NO744081L

NO744081L -

Info

Publication number: NO744081L
Application number: NO744081A
Authority: NO
Inventors: C Berger; D Farge; G Gros; M N Messer; C Moutonnier
Original assignee: Rhone Poulenc Sa
Priority date: 1973-11-14
Filing date: 1974-11-13
Publication date: 1975-06-09
Also published as: ATA914274A; NL7414486A; HU168853B; SU576947A3; ES431943A1; GB1430908A; CA1026745A; AT335608B; DE2454109A1; JPS5082090A; US4007176A; CH608499A5; FI330074A; CH602762A5; DK590774A; AR205398A1; IE40206L; SU566525A3; IL46040A0; AR205728A1

Description

Fremgangsmåte for fremstilling av nye

cefalosporinderivater.

Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte for fremstilling av nye cefalosporinderivater med den generelle formel:

samt salter derav.

I formel I angir et av symbolene'A. og A, et oksygenatom eller et svovelatom og det andre angir et svovelatom, symbolet R angir et hydrogenatom, en acetoksygruppe, en (5-metyl-l,3,4-tiadiazol-2-yl)tiogruppe eller en (1-metyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)triogruppe og symbolet R2angir en karboksygruppe, eller symbolet'R-j_ angir en pyridinogruppe og symbolet R2angir et karboksylation.

Ifølge oppfinnelsen kan de nye forbindelser med formelen I fremstilles ved at en syre med den generelle formel: der A og A1 har den ovenfor angitte betydning, eller et derivat av denne syre, slik.som f.eks. et halogenid, et anhydrid eller et blandet anhydrid, omsettes med et cefalosporin med den generelle formel:

der R^og R^har de ovenfor angitte betydninger.

Når man anvender en syre med den generelle formel II og når R2angir en karboksygruppe, foretrekker man først å beskytte syregruppen i forbindelsen med formelen III ved hjelp av en gruppe som er lett å fjerne, f.eks. en ter.butylgruppe. Vanligvis gjennomføres kondensasjonen i et organisk .oppløsningsmiddel slik som dimetylformamid 'i nærvær av et kondensasjonsmiddel slik som dicykloheksylkarbodiimid, ved

en temperatur mellom 0 og 40°C. Mån fjerner deretter beskyttelses-'gruppen for syregruppen, f.eks. ved spalting i surt medium.

Når man anvender syren med formelen II i form av et halogenid. et anhydrid eller et blandet anhydrid, er det ikke nødvendig å beskytte syregruppen i forbindelse med formelen III. Man gjennomfører vanligvis kondensasjonen i et organisk oppløsningsmiddel slik som kloroform i

nærvær av en syr.eakseptor, f.eks. en nitrogenholdig organisk base slik som pyridin eller trietylamin, eller i. et vannholdig organisk medium i nærvær av et alkalisk kondensasjonsmiddel, slik som natriumbikarbonat.

Den forbindelse med den generelle formel III der R-^angir et hydrogenatom og R2betegner en karboksygruppe er 7~amino-3-desacetoksy-'cefalosporansyre (eller 7-ADCA) som kan oppnås enten å gå ut fra et penicillin, f.eks. ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet i belgisk patent nr. 7^7•382 eller ved desacetoksylering av en forbindelse med den generelle formel III der R^ angir en acetoksygruppe og R2angir en karboksygruppe, f.eks. ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet i det belgiske patent nr. 779-03^»

Den forbindelse med den generelle formel III der R, angir en acetoksygruppe og R2angir en karboksygruppe er 7-aminocefalosporansyre (eller 7-ACA) som f.eks. kan oppnås ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet i det belgiske patent nr. 615.955 eller det amerikanske patent nr. 3.239-394.

De forbindelser med den generelle formel III der R^er en (5-metyl-l53,4-tiadiazol-2-yl)tiopgruppe eller en (1-metyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl )triogruppe og R2angir en karboksygruppe, eller der R-^ . angir en pyridingruppe og R2betegner et karboksylation, kan oppnås ved at 5-metyl-2-tiokso-l,3,4-tiadiazolin, l-metyl-5-tiokso-l,2,3,4-tetrazolin eller pyridin omsettes med en forbindelse med den generelle formel III, der R^ angir en acetoksygruppe og R2angir en karboksygruppe .

Denne reaksjon gjennomføres vanligvis ved oppvarming i vann-<1>holdig alkalisk medium ved en temperatur på mellom 40 og 80°C og eventuelt, spesielt når R^angir en pyridinogruppe, i nærvær av en aktivatoi slik som et alkalimetalliodid eller et alkalimetallsulfocyanid.

Syren med formelen II kan. oppnås ved forsåpning av tilsvarende metyl- eller etylester.

Den metyl- eller etylester av syren med formelen II der A angir et oksygenatom eller et svovelatom og A^angir et svovelatom kan oppnås ved at metyl- eller etyl-y-bromacetylatet omsettes med 2-merkaptc etanol eller med etanditiol.

Den metyl- eller etylester av syren med formelen II der A angir et svovelatom og A^angir et oksygenatom kan oppnås ved at metyl-eller etyl-3-brom-3-formylpropionat omsettes med 2-merkaptoetanol.

De forbindelser med den generelle formel I der symbolene A og A^har den ovenfor angitte betydning, symbolet R-^angir en (5-metyl-l,3j4-tiadiazol-2-yl)tiogruppe eller en (1-metyl-l, 2 , 3, 4-tetrazol-5~yl )■-tiogruppe og symbolet R2angir en karboksygruppe, eller symbolet R^angir en pyridinogruppe og symbolet R2 angir et karboksylation, kan ifølge oppfinnelsen fremstilles ved at 5-metyl-2-tiokso-l,3,4-tiadiazolin, 1-metyl-5-tiokso-l,2,3j4-tetrazolin eller pyridin omsettes med •en forbindelse med den generelle formel I der A og A-^har den ovenfor angitte betydning, R-j^angir en acetoksygruppe og R2angir en karboksygruppe .

