SK11797A3 - Cyclopeptolides, process for their preparation and their use in therapy - Google Patents
Cyclopeptolides, process for their preparation and their use in therapy Download PDFInfo
- Publication number
- SK11797A3 SK11797A3 SK117-97A SK11797A SK11797A3 SK 11797 A3 SK11797 A3 SK 11797A3 SK 11797 A SK11797 A SK 11797A SK 11797 A3 SK11797 A3 SK 11797A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- formula
- leu
- compounds
- group
- substituted
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 title 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 218
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 48
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 42
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 40
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 37
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 29
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 28
- -1 α-hydroxy-substituted butyric acid residue Chemical group 0.000 claims description 26
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 19
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 19
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 claims description 18
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 claims description 17
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 13
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 13
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 13
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 10
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 9
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 9
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 9
- CZCIKBSVHDNIDH-UHFFFAOYSA-N Nalpha-methyl-DL-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC)C(O)=O)=CNC2=C1 CZCIKBSVHDNIDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 8
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical class CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 claims description 8
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 7
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 6
- CZCIKBSVHDNIDH-NSHDSACASA-N N(alpha)-methyl-L-tryptophan Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H]([NH2+]C)C([O-])=O)=CNC2=C1 CZCIKBSVHDNIDH-NSHDSACASA-N 0.000 claims description 6
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 6
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 6
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 claims description 6
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 claims description 5
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims description 5
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 claims description 5
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 5
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 claims description 5
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical compound CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N Diazomethane Chemical compound C=[N+]=[N-] YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- LCPYQJIKPJDLLB-UWVGGRQHSA-N Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C LCPYQJIKPJDLLB-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims description 4
- OBETXYAYXDNJHR-UHFFFAOYSA-N alpha-ethylcaproic acid Natural products CCCCC(CC)C(O)=O OBETXYAYXDNJHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 4
- MCQRPQCQMGVWIQ-UHFFFAOYSA-N boron;methylsulfanylmethane Chemical compound [B].CSC MCQRPQCQMGVWIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 4
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 108010091798 leucylleucine Proteins 0.000 claims description 4
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 claims description 4
- PTXVSDKCUJCCLC-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxyindole Chemical compound C1=CC=C2N(O)C=CC2=C1 PTXVSDKCUJCCLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical group [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical class CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 3
- AFENDNXGAFYKQO-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxybutyric acid Chemical group CCC(O)C(O)=O AFENDNXGAFYKQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- GDFAOVXKHJXLEI-VKHMYHEASA-N N-methyl-L-alanine Chemical compound C[NH2+][C@@H](C)C([O-])=O GDFAOVXKHJXLEI-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 2
- AKCRVYNORCOYQT-YFKPBYRVSA-N N-methyl-L-valine Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(O)=O AKCRVYNORCOYQT-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 2
- 238000007171 acid catalysis Methods 0.000 claims description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 claims description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 2
- 125000005982 diphenylmethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])(*)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052987 metal hydride Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 150000004681 metal hydrides Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 2
- 125000002757 morpholinyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000002902 organometallic compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 claims description 2
- 125000000547 substituted alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003107 substituted aryl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000003463 sulfur Chemical class 0.000 claims description 2
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 claims description 2
- VDCLCAXYTCLVQY-CTVGSUQISA-N 2-[(3s,6s,9s,15s,18s,21s,24s,27s)-15,18-di(butan-2-yl)-6-[(4-methoxyphenyl)methyl]-3,10,16,19,22,28-hexamethyl-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29-decaoxo-9,24,27-tri(propan-2-yl)-1,4,7,10,13,16,19,22,25,28-decazabicyclo[28.4.0]tetratriacontan-21-yl]acetic acid Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N2CCCCC2C(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(=O)N(C)[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N(C)[C@@H](C(C)CC)C(=O)N(C)[C@H](C(NCC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)N1)=O)C(C)CC)C(C)C)C1=CC=C(OC)C=C1 VDCLCAXYTCLVQY-CTVGSUQISA-N 0.000 claims 12
- GVNVAWHJIKLAGL-UHFFFAOYSA-N 2-(cyclohexen-1-yl)cyclohexan-1-one Chemical compound O=C1CCCCC1C1=CCCCC1 GVNVAWHJIKLAGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 101150065749 Churc1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 102100038239 Protein Churchill Human genes 0.000 claims 1
- NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N ethyl (e)-3-[3-amino-2-cyano-1-[(e)-3-ethoxy-3-oxoprop-1-enyl]sulfanyl-3-oxoprop-1-enyl]sulfanylprop-2-enoate Chemical compound CCOC(=O)\C=C\SC(=C(C#N)C(N)=O)S\C=C\C(=O)OCC NLFBCYMMUAKCPC-KQQUZDAGSA-N 0.000 claims 1
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 abstract description 7
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 abstract description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 288
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 240
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 159
- 125000000250 methylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 147
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 141
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 136
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 136
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 84
- XJODGRWDFZVTKW-LURJTMIESA-N (2s)-4-methyl-2-(methylamino)pentanoic acid Chemical compound CN[C@H](C(O)=O)CC(C)C XJODGRWDFZVTKW-LURJTMIESA-N 0.000 description 66
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 60
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 36
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 32
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 32
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 25
- 102000015271 Intercellular Adhesion Molecule-1 Human genes 0.000 description 25
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 25
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 22
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 20
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 108010000134 Vascular Cell Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 17
- 102100023543 Vascular cell adhesion protein 1 Human genes 0.000 description 17
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 16
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 16
- 108010024212 E-Selectin Proteins 0.000 description 13
- 102100023471 E-selectin Human genes 0.000 description 13
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 13
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 13
- OXEUETBFKVCRNP-UHFFFAOYSA-N 9-ethyl-3-carbazolamine Chemical compound NC1=CC=C2N(CC)C3=CC=CC=C3C2=C1 OXEUETBFKVCRNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 12
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 12
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 12
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 12
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 11
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- SJZRECIVHVDYJC-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybutyric acid Chemical compound OCCCC(O)=O SJZRECIVHVDYJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 239000008259 solid foam Substances 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 6
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 6
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 6
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 6
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 6
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 6
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 5
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 5
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 5
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- 238000001516 cell proliferation assay Methods 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 4
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 4
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 4
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 101100342977 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) leu-1 gene Proteins 0.000 description 3
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 3
- 239000012911 assay medium Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 125000001160 methoxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC(*)=O 0.000 description 3
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 3
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000351901 Bartalinia Species 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N N-Butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000006727 cell loss Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- CLUOCCWZZAGLPM-UHFFFAOYSA-N diphenyl-sulfanyl-sulfanylidene-$l^{5}-phosphane Chemical compound C=1C=CC=CC=1P(=S)(S)C1=CC=CC=C1 CLUOCCWZZAGLPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- PNDZEEPOYCVIIY-UHFFFAOYSA-N indo-1 Chemical compound CC1=CC=C(N(CC(O)=O)CC(O)=O)C(OCCOC=2C(=CC=C(C=2)C=2N=C3[CH]C(=CC=C3C=2)C(O)=O)N(CC(O)=O)CC(O)=O)=C1 PNDZEEPOYCVIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000007431 microscopic evaluation Methods 0.000 description 2
- 210000004925 microvascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- WRIKHQLVHPKCJU-UHFFFAOYSA-N sodium bis(trimethylsilyl)amide Chemical compound C[Si](C)(C)N([Na])[Si](C)(C)C WRIKHQLVHPKCJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- HJUGFYREWKUQJT-UHFFFAOYSA-N tetrabromomethane Chemical compound BrC(Br)(Br)Br HJUGFYREWKUQJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000002834 transmittance Methods 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- HBDJFVFTHLOSDW-DNDLZOGFSA-N (2r,3r,4r,5r)-2,3,5,6-tetrahydroxy-4-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyhexanal;hydrate Chemical compound O.O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HBDJFVFTHLOSDW-DNDLZOGFSA-N 0.000 description 1
- AFENDNXGAFYKQO-VKHMYHEASA-N (S)-2-hydroxybutyric acid Chemical class CC[C@H](O)C(O)=O AFENDNXGAFYKQO-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- XXJGBENTLXFVFI-UHFFFAOYSA-N 1-amino-methylene Chemical group N[CH2] XXJGBENTLXFVFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 2-(diethylamino)ethyl 4-aminobenzoate;(2s,5r,6r)-3,3-dimethyl-7-oxo-6-[(2-phenylacetyl)amino]-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid;hydrate Chemical group O.CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1.N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 0.000 description 1
- APISVOVOJVZIBA-UHFFFAOYSA-N 2-(triphenyl-$l^{5}-phosphanylidene)acetonitrile Chemical compound C=1C=CC=CC=1P(C=1C=CC=CC=1)(=CC#N)C1=CC=CC=C1 APISVOVOJVZIBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBZVNWNSRNTWPS-UHFFFAOYSA-N 6-amino-4-hydroxynaphthalene-2-sulfonic acid Chemical group C1=C(S(O)(=O)=O)C=C(O)C2=CC(N)=CC=C21 HBZVNWNSRNTWPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001027553 Bos taurus Fibronectin Proteins 0.000 description 1
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N Carbamic acid Chemical class NC(O)=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 238000006646 Dess-Martin oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 101100095895 Drosophila melanogaster sle gene Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007818 Grignard reagent Substances 0.000 description 1
- 208000028782 Hereditary disease Diseases 0.000 description 1
- 101001018097 Homo sapiens L-selectin Proteins 0.000 description 1
- 101000851176 Homo sapiens Pro-epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102100022339 Integrin alpha-L Human genes 0.000 description 1
- 108010008212 Integrin alpha4beta1 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 102100033467 L-selectin Human genes 0.000 description 1
- 101710128836 Large T antigen Proteins 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010064548 Lymphocyte Function-Associated Antigen-1 Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- PHXQIAWFIIMOKG-UHFFFAOYSA-N NClO Chemical compound NClO PHXQIAWFIIMOKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004133 Sodium thiosulphate Substances 0.000 description 1
- GCTFWCDSFPMHHS-UHFFFAOYSA-M Tributyltin chloride Chemical compound CCCC[Sn](Cl)(CCCC)CCCC GCTFWCDSFPMHHS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OKJPEAGHQZHRQV-UHFFFAOYSA-N Triiodomethane Natural products IC(I)I OKJPEAGHQZHRQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ITLHXEGAYQFOHJ-UHFFFAOYSA-N [diazo(phenyl)methyl]benzene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=[N+]=[N-])C1=CC=CC=C1 ITLHXEGAYQFOHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PQLVXDKIJBQVDF-UHFFFAOYSA-N acetic acid;hydrate Chemical compound O.CC(O)=O PQLVXDKIJBQVDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003668 acetyloxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)O[*] 0.000 description 1
- 208000038016 acute inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006022 acute inflammation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 238000011157 data evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- NKLCNNUWBJBICK-UHFFFAOYSA-N dess–martin periodinane Chemical compound C1=CC=C2I(OC(=O)C)(OC(C)=O)(OC(C)=O)OC(=O)C2=C1 NKLCNNUWBJBICK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N diethyl azodicarboxylate Substances CCOC(=O)\N=N\C(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 1
- FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N ethyl n-ethoxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CCOC(=O)N=NC(=O)OCC FAMRKDQNMBBFBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000004795 grignard reagents Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000008611 intercellular interaction Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000003780 keratinization Effects 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 229960003017 maltose monohydrate Drugs 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- BKBMACKZOSMMGT-UHFFFAOYSA-N methanol;toluene Chemical compound OC.CC1=CC=CC=C1 BKBMACKZOSMMGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSEFCHWGJNHZNT-UHFFFAOYSA-M methyl(triphenyl)phosphanium;bromide Chemical compound [Br-].C=1C=CC=CC=1[P+](C=1C=CC=CC=1)(C)C1=CC=CC=C1 LSEFCHWGJNHZNT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- PVWOIHVRPOBWPI-UHFFFAOYSA-N n-propyl iodide Chemical compound CCCI PVWOIHVRPOBWPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- GVUGOAYIVIDWIO-UFWWTJHBSA-N nepidermin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(C)C)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 GVUGOAYIVIDWIO-UFWWTJHBSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- YJVFFLUZDVXJQI-UHFFFAOYSA-L palladium(ii) acetate Chemical compound [Pd+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O YJVFFLUZDVXJQI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003359 percent control normalization Methods 0.000 description 1
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010079 rubber tapping Methods 0.000 description 1
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- XMVONEAAOPAGAO-UHFFFAOYSA-N sodium tungstate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][W]([O-])(=O)=O XMVONEAAOPAGAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000028070 sporulation Effects 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- DGQOCLATAPFASR-UHFFFAOYSA-N tetrahydroxy-1,4-benzoquinone Chemical compound OC1=C(O)C(=O)C(O)=C(O)C1=O DGQOCLATAPFASR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilane Chemical compound C[SiH](C)C PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000003606 umbilical vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K11/00—Depsipeptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K11/02—Depsipeptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof cyclic, e.g. valinomycins ; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Virology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Botany (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
Description
Oblasť techniky
Vynález sa týka cyklopeptolidov a ich terapeutického použitia ako inhibítorov expresie adhéznych molekúl.
Doterajší stav techniky
Celulárne adhézne molekuly ako ICAM-1, VCAM-1 a E-selektín sa exprimujú na povrchu endotelových buniek, rovnako ako keratinocyty pre ICAM-1, pri odozve na protizápalové mediátory, vrátane TNFa, IFN/', IL1 a LPS. Zodpovedajúce kontraligandy, napríklad LFA-1, VLA-4 a SLE*, sa exprimujú na povrchu cirkulujúcich krvných buniek. Transendotelová migrácia leukocytov počas zápalových procesov, ako aj extravaskulárna interakcia bunka-bunka, sú regulované ako následok interakcie medzi týmito adhéznymi molekulami a ich kontraligandami. Následkom toho inhibítory expresie adhéznych molekúl sú potencionálne použitelné na liečenie mnohých chorobných stavov. V súčasnosti však nie sú dostupné žiadne vhodné nízkomolekulárne inhibítory expresie adhéznych molekúl.
Cyklopeptolidy sú cyklické molekuly, ktoré obsahujú zvyšky aminokyselín viazané navzájom peptidovými väzbami a aspoň jeden zvyšok hydroxysubstituovanej karboxylovej kyseliny, ktorý je viazaný svojím hydroxylovým substituentom na zvyšok susednej kyseliny esterovou väzbou.
Teraz sa objavila nová trieda cyklopeptolidov, ktoré sú inhibítormi ICAM-1, VCAM-1 a E-selektínovej expresie.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu sú cykloheptapeptolidy všeobecného vzorca I (I) v ktorom
A predstavuje zvyšok α-hydroxysubstituovanej kyseliny maslovej, prípadne /-substituovanej substituentom R6, ktorý predstavuje skupiny CN, COOR2, CONR3R4, CORS, CSNH^ alebo alkylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná azidoskupinou, atómom halogénu, alkoxyskupinou, prípadne chránenou hydroxyskupinou alebo aminoskupinou, vinylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná alkylovou skupinou, atómom halogénu alebo kyanoskupinou, cykloalkylovú skupinu, tetrazolylovú skupinu alebo skupinu -C=CH, kde R2 predstavuje atóm vodíka alebo prípadne arylom substituovanú alkylovú skupinu, R3 a R4 sú rovnaké alebo rôzne a predstavujú atóm vodíka alebo alkylovú skupinu alebo tvoria spolu s atómom dusíka troj- až šesťčlenný kruh, ktorý prípadne obsahuje druhý heteroatóm a R5 predstavuje atóm vodíka alebo nižšiu alkylovú skupinu,
B predstavuje zvyšok α-amino-T'-metyl-substituovanej oktánovej kyseliny,
R1 predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu,
C predstavuje zvyšok tryptofánu alebo N~metyltryptofánu všeobecného vzorca VI
C0-
F?
(VI) kde
Rs predstavuje atóm vodíka, alkoxyskupinu, alkylovú skupinu alebo benzylovú skupinu, R9 predstavuje atóm vodíka alebo atóm halogénu, R10 predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu a rmz predstavuje jednoduchú alebo dvojitú väzbu,
X predstavuje zvyšok α-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až 14 atómov uhlíka a
Y predstavuje zvyšok α-amino- alebo N-metyl-a-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až 10 atómov uhlíka.
Vo všeobecnom vzorci I je orientácia C-koncových až N-koncových zvyškov aminokyselín v smere hodinových ručičiek a peptolidová esterová väzba je medzi zvyškami A a Y. Ak R1 predstavuje metylovú skupinu, zvyšky Rx-Leu a Leu sú zvyšky N-metylleucínu a leucínu.
S výhodou je A zvyšok α-hydroxymaslovej kyseliny, ktorá je ^-substituovaná kyanoskupinou, skupinou COOR'2, pričom R'2 predstavuje atóm vodíka, nižšiu alkylovú skupinu s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka alebo difenylmetylovú skupinu, skupinou CONR,3R'4, pričom R'3 predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu a R'4 predstavuje atóm vodíka alebo alkylovú skupinu alebo R'3 a R'4 tvoria spolu s atómom dusíka troj- až šesťčlenný kruh alebo morfolinylový kruh, skupinou CHzOH, COR,S, pričom R'5 predstavuje atóm vodíka alebo nižšiu alkylovú skupinu s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka, vinylovou skupinou, prípadne substituovanou kyanoskupinou, atómom brómu alebo nižšou alkylovou skupinou s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka, alkylovou skupinou, prípadne substituovanou azidoskupinou, aminoskupinou, hydroxyskupinou, atómom chlóru alebo alkoxyskupinou, tetrazolylovou skupinou, cyklopropylovou skupinou, skupinou CSNH alebo -C^CH.
S výhodou predstavuje C zvyšok N-metyltryptofánu všeobecného vzorca VI, kde Re predstavuje atóm vodíka, alkoxyskupinu s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka, predovšetkým metoxyskupinu alebo alkylovú skupinu a R® predstavuje atóm vodíka alebo atóm halogénu.
S výhodou predstavuje X zvyšok a-amino-šubstituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 4 až 8 atómov uhlíka, ktorá je prípadne β- alebo ,7-substituovaná alkylovou skupinou s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka. Najvýhodnejšie predstavuje X zvyšok a-amino-β- alebo f'-substituovane j oktánovej alebo maslovej kyseliny, pričom substituentom je alkylová skupina s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka, predovšetkým metylová skupina.
S výhodou predstavuje Y zvyšok N-metyl-a-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až 4 atómov uhlíka, ktorá je prípadne β- alebo ^-substituovaná alkylovou skupinou s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka. Najvýhodnejšie predstavuje Y zvyšok N-metylalanínu alebo N-metylvalínu.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I obsahujú asymetrické atómy uhlíka a preto môžu mať buď R alebo S konfiguráciu.
Vynález zahŕňa peptidy alebo peptolidy s otvoreným reťazcom, ktoré zodpovedajú zlúčeninám všeobecného vzorca I, napríklad molekuly s otvoreným reťazcom získané buď štiepením esterovej väzby medzi zvyškami Y a A alebo štiepením amidovej väzby medzi zvyškami iného susedného páru kyseliny. Výhodnými derivátmi s otvoreným reťazcom sú zlúčeniny všeobecných vzorcov IV a V
H-C-X-Y-A-B- RxLeu - Leu.0Rv (IV)
HA - B - RxLeu - Leu - C - X - Y.OR7 (V) kde R7 predstavuje atóm vodíka alebo alkylovú skupinu.
Výhodnou podskupinou zlúčenín podľa vynálezu sú zlúčeniny všeobecného vzorca I p
|--- Ag>-BE>-R:LpLeu-Leu-CE>-Xp-Ys> --
kde
Ap predstavuje zvyšok α-hydroxy-substituovanej kyseliny maslovej, prípadne /-substituovanej substituentom R6®3, ktorý predstavuje kyanoskupinu, prípadne chránené CH2OH, C00R2®3, CONR3r>R4E>, COR5®3 alebo -CH=CH2, kde R2®5 predstavuje atóm vodíka alebo prípadne arylom substituovanú alkylovú skupinu, R3®3 a R4p sú rovnaké alebo rôzne a predstavujú atóm vodíka alebo alkylovú skupinu alebo tvoria s atómom dusíka päť- až šesťčlenný kruh, ktorý prípadne obsahuje druhý heteroatóm a R5®3 predstavuje atóm vodíka alebo nižšiu alkylovú skupinu,
Bp predstavuje zvyšok a-amino-/-metyl-substituovanej oktánovej kyseliny,
R1®3 predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu,
Cp predstavuje zvyšok tryptofánu alebo N-metyltryptofánu, ktorý je prípadne N'-substituovaný alkoxyskupinou s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka,
Xp predstavuje zvyšok α-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až 14 atómov uhlíka a
Y13 predstavuje zvyšok α-amino- alebo N-metyl-a-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až 10 atómov uhlíka.
Ďalšou podskupinou zlúčenín podľa vynálezu sú zlúčeniny všeobecného vzorca ľ
P
-- A1P-B'P-R'lpLeu-Leu-C'P-X1Y’p — í1’.) kde
A’®3 predstavuje zvyšok α-hydroxy-substituovane j kyseliny maslovej, prípadne /-substituovanej substituentom R’®®3, ktorý predstavuje kyanoskupinu, COOR’2®3, CONR' 3E3R' COR'3®3, alkylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná azidoskupinou, atómom halogénu, alkoxyskupinou, prípadne
chránenou hydroxyskupinou alebo aminoskupinou, vinylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná alkylovou skupinou, atómom halogénu alebo kyanoskupinou, cykloalkylovú skupinu, tetrazolylovú skupinu alebo -C=CH, pričom R'21? predstavuje atóm vodíka alebo prípadne arylom substituovanú alkylovú skupinu, R'3p a R’4p sú rovnaké alebo rôzne a predstavujú atóm vodíka alebo alkylovú skupinu alebo tvoria spolu s atómom dusíka troj- až šesťčlenný kruh, ktorý prípadne obsahuje druhý heteroatóm a R’SE> predstavuje atóm vodíka alebo nižšiu alkylovú skupinu,
B,I? predstavuje zvyšok a-amino-/-metyl-substituovanej oktánovej kyseliny,
R'ip predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu,
C’33 predstavuje zvyšok tryptofánu alebo N-metyltryptofánu, všeobecného vzorca VI'
kde
R'ap predstavuje atóm vodíka, alkoxyskupinu, alkylovú skupinu alebo benzylovú skupinu, R'9E> predstavuje atóm vodíka alebo atóm halogénu, R,1OE> predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu a ---- predstavuje jednoduchú alebo dvojitú väzbu,
X’®5 predstavuje zvyšok α-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až 14 atómov uhlíka a
Y,p predstavuje zvyšok α-amino- alebo N-metyl-a-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až 10 atómov uhlíka.
Vynález tiež zahŕňa všetky zlúčeniny podlá vynálezu vo forme soli alebo esteru, ako aj vo voľnej forme.
