NO164038B - Mikrobiologisk frete for fremstilling av antracykl inderivater ved fermentering av streptomyces purpurascenshpl y-11472, dsm 2658. - Google Patents
Mikrobiologisk frete for fremstilling av antracykl inderivater ved fermentering av streptomyces purpurascenshpl y-11472, dsm 2658. Download PDFInfo
- Publication number
- NO164038B NO164038B NO854909A NO854909A NO164038B NO 164038 B NO164038 B NO 164038B NO 854909 A NO854909 A NO 854909A NO 854909 A NO854909 A NO 854909A NO 164038 B NO164038 B NO 164038B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- rod
- roa
- kesarirodin
- hours
- fermentation
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract 3
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 title description 3
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 title 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 29
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 29
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 17
- 241000187410 Streptomyces purpurascens Species 0.000 claims abstract description 14
- 239000013000 chemical inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 14
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 10
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- XXIHHRIZGBRENI-WDSKDSINSA-N L-rhodinose Chemical compound C[C@H](O)[C@@H](O)CCC=O XXIHHRIZGBRENI-WDSKDSINSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 3
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 10
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 8
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 8
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 5
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 5
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 5
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 claims 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract description 13
- 238000002955 isolation Methods 0.000 abstract description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 24
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 11
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 10
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 8
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 8
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 8
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 8
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 5
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 5
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 5
- 238000012262 fermentative production Methods 0.000 description 5
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 5
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 4
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 3
- 239000003817 anthracycline antibiotic agent Substances 0.000 description 3
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- HVBSAKJJOYLTQU-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzenesulfonic acid Chemical compound NC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 HVBSAKJJOYLTQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229930194692 Rhodomycin Natural products 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M dihydrogenphosphate Chemical compound OP(O)([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000010265 fast atom bombardment Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 210000002196 fr. b Anatomy 0.000 description 2
- 210000003918 fraction a Anatomy 0.000 description 2
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 2
- FUKUFMFMCZIRNT-UHFFFAOYSA-N hydron;methanol;chloride Chemical compound Cl.OC FUKUFMFMCZIRNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 description 2
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 2
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 2
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N sulfanilamide Chemical compound NC1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003456 sulfonamides Chemical class 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- PKDBCJSWQUOKDO-UHFFFAOYSA-M 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC=CC=C1C(N=[N+]1C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 PKDBCJSWQUOKDO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UFBJCMHMOXMLKC-UHFFFAOYSA-N 2,4-dinitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O UFBJCMHMOXMLKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000167854 Bourreria succulenta Species 0.000 description 1
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical class [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- FHFHNVHRVKQQHN-UHFFFAOYSA-N Islandicin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=C(O)C(C)=CC(O)=C3C(=O)C2=C1O FHFHNVHRVKQQHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- KQXDHUJYNAXLNZ-XQSDOZFQSA-N Salinomycin Chemical compound O1[C@@H]([C@@H](CC)C(O)=O)CC[C@H](C)[C@@H]1[C@@H](C)[C@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](CC)[C@@H]1[C@@H](C)C[C@@H](C)[C@@]2(C=C[C@@H](O)[C@@]3(O[C@@](C)(CC3)[C@@H]3O[C@@H](C)[C@@](O)(CC)CC3)O2)O1 KQXDHUJYNAXLNZ-XQSDOZFQSA-N 0.000 description 1
- 239000004189 Salinomycin Substances 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 206010041925 Staphylococcal infections Diseases 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 241000204060 Streptomycetaceae Species 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical class [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 229930188522 aclacinomycin Natural products 0.000 description 1
- USZYSDMBJDPRIF-SVEJIMAYSA-N aclacinomycin A Chemical compound O([C@H]1[C@@H](O)C[C@@H](O[C@H]1C)O[C@H]1[C@H](C[C@@H](O[C@H]1C)O[C@H]1C[C@]([C@@H](C2=CC=3C(=O)C4=CC=CC(O)=C4C(=O)C=3C(O)=C21)C(=O)OC)(O)CC)N(C)C)[C@H]1CCC(=O)[C@H](C)O1 USZYSDMBJDPRIF-SVEJIMAYSA-N 0.000 description 1
- 229960004176 aclarubicin Drugs 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000007259 addition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 229940124350 antibacterial drug Drugs 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000009614 chemical analysis method Methods 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 235000019693 cherries Nutrition 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- GRWZHXKQBITJKP-UHFFFAOYSA-L dithionite(2-) Chemical compound [O-]S(=O)S([O-])=O GRWZHXKQBITJKP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 1
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Chemical class 0.000 description 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000011344 liquid material Substances 0.000 description 1
- GVALZJMUIHGIMD-UHFFFAOYSA-H magnesium phosphate Chemical compound [Mg+2].[Mg+2].[Mg+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O GVALZJMUIHGIMD-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000004137 magnesium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000157 magnesium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002261 magnesium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 235000010994 magnesium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M methylene blue Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- BDRTVPCFKSUHCJ-UHFFFAOYSA-N molecular hydrogen;potassium Chemical compound [K].[H][H] BDRTVPCFKSUHCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XONPDZSGENTBNJ-UHFFFAOYSA-N molecular hydrogen;sodium Chemical compound [Na].[H][H] XONPDZSGENTBNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- -1 nitrofurazine Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- NNFCIKHAZHQZJG-UHFFFAOYSA-N potassium cyanide Chemical compound [K+].N#[C-] NNFCIKHAZHQZJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 229940080817 rotenone Drugs 0.000 description 1
- JUVIOZPCNVVQFO-UHFFFAOYSA-N rotenone Natural products O1C2=C3CC(C(C)=C)OC3=CC=C2C(=O)C2C1COC1=C2C=C(OC)C(OC)=C1 JUVIOZPCNVVQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001548 salinomycin Drugs 0.000 description 1
- 235000019378 salinomycin Nutrition 0.000 description 1
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004317 sodium nitrate Substances 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- SKIVFJLNDNKQPD-UHFFFAOYSA-N sulfacetamide Chemical compound CC(=O)NS(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 SKIVFJLNDNKQPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002673 sulfacetamide Drugs 0.000 description 1
- 229950000244 sulfanilic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- AWDBHOZBRXWRKS-UHFFFAOYSA-N tetrapotassium;iron(6+);hexacyanide Chemical compound [K+].[K+].[K+].[K+].[Fe+6].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-] AWDBHOZBRXWRKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- SWGJCIMEBVHMTA-UHFFFAOYSA-K trisodium;6-oxido-4-sulfo-5-[(4-sulfonatonaphthalen-1-yl)diazenyl]naphthalene-2-sulfonate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].C1=CC=C2C(N=NC3=C4C(=CC(=CC4=CC=C3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=CC=C(S([O-])(=O)=O)C2=C1 SWGJCIMEBVHMTA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Chemical class 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
- C07H15/252—Naphthacene radicals, e.g. daunomycins, adriamycins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
- C12P19/56—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides having an oxygen atom of the saccharide radical directly bound to a condensed ring system having three or more carbocyclic rings, e.g. daunomycin, adriamycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Virology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Pyridine Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Oppfinnelsen vedrører en fremgangsmåte til fremstilling av nye kesarirodiner eller syreaddisjonssalter av kesarirodin betegnende antracyklinforbindelser, karakterisert ved at mikroorganismen HPL Y-11472 - DSM 2658 fermenteres i nærvær av kjemiske inhibitorer.