Denne reaksjon gjennomføres vanligvis ved oppvarming i vannholdig alkalisk medium ved en temperatur mellom 40 og 80°C og eventuelt, spesielt når R^angir en pyridinogruppe, i nærvær av en aktivator, f.eks. et alkalimetalliodid eller et alkalimetallsulfocyanid.

De nye cefalosporinderivater med den generelle formel I kan . eventuelt renses ifølge fysikalske metoder slik som kromatografi eller krystallisasjon eller ifølge kjemiske metoder slik som dannelse av en eter, rensing av denne og etterfølgende forsåpning.

De forbindelser med den generelle formel I der.R2angir en karboksygruppe kan ifølge i og for seg kjente metoder omdannes til metallsalter eller til addisjonssalter med nitrogenholdige baser. Dis-se salter kan oppnås ved at en alkalimetallbase, en. jordalkalimetall-base, ammoniakk eller et amin omsettes med en forbindelse med den generelle formel I i et egnet oppløsningsmiddel slik som en alkohol, en eter, et keton eller vann, eller ved utbytningsreaksjon med et salt av en organisk syre. Det dannede salt faller ut etter eventuell konsentrering av oppløsningen og det separeres ved filtrering eller dekantering.

De nye cefalosporinderivater med den generelle formel I oppviser meget interessante antibakterielle egenskaper. De oppviser såvel in vitro som in vivo en kraftig virkning mot grampositive og gramnega-tive bakterier.

In vitro har forbindelsene i konsentrasjoner på mellom 0,01 og 50 yUg/cm^ vist seg å være virksomme mot stammer av stafylokokker som er følsomme overfor penicillin G (Staphylococcus aureus 209 P>Staphylococcus aureus Smith), og i konsentrasjoner på mellom 0,1 og 50 yug/cm^ har de vist seg virksomme mot stammer av stafylokokker som er resistente mot penicillin G (Staphylococcus aureus MB 9) og mot Escherichia coli av stammen Monod.

In vivo har forbindelsene ved eksperimentelt fremkalte in-feksjoner i mus vist seg å være virksomme mot Staphylococcus, aureus Smith (følsom for penicillin G) i doser mellom 0,1 og 10 mg/kg/døgn ved oral inngivelse og i doser på mellom 0,01 og 10 mg/kg/døgn ved subkutan inngivelse, mot Staphylococcus aureus MB 9 (resistent mot penicillin G) i doser på mellom 10 og 300 mg/kg/døgn ved subkutan inngivelse og mot Escherichia coli i doser på mellom 1 og 100 mg/kg/ døgn ved subkutan inngivelse og i doser på mellom 10 og 500 mg/kg/døgn ved oral inngivelse.

Oppfinnelsen skal illustreres ved følgende, ikke begrensende eksempler.

Eksempe! 1.

Til en oppløsning av. 11 g (5J6-dihydro-l,<i>J-ditiin-2-yl)-eddiksyre i 250 cm^ benzen settes 14,9 g tionylklorid og 3 dråper dimetylformamid. Man oppvarmer under tilbakeløp helt til avsluttet gassutvikling og konsentrerer deretter det hele til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg), I to satser tilsetter man 75 cm-' benzen, hvoretter det hele konsentreres til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg) for å fjerne gjenværende tionylklorid.

Man oppløser resten i 100 citk 3 kloroform, hvoretter man . i løpel av en time og mens man holder temperaturen ved 0°C setter den oppnådde

oppløsning til en oppløsning av 17 g 7-aminocefalosporansyre og 12,75 g trietylamin i 250 cm^ kloroform. Man lar det hele stå i 2 timer ved en temperatur nær 20°C og deretter■. konsentreres det hele til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg). Man opptar resten i 300 cm^ vann og

tilsetter deretter 50 cm 3 av en mettet vannoppløsning av 'natriumbikar-bonatog 300 cm 3 etylacetat. Man omrører den oppnådde blanding og filtrerer deretter gjennom "supercel". Den organiske fase separeres og kasseres. Til vannfasen settes nok en gang 300 chk etylacetat, hvoretter det hele surgjøres under omrøring til en Ph-verdi på 1,5 ved tilsetning av 4N saltsyre. Man separerer den organiske fase og ekstraherer vannfasen tre ganger med tilsammen 600 cm^ etylacetat. De organiske ekstrakter forenes, tørkes over natriumsulfat■og .behandles med avfarvningskull. Man"konsentrerer deretter til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg) og oppnår 23,6 g av en rest som opptas i

,1,5 ltr. etylacetat. Man tilsetter 83 cirr av en 0,6N oppløsning av natrium-2-etylheksanoat i 1-butanol. Herved felles det ut et produkt. Man omrører i en time, hvoretter det faste stoff separeres ved filtrering. Det faste stoff vaskes med 100 cm^ isopropyleter og tørkes deretter under redusret trykk (20 mm Hg). Man oppnår herved 1731 g natriumsalt av 3-acetoksymetyl-2-karboksy-7~_/T"5 , 6-dihydro-l, 4-ditiin-2-yl)acetamido7-8-okso-5-tia-l-azabicyklo/"4~,2,<0>7-2-okten.

Den som utgangsstoff anvendte (5,6-dihydro-l,4-ditiin-2-yl )-<*>eddiksyre fremstilles på følgende måte. Til en oppløsning av 121,3 g' etyl-(5j6-dihydro-l,4-ditiin-2-yl)acetat i 800 cm^ etanol setter man 71,4 cm ■3 10N natriumhydroksydoppløsning. Reaksjonsblandingen oppvarmes

,i 3 timer ved 50°C. Etter avdampning av oppløsningsmidlet under redusert trykk (25 mm Hg) oppløses resten i 500 cm^ destillert vann. Den alkaliske vannoppløsning vaskes to ganger med tilsammen 100 cm^ eter, behandles med 0,2 g avfarvingskull, filtreres og gjøres deretter sur med et overskudd av saltsyre (d=l,19). Den utsaltede olje ekstraheres tre ganger med tilsammen 450 cm^ eter. De forenede eteroppløsninger vaskes tre ganger med tilsammen 300 cm destillert bann, tørkes over

vannfri magnesiumsulfat og dampes inn. Man løser r.esten på 102,2 g i 150 cm^ kokende isopropyleter og tilsetter deretter 50 cm^ petroleter (40-60<0>C). Etter 3 timer ved 2 oC separeres de dannede krystaller ved filtreringjvaskes to ganger med tilsammen 60 cm? iskald isopropyleter og tørkes under redusert trykk (25 mm Hg). Man oppnår 82,2 g (5,6-dihydro-1,4-ditiin-2-yl)eddiksyre med smeltepunkt 82°C.