Zlúčeniny vzorcov II a III (tu označované ako zlúčeniny A a B)
sa izolovali z kultúr plesňového kmeňa F92-4471/08, ktorý sa izoloval zo vzorky listového odpadu neďaleko La Piata, v Argentíne a je experimentálne priradený k rodu Bartalinia. Vzorky kmeňa F92-4471/08 boli uložené v US Department of Agriculture, kolekcia NRRL kultúr podľa ustanovenia Budapeštianskej dohody z 2. decembra 1993 a sú označené vkladovým číslom NRRL 21123. Charakteristiky plesňového kmeňa F92-4471/08 sú ďalej opísané v príklade 1.
Vynález sa týka kmeňa F92-4471/08 (NRRL 21123) v izolovanej forme, jeho mutantov a derivátov, ako aj nových cyklopeptolidov produkovaných týmto kmeňom.
Zlúčeniny A a B a príbuzné zlúčeniny sa môžu získať kultiváciou F92-4471/08/NRRL 21123 alebo jeho mutantov alebo derivátu alebo podobných plesňových kmeňov v živnom médiu a izolovaním týchto zlúčenín z neho, ako sa opisuje napríklad v príklade 2.
Charakteristiky zlúčenín A a B sú uvedené v príklade 3.
Zlúčeniny podľa vynálezu sa môžu pripravovať derivatizáciou zlúčenín A a B, ktorá spočíva v tom, že
a) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje skupinu COOR'2, kde R'2 je alkylová skupina, prípadne substituovaná arylovou skupinou, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje kyanoskupinu, s nukleofilmi, s výhodou s alkoholom, za príslušnej zásaditej alebo kyslej katalýzy, s výhodou s použitím kyseliny chlorovodíkovej, v organickom rozpúšťadle, s výhodou v éteri, alebo
b) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje skupinu COalkyl, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R6 predstavuje kyanoskupinu, s použitím organokovových zlúčenín, s výhodou Grignardových zlúčenín alebo alkyllítia, ako nukleofilov, pričom reakcia sa uskutočňuje v aprotických organických rozpúšťadlách, s výhodou v éteroch, s použitím katalyzátorov alebo bez použitia katalyzátorov, alebo
c) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje skupinu COOH, sa hydrolyzujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom Rs predstavuje skupinu COOalkyl, minerálnou kyselinou, s výhodou kyselinou chlorovodíkovou, vo vodno-alkoholovom roztoku alebo zásaditou hydrolýzou, alebo
d) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje skupinu COOR’2, sa esterifikujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R6 predstavuje skupinu COOH, štandardnými spôsobmi, s výhodou konverziou na chlorid kyseliny, napríklad s tionylchloridom a spracovaním s príslušným alkoholom v prítomnosti alebo bez prítomnosti činidla, ktoré viaže kyselinu, alebo
e) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje skupinu CH2OH, sa redukujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R6 predstavuje skupinu COOR2, hydridmi kovov alebo borohydridmi, s výhodou komplexom boránu s dimetylsulfidom, v organických rozpúšťadlách, alebo
f) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje skupinu CONR3R4, sa prevedú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R6 predstavuje skupinu COOR2, reakciou s amínmi, s výhodou konverziou voľnej kyseliny, na chlorid kyseliny a ten sa nechá reagovať s amínom vzorca HNR3R‘1, alebo
g) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca. I, v ktorom R6 predstavuje skupinu CHO, sa oxidujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje skupinu CHzOH, alebo
h) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje prípadne substituovanú vinylovú skupinu, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje skupinu CHO, s metylovaným Wittigovým činidlom, alebo
i) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R6 predstavuje prípadne substituovanú alkylovú skupinu, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R6 predstavuje skupinu CH^OH, alebo
j) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Rs predstavuje skupinu CH2NH2, sa redukujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R6 predstavuje skupinu CH2N3, alebo
k) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje skupinu C=CH, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom Rs predstavuje skupinu CH=Br , alebo
1) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R6 predstavuje cyklopropylovú skupinu, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom Rs predstavuje vinylovú skupinu, s diazometánom, alebo
m) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje tetrazolylovú skupinu, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje kyanoskupinu, s azidovou zlúčeninou, alebo
n) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R8 predstavuje atóm vodíka, sa odstráni metoxyskupina zo zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu OCH , alebo r
o) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom symbol
---- predstavuje jednoduchú väzbu, sa redukujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom symbol ---- predstavuje dvojitú väzbu, alebo
p) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje alkylovú skupinu alebo benzylovú skupinu, sa
zavádzajú tieto skupiny do zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje atóm vodíka, alebo
q) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje atóm halogénu, sa halogénujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R9 predstavuje atóm vodíka alebo
r) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje alkoxyskupinu a symbol ---- predstavuje dvojitú väzbu, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje atóm vodíka a symbol ---- predstavuje jednoduchú väzbu, s volframanom alkalického kovu a peroxidom vodíka a N-hydroxyindolový medziprodukt sa alkyluje, alebo
s) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje CSNH2, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I s derivátmi síry, s výhodou s difenylfosfinoditiovou kyselinou.
Zlúčeniny podľa vynálezu sa môžu tiež pripravovať chemickou syntézou, napríklad použitím bežných techník na syntézu peptidov. Typickým konečným stupňom pri príprave týchto zlúčenín je cyklizačný stupeň, pri ktorom sa lineárny peptid alebo peptolid, ktorý obsahuje zvyšky kyselín A, B, R1Leu, Leu, C, X a Y viazané spolu v príslušnom poradí, cyklizuje reakciou, pri ktorej vzniká amidová alebo esterová väzba.
Tak predložený vynález zahŕňa spôsob prípravy cyklického peptolidu všeobecného vzorca I, ktorý spočíva v tom, že sa cyklizuje lineárny peptid alebo peptolid, ktorý obsahuje zvyšky kyselín A, B, RxLeu, Leu, C, X a Y viazané spolu v príslušnom poradí.
Zlúčeniny podľa vynálezu vykazujú farmakologický účinok a sú preto použiteľné ako liečivá. Predovšetkým sú tieto zlúčeniny inhibítormi stimulovanej expresie bunkových adhéznych molekúl, obzvlášť inhibítormi VCAM-1, ktorá sa vzťahuje na expresiu E-selektínu a ICAM-1. Účinok na inhibíciu VCAM-1 prebieha na úrovni ako transkripčnej tak aj posttranskripčnej. Testy, ktoré sa môžu použiť na detekciu inhibície expresie ICAM-1, VCAM-1 a E-selektínu zlúčeninami podľa vynálezu sú ďalej opísané v príkladoch. Zlúčeniny sú tak použiteľné na liečenie a profylaxiu ochorení, ktoré vyvolávajú expresiu bunkových adhéznych molekúl. Tieto ochorenia zahŕňajú veľa nevrodených a zdedených ochorení/porúch, kde cirkulujúce leukocyty majú prominentnú úlohu v patogénnych procesoch, predovšetkým u akútnych a chronických zápalov (napríklad alergia, astma, psoriáza, reperfúzne poranenia, reumatická artritída a septický šok) a u autoimúnnych stavov (napríklad skleróza multiplex). Ostatné indikácie pre zlúčeniny zahŕňajú nádorové metastázy (napríklad melanóm, osteokarcinóm) a odmietanie aloimplantátu/xenoimplantátu, pretože je známe, že inhibícia vaskulárnych adhéznych molekúl môže výrazne zlepšiť prognózy týchto procesov.
Zlúčeniny podľa vynálezu tiež prichádzajú terapeuticky do úvahy pri hyperproliferácii kožných ochorení (napríklad psoriázy) , ako aj pri rôznych zhubných bujneniach, vzhľadom na ich inhibičné aktivity pri submikromolárnych koncentráciách, pri ktorých sa testovali 72 hodín v testoch keratinizácie, ako aj pri testoch bujnenia.
Zlúčeniny podľa vynálezu sú účinné pri inhibícii TNFa_ alebo IL6-indukovanej HIV produkcii u Ul monocytových bunkových línií, ako sa vyhodnotilo pomocou p24 Elisa a sú preto tiež použiteľné na liečenie ochorení vyvolaných deficitom imunity a ochorení vyvolaných vírusmi, predovšetkým na liečenie
AIDS.
Vynález tiež zahŕňa terapeutické použitie zlúčenín podľa vynálezu a terapeutické zmesi, ktoré tieto zlúčeniny obsahujú.
Vynález sa tiež týka spôsobov ochorení, ktoré sa týkajú expresie ί tieto spôsoby spočívajú v podávaní liečenia alebo profylaxie adhéznych molekúl, pričom terapeuticky alebo profy-
laktický účinného množstva zlúčeniny podľa vynálezu danému subjektu.
Vynález sa tiež obsahujú terapeuticky týka terapeutických prostriedkov, ktoré účinné množstvo zlúčeniny podľa vynále zu.
Ďalej sa vynález týka použitia zlúčenín podľa vynálezu na prípravu liečiv na liečenie alebo profylaxiu ochorení, ktoré sa týkajú expresie adhéznych molekúl.
Tieto prostrieaky môžu byť na parenterálne, orálne, aerosólové alebo topické použitie a obvykle obsahujú jedno alebo viac farmaceutický prijateľných riedidiel alebo nosičov a môžu obsahovať aditíva, ako sú stabilizátory a pod.
Dávky použitých zlúčenín sa môžu meniť podľa stavu a ochorenia, či sa používajú na liečenie alebo profylaxiu a spôsobu podávania spolu s ďalšími prostriedkami. Vo všeobecnosti sa však dosiahnu uspokojivé výsledky pri orálnom podávaní v dávkach od asi 0,05 do asi 10 mg/kg/deň, s výhodou od asi 0,1 do asi 7,5 mg/kg/deň, ešte výhodnejšie od asi 0,1 do asi 2 mg/kg/deň, pričom podávanie sa uskutočňuje v jednej alebo viac rozdelených dávkach dvakrát až štyrikrát denne. Alternatívne sa môže na parenterálne podávanie, napríklad intravenóznym kvapkaním alebo infúziou, použiť dávka od asi 0,01 do asi 5 mg/kg/deň, s výhodou od asi 0,05 do asi 1 mg/kg/deň a ešte výhodnejšie od asi 0,1 do asi 1,0 mg/kg/deň.
Vhodné denné dávky pre ľudí sú tak od asi 2,5 do asi 500 mg, s výhodou od asi 5 do asi 250 mg a ešte výhodnejšie od asi 5 do asi 100 mg, perorálne, alebo od asi 0,5 do asi 250 mg, s výhodou od asi 2,5 do asi 125 mg a ešte výhodnejšie od asi 2,5 do asi 50 mg, intravenózne.
Zlúčeniny sa môžu podávať akýmkoľvek vhodným spôsobom, vrátane podávania enterálneho, parenterálneho a topického a tiež inhaláciou. Vhodnými enterálnymi formami sú roztoky na pitie, tablety alebo kapsule. Vhodnými parenterálnymi formami sú injektovateľné roztoky alebo suspenzie. Vhodnými formami na topickú aplikáciu sú krémy, tekuté liekové formy na vonkajšie použitie a pod. pri rozsahu koncentrácie 0,01 až 10 %, s výhodou 0,1 až 1 % hmotn. pre takéto prípravky. Vhodné jednotkové dávkové formy na orálnu aplikáciu môžu obsahovať od 1 do 50 mg zlúčeniny, obvykle od 1 do 10 mg. Zlúčenina podľa príkladu 4 je výhodnou zlúčeninou podľa vynálezu a môže sa podávať väčším cicavcom, napríklad ľuďom, podobnými spôsobmi podávania v podobných alebo nižších dávkach ako sú dávky bežne používané pri známych štandardných látkach na dané indikácie.
Predložený vynález je ďalej bližšie opísaný v nasledujúcich príkladoch, ktoré sú sprevádzané grafmi, pričom: obr. 1 uvádza DV spektrá zlúčenín A (a) a B (b),
obr. 2 uvádza IČ spektrum zlúčeniny A, kde na osi x je uvedený vlnočet v cm-1 a na osi y transmitancia v %, obr. 3 uvádza IČ spektrum zlúčeniny B, kde na osi x je uvedený vlnočet v cm-x a na osi y transmitancia v %, obr. 4 uvádza protónové NMR spektrum zlúčeniny A, obr. 5 uvádza protónové NMR spektrum zlúčeniny B, obr. 6 uvádza 13C NMR spektrum zlúčeniny A, obr. 7 uvádza 13C NMR spektrum zlúčeniny B.
V nasledujúcich príkladoch, ktoré vynález bližšie ilustrujú bez toho, že by ho obmedzovali, sú teploty uvedené v stupňoch Celzia a sú použité nasledujúce skratky: Bz je benzyl, iPr je izopropyl, nPr je n-propyl, db je dvojitá väzba, sb je jednoduchá väzba, br je široký, d je dublet, m je multiplet, q je kvartet, t je triplet, Hba je modifikovaná kyselina 2-hydroxymaslová,
TFA je kyselina trifluóroctová a
THF je tetrahydrofurán.
A' =
-O.CHXCHXR6 í°
B' =
CO-
χ'= -NH-CH-COCH / \
CH. CHj
Y’= -N-CH-COCH.CH / \
CH. CH,
Príklady uskutočnenia vynálezu
Charakterizácia kmeňa F/92-4471/08 (NRRL 21123)
Kmeň pliesne NRRL 21123, ktorý produkuje zlúčeniny A a B, sa izoloval zo vzorky listového odpadu zozbieraného neďaleko La Piata, Argentína.
Pri pestovaní na 2% sladovom agarovom médiu A (2 % extraktu zo sladu, 0,4 % extraktu z kvasníc, 2 % agaru v deionizovanej vode) kmeň NRRL 21123 po troch dňoch po naočkovaní produkuje pri 27 *C kolónie s priemerom 25 až 35 mm. Kolónie obvykle vyvíjajú krátke vzdušné mycélium, ktoré je biele až sivé alebo sivohnedé.
Podľa merania priemeru kolónie na médiu A je optimálna teplota pre rast medzi 21 až 30 ‘C, minimálna teplota je medzi 0 až 6 °C a maximálna teplota je medzi 33 až 38 °C. Sporulácia sa pozorovala po štyroch dňoch inkubácie v rozsahu medzi 21 až 33 ‘C.
Kmeň pliesne NRRL 21123 produkuje sklovité priesvitné až veľmi svetlo hnedé konídie na flaštičkovitých alebo krúžkovitých konidiogénnych bunkách v dobre definovaných pyknidiách. Konídie sú vo všeobecnosti päťbunkové, cylindrické, obvykle mierne zakrivené a prevažná časť meria 24 až 26 x 2,6 až 4 μπι. Každé konídium má na jednom konci jeden sklovité priesvit ný nerozvetvený prívesok a na druhej koncovej bunke dva až štyri (obvykle tri) sklovité priesvitné a nerozvetvené prívesky.
Na podklade týchto morfologických charakteristík a podľa identifikačného kľúča v práci B. C. Sutton (1980): The Coelomycetes (publikované Commonwealth Mycological Inštitúte, Surrey, England) je kmeň NRRL 21123 v súlade s rodom Bartalinia Tassi.
Príklad 2
Fermentácia
Kmeň NRRL 21123 sa pestuje 15 dní pri teplote 21 ’C na šikmom agare s obsahom média A (2 % extraktu zo sladu, 0,4 % extraktu z kvasníc, 2 % agaru, deionizovaná voda). Konídie jednej šikmej kultúry sa suspendujú v 10 ml sterilnej vodovodnej vody. 1 ml suspenzie konídií sa naočkuje do každej z dvoch 500 ml Erlenmeyerových baniek, ktoré obsahujú 200 ml média B (2 % extraktu zo sladu, 0,4 % extraktu z kvasníc v deionizovanej vode). Tieto banky sa inkubujú 6 dní pri teplote 21 ‘C na rotačnej trepačke rýchlosťou 200 otáčok za minútu, čím sa pripraví predkultúra. 2 ml predkultúry sa potom očkujú do každej z dvesto 500 ml Erlenmeyerových baniek, ktoré obsahujú 200 ml média C (2,2 % monohydrátu maltózy, 0,72 % extraktu z kvasníc v deionizovanej vode). Tieto bunky sa inkubujú pri teplote 21 ’C na rotačnej trepačke rýchlosťou 200 otáčok za minútu a dajú sa spolu po 6 dňoch na ďalšie spracovanie.
Príklad 3
Izolácia metabolitov, zlúčeniny A a B litrov fermentačného bujónu kmeňa NRRL 21123, ako je opísaný v príklade 2, sa filtruje pomocou Clarcelu ako filtračnej pomôcky. Vlhké mycélium sa zoberie a extrahuje sa trikrát 15 1 zmesi metanolu a acetónu (1 : 1). Spojené extrak-
ty sa zahustia na cirkulačnej odparke za zníženého tlaku na približne 3 1 zostatkového vodného roztoku. Ten sa extrahuje štyrikrát 1 1 etylacetátu. Etylacetátové extrakty sa spoja a zahustia sa za zníženého tlaku na 25 g olejovitého zvyšku, ktorý sa potom rozdelí trikrát v rozpúsťadlovom systéme 90 % vodného metanolu a hexánu, spodná fáza po zahustení za zníženého tlaku poskytne 4,5 g surovej tuhej látky. Táto tuhá látka sa nanesie na kolónu s vnútorným priemerom 5,5 cm a výškou 38 cm so silikagélom (Merck, Kieselgel 60, 40 až 63 Mm) a chromatografuje sa 1,4 1 zmesi metylterc-butyléteru a metanolu (98 : 2) a potom 11 (95 : 5). Prietoková rýchlosť sa udržiava na 110 ml za minútu. Frakcie, ktoré vykazujú aktivitu v teste inhibície ICAM-1 expresie, ako sa opisuje v príklade 4, (každá 90 ml), ktoré obsahujú buď zlúčeninu A (č. 9 až 10) alebo zlúčeninu B (č. 11 až 25) sa spoja.
Zlúčenina A
Spojené frakcie 9 až 10 z chromatografie na silikagéli opísané vyššie sa odparia za zníženého tlaku do sucha, čím sa získa 1 g surovej látky. Tá sa ďalej čistí preparatívnou HPLC, s použitím Merck kolóny s vnútorným priemerom 50 mm a výškou
250 mm so 7 μιη LiChrospher RP-18. Počas 60 minút sa aplikuje lineárny gradient 80 -> 100 % metanolu vo vode. Prietoková rýchlosť je 25 ml/min, 25 ml frakcie sa zoberú a monitorujú sa pri 220 nm. Frakcie 25 až 62 sa spoja na základe UV, TLC a biologickej účinnosti a potom sa zahustia za zníženého tlaku, čím sa získa 0,6 g zvyšku. Konečné čistenie sa uskutočňuje chromatografiou na Sephadexe LH 20 s použitím kolóny s vnútorným priemerom 2,7 cm a výškou 86 cm a elúciou metanolom. Eluované frakcie, ktoré obsahujú zlúčeninu A v čistej forme, ako sa stanovilo pomocou TLC, sa spoja a odparia za zníženého tlaku do sucha, čím sa získa 580 mg bezfarebného prášku. Vlastnosti zlúčeniny A sú uvedené v tabuľke 1 nižšie.
Zlúčenina B
Spojené frakcie 11 až 25 poskytnú po odparení rozpúšťadla za zníženého tlaku 2 g surovej látky, ktorá sa ďalej čistí preparatívnou HPLC, s použitím Merck kolóny s vnútorným priemerom 50 mm a výškou 250 mm so 7 μιη LiChrospher RP-18. Elúcia sa uskutočňuje lineárnym gradientom 80 -> 100 % metanolu vo vode počas 60 minút. Prietoková rýchlosť je 25 ml/min, 25 ml frakcie sa zoberú a detegujú sa pri 220 nm. Frakcie 47 až 55 obsahujú predovšetkým zlúčeninu B, na základe UV, TLC a biologickej účinnosti. Frakcie sa spoja, odparia sa za zníženého tlaku a získa sa 0,4 g zvyšku. Ten sa ďalej čistí chromatografiou na Sephadexe LH 20 na kolóne s vnútorným priemerom 2,7 cm a výškou 86 cm a elúcia sa uskutočňuje metanolom. 12 ml frakcie sa zoberú a monitorujú sa pri 220 nm. Na základe UV, TLC a biologickej účinnosti sa frakcie 23 až 27 spoja, odparia sa za zníženého tlaku a získa sa 0,3 g zvyšku. Po konečnej chromatografii na silikagéli s použitím kolóny s vnútorným priemerom 2,2 cm a výškou 16 cm, naplnené Merck Kieselgel 60, 40 až 63 μιη a elúciou zmesí toluénu a etanolu (95 : 5) sa získa čistá zlúčenina B, stanovené TLC. Výsledné frakcie sa spoja a odparia za zníženého tlaku, čím sa získa 145 mg bezfarebného prášku. Vlastnosti zlúčeniny B sú tiež uvedené v tabuľke 1 nižšie.
Tabuľka 1 nižšie sa vzťahuje na obrázky 1 až 7.
Tabuľka 1 vlastnosti zlúčenina A zlúčenina B
| 1. | vzhľad | bezfarebný prášok | bezfarebný prášok |
| 2. | [alD 2S | -234’ (MeOH, c=l,ll) | -243’ (MeOH, c=l, i |
| 3 . | hmotnostné | ||
| spektrum (FAB) | m/e = 977 MH*) | m/e = 949 MH*) | |
| 4 . | molekulový | ||
| vzorec | C H N 0 | C H N 0 | |
| 53 & 9 | 51 80 8 9 | ||
| 5. | UV spektrum | ||
| (MeOH) | viď obr. la | viď obr. lb | |
| 6. | IČ spektrum | ||
| (KBr) | viď obr. 2 | viď obr. 3 | |
| 7. | protónová NMR, | v CDC1 -DMSO-d = 3 6 | v CDC1 -DMSO-d = 3 6 |
| 500 MHz, DMSO-d ' 6 | 3:2, viď obr. 4 | 4:1, viď obr. 5 | |
| ako vnútorný | |||
| štandard | |||
| 8. | 13C NMR, 125,7 | v CDC1 -DMSO-d = | v CDC1 -DMSO-d = |
| 3 e | 3 6 | ||
| MHZ, DMSO-d r 6 | 3:2, viď obr. 6 | 4:1, viď obr. 7 | |
| ako vnútorný | |||
| štandard | |||
| 9. | rozpustnosť | rozpustná v chloroforme, metanole, DMSO | |
| nerozpustná vo vode a | hexáne | ||
| 10 | . TLCa(Rf) | 0,31 | 0,24 |
| 11 | . HPLCa | 4,2 minúty | 3,3 minúty |
a 5 cm x 20 cm silikagélová doštička 60 F254 (Merck), toluén-MeOH (95 : 5)
Merck LiChrospher 100, Rp-18 (5 μιη), 4 x 125 mm, MeOH-H_O (9 : 1), 1,2 ml/min, detekcia pri 220 nm s použitím fotodiódového mriežkového detektora Waters 996
Príklad 4
Zlúčenina vzorca I (A = A', Re = COOCH3, B = B', R1 = CH3, C = C’, R® = OCIT ,
---- = db, X = X', Y = Y')
K zmesi 2 g zlúčeniny A a 1,65 ml metanolu sa pridá studený roztok HC1 v éteri (30 ml, 17 % hmotn./obj., -20 ’C) a udržiava sa pri teplote -20 ’C počas 3 dní. Reakčná zmes sa potom neleje do vodného roztoku hydrogénuhličitanu a extrahuje sa etylacetátom. Organický extrakt sa vysuší síranom sodným, prefiltruje sa a odparí za zníženého tlaku. Surový produkt sa rozpustí v 30 ml zmesi metanolu a koncentrovanej vodnej HC1 (9 : 1) a mieša sa pri teplote miestnosti počas 3 hodín. Roztok sa potom zriedi vodou a extrahuje sa etylacetátom. Organický extrakt sa vysuší síranom sodným, prefiltruje sa a odparí za zníženého tlaku. Surová reakčná zmes sa čistí chromato-
grafiou s obrátenými fázami na LiChrospher RP-8 (gradiént: metanol/voda = 8/2 až 10/0) a následnou chromatografiou na silikagéli (gradiént: toluén/voda = 100/0 až 95/5), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny a derivát s otvoreným reťazcom všeobecného vzorca IV (R6 = COOCH3, R7 = CH3) vo forme bezfarebnej tuhej látky.
