HU207869B - Process for producing nor-statin and nor-cyclostatin containing polypeptides - Google Patents

Process for producing nor-statin and nor-cyclostatin containing polypeptides Download PDF

Info

Publication number
HU207869B
HU207869B HU874901A HU490187A HU207869B HU 207869 B HU207869 B HU 207869B HU 874901 A HU874901 A HU 874901A HU 490187 A HU490187 A HU 490187A HU 207869 B HU207869 B HU 207869B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
phe
sta
alkyl
hydrogen
distilled
Prior art date
Application number
HU874901A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT45270A (en
Inventor
Dannis Jay Hoover
Robert Louis Rosati
Ronald Thure Wester
Original Assignee
Pfizer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer filed Critical Pfizer
Publication of HUT45270A publication Critical patent/HUT45270A/hu
Publication of HU207869B publication Critical patent/HU207869B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/14—Angiotensins: Related peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/20—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carbonic acid, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/205—Radicals derived from carbonic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D265/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D265/28—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines
    • C07D265/30—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines not condensed with other rings
    • C07D265/32—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines not condensed with other rings with oxygen atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/14—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D295/145—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with the ring nitrogen atoms and the carbon atoms with three bonds to hetero atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0227—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the (partial) peptide sequence -Phe-His-NH-(X)2-C(=0)-, e.g. Renin-inhibitors with n = 2 - 6; for n > 6 see C07K5/06 - C07K5/10
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

A jelen találmány az 1987. július 1-jén benyújtott, 68982 sorszámú szabadalmi bejelentés részleges folytatása, amely említett bejelentés viszont az 1986. október 31-én benyújtott, 925 449 számú szabadalmi bejelentés folytatása.
A jelen találmány tárgya eljárás a kórosan magas vérnyomás csökkentésére használható, új, nor-sztatint és nor-ciklosztatint tartalmazó polipeptidek előállítására,
A renin nevű proteolitikus (fehérjebontó) enzimet, amelynek molekulasúlya körülbelül 40000, a vese termeli és bocsátja a vérbe. Ismeretes, hogy a renin in vivő körülmények között (az élő szervezetben) úgy fejti ki aktivitását, hogy elhasítja az angiotenzinogént, egy természetes eredetű plazma-glikoproteint. A humán (emberi) angiotenzinogén esetében a renin a 10-es helyzetű aminosav, a leucin és a 11-es helyzetű aminosav, a valin közötti kötést hasítja az angiotenzinogén M-terminálisán, amelynek szerkezete az alábbi:
Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Val1 2 34567 89 10 11
Ile-His-Ser-Glu12 13 14 15
Ezután a renin fenti hatása révén keletkező, és a vérben keringő N-terminális dekapeptidet (angiotenzin I) a szervezet tovább bontja az angiotenzin II néven ismert oktapeptiddé. Ismeretes, hogy az angiotenzin II egy erős hatású presszor anyag, vagyis egy olyan anyag, amely képes a vérnyomást lényegesen megnövelni, és hatását feltehetőleg úgy fejti ki, hogy összehúzza a véredényeket, és a mellékveséből felszabadítja az aldoszteront, a nátriumot visszatartó hormont. így a renin-angiotenzinogén rendszer oka lehet a magas vérnyomás és a szívbaj bizonyos formáinak.
A renin-angiotenzinogén rendszer működéséből eredő, hátrányos hatások enyhítésének egyik módja abban áll, hogy olyan anyagot adagolunk a szervezetbe, amely gátolni képes azt, hogy a renin elhasítsa az angiotenzinogént. Számos ilyen anyag ismeretes, például az antirenin antitestek, pepsztatin és a természetes eredetű foszfolipidek. Az 1982. február 2-án közzétett, 45665 számú európai szabadalmi bejelentés ismertet egy sorozat
X-Y-Pro-Phe-His-A-B-Z-W általános képletű polipeptid-származékot, amelyek gátolják a renint, és ahol a fenti általános képletben X jelentése lehet hidrogénatom vagy egy amin-védőcsoport,
Y jelentése lehet egy kémiai kötés,
B jelentése egy liporil aminosavból leszármaztatható csoport,
Z jelentése egy aromás aminosavból leszármaztatható csoport,
W jelentése lehet hidroxilcsoport, és
A jelentése lehet többek között (a) általános képletű csoport, ahol
R1 és R2jelentése egy lipofil vagy aromás oldallánc.
A fenti, közzétett szabadalmi bejelentésben megadott meghatározásokban nem szerepel, hogy akár A, vagy akár Z jelentése lehetne sztatin, vagy hogy B jelentése lehetne lizin.
Az 1983. április 20-án közzétett, 77028A számú európai szabadalmi bejelentés ismertet egy sorozat olyan, a renint gátló polipeptidet, amelyek nem terminális helyzetben sztatint vagy egy sztatin-származékot tartalmaznak. E sorozat tagjai közé tartoznak olyan vegyületek is, amelyekben előfordul a fenil-alaninhisztidin-sztatin szekvencia.
A 132304A számú európai szabadalmi bejelentés szintén olyan sztatint tartalmazó polipeptideket ismertet, amelyeket a renint gátló, és így a kórosan magas vérnyomást csökkentő szerekként lehet használni: míg a 115 993 A számú európai szabadalmi bejelentés olyan, ciklosztatint tartalmazó polipeptidekről számol be, amelyeket a renint gátló, és a kórosan magas vérnyomást csökkentő szerekként lehet felhasználni.
A találmány tárgya eljárás (I) és (II) általános képletű polipeptid-származékok és gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sóik előállítására, ahol Z jelentése -NRR12 általános képletű csoport, ahol
R hidrogénatom és R12 hidrogénatom, morfolinoP-(OCH3)O vagy mofrolino-szulfonilcsoport, vagy
R11 és R12 a szomszédos nitrogénatommal morfolino-, 3-oxi-morfolino-, 3,5-dioxo-morfolino- vagy 4-(1-3 szénatomos alkil)-piperazinocsoportot alkot, vagy
R13 -CO-NH- általános képletű csoport, ahol
R13 1-6 szénatomos alkil-, 1-4 szénatomos alkoxi-, karboxi-(l-4 szénatomos)-alkil-, amino-(l-5 szénatomos)-alkil-, 2-5 szénatomos alkanoil-, morfolino-, 3-oxo-morfolino-, piperazino-, 4(1-4 szénatomos alkanoil)-piperazino-, 4-(1-3 szénatomos alkil)-piperazino-, 4-(1-4 szénatomos -alkoxi)-karbonil-piperazino-, (S)-pirrolid2-il-, N-terc-butoxi-karbonil-(S)-pirrolid-2-il-, 2-[(l—3 szénatomos alkoxi)-karbonil]-(S)-pirrolidin-l-il-, piperidil-, hidroxi-piperidino-, 4oxo-piperidino-, N-[(l-4 szénatomos alkoxi)karbonilj-piperidil-, tiomorfolino-, tiomorfoliηο-1-oxid-, tiomorfolino-l,l-dioxid-, 4,4-di(1-4 szénatomos)-alkoxi-piperidino-, piridilvagy hidroxi-piridilcsoport vagy
R14 NH-CO-NH- általános képletű csoport, ahol
R14 1-4 szénatomos alkil-, 1-3 szénatomos alkoxi(2-4 szénatomos)-alkil- vagy hidroxi-(2-4 szénatomos)-alkilcsoport vagy morfolinokarboniloxicsoport vagy N-[(l—3 szénatomos alkoxi)-karbonil-metil]-N-metilamino-CO-N H-csoport,
M jelentése fenil-, naftil-, benzil-, tienil-, hidroxi-fenil-, metoxi-fenil-, klór-fenil- vagy ciklohexil-csoport,
Q jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport,
R2 jelentése 1-5 szénatomos alkil-, 4-amino-butil-, 4(benziloxi-karbonil-amino)-butilcsoport, 1-3 szénatomos alkil-szulfonil-metil-csoport, 1-3 szénatomos alkil-szulfínil-metilcsoport vagy hidroxi-, karboxi-, 1-3 szénatomos alkoxi-, 1-3 szénatomos
HU 207 869 Β alkiltio-metil-, karbamoil- vagy benziloxicsoporttal szubsztituált 1-2 szénatomos alkilcsoport, benzilcsoport, imidazol-4-Íl-metil- vagy N-terc-butoxikarbonil-imidazol-4-il-metil-csoport,
X ciklohexil-, fenil- vagy izopropilcsoport,
W -CHWW OR20 általános képletű csoport, ahol
R20 hidrogénatom, piperidil-(l—3 szénatomos alkil)-karbonil-> karboxi-(l-2 szénatomos alkil)karbonil- vagy 2-3 szénatomos alkanoilcsoport, vagy =CO, =CHWWN3, =CH —N3, =CH\\\\ NH2, =CH—NH2, =C(CH3)\\\\OH vagy =C(CH3) — OH csoport,
Z1 jelentése -CH2OH csoport, vagy -CONR16R17 általános képletű csoport, ahol R16 hidrogénatom, 1-3 szénatomos alkoxi-, 1-5 szénatomos alkil-, 1-5 szénatomos alkil-karbamoil-, amino-(2-5 szénatomos)-alkil-, pikolil-, omega-di-(l-2 szénatomos alkil)-amino-(3-5 szénatomos)-alkil- vagy trifluor-etilcsoport, és
R17 hidrogénatom vagy metilcsoport vagy
R16ésR17a hozzájuk kapcsolódó nitrogénatommal morfolinocsoportot alkot, vagy
-COOR18 általános képletű csoport, ahol
R18 hidrogénatom, 1-5 szénatomos alkil-, 6-7 szénatomos cikloalkil-metil- vagy benzilcsoport, vagy
-COR19 általános képletű csoport, ahol
R19 1-5 szénatomos alkil-, hidroxi-(l-4 szénatomos)-alkil-, 4-(1-2 szénatomos alkil-piperazino)-, vagy 6-7 szénatomos cikloalkil-metilcsoport,
R5 imidazol-4-il-metil· vagy n-butilcsoport,
R6 1-4 szénatomos alkoxicsoport, és L -CH= csoport vagy nitrogénatom.
A jelen találmány szerinti vegyületekkel vagy az ezen vegyületeket és vivőanyagokat tartalmazó gyógyászati készítményekkel emlősöket a kórosan magas vérnyomás csökkentése céljából kezelhetünk.
Amint azt a fentiekben említettük, a találmány tárgya kiterjed a biológiailag aktív vegyületek gyógyászatilag elfogadható sóinak előállítására is. Gyógyászatilag elfogadható sóknak tekintjük az alkalmazott dózisokban nem-toxikus sókat. Miután a jelen találmány szerinti vegyületek bázikus csoportokat tartalmazhatnak, e vegyületek savaddíciós sókat képezhetnek. Gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sók például a hidrokloridok, hidrobromidok, hidrojodidok, szulfátok, hidrogén-szulfátok, foszfátok, savanyú foszfátok, acetátok, laktátok, maleátok, mezilátok, fumarátok, citrátok, savanyú citrátok, tartarátok, hidrogén-tartarátok, szukcinátok, glükonátok és szacharátok.
A jelen leírásban a rövidség kedvéért az egyes aminosavak és reagensek szokásosan alkalmazott rövidítéseit használtuk. így például a fenil-alanin nevű aminosav rövidítése: Phe, a homoszerin rövidítése: Hse, a hisztidin rövidítése: His, a lizin rövidítése: Lys, és a norleucin rövidítése: Nle. A tercier-butoxi-karbonilcsoportot Boc néven rövidítjük, a benziloxi-karboniicsoport rövidítése: CBZ, és a hisztidin imidazolgyűrűjén szereplő N-tercier-butoxi-karbonil-csoport rövidítése: imBoc. További rövidítések például a következők:
CPBA m-klór-perbenzoesav,
DCC diciklohexil-karbodiimid,
DEC dimetil-amino-propil-etil-karbodiimid-hidroklorid,
DMF dimetil-formamid,
HC1 sósav,
HBT 1-hidroxi-benzotriazol, mezil CH3SÖ2 képletű csoport, thala 2-tienil-alanin,
Nphala 1-naftil-alanin,
TBDMS tercier-butil-dimetil-szilil,
TEA trietil-amin,
S-MeCys S-metil-cisztein,
S-EtCys S-etil-cisztein,
MgSO4 magnézium-szulfát,
NaOH nátrium-hidroxid,
CH2C12 diklór-metán,
K2CO3 kálium-karbonát,
NaHCO3 nátrium-hidrogén-karbonát,
O-MeTyr O-metil-tirozin,
O-MeHse O-metil-homoszerin, és más hasonlók.
A sztatinhoz és ciklosztatinhoz képest eggyel kevesebb szénatomot tartalmazó, módosított csoportokat a (b) és (c) képletekkel jellemezzük. E csoportok rövidítése: nor-Sta és nor-C-Sta.
A jelen találmány szerinti vegyületekben szereplő valamennyi természetes aminosav L-konfigurációjú, vagyis természetes konfigurációjú, illetve az ettől való eltérést külön említjük.
A jelen találmány tárgya továbbá eljárás az olyan (I) és (II) általános képletű vegyületek előállítására, ahol a norsztatin és norciklosztatin helyett norsztaton és norciklosztaton szerepel.
A jelen találmány szerinti vegyületek emlősökön, beleértve az embereket is, in vivő körülmények között csökkentik a kórosan magas vérnyomást. E hatásnak legalábbis egy lényeges része e vegyületeknek azon képességétől ered, amellyel gátolni képesek, hogy a renin elhasítsa az angiotenzinogént. Nem kívánjuk ugyan a hatás mechanizmusát az alábbi elméletben megadottra szűkíteni, de valószínű, hogy a jelen találmány szerinti vegyületeknek a renint gátló hatásának mechanizmusa a reninhez való (az angiotenzinogénhez képest) szelektív kötődésén alapul. A jelen találmány szerinti vegyületek enzimgátló hatást mutatnak, amely reninre nézve szelektív. E vegyületek - kis molekulasúlyuk révén - feloldhatók vizes közegekben, így az orális (szájon át való) adagolás egyszerű, továbbá e vegyületeket kereskedelmi szempontból reális költséggel elő lehet állítani. A jelen találmány szerinti vegyületeket szívbaj kezelésére is használhatjuk.
A jelen találmány szerinti vegyületeket a szakemberek előtt ismeretes módszerekkel állíthatjuk elő. Az előnyös kémiai szintézis alapeleme egy aminosav3
HU 207 869 Β ból leszármaztatható egység nem-védett a-amino-csoportjának az acilezése egy másik, olyan aminosavnak az acilezés céljából aktivált karboxilcsoportjával, amely másik aminosav saját α-nitrogénatomjához egy alkalmas védőcsoport kapcsolódik; így a két aminosavegység között peptidkötést hozunk létre, majd az említett védőcsoportot lehasítjuk. A szintézisnek ezt az alapelemét, tehát a kapcsolást és a védőcsoport lehasítását mindaddig újra megismételjük, míg a teljes polipeptidet fel nem építjük, mégpedig a jelen leírásban ismertetett módon, a peptidláncot a C-terminálisán kezdve. A jelen találmány szerinti vegyületek előállításához használt aminosavak a kereskedelemben kaphatók (szabad savak, sók, észterek és más hasonlók formájában), mégpedig mind az a-amino-csoporton védett, mind pedig az a-amino-csoporton nem-védett változatban.
A jelen találmány szerinti vegyületeknek azon aktivitását, amellyel meggátolják a reninnek az angiotenzinogént hasító hatását, úgy határozhatjuk meg, hogy megmérjük, milyen mértékben képesek in vitro körülmények között gátolni a reninnek az angiotenzinogént hasító hatását.
A jelen találmány szerinti vegyületeket mint a magas vérnyomást csökkentő szereket orálisan (szájon át) vagy parenterálisan (a gyomor- és bélrendszer megkerülésével) adagolhatjuk, előnyös az orális adagolás, miután ez a betegek számára kényelmesebb. Ezeket a magas vérnyomást csökkentő vegyületeket általában orális adagolás esetében naponta és testsúlykilogrammonként körülbelül 0,1 mg és körülbelül 20 mg közötti dózisban, míg parenterális adagolás esetén naponta és testsúlykilogrammonként 0,1 mg és körülbelül 5 mg közötti dózisban alkalmazzuk; a fenti értékektől szükségszerűen eltérhetünk a kezelendő beteg állapotától és az alkalmazott vegyülettől függően. Egy tipikus esetben a kezelést alacsony napi dózissal kezdjük, és ezt a dózist a kezelőorvos csak akkor emeli, ha ez szükséges. Meg kell jegyeznünk, hogy adagolhatjuk e vegyületeket a gyógyászatilag elfogadható vivőanyagok kíséretében bármely fenti adagolási módszerrel, és hogy az adagolást elvégezhetjük napi egyszeri vagy többszöri dózisok formájában.
Orális úton adagolhatjuk a jelen találmány szerinti új vegyületeket nagyszámú, különféle dózisformában, vagyis e vegyületeket különféle, gyógyászatilag elfogadható, semleges vivőanyagok felhasználásával átalakíthatjuk szögletes vagy kerek tablettákká, kapszulákká, pirulákká, kemény drazsékká, porokká, permetekké, vizes szuszpenziókká, kanalas orvosságokká, szirupokká és más hasonlókká. Alkalmas vivőanyagok a szilárd hígítószerek és töltőanyagok, a steril vizes közegek, és különféle nem-toxikus, szerves oldószerek, és más hasonlók. Ezenkívül az ilyen, orálisan adagolt gyógyszerkészítményeket alkalmas módon édesíthetjük és/vagy ízesíthetjük, mégpedig az ilyen célokra szokásosan használt, különféle szerek segítségével. Az ilyen, orálisan adagolt dózisformákban a jelen találmány szerinti vegyületek menynyisége a teljes készítmény súlyára számítva körülbelül 0,5 súly% és körülbelül 90 súly% között van, mégpedig olyan mennyiségben, amely biztosítja a kívánt dózisegységet.
Orális adagolásra használhatunk olyan tablettákat, amelyek különféle töltőanyagokat tartalmaznak, ilyenek például a nátrium-citrát, kalcium-karbonát és a kalcium-foszfát, használhatunk ezenkívül különféle, a szétesést elősegítő anyagokat, például keményítőt, és előnyösen burgonya- vagy tápióka-keményítőt, alginsavat és bizonyos komplex szilikátokat, kötőanyagokkal, mint például polivinil-pirrolidonnal, szacharózzal, zselatinnal és gumiarábikummal együtt. Ezenkívül használhatunk csúsztatószereket, mint például magnézium-sztearátot, nátrium-lauril-szulfátot és talkumot, és hasonló összetételű keverékeket használhatunk a lágy és kemény zselatin kapszulákban is, így segédanyagként szerepelhetnek a laktóz, vagy más néven tejcukor, valamint a nagy molekulasúlyú polietilén-glikolok. Amikor orális adagolás céljaira vizes szuszpenziókat és/vagy oldat formájú kanalas orvosságokat kívánunk előállítani, akkor az ezekben levő hatóanyagot kísérhetik különféle édesítő vagy ízesítő szerek, színezőanyagok vagy festékek, és kívánt esetben emulgeálószerek, és/vagy víz, etanol, propilén-glikol, glicerin és ezek különféle elegyei.
A jelen találmány szerinti vegyületeket a kórosan magas vérnyomás és a szívbaj esetében használhatjuk.
A találmány szerinti eljárást a továbbiakban - a találmány oltalmi körének szűkítése nélkül - példákkal szemléltetjük.
ÁLTALÁNOS MEGJEGYZÉSEK
A nagy felbontású folyadék-kromatográfiás műveletet az alábbi körülmények között végezzük: detektálás: 214 nm hullámhossznál, oszlop: 4,6x250 mm méretű, Dupont Zorbax C-8, áramlási sebesség: 1,5 ml/perc.
A vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálatokat az alábbi rendszerekkel végezzük:
A-rendszer: etil-acetát és hexán megadott arányú elegye, szilikagélen;
B-renószer: dietil-éter és hexán megadott arányú elegye, szilikagélen;
C-rendszer: kloroform, etanol és ecetsav 18:2: 1 arányú elegye, szilikagélen;
D-rendszer: kloroform, etanol és ecetsav 9:2:1 arányú elegye.
1. példa
Boc-Phe-His-nor-C-Sta-NH Clh [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése tercier-butoxi-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése imidazol-4-il-metil-csoport,
W jelentése a-hidroxi-metilén-csoport,
Z1 jelentése N-metil-karboxamido-csoport, és X jelentése ciklohexilcsoport.]
HU 207 869 Β
a) lépés
N-Metil-(S)-3-tercier-butoxi-karbonil-amino-4-ciklohexil-(R )-2-hidroxi-butiramid
100 mg (S)-3-tercier-butoxi-karbonil-amino-4-ciklohexil-(R)-2-hidroxi-vajsavat (4599198 számú amerikai szabadalmi leírás) feloldunk 0,9 ml tetrahidro-furán és 55 μΐ trietil-amin elegyében, és az elegyhez -30 °C hőmérsékleten hozzáadunk 45 μΐ klór-hangyasav-izobutil-észtert. Másfél óra múlva az elegyet 60 ’C hőmérsékletre hűtjük, hozzáadunk 1,5 ml
1,6 mólos, tetrahidro-furános metil-amin-oldatot, és az elegyet hagyjuk 25 ’C hőmérsékletre melegedni. Ezután a reakcióelegybe fölös mennyiségű, gáz alakú metil-amint vezetünk, majd 25 ml dietil-éterrel hígítjuk, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal kétszer mossuk, megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A kapott terméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 2:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon színtelen, szilárd anyag formájában 45 mg (hozam: 42%) cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,16 (szilikagélen, futtató elegy: etil-acetát és hexán 2:1 arányú elegye).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,32 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=2,1) 40:60 arányú elegye]·
b) lépés
N-Metil-(S)-3-amino-4-ciklohexil-(R )-2 -hidroxibutiramid mg, a fenti a) pontban leírt módon kapott terméket feloldunk 2 ml normál dioxános sósav-oldatban, és az elegyet másfél órán át 25 ’C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról többször dietil-étert desztillálunk le, ily módon színtelen, szilárd anyag formájában 50 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,05 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=7,0) 40: 60 arányú elegye]·
c) lépés
Boc-Phe-His(imBoc)-nor-C-Sta-NHCH3 mg, a fenti b) pontban leírt módon kapott termék 0,5 ml diklór-metánnal készült oldatához 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 30 μΐ trietil-amint, 112 mg Boc-Phe-His(imBoc)-ot 4599198 számú amerikai szabadalmi leírás), 48 mg hidroxi-benzotriazolt és 46 mg diciklohexil-karbodiimidet, az elegyet 6 órán át 0 °C hőmérsékleten keverjük, majd éjszakán át hagyjuk 25 ’C hőmérsékletre melegedni. Utána az oldatlan részeket kiszűrjük és diklór-metánnal kimossuk. Az egyesített szűrletről és mosófolyadékról az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot feloldjuk etil-acetátban. Néhány perces keverés után az etilacetátos szuszpenziót megszűrjük, a szűrletet 1 normál nátrium-hidroxid-oldattal kétszer kimossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként növekvő polaritású (1%, 2%, 4%, 6% és 10% etanolt tartalmazó) etanol-diklór-metán elegyeket használunk. Ily módon színtelen, amorf, szilárd anyag formájában 57 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
d) lépés
Boc-Phe-His-nor-C-Sta-NHCH3
A fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldjuk ecetsav és víz 80:20 térfogatarányú elegyében (1,2 ml), és az elegyet 12 órán át 25 ’C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról háromszor dietil-étert és kétszer diklór-metánt desztillálunk le, ily módon világosbarna színű, porszerű anyag formájában 47 mg terméket kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban; 3,61 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=2,l) 50:50 arányú elegye]· 'H-NMR-spektrum (DMSO-d6): 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,32 (s, 9H, Boc), 2,60 (d, 3H, NCH3), 3,90, 4,66 és 7,9 (m, 1-1H), 4,18 (m, 2H), 7,12, 7,7, 8,28 (d, 1-1H), 7,32 (s, IH), 7,2-7,4 (m, aromás).
2. példa
Boc-Phe-His-nor-C-Sta-NHCONHCH2CH2CH3 [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése tercier-butoxi-karbonil-amino-csoport,
R2 jelentése imidazol-4-il-metil-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
W jelentése a-hidroxi-metilén-csoport,
Z' jelentése N3-(n-propil)-ureido-karbonil-csoport, és X jelentése ciklohexilcsoport.]
a) lépés
N-tercier-butoxi-karbonil-O-tercier-butil-dimetilszilil-nor-C-Sta-NHCONHCH2CH2CH3
415 mg (S)-3-tercier-butoxi-karbonil-amino-(R)-2tercier-butil-dimetil-szililoxi-4-ciklohexil-butiramid (4599198 számú amerikai szabadalmi leírás) és 94 μΐ propil-izocianát 2 ml toluollal készült elegyét 90 órán át 100 ’C hőmérsékleten tartjuk, majd lehűtjük, és szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 15:85 arányú elegyét használjuk. Ily módon színtelen, olajos, habos anyag formájában 260 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,49, futtató elegy: etil-acetát és hexán: 1:2 arányú elegye (Arendszer).
b) lépés
Nor-C-Sta-NHCONHCH2CH2CH3-hidroklorid
255 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket 25 ’C hőmérsékleten feloldjuk acetonitril és 48%-os, vizes hidrogén-fluorid 95:5 arányú, frissen készített elegyében (3 ml), és a kapott elegyet 2 órán át keverjük. Utána az elegyhez fölös nátrium-hidrogénkarbonátot és 20 ml vizet adunk, majd etil-acetáttal kirázzuk. Az etil-acetátos részt vízzel mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 198 mg olajat kapunk. Ezt az olajos
HU 207 869 Β terméket 0 °C hőmérsékleten feloldjuk 4 ml 4 normál dioxános sósav-oldatban, az elegyet 1 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon színtelen, viasszerű, szilárd anyag formájában 130 mg terméket kapunk.
E termék NMR-vizsgálata azt jelzi, hogy a szililcsoport nem hasadt le teljesen. A vékony réteg-kromatográfiás vizsgálat két terméket jelez, Rrértékük: 0,42 és 0,07 (futtató elegy: C-rendszer), e két termékről feltételezzük, hogy az egyik az amino-szilil-éter, és a másik az amino-alkohol. Ezt a terméket további tisztítás nélkül használjuk fel a következő reakciólépésben.
c) lépés
Boc-Phe-His(imBoc)-nor-C-StaNHCONHCH2CH2CH3
119 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva, és azt az 1. példa c) lépésében leírt módon reagáltatva, majd a kapott terméket ugyancsak az ott leírt módon megtisztítva színtelen, amorf, szilárd anyag formájában 97 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás R,-értéke: 0,55, futtató elegy: C-rendszer.
