NO792876L - Fremgangsmaate og apparat for aa detektere blodplater i helt blod - Google Patents
Fremgangsmaate og apparat for aa detektere blodplater i helt blodInfo
- Publication number
- NO792876L NO792876L NO792876A NO792876A NO792876L NO 792876 L NO792876 L NO 792876L NO 792876 A NO792876 A NO 792876A NO 792876 A NO792876 A NO 792876A NO 792876 L NO792876 L NO 792876L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- light
- cells
- platelets
- focusing
- scattered
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 18
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 title claims description 17
- 239000008280 blood Substances 0.000 title claims description 17
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 77
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 claims description 35
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 9
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims description 6
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 6
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 5
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 4
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 4
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000009652 hydrodynamic focusing Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 238000004159 blood analysis Methods 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000001446 dark-field microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000009123 feedback regulation Effects 0.000 description 1
- CPBQJMYROZQQJC-UHFFFAOYSA-N helium neon Chemical compound [He].[Ne] CPBQJMYROZQQJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 238000001429 visible spectrum Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/02—Investigating particle size or size distribution
- G01N15/0205—Investigating particle size or size distribution by optical means
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Microscoopes, Condenser (AREA)
Description
Fremgangsmåte og apparat for å detektere blodplater i helt blod.
Foreliggende oppfinnelse angår blodcelleanalyse
og mer spesielt detektering av blodplater i nærvær av andre celler, slik som i helt blod.
Moderne klinisk og forsøksanalyseteknikk krever forsiktig og kontrollert identifikasjon og atskillelse av forskjellige typer av celler som finnes i blodet, f.eks. hvite celler, røde celler og blodplater.. Vanligvis blir små blodprøver tatt og passende fortynnet og. utsatt for forskjellige reagenser og/eller fargestoffer og de fortynnede biprøver blir nøyaktig analysert. Ofte blir histogrammer oppnådd som viser fordelingen
av forskjellige celler som en funksjon av spesifiserte parametre, slik som volum. Basert på kjennskapen til beskaffenheten og karakteristikken til de respektive celler kan disse histogrammene ofte bli virksomt- bragt i sa msvar med ^tilsjtedeværelsen av celler av forskjellige typer.
Et utfordrende problem i konstruksjonen og frem-^stillingen av effektive blodanalyseinstrumenter har vært skillingen, identifikasjonen og analysen av blodplater. Spesielt ved hjelp av størrelsen, størrelsesfordelingen og totalantallet av blodplater pr. volumenhet har frembragt vesentlige skillevanskelig-heter. F.eks. er de minste blodplatene ofte blitt blandet sammen med partikler, mikrobobler, eller andre falske elementer ved undersøkelsen av den fortynnede blodprøven. De største blodplat-
ene har ofte. et volum liknende det til de minste røde cellene, f.eks, i størrelsesorden av tredve til førti kubikk-mikroner. Dessuten er blodplateantallet pr. volumenhet til blod vanligvis mye mindre enn antallet med røde celler i samme volum, slik at dersom røde celler Jaeskvjtt^r^en normal størrelsésfordeling kan antallet med små røde celler bli lett sammenliknbar med antallet av blodplater i prøven, Fortynningstrinnet har vanligvis liten
effekt på disse problemer siden røde celler,.: :hvite celler,
blodplater og liknende (bJ^r/^anIl.^visVfortynnet i samme hastighet.
I virkeligheten er den normale konsekvensen av fortynningen at mindre.celler er totalt tilgjengelig for analysen hvorved dette tenderer til å øke problemet.
Den prinsipielle og tidligere oftest heldige kjente løsningen av blodplateatskillelsen og analysen har stolt på prinsippene som angår den elektriske ledeevnen éller motstanden. Ifølge med__denne jtilnæjg ning^ n blir et par elektrolytt-tanker opp-rettholdt nær til hverandre atskilt kun ved en elektrisk.isolert
vegg. En positiv elektrode blir satt inn i den ene tanken og en negativ elektrode i den andre. En liten åpning, typisk...:! om-
radet pa 50-75 mikronen i diameter, gjennomtrenger veggen og forbinder derved de to tankene med -e-lekl^o^tyirfe-. En blodprøve blir satt ned i en tank og ved opprettholdelse av s trøjnmen passerer h^ lkui denne fra den ene til den andre gjennom åpningen. Motstanden til åpningen blir nøyaktig overvåket og denne motstanden blir for-
andret når celler passerer gjennom åpningen basert på forskjell-
ige ledeevner (eller motstander) til forskjellige celletyper. Vanligvis er motstandsforandringen når en celle passerer gjennom åpningen en funksjon av volumet og formen til cellen.