TLC: silikagél, toluén/metanol =9/1, Rf = 0,41 (zlúčenina uvedená v názve), Rf = 0,38 (derivát s otvoreným reťazcom), obrátená fáza RP-8, metanol/voda/trifluóroctová kyselina = 95/4/1, Rf = 0,34 (zlúčenina uvedená v názve), Rf = 0,51 (derivát s otvoreným reťazcom).
Príklad 5
Zlúčenina vzorca I (A = A·, Re = COOH, B = B', R1 = CHa, C = C', R® = OCH3,
---- = db, X = X', Y = Y')
Roztok 209 mg zlúčeniny vzorca I podlá príkladu 4 v 15 ml zmesi terc-butanolu a koncentrovanej vodnej HC1 (9/1) sa za hrieva na teplotu 60 ’C počas 8 hodín. Reakčná zmes sa naleje do nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu a extrahuje sa etylacetátom. Organická fáza sa premyje pufrom pH 7, vysuší sa síranom sodným a odparí sa za zníženého tlaku. Surový produkt sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 100/0 až 95/5), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,25, obrátená fáza RP-8, metanol/voda = 92/8, Rf = 0,34.
Príklad 6
Zlúčenina vzorca I (A = A', R6 = CO.NH.CH3, B = B', R1 = CH3, C = C', Rs = OCH3, ---- =db, X = X', Y = Y')
Roztok 10 mg zlúčeniny podľa príkladu 5 v 0,5 ml dichlórmetánu sa ochladí na teplotu 0 ’C a pridá sa 50 μΐ tionylchloridu. Reakčná zmes sa udržiava pri teplote 0 ’C počas 1,5 hodiny a potom sa pri teplote 0 ’C odparí za zníženého tlaku. Zvyšný žltý olej sa rozpustí 1 ml dichlórmetánu pri teplote 0 ’C a pridá sa 100 μΐ 40 % vodného roztoku metylamínu. Po 45 minútach sa reakčná zmes naleje do 0,1 M vodnej HC1, extrahuje sa etylacetátom a rozdelí sa medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu. Organická fáza sa premyje roztokom chloridu sodného, vysuší sa síranom sodným a odparí sa za zníženého tlaku. Surový produkt sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/etylacetát/metanol = 100/0/0 až 65/25/10), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,25, obrátená fáza RP-8, metanol/voda = 95/5, Rf = 0,33.
Analogicky podlá príkladu 6 sa získajú nasledovné zlúčeniny vzorca I (A = A’,B=B’,C=C‘,X=X’, Y = Y' a Rx = CH ) :
' príklad
R6
R8
| 7 | -CO-./ \) | OCH. | db |
| 8 | -CO-N \ Ch | a | db |
| Q | CO.N^ | . - | db |
| 10 | - CO - / | II | db |
| 1 1 | -CO-nQ | n | db |
| 12 | -CO-jHCH.X.CHj CH. J | t* | db |
Príklad 13
Zlúčenina vzorca I (A = A1, R6 = COO.iPr, B = B’, Rx = CH3, C = C’, R® = OCHa,
---- = db, X = X», Y = Y')
Roztok 10 mg zlúčeniny podlá príkladu 5 v 0,75 ml dichlórmetánu sa ochladí na teplotu 0 ’C a pridá sa 75 μΐ tionylchloridu. Reakčná zmes sa udržiava pri teplote 0 ’C počas 2 hodín a potom sa odparí pri teplote 0 'C za zníženého tlaku. Zvyšný žltý olej sa rozpustí 1 ml dichlórmetánu pri teplote 0 ’C a pridá sa 3 0 μΐ izopropanolu. Po 3 hodinách pri teplote 0 ’C sa reakčná zmes naleje do 0,1 M vodnej HC1 a extrahuje sa etylacetátom. Organická fáza sa premyje roztokom chloridu sodného, vysuší sa síranom sodným a odparí sa za zníženého tlaku. Surový produkt sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 100/0 až 95/5), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,47, obrátená fáza RP-8, metanol/voda = 95/5, Rf = 0,37.
Analogicky podľa príkladu 9 sa pripravia nasledujúce zlúčeniny vzorca I (A = A',B=B',C=C’,X= X', Y = Y’ a R1 = CH ):
'
| príklad | R6 | R8 | — |
| 14 | -COO.C H 2 5 | OCH 3 | db |
| 15 | -COO.nPr | OCH 3 | db |
Príklad 16
Zlúčenina vzorca I (A = A', R6 = COCH3, B = B', R1 = CH3 , C = C· , R8 = OCH3,
---- = db, X = X', Y = Y')
Roztok 200 mg zlúčeniny A v 2 ml éteru sa pridá k roztoku metylovaného Grignardovho činidla 2 mmol v 5 ml éteru a mieša sa pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Potom sa pridajú ďalšie 2 mmol MeMgJ v éteri a zmes sa znovu mieša pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Reakčná zmes sa potom naleje do
0,1 M roztoku HC1 a extrahuje sa etylacetátom. Organická fáza sa premyje roztokom hydrogénuhličitanu sodného, vysuší sa síranom sodným a odparí sa za zníženého tlaku. Surová reakčná zmes sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/etylaCetát/metanol = 100/0/0 až 68/27/5), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve, ako aj značné množstvo nezreagovanej východiskovej látky.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,30.
Príklad 17
Zlúčenina vzorca I (A = A', Re = CH20H, B = B'
----= db, X = X', Y = Y' )
Rx = CH , C = C', Rs = OCH , r ’ 3 1
K roztoku 27 mg zlúčeniny podľa príkladu 5 v 2 ml tetrahydrofuránu sa pri teplote miestnosti pridá 0,5 ml 2 M roztoku komplexu boránu a dimetylsulfidu. Reakčná zmes sa mieša počas 2,5 hodiny, naleje sa do 0,1 M HC1 a extrahuje sa etylacetátom. Organická fáza sa premyje fosfátovým pufrom (pH 7), vysuší sa síranom sodným a odparí sa za zníženého tlaku. Surová látka sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 100/0 až 95/5), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,27, obrátená fáza
RP-8, metanol/voda = 92/8, neoddelené od východiskovej látky.
Príklad 18
Zlúčenina vzorca I (A = A', R6 = CN, B = B', Rx = CH3, C = C', Rs = H,----= db,
X = X', Y = Y')
K roztoku 53 mg zlúčeniny A a 66 mg octanu sodného v 4 ml acetanhydridu sa pridá 18 mg paládia na aktívnom uhlí (10 %). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti v atmosfére vodí ka počas 20 hodín (50 % konverzia podľa TLC) a potom sa naleje do vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a extrahuje sa etylacetátom. Organický roztok sa vysuší síranom sodným a odparí vo vysokom vákuu. Surový produkt sa čistí chromátografiou s obrátenými fázami na RP-8 (gradient: metanol/voda = 80/20 až 100/0), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,33, obrátená fáza RP-8, metanol/voda = 92/8, Rf =0,50 (východisková látka Rf
Príklad 19
Zlúčenina vzorca I (A = A', R6 = CHO, B = B', ---- = db, X = X', Y = Y')
R1 = CH , C = CR® = OCH , ' ' 3 f
K roztoku 50 mg zlúčeniny podľa príkladu 17 v 4 ml dichlórmetánu sa pridá 35 mg Dess-Martinovho perjodovaného činidla (1,1,1-tris(acetyloxy)-1,1-dihydro-l,2-benzjodoxol-3(1H-ónu) a suspenzia sa mieša pri teplote 20 ’C počas 3 hodín. Potom sa surová reakčná zmes naleje na silikagél a eluuje sa etylacetátom. Frakcie, ktoré obsahujú produkt sa spoja, odparia sa za zníženého tlaku a čistia sa chromátografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 100/0 až 95/5), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
Príklad 20
Zlúčenina vzorca I (A = A’, R6 = CH=CH2, 3 = 31^1 = CH3, C = C’, R® = OCH3,
---- = db, X = X', Y = Y')
Roztok metylovaného Wittigovho činidla, pripravený miešaním zmesi metyltrifenylfosfóniumbromidu a nátriumami du v bezvodom THF, sa pridáva pomaly pri teplote 20 ’C k roztoku 24,7 mg zlúčeniny podľa príkladu 19 v bezvodom THF až do dosiahnu tia žltej farby činidla. Potom sa reakčná zmes naleje do 0,1 M kyseliny chlorovodíkovej a extrahuje sa etylacetátom. Organický extrakt sa odparí za zníženého tlaku a zvyšný surový produkt sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 100/0 až 97/3), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
Príklad 21
Zlúčenina vzorca I
(A = A', R6 = CH=CH-C2Hs, B = B', R1 = CH3, C = C ’ , R3 =
OCHa,----= db, X = X' , Y = Y' )
Zlúčenina uvedená v názve sa pripraví analogicky podľa príkladu 20.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,44.
Príklad 22
Zlúčenina vzorca I (A = A', R6 = CH2N3, B = B', R1 = CH3, C = C', R8 = OCH3,
---- = db, X = X', Y = Y')
K roztoku 30 mg zlúčeniny podľa príkladu 17 a 12 mg trifenylfosfínu v 3 ml bezvodého THF sa pridá 150 μΐ 0,38 M toluénovaného roztoku kyseliny azidovodíkovej. Pri teplote miestnosti sa pridáva dietylažodikarboxylát, až roztok zostane žltý a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 10 minút. Surová reakčná zmes sa naleje na 5 g oxidu hlinitého (neutrálneho) a eluuje sa etylacetátom. Frakcie, ktoré obsahujú produkt sá odparia za zníženého tlaku a čistia sa chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 99,5/0,5 až 95/5), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,46, obrátená fáza RP-8, metanol/voda/TFA = 95/4/1, Rf = 0,41.
Príklad 23
Zlúčenina vzorca I (A = A', R6 = CH2NH2, B = B', Rx = CH3, C = C', Ra = OCHa,
---- = db, X = X', Y = Y')
Roztok 20 mg zlúčeniny podlá príkladu 22 v 2 ml metanolu sa mieša v atmosfére vodíka pri teplote 4 ‘C so 4 mg paládia na uhlí (10 %) počas 20 hodín. Katalyzátor sa odfiltruje a reakčná zmes sa odparí za zníženého tlaku. Surový produkt sa čistí chromatografiou s obrátenými fázami na RP-8 (gradient: metanol/voda 0,5 % TFA = 80/20 až 100/0), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
TLC: obrátená fáza RP-8, metanol/voda/TFA = 95/4/1, Rf = 0,69.
Príklad 24
Zlúčenina vzorca I (A = A', R6 = CH=CBr2, B = B', Rx = CH3, C = C’, R8 = OCH3 , ---- = db, X = X', Y = Y')
Roztok 225 mg zlúčeniny podľa príkladu 19 v 2,5 ml dichlórmetánu sa pridá k zmesi 30 mg práškového zinku, 120 mg trifenylfosfínu a 150 mg tetrabrómmetánu a mieša sa počas 30 minút pri teplote miestnosti. Zmes sa potom naleje na 5 g oxidu hlinitého a eluuje sa etylacetátom. Frakcie, ktoré obsahujú produkt sa odparia za zníženého tlaku a čistia sa chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 99,5/0,5 až 97/3), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej tuhej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,27.
Príklad 25
Zlúčenina vzorca I (A = A', Re = CsCH, B = B', R1 = CH3 , C = C', Ra = OCH3,
---- = db, X = X·, Y = Y' )
Roztok n-butyllítia v hexáne (3 mólekvivalenty) sa pridáva k 50 mg zlúčeniny podľa príkladu 24 pri teplote -78 *C počas 2 hodín. Reakčná zmes sa naleje do 0,1 M vodnej HC1 a extrahuje sa etylacetátom. Organická fáza sa premyje roztokom hydrogénuhličitanu a roztokom chloridu sodného a odparí sa za zníženého tlaku. Surový produkt sa čistí chromátografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 99,5/0,5 až 97/3), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej tuhej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,44.
Príklad 26
Zlúčenina vzorca I (A = A', R6 = CH=CH-CN, B = B', Rx = CH3, C = C', R8 = OCH3, ---- = db, X = X’, Y = Y')
Roztok 30 mg zlúčeniny podľa príkladu 19 a 270 mg kyanometyléntrifenylfosforánu v 5 ml toluénu sa mieša pri teplote miestnosti počas 4 hodín. Potom sa surová reakčná zmes prefiltruje cez oxid hlinitý (neutrálny) a eluuje sa etylacetátom. Frakcie, ktoré obsahujú produkt sa spoja a odparia sa za zníženého tlaku. Zlúčenina uvedená v názve je zmesou E/Z izomérov.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,39.
Príklad 27
Zlúčenina vzorca I
(A = A', R6 = CH2C1, B = B', Rx = CH3 , C = C', Rs = OCH3 , ---- = db, x = x ’, Y = Y')
Roztok 20 mg zlúčeniny podľa príkladu 17 v 1 ml toluénu sa pridá k roztoku 10 mg dichlórtrifenylfosforánu v 1 ml toluénu a mieša sa pri teplote 60 “C. Po dvoch hodinách sa pridá ďalších 35 mg dichlórtrifenylfosfínu. Po jednej hodine sa reakčná zmes prefiltruje cez neutrálny oxid hlinitý a eluuje sa etylacetátom. Frakcie, ktoré obsahujú produkt sa odparia a surová látka sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 100/0 až 97/3), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej tuhej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,39.
Príklad 28
Zlúčenina vzorca I (A = A’ , R6 = CH .O.CH , B = B' , R1 = CH , C = C', R8 = OCH , ---- = db, X = X', Y = Y' )
Roztok 34 mg zlúčeniny podľa príkladu 17 v 6 ml dichlórmetánu a 100 mg silikagélu sa nechá reagovať s roztokom diazometánu v éteri, až sa východisková látka spotrebuje. Na zbavenie sa polymetylénu vytvoreného počas reakcie sa zmes prefiltruje, odparí sa a pridá sa čerstvý dichlórmetán a silikagél. Po konečnom odparení za zníženého tlaku sa surová látka čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 99,7/0,3 až 97/3), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej tuhej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,34.
Príklad 29
Zlúčenina vzorca I (A = A' , R® = —/ B = B' , R1 = CH3, C = C' , Re = OCH3, zírrr = db, X = X', Y = Y')
Roztok 13 mg zlúčeniny podľa príkladu 20 a 2,8 mg paládiumacetátu v 2,5 ml dichlórmetánu sa nechá reagovať s étero-
vým roztokom diazometánu pri teplote miestnosti, až sa východisková látka spotrebuje. Surová reakčná zmes sa prefiltruje cez silikagél a eluuje sa zmesou toluénu a metanolu. Frakcie, ktoré obsahujú produkt sa odparia a surová látka sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 99,5/0,5 až 97/3), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej tuhej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,38, obrátená fáza RP-8, metanol/fosfátový puf or pH 7 = 92/8, Rf = 0,27.
Príklad 30
Zlúčenina vzorca I
(A = A’, R® = COO.CH(C6Hs)2, B = B · , R1 = CHa, C = C', Rs = och3,----- db, X = X', Y = Y')
Roztok 8,2 mg zlúčeniny podľa príkladu 5 a 3,1 mg difenyldiazometánu v 0,5 ml toluénu sa zahrieva na teplotu 60 ’C počas 3 hodín. Roztok sa potom priamo nanesie na chromatografickú kolónu so silikagélom (gradient: toluén/metanol = 100/0 až 97/3), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej tuhej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,46.
Príklad 31
| Zlúčenina vzorca I | NE—N |
| (A = A’, RG = | \ 1, B = B’, R1 = CH , C = C', R8 = OCH , N—N 3 3 |
| ----- db, X = X' , | Y = Y’) |
Roztok 50 mg zlúčeniny A v 1 ml dimetylformamidu sa zahrieva so 125 mg tributylcínchloridu a 25 mg-azidu sodného pri teplote 100 ‘C počas 8 dní. Potom sa zmes naleje do 1 M vodnej HC1 a extrahuje sa etylacetátom. Organická fáza sa premyje roztokom chloridu sodného, vysuší sa síranom sodným a odparí sa za zníženého tlaku. Surový produkt sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 100/0,25 až 100/2,5), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol =
0,12, obrátená fáza
RP-8, metanol/fosfátový puf or pH 7 = 92/8, Rf = 0,48.
Príklad 32
Zlúčenina vzorca I (A = A’, R6 = CN, B = B', C = C'
Y = Y' ).
Re = CH3,----= db, X = X’ ,
Roztok 20 mg zlúčeniny podlá príkladu 18 v 1 ml dimetylformamidu sa zmieša s 1 ml jódmetánu a pridá sa roztok 5 mg nátrium-bis(trimetylsilyl)amidu v 0,3 ml dimetylformamidu. Po miešaní reakčnej zmesi pri teplote miestnosti počas 1,5 hodiny sa zmes naleje do 0,1 M HC1, extrahuje sa etylacetátom a rozdelí sa medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu. Organická fáza sa premyje roztokom chloridu sodného, vysuší sa síranom sodným a odparí sa za zníženého tlaku. Surový produkt sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 100/0,25 až 100/2,5), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,43.
Analogicky podľa príkladu 32 sa pripravia nasledovné zlúčeniny vzorca I (A = A', R6 = CN, B = B', X = X', Y = Y'):
| príklad | C | R6 | — |
| 33 | C’ | C H 2 S | db |
| 34 | C' | Bz | db |
Príklad 35
Zlúčenina vzorca I (A = A', R6 = CN, B = B', C = C*
X = X', Y = Y*)
Ra = CH2C(CH3)3, ---- = db,
K roztoku 38 mg zlúčeniny podľa príkladu 38 v 2 ml kyseliny octovej a 0,2 ml pivaloylaldehydu sa pridá 30 μΐ 2 M komplexu boránu s dimetylsulfidom v THF a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 5 minút. Zmes sa potom naleje do zmesi hydrogénuhličitanu sodného a etylacetátu a pridá sa malé množstvo vody. Organická vrstva sa oddelí, premyje sa roztokom chloridu sodného, vysuší sa síranom sodným a odparí sa za zníženého tlaku. Zvyšný bezfarebný olej (TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,53) sa rozpustí v 3 ml THF a pri teplote miestnosti sa pridáva tetrahydrofuránový roztok 2,3-dichlór-5,6-dikyano-1,4-benzochinónu (DDQ, 8 mg v 0,2 ml), až reakčná zmes stmavne. Zmes sa prefiltruje cez 5 g silikagélu a eluuje sa zmesou toluénu a metanolu 100/0,5 až 95/5, čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,49.
Príklady 36 a 37
Analogicky podľa príkladu 35 sa pripravia nasledovné zlúčeniny vzorca I (A = A’, R® = CN, B = B’, X = X', Y = Y’):
| príklad | C | Re | — |
| 36 | c· | Bz | sb |
| 37 | c· | ch(ch3)2 | db |
Príklad 38
Zlúčenina vzorca I (A = A', Re = CN, B = B’, C = C', Rs = H, ----- sb,
X = X' , Y = Y')
Heterogénna zmes 25 mg zlúčeniny podľa príkladu 18, 1 ml trifluóroctovej kyseliny a 0,3 ml trimetylsilánu sa intenzívne mieša v atmosfére argónu pri teplote 4 ’C počas 20 hodín. Reakčná zmes sa naleje do nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu a extrahuje sa etylacetátom. Organická fáza sa premyje roztokom chloridu sodného, vysuší sa síranom sodným a odparí sa za zníženého tlaku. Surový produkt sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 100/0,5 až 100/5), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, indolín A Rf = 0,16, indolín B Rf =0,10, obrátená fáza RP-8, metanol/voda/TFA = 95/4/1, indolín A + B Rf = 0,71.
Príklad 39
Zlúčenina vzorca I (A = A', R6 = CN, B = B’, C = C·, Rs = O.(CH2)2CH3,----- db,
X = X’, Y = Y')
K roztoku 30 mg zlúčeniny podľa príkladu 38 (zmes diastereomérov) v 1 ml metanolu sa pridá 100 mg volframanu sodného (Na^WO^.2HaO) a 100 μΐ 30 % roztoku peroxidu vodíka. Reakčná zmes sa mieša 20 minút pri teplote miestnosti a potom sa priamo čistí gélovou chromatografiou (Sephadex LH-20, metanol/e34
tylacetát = 1 : 1). Frakcie, ktoré obsahujú N-hydroxyindolový medziprodukt sa odparia, zvyšok sa vyberie do 2 ml bezvodého DMF a pridajú sa 2 ml propyljodidu a 7,5 mg nátrium-bis(trimetylsilyl)amidu. Po 30 minútovom miešaní pri teplote miestnosti sa reakčná zmes naleje do 0,1 M kyseliny chlorovodíkovej a extrahuje sa etylacetátom. Organická vrstva sa premyje hydrogénuhličitanom sodným a roztokom chloridu sodného a odparí sa za zníženého tlaku. Produkt sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 100/0,5 až 98/2) a chromatografiou s obrátenými fázami (RP-8, gradient: vodný roztok metanólu = 75 až 100 %), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 90/10, Rf =0,51, RP-8, metanol/fosfátový pufor pH 7 = 92/8, Rf = 0,30.
Príklad 40
Zlúčenina vzorca I (A = A', R6 = CN, B = B', C = C', R8 = O.C_Hs,----- db,
X = X’, Y = Y')
Zlúčenina uvedená v názve sa pripraví analogicky, ako je opísané v príklade 39.
Príklad 41
Zlúčenina vzorca I (A = A', R6 = CN, B = B', C = C', Ra = OCH3, R® = Br,----= db, X = X' , Y = Y')
Roztok 50 mg zlúčeniny A v 2 ml tetrachlórmetánu sa mieša s 3 mg práškového železa a počas 1 hodiny sa pridá 10 mg brómu v tetrachlórmetáne. Surová reakčná zmes sa naleje do vodného roztoku hydrogénuhličitanu a extrahuje sa etylacetátom. Organická fáza sa premyje roztokom tiosíranu sodného a roztokom chloridu sodného a odparí sa za zníženého tlaku. Surový produkt sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient:
toluén/metanol = 99,5/0,5 až 97/3), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej tuhej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,48, obrátená fáza RP-8, metanol/voda = 92/8, Rf = 0,19.
