NO840336L - Fungicide triazolderivater. - Google Patents

Description

I

Nærværende oppfinnelse vedrører nye triazolderivater med fungicid aktivitet og som er anvendelige ved behandlingen av soppinfeksjoner hos dyr, inklusive mennesker, og som fungicider i landbruket. De er også i besiddelse av antileishmanisk aktivitet.

Ifølge oppfinnelsen tilveiebringes.det forbindelser med formelen

hvor R er en C^-C^ perfluoralkylgruppe, og R1 er H eller CII3,

og deres farmasøytisk og agrikulturelt akseptable salter.

Når R inneholder 3, 4 eller 5 karbonatomer kan den være rettkjedet eller forgrenet. R er fortrinnsvis rettkjedet.

Oppfinnelsen tilveiebringer også en farmasøytisk blanding bestående av en forbindelse med formel (I) eller et farma-søytisk akseptabelt salt derav sammen med et farmasøytisk

akseptabelt fortynningsmiddel eller bærer.

Oppfinnelsen tilveiebringer dessuten en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav for anvendelse innen medisinen, spesielt for behandling av soppinfeksjoner hos dyr, inklusive mennesker, eller for behandling av leishmaniase.

Oppfinnelsen tilveiebringer ytterligere en fungicid blanding for agrikulturell (inklusive hortikulturell) anvendelse, bestående av en forbindelse med formel (I) eller et

agrikulturelt akseptabelt salt derav,, sammen med et agrikulturelt akseptabelt fortynningsmiddel eller bærer. i i

Oppfinnelsen omfatter også en fremgangsmåte for behandlin<g*>av en plante eller et frø som lider av soppinfeksjon, hvilken fremgangsmåte består i å bringe nevnte plante eller frø eller plantens grobunn, i kontakt med en fungicid effektiv

mengde av en forbindelse med formel (I) eller et agrikulturelt akseptabelt salt derav.

Forbindelsene med formel (I) er også effektive mot både innvolds-leishmaniase ( L. donovani) og mukokutan leishmaniase

( L, tropica major stamme L561). Hos mus ble det konstatert en 50%'s reduksjon i parasittantall (L. donovani) og en 50%'s reduksjon i skadestørrelse ( L. tropica major) når produktet ifølge eksempel 1 ble administrert med et dosenivå på 5 x 20 mg/kg ad oral.vei.

Forbindelser, hvor R"<*>"er CH^, foreligger som par av diastereoisomerer, og oppfinnelsen omfatter både de separerte og de ikke-separerte par. Separasjon av parene kan utføres kro-matografisk, og typiske fremgangsmåter er beskrevet i eksempel 4 og 5.

Fortrinnsvis er R -CF2C<F>3,-(CF2)-2CF3 eller -(CF2)3CF3. Fortrinnsvis er R"<*>"H.

Forbindelsene med formel (I) kan fremstilles som følger:

hvor X er en avgangsgruppe slik som Cl, Br. I, CH3S020-,. CF3S020- eller p-toluensulfonyloksy Og M er et kation, fortrinnsvis Na, K eller Li.

Fortrinnsvis er X Cl eller Br. i j

i Reaksjonen utføres fortrinnsvis ved å anvende 1,2,4-triazol i nærvær.av en base slik som kaliumkarbonat, eller ved å anvende et alkalimetallsalt av triazolen, som kan fremstilles konvensjonelt, f.eks. fra triazolen og natriumhydrid.

Typisk fullendes reaksjonen ved oppvarmning av reaktantene sammen i et egnet organisk oppløsningsmiddel, f.eks. tørt dimetylformamid, ved 50-130°C inntil reaksjonen er fullendt. Produktet (I) kan deretter isoleres og renses på vanlig må-te.

Utgangsmaterialene (II) er tilgjengelige på konvensjonell måte, f.eks. ved å omsette en forbindelse med formelen:

med RMgI eller RMgBr..

En typisk måte illustreres detaljert i eksempel 1.

Grignard-utgangsmaterialene kan fremstilles' ved en konvensjonell utbyttingsreaksjon, f.eks.:

I det tilfelle hvor R er CF^ fremstilles mellomproduktet (<II>) lettere ved anvendelse av organosink- eller organokob-berderivatet av trifluormetyljodid enn av Grignard-forbindelsen som foreslått i Chem. Letts., 1981, 1679 henh. Chem. Letts., 1982, 1453.

