JPH04368388A - ダイネマイシンｃ抗腫瘍抗生物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はダイネマイシン（ｄｙｎ
ｅｍｉｃｉｎ）Ｃと命名された新規抗生物質化合物及び
そのトリアセテート誘導体に関する。両化合物は抗細菌
、抗真菌及び抗腫瘍活性を有する。

【０００２】

【従来の技術】ダイネマイシンＣの構造の解明によって
、それが共役ジイン部分を有していることが明らかにな
った。この通常でない機能性（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉ
ｔｙ）はアクチノマデュラ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ
）株（米国特許４６７５１８７参照）及びミクロモノス
ポラ（Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ）株〔Ｐｒｏｇｒ
ａｍ　　ａｎｄ　　Ａｂｓｔｒａｃｔｓ　　２６ｔｈ　
　ｏｆ　　Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ　　Ｃｏｎｆｅｒ
ａｎｃｅ　　ｏｎ　　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　　
Ａｇｅｎｔｓａｎｄ　　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，Ｓ
ｅｐｔ．１９８６，Ａｂｓｔｒａｃｔ２２７（抗微生物
剤及び化学療法についての第２６回相互科学会議のプロ
グラム及び要約、１９８６年９月、要約２２７）〕によ
って、それぞれ、生産される並はずれて有能な抗腫瘍抗
生物質であるエスペラマイシン（ｅｓｐｅｒａｍｉｃｉ
ｎｓ）（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１０９，３４
６２−３４６４，１９８７）及びキャリケマイシン（ｃ
ａｌｉｃｈｅｍｉｃｉｎｓ）（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ，Ｓ
ｏｌ．，１０９，３４６４−３４６６，１９８７及び同
１０９，３４６６−３４６８，１９８７）において見い
出されていた。

【０００３】エスペラマイシンＡ１及びＡ２は米国特許
４５３０８３５に記載されたＣＬ−１５７７Ａ及びＢに
それぞれ等しいと考えられている。これらのエスペラマ
イシンはまた米国特許４５７８２７１に記載された抗生
物質ＷＳ−６０４９Ａ及びＢにそれぞれ構造的に関連を
有している。ＣＬ−１５７７−Ｂ４と命名されたＣＬ−
１５７７ＡまたはＢの断片が米国特許４６６１３５３に
記載され、他方ＢＢＭ−１６７５Ｃと命名されたエスペ
ラマイシンＡ１またはＡ２の断片が英国公開出願２１７
９６４９Ａに記載されている。

【０００４】ＢＭＹ−４１３３９と命名された、式

【化
６】 を有するエスペラマイシン成分が１９８９年３月１５日
に提出された米国特許出願３２３６４８に記載されてい
る。

【０００５】ＢＵ−３４２０Ｔ及びトリアセチルＢＵ−
３４２０Ｔと命名された、共役ジイン部分を有する抗腫
瘍抗生物質が米国特許４９１６０６５に記載されている
。これらの抗生物質は、ダイネマイシン（ｄｙｎｅｍｉ
ｃｉｎ）Ａ及びトリアセチルダイネマイシンＡとも命名
され、Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４２（９），１４
４９−１４５２，１９８９にも開示されている。ＢＵ−
３４２０Ｔ（ダイネマイシンＡ）はミクロモノスポラ・
チエルシナ（Ｍ．ｃｈｅｒｓｉｎａ）Ｍ９５６−１株（
ＡＴＣＣ−５３７１０）の発酵液から得られる。

【０００６】

【発明の概要】本発明は広範囲の真菌及びグラム陽性及
びグラム陰性細菌に対して活性を示す抗生物質ダイネマ
イシンＣ及びそのトリＯ−アセチル誘導体を提供する。 これらの化合物は、更に、インビトロ及びインビボで抗
腫瘍活性を示す。

