NO180046B - Markerte fibrinogen-reseptor-antagonister, og deres anvendelse - Google Patents

Markerte fibrinogen-reseptor-antagonister, og deres anvendelse Download PDF

Info

Publication number
NO180046B
NO180046B NO931528A NO931528A NO180046B NO 180046 B NO180046 B NO 180046B NO 931528 A NO931528 A NO 931528A NO 931528 A NO931528 A NO 931528A NO 180046 B NO180046 B NO 180046B
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
fibrinogen
biphenylyl
fibrinogen receptor
receptor antagonist
oxymethyl
Prior art date
Application number
NO931528A
Other languages
English (en)
Other versions
NO931528L (no
NO931528D0 (no
NO180046C (no
Inventor
Johannes Weisenberger
Hans-Dieter Schubert
Karl-Heinz Switek
Guenter Linz
Frank Himmelsbach
Original Assignee
Thomae Gmbh Dr K
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from DE4214245A external-priority patent/DE4214245A1/de
Application filed by Thomae Gmbh Dr K filed Critical Thomae Gmbh Dr K
Publication of NO931528D0 publication Critical patent/NO931528D0/no
Publication of NO931528L publication Critical patent/NO931528L/no
Publication of NO180046B publication Critical patent/NO180046B/no
Publication of NO180046C publication Critical patent/NO180046C/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4166—1,3-Diazoles having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. phenytoin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4196—1,2,4-Triazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/49—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C255/53—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton containing cyano groups and hydroxy groups bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C257/00—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines
    • C07C257/10—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines
    • C07C257/18—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines having carbon atoms of amidino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D233/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/30—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D233/32—One oxygen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/06—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 2
    • C07D235/12—Radicals substituted by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
    • C07D235/18—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with aryl radicals directly attached in position 2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/14—The ring being saturated

