NO312071B1

NO312071B1 - Cytotoksisk aminosukker og beslektede sukkerderivater av indolopyrrolokarbazoler, anvendelse derav samt farmasöytiskformulering

Info

Publication number: NO312071B1
Application number: NO19990789A
Authority: NO
Inventors: Mark George Saulnier; Neelakantan Balasubramanian; David Bertil Frennesson; Denis R St Laurent; David R Langley
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1996-08-22
Filing date: 1999-02-19
Publication date: 2002-03-11
Also published as: WO1998007433A1; ATE210988T1; RU2167880C2; NZ333536A; DE69709407T2; CN1228704A; AU710669B2; HK1024177A1; EP0971717A1; DE69709407D1; HUP9903931A3; BR9711306A; ES2169414T3; IL127918A0; PT971717E; PL331709A1; AU4155897A; EP0971717A4; DK0971717T3; KR20000068225A

Description

Foreliggende oppfinnelse angår aminosukker og andre sukkerderivater av indolpyrrolokarbazoler, hvorav noen av disse forbindelser oppviser topoisomerase-l-aktivitet. De er anvendbare for inhibering av proliferasjon av tumorceller og ved at de oppviser antitumoreffekt. Det er videre beskrevet anvendelse derav og farmasøytisk formulering.

lndolo[2,3-a]-karbazolalkaloider så som rebeccamycin (US-patenter nr. 4 487 925 og 4 552 842) og deres vannløselige, klinisk aktive analog, 6-(2-dietyl-aminoetyl)rebeccamycin (1) (US-patent nr. 4 785 085) er nyttige antitumormidler med DNA som mål.

Topoisomeraser er viktige nuklearenzymer som har som virker til å løse topologiske dilemmaer i DNA så som overvikling, undervikling (underwinding) og sammenlenking, noe som normalt oppstår ved replikasjon, transkripsjon og kanskje andre DNA-prosesser. Disse enzymer tillater relaksasjon av DNA ved dannelse av enzym-brodannede trådbrudd, som virker som transiente porter eller dreiepunkter for passering av andre DNA-tråder. Topoisomerase-målrettede medikamenter synes å interferere med denne brytnings-gjenforeningsreaksjon for DNA-topoisomeraser. I nærvær av topoisomeraseaktive midler akkumuleres et mislykket reaksjons-mellomprodukt betegnet 'spaltbart kompleks' og resulterer i replikasjons/transkripsjons-stopp, som til sist fører til celledød. Utviklingen av topoisomerase-l-aktive midler gir derfor en ny tilgjengelighet til det multiregimen-tale arsenal av terapier som nå anvendes for behandling av kreft.

Artikkelen i Cancer Chemoter. Pharmacol (1994), 34 (suppl): s. 41-s. 45 diskuterer de topoisomerase-l-aktive forbindelser som er i kliniske studier, og disse midler finnes å være effektive i kliniske anti-tumor-studier. Strukturelt er disse kliniske kandidater beslektet med Campothecin-alkaloid (2).

I europeiske patentpublikasjoner 0 545 195 B1, publisert 22. november 1995, og 0 602 597 A2, publisert 22. juni 1994, og i Cancer Research, 1993, 53, 490-494 og 1995, 55, 1310-1315, beskrives indolo[2,3-a]karbazoldervater (3) beslektet med rebeccamycin-klassen, og det hevdes anti-tumor-aktivitet; hoved-virkningsmekanismen er imidlertid kanskje ikke lik camptothecin. Camptotheciner virker ved topoisomerase-l-mekanisme. Verdenspatentsøknaden WO 95/30682 beskriver også indolokarbazoler beslektet med forbindelse (3) og anti-tumor-aktivitet hevdes.

I W096/11933, publisert den 25. april 1996 og i det tilsvarende US-patent nr. 5 475 110 beskrives en serie sammensmeltede pyrrolokarbazoler og det vises in vitro biologiske data så som inhibering av neuronal cholin-acetyltransferase (ChAT), proteinkinase C (PKC) inhibering for noen forbindelser. I US-patent nr. 5 468 849 beskrives visse fluorrebeccamycin-analoger som nyttige antitumormidler, samt en fremgangsmåte for fremstilling derav ved fluortryptophan-analog mating av en rebeccamycin-produserende stamme av Saccharothrix aerocolonigener, fortrinnsvis Saccharothrix aerocolonigener C38.383-RK2 (ATCC 39243).

I US-patent nr. 5 468 872 beskrives indolokarbazolalkaloider som er forskjellige i struktur fra de med formel I ifølge foreliggende oppfinnelse.

I WO96/04293, publisert 15. februar 1996, beskrives indolopyrrolokarbazoler som har en disakkarid-substituent som er forskjellig fra våre amino-substituerte sukkerforbindelser.

Det finnes intet i noen av de foran angitte referanser, eller i den generelle kjente teknikk, som foreslår det nye cytotoksiske aminosukker og andre sukkerderivater av indolopyrrolokarbazoler- hvorav noen er topoisomerase-l-aktive midler

- ifølge foreliggende oppfinnelse.

Et formål med foreliggende oppfinnelse er å tilveiebringe nye sukkerderivater av indolopyrrolokarbazoler som inhiberer proliferasjon av antitumorceller, og noen av derivatene som oppviser øket vandig løselighet, topoisomerase-l-aktivitet.

Denne oppfinnelse angår forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav,

kjennetegnet ved at

Ri og R-ia uavhengig er hydrogen, en pentosegruppe (A) eller en heksosegruppe

(B) med formlene

forutsatt at én av Ri og Ria er hydrogen og den andre ikke er hydrogen;

