NO852758L - 1-hydroksy-cytorodiner, en mikrobiologisk fremgangsmaate til deres fremstilling, og deres anvendelse som cytostatika - Google Patents
1-hydroksy-cytorodiner, en mikrobiologisk fremgangsmaate til deres fremstilling, og deres anvendelse som cytostatikaInfo
- Publication number
- NO852758L NO852758L NO852758A NO852758A NO852758L NO 852758 L NO852758 L NO 852758L NO 852758 A NO852758 A NO 852758A NO 852758 A NO852758 A NO 852758A NO 852758 L NO852758 L NO 852758L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- rod
- roa
- sugar
- sugar combination
- formula
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 43
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 14
- 241000187410 Streptomyces purpurascens Species 0.000 claims abstract description 12
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 12
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 6
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims description 32
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 17
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 17
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 15
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 11
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 claims description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 claims description 3
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 claims description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 claims description 3
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 claims description 3
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 claims description 3
- ATPYMFXOZQEWIG-LFRDXLMFSA-N (2s,5r,6s)-5,6-dihydroxy-2-methyloxan-3-one Chemical compound C[C@@H]1O[C@H](O)[C@H](O)CC1=O ATPYMFXOZQEWIG-LFRDXLMFSA-N 0.000 claims description 2
- XXIHHRIZGBRENI-WDSKDSINSA-N L-rhodinose Chemical compound C[C@H](O)[C@@H](O)CCC=O XXIHHRIZGBRENI-WDSKDSINSA-N 0.000 claims description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 claims 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 2
- 238000007445 Chromatographic isolation Methods 0.000 claims 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000012059 conventional drug carrier Substances 0.000 claims 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 claims 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 14
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 8
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 8
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 6
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 6
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 6
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 6
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 6
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 5
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 238000000039 preparative column chromatography Methods 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 3
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 3
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 210000002196 fr. b Anatomy 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 3
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 2
- TUXOBALMXBTRPP-UHFFFAOYSA-N acetic acid;n,n-diethylethanamine;hydrate Chemical compound O.CC([O-])=O.CC[NH+](CC)CC TUXOBALMXBTRPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- ZJULYDCRWUEPTK-UHFFFAOYSA-N dichloromethyl Chemical compound Cl[CH]Cl ZJULYDCRWUEPTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 2
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 2
- MWMZEHHNWIPABX-IHIFUPQISA-N (7s,9r,10r)-7-[(2r,4s,5s,6s)-4-(dimethylamino)-5-[5-(5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-10-[(4s,5s,6s)-4-(dimethylamino)-5-[5-(5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-9-ethyl-6,9 Chemical compound O([C@H]1[C@H](C[C@@H](O[C@H]1C)O[C@H]1C[C@]([C@@H](C2=C(O)C=3C(=O)C4=CC=CC=C4C(=O)C=3C(O)=C21)OC1O[C@@H](C)[C@@H](OC2OC(C)C(OC3OC(C)C(O)CC3)CC2)[C@H](C1)N(C)C)(O)CC)N(C)C)C(OC1C)CCC1OC1CCC(O)C(C)O1 MWMZEHHNWIPABX-IHIFUPQISA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 229930189295 Rhodirubin Natural products 0.000 description 1
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930188522 aclacinomycin Natural products 0.000 description 1
- LJZPVWKMAYDYAS-QKKPTTNWSA-N aclacinomycin T Chemical class O([C@H]1C[C@]([C@@H](C2=CC=3C(=O)C4=CC=CC(O)=C4C(=O)C=3C(O)=C21)C(=O)OC)(O)CC)[C@H]1C[C@H](N(C)C)[C@H](O)[C@H](C)O1 LJZPVWKMAYDYAS-QKKPTTNWSA-N 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- STUJMJDONFVTGM-UHFFFAOYSA-N cinerubine A Natural products C12=C(O)C=3C(=O)C4=C(O)C=CC(O)=C4C(=O)C=3C=C2C(C(=O)OC)C(CC)(O)CC1OC(OC1C)CC(N(C)C)C1OC(OC1C)CC(O)C1OC1CCC(=O)C(C)O1 STUJMJDONFVTGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 210000003918 fraction a Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- STUJMJDONFVTGM-CEPMKHARSA-N methyl (1r,2r,4s)-4-[4-(dimethylamino)-5-[4-hydroxy-6-methyl-5-(6-methyl-5-oxooxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-2-ethyl-2,5,7,10-tetrahydroxy-6,11-dioxo-3,4-dihydro-1h-tetracene-1-carboxylate Chemical compound O([C@H]1C[C@]([C@@H](C2=CC=3C(=O)C4=C(O)C=CC(O)=C4C(=O)C=3C(O)=C21)C(=O)OC)(O)CC)C(OC1C)CC(N(C)C)C1OC(OC1C)CC(O)C1OC1CCC(=O)C(C)O1 STUJMJDONFVTGM-CEPMKHARSA-N 0.000 description 1
- PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N monothioglycerol Chemical compound OCC(O)CS PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- SRVJKTDHMYAMHA-WUXMJOGZSA-N thioacetazone Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(\C=N\NC(N)=S)C=C1 SRVJKTDHMYAMHA-WUXMJOGZSA-N 0.000 description 1
- 229940035024 thioglycerol Drugs 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/06—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using actinomycetales
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
- C07H15/252—Naphthacene radicals, e.g. daunomycins, adriamycins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/56—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen atom of the saccharide radical directly bound to a condensed ring system having three or more carbocyclic rings, e.g. daunomycin, adriamycin
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Oppfinnelsen vedrører 1-hydroksy-cytorodiner med formel I
hvori betyr hydrogen eller resten OR^og R2betyr restene -0R4eller. -COOR5, idet R5betyr C^-C-^-alkyl og R3og R4er like eller forskjellige og betyr hydrogen eller en sukkerkombinasjon av følgende sammensetning: Roa-dF-Rod, Roa-dF-CinA, Roa-dF<=>CinB, Roa-Rod-Rod, Roa-dF-Acu, Roa-Rod-CinA, Roa-Rod-Acu.eller Rod-Rod-Rod, hvori Roa betyr rodosamin, dF betyr desoksyfucose, Rod betyr rodinose, Acu betyr aculose, CinA betyr cinerulose A og Cin B betyr cinerulose B og dF = Cin B betyr at de to sukkerbyggestener er sammenknyttet ved ekstra eterbro ved siden av den vanlige glykosidiske binding.