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

I normalsituasjonen, dvs. ved intakte blodkar, sikres vedlikeholdet av blodets flyteevne ved at ingen av de utslags-givende hemostatiske mekanismer er aktivert. For å stanse blodet ved skader innledes følgende to prosesser: 1. trombocyttaggregasjonen som inntrer umiddelbart i løpet av sekunder ved kariesjonen og som initierer blodstansingen gjennom den trombe som dannes, og 2. den noe senere inntredende koagulering som stabiliserer tromben ved dannelse av fibrintråder.
Aggregasjonen og koagulasjonen kan imidlertid også opptre i karvegger som ikke er skadet, men som er forandret for eksempel gjennom aterosklerotisk plakk, og forårsaker således livstruende sykdommer som hjerteinfarkt, lungeemboli og hjerneslag.
Et logisk forebyggende tiltak ville i disse tilfeller være å forhindre dannelsen av den initiale trombe. Forskjellige farmasøytika som hemmer enkelte av trombocytt-aggregasjonens veier, har hittil vært benyttet uten over-bevisende hell. Det felles sluttrinn for alle aktiveringsveier er dannelsen av tromben som, ifølge de nyeste kunnskaper, oppstår ved at trombocytter via fibrinogenreseptorer, som forefinnes på deres membran, sammenholdes av det bifunksjonelle, trådformede fibrinogen. Om denne prosess kunne hindres, kunne trombedannelsen hemmes uavhengig av arten av aktivering (se Cahill, M. et al. i Brit. J. Clin. Pharmacol. 33 , 3-9 (1992)) .
Ved léting etter fibrinogen-reseptor-antagonister som blokkerer fibrinogen-reseptorene og dermed hemmer bindingen av fibrinogenet til trombocyttene, er det behov for en metode for å kunne bestemme denne binding kvantitativt. En standardmetode består i bruk av <125>I-fibrinogen og separasjon av cellebundet og oppløst fibrinogen ved seiitrif ugering. Denne fremgangsmåte har følgende graverende ulemper:
1. Den anvendte nuklide er en y-stråler
2. Halveringstiden utgjør kun 6 0 dager
3. Fibrinogen er et adhesivt protein
4. Bindingen er ikke fullstendig reversibel
5. Metoden er ikke anvendelig i nærvær av plasma
6. Trombocyttene må aktiveres.
For den praktiske bruk er punktene 4 og 6 ikke meget viktige. Punktene 1 til 3 betinger imidlertid omfattende forholdsregler for avskjerming, kompliserer oppbevaringen eller betinger materialtap og synes å gjøre bruk av pipetteringsautomater avgjørende. Den største ulempe er imidlertid at metoden, som følge av det høye fibrinogen-innhold, ikke kan benyttes i nærvær av plasma siden plasmafibrinogen hemmer bindingen av <125>I-fibrinogen til aktiverte blodplater med en IC50 på 12 0 nM. For måling av bindingen må det derfor benyttes vaskede eller gelfiltrerte trombocytter (se Harfenist, E.J. et al. i Blood 71, 132-136 (1988)).
Det har nå overraskende vist seg at det finnes fibrinogen-reseptor-antagonister som også binder seg til fibrinogenreseptorene i nærvær av plasmafibrinogen. Slike fibrinogen-reseptor-antagonister beskrives eksempelvis i EP-A-0 372 486 og i EP-A-0 381 033 samt i de ikke-forut-publiserte tyske eller europeiske utlegningsskriftene EP-A-0 483 667, EP-A-0 496 378, EP-A-0 503 548,
EP-A-0 525 629, EP-A-0 528 369, DE-A-41 29 603 og
DE-A-41 34 467.
Ifølge oppfinnelsen anvendes en fibrinogen-reseptor-antagonist med formel
hvor n er 1-3, og R er -hydrogen eller lavere alkyl, til bestemmelse av bindingen av kjemiske forbindelser til fibrinogen-reseptorer og til konsentrasjonsbestemmelse av fibrinogen-reseptor-antagonist.
Forbindelsene med den ovenstående formel utgjør også en del av foreliggende oppfinnelse.
Særlig foretrukket er de forbindelsene med den ovenfor angitte generelle formel I som oppviser en god in vitro virk-ning i den kollagen-induserte aggregasjonstest, hvor de tritiummerkede fibrinogen-reseptor-antagonistene ifølge oppfinnelsen (se Huang, E.M. og Detwiler, T.C.: "Stimulus-Response Coupling Mechanisms" i Biochemistry of Platelets, Academic Press, Orlando, Florida, 1986, side 1-68) oppviser en EC50-virkning på mindre enn 500 nM, men spesielt forbindelsene
(3S,5S)- og (3R,5R)-5-[(4'-amidino-4-bifenylyl)-oksymetyl]-3-karboksymetyl-pyrrolidin-2-on.
