-0,82; 1,55* (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,50° (d, 7Hz, MeAla β
181 990
Me); 1,04* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,6* (d, 6,6Hz, Leu d’-Me); 0,41 (m, cyPr); -0,03* (d, 6,6Hz, Leu d”-Me); -0,24* (ddd, Leu γ-CH).
(3 konformery 63:35:2, oznaczone * ° ’): 8,78° (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,93*, 7,77° (2d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,47* (d, 8Hz, indol H-7’); 7,43* (d, 8Hz, indol H-4’); 7,40-7,23; 7,17°, 7,13* (2dd, indol H-6’); 7,04, 7,03 (2s, indol H-2’); 6,93° (dd, indol H-5’); 6,97, 6,93 (2s, CHPh2); 6,74* (dd, indol H-5’); 6,14° (d, 10Hz, Leu NH); 5,92* (d, 6Hz, Leu NH); 5,78’ (d, Leu NH); 5,27° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,12* (dd, Hba a-H); 4,98* (ddd, PrLeu6 a-H); 4,96* (dd, MeTrp a-H); 4,85* (ddd, PrLeu2 a-H); 4,70° (ddd, a-H); 4,47* (dd, MeLeu a-H); 4,18* (ddd, a-H); 4,00*, 3,97° (2s, OMe); 3,57° (dd, MeTrp β-Ha); 3,53° (dd, MeTrp β-Hb); 3,37* (dd, MeTrp β-Ha); 3,27* (dd, MeTrp β-Hb); 3,20, 3,19, 2,93, 2,83 (4s, N-Me); 2,66 (q, 7Hz); 2,55-2,33; 2,52 (s, NMe); 2,46 (s, N-Me); 2,27-1,92; 1,80 (m); 1,68-1,05; 1,35°, 1.28* (2d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,03* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,96-0,83; 0,53’ (d, Leu d’-Me); 0,49* (d, 6,6Hz, Leu d’-Me); 0,32’ (d, Leu d”Me); -0,12* (d, 6,6Hz, Leu d”-Me); -0,49* (ddd, Leu γ-CH).
(mieszanina konformerów, podano tylko wybrane sygnały): 7,13, 7,03 (2s, indol H-2’); 4,56, 4,40 (2m, a-H); 4,03 (s, N-OMe); 3,42, 3,23, 3,07, 2,94, 2,53 (5s, N-Me); 0,57, 0,53 (2d, 6,6Hz, Leu d’-Me); 0,17, 0,03 (2d, 6,6Hz, Leu d”-Me); -0,03, 0,27 (2ddd, Leu β-CH).
(3 konformery 78:16:6, oznaczone * 0 ’): 8,45* (d, J=10Hz, PrLeu6 NH); 8,04* (d, J=10Hz, PrLeu2NH); 7,83° (d, J=10Hz, NH); 7,68*, 7,53° (2d, J=7Hz, indol H-4’); 7,30* (d, J=8Hz, indol, H-7’); 7,23* (m, indol H-6’); 7,10* (dd, indol H-5’); 6,87°, 6,79* (2s, indol H-2’); 6,28° (d, J=10Hz, Leu NH); 6,07* (d, J=6Hz, Leu NH); 5,83’ (d, J=10Hz, Leu NH); 5,31° (ddd, PrLeu a-H); 5,18* (dd, Hba a-H); 5,13° (dd,
181 990
Hba α-H); 5,05* (ddd, PrLeu6 a-H); 4,98° (ddd, Leu a-H); 4,93* (dd, MeTrp a-H); 4,84* (ddd, PrLeu2 a-H); 4,78° (ddd, PrLeu a-H); 4,47* (dd, MeLeu a-H); 4,13* (ddd, Leu a-H); 3,8-3,5 (m); 3,72*° (2s, MeTrp N1’-Me); 3,69* (q, J=7Hz, MeAla a-H); 3,40° (s, MeAla NMe); 3,28* (s, MeAla N-Me); 3,20 (dd, MeTrp β-Hb); 3,12* (dd, Me Trp β-Ha); 2,93* (s, MeTrp, N-Me); 2,53° (s, N-Me); 2,52* (s, MeLeu N-Me); 3,21° (s, N-Me); 2,25-2,08 (m, Hba y-CH2, β-Ha); 1,92* (m, Hba β-Hb); 1,83-1,75 (m); 1,7-1,07 (m); 1,53*, 1,48° (2d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,04 (d, J=6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,97-0,84 (m); 0,53* (d, J=6,6Hz, Leu Me); 0,28’ (d); -0,17* (d, J=6,6Hz, Leu Me); -0,53* (ddd, Leu γ-CH).
