JPS63191043A

JPS63191043A - 細胞分析装置

Info

Publication number: JPS63191043A
Application number: JP62022884A
Authority: JP
Inventors: Akishi Yamamoto; 晃史山本
Original assignee: Omron Tateisi Electronics Co
Current assignee: Omron Corp
Priority date: 1987-02-03
Filing date: 1987-02-03
Publication date: 1988-08-08

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（イ）産業上の利用分野この発明は、フローサイトメトリーを適用した細胞分析
装置に関し、詳しく言えば、細胞浮遊液中の目的細胞群
についての細胞光情報の選別に関する。

（ロ）従来の技術フローサイトメトリーは、蛍光色素で標識された細胞を
、細い液流中に流し、この細胞の１つ１つにレーザ光又
は紫外線を照射することにより生じる散乱光や蛍光の量
、すなわち細胞光情報を瞬時に測定し、細胞分析を行う
ものである。このフローサイトメトリーは、大量の細胞
を高速度かつ高精度に分析できる特長を有している。

上記フローサイトメトリーを適用した細胞分析装置とし
ては、フローセルと、このフローセル内を流れる細胞に
光ビームを照射する光源と、光ビームを照射された細胞
の細胞光情報を検出する受光器と、この細胞光情報の解
析等を行うコンピュータを備えてなるものが知られてい
る。

この従来の細胞分析装置は、蛍光色素で染色した細胞浮
遊液（試料）を、シース液と共にフローセル内に流す。

フローセル内には層流が形成されており、細胞は、フロ
ーセル中心軸上を１つずつ流れていく。

これら細胞に光ビームが照射されることにより生じる散
乱光及び蛍光の強度は、細胞光情報のパラメータとして
、光電子倍増管等の受光器により検出される。

細胞浮遊液中に複数の細胞群が含まれており、そのうち
の１つの細胞群について分析を行う場合には、細胞光情
報のうちの１又は２以上のパラメータを座標点とする空
間に、ウィンドウと呼ばれる所定の領域を操作者が設定
し、この領域に属する細胞の光情報を目的細胞群の細胞
光情報として選別していた。そして、選別された細胞光
情報に基づいて、目的細胞群の分析を行っていた。

例えば、人体血液中のリンパ球サブセントの分析におい
ては、血液を溶血処理した試料が用いられるが、この試
料中にはリンパ球、単球、顆粒球が含まれている。細胞
光情報のパラメータのうちの９０°散乱光強度Ｉ、。を
横軸に、前方散乱光強度Ｉ０を縦軸にとったサイトグラ
ムを示すと、第６図のように、各細胞は分布する。ｂは
リンパ球の分布、Ｃは単球の分布、ｄは顆粒球の分布を
示している。なお、ａはデブリスと呼ばれ、赤血球の膜
成分等より構成されるものであるが、通常はノイズ処理
の段階で取除かれる。

リンパ球について分析を行う場合には、対照試料（健常
者の試料）を用いて、第６図に示すように、ウィンドウ
ｅを設定する。このウィンドウｅに属する細胞の光情報
のみを選別して解析が行われる。第７図（ａｌは、ウィ
ンドウｅにより選別されたリンパ球の９０°散乱光強度
■、。についてのヒストグラム、第７図（ｂ）は、前方
散乱光強度１０についてのヒストグラムを示す。もちろ
ん、蛍光特性についても解析が行われる。これらの結果
は、ＣＲＴに表示され、また、プリンタより出力される
。

（ハ）発明が解決しようとする問題点近年、フローサイトメトリーは、血液癌の検査や治療中
のモニタリング等の臨床検査に適用されるようになり、
多くの検体試料を効率良く測定するため、その自動化が
要求されることとなった。

しかし、上記従来の細胞分析装置は、細胞光情報の選別
をウィンドウにより行っているが、試料によっては、操
作者がウィンドウを変更しなければ、目的細胞の光情報
を選別することができない場合が生じ、分析の自動化が
阻まれ、効率的な処理が行えない不都合があった。

例えば、リンパ球サブセットの分析において、第６図に
示すリンパ球の分布すの位置、大きさや形状が試料によ
って変化し、ウィンドウｅをそれに応じて操作者が変更
しなければならない。

この場合、リンパ球分布Ｃを輪郭追跡法により輪郭を決
定し、この輪郭内に属する細胞の光情報について分析を
行うことも考えられる。しかし、輪郭追跡法は、演算が
複雑になる不都合があった。