Príklad 42
Zlúčenina vzorca I
| (A = A', R6 = | = CSNH2, B = B ’ , R1 = CH3 , C = C ’ , R® = OCH3 , |
| ---- = db, X = | = X’, Y = Y' ) |
Roztok 50 mg zlúčeniny A a 50 mg difenylfosfinoditiovej kyseliny v 4 ml izopropanolu sa zahrieva na teplotu 60 ’C počas 3 dní. Reakčná zmes sa ochladí teplotu -20 ’C, zrazenina sa odstráni filtráciou, roztok sa zriedi etylacetátom a extrahuje sa vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného. Organická fáza sa odparí za zníženého tlaku a surový produkt sa čistí chromatografiou na silikagéli (gradient: toluén/metanol = 100/0,5 až 96/4), čím sa získa zlúčenina uvedená v názve vo forme bezfarebnej peny.
TLC: silikagél, toluén/metanol = 9/1, Rf = 0,29.
Biologická účinnosť
Účinnosti zlúčenín podlá vynálezu sa testovali v testoch cytotoxicity a inhibície expresie ICAM-1, VCAM-1 a E-selektínu, ako aj v testoch bunkového bujnenia. Koncentrácie zlúčenín potrebných na polovicu maximálnej inhibície (ICso) sú pre každý test uvedené v tabuľke 2 nižšie.
Tabuľka 2 zlúč.
IC
| ICAM-1 | 50 ' ' ICAM-1 | VCAM-1 | E-selektín | cytotox. | |
| (HaCaT) | (HMEC) | (HMEC) | (HUVEC) | (24 h) | |
| zl. A | 0,009 | 0,06 | 0,002 | 0,04 | > 40 |
| Zl.B | 0,02 | 1,3 | 0,03 | > 40 |
bunk.bujn.
(HaCaT 72 h)
0,006
0,05
Tieto
HaCaT testy sa uskutočnili nasledujúcim spôsobom:
bunky, spontánne transformované nenádorové ľudské keratinocytové bunkové línie s vysoko zachovalými fenotypovými diferenciačnými charakteristikami normálnych keratinocytov (Boukamp a kol., 1988 J. Celí Biol. 106, 761 až 771), sa použili ako na test bujnenia tak aj na test ICAM-1 bunková Elisa.
A. ICAM-1 test bunková Elisa
I. Keratinocyty ICAM-1 bunková Elisa
Test ICAM-1 bunková Elisa sa použil na stanovenie inhibície ICAM-1 expresie v podstate tak, ako je opísané v práci Wi-
niski a Foster (1992, J. Invest. Dermatol., 99, 48 až 52). HaCaT bunky sa naočkovali do 96 jamkových mikrotitračných dosiek (2 x 104, buniek na jamku z živnom médiu: DMEM s 5 % FCS, 100 jednotiek/ml penicilínu, 100 gg/ml streptomycínu, 2 mM glutamínu, 1 mM pyruvátu sodného), nechali sa rásť až do zhluknutia a potom sa inkubovali v čerstvom testovacom médiu (rovnakom ako živné médium, avšak s použitím 0,5 % FCS namiesto 5 %) a to s alebo bez IFN-//TNF-a stimulačného média (testovacie médium + 1000 jednotiek/ml IFN-^/3 ng/ml TNF-α), ako v prítomnosti tak aj neprítomnosti zlúčeniny A alebo zlúčeniny B počas asi 24 hodín. Médium sa potom vymyje a vrstvy, ktoré sa skladajú z jedného radu buniek (monovrstvy), sa fixujú 1 % paraformaldehydu. Monovrstvy sa inkubujú sýtiacimi množstvami primárnych protilátok (monoklonálne myši anti-ICAM-1) a sekundárnych protilátok (kozie anti-myšie s konjugovanou peroxidázou). Nasledujúcou reakciou peroxidázy s použitím
3-amino-9-etyl-karbazolu (AEC) ako substrátu sa vytvorí nerozpustný farebný produkt, ktorý sa ľahko meria v štandardnom čítacom zariadení z mikrotitračných dosiek.
II. Meranie cytotoxicity
Po skončení AEC reakcie na detekciu ICAM-1 sa HaCaT monovrstvy prepláchnu PBS (200 μΐ), PBS sa odleje z dosiek, ktoré sa potom zbavia prebytočnej kvapaliny poklopávaním povrchu papierovým obrúskom. Spodné povrchy mikrotitračných dosiek sa jemne zotrú faciálnym tkanivom a potom znovu faciálnym tkanivom a odpočíta sa absorbancia pri 492 nm. Skôr ako monovrstvy môžu vyschnúť, pridá sa do každej jamky 0,1 ml 0,1 % roztoku kryštalickej fialovej v PBS (najskôr prefiltrovanej cez 0,2 μτη filter). Dosky sa potom inkubujú pri teplote miestnosti počas 10 minút, premyjú sa starostlivo 5 x PBS, prebytok kvapaliny sa odstráni vyššie opísaným spôsobom a znovu, skôr ako monovrstvy stačia uschnúť, sa odpočíta absorbancia pri 492 nm. Odpočítaním optických hustôt pred a po vyfarbení sa získajú hodnoty vyvolané vyfarbením kryštalickou fialovou a tie sú tak vo vzťahu k množstvu buniek monovrstvy prítomných v jamkách. Tieto hodnoty sa používajú na korekciu AEC hodnôt.
B. Bunkový test Elisa endotelových buniek VCAM-1, ICAM-1 a E-selektínu.
Test je založený na 96 jamkovej bunkovej Elisa metóde s použitím ludskej mikrovaskulárnej endotelovej bunkovej línie HMEC-1 a ľudských umbilikálnych žilových endotelových buniek (HUVEC). Bunky sa najskôr 4 hodiny ošetrujú testovanou zlúčeninou A alebo zlúčeninou B, stimulujú sa nasledujúcich 8 až 16 hodín s TNF-α a potom sa fixujú paraformaldehydom na nasledujúce stanovenie expresie VCAM-1, ICAM-1 alebo E-selektínu nepriamou imunoperoxidázovou farbiacou technikou. Cytotoxické účinky sa stanovia spočítaním relatívneho počtu buniek (jadrové farbivo Giemsa) po expozícii na testovanú zlúčeninu, v porovnaní s kontrolnými jamkami (len s rozpúšťadlom a médiami). Zlúčeniny sa považujú za pozitívne, ak vykazujú > 50 % inhibí ciu VCAM-1, ICAM-1 alebo E-selektínu pri < 25 % úbytku buniek.
Metodológia
I. Bunková línia
Pri VCAM-1 a ICAM-1 teste sa používajú zvečnelé (SV-40 vírus veľký T antigén) ľudské mikrovaskulárne endotelové bunkové línie (HMEC-1, Ades a kol., Jrl Invest Dermatol 99, 683 až 690, 1992). HMEC-1 bunky podstatne exprimujú nízke hladiny ICAM-1, ktoré sa doregulovávajú zápalovými mediátormi. Avšak len tieto môžu exprimovat VCAM-1 po cytokinovej stimulácii. Pokusy dávka-odozva a časové závislosti sa uskutočnili tak, aby sa stanovili optimálne podmienky na vyvolanie expresie VCAM-1 a ICAM-1.
II. Podmienky rastu
HMEC-1 bunky sa nechali rásť v T-75 bankách (Nunc) za štandardných podmienok (37 ’C, 5 % C02) s 1,5 x 106 buniek/ml živného média (CM = endotelové bunky základného média [EBM, Clonetics] doplneného 10 % FCS, 10 ng/ml ľudského EGF (Boe-
hringer), 1 gg/ml hydrokortizónu (Sigma # 0888), 2,2 g/1 NaHCO3, 15 mM Hepes, 0,11 g/1 pyruvátu sodného, 4 mM glutamínu, 100 jednotiek/ml penicilínu a 100 Mg/ml streptomycínu). Po miernej trypsinácii (0,25 % trypsínu + 0,1 % EDTA počas 8 minút) a resuspendácii sa bunky preočkujú každé 2 až 3 dni v rozdeľovačom pomere 1:3.
III. Test bunková Elisa VCAM-1 a ICAM-1
Mikrotitračné dosky s 96 jamkami s plochým dnom sa najskôr potiahnu hovädzím fibronektínom (FN, Sigma # F1141) a potom sa naočkujú 2 x 10A buniek na jamku v 200 μΐ EBM rastového média a inkubujú sa cez noc. Nasledujúci deň sa živné médium (CM) najskôr nahradí 200 μΐ na jamku EBM testovacieho média (CM doplnené 5 % FCS namiesto 10 %) a potom sa nahradí 180 μΐ média s obsahom buď (1) príslušnej koncentrácie zlúče niny A alebo zlúčeniny B, (2) zodpovedajúcej koncentrácie média extrahovaného rozpúšťadlom/metanolom, alebo (3) samotného EBM testovacieho média a inkubujú sa pri teplote 37 ‘C počas 4 hodín. Každý z testov v 96 jamkách sa uskutočňuje so zdvojenými jamkami. Bunky sa potom stimulujú pridaním 20 μΐ koncentrovaného cytokinového roztoku (2000 jednotiek/ml TNF-α) a inkubujú sa pri teplote 37 ’C počas 16 hodín.
Bunková monovrstva sa potom premyje 1 % paraformaldehydom v EBM médiu, fixuje sa 2 % paraformaldehydom pri teplote miestnosti počas 15 minút a niekoľkokrát sa premyje PBS. PBS sa z buniek odstráni a monovrstva sa inkubuje 30 minút v PBS s obsahom 10 % normálneho kozieho séra (NGS). NGS roztok sa nahradí 100 μΐ na jamku anti-VCAM-1 alebo ICAM-1 monoklonálnych protilátok a inkubuje sa cez noc pri teplote 4 ‘C. Roztok mAb sa potom odstráni a bunky sa niekoľkokrát premyjú PBS a následne sa inkubujú s PBS s obsahom 10 % NGS počas 30 až 60 minút pri teplote miestnosti. NGS roztok sa odstráni a pridá sa 100 μΐ chrenovej peroxidázy konjugovanej s kozou F(Ab')2 antimyšou IgG protilátkou (Tágo, riedenie 1 : 500 v PBS s obsahom 5 % NGS) a dosky sa inkubujú 1 hodinu pri teplote miestnosti. Sekundárne protilátky sa potom odstránia a bunky sa premyjú PBS, ktorý sa potom nahradí 150 μΐ na jamku čerstvo pripraveného a prefiltrovaného AEC roztoku (3-amino-9-etylkarbazol, Sigma) a dosky sa inkubujú počas 45 až 60 minút pri teplote miestnosti. Peroxidázový substrát sa odstráni a bunky sa premyjú v PBS. Odčítajú sa hodnoty absorbancie na mikrotitračnej doske pri 550 nm a korigujú sa na slepý pokus (blank) alebo na referenčnú hodnotu pri 690 nm.
IV. E-selektínový test
E-selektínový test sa uskutočňuje s použitím čerstvo izolovaného HUVEC, v podstate tak, ako sa opísalo pre VCAM-1 alebo ICAM-1 test, s výnimkou kratšej stimulácie TNF-a (6 až 8 hodín).
V. Meranie cytotoxicity (úbytok buniek na podklade farebného jadierka)
Endotelové bunky sa odfarbujú náhradou PBS za 95 % etanol počas 20 minút (dvakrát obmena po 10 minútach) s mikroskopickým vyhodnocovaním. Bunky sa potom prepláchnu v destilovanej vode (Aquatest) a monovrstva sa prekryje 33 % roztokom Giemsa v destilovanej vode na 5 minút pri teplote miestnosti. Jamky sa potom premyjú destilovanou vodou a sušia sa na vzduchu počas aspoň 15 minút. Na kontrolu, či sú vyfarbené len jadierka, sa použije mikroskopické vyhodnotenie, pričom v podstate nie je zafarbená žiadna cytoplazma. Hodnoty Giemsa absorbancie sa odčítajú na čítacom zariadení pre mikrotitračné doštičky pri 550 nm a korigujú sa na hodnoty slepého pokusu (rady bez buniek) pri 690 nm.
VI. Vyhodnotenie údajov
AEC hodnoty na stanovenie expresie VCAM-1 alebo E-selektínu (nestimulovaná kontrola jamiek) sú v podstate rovnaké ako hodnoty z grafu porovnateľnej kontroly mAb a reprezentujú pozadie farbenia. V každej z 96 jamkových doštičiek sa priemer hodnôt stanovenia odpočíta od priemernej AEC hodnoty pre každú cytokinom stimulovanú skupinu (EBM, kontroly s rozpúšťadlom aj s testovanou látkou) a získa sa číslo, ktoré reprezentuje expresiu regulovanej ICAM-1 a vyvolanej VCAM-1 alebo bunkovej adhéznej molekuly (CAM) E-selektínu (tu označené ako AEC-CAM). Každá hodnota AEC-CAM sa potom delí zodpovedajúcou priemernou hodnotou Giemsa a získa sa číslo, ktoré stanovuje relatívne hladiny expresie CAM pre danú hustotu, vztiahnuté na počet jadier (tu označené ako pomer AEC : Giemsa).
AEC (stimulovaný) - AEC (nestimulovaný) = AEC-CAM
AEC-CAM/Giemsa = AEC : Giemsa pomer
Tak aktuálne hodnoty CAM ICso sa stanovujú porovnaním AEC : Giemsa hodnôt pre testovanú látku s hodnotami stimulovanej kontroly (EBM, rozpúšťadlo). Tieto hodnoty sa potom analy žujú relatívne k hodnotám ICso pre samotné Giemsa. Presné kritériá stanovia, či profil CAM inhibície versus cytotoxicita (Giemsa) indikuje '‘skutočný’1 úspech, ktorý sa mal sledovať.
C. Test HaCaT bunkového bujnenia
HaCaT bunky sa kultivujú v DMEM (Gibco # 074-02100) doplnenom 2,2 g/1 NaHCO3, 0,11 g/1 pyruvátu sodného, 15 mM Hepes, 5 % plodového telacieho séra (FCS), penicilínom 100 jednotiek/ml, streptomycínom (100 Mg/ml) a glutamínom (na zvýšenie konečnej koncentrácie na 4 mM) . Na test bujnenia sa bunky oddelia trypsinizáciou, suspendujú sa v čerstvom médiu a naočkujú sa do 96 jamkových mikrotitračných doštičiek pri konečnej hustote 4000 buniek/0,2 ml/jamka. Po 24 hodinách (deň 0) sa médium nahradí za čerstvé médium s obsahom odstupňovanej koncentrácie testovanej zlúčeniny. Po 3 dňoch inkubácie pri teplote 37 °C/5 % CO^ sa meria rozsah bunkového bujnenia v porovnaní s rozpúšťadlovou kontrolou kolorimetrickým testom, ktorý meria relatívnu hmotnosť buniek použitím farbiva sulforodamínu B (Shekon a kol., 1990, J. Natl. Cancer Inst., 82, 1107 až 1112). Východiskový počet buniek sa stanoví zmeraním relatívnej hmotnosti buniek v deň 0. Výsledky sa -vyjadria ako % inhibície = 100 - % kontrolnej absorbancie (kde rozpúšťadlová kontrola = 100 %) a reprezentujú priemer ± štandardná odchýlka z troch meraní. Krivka dávka-odozva sa vynáša semilogaritmicky a koncentrácia potrebná na polovicu maximálnej inhibície (ICgo) sa stanoví lineárnou interpoláciou. Maximálna inhibícia bez čistej straty buniek reprezentuje východiskový počet buniek a je obvykle medzi 90 až 98 %.
príklad:
NMR spektrá (CDCI3) spektrum:
(3 konforméry 55:44:3, majoritný a minoritný konformér označený’, prípadne ’): 8,80* (d, J=10Hz, NH), 7,89* (d,
J=10Hz, NH) , 7,78° (d, J=10Hz, NH) , 7,57° (d, J=L0Hz, NH) , 7,50’° (d, J=7Hz, MeMeOTrp H-4'), 7,39*, 7,37° (2d, J=8Hz, MeMeOTrp H-7') , 7,20*° (m, MeMeOTrp, H-6'), 7,11°, 7,06* (2s, MeMeOTrp H-2') , 7,03*° (2dd, MeMeOTrp H, 5 ' ) , 6,16° (d, J=10Hz, Leu NH), 5,95* (d, J=6Hz, Leu NH) , 5,30° (m, al-H) , 5,10* (dd, hydroxymaslová kyselina al~H) , 5,03-4,98 (m, al-H), 4,91 (dd,
| al | -H. | ) , 4, | 85 (m, | al-H) | , 4, | 71° (m, | al-H), | 4., 45* | (dd, | al-H), |
| 4. “ t | 7 9 | * (m, | al-H), | 4,03*, | 4,0 | 2° (2s, | N-OMe) | , 3,87 | (dd) , | 3,72*, |
| r | 6 4 | ° (2s, | COOMe) | , 3,63- | •3,50 | (m), 3,4 | 7* (q, | J=7Hz, | MeAla | ôl-r.i , |
| 41 | ° (s, | N-Me), | 3, 36* | (dd, | MeMeOTrp | P-H) , | 3,23-3, | 17 (m) | , 3,20’ | |
| (s | r | MeAla | N-Me), | 3,19° | ' O, | N-Me), | 2,91* | (s, Me! | HeOTrr | N-Me), |
2,53* (s, MeLeu N-Me), 2,51° (s, MeMeOTrp N-Me), 2,43-2,09 (m),
2,03-1,89 (m), 1,83-1, 75 (m), 1, 68-1,07 (m), 1,52’ (d, J=7Ez,
MeAla P-Me), 1,48° (d, J=7Hz, MeAla P-Me), 1,04 (d, J=6,5Hz),
0, 98-0, 83 (m), 0,53* (d, J=6,6Hz, Leu Me), 0,01* (d,J=6,6Hz,
Leu Me), -0,32 (ddd, J=3,6Hz, J=ll,lHz, J=14,5Hz, Leu P-CH).
(derivát všeobecného vzorca IV s otvoreným reťazcom): (2 konforme'ry 68:32, majoritný a minoritný konformér označený *, prípadne °) 8,16, 8,12, 8,05, 8,00 (4d, NH) , 7,58°, 7,55* (2d, J=8Hz, MeMeOTrp 4'-H), 7,38*° (d, MeMeOTrp H-7'), 7,22*,
7,2.0° (2m, MeMeOTrp H-6'), 7,15*, 7,12° (2s, MeMeOTrp H-2'),
7, 07*, 7, 03° (2m, MeMeOTrp H-5'), 6,57 (s br,NH), 5,10° (dd, al-H), 5,17* (dd, hydroxymaslová kyselina al-H), 5,11*° (m, MeLeu al-H), 5,04*’ (dd, al-H),4,99* (ddd, al-H), 4,88° (ddd, al-H), 4,51° (dd), 4,53* (m, Leu al-H), 4,48’ (m), 4,42* (m br,
MeAla al-H), 4,05*, 4,03° (2s, N-OMe), 3,88° (q, J=7Hz, MeAla al-H), 3,71°, 3,68* (2s, COOMe), 3,57*, 3,54° (2s, COOMe),
3,47^ (m br, MeMeOTrp al-H), 3,27°, 3,21* (2s, NMe), 3,2 (m,
MeMeOTrp P-Ha) , 3,00* (s, NMe), 2,9 (m, MeMeOTrp P-Ho) , 2,64° (s, NMe), 2,32*, 2,28° (2s, NMe), 2,33-2,13 (m), 2,20 (m), 1,86 (m), 1,7-1,1 (m), 1,50°, 1,48* (2d, J=7Hz, MeAla P-Me), 0,970,93 (m), 0,90-0,76 (m).
| (d, | J=10Hz, NH) , 7,93 (d, | J=10Hz, NH) , 7,79 (d, J=9Hz, NH) , | |
| 7, 65 | (m br, NH) , 7,54 (m, | MeMeOTrp H-4'), 7 | ,38, 7,37, 7,34* |
| (3d, | J=8Hz, MeMeOTrp H-7'), | 7,19 (m, MeMeOTrp, | H-6'), 7,08-6,98 |
| (m, | MeMeOTrp H-5'), 7,02 ( | s, MeMeOTrp H-2'), | 6,14 (d, J=10Hz, |
| Leu . | NH), 6,29* (d, J=7Hz, | Leu NH) , 6,07 (d, | J=6Hz, Leu NH; , |
| 5,25 | (m, al-H), 5,12-4,92 | (al-H), 4,84 (m, | al-H), 4,69 (m, |
4,00
4,02, (3s,
- 1 G. J.
N-OMe),
3,98 (m, al-H), 3,63-3,3 (m), 3,39-3,34* (s br,
NMe; ,
3,21 (s,
3,04* (s, NMe), 2,91 (s, N-Me), 2,53 (s, NMe), 2,37 (s br, NMe), 2, ΞΙ, 05 (m), 1,47, 1, 43, 1,41* (3d, J=7Hz, MeAla P-Me) , 1,03 (d,
J=6,5Hz), 0,98-0,83 (m), 0, 68*, 0, 55, 0,47*, -0, 02 (4d,
J=6,6Hz, Leu Me), -0,32 (ddd, Leu P-CH) .
(3 konforme'ry 4:3:1, minoritný konformér označený *) : 8,82 (d, J=10Hz, NH), 7,95* (d, J=9,3Hz, NH), 7,90 (d, J=9,8Hz, NH), 7,80 (d, J=9,4Hz, NH), 7,59, 7,53 (2d, J=8Hz, MeMeOTrp H-4'), 7, 45-7, 30 (m, MeMeOTrp ·H-7') , 7,23-7,15 (m, MeMeOTrp, H-6'),
7,20, 7,18 (2s, MeMeOTrp H-2'), 7,11-7,03 (m, MeMeOTrp H-5'), 6,86* (q, J=5Hz, NHMe), 6,23 (d, J=9,5Hz, Leu NH), 5,95 (d,
J=6,5Hz, Leu NH, q, NHMe), 5,84* (d, J=8,9Hz, Leu NH) , 5,55 (q,
5Hz, NHMe), 5,3-4,95 (m, al-H), 4,84 (ddd, al-H), 4,69 (ddd, al-H), 4,42 (dd, MeLeu al-H), 4,34 (ddd, Leu al-H), 4,05*,
4,03, 4,02 (3s, N-OMe), 3,93 (m., al-H), 3,63-3,52 (m, al-H),
3,47 (q, Ala al-H), 3,37, 3,35*, 3,24*, 3,22, 3,20 (5s, NMe),
3,3-3,2 (m), 3,03*, 2, 92 (2s, NMe), 2,85, 2,74, 2,70* (3d,
J=5Hz, NH-M'e) , 2,53, 2,52 (2s, NMe), 2,23-1,93 (m), 1-85-1,05 (m), 1,53, 1,47, 1,44* (3d, J=7Hz, MeAla P-Me), 1,03 (d, u=6,5Hz), 0,98-0, 80 (m), 0, 57*, 0,55, 0, 38*, 0,08 (4d, J=6, 6Hz, Leu Me), -0,30 (ddd, Leu P-CH).