Farmasøytisk fordragelige syreaddisjonssalter av forbindél-sene med formel (I) er de dannet fra sterke syrer som dan-ner ikke-giftige syreaddisjonssalter, slik som saltsyre, bromhydrogensyre, svovel-, oksalsyre og metansulf onsyre.

i Saltene kan erholdes ifølge vanlige fremgangsmåter, f.eks. I

I

ved å blande oppløsninger som inneholder tilnærmet ekvimo-' lare mengder av den frie base og ønsket syre, og det nød-vendige salt samles opp ved filtrering, hvis uoppløselig, eller ved inndampning av oppløsningsmidlet.

Forbindelsene med formel (I) og deres farmasøytisk fordragelige salter er antisopp-midler anvendelige ved bekjempelse av soppinfeksjoner hos dyr, inklusive mennesker. F.eks. er de anvendelige ved behandlingen av topiske soppinfeksjoner hos mennesker forårsaket av, blant andre organismer, artene Candida, Trichophyton, Microsporum eller Epidermophyton, eller ved slimhindeinfeksjoner forårsaket av Candida albicans (f.eks. trøske- og vaginal candidiasis). De kan også anvendes ved behandlingen av systemiske soppinfeksjoner forårsaket f.eks. av Candida albicans, Cryptococcus neoformans, Aspergillus fumigatus, Coccidioides, Paracoccidioides, Histo-plasma eller Blastomyces.

In vitro evalueringen av antisopp-aktiviteten for forbindelsene kan utføres ved å bestemme den minimale inhiberende konsentrasjon (m.i.c.) for forsøksforbindelsene i et egnet medium ved.hvilken vekst av den spesielle mikroorganiske ikke inntreffer. I praksis inokuleres et antall agarplater, som hver har forsøksforbindelsen innarbeidet ved en spesiell konsentrasjon, med en standardkultur av f.eks. Candida albicans og hver plate inkuberes deretter i 48 timer ved 37°C.. Platene undersøkes deretter for vekst eller ikke vekst av soppen og den angjeldende m.i.c. verdi noteres. Andre mikroorganismer som anvendes under slike forsøk kan omfatte Cryptococcus neoformans, Aspergillus fumigatus, Trichophyton spp; Microsporum spp; Epidermophyton flocc. osum, Coccidioides immitis og . Torulopsis glabrata.

In vivo evalueringen av forbindelsene kan utføres ved en rekke dosenivåer ved intraperitoneal eller intravenøs in-jeksjon eller ved oral administrasjon, til mus som er inoku-lert med en stamme av Candida albicans. Aktivitet er basert

på overlevende av en behandlet gruppe mus etter døden av

" ■ I

I

en ubehandlet gruppe mus etter 48 timers observasjon. Dose-nivået ved hvilken forbindelsen gir 50%'s beskyttelse mot den letale virkning av infeksjonen (PD^Q) opptagnes.

For anvendelse på mennesker kan de fungicide forbindelser med formel (I) administreres alene, men vil generelt administreres i blanding med en farmasøytisk bærer valgt under hensyntagen til tilsiktet administrasjonsvei og standard far-masøytisk praksis. F.eks. kan de administreres oralt i form av tabletter som inneholder slike eksipienter som stivelse eller laktose eller i kapsler eller ovula enten alene .eller i blanding med eksipienter eller i form av eliksirer eller suspensjoner som inneholder smaks- eller fargestoffer. De kan injiseres parenteralt, f.eks. intravenøst, intramuskulært eller subkutant. For parenteral administrering anvendes-de best i form av en steril vandig oppløsning som kan inneholde andre stoffer, f.eks. tilstrekkelig salter eller glukose til å gjøre oppløsningen isotonisk med blod.