この発明は、上記不都合に鑑みなされたもので、複雑な
演算を行うことなく、目的細胞群の細胞光情報を正確に
選別でき、分析を効率良く行える細胞分析装置を提供す
ることを目的としている。

（ニ）問題点を解決するための手段上記不都合を解決するための手段として、この発明の細
胞分析装置は、細胞浮遊液が流されるフローセルと、こ
のフローセル内を流れる細胞に光ビームを照射する光源
と、この光ビームが照射されたそれぞれの細胞について
、■又は２以上のパラメータよりなる細胞光情報を検出
する細胞光情報検出手段と、前記細胞浮遊液中の目的細
胞群の細胞光情報を選別する細胞光情報選別手段と、前
記細胞光情報検出手段で得られた細胞光情報及び前記細
胞光情報選別手段で選別された細胞光情報を処理する細
胞光情報処理手段と、この細胞光情報処理手段での処理
結果を出力する出力手段を備えてなるものにおいて、前
記細胞光情報処理手段で得られる、１又は２以上のパラ
メータについてのヒストグラムより変曲点を抽出し、こ
の変曲点に基づいて前記細胞浮遊液中の細胞群を画分す
る細胞群画分手段を設け、前記細胞光情報選別手段は、
この細胞群画分手段で得られた画分のうち、ｌ又は２以
上の画分に基づいて細胞光情報を選別するものである。

（ホ）作用この発明の細胞分析装置の作用を、実施例に対応する第
３図及び第４図を参照しながら説明する。

第３図は、前方散乱光強度Ｉ０を縦軸に、９０°散乱光
強度■、。を横軸にとり、リンパ球分布ｂ、卓球分布Ｃ
１顆粒球分布ｄを示したサイトグラムである。第４図（
ａ）は、第３図に示す分布の９０゜散乱光強度Ｉ９６に
ついてのヒストグラム、第４図中）は、同じく前方散乱
光強度Ｉ０についてのヒストグラムをそれぞれ示してい
る。

これらヒストグラム中の変曲点のうち、ｐｌ、り！及び
ｐ３による画分を、第３図に破線で示す。第３図のサイ
トグラムは、この破線により６つに画分されるが、■の
画分にはリンパ球分布すが、■の画分には単球分布Ｃが
、■及び■の画分には顆粒球分布ｄが含まれることとな
る。従って、前記細胞光情報処理手段で得られたヒスト
グラムの変曲点から、細胞群画分手段より細胞群を画分
し、これら１又は２以上の画分により目的細胞群の細胞
光情報を選別することができる。

（へ）実施例この発明の実施例を、第１図乃至第５図に基づいて以下
に説明する。

この実施例細胞分析装置の概要は、細胞光情報として、
前方散乱光強度、９０°散乱光強度、異なる２色の蛍光
強度の合計４つのパラメータを採用しており、前方散乱
光強度、９０°散乱光強度のそれぞれについてのヒスト
グラムの変曲点より、細胞群を画分するものである。

第２図は、この実施例細胞分析装置の構成を示すブロッ
ク図である。２はフローセルであり、その内部を蛍光色
素で細胞を標識した試料（細胞浮遊液）がシース液と共
に流される。フローセル２内には、層流が形成され、試
料中の細胞は、フローセル２中心軸上を１つ１つ流れて
い（。

このフローセル２内に試料を流す操作は、送液装置３に
より自動的に行われる。送液装置３は、複数の送液ポン
プ及び試料供給部を含んでおり、後述のマイクロコンピ
ュータ（ＭＰＵ）８により制御される。

４は、空冷アルゴンレーザ（波長４８８ｎｍ）光源であ
る。このレーザ光源４よりのレーザビーム！は、フロー
セル２中心軸上を流れる細胞Ｃに照射される。

フローセル２の周囲には、レンズ５ａ、５ｂ。

ハーフミラ−６ａ、６ｂが配設されている。細胞Ｃから
の前方散乱光は、レンズ５ａにより収束されて、光電子
倍増管（細胞光情報検出手段）７ａに入射する。

細胞Ｃの９０°散乱光は、レンズ５ｂを透過し、ハーフ
ミラ−６ａで反射され、光電子倍増管（細胞光情報検出
手段）７ｂに入射する。

細胞Ｃからの蛍光のうち、１部はレンズ５ｂ及びハーフ
ミラ−６ａを透過し、緑色蛍光検出用の光電子倍増管（
細胞光情報検出手段）７ｃに入射する。また一部は、レ
ンズ５ｂ、ハーフミラ−６ａ、６ｂを透過して、赤色蛍
光検出用の光電子倍増管（細胞光情報検出手段）７ｄに
入射する。