(3 konformery 80:14:6, oznaczone * ° ’): 8,48* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 8,06* (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,94° (d, 10Hz, PrLeu NH); 7,68* (d, 8Hz, indol H-4’); 7,54° (d, indol); 7,33* (d, 8Hz, indol H-7 ); 7,31° (d, 8Hz, indol); 7,22* (dd, indol H-6’); 7,1* (dd, indol H-5’); 7,53° (d, PrLeu NH); 6,93° (s, indol H-2’); 6,84* (s, indol H-2’); 6,26° (d, br, Leu NH); 6,05* (d, 7,5Hz, Leu NH); 5,84’ (d, Leu NH); 5,31° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,18* (dd, Hba a-H); 5,13° (dd, Hba a-H); 5,06* (ddd, PrLeu6 a-H); 4,99° (ddd, Leu a-H); 4,93* (dd, MeTrp a-H); 4,87* (ddd, PrLeu2 a-H); 4,8° (ddd, PrLeu2 a-H); 4,47* (dd, MeLeu a-H); 4,16* (ddd, Leu a-H); 4,1* (m, N-CH2); 3,78-3,57; 3,69* (q, 7Hz, MeAla a-H); 3,47-2,90; 3,42° (s, MeAla N-Me); 3,32* (dd, MeTrp βHa); 3,3* (s, MeAla N-Me); 3,23* (dd, MeTrp β-Hb); 3,21° (s, N-Me); 3,06’ (s, N-Me); 2,93* (s, MeTrp N-Me); 2,53* (s, MeLeu N-Me); 2,52° (s, N-Me); 2,32-2,10; 1,93* (m, Hba γ-CHb); 1,83-1,08; 1,53* (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,48° (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,04* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,97-0,84; 0,52* (d, 6,6Hz, Leu d’-Me); 0,26’ (d, Leu d”-Me); -0,17* (d, 6,6Hz, Leu d”-Me); -0,55* (ddd, Leu γ-CH).
181 990 (3 konformery 71:24:5, oznaczone * ° ’): 8,50* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 8,06* (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,94° (d, 10Hz, PrLeu NH); 7,77° (d, 8Hz, indol H-4’); 7,72* (d, 8Hz, indol H-4'); 7,53° (d, 10Hz, PrLeu NH); 7,40-7,05, 6,92° (s, indol H-2’); 6,88* (s, indol H-2’); 6,23° (d, 9,4Hz, Leu NH); 6,09* (d, 7,4Hz, Leu NH); 5,87’ (d, Leu NH); 5,32° (ddd, PrLeu a-H); 5,23* (AB; N1’-CH2); 5,20* (AB; N1’-CH2); 5,17* (dd, Hba a-H); 5,14° (dd, Hba a-H); 5,04* (ddd, PrLeu6 a-H); 4,99° (ddd, PrLeu2 a-H); 4,96* (dd, MeTrp a-H); 4,87* (ddd, PrLeu2 a-H); 4,78° (ddd, Leu a-H); 4,47* (dd, MeLeu a-H); 4,21* (ddd, Leu a-H); 3,76° (q, 7Hz, MeAla a-H); 3,73-3,65, 3,67* (q, 7Hz, MeAla a-H); 3,58° (dd, MeLeu a-H); 3,50-3,37, 3,42° (s, MeAla N-Me); 3,33* (dd, MeTrp p-Ha); 3,27* (s, MeAla N-Me); 3,23° (s, N-Me); 3,23* (dd, MeTrp β-Hb); 2,92* (s, MeTrp N-Me); 2,53* (s, MeLeu N-Me); 2,52° (s, N-Me); 2,28-1,08, 1,53 (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,49° (d, 7Hz, MeAla p-Me); 1,06* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,98-0,82, 0,50’ (d, Leu d’-Me); 0,45* (d, 6,6Hz, Leu d’-Me); 0,28’ (d, Leu d”-Me); -0,11* (d, 6,6Hz, Leu d”-Me); -0,47 (ddd, Leu γ-CH).
(3 konformery 1:1:1): 8,62, 8,43, 8,07, 7,94,7,87, 7,42 (6d, J=10Hz, NH); 7,12 (d, J=7,4Hz, indolina arom. H); 7,08-6,99 (m, indolina arom. H); 6,72, 6,69, (2dd indolina arom. H); 6,66-6,63 (m, indolina arom. H); 6,58 (d, J=8Hz, indolina arom. H); 6,29 (d, J=8Hz, Leu NH); 6,15 (m br, Leu NH); 5,88 (d, J=8Hz, Leu NH); 5,28-4,98 (m, a-H); 4,93 (ddd, a-H); 4,74 (ddd, a-H); 4,65 (m, a-H); 4,54 (dd, aH); 4,43 (dd, a-H); 3,80-3,66 (m); 3,55-3,0 (m); 3,46, 3,35, 3,31, 3,24, 3,22, 3,12, 3,00, 2,82, 2,57 (9s, N-Me); 2,55-1,1 (m); 1,52, 1,48,1,43 (3d, J=7Hz, MeAla p-Me); 1,13 (d, J=7Hz); 1,03-0,83 (m); 0,78, 0,76, 0,73 (3d, J=6,5Hz).
