NO173017B - Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk aktive nor-statin- eller nor-cyklostatinpolypeptider - Google Patents

Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk aktive nor-statin- eller nor-cyklostatinpolypeptider Download PDF

Info

Publication number
NO173017B
NO173017B NO874530A NO874530A NO173017B NO 173017 B NO173017 B NO 173017B NO 874530 A NO874530 A NO 874530A NO 874530 A NO874530 A NO 874530A NO 173017 B NO173017 B NO 173017B
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
product
give
sta
concentrated
nmr
Prior art date
Application number
NO874530A
Other languages
English (en)
Other versions
NO874530D0 (no
NO874530L (no
NO173017C (no
Inventor
Dennis Jay Hoover
Robert Louis Rosati
Ronald Thure Wester
Original Assignee
Pfizer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer filed Critical Pfizer
Publication of NO874530D0 publication Critical patent/NO874530D0/no
Publication of NO874530L publication Critical patent/NO874530L/no
Publication of NO173017B publication Critical patent/NO173017B/no
Publication of NO173017C publication Critical patent/NO173017C/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/14—Angiotensins: Related peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/20—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carbonic acid, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/205—Radicals derived from carbonic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D265/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D265/28—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines
    • C07D265/30—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines not condensed with other rings
    • C07D265/32—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines not condensed with other rings with oxygen atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/14—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D295/145—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with the ring nitrogen atoms and the carbon atoms with three bonds to hetero atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0227—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the (partial) peptide sequence -Phe-His-NH-(X)2-C(=0)-, e.g. Renin-inhibitors with n = 2 - 6; for n > 6 see C07K5/06 - C07K5/10
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)