光電子倍増管７ａ、７ｂ、７Ｃ１７ｄの出力信号は、図
示しない増幅器及びアナログ／デジタル変換器を経て、
ＭＰＵ８に人力される。

ＭＰＵ８は、散乱光強度！。、■９゜のそれぞれについ
てヒストグラムを作成する機能、これらヒストグラムの
変曲点を抽出し、細胞群を画分する機能、目的細胞群の
細胞光情報を選別する機能、選別された細胞光情報に基
づいて、目的細胞群の蛍光特性を解析する機能等を含ん
でいる。

ＭＰＵ８には、キーボード９が接続されている。

このキーボード９より、測定条件等のプロトコル、患者
の属性及び操作者の命令等が入力される。

次に、この実施例細胞分析装置の動作を、血液中のリン
パ球サブセット分析を例に取り、第１図を主に参照しな
がら以下に説明する。

先ず、試料が用意される。この試料は、患者から採血さ
れた血液に溶血処理を施し、赤血球を取除くと共に、異
なる蛍光色素で標識された２種のモノクローナル抗体と
反応させて得られる。このモノクローナル抗体には、フ
ルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ：緑色蛍光
）で標識された０ＫＴ４モノクロ一ナル抗体及びファイ
コニリスリン（ＰＥ：赤色蛍光）で標識された０ＫＴ８
モノクロ一ナル抗体が使用される。

このようにして調製された試料は、送液装置３にセット
される。ここで測定開始の命令がプロトコル及び患者属
性データと共にキーボード９より入力されると、測定が
開始される〔ステップ（以下ＳＴという）１）。

試料は、送液装置３よりフローセル２内に送られる。試
料中の細胞には、レーザビームｌが照射され（第２図参
照）、前方散乱光強度■。、９０゜散乱光強度Ｉ、い緑
色蛍光強度Ｉｇ及び赤色蛍光強度１ｒが検出される（Ｓ
ｒ１）。

１つ１つの細胞についての散乱光強度■。、■、。、蛍
光強度Ｉｇ、Ｉｒは、ＭＰＵ８のメモリに記憶されてい
く。いわゆるリスト様式である。なお、リスト様式はメ
モリに大容量が必要となり、コストが比較的高くなるた
め、ローコストの細胞分析装置には、外部記憶装置が用
いられる。

継いで、ＭＰＵ８は前方散乱光強度ｒｏ、９０゜散乱光
強度■、。についてのヒストグラムを作成する（Ｓｒ３
）。９０＠散乱光強度Ｉ、。についてのヒストグラムを
、第４図（ａ）に示す。第４図ｆａ）は、散乱光強度Ｉ
９゜のチャンネルを横軸に取り、各チャンネルに属する
細胞の数ｎを縦軸に取っている。

このヒストグラムには、３つのピークと２つの谷とがあ
るのが認められる。これら谷の変曲点ｐＩ。

ｐ２が、ＭＰＵ８により抽出される（Ｓｒ１）。

一方、第４図（ｂ）は、前方散乱光強度Ｉ０についての
ヒストグラムを、横軸に散乱光強度Ｉ０のチャンネルを
、縦軸に各チャンネルに属する細胞の数ｎを取り、示し
ている。このヒストグラムには、２つのピーク点と１つ
の谷があり、この谷の変曲点ｐ、が、ＭＰＵ８により抽
出される（Ｓｒ１）。

第３図は、縦軸に前方散乱光強度Ｉ０、横軸に９０６散
乱光強度■、。を取って示すサイトグラムである。この
サイトグラム上には、リンパ球の分布す、単球の分布Ｃ
及び顆粒球の分布ｄが存在する。

変曲点ｐ８、ｐｚ、ｌ）ｓにより、サイトグラムは６つ
の百分Ｉ〜■に分けられる。画分■には卓球の分布Ｃが
存在し、画分■にはリンパ球の分布すが存在すると共に
、画分■及び■には顆粒球の分布ｄが存在する。リンパ
球サブセット分析の場合には、画分「の採用を決定しく
５Ｔ５）　、この百分■に属する細胞の光情報を選別し
て処理する。なお、上記ヒストグラム及びサイトグラム
は、必要に応じてＣＲＴＩＯに表示され、また、プリン
タ１１により出力される。