Etyl-(5,6-dihydro-l,4-ditiin-2-yl)acetatet fremstilles på følgende måte.. Til en oppløsning av 68,0 g natriumetylat i 700 cm? vannfri etanol setter man ved 10°C i løpet av 15 minutter en oppløs-ning av'94,0 g etanditiol i 300 cm-5 vannfri etanol. Deretter tilsetter man i løpet av 30 minutter og ved en temperatur på 45~50°C 209,0 g etyl-y-bromacetylacetat. Reaksjonsblandingen omrøres i 2,5 timer ved en temperatur nær 25°C. Etter filtrering avdampes oppløsningsmidlet ved 70°C under redusert trykk (25 mm Hg). Resten oppløses i 1000 cm-5 vannfri toluen. Etter filtrering og tilsetning av 2,0 g paratoluensulfonsyre-monohydrat oppvarmes reaksjonsblandingen under tilbakeløp inntilfullstendig dehydratisering.(det dannede vann separeres i en Dean-Stark-apparatur). Etter avkjøling vaskes toluenoppløsningen to ganger med tilsammen 200 cm? av en 5#-ig vannoppløsning av natriumbikarbonat og deretter 2 ganger med tilsammen 400. cm? destillert vann. Oppløsningen tørkes deretter over vannfri magnesiumsulfat og dampes inn under redusert trykk (25 mm Hg). Den oppnådde rest på 197,5 g destil-leres. Herved oppnås 100,7 g etyl-(5,6-dihydro-l,4-ditiin-2-yl)acetat med et kokepunkt på 125-128°C ved 0,1 mm Hg.

Etyl-y-bromacetylacetat kan fremstilles ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet av A. Burger og G.E. Ullyot i "J.Org.Chem.", 12, 346 (1947).

Eksempel 2.

T5l en oppløsning av 6 g (5,6-dihydro-l,4-ditiin-2-yl)eddik-syre i 50 cm^ dimetylformamid setter man 11,2 g 3-acetoksymetyl-7~amino-2-tert. butoksykarbonyl-8-oks0-5-1ia- 1-azab.icyklo/IT, 2 , 07-2-okten og 7 a 8 g dicykloheksylkarbodiimid. Man omrører det hele i 5 timer ved en temperatur nær 20°C, hvoretter man separerer det faste stoff ved

•filtrering. Man opptar filtratet i 300 cm^. etylacetat og vasker med

en vannoppløsning av natriumbikarbonat, med IN saltsyre og deretter med vann. Det hele tørkes over natriumsulfat, behandles med avfarvningskull og. konsentreres til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg). Man oppnår derved 20 g av en'rest som man kromatograferer på 330 g

siliciumdioksyd. Man eluerer med 10 ltr. av en blanding av etylacetat

og cykloheksan i volumforholdet 1:3 og konsentrerer eluatet til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg). Man oppnår herved 10,3 g 3-acetoksymetyl-2-tert.butoksykarbonyl-7-/T5s 6-dihydro-l, 4-ditiin-2-yl)acetamido7-8-okso-5-tia-l-azabicykloA",2,07~2-okten med smeltepunkt

■80°C.

Man oppløser 9,6 g 3-acetoksymetyl-2-tert.butoksykarbonyl-7-/_T5 > 6-dihydro-l, 4-dit i in-2-yl )acétamido7-8-okso~5-t ia-l-azabicyklo-_/4, 2 ,£7-2-okten i 100 cm-5 trif luoreddiksyre. Man lar det hele stå en time under avkjøling i et isbad. Det hele konsentreres til tørr tilstand under redusert trykk (1 mm Hg), det tilsettes 150 cm? etylacetat og man konsentrerer på ny til tørr tilstand under redusert trykk.

Resten opptas i en vannoppløsning av natriumbikarbonat, hvoretter man vasker med etylacetat. Vannfasen surgjøres til en pH-verdi på 1,2 med 4N saltsyre i nærvær av etylacetat. Man separerer den organiske fase og ekstraherer vannfasen med etylacetat. De forenede organiske ekstrakter filtreres gjennom "supercel" og tørkes deretter over magnesiumsulf at.' Man konsentrerer til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg), hvoretter man vasker resten med isopropyleter. Man oppnår herved 3,5 g 3-acetoksymetyl-2-karboksy-7_/T5>6-dihydro-l,4-ditiin-2-y 1) ac et amido7-8-oks o-5-t ia-l-azabicyklo A, 2 ,0_/-2-okten.

Utgangsforbindelsen 3-acetoksymetyl-7-amino-2-tert.butoksy-karbonyl-8-okso-5-tia-l-azabicyklo/J,2,07-2-okten kan fremstilles ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet av R.J. Stedman i "J.Med. Chem.", 9, 444 (1966).