De nye forbindelser har en antibakteriell virkning mot gram-positive bakterier, og har dessuten en virkning mot en rekke av tumortyper. De nye forbindelser har den ifølge formel I viste generelle struktur:
hvori betyr H eller 0R2 og R2 betyr H, eller en sukker-kombinas jon av følgende type: (A) Roa-dF-Rod (B) Roa-Rod-Rod,
idet Roa betyr rodosamin, dF betyr deoksyfucose og Rod
betyr rodinose.
Strukturen av disse sukkere er vist i følgende formelbilder.
Rodosamin (Roa) Deoksyfucose (dF) Rodinose (Rod)
De to typer av kesarirodiner tilsvarende sukkerkombinasjonen (A) og (B) betegnes som kesarirodin A resp. kesarirodin B. Følgelig betyr "kesasirodin" i foreliggende oppfinnelse enten kesarirodin A eller B, eller en blanding av begge kesarirodin. Kesarirodin har i sin sakkariddel en dimetylaminogruppe og kan dermed danne syreaddisjonssalter. Til de syrer som ved tilleggsreaksjon med kesari-
rodin danner salter, hører f. eks. saltsyre, svovelsyre og vinsyre.
Mikroorganismer til fremstilling av kesarirodiner Streptomyces purpurascens (HPL Y-11472) - DSM 2658 hører til klassen Actinomycelater, Familie Streptomycetaceae og slekten Streptomyces. Mikroorganismen betegnes nedenfor som "S. purpurascens" - DSM 2658.
Antracyklin-antibiotika produseres påvisningsvis av forskjellige Streptomyces-arter og er omtalt i litteraturen. Disse antibiotika spiller en viktig rolle i medisinen for beherskning av tumorer i kreftterapien og som antibakterielle medikamenter. Tidligere er det fremstilt forskjellige antracyklinforbindelser. Av disse er det tidligere i klinikk-en ved karcinoma anvendt danomycin og adriamycin.
Rodomyciner, iso-rodomyciner og fra rodomycin avledede antracyklin-antibiotika er f. eks. omtalt i J. Med. Chemie 20,
957 - 960 (1977). Aklacinomycin er utførlig beskrevet i US-patent nr. 3 988 315 og av Oki et al. i J. Antibiotics
28, 830 (1975) og 32, 791-812 (1979).
Cinerubinene A og B beskrives i U.K patent nr. 846 130, US-patent nr. 3 864 489 og av Keller-Schlierlein et al i "Anti-microbial Agents and Chemotherapy", side 68 (1970), Chemical Abstracts 54, 14661 (1960) og J. Antibiotics 28, 830 (1975).
Ytterligere sammenfattende beskrivelse av antracyklinanti-biotika kan sees i "Index of Antibiotics from Antinomycetes",
Hamao Umezawa, Editor-in Chief, University Park Press, State College, Pennsylvania, USA (1976) som følger:
Oppfinnelsen vedrører en fremgangsmåte til fremstilling
av forbindelser som nedenfor betegnes som kesarirodiner,
hører til klasse av antracykliner og har den generelle formel I, ved fermentering av S-purpurascens HPL Y-11472-DSM 2658 ved en pH-verdi mellom 6,5 og 8,5, og en tem-
peratur mellom 24°C og 40°C under aerobe betingelser i et næringsmedium som gir karbon og nitrogen som næringsstof-
fer inneholdende uorganiske salter og sporelementer i fravær eller nærvær av antiskummidler som silikonolje eller desmorfen, og hvor det etter 20-36 t. fermentering tilsettes en kjemisk inhibitor 10-80 mg/l, og isolering av forbind-
elsene fra kulturvæske og mycelium etter 48-56 t. på den nedenfor omtalte måte.