なお、試料によってはピークと谷との差がなく、ヒスト
グラムより変曲点が正確に求められない場合がある。こ
の場合には、第１図には示していないが、ヒストグラム
のピークと谷の差が一定以上である時には変曲点を抽出
し、そうでない時には変曲点を抽出できないことを操作
者に報知し、ウィンドウの設定を要求する。

Ｓｒ１では、Ｓｒ５で決定された画分■に属する細胞群
、すなわちリンパ球の蛍光強度１ｇ、Ｉｒデータが解析
される。この解析としては、例えば蛍光強度１ｇ、Ｉｒ
について、それぞれのヒストグラムの作成がある。これ
らヒストグラムの一例を、第５図＋ａ）及び第５図（ｂ
）に示す。第５図（ａ）は、赤色蛍光強度１ｒについて
のヒストグラム、第５図（ｂｌは、緑色蛍光強度１ｇに
ついてのヒストグラムである。

これらヒストグラム（あるいは蛍光強度１ｒ。

ｒｇをそれぞれ縦軸、横軸に取るサイトグラム）は、Ｃ
ＲＴＩＯに表示される（Ｓ　Ｔ’　？　）。

続＜Ｓｒ１では、プリントする旨の命令が入力されてい
るか否かが判定される。この判定がＮＯの場合には、５
ＴＩＯへ直接進む。判定がＹＥＳの場合には、Ｓｒ９に
進み、解析結果がプリンタ１１により印刷される。

５ＴＩＯでは、測定を終了する旨の入力がなされている
か否か判定される。判定がＮｏの場合、すなわち試料の
測定を続ける場合には、ＳＴＩに戻る。判定がＹＥＳの
場合には、測定を終了する。

なお、上記実施例においては、リンパ球サブセットの分
析について説明し、細胞光情報のパラメータとして散乱
光強度Ｉ０、■、。、蛍光強度１ｒ、Ｉｇの４つを採用
している。しかし、この発明はこれに限定されるもので
はなく、リンパ液羊水等、各種の試料の分析に適用可能
である。また、パラメータ数及びその組合わせも、測定
に応じて適宜変更可能であり、変曲点抽出のためのヒス
トグラムのパラメータも、これらパラメータから適宜選
択できる。

一方、試料を染色するための蛍光色素及びモノクローナ
ル抗体も、上記実施例のものに限定されず、適宜変更可
能であり、また、３色、４色染色も可能である。例えば
、蛍光色素としては、アロファイコシアニン（Ａ　Ｐ　
Ｃ）、テキサスレッド（ＴＲ）等も使用できる。光源に
は、使用する蛍光色素の励起に適したレーザ光源が使用
される。例えばヘリウムネオンレーザ、ヘリウムカドミ
ウムレーザ、あるいは色素レーザが使用される。

（ト）発明の詳細な説明したように、この発明の細胞分析装置は、細胞光
情報中のパラメータについてヒストグラムを作成し、こ
のヒストグラムの変曲点により細胞群を画分し、この百
分により細胞光情報を選別するものである。従って、複
雑な演算を必要とすることなく、目的細胞群の細胞光情
報を正確に選別でき、正確な分析を効率良く行える利点
を有している。