【０００７】ダイネマイシンＣはミクロモノスポラ・チ
エルシナ（Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ　　ｃｈｅｒ
ｓｉｎａ）Ｍ９５６−１株の変異株を培養することによ
って得られる。変異株Ｆ１０８５と命名された変異株は
ミクロモノスポラ・チエルシナＭ９５６−１株をＮ−メ
チル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンで処理す
ることによって得られる。資化し得る炭素及び窒素源を
含有する水性栄養培地中、液内好気条件下で、変異株Ｆ
１０８５を培養培地中に実質量のダイネマイシンＣが該
生物によって生産されるまで培養する。ついで培養培地
からダイネマイシンＣを常用の手順によって回収する。 ダイネマイシンＣのトリアセテート誘導体はダイネマイ
シンＣの、例えば無水酢酸による、アセチル化によって
製造することができる。

【０００８】別の面において、動物宿主における細菌ま
たは真菌感染症を治療するために、または哺乳類宿主に
おける腫瘍を抑制するために有用な医薬組成物であって
、医薬的に許容し得る担体または希釈剤と組み合わされ
た細菌抑制、真菌抑制または腫瘍抑制有効量のダイネマ
イシンＣまたはそのトリアセテート誘導体によりなる医
薬組成物が提供される。本発明のさらなる面において、
動物宿主における細菌または真菌感染症を治療する方法
であって、宿主に、抗真菌または抗細菌有効量のダイネ
マイシンＣもしくはそのトリアセテート誘導体またはそ
の医薬組成物を投与することよりなる方法が提供される
。最後に、本発明は哺乳類宿主における腫瘍の増殖（ｇ
ｒｏｗｔｈ）を抑制する方法であって、宿主に、腫瘍抑
制量のダイネマイシンＣもしくはそのトリアセテート誘
導体またはその医薬組成物を投与することよりなる方法
を提供する。

【０００９】

【詳しい開示】本発明のダイネマイシンＣ抗生物質はミ
クロモノスポラ・チエルシナ変異株Ｆ１０８５またはそ
のダイネマイシンＣ生産性変異株の発酵によって生産さ
れる。Ｆ１０８５株はミクロモノスポラ・チエルシナＭ
９５６−１株（ＡＴＣＣ−５３７１０）の胞子懸濁液を
Ｎ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンで
処理することによって得た。

【００１０】生産性生物の分類学的研究変異株Ｆ１０８
５は記述された寒天培地上に生育した（ｇｒｏｗｎ）非
断片状栄養菌糸（ｎｏｎ−ｆｒａｇｍｅｎｔａｒｙ　　
ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ　　ｍｙｃｅｌｉａ）上に単一の
胞子を形成する。胞子の表面は短い鈍い棘（ｓｈｏｒｔ
　　ｂｌｕｎｔ　　ｓｐｉｎｅｓ）を有している。気生
菌糸（ａｅｒｉａｌ　　ｍｙｃｅｌｉｕｍ）、運動性胞
子（ｍｏｔｉｌｅ　　ｓｐｏｒｅ）及び特殊管（ｓｐｅ
ｃｉａｌｖｅｓｓｅｌｓ）は形成されない。下記表１に
示すように、栄養菌糸の色は無色〜オレンヂであり、胞
子形成後にブラウン〜ブラックになる。生育温度は１８
℃〜４９℃に亘る。硝酸塩は亜硝酸塩に還元されない。 食塩に対する耐性（ｔｏｌｅｒａｎｃｅ）は２％ではみ
られるが、３％ではみられない。糖の利用性のプロフィ
ールを表２に示す。変異株Ｆ１０８５の生育及び胞子形
成は、記述の培地上では、親株よりやや遅い。 しかしながら、変異株の上述の分類学的性質によると、
変異株Ｆ１０８５と親株Ｍ９５６−１の間に明瞭な差異
は認められない。

【００１１】

【表１】

【００１２】

【表２】

【００１３】変異株Ｆ１０８５の生物学的に純粋な培養
菌はアメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣ
Ｃ）に寄託され、微生物の永久コレクションにＡＴＣＣ
−５５０７７として加えられた。ミクロモノスポラ・チ
エルシナＭ９５６−１の変異株Ｆ１０８５の培養によっ
てダイネマイシンＡは生産されない。本発明は上記特定
変異株の使用に限定されないことが理解されるべきであ
る。該微生物の他のダイネマイシンＣ生産性変異株であ
って、Ｘ線照射、紫外線照射、ナイトロジェンマタート
処理、ファージへの暴露等の常用手段によって生成させ
ることができる変異株を含めることが特に意図される。