Description

Denne oppfinnelse angår fremstillingen av nye nor-statin-og nor-cyklostatin-holdige peptider egnet som antihypertensive midler.
Det proteolytiske enzym renin, som har en molekylvekt på ca. 40.000, produseres og utskilles i blodet av nyren. Det er kjent å være virksomt in vivo ved å spalte naturlig forekommende plasma glykoprotein angiotensinogen, for human angiotensinogens vedkommende i bindingen mellom leucin (10.)
og valin (11.) aminosyreresten i den N-terminale ende av angiotensinogenet:
Det sirkulerende N-terminale dekapeptid (angiotensin I) som dannes ved den omtalte spaltende virkning av renin, brytes deretter ned av kroppen til et oktapeptid kjent som angiotensin II. Angiotensin II er kjent som en potent pressorsubstans, dvs. en substans som er i stand til å
indusere en signifikant økning i blodtrykket og antas å virke ved å få blodkarene til å trekke seg sammen og frigjøre det natrium-tilbakeholdende hormon, aldosteron, fra binyrene. Renin-angiotensinogen-systemet har således vært ansett som en forårsakende faktor ved visse former av hypertensjon og kongestiv hjertesvikt.
En måte å lette de uheldige effekter av virkningen av renin-angiotensinogen-systemet på, er å gi en substans som kan hemme den angiotensinogen-spaltende virkning av renin. En rekke slike substanser, innbefattet antirenin-antistoffer, pepstatin og naturlig forekommende fosfolipid-forbindelser, er kjent. Europeisk patentsøknad nr. 45.665 (publisert 2.
februar, 1982) omtaler en rekke renin-hemmende polypeptid-derivater med formel
hvor X kan være hydrogen eller en amino-beskyttende gruppe, Y
kan mangle, B er en lipofil aminosyrerest, Z er en aromatisk aminosyrerest, W kan være hydroksyl og A kan bl.a. være:
hvor hver av Rx og R2er en lipofil eller aromatisk sidekjede. Etter de definisjoner som er angitt i den publiserte patent-søknad, er det ikke tenkt på at A eller Z skulle kunne være statin eller B skulle kunne være lyein.
Europeisk patentsøknad nr. 77.028A (publisert 20. april,1983) omtaler en serie renin-hemmende polypeptid-forbindelser som har en ikke-terminal statin- eller statin-derivatrest. Denne serie innbefatter forbindelser som har en fenylalanin-histidinstatin-sekvens.
Europeisk patentsøknad 132.304A beskriver også bruk av statinholdige polypeptider son renin-hemmende antihypertensive midler, og Europeisk patentsøknad 114.993A beskriver polypeptider som inneholder cyklostatin og som er egnet som renin-hemmende antihypertensive midler.
De nye peptider fremstillet i henhold til foreliggende oppfinnelse har formel
og
og farmasøytisk akseptable salter derav, hvor Z er ^-(Y),,,-
(A)p, hvor Rx er (Ci-Cg) alkyl, amino, (Cj-CA) alkoksy, (Cx-CA) alkylamino, (C!-C3) alkoksy (C2-C4) alkylenamino, karboksy (Cx-C4) alkyl, hydroksy (C2-CA) alkylenamino, ( Cx- Cz) alkoksyCOCH2N (CH3) , amino(Ci-Cs)alkyl, morfolino, piperidyl, hydroksypiperidino, 4-oksopiperidino, piperazino, 4-oksopiperidinoetylen-ketal, 4-(Cx-Ca)alkylpiperazino, tiomorfolino, tiomorfolino-l-oksyd, tiomorfolino-1,1-dioksyd, N-(Ci-Cz,) alkoksykarbonylpiperidyl, 4-(Ci-CJ alkoksykarbonylpiperazino, 3-oksomorfolino, 3,5-dioksomorfblino, hydroksypyridyl, pyridyl, (s)-pyrrolid-2-yl, N-t-butoksykarbonyl-(s)-pyrrolid-2-yl, ( Cx- C3)alkoksykarbonyl-(s)-pyrrolid-2-yl eller 4-(Ci-CJ alkanoylpiperazino; Y er C=0, P(OCH3)=0 eller S02; A er N(CH3), NH eller 0; m og p er begge heltallene 0 eller 1; M er fenyl, benzyl, naftyl,
tienyl, metoksyfenyl, hydroksyfenyl eller klorfenyl; Q er metyl eller hydrogen; R2er ( C^- C^ alkyl, (Ci-Cg) alkyltio( Cx-C2) alkyl, (Ci-^) alkoksy (Cx-Cz) alkyl, benzyloksy (Ci-Cz)alkyl, benzyl, hydroksy(C1-C2) alkyl, karboksy (Ci-CJalkyl, ( C^ Cj) alkyl-sulfinyl (Ci-Cz) alkyl, ( C^ C^) alkylsulfonyl (Cl-Cz) alkyl, 4-benzyloksykarbonylaminobutyl, 4-aminobutyl, imidazol-4-ylmetyl, N-t-butoksykarbonylimidazol-4-ylmetyl eller karbamoyl (Cx-Cz) alkyl; X er cykloheksyl, i-propyl eller fenyl;
W er CH 005(^-0,) alkylpiperidino, CH OH, C=0, CH N3, CH,^N3, CH^-NH2, CH NH2, C(CH3) OH, C(CH3)^|0H, CH OCOCCi-Cz) alkyl eller CH 0C0 (Cr-Cj,) alkylen-C02H; Z<1>er CH20H eller R-S-T, hvor R er C=0, S er 0, NH, N(CH3) , CH2eller en kjemisk binding som knytter sammen R og T; T er (Cx-
C5) alkyl,
(Ci-CJ alkoksy, CONH-(Ci-CJ alkyl, hydrogen, trifluoretyl, (C6-C7) cykloalkyl, benzyl, amino (C2-C5) alkyl, morfolino, 4-(C1-C2) alkylpiperazino eller omega-di (C!-C2) alkylamino (C3-C5) alkyl; L er CH eller N; R5er imidazol-4-ylmetyl eller (C2-C5)alkyl; og R6er ( C^ Ct,) alkoksy med det forbehold at når m er 0, da er20; når A er O, da er Y C=0; når T er CONH-(CX-CA)alkyl, da er S NH, N(CH3) eller CH2; og når T er amino(C2-C5) alkyl, morfolino eller 4-(C1-C2)alkylpiperazino, da er S CH2eller en kjemisk binding som knytter sammen R og T,
En foretrukket gruppe utgjøres av forbindelser med formel I, hvor Y er C=0, A er NH, Q er hydrogen, X er cykloheksyl, W er CH OH, R er C=0, T er benzyl eller (C^Cs) alkyl og m og p begge er 1. Spesielt foretrukket innen denne gruppe er forbindelser hvor R2er morfolino, M er fenyl, S er O og R2er n-propyl og T er i-propyl, hvor R2er CH3SCH2- og T er i-propyl, hvor R2er n-butyl og T er metyl, hvor R2er H0CH2og T er i-propyl, hvor R2er CH30(CH2)2- og T er i-propyl, hvor R2er CH3SCH2- og T er benzyl, hvor R2er metyl og T er i-propyl, hvor R2er n-butyl og T er i-propyl, hvor R2er CH3OCH2- og T er i-propyl, og hvor R2er CH3CH2OCH2- og T er i-propyl. Andre spesielt foretrukne forbindelser innen denne gruppe utgjøres av slike hvor M er fenyl, S er O, T er i-propyl, R2er CH3SCH2-og Ri er pyrrolidyl, 4-pyridyl, piperazino eller 4-hydroksypiperidino. Dessuten forbindelser hvor Rx er morfolino, M er fenyl, S er en kjemisk binding som knytter sammen R og T og R2er n-butyl og T er CH2CH(CH3)2, og hvor R2er CH3SCH2og T er CH2CH(CH3)2. Spesielt foretrukket innen denne gruppe er også forbindelser hvor Rx er morfolino, S er O og M er 2-tienyl, R2er CH3SCH2og T er i-propyl, hvor M er 4-hydroksyfenyl, R2er CH3SCH2- og T er i-propyl, og hvor M er 4-metoksyfenyl, R2er n-butyl og T er metyl. Særlig foretrukne forbindelser innen denne gruppe er dessuten forbindelser hvor Rx er morfolino, M er fenyl, R2er n-butyl, S er NH og T er metyl.
En foretrukket gruppe utgjøres av forbindelser med formel I, hvor M er fenyl, S er en kjemisk binding som knytter sammen R og T, T er (C1-C5) alkyl og R er C=0.
Som tidligere nevnt, omfatter oppfinnelsen fremstillingen av farmasøytisk akseptable salter av de biologisk aktive forbindelsene. Egnede salter er slike som er ugiftige i de aktuelle doseringer. Siden de nye forbindelsene kan inneholde basiske grupper, er syreaddisjonssalter mulige. Farmasøytisk akseptable syreaddisjonssalter innbefatter f.eks. hydroklorid-, hydrobromid-, hydrojodid-, sulfat-, bisulfat-, fosfat-, sure fosfat-, acetat-, laktat-, maleat-, mesylat-, fumarat-, citrat-, sure citrat-, tartrat-bitartrat-, succinat-, glukonat- og sakkaratsalter.
For korthets skyld er det, hvor det har vært mulig, benyttet vanlig aksepterte forkortede navn for de enkelte aminosyrer og reagenser. For eksempel er aminosyren fenylalanin forkortet som Phe, homoserin som Hse, histidin som His, Lysin som Lys og norleucin som Nie. Den amino-beskyttende gruppen T-butoksykarbonyl, er forkortet Boe, benzyloksykarbonyl som CBZ og N-t-butoksykarbonyl på imidazolet av histidin som imBoc. Andre forkortelser er: CPBA klorperbenzosyre, DCC dicykloheksylkarbodiimid, DEC dimetylaminopropyl-etylkarbodiimid-HCl, DMF dimetylformamid, HCl hydrogenklorid, HBT hydroksybenzotriazol, mesyl CH3S02-, thala 2-tienylalanin, Nphala 1-naftylalanin, TBDMS t-butyldimetylsilyl, TEA trietylamin, S-MeCys S-metylcystein, S-Et-Cys S-etylcystein, MgSOAmagnesiumsulfat, NaOH natriumhydroksyd, CH2C12diklormetan, K2C03kaliumkarbonat, NaHC03natriumbikarbonat, O-MeTyr 0-metyl-tyrosin, 0-MeHse 0-metylhomoserin, etc.
De endrede norstatin- og norcyklostatin-forbindelser som inneholder et karbonatom mindre i strukturen, har henholdsvis formel:
Disse strukturene er forkortet til henholdsvis nor-Sta og nor-C-Sta.
Alle naturlige aminosyrer som inngår i forbindelsene som fremstilles ifølge oppfinnelsen, har L-konfigurasjon, dvs. den naturlig forekommende konfigurasjon, om intet annet er angitt.
Som del av foreliggende oppfinnelse anses også fremstillingen av forbindelser med formel I og II, hvor nor-Sta og nor-C-Sta er erstattet med nor-Staton og nor-C-Staton.
Forbindelsene fremstillet i henhold til oppfinnelsen oppviser antihypertensiv virkning in vivo hos pattedyr, innbefattet mennesket. En vesentlig del av denne virkning er et resultat av forbindelsenes evne til å hemme reninets spaltning av angiotensinogen. Mekanismen for den renin-hemmende aktivitet kan skyldes forbindelsenes selektive binding (sammenlignet med angiotensinogen) til renin. De nye forbindelsene oppviser en enzym-hemmende virkning som er valgt for renin. På grunn av deres lave molekylvekter har de fordelaktige løselighets-karakteristika i vandige medier, og muliggjør således oral administrasjon, og de kan syntetiseres til kommersielt realistiske omkostninger. Forbindelsene fremstillet i henhold til oppfinnelsen er også egnet ved kongestiv hjertesvikt.
Forbindelsene kan i henhold til oppfinnelsen fremstilles etter kjente fremgangsmåter. Den grunnleggende sub-unit for den foretrukne kjemiske syntese, er acyleringen av den ubeskyttede alfa-aminogruppen i en aminosyrerest, med en aminosyre som har en aktivert (for acyleringsformål) karboksylfunksjon og en passende beskyttelsesgruppe bundet til dens eget alfa-nitrogen, for å danne en peptidbinding mellom de to aminosyrerestene, hvorpå beskyttelsesgruppen fjernes. Denne koblings-deblokkeringssyntese foretas gjentatte ganger for å bygge opp polypeptidet ved å starte fra den C-terminale ende slik som beskrevet. Aminosyrene som i henhold til oppfinnelsen benyttes til syntese av forbindelsene, er kommersielt tilgjengelige (som frie syrer, salter eller estere, etc.) i både alfa-amino-beskyttede og alfa-amino-ubeskyttede former.
Aktiviteten av forbindelsene som hemmere av reninets angiotensinogen-spaltende virkning, kan bestemmes ved å undersøke forbindelsenes evne til å hemme den angiotensinogen-spaltende aktivitet av renin in vitro.
Forbindelsene fremstillet i henhold til oppfinnelsen kan gis som antihypertensive midler ved oral eller parenteral administrasjon, hvorav førstnevnte foretrekkes av bekvemmelig-hetshensyn for pasienten. I alminnelighet gis disse antihypertensive forbindelsene oralt i doser som varierer fra ca. 0,1 mg til ca. 20 mg per kg legemsvekt per dag, og 0,1 mg til ca. 5 mg per kg legemsvekt per dag ved parenteral administrasjon. Variasjoner vil nødvendigvis opptre avhengig av pasientens tilstand og av hvilken forbindelse som gis. Behandlingen startes gjerne med en lav døgndose som behandlende lege øker kun når det er påkrevet. Det skal bemerkes at forbindelsene kan gis i kombinasjon med farmasøytisk akseptable bæremidler ved hjelp av de tidligere angitte administrasjonsmåter, og at administrasjonen kan foretas med både enkeltdoser og avdelte doser.
De nye forbindelsene kan gis oralt i en rekke ulike doseringsformer, dvs. de kan tilberedes med forskjellige farmasøytisk akseptable inerte bæremidler i form av tabletter, kapsler, pastiller av forskjellig type, pulvere, spray, vandige suspensjoner, miksturer, siruper og lignende. Slike bæremidler innbefatter faste fortynnings- og/eller fyllstoffer, sterile vandige medier og forskjellige ugiftige organiske oppløsningsmidler, etc. De farmasøytiske formuleringene kan dessuten tilsettes passende søtningsmidler og/eller smaksforbedrende midler. I alminnelighet vil forbindelsene i slike orale doseringsformer forekomme i konsentrasjonsnivåer fra ca. 0,5% til 90% av sammensetningens totalvekt, i mengder som er tilstrekkelige til å gi den ønskede enhetsdose.
For oral administrasjon kan det benyttes tabletter som inneholder forskjellige hjelpestoffer, så som natriumcitrat, kalsiumkarbonat og kalsiumfosfat, sammen med diverse spreng-midler, så som stivelse, fortrinnsvis potet- eller tapioka-stivelse, alginsyre og visse komplekse silikater, sammen med bihdemidler, så som polyvinylpyrrolidon, sukrose, gelatin og akasie. Glattemidler så som magnesiumstearat, natriumlaurylsulfat og talk kan også benyttes som fyllstoff i myke og harde gelatinkapsler; samt laktose eller melkesukker og høymolekylære polyetylenglykoler. Når det for peroral administrasjon ønskes vandige suspensjoner og/eller miksturer, vil det essensielle virkestoff kunne kombineres med forskjellige søtnings- eller smaksforbedrende midler, farvestoffer eller eventuelt emulgeringsmidler i vann, etanol, propylenglykol, glycerol og forskjellige kombinasjoner av disse.
De nye forbindelsene kan også benyttes ved diagnose av hypertensjon og kongestiv hjertesvikt.
I de følgende eksempler ble høytrykks væskekromatografi (HPLC) foretatt under følgende betingelser: 214 nm deteksjon, 4,6 x 250 mm Dupont Zorbax C-8 kolonne med en gjennomstrømningshastighet på 1,5 ml/min. Forkortelsene for TLC-systemene er: System A = etylacetat-heksan, i de angitte forhold, på silika; System B = eter-heksan, i de angitte forhold, på silika; System C = 18/2/1 HCCl3-EtOH-HOAc, på silika; System D = 9:2:1 kloroform-etanol-eddiksyre.
EKSEMPEL 1
BocPheHisnor-C-StaNHCH3(I, Z=t-butoksykarbonylamino;
M=fenyl; Q=H; R2=imidazol-4-ylmetyl; W=CH OH;
Z^ CONHCH, ; og X=cvkloheksvH
A. N-metyl-(S)-3-t-Boc-amino-4-cykloheksyl-(R)-2-hydroksysmørsyreamid
(S)-3-t-Boc-amino-4-cykloheksyl-(R)-2-hydroksysmørsyre (100 mg) (US-patent 4.599.198) ble oppløst i 0,9 ml tetrahydrofuran med 55 -liter trietylamin, og blandingen ble behandlet ved -30°C med isobutylklorformiat (45 /uliter) . Etter 1,5 timer ble blandingen avkjølt til -60°C og tilsatt 1,5 ml av en 1,6M oppløsning metylamln i tetrahydrofuran, hvoretter blandingen ble bragt til 25°C. Et overskudd av metylamin ble boblet inn i reaksjonsblandingen som så ble fortynnet med25ml eter, ekstrahert 2 ganger med mettet
natriumbikarbonatoppløsning, tørket og konsentrert. Kromatografi i 2:1 etylacetat-heksaner på silika ga 45 mg (42%) av tittelforbindelsen som et farveløst faststoff, Rf = 0,16 i 2:1 etylacetat-heksaner, silika, og RP-HPLC, 40/60 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat, 3,32 min.
B. N-metyl-(S)-3-amino-4-cykloheksyl-(R)-2-hydroksysmørsyreamid
Produktet fra Eksempel IA (45 mg) ble oppløst i 2 ml 4N hydrogenklorid-dioksan og omrørt ved 25°C i 1,5 timer. Blandingen ble konsentrert og inndampet flere ganger sammen med eter for å gi 50 mg av tittelforbindelsen som et farveløst faststoff. HPLC: retensjonstid 3,05 min., 40/60 MeCN-pH 7,0 0,1M fosfat.
C. BocPheHis( imBoc) nor- C- StaNHCH3
En oppløsning av produktet fra Eksempel IB (49 mg) i
0,5 ml diklormetan, ble behandlet ved 0°C med henholdsvis 30 juliter trietylamin, 112 mg BocPheHis (imBoc) (US-patent 4.599.198), 48 mg hydroksybenzotriazol og 46 mg dicykloheksylkarbodiimid, hvoretter blandingen ble omrørt ved 0°C i 6 timer og deretter fikk oppvarmes til 25°C over natten. Blandingen ble filtrert, bunnfallet vasket med diklormetan og de kombinerte filtrater konsentrert og oppløst i etylacetat. Etter omrøring i noen få minutter, ble etylacetatsuspensjonen filtrert og filtratet vasket med IN natriumhydroksydoppløsning (2 ganger), tørket over magnesiumsulfat og konsentrert. Kromatografi på silika under eluering med etanol-diklormetan med trinnvis økende polaritet (1%, 2%, 4%, 6% og 10% etanol) ga 57 mg av tittelforbindelsen som et farveløst amorft faststoff.
D. BocPheHisnor- C- StaNHCH3
Produktet fra Eksempel 1C ble oppløst i 1,2 ml 80/20 (volumdeler) eddiksyre-vann og omrørt ved 25°C i 12 timer. Blandingen ble konsentrert, inndampet 3 ganger sammen med eter og 2 ganger med diklormetan for å gi 47 mg av et produkt i form av et lysebrunt pulver.
HPLC i 50/50 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat, 3,61 min.;<4>i NMR, DMSO, 300 MHz, partiell, delta ppm: 1,32 (s, 9H, Boe); 2,60
(d, 3H, NCH3) ; 3,90, 4,66 og 7,9 (m, 1H hver); 4,18 (m, 2H) ; 7,12, 7,7, 8,28 (d, 1H hver); 7,32 (s, 1H); 7,2-7,4 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 2
BocPheHisnor-C-StaNHCONHCH2CH2CH3(I, Z=t-butoksy-karbonylamino; R2=imidazol-4-ylmetyl; M=fenyl; Q=H;
W=CH OH; Z^ CONHCONHCHoCHoCH, ; oa X=cvkloheksvl
A. N-t-Boc-O-t-butyldimetylsilyl-nor-C-StaNHCONHCH, CH, CH,
En oppløsning av 415 mg (S)-3-t-Boc-amino-(R)-2-t-butyl-dimetylsilyloksy-4-cykloheksylsmørsyreamid (US-patent 4.599.198) og 94 -liter propylisocyanat i 2 ml toluen, ble oppvarmet til 100°C i 90 timer og deretter avkjølt og krornatografert på silika i 15% etylacetat-heksan, hvilket ga260mg av tittelforbindelsen som et farveløst oljeaktig skum, TLC Rf = 0,49, 1:2 (system A).
B. Nor- C- StaNHCONHCH, CH, CH,- hvdroklorid
Produktet fra Eksempel 2C (255 mg) ble oppløst ved 25°C i 3 ml av en oppløsning nylig fremstillet 5% vandig 48% hydrogenfluoridsyre i acetonitril og omrørt i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble tilsatt et overskudd av natriumbikarbonat sammen med 20 ml vann, og blandingen ble ekstrahert med etylacetat, som deretter ble vasket med vann, tørket (magnesiumsulfat) og konsentrert for å gi 198 mg av en olje. Den ble oppløst ved 0°C i 4 ml 4N hydrogenklorid-dioksan, omrørt ved 25°C i 1 time og deretter konsentrert for å gi 130 mg farveløst voksaktig faststoff. NMR tydet på at silylgruppe-avspaltningen var ufullstendig. TLC viste to produkter med Rf = 0,42 og 0,07 (system C) som antas å være henholdsvis aminosilyleteren og aminoalkoholen. Dette produktet ble benyttet uten videre rensing i det følgende trinn.
C. BocPheHis f imBoc) nor- C- StaNHCONHCH-, CH., CH,
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 119 mg av produktet fra Eksempel 2B 97 mg av tittelforbindelsen som et farveløst amorft faststoff, TLC Rf = 0,55 (system C). Den uønskede korresponderende O-silylerte forbindelse (oppnådd fra 0-silyl-forurensningen i Eksempel 2B) ble fraskilt under det kromatografiske trinn (en mindre polar substans, Rf = 0,60, (system C)).
D. BocPheHisnor- C- StaNHCONHCH. CHoCH,
Produktet fra Eksempel 2C (91 mg) ble oppløst i 1,5 ml 80/20 eddiksyre-vann og omrørt ved 25°C i 6 timer. Blandingen ble konsentrert, inndampet sammen med eter 3 ganger og tørket over natten for å gi 80 mg produkt i form av et farveløst faststoff, Rf = 0,10 i system C, og med en HPLC-retensjonstid på 2,35 min. i 70/30 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat.
NMR, DMSO, 250 MHz, partiell delta, ppm: 0,86 (t, 3H);
1,32 (s, 9H, Boe); 1,47 (q, 2H); 3,14 (q, 2H); 4,06 og 4,48 (m, 1H, hver); 4,17 (m, 2H); 6,83 (s, 1H); 7,10, 7,63, 8,02 (d, 1H hver); 7,15-7,35 (m, aromatisk); 7,56 (s, 1H); 8,28 (m, 1H) .
EKSEMPEL 3
Indol-2-karbonylHisnor-C-Sta-metylester (II, R5=imidazol- " 4- vlmetvl; Rg =OCH, ; og L=CH)
A. 4-cykloheksyl-2-pentyn-l-yl-tetrahydrofuran-pyran- l- yl- eter
En ovntørket 5 liter trehalset rundkolbe forsynt med mekanisk rører, termometer, dråpetrakt og nitrogeninnløp, ble tilsatt 192 g propargyltetrahydropyranyleter og 750 ml tørr tetrahydrofuran (Aldrich gold label). Den omrørte oppløsningen ble holdt ved 0°C med et tørris-acetonbad mens 604 ml 2,5M n-butyllitium ble tilsatt i løpet av 45 min. Den resulterende mørke oppløsning ble tilsatt til en oppløsning av cykloheksylmetylbromid i heksametylfosforamid (destillert fra kalsiumhydrid under redusert trykk) i løpet av 20 minutter ved 5-10°C, og omrøringen ble fortsatt i 4 timer ved 25°C. Blandingen ble helt over i en omrørt blanding av 2 liter is-vann og 2 liter heksan. Det organiske lag ble vasket med 2 x 500 ml 1,0M litiumkloridoppløsning, tørket over natriumsulfat, konsentrert og destillert ved bruk av en 20 cm Vigreux-kolonne for å gi 102 g gjenvunnet propargyltetrahydropyranyleter, kp. 60-90°C ved 3 mm, etterfulgt av 151 g av tittelproduktet, kp. 125-130°C ved 0,5 mm, TLC Rf = 0,5 i 1:4 system B.
B. 4- cykloheksvl- 2- butvn- l- ol
En 2 liter trehals-kolbe forsynt med mekanisk rører, nitrogeninnløp og termometer ble tilsatt 140 g av produktet fra Eksempel 3A og 700 ml metanol. Den omrørte blanding ble avkjølt til 2-3°C og tilsatt 560 mg p-toluensulfonsyre, hvorpå kjølebadet ble erstattet med et vannbad som hevet reaksjonstemperaturen til 30°C. Etter 4,5 timer ble 5 ml IN natriumhydroksydoppløsning tilsatt og det meste av metanolen fjernet under redusert trykk på en rotasjonsfordamper. Residuet ble oppløst i 700 ml heksan og oppløsningen vasket med IN natriumhydroksydoppløsning (3 x100ml), tørket over kaliumkarbonat, filtrert, konsentrert og destillert fra kaliumkarbonat ved bruk av en 20 cm Vigreux-kolonne for å gi 76 g produkt med kp. 90°C ved 1 mm som en lysegul væske, som ifølge ^ NMR var forurenset med 1% metanol og 1% heksametylfosforamid. Dette produktet ble benyttet i det neste trinn uten ytterligere rensing. TLC Rf = 0,5, 1:1 (system B). Analyse beregnet for C10H16O: C, 78,90; H, 10,59
Funnet: C, 78,31; H, 10,72.
C. Z - 4- cykloheksvl- 2- buten- l- ol
En 500 ml Parr-beholder ble tilsatt 35,2 g av produktet fra Eksempel 3B, 250 ml toluen, 250 mg "Lindlar Catalyst Poison" (Fluka). Oppløsningen ble spylt med nitrogen og tilsatt 14,08 g Lindlar katalysator (Aldrich). Blandingen ble ristet under et hydrogentrykk på 2,5 kg/cm<2>i 45 min., hvorunder reaksjonstemperaturen spontant steg til ca. 45°C. Den avkjølte suspensjon ble filtrert gjennom Celite og kombinert med en annen reaksjonsblanding fremstillet på samme måte fra nye 35,2 g av samme utgangsmateriale. Blandingen ble konsentrert ved destillasjon under atmosfæretrykk fra kalsiumkarbonat gjennom en 3 0 cm Vigreux-kolonne og deretter på en rotasjonsfordamper under vannstrålevakuum ved 25°C, etterfulgt av oppvarming til 80°C under 0,3 mm i samme kolbe forsynt med en Vigreux-kolonne, inntil svakt tilbakeløp ble oppnådd. Den gjenværende væske, en lysegul olje, veide 77,4 g, og var ifølge NMR forurenset med 1% metanol og 1% heksametylfosforamid. Dette produkt oppviste en enkelt flekk ved TLC Rf = 0,4, 1:1 (system B) og hadde ifølge NMR ingen påvisbar trans-isomer.
D. 2( S), 3( R)- epoksy- 4- cvkloheksyl- l- butanol
En 1 liter trehals-kolbe forsynt med termometer, mekanisk rører, nitrogeninnløp og kjølebad, ble tilsatt 15 g 4 Ångstrøm600mesh molekylarsikt, 400 mi diklormetan og 7,23 ml (+)-diisopropyl-L-tartrat (Aldrich). Den omrørte blanding ble avkjølt til -5°C og tilsatt 6,75 ml titantetraisopropoksyd og deretter 227 ml 3,OM t-butylhydrogenperoksyd i toluen
(Aldrich), som ingen ga nevneverdig eksoterm reaksjon. Til den omrørte blanding ble det ved -20°C tilsatt en oppløsning av 70 g av produktet fra Eksempel 3C i 30 ml diklormetan i løpet av 10 min., slik at temperaturen ikke oversteg -20°C. Blandingen ble omrørt i 6 timer ved -10°C og deretter anbragt (uten omrøring) i kjøleskap (-10°C) i 60 timer. Blandingen ble igjen omrørt i et isbad og tilsatt 120 ml og deretter 30 ml 6N natriumhydroksydoppløsning, hvoretter blandingen ble mettet med natriumklorid. Metanol (50 ml) ble tilsatt og blandingen filtrert, behandlet med 100 ml 0,1M pH 7 fosfatbuffer, hvorpå den etter kraftig risting fikk stå inntil delvis separasjon inntrådte. Det nedre (organiske) lag ble fraskilt, og det øvre (vandige og midtre emulsjon) lag ble ekstrahert med diklormetan (3 x 200 ml). Den gjenværende emulsjon (midtre lag) ble filtrert gjennom Celite som forårsaket fullstendig separasjon i et organisk og et vandig lag. De kombinerte organiske lag ble vasket med pH 7 fosfatbuffer (3 x 100 ml), vandig bikarbonat, saltvann, tørket (magnesiumsulfat), filtrert og konsentrert for å gi 85 g av en viskøs olje som ble destillert ved bruk av en 2 0 cm Vigreux-kolonne for å gi12 g, kp. 60-122°C ved 0,5 mm og deretter 51 g av tittelforbindelsen, kp. 122-130°C ved 0,45 mm, TLC Rf = 0,20 i
2 :1 (system B).
Analyse beregnet for C10H18O2:
C, 70,55; H, 10,66
Funnet: C, 69,89; H, 10,50.
E. 2( S), 3( R)- epoksv- 4- cykloheksvl- l- butansvre
3g av produktet fra Eksempel 3D ble oppløst i acetonitril (30 ml) og i den angitte rekkefølge tilsatt 45 ml vann, 30 ml tetrakiormetan, 690 mg ruthenium-triklorid-trihydrat og 10,0 g perjodsyre. Temperaturen steg gradvis, men ble holdt ved 30-35°C ved forsiktig avkjøling. Etter 1,5 timer ble 75 ml saltvann og 400 ml kloroform tilsatt. Det organiske lag ble fraskilt og det vandige lag ekstrahert 3 ganger med kloroform (400 ml). De kombinerte organiske lagene ble vasket med 50 ml 2N saltsyre mettet med natriumklorid, tørket (magnesiumsulfat), filtrert gjennom Celite og konsentrert for å gi 2,55 g av tittelforbindelsen som et purpur faststoff, TLC Rf = 0,40, (system C) som omgående ble benyttet uten rensing i det neste trinn.
F. 3 ( S) - azido- 2 ( R) - hvdroksy- 4- cykloheksylsmørsyre
Produktet fra Eksempel 3E (2,65 g) ble oppløst i 10 ml absolutt etanol og ved 25°C tilsatt til en omrørt oppløsning av 2,11 g litiumazid og 6,43 ml titantetraisopropoksyd i 180 ml absolutt etanol. Blandingen ble omrørt ved 25°C i 20 timer og deretter ved 35°C i 5 timer og ved 25°C i 14 timer, hvorpå den ble konsentrert, oppløst i 250 ml eter og 75 ml 1% svovelsyre, omrørt i 30 min. og separert. Det resulterende organiske lag ble vasket med 5% svovelsyre (3 x 20 ml), pH 7 fosfatbuffer (2 ganger), tørket (magnesiumsulfat) og konsentrert for å gi2,82 g av tittelforbindelsen som en lysebrun olje som gikk over i fast form ved henstand. Materialet hadde ved TLC Rf = 0,35 (system C) og ved IR (CHC13) 2100 cm"<1>.
G. 3(S)-azido-2(R)-hydroksy-4-cykloheksylsmørsyre-metylester
Diazometan ble fremstillet ved å behandle 4,5 g N'-nitroso-N-metyl-N-nitroguanidin i 75 ml eter med 31 ml 6N natriumhydroksydoppløsning ved 0°C, etterfulgt av dekantering og kortvarig tørking av det organiske lag over 5 g kalium-hydroksyd. Oppløsningen ble anbragt i en dråpetrakt og dråpevis tilsatt til en omrørt oppløsning av 2,82 g av produktet fra Eksempel 3F i 50 ml eter ved 0°C. Etter 40 min. ble 20 ml eddiksyre tilsatt og blandingen ekstrahert med mettet natriumbikarbonat (3 x 20 ml), natriumhydroksydoppløsning (2 x 20 ml), tørket (natriumsulfat), filtrert og kromatografert på silika under eluering med 1:8 etylacetat-heksan. 2,43 g av tittelforbindelsen ble oppnådd ved konsentrering av passende fraksjoner og oppviste TLC Rf = 0,58, 1:1 (system A),
IR (CHC13) 2100 cm"<1>, [alfa]D<20>+ 10,1° (c=l,19, CHC13) .
H. 3(S)-amino-2(R)-hydroksy-4-cykloheksylsmørsyre-metylester- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 3G (2,23 g) ble ristet med 100 mg 10% Pd/C i 15 ml etanol og 0,4 ml eddiksyre under 3,5 kg/cm<2>hydrogen i 40 min. ved 25°C. Blandingen ble filtrert gjennom Celite, konsentrert, inndampet sammen med toluen (2 x 10 ml), oppløst i 4 ml 3,4M hydrogenklorid-dioksan, konsentrert og inndampet flere ganger sammen med eter for etter tørking å gi1,49 g av et oljeaktig lysegult skum, TLC Rf = 0,15 (platen ble etter avsetting av flekkene utsatt for ammoniakkgass før utvikling i system C).
I. Indol- 2- karbonvlHis- metvlester
5,5 g histidin-metylester-dihydroklorid ble suspendert i500ml diklormetan og behandlet ved 0°C med 6,92 ml trietylamin og deretter suksessivt med 4,2 g indol-2-karboksylsyre, 5,56 g hydroksybenzotriazol og 5,35 g bicykloheksylkarbodiimid.
Blandingen ble omrørt i et isbad som så fikk anta 25°C over natten. Blandingen ble filtrert, bunnfallet vasket med diklormetan, filtratet konsentrert, residuet oppløst i 200 ml kloroform og ekstrahert med 4 x 30 ml IN natriumhydroksyd-oppløsning, saltvann, tørket (natriumsulfat) og konsentrert for å gi 7,2 g av et gult skum. Skummet ble oppløst i en blanding av 5 ml kloroform, 20 ml vann, 25 ml IN saltsyre, hvorpå det vandige lag ble vasket med 5 ml kloroform og deretter justert til pH 6 med natriumhydroksydoppløsning.Blandingen ble konsentrert og tørket for å gi 4,3 g av et lysegrønt faststoff som hadde en retensjonstid på 3,46 min. ved HPLC i 35/65 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat (85% totalabsorbsjon), med mindre forurensninger ved 3,3 6 og 1,66 min. TLC Rf i system C var 0,07. Dette produktet ble benyttet i det neste trinn uten ytterligere rensing.
J. N-alfa-(indol-2-karbonyl)-N(im)-t-butoksykarbonyl-L- histidin
4,3 g av produktet fra Eksempel 31 ble oppløst i 60 ml metanol og 20 ml vann, avkjølt til 0°C og behandlet med 7,6 g vannfri kaliumkarbonat. Etter 1 time ved 0°C og 2 timer ved25°C, ble blandingen avkjølt, regulert til pH 3 med 6N saltsyre, konsentrert, avkjølt til 0°C, bragt til pH 10,5 med6N natriumhydroksyd, behandlet med 150 ml dioksan og ved0°C tilsatt 4,2 ml di-t-butyldikarbonat (Boe)<20>).Blandingen ble
deretter omrørt ved 25°C og pH holdt mellom9og 10,5 ved
•i
tilsetning av 6N natriumhydroksyd. Etter 75 min. ble ytterligere 2 ml (Boe)<20>) tilsatt, og etter ytterligere 15 min. ble blandingen konsentrert for å fjerne det meste av dioksanet, hvorpå 100 ml vann ble tilsatt og den resulterende oppløsning vasket 3 ganger med eter (25 ml hver gang). Det vandige lag ble avkjølt i et isbad, tilsatt 500 ml etylacetat og pH av det vandige lag bragt til1,3 med 6N saltsyre. Det organiske lag ble fraskilt, det vandige lag ekstrahert med etylacetat, de organiske lagene kombinert, vasket med saltvann, tørket (natriumsulfat), filtrert og konsentrert for etter tørking, å gi 3,1 g av tittelforbindelsen som et tørt gult pulver, HPLC i 50/50 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat 4,57 min.
(93% av integratorens totale UV-absorbsjon) og [alfa]D<20>+ 10,5°
(c=0,88, CHC13) .
K. Indol- 2- karbonvlHis( imBoc) nor- C- Sta- metylester
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ble 500 mg av produktet fra Eksempel 3H i 25 ml diklormetan, koblet med 911 mg av produktet fra Eksempel' 3J, hvorved 550 mg av tittelforbindelsen ble oppnådd, TLC Rf = 0,58 (system C). En mindre komponent, Rf = 0,55 forekom også.
L. Indol- 2- karbonvlHisnor- C- Sta- metvlester
Produktet fra Eksempel 3K (455 mg) ble omrørt i 10 ml 5:1 eddiksyre-vann i 16 timer ved 25°C, konsentrert, inndampet flere ganger sammen med eter og tørket for å gi 431 mg av et lysegult pulver, HPLC i 40/60 acetonitril-pH 2,1 0,1M fosfat som oppviste topper ved 5,53 min. (39%) og 6,43 (58%).
NMR, DMSO, partiell delta, ppm: 2,94 (m); 3,53 (s, 3H, 0CH3) ; 4,02, 4,18, 4,64 (m) ; 6,80 (s, 1H) ; 6,9-7,6 (aromatisk m); 7,0 (t); 7,4 (d); 7,6 (d).
EKSEMPEL 4
BocPheHis(imBoc)nor-C-Sta-metylester (I, Z=t-butoksy-karbonylamino; R2=N-t-butoksykarbonylimidazol-4-yl-metyl; W=CH OH; Q=H; M=f enyl; Z<1>=C02CH3;
og X=cykloheksyl)
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C ga 2,0 g av produktet fra Eksempel3H, 1,8 g av tittelforbindelsen som et farveløst skum, TLC Rf = 0,37 i system C, HPLC i 70/30 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat som eluertes ved 5,42 min. Det ble også oppnådd 125 mg av en mindre polar substans, Rf = 0,43, som spektralt ble identifisert som O-BocPheHis(imBoc)-derivatet av det ovenfor angitte produkt. En blanding (500 mg) av produktet for dette eksempel og denne forbindelse ble også oppnådd.
NMR, CDC13, 300 MHz, delta, ppm: 1,33 og 1,55 (s, 9H hver, Boe); 2,72 og 2,94 (m, 1H hver); 3,1 (m, 2H); 3,70 (s, 3H, OCH3); 4,04, 4,52 og 4,95 (m, 1H hver); 4,28 (m, 2H); 6,68 og 8,08 (d, 1H hver); 7,05-7,30 (m, aromatisk); 7,88 (s, 1H).
EKSEMPEL 5
BocPheHisnor-C-Sta-metylester (I, Z=t-butoksykarbonyl-amino; M=fenyl; Q=H; R2=imidazol-4-ylmetyl; Z<1>==C02CH3;
W=CHOH; oa X=cvkloheksvl)
Produktet fra Eksempel 4 (800 mg) ble omrørt 14 timer i10ml 4:1 eddiksyre-vann ved 25°C, konsentrert, inndampet flere ganger sammen med eter, hvilket ga 580 mg av et lysegult skum,TLC Rf = 0,30 i system D, HPLC i 50/50 acetonitril-pH 2,1 0,1M fosfat, 6,32 min.
NMR, 300 MHz, CDC13, partiell, delta, ppm: 1,42 (s, 9H, Boe); 2,9-3,1 (m); 3,78 (s, 3H, OCH3) ; 4,20 og 4,62 (1H hver); 4,38 (m, 2H) ; 6,89 (s, 1H) ; 7,1-7,4 (m, aromatisk); 7,78 (m, 2-3H).
EKSEMPEL 6
BocPheHisnor-C-Staton-metylester (Z= (CH3) 3COCONH;
M=fenyl; Q=H; X=cykloheksyl; R2=imidazol-4-ylmetyl;
W=C=Q; oa Z^ COyCH,)
En omrørt oppløsning av 157 mg pyridiniumdikromat i 10 ml diklormetan ble behandlet ved 25°C med 107/iliter eddiksyreanhydrid og deretter med 250 mg av produktet fra Eksempel 5 tilsatt i én porsjon. Etter 1,5 timer ble blandingen fortynnet med 150 ml diklormetan, og denne oppløsningen ble vasket med 2 x 10 ml IN saltsyre, vandig bikarbonat, saltvann, tørket (natriumsulfat) og konsentrert for å gi 260 mg av et brunt faststoff, TLC Rf = 0,2 (hovedflekk) og 0,27 (mindre flekk, ca. 5%), i system D. Ved disse TLC-undersøkelsene kunne ingen av de mer polare produkter fra Eksempel 5 påvises. Den mindre polare forurensning kunne fjernes ved kromatografi på silika i 5% etanol-etylacetat, men gjenvinningen var dårlig; 50 mg råmateriale ga 7 mg produkt som ifølge TLC var rent.
NMR, 300 MHz, CDC13, partiell, delta, ppm: 1,24 (s, Boe); 3,82 (s, OOCH3) ; 7,0-7,5 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 7
MorfolinokarbonylPheHisnor-C-Sta-metylester (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=imidazol-4- vlmetvl; W=CH OH; Z^ CCCH, ; og X=cvkloheksvl)
A. ( S)- 2- isocyanat- 3- fenvlpropionsyre- benzvlester
Etter fremgangsmåten til Lombardino et al., (J. Med. Chem., 1964, 1, 97) ble 18,0 g L-fenylalanin-benzylester-hydroklorid i 150 ml toluen omrørt under tilbakeløpsbehandling i fosgenatmosfære i 1,5 timer, avkjølt og konsentrert for å gi et faststoff som ble omkrystallisert fra 120 ml heksan for å gi 16,1 g farveløse nåler.
Analyse beregnet for C17H15N03:
C, 72,59; H, 5,37; N, 4,98.
Funnet: C, 72,32; H, 5,35; N, 4,92.
Smp. 68-72°C. [alfa]D<23>-80,4° (C=l,02, CHC13) . IR (CHC13) 2250, 1750cm"<1>.
B. MorfolinokarbonylPhe- benzylester
Produktet fra Eksempel 7A ble oppløst i 5 ml diklormetan, behandlet ved 25°C med 930 -liter mor f ol in, og etter 3 0 min. ble blandingen konsentrert til et voksaktig faststoff som ble omkrystallisert fra varm 4:1 heksan-etylacetat for å gi 1,92 g av tittelforbindelsen, smp. 87-89°C. MS (kjemisk ionisasjon, isobutan) 369 (MH<+>, basistopp).
C. MorfolinokarbonylPhe
Produktet fra Eksempel 7B (1,85 g) ble oppløst i 30 ml absolutt metanol og 5 ml eddiksyre og ristet med 0,5 g 10% Pd/C i 1 time under et hydrogentrykk på 3,7 kg/cm<2>. Suspensjonen ble filtrert, konsentrert, inndampet 3 ganger sammen med toluen og tørket for å gi 1,43 g av et farveløst skum.
D. BocHis( imBoc) nor- C- Sta- metylester
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, bortsett fra at DiBocHis ble benyttet i stedet for BocPheHis(imBoc), ga 200 mg av produktet fra Eksempel 3H 345 mg av en ca. 1,5:1-blanding av tittel-substansen, Rf = 0,38 og det korresponderende 0-BocHis(imBoc)-derivat, Rf = 0,50, (TLC på silika i etylacetat). Denne blandingen ble benyttet uten separasjon i Eksempel 3E. Blandingen kunne separeres ved preparativ HPLC på en Zorbax C-8 25 cm x 9,8 mm kolonne under eluering med 85/15 acetonitril-vann ved 6:3 ml/min., deteksjon ved 254 nm. Tittelforbindelsen eluertes etter 4,76 min. og det O-acylerte derivat ved 6,48
min. Rene prøver av hver ble derved oppnådd.
E. BocHisnor- C- Sta- metvlester
Blandingen oppnådd i Eksempel 7D (895 mg) ble oppløst i20ml metanol ved 25°C og behandlet med 30 mg vannfri kaliumkarbonat. Etter 1 time ble blandingen konsentrert og tørket for å gi 604 mg av et gult skum som ble benyttet uten rensing i den etterfølgende reaksjon. HPLC i 50/50 acetonitril-pH 2,1 0,1M fosfat oppviste topper ved 3,15 min. og 1,98 min. i forholdet 2,8:1. Toppen ved 1,98 min. ble antatt å være BocHisOMe, hvilket ble bekreftet ved NMR av blandingen og ved påfølgende omdannelse til det nedenfor angitte kjente derivat.
F. Hisnor- C- Sta- metylester- hvdroklorid
Produktet fra Eksempel 7E (595 mg) ble oppløst i 3,4N
hydrogenklorid-dioksan ved 25°C og omrørt i 30 min. Blandingen ble konsentrert og residuet tørket i vakuum for å gi 555 mg av et gult faststoff, HPLC i 5/95 acetonitril-pH 2,1 0,1M fosfat, 1,54 min. NMR tydet på at tittelforbindelsen forelå, forurenset med histidinmetylester-dihydroklorid.
G. MorfolinokarbonylPheHisnor- C- Sta- metvlester
Ved å følge fremgangsmåten i Eksempel 1C, bortsett fra at produktet fra Eksempel 7C ble benyttet i stedet for BocPheHis(imBoc) og at 2,2 ekv. trietylamin ble benyttet i stedet for 1,1 ekv., ga 550 mg av produktet fra Eksempel 7F365 mg av et lysegult amorft faststoff som ble oppløst i 3 ml metanol og behandlet med 4 mg vannfri kaliumkarbonat ved 25°C i 2 timer og konsentrert for å gi 355 mg av et lysegult skum. Dette ble oppløst i 4 ml diklormetan og kraftig omrørt i 5 min. med 20 ml IN saltsyre. Lagene ble separert og det vandige lag ekstrahert med 2 x 2 ml diklormetan. Det vandige lag ble behandlet med tilstrekkelig 2N natriumhydroksyd til at pH steg til 10,5,og ble deretter ekstrahert med 4 x 100 ml diklormetan. Sistnevnte diklormetanekstrakter ble tørket (natriumsulfat) og konsentrert for å gi 225 mg av tittelforbindelsen som et hvitaktig skum, TLC Rf = 0,1 i system D, HPLC 2,95 min. i 50/50 acetonitril-pH 2,1 fosfat (93% av total UV-integrasjon), med en mindre forurensning ved 1,94 min. (5% UV-integrasjon).
NMR, 300 MHz, CDCl3, partiell, delta, ppm: 0,7-1,4 (m, 6-8H); 1,5-1,8 (m, 4-6H); 3,4-2,8 (m, ca. 8H); 3,6 (m, 4H); 3,73 (s, 3H, 0CH3) ; 4,08 og 4,54 (m, 1H); 4,30 (m, 2H); 5,2 (m, 1H); 6,82 og 7,57 (s, 1H hver); 6,97 og 8,12 (d, 1H hver); 7,1-7,35 (m, ca. 6H, aromatisk).
EKSEMPEL 8
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-metylester (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
W=CH OH; Z^ COoCH, og X=cvkloheksvl)
A. Norleucin- benzvlester
Etter den generelle fremgangsmåte skissert i J. Med Chem.
(1986), 30, 3575, ble 15,0 g norleucin (Nie) blandet med
200 ml benzylalkohol og avkjølt til 0°C. Tionylklorid (25 ml) ble tilsatt dråpevis i løpet av 15 min. og blandingen langsomt oppvarmet til 90°C, hvorunder det ved ca. 50°C inntrådte en voldsom S02-utvikling. Etter 2 timer ved 90°C ble blandingen avkjølt til 0°C og tilsatt ytterligere 25 ml tionylklorid.Blandingen ble deretter oppvarmet igjen til 90°C i 2 timer, avkjølt, fortynnet med 1,6 liter eter og lagret over natten ved 0°C. De utfelte krystallene ble frafiltrert, vasket med eter og tørket for å gi 23,1 g av et fuktig faststoff som ble omkrystallisert fra 1:10 etanol-eter ved bruk av 23 ml etanol.
Det frafiltrerte og tørkede faststoff veide 17,1 g, TLC Rf = 0,25 i system C (platene med avsatte flekker ble utsatt for ammoniakkgass og tørket før eluering).
B. MorfolinokarbonvlPheNle- benzylester
Ved å følge fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 2,12 g av produktet fra Eksempel 8A og 2,63 g av produktet fra Eksempel 7C, 3,30 g av tittelforbindelsen som et farveløst skum. TLC Rf = 0,5 i etylacetat på silika, HPLC: retensjonstid 2,27 min. (97% av totalabsorbsjon) til 25 min. i 70/30 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat.
C. MorfolinokarbonvlPheNle
Produktet fra Eksempel 8B (3,3 g) ble ristet i 35 ml metanol og 7 ml eddiksyre med1,0g 10% Pd/C i 45 min., filtrert gjennom Celite, konsentrert, inndampet flere ganger sammen med toluen og eter og tørket for å gi 2,9 g av et farveløst faststoff, TLC Rf = 0,2 i system C.
D. MorfolinokarbonvlPheNlenor- C- Sta- metylester
Ved å følge fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 3 00 mg av produktet fra Eksempel 3H og 700 mg av produktet fra Eksempel 8C, 350 mg av det ønskede produkt som et lysegult faststoff, TLCRf =0,33i etylacetat på silika, HPLC: retensjonstid 6,02 min. i 75/25 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat.
NMR (CDC13) , 300 MHz, partiell, delta, ppm: 0,86 (t, 3H, J=6-7Hz, overlappende en 1-2H m sentrert ved 0,9); 1,04-1,36 (m, ca. 8H); 1,46 (dd, 2H); 1,46-1,90 (m, ca. 10H); 3,0 (sentrum av dd, 1H); 3,05-3,38 (m, ca. 5H); 3,58 (m, ca. 4H); 3,74 (s, 3H, OCH3) ; 4,12 (d, 1H, J=l-2Hz) ; 4,20 (q, 1H) ; 4,32-4,50 (m, 2H) ; 4,92 (d, 1H, J=ca. 8Hz); 6,48 (d, 1H, J=9Hz); 6,54 (d, 1H, J=10Hz); 7,12-7,35 (m, 5H, aromatisk).
EKSEMPEL 9
MorfolinokarbonylPheNlenor-Sta-i-propylester
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=n-butyl; W=CH OH; Z1=C02CH(CH3) 2; og
X=isopropyl)
A. N-t-buoksykarbonyl-(S)-3-amino-(R,S)-2-
hydroksy- 5- metvlkapronitril