【図面の簡単な説明】

第１図は、この発明の一実施例に係る細胞分析装置の動
作を説明するフロー図、第２図は、同細胞分析装置の回
路構成を説明するブロック図、第３図は、同細胞分析装
置で得られた前方散乱光強度と９０＠散乱光強度とに関
するサイトグラム、第４図（ａ）及び第４図（ｂ）は、
それぞれ同細胞分析装置で得られた９０″散乱光強度及
び前方散乱光強度についてのヒストグラム、第５図（ａ
）及び第５図（ｂｌは、それぞれ同細胞分析装置で得ら
れた赤色蛍光強度及び緑色蛍光強度についてのヒストグ
ラム、第６図は、従来の細胞分析装置におけるウィンド
ウを説明するためのサイトグラム、第７図（ａ）は、同
ウィンドウに属する細胞についての９０°散乱光強度の
ヒストグラム、第７図（ｂ）は、同ウィンドウに属する
細胞についての前方散乱光強度のヒストグラムである。２：フローセル、　　４：光源、？ａ・７ｂ７ｃ・７ｄ：光電子倍増管、８　：ＭＰＵ、
　　　　　　１０　：　ＣＲＴ。１１：プリンタ。特許出願人　　　　　　　　立石電機株式会社代理人　
　　　　弁理士　　中　村　茂　信第１反第２図第３図第４図＜ａ） ■ｏ（Ｃｈ）→ ５０　　　　１００　　　１ｓｏ　　　　２００　　　
２５０Ｉｏ　＜ｃｈ）　−一◆ 手続（甫正書（自発）昭和６２年１２月２５日キ許庁長宮殿昭和６２年特許＋９ｆｆ第２２８８４号２、発明の名称細胞分析装置３、補正をする者事件との関係　特許出願人住所　　京都市右京区花園土堂町１０番地名称　　　（
２９４）立石電機株式会社代表者　立石義雄自発補正６、補正の対象（１）明細書の「特許請求の範囲１の欄、「発明の詳細
な説明ＩのＷＡ及び［図面の簡単な説明１のＷＡ（２）
図面７、補正の内容（１）特許請求の範囲を別紙の通り補正する。（２）明細書第３頁第１６行目に、「液流中」とあるの
を、「層流中」と補正する。（３）同第３頁第１７行目に「紫外線１とあるのを、「
放電管の光ビーム」と補正する。（４）同第４頁第１５行目に「光電子倍増管１とあるの
を、「光電子増倍管」と補正する。（５）同第４頁第２０行目に「座標点−１とあるのを、
「座標系」と補正する。（６）同第８頁第２行目に「出力手段を」とあるのを、
［出力手段とを１と補正する。（７）同第８頁第６行目から第９行目にかけて「細胞群
を画分する・・・・・・・に基づいて」とあるのを、「
細胞群を分画する細胞群分画手段を設け、前記細胞光情
報選別手段は、この細胞分画手段で得られた分画のうち
、１又は２以上の分画に基づいて」と補正する。（８）同第９頁第８行目に「細胞群画分手段より細胞群
を画分し、Ｊとあるのを、「細胞群分画手段より細胞群
を分画し、」と補正する。（９）同第９頁第１９行目に［画分１とあるのを、［分
画Ｊと補正する。０ω同第１０頁第１１行目に「空冷アルゴンレーザｊと
あるのを、「アルゴンレーザＪと補正する。（１１）同第１０頁第１６行目、第１１員第１行目、第
４行目及び第６行目に、それぞれ「ハーフミラ−」とあ
るのを、「ダイクロイックミラー」と補正する。０り同第１Ｏ頁第１８行目、第１１頁第１行目、第５行
目、第７行目から第８行目にかけて、及び第９行目に、
それぞれ「光電子倍増管」とあるのを、「光電子増倍管
」と補正する。（１３）同第１０頁第１９行目の［入射する。１のあと
に、ｒ５ｃは、レーザビーム２の光電子増倍管７ａへの
直射を防ぐためのビームストッパである。１を追加する
。測置第１１頁第１４行目にｃ画分するＪとあるのを、「
分画する」と補正する。０同第１３０第１９行目に「散乱光強度１とあるのを、
［前方散乱光強度１と補正する。０ω同第１６０第１Ｏ行目に「リンパ液羊水等、」とあ
るのを、「リンパ液あるいは羊水等、」と補正する。０７］同第１６１第１９行目から第２０行目にかけて［
アロファイコシアニン（ＡＰＣ）　、Ｊとあるのを削除
する。０８）同第１７頁第９行目に「画分し、この画分により
」とあるのを、［分画し、この分画により」と補正する
。（１つ）同第１８頁第７行目に「ライインドウ」とある
のを、「ウィンドウｊと補正する。ｅ［ｌｌ同第１８頁第１２行目に（光電子倍増管」とあ
るのを、「光電子増倍管１と補正する。（２１）第１図及び第２図を別紙の捕り補正する。８、添付書類の目録（１）特許請求の範囲を記載した書面　　　１通（２）
訂正図面〔第１図及び第２図〕１ｊｒｒＩ以上２、特許請求の範囲（１）　ａｌｌ胞浮遊液が流されるフローセルと、この
フローセル内を流れる細胞に光ビームを照射する光源と
、この光ビームが照射されたそれぞれの細胞について、１
又は２以上のパラメータよりなる細胞光情報を検出する
細胞光情報検出手段と、前記細胞浮遊液中の目的細胞群
の細胞光情報を選別する細胞光情報選別手段と、前記細胞光情報検出手段で得られる細胞光情報及び前記
細胞光ｆ青報選別手段で選別された細胞光情報を処理す
る細胞光情報処理手段と、この細胞光情報処理手段の処
理結果を出力する出力手段とを備えてなる細胞分析装置
において、前記ＩＩＩ胞光情報処理手段で得られる、１
又は−？−共上のパラメータについてのヒストグラムよ
り変曲点を抽出し、この変曲点に基づいて前記細胞浮遊
液巾の細胞群を公ユする細胞群」手段とを備え、前記細胞光情報選別手段は、この細胞群公丘手段で得ら
れた」のうち、１又は２以上の」に基づいて細胞光情報
を選別することを特徴とする細胞分析装置。（２）前記細胞浮’Ａｔ液中の目的細胞群は、１又は２
以上の相異なる色の蛍光色素で杆識されており、この蛍
光色素よりの蛍光の強度をパラメータとして前記Ｘ■胞
光↑ｎ報検出手段で検出する特許請求の範囲第１項記載
の細胞分析装置。（３）前記細胞群公丘手段は、ヒストグラムのピークと
谷との差が所定値以上の場合に変曲点を抽出する特許請
求の範囲第１項又は第２項記載の細胞分析装置。（４）前記光源は、アルゴンレーザ光源である特許請求
の範囲第１項又は第２項又は第３項記載のＩＴＩ胞分析
装置。（５）前記光源は、ヘリウムネオンレーザ光源である特
許請求の範囲第１項又は第２項又は第３項記載の細胞分
析装置。（６）前記光源は、ヘリウムカドミウムレーザ光源であ
る特許請求の範囲第１項又は第２項又は第３項記載の細
胞分析装置。（７）前記光源は、色素レーザ光源である特許請求の範
囲第１項又は第２項又は第３項記載の細胞分析装置。特許出＋ｔｎ人　　　　　立石電機株式会社代理人　　
弁理士　　中　村　茂　借方１望第２図