- R2, R3, R4, R5 og R2', Ry. R*, R5" og R5' er uavhengig Ci.7-alkyl, azido, halogen, NR9R10, OR, SR, -OS02Rc, eller danner sammen =0, OH, C1-C7 -alkoksy eller C1-C7- alkyl, og ytterligere forutsatt at R3 eller Ry ikke er -NH2-, bortsett fra dersom R6 er -(CH2)nNHC(=NH)NH2, idet R5 dessuten kan være het hvor het er valgt blant imidazol, pyridin og pyrimidin som ;eventuelt er substituert med O eller OH; ;Rc er Ci.7-alkyl; ;R er uavhengig hydrogen, Ci-7-alkyl, idet nevnte Ci.7-alkyl eventuelt er substituert med OH, C02H eller fenyl; ;R9 og R10 er uavhengig hydrogen eller Ci.7-alkyl,som kan være substituert med OH, NH2, eller CH(Rb)(CH2)nNH2, eller R9 og R10 danner sammen med nitrogenatomet som de er festet til, en ftalimido-, morfolino-, tiomorfolino-, piperidino- eller piperazinoring, hvor nevnte ringer eventuelt ;kan være substituert med okso eller Ci-C7-alkyl; ;RberH eller COOH; ;R6 er hydrogen, Ci.7-alkyl, eventuelt med Ci-C6-alkyl substituert fenyl-Ci-CT-alkyl, OH, NH2 eller (CH2)n-NHC(=NH)NH2, ;R7 og R8 er til sammen 0; ;Xl X'i, X2 og X'2 er uavhengig H, halogen eller -CN, forutsatt at X2, X'2, Xi og X'i ikke er 1,11-diklor, og videre forutsatt at dersom X2 og X'2 hver er H, Xi og X\ er hver uavhengig H eller halogen, Ri er heksose, R7 og R8 sammen er O, og hver av R2, R5 og R4 er OH, R2; Ry, Ra1 og R5> og R5- er hver H, Q er NH, og hver av R3 og R6 er ikke NH2 og R3 ikke er metoksy ;dersom R6 er H; ;WerC; ;Q er O, NR9 eller S, og ;n er et helt tall fra 0 til 4. ;Et ytterligere aspekt ved foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en farmasøytisk formulering som omfatter en antitumor-effektiv mengde av en forbindelse med formel I i henhold til hvilke som helst av kravene 1-16. ;Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også anvendelse av en forbindelse med formel I i henhold til hvilke som helst av kravene 1-16, til fremstilling av et farmasøytisk preparat for inhibering av tumorvekst i en pattedyr-vert. ;I søknaden anvendes, dersom ikke annet er uttrykkelig spesifisert, de føl-gende definisjoner. De senkede tall etter symbolet "C" definerer antall karbon-atomer som en bestemt gruppe kan inneholde. "Cve-alkyl" betyr for eksempel en rettkjedet eller forgrenet, mettet karbonkjede som har fra ett til seks karbonato-mer; idet eksempler inkluderer metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sek-butyl, isobutyl, t-butyl, n-pentyl, sek-pentyl, isopentyl, og n-heksyl. ;"Halogen" betyr fluor, klor, brom og jod; fluor er foretrukket. ;Foretrukne forbindelser med formel I slike hvor i Ri eller R1a alle substituenter er H, unntatt R2, R3 og R4 som hver er OH; og R5 er NR9R10. ;Andre foretrukne forbindelser med formel I er de hvor i Ri eller Ria alle substituenter er H, untatt R2, R3 og R5 som hver er OH; og R4 er NR9R10. ;Andre foretrukne forbindelser med formel I er de hvor i Ri eller R1a alle substituenter er H, untatt R2, R3 og R4 som hver er OH; og R5 er halogen. ;Farmasøytisk akseptable salter og/eller solvater av forbindelser med formel I omfattes også av foreliggende oppfinnelse som videre inkluderer stereoiso-merer så som enantiomerer som kan oppstå som konsekvens av strukturell asymmetri i utvalgte forbindelser med formel I og anomerer som oppstår fra Rr substitusjons-stereokjemi. ;Forbindelsene ifølge denne oppfinnelse kan forekomme i form av farma-søytisk akseptable salter. Slike salter inkluderer addisjonssalter med uorganiske syrer så som for eksempel saltsyre og svovelsyre, og med organiske syrer så som for eksempel eddiksyre, sitronsyre, metansulfonsyre, toluensulfonsyre, vin-syre og maleinsyre. Videre kan - dersom forbindelsene ifølge denne oppfinnelse inneholder en sur gruppe - den sure gruppe eksistere i form av alkalimetallsalter så som for eksempel et kaliumsalt og et natriumsalt, jordalkalimetallsalter som for eksempel et magnesiumsalt og et kalsiumsalt, og salter med organiske baser så som et etylammoniumsalt og et aragininsalt. ;Forbindelsene ifølge denne oppfinnelse er nyttige farmakologiske midler med anti-tumor-egenskaper. Med topoisomerase-l-aktive egenskaper kan forbindelsene være nyttige som anti-tumor-midler. I de senere år er et stort antall rap-porter kommet til overflaten i litteraturen og foreslått at rollen for topoisomerase-l-målrettede medikamenter er å stabilisere et kovalent topoisomerase-l-kompleks for å få enzymforbundne DNA-enkelttrådbrudd. Fra et farmakologisk standpunkt er det fordeler å målrette topoisomerase-l; for det første tyder relativt høye nivåer av dens nærvær i både proliferasjonsceller og passive celler på at dens funksjon kan være uavhengig av celleveksthastigheten, og for det andre kan topoisomerase-l-aktive midler være effektive i langsomt voksende så vel som i hurtig prolifere-rende tumorer. Celler fra colon-tumorer er blitt vist å inneholde høyere intracellu-lære nivåer av topoisomerase-l enn normale mucosa-celler, noe som tyder på muligheten av selektiv cytotoksisk fordel. Inhibering av proliferasjon av tumorceller ved hjelp av forbindelser med formel I var således opprinnelig vist ved effektiv inhibering av topoisomerase-l. Utvalgte forbindelser med formel I, vanligvis med ECso-verdier lavere enn 10 um i topoisomerase-l-undersøkelsen, ble også testet i en undersøkelse av inhibering av humane/muse-tumorcelle-proliferasjon. Forbindelser ifølge denne oppfinnelse ble også undersøkt med henblikk på deres tera-peutiske effekt in vivo mot musetumor (P388) og resultatene er vist i de følgende farmakologiske testeksempler (tabell 1). ;In-vivo antitumoreffekt ;ln-vivo antitumor-forsøk ble initiert ved implantering i mus (BDF1 eller CDF1) ip med 10(6) P388 leukemi-celler. Behandlinger ble påbegynt én dag etter implantering og omfattet én ip injeksjon pr. dosenivå; flere dosenivåer ble evaluert pr. forbindelse. Seks mus ble typisk anvendt pr. dosenivå i behandlingsgrupper, og åtte til ti mus ble anvendt som parallelle ubehandlede leukemikontroller. Evaluering av aktivitet ble gjort på basis av sammenligning av median overlevelsestid (MST = median survival time) for behandlede (T = treated) mus med MST for kontrollmus (C = control). Aktivitet ble definert som %T/C på > eller = 125%, beregnet som: ;;Topoisomerase-l-aktivitat (in-vitro) ;Topoisomerase-l-aktivitet ble målt som beskrevet nedenfor. Prosedyren for undersøkelse av indusert forbindelse, topoisomerase-l-formidlet enkelttråd-brudd-dannelse i DNA var i hovedsak som beskrevet av Hsiang et al. i J. Biol. Chem. 260: 14873-14878 (1985). Prøver oppløst i 100% DMSO som enten 10uM eller 10 mg/ml løsninger ble, dersom ikke annet er angitt, fortynnet i tris-EDTA buffer. Marin bakteriofag PM2 DNA (Boehringer Mannheim) ble også fortynnet i tris-EDTA buffer til en konsentrasjon på 0,02 ug/ul. Forskjellige fortynninger av forbindelse for evaluering ble blandet med fortynnet DNA og denne blanding ble satt til 1000 enhetsalikvoter (én enhet enzymaktivitet er definert som den mengde som er i stand til å relaksere 100 ng supertvinnet DNA i løpet av ca. 30 minutter ved 37°C) av renset human topoisomerase-l (topogen) i 2X reaksjonsbuffer for å starte reaksjonen. Forbindelsen - DNA - enzymblanding ble inkubert i 30 minutter ved 37°C før reaksjonen ble stoppet med varm stpp-buffer inneholdende natrium-dodecylsulfat og proteinase K (Sigma). Disse blendinger fikk inkubere ved 37°C i ytterligere 10 minutter, hvoretter blandingen ble tatt av vannbadet og ekstrahert med en 24:1-blanding av kloroform og isoamylalkohol. Etter sentrifugering ble alikvoter av den vandige fase anbrakt i brønner av en 0,9% agarosegel (SeaKem) i tris-boratbuffer inneholdende 0,5 ug/ml etidiumbromid og utsatt for elektroforese i 15 timer for å separere de forskjellige topologiske isomerer og innskårne og brukkede DNA-er. Etter avfarging av gelen i vann, ble de etidiumbromid-farvede DNA-produkter visualisert ved å eksponere gelen for UV-stråling. Negativer av fotografier av de bestrålte geler ble skannet med et densiometer og arealer under toppene ble beregnet for å oppnå prosent enkelttråd-DNA bruddannelse for hver prøve. En median effektiv konsentrasjon (EC50) ble oppnådd for hver forbindelse ved interpolering mellom punkter av den resulterende dose/effekt-kurve som definerer forbindelsens kraft når det gjelder dens effekt for indusering av topoisomerase-l-formidlet enkelttrådbrudd i DNA. ;Topoisomerase-l-aktiviteten for utvalgte forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse er vist nedenfor i tabell II. ;De nye forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse, som eksemplifisert ved amino- og sukkerderivater i tabell II, viser bemerkelsesverdig topoisomerase-l-aktivitet selv i det sub-mikromolare område av konsentrasjon. A priori er denne aktivitet imidlertid uventet og ikke forutsigbar av fagmannen, ettersom en liten endring i substitusjonsmønstre synes å resultere i en i høy grad uventet endring i aktivitet. Dette eksemplifiseres av topoisomerase-l-aktivitetsforskjellen for forbindelsene fremstilt ifølge eksempler 18 og 19. Eksempel 19 er et effektivt anti-tu-mormiddel med sub-mikromolar topo-l-aktivitet, mens eksempel 18 ikke viste topo-l-aktivitet selv ved en mikromolar konsentrasjon på over 100. Den eneste forskjell mellom forbindelsene ifølge eksempler 18 og 19 er at i eksempel 18 er Xi og X'i 2,10-difluor og R6 er amino, mens i eksempel 19 er Xi og X^ 3,9-difluor og Re er hydrogen. Videre er rebeccamycin, hvor X: og X\ er 1,11-diklor, R4 er metoksy og R5 er hydroksy, ikke topo-l-aktiv. ;In-vitro cellebasert cytotoksisk aktivitet ;Proliferasjons-inhiberingsaktiviteten mot human colon-cellelinje ble målt som følger: Cyclotoksisitet ble undersøkt i HTC116 humane colon-karsionomaceller ved XTT (2,3-bis(2-metoksy-4-nitro-5-sulfofenyl)-5-[(fenylamino)karbonyl]-2H-tetrazoliumhydroksyd-undersøkelse som beskrevet i litteraturen av Scudiero, DA, Shoemaker, RH, Pauli, KD, Monks, A, Tierney, S, Nofziger, TH, Currens, MJ, Seniff, D, og Boyd, MR. Evaluering av en løselig tetrazolium/formazan-undersø-kelse for cellevekst og medikamentfølsomhet i kultur ved anvendelse av humane og andre tumor-cellelinjer ble gjennomført i henhold til prosedyren beskrevet i Cancer Res. 48: 4827-4833,1988. Celler ble plattert med 4000 celler/brønn i mikrotiterplater med 96 brønner og 24 timer senere ble medikamenter tilsatt og seriefortynnet. Cellene ble inkubert ved 37°C i 72 timer, og ved dette tidspunkt ble tetrazoliumfarvestoffet, XTT, inneholdende fenazinmetosulfat, tilsatt. Et dehydro-genase-enzym i levende celler reduserer XXT til en form som absorberer lys ved 450 nm og som kan kvantifiseres spektrofotometrisk. Jo høyere absorpsjonen er, desto større er antallet levende celler. Resultatene uttrykkes som en IC5o som er den medikamentkonsentrasjon som er nødvendig for å inhibere celleproliferasjon (dvs. absorpsjon ved 450 nm) til 50% av den for ubehandlede kontrollceller. ;Resultatene for utvalgte forbindelser er vist i tabell III. ;;Det er mulig å administrere forbindelser med formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt og/eller et solvat derav, til et pattedyr implantert med tumor eller som er tilbøyelig til kreftutvikling. Generelt vil forbindelsen bli gitt i et doseområde på fra ca. 0,001 mg/kg til ca. MTD (maksimalt tolerert dose). Selv om doseringen og dosestyringen og tidspunkt-fastsettelsene for en formel l-forbindelse i hvert tilfelle må reguleres omhyggelig, og det må utvises sunn, fagmessig vurdering under hensyntagen til pasientens alder, vekt og tilstand, samt til administreringsmåten og naturen og graden av kreftsykdomstilstanden. Betegnelsen "systemisk administrering" slik den er anvendt her angir oral sublingual, bukkal, transnasal, rektal, intramuskulær, intravenøs, intravntrikulær, intratekal, og subkutan administreringsmåte. I samsvar med god klinisk praksis foretrekkes det å administrere foreliggende forbindelser i et konsentrasjonsnivå som vil gi effektive fordelaktige effekter uten å forårsake noen skadelige eller uheldige bivirkninger. ;Prosedyren for fremstilling av forbindelser med formel I er illustrert i skjema I, og fremstillingen av nøkkel-mellomproduktene / utgangsmaterialene er illustrert i skjema II ;hvor ;y = Br eller Cl; ;R' = H eller et monosakkarid-derivat; ;R" = H eller aryl eller heteroaryl ;;I skjemaer I og II er R2 til R6, X-i, X2, Xr, X2< og Q som definert i det foregående. PG er en syntetisk, organisk "beskyttende gruppe" av den type som generelt anvendes for å "beskytte" en hydroksylfunksjonalitet, f.eks. en gruppe av acyl-type så som en acetyl-, trifluoracetyl-, eller en aralkylgruppe så som en benzyl-gruppe eller lignende. Egnede "beskyttende" eller "blokkerende" grupper anvendt i organiske synteser er velkjent for praktikeren og er fyllestgjørende beskrevet i den formålstjenlige litteratur. Se f.eks. Theodora Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New York. ;Utgangsmaterialene i skjema I er dihalogen-maleimid-derivater (II), så som 3,4-dibrommaleimd, og de substituerte derivater med formel III. Addisjon av indol-derivater III (R" = H eller Ar) til maleimid II i nærvær av en base så som etylmagnesiumbromid eller lignende i organiske løsemidler som THF (dvs. tetrahydrofuran), benzen eller toluen eller kombinasjoner derav ved -20°C til tilbakeløpstem-peratur vil resultere i mono- og bis-derivater, henholdsvis V og IV. Mengden av reaktanter kan reguleres for å variere produktforholdet av V i forhold til IV på for-delaktig måte. Mellomprodukt IV kan videre omdannes til indolopyrrolokarbazol-kjerne IV ved anvendelse av oksydative cykliseringsbetingelser så som dicyano-diklorokinon (DDQ = dicyanodichloroquinone) / syre / varme eller palladiumacetat / syre eller jod, lys og lignende. Glykosylering av VI med reaktive sukkerderivater så som 1,2-epoksydet beskrevet i publikasjoner J. Org. Chem. 1993, 58, 343-349 og J. American Chemical Society 1989, 111, 6661-6666, eller 1-halogen eller andre i nærvær av en passende base så som diisopropyletylamin, heksametyldi-silazid, for å danne mono- eller di- eller tri-anionet av indolopyrazolokarbazolkjer-nen VI i et organisk løsemiddel så som THF, DMF (dvs. dimetylformamid), dioksan, benzen, DME (dvs. dimetoksyetan), produserer det fullstendig beskyttede derivat VIII. Alternativt, og mer foretrukket, kan glykosylering også utføres ved å reagere 1-hydroksyformen av et passende beskyttet sukkerderivat med kjernen VI ved den velkjente Mitsunobu-prosedyre [PPIVdialkyazidodikarboksylat] i ete-risk løsemiddel så som THF eller klorert løsemiddel så som CH2CI2. Passende sukkerderivat for glykosyleringen kan oppnås ved selektiv modifisering av de forskjellige hydroksylgrupper under anvendelse av metoder fra litteraturen. Artikkelen i J. Carbohydrate Chemistry (1955), 14 (9), s. 1279-94, beskriver for eksempel 6-halogen-6-deoksyglukose-derivatet. En annen metode for å oppnå forbindelse VIII omfatter glykosylering av mono-adduktet, først under de betingelser som er beskrevet ovenfor for å gi mellomproduktet VII, fulgt av dehydro-halogenering og cyklisering under anvendelse av et antall av velkjente metoder publisert i litteraturen for slik omdannelse, inkludert varme eller skinnende UV-bestråling av en løsning VII i løsemidler som dioksan, etanol, eller i en passende blanding av løsemidler. Forbindelsen VIII er en beskyttet form av formel I. Skjønn-somt valg av den beskyttende gruppe i sukkeret vil tillate selektiv manipulering av den primære hydroksylgruppe. Dersom for eksempel den primære 6-hydroksylgruppe var beskyttet med p-metoksybenzyl-beskyttelsesgruppen (PMB) og resten av hydroksylen var beskyttet med enkle benzylgrupper (Bn), er det mulig for en fagmann å fjerne PMB-gruppen uten å avbeskytte benzylgruppen. På denne måte oksyderes den primære 6-hydroksylgruppe for å gi den korresponderende syre, og estrene og amidderivatene derav. Videre oksyderes 6-hydroksylgruppen under kontrollerte oksydasjonsbetingelser under anvendelse av Dess-Marin-reagens eller lignende, til det korresponderende aldehyd. Behandling av aldehydet med velkjent fluoreringsmiddel så som DAST resulterer i 6-difluormetyl-derivatet. På lignende måte ble også andre hydroksylgrupper modifisert. 4-Hydroksylgruppen i galaktose-sukkerderivatet (heksose-sukker i pyranoseform hvor 4-hydroksylet orienterer den aksiale stilling) kan for eksempel anvendes for å modifisere 4-stillingen. Oksydasjon av 4-hydroksylgruppen i det passende beskyttede sukkerderivat ga ketonet som kunne funksjonaliseres ytterligere til forskjellige derivater inkludert 4-difluor-derivatet under anvendelse av de kjente prosedyrer. Dersom 4-hydroksylgruppen aktiveres, for eksempel i tilfelle av 4-mesylat, er den følsom for nukleofil erstatning med midler så som et azid (f.eks. natriumazid) for å tilveiebringe 4-azidoderivat. På den andre side, dersom sukkerderivatet med den ubeskyttede 4-hydroksylgruppe behandles med fluoreringsmidlet DAST, oppnås 4-fluorderivatet. På lignende måte modifiseres også andre hydroksylgrupper selektivt. Modifikasjon av den publiserte litteraturprosedyre gjør det for eksempel mulig å føre inn et fluoratom i 2-stillingen i sukkeret (Bioorg. Med. Chem., bind 5, nr. 3, sider 497-500 (1997). Dette illustreres i eksempel 90. Enkel beskyttelsesgruppe-manipulering så som hydrogenering eller overføringshydrogenering med Pearlman's katalysator for om nødvendig å fjerne benzyl-beskyttelsesgruppene på sukkerandelen, hydrolyse med KOH eller NaOH av maleimid-nitrogenbeskyttelsesgruppen for å gi anhydridet etter en sur opparbeiding fulgt av oppvarming med et passende amin vil produsere den ønskede formel la med det korrekte substitusjonsmønster. Selektiv derivatisering av hver hydroksylgruppe i sukkerandelen i forbindelse la kan oppnås ved å anvende beskyttelsesgruppe-manipuleringen og fjerning av den primære hydroksyl-beskyttelsesgruppe, i nærvær av de sekundære hydroksyl-beskyttelsesgrupper. Dersom for eksempel forbindelsen med formel la i en glukopyranosylform (dvs. heksose med formel (B)), hvor alle sukker-hydroksylgruppene er frie, behandles med en silylreagens så som trimetylsilyl eller t-butyl-di-fenylsilyl, eller fortrinnsvis t-butyl-di-metylsilyl-triflat i nærvær av en base i et løsemiddel så som CH2CI2 eller THF ved lav temperatur eller romtemperatur, fås derivatet hvor 3- og 6-stillingene er beskyttet som silyletere. Selektiv avbeskyt-telse av silyleteren i 6-stilling kan oppnås under kontrollerte betingelser med vandig mineralsyre eller organisk syre så som en blanding av trifluoreddiksyre og vann som løsemiddel, ved lav temperatur så som -25°C til 0°C i en periode på 30 minutter til 3 timer eller inntil reaksjonen er over, fulgt av tynnskiktkromatografi. Dette mellomprodukt er nå klart for videre derivatisering i 6-stillingen for å aktivere 6-hydroksylgruppen til en god avspaltende gruppe så som mesitylat eller haloge-nid. Metansulfonyl eller toluensulfonyl eller trifluormetansulfonylklorid i nærvær av en base så som trietylamin eller pyridin vil produsere det korresponderende mesylat eller tosylat. Alternativt kan selektiv mesylering av den primære 6-hydroksylgruppe også oppnås direkte fra forbindelse med formel la hvor alle sukker-hydroksylgruppene er ubeskyttet, under pyridin og mesylklorid i pyridin ved 0°C. Nukleofil erstatning med et passende amin eller andre nukleofiler så som azid, fulgt av reduksjon av azidet til amin vil så gi de ønskede forbindelser med formel I så som 6'-aminosukkerderivater I b. På denne måte ble 6-metylsulfid-derivatet fremstilt ved anvendelse av enten natriumsaltet av tiolderivatet eller tiol og en base så som K2CO3 i DMF eller en organisk amin-base så som trietylamin eller Hunig's base, ved forskjellige temperaturer fra romtemperatur til 150°C. 6-Alkyl-sulfidet, for eksempel 6-metylsulfid, oksyderes videre ved hjelp av kjente oksyda-sjonsmidler så som okson eller m-klorbenzosyre eller, fortrinnsvis, monoperoksy-ftalsyre-magnesiumsalt (MMPP) til sulfoksydene eller sulfon under kontrollerte betingelser. På lignende måte kan andre hydroksylgrupper også derivatiseres etter ønske. Enda en ytterligere modifikasjon av formel I vil resultere i N-maleimid-substituerte (dvs. Re) indolpyrrolokarbazol-derivater le. Anhydridet oppnådd fra basehydrolysen av den passende beskyttede form av formel I kan reageres med et antall aminderivater for å produsere de ønskede N-substituerte maleimider. ;Som vist i skjema II kan det N-substituerte maleimidderivat oppnås enten ;direkte fra dihalomaleinsyreanhydridet ved behandling med et passende aminde-rivat eller halogenering av maleimidet fulgt av alkylering. Utgangs-indolderivatene som ikke er substituert i 2-stillingen kan oppnås ved å følge publiserte prosedyrer, ;og 2-arylindoler kan fremstilles fra arylmetylketonene ved å følge Fischer's velkjente indol-synteseprosedyrer. ;Forbindelsene som utgjør denne oppfinnelse og fremgangsmåtene for fremstilling av forbindelsene vil bli mer fullstendiggjort ved betraktning av de føl-gende eksempler som er for illustrasjonsformål. ;Flere mellomprodukter, samt andre konvensjonelle utgangsmaterialer, f.eks. II, III og IX, anvendt ved fremstilling av sluttprodukter I, var generelt kommersielt tilgjengelige. Representative synteser av noen av sluttforbindelsene med formel I (hvor i R- i alle substituenter er hydrogen dersom ikke annet er nevnt) angis heri i det følgende. Syntesen av noen av mellomproduktene angis også, så som i eksempler 1-11, 14, 91-96, 98-102, 104 og 105. ;Alle vannfri reaksjoner ble gjennomført undr en atmosfære av nitrogen eller argon under anvendelse av tørre løsemidler fra "Aldric Sure Seal" flasker eller friskt destillerte løsemidler. Kolonnekromatografi ble gjennomført med silikagel 60 (E M Science, 38-63 um) under anvendelse av det nevnte løsemiddelsystem som elueringsmiddel. Tynnskiktkromatografi ble gjennomført på Anatech GFLH eller Whatman MK6F silikagelplater. Smeltepunkter ble bestemt i et åpent kapillarrør med et Thomas-Hoover smeltepunktapparat, dersom ikke annet er angitt, og er ikke korrigerte. Infrarødspektre ble tatt opp på et Perkin-Elmer 1800 Fourier trans-form spektrofotometer ved hjelp av tynne filmer eller KBr-pelleter. <1>H NMR-spektre og <13>C NMR-spektre ble tatt opp på enten Bruker AM-300 eller JEOL 300 eller Bruker AC-300 eller 500 MHz NMR-instrumenter og er uttrykt som deler pr. million (ppm eller 5) fra det nevnte løsemiddel som den interne standard. Koblingskon-stanter er i Herz og signaler er angitt som singlett (s), triplett (t), kvartett (q = quar-tet), multiplett (m) og bred (br). Lavoppløsnings-massespektre ble bestemt enten på et Finnigan Model 4500 Quadrapole massespektrometer ved direkte kjemisk ionisering (DCI = direct chemical ionization) med isobutan som den positive Cl-gass, et Finnigan Model SSQ-7000 instrument (neg. eller pos. ESI) eller på et Kratos MS-25 eller Finnigan TSQ-70 instrument (FAB). Høyoppløsnings-masse-spektre (HRMS) ble bestemt enten på et Kratos MS-50 massespektrometer under anvendelse av hurtig atombombardement med Csl i glycerol som referansemiddel, eller på et Finnigan MAT-900 instrument under anvendelse av elektrospray-ionisering med polypropylenglykol som referansemiddel. ;Eksempel 1 ;3,4-Dibrommaleimid (II; R6 = H, y = Br) ;Til en magnetisk omrørt løsning av maleimid (25,0 g, 0,258 mol) i deioni-sert vann (250 ml) ble det hurtig tilsatt brom (100 g, 0,626 mol), fulgt av benzoyl-peroksyd (300 mg). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet på 50°C i 6,5 timer og så omrørt ved romtemperatur i 11,5 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt i et is/vannbad i 45 minutter, og den faste felling ble filtrert fra, vasket med vann og lufttørket, hvilket ga 36,35 g (55,4%) av tittelforbindelsen i form av et hvitt, fast stoff. 75 MHz <13>C NMR (d6-aceton): 5 165,08, 130,73; FAB-massespektrum, m/e 253 (M<+>); Anal. beregnet for C4HBr2N02: C, 38,30; H, 2,05; N, 4,06; Br 46,32, Funnet: C, 38,28; H, 2,06; N, 4,07; Br, 46,24. ;Eksempel 2 ;1- (tert-Butylbenzyl)-3,4-dibrommaleimid (II; R6=tert-butylbenzyl, y=Br) ;Til en magnetisk omrørt løsning av 3,4-dibrommaleimid (20,0 g, 78,5 mmol) i aceton (1200 ml) ble det tilsatt kaliumkarbonat (132 g, 0,954 mol). 4-(t-Butyl)-benzylbromid (24,98 g, 20,2 ml, 110 mmol) ble langsomt tilsatt i løpet av 15 minutter, og reaksjonsblandingen ble deretter omrørt i 6 timer i mørke. Reaksjonsblandingen ble filtrert over et skikt av Celite og vasket med aceton (250 ml). Inndamping i vakuum, fulgt av flashkromatografi på silikagel med 50% heksan i diklormetan, ga 22,5 g (71,5%) av tittelforbindelsen i form av et hvitt, fast stoff. ;300 MHz <1>H NMR (CDCI3) 5 7,45-7,25 (m, 4 H), 4,75 (s, 2 H), 1,32 (s, 9 H); DCI-massespektrum, m/e 399 (M<+>); Anal. beregnet for Ci5Hi5Br2N02: C, 44,92; H, 3,77; N, 3,49. Funnet: C, 45,04; H, 3,81; N, 3,38. ;Eksempel 3 ;2- (2-Benzo[b]tienyl)-5-fluor-1H-indol (III: Xi = 5F; X2 = H; R'= 2-benzo[b]tienyl, ;R'=H) ;n-Butyllitium i heksaner (1,6M, 255 ml, 0,41 mol) ble tilsatt i 5 milliliters por-sjoner til en kald (4°C) løsning av tianaften (47,8 g, 0,36 mol) i tørt tetrahydrofuran/dietyleter (1:1, 400 ml) under en atmosfære av nitrogen. Alkyllitiumet ble tilsatt med en hastighet som var slik at den interne reaksjonstemperatur aldri oversteg ;8°C. Etter at tilsetningen var fullstendig, fikk reaksjonsblandingen varme seg opp til omgivelsestemperatur hvor den ble omrørt i 1 time før den ble kjølt ned igjen til 4°C og forsiktig behandlet med en løsning av acetaldehyd (50 ml) i tørt tetrahydrofuran (50 ml). Blandingen fikk varme seg opp til romtemperatur i 0,5 timer før den ble bråkjølt med vann og fortynnet med etylacetat. Den organiske fase ble separert fra, vasket med saltløsning, tørket og konsentrert. Den vandige fase ble ekstrahert to ganger til med etylacetat og forent med det opprinnelige organiske ekstrakt før ytterligere bearbeidelse. Rensing av den resulterende rest ved flashkromatografi på silikagel (gradienteluering med 7% etylacetat i heksaner, fulgt av 15% etylacetat i heksaner) ga 29,25 g (46%) av mellomprodukt-alkoholen i form av et lysegult, fast stoff, som ble videreført direkte. Alkoholen (29,15 g, 0,16 mol) ble oppløst i vannfri diklormetan (800 ml), og reaksjonsblandingen ble behandlet ;med Celite (36 g) og pyridinklorkromat (35 g). Etter 1 time ved romtemperatur ble det tilsatt ytterligere diklormetan (400 ml), Celite (36 g) og PCC (35 g). Blandingen ble omrørt i ytterligere 1 time ved romtemperatur før den ble fortynnet med eter (1 I), suge-filtrert gjennom et skikt av silikagel og konsentrert. Metylketonet (27,6 g, 96%) ble isolert som et rent, hvitt, fast stoff. Vannfritt natriumacetat (16,6 g, 0,20 mol) ble tilsatt i én porsjon til en omrørt suspensjon av 4-fluorfenylhydrazin-hydroklorid (32,98 g, 0,20 mol) og metylketonet (27,5 g, 0,156 mol) i absolutt etanol (150 ml). Blandingen ble tilbakeløpskokt i 2 timer før den ble avkjølt, fortynnet med diklormetan og vasket med mettet natriumhydrogenkarbonat-løsning, 1N saltsyre og saltløsning. Etter tørking og løsemiddelfordamping ble resten omkry-stallisert fra varm etanol for å gi det rene hydrazon (40,08 g, 90%) i form av et gult, fast stoff. Hydrazonet (18,3 g, 64,4 mmol) ble anbrakt i en 500 ml énhalset, rund kolbe (utstyrt med en tilbakeløpskondensator), som inneholdt nettopp sam-menblandet sinkklorid holdt under en nitrogenatmosfære. Kolben ble så anbrakt i et forvarmet oljebad (180°C) i 1 time. Etter 1 time fikk temperaturen på oljebadet kjøle seg av til 140°C før kolben forsiktig ble ifylt absolutt etanol. Blandingen ble tilbakeløpskokt i 6 timer før den ble avkjølt, fortynnet med etylacetat og vasket med 1N saltsyre og saltløsning før tørking og konsentrering av løsemiddel til 1/3 volum. Sugefiltrering ga tittelforbindelsen (22,4 g, 65%) i form av et hvitt, fast stoff, sm.p. 263-264°C. ;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 6 11,91 (s, 1H), 7,99-7,96 (m, 1H), 7,89-7,86 (m, 2H), 7,83 (s, 1H, 7,43-7,29 (serier av m, 4H), 7,03-6,96 (m, 1H), 6,81 (d, J=1,5 Hz, 1H); <13>C NMR (75 MHz, DMSO-d6) ppm 158,79, 155,72, 140,01, 138,35, 134,92, 133,92, 133,79, 128,64, 128,50, 124,93, 124,79, 123,70, 122,44, 119,73, 112,35, 112,77, 110,76, 110,41, 104,90, 104,59, 100,90, 100,84; IR (KBr, cm"<1>) 3421, 1625, 1586, 1567, 1501, 1448, 1412, 1286, 1201, 1188, 1128,862, 825, 783, 744, 725, 559, 515; MS (neg., ESI, M-H-) m/z 266, Anal. beregnet for C16H10FNS: C, 71,89; H, 3,77; N, 5,24, Funnet: C, 71,82; H, 3,76; N, 5,13. ;Eksempel 4 ;(E)-4-Fluor-2-nitro-p-dimetylaminostyren ;En blanding av 4-fluor-2-nitrotoluen (185,0 g, 1,19 mol) og N,N-dimetylformamid-dimetylacetal (500 ml, 3,77 mol) i tørt dimetylformamid ble tilbakeløps-kokt i 2 timer under nitrogen før azeotrop destillasjon av metanol fra reaksjonsblandingen. Det ble utført enda en reaksjon (169,2 g 4-fluor-2-nitrotoluen) i tandem. Det ble isolatert en kombinert vekt av 450 g (95%) av tittelforbindelsen i form av et rødt, fast stoff (stivner ved avkjøling), som var tilstrekkelig rent til å bli ført videre. Kugelrohr-destillering ga tittelforbindelsen (analytisk ren for karakte-riseringsformål) i form av et rødaktig/sort, krystallinsk, fast stoff, sm.p. 54-55 °C . ;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 7,72-7,62 (m, 2H), 7,37-7,32 (m, 1H), 7,33 (d, 1=13,4 Hz, 1H), 5,58 (d, 1=13,4 Hz, 1H), 2,58 (s, 6H); <13>C NMR (75 MHz, DMSO-de) ppm 158,19, 154,99, 146,16, 143,13, 143,02, 132,57, 132,54, 126,14, 126,04, 120,98, 120,69, 111,41, 111,07, 88,23; IR (KBr, cm<1>) 3446, 1622, 1570, 1508, 1386, 1270, 1092, 940, 822, 798; MS (MH<+>) m/z 211. Anal. beregnet for C10H11FN2O2: C, 57,14; H, 5,27; N, 13,33; funnet: C, 57,09; H, 5,16; N, 13,46. ;Eksempel 5 ;6-Fluorindol (III: X, = F, X2 = R"= R'= H) ;(E)-4-Fluor-2-nitro-p-dimetylaminostyren (120 g, 0.5 mol) ble oppløst i tetrahydrofuran (1 I) og underkastet Parr-hydrogenering (345 kPa H2, romtemperatur, 24 timer) under anvendelse av 10% palladium på karbon (30 g). Blandingen ble filtrert gjennom Celite (vasket med THF, metanol og metylenklorid) og konsentrert ned til tørrhet. Denne reaksjon ble utført ytterligere tre ganger for å forbruke ;det ovennevnte utgangsmateriale. Vanndampdestillasjon av resten ga tittelforbindelsen (192,6 g, 62%) i form av hvite nåler, sm.p. 73-75°C. ;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 11,14 (br s, 1H), 7,51 (dd, 1=8,6,5,5 Hz, 1H), 7,32 (t, 1= 2,9 Hz, 1H), 7,16 (dd, 1=10,1, 2,3 Hz, 1H), 6,87-6,80 (m, 1H), 6,43-6,41 (m, 1H); <13>C NMR (75 MHz, DMSO-d6) ppm 160,26, 157,16, 135,79, 135,63, 125,94, 125,89, 124,42, 120,97, 120,83, 107,43, 107,10, 101,17, 97,47, 97,13; IR (KBr, cm"<1>) 3392, 3072, 1626, 1508, 1448, 1342, 1144, 954, 846, 802, 728, 508; MS (MH<+>) m/z 136; anal. beregnet for C8H6FN: C, 71,10; H, 4,47; N, 10,36; funnet: C, 71,28; H, 4,69; N, 10,24. ;Eksempel 6 ;3,4-bis(5-Fluor-1 H-indol-3-yl)-N-[4-(t-butyl)benzyl]-pyrrol-2,5-dion (IV: X^F; X2=R'=R"= H; R6 =4-(t-butyl)benzyl) ;Til en magnetisk omrørt løsning av 5-fluorindol (7,0 g, 51,8 mmol) i vannfri benzen (125 ml) ble det under argon tilsatt ved omrøring metylmagnesiumjodid (3,0 M i eter; 18,0 ml, 54,0 mmol). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 30 minutter, og deretter ble denne løsning i løpet av 10 minutter ved hjelp av en kanyl satt til en hurtig omrørt løsning av N-[4-(t-butyl)benzyl]-3,4-dibrommaleimid (6,50 g, 16,2 mmol) i vannfri benzen (60 ml). Den resulterende mørkt purpurfargede løsning ble omrørt ved romtemperatur under argon i 16 timer, og ble helt i en blanding av 20% vandig sitronsyre (350 ml) og etylacetat (500 ml). Det organiske skikt ble vasket med vann (200 ml) og saltløsning (200 ml), og tørket (Na2S04). Inndamping i vakuum, fulgt av flashkromatografi på silikagel med 100% diklormetan, fulgt av 10% etylacetat i diklormetan, ga 3,68 g (44%) av tittelforbindelsen i form av et rødt, fast stoff. ;300 MHz <1>H NMR (CDCI3) 5 8,63 (brs, 2H), 7,87 (d, 2H, J = 2,9 Hz), 7,46-7,34 (m, 4H), 7,23 (dd, 2H, J = 8,9, 4,4 Hz), 6,79 (ddd, 2H, J = 9,1, 8,9, 2,5 Hz), 6,48 (dd, 2H, J = 10,2, 2,5 Hz), 4,83 (s, 2H), 1,30 (s, 9H); 75 MHz; <13>C NMR (CDCIs) 6 172,15 (s), 157,73 (d, J = 235 Hz), 150,82 (s), 133,79 (s), 132,27 (s), 129,92 (s), 128,32 (s), 127,14 (s), 126,16 (d, J = 10,4 Hz), 125,72 (s), 112,19 (d, J = 9,8 Hz), 111,10 (d, J = 26,6 Hz), 106,95 (d, J = 4,3 Hz), 106,43 (d, 25,1 Hz), 41,68 (s), 34,55 (s), 31,33 (s); FAB massespektrum, m/e 509 (M<+>). ;Eksempel 7 ;3-Brom-4-(6-fluor-1H-indol-3-yl)-1H-pyrrol-2,5-dion (V: X^F; R'= R"=R6=H; y=Br) og 3,4-bis(6-fluor-1H-indol-3-yl)-1H-pyrrol-2,5-dion (IV: Xi=F; X2=R'= R"=R6=H) ;Til en løsning av 6-fluorindol (50,0 g, 0,37 mol) i vannfritt benzen (1 I) under nitrogen ble det ved hjelp av sprøyte tilsatt etylmagnesiumbromid (3M, 130 ml, 0,43 mol) ved en hastighet som holdt den indre temperatur mellom 45 og 50°C. Blandingen ble så varmet opp til 50-55°C i 0,5 timer før en suspensjon av 2,3-dibrommaleimid (24,9 g, 0,093 mol) i vannfri benzen ble helt i reaksjonsblandingen. Blandingen ble tilbakeløpskokt i 22 timer, avkjølt, fortynnet med etylacetat og surgjort til pH=1 med 1N HCI. Den organiske fase ble så separert fra, vasket med saltløsning, tørket og konsentrert. Den vandige fase ble fortynnet nok en gang med etylacetat og separert fra. Den resulterende organiske fase ble behandlet på samme måte som den som er nevnt i det foregående, og ble kombinert med den opprinnelige. Enda en 50 grams reaksjon ble utført og kombinert før kromatografi. Rensing av de kombinerte rester ved flashkromatagrafi på silikagel (gradienteluering med 10% etylacetat i heksaner, fulgt av 20% og til slutt 40% etylacetat i heksan) ga to hovedprodukter. Det ble isolert tittelforbindelse med formel V (12,31 g, 21,5%) i form av et murstensrødt, fast stoff og tittelforbindelse med formel IV (31,5 g, 41%) i form av et rødaktig/orange skum. ;For tittelforbindelsen med formel V: Sm.p. 73-75°C: <1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6)5 11,14 (brs, 1H), 7,51 (dd, J=8,6, 5,5 Hz, 1H), 7,32 (t, J= 2,9 Hz, 1H), 7,16 (dd, j=10,1, 2,3 Hz, 1H), 6,87-6,80 (m, 1H), 6,43-6,41 (m, 1H); <13>C NMR (75 MHz, DM50-d6) ppm 160,26, 157,16, 135,79, 135,63, 125,94, 125,89, 124,42, 120,97, 120,83, 107,43, 107,10, 101,17, 97,47, 97,13; IR(KBr, cm"<1>) 3392, 3072, 1626, 1508, 1448, 1342, 1144, 954, 846, 802, 728, 508; MS (MH<+>) m/z 136; anal. beregnet for C8H6FN: C, 71,10; H, 4,47; N, 10,36; funnet: C, 71,28; H, 4,69; N, 10,24. ;For tittelforbindelsen med formel IV: Sm.p, 207-208°C (dek); <1>H NMR (300 MHz, DMSO-de) 5 12,10 (s, 1H), 11,37 (s, 1H), 8,03 (d, J=2,9 Hz, 1H), 7,86 (dd, J=8,9, 5,4, 2,3 Hz, 1H), 7,28 (dd, J=9,6, 2,3 HZ, 1H), 7,00 (dt, J=9,3, 2,3 Hz, 1H); <13>C NMR (75 MHz, DMSO-d6) ppm 170,12, 167,35, 160,70, 157,56, 137,65, 136,62, 136,45, 131,58, 131,56, 123,51, 123,38, 121,27, 115,40, 109,03, 108,70, 103,89, 98,47, 98,14; IR (KBr, cm"<1>) 3328, 3222, 1726, 1604, 1450, 1338, 1240, 1192, 1148, 840, 794; MS (MH<+>) m/z 309, 311; anal. beregnet for Ci2H6BrFN202: C, 46,63; H, 1,96; N, 9,06; funnet: C, 46,70; H, 2,00; N, 8,94. ;Eksempel 8 ;3.9- Difluor-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7(6-N-[4-(t-butyl)benzyl]-)-dion (VI: X^Xr^F; X2=X2=R'= H; R6 =4-(t-butyl)benzyl; Q=NH) ;Til en magnetisk omrørt løsning av produktet fra eksempel 6 (11,6 g, 22,8 mmol) i vannfritt benzen (1700 ml) ble det under omrøring tilsatt under argon p-toluensulfonsyre-monohydrat (170 mg) og DDQ (10,9 g, 48,0 mmol). Blandingen ble under omrøring tilbakeløpskokt under argon i 1 time, og ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer. Den resulterende mørke felling ble utvunnet ved filtrering, vasket med kald etylacetat (50-70 ml), og tørket i 1-2 timer i vakuum, hvilket ga 12,80 g (94%) av tittelforbindelsen i form av et gulbrunt, fast stoff (monoetylacetat-kompleks ved proton-NMR; ytterligere tørking i vakuum kan redusere etylacetatinnholdet med fra en halvdel til to tredjedeler). Omkrystallisering fra THF/etylacetat gir det analytisk rene produkt i form av et sterkt gult, fast stoff (monoetylacetat-kompleks ved proton-NMR). ;300 MHz <1>H NMR (d6-DMS0) 5 11,83 (brs, 2H), 8,46 (dd, 2H, J = 9,7, 2,6 Hz), 7,69 (dd, 2H, J = 8,9, 4,6 Hz), 7,36 (ddd, 2H, J=9,1, 8,9, 2,6 Hz), 7,34-7,77 (m, 4H), 4,63 (s, 2H), 1,22 (s, 9H); FAB-massespektrum, m/e 507 (M<+>); anal. beregnet for C31H23F2N302)- C4H802; C, 70,58; H, 5,25; F, 6,38; N, 7,06; funnet: C, 70,52; H, 5,31; F, 6,14; N, 7,00. ;Eksempel 9 ;2.10- Difluor-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7(6H)-dion ;(VI: X^ = Xr=F; X2=X2=R'=R6=H; Q=NH) ;2,3-Diklor-5,6-dicyano-1,4-benzokinon (15,81 g, 0,70 mol) ble tilsatt i én porsjon til en omrørt suspensjon av 3,4-bis(6-fluor-1H-indol-3-yl)-1H-pyrrol-2,5-di-on-(11,5 g, 0,032 mol) og toluensulfonsyre-monohydrat (0,44 g) i benzen (1 I) under nitrogen, og blandingen ble tilbakeløpskokt i 2 timer før den ble avkjølt, lagret ved romtemperatur i 16 timer, og sugefiltrert gjennom en sintret glasstrakt. Fellingen ble vasket suksessivt med benzen, etylacetat og eter til det ble observert et fargeløst filtrat. Enda en 20,0 grams reaksjon ble utført i tandem under anvendelse av proporsjonalt de samme mengder reagenser som anvendt i den ;første reaksjon. Tittelforbindelsen (15,51 g, 40%) ble etter konsolidering isolert i form av et gulaktig/grønt, fast stoff, sm.p. >305°C. ;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 11,67 (br s, 2H), 10,93 (br s, 1H), 8,84 (dd, J=8,8, 5,8 Hz, 2H), 7,55 (dd, J=10,0, 2,3 Hz, 2H), 7,11 (dt, J=9,2, 2,3 Hz, 2H), 4,00 (q, J=7,1 Hz, 2H), 1,96 (s, 3H), 1,15 (t, J=7,1 Hz, 3H); <13>C NMR (75 MHz, DMSO-de) ppm 171,09, 170,32, 163,27, 160,08, 141,00, 140,83, 129,25, 125,69, 125,55, 119,54, 118,23, 115,09, 108,51, 108,19, 98,64, 98,28, 59,74, 20,74, 14,07; IR (KBr, cm-<1>) 3320, 1748, 1690, 1572, 1404, 1376, 1312, 1232, 1144, 1116, 840; MS (M<+>) m/z 361. Anal. beregnet for C2oH9F2N302<*>1,0ROAc ■ 1,0EtOAcH ■ 0,1 H20: C, 63,89; H, 3,84; N, 9,31; funnet: C, 64,12; H, 3,76; N, 9,55.