Eksempel 3-

Til en oppløsning av 3jl0 g (5 , 6-dihydro-l,4-ditiin-2-yl)-eddiksyre i 60 cm 3 benzen setter " man 3 cm 3 tionylklorid., hvoretter man oppvarmer under tilbakeløp helt til gassutviklingen opphører. Man konsentrerer deretter til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg) Man. oppnår en brun olje som man oppløser i 60 cm? kloroform. Denne oppløsning settes dråpevis i løpet av en time til en suspensjon av •4,28 g 7-amino-3-desacétoksycefalosporansyre i 50 cm? kloroform og 5,5 cm? trietylamin, hvilken suspensjon holdes ved 5°C. Man omrører •deretter det hele i 45 minutter ved en temperatur nær 20°C og konsentrerer -deretter det hele til tørr tilstand under redusert trykk (20'mm

Hg). Resten oppnås i 100 cm^ 3 vann og 100 crrr 1 etylacetat og vannfasens pH-verdi innstilles til 8,5 ved tilsetning av trietylamin. Man dekanterer av den organiske fase. Til vannfasen settes 300 cm? etyl acetat og deretter 4N saltsyre til en pH-verdi lik 2. Man separerer den organiske fase og vasker vannfasen med 100 cm? etylacetat. De organiske faser forenes, tørkes over magnesiumsulfat, behandles med avfarvingskull og konsentreres til et volum på 50 cm? under redusert trykk (20 mm Hg). Etter avkjøling til ca. 0°C separerer man det faste stoff ved filtrering og vasker det deretter med 2 x 20 cm? etylacetat. Man oppnår 2,6 g 2-karboksy-7_/T5>6-dihydro-l,4-ditiin-2-yl)acetamido7-3-metyl^8-okso-5-tia-l-azabicyklo/_7,2,0_7-2-okten i form av et pulver med lys beige farve.

7-aminodesacetoksycefalosporansyren kan fremstilles ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet av R.J. Stedman, K. Swered og J.R.E. Hoover i "J.Med.Chem.", 7, 117 (1964). , Eksempel 4.

Til en oppløsning av 6,45 g (5,6-dihydro-l,4-ditiin-2-yl)-eddiksyre i 120 cm^ benzen setter man 8,7 g tionylklorid. Man oppvarmer

blandingen under tilbakeløp inntil gassutviklingen har opphørt og konsentrerer deretter til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg). Den- oppnådde brune olje oppløses, i 50 cm? aceton, og denne oppløsning

settes dråpe for dråpe i løpet av 1 time til en oppløsning av 12 g 7-amino-2-karboksy-3-/T-l-nietyl-l, 2 , 3 , 4-tetrazol-5-yl) tiometyl7-8-okso-5-tia-l-azabicyklo/_1l,2,07-2-okten og 7a35g natriumbikarbonat i 200 cm?

vann og 100 cm^ 3 aceton, og oppløsni. ngen holdes ved 3 oC. Man omrører i

1 time ved 3°C og deretter i 2 timer ved ca. 20°C. Man konsentrerer

til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg) og tilsetter 150 cm? vann og avfiltrerer det lette uoppløselige stoff. Man vasker oppløs-ningen to ganger med. 300 cm<5>etylacetat og innstiller pH-verdien til

2,2 ved tilsetning av 4N saltsyre i nærvær av 300 cm? .etylacetat. Man

filtrerer gjennom "supercel", dekanterer og ekstraherer vannfasen med

300 cm? etylacetat. De organiske faser forenes og vaskes med 200 cm?

vann, tørkes over magnesiumsulfat og behandles med avfarvingskull. Man filtrerer og konsentrerer- filtratet til et volum på 100 cm?. Man tilsetter deretter 700 cm? etyleter og avkjøler til 0°C. Den' dannede felling separeres ved filtrering og vaskes med 100 cm^ etyleter. Man oppnår 4,4 g 2-karboksy-7-_/T"5, 6-dihydro-l, 4-ditiin-2-yl) acetamido7-3~ /Tl-metyl-1,2, 3, 4-t etrazol-5-y 1 ) tiomety 1/7-8-okso-5~t ia-1-azabicy klo-Jj\ 12,07-2-okten i form av et fløtefarvet pulver.

/~a7Q°'= -71,1° - 1,5° (c = 1; dimetylformamid).

Utgangsforbindelsen 7-amino-2-kårboksy-3-/Tl-metyl-l.,2,3,4-tetrazol-5-yl)tiometyl7-8-okso-5-tia-l-azabicykloA,2,£7-2-okten kan fremstilles ifølge den fremgangsmåte som er beskrevet i det amerikanske patent nr. 3.516.997.

Eksempel. 5.

Til en oppløsning av 8,3 g (5,6-dihydro-l,4-oksatiin-2-yl)-eddiksyre i 50 cm? vannfri dietyleter setter man 12,4 g tionylklorid

■:-. og 5 dråper dimetylformamid. Man oppvarmer under tilbakeløp inntil ..;:<. gassutviklingen■er ferdig .og konsentrerer deretter til tørr tilstand

under redusert trykk (20.mm Hg). I tre satser tilsetter man 70 cm? benzen, hvoretter man konsentrerer til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg) for å fjerne gjenværende tionylklorid.

Man oppløser resten i 80 cm? kloroform. Den oppnådde opp-løsning settes i løpet' av en time og ved en temperatur på -10°C -til<1>en oppløsning av 14,3 g 7-aminocefalosporansyre og 10,6 g trietylamin i 220 cm^ kloroform. Man lar det hele stå i 15 timer ved en tempera-, tur nær 4°C og konsentrerer deretter til tørr tilstand under redusert' trykk (20 mm Hg). Man opptar resten i 300 cmJ 3 vann og tilsetter 50 cm<3>av en mettet vannoppløsning av natriumbikarbonat og 300 cm? etylacetat. Mnå omrører denne blanding og filtrerer den deretter gjennom "supercel" Den organiske fase separeres og kastes. Til vannfasen settes 400 cm? etylacetat og det hele surgjøres deretter under omrøring.til en pH-verdi lik 2 ved tilsetning av 4N saltsyre. Man omrører blandingen og filtrerer deretter gjennom "supercel". Til slutt isoleres den organisk fase ved dekantering. De organiske ekstrakter vaskes 4 ganger med 250 cm? vann, tørkes over natriumsulfat. og behandles med avfarvingskull. Man konsentrerer deretter til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg) og man oppnår 14,8 g av en rest som opptas i 50 cm? etylacetat. Etter 30 minutter ved 2°C isoleres det utfelte faste stoff ved filtrering, vaskes to ganger med 15 c.m^ etylacetat og to ganger med 15 cm? isopropyleter og det hele tørkes deretter under redusert trykk

(0,5 mm Hg). Man oppnår herved 6,4 g 3-acetoksymetyl-2-karboksy-7-/J5 j 6-dihydro-l,4-oksatiin-2-yl)acetamido7-8-okso-5_tia-l-azabicyklo-• _/"4~, 2,07-2-okten som smelter ved 190-191°C under spalting.-