Boc-leucinal (119 g) (fremstillet av Dibal-H-reduksjon av metylesteren etter fremgangsmåten til Rich et al., J. Med. Chem. 1978, 43., 3624) ble oppløst i 500 ml dimetoksyetan og behandlet ved 5°C med 63,8 g natriumbisulfitt i 500 ml slik at temperaturen ikke overskred 10°C. Omrøringen ble fortsatt i 5 timer ved 0°C og blandingen omrørt til 25°C i 48 timer. Blandingen ble konsentrert til 350 ml, tilsatt 1 liter etylacetat og deretter 39,5 g KCN i 100 ml vann. Etter omrøring i 72 timer ved 25°C, ble lagene separert, det vandige lag ekstrahert 2 x med etylacetat og de kombinerte organiske lagene vasket med saltvann, tørket over natriumsulfat og konsentrert for å gi tittelforbindelsen som en lysegul olje, 134 g, TLC Rf = 0,22 i 1:3 system A.
B. N-t-butoksykarbonyl-(S)-3-amino-(R)-2-t-butyl-dimetvls ily1oksy- 5- metylkapronitril
Produktet fra Eksempel 9A (117 g) ble oppløst i 800 ml dimetylformamid og avkjølt i et isbad. Imidazol (82,2 g) og 102 g t-butyldimetylklorsilan ble tilsatt etter hverandre og blandingen omrørt i 3 timer ved 25°C. Blandingen ble konsentrert, tilsatt 500 ml heksan og 500 ml eter og det organiske lag vasket med mettet litiumbromidoppløsning (3 x 50 ml) , IN saltsyre, saltvann, tørket og konsentrert for å gi 166 g av en gul viskøs olje. Disse to isomerene kunne separeres ved kolonnekromatografi ved å anbringe 17 g av blandingen på 1,8 kg silika, pakket og eluert i 1:25 eter-heksan (10 liter), deretter 10 liter 1:22,5, etterfulgt av 10 liter 1:20 eter-heksan. Ved å gjenta denne del av fremgangsmåten ble 47,2 g av den mindre polare isomer oppnådd som et farveløst voksaktig faststoff sammen med 3 0,6 g av den mer polare isomer, N-t-butoksykarbonyl-(S)-3-amino-(S)-2-t-butyldimetylsilyloksy-5-metylkapronitril og 42 g av blandingen.
C. N-t-butoksykarbonyl-(S)-3-amino-(R)-2-t-butyl-dimetylsilyloksv- 5- metvlheksanamid
Produktet fra Eksempel 9B (30 g) ble oppløst i 650 ml absolutt etanol og behandlet ved 0°C med 144 ml IN natrium- hydroksydoppløsning og deretter med 290 ml 30% vandig hydrogenperoksyd slik at temperaturen ikke overskred 5°C. Etter 3,5 timer ved 0°C, ble blandingen oppvarmet til 30°C i 0,5 timer, avkjølt til 0°C og behandlet med 116 ml 30% H202. Etter 10 min._tydet TLC på at utgangsmaterialet var forsvunnet, og 200 ml 20% vandig natriumsulfat ble dråpevis tilsatt ved mindre enn 5°C. Blandingens volum ble redusert til 450 ml i vakuum og ekstrahert med etylacetat (4 x 250 ml) som var vasket med saltvann, og deretter tørket og konsentrert for å gi 36 g av en olje som ble kromatografert på 800 g silika med 1:1 eter-heksan. Noen urene_fraksjoner ble rekrornatografert i det samme system og ga totalt 17,0 g farveløst produkt, Rf = 0,2 i 1:1 eter-heksan.
D. (S)-3-amino-(R)-2-hydroksy-5-metyl-heksan-amid- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 9C (16,9 g) ble oppløst i 50 ml dioksan og behandlet med 100 ml 3,4N hydrogenklorid-dioksan ved 25°C. Etter 2,5 timer ble blandingen konsentrert, inndampet sammen med eter og tørket for å gi 8,7 g av tittelforbindelsen som et farveløst faststoff, HPLC: retensjonstid 2,35 min. i 5/95 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat.
E. (S)-3-amino-(R)-2-hydroksy-5-metyl-heksansyre-hvdroklorid
Produktet fra Eksempel 9D (8,7 g) ble oppløst i 150 ml 6N saltsyre og oppvarmet ved 60°C i 2 timer, konsentrert og tørket for å gi 10,6 g av et lysegult faststoff, HPLC: retensjonstid 5,0 min. i 5/95 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat.
F. i-propyl-(S)-3-amino-(R)-2-hydroksy-5-metylheksanoat- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 9E (1,25 g) ble oppløst i 2-propanol som ble mettet med hydrogenklorid og fikk stå i 18 timer ved 25°C. Blandingen ble konsentrert, residuet inndampet sammen med toluen og eter og tørket for å gi 1,3 6 g av det ønskede produkt som et oljeaktig gult skum, TLC Rf = 0,33 i system D (plate med avsatte flekker utsatt for NH3-damp før utvikling).
G. MorfolinokarbonylPheNlenor- Sta- i- propylester
Ved å benytte fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 300 mg av produktet fra Eksempel 9F og 782 mg av produktet fra Eksempel 8C, 209 mg av produktet som et farveløst skum, TLC Rf = 0,4 i etylacetat, HPLC: retensjonstid 5,86 min. i 75/25 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat.
<*>H NMR (CDC13) , 300 MHz, partiell, delta: 0,82 (t, 3H, J=6Hz); 0,89 (sentrum av dd, 6H); 1,21 (sentrum av dd, 6H); 1,3-1,6 (m, ca. 5H); 1,6-2,0 (m, 2-3H); 2,88-3,34 (multipletter, ca. 7H); 3,55 (m, 4-5H); 4,05, 4,20, 4,36 og 4,46 (m, 1H hver); 4,98 (m, 2H); 6,47 og 6,56 (m, 1H hver), 7,05-7,31 (m, 5H).
EKSEMPEL 10
MorfolinokarbonylPheLysnor-C-Sta-metylester (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=4-aminobutyl;
X=cykloheksyl; W=CH OH; og Z^COzCHg) og morfolinokarbonylPheLys(E-CBZ)nor-C-Sta-metylester (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=ØCH2OCONH(CH2),-; X=cykloheksyl; W=CH OH; og Z1=C0, CH,)
A. BocLvs( E- CBZ) nor- C- Sta- metylester
Ved å følge den generelle fremgangsmåte for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C ga 300 mg av produktet fra Eksempel 3H og 679 mg BocLys(E-CBZ) (Chemalog Co.), 430 mg av produktet som et farveløst skum, TLC Rf = 0,57 i etylacetat, HPLC 4,83 min. i 70/30 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat.
B. Lys( E- CBZ) nor- C- Sta- metvlester- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 10A (400 mg) ble oppløst i 5 ml 3,4N hydrogenklorid-dioksan ved 25°C, omrørt 1,5 timer, konsentrert, inndampet flere ganger sammen med eter og tørket for å gi 366 mg av produktet som et lysegult skum.
C. MorfolinokarbonylPheLys( E- CBZ) nor- C- Sta- metylester
Ved å følge fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C ga 360 mg av produktet fra Eksempel 10B og 311 mg av produktet fra Eksempel 7C, 180 mg produkt som et farveløst skum. TLC Rf = 0,64 i system D, HPLC 2,86 min. i
70/30 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat.
<X>H NMR, CDCI3, 300 MHz, partiell, delta: 0,72-2,0 (m, ca. 25H); 2,94 (sentrum av dd, 1H); 3,0-3,32 (m, ca. 6H); 3,50 (sentrum av m, ca. 4H) ; 3,68 (s, 3H, 0CH3) ; 5,02 (m, 2H) ; CH20, 6,52 og 6,68 (d, 1H hver); 7,08-7,48 (m, ca. 11H).
D. MorfolinokarbonylPheLysnor-C-Sta-metylester- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 10C (50 mg) ble oppløst i 10 ml metanol og 2 ml eddiksyre og ristet med 20 mg 10% Pd/C i 45 min. ved 25°C under 3,5 kg/cm<2>hydrogen. Blandingen ble filtrert, konsentrert og inndampet først sammen med 3 ml 3,4N hydrogenklorid-dioksan og deretter med eter (3 x) og så tørket for å gi 36 mg av produktet som blekgule plater, HPLC 4,08 min. i 40/60 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat, TLC Rf = 0,12 i system
D.
<X>H NMR, 250 MHz, DMS0-d6, partiell, delta: 0,67-1,8 (m, ca. 25H); 2,67-3,07 (m, ca. 4H); 3,07-3,56 (m); 3,56 (s, 3H, OCH3) ; 4,07 (tilsynelatende d, 1H, J=3Hz); 4,13-4,40 (m, ca. 3H); 6,72 (d, 1H; J=8Hz); 7,10-7,4 (m, ca. 5H); 7,62 (d, 1H, J=9HZ); 8,08 (d, 1H, J=8,5HZ).
EKSEMPEL 11
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-5-aminopentylamid-hydroklorid (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl;
Q=H; R2=n-butyl; W=CH OH; Zx=CONH (CH2) 5NH2;
og X=cykloheksvl)
A. 3-(S)-azido-2-(R)-hydroksy-4-cykloheksyl-N-( 5- benzyloksykarbonylaminopentyl) amid
Ved å benytte den generelle fremgangsmåte for syntese og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 800 mg av 5-(benzyl-oksykarbonylamino)-1-aminopentan og 477 mg av produktet fra Eksempel 3F, 490 mg av tittelforbindelsen som en lysegul sirup, TLC Rf = 0,5 i etylacetat, IR (CHC13) 2100 cm"<1>.
B. 3-(S)-amino-2-(R)-hydroksy-4-cykloheksyl-N-( 5- benzvloksykarbonylaminopentvl) amid
Produktet fra Eksempel 11A (410 mg) ble oppløst i 5 ml metanol og behandlet ved 0°C med 525 mg vannfri tinn(II)klorid i 5 ml metanol i løpet av 1 min. Blandingen ble omrørt ved 25°C i 18 timer, konsentrert, behandlet med 3 ml vann, 3 ml IN natriumhydroksydoppløsning og ekstrahert med 200 ml eter. Det vandige lag ble mettet med natriumklorid og ekstrahert med eter. Eterlagene ble tørket, filtrert og konsentrert for å gi 200 mg av et oljeaktig skum. De vandige lag ble gjort ytterligere basisk med 5 ml IN natriumhydroksyd og behandlet med 5 g natriumklorid og ekstrahert med 3 x 100 ml etylacetat, 3 x 100 ml diklormetan, hvorpå de kombinerte organiske lag ble tørket, filtrert og konsentrert for å gi ytterligere 210 mg lysegult skum. De kombinerte faststoffene (410 mg) ble kromatografert på25 g silika under eluering med 250 ml porsjoner av 1%, 2%, 4%, 6%, 8% og 12% etanol-diklormetan, hvilket ga 172 mg rent produkt som et farveløst skum, HPLC 3,39 min. i 50/50 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat.
C. MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-(5-CBZ-aminopentvl) amid
Ved å benytte den generelle fremgangsmåte for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, bortsett fra at trietylamin ble sløyfet, ga 165 mg av produktet fra Eksempel 11B og 246 mg av produktet fra Eksempel 8C, 212 mg produkt som et lysegult skum, TLC Rf = 0,14 i etylacetat, 0,80 i system D. HPLC (4,8 min.) tydet på ca. 30% (UV-absorbsjon) av en ikke identifisert forurensning, 5,03 min. i 60/40 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat.
D. MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-(5-aminopentvl) amid- hvdroklorid
Produktet fra Eksempel 11C (186 mg) ble oppløst i 20 ml metanol og 4 ml eddiksyre og ristet med 60 mg 10% Pd/C i 2 timer ved 25°C, filtrert gjennom Celite, konsentrert, inndampet sammen med toluen og tørket for å gi 167 mg av et lysegult faststoff som ble inndampet 2 ganger sammen med 3,4N hydrogenklorid-dioksan og eter og tørket for å gi 150 mg produkt som et lysegult faststoff, HPLC 3,72 min. i 4 0/60 acetonitril-pH 2,1 0,1M fosfat.
<X>H NMR (DMSO-d6+ 10% H20), 300 MHz, partiell, delta: 0,82 (m, ca. 5H); 0,96-1,8 (m, ca. 2 5H); 2,7, 3,0, 3,2 og 3,44
(senterne av 2-3H multipletter); 3,76 (tilsynelatende d, 1H); 4,0-4,2 (m, 2H) ; 4,2-4,35 (m, 1-2H); 4,35-4,9 (br, 3-4H); 6,7 (m, 1H); 7,06-7,4 (m, 5-6H); 7,63 (m, 1H); 7,92 (br, ca. 2H); 8,05 (d, 1H, J=9Hz).
EKSEMPEL 12
1-formylpiperaz inokarbonylPheNlenor-C-Sta-metylester (I, Z=4-formylpiperazinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R o=n- butvl; X=cvkloheksvl; W=CH OH; oa Z^ CO-^ CH,)
A. 1- formylpiperazinokarbonvlPhe- benzvlester
Produktet fra Eksempel 7A (3,0 g) ble oppløst i 17 ml diklormetan og behandlet ved 25°C med 1,7 ml N-formylpiperazin som på grunn av eksoterm reaksjon, bragte temperaturen til 40°C. Etter 0,5 timer ved 25°C ble blandingen konsentrert og kromatografert på 100 g silika under eluering med 2 liter etylacetat, fulgt av 10% etanol-etylacetat, for å gi 3,1 g produkt, Rf = 0,1 i etylacetat, HPLC 4,56 min. i 50/50 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat.
B. 1- formylpiperazinokarbonylPhe
Produktet fra Eksempel 12A (3,0 g) ble oppløst i 50 ml metanol og 5 ml eddiksyre og ristet med 1,0 g 10% Pd/C under3,5kg/cm<2>hydrogen i 1 time ved 25°C, filtrert gjennom Celite, konsentrert, inndampet sammen med toluen (3 x) og tørket for å gi 2,31 g av tittelforbindelsen som et farveløst skum, Rf = 0,17 i system D.
C. 1- formylpiperazinokarbonvlPheNle- benzylester
Ved å benytte den generelle fremgangsmåte for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C ga 750 mg av produktet fra Eksempel 3H og 1,02 g av produktet fra Eksempel 8A, 1,06 g av tittelforbindelsen som et farveløst faststoff, TLC Rf = 0,65 i system D, HPLC 2,48 min. i 70/30 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat.
D. 1- formylpiperazinokarbonvlPheNle
Produktet fra Eksempel 12C (1,04 g) ble oppløst i 30 ml metanol med 3 ml eddiksyre, ristet med 300 mg 10% Pd/C i-1 time ved 25°C under 3,5 kg/cm<2>hydrogen, filtrert, konsentrert, inndampet sammen med toluen (3 x), eter og tørket for å gi 870 mg av tittelforbindelsen som et hvitaktig skum, TLC Rf = 0,5 i system D.
E. 1- f ormylpiperaz inokarbonylPheNlenor- C- Sta- metvlester
Ved å benytte den generelle fremgangsmåte for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C ga 200 mg av produktet fra Eksempel 3H og 465 mg av produktet fra Eksempel 12D, 194 mg av produktet som et lysegult skum, TLC Rf = 0,53 i system D, HPLC 4,50 min. i 50/50 MeCN-pH 2,1 0,1M fosfat.
NMR (CDC13) , 300 MHz, partiell, delta: 0,82 (t, 3H, J=6Hz, overlappende en 0,9 multiplett); 1,0-1,35 (m, ca. 5H); 1,44 (sentrum av dd, 2H); 1,44-1,9 (m, ca. 9H); 2,98 og 3,10 (hvert sentrum av dd, 1H hver); 3,10-3,57 (m, ca. 8H); 3,57-3,72 (m, med 3,72 s [OCH3], totalt ca. 5H); 4,13 (d, 1H, J=3Hz); 4,21 (q, 1H) ; 4,39 (q, 1H) ; 4,49 (q, 1H) ; 5,18, 6,49 og 6,63 (d, 1H hver, J=6Hz); 7,08-7,36 (m, 5-6H); 8,0 (s, 1H, N-CHO).
EKSEMPEL 13
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-(0-4-piperidino-butyryl)-metylester (I, Z=morfolinokarbonylamino;
M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl; X=cykloheksyl;
W=CH OCOrCH,),- piperidino: Z1=CC-, CH,')
A. 4- piperidinobutvrvlklorid- hvdroklorid
4-piperidinosmørsyre-hydroklorid (750 mg) og 4 ml tionylklorid ble blandet og omrørt under tilbakeløpskjøling i 45 min., konsentrert, utgnidd med eter og tørket for å gi 700 mg av et lysebrunt faststoff som ved oppløsning i tørr metanol, ga Rf = 0,1 i system D, hvilket var klart forskjellig fra utgangssyren og antagelig var metylesteren. Faststoffet ble benyttet uten videre rensing.
B. MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta(0-4-piperidino-butvryl- metvlester
Produktet fra Eksempel 8D (50 mg) ble tørket ved tilsetning og fjerning av benzen i vakuum, og ble deretter oppløst i 1 ml diklormetan og behandlet suksessivt ved 25°C med 30 -liter trietylamin og 25 mg av produktet fra Eksempel 13A. Etter 1,5 timer ble ytterligere 15/xliter trietylamin og 22 mg syreklorid tilsatt og etter ytterligere 2,4 timer, 19 -liter trietylamin og 21 mg syreklorid. Etter 1 time til ble 7 -liter trietylamin og 10 mg syreklorid tilsatt, hvorpå blandingen 1/2 time senere ble fortynnet med diklormetan, vasket med vandig bikarbonat, tørket og konsentrert for å gi 75 mg av en mørkebrun olje som omgående ble kromatografert på 3 g silika med 3% etanol-metylenklorid og deretter ble eluert med 100 ml av det samme oppløsningsmiddel og 100 ml hver av 5%, 7%, 9% og13% etanol-diklormetan. Tittelforbindelsen eluertes for seg selv og ble oppnådd som et lysebrunt faststoff, 25 mg, TLC Rf = 0,23 i system D, HPLC 5,09 min. i 60/40 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<X>H NMR (CDC13), 300 MHz, partiell, delta: 0,82 (t, 3H, overlappende 1-2H m); 1,04-2,0 (m); 2,26-2,58 (m); 3,06 (m, 2H) ; 3,1-3,34 (m, 4-6H) ; 3,57 (m, ca. 4H) ; 3,70 (s, 3H, 0CH3) ; 4,18 (q, 1H)74,46 (q, 1H); 4,53 (m, 1-2H); 4,94 (m, 1H); 7,1-7,3 (m, 5-7H).
EKSEMPEL 14
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-N-metylamid (I,Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
X=cvkloheksvl; W=CH OH: Z<1>=C0NHCH,1
A. 3(S)-azido-2(R)-t-butyldimetylsilyloksy-4-cvkloheksylsmørsyre- metvlester
Produktet fra Eksempel 3G (0,60 g) ble oppløst i 5 ml dimetylformamid og behandlet ved 0°C med 422 mg imidazol og deretter med 523 mg t-butyldimetylklorsilan. Etter 18 timer ved 25°C ble blandingen behandlet med 211 mg imidazol og 255 mg t-butyldimetylklorsilan og omrørt ved 2 5°C i 1 time. Blandingen ble konsentrert, residuet oppløst i etylacetat, ekstrahert med vandig IM litiumkloridoppløsning, IN saltsyre, saltvann, tørket, filtrert, konsentrert (hvilket ga 900 mg klar olje) og kromatografert på 25 g silika med 1 liter 1:75 eter-heksan for å gi 800 mg rent produkt, TLC Rf = 0,55 i 1:2 eter-heksan.
B. 3(S)-azido-2(R)-t-butyldimetylsilyloksy-4-cyklo-heksvlsmørsyre- N- metylamid
Produktet fra Eksempel 14A (725 mg) ble oppløst i metanol og avkjølt til 0°C. Oppløsningen ble mettet med vannfri metylamin og den lukkede kolbe omrørt ved 40°C i 5 timer. Oppløsningen ble konsentrert, residuet inndampet sammen med eter og tørket for å gi 642 mg av et farveløst faststoff, TLC Rf = 0,18 i 1:2 eter-heksan.
C. 3(S)-amino-2(R)-t-butyldimetylsilyloksy-4-cyklo-heksylsmørsyre- N- metylamid
Produktet fra Eksempel 14B (640 mg) ble oppløst i 30 ml metanol og 3 ml eddiksyre og ristet med 200 mg 10% Pd/C under3,5 kg/cm2 hydrogen i 1 time ved 25°C. Blandingen ble filtrert gjennom Celite, filtratet konsentrert og residuet oppløst i etylacetat. Oppløsningen ble vasket med vandig natriumbikarbonat, tørket, filtrert og konsentrert for å gi 550 mg av en farveløs olje som ble benyttet i det neste trinn uten rensing.
D. MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta(0-t-butyl-dimetylsilyleter)- N- metvlamid
Ved å benytte den generelle fremgangsmåte for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, bortsett fra at trietylamin ble sløyfet, ga råproduktet fra Eksempel 14C (250 mg) og 350 mg av produktet fra Eksempel 8C, 206 mg av tittelforbindelsen som et lysegult faststoff, TLC Rf = 0,18 i etylacetat, Rf = 0,7 i system D, HPLC 8,2 min. i 70/30 MeCN-pH 2,1 fosfat.
E. MorfolinokarbonylPheNlenor- C- Sta- metvlester
Produktet fra Eksempel 14D (2 00 mg) ble behandlet med
3 ml 3N hydrogenklorid-dioksan ved 25°C i 30 min., konsentrert, inndampet sammen med eter (3 x) og tørket for å gi 155 mg av et blekgult faststoff, TLC Rf = 0,48 i system D, HPLC 4,57 min. i 50/50 acetonitril-pH 2,IM fosfat.
<4>i NMR, 300 MHz, DMS0-d6, partiell, delta: 0,82 (t, 3H, J=6Hz, overlappende m 1-2H); 1,0-1,32 (m, ca. 10H); 1,4-1,9 (m) ; 2,54 (d, 3H, J=6Hz, NCH3) ; 2,78 og 2,96 (senterne av dd, 1H hver); 3,06-3,28 (m, ca. 4H); 3,42 (sentrum av m, ca. 4H);
3,76 (tilsynelatende d, 1H, J=ca. 1Hz); 4,11 (m, 2H); 4,28 (m, 1H) ; 6,62, 7,58 og 7,96 (d, 1H hver); 7,06-7,3 (m, 5H).
EKSEMPEL 15
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-N-n-butylaitiid
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=n-butyl; X=cykloheksyl; W= CH OH;
Z^ CONHfCHo UCH,
A. 3(S)-azido-2(R)-t-butyldimetylsilyloksy-4-cykloheksylsmørsvre- N- n- butylamid
Produktet fra Eksempel 14A (800 mg) ble oppløst i 2 ml metanol og 1 ml butylamin og omrørt under
tilbakeløpsbehandling i 18 timer. Butylamin (1 ml) ble tilsatt og tilbakeløpsbehandlingen fortsatt i 2 timer. Blandingen ble konsentrert og kromatografert på 25 g silika under eluering med 1:5 eter-heksan, hvilket ga 500 mg av et farveløst voksaktig faststoff, TLC Rf = 0,1 i 1:5 eter-heksan, sammen med 240 mg gjenvunnet utgangsmateriale.
B. 3(S)-amino-2(R)-t-butyldimetylsilyloksy-4-cyklo-heksylsmørsvre- N- n- butvlamid
Produktet fra Eksempel 15A (450 mg) ble oppløst i 30 ml metanol med 3 ml eddiksyre og ristet med 220 mg Pd/C i 5 timer. Blandingen ble filtrert gjennom Celite, filtratet konsentrert, residuet inndampet sammen med toluen, oppløst i etylacetat, vasket med 3 porsjoner vandig bikarbonat, tørket over magnesiumsulfat og konsentrert for å gi 360 mg av en farveløs olje som ble benyttet uten rensing i det neste trinn.
C. MorfolionkarbonylPheNlenor-C-Sta(0-t-butyl-dimetylsilvleter)- N- n- butylamid
Ved å benytte den generelle fremgangsmåte for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, bortsett fra at trietylamin ble utelatt, ga 355 mg av produktet fra Eksempel 15B og 300 mg av produktet fra Eksempel 8C, 313 mg produkt som et farveløst faststoff, Rf = 0,8 i system D, HPLC 7,5 min. i 85/15 acetonitril-vann.
D. MorfolinokarbonvlPheNlenor- C- Sta- N- n- butvlamid
Produktet fra Eksempel 15C (305 mg) ble opplost ved 25°C i 3 ml 3,4N hydrogenklorid-dioksan. Etter 45 min. ble blandingen konsentrert, residuet inndampet 3 ganger sammen med eter og tørket for å gi 239 mg av et beige faststoff, TLC Rf = 0,6 i system D, HPLC 10,2 min. i 50/50 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<*>H NMR, DMS0-d6, 300 MHz, partiell, delta: 0,9 (tripletter, 6H totalt, overlappende 1-2H m); 1,0-1,85 (m, ca. 20H); 2,76 (sentrum av dd, 1H); 2,9-3,5 (m); 3,74 (tilsynelatende d, 1H, J=ca. 1Hz); 4,14 (m, 2H); 4,27 (m, 1H); 6,60 (d, 1H) ; 7,05-7,3 (m, 5H) ; 7,58 (t, 1H) ; 7,98 (d, 1H) .
EKSEMPEL 16
MorfolinokarbonylPheNva-nor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=n-propyl; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
Z1=CQoCH( CH,K')
A. L- norvalin- metylester- hvdroklorid
Vannfri hydrogenklorid ble boblet inn i en suspensjon av 2,0 g L-norvalin (Chemical Dynamics) i 50 ml vannfri metanol ved 0°C i 15 min. Den resulterende oppløsning ble omrørt ved romtemperatur i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum til et hvitt faststoff som ble omkrystallisert fra etanol/eter for å gi 2,3 g av den ønskede metylester.
B. N-(morfolinokarbonyl)-L-fenylalanin-L-norvalin- metylester
Til en oppløsning av 0,50 g N-(morfolinokarbonyl-L-fenylalanin og 0,26 g L-norvalin-metylester i 10 ml vannfri metylenklorid ble tilsatt 0,22 ml trietylamin, 0,33 g 1-hydroksybenzotriazol og 0,38 g 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etyl-karbodiimid. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer, hvorpå den ble fortynnet med 50 ml etylacetat og vasket (2 x 25 ml) med 0,1N saltsyre og (2,25 ml) 0,1N natriumhydroksyd. Den organiske fase ble tørket over magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert i vakuum for å gi 0,62 g av det rå dipeptid.
C. N-( morfolinokarbonyl)- L- fenvlalanin- L- norvalin
Til en oppløsning av 0,62 g N-(morfolinokarbonyl)-L-fenylalanin-L-norvalin-metylester i 40 ml metanol og 20 ml vann ble det tilsatt 1,2 g kaliumkarbonat. Den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 60 timer, hvorpå den ble konsentrert i vakuum til en vandig oppløsning og vasket med (3 x 50 ml) eter. Den vandige fase ble surgjort med 10 ml 4N saltsyre og ekstrahert (3 x 25 ml) metylenklorid. De kombinerte ekstraktene ble tørket over magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert for å gi 0,46 g rå syre.
D. MorfolinokarbonvlPheNva- nor- C- Sta- i- propylester
Til en oppløsning av 0,13 g N-(morfolinokarbonyl)-L-fenylalanin-L-norvalin og 0,10 g 2(R)-hydroksy-3(S)-amino-4-cykloheksylbutansyre-2-propylester (Eksempel 17A) i 5 ml vannfri metylenklorid ble det tilsatt 0,055 ml trietylamin, 0,060 g 1-hydroksybenzotriazol og 0,075 g 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid.
Oppløsningen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer, hvorpå den ble fortynnet med 40 ml etylacetat og vasket med 2 x 25 ml 0,1N saltsyre og 2 x 25 ml 0,1N natriumhydroksyd. Den organiske fase ble tørket over magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble kromatografert på silikagel (29:1, CH2Cl2:EtOH) for å gi 0,17 g rent peptid, (77%). NMR (300 MHz, CDC13) : 0,86 (m, 3H); 1,27 (d, J=8Hz, 6H); 4,09 (m, 1H) ; 4,25 (m, 1H); 4,46 (m, 1H); 4,51 (m, 1H); 7,25 (m, 5H).
EKSEMPEL 17
MorfolinokarbonylPhe-S-metyl-Cysnor-C-Sta-i-propylester (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CH OH; og
Z1=CQ2 CH( CH,K)
A. 2(R)-hydroksy-3(S)-amino-4-cykloheksylbutansyre,
2- propanolester, hvdroklorid
I en isavkjølt oppløsning av 1,0 g N-t-butyloksykarbonyl-2 (R)-hydroksy-3(S)-amino-4-cykloheksylbutansyre i 50 ml 2-propanol ble det boblet inn vannfri hydrogenklorid i 2 0 min. Oppløsningen fikk anta romtemperatur og ble omrørt i 16 timer. Oppløsningen ble konsentrert i vakuum og tørket under høyvakuum for å gi 0,93 g av den ønskede amin-hydrokloridester.
B. S- metyl- L- cystein- metvlester. hvdroklorid
En isavkjølt suspensjon av 2,5 g S-metyl-L-cystein (Chemical Dynamics) i 25 ml vannfri metanol ble mettet med vannfri hydrogenklorid, hvorunder alt materialet gikk i oppløsning. Oppløsningen fikk oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt i 20 timer. Oppløsningen ble konsentrert i vakuum til et gult faststoff som ble omkrystallisert fra eter/etanol for å gi 3,0 g (87%) av den ønskede metylesteramin-hydroklorid.
C. N-(morfolinokarbonyl)-L-fenylalanin-S-metyl-L- cvstein- metvlester
Til en oppløsning av 0,96 g N-(morfolinokarbonyl)-L-fenylalanin 3 og 0,55 g S-metyl-L-cystein-metylester i 50 ml vannfri metylenklorid, ble det ved romtemperatur tilsatt 0,50 ml trietylamin,0,51 g 1-hydroksybenzotriazol og 0,70 g 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid-hydroklorid. Etter omrøring i 4 timer, ble oppløsningen fortynnet med 100 ml etylacetat og vasket med 2 x 35 ml 0,1N saltsyre og 2 x 35 ml 0,1N natriumhydroksyd. Den organiske fase ble tørket over magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert i vakuum for å gi 1,15 g av det ønskede faste dipeptid.
D. N-(morfolinokarbonyl)-L-fenylalanin-S-metyl-L- cvstein
Til en isavkjølt oppløsning av 1,15 g N-(morfolinokarbonyl)-L-fenylalanin-S-metyl-L-cystein-metylester i 30 ml vann og 60 ml metanol ble det tilsatt 3,5 g kaliumkarbonat. Den resulterende blanding ble omrørt ved 0°C i 15 min. og ved romtemperatur i 4 timer. Oppløsningen ble konsentrert i vakuum, hvorpå den vandige oppløsningen ble surgjort med konsentrert saltsyre og ekstrahert 3 x 50 ml med metylenklorid. De kombinerte ekstraktene ble tørket over magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert i vakuum for å gi 1,0 g (89%) av den rå syren.
E. MorfolinokarbonylPhe-S-metyl-Cysnor-C-Sta-i- propvlester
Til en oppløsning av 0,43 g N-(morfolinokarbonyl)-L-fenylalanin-S-metyl-L-cystein 5 og 0,34 g 2(R)-hydroksy-3(S)-amino-4-cykloheksylbutansyre-2-propanolester i 20 ml vannfri metylenklorid ble det tilsatt 0,17 ml trietylamin, 0,18 g hydroksybenzotriazol og 0,23 g 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etyl-karbodiimid. Oppløsningen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer, hvorpå den ble fortynnet med 50 ml etylacetat og vasket med 25 ml 0,1N saltsyre og 25 ml 0,1N natriumhydroksyd. Den organiske fase ble tørket over magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble kromatografert på silikagel (29:1, CH2Cl2:EtOH) for å gi 0,42 g rent peptid 6 (62%).
NMR (300 MHz, CDC13) : 1,30 (2 x d, 6H) ; 2,13 (s, 3H) ; 4,49 (m, 3H) ; 5,07 (m, 1H) ; 7,25 (m, 5H) .
EKSEMPEL 18
Benzimidazol-2-karbonylNlenor-C-Sta-metylester
fII. L=N; R^ =n- butvl; oa R£ =OCH,)
A. Benzimidazol- 2- karbonyl- norleucin- benzylester
Etter fremgangsmåten for fremstilling av produktet fra Eksempel 1C, ga 80 mg benzimidazol-2-karboksylsyre og 110 mg norleucin-benzylester-hydroklorid (produktet fra Eksempel 8A) etter kromatografi på silikagel under eluering med etylacetat-heksaner, 110 mg av et faststoff som ble omkrystallisert fra1:7 eter-heksaner, hvilket førte til 85 mg av et farveløst faststoff.
B. Benzimidazol- 2- karbonyl- norleucin
Produktet fra Eksempel 18A (82 mg) ble oppløst i 15 ml metanol og 2 ml eddiksyre og ristet med 50 mg 10% Pd/C under3,5kg/cm<2>hydrogen ved 25°C i 1 time, filtrert gjennom Celite, konsentrert, inndampet sammen med 3 ml toluen (5 x) og tørket for å gi 48 mg av et gulaktig faststoff, TLC Rf = 0,3 5 i system C.
C. 3(S)-amino-2(R)-t-butyldimetylsilyloksy-4-cyklo-heksylsmørsyre- metylester
Ved å benytte fremgangsmåten for fremstilling av produktet fra Eksempel 14B, ga 750 mg av produktet fra Eksempel 18B, 500 mg av tittelforbindelsen som en gul olje.
D. Benzimidazol- 2- karbonvlNlenor- C- Sta- metvl- TBDMS- eter
Etter fremgangsmåten for fremstilling av produktet fra Eksempel 1C, ga 65 mg av produktet fra Eksempel18C og 45 mg av produktet fra Eksempel 18B, 110 mg råprodukt som ble renset på silika under eluering med eter-heksan for å gi 65 mg av et farveløst skum, TLC Rf = 0,52 i 1:1 system A.
E. Benzimidazol- 2- karbonvlNlenor- C- Sta- metylester
Produktet fra Eksempel 8D (60 mg) ble oppløst i 3 ml 4N HCl-dioksan. Etter 45 min. ved 25°C ble blandingen konsentrert, residuet inndampet sammen med eter, oppløst i etylacetat, vasket med vandig natriumhydroksyd, tørket, konsentrert og kromatografert på silika i etylacetat-heksan (1:1), hvilket ga 27 mg av et gult faststoff som ble renset ved preparativ HPLC (1cm C-8 kolonne) som ble eluert med 7/3 acetonitril-vann. 10mg av den rene substans ble derved oppnådd, TLC Rf = 0,55 på silika i etylacetat, HPLC 3,17 min. i 70/30 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<X>H NMR, CDC13, 300 MHz, partiell, delta ppm: 0,83 (t, 3H) ; 3,80 (s, 3H); 4,10, 4,15, 4,29, 4,57 og 4,79 (m, 1H hver); 7,25 (m, 2H); 7,33 (m, 2-3H); 7,50, 7,77 og 8,10 (d, 1H hver).
EKSEMPEL 19
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-natriumsalt (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
X=cvkloheksvl: W=CH OHr oa Z^ CO-jn
Produktet fra Eksempel 8 (25 mg) ble oppløst i 0,5 ml dioksan og behandlet ved 25°C med 42/iliter IN
natriumhydroksydoppløsning. Etter 3 timer ble blandingen konsentrert for å gi tittelforbindelsen som et lysegult faststoff (17 mg), HPLC 3,06 min. i 60/40 acetonitril-pH 2,1 fosfatbuffer.
<*>H NMR, DMSO, 300 MHz, partiell, delta ppm: 0,87 (t, . 3H) ;
4,97, 5,07 og 5,34 (m, 1H hver); 6,66, 7,98 og 8,10 (d, 1H hver); 7,1-7,35 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 20
3- (S)-morfolinokarbonylPheNorleucylamino)-2-(R)-hydroksy-4- fenylbutyramid (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl;
0=H; R?=n- butvl; X=fenvl; W=CHOH; oa Z1=CONH-')
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 148 mg 3(S)-amino-2(R)-hydroksy-4-fenylbutyramid-hydroklorid (Eksempel ID i US-patent 4.668.769) og 251 mg av produktet fra Eksempel 8C, 170 mg av et farveløst pulver, TLC Rf = 0,3 i system C.
<X>H NMR, DMSO, 250 MHz, partiell, delta ppm: 0,82 (t, 3H); 2,60 (dd, 1H); 2,80 (overlapping dd, 1H); 2,95 (dd, 1H); 3,42 (m, 4H); 3,68 ((d, 1H); 4,17 (m, 2H); 4,28 (m, 1H); 6,61, 7,52 og 7,91 (d, 1H hver); 7,05-7,35 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 21
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-amid (I, Z=morfolino-karbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl; X=cykloheksyl;
W=CHOH: oa Z<1>=CONH.,')
A. Boc- nor- C- Sta- amid- TBDMS- eter
Produktet fra Eksempel 1C (US-patent 4.668.769) (9,17 g) ble oppløst i 2 00 ml metanol og ristet med 1 g 10% Rh/C i 70 timer ved 25°C under 2,1 kg/cm<2>hydrogen, filtrert gjennom Celite og konsentrert til 8,25 g av et blekgult skum som ble kromatografert på 400 g silika i etylacetatHieksan (3 liter av 1:3 og deretter 2 liter av 100:0), for å gi 7,2 g av produktet som et farveløst krystallinsk faststoff.
B. Nor- C- Sta- amid- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 2IA (6,1 g) ble oppløst i 15 ml 4N HCl-dioksan, omrørt i 3 timer ved 25°C, konsentrert og inndampet sammen med eter for å gi 3,00 g av et farveløst pulver som ble suspendert i et minimum av eter, filtrert og tørket for å gi 2,70 g farveløst faststoff, smp. 236-238°C.
C. MorfolinokarbonylPheNlenor- C- Sta- amid
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra 1C, ga 150 mg av produktet fra Eksempel 2IB og 248 mg av produktet fra Eksempel 8C, 169 mg av tittelforbindelsen som et farveløst pulver, TLC Rf = 0,30 i system C.
<X>H NMR, DMSO, 250 MHz, partiell, delta ppm: 0,85 (t, 3H); 3,44 (m, 4H); 3,73 (m, 1H); 4,15 (m, 2H); 4,30 (m, 1H); 5,64, 6,64 og 8,02 (d, 1H); 7,10-7,35 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 22
Benzimidazol-2-karbonylHisnor-C-Sta-metylester
( II, L=N; R^ =imidazol- 4- vlmetvl; Re =OCH^)
A. DiBocHisnor- C- Sta- metylester- TBDMS- eter
Etter fremgangsmåten for fremstilling av produktet fra Eksempel 1C, ga 750 mg av produktet fra Eksempel 18C og 1,05 g av Boc-His(imBoc), 1,6 g råprodukt som ble kromatografert på silika under eluering med etylacetat-heksan for å gi 932 mg av tittelforbindelsen, TLC Rf = 0,31 i1:1 system A.
B. Hisnor- C- Sta- metvlester- dihvdroklorid
Produktet fra Eksempel 22A (400 mg) ble oppløst i 2 ml diklormetan, avkjølt til 0°C og behandlet med 3 ml trifluoreddiksyre. Etter 3 0 min. ved 0°C og 80 min. ved 30°C ble blandingen konsentrert og inndampet sammen med 3 porsjoner 4N HCl-dioksan, deretter tilsatt eter og tørket for å gi 210 mg blekgult faststoff.
C. Benzimidazol- 2- karbonvlHisnor- C- Sta- metylester
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 2 05 mg av produktet fra Eksempel 22B og 93 mg av benzimidazol-2-karboksylsyre, 27 mg av et blekgult faststoff som ble kromatografert igjen på 1 g silika i 6% etanol-diklormetan for å gi 12 mg produkt, TLC Rf = 0,44 i system D, HPLC 6,01 min. i 60/40 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<*>H NMR, CDC13, 300 MHz, partiell, delta ppm: 3,75 (s, 3H) ; 4,20 (br, 1H); 3,16 (m); 6,96 (s, 1H).
EKSEMPEL 23
4-metylpiperazinokarbonylPheNlenor-C-Sta-N-metylamid (I,Z=4-metylpiperazinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R?=n- butvl; X=cvkloheksvl; W=CH OH; oa Z^ CONHCH,)
A. 4- metylpiperazinokarbonylPhe- benzylester
Produktet fra Eksempel 7A (15,0 g) ble oppløst i 100 ml diklormetan og ved 3°C behandlet med N-metylpiperazin. Etter 10 min. (temperaturen steg til 20°C) ble blandningen konsentrert og residuet renset på silikagel (eluering med 5%-ll% etanol i diklormetan), hvilket førte til 18,1 g av en blekgul olje.
B. 4- metylpiperazinokarbonylPhe- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 23A (18 g) ble oppløst i 150 ml eddiksyre og ristet med 3 g 10% Pd/C under 3,5 kg/cm<2>hydrogen i 45 min. og 25°C, filtrert gjennom Celite, konsentrert, residuet inndampet sammen med toluen (2 x) , eter (2 x) og tørket for å gi 16,8 g av et farveløst hygroskopisk skum. Dette ble inndampet 3 ganger sammen med 30 ml 4N HCl-dioksan og tørket for å gi 15,9 g farveløse krystaller.
C. 4 - metvlp iperaz inokarbony lPheNl e- benz vi ester
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, bortsett fra at2,5 ekv. trietylamin ble benyttet, ga 2,00 g norleucin-benzylester (8A) og 2,54 g av produktet fra Eksempel 23B, 2,34 g av et farveløst hvitt skum, TLC Rf = 0,12 i system C.
D. 4- metylpiperazinokarbonvlPheNle
Produktet fra Eksempel 23C (2,32 g) ble oppløst i 20 ml10:1 metanol-eddiksyre og ristet med 500 mg 10% Pd/C under3,5kg/cm<2>hydrogen i 1,5 timer ved 25°C, filtrert gjennomCelite, inndampet 3 ganger sammen med tilsatt toluen og eter og tørket for å gi 2,15 g farveløst faststoff.
E. 4-metylpiperazinokarbonylPheNlenor-C-Sta-N-metylamid- TBDMS- eter
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 350 mg av produktet fra Eksempel23D og 201 mg av produktet fra Eksempel 14C, 235 mg av et farveløst faststoff, HPLC 4,92 min. i 70/30 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
F. 4- metylpiperazinokarbonvlPheNlenor- C- Sta- N- metylamid
Produktet fra Eksempel 23E (230 mg) ble oppløst i 5 ml 4N HCl-dioksan ved 25°C. Etter 30 minutter ble blandingen konsentrert under redusert trykk, residuet inndampet flere ganger sammen med tilsatt eter, tørket, utgnidd med eter og tørket for å gi 175 mg av et gult faststoff, HPLC 3,92 min. i40/60 acetonitril-pH 2,1 fosfat, TLC Rf = 0,08 i system D (platen med avsatte flekker ble utsatt for NH3-gass før eluering).
<X>H NMR, CDC13, 300 MHz, partiell, delta ppm: 0,90 (t, 3H) ; 2,59 (d, 3H); 3,82 (m, 1H); 7,00, 7,62 og 8,08 (d, 1H hver).
EKSEMPEL 24
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-etylketon (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
X=cvkloheksvl; W=CHOH; oa Z^ COCH.CH,)
A. 5(S)-Bocamino-4(R)-benzyloksy-6-cykloheksyl-3-fR, S)- heksanol
Produktet fra Eksempel 5A (US-patent 4.668.769) (700 mg) ble oppløst i 5 ml eter og behandlet ved 0°C med1,45 ml 2, 8M etylmagnesiumbromid i eter. Etter 20 min. ble ytterligere650/uliter 2,8M etylmagnesiumbromid tilsatt og etter 30 min. ble oppløsningen behandlet med 1 ml mettet vandig ammoniumklorid. Blandingen ble fortynnet med eter, ekstrahert med IN saltsyre, dikarbonat, saltvann, tørket over magnesiumsulfat og konsentrert for å gi 530 mg av en viskøs olje, TLC Rf = 0,4 og 0,25 (1:3 system A).
B. 5( S )- Bocamino- 4( R)- benzvloksy- 6- cykloheksyl- 3-heksanon
Produktet fra Eksempel 24A (525 mg) ble oppløst i 5 ml eter og behandlet ved 25°C med 1,0 ml kromsyreoppløsning (Org. Syn. V, s. 310). Etter 1 time ble det tilsatt eter og opp-løsningen ble vasket med IN natriumhydroksyd, saltvann, tørket over natriumsulfat, konsentrert og residuet renset på silika under eluering med 1:7 eter-heksaner for å gi 250 mg av en farveløs olje, TLC Rf = 0,6 i 1:3 system A.
C. 5 ( S ) - amino- 4 ( R) - benzyloksv- 6- cykloheksanon-hydroklorid
Produktet fra Eksempel 24B (245 mg) ble oppløst i 3 ml 4N HCl-dioksan, omrørt 45 min. ved 25°C, konsentrert, residuet inndampet sammen med tilsatt eter og tørket for å gi 190 mg av et blekgult skum, TLC Rf = 0,58 i system C (platen med avsatte flekker ble utsatt for NH3-gass før eluering).
D. MorfolinokarbonvlPheNlenor- C- Sta- etylketon-benzvlester
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 95 mg av produktet fra Eksempel 24D og 142 mg av produktet fra Eksempel 8C, 133 mg av tittelforbindelsen som et farveløst skum.
E. MorfolinokarbonvlPheNlenor- C- Sta- etvlketon
Produktet fra Eksempel 24D (120 mg) ble oppløst i 3 ml 2:1 metanol-eddiksyre og ristet med 75 mg 10% Pd/C under3,5 kg/cm<2>hydrogen i 20 timer ved 25°C, hvorpå blandingen ble filtrert gjennom Celite, filtratet konsentrert, inndampet 5 x med tilsatt toluen, 5 x med tilsatt eter og tørket for å gi100 mg av et lys-beige faststoff, HPLC 2,96 min. i 70/30 acetonitril-pH 2,1 buffer, TLC Rf = 0,3 (etylacetat, silika).
4i NMR, CDC13, 3 00 MHz, partiell, delta ppm: 0,88 og 1,09 (t, 3H hver); 2,47 og 2,78 (dq, 1H hver); 3,10 (m, 2H) ; 3,17 og 3,64 (m, 4H hver); 4,13, 4,16 og 4,98 (m, 1H hver); 4,52 (m, 2H) ; 5,17 og 5,48 (d, 1H hver); 7,1-7,35 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 25
MorfolinokarbonylPheHisnor-C-Sta-N-metylamid (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=imidazol-4- ylmetvl; X=cykloheksyl; W=CH OH; og Z^ CONHCH,)
A. DiBocHis- benzylester
DiBoc-L-Histidin (0,317 mol) ble oppløst i 800 ml tørr DMF og tilsatt 43,9 g vannfri kaliumkarbonat. Blandingen ble omrørt i et isbad og tilsatt 37,8 ml benzylbromid. Blandingen ble omrørt ved 0°C og fikk deretter oppvarmes til 25°C i løpet av natten, hvorpå den ble filtrert gjennom Celite (under vasking med eter), filtratet ble konsentrert, residuet oppløst i 700 ml etylacetat og oppløsningen vasket med 2 x 200 ml IM litiumklorid og 2 x 4M litiumklorid, 2 x 100 ml IN NaOH, vann, saltvann, tørket over magnesiumsulfat og konsentrert for å gi et oljeaktig faststoff. Faststoffet ble kraftig omrørt under 500 ml heksan, hvorved det dannet seg en krystallinsk masse som ble knust i en morter og vasket med 2 x 100 ml heksan ved 25°C på filteret. Faststoffet veide etter tørking 120,5 g, smp. 99-99,5°C, TLC Rf = 0,35 i 1:1 system A, [alfa]2<D>5-6,4 (c=l,09, CHC13) .
B. Histidin- benzylester- dihydroklorid
Produktet fra Eksempel 25A (92 mg) ble oppløst i 400 ml kald 4N HCl-dioksan og den resulterende suspensjon omrørt i 24 timer ved 25°C. Det meste av væsken ble avdekantert og residuet konsentrert, tørket, vasket 3 x med eter og tørket for å gi tittelforbindelsen som et farveløst faststoff i kvantitativt utbytte. [alfa]2D5 steg til + 6,4 (c=2,865, MeOH) i løpet av 24 timer (angitt verdi, Org. Prep. Proe. Int'l., 1970, 255, [alfa]D =6,54 under disse betingelsene). Fremgangsmåten illustrert gjennom disse eksemplene er bedre enn den nevnte.
C. MorfolinokarbonylPheHis- benzvlester
Etter fremgangsmåten for fremstilling av produktet fra Eksempel 1C, ga 1,37 g av produktet fra Eksempel 7C og 1,21 g av produktet fra Eksempel 25B, 1,88 g gult skum (råprodukt). Dette materialet ble utgnidd med eter og tørket for å gi
1,68 g av et lysegult skum (HPLC 2,92 min. i 50/50 acetonitril-pH 2,1 fosfat) som ble benyttet uten videre rensing.
D. Morf olinokarbonylPheHis ( imBoc) - benzylester
Produktet fra Eksempel 25C (1,68 g) ble oppløst i 30 ml dioksan og 15 ml vann og pH justert til 11 med vandig IN natriumhydroksyd. Di-t-butyldikarbonat (850juliter) ble tilsatt og pH holdt mellom 9 og 11 ved tilsetning av natriumhydroksyd. Etter 45 min. ble 450 -liter di-t-butyldikarbonat tilsatt (pH holdt ved ca. 10,5) og etter i alt 1,5 timer ble pH justert til 5 med IN HC1, hvoretter oppløsningen ble delvis konsentrert og deretter ekstrahert med 4 x 100 ml etylacetat. Disse ekstraktene ble vasket med vandig natriumhydroksyd, bikarbonat, tørket over natriumsulfat og konsentrert for å gi 1,85 g av et oljeaktig skum som ble renset på silika under eluering med en gradient bestående av etanol i diklormetan (2 til 8% EtOH), hvilket ga 1,05 g av et blekgult skum, HPLC 3,10 min. i 70/30 acetonitril-buffer, TLC Rf = 0,13 (etylacetat, silika).
E.. MorfolinokarbonvlPheHis
Produktet fra Eksempel 25D (500 mg) ble oppløst i 25 ml metanol og 2 ml eddiksyre og ristet med 250 mg 10% Pd/C under3,5kg/cm<2>hydrogen i 45 min. ved 25°C, hvorpå blandingen ble filtrert gjennom Celite, filtratet konsentrert, inndampet sammen med tilsatt toluen (3 x), eter (4 x) og tørket for å gi 423 mg av et farveløst faststoff, TLC Rf = 0,3 i system C.
F. MorfolinokarbonylPheHis(imBoc)nor-C-Sta-N-metylamid- TBDMS- eter
