PL177349B1 - Środek farmaceutyczny do stosowania w obniżaniu poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi - Google Patents

Środek farmaceutyczny do stosowania w obniżaniu poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi

Info

Publication number
PL177349B1
PL177349B1 PL93301579A PL30157993A PL177349B1 PL 177349 B1 PL177349 B1 PL 177349B1 PL 93301579 A PL93301579 A PL 93301579A PL 30157993 A PL30157993 A PL 30157993A PL 177349 B1 PL177349 B1 PL 177349B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
group
compound
formula
substituted
alkanoyloxy
Prior art date
Application number
PL93301579A
Other languages
English (en)
Other versions
PL301579A1 (en
Inventor
Larry J. Black
Henry U. Bryant
George J. Cullinan
Raymond Francis Kauffman
Original Assignee
Lilly Co Eli
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lilly Co Eli filed Critical Lilly Co Eli
Publication of PL301579A1 publication Critical patent/PL301579A1/xx
Publication of PL177349B1 publication Critical patent/PL177349B1/pl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4535—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a heterocyclic ring having sulfur as a ring hetero atom, e.g. pizotifen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/4025—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. cromakalim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Transition And Organic Metals Composition Catalysts For Addition Polymerization (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Bipolar Transistors (AREA)
  • Semiconductor Lasers (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