【００１４】ダイネマイシンＣの製造 ダイネマイシンＣはミクロモノスポラ・チエルシナＭ９
５６−１の変異株Ｆ１０８５またはそのダイネマイシン
生産性変異株を、水性栄養培地中、液内好気条件下に培
養することによって生産される。生産性微生物は資化し
得る炭素源、例えば、ムーアラビノース、Ｄ−キシロー
ス、スクロース、メリビオース、ラフィノース、可溶性
デンプンを含有する栄養培地中で増殖させる。この栄養
培地はまた資化し得る窒素源、例えばフィッシュミール
、ペプトン、大豆粉、落下生ミール、綿実ミール、コー
ンスティープリカーを含有する必要がある。栄養性無機
塩も培地に入れることができる。かかる塩はナトリウム
、カリウム、アンモニウム、カルシウム、ホスフェート
、カルフェート、クロライド、ブロマイド、ニトレート
、カーボネート等のイオンを与えることができる通常の
塩のいずれをも包含することができる。ダイネマイシン
Ｃの生産は生産性微生物の十分な増殖に資するいずれか
の温度、例えば１８℃〜４９℃で行うことができ、好適
には約２８℃の温度で行う。

【００１５】発酵はフラスコ中、または種々の容量の実
験室用または工業用発酵槽中で行うことができる。タン
ク発酵を用いる場合には、微生物の斜面培養物もしくは
土壌培養物または凍結乾燥培養物を少量の培養倍地に植
菌することによって栄養培養液中に無性植菌物（ｖｅｇ
ｅｔａｔｉｖｅ　　ｉｎｏｃｕｌｕｍ）を生じさせるこ
とが望ましい。このようにして活性な植菌物を得た後、
これをダイネマイシンＣの大規模生産のための発酵タン
ク培地に無菌的に移す。無性植菌物が生産される培地は
、生産性微生物の良好な増殖が得られる培地である限り
、タンク中で用いられる培地と同じでも異なってもよい
。 一般に、ダイネマイシンＣの最適な生産は役３−４日の
培養期間後に達成される。抗生物質の生産はテスト微生
物としてバチルス・ズブチリスを用いるペーパーディス
ク−寒天拡散アッセイによって関しできる。

【００１６】単離及び精製 発酵液からダイネマイシンＣの単離は溶媒抽出、クロマ
トグラフィー等の常用の単離精製法によって行うことが
できる。下記実施例２はダイネマイシンＣを実質植え純
粋な形態で得るために好ましい単離精製手順を例示する
。実施例３はダイネマイシンＣのトリアセチル誘導体の
製造を例示する。この誘導体はダイネマイシンＣを、不
活性有機溶媒中、無水酢酸等のアセサチル化剤と反応さ
せることによって得ることができる。

【００１７】ダイネマイシンＣ及びダイネマイシンＣト
リアセテートの物理科学的性質ダイネマイシンＣは無訂
正の、鮮明な（ｖｉｖｉｄ）濃紫色の粉末として得られ
た。このものはジメチルスルホキシド、１，４−ジオキ
サン、ジメチルホルムアミド及びアセトニトリルに可溶
、メタノール及び酢酸エチルにわずかに可溶、及び水及
びｎ−ヘキサンに実際上不要である。タイネマイシンＣ
の物理科学的性質を表３に要約する。ダイネマイシンＣ
はＨＰＬＣ及びＴＬＣ分析でダイネマイシンＡから区別
される。この成分のＵＶスペクトルは、ダイネマイシン
Ａと同１じ発色団、１，４，６−トリ−ヒドロキシ−８
，９−ジ置換アントラキノンによる、２３９、２９０、
５６８ｎｍあたりでの極大を示した。