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 140 mg av produktet fra Eksempel 14C og 285 mg av produktet fra Eksempel 2E, 223 mg farveløst skum, HPLC 9,95 min. i 70/30 acetonitril-pH 2,1 buffer.
G. MorfolinokarbonylPheHisnor-C-Sta-N-metylamid-TBDMS- eter
Produktet fra Eksempel 25F (218 mg) ble oppløst i 3 ml metanol ved 25°C og behandlet med 10 mg vannfri kaliumkarbonat. Etter 1 time ble blandingen konsentrert for å gi 193 mg av et farveløst faststoff, TLC Rf = 0,06 i system C.
H. MorfolinokarbonylPheHisnor-C-Sta-N-metylamid-hydroklorid
Produktet fra Eksempel 25G (185 mg) ble oppløst i 3 ml 4N HCl-dioksan, omrørt i l time ved 25°C, konsentrert og inndampet sammen med tilsatt eter for å gi 150 mg av et farveløst faststoff, HPLC 1,83 min. i 1:1 acetonitril-pH 2,1 fosfat, TLC Rf = 0,25 i system D (platen med avsatte flekker utsatt for NH3-gass før eluering).
<2>H NMR, DMSO, 250 MHz, partiell, delta ppm: 2,58 (d, 3H) ; 3,90, 4,12, 4,27 og 4,58 (m, 1H hver); 6,87, 7,60, 7,82 og 8,33 (d, 1H hver); 7,13-7,34 (m, aromatisk); 7,44 og 9,02 (s, 1H hver).
EKSEMPEL 26
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-dimetylamid (I, Z=morfolinokarbonylami.no; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
X=cvkloheksvl; W=CHOH; og Z 1=CONH( CH?) )
A. Bocnor- C- Sta- dimetylamid
Etter fremgangsmåten for fremstilling av produktet fra Eksempel 1C, ga 350 mg Bocnor-C-Sta (Eksempel 1G, US-patent 4.668.769) og 170 mg dimetylamin-hydroklorid, 405 mg råprodukt som ble renset på silika (1:2 etylacetat-heksaner), hvorved 310 mg av et farveløst skum ble oppnådd.
B. Nor- Sta- dimetylamid- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 26B (305 mg) ble oppløst i 4 ml HCl-dioksan, omrørt i 18 timer, konsentrert, inndampet sammen med eter og tørket for å gi 250 mg av et lysegult faststoff, TLC Rf = 0,1 i system C.
C. MorfolinokarbonylPheNlenor- C- Sta- dimetvlamid
Etter fremgangsmåten for fremstilling av produktet fra Eksempel 1C, ga 245 mg av produktet fra Eksempel 26B og 472 mg av produktet fra Eksempel 8C, 325 mg av et farveløst skum, HPLC 5,36 min. i 50/50 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
lE NMR, CDC13, 300 MHz, partiell, delta ppm: 0,86 (t, 3H) ; 2,91 og 3,03 (s, 3H hver); 3,07 (m, 2H); 3,45 og 3,59 (m, 4H hver); 4,15 (m, 2H); 4,31, 4,36 og 4,52 (m, 1H hver); 5,00, 6,13 og 6,49 (d, 1H hver); 7,08-7,26 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 27
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Staton-metylester (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
X=cykloheksvl; W= C=0; Z^ CO^ H,)
Produktet fra Eksempel 8D (100 mg) ble oppløst i 0,4 ml diklormetan og behandlet med 48 -liter eddiksyreanhydrid og 141 mg pyridiniumdikromat. Etter 45 min. ble blandingen anbragt i en fryseboks ved -20°C, hvor den ble oppbevart i 18 timer. Etylacetat ble tilsatt og oppløsningen vasket med IN HC1, vandig natriumbikarbonat, IN natriumhydroksyd, saltvann, tørket over natriumsulfat og konsentrert for å gi 85 mg farveløst faststoff som ble kromatografert på silika under eluering med etanol-diklormetan, hvilket førte til 44 mg av tittelforbindelsen, TLC Rf = 0,28 (etylacetat på silika).
<X>H NMR, CDClg, 300 MHz, partiell, delta ppm: 0,87 (t, 3H) ; 3,62 (m, 4H); 4,34, 4,51 og 5,09 (m, 1H hver); 4,94, 6,57 og 6,77 (d, 1H, hver); 7,15-7,35 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 28
Morfolinokarbonyl-O-MeTyrNlenor-C-Sta-etylketon
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=p-metoksyfenyl; Q=H;
R, =n- butvl: X=cvkloheksvl; W=CH OH: Z^ COCHoCH,)
A. Morfolinokarbonyl-O-MeTyrNlenor-C-Sta-etylketon-benzvleter
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 150 mg av morfolinokarbonyl-O-MeTyrNle og 97 mg av produktet fra Eksempel 24D, 140 mg farveløst skum, TLC Rf = 0,38 (etylacetat, silika).
B. Morfolinokarbonvl- O- MeTvr- Nlenor- C- Sta- etvlketon
Produktet fra Eksempel 28A (128 mg) ble oppløst i 3 ml metanol og 1 ml eddiksyre og ristet med 130 mg10% Pd/C under3,5kg/cm<2>hydrogen i 18 timer ved 25°C. Blandingen ble filtrert gjennom Celite og konsentrert, og residuet inndampet sammen med tilsatt toluen (5 x) og eter (5 x) for etter tørking å gi 115 mg blekgult faststoff, TLC Rf = 0,25 (etylacetat-silika), HPLC 3,64 min. i 70/30 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<X>H NMR, CDC13, 300 MHz, partiell, delta ppm: 0,90 og 1,11 (t, 3H hver); 2,47 og 2,79 (dq, 1H hver); 3,04 (m, 2H) ; 3,29 og 3,64 (m, 4H hver); 3,80 (s, 3H); 4,13, 4,16, 4,25 og 4,35 (m, 1H hver); 4,95, 6,28 og 6,43 (d, 1H hver); 6,84 og 7,12 (d, 2H hver).
EKSEMPEL 29
MorfolinokarbonylPheNle-2(R,S)-metyl-nor-C-Sta-metylester (I, Z=morfolinokarbonylami.no; M=fenyl; Q=H;
R2=n-butyl; X=cykloheksyl; W=C(CH3) OH og C(CH3) OH;
Z1=COoCH,')
A. Metyl-3(S)-Boc-amino-4-cykloheksyl-2-okso-l-metyltio- l- vlsulfoksyd
Metyl-metyltiometyl-sulfoksyd (8,2 ml) i 78 ml tørr THF ble avkjølt i et isbad og i løpet av 20 min. dråpevis behandlet med 49 ml 1,6N butyllitium i heksan. Etter 45 min. ble oppløsningen bragt til -25°C og behandlet dråpevis med en oppløsning av Boc-heksahydro-L-fenylalanin-metylester i 20 ml THF. Etter 3 0 min. ved -25°C ble oppløsningen konsentrert under redusert trykk og rsiduet oppløst i 200 ml eter. Oppløsningen ble vasket med vann (4 x 30 ml) og deretter med saltvann og så tørket over magnesiumsulfat. Til det vandige lag ble det tilsatt mer saltvann, hvoretter blandingen ble ekstrahert med etylacetat som ble tørket over magnesiumsulfat. De organiske lag ble slått sammen og konsentrert for å gi en orange olje som ble kromatografert på silika (etylacetat-heksaner), hvilket ga 6,8 g av et lyst ravfarvet skum, TLC Rf = 0,28 i 3 :1 system A.
B. Boc- nor- C- Sta- metylester
Produktet fra Eksempel 29A, 4,25 g ble oppløst i 25 ml metanol ved 0°C og behandlet med 2,86 g jod. Etter omrøring i 1 time ved 3 0°C ble blandingen helt over i en omrørt blanding av is, 300 ml 10% vandig natriumtiosulfat og 100 ml etylacetat. Det organiske lag ble fraskilt og det vandige lag vasket med etylacetat (4 x 50 ml). De organiske lag ble tørket over magnesiumsulfat, konsentrert og kromatografert på silika (etylacetat-heksan), hvilket ga 980 mg av et gult faststoff, TLC Rf = 0,32 (1:2 system C). Det ble også oppnådd 1,66 g av en olje, TLC Rf = 0,45 i samme system, som ble identifisert som 3(S)-t-Boc-amino-4-cykloheksyl-2-okso-l,1-dismetyltio-l-metoksybutan.
C. Metyl-3-Bocamino-4-cykloheksyl-2(R,S)metyl-2-hydroksvbutyrat
En oppløsning av 459 mg av Rf = 0,32-produktet fra Eksempel 29B i 2 ml eter ble ved 0°C behandlet med 1,92 ml metylmagnesiumbromid (1,9M i n-butyleter). Etter 10 min. ved0°C ble 1 ml mettet vandig ammoniumklorid tilsatt. Blandingen ble ekstrahert med eter og eterfasen vasket med IN HCl, vandig natriumbikarbonat og saltvann, tørket over magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert, hvorpå residuet ble kromatografert på silika (eter-heksaner) for å gi 375 mg farveløst faststoff.
D. Metyl-3-amino-4-cykloheksyl-2(R,S)-metyl-2-hydroksvbutyrat- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 29C ble oppløst i 3 ml 4N HC1-dioksan og omrørt ved 25°C. Etter 30 min. ble blandingen konsentrert og inndampet sammen med eter, hvilket ga 275 mg av et gult skum.
E. MorfolinokarbonylPheNle-2(R,S)-metyl-nor- C- Sta- metvlester
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 255 mg av produktet fra Eksempel29E og 375 mg av produktet fra Eksempel 8C, 321 mg av et farveløst faststoff, TLC Rf = 0,68 i system C, HPLC 5,24 min. -(68%) og 5,51 min., 32% i 60/40 acetonitril-vann. De to komponentene ble separert ved halv-preparativ HPLC (9,8 x 250 mm Zorbax C-8, 6,3 ml/min., 60/40 acetonitril-vann, 254 nm deteksjon) ved injeksjon av ca. 20 mg porsjoner, hvilket ga 172 mg av forbindelsen med kortere retensjonstid og 97 mg av forbindelsen med lenger retensjonstid som farveløse faststoff (HPLC-analyse med det ovenfor angitte system ga henholdsvis 5,20 og 5,53 min., begge homogene (98%)).
Forbindelsen med kortere retensjonstid ved HPLC,<X>H NMR, CDC13, 300 MHz, partiell delta ppm: 0,82 (t, 3H); 1,34 (s, 3H);
3,04 og 3,13 (dd, 1H hver); 3,13-3,34 (m); 3,59 (m, 4-5H);
3,78 (s, 3H); 4,32 (m, 2H); 4,51 (m, 1H); 5,05 (m, 1H); 6,36 (m, 1H); 7,71 (m, 1H); 7,14-7,35 (m, aromatisk).
Forbindelsen med lenger retensjonstid ved HPLC,<1>H NMR,CDCI3, 300 MHz, partiell, delta ppm: 0,89 (t, 3H); 1,39 (s, 3H); 3,04 (dd, 1H); 3,60 (m, 4H); 3,76 (s, 3H); 3,92, 4,47 og 4,88 (m, 1H hver)?4,20-4,32 (m, 2H); 7,12-7,35 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 30
MorfolinokarbonylPheN-alfa-MeNlenor-C-Sta-etylketon
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=CH3;
R, =n- butvl: X=cvkloheksvl; W=CHOH; Z^ COCr^ CH,)
A. N- Boc- N- metvl- L- norleucin
N-metyl-L-norluecin (1,0 g) (J. Chem. Soc, 1968, s. 930) ble oppløst i 11 ml DMF ved 0°C og behandlet med 2,1 ml trietylamin og deretter med 1,74 ml di-t-butyldikarbonat. Blandingen ble omrørt ved 0°C i 4 timer og fikk deretter oppvarmes til 20°C i løpet av natten. Blandingen ble konsentrert, oppløst i en blanding av vandig mettet natriumbikarbonat og etylacetat. Det vandige lag ble fraskilt, vasket med etylacetat og surgjort med HC1 i nærvær av etylacetat. Det organiske lag ble fraskilt og blandet med nye etylacetatekstrakter av det vandige lag, tørket over magnesiumsulfat og konsentrert for å gi 1,17 g gul olje.
B. N- Boc- N- metvl- L- norleucin- benzvlester
Produktet fra Eksempel 30A (750 mg) ble oppløst i 7,5 ml tørr DMF ved 0°C og behandlet med 423 mg vannfri kaliumkarbonat og 364/xliter benzylbromid. Blandingen ble omrørt i en kolbe som var avkjølt i et isbad og som i løpet av natten fikk anta 20°C. Blandingen ble fortynnet med eter og filtrert gjennom Celite. Filtratet ble konsentrert og residuet oppløst i etylacetat som ble vasket med 10% vandig litiumklorid (3 x), IN natriumhydroksyd, saltvann, tørket over magnesiumsulfat og konsentrert for å gi 942 mg gul olje.
C. N- metyl- L- norleucin- benzylester- hvdroklorid
Produktet fra Eksempel 30B (915 mg) ble oppløst i 3,5 ml 4N HCl-dioksan og omrørt ved 25°C i 45 min. Blandingen ble konsentrert og 727 mg hvitaktig pulver ble derved oppnådd, TLC Rf = 0,55 i system C.
D. MorfolinokarbonvlPhe- N- MeNle- benzylester
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 370 mg av produktet fra Eksempel 30C og 378 mg av produktet fra Eksempel 7C, 476 mg av en ugjennomsiktig olje, TLC Rf = 0,69 i system C.
E. MorfolinokarbonvlPhe- N- MeNle
Produktet fra Eksempel 30E (468 mg) ble oppløst i 10 ml metanol og 1 ml eddiksyre og ristet med 100 mg 10% Pd/C ved25°C under3,5 kg/cm<2>hydrogen i 1 time og ble deretter filtrert gjennom Celite, konsentrert og inndampet sammen med tilsatt toluen og deretter med tilsatt eter og så tørket for å gi 365 mg hvitaktig pulver, TLC Rf = 0,6 i system C.
F. MorfolinokarbonylPheN-MeNle-nor-C-Sta-etylketon-benzyleter
Etter fremgangsmåten for fremstilling av produktet fra Eksempel 1C, ga 78 mg av produktet fra Eksempel 24D og 93 mg av produktet fra Eksempel 3OE, 148 mg av et hvitaktig skum som ble benyttet uten videre rensing.
G. MorfolinokarbonvlPhe- N- MeNlenor- C- Sta- etvlketon
Produktet fra Eksempel 3OF (142 mg) ble oppløst i 10 ml metanol og 1 ml eddiksyre og ristet med 150 mg 10% Pd/C ved 25°C under 3,5 kg/cm<2>hydrogen i 20 timer, filtrert, konsentrert, inndampet sammen med toluen og deretter sammen med eter og så tørket for å gi 120 mg hvitaktig skum. Dette materialet ble kromatografert på silika (etanol-diklormetan-gradient), hvilket ga 93 mg farveløst faststoff, TLC Rf = 0,48 i system C, HPLC 5,29 min. i 70/30 acétonitril-pH 2,1 fosfat.
<X>H NMR, DMSO, 250 MHz, partiell, delta ppm: 0,80 og 0,85 (t, 3H hver); 2,91 (s, NCH3) ; 4,5 og 4,63 (m, 1H hver); 4,59 (m, 2H); 4,94, 5,39, 5,58, 6,62 og 8,00 (d, sannsynligvis NH-resonans av forskjellige rotamerer), 7,15-7,38 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 31
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-metylketon (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
X=cvkloheksvl; W=CHOH; Z^ COCH,)
A. 4(S)-Bocamino-3(R)-benzyloksy-5-cykloheksyl-2-pentanon
3(S)-t-butoksykarbonylamino-2(R)-benzyloksy-4-cykloheksylbutyraldehyd (315 mg) ble oppløst i 4 ml eter ved 0°C og behandlet med 530/iliter 1,9M metylmagnesiumbromid i n-butyleter. Etter 20 min. ble ytterligere 530 jxliter av Grignard-reagenset tilsatt, og 10 min. senere ble reaksjonen avbrutt med mettet vandig ammoniumklorid og deretter ekstrahert med eter. Eterlagene ble vasket med IN HC1, vandig natriumbikarbonat, saltvann, tørket over natriumsulfat og konsentrert for å gi 580 mg gul olje. Dette materialet ble oppløst i 5 ml eter og behandlet med 1 ml kromsyreoppløsning (Org. Syn. Coll. Vol. 5, s. 310). Etter 30 min. ble blandingen fortynnet med eter og vasket med IN natriumhydroksyd (4 x 5 ml), tørket over magnesiumsulfat og konsentrert for å gi 250 mg av en lysegul olje som ble renset på silikagel (eter-heksaner), hvorved 125 mg farveløs olje ble oppnådd, TLC Rf = 0,24 (1:4 system B).
B. 4(S)-amino-3(R)-benzyloksy-5-cykloheksyl-2-pentanon- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 3IA (120 mg) ble oppløst i 3 ml 4N HCl-dioksan og omrørt ved 25°C i 1,2 timer. Blandingen ble
konsentrert og residuet inndampet 3 x sammen med tilsatt eter og tørket for å gi 100 mg av et farveløst skum, TLC Rf = 0,22 (System C, platen med avsatte flekker ble utsatt for ammoniakk før eluering).
C. MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-metylketon-benzvleter
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 95 mg av produktet fra Eksempel 31B og 150 mg av produktet fra Eksempel 8C, 180 mg blekgult skum, TLC Rf = 0,30 (etylacetat, silika).
D. MorfolinokarbonvlPheNlenor- C- Sta- metylketon
Produktet fra Eksempel 31C (180 mg) ble oppløst i 3 ml metanol og 1 ml eddiksyre og ristet med 10% Pd/C (180 mg) ved 25°C under 3,5 kg/cm<2>hydrogen i 24 timer. Blandingen ble filtrert, konsentrert, inndampet sammen med tilsatt toluen og tørket for å gi 160 mg farveløst skum som ble kromatografert på silika (etanol-diklormetan-gradient) og førte til 55 mg farveløst faststoff, HPLC 3,37 min. i 70/30 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<X>H NMR, CDC13, 300 MHz, partiell, delta ppm: 0,86 (t, 3H) ; 2,17 (s, 3H); 3,05 og 3,09 (dd, 1H hver); 3,24 og 3,59 (m, 4H hver); 3,89, 4,08, 4,15, 4,47 og 4,55 (m, 1H hver); 4,92, 6,11 og 6,48 (d, 1H hver); 7,13-7,35 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 32
MorfolinokarbonylPhe-O-EtSernor-C-Sta-N-metylamid
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R, =CH<;0- CHo: X=cvkloheksvl; W=CH OH; Z^ CONHCH,)
A. MorfolinokarbonylPhe-O-EtSernor-C-Sta-N-metylamid- TBDMS- eter
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 70 mg av produktet fra Eksempel 14C og 75 mg morfolinokarbonyl-Phe-O-EtSer, 50 mg farveløst faststoff.
B. MorfolinokarbonylPhe- O- EtSer- C- Sta- N- metylamid
Produktet fra Eksempel 32A (48 mg) ble oppløst i 2 ml 4N HCl-dioksan og omrørt 1 time ved 25°C. Blandingen ble konsentrert og residuet inndampet sammen med eter og tørket, hvilket ga 40 mg farveløst faststoff, HPLC 3,46 min. i 50/50 acetonitril-pH 2,1 fosfat, TLC Rf = 0,28 i system C.
<X>H NMR, DMSO-d6, 300 MHz, partiell, delta ppm: 1,12 (t, 3H) ; 2,57 (d, 3H); 2,81 og 3,03 (dd, 1H hver); 3,20 (m, 4H); 3,45 (m) ; 3,78 og 4,13 (m, 1H hver); 4,35 (m, 2H); 5,74, 6,68, 7,54 og 8,08 (d, 1H hver); 7,12-7,35 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 33
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-i-propylketon
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
X=cvkloheksvl: W=CH OH; oa Z^ COCHfCH^,)
A. 5(S)-Bocamino-4(R)-benzyloksy-6-cykloheksyl-2- metyl- 3- heksanon
3(S)-butoksykarbonylamino-2(R)-benzyloksy-4-cykloheksyl-butyraldehyd (400 mg) ble oppløst i 3 ml eter ved 0°C og behandlet med 1,17 ml isopropyl-magnesiumbromid (2,OM i dietyleter). Etter 20 min. ble ytterligere 0,6 ml Grignard-reagens tilsatt, etterfulgt 5 min. senere av 1 ml mettet vandig natriumbikarbonat, saltvann, tørket over magnesiumsulfat og konsentrert for å gi 350 mg klar olje. Materialet ble oppløst i 2 ml eter og behandlet med 2 ml kromsyreoppløsning (Org. Syn. Coll. Vol. V, s. 310) og etter 30min. ble blandingen ekstrahert med eter som så ble vasket med vandig natriumhydroksyd, saltvann, tørket og konsentrert for å gi 250 mg gul olje som ble renset på silika (eter-heksaner), hvilket ga 125 mg lysegul olje, TLC Rf = 0,33 (1:4 system A).
B. 5(S)-amino-4(R)-benzyloksy-6-cykloheksyl-2-mety1- 3- heksanon- hydrokiorid
produktet fra Eksempel 33A (120 mg) ble oppløst i 2 ml 4N HCl-dioksan og omrørt ved 25°C i 1,2 timer og deretter konsentrert, hvorpå residuet ble inndampet sammen med eter for å gi 95 mg farveløst faststoff, TLC Rf = 0,4 i system C (platen med avsatte flekker ble utsatt for ammoniakk før eluering).
C. MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-isopropyl-keton- benzvleter
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 95 mg av produktet fra Eksempel 33B og 136 mg av produktet fra Eksempel 8C, 160 mg farveløst skum, HPLC 3,56 min. i 85/15 acetonitril-vann.
D. MorfolinokarbonylPheNlenor- C- Sta- i- propyl- keton
Produktet fra Eksempel 33C (155 mg) ble oppløst i 3 ml metanol og 3 ml eddiksyre og ristet med 155 mg 10% Pd/C i 18 timer ved 25°C, filtrert gjennom Celite og konsentrert, hvoretter residuet ble inndampet sammen med toluen og eter og etter tørking, ga 100 mg blekgult faststoff, TLC Rf = 0,40 (etylacetat-silika).
<*>H NMR, CDCI3, 250 MHz, partiell, delta ppm: 0,87 (t, 3H) ; 1,08 og 1,12 (d, 3H hver); 3,09 (m, 2H); 3,62 (m, 4H); 4,15 (m, 1H); 4,32 (s, 1H); 4,99, 6,38 og 6,51 (d, 1H hver);' 7,15-7,37 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 34
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-i-butyl-keton
(I,Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
X=cvkloheksvl: W=CH OH: og Z1=C0CHoCHf CH?)■ >)
A. 6(S)-Bocamino-5(R)-benzyloksy-7-cykloheksyl-2-metyl- 4- heksanon
3(S)-t-butoksykarbonylamino-2(R)-benzyloksy-4-cykloheksylbutyraldehyd (1,00 g) ble oppløst i 10 ml eter ved 0°C og behandlet med 1,6 ml 2,OM isobutylmagnesiumklorid i eter. Etter 30 min. ble ytterligere 3 ml Grignard-reagens tilsatt og oppløsningen oppvarmet til 25°C. Etter 1 time til, ble reaksjonen avbrutt med vandig ammoniumkloridoppløsning og blandingen ekstrahert med eter. Eterlaget ble vasket med saltvann, tørket over natriumsulfat og konsentrert, hvorved 1,02 g klar olje ble oppnådd. Materialet ble oppløst i 20 ml eter og behandlet med 5 ml kromsyreoppløsning (Org. Syn. Vol. V. s. 310) . Etter omrøring ved 0°C i 1 time og ved 25°C i 3 0 min., ble blandingen fortynnet med eter og vasket med IN natriumhydroksyd, saltvann, tørket over magnesiumsulfat og konsentrert, hvorpå råproduktet ble renset på silika (eter-heksan) , hvilket ga 440 mg farveløs olje, TLC Rf = 0,33 i 1:3 system B.
B. 6(S)-amino-5(R)-benzyloksy-7-cykloheksyl-2-metyl- 4- heksanon- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 34A (430 mg) ble oppløst i 3 ml4N HCl-dioksan og omrørt i 1,2 timer ved 25°C, konsentrert, inndampet sammen med eter 3 ganger og tørket for å gi 325 mg farveløst faststoff, TLC Rf = 0,29 i system C (plater med avsatte flekker utsatt for ammoniakk før eluering).
C. MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-i-butyl-keton- benzvlester
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 150 mg av produktet fra Eksempel 34B og 207 mg av produktet fra Eksempel 8C, 280 mg farveløst skum.
D. MorfolinokarbonylPheNlenor- C- Sta- i- butyl- keton
Produktet fra Eksempel 34C (300 mg) ble oppløst i 10 ml 1:1 metanol-eddiksyre og ristet med 300 mg 10% Pd/C i 18 timer ved 25°C og under 3,5 kg/cm<2>hydrogen. Blandingen ble filtrert gjenom Celite, filtratet konsentrert og inndampet sammen med tilsatt toluen, hvorpå residuet ble kromatografert på silika (etanol-diklormetan-gradient), hvorved 180 mg farveløst faststoff ble oppnådd, HPLC 4,40 min. i 70/30 acetonitril-pH 2,1 fosfat, TLC Rf = 0,31 (etylacetat-silika).
<4>i NMR, CDC13, 300 MHz, partiell, delta ppm: 0,84 (t, 3H) ; 0,90 og 0,92 (d, 3H hver); 2,10 (septett, 1H); 2,38 og 2,53 (dd, 1H hver); 3,04 (m, 2H); 3,26 og 3,58 (m, 4H hver); 4,06 (s, 1H); 4,22, 4,52 og 4,60 (m, 1H hver); 5,26, 6,57 og 7,00 (d, 1H hver); 7,1-7,3 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 35
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-metoksyamid
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R, =n- butvl; X=cvkloheksvl; W=CHOH: og Z^ CONHOCH,)
A. Boc- nor- C- Sta- metoksyamid
Etter fremgangsmåten.for fremstilling av produktet fra Eksempel 1C, ga 54 mg metoksyamin-hydroklorid og 98 mg Boc-nor-C-Sta (produktet fra Eksempel 1G, US-patent 4.668.769), 102 mg råprodukt som ble renset på silika (etylacetat-heksaner) , hvilket ga 40 mg av tittelforbindelsen.
B. Nor- C- Sta- metoksyamid- hvdroklorid
Produktet fra Eksempel 35A (38 mg) ble omrørt i 2 ml 4N HCl-dioksan ved 25°C i 1,2 timer og konsentrert til et farveløst faststoff som ble vasket 3 ganger med eter for å gi 25 mg faststoff.
C. MorfolmokarbonvlPheNle- N- hvdroksvsuccinimid- ester
Produktet fra Eksempel 8A (1,05 g) ble oppløst i 5 ml dimetoksyetan og behandlet ved 0°C med 350 mg N-hydroksysuccin-imid og 573 mg dicykloheksylkarbodiimid og deretter omrørt over natten i et isbad som fikk anta 18°C. Blandingen ble filtrert, det frafiltrerte faststoff vasket med dimetoksyetan, filtratene konsentrert og residuet suspendert i etylacetat. Etylacetatsuspensjonen ble vasket med mettet vandig natriumbikarbonat og deretter med saltvann, tørket over magnesiumsulfat og konsentrert for å gi 960 mg farveløst skum.
D. MorfolinokarbonvlPheNlenor- C- Sta- metoksyamid
Produktet fra Eksempel 35B (23 mg) ble oppløst i 0,3 ml dimetoksyetan og behandlet ved 25°C suksessivt med 10/xliter trietylamin og 42 mg av produktet fra Eksempel 35C. Mer dimetoksyetan (2 00/iliter) og 200 juliter diklormetan ble tilsatt, hvorpå blandingen ble omrørt i 22 timer, oppløst i 30 ml etylacetat, vasket med 2 x 1 ml IN HC1, 2 x 2 ml mettet vandig natriumbikarbonat, tørket over magnesiumsulfat, konsentrert og kromatografert på silika (etanol-diklormetan-gradient), hvilket ga 45 mg av et farveløst faststoff,TLC Rf = 0,5 i system C, HPLC 2,84 min. i 60/40 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<*>H NMR, CDC13, 250 MHz, partiell, delta ppm: 0,89 (t, 3H); 3,02 (dd, 1H); 3,14 (m); 3,62 (m, 4H); 3,77 (s, 3H); 4,35, 4,60 og 5,01 (m, 1H hver); 7,13-7,38 (m, aromatisk); 9,57 (s, 1H) .
EKSEMPEL 3 6
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Statol (I, Z=morfolino-karbonylamino; M=fenyl; Q_=H; R2=n-butyl; X=cykloheksyl ;
W=CH OH; o<q>Z^ CHoOH)
A. 3( S)- amino- 2( R)- benzvloksv- 4- cvkloheksyl- l- butanol
3(S)-t-butoksykarbonylamino-2(R)-benzyloksy-4-cykloheksyl-l-butanol (108 mg) (US-patent 4.668.769), Eksempel 1J, ble oppløst i 0,5 ml eter og avkjølt til 0°C. I denne oppløsningen ble det ledet inn et overskudd av vannfri HC1, og oppløsningen ble omrørt ved 25°C i 2 timer og konsentrert for å
gi 88 mg farveløst faststoff, TLC Rf = 0,28 i system A.
B. 3(S)-(morfolinokarbonylPheNleamino)-2(R)-benzvloksv- 4- cykloheksyl- l- butanol
Produktet fra Eksempel 36A (85 mg) ble oppløst i
500 juliter dimetoksyetan og ved 0°C behandlet suksessivt med 38/xliter trietylamin og 132 mg av produktet fra Eksempel 35C. Etter 18 timer ble blandingen konsentrert og kromatografert på silika (etylacetat-heksaner), hvilket ga 139 mg farveløst faststoff, TLC Rf = 0,25 (etylacetat-silika).
C. MorfolinokarbonylPheNlenor- C- Statol
Produktet fra Eksempel 36B (80 mg) og 90 mg 10% Pd/C ble blandet i 5 ml metanol og 5 ml eddiksyre og ristet under3,4kg/cm<2>hydrogen ved 25°C i 21 timer. Blandingen ble konsentrert og residuet kromatografert på silika (etanol-diklormetan-gradient), hvorved 64 mg farveløst faststoff ble oppnådd, TLC Rf = 0,5 i system C, HPLC 4,95 min. i 50/50 acetonitril-vann.
<X>H NMR, CDC13, 250 MHz, partiell, delta ppm: 0,92 (t, 3H) ; 2,94 (dd, 1H); 3,09-3,72 (overlapping m); 4,12-4,37 (m, ca. 3H) ; 4,79, 6,28 og 6,93 (d, 1H hver); 7,20-7,48 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 37
MorfolinokarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-butyl-keton
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=CH3SCH2;
X=cvkloheksvl; W=CH OH; oa Z^ COCHoCH ( CH,K)
A. MorfolinokarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-butyl-keton- benzvleter
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 120 mg av produktet fra Eksempel 34B og 129 mg Mor-Phe-SMeCys, 114 mg farveløst pulver, TLC Rf = 0,58 i system C.
B. MorfolinokarbonvlPhe- S- MeCysnor- C- Sta- i- butvl- keton
Produktet fra Eksempel 37A (95 mg) ble oppløst i 1,0 ml maursyre og tilsatt 100 mg palladiumsort (ALFA Co.). Etter omrøring over natten ble blandingen filtrert gjennom Celite og konsentrert, hvorpå residuet ble inndampet sammen med toluen og tørket for å gi 97 mg av en lysebrun olje som ble renset på silika (etanol-diklormetan-gradient) for å gi 23,5 mg farveløst pulver, TLC Rf = 0,65 i system C, 3,65 min. ved HPLC i 70/30 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<X>H NMR, CDC13, 300 MHz, partiell, delta ppm: 0,90 og 0,92 (d, 3H hver); 2,10 (s, 3H); 2,14 (septett, 1H); 2,38, 2,56,2,65, 2,92, 3,00 og 3,14 (dd, 1H hver); 3,14-3,37 (m); 3,60 (m, 4H) ; 3,97, 4,05 og 4,65 (m, 1H hver); 4,41-4,56 (m, 2H) ;6,76 og 6,86 (d, 1H hver); 7,14-7,36 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 38
BocPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I, Z=t-(CH3)3COCONH; M=fenyl; Q=H; R2=CH3SCH2; X=cykloheksvl; W=CHOH; oa Z^ CCCHfCH-^7)
A. BocPhe- S- MeCys
S-metylcystein (6,26 g) ble oppløst i 65 ml mettet vandig natriumbikarbonat ved 25°C og tilsatt 35 ml THF. Oppløsningen ble behandlet i én porsjon med 12,0 g N-t-Boc-L-fenylalanin-hydroksysuccinimidester. Etter 3 0 min. ble oppløsningen overført til en skilletrakt og vasket 2 ganger med etylacetat. En ny porsjon etylacetat ble tilsatt og pH ble justert til 1,1 med 6N HC1. Det organiske lag ble fraskilt og det vandige lag ekstrahert med etylacetat (4 x). De kombinerte organiske lagene ble vasket 2 ganger med IN HCl, saltvann, tørket over magnesiumsulfat og konsentrert for å gi 12,0 g farveløst skum.
B. Boc- Phe- S- MeCysnor- C- Sta- i- propylester
Nor-C-Sta-isopropylester (1,0 g) ble oppløst i 20 ml diklormetan og suksessivt behandlet med 1,57 g (1,0 ekv.) av produktet fra Eksempel 38A, 945 mg (1,5 ekv.) hydroksybenzo-triazolhydrat og 788 mg (1,0 ekv.) 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etyl-karbodiimid-hydroklorid (DEC). Reaksjonsblandingen ble omrørt i et isbad som fikk anta 18°C over natten. Blandingen ble konsentrert, residuet oppløst i etylacetat og den resulterende oppløsning vasket 2 ganger med IN HCl,2ganger med IN NaOH, 1 gang med saltvann, tørket over magnesiumsulfat og konsentrert for å gi et farveløst faststoff som ble renset på silika (etylacetat-heksaner), hvilket ga 1,85 g av tittel forbindelsen som et farveløst pulver. TLC Rf = 0,60 i system
C.
<X>H NMR, CDClg, 300 MHz, partiell, delta ppm: 0,94 (m) ; 1,29 og 1,30 (d, 3H hver); 1,39 (s, 9H); 2,13 (s, 3H); 2,64, 2,98, 3,03 og 3,15 (dd, 1H hver); 4,09 (d, 1H); 4,30-4,50 (m, 3H) ; 4,90 (m, 1H); 5,07 (septett, 1H); 6,66 (m, 1H) ; 6,86 (d, 1H); 7,16-7,36 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 39
Phe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I, Z=NH2;
M=fenyl; Q=H; R2=CH3SCH2; X=cykloheksyl;
W=CHOH: oa Z1=COC, CH( CH,'>?')
Produktet fra Eksempel 38B (500 mg) ble oppløst i 3 ml 4N HCl-dioksan og omrørt ved 25°C i 40min. Blandingen ble konsentrert og residuet inndampet sammen med eter, hvilket ga 460 mg av et hvitaktig pulver, TLC Rf = 0,25 i system C (substansen ble behandlet med trietylamin i diklormetan og deretter anbragt på TLC-platen), HPLC 4,05 min. i 50/50 acetonitril-pH 2,1 buffer.
<X>H NMR, DMSO, 250 MHz, partiell, delta ppm: 1,20 (overlapping d, 6H); 2,11 (s, 3H); 2,55 (2,82, 2,93 og 3,18 (dd, 1H hver); 4,01, 4,08, 4,23 og 4,57 (m, 1H hver); 7,30 (s, aromatisk); 5,38, 7,96 og 8,89 (d, 1H hver);8,18 (br, 3H).
EKSEMPEL 4 0
4-pikolinoylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I, Z=4-pikolinoylamino; M=fenyl; Q=H; R2=CH3SCH2-;
X=cvkloheksvl; W=CH OH; og Z^ COoCHfCH,) 2)
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 38B, bortsett fra at 1,05 ekv. trietylamin (54/iliter) ble benyttet for å nøytralisere utgangsamin-hydrokloridet, ga 2 00 mg av produktet fra Eksempel39og 45 mg pyridin-4-karboksylsyre (pikolinsyre), 157 mg farveløst pulver, TLC Rf = 0,52 i system C, HPLC 7,10 min. i 50/50 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<X>H NMR, DMSO, 250 MHz, partiell, delta ppm: 1,18 og 1,20 (d, 3H hver); 2,09 (s, 3H); 2,60, 2,80 og 3,14 (dd, 1H hver);
4,00, 4,22, 4,49 og 4,78 (m, 1H hver); 4,87 (septett, 1H) ;5,35, 7,18, 8,42 og 8,90 (d, 1H hver); 7,26 (t, 2H); 7,37 (d, 2H); 7,67 (d, 2H); 8,70 (d, 2H).
EKSEMPEL 41
4-t-BocpiperazinokarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I, Z=4-t-Bocpiperazinokarbonylamino; M=fenyl;
Q=H; R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CHOH; og Z^ COoCHfCH,),)
A. 4- t- BocpiperazinokarbonylPheS- MeCys- metylester
Etter fremgangsmåten for fremstilling av produktet fra Eksempel 38B, ga 245 mg S-metyl-cystein-metylester og 500 mgBoc-piperazinkarbonyl-L-fenylalanin, 547 mg av et farveløst skum som ble benyttet uten videre rensing.
B. 4- t- BocpiperazinokarbonvlPhe- S- MeCys
Produktet fra Eksempel 4IA (467 mg) ble oppløst i 1 ml dioksan og 0,5 ml vann ved 0°C og behandlet med 33 mg litium-hydroksyd. Etter 2,5 timer ble blandingen konsentrert, residuet oppløst i vann og den resulterende oppløsning ekstrahert med eter. Etylacetat ble tilsatt til det vandige lag som ble bragt til pH 1 med IN HCl, ekstrahert med etylacetat (4 x), ekstraktene vasket med vann og tørket over magnesiumsulfat for å gi 417 mg farveløst faststoff.
C. 4-t-BocpiperazinokarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i- propylester
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 36B, ga 100 mg nor-C-Sta-isopropylester og 203 mg av produktet fra Eksempel 41B, 182 mg farveløst faststoff, TLC Rf = 0,49 (etylacetat/silika).
<X>H NMR, CDC13, 250 MHz, partiell, delta ppm: 1,2 6 og 1,27 (d, 3H hver); 1,45 (s, 9H); 2,10 (s, 3H); 2,73 (dd, 1H); 3,00 (m, 2H); 3,27 og 3,36 (m, 9H totalt); 3,77 (d, 1H); 4,10(dd,1H); 4,44 (m, 1H); 4,81 (d, 1H); 5,07 (septett, 1H); 6,84 og 6,93 (d, 1H hver); 7,18-7,39 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 42
PiperazinokarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyl-
ester (I, Z=piperazinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=CH3SCH2-; X=xykloheksyl; W=CH OH; og
Z^ COoCHfCH,),)
Produktet fra Eksempel 41 (33 mg) ble oppløst i 2 ml 4N HCl-dioksan og omrørt ved 25°C i 50 min. og deretter konsentrert, hvorpå residuet ble inndampet sammen med eter for å gi 31 mg av et hvitaktig pulver, TLC Rf = 0,2 i system C (platen med avsatte flekker utsatt for ammoniakk før eluering), HPLC 2,98 min. i 50/50 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<X>H NMR, DMSO, 250 MHz, partiell, delta ppm: 1,18 og 1,20 (d, 3H hver); 2,10 (s, 3H); 4,00 og 4,21 (m, 1H hver); 4,40 (m, 2H); 4,85 (septett, 1H); 5,33, 6,90, 7,63 og 8,22 (d, 1H hver); 7,13-7,33 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 43
MorfolinokarbonylheksahydroPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=cyklo-heksyl; Q=H; R2=CH3SCH2; X=cykloheksyl; W=CH OH;
og Z^ CO- iCHfCHO?)
A. Morfolinokarbonylheksahydro- L- fenvlalanin
Produktet fra Eksempel 7C (4,0 g) ble oppløst i 55 ml 10:1 metanol-eddiksyre og ristet med 1,0 g 10% Pd/C under3,5 kg/cm<2>hydrogen ved 25°C i 3,5 timer. Blandingen ble filtrert gjennom Celite, konsentrert og inndampet sammen med eter for å gi 4,15 g farveløst skum som ble renset på silika (pakket og påsatt i etylacetat, eluert i det samme oppløsningsmiddel etterfulgt av en etanol-diklormetan-gradient), hvilket ga 704 mg farveløst skum, TLC Rf = 0,4.
B. MorfolinokarbonylheksahydroPhe-hydroksysuccinimidester
Produktet fra Eksempel 43A (700 mg) ble oppløst i 5 ml dimetoksyetan og ved 0°C suksessivt behandlet med 283 mg N-hydroksy-succinimid og 507 mg dicykloheksylkarbodiimid. Reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til 18°C over natten og ble deretter filtrert og konsentrert, hvorpå residuet ble oppløst i etylacetat som var vasket 2 ganger med mettet vandig natriumbikarbonat, saltvann, tørket over magnesiumsulfat og konsentrert for å gi 704 mg farveløst skum.
C. MorfolinokarbonvlheksahydroPhe- S- MeCys
S-metylcystein (442 mg) ble oppløst i 4,6 ml mettet vandig natriumbikarbonat og tilsatt 2,5 ml THF og deretter 890 mg av produktet fra Eksempel 43B. Etter omrøring i 20 min. ved25°C ble blandingen fortynnet med vann, vasket 2 ganger med etylacetat og bragt til pH 1,1 med IN HCl i nærvær av etylacetat. Det organiske lag ble fraskilt og det vandige lag ble ekstrahert med 4 porsjoner etylacetat, hvoretter de kombinerte organiske lag ble vasket 2 ganger med IN HCl, saltvann, tørket over magnesiumsulfat og konsentrert for å gi 796 mg farveløst skum.
D. MorfolinokarbonylheksahydroPhe-S-MeCysnor-C-Sta- i- propvlester
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 38B, ga 94 mg nor-C-Sta-isopropylester og 170 mg av produktet fra Eksempel 43C, 178 mg farveløst pulver, TLC Rf = 0,83 i system C; HPLC 4,16 min. 70/30 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<4>l NMR, CDC13, 250 MHz, Partiell, delta ppm: 0,93 (m, 4H) 1,26 og 1,27 (d, 3H hver); 2,13 (s, 3H); 2,76 og 3,11 (dd, 1H hver); 3,39 (m, 4H); 3,70 (m, 4H); 4,08 (br, 1H); 4,28 (m,
1H); 4,41 (m, 2H); 4,82, 6,83 og 6,93 (d, 1H hver); 5,04 (septett, 1H).
EKSEMPEL 44
BocProPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I, Z=Bocpyrrolidyl-2-karbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
Z^ COoCHfCHoU)
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 38B, bortsett fra at 1,2 ekv.,
71/uliter trietylamin, ble benyttet for å nøytralisere amin-hydrokloridet, ga 233 mg av produktet fra Eksempel 39 og 101 mg Boc-L-prolin, 237 mg farveløst pulver, TLC Rf = 0,66 i
system C.
<X>H NMR, CDC13, 250 MHz, partiell, delta ppm: 1,27 og 1,29 (d, 3H hver); 1,48 (s, 9H); 2,13 (s, 3H); 2,67 og 3,04 (dd, 1H hver); 4,44 (m, 1H); 4,62 (m, 2H); 5,07 (septett, 1H); 6,42 og 6,60 (d, 1H); 7,1-7,4 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 45
ProPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester-hydroklorid
(I, Z=(S)-2-pyrrolidylkarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R, =CH, SCH,- : X=cvkloheksvl; W=CH OH; oa Z 1=COoCH ( CH?) ■>)
Produktet fra Eksempel 44 (124 mg) ble oppløst i 3 ml 4N HCl-dioksan og omrørt ved 25°C i 40 min. Blandingen ble inndampet for å gi 114 mg av et blekgult pulver, TLC Rf = 0,39 1 system C (platen med avsatte flekker ble utsatt for ammoniakk før eluering).
<X>H NMR, DMSO, 250 MHz, partiell, delta ppm: 1,27 og 1,29 (d, 3H hver); 2,09 (s, 3H); 2,56 (dd, 1H); 4,00, 4,08, 4,22, 4,47 og 4,64 (m, 1H hver); 4,85 (septett, 1H); 5,37, 7,73, 8,41 og 8,78 (d, 1H hver); 7,13-7,33 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 46
0- succinoyl-morfolinokarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-1- propylester (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl;
Q=H; R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CH OCO (CH2)2C02H;
oa Z^ CCCHfCH,),)
Produktet fra Eksempel 17E (101 mg) ble oppløst i 0,8 ml diklormetan og behandlet med 16 mg ravsyreanhydrid og13//liter pyridin. Etter omrøring i 18,5 timer ved 25°C, ble 2 0 mg dimetylaminopyridin tilsatt. 4 timer senere ble 40 mg ravsyreanhydrid tilsatt. Etter omrøring i ytterligere 20 min. ble blandingen fortynnet med etylacetat og vasket 3 ganger med IN HCl, saltvann, tørket over magnesiumsulfat, konsentrert og kromatografert på silika under eluering med etylacetat og deretter med 4% etanol i diklormetan, hvilket ga 59 mg farveløst pulver, TLC Rf = 0,1 (etylacetat, silika), HPLC 2,84 min. i 70/30 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<*>H NMR, CDCI3, 300 MHz, partiell, delta ppm: 0,94 (m) ;
1,24 og 1,27 (d, 3H hver); 2,10 (br, 3H); 2,64-3,54 (m) ; 3,6 (m, 4H) ; 4,23, 4,53 og 4,67 (m, 1H hver); 4,96 (br, 1H); 4,98 (septett, 1H) ; 5,14 (br, 1H) ; 6,65 (d, 1H) ; 7,16-7,39 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 47
MorfolinokarbonylPhe-N-MeNlenor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=CH3;
R2=n-butyl; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
Z<1>=COoCHfCH,U'>
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 38B, ga 76 mg nor-C-Sta-isopropylester og 126 mg av produktet fra Eksempel 3OE, 117 mg farveløst skum, TLC Rf = 0,68 i system C. Det ønskede produkt ble isolert fra blandingen ved preparativ HPLC på en 9,8 x 250 mm Zorbax C-8 kolonne, 6,3 ml/min. av 75/25 aceonitril-vann, retensjonstid: 5,61 min., skiltes fra en uønsket inaktiv forbindelse ved 6,42 min. Farveløst skum (60 mg) ble derved oppnådd, analytisk HPLC 4,98 min. i 75/25 acetonitril-vann.
<*>H NMR, CDC13, 250 MHz, partiell, delta ppm: 0,83 (t, 3H); 1,23 og 1,26 (d, 3H hver); 2,70 (s, 3H); 2,95 og 3,09 (dd, 1H hver); 3,22-3,45 (m, 4H); 3,65 (m, 4H); 4,02 og 4,05 (d, 1H totalt); 4,95 (m, 2H); 5,15 og 7,75 (d, 1H hver); 7,14-7,38 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 48
PiperidinokarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=piperidinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R, =CH, SCH,- ; X=cvkloheksvl; W=CH OH; og Z^ COgCH( CH^ 2) A. PiperidinokarbonvlPhe- benzvlester
Produktet fra Eksempel 7A (1,74 g) ble oppløst i 13 ml
diklormetan og behandlet med 0,61 ml piperidin ved 0°C. Etter 15 min. ble 0,1 ml piperidin tilsatt, hvorpå oppløsningen ble inndampet og residuet kromatografert på silika under eluering med etylacetat-heksaner for å gi 1,61 g farveløs olje, TLC Rf = 0,36 i 1:1 system A.
B. PiperidinokarbonvlPhe
Produktet fra Eksempel 48A (1,6 g) ble oppløst i 50ml 10:1 metanol-eddiksyre og ristet med 0,6 g 10% Pd/C under3,5kg/cm<2>hydrogen og 25°C i 30 min. Blandingen ble filtrert gjennom Celite, filtratet inndampet og residuet inndampet sammen med tilsatt toluen og deretter med eter for å gi 1,17 g av et farveløst skum, TLC Rf = 0,50 i system C.
C. Boc- S- MeCysnor- C- Sta- i- propylester
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 38B, ga 900 mg nor-C-Sta-isopropylester og 871 mg Boc-S-metyl-L-cystein, 1,04 g av et farveløst pulver, TLC Rf = 0,42 i 1:1 system A.
D. S- MeCvsnor- C- Sta- i- propylester- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 48C (1,03 g) ble oppløst i 6 ml 4N HCl-dioksan, omrørt 45 min. ved 25°C og konsentrert for å gi 998 mg farveløst faststoff, TLC Rf = 0,48 i system C.
E. PiperidinokarbonvlPhe- S- MeCysnor- C- Sta- i- propvlester
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 38B, bortsett fra at trietylamin ble benyttet for å nøytralisere amin-hydrokloridet, ga 13 0 mg av produktet fra Eksempel 48D og 90 mg av produktet fra Eksempel 48B, 117 mg farveløst faststoff, TLC Rf = 0,44 (etylacetat-silika).
<t>ø NMR, CDC13, 250 MHz, partiell, delta ppm: 1,27 og 1,29 (d, 3H hver); 2,08 (s, 3H); 2,75, 2,92, 3,13 og 3,31 (dd, 1H hver); 3,20 (m); 4,11 (s, 2H); 4,33-4,58 (m); 4,72 og 6,90 (d, 1H hver); 5,09 (septett, 1H); 7,19-7,4 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 49
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-2-hydroksy-i-butyl-keton (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=n-butyl; X=cykloheksyl; W=CH OH; og
Z^ COCH. CfOH) ( CH,K)
A. 6(S)-Bocamino-5(R)-benzyloksy-7-cykloheksyl-2- metvl- 2- hydroksy- 4- heksanon
3(S)-t-butoksykarbonylamino-2(R)-benzyloksy-4-cykloheksylbutyraldehyd (475 mg) ble ved -78°C tilsatt til en
oppløsning av 2,5 ekv. 1itium-etylacetat (fra 5 ml THF,
392 -liter diisopropylamin og 1,75 ml 1,6M n-butyllitium i heksan ved 0°C etterfulgt av 272/xliter etylacetat ved -78°C) , omrørt 10 min. ved -78°C og 10 min. ved 0°C, hvorpå reaksjonen ble avbrutt med vandig ammoniumklorid. Produktet ble isolert ved ekstraksjon med eter, hvilket ga 548 mg isomere forbindelser (TLC Rf = 0,35 og 0,28 i 1:1 system B). Dette materialet ble, sammen med 217 mg av de samme forbindelser fremstillet på identisk måte, men separat, oppløst i 8 ml THF og behandlet med 5,9 ml 1,3M eterisk metyllitium ved 0°C og omrørt i 5 min., hvorpå reaksjonen ble avbrutt med vandig ammoniumkloridoppløsning. En gulaktig olje (702 mg) ble oppnådd ved eterekstraksjon. TLC Rf = 0,2 i 1:1 system B. Dette materialet ble oppløst i 25 ml aceton og behandlet med