Utgangsforbindelsen (5,6-dihydro-l,4-oksatiin-2-yl)eddiksyre kan fremstilles pp følgende.måte. Til en oppløsning av 20 g etyl-(5,6-dihydro-l,4-oksatiin-2-yl)acetat i 55 cm? etanol setter man en oppløs-nmg av 5 g natriumhydroksyd 1 30 cm-^vann. Reaksjonsblandingen. opp varmes i en time ved 50°C, hvoretter man lar temperaturen synke til ca. 20°C og tilsetter 100 cm<5>etanol. Etter en time ved 2°C separeres de dannede krystaller ved filtrering, og vaskes to ganger méd 25 cnr etanol. Den oppnådde krystallinske forbindelse tørkes over .kalium-hydroksyd under redusert trykk (0,5 mm Hg). Man oppnår herved 15,2 g natriumsalt a- (5,6-dihydro-l,4-oksatiin-2-yl)eddiksyre med et smeltepunkt på 248°C.

Det oppnådde natriumsaltet oppløses i 50 cm? destillert vann.

Man surgjør deretter ved tilsetning av 4N saltsyre og ekstraherer deretter to ganger med 150 cm? dietyleter. Man forener eterekstraktene og vasker dem to ganger med 100 cm<5>vann. Man tørker over .natriumsulfat og behandler det hele med avfarvingskull. Etter konsentrering til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg) oppnår man 13 g (5,6-dihydro-l,4-oksatiin-2-yl)eddiksyre i en oljeaktig form.

Etyl-(5,6-dihydro-l,4-oksatiin-2-yl)acetat kan fremstilles på følgende måte. Til en etanolisk oppløsning av natriumetylat (oppnådd ved omsetning av 17,2 g natrium med 570 cm? vannfri etanol) settes ved'10°C og i løpet av en time en oppløsning av 58,5 g 2-merkaptoetanol i 220 cm? vannfri etanol. Etter oppvarming av reaksjonsblandingen til. 45-50°C tilsetter man i løpet av 45 minutter 157 g et.<y>l-ybromacetyl-acetat, hvoretter reaksjonsblandingen omrøres i 2 timer ved en temperatur nær 25°C. Etter filtrering avdampes oppløsningsmidlet ved 50°C under redusert trykk (20 mm Hg). Resten oppløses i .1000 cm? vannfri toluen. 'Man filtrerer på nytt, hvoretter man tilsetter 1,5 g paratoluensulfonsyre-monohydrat. Man oppvarmer reaksjonsblandingen under-tilbakeløp inntil fullstendig dehydratisering (det dannede vann separeres i en Dean-Stark-apparatur). Man avdestillerer deretter 200 crn^ toluen. Etter avkjøling filtreres toluenoppløsningen, vaskes to ganger med 200 cm? av en mettet natriumbikarbonatoppløsning og deretter to ganger med 200 cm? vann. Man tørker over natriumsulfat, behandler med avfarvingskull, filtrerer og damper inn under redusert trykk (20 mm Hg) Man oppnår herved en rest på 131,9 g som kromatografe-res på 250 g aluminiumoksyd. Man eluerer med .2,5 ltr. av en blanding av etylacetat •og cykloheksan i volumforholdet 1:19 og man konsentrerer eluatet til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg). Man oppnår herved •75,7 g etyl-(5,6-dihydro-l,4-oksatiin-2-yl)acetat i form av en olje. Eksempel 6.

Til en oppløsning av 8,9 g (5,6-dihydro-l,4-oksatiin-3-yl)-eddiksyre 1 90 cm^ vannfri dietyleter setter man 13,2 g tionylklorid og 5 dråper dimetylformamid. Man oppvarmer under tilbakeløp inntil gassutviklingen har opphørt og. konsentrerer deretter til. tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg). I to satser tilsetter man 50 cm? kloroform, hvoretter man konsentrerer til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg) for å fjerne gjenværende tionylklorid.

Man oppløser resten i 90 cm? kloroform. Den oppnådde oppløs-ning settes i løpet av en time og ved en temperatur på -10°C. til en oppløsning av 15,1 g 7-aminocefalosporansyre og 11,2 g trietylamin i 240' cm? kloroform. Man lar det hele stå i 15 timer ved en temperatur , nær + 4?C og konsentrerer deretter til tørr tilstand under redusert tryk (20 mrn Hg). Man opptar resten i 250 cm^ vann og innstiller pH-verdien til 7,5 ved tilsetning av en mettet vannoppløsning av natriumbikarbonat Man vasker den oppnådde oppløsning med 2 x 250 cm? etylacetat. De organiske sjikt separeres og kastes. Til vannfasen setter man nok en gang 300 cm? etylacetat, hvoretter man surgjør det hele under omrøring<1>inntil pH lik 2 ved tilsetning av 4N saltsyre. Man filtrerer gjennom "supercel". Man isolerer den organiske fase ved dekantering, hvoretter man vasker den med 2 x 100 cm? vann, tørker den over. natriumsulf a og behandler den med avfarvingskull. Man konsentrerer til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg). Man oppnår 16 g av en rest som man tar opp i 50 cm? etylacetat. Til den således oppnådde oppløsning setter man under omrøring 500 cnr 3 isopropyleter. Man omrører i en time hvoretter det dannede faste stoff separeres ved filtrering. Det faste stoff vaskes to ganger med tilsammen 200 cm? isopropyleter og tørkes deretter under redusert trykk (0,5 mm Hg). Man oppnår herved'8,1 g 3-acetoksymetyl-2-karboksy-7-/T5,6-dihydro-l,4-oksat iin-3"yl)acetamido7 8-okso-5-tia-l-azabicyklo_/"4",2,07-2-okten.