181 990
3 konformery 73:23:4 oznaczone * ° ’): 8,53* (d, J=10Hz, PrLeu NH); 8,06* (d, J=10Hz, PrLeu’ NH); 7,95° (d, J=10Hz, NH); 7,67*, 7,52° (2d, J=7Hz, indol H-4’); 7,55° (d, J=10Hz, NH); 7,33*. 7,31° (2d, J=8Hz, indol H-7’); 7,19*, 7,17° (2dd, indol H-6’); 7,08*. 7,04° (2dd, indol H-5’); 6,98’, 6,88°, 6,80* (3s, indol H-2’); 6,23° (d, J=9,3Hz, Leu NH); 6,05* (d, J=7,5Hz, Leu NH); 5,84’ (d, Leu NH); 5,33° (ddd, PrLeu a-H); 5,18* (dd, Hba a-H); 5,14° (dd, Hba a-H); 5,05* (ddd, PrLeu a-H); 4,98° (ddd, Leu a-H); 4,93* (dd, indol a-H); 4,87* (ddd, PrLeu’ a-H); 4,81° (ddd, Leu a-H); 4,47* (dd, MeLeu aH); 4,22* (ddd Leu a-H); 3,86-3,67 (m); 3,83* (s, t-Bu-CH2-N); 3,69* (q, J=7Hz, MeAla a-H); 3,5-3,2 (m); 3,43° (s, MeAla N-Me); 3,30* (s, MeAla N-Me); 3,22° (s, N-Me); 2,93* (s, MeMeTrp, N-Me); 2,53* (s, MeLeu N-Me); 2,53° (s, N-Me); 2,25 (m, Hba y-CH2); 2,18 (m, Hba β-Ha); 2,0-1,08 (m); 1,54*, 1,49° (2d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,05 (d, J=6,5Hz, MeLeu Me); 0,97-0,84 (m); 0,52* (d, J=6,6Hz, Leu Me); 0,28’ (d); -0,06* (d, J=6,6Hz, Leu Me); -0,49* (ddd, Leu γ-CH).
(3 konformery 78:19:3, oznaczone * 0 ’): 8,52* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 8,06* (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,94° (d, 10Hz, PrLeu NH); 7,68* (d, 8Hz, indol H-4’); 7,53° (d, 8Hz, indol H-4’); 7,52° (d, 10Hz, PrLeu NH); 7,36* (d, 8Hz, indol H-7’); 7,33° (d, 8Hz, indol H-7’); 7,2* (dd, indol H-6’); 7,17° (dd, indol H-6’); 7,09* (dd, indol H-5’); 7,05° (dd, indol H-5’); 7,02° (s, indol H-2’); 6,91* (s, indol H-2’); 6,23° (d, 9,5Hz, Leu NH); 6,03* (d, 7,4Hz, Leu NH); 5,87’ (d, Leu NH); 5,32° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,18* (dd, Hba a-H); 5,14° (dd, Hba a-H); 5,05* (ddd, PrLeu6 a-H); 4,98° (ddd, PrLeu2 a-H); 4,93* (dd, MeTrp a-H); 4,87* (ddd, PrLeu2 a-H); 4,81° (ddd, Leu a-H); 4,60 (m, N-CH); 4,46* (dd, MeLeu a-H); 4,16* (ddd, Leu a-H); 3,75° (q, 7Hz, MeAla a-H); 3,70 (m); 3,69* (q, 7Hz, MeAla a-H); 3,57° (dd, MeLeu a-H);
181 990
3,45 (m); 3,42° (s, MeAla N-Me); 3,32* (dd, MeTrp β-Ha); 3,31* (s, MeAla N-Me); 3,23* (dd, MeTrp β-CHb); 3,21° (s, N-Me); 2,93* (s, MeTrp N-Me); 2,53* (s, MeLeu N-Me); 2,50° (s, N-Me); 2,28 (ABXY); 2,18 (ΑΒ-ΧΥ, Hba y-CH2); 2,13* (m, Hba γ-CHa); 1,93* (m, Hba γ-CHb); 1,85-1,08; 1,53* (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,47 (m, NCHMe2)·, 1,04* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,98-0,83; 0,52’ (d, Leu d’Me); 0,51* (d, 6,6Hz, Leu d’-Me); 0,34’ (d, Leu d”-Me); -0,2* (d, 6,6Hz, Leu d”-Me); -0,60* (ddd, Leu γ-CH).
Indolina A (3 konformery 46:27:27, oznaczone * ° ’): 8,62* (d, J=10Hz, PrLeu NH); 8,13° (d, J=10Hz, NH); 8,02° (d, J=10Hz, NH); 7,92° (d, 10Hz, NH); 7,86* (d, J=10Hz, PrLeu’ NH); 7,40° (d, J=10Hz, NH); 7,23°, 7,16*, 7,09° (3d, J=7,4Hz, indolina arom. H); 7,05°, 7,02*, 7,02° (3dd, indolina arom. H); 6,76°, 6,72*, 6,71° (3dd, indolina arom. H); 6,64°, 6,62°, 6,58* (3d, J=7,7Hz, indolina arom. H); 6,32° (d, J=8Hz, Leu NH); 6,10° (m br, Leu NH); 5,94* (d, J=9Hz, Leu NH); 5,28-4,73 (m); 4,60° (dd, a-H); 4,13* (dd, a-H); 3,75-2,85 (m); 3,45*, 3,33°, 3,33*, 3,23°, 3,20°, 3,02*, 2,81°, 2,79°, 2,57° (9s, N-Me); 2,45-0,83 (m); 1,52°, 1,46°, 1,42* (3d, J=7Hz, MeAla β-Me). Indolina B (3 konformery 1:1:1): 8,62, 8,43, 8,07, 7,94, 7,87, 7,42 (6d, J=10Hz, NH); 7,12 (d, J=7,4Hz, indolina arom. H); 7,08-6,99 (m, indolina arom. H); 6,72, 6,69 (2dd indolina arom. H); 6,66-6,63 (m, indolina arom. H); 6,58 (d, J=8Hz, indolina arom. H); 6,29 (d, J=8Hz, Leu NH); 6,15 (m br, Leu NH); 5,88 (d, J=8Hz, Leu NH); 5,28-4,98 (m, a-H); 4,93 (ddd, a-H); 4,74 (ddd, a-H); 4,65 (m, a-H); 4,54 (dd, a-H); 4,43 (dd, a-H); 3,80-3,66 (m); 3,55-3,0 (m); 3,46, 3,35, 3,31, 3,24, 3,22, 3,12, 3,00, 2,82, 2,57 (9s, N-Me); 2,551,1 (m); 1,52, 1,48, 1,43 (3d, J=7Hz, MeAla β-Me); 1,13 (d, J=7Hz); 1,03-0,83 (m); 0,78, 0,76, 0,73 (3d, J=6,5Hz).