Karbonkilder kan være glukose, sakkarose, stivelse, gly-
cerol, dekstrin, fruktose, melasse, havremel, maltose, lak-
tose og galaktose. Foretrukkede karbonkilder er glukose,
stivelse og sakkarose. Nitrogenkilder kan være sojabønne-
mel, gjærmel, gjærekstrakt, storfeekstrakt, maltekstrakt,
agar, pepton, kasein, bomullsfrøolje, kirsebærstenpulver og uorganiske forbindelser som ammoniumsalter eller nitrater (f. eks. ammoniumsulfat, natriumnitrat, ammoniumklorid og kaliumnitrat). Foretrukkede nitrogenkilder er maltekstrakt, gjærekstrakt, sojabønnemel og kaliumnitrat. Hvis ønsket kan næringsstoffet tilsettes i form av uorganiske salter som
natriumklorid, magnesiumsulfat, kaliumklorid, kaliumhydro-gen- og -dihydrogenfosfat, kalsiumklorid, kalsiumkarbonat, ammoniumhydrogenfosfat, natriumhydrogen- og -dihydrogenfosfat, magnesiumfosfat, og kalsiumfosfat. Som sporelementer kan anvendes jern-, mangan, kobber-, sink- og andre tungmetallsalter. Som kjemiske inhibitorer kan det tjene kaliumcyanid, kaliumheksacyanoferrat (III), metylenblå, tri-fenyltetrazoliumklorid, sulfanilsyre, sulfanilamid, askorbinsyre og dens salter, natriumazid, jern(III)klorid, etylen-diaminotetraeddiksyre,nitrofurazin, salinomycin, ditionit, rotenon, 2,4-dinitrofenol, erytromycin og dimetylsulfoksyd. Foretrukkede inhibitorer er askorbinsyre og dens salter, natriumazid og jern(III)klorid.
Kultiveringen av S. purpurascens - DSM 26 58 kan foregå ved temperaturer mellom 24°C og 40°C og en pH-verdi mellom 6,5
og 8,5. S. purpurascens DSM-2653 kultiveres : fortrinnsvis under aerobe betingelser ved 27°C og pH-verdi 7,0. Den kjemiske inhibitor som jern(III)klorid, natriumazid eller askorbinsyre kan tilsettes etter 20 - 36 timers fermentering for å oppnå en sluttkonsentrasjon mellom 10 og 80 mg/liter av fermenteringsvæsken. Fortrinnsvis tilsettes etter 27 timers fermentering natriumazid for å oppnå en sluttkonsentrasjon på 20 mg/liter. Fermenteringen avbrytes etter 48 til 56 timer når det er blitt dannet optimale mengder av de ønske-de forbindelser. Som fermentering foretrekkes submersfermen-tering. Ved begynnelsen av fermenteringen kan det til fermentereren inntil sluttkonsentrasjon på 0,025 % settes antiskummidler.
I den således dannede kulturvæske er det samlede kesarirodin inneholdt såvel i mycelium som i kulturfiltrat.
Forløpet av fermenteringen og dannelse av antracyklin-forbindelsene lar seg påvise ved ekstrahering av den samlede væske (Mycelium og kulturfiltrat) med et organisk oppløsnings-
middel og måling av abeorbsjonsintensiteten ved 492 nm,
og ved kromatografi av ekstraktet på kiselsyreplater, samt ved den antibakterielle virkning overfor Staphylococcus aureus 209 P. Som organisk oppløsningsmiddel kan det anvendes kloroform, etylacetat, butylacetat, butanol, toluen og benzen. Etylacetat foretrekkes.
Kesarirodiner kan fremstilles ved utvinning fra disse kulturvssker med egnede metoder. En av disse metoder som er vist ved det vedlagte skjema I baseres på ekstrahering. Således kan kesarirodin i kulturfiltratet eksempel-vis utvinnes ved ekstrahering med et med vann ikke blandbart oppløsningsmiddel som etylacetat, etter at pH-verdien av filtratet er blitt innstillet på 7,5 - 8,0.
Kesarirodin i mycelium kan isoleres ved behandling av mycelium, som er utvunnet ved filtrering eller sentrifuger-ing med etylacetat, kloroform, metanol, etanol, aceton, butanol, metyletylketon, en saltsyreoppløsning eller en eddik-syreoppløsning. Som oppløsningsmiddel foretrekkes aceton. Etter ekstraheringen fjernes acetonet og det vandige sjikt innstilles på en pH-verdi på 7,5 - 8,0, og ekstraheres med etylacetat. Man kan underkaste kulturvæsken også i overnevnte ekstraheringstrinn uten å avdele mycelet.
Etylacetat-ekstraktet av kulturfiltratet og mycelium kombi-neres eller opparbeides adskilt, konsentreres og deretter renses ifølge skjema II.
Skjema I
Isolering av det antibiotiske kompleks av S. purpurascens DSM 2658
Skjema II
Isolering og rensning av kesarirodin A og B
Oppløsningsmiddel A = kloroform : metanol : eddiksyre :
Aqua dest. : trietanolamin
(80 : 10 : 10 : 2 : 0,1).
En annen metode til fremstilling av kesarirodin fra kulturvæsken baseres pa adsorpsjon. Det kesarirodin holdige flytende materiale som f. eks. kulturfiltratet eller det ved overnevnte ekstraheringsfremgangsmåte fremstilte ekstrakt underkastes søylekromatografi, væskekromatografi eller en annen metode, hvor det anvendes et egnet adsorbens som aktiv-kull "diaion HP-20", "XAD", aluminiumoksyd, kiselgel eller "Sephadex" eller "Sephadex LH-20". Kesarirodinene kan elueres med metanol eller aceton, fra adsorbentene. De fremstilte eluater konsentreres til tørrhet idet det fremkommer rått kesarirodin som orangerødt pulver. De rå kesarirodinene kan renses idet man ønskelig ofte gjentar overnevnte ekstrahering- og adsorpsjonsteknikk. Anvendes kan alt etter ønske søylekromatografi med de allerede nevnte forskjellige absorbenter, motstrømsfordeling eller preparativt tynnsjiktkromatografi og krystallisering. Den videre rensning lar seg oppnå ved hjelp av høy-ydelses væskekromatografi.(HPLC)..
Som det er vist i skjema II gir fraksjon K tre komponenter hvorav den halvrene fraksjon A vidererenses for å gi en ren forbindelse, som nedenfor betegnes som kesarirodin A. Fraksjon B vidererenses for å gi en ren forbindelse som nedenfor betegnes som kesarirodin B. Fraksjonen 'X' er en blanding av ekstra antracyklin-forbindelser som dessuten videreunder-søkes. Den generelle struktur av kesarirodinene er iden-tisk med den med formel I.