2 ml kromsyreoppløsning (Org. Syn. Coll. Vol. V, s. 310) og
konsentrert, oppløst i vann og gjentatte ganger ekstrahert med etylacetat som ble tørket over magnesiumsulfat, konsentrert og renset på silika for å gi 172 mg farveløst faststoff, TLC Rf = 0,34 i 1:1 system B.
B. 6(S)-amino-5(R)-benzyloksy-7-cykloheksyl-2-metyl- 2- hydroksv- 4- heksanon- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 49A (124 mg) ble oppløst i 0,5 ml trifluroeddiksyre ved 0°C, omrørt i 20 min. og konsentrert, hvoretter residuet ble inndampet sammen med toluen, eter og eter inneholdende 1,1 ekv. HCl (i dioksan) for etter tørking, å gi 106 mg gulaktig olje.
C. MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-2-hydroksy-i-butvl- keton- benzyleter
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 38B, bortsett fra at trietylamin ble tilsatt for å nøytralisere amin-hydrokloridet, ga 104 mg av produktet fra Eksempel 49B og 106 mg av produktet fra Eksempel 8C, 60 mg farveløst faststoff, TLC Rf = 0,4
(etylacetat/silika).
D. MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-2-hydroksy-i- buty1- keton
Produktet fra Eksempel 49C (58 mg) ble oppløst i 10 ml 1:1 eddiksyre-metanol og ristet med 100 mg 10% Pd/C i 20 timer ved25°C under 3,5 kg/cm<2>hydrogen. Blandingen ble filtrert gjennom Celite, konsentrert og renset på silika i etylacetat/heksaner, hvilket ga 20 mg farveløst pulver, TLC Rf = 0,22 (etylacetat/silika).
<t>ø NMR, CDC13, 250 MHz, partiell, delta ppm: 0,88 (t, 3H) ; 1,27 (s, 6H); 2,76 og 2,87 (d, 1H hver); 3,00 og 3,16 (dd, 1H) ; 3,26 (m, 4H) ; 3,63 (m, 4H); 4,16 (br, 1H); 4,23 (m, 1H); 4,51 (m, 2H); 5,00, 6,62 og 6,73 (d, 1H hver); 7,13-7,36 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 50
4-hydroksypiperidinokarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I, Z=4-hydroksypiperidinokarbonylamino;
M=fenyl; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CH OH;
ogZx=CO?CHrCH,U)
En oppløsning av 150 mg av produktet fra Eksempel 39 og 40 /uliter trietylamin i 0,8 ml diklormetan ble ved 0°C tilsatt til en 0°C oppløsning av 49 mg karbonyldiimidazol og 20 mg imidazol i 0,3 ml diklormetan, hvorpå den resulterende oppløsning ble omrørt i 1 time ved 0°C. En oppløsning av 25 mg 4-hydroksypiperidin i 0,3 ml diklormetan ble tilsatt og blandingen omrørt ved 0°C i 1,5 timer og ved 20°C i 20 timer, fortynnet med etylacetat og vasket med IN HCl (2 x) , saltvann, tørket over magnesiumsulfat, konsentrert og renset på silika, hvilket førte til 26,1 mg farveløst skum, TLC Rf = 0,22 (etylacetat/silika), HPLC 3,10 min. i 60/40 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<t>ø NMR, CDCI3, 250 MHz, partiell, delta ppm: 1,27 og 1,29 (d, 3H hver); 2,10 (s, 3H); 2,73 og 3,30 (dd, 1H hver); 3,03 (m, 3-4H); 3,58 (m, 2H); 3,87 (m, 1H); 4,10 (m, 1H); 4,45 (m, 3H) ; 4,82 (d, 1H); 5,08 (septett, 1H); 6,91 og 7,09 (d, 1H hver); 7,19-7,40 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 51
Metyl-3(S)-(BocPheHisamino)-2(S)-azido-4-cykloheksyl-butyrat som en blanding med 3(R), 2(R), isomer (I, Z=Bocamino; M=fenyl; Q=H; R2=imidazol-4-ylmetyl;
X=cvkloheksvl; W=CH N, ; og Z^ COoCH,)
A. Racemisk metyl-3(S)-Bocamino-4-cykloheksyl-2( R)- hydroksybutyrat
10 g av en blanding av 80% N-t-butoksykarbonyl-(S)-3-amino-(R)-2-hydroksy-4-fenylbutyronitril og 20% av den korresponderende 2(S)-isomer (US-patent 4.668.769) ble kokt under tilbakeløpskjøling i 18 timer i en blanding av 80 ml p-dioksan, 30 ml vann og 30 ml konsentrert HCl, hvoretter blandingen ble inndampet, residuet oppløst i vann og oppløsningen vasket med kloroform (3 x). Den vandige oppløsningen ble avkjølt og bragt til pH 7,5 med HCl. Bunnfallet ble frafiltrert, vasket med vann og deretter med aceton og tørket for å gi 4,10 g av et lyst grønnaktig faststoff. Dette materialet ble oppløst i 40 ml p-dioksan og 20 ml vann, hvorpå oppløsningen ble bragt til pH 11 med natriumhydroksyd og behandlet med 5,85 ml di-t-butyldikarbonat. Ved hjelp av natriumhydroksyd ble pH holdt mellom 9,5 og 11,2, og etter 1,5 timer ble blandingen delvis konsentrert og den gjenværende vandige oppløsning vasket 3 ganger med eter og deretter surgjort til pH 1,0 i nærvær av etylacetat, separert, ekstrahert videre med etylacetat, ekstraktene tørket over natriumsulfat og konsentrert for å gi 4,7 g lysegult faststoff, TLC Rf =-0,38 i system C. Dette materialet ble oppløst i 100 ml metanol inneholdende 12 ml eddiksyre og ristet med 1,1 g 10% Rh/C i 5,5 timer ved 25°C og4,1kg/cm<2>hydrogen, filtrert og inndampet for å gi 4,58 g gult skum, TLC Rf = 0,45 i system C. Materialet ble oppløst i eter og behandlet med et overskudd av eterisk diazometan og deretter med eddiksyre for å dekomponere
diazometanoverskuddet, konsentrert og renset på silika (etylacetat-heksaner), hvilket ga 4,3 g voksaktig faststoff,TLC Rf = 0,5 (1:1 system A), [alfa]D 20 tilnærmet null (CHC13, c=l,l).
B. Racemisk metyl-3(S)-Bocamino-4-cykloheksyl-2( S)- azidobutyrat 2 g av produktet fra Eksempel 51A, 4,16 g trifenylfosfin og 12,1 mmol hydrogenazidsyre (fra natriumazid og svovelsyre i benzen/vann, hvorpå benzenoppløsningen ble tørket over natriumsulfat og titrert med standard base) ble oppløst i totalt 60 ml benzen ved 0°C og behandlet med 2,49 ml dietylazodikarboksylat. Blandingen ble omrørt i 30 min., filtrert, konsentrert og renset på silika (eter-heksaner), hvilket ga 1,02 g av et voksaktig, gråhvitt faststoff, TLC Rf = 0,48 i 1:3 system A.
C. Racemisk metyl-3(S)-amino-4-cykloheksyl-2(S)-azidobutyrat- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 51B (430 mg) ble oppløst i 15 ml 4N HCl-dioksan, omrørt i 1 time ved 25°C og inndampet for å gi 355 mg av et gråhvitt skum, TLC Rf = 0,22 i system C.
D. Metyl-3(S)-(BocPheHis(imBoc)amino-2(S)-azido-4-cykloheksylbutyrat som en l:l-blanding med 3 fR), 2( R) isomer
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av
produktet fra Eksempel 1C, ga 340 mg av produktet fra Eksempel 51C og 710 mg BocPheHis(imBoc), 620 mg av tittelforbindelsene, TLC Rf = 0,45 og 0,47 (5% etanol-diklormetan) som et farveløst skum.
E. Metyl-3(S)-(BocPheHisamino)-2(S)-azido-4-cyklo-heksylbutyrat som en blanding med
3( R), 2( R) isomeren
Produktet fra Eksempel 51D (380 mg) ble oppløst i 10 ml 5:1 eddiksyre-vann, omrørt i 4 timer ved 25°C, konsentrert, inndampet med tilsatt toluen og deretter med eter og så tørket for å gi 280 mg lysegult skum.
<X>H NMR, CDC13, 300 MHz, partiell, delta ppm: 1,37 (s, 9H) ; 3,76 og 3,78 (s, ca. 1:1 forhold, 3H totalt); 6,80 (s, 1H); 7,53 og 7,55 (s, 1:1, 1H totalt).
EKSEMPEL 52
Metyl-3(S)-(BocPheHisamino)-2(S)-amino-4-cykloheksyl-butyrat som en blanding med 3(R),2(R)-isomeren (I, Z=Bocamino; M=fenyl; Q=H; R2=imidazol-4-ylmetyl;
X=cvkloheksvl; W=CHNH, ; oa Z^ COoCH,)
Produktet fra Eksempel 51D (275 mg) ble oppløst i 20 ml etanol inneholdende 0,5 ml eddiksyre og ristet med 100 mg 10% Pd/C i 3 timer ved 25°C under 3,5 kg/cm<2>hydrogen, filtrert og konsentrert, hvilket ga 240 mg av et lysebrunt faststsoff, HPLC 5,64 og 7,01 min. i 60/40 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<X>H NMR, CDC13, 300 MHz, partiell, delta ppm: 1,33 og 1,35 (s, 9H, totalt); 3,72 (s, 3H totalt); 6,78 (s, 1H totalt).
EKSEMPEL 53
Metyl-3(S)-(BocPheHisamino)-2(R)-azido-4-cykloheksyl-butyrat som en blanding med 3(R),2(S)-isomer (I, Z=Bocamino; M=fenyl; Q=H; R2=imidazol-4-ylmetyl;
X=cvkloheksvl: W=CHN, ; og Z^ CCCH,)
A. Racemisk metyl-3(S)-Bocamino-4-cykloheksyl-2( S)- benzyloksybytvrat
En oppløsning av 600 mg av produktet fra Eksempel 51A, 700 mg benzosyre og 1,5 g trifenylfosfin i 5 ml THF ble behandlet ved 25°C med 0,9 ml dietylazodikarboksylat. Etter 1,5 timer ble 23 0 mg benzosyre, 0,5 g trifenylfosfin og 0,3 ml dietylazodikarboksylat tilsatt og 3 timer senere ble blandingen avkjølt til 0°C i 12 timer. Blandingen ble renset på silika (etylacetat/heksaner), hvilket ga 509 mg farveløst faststoff, TLC Rf = 0,41 i 1:3 system A.
B. Racemisk-metyl-3(S)-Bocamino-4-cykloheksyl-2( S)- hvdroksybutyrat
Produktet fra Eksempel 53A (550 mg) ble oppløst i 5 ml metanol og behandlet ved 2 5°C med 9 mg vannfri kaliumkarbonat. Etter 1,8 timer ble blandingen konsentrert og residuet renset på silika for å gi 32 6 mg oljeaktig skum, TLC Rf = 0,18 i 1:3 system A.
C. Racemisk metyl-3(S)-Bocamino-4-cykloheksyl-2( R)- azidobutvrat
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 51B, ga 320 mg av produktet fra Eksempel 53B, 280 mg farveløst voksaktig faststoff, TLC Rf = 0,50 i 1:3 system B.
D. Racemisk metyl-3(S)-amino-4-cykloheksyl-2 ( R) - azidobutvrat- hvdroklorid
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 51C, ga 260 mg av produktet fra Eksempel 53C, 198 mg lysegult faststoff.
E. Metyl-3(S)-(BocPheHis(imBoc)-amino)-2(R)-azido-4-cykloheksylbutyrat som en blanding med 3 ( R) . 2( S)- isomer
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 1C, ga 192 mg av produktet fra Eksempel 53D og 398 mg BocPheHis(imBoc) (US-patent 4.559.198), 253 mg av et lysegult skum, TLC Rf = 0,5 (etylacetat).
F. Metyl-3(S)-(BocPheHisamino)-2(R)-azido-4-cykloheksyl- butyrat som en blanding; med 3 ( R). 2 ( S )-isomeren
Produktet fra Eksempel 53E (211 mg) ble omrørt i 4 timer ved 25°C i 12 ml 5:1 eddiksyre-vann, konsentrert og tørket, hvilket ga 210 mg av et lysegult skum, TLC Rf = 0,1 i system
C.
<*>H NMR, CDC13, 300 MHz, partiell, delta ppm: 1,30 og 1,34 (s, 3:2 forhold, 9H totalt); 3,76 og 3,81 (s, 3:2 forhold, 3H totalt); 6,67 og 6,78 (s, 2:3 forhold, 1H totalt); 7,52 og 7,55 (s, 2:3 forhold, 1H totalt).
EKSEMPEL 54
Metyl-3(S)-(BocPheHis-amino)-2(R)-amino-4-cykloheksyl-butyrat som en blanding med 3(R),2(S)-isomeren (I, Z=Bocamino; M=fenyl; Q=H; R2=imidazol-4-ylmetyl;
X=cvkloheksvl: W=CH NHo; og Z^ CCvCH,)
Produktet fra Eksempel 53F (17 0 mg) ble oppløst i 15 ml etanol og 0,4 ml eddiksyre og ristet med 90 mg 10% Pd/C i 1,5 timer ved 25°C under 3,5 kg/cm<2>hydrogen, filtrert, konsentrert, inndampet sammen med eter og toluen og tørket, hvilket ga 170 mg lysebrunt faststoff, HPLC 5,17 og 6,17 min.
(ca. 1:1) i 35/65 acetonitril-pH 2,1 fosfat.
<X>H NMR, DMSO-d6, 300 MHz, partiell, delta ppm: 1,29 (s,9H); 3,56 og 3,61 (s, 3:2 forhold, 3H totalt); 6,80 og 7,50
(s, 1H hver).
EKSEMPEL 55
MorfolinokarbonylPheLeunor-C-Sta-metylester (I, Z=mor f olinokarbonyl amino; M=fenyl; Q=H; R2=CH2CH(CH3) 2;
X=cvkloheksvl: W=CH OH; oa Z^ COgCH,)
A. Nor- C- Sta- metvlester- hydroklorid
En oppløsning av 0,15 g Boc-nor-C-Sta-metylester i 4 ml4N HCl/dioksan ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum for å gi 0,15 g av et hvitt faststoff. Materialet ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, DMS0-d6) delta 3,65 (s, 3H) ; 4,17 (m, 1H); 6,47 (d, J=4Hz, 1H).
B. MorfolinokarbonvlPheLeu- metylester
Til en oppløsning av 0,30 g morfolinokarbonylPhe og
0,22 g HCl-LeuOMe i 5 ml vannfri CH2C12ble det suksessivt tilsatt 0,12 g TEA, 0,18 g HBT og 0,24 g DCC. Etter omrøring ved romtemperatur i 20 timer ble oppløsningen filtrert gjennom Celite og vasket 2 x 10 ml med 0,1N natriumhydroksyd. Den organiske fase ble tørket over MgSOA, filtrert og konsentrert i vakuum. Residuet ble kromatografert på Si02(2:1 EtOAc:heksan) for å gi 0,43 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,89 (d, J=7Hz, 6H); 3,71 (s, 3H); 4,48 (m, 1H); 4,57 (m, 1H); 6,25 (d, J=7Hz, 1H).
C. MorfolinokarbonvlPheLeu
Til en oppløsning av 0,43 g morfolinokarbonylPheLeuOMe i10ml MeOH ble det tilsatt 0,1 g K2C03, hvoretter den resulterende oppløsning ble omrørt ved romtemperatur i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum til et volum på 10 ml og surgjort med IN HCl og deretter ekstrahert 3 x 25 ml CH2C12. De kombinerte ekstraktene ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert for å gi en rå syre som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,87 (2d, 6H); 4,45 (m, 1H); 4,65 (m, 1H); 5,36 (d, J=7Hz, 1H).
D. MorfolinokarbonylPheLeunor- C- Sta- metylester
MorfolinokarbonylPheLeu (96 mg) ble kondensert med 80 mg nor-C-StaOMe-HCl ved å benytte den ovenfor beskrevne DCC-metode. Råproduktet ble kromatografert på Si02(29:1 CH2Cl2:EtOH) for å gi 68 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,85 (2d, 6H); 3,72 (s, 3H); 4,28 (m, 1H); 4,41 (m, 2H) .
EKSEMPEL 56
MorfolinokarbonylPheMetnor-C-Sta-metylester (I, Z=mor f ol inokarbony lamino; M=f eny 1; Q=H; R2=CH3S (CH2) 2-;
X=cvkloheksvl; W=CH OH; oa Z^ CCsCH,)
A. MorfolinokarbonylPheMet- metylester
MorfolinokarbonylPhe (0,30 g) ble koblet til 0,24 g HC1-metioninOMe ved å benytte DCC-metoden i Eksempel 55. Råmaterialet ble kromatografert på Si02(2:1, EtOAc:heksan) for å gi 0,36 g rent dipeptid. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,05 (s, 3H); 3,72 (s, 3H); 4,57 (m, 2H).
B. Morfolinokarbony1PheMet
MorfolinokarbonylPheMet-metylester (0,36 g) ble hydrolysert ved å benytte fremgangsmåten i Eksempel 55, hvilket førte til 0,3 g rå syre som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,01 (s, 3H) ; 2,44 (m, 1H) ; 4,61 (m, 1H).
C. MorfolinokarbonylPheMetnor- C- Sta- metylester
MorfolinokarbonylPheMet (0,10 g) ble koblet til 0,080 g nor-C-StaOMe-HCl (Eksempel 55) ved å benytte DCC (Eksempel 1). Råproduktet ble kromatografert på Si02(29:1, CH2Cl2-EtOH) for
å gi 50 mg rent produkt og 32 mg urent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,98 (s, 3H); 3,74 (s, 3H); 4,38 (m, 2H); 4,46 (m, 1H) .
EKSEMPEL 57
MorfolinokarbonylPhePhenor-C-Sta-metylester
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R?=benzvl: X=cvkloheksvl: W=CH OH; og Z^ CCCH^
A. MorfolinokarbonylPhePhe- metylester
MorfolinokarbonylPhe (0,30 g) ble kondensert med 0,26 g PheOMe-HCl ved å benytte DCC-metoden beskrevet i Eksempel 55. Det rå dipeptid ble kromatografert på Si02(1:2 EtOAc:heksan) for å gi 0,37 g rent produkt. NMR (3 00 MHz, CDC13) delta 3,65 (s, 3H); 4,49 (m, 1H); 4,78 (m, 1H).
B. MorfolinokarbonylPhePhe
MorfolinokarbonylPhePhe-metylester (0,37 g) ble hydrolysert som i Eksempel 55 for å gi 0,35 g rå syre som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,59 (m, 1H); 4,65 (m, 1H); 5,10 (d, J=8Hz, 1H).
C. MorfolinokarbonylPhePhenor- C- Sta- metylester
MorfolinokarbonylPhePhe (0,10 g) ble kondensert med 0,080 g nor-C-StaOMe-HCl ved bruk av DCC-metoden beskrevet i Eksempel 55. Råproduktet ble kromatografert på Si02(29:1 CH2Cl2:EtOH) for å gi 0,10 g ren forbindelse. NMR (300 MHz, CDC13, delta 2,74 (s, 3H); 4,26 (m, 1H); 4,36 (m, 1H); 4,52 (m, 1H) .
EKSEMPEL 58
MorfolinokarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-metylester
(I,Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R 7=CH, SCH?: X=cvkloheksvl; W=CHOH; oa Z^ COyCH,)
A. MorfolinokarbonylPhe- S- MeCys- metylester
MorfolinokarbonylPhe (0,96 g) og S-MeCysOMe-HCl (0,55 g) ble koblet ved å benytte det vannløselige reagenset DEC sammen med TEA og HBT som i Eksempel 55. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 100 ml EtOAc, vasket 2 x 35 ml 0,1N HCl og 2 x 35 ml 0,1N NaOH. Den organiske fase ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert i vakuum. Råproduktet (1,15 g) var tilstrekkelig rent for videre omsetning. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,00 (s, 3H) ; 3,72 (s, 3H) ; 4,58 (m, 1H); 4,65 (m, 1H) .
B. MorfolinokarbonvlPhe- S- MeCys
MorfolinokarbonylPhe-S-MeCys-metylester (1,15 g) ble hydrolysert som i Eksempel 55, bortsett fra at reaksjonsblandingen først ble omrørt ved 0°C i 15 min. og deretter ved romtemperatur. Råproduktet (1,0 g) ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,03 (s, 3H) ; 4,63 (m, 1H) ;
4,77 (m, 1H). C. MorfolinokarbonylPhe- S- MeCysnor- C- Sta- metylester MorfolinokarbonylPhe-S-MeCys (130 mg) ble koblet til nor-C-StaOMe-HCl (69 mg) ved bruk av DCC-metoden beskrevet i Eksempel 55. Det rå produkt ble kromatografert på Si02(19:1 CH2Cl2:EtOH) for å gi 58 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,06 (s, 3H); 3,72 (s, 3H); 4,40 (m, 2H).
EKSEMPEL 59
MorfolinokarbonylPhe-S-EtCysnor-C-Sta-metylester
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q_=H, R2=CH3CH2SCH2-; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
z<1>=æ2cH3
A. MorfolinokarbonvlPhe- S- EtCys- metylester MorfolinokarbonylPhe (0,20 g) ble koblet til S-EtCysOMe-HC1 (0,15 g) ved å benytte DCC-metoden beskrevet i Eksempel 55. De rå forbindelsene ble kromatografert på Si02(3:1 EtOAc:heksan) for å gi 0,20 g rent produkt. NMR (3 00 MHz, CDC13) delta 2,16 (t, J=7Hz, 3H); 2,45 (q, J=7Hz, 2H); 3,73 (s, 3H); 4,64 (m, 2H).
B. MorfolinokarbonylPhe- S- EtCys
MorfolinokarbonylPhe-S-EtCys-metylester (0,20 g) ble hydrolysert som i Eksempel 55 for å gi 0,11 g rå syre som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,16 (t, J=7Hz, 3H); 2,50 (q, J=7Hz, 2H); 4,64 (m, 1H); 4,79 (m, 1H) . C. MorfolinokarbonylPhe- S- EtCysnor- C- Sta- metvlester MorfolinokarbonylPhe-S-EtCys (0,11 g) ble koblet til nor-C-StaOMe-HCl (75 mg) ved bruk av DCC-metoden beskrevet i Eksempel 55. De rå forbindelsene ble kromatografert på Si02(29:1 CH2Cl2:Et0H) for å gi 0,10 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,21 (t, J=7Hz, 3H); 2,50 (m, 2H); 3,75 (s, 3H);
4,40 (m, 2H).
EKSEMPEL 60
MorfolinokarbonylPhe-O-BSernor-C-Sta-metylester
(I,Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=CH2OCH2C6H5; X=cykloheksyl; W=CH OH; og
Z^ COoCH,)
A. MorfolinokarbonvlPhe- O- BSer- metylester
MorfolinokarbonylPhe (0,31 g) ble koblet til O-BSerOMe-HC1 (0,25 g) ved å benytte DCC-metoden beskrevet i Eksempel 55. Råforbindelsen ble kromatografert på Si02(1:3 EtOAc:heksan) for å gi 0,28 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,70 (s, 3H) ; 4,43 (m, 2H) ; 4,63 (m, 2H).
B. MorfolinokarbonvlPhe- O- BSer
MorfolinokarbonylPhe-O-Bser-metylester (0,28 g) ble hydrolysert som i Eksempel 55. Den rå syren (0,19 g) ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,40 (m, 2H); 4,63 (m, 1H); 4,72 (m, 1H).
C. MorfolinokarbonvlPhe- O- BSernor- C- Sta- metylester
MorfolinokarbonylPhe-O-Bser (0,19 g) ble koblet til nor-C-StaOMe-HCl (0,14 g) ved bruk av DCC-metoden beskrevet i Eksempel 55. Det rå materialet ble renset ved kromatografi på Si02(29:1 CH2Cl2:EtOH) for å gi 0,11 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDCI3) delta 3,73 (s, 3H); 4,40 (m, 2H); 4,45 (AB, 2H).
EKSEMPEL 61
MorfolinokarbonylPhe-O-BThrnor-C-Sta-metylester
(I,Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=CH(CH3)OCH2C6H5; X=cykloheksyl; W=CH OH;
og Z^ COoCH,)
A. MorfolinokarbonvlPhe- O- BThr- metylester
MorfolinokarbonylPhe (0,30 g) og OBThrOMe-HCl (0,35 g) ble koblet ved bruk av standard-DCC-metoden (Eksempel 55). Det rå materialet (0,62 g) ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDCI3) delta 1,13 (d, J=6Hz, 3H); 3,63 (s, 3H); 4,38 (AB, 2H); 4,53 (m, 1H); 4,64 (m, 1H).
B. Morfolinokarbonyl- OBThr
MorfolinokarbonylPhe-OBThr-metylester (0,62 g) ble hydrolysert som beskrevet i Eksempel 55, hvilket ga 0,41 g rå syre som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13delta 1,17 (d, J=6Hz, 3H); 4,43 (AB, 2H); 4,62 (m, 1H); 4,70 (m, 1H) .
C. MorfolinokarbonylPhe- OBThrnor- C- Sta- metylester
MorfolinokarbonylPhe-OBThr (99 mg) og nor-C-StaOMe-HCl (44 mg) ble koblet ved å bruke standard-DCC-reaksjonen (Eksempel 55). Det rå materialet ble renset ved kromatografi (29:1 CH2Cl2:EtOH) for å gi 97 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,16 (d, J=6Hz, 3H); 3,76 (s, 3H); 4,30 (m, 1H) ; 4,41 (m, 1H); 4,46 (AB, 2H).
EKSEMPEL 62
MorfolinokarbonylPheNvanor-C-Sta-metylester (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=n-propyl;
X=cvkloheksvl; W=CH OH oa Z1=CQ., CH,')
A. MorfolinokarbonylPheNva- metylester
MorfolinokarbonylPhe (0,20 g) og NvaOMe-HCl (0,10 g) ble kondensert ved bruk av DCC-metoden beskrevet i Eksempel 55. Det rå materialet ble kromatografert på Si02(4:1 EtOAc:heksan) for å gi 0,22 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,92 (t, J=7Hz, 3H); 3,65 (s, 3H); 4,42 (m, 1H); 4,54 (m, 1H).
B. MorfolinokarbonylPheNva
MorfolinokarbonylPheNva-metylester (0,22 g) ble hydrolysert ved bruk av standardmetoden (Eksempel 55), for å gi 0,17 g rå syre som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,89 (t, J=7Hz, 3H) ; 4,46 (m, 1H) ; 4,62 (m, 1H) .
C. MorfolinokarbonylPheNvanor- C- Sta- metylester
MorfolinokarbonylPheNva (0,10 g) og nor-C-StaOMe-HCl (0,075 g) ble koblet ved bruk av DCC som beskrevet i Eksempel 55. Det rå produkt ble renset ved kromatografi (29:1 CH2Cl2:EtOH) for å gi 0,12 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,97 (t, J=7Hz, 3H); 3,72 (m, 3H); 4,29 (m, 1H); 4,40 (M, 1H) ; 4,53 (m, 1H) .
EKSEMPEL 63
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-n-propylamid (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
X=cvkloheksvl; W=CH OH; og Z^ CONHfCHoUCH,)
A. Boc- nor- C- Sta- n- propylamid
Til en oppløsning av 100 mg Boc-nor-C-Sta og 21 mg n-propylamin i 5 ml tørr CH2C12ble det tilsatt 54 mg HBT og 70 mg DEC, hvoretter den resulterende oppløsning ble omrørt ved romtemperatur i 20 timer. Oppløsningen ble fortynnet med 200 ml EtOAc og vasket 2 x 20 ml H20, 2 x 20 ml 0,1N HCl, 2 x 20 ml 0,1N NaOH. Den organiske fase ble tørket over MgS0A, filtrert og konsentrert i vakuum til 142 mg rå-amid som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,91 (t, J=7Hz, 3H) ; 1,40 (s, 9H) ; 3,85 (m, 1H) ; 4,04 (d, J=3Hz, 1H) .
B. nor- C- Sta- n- propylamid- hydroklorid
En blanding av 139 mg Boc-nor-C-StaNHnPr i 3 ml 4N HCl i dioksan ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer. Oppløsningen ble konsentrert i vakuum for å gi 96 mg råprodukt som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 0,85 (t, J=7Hz, 3H) ; 3,06 (m, 2H) ; 4,03 (d, J=3Hz, 1H) .
C. MorfolinokarbonylPheNlenor- C- Sta- n- propvlamid
MorfolinokarbonylPheNle (13 5 mg) ble koblet til HCl-nor-C-StaNHnPr (96 mg) ved bruk av DEC-metoden beskrevet i Eksempel 58. Det rå produkt ble kromatografert på Si02(9:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 113 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,90 (t, J=7Hz, 3H); 4,08 (d, J=7Hz, 1H); 4,32 (m, 2H); 4,80 (m, 1H).
EKSEMPEL 94
Morf olinokarbonyl-p-ClTyrS-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=p-klorfenyl;
Q=H; R2=CH3SCH2; X=cykloheksyl; W=CH OH;
Z1=CO, CH( CH,'),)
A. Morfolinokarbonyl- p- klorTyr
Til en oppløsning av 0,5 g p-klorTyr i 5 ml 2N NaOH og
20 ml dioksan ble tilsatt 0,36 g morfolinokarbonylklorid som beskrevet i Eksempel 92 for å gi 0,26 g råprodukt som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 4,65 (m, 1H) ; 6,97 (d, J=8Hz, 2H); 7,19 (d, J=8Hz, 2H) .
B. Morfolinokarbonyl-p-ClTyrS-MeCysnor-C-Sta-i-propylester
Morfolinokarbonyl-p-ClTyr (70 mg) ble koblet til 82 mg S-MeCysnor-C-StaOiPr ved bruk av DEC som beskrevet i Eksempel 76. Råmaterialet ble kromatografert (19:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 118 mg rent produkt som en blanding av isomerer ved p-ClTyr-stillingen. NMR (én isomer) (300 MHz, CDC13) delta 1,97 (s, 3H); 4,37 (m, 3H); 5,96 (m, 1H).
EKSEMPEL 95
2-morf olino-3-fenylpropionylNlenor-C-Sta-i-propylester (I, Z=morfolino; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
X=cvkloheksvl; W=CH OH: oa Z^ COoCH( CH -,) ,)
A. Etyl- 2- morfolino- 3- fenylpropionat
En oppløsning av 2,0 g etyl-2-brom-3-fenylpropionat og 2,8 g morfolin i 5 ml DMF ble omrørt over natten ved romtemperatur. Blandingen ble fortynnet med 75 ml 1% HCl og vasket 3 x 50 ml eter. Den vandige fase ble gjort basisk og ekstrahert 3 x 100 ml EtOAc. De kombinerte ekstraktene ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert. Residuet ble kromatografert (35% EtOAc:heksan) for å gi 0,8 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDCl3) delta 1,12 (t, J=7Hz, 3H); 3,36 (m, 1H); 4,04 (m, 2H).
B. 2- morfolino- 3- fenvlpropionsvre
En oppløsning av 0,65 g av etylesteren fra Eksempel 95A i 3,7 ml IN NaOH og 5 ml MeOH ble tilbakeløpsbehandlet i 3 timer. Oppløsningen ble surgjort med vannfri HCl og konsentrert. Residuet ble tørket grundig i høyvakuum. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 3,90 (br, 4H); 4,15 (m, 1H).
C. 2- morfolino- 3- fenvlpropionylNle- benzvlester
Produktet fra Eksempel 95B (0,35 g) ble koblet til 0,33 g NleObenzylester ved bruk av DEC som beskrevet i Eksempel 58. Råmaterialet ble kromatografert (39:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 0,45 g produkt som en blanding av isomerer ved MPP-stillingen. NMR (én isomer) (300 MHz, CDC13) delta 3,68 (m, 4H) ; 4,57 (m, 1H); 5,17 (AB, 2H).
D. 2- morfolino- 3- fenylpropionylNLe
Produktet fra Eksempel 95C (0,55 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen ved hydrogenering (2,8 kg/cm<2>) med 0,28 g 10% Pd/C i 50 ml MeOH i 2 timer. Blandingen ble filtrert gjennom Celite og konsentrert for å gi 0,41 g rå syre som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 3,74 (m, 4H); 4,38 (m, 1H).
E. 2- morfolino- 3- fenylpropionvlNlenor- C- Sta- i-propylester
Produktet fra Eksempel 95D (54 mg) ble koblet til 43 mg HCl-nor-C-StaOiPr ved bruk av DEC som beskrevet i Eksempel 58. Råmaterialet ble kromatografert (19:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 49 mg rent produkt og 47 mg av MPP-diastereomeren. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,12 (m, 1H) ; 4,39 (m, 1H) ; 5,00 (m, 1H) .
EKSEMPEL 96
2-(4-metylpiperazino)-3-fenylNlenor-C-Sta-i-propylester (I, Z=4-metylpiperazino; M=fenyl; X=cykloheksyl; Q=H;
R, =n- butvl; W=CH OH; oa Z^ COoCHfCH,) ■,)
A. 2-( 4- metvlpiperazino)- 3- fenvlpropionsyre- etylester
Etyl-2-brom-3-fenylpropionat (1,95 g) ble behandlet med 3,05 g N-metylpiperazin som beskrevet i Eksempel 95 for å gi 0,30 g rent produkt etter kromatografi (9:1 CH2Cl2:MeOH) . NMR (300 MHz, CDCI3) delta 1,10 (d, J=7HZ, 3H) ; 2,26 (s, 3H) ; 3,37 (m, 1H); 4,00 (m, 2H) .
B. 2-( 4- metylpiperazino)- 3- fenvlpropionsyre
En blanding av 0,56 g av etylesteren fra Eksempel 96A i31ml IN NaOH og 20 ml EtOH ble tilbakeløpsbehandlet i 16 timer. Vannfri HCl ble boblet inn, og blandingen ble konsentrert. Residuet ble oppløst i varm iPrOH-MeOH (1:1) og filtrert, hvoretter filtratet ble konsentrert for å gi 0,55 g råprodukt. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 2,72 (s, 3H) ; 3,80 (m, 1H) .
C. 2-(4-metylpiperazino)-3-fenylpropionylNle-benzylester
Produktet fra Eksempel 96B (0,55 g) ble koblet til 0,51 g NleOBn ved bruk av DEC-metoden beskrevet i Eksempel 58. Råmaterialet ble kromatografert (19:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 0,42 g produkt som en blanding av MPPP-epimerer. NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,27 (s, 3H); 2,85 (m, 1H); 3,26 (m, 1H); 4,54 (m, 1H) .
D. 2- f4- metylpiperazino)- 3- fenylpropionylNle
Produktet fra Eksempel 96C (0,42 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 95 for å gi 0,31 g rå syre som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, DMS0-d6) delta 2,48 (s, 3H) ; 4,32 (m, 1H) .
E. 2- (4-metylpiperazino)-3-fenylpropionylNle-nor-C-Sta- i- propylester
Produktet fra Eksempel 96D (76 mg) ble koblet til 60 mg HCl-nor-C-StaOiPr ved bruk av DEC (Eksempel 58). Råmaterialet ble kromatografert (9:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 30 mg og 33 mg MPPP-epimerer. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,35 (s, 3H) ; 4,16 (m, 1H); 4,40 (m, 1H); 5,01 (m, 1H) .
. EKSEMPEL 97
2-(3,5-dioksomorfolino)-3-fenylpropionylNlenor-C-Sta-i-propylester (I, Z=3,5-dioksomorfolino; M=fenyl; Q=H;
R, =n- butvl; X=cvkloheksvl; W=CHOH: Z 1=CO, CH( CHi) ■,)
A. 2-(3,5-dioksomorfolino)-3-fenylpropionsyre-benzvlester
Til en oppløsning av 0,21 g HCl-PheO-benzylester og
0,10 ml TEA i 10 ml CH2C12ble det tilsatt 80 mg glykolsyreanhydrid. Oppløsningen ble omrørt ved romtemperatur 1 2 timer. Blandingen ble fortynnet med 2 00 ml EtOAc og vasket 2 x 20 ml 0,1N HCl, 20 ml H20 og 20 ml saltvann. Den organiske fase ble tørket over MgSOA, filtrert og konsentrert for å gi 0,32 g råprodukt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,14 (m, 2H); 4,12 (m, 4H) ; 4,95 (m, 1H) ; 5,13 (AB, 2H).
En oppløsning av den foregående rå syre og 7 6 mg pyridin i 5 ml Ac20 ble oppvarmet til 100°C i 18 timer. Reaksjons blandingen ble tilsatt til 100 mg H20 og ekstrahert 2 x 100 ml EtOAc. De kombinerte ekstraktene ble vasket med 20 ml 0,1N HCl, 20 ml 0,1N NaOH og 20 ml H20. Den organiske fase ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert for å gi 0,23 g råprodukt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,18 (2AB, 4H) ; 5,19 (AB, 2H); 5,53 (m, 1H).
B. 2-( 3. 5- dioksomorfolino)- 3- fenylpropionsyre
Produktet fra Eksempel 97A ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 95 for å gi 0,15 g råprodukt. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 4,32 (AB, 4H) ; 5,30 (m, 1H) .
C. 2-( 3. 5- dioksomorfolino)- 3- fenvlpropionylNle-benzylester
Produktet fra Eksempel 97B (0,15 g) ble koblet til 0,16 g HCl-NleObenzylester ved bruk av standard-DEC-reaksjonen beskrevet i Eksempel 58. Råmaterialet ble kromatografert (4:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 0,14 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,18 (AB, 4H); 4,63 (m, 1H); 5,16 (AB, 2H).
D. 2- f 3. 5- dioksomorfolino)- 3- fenylpropionylNle
Produktet fra Eksempel 97C (0,14 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 95 for å gi 0,12 g råprodukt. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 4,24 (AB, 4H) ; 4,62 (m, 1H); 5,17 (m, 1H) .
E. 2-(3,5-dioksomorfolino)-3-fenylpropionylNle-nor- C- Sta- i- propylester
Produktet fra Eksempel 97D (0,12 g) ble koblet til HCl-nor-C-StaOiPr ved bruk av standard-DEC-reaksjonen beskrevet i Eksempel 58. Råmaterialet ble kromatografert (19:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 88 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,18 (m, 1H); 4,32 (s, 4H); 4,48 (m, 1H); 5,02 (m, 1H).
EKSEMPEL 98
2-(3-oksomorfolino)-3-fenylpropionylNlenor-C-Sta-i-propylester (I, Z=3-oksomorfolino; M=fenyl; Q=H;
R2=n-butyl; X=cykloheksyl; W=CH OH; og
Z^ COoCHfCH,),)
A. N- glykolvlfenylalanin- benzylester
Til en oppløsning av 2,23 g av acyleringsproduktet mellom
PheObenzylester og glykolsyreanhydrid (Eksempel 96) i 6,6 ml THF ved 0°C, ble det langsomt tilsatt 1,1 ekv. BH3-DMS, hvoretter den resulterende oppløsning ble omrørt i 5 timer. H20 (5 ml) ble dråpevis tilsatt fulgt av 5 ml 0,1N HCl. Blandingen ble tilsatt 150 ml H20, surgjort og ekstrahert 2 x 150 ml EtOAc.. De kombinerte ekstraktene ble vasket 2 x 30 ml 0,1N NaOH, 30 ml H20. Den organiske fase ble tørket over MgS0A, filtrert og konsentrert. Residuet ble kromatografert (39:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 0,43 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,99 (AB, 2H); 4,97 (m, 1H); 5,15 (AB, 2H).
B. N-( O- mesylglykolyl) fenylalanin- benzvlester
Til en oppløsning av 0,41 g av foregående alkohol og
0,41 g TEA i 10 ml CH2C12ble det ved 0°C dråpevis tilsatt 0,11 ml mesylklorid, hvorpå den resulterende oppløsning ble omrørt ved 0°C i 1 time. Oppløsningen ble fortynnet med 200 ml EtOAc og vasket med 30 ml 0,1N HCl, 0,1N NaOH. Den organiske fase ble tørket over MgSOA, filtrert og konsentrert for å gi 0,25 g rå mesylat. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,92 (s, 3H) ; 4,29 (m, 2H); 4,92 (m, 1H); 5,13 (AB, 2H).
C. N-( i odetoksvacetvl) fenylalanin- benzvlester
En blanding av 0,25 g av foregående mesylat og 0,23 g Nal i20 ml aceton ble tilbakeløpsbehandlet i 6 timer. Reaksjonsblandingen ble helt over i 100 ml H20 og ekstrahert 2 x 100 ml EtoAc. De kombinerte ekstraktene ble vasket med 50 ml saltvann, tørket over MgS04, filtrert og konsentrert. Råmaterialet ble kromatografert (9:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi
0,35 g rent jodid. NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,96 (s, 2H) ; 4,93 (m, 1H); 5,11 (AB, 2H).
D. 2-( 3- oksomorfolino)- 3- fenylpropionsvre- benzylester
Til en oppløsning av 0,16 g av foregående jodid i 3 ml THF ved -78°C, ble det dråpevis tilsatt 1,1 ekv. KNTMS2, hvorpå den resulterende oppløsning ble omrørt i 5 timer ved -78°C. NH4C1 (1 ml) ble langsomt tilsatt og blandingen ble helt over i 100 ml H20, surgjort og ekstrahert 2 x 100 ml EtOAc. De kombinerte ekstraktene ble vasket med 20 ml saltvann, tørket over MgS04, filtrert og konsentrert. Residuet ble kromatografert (9:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 71 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,10 (AB, 2H) ; 5,19 (AB, 2H) ; 5,27 (m, 1H) .
E. 2-( 3- oksomorfolino)- 3- fenvlpropionsyre
produktet fra Eksempel 98C (96 mg) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 95 for å gi 70 mg rå syre. NMR (300 MHz, DMS0-d6) delta 3,92 (AB, 2H) ; 5,04 (m, 1H) .
F. 2- f 3- oksomorf olino) - 3- f enylpropionvlNle- bertzylester
Produktet fra Eksempel 98D (90 mg) ble koblet til 98 mgNleO-benzylester ved bruk av standard-DEC-reaksjonen beskrevet i Eksempel 58. Råmaterialet ble kromatografert (39:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 127 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,14 (s, 2H); 5,54 (m, 1H); 5,16 (m, 2H); 5,32 (m, 1H) .
G. 2-( 3- oksomorfolino)- 3- fenvlpropionylNle
Produktet fra Eksempel 98E (127 mg) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 95 for å gi114mg rå syre som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 4,12 (br, 2H) ; 4,52 (br, 1H) .
H. 2-(3-oksomorfolino)-3-fenylpropionylNlenor-C-Sta-i- propylester
Produktet fra Eksempel 98F (114 mg) ble koblet til 92 mg HCl-nor-C-StaOiPr ved bruk av DEC-reaksjonen (Eksempel 58). Råmaterialet ble kromatografert (19:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi13mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,42 (m, 2H) ; 5,02 (m, 2H).
EKSEMPEL 99
3-oksomorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-i-propylester (I, Z=3-oksomorfolinokarbonylamino; Q=H; M=fenyl;
R2=n-butyl; X=cykloheksyl; W=CH OH; og
Z1=CQ2CH(, CH3) 2)
A. 3- oksomorfolinokarbonylPhe- benzylester
Til en suspensjon av 79 mg pentan-vasket NaH i 5 ml THF ble det tilsatt en oppløsning av 200 mg 3-ketomorfolin i 10 mlTHF. Den resulterende blanding ble omrørt i 5 min. ved romtemperatur og deretter avkjølt til 0°C. En oppløsning av 584 mg PheOBn-isocyanat i 15 ml THF ble dråpevis tilsatt, hvorpå den resulterende oppløsning ble omrørt ved 0°C i 1 time. Reaksjonsblandingen ble helt over i 100 ml H20 og ekstrahert 2 x 100 ml EtOAc. De kombinerte ekstraktene ble vasket med 20 ml 0,1N HCl, 20 ml 0,1N NaOH, tørket over MgS04, filtrert og konsentrert. Råmaterialet ble kromatografert (4:1 EtOAc:CH2C12) for å gi 132 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,24 (s, 2H); 4,82 (m, 1H); 5,18 (AB, 2H).
B. 3- oksomorfolinokarbonvlPhe
Produktet fra Eksempel 99A (0,64 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 95 for å gi 0,44 g rå syre. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 4,22 (s, 2H) ; 4,51 (m, 1H) .
C. 3- oksomorfolinokarbonylPheNle- benzylester
Produktet fra Eksempel 99B (0,44 g) ble koblet til 0,41 g NleOBn ved bruk av standard-DEC-reaksjonen (Eksempel 58) for å gi 0,73 g råmateriale som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,25 (m, 2H) ; 4,61 (m, 1H) ; 4,16 (m, 2H) .
D. 3- oksomorfolinokarbonvlPheNle
Produktet fra Eksempel 99C (0,72 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 95 for å gi 0,56 g råmateriale. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 4,19 (m, 2H) ; 4,65 (m, 2H).
E. 3- oksomorfolinokarbonylPheNlenor- C- Sta- i- propylester
Produktet fra Eksempel 99D (125 mg) ble koblet til 91 mg HCl-nor-C-StaOiPr ved bruk av DEC (Eksempel 58). Råmaterialet ble kromatografert (19:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 73 mg produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,20 (m, 2H) ; 4,39 (m, 1H) ; 4,52 (m, 1H) ; 5,01 (m, 1H) .
EKSEMPEL 100
MetoksyetylaminokarbonylPheNlenor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=CH30(CH2)2NHCONH; M=fenyl; Q=H; X=cykloheksyl;
R, =n- butvlr W=CHOH: og Z^ COgCH( CH,U)
A. MetoksyetvlaminokarbonylPhe- benzylester
Til en omrørt oppløsning av 0,20 g PheOBn-isocyanat i
10 ml CH2C12ble det tilsatt 59 mg O-Me-etanolamin, og opp- løsningen ble omrørt i 1 time. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 200 ml eter og vasket med 20 ml 0,1N HCl og 20 ml 0,1N NaOH. Den organiske fase ble tørket over MgSOA/filtrert og konsentrert for å gi 0,20 g råprodukt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,28 (s, 3H) ; 4,80 (m, 1H) ; 5,11 (m, 2H) .
B. Metoksyety1aminokarbony1Phe
En blanding av 0,20 g av foregående benzylester og 0,10 g 10% Pd/C i 50 ml MeOH ble hydrogenert ved 3,5 kg/cm<2>i 2 timer. Blandingen ble filtrert gjennom Celite og konsentrert for å gi 0,19 g råprodukt. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 3,24 (s, 3H) ;
4,30 (m, 1H).
C. MetoksyetylaminokarbonvlPheNle- benzvlester
Foregående Phe-derivat (0,19 g) ble koblet til 0,14 gNleOBn ved bruk av standard-DEC-metoden (Eksempel 58). Dette førte til 0,23 g råmateriale som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,26 (s, 3H) ; 4,52 (m, 2H) ; 5,10 (m, 2H).
D. MetoksyetylaminokarbonvlPheNle
En blanding av 0,23 g av foregående forbindelse og 0,12 g 10% Pd/C i 50 ml EtOH ble hydrogenert ved 3,5 kg/cm<2>i 2 timer. Blandingen ble filtrert og konsentrert for å gi 0,16 g råprodukt. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 3,21 (s, 3H) ; 4,10 (m, 1H); 4,41 (m, 1H).
E. MetoksyetylaminokarbonylPheNlenor- C- Sta- i-pro<p>vlester
Foregående syre (0,17 g) ble koblet til 0,13 g HCl-nor-C-Sta-OiPr ved bruk av standard-DEC-reaksjonen (Eksempel 58) . Råmaterialet ble kromatografert (19:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 0,18 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,28 (s, 3H); 4,32 (m, 1H); 4,45 (m, 1H); 4,57 (m, 1H) ; 5,03 (m, 1H) .
EKSEMPEL 101
HydroksyetylaminokarbonylPheNlenor-C-Sta-i-propylester (I, Z=HO(CH2)2NHCONH; M=fenyl; p_=H; R2=n-butyl;
X=c<y>kloheksvl; W=CH OH; oa Z 1=CO?CH ( CH?),)
A. HydroksyetylaminokarbonylPhe- benzylester
Til en oppløsning av 0,50 g PheOBn-isocyanat i 10 ml CH2C12ble det tilsatt 0,12 g etanolamin, hvorpå den resulterende oppløsning ble omrørt i 4 timer. Blandingen ble fortynnet med 200 ml EtOAc og vasket med 20 ml 0,1N HCl og 20 ml 0,1N NaOH. Den organiske fase ble tørket over MgS0A, filtrert og konsentrert for å gi 0,44 g råprodukt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,79 (m, 1H) ; 4,12 (m, 2H) .
B. t-butyldimetylsilyloksyetylaminokarbonylPhe-benzvlester
Til en oppløsning av 0,44 g av foregående alkohol i 10 ml DMF ble det tilsatt 0,24 g t-butyldimetylsilylklorid og 0,22 g imidazol. Etter 18 timer ble oppløsningen tilsatt til 150 ml H20 og ekstrahert 2 x 150 ml EtOAc. De kombinerte ekstraktene ble vasket med 30 ml H20, tørket over MgS04, filtrert og konsentrert. Residuet ble kromatografert (39:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 0,50 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,89 (s, 9H); 4,98 (m, 1H); 5,13 (m, 2H).
C. t- butyldimetylsilyloksyetylaminokarbonylPhe
En blanding av foregående benzylester (0,18 g) og 0,09 g
10% Pd/C i 30 ml MeOH ble hydrogenert ved 3,5 kg/cm<2>i 3 timer. Blandingen ble filtrert gjennom Celite og konsentrert for å gi 0,13 g råmateriale. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 0,89 (s, 3H) ; 4,27 (m, 1H).
D. t-butyldimetylsilyloksyetylaminokarbonylPheNle-benzylester
Foregående syre (0,13 g) ble koblet til 96 mg NleOBn ved bruk av DEC-metoden (Eksempel 58). Kromatografi (19:1 CH2C12:-MeOH) førte til 0,10 g rent produkt. NMR (300 MHz, DMS0-d6) delta 0,91 (s, 9H); 4,50 (m, 2H); 4,72 (m, 1H); 5,11 (s, 2H).
E. t- butyldimetylsilyloksyetylaminokarbonylPheNle
Foregående produkt ble befridd for beskyttelsesgruppen ved hydrogenering som beskrevet i Eksempel 100, hvilket førte til 78 mg råmateriale. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 0,88 (s, 9H) ; 4,00 (m, 1H) ; 4,37 (m, 1H) .
F. t-butyldimety1s ily1oksyety1aminokarbony1PheNle-nor- C- Sta- i- propylester
Foregående syre (73 mg) ble koblet til 45 mg HCl-nor-C-StaOiPr (DEC, Eksempel 58) for å gi 116 mg råprodukt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,86 (s, 9H) ; 4,38 (m, 1H) ; 4,45 (m, 1H) ; 5,02 (m, 1H).
G. HydroksyetylaminokarbonvlPheNlenor- C- Sta- i-propylester