(3 konforméry 40:53:7, označené *0'):
8,81* (d, J=10Hz,
C;AA
7,38* (d, J=10Hz, CcA?. NH) ,
7,78° (d, J=10Hz, NH) ,
7,5/° (d, υ=10Εζ,
NH), 7,52*° (2d,
J=7Hz, MeMeOTrp H-4'),
7,39*,
7,37° (2d,
J-8Hz, MeMeOTrp H-7'),
7,20,
7,13 (2m, MeMeOTrp H-6'), 7,17* (s, MeMeOTrp
7,01*
MeMeOTrp H-5'), 6,17° (d, J=10Hz, Leu
98’ (d,
J=5Hz, Leu NH) ,
5, 31°
MeA
i), 5,19* (dd, hydroxymaslová kyselina al-H),
5,05-4,94 (m, al-H),
4,88-4,83 (m, al-H), 4,70-4,64 (m, al-H),
4, 43* (dd, MeLeu al-H),
4,32* (m,
Leu al-H), 4,03*, 4,02° (2s,
N-OMe) , 3,93° (m, al-H) , 3,7-3,5 (m, morfolin),
3,5-3,2 (m) ,
3,40° (s, N-Me),
3,34° (dd, MeMeOTrp H-Pa), 3,22 (m, MeMeOTrp
H-Pb),
3,20° (s,
N-Me), 3,17* (s, N-Me), 2,93* (s, MeMeOTrp
N-Me),
2,54* (s,
MeLeu N-Me), 2,53° (s, N-Me),
2,4-2,35 (m),
2,2-1,9 (m) ,
1,83-1,05 (m), 1,53*,
1,50° (2d,
J=7Hz, MeAla
P-Me),
1, 04 (d,
J=6,5Hz,
MeLeu Me) ,
1,00-0,77 (m), 0,57* (d,
Leu
Me) , 0,52',
0,34' (2d, J=6,6Hz, Leu Me) , 0,09* (d,
J=6,6Hz,
Leu
Me) , -0,25 (ddd, Leu P-CH).
(2 konforméry 45:55, označené *°): 8,84* (d, J=10Hz, C9AA
NH), 7,87* (d, J=10Hz, C9AA NH) , 7,77° (d, J=10Hz, NH) , 7,57° (d, J=10Hz, NH), 7,55*, 7,52° (2d, J=7Hz, MeMeOTrp H-4'),
7, 36*, 7,35’ (2d, J=8Hz,
MeMeOTrp H-7'),
7,36* (s, MeMeOTrp
H-2'), 7,20, 7,17 (2m,
MeMeOTrp H-6'),
7,03°, 7,01* (2m,
MeMeOTrp H-5 ') , 6,17° (d,
J=10Hz, Leu NH),
NE), 5,31° (ddd, MeAla al-H), 5,24*
5,95* (d, J=6Hz, Leu (dd, hydroxymaslová kyselina al-H), 5,05-4,97 (m, al-H), 4,93 (dd, al-H), 4,87 (dd, al-H), 4, 88-4, 83 (m, al-H), 4, 66-4, 60 (m, al-H), 4,48* (dd, (m), 4, 03*, 4,02°
3,40° (s, N-Me),
2,99, 2,98 (2s,
CON-Me) , 2,96 (s, 2:<CON-Me) , 2,92* (s, MeMeOTrp
N-Me),
2,54 (s,
N-Me} , 2,4-2,25 (m), 2,15-1,9 (m),
1,83-1,05
1,00-0,33 (m)
J=7Hz, MeAla P-Me),
1,04 (d,
J=6,5Hz, , 0,79°, 0,74° (2d),
0,57* (d, J=6, 6 , ueu
10Hz,
LeuS NH) , 7,89* (d, 10Hz, PrLeu2 NH) , 7,77° (d, 10Hz,
7,52’ (d, 8Hz, indol H-4'), 7,50° (d, PrLeu2
NH) ,
NH) , (d,
H-7') ,
8Hz, indol H-4'), 7,38* (d, 8Hz, indol
7,37° (d,
| 8Hz, | inde 1 | H-7'), 7,19’ (dd, indol | H-6'), | 7,18* (dd, | indo 1 |
| H-6') | , 7,13' | (s, indol H-2'), 7,02* (s, indol | H-2'), 6,99° | (dd, | |
| indol H-5') | , 6,90* (dd, indol H-5') | , 6,18’ | (d br, 10Hz | , Leu | |
| NH) , | 5,93* | (d, 6Hz, Leu NH) , 5,83’ | (d, Leu | NH), 5,30° | (ddd, |
| PrLeuS a-H) | , 5,30* (dd, Hba a-H) , | 5,02* (ddd, PrLeu6 | a-H), | ||
| 5,00° | (ddd, | PrLeu2 a-H), 4,89* (dd, | MeTrp | a-H) , 4,84* | (ddd, |
| PrLeu2 a-H) | , 4,71’ (ddd, a_H)í 4/44 | * (dd, | MeLeu a-H) , | 4,37* |
(ddd, Leu a-H) , 4,03*, 4,02°.(2s, N-OMe) , 3,63-3,52, 3,49* (q, 7Hz, MeAla a-H), 3,40° (s, N-Me), 3,38* (dd, MeTrp P-Ha), 3,263,20, 3,23* (s, MeAla N-Me), 3,21° (s, N-Me), 2,93* (s, MeTrp N-Me), 2,53* (s, MeLeu N-Me), 2,52’ (s, N-Me), 2,45-1,75, 2,33,
2,15 (2m, aziridín), 1,56-1,07, 1,50* (d, 7Hz, MeAla .β-Me),
1,47° (d, 7Hz, MeAla β-Me), 1,03* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me), 0,98-0,83, 0,48* (d, 6,6Hz, Leu S'-Me), -0,13* (d, 6,6Hz, Leu Ô''-Me), -0,48* (ddd, Leu Y-CH) .
(3 kcnformery 45:51:4, označené *°'): 8,86* (d, 10Hz,
| PrLeuE NH | ), 7,87* (d, 10Hz, PrLeu2 NH), | 7,75° (d, 10Hz, PrLeuS | |
| NH) , | 7, 57 | ’ (d, 8Hz, indol H-4'), 7,55° | (d, PrLeu2 NH), 7,51° |
| (d, | 8 Hz, | indcl H-4'), 7,41° (s, indol | H-2'), 7,38* (d, 8Hz, |
| indcl H-7 | '), 7,36° (d, 8Hz, indol H-7'), | 7,29* (s, indol H-2'), |
| 7, 13* | (dd, | indcl H· | -5'), 7,17° | (dd, | indol H-6'), 7,03° | (dd, |
| indcl | H-5') | , 7,01* | (dd, indcl | H-5') , | 6,17° (d br, 10Hz | , Leu |
| NH) , 5 | , 94* | (d, 6Hz, | Leu NE), | 5,79° | (d, Leu NH) , 5.,30° | (ddd, |
| P r L e u c | , 5,27* | (dd, a-H) , | 5,00* | (ddd, PrLeuS a-H), | 4,93° | |
| (ddd, | -- l i | , 4,93° | (dd, a-H) , | 4, 87* | (dd, a-H), 4; 85* | (ddd, |
| PrLeu2 | a-H) | 4,63° | (ddd, a-H) | , 4,47 | * (dd, MeLeu a-H) , | 4, 40 |
| (m), 4,02* (ddd, Leu a-H) , | 4,02, | 4,01 (2s, | N-OMe) | , 3, 68-3,22, |
| 3,40° (s, N-Me), 3,20° (s, | N-Me), | 3,18* (s, | MeAla | N-Me), 2,91* |
| (s, MeTrp N-Me), 2,55° (s, | N-Me), | 2,53* (s, | MeLeu | N-Me), 2,35- |
| 1, 05, 1, 54* (d, 7Hz, MeAla | β-Me), | 1,50° (d, | 7Hz, MeAla β-Me), |
| 1,03* (d, 6,5Hz, MeLeu | d-Me), | 0,98-0,83, 0,78° | (d, | 6Hz, | Leu |
| δ'-Me), 0,73° (d, 6Hz, | Leu | δ''-Me), 0,57* (d, | 6/ | 6Hz, | Leu |
| Ô'-Me), 0,15* (d, 6, 6Hz, | Leu | '-Me), -0,27* (ddd, | Leu | Y-CH) |
(3 konforméry 46:51:3, označené *’'):. 8,87* (d, 10Hz,
PrLeu6 NH) , 7,87* (d, 10Hz, PrLeu2 NH) z 7,76° (d, 10Hz, PrLeu6 NH), 7,56° (d, PrLeu2 NH), 7,55* (d, 8Hz, indol H-4') , 7,52° (d, 8Hz, indol H-4'), 7,37 (d, 8Hz, indol H), 7,36 (d, 8Hz, indol H), 7,36° (s, indol H-2'), 7,22* (s, indol H-2'), 7,20* (dd, indol H-6'), 7,18° (dd, indol H-6'), 7,03° (dd, indol
Η-5'), 7,00* (dd, indol H-5') , 6,16° (d, 10Hz, Leu NH), 5,94* (d, 6Hz, Leu NH), 5,78' (d, Leu NH), 5,31° (ddd, PrLeu6 a-H),
| 5,27* | (dd, | a-H), 5,06-4,80, | 4,65 (ddd, a-H), | 4,47* (dd, MeLeu |
| a-H) , | 4, 33 | (m), 4,03, 4,01 | (2s, N-OMe), 4,00 | (ddd, a-H), 3,75- |
| 3,20, | 3, 40 | (s, N-Me) , 3,20 | (s, N-Me), 3,18* | (s, MeAla N-Me), |
| 2,91* | (s, | MeTro N-Me), 2,53 | (s, N-Me), 2,53° | (s, MeLeu N-Me), |
2, 45-1, 07, 1, 53* (d, 7Hz, MeAla β-Me), 1,49° (d, 7Hz, MeAla
P-Me), 1,03* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me), 0,98-0,83, 0,79 (d, 6Hz,
Me) , 0,74 (d, 6Hz, Me) , 0,55* (d, 6,6Hz, Leu ^'-Me), 0,07* (d,
6,6Hz, Leu δ''-Me),'-0,36* (ddd, Leu P-CH).
4 konformery 27:33:17:33, označené *°' ): 8,9* (d, 10Hz,
| PrLeu6 | NH) , | 3,82' (d, 10Hz, PrLeu6 NH), 7,9* (d, | 10Hz, P: | rLeu2 |
| NH) , 7, | 36' | (d, 10Hz, PrLeu2 NH) , 7,76° (d, 10Hz, | PrLeuS | NH) , |
| 7,75' ' | (d, | 10Hz, PrLeu6 NE), 7,24* (s, indol), | 7, 03- | (dd, |
indcl) , 6,17'' (d br, 10Hz, Leu NH) , 6,17° (d br, 10Hz, Leu
| NH) , | 6, 03 ' | (d, | 6Hz, Leu NH) , 5,98* | (d, 6? | iz, | Leu NH) , 4,02 | |
| (s) , | 4, 02Q | (s) , | 4, 02* | (s), 4,02' (s), | 3, 40 | (s, | , N-Me), 3,40 (s, |
| N-Me) | , 3,20 | (s, | N-Me), | 3,20 (s, N-Me), | 3,17 | (s | , N-Me), 2,97 (s, |
| N-Me) | , 2,94 | (s, | N-Me), | 2,94 (s, N-Me), | 2, 93 | (s | , N-Me), 2,91 (s, |
| N-Me) | , 2,56 | (S, | N-Me) | , 2,56 (s, N-Me) | , 2,53' | (s, MeLeu N-Me) , | |
| 2, 53* | (s, MeLeu | N-Me) | , 1,53* (d, 7Hz | , MeAla | β-Me), 1,53' (d, |
7Hz, MeAla β-Me) , 1,50° (d, 7Hz, MeAla P-Me), 1,50 (d, 7Hz,
MeAla β-Me), 1,03' (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me), 1,03* (d, 6,5Hz,
MeLeu d-Me), 0,78° (d, 6,6Hz, Leu5'-Me), 0,77 (d, 6, 6Hz, Leu δ'-Me), 0,72(d, δ''-Me), 0,61'(d, Ô'-Me), 0,21'(d, δ' 6,6Hz, Leu δ''-Me),
6,6Hz, Leu δ'-Me),
6,6Hz, Leu δ-'-Μθ),
| 0,72° | (d, | 6,6Hz, | Leu |
| 0, 55* | (d, | 6,6Hz, | Leu |
| 0, 12* | (d, | 6,6Hz, | Leu |
-Me), -0,17' (ddd, Leu Y-CH), -0,31* (ddd, Leu Y-CH).
(2 konforméry 55:45, majoritný a minoritný konformér označený ’, prípadne ’) ; 8,80* (d, J=10Hz, NH), 7, 88*(d,
J=LQHz, NH), 7,77° (d, J=10Hz, NH) , 7,57° (d, J=10Hz, NH) ,
7,52’, 7,51° (2d, J=7Hz, MeMeOTrp H-4'), 7,39*, 7,37°(2d,
J=8Hz, MeMeOTrp . E-7'), 7,20*’ (m, MeMeOTrp H-6'), 7,16°, 7,09* (2s, MeMeOTrp H-2'), 7,03*° (2dd, MeMeOTrp H-5'), 6,17°(d,
J=10Ez, Leu NE), 5,97* (d, J=6Hz, Leu NH) , 5,31° (m, MeAla al-H), 5,11-4,96 (m, al-H), 4,92* (dd, MeMeOTrp al-H),4,87 (ddd, al-H), 4,59° (m, Leu al-H), 4,47* (dd, MeLeu al-H), 4,27* (dd, Leu al-H), 4,03*, 4,02° (2s, N-OMe), 3,92 (dd), 3-55-3,15 (~) , 3,47’ (q, J=7Hz, MeAla al-H), 3,41° (s, N-Me), 3,21* (s, MeAla NMe), 3,20° (s, N-Me), 2,92* (s, MeMeOTrp N-Me), 2,53* (s, MeLeu N-Me), 2,51° (s, N-Me), 2,35-2,75 (m), 1,7-1,05 (m), 1,53* (d, J=7Hz, MeAla P-Me), 1,49° (d, J=7Hz, MeAla P-Me),
1,28*, 1,25*, 1,23°, 1,13’ (4d, J=6Hz, COOCHMe;) , 1,04 (d,
J=6,5Ez, MeLeu Me), 0,98-0,83 (m), 0,55* (d, J=6,6Hz, Leu Me), 0,05* (d, J=6,6Hz, Leu Me) , -0,31 (ddd, Leu P-CH) .
(3 konŕorméry 55:43:2, označené *”): 8,82* (d, J=10Hz,
CiAA NH) , 7,85* (d, J=10Hz, CSAA NH) , 7,78° (d, J=10Hz, NH) ,
7,58° (d, J=10Hz, NH), 7,52*, 7,51° (2d, J=7Hz, MeMeOTrp H-4') , 7,39*, 7,37° (2d, J=8Hz, MeMeOTrp H-7'), 7,22*, 7,21° (2m,
MeMeOTrp H-6'), 7,14°, 7,08* (2s, MeMeOTrp H-2'), 7,03*° (2dd, MeMeOTrp H-'), 6,17° (d, J=10Hz, Leu NH), 5,95* (d, J=6Hz, Leu NH), 5,78' (d, J=10Hz, Leu NH) , 5,31° (ddd, MeAla al-H), 5,12* (dd, hydroxymaslová kyselina al-H), 5,05-4, 98 (m, al-H), 4,91* (dd, MeMeOTrp al-H), 4,86* (ddd, C9AA al-H), 4,73-4,68 (m, Leu al-H), 4,47* (dd, MeLeu al-H), 4,32-4,26 (m, Leu al-H), 4,25 (dq, J=llHz, J=7Hz, COOCH;-) , 4,15-4,07 (m, COOCff2-), 4,04*,
4,03° (2s, N-OMe), 3,84’ (m, al-H), 3, 64-3,50 (m), 3,47* (q, J=7Hz, MeAla al-H), 3,41’ (s, N-Me), 3,34’ (dd, MeMeOTrp H-Pa),
3,22 (m, MeMeOTrp fí-Pb), 3,20* (s, MeAla NMe), 3,19° (s, N-Me),
2,93* (s, MeMeOTrp N-Me), 2,53* (s, MeLeu N-Me), 2,52° (s,
N-Me), 2,4-2,1 (m), 2,05-1,9 (m) , 1, 83-1,76 (m), 1,7-1,07 (m),
1,53’, 1,49’ (2d, J=7Hz, MeAla . P-Me) , 1, 30, 1, 25 (2t, J=7Hz,
COOCHzCHj) , 1,04 (d, J=6,5Ez, MeLeu Me) , 1,00-0,84 (m), 0,55* (d, J=6,6Hz, Leu Me) , 0,03* (d, J=6,6Ez, Leu Me) , -0,32 (ddd, Leu P-CH).
57:41:2, *°'): 8,32* (d, J=10Hz,
C?AA NE), 7,90’ (d,
J=10Ez,
7,78° (d,
J=10Hz, NE) ,
7,58° (d, J=10Hz,
7, 39*, 7,33° (2d,
7,03* (2s, MeMeOTrp H-2') ,
7,03°, 7,02*
6, 17°
Leu NE) , 5,93* (d,
J=6Hz,
Leu NE), 5,82' al-H), 5,12’ (dd, hydroxymaslová kyselina al-E), 5,05-4,98 (m, al-H), 4,91* (dd, MeMeOTrp al-E), 4,86* (ddd, CsAA al-H) , 4,734,68 (m, Leu al-E), 4,47* (dd, MeLeu al-H), 4,28* (m, Leu al-H), 4,2-3,95 (m, COOCEJ , 4,03*, 4, 02° (2s, N-OMe), 3,90° (m, al-H), 3,64-3,42 (m), 3,47* (q, J=7Hz, MeAla al-H), 3,41° (s, N-Me), 3,34° (dd, MeMeOTrp H-Pa), 3,22 (m, MeMeOTrp H-Pb), 3,20* (s, MeAla NMe), 3,19° (s, N-Me), 2,93* (s, MeMeOTrp N-Me), 2,53* (s, MeLeu N-Me), 2,52° (s, N-Me), 2,4-2,1 (m), 2,03-1,9 (m), 1,83-1,76 (m), 1,72-1, 58 (m, COOCH2C&CH3), 1,551,07 (m), 1,53*, 1,49° (2d, J=7Hz, MeAla P-Me), 1,04 (d,
J=6,5Hz, MeLeu Me), 1,00-0,84 (m), 0,54* (d, J=6,6Hz, Leu Me), 0,02* (d, J=6,6Hz, Leu Me), -0,34 (ddd, Leu P-CH) .
(2 konformery 70:30, označené *, prípadne0): 8,92*,
7,87*, 7,75°, 7,58° (4d, J=10Hz, NH), 7,49* (d, J=8Hz, MeMeOTrp
H-4'), 7,37* (d, J=8Hz, MeMeOTrp H-7'), 7,20* (dt, MeMeOTrp
Η-6')ζ 7,18°, 7,03* (2s, MeMeOTrp H-2') , 6,20° (d, J=10Hz, Leu. NH) , 5,9c* (d, J=7Ez, Leu. NH), 5,33* (m, hydroxymaslová kyselina al-H), 5,02 (m, al-H), 4,90* (ad, al-H), 4,83* (ddd, al-H), 4,79* (dd, al-E) , 4,70° (m, al-H), 4,39* (dd, al-H),
4,38° (m, al-H), 4,03* (s, N-CMe) , 3,92° (m), 3,63-3,53 (m), 3, 44-3, 40 (m), 3,39°, 3,20° (2s, NMe) , 3,32-3,18 (m), 3,17* (s,
MeAla NMe), 2,94* (s, MeMeOTrp NMe), 2,53* (s, MeLeu NMe), 2,52° (s, NMe), 2,5-2,3 (m), 2,1-1,1 (m), 2,17*, 2,11° (2s, COMe), 1,51*, 1,43° (2d, J=7Hz, MeAla P-Me), 1,03* (d,
0,98-0,83 (m),
1* r — (Ô,
-0,39* (ddd, Leu P-CE).
| 17 (3 kor.forméry | 45:40:15, označené *a'): | 8,73° | (d, | J=9,9Ez, |
| NH) , 7,83* (d, J=9, | 7Hz, NE), 7,75' (d, NE), | 7,59' | (d, | J=7,8Hz, |
MeMeOTrp E-4'), 7,57 (d, J=9,5Ez, NE), 7,55, 7,53 (2d, J=3Hz,
MeMeOTrp E-4'), 7,46' (s, MeMeOTrp H-2'),
7,42*,
7,39°, 7,34' (3d,
J=8,2Hz,
MeMeOTrp E-7 '), 7,24*, 7,22°,
7,18' (3t, MeMeOTrp
H-6' ) n*
I ' f — — /
7,08',
7,06° (3t, MeMeOTrp
7, 04*, 7,03° (2s,
H-2'),
6,25° (d, J=9,5Hz,
Leu NH) ,
6,03* (d,
J=7Hz, Leu NH)
5, 99' (m., al-H) ,
5,13' (t,
J=4Hz,
4, 97 (dd, ai-H),
4, 88
78-4,70 (m,
MeLeu al-H), 4,13 (ddd, Leu al-H),
4,04, 4,02 al-H) (dd, , 4,
| (2s, N-OMe), | 3,78 | (m, al-H), 3,i | |
| 3,22*, | 3,20° | (4s, | NMe), 3,17-3,08 |
| 2,52*, | 2, 51° | (5s, | NMe), 2,01-1,1 |
| J=7Hz, | MeAla | P-Me) | , 1,04 (d, J=6, |
| 0,60*, | 0,56', | 0,03 | i* (4d, J=6,6Hz, |
P-CH).