Denne tidligere kjente tilnærmingen er tilfreds-stillende for normale røde celler og normale blodplater, men møter et heller alvorlig atskjJl^lsessammenbrudd med hensyn til. større blodplater og mindre røde celler som besitter sammenlikn-
bare volummessige parametre. Slike problemer blir ytterligere forverret ved det faktum at det aktuelle antall med små røde celler i en normal prøve er sammenliknbart med blodplateantallet i prøven.. Konvensjonelle forsøk for å korrigere disse problemene og tidligere skille mellom små røde celler og store blodplater ved å utnytte matematiske korreksjoner, hvor dette vanligvis blir basert på antakelsen at røde celler har en gitt volumfor-
deling, mens derimot blodplatene har en forskjellig men kjent volumfordeling. På denne basisen har algoritmer bitt utledet
til å korrigere de aktuelle data og å beskrive et kalkulert skille mellom røde celler og blodplater. Disse algoritmene er
typisk passende for ikke-patologiske blodprøver, men er ofte unøyaktige for patologiske blodprøver eller prøver som har nett-
opp blitt utsatt for transfusjoner.
Disse kjente systemer har også møtt vanskeligheter ,med hensyn til nøyaktig detektering av de minste blodplatene. D.v.s. de tidligere kjente elektriske systemene av motstands-typen møter problemer med hensyn til elektrisk støy, små falske partikler ved eller nær åpningen eller akustisk vibrasjon i elektrolyttene. Algoritmen har blitt utviklet for å forsøke å korrigere disse vanskelighetene, men det er innlysende at disse algoritmene er best til beregninger og i virkeligheten, kan ikke adekvat beregning utføres alminnelig for urenhet, vibrasjon og liknende vanskeligheter som kan bli tilført installasjonen av instrumentene eller til fremgangsmåten utnyttet ved teknikken og ikke til enhver fysikalsk eller fysiologisk beslektet f aktor^:..
Det er en primær hensikt ved foreliggende oppfinnelse å atskille blodplater i tilstedeværelse av andre celler
slik som i - heJ.- t blod, som passende unngår sammenblanding mellom store blodplater og små røde celler, og mellom små blodplater og falske partikler eller bobler i prøven.
Det er videre en hensikt med foreliggende oppfinnelse å frembringe et slikt apparat og fremgangsmåte som stoler i første rekke på direkte målinger enn på utstrakt korreksjon av målte data ved hjelp av algoritmer eller liknende.
Det er enda en ytterligere hensikt med foreliggende oppfinnelse å frembringe en fremgangsmåte og apparat som atskiller blodplater fra røde celler på basis av andre kriterier enn kun på cellens volum og form.
Det er enda en ytterligere hensikt med foreliggende oppfinnelse å atskille blodplater ved andre metoder enn elektrisk/ ledeevnemålinger og for.derved å minimalisere eller i hovedsaken eliminere elektroniske problemer slik som støy.
Det er enda en annen hensikt med foreliggende fremgangsmåte som atskiller blodplater fra røde blodceller i prøver som har patologiske cellebetingelser eller som har nett-°PP gjennomgått transfusjon eller blodfjerning, såvel som for
å observere ikke-patologiske blodprøver.
Foreliggende oppfinnelse er basert på atskillelse av blodplater ved hjelp av en optisk tilnærming og som derved betinger målingen av cellebrytingen såvel som volumet. Ved å gjøre slik tillater foreliggende oppfinnelse at en stoler på de forskjellige optiske karakteristikkene til cellene som er vidt forskjellig mellom røde celler og blodplate og som derved åpner en mye finere atskillelse mellom røde celler og blodplater enn som ville være mulig ved kun volumetriske fremgangsmåter (d.v.s. elektriske). Utnyttelsen av fokusert optikk og mer spesielt prinsippet med mørkfeltmikroskopi forénklér betraktning-en av svært små, presise lokale områder som derved hovedsakelig reduserer effekten til falske partikler eller bobler nær området som blir betraktet.
Ifølge prinsippet med foreliggende oppfinnelse blir. en blodprøve anordnet til å passere et spesifisert punkt med en påfølgende hastighet av en celle i gangen (d.v.s. hydrodynamisk fokusering). Dette punktet er belyst, som vel kjent for fagmannen, med den ytterligere fastsettelsen at belysningsstrålen er optisk behandlet for å støte på et spesielt forut definert område og langs en spesiell linje. Dimensjonene til brennpunktet er gjort liten nok til å redusere sammenfall ved celletellingen til nivåer lave nok til å tillate høy nøyaktighet ved sammenfall av féilkorreksjonen
Når hver celle passerer gjennom det optiske brennpunktområdet blir forskjellige deler av den innfallende strålen overført, spredt og absorbert av cellen. Den overførte strålen blir så fysikalskt blokkert av en kunstig hindring som sammenlikner den innfallende stråletverrsnittsprofilen slik at bare den spredte strålen blir samlet ved f.eks. linse eller speilsystem.
Spredningsiyssamlingsoptikken blir anordnet slik for å kaste bilde av den belyste prøvestrømmen på en åpning som har samme størrelsen som det belyste strømningsbildet, og samlingsoptikkens fokusdybde er av samme størrelse som prøve-strømmen. Bare spredt lys som fremkommer ved den innbyrdes fjær-ingen av innfallende fokusert stråling og hydrodynamisk fokusert prøvestrøm er derfor tillatt å passere gjennom åpningen. Denne strålingen blir avfølt av en fotodetektor som på sin side frembringer elektriske signaler som blir lett behandlet for å gi indikasjon av celletyper som er slik belyst. (D.v.s. ved hjelp av pulshøyde og pulsbredde).