For oral eller parenteral administrering til mennesker vil det daglige dosenivå av de fungicide forbindelser med formel (I) ligge i området 0,1 - 10 mg/kg (i oppdelte doser) når administrert enten oralt eller parenteralt. Således vil tabletter eller kapsler av forbindelsene inneholde fra 5 mg til-0,5 g aktiv forbindelse for administrering enkeltvis eller b eller flere ad gangen alt etter behov. Legen vil i hvert tilfelle bestemme den aktuelle dose som vil være mest egnet for en individuell pasient/ og den vil variere med alder, vekt og respons'en hos den spesielle pasient. Dosene nevnt ovenfor er ment som eksempel ved et gjennomsnittstilfelle. Det kan selvfølgelig foreligge individuelle tilfeller hvor høyere eller lavere doseområder er heldigere, og slike faller innenfor rammen av nærværende oppfinnelse.

Alternativt kan de fungicide forbindelser med formel (I) administreres i form av et suppositorium eller pessar, eller de kan påføres topisk i form av en losjon, oppløsning, krem, salve eller forstøvningspulver. F.eks. kan de innarbeides i i en krem som består av en vandig emulsjon av polyetylen- glykoler eller flytende paraffin, eller de kan innarbeides, i en konsentrasjon mellom 1 og 10%, i en salve bestående av en hvit voks-eller hvit myk paraffinbase sammen med slike stabilisatorer og preservativer som måtte være nødvendige.

Forbindelsene med formel (I) og deres salter er også i besiddelse av aktivitet mot en rekke plantepatogene sopper, inklusive f.eks. forskjellige rustsopper, meldugg og mu sopper, og forbindelsene er således anvendelige ved behandling av planter og frø for å utrydde eller forhindre slike sykdommer.

In vitro evalueringen av aktivitetene til forbindelsene mot plantesopper kan bestemmes ved å måle deres minimale inhiberende konsentrasjon på samme måte som tidligere beskrevet bortsett fra at platene inkuberes ved 30°C i 48 timer eller lenger før de undersøkes for vekst eller ikke.

Mikroorganismer som anvendes ved slike forsøk omfatter Cochli obolus carbonum, Pyricularia oryzae, Glomerella cingulata, Penicillium digitatum, Botrytis cinerea og Rhizoctonia so-lani.

For agrikulturelle og havebruksformål anvendes forbindelsene og deres agrikulturelt fordragelige salter fortrinnsvis i form av en blanding formulert mest hensiktsmessig for den spesielle anvendelse og ønskete formål. Således kan forbindelsene påføres i form av forstøvningspulvere, eller granu-ler, frø"dressings", vandige oppløsninger, dispersjon eller emulsjoner, "dips", spray, aerosoler eller røyk. Blandinger kan også påføres i form av dispergerbare pulvere, gra-nuler eller korn, eller konsentrater for fortynning før anvendelse. Slike blandinger kan inneholde slike vanlige bærere, fortynningsmidler eller hjelpestoffer som er kjent og aksepterte innen landbruk og havebruk og de fremstilles i overensstemmelse med vanlige fremgangsmåter. Blandingene kan også innarbeide^andre aktive bestanddeler, f.eks. forbindelser med herbicid eller insekticid aktivitet eller eller et ytterligere fungicidt middel. Forbindelsene og' blandingene kan påføres på en rekke måter, f.eks. kan de påføres direkte til plantebladene, stenglene, grenene, frø-ene eller røttene eller til jorden eller andre vekstmedia, og de kan anvendes ikke bare for å utrydde sykdom, men også profylaktisk å beskytte plantane eller frøene fra angrep.

De følgende eksempler illustrerer oppfinnelsen. Alle tempe-raturer er i °C.

EKSEMPEL 1

Fremstilling av 2-( heptafluorpropyl)- 1, 3- bis( lH- 1, 2, 4- triazol- l- yl) propan- 2- ol

Begge deler av denne reaksjon ble utført under nitrogen.

( A) Heptafluorpropyliodid (5 g) ble rørt ved -78°C i tørr die.tyleter (20 ml) . En oppløsning av fenylmagnesiumbromid i eter (10 ml av en 1,88.M oppløsning) ble tilsatt i løpet.av-l/2, time. Når denne tilsetning var fullendt ble reaksjonsblandingen rørt ved -20° i 1 time. Til denne oppløsning ble ved -78°C tilsatt 1,3-dikloraceton (3,25 g) i tørr dietyleter (20) dråpevis, idet temperaturen ble holdt under -65°C.