181 990 (3 konformery 76:18:6, oznaczone * °'): 8,49* (d, 10Hz, PrLeu NH); 8,05* (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,94° (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,67* (d, 8Hz, indol H-4'); 7,53° (d, 8Hz, indol H-4'); 7,52° (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,4* (d, 8Hz, indol H-7’); 7,38° (d, 8Hz, indol H-7 ); 7,23 (dd, indol H-6'); 7,19° (dd, indol H-6’); 7,11* (dd, indol H-5’); 7,07° (dd, indol H-5’); 7,05° (s, indol H-2’); 7,01* (s, indol H-2'); 6,22° (d, br, Leu NH); 6,05* (d, 7,5Hz, Leu NH); 5,84’ (d, Leu NH); 5,31° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,19* (dd, Hba a-H); 5,16° (dd, Hba a-H); 5,04* (ddd, PrLeu6 a-H); 5,00° (ddd, PrLeu2 a-H); 4,94* (dd, MeTrp a-H); 4,87* (ddd, PrLeu2 a-H); 4,81° (ddd, Leu a-H); 4,67’ (ddd, Leu a-H); 4,45* (dd, MeLeu a-H); 4,18* (ddd, Leu a-H); 4,14 (s, OPr); 3,80-3,55;
3,67* (q, 7Hz, MeAla a-H); 3,50-3,40; 3,42° (s, N-Me); 3,29* (dd, MeTrp β-Ha); 3,27* (s, MeAla N-Me); 3,21° (s, N-Me); 3,18* (dd, MeTrp β-Hb); 3,04’ (s, N-Me); 2,93* (s, MeTrp N-Me); 2,55° (s, NMe); 2,53* (s, MeLeu N-Me); 2,30-1,90; 1,80 (m, OPr); 1,53* (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,48° (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,08° (t, OPr); 1,07 (t, OPr); 1,05* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,98-0,85; 0,59’ (d, Leu d’Me); 0,57* (d, 6,6Hz, Leu d’-Me); 0,37’ (d, Leu d”-Me); -0,07* (d, 6,6Hz, Leu d”-Me).
(3 konformery 73:21:6, oznaczone * ° ’): 8,49* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 8,05* (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,94° (d, 10Hz, PrLeu6 NH);
7,67* (d, 8Hz, indol H-4’); 7,53° (d, 8Hz, indol H-4’); 7,52° (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,4* (d, 8Hz, indol H-7’); 7,38° (d, 8Hz, indol H-7’); 7,23* (dd, indol H-6’); 7,19° (dd, indol H-6’); 7,11* (dd, indol H-5’); 7,07° (dd, indol H-5'); 7,05° (s, indol H-2’); 7,01* (s, indol H-2’); 6,22° (d, 9,4Hz, Leu NH); 6,05* (d, 7,3Hz, Leu NH); 5,86' (d, Leu NH); 5,31° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,19* (dd, Hba a-H); 5,16° (dd, Hba a-H); 5,03* (ddd, PrLeu6 a-H); 5° (ddd, PrLeu2 a-H); 4,94* (dd,
181 990
MeTrp α-H); 4,87* (ddd, PrLeu2 a-H); 4,81° (ddd, Leu a-H); 4,65’ (ddd, Leu a-H); ”4,46* (dd, MeLeu a-H); 4,26* (q, OEt); 4,26° (q, OEt); 4,19* (ddd, Leu a-H); 3,80-3,56; 3,67* (q, 7Hz, MeAla a-H); 3,45-3,33; 3,41° (s, MeAla N-Me); 3,29* (dd, MeTrp β-Ha); 3,27* (s, MeAla N-Me); 3,21° (s, N-Me); 3,19* (dd, MeTrp β-Hb); 3,04’ (s, NMe); 2,93* (s, MeTrp N-Me); 2,57° (s, N-Me); 2,52* (s, MeLeu NMe); 2,32-1,08; 1,53* (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,48° (d, 7Hz, MeAla βMe); 1,40° (t, OEt); 1,40* (t, OEt); 1,05* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,98-0,84; 0,60’ (d, Leu d’-Me); 0,57* (d, 6,6Hz, Leu d’-Me); 0,37’ (d, Leu d”-Me); -0,07* (d, 6,6Hz, Leu d”-Me); -0,36* (ddd, Leu γ-CH).