Oppfinnelsen vedrører videre en fremgangsmåte til fremstilling av forbindelse med formel I, idet fremgangsmåten erkarakterisert vedat stammen Streptomyces purpurascens DSM 2658 fermenteres ved en pH-verdi på 6,5 - 8,5, en temperatur på 24-40°C og en høy luftningsgrad i et egnet næringsmiddel og forbindelse med formel I isoleres fra kulturvæsken av mycel etter vanlige metoder.
Isoleringen og identifiseringen av Streptomyces purpurascens DSM 2658 er omtalt i den tyske patentsøknad P 332 325.0. Mikroorganismer ble deponert den 24.5.1983 ved DSM (Deutsche Samm-lung von Mikroorganismen)"i D-3400 Gottingen (Grisebachstr.8).
I nevnte patentsøknad omtales også en fremgangsmåte til fremstilling av 1-deshydroksy-antracyklin-derivater med formel I, de såkalte cytorodiner, ved fermentering av stammen Streptomyces purpurascens-DSM 2658 under aerobe betingelser.
Det ble nå overraskende funnet at ved økning av oksygen-forsørgningen ved fermenteringen dannes 1-hydroksy-cytorodiner. Disse nye fremfor alt cytostatisk virksomme forbindelser fører til gruppen av 1-hydroksy-antracykliner, hvor i av følgende representanter allerede er omtalt:
1-hydroksy-3-rodomyciner - også kalt 6 -iso-rodomyciner:
f. eks. violamyciner A og B I - k (W. Fleck et al., Z Allgem. Mikrobiologie 14, 551 (1974) og g-isorodomyciner (H. Brock-menn et al., Chem. Ber. 98, 3145 (1965).
e-pyrromyciner (cinerubiner): f. eks. cinerubin A (W. Keller-Schierlein, ANtimicrob. Agents Chemother. 68 (1970)), forskjellige rodirubiner (H. Umezawa et al., J. Antib. 30, 616
(1977) og aclacinomyciner A2, B2, M2, S2og T2(T. Oki et al., J. Antibiot. 28, 830 (1975) og 32, 801 (1979), samt Musetta-, Marcello-, Rudolphomycin o.l. (D.E. Nettleton et al., J. Nat. Prod. 43, 242 (1980)).
Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen til fremstilling av forbindelse med den generelle formel I gjennomføres ved fermentering av Streptomyces purpurascens-DSM 26 58 ved en pH-verdi på 6,5 - 8,5 og en temperatur på 24-40°C under aerobe betingelser en tilstrekkelig høy oksygenforsørging, f. eks. ved en høy luftningsgrad i et næringsmedium inneholdende karbon-
og nitrogenkilder som uorganiske næringssalter og sporelementer og etterfølgende isolering av forbindelsene fra kulturvæsken og mycelet etter vanlige metoder som omtalt i det følgende.
Som karbonkilder egner det seg glucose, stivelse, dextrin og glycerol. Egnede nitrogenkilder er soyamel, gjærekstrakt, kjøttekstrakt, maltekstrakt, maissvellevann, pepton og kasein. Som uorganiske næringssalter egner det seg f. eks. natrium-klorid, .. magnesiumsulfat eller kalsiumkarbonat. Som spore-elementer kan man anvende jern, magnesium, kobber, sink og kobolt.
Streptomyces purpurascens - DSM 2658 kan fermenteres ved temperaturer på 24-40°C ved en pH på 6,5 - 8,5 og en virknings-grad på 0,8 - 1,2 vvm. Fortrinnsvis foregår fermenteringen av Streptomyces purpurascens - DSM 2658 under aerobe betingelser ved 30°C og ved en pH-verdi på 7,0. Etter 70 - 130, fortrinnsvis 90 - 110 timer, når det høyeste utbyttet er opp-nådd, avbryter man fermenteringen. Fortrinnsvis kan det ved fermenteringen dreie seg om en submers-fermentering.
Fremadskridningen av fermenteringen og dannelsen av antracyklinforbindelsene kan følges ved hjelp av den antibakterielle virkning mot S. aureus 209 P og Bae. subt., samt direkte ved ekstrahering av den samlede kulturoppløsning (Mycel og kultur-filtrat) med et organisk oppløsningsmiddel og måling av absorb-sjonsintensiteten av de fiolette forbindelser ved 495, 525 og 568 nm. Som organiske oppløsningsmidler anvendes fortrinnsvis etylacetat.
Antracyklinforbindelser i kulturfiltratet og i mycelet isoleres ifølge skjema og oppstilling I (sml. også eks. 3).
Antracyklinforbindelsene i mycelene ekstraheres med et organisk oppløsningsmiddel, fortrinnsvis ved vandig aceton, som ble innstillet på en pH-verdi på 3,5. Etter fjerning av aceton-et innstilles pH-verdien av den vandige fase på 7,5, og ekstraheres deretter ved en pH-verdi på 7,5 i et organisk oppløsnings-middel som butylacetat, metylacetat eller kloroform, fortrinnsvis med etylacetat. Etylacetatekstraktene fra mycelet og kulturfiltratet forenes eller opparbeides separat, konsentreres og opptas i et organisk oppløsningsmiddel som benzen eller toluen. Fortrinnsvis anvendes toluen. Toluenoppløsningene ekstraheres deretter med en acetatpuffer av en pH-verdi på 3,5. På dette trinn oppdeler man blandingen av antracyklinderivater i to fraksjoner. Den i toluenfasen gjenblivende blanding betegnes som fraksjon A, den i den vandige fase gjenblivende glykosid-blanding betegnes som fraksjon B.
Fraksjon B renses videre ifølge oppstilling II. Som vist
i oppstilling II får man fra fraksjonen B 1-hydroksy-cytorodin A, B, C og P og blandingen N + 0 (1:1) . Ved fraksjonene I, II, III og IV dreier det som ikke oppdelte blandinger av antracyklinforbindelsene med formel I.
De fra kulturoppløsningen av Streptomyces purpurascens - DSM 2658 isolerte og ifølge oppstillingen I rensede forbindelser med den generelle formel I.