Ifølge prinsippene ved foreliggende oppfinnelse blir blodplater lett skilt fra røde blodceller også når deres respektive cellevolumer enkeltvis er hovedsakelig like. Dessuten reduserer prinsippet med forsiktig fokusering hovedsakelig effektene til falske signaler eller bobler i fokuseringsvæsken (omhyllingen ") som omgir prøvestrømmen som derved øker mulig-heten til å skille fra hverandre svært små blodplater.
Oppfinnelsen skal nå nærmere beskrives med hen-visning til tegningene.
Fig. IA og IB viser en skjematisk fremstilling
av en utførelsesform av prinsippet til foreliggende oppfinnelse.
Fig. 2 viser et alternativt strålespaltingsskjerna
som er nyttig i forbindelse med utførelsesformen på fig. IA.
Fig. 3 og 4 viser henholdsvis side og toppsnitt, av en foretrukket konstruksjon av utførelsesformen på fig. IA. og IB.
Som beskrevet ovenfor angår prinsippet til foreliggende oppfinnelse utnyttelse av cellebrytning for å hjelpe og skille blodplatene fra røde blodceller. Uttrykt matematisk kan brytningen R bli beregnet ved hjelp av likningen:
hvor<nc>e2ie er brytningsindeksen til den gjeldende celle og<n>medium er brytningsindeksen til fortynningen eller løsningen i hvilke cellen er suspendert.
I den følgende beskrivelsen vil det hovedsakelig bli henvist til fig. IA og IB som viser symbolsk og funksjons-messig prinsippene til foreliggende oppfinnelse. Fig. 3 og 4 har de samme henvisningstallene som tilsvarer de samme spesielle delene på utførelsen på fig. IA og IB. Man skal bemerke at fig. 3 og 4 er konstruert med konvensjonelle elementer, men ut-førelsesformen på fig. 3 og 4 utfører hovedsakelig de funksjoner som avledes av aspektene ved utførelsesformen på fig. lA og. IB.
På fig. IA og IB er vist en laser 101 som frembringer en lysstråle som er forbundet med en strålespalter 102. Laseren 101 er av den typen som-frembringer lys i det synlige spekteret og i kontinuerlig drift (d.v.s. ikke pulset). I en foretrukket utførelsesform er laseren 101 en heliumneonlaser av den typen som er vanlig i handelen, i praksis vil imidlertid mange alternative lasere være passende. Hovedlyskilden ifølge foreliggende oppfinnelse trenger i virkeligheten ikke å være en laser sålenge lyskilden som benyttes er forenlig med de optiske egenskapene som omtalt heretter og fokuserbar for å tilfreds-
stille kravene som blir nevnt i det følgende.
Lysstrålen utsendt fra laseren loi støter mot strålespalteren 102 som forbinder deler av lyset henholdsvis med et linsepar 106 og med en fotodetektor 103. Hensikten med fotodetektoren 103 er å frembringe et signal, på hvilket reguleringen av laseren 101 kan bli plassert, fortrinnsvis ved hjelp, av å overvåke lasereffekten. Laserreguleringen blir rutinemessig ut-
ført ifølge behovene og ønskene til konstruktøren på'vanlig fag-messig måte. Strålespalteren 102 er alternativt utført av hvilke som helst av de mange typene som er vanlig i handelen eller ved hjelp av konstruksjonen som vist på fig. 2. Vesentlig er at strålespalteren 102 i forbindelse med fotodetektoren 103 muliggjør en tilbakekoplingsregulering hvorved en lysstråle med hovedsakelig konstant effekt og intensitet er forbundet med linseparet 106.
Linseparet 106 er definert av sylindriske linser
104 og 105 hvor hver av dem utgjør den innfallende strålen med lineær konvergens langs en spesifisert akse, slik at strålen utsendt fra den andre linsen 105 besitter en fast, endelig bredde og høyde og har særskilte plasseringer respektiv bilde og fokusplanet. Linsen 104 konvergerer dens innfallende lys i en stråle som har en spesielt konstruert bredde (d.v.s. i dimensjonen perpendikulært til overflaten på fig. 1) ved punkt 112, hvor
fokusplanet til linsen 104 er ved det innbyrdes hjørnet 114.
Linsen 105 er også en sylindrisk linse virksomt rotert 90° fra orienteringen til linsen 104, slik at linsen 105 justerer høyden
til den utsendte strålen til en spesiell utstrekning ved punktet
112 (d.v.s. i den vertikale retningen på fig. 1 som vist). Fokusplanet til linsen 105 krysser punktet 112. Strålen utsendt fra
linseparet 106 har derfor bestemt utbredelse og er fokusert i
en linje ved punktet 112. I en foretrukket utførelsesform er utstrekningen av stålen ved punktet 112 tilnærmet 200 mikroner bred (loddrett på tegningen på fig. 1) og 5 mikroner høyt (verti-kalt på tegningen på fig. 1) og er hovedsakelig loddrett på den horisontale utbredelsen på fig. 1.