Eksempel 10

3,9-Difluor-12,13-dihydro-13-[3,4,6-tris-0-(fenylmetyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H-in-dolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7(6N-[4-(t-butyl)benzyl]-)-dion (VIII: X^Xi^F; X2=X2=R,=R",= H; R6 =4-(t-butyl)benzyl; Q=NH; PG = benzyl)

Til en magnetisk omrørt suspensjon av kjerne fra eksempel 8 (9,50 g, 17,7 mmol) i vannfritt THF (450 ml) ble det under omrøring i løpet av 5-10 minutter under argon tilsatt natrium-bis(trimetylsilyl)amid (1,0 M i THF; 50,0 ml, 2,82 ekviv). Den resulterende mørkerøde løsning ble omrørt ved romtemperatur i 45 minutter, behandlet ufortynnet ved hjelp av sprøyte med klortrimetylsilan (5,06 ml, 40,0 mmol), og ble omrørt ved romtemperatur i ytterligere 1 time. Reaksjonsblandingen ble så oppvarmet til tilbakeløp og holdt ved tilbakeløp samtidig som en løs-ning av 1,2-anhydro-sukkeret IX (13.5 g, 31,2 mmol; se J. Org. Chem. 1993, 58, 343-349) i vannfritt THF (200 ml) i løpet av 3,5 timer ble tilsatt ved hjelp av en trakt som ga konstant tilsetning. Etter at tilsetningen var fullstendig, ble reaksjonen tilbakeløpskokt i 10 timer under argon, behandlet med en løsning av ytterligere 1,2-anhydro-sukker IX (800 mg) i vannfritt THF (40 ml) og tilbakeløpskokt i ytterligere 2,5 timer. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur i løpet av 45 minutter, behandlet med HCI (1,0 N, 280 ml) og omrørt i 75 minutter. Blandingen ble fordelt mellom etylacetat (2 000 ml) og 0,5 N HCI (600 ml). Det organiske skikt ble vasket med mettet, vandig natriumhydrogenkarbonat (300 ml), vann (350 ml) og saltløsning (400 ml). De opprinnelige, sure, vandige skikt ble ekstrahert med frisk etylacetat (600 ml), som så ble vasket med vann (100 ml) og saltløsning (150 ml). De forenede organiske ekstrakter ble tørket (Na2S04) og rotasjonsinndampet til et volum på ca. 300 ml, hvoretter den resulterende gule felling ble oppsamlet ved filtrering, vasket med etylacetat (300 ml) og tørket i vakuum, hvilket ga 3,00 g (31,6%) utvunnet ren utgangskjerne. Filtratet ble konsentrert i vakuum, oppløst i metylenklorid/heksan, og renset ved flashkromatografi på silikagel under anvendelse av 5-10% etylacetat i heksaner. De gule fraksjoner inneholdende det minst polare sted ble inndampet til et volum på ca. 300 ml, og fikk stå over natten for å gi 625 mg (3,8%) vakre gule prismer av N12, Ni3-dobbelt-glykosylert produkt (struktur bestemt ved røntgen-krystallografi). Det ble oppnådd ytterligere 380 mg (2,3%) av det samme fra modervæsken. Ytterligere eluering med 10-15% etylacetat i heksaner ga 9,23 g (55,5%, 81% basert på utvunnet utgangskjerne) av analytisk ren tittelforbindelse med formel VIII i form av et gult, fast stoff.

500 MHz <1>H NMR (d6-DMSO) 8 10,85 (brs, 1H), 8,84 (dd, 1H, J = 9,6, 2,7 Hz), 8,75 (dd, 1H, J = 9,6, 2,5 Hz), 7,54 (ddd, 1H, J = 9,1, 9,1, 2,7 Hz), 7,42-7,18 (m, 21H), 6,43 (d, 1H, J = 8,8 Hz, 1'H), 5,38 (d, 1H, J = 6,3 Hz, 2'OH), 4,94-4,56 (m, SH), 4,30-4,15 (m, 2H), 3,98-3,72 (m, 4H), 1,24 (s, 9H); FAB-massespektrum, m/e 939 (M<+>); anal. beregnet for C58H51F2N3O7: C, 74,11; H, 5,47; F, 4,04; N, 4,47; funnet: C, 73,89; H, 5,51; F, 3,77; N, 4,26.

Eksempel 11

2,10-Difluor-12,13-dihydro-13-[3,4,6-tris-0-(fenylmetyl)-p-D-glukopyranosyl]-5-H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7(6H)-dion (A=VIII: Xi= Xi=F; X2=X2=R6=Rm =H; Q=NH; PG=benzyl) og 2,10-difluor-12,13-dihydro-13-[2-O-[3,4,6-tris-O-(fe-nylmetyl)-p-D-glukopyranosyl]-3,4,6-tris-0-(fenylmetyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H-in-dolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7(6H)-dion (B =VIII: Xi= Xr=F; X2=X2=R6= H; Q=NH; PG=benzyl; R'" = 3,4,6-tris-0-(fenylmetyl)-p-D-glukopyranosyl)

En løsning av natriumbis(trimetylsilyl)amid (1M, 9,1 ml, 3,3 ekviv.) i tetrahydrofuran ble ved hjelp av sprøyte satt til en løsning av 2,10-difluor12,13-dihy-dro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7(6H)-dion (11,17 g, 32,38 mmol) i vannfritt tetrahydrofuran (600 ml) ved romtemperatur. Etter 25 minutter ble en løsning av epoksyd (24,27 g, 56,11 mmol, 1,7 ekviv.) i vannfritt THF (50 ml) dråpevis kanylert til reaksjonsblandingen. Blandingen ble tilbakeløpskokt i 6 timer før den ble undertrykket med mettet ammoniumkloridløsning og fortynnet med etylacetat. Den organiske fase ble separert fra, vasket med saltløsning, tørket og inndampet. Rensing av resten ved flashkromatografi på silikagel (gradienteluering med 15% tetrahydrofuran i heksaner, fulgt av 20% og 40% tetrahydrofuran i heksaner) ga tittelforbindelsen A med formel VIII (6,1 g, 30%) i form av et gult skum, ureagert aglykon (4,00 g) og bis-sukkerforbindelsen B (10,9 g, 34%; MS (M<+>), beregnet for C14H66F2N3Oi2 1226, 4615, observert 1226, 4566) i form av et gult skum, som ble direkte omdannet til tittelforbindelsen A med formel VIII som beskrevet i det følgende. For tittelforbindelse med formel A=VIII: Sm.p. 140-147°C;

<1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 10,50 (s, 1H), 8,79-8,74 (dd, J=8,8, 5,8 Hz, 1H), 8,21 (dd, J=8,8, 5,6 Hz, 1H), 7,59-7,33 (m, 11H), 7,28-7,12 (2m,11H), 7,06-7,00 (m, 1H), 6,81 (dd, J=9,1, 2,2 Hz, 1H), 6,61-6,58 (m, 1H), 5,83 (d, J=9,0 Hz, 1H), 5,12 (d, J=5,3 Hz, 1H), 5,08 (d, J=5,2 Hz, 1H), 5,01-4,98 (m, 1H), 4,85 (d, J=10,8 Hz, 1H), 4,73-4,72 (m, 1H), 4,55-4,35 (m, 4H), 4,07-3,93 (m, 3H), 3,76-3,72 (m, 1H); <13>C NMR (75 MHz, CDCI3) ppm 169,55, 169,10, 164,43, 164,25, 161,18, 161,00, 143,00, 142,83, 141,68, 141,50, 137,69, 137,59, 136,32, 130,45, 128,91, 128,74, 128,63, 128,56, 128,43, 128,06, 127,02, 126,89, 126,15, 126,01, 120,00, 119,01, 118,44, 118,17, 118,09, 110,33, 110,02, 109,48, 109,16, 98,04, 97,70, 97,34, 85,89, 85,62, 76,35, 75,36, 75,05, 74,09, 73,74, 66,75; IR (KBr, cn<V >1) 3430, 3334, 2914, 2870, 1752, 1702, 1580, 1452, 1328, 1232, 1140, 1062, 698; MS (M<+>) beregnet for C47H38F2N307 794,2678, observert 794,2687. Anal. beregnet for C47H37F2N307-1,0 H20: C, 69,54; H, 4,84; N, 5,17; H20, 2,2. Funnet: C, 69,57; H, 4,70; N, 5,10; H20, 0,4.

Forbindelse B omdannes til forbindelse A ved omrøring av en løsning av 2,10-difluor-12,13-dihydro-13-[2-O-[3,4,6-tris-O-(fenylmetyl)-p-D-glukopyrano-syl]-3,4,6-tris-0-(fenylmetyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7(6H)-dion (10,9 g, 8,89 mmol) i tørt etylacetat (25 ml) og behandling med en løsning av vannfritt metanolisk hydrogenklorid (8M, 500 ml) i en forseglet kolbe i 96 timer ved romtemperatur. Løsemidlet(-midlene) ble så fjernet i vakuum og den resulterende rest ble fortynnet med etylacetat og tetrahydrofuran og ble nøytralisert til pH = 8 med en løsning av mettet natriumhydrogenkarbonat. Den organiske fase ble separert fra og vasket med saltløsning før tørking og konsentrering av løsemiddel. Rensing av resten ved flashkromatografi på silikagel (som beskrevet i det ovennevnte) ga tittelforbindelse A med formel VIII (5,7 g, 81%) i form av et gult skum, samt aglykon-utgangsmaterialet (0,7 g).

Eksempel 12

3.9- Difluor-12,13-dihydro-13-[p-D-glukopyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7(6N-[4-(t-butyl)benzyl]-)-dion (la: Xi =Xr=F; X2=X2=H; R6=4-(t-butyl)-benzyl; Q=NH; R2-R5=OH)

Til en magnetisk omrørt løsning av forbindelse fra eksempel 10 (2,10 g, 2,23 mmol) i 95% etanol (450 ml) og cykloheksen (175 ml) ble det tilsatt 20% palladiumhydroksyd på karbon (0,49 g), og blandingen ble tilbakeløpskokt under nitrogen og med kraftig omrøring i 20 timer. Blandingen ble filtrert varm gjennom Celite og vasket med metanol. Filtratet ble konsentrert i vakuum og renset ved flashkromatografi på silikagel under anvendelse av 3-5% metanol i metylenklorid, hvilket ga 1,35 g (90%) av den rene tittelforbindelse i form av et gulorange, fast stoff. Den analytiske prøve ble inndampet fra etylacetat, tørket i vakuum, og oppnådd som 1/2 EtOAc-kompleks pr. molekyl.

300 MHz <1> H NMR (d6-DMSO) 6 11,81 (brs, 1H), 8,84 (dd, 1H, J = 9,7, 2,7 Hz), 8,76 (dd, 1H, J = 9,7, 2,6 Hz), 8,04 (dd, 1H, J = 9,3, 4,4 Hz), 7,70 (dd, 1H, J = 8,9, 4,6 Hz), 7,55-7,46 (m, 2H), 7,40-7,33 (m, 4H), 6,31 (d, 1H, J = 8,9 Hz), 6,12 (brs, 1H), 5,43 (d, 1H, J = 4,4 Hz), 5,17 (d, 1H, J = 5,5 Hz), 4,93 (d, 1H, 5,4 Hz), 4,90 (s, 2H), 4,13-4,07 (m, 1H), 4,00-3,96 (m, 2H), 3,87-3,80 (m, 1H), 3,63-3,46 (m, 2H), 1,24 (s, 9H); FAB-massespektrum, m/e 669 (M<+>); anal. beregnet for C37H33F2N307l1/2 C4H802: C, 65,63; H, 5,22; F, 5,32; N, 5,89; funnet: C, 65,04; H, 5,20; F, 5,32; N, 5,91.

Eksempel 13

2.10- Difluor-12,13-dihydro-13-[p-D-glukopyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-(6H)-dion (la: X^ Xr=F; X2=X2= R6=H; Q=NH; R2=R5=OH)

En løsning av 2,10-difluor-12,13-dihydro-13-[3,4,6-tris-O-(fenyl-metyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (4,36 g, 5,49 mmol)) i en blanding av etanol og etylacetat (1:1, 100 ml) ble underkastet Parr-hydrogenering (H2) 414 kPa) i 6 timer ved omgivelsestemperatur med 20% Pd(OH)2 på karbon (4,4 g) som katalysator. Etter sugefiltrering gjennom Celite ble filtratet konsentrert ned til tørrhet, hvilket ga en orangegul rest, som ble renset ved kolonnekromatografi på silikagel (eluering med 50% tetrahydrofuran i heksaner), hvilket ga tittelforbindelsen (2,33 g, 77%) i form av et gult, fast stoff, sm.p. 255-260°C. <1> H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 11,77 (s, 1H), 11,19, (s, 1H), 9,14-9,03 (m, 2H), 7,89 (dd, J=11,0, 2,0 Hz, 1H), 7,41 (dd, J=9,8, 2,3 Hz, 1H), 7,27-7,19 (m, 2H), 6,26 (d, J=8,9 Hz, 1H), 6,14-6,12 (m, 1H), 5,43 (d, J=4,0 Hz, 1H), 5,17 (d, J=5,5 Hz, 1H), 4,98 (d, J=5,5 Hz, 1H), 4,24-3,94 (m, 3H), 3,83-3,81 (m, 1H), 3,59-3,57 (m, 1H), 3,50-3,42 (m, 1H); <13>C NMR (75 MHz, DMSO-d6) ppm 170,99, 170,91, 163,43, 160,24, 143,12, 141,63, 130,09, 128,74, 126,02, 120,90, 119,35, 118,22, 118,14, 117,74, 116,54, 108,78, 108,57, 98,77, 98,55, 98,20, 84,64, 78,56, 76,44, 73,06, 67,51, 58,29; IR (KBr, cm"<1>) 3326, 1744, 1700, 1578, 1452, 1328, 1232, 1114, 1074, 828; MS (M<+>) m/z 523; anal. beregnet for C26Hi9F2N307-0,25EtOAc-0,40H2O: C, 58,68; H, 3,98; N, 7,60; H20,130; funnet: C, 58,55; H, 4,18; N, 7,38; H20, 1,20.

Eksempel 14

2,10-Difluor-12,13-dihydro-13-[2-O-(trietylsilyl)-3,4,6-tris-O-(fenylmetyl)-p-D-gluko-pyranosyl]-6-trietylsilyl-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion (A= VIII: Xi= Xr=F; X2=X2=H; R6=R,<M>=trietylsilyt; Q=NH; PG=benzyl) og 2,10-difluor-12,13-dihydro-13-[2-0-(trietylsilyl)-3,4,6-tris-0-(fenylmetyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H-in-dolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (B= VIII: Xi= Xr=F; X2=X2=R6=H; R"'=trietylsilyl; Q=NH; PG=benzyl)

Trietylsilyltriflat (9,0 ml, 40,0 mmol, 20 ekviv.) ble tilsatt i én porsjon til en løsning av 2,10-difluor-12,13-dihydro-13-[3,4,6-tris-O-(fenylmetyl)-p-D-glukopy-ranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (1,60 g, 2,0 mmol) i tørt pyridin (100 ml). Blandingen ble omrørt i en forseglet kolbe ved romtemperatur i 48 timer før det ble tilsatt absolutt etanol (5 ml). Etter 10 minutter ble løse-midlet fjernet i vakuum ved romtemperatur. Resten ble så fortynnet med etylacetat og tetrahydrofuran og surgjort med 0,1 N saltsyre til surhet var oppnådd. Etter at den organiske fase var separert fra, ble den organiske fase vasket med salt-løsning, tørket over vannfritt natriumsulfat, og konsentrert. Forsøk på å rense resten ved flashkromatografi (2 ganger) på silikagel (eluering med 10% tetrahydrofuran i heksaner første gang og 40% eter i heksaner andre gang) ga tittelforbindelse A (1,4 g) i form av et lett urent, gult skum. Urenheten viste seg å være B. Fullstendig omdannelse av A til B kunne gjennomføres ved oppløsning av A (1,4 g, 1,37 mmol) i absolutt etanol (20 ml) og behandling av løsningen med ammoniumacetat (0,11 g, 1,40 mmol) ved omgivelsestemperatur i 2 timer. Blandingen ble så fortynnet med etylacetat og vasket suksessivt med en løsning av mettet natriumhydrogenkarbonat og saltløsning før tørking og konsentrering til tørrhet. Tittelforbindelse B (1,19 g, 96%) ble isolert som et gult skum.