Oppstilling I
Oppstilling II
De foretrukkede forbindelser ifølge oppfinnelsen har den i formel II viste struktur, idet R4og R,, har følgende betydninger:
Antracyklinforbindelser ifølge oppfinnelsen utmerker seg ved en sterk virkning mot grampositive bakterier samt en ut-preget cytostatisk virkning.
Oppfinnelsen skal forklares nærmere ved hjelp av noen eksempler .
Eksempel 1
Fremstilling av 1-hydroksy-cytorodiner ved fermentering av Streptomyces purpurascens - DSM 2658.
Streptomyces purpurascens - DSM 2 658 ble hatt på gjær-malt-agar av følgende sammensetning:
Dertil ble mediet fordelt på Roux-flasker og sterilisert 30 minutter ved 121°C, avkjølt, podet med sporesuspensjon, og inkubert 7-14 dager ved 25°C. Deretter kunne man fastslå en god vekst og en god sporedannelse. Av denne stamkultur ble det fremstillet en sporesuspensjon med 10 7 sporer pr. ml, i steril NaCl (0,8 %-ig). 10 ml tjente som inokulum av 500 ml av følgende forkulturmedium:
Hver gang 500 ml av overnevnte medium ble fordelt på 2000 ml Erlenmeyerkolber, sterilisert 30 minutter ved 121°C.
De podede kolber ble inkubert 2 dager ved 25°C og 200 omdr. pr. minutt på en rotasjonsryster.
500 ml av den voksende forkultur ble anvendt som inokulum for følgende hovedkultur:
9 liter av overnevnte medium ble fylt i en 12 liters fermenterer og sterilisert 50 minutter ved 121°C. Fermenteringen ble gjennomført ved 28°C under rørehastighet på 6 0 omdr. pr. minutt og en luftningsgrad på 8-9 liter luft pr. minutt.
Fermentasjonsvarigheten utgjorde 90 - 110 timer. Til fast-slåing av høstetidspunktet ble dannelse av absorbsjonsmaksi-mum ved 568 nm fulgt. Dertil ble det ekstrahert prøver av kulturoppløsningen med etylacetat og absorbsjonsspekteret opp-tatt i mellom 400 og 600 nm.
Eksempel 2
Fermentering av Streptomyces purpurascens - DSM 2 6 58 i større målestokk.
Ifølge eksempel 1 ble Streptomyces purpurascens - DMS 2658 dyrket i 200 ml Erlenmeyerkolber med 500 ml forkulturmedium, og i 2 dager overpodet i en 30 liter fermenterer med 20 1 forkulturmedium. Fermenteringen foregikk ved 28°C under om-røring ved 160-180 omdr. pr. minutt med en luftningsgrad på 6-7 liter pr. minutt. Etter 48 timer tjener denne forkultur som inokulum for 300 1 fermenterer med 200 1 hovedkultur-medium (eksempel 1). Fermenteringen foregikk 90-110 timer ved 28°C, en røreomkretshastighet på 3,5 m/sek. og en luftningsgrad på 1 vvm (200 ml/min). Høstningskriteriene tilsvarte disse fra eksempel 1.
Eksempel 3
Isolering av råblandingen av antracyklinforbindelser..
190 liter kulturoppløsning ble blandet med 0,5 % formalin og med eddiksyre innstillet på pH 5,2. Mycelet ble adskilt med de vanlige metoder (faststoffseparator, filterpresse) og vasket flere ganger med litt vann.
Kulturfiltratet (ca. 185 liter) ble forenet som vaskevannet, innstillet med NåOH på pH 7,5-8,0, og ekstrahert to ganger med hver gang 50 ml etylacetat. Den vandige fase ble kassert.
De organiskk faser ble forenet, inndampet i vakuum til 8 liter og deretter ekstrahert 4 ganger med 3 liter natriumacetat-pufferoppløsning (p.H 3,5). De forenede pufferoppløsninger ble deretter vasket 3 ganger med 3 liter toluen.
Det adskilte mycel (ca. 3,4 kg) ble utrørt 3 ganger med 15 liter aceton, den avdekanterte acetonoppløsning inndampet i vakuum, blandet med 5 liter av N-acetatpufferoppløsning.av pH 3,5, og vasket 3 ganger med 2,5 liter toluen.
Den vandige pufferfase av kulturfiltratoppberedningen ble med NaOH innstillet på pH = 7,9, og ekstrahert 3 ganger med 3 liter etylacetat. De forenede etylacetatekstrakter ble inndampet i vakuum.
Den vandige pufferfase fra mycelopparbeidelsen ble med NaOH innstilt på pH 8,0, og ekstrahert 3 ganger med hver gang 2,5 1 etylacetat. De forenede organiske ekstrakter ble inndampet i vakuum.
Den gjenblivende vandige fase ble kassert.
Eksempel 4
Isolering av 1-hydroksy-cytorodin A ved hjelp av "Reversed phase" HPLC.
En sterk fiolett Charge av cytorodin A av rå, polar cytorodinblanding (kompleks II), utvinner vanlige søylekromato-grafi på kiselgel med eddiksyreholdig mobil fase, og etter-følgende ytterligere anrikning ved preparativ HPLC på Si02ble ved hjelp av preparativ HPLC videre oppdelt på et "reversed phase" adsorbens. Således ble f. eks. 250 mg oppløst i 4 ml av en mobil fase CHCl^-metanol-lO % ammoniumacetat i vann, 150 : 1050 : 375 og hatt på en stålsøyle (3,2 x 25 cm), fylt med ca. 120 g "LiChrosorb", RP-18, 25-40 y (Merck) under trykk kromatografert ved en strømning på 4 ml pr. minutt.
Adskillelsen ble fulgt med to etter hverandre koblede gjennom-strømningsfotometere ved bølgelengdene 490 og 560 nm. Etter sammenfatning av vanlig opparbeidelse resp. av de rød og fiolette fraksjoner, fremkom følgende resultater:
Ca. 150 mg av på overnevnte måte fremstillet 1-hydroksy-cytorodin A ble vidererenset med fornyet preparativ HPLC på RP-18, 25-40 u under overnevnte betingelser. Det ble dannet 60 mg 1-hydroksy-cytorodin A med mindre enn 2 % resterende cytorodin A.