En hydrodynamisk fokuseringsstrømkanal 107 gjør
av celler som undersøkes passerer punktet 112 hovedsakelig en
i gangen og i hurtig rekkefølge. Prinsippet med operasjonen og celleanalysen er velkjent for fagmannen, f.eks. ved rekken av instrumenter som er vanlig i handelen. Kort sagt en omhyllings-
væske slik som f.eks. saltoppløsning blir injisert oppover fra dysene 109 og 110, som derved frembringer en konvergeringsstrøm som er definert av en kjegleformet strømningskanal 111. Den fortynnede blodprøven som skal undersøkes blir. injisert ved innløps-dysen 108 og blir ledet inn i og gjennom, strømningskanalen 111
med resultatet at cellene passerer enkeltvis punktet 112 i på-følgende rekkefølge. Dette er kjent som "hydrodynamisk fokusering" ..
Følgelig skal man ta med i vurderingen at det.
finnes en dual fokusering eller sammenfalling med punktet 112
med celler som er hydrodynamisk fokusert når de passerer ved punktet 112 og utsendt lysstråler fra linseparet 106 som er fokusert ved punket med en stråle som har utstrekninger nødven-
dig for å belyse de passerende celler. Det innfallende lyset blir spesielt overført av en celle, spesielt spredt av en celle og en liten del blir absorbert av cellen, som ventelig er omformet til andre former av energi. Ifølge prinsippene med foreliggende oppfinnelse er den mer viktige komponenten lysspredningen av cellene som ved praktisk anvendelse kan være tilnærmet en prosent av lyset som belyser cellen.
Ifølge foreliggende oppfinnelse blir prinsippet
med nørkfeltmikroskopien utnyttet til å behandle lys utsendt
fra celler under undersøkingen ved punktet 112. Disse prinsippene involverer vanligvis anvendelsen av en kunstig hindring som sammenlikner stråleprofilen slik at bare spredt lys blir detek-
tert og utnyttet for analysen av cellen som forårsaker spredning.
Med dette til hensikt, er en vire eller liknende hindring 113 plassert i strålebanen, hvor størrelsen til viren 113 er den samme ved det innbyrdes skjærende punket 114 som lysstrålen.
F.eks. har det innbyrdes kryssende punktet 114 en hindring på tilnærmet 700 mikroner bredde ved strålen utsendt fra punktet 112 i foreliggende utførelsesform. Funksjonen til viren 113 blir derfor å blokkere alt lys utsendt fra linseparet 106 direkte gjennom punktet 112. Det er klart at hovedsakelig alt lys fra linseparet 106 vil bli blokkert av viren 113 når ingen celle er tilstede ved punktet 112 og at lyset utsendt av celler ved punktet 112 vil være blokkert av viren 113. Derfor vil bare alt lyset spredt av celler ved punktet 112 passere hindringen 113 til et mikroskopobjektiv 115. Mens hindringen 113 i en foretrukket ut-førelsesform er en vertikal vire,.er den i en alternativ ut-førelsesform en vertikal fotodetektor som blokkerer uspredt lys, detekterer lys slukket av celler og passeres av spredt lys til objektivet 115.
Hensikten med mikroskopobjektivet 115 er å detektere side til side spredningen av lys fra celler ved punktet 112, som hovedsakelig er alt sådant lys som er spredt. Dette lyset på sin side blir konvergert av objektivet 115 ved punktet 116, som er en åpning definert av en ellers ugjennomskinnglig skjerm 117. I en foretrukket utførelsesform er det mikroskopiske objektivet 115 et 10-20X forstørrelse, 1/4 blenderåpningsobjéktiv av vanlig kommersiell herkomst, hvor åpningen 116 er i størrel-sesorden av-det forstørrede bilde til strålen ved punktet 112.
Skjermen 117 definerer biIdéplanet til mikroskop-ob jektivet 115 og åpningen 116 deri plassert på aksen definert av punktet 112 og 114 ovenfor forklart (enten aksen er lineær eller optisk manipulert som ønsket). Konsekvensen av plasseringen av åpningen 116 i senteret til bildeplanet til objektivet 115 er at bare lys korresponderende med belyst celle ved 112 vil passere gjennom åpningen 116. Virkningen av belyste partikler, mikrobobler eller andre falske signaler i området nær punktet 112 vil derfor hovedsakelig bli blokkert av den ugjennomskinne-lige skjermen 117 og vil ikke passere til fotodetektoren 119.
Lys som passerer gjennom åpningen 116 blir til-ført til en linse 118 som frembringer diffus belysning av en fotoforsterker 119, som har sin følsomme del plassert i fokusplanet til linsen 118. Bruken av fokusplanet i stedet for billed-planet til linsen 118 tenderer til å eliminere uregelmessig-heter i følsomheten til fotoforsterkeren 119. I en.foretrukket utførelsesform er fotoforsterkeren 119 en ti-trinns S-20 lav mørkstrømsfotoforsterkér av vanlig i handelen tilgjengelig.