For A: Sm.p. 77-79°C ; <1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 10,64 (s, 1H), 9,29 (dd, J=8,8, 5,8 Hz, 1H), 9,23-9,20 (m, 1H), 7,33-7,20 (m, 15H), 7,13-7,04 (m, 4H), 5.77 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,05 (d, J=11,6 Hz, 1H), 4,89-4,79 (m, 2H), 4,67-4,63

(m, 2H), 4,54 (d, J=12,4 Hz, 1H), 4,28 (m, 1H), 4,16 (m, 1H), 3,97 (m, 2H), 3,79-3,76 (m, 2H), 1,23-1,16 (m, 6H), 1,11-1,06 (m, 9H), 0,24 (t, J=8,0 Hz, 9H),

-0,29-(-0,50) (m, 6H); <13>C NMR (75 MHz, CDCI3) ppm 175,34, 142,70, 141,88, 138,08, 137,40, 136,28, 128,72, 128,56, 128,27, 128,13, 128,05, 127,52, 127,40, 127.17, 126,73, 121,40, 118,12, 109,84, 109,53, 109,21, 98,26, 97,52, 86,12, 77,71, 77,44, 77,01, 76,72, 76,59, 75,53, 75,25, 74,26, 66,82, 6,91, 6,12, 4,03, 3,95; IR (KBr, cm"<1>) 3458, 3334, 2954, 2876, 1692, 1454, 1328, 1300, 1116, 1072, 732, 696; MS (M<+>) beregnet for C59H66F2N307Si2 1022, 4407, observert 1022, 4377. For B: Sm.p. ikke bestemt; <1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 8 10,65 (s, 1H), 9,25-9,22 (m, 1H), 9,14 (dd, J=8,8, 5,6 Hz, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,33-7,21 (m, 14H), 7,16-7,03 (m, 4H), 5,77 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,05 (d, J=11,5 Hz, 1H), 4,87-4.78 (m, 2H), 4,69-4,63 (m, 2H), 4,59-4,51 (m, 1H), 4,28 (t, J=8,8 Hz, 1H), 4,15 (t, J=8,8 Hz, 1H), 4,02-3,91 (m, 2H), 3,79-3,73 (m, 2H), 0,23 (t, J=8,0 Hz, 9H), -0,28-(-0,52) (m, 6H); <13>C NMR (75 MHz, CDCI3) ppm 169,70, 169,66, 164,39, 161.18, 142,80, 142,64, 142,16, 141,99, 138,05, 137,37, 136,26, 130,65, 130,65 126,71 (11 linjer, olefinisk), 121,11, 119,48, 119,11, 118,93, 118,68, 118,44, 110,04, 109,74, 109,44, 98,39, 98,04, 97,63, 97,26, 86,11, 86,06, 77,76, 77,21, 76,74, 75,52, 75,25, 74,30, 66,86, 6,10, 4,03; IR (KBr, cm"<1>) 3434, 2876, 1754, 1718, 1624, 1582, 1454, 1326, 1116, 1086, 738; MS (FAB, MH<+>) m/z beregnet for C53H52F2N307Si 908,3543, observert 908,3547.

Eksempel 15

3.9- Difluor-12,13-dihydro-13-[6-0-(metylsulfonyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H-indolo-[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (Ib: Xi=Xr =F; X2=X2=H=R6; R2-R4=OH; R5=mesylat)

Til en magnetisk omrørt løsning av 3,9-difluor-12,13-dihydro-13-[p-glukopy-ranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (330 mg, 0,630 mmol) i vannfritt pyridin (8 ml) ved 0°C under N2 ble det ufortynnet og ved hjelp av sprøyte tilsatt metansulfonylklorid (80 ul, 1,03 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i 3,25 timer, og ble målt ved hjelp av TLC på silikagel (EtOAc-eluering) for å vise den nye høyere Rf-produktflekk i tillegg til utgangsmateriale. Ytterligere metansulfonylklorid (20 0,26 mmol) ble tilsatt, og reaksjonen ble omrørt ved 0°C i 1,25 timer og så opparbeidet under anvendelse av EtOAc (350 ml) og mettet, vandig kobber(ll)-sulfat (100 ml). Etylacetat-skiktet ble vasket med mettet, vandig kobber(ll)-sulfat (3 X, 150 ml), 0,1 N HCI (200 ml), vann (200 ml) og saltløsning (200 ml), og tørket (Na2S04). Inndamping i vakuum, fulgt av flashkromatografi på silikagel med 4-6% metanol i diklormetan, ga 146 mg (39%) av tittelforbindelsen i form av et gult, fast stoff.

500 MHz COSY <1>H NMR (CD3COCD3) 8 10,40 (s, 1H), 10,00 (brs, 1H), 8,97-8,86 (m, 2H), 8,02-7,96 (m, 2H), 7,42-7,33 (m, 2H), 6,43 (d, 1H, J = 9,2 Hz, 1'H), 4,98 (d, 1H, J = 11,0 Hz, 6'H), 4,76 (d, 1H, J = 11,0 Hz, 6"H), 4,48 (d, 1H, J = 10,0 Hz, 5'H), 4,22 (t, 1H, J = 9,7 Hz, 4'H), 4,00 (t, 1H, J = 9,3 Hz, 2'H), 3,89 (t, 1H, J = 9,0 Hz, 3'H), 3,23 (s, 3H); FAB-massespektrum, m/e 601 (M<+>).

Eksempel 16

2.10- Difluor-12,13-dihydro-13-[6-deoksy-6-(1,3-dihydro-1,3-diokso-2-isokinolinyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (A=lb: Xi=Xr =F, X2=X2=R2=R6=H; R2-R4=OH; R5=ftalimid)

Kaliumftalimid (0,45 g, 2,43 mmol) ble tilsatt i én porsjon til en omrørt løs-ning av 2,10-difluor-12,13-dihydro-13-[6-0-(metylsulfonyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (200 mg, 0,33 mmol) i vannfritt dimetylformamid (10 ml) før blandingen ble oppvarmet på 130°C i 3 timer, avkjølt til omgivelsestemperatur og konsentrert ned i vakuum over natten. Resten ble så tatt opp i etylacetat (noe tetrahydrofuran ble tilsatt) og vasket med 0,1N saltsyre og saltløsning. Etter tørking og konsentrering av løsemiddel ble resten renset ved flashkromatografi på silikagel (eluering med 7%. metanol i kloroform), hvilket ga tittelforbindelse (46 mg, 21%) i form av et gult, fast stoff. Sm.p. >300°C.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 5 11,21 (m), 10,80 (s), 9,15-9,13 (m), 9,07-9,02 (m), 7,97 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,86 (d, J=11,1 Hz, 1H), 7,74-7,69 (m), 7,40 (d, J=10,3 Hz, 1H), 7,31-7,23 (m), 7,20-7,17 (m), 6,09 (d, J=9,1 Hz, 1H), 5,73 (m), 5,64 (m), 5,30 og 5,26 (2m), 4,99 (m), 4,36-4,27 (m), 4,21 (m), 4,14-4,10 (m), 4,01-3,96 (m), 3,83-3,72 (2m), 3,57-3,53 (m); IR (KBr, cm"<1>) 3426, 1752, 1706, 1624, 1579, 1452, 1397, 1328, 1113, 1035; MS (neg. ESI, M-H") m/z 651. Eksempel 17

13-[6-(Azido-6-deoksy-(3-D-glukopyranosyl)-2,10-difluor-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (Ib: X1=X1=F; X2=X2=H=R6; R2-R4=OH; R5<=>N3)

Natriumazid (0,29 mg, 0,44 mmol) ble tilsatt i én porsjon til en omrørt løs-ning av 2,10-difluor-12,13-dihydro-13-[6-O-(metylsulfonyl)-(3-D-glukopyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (132 mg, 0.22 mmol) og pul-veriserte 4Å molekylsikter (50 mg) in vannfritt dimetylformamid (3 ml) før blandingen ble oppvarmet på 60°C i 6 timer, avkjølt til omgivelsestemperatur, fortynnet med etylacetat (noe tetrahydrofuran ble tilsatt) og vasket med en mettet løsning av natriumhydrogenkarbonat og saltløsning. Etter tørking og konsentrering av løsemiddel ble resten renset ved flashkromatografi på silikagel (eluering med 10% metanol i kloroform), hvilket ga tittelforbindelsen (40 mg, 33%) i form av et gult, fast stoff, dekomponeringspunkt 265°C.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 11,89 (brs, 1H), 11,21 (brs, 1H), 11,14 (brs, 1H), 10,82 (s, 1H), 9,19 (dd, J=8,8 Hz, 1H), 9,13-9,06 (m, 3H), 7,90 (dd, J=10,8, 2,1 Hz, 1H), 7,71 (dd, J=10,5, 2,1 Hz, 1H), 7,49 (dd, J=9,6, 2,1 Hz, 1H), 7,35 (dd, J=9,4, 2,3 Hz, 1H), 7,30-7,22 (m, 4H), 6,33 (d, J=8,7 Hz, 1H), 6,27 (d, J=8,6 Hz, 1H), 5,72 (d, J=5,2 Hz, 1H), 5,61 (d, J=4,9 Hz, 1H), 5,33 (br s, 1H), 5,23-5,21 (m, 2H), 5,11 (d, J=5,0 Hz, 1H), 4,20-4,10 (m, 4H), 4,02-3,94 (m, 3H), 3,85-3,83 (m, 1H), 3,79 3,69 (m, 3H), 3,63-3,58 (m, 3H); IR (KBr, cm"<1>) 3422, 2110, 1740, 1700, 1622, 1580, 1450, 1381, 1329, 1231, 1170, 1115, 1074, 829, 763; HRMS (neg. ESI, M-H") beregnet for C26H17F2N606 547,1256, observert 547,1199.

Eksempel 18

6-Amino-13-(6-amino-6-deoksy-p-D-glukopyranosyl)-2,10-difluor-12,13-dihydro-5-H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (le: Xi=Xr=F; X2=X2=H; R2-R4=OH; R5=NH2=R6)

Hydrazinhydrat (2 ml) ble satt til 2,10-difluor-12,13-dihydro-13-[6-deoksy-6-(1,3-dihydro-1,3-diokso-2-isokinolinyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]-pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (19 mg, 0,029 mmol), og blandingen ble om-rørt ved romtemperatur i 1 time og ved 50°C i 1 time før den ble konsentrert ned i vakuum i løpet av 24 timer. Rensing av resten ved HPLC på en C18 YMC Pack ODS-kolonne (30% isokratisk strømning under anvendelse av metanol/vann/0,1% trifluoreddiksyre) ga tittelforbindelsen (10 mg, 25%) i form av et orange-gult, fast stoff, sm.p. >300°C.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6/D20) 5 8,94-8,89 (2m), 8,81 (m), 8,68 (m), 7,93 (m), 7,82 (d, J=10,0 Hz, 1H), 7,73 (d, J=10,2 Hz, 1H), 7,39 (d, J=9,5 Hz, 1H), 7,12-7,11 (m), 6,93 (m), 6,20 (d, J=8,9 Hz, 1H), 6,07 (d, J=7,7 Hz, 1H), 4,22 (m), 4,16-4,12 (m), 4,14 (t, J=8,9 Hz, 1H), 3,79 (t, J=8,9 Hz, 1H), 3,75-3,73 (m), 3,61-3,52 (m), 3,40-3,34 (m), 3,31-3,27 (m); IR (KBr, cm"<1>) 3415, 1757, 1706, 1676, 1623, 1581, 1451, 1404, 1330, 1203, 1112, 839; HRMS (neg. ESI, M-H") beregnet for C26H|9F2N506 536,1460, observert 536,1349.

Eksempel 19

13-[6-(Amino-6-deoksy-p-D-glukopyranosyl)-3,9-difluor-12,13-dihydro-5H-indolo-[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (Ib: X!=Xr=F; x2=X2=H=R6; R2-R4=OH; R5=NH2)

Til en løsning av forbindelsen 13-[6-(azido-6-deoksy-p-D-glukopyranosyl)-3,9-difluor-12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (98,9 mg, 0,180 mmol) i absolutt metanol (125 ml) under N2 i en Parr ble det tilsatt palladium(ll)-klorid (90 mg, 0,51 mmol). Blandingen ble sonikert (sonnicated)

i 10 minutter og deretter anbrakt på en Parr-ryster ved 483 kPa hydrogentrykk i 45 timer. Blandingen ble filtrert gjennom en liten Celite-pute, vasket med metanol, og konsentrert i vakuum. Rensing på en Sephadex LH 20-kolonne med metanol-

eluering (0,4-0,5 ml/min. strømningshastighet), ga 69,6 mg (70%) av tittelforbindelsen i form av et gul-orange, fast stoff: 500 MHz COSY<1>H NMR (d6-DMSO) 8 11,20 (brs, 1H), 8,92 (dd, 1H, J = 9,7, 2,6 Hz), 8,81 (dd, 1H, J = 9,7, 2,6 Hz), 8,05 (dd, 1H, J = 9,0, 4,6 Hz), 7,95 (brs, 3H), 7,88 (dd, 1H, J = 8,9, 4,6 Hz), 7,48 (ddd, 1H, J = 2,5, 8,9, 9,1 Hz), 7,41 (ddd, 1H, J = 2,5, 8,9, 9,1Hz), 6,41 (d, 1H, J = 8,8 Hz, 1'H), 5,70 (brs, 1H), 5,36 (brd, 2', 3\ OH), 4,23-4,19 (m, 1H, 5'H), 4,06-4,02 (m, 1H, 2'H), 3,89-3,84 (m, 1H, 3'H), 3,56 (t, 1H, j 8,9 Hz, 4'H), 3,32-3,25 (m, 1H, 6'H), 3,13-3,08 (m, 1H, 6"H); FAB-massespektrum, m/e 522 (M<+>).

Eksempel 20

4-12-(Benzo[b]tien-2-yl)-5-fluor-1H-indol-3-yl]-3-klor-1-metyl-1H-pyrrol-2,5-dion(V: X!=5F; X2=H=R':R6=Me; R"=benzo[b]tienyl; y=CI)

Til en løsning av 2-(2-benzo[b]tienyl)-5-fluorindol (10,0 g, 0,37 mol) i vannfritt tetrahydrofuran (250 ml) under nitrogen ble det ved hjelp av sprøyte tilsatt etylmagnesiumbromid (3M, 13,1 ml, 0,39 mol) ved en hastighet som holdt den indre temperatur mellom 45 og 50°C. Blandingen ble så oppvarmet på 50-55°C i 0,5 timer og kjølt ned igjen til romtemperatur før en løsning av 3,4-diklor-1-metyl-maleimid (7,41 g, 0,41 mol) i vannfritt tetrahydrofuran ble kanylert inn i reaksjonsblandingen. Blandingen ble tilbakeløpskokt i 2 timer, avkjølt, fortynnet med etylacetat, vasket med en løsning av mettet ammoniumklorid og saltløsning før tør-king og konsentrering av løsemiddel til 1/4 volum. Sugefiltrering av suspensjonen ga tittelforbindelsen (12,65 g, 82%) i form av et rødfiolett, fast stoff, sm.p. 250-251 °C.

<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 12,50 (s, 1H), 8,03-7,99 (m, 1H), 7,93-7,89 (m, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,52 (dd, J=8,9, 4,4 Hz, 1H), 7,46-7,36 (m, 2H), 7,29 (dd, J=9,9, 2,5 Hz, 1H), 7,16-7,09 (m, 1H), 3,37 (s, 3H); <13>C NMR (75 MHz, DMSO-de) ppm 167,71, 165,34, 159,10, 156,00, 139,48, 134,18, 133,76, 133,19, 133,06, 132,66, 127,41, 127,27, 125,20, 125,02, 124,22, 123,64, 122,55, 113,23, 113,10, 111,89, 111,54, 105,40, 105,07, 100,56, 24,61; IR (KBr, cm"<1>) 3336,

1778, 1706, 1636, 1490, 1441, 1383, 1297, 1170, 1010, 982, 881, 822, 800, 750, 736; MS (neg. ESI, M-H") m/z 409; anal. beregnet for C2i Hi2FN202S: C, 61,39; H, 2,94; N, 6,82; funnet: C, 61,08; H, 2,88; N, 6,62.

Eksempel 21

3-Fluor-6-metyl-5H,13H-benzo[b]tienyl[2,3-a]pyrrolo]3,4-c]karbazol-5,7-dion

(VI: Xi=F; X2=Xr =X2=R'=H; Q=S; R6=Me)

En suspensjon inneholdende 4-[2-(benzo[b]tien-2-yl)-5-fluor-1H-indol-3-yl]-3-klor-1-metyl-1H-pyrrol-2,5-dion (12,6 g, 30,7 mmol) i tørr absolutt etanol/dioksan (60%, 1 I) ble anbrakt i en 2 liters pyrekskolbe, utstyrt med en tilbakeløpskonden-sator. Blandingen ble omrørt og bestrålt (Hanovia medium-trykk Hg-lampe, 450W) i 14 timer før den ble avkjølt til omgivelsestemperatur og avkjølt i ytterligere 24 timer ved -5°C. Sugefiltrering av suspensjonen ga tittelforbindelsen (12,7 g, 95%) i form av et fluorescerende gulaktig-grønt fiberglasslignende, fast stoff, sm.p.

>305°C.

<1>H NMR (500 MHz, DM50-d6) 6 9,50 (d, 1=7,8 Hz, 1H), 8,39 (d, J=9,7 Hz, 1H), 8,05 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,55-7,47 (m, 3H), 7,33-7,29 (m, 1H), 3,55 (s, 0,3

dioksan, 3H), 2,96 (s, 3H); <13>C NMR (125 MHz, DMSO-d6 ved 40°C) ppm 168,99, 168,73, 158,05, 138,98, 138,93, 137,97, 134,13, 129,91, 127,73, 127,07, 126,59, 125,40, 125,22, 122,99, 121,18, 118,50, 115,75, 115,55, 114,81, 112,85, 112,78, 109,87, 109,67, 66,45 (dioksan), 23,66; IR (KBr, cm"<1>) 3263, 1756, 1702, 1694, 1629, 1494, 1455, 1374, 1291, 1256, 1222, 1168, 1156, 1110, 982, 869, 806, 755, 745, 704, 613; MS (neg. ESI, M-H-) m/z 373. Anal, beregnet for C2i HnFN202S • 0,3dioksan ■ 1,5H20: C, 65,93; H, 3,44; N, 6,93; H20, 0,89. Funnet: C, 65,86; H, 3,43; N, 6,68; H20, 0,56.

Eksempel 22

3-Fluor-6-metyl-13-[2,3,4,6-tetra-0-(fenylmetyl)-p-D-glukopyranosyl-5H,13-H-benzo[b]tienyl[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7(6H)-dion

(VIII: X^F; X2=X1=X2=H; Q=S; R6=Me; PG=R'"=benzyl)

Diisopropylazo-dikarboksylat (4,6 ml, 24,0 mmol, 4,5 ekviv.) ble dråpevis satt til en kald (0°C), lett suspensjon av 3-fluor-6-metyl-5H,13H-benzo[b]tienyl[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion (2,0 g, 5,34 mmol), 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-D-glu-kopyranose (8,67 g, 16,03 mmol, 3,0 ekviv.) og trifenylfosfin (6,31 g, 24,0 mmol, 4,5 ekviv.) i vannfritt tetrahydrofuran (200 ml). Blandingen ble omrørt ved 0°C i 1 time før den ble fortynnet med etylacetat og vasket med 0,1 N saltsyre og saltløs-ning. Etter tørking og løsemiddel-inndamping ble resten renset ved flashkromatografi på silikagel (eluering med 10% etylacetat i heksaner fulgt av 15% etylacetat i heksaner), hvilket ga tittelforbindelsen (4,60 g, 96%) i form av et gult skum, sm.p. 64-70°C.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6, 1:1 blanding av rotasjons-isomerer) 5 9,87 og 9,78 (2m,1H), 9,00-8,99 og 8,85-8,83 (2m, 1H), 8,11-8,02 (2m, 1,5H), 7,73 (d, J=7,2 Hz, 0,5H), 7,58-7,54 (m, 2.5H), 7,38-7,23 (m, 15H), 7,18 (d, J=7,9 Hz, 0,5H), 6,84 (t, J=7,4 Hz, 0,5H), 6,78-6,75 (m, 0,5H), 6,67 (t, J=7,6 Hz, 1H), 6,55 (t, J=7,5 Hz, 1H), 6,51 (d, J=8,8 Hz, 0,5H), 6,43 (d, J=9,2 Hz, 0,5H), 6,12-6,10 (m, 2H), 4,95 (d, J=10,9 Hz, 0,5H), 4,88-4,79 (m, 3H), 4,74-4,65 (m, 1H), 4,58-4,48 (m, 2,5H), 4,36-4,29 (m, 1,5H), 4,24-4,20 (m, 0,5H), 4,14 (br s, 0,5H), 4,11-4,00 (m, 3H), 3,93 (d, J=10,6 Hz, 0.5H), 3,87 (br s, 1H), 3,18 (s, 3H); IR (KBr, cm"<1>) 3423, 2920, 2866, 1759, 1699, 1622, 1481, 1453, 1380, 1283, 1255, 1213, 1180, 1160, 1089, 744, 697; MS (FAB, M<+>) m/z 896.

Eksempel 23

3-Fluor-6-metyl-13-[p-D-glukopyranosyl]-5H, 13H-benzo[b]tienyl[2,3-a]-pyrrolo-[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (la: X^F; X2=X2=Xr=H; Q=S; R6=Me; R2-R5=OH)

Til en kald (0°C), omrørt løsning av 3-fluor-6-metyl-13-[2,3,4,6-tetra-0-(fe-nylmetyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H,13H-benzo[b]tienyl[2,3-a]pyrrolo-[3,4-c]karba-zol-5,7-(6H)-dion (4,5 g, 5,02 mmol) i etantiol (30 ml) ble det tilsatt kald (0°C) bortrifluorid-eterat (6,36 ml, 50,2 mmol). Blandingen ble omrørt ved 0°C i 1 time før den ble omrørt ved omgivelsestemperatur i totalt 48 timer. Ytterligere bortrifluorid-eterat (3,2 ml) ble tilsatt etter 12 timer og 24 timer. Løsemidlet ble fjernet i vakuum, og den gjenværende rest ble tatt opp i etylacetat/tetrahydrofuran og vasket med 1N saltsyre og saltløsning før tørking og konsentrering av løsemiddel. Rensing av resten ved flashkromatografi på silikagel (gradienteluering med 10% metanol i kloroform, fulgt av 15% metanol i kloroform) ga tittelforbindelsen (2,53 g, 94%) i form av et gult, fast stoff, sm.p. >305°C.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 9,85 og 9,71 (2d, J=7,4 og 7,5 Hz, 1H), 8,96 og 8,89 (2d, J=9,6 og 9,6 Hz, 1H), 8,13-8,05 (m, 1,25H), 7,99 (dd, J=9,0, 4,5 Hz, 0,75H), 7,61-7,41 (3m, 3H), 6,29 og 6,09 (2d, 8,8 og 9,3 Hz, 1H), 5,36-5,33 (3H), 4,84-4,72 (m, 1,5H), 4,04-3,98 (m, 1H), 3,92-3,86 (m, 1.75H), 3,76-3,68 (m,

2H), 3,63-3,54 (m, 1.75H), 3,16 (s, 3H); <13>C NMR (125 MHz, DMSO-d6) ppm

169,34, 169,19, 169,04, 158,81, 156,95, 140,06, 138,48, 137,05, 133,12, 131,70, 131,49, 130,85, 129,75, 128,36, 127,40, 127,20, 126,52, 125,78, 125,71, 125,39, 122,80, 122,66, 122,35, 119,81, 116,33, 116,08, 115,94, 115,74, 110,70, 110,50, 105,28, 87,77, 81,36, 77,72, 70,89, 69,86, 61,28, 24,33; IR (KBr, cm-<1>) 3428,

1756, 1694, 1622, 1481, 1460, 1448, 1384, 1084, 745; MS (neg. ESI, M-H") m/z 535.