<C>60H88<N>2°21' MolekYlvekt beregnet 1172 (FAB-MS bekreftet).
Eksempel 5
Isolering av l-hydroksy-cytorodin V ved preparativ middel-trykk- og sjiktkromatografi. 7 g rå cytorodinblanding utvunnet ved ekstrahering av kultur-oppløsningen som. omtalt i oppstillingen I, blir kromatografert på 120 g kiselgel 31 u (Grace) i to radialt kompri-merte Silica-patroner (Waters, "Prep LC/System 500") med røringsmiddelblandingen CHCl^/metanol/96 %-ig eddiksyre/vann = 80 : 10 : 10 : 2. Prøven ble fylt i 65 ml av den mobile fase på den ekvilibrerte søyle og oppdelt ved en strømning på 21 ml/minutt i fraksjoner på 23 ml. Vurderingen foregikk tynn-sjiktkromatografisk og ved hjelp av analytisk HPLC.
I fraksjon 29 - 34 fremkom 195 g av en blanding av cytorodin
V og l-hydroksy-cytorodin V ved en renhet på 8 0 % (Rf 0,38
i system A).
60 mg av denne prøve ble renset ved preparativ tynnsjiktkromatografi (Merck, DC-ferdigplate kiselgel 60) .
Eluering av de utskrapte bånd foregikk med CHCl^/Metanol 1:1. Elueringsoppløsningen ble nøytralisert med vandig dinatrium-hydrogenfosfatoppløsning, blandet med vann til adskillelse av CHCl^-fasem. Kloroformfasen ble separert, vasket en gang
med litt vann, tørket over vannfri Na2S04og inndampet. Etter opptak i litt kloroform ble det utfeit med 10-ganger volum-mengden petroleter og utfellingen tørket i vakuum. Det ble ved siden av 12 mg cytorodin C dannet 17 ml 1-hydroksy-cyto- - rodin V.
V: identifisert ved hjelp av "<*>"H-NMR.
C60<H>84<N>2°20'<m>olekYlvekten'1152 (FAB-MS. bekreftet) .
<C>60<H>84<N>2°21' molekYlvekt beregnet: 1168 (FAB-MS bekreftet).
Eksempel 6
Isolering av l-hydroksy-cytorodin B ved hjelp av "reversed phase" HPLC.
En ved hjelp av vanlig preparativ søylekromatografi på kiselgel (eddiksyreholdig mobil fase) utvinnet fiolett Charge av cytorodin B ble kromatografert under trykk på en med 30 g 10 y "Lichrosorb" RP 18 (Merck) fylt stålsøyle (1,6 x 25 cm). Dertil ble det oppløst 120 mg med 1 ml av den mobile fase CHCl3-MeOH-10 % ammoniumacetat i vann, 150 : 1050 :375 og inji-sert. Ved en strømning på 4 ml /minutt ble det oppfanget fraksjoner på 4 ml og vurdert ved måling av ekstinksjonen ved 490 og 570 nm.
Sammenhørende fraksjoner ble forenet og opparbeidet som vanlig.
Det ble dannet:
B: Identifisering ved hjelp av "4-I-NMR, absorbsjonsspektrum av FAB-MS.
<C>60<H>86<N>2°22</>MolekYlvekt, beregnet 1186, (FAB-MS bekreftet).
Eksempel 7
Isolering av l-hydroksy-cytorodin C ved "reversed phase" HPLC.
En ved vanlig preparativ søylekromatografi på kiselgel utvunnet ved rå fiolett cytorodin C-holdig produkt (25 mg) ble kromatografert på en med 30 g 10 y "Lichrosorb" RP-18 (Merck) fylt stålsøyle (1,6 x 25 cm) med blandingen CHCl^-metanol-10 % ammoniumacetat i vann 150 : 1050 : 375 ved en strømning på 2 ml/min. Fraksjoner på 2 ml ble oppfanget og forenet etter vurdering ved måling av ekstinksjonene ved 490 og 570 nm. Etter vanlig opparbeidelse ble det dannet:
Fraksjon 80 - 142 10 mg cytorodin G 1
15 9 - 175 7 mg 1-OH-cytorodin C
<C>60<H>80<N>2°23'<m>olekYlvekt'beregnet, 1196 (FAB-MS bekreftet).
Eksempel 8
Isolering av l-hydroksy-cytorodin N + 0 ved hjelp av "re-ver sed phase" - HPL.
Ved vanlig fleretrinns søylekromatografi på 31 y kiselgel, pH 7,5 og deretter på 10 y "Lichrosorb" RP-18 (se eks. 4) ble det dannet en sterk fiolett charge av et produkt som for-holder seg ifølge DC og analytisk HPLV på kiselgel med system B som cytorodin N + 0 og som ved gjentatt- preparativ HPLC på "reversed phase"-adsorbenter videre kunne oppdeles
i en rød og fiolett del.
Dertil ble f. eks. 230 mg av det fiolette produkt oppløst i
4 ml av den mobile fase CHCl^-metanol-lO % ammoniumacetat i vann 150 : 1050 : 375, og kromatografert på ca. 100 g 10 y Lichrosorb" RP-18 (Merck) i en stålsøyle 3,2 x 25 cm under trykk ved en strømning på 4 ml/minutt. Det ble samlet fraksjoner på 8 ml og sammenfattet etter vurdering ved analytisk "reversed phase"-HPLC med dobbeltbølgelengde-deteksjon ved 490 og 560 nm. Det ble dannet etter vanlig opparbeidelse:
Av to tilsvarende kromatografiske løp ble det fremstillet
til sammen 73 mg l-hydroksy-cytorodin N + 0 og rekromato-grafert på overnevnte måte. Det ble dannet 18 mg l-hydroksy-cytorodin N + 0 med mindre enn 2 % resterende cytorodin N + 0.
<C>60<H>88<N>2°22' molekYlvekt beregnet 1188, (FAB-MS bekreftet). Det isolerte produkt er en 1 : 1 blanding av de to struktur-isometriske komponenter 1-OH-N + l-OH-0. Dette fremgår av ''"H-NMR-spektrum, avbygningsforsøk (hydrogenolyse) og be-stemmelse av de enkelte sukkerbygningsstener etter hydrogenolyse og totalhydrolyse.