【００１８】ダイネマイシンＣの分子式はＦＡＢ−ＭＳ
〔負（ｎｅｇａｔｉｖｅ）〕〔ｍ／ｚ５２１（Ｍ）−〕
及び１ＨＭＲスペクトル（図３）に基づきＣ３Ｈ１９Ｎ
Ｏ８とされた。ダイネマイシンＣのマススペクトルはダ
イネマイシンＡのマススペクトル〔ＦＡＢ−ＭＳ（ネガ
ティブ）、ｍ／ｚ５３７（Ｍ）−〕と１６質量単位異な
る。表４に示される如く、ダイネマイシンＣについては
δ：１２．３０ｐｐｍでノシグナル（カルボキシリック
プロトン）がなくなり、他方、アルデヒドプロトンに帰
属される新しいシグナルがδ：１０．０３ｐｐｍの位置
でダイネマイシンＣに見られた。スペクトルは、また、
ダイネマイシンＡの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルで観察され
た１，５−ジイン−３−エン系の２つのシス二重結合プ
ロトン（δ：６．１１，２Ｈ）を示した。

【００１９】トリアセチルダイネマイシンＣの物理科学
的性質を表５に要約する。アセチル誘導体のＩＲスペク
トル（図２）はダイネマイシンＣのスペクトルで観察さ
れたバンドに加え、１７６５ｃｍ−１に強いカルボニル
バンドを示す。１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（表６）におい
ては、１つのメチル（δ：１．０８）、３つのアセチル
メチル（２．３５，２．３６及び２．４４）、１つのメ
トキシ（４．０１）、３つのメチン（３．５３，５．０
５及び５．０８）、２つのオレフィニック（６．０９×
２）、３つのアロマティックプロトン（７．６２×２及
び８．０８）及び１つのアルデヒドプロトン（１０．０
２）が観察された。１３Ｃ−ＮＭＲでも対応する炭素シ
グナルが見い出された。４級炭素中に、エスペラマイシ
ンとのスペクトル比較から共役ジイン系を強く示唆する
４つの炭素がδ８９．６、８９．７、９７．５及び９７
．６に現われた。各炭素シグナルは、また、アルデヒド
炭素シグナルを除き、トリアセチルダイネマイシンＡの
対応する炭素と比較的良好な相関関係を示した。トリア
セチルダイネマイシンＡのカルボキシリック炭素はδ１
６７．３（ｓ）で共鳴し、一方、トリアセチルダイネマ
イシンＣのアルデヒドカルボニルシグナルは１３Ｃ−Ｎ
ＭＲスペクトル（表７）のδ１８８．０（ｄ）で観察さ
れた。従って、ダイネマイシンＣ及びトリアセチルダイ
ネマイシンＣの構造はダイネマイシンＡのＣ−５のカル
ボキシル基の代りにアルデヒド基を有していると結論し
た。すなわち、

【００２０】

【化７】

【００２１】

【表３】

【００２２】

【表４】

【００２３】

【表５】

【００２４】

【表６】

【００２５】

【表７】

【００２６】ダイネマイシンＣ及びそのトリアセテート
誘導体の生物学的活性インビトロ抗細菌及び抗真菌活性
栄養寒天〔ｐＨ，ディフコ（Ｄｉｆｃｏ），１０５ｃｆ
ｕ／ｍｌ含有〕を２倍連続管希釈法（ｔｗｏ−ｆｏｌｄ
　　ｓｅｒｉａｌ　　ｔｕｂｅ　　ｄｉｌｕｔｉｏｎｍ
ｅｔｈｏｄ）により最小阻止濃度（ＭＩＣ）を測定した
。３２℃で１８時間インキュベーション後、ＭＩＣを測
定した。ダイネマイシン（及びそのトリアセテートはグ
ラム陽性微生物に対して強い活性を示した。両化合物は
これらの微生物に対してアミカシン（ａｍｉｋａｃｉｎ
）よりはるかに良好な活性を有していた。７つのシュー
ドモナス菌株及び２つのキサントモナス菌株を含むグラ
ム陰性微生物に対して、ダイネマイシンＣトリアセテー
トはＭＩＣ０．０５−０．８ｍｃｇ／ｍｌの範囲の活性
を示した。ダイネマイシンＣはシュードモナス．エルギ
ノーサ種に対しては活性を示さなかったが、エンテロバ
クター・クロアカヱ（ｃｌｏａｃａｅ）ＩＰＭ−１２及
びセラチア．マルセッセンスＩＰＭ−１６を除く他のグ
ラム陰性菌についてはアミカシンより優れた活性を示し
た。

