PT652005E - Metodo para inibicao da endometriose - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO "MÉTODOS PARA INIBIÇÃO DA ENDOMETRIOSE" A endometriose é um estado de dismenorreia grave, que é acompanhado por dor aguda, sangramento para dentro das massas endometriais ou cavidade peritoneal e conduz frequentemente a infertilidade. A causa dos sintomas desta patologia parece ser crescimentos endometriais ectópicos que respondem inadequadamente ao controlo hormonal normal e estão localizadas em tecidos inadequados. Devido aos locais inadequados para o crescimento do endométrio, os tecidos parecem iniciar respostas inflamatórias locais causando infiltração de macrofagos e uma cascata de acontecimentos conduzindo à iniciação da resposta dolorosa. A etiologia exacta desta doença não é bem conhecida e o seu tratamento por terapia hormonal é mal definido, e marcado por numerosos efeitos secundários indesejados e talvez perigosos.

Um dos tratamentos para esta doença consiste na utilização de uma dose baixa de estrogénios para suprimir o crescimento do endométrio através de um efeito de retrocontrolo negativo na libertação de gonadotropina a nível central e subsequente produção de estrogénios pelos ovários; no entanto, é por vezes necessário utilizar continuamente estrogénios para controlar os sintomas. A utilização de estrogénios pode conduzir frequentemente a efeitos secundários indesejados e até a risco de cancro do endométrio.

Outro tratamento consiste na administração contínua de progestinas que induzem amenorreia e ao suprimirem a produção de estrogénios podem causar regressão no crescimento do endométrio. A utilização da terapêutica -2-

ÍA crónica com progestina é frequentemente acompanhada por efeitos secundários desagradáveis no SNC das progestinas e ffequentemente leva a infertilidade devido à supressão da função dos ovários.

Um terceiro tratamento consiste na administração de androgénios fracos, que são eficientes no controlo da endometriose; no entanto, induzem graves efeitos masculinizantes. Muitos destes tratamentos estão também relacionados com o ligeiro grau de perda óssea da terapêutica contínua.

Deste modo, são necessários novos métodos de tratamento de endometriose.

Esta invenção proporciona a utilização de um composto de fórmula I

em que R1 e R3 são independentemente hidrogénio, -CH, f í - C—(C,-C6 alquilo) ,-C —Ar em que Ar é fenilo substituído opcionalmente; 2 ' R é seleccionado do grupo que consiste em pirrolidino e -3-piperidino; ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos, para a preparação de um medicamento para inibir a endometriose. A presente invenção relaciona-se com a descoberta de que um grupo seleccionado de 2-fenil-3-aroílbenzotiofenos (benzotiofenos), aqueles composto de fórmula I, são úteis para inibição da endometriose. Os medicamentos proporcionados por esta invenção são administrados ao ser humano necessitado de inibição de endometriose, compreendendo uma dose de um composto de fórmula I ou um seu sal farmaceuticamente aceitável ou solvato, que é eficaz para inibir a endometriose. O termo inibir é definido como incluindo o seu significado genericamente aceite que inclui tratar profilacticamente um ser humano que fica sujeito a endometriose, e manter controlada e/ou tratar a endometriose existente. Como tal, a presente utilização inclui tratamento médico terapêutico e/ou profiláctico, consoante apropriado.

De um modo geral, o composto é formulado com excipientes correntes, diluentes ou veículos e submetido a compressão para formar comprimidos, ou formulado como elixires ou soluções para administração oral conveniente, ou administrado por via intramuscular ou intravenosa. Os compostos podem ser administrados por via transdérmica, e podem ser formulados em formas de dosagem de libertação controlada e outras semelhantes.