Lys som støter på fotoforsterkeren blir detektert og omformet til elektriske impulser som blir behandlet som ønsket for å frembringe histogrammer eller liknende som tilsvarer celler som blir undersøkt. I det vesentlige er signaler fra fotoforsterkeren 119 et analogt signal som har pulser eller topper som korresponderer med belysningen av celler enkeltvis ved punktet 112, hvor amplituden til pulsene og bredden til disse korresponderer med den fysikalske utformingen av cellene som blir undersøkt. Det er klart at utnyttelsen av den ovenfor beskrevne optiske teknikk imidlertid forårsaker signalene fra fotoforsterkeren 119 til å bli avhengig ikke bare av volumet til cellene, men også av cellebrytningen siden spredt lys blir utnyttet for å detektere cellene. Fig. 2 viser en sammenstilling av en strålespalter 202 på fig. 1. På fig. 2 er aksen til lyset vist isometrisk, passerende fra en laser 101 mot linsen 104. Utførelsen på fig. 2 utnytter tre dielektriske speiler 201, 202 og 203 som deler lysstrålen fra laseren 101 i komponentene 204 og 205.uten hensyn til polarisasjonen til strålen fra laseren 101. Betjeningen av speilene 201, 202 og 203 kan bli utført ved betraktning av rom-
orienteringen derav. For å gjøre det kan man anvende et tre-dimensjonalt koordinatsystem som vist. I et slikt koordinatsystem ér speilen 201, som reflekterer deler av dens innfallende stråle til speilen 203 og sender deler av den innfallende stråle til speilen 202, hellet 45° med X-aksen og 45° med Y-aksen og 0° med Z-aksen. Speilen 203, som reflekterer deler av dens innfallende lys i retningen mot Z-aksen til fotodetekteren 103, er orientert med 45° med Y-aksen, 45° med Z-aksen og 0° med hensyn til X-aksen. Speilen 202, som sender delen av det hellende lys, men frembringer en polarisasjon-korreksjon sammenliknbar med den frembragt ved speilet 203 for strålen 204, er orientert med 45° med X-aksén, 45° med Z-aksen og 0° med Y-aksen. Strålen 204 og 205 vil derved være av proporsjonal intensitet som er uav-hengig av polarisasjons tilstanden til strålen fra 101 med strålen 204 forskjøvet fra og ortogonalt til strålen 205. Fig. 3 og 4 viser en fysikalsk fordelaktig konstruksjon for utførelsesformen på fig. 1. Som vist på fig. 4 er en 45° refleksjon anvendt ved 401 som derved sparer det totale rommet. Ellers anvender utførelsesformen på fig. 3 og 4 de spesielle fysikalske utførelsesformer til de respektive ehhter som beskrevet i forbindelse med den ovennevnte beskrivelse av utførelsesformen på fig. 1.
Det er klart at foregående beskrivelse viser illustrativt og foretrukne utførelsesformer av foreliggende opp finnelse, men at et antall alternative utførelsesformer vil være
innlysende for fagmannen uten å avvike fra hensikten og tanken med foreliggende oppfinnelse.
Claims (8)
1. Fremgangsmåte til analysering _av b lodceller,. karakterisert ved at den omfatter:
a) belysning av respektive blodceller i en prøve, og
b) utskilling av blodplater fra røde blodceller basert på parameteret til cellevolumet og c e 11 e b r v t n i nq.e n A
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at nevnte belysningstrinn omfatter:
a) passering av celler ved et forutbestemt brenn-punkt mecT^en av gangen,
b) frembringing av.en regulert kilde med synlig
° c) fokusering ay lyset fra nevnte/i hovedsaken normalt im& éf celles trømmen»'for å belyse i hovedsaken enkelte
celler ved nevnte punkt, hvor nevnte fokuserte lysstråle har et forutbestemt tverrsnitt Ive^^ ne^^ fee^<p>^ refety..