Utgangsforbindelsen (5,6-dihydro-l,4-oksatiin-3-yl)eddiksyre. kan fremstilles på følgende måte. Til en oppløsning av-13,4 g etyl-(5,6-dihydro-l,4-oksatiin-3_yl)acetat i 134 cm etanol setter man en oppløsning av 3,2 g natirumhydroksyd .i 18 cm-5, vann. Reaksj onsblandinge oppvarmes i en time ved 60°C og konsentreres deretter til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg). Man oppnår en rest som man tar opp i

250 cm? vann. Man ekstraherer med 200 cm? dietyleter, dekanterer og fjerner eterfasen. Vannfasen gjøres sur til en pH-verdi på 1 ved tilsetning av 4N saltsyre og ekstraheres deretter tre ganger med tilsammen 600 cm? dietyleter. Eterfraksjonene forenes, vaskes to ganger med tilsammen 200 cm? vann, tørkes over natriumsulfat og behandles med avfarvingskull. Etter filtrering konsentrerer man til tørr tilstand

under redusert trykk (20 mm Hg). Man oppnår herved 8,9 g 5,6-dihydro-1,4-oksatiin-3~yl)eddiksyre i oljelignende form, og man anvender dette produkt som sådant..

Etyl-(5,6-dihydro-lj4-oksatiin-3-yl)acetat kan fremstilles på følgende måte. Til en etanolisk oppløsning av natriummetylat (oppnådd ved omsetning av 11,2 g natrium og 350 cm^ vannfri etanol) setter man ved 10°C og i løpet av en time en oppløsning av 38,2 g 2-merkaptoetanol i 146 cm? vannfri etanol. Etter oppvarming av reaksjonsblandingen til en temperatur på 45-50°C tilsetter man i løpet av 20 minutter 102,8 g etyl-3-brom-2-formylpropionat. Reaksjonsblandingen. omrøres i 15 timer ved en temperatur nær 25°C. Etter filtreringen avdampes.oppløsnings-midlet ved 50°C under redusert trykk (20 mm Hg). Resten oppløses i 500 cm? vannfri toluen. Man filtrerer på nytt og tilsetter deretter 1j5g paratoluensulfonsyre-monohydrat. Man oppvarmer reaksjonsblandingen under tilbakeløp inntil fullstendig dehydratisering (det dannede vann separeres i en Dean-Stark-apparatur), hvoretter man avdamper opp-løsningsmidlet ved 50°C under redusert trykk (20 mm Hg). Man opptar resten i 700 cm? dietyleter. Det dannes et uoppløselig stoff som fjernes ved filtrering på "supercel".- Man vasker eteroppløsningen to ganger med tilsammen 600 cm vann, tørker over natriumsulfat, behandler med avfarvingskull og filtrerer. Man konsentrerer til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg) og oppnår 65 g av'en rest som-man kromatograferer på 600 g aluminiumoksyd. Man eluerer med 2,6 ltr. av en blanding av etylacetat og cykloheksan i volumforholdet 1:19, og man konsentrerer eluatet til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg). Man oppnår herved 16,8 g etyl-(5,6-dihydro-l,4-oksatiin-3-yl)acetat i form av en olje.

Etyl-3-brom-3~formylpropionat kan fremstilles ifølge M. Aeber-li og M. Erlenmeyer i "Heiv.Chim.Acta.", 33, 503 (1950).

Eksempel 7.

Man oppløser 10 g natriumsulfat av 3-acetoksymetyl-2-karboksy~7-/T5,6-dihydro-l,4-ditiin-2-y1)acetamido/-8-okso-5_tia-l-azabicyklo-JJ<\>y2,£7-2-okten i 200 cm? destillert vann. Til denne oppløsning setter .man 2,25 g natriu<m>bikarbonat. og deretter 3,54 g 2-metyl-5-tiokso-l,3,4-tiadiazolin, hvoretter man oppvarmer under omrøring til 60°C i 16 timer. Etter avkjøling vaskes reaksjonsblandingen med 200 cm 3 etylacetat. Blandingens pH-verdi innstilles på 6,5 ved tilsetning av 4N saltsyre, hvoretter blandingen på nytt vaskes med 200 cm? etylacetat. Man sur-gjør til pH 2 ved tilsetning av 4N saltsyre i nærvær av 200; cm5 etylacetat. Etter dekantering av den organiske fase ekstraherer man vann fasen to ganger med tilsammen 200 cm? etylacetat. De organiske ekstrakter forenes, vaskes tre ganger med tilsammen 500 cm vann, tørkes over natriumsulfat, behandles med avfarvingskull, filtreres og konsentreres deretter til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg). Den oppnådde faste rest opptas i 200 cm 3 isopropyleter, separeres ved filtrering og tørkes under redusert trykk (2 mm Hg).

Man oppnår herved 6 g 2-karboksy-7-_/( 5,6-dihydro-l, 4-ditiin-2-<y>l)-acetamido7-3-</>.T5-met<y>l-l,3J4-diadiazol-2-<y>l)tiomet<y>l7-870kso-5-tia-l-azabicyklo/4"',2,07-2-okten med smeltepunkt 170°C.

/~a7p° = -70° ±1° (c = 1; dimetylformamid).

Det som utgangsmateriale anvendte 2-metyl-5-tiokso-l,3,4-tiadiazolin kan fremstilles på den måte som er beskrevet i amerikansk patent' nr. 3. 073-731. i Eksempel 8.

Til 250 cm? av en bufferløsning (pH 6,4) setter man 16,4 g 3- acetoksymetyl-2-karboksy-7-_/T5, 6-dihydro-l, 4-dit i in-2-yl )acetamido/- 8-okso-5-tia-l-azabicyklo/JT,2,07-2-okten, 3,75 g natriumbikarbonat og 5,05 g' l-metyl-5-tiokso-l,2,3,4-tetrazolin, hvoretter man oppvarmer den oppnådde oppløsning til 60 oC i 6 timer. Etter avkjøling tilsetter man 50 cnr 3 av • en mettet natriumbikarbonatoppløsning og vasker med 300 cnr<3>etylacetat. Man behandler deretter vannfasen med avfarvingskull og innstiller pH-verdien til 2 ved tilsetning av 4N saltsyre i nærvær av 250 cm? etylacetat. Man separerer etylacetatet ved dekantering og vasker vannfasen ' med 300 cm 3 etylacetat. De forenede organiske ekstrakter tørkes over magnesiumsulfat, behandles med avfarvingskull og filtreres.