De ovennevnte fibrinogen-reseptor-antagonister med den generelle formel I oppviser en sammenlignbar eller høyere affinitet overfor reseptoren enn <125>I-fibrinogen. Deres binding til reseptoren forstyrres ikke av fremmedproteiner. Når minst ett atom i disse er erstattet med et detekterbart atom, f.eks. et hydrogenatom erstattet med et tritiumatom, kan de benyttes som ligander i fibrinogen-reseptor-bindingstesten også i nærvær av plasma.
Foreliggende oppfinnelse angår således de nye tritium-merkede fibrinogen-reseptor-antagonister som har en sammenlignbar eller høyere affinitet overfor reseptoren enn <125>I-fibrinogen og hvis binding ikke forstyrres av fremmedprotein, spesielt forbindelser med ovennevnte generelle formel I som i nærvær av fremmedprotein, f.eks. av albumin eller fibrinogen, oppviser en affinitet (KD) på mindre enn 500 nM overfor reseptoren, deres anvendelse som ligander a) til bestemmelse av binding av kjemiske forbindelser til fibrinogenreseptorer og b) til konsentrasjonsbestemmelse av fibrinogen-reseptor-antagonister
spesielt i nærvær av fremmedprotein og/eller i ulike kropps-væsker som blodplasma eller urin, samt fremgangsmåter for deres fremstilling.
Fibrinogen-reseptor-bindingstesten i henhold til oppfinnelsen ble eksempelvis foretatt ved bruk av (3S,5S)-5-[ (4'-amidino-4-bifenylyl)-oksymetyl]-3-karboksymetyl-pyrrolidin-2-on-[3-<3>H-4-bifenylyl] <3>H-BIBU 52 ZW] som ligand, på følgende måte: En suspensjon av humantrombocytter i plasma inkuberes med <3>H-BIBU 52 og forskjellige konsentrasjoner av testforbindelsen.' Fri og bundet ligand adskilles ved sentrifugering og bestemmes kvantitativt ved scintillasjonstelling. Ut fra de målte ver-dier bestemmes testforbindelsens hemming av <3>H-BIBU 52-bindingen.
For å måle for eksempel bindingskonkurransen mellom <3>H-BIBU 52 og umerket BIBU 52, uttas blod fra en antekubital-vene som tilsettes trinatriumcitrat som antikoagulant (slutt-konsentrasjon 13 mM). Blodet sentrifugeres i 10 minutter ved 170 x g og det overstående platerike plasma (PRP) tas ut. Det gjenværende blod avsentrifugeres omhyggelig en gang til for å oppnå plasma. PRP-fraksjonen fortynnes med 1:10 med autologt plasma. 750 fil inkuberes med 50 fil fysiologisk natriumklorid-oppløsning, 100 fil testsubstansoppløsning, 50 fil <14>C-sukrose og 50 pil <3>H-BIBU 52 ved romtemperatur i 20 minutter. For målingen av den uspesifikke binding benyttes 3 0 fM BIBU 52 i stedet for testsubstansen. Prøvene sentrifugeres i 20 sekunder ved 10000 x g og supernatanten suges av. 100 fil av denne uttas for bestemmelse av den fri ligand. Sentrifugeknappen oppløses i 500 fil 0,2N NaOH, hvorav 450 fil tilsettes 25 fil 5N HCl og måles. Det gjenværende restplasma i knappen bestemmes ut fra <14>C-innholdet og den bundne ligand ut fra <3>H-målingen. Etter subtraksjon av den uspesifikke binding, trekkes aktiviteten i knappen opp mot konsentrasjonen av testforbindelsen (se figur 1) og konsentrasjonen for en 50% hemming av bindingen bestemmes.
De nye tritiummerkede fibrinogen-reseptor-antagonister oppnås etter publiserte-fremgangsmåter, f.eks. a) ved hydrogenolytisk utveksling av et halogenatom, f.eks. et klor-, brom- eller jodatom, med tritium,
b) ved katalytisk hydrogen/tritium-utveksling med tritium,
c) ved katalytisk hydrogen/tritium-utveksling i tritierte
oppløsningsmidler, eller
i
d) ved tritiering av et forutgående trinn av den ønskede fibrinogen-reseptor-antagonist og påfølgende syntese av
fibrinogen-reseptor-antagonisten.
Fremgangsmåte a) utføres fortrinnsvis i et egnet opp-løsningsmiddel som vann, metanol, etanol, dimetylformamid eller dimetylsulfoksyd, men fortrinnsvis i et upolart opp-løsningsmiddel som etylacetat, dioksan eller tetrahydrofuran, i nærvær av en egnet katalysator som 5% palladium på aktivkull, 10% palladium på aktivkull, palladium, platina, palladiumdiklorid, 2% palladium på bariumkarbonat, palladium/bariumsulfat eller Raney-nikkel, under tilsetning av et overskudd av en basiskomponent som trietylamin, pyridin, kinolin, natriumhydroksyd, kaliumkarbonat, ammoniakk, magnesiumoksyd eller kalsiumoksyd, med tritiumgass ved 1-5 bar og ved 20-50°C, fortrinnsvis ved 25°C. For fjerning av det labile tritium, frafiltreres katalysatoren, hvoretter opp-løsningsmidlet fordampes, residuet tas opp i et polart opp-løsningsmiddel, oppvarmes til tilbakeløp i 10 minutter, hvoretter, etter 12 timer ved romtemperatur, oppløsningsmidlet på nytt fordampes.