3. Fremgangsmåte ifølge krav 2, karakterisert ved .at nevnte atskillelsestrinn omfatter:
a) detektering av hovedsakelig lav-vinkel, forover-spredt lys av celler ved nevnte punkt,
b) blokkering av i hovedsaken alt annet lys fra nevnte Æeki±s^ Bi^ ng.SB unkt,
c)' ^a^]*é«l"M «»^ av om det er en rød celle eller en blodplate som spredte det detekterte lyset basert på amplituden og varigheten <g> Hryly get fr>lik du (jt»k4a<j>.i-^.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 3, karakterisert ved at .névnte blokkering£*r£>iwi) omfatter plassering av en fysikalsk blokk- på tvers av lvsbanen utsendt fra nevnte bree nnpunkt, hvor nevnte blokk er plassert i fokalplanet som er dannet i fokuseringstrinnet. pt» i i nrmmwi.ii.iw. ■ i n.w wwiu«m<ihhhhiii iimj i Lmi '.i Juiij'T "
5. Fremgangsmåte ifølge krav 4, kairakteri - Ær sert ved at nevnte detekteringstrinn omfatter detektering av l^^jujt^e^idt fra nevnte fokuseringspunkt og ikke blo^ert^i nevnte plasseringstrTmTr^^^"^^*'
6. Fremgangsmåte til å skille blodplater fra røde blodceller i en hel blodprøve, karakterisert ved at den omfatter:
a) frembringelse av fokusert belysning av indivi-duelle celler i prøven,
b) skilling av lys spredt av blodplatene fra lyset spredt av røde celler ved å anvende spredt lys med et mørkt felt optisk system. I <
7. Apparat for å (aksA-ie) blodplater fra røde blod- t celler i en ffe!©^ "blodprøve, karakterisert ved at de^ omfatter:
a) anordning for å frembringe en hydrodynamisk fokusert væskestrøm av nevnte prøve til et fokusområde som dimensjonsmessig imøtekommer alle typer av celler som skal undersøkes,
b) anordning for å belyse nevnte fokusområde på tvers av cellestrømbanen,
c) anordning for å detektere lys spredt fra celler ved nevnte fokuseringsområde med unntastefc av lys sendt^gjennom nevnte fokuseringsområde,
d) anordning for å frembringe et signal som korresponderer med detektert spredt lys, hvor nevnte signal definerer respektive topper som korresponderer med fysikalske dimensjoner, og brytningskarakteristikker til respektive celler i nevnte prøver.
8. Apparat ifølge krav 7, karakterisert ved at/ nevnte ariordnifig for.belysning omfatter en lyskilde og en anordning for å fokusere nevnte lys langs en akse på nevnte fokuseringsområde, hvor den fokuserte strålen ved nevnte område har forutbestemte tverrsnittsdimensjoner betegnet med a og b, og ved at nevnte anordning for å detektere omfatter en kunstig hindring på nevnte akse for å frembringe en blokkering av lys utsendt fra nevnte område og som ble utsendt gjennom nevnte område a x b.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US05/939,943 US4577964A (en) | 1978-09-06 | 1978-09-06 | Apparatus and method for detecting platelets in whole blood |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO792876L true NO792876L (no) | 1980-03-07 |
Family
ID=25473975
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO792876A NO792876L (no) | 1978-09-06 | 1979-09-05 | Fremgangsmaate og apparat for aa detektere blodplater i helt blod |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4577964A (no) |
EP (1) | EP0009307B1 (no) |
JP (1) | JPS5537998A (no) |
AU (1) | AU524291B2 (no) |
CA (1) | CA1125050A (no) |
DE (1) | DE2966186D1 (no) |
IE (1) | IE48476B1 (no) |
NO (1) | NO792876L (no) |
Families Citing this family (43)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5994037A (ja) * | 1982-11-19 | 1984-05-30 | Shimadzu Corp | 血球計数装置 |
AU3418584A (en) * | 1983-10-14 | 1985-04-18 | Ortho Diagnostic Systems Inc. | Screening method for red blood cell abnormality |
US4735504A (en) * | 1983-10-31 | 1988-04-05 | Technicon Instruments Corporation | Method and apparatus for determining the volume & index of refraction of particles |
US4989977A (en) * | 1985-07-29 | 1991-02-05 | Becton, Dickinson And Company | Flow cytometry apparatus with improved light beam adjustment |
DE3534973C2 (de) * | 1985-10-01 | 1995-02-09 | Eppendorf Geraetebau Netheler | Durchflußimpulsphotometer zur Partikelmessung |
GB8603391D0 (en) * | 1986-02-12 | 1986-03-19 | British Aerospace | Position sensor |
US4989978A (en) * | 1986-04-04 | 1991-02-05 | Technicon Instruments Corporation | Method and apparatus for determining the count per unit volume of particles |
US6780333B1 (en) | 1987-01-30 | 2004-08-24 | Baxter International Inc. | Centrifugation pheresis method |
US5104526A (en) * | 1987-01-30 | 1992-04-14 | Baxter International Inc. | Centrifugation system having an interface detection system |