65-3,35 (m), 3,42°, 3,32', (m), 3,03', 2, 92', 2, 90*, (m), 1, 53, 1, 49, 1, 40' (3d,
5Hz), 0,98-0,83 (m), 0,72',
Leu Me), -0,16 (ddd, Leu (3 konforméry 73:20:7, označené 8,54° (ď, J=10Hz,
NH) , 8,38' (s br, MeTrp N'-H), 8,17° (2d br, J=2Hz, MeTrp
N'-H), 8,13’, 8,03°, 8,01' (3d, J=9,7Hz, NH) , :7,78* (d, J=7,7Hz, MeTrp E-4'), 7,74', 7,70', 7,63°, 7,63° (4d) , 7,46’, 7,44°, 7,40' (3d, J=8Ez MeTrp H-7') , 7,27* (dt, · MeTrp H-6'),
7,20’, 7,17° (2dt, MeTrp E-S'), 7,09°, 7,03* (2d, J=2Hz, MeTrp
H-2 '), 6,33° (d, J=L0Ez, Leu NH), 6,17* (d, J=7,4Hz, Leu NH) ,
5,97' (d, J=9Hz, Leu NH), 5,38° (m, al-H), 5,27* (dd, hydroxymaslová kyselina al-H), 5,21° (dd, al-H), 5,12* (ddd, al-H), 5,07* (dd, al-H), 4,96* (ddd, al-H), 4,87 (m), 4,55* (dd, MeLeu al-H), 4,29’ (ddd, Leu al-H], 3,85-3,25 (m), 3,76* (q, J=7Hz, MeAla al-H), 3,49°, 3,36' (2s, NMe), 3,13* (s, MeAla
| NMe) , | 7 * t | 3,13'(2s, NMe) | 7 Π9 * / / J U | (s, MeTrp NMe) , | 2,62’ (s, |
| NMe) , | 2Z | (s, MeLeu NMe) , | 7 4. z w v — / | 15 (m), 1,62*, 1, | 56°, 1,51' |
| (3d, | J = / Π Ξ z | MeAla β-Me) , 1, | 13* (d, | J=6,5Hz, MeLeu), | 1,07-0,93 |
-0,28*
, > J >
(ΣΓ-) ,
(3 konzcrméry 6/:29:4, označené *’') : 9,52* (t, J=l,5Hz,
CHO), 9,41° (t, J=lHz, CHO), 9,05' (m, CHO), 8,73* (d, J=10Hz, C=AA NH) , 7,36* (d, J=10Hz, CjÄA NE), 7,77° (d, J=10Hz, NH) ,
7,60° (d, J=10Hz, NH), 7,47*° (2d, J=7Hz, MeMeOTrp H-4'),
7,38*° (2d, J=8Hz, MeMeOTrp H-7'), 7,20*° (2t, J=8Hz, MeMeOTrp H-6'), 7,15°, 7,04* (2s, MeMeOTrp H-2'), 7,03’ (m, MeMeOTrp
H-5'), 7,00* (dd, MeMeOTrp H-5), 6,22° (d, J=10Hz, Leu NH) , 6,02* (d, J=6Hz, Leu NH) , 5,87' (d, J=10Hz, Leu NH) , 5,29’ (ddd, MeAla al-H), 5,17* (dd, hydroxymaslová kyselina al-H), 5, 03-4,93 (m, al-H), 4,91* (dd, MeMeOTrp al-H), 4,84* (ddd,
CsAA al-H), 4,79-4, 64° (m, Leu al-H), 4,43* (dd, MeLeu al-H), 4,35* (ddd, Leu al-H), 4, 04', 4,03*, 4, 02° (3s, N-OMe) , 3,81° (m, al-H), 3,63° (dd), 3,57-3,50 (m), 3,48-3,42 (m), 3,43* (q,
J=7Hz, MeAla al-H), 3,38’ (s, N-Me), 3,30-3,12 (m), 3,20° (s, N-Me), 3,15* (s, MeAla NMe) , 2,93* (s, MeMeOTrp N-Me), 2,58° (s, N-Me), 2,53* (s, MeLeu N-Me), 2,25 (m, Cŕf?-CHO), 2,15-1,9 (in), 1,85-1,74 (m), 1,65-1,08 (m), 1, 48’, 1, 45° (2d, J=7Hz,
MeAla β-Me), 1,04* (d, J=6,5Hz, MeLeu Me) , 0, 98-0, 83 (m),
0, 67', 0,58’, 0,52', 0,01* (4d, J=5,6Hz, Leu Me) , -0,20* (ddd, Leu β-CH).
(2 konforméry 1:1): 8,7/ (d, J=10Ez, C?AA NH), 7,79 (d,
| J=10Ez, C?AA NH) , | 7,73 | (d, J=10Ez, NH) , 7,65 | (d, | J=10Hz, NH), | |
| • | 7,44, 7, 44, 7, 42, | 7,39 | (4d, MeMeOTrp E-4' a i | 1-7'' | ), 7,25, 7,22 |
| (2t, MeMeOTrp H-6 | '), 7, | 13-7,03 (m, MeMeOTrp i | 1-5': | l, 7,02, 6,98 |
, 6 !
(2s, MeMeOTrp H-2') , 6,19 (d, J=10Ez, Leu NE), 6,00 (d, J=6Hz, Leu NH) , 5, 80-5,53 (m, olefin-H) , 5,31 (ddd, MeAla al-H), 5,03(in, al-H, olefín-H), 4,47 (dd, MeLeu al-H), 4,15-3,98 (m), 4,02 (2s, N-OMe), 3,7-3,0 (m), 3, 44, 3,21, 3,20, 2, 92,
2,44 (6s, N-Me), 2,15-1,90 (m), 1, 90-1,08 (m) , 1,55, 1,50
J=7Ez, MeAla β-Me), 1,05 (d, J=6,5Ez, MeLeu Me), 1,0-0,8 0,60, 0,06 (2d, J=6,6Hz, Leu Me) , -0,20 (ddd, Leu β-CH) .
(3 konforméry 44:53:3, označené *°'): 8,81* (d, 10Hz,
PrLeu6 NH) , 7, 78, 7, 73, 7, 67 (3d, 10Hz, NH) , 7,43, 7, 42 (2d,
8Hz, indol H-4'), 7,37 (d, 8Hz, indol H-7') , 7, 28-7,00, 7,02,
6,97 (2s, indol H-2'), 6,21’ (d, 10Hz, Leu NH), 5,97* (d, 5Hz,
Leu NH), 5,75' (d, Leu NH), 5,50-4,65, 4,47* (dd, MeLeu a-H),
4,05 (ddd, a-H), 4,04 (s, OMe) , 4,02 (s, OMe) , 3,65-3,10,
3,44° (s, MeAla N-Me), 3,22 (s, MeAla N-Me), 3,19 (s, N-Me),
2,93* (s, MeTrp N-Me), 2,52, 2,39 (2s, N-Me), 2,15-0,82, 1,54*, 1,50° (2d, 7Hz, MeAla β-Me), 1,04* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me),
0,57* (d, 6,6Hz, Leu 5'-Me), 0,48' (d, Leu 5'-Me), 0,26' (d,
Leu5''-Me), -0,04* (d, 6,6Hz, Leu 5-Me) .
7,77, .7, 63 (4d, 10Hz, PrLeu
NH), 7,49* (d,
7Hz, indol H-4'),
7, 48° (č,
7Hz,
7,43’ (d, 8Hz, indo 1
7,04° (s, indol H-2'), 7,02’ (s, inde!
, 6,98' (s, indo1 /r.Z,
PrLeuS a-H) (ddd,
ErLeuc a-H)
4,8 6* (ddd, a-H), 4,47* (dd, MeLeu a-H), 4,18* (ddd, Leu a-H), 4,06 (s, N-OMe), 4,06' (s, N-OMe), 4,03 (ô, N-CMe) , 3,71-3,50, 3,42 (s, N-Me), 3,23-3,05, 3,20 (s, N-Me), 3,13 (s, N-Me) , 2,92(s,
N-Me), 2,52 (s, N-Me) , 2,51 (s, N-Me)· , 2,03-1, 08, 1,54’(d,
7Hz, MeAla β-Me), 1,50° (d, 7Hz, MeAla β-Me), 1,05* (d, 6,5Hz,
MeLeu d-Me), 0,98-0,84, 0,63* (d, 6,6Hz, Leu ^'-Me), 0,53'(d,
7Hz, Leu Sz_j4e)z 0,34' (d, 7Hz, Leu 8''_yre), 0,11* (d, 6,6Ez,
Leuô''-Me), -0,13* (ddd, Leu 7-CH).
(3 konformery 40:40:20, označené *°'): 8,50* (d, 10Hz,
PrLeu6 NH) , 8,20 (m), 7,98* (d, 10Hz PrLeu2 NH), 7,57* (d, 8Hz, indol H-4'), 7,53-7,35, 7,25-7,18, 7,23* (s, indol H-2'), 7,137, 06, 7,05° (s, indol H-2'), 6,69 (d), 6,29 (d br), 6,22 (d
- br),.. 6,14° (d, 7Hz, Leu NH), 6,07* (d, 9Hz, Leu NH) , 5,5° (ddd,·PrLeu6 a-H) , 5,26-4, 63 (m, a-H), 4,36 (m, MeLeu a-H) , 4,18* (ddd, Leu a-H), 4,04 (s, OMe), 4,03' (s, OMe), 4,02 (s, OMe), 3,68-2,78, 3,34 (s, N-Me), 3,19 (s, N-Me), 3,12 (s, N-Me), 3,03 (s, N-Me), 2,91 (s, N-Me), 2,53 (s, N-Me), 2,10-1,05.,
| 1,03-0, 78, 0,76 (d), 0,71 (d, 6,5Hz, Leu Leu g-Me), 0,08 (d, 6,6Hz, Leu g-Me), -0, | ||
| 24 (3 konforméry 43: | 47:5, označené * | |
| PrLeuô NH) | , . 7,87* (d, | 10Hz, PrLeu2 NH) , |
| 7,63° (d, | 10Hz, NH), | 7, 55-7,37 (m, i |
| indol), 7, | 08° (s, indol | H-2'), 7,03* (s, |
| 8Hz C=C,), | 6,23 (t, 8Hz | C=C,), 6,18° (d, |
| (d, 10Hz, | Leu NH), 5,80 | (d, Leu NH) , 5,. |
| 5,08-4,91 | (a-H), 4,86* | (ddd, PrLeu2 a-8 |
| 4,46* (dd, | MeLeu a-H) , | 4,14* (ddd, Leu |
| 4,03* (s, | OMe), 4,02' | (s, OMe), 3,71a |
> ,
3, SO*
7Hz, (q,
O ' ndcl),
7, 80° g-Me), 0,60 (d, 6,6Hz,' (ddd, Leu ľ-CH).
) : 8,68* (d, 10Hz, (d, 10Hz, NH) ,
7,27-7,10 (m,
3,23 (s, N-Me), (d, o,6Hz, Leu indol β,7Εζ,
Leu NE),
4,77-4,63
M, (q, 7Hz, MeAl
6, 03*
3,44° (s, MeAla N-Me)
N-Me), 2,20-0,83, 1,56* (d, (3 konformery 51:45:4, označené
NH) , s,
7Ez, MeAla β-Me),
-0,17* (ddd, Leu ľ-CH).
*0'): 8,68* (d, lOEz,
7,81° (d, 10Hz,
7,63° (d, 10Hz, PrLeu2 NH) , 7,53 (d, 8Hz, indol
H-4'), indol H-7'), 7,40 (d,
7,51
| 8Hz, | indol H-7') , | 7,26 | (dd, indol H-6'), 7,23 (dd, indol | |||
| 7, 13 | (dd, indol H | -5'), | 7,07 | 0 (s, indol H-2'), 7, i | 07 (dd, | |
| H-5' | ), 7,03* | (s, | indol | H-2' | ) , 6, 21e (d, 10Hz, Leu NH) , | |
| (d, | 6Hz, Leu | NH) , | 5,79 | ' (d, | 10Hz, Leu NH), 5,32° | (ddd, |
| a_H) | λ 5,14* | (dd, | Hba | «-H) | , 5,03* (ddd, PrLeu6 | a-H), |
indol
6, 05*
PrLeu6
4, 87* (ddd, PrLeu2 a-H),
4,83* (dd, MeTrp a-H), 4,77° (ddd, Leu α-Η) , 4,51* (dd, MeLeu α-Η), 4,13* (ddd, Leu α-Η), 4,06’ (s,
| OMe) , | 4,03* (s, | OMe), | 3,68 (m), | 3,57* | (q, 7 Hz, MeAla | a-H), |
| 3,44° | (s, MeAla | N-Me), | 3,36* (dd, | MeTrp | β-Ha), 3,23 (dd, | Meľ m |
| β-Hb), | 3,22 (s, | N-Me), | 3,17 (s, N- | -Me), 3 | ,14 (dd), 2,96 (m | CCH) , |
2,93* (s, MeTrp N-Me), 2,53 (s, N-Me), 2,49 (s, N-Me), 2,25-1,97, 1,86-1,78, 1,55* (d, 7Hz, MeAla β-Me), 1,52° (d,
7Hz, MeAla β-Me), 1,50-1,09, 1,06* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me), 1,00-0, 85, 0,63’ (d, 6,6Hz, Leu 5'-Me), 0,58' (d, Leu δ'-Μ=),
0,38' (d, Leu δ''-Μβ), 0,07* (d, 6,6Hz, Leu δ''-Με), -0,11* (ddd, Leu 7-CH).
6 (Zmes E/Z izomérov 6:4 každý s 3 konformérmi, uvedené len charakreriscicke signály): 8,61, 3,43, 7,93, 7,84, 7,32, 7,74 (d, 10Hz, PrLeuNH), 7,52 (d, 3Hz, indcl), 7,08 (s, indol H-2 '), 6,44, 6, 22 (2dt, C.YCHCN) , 6,36-5,26 (m), 6, 13, 6, 07, 5,37 (3d,
| Leu NH), 5,33-5,28 | (m), 5,24, | 5,20 | (2dm, CH=CHCN) , 5,06-4,97 |
| (m), 4,92 (2d), 4, | 87-4,75 (m) | , 4,49 | , 4,46 (2dd, MeLeu α-Η) , |
| 4,28, 4,18 (2ddd, | Leu α-Η), | 4,07, | 4,06, 4,05, 4,03 (4s, |
| N-OMe), 3,88, 3,82 | (2q, 7Hz, | MeAla | α-Η) , 3, 43, 3,40, 3,23, |
| 3,21, 3,19, 3,12, | 2,93, 2,55, | 2,53, | 2,52, 2,51 (lis, N-Me), |
1, 54-1,49 (5d, MeAla β-Me), 1,06, 1,04 (2d, 7Hz, MeLeu d-Me) ,
0,74, 0, 65, 0,52, 0, 26, 0,08 (5d, Leu g-Me) , -0,04 (ddd, Leu
Y-CH).
(3 konformery 51:46:3, označené 8,71* (d, 10Hz,
PrLeu6 NH) , 7,90* (d, 10Hz, PrLeu2 NH), 7,76° (d, 10Hz, PrLeu6 NH), 7,6° (d, 10Hz, PrLeu2 NH) , 7,52* (d, 8Hz, indol H-4') , 7,48° (d, 8Hz, indol H-4'), 7,42 (d, 8Hz, indol), 7,40 (d, 8Hz, indol), 7,26* (dd, indol H-6'), 7,13* (dd, indol H-5'), 7,07° (dd, indol H-5'), 7,03* (s, indol H-2'), 7,02° (s, indol H-2'),
6,16° (d br, 10Hz, Leu NH), 6,01* (d, 6Hz, Leu NH), 5,77' (d,
Leu NH), 5,31 (ddd, a-H) , 5, 05-4, 97, 4,86 (ddd, a-H) , 4,82 (dd, a-H) , 4,74 (m), 4,46* (dd, MeLeu a-H) , .4,17* (ddd, Leu a-H), 4,05* (s, N-OMe), 4,03° (s, N-OMe) , 3,68 (m), 3,57 (m),
| 3,47* (m, CH:C1), | 3,43 (s, N-Me), 3,28* | (dd, MeTrp | β-Ha), | 3,23* |
| (s, MeAla N-Me), | 3,21 (s, N-Me), 3,20* | (dd, MeTrp | β-Hb), | 2,92* |
| (s, MeTrp N-Me), | 2,53* (s, MeLeu N-Me), | . 2,49 (s, | N-Me), | 2,23’ |
| (dd, indol H-6'), | 2,05-1, 1, 1, 54* (d, | 7Hz, MeAla | β-Me), | 1, 50’ |
| (d, 7Hz, MeAla β- | Me), 1,05* (d, 6,5fíz, | , 0,98- | 0, 8 o, | |
| 0,57* (d, 6, 6Hz, | Leu δ'-Me), 0,52' (d, | Leu δ'-Me | ), 0,28 | ' (d, |
Leu 0,06* (d, 6,6Hz, Leu -0,32* (ddd, Leu
7-CH) .
(3 konforméry 37:59:4, označené *°'): 8,73* (d, 10Ez,
PrLeuô NH), 7,8* (d, 10Hz, PrLeu2 NE), 7,73° (d, 10Hz, PrLeu6
NH) , 7,63° (d, 10Hz, PrLeu2 NE), 7,49° (d, 8Hz, indol H-4'),
7,47* (d, 8Hz, indol H-4'), 7,42* (d, 8Hz, indol H-7') , 7,38° (d, 8Hz, indol H-7'), 7,25 (dd, indol), 7,22° (dd, indol H-6'),
7,12* (dd, indol H-5'), 7,06° (dd, indol H-5'), 7,04 (s, indol
H-2'), 7,03 (s, indol H-2'), 6,22° (d br, 10Hz, Leu NH) , 6,00* (d, 6Hz, Leu NH), 5,78' (d, Leu. NH), 5,31° (ddd, PrLeuô a-H),
5,07 (dd, “-H), 5,05-4, 90, 4, 87 (ddd, a-H) , 4,79 (dd, a-H) ,
4,72 (m), 4,49* (dd, MeLeu a-H) , 4,11* (ddd, Leu a-H) , 4,05* (s, N-OMe), 4,03° (s,.. N-OMe), 3, 75-3,50, 3, 43 (s, N-Me) , 3,383,13, 3,28 (s, OMe), 3,28 (s, OMe) , 3,23 (s, N-Me), 3,21’ (s, N-Me), 2,92* (s, MeTrp N-Me), 2,53* (s, MeLeu N-Me), 2,48° (s, N-Me), 2,00-1,08, 1,55* (d, 7Hz, MeAla β-Me), 1,50° (d, 7Hz,
MeAla β-Me), 1,05* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me), 0, 98-0, 85, 0, 60* (d,
6,6Hz, Leu δ'-Μβ), 0,05* (d, 6, 6Hz, Leu δ''-Μβ), -0,18* (ddd,
Leu 7-CH) .
(2 konforméry 50:50, označené *°): 8,70’ (d, 10Hz, PrLeuS
NH), 7,80* (d, 10Hz, PrLeu2 NE), 7,71° (d, 10Hz, PrLeuô NH) ,
7,69° (d, 10Hz, PrLeu2 NH) , 7,47-7,35, 7,24 (dd, indol), 7,21
| (dd, indol), 7,04 | (dd, indol), 7,01 (dd, | indol) , 7,01 (s, | indol | |
| H-2'), 6,97 (s, indol H-2'), 6,25° (d br | :, 10Hz, Leu | NH) , | 6, 00* | |
| (d, 6Hz, Leu NH) | , 5,30° (ddd, PrLeuS ( | a-H) , 5,10-4 | íX O· t ~ t | d -, - - |
| (dd, MeLeu a-H), | 4,07* (ddd, Leu a-H), | 4,04* (s) , | 4, 02° | (s) , |
| 3,72-3,02, 3,41 | (s, N-Me), 3,20 (s, N | -Me) , 3,20* | (s, | MeAla |
| N-Me), 2,91* (s, | MeTrp N-Me), 2,53 (s, | N-Me), 2,45 | (s, 1 | ľ-Me) , |
| 2,07-0,82, 1,55* | (d, 7Ez MeAla β-Me), | 1,50° (d, | 7Hz | MeAla |
| β-Me) , 1,04* (d, | 6,5Hz, MeLeu d-Me), | 0,6* (d, | 6, ôHz, | ZjcLI |
δ'-Me)
0,41 (m, cyPr), -0,03* (d, 6,6Hz, Leu δ''-Με),
-Λ u
d * (ddd, Leu 7-CH).
| 30 (3 konforméry | 63: | 35 :2, označené *”) | : 8,78° (d, | 10Hz, | |
| PrLeuô NH) , 7,93*, | 7,77 | ° (2d, : | 10Hz, PrLeu2 | NH), 7,47* (d, | 8 Hz, |
| indol H-7 ') , 7,43* | (d, | 8Hz, | indol H-4'), | 7,40-7,23, 7 | ,17°, |
| 7,13* (2dd, indol | H-6' | ), 7,04 | , 7,03 (2s, | indol H-2'), | 6, 93° |
| (dd, indol H-5'), | 6, 97 | , 6,93 | (2s, CH-Phz) | , (dd, | indol |
| H-5'), 6,14° (d, 10 Hz, | Leu NH) | , 5,92* (d, | 6Hz, Leu NH), | 5,78' |
(ddd, a-H) ,
Hba (d, Leu NH) , 5,27°
PrLeuô a-H), 5,12* (dd,
4,98* (ddd, PrLeuG
4,96* (dd, MeTrp a-H) ,
4, 85* (ddd,
PrLeu2 a-H), 4,70° (ddd, a-H),
4,47* (dd, MeLeu
4,18* (ddd, Leu a-H), 4,00*, 3,97° (2s,
OMe), 3,57° (dd,
MeTrp β-Ha),
3,53° (dd, MeTrp β-Hb), 3,37* (dd, MeTrp β-Ha),
3,27* (dd,
MeTrp P-Hb), 3,20, 3, 19, 2, 93, 2,83 (4s, N-Me), 2,66 (q, 7Hz),
2, 55-2,33, 2,52 (s, N-Me), 2,46 (s, N-Me), 2,27-1,92, 1,80 (m),
| 1, 68-1,05, 1,35°, 1,28* | (2d, | 7Hz, | MeAla P-Me), 1,03* (d, 6,5Hz, | ||
| MeLeu d-Me), 0,96-0,83, | 0,53 | ' (d, | Leu δ'-Μβ), | 0,49* (d, | 6, 6Ez, |
| Leu —Μθ) r 0,32' (d, | Leu | δ' | Me) , -0,12’ | (d,. 6,6E | z, Leu |
s~Me), -0,49* (ddd, Leu Ϊ-CH).
(Zmes konformérov, uvedené len vybrané signály): 7,13,
7,03 (2s, indol H-2'), 4, 56, 4, 40 (2m, a-?I) , 4,03 (s, N-GMe) , 3, 42, 3,23, 3,07, 2,94, 2,53 (53, N-Me), 0,57, 0, 53 (2d, 6,6Hz,
Leu 5'-Me), 0,17, 0,03 (2d, 6, 6Hz, Leu S''-Me), -0,03, -0,27 (2ddd, Leu P-CH).