De fra fermenteringsvæskene fra S. purpurascens DSM 2658 isolerte som i skjema I og II rensede kesarirodin A og B har de nedenfor viste strukturformleas Ia og Ib: Kesarirodin-antibiotika har antibakteriell virkning mot gram-positive bakterier, fungisid virkning og antitumor-virkning,
Oppfinnelsen skal forklares nærmere ved hjelp av noen eksem-pler .
Eksempel 1
Kultivering av S. purpurascens - DSM 26 58 for den fermentative produksjon av det antibiotiske virksomme kompleks
Streptomyces purpurascens - DSM 26 58 holdes på gjær-malte-agar med følgende sammensetning:
Mediet fordeles i reagensglass og steriliseres i 20 minutter ved 121°C. Reagensglassene avkjøles i skråstilling til fremstilling av skrå agar-rør. Skrå agar-rørene podes med kulturen og innkuberes 10 - 15 dager ved 28°C til det er å iaktta god vekst og sporedannelse. En sporesuspensjon i Aqua dest. av et skrå-agar-rør anvendes til å inokulere 5 erlenmeyerkolber til 500 ml som hver inneholder 100 ml av podningskulturene i mediet, eller en aspiratorflaske til 5 liter som inneholder 1 liter av det samme podningskultur-medium.
Podningskulturmediets sammensetning
Overnevnte medium fordeles i mengder på 100 ml på erlenmeyerkolber til 500 ml, eller i mengder på 1 liter på sugeflasker til 5 liter og steriliseres 5 minutter ved 125°C. Kolbene/flaskene avkjøles, podes med sporesuspen-sjoner og rystes 72 timer ved 28°C ved 240 omdreininger på en dreieryster med en amplitude på 3,75 cm. Med den godt oppvoksede podningskultur podes en 15 liters glass-fermenterer som inneholder 10 liter av produksjonsmediet i konsentrasjon på 5 volum-%. Produksjonsmediets sammensetning
0,025 % "Desmorfen" tilsettes som antiskummiddel til innhold av fermentereren.
Av det overenvnte medium haes 10 liter i en 15 liter fermen-terer. Mediet steriliseres ved hjelp av indirekte og direkte damp 28 minutter ved 121°C. Fermentereren avkjøles og inoku-leres med annet trinns podningskultur ( 5 volum-%). Fermenteringen foregår ved 27°C 0,51°C) under omrøring ved 170-180 omdreininger i 48 - 56 timer. Lufting foregår med en grad på 0,6 - 0,8 wm. I løpet av fermenteringen tilsettes etter ca. 24 - 32 timer som angitt nedenfor inhibitor-stoffet. (eksempel 6 - 9).
Fermentereren høstes etter forløp av 48 - 56 timer, når konsentrasjonen av det antibiotisk virksomme kompleks ut-gjør 30 - 50 mikrogram pr. ml og kulturvæskens pH-verdi ligger mellom 5,5 og 6,0. Svinge-cellevolumet utgjør på dette tidspunkt 11 - 13 ml pr 100 ml.
Eksempel 2
Kultivering av S. purpurascens - DSM 2658 for den fermentative produksjon av det antibiotisk virksomme kompleks
Kulturen dyrkes under samme betingelser som i eksempel 1 med følgende medier:
(1) Podningskulturmediets sammensetning: 7 2 timer ved 28oc. Produksjonsmediets sammensetning
I løpet av fermenteringen tilsettes som omtalt nedenfor etter ca. 24-32 timer den kjemiske inhibitor (eksempel 6-9). Fermentereren høstes etter forløp av 48-56 timer når konsentrasjonen av antibiotisk virksomt stoff utgjør 20-40 mikrogram pr. ml, og kulturvæskens pH-verdi ligger mellom 5,8 og 6,2. Ved innhøstningstidspunktet ligger det avsatte cellevolum ved 11-13 ml pr. 100 ml.
Eksempel 3
Kultivering av S. purpurascens - DSM 2658 for den fermentative produksjon av antibiotikakompleks
Kulturen dyrkes under de samme betingelser som i eksempel
1 med følgende medier:
Podningskulturmediets sammensetning
72 timer ved 28°C. Produksjonsmediets sammensetning
I løpet av fermenteringen tilsettes etter ca. 24-32 timer som omtalt nedenfor den kjemiske inhibitor (eksempel 6-9). Fermenteringen avbrytes etter 48 - 52 timer.
Eksempel 4
Kultivering av S. purpurascens - DSM 2658 for den fermentative produksjon av det antibiotiske virksomme kompleks
Kulturen dyrkes under de samme betingelser som i eksempel 1 med følgende medium:
Stammeholde- agars- sammensetning:
Podhingskulturmediets sammensetning: 72 timer ved 28°C.
Produksjonsmediets sammensetning:
I løpet av fermenteringen tilsettes i løpet av 24-32 timer en kjemisk inhibitor som omtalt nedenfor (eksempel 6-9). Fermentereren høstes etter 48-52 timer, når konsentrasjonen av det antibiotiske virksomme kompleks utgjør 25-40 mikrogram pr. ml, og kulturvæskens pH-verdi svinger mellom 6,3 og 6,4. Ved høstningstidspunktet utgjør det avsatte cellevolum 5,0-6,0 ml pr. 100 ml.
Eksempel 5
Kultivering av S. purpurascens - DSM 2658, den fermentative produksjon av det antibiotiske virksomme kompleks.
Kulturen virker på samme måte som i eksempel 1 med følgende medium:
Podningskultur- mediesammensetning:
72 timer ved 28°C.
Eksempel 6
' Tilsetning av kjemisk inhibitor:
Det fremstilles en konsentrert oppløsning av ascorbinsyre eller dens salter (20 mg/ml) i aqua dest. og steriliseres ved en sterilfiltrering. Den gir som omtalt i eksempel 1-5 satt til fermenteringsmediet fra 24-32 timer etter begynt fermentering, idet en sluttkonsentrasjon på 20-100 mg stoff pr. liter oppnås.