Os compostos utilizados de acordo com a presente invenção podem ser produzidos de acordo com procedimentos estabelecidos, como os pormenorizados nas patentes U. S. nos 4 133 814, 4 418 068, e 4 380 635. De um modo geral, o processo inicia-se com um benzo[b]tiofeno com um grupo 6-hidroxilo e um grupo 2-(4-hidroxi)fenilo. O composto de partida é protegido, alquilado, e desprotegido para formar os compostos de fórmula I. Os exemplos da preparação destes compostos são fornecidos nas patentes U.S. acima -4-mencionadas. Fenilo substituído inclui fenilo mono ou disubstituídos com Cj-Cé alquilo, C1-C4 alcoxi, hidroxilo, nitro, cloro, fluor ou tri(cloro ou fluoro)metilo.

Os compostos utilizados de acordo com a presente invenção formam sais de adição de ácido e de base farmaceuticamente aceitáveis com uma grande variedade de ácidos orgânicos e inorgânicos e bases e incluem os sais fisiologicamente aceitáveis que são frequentemente utilizados em química farmacêutica. Estes sais também são parte desta invenção. Os ácidos inorgânicos tipicamente utilizados para formar estes sais incluem ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido iodídrico, ácido nítrico, ácido sulfurico, ácido fosfórico e outros semelhantes. Também podem ser utilizados sais derivados de ácidos orgânicos, tais como mono ácidos alifáticos ou ácidos dicarboxílicos, ácidos alcanóicos fenil-substituídos, ácidos hidroxialcanóicos e ácidos hidroxialcano-dióicos, ácidos aromáticos, ácidos sulfónicos alifáticos e aromáticos. Esses sais farmaceuticamente aceitáveis incluem assim acetato, fenilacetato, trifluoro-acetato, acrilato, ascorbato, benzoato, clorobenzoato, dinitrobenzoato, hidroxi-benzoato, metoxibenzoato, metilbenzoato, o-acetoxibenzoato, naftaleno-2-ben-zoato, brometo, isobutirato, fenilbutirato, β-hidroxibutirato, butino-l,4-dioato, hexino-l,4-dioato, caprato, caprilato, cloreto, cinamato, citrato, formato, fuma-rato, glicolato, heptanoato, hipurato, lactato, malato, maleato, hidroximaleato, malonato, mandelato, mesilato, nicotinato, isonicotinato, nitrato, oxalato, ftalato, tetrafitalato, fosfato, monohidrogenofosfato, dihidrogenofosfato, metafosfato, pirofosfato, propiolato, propionato, fenilpropionato, salicilato, sebacato, succinato, suberato, sulfato, bissulfato, pirossulfato, sulfito, bissulfito, sulfonato, benzeno-sulfonato, p-bromofenilsulfonato, clorobenzenossulfonato, etanossulfo-nato, 2-hidroxietanossulfonato, metanossulfonato, naftaleno-1-sulfonato, nafita-leno-2-sulfonato, p-toluenossulfonato, xilenossulfonato, tartarato, e outros semelhantes. Um sal preferido é o sal cloridrato. -5- Ιμι ^ U^-η

Os sais de adição de ácidos farmaceuticamente aceitáveis são tipicamente formados por reacção de um composto de fórmula I com uma quantidade equimolar ou excesso de ácido. Os reagentes são de um modo geral combinados num solvente comum tal como éter dietílico ou benzeno. O sal precipita normalmente na solução dentro de cerca de uma hora até 10 dias e pode ser isolado por filtração ou o solvente pode ser removido por meios convencionais.

As bases vulgarmente utilizadas para a formação de sais incluem hidróxido de amónio, hidróxidos carbonatos e bicarbonatos de metais alcalinos e alcalino-terrosos, assim como aminas alifáticas e aromáticas, secundárias e terciárias, diaminas alifáticas e hidroxialquilaminas. As bases especialmente úteis na preparação de sais de adição incluem hidróxido de amónio, carbonato de potássio, bicarbonato de potássio, hidróxido de cálcio, metilamina, dietilamina, etilenodiamina, ciclohexilamina e etanolamina.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis têm geralmente características de solubilidade acrescidas em comparação com o composto do qual derivam, e assim são frequentemente mais adequados para formulações como líquidos ou emulsões.