1.Srodek farmaceutyczny do stosowania w obnizaniu poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi, zawierajacy substancje czynna do obnizania poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi i co najmniej jedna farmaceutycznie dopuszczalna za- róbke, rozcienczalnik lub nosnik, znam ienny tym, ze jako substancje czynna zawiera zwiazek o wzo- rze 1, w którym n jest równe 0, 1 lub 2, R oznacza grupe hydroksylowa grupe metoksylowa grupe alkanoiloksylowa C1-C7, grupe cykloalkanoiloksy- low a C3 -C7, grupe (C 1-C6 alkoksylo)-C1 -C 7 alka- noiloksylowa podstawiona lub niepodstawiona grupe aroiloksylowa lub podstawiona albo niepod- stawiona grupe aryloksykarbonyloksylowa R 1 o- znacza atom wodoru, grupe hydroksylowa atom chlorowca, grupe metoksylowa grupe alkanoiloksy- lowa C1-C7 , grupe cykloalkanoiloksylowa C3 -C7, grupe (C1 -C6 alkoksylo) -C1 -C7-alkanoiloksylowa podstawiona lub niepodstawiona grupe aroiloksy- low a lub podstawiona albo niepodstawiona grupe aryloksykarbonyloksylowa, R2 oznacza pierscien heterocykliczny wybrany z grupy skladajacej sie z pirolidyny, piperydyny lub heksametylenoiminy, lub jego dopuszczalna farmaceutycznie sól lub solwat. Wzór 1 PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest środek farmaceutyczny do stosowania w obniżaniu poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi.
Wszystkie komórki ssaków potrzebują cholesterolu jako składnika strukturalnego ich błon komórkowych oraz do sterolowych produktów końcowych. Jednakże nierozpuszczalność cholesterolu w wodzie, sprawiająca że jest użyteczny w błonach komórkowych, sprawia również, że jest on potencjalnie przyczyną śmierci. Gdy -cholesterol akumuluje się w niewłaściwym miejscu, na przykład w ścianie tętnicy, nie może on być łatwo usunięty, a jego obecność prowadzi do powstania złogów miażdżycowych. Wykazano, że podwyższone stężenia w surowicy cholesterolu połączonego z lipoproteinami niskiej gęstości (LDL) są głównym czynnikiem przyczyniającym się do powstawania i postępu miażdżycy tętnic.
Estrogen, zwłaszcza po podaniu doustnym, obniża poziomy LDL w surowicy i podwyższa poziomy korzystnych lipoprotein wysokiej gęstości (HDL). Długotrwała terapia estrogenem jest jednakże stosowana w szeregu zaburzeń, w tym przy zwiększonym ryzyku raka macicy i ewentualnie raka sutka, co powoduje, że wiele kobiet nie jest poddawanych takiemu leczeniu. Ostatnio proponowane schematy leczenia, mające na celu zmniejszenie ryzyka raka, takie jak podawanie kombinacji progestogenu i estrogenu, powodują u pacjentek niedopuszczalne krwawienia. Ponadto wydaje się, że łączenie progesteronu z estrogenem osłabia obniżające poziom cholesterolu działanie estrogenu. Znaczne działania uboczne związane z terapią estrogenem potwierdza ją-potrzebę opracowania alternatywnych metod leczenia hipercholesterolemii, mających pożądany wpływ na poziom LDL w surowicy, ale nie powodujących działań niepożądanych.
Usiłowania zaspokojenia tego zapotrzebowania poprzez zastosowanie związków powszechnie znanych jako antyestrogeny, oddziaływujących z receptiorem estrogenu i/lub wiążących się z tym, co nazwano antyestrogenowym miejscem wiążącym (AEBS) zakończyły się niewielkim sukcesem, prawdopodobnie z powodu tego, że związki te generalnie wykazują mieszane działanie agonistyczno-antagonistyczne, towarzyszące terapii estrogenowej.
Wynalazek niniejszy umożliwia obniżanie poziomu cholesterolu w surowicy bez działań ubocznych towarzyszących terapii estrogenowej i w związku z tym zapewnia skuteczne i możliwe do zaakceptowania leczenie hipercholesterolemii.
Substancjami czynnymi w środku według wynalazku są pochodne 2-fenylo-3aroilobenzotiofenu o wzorze 1, należące do grupy związków otrzymanych po raz pierwszy przez C. Davida Jones’a i Tulio Suareza jako środki antykoncepcyjne (patrz patent USA nr 4133814, udzielony 9 stycznia 1979). Następnie Jones odkrył, że grupa związków, do której należały związki o wzorze 1, jest użyteczna w terapii antyestrogenowej i antyandrogennej, zwłaszcza w leczeniu raka sutka i prostaty (patrz patent USA nr 4418068, udzielony 29 listopada 1983). Jeden z tych związków, związek o wzorze 1, w którym n jest równe O, R i R1 oznaczają grupy hydroksylowe, a R2 oznacza pierścień piperydyny, przez krótki okres czasu badano klinicznie w leczeniu raka piersi. Związek ten nosi nazwę raloxifene (poprzednio keoxifene).
Istotą wynalazku jest nowy środek farmaceutyczny do stosowania w obniżaniu poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi, zawierający substancję czynną do obniżania poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi i co najmniej jedną farmaceutycznie dopuszczalną zaróbkę, rozcieńczalnik lub nośnik, który jako substancję czynną zawiera związek o wzorze 1, w którym n jest równe 0, 1 lub 2, R oznacza grupę hydroksylową, grupę metoksylową, grupę alkanoiloksylową C1-C7, grupę cykloalkanoiloksylową, C3-C7, grupę (C1-C6 alkoksylo)-CCC7-alkanoiloksylową, podstawioną lub niepodstawioną grupę aroiloksylową, lub podstawioną albo niepodstawioną grupę aryloksykarbonyloksylowę, Rr oznacza atom wodoru, grupę hydroksylową, atom chlorowca, grupę metoksylową, grupę alkanoiloksylową C1-C7, grupę cykloalkanoiloksylową, C3-C7 grupę (C1-C6 alkok.sylo)-C1-C7-alkanoiloksylową, podstawioną lub niepodstawioną grupę aroiloksylową, lub podstawioną albo niepodstawioną grupę aryloksykarbonyloksylową, R2 oznacza pierścień heterocykliczny wybrany z grupy składającej się z pirolidyny, piperydyny lub heksametylenoiminy, lub jego dopuszczalną farmaceutycznie sól lub solwat.
177 349
Środek farmaceutyczny jako związek o wzorze 1 korzystnie zawiera raloxifene lub jego dopuszczalną farmaceutycznie sól lub solwat a zwłaszcza chlorowodorek raloxifene.
Środek farmaceutyczny korzystnie jest dostosowany do podawania człowiekowi dawki od 50 do 200 mg/dzień.
Ogólne określenia chemiczne stosowane w opisie związku o wzorze ogólnym 1 mają swoje zwykłe znaczenia. Na przykład określenie „alkil” samodzielnie lub jako część innego podstawnika oznacza rodnik alkilowy o łańcuchu prostym lub rozgałęzionym, mający określoną liczbę atomów węgla, taki jak metyl, etyl, propyl i izopropyl oraz gdy wskazano wyższe homologi i izomery.
Określenie „alkoksyl” oznacza grupę alkilową, mającą określoną liczbę atomów węgla, połączoną przez atom tlenu, takąjak metoksyl, etoksyl, propoksyl, butoksy, pentyloksyl i heksyloksyl i obejmuje również rozgałęzione struktury łańcuchowe, takie jak na przykład izopropoksyl i izobutoksyl
Określenie „alkanoiloksyl C1-C7” oznacza grupę -O-C(O)-Ra, gdzie Ra oznacza wodór lub alkil Cą-C·,, i obejmuje grupy formyloksylową, acetoksylową. propanoiloksylową, butanoiloksylowją pentanoiloksyłową, heksanoiloksylową i podobne i obejmuje również izomery o łańcuchu rozgałęzionym, takie jak na przykład 2,2-dimetylopropanoiloksyl i 3,3dimetylobutanoiloksyl.
Analogicznie określenie cykloalkanoiloksyl C4-C7 oznacza grupę cykloalkil, gdzie do grup C3-C6 alkilowych należą cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl i cykloheksyl.
Określenie „(C1-C6 alkoksylo)-Ci-C7 alkanoiloksyl oznacza grupę -O-C(O)-Rb-O-(C]-C6 alkil), gdzie Rb oznacza wiązanie, (Ci-C, alkoksykarbonyloksyl) lub C1-C6 alkanodil i obejmuje na przykład metoksykarbonyloksyl, etoksykrabonyloksyl, propoksykarbonyloksyl, butoksykarbonyloksyl, metoksyacetoksyl, metoksypropanoiloksyl, metoksybutanoiloksyl, metoksypenanoiloksyl, metoksyheksanoiloksyl, etoksyacetoksyl, etoksypropanoiloksyl, etoksybutanoiloksyl, etoksypentanoiloksyl, etoksyheksanoiloksyl, propoksyacetoksyl, propoksypropanoiloksyl, propoksybutanoiloksyl, oraz podobne.
Określenie „niepodstawiony lub podstawiony aroiloksyl” oznacza grupę -O-C(O)-aryl, gdzie aryl oznacza grupę fenylową, naftylowją tienylową lub furylową, przy czym każda z tych grup może być niepodstawiona lub monopodstawiona grupą hydroksylową, chlorowcem, grupą C1-C3- alkilową lub grupą Ci-C3alkoksylową.
Określenie „niepodstawiony lub podstawiony aryloksykarbonyloksyl” oznacza grupę O-C(O)-O-aryl, gdzie aryl oznacza grupę fenylową, naftylowją tienylową lub furylowćą przy czym każda z tych grup może być niepodstawiona lub monopodstawiona grupą hydroksylową, chlorowcem, grupą C1-C3 alkilową lub grupą C1-C3 alkoksylową.
Określenie „chlorowiec” oznacza chlor, fluor, brom lub jod.
Przykładowe związki stanowiące substancję czynną środka według wynalazku przedstawione są w tabeli 1.
Tabela 1
Związek nr n R R1 R2 Sól
1 2 3 4 5 6
1 0 wzór 2 wzór 2 piperydyno
2 0 wzór 2 wzór 2 piperydyno HCl
3 0 wzór 3 wzór 3 piperydyno
4 0 wzór 3 wzór 3 piperydyno HCl
5 0 -OC(O)CH2CH2CH3 -OC(O)CH2CH2CH3 piperydyno
6 0 -OC(O)CH2CH2CH3 -OC(O)CH2CH2CH3 piperydyno HCl
7 0 -OC(O)C(CH3)3 -OC(O)C(CH3)3 piperydyno
8 0 -OC(O)C(CH3)3 -OC(O)C(CH3)3 piperydyno HCl
9 0 -OC(O)CH2C(CH3)3 -OC(O)CH2C(CH3)3 piperydyno
ΠΊ 349 cd. tabeli 1
1 2 3 4 5 6
10 0 -OC(O)CH2C(CH3)3 -OC(O)CH2C(CH3)3 piperydyno HCl
11 0 wzór 4 wzór 4 piperydyno
12 0 wzór 4 wzór 4 piperydyno HCl
13 0 wzór 5 wzór 5 piperydyno
14 0 -OC(O)CH2CH2CH2CH2CH3 -OC(O)CH2CH2 CH2CH3 piperydyno
15 0 -OC(O)CH2CH2CH2CH3 -OC(O)CH2CH2CH2CH3 piperydyno HCl
16 0 wzór 6 wzór 6 piperydyno
17 0 wzór 6 wzór 6 piperydyno HCl
18 0 wzór 7 wzór 7 piperydyno
19 0 -OC(O)CH2CH2OCH3 -OC(O)CH2CH2OCH3 piperydyno
20 0 -OC(O)CH2CH2OCH3 -OC(O)CH2CH2OCH3 piperydyno HCl