(3 konformery 63:32:5; oznaczone * ° ’): 8,45* (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 8,06* (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,97° (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,90’ (d, 10Hz, PrLeu6 NH); 7,63* (d, 8Hz, indol H-4’); 7,56° (d, 10Hz, PrLeu2 NH); 7,45° (d, 8Hz, indol H-4’); 7,4* (d, 8Hz, indol H-7’); 7,38° (d, 8Hz, indol H-7’); 7,23* (dd, indol H-6’); 7,22° (dd, indol H-6’); 7,13* (dd, indol H-5’); 7,08° (dd, indol H-5’); 6,2° (d, 10Hz, Leu NH); 6,07* (d, 7,5Hz, Leu NH); 5,77’ (d, 8,5Hz, Leu NH); 5,32° (ddd, PrLeu6 a-H); 5,26’ (dd, Hba a-H); 5,2* (dd, Hba a-H); 5,16° (dd, Hba a-H); 5,03* (ddd, PrLeu6 a-H); 4,97* (dd, MeTrp a-H); 4,87* (ddd, PrLeu2 a-H); 4,67° (ddd, a-H); 4,46* (dd, MeLeu a-H); 4,13* (ddd, Leu a-H); 4,09* (s, N-OMe); 4,04’ (s, N-OMe); 4,03° (s, N-OMe); 3,74° (q, 7Hz, MeAla a-H); 3,71* (q, 7Hz, MeAla a-H); 3,703,60;3,54-3,50;3,47° (s, MeAla N-Me); 3,28-3,17;3,25* (s, MeAla NMe); 3,20° (s, N-Me); 2,97* (s, MeTrp N-Me); 2,52* (s, MeLeu NMe); 2,42° (s, N-Me); 2,40-2,14;1,97 (m); 1,79 (m); 1,65-1,08;1,53* (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,5° (d, 7Hz, MeAla β-Me); 1,04* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me); 0,98-0,83;0,62’ (d, Leu d’-Me); 0,57* (d, 6,6Hz, Leu
181 990 d’-Me); 0,37’ (d, Leu d”-Me); -0,09* (d, 6,6Hz, Leu d”-Me); -0,35* (ddd, Leu γ-CH).
(3 konformery 44:30:26, oznaczone * 0 ’): 8,85 (d, CSNH2); 8,60 (d, PrLeu6 NH); 8,17 (d, CSNH2); 8,03, 8,00 (2d, NH); 7,88 (m, CSNH2); 7,6-7,1; 6,28* (d, 10Hz, Leu NH); 6,07° (d, 7Hz, Leu NH); 5,87’ (d, 9Hz, Leu NH); 6,26* (ddd, PrLeu2 a-H); 5,22 (dd, a-H); 5,15-4,95, 5,08* (dd, Hba a-H); 4,83° (ddd, PrLeu2 a-H); 4,50* (ddd, Leu a-H); 4,37* (dd, MeTrp a-H); 4,25° (ddd, Leu a-H); 4,09, 4,05, 4,03* (3s, OMe); 3,89 (m, a-H); 3,65*, 3,63’, 3,52° (3q, 7Hz, MeAla a-H); 3,57 (m); 3,17, 3,16, 3,15, 3,22, 3,20, 3,05, 2,92, 2,55, 2,53 (9s, NMe); 1,8-1,1; 1,05 (d, 7Hz); 0,99-0,82, 0,60°, 0,55’, 0,23’, 0,17° (4d, 7Hz, Leu d-Me); -0,15°, -0,17’ (ddd, Leu γ-CH).
181 990
Fig. l(b)
181 990
Fig. 2
181 990
PRZEPUSZCZALNOŚĆ [%]
Fig. 3
181 990
181 990
181 990
181 990
181 990
A-B-RjLeu-Leu-C-X-Y
Wzór 1 Ap · BP - R1pLeU · Leu - Cp - x|
Wzór Ip
Wzór l’p γ o rT o 0<y
Wzór 2
181 990
Wzór 3
H-C-Χ-Υ-Α-Β- R,Leu - Leu.OR7
Wzór 4
HA - B - R,Leu - Leu - C - X - Y.0R7
Wzór 5
Wzór 6
181 990
| UJαζ“·Γ~ . ι ’Ρ R8p Wzór 6’p C’ = COc- C«· R8 Wzór 9 | ·= -O.CJKCH^ ί0 Wzór 7 CO- _ I r5*]!----η— cH2.cH.y- β CH. 1 R. Wzór 8 X’= -NH-CH-CO CH-CHj (CH^-Cą |
Wzór 10
181 990
CH
Wzór 11
Wzór 12
CHjCHj
-CO-N
Wzór 13
Wzór 14
-CO-N
- CO -N
Wzór 15
Wzór 16
Wzór 18
Wzór 17
181 990
Wzór 19
Wzór 20 ,NH-N
N-N
Wzór 21
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz.
Cena 6,00 zł.
Claims (7)
- Zastrzeżenia patentowe1. Cyklopeptolidy o wzorze 1, w którymA oznacza resztę α-łiydroksy-podstawionego kwasu masłowego, ewentualnie podstawioną w położeniu γ podstawnikiem R^, który oznacza CN, COOR2, CONR3R4, COR5, CSNH2 lub alkil, który może być podstawiony grupą azydową chlorowcem, grupą alkoksy, ewentualnie osłanianą grupą hydroksylową lub aminową winyl, który może być podstawiony alkilem, chlorowcem lub CN, cykloalkil, tetrazolil lub -C=CH, gdzie R2 oznacza wodór lub alkil, ewentualnie podstawiony arylem, R3 i R4 są takie same lub różne i oznaczają wodór lub alkil, albo razem wraz z azotem tworząpierścień zawierający od 3 do 6 członów i ewentualnie zawierający drugi heteroatom, zaś R5 oznacza wodór lub niższy alkil,B oznacza resztę α-amino-y-metylo-podstawionego kwasu kaprylowego,Rj oznacza wodór lub metyl,C oznacza resztę tryptofanową lub N-metylo-tryptofanową o wzorze 6, w którym R6 oznacza wodór, grupę alkoksy, alkil lub benzyl, R9 oznacza wodór lub chlorowiec, R10 oznacza wodór lub metyl, a.... oznacza pojedyncze lub podwójne wiązanie,X oznacza resztę α-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2 do CI4), zaśY oznacza resztę α-amino lub N-metylo-a-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2 do C,o).