Eksempel 9
Isolering av l-hydroksy-cytorodin P ble "reversed phase"-HPLC.
Ved vanlig søylekromatografi på 31 u kiselgel på pH 7,5,
ble det dannet et sterkt fiolett produkt, hvis hovedkompo-nenter ved DC (system A) og analytisk HPLC på kiselgel viste en litt høyere retensjon enn l-hydroksy-cytorodin C. Ved gjentatt preparativ "reversed phase" HPLC kunne den nye forbindelse isoleres. Hertil ble f. eks. 175 mg av det fiolette råprodukt oppløst i 2,5 ml av den mobile fase CHCl^-metanol 15 % ammoniumacetat i vann 500 : 1100 : 300, og kromatografert på ca. 100 g 10 u Lichrosorb" RP-18 (Merck),, i en stål-søyle 3,2 x 25 cm under trykk ved en strømning på 4 ml/min. Det ble samlet i fraksjoner på 8 ml og sammenhørende fraksjoner forenet etter vurdering ved hjelp av analytisk "reversed phase"-HPLC ved dobbeltbølgelengde-deteksjon ved 490 og 560 nm,
Det ble dannet:
Ved flere likeartede kromatografiske løp fremstilles sterkt anriket 1-OH-cytorodin charger ble forenet og kromatografert igjen under overnevnte betingelser. Av ca. 8 0 mg ble det dannet 20 mg ren l-hydroksy-cytorodin P.
<C>60<H>82<N>2°22' molekYlvekt beregnet 1182 (FAB-MS bekreftet).
Eksperimentelle betingelser:
1. Høytrykkvæskekromatografi (HPLC) på kiselgel:
Stålsøyler (4,6 x 250 mm), pakket med 7 y (Lichrosorb" Si 60 (Merck) eller 7 y kiselgel 60 (Grace), mobil fase: CHCl^- metanol-86 %-ig eddiksyre-trietylamin-vann 80 : 10 : 10 : 2 : 0,01. Strømning: 0,5 - 1,5 ml/min. påvisning ved 26 0 eller 490 nm med gjennomstrømningsfotometer.
2. "reversed phase" HPLC.
Stålsøyler (4,6 x 250 mm) pakket med 10 y "Lichrosorb" RP-18
(Merck)
mobil fase: CHCl3-metanol-10 % ammoniumacetat i vann 250 : 1050 : 375.
Strømning: 0,5 - 1,5 ml/min, påvisning ved 490 nm og 560 nm med gjennomstrømningsfotometer.
De anvendte analytiske preparative HPLC-søyler ble med den av firma "Merck" (Darmstadt) selv anbefalte fremgangsmåter ved hjelp av en pneumatisk pumpe (Haskel).
3. Preparativ søylekromatogrfi.
Til vanlig preparativ søylekromatografi ble det anvendt 31 y kiselgel 60 (Grace) eller 15-40 y kiselgel 60 (Merck) i åpne glass-søyler eller under trykk pakkete stålsøyler. Som mobil fase tjente oppløsningsmiddelblandingen av tilsvarende sammensetninger som ved ovenfor angitte analytiske HPLC-system, eventuelt med nedsatt mengder av metanol, eddiksyre og vann.
Til kromatografi av andre sterke polare komponenter ble 31 y kiselgel 60 (Grace) vasket med 2 n HCL metallfritt og etter utvasking behandlet med syre i vandig suspensjon med 5 n NaOH inntil det hadde innstilt seg en pH på 7,5. Etter dekantering ble den modifiserte kiselgel tørket ved 130°C, siktet og innstillet med den mobile fase i søylen. Som mobil fase ble det anvendt oppløsningsmiddelblandinger CHCl^/vann/metanol 13 : 4 : 3-7. Belastningsforholdet utgjorde ca. 1 : 100 - 1 : 300.
4. Tynnsjiktkromatografi (DC).
Kiselgelplater F254(<M>erck) ble fremkalt med system A: CHCl^-metanol-96 % eddiksyre-vann-trietylamin 80 : 10 : 2 : 0,01 eller system B: CHC l3Tmetanol-99 %-ig eddiksyre 75 : 15 : 10 : 2.
5. Vanlig opparbeidelse.
Den vanlige opparbeidelsen ble utført som følger: Forenede fraksjoner av "reversed phase" HPLC ble blandet med ca. halv-parten av dens volum av vann og tilsatt kloroform til fase-adskillels'e. Den adskilte klorof ormf ase ble vasket med vann, tørket over vannfritt Na2S04og inndampet i vann. De således dannede produkter ble på følgende måte befridd for med-følgende fett, mykningsmidler og metallioner: Produktet,
f. eks. 30 mg ble oppløst i 20 ml natrium-acetatpuffer, pH 3,5, blandet med 1 ml 0,001 molart vandig etylendiamintetraeddik-syre (EDTA), innstillet med NaOH på pH 3,5), og rystet med 5 ml toluen. Toluenfasen ble kassert, den vandige fase innstillet med 2 n NaOH på pH 7,5, ekstrahert med 20 ml CHCl^under god rysting. Etter tørkning over vannfri Na2S04 ble det filtrert og inndampet i vakuum. Eventuelt ble residuet oppløst i litt
CHCl^og oppløsningen ble frasuget gjennom en glassfritte
og inndampet ved tilsetning av heptan til uklarhet i vakuum.
6. Spektroskopiske undersøkelser.
Identifiseringen av komponentene i de ovenstående eksempler foregikk ved de nedenfor angitte målebetingelser: Proton-resonansspektrene (<1>H-NMR-spektre) ble målt på en HX-270 Bruker Fourier-transform kjerneresonans-rspektrometer
"ved 270 MHZ. Konsentrasjonene utgjorde 2-4 mg/0,5 ml
99,8 % CDCl^, oppløsningene ble med en gang etter fremstilling rystet med 0,1 ml 5-%-ig Na2C03i 99,5 % D20.
De på figurene med en stjerne utstyrte signaler, stammer fra lavmolekylære forurensninger i %-0-området og av oppløsnings-middelrester.