Foregående materiale (116 mg) ble befridd for beskyttelsesgruppen ved behandling med 1,5 ekv. Bu4NF i 5 ml THF i 2 timer. Oppløsningen ble fortynnet med 200 ml EtOAc og vasket med 20 ml 0,1N HCl og 20 ml 0,1N NaOH. Den organiske fase ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert og residuet kromatografert (9:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 63 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,41 (m, 1H) ; 4,50 (m, 1H) ; 4,74 (m, 1H) ; 5,07 (m, 1H) .
EKSEMPEL 102
MorfolinosulfonylPheNlenor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=morfolinosulfonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=n-butyl; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
Z^ CO- pCHCCH,),)
A. MorfolinosulfonylPheNle- benzylester
En oppløsning av 0,29 g PheNleOBn, 0,40 g morfolino-sulf onylklorid og 0,36 g TEA i 10 ml CH2C12ble tilbakeløps-behandlet i 16 timer. Mer av de to sistnevnte reagenser ble tilsatt og oppvarmingen fortsatt i 8 timer. Oppløsningen ble fortynnet med 50 ml EtOAc og vasket med 25 ml 0,1N HCl og 25 ml 0,1N NaOH. Den organiske fase ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert, og residuet ble kromatografert (2:1 heksan:EtOAc) for å gi 0,36 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDCI3) delta 4,04 (m, 1H); 4,60 (m, 1H); 5,15 (m, 2H).
B. MorfolinosulfonylPheNle
Foregående materiale (0,36 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen (Eksempel 100) for å gi 0,30 g råprodukt.
NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 3,95 (m, 1H) ; 4,10 (m, 1H) .
C. MorfolinosulfonvlPheNlenor- C- Sta- i- propvlester
Produktet fra Eksempel 102B (0,29 g) ble koblet til
0,12 g HCl-nor-C-StaOiPr ved bruk av DEC (Eksempel 58). Kromatografi (29:1 CH2Cl2:EtOH) førte til 0,29 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,02 (m, 1H) ; 4,41 (m, 2H) ; 5,06 (m, 1H) .
EKSEMPEL 103
MorfolinometylfosfinPheNlenor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=morfolinoP(OCH3) (O)amino; M=fenyl; Q=H;
R, =n- butvl: X=cvkloheksvl; W=CHOH: Z1=CQ., CH( CH,U')
A. MorfolinometylfosfinPheNle- benzylester
En oppløsning av 0,30 g PheNleOBn, 0,30 g TEA og 0,44 g morfolinometylfosfinsyreklorid i 10 ml CH2C12ble omrørt i 60 timer. Oppløsningen ble fortynnet med 50 ml EtOAc og vasket med 25 ml 0,1N HCl og 0,1N NaOH. Den organiske fase ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert. Residuet ble kromatografert (19:1 CH2Cl2:EtOH) for å gi 0,18 g produkt som en blanding av isomerer ved fosfor. NMR (3 00 MHz, CDC13) delta 3,57 (d, J=10Hz, 3H); 4,50 (m, 1H); 5,09 (m, 2H).
B. Morfolinomety1fosfinPheNle
Foregående materiale ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 100 for å gi 0,10 g råmateriale. NMR (300 MHz, DMS0-d6) delta 3,26 (d, J=10Hz, 3H) ; 3,96 (m, 1H) .
C. MorfolinometylfosfinPheNlenor-C-Sta-
i- propylester
Produktet fra Eksempel 103B (0,10 g) ble koblet til 58 mgHCl-nor-C-StaOiPr ved bruk av DEC-metoden (Eksempel 58). Kromatografi (19:1 CH2Cl2:EtOH) førte til 28 mg rent materiale. NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,61 (d, J=llHz, 3H) ; 4,45 (m, 1H) ; 4,43 (m, 1H); 4,99 (m, 1H).
EKSEMPEL 104
TiomorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=tiomorfolinokarbonylamino; Q=H; M=fenyl;
X=cvkloheksvl; W=CH OH; Z^ COoCHfCH-,)
A. TiomorfolinokarbonylPhe- benzvlester
Til en oppløsning av 1,0 g PheOBn-isocyanat i 10 ml CH2C12ble det ved 0°C tilsatt 0,85 g tiomorfolin, hvorpå den resulterende oppløsning ble omrørt ved romtemperatur i 1,5 timer. Oppløsningen ble fortynnet med 50 ml EtOAc og vasket 2 x 25 ml 0,1N HCl. Den organiske fase ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert for å gi 1,26 g råprodukt som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,83 (m, 2H); 5,15 (AB, 2H).
B. TiomorfolinokarbonylPhe
En blanding av 1,26 g av foregående materiale og 4,5 g K2C03i 15 ml H20 og 70 ml MeOH ble omrørt ved romtemperatur i 60 timer og deretter oppvarmet under tilbakeløpskjøling i 16 timer. Blandingen ble konsentrert til en vandig oppløsning og vasket 2 x 50 ml eter. Den vandige fase ble surgjort og ekstrahert 3 x 50 ml CH2C12. De kombinerte ekstraktene ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 3,01 (m, 2H); 4,26 (m, 1H).
C. TiomorfolinokarbonylPheNle- benzylester
Produktet fra Eksempel 104B (0,72 g) ble koblet til
0,75 g NleOBn ved bruk av standard-DEC-reaksjonen (Eksempel 58) for å gi 1,1 g råprodukt som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,47 (m, 1H) ; 4,58 (m, 1H) ; 5,12 (m, 2H).
D. TiomorfolinokarbonvlPheNle
Produktet fra Eksempel 104C (1,1 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 104B ovenfor. Dette førte til 0,70 g råprodukt som ble benyttet i den videre omsetning. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 3,59 (m, 4H) ; 4,46 (m, 1H) ; 4,73 (m, 1H) .
E. TiomorfolinokarbonylPheNlenor- C- Sta- i- propylester
Produktet fra Eksempel 104D (0,70 g) ble koblet til
0,50 g HCl-nor-C-StaOiPr ved bruk av DEC-reaksjonen (Eksempel 58), og råmaterialet ble kromatografert (29:1 CH2Cl2:EtOH) for å gi 0,65 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,28 (m, 1H) ; 4,43 (m, 1H); 4,57 (m, 1H); 5,00 (m, 1H).
EKSEMPEL 105
1-oksotiomorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-i-propylester (I, Z=tiomorfolinokarbonylaminosulfoksyd; M=fenyl; Q=H;
R, =n- butvl; X=cykloheksvl: W=CH OH; Z^ COoCHfCH,) ,)
Til en oppløsning av 0,10 g av produktet fra Eksempel 104E i 5 ml CH2C12ble det ved 0°C tilsatt 35 mg mCPBA, hvorpå den resulterende oppløsning ble omrørt i 15 min. Oppløsningen ble fortynnet med 20 ml EtOAc og vasket 2 x 20 ml 10% Na2S03og 20 ml 0,1N NaOH. Den organiske fase ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert, og residuet ble kromatografert (9:1 CH2Cl2:EtOH) for å gi 82 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,29 (m, 1H); 3,38 (m, 1H); 4,59 (m, 1H); 4,94 (m, 1H).
EKSEMPEL 106
1,1-dioksotiomorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=tiomorfolinokarbonylaminosulfon; M=fenyl; Q=H;
R o=n- butvl; X=cykloheksvl; W=CH OH: oa Z 1=C0?CH f CH,) ?) A. 1, ldioksotiomorfolinokarbonyl- Phe- benzylester
Til en oppløsning av 0,64 g av produktet fra Eksempel 104A i 20 ml CH2C12ble det ved 0°C tilsatt 1,0 g mCPBA, hvorpå den resulterende oppløsning ble omrørt i 16 timer. Oppløsningen ble fortynnet med 100 ml EtOAc og vasket 3 x 50 ml 10% Na2S03. Den organiske fase ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert. Råmaterialet ble kromatografert (1:1 EtOAc-heksan) for å gi 0,47 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,79 (m, 1H) ; 5,16 (AB, 2H) .
B. 1, 1- dioksotiomorfolinokarbonvlPhe
Produktet fra Eksempel 106A (0,47 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 100 for å gi 0,30 g rå syre som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 4,05 (m, 1H) ; 4,60 (m, 1H) ; 5,15 (AB, 2H) .
C. 1. 1- dioksotiomorfolinokarbonvlPheNle- benzylester
Produktet fra Eksempel 106B (0,30 g) ble koblet til 0,29 g NleOBn ved bruk av DEC-reaksjonen beskrevet i Eksempel 58 for å gi 0,46 g råprodukt som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,50 (m, 2H) ; 5,12 (AB, 2H) .
D. 1, 1- dioksotiomorfolinokarbonvlPheNle
Produktet fra Eksempel 106C (0,46 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 100 for å gi0,36 g rå syre som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, DMS0-d6) delta 3,97 (m, 1H) ; 4,32 (m, 1H) .
E. 1,1-dioksotiomorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-i- propylester
Produktet fra Eksempel 106D (0,26 g) ble koblet til
0,18 g HCl-nor-C-StaOiPr ved bruk av DEC (Eksempel 58) for å gi 0,31 g rent produkt etter rensing ved kromatografi (19:1 CH2Cl2:EtOH) . NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,28 (m, 1H) ; 4,47 (m, 1H) ; 4,60 (m, 1H) ; 5,02 (m, 1H) .
EKSEMPEL 107
MorfolinokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-benzylester
(I, Z=morfolinokarbonylamino: M=fenyl; Q=H;
R ?=CH, SCHo- ; X=cvkloheksvl; W=CH OH; Z^ CCCHoC.H^
A. Bocnor- C- Sta- benzvlester
Bocnor-C-Sta (0,10 g) ble forestret med 0,11 g benzylalkohol ved bruk av standard-DEC-reaksjonen (Eksempel 58) med 0,25 ekv. DMAP. Råmaterialet ble kromatografert (39:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 0,10 g ren ester. NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,39 (s, 9H); 4,10 (s, 1H); 4,13 (s, 1H); 5,14 (AB, 2H).
B. nor- C- Sta- benzylester- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 107A (0,10 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 63 for å gi 96 mg råsalt som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, DMS0-d6) delta 4,16 (m, 1H); 5,12 (m, 2H).
C. MorfolinokarbonylPheS- MeCvsnor- C- Sta- benzvlester
Produktet fra Eksempel 107B (0,12 g) ble koblet til 84 mg HCl-nor-C-StaOBn ved bruk av standard-DEC-reaksjonen (Eksempel 58). Råmaterialet ble kromatografert (19:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 92 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,08 (s, 3H) ; 4,40 (m, 3H); 5,14 (AB, 2H).
EKSEMPEL 108
MorfolinokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-cykloheksyl-metylester (I, Z=morfolinokarbonylamino;M=fenyl;
Q=H; R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CHOH; og Z^ COoCHoCÆ,)
A. Bocnor- C- Sta- cvkloheksyl- metvlester
Bocnor-C-Sta (70 mg) ble forestret med 80 mg cykloheksyl-metanol som beskrevet i Eksempel 107 for etter kromatografi (39:1 CH2Cl2:MeOH), å gi 40 mg rent materiale. NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,35 (s, 9H); 3,39 (d, J=6Hz, 1H); 4,08 (m, 1H).
B. nor- C- Sta- cykloheksyl- metvlester- hvdroklorid
Produktet fra Eksempel 108A (40 mg) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 63 for å gi 37 mg råsalt. NMR (300 MHz, DMS0-d6) delta 3,53 (s, 1H) ; 4,10 (m, 1H) .
C.MorfolinokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-cvkloheksyl- metvlester
MorfolinokarbonylPheS-MeCys (42 mg) ble koblet til 34 mg av produktet fra Eksempel 108B ved bruk av DEC-reaksjonen (Eksempel 58). Kromatografi (19:1 CH2Cl2:MeOH) førte til 50 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,12 (s, 3H) ; 4,42 (m, 3H) .
EKSEMPEL 109
2-(morfolinokarbonyloksy)-3-fenylpropionylNlenor-C-Sta-i-propylester (I, Z=morfolinokarbonyloksy; M=fenyl; Q=H;
Ro=n- butvl; X=cvkloheksvl; W=CH OH; Z^ CO^ H( CH, U)
A. 2-(morfolinokarbonyloksy)-3-fenylpropionsyre-metylester
Til en oppløsning av 0,74 g metylfenyllaktat i 10 ml
CH2C12ble det tilsatt 0,60 g morfolinokarbonylklorid og 1,1 g DMAP, hvorpå den resulterende oppløsning ble omrørt ved romtemperatur over natten. Ytterligere 0,60 g morfolinkarbonylklorid ble tilsatt og omrøringen fortsatt i 2 dager. Blandingen ble helt over i 100 ml H20 og ekstrahert 2 x 100 ml EtOAc. De kombinerte ekstraktene ble vasket med 20 ml 0,1N HCl og 20 ml 0,1N NaOH, tørket over MgSOA, filtrert og konsentrert for å gi 1,24 g råprodukt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,75 (s, 3H); 5,19 (m, 1H).
B. 2-( morfolinokarbonvloksy)- 3- fenylpropionsyre
Produktet fra Eksempel 109A (1,2 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 55 for å gi 1,1 g rå syre. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 4,22 (m, 1H) ;.
C. 2-(morfolinokarbonyloksy)-3-fenylpropionylNle-benzylester
Produktet fra Eksempel 109B (0,12 g) ble koblet til
0,12 g NleOBn ved bruk av DEC som beskrevet i Eksempel 58. Dette førte til 0,20 g råprodukt som ble benyttet i den videre omsetning. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,59 (m, 1H) ; 5,14 (AB, 2H) ; 5,37 (m, 1H).
D. 2-( morfolinokarbonyloksy)- 3- fenvlpropionvlNle
Produktet fra Eksempel 109C (0,20 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 100 for å gi 0,16 g rå syre som ble benyttet i den videre omsetning. NMR (300 MHz, DMS0-d6) delta 4,15 (m, 1H) ; 5,09 (m, 1H) .
E. 2-(morfolinokarbonyloksy)-3-fenylpropionylNle-nor- C- Sta- i- propylester
Produktet fra Eksempel 109D (0,15 g) ble koblet til
0,11 g HCl-nor-C-StaOiPr ved å bruke DEC-metoden beskrevet i Eksempel 58. Råmaterialet ble kromatografert (19:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 0,16 g rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,22 (m, 1H) ; 4,41 (m, 1H) ; 5,02 (m, 1H) ; 5,28 (m, 1H) .
EKSEMPEL 110
O-acetyl-morfolinokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R ?=CH, SCH?- ; W=CHOCOCH, ; X=cvkloheksvl; Z 1=CQ?CH ( CH,) ?)
Til en oppløsning av 0,10 g av produktet fra Eksempel 17 1 1 ml pyridin ble det tilsatt 26 mg Ac20, hvorpå den resulterende oppløsning ble omrørt ved romtemperatur over natten. Oppløsningen ble fortynnet med 100 ml EtOAc og vasket 2 x 10 ml 0,IN HCl og 2 x 10 ml 0,IN NaOH. Den organiske fase ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert. Råmaterialet ble kromatografert (19:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 90 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,16 (s, 6H) ; 4,37 (m, 1H) ; 4,52 (m, 2H); 4,88 (d, J=3Hz, 1H); 4,96 (m, 1H).
EKSEMPEL 111
MetylaminokarbonylPheNlenor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=CH3NHCONH; M= fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
X=cvkloheksvl; W=CH OH; og Z^ COoCHfCH,)
A. MetylaminokarbonylPhe- benzylester
Til en oppløsning av 0,30 g PheOBn-isocyanat i 20 ml CH2C12ble det tilsatt 0,51 ml av en 2,3M MeNH2-oppløsning i benzen, hvorpå den resulterende oppløsning ble omrørt i 4 timer.Oppløsningen ble fortynnet med 200 ml EtOAc, vasket med 20 ml 0,1N HCl og 20 ml 0,1N NaOH. Den organiske fase ble tørket over MgS04, filtrert og konsentrert for å gi 0,30 g råprodukt som ble benyttet videre. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,69 (d, J=5Hz, 3H); 4,42 (m, 1H); 4,83 (m, 2H).
B. MetylaminokarbonylPhe
Produktet fra Eksempel 111A (0,30 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 100 for å gi 0,23 g rå syre som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 2,62 (s, 3H) ; 4,33 (m, 1H) .
C. MetylaminokarbonylPheNle- benzvlester
Produktet fra Eksempel 111B (0,23 g) ble koblet til NleOBn ved bruk av standard-DEC-reaksjonen (Eksempel 58) for å gi 0,38 g råmateriale som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,51 (br, 3H) ; 4,29 (m, 1H) ; 4,46
(m, 1H); 5,14 (s, 2H).
D. MetylaminokarbonvlPheNle
Produktet fra Eksempel 111C (0,37 g) ble befridd for beskyttelsesgruppen som beskrevet i Eksempel 100 for å gi 0,29 g rå syre som ble benyttet uten rensing. NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 2,52 (d, J=5Hz, 3H); 4,17 (m, 1H); 4,46 (m, 1H).
E. MetylaminokarbonvlPheNlenor- C- Sta- i- propylester
Produktet fra Eksempel 111D (0,15 g) ble koblet til
0,13gHCl-nor-C-StaOiPr ved bruk av standard-DEC-reaksjonen (Eksempel 58) for å gi 0,13 g rent produkt etter kromatografi (9:1 CH2Cl2:MeOH) . NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,77 (d, J=5Hz, 3H) ; 4,34 (m, 2H) ; 4,47 (m, 1H) ; 4,74 (m, 1H) ; 5,01 (m, 1H) .
EKSEMPEL 112
Morf olinokarbonylThalaS-MeCysnor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=2-tienyl; Q=H;
R, =CH7SCH,- ; X=cvkloheksvl; W=CH OH: og Z^ CCCH( CH,U)
A. MorfolinokarbonylThala
Til en oppløsning av 100 mg 2-tienylalanin i 15 ml dioksan-vann (2:1 volum/volum) justert til pH 11 med natriumhydroksyd, ble det tilsatt 96 mg morfolinosulfonylklorid hvorpå reaksjonsblandingen ble omrørt over natten ved romtemperatur. pH ble igjen justert til 11 og ytterligere 40 mg sulfonylklorid ble tilsatt. Etter omrøring i 2 timer ble den vandige oppløsning ekstrahert med metylenklorid, pH justert til ca. 2 og ekstrahert med etylacetat. Den organiske fase ble fraskilt, vasket med saltvann og tørket (Na2S04). Oppløsnings-midlet ble fjernet for å gi 66 mg av mellomproduktet.
B. MorfolinokarbonylThalaS- MeCysnor- C- Sta- i- propylester
Ved å følge den generelle fremgangsmåte i Eksempel 55, ga 100 mg av produktet fra 92B, 66 mg av produktet fra Eksempel 112A, 48 mg DCC, 32 mg HBT og 20 mg N-metylmorfolin, 168 mg råprodukt. Kromatografi på silikagel ga 59mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,13 (m, 6H); 2,05 (s, 3H); 3,0-3,4 (m, 4H) ; 3,5-3,65 (m, 4H) ; og 6,85-7,15 (m, 3H) .
EKSEMPEL 113
MorfolinokarbonylNphalaS-MeCysnor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=l-naftyl; Q=H;
R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
Z^ COoCHfCH,)^
A. MorfolinokarbonvlNphala
Ved å benytte fremgangsmåten i Eksempel 112A, ga 420 mg morfolinosulfonylklorid, 500 mg 1-naftylalanin, 3 ml IN natriumhydroksyd og 200 mg natriumbikarbonat i 5 ml 1:1 tetrahydrofuran, 120 mg av det ønskede mellomprodukt.
B. MorfolinokarbonylNphalaS-MeCysnor-C-Sta-i
<p>ropvlester
Ved å benytte den vanlige koblingsmetoden ble 145 mg av produktet fra Eksempel 93B, 131 mg av det ovenfor oppnådde produkt, 82 mg DCC, 55 mg HBT og 45 -liter N-metylmorfolin i 15 ml metylenklorid, 253 mg produkt som ble kromatografert på silikagel med 1-1,5% metanol i kloroform, 83 mg. NMR (3 00 MHz, CDC13) delta 1,2 (d, J=5Hz, 6H); 2,01 (s, 3H); 3,05 (m, 2H); 3,41 (m, 2H); og 6,75-8,18 (m, 7H).
EKSEMPEL 114
MorfolinokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-metylester
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R, =CH, SCH,- ; X=cvkloheksvl; W=CHOH; oa Z^ COoCH,
Ved å følge den vanlige koblingsmetoden, ga 135 mg S-MeCysnor-C-Sta-metylester-hydroklorid, 88,2 mg morfolinokarbonylPhe, 32,1 mg N-metylmorfolin, 42,9 mg HBT og 65,4 mg DCC i 20 ml metylenklorid, produktet. Kromatografi på silikagel med kloroform-metanol (99:1; volum/volum) ga 103 mg rent produkt, som var identisk med produktet fremstillet i Eksempel 58. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,1 (s, 3H) ; 3,7 (s, 3H); 3,0-3,4 (m, 4H); 3,5-3,84 (m, 4H); og 7,3 (s, 5H).
EKSEMPEL 115
MorfolinokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-N-metylamid
(I, Z=morfolinokarbonylamino; Q=H; M=fenyl;
R ?=CHgSCH,- : X=cvkloheksvl; W=CHOH: oa Z^ CONHCH,
Produktet fra Eksempel 114 (45 mg) oppløst i 10 ml metanol ble behandlet med metylamin til metning, hvorpå reaksjonsblandingen ble hensatt ved romtemperatur over natten. Oppløsningsmidlet ble fjernet og residuet utgnidd med dietyleter, 30 mg. Produktet var identisk med det i Eksempel 86. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,1 (s, 3H); 2,65 (s, 3H); 2,85 (d, J=5Hz, 2H) og 7,2 (s, 5H).
EKSEMPEL 116
MorfolinokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-N-trifluoretylamid (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R, =CH, SCH,- : X=cvkloheksvl; W=CH OH: Z^ CONHCH^ CF,)
A. Bocnor- C- Sta- N- trifluoretvlamid
Ved å benytte den generelle koblingsmetode, ga 33 mg trifluoretylamin-hydroklorid, 75,3 mg Bocnor-C-Sta, 25 mg N-metylmorfolin, 33 mg HBT og 51,5 mg DCC i 20 ml metylenklorid, 121 mg av det ønskede mellomprodukt som et skum.
B. nor- C- Sta- N- trifluoretvlamid- hvdroklorid
Produktet fra Eksempel 116A ble avblokkert med HC1-dioksan (5 ml) ved romtemperatur i 90 min. Fjerning av oppløsningsmidlet ga 87 mg produkt.
C. BocS- MeCvsnor- C- Sta- N- trifluoretvlamid
Ved å benytte den generelle koblingsmetode, ga 87 mg av produktet fra Eksempel 116B, 58,8 mg BocS-MeCys, 25,3 mg N-metylmorfolin, 33,8 mg HBT og 51,5 mg DCC i 20 ml metylenklorid, 146 mg av det ønskede mellomprodukt.
D. S- MeCysnor- C- Sta- N- trifluoretylamid- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 116C (14 6 mg) ble avblokkert ved bruk av 5 ml dioksan mettet med HCl i90 min. ved romtemperatur. Fjerning av oppløsningsmidlet ga 121 mg produkt.
E. MorfolinokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-N-tri fluorety1amid
Ved bruk av koblingsmetoden ga 121 mg av produktet fra Eksempel 116D, 69,5 mg morfolinokarbonylPhe, 25,3 mg N-metylmorfolin, 33,8 mg HBT og 51,5 mg DCC i 20 ml metylenklorid, 123 mg produkt. Kromatografi på silikagel med kloroform-metanol (99:1; volum/volum) ga 57 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,1-3,5 (m, 4H) ; 3,5-3,8 (m, 4H) og 7,3 (s, 5H) .
EKSEMPEL 117
(2-metoksykarbonylpyrrolid-l-yl) karbonylPheS-MeCysnor C-Sta-i-propylester (I, Z=l-(2-metoksykarbonyl-pyrrolidyl) karbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=CH3SCH2-;
X=cvkloheksvl; W=CHOH; oa Z^ COCHfCH,U1
A. (2-metoksykarbonylpyrrolid-l-yl)karbonyl-Phe- benzvlester
En oppløsning av 66 mg prolin-metylester-hydroklorid i
10 ml CH2C12og 70/zliter N,N-diisopropyletylamin ble behandlet med 112mg l-benzyloksykarbonyl-2-fenetyl-isocyanat ved 0°C, hvorpå reaksjonsblandingen ble omrørt over natten. Opparbeidning ga 153 mg av det ønskede mellomprodukt.
B. ( 2- metoksykarbonylpyrrolid- l- yl) karboksvlPhe
Ved bruk av fremgangsmåten i Eksempel 18B, ble produktet fra Eksempel 117A debenzylert for å gi 170 mg mellomprodukt.
C. (2-metoksykarbonylpyrrolid-l-yl)karbonylPheS- MeCysnor- C- Sta- i- propvlester
Ved å benytte den vanlige koblingsmetoden ga produktet fra Eksempel 92B (174 mg) , det ovenfor oppnådde mellomprodukt (140 mg) , 82 mg DCC, 55 mg HBT og 45 juliter N-metylmorfolin i 10 ml CH2C12, 230 mg råprodukt. Kromatografi på silikagel med 1-1,5% metanol i kloroform ga 102 mg produkt. NMR (300 MHz, CDCI3) delta 1,21 (m, 6H); 2,09 (s, 3H); 2,78-2,89 (m, 2H); 3,0-3,2 (m, 2H); 3,65 (s, 3H) og 7,12-7,32 (m, 5H) .
EKSEMPEL 118
N-metyl-N-metoksykarbonylmetylaminokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I, Z=CH3OCOCH2N(CH3)CONH;
M=fenyl; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CHOH;
Z^ CO. CHfCH,),)
A. N-(metoksykarbonylmetyl)-N-metylaminokarbonylPhe- benzylester
En reaksjonsblanding av L-fenylalanin-benzylester
(171 mg), 72 mg N-metyl-N-klorkarbonylglysin-metylester og 47 -liter N-metylmorfolin i 15 ml CH2C12ble omrørt ved 0°C og deretter over natten ved romtemperatur. 4-dimetylaminopyridin (10 mg) ble tilsatt og omrøringen fortsatt i 3 timer. Mer karbamoylklorid (40 mg) ble tilsatt, hvorpå
reaksjonsblandingen ble omrørt i flere dager.
Oppløsningsmidlet ble fjernet og residuet kromatografert på silikagel med kloroform. Det rene mellomprodukt, 105 mg, ble isolert i fraksjoner 22-30.
B. N-( metoksykarbonylmetyl)- N- metvlaminokarbonylPhe
Produktet fra Eksempel 118A ble debenzylert ved å følge den generelle fremgangsmåte i Eksempel 18B for å gi 129 mg av det rå mellomprodukt.
C. N-metyl-N-metoksykarbonylmetylaminokarbonylPhe-S- MeCvsnor- C- Sta- i- propylester
Ved å benytte den tidligere beskrevne koblingsmetode ga 115 mg av produktet fra Eksempel 92B, 115 mg av produktet ovenfor, 81 mg DCC, 53 mg HBT og 43 -liter N-metylmorfolin i 10 ml CH2C12, 2 51 mg produkt. Kromatografi på silikagel med 1-2% metanol i kloroform ga 70 mg av det ønskede produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,23 (m, 6H); 2,03 (s, 3H); 2,9 (s, 3H); 3,65 (s, 3H); og 7,1-7,28 (m, 5H).
EKSEMPEL 119
N-metyl-N-metoksykarbonylmetylaminokarbonylPheNlenor-C-Sta-i-propylester (I; Z=CH3OCOCH2N(CH3)CONH; M=fenyl;
Q=H; R2=n-butyl; X=cykloheksyl; W=CHOH; og Z^ COoCHfCH,),)
A. Nlenor- C- Sta- hvdroklorid
Ved å benytte den vanlige koblingsmetode, ga BocNle
(78 mg), nor-C-Sta-i-propylester-hydroklorid, 69 mg DCC, 45 mg HBT og 37 -liter N-metylmorfolin i 10 ml CH2C12, 171 mg produkt.
Boe ble fjernet fra produktet ved behandling med 10 ml dioksan mettet med HCl i 3 timer. Opparbeidning ga 155 mg av det angitte produktet.
B. N-metyl-N-metoksykarbonylmetylaminokarbonylPhe-Nlenor- C- Sta- i- propylester
Ved bruk av den vanlige koblingsmetode, ga 101 mg av produktet fra Eksempel 118B, 155 mg av produktet ovenfor, 70 mg DCC, 46 mg HBT og 37 -liter N-metylmorfolin, 209 mg produkt som ble renset ved kromatografi på silikagel med 0,5-1% metanol i kloroform som elueringsmiddel, 51 mg. NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,85 (t, J=5Hz., 3H) ; 1,12 (m, 6H) ; 2,77 (s, 3H); 3,09-3,19 (m, 2H); 3,62 (s, 3H) og 7,1-7,29.
EKSEMPEL 120
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-N-2-metylbutylamid
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=n-butyl; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
Z^ CONHCHoCH f CH,) C?H-=)
A. nor- C- Sta- N- 2- metylbutylamid- hvdroklorid
Ved å gå ut fra 80,6 mg Boc-nor-C-Sta og 22,3 mg 2-metylbutylamin og benytte DCC-koblingsmetoden i Eksempel 64A etterfulgt av avblokkeringsmetoden i Eksempel 64B, ble det oppnådd 87 mg av det angitte produkt.
B. MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-N-2-metylbutylamid
MorfolinokarbonylPheNle (100 mg) ble koblet til nor-C-Sta-N-2-metylbutylamid ved bruk av DCC-metoden i Eksempel 55. Råmaterialet ble kromatografert på silikagel (99:1 CHC13:metanol) og ga etter 80 x 4 ml fraksjoner (97,5:2,5), 80 mg av det ønskede produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,8-1,05 (m, 6H); 2,5 (d, J=5Hz, 2H); 3,0-3,4 (m, 4H); 3,4-3,84 (m, 4H) ; 5,35 (d, J=5Hz, 1H) og 7,3 (s, 5H).
EKSEMPEL 121
MorfolinokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-N-2,2-dimetyl-3-dimetylaminopropylamid (I, Z=mor f ol inokarbony lamino;
M=fenyl; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CH OH;
og Z1=CONHCH?CfCH, KCH, N( CH,)?)
A. nor-C-Sta-N-2,2-dimetyl-3-dimetylaminopropylamid-hydroklorid
Ved å gå ut fra 50 mg Bocnor-C-Sta og 22 mg N,N,2,2-tetrametyl-1,3-propandiimin og benytte DCC-koblingsmetoden i Eksempel 64A, fulgt av avblokkeringsmetoden i Eksempel 64B, ble 98 mg av det ønskede mellomprodukt oppnådd.
B. S-MeCysnor-C-Sta-2,2-dimetyl-3-dimetylaminopropyl-amid- hydroklorid
Ved å benytte 98 mg av produktet fra Eksempel 12IA og
60 mg Boc-S-MeCys og følge DCC-koblingsmetoden og deretterBoc-avblokkeringsteknikken, ble 120 mg produkt oppnådd.
C. MorfolinokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-2,2-dimetvl- 3- dimetylaminopropylamid
Produktet fra Eksempel 12IB (120 mg) og
morfolinokarbonylPhe (66 mg) ble koblet ved å benytte DCC-metoden fra Eksempel 55 for å gi 116 mg. NMR (300 MHz, CDC13+ CH3OD) delta 0,81 (s, 6H); 1,15 (s, 6H); 2,0 (s, 3H); 3,1-3,4 (m, 4H); 3,4-3,64 (m, 4H); og 7,06-7,15 (m, 5H).
EKSEMPEL 122
MorfolinokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-N-2-pikolylamid
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
Z<x=>CONHCH?CÆN)
A. nor- C- Sta- N- 2- pikolylamid- dihvdroklorid
Ved å benytte koblingsmetoden fra Eksempel 64A, ga
60,2 mg Boc-nor-C-Sta og 21,6 mg 2-aminometylpyridin, 108 mg Bocnor-C-Sta-N-2-pikolylamid som ble avblokkert ved bruk av fremgangsmåten i Eksempel 64B for å gi 83 mg av det angitte mellomprodukt.
B. S- MeCysnor- C- Sta- N- 2- pikolvlamid- dihydroklorid
BocS-MeCys (47 mg) ble koblet med 83 mg av det foregående produkt ved hjelp av DCC-metoden i Eksempel 55 for å gi 126 mg produkt som ble avblokkert med hydrogenklorid i dioksan for å gi 78 mg av det angitte produkt.
C. MorfolinokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-N-2-pikolvlamid
Ved bruk av DCC-koblingsmetoden i Eksempel 55 ga 78 mg av produktet fra Eksempel 122B og 44,9 mg morfolinokarbonylPhe, 113 mg av produktet som ble kromatografert på silikagel med kloroform-metanol fra 99:1 til 95:5 som eluent, 22 mg. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,05 (s, 3H); 2,85 (J=5Hz, 2H); 3,0-3,4 (m, 4H); 3,4-3,7 (m, 4H); og 7,0-7,9 (m, 9H).
EKSEMPEL 123
3-hydroksypyrid-2-ylkarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I; Z=3-hydroksypyrid-2-ylkarbonylamino;
M=fenyl; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CH OH;
og Z^ COoCHfCH,) ,)
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 38B, bortsett fra at 34/uliter, 1,2 ekv. trietylamin ble benyttet for å nøytralisere aminhydrokloridet, ga 110 mg av produktet fra Eksempel 39 og 28 mg 3-hydroksypikolinsyre, 78 mg farveløst pulver, TLC Rf = 0,42 i 2:1 etylacetat-heksan.
<X>H NMR, CDC13, 250 MHz, partiell, delta ppm: 1,26 og 1,27
(d, 3H hver); 2,11 (s, 3H); 2,60 og 2,85 (dd, 1H hver); 3,26 (m, 3H); 4,09, 4,37, 4,45, 4,79 og 5,03 (m, 1H hver); 6,5, 6,81 og 8,49 (d, 1H hver); 8,08 (m, 1H).
EKSEMPEL 124
MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-cykloheksylmetyl-keton (I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
X=cvkloheksvl; W=CH OH; oa Z^ COCHoC^H,^
A. (S)-4-t-butoksykarbonylamino-3(R)-benzyloksy-1, 5- dicykloheksyl- 2- butanon
En oppløsning av cykloheksylmetylmagnesiumbromid (fra 0,78 ml cykloheksylmetylbromid og 0,14 g magnesium i 3 ml eter) ble behandlet med 1,00 g 3(S)-t-butoksykarbonylamino-2(R)-benzyloksy-4-cykloheksylbutyraldehyd (produkt fra Eksempel 5A, US-patent 4.668.769) i 6 ml eter ved 5°C i løpet av 2-3 min. Etter 25 min. ble blandingen behandlet med vandig ammoniumklorid, ekstrahert med eter og vasket med IN HCl, vandig bikarbonat, tørket, konsentrert og renset på silika under eluering med etylacetat/heksaner for å gi 278 mg av en blanding av de to alkohol-isomerene, TLC Rf = 0,48 og 0,41 i 1:3 etylacetat/heksaner. Dette produkt ble oppløst i 5 ml 1:2 eter-aceton og behandlet ved 0°C med 1 ml kromsyreoppløsning (Org. Syn. Coll. Vol. V. s. 310). Etter 15 min. ble blandingen fortynnet med eter og vasket med vandig NaOH, tørket og kromatografert på silika i etylacetat/heksaner for å gi 201 mg gul olje, TLC Rf = 0,59 i 1:3 etylacetat-heksaner.
B. 4(S)-amino-3(R)-benzyloksy-1,5-dicykloheksyl-2-butanon- hydroklorid
Produktet fra Eksempel 124A (195 mg) ble oppløst i 2 ml4N HCl-dioksan og omrørt ved 25°C i 1 time, konsentrert og tørket for å gi 165 mg farveløst pulver, TLC Rf = 0,56 i system C (platen med avsatte flekker utsatt for NH3før eluering).
C. MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-cykloheksyl-metylketon- benzvlester
Etter den generelle fremgangsmåte for fremstilling av produktet fra Eksempel 38B, bortsett fra at 1,3 ekv. trietylamin ble benyttet for å nøytralisere aminsaltet, ga158 mg av produktet fra Eksempel 124B og 152 mg av produktet fra Eksempel 7C, etter rensing på silikagel i etylacetat-heksaner, 228 mg farveløst skum, TLC Rf = 0,29 i 2:1 system A.
D. MorfolinokarbonylPheNlenor-C-Sta-cykloheksyl-metylketon
Produktet fra Eksempel 124C (220 mg) ble oppløst i 20 ml 1:1 metanol-eddiksyre og ristet med 250 mg 10% Pd/C i 22 timer ved 25°C og 3,5 kg/cm<2>hydrogen, filtrert gjennom Supercel, konsentrert, inndampet sammen med tilsatt toluen og eter og tørket for å gi 179 mg av et ravfarvet skum som ble kromatografert på silika i etylacetat-heksaner for å gi 131 mg farveløst pulver, TLC Rf =0,44 i etylacetat.
lE NMR CDC13, 250 MHz, partiell, delta ppm: 0,87 (t, 3H) ; 2,40, 2,53, 3,05 og 3,12 (dd, 1H hver); 3,28 (m); 3,62 (m, 4H); 4,07 (br, 1H); 4,15 (m, 1H); 4,52 (m, 2H); 5,00, 6,23 og 6,51 (d, 1H hver).
EKSEMPEL 125
4-oksopiperidinokarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-i-propylester- etylen-ketal (I, Z=4-oksopiperidinokarbonylamino-etylen ketal; M=fenyl; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl;
W=CHOH: oa Z1=C0, CH( CH,1,')
Etter fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 50, ga 150 mg av produktet fra Eksempel 39 og 32/uliter 4-piperidon-etylen-ketal, 60 mg farveløst pulver, TLC Rf = 0,30 i etylacetat, HPLC 2,76 og 3,09 min.
(ca. 2:1) i 80/20 acetonitril-vann. Hovedkomponenten ble fraskilt ved halv-preparativ omvendt-fase HPLC på en 9,8 x250 mm Zorbax C-8 kolonne i 70/30 acetonitril-vann. 60 mg av blandingen ga 28 mg av den tidligst-eluerende forbindelse.
<X>H NMR, CDCI3, 250 MHz, partiell, delta ppm: 0,92 (m) ; 1,26 og 1,28 (d, 3H hver); 2,09 (s, 3H); 2,72, 2,93, 3,08, og 3,29 (dd, 1H hver); 3,34 (m); 3,92 (s, 4H); 4,10 (br, 1H); 4,35-4,53 (m, 3H); 4,87 (d, 1H); 5,06 (septett, 1H); 6,95 og 7,11 (d, 1H hver); 7,18-7,38 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 126
N-Bocpiperid-4-ylkarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I; Z=N-Bocpiperid-4-ylkarbonylamino; M=fenyl;
Q=H; R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CHOH; og Z^ CO. CHfCHaU
Ved å benytte fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 38B, bortsett fra at 1,3 ekv. trietylamin ble benyttet for å nøytralisere aminhydrokloridet, ga 230 mg av produktet fra Eksempel 39 og 97 mg N-Boc-isonikotinsyre, 241 mg farveløst pulver, TLC Rf = 0,49 i etylacetat .
<4>i NMR, CDC13, 250 MHz, partiell, delta ppm: 1,28 (d, 6H) ; 1,46 (s, 9H); 2,14 (s, 3H); 2,62, 2,91, 3,05 og 3,16 (dd, 1H hver); 2,70 (m); 3,39, 5,98, 6,53 og 6,75 (d, 1H hver); 4,35 og 4,45 (m, 1H hver); 5,04 (septett, 1H); 7,13-7,37 (m, aromatisk).
EKSEMPEL 127
Piperid-4-ylkarbonylPheS-MeCysnor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=piperid-4-ylkarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
Z1=C02 CH( CH3j2j
Produktet fra Eksempel 126 (175 mg) ble oppløst i 4N HC1-dioksan i 3 0 min. ved 25°C, konsentrert og tørket for å gi 157 mg lysegult pulver, TLC Rf = 0,20 i system C (platen med avsatte flekker ble utsatt for ammoniakk før eluering).
<X>H NMR, DMS0-d6, 250 MHz, partiell, delta ppm: 1,28 og 1,29 (d, 3H hver); 2,09 (s, 3H); 4,00, 4,21 og 4,45 (m, 1H hver); 4,86 (septett, 1H); 5,36, 7,69, 8,15 og 8,30 (d, 1H hver).
EKSEMPEL 128
4-oksopiperidinokarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I, Z=4-oksopiperidinokarbonylamino; M=fenyl;
Q=H; R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
Z^ CO^ HfCH,),)
A. 4-oksopiperidinokarbonylPhe-benzylester
4-piperidon-hydroklorid (819 mg) ble oppløst i 15 ml diklormetan og behandlet ved 0°C med 740/uliter trietylamin og 1,50 g av produktet fra Eksempel 7A (isocyanatoPheOBn). Etter 1,5 timer ble blandingen oppløst i etylacetat, vasket med IN HCl (3 x), vandig NaHC03, saltvann, tørket over MgS04, konsentrert, oppløst i 10 ml varm 2:1 etylacetat-heksaner, avkjølt og filtrert, hvorved 0,6 g faststoff ble fjernet. TLC Rf = 0,53 i 1:1 system A. Moderluten ble kromatografert på silika i 1:1 etylacetat-heksaner, hvilket ga 322 mg av en klar olje, TLC Rf = 0,13 i system A. NMR-spekteret var overens-stemmende med tittelstrukturen.
B. 4- oksopiperidinokarbonvlPhe
Produktet fra Eksempel 128A (297 mg) ble oppløst i 15 ml 1:10 eddiksyre-metanol og ristet ved 25°C og 3,5 kg/cm<2>hydrogen med 150 mg 10% Pd/C i 30 min., filtrert, konsentrert og inndampet sammen med tilsatt toluen, hvilket ga 227 mg farveløst skum, TLC Rf =0,05 i etylacetat.
C. 4-oksopiperidinokarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i- propylester
Ved å benytte fremgangsmåten for fremstilling og rensing av produktet fra Eksempel 38B, bortsett fra at trietylamin ble benyttet for å nøytralisere amin-hydrokloridet, ga 100 mg S-MeCysnor-C-Sta-isopropylester-hydroklorid (produktet fra Eksempel 48D) og 73 mg av produktet fra Eksempel 128B, 116 mg farveløst faststoff, TLC Rf = 0,29 i etylacetat.
EKSEMPEL 129
KarboksylbutylkarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester (I, Z=H02C(CH2) 4CONH-; M=fenyl; Q=H;
R2=CH3SCH2-; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
Z^ COoCHfCH,),)
A. (CH3)3C02C (CHZ)«COPhe-S-MeCysnor-C-Sta-
i- propylester
Heksandikarboksylsyre-mono-tert-butylester (0,10 g) ble kondensert med 0,10 g Phe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester-hydroklorid ved bruk av DEC som beskrevet i Eksempel 58. Kromatografi på Si02(1:19 MeOH:CH2Cl2) førte til 95 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,41 (s, 9H) ; 4,38 (m, 2H) ; 4,62 (m, 1H); 5,01 (m, 1H).
B. KarboksybutylkarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i- propvlester
En oppløsning av 90 mg av den ovenfor oppnådde t-butylester i 2 ml trifluoreddiksyre og 2 ml CH2C12ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Etter standard syre-base-opparbeidning ble råmaterialet renset ved kromatografi (9:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 52 mg rent produkt, NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,08 (s, 3H); 4,40 (m, 2H); 4,73 (m, 1H); 4,97 (m, 1H).
EKSEMPEL 130
AminopentylkarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=H2N(CH2)5CONH-; M= fenyl; Q=H; R2=CH3SCH2;
X=cvkloheksvl; W=CHOH: oa Z1=:COoCH ( CH,) ■ >)
A. BocaminopentylkarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i- propvlester
N-Boc-6-aminoheksansyre (59 mg) ble koblet til Phe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propylester-hydroklorid (133 mg) ved bruk av standard-DEC-reaksjonen (Eksempel 58) for å gi 145 mg råprodukt som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300MHz, CDC13) delta 1,43 (s, 9H); 2,12 (s, 3H); 4,35 (m, 1H); 4,43 (m, 1H) ; 4,58 (m, 1H) ; 4,62 (m, 1H) ; 5,03 (m, 1H) .
C. AminopentylkarbonylPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i- propylester [
En oppløsning av 140 mg av produktet fra Eksempel 13 OA i
3 ml 4N HCl i dioksan ble omrørt i 45 min. og konsentrert. Syre-base opparbeidning førte til 100 mg rent produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,07 (s, 3H); 4,36 (m, 2H); 4,64 (m, 1H) ; 4,98 (m, 1H).
EKSEMPEL 131
MorfolinokarbonylPheAspnor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=H02CCH2; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
Z^ COoCHfCH,),)
A. MorfolinokarbonylPhe- Asp- benzvlester
Asparaginsyre-beta-benzylester (0,4 g) ble behandlet med morfolinokarbonylPhe-hydroksysuccinimidester som beskrevet i Eksempel80 for å gi 0,42 g råmateriale som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, DMS0-d6) delta 4,34 (m, 1H) ; 4,61 (m, 1H); 5,10 (s, 2H).
B. MorfolinokarbonylPhe-Asp(O-benzylester)nor-C-Sta- i- propvlester
Produktet fra Eksempel 131A (0,29 g) ble koblet til
0,12 g nor-C-Sta-i-propylester ved bruk av standard-DEC-reaks j onen (Eksempel 76) for å gi 0,20 g råmateriale som ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,39 (m, 2H) ; 4,65 (m, 1H); 5,02 (m, 1H); 5,09 (AB, 2H) .
C. MorfolinokarbonvlPhe- Aspnor- C- Sta- i- propylester
En oppløsning av 0,20 g av den ovenfor oppnådde rå benzylester og 0,4 g 10% Pd/C i 30 ml MeOH ble hydrogenert ved3,2kg/cm<2>i 3 0 min. Blandingen ble filtrert gjennom Celite og konsentrert. Residuet ble kromatografert (23:1:1
CHCI3) :MeOH:AcOH) for å gi 81 mg rent produkt, NMR (300 MHz, DMS0-d6) delta 4,17 (m, 1H); 4,28 (m, 1H); 4,4 (m, 1H); 4,84 (m, 1H) .
EKSEMPEL 132
MorfolinokarbonylPhe-Asnnor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=mor f ol inokarbonylami.no; M=fenyl; Q=H;
R2=H2NCOCH2; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
Z^ COoCHfCH-J,)
A. MorfolinokarbonylPheAsn
Asparagin (0,5 g) ble behandlet med 1,0 g morfolin-karbonylPhe-hydroksysuccinimid som beskrevet i Eksempel80. Råmaterialet (0,80 g) ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, DMS0-d6) delta 4,10 (m, 1H) ; 3,34 (m, 1H) ; 4,53 (m, 1H) .
B. MorfolinokarbonylPhe- Asnnor- C- Sta- i- propylester
Foregående produkt (0,18 g) ble koblet til 0,10 g nor-C-Sta-i-propylester ved bruk av standard-DEC-reaksjonen (Eksempel 76) for å gi 0,17 g rent produkt etter kromatografi (9:1 CH2Cl2:MeOH) . NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,39 (m, 2H) ; 4,62 (m, 1H); 5,01 (m, 1H).
EKSEMPEL 133
MorfolinokarbonylPheValnor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=fenyl; Q=H;
R2=CH(CH3)2) ; X=cykloheksyl; W=CHOH; og
Z1=C02CH( CH3j2J
A. MorfolinokarbonylPheVal
Valin (0,40 g) ble behandlet med 0,60 g
morfolinokarbonylPhe-hydroksysuccinimidester som beskrevet i Eksempel 80. Råmaterialet (0,53 g) ble benyttet uten videre rensing. NMR (300 MHz, DMS0-d6) delta 0,92 (d, J=7Hz, 3H) ; 4,18 (m, 1H); 4,43 (m, 1H).
B. MorfolinokarbonvlPheValnor- C- Stå- n- propylester
Foregående produkt (0,17 g) ble koblet til 0,10 g nor-C-Sta-i-propylester ved bruk av standard-DEC-reaksjonen (Eksempel 76). Råmaterialet ble kromatografert (24:1 CH2Cl2:MeOH) for å gi 0,15 g rent produkt. NMR (3 00 MHz, CDC13) delta 0,77 (d, J=6Hz, 3H); 0,84 (d, J=7Hz, 3H); 4,45 (m, 1H); 4,52 (m, 1H); 5,00 (m, 1H).
EKSEMPEL 134
IsovalerylPhe-Nlenor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=(CH3)2CHCH2CONH; M=fenyl; Q=H; R2=n-butyl;
X=cvkloheksvl; W=CH OH; oa Z^ COoCHf CH,) ,)
Ved bruk av den nevnte koblingsmetode fra Eksempel 5B, ga 107 mg isovalerylPheNle, 72 mg nor-C-Sta-i-propylester, 68 mg HBT og 57 mg DEC i 1 ml CH2C12, etter kromatogarfi på Si02med 1:1 etylacetat-heksaner som eluent, 121 mg av det ønskede produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,9 (m, 9H) ; 1,22 (d, 6H) ; 2,93-3,08 (m, 2H); 4,05 (m, 1H); 4,19, 4,40, 4,66 (m, 1H hver); 4,98 (septett, 1H), 6,09, 6,25, 6,52 (d, 1H, hver) og 7,1-7,24 (m, 5H).
EKSEMPEL 135
MorfolinokarbonylhomoPheNlenor-C-Sta-i-propylester
(I, Z=morfolinokarbonylamino; M=benzyl; R2=n-butyl;
0=H; X=cvkloheksvl; Z 1=C0oCH( CH,)■ > ) oa W=CH OH;
Ved bruk av DCC-metoden fra Eksempel 55, ga 138 mg morfolinokarbonylhomoPheNle, 95 mg nor-C-Sta-i-propylester-hydroklorid, 70 mg DCC, 46 mg HBT og 38 -liter N-metylmorfolin, etter kromatografering på Si02med 1-2% metanol i kloroform, 62 mg av det ønskede produkt. NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,2 (d, 5H); 3,2 (m, 2H); 3,5 (m, 2H) og 7,2 (s, 5H).