Eksempel 24

3-Fluor-13-(p-D-glukopyranosyl)-5H, 13H-benzo[b]tienyl[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]kar-bazol-5,7-(6H)-dion (la: R2-R5=OH; R6-X2-Xr-X2=H; Q=S)

3-Fluor-6-metyl-13-(p-D-glukopyranosyl)-5H, 13H-benzo[b]tienyl[2,3-a]pyr-rolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (0,20 g, 0,37 mmol) ble suspendert i en løsning av 10% vandig kaliumhydroksyd (30 ml) under nitrogen. Blandingen ble forsiktig tilbakeløpskokt i 3 timer før den ble titrert med konsentrert HCI inntil det hadde dannet seg en tykk felling. Fellingen ble tatt opp i etylacetat/tetrahydrofuran og vasket med 1N saltsyre og saltløsning før tørking og konsentrering av løsemiddel. Resten ble løst i absolutt etanol (1 ml) og fast ammoniumacetat (3,0 g) ble tilsatt. Blandingen ble forent ved 150°C i 3 timer før den ble avkjølt, fortynnet med etylacetat/tetrahydrofuran, vasket med 1N natriumhydroksyd, saltløsning, tørket og konsentrert. Rensing av denne rest ved flashkromatografi på silikagel (gradienteluering med 30% tetrahydrofuran i kloroform, fulgt av 50% tetrahydrofuran i kloroform) ga tittelforbindelsen (69,5 mg, 36%) i form av et gult, fast stoff, sm.p.

>305°C.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 11,67 (s, 0,25H), 11,53 og 11,51 (2s, 1H), 9,95-9,93 og 9,91-9,89 (2m, 1H), 9,02 og 8,97 (2dd, J=9,8, 2,7 Hz og 9,7, 2,8 Hz, 1H), 8,24-8,23 og 8,18-8,16 (2m, 1H), 8,08 og 8,01 (2dd, J=9,4, 4,4 Hz og 9,1, 4,6 Hz, 1H), 7,69-7,63 (m, 2H), 7,54-7,48 (m, 1 H), 6,34 og 6,09 (2d, J=8,9, 9,4 Hz, 1H), 5,37-5,35 (m, 1H), 5,28 og 5,22 (2br m, 2H), 4,75 (br m, 0.75H), 4,04 og 3,87-3,75 (2m, 3H), 3,68-3,58 (m, 2H), 3,55-3,52 (m, 2H); <13>C NMR (125 MHz, DMSO-de) ppm 170,39,170,16, 158,76, 156,89, 140,05, 138,34, 136,87, 133,09, 131,76, 128,32, 127,28, 126,62, 125,64, 122,64, 120,60, 116,16, 115,95, 115,84, 110,76, 110,56, 107,35, 87,71, 81,13, 77,45, 70,74, 69,79, 67,01, 61,23; IR (KBr,

cm"1) 3392, 1747, 1705, 1625, 1481, 1462, 1430, 1326, 1284, 1262, 1180, 1087, 804, 758, 747; HRMS (neg. ESI, M-H") beregnet for C26H18FN2O7S 521,0897, observert 521,0802.

Eksempel 25

3,9-Difluor-12,13-dihydro-13-[3,6-0-(t-butyldimetylsilyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6N-[4-(t-butyl)benzyl]-)-dion (Ib: Xi=Xr= F; X2=X2'=H; R6=4-(t-butyl)benzyl; Q=NH; R2=R4=OH; R3=R5=t-butyldimetylsilyloksy)

Til en magnetisk omrørt løsning av produkt fra eksempel 12 (750 mg, 1,12 mmol) og imidazol (1,9 g, 28 mmol) i vannfritt DMF (14 ml) under N2 ble det under omrøring tilsatt, ufortynnet og ved hjelp av sprøyte, t-butyldimetylsilyl-trifluorme-tansulfonat (2,96 g, 2,57 ml, 11,2 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time og undertrykket med absolutt etanol (5 ml). Blandingen ble fortynnet med etylacetat (150 ml) og vasket med vann (6 x 100 ml) og salt-løsning (100 ml), og tørket (Na2S04). Dette materiale ble anvendt direkte i neste trinn uten ytterligere rensing. Den analytiske prøve ble renset ved flashkromatografi på silikagel med heksan/metylenklorid: 300 MHz <1>H NMR (CDCI3) 5 10,06 (brs, 1H), 9,12 (dd, 1H, J = 9,2, 2,7 Hz), 7,88-7,81 (m, 1H), 7,72 (dd, 1H, J = 9,2, 3,9 Hz), 7,41 (ddd, 1H, J = 8,9, 8,9, 2,6 Hz), 7,25 (dd, 1H, J = 9,0, 4,1 Hz), 7,20-6,99 (m, 4H), 6,92 (ddd, 1H, J = 8,7, 8,7, 2,4 Hz), 5,97 (d, 1H, J = 8,9 Hz), 4,58-3,90 (m, 8H), 1,18 (s, 9H), 0,91 (s, 9H), 0,83 (s, 9H), 0,27 (s, 3H), 0,10 (s, 3H), 0,05 (s, 3H), -0,02 (s, 3H); FAB-massespektrum, m/e 897 (M<+>). Eksempel 26 3,9-Difluor-12,13-dihydro-13-[3-0-(t-butyldimetylsilyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo [3,4-c]karbazol-5,7-(6N-[4-(t-butyl)benzyl]-)-dion (Ib: Xi=Xr=F; X2=X2,= H; R6 =4-(t-butyl)benzyl; Q=NH; R2=R4=OH; R3 = t-butyldimetylsilyloksy) Til en magnetisk omrørt løsning av råproduktet fra eksempel 25 ble det ved -5°C tilsatt en blanding av 9 :1 trifluoreddiksyre : vann, for-avkjølt til -5°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -5°C i 45 minutter, fortynnet med etylacetat (200 ml) og vasket med mettet, vandig natriumhydrogenkarbonat (6 x 150 ml), vann (1 x 150 ml) og saltløsning (1 x 150 ml) og tørket (Na2S04). Inndamping i vakuum,

fulgt av flashkromatografi på silikagel med 1-10% metanol i metylenklorid ga 59 mg (6%) av utgangsmatehalet (dvs. forbindelse ifølge eksempel 25), 78 mg (10%) av fullstendig desilylert produkt (dvs. forbindelse ifølge eksempel 12), og 585 mg (74%) av den rene tittelforbindelse i form av et gult, fast stoff.

500 MHz COSY <1>H NMR (d6-DMSO) 5 11,80 (brs, 1H), 8,82 (dd, 1H, J = 9,6, 2,7 Hz), 8,76 (dd, 1H, J = 9,7, 2,7 Hz), 8,03 (dd, 1H, J = 9,2, 4,4 Hz), 7,68 (dd, 1H, J = 8,9, 4,5 Hz), 7,51-7,45 (m, 2H), 7,38-7,31 (m, 4H), 6,28 (d, 1H, J = 9,1 Hz, TH), 6,08 (t, 1H, J = 3,9 Hz, 6'OH), 5,35 (d, 1H, J = 6,8 Hz, 4'OH), 4,88 (s, 2H), 4,81 (d, 1H, J = 6,8 Hz, 2'OH), 4,12-4,08 (m, 1H, 6'H), 3,98-3,93 (m, 1H, 5'H), 3,93-3,90 (m, 1H, 4'H), 3,86-3,82 (m, 1H, 6'H), 3,73 (t, 1H, J = 8,8 Hz, 3'H), 3,39 (ddd, 1H, J = 9,1, 8,8, 6,8 Hz, 2'H), 1,23 (s, 9H), 0,76 (s, 9H), 0,07 (s, 3H),

-0,03 (s, 3H); FAB-massespektrum, m/e 783 (M<+>).

Eksempel 27

3,9-Difluor-12,13-dihydro-13-[3-0-(t-butyldimetylsilyl)-6-0-(metansulfonyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo [3,4-c]karbazol-5,7-(6N-[4-(t-butyl)benzyl]-)-dion (Ib: X^ =XV= F; X2=X2=H; R6=4-(t-butyl)benzyl; Q=NH; R2=R4=OH; R3=t-butyldimetylsilyloksy; R5=metansulfonyloksy)

Til en magnetisk omrørt løsning av det rene produkt fra eksempel 26 (403 mg, 0,514 mmol) i vannfritt pyridin (7 ml) ved -10°C under argon ble det ufortynnet og ved hjelp av sprøyte i løpet av 1 minutt tilsatt metansulfonylklorid (46 u.l, 0,594 mmol). Etter 70 minutter ved -10°C ble en alikvot fjernet, satt til en blanding av etylacetat og mettet, vandig kobber(ll)-sulfat og analysert ved hjelp av TLC på silikagel under anvendelse av 1-2% metanol i metylenklorid. Det ble påvist for det meste utgangsmateriale med en liten mengde av den høyere Rf-produktflekk. Ytterligere metansulfonylklorid (32 ble tilsatt, og reaksjonen ble opprettholdt ved -10°C i 1 time. Med 30 minutters intervaller ble reaksjonsblandingen behandlet suksessivt med ytterligere metansulfonylklorid (33 u.l, 31 u,l, 31 (xl, og 24 pj). Etter totalt ca. 5 timer ved -10°C viste TLC hoved-produktflekken og litt av det lavere Rf-utgangsmateriale. I løpet av de siste 1,5 timer hadde reaksjonstempera-turen fått stige til -1°C fra -10°C. Reaksjonsblandingen ble undertrykt ved å tilsette 200 \ x\ absolutt etanol, ble omrørt i 5 minutter og fordelt med etylacetat (600 ml) og mettet, vandig kobber(ll)-sulfat (250 ml). Det organiske skikt ble vasket med mettet, vandig kobber(ll)-sulfat (200 ml), vann (200 ml) og saltløsning (200 ml), og tørket (Na2S04). Inndamping i vakuum, fulgt av flashkromatografi på silikagel med 1% metanol i metylenklorid, ga 404 mg (91%) av den rene tittelforbindelse og 40 mg av gjenvunnet utgangsmateriale: 300 MHz <1>H NMR (CDCI3) 5 9,83 (brs, 1H), 9,08 (dd, 1H), 7,80-7,71 (m, 1H), 7,68 (dd, 1H), 7,52 (dd, 1H), 7,40 (ddd, 1H), 7,21-7,13 (m, 2H), 7,03-6,86 (m, 3H), 5,94 (d, 1H), 5,15-3,92 (m, 10H), 3,02 (s, 3H), 1,19 (s, 9H), 0,84 (s, 9H), 0,23 (s, 3H), -0,01 (s, 3H); FAB-massespektrum, m/e 861 (M<+>).

Eksempel 28

3,9-Difluor-12,13-dihydro-13-[3-0-(t-butyldimetylsilyl)-6-(4N-morfolino)-p-D-gluko-pyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6N-[4-(t-butyl)benzyl]-)-dion (Ib: Xi=Xr= F; X2=X2=H; R6=4-(t-butyl)benzyl; Q=NH; R2=R4=OH; R3=t-butyldimetylsilyloksy; R5=morfolino)

Til en magnetisk omrørt løsning av den rene produkt fra eksempel 27 (193 mg, 0,224 mmol) i vannfritt DMSO (5 ml) under N2 ble det tilsatt morfolin (210 pl, 2,41 mmol). Den resulterende røde reaksjonsblanding ble omrørt i 69 timer ved 47°C, og ble fordelt med etylacetat (350 ml) og mettet, vandig natriumhydrogenkarbonat (75 ml). Det organiske skikt ble vasket med vann (4 x 70 ml) og saltløs-ning (75 ml), og tørket (Na2S04). Inndamping i vakuum, fulgt av flashkromatografi på silikagel med 20-25% etylacetat i metylenklorid ga 9 mg (5%) gjenvunnet utgangsmateriale og så 102 mg (53%; 56% basert på gjenvunnet utgangsmateriale) av den rene tittelforbindelse i form av et gult, fast stoff.

300 MHz <1>H NMR (CDCI3) 5 10,03 (brs, 1H), 9,09 (dd, 1H), 8,02-7,96 (m, 1H), 7,69 (dd, 1H), 7,39 (ddd, 1H), 7,30-7,23 (m, 1H), 7,21-7,17 (m, 2H), 7,07-6,98 (m, 3H), 5,96 (d, 1H), 4,53-3,93 (m, 6H), 3,72-3,57 (m, 4H), 3,19-2,98 (m, 2H), 2,82-2,71 (m, 2H), 2,68-2,58 (m, 2H), 1,19 (s, 9H), 0,88 (s, 9H), 0,27 (s, 3H), 0,08 (s, 3H); ESI (neg.) -massespektrum, m/e 851 (M-H)".

Eksempel 29

3,9-Difluor-12,13-dihydro-13-[6-(4N-morfolino)-p-D-glukopyranosyl]-5-H-indolo-[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (la: Xi=Xr= F; X2=X2=R6=H; R5= 4N-morfolino; Q=NH; R2-R4=OH)

Til en magnetisk omrørt løsning av det rene produkt fra eksempel 28 (205 mg, 0-240 mmol) i absolutt etanol (160 ml) ble det tilsatt vandig kaliumhydroksyd (4,45 M, 42 ml, 187 mmol). Den resulterende mørkerøde løsning ble oppvarmet i en åpen kolbe inntil all etanol var fordampet og det oppnås fast stoff i form av en harpiks (ca. 1,5 timer). Blandingen ble avkjølt under en nitrogenstrøm, og konsentrert HCI (12 N; 17 ml, 204 mmol) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt i 5 minutter og absolutt etanol (90 ml) ble tilsatt, fulgt av fast ammoniumacetat (85 g). Blandingen ble oppvarmet under omrøring i en åpen kolbe på like under kokepunktet i 2,5-3 timer, deretter til 180°C (smeltens indre temperatur) i løpet av ca. 2 timer. Blandingen ble ytterligere oppvarmet til 200°C i løpet av 10-15 minutter, hurtig avkjølt under en nitrogenstrøm til ca. 50-60°C, og tatt opp i vann (200 ml), mettet, vandig natriumhydrogenkarbonat (200 ml, og etylacetat (800 ml). Det organiske skikt ble vasket med saltløsning (200 ml), de kombinerte vandige skikt ble ekstrahert med frisk etylacetat (300 ml), og sistnevnte ekstrakt ble vasket med saltløsning (100 ml). De kombinerte organiske ekstrakter ble tørket (Na2S04) og inndampet i vakuum. Råmaterialet ble oppløst i metanol (400 ml) og behandlet med vannfritt kaliumkarbonat (2,0 g) og kaliumfluorid-dihydrat (1,03 g), og ble omrørt ved romtemperatur i 15 timer. Løsemidlet ble fordampet i vakuum, resten ble oppløst i metanol (250 ml), behandlet med 1 N HCI (15 ml), og inndampet i vakuum. Resten ble oppløst i absolutt etanol (500 ml), inndampet i vakuum, og denne prosess ble gjentatt nok en gang. Omkrystallisering fra 95% etanol ga 79,6 mg (53%, 2 høstinger) av den rene tittelforbindelse i form av dens HCI-salt.

500 MHZ COSY 1H NMR (d6-DMSO) 5 12,67 (brs, 1H), 11,19 (s,1H), 8,92 (dd, 1H, J = 9,7, 2,6 Hz), 8,79 (dd, 1H, J = 9,8, 2,3 Hz), 8,05 (dd, 1H, J = 9,0, 4,5 Hz), 7,94 (dd, 1H, J = 8,7, 4,5 Hz), 7,46 (ddd, 1H, J = 2,5, 8,9, 9,0 Hz) 7,41 (ddd, 1H, J = 2,6, 9,0, 9,1 Hz), 6,61 (d, 1H, J = 8,6 Hz,1'H), 3,97 (t,1H, J = 8,8 Hz,2'H), 3,91-3,16 (m,13H).

Example 30

3,9-Difluor-12,13-dihydro-13-[6-azido-p-D-glukopyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrro-lo[3,4-c]karbazol-5,7-(6-hydroksy)dion (le)

Til en magnetisk omrørt løsning av det rene 3,9-difluor-12,13-dihydro-13-[6-azido-p-D-glukopyranosyl]-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-[6(4-t-butylbenzyl)]-dion (20 mg, 0,029 mmol) i absolutt etanol (5 ml) ble det tilsatt vandig kaliumhydroksyd (4,45 M, 1,1 ml, 4,9 mmol). Den resulterende mørkerøde løsning ble oppvarmet i en åpen kolbe inntil all etanol var fordampet og det hadde dannet seg et fast stoff i form av harpiks (ca. 1,5 timer). Blandingen ble avkjølt under en strøm av nitrogen og det ble tilsatt absolutt etanol (5 ml), fulgt av fast hydroksylamin-hydroklorid (685 mg). Blandingen ble tilbakeløpskokt under omrø-ring i 4 timer, og så oppvarmet til 110°C (smeltens indre temperatur etter at løse-midlet hadde kokt av) i ca. 3 timer. Blandingen ble avkjølt under en strøm av nitrogen til romtemperatur, og ble tatt opp i 1 N HCI (80 ml) og etylacetat (400 ml). Det organiske skikt ble vasket med 1 N HCI (3 x 50 ml), vann (2 x 50 ml) og salt-løsning (100 ml), og tørket (Na2S04). Inndamping i vakuum, fulgt av rensing på en Sephadex LH 20-kolonne med metanoleluering (0,4-0,5 ml/min. strømningshas-tighet) ga 4,3 mg (27%) av tittelforbindelsen i form av et gulrødt, fast stoff.

IR (KBr) 2114 cm"<1>; 500 MHz COSY <1>H NMR (CD3OD) 5 8,53 (dd, 1H, J = 9,6, 2,1 Hz), 8,36 (dd, 1H, J = 9,5, 1,9 Hz), 7,68 (dd, 1H, J = 8,8, 3,7 Hz), 7,36 (dd, 1H, J = 8,8, 4,2 Hz), 7,24 (ddd, 1H, J = 8,7, 8,7, 2,0 Hz), 7,14 (ddd, 1H, J = 8,9, 8,8, 2,3 Hz), 5,98 (d, 1H, J = 9,0 Hz, 1'H), 4,47 (d, 1H, J = 12,1 Hz, 6'H), 4,28 (d, 1H, J = 12,1 Hz, 6"H), 4,11 (d, 1H, J = 9,4 Hz, 5'H), 3,91 (t, 1H, J = 9,4 Hz, 4'H), 3,61 (t, 1H, J = 9,0 Hz, 2'H), 3,46 (dd, 1H, J = 9,4, 9,0 Hz, 3'H); FAB-massespektrum, m/e 564 (M<+>).

Eksempel 31

3,9-Difluor-12,13-dihydro-13-[6-amino-p-D-glukopyranosyl]-5-H-indolo[2,3-a]pyr-rolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6-hydroksy)dion (le)

Til en løsning av produkt fra eksempel 30 (3,0 mg, 0,0053 mmol) i absolutt metanol (2 ml) under N2 i en Parr ble det tilsatt palladium(ll)-klorid (15 mg, 0,09 mmol). Blandingen ble sonikert i 10 minutter og så anbrakt på en Parr-ryster ved 448 kPa hydrogentrykk i 24 timer. Blandingen ble filtrert gjennom en liten pute av Celite, vasket med metanol og konsentrert i vakuum, hvilket ga 2,0 mg (66%) tittelforbindelse i form av et gulorange, fast stoff: FAB-massespektrum, m/e 538

(M<+>).

Ytterligere eksempler med formel l-forbindelser, som kan syntetiseres ved modifiseringer av de foregående syntetiske prosedyrer, er vist i tabell IV hvor sub-stituentene er de samme som i eksempel 29 dersom ikke annet er angitt.

De analytiske data for enkelte av eksemplene vist i tabell IV er angitt i det følgende:

Eksempel 32

IR (KBr) 2110 cm"<1>; 500 MHz COSY <1>H NMR (CD3OD) 5 8.81-8,8,79 (m, 2H), 7,68 (dd, 1H, J = 9,1, 4,0 Hz), 7,56 (dd, 1H, J = 8,8, 4,2 Hz), 7,38-7,25 (m, 6H), 6,05 (d, 1H, J = 8,5 Hz, 1'H), 4,75 (s, 2H), 4,29 (d, 1H, J = 12,8 Hz, 6'H), 4,17-4,06 (m, 2H, 5',6"H), 4,00 (t, 1H, J = 8,9 Hz, 4'H), 3,70-3,65 (m, 2H, 2',3'H), 1,27 (s, 9H); FAB-massespektrum, m/e 694 (M<+>).

Eksempel 33:

Gult, fast stoff: IR (KBr) 2112, 1750, 1700 cm"<1>; 500 MHz COSY <1>H NMR (CD3OD) 5 8,78-8,72 (m, 2H), 7,77 (dd, 1H, J = 9,1, 4,1 Hz), 7,55 (dd, 1H, J = 8,8, 4,2 Hz), 7,33-7,26 (m, 2H), 6,12 (d, 1H, J = 8,5 Hz, 1'H), 4,27 (d, 1H, J = 11,5 Hz, 6'H), 4,15-4,07 (m, 2H, 5',6"H), 4,01 (t, 1H, J = 8,7 Hz, 4'H), 3,74-3,67 (m, 2H, 2',3'H); FAB-massespektrum, m/e 548 (M<+>).

Eksempel 34

Gulorange, fast stoff: 500 MHz <1>H NMR (CD3OD) 8 8,81-8,61 (m, 2H), 7,88-7,04 (m, 7H), 6,32 (d, 1H, J = 8,9 Hz, 1'H), 4,20-3,30 (m, 6H); FAB-massespektrum, m/e 574 (MH<+>).

Eksempel 35

Gult, fast stoff: FAB-massespektrum, m/e 605 (M<+>).

Eksempel 36

Gult, fast stoff, sm.p. 257-273°C <1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 6 11,73 (br s, 1H), 9,53-9,40 (2m, 1H), 8,65-8,63 (m, 1H), 8,25-7,91 (4m, 2H), 7,52-7,25 (3m, 2H), 6,21 og 6,10 (2d, J=8,8, 9,3 Hz, 1H), 5,47-4,99 (serier av m, 3H), 4,10-3,86 (3m, 3H), 3,56-3,53 (m, 7H), 2,99-2,57 (serier av m, 4H); IR (KBr, cm"<1>) 3412, 2924, 2800, 1706, 1653, 1602, 1567, 1481, 1463, 1425, 1321, 1301, 1198, 1110, 1067, 916, 804, 764, 742; MS (+ESI, M+H<+>) m/z 610.