As formulações farmacêuticas podem ser preparadas por procedimentos conhecidos na arte. Por exemplo, os compostos podem ser formulados com excipientes, diluentes, ou veículos correntes e formar comprimidos, cápsulas, suspensões, pós, e outros semelhantes. Exemplos de excipientes, diluentes, e veículos adequados para estas formulações incluem os seguintes: excipientes e diluentes tais como amido, açúcares, manitol, e derivados -6-

de silício; agentes ligantes tais como carboximetil celulose e outros derivados de celulose, alginatos, gelatina, e polivinilpirrolidona; agentes molhantes tais como glicerol; agentes de desintegração tais como carbonato de cálcio, e bicarbonato de cálcio; agentes para retardar a dissolução tais como parafina; aceleradores de reabsorção tais como compostos de amónio quaternário, agentes tensoactivos tais como álcool cetílico, monoestearato de glicerol; veículos de absorção tais como caulino e bentonite; e lubrificantes tais como talco, estearato de cálcio e de magnésio, e polietil glicóis sólidos.

Os compostos também podem ser formulados como elixires ou soluções para administração oral conveniente ou como soluções adequadas para administração parentérica, por exemplo por via intramuscular, subcutânea ou intravenosa. Adicionalmente, os compostos são bem adequados para formulação em formas de dosagem de libertação controlada e outras semelhantes. As formulações podem ser constituídas de modo a libertarem o princípio activo apenas e preferencialmente numa parte particular do tracto intestinal, possivelmente ao longo de um período de tempo. Os revestimentos, envelopes, e matrizes protectoras podem ser feitas, por exemplo, a partir de substâncias poliméricas ou de ceras. A dosagem particular de um composto de fórmula I necessária para inibir a endometriose, de acordo com esta invenção dependerá da gravidade da doença, da via de administração, e de factores relacionados que são decididos pelo médico assistente. De um modo geral, doses diárias aceites e eficazes serão desde cerca de 0,1 até cerca de 1000 mg/dia, e mais tipicamente desde cerca de 50 até cerca de 200 mg/dia. Essas dosagens podem ser administradas a um indivíduo necessitado de tratamento desde uma até cerca de três vezes por dia, ou -7-

Uuj com mais frequência conforme necessário para inibir eficazmente a endometriose.

Normalmente é preferível administrar um composto de fórmula I na forma de um sal de adição de ácido, como é usual na administração de fármacos que possuem um grupo básico, tal como o anel piperidino. É também vantajoso administrar este composto I por via oral a um ser humano idoso (e.g. uma mulher em fase pós-menopáusica). Para este fim estão disponíveis as seguintes formas de dosagem oral.

Formulações

Nas formulações que se seguem, “ princípio activo” significa um composto de fórmula I.

Formulação 1: Cápsulas de gelatina

Prepara-se cápsulas de gelatina dura utilizando o seguinte:

Componentes Quantidade (mg/cápsula) Princípio activo 0,1 -1000 Amido, NF 0-650 Amido em pó fluido 0-650 Óleo de silicone 350 centistoke 0-15

Os componentes são misturados, passados através de um peneiro U. S. N° 45 “mesh”, e utilizados no enchimentos de cápsulas de gelatina dura. -8- (Μη

Os exemplos de formulações específicas de cápsulas do composto de fórmula 1 em que R é piperidino, (raloxifene), que foram produzidas incluem os abaixo indicados:

Formulação 2: Cápsula de raloxifene

Componentes Quantidade (mg/cápsula) Raloxifene 1 Amido, NF 112 Amido em pó fluido 225,3 Óleo de silicone 350 centistoke 1,7 Formulação 3: Componentes Quantidade (mg/cápsula) Raloxifene 5 Amido, NF 108 Amido em pó fluido 225,3 Óleo de silicone 350 centistoke 1,7

Formulação 4:

Componentes_Quantidade (mg/cápsula)

Raloxifene 10 Amido, NF 103 Amido em pó fluido 225,3 r Oleo de silicone 350 centistoke 1,7

Formulação 5: ’9' Um Componentes Quantidade (mg/cáosulai Raloxifene 50 ' Amido, NF 150 Amido em pó fluido 397 Oleo de silicone 350 centistoke 3,0

As formulações específicas acima referidas podem ser modificadas em concordância com variações razoáveis fornecidas.