21 0 -OH -OH piperydyno HCl
22 0 -OH -OH piperydyno
23 0 -OH -OH piperydyno HCl
24 0 -OH -OH pirolidyno
25 0 -OH -OH pirolidyno HCl
26 0 -OH -OH heksametylenoim ino HCl
27 0 -OCH3 -OCH3 piperydyno HCl
28 0 -OC(O)CH3 -OC(O)CH3 piperydyno HCl
29 0 -OCHj H pirolidyno cytrynian
30 0 -OCH3 -OCH3 pirolidyno cytrynian
31 0 wzór 5 wzór 5 piperydyno HCl
32 0 -OH Cl piperydyno HCl
33 0 1 -OH F piperydyno HCl
Środek według wynalazku znajduje zastosowanie do obniżania poziomu cholesterolu w surowicy. Stosowanie środka według wynalazku polega na podawaniu go pacjentowi, któremu potrzeba obniżyć poziom cholesterolu w surowicy. Stosowanie środka polega na podawaniu go w celach profilaktycznych i/lub podawaniu w celach leczniczych, zależnie od potrzeby. Generalnie środek według wynalazku będzie zawierał oprócz substancji czynnej również typowe środki pomocnicze, rozcieńczalniki lub nośniki i będzie miał postać tabletek, płynów lub roztworów do podawania doustnego, lub też będzie podawany drogą domięśniową lub dożylną. Środek może być podawany przezskómie i nadaje się do podawania w postaci preparatów o przedłużonym działaniu i podobnych.
Pochodne benzotiofenu o wzorze 1 obniżają poziom cholesterolu w surowicy u zwierząt i powinny być szczególnie użyteczne od obniżania poziomu cholesterolu u ludzi. Nadmiar cholesterolu w surowicy może być skutkiem wielu stanów i zaburzeń, w tym braku endogennego estrogenu, co występuje u kobiet w następstwie zakończenia menstruacji spowodowanego procesami naturalnymi, chirurgicznymi lub innymi, oraz u pacjentów cierpiących na dysgenezję gonad.
Pochodne benzotiofenu o wzorze 1 stanowią serię związków, wykazujących wysokie powinowactwo do typowych receptorów estrogenu w pierwszorzędowych tkankach płciowych. Jednakże w tkankach tych wywołują one minimalne odpowiedzi estrogenne i w rzeczywistości oddziały wjąjako silni antagoniści naturalnych estrogenów, takich jak estradiol. W przeciwieństwie do różniących się strukturalnie związków antyestrogenowych, pochodne benzotiofenu o wzorze 1 są zdolne do antagonizowania klasycznych odpowiedzi estrogenowych w pierwszorzędwych tkankach płciowych, wywierając jednocześnie odpowiedź estrogenową na poziomy cholesterolu w surowicy. Dychotomia ta wskazuje na selektywne działania agonistyczno/antagonistyczne na specyficzne komórki celowe, które są wysoce pożądane w leczeniu hipercholesterolemii. A zatem środek według wynalazku umożliwia obniżanie poziomu cholesterolu w surowicy poprzez podawanie pacjentowi środka według wynalazku,
177 349 zawierającego związek o wzorze 1 w ilości, która obniża poziom LDL w surowicy, ale nie wpływa w sposób istotny na pierwszorzędowe tkanki płciowe. To połączenie cech pozwala na dłUgotrwałe leczenie chorób chronicznych przy niewielkim ryzyku wystąpienia działań niepożądanych, związanych z typową estrogenową, terapią zastępczą.
Działanie biologiczne benzotiofenów o wzorze 1 jest złożone i może być nie związane z wykrywalną obecnością związku macierzystego we krwi. W następstwie doustnego podania ludziom w klinice korzystnego środka według wynalazku, zawierającego jako substancję czynną raloxifene (w postaci chlorowodorku) w surowicy tych osób nie wykryto związku macierzystego. Ustalono, że po podaniu doustnym związek ulegał intensywnemu sprzęganiu do formy glukuronidowej. Jakkolwiek u tych osób nie badano żadnych biologicznych punktów końcowych, to zaistniała obawa, że związek ten nie jest dostępny biologicznie.
W celu zbadania biodostępności podjęto badania na zwierzętach laboratoryjnych. Badania na zwierzętach wykazały, że najwyższą aktywność zarówno jeśli chodzi o hamowanie wychwytu do macicy trytowaneg estradiolu jak i normalną odpowiedź uterotropową na estradiol wykazuje raloxifene nawet w warunkach, gdy raloxifene ulegał intensywnemu sprzęganiu w osoczu zwierząt. Ponadto koniugat, wyizolowany z moczu ludzi poddanych działaniu raloxifenu, wykazywał znaczną czynność antyestrogenno/antyuterotropową po podaniu dożylnym szczurom oraz hamował interakcję irytowanego estradiolu z receptorami estrogenu w macicy szczura w sposób podobny do związku macierzystego w temperaturze zbliżonej do fizjologicznej. Ponieważ związki te nie wiążą się poniżej 4°C, badania wykazały, że związek sprzężony może być przekształcony w formę macierzystą w miejscu działania, przypuszczalnie przez działanie β-glukuronidazy. Taka konwersja może przyczyniać się do czynności związku. β-Glukuronidaza jest prawie wszechobecna i przypuszczalnie mogłaby być dostępna do przekształcenia sprzężonego związku do formy pozajelitowej, jeśli byłoby to wymagane do jego czynności. Zatem sprzęganie pochodnych benzotiofenu o wzorze 1 nie jest uważane za koniecznie szkodzące jego biodostępności.
Zatem leczenie środkiem według wynalazku polega na podawaniu środka, zawierającego związek o wzorze 1 lub jego dopuszczalną farmaceutycznie sól lub solwat, w takiej ilości aby był skuteczny w obniżaniu poziomu cholesterolu w surowicy. Szczególna korzyść ze stosowania środka według wynalazku polega na tym, że unika się potencjalnie szkodliwych i niedopuszczalnych estrogennych działań ubocznych. Zależnie od potrzeb może on być stosowany zarówno w celach profilaktycznych jak i leczniczych.
Środek według wynalazku może być również podawany razem z estrogenem, zarówno niezależnie jak i w połączeniu. Stosowane tu określenie „estrogen” odnosi się do każdego związku, którego zakres czynności zbliżony jest do czynności cząsteczki występującej w naturze, którą jest jak się powszechnie uważa 17e-estradiol. Do przykładów takich związków należą estriol, estron, etynyloestradiol, Premarin (handlowy preparat sprzężonych estrogenów, wyizolowanych ze źródeł naturalnych - Ayerst) i podobne. Kombinacja ta, dzięki selektywnym agonistyczno/antagonistycznym właściwościom związków o wzorze 1 zapewnia korzyści terapii ^estrogenowej bez działań ubocznych, towarzyszących terapii samym estrogenem.
Środek według wynalazku korzystnie jako substancję czynną zawiera związek o wzorze ogólnym 1, w którym n jest równe 0, a R i R1 niezależnie oznaczają grupę hydroksylową, alkanoiloksylową C1-C7, (C1-C6 alkoksylo)-C-C7 alkanoiloksylową, podstawioną lub niepodstawioną benzoiloksylową, lub podstawioną albo niepodstawioną fenoksykarbonyloksylową. Następne korzystne środki według wynalazku zawierają związek o wzorze ogólnym 1, w którym R i R1 są takie same. Korzystne charakterystyki wykazują również związki, posiadające niektóre grupy R2. Na przykład korzystnie środek według wynalazku zawiera jako substancję czynną związek o wzorze 1, w którym R2 oznacza grupę piperydyno lub pirolidyno. Szczególnie korzystnie środek według wynalazku zawiera jako substancję czynną związek o wzorze ogólnym 1, w którym R2 oznacza grupę piperydyno lub pirolidyno, a R i Ri oznaczają grupę hydroksylową. Najbardziej korzystnie środek według wynalazku zawiera jako substancję czynną raloxifene.
Związki o wzorze 1 i ich dopuszczalne farmaceutycznie sole mogą być otrzymane według typowych procedur, takich jak na przykład procedury opisane szczegółowo w patentach USA nr 4133814 i 4418068.
ffl 349
Związki o wzorze 1 tworzą sole addycyjne z szerokim zakresem kwasów i zasad organicznych i nieorganicznych, w tym sole dopuszczalne fizjologicznie, często stosowane w chemii farmaceutycznej. Środek farmaceutyczny zawierający jako substancję czynną taką sól wchodzi również w zakres wynalazku. Typowe kwasy nieorganiczne, stosowane do otrzymywania takich soli to kwasy chlorowodorowy, bromowodorowy, jodowodorowy, azotowy, siarkowy, fosforowy, nadfosforowy i podobne. Mogą być również stosowane sole otrzymane z kwasów organicznych, takich jak kwasy alifatyczne mono- i dikarboksylowe, fenylopodstawione kwasy alkanowe, kwasy hydroksyalkanowe i hydroksyalkanodiowe, kwasy aromatyczne, alifatyczne i aromatyczne kwasy sulfonowe. Do typowych soli należą octan, fenylooctan, trifluorooctan, akrylan, askorbinian, benzoesan, chlorobenzoesan, dinitrobenzoesan, hydroksybenzoesan, metoksybenzoesan, metylobenzoesan, o-acetoksybenzoesan, naftaleno-2benzoesan, bromek, izomaślan, fenylomaślan, β-hydroksymaślan, butyno-1,4-dioesan, heksyno-1,4-dioesan, kaprynian, kaprylan, chlorek, cynamonian, cytrynian, mrówczan, fumaran, glikolan, heptanian, hipuran, mleczan, jabłczan, maleinian, hydroksymaleinian, malonian, migdalan, mezylan, nikotynian, izonikotynian, azotan, szczawian, ftalan, tereftalan, fosforan, monowodorofosforan, diwodorofosforan, metafosforan, pirofosforan, propiolan, propionian, fenylopropionian, salicylan, sebacynian, bursztynian, suberan, siarczan, dwusiarczan, pirosiarczan, siarczyn, dwusiarczyn, sulfonian, benzenosulfonian, p-bromofenylosulfonian, chlorobenzenosulfonian, etanosulfonian, 2-hydroksyetanosulfonian, metanosulfonian, naftalenowi sulfonian, p-toluenosulfoinian, ksylenosulfonian, winian, i podobne.
Ponadto niektóre ze związków o wzorze ogólnym 1 mogą tworzyć solwaty z wodą lub rozpuszczalnikami organicznymi, takimi jak etanol. Środek farmaceutyczny zawierający taki solwat jako substancję czynną również wchodzi w zakres wynalazku.