Eksempel 37

12-[6-(Amino-6-deoksy-|3-D-glukopyranosyl)-3-fluor-5H,13H-benzo[b]tienyl-[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion

Trifenylfosfin (107 mg, 0,41 mmol) ble tilsatt i én porsjon til en omrørt løs-ning av 12-[6-(azido-6-deoksy-P-D-glukopyranosyl)-3-fluor-5H,13H-benzo[b]tienyl-[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion (75 mg, 0,14 mmol) i våt tetrahydrofuran (3 ml) under nitrogen før blandingen ble oppvarmet på 50°C i 28 timer, avkjølt til omgivelsestemperatur og behandlet med vandig ammoniumhydroksydløsning i 1 time ved romtemperatur og i 1 time ved 50°C. Under avkjøling til romtemperatur ble blandingen konsentrert ned i vakuum, og resten ble tatt opp i metanol, surgjort med 1N HCI/Et20 og inndampet til tørrhet. Rensing av denne rest ved HPLC på en YMC Pack ODS (20 x 100) -kolonne som ble drevet ved 87% B, ga tittelforbindelsen (54 mg, 71%) i form av et gult, fast stoff, dekomponeringspunkt 290°C (forseglet rør); <1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 5 11,55 (brs, 1H), 9,94-9,90 (m, 1H), 9,03-8,96 (2m, 1H), 8,30-8,26 (m, 4H), 8,12-8,08 (m, 1H), 7,71-7,29 (serier av m, 6H), 6,36 og 6,15 (2d, J=8,9, 9,3 Hz, 1H), 5,81 og 5,55 (2m, 2H), 4,23-3,70 (5m, 2H), 3,60-3,57 og 2,94 (2m, 2H), 1,68-1,41 (3m, 2H); IR (KBr, cm-<1>) 3401, 1702, 1624, 1482, 1460, 1328, 1284, 1209, 1182, 1087, 757, 746; MS (FAB, MH<+>) m/z 522.

Eksempel 39

3,9-Difluor-12-(6-amino-6-deoksy-p-D-glukopyranosyl)benzofurano[2,3-a]-pyrrolo-[3,4-c]karbazol-5,7-dion

Til en magnetisk omrørt løsning av 3,9-difluor-12-(p-D-glukopyranosyl)ben-zofurano[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion (50 mg, 0,09 mmol) og pulveri-serte molekylsikter 4 Ångstrom (100 mg) i vannfritt pyridin (3 ml) ved -30°C under Ar ble ufortynnet og ved hjelp av sprøyte tilsatt metansulfonylklorid (10 pl, 0,12 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -30°C i 1 time, deretter ved -10°C i 0,5 timer, fulgt av en ytterligere porsjon metansulfonylklorid (10 pl, 0,12 mmol). Denne resulterende blanding ble så omrørt ved 0°C i 1 time, sugefiltrert og konsentrert. Resten ble tatt opp i EtOAc/THF og vasket med vann, tørket (Na2S04) og inndampet. Den resulterende rest ble vasket med toluen, hvilket ga et gult råprodukt, som ble anvendt direkte i den følgende reaksjon uten ytterligere rensing. Natriumazid (62 mg, 0,95 mmol) ble satt til en omrørt løsning av 3,9-difluor-12-(6-0-(metylsulfonyl)-p-D-glukopyranosyl)benzofurano2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-kar-bazol-5,7-dion (54 mg, 0,09 mmol) i vannfritt DMF (3 ml) før blandingen ble oppvarmet ved 70°C i 1 time. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til omgivelsestemperatur, fortynnet med vann, tørket (Na2S04) og konsentrert i vakuum. Det gule råprodukt ble anvendt direkte for den følgende reaksjon uten ytterligere rensing. En blanding av 3,9-difluor-12-(6-azido-6-deoksy-p-D-glukopyranosyl)-benzofurano-[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion (eksempel 40) (49 mg, 0,09 mmol) og 10% palladium på trekull (50 mg) i en blanding av etanol (3 ml) og THF (1 ml) ble hydrogenert ved 1 atmosfære i 21 timer. Den resulterende blanding ble filtrert, vasket med metanol og THF, og ble konsentrert i vakuum. Det rå produkt ble kromatografert (60% CH2CI2: 20% THF og 20% av en løsning av 90% MeOH og 10% NH4OH, for å gi tittelforbindelsen (20 mg, 42%) i form av et gult, fast stoff.

IR (KBr) 1753, 1701, 1479 cm"<1>:<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) 5 8,87-8,82 (m, 1H), 8,56-8,49 (m, 1H), 8,10-7,99 (m, 2H), 7,67-7,50 (m, 2H), 6,53 (d, 0,7 H, J=9,0 Hz), 6,14 (d, 0,3H, J=9,0 Hz), 5,44-5,30 (m, 2H), 4,28-2,86 (m, 7H): HPLC: 90,4% (247 nm).

Eksempel 45

300 MHz <1>H NMR (d6-aceton) 6 11,97 (brs, 1H), 9,91 (s, 1H), 9,12 (dd, 1H), 8,88 (dd, 1H), 7,92 (dd, 1H), 7,69 (dd, 1H), 7,47-7,23 (m, 2H), 7,48 (ddd, 1H, J = 2,5, 8,9, 9,1 Hz), 7,41 (ddd, 1H, J = 2,5, 8,9, 9,1 Hz), 6,73 (s, 1H, 1'H), 4,60-3,95 (m, 6H).

Eksempel 47

Gulorange, fast stoff: 500 MHz <1>H NMR (CDCI3 med dråpe d6-DMSO) 8 10,36 (d, 1H, JH-F = 4,2 Hz), 9,98 (brs, 1H), 8,81 (dd, 1H, J= 9,5, 2,6 Hz), 8,68 (dd, 1H, J= 9,5, 2,5 Hz), 7,47 (dd, 1H), 7,30-7,24 (m, 1H), 7,15-7,04 (m, 2H), 5,84 (d,1H, J = 8,5 Hz), 5,02 (dd, 1H, JH-F = 45,2 Hz, JH-H = 10,1 Hz), 4,72 (dd, 1H, JH-F = 49,6 Hz, JH-H = 10,1 Hz), 4,03-3,82 (m, 2H), 3,71 - 3,60 (m, 2H); neg. ESI-massespektrum, m/e 524 (M-H)".

Eksempel 48

500 MHz <1>H NMR (d6-DMSO) 6 8,80-7,20 (m, 6H), 6,38 (d, 1H), 5,15-3,45 (m, 6H). Neg. ESI-massespektrum, m/e 540 (M-H)".

Ytterligere eksempler med formel l-forbindelser, som kan syntetiseres ved modifiseringer av de foregående syntetiske prosedyrer, er vist i tabell V hvor sub-stituentene er de samme som i eksempel 29 dersom ikke annet er angitt.

Eksempel 50

Gult, fast stoff, sm.p. 242-248°C dek.; <1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 5 11,55 (br m, 1H, 9,75-9,57 (2m, 1H), 9,01-8,87 (2m, 1H), 8,23-7,98 (3m, 2H), 7,57-7,34 (2m, 2H), 6,33 og 6,21 (2d, J=8,8, 9,4 Hz, 1H), 5,69-5,61 (2m, 1H), 5,44-5,17 (2m, 2H), 4,12-3,96 (m, 4H), 3,66-3,55 (2m, 2H); IR (KBr, cm"<1>) 3392, 2926, 1703, 1622, 1602, 1567, 1481, 1463, 1426, 1324, 1198, 1085, 915, 806, 763, 742; MS (-ESI, M-H") m/z 557.

Eksempel 52

Gult, fast stoff, sm.p. 248-250°C; <1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 6 11,73, 11,65 og 11,62 (3s, 1H), 9,81-9,68 (2m, 1H), 9,07-8,99 (2m, 1H), 8,27-8,00 (m, 2H), 7,61-7,50 (m, 1H), 6,38 og 6,26 (2d, J=8,8, 9,3 Hz, 1H), 5,69-5,21 (serier av m, 3H), 5,05-4,82 (m, 2H), 4,25-3,82 (m, 2H), 3,72-3,61 (m, 1H); IR (KBr, cm"<1>) 3384, 1706, 1622, 1602, 1568, 1481, 1463, 1325, 1198, 1086, 916, 806, 763, 742; MS (-ESI, M-H") m/z 541.

Eksempel 54

300 MHz <1>H NMR (CD3OD) 6 8.80 (dd, 1 H, J = 9.6, 2,3 Hz), 8,72 (dd, 1H, J = 9,9, 2,8 Hz), 7,84-7,73 (m, 2H), 7,37-7,26 (m, 2H), 6,15 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 4,34-4,27 (m, 1H), 4,14 (t, 1H, J = 9,5 Hz), 3,97 (t, 1H, J = 9,0 Hz), 3,74 (t, 1H, J = 9,0 Hz), 3,45 (dd, 1H, J = 14,8, 1,8 Hz), 3,15 (dd, 1H, J = 14-8, 3,9 Hz), 2,19 (s, 3H); Neg. ESI-massespektrum, m/e 552 (M-H).

Eksempel 56

12-[6-(Azido-6-deoksy-p-D-glukopyranosyl)-3-fluor-5H, 13H-benzo[b]tienyl-[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H)-dion

Natriumazid (216 mg, 3,30 mmol) ble i én porsjon satt til en omrørt løsning av 3-fluor-13-[6-0-(metylsulfonyl)-p-D-glukopyranosyl]-5H,13H-benzo[b]tienyl-[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-(6H-dion (0,20 g, 0,33 mmol) i vannfritt dimetylformamid (3 ml) før blandingen ble oppvarmet til 120°C i 3 timer, avkjølt til omgivelsestemperatur og konsentrert ned i vakuum. Resten ble renset ved flashkromatografi på silikagel (eluering med 40% tetrahydrofuran i heksaner), hvilket ga tittelforbindelsen (141 mg, 78%) i form av et gult, fast stoff, dekomponeringspunkt 265°C.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 6 11,51 (brs, 1H), 9,94-9,87 (2m, 1H), 9,03-8,95 (2m, 1H), 8,20-7,99 (3m, 2H), 7,67-7,63 (m, 2H), 7,53-7,49 (m, 1H), 6,37 og 6,20 (2d, J=8,9 og 9,4 Hz, 1H), 5,54-5,14 (serier av m, 3H), 4,10-3,76 (4m, 3H), 3,67-3,26 (m, 3H); IR (KBr, cm-<1>) 3332, 2103, 1702, 1481, 1461, 1431, 1372, 1324, 1283, 1230, 1211, 1178, 1079, 746; MS (-ESI, M-H") m/z 546.

Eksempel 57

Gult, fast stoff, sm.p. 268-277°C (dek.); <1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 5 11,52 (brs, 1H), 9,75-9,51 (3m, 1H), 9,00-8,88 (2m, 1H), 8,30-7,97 (3m, 2H), 7,66-7,22 (3m, 2H), 6,35-6,20 (2m, 1H), 5,86-5,56 (m, 1H), 5,42-5,35 (m, 2H), 4,28-3,89 (m, 2H), 3,72-3,56 (rn, 2H), 3,50-3,32 (m, 1H), 3,27-3,14 (m, 1H), 2,61-2,53 (4s, 3H); IR (KBr, cm"<1>) 3412, 2950, 1707, 1625, 1605, 1481, 1464, 1385, 1324, 1198, 1086, 916, 764, 742; LCMS (-ESI, M-H") m/z 685.

Eksempel 58

Gulorange, fast stoff (blanding av diastereomerer ved svovel): 500 MHz <1>H NMR (d6-DMS0; blanding av 2 diastereomerer og rotomerer) 5 8,85-8,74 (m, 2H), 8,15-7,75 (m, 2H), 7,55-7,35 (m, 2H), 6,45-6,10 (m, 1H), 5,80-5,25 (m, 3H), 4,60-3,10 (m, 6H), 2,76, 2,74, 2,58, og 2,56 (alle s, 3H); Neg. ESI-massespektrum,

m/e 568 (M-H)".

Eksempel 59

300 MHz <1>H NMR (CD3OD) 5 8,87 (dd, 1H, J=9,6, 2,6 Hz), 8,78 (dd, 1H, J=9,8, 2,6 Hz), 7,94 (dd, 1H, J=8,9, 4,4 Hz), 7,83 (dd, 1H, J=9,0, 4,1 Hz), 7,38-7,27 (m, 2H), 6,14 (d, 1H, J=9,3 Hz), 4,34-4,18 (m, 2H), 3,94 (t, 1H, J=9,2 Hz), 3,73 (t, 1H, J=8,9 Hz), 3,51-3,22 (m, 4H). Neg ESI-massespektrum, m/e 596 (M-H)".

Eksempel 60

Gult, fast stoff, sm.p. 228-232°C; <1>H NMR (500 MHz, DMS0-d6) 8 11,88 og 11,76 (2brm, 1H), 9,75-9,69 (2m, 1H), 8,73-8,62 (2m, 1H), 8,18 og 8,09 (2d, 1 = 4,8, 4,7 Hz, 1H), 7,99-7,92 (2m, 1H), 7,65-7,35 (m, 3H), 6,28 og 6,07 (2d, J=8,9, 9,2 Hz, 1H), 5,29-4,97 (3m, 3H), 4,10-3,85 (3m, 2H), 3,60-3,48 (m, 2H), 2,97-2,70 (3m, 2H), 2,58 (m, 3H), 1,56-1,44 (m, 5H), 1,34 (m, 2H); IR (KBr, cm"<1>) 3406, 2934, 1705, 1622, 1481, 1461, 1430, 1374, 1321, 1284, 1179, 1081, 1038, 758, 747; MS (+ESI, M+H<+>) m/z 590.

Eksempel 61

Gult, fast stoff, sm.p. 228-232°C; <1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 11,88 og 11,76 (2br m, 1H), 9,75-9,69 (2m, 1H), 8,73-8,62 (2m, 1H), 8,18 og 8,09 (2d, J= 4,8, 4,7 Hz, 1H), 7,99-7,92 (2m, 1H), 7,65-7,35 (m, 3H), 6,28 og 6,07 (2d, J=8,9, 9.2 Hz, 1H), 5,29-4,97 (3m, 3H), 4,10-3,85 (3m, 2H), 3,60-3,48 (m, 2H), 2,97-2,70 (3m, 2H), 2,58 (m, 3H), 1,56-1,44 (m, 5H), 1,34 (m, 2H); IR (KBr, cm"<1>) 3406, 2934, 1705, 1622, 1481, 1461, 1430, 1374, 1321, 1284, 1179, 1081, 1038, 758, 747; MS (+ESI, M+H<+>) m/z 590.

Eksempel 62

Gult, fast stoff, sm.p. 280-282°C; <1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 11,64 (br s, 1H), 9,83-9,68 (2m, 1H), 9,08-8,97 (2m, 1H), 8,45-7,10 (serier av m, 8H), 6,37 og 6,25 (2d, J=8,8, 9,1 Hz, 1H), 5,74-5,68 (2m, 1H), 5,50-5,21 (2m, 2H), 4,20-4,04 (2m, 4H), 3,71-3,60 (m, 2H); IR (KBr, cm"<1>) 3369, 2918, 1752, 1712, 1601, 1580, 1558, 1482, 1456, 1413, 1319, 1256, 1197, 1094, 1020, 914, 805, 762; MS (-ESI, M-H") m/z 632.

Eksempel 63

Gult, fast stoff, dekomponeringspunkt 248°C; <1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 11,65 (brs, 1H), 9,78-9,73 (2m, 1H), 9,07-8,97 (2rn, 1H), 8,30-7,95 (serier av m, 3H), 7,61-7,42 (2m, 3H), 7,15-7,06 (m, 2H), 6,37 og 6,25 (2d, J=8,8, 9.3 Hz, 1H), 5,81-5,22 (serier av m, 3H), 4,32-4,12 (3m, 3H), 3,77-3,63 (m, 3H); IR (KBr, cm"<1>) 3401, 2963, 1752, 1707, 1475, 1465, 1424, 1261, 1198, 1092, 1021, 801; LCMS (+ESI, M+H<+>) m/z 650.

Eksempel 64

Oppnådd 15,1 mg (49%) gult, fast stoff, sm.p. 254-265°C (dek.); <1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6)5 11,61 (brs, 1H), 9,76-9,66 (2m, 1H), 9,01-8,92 (2m, 1H), 8,31-7,96 (3m, 2H), 7,78 (br s, 1H), 7,58-7,45 (m, 2H), 6,30 og 6,19 (2d, J=8,9, 9,4 Hz, 1H), 5,99 (brs, 1H), 5,50-5,16 (serierav m, 3H), 4,12-3,92 (3m, 3H), 3,61-3,39 (m, 3H); IR (KBr, cm"<1>) 3392, 2927, 1706, 1661, 1604, 1567, 1532, 1480, 1463, 1384, 1324, 1085, 916, 826, 807, 764, 742; MS (-ESI, M-H") m/z 649.

Eksempel 65

Gult, fast stoff, sm.p. 244-246°C; <1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 11,63 (br s, 1H), 9,75-9,67 (2m, 1H), 9,00-8,94 (2m, 1H), 8,28-8,20 (2m, 1H), 8,11-7,97 (2m, 1H), 7,57-7,50 (m, 2H), 6,30 og 6,16 (2d, J=8,8, 9,3 Hz, 1H), 5,63-5,19 (serier av m, 3H), 4,05-4,02 (m, 1H), 3,61-3,07 (m, 6H); IR (KBr, cm"<1>) 3412, 1762, 1703, 1602, 1482, 1464, 1425, 1315, 1259, 1199, 1082, 916, 807, 763, 742; MS (-ESI, M-H") m/z 637.

Eksempel 66

Oppnådd 4,7 mg (55%) gult, fast stoff, sm.p. 252-254X (dek.); <1>H NMR (500 MHz, DMSOd6) 8 11,60 (brs, 1H), 9,83-9,71 (2m, 1H), 9,07-9,01 (2m, 1H), 8,30-8,07 (3m, 2H), 7,65-7,56 (2m, 2H), 6,43-6,30 (2m, 1H), 5,73-5,71 (m, 1H), 5,55-5,20 (2m, 2H), 4,21-4,07 (m, 4H), 3,81-3,52 (2m, 4H); IR (KBr, cm"<1>) 3384, 2926, 1706, 1622, 1602, 1568, 1482, 1464, 1426, 1384, 1309, 1259, 1230, 1081, 916, 805, 763, 742; LCMS (-ESI, M-H") m/z 653.

Eksempel 67

Opppnådd 10,5 mg (26%) gult, fast stoff, dekomponeringspunkt 290°C; <1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 12,34 og 12,23 (2s, 1H), 11,58 (s, 1H), 9,75-9,63 (2m, 1H), 9,018,92 (2m, 1H), 8,23-8,15 (m, 1H), 8,17-7,96 (m, 1H), 7,53-7,46 (m, 2H), 7,11-6,85 (serier av m, 2H), 6,32 og 6,15 (2d, J=8,9, 9,3 Hz, 1H), 5,85-5,14 (serier av m, 3H), 4,11-3,98 (m, 2H), 3,71-3,49 (m, 4H); IR (KBr, cm"<1>) 3242, 2926, 1751, 1705, 1602, 1481, 1463, 1426, 1325, 1198, 1086, 915, 763, 742; MS (-ESI, M-H") m/z 621.

Eksempel 71

2,3,9,10-Tetrafluor-12-(4-deoksy-4,4-difluor-(3-D-glukopyranosyl)indolo-[2,3-a]pyrrolo-[3,4-c]karbazol-5,7-d ion

Til en løsning av Dess-Martin-perjodinan (0,470 g, 1,11 rnmol) i 30 ml diklormetan ble det dråpevis tilsatt en løsning av 6-(4-tert-butylbenzyl)-2,3,9,10-tetrafluor-12-(2,3,6-tri-0-benzyl-p-D-glukopyranosyl)indolo[2,3-a][pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion (0.540 g, 0,55 mmol) i 20 ml diklormetan, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur under Ar i 1 time. Ytterligere 0,470 g (1,11 mmol) Dess-Martin-reagens ble tilsatt og omrøring ble fortsatt i 2 timer. Den resulterende blanding ble fortynnet med diklormetan, vasket (mettet NaHC03-Na2S203, mettet NaHC03, saltløsning), tørket (Na2S04) og inndampet. Resten ble kromatografert (Si02/heksan-etylacetat, 2:1), hvilket ga ketonet (0,360 g, 67%) i form av et mør-kegult, fast stoff. Til en porsjon av ketonet (0,067 g, 0,07 mmol) i 2 ml diklormetan ble det tilsatt DAST (0,036 ml, 0,28 mmol), og blandingen ble omrørt ved romtemperatur under Ar i 18 timer. Blandingen ble så fordelt med diklormetan/mettet NaHC03 og den organiske fase ble fraskilt, vasket (saltløsning), tørket (Na2S04) og inndampet, hvilket ga en harpiks. Flashkromatografi (SiOyheksan-etylacetat, 3:1) ga 6-(4-tert-butylbenzyl)-2,3,9,10-tetrafluor-12-(4-deoksy-4,4-difluor-2,3,6-tri-0-benzyl-p-D-glukopyranosyl)-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion (0,054 g, 54%) i form av et gult, fast stoff: <1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) 8 10.21 (s, 1H), 9,14 (dd, J=10,6, 8,4 Hz, 1H), 9,02 (dd, J=10,7, 8,2 Hz, 1H), 7,53 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,40 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,34 (m, 5H), 7,20-7,12 (m, 6H), 6,97 (dd, J=10,0, 6,6 Hz, 1H), 6,80 (t, J=7,4 Hz, 1H), 6,72 (t, J=7,6 Hz, 2H), 6,13 (d, J=7,2 Hz, 2H), 5,82 (d, J=8,6 Hz, 1H), 4,97 (m, 3H), 4,80 (d, J=11,1 Hz, 1H), 4,65 og 4,61 (ab q, J=12,0 Hz, 2H), 4,24-4,01 (m, 6H), 3,37 (d, J=10,6 Hz, 1H), 1,28 (s, 9H).

Dette materiale ble avbeskyttet på vanlig måte (i) vandig NaOH, THF-EtOH; konsentrert HCI; ii) NH4OAc, D; iii) H2, Pd(OH)2-C, CHCI3-MeOH), hvilket ga tittelforbindelsen (24 % samlet utbytte) i form av et gult, fast stoff: IR (KBr) 3410, 1747, 1704, 1596, 1478, 1323 cm"<1>; <1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) 8 11,39 (s,1H), 11,34 (s, 1H), 8,93 (m, 2H), 8,03 (dd, J=11,8, 6,8 Hz, 1H), 7,62 (dd, J=10,7, 6,9 Hz, 1H), 6,54 (d, J=9,2 Hz, 1H), 6,08 (m, 2H), 5,48 (d, J=5,9 Hz, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,22 (m, 1H), 4,06 (m, 2H), 3,66 (m, 1H), MS (ESI) m/e 578 (M-H). HPLC: 91,1% (320 nm).