【００２７】

【表８】

【００２８】

【表９】

【００２９】１／１５Ｍリン酸緩衝液でｐＨ７．０に調
節した酵母形態寒天（ｙｅａｓｔｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ
　　ａｇａｒ）上での寒天希釈法によってダイネマイシ
ンＣ及びそのトリアセテートの抗真菌ＭＩＣを測定した
。 １０６ｃｅｌｌｓ／ｍｌの真菌懸濁液の一定量５μｌを
マルチ植菌器（ｍｕｌｔｉｉｎｏｃｕｌａｔｏｒ）で抗
生物質含有寒天板上に植菌した。２８℃で４０時間イン
キュベーション後、真菌の生育を事実上完全に阻止する
抗生物質の最低濃度（ＭＩＣ）を決定した。

【００３０】ダイネマイシンＣ及びダイネマイシンＣト
リアセテートはアンホテリシン（ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃ
ｉｎ）耐性株であるキャンディダ・アルビカンスＡＴＣ
Ｃ３８２４７に対し、それぞれ０．８ｍｃｇ／ｍｌ及び
０．４ｍｃｇ／ｍｌの活性を示し、これらの活性はケト
コナゾール（ｋｅｔｏｃｏｎａｚｏｌｅ）より強力であ
った。クリプトコッカス・ネオフォルマンス（ｎｅｏｆ
ｏｒｍａｎｓ）Ｄ４９及びクリプトコッカス・ネオフォ
ルマンスＩＡＭ４５１４に対し、ダイネマイシンＣはア
ンホテリシンＢ及びケトコナゾールよりはるかに活性で
あったが、ダイネマイシンＣトリアセテートはこれら２
つの菌株に対して不活性であった。

【００３１】

【表１０】

【００３２】抗腫瘍活性 ダイネマイシンＣ及びそのトリアセテート誘導体をネズ
ミ及びヒトの腫瘍細胞系に対するインビトロ細胞毒性に
ついてテストした。ダイネマイシンＡ及びそのトリアセ
テート誘導体を基準化合物として用いた。ウシ胎児血清
（ＦＣＳ，１０％）及びカナマイシン（６０ｍｃｇ／ｍ
ｌ）を補った強化イーグル最少必須培地（ａｕｒｉｃｈ
ｅｄ　　Ｅａｇｌｅ　　ｍｉｎｉｍｕｍ　　ｅｓｓｅｎ
ｔｉａｌ　　ｍｅｄｉｕｍ（ＭＥＭ）にＢ−１６−Ｆ１
０（ネズミ黒色腫）細胞を、ＦＣＳ（１０％）、ペニシ
リン（１００μ／ｍｌ）及びストレプトマイシン（１０
０ｍｃｇ／ｍｌ）を補ったマッコイ５Ａ培地（Ｍａｃｃ
ｏｙ’ｓ　　５Ａ　　ｍｅｄｉｕｍ）にＨＣＴ−１１６
（ヒト結腸癌）細胞をそれぞれ対数増殖期まで生育させ
て回収し、テスト物質をそれぞれ１．５×１０４、１．
３×１０４．、１．３×１０４、２．５×１０４及び３
．０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍｌの濃度で加えた９６穴ま
たは２４穴組織培養平板（ｐｌａｔｅ）の穴に接種した
。ついで５％ＣＯ２及び９５％空気の加湿された雰囲気
下３７℃で７２時間インキュベートした。生存細胞を０
．００６％ニュートラルレッド（ｎｅｕｔｒａｌ　　ｒ
ｅｄ）溶液で染色した後、５４０ｎｍでの比色定量によ
って細胞毒活性を測定した。結果を表１１にＩＣ５０よ
って要約する。ダイネマイシンＣはダイネマイシンＡと
殆ど同程度の活性を示し、これらの化合物のアセテート
はＢ１６黒色腫に対して有能な活性を示した。