Uma formulação para comprimido é preparada utilizando os componentes abaixo:

Formulação 6: Comprimidos

Componentes Quantidade (mg/comprimido) Princípio activo 0,1 - 1000 Celulose microcristalina 0-650 Dióxido de silício, pirogenado 0-650 Ácido esteárico 0-15

Os componentes são misturados e sujeitos a compressão para formar comprimidos.

Em alternativa, os comprimidos contendo cada um 0,1-1000 mg de princípio activo são produzidos como se segue: - 10-

Formulação 7: Comprimidos

Componentes Quantidade (mg/comprimido) Princípio activo 0,1 - 1000 Amido 45 Celulose microcristalina 35 Polivinilpirrolidona 4 (como solução aquosa a 10%) Carboximetilcelulose de sódio 4,5 Estearato de magnésio 0,5 Talco 1 O princípio activo, amido, e celulose são passados através de um peneiro de malha U.S. N° 45 e misturados cuidadosamente. A solução de polivinilpirrolidona é misturada com os pós resultantes que foram passados através de um peneiro de malha U.S. N° 14. Os grânulos assim produzidos são secos a 50°C-60°C e passados através de um peneiro de malha U.S. N° 18. O carboximetilamido de sódio, estearato de magnésio, e talco, passados previamente através de um peneiro de malha U.S. N° 60, são então adicionados aos grânulos que, após mistura, são sujeitos a compressão numa máquina para formar comprimidos.

As suspensões contendo por dose 0,1-1000 mg de medicamento por 5 mL são produzidas como se segue:

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Formulação 8: Suspensões

Componentes . _ Quantidade (mg/s mL) Princípio activo 0,1 1000 mg Carboximetilcelulose de sódio 50 mg Xarope 1>25 mg Solução de ácido benzóico 0,10 mL Aroma q.v. Corante q.v. Água purificada até 5 mL O medicamento é passado através um peneiro U.S. N° 45 “mesh” e misturado com carboximetilcelulose de sódio e xarope para formar uma pasta macia. A solução de ácido benzóico, aroma e corante são diluídas com alguma da água e adicionada, com agitação. Adiciona-se então água suficiente para se obter o volume desejado.

PROCEDIMENTO DE ENSAIO

Nos ensaios 1 e 2, podem ser examinados os efeitos no crescimento de tecido do endométrio retirado ao dia 14 e dia 21 de administração dos compostos da invenção

Ensaio 1

Utilizou-se vinte a trinta ratos fêmeas adultos de estirpe CD como animais teste. São divididos em três grupos com igual número. O ciclo “estrous” de todos os animais é monitorizado. No dia da “proestrus” é efectuada a cirurgia

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- 12- a cada fêmea. Retirou-se o como uterino esquerdo às fêmeas de cada grupo, seccionou-se em pequenos quadrados, e suturaram-se os quadrados sem apertar, em vários pontos adjacentes ao fluxo sanguíneo mesentérico. Adicionalmente, às fêmeas do grupo 2 removeram-se os ovários.

No dia seguinte à cirurgia, os animais dos Gmpos 1 e 2 receberam injecções intraperitoniais de água durante 14 dias ao passo que os animais do Grupo 3 receberam injecções intraperitoniais de 1,0 mg de um composto da invenção por quilograma de peso durante o mesmo período. Ao fim de 14 dias de tratamento cada fêmea foi sacrificada e os explantes do endométrio, glândulas supra-renais, restante útero, e ovários, quando apropriado, são removidos e preparados para exame histológico. Os ovários e glândulas supra-renais são pesados.

Ensaio 2

Utilizou-se vinte a trinta ratos fêmeas adultos de estirpe CD como animais teste. Estes foram divididos em dois grupos iguais. O ciclo “estrous” de todos os animais foi monitorizado. No dia da “proestrus” é efectuada a cirurgia a cada fêmea. Retirou-se o como uterino esquerdo às fêmeas de cada grupo, seccionou-se em pequenos quadrados, e suturaram-se os quadrados sem apertar, em vários pontos adjacentes ao fluxo sanguíneo mesentérico.