Massespektrene ble målt på massespektrometere MS-902 S, AEI, under anvendelse av en FAB-(fast-atom-Bombardment-) ione-kilde. Stoffene ble innbragt i en matrix av tioglycerol i ionekilden delvis under tilsetning av ammoniumklorid.
Absorbsjonsspektrene ble målt i området 200 - 700 nm:
a) vann-metanol 1 : 9
b) 10 % 1 n HC1 i metanol
c) 10 % 1 n NaOH i metanol.
Stoffkonsentrasjonen utgjorde 10 - 30 mg/l, angis absorbsjons-maxima i nm og den molare ekstinksjonskoeffisient (log e).
7. Fastslåelse av zytotoksisk aktivitet.
Bestemmelsen av den zytostatiske virkning av de her omtalte forbindelser foregikk på L1210 leukemiceller hos mus. I detalj ble det anvendt følgende prøvesystemer:
a) Proliferasjonsutstyr.
Ved denne metode bestemmes in vitro etter inkubasjon av
cellene med forskjelligekonsentrasjoner av prøvestoffet, hvor-vidt cellene kan innsuge radioaktive DNA-forløpere (f. eks. C14 markert thymidin). Ubehandlede Ll210-celler underkastes samme prøvebetingelser, og tjener som kontroll. I det føl-gende beskrives metoden kort.
Ll210-celler i eksponensiell vekstfase (5 .x 10 /ml i RPMI 1640) inkuberes i en mikrotiterplate i 72 timer med forskjellig konsentrasjoner av prøvestoffet (37°C, 5 % C02,
95 % relativ luftfuktighet). Kontrollen består av celler
som bare inkuberes med fritt medium. Alle bestemmelsene gjennomføres som firegangers bestemmelser. Etter 65 timer tilsettes 50 yl C-l 14 thymidin (1,5 yc/ml) for å markere DNA av cellene radioaktivt. Etter 7 timers inkubasjon fra-suges cellene, DNA felles med 5 %-ig trikloreddiksyre og vaskes i rekkefølge med vann resp. metanol.
Etter tørkning ved 50°C fastslås en i DNA innbyggete radio-aktivitet etter tilsetning av 5 ml szintillasjonsvæske.
Resultatene angis som forhold av szintillasjonsindeks etter inkubasjon med prøvestoffet i prosent av ubehandlede kontroller. Av de således oppnådde måleverdier fastslås dosis-virksomkurven, og grafisk fastslås IC^q? dvs. konsentrasjonen som under prøvebetingelsene senker innbygningen av radioaktivt thymidin med 50 % i forhold til kontrollene. IC5q~verdiene av de her omtalte forbindelser sammenlignet til adriamycin (ADM) er sammenfattet i tabell 1.
b) Kolonidannelse av L1210 leukemiceller i bløt agar.
Denne metode tjener til påvisning av en innvirkning av prøve-stoffene på vekstforhold av cellene over flere generasjoner (ved en cellesyklustid på 10-12 timer iakttas i prøvetiden på 7 dager ca. 14 på hverandre følgende generasjoner).
Zytostatisk virksomme stoffer bevirker i denne prøve en red-uksjon av det således iakttatte kolonitall i forhold til en ubehandlet kontroll. I detalj gjennomføres prøven som følger: 500 leukemiceller pr. plate inkuberes med forskjellige konsentrasjoner av prøvestoff i 1 time ved ca. 30°C. Deretter vaskes cellene to ganger med McC.oy5A medium og til slutt "helles ut iPetriskåler etter tilsetning av 0,3 % agar. Kontrollene inkuberes bare med fritt medium. I steden for 1 timers inkubasjon, tilblandes i mange tilfeller forskjellige konsentrasjoner og prøvestoff av øvre agar-sjikt for således å beregne en kontinuerlig eksposisjon av cellene over den samlede inkubasjonstid. Etter agarens virkning inkuberes platene i rugeskap 7 dager ved 37°C (5 % C02, 95 % relativ luftfuktighet). Deretter telles antallet av dannede kolonier med en diameter 60 y. Resultatene angis som kolonitall i behandlede agarplater i prosent av ubehandlede kontroller. Fra den således dannede dosisvirkningskurve fastslås ^Cj-q som mål for virkningen av stoffet. Resultatene av de her omtalte forbindelser sammenlignet med adriamycin er sammenfattet i tabell 1.
Som det anføres ovenfor har forbindelsene ifølge oppfinnelsen zytostatisk virkning, dvs. terapeutisk virkning mot tumorer, spesielt maligne tumorer hos dyr og mennesker.
Forbindelsene og syreaddisjonssaltene kan følgelig anvendes som medikamenter til behandling av tumorer. Forbindelsene kan administreres på forsjellig måte, avhengig av doserings-formen. Normalt administreres forbindelser blandet med farma-søytisk vanlige bærestoffer eller fortynningsmidler. Således kan det f. eks. administreres enkeltvis eller i blanding sammen med bærestoffer som maltose eller laktose, eller som ikke-toksiske komplekser, f. eks. som desoksyribonuklein-syrekompleks.
En typisk administreringstype er injeksjon av en oppløsning av forbindelsene ifølge oppfinnelsen i destillert vann eller i fysiologisk kokesaltoppløsning. Oppløsningene kan injiseres intraperitonealt, intravenøst eller intraarteriell.
Dagsdose og enhetsdose kan fastsettes av dyreforsøk og oppta in vitro prøver således at den samlede dose kan administreres kontinuerlig eller i avstander ikke overskrider et på for-hånd fastlagt område. Således utgjør den samlede dose for en behandlingssyklus ca. 0,5-5 mg/kg legemsvekt. Denne dose kan administreres i tilsvarende brøkdeler over et tidsrom på 7 dager. Det er imidlertid klart at konkrete doser for be-handlingen av mennesker eller dyr kan fastlegges individuelt i avhengighet av den eventuelle situasjon, f. eks. alder, legemsvekt, kjønn, følsomheten, næring, administrering, tids-punkt, ytterligere administrerte medikamenter, pasientens kroppstilstand mot sykdommens tyngde.