Por å rense cefalosporinderivatet tilsetter man til denne oppløsning 8,4 g difenyldiazometan, hvoretter' man omrører blandingen ved en temperatur nær 20°C i 16 timer.. Man konsentrerer fil tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg) og festen på 18,8 g kromatogra-feres på 200 g silikagel. Man eluerer med en blanding av like volum-deler etylacetat og cykloheksan. Ved avdampning av oppløsningsmidlet oppnår man 7,6 g 7-/T5,6-dihydro-l,4-ditiin-2-yl)acetamido/-2-difenyl-metoksykarbonyl-3-_/T~l-nietyl-l, 2,3, 4-tetrazol-5~yl)t iometyl/-8-okso-5_ tia-l-azabicyklo/"4",2,07-2-okten i form av en lakk. 7,5 g av difenyl-3 3

metylesteren oppløses 1 25 cm anisol og 20 cm trifluoreddiksyre, hvoretter den oppnådde oppløsning omrørés ved ca. 20°C i 15 minutter. Man konsentrerer til tørr tilstand under redusert trykk (1 mm Hg), hvoretter man tilsetter 20 cnr 3 etylacetat og en mettet natriumbi.karbo<->

natoppløsning inntil pH-verdien er 8. Vannfasen separeres ued dekantering, vaskes med 100 cm<5>etylacetat, behandles med avfarvingskull, filtreres og surgjøres til pH = 2 ved tilsetning av 4N saltsyre i nærvær av 400 cm? etylacetat. Den organiske fase tørkes over natriumsulfat, filtreres og konsentreres til tørr tilstand under redusert trykk (20 mm Hg). Man oppnår 4,5 'g 2-karboksy-7-/T5,6-dihydro-l,4-ditiin-2-yl)acetamido7-3-/_Tl-metyl-l ,2,3,4-tetrazol-5-y 1 )tiometyl7-8-okso-5-1-azabicyklo-A, 2 ,0_7-2-okten.

Utgangsforbindelsen l-metyl-5-tiokso-l,2,3,4-tetrazolin fremstilles ifølge R. Stolle og Fr. Henke-Stark i "J.Prakt.Chem.", 124, 261 (1930).

Eksempel 9•

Til 45,2 g natriumsalt av 3-acetoksymetyl-2-karboksy-7-/T5,6-dihydro-1,4-ditiin-2-yl)acetamido7-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-/_'4", 2 ,07-2-okten og 194 g kaliumtiocyanat setter man 40 cm - z vann og 16,1 cm- z. pyridin. Etter omrøring oppnår man en homogen sirupslignende blanding hvis pH-verdi innstilles til 6,5 ved tilsetning av konsentrert fosfor-syre. Man oppvarmer til 60°C i 5 timer. Etter avkjøling fortynner

■ man'reaksjonsblandingen med 1 ltr. destillert vann, hvoretter man vasker tre ganger med tilsammen 800 cm? kloroform. Man.fjerner de siste spor av kloroformen i vannfasen ved destillasjon under redusert trykk (20 mm Hg) hvoretter man behandler med avfarvingskull, filtrerer gjennom "supercel" og avkjøler i et bad av is og vann. Man surgjør til pH = 2 ved tilsetning av 4N saltsyre mens temperatur holdes under 5°C. Herved faller det ut et produkt. Man omrører i en time under fortsatt avkjøling i en blanding av is.og vann, hvoretter man vasker to ganger ved dekantering med 1 ltr. isvann. Man isolerer utfellingen ved

filtrering og vasker den tre ganger med tilsammen 2 ltr. isvann. Det oppnådde faste stoff suspenderes i 120 cm? vann, hvoretter man tilsetter 120 cm? av en 25%-ig oppløsning av "Amberlite LA 2" i metylisobutylketon. Man omrører inntil fullstendig oppløsning av det faste stoff, hvoretter man dekanterer den organiske fase som fjernes. Man ekstraherer vannfasen to ganger med tilsammen 240 cm? 25%-ig oppløsning

av "Amberlite LA- 2" i metylisobutylketon, deretter med 300 cnr etylacetat og tilslutt tre ganger med tilsammen 300 cnr dietyleter. Man damper av vannet under redusert trykk (20 mm Hg) ved 40°C. Man oppnår en olje som_man river i 800 cm? aceton. Det dannede faste stoff isoleres ved filtrering, vaskes to ganger med tilsammen 300 cm? aceton og tørkes deretter under redusert trykk (0,5 mm Hg). Man oppnår herved

8,3 g 2-karboksylat0-7-/(5,6-dihydro-l,4-ditiin-2-yl)acetamido/-8-okso-3'- (1-pyridiniometyl)-5_tia-l-azabicykloA, 2 ,07-2-okte 4n.

Eksempel 10.

Man oppløser 14 g natriumsalt av 3-acetoksymet-l-2-karboksy-7-/.C 5 j 6-dihydro-l, 4-oksatiin-2-yl)acetamido/-8-okso-5_t ia-l-azabicyklo-A, 2,07-2-okten i 350 cm? destillert vann. Til den oppnådde oppløsning tilsetter man 2,69 g natriumbikarbonat og deretter 4 5 65 g 2-metyl-5-tiokso-1,3j4-tiadiazolinjhvoretter man oppvarmer under omrøring til 60°C i 6 timer. Etter avkjøling vaskes reaksjonsblandingen med 2 x 150 cm? etylacetat, hvoretter den surgjøres til pH = 2 ved tilsetning av 4NNsaltsyre i nærvær av 350 cm? etylacetat. Etter dekantering av den organiske fase ekstraheres vannfasen to ganger med tilsammen 150-cnr etylacetat. De organiske ekstrakter forenes, vaskes 6 ganger med tilsammen 600 cm? vann, tørkes over natriumsulfat, behandles med avfarvingskull, filtreres samt konsentreres under redusert trykk (20 mm Hg) til et sluttvolum på 80 cm?. Etter 30 minutter ved 2°C separeres det dannede fasestoff ved filtrering. Dette stoff vaskes to ganger med 10 cnr 3 etylacetat og d• eretter med 100 cm 3 isopropyleter. Etter tørking under redusert trykk (0,5 mm Hg) oppnår man 7 3 5 g -2-karboksy-7-_/(5} 6- ' dihydro-1,4-oksatiin-2-yl)acetamido7-3_/T5-mety1-1,3,4-tiadiazol-2-yl)-tiomety_l/-8-okso-5-tia-l-azabicyklo-A, 2 ,0/-2-okten .