Eksempel 75

Gult, faststoff: 500 MHz <1>H NMR (d6-DMS0) 5 11,85 (s, 1H), 11,18 (s, 1H), 8,92 (dd, 1H), 8,81 (dd, 1H), 8,06 (dd, 1H), 7,78 (dd, 1H), 7,49-7,39 (m, 2H), 6,28 (d, 1H, 1'H, J=8,8 Hz), 5,85 (d, 1H, 3'0H), 5,45 (d, 1H, 2'0H), 4,25-3,89 (m, 3H, 2'H, 3'H, 5'H), 3,68 (t,1H, 4'H),1,42 (d, 3H, 6'H); Negativt ESI-massespektrum, m/e 531 (M-H)". IR (KBr) 2112 cm"<1>.

Eksempel 79

Gult, fast stoff: 500 MHz <1>H NMR (d6-DMSO) 5 12,72 (s, 1H), 11,18 (brs, 1H), 8,92 (dd, 1H), 8,80 (dd, 1H), 8,21 (brs, 2H), 8,07 (dd, 1H), 7,94 (dd, 1H), 7,48 -7,39 (m, 2H), 6,60 (d, 1H J = 7,8 Hz, 1'H), 5,98 (brs, 1H, 3'OH), 5,48 (brs, 1H, 2'0H), 4,55-4,50 (m, 1H, 5'H), 4,07-4,02 (m, 2H, 2'H, 3'H), 3,19 (t, 1H, 4'H), 1,43 (d, 3H, 6'CH3); neg. ESI-massespektrum 505 (M-H)'.

Eksempel 87

Gult, fast stoff: 300 MHz <1>H NMR (CD3OD) 5 8,84 (dd, 1 H), 8,74 (dd, 1 H), 7,77 (dd, 1H), 7,35-7,24 (m, 2H), 6,14 (d, 1H, J=9,2 Hz), 4,23-3,95 (m, 4H), 3,90 (t, 1H, J=9,2 Hz), 3,74 (t, 1H, J=9,0 Hz); IR (KBr) 2114 cm"<1>; Neg. ESI-massespektrum, m/e 547 (M-H)".

Eksempel 88

Gult, fast stoff 500 MHz <1>H NMR (CD3OD) 5 8,89 (dd, 1H), 8,77 (dd, 1H), 7,81 (dd, 1H), 7,63 (dd, 1H), 7,33-7,26 (m, 2H), 6,15 (d, 1H, J=8,9 Hz), 4,2-3,88 (m, 3 H), 3,73 (t, 1H, J=8,9 Hz), 3,59 (dd, 1H, J=9,6, 8,9 Hz), 3,54 (t, 1H, J=9,6 Hz); Neg. ESI-massespektrum, m/e 521 (M-H)".

Eksempel 89

Gult, fast stoff: IR (KBr) 3435, 3345, 1740, 1713, 1477, 1320 cm"<1>; <1>H NMR (THF-de, 400 MHz) 5 11,50 (s, 1H), 10,12 (s, 1H), 9,08 (dd, J=11,0, 8,6 Hz,1H), 8,99 (dd, J=11,0, 8,4 Hz, 1H), 7,71 (dd, J=11,5, 6,6 Hz, 1H), 7,63 (dd, J=10,3, 6,7 Hz, 1H), 6,11 (d, J=8,9 Hz, 1H), 5,30 (d, J=4,5 Hz, 1H), 5,01 (d, J=4,1 Hz, 1H), 4,62 (d, J=5,1 Hz, 1H), 4,56 (d, J=9,7 Hz, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,97-3,91 (m, 1H), 3,78-3,54 (m, 2H).

Eksempel 90

3,9-Difluor-12,13-dihydro-13-(2-fluor-p-D-glukopyranosyl)-5(H)indolo-[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion

Det ble anvendt Mitsunobu-prosedyren beskrevet tidligere i eksempel 22, med 250 mg (0,465 mmol) av produktet fra eksempel 6 og 210 mg (0,464 mmol) 2-fluor-3,4,6-tri-0-benzyl-D-glukopyranose (fremstilt ved å behandle kommersielt tilgjengelig tri-O-benzyl-D-glukal (1,5 g, 3,6 mmol) med xenon-difluorid (1,0 g, 5,91 rnmol) i acetonitril (50 ml) og vann (5 ml) i 3 timer ved romtemperatur). Typisk bearbeidelse fulgt av flashkromatografi på silikagel med 5% etylacetat i metylenklorid ga 380 mg (23,4%) av den rene 2-fluor-3,4,6-tri-0-benzyl-D-gluko-pyranose. Denne prosedyre var en modifikasjon av en publisert metode: Se T. Hayashi, B.W. Murray, R. Wang, og C.-H. Wong Bioorganic and Medicinal Chemistr<y,> 1997, 5, 497-500). Etter rensing ved flashkromatografi under anvendelse av 20-60 % metylenklorid i heksan ble det oppnådd 120 mg (28%) av relativt rent glykosylert produkt: Fjerning av benzyl-beskyttelsesgruppene ved å anvende overføringshydogeneringsbetingelser (95% EtOH/cykloheksen/20% Pd(OH)2/C, tilbakeløp i 6-48 timer), fulgt av fjerning av 4-t-bytylbenzyl-beskyttelsesgruppen under basiske hydrolysebetingelser (4,45M KOH, EtOH/tilbakeløp; konsentrert HCI; NH4OAc/EtOH/varme i 8-48 timer) ga etter rensing ved flashkromatografi på silikagel med aceton : metylenklorid : etylacetat, fulgt av ytterligere rensing på Sephadex LH-20 i metanol, 15 mg (39% for de to avblokkerings-trinnene) av den rene tittelforbindelse i form av et gulorange, fast stoff.

300 MHz <1>H NMR (d6-DMSO) 5 11,68 (brs, 1H), 11,28, (brs, 1H), 8,88 (dd, 1H), 8,78 (dd, 1H), 8,10 (dd, 1H), 7,68 (dd, 1 H), 7,60-7,43 (m, 2H), 6,77 (dd, 1H, J = 8,8, 2,5 Hz), 6,23 (brs, 1H), 5,77 (brs, 1H), 5,62 (brs, 1H), 4,32 (dt, 1H, J = 50,7, 9,0 Hz), 4,15-3,80 (m, 5H); neg. ESI-massespektrum, m/e 524 (M-H)".

Eksempel 91

3,9-Difluor-12-((3-D-glukopyranosyl)benzofurano[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karba-zol-5,7-dion

Gult, fast stoff. IR (KBr) 1757, 1706, 1483 cm'<1>.<1>H NMR (DMS0-d6, 400 MHz) 5 11,45 (brs, 1H), 8,84-8,79 (m, 1H), 8,53-8,46 (m, 1H), 8,08-7,81 (m, 1H), 7,64-7,50 (m, 2H), 6,49 (d, 0,7H, J=8,9 Hz), 6,07 (d, 0,3H, J=8,9 Hz), 5,38-5,16 (m, 3H), 4,75-4,21 (m, 1H), 3,93-3,49 (m, 6H). HPLC: 97,5% (305 nm).

Eksempel 92

3-Brom-9-fluor-12-(p-D-glukopyranosyl)benzofurano[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion

Gult, fast stoff. IR (KBr) 1775, 1708 cm'<1>. <1>H NMR (DMS0-d6, 400 MHz) 6 11,69 og 11,49 (2 brs, 1H), 8,97 (d, 0,3H, J=2,0 Hz), 8,91 (d, 0,7H, J=2,0 Hz), 8,85-8,79 (m, 1H), 8,08-7,77 (m, 3H), 7,59-7,49 (m, 1H), 6,47 (d, 0,7H, J=9,0 Hz), 6,07 (d, 0,3H, J=9,0 Hz), 5,37-5,21 (m, 3H), 4,7-4,20 (m, 1H), 3,92-3,54 (m, 6H). HPLC: 92,5% (260 nm).

Eksempel 93

3-Cyano-9-fluor-12-(P-D-glukopyranosyl)benzofurano[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion

3-Brom-9-fluor-12-(2,3,4,6-tetra-0-benzyl-p-D-glukopyranosyl)benzofura-no[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion (189 mg, 0,2 mmol) ble kombinert med sinkcyanid (14 mg, 0,6 mmol) og tetrakis-(trifenylfosfin)-palladium(0) (12 mg, 0,01 mmol) i deoksygenert DMF (2 ml), og den gule oppslemming ble oppvarmet på

80°C under nitrogen i 16 timer. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur, fortynnet med EtOAc, vasket med vann og saltløsning, tørket (Na2S04) og inndampet. Den resulterende rest ble kromatografert (hex:EtOAc, 7:3), hvilket ga 3-cyano-9-fluor-12-(2,3,4,6-tetra-0-benzyl-p-D-glukopyranosyl)benzofurano[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion (160 mg, 90%) i form av et gult, fast stoff: IR (KBr) 2235 cm"<1>. Til en løsning av 3-cyano-9-fluor-12-(2,3,4,6-tetra-0-benzyl-p-D-glukopyranosyl)-benzofurano[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion (58 mg, 0,06 mmol) i 5 ml tørr CH2CI2 ble det dråpevis tilsatt bortriklorid (0,39 ml, 1,0 M løsning i CH2CI2) ved

-78°C. Den resulterende løsning ble varmet opp til 0°C og omrørt i 2 timer og kjølt

ned igjen til -78°C før tilsetning av metanol (5 ml). Denne resulterende blanding ble varmet opp til omgivelsestemperatur. Løsemidlet ble fjernet i vakuum og den gjenværende rest ble tatt opp i EtOAc/THF og vasket med 10% vandig HCI og saltløsning før tørking (Na2S04) og konsentrering av løsemiddel. Rensing av resten ved preparativ TLC (THF:hex, 9:1) ga tittelforbindelsen (18 mg, 53%) i form av et gult, fast stoff.

IR (KBr) 3417, 2220, 1757, 1708, 1635, 1478 cm"<1>: <1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) 8 9,05 (s, 0,3H), 8,90 (s, 0,7H), 8,70-8,67 (m, 1H), 8,16-7,95 (m, 3H), 7,48-7,45 (m, 1H), 6,42 (d, 0,7H, J=8,3 Hz), 6,11 (d, 0,3H, J=8,3 Hz), 5,45-5,37 (m, 3H), 4,17-3,50 (7H): HPLC: 91,4% (260 nm).

Eksempel 94

3-Jod-9-fluor-12-(p-D-glukopyranosyl)benzofurano[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion

3-Brom-9-fluor-12-(2,3,4,6-tetra-0-benzyl-p-D-glukopyranosyl)benzofura-no-[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion (189 mg, 0,2 mmol) ble kombinert med bis(tributyltinn) (0,2 ml, 0,4 mmol) og tetrakis-(trifenylfosfin)-palladium(0) (23 mg, 0,02 mmol) i deoksygenert NMP (2 ml), og den gule oppslemming ble oppvarmet på 90°C under nitrogen i 18 timer. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur, fortynnet med EtOAc, vasket med vann og saltløsning, tørket (Na2S04) og inndampet. Den resulterende rest ble kromatografert (heks:EtOAc, 4:1), hvilket ga 3-tri-butylstannyl-9-fluor-12-(2,3,4,6-tetra-0-benzyl-p-D-glukopyranosyl)benzofurano-[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion (150 mg, 90%) i form av en gul olje. Til en løsning av denne gule olje i 5 ml CHCI3 ble det tilsatt b (33 mg, 0,13 mmol). og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 0,5 timer. Den resulterende blanding ble behandlet med mettet NaHS03, vasket med vann, saltløsning, tørket og inndampet. Denne urene rest (118 mg, 91%) ble behandlet med bortriklorid (0,71 ml, 1,0 M løsning i CH2CI2) som tidligere beskrevet, hvilket ga tittelforbindelsen i form av et gult, fast stoff.

IR (KBr) 3140, 3040, 1753, 1703, 1405 cm"<1>: <1>H NMR (DMSO d6 og D20-utbytte, 400 MHz) 6 9,05 (d, 0,3H, J=1,7 Hz), 8,89 (d, 0,7H, J=1,7 Hz), 8,67 (dd, 0,3H, J=9,5, 2,7 Hz), 8,62 (dd, 0,7H, J=9,5, 2,7 Hz), 7,98-7,64 (m, 3H), 7,47-7,41

(m, 1H), 6,42 (d, 0,7H, J=9,0 Hz), 6,00 (d, 0,3H, J=9,0 Hz), 4,26-3,50 (m, 6H): HPLC: 94,9% (320 nm).

Eksempel 95

6-(4-tert-Butylbenzyl)-2,3,9,10-tetrafluor-12-(2,3,4,6-tetra-O-benzyl-p-D-glukopyranosyl)indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion

Til en suspensjon av 6-(4-tert-butylbenzyl)-2,3,9,10-tetrafluorindol[2,3-a]-pyrrolo[3,4-c]-karbåzol-5,7-dion (1,131 g, 2,08 mmol) og vannfritt Na2S04 (5,0 g) i 25 ml tørt THF ble det tilsatt fint pulverisert KOH (0,932 g, 16,6 mmol). Den resulterende blanding ble kraftig omrørt ved romtemperatur under Ar i 1,5 timer. Til den resulterende mørke, purpurfargede blanding ble det tilsatt en løsning av 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-a-D-glukopyranosylklorid (1,450 g, 2,60 mmol) i 10 ml tørt THF, og omrøring ble fortsatt i 24 timer. Ytterligere 0,200 g (0,36 mmol) av klor-sukkeret ble tilsatt og omrøring ble fortsatt i ytterligere 24 timer. Blandingen ble så fortynnet med etylacetat og undertrykket med 1 N HCI. Den organiske fase ble separert fra, vasket (saltløsning), tørket (Na2S04) og inndampet, hvilket ga et gult skum. Flashkromatografi (pre-adsorbert på Si02i eluert med heksan/etylacetat, 5:1) ga produktet i form av et sterkt gult glass. Dette glass ble tatt opp i diklormetan, og løsningen ble fortynnet med metanol. Konsentrasjon av denne løsning på rotasjonsfordamperen, fulgt av tørking i vakuum, ga tittelforbindelsen (1,240 g, 54%) i form av et sterkt gult, fast stoff: IR (KBr) 3307, 1748, 1694, 1593, 1473, 1072 cm"<1>; <1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) 6 10,58 (s, 1H), 9,18 (dd, J=10,7, 8,2 Hz, 1H), 9,07 (dd, =10,8, 8,2 Hz, 1H), 7,53 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,41 (m, 6H), 7,28 (m, 8H), 7,22 (m, 4H), 6,94 (dd, J=10,1, 6,5 Hz, 1H), 6,88 (t, J=7,3 Hz, 1H), 6,81 (t, J=7,3 Hz, 2H), 6,16 (d, J=7,2 Hz, 2H), 5,75 (d, J=8,4 Hz, 1H), 5,03 (d, J=10,8 Hz, 1H), 4,96 (m, 2H), 4,90 (m, 2H), 4,78 (d, J=10,8 Hz, 1H), 4,64 (d, J=12,2 Hz, 1H), 4,58 (d, J=12,2 Hz, 1H), 4,29 (t, J=10,4 Hz, 1H), 4,07 (d, J=10,1 Hz, 1H), 4,00-3,85 (m, 5H), 3,15 (d, J=9,2 Hz, 1H), 1,28 (s, 9H). Anal. beregnet for CesHssF^sOr: C, 73,22; H, 5,20; N, 3,94; funnet: C, 72,92; H, 5,58: N, 4,02.

Eksempel 96

2,3,9,10-Tetrafluor-12-(p-D-glukopyranosyl)indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion

IR (KBr) 3432, 3310, 1743, 1702, 1475, 1331 cm"<1>. <1>H NMR (DMSO-d6,400 MHz) 8 11,86 (s, 1H), 11,31 (s, 1H), 8,99 (dd, J=11,1, 8,5 Hz, 1H), 8,92 (dd, J= 11.2, 8,3 Hz, 1H), 8,18 (dd, J=11,7, 6,9 Hz, 1H), 7,62 (dd, J=11,0, 7,0 Hz, 1H), 6,26 (d, J=9,0 Hz, 1H), 6,19 (t, J=4,2 Hz, 1H), 5,43 (d, J=4,8 Hz, 1H), 5,17 (d, J=5,7 Hz, 1H), 4,99 (d, J=5,6 Hz, 1H), 4,10 (dd, J=10,7, 4,2 Hz, 1H), 3,92 (m, 2H), 3,82 (m, 1H), 3,57 (m, 1H), 3,41 (m, 1H), HPLC: 97,1% (320 nm).

Eksempel 97

2,3,9,10-Tetrafluor-12-(6-fluor-6-deoksy-p-D-glukopyranosyl)indolo[2,3-a]pyr-rolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion

IR (KBr) 3440, 3365, 1750, 1705, 1478 cm"<1>. <1>H NMR (DMSO-d6,400 MHz) 8 12,04 (s, 0.5H), 11,31 (s, 0,5H), 11,27 (s, 0,5H), 10,68 (s, 0,5H), 9,07 (dd, J= 11.3, 8,8 Hz, 0,5H), 8,95 (dd, J=19,4, 9,2 Hz, 1H), 8,87 (dd, J=10,9, 8,9 Hz, 0,5H), 8,17 (dd, J=11,9, 6,9 Hz, 0,5H), 7,91 (dd, J=11,5, 7,1 Hz, 0,5H), 7,71 (dd, J=10,7, 6,9 Hz, 0,5H), 7,50 (dd, J=9,6, 6,9 Hz, 0,5H), 6,34 (d, J=8,8 Hz, 0,5H), 6,32 (d, J=7,9 Hz, 0,5H), 5,98-4,73 (m, 5H), 4,22-3,46 (m, 4H). HPLC: 98,2%

(320 mn).

Eksempel 98

6-(4-tert-Butylbenzyl)-2,3,9,10-tetrafluor-12-(2,3,6-tri-O-benzyl-p-D-galaktopyrano-syl)indolo[2,3-a]-pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion

En løsning av 6-(4-tert-butylbenzyl)-2,3,9,10-tetrafluor-12-(2,3,6-tri-O-benzyl-4-0-(4-metoksybenzyl)-p-D-galaktopyranosyl)indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karba-zol-5,7-dion (0,135 g, 0,12 mmol) i 10 ml 10% TFA-CH2CI2 ble omrørt ved romtemperatur under Ar i 20 minutter. Den resulterende blanding ble fortynnet med diklormetanan, hvoretter den ble vasket (mettet NaHCOa), tørket (MgS04) og inndampet. Den resulterende rest ble kromatografert (Si02/etylacetat-heksan, 1:2), hvilket ga tittelforbindelsen (0,107 g, 90%) i form av et gult, fast stoff.

<1>H NMR DMSO-d6,400 MHz) 8 12,21 (s, 1H), 9,00 (dd, J=11,1, 8,4 Hz, 1H), 8,90 (dd, J=11,2, 8,4 Hz, 1H), 8,11 (dd, J=12,0, 6,9 Hz, 1H), 7,61-7,18 (m, 15H),

6,71 (t, J=7,4 Hz, 1H), 6,61 (t, J=7,7 Hz, 2H), 6,39 (d, J=9,2 Hz, 1H), 6,18 (d,10 J=7,2 Hz, 2H), 4,89 (s, 2H), 4,87 (d, J=13,9 Hz, 1H), 4,71 (d, J=12,1 Hz, 1H), 4,58 (s, 1H), 4,49 (s, 2H), 4,33 (m, 1H), 4,20 (m, 2H), 4,00-3,66 (m, 4H), 3,58 (d, J= 11,2 Hz, 1H), 1,26 (s, 9H).

Eksempel 99

6-(4-tert-Butylbenzyl)-2,3,9,10-tetrafluor-12-(2,3,6-tri-O-benzyl-4-deoksy-|3-D-ga-laktopyranosyl)indolo[2,3-a]-pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion

Til en løsning av 6-(4-tert-butylbenzyl)-2,3,9,10-tetrafluor-12-(2,3,6-tri-O-benzyl-p-D-galaktopyranosyl)indolo[2,3-a]-pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion (0,402 g, 0,41 mmol) i 10 ml acetonitril ble det tilsatt DMAP (0,100 g, 0,82 mmol), fulgt av fenylklortionoformiat (0,085 g, 0,49 mmol), og blandingen ble oppvarmet ved til-bakeløp under Ar i 19 timer. Ytterligere 0,043 g (0,25 mmol) fenylklortionoformiat og 0,030 g (0,25 mmol) DMAP ble så tilsatt, og blandingen ble oppvarmet på til-bakeløp i 19 timer. Den avkjølte blanding ble fordelt med etylacetat og mettet NaHC03, og den organiske fase ble vasket, tørket og inndampet. Resten ble flashkromatografert (SiCVetylacetat-heksan, 1:3), hvilket ga tionokarbonatet (0,320 g, 0,29 mmol, 70%) i form av et fast stoff. Dette materiale ble oppløst i 10 ml toluen, løsningen ble renset med en strøm av Ar-bobler i 15 minutter og så ble AIBN (0,010 g, 0,06 mmol), og tributyltinn-hydrid (0,126 g, 0,43 mmol) tilsatt. Den resulterende løsning ble oppvarmet på tilbakeløp under Ar i 18 timer. Ytterligere 0,126 g tributyltinn-hydrid og 0,010 g AIBN ble tilsatt, og tilbakeløpskoking ble fortsatt i 4 timer. Den avkjølte blanding ble inndampet og resten ble kromatografert (Si02/etylacetat-heksan, 1:2), hvilket ga tittelforbindelsen (0,215 g, 78%) i form av et gult, fast stoff: IR cm"<1>; <1>H NMR (CDC13,400 MHz) 5 10,69 (s,1H, 9,15 (dd, J=10,7, 8,4 Hz, 1H, 9,06 (dd, J=10,7, 8,3 Hz, 1H), 7,53-7,24 (m, 15H), 6,98 (dd, J=10,1, 6,6 Hz, 1H), 6,83 (m, 1H), 6,78 (m, 2H), 6,18 (d, J=7,0 Hz, 2H), 5,68 (d, J=8,9 Hz, 1H), 4,95-4,68 (m, 5H), 4,19-3,75 (m, 7H), 3,30 (d, J=10,5 Hz, 1H), 2,58 (m, 1H), 2,35 (m, 1H), 1,26 (s, 9H).

Eksempel 100

2,3,9,10-Tetrafluor-12-(4-deoksy-p-D-glukopyranosyl)indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion

IR (KBr) 3440,1745,1710,1474 cm"<1>. <1>H NMR DMSO-d6,400 MHz) 5 11,89 (s, 1H), 11,31 (s, 1H), 8,99 (dd, J=9,8, 8,9 Hz, 1H), 8,92 (dd, J=10,3, 9,0 Hz, 1H), 8,14 (dd, j=11,7, 6,5 Hz, 1H), 7,64 (dd, J=10,5, 6,9 Hz, 1H), 6,21 (t, J=4,5 Hz, 1H), 6,18 (d, J=9,2 Hz, 1H), 5,07 (d, J=5,6 Hz, 1H), 4,96 (d, J=5,4 Hz, 1H), 4,28 (d, J=12,1 Hz, 1H), 3,90-3,75 (m, 3H), 2,27 (m, 1H), 2,01 (m, 1H). HPLC: 96,7%

(320 nm).