A megfelelő, nem-kívánatos O-szililezett terméket [amely a fenti b) lépésben kapott termék O-szililszennyeződéséből származik] a kromatográfiás tisztítási művelet során különítjük el, ez a kevésbé poláros anyag, vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,60, futtató elegy: C-rendszer.
d) lépés
Boc-Phe-His-nor-C-Sta-NHCONHCH2CH2CH3 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk ecetsav és víz 80:20 arányú elegyében (1,5 ml), és a kapott elegyet 6 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról háromszor dietil-étert desztillálunk le. és az így kapott maradékot éjszakán át szárítjuk. Ily módon színtelen, szilárd anyag formájában 80 mg terméket kapunk, vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,10 (futtató elegy: C-rendszer), és retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 2,35 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=2,l) 70: 30 arányú elegye].
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6): 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,86 (t, 3H), 1,32 (s, 9H, Boc),
1,47 (q, 2H), 3,14 (q, 2H), 4,06 és 4,48 (m, 1-1H), 4,17 (m, 2H), 6,83 (s, IH), 7,10, 7,63, 8,02 (d,
1-1H), 7,15-7,35 (m, aromás), 7,56 (s, IH), 8,28 (m, IH).
3. példa
Indol-2-karbonil-His-nor-C-Sta-metil-ész.ter [(II) általános képletű vegyület, ahol
R5 jelentése imidazol-4-il-metil-csoport,
R6 jelentése metoxicsoport, és
L jelentése metincsoport.]
a) lépés
4-Ciklohexil-2 -pentin-1 -il-tetrahidro-pirán-1 -iléter
Egy szárítószekrényben megszárított, 5 1 térfogatú, háromnyakú gömblombikot felszerelünk mechanikus keverővei, hőmérővel, csepegtető tölcsérrel és nitrogén bevezetőcsővel, a lombikba bemérünk 192 g propargil-tetrahidro-piranil-étert és 750 ml vízmentes tetrahidro-furánt (Aldrich „aranycímkés” minőség). Az oldathoz keverés közben, 45 perc alatt olyan sebességgel adagolunk hozzá 604 ml 2,5 mólos n-butil-lítium-oldatot, hogy eközben az elegy hőmérsékletét egy aceton-szárazjég hűtőfürdő segítségével 0 °C-on tartjuk. Az így kapott sötét színű oldathoz 20 perc alatt, 5-10 °C hőmérsékleten hozzáadjuk ciklohexil-metil-bromid (kalcium-hidridről csökkentett nyomáson desztillált) hexametil-foszforsav-amiddal készült oldatát, és ezután a reakcióelegyet további 4 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. Ezután az elegyet 2 1 jeges víz és 2 1 hexán kevert elegyére öntjük, a szerves részt elválasztjuk, kétszer 500 ml 1,0 mólos lítium-klorid-oldattal mossuk, nátriumszulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot egy 20 cm hosszú Vigreux-kolonnán desztilláljuk, ily módon 102 g propargil-tetrahidro-piranil-étert (fp.: 60-90 °C/400 Pa) nyerünk vissza, majd 151 g cím szerinti vegyületet kapunk, fp.: 125-130 °C/67 Pa.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,5 (futtató elegy: dietil-éter és hexán 1: 4 arányú elegye).
b) lépés
4-Clklohexil-2-butin-] -ol
Egy 2 1 térfogatú, háromnyakú, mechanikus keverővei, nitrogén bevezetőcsővel és hőmérővel felszerelt lombikba bemérünk 140 g, a fenti a) pontban leírt módon kapott terméket és 700 ml metanolt. Az elegyet keverés közben 2-3 °C hőmérsékletre hűtjük, hozzáadunk 560 mg p-toluol-szulfonsavat, majd a hűtőfürdőt eltávolítjuk, és egy meleg vízfürdő segítségével a reakcióelegy hőmérsékletét 30 °C-ra emeljük.
4,5 óra múlva az elegyhez hozzáadunk 5 ml 1 normál nátrium-hidroxid-oldatot, majd a metanol legnagyobb részét csökkentett nyomáson, egy forgó rendszerű desztilláló készülékben ledesztilláljuk. A maradékot feloldjuk 700 ml hexánban, az oldatot háromszor 100 ml 1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, kálium-karbonáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot egy 20 cm hosszú Vigreux-kolonnán, káliumkarbonátról ledesztilláljuk, ily módon világossárga színű folyadék formájában 76 g terméket kapunk, fp.: 90 °C/133,3 Pa. Az 'H-NMR-spektrum szerint e terméket körülbelül 1% metanol és 1% hexametil-foszforsav-amid szennyezi. Az így kapott terméket további tisztítás nélkül használjuk fel a következő reakciólépésben.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,5 (futtató elegy: dietil-éter és hexán 1:1 arányú elegye).
Elemi analízis a C|0H)6O képlet alapján: számított: C: 78,90, H: 10,59;
talált: C: 78,31, H: 10,72%.
c) lépés ,
Z-4-Ciklohexil-2-buten-l -ol
Egy 500 ml térfogatú Parr-készülékbe bemérünk
HU 207 869 Β
35,2 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket, 250 ml toluolt és 250 mg „Lindlar Catalyst Poison”-t (Fluka-gyártmány,Lindlar-féle mérgezett katalizátor). Az így kapott oldatot nitrogénnel átöblítjük, és hozzáadunk 14,08 g Lindlar-katalizátort (Aldrich). A reakcióelegyet 45 percig 2,45xl05 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk, ezalatt az elegy hőmérséklete magától körülbelül 45 °C-ra emelkedik. Ezután az elegyet lehűtjük, a kapott szuszpenziót celiten átszűrjük, és egyesítjük egy másik reakcióeleggyel, amelyet ugyanígy állítunk elő, 35,2 g ugyanezen kiindulási anyag felhasználásával. Az egyesített elegyről az oldószert először egy 25 cm hosszú Vigreux-kolonnán, kalcium-karbonátról, normál nyomáson ledesztilláljuk, majd a desztillációt 25 °C hőmérsékleten, vízsugár-szivattyúval csökkentett nyomáson egy forgó rendszerű desztilláló készülékben folytatjuk. Ezután a maradékot tartalmazó lombikot felszereljük egy Vigreux-kolonnával, és az elegyet 40 Pa nyomáson 80 °C hőmérsékleten mindaddig melegítjük, míg az elegy enyhén forrni nem kezd.
A maradék folyadék egy világossárga színű olaj, súlya: 77,4 g, és az NMR-vizsgálat szerint 1% metanolt és 1% hexametil-foszforsav-amidot tartalmaz.
A termék vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálata egy foltot mutatott, Rrértéke: 0,4 (futtató elegy: dietiléter és hexán 1:1 arányú elegye).
Az NMR-spektrumban nem lehetett a transz-izomert kimutatni.
d) lépés
2-(S),3(R)-Epoxi-4-ciklohexil-l-butanol
Egy 1 1 térfogatú, háromnyakú, hőmérővel, mechanikus keverővei, nitrogén bevezetőcsővel és hűtőfürdővel felszerelt lombikba bemérünk 15 g 4 Ángström pórusméretű, 600 mesh szemcseméretű molekulaszűrőt, 400 ml diklór-metánt és 7,23 ml (-t-)-diizopropil-L-tartarátot (Aldrich). Az elegyet keverés közben -5 °C hőmérsékletre hűtjük, és hozzáadunk először 6,75 ml titán-tetraizopropilátot, majd 227 ml 3,0 mólos, toluolos tercier-butil-hidroperoxid-oldatot (Aldrich), egyik reagens hozzáadása sem okozott észrevehető melegedést. Ezután az elegyhez keverés közben, -20 °C hőmérsékleten, 10 perc alatt, olyan sebességgel adjuk hozzá 70 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termék 30 ml diklór-metánnal készült oldatát, hogy az elegy hőmérséklete ne emelkedjen -20 °C fölé. A reakcióelegyet 6 órán át -10 °C hőmérsékleten keverjük, majd 60 órán át keverés nélkül egy -10 °C hőmérsékletű hűtőszekrényben tartjuk. Ezután az elegyet jeges fürdőben keverjük, hozzáadunk 120 ml vizet, majd 30 ml 6 normál nátriumhidroxid-oldatot, és ezt követően az elegyet nátriumkloriddal telítjük. Utána hozzáadunk 50 ml metanolt, az oldatlan részeket kiszűrjük, a szűrlethez hozzáadunk 100 ml 0,1 mólos foszfát-puffért (pH = 7,0), az elegyet erélyesen összerázzuk, és állni hagyjuk, míg a fázisok részlegesen szét nem válnak. Az alsó, szerves részt elválasztjuk, és a felső, vizes részt, valamint a középső, emulziós részt háromszor 200 ml diklór-metánnal kirázzuk. A maradék emulziós középső részt celiten átszűrjük, így a két fázis teljesen szétválik. Az egyesített szerves részeket háromszor 100 ml foszfátpufferral (pH = 7,0), ezután vizes nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal, utána telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, majd magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Az így kapott, 85 g súlyú, viszkózus olajat egy 20 cm hosszú Vigreux-kolonnán ledesztilláljuk, az előfrakció súlya: 12 g, fp.: 60-122 °CI61 Pa, ezután 51 g cím szerinti vegyületet kapunk, fp.: 122— 130°C/61Pa.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,20 (futtató elegy: dietil-éter és hexán 2:1 arányú elegye).
Elemi analízis a C10H18O2 képlet alapján: számított: C: 70,55, H: 10,66;
talált: C: 69,89, H: 10,50.
e) lépés
2(S),3(R)-Epoxi-4-ciklohexil-l-butánsav g, fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 30 ml acetonitrilben, és az oldathoz hozzáadunk először 45 ml vizet, ezután 30 ml szén-tetrakloridot, majd 690 mg ruténium-triklorid-trihidrátot, és végül 10,0 g perjódsavat. Ennek során az elegy hőmérséklete fokozatosan emelkedik, és enyhe hűtéssel 3035 °C-on tartjuk. Másfél óra múlva az elegyhez hozzáadunk 75 ml telített nátrium-klorid-odatot és 400 ml kloroformot. A szerves részt elválasztjuk, és a vizes részt háromszor 400 ml kloformmal kirázzuk. Az egyesített szerves részeket 50 ml, nátrium-kloriddal telített, 2 normál sósavval mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, celiten átszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon bíborvörös színű, szilárd anyag formájában 2,55 g cím szerinti vegyületet kapunk, amelyet tisztítás nélkül, azonnal felhasználunk a következő reakciólépésben.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,40 (futtató elegy: C-rendszer).
f) lépés
3-(S)-Azido-2(R)-hidroxi-4-ciklohexil-vajsav
2,65 g, a fenti e) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 10 ml vízmentes etanolban, és az oldatot 25 °C hőmérsékleten hozzáadjuk 2,11 g lítium-azid és 6,43 ml titán-tetraizopropilát 180 ml vízmentes etanollal készült, kevert oldatához. Az elegyet 20 órán át 25 °C hőmérsékleten, utána 5 órán át 35 °C hőmérsékleten, és végül 14 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. Ezt követően az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk 250 ml dietil-éterben, és az elegyet fél órán át 75 ml 1%-os kénsavval keverjük, majd a szerves és vizes részeket elválasztjuk. A szerves részt háromszor 20 ml 5%-os kénsavval, majd foszfát-pufferral (pH = 7,0) kétszer mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon világosbarna olaj formájában 2,82 g cím szerinti vegyületet kapunk, amely állás közben megszilárdul.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,35 (futtató elegy: C-rendszer).
IR-spektrum (CHC13): 2100 cm-1.
HU 207 869 Β
g) lépés
3(S)-Azido-2(R)-hidroxi-4-ciklohexil-vajsav-metilészter
Diazo-metánt állítunk elő oly módon, hogy 4,5 g N’-nitrózó-N-metil-nitro-guanidint 75 ml dietil-éterben, 0 ’C hőmérsékleten 31 ml 6 normál nátriumhidroxid-oldattal kezelünk, majd a szerves részt leöntjük, és 5 g kálium-hidroxidon rövid ideig szárítjuk. Az így kapott oldatot beletöltjők egy csepegtető tölcsérbe, és hozzácsepegtetjük 2,82 g a fenti f) lépésben leírt módon kapott termék 50 ml dietil-éterrel készült, 0 ’C hőmérsékleten kevert oldatához. 40 perc múlva az elegyhez hozzáadunk 20 ml ecetsavat, majd az elegyet háromszor 20 ml telített nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal, és ezután kétszer 20 ml nátriumhidroxid-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, majd az így kapott anyagot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1:8 arányú elegyét használjuk. A megfelelő frakciókról az oldószert ledesztillálva 2,43 g cím szerinti vegyületet kapunk. Vékonyrétegkromatográfiás R,-értéke: 0,58 (futtató elegy: etilacetát és hexán 1:1 arányú elegye).
IR-spektrum (CHC13): 2100 cm-1.
[α]β = + 10,1° (c= 1,19, kloroform).
h) lépés
3(S)-Amino-2(R)-hidroxi-4-ciklohexil-vajsav-metilészter-hidroklorid
2,23 g, a fenti g) lépésben leírt módon kapott termék, 100 mg 10%-os csontszenes palládium, 15 ml etanol és 0,4 ml ecetsav elegyét 40 percig 25 °C hőmérsékleten, 3,5x115 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról kétszer 10 ml toluolt desztillálunk le. Az így kapott maradékot feloldjuk 4 ml 3,4 mólos, dioxános sósavoldatban. majd az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról többször dietil-étert desztillálunk le. Az így kapott anyagot megszárítjuk, ily módon olajos, világossárga színű, habos anyag formájában 1,49 g terméket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,15 (futtató elegy: a minta felcseppentése után a futtató lemezt ammónia gőzök hatásának tesszük ki, majd ezután a C-rendszerben futtatjuk).
i) lépés
Indol-2-karbonil-His-metU-észter
5,5 g hisztidin-metil-észter-dihidro-kloridot
500 ml diklór-metánban szuszpendálunk. majd 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk először 6,92 ml trietilamint, ezután 4,2 g indol-2-karbonsavat, utána 5,56 g hidroxi-benzotriazolt, és végül 5,35 g diciklohexilkarbodiimidet. A reakcióelegyet jeges fürdőben keverjük, majd hagyjuk éjszakán át 25 ’C hőmérsékletre melegedni. Másnap az oldatlan részeket kiszűrjük, és diklór-metánnal mossuk. A szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk 200 ml kloroformban, a kloroformos oldatot négyszer 30 ml 1 normál nátrium-hidroxid-oldattal, utána telített nátriumklorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 7,2 g sárga színű, habos anyagot kapunk. Ezt a habos anyagot feloldjuk 5 ml kloroform, 20 ml víz és 25 ml 1 normál sósav elegyében, a vizes részt 5 ml kloroformmal mossuk, majd nátrium-hidroxid-oldat segítségével pH = 6-ra állítjuk. Ezután az elegyről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot megszárítjuk. Ily módon 4,3 g világoszöld színű, szilárd anyagot kapunk, amelynek retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,46 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH = 2,1) 35: 65 arányú elegye].
A nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálat során a fenti termék adja a teljes abszorpció 85%-át, és ezenkívül kisebb mennyiségben jelen levő szennyezéseket lehet kimutatni 2,36 perces és 1,66 perces retenciós időkkel.
A termék vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,07 (futtató elegy: C-rendszer).
Ezt a terméket további tisztítás nélkül használjuk fel a következő reakciólépésben.
j) lépés
N-&(Indol-2-karbonil)-N(im)-tercier-bu.toxi-karbonil-L-hisztidin
4,3 g, a fenti i) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 60 ml metanol és 20 ml víz elegyében, az oldatot 0 °C hőmérésékletre hűtjük, és hozzáadunk
7,6 g vízmentes kálium-karbonátot. Az elegyet 1 órán át 0 ’C hőmérsékleten, majd 2 órán át 25 ’C hőmérsékleten tartjuk, ezután lehűtjük, 6 normál sósavval pH = 3-ra savanyítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot 0 ’C hőmérsékletre hűtjük, pH-ját 6 normál nátrium-hidroxid-oldattal 10,5-re állítjuk, majd hozzáadunk 150 ml dioxánt és 0 ’C hőmérsékleten 4,2 ml di-tercier-butil-dikarbonátot. Ezután a reakcióelegyet 25 ’C hőmérsékleten keverjük, miközben pH-ját 6 normál nátrium-hidroxid-oldat adagolásával 9 és 10,5 között tartjuk. 75 perc múlva az elegyhez hozzáadunk további 2 ml di-tercier-butil-dikarbonátot, és további 15 perc múlva a dioxán legnagyobb részét ledesztilláljuk. A maradék elegyhez hozzáadunk 100 ml vizet, és a kapott oldatot háromszor 25 ml dietil-éterrel mossuk. Ezután a vizes részt jeges fürdőben lehűtjük, hozzáadunk 500 ml etil-acetátot, és pH-ját 6 normál sósavval 1,3-ra állítjuk. Ezután a szerves részt elválasztjuk, a vizes részt etil-acetáttal kirázzuk, a szerves részeket egyesítjük, telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A kapott maradékot megszárítjuk, ily módon száraz, sárga színű, porszerű anyag formájában 3,1 g cím szerinti vegyületet kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 4,57 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH = 2,1) 50:50 arányú elegye, a fenti csúcs a teljes ultraibolya-abszorpció 93%át teszi ki].
[a]□ = 10,5° (c = 0,88, kloroform)
HU 207 869 Β
k) lépés
Indol-2-karbonil-His(imBoc)-nor-C-Sta-metil-észter
500 mg, a fenti h) lépésben leírt módon kapott terméket 25 ml diklór-metánban 911 mg, a fenti j) lépésben leírt módon kapott termékkel kapcsolunk, mégpedig az 1. példa c) lépésében leírt módon, majd a terméket ugyancsak az 1. példa c) lépésében leírt módon tisztítjuk meg. Ily módon 550' mg cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,58 (futtató elegy: C-rendszer).
A termék tartalmaz egy kis mennyiségű szennyezést is, amelynek vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,55.
l) lépés
Indol-2-karbonil-His-nor-C-Sta-metil-észter
455 mg, a fenti k) lépésben leírt módon kapott terméket ecetsav és víz 5:1 arányú elegyében (10 ml) 16 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról többször dietilétert desztillálunk le, és végül megszárítjuk. Ily módon 431 mg világossárga színű, porszerű anyagot kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 5,53 perc (39%) és 6,43 perc (58%), [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH = 2,1) 40:60 arányú elegye].
'Η-NMR-spektrum (DMSO-d6), részleges adatok, delta, ppm: 2,94 (m), 3,53 (s, 3H, OCH3), 4,02, 4,18, 4,64 (m), 6,80 (s, IH), 6,9-7,6 (aromás m), 7,0 (t), 7,4 (d), 7,6 (d).
4. példa
Boc-Phe-His(imBoc)-nor-C-Sta-metil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése tercíer-butoxi-karbonil-amino-csoport,
R2 jelentése N-tercier-butoxi-karbonil-imidazol-4-ilmetíl-csoport,
W jelentése a-hidroxi-metilén-csoport,
Q jelentése hidrogénatom,
M jelentése fenilcsoport,
Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport, és
X jelentése ciklohexilcsoport.]
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 2,0 g, a 3. példa h) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva színtelen, habos anyag formájában 1,8 g cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,37 (futtató elegy: C-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 5,42 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=2,1) 70:30 arányú elegye]·
Melléktermékként 125 mg kevésbé poláros vegyületet kapunk, amelynek vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,43, és amely a spektroszkópiai vizsgálatok szerint a fenti termék O-Boc-Phe-His(imBoc)-származéka. A fentieken kívül e reakcióban további 500 mg olyan keveréket különítünk el, amely az utóbbi származék és a jelen példa szerinti vegyület keveréke.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, részleges adatok: 1,33 és 1,55 (s, 9-9H, Boc), 2,72 és 2,94 (m, 1-1H), 3,1 (m, 2H), 3,70 (s, 3H, OCH3), 4,04, 4,52 és 4,95 (m, 1-1H), 4,28 (m, 2H), 6,68 és 8,08 (d, 1-1H), 7,05-7,30 (m, aromás), 7,88 (s, IH).
5. példa
Boc-Phe-His-nor-C-Sta-metü-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése tercier-butoxi-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése imidazol-4-il-metil-csoport,
Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport,
W jelentése a-hidroxi-metilén-csoport, és X jelentése ciklohexilcsoport.]
800 mg, a fenti 4. példa szerinti vegyület, 8 ml ecetsav és 2 ml víz elegyét 14 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról többször dietil-étert desztillálunk le. Ily módon 580 mg világossárga színű, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,30 (futtató elegy: D-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 6,32 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=2,1) 50:5 arányú elegye]· ’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,42 (s, 9H, Boc), 2,9-3,1 (m), 3,78 (s, 3H, OCH3), 4,20 és 4,62 (1-1H), 4,38 (m, 2H), 6,89 (s, IH), 7,1-7,4 (m, aromás), 7,78 (m, 2-3H).
6. példa
Boc-Phe-His-nor-C-Staton-metil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése tercier-butoxi-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
X jelentése ciklohexilcsoport,
R2 jelentése imidazol-4-il-metil-csoport,
W jelentése karbonilcsoport, és Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
157 mg piridínium-dikromát 10 ml diklór-metánnal készült oldatához keverés közben, 25 °C hőmérsékleten hozzáadunk 107 μΐ ecetsav-anhidridet, majd az elegyhez egyszerre hozzáadunk 250 mg, a fenti 5. példában leírt módon kapott terméket. Másfél óra múlva az elegyet 150 ml diklór-metánnal hígítjuk, az oldatot kétszer 10 ml 1 normál sósavval, utána vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, és végül telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 260 mg barna színű, szilárd anyagot kapunk. Ennek az anyagnak a vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálata (futtató elegy: D-rendszer) egy főterméket (Rrértéke: 0,2) és egy körülbelül 5%-nyi mennyiségben jelen levő mellékterméket (Rrértéke: 0,27) jelez. Ezekben a vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálatokban az 5. példa
HU 207 869 Β szerinti polárosabb terméket nem lehetett kimutatni. A kevésbé poláros szennyezést szilikagélen kromatografálva el lehet távolítani, eluens: etanol és etil-acetát 5:95 arányú elegye. A visszanyerés hozama azonban alacsony, 50 mg nyerstermékből 7 mg olyan terméket kapunk, amely a vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat szerint tiszta.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,24 (s, Boc), 3,82 (s, OCH3), 7,0-7,5 (m, aromás).
7. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-His-nor-C-Sta-metil-észter [(I) általános képletű vegyüiet, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése imidazol-4-il-metil-csoport,
W jelentése a-hidroxi-metilén-csoport,
Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport, és X jelentése ciklohexilcsoport.]
a) lépés (S)-2-Izocianáto-3-fenil-propionsav-benzil-észter Lombardino és munkatársai módszere szerint [J. Med.
Chem., 7, 97 (1964)] 18,0 g L-fenil-alanin-benzil-észterhidrokloridot 150 ml toluolban, foszgén-atmoszférában másfél órán át forralva keverünk, majd az elegyet lehűtjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A kapott szilárd anyagot 120 ml hexánból átkristályosítjuk, ily módon 16,1 g színtelen, tűkristályos anyagot kapunk, op.: 68-72 ’C.
Elemi analízis a Ci7HI5NO3 képlet alapján: számított: C: 72,59, H: 5,37, N: 4,98;
talált: C: 72,32, H: 5,35, N: 4,92%.
[a] o = -80,4° (c= 1,02, kloroform).
IR-spektrum (CHC13): 2250, 1750 cm-’.
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-benzil-észter
A fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldjuk 5 ml diklór-metánban, az oldathoz 25 ’C hőmérsékleten hozzáadunk 930 pl morfolint, majd félóra múlva az oldószert ledesztilláljuk. A maradékként kapott, víasszerű, szilárd anyagot hexán és etil-acetát 4: 1 arányú, forró elegyéből átkristályosítjuk, ily módon 1,92 g cím szerinti vegyületet kapunk, op.: 87-89 ’C. Tömegspektrum (kémiai ionozáció, izobután): 369 (MH+, alapcsúcs).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe
1,85 g a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 30 ml vízmentes metanol és 5 ml ecetsav elegyében, és 0,5 g 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 1 órán át 3,71xl05 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról háromszor toluolt desztillálunk le, és a kapott terméket megszárítjuk. Ily módon 1,43 g színtelen, habos anyagot kapunk.
d) lépés
Boc-His(imBoc)-nor-C-Sta-metil-észter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon járunk el, azzal az eltéréssel, hogy Boc-Phe-His(imBoc) helyett di-Boc-His-t használunk; ily módon, 200 mg, a 3. példa h) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva 345 mg olyan terméket kapunk, amely a cím szerinti vegyüiet (vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,38, szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát), és a megfelelő O-Boc-His(imBoc)-származék (Rrértéke: 0,50) körülbelül 1,5: 1 arányú keveréke. Ezt a keveréket összetevői szétválasztása nélkül, közvetlenül felhasználjuk a 7. példa e) lépésében. E keveréket preparatív méretű, nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás módszerrel szét lehet választani, mégpedig az alábbi körülmények között, oszlop: Zorbax C-8, mérete: 25 cmx9,8 mm, eluens: acetonitril és víz 85: 15 arányú elegye, áramlási sebesség: 6,3 ml/perc, detektálás: 254 nm hullámhossznál. A cím szerinti vegyüiet retenciós ideje: 4,76 perc, míg az O-acilezett származéké:
6,48 perc. Ily módon mindkét vegyületből tiszta mintákat nyerünk.
e) lépés
Boc-His-nor-C-Sla-metll-észter
895 mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott vegyületet 25 ’C hőmérsékleten feloldunk 20 ml metanolban, és az oldathoz hozzáadunk 30 mg vízmentes kálium-karbonátot. 1 óra múlva az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot megszárítjuk. Ily módon 604 mg sárga színű, habos anyagot kapunk, amelyet tisztítás nélkül használunk fel a következő reakciólépésben. E termék nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálata [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH =2,1) 50: 50 arányú elegye] 3,15 perc és 1,98 perces retenciós idővel két csúcsot mutat, arányuk: 2,8: 1. Az 1,98 perces retenciós idejű csúcs feltehetőleg a tercier-butoxi-karbonil-hisztidin-metil-észter, ezt erősíti meg a keverék NMR-spektruma, valamint az alább leírt, ismert vegyületté való átalakítás.
f) lépés
His-nor-C-Sta-metil-észter-hidroklorid
595 mg, a fenti e) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 3,4 normál, dioxános sósav-oldatban, és félórán át 25 ’C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot csökkentett nyomáson megszárítjuk. Ily módon 555 mg sárga színű, szilárd anyagot kapunk, amelynek retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 1,54 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH = 2,1) 5: 95 arányú elegye]. Az NMR-spektrum azt mutatja, hogy ez a termék a cím szerinti vegyüiet, amelyet hisztidin-metil-észter-dihidroklorid szennyez.
g) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-His-nor-C-Sta-metÍl-észter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon járunk el, azzal az eltéréssel, hogy a Boc-Phe-His-(imBoc) helyett a fenti
c) lépésben leírt módon kapott terméket használjuk, továbbá 1,1 egyenértéknyi helyett 2,2 egyenértéknyi trietilamint alkalmazunk. Ily módon, 550 mg, a fenti f) lépésben leírt módon kapott vegyületből kiindulva 365 mg világossárga színű, amorf, szilárd anyagot kapunk, amelyet
HU 207 869 Β feloldunk 3 ml metanolban, az oldathoz hozzáadunk 4 mg vízmentes kálium-karbonátot, és az elegyet 2 órán át 25 °C hőmérsékleten tartjuk. Ezután az oldószert ledesztilláljuk, így 355 mg világossárga színű, habos anyagot kapunk. Ez utóbbit feloldjuk 4 ml diklór-metánban, és az oldatot 5 percig 20 ml 1 normál sósavval erélyesen keverjük. Utána a szerves és vizes részt elválasztjuk, és a vizes részt kétszer 2 ml diklór-metánnal kirázzuk. Ezt követően a vizes részhez annyi 2 normál nátrium-hidroxidoldatot adunk hogy az elegy pH-ja 10,5-re emelkedjen, majd a meglúgosított elegyet négyszer 100 ml diklór-metánnal kirázzuk. Ez utóbbi diklór-metános részeket nátrium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon majdnem színtelen, habos anyag formájában 225 mg cím szerinti vegyületet kapunk. Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,1 (futtató elegy: D-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 2,95 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,l) 50:50 arányú elegye], ez a termék teszi ki a teljes ultraibolya elnyelés 93%-át, és kimutatható továbbá egy 1,94 perces retenciós idővel jelentkező, az ultraibolya elnyelés alapján 5%-ot kitevő szennyezés. lH-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,7-1,4 (m, 6-8H), 1,5-1,8 (m, 46H), 3,4-2,8 (m, körülbelül 8H), 3,6 (m, 4H), 3,73 (s,
3H, OCH3), 4,08 és 4,54 (m, IH), 4,30 (m, 2H), 5,2 (m, IH), 6,82 és 7,57 (s, 1-1H), 6,97 és 8,12 (d,
1-1H), 7,1-7,35 (m, körülbelül 6H, aromás).
8. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-metil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
W jelentése a-hidroxi-metilén-csoport,
Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport, és
X jelentése ciklohexilcsoport.]
a) lépés
Norleucin-benzil-észter
Az ismert [J. Med. Chem., 30,3575. (1986)] eljárás szerint, 15,0 g norleucint összekeverünk 200 ml benzilalkohollal, és az elegyet 0 °C hőmérsékletre hűtjük. Az elegyhez negyedóra alatt hozzácsepegtetünk 25 ml tionil-kloridot, majd a reakcióelegyet lassan 90 °C hőmérsékletre melegítjük. Eközben, körülbelül 50 °C hőmérsékleten heves kén-dioxid-fejlődés figyelhető meg. Az elegyet 2 órán át 90 °C hőmérsékleten tartjuk, majd 0 °C hőmérsékletre hűtjük, és hozzáadunk további 25 ml tionil-kloridot. Ezután ismét 2 órán át 90 °C hőmérsékleten tartjuk, majd lehűtjük, 1,6 1 dietil-éterrel hígítjuk, és éjszakán át 0 °C hőmérsékleten tartjuk. A kivált kristályos anyagot kiszűrjük, dietil-éterrel mossuk és megszárítjuk, ily módon 23,1 g tapadós, szilárd anyagot kapunk, amelyet 23 ml etanol és 230 ml dietiléter elegyéből átkristályosítunk. A kiszűrt és megszárított szilárd anyag súlya: 17,1 g.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,25 (futtató elegy: C-rendszer, a futtató lemezeket a felcseppentés után ammónia gőzöknek tesszük ki, és futtatás előtt kiszellőztetjük).
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-benzil-észter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 2,12 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termékből és 2,63 g, a 7. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva színtelen, habos anyag formájában 3,30 g cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,5 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,27 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=2,l) 70:30 arányú elegye, ez a vegyület adja a vizsgálat 25 perces időtartama alatt a teljes ultraibolya abszorpció 97%-át],
c) lépés
Motfollnil-karbonll-Phe-Nle
3,3 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termék 35 ml metanol és 7 ml ecetsav elegyével készült oldatát 1,0 g 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 45 percig hidrogénezzük, majd a katalizátort celiten kiszűrjük. A szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról többször toluolt és dietil-étert desztillálunk le, majd megszárítjuk. Ily módon 2,9 g színtelen szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,2 (futtató elegy: C-rendszer).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-metil-észtér
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 300 mg, a 3. példa h) lépésében leírt módon kapott termékből és 700 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva világossárga színű, szilárd anyag formájában 350 mg kívánt terméket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,33 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 6,02 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=2,l) 75:25 arányú elegye]. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,86 (t, 3H, J = 6-7 Hz, átfed egy
1-2 H-nak megfelelő multiplettel, amelynek középpontja 0,9-nél van), 1,04-1,36 (m, körülbelül 8H), 1,46 (dd, 2H), 1,46-1,90 (m, körülbelül 10H), 3,0 (dd, középpontja, IH), 3,05-3,38 (m, körülbelül 5H), 3,58 (m, körülbelül 4H), 3,74 (s, 3H, OCH3), 4,12 (d, IH, J= 1-2 Hz), 4,20 (q, IH), 4,32-4,50 (m, 2H), 4,92 (d, IH, J=körülbelül 8 Hz), 6,48 (d, IH, J=9 Hz), 6,54 (d, IH, J= 10 Hz), 7,12-7,35 (m, 5H, aromás).
9. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
HU 207 869 Β
M jelentése feniícsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
W jelentése cc-hidroxi-metilén-csoport,
Z1 jelentése izopropil-karbonil-csoport, és X jelentése izopropilcsoport.]
a) lépés
N-tercier-butoxi-karboml-(S)-3-amino-(R, S)-2hidroxi-5-metil-kapronitril
119 g N-tercier-butoxi-karbonil-leucinaldehidet [amelyet úgy állítunk elő, hogy a megfelelő metil-észtert diizobutil-alumínium-hidriddel Rich és munkatársai módszerével, J. Med. Chem., 43, 3624. (1978) redukáljuk] feloldunk 500 ml dimetoxi-etánban, és az elegyhez 5 °C hőmérsékleten hozzáadjuk 63,8 g nátrium-hidrogén-szulfit 500 ml vízzel készült oldatát, mégpedig oly módon, hogy eközben az elegy hőmérséklete ne emelkedjen 10 °C fölé. Utána az elegyet 5 órán át 0 ’C hőmérsékleten, majd további 48 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. Ezután a reakcióelegyet 350 ml térfogatra betöményítjük, hozzáadunk 1 1 etilacetátot, majd 39,5 g kálium-cianid 100 ml vízzel készült oldatát. A reakcióelegyet 72 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük, majd a vizes részt elválasztjuk, és kétszer etil-acetáttal kirázzuk. Az egyesített szerves részeket telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon világossárga színű olaj formájában 134 g cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,22 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1: 3 arányú elegye).
b) lépés
N-tercier-Butoxi-karbonil-(S)-3-a>nino-(R)-2-tercier-butil-dimetil-szililoxi-5-metil-kapronitril
117 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 800 ml dimetil-formamidban, és az oldatot jeges fürdőben lehűtjük. Az oldathoz hozzáadunk először 82,2 g imidazolt, majd 102 g tercier-butil-dimetil-klór-szilánt, és a reakcióelegyet 3 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. Ezután az oldószert ledesztilláljuk, a maradékhoz hozzáadunk 500 ml hexánt és 500 ml dietil-étert, a szerves oldatot háromszor 50 ml telített lítium-bromid-oldattal, utána 1 normál sósavval, és végül telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 116 g sárga színű, viszkózus olajat kapunk. Az így kapott két izomert oszlop-kromatográfiás módszernél választjuk szét, mégpedig oly módon, hogy a fenti keverék 17 g súlyú részletét felvisszük egy 1,8 kg szilikagéllel töltött oszlopra, amelyet dietil-éter és hexán 1: 25 arányú elegyével hoztunk egyensúlyba. Az oszlopot először ugyanezzel az eleggyel (10 1), utána dietiléter és hexán i: 22,5 arányú elegyével (10 1), és végül dietil-éter és hexán 1:20 arányú elegyével (10 1) eluáljuk. Ennek az eljárásnak a megismétlése útján színtelen, viasszerű, szilárd anyag formájában 47,2 g kevésbé poláros izomert, és 30,6 polárosabb izomert, mégpedig N-tercier-butoxi-karbonil-(S)-3-amino-(S)-2-tercierbutil-dimetil-szililoxi-5-metil-kapronitrilt kapunk, továbbá 42 g keveréket.
c) lépés
N-tercier-butoxi-karbonil-(S)-3-amino-(R)-2-tercier-butil-dimetil-szililoxi-5-metil-hexánsav-amid g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 650 ml vízmentes etanolban, és 0 ’C hőmérsékleten hozzáadunk először 144 ml 1 normál nátrium-hidroxid-oldatot, majd 290 ml 30%-os, vizes hidrogén-peroxid-oldatot, mégpedig oly módon, hogy eközben az elegy hőmérséklete ne emelkedjék 5 °C fölé. Az elegyet 3,5 órán át 0 ’C hőmérsékleten tartjuk, majd fél órára 30 ’C hőmérsékletre melegítjük. Ezután 0 ’C hőmérsékletre visszahűtjük, és hozzáadunk 116 ml 30%-os hidrogén-peroxid-oldatot.10 perccel később a vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat azt mutatja, hogy a kiindulási anyag eltűnt. Ekkor 5 ’C alatti hőmérsékleten hozzácsepegtetünk 200 ml 20%os, vizes nátrium-szulfát-oldatot, és az elegyet csökkentett nyomáson 450 ml térfogatra betöményítjük. Ezután négyszer 250 ml etil-acetáttal kirázzuk, a szerves részeket telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Az így kapott 36 g súlyú olajat 800 g szilikagélen kromatografáljuk, eluensként dietil-éter és hexán 1: 1 arányú elegyét használjuk. Bizonyos szennyezett frakciókat ugyanezzel az eluenssel újra kromatografálunk, ily módon összesen 17,0 g színtelen terméket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,2 (futtató elegy: dietil-éter és hexán 1: 1 arányú elegye).
d) lépés (S)-3-Amino-(R)-2 -hidroxi-5-metU-hexánsav-amidhidroklorid
16,9 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 50 ml dioxánban, és az oldathoz 25 °C hőmérsékleten hozzáadunk 100 ml 3,4 normál, dioxános sósav-oldatot. 2,5 óra múlva az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról dietil-étert desztillálunk le, és megszárítjuk. Ily módon színtelen, szilárd anyag formájában 8,7 g cím szerinti vegyületet kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 2,35 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH = 2,1) 5:95 arányú elegye].
e) lépés (S)-3-Amino-(R)-2-hidroxi-5-metil-hexánsav-hidroklorid
8,7 g, fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 150 ml 6 normál sósavban, és az elegyet 2 órán át 60 °C hőmérsékleten tartjuk. Ezután az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot megszárítjuk. Ily módon 10,6 g világossárga színű, szilárd anyagot kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 5,0 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH = 2,1) 5:95 arányú elegye]·
f) lépés (S)-3-A mino-(R )-2-hidroxi-5-metil-hexánsav-izopropil-észter-hidroklorid
1,25 g, a Teríti e) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk sósavval telített izopropanolban, és az
HU 207 869 Β elegyet 18 órán át 25 °C hőmérsékleten állni hagyjuk. Utána az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról toluolt és dietil-étert desztillálunk le, majd megszárítjuk. Ily módon olajos, sárga színű, habos anyag formájában 1,36 g kívánt tennéket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,33 (futtató elegy: D-rendszer, a futtató lemezeket a minták felcseppentése után ammónia gőzöknek tesszük ki, majd ezután futtatjuk).
g) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-Sta-izopropil-észter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 300 mg, a fenti f) lépésben leírt módon kapott termékből és 782 mg, a 8. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva színtelen, habos anyag formájában 209 mg tennéket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,4 (futtató oldószer: etil-acetát).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 5,86 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=2,1) 75:25 arányú elegye].
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,82 (t, 3H, J=6 Hz), 0,89 (dd középpontja, 6H), 1,21 (dd középpontja, 6H), 1,31,6 (m, körülbelül 5H), 1,6-2,0 (m, 2-3H), 2,88— 3,34 (multiplettek, körülbelül 7H), 3,55 (m, 4-5H), 4,05, 4,20, 4,36 és 4,46 (m, 1-1H), 4,98 (m, 2H), 6,47 és 6,56 (m, 1-1H), 7,05-7,31 (m, 5H).
10. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Lys-nor-C-Sta-metil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése 4-amino-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport] és morfolinil-karbonil-Phe-Lys(E-CBZ)-nor-C-Sta-metilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése 4-(benziloxi-karbonil-amino)-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Boc-Lys(E-CBZ)-nor-C-Sta-metil-észter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 300 mg, a 3. példa h) lépésében leírt módon kapott termékből, és 679 mg Boc-Lys(E-CBZ)-ből (Chemalog Co.) kiindulva színtelen, habos anyag formájában 430 mg terméket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,57 (futtató oldószer: etil-acetát).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 4,83 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=2,1) 70:30 arányú elegye]·
b) lépés
Lys(E-CBZ)-nor-C-Sta-metil-észter-hidroklorid
400 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket 25 °C hőmérsékleten feloldunk 5 ml 3,4 normál, dioxános sósav-oldatban, az oldatot másfél órán át keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról többször dietil-étert desztillálunk le, és megszárítjuk. Ily módon világossárga színű, habos anyag formájában 366 mg terméket kapunk.
c) lépés
MorfolinU-karbonil-Phe-Lys(E-CBZ)-nor-C-Stametil-észter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 360 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből és 311 mg, a 7. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva színtelen, habos anyag formájában 180 mg tennéket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,64 (futtató elegy: D-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 2,86 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=2,1) 70:30 arányú elegye]. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,72-2,0 (m, körülbelül 25H), 2,94 (dd középpontja, IH), 3,0-3,32 (m, körülbelül 6H),
3,50 (m középpontja, körülbelül 4H), 3,68 (s, 3H,
OCH3), 5,02 (m, 2H, CH2O), 6,52 és 6,68 (d, 11H), 7,08-7,48 (m, körülbelül UH).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Lys-nor-C-Sta-metil-észter-hidroklorid mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 10 ml metanol és 2 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 20 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 45 percig 25 °C hőmérsékleten, 3,5x1ο5 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról először 3 ml 3,4 normál, dioxános sósavoldatot, majd háromszor dietil-étert desztillálunk le, és végül megszárítjuk. Ily módon halványsárga színű lemezek formájában 36 mg tennéket kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 4,08 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=2,1) 40:60 arányú elegye]·
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,12 (futtató elegy: D-rendszer).
Ή-NMR-spektrum (DMSO-dó), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,67-1,8 (m, körülbelül 25H), 2,67-3,07 (m, körülbelül 4H), 3,07-3,56 (m), 3,56 (s, 3H, OCH3, 4,07 (látszólagos d, IH, J = 3 Hz), 4,13-4,40 (m, körülbelül 3H), 6,72 (d, IH, J=8 Hz), 7,10-7,4 (m, körülbelül 5H), 7,62 (d, IH, J=9 Hz), 8,08 (d, IH, J=8,5 Hz).
HU 207 869 Β ll. példa
Morfolinil-karboml-Phe-Nle-nor-C-Sta-N-(5 -amino-pentil)-amid-hidroklorid [(I) általános képletű vegyűlet, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
W jelentése a-hidroxi-metilén-cs -irt,
Z1 jelentése N-(5-amino-pentil)-kar axamido-csoport, és X jelentése ciklohexilcsoport],
a) lépés
3-(S)-Azido-2-(R)-hidroxi-4-ciklohexil-N-(5-benziloxi-karbonil-amino-pentil)-amid
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és
800 mg 5-(benziloxi-karbonil-amino)-l-amino-pentánból és 477 mg, a 3. példa f) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva világossárga színű, szirupszerű anyag formájában 490 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,5 (futtató oldószer: etil-acetát).
IR-spektrum (CHC13) 2100 cm'1.
b) lépés
3-(S)-Amino-2-(R)-hidroxi-4-ciklohexil-N-(5benziloxi-karbonil-amino-pentil)-amid
410 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 5 ml metanolban, és az oldathoz 0 °C hőmérsékleten, 1 perc alatt hozzáadjuk 525 mg vízmentes ón(II)-klorid 5 ml metanollal készült oldatát. A reakcióelegyet 18 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk, a maradékhoz hozzáadunk 3 ml vizet, majd 3 ml 1 normál nátriumhidroxid-oldatot, és 200 ml dietil-éterrel kirázzuk. A vizes részt nátrium-kloriddal telítjük, és dietil-éterrel kirázzuk. A dietil-éteres részeket megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 200 mg olajos, habos anyagot kapunk. A vizes részeket 5 ml 1 normál nátrium-hidroxid-oldattal tovább lúgosítjuk, hozzáadunk 5 g nátrium-kloridot, és háromszor 100 ml etil-acetáttal, majd háromszor 100 ml diklór-metánnal kírázzuk. Az egyesített szerves részeket megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon további 210 mg, világossárga színű, habos anyagot kapunk. Az egyesített szilárd termékeket (súlya: 410 mg) 25 g szilikagélen kromatografáljuk, eluensként egymás után 250-250 ml térfogatú, alábbi összetételű etanol és diklór-metán elegyeket használunk: 1:99; 2:98; 4:96; 6:94; 8:92 és 12:88. Ily módon színtelen, habos anyag formájában 172 mg tiszta terméket kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,39 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH = 2,1) 50:50 arányú elegye]·
c) ^pés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-N-(5benziloxi-karbonil-amino-pentil)-amid
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, de azzal az eltéréssel, hogy trietil-amint nem használunk, és 165 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből és 246 mg, a 8. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva világossárga színű, habos anyag formájában 212 mg terméket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke etil-acetát mint futtató oldószer alkalmazásával: 0,14; míg a Drendszer mint futtató elegy alkalmazásával: 0,80.
A tennék retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 4,8 perc, e vizsgálat egy 5,03 perces retenciós idejű, a teljes ultraibolya elnyelés alapján számítva 30%-os mennyiségben jelen levő, és nem azonosított szennyezést mutat [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH = 2,1) 60:40 arányú elegye].
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-N-(5-amino-pentil)-amid-hidroklorid
186 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 20 ml metanol és 4 ml ecetsav elegyében, és 60 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 2 órán át 25 °C hőmérsékleten rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról toluolt desztillálunk le, majd megszárítjuk. Ily módon 167 mg világossárga színű, szilárd anyagot kapunk, amelyről kétszer 3,4 normál, dioxános sósav-oldatot és dietil-étert desztillálunk le, majd a maradékot megszárítjuk. Ily módon világossárga színű, szilárd anyag formájában 150 mg terméket kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,72 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=2,l) 40:60 arányú elegye].
‘H-NMR-spektrum (DMSO-d6 + 10% H2O), 300
MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,82 (m, körülbelül 5H), 0,96-1,8 (m, körülbelül 25H), 2,7, 3,0, 3,2 és 3,44 (2-3H multiplettek középpontjai), 3,76 (látszólagos d, IH), 4,0-4,2 (m, 2H), 4,2-4,35 (m, 1-2H), 4,35-4,9 (széles, 3-4H), 6,7 (m, IH), 7,067,4 (m, 5-6H), 7,63 (m, IH), 7,92 (széles, körülbelül 2H), 8,05 (d, IH, J = 9Hz).
12. példa
-Formil-piperazin-4-il-karbonil-Phe-Nle-nor-CSta-metll-észter [(I) általános képletű vegyűlet, ahol Z jelentése l-formil-piperazin-4-il-karbonil-aminocsoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
-Formil-piperazin-4-il-karbonil-Phe-benzil-észter
3,0 g, a 7. példa a) lépésében leírt módon kapott terméket feloldunk 17 ml diklőr-metánbafi, és az oldathoz 25 °C hőmérsékleten hozzáadunk 1,7 ml N-formilpiperazint, ennek hatására exoterm reakció játszódik
HU le, és az elegy 40 °C hőmérsékletre melegszik. Ezután a reakcióelegyet fél órán át 25 °C hőmérsékleten tartjuk, majd az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot 100 g szilikagélen kromatografáljuk, eluensként először 2 1 etil-acetátot használunk, majd az oszlopot etanol és etil-acetát 11:90 arányú elegyével eluáljuk tovább. Ily módon 3,1 g terméket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,1 (futtató oldószer: etil-acetát).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 4,56 perc [eluens: acetonitril és 0,1 mólos foszfát-puffer (pH=2,l) 50:50arányú elegye.
b) lépés l-FormÍl-piperazÍn-4-il-karbonil-Phe
3,0 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 50 ml metanol és 5 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 1,0 g 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 1 órán át 25 °C hőmérsékleten, 3,5xlű5 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról háromszor toluolt desztillálunk le, és végül megszárítjuk. Ily módon színtelen, habos anyag formájában 2,31 g cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,17 (futtató elegy: D-rendszer).
c) lépés l-Formil-piperazin-4-il-karbonil-Phe-Nle-benzilészter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 750 mg, a 3. példa h) lépésében leírt módon kapott termékből és 1,02 g, a 8. példa a) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva színtelen, szilárd anyag formájában 1,06 g cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,65 (futtató elegy: D-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 2,48 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,l) 70:30 arányú elegye].
d) lépés
-Formil-piperazin-4-il-karbonil-Phe-Nle
1,04 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 30 ml metanol és 3 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 300 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 1 órán át 25 °C hőmérsékleten, 3,5xl05 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról háromszor toluolt desztillálunk le, ezután dietil-étert desztillálunk le róla, és végül megszárítjuk. Ily módon majdnem fehér színű, habos anyag formájában 870 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,5 (futtató elegy: D-rendszer).
e) lépés l-Formil-piperazin-4-il-karbonil-Phe-Nle-nor-CSta-metil-észter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 200 mg, a 3. példa h) lépésében leírt módon kapott termékből, és 465 mg, a fenti e) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva világossárga színű, habos anyag formájában 194 mg terméket kapunk.
869 B 2
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,53 (futtató elegy: D-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 4,50 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,1) 50:50 arányú elegye]. H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,82 (t, 3H, J=6 Hz, átfedésben egy 0,9-nél levő multiplettel), 1,0-1,35 (m, körülbelül 5H), 1,44 (dd középpontja, 2H), 1,44-1,9 (m, körülbelül 9H), 2,98 és 3,10 (dd jelrendszerek középpontjai, 1-1H), 3,10-3,57 (m, körülbelül 8H), 3,57-3,72 (m, ezen belül 3,72 s [OCH3], összesen körülbelül 5H), 4,13 (d, IH, J=3 Hz), 4,21 (q, IH), 4,39 (q, IH), 4,49 (q, IH), 5,18, 6,49 és 6,63 (d, 1-1H, J=6 Hz), 7,08-7,36 (m, 5-6H), 8,0 (s, IH, N-CHO).
13. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-(O-4-plperidil-butiril)-metil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése a-(4-piperidil-butiriloxi)-metilén-csoport, és
Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
4-Piperidil-butiril-klorid-hidroklorid
750 mg 4-piperidil-vajsav-hidroklorid és 4 ml tionil-klorid elegyét 45 percig forralva keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot dietil-éterrel eldörzsöljük, és megszárítjuk. Ily módon 700 mg világosbarna színű, szilárd anyagot kapunk. Ha ezt a terméket feloldjuk vízmentes metanolban, akkor a kapott anyag vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke a D-renszerben mint futtató elegyben: 0,1, és jól megkülönböztethető a kiindulási savtól; e vegyület feltehetőleg a metil-észter. A fent leírt módon kapott szilárd anyagot további tisztítás nélkül használjuk fel a következő reakciólépésben.
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-(O-4-piperidil-butiril)-metil-észter mg, a 8. példa d) lépésében leírt módon kapott terméket oly módon vízmentesítünk, hogy az anyaghoz benzolt adunk, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Az így vízmentesített anyagot feloldjuk 1 ml diklór-metánban, és 25 °C hőmérsékleten hozzáadunk először 30 μΐ trietil-amint, majd 25 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket. Másfél óra múlva az elegyhez hozzáadunk további 15 μΐ trietil-amint és 22 mg savkloridot. További 2,4 óra múlva az elegyhez újabb 19 μΐ trietil-amint és 21 mg savkloridot adunk. Egy óra elteltével további 7 μΐ trietil-amint és 10 mg savkloridot adunk az elegyhez, majd fél óra múlva diklór-metánnal hígítjuk, az oldatot vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, megszárítjuk,
HU 207 869 Β és az oldószert, ledesztilláljuk. Az így kapott 75 mg súlyú, sötétbarna színű olajat azonnal felvisszük egy 3 g szilikagéllel töltött, etanol és diklór-metán 3:97 arányú elegyével egyensúlyba hozott kromatografáló oszlopra, és az oszlopot először ugyanezen oldószerelegy 100 ml térfogatú részletével, majd ezután etanol és diklór-metán 100-100 ml térfogatú, 5:95; 7:93; 9:91 és 13: 87 arányú elegyével eluáljuk. Ily módon a cím szerinti vegyületet tiszta állapotban, világosbarna, szilárd anyag formájában kapjuk, súlya: 25 mg.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,23 (futtató elegy: D-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 5,09 perc (eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH = 2,1) 60: 40 arányú elegye]. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,82 (t, 3H, átfedésben 1-2H m jellel), 1,04-2,0 (m), 2,26-2,58 (m), 3,06 (m, 2H), 3,1-3,34 (m, 4-6H), 3,57 (m, körülbelül 4H), 3,70 (s, 3H, OCH3), 4,18 (q, IH), 4,46 (q, IH), 4,53 (m, 1-2H), 4,94 (m, IH), 7,1-7,3 (m, 5-7H).
14. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-N-metilamid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolin-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése N-metil-karboxamido-csoport.]
a) lépés
3(S)-Azido-2(R)-tercier-butil-dimetil-szililoxi-4ciklohexil-vajsav-metil-észter
0,60 g, a 3. példa g) lépésében leírt módon kapott terméket feloldunk 5 ml dimetil-formamidban, és 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk először 422 mg imidazolt, majd 523 mg tercier-butil-dimetil-klór-szilánt. Az elegyet 18 órán át 25 ’C hőmérsékleten tartjuk, majd hozzáadunk további 211 mg imidazolt és 255 mg tercierbutil-dimeti 1-klór-szilánt, és az elegyet 1 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. Ezután az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk etil-acetátban, az oldatot először 1 mólos, vizes lítium-klorid-oldattal, utána 1 normál sósavval, és végül nátrium-klorid-oldattal mossuk, megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékként kapott, 900 mg súlyú, tiszta olajat 25 g szilikagélen kromatografáljuk, eluensként dietil-éter és hexán 1:75 arányú elegyét (1 1) használjuk. Ily módon 800 mg tiszta terméket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,55 (futtató elegy: dietil-éter és hexán 1:2 arányú elegye).
b) lépés
3(S)-Azido-2(R)-lercier-butil-dimetil-szililoxi-4ciklohexil-vajsav-N-metil-amid
725 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk metanolban, az oldatot 0 °C hőmérsékletre hűtjük, és vízmentes metil-aminnal telítjük. Az elegyet dugóval lezárt lombikban 5 órán át 40 °C hőmérsékleten keverjük. Ezután az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról dietil-étert desztillálunk le, majd megszárítjuk. Ily módon 642 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,18 (futtató elegy: dietil-éter és hexán 1: 2 arányú elegye).
c) lépés
3(S)-Amino-2(R)-tercier-butil-dimetil'SZÍliloxi-4ciklohexil-vajsav-N-rnetil-amid
640 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 30 ml metanol és 3 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 200 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 1 órán át 25 °C hőmérsékleten, 3,5xl03 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot feloldjuk etil-acetátban. Az oldatot vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 550 mg színtelen olajat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel a következő reakciólépésben.
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nl.e-nor-C-Sta-(O-tercierbutil-dimetil-sziliTéter)-N-metil-am.id
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, de azzal az eltéréssel, hogy trietil-amint nem használunk, és 250 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott nyerstermékből és 358 mg, a 8. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva világossárga színű, szilárd anyag formájában 206 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,18 (futtató oldószer: etil-acetát, 0,7 (futtató elegy: D-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 8,2 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH = 2,1) 70: 30 arányú elegye].
e) lépés
MorfoUnil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-N-metilamid
200 mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket 25 ’C hőmérsékleten 3 ml 3 normál, dioxános sósav-oldattal félórán át kezelünk. Utána az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról háromszor dietil-étert desztillálunk le, majd megszárítjuk. Ily módon 155 mg halványsárga színű, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,48 (futtató elegy: D-rendszer)
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 4,57 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH = 2,1) 50: 50 arányú elegye]. 'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,82 (t, 3H, J = 6 Hz, átfedő m
1-2H), 1,0—1,32 (m, körülbelül 10H), 1,4-1,9 (m),
2,54 (d, 3H, J = 6 Hz, NCH3), 2,78 és 2,96 (dd jelrendszerek középpontjai, 1-1H), 3,06-3,28 (m, körülbelül 4H), 3,42 (m középpontja, körülbelül 4H), 3,76 (látszólagos d, IH, J = körülbelül 1 Hz), 4,11 (m, 2H), 4,28^(m, IH), 6,62, 7,58 és 7,96 (d, 1-1H), 7,06-7,3 (m, 5H).
HU 207 869 Β
75. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-N-(n-butil)-amid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése N-(n-butil)-karboxamido-csoport.]
a) lépés
3(S)-Azido-2(R)-tercier-butil-dimetil-szililoxi-4clklohexil-vajsav-N-(n-butil)-amid
800 mg, a 14. példa a) lépésében leírt módon kapott tennék, 2 ml metanol és 1 ml butil-amin elegyét 18 órán át forralva keverjük. Utána hozzáadunk további 1 ml butil-amint, és a forralást további 2 órán át folytatjuk. Ezután az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot 25 g szilikagélen kromatografáljuk, eluensként dietil-éter és hexán 1:5 arányú elegyét használjuk. Ily módon 500 mg színtelen, viasszerű, szilárd anyagot kapunk, amelynek vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke dietil-éter és hexán 1:5 arányú elegyében mint futtató elegyben: 0,1, valamint 240 mg kiindulási anyagot visszanyerünk.
b) lépés
3(S)-Amino-2(R)-tercier-butil-dimetil-szililoxi-4ciklohexil-vajsav-N-(n-butil)-amid
450 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 30 ml metanol és 3 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 5 órán át 220 mg csontszenes palládiummal rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról toluolt desztillálunk le. Az így kapott anyagot etil-acetátban feloldjuk, az oldatot vizes nátriumhidrogén-karbonát-oldattal háromszor mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 360 mg színtelen olajat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel a következő reakciólépésben.
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-(O-tercierbutil-dimetil-szilil-éter)-N-(n-butil)-amid
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, de azzal az eltéréssel, hogy trietil-amint nem használunk, és 355 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből, és 300 mg, a 8. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva színtelen, szilárd anyag formájában 313 mg terméket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,8 (futtató elegy: D-rendszer)
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 7,5 perc (eluens: acetonitril és víz 85:15 arányú elegye).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-N-(n-butil)-amid
305 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket 25 °C hőmérsékleten feloldunk 3 ml 3,4 normál, dioxános sósav-oldatban. 45 perc múlva az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról háromszor dietilétert desztillálunk le, majd megszárítjuk. Ily módon 239 mg drapp színű, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,6 (futtató elegy: D-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 10,2 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,1) 50:50 arányú elegye]. 'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,9 (triplettek, összesen 6H, átfedő 1-2H m), 1,0-1,85 (m, körülbelül 20H), 2,76 (dd jelrendszer középpontja, IH), 2,9-3,5 (m), 3,74 (látszólagos d, IH, J=körülbelül 1 Hz), 4,14 (m, 2H), 4,27 (m, IH), 6,60 (d, IH), 7,05-7,3 (m, 5H), 7,58 (t,lH), 7,98 (d, IH).
16. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nva-nor-C-Sta-izopropilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-propil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
L-Norvalin-metil-észter-hidroklorid
2,0 g L-norvalin (Chemical Dynamics) 50 ml vízmentes metanollal készült szuszpenziójába 0 °C hőmérsékleten negyedórán át vízmentes, gáz alakú sósavat vezetünk. Az így kapott oldatot 18 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A fehér színű, szilárd maradékot etanol és dietil-éter elegyéből átkristályosítva 2,3 g kívánt metil-észtert kapunk.
b) lépés
N-(Morfolinil-karbonil)-L-fenil-alanin-L-norvalinmetil-észter
0,50 g N-(morfolinil-karbonil)-L-fenil-alanin és 0,26 g L-norvalin-metil-észter 10 ml vízmentes diklórmetánnal készült oldatához hozzáadunk 0,22 ml trietilamint,0,33 g 1-hidroxi-benzotriazoltés 0,38 g l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimidet. A reakcióelegyet 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 50 ml etil-acetáttal hígítjuk, és először kétszer 25 ml 0,1 normál sósavval, majd kétszer 25 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, és magnézium-szulfáton megszárítjuk. Ezután a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Ily módon 0,62 g nyers dipeptidet kapunk.
c) lépés
N-(Morfolinil-karbonil)-L-fenil-alanin-L-norvalin
0,62 g N-(morfölinil-karboniI)-L-fenil-alanin-Lnorvalin-metil-észter 40 ml metanol és 20 ml víz elegyével készült oldatához hozzáadunk 1,2 g kálium-karbonátot, és az elegyet 60 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután az oldószert csökkentett nyomáson
HU 207 869 Β ledesztilláljuk, és a vizes maradékot háromszor 50 ml dietil-éterrel mossuk. Utána a vizes részt 10 ml 4 normál sósavval megsavanyítjuk, és háromszor 25 ml diklór-metánnal kirázzuk. Az egyesített szerves részeket magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,46 g nyers savat kapunk.
d) lépés
Motfolinil-karbonil-Phe-Nva-nor-C-Sta-izopropilészter
0,13 g N-(morfolinil-karbonil)-L-fenil-alanil-Lnorvalin és 0,10 g, a 17. példa a) lépésében leírt módon kapott 2(R)-hidroxi-3(S)-amino-4-ciklohexil-vajsavizopropil-észter 5 ml vízmentes diklór-metánnal készült oldatához hozzáadunk 0,055 ml trietil-amint, 0,060 g 1-hidroxi-benzotriazolt és 0,075 g l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimidet.
A reakcióelegyet 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 40 ml etil-acetáttal hígítjuk. A meghígított oldatot kétszer 25 ml 0,1 normál sósavval, majd kétszer 25 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 29:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,17 g (hozam: 77%) tiszta peptidet kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
0,86 (m, 3H), 1,27 (d, J = 8 Hz, 6H), 4,09 (m, IH),
4,25 (m, IH), 4,46 (m, IH), 4,51 (m, IH), 7,25 (m,
5H).
17. példa
Morfolinil-karboml-Phe-S-metil-Cys-nor-C-Staizopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxí-karbonil-csoport.]
a) lépés
2-(R)-Hidroxi-3(S)-amino-4-ciklohexil-vajsav-izopropil-észter-hidroklorid
1,0 g N-(tercier-butoxi-karbonil)-2-(R)-hidroxi3(S)-amino-4-ciklohexil-vajsav 50 ml izopropanollal készült, jégbe hűtött oldatába 20 percig vízmentes, gáz alakú sósavat vezetünk. Utána az oldatot hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni, és 16 órán át keverjük. Ezután az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, és a maradékot nagymértékben csökkentett nyomáson megszárítjuk. Ily módon 0,93 g kívánt amino-észter-hidrokloridot kapunk.
b) lépés
S-Metil-L-cisztein-metil-észter-hidroklorid
2,5 g S-metil-L-cisztein (Chemical Dynamics) 25 ml vízmentes metanollal készült, jégbe hűtött szuszperizióját vízmentes, gáz alakú sósavval telítjük, ennek során az oldatlan részek teljesen feloldódnak. Az így kapott oldatot hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni, és 20 órán át keverjük. Ezután az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, és a sárga színű, szilárd maradékot dietiléter és etanol elegyéből átkristályosítjuk.
Ily módon 3,0 g (hozam: 87%) kívánt metil-észteramin-hidrokloridot kapunk.
c) lépés
N-(MoifoUnil-karbonil)-L-fenil-alanln-S-metil-Lcisztein-metil-észter
0,96 g N-(morfolinil-karbonil)-L-fenil-alanin és 0,55 g S-metil-L-cisztein-metil-észter 50 ml vízmentes diklór-metánnal készült oldatához szobahőmérsékleten hozzáadunk 0,50 ml trietil-amint, 0,51 g 1-hidroxibenzotriazolt és 0,70 g l-(3-dimetil-amino-propil)-3etil-karbodiimid-hidrokloridot. Az elegyet 4 órán át keverjük, majd 100 ml etil-acetáttal hígítjuk, és a meghígított oldatot kétszer 35 ml 0,1 normál sósavval, majd kétszer 35 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk. Utána a szerves részt magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Ily módon 1,15 g kívánt, szilárd dipeptidet kapunk.
d) lépés
N-(Morfolinil-karbonil)-L-fenil-alanin-S-metil-Lcisztein
1,15 g N-(morfolinil-karbonil)-L-fenil-alanin-Smetil-L-cisztein-metil-észter 30 ml víz és 60 ml metanol elegyével készült oldatához jeges fürdőben hozzáadunk 3,5 g kálium-karbonátot. A kapott elegyet negyedórán át 0 °C hőmérsékleten, majd további 4 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, és a vizes maradékot tömény sósavval megsavanyítjuk. A savas elegyet háromszor 50 ml diklór-metánnal kirázzuk, az egyesített szerves részeket magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Ily módon 1,0 g (hozam: 89%) nyers savat kapunk.
e) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-S-metil-Cys-nor-C-Staizopropil-észter
0,43 g N-(morfolinil-karbonil)-L-fenil-alanin-S-metil-L-cisztein és 0,34 g 2(R)-hidroxi-3(S)-amino-4-ciklohexil-vajsav-izopropil-észter 20 ml vízmentes diklór-metánnal készült oldatához hozzáadunk 0,17 ml trietilamint, 0,18 g hidroxi-benzotriazolt és 0,23 g l-(3-dimetilamino-propil)-3-etil-karbodiimidet. A reakcióelegyet 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 50 ml etilacetáttal hígítjuk, és az oldatot 25 ml 0,1 normál sósavval, majd 0,25 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk. Ezután a szerves részt magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 29:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,42 g (hozam: 62%) tiszta peptidet kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,30 (2xd, 6H), 2,13 (s, 3H), 4,49 (m, 3H), 5,07 (m,
III), 7,25 (m,5H).
HU 207 869 Β
18. példa
Benzimidazol-2-karbonil-Nle-nor-C-Sta-metil-észter [(II) általános képletű vegyület, ahol L jelentése nitrogénatom,
R5 jelentése n-butil-csoport, és Rg jelentése metoxicsoport].
a) lépés
Benzimidazol-2-karbonil-norleucin-benzil-észter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 80 mg benzimidazol-2-karbonsavból és 110 mg, a 8. példa a) lépésében leírt módon kapott norleucin-benzilészter-hidrokloridból kiindulva, és a kapott nyersterméket szilikagélen kromatografálva (eluens: etil-acetát és hexán elegye) 110 mg szilárd terméket kapunk, amelyet dietil-éter és hexán 1:7 arányú elegyéből átkristályosítva 85 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
b) lépés
Benzimidazol-2-karbonil-norleucin mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 15 ml metanol és 2 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 50 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 25 °C hőmérsékleten 3,5xl05 Pa hidrogén nyomáson 1 órán át rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, majd a maradékról ötször 3 ml toluolt desztillálunk le, és végül megszárítjuk. Ily módon 48 mg sárgás színű, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,35 (futtató elegy: C-rendszer).
c) lépés
3(S)-Amino-2(R)-tercier-butil-dimetil-szililoxi-4ciklohexil-vajsav-metil-észter
A14. példa b) lépésében leírt módon eljárva, és 750 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva sárga színű olaj formájában 500 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
d) lépés
Benzimidazol-2-karbonil-Nle-nor-C-Sta-metil-tercier-butil-dimetil-szllil-éter
Az 1, példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 65 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termékből és 45 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva 110 mg nyersterméket kapunk, amelyet szilikagélen kromatografálva tisztítunk, eluensként dietil-éter és hexán elegyét használjuk. Ily módon 65 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,52 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1:1 arányú elegye).
e) lépés
Benzimidazol-2-karbonil-Nle-nor-C-Sta-metil-észter mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 3 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatban, és az elegyet 45 percig 25 °C hőmérsékleten tartjuk. Ezután az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról dietil-étert desztillálunk le, majd feloldjuk etil-acetátban. Az etil-acetátos oldatot vizes nátriumhidroxid-oldattal mossuk, megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1:1 arányú elegyét használjuk. Az így kapott, 27 mg súlyú, sárga színű, szilárd anyagot egy 1 cm hosszú, fordított fázisú C-8 szilikagéllel töltött oszlopon, preparatív nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás módszerrel tisztítjuk, eluensként acetonitril és víz 7:3 arányú elegyét használjuk. Ily módon 10 mg tiszta terméket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,55 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,17 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,1) 70:30 arányú elegye], 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,83 (t, 3H), 3,80 (s, 3H), 4,10,
4,15, 4,29, 4,57 és 4,79 (m, 1-1H), 7,25 (m, 2H),
7,33 (m, 2-3H), 7,50,7,77 és 8,10 (d, 1-1H).
19. példa
Morfolinll-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-nátriumsó [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése karboxilcsoport.] mg, a 8. példában leírt módon kapott vegyületet feloldunk 0,5 ml dioxánban, és az oldathoz 25 °C hőmérsékleten hozzáadunk 42 μΐ 1 normál nátrium-hidroxid-oldatot. 3 óra múlva az oldószert ledesztilláljuk, ily módon világossárga színű, szilárd anyag formájában 17 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,06 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,l) 60:40 arányú elegye], 'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,87 (t, 3H), 4,97, 5,07 és 5,34 (m, 1-1H), 6,66, 7,98 és 8,10 (d, 1-1H), 7,1-7,35 (m, aromás).
20. példa
3(S)-Morfolinil-karbonil-Phe-norleucll-amino-2 (R)-hidroxi-4 -fenil-butiramid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése fenilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z* jelentése karboxamidocsoport.]
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 148 mg 3(S)-amino-2(R)-hidroxi-4-fenil-butiramidhidrokloridból [amelyet a 4668769 számú amerikai szabadalmi leírás 1. példájának d) lépésében leírt módon állítunk elő] és 251 mg, a 8. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva 170 mg színtelen, porszerű anyagot kapunk.
HU 207 869 Β
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,3 (futtató elegy: C-rendszer).
1 H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,82 (t, 3H), 2,60 (dd, IH), 2,80 (átfedő dd, IH), 2,95 (dd, IH), 3,42 (m, 4H), 3,68 (d, IH), 4,17 (m, 2H), 4,28 (m, IH), 6,61, 7,52 és 7,91 (d, 1-1H), 7,05-7,35 (m, aromás).
21. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-amid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Zl jelentése karboxamidocsoport.]
a) lépés tercier-Butoxi-karboml-nor-C-Sta-amid-tercier-butil-dimetil-szUU-éter
9,17 g, a 4668769 számú amerikai szabadalmi leírás 1. példájának c) lépésében leírt módon kapott terméket feloldunk 200 ml metanolban, és 1 g 10%-os csontszenes ródium jelenlétében 70 órán át 25 ’C hőmérsékleten és 2,1x1ο5 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és az így kapott, 8,25 g súlyú, halványsárga színű, habos anyagot 400 g szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1:3 arányú elegyét (3 1), majd 2 1 etil-acetátot használunk. Ily módon színtelen, kristályos, szilárd anyag formájában 7,2 g terméket kapunk.
b) lépés nor-C-Sta-amid-hidroklorid
6,1 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 15 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatban, az elegyet 3 órán át 25 ’C hőmérsékleten keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról dietil-étert desztillálunk le. Az így kapott, 3,00 g súlyú, színtelen, porszerű anyagot felszuszpendáljuk a szükséges legkisebb mennyiségű dietiléterben, majd az oldatlan részeket kiszűrjük és megszárítjuk. Ily módon 2,70 g színtelen, szilárd anyagot kapunk, op.: 236-238 ’C.
c) lépés
Morfollnil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-amid
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 150 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből és 248 mg, a 8. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva színtelen, porszerű anyag formájában 169 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,30 (futtató elegy: C-rendszer).
1 H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,85 (t, 3H), 3,44 (m, 4H), 3,73 (m, IH), 4,15 (m, 2H), 4,30 (m, IH), 5,64, 6,64 és
8,02 (d, IH), 7,10-7,35 (m, aromás).
22. példa
Benzimidazol-2-karbonil-His-nor-C-Sta-metil-észter [(II) általános képletű vegyület, ahol L jelentése nitrogénatom,
R5 jelentése imidazol-4-il-metil-csoporí, és R6 jelentése metoxicsoport],
a) lépés
Bisz-tercier-butoxi-karbonil-His-nor-C-Sta-metilészter-tercier-butil-dimetil-szilil-éter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 750 mg, a 18. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből és 1,05 g Boc-His(imBoc)-ból kiindulva 1,6 g nyersterméket kapunk, amelyet szilikagélen kromatografálunk, eluensként etil-acetát és hexán elegyét használjuk. Ily módon 932 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,31 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1: 1 arányú elegye).
b) lépés
His-nor-C-Sta-metil-észter-dihidroklorid
400 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 2 ml diklór-metánban, az oldatot 0 ’C hőmérsékletre hűtjük, és hozzáadunk 3 ml trifluor-ecetsavat. Az elegyet félórán át 0 ’C hőmérsékleten, majd ezután 80 percen át 30 °C hőmérsékleten tartjuk. Utána az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról háromszor 4 normál dioxános sósav-oldatot, majd dietil-étert desztillálunk le. A maradékot megszárítva 210 mg halványsárga színű, szilárd anyagot kapunk.
c) lépés
Benzimidaz,ol-2-karboml-His-nor-C-Sta-metil-észter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 205 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből és 93 mg benzimidazol-2-karbonsavból kiindulva 27 mg halványsárga színű, szilárd anyagot kapunk, amelyet 1 g szilikagélen újra kromatografálunk, eluensként etanol és diklór-metán 6:94 arányú elegyét használjuk. Ily módon 12 mg terméket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,44 (futtató elegy: D-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 6,01 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH = 2,1) 60: 40 arányú elegye]. ‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 3,75 (s, 3H), 4,20 (széles, IH), 3,16 (m),6,96(s, IH).
23. példa
4-Metil-piperazin-l-il-karbonil-Phe-Nle-nor-CSta-N-metil-amid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése 4-metil-piperazin-l-il-karbonil-aminocsoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
HU 207 869 Β
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése N-metil-karboxamido-csoport.]
a) lépés
4-Metil-piperazin-l-il-karbonil-Phe-benzil-észter
15,0 g, a 7. példa a) lépésében leírt módon kapott tennéket feloldunk 100 ml diklór-metánban, és az oldathoz 3 °C hőmérsékleten hozzáadunk N-metil-piperazint. 10 perc múlva (miután az elegy hőmérséklete 20 °C-ra emelkedett) az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, eluensként 5-11% etanolt tartalmazó diklór-metánt használunk. Ily módon 18,1 g halványsárga színű olajat kapunk.
b) lépés
4-Metil-piperazin-l-il-karbonil-Phe-hidroklorid g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 150 ml ecetsavban, és az oldatot 3 g 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 45 percig 25 °C hőmérsékleten, 3,5x1ο5 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a székletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról kétszer toluolt, madj kétszer dietil-étert desztillálunk le, és végül megszárítjuk. Ily módon 16,8 g színtelen, nedvszívó, habos anyagot kapunk. Erről az anyagról háromszor 30 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatot desztillálunk le, és a maradékot megszárítjuk. Ily módon 15,9 g színtelen, kristályos anyagot kapunk.
c) lépés
4-Metil-piperazin-l-il-karbonil-Phe-Nle-benzilészter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, azzal az eltéréssel, hogy 2,5 egyenértéknyi mennyiségű trietil-amint használunk, és 2,00 g, a 8. példa a) lépésében leírt módon kapott norleucin-benzil-észterből és 2,54 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva 2,34 g színtelen, fehér színű, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,12 (futtató elegy: C-rendszer).
d) lépés
4-Metil-piperazin-I-il-karbonil-Phe-Nle
2,32 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk metanol és ecetsav 10:1 arányú elegyében (20 ml), és az oldatot 500 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében másfél órán át 25 °C hőmérsékleten 3,5x1ο5 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a maradékról háromszor toluolt és dietilétert desztillálunk le, majd megszáritjuk. Ily módon 2,15 g színtelen, szilárd anyagot kapunk.
e) lépés
4-Metll-piperazin-l-il-karbonil-Phe-Nle-nor-CSta-N-metil-amid-tercier-butil-dimetil-szilil-éter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 350 mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott termékből és 201 mg, a 14. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva 235 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 4,92 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,1) 70:30 arányú elegye].
f) lépés
4-Metil-piperazin-l-il-karbonil-Phe-Nle-nor-CSta-N-metil-amid
230 mg, a fenti e) lépésben leírt módon kapott terméket 25 °C hőmérsékleten feloldunk 5 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatban. Félóra múlva az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, a maradékról többször dietil-étert desztillálunk le, majd megszárítjuk. Az így kapott anyagot dietil-éterrel eldörzsöljük, majd megszárítjuk. Ily módon 175 mg sárga színű, szilárd anyagot kapunk,
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,92 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,1) 40:60 arányú elegye].
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,08 (futtató elegy: D-rendszer, a minták felcseppentése után a futtató lemezt ammónia gőzök hatásának tesszük ki, majd ezután futtatjuk).
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,90 (t, 3H), 2,59 (d, 3H), 3,82 (m,lH), 7,00,7,62 és 8,08 (d, 1-1H).
24. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-etil-keton [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése propionilcsoport.]
a) lépés (S)-tercier-Butoxi-karbonil-amino-4(R)-benziloxi6-ciklohexil-3-(R,S)-hexanol
700 mg, a 4668769 számú amerikai szabadalmi leírás 5. példájának a) lépésében leírt módon kapott terméket feloldunk 5 ml dietil-éterben, és az oldathoz 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 1,45 ml 2,8 mólos dietil-éteres etil-magnézium-bromid-oldatot. 20 perc múlva az elegyhez hozzáadunk további 650 μΐ 2,8 mólos etil-magnézium-bromid-oldatot, majd félóra múlva a reakcióelegyhez 1 ml telített, vizes ammónium-klorid-oldatot. Ezután az elegyet dietil-éterrel hígítjuk, 1 normál sósavval, utána nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, és végül telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 530 mg viszkózus olajat kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,4 és 0,25 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1:3 arányú elegye).
b) lépés
5(S)-tercier-Butoxi-karbonil-amino-4 (R )-benziloxi6-ciklohexil-3-hexánon
525 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott tennéket feloldunk 5 ml dietil-éterben, és az oldathoz 25 “C hőmérsékleten hozzáadunk 1,0 ml krómsav-oldatot (Org. Syn. V, 310). 1 óra múlva az elegyhez dietil-étert adunk, és az oldatot 1 normál nátrium-hidroxid-oldattal, majd telített nátrium-klorid-oldattal mos21
HU 207 869 Β suk, nátrium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, eluensként dietil-éter és hexán 1:7 arányú elegyét használjuk. Ily módon 250 mg színtelen olajat kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,6 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1: 3 arányú elegye).
c) lépés
5(S)-Amino-4(R)-benziloxi-6- :iklohexanon-hidroklorid
245 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 3 ml 4 normál, dioxános sósavoldatban, az oldatot 45 percig 25 °C hőmérsékleten keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról dietil-étert desztillálunk le, majd megszárítjuk. Ily módon 190 mg halványsárga színű, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,58 (futtató elegy: C-rendszer, a minták felcseppentése után a futtató lemezeket ammónia gőzöknek tesszük ki, majd ezután futtatjuk).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-etil-ketcmbenzil-éter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 95 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott vegyületből és 142 mg, a 8. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva színtelen, habos anyag formájában 133 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
e) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-etil-keton
120 mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 2 ml metanol és 1 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 75 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 20 órán át 25 °C hőmérsékleten, 3,5xlO5 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról ötször toluolt, majd ötször dietil-étert desztillálunk le, és végül megszárítjuk. Ily módon 100 mg világosdrapp színű, szilárd anyagot kapunk. Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 2,96 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH = 2,1) 70: 30 arányú elegye].