Ao fim de aproximadamente 50 dias a seguir à cirurgia, os animais do Gmpo 1 recebem injecções intraperitoniais de água durante 21 dias enquanto que os animais do Grupo 2 recebem injecções intraperitoniais de 1,0 mg de um composto da invenção por quilograma de peso durante o mesmo período. Ao fim de 21 dias de tratamento cada fêmea é sacrificada e os explantes do endométrio e as glândulas supra-renais, são removidos e pesados. Os explantes são medidos como uma indicação do crescimento. Os ciclos “estrous” são monitorizados. - 13-

Ensaio 3 A Indução cirúrgica de endometriose

Utiliza-se autoenxertos de tecido do endométrio para induzir endometriose em ratos e/ou coelhos. Os animais fêmea com maturidade reprodutiva são submetidos a ooforectomia bilateral e é fornecido estrogénio de modo exógeno providenciando assim um nível hormonal específico e constante. O tecido do endométrio autólogo é implantado no peritoneu de 5-150 animais e é fornecido estrogénio para induzir o crescimento do tecido explantado. O tratamento consistindo num composto da invenção é administrado por lavagem gástrica diária durante 3-16 semanas e os implantes são retirados para medição de crescimento ou regressão. Na altura dos animais serem sacrificados, o como intacto do útero é colhido para verificar o estado do endométrio. B Implantação de tecido do endométrio humano em murganhos glabros.

Tecido de lesões endometriais humanas é implantado no peritoneu de murganhos glabros fêmeas castradas, sexualmente maduras. Fomeceu-se estrogénios exógenos para induzir crescimento do tecido explantado. Nalguns casos as células endometriais colhidas são cultivadas in vitro antes da implantação. O tratamento consistindo de um composto da invenção é administrado por lavagem gástrica diária durante 3-16 semanas e os implantes removidos para medição de crescimento ou regressão. Na altura dos animais serem sacrificados, os úteros são colhidos para verificar o estado do endométrio intacto. - 14-

Ensaio 4 A Tecido humano de lesões endometriais é colhido, e mantido in vitro como culturas não transformadas primárias. As amostras cirúrgicas são empurradas através de uma rede ou peneiro esterilizado ou alternadamente separadas do tecido circundante para produzir uma suspensão de célula única. As células são mantidas num meio contendo 10% de soro e antibióticos. As velocidades de crescimento são determinadas na presença e ausência de estrogénio. As células são ensaiadas quanto à sua capacidade de produzir o componente complementar C3 e da sua resposta a factores de crescimento e hormonado crescimento. As culturas in vitro são avaliadas quanto à sua resposta proliferativa após o tratamento com progestinas, GnRH, um composto da invenção e veículo. Os níveis de receptores da hormona esteróide são avaliados semanalmente para determinar quais as características importantes da célula que são mantidas in vitro. Utilizou-se tecido de 5-25 doentes. A actividade em qualquer dos ensaios acima referidos indica que os compostos da invenção são úteis no tratamento da endometriose.

Lisboa, 26 de Julho de 2001

Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 USBOA

Claims (4)

1. (/ίλη -1 - REIVINDICAÇÕES 1. Utilização do composto de fórmula

   (I) em que R e R são independentemente hidrogénio, í I -CH3 _ -C—(C,-C6alquilo) ,-C—Ar em que Ar é um fenilo substituído opcionalmente; R é seleccionado do grupo que consiste em pirrolidino e piperidino; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável ou solvato, para a preparação de um medicamento para inibição da endometriose.
2. 2. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que o referido composto é um seu sal cloridrato.
3. 3. Utilização de acordo com a reivindicação 1, em que o referido medicamento é profilático. -2- composto é
4. 4. Utilização de acordo com a reivindicação 1 em que o referido

   Lisboa, 26 de Julho de 2001

   Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VjCTOR CORDON, 14 1200 USBOA