US5076911A (en) * | 1987-01-30 | 1991-12-31 | Baxter International Inc. | Centrifugation chamber having an interface detection surface |
JPS63191043A (ja) * | 1987-02-03 | 1988-08-08 | Omron Tateisi Electronics Co | 細胞分析装置 |
KR970007077B1 (ko) * | 1987-03-13 | 1997-05-02 | 코울터 일렉트로닉스 인커퍼레이티드 | 광산란 기술을 이용한 다중-부분식별 분석 방법 |
US4810090A (en) * | 1987-08-24 | 1989-03-07 | Cobe Laboratories, Inc. | Method and apparatus for monitoring blood components |
JPH01132932A (ja) * | 1987-11-18 | 1989-05-25 | Omron Tateisi Electron Co | 流れ式粒子分析装置の信号光検出光学系 |
WO1989010562A1 (en) * | 1988-04-20 | 1989-11-02 | Vsesojuzny Kardiologichesky Nauchny Tsentr Akademi | Method and device for analyzing thrombocyte aggregation |
US5061070A (en) * | 1988-04-22 | 1991-10-29 | International Business Machines Corporation | Particulate inspection of fluids using interferometric light measurements |
US4920275A (en) * | 1988-12-30 | 1990-04-24 | Canon Kabushiki Kaisha | Particle measuring device with elliptically-shaped scanning beam |
CA2016699C (en) * | 1989-05-15 | 2003-11-18 | Paul N. Marshall | Lytic agents and uses thereof |
JPH03181384A (ja) * | 1989-12-12 | 1991-08-07 | Tonen Corp | 純水製造装置の樹脂再生システム |
US5133602A (en) * | 1991-04-08 | 1992-07-28 | International Business Machines Corporation | Particle path determination system |
US5534999A (en) * | 1993-03-05 | 1996-07-09 | Shinmikuni Kikai Ltd. | Monitoring sub-micron particles |
US6215587B1 (en) * | 1994-02-14 | 2001-04-10 | Robert R. Alfano | Microscope imaging inside highly scattering media |
US5631165A (en) * | 1994-08-01 | 1997-05-20 | Abbott Laboratories | Method for performing automated hematology and cytometry analysis |
US5891734A (en) * | 1994-08-01 | 1999-04-06 | Abbott Laboratories | Method for performing automated analysis |
US5656499A (en) * | 1994-08-01 | 1997-08-12 | Abbott Laboratories | Method for performing automated hematology and cytometry analysis |
ES2121708T1 (es) * | 1994-09-20 | 1998-12-16 | Neopath Inc | Aparato para iluminacion, estabilizacion y homogeneizacion. |
US5817519A (en) * | 1995-12-28 | 1998-10-06 | Bayer Corporation | Automated method and device for identifying and quantifying platelets and for determining platelet activation state using whole blood samples |
US6025201A (en) * | 1995-12-28 | 2000-02-15 | Bayer Corporation | Highly sensitive, accurate, and precise automated method and device for identifying and quantifying platelets and for determining platelet activation state using whole blood samples |
US5734464A (en) * | 1996-11-06 | 1998-03-31 | Cobe Laboratories, Inc. | Red blood cell spillover detection technique |
US5831730A (en) * | 1996-12-06 | 1998-11-03 | United Sciences, Inc. | Method for monitoring particulates using beam-steered solid-state light source |
US5751423A (en) * | 1996-12-06 | 1998-05-12 | United Sciences, Inc. | Opacity and forward scattering monitor using beam-steered solid-state light source |
US7390662B2 (en) * | 2005-11-09 | 2008-06-24 | Beckman Coulter, Inc. | Method and apparatus for performing platelet measurement |
WO2006057768A2 (en) * | 2004-11-24 | 2006-06-01 | Battelle Memorial Institute | Optical system for cell imaging |
CN101438143B (zh) * | 2005-04-29 | 2013-06-12 | 霍尼韦尔国际公司 | 血细胞计数器细胞计数和尺寸测量方法 |
US7344890B2 (en) * | 2005-11-09 | 2008-03-18 | Beckman Coulter, Inc. | Method for discriminating platelets from red blood cells |
JP4817442B2 (ja) * | 2006-07-31 | 2011-11-16 | シスメックス株式会社 | 粒子分析装置用光学系、及びそれを用いた粒子分析装置 |
CN101153868B (zh) * | 2006-09-30 | 2012-05-30 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 流式细胞分析仪 |
CN101498646B (zh) * | 2008-02-03 | 2014-06-11 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 前向散射光信号探测装置与方法及细胞或粒子分析仪 |
JP4850873B2 (ja) * | 2008-06-16 | 2012-01-11 | 日之出水道機器株式会社 | 地下構造物用ブロック |
GB0814297D0 (en) * | 2008-08-05 | 2008-09-10 | Ge Healthcare Uk Ltd | Microscopy |
JP6352713B2 (ja) * | 2014-07-22 | 2018-07-04 | シスメックス株式会社 | フローサイトメータ、粒子分析装置およびフローサイトメトリー法 |
CN108474731B (zh) * | 2016-01-21 | 2021-09-21 | 东京毅力科创株式会社 | 异物检测装置和异物检测方法 |
CN109477837B (zh) | 2016-09-28 | 2022-09-16 | 泰尔茂株式会社 | 用于检测血液样品中的分析对象物的方法、组合物和芯片 |
Family Cites Families (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE1292877B (de) * | 1961-06-23 | 1969-04-17 | Cap Ges Fuer Entwicklung Von M | Verfahren und Vorrichtung zum selbsttaetigen photoelektrischen Zaehlen, Registrierenund Differenzieren von Teilchen |