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,3 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát). 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,88 és 1,09 (t, 3-3H), 2,47 és 2,78 (dq, 1-1H), 3,10 (m, 2H), 3,17 és 3.64 (m, 4-4H),
4,13, 4,16 és 4,98 (m, 1-1H), 4,52 (m, 2H), 5,17 és
5,48 (d, 1-1H), 7,1-7,35 (m, aromás).
25. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-His-nor-C-Sta-N-metilamid-hidroklorid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése imidazol-4-il-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése a-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése N-metil-karboxamidocsoport.]
a) lépés
Bisz-(tercÍer-butoxi-karbonÍl)-hisztidÍn-benzil-észter
0,317 mól bisz-(tercier-butoxi-karbonil)-L-hisztidint feloldunk 800 ml vízmentes dimetil-formamidban, és az oldathoz hozzáadunk 43,9 g vízmentes kálium-karbonátot. Az elegyet jeges fürdőben keverjük, és hozzáadunk 37,8 ml benzil-bromidot. Utána a reakcióelegyet 0 °C hőmérsékleten keverjük, és éjszakán át hagyjuk 25 °C hőmérsékletre melegedni. Másnap az oldatlan részeket celiten kiszűrjük és dietil-éterrel mossuk, majd a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot feloldjuk 700 ml etilacetátban, az oldatot kétszer 200 ml 1 mólos lítiumklorid-oldattal, majd kétszer 4 mólos lítium-kloridoldattal, ezután kétszer 100 ml 1 normál nátriumhidroxid-oldattal, utána vízzel, és végül telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékként kapott, olajos, szilárd anyagot 500 ml hexánnal erélyesen keverjük, ennek hatására kristályos massza keletkezik, amelyet mozsárban elporítunk, a szilárd részeket kiszűrjük, és kétszer 100 ml 25 °C hőmérsékletű hexánnal mossuk, majd megszárítjuk. Ily módon 120,5 g szilárd anyagot kapunk, op.: 99-99,5 °C.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,35 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1: 1 arányú elegye).
[a]2o= 6,4° (c = 1,09, kloroform).
b) lépés
Hisztidin-benzil-észter-dihidroklorid mg, a fenti a) lépésben kapott leírt módon kapott terméket feloldunk 400 ml lehűtött, 4 normál, dioxános sósav-oldatban, és a kapott szuszpenziót 24 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. A folyadék legnagyobb részét leöntjük, a maradékról az oldószert ledesztilláljuk, az így kapott anyagot megszárítjuk, dietil-éterrel háromszor mossuk, és újra megszárítjuk.
Ily módon színtelen, szilárd anyag formájában 100%-os hozammal kapjuk a cím szerinti vegyületet. A termék [a]p-értéke 24 óra alatt +6,4°-ra emelkedik (c=2,865, metanol). Az ugyanilyen körülmények között mért irodalmi adat: 6,54 (Org. Prep. Proc. Int’ 1., 1970, 255).
A jelen példában leírt eljárás előnyösebb, mint az irodalomban ismertetett módszer.
c) lépés
Moifolinil-karbonil-Phe-His-benzil-észter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 1,37 g, a 7. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből és 1,21 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva 1,8 g sárga színű, habos nyersterméket kapunk. Ezt a terméket dietil-éterrel eldörzsöljük és megszárítjuk, ily módon 1,68 g világossárga színű, habos anyagot kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel a következő reakciólépésben.
HU 207 869 Β
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 2,92 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH = 2,1) 50: 50 arányú elegye].
d) lépés
Morfolmil-karbonil-Phe-His(imBoc)-benzil-észter
1,68 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 30 ml dioxán és 15 ml víz elegyében, és az elegy pH-ját 1 normál, vizes nátrium-hidroxid-oldattal 11-re állítjuk. Ezután hozzáadunk 850 μΐ di-tercier-butil-dikarbonátot, és az elegy pH-ját nátriumhidroxid-oldat segítségével 9 és 11 között tartjuk. 45 perc múlva az elegyhez hozzáadunk további 450 μΐ di-tercier-butil-dikarbonátot, eközben a pH-t 10,5 körül tartjuk, majd összesen másfél óra múlva az elegy pHját 1 normál sósavval 5-re állítjuk, és részlegesen betöményítjük. A betöményített elegyet négyszer 100 ml etil-acetáttal kirázzuk, az etil-acetátos részeket vizes nátrium-hidroxid-oldattal, majd nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Az így kapott, 1,85 g súlyú, olajos, habos anyagot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, mégpedig oly módon, hogy 2%-tól 8%-ig növekvő mennyiségű etanolt tartalmazó diklórmetánnal gradiens elúciót végzünk. Ily módon 1,05 g halványsárga színű, habos anyagot kapunk. Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,10 perc (eluens: acetonitril és puffer-oldat 70:30 arányú elegye).
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,13 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát).
e) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-His
500 mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 25 ml metanol és 2 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 250 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 45 percig 25 °C hőmérsékleten, 3,5xl05 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról háromszor toluolt, majd négyszer dietil-étert desztillálunk le, és végül megszárítjuk. Ily módon 423 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,3 (futtató elegy: C-rendszer).
ü lépés
Morfolinil-karboml-Phe-His(imBoc)-nor-c-Sta-Nmetil-amid-tercier-butil-dimetil-szilil-éter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 140 mg, a 14. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből és 285 mg, a fenti e) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva 223 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 9,95 perc [eluens: acetonitril és puffer-oldat (pH=2,l) 70:30 arányú elegye].
g) lépés
Morfolinil-karboml-Phe-His-nor-C-Sta-N-metilamid-tercier-butil-dimetil-szilil-éter
218 mg, a fent f) lépésben leírt módon kapott terméket 25 °C hőmérsékleten feloldunk 3 ml metanolban, és az oldathoz hozzáadunk 10 mg vízmentes kálium-karbonátot. 1 óra múlva az oldószert ledesztilláljuk, ily módon 193 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,06 (futtató elegy: C-rendszer).
h) lépés
Morfoliml-karbonil-Phe-His-nor-C-Sta-N-metilamid-hidroklorid
185 mg, a fenti g) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 3 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatban, az oldatot 1 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról dietil-étert desztillálunk le. Ily módon 150 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 1,83 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,1) 1:1 arányú elegye].
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,25 (futtató elegy: D-rendszer, a minták felcseppentése után a futtató lemezeket ammónia gőzök hatásának tesszük ki, majd ezután futtatjuk).
’H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 2,58 (d, 3H), 3,90,4,12, 4,27 és 4,58 (m, 1-1H), 6,87, 7,60, 7,82 és 8,33 (d, 1-1H), 7,13-7,34 (m, aromás), 7,44 és 9,02 (s, 1-1H).
26. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-dimetilamid [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése N,N-dimetil-karboxamido-csoport.]
a) lépés tercier-Butoxi-karbonll-nor-C-Sta-dimetil-amid Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 350 mg, a 4668769 számú amerikai szabadalmi leírás 1. példájának g) lépésében leírt módon előállított Bocnor-C-Sta-ból és 170 mg dimetil-amin-hidrokloridból kiindulva 405 mg nyersterméket kapunk, amelyet szilikagélen kromatografálva tisztítunk, eluensként etilacetát és hexán 1:2 arányú elegyét használjuk. Ily módon 310 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
b) lépés nor-C-Sta-Dimetil-amid-hidroklorid
305 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 4 ml dioxános sósav-oldatban, az elegyet 18 órán át keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról dietil-étert desztillálunk le, és végül megszárítjuk. Ily módon 250 mg világossárga színű, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,1 (futtató elegy: C-rendszer).
c) lépés
Morfolinil-karboml-Phe-Nle-nor-C-Sta-dimetilamid
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 245
HU 207 869 Β mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből és 472 mg, a fenti 8. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva 325 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 5,36 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH-2,1) 50:50 arányú elegye]. Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,86 (t, 3H), 2,91 és 3,03 (s, 3-3H),
3,07 (m, 2H), 3,45 és 3,59 (m, 4-4H), 4,15 (m, 2H),
4,31, 4,36 és 4,52 (m, 1—IH), 5,00, 6,13 és 6,49 (d,
1-1H), 7,08-7,26 (m, aromás).
27. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Staton-metilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése karbonilcsoport, és
Z' jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
100 mg, a 8. példa d) lépésében leírt módon kapott terméket feloldunk 0,4 ml diklór-metánban, és az oldatot 48 μΐ ecetsav-anhidriddel és 141 mg piridínium-dikromáttal kezeljük. 45 perc múlva az elegyet beletesszük egy -20 °C hőmérsékletű fagyasztószekrénybe, és 18 órán át itt tartjuk. Ezután etil-acetátot adunk hozzá, és a kapott oldatot először 1 normál sósavval, utána vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, ezt követően 1 normál nátrium-hidroxid-oldattal, és végül telített nátriumklorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 85 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk, amelyet szilikagélen kromatografálunk, eluensként etanol és diklór-metán elegyét használjuk. Ily módon 44 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,28 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát). Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,87 (t, 3H), 3,62 (m, 4H), 4,34,
4,51 és 5,09 (m, 1-1H), 4,94, 6,57 és 6,77 (d,
1-1H), 7,15-7,35 (m, aromás).
28. példa
Morfolinil-karbonll-O-MeTyr-Nle-nor-C-Sta-etllketon [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése p-metoxi-fenil-csoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése a-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése propionilcsoport.]
a) lépés
Morfolinil-kárbonil-O-MeTyr-Nle-nor-C-Sta-etilketon-benzil-éter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és
150 mg, morfolinil-karbonil-O-MeTyr-Nle-ből és 97 mg, a 24. példa d) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva 140 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,38 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát).
b) lépés
Moifolinil-karbonil-O-MeTyr-Nle-nor-C-Sta-etilketon
128 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 3 ml metanol és 1 ml ecetsav elegyében, és az oldott 130 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 18 órán át 25 °C hőmérsékleten, 3,5xl05 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, éa szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról ötször toluolt, majd ötször dietil-étert desztillálunk le, és végül megszárítjuk. Ily módon 115 mg halványsárga színű, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,25 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,64 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH = 2,1) 70: 30 arányú elegye]. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,90 és 1,11 (t,3-3H), 2,47 és 2,79 (dq, 1—IH), 3,04 (m, 2H), 3,29 és 3,64 (m, 4-4H),
3,80 (s, 3H), 4,13, 4,16, 4,25 és 4,35 (m, 1-1H),
4,95, 6,28 és 6,43 (d, 1-1H), 6,84 és 7,12 (d, 22H).
29. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-2(R, S)-metil-nor-CSta-metil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése a- és β-hidroxi-l-metil-metilén-csoport, és
Z' jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Metil-3-(S)-tercier-butoxi-karbonil-amino-4-ciklohexil.-2-oxo-l-metil-tio-1 -il-szulfoxid
8,2 ml metil-(metil-tio-metil)-szulfoxid 78 ml vízmentes tetrahidro-furánnal készült oldatát jeges fürdőben lehűtjük, és 20 perc alatt hozzácsepegtetünk 49 ml 1,6 normál, hexános butil-lítium-oldatot.
perc múlva az elegyet -25 °C hőmérsékletre hűtjük, majd hozzácsepegtetjük tercier-butoxi-karbonilhexahidro-L-fenil-alanin-metil-észter 20 ml tetrahidrofuránnal készült oldatát. Az így kapott elegyet félórán át -25 °C hőmérsékleten tartjuk, majd az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, és a maradékot feloldjuk 200 ml dietil-éterben. Az oldatot négyszer 30 ml vízzel, majd.telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, és magnézium-szulfáton megszárítjuk. A vizes ré1
HU 207 869 Β székhez további telített nátrium-klorid oldatot adunk, majd etil-acetáttal kirázzuk, és a szerves részt magnézium-szulfáton megszárítjuk. A kétféle szerves részt egyesítjük, az oldószert ledesztilláljuk, és a kapott, narancssárga színű olajat szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán elegyét használjuk. Ily módon 6,8 g világos, borostyánsárga színű, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,28 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 3:1 arányú elegye).
b) lépés
Boc-nor-C-Sta-metil-észter
4,25 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 25 ml metanolban, és az oldatot 0 °C hőmérsékleten 2,86 g jóddal kezeljük. Az elegyet 1 órán át 30 °C hőmérsékleten keverjük, majd keverés közben jég, 300 ml 10%-os, vizes nátriumtioszulfát-oldat és 100 ml etil-acetát elegyére öntjük. A szerves részt elválasztjuk, és a vizes részt négyszer 50 ml etil-acetáttal mossuk. A szerves részeket magnézium-szulfáton megszárítjuk, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán elegyét használjuk. Ily módon 980 mg sárga színű, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,32 (futtató elegy: C-rendszer).
A kromatográfiás tisztítás során ezenkívül 1,66 g olajat kapunk, amelynek vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke a fenti rendszerben: 0,45. Ezt a terméket 3(S)-tercier-butoxi-karbonil-amino-4-ciklohexil-2oxo-1,1 -bisz-metil-tio-1 -metoxi-butánként azonosítjuk.
c) lépés
3-tertier-Butoxi-karboniL-amino-4-ciklohexil-2(R,
S)-metil-2-hidroxi-vajsav-metil-észter
459 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott, 0,32-es Rf-értékű termék 2 ml dietil-éterrel készült oldatához 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 1,92 ml
1,9 mólos, n-butil-éterrel készült metil-magnéziumbromid-oldatot. Az elegyet 10 percig 0 °C hőmérsékleten tartjuk, majd hozzáadunk 1 ml telített, vizes ammónium-klorid-oldatot. A kapott elegyet dietil-éterrel kirázzuk, a dietil-éteres részt 1 normál sósavval, utána vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, és végül telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként dietil-éter és hexán elegyét használjuk, ily módon 375 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
d) lépés
3-Amino-4-ciklohexil-2(R, S)-metil-2-hidroxi-vajsav-metil-észter-hidroklorid
A fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldjuk 3 ml 4 nonnál, dioxános sósav-oldatban, és az oldatot félórán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról dietil-étert desztillálunk le. Ily módon 275 mg sárga színű, habos anyagot kapunk.
e) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-2(R, S)-metil-nor-CSta-metil-észter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 255 mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott termékből, és 375 mg, a 8. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva 321 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,68 (futtató elegy: C-rendszer).
A nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban ez a termék két csúcsból áll, az egyik csúcs retenciós ideje: 5,24 perc (68%), míg a másiké:
5,51 perc (32%), eluens: acetonitril és víz 60:40 arányú elegye. E két összetevőt félpreparatív nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás módszerrel választjuk szét. E kromatográfiás módszer adatai: 9,8x250 mm méretű, Zorbax C-8 fordított fázisú szilikagéllel töltött oszlop, áramlási sebesség: 6,3 ml/perc, eluens: acetonitril és víz 60:40 arányú elegye, detektálás: 254 nm hullámhossznál. A két összetevő keverékét körülbelül 20 mg anyagot tartalmazó minták formájában visszük fel az oszlopra, ily módon 172 mg kisebb retenciós idejű anyagot, és 97 mg nagyobb retenciós idejű anyagot kapunk, mindkettőt színtelen, szilárd anyagok formájában. Az így szétválasztott termékek a fentiekben említett, analitikai célú, nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban 5,20 és 5,53 perces retenciós időkkel jöttek le az oszlopról, mindkét termék tiszta volt (tisztaságuk nagyobb mint 98%).
A kisebb retenciós idejű termék 'H-NMR-spektruma (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm:
0,82 (t, 3H), 1,34 (s, 3H), 3,04 és 3,13 (dd, 1-1H),
3,13—3,34 (m), 3,59 (m, 4-5H), 3,78 (s, 3H), 4,32 (m, 2H), 4,51 (m, IH), 5,05 (m, IH), 6,36 (m, IH),
7,71 (m, IH), 7,14—7,35 (m, aromás).
A nagyobb retenciós idejű termék 'H-NMR-spektruma (CDCI3), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm:
0,89 (t, 3H), 1,39 (s, 3H), 3,04 (dd, IH), 3,60 (m,
4H), 3,76 (s, 3H), 3,92, 4,47 és 4,88 (m, 1-1H),
4,20-4,32 (m, 2H), 7,12-7,35 (m, aromás).
30. példa
MorfolinU-karbonil-Phe-Na-MeNle-nor-C-Sta-etilketon [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolin-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése metilcsoport,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése a-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése propionilcsoport.]
a) lépés
N-tercier-Butoxi-karbonil-N-metil-L-norleucin
1,0 g N-metil-L-norleucint (J. Chem. Soc., 1968, 930) feloldunk 11 ml dimetil-formamidban, és az oldathoz 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 2,1 ml trietilamint, majd 1,74 ml di-tercier-butil-dikarbonátot. Az elegyet 4 órán át 0 °C hőmérsékleten keverjük, majd
HU 207 869 Β éjszakán át hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni. Utána az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot feloldjuk telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldat és etil-acetát elegyében. A vizes részt elválasztjuk, etilacetáttal mussuk, és etil-acetát jelenlétében sósavval megsavanyítjuk. A szerves részt elválasztjuk, a vizes részt etil-acetáttal ismét kirázzuk, ezeket az etil-acetátos részeket egyesítjük, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 1,17 g sárga színű olajat kapunk.
b) lépés
N-tercier-Butoxi-karbonil-N-metil-L-norleucinbenzil-észter
750 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 7,5 ml vízmentes dimetil-formamidban, és az oldathoz 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 423 mg vízmentes kálium-karbonátot, és 364 μΐ benzil-bromidot. A reakcióelegyet jeges fürdőben keverjük, majd éjszakán át hagyjuk 20 °C hőmérsékletre melegedni. Másnap az elegyet dietil-éterrel hígítjuk, és az oldatlan részeket celiten kiszűrjük. A szú'rletró'l az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk etilacetátban, és az oldatot háromszor 10%-os, vizes lítium-klorid-oldattal, utána 1 normál nátrium-hidroxidoldattal, és végül telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 942 mg sárga színű olajat kapunk.
c) lépés
N-Metil-L-norleucin-benzil-észter-hidroklorid
915 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 3,5 ml 4 normál, dioxános sósavoldatban, és az elegyet 45 percig 25 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, ily módon 727 mg majdnem fehér színű, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,55 (futtató elegy: C-rendszer).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Na-MeNle-benzil-é$zter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 370 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termékből, és 378 mg, a 7. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva 476 mg opálos olajat kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,69 (futtató elegy: C-rendszer).
e) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Na.-MeNle
468 mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 10 ml metanol és 1 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 100 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 1 órán át 25 °C hőmérsékleten és 3,5xl05 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról toluolt, majd dietil-étert desztillálunk le, és végül megszárítjuk. Ily módon 365 mg majdnem fehér színű, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,6 (futtató elegy: C-rendszer).
f) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-N-a-MeNle-nor-C-Staetil-keton-benzil-éter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 78 mg, a 24. példa d) lépésében leírt módon kapott termékből és 93 mg, a fenti e) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva 148 mg majdnem fehér színű, habos anyagot kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel a következő reakciólépésben.
g) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nct-MeNle-nor-C-Sta-etilketon
142 mg, a fenti f) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 10 ml metanol és 1 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 150 mg 10%-os esontszenes palládium jelenlétében 20 órán át 25 °C hőmérsékleten és 3,5xl05 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról toluolt, majd dietil-étert desztillálunk le. és végül megszárítjuk. Ily módon 120 mg majdnen fehér színű, habos anyagot kapunk. Ezt az anyagot szilikagélen kromatografáljuk, mégpedig oly módon, hogy etanol és diklór-metán elegyével gradiens elúciót végzünk. Ily módon 93 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,48 (futtató elegy: C-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 5,29 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH = 2,l) 70: 30 arányú elegye]. Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,80 és 0,85 (t, 3-3H), 2,91 (s,
NCH3), 4,5 és 4,63 (m, 1-1H), 4,59 (m, 2H), 4,94,
5,39, 5,58, 6,62 és 8,00 (d, feltehetően a különböző rotamerek NH-rezonancia jelei), 7,15-7,38 (m, aromás).
31. példa
Morfolinil-karbonil-Plie-Nle-nor-C-Sta-metil-keton [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metílén-csoport, és Z1 jelentése acetilcsoport.]
a) lépés
4(S)-tercier-Butoxi-karbonil-amino-3(R)-benziloxi5-ciklohexil-2-pentanon
315 mg 3(S)-tercier-butoxi-karbonil-amino-2-(R)benziloxi-4-ciklohexil-butiraldehidet feloldunk 0 °C hőmérsékleten 4 ml dietil-éterben, és az oldathoz hozzádunk 530 μΐ 1,9 mólos n-butil-éterrel készült metil-magnézium-bromid-oldatot. 20 perc múlva az elegyhez hozzáadunk további 530 μΐ Grignard-reagenst, majd 10 perccel ezután a reakciót telített, vizes ammónium-klorid-oldat hozzáadása útján befagyasztjuk, és az elegyet dietil-étemel kirázzuk. A dietil-éteres részeket 1 normál sósavval, utána vizes nátrium26
HU 207 869 Β hidrogén-karbonát-oldattal, és végül telített nátriumklorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 580 mg sárga színű olajat kapunk. Ezt az anyagot feloldjuk 5 ml dietil-éterben, és hozzáadunk 1 ml krómsav-oldatot (Org. Syn. Coll. Vol. 5, 310). Félóra múlva az elegyet dietil-éterrel hígítjuk, az oldatot négyszer 5 ml 1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 250 mg világossárga színű olajat kapunk, amelyet szilikagélen kromatografálva tisztítunk, eluensként dietil-éter és hexán elegyét használjuk. Ily módon 125 mg színtelen olajat kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,24 (futtató elegy: dietil-éter és hexán 1:4 arányú elegye).
b) lépés
4(S)-Amino-3(R)-benziloxi-5-ciklohexil-2-pentanon-hidroklorid
120 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 3 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatban, és az oldatot 1,2 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról háromszor dietil-étert desztillálunk le, majd megszárítjuk. Ily módon 100 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,22 (futtató elegy: C-rendszer, a minták felcseppentése után a futtató lemezeket ammónia gőzöknek tesszük ki, majd ezután futtatjuk).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-metil-keton-benzil-éter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 95 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből és 150 mg, a 8. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva 180 mg halványsárga színű, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,30 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-metil-keton
180 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 3 ml metanol és 1 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 180 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 24 órán át 25 °C hőmérsékleten és 3,5xl05 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról toluolt desztillálunk le, majd megszárítjuk. Az így kapott, 160 mg súlyú, színtelen, habos anyagot szilikagélen kromatografáljuk, mégpedig oly módon, hogy etanol és diklór-metán elegyével gradiens elúciót végzünk. Ily módon 55 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,37 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,l) 70:30 arányú elegye], 'H-NMR-spektrum (CDCI3), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,86 (t, 3H), 2,17 (s, 3H), 3,05 és
3,09 (dd, 1-1H), 3,24 és 3,59 (ra, 4-4H), 3,89,4,08,
4,15, 4,47 és 4,55 (m, 1-1H), 4,92, 6,11 és 6,48 (d, 1-1H), 7,13-7,35 (m, aromás).
32. példa
Morfollnil-karbonil-Phe-O-EtSer-nor-C-Sta-N-metil-amid [(I) általános képletű vegyüiet, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése etoxi-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése N-metil-karboxamido-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-EtSer-nor-C-Sta-N-metil-amid-tercier-butil-dimetil-szilil-éter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 70 mg, a 14. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből és 75 mg morfolinil-karbonil-Phe-O-EtSer-ből kiindulva 50 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-EtSer-nor-C-Sta-N-metil-amid mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 2 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatban, és az oldatot 1 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról dietilétert desztillálunk le, és megszárítjuk. Ily módon 40 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,46 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,1) 50:50 arányú elegye].
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,28 (futtató elegy: C-rendszer), ’H-NMR-spektrum (DMSO-dg), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,12 (t, 3H), 2,57 (d, 3H), 2,81 és 3,03 (dd, 1-1H), 3,20 (m, 4H), 3,45 (m), 3,78 és 4,13 (m, 1-1H), 4,35 (m, 2H), 5,74, 6,68, 7,54 és 8,08 (d, 1-1H), 7,12-7,35 (m, aromás).
33. példa
Morfolinll-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropilketon [(I) általános képletű vegyüiet, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése-COCH(CH3)2.]
a) lépés
5(S)-tercler-Butoxi-karbonil-amino-4(R)-benziloxi6-ciklohexil-2-metil-3-hexánon
400 mg 3(S)-tercier-butoxi-karbonil-amino-2(R)benziloxi-4-ciklohexil-butiraldehidet feloldunk 3 ml dietil-éterben, és az oldathoz 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 1,17 ml 2,0 mólos, dietil-éteres izopropil-magnézium-bromid-oldatot. 20 perc múlva az
HU 207 869 Β elegyhez további 0,6 ml Grignard-reagenst adunk, majd 5 perccel később az elegyet 1 ml telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 350 mg tiszta olajat kapunk, amelyet feloldunk 2 ml dietil-éterben, és hozzáadunk 2 ml krómsav-oldatot (Org. Syn. Coll. Vol. V, 310). Félóra múlva az elegyet dietil-éterrel kirázzuk, a szerves részt vizes nátrium-hidroxid-oldattal, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 250 mg sárga színű olajat kapunk, amelyet szilikagélen kromatografálva tisztítunk, eluensként dietil-éter és hexán elegyét használjuk. Ily módon 125 mg világossárga színű olajat kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,33 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1:4 arányú elegye).
b) lépés
5(S)-Amino-4(R)-benziloxi-6-áklohexil-2-metil-3hexanon-hidroklorid
120 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 2 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatban, és az oldatot 1,2 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról dietil-étert desztillálunk le. Ily módon 95 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,4 (futtató elegy: C-rendszer, a minták felcseppentése után a futtató lemezeket ammónia gőzöknek tesszük ki, majd ezután futtatjuk).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropilketon-benzil-éter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 95 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből és 136 mg, a 8. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva 160 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,56 perc (eluens: acetonitril és víz 85:15 arányú elegye),
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropilketon
155 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 3 ml metanol és 3 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 18 órán át 25 °C hőmérsékleten 155 mg 10%-os csontszenes palládiummal rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról toluolt, majd dietil-étert desztillálunk le, és végül megszárítjuk. Ily módon 100 mg halványsárga színű, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,40 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát).