Claims (15)
1. Forbindelser med formel I
hvor betyr hydrogen eller resten OR^ og R2 betyr restene
-0R4 eller -COOR5 , idet C5 betyr C-^ -C^ alkyl og R3 og R4 er like eller forskjellige og betyr hydrogen eller en sukkerkombinasjon av følgende sammensetning:
Roa-dF-Rod, Roa-dF-CinA, Roa-dF=CinB, Roa-Rod-Rod, Roa-dF-Acu, Roa-Rod-CinA, Roa-Rod-Acu eller Rod-Rod-Rod, hvori Roa betyr rhodosamin, dF betyr desoksyfukose, Rod betyr rhodinose, Acu betyr aculose, CinA betyr cinerulose A og CinB cinerulose B,
og dF = Vin B betyr at de to sukkerbyggestenene er sammenknyttet til en ekstra eterbro ved siden av den vanlige glykosidiske binding,
samt deres fysiologiske tålbare syreaddisjonssalter.
2. Forbindelse med formel I ifølge krav 1, hvori R^ betyr resten -0R3 , og R2 betyr resten 0R4 , idet R3 og R4 er like eller forskjellig og betyr en av de nevnte sukkerkombinasjoner.
3. Forbindelse ifølge krav 2, idet R3 betyr sukkerkombinasjon- ' en Roa-Rod-Rod, og R4 sukkerkombinasjonen Roa-Rod-Rod, samt deres fysiologisk tålbare syreaddisjonssalter.
4. Forbindelse ifølge krav 2, idet R3 betyr sukkerkombinasjoner -Roa-Rod-Rod, og R4 betyr sukkerkombinasjonen Roa-dF-Cin A, samt deres fysiologiskesyreaddisjonssalter.
5. Forbindelse ifølge krav 2, idet R3 og R4 betyr sukkerkombinasjoner Roa-dF=C inB , samt deres fysiologisk tålbare syre-addis jonssalter .
6. Forbindelse ifølge krav 2, idet R3 betyr sukkerkombinasjoner Roa-dF-Rod, og R4 betyr sukkerkombinasjoner Roa-Rod-Rod, samt deres fysiologisk tålbare syreaddisjonssalter.
7. Forbindelse ifølge krav 2, idet R^ betyr sukkerkombinasjoner Roa-Rod-Rod, og R4 betyr sukkerkombinasjoner Roa-dF-Rod, samt deres fysiologisk tålbare syreaddisjonssalter.
8. Forbindelse ifølge krav 2, idet R^ betyr sukkerkombinasjonen Roa-Rod-Rod, og R2 betyr sukkerkombinasjonen Rod-Rod-
Acu, samt deres fysiologisk tålbare syreaddisjonssalter.
9. Forbindelse ifølge krav 2, idet R^ betyr sukkerkombinasjonen Roa-Rod-Acu, og R^ betyr sukkerkombinasjonen Roa-dF-Cin A, samt deres fysiologisk tålbare syreaddisjonssalter.
10. Fremgangsmåte til fremstilling av forbindelse med formel I ifølge krav 1, karakterisert ved at mikroorganismer Streptomyces purpurascens (DSM 2658) fermenteres ved forhøyet oksygenforsørgning på ellers vanlig måte under aerobe betingelser i nærvær av et næringsmedium og de dannede forbindelser isoleres på vanlig måte fra kulturvæsken og mycelet ved ekstrahering med organiske oppløsningsmidler og etterfølgende kromatografi eller fordeling.
11. Fremgangsmåte ifølge krav 9, karakterisert ved at mikroorganismer Streptomyces purpurascens DSM 2658 fermenteres i et næringsmedium som inneholder karbon- og nitrogenkilder samt uorganiske næringssalter og sporelementer ved temperaturer på 24-40°C og en pH på 6,5-8,5 i dannede forbindelser ekstraheres fra kulturvæsken med etylacetat og kloroform og fra mycelet i første rekke med vandig aceton fra den adskilte vandige fase, deretter med etylacetat, de forenede etylacetatekstrakter konsentreres og opptas med benzen eller toluen, den dannede oppløsning ekstraheres med en acetatpuffer ved en pH-verdi på 3,5, og fra den dannede oppløsning isoleres ved kromatografi eller fordeling _forbindelsene med formel I.
12. Fremgangsmåte ifølge krav 10, karakterisert ved at den kromatografiske isolering av forbindelsene med formel I, foregår ved hjelp av kiselgelsøyler, "reversed phase"-adsorbenter, dråpe-motstrøms-kromatografi eller fordeling på etterfølgende tynnsjikt- eller høytrykksvæskekro-matografi.
13. Fremgangsmåte til fremstilling av legemidler, karakterisert ved at en forbindelse med formel I ifølge krav 1, bringes i en terapeutisk egnet administrer-ingsform, eventuelt med vanlig farmasøytiske bærere og/eller stabilisatorer.