Blandingen ble deretter rørt i 4 timer ved mellom -20° og -50°C. Iseddikk (3 ml) i dietyleter (5 ml) ble tilsatt lang-somt fulgt av vann (15 ml). Blandingen fikk oppvarme seg til 5°C og deretter ble fasene separert. Den vandige-fase ble vasket med eter (2 x 25 ml). De eteriske ekstrakter ble kombinert, tørket (MgSO^) og inndampet og ga rå 1,3-di-klor-2-(heptafluorpropyl)propan-2-yl, som ble anvendt direkte i neste trinn.

( B) Den rå propanol fra Del (A) ble forenet med 1,2,4-, triåzol (6 g)- og vannfritt kaliumkarbonat (18 g) i tørt dimetylformamid (DMF) (60 ml) og oppvarmet ved 80°C over natten. Blandingen ble deretter kjølt, DMF ble fjernet og re-sten tatt opp i etylacetat (200 ml), vasket med vann (3 x 100 ml), tørket over MgSO^og inndampet. Den resulterende rest ble kromatografert ved "flash"-kromatografi på kisel-gel (230-400 mesh), eluering med en blanding av etylacetat og metanol (90:10 etter volum). Inndampning av de produkt-holdige fraksjoner ga, etter omkrystallisasjon fra metylen-, klorid/heksan, 226 mg av den rene tittelforbindelse, smp. 106-108°C.

Analyse % : Funnet: C 33,4; H 2,5; N 23,2;

Beregnet for HgNgQF.^ C 33,1; H 2,5; N 23,2

EKSEMPLER 2 og 3

De følgende forbindelser ble fremstilt på samme måte som ifølge fremgangsmåten i eksempel 1 del (A) og (B) fra hen-siktsmessige utgangsmaterialer:

! eksempel 3(A) ble 50% vandig ammoniumklorid anvendt i stedet for iseddik/dietyleter/vann.

EKSEMPEL 4

Fremstilling av 2-( heptafluorpropyl)- 1, 3- bis( 1H- 1, 2, 4- triazol- l- yl) butan- 2- ol

Heptafluorpropyljodid (15 g) ble rørt ved -78°C i tørr dietyleter (60 ml) og en oppløsning av fenylmagnesiumbromid (15 ml. av en 3M oppløsning) ble tilsatt dråpevis i løpet av 45 minutter. Blandingen ble rørt i ytterligere 30 minutter etter at tilsetningen var fullendt, og en oppløsning av 1,3-dibrom-butan-2-on (9,3 g) i tørr dietyleter (40 ml) ble deretter tilsatt ved en slik hastighet at temperaturen for reaksjonsblan dingen ikke oversteg -70°C. Blandingen ble rørt i ytterli-I gere 30 minutter ved -70°C etter at tilsetningen var full-ført og fikk deretter oppvarme seg til -40°C i løpet av 30 minutter. Reaksjonsblandingen ble holdt ved mellom -35 og

-40°C i 30 minutter og deretter ved mellom -35 og -30°C i ytterligere 30 minutter. En oppløsning av ammoniumklorid

(15 g) i vann (170 ml) ble deretter tilsatt, og blandingen fikk oppvarme seg til romtemperatur. Etersjiktet ble skilt fra og det vandige sjikt ble vasket med eter (2 x 25 ml). De forenete eterekstrakter. ble tørket (MgSO^) og inndampet og ga en lysegul væske (18 g) som øyeblikkelig ble tilsatt til en rørt blanding av 1,2,4-triazol (15 g) og vannfritt kaliumkarbonat (30 g) i tørt dimetylformamid (70 ml). Blandingen ble rørt ved 70°C i 3 timer og deretter ved romtemperatur over natten. Blandingen ble deretter helt i en blanding av vann (300 ml) og eter (300ml) og etersjiktet ble skilt fra. Det vandige sjikt ble vasket med eter (2 x. 300 ml) og

.de forenete eterekstrakter ble vasket med vann (3 x 100 ml), tørket (MgSO^) og inndampet og ga en lysegul væske (12 g)

som ble "flash"-kromatografert på siliciumoksyd .(230-400 mesh) under eluering med etylacetat:metanol 95:5 etter volum og ga tittelforbindelsen som en diasteromer blanding i form av.en lysegul gummi 2,8 g (18%). En 0,5 g's prøve av. denne gummi ble "flash"-kromatografert igjen, under anvendelse av acetohitril som elueringsmiddel og ga ren diastereoisomer 1 som et dihydrokloridsalt etter behandling med eterisk hydrogenklorid (0,11 g; hygroskopisk hvitt faststoff).