1 H-NMR-spektrum (CDC13), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,87 (t, 3H), 1,08 és 1,12 (d, 3-3H), 3,09 (m, 2H), 3,62 (m, 4H), 4,15 (m, IH), 4,32 (s, IH), 4,99,
6,38 és 6,51 (d, 1—IH), 7,15-7,37 (m, aromás).
34. példa
Morfolinil-karboni.l-Phe-Nle-nor-C-Sta-izobutil-keton [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
K2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexil-csoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izovalerilcsoport.]
a) lépés
6(S)-tercier-Butoxi-karbonil-amino-5(R)-benziloxi7~ciklohexil-2-m.etil-4-hexanon
1,00 g 3(S)-tercier-butoxi-karbonil-amino-2-(R)benziloxi-4-ciklohexil-butiraldehidet feloldunk 10 ml dietil-éterben, és az oldathoz 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 1,6 ml 2,0 mólos, dietil-éteres izobutil-magnézium-kloridot. Félóra múlva az elegyhez hozzáadunk további 3 ml Grignard-reagenst, és hagyjuk az oldatot 25 °C hőmérsékletre melegedni. További 1 óra múlva a reakciót vizes ammónium-klorid-oldat hozzáadásával befagyasztjuk, és az elegyet dietil-éterrel kirázzuk. A dietil-éteres részt telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 1,02 g tiszta olajat kapunk. Ezt az anyagot feloldjuk 20 ml dietil-éterben, és hozzáadunk 5 ml krómsav-oldatot (Org. Syn. V, 310). Az elegyet 1 órán át 0 °C hőmérsékleten, majd további félórán át 25 °C hőmérsékleten keverjük, majd dietil-éterrel hígítjuk. Az oldatot 1 normál nátriumhidroxid-oldattal, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A kapott nyersterméket szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, eluensként dietil-éter és hexán elegyét használjuk. Ily módon 440 mg színtelen olajat kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,33 (futtató elegy: dietil-éter és hexán 1:3 arányú elegye).
b) lépés
6(S)-Amino-5(R)-benziloxi-7-ciklohexil-2-metU-4hexanon-hidroklorid
430 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 3 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatban, és az oldatot 1,2 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról háromszor dietil-étert desztillálunk le, majd megszárítjuk. Ily módon 325 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,29 (futtató elegy: C-rendszer, a minták felcseppentése után a futtató lemezeket ammónia gőzöknek tesszük ki, majd ezután futtatjuk).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izobutil-keton-benzil-észter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 150 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből és 207 mg, a 8. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva 280 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
HU 207 869 Β
d) lépés
Morfotinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izobutil-keton
300 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 5 ml metanol és 5 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 300 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 18 órán át 25 °C hőmérsékleten, 3,5x115 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról toluolt desztillálunk le. Az így kapott anyagot szilikagélen kromatografáljuk, mégpedig oly módon, hogy etanol és diklór-metán elegyével gradiens elúciót végzünk. Ily módon 180 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 4,40 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,1) 70: 30 arányú elegye].
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,31 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát). 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,84 (t, 3H), 0,90 és 0,92 (d, 3-3H),
2,10 (szeptett, IH), 2,38 és 2,53 (dd, 1-1H), 3,04 (m, 2H), 3,26 és 3,58 (m, 4-4H), 4,06 (s, IH), 4,22,
4,52 és 4,60 (m, 1-1H), 5,26, 6,57 és 7,00 (d,
1-1H), 7,1-7,3 (m, aromás).
35. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-metoxiamid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfoÜnil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése N-metoxi-karboxamido-csoport.]
a) lépés
Boc-nor-C-Sta-metoxi-amid
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 54 mg metoxi-amin-hidrokloridból és 98 mg, a 4668769 számú amerikai szabadalmi leírás 1. példájának g) lépésében leírt módon kapott Boc-nor-C-Sta-ból kiindulva 102 mg nyersterméket kapunk, amelyet szilikagélen kromatografálva tisztítunk, eluensként etilacetát és hexán elegyét használjuk. Ily módon 40 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
b) lépés nor-C-Sta-Metoxi-atnid-hidroklorid mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket 2 ml 4 normál, dioxános sósav-oldattal 1,2 órán át 25 °C hőmérsékleten keverünk, majd az oldószert ledesztilláljuk. Az így kapott, színtelen, szilárd anyagot dietil-éterrel háromszor mossuk, ily módon 25 mg szilárd anyagot kapunk.
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-N-hidroxi-szukcinimid-észter
1,05 g, a 8. példa a) lépésében leírt módon kapott terméket feloldunk 5 ml dimetoxi-etánban, és az oldathoz 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 350 mg Nhidroxi-szukcinimidet és 573 mg diciklohexil-karbodiimidet.
A reakcióelegyet jeges fürdőben keverjük, és hagyjuk, hogy éjszakán át 18 °C hőmérsékletre melegedjen. Utána az oldatlan részeket kiszűrjük, dimetoxi-etánnal mossuk, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot etil-acetátban szuszpendáljuk. Az etil-acetátos szuszpenziót telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 960 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
d) lépés
Morfoliml-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-metoxiamid mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 0,3 ml dimetoxi-etánban, és az oldathoz 25 °C hőmérsékleten hozzáadunk először 12 μΐ trietil-amint, majd 42 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket. Utána az elegyhez további 200 μΐ dimetoxi-etánt, majd 200 μΐ diklór-metánt adunk, és 22 órán át keverjük. Ezután az elegyet feloldjuk 30 ml etil-acetátban, az oldatot kétszer 1 ml 1 normál sósavval, majd kétszer 2 ml telített, vizes nátriumhidrogén-karbonát-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagélen kromatografáljuk, mégpedig oly módon, hogy etanol és diklór-metán elegyével gradiens elúciót végzünk. Ily módon 34 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,5 (futtató elegy: C-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 2,84 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH = 2,1) 60:40 arányú elegye], Ή-NMR-spektrum (CDC13), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,89 (t, 3H), 3,02 (dd, IH), 3,14 (m), 3,62 (m, 4H), 3,77, (s, 3H), 4,35, 4,60 és 5,01 (m, 1-1H), 7,13-7,38 (m, aromás), 9,57 (s, IH).
36. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Statol [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése hidroxi-metil-csoport.]
a) lépés
3(S)-Amino-2(R)-benziloxi-4-ciklohexll-l-butanol
108 mg, a 4668769 számú amerikai szabadalmi leírás 1. példájának j) pontjában leírt módon kapott 3(S)-tercier-butoxi-karbonil-amino-2(R)-benzil-oxi-4ciklohexil-l-butanolt feloldunk 0,5 ml dietil-éterben, és az oldatot 0 °C hőmérsékletre hűtjük. Ezután az oldatba fölös mennyiségű vízmentes, gáz alakú sósavat vezetünk, és az oldatot 2 órán át 25 °C hőmérsékleten
HU 207 869 Β keverjük. Utána az oldószert ledeszti Háljuk, ily módon 88 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,28 (futtató elegy: etil-acetát és hexán elegye).
b) lépés
3(S)-(Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-amino)-2(R)benziloxi -4 - ciklohexi l-ί-butanol) mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 500 μΐ dimetoxi-etánban, és az oldathoz 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk először 38 μΐ trietilamint, majd utána 132 mg a 35. példa c) lépésében leírt módon kapott terméket. 18 óra múlva az elegyről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán elegyét használjuk. Ily módon 139 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,25 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Statol mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket és 90 mg 10%-os csontszenes palládiumot öszszekeverünk 5 ml metanollal és 5 ml ecetsavval, és az elegyet 21 órán át 25 °C hőmérsékleten, 3,36xl05Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagélen kromatografáljuk, mégpedig oly módon, hogy etanol és diklórmetán elegyével gradiens elúciót végzünk. Ily módon 64 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,5 (futtató-elegy: C-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 4,95 perc (eluens: acetonitril és víz 50:50 arányú elegye).
'H-NMR-spektrum (CDC13), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,92 (t, 3H), 2,94 (dd, IH), 3,093,72 (átfedő m), 4,12-4,37 (m, körülbelül 3H), 4,79, 6,28 és 6,93 (d, 1-1H), 7,20-7,48 (m, aromás).
37. példa
MorfoUnil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-izobutil-keton [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése feniícsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izovalerilcsoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-izobutil-keton-benzil-éter
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 120 mg, a 34. példa b) lépésében leírt módon kapott termékből és 129 mg Mor-Phe-S-MeCys-ből kiindulva 114 mg színtelen, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,58 (futtató elegy: C-rendszer).,
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-c-Sta-izobutil-keton mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 1,0 ml hangyasavban, és az oldathoz hozzáadunk 100 mg palládiumkormot (ALFA Co.). Az elegyet éjszakán át keverjük, majd celiten átszűrjük, az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról toluolt desztillálunk le, és megszárítjuk. Ily módon 97 mg barna színű olajat kapunk, amelyet szilikagélen kromatografálva tisztítunk, mégpedig oly módon, hogy etanol és diklórmetán elegyével gradiens elúciót végzünk. Ily módon 23,5 mg színtelen, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,65 (futtató elegy: C-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,65 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH = 2,1) 70:30 arányú elegye]. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,90 és 0,92 (d, 3-3H), 2,10 (s,
3H), 2,14 (szeptett, IH), 2,38, 2,56, 2,65,2,92, 3,00 és 3,14 (dd, 1-1H), 3,14-3,37 (m), 3,60 (m, 4H), 3,97, 4,05 és 4,65 (m, 1-1H), 4,41-4,56 (m, 2H), 6,76 és 6,86 (d, 1-IH), 7,14-7,36 (m, aromás).
38. példa
Boc-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése tercier-butoxi-karbonil-amino-csoport,
M jelentése feniícsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropil-karbonil-csoport.]
a) lépés
Boc-Phe-S-MeCys
6,26 g S-metil-ciszteint 25 °C hőmérsékleten feloldunk 65 ml telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonátoldatban, majd az elegyhez hozzáadunk 35 ml tetrahidro-furánt. A kapott oldathoz egyszerre hozzáadunk 12,0 g N-tercier-butoxi-karbonil-L-fenil-alanin-hidroxi-szukcinimid-észtert. Félóra múlva az oldatot átöntjük egy választótölcsérbe, és etil-acetáttal kétszer kimossuk. Utána friss etil-acetátot adunk hozzá, és pHját 6 normál sósavval 1,1-re állítjuk. A szerves részt elválasztjuk, és a vizes részt további négyszer etil-acetáttal kirázzuk. Az egyesített szerves részeket kétszer 1 normál sósavval, majd utána telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 12,0 és színtelen, habos anyagot kapunk.
b) lépés
Boc-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter
1,0 g nor-C-Sta-izopropil-észtert feloldunk 20 ml diklór-metánban, és az oldathoz hozzáadunk először 1,57 g (1,0 egyenérték), a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket, utána 945 mg (1,5 egyenérték) hidroxi-benzotriazol-hidrátot, és végül 788 mg (1,0 egyenérték) l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid1
HU 207 869 Β hidrokloridot. A reakcióelegyet jeges fürdőben keverjük, majd éjszakán át hagyjuk 18 °C hőmérsékletre melegedni. Utána az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot feloldjuk etil-acetátban. Az oldószert kétszer 1 normál sósavval, ezután kétszer 1 normál nátrium-hidroxid-oldattal, és végül egyszer telített nátrium-kloridoldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon színtelen, szilárd anyagot kapunk, amelyet szilikagélen kromatografálva tisztítunk, eluensként etil-acetát és hexán elegyét használjuk. Ily módon színtelen, porszerű anyag formájában 1,85 g cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,60 (futtató elegy: C-rendszer).
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,94 (m), 1,29 és 1,30 (d, 3-3H), 1,39 (s, 9H), 2,13 (s, 3H), 2,64, 2,98, 3,03 és 3,15 (dd, 1-1H), 4,09 (d, IH), 4,30-4,50 (m, 3H), 4,90 (m, IH), 5,07 (szeptett, IH), 6,66 (m, IH), 6,86 (d, IH), 7,16-7,36 (m, aromás).
39. példa
Phe-S-MeCys-C-Sta-izopropil-észter-hidroklorid [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése aminocsoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hídroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropil-karbonil-csoport.]
500 mg, a 38. példa b) lépésében leírt módon kapott terméket feloldunk 3 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatban, és az oldatot 40 percig 25 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról dietil-étert desztillálunk le. Ily módon 460 mg majdnem fehér színű, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,25 (futtató elegy: C-rendszer, a futtatni kívánt mintához diklórmetánban trietil-amint adunk, majd az így kapott elegyet cseppentjük fel a vékonyréteg-kromatográfiás lemezre).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 4,05 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,1) 50:50 arányú elegye]. ‘H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,20 (átfedő d, 6H), 2,11 (s,
3H), 2,55, 2,82,2,93 és 3,18 (dd, 1-1H), 4,01, 4,08
4,23 és 4,57 (m, 1—IH), 7,30 (s, aromás), 5,38,7,96 és 8,89 (d, 1-1H), 8,18 (széles, 3H).
40. példa
4-Pikolinoil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése 4-pikolinoil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport].
A 38. példa b) lépésében leírt módon eljárva, azzal az eltéréssel, hogy a kiindulási amin-hidroklorid semlegesítéséhez 1,05 egyenértéknyi (54 μΐ) trietil-amint használunk, 200 mg, a 39. példában leírt módon kapott termékből és 45 mg piridin-4-karbonsavból (pikolinsavból) kiindulva 157 mg színtelen, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,52 (futtató elegy: C-rendszer).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 7,10 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,1) 50:50 arányú elegye]. 'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,18 és 1,20 (d, 3-3H), 2,09 (s,
3H), 2,60, 2,80 és 3,14 (dd, 1-1H), 4,00, 4,22, 4,49 és 4,78 (m, 1-1H), 4,87 (szeptett, IH), 5,35, 7,18, 8,42 és 8,90 (d, 1-1H), 7,26 (t, 2H), 7,37 (d, 2H), 7,67 (d, 2H), 8,70 (d, 2H).
41. példa
4-tercier-Butoxi-karboml-piperazinil-karbonilPhe-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése 4-tercier-butoxi-karbonil-piperazinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z* jelentése izopropil-karbonil-csoport.]
a) lépés
4-tercier-Butoxi-karboml-piperazinil-karbonilPhe-S-MeCys-metil-észter
A 38. példa b) lépésében leírt módon eljárva, és 245 mg S-metil-cisztein-metil-észterből és 500 mg tercier-butoxi-karbonil-piperazilin-karbonil-L-fenil-alaninból kiindulva 547 mg színtelen, habos anyagot kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel a következő reakciólépésben.
b) lépés
4-tercier-Butoxi-karbonil-piperazinil-karbonilPhe-S-MeCys
467 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket 0 °C hőmérsékleten feloldunk 1 ml dioxán és 0,5 ml víz elegyében, és az oldathoz hozzáadunk 33 mg lítium-hidroxidot. 2,5 óra múlva az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk vízben, és az oldatot dietil-étenel kirázzuk. Ezután a vizes részhez etil-acetátot adunk, majd a vizes rész pH-ját 1 normál sósavval 1-re állítjuk, ezután etil-acetáttal négyszer kirázzuk, az etil-acetátos részeket vízzel mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 417 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
c) lépés
4-iercier-Butoxi-karbonil-piperazinil-karbonilPhe-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter
HU 207 869 Β
A 36. példa b) lépésében leírt módon eljárva, és 100 mg nor-C-Sta-izopropil-észterből és 203 mg, a 41. példa b) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva 182 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,49 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát). 'H-NMR-spektrum (CDC13), 250 MHz, részleges adatok, delta ppm: 1,26 és 1,27 (d, 3-3H), 1,45 (s, 9H),
2,10 (s, 3H), 2,73 (dd, IH), 3,00 (m, 2H), 3,27 és
3,36 (m, összesen 9H), 3,77 (d, IH), 4,10 (dd, IH),
4,44 (m, IH), 4,81 (d, IH), 5,07 (szeptett, IH), 6,84 és 6,93 (d, 1-IH), 7,18-7,39 (m, aromás).
42. példa
Piperazinil-karbonll-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése piperazinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.] mg, a 41. példában leírt módon kapott terméket feloldunk 2 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatban, és az oldatot 50 percig 25 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról dietil-étert desztillálunk le. Ily módon 31 mg majdnem fehér színű, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,2 (futtató elegy: C-rendszer, a minták felcseppentése után a futtató lemezeket ammónia gőzöknek tesszük ki, majd ezután futtatjuk),
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 2,98 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH-2,1) 50:50 arányú elegye]. 'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,18 és 1,20 (d, 3-3H), 2,10 (s,
3H), 4,00 és 4,21 (m, 1-1H), 4,40 (m, 2H), 4,85 (szeptett, IH), 5,33, 6,90, 7,63 és 8,22 (d, 1-1H),
7,13-7,33 (m, aromás).
43. példa
Morfolinil-karbonil-hexahidro-Phe-S-MeCys-norC-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése ciklohexilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z* jelentése izopropil-karbonil-csoport].
a) lépés
Morfolinil-karbonil-hexahidro-L-fenil-alanin
4,0 g, a 7. példa c) lépésében leírt módon kapott terméket feloldunk 50 ml metanol és 5 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 1,0 g 10%-os csontszenes ródium jelenlétében 3,5 órán át 25 °C hőmérsékleten,
3,5xl05 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról dietil-étert desztillálunk le. Az így kapott, 4,15 g súlyú, színtelen, habos anyagot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk. A szilikagél-oszlopot etil-acetáttal mint oldószerrel töltjük, majd először ugyancsak etil-acetáttal eluáljuk, majd etanol és diklór-metán elegyével gradiens elúciót végzünk. Ily módon 704 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,4.
b) lépés
Morfolinil-karbonil-hexahidro-Phe-hidroxi-szukcinimid-észter
700 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 5 ml dimetoxi-etánban, és 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk először 283 mg N-hidroxiszukcinimidet, majd 507 mg diciklohexil-karboimidet. Ezután hagyjuk, hogy az elegy éjszakán át 18 °C hőmérsékletre melegedjen. Másnap az oldatlan részeket kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot feloldjuk etil-acetátban. Ezt az oldatot kétszer telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 704 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
c) lépés
Morfolinil-karbonil-hexahidro-Phe-S-MeCys
442 mg S-metil-ciszteint feloldunk 4,6 ml telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldatban, és hozzáadunk először 2,5 ml tetrahidro-furánt, majd 890 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket. Az elegyet 20 percig 25 °C hőmérsékleten keverjük, majd vízzel hígítjuk és etil-acetáttal kétszer mossuk. Ezután a vizes rész pH-ját etil-acetát jelenlétében, 1 normál sósavval 1,1-re állítjuk, a szerves részt elválasztjuk, és a vizes részt etil-acetáttal négyszer kirázzuk. Az egyesített szerves részeket kétszer 1 normál sósavval, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnéziumszulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 796 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
d) lépés
Morfolinil-karbonil-hexahidro-Phe-S-MeCys-CSta-izopropil-észter
A 38. példa b) lépésében leírt módon eljárva, és 94 mg nor-C-Sta-izopropil-észterből és 170 mg, a fenti
c) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva 178 mg színtelen, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,83 (futtató elegy: C-rendszer)
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 4,16 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH = 2,1) 70:30 arányú elegye]. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,93 (m, 4H), 1,26 és 1,27 (d,
3-3H), 2,13 (s, 3H), 2,76 és 3,11 (dd, 1-1H), 3,39 (m, 4H), 3,70 (m, 4H), 4,08 (széles, IH), 4,28 (m,
IH), 4,41 (m, 2H), 4,82, 6,83 és 6,93 (d, 1-1H),
5,04 (szeptett, IH).
HU 207 869 Β
44. példa
Boc-Pro-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-lzopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése tercier-butoxi-karbonil-(s)-pirrolidil-2karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z] jelentése izopropoxi-karbonil-csoport,]
A 38. példa b) lépésében leírt módon eljárva, de azzal az eltéréssel, hogy az amin-hidroklorid semlegesítéséhez 1,2 egyenértéknyi (71 μΐ) trietil-amint használunk, és 233 mg, a 39. példában leírt módon kapott termékből és 101 mg tercier-butoxi-karbonil-L-prolinból kiindulva 237 mg színtelen, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,66 (futtató elegy: C-rendszer).
’H-NMR-spektrum (CDC13), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,27 és 1,29 (d, 3-3H), 1,48 (s, 9H), 2,13 (s, 3H), 2,67 és 3,04 (dd, 1-1H), 4,44 (m, IH), 4,62 (m, 2H), 5,07 (szeptett, IH), 6,42 és 6,60 (d, IH), 7,1-7,4 (m, aromás).
45. példa
Pro-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter-hidroklorid [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése (s)-2-pirrolidil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport].
124 mg, a 44. példában leírt módon kapott tennéket feloldunk 3 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatban, és az oldatot 40 percig 25 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, ily módon 114 mg halványsárga színű, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,39 (futtató elegy: C-rendszer, a minták felcseppentése után a futtató lemezeket ammónia gőzöknek tesszük ki, majd ezután futtatjuk).
’H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,27 és 1,29 (d, 3-3H), 2,09 (s, 3H), 2,56 (dd, IH), 4,00, 4,08, 4,22, 4,47 és 4,64 (m, 1-1H), 4,85 (szeptett, IH), 5,37, 7,73, 8,41 és 8,78 (d, 1-1H), 7,13—7,33 (m, aromás).
46. példa
O-Szukcinoil-morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCysnor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése a-szukcinoiloxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése izopropil-karbonil-csoport.]
101 mg, a 17. példa e) lépésében leírt módon kapott terméket feloldunk 0,8 ml diklór-metánban, és az oldathoz hozzáadunk 16 mg borostyánkősav-anhidridet és 13 μΐ piridint. Az elegyet 18,5 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük, majd hozzáadunk 20 mg dimetilamino-piridint. 4 órával később az elegyhez hozzáadunk 40 mg borostyánkősav-anhidridet. További 20 perces keverés után az elegyet etil-acetáttal hígítjuk, és háromszor 1 normál sósavval, majd telített nátriumklorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként először etil-acetátot, majd etanol és diklór-metán 4:96 arányú elegyét használjuk. Ily módon 59 mg színtelen, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,1 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 2,84 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,1) 70:30 arányú elegye]. ’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,94 (m), 1,24 és 1,27 (d, 3-3H),
2,10 (széles, 3H), 2,64-3,54 (m), 3,6 (m, 4H), 4,23,
4,53 és 4,67 (m, 1-1H), 4,96 (széles, IH), 4,98 (szeptett, IH), 5,14 (széles IH), 6,65 (d, IH), 7,167,39 (m, aromás)·.
47. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-N&-MeNle-nor-c-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése metilcsoport,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése izopropil-karbonil-csoport.]
A 38. példa b) lépésében leírt módon eljárva, és 76 mg nor-C-Sta-izopropil-észterből, és 126 mg, a 30. példa e) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva 117 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,68 (futtató elegy: C-rendszer)
Az így kapott keverékből a kívánt terméket az alábbi körülmények között végzett, preparatív nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás módszerrel különíthetjük el: 9,8x250 mm méretű Zorbax C-8 fordított fázisú szilikagéllel töltött oszlop, áramlási sebesség: 6,3 ml/perc, eluens: acetonitril és víz 75:25 arányú elegye. A kívánt tennék retenciós ideje: 5,61 perc, míg a nemkívánt, inaktív vegyület retenciós ideje: 6,42 perc.
Ily módon 60 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
Retenciós ideje az analitikai nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 4,98 perc (eluens: acetonitril és víz 75:25 arányú elegye).
’H-NMR-spektrum (CDC13), 250 MHz, részleges ada33
HU 207 869 Β tok, delta, ppm: 0,83 (t, 3H), 1,23 és 1,26 (d, 3-3H), 2,70 (s, 3H), 2,95 és 3,09 (dd, 1-1H), 3,22-3,45 (m, 4H), 3,65 (m, 4H), 4,02 és 4,05 (d, összesen IH), 4,95 (m, 2H), 5,15 és 7,75 (d, 1-1H), 7,14-7,38 (m, aromás).
48. példa
Piperiáiml-karbonil-Phe-S-Mecys-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése piperidinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Piperidinil-karbonil-Phe-benzil-észter
1,74 g, a 7. példa a) lépésében leírt módon kapott terméket feloldunk 13 ml diklór-metánban, és az oldathoz 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 0,61 ml piperidint. Negyedóra múlva az elegyhez további 0,1 ml piperidint adunk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán elegyét használjuk. Ily módon 1,61 g színtelen olajat kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,36 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1: 1 arányú elegye).
b) lépés
Piperidinil-karbonil-Phe
1,6 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk metanol és ecetsav 10:1 arányú elegyében (50 ml), és az oldatot 0,6 g 10%-os csontszenes palládium jelenlétében félórán át 25 °C hőmérsékleten 3,5xl05 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról először toluolt, majd dietil-étert desztillálunk le. Ily módon 1,17 g színtelen, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,50 (futtató elegy: C-rendszer).
c) lépés
Boc-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter
A 38. példa b) lépésében leírt módon eljárva, és 900 mg nor-C-Sta-izopropil-észterből és 871 mg tercier-butoxi-karbonil-S-metil-L-ciszteinből kiindulva 1,04 g színtelen, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,42 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1: 1 arányú elegye).
d) lépés
S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter-hidroklorid
1,03 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 6 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatbn, az oldatot 45 percig 25 °C hőmérsékleten keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 998 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,48 (futtató elegy: C-rendszer).
e) lépés
Piperidinil-karboni.l-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-Ízopropil-észter
A 38. példa b) lépésében leírt módon eljárva, de azzal az eltéréssel, hogy az amin-hidroklorid semlegesítéséhez trietil-amint használunk, és 130 mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott termékből és 90 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva 117 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,44 (szilikagélen, futtató oldószer): etil-acetát). ’H-NMR-spektrum (CDC13), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,27 és 1,29 (d, (3—3H), 2,08 (s,
3H), 2,75, 2,92, 3,13 és 3,31 (dd, 1-1H), 3,20 (m),
4,11 és (s, 2H), 4,33-4,58 (m), 4,72 és 6,90 (d,
1-1H), 5,09 (szeptett, IH), 7,19-7,4 (m, aromás).
49. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-(2-hidroxiizobutil)-keton [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése 3-hidroxi-izovaleril-csoport.]
a) lépés
6(S)-tercier-Butoxi-karbonil-amino-5(R)-benziloxi7-ciklohexil-2-metil-2-hidroxi-4-hexanon
475 mg 3(S)-tercier-butoxi-karbonil-amino-2-(R)benziloxi-4-ciklohexil-butiraldehidet -78 ’C hőmérsékleten hozzáadunk 2,5 egyénértéknyi mennyiségű Iitio-etil-acetáthoz (amelyet úgy állítunk elő, hogy 392 pl diizopropil-amin 5 ml tetrahidro-furánnal készült oldatához 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 1,75 ml 1,6 mólos, hexános n-butil-lítium-oldatot, majd a kapott elegyhez -78 °C hőmérsékleten 272 pl etil-acetátot adunk), a reakcióelegyet 10 percig-78 °C hőmérsékleten, majd további 10 percig 0 °C hőmérsékleten keverjük, és ezután a reakciót vizes ammóniumklorid-oldat hozzáadásával befagyasztjuk. A termékeket dietil-éteres kirázással különítjük el, ily módon 548 mg izomer keveréket kapunk, vékonyréteg-kromatográfiás Rrértékek: 0,35 és 0,28 (futtató elegy: dietiléter és hexán 1: 1 arányú elegye). Az így kapott terméket, valamint egy másik hasonló kísérletben kapott további 217 m g ugyanezen terméket egyesítjük, feloldjuk 8 ml tetrahidro-furánban, és 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 5,9 ml 1,3 mólos, dietil-éteres metil-lítium-oldatot. Az elegyet 5 percig keverjük, majd a reakciót vizes ammónium-klorid-oldat hozzáadásával befagyasztjuk. Dietil-éteres kirázás útján 702 mg sárgás színű olajat kapunk. Vékonyréteg-kromatográfiás Rfértéke: 0,2 (futtató elegy: dietil-éter és hexán 1: 1 arányú elegye).
Az így kapott anyagot feloldjuk 25 ml acetonban, és hozzáadunk 2 ml krómsav-oldatot (Org. Syn. Coll. Vol. v, 310). Ezután az oldószert ledesztilláljuk, a ma1
HU 207 869 Β radékot feloldjuk vízben, és a vizes oldatot etil-acetáttal többször kirázzuk. A szerves részt magnézium-szulfáton megszárítjuk, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk. Ily módon 172 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,34 (futtató elegy: dietil-éter és hexán 1:1 arányú elegye).
b) lépés
6(S)-AmÍno-5(R)-benziloxÍ-7-ciklohexil-2-metil-2hidroxi-4-hexanon-hidroklorid
124 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket 0 °C hőmérsékleten feloldunk 0,5 ml trifluorecetsavban, az oldatot 20 percig keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk. A maradékról először toluolt, utána dietil-étert, és végül 1,1 egyenértéknyi mennyiségű, dioxános sósav-oldatot tartalmazó dietil-étert desztillálunk le, majd megszárítjuk. Ily módon 106 mg sárgás színű olajat kapunk.
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-(2-h.ldroxiizobutil)-keton-benzil-éter
A 38. példa b) lépésében leírt módon eljárva, de azzal az eltéréssel, hogy az amin-hidroklorid semlegesítése céljából az elegyhez trietil-amint adunk, és 104 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből és 106 mg, a 8. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből kiindulva 60 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,4 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát).
d) lépés
Morfolinil-karboml-Phe-Nle-nor-C-Sta-(2-hidroxiizobutil)-keton mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 5 ml ecetsav és 5 ml metanol elegyében, és az oldatot 100 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 20 órán át 25 °C hőmérsékleten, 3,5x115 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, eluensként etil-acetát és hexán elegyét használjuk. Ily módon 20 mg színtelen, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,22 (szilikagélen futtató oldószer: etil-acetát). ‘H-NMR-spektrum (CDC13), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,88 (t, 3H), 1,27 (s, 6H), 2,76 és
2,87 (d, 1-1H), 3,00 és 3,16 (dd, IH), 3,26 (m, 4H),
3,63 (m, 4H), 4,16 (széles, IH), 4,23 (m, IH), 4,51 (m, 2H), 5,00, 6,62 és 6,73 (d, I-1H), 7,13-7,36 (m, aromás).
50. példa
4-Hidroxi-piperidinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor·C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyűlet, ahol Z jelentése 4-hidroxi-piperidinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése a-hidroxi-metilén-csoport, és Z‘ jelentése izopropoxi-karbonil-csoport].
mg karbonil-diimidazol és 20 mg. imidazol 0,3 ml diklór-metánnal készült oldatához 0 °C hőmérsékleten hozzáadjuk 150 mg, a 39. példában leírt módon kapott termék és 40 μΐ trietil-amin 0,8 ml diklórmetánnal készült, és 0 °C hőmérsékletre lehűtött oldatát, majd az így kapott oldatot 1 órán át 0 °C hőmérsékleten keverjük. Ezután hozzáadjuk 25 mg 4hidroxi-piperidin 0,3 ml diklór-metánnal készült oldatát, és a reakcióelegyet másfél órán át 0 ’C hőmérsékleten, majd 20 órán át 20 ’C hőmérsékleten keverjük. Ezután etil-acetáttal hígítjuk, az oldatot kétszer 1 normál sósavval, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, ily módón 26,1 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,22 (szilikagélen, futtató oldószer: etil-acetát).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 3,10 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,1) 60:40 arányú elegye]. ‘H-NMR-spektrum (CDC13), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,27 és 1,29 (d, 3-3H), 2,10 (s,
3H), 2,73 és 3,30 (dd,l-lH), 3,03 (m, 3-4H), 3,58 (m, 2H), 3,87 (m, IH), 4,10 (ra, IH), 4,45 (m, 3H),
4,82 (d, IH), 5,08 (szeptett, IH), 6,91 és 7,09 (d,
1-1H),7,19-7,40 (m, aromás).
57. példa (S)-(Boc-Phe-His-amino )-2( S)-azido-4-ciklohexilvajsav-metil-észter és a megfelelő 3(R),2(R)-izomer keveréke [(I) általános képletű vegyűlet, ahol Z jelentése tercier-butoxi-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése imidazol-4-il-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése β-azido-metilén-csoport, és
Z* jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Racém-3(S)-tercier-butoxi-karbonil-amino-4-ciklohexil-2(R)-hidroxi-vajsav-metil-észter
N-tercier-butoxi-karbonil-(S)-3-amino-(R)-2-hidroxi-4-fenil-butironitril és a megfelelő 2-(S)-izomer 80:20 arányú elegyét (10 g, előállítását lásd a 4668769 számú amerikai szabadalmi leírásban) 80 ml dioxán, 30 ml víz és 30 ml tömény sósav elegyével 18 órán át forraljuk. Utána az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk vízben, és az oldatot, kloroformmal háromszor mossuk. Ezután a vizes részt jeges fürdőben lehűtjük, és pH-ját sósavval 7,5-re állítjuk. A kivált csapadékot kiszűrjük, vízzel, majd acetonnal mossuk és megszárítjuk. Ily módon 4,10 g világoszöldes színű, szilárd anyagot kapunk. Ezt a terméket feloldjuk 40 ml dioxán és 20 ml víz elegyében, az oldat
HU 207 869 Β pH-ját nátrium-hidroxiddal 11-re állítjuk, és az elegyhez hozzáadunk 5,85 ml di-tercier-butil-dikarbonátot. A reakciőelegy pH-ját nátrium-hidroxid segítségével 9,5 és 11,2 között tartjuk, majd másfél óra múlva az oldószert részlegesen ledesztilláljuk. A maradék vizes oldatot dietil-éterrel háromszor mossuk, majd etil-acetát jelenlétében pH= 1,0-ra savanyítjuk. A szerves részeket elválasztjuk, a vizes részt további etil-acetáttal kirázzuk, majd az etil-acetátos részeket nátrium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 4,7 g világossárga színű, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,38 (futtató elegy: C-rendszer).
Ezt a képletet feloldjuk 100 ml metanol és 12 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 1,1 g 10%-os csontszenes ródium jelenlétében 5,5 órán át 25 °C hőmérsékleten, 4,06xl05 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, ily módon 4,58 g sárga színű, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,45 (futtató elegy: C-rendszer).
Ezt az anyagot feloldjuk dietil-éterben, és fölös, dietil-éteres diazo-metán-oldatot adunk hozzá. Utána a fölös diazo-metán elbontása céljából ecetsavat adunk az elegyhez, majd az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, eluensként etil-acetát és hexán elegyét használjuk. Ily módon 4,3 g viasszerű, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,5 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1: 1 arányú elegye).
[a]§=lényegében 0 (kloroform, c = 1,1).
b) lépés
Racém 3(S)-tercier-butoxi-karbonil-amino-4-ciklohexil-2(S)-azido-vajsav-metil-észter g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termék,
4,16 g trifenil-foszfin és 12,1 mmól hidrazosav (amelyet nátrium-azid és kénsav felhasználásával benzol és víz kétfázisú elegyében állítunk elő, majd a benzolos részt nátrium-szulfáton megszárítjuk, és bázis-mérőoldattal megtitráljuk) 60 ml benzollal készült oldatához 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 2,49 ml azodikarbonsav-dietilésztert. A reakcióelegyet félórán át keverjük, majd az oldatlan részeket kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, eluensként dietil-éter és hexán elegyét használjuk. Ily módon 1,02 g viasszerű, majdnem fehér színű, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,48 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1: 3 arányú elegye).
c) lépés
Racém 3(S)-amino-4-ciklohexil-2(S)-azido-vajsavmetil-észter-hidroklorid
430 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 15 ml 4 normál, dioxános sósav-oldatban, az oldatot 1 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 355 mg majdnem fehér színű, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,22 (futtató elegy: C-rendszer).
d) lépés
3(S)-[Boc-Phe-His(imBoc)-aminoJ-2(S)-azido-4ciklohexil-vajsav-metil-észter és a megfelelő 3(R), 2(R)-izomer 1:1 arányú keveréke
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 340 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termékből és 710 mg Boc-Phe-His(imBoc)-ból kiindulva színtelen, habos anyag formájában 620 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértékek: 0,45 és 0,47 (futtató elegy: etanol és diklór-metán 5:95 arányú elegye).
e) lépés
3(S)-(Boc-Phe-His-amino)-2(S)-azido-4-ciklohexilvajsav-metil-észter és a megfelelő 3(R), 2(R) izomer keveréke
380 mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk ecetsav és víz 5:1 arányú elegyében (10 ml), az oldatot 4 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról először toluolt, majd dietil-étert desztillálunk le, és végül megszárítjuk. Ily módon 280 mg világossárga színű, habos anyagot kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,37 (s, 9H), 3,76 és 3,78 (s, körülbelül 1:1 arányban, összesen 3H), 6,80 (s, IH),
7,53 és 7,55 (s, 1: 1, összesen IH).
52. példa
3(S)-(Boc-Phe-His-amino)-2(S)-amino-4-ciklohexil-vajsav-metil-észter és a megfelelő 3(R), 2(R)izomer keveréke [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése tercier-butoxi-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése imidazol-4-il-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése β-amino-metilén-csoport, és Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
275 mg, az 51. példa d) lépésében leírt módon kapott terméket feloldunk 20 ml etanol és 0,5 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 100 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 3 órán át 25 °C hőmérsékleten, 3,5xl05 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalitázort kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 240 mg világosbarna színű, szilárd anyagot kapunk.
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 5,64 és 7,01 perc [eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH = 2,1) 60: 40 arányú elegye]. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,33 és 1,35 (s, összesen 9H), 3,72 (s, összesen 3H), 6,78 (s, összesen IH).
53. példa
3(S)-(Boc-Phe-His-amino)-2(R)-azido-4-ciklohexilvajsav-metil-észter és a megfelelő 3(R), 2(R) izomer [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése tercier-butoxi-karbonil-amino-csoport.
HU 207 869 Β
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése imidazol-4-il-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-azido-metilén-csoport, és
Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Racém 3(S)-tercier-butoxi-karbonil-amino-4-ciklohexil-2(S)-benziloxi-vajsav-metil-észter
600 mg, az 51. példa a) lépésében leírt módon kapott termék, 700 mg benzoesav és 1,5 g trifenil-foszfin 5 ml tetrahidro-furánnal készült oldatához 25 °C hőmérsékleten hozzáadunk 0,9 ml azodikarbonsav-dietil-étert. Másfél óra múlva az elegyhez hozzáadunk további 230 mg benzoesavat, 0,5 g trifenil-foszfint és 0,3 ml azodikarbonsav-dietil-észtert. 3 órával később az elegyet 0 °C hőmérsékletre hűtjük, és 12 órán át ezen a hőmérsékleten tartjuk. Utána az elegyet szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, eluensként etil-acetát és hexán elegyét használjuk. Ily módon 509 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,41 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1:3 arányú elegye).
b) lépés
Racém 3(S)-tercier-butoxi-karbonil-amino-4-ciklohexil-2 (S)-hidroxi-vajsav-metil-észter
550 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 5 ml metanolban, és az oldathoz 25 °C hőmérsékleten hozzáadunk 9 mg vízmentes kálium-karbonátot. 1,8 óra múlva az elegyről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk. Ily módon 326 mg olajos, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,18 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1:3 arányú elegye).
c) lépés
Racém 3(S)-tercier-butoxi-karbonil-amino-4-ciklohexil-2(R)-azido-vajsav-metil-észter
Az 51. példa b) lépésében leírt módon eljárva, és
320 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva 280 mg színtelen, viasszerű, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,50 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1:3 arányú elegye).
d) lépés
Racém 3(S)-amino-4-ciklohexil-2(Rfiazido-vajsavmetil-észter-hidroklorid
Az 51. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 260 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva 198 mg világossárga színű, szilárd anyagot kapunk.
e) lépés
3(S)-[Boc-Phe-His(imBoc)-amino]-2(R)-azido-4ciklohexil-vajsav-metil-észter és a megfelelő 3(R), 2(S)-izomer keveréke
Az 1. példa c) lépésében leírt módon eljárva, és 192 mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott termékből és 398 mg, a 4559 198 számú amerikai szabadalmi leírásban leírt módon előállított Boc-PheHis(imBoc)-ból kiindulva 253 mg világossárga színű, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,5 (futtató oldószer etil-acetát).
f) lépés
3(S)-(Boc-Phe-His-amino)-2(R)-azido-4-ciklohexilvajsav-metil-észter és a megfelelő 3(R), 2(S)-izomer keveréke
211 mg, a fenti e) lépésben leírt módon kapott terméket 10 ml ecetsav és 2 ml víz elegyével 4 órán át 25 °C hőmérsékleten keverünk. Ezután az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot megszárítjuk. Ily módon 210 mg világossárga színű, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,1 (futtató elegy: C-rendszer).
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,30 és 1,34 (s, arányuk 3:2, összesen 9H), 3,76 és 3,81 (s, arányuk 3:2, összesen 3H), 6,67 és 6,78 (s, arányuk 2:3, összesen IH), 7,52 és 7,55 (s, arányuk 2:3, összesen IH).
54. példa
3(S)-(Boc-Phe-His-amino)-2(R)-amino-4-ciklohexil-vajsav-metil-észter és a megfelelő 3(R), 2(S)izomer keveréke [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése tercier-butoxi-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése imidazol-4-il-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-amino-metilén-csoport, és Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
170 mg, az 53. példa f) lépésében leírt módon kapott terméket feloldunk 15 ml etanol és 0,4 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 90 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében másfél órán át 25 °C hőmérsékleten, 3.5X105 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort kiszűrjük, a szűrlétről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról dietil-étert és toluolt desztillálunk le, majd megszárítjuk. Ily módon 170 mg világosbarna színű, szilárd anyagot kapunk.
A két izomer retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 5,17 és 6,17 perc [arányuk: körülbelül 1:1, eluens: acetonitril és foszfát-puffer (pH=2,l) 35:65 arányú elegye].
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,29 (s, 9H), 3,56 és 3,61 (s, arányuk 3:2, összesen 3H), 6,80 és 7,50 s, 1-1H).
55. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Leu-nor-C-Sta-metil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése izobutilcsoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
HU 207 869 Β
a) lépés nor-C-Sta-metil-észter-hldroklorid
0,15 g Boc-nor-C-Sta-metil-észter 4 ml 4 normál, dioxános sósav-oldattal készült oldatát 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, ily módon 0,15 g fehér színű, szilárd anyagot kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
‘H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 3,65 (s, 3H), 4,17 (m, IH), 6,47 (d, .1 = 4 Hz, IH).
b) lépés
Mofolinil-karbonil-Phe-Leu-metil-észter
0,30 g morfolinil-karbonil-Phe és 0,22 g leucin-metil-észter-hidroklorid 5 ml vízmentes diklór-metánnal készült oldatához hozzáadunk először 0,12 g trietilamint, utána 0,18 g hidroxi-benzotriazolt, és végül 0,24 g diciklohexil-karbodiimidet. A reakcióelegyet 20 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd celiten átszűrjük, és kétszer 10 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk. A szerves részt magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 2: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,43 g tiszta terméket kapunk. ‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
0,89 (d, J = 7 Hz, 6H), 3,71 (s, 3H), 4,48 (m, IH), 4,57 (m, IH), 6,25 (d, J = 7 Hz, IH).
c) lépés
Morfoliml-karboml-Phe-Leu
0,43 g morfolinil-karbonil-Phe-Leu-metil-észter 10 ml metanollal készült oldatához hozzáadunk 0,1 g kálium-karbonátot, és az oldatot 24 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána az oldatot csökkentett nyomáson 10 ml térfogaira betöményítjük, a maradékot 1 normál sósavval megsavanyítjuk, és háromszor 25 ml diklór-metánnal kirázzuk. Az egyesített szerves részeket magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szántószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztfláljuk. Az így kapott nyers savat további tisztítás nélkül használjuk fel.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm: 0,87 (2d, 6H), 4,45 (m, IH), 4,65 (m, IH), 5,36 (d, .1 = 7 Hz, IH).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Leu-nor-C-Sta-metil-észter mg morfolinil-karbonil-Phe-Leu-t és 80 mg norC-Sta-O-Me-HCl-t a fent leírt módon, diciklohexilkarbodiimid jelenlétében kondenzálunk. A nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként diklórmetán és etanol 29:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 68 mg tiszta terméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm: 0,85 (2d, 6H), 3,72 (s, 3H), 4,28 (m, IH), 4,41 (m, 2H).
56. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Met-nor-C-Sta-metil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése 2-metil-tio-etil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karboml-Phe-Met-metll-észter
0,30 g morfolinil-karbonil-Phe-t az 55, példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimíd jelenlétében kondenzálunk 0,24 g metionin-metil-észter-hidrokloriddal. A nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 2: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,36 g tiszta dipeptidet kapunk. ‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,05 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 4,57 (m, 2H).
b) lépés
Moifolinil-karbonil-Phe-Met
0,36 g morfolinil-karbonil-Phe-Met-metil-észtert az 55. példában leirt módon elhidrolizálunk. Ily módon 0,3 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
22,01 (s, 3H), 2,44 (m, IH), 4,61 (m, IH).
c) lépés
MorfolinÍl-karbonil-Phe-Met-nor-C-Sta-metil-észter
0,10 g morfolinil-karbonil-Phe-Met-et az 1. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimíd jelenlétében kondenzálunk 0,080 g, az 55. példában leírt módon kapott nor-C-Sta-O-Me-HCl-lel. A kapott nyersterméket szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, eluensként diklórmetán és etanol 29:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 50 mg tiszta és 32 mg szennyezett terméket kapunk. ‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,98 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 4,38 (m, 2H), 4,46 (m,
IH).
57. példa.
Morfolinil-karbonil-Phe-Phe-nor-C-Sta-metil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése benzilcsoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Phe-metil-észter
0,30 g morfolinil-karbonil-Phe-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimíd jelenlétében kondenzálunk 0,26 g L-fenil-alanin-metil-észter-hidrokloriddal. A nyers dipeptidet szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1:2 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,37 g tiszta terméket kapunk. ‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,65 (s, 3H), 4,49 (m, IH), 4,78 (m, IH).
HU 207 869 Β
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Phe
0,37 g morfolinil-karbonil-Phe-Phe-metil-észtert az 55. példában leírt módon elhidrolizálunk. Az így kapott 0,35 g nyers savat további tisztítás nélkül használjuk fel.
'H-NMR-spektrum (CDC13), delta, ppm: 4,59 (m, IH),
4,65 (m, IH), 5,10 (d, J=8 Hz, IH).
c) lépés
Morfoliml-karboml-Phe-Phe-nor-C-Sta-metil-észter
0,10 g morfolinil-karbonil-Phe-Phe-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 0,080 g nor-C-Sta-OMe-HCllel. A nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 29:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,10 g tiszta terméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), delta, ppm: 2,74 (s, 3H),
4,26 (m, IH), 4,36 (m, IH), 4,52 (m, IH).
58. példa
MorfoUnil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-metilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-metil-észter
0,96 g morfolinil-karbonil-Phe-t 0,55 g S-MeCysOMe-HCl-lel kapcsolunk az 55. példában leírt módon, a vízoldható karbodiimid, az l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid, valamint trietilamin és hidroxi-benzotriazol jelenlétében. A kész reakcióelegyet 100 ml etil-acetáttal hígítjuk, az oldatot kétszer 35 ml 0,1 normál sósavval, majd kétszer 35 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Az így kapott, 1,15 g súlyú nyerstermék elegendően tiszta a további felhasználáshoz.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,00 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 4,58 (m, IH), 4,65 (m,
IH).
b) lépés
Motfolinil-karbonll-Phe-S-MeCys
1,15 g morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-metilésztert az 55. példában leírt módon elhidrolizálunk, azonban azzal az eltéréssel, hogy a reakcióelegyet először negyedórán át 0 °C hőmérsékleten keverjük, majd ezután szobahőmérsékleten folytatjuk a keverést. A nyersterméket (súlya: 1,0 g) további tisztítás nélkül használjuk fel.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,03 (s, 3H), 4,63 (m, IH), 4,47 (m, IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-metilészter
130 mg morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kapcsolunk 69 mg nor-C-Sta-OMe-HCl-lel. A nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 58 mg tiszta terméket kapunk.
1 H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,06 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 4,40 (m, 2H).
59. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-EtCys-nor-C-Sta-metilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése etil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-S-EtCys-metil-észter
0,20 g morfolinil-karbonil-Phe-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 0,15 g S-EtCys-OMe-HCl-lel. A nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etilacetát és hexán 3:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,20 g tiszta terméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,16 (t, J=7 Hz, 3H), 2,45 (q, J = 7 Hz, 2H), 3,73 (s,
3H), 4,64 (m, 2H).
b) lépés
Morfolinll-karbonil-Phe-S-EtCys
0,20 g morfolinil-karbonil-Phe-S-EtCys-metil-észtert az 55. példában leírt módon elhidrolizálunk, ily módon 0,11 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,16 (t, J=7 Hz, 3H), 2,50 (q, J=7 Hz, 2H), 4,64 (m, IH), 4,79 (m, IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-S-EtCys-nor-C-Sta-metilészter
0,11 g morfolinil-karbonil-Phe-S-EtCys-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 75 mg nor-C-Sta-OMe-HCl-lel.
A nyersterméket szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, eluensként diklór-metán és etanol 29:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,10 g tiszta terméket kapunk. ‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,21 (t, J=7 Hz, 3H), 2,50 (m, 2H), 3,75 (s, 3H),
4,40 (m, 2H).
60. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-O-BzlSer-nor-C-Sta-metil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
HU 207 869 Β
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése benziloxi-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-BzlSer-metil-észter
0,31 g morfolinii-karbonil-Phe-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kapcsolunk 0,25 g O-BzlSer-OMe-HCl-lel. A nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1: 3 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,28 g tiszta terméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,70 (s, 3H), 4,43 (m, 2H), 4,63 (m, 2H).
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-BzlSer
0,28 g morfolinil-karbonil-Phe-O-BzlSer-metilésztert az 55. példában leírt módon elhidrolizálunk. A kapott nyers savat (súlya: 0,19 g) további tisztítás nélkül használjuk fel.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,40 (m, 2H), 4,63 (m, 1H), 4,72 (m, ÍH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-BzlSer-nor-C-Sta-metil-észter
0,19 g morfolinil -karbonil-Phe-O-BzlSer-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 0,14 g nor-C-Sta-OMe-HCl-lel. A nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 29:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,11 g tiszta terméket kapunk. ’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,73 (s, 3H), 4,40 (m, 2H), 4,45 (AB, 2H).
61. példa
MorfolinÍl-karbonil-Phe-O-BzlThr-nor-C-Sta-metil-észter [(I) általános képletű vegyüiet, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése 1-benziloxi-etil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-BzlThr-metil-észter
0,30 g morfolinil-karbonil-Phe-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 0,35 g O-BzlThr-OMe-HCl-lel. A 0,62 g súlyú nyersterméket további tisztítás nélkül használjuk fel. ’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,13 (d, J = 6 Hz, 3H), 3,63 (s, 3H), 4,38 (AB, 2H),
4,53 (m, ÍH), 4,64 (m, ÍH).
b) lépés
Morfollnil-karbonil-O-BzlThr
0,62 g morfolinil-karbonil-Phe-O-BzlThr-metilésztert az 55. példában leírt módon elhidrolizálunk. Az így kapott, 0,41 g súlyú nyers savat további tisztítás nélkül használjuk fel.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,17 (d, J=6 Hz, 3H), 4,43 (AB, 2H), 4,62 (m, ÍH), 4,70 (m, ÍH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-BzlThr-nor-C-Sta-metil-észter mg morfolinil-karbonil-Phe-O-BzlThr-t az 55.
példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 44 mg nor-C-Sta-OMe-HCl-lel. A nyersterméket kromatográfiás módszerrel tisztítjuk, eluensként diklór-metán és etanol 29: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 97 mg tiszta terméket kapunk. ’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,16 (d, J=6 Hz, 3H), 3,76 (s, 3H), 4,30 (m, ÍH),
4,41 (m, ÍH), 4,46 (AB, 2H).
62. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nva-nor-C-Sta-metil-észter [(I) általános képletű vegyüiet, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-propil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinll-karbonil-Phe-Nva-metil-észter
0,20 g morfolinil-karbonil-Phe-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk, 0,10 g Nva-OMe-HCl-lel. A nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 4: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,22 g tiszta terméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm: 0,92 (t, J = 7 Hz, 3H), 3,65 (s, 3H), 4,42 (m, ÍH),
4,54 (m, ÍH).