【００３３】

【表１１】

【００３４】上述の如く、ダイネマイシンＣ及びそのト
リアセチル誘導体は有能な抗細菌及び抗真菌活性を有し
、かかる微生物によって引き起こされる哺乳類及び他の
動物の治療的処置に有用である。これらの化合物は、ま
た、医療用及び歯科用器具の殺菌等の、抗微生物剤の他
の通常の適用のために用いることもできる。ダイネマイ
シンＣ及びそのトリアセチル誘導体は、また、哺乳類に
おける悪性腫瘍の増殖を抑制するのに治療的に有用であ
る。

【００３５】従って、本発明は細菌または真菌の感染症
に冒された動物宿主を治療する方法であって、宿主に、
抗細菌または抗真菌有効用量のダイネマイシンＣもしく
はダイネマイシンＣトリアセテートまたはその医薬組成
物を投与することを特徴とする方法を提供する。また、
哺乳類における悪性腫瘍の増殖を抑制する方法であって
、哺乳類宿主に、腫瘍抑制有効用量のダイネマイシンＣ
もしくはダイネマイシンＣトリアセテートまたはその医
薬組成物を投与することを特徴とする方法も提供される
。

【００３６】別の面において、本発明は医薬上許容され
る担体または希釈剤と組み合わされた、抗細菌または抗
真菌有効量のダイネマイシンＣまたはダイネマイシンＣ
トリアセテートよりなる医薬組成物を提供する。本発明
は、さらに、医薬上許容される担体または希釈剤と組み
合わされた、腫瘍抑制有効量のダイネマイシンＣまたは
ダイネマイシンＣトリアセテートよりなる医薬組成物を
提供する。

【００３７】医薬組成物は他の活性な抗微生物剤または
抗腫瘍剤を含有していてもよく、望ましい投与ルートに
適した医薬形態に仕上げることができる。かかる組成物
の例は錠剤、カプセル剤、丸剤、粉末剤、顆粒剤等の経
口投与用固体組成物；溶液剤、懸濁剤、シロップ剤、エ
リキシル剤等の経口投与用液体組成物；及び無菌の溶液
剤、懸濁剤、乳濁剤等の非経口投与用製剤を包含する。 非経口投与用製剤は、また、使用直前に無菌の水、食塩
水または他の適当な無菌の注入し得る媒体に溶解するこ
とができる無菌固体組成物の形態で製造することも可能
である。

【００３８】抗微生物剤として使用するに際しては、ダ
イネマイシンＣもしくはダイネマイシンＣトリアセテー
トまたはその医薬組成物を活性成分の濃度が処置される
特定微生物の最小阻止濃度よりも大となるように、投与
する。抗腫瘍剤としての使用に際し、与えられた哺乳類
宿主に対するダイネマイシンＣ及びダイネマイシンＣト
リアセテートの最適の用量及び規定療法（ｒｅｇｉｍｅ
ｎｓ）は当業者が容易に確かめることができる。もちろ
ん、用いられる化合物の実際の投与量が製造された特定
の組成物、適用形式（ｍｏｄｅ　　ｏｆ　　ａｐｐｌｉ
ｃａｔｉｏｎ）、及び特定の位置（ｓｉｔｕｓ）、宿主
及び治療対象疾患によって変化することは理解されるで
あろう。薬物の作用に影響する（ｍｏｄｉｆｙ）多くの
因子、例えば年令、体重、性、日常食（ｄｉｅｔ）、投
与の時間、投与ルート、排泄速度（ｒａｔｅ　　ｏｆ　
　ｅｘｃｒｅｔｉｏｎ）、患者の症状、薬物の組合せ、
反応感受性（ｒｅａｃｔｉｏｎ　　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉ
ｔｉｅｓ）及び病気の重さを考慮することになろう。