Eksempel 7
Tilsetning av en kjemisk inhibitor:
Natriumazid blir i konsentrert (20 mg/ml) steril vandig oppløsning satt til fermenteringsmediet som omtalt i eksemplene 1-5, ca. 24-32 timer etter begynt fermentering til det oppnås en sluttkonsentrasjon på 10-80 mg stoff pr. liter.
Eksempel 8
Tilsetning av en kjemisk inhibitor:
Jern(III)klorid oppløses til en konsentrasjon på 20 mg/ml
i vann, oppløsningen steriliseres ved filtrering og settes til det i eksemplene 1-6 omtalte fermenteringsmedium ca. 24-32 timer etter begynt fermentering for å gi en slutt-konsentras jon på 10-100 mg stoff/liter.
Eksempel 9
Tilsetning av en kjemisk inhibitor:
Tilsetning av et sulfonamid som sulfanilamid, sulfacetamid eller sulfonamid foregikk ved tilsetning av en steril konsentrert (20 mg/ml) vandig oppløsning til det i eksemplene 1-5 omtalte fermenteringsmedium, ca. 24-32 timer etter begynnende fermentering idet det oppnås en sluttkonsentrasjon på 40-200 mg stoff pr. liter.
Eksempel 10
Isolering av kesarirodin:
Det sentrifugeres ca. 4 0 liter av fermenteringsvæsken for
å adskille mycelet og kulturfiltrat fra hverandre. Isoleringsprosessen av kesarirodin fra mycelium og kulturfiltrat er utførlig vist på skjema I. (a) Kulturfiltratet innstilles med NaHC03 på en pH-verdi på 7,5, og ekstraheres 2 ganger med 20 ml etylacetat, de kombinerte til acetatekstrakter konsentreres deretter i vakuum til tørrhet. Man får ca. 1,5 g ekstrakt som betegnes som fraksjon K. (b) Det adskilte mycelium ekstraheres tre ganger med 20 ml aceton:acetat-puffer (9:1) ved pH 3,5, kombinerte ekstrakter konsentreres under vakuum for å fjerne aceton. Det gjen-blivende vandige sjikt innstilles med NaHCO^ til en pH-
verdi på 7,5 og ekstraheres tre ganger med 30 liter etylacetat. De kombinerte ekstrakter konsentreres under vakuum til tørrhet. Man får ca. 6,0 g ekstrakt som betegnes som fraksjon K.
Kesarirodininneholdende ekstrakt, dvs. fraksjon K fra mycelium og kulturfiltrat, kan oppberedes sammen eller adskilt. Isoleringsprosessen av kesarirodin A og B er vist på skjema
II.
(c) 7,5 g ekstrakt (fraksjon K) haes på en 4,5 x 40 cm tynnsjiktkromatografi-kiselgel-H-(BDH)-søyle og elueres med følgende oppløsningsmiddelblanding: Kloroform : metanol : eddiksyre : aqua dest. : trietanolamin i forhold 80 : 10 : 2 : 0,1. Ved denne fremgangsmåte får man ca. 50 mg av den halvrene fraksjon A som inneholder kesarirodin A og ca. 60 mg av den halvrene fraksjon B som inneholder kesarirodin B.
De halvrene fraksjoner vaskes første med petroleter og deretter adskilt renses med preparativ tynnsjiktkromatografi på kiselgel ved hjelp av oppløsningsmiddelsystem som består av kloroform : metanol : eddiksyre : aqua dest. : trietanolamin i forhold 80 : 10 : 2,0 : 0,1. Man får 27 mg av stoffet kesarirodin A og 32 mg av stoffet kesarirodin B.
Karakterisering av kesarirodin A og B:
De rene stoffer kesarirodin A og B analyseres resp. ved hjelp av kjemisk analyse og spektroskopiske metoder.
For UV-absorbsjonsmaksima anvendes stoffet i en konsentrasjon på 10 - 30 mg/liter. Absorbsjonsspektrum ble opp-tegnet på områder fra 200 til 800 nm.
Protonresonansspektret (<1>H-NMR-spektret) ble opptatt på
et HX-270 Bruker Fourier-transform Magnetic Resonance Spectrpmeter ved 270 MHz. Prøvens konsentrasjon utgjorde 2,6-2,7 mg/0,5 ml 99,8 % CDC13, blandet med 0,1 ml 5 % Na2 C03 i 99,5 % D20.
Massespektrum ble bestemt i et MS-902S AEI, massespektrometer (FAB (Fast-Atom-Bombardment)-Positivionemetoden).
Fysikalsk- kjemiske egenskaper av kesarirodin A:
Utseende: Orange-rødt pulver.
Kjemisk formel: C4o<H>53°l4<N>
Molekylvekt: 77.
UV- spektrum:
X max i:
(a) metanol: 203, 234, 253, 292, 464, (sh), 478, (sh), 492, 512 (sh), 526, 575 nm. (b) 0,1 N-HCl-metanol: 203, 234, 253, 292, 464 (sh),
478 (sh), 492, 512 (sh).,
526 (sh), 558 (sh) nm.
(c) 0,1 N-NaOH-metanol:20 3, 239, 298, 554, 586 nm.
<1>H-nMR-spektrum (CDC13 + 0,1 ml 5 % Na2C03 i D2<D) :
7,88 (d, J=7 Hz, 1H), 7,69 (t, J=( Hz, 1H), 7,29 (d, J=
3 Hz, 1H), 5,49 (d, J = 3 Hz, 1H), 5,21 (s, 1H), 5,03 (d, J= 3 Hz, 1H), 4,85 (s, 1H), 4,51 (q, J=6 Hz, 1H), 4,21 (q,
J=6 Hz, 1H), 4,0 - 4,1 (kompleks, 2H), 3,72 (s, 1H),
3,65 (s, 1H), 3,56 (s, 1H), 3,25 (d, J=20 Hzm 1H),
2,56 (d, J=20 Hz, 1H), 2,34 (bd, J=14 Hz, 1H), 2,15
(s, 6H), 2,0 - 2,2 (kompleks, 4H), 1,61 - 1,9 (kompleks 8H), 1,17 - 1,32 (overlappende dubletter, 6H), 1,14
(d, J=6 Hz, 3H), 1,07 (t, J=7,5 Hz, 3H).