14. Legemiddel, karakterisert ved et inn-hold av en forbindelse med formel I ifølge krav 1.
15. Forbindelse med formel I ifølge krav 1 til anvendelse som legemiddel.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19843425357 DE3425357A1 (de) | 1984-07-10 | 1984-07-10 | 1-hydroxy-cytorhodine, ein mikrobiologisches verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als cytostatika |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO852758L true NO852758L (no) | 1986-01-13 |
Family
ID=6240265
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO852758A NO852758L (no) | 1984-07-10 | 1985-07-09 | 1-hydroksy-cytorodiner, en mikrobiologisk fremgangsmaate til deres fremstilling, og deres anvendelse som cytostatika |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0167954B1 (no) |
| JP (1) | JPS6144841A (no) |
| KR (1) | KR860001190A (no) |
| AT (1) | ATE46701T1 (no) |
| AU (1) | AU586977B2 (no) |
| DE (2) | DE3425357A1 (no) |
| DK (1) | DK313985A (no) |
| ES (1) | ES8609356A1 (no) |
| FI (1) | FI81608C (no) |
| GR (1) | GR851682B (no) |
| HU (1) | HUT42134A (no) |
| IL (1) | IL75748A0 (no) |
| NO (1) | NO852758L (no) |
| PT (1) | PT80790B (no) |
| ZA (1) | ZA855154B (no) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61236792A (ja) * | 1985-04-12 | 1986-10-22 | Sanraku Inc | 新規アントラサイクリン抗生物質 |
| JPS62238298A (ja) * | 1986-04-08 | 1987-10-19 | Sanraku Inc | 新規アントラサイクリン抗生物質ｄｃｐ−１及び２ |
| DE3709337A1 (de) * | 1987-03-21 | 1988-10-13 | Hoechst Ag | Neue anthracyclin-glycoside, ein verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als cytostatika |
| DE3712350A1 (de) * | 1987-04-11 | 1988-10-20 | Behringwerke Ag | Semisynthetische rhodomycine, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als zytostatika |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DD122069A1 (no) * | 1974-04-29 | 1976-09-12 | ||
| JPS6023679B2 (ja) * | 1979-07-13 | 1985-06-08 | メルシャン株式会社 | ロドマイシン群抗生物質とその製造法 |
| EP0050724B1 (en) * | 1980-10-27 | 1985-01-09 | F. HOFFMANN-LA ROCHE & CO. Aktiengesellschaft | Process for anthracycline glycosides |
| DE3325957A1 (de) * | 1983-07-19 | 1985-02-07 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Anthracyclin-derivate, ein verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als cytostatika |
| JPS61236792A (ja) * | 1985-04-12 | 1986-10-22 | Sanraku Inc | 新規アントラサイクリン抗生物質 |
-
1984
- 1984-07-10 DE DE19843425357 patent/DE3425357A1/de not_active Withdrawn
-
1985
- 1985-07-01 DE DE8585108137T patent/DE3573263D1/de not_active Expired
- 1985-07-01 AT AT85108137T patent/ATE46701T1/de not_active IP Right Cessation
- 1985-07-01 EP EP85108137A patent/EP0167954B1/de not_active Expired
- 1985-07-04 HU HU852605A patent/HUT42134A/hu unknown
- 1985-07-08 FI FI852696A patent/FI81608C/fi not_active IP Right Cessation
- 1985-07-08 GR GR851682A patent/GR851682B/el unknown
- 1985-07-08 ES ES544960A patent/ES8609356A1/es not_active Expired
- 1985-07-09 PT PT80790A patent/PT80790B/pt not_active IP Right Cessation
- 1985-07-09 ZA ZA855154A patent/ZA855154B/xx unknown
- 1985-07-09 IL IL75748A patent/IL75748A0/xx unknown
- 1985-07-09 KR KR1019850004876A patent/KR860001190A/ko not_active Application Discontinuation
- 1985-07-09 DK DK313985A patent/DK313985A/da not_active Application Discontinuation
- 1985-07-09 NO NO852758A patent/NO852758L/no unknown
- 1985-07-09 JP JP60149404A patent/JPS6144841A/ja active Pending
- 1985-07-09 AU AU44734/85A patent/AU586977B2/en not_active Ceased
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL75748A0 (en) | 1985-11-29 |
| DK313985D0 (da) | 1985-07-09 |
| ATE46701T1 (de) | 1989-10-15 |
| ES544960A0 (es) | 1986-08-01 |
| GR851682B (no) | 1985-11-26 |
| DE3425357A1 (de) | 1986-01-23 |
| DK313985A (da) | 1986-01-11 |
| ZA855154B (en) | 1986-02-26 |
| PT80790A (de) | 1985-08-01 |
| KR860001190A (ko) | 1986-02-24 |
| FI852696A0 (fi) | 1985-07-08 |
| PT80790B (pt) | 1987-10-20 |
| AU4473485A (en) | 1986-01-16 |
| AU586977B2 (en) | 1989-08-03 |
| DE3573263D1 (en) | 1989-11-02 |
| JPS6144841A (ja) | 1986-03-04 |
| EP0167954B1 (de) | 1989-09-27 |
| FI81608B (fi) | 1990-07-31 |
| HUT42134A (en) | 1987-06-29 |
| EP0167954A3 (en) | 1986-11-20 |
| ES8609356A1 (es) | 1986-08-01 |
| FI81608C (fi) | 1990-11-12 |
| EP0167954A2 (de) | 1986-01-15 |
| FI852696L (fi) | 1986-01-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK145200B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af anthtacyclinglycosid-antibiotika | |
| NO160011B (no) | Mikrobiologisk fremgangsmaate for fremstilling av antracyklin-derivater. | |
| EP0182152A2 (en) | Antitumor antibiotics (LL-E33288 Complex) | |
| US5250563A (en) | Inhibitors of HIV protease | |
| EP0194784A2 (en) | CL-1577-B4 Compound, its production and use | |
| NO852758L (no) | 1-hydroksy-cytorodiner, en mikrobiologisk fremgangsmaate til deres fremstilling, og deres anvendelse som cytostatika | |
| EP0350623A2 (en) | BU-3420T antitumor antibiotic | |
| EP0087021B1 (en) | Cl 1565 antibiotic compounds and their production | |
| KR920001448B1 (ko) | Bbm-2478 항생제 착화합물 | |
| JPH07233186A (ja) | 新規ｂｂｍ−１６７５ｄ抗腫瘍性抗生物質 | |
| NO164038B (no) | Mikrobiologisk frete for fremstilling av antracykl inderivater ved fermentering av streptomyces purpurascenshpl y-11472, dsm 2658. | |
| US5451581A (en) | Antibiotic LL-14E605β and O-methyl-LL-14E605β | |
| JP3199748B2 (ja) | Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ Ｃａｒｂｏｎａｃｅａ由来の新規オルトソマイシン | |
| JPH03141290A (ja) | 抗腫瘍抗生物質ｂｍｙ―４１３３９ | |
| EP0542234B1 (en) | Antibacterial substance BE-24566B | |
| EP0376177A2 (en) | TAN-1120, its derivatives, production and use thereof | |
| EP0332080B1 (en) | Bu-3862t antitumor antibiotic | |
| AU2016362540A1 (en) | Antibiotic FIIRV 104/18 complex and the isolated individual factors thereof | |
| JPH0578322A (ja) | 新規抗生物質ｓｆ２７３８物質及びその製造法並びに制癌剤 | |
| JPH0576958B2 (no) | ||
| JPH04368388A (ja) | ダイネマイシンｃ抗腫瘍抗生物質 | |
| EP0432697A2 (en) | BU-4146T antibiotic | |
| KR840000127B1 (ko) | 이스타마이신의 제조방법 | |
| EP0447494A1 (en) | Altromycin compounds | |
| IE44567B1 (en) | Antibiotic bm123 and production thereof |