【００３９】以下の実施例はもっぱら例示目的で示され
るものであり、本発明の範囲を限定することを意図する
ものではない。他に別段の説明がない場合、用いたすべ
ての用量比は容量／容量である。 実施例１ ダイネマイシンＣの発酵 ラクトース１％、可溶性デンプン３％、フィッシュミー
ル１％、ＣａＳＯ４０．６％及びＣａＣＯ３　　０．５
％（ｐｈ７．０）よりなる種培地１５０ｍｌを含む５本
の５００ｍｌエルレンマイカーフラスコにＦ１０８５株
の十分に生育させた斜面培養物を植菌した。種培養フラ
スコをロータリー振盪機（２００ｒｐｍ）上３２℃で４
日間培養し、ついでコーンスターチ１％、ファーマメデ
ィア（ｐｈａｒｍａｍｅｄｉａ）０．５％、ＣａＣＯ３
　　０．１％、ＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ０．００５％及び
ＮａＩ　　０．００００５％よりなり、ｐＨを殺菌後７
．０に調節した生産培地１２Ｌを含有する２０Ｌ攪拌ジ
ャーファーメンターに種培養物５００ｍｌを移した。発
酵槽を２５０ｒｐｍの攪拌下、通気速度１２Ｌ／ｍｉｎ
、温度３０℃で９０時間操作した。発酵液中での抗生物
質生産を指標微生物としてバチルス．ズブチリスＰＣＩ
２１９を用いるペーパーディスク寒天拡散アッセイによ
って監視した。各成分の分析のため、ＴＬＣ及びＨＰＬ
Ｃも用いた。

【００４０】実施例２ ダイネマイシンＣの単離精製 実施例１の一般的手順によって得た回収培養液（５２Ｌ
）をｎ−ブタノール（２８Ｌ）で抽出した。混合物をシ
ャープレス型（ｓｈａｒｐｌｅｓ　　ｔｙｐｅ）遠心分
離機によって菌糸体ケーキ、水層及びｎ−ブタノール層
に分離した。溶媒抽出液（２５Ｌ）を真空濃縮して小客
量とし、ついで農縮液を酢酸エチル（１Ｌ）に加えて生
物学的に不活性な固体を析出させた。不純物を濾去した
後、瀘液を水（３．２Ｌ）で洗浄し、乾燥して暗褐色油
状物質（３３．６ｇ）を得た。粗製の物質を酢酸エチル
−メタノール−水（６：１０：２０）３６０ｍｌに溶解
し、バッチ式操作でＳＰ−８００（三菱化成，１００ｍ
ｌ）に吸着させた。水（４５０ｍｌ）及び水性メタノー
ル（５０％及び８０％）各４５０ｍｌで洗浄後、８０％
水性アセトン（９２０ｍｌ）で活性部分（ｔｈｅ　　ａ
ｃｔｉｖｉｔｙ）を溶出し、真空濃縮して暗緑色油性物
質（３．６ｇ）を得た。

【００４１】ダイネマイシンＣを含有する油性物質を展
開溶媒としてメタノール−酢酸エチル（１：１）を用い
るセファデックスＬＨ−２０カラム（φ２．５×４０ｃ
ｍ）クロマトグラフィーに付した。ＴＬＣ（ＳｉＯ２，
キシレン−メチルエチルケトン−メタノール＝５：５：
１，ｖ／ｖ）によって監視し、適切な画分を乾燥して暗
紫色吸湿性固体２１５ｍｇを得た。この固体を１，４−
ジオキサン２ｍｌに溶解し、予め８０％水性メタノール
で平衡化した逆相シリカゲル（ＯＤＳ，Ａ６０，３５０
／２５０メッシュ，山村化学研究所，φ２．５×３５ｃ
ｍ）に付した。カラムを８０％水性メタノール及び８０
％水性アセトンで展開し、溶出液をＨＰＬＣ〔ＹＭＣゲ
ル（ＯＤＳ），Ａ３０１−３，４．６ｍｍＩ．Ｄ．×１
００ｍｍ，３μｍ，山村化学研究所；移動相として０．
８ｍｌ／ｍｉｎの流速のアセトニトリル−０．１５％Ｋ
Ｈ２ＰＯ４，ｐｈ３．５（７５：２５　　ｖ／ｖ）；検
出は５９５ｎｍでのＵＶ吸収〕で監視した。活性画分を
回収し、乾燥してダイネマイシンＣの半ば純粋な固体（
１０．３ｍｇ）を得た。この試料をアセトニトリルを用
いるセファデックスＬＨ−２０カラム（φ４．２×３０
ｃｍ）クロマトグラフィーに付し、均質で鮮明な濃紫色
粉末としてダイネマイシンＣを得た（３ｍｇ）。