Oppløselighet:
Kesarirodin A er oppløselig i metanol, aceton, etylacetat, kloroform og svake syrer, lite oppløselig i heksan og petroleter. Det danner i metanol en orangerød oppløsning/ antar imdidlertid i alkalisk miljø en purpurrød farve.
Tynnsj iktkromatografi:
Kesarirodin A har på kiselgel-plater med forskjellige oppløs-ningssytemer de i tabell I viste R^-verdier.
De overnevnte verdier viser at kesarirodin A har struktur-formel Ia.
Fyslkalsk- kjemiske egenskaper av kesarirodin B:
Uteseende: Orange-rødt pulver
Kjemisk formel: C.riHr-0,oN
J 40 53 13
Molekylvekt: 755.
UV- spektrum:
X max i:
(a) metanol: 203, 234, 253, 292, 464 (sh),
478 (sh), 492, 510 (sh), 526, 582 nm.
(b) 0,1 N-HCl-metanol: 203, 234, 253, 292, 464 (sh), 478
(sh), 492, 510 (sh), 526 (sh),
558 (sh) nm.
(c) 0,1 N-NaOH-metanol: 203, 239, 298, 552, 584 nm.
■"■H-NMR-spektrum (CDC13 + 0,1 ml 5 % Na2C<0>3 i D20) :
7,88 (d, J=7 Hz, 1H), 7,7 (t, J=( Hz, 1H), 7,31 (d, J=8
Hz, kH), 5,52 (d, J=3 Hz, 1H), 5,21 (s, 1H), 4,95 (s,
1H), 4,83 (d, J=3 Hz, 1H), 4,4 (q, J=6 Hz, 1H), 3,98 -
4,08 (kompleks, 2H), 3,78 (s, 1H), 3,56 (s, 1H), 3,46
(s, 1H), 3,26 (d, J=20 Hz, 1H), 2,58 (d, J=20 Jz, 1H),
2,25 - 2,38 (kompleks, 1H), 2,28 (s, 6H), 1,88 - 2,2 (kompleks, 4H), 1,5 - 1,85 (kompleks, 10H), 1,02 - 1,35 (overlappende multipletter, 12H).
Oppløselighet:
Kesarirodin B er oppløselig i metanol og aceton, etylacetat, kloroform og svake syrer, er lite oppløselig i n-heksan og petroleumseter. Det danner i metanol en orangerød oppløsning, antar i alkalisk miljø derimot en purpurrød farve.
Tynnsjiktkromatografi:
Kesarirodin B har på 'kiselgelplater ved anvendelse av forskjellige oppløsningssystemer de i tabell I angitte R^-verdier.
De overnevnte resultater viser at kesarirodin B har struk-turformel Ib.
Antibakteriell virkning av kesarirodin
Det ble bestemt en bakteriostatisk virkning av kesarirodin. Resultatene er angitt som diameter (i millimeter) av hemme-ringen frembragt ved stoffet i form av en 1 mg/ml-oppløsning i et hull av 6 mm diameter i agar som inneholder prøveorga-nismen, vises i følgende tabell, tabell II. Kesarirodiner er virksomme mot grampositive bakterier også, og kan derfor anvendes som antibiotika til behandling av sopp- og staphylo-kokk-infeksjoner, difteri, pneumoni, osv.
Antitumor- virkning av kesarirodin:
Fastleggelsen av den zytostatiske aktivitet av kesarirodin foregikk på nedenfor omtalte måte på muse-L 1210-leukemiceller.
(a) Proliferasjonsprøve:
Ved denne in vitro-metode er det etter inkubasjon av cellene med forkjellige konsentrasjoner og prøvestoffer mulig å bestemme den inngitte mengde av en radioaktiv markert DNS-forløper (f. eks. 14C-tiamidin) i en voksende celle. Som kontroll tjener en samme fremgangsmåte underkastede ubehandlede L 1210-celler. Metoden sammenfattes kort i det følgende.
L 1210-celler i eksponensiell vekstfase (5 x 10 3/ml i RPMI 1640) inkuberes i 72 timer (37°C, 5 % C02, 95 % relativ fuktighet) i en 96-hull-mikrotiterplate med forskjellige konsentrasjoner av prøvestoffet. Som kontroller anvendes celler som bare bringes i berøring med det friske medium.
Det anlegges fire hull for hver medikamentkonsentrasjon og kontroll. Etter 65 timer tilsettes 50 yl 14C tiamidin (1,5 yCi/ml) for å markere celle DNS. Etter 4 timers inkubasjon høstes cellene, DMS adskilles med 5 % trifluoreddik-syre, og vaskes med vann og metanol. Etter tørkning ved 50°C bestemmes szintillasjonstallet med 5 ml szintillasjons-væske.
Resultatene uttrykkes som kvotient av scintillasjonsindeks etter inkubasjon med prøvestoffet med denne for kontroll-stoffet. Med de fastslåtte verdier tegnes dosisvirknings-kurve, og det fastslås grafisk verdien ^C^g/ dvs. den konsentrasjon av prøvestoffet som hemmer innbygning av markert tymidin sammenlignet til kontrollene rundt 5 %. IC,.g-verdiene er overfor stilt de av adriamycin i følgende tabell III. (b) Stammecelleprøve ( kontinuerlig eksperiment i mykagar) : Denne metode tjener til påvisning av virkning av prøve-stoffene på vekst av leukemicellene over flere generasjoner, (da varigheten av en cellesyklus utgjør 10-12 timer, omfattes i løpet av undersøkelsestidsrommet på 7 dager rundt 14 på hverandre følgende generasjoner).