Zasadami typowo stosowanymi do otrzymywania soli są wodorotlenek amonu oraz wodorotlenki, węglany i wodorowęglany metali alkalicznych i ziem alkalicznych, jak również aminy alifatyczne i aromatyczne, diaminy alifatyczne i hydroksyloaminy. Szczególnie użyteczne są sole addycyjne z takimi zasadami jak wodorotlenek amonu, węglan potasu, wodorowęglan sodu, wodorotlenek wapnia, metyloamina, dietyloamina, etylenodiamina, cykloheksyloamina i etanoloamina.
Dopuszczalne farmaceutycznie sole mają generalnie ulepszoną rozpuszczalność w porównaniu ze związkiem od którego pochodzą i w związku z tym często lepiej nadają się do wytwarzania preparatów w postaci płynów lub emulsji.
Środek według wynalazku może być wytwarzany sposobami znanymi ze stanu techniki poprzez zmieszanie związku o wzorze ogólnym 1 lub jego o dopuszczalnej farmaceutycznie soli lub solwatu, otrzymanych w znany sposób, z odpowiednimi obojętnymi nośnikami i przetworzenie mieszaniny na preparat farmaceutyczny, odpowiedni do stosowania do obniżania poziomu cholesterolu w osoczu.
Na przykład związki o wzorze ogólnym 1 albo pojedynczo albo w połączeniu z estrogenem, mogą być przetwarzane razem z typowymi substancjami pomocniczymi, rozcieńczalnikami lub nośnikami i kształtowane w tabletki, kapsułki, zawiesiny, proszki i podobne. Przykładami substancji pomocniczych, rozcieńczalników i nośników, odpowiednich do takich preparatów są: wypełniacze, takie jak skrobia, cukry, mannitol oraz pochodne krzemionki, środki wiążące takie jak karboksymetyloceluloza i inne pochodne celulozy, alginiany, żelatyna i poliwinylopirolidon, środki zwilżające takie jak gliceryna, środki rozsadzające takie jak agar-agar, węglan wapnia i wodorowęglan sodu, środki opóźniające rozpuszczanie, takie jak parafina, środki przyspieszające resorpcję, takie jak czwartorzędowe związki amoniowe, środki powierzchniowo-czynne, takie jak alkohol cetylowy, monostearynian gliceryny, nośniki adsorpcyjne, takie jak kaolin i bentonit oraz środki smarujące, takie jak talk, stearynian wapnia i magnezu oraz stałe glikole polietylenowe.
Środek według wynalazku, zawierający związek o wzorze ogólnym 1 pojedynczo lub w połączeniu z estrogenem, może mieć również postać eliksirów lub roztworów do podawania doustnego lub roztworów odpowiednich do podawania pozajelitowego, na przykład drogą domięśniową, podskórną lub dożylną. Ponadto środek, zawierający związek o wzorze 1 pojedynczo lub w połączeniu z estrogenem, może mieć postać formy leku o przedłużonym dzia8
177 349 łaniu lub podobną. Środek według wynalazku może mieć również taką postać, że substancja czynna jest uwalniana tylko lub korzystnie w szczególnej części przewodu pokarmowego, możliwie przez pewien okres czasu. Powłoki, otoczki i matryce ochronne mogą być wykonane na przykład z substancji polimerycznych lub wosków.
Konkretna dawka związku o wzorze 1, wymagana do obniżenia poziomu cholesterolu w surowicy zależeć będzie od ciężkości stanu chorobowego, drogi podawania i związanych czynników. Generalnie dopuszczalne i skuteczne dawki dzienne zawarte będą w zakresie od około 0,1 do około 1000 mg, a bardziej typowo od około 50 do około 200 mg. Dawki takie będą podawane pacjentowi potrzebującemu leczenia od jednego do trzech razy dziennie lub tak często jak jest potrzebne do skutecznego obniżenia poziomu cholesterolu w surowicy. Generalnie dopuszczalne i skuteczne dawki dzienne estrogenu będą wynosić od około 0,01 do około 4,0 mg, a bardziej typowo od około 0,1 do około 2,0 mg. Dawki takie są podawane pacjentowi potrzebującemu leczenia od jednego do trzech razy dziennie lub częściej, jeśli jest taka potrzeba.
Środek według wynalazku jest użyteczny zarówno dla kobiet jak i dla mężczyzn. Brak odpowiedzi estrogennej powinien umożliwić mężczyznom korzystanie z wynalazku bez feminizujących odpowiedzi estrogenu lub agonistów estrogenu, takich jak ginekomastia. Środek jest szczególnie użyteczny dla kobiet, zwłaszcza kobiet z niedoborami estrogenu. Niedobór estrogenu może występować naturalnie, na przykład w okresie pomenopauzalnym, lub w następstwie zabiegów chirurgicznych. Środek według wynalazku może być stosowany przez pacjentów, którzy przyjmują lub przyjmowali kortykosteroidy przez dłuższy okres czasu oraz pacjentów cierpiących na dysgenezję gonad.
Zwykle korzystne jest stosowanie związku o wzorze ogólnym 1 w postaci soli addycyjnej z kwasem, co jest typowe przy podawaniu farmaceutyków posiadających grupę zasadową, taką jak pierścień piperydyny. Korzystne jest również podawanie takiego związku drogą doustną osobom w wieku starszym (na przykład kobietom w wielu pomenopauzalnym).
Procedury badania
W przykładach ilustrujących metodykę wykorzystano model pomonopauzalny, w którym ustalano wpływ różnych schematów leczenia na krążące lipidy.
Do badań wykorzystano szczury płci żeńskiej Sprague Dawley w wieku siedemdziesięciu pięciu dni (waga w zakresie 200 do 225 g), otrzymane z Charles River Laboratories (Portage, MI). Zwierzęta poddawano w Charles River Laboratories obustronnemu wycięciu jajników (OVX) lub procedurze chirurgicznej Sham, a następnie po tygodniu wysyłano. Po przybyciu trzymano je przez tydzień w metalowych klatkach w grupach po 3 lub 4 w klatce z dostępem do pożywienia (zawartość wapnia około 0,5%) i wody ad libitum. Utrzymywano temperaturę pokojową w zakresie 22.2° ± 1.7° przy minimalnej wilgotności względnej 40%. Cykl zmian oświetlenia w pokoju był następujący: światło prze 12 godzin i ciemność przez 12 godzi.
Schemat dawkowania/Pobieranie tkanek
Po tygodniowym okresie aklimatyzacji (zatem w dwa tygodnie po wycięciu jajników) rozpoczęto codzienne podawanie badanych związków. Jeśli nie wskazano inaczej, wszystkie związki podawano doustnie w ilości 1 ml/kg wagi ciała. 17P-Estradiol podawano podskórnie w 20% glikolu polietylenowym jako vehiculum; jeśli nie wskazano inaczej, 17αetynyloestradiol i związek badany podawano doustnie w postaci zawiesiny w 1 % karboksymetylocelulozie lub 20% cyklodekstrynie. Preparaty podawano zwierzętom raz dziennie przez 4 dni. Następnie zwierzęta ważono i znieczulano mieszaniną ketamina:ksylazyna (2:1, v/v) i pobierano próbki krwi poprzez punkcję serca. Następnie zwierzęta uśmiercano przez uduszenie CO2 i usuwano macicę poprzez nacięcie linii środkowej oraz oznaczano wagę mokrą.
Analiza cholesterolu
Próbki krwi pozostawiano do skrzepnięcia w temperaturze pokojowej przez 2 godziny i wytwarzano osocze przez odwirowanie przez 10 minut przy 3000 rpm. Poziom cholesterolu w surowicy oznaczano stosując wysokiej sprawności technikę oznaczania cholesterolu Boehringer Mannheim. W skrócie technika ta polega na tym, że cholesterol utlenia się do cholest-4en-3-onu i nadtlenku wodoru. Następnie nadtlenek wodoru poddaje się reakcji z fenolem i 4177 349 aminofenazonem w obecności peroksydazy, otrzymując barwnik p-chinonoiminowy, który wykrywa się spektrofotometrycznie przy 500 nm. Następnie oblicza się stężenie cholesterolu w stosunku do krzywej wzorcowej. Całe oznaczenie zautomatyzowano, stosując zautomatyzowaną stację roboczą Biomek.
Oznaczanie peroksydazy eozynofilowej w macicy (EPO)
Do czasu przeprowadzenia oznaczenia enzymatycznego macice trzymano w 4°C. Następnie macice homogenizowano w 50 objętościach 50 mM buforu Tris (pH 8,0), zawierającego 0,005% Triton Χ-100. Po dodaniu 0,01% nadtlenku wodoru i 10 mM o-fenylenodiaminy (stężenia końcowe) w buforze Tris monitorowano wzrost absorbancji przy 450 nm przez jedną minutę. Obecność eozynofilów w macicy stanowi wskazówkę czynności estrogennej związku. Oznaczono maksymalną, prędkość w przedziale 15 sekundowym po początkowej, liniowej części krzywej reakcji.
Źródła związków;
173-Estradiol, 17a-etynyloestradiol i tamoxifen otrzymano z Sigma Chemical Co., St. Louis, MO.
Grupy eksperymentalne:
Wszystkie grupy eksperymentalne składały się z pięciu lub sześciu zwierząt.
Wpływ raloxifenu na poziom cholesterolu w surowicy
Wyniki otrzymane w grupach kontrolnych przedstawiono w tabeli 2. Podsumowując, wycięcie jajników u szczurów powodowało wzrost poziomu cholesterolu w surowicy w porównaniu z grupami kontrolnymi, którym podawano tylko vehiculum. Estrogen, podawany w doustnie aktywnej formie etynyloestradiolu (EE2) powodował zmniejszenie poziomu cholesterolu w surowicy w sposób zależny od dawki, ale przy podawaniu w dawce 100 pg/kg/dzień wywierał -również działanie stymulujące na macicę, w wyniku czego ciężary macic zbliżały się do ciężaru macicy szczurów nieleczonych. Wyniki podano jako średnią pomiarów u 5 do 6 szczurów ± błąd standardowy średniej.
Tabela 2
Poziom cholesterolu w surowicy (mg/l) Stosunek ciężaru macicy (mg macicy/g ciężaru ciała) Czynność EPO (m OD/min)
Kontrola z wyciętymi jajnikami (0,3 ml CMC) 81,3 ± 13,4 0,48 ± 0,04 5 ± 2
Kontrola nietknięta (0,3 ml CMC) 72,6 ± 14,6 1,70 ±0,12 216 ± 32
EE> 0,1,mgkg 46,5 ± 5,8 1,45 ±0,^8 366 ± 17
W badaniach tych raloxifene, podawany w postaci soli, również powodował zmniejszenie stężenia cholesterolu w sposób zależny od dawki, jednakże u tych zwierząt obserwowano tylko minimalny wzrost ciężaru macicy w stosunku do grup kontrolnych z wyciętymi jajnikami. Wpływ raloxifenu przedstawiono w tabeli 3. Każdy punkt odzwierciedla odpowiedzi 5 do 6 szczurów i obrazuje typową krzywą dawka-odpowiedź dla raloxifenu w tym modelu. Wyniki podano jako średnią pomiarów u 5 do 6 szczurów ± błąd standardowy średniej.
Tabela 3
Poziom cholesterolu w surowicy (mg/l) Stosunek ciężaru macicy (mg macicy/g ciężaru ciała) Czynność EPO (m OD/min)