Eksempel 101

2,3,9,10-Tetrafluor-12-(2,3,4-tri-0-benzyl-p-D-glukopyranosyl)indolo[2,3-a]-pyrro-lo[3,4-c]karbazol-5,7-dion

En løsning av 2,3,9,10-tetrafluor-12-(2,3,4-tri-O-benzyl-6-0-(4-metoksybenzyl)-p-D-glukopyranosyl)indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion (0,410 g, 0,43 mmol) i 10 ml 10% TFA-CH2CI2 ble omrørt ved romtemperatur under Ar i 15 minutter. Den resulterende blanding ble fortynnet med etylacetat (50 ml), og deretter ble den vasket (1M, NaHC03, 2 x 50 ml; H20, 2 x 50 ml; saltløsning, 50 ml), tørket (MgS04) og inndampet. Den resulterende rest ble kromatografert (Si02/2-26% etylacetat-heksan), hvilket ga tittelforbindelsen (0,346 g, 97%) i form av et gult, fast stoff.

IR (CH2CI2) 3333, 1753, 1700, 1478, 1093 cm"<1>; <1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) 5 11,76 (s, 1H, 11,33 (s, 1H), 8,99 (dd, J=10,8, 8,5 Hz, 1H), 8,93 (dd, J= 10,9, 8,5 Hz, 1H), 8,14 (dd, J=11,8, 6,8 Hz, 1H), 7,66 (dd, J=10,7, 6,9 Hz, 1H),

7,40 (m, 5H), 7,26 (m, 5H), 6,98 (t, J=7,4 Hz, 1H), 6,83 (t, J=7,6 Hz, 2H), 6,55 (d, J=8,9 Hz, 1H), 6,44 (m, 1H), 6,10 (d, J=7,6 Hz, 2H), 4,96 (d, J=11,1 Hz, 1H), 4,92 (d, J=11,0 Hz, 1H), 4,82 (m, 2H), 4,23 (t, J=9,4 Hz, 1H), 4,20-4,06 (m, 3H), 3,98-3,95 (m, 2H), 3,66 (t, J=9,0 Hz, 1H), 2,94 (d, J=10,6 Hz, 1H); HPLC: 98,9% (320 nm). Anal. beregnet for C47H35F4N3O7: C, 68,03; H, 4,25; N, 5,07. Funnet: C, 68,00; H,4,72; N, 4,79.

Eksempel 102

2,3,9,10-Tetrafluor-12-((2,3,4-tri-O-benzyl-p-D-glukopyranosid)uronat)indolo-[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion

Til en løsning av 2,3,9,10-tetrafluor-12-(2,3,4-tri-0-benzyl-p-D-glukopy-ranosyl)-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion (0,125 g, 0,15 mmol) i 12 ml tørt DMF ble det tilsatt pyridin-dikromat (PDC) (0,282 g, 0.75 mmol), og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 4 timer. Ytterligere 0,282 g (0,75 mmol) PDC ble så tilsatt, og omrøring ble fortsatt i 16 timer. En ytterligere porsjon PDC (0,282 g, 0,75 mmol) ble tilsatt, og dette ble gjentatt etter 24 timer. Det ble tilsatt tilsam-men 1,128 g (3,0 mmol) PDC, og reaksjonen ble kjørt i 4 dager. Den resulterende blanding ble avkjølt ved 5°C, behandlet med 10 ml mettet NaHS03 og så fortynnet med vann (25 ml). Denne blanding ble ekstrahert med etylacetat/THF (1:1, 4 x 25 ml), og det kombinerte ekstrakt ble vasket (2 x 25 ml mettet NaHS03, 25 ml saltløsning), tørket (MgS04) og inndampet. Den resulterende rest ble kromatografert (SiO2/0-20% MeOH-CH2CI2), hvilket ga tittelforbindelsen (0,069 g, 55%) i form av et gult, fast stoff.

IR (KBr) 3412, 3260, 1746, 1710, 1597, 1477, 1320 cm"<1>; <1>H NMR (DMSO-de, 400 MHz) 5 11,21 (s, 1H), 9,02 (dd, J=10,8, 8,8 Hz, 1H), 8,57 (brs, 1H), 8,00 (m, 1H), 7,85 (m, 1H), 7,45 (d, J=7,0 Hz, 2H), 7,33 (m, 3H), 7,19 (s, 5H), 7,00 (t, J=7,4 Hz, 1H), 6,86 (t, J=7,5 Hz, 2H), 6,38 (d, J=7,2 Hz, 1H), 6,07 (d, J=7,3 Hz, 2H), 4,93 (d, J=10,8 Hz, 1H), 4,77 (d, J=11,2 Hz, 1H), 4,73 (d, J=10,8 Hz, 1H), 4,64 (d, J=11,2 Hz, 1H), 4,29 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,04 (m, 1H), 3,89 (m, 2H), 3,35 (m, 1H), 2,82 (m, 1H).

Eksempel 103

2,3,9,10-Tetrafluor-12-[(p-D-glukopyranosid)uronsyre]indolo[2,3-a]pyrrolo-[3,4-c]-karbazol-5,7-dion

En blanding av 2,3,9,10-tetrafluor-12-[(2,3,4-tri-0-benzyl-p-D-glukopyrano-sid)-uronat]indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion (0,030 g, 0,035 mmol) og 20% palladiumhydroksyd på trekull (0,030 g) i en blanding av metanol (5 ml) og tetrahydrofuran (5 ml) ble hydrogenert ved 1 atmosfære i 20 timer. Ytterligere 30 mg 20% palladiumhydroksyd på trekull ble tilsatt, og hydrogeneringen ble fortsatt i ytterligere 24 timer. Den resulterende blanding ble filtrert, filterkaken vasket med THF/MeOH/H20 (10:10:1, 4 x 5 ml) og filtratet inndampet, hvilket ga en fast rest. Flashkromatografi (SiO2/2-20% MeOH-THF og deretter 20% MeOH-THF inneholdende 1-4% H20) ga tittelforbindelsen (0,006 g, 30%) i form av et gult, fast stoff.

IR (KBr) 3425, 3260, 1740, 1707, 1600, 1475,1322 cm"<1>; <1>H NMR (DMSO-de, 400 MHz) 8 13,11 (brs, 1H), 10,96 (brs, 1H), 9,02-7,51 (m, 5H), 6,21 (d, J=8,9 Hz, 1H), 5,4-4,0 (m, 8H).

Eksempel 104

3-Karboksy-9-fluor-12-(p-D-glukopyranosyl)benzofurano[2,3-a]-pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion

3-Cyano-9-fluor-12-(2,3,4,6-tetra-0-benzyl-p-D-glukopyranosyl)benzofura-no[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion (380 mg, 0,43 mmol) i EtOHTHF (10 ml:5 ml) ble tilsatt en 4,0 M løsning av NaOH (10 ml). Blandingen ble forsiktig til-bakeløpskokt i 24 timer. Denne resulterende blanding ble avkjølt til 0°C og behandlet med konsentrert HCI (15 ml). Denne løsning ble omrørt ved omgivelsestemperatur i 24 timer før den ble tatt opp i EtOAc:THF og vasket med vann og saltløsning før tørking og konsentrering av løsemiddel. Til denne rest ble det tilsatt fast ammoniumacetat (5,0 g), og blandingen ble sammensmeltet ved 150°C i 1 time før den ble avkjølt, fortynnet (EtOAc:THF), vasket med vann, saltløsning, tørket (Na2S04) og konsentrert. En porsjon av dette råprodukt (60 mg) ble hydrogenert (Pd/C) som tidligere beskrevet, hvilket ga tittelforbindelsen (18 mg, 50%) i form av et gult, fast stoff.

IR (KBr) 3420, 1756, 1710, 1561, 1395 cm"<1>: <1>H NMR (DMSO-d6 og D20-utbytte, 400 MHz) 8 9,26 (brs, 1H), 8,83-8,76 (m, 1H), 8,22 (brs, 1H), 7,99-7,96 (m, 1H), 7,83-7,68 (m, 1H), 7,55-7,45 (m, 1H), 6,51 (d, 0,6H, J=8,9 Hz), 5,99 (d, 0.4H, J=8,9 Hz), 4,31-3,43 (m, 6H): HPLC: 94,0% (320 nm).

Eksempel 105

3,9-Difluor-6-[(2-guanidino)-etyl]-12,13-dihydro-13-(p-D-glukopyranosyl)-5(H)-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion

Til en magnetisk omrørt løsning av det rene produkt fra eksempel 10 (3,35 g, 3,25 mmol) i absolutt etanol (600 ml) ble det tilsatt vandig kaliumhydroksyd (4,45 M, 60,0 ml, 267 mmol). Den resulterende mørkerøde løsning ble oppvarmet i en åpen kolbe inntil ca. halvparten av etanolen var fordampet (ca. 3 timer). Blandingen ble avkjølt under en nitrogenstrøm, og konsentrert HCI (12 N; 175 ml) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt i 15 minutter og så fordelt med vann (300 ml) og etylacetat (800 ml). Det organiske skikt ble vasket med vann (300 ml), mettet, vandig natriumhydrogenkarbonat (300 ml), og saltløsning (300 ml), tørket (Na2S04), og inndampet i vakuum. Det resulterende faste anhydrid ble behandlet med etylendiamin (50 ml) og oppvarmet til koking i ca. 4-5 timer, oppløst i absolutt etanol (175 ml), tilbakeløpskokt i ca. 6 timer, og ble så konsentrert i vakuum. Rensing ved flashkromatografi på silikagel med 2-10% metanol i metylenklorid ga 1,72 g (55%) av det rene 6N-(2-amino)-etyl)-derivat av utgangsforbindelsen i form av et gulorgange, fast stoff.

300 MHz <1>H NMR (CDCI3) 5 10,65 (brs, 1H), 9,05 (dd, 1H), 8,94 (dd, 1H), 7,55 (dd, 1H), 7,45-7,14 (m, 18H), 7,00 (t, 1H), 6,87 (t, 2H), 6,14 (d, 2H), 5,95 (d, 1H), 5,05-4,58 (m, 6H), 4,40-4,34 (m, 1H), 4,12-3,85 (m, 8H), 3,22-3,15 (m, 2H), 2,96 (d, 1H): Pos. ESI-massespektrum, m/e 927 (M+H)<+>.

Til en magnetisk omrørt løsning av det rene produkt fra ovennevnte (1,72 g, 1,86 mmol.) i vannfritt TI-IF (20 ml) ble det tilsatt N,N-diisopropyletylamin (314 ml) og N,N'-bis(benzyloksykarbonyl)-S-metylisotiourea (800 mg, 2,23 mmol: K. Nowak, L. Kania Rocz. Chem. 1969, 43, 1953), og reaksjonsblandingen ble oppvarmet i et 70°C oljebad i 24 timer. Løsningen ble avkjølt til romtemperatur, inndampet i vakuum, og renset ved flashkromatografi på silikagel under anvendelse av 5% etylacetat i metylenklorid, hvilket ga 1,57 g (68%) av det rene di-CBz-beskyttede guanidinderivat av utgangsaminet i form av et gult, fast stoff.

300 MHZ <1>H NMR (CDCI3) 5 11,80 (brs, 1H), 10,70 (brs, 1H), 9,18 (brs, 1 H), 9,08 (dd, 1H), 8,92 (dd, 1H), 7,62-7,10 (m, 24H), 6,96 (t, 1H), 6,85 (t, 2H), 6,13 (d, 2H), 5,95 (d, 1H), 5,20-4,60 (m, 10H), 4,36 (t, 1H), 4,20-3,85 (m, 10H), 3,02 (d, 1H).

Til en løsning av produktet fra ovennevnte (1,58 g, 1,38 mmol.) i 3:1 metanol/etylacetat (120 ml) og 1N HCI (18 ml) under N2 ble det tilsatt 20% palladium-(ll)-hydroksyd på karbon (722 mg). Blandingen ble anbrakt på en Parr-ryster under et hydrogentrykk på 448 kPa i 3 dager, og ble deretter filtrert gjennom en liten Celite-pute. Celiten ble vasket med metanol (3 x 50 ml) og konsentrert i vakuum, hvilket ga et orange, fast stoff. Rensing på Sephadex LH-20 med metanoleluering ga 754 mg (91%) av den rene tittelforbindelse i form av et rødorange, fast stoff.

500 MHZ <1>H NMR (CD3OD) 5 8,83 (dd, 1H, J=9,7, 2,8 Hz), 8,73 (dd, 1H, J=8,9, 2,5 Hz), 7,77 (dd, 1H, J=9,2, 4,1 Hz), 7,63 (dd, 1H, J=8,9, 4,4 Hz), 7,34-7,25 (m, 2H), 6,15 (d, 1H, J=8,5 Hz), 4,32,-4,17, (m, 2H), 4,11-3,97 (m, 2H), 3,91-3 ,84 (m, 2H), 3,78-3,66 (m, 2H), 3,60-3,53 (m, 2H). FAB-massespektrum, m/e 609 (M+H)\

Eksempel 106

2,3,9,10-Tetrafluor-12-((6-deoksy-6,6-difluor-p-D-glukopyranosyl)indolo[2,3-a]-pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion (R5, R5= F, R2-R4= OH, Xi, Xr, X2, X2,= F, Q=

NH)

En løsning av 2,3,9,10-tetrafluor-12-(2,3,4-tri-0-benzyl-p-D-glukopyrano-syl)indolo[2,3,-a]pyrrolo[3,4-c]karbazol-5,7-dion (0,166 g, 0,20 mmol) i 5 ml diklormetan ble satt til en kald (5°C) løsning av Dess-Martin-perjodinan (0,106 g, 0,25 mmol) i 5 ml diklormetan. Den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur under Ar i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter fortynnet med etylacetat (25 ml), vasket (1M NaHCO3-30% Na2S203, 2 x 10 ml; 1M NaHC03, 2 x 10 ml; H20, 10 ml; saltløsning, 10 ml), tørket (MgS04) og inndampet. Den resulterende rest ble kromatografert (SiO2/2-30% etylacetat-heksan), hvilket ga 2,3,9,10-tetrafluor-12-((2,3,4-tri-0-benzyl-p-D-glukopyranosid)uronaldehyd)indolo-[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion (0,118 g, 71%) i form av et lysegult, fast stoff.

IR (CH2CI2), 3344, 2930, 1753, 1724, 1597, 1479, 1322 cm'<1>; <1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) 5 11,08 (s, 0,3H), 10,68 (s, 1H), 3,85 (s, 0,3H), 8,97 (m, 0,3H), 8,79 (m, 0,3H), 8,43 (m, 1H), 7,99 (br s, 0.7H), 7,83 (m, 1H), 7,68 (m, 0,3H), 7,53-6,73 (m, 14H), 6,27 (m, 1H), 6,05 (d, J=7,2 Hz, 2H), 5,80 (d, J=9,0 Hz, 1H), 5,61 (s, 2H), 5,09 (d, J=11,1 Hz, 1H), 4,91 (m, 3H), 4,29-3,85 (m, 4H), 3,74 (t, J=8,8 Hz, 1H), 2,92 (d, J=10,3 Hz, 1H).

Til en kald (5°C) løsning av aldehydet (0,053 g, 0,085 mmol) i 5 ml diklormetan under Ar ble det dråpevis tilsatt DAST (0,022 ml, 0,17 mmol). Den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble så fortynnet med etylacetat (20 ml), vasket (1M, NaHC03, 2 x 10 ml; H20, 2 x 10 ml; saltløsning, 10 ml), tørket (MgS04) og inndampet. Resten ble kromatografert (Si02/2-24% etylacetat-heksan), hvilket ga 2,3,9,10-tetrafluor-12-(2,3,4-tri-0-benzyl-6-deoksy-6,6-difluor-p-D-glukopyranosyl)indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]-karbazol-5,7-dion (0,046 g, 85%) i form av et lysegult, fast stoff.

IR (CH2CI2), 3400, 1757, 1728, 1596, 1478, 1320 cm'<1>; <1>H NMR (CDCI3, 400 MHz) 5 9,98 (s, 1H), 8,89 (m, 2H), 7,71 (m, 1H), 7,51-7,26 (m, 11H), 7,09 (m, 1H), 7,00 (t, J=7,4 Hz, 1H), 6,85 (t, J=7,5 Hz, 2H), 6,24 (t, J=53,7 Hz, 1H), 6,13 (d, J=7,2 Hz, 2H), 5,80 (d, J=9,0 Hz, 1H), 5,04 (d, J=11,2 Hz, 1H), 4,89 (s, 2H), 4,84 (d, J=11,2 Hz, 1H), 4,23 (m, 1H), 4,3 (m, 2H), 3,95 (d, J=10,3 Hz, 1H), 3,81 (m, 1H), 3,04 (m, 1H); MS (ESI) m/e 848 (M-H).

En blanding av tri-O-benzylglukopyranosidet (0,035 g, 0,041 mmol) og 20% Pd(OH)2-C i en blanding av metanol (5 ml) og kloroform (2 ml) ble hydrogenert ved 1 atmosfæres trykk i 16 timer. Den resulterende blanding ble filtrert, og filterkaken ble vasket med tetrahydrofuran/metanol (1:1). Filtratet ble inndampet og resten kromatografert (Si02/2-12% MeOH-CH2CI2), hvilket ga tittelforbindelsen (0,019 g, 80%) i form av et gult, fast stoff.

IR (KBr), 3385, 1748, 1713, 1595, 1476, 1326 cm'<1>; <1>H NMR (THF-d8, 400 MHz) 6 10,55 (s, 1H), 10,18 (s, 1H), 9,14 (dd, J=10,6, 8,8 Hz, 1H), 9,04 (dd, J= 10,6, 8,6 Hz, 1H), 7,79 (dd, J=11,5, 6,6 Hz, 1H), 7,44 (dd, J=9,8, 7,1 Hz, 1H), 6,56 (t, J=53,7 Hz, 1H), 6,18 (d, J=7,9 Hz, 1H), 5,52 (brs, 1H), 5,10 (brs, 1H), 4,71 (brs, 1H), 4,27 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 3,69 (m, 2H). HPLC: 95,2% (230 nm).

Claims

1. Forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav karakterisert ved at Ri og R1a uavhengig er hydrogen, en pentosegruppe (A) eller en heksosegruppe (B) med formlene forutsatt at én av Ri og R1a er hydrogen og den andre ikke er hydrogen; - R2, R3> R4, R5 og R2', Ry. R*, R5" og R5> er uavhengig Ci_7-alkyl, azido, halogen, NR9R10, OR, SR, -OS02Rc, eller danner sammen =0, OH, C1-C7 -alkoksy eller CrC7- alkyl, og ytterligere forutsatt at R3 eller Ry ikke er -NH2', bortsett fra dersom R6 er -(CH2)nNHC(=NH)NH2, idet R5 dessuten kan være het hvor het er valgt blant imidazol, pyridin og pyrimidin som eventuelt er substituert med O eller OH; Rc er Ci-7-alkyl; R er uavhengig hydrogen, Ci.7-alkyl, idet nevnte d.7-alkyl eventuelt er substituert med OH, C02H eller fenyl; R9 og R10 er uavhengig hydrogen eller Ci.7-alkyl,som kan være substituert med OH, NH2, eller CH(Rb)(CH2)nNH2, eller R9 og R10 danner sammen med nitrogenatomet som de er festet til, en ftalimido-, morfolino-, tiomorfolino-, piperidino- eller piperazinoring, hvor nevnte ringer eventuelt kan være substituert med okso eller Ci-C7-alkyl; Rb er H eller COOH; R6 er hydrogen, Ci-7-alkyl, eventuelt med Ci-C6-alkyl substituert fenyl-CrC7-alkyl, OH, NH2 eller (CH2)n-NHC(=NH)NH2, R7 og R8 er til sammen O; X-i, X'i, X2 og X'2 er uavhengig H, halogen eller -CN, forutsatt at X2, X'2l Xi og X'i ikke er 1,11-diklor, og videre forutsatt at dersom X2 og X'2 hver er H, X: og X'i er hver uavhengig H eller halogen, Ri er heksose, R7 og R8 sammen er O, og hver av R2, R5 og R4 er OH, R2>, R3, R4. og R5' og R5- er hver H, Q er NH, og hver av R3 og R6 er ikke NH2 og R3 ikke er metoksy dersom R6 er H; WerC; Q er O, NR9 eller S, og n er et helt tall fra 0 til 4.

2. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at alle substituenter i Ri eller R-ia er H unntatt R2, R3 og R4 som hver er OH; og R5 er NR9R10.

3. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at alle substituenter i Ri eller R1a er H unntatt R2, R3 og R5 som hver er OH; og R4 er NR9R10.

4. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at alle substituenter i Ri eller R1a er H unntatt R2, R3 og R4 som hver er OH; og R5 er halogen.

5. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R7 og R8 til sammen er O.

6. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at Xi, X'i, X2 og X'2 uavhengig er halogen.

7. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at halogengruppen er fluor.

8. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at Q er O, S eller NH.

9. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R2, R3 og R5 er hver OH; og R4 er NR9R10, halogen eller N3.

10. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at alle substituenter i Ri eller Ria er H, unntatt R5l R3 og R4 som hver er OH og R2 er halogen.

11. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at alle substituenter i Ri eller R1a er H, unntatt R2, R3 som hver er OH; R5 er halogen; og R4 er azido, NR9R10 eller OR.

12. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at alle substituenter i R-i eller R1a er H, unntatt R2, R3 som hver er OH; R5 er halogen; og R4 er halogen, H eller d-C7-alkyl.

13. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at alle substituenter i Ri eller R1a er H, unntatt R2 og R3 som hver er hydrogen eller hydroksy; R4 er hydrogen, halogen, d-7-alkyl eller azido; og R5 er hydroksy, azido, Ci.7-alkyl, halogen eller NR9R10.

14. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at alle substituenter i R^ eller Ria er H, unntatt R3 og R4 som hver er hydrogen eller hydroksy; R2 er hydrogen, halogen, C^-alkyl eller azido; og R5 er hydroksy, azido, Ci-7-alkyl, halogen eller NR9R10.

15. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at alle substituenter i Ri eller R-ia er H, unntatt R3 og R5 som hver er hydrogen eller hydroksy; R2 er hydrogen, halogen, Ci.7-alkyl eller azido; og R5 er hydroksy, azido, Ci_7-alkyl, halogen eller NR9R10.

16. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at alle substituenter i Ri eller R1a er H, unntatt R2 og R4 som hver er hydrogen eller hydroksy; R3 er hydrogen, halogen, C^-alkyl eller azido; og R5 er hydroksy, azido, Ci.7-alkyl, halogen eller NR9R10.

17. Farmasøytisk formulering, karakterisert ved at den omfatter en anitumor-effektiv mengde av en forbindelse med formel I i henhold til hvilke som helst av kravene 1-16.

18. Anvendelse av en forbindelse med formel I i henhold til hvilke som helst av kravene 1-16, til fremstilling av et farmasøytisk preparat for inhibering av tumorvekst i en pattedyr-vert.