Claims

【特許請求の範囲】

（１）細胞浮遊液が流されるフローセルと、このフロー
セル内を流れる細胞に光ビームを照射する光源と、この光ビームが照射されたそれぞれの細胞について、１
又は２以上のパラメータよりなる細胞光情報を検出する
細胞光情報検出手段と、前記細胞浮遊液中の目的細胞群の細胞光情報を選別する
細胞光情報選別手段と、前記細胞光情報検出手段で得られる細胞光情報及び前記
細胞光情報選別手段で選別された細胞光情報を処理する
細胞光情報処理手段と、この細胞光情報処理手段の処理結果を出力する出力手段
とを備えてなる細胞分析装置において、前記細胞光情報
処理手段で得られる、１又は２以上のパラメータについ
てのヒストグラムより変曲点を抽出し、この変曲点に基
づいて前記細胞浮遊液中の細胞群を画分する細胞群画分
手段とを備え、前記細胞光情報選別手段は、この細胞群画分手段で得ら
れた画分のうち、１又は２以上の画分に基づいて細胞光
情報を選別することを特徴とする細胞分析装置。
（２）前記細胞浮遊液中の目的細胞群は、１又は２以上
の相異なる色の蛍光色素で標識されており、この蛍光色
素よりの蛍光の強度をパラメータとして前記細胞光情報
検出手段で検出する特許請求の範囲第１項記載の細胞分
析装置。
（３）前記細胞群画分手段は、ヒストグラムのピークと
谷との差が所定値以上の場合に変曲点を抽出する特許請
求の範囲第１項又は第２項記載の細胞分析装置。
（４）前記光源は、アルゴンレーザ光源である特許請求
の範囲第１項又は第２項又は第３項記載の細胞分析装置
。
（５）前記光源は、ヘリウムネオンレーザ光源である特
許請求の範囲第１項又は第２項又は第３項記載の細胞分
析装置。
（６）前記光源は、ヘリウムカドミウムレーザ光源であ
る特許請求の範囲第１項又は第２項又は第３項記載の細
胞分析装置。
（７）前記光源は、色素レーザ光源である特許請求の範
囲第１項又は第２項又は第３項記載の細胞分析装置。