Kontrola z wyciętymi jajnikami (0,3 ml CMC) 87,5 ±8,1 0,45 ± 0,02 4,8 ± 1,6
EE2 0,1 mg/kg 8,1 ± 1,6 1,01 ±0,03 295,1 ±32,5
raloxifene 0,01 mg/kg 57,5 ± 6,9 0,54 ± 0,04 6,6 ±1,4
raloxifene 0,10 mg/kg 35,3 ±3,2 0,54 ± 0,04 5,8 ± 0,6
raloxifene 1,00 mg/kg 31,6 ±3,4 0,56 ± 0,04 7,2 ± 2,0
177 349
Raloxifene podawano w postaci soli chlorowodorkowej, pojedynczo lub w połączeniu z 17p-estradiolem. Szczury, którym podawano sam Raloxifene miały ciężary macicy minimalnie wyższe niż szczury kontrolne z wyciętymi jajnikami i znacznie niższe niż szczury, którym podawano 17p-estradiol i które miały ciężar macicy zbliżony do nietkniętych szczurów kontrolnych. Przeciwnie do tego, podawanie raloxifenu powodowało znaczne zmniejszenie poziomu cholesterolu w surowicy u szczurów z wyciętymi jajnikami. 17[3-Estradiol nie powodował znaczącego zmniejszenia wpływu raloxifenu na poziom cholesterolu przy podawaniu raloxifenu łącznie z 17p-estradiolem.
Tabela 4
Eksperyment A Poziom cholesterolu w surowicy (mg/l) Stosunek ciężaru macicy (mg macicy/g ciężaru ciała) Czynność EPO (m OD/min)
Kontrola z wyciętymi jajnikami (0,3 ml CMC) 47,5 ± 8,2 0,62 ± 0,04 8 ± 2
Kontrola nietknięta (0,3 ml CMC) 48,6 ± 7,3 2,25 ±0,14 245 ± 27
17P-estradiol (0,1 mg/kg) 39,6 ± 4,6 1,41 ±0,04 403 ± 55
17p-estradiol 0,1 mg/kg + raloxifene 10 mg/kg 19,3 ±4,3 0,99 ± 0,04 83 ±31
raloxifene 10 mg/kg 25,6 ± 7,1 0,68 ± 0,04 2 ± 1
Zdolność raloxifenu do obniżania poziomu cholesterolu w surowicy porównano ze zdolnością tamoxifenu (SIGMA, St. Louis, MO). Wykazano, że tamoxifen, dobrze znany antyestrogen stosowany obecnie w leczeniu niektórych rodzajów raka, obniża poziom cholesterolu w surowicy (patrz na przykład Love R. i współpr., J. Natl. Can. Inst., 82, 1327-1332 (1990). Szereg dawek raloxifenu i tamoxifenu podawano doustnie szczurom z wyciętymi jajnikami, podobnie jak w poprzednim badaniu. Chociaż, jak stwierdzono na podstawie porównania ciężarów macic, oba związki wykazywały zdolność obniżania poziomu cholesterolu w surowicy przy umiarkowanej jedynie czynności uterotropowej, to porównanie kilku parametrów histologicznych, wykazało, że istnieje znacząca różnica między szczurami leczonymi tymi związkami. Dane przedstawiono poniżej w tabelach 5 i 6.
Tabela 5
Poziom cholesterolu w surowicy (mg/l) Stosunek ciężaru macicy (mg macicy/g ciężaru ciała) Czynność EPO (m OD/min)
Kontrola z wyciętymi jajnikami (0,3 ml CMC) 61,4 ±3,6 0,42 ± 0,05 4,3 ± 0,2
EE, 100 gg/kg 9,1 ±2,0 0,93 ± 0,08 155,6 ±45,4
raloxifene 1 mg/kg 35,8 ±41,1 0,54 ± 0,03 5,0 ± 0,6
tamoxifen 1 mg/kg 36,5 ±2,8 0,76 ± 0,04 130,4 ± 31,4
Tabela 6
Wysokość nabłonka Eozynofile zrębowe Grubość mięśnia macicy Ekspansja zrębowa
Kontrola z wyciętymi jajnikami (0,3 ml CMC) 1,24 1,00 4,42 10,83
Kontrola nietknięta (0,3 ml CMC) 2,71 4,17 8,67 20,67
EE2 100 gg/kg 3,42 5,17 8,92 21,17
raloxifene 1 mg/kg (podskórnie) 1,67 1,17 5,42 14,00
tamoxifen 1 mg/kg (podskórnie) 2,58 2,83 5,50 14,17
Zwiększenie wysokości nabłonka jest oznaką estrogenności środków leczniczych i może być łączone ze zwiększoną częstością występowania raka macicy. Przy podawaniu raloxifenu
177 349 w sposób wyżej opisany nie stwierdzono statystycznie mierzalnego wzrostu wysokości nabłonka w stosunku do kontroli z wyciętymi jajnikami. Wynik ten jest przeciwny do wyników obserwowanych dla tamoxifenu i estrogenu. Przy wszystkich podawanych dawkach tamoxifen zwiększał wysokość nabłonka tak samo jak u szczurów nietkniętych. Podawanie estradiolu powodowało zwiększenie wysokości nabłonka do grubości większej niż u szczurów nietkniętych.
Estrogenność można również ocenić przez zbadanie niepożądanej reakcji, polegającej na infiltracji eozynofilów do macicy. Raloxifen nie powodował wcale wzrostu liczby eozynofili obserwowanych w warstwie zrębowej; u szczurów z wyciętymi jajnikami, natomiast tamoxifen powodował znaczny wzrost reakcji. Estradiolu, tak jak oczekiwano, powodował znaczne zwiększenie infiltracji eozynofili.
Między wpływami raloxifenu i tamoxifenu na grubość zrębu i mięśnia macicy nie wykryto żadnej lub bardzo małą różnicę. Oba środki powodowały wzrost wyników tych pomiarów, który był dużo mniejszy niż wpływ estrogenu.
Łączny wynik estrogenności, będący kompilacją wszystkich czterech parametrów, wykazał że raloxifene jest znacznie mniej estrogenny niż tamoxifen.
Inne związki o wzorze 1 podawano doustnie w badaniach na szczurach takich jak opisane powyżej. W tabeli 7 przedstawiono wpływ kilku związków w dawce 1 mg/kg, mierzony jako procentowe zmniejszenie poziomu cholesterolu w surowicy, procentowy wzrost ciężaru macicy oraz czynność EPO, a w tabeli 8 zilustrowano wpływ zmiany dawek związków nr 32 i 33 na wyniki tych badań.
Tabela 7
Związek nr % zmniejszenia poziomu cholesterolu w surowicy8 % przyrost wagi macicyb Czynność EPO (m OD/min)c
8 64,4 49,2 9,1
10 71,9 45,3 4,3
12 75,6 41,6 4,6
13 69,7 35,9 5,5
16 80,2 43,9 3,1
17 55,2 7,1 8,2
22 75,6 38,1 4,6
23 49,5 87,5 16,3
24 73,0 48,9 9,5
25 81,6 10,6 16,4
26 64,1 53,8 5,6
27 32,9 58,0 -
30 15,6 4,5 1,9
31 68,0 38,6 5,2
a Procentowe zmniejszenie poziomu choleterolu w surowicy równa się (poziom cholesterolu w surowicy traktowanych zwierząt OVX minus poziom cholesterolu w surowicy zwierząt nietraktowanych OVX) podzielone przez (poziom cholesterolu w surowicy zwierząt OVX) pomnożone razy 100%.
b Procentowy przyrost ciężaru macicy równa się (ciężar macicy traktowanych zwierząt OVX minus ciężar macicy zwierząt OVX) podzielony przez (ciężar macicy zwierząt OVX) pomnożone przez 100%.
c Vmax dla aktywności peroksydazy eozynofilów
Tabela 8
Związek nr Dawka (mg/kg) % zmniejszenia poziomu cholesterolu w surowicy8 % przyrost wagi macicyb Czynność EPO macicy (m OD/min)c
1 2 3 4 5
EE2 0,1 89,7 164,1 144,5
32 0,1 32,3 56,6 8
32 1 69,9 46,3 8,8
32 10 65,0 39,0 6
177 349 cd tabeli 8
1 2 3 4 5
33 0,1 33,8 10,9 3,5
33 1 46,0 37,7 11,4
33 10 41,3 66,8 8,9
a Procentowe zmniejszenie poziomu cholesterolu w surowicy równa się (poziom cholesterolu w surowicy traktowanych zwierząt OVX minus poziom cholesterolu w surowicy zwierząt nietraktowanych OVX) podzielone przez (poziom cholesterolu w surowicy zwierząt OVX) pomnożone razy 100%.
b Procentowy przyrost ciężaru macicy równa się (ciężar macicy traktowanych zwierząt OVX minus ciężar macicy zwierząt OVX) podzielony przez (ciężar macicy zwierząt OVX) pomnożone przez 100%.
c Vma dla aktywności peroksydazy eozynofilów.
Poniżej przedstawiono przykłady doustnych postaci środka według wynalazku („Substancja czynna” oznacza związek o wzorze 1).
Przykład I. Kapsułki
Twarde kapsułki żelatynowe przygotowano stosując jedną z poniższych kompozycji A-E. Kompozycja A
Składnik Ilość (mg/kapsułkę)
Substancja czynna 0,1-1000
Skrobia, NF 0-650
Skrobia, sypki proszek 0-650
Olej silikonowy, 350 mm2/s 0-15
Składniki wymieszano, przesiano przez sito nr 45 US mesh i napełniano mieszanką twarde kapsułki żelatynowe. Kompozycja B
Składnik Ilość (mg/kapsułkę)
Chlorowodorek raloxifenu 1
Skrobia, NF 112
Skrobia, sypki proszek 225,3
Olej silikonowy, 350 mm2/s 1,7
Kompozycja C
Składnik Ilość (mg/kapsułkę)
Chlorowodorek raloxifenu 5
Skrobia, NF 108
Skrobia, sypki proszek 225,3
Olej silikonowy, 350 mm2/s 1,7
Kompozycja D
Składnik Ilość (mg/kapsułkę)
Chlorowodorek raloxifenu 10
Skrobia, NF 103
Skrobia, sypki proszek 225,3
Olej silikonowy, 350 mm2/s 1,7
Kompozycja E
Składnik Ilość (mg/kapsułkę)
Chlorowodorek raloxifenu 50
Skrobia, NF 150
Skrobia, sypki proszek 397
Olej silikonowy, 350 mm2/s 3,0
177 349
Przykład Π. Tabletki
Tabletki przygotowano stosując kompozycje A lub B. Kompozycja A
Składnik Ilość (mg/kapsułkę)
Substancja czynna 0,1-1000
Celuloza mikrokrystaliczna 0-650
Krzemionka koloidalna 0-650
Kwas stearynowy 0-15
Składniki zmieszano i sprasowano w tabletki.
Alternatywnie tabletki zawierające po 0,1-1000 mg substancji czynnej otrzymano w sposób następujący: Kompozycja B
Składnik Ilość (mg/kapsułkę)
Chlorowodorek raloxifenu 0,1-1000
Skrobia 45
Celuloza mikrokrystaliczna 35
Poliwinylopirolidon (10% roztwór w wodzie) 4
Sól sodowa karboksymetylocelulozy 4,5
Stearynian magnezu 0,5
Talk 1
Substancję czynną, skrobię i celulozę przesiano przez sito nr 45 US mesh i dokładnie wymieszano. Z otrzymanym proszkiem wymieszano roztwór Poliwinylopirolidonu i następnie przepuszczono przez sito nr 14 US mesh. Tak wytworzone granulki wysuszono w 50-60°C i przepuszczono przez sito nr 18 US mesh. Sól sodowa karboksymetylocelulozy, stearynian magnezu i talk przepuszczono przez sito nr 60 US mesh, po czym dodano do granulek i po wymieszaniu prasowano w tabletkarce, otrzymując tabletki.
Przykład III. Zawiesiny
Zawiesiny zawierające 0,1-1000 mg substancji czynnej na dawkę 5 ml otrzymano z następujących składników.
Składnik Ilość (na dawkę 5 ml)
Substancja czynna 0,1-1000 mg
Sól sodowa karboksymetylocelulozy 50 mg
Syrop 1,25 mg
Roztwór kwasu benzoesowego 0,10 ml
Zapach ile potrzeba
Barwnik ile potrzeba
Woda oczyszczana do 5 ml
Substancję czynną przesiano przez sito nr 45 US mesh i zmieszano z solą sodową karboksymetylocelulozy i syropem, otrzymując pastę. Roztwór kwasu benzoesowego, dodatek smakowy i barwnik rozcieńczono częścią wody i dodano mieszając. Następnie dodano wodę w ilości potrzebnej do otrzymania żądanej objętości.
177 349
OC(O)<>F -OC(O)Y]
Wzór 2 Wzór 3
Wzór A Wzór 5 oc
Wzór 6
Wzór 7
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz
Cena 4,00 zł.