Natriumsaltet av 3-acetoksyiiietyl-2-karboksy-7~_/T5,6-dihydro-1, 4-oksatiin-2-y 1 )acetamido7-8-okso-5-t ia-l-azabicyklo A, 2 ,0_7-2-okten fremstilles på følgende måte. Til en oppløsning av 70 g 3-acetoksy-metyl-2-karboksy-7r/T5,6-dihydro-l,4-oksatiin-2-yl)acetamido/-8-okso-5-tia-l-azabicyklo A, 2,_0_7-2-okten i 2000 cm? etylacetat setter man 325 cm? av en 0,6N oppløsning av natrium-2-etylheksanoat i 1-butanol. Herved felles det ut et produkt. Man omrører i 1 time, hvoretter man . separerer det faste stoff ved filtrering. Det faste stoff vaskes tre ganger med tilsammen 900 cm? etylacetat og deretter tre ganger med •tilsammen 750 cm 3 isopropyleter. Etter tørking under redusert trykk (20 mm Hg) oppnår man 5358 g natriumsalt av 3-acetoksymetyl-2-karboksy-•7-/T5 3 6-'dihydro-l, 4-oksatiin-2-yl )acetamido7-8-okso-5_tia-l-azabicyklo-A,2,0_7-2-okten.

Eksempel 11.

Man oppløser 14 g natriumsalt av 3_acetoksymetyl-2-karboksy-7- / T53 6-dihydro-l, 4-oksatiin-2-yl)acetamido7-8-okso-5-tia-l-azab icyklo-A, 2 ,0_7-2-okten i 350 cm? av en buf f eroppløsning (ph = 6,2), bestående ,av 47,1 g monokaliumfosfat, 80,9 cm? IN natriumhydroksydoppløsning og vann. Til den oppnådde oppløsning setter man 2 3 69 g natriumbikarbonat. og deretter 337g l-metyl-5-tiokso-l,2,334-tetrazolin, hvoretter man under omrøring oppvarmer til 60°C i 6 timer. Etter avkjøling vaskes reaksjonsblandingen med 2 x 150 cm? etylacetat. Det hele surgjøres til en pH-verdi på 2 ved tilsetning av 4N saltsyre i nærvær av 350 cnr etylacetat. Etter dekantering av den organiske fase ekstraheres vannfasen to ganger med tilsammen 150 cm? etylacetat..De organiske ekstrakt er forenesjvaskes 7 ganger med tilsammen 700 cm? vann, tørkes over natriumsulfat, behandles med avfarvingskull, filtreres og konsentreres<1>under redusert trykk (20 mm Hg) til et sluttvolum på 120 cnr . Man tilsetter deretter 120 cm^ isopropyleter under omrøring. Etter utfelling omrører man i en time, hvoretter.man separerer det faste stoff ved filtrering. Det faste stoff vaskes to ganger med til sammen 100 cm? isopropyleter og tørkes deretter under redusert trykk (20 mm Hg). Man oppnår herved 4,5 g 2-karboksy-7-/.T5} 6-dihydro-l, 4-oksatiin-2-y 1) - acetamido/-3-/Tl-metyl-l,2,3 >4-tetrazol-5-y1)t iometyl7-8-okso-5-tia-1-azabicykloV"4"j 2,07-2-okten som er solvatisert med ca. 10$ etylacetat.

Man oppnår natriumsaltet av 2-karboksy-7-/7~5 ,6-dihydro-l, 4-oksatiin-2-y1)acetamido/-3_/Tl-metyl-1,2,3,4-tetrazol-5~y1)tiomety1/- - 8- okso-5-tia-l-azabicyklo/_"4",2,0_7-2-okten ved å oppløse tilsvarende syre i en 0,1N vannoppløsning av natriumbikarbonat og deretter å lyofilisere.

Claims

Fremgangsmåte for fremstilling av et nytt cefalosporinderivat med den generelle formel:

der et -av symbolene A 'og A^ angir et oksygenatom eller et svovelatom og det andre angir et svovelatom, symbolet angir et hydrogenatom, en acetoksygruppe, en (5-metyl-l,33 4-tiadiazol-2-yl)tiogruppe eller en (1-metyl-l,2,33 4-tetrazol-5-yl)tiogruppe og symbolet R^ angir en kar boksygruppe, eller symbolet angir en pyridinogruppe og symbolet R2 angir et karboksylation, samt metallsalter derav og addisjonssalter derav med nitrogenholdige baser når R2 angir en karboksygruppe, karakterisert ved at(a) en syre med den generelle formel:

der A og A^ har den ovenfor angitte betydning, eller et derivat av denne syre, omsettes med et cefalosporin med den generelle formel:

der R^ og R2 har den ovenfor angitte betydning; eller at (b) når R-j^ angir en (5-metyl-l,3,4-tiadiazol-2-yl)tiogruppe eller en (1-metyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)tiogruppe og R2 angir en karboksygruppe, eller R^ angir en pyridinogruppe og R2 angir et karboksylation, 5-metyl'-2-tiokso-l, 3,4-tiadiazolin, l-metyl-5-tiokso-l, 2 , 3, 4-tetrazolin eller pyridin omsettes med en forbindelse med den generelle formel (I) der A og A1 har den ovenfor angitte betydning, R^ betyr en acetoksygruppe og R2 betyr en karboksygruppe, hvoretter, når R2 betyr en karboksygruppe, den oppnådde forbindelse eventuelt omdannes til et metall-salt eller til et addisjonssalt med en nitrogenholdig base.