I denne prøve beror virkningen av zytotoksiske stoffer
på nedsettelse av antall iakttagbare kolonier sammenlignet til ubehandlede kontroller. Det anvendes følgende metoder:
Pr. plate anvendes 500 L 1210-leukemiceller. Eksperimentene gjennomføres ved kontinuerlig inkubasjon ved forskjellige konsentrasjoner av prøvestoffet, idet stoffet før påføring av cellene på platen tilblandes det øvre agar-sjikt. Platene lagres 7 dager i et rugeskap (37°C 5 % C02, 95 % relativ luftfuktighet). Deretter helles antallet av dannede kolonier med en diameter på mer enn 60 ym med et omvendt mikro-skop. Resultatene uttrykkes som % sats av de på de behandlede plater dannede kolonier sammenlignet til de dannede kolonier av ubehandlede kontroller. Med de fastslåtte verdier tegnes en dosisvirknings-kurve hvorav det grafisk fastslås IC,.q-verdier. IC^^-verdien av kesarirodin sammenlignes i tabell III med verdiene for adriamycin.
Som anført ovenfor har forbindelsen ifølge oppfinnelsen antibakterielle fungicid og zytostatisk virkning, dvs. terapeutisk virkning, spesielt overfor maligne tumorer hos dyr og mennesker.
Forbindelsene og syreaddisjonssaltene kan derfor anvendes som medikamenter til behandling av infeksjonssykdommer som sykdommer og tumorer. Forbindelsene kan administreres på forkjellig måte i avhengighet av doseringsformen. Normalt administreres forbindelsene blandet med farmasøytisk vanlige bærestoffer eller fortynningsmiddel. Således kan de f. eks. administreres enkeltvis eller i blanding sammen med bærestoffer som maltose eller laktose, eller som ikke-toksiske komplekser, f. eks. som desoksyribonukleinsyre-kompleks.
En typisk administreringsform er injeksjon av en oppløsning av forbindelsene ifølge oppfinnelsen i destillert vann eller i fysiologisk kokesaltoppløsning. Oppløsningene kan injiseres intraperitonealt, intravenøst eller intraarteri-elt.
Dagsdose og enhetsdoser kan fastsettes fra dyreforsøk og også fra in vitro-prøver, således at den samlede dosis administreres kontinuerlig eller i avstander som ikke over-skrider et på forhånd fastlagt område. Således utgjør den samlede dose for en behandlingssyklus ved kreftsykdommer ca. 0,1 - 20 mg, fortrinnsvis 0,5 - 10 mg/kg legemsvekt. Denne dose kan administreres i tilsvarende brøkdeler over et tidsrom på 7 dager. For behandling av infeksjon- og soppsykdommer kommer det som dosisenhet i betraktning 0,1 - 10 mg, fortrinnsvis 0,5-5 mg/kg legemsvekt. Som dagsdose kan det administreres 1 til 3-ganger doseenheten.
Claims (2)
1.
Fremgangsmåte til fremstilling av kesarirodin-forbindelser som kan anvendes til behandling av bakterielle infeksjonssykdommer, sopp- og kreftsykdommer med formel
hvori Ri betyr resten OR2, idet R2 betyr sukkerkombinasjonen Roa-dF-Rod eller Roa-Rod-Rod, idet Roa betyr rodosamin, dF betyr desoksyfucose og Rod betyr rodinose, samt deres fysiologisk tålbare syreaddisjonssalter, karakterisert ved at mikroorganismen Streptomyces purpurascens HPL Y-11472, DSM 2658 fermenteres ved en temperatur på 24-40°C , pH 6,5-8,5 under aerobe betingelser i et næringsmedium og hvor det etter 20-36 timers fermentering tilsettes en kjemisk inhibitor 10-80 mg/l og de dannede forbindelser isoleres fra kulturvæsken og mycelet etter 48-56 timer ved ekstraksjon med organiske oppløsningsmidler, og etterfølgende kromatografi.
2.
Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at det som kjemisk inhibitor anvendes jern(III)klo-rid, natriumazid eller askorbinsyre.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19843446052 DE3446052A1 (de) | 1984-12-18 | 1984-12-18 | Anthracyclin-derivate, ein mikrobiologisches verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO854909L NO854909L (no) | 1986-06-19 |
NO164038B true NO164038B (no) | 1990-05-14 |
NO164038C NO164038C (no) | 1990-08-22 |
Family
ID=6253030
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO854909A NO164038C (no) | 1984-12-18 | 1985-12-05 | Mikrobiologisk fremgangsmaate for fremstilling av antracyklinderivater ved fermentering av streptomyces purpurascenshpl y-11472, dsm 2658. |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0186807B1 (no) |
JP (1) | JPS61145145A (no) |
AT (1) | ATE45582T1 (no) |
AU (1) | AU585918B2 (no) |
DE (2) | DE3446052A1 (no) |
DK (1) | DK587185A (no) |
ES (1) | ES8704506A1 (no) |
FI (1) | FI80723C (no) |
GR (1) | GR853020B (no) |
HU (1) | HU197596B (no) |
MX (1) | MX7626E (no) |
NO (1) | NO164038C (no) |
NZ (1) | NZ214561A (no) |
PH (1) | PH24107A (no) |
PT (1) | PT81692B (no) |
ZA (1) | ZA859607B (no) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3446052A1 (de) * | 1984-12-18 | 1986-07-17 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Anthracyclin-derivate, ein mikrobiologisches verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel |
DE3920062A1 (de) * | 1989-06-20 | 1991-01-10 | Hoechst Ag | Neue anthracyclin-derivate, ein verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel |
US5948896A (en) * | 1997-08-13 | 1999-09-07 | Gem Pharmaceuticals | Processes for preparing 13-deoxy anthracycline derivatives |
CN116064288B (zh) * | 2022-08-30 | 2024-04-09 | 内蒙古农业大学 | 一株植物解铁、促生浅绛红链霉菌hc7-22及其应用 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US436630A (en) * | 1890-09-16 | Truss-pad | ||
GB2048245B (en) * | 1979-04-27 | 1983-03-16 | Erba Farmitalia | Biosynthetic antracyline glycoside |
JPS5874694A (ja) * | 1981-10-29 | 1983-05-06 | Sanraku Inc | アントラサイクリン誘導体 |
DE3446052A1 (de) * | 1984-12-18 | 1986-07-17 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Anthracyclin-derivate, ein mikrobiologisches verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel |
-
1984
- 1984-12-18 DE DE19843446052 patent/DE3446052A1/de not_active Withdrawn
-
1985
- 1985-12-05 DE DE8585115490T patent/DE3572359D1/de not_active Expired
- 1985-12-05 NO NO854909A patent/NO164038C/no unknown
- 1985-12-05 AT AT85115490T patent/ATE45582T1/de active
- 1985-12-05 EP EP85115490A patent/EP0186807B1/de not_active Expired
- 1985-12-16 NZ NZ214561A patent/NZ214561A/xx unknown
- 1985-12-16 GR GR853020A patent/GR853020B/el unknown
- 1985-12-16 PH PH33181A patent/PH24107A/en unknown
- 1985-12-16 HU HU854802A patent/HU197596B/hu unknown
- 1985-12-16 FI FI854978A patent/FI80723C/fi not_active IP Right Cessation
- 1985-12-16 ES ES549951A patent/ES8704506A1/es not_active Expired
- 1985-12-17 ZA ZA859607A patent/ZA859607B/xx unknown
- 1985-12-17 MX MX85108U patent/MX7626E/es unknown
- 1985-12-17 DK DK587185A patent/DK587185A/da not_active Application Discontinuation
- 1985-12-17 JP JP60282181A patent/JPS61145145A/ja active Pending
- 1985-12-17 PT PT81692A patent/PT81692B/pt not_active IP Right Cessation
- 1985-12-17 AU AU51362/85A patent/AU585918B2/en not_active Ceased
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE3446052A1 (de) | 1986-07-17 |
MX7626E (es) | 1990-03-29 |
ES549951A0 (es) | 1987-04-01 |
AU5136285A (en) | 1986-07-17 |
NO854909L (no) | 1986-06-19 |
FI80723C (fi) | 1990-07-10 |
EP0186807A3 (en) | 1986-11-20 |
NZ214561A (en) | 1989-08-29 |
ES8704506A1 (es) | 1987-04-01 |
FI854978A0 (fi) | 1985-12-16 |
PH24107A (en) | 1990-03-05 |
EP0186807B1 (de) | 1989-08-16 |
FI80723B (fi) | 1990-03-30 |
DK587185A (da) | 1986-06-19 |
PT81692B (pt) | 1988-04-21 |
HUT43641A (en) | 1987-11-30 |
FI854978A (fi) | 1986-06-19 |
HU197596B (en) | 1989-04-28 |
JPS61145145A (ja) | 1986-07-02 |
GR853020B (no) | 1986-04-15 |
DK587185D0 (da) | 1985-12-17 |
NO164038C (no) | 1990-08-22 |
ZA859607B (en) | 1986-08-27 |
ATE45582T1 (de) | 1989-09-15 |
EP0186807A2 (de) | 1986-07-09 |
DE3572359D1 (en) | 1989-09-21 |
PT81692A (de) | 1986-01-01 |
AU585918B2 (en) | 1989-06-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4007167A (en) | Antibiotic BM123 and production thereof | |
DK145200B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af anthtacyclinglycosid-antibiotika | |
NZ208622A (en) | Anthracycline derivatives, preparation by fermentation process and pharmaceutical compositions | |
EP0185456B1 (en) | Cl-1577d and cl-1577e antibiotic/antitumor compounds, their production and use | |
KR20020092899A (ko) | 항생 물질 카프라자마이신류 및 그 제조법 | |
US4018972A (en) | Antibacterial agents cis-BM123γ1 and cis-BM123γ2 | |
EP0350623A2 (en) | BU-3420T antitumor antibiotic | |
NO164038B (no) | Mikrobiologisk frete for fremstilling av antracykl inderivater ved fermentering av streptomyces purpurascenshpl y-11472, dsm 2658. | |
DK146342B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af anthracyclinglycosidantibiotika betegnet ma 144-m1 og ma 144-m2 eller ikke toksiske syreadditionssalte eller komplekser deraf med desoxyribonucleinsyre | |
Speitling et al. | Demethyl mutactimycins, new anthracycline antibiotics from Nocardia and Streptomyces strains | |
US4598145A (en) | Albacarcins V and M | |
NO852758L (no) | 1-hydroksy-cytorodiner, en mikrobiologisk fremgangsmaate til deres fremstilling, og deres anvendelse som cytostatika | |
US5334613A (en) | Antibacterial substance BE-24566B | |
US4461831A (en) | Antitumor agents albacarcins V and M | |
CA1306213C (en) | Phenanthridine derivatives, process for the preparation thereof, and compositions containing them | |
DK161338B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af 2-hydroxyaclacinomycin a, b og n eller syreadditionssalte deraf samt en rekombinant mikroorganisme til anvendelse derved | |
EP0574857B1 (en) | Polycyclic compounds 31668P and 31668U, a process for their production and their use as antibiotic or antitumor agents | |
EP0659752B1 (en) | Antibacterial and anti-tumor epoxide derivate dc 114-a1 | |
JPH0578322A (ja) | 新規抗生物質sf2738物質及びその製造法並びに制癌剤 | |
EP0311054B1 (en) | Anthracycline Antibiotics | |
JPH04368388A (ja) | ダイネマイシンc抗腫瘍抗生物質 | |
JPH0576958B2 (no) | ||
WO1990009435A1 (en) | Altromycin compounds | |
JPS5813156B2 (ja) | シンコウセイブツシツ sf−1854 ブツシツノセイゾウホウ | |
US4256835A (en) | Process for preparing cephamycin C |