Analyse %:

Funnet: C 29,5, H 2,9, N 18,7 Beregnet for ^-^F^O . 2HC1: C 29,4. H 2,9, N 18,7%

Ytterligere eluering ga, som et hvitt faststoff, en 1:4 blanding av diastereoisomer 1 og diastereoisomer 2 som et di-hydroklorid etter behandling med eterisk hydrogenklorid,

0,09 g, smp. 95-98°C.

I

i

i I

a- a.. I

I

Analyse %: Funnet: C 29,7 H 2,9, N 18,55 Beregnet for Cii^f^g0•2HC1: c 29 ' 4' H 2,9, N 18,7 %

En ren prøve av d.iasteroisomer 2 ble fremstilt ved gjentatt preparativ høytrykksvæskekromatografi på siliciumoksyd under eluering med en kloroform:acetonitrilblanding (1:1).

EKSEMPEL 5

2-nonafluorbutyl-1,3-bis(1H-1,2,4-triazoi-l-yl)butan-2-ol ble fremstilt på samme måte som i eksempel 4 fra hensiktsméssige

utgangsmaterialer. I det endelige trinn ble reaksjonsblandingen imid-lertid oppvarmet ved 50-55°i 1,5 time i stedet for ved 70°C i. 3 'timer, og ti-ttelforbindelsen ble igjen isolert som en diastereoisomer blanding (2:1 forhold av diastereoisomerer ) (23%'s utbytte).

En prøve av denne blanding ble "flash"-kromatografert på siliciumoksyd under eluering med etylacetat:dietylamin (3:2. etter volum) og ga ren diastereoisomer 1 som et dihydrokloridsalt, smp.- 88-94°C etter behandling med eterisk hydrogenklorid. Produktet var et hygroskopisk hvitt faststoff.

Analyse %:

Funnet: C 28,1, H 2,5, N 17,0; Beregnet for C. „Hn FnNr0.2HC1: C 28,9, H 2,6, N 16,8% 12 119 6 Ytterligere eluering ga en 3:2 blanding av diastereoisomerer 1 og 2 som en gummi, som etter behandling med eterisk hydrogenklorid ga dihydrokloridsaltet som et hvitt faststoff, smp. 103-8°C.

Analyse %:

Funnet: C 29,1, H 2,3. N 17,0 Beregnet for C 12 H 11 F 9 N 60.2HC1: C 28.9, H 2,6, N 16,8%

Aktivitetsdata

PD^q verdier (oral, mus, mg/kg) erholdt ved forsøksmetoden tidligere beskrevet mot C. Albicans er som følger:

■i

Claims (7)

1. Fremgangsmåte ved fremstilling av en forbindelse med formelen:

eller et farmasøytisk eller agrikulturelt akseptabelt salt derav,.hvori R er en C^ -C^ perfluoralkylgruppe og R1 er H eller CH^ , karakterisert ved å omsette 1,2,4-triazol eller et basesalt derav med en forbindelse med formelen:

hvor R og R^ er som foran angitt, og X er en avgangsgruppe, f.ulgt eventuelt av omdannelse av produktet til et farmasøy-tisk eller agrikulturelt akseptabelt salt.

2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at X er Cl, Br, I, CH3 S02 0-, CF-j SG^ O- eller p-toluensulf onyloksy.

3. Fremgangsmåte, ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved at. den utføres under anvendelse av 1,2,4-triazol i nærvær av en base.

4. Fremgangsmåte ifølge krav 3, karakterisert ved at nevnte base er kaliumkarbonat..

5. Fremgangsmåte ifølge et hvilket som helst av 'foregående krav, karakterisert ved | at den utføres i et organisk oppløsningsmiddel ved fra 50 til' 130°C.

6. Fremgangsmåte ifølge et hvilket som helst av foregående krav, karakterisert ved at R er -CF2 CF3 , -(CF2)2CF3 eller -(CF2 )3 C <F>3 -

7. Fremgangsmåte ifølge et hvilket som helst av de foregående krav, k a r a k t e r i i s e r t ved at R <1> er H.