Fremgangsmåte b) utføres fortrinnsvis i et egnet opp-løsningsmiddel som fosfat-buffer pH 7, vann, iseddik, metanol eller etanol, i nærvær av en egnet katalysator som palladium-dioksyd/bariumsulfat, platina, palladium, 5% palladium på aktivkull, 10% palladium på aktivkull, platinadioksyd-hydrat eller palladium/platinadioksydhydrat, ved omrøring under bærerfri tritiumgass i fra 1 time til 20 dager ved 20-50°C, fortrinnsvis ved 25°C. For fjerning av det labile tritium, frafiltreres katalysatoren, hvoretter oppløsningsmidlet fordampes, residuet tas opp i et polart oppløsningsmiddel, oppvarmes til tilbakeløp i 10 minutter, hvoretter, etter 12 timer ved romtemperatur, oppløsniiigsmidlet på nytt fordampes, og det således oppnådde produkt renses ved hjelp av HPLC.
Fremgangsmåte c) utføres i et egnet tritiert oppløsnings-middel som HTO, 70% CH3CO0T, CF3COOT, KOH/HTO, dioksan/HTO, HTS04/HTO/vann, CH30T eller CH3CH2OT, i nærvær av en egnet katalysator som platinadioksyd, 5% palladium på aktivkull, 10% palladium på aktivkull, palladium, platina eller Raney-nikkel, ved oppvarming til 100-140°C i en lukket beholder i fra én til 20 timer. For fjerning av det labile tritium, frafiltreres katalysatoren, hvoretter oppløsningsmidlet fordampes, residuet tas opp i et polart oppløsningsmiddel, oppvarmes til tilbakeløp i 10 minutter, hvoretter, etter 12 timer ved romtemperatur, oppløsningsmidlet på nytt fordampes og det1 således oppnådde produkt renses ved hjelp av HPLC.
Mellomproduktene for fremstilling av tritierte fibrinogen-reseptor-antagonister ifølge fremgangsmåte d) fremstilles etter vanlige kjemiske metoder, idet det respektive nødvendige merkede mellomtrinn fremstilles etter fremgangsmåte a) til c).
Ved de ovenfor beskrevne omsetninger er det særlig fordelaktig i stedet for den frie karboksylsyre, å benytte deres respektive estere med en lavere alkohol, f.eks. deres metyl-, etyl-, n-propyl-, isopropyl- eller tert.butylester, spesielt metylesteren. Etter tritieringen overføres esteren ved hydrolyse, fortrinnsvis i nærvær av en base som natronlut, f.eks. i nærvær av metanol/2N natronlut (6:1) ved romtemperatur, i den tilsvarende frie karboksylsyre.
Særlig fordelaktig oppnås forbindelsene
[<3>H] (3S,5S)- og (3R, 5R)-5-[ (4 '-amidino-4-bif enylyl) -oksy-metyl]-3-karboksymetyl-pyrrolidin-2-on,
ved hydrogenolytisk utveksling av halogen med tritium ifølge fremgangsmåte a) i dimetylformamid i en lukket beholder under kraftig omrøring under normaltrykk av 3 70 GBq bærerfri tritiumgass, og
forbindelsene
(3S,5S)-5-[(4'-amidino-4-bifenylyl)-oksymetyl]-3-karboksy-metyl-pyrrolidin-2-on [3-3H-4-bif enylyl]
og
(3R,5R)-5- [ (4'-amidino-4-bifenylyl)-oksymetyl]-3-karboksy-metyl-pyrrolidin-2-on [3-3H-4-bif enylyl] ifølge fremgangsmåte a)
ved hydrogenolytisk utskiftning av et halogenatom i bifenyl-kjernens 3-stilling, hensiktsmessig bromatomet.
De etterfølgende eksempler skal belyse oppfinnelsen nærmere:
Fremstilling av utgangsforbindelsene:
Eksempel A
(3S,5S)-5-[(4'-amidino-3-brom-4-bifenylyl)oksymetyl] -3-f( metoksykarbonyl) metyl]- 2- pvrrolidinon- hvdroklorid
I en oppløsning av 6,4 g av 4:1-blandingen av (3S,5S)- og (3R,5S)-5-[(3-brom-4 '-cyano-4-bifenylyl)oksymetyl] -3-[(metoksykarbonyl)metyl]-2-pyrrolidinon i 250 ml vannfri metanol ledes det ved 0°C under omrøring inn hydrogenklorid i 2 timer. Etter omrøring i 2 timer ved romtemperatur fordampes oppløsningsmidlet i vakuum ved en badtemperatur på 3 0°C. Residuet oppløses i 250 ml vannfri metanol og omrøres etter tilsetning av 20 g ammoniumkarbonat i 16 timer ved romtemperatur. Suspensjonen filtreres gjennom litt kiselgel og filtratet inndampes i vakuum. Råproduktet kromatograferes over kiselgel med metylenklorid/metanol/kons. ammoniakk (4:1:0,25). Det isomer-rene produkt oppnås som hydroklorid som siste fraksj on.
Utbytte: 270 mg (4% av det teoretiske)
Rf-verdi: 0,16 (kiselgel; metylenklorid/metanol/kons.
ammoniakk = 4:1:0,25)
Eksempel B'
(3S,5S)-5-[(4'-amidino-4-bifenylyl)oksymetyl]-3-[(metoksy-karbonyl) metyl! - 2- pyrrolidinon- hydroklorid- l, 25 HC1