【００４２】実施例３ トリアセチルダイネマイシンＣ ダイネマイシンＣ（１２ｍｇ）をピリジン（１．０ｍｌ
）中室温で２２時間無水酢酸で処理した。反応混合物を
トルエンの添加下に真空濃縮して溶媒を除去した。残渣
をＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ（１：１）０．５ｍｌに溶解
し、溶液をシリカゲルプレート（メルク，キーゼルゲル
６０Ｆ２５４，２０×２０ｃｍ）上に塗布した。プレー
トをキシレン−メチルエチルケトン（１：１）で展開し
、目的とする部分（Ｒｆ０．６０−０．８５）を掻き取
り、ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ（５：１）６０ｍｌで溶出
した。溶出液を真空蒸発して、ダイネマイシンＣに比較
して増加した溶解度を有する均質なトリアセチルダイネ
マイシンＣ（９．５ｍｇ）を得た。

【図面の簡単な説明】

【図１】ダイネマイシンＣ（ＫＢ〜中）の赤外吸収スペ
クトルを示す。

【図２】トリアセチルダイネマイシンＣ（ＫＢ〜中）の
赤外吸収スペクトルを示す。

【図３】ＤＭＳＯ−ｄ５中でのダイネマイシンＣのプロ
トン磁気共鳴スペクトルを示す（４００ＭＨｚ）。

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　式 【化１】 を有するダイネマイシンＣと命名された化合物。
2. 【請求項２】　　式 【化２】 を有するトリアセチルダイネマイシンＣと命名された化
   合物。
3. 【請求項３】　　式 【化３】 を有するダイネマイシンＣを製造する方法であって、ミ
   クロモノスポラ・チエルシナのダイネマイシンＣ生産性
   株を、資化し得る炭素及び窒素源を含有する水性栄養培
   地中、液内好気条件下に、該生物によって実質量のダイ
   ネマイシンＣが培養培地中に生産されるまで培養し、つ
   いでダイネマイシンＣを培養培地から回収することより
   なる方法。
4. 【請求項４】　　ダイネマイシンＣ生産性株がミクロモ
   ノスポラ・チエルシナＦ１０８５（ＡＴＣＣ−５５０７
   ７）またはその変異株である請求項３の方法。
5. 【請求項５】　　微生物ミクロモノスポラ・チエルシナ
   変異株Ｆ１０８５（ＡＴＣＣ−５５０７７）の生物学的
   に純粋な培養菌であって、資化し得る炭素及び窒素源を
   含有する培養培地中液内好気条件下での培養によって、
   抗生物質ダイネマイシンＣを回収し得る量生産し得る培
   養菌。
6. 【請求項６】　　式 【化４】 のダイネマイシンＣを不活性有機溶媒中でダイネマイシ
   ンＣの１１，１５及び１８位にアセチル基を導入し得る
   アセチル化剤と反応させることを特徴とする式【化５】 を有するトリアセチルダイネマイシンＣを生産する方法
   。
7. 【請求項７】　　ダイネマイシンＣを有効成分とする腫
   瘍抑制剤。
8. 【請求項８】　　トリアセチルダイネマイシンを有効成
   分とする腫瘍抑制剤。
9. 【請求項９】　　ダイネマイシンＣを有効成分とする細
   菌感染症治療剤。
10. 【請求項１０】　　トリアセチルダイネマイシンＣを有
    効成分とする細菌感染症治療剤。
11. 【請求項１１】　　ダイネマイシンＣを有効成分とする
    真菌感染症治療剤。
12. 【請求項１２】　　トリアセチルダイネマイシンＣを有
    効成分とする真菌感染症治療剤。