(3 konforméry 78:16:6, označené *0'): 8,45* (d, J=10Ez,
PrLeuô NE), 8,04* (d, J=10Hz, PrLeu2 NE), 7,83° (d, J=10Ez,
NH) , 7,63*, 7,53° (2d, J=7Hz, indol E-4'), 7,30’ (d, J=3Ez, indol H-7'), 7,23* (m, indol H-6'), 7,10* (dd, indol E-5'),
| 5,87°, | 6, 79’ | r (2s, | indol E-2 '), 6,23“ | 1 ((d, J=10Hz, Leu | NE) , |
| 6, 07* | (d, J | =6Hz, | Leu NE), 5,83' (d, | J=10Hz, Leu NH) , | 5,31° |
| (ddd, | PrLeu | «-H), | 5,18* (dd, Hba a-H | ) , 5,13° (dd, Eba | a-H), |
| 5, 05* | (ddd, | PrLeu6 a-H), 4,98° (ddd | , Leu a-H) , 4,93* | (dd, | |
| MeTrp | a-H) , | 4,84* | (ddd, PrLeu2 “-H), | 4,78° (ddd, PrLeu2 | a-H), |
| 4, 47* | (dd, | MeLeu | a-H), 4,13* (ddd, | Leu M), 3,8-3,5 | (m) , |
| 3,72*° | (2s, | MeTrp | Nl'-Me), 3,69* (q, | J=7Hz, MeAla a-H), | 3, 40° |
(s, MeAla N-Me), 3,28* (s, MeAla N-Me), 3,20 (dd, MeTrp P-Hb), 3,12* (dd, MeTrp β-Ha), 2,93* (s, MeTrp N-Me), 2,53° (s, N-Me), 2,52* (s, MeLeu N-Me), 3,21° (s, N-Me), 2,25-2,08 (m, Hba Y-CHz, P-Ha), 1,92* (m, Hba P-Hb), 1, 83-1,75 (m), 1,7-1,07 (m), 1,53*, 1,48° (2d, J=7Hz, MeAla P-Me), 1,04 (d, J=6,5Hz, MeLeu
S-Me), 0,97-0,84 (m), 0,53* (d, J=6,6Hz, Leu Me) , 0,28' (d),
-0,17* (d, J=6,6Hz, LeuMe), -0,53* (ddd, Leu Y-CH) .
(3 konforméry 80:14:6, označené *°'): 8,48* (d, 10Hz,
PrLeu6 NH) , 8,06* (d, 10Hz, PrLeu2 NE), 7,94° (d, lOEz, PrLeu NH) , 7,68* (d, 8Hz, indol H-4'), 7,54’ (d, indol), 7,33* (d, 8Hz, indol H-7'), 7,31° (d, 8Hz, indol), 7,22* (dd, indol
| H-6'), 7,1* | (dd, indol H-5'), 7,53° | (d, | PrLeu NH) , 6,93° (s, | |||
| indol H-2'), | 6,84* (s, indol | H-2'. | ) , 6, | 26° | (d br, | Leu NH), 6,05’ |
| (d, 7,5Ez, | Leu NH) , 5,84' | (d, | Leu | NH) | ς 31 f f — | ’ (ddd, PrLeuí |
| α-Η), | 5, 18* | (dd, Hba «-Η) , 5,13° (dd, Hba | a-H), | 5,0 6’ (ddd, |
| PrLeuô | a-H) | , 4,99’ (ddd, Leu a-H), 4,93* | (dd, | MeTrp a-H; , |
| 4, 87* | (ddd, | PrLeu2 a-H), 4,8° (ddd, PrLeu2 | a-H) | , 4,47’ (dd, |
| MeLeu | CL-U\ '‘‘‘I t | 4,16* (ddd, Leu a-H) , 4,1* (m, | N-CH; | ), 3,79-3,57, |
3,69* (q, 7Hz, MeAla a-H) , 3,47-2,90, 3,42° (ô, MeAla N-Me),
3,32* (dd, MeTrp P-Ha), 3,3* (s, MeAla N-Me), 3,23’ (dd, MeTrp P-Hb), 3,21’ (s, N-Me), 3,06' (s, N-Me), 2,93* (s, MeTrp N-Me), 2,53* (s, MeLeu N-Me), 2,52’ (s, N-Me), 2,32-2,10, 1,93* (m, Hba Y-CHb), 1,83-1,08, 1,53* (d, 7Hz, MeAla P-Me), 1,48° (d, 7Hz, MeAla P-Me), 1,04* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me) , 0,97-0,84,
0,52* (d, 6,6Hz, Leu $'-Me), 0,26' (d, ueu $''-Me), -0,17* (d,
6,6Hz, Leu δ''-Me), -0,55* (ddd, Leu Y-CH).
(3 konforméry 71:24:5, označené *”): 8,50* (d, 10Hz,
PrLeuô NH) , 8,06* (d, 10Hz, PrLeu2 NH), 7,94° (d, 10Hz, PrLeu
| NH) , 7 | ,77° | (d, | 8Hz, indol H-4'), 7,72* (d, | 8Hz, | indol H-4') | |
| 7,53° | (d, | 10Hz, | PrLeu | NH), 7, 40-7, 05, 6,92 | ° (s, | indol H-2') |
| 6,88* | (s, | indol | H-2') | , 6,23° (d, 9,4Hz, Leu NH) | , 6,09* (d | |
| 7,4Hz, | Leu | NH) , | 5,87' | (d, Leu NH) , 5,32’ | (ddd, | PrLeuô a-H) |
| 5,23* | (A3, Nľ-CH2), 5,20* (AB, N1'-CH2), 5,17* (dd, Hba a-H) , | |
| 5,14° | (dd, Hba a-H), 5,04* (ddd, PrLeu6 a-H), 4,99° | (ddd, |
| PrLeu2 | a-H) , 4,96* (dd, MeTrp a-H), 4,87* (ddd, PrLeu2 |
| 4,78° | (ddd, | Leu a-H) , | 4,47* | (dd, MeLeu a-H), | 4,21* . | (ddd, Leu | |
| a-H) , | 3,76° | (q/ | 7Hz, | MeAla | a-H), 3,73-3,65, | 3,67* | (q, 7Hz, |
| MeAla | a-H) , | 3,58° | (dd, | MeLeu | a-H) , 3,50-3,37, | 3,42° | (s, ΜθΑΙη |
| N-Me), | 3, 33* | (dd, | MeTrp | P-Ha), | 3,27* (s, MeAla | N-Me), | 3,23° (s, |
| N-Me), | 3,23* | (dd, | MeTrp | P-Hb), | 2,92* (s, MeTrp | N-Me), | 2,53* (ô, |
| MeLeu | N-Me), | 2,52 | 0 (s, | N-Me), | 2,28-1,08, 1, 53' | * (d, 7 | Hz, MeAla |
| P-Me), | 1, 49' | ’ (d, | 7Hz, | MeAla | P-Me), 1,06* (d, 6,5ŕ | iz, MeLeu | |
| d-Me), | 0, 98- | 0,82, | 0, 50 ' | (d, Leu _Mg), 0,45* | (d, 6 | , 6 Hz, Leu | |
| δ'-Me) | , 0,28 | ' (d, | Leu | δ''-Me) | , -0,11* (d, 6,6 | Hz, Leu | : δ-'-Me), |
| -0,47* | (ddd, | Leu Ί | -CH) . |
(3 konforméry 1:1:1): 8,62, 8, 43, 8,07, 7, 94, 7, 87, 7, 42 (6d, J=10Hz, NH), 7,12 (d, J=7, 4Hz, indolín aróm. H), 7,08-6,99 (m, indolín aróm. H), 6,72, 6,69 (2dd, indolín aróm. H), 6,666,63 (m, indolín aróm. H), 6,58 (d, J=8Hz, indolín aróm. H),
| 6, 29 | (d, J=8Hz, Leu | NH) , 6,15 | (m br, | Leu | NH) , | 5,88 | (d, J=8Hz, |
| Leu | NH) , 5,28-4,98 | (m, a_H), | 4, 93 | (ddd, | a-H) | , 4, | 74 (ddd, |
| a-H) | , 4,65 (m, a_H), | 4,54 (dd, | a-H) , | 4, 43 | (dd, | a-H) | , 3,80-3,66 |
(m), 3,55-3,0 (m), 3, 46, 3, 35, 3,31, 3,24, 3,22, 3, 12, 3,00,
2, 82, 2,57 (9s, N-Me), 2,55-1,1 (m), 1,52, 1, 48, 1,43 (3d,
J=7Hz, MeAla P-Me), 1,13 (d, J=7Hz), 1,03-0,83 (m), 0,78, 0,76, 0,73 (3d, J=6,5Hz).
(3 konforméry 73:23:4, označené *°'): 8,53 * (d, J=10Hz,
PrLeu NH), 8,06* (d, J=10Hz, PrLeu' NH), 7,95° (d, J=10Hz, NH),
7, 67*, 7,52° (2d, J=7Hz, indol H-4'), 7,55° (d, J=10Hz, NH) ,
7,33*, 7,31° (2d, J=8Hz, indol H-7'), 7,19*, 7,17° (2dd, indol
H-6'), 7,08*, 7,04° (2dd, indol H-5'), 6, 98 ', 6, 88 ’, ;6, 8 0’ (3s, indol H-2'), 6,23° (d, J=9,3Hz, Leu NH), 6,05* (d, J=7,5Hz, Leu
NH) , 5,84' (d, Leu NH), 5,33° (ddd, PrLeu a-H) , 5,18* (dd, Eba a-H),.5,14° (dd, Hba a-H), 5,05* (ddd, PrLeu a-H) , 4,98° (ddd, Leu a-H) , 4,93* (dd, indol a-H), 4,87* (ddd, PrLeu' a-H) ,
| 4,81° | (ddd, Leu a-H), | 4,47* (dd, MeLeu a-H) | , 4,22* (ddd, Leu | ||
| a-H) , | 3,86-3,67 | (m) , | 3,83* (s, t-Bu-CH2-N) , | 3, 69* | (q, J=7Ez, |
| Μ&ΑΣ s. | a-H), 3,5 | -3,2 | (m), 3,43° (s, MeAla | N-Me), | 3,30* (s, |
MeAla N-Me) , 3,22° (s, N-Me) , 2,93*
MeMeTro, N-Me), 2,53*
(s, MeLeu N-Me), 2,53° (s, N-Me), 2,25 (m, Eha g-CH2} , 2,13 (m,
Eba P-Ha), 2,0-1,08 (m), 1,54*, 1,49° (2d, J=7Ez, MeAla β-Me),
1,05 (d, J=6,5Hz, MeLeu Ne), 0,97-0, 84 (m), 0,52* (d, J=6,6Hz,
Leu Me) , 0,28' (d), -0,06* (d, J=6,6Ez, Leu Me) , -0,49* (ddd,
Leu /—Cn) .
(3
10Hz,
PrLeuô NH) , 8,06* (d, 10Hz, PrLeu2 NH) , 7,94° (d,
10Hz,
PrLeu
NH) , 7,68* (d, 8Hz, indol
H-4'), 7,53° (d, 8Ez, indol
H-4'),
7,52° (d, 10Hz, PrLeu NH) ,
7,36* (d,
H-7'),
7,33° (d, 8Hz, indol H-7'), 7,2* (dd, indol
H-6'), 7,17° (dd, indol
H-6'), 7,09* (dd, indol H-5'), 7,05° (dd, indol H-5'),
7,02° (s, indol H-2'), 6,91* (s, indol H-2'), 6,23° (d, 9,5Hz, Leu
NH) , 6,03* (d, 7,4Hz, Leu NH) , 5,87' (d, Leu NH) , 5,32° (ddd, PrLeu6 a-H) , 5,18* (dd, Hba a-H) , 5,14° (dd, Hba a-H) , 5,05* (ddd, PrLeu6 a-H), 4,98° (ddd, PrLeu2 a-H) , 4,93* (dd, MeTrp a-H) , 4,87* (ddd, PrLeu2 a-H) , 4,81° (ddd, Leu a-H), 4,60 (m, N-CH), 4,46* (dd, MeLeu CC-H), 4,16* (ddd, Leu a-H), 3,75° (q,
7Hz, MeAla «-Η), 3,70 (m), 3,69* (q, 7Hz, MeAla a-H) , 3,57° (dd, MeLeu α-Η), 3,45 (m), 3,42° (s, MeAla N-Me), 3,32* (dd,
MeTrp P-Ha), 3,31* (s, MeAla N-Me), 3,23* (dd, MeTrp P-Eb),
3,21° (s, N-Me), 2,93* (s, MeTrp N-Me), 2,53* )s, MeLeu N-Me), 2,50° (s, N-Me), 2,28 (AB-XY) , 2,18 (AB-XY, Hba g-CH2), 2,13(m, Hba Y-CHa), 1,93* (m, Hba ľ-CHb), 1,85-1, 08, 1,53* (d, 7Hz, . MeAla P-Me), 1,47 (m, N-CHMe2), 1,04* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me),
0, 98-0, 83, 0,52' (d, Leu Ô'-Me), 0,51* (d, 6,6Hz, Leu 5'-Me),
0,34' (d, Leu 5''-Me), -0,2* (d, 6, 6Hz, Leu 5-Me), -0,60’ (ddd, Leu ľ-CH).
Indolín A (3 konforméry 46:27:27, označené *°'): 3,62’ (d, J=10Hz, PrLeu NH) , 8,13° (d, J=10Hz, NH) , 8,02° (d, J=10Hz,
NH) , 7,92° (d, J=10Hz, NH), 7,86* (d, J=10Hz, PrLeu' NH), 7,403 (d, J=10Hz, NH), 7,23°, 7,16*,7,09° (3d, J=7,4Hz, indolín aróm. H), 7,05°, 7,02*, 7,02° (3dd, indolín aróm. H), 6,76°, 6,72*,
6,71° (3dd, indolín aróm. H), 6,64°, 6,62°, 6,58* (3d, J=7,7Hz, indolín aróm. H), 6,32° (d, J=8Hz, Leu NH) , 6,10° (m br, Leu NH) , 5,94* (d, J=9Hz, Leu NH) , 5,28-4, 73 (m), 4,60° (dd, a-H) , 4,13* (dd, a-H), 3,75-2,85 (m), 3,45*, 3,33°, 3,33*, 3,23°,
3,20°, 3,02*, 2,81°, 2,79°, 2,57° (9s, N-Me), 2,45-0,83 (m), 1,52°,· 1,46°, 1,42* (3d, J=7Hz, MeAla P-Me).
Indolín B (3 konforméry 1:1:1): 8,62, 8,43, 8,07, 7,94, 7,87, 7,42 (6d, J=10Hz, NH) , 7,12 (d, J=7,4Hz, indolín aróm. H),
7, 08-6,99 (m, indolín aróm. H), 6, 72, 6,69 (2dd, indolín aróm. H), 6,66-6,63 (m, indolín aróm. H), 6,58 (d, J=8Hz, indolín aróm. H), 6,29 (d, J=8Hz, Leu NH) , 6,15 (m br, Leu NH) , 5,88 (d, J=8Hz, Leu NH) , 5, 28-4,98 (m, a-H), 4,93 (ddd, a-H), 4,74 (ddd, a-H), 4,65 (m, »-H), 4,54 (dd, a-H), 4,43 (dd, a_H) , 3,80-3,66 (m), 3,55-3,0 (m), 3, 46, 3, 35, 3, 31, 3,24, 3,22,
3
3,12, 3,00, 2,82, 2,57 (9s, N-Me), 2,55-1,1 (m), 1,52, 1, 48,
1,43 (3d, J=7Hz, MeAla P-Me), 1,13 (d, J=7Hz), 1, 03-0, 83 (m),
0, 78, 0,76, 0,73 (3d, J=6,5Hz).
(3 konformery 76:18:6, označené *°'): 8,49* (d, 10Hz,
PrLeu6 NH) , 8,05* (d, 10Hz, PrLeu2 NH) , 7,94° (d, 10Hz, PrLeuc NH) , 7,67* (d, 8Hz, indol H-4'), 7,53° (d, 8Hz, indol H-4'), 7,52° (d, 10Hz, PrLeu2 NH), 7,4* (d, 8Hz, indol H-7'), 7,38° (d, 8Hz, indol H-7'), 7,23* (d, 8Hz, indol H-7'), 7,19° (dd,
| indol | H-6'), 7,11* | (dd, | indol | H-5 ') | , 7,07° (dd, indol H-5') , |
| 7, 05° | (dd, indol H- | -2') , | 7,01* | (dd, | indol H-2'), 6,22° (d br, |
| Leu NH) , 6,05* (d, | 7, 5Hz | , Leu | NH) , | 5,84' (d, Leu NH) , 5,31° | |
| (ddd, | PrLeu6 a-H), | 5,19* | (dd, | Hba a_ | H), 5,16° (dd, Hba α-Η) , |
| 5, 04* | (ddd, PrLeuô | a-H), | 5,00° | (ddd, | PrLeu2 a-H) , 4,94* (dd, |
| MeTrp | «-H) , 4,87* | (ddd, | PrLeu2 a_H) | , 4,81° (ddd, Leu α-Η) , |
| 4,6/' (ddd, | . . Leu | a-H) | , 4,45* (dd, | MeLeu | a-H) , | , 4,18* (ddd, Leu |
| a-H), 4,14 | (s, | OPr) | , 3, 80-3, 55, | 3, 67* | (q, | 7Hz, MeAla a_fí), |
| 3,50-3,40, | 3,42° | (s, | N-Me), 3,29* | (dd, | MeTrp | P-Ha), 3,27* (s, |
MeAla N-Me), 3,21° (s, N-Me), 3,18* (dd, MeTrp P-Hb), 3,04' (s,
N-Me), 2,93* (s, MeTrp N-Me), 2,55° (s, N-Me), 2,53* (s, MeLeu
N-Me), 2,30-1,90, 1,80 (m, OPr), 1,53* (d, 7Hz, MeAla P-Me),
1,48° (d, 7Hz, MaAla P-Me), 1,08° (t, OPr), 1,07 (t, OPr),
1,05* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me), 0,98-0, 85, 0, 59' (d, Leu 5'-Me),
0,57* (d, 6,6Hz, Leu 5'-Me), 0,37' (d, Leu 5-Me), -0,07* (d,
6,6Hz, Leu '-Me).
(3 konformery 73:21:6, označené *°'): 8,49* (d, 10Hz, PrLeu6 NH) , 8,05* (d, 10Hz, PrLeu2 NH) , 7,94° (d, 10Hz, PrLeuô NH), 7,67* (d, 8Hz, indol H-4'), 7,53° (d, 8Hz, indol H-4'),
7,52° (d, 10Hz, PrLeu2 NH) , 7,48 (d,
8Hz, indol H-7'),
7,38° (d, 8Hz, indol H-7'), 7,23* (dd, indol
H-6'), 7,19° (dd, indol
H-6'), 7,11* (dd, indol H-5'),
7,07° (dd, indol
H-5') ,
7,05° (s, indol H-2'), 7,01* (s, indol
H-2'), 6,22° (d,
9,4Hz,
Leu NH) , 6,05* (d, 7,3Hz, Leu NH) , . 5,86' (d, Leu NH) , (ddd,
PrLeu6 Hba a-H) , “-H)
5,03* (ddd,
PrLeu6
Hba a-H), 5° (ddd, PrLeu2 a.
k94* (dd,
MeTrp a-H),
4, 87* (ddd, PrLeu2 (ddd,
Lc
65' (ddd,
Leu a-H), 4,46* (dd, a-H) ,
4,26’ (q,
OEt)
26° (q.
OEt) ,
4,19* (ddd, Leu a-H),
3,30-3,56,
3, 67* a-H),
MeAla
7Hz, (q,
3,45-3,33, 3,41°
3, 29’ (s, MeAla
| (dd, | MeTrp | P-Ha), | 3,27* (s, MeAla N-Me), 3,21° (s, N-Me), | 3, 19* |
| (dd, | MeTrp | P-Hb), | 3,04' (s, N-Me), 2,93* (s, MeTrp N-Me), | 2, 57° |
| (s, | N-Me), | 2,52* | (s, MeLeu N-Me), 2,32-1,08, 1,53* (d, | 7 Hz, |
| Μ-Δ 1 | .a P-Me) | , 1,48 | ° (d, 7Hz, MeAla P-Me), l,40e (t, OEt), | 1, 40* |
| (t, | OEt) , | 1, 05* | (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me), 0,98-0,84, 0,60 | (d, |
| Leu | 5'-Me), | 0, 57* | (d, 6,6Hz, Leu δ'-Μθ)ζ 0,37' (d, Leu δ-' | -Me) , |
| -0,07* (d, | 6, 6Hz, | Leu δ''-Me), -0,36* (ddd, Leu Y-CH). |
(3 konforméry 63:32:5, označené *0'): 8,45* (d, 10Hz,
PrLeu6 NH) , 8,06* (d, 10Hz, PrLeu2 NH), 7,97° (d, 10Hz, PrLeuS NH), 7,90' (d, 10Hz, PrLeu6 NH) , 7,63* (d, 8Hz, indol H-4'), 7,56° (d, 10Hz, PrLeu2 NH), 7,45° (d, 8Hz, indol H-4'), 7,4* (d, 8Hz, indol H-7'), 7,38° (d, 8Hz, indol H-7'), 7,23* (dd, indol H-6'), 7,22° (dd, indol H-6'), 7,13* (dd, indol H-5'), 7,08° (dd, indol H-5'), 6,2° (d, 10Hz, Leu NH) , 6,07* (d, 7,5Hz, Leu Nh) , 5,77' (d, 8,5Hz, Leu NH) , 5,32° (ddd, PrLeu6 a-H), 5,26' (dd, Hba a-H), 5,2* (dd, Hba a-H), 5,16° (dd, Hba a-H), 5,03* (ddd, PrLeu6 a_H), 4,97* (dd, MeTrp a_H), 4,87*
(ddd, PrLeu2 α-Η), 4,67° (ddd, α-Η), 4,46* (dd, MeLeu α-Η) ,
4,13* (ddd, Leu α-Η) , 4,09* (s, N-OMe), 4,04' (s, N-OMe),
4,03° (s, N-OMe), 3,74° (q, 7Hz, MeAla α-Η), 3,71* (q, 7Ez,
MeAla α-Η) , 3,70-3,60, 3,54-3,50, 3,47° (s, MeAla N-Me), .3,28-3,17, 3,25* (s, MeAla N-Me) , 3,20° (s, N-Me), 2,97* (s,
MeTrp N-Me), 2,52* (s, MeLeu N-Me), 2,42° (s, N-Me), 2,40-2,14, 1,97 (m), 1,79 (m), 1,65-1, 08, 1, 53* (d, 7Hz, MeAla P-Me), 1,5° (d, 7Hz, MeAla P-Me), 1,04* (d, 6,5Hz, MeLeu d-Me), 0,93-0,33, 0,62' (d, Leu S'-Me), 0,57* (d, 6,6Hz, Leu 5'-Me), 0,37' (d, Leu δ-'_ιντθ)/ -0,09* (d, 6,6Hz, Leu δ''-^e), -0,35* (ddd, Leu konforméry 44:30:26, označené *”): 8,85 (d, CSNH2),
PrLeu6 NH), 8,17 (d, CSNH2), 8,03, 8,00 (2d, NH), 7,88 (m, CSNH2), 7,6-7,1, 6,28* (d, 10Hz, Leu NH) , 6,07° (d, 7Hz,
Leu NH), 5,87' (d, 9Hz, Leu NH) , 6,26* (ddd, PrLeu2 α-Η), 5,22 (dd, Hba α-Η) , 5,15-4,95, 5,08* (dd, Hba α-Η) , 4,83° (ddd, PrLeu2 α-Η), 4,50* (ddd, Leu α-Η), 4,37* (dd, MeTrp α-Η) , (m, (m) , NMe) , 0, 17° (4d, 7Hz, Leu S-Me), -0,15°, -0,17' (ddd, Leu Y-CH) .