- 2. Cyklopeptolidy według zastrz. 1, znamienne tym, że odpowiadająwzorowi Ip, w którymAp oznacza resztę α-hydroksy-podstawionego kwasu masłowego, ewentualnie podstawioną w położeniu γ grupą R^, która oznacza CN, ewentualnie osłanianą grupę CH2OH, COOR2p, CONR3pR4p, COR5p lub -CH=CH2, gdzie R2p oznacza wodór lub alkil, ewentualnie podstawiony arylem, R3p i R4p są takie same lub różne i oznaczają wodór lub alkil, albo razem wraz z azotem tworząpierścień zawierający 5 lub 6 członów i ewentualnie zawierający drugi heteroatom, a R5p oznacza wodór lub niższy alkil,Bp oznacza resztę a-amino-y-metylo-podstawionego kwasu kaprylowego,Rip oznacza wodór lub metyl,Cp oznacza resztę tryptofanową lub N-metylo-tryptofanową która ewentualnie jest podstawiona grupą N'-(od C] do C4)alkoksy,XP oznacza resztę α-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2 do C14), zaśY oznacza resztę α-amino lub N-metylo-a-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2uo C10).
- 3. Cyklopeptolidy według zastrz. 1, znamienne tym, że odpowiadająwzorowi Γρ, wktórymA'p oznacza resztę α-hydroksy-podstawionego kwasu masłowego, ewentualnie podstawioną w położeniu γ grupą R'6p, która oznacza CN, COOR'2p, CONR'3pR'4p, COR'5p, alkil, który może być podstawiony grupą azydową chlorowcem, grupą alkoksy, ewentualnie osłanianą grupą hydroksy lub grupą aminową winyl, który może być podstawiony alkilem, chlorowcem lub CN, cykloalkil, tetrazolil lub -C=CH, przy czym R'2p oznacza wodór lub alkil, ewentualnie podstawiony arylem, R'3p i R'4p są takie same lub różne i oznaczają wodór lub alkil, albo razem wraz z azotem tworząpierścień zawierający od 3 do 6 członów i ewentualnie zawierający drugi heteroatom, a R'5p oznacza wodór lub niższy alkil,B'p oznacza resztę a-amino-y-metylo-podstawionego kwasu kaprylowego,R'lp oznacza wodór lub metyl,Cp oznacza resztę tryptofanową lub N-metylo-tryptofanową o wzorze 6'p, w którym R'gp oznacza wodór, grupę alkoksy, alkil lub benzyl, R'9p oznacza wodór lub chlorowiec, R' (oznacza wodór lub metyl, a .... oznacza pojedyncze lub podwójne wiązanie,181 990Χ'ρ oznacza resztę α-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2 do C14), aY'p oznacza resztęa-amino lub N-metylo-a-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2 do C10).
- 4. Cyklopeptolidy według zastrz. 1, znamienne tym, że odpowiadają wzorowi 1, w którymA oznacza resztę α-hydroksy-podstawionego kwasu masłowego określoną we wzorze 7 jako A', z podstawnikiem R6 w położeniu γ, oznaczającym -COO-nPr,B oznacza resztę a-amino-y-metylo-podstawionego kwasu kaprylowego określoną we wzorze 7 jako B',R! oznacza metyl,C oznacza resztę N-metylo-tryptofanową o wzorze 9, w którym R8 oznacza grupę OCH3 a R9 oznacza wodór,X oznacza resztę α-amino-podstawionego kwasu karboksylowego o wzorze 10 zaśY oznacza resztę α-amino lub N-metylo-a-amino-podstawionego kwasu karboksylowego o wzorze 13.
- 5. Cyklopeptolidy według zastrz. 1 albo 2, albo 3, albo 4, znamienne tym, że występują w postaci soli lub estru.
- 6. Szczep grzybny, znamienny tym, że ma oznaczenie F92-4471/08 i jest zdeponowany jako NRRL 21123 oraz jego mutanty i pochodne.