I en blanding av 1000 ml tørr metanol og 200 ml petrol-eter avkjølt til 0°C innføres hydrogenkloridgass i 2,5 timer. Under omrøring og videre avkjøling tilsettes 33 g (3S,5S)-5[(4'-cyano-4-bifenylyl)oksymetyl]-3-(metoksykarbonyl)metyl]-2-pyrrolidinon, og etter fullstendig oppløsning innføres hydrogenkloridgass i ytterligere 15 min.. Etter henstand natten over ved romtemperatur fjernes oppløsningsmidlet i vakuum, residuet oppløses i 700 ml metanol og omrøres ved romtemperatur i 4,5 timer etter tilsetning av 144 g ammoniumkarbonat. Deretter avsuges de utfelte ammoniumsalter og vaskes med litt metanol. Filtratet inndampes til tørrhet i vakuum, og residuet renses kolonnekromatografisk (kiselgel; diklormetan/metanol = 85:15).
Utbytte: 27,7 g (60% av det teoretiske),
Smeltepunkt: fra 141°C (dekomp.)
Rf-verdi: 0,3 0 (kiselgel; metylenklorid/metanol = 85:15)
Analogt oppnås: (3R,5R)-5-[(4'-amidino-4-bifenylyl)oksymetyl]-3-[(metoksykarbonyl)metyl]-2-pyrrolidinon-hydrokorid-semihydrat Smeltepunkt: 138°C (dekomp.)
Rf-verdi: 0,52 (omvendt fase kiselgel (RP8); metanol/10%
natriumkloridoppløsning = 6:4)
Fremstilling av sluttproduktene:
Eksempel 1
(3S,5S)-5-[(4'-amidino-4-bifenylyl)oksymetyl]-3-[(metoksy-karbonvl) metyl] - 2- pyrrolidinon- hydroklorid r3- 3H- 4- bif enylyl]
I lukket apparatur behandles en oppløsning av 25 mg (3S,5S)-5-[(4'-amidino-3-brom-4-bifenylyl)oksymetyl]-3-[(metoksykarbonyl)metyl]-2-pyrrolidinon-hydroklorid i 0,5 ml dimetylformamid med 370 GBq bærerfri tritiumgass i nærvær av 10 mg av en katalysator av 10% palladium på aktivkull, under kraftig omrøring. Etter 4 timer er tritiumopptaket fullført. Reaksjonsoppløsningeri fortynnes med mer dimetylformamid, katalysatoren frafiltreres og oppløsningsmidlet fordampes ved 80°C under redusert trykk. Under dette trinn fjernes stor-parten av det labile tritium. For å fjerne resten av det labile tritium tas residuet opp i 50 ml absolutt etanol, hensettes ved romtemperatur i 3 dager, hvoretter etanolen igjen fordampes fullstendig ved 35°C under redusert trykk. Residuet tas opp i 50 ml absolutt etanol for oppbevaring. Radiokjemisk utbytte: 13,14 GBq (3,6% av det teoretiske basert på den benyttede tritium-totalaktivitet)
Radiokjemisk renhet: 98,8% av det teoretiske
Bestemmelsesmetode HPLC:
Eksempel 2
(3S,5S)-5-[(4'-amidino-4-bifenylyl)oksymetyl]-3-[(karboksyl)-metvll - 2- pyrrolidinon T3- 3H- 4- bif enylyl]
En oppløsning av 2,57 mg (1,577 GBq) (3S,5S)-5-[ (4 ' - amidino-4-bifenylyl)oksymetyl]-3-[(metoksykarbonyl)-metyl]-2-pyrrolidinon-[3-<3>H-4-bifenylyl] i 6 ml etanol inndampes under redusert trykk ved 35°C. Residuet oppløses i 300 fil metanol og tilsettes 50 fil 2N natronlut (pH 12) . Etter 12 timer ved romtemperatur tilsettes 600 fil vann og deretter ammoniumklorid til pH 8. Deretter tilsettes ytterligere 180 fil vann og 60 fil metanol og denne klare oppløsning renses ved kromatografi på RP-8 tynnskikt-ferdigplater (Fa. Merck; eluent: 60% metanol/40% av en 10% natriumkloridoppløsning). Tittel-forbindelsens vandringsstrekning som lett kan iakttas i UV-lys (254 og 366 nm), skrapes av fra de fremdeles fuktige plater under vanlige forsiktighetsregler, utrøres grundig med 4 ml dimetylsulfoksyd og 200 fil IN saltsyre. Suspensjonen filtreres over et membranfilter med porevidde 0,5 fim. Det oppnås 3,5 ml oppløsning av [3H] tittelf orblndelsen.
Radiokjemisk renhet: 97,8% av det teoretiske
Bestemmelsesmetode HPLC:
Eksempel 3
(3S,5S)-5-[(4'-amidino-4-bifenylyl)oksymetyl]-3-[(karboksy)-metyll - 2- pyrrolidinon [ 3 - 3H- 4- bif enylyl]
En oppløsning av 2,14 mg (3S,5S)-5-[(4'-amidino-4-bifenylyl)-oksymetyl]-3-[(metoksykarbonyl)metyl]-2-pyrrolidinon-hydroklorid [3-3H-4-bif enylyl] i 5 ml etanol med en total-radioaktivitet på 1,314 GBq inndampes under redusert trykk ved 35°C. Residuet oppløses i 350 /il metanol og tilsettes 25 /il 2N i natronlut (pH 12). Etter 12 timer ved romtemperatur sentrifugeres de utfelte krystaller til bunnen av reaksjons-beholderen, hvoretter den klare supernatant avpipetteres. Det krystallinske residuet vaskes tre ganger med 100 /il porsjoner metanol, oppløses i 300 /il dimetylsulfoksyd og 40 /il IN saltsyre, hvoretter oppløsningen bringes til et totalvolum på 3 ml med mer dimetylsulfoksyd.