US3315229A (en) * | 1963-12-31 | 1967-04-18 | Ibm | Blood cell recognizer |
US3703641A (en) * | 1969-08-18 | 1972-11-21 | North American Rockwell | Particle-size measuring apparatus |
US3790760A (en) * | 1971-09-27 | 1974-02-05 | Cornell Aeronautical Labor Inc | Apparatus for counting, differentiating and sorting particles according to their microstructure variations |
BE793185A (fr) * | 1971-12-23 | 1973-04-16 | Atomic Energy Commission | Appareil pour analyser et trier rapidement des particules telles que des cellules biologiques |
US3785735A (en) * | 1972-01-19 | 1974-01-15 | Bio Physics Systems Inc | Photoanalysis method |
FR2195907A5 (no) * | 1972-08-10 | 1974-03-08 | Meric Jean Paul | |
US3819270A (en) * | 1972-10-02 | 1974-06-25 | Block Engineering | Blood cell analyzer |
US3824402A (en) * | 1973-06-04 | 1974-07-16 | Energy Commission | Dual parameter flow photometric apparatus and method |
US3871770A (en) * | 1973-06-04 | 1975-03-18 | Nuclear Data Inc | Hydrodynamic focusing method and apparatus |
US3947123A (en) * | 1974-05-13 | 1976-03-30 | The Board Of Regents Of The University Of Washington | Coherent optical analyzer |
US3960449A (en) * | 1975-06-05 | 1976-06-01 | The Board Of Trustees Of Leland Stanford Junior University | Measurement of angular dependence of scattered light in a flowing stream |
JPS5842637B2 (ja) * | 1975-07-04 | 1983-09-21 | 株式会社東芝 | レ−ザシユツリヨクアンテイカソウチ |
JPS5267595A (en) * | 1975-12-02 | 1977-06-04 | Nec Corp | Laser output stabilizing device |
JPS5949529B2 (ja) * | 1976-06-25 | 1984-12-03 | 東亜医用電子株式会社 | 血小板計測装置 |
US4110604A (en) * | 1976-11-04 | 1978-08-29 | Becton, Dickinson And Company | Particle density measuring system |
US4202625A (en) * | 1978-08-18 | 1980-05-13 | Ortho Diagnostics, Inc. | Method and apparatus for discriminating red blood cells from platelets |
-
1978
- 1978-09-06 US US05/939,943 patent/US4577964A/en not_active Expired - Lifetime
-
1979
- 1979-07-23 AU AU49128/79A patent/AU524291B2/en not_active Expired
- 1979-08-01 EP EP79301538A patent/EP0009307B1/en not_active Expired
- 1979-08-01 DE DE7979301538T patent/DE2966186D1/de not_active Expired
- 1979-09-04 CA CA334,999A patent/CA1125050A/en not_active Expired
- 1979-09-05 JP JP11304079A patent/JPS5537998A/ja active Granted
- 1979-09-05 IE IE1685/79A patent/IE48476B1/en unknown
- 1979-09-05 NO NO792876A patent/NO792876L/no unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US4577964A (en) | 1986-03-25 |
IE791685L (en) | 1980-03-06 |
DE2966186D1 (en) | 1983-10-27 |
JPS5537998A (en) | 1980-03-17 |
CA1125050A (en) | 1982-06-08 |
EP0009307A1 (en) | 1980-04-02 |
JPS6351268B2 (no) | 1988-10-13 |
AU524291B2 (en) | 1982-09-09 |
AU4912879A (en) | 1980-03-13 |
IE48476B1 (en) | 1985-02-06 |
EP0009307B1 (en) | 1983-09-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
NO792876L (no) | Fremgangsmaate og apparat for aa detektere blodplater i helt blod | |
KR970007077B1 (ko) | 광산란 기술을 이용한 다중-부분식별 분석 방법 | |
US3822095A (en) | System for differentiating particles | |
US8773661B2 (en) | Virtual core flow cytometry | |
DK174059B1 (da) | Partikelanalysator og fremgangsmåde til bestemmelse af graden af partiklers symmetri | |
JP3375203B2 (ja) | 細胞分析装置 | |
JP2815435B2 (ja) | 粒子解析装置及び血球カウンタ | |
DK154457B (da) | Fremgangsmaade til automatisk cellevolumenbestemmelse | |
KR100834588B1 (ko) | 정액 분석 | |
NO312487B1 (no) | Apparat for telling og bestemmelse av minst en leukocytt- undergruppe | |
NO157314B (no) | Fremgangsmaate og apparat for identifisering og opptelling av spesifiserte blodcelle-undergrupper. . | |
SE531510C2 (sv) | Blodanalys | |
KR20180051844A (ko) | 혈구 분석 시스템 및 분석방법 | |
US3662176A (en) | Photo-optical particle analysis method and apparatus | |
EP0008874B1 (en) | Method and apparatus for discriminating red blood cells from platelets | |
Kubota et al. | Flow cytometer and imaging device used in combination | |
EP2843410A2 (en) | Sample analyzing method and sample analyzer | |
US9417231B2 (en) | Urine sample analyzing method and sample analyzer including classifying epithelial cells into at least two types based on the change of polarization condition | |
JP2674704B2 (ja) | 二次元分布分画方法 | |
JPH04337460A (ja) | 尿中の細胞分析装置および方法。 | |
JPH0792076A (ja) | 粒子解析装置 | |
JP2002296170A (ja) | フローサイトメータ | |
JPH1130580A (ja) | 粒子測定装置 | |
EP0064110B1 (fr) | Appareil de photométrie par diffusion | |
WO1993016368A1 (en) | Particle measurement system |