- 7. Środek terapeutyczny stanowiący inhibitor ekspresji cząsteczek adhezyjnych, znamienny tym, że zawiera terapeutycznie skuteczne ilości cyklopeptolidów o wzorze 1, w którymA oznacza resztę α-hydroksy-podstawionego kwasu masłowego, ewentualnie podstawioną w położeniu γ podstawnikiem R6, który oznacza CN, COOR2, CONR3R4, COR5, CSNH2 lub alkil, który może być podstawiony grupąazydową, chlorowcem, grupąalkoksy, ewentualnie osłanianą grupą hydroksylową lub aminową, winyl, który może być podstawiony alkilem, chlorowcem lub CN, cykloalkil, tetrazolil lub -OCH, gdzie R2 oznacza wodór lub alkil, ewentualnie podstawiony arylem, R3 i R4 są takie same lub różne i oznaczają wodór lub alkil, albo razem wraz z azotem tworzą pierścień zawierający od 3 do 6 członów i ewentualnie zawierający drugi heteroatom, zaś Rs oznacza wodór lub niższy alkil,B oznacza resztę a-amino-y-metylo-podstawionego kwasu kaprylowego,R, oznacza wodór lub metyl,C oznacza resztę tryptofanową lub N-metylo-tryptofanową o wzorze 6, w którym R8 oznacza wodór, grupę alkoksy, alkil lub benzyl, R9 oznacza wodór lub chlorowiec, R)0 oznacza wodór lub metyl, a.... oznacza pojedyncze lub podwójne wiązanie,X oznacza resztę α-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2 do Cu), zaśY oznacza resztę α-amino lub N-metylo-a-amino-podstawionego kwasu karboksylowego (od C2 do C|0).♦ * *
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB9415168A GB9415168D0 (en) | 1994-07-27 | 1994-07-27 | Organic compounds |
| GBGB9504332.9A GB9504332D0 (en) | 1995-03-03 | 1995-03-03 | Organic compounds |
| PCT/EP1995/002966 WO1996003430A1 (en) | 1994-07-27 | 1995-07-26 | Organic compounds |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL317349A1 PL317349A1 (en) | 1997-04-01 |
| PL181990B1 true PL181990B1 (pl) | 2001-10-31 |
Family
ID=26305345
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL95317349A PL181990B1 (pl) | 1994-07-27 | 1995-07-26 | Cyklopeptolidy, szczep grzybny i srodek terapeutyczny stanowiacy inhibitor ekspresji czasteczek adhezyjnych PL PL PL PL |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6013627A (pl) |
| EP (1) | EP0775158B1 (pl) |
| JP (1) | JP3425763B2 (pl) |
| KR (1) | KR100378974B1 (pl) |
| CN (1) | CN1116304C (pl) |
| AT (1) | ATE187461T1 (pl) |
| AU (1) | AU702332B2 (pl) |
| BR (1) | BR9508342A (pl) |
| CA (1) | CA2192786C (pl) |
| CY (1) | CY2225B1 (pl) |
| CZ (1) | CZ289311B6 (pl) |
| DE (1) | DE69513837T2 (pl) |
| DK (1) | DK0775158T3 (pl) |
| ES (1) | ES2142490T3 (pl) |
| FI (1) | FI970279A0 (pl) |
| GR (1) | GR3032698T3 (pl) |
| HK (1) | HK1014011A1 (pl) |
| HU (1) | HUT77388A (pl) |
| MX (1) | MX9606494A (pl) |
| NO (1) | NO970340D0 (pl) |
| NZ (1) | NZ291168A (pl) |
| PL (1) | PL181990B1 (pl) |
| PT (1) | PT775158E (pl) |
| RU (1) | RU2155772C2 (pl) |
| SK (1) | SK11797A3 (pl) |
| WO (1) | WO1996003430A1 (pl) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6187757B1 (en) * | 1995-06-07 | 2001-02-13 | Ariad Pharmaceuticals, Inc. | Regulation of biological events using novel compounds |
| US6011136A (en) * | 1995-11-21 | 2000-01-04 | Novartis Ag | Cyclopeptolides |
| WO1999014082A1 (en) | 1996-09-18 | 1999-03-25 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Adhesively-bonded inflatable restraint and method of making |
| US6365619B1 (en) | 1999-07-22 | 2002-04-02 | Novartis Ag | Treatment of arteriosclerosis |
| US7067526B1 (en) | 1999-08-24 | 2006-06-27 | Ariad Gene Therapeutics, Inc. | 28-epirapalogs |
| ES2219388T3 (es) * | 1999-08-24 | 2004-12-01 | Ariad Gene Therapeutics, Inc. | 28-epi-rapalogos. |
| AU2002223649A1 (en) * | 2000-10-27 | 2002-05-06 | Novartis Ag | Vegh inhibitors and their use |
| GB0028367D0 (en) * | 2000-11-21 | 2001-01-03 | Celltech Chiroscience Ltd | Chemical compounds |
| GB0101598D0 (en) * | 2001-01-22 | 2001-03-07 | Novartis Ag | Organic compounds |
| JP2006516548A (ja) | 2002-12-30 | 2006-07-06 | アンジオテック インターナショナル アクツィエン ゲゼルシャフト | 迅速ゲル化ポリマー組成物からの薬物送達法 |
| US8921642B2 (en) | 2008-01-11 | 2014-12-30 | Massachusetts Eye And Ear Infirmary | Conditional-stop dimerizable caspase transgenic animals |
| CN105283553B (zh) | 2013-06-11 | 2021-06-25 | 克隆技术实验室有限公司 | 蛋白质富集的微泡及其制备和使用方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4443367A (en) * | 1982-04-08 | 1984-04-17 | Monsanto Company | Peptide and peptolide substrates for mammalian collagenase |
| US4425428A (en) * | 1982-04-08 | 1984-01-10 | Monsanto Company | Novel peptide and peptolide substrates for mammalian collagenase |