Claims (8)

1. Anvendelse av en fibrinogen-reseptor-antagonist med formel hvor n er 1-3, og R er hydrogen eller lavere alkyl, til bestemmelse av bindingen av kjemiske forbindelser til fibrinogen-reseptorer.
2. Anvendelse av en fibrinogen-reseptor-antagonist med formel hvor n er 1-3, og R er hydrogen eller lavere alkyl, til konsentrasjonsbestemmelse av fibrinogen-reseptor-antagonist.
3. Anvendelse av en merket fibrinogen-reseptor-antagonist ifølge krav 1 eller 2, for bestemmelse i nærvær av fremmedprotein og/eller kroppsvæskeV.
4. Anvendelse ifølge et av kravene 1 eller 2, av en fibrinogen-reseptor-antagonist som er (3S,5S)- eller (3R, 5R)-5-[ (4 '-amidino-4-bifenylyl)-oksymetyl]-3-karboksymetyl-pyrrolidin-2- on eller et salt derav, hvor et hydrogenatom i bifenylylgruppen er erstattet med tritium.
5. Anvendelse ifølge et av kravene 1-4, av en fibrinogen-reseptor-antagonist som er (3S,5S)-5-[(4'-amidino-4-bifenylyl)oksymetyl]-3-[(karboksy)metyl]-2-pyrrolidinon[3-<3>H-4-bifenylyl] eller salt derav.
6. Fibrinogen-reseptor-antagonist, karakterisert ved formelen hvor n er 1-3, og R er hydrogen eller lavere alkyl.
7. Fibrinogen-reseptor-antagonist ifølge krav 6, karakterisert ved at den er (3S,5S)- eller (3R, 5R) -5-[(4'-amidino-4-bifenylyl)-oksymetyl]-3-karboksy-metyl-pyrrolidin-2-on eller et salt derav, hvor minst et hydrogenatom i bifenylylgruppen er erstattet med tritium.
8. Fibrinogen-reseptor-antagonist ifølge kravene 6 eller 7, karakterisert ved at den er (3S,5S)-5-[ (4 ' - amidino-4-bifenylyl) oksymetyl]-3-[(karboksy)metyl]-2-pyrrolidinon [3-3H-4-bif enylyl] eller et salt derav.
NO931528A 1992-04-28 1993-04-27 Markerte fibrinogen-reseptor-antagonister, og deres anvendelse NO180046C (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4213930 1992-04-28
DE4214245A DE4214245A1 (de) 1992-04-30 1992-04-30 Tritiummarkierte fibrinogen-rezeptor-antagonisten, deren verwendung und verfahren zu ihrer herstellung