Claims (9)

1. Analogifremgangsmåte for fremstilling av en terapeutisk aktiv forbindelse med formel:
og farmasøytisk akseptable salter derav, hvor Z er ^-( Y)^ (A)p, hvor Rx er (Cx-C6)alkyl, amino, (Ci-CJ alkoksy, (Ci-CA) alkylamino, ( Cx- C3) alkoksy (C2-CJ alkylenamino, karboksy (0^-CA)alkyl, hydroksy (C2-CA)alkylenamino, (Cx-Cg)alkoksyCOCH2N(CH3) , amino(C1-C5)alkyl, morfolino, piperidyl, hydroksypiperidino, 4-oksopiperidino, piperazino, 4-oksopiperidinoetylen-ketal, 4-(Ci-Cj)alkylpiperazino, tiomorfolino, tiomorfolino-l-oksyd, tiomorf olino-1,1-dioksyd, N- (Cj-CJ alkoksykarbonylpiperidyl, 4-(CX-CA)alkoksykarbonylpiperazino, 3-oksomorfolino, 3,5-dioksomorfolino, hydroksypyridyl, pyridyl, (s)-pyrrolid-2-yl, N-t-butoksykarbonyl-(s)-pyrrolid-2-yl, ((^-03)alkoksykarbonyl-(s)-pyrrolid-2-yl eller 4-(Ci-CJalkanoylpiperazino; Y er C=0, P(0CH3)=0 eller S02; A er N(CH3), NH eller 0; m og p er begge heltallene 0 eller 1; M er fenyl, benzyl, naftyl, tienyl, metoksyfenyl, hydroksyfenyl eller klorfenyl; Q er metyl eller hydrogen; R2er (Ci-Cs) alkyl, ( C^ C^ alkyltio (CV C2)alkyl, (Ci-Cg)alkoksy(Ci-Cz)alkyl, benzyloksy (Cx-Q,)alkyl, benzyl, hydroksy (C!-C2) alkyl, karboksy (Ci-Cz) alkyl, ( C^ C^) alkyl-sulfinyl (Ci-Cz)alkyl, (C^C;,) alkylsulfonyl (Cx-C2) alkyl, 4-benzyloksykarbonylaminobutyl, 4-aminobutyl, imidazol-4-ylmetyl, N-t-butoksykarbonylimidazol-4-ylmetyl eller karbamoyl(Ci-Cz)alkyl; X er cykloheksyl, i-propyl eller fenyl; W er CH OCOCCi-Cg)alkylpiperidino, CH OH, C=0, CH N3, CH^N3, CH^NH2, CH NH2, C(CH3) OH, C(CH3)^OH, CH OCOtCi-Cz)alkyl eller CH 0C0(Ci-CJalkylen-C02H; Z<1>er CH2OH eller R-S-T, hvor R er C=0, S er O, NH, N(CH3) , CH2eller en kjemisk binding som knytter sammen R og T; T er (Cx-C5) alkyl, (Ci-CJ alkoksy, CONH- ( C^ C^) alkyl, hydrogen, trifluoretyl, (C6-C7) cykloalkyl, benzyl, amino(C2-C5) alkyl, morfolino, 4-(C1-C2) alkylpiperazino eller omega-di ( C^ Cz) alkylamino (C3-C5) alkyl; L er CH eller N; R5er imidazol-4-ylmetyl eller (C2-C5) alkyl ; og R6er (C1-CA) alkoksy med det forbehold at når m er 0, da er p 0; når A er O, da er Y C=0; når T er CONH-(Ci-CJ alkyl, da er S NH, N(CH3) eller CH2; og når T er amino(C2-C5) alkyl, morfolino eller 4-(C1-C2) alkylpiperazino, da er S CH2eller en kjemisk binding som knytter sammen R og T,karakterisert veddannelse av en amidbinding, C(0)N, ved dehydrerende kobling, hvor funksjonelle grupper som ikke deltar i reaksjonen kan være blokkert, etterfulgt av de eventuelle trinn1) selektiv fjerning av de blokkerende grupper, 2) oksydering av en sulfidgruppe til sulfoksyd eller sulfon, 3) oksydering av W når den er CH OH eller CH^^OH til C=0, 4) acylering av W når den er CH OH, og eventuelt fremstilling av et farmasøytisk akseptabelt salt av produktet.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, for fremstilling av en forbindelse med formel I hvor Y er C=0, A er NH, Q er hydrogen, X er cykloheksyl, W er CH—-OH, R er C=0, T er benzyl eller (C1~C5)alkyl, og m og p er er hver 1,karakterisert vedat at det anvendes tilsvarende utgangsmaterialer.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 2, for fremstilling av en forbindelse hvor R1er morfolino, M er 2-tienyl, R2er CH3SCH2-, S er 0 og T er i-propyl,karakterisert vedat det anvendes tilsvarende utgangsmaterialer.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 2, for fremstilling av en forbindelse hvor R1er morfolino, M er fenyl, R2er n-propyl, S er 0 og T er i-propyl, karakterisert vedat det anvendes tilsvarende utgangsmaterialer.
5. Fremgangsmåte ifølge krav 2, for fremstilling av en forbindelse hvor R.^ er morfolino, M er fenyl, R2er CH3SCH2-, S er 0 og T er i-propyl, karakterisert vedat det anvendes tilsvarende utgangsmaterialer.
6. Fremgangsmåte ifølge krav 2, for fremstilling av en forbindelse hvor R1er 2-pyrrolidyl, M er fenyl, R2er CH3SCH2-, S er 0 og T er i-propyl,karakterisert vedat det anvendes tilsvarende utgangsmaterialer.
7. Fremgangsmåte ifølge krav 2, for fremstilling av en forbindelse hvor R1er morfolino, M er 4-metoksyfenyl, R2er n-butyl, S er 0 og T er metyl, karakterisert vedat det anvendes tilsvarende utgangsmaterialer.
8. Fremgangsmåte ifølge krav 2, for fremstilling av en forbindelse hvor R^^er 4-oksopiperidino, M er fenyl, R2er CH3SCH2~, S er 0 og T er i-propyl,karakterisert vedat det anvendes tilsvarende utgangsmaterialer.
9. Fremgangsmåte ifølge krav 1 for fremstilling av en forbindelse med formel I hvor M er fenyl, S er en kjemisk binding som binder sammen R og T, T er (C1~C5)alkyl, og R er C=0, karakterisert vedat det anvendes tilsvarende utgangsmaterialer.
NO874530A 1986-10-31 1987-10-30 Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk aktive nor-statin- eller nor-cyklostatinpolypeptider NO173017C (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US92544986A 1986-10-31 1986-10-31
US6898287A 1987-07-01 1987-07-01