| DE3851268T2 (de) * | 1987-06-19 | 1995-01-26 | Sandoz Ag | Zyklische Peptolide. |
| DE3832059A1 (de) * | 1988-09-21 | 1990-03-29 | Howaldtswerke Deutsche Werft | Tauchtiefengesteuerte ausblasventil-einrichtung |
| DE3832362A1 (de) * | 1988-09-23 | 1990-03-29 | Sandoz Ag | Neue cyclopeptolide, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
-
1995
- 1995-07-26 NZ NZ291168A patent/NZ291168A/en unknown
- 1995-07-26 WO PCT/EP1995/002966 patent/WO1996003430A1/en active IP Right Grant
- 1995-07-26 JP JP50548596A patent/JP3425763B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-26 AU AU32221/95A patent/AU702332B2/en not_active Ceased
- 1995-07-26 CZ CZ1997221A patent/CZ289311B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1995-07-26 KR KR1019970700504A patent/KR100378974B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1995-07-26 EP EP95928473A patent/EP0775158B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-07-26 DE DE69513837T patent/DE69513837T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-26 MX MX9606494A patent/MX9606494A/es not_active IP Right Cessation
- 1995-07-26 DK DK95928473T patent/DK0775158T3/da active
- 1995-07-26 AT AT95928473T patent/ATE187461T1/de not_active IP Right Cessation
- 1995-07-26 PL PL95317349A patent/PL181990B1/pl unknown
- 1995-07-26 CA CA002192786A patent/CA2192786C/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-26 CN CN95194370A patent/CN1116304C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-26 PT PT95928473T patent/PT775158E/pt unknown
- 1995-07-26 BR BR9508342A patent/BR9508342A/pt not_active Application Discontinuation
- 1995-07-26 ES ES95928473T patent/ES2142490T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-07-26 RU RU97102700/04A patent/RU2155772C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1995-07-26 SK SK117-97A patent/SK11797A3/sk unknown
- 1995-07-26 US US08/776,440 patent/US6013627A/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-26 HU HU9700226A patent/HUT77388A/hu unknown
-
1997
- 1997-01-23 FI FI970279A patent/FI970279A0/fi unknown
- 1997-01-27 NO NO970340A patent/NO970340D0/no unknown
-
1998
- 1998-12-23 HK HK98115157A patent/HK1014011A1/xx unknown
-
2000
- 2000-02-18 GR GR20000400396T patent/GR3032698T3/el unknown
-
2001
- 2001-06-08 CY CY0100011A patent/CY2225B1/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1996003430A1 (en) | 1996-02-08 |
| MX9606494A (es) | 1997-03-29 |
| BR9508342A (pt) | 1997-10-21 |
| CA2192786C (en) | 2009-06-16 |
| EP0775158B1 (en) | 1999-12-08 |
| RU2155772C2 (ru) | 2000-09-10 |
| ES2142490T3 (es) | 2000-04-16 |
| CY2225B1 (en) | 2003-04-18 |
| NO970340L (no) | 1997-01-27 |
| AU3222195A (en) | 1996-02-22 |
| CZ289311B6 (cs) | 2001-12-12 |
| JPH10504540A (ja) | 1998-05-06 |
| DE69513837T2 (de) | 2000-05-18 |
| SK11797A3 (en) | 1997-07-09 |
| DK0775158T3 (da) | 2000-05-22 |
| FI970279A (fi) | 1997-01-23 |
| CZ22197A3 (en) | 1997-05-14 |
| ATE187461T1 (de) | 1999-12-15 |
| AU702332B2 (en) | 1999-02-18 |
| HUT77388A (hu) | 1998-04-28 |
| NZ291168A (en) | 1998-06-26 |
| CN1154705A (zh) | 1997-07-16 |
| NO970340D0 (no) | 1997-01-27 |
| KR100378974B1 (ko) | 2003-10-08 |
| JP3425763B2 (ja) | 2003-07-14 |
| PT775158E (pt) | 2000-05-31 |
| PL317349A1 (en) | 1997-04-01 |
| EP0775158A1 (en) | 1997-05-28 |
| GR3032698T3 (en) | 2000-06-30 |
| CA2192786A1 (en) | 1996-02-08 |
| CN1116304C (zh) | 2003-07-30 |
| DE69513837D1 (de) | 2000-01-13 |
| US6013627A (en) | 2000-01-11 |
| HK1014011A1 (en) | 1999-09-17 |
| FI970279A0 (fi) | 1997-01-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100203556B1 (ko) | 신규의 사이클로스포린 | |
| PL181990B1 (pl) | Cyklopeptolidy, szczep grzybny i srodek terapeutyczny stanowiacy inhibitor ekspresji czasteczek adhezyjnych PL PL PL PL | |
| US5643869A (en) | Pipecolic acid-containing peptolides, their preparation and pharmaceutical compositions containing them | |
| FI80475C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av ett tumoerhaemmande antibioticum, sandramycin. | |
| KR920006881B1 (ko) | 프리파스타틴(plipastatin)의 제조방법 | |
| US7446094B2 (en) | Cytotoxic depsipeptides | |
| AU712900B2 (en) | Cyclopeptolides | |
| AU603427B2 (en) | Oxytocin and vasopressin antagonists | |
| CA2224025A1 (en) | Novel antibiotic, feglymycin, processes for its preparation and its use | |
| WO2004012756A1 (en) | New cytotoxic cyclopeptide and its use for the treatment of cancer | |
| JPH06263789A (ja) | 新規イソテトラセノン系物質及びその製造法 |