Claims (12)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1 .Środek farmaceutyczny do stosowania w obniżaniu poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi, zawierający substancję czynną do obniżania poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi i co najmniej jedną farmaceutycznie dopuszczalną zaróbkę, rozcieńczalnik lub nośnik, znamienny tym, że jako substancję czynną zawiera związek o wzorze 1, w którym n jest równe 0, 1lub 2, R oznacza grupę hydroksylową, grupę metoksylową, grupę alkanoiloksylową C1-C7, grupę cykloalkanoiloksylową, C3-C7, grupę (C1-C6 alkoksylo)-Ci-C7 alkanoiloksylową, podstawioną lub niepodstawioną grupę aroiloksylową, lub podstawioną albo niepodstawioną grupę aryloksykarbonyloksylową, Rr oznacza atom wodoru, grupę hydroksylową, atom chlorowca, grupę metoksylową, grupę alkanoiloksylową C1-C7, grupę cykloalkanoiloksylową C3-C7, grupę (C1-C6 alkoksylo) -Ci-C7-alkanoiloksylową, podstawioną lub niepodstawioną grupę aroiloksylową, lub podstawioną albo niepodstawioną. grupę aryloksykarbonyloksylową, R2 oznacza pierścień heterocykliczny wybrany z grupy składającej się z pirolidyny, piperydyny lub heksametylenoiminy, lub jego dopuszczalną farmaceutycznie sól lub solwat.
  2. 2. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako związek o wzorze 1 zawiera raloxifene lub jego dopuszczalną farmaceutycznie sól.
  3. 3. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jako związek o wzorze 1 zawiera chlorowodorek raloxifene.
  4. 4. Środek według zastrz. 1, znamienny tym, że jest dostosowany do podawania człowiekowi dawki od 50 do 200 mg/dzień.
  5. 5. Środek według zastrz. 4, znamienny tym, że jako związek o wzorze 1 zawiera raloxifene lub jego dopuszczalną farmaceutycznie sól.
  6. 6. Środek według zastrz. 4, znamienny tym, że jako związek o wzorze 1 zawiera chlorowodorek raloxifene.
  7. 7. Środek farmaceutyczny do obniżania poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi, zawierający substancję czynną do obniżania poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi i co najmniej jedną farmaceutycznie dopuszczalną zaróbkę, rozcieńczalnik lub nośnik, znamienny tym, że jako substancję czynną zawiera związek o wzorze 1, w którym n jest równe 0 lub 1, R oznacza grupę hydroksylową grupę metoksylową, grupę alkanoiloksylową C1-C7, grupę cykloalkanoiloksylową C3-C7, grupę (C1-C6 alkoksylo) -C1-C7 alkanoiloksylową, podstawioną lub niepodstawioną grupę aroiloksylową, lub podstawioną albo niepodstawioną grupę aryloksykarbonyloksylową, R1 oznacza atom wodoru, grupę hydroksylową atom chloru, atom bromu, grupę metoksylową, grupę alkanoiloksylową C1-C7, grupę cykloalkanoiloksylową C3-C7, grupę (C1-C6 alkoksylo)-C1-C7 alkanoiloksylową, podstawioną lub niepodstawioną grupę aryloksykarbonyloksylową, R2 oznacza pierścień heterocykliczny wybrany z grup, składającej się z pirolidyny, piperydyny lub heksametylenoiminy, lub jego dopuszczalną, farmaceutycznie sól lub solwat.
  8. 8. Środek według zastrz. 7, znamienny tym, że jako związek o wzorze 1 zawiera raloxifene lub jego dopuszczalną farmaceutycznie sól.
  9. 9. Środek według zastrz. 7, znamienny tym, że jako związek o wzorze 1 zawiera chlorowodorek raloxifene.
  10. 10. Środek według zastrz. 9, znamienny tym, że jest dostosowany do podawania człowiekowi dawki od 50 do 200 mg/dzień.
  11. 11. Środek według zastrz. 9, znamienny tym, że jako związek o wzorze 1 zawiera raloxifene lub jego farmaceutycznie dopuszczalną sól.
  12. 12. Środek według zastrz. 9, znamienny tym, że jako związek o wzorze 1 zawiera chlorowodorek raloxifene.
    * * * m 349
PL93301579A 1992-12-22 1993-12-20 Środek farmaceutyczny do stosowania w obniżaniu poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi PL177349B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US99522292A 1992-12-22 1992-12-22