Publications (4)

Publication Number Publication Date
NO874530D0 NO874530D0 (no) 1987-10-30
NO874530L NO874530L (no) 1988-05-02
NO173017B true NO173017B (no) 1993-07-05
NO173017C NO173017C (no) 1993-10-13

Family

ID=26749566

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO874530A NO173017C (no) 1986-10-31 1987-10-30 Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk aktive nor-statin- eller nor-cyklostatinpolypeptider

Country Status (22)

Country Link
EP (1) EP0266950B1 (no)
JP (1) JPH07108901B2 (no)
KR (1) KR910002544B1 (no)
CN (1) CN1027271C (no)
AR (1) AR245732A1 (no)
AU (1) AU585180B2 (no)
CA (1) CA1310793C (no)
DE (1) DE3788626T2 (no)
DK (1) DK568487A (no)
EG (1) EG18378A (no)
ES (1) ES2061512T3 (no)
FI (1) FI90346C (no)
HU (1) HU207869B (no)
IE (1) IE61087B1 (no)
IL (1) IL84270A0 (no)
MY (1) MY103189A (no)
NO (1) NO173017C (no)
NZ (1) NZ222373A (no)
PH (1) PH25231A (no)
PL (1) PL151679B1 (no)
PT (1) PT86024B (no)
YU (1) YU46819B (no)

Families Citing this family (51)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5214129A (en) * 1985-01-23 1993-05-25 Abbott Laboratories Peptidylaminodiols
IL81234A (en) * 1986-01-16 1992-09-06 Abbott Lab Peptidylaminodiols,process for their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
HU204285B (en) * 1986-10-31 1991-12-30 Pfizer Process for producing renin-inhibiting polypeptides of small molecule mass and pharmaceutical compositions containing them
US4977141A (en) * 1987-10-01 1990-12-11 G. D. Searle & Co. Peptidyl α-aminoacyl aminodiol carbamates as anti-hypertensive agents
US4927807A (en) * 1987-10-06 1990-05-22 Abbott Laboratories Glaucoma treatment
JPH02503440A (ja) * 1988-03-03 1990-10-18 イー・アール・スクイブ・アンド・サンズ・インコーポレイテッド １，２‐ヒドロキシホスホネートおよびその誘導体
US5217958A (en) * 1988-03-03 1993-06-08 E. R. Squibb & Sons, Inc. 1,2-hydroxy phosphonates and derivatives thereof
US5736520A (en) * 1988-10-07 1998-04-07 Merrell Pharmaceuticals Inc. Peptidase inhibitors
ZA897515B (en) * 1988-10-07 1990-06-27 Merrell Dow Pharma Novel peptidase inhibitors
EP0376040A3 (en) * 1988-12-27 1990-09-12 American Cyanamid Company N-phosphinyl di-and tripeptides as renin inhibitors
US4965372A (en) * 1989-01-19 1990-10-23 Pfizer Inc. Process and intermediates for isopropyl 3S-amino-2R-hydroxy-alkanoates
US5468732A (en) * 1989-02-16 1995-11-21 Pfizer Inc. Phosphorus containing renin inhibitors
WO1990009172A1 (en) * 1989-02-16 1990-08-23 Pfizer Inc. Phosphorus containing renin inhibitors
US5180744A (en) * 1989-12-04 1993-01-19 G. D. Searle & Co. Aralkyl-N-terminal amino hydroxy
US5231111A (en) * 1989-12-04 1993-07-27 G. D. Searle & Co. Imidazolyl/imidazolylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5223514A (en) * 1989-12-04 1993-06-29 G. D. Searle & Co. Quinolinyl/quinolinylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5210095A (en) * 1989-12-04 1993-05-11 G. D. Searle & Co. Chromonyl/chromonylalkyl-N-terminal amino hydroxy
US5223512A (en) * 1989-12-04 1993-06-29 G. D. Searle & Co. Quinolonyl/quinolonylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
DK0431520T3 (da) * 1989-12-04 1995-04-10 Searle & Co Heterocycliske acylaminodiol-beta-aminosyrederivater
US5175170A (en) * 1989-12-04 1992-12-29 G. D. Searle & Co. β-amino acid derivatives
US5217988A (en) * 1989-12-04 1993-06-08 G. D. Searle & Co. Indolyl indolylakyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxyβ-amino acid derivatives
US5175181A (en) * 1989-12-04 1992-12-29 G. D. Searle & Co. Imidazolyl/imidazolylalkyl-N-terminal amino hydroxy
US5212175A (en) * 1989-12-04 1993-05-18 G. D. Searle & Co. Benzothiophenyl benzothiophenylalkyl-N-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5147888A (en) * 1989-12-04 1992-09-15 G. D. Searle & Co. N-terminal indolyy indolylalkylaminodiol β-amino acid derivatives
US5223532A (en) * 1989-12-04 1993-06-29 G. D. Searle & Co. Chromonyl/chromonylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino derivatives
US5215996A (en) * 1989-12-04 1993-06-01 G. D. Searle & Co. Naphthyridinyl/naphthyridinylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5223534A (en) * 1989-12-04 1993-06-29 G. D. Searle & Co. Benzofuuranyl/benofuranylaklyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5171751A (en) * 1989-12-04 1992-12-15 G. D. Searle & Co. Benzofuran/benzofuranalkyl-N-terminal amino hydroxy
US5216013A (en) * 1989-12-04 1993-06-01 G. D. Searle & Co. Aralkyl-N-terminal cycloalkoxy-C terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5217991A (en) * 1989-12-04 1993-06-08 G. D. Searle & Co. Cycloalkyl/cycloalkylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5180725A (en) * 1989-12-04 1993-01-19 G. D. Searle & Co. Quinoxalinyl/quinoxaliy; alkyl-N-terminal amino hydroxy
US5217989A (en) * 1989-12-04 1993-06-08 G. D. Searle & Co. Benothiophenyl/benzothiophenylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5179102A (en) * 1989-12-04 1993-01-12 G. D. Searle & Co. Naphthyridinyl/naphthyridinylalkyl-n-terminal anino hydroxy β-amino acid derivatives
TW209870B (no) * 1990-01-18 1993-07-21 Pfizer
US5064965A (en) * 1990-03-08 1991-11-12 American Home Products Corporation Renin inhibitors
US5023338A (en) * 1990-03-08 1991-06-11 American Home Products Corporation Renin inhibitors
US5095119A (en) * 1990-03-08 1992-03-10 American Home Products Corporation Renin inhibitors
US5075451A (en) * 1990-03-08 1991-12-24 American Home Products Corporation Pyrrolimidazolones useful as renin inhibitors
US5278161A (en) * 1990-06-28 1994-01-11 Hoffmann-La Roche Inc. Amino acid derivatives useful as renin inhibitors
JPH04243835A (ja) * 1990-08-29 1992-08-31 Pfizer Inc 高眼圧症又は緑内障治療用薬剤組成物及び治療方法
JP2847584B2 (ja) * 1991-06-21 1999-01-20 高砂香料工業株式会社 シクロヘキシル酪酸誘導体及びその製造法
US5442105A (en) * 1991-06-21 1995-08-15 Takasago International Corporation Process for producing cyclohexylbutyric acid derivative
EP0617626A1 (en) * 1991-12-18 1994-10-05 Pfizer Inc. Soybean protein or hydrolyzates in pharmaceutical compositions to protect bioactive peptides from enzymatic inactivation
US6153592A (en) * 1992-11-09 2000-11-28 Port Systems, Llc Enhancing the bioavailability of proteolytically labile therapeutic agents
US5872101A (en) * 1995-01-06 1999-02-16 Sibia Neurosciences, Inc. Methods of treating neurodegenerative disorders using protease inhibitors
US5804560A (en) * 1995-01-06 1998-09-08 Sibia Neurosciences, Inc. Peptide and peptide analog protease inhibitors
JP3314938B2 (ja) * 1995-06-06 2002-08-19 ファイザー・インコーポレーテッド グリコーゲンホスホリラーゼ抑制剤としての置換されたｎ−（インドール−２−カルボニル）−グリシンアミド類および誘導体
JP4689042B2 (ja) * 1998-11-04 2011-05-25 明治製菓株式会社 ピコリン酸アミド誘導体、それを有効成分として含有する有害生物防除剤
US6117870A (en) * 1998-11-12 2000-09-12 Fujirebio Kabushiki Kaisha Cyclic amide derivatives
US20020002152A1 (en) 2000-04-14 2002-01-03 Craig Richard A. Hydrazide and alkoxyamide angiogenesis inhibitors
UA108742C2 (uk) 2009-09-23 2015-06-10 Фармацевтична композиція для лікування запальних захворювань, опосередкованих mcp-1

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK110285A (da) * 1984-03-12 1985-09-13 Pfizer Polypeptider og polypeptidderivater indeholdende statin eller derivater deraf og farmaceutiske praeparater
DE3418491A1 (de) * 1984-05-18 1985-11-21 Merck Patent Gmbh, 6100 Darmstadt Diaminosaeurederivate
EP0190891A3 (en) * 1985-01-31 1988-04-20 Kissei Pharmaceutical Co. Ltd. Novel amino acid derivatives
US4743585A (en) * 1986-11-21 1988-05-10 Warner-Lambert Company Renin inhibitors
NZ222755A (en) * 1986-12-23 1989-11-28 Warner Lambert Co Renin inhibiting acyl peptide derivatives containing two to four amino acid residues, and pharmaceutical compositions

Also Published As

Publication number Publication date
DK568487A (da) 1988-05-01
EP0266950B1 (en) 1993-12-29
EG18378A (en) 1993-04-30
EP0266950A2 (en) 1988-05-11
NO874530D0 (no) 1987-10-30
FI90346B (fi) 1993-10-15
CN1027271C (zh) 1995-01-04
HUT45270A (en) 1988-06-28
HU207869B (en) 1993-06-28
YU198087A (en) 1989-02-28
NZ222373A (en) 1989-09-27
DK568487D0 (da) 1987-10-30
NO874530L (no) 1988-05-02
PT86024A (en) 1987-11-01
EP0266950A3 (en) 1990-04-11
ES2061512T3 (es) 1994-12-16
JPH07173134A (ja) 1995-07-11
KR880005152A (ko) 1988-06-28
YU46819B (sh) 1994-06-10
AU8054187A (en) 1988-05-05
IE61087B1 (en) 1994-09-21
AU585180B2 (en) 1989-06-08
PL268521A1 (en) 1988-09-01
PT86024B (pt) 1990-07-31
IE872929L (en) 1988-04-30
FI874787A (fi) 1988-05-01
MY103189A (en) 1993-05-29
CN87101499A (zh) 1988-05-11
DE3788626D1 (de) 1994-02-10
CA1310793C (en) 1992-11-24
FI90346C (fi) 1994-01-25
FI874787A0 (fi) 1987-10-30
KR910002544B1 (ko) 1991-04-23
AR245732A1 (es) 1994-02-28
JPH07108901B2 (ja) 1995-11-22
PL151679B1 (en) 1990-09-28
DE3788626T2 (de) 1994-04-28
PH25231A (en) 1991-03-27
NO173017C (no) 1993-10-13
IL84270A0 (en) 1988-03-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO173017B (no) Analogifremgangsmaate for fremstilling av terapeutisk aktive nor-statin- eller nor-cyklostatinpolypeptider
US5559128A (en) 3-substituted piperidines promote release of growth hormone
AU692044B2 (en) Substituted oxazolidine calpain and/or cathepsin B inhibitors
EP1600457B1 (en) Peptide derivatives having beta-secretase inhibitory activity
US4814342A (en) Nor-statine and nor-cyclostatine polypeptides
US5663171A (en) Acyclic compounds promote release of growth hormone
NO158740B (no) Analogifremgangsmaate ved fremstilling av terapeutisk aktive 4-substituerte 2-azetidinonforbindelser.
US5374731A (en) Amino acid derivatives with renin-inhibiting properties, a process for the preparation thereof, agents containing these, and the use thereof
AU622015B2 (en) Dipeptide derivatives having enzyme-inhibitory action
IE902238A1 (en) Tetrapeptide type-b cck receptor ligands
CA2071744A1 (en) Compounds with renin-inhibiting properties, a process for the preparation thereof and the use thereof
US4935405A (en) Nor-statine and nor-cyclostatine polypeptides
US5034376A (en) Nor-statine and nor-cyclostatine polypeptides
JPH08325152A (ja) Ａｃｅおよびｎｅｐの抑制に有用なベンゾ縮合アゼピノンおよびピペリジノン化合物
JPH0526775B2 (no)
AU634188B2 (en) Dipeptide derivatives having an enzyme inhibitory action
US4670541A (en) Use of diamino alcohols as analgesic agents
CZ187992A3 (en) Heterocyclic compounds with renin-inhibiting properties, process of their preparation and their use
NZ234608A (en) Oligohydroxy amide and peptide derivatives with renin-inhibiting activity and compositions
JPS63183551A (ja) ノルスタチンおよびノルシクロスタチンポリペプチド
JPH0597789A (ja) α−ヒドロキシグリシンアミド誘導体及びその製造方法
US4859654A (en) Homocyclostatine and cyclostatine containing polypeptides as antihypertensive agents
EP0297816A2 (en) Homocyclostatine and cyclostatine containing polypeptides as antihypertensive agents
JPH0881494A (ja) 新規な化合物およびその製造法