Publications (4)

Publication Number Publication Date
NO931528D0 NO931528D0 (no) 1993-04-27
NO931528L NO931528L (no) 1993-10-29
NO180046B true NO180046B (no) 1996-10-28
NO180046C NO180046C (no) 1997-02-05

Family

ID=25914315

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO931528A NO180046C (no) 1992-04-28 1993-04-27 Markerte fibrinogen-reseptor-antagonister, og deres anvendelse

Country Status (16)

Country Link
US (1) US5677466A (no)
EP (1) EP0567967B1 (no)
JP (1) JPH0650977A (no)
KR (1) KR940005271A (no)
AT (1) ATE140225T1 (no)
AU (1) AU670778B2 (no)
CA (1) CA2094963A1 (no)
DE (1) DE59303178D1 (no)
DK (1) DK0567967T3 (no)
ES (1) ES2092170T3 (no)
FI (1) FI931881A (no)
GR (1) GR3020740T3 (no)
IL (1) IL105519A0 (no)
MX (1) MX9302446A (no)
NO (1) NO180046C (no)
NZ (1) NZ247511A (no)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4304650A1 (de) * 1993-02-16 1994-08-18 Thomae Gmbh Dr K Kondensierte 5-gliedrige Heterocyclen, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel
DE4324580A1 (de) * 1993-07-22 1995-01-26 Thomae Gmbh Dr K Bicyclische Heterocyclen, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zu ihrer Herstellung
US5925635A (en) * 1996-04-17 1999-07-20 Dupont Pharmaceuticals Company N-(amidinophenyl) cyclourea analogs as factor XA inhibitors
US6348478B1 (en) 1997-11-20 2002-02-19 Teijin Limited Biphenylamidine derivatives
NZ504407A (en) 1997-11-20 2002-02-01 Teijin Ltd Biphenylamidine derivatives substituted by nitrogen containing heterocyclic ring useful as a Factor Xa inhibitor
US6676968B1 (en) 1999-01-28 2004-01-13 Teijin Limited Release-regulating preparations comprising biphenyldiamine derivatives
US6822101B2 (en) 2002-09-16 2004-11-23 Abbott Laboratories Process for preparing amine-substituted benzofurans
WO2004024707A2 (en) * 2002-09-16 2004-03-25 Abbott Laboratories Process for preparing amine type substituted benzofurans
EP3489692A1 (de) 2017-11-28 2019-05-29 Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH Prothrombinzeit-reagenz enthaltend einen eisenchelator