Claims (29)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Cyklopeptolid všeobecného vzorca I — A-B-R^Leu-Leu-C-X-Y — (I) v ktoromA predstavuje zvyšok α-hydroxysubstituovanej kyseliny maslovej, prípadne /'-substituovanej substituentom R®, ktorý predstavuje skupiny CN, COOR2, CONR3R4, CORS, CSNH2 alebo alkylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná azidoskupinou, atómom halogénu, alkoxyskupinou, prípadne chránenou hydroxyskupinou alebo aminoskupinou, vinylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná alkylovou skupinou, atómom halogénu alebo kyanoskupinou, cykloalkylovú skupinu, tetrazolylovú skupinu alebo skupinu -C^CH, kde R2 predstavuje atóm vodíka alebo prípadne arylom substituovanú alkylovú skupinu, R3 a R4 sú rovnaké alebo rôzne a predstavujú atóm vodíka alebo alkylovú skupinu alebo tvoria spolu s atómom dusíka troj- až šesťčlenný kruh, ktorý prípadne obsahuje druhý heteroatóm a Rs predstavuje atóm vodíka alebo nižšiu alkylovú skupinu,B predstavuje zvyšok a-amino-/'-metyl-substituovanej oktánovej kyseliny,R1 predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu,C predstavuje zvyšok tryptofánu alebo N-metyltryptofánu všeobecného vzorca VI (VI) m! r kdeR® predstavuje atóm vodíka, alkoxyskupinu, alkylovú skupinu alebo benzylovú skupinu, R® predstavuje atóm vodíka alebo atóm halogénu, R10 predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu a---- predstavuje jednoduchú alebo dvojitú väzbu,X predstavuje zvyšok α-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až 14 atómov uhlíka aY predstavuje zvyšok α-amino- alebo N-metyl-a-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až 10 atómov uhlíka.
- 2. Cyklopeptolid podľa nároku 1, kde A predstavuje zvyšok α-hydroxymaslovej kyseliny, ktorá je ^-substituovaná kyanoskupinou, skupinou COOR'2, pričom R'2 predstavuje atóm vodíka, nižšiu alkylovú skupinu s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka alebo difenylmetylovú skupinu, skupinou C0NR,3R'4, pričom R'3 predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu a R'4 predstavuje atóm vodíka alebo alkylovú skupinu alebo R’3 a R'4 tvoria spolu s atómom dusíka troj- až šesťčlenný kruh alebo morfolinylový kruh, skupinou CH2OH, COR,S, pričom R'5 predstavuje atóm vodíka alebo nižšiu alkylovú skupinu s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka, vinylovou skupinou, prípadne substituovanou kyanoskupinou, atómom brómu alebo nižšou alkylovou skupinou s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka, alkylovou skupinou, prípadne substituovanou azidoskupinou, aminoskupinou, hydroxyskupinou, atómom chlóru alebo alkoxyskupinou, tetrazolylovou skupinou, cyklopropylovou skupinou, skupinou CSNHz alebo -C=CH.
- 3. Cyklopeptolid podľa nároku 1 alebo 2, kde C predstavuje zvyšok N-metyltryptofánu všeobecného vzorca VI, kde R® predstavuje atóm vodíka, alkoxyskupinu s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka, predovšetkým metoxyskupinu alebo alkylovú skupinu a R® predstavuje atóm vodíka alebo atóm halogénu.
- 4. Cyklopeptolid podľa nároku 1, 2 alebo 3, kde X predstavuje zvyšok α-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 4 až 8 atómov uhlíka, ktorá je prípadne β- alebo /-substituovaná alkylovou skupinou s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka.
- 5. Cyklopeptolid podľa nárokov 1 až 4, kde X predstavuje zvyšok a-amino-β- alebo /-substituovanej oktánovej alebo maslovej kyseliny, pričom substituentom je alkylová skupina s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka, predovšetkým metylová skupina .
- 6. Cyklopeptolid podľa nárokov 1 až 5, kde Y predstavuje zvyšok N-metyl-a-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až 4 atómov uhlíka, ktorá je prípadne β- alebo /-substituovaná alkylovou skupinou s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka.
- 7. Cyklopeptolid podľa nárokov 1 až 5, kde Y predstavuje zvyšok N-metylalanínu alebo N-metylvalínu.
- 8. Cyklopeptolid vzorca II
- 9. Cyklopeptolid vzorca III
- 10. Peptid alebo peptolid s otvoreným reťazcom, ktorý zodpovedá cyklopeptolidu podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov.
- 11. Peptid alebo peptolid s otvoreným reťazcom všeobecného vzorca IVH-C-X-Y-A-B- RxLeu - Leu.OR7 (IV) kde substituenty majú význam uvedený v nároku 1 a R7 predstavuje atóm vodíka alebo alkylovú skupinu.
- 12. Peptid alebo peptolid s otvoreným reťazcom všeobecného vzorca VHA - B - RxLeu - Leu - C - X - Y.OR7 (V) kde substituenty majú význam uvedený v nároku 1 a R7 predstavuje atóm vodíka alebo alkylovú skupinu.
- 13. Cyklopeptolid všeobecného vzorca I — AP-BE’-RlpLeu-Leu-Cp-XE’-YT’ — kdeA** predstavuje zvyšok α-hydroxy-substituovane j kyseliny maslovej, prípadne /-substituovanej substituentomR*5®3, ktorý predstavuje kyanoskupinu, prípadne chránenú CH OH, COOR2E3, CONR3pR4I?, CORSs> alebo -CH=CH , kde rzp predstavuje atóm vodíka alebo prípadne arylom substituovanú alkylovú skupinu, R3E> a R4p sú rovnaké alebo rôzne a predstavujú atóm vodíka alebo alkylovú skupinu alebo tvoria s atómom dusíka päť- alebo šesťčlenný kruh, ktorý prípadne obsahuje druhý heteroatóm a RSp predstavuje atóm vodíka alebo nižšiu alkylovú skupinu,B®3 predstavuje zvyšok a-amino-/-metyl-substituovanej oktánovej kyseliny,R113 predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu,C®3 predstavuje zvyšok tryptofánu alebo N-metyltryptofánu, ktorý je prípadne N’-substituovaný alkoxyskupinou s obsahom 1 až 4 atómov uhlíka,X13 predstavuje zvyšok α-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až
- 14 atómov uhlíka aY*3 predstavuje zvyšok α-amino- alebo N-metyl-a-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až 10 atómov uhlíka.Cyklopeptolid vzorca 1-- A'p-B,p-R,Xl’Leu-Leu-C'I3-X’í3-Y'E’ -I1',' kdeA,E> predstavuje zvyšok α-hydroxy-substituovanej kyseliny maslovej, prípadne /-substituovanej substituentom R,6r3, ktorý predstavuje kyanoskupinu, COOR,2E>, CONR'3E>R’C0R,SE3, alkylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná azidoskupinou, atómom halogénu, alkoxyskupinou, prípadne chránenou hydroxyskupinou alebo aminoskupinou, vinylovú skupinu, ktorá môže byť substituovaná alkylovou skupinou, atómom halogénu alebo kyanoskupinou, cykloalkylovú skupinu, tetrazolylovú skupinu alebo -C=CH, pričom R,2p predstavuje atóm vodíka alebo prípadne arylom substituovanú alkylovúTL skupinu, R,3r> a R,4p sú rovnaké alebo rôzne a predstavujú atóm vodíka alebo alkylovú skupinu alebo tvoria spolu s atómom dusíka troj- až šesťčlenný kruh, ktorý prípadne obsahuje druhý heteroatóm a R'SE> predstavuje atóm vodíka alebo nižšiu alkylovú skupinu,B, p> predstavuje zvyšok α-amino-^-metyl-substituovanej ok- tánovej kyseliny, rup predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu,C, 1? predstavuje zvyšok tryptofánu alebo N-metyltryptofá- nu, všeobecného vzorca VI' r» (VI^) kde risip predstavuje atóm vodíka, alkoxyskupinu, alkylovú skupinu alebo benzylovú skupinu, R'9p predstavuje atóm vodíka alebo atóm halogénu, R,XOE5 predstavuje atóm vodíka alebo metylovú skupinu a ---- predstavuje jednoduchú alebo dvojitú väzbu,X,E> predstavuje zvyšok α-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až 14 atómov uhlíka aY’1* predstavuje zvyšok α-amino- alebo N-metyl-a-amino-substituovanej karboxylovej kyseliny s obsahom 2 až 10 atómov uhlíka.
- 15. Zlúčenina podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov vo forme soli alebo esteru.
- 16. Zlúčenina, ktorá má vlastnosti uvedené v riadkoch 2, 3 a 5 až 8 v tabuľke 1 pre zlúčeninu A.
- 17. Zlúčenina, ktorá má vlastnosti uvedené v riadkoch 2, 3 a 5 až 8 v tabuľke 1 pre zlúčeninu B.
- 18. Plesňový kmeň F92-4471/08 uložený ako NRRL 21123 alebo jeho mutant alebo jeho derivát.
- 19. Nové cyklopeptolidy produkované kmeňom F92-4471/08 uloženým ako NRRL 21123.
- 20. Spôsob prípravy zlúčeniny podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že sa kultivuje F92-4471/08 (NRRL 21123) alebo jeho mutant alebo jeho derivát alebo podobný plesňový kmeň v živnom médiu a zlúčenina sa z neho izoluje.
- 21. Spôsob prípravy zlúčeniny podľa nároku 1 derivatizáciou zlúčeniny vzorca II alebo III, vyznačujúci sa tým, žea) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje skupinu COOR'2, kde R'2 je alkylová skupina, prípadne substituovaná arylovou skupinou, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R6 predstavuje kyanoskupinu, s nukleofilmi, s výhodou s alkoholom, za príslušnej zásaditej alebo kyslej katalýzy, s výhodou s použitím kyseliny chlorovodíkovej, v organickom rozpúšťadle, s výhodou v éteri, alebob) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R6 predstavuje skupinu COalkyl, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje kyanoskupinu, s použitím organokovových zlúčenín, s výhodou Grignardových zlúčenín alebo alkyllítia, ako nukleofilov, pričom reakcia sa uskutočňuje v aprotických organických rozpúšťadlách, s výhodou v éteroch, s použitím katalyzátorov alebo bez použitia katalyzátorov, aleboc) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R6 predstavuje skupinu COOH, sa hydrolyzujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom Re predstavuje skupinu COO alkyl, minerálnou kyselinou, s výhodou kyselinou chlorovodíkovou, vo vodno-alkoholovom roztoku alebo zásaditou hydrolýzou, alebod) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R6 predstavuje skupinu COOR'2, sa esterifikujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu COOH, štandardnými spôsobmi, s výhodou konverziou na chlorid kyseliny, napríklad s tionylchloridom a spracovaním s príslušným alkoholom v prítomnosti alebo bez prítomnosti činidla, ktoré viaže kyselinu, aleboe) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu CHzOH, sa redukujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu COOR2, hydridmi kovov alebo borohydridmi, s výhodou komplexom boránu s dimetylsulfidom, v organických rozpúšťadlách, alebof) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu CONR3R4, sa prevedú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinuCOOR2, reakciou s amínmi, s výhodou konverziou voľnej kyseliny, na chlorid kyseliny a ten sa nechá reagovať s amínom vzorca HNR3R4, alebog) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu CHO, sa oxidujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu CH2OH, aleboh) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje prípadne substituovanú vinylovú skupinu, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu CHO, s metylovaným Wittigovým činidlom, aleboi) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R6 predstavuje prípadne substituovanú alkylovú skupinu, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu CH^OH, aleboj) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu CH2NH2, sa redukujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu CH N , alebok) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu C=CH, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu CH=Br , alebo2 '1) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje cyklopropylovú skupinu, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje vinylovú skupinu, s diazometánom, alebom) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje tetrazolylovú skupinu, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje kyanoskupinu, s azidovou zlúčeninou, alebon) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje atóm vodíka, sa odstráni metoxyskupina zo zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje skupinu OCHa, aleboo) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom symbol ---- predstavuje jednoduchú väzbu, sa redukujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom symbol ---predstavuje dvojitú väzbu, alebop) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje alkylovú skupinu alebo benzylovú skupinu, sa zavádzajú tieto skupiny do zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje atóm vodíka, aleboq) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R9 predstavuje atóm halogénu, sa halogénujú zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje atóm vodíka alebor) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje alkoxyskupinu a symbol ---- predstavuje dvojitú väzbu, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje atóm vodíka a symbol ---- predstavuje jednoduchú väzbu, s volframanom alkalického kovu a peroxidom vodíka a N-hydroxyindolový medziprodukt sa alkyluje, alebos) na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R® predstavuje CSNHz, sa nechajú reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca I s derivátmi síry, s výhodou s difenylfosfinoditiovou kyselinou.
- 22. Spôsob prípravy zlúčenín podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že sa cyklizuje lineárny peptid alebo peptolid, ktorý obsahuje zvyšky kyselín A, B, RxLeu, Leu, C, X a Y viazané spolu v príslušnom poradí.
- 23. Terapeutické použitie zlúčeniny podlá nároku 1.
- 24. Terapeutické použitie zlúčeniny podľa nároku 1 na inhibíciu expresie adhéznych molekúl.
- 25. Zlúčenina podlá nároku 1 na použitie ako liečiva.
- 26. Terapeutická zmes, vyznačujúca sa tým, že obsahuje terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny podľa nároku 1.
- 27. Terapeutická zmes podlá nároku 24 vo forme krému alebo tekutej liekovej formy na vonkajšie použitie alebo podobné formy na topické použitie.
- 28. Terapeutická zmes podlá nároku 24 vo forme aerosólu na použitie v inhalátore.
- 29. Použitie zlúčeniny podľa nároku 1 na prípravu liečiva na liečenie alebo profylaxiu ochorenia spôsobeného zvýšenými hladinami expresie adhéznych molekúl.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB9415168A GB9415168D0 (en) | 1994-07-27 | 1994-07-27 | Organic compounds |
| GBGB9504332.9A GB9504332D0 (en) | 1995-03-03 | 1995-03-03 | Organic compounds |
| PCT/EP1995/002966 WO1996003430A1 (en) | 1994-07-27 | 1995-07-26 | Organic compounds |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK11797A3 true SK11797A3 (en) | 1997-07-09 |
Family
ID=26305345
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK117-97A SK11797A3 (en) | 1994-07-27 | 1995-07-26 | Cyclopeptolides, process for their preparation and their use in therapy |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6013627A (sk) |
| EP (1) | EP0775158B1 (sk) |
| JP (1) | JP3425763B2 (sk) |
| KR (1) | KR100378974B1 (sk) |
| CN (1) | CN1116304C (sk) |
| AT (1) | ATE187461T1 (sk) |
| AU (1) | AU702332B2 (sk) |
| BR (1) | BR9508342A (sk) |
| CA (1) | CA2192786C (sk) |
| CY (1) | CY2225B1 (sk) |
| CZ (1) | CZ289311B6 (sk) |
| DE (1) | DE69513837T2 (sk) |
| DK (1) | DK0775158T3 (sk) |
| ES (1) | ES2142490T3 (sk) |
| FI (1) | FI970279A0 (sk) |
| GR (1) | GR3032698T3 (sk) |
| HK (1) | HK1014011A1 (sk) |
| HU (1) | HUT77388A (sk) |
| MX (1) | MX9606494A (sk) |
| NO (1) | NO970340D0 (sk) |
| NZ (1) | NZ291168A (sk) |
| PL (1) | PL181990B1 (sk) |
| PT (1) | PT775158E (sk) |
| RU (1) | RU2155772C2 (sk) |
| SK (1) | SK11797A3 (sk) |
| WO (1) | WO1996003430A1 (sk) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6187757B1 (en) * | 1995-06-07 | 2001-02-13 | Ariad Pharmaceuticals, Inc. | Regulation of biological events using novel compounds |
| US6011136A (en) * | 1995-11-21 | 2000-01-04 | Novartis Ag | Cyclopeptolides |
| WO1999014082A1 (en) | 1996-09-18 | 1999-03-25 | Minnesota Mining And Manufacturing Company | Adhesively-bonded inflatable restraint and method of making |
| US6365619B1 (en) | 1999-07-22 | 2002-04-02 | Novartis Ag | Treatment of arteriosclerosis |
| US7067526B1 (en) | 1999-08-24 | 2006-06-27 | Ariad Gene Therapeutics, Inc. | 28-epirapalogs |
| ES2219388T3 (es) * | 1999-08-24 | 2004-12-01 | Ariad Gene Therapeutics, Inc. | 28-epi-rapalogos. |
| AU2002223649A1 (en) * | 2000-10-27 | 2002-05-06 | Novartis Ag | Vegh inhibitors and their use |
| GB0028367D0 (en) * | 2000-11-21 | 2001-01-03 | Celltech Chiroscience Ltd | Chemical compounds |
| GB0101598D0 (en) * | 2001-01-22 | 2001-03-07 | Novartis Ag | Organic compounds |
| JP2006516548A (ja) | 2002-12-30 | 2006-07-06 | アンジオテック インターナショナル アクツィエン ゲゼルシャフト | 迅速ゲル化ポリマー組成物からの薬物送達法 |
| US8921642B2 (en) | 2008-01-11 | 2014-12-30 | Massachusetts Eye And Ear Infirmary | Conditional-stop dimerizable caspase transgenic animals |
| CN105283553B (zh) | 2013-06-11 | 2021-06-25 | 克隆技术实验室有限公司 | 蛋白质富集的微泡及其制备和使用方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4443367A (en) * | 1982-04-08 | 1984-04-17 | Monsanto Company | Peptide and peptolide substrates for mammalian collagenase |
| US4425428A (en) * | 1982-04-08 | 1984-01-10 | Monsanto Company | Novel peptide and peptolide substrates for mammalian collagenase |
| DE3851268T2 (de) * | 1987-06-19 | 1995-01-26 | Sandoz Ag | Zyklische Peptolide. |
| DE3832059A1 (de) * | 1988-09-21 | 1990-03-29 | Howaldtswerke Deutsche Werft | Tauchtiefengesteuerte ausblasventil-einrichtung |
| DE3832362A1 (de) * | 1988-09-23 | 1990-03-29 | Sandoz Ag | Neue cyclopeptolide, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
-
1995
- 1995-07-26 NZ NZ291168A patent/NZ291168A/en unknown
- 1995-07-26 WO PCT/EP1995/002966 patent/WO1996003430A1/en active IP Right Grant
- 1995-07-26 JP JP50548596A patent/JP3425763B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-26 AU AU32221/95A patent/AU702332B2/en not_active Ceased
- 1995-07-26 CZ CZ1997221A patent/CZ289311B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1995-07-26 KR KR1019970700504A patent/KR100378974B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1995-07-26 EP EP95928473A patent/EP0775158B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-07-26 DE DE69513837T patent/DE69513837T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-26 MX MX9606494A patent/MX9606494A/es not_active IP Right Cessation
- 1995-07-26 DK DK95928473T patent/DK0775158T3/da active
- 1995-07-26 AT AT95928473T patent/ATE187461T1/de not_active IP Right Cessation
- 1995-07-26 PL PL95317349A patent/PL181990B1/pl unknown
- 1995-07-26 CA CA002192786A patent/CA2192786C/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-26 CN CN95194370A patent/CN1116304C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-26 PT PT95928473T patent/PT775158E/pt unknown
- 1995-07-26 BR BR9508342A patent/BR9508342A/pt not_active Application Discontinuation
- 1995-07-26 ES ES95928473T patent/ES2142490T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-07-26 RU RU97102700/04A patent/RU2155772C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1995-07-26 SK SK117-97A patent/SK11797A3/sk unknown
- 1995-07-26 US US08/776,440 patent/US6013627A/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-26 HU HU9700226A patent/HUT77388A/hu unknown
-
1997
- 1997-01-23 FI FI970279A patent/FI970279A0/fi unknown
- 1997-01-27 NO NO970340A patent/NO970340D0/no unknown
-
1998
- 1998-12-23 HK HK98115157A patent/HK1014011A1/xx unknown
-
2000
- 2000-02-18 GR GR20000400396T patent/GR3032698T3/el unknown
-
2001
- 2001-06-08 CY CY0100011A patent/CY2225B1/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1996003430A1 (en) | 1996-02-08 |
| MX9606494A (es) | 1997-03-29 |
| BR9508342A (pt) | 1997-10-21 |
| CA2192786C (en) | 2009-06-16 |
| EP0775158B1 (en) | 1999-12-08 |
| RU2155772C2 (ru) | 2000-09-10 |
| ES2142490T3 (es) | 2000-04-16 |
| CY2225B1 (en) | 2003-04-18 |
| NO970340L (no) | 1997-01-27 |
| AU3222195A (en) | 1996-02-22 |
| CZ289311B6 (cs) | 2001-12-12 |
| JPH10504540A (ja) | 1998-05-06 |
| DE69513837T2 (de) | 2000-05-18 |
| DK0775158T3 (da) | 2000-05-22 |
| FI970279A (fi) | 1997-01-23 |
| CZ22197A3 (en) | 1997-05-14 |
| ATE187461T1 (de) | 1999-12-15 |
| AU702332B2 (en) | 1999-02-18 |
| HUT77388A (hu) | 1998-04-28 |
| NZ291168A (en) | 1998-06-26 |
| CN1154705A (zh) | 1997-07-16 |
| NO970340D0 (no) | 1997-01-27 |
| KR100378974B1 (ko) | 2003-10-08 |
| JP3425763B2 (ja) | 2003-07-14 |
| PT775158E (pt) | 2000-05-31 |
| PL181990B1 (pl) | 2001-10-31 |
| PL317349A1 (en) | 1997-04-01 |
| EP0775158A1 (en) | 1997-05-28 |
| GR3032698T3 (en) | 2000-06-30 |
| CA2192786A1 (en) | 1996-02-08 |
| CN1116304C (zh) | 2003-07-30 |
| DE69513837D1 (de) | 2000-01-13 |
| US6013627A (en) | 2000-01-11 |
| HK1014011A1 (en) | 1999-09-17 |
| FI970279A0 (fi) | 1997-01-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SK11797A3 (en) | Cyclopeptolides, process for their preparation and their use in therapy | |
| KR101566046B1 (ko) | 환형 화합물을 생산하는 미생물 | |
| US5643869A (en) | Pipecolic acid-containing peptolides, their preparation and pharmaceutical compositions containing them | |
| CA2237157C (en) | Cyclopeptolide inhibitors of adhesion molecules | |
| US5338758A (en) | Bicyclic diterpene PAF antagonist compounds | |
| US6583171B1 (en) | Antineoplastic agents | |
| AU738970B2 (en) | Novel antibiotic, feglymycin, processes for its preparation and its use | |
| KR0159643B1 (ko) | 항암 및 항진균 화합물 및 이를 포함하는 약학적 조성물 | |
| US7112581B2 (en) | Macrocyclic lactams | |
| JPH08301862A (ja) | Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ種の抗生物質シリアノンおよびその化学誘導体並びにその製造法および使用 | |
| WO2004087938A1 (ja) | 新規生理活性物質ｐｆ１２７０ａ、ｂおよびｃ物質 | |
| JPH06263789A (ja) | 新規イソテトラセノン系物質及びその製造法 | |
| JPH0987269A (ja) | アセトフタリジン、細胞周期阻害剤および抗腫瘍剤 |