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL301579A1 PL301579A1 (en) 1994-06-27
PL177349B1 true PL177349B1 (pl) 1999-10-29

Family

ID=25541537

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL93301579A PL177349B1 (pl) 1992-12-22 1993-12-20 Środek farmaceutyczny do stosowania w obniżaniu poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi

Country Status (28)

Country Link
US (1) US5464845A (pl)
EP (2) EP0605193B1 (pl)
JP (1) JP3197129B2 (pl)
KR (1) KR100278946B1 (pl)
CN (1) CN1043608C (pl)
AT (1) ATE233559T1 (pl)
AU (1) AU669235B2 (pl)
BG (1) BG61524B1 (pl)
BR (1) BR9305182A (pl)
CA (1) CA2112017C (pl)
CZ (1) CZ283863B6 (pl)
DE (1) DE69332735T2 (pl)
DK (1) DK0605193T3 (pl)
ES (1) ES2193142T3 (pl)
HU (1) HU223342B1 (pl)
IL (1) IL108042A (pl)
MY (1) MY109345A (pl)
NO (1) NO304924B1 (pl)
NZ (1) NZ250486A (pl)
PH (1) PH30430A (pl)
PL (1) PL177349B1 (pl)
RO (1) RO113806B1 (pl)
RU (1) RU2123335C1 (pl)
SG (1) SG52696A1 (pl)
SK (1) SK279271B6 (pl)
TW (1) TW383306B (pl)
YU (1) YU48918B (pl)
ZA (1) ZA939427B (pl)

Families Citing this family (54)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
USRE39049E1 (en) 1992-07-28 2006-03-28 Eli Lilly And Company Methods for inhibiting bone loss
USRE38968E1 (en) 1992-07-28 2006-02-07 Eli Lilly And Company Methods for inhibiting bone loss using 6-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-benzo[b]thien-3-yl-4-[2-(piperidin-1-yl) ethoxyphenylimethanone hydrochloride
TW366342B (en) * 1992-07-28 1999-08-11 Lilly Co Eli The use of 2-phenyl-3-aroylbenzothiophenes in inhibiting bone loss
US5482949A (en) * 1993-03-19 1996-01-09 Eli Lilly And Company Sulfonate derivatives of 3-aroylbenzo[b]thiophenes
US5482950A (en) * 1993-10-15 1996-01-09 Eli Lilly And Company Methods for lowering serum cholesterol
US6489355B2 (en) * 1993-12-01 2002-12-03 Eli Lilly And Company Methods of inhibiting the effects of amyloidogenic proteins
NZ270077A (en) * 1993-12-14 1996-04-26 Lilly Co Eli Aqueous complexes of benzothiophenes and cyclodextrins
US6417198B1 (en) 1993-12-21 2002-07-09 Eli Lilly And Company Methods of inhibiting CNS problems in post-menopausal women
US5441966A (en) * 1993-12-21 1995-08-15 Eli Lilly And Company Methods of inhibiting Turner's syndrome
AU698389B2 (en) * 1993-12-21 1998-10-29 Eli Lilly And Company Methods for inhibiting LDL oxidation and atheroclerosis
US5478847A (en) * 1994-03-02 1995-12-26 Eli Lilly And Company Methods of use for inhibiting bone loss and lowering serum cholesterol
US5629425A (en) * 1994-09-19 1997-05-13 Eli Lilly And Company Haloalkyl hemisolvates of 6-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-3-[4-piperidinoethoxy)-benzoyl]benzo[b]thiophene
CO4410190A1 (es) * 1994-09-19 1997-01-09 Lilly Co Eli 3-[4-(2-AMINOETOXI)-BENZOIL]-2-ARIL-6-HIDROXIBENZO [b] TIOFENO CRISTALINO
US6562862B1 (en) * 1994-10-20 2003-05-13 Eli Lilly And Company Methods of inhibiting physiological conditions associated with an excess of neuropeptide Y
EP0895781A3 (en) * 1994-10-20 1999-07-07 Eli Lilly And Company Use of benzofurans, benzothiophenes or indoles for the manufacture of a medicament for the treatment of conditions associated with an excess of tachykinins
US5552412A (en) 1995-01-09 1996-09-03 Pfizer Inc 5-substitued-6-cyclic-5,6,7,8-tetrahydronaphthalen2-ol compounds which are useful for treating osteoporosis
US5484808A (en) * 1995-02-09 1996-01-16 Eli Lilly And Company Methods of inhibiting cell-cell adhesion
CA2215902A1 (en) * 1995-04-21 1996-10-24 Charles David Jones Benzothiophenes with novel basic side chains
CA2223595C (en) * 1995-06-07 2008-08-05 Neorx Corporation Prevention and treatment of cardiovascular pathologies with tamoxifen analogues
US5731328A (en) * 1995-10-10 1998-03-24 Eli Lilly And Company Methods of inhibiting plasminogen activator inhibitor 1
US5726168A (en) * 1995-10-12 1998-03-10 Eli Lilly And Company Lipophilic benzothiophenes
HN1996000101A (es) 1996-02-28 1997-06-26 Inc Pfizer Terapia combinada para la osteoporosis
IL120266A (en) 1996-02-28 2005-05-17 Pfizer Use of estrogen antagonists and estrogen agonists in the preparation of medicaments for inhibiting pathological conditions
TW442286B (en) * 1996-02-28 2001-06-23 Pfizer New therapeutic uses of estrogen agonists
EP0801066A1 (en) * 1996-03-12 1997-10-15 Eli Lilly And Company Heterocyclic substituted benzothiophenes and pharmaceutical compositions
US6008377A (en) * 1996-03-19 1999-12-28 Eli Lilly And Company Synthesis of 3-[4-(2-aminoethoxy)-benzoyl]-2-aryl-6-hydroxy-benzo[B]thiophenes
US6458811B1 (en) 1996-03-26 2002-10-01 Eli Lilly And Company Benzothiophenes formulations containing same and methods
US5811437A (en) * 1996-05-21 1998-09-22 Eli Lilly And Company Methods of increasing nitric oxide synthesis
US5747509A (en) * 1996-06-03 1998-05-05 Schering Aktiengesellschaft Method for lowering plasma levels of lipoprotein(a)
CA2206752A1 (en) * 1996-07-02 1998-01-02 George Joseph Cullinan Benzothiophene compounds, intermediates, processes, and methods of use
US5980938A (en) * 1996-07-15 1999-11-09 Eli Lilly And Company Effect of compounds that suppress induction of plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1)
CA2214072C (en) * 1996-08-29 2006-11-14 Eli Lilly And Company Benzo [b] thiophene compounds, intermediates, processes, compositions, and methods
US5773432A (en) * 1996-10-30 1998-06-30 Schering Aktiengesellschaft Method for lowering plasma levels of lipoprotein(a)
UA59384C2 (uk) 1996-12-20 2003-09-15 Пфайзер, Інк. Похідні сульфонамідів та амідів як агоністи простагландину, фармацевтична композиція та способи лікування на їх основі
CA2236254A1 (en) * 1997-04-30 1998-10-30 David Warren Hoard Process for preparing benzo¬b|thiophenes
HUP0003187A3 (en) * 1997-04-30 2002-04-29 Lilly Co Eli Substituted benzothiophenes and process for preparing them
JP2001523253A (ja) * 1997-04-30 2001-11-20 イーライ・リリー・アンド・カンパニー ベンゾ［ｂ］チオフェン類の製造のための中間体および方法
CA2231013A1 (en) * 1997-04-30 1998-10-30 Eli Lilly And Company Process for preparing benzoic acid derivative intermediates and benzothiophene pharmaceuticals
CA2287920A1 (en) * 1997-04-30 1998-11-05 Eli Lilly And Company Intermediates and a process for preparing benzo¬b|thiophenes
KR20010020379A (ko) * 1997-04-30 2001-03-15 피터 지. 스트링거 치환된 벤조[ｂ]티오펜을 제조하기 위한 레지오선택적 알킬화 방법
US6124314A (en) * 1997-10-10 2000-09-26 Pfizer Inc. Osteoporosis compounds
US6096781A (en) * 1997-11-14 2000-08-01 Eli Lilly And Company 2-arylbenzo[B]thiophenes useful for the treatment of estrogen deprivation syndrome
US6465445B1 (en) 1998-06-11 2002-10-15 Endorecherche, Inc. Medical uses of a selective estrogen receptor modulator in combination with sex steroid precursors
US7005428B1 (en) 1998-06-11 2006-02-28 Endorecherche, Inc. Medical uses of a selective estrogen receptor modulator in combination with sex steroid precursors
US6353003B1 (en) 1998-06-17 2002-03-05 Eli Lilly And Company Method for reducing levels of homocysteine and C-reactive protein
US6258826B1 (en) 1998-10-13 2001-07-10 Eli Lilly And Company Pharmaceutical formulations and applications thereof for the treatment of estrogen deprivation syndrome
UA72293C2 (en) 1999-12-22 2005-02-15 Pfizer Prod Inc Ep4 receptor selective agonists (variants) for treating conditions presenting with low bone mass and pharmaceutical composition
ES2274854T3 (es) * 2000-05-08 2007-06-01 Pfizer Products Inc. Resolucion enzimatica de moduladores selectivos del receptor de estrogeno.
US20030216358A1 (en) * 2001-07-05 2003-11-20 Muchmore Douglas Boyer Method for enhancing bone mineral density gain
US20060106010A1 (en) * 2003-05-27 2006-05-18 Black Larry J Methods for inhibiting bone loss
EP1696893A1 (en) * 2003-12-17 2006-09-06 Pfizer Products Incorporated Continuous combination therapy with selective prostaglandin ep4, receptor agonists and an estrogen for the treatment of conditions that present with low bone mass.
EP2173648A4 (en) 2007-07-27 2012-11-21 Container Stuffers Llc FREIGHT LOADER
CN101669557B (zh) * 2009-08-20 2012-07-25 杭州六易科技有限公司 一种清热解毒凉茶的制作方法
US20170298081A1 (en) * 2014-08-08 2017-10-19 Kasuma Partners Inc. Condensed heterocyclic compound