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5039805A (en) * 1988-12-08 1991-08-13 Hoffmann-La Roche Inc. Novel benzoic and phenylacetic acid derivatives
US5084466A (en) * 1989-01-31 1992-01-28 Hoffmann-La Roche Inc. Novel carboxamide pyridine compounds which have useful pharmaceutical utility
DE4134467A1 (de) * 1991-10-18 1993-04-22 Thomae Gmbh Dr K Heterobiarylderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und verfahren zu ihrer herstellung
DE4035961A1 (de) * 1990-11-02 1992-05-07 Thomae Gmbh Dr K Cyclische iminoderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und verfahren zu ihrer herstellung
DE4102024A1 (de) * 1991-01-24 1992-07-30 Thomae Gmbh Dr K Biphenylderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und verfahren zu ihrer herstellung
DE4107857A1 (de) * 1991-03-12 1992-09-17 Thomae Gmbh Dr K Cyclische harnstoffderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und verfahren zu ihrer herstellung
DE4124942A1 (de) * 1991-07-27 1993-01-28 Thomae Gmbh Dr K 5-gliedrige heterocyclen, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende arzneimittel
DE4127404A1 (de) * 1991-08-19 1993-02-25 Thomae Gmbh Dr K Cyclische iminoderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und verfahren zu ihrer herstellung
DE4129603A1 (de) * 1991-09-06 1993-03-11 Thomae Gmbh Dr K Kondensierte 5-gliedrige heterocyclen, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende arzneimittel

Also Published As

Publication number Publication date
EP0567967A1 (de) 1993-11-03
CA2094963A1 (en) 1993-10-29
MX9302446A (es) 1994-03-31
NZ247511A (en) 1995-02-24
EP0567967B1 (de) 1996-07-10
AU670778B2 (en) 1996-08-01
FI931881A (fi) 1993-10-29
ES2092170T3 (es) 1996-11-16
FI931881A0 (fi) 1993-04-27
ATE140225T1 (de) 1996-07-15
US5677466A (en) 1997-10-14
NO931528L (no) 1993-10-29
IL105519A0 (en) 1993-08-18
JPH0650977A (ja) 1994-02-25
NO931528D0 (no) 1993-04-27
NO180046C (no) 1997-02-05
GR3020740T3 (en) 1996-11-30
AU3715393A (en) 1993-11-04
KR940005271A (ko) 1994-03-21
DE59303178D1 (de) 1996-08-14
DK0567967T3 (da) 1996-11-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2950616B2 (ja) トリテルペン誘導体
CN111892578B (zh) 一种靶向降解黏着斑激酶的化合物及应用
NO180046B (no) Markerte fibrinogen-reseptor-antagonister, og deres anvendelse
TW200406407A (en) Aryl-heteroaryloxy-aryloxy-pyrimidine-2,4,6,-trione metalloproteinase inhibitors
EP2915809B1 (en) Compound suitable for detection of mitochondrial complex-1
CN116082303A (zh) 新型氧代吡啶类化合物及其中间体和应用
US5378634A (en) Labelling color for detecting methamphetamine
EP0103961B1 (en) Allyloxy- and allylthio-2,3,4,5-tetrahydro-1h-3-benzazepines
KR20170012360A (ko) 소분자 lfa-1 억제제
WO1994002462A1 (en) 4-amino-n^_-(4-methyl-4-piperidinyl)-2-methoxybenzamides
JPS5877880A (ja) テトラゾ−ル誘導体
USRE35904E (en) Method and probes for detecting nucleoside transporter and method for producing the probes
NL8020051A (nl) Radioactief gemerkte amineverbindingen en hun gebruik.
KR880002510B1 (ko) 1,4-디하이드로피리딘 유도체 및 이의 제조방법
CA2108815A1 (en) Alkoxymethyl-substituted pyridonebiphenyls
JP3373591B2 (ja) 硫酸化トリテルペン誘導体およびそれを含有するエンドセリンレセプター拮抗剤
TW202432145A (zh) 含磷化合物、藥物組合物及其應用
DE4214245A1 (de) Tritiummarkierte fibrinogen-rezeptor-antagonisten, deren verwendung und verfahren zu ihrer herstellung
KR20210077596A (ko) 방사성 할로겐이 표지된 복합체 제조용 링커화합물 및 이의 용도
JPH07233148A (ja) ピペリジン誘導体及びそれを含有する医薬製剤
JPS6045565A (ja) トリアゾ−ル誘導体
JP2021516664A (ja) テトラヒドロイソキノリン系誘導体、その製造方法及び用途
EP0409297A2 (en) Steroid ethers
JPH0436279A (ja) 光学活性なベンゾオキセピン誘導体の製造法
JPS59104378A (ja) カルボスチリル誘導体