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4133814A (en) * 1975-10-28 1979-01-09 Eli Lilly And Company 2-Phenyl-3-aroylbenzothiophenes useful as antifertility agents
US4418068A (en) * 1981-04-03 1983-11-29 Eli Lilly And Company Antiestrogenic and antiandrugenic benzothiophenes
US4729999A (en) * 1984-10-12 1988-03-08 Bcm Technologies Antiestrogen therapy for symptoms of estrogen deficiency
TW366342B (en) * 1992-07-28 1999-08-11 Lilly Co Eli The use of 2-phenyl-3-aroylbenzothiophenes in inhibiting bone loss
US5441964A (en) * 1993-10-15 1995-08-15 Eli Lilly And Company Methods for inhibiting bone loss using substituted benzothiophene

Also Published As

Publication number Publication date
EP0605193A1 (en) 1994-07-06
JP3197129B2 (ja) 2001-08-13
BG98317A (en) 1995-02-28
CN1094042A (zh) 1994-10-26
US5464845A (en) 1995-11-07
KR940013501A (ko) 1994-07-15
EP0605193B1 (en) 2003-03-05
CA2112017C (en) 2005-06-14
RO113806B1 (ro) 1998-11-30
PL301579A1 (en) 1994-06-27
HUT69686A (en) 1995-09-28
ZA939427B (en) 1995-06-15
PH30430A (en) 1997-05-09
DE69332735D1 (de) 2003-04-10
BR9305182A (pt) 1994-08-16
NO934740D0 (no) 1993-12-21
NO934740L (no) 1994-06-23
MY109345A (en) 1997-01-31
ATE233559T1 (de) 2003-03-15
EP1238667A3 (en) 2003-12-10
TW383306B (en) 2000-03-01
CN1043608C (zh) 1999-06-16
JPH06234632A (ja) 1994-08-23
AU669235B2 (en) 1996-05-30
AU5257893A (en) 1994-07-07
SG52696A1 (en) 1998-09-28
DE69332735T2 (de) 2003-10-23
HU9303676D0 (en) 1994-04-28
SK142193A3 (en) 1995-01-12
KR100278946B1 (ko) 2001-01-15
DK0605193T3 (da) 2003-03-31
CZ279093A3 (en) 1994-07-13
HU223342B1 (hu) 2004-06-28
CA2112017A1 (en) 1994-06-23
BG61524B1 (bg) 1997-11-28
SK279271B6 (sk) 1998-08-05
NO304924B1 (no) 1999-03-08
NZ250486A (en) 1997-06-24
YU48918B (sh) 2002-11-15
CZ283863B6 (cs) 1998-06-17
IL108042A0 (en) 1994-04-12
ES2193142T3 (es) 2003-11-01
YU79893A (sh) 1997-05-28
IL108042A (en) 1998-01-04
EP1238667A2 (en) 2002-09-11
RU2123335C1 (ru) 1998-12-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL177349B1 (pl) Środek farmaceutyczny do stosowania w obniżaniu poziomu cholesterolu w surowicy krwi u ludzi
JP2749247B2 (ja) ベンゾチオフェン類を含有する医薬製剤
US5478847A (en) Methods of use for inhibiting bone loss and lowering serum cholesterol
AU712800B2 (en) Method of increasing testosterone
JPH07258080A (ja) 血清中コレステロールの低下及び平滑筋細胞の増殖、再狭窄、エンドメトリオーシス、又は子宮のフィブロイド病の阻止に適した医薬組成物
US5550164A (en) Method for inhibiting uterine fibroid disease with 1,1,2-triphenylbut-1-ene derivatives
PL181025B1 (pl) Środek farmaceutyczny do obniżania stężenia glukozy we krwi ludzkiej
PT652005E (pt) Metodo para inibicao da endometriose
JPH07215858A (ja) 機能障害性子宮出血を抑制する方法
JPH07304662A (ja) １，１，２−トリフェニルブタ−１−エン誘導体を用いる血清コレステロールの低下法
CN1199337A (zh) 抑制血纤维蛋白溶酶原激活剂抑制剂1的方法
JPH07215866A (ja) 男性不妊症を抑制する方法

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20061220