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nva
0,22 g morfolinil-karbonil-Phe-Nva-metil-észtert az 55. példában leírt, szokásos módszerrel elhidrolizálunk. Ily módon 0,17 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel. ’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
0,89 (t, =7 Hz, 3H), 4,46 (m, ÍH), 4,62 (m, 1H).
c) lépés
Moifolinil-karbonil-Phe-Nva-nor-C-Sta-metil-észter 0,10 g morfolinil-karbonil-Phe-Nva-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 0,075 g nor-C-Sta-OMe-HCl-lel. A nyersterméket kromatográfiás módszerrel tisztítjuk, eluensként diklór-metán és etanol 29:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,12 g tiszta terméket kapunk. ’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
0,97 (t, J = 7 Hz, 3H), 3,72 (in, 3H), 4,29 (m, ÍH),
4,40 (m, III), 4,53 (m, ÍH).
HU 207 869 Β
63. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-n-propilamid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése N-(n-propil)-karboxamido-csoport.]
a) lépés
Boc-nor-C-Sta-n-propll-amid
100 mg Boc-nor-C-Sta és 21 mg n-pröpil-amin 5 ml vízmentes diklór-metánnal készült oldatához hozzáadunk 54 mg hidroxi-benzotriazolt és 70 mg l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidrokloridot. A kapott oldatot 20 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 200 ml etil-acetáttal hígítjuk. A kapott oldatot kétszer 20 ml vízzel, utána kétszer 20 ml 0,1 normál sósavval, és végül kétszer 20 ml 0,1 normál nátrium-hidroxidoldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítőszert kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Az így kapott 142 mg nyers amidot további tisztítás nélkül használjuk fel. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
0,91 (t, J=7 Hz, 3H), 1,40 (s, 9H), 3,85 (m, IH),
4,04 (d, J=3 Hz, IH).
b) lépés nor-C-Sta-n-propil-amid-hidroklorid
139 mg Boc-nor-C-Sta-NHnPr és 3 ml 4 normál, dioxános sósav-oldat elegyét 3 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána az oldatról az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, ily módon 96 mg nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 0,85 (t, J=7 Hz, 3H), 3,06 (m, 2H), 4,03 (d, J=3Hz, IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-n-propilamid
135 mg morfolinil-karbonil-Phe-Nle-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 96 mg HCl-nor-C-Sta-NHnPr-rel. A nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 9:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 113 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
0,90 (t, J=7 Hz, 3H), 4,08 (d, J=7 Hz, IH), 4,32 (m, 2H), 4,80 (m, IH).
64. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropilamid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z* jelentése N-izopropil-karboxamido-csoport.]
a) lépés
Boc-nor-C-Sta-izopropil-amid mg izopropil-amint az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 100 mg Boc-nor-C-Sta-val. A nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 9:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 93 mg tiszta amidot kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,11 (d, J=5 Hz, 3H), 1,12 (d, J=5 Hz, 3H), 1,37 (s, 9H), 3,82 (m, 1Ή), 3,97 (m, IH), 4,03 (m, IH).
b) lépés nor-C-Sta-izopropil-amid-hidroklorid mg Boc-nor-C-Sta-NHiPr-ről a védőcsoportot úgy hasítjuk le, hogy 13 órán át 2 ml 4 normál, dioxános sósav-oldattal keverjük. Utána az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, ily módon 52 mg fehér színű, szilárd anyagot kapunk. A nyers sósavas sót további tisztítás nélkül használjuk fel. Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 1,10 (m, 6H), 3,92 (m, IH), 3,98 (m, IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropilamid mg morfolinil-karbonil-Phe-Nle-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 48 mg HCl-nor-C-Sta-NHirPr-rel.
A nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 60 mg tiszta terméket kapunk. Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,09 (d, J=6 Hz, 6H), 4,00 (m, IH), 4,03 (m, 3H),
4,33 (m, 2H).
65. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izobutilamld [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése N-izobutil-karboxamido-csoport.]
a) lépés
Boc-nor-C-Sta-izobutil-amid μΐ izobutil-amint az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 100 mg Boc-nor-C-Sta-NHiBu-val. A nyersterméket kromatográfiás úton tisztítjuk, eluensként diklór-metán és metanol 9:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 75 mg tiszta terméket kapunk, ‘H-NMR-spektrum (CDCI3), 300 MHz, delta, ppm:
0,89 (d, J = 6 Hz, 6H), 1,39 (s, 9H), 3,83 (m, IH),
4,03 (m, IH).
HU 207 869 Β
b) lépés nor-C-Sta-izobuti.l-amid-hidrokl.orid
173 mg Boc-nor-C-Sta-NHiBu-ról a védó'csoportot a 64. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 170 mg nyers sót kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
’H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 0,85 (d, J=6 Hz, 6H), 2,93 (m, 2H), 4,03 (m,
IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izobutilamid
235 mg morfolinil-karbonil-Phe-Nle-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 160 mg HCl-nor-C-Sta-NHiBu-val. A nyersterméket kromatográfiás úton tisztítjuk, eluensként diklór-metán és metanol 9: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 152 mg tiszta terméket kapunk. Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm: 0,87 (d, J=6 Hz, 6H), 4,08 (d, J=3 Hz, IH), 4,32 (m, 2H).
66. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-N-metil-Nizopropil-amid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése N-metil-N-izopropil-karboxamido-csoport.]
a) lépés
Boc-nor-C-Sta-N-metil-N-izopropil-amid mg N-metil-N-izopropil-amint az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 120 mg Boc-nor-C-Sta-val. A nyersterméket kromatográfiás úton tisztítjuk, eluensként diklór-metán és metanol 39: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 56 mg tiszta terméket kapunk. ’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,40 (s, 9H), 2,89 (s, 3H), 4,74 (m, IH).
b) lépés nor-C-Sta-N-metil-N-izopropil-amid-hidroklorid mg Boc-nor-C-Sta-N(Me)iPr-ró'l a védőcsoportot a 64. példában leírt módon lehasítjuk, és az így kapott, 52 mg súlyú nyers sót további tisztítás nélkül használjuk fel.
’H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, deka, ppm: 3,00 (s, 3H), 4,30 (s, IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-N-metil-Nizopropil-amid mg morfolinil-karbonil-Phe-Nle-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 52 mg HCl-nor-C-Sta-N(Me)-iPr-rel. A nyersterméket kromatográfiás módszerrel tisztítjuk, eluenskértt diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 99 mg tiszta terméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,84 (s, 3H), 4,12 (m, IH), 4,40 (m, IH), 4,53 (m,
IH).
67. példa.
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-N-metil-Nizobutil-amid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése N-metil-N-izobutil-karboxamido-csoport].
a) lépés
Boc-nor-C-Sta-N-metil-N-izobutil-amid mg N-metil-N-izobutil-amint az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 128 mg Boc-nor-C-Sta-val. A nyersterméket kromatográfiás módszerrel tisztítjuk, eluensként diklór-metán és metanol 9: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 130 mg tiszta terméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,38 (s, 9H), 3,03 (s, 3H), 4,28 (m, IH).
b) lépés nor-C-Sta-N-metil-N-izobutil-amid-hidroklorid
123 mg Boc-nor-C-Sta-N(Me)iBu-ról a védőcsoportot az 55. példában leírt módon lehasítjuk, és az így kapott, 118 mg súlyú nyers sót további tisztítás nélkül használjuk fel.
’H-NMR-spektrum (DMSO-dé), 300 MHz, delta, ppm: 3,67 (s, 3H), 4,54 (m, IH), 4,61 (m, IH).
c) lépés
Morfolinil-karboml-Phe-Nle-nor-C-Sta-N-metil-Nizobutil-amid
173 mg morfolinil-karbonil-Pbe-Nle-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 118 mg HCl-nor-C-Sta-N(Me)-iBu-val. A nyersterméket kromatográfiás módszerrel tisztítjuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 184 mg tiszta terméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,04 (s, 3H), 4,18 (m, IH), 4,36 (m, IH), 4,43 (m,
IH), 4,57 (m, IH).
68. példa.
Morfolinil-karbonil-Phe-Nlc-nor-C-Sta-n-pentilamid.
[(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése N-(n-pentil)-karboxamido-csoport.]
HU 207 869 Β
a) lépés
Boc-nor-C-Sta-n-pentil-amid mg n-pentil-amint a 63. példában leírt módon, 1 -(3 -dimetil-amino-propil)-3 -etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 100 mg Boc-nor-CSta-val. Az így kapott, 128 mg súlyú nyersterméket további tisztítás nélkül használjuk fel. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,41 (s, 9H), 3,25 (m, 2H), 3,86 (m, IH), 4,05 (m,
IH).
b) lépés nor-C-Sta-n-pentil-amid-hidroklorid
128 mg Boc-nor-C-Sta-NHnPn-ről a védőcsoportot a 63. példában leírt módon lehasítjuk, és az így kapott, 108 mg súlyú nyers sót további tisztítás nélkül használjuk fel.
Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 3,09 (m, 2H), 4,00 (d, J=4 Hz, IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-n-pentilamid
138 mg morfolinil-karbonil-Phe-Nle-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 108 mg HCl-nor-C-Sta-NHnPn-nel. A nyersterméket kromatográfiás módszerrel tisztítjuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 140 mg tiszta terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,08 (m, IH), 4,32 (m, 2H), 4,74 (m, IH).
69. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-morfolid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z* jelentése morfoIin-4-il-karbonil-csoport.]
a) lépés
Boc-nor-Sta-morfolid mg morfolint az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 100 mg Boc-nor-C-Sta-val. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 4:1 arányú elegyét használjuk, ily módon 134 mg tiszta terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,36 (s, 9H), 4,06 (d, J=5 Hz, IH), 4,22 (széles,
IH).
b) lépés nor-C-Sta-morfolid-hidroklorid
122 mg Boc-nor-C-StaMr-ről a védőcsoportot a 63. példában leírt módon lehasítjuk, ily módon 125 mg nyers sót kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,34 (d, J=5 Hz, IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-morfolid
142 mg morfolinil-karbonil-Phe-Nle-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 101 mg HCl-nor-C-Sta-Mr-rel. Anyersteméket kromatográfiás módszerrel tisztítjuk, eluensként diklór-metán és etanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 72 mg tiszta terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,16 (m, IH), 4,25 (széles, IH), 4,42 (m, IH), 4,48 (m, IH), 4,97 (m, IH).
70, példa
Morfolinil-Phe-Nle-nor-C-Sta-4-metil-piperazÍd [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése 4-metil-piperazin-l-il-karbonil-csoport.]
a) lépés
Boc-nor-C-Sta-4-metil-piperazid mg 1-metil-piperazint az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 100 mg Boc-nor-C-Sta-val. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 9:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 118 mg tiszta terméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,36 (s, 9H), 2,30 (s, 3H), 3,96 (m, IH), 4,24 (s,
IH).
b) lépés nor-C-Sta-4-metU-piperazid-hidroklorid
118 mg Boc-nor-C-Sta-MePip-ről a védőcsoportot a 63. példában leírt módon lehasítjuk, és az így kapott, 113 mg súlyú sót további tisztítás nélkül használjuk fel. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,48 (s, 3H), 4,22 (m, IH), 4,39 (m, 2H).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-4-metilpiperazid
133 mg morfolinil-karbonil-Phe-Nle-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 105 mg HCl-nor-C-Sta-MePip-pel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklórmetán és etanol 9:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 110 mg tiszta terméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,33 (s, 3H), 4,17 (m, IH), 4,31 (m, 2H), 4,52 (m,
IH).
71. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
HU 207 869 Β
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés nor-C-Sta-izopropil-észter-hidroklorid
100 mg Boc-nor-C-Sta 2 ml vízmentes izopropanollal készült oldatát vízmentes sósavval telítjük, és a kapott oldatot éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, ily módon 98 mg nyers sót kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel. ’H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 1,20 (d, J = 6 Hz, 6H), 3,28 (m, IH), 4,05 (d, .1 = 5 Hz, IH), 4,92 (m, IH).
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropilészter
142 mg morfolinil-karbonil-Phe-Nle-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 92 mg HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 9:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 60 mg tiszta tennéket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1.24 (d, J = 7 Hz, 6H), 4,06 (széles, IH), 4,19 (m,
IH), 4,43 (m, 2H),5,00 (m, IH).
72. példa
Morfotinil-karbonil-Phe-O-MeSer-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metoxi-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropil-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-MeSer-m il-észter
0,5 g morfolinil-karbonil-Phe-t az 58. éldában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimidhidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,34 g DL-Ometil-szerin-O-Me-vel. A nyersterméket (súlya: 0,37 g) további tisztítás nélkül használjuk fel.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3.24 (s, 3H), 3,76 (s, 3H), 4,65 (m, IH).
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-MeSer
0,37 g morfolinil-karbonil-Phe-O-MeSer-OMe-t az 55. példában leírt módon elhidrolizálunk, ily módon 0,16 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,18 (s, 3H), 4,58 (m, IH), 4,73 (m, IH).
c) lépés
Morfoiinil-karbonil-Phe-O-MeSer-nor-C-Sta-izopropil-észter
0,15 g morfolinil-karbonil-Phe-O-MeSer-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,10 g HCl-uor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 29: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 43 mg tiszta terméket, valamint 36 mg olyan mellékterméket kapunk, amelyben a szerincsoport konfigurációja ellentétes.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm: 3,14 (s, 3H), 4,13 (m, 2H), 4,45 (m, 2H), 4,96 (m, 2H).
73. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-O-EtSer-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése etoxi-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropil-karbonil-csoport.]
a) lépés
Boc-O-EtSer
0,94 g N-tercier-butoxi-karbonil-szerin 66 ml tetrahidro-furánnal készült oldatához hozzáadunk 1,47 g nátrium-metilát 2,6 ml metanollal készült oldatát, majd az elegyhez hozzáadunk 11,7 g etil-jodidot. Negyedóra múlva a reakcióelegyhez további 0,49 g nátrium-metilátot és 2 ml etil-jodidot adunk, majd az elegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután ismét nátrium-metilátot és etil-jodidot adunk az elegyhez, és további 6 órán át keverjük. Utána az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, a maradékot feloldjuk 25 ml vízben, és az oldatot kétszer 25 ml dietil-éterrel mossuk. Ezután a vizes részt tömény sósavval megsavanyitjuk, és négyszer 25 ml diklór-metánnal kirázzuk. Az egyesített diklórmetános részeket magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Ily módon 0,34 g nyersterméket kapunk, amelyet közvetlenül felhasználunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,19 (t, J = 7 Hz, 3H), 1,46 (s, 9H), 3,53 (q, J = 7 Hz,
2H), 4,43 (m, IH).
b) lépés
O-EtSer-metil-észter-hidroklorid
0,51 g Boc-O-EtSer 25 ml vízmentes metanollal készült oldatát vízmentes sósavval telítjük, és az elegyet 18 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, és a szilárd maradékot etanol és dietil-éter elegyéből átkristályosítjuk. Ily módon 0,1 g tiszta sót kapunk. ’H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 1,10 (t, J = 8 Hz, 3H), 3,48 (m, 2H), 3,75 (s,
3H), 4,28 (m, IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonll-O-EtSer-metil-észter
0,36 g morfolinil-karbonil-Phe-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodi1
HU 207 869 Β imid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,25 g HCl-O-EtSer-OMe-vel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 19 :1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,22 g tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,10 (t, J=7 Hz 3H), 3,41 (q, J=7 Hz, 2H), 3,73 (s,
3H), 4,62 (m, 2H).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-EtSer
0,22 g morfolinil-karbonil-Phe-O-EtSer-OMe-t az 55. példában leírt módon elhidrolizálunk. Ily módon 0,15 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,12 (2t, 3H), 4,62 (m, IH), 4,72 (m, IH).
e) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-EtSer-nor-C-Sta-izopropil-észter mg morfolinil-karbonil-Phe-O-EtSer-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 54 mg HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 50 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,12 (t, J=7 Hz, 3H), 3,44 (q, J=7 Hz, 2H), 4,30 (m, IH), 4,43 (m, 2H), 5,04 (m, IH).
74. példa
Morfoliml-karbonil-Phe-tetrametilén-Gly-nor-C·
Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport (tetrametilén-csoport),
X jelentése ciklohexilcsoport W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z* jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Tetrametilén-glicin-metil-észter-hidroklorid
2,5 g a-tetrametilén-glicin 30 ml metanollal készült oldatát vízmentes sósavval telítjük, és az elegyet 60 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, és a maradékot dietil-éter és etanol elegyéből átkristályosítjuk. Ily módon 2,4 g tiszta terméket kapunk.
lH-NMR-spektrum (DMSO-dg), 300 MHz, delta, ppm: 3,77 (s, 3H).
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-TMGly-metil-észter
0,50 g morfolinil-karbonil-Phe-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,36 g HCl-TMGly-OMe-vel. A nyersterméket (súlya: 0,48 g) további tisztítás nélkül használjuk fel.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,67 (s, 3H), 4,57 (m, 2H), 5,51 (d, J=6 Hz, IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-TMGly
0,48 g morfolinil-karbonil-Phe-TMGly-OMe-t az
55. példában leírt módon elhidrolizálunk. Ily módon 0,43 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül reagáltatunk tovább.
Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,39 (m, 2H), 6,55 (d, J=8 Hz, IH).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-TMGly-nor-C-Sta-izopropil-észter
0,11 g morfolinil-karbonil-Phe-TMGly-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etilkarbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,10 g HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 3:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 70 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,21 (m, IH), 4,47 (m, IH), 4,98 (m, 2H).
75. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Phu-Gly-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-pentil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z* jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Pn-Gly-etil-észter g glicin-etil-észter-benzofenon-imin, 8 g jódpentán és 14 g tetrabutil-ammónium-hidrogén-szulfát 150 ml diklór-metánnal és 33 ml 10%-os nátrium-hidroxid-oldattal készült elegyét 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána a szerves részt elválasztjuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot feloldjuk 50 ml tetrahidro-furán és 50 ml 0,1 normál sósav elegyében, és az elegyet 24 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a tetrahidro-furánt ledesztilláljuk, és a maradék vizes oldatot háromszor 50 ml dietil-éterrel mossuk. Ezután a vizes részt meglúgosítjuk, és háromszor 50 ml diklórmetánnal kirázzuk. Az egyesített szerves részeket magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,51 g tiszta terméket kapunk. A megfelelő sósavas sót úgy állítjuk elő, hogy a fenti amint dietil-éterben vízmentes sósavval kezeljük.
Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 1,05 (t, J = 7 Hz, 3H), 1,77 (m, 2H), 3,97 (m, IH), 4,20 (m, 2H).
HU 207 869 Β
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-PnGly-etil-észter
0,40 g Morfolinil-karbonil-Phe-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,33 g HCl-PnGly-OEt-tel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1: 3 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,40 g terméket kapunk, amely a pentil-glicin rész szerinti diasztereomerek keveréke.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,13 (m, 2H), 4,42 (m, IH), 4,57 (m, IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-PnGly
A morfolinil-karbonil-Phe-PnGly-OEt-et az 55. példában leírt módon elhidrolizáljuk. Ily módon 0,33 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel, 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,43 (m, 2H), 4,72 (m, IH), 4,93 (m, IH).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-PnGly-nor-C-Sta-izopropil-észter
0,16 g morfolinil-karbonil-Phe-PnGly-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etilkarbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,10 g HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,11 g kívánt L-izomert, és 0,078 g D-izomert kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), fő izomer, 300 MHz, delta, ppm: 2,27 (d, J = 7 Hz, 6H), 4,25 (m, IH), 4,46 (m, IH), 4,53 (m, IH), 5,03 (m, 2H).
76. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-O-MeHSe-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése 2-metoxi-etil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Boc-O-metil-homoszerin
0,51 g Boc-homoszerint a Boc-szerinre a 73, példában leírt módon metilezünk. Ily módon 0,45 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel a következő reakciólépésben.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,40 (s, 9H), 3,16 (s, 3H), 3,90 (m, 2H).
b) lépés
Boc-O-MeHSe-nor-C-Sta-izopropil-észter
0,45 g Boc-O-MeHSe-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimidhidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,5 g nor-CSta-OiPr-rel, azzal az eltéréssel, hogy nem használunk trietil-amint. A kapott nyersterméket kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,52 g tiszta terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1.21 (d, .1 = 7 Hz, 6H), 1,38 (s, 9H), 3,27 (s, 3H),
4,19 (m, IH), 4,38 (m, IH), 4,96 (m, IH).
c) lépés
O-MeHSe-nor-C-Sta-izopropil-észter
0,52 g Boc-O-MeHSe-nor-C-Sta-OiPr-ről a védőcsoportot a 63. példában leírt módon, a szokásos dioxános sósav-oldat segítségével lehasítjuk. Ily módon 0,66 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 1,18 (d, J = 7 Hz, 6H), 3,24 (s, 3H), 4,18 (m, IH), 4,80 (m, IH).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-MeHSe-nor-C-Sta-izopropil-észter
0,19 g morfolinil-karbonil-Phe-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,20 g HCl-O-MeHSe-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 29:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,31 g tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum, (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,23 (d, J = 7 Hz, 3H), 1,25 (d, J = 7 Hz, 3H), 3,19 (s, 3H), 4,29 (m, IH), 4,42 (m, 2H), 5,04 (m, IH).
77. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Hse-nor-C-Sta-izopropilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése 2-hidroxi-etil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Boc-O-benzil-homoszerin
0,51 g tercier-butoxi-karbonil-homoszerint a 73. példában a szerinre leírt módon benzilezünk. Ily módon 0,42 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,38 (s, 9H), 4,10 (m, IH), 4,45 (AB, 2H).
b) lépés
Boc-O-benzil-homoszerin-nor-C-Sta-izopropil-észter
0,40 g Boc-O-benzil-Hse-t a 76, példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimidhidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,50 g nor-CSta-OÍPr-rel, A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,53 g tiszta terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1.22 (d, J = 7 Hz, 6H), 1,40 (s, 9H), 4,10 (m, IH),
4,40 (m, IH), 4,45 (rn, 2H), 4,96 (m, IH).
HU 207 869 Β
c) lépés
O-Benzil-homoszerin-nor-C-Sta-izopropil-észterhidroklorid
0,53 g Boc-O-benzil-Hse-nor-C-Sta-OiPr-ről a védőcsoportot a 76. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 0,54 g nyers sót kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 1,17 (d, J=7 Hz, 3H), 1,18 (d, J=Hz, 3H), 4,21 (m, IH), 4,47 (m, 2H), 4,80 (m, IH).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-benzil-homoszerin-norC-Sta-izopropil-észter
0,53 g morfolinil-karbonil-Phe-t a 76. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,54 g HCl-O-benzil-Hse-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,40 g tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,24 (d, J=7 Hz, 3H), 1,27 (d, J=7 Hz, 3H), 4,28 (m, IH), 4,39 (AB, 2H), 4,48 (m, 2H), 5,04 (m,
IH).
e) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Hse-nor-C-Sta-izopropilészter
0,39 g morfolinil-karbonil-Phe-O-benzil-Hse-nor-CSta-OiPr és 1,0 g 10%-os csontszenes palládium 40 ml metanollal készült elegyét 7 órán át 3,5x1ο5 nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon kis mennyiségű, reagálatlan kiindulási anyag mellett 91 mg tiszta terméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 1,17 (d, J=7 Hz, 3H), 1,19 (d, J=7 Hz, 3H), 4,29 (m, 2H), 4,47 (m, IH), 4,83 (m, IH).
78. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-oxid-nor-C-Staizopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-szulfinil-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.] mg, a 17. példában leírt módon kapott morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-OiPr és 24 mg m-klór-perbenzoesav 10 ml diklór-metánnal készült oldatát félórán át 0 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldatot 30 ml etil-acetáttal hígítjuk és először kétszer 15 ml 10%-os nátrium-szulfit-oldattal, majd utána egyszer 15 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk. Utána a szerves részt magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 17:3 arányú elegyét használjuk. Ily módon 40 mg tiszta terméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,29 (d, J=7 Hz, 6H), 2,78 (s, 3H), 4,37 (m, IH),
4,44 (m, IH), 4,77 (m, IH), 5,00 (m, IH).
79. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-dloxid-nor-CSta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-szulfonil-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.] mg, a 17. példában leírt módon kapott morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-OiPr és 16 mg m-klór-perbenzoesav 3 ml diklór-metánnal készült elegyét félórán át 0 °C hőmérsékleten keverjük. Ezután a reakcióelegyet a 78. példában leírt módon dolgozzuk fel, és a maradékot kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 13 mg tiszta terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,28 (d, J=7 Hz, 3H), 1,30 (d, J=7 Hz, 3H), 3,00 (s, 3H), 4,26 (m, IH), 4,45 (m, IH), 4,85 (m, IH),
5,06 (m, IH).
80. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Ser-nor-C-Sta-izopropilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése hidroxi-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-O-szukcinimid g morfolinil-karbonil-Phe és 15,5 g N-hidroxiszukcinimid 800 ml diklór-metánnal készült oldatához hozzáadunk 19 g l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etilkarbodiimid-hidrokloridot. Az elegyet 20 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd a kapott oldatot kétszer 200 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Ily módon fehér színű, szilád anyag formájában 29 g nyersterméket kapunk.
•H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,78 (m 4H), 4,81 (d, J=8 Hz, IH), 5,09 (m, IH).
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Ser
0,30 g szerin 10 ml telített nátrium-hidrogén-karbo47
HU 207 869 Β nát-oldattal készült oldatához hozzáadjuk 0,50 g morfolinil-karbonil-Phe-OSuc 5 ml tetrahidro-furánnal készült oldatát, és a kapott elegyet negyedórán át keverjük. Utána 30 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal hígítjuk, és háromszor 40 ml diklór-metánnal mossuk. Ezután a vizes részt tömény sósavval megsavanyítjuk, és hatszor 75 ml etil-acetáttal kirázzuk. Az egyesített szerves részeket magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,40 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,66 (m, 2H), 4,25 (m, IH), 4,37 (m, IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Ser-nor-C-Sta-izopropilészter
0,39 g morfolinil-karbonil-Phe-Ser-t a 76. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,33 g nor-C-Sta-OiPr-rel. A kapott nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 24:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,23 g tiszta terméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDCl3), 300 MHz, delta, ppm;
1,13 (d, J = 7 Hz, 3H), 1,15 (d, J = 7 Hz, 3H), 3,94 (m, IH), 4,20 (m, 2H), 4,30 (m, IH), 4,88 (m, IH),
4,80 (m, IH).
81. példa
Morfolinil-karboníl-Phe-Ala-nor-C-Sta-izopropilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metilcsoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Ala
0,24 g alanint a 80. példában leírt módon reagáltatunk 0,50 g morfolinil-karbonil-Phe-OSuc-kal. Az így kapott 0,15 g nyersterméket további tisztítás nélkül használjuk fel.
Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: (d, J = 7 Hz, 3H), 4,20 (m, IH), 4,32 (m, IH).
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Ala-nor-C-Sta-izopropilészter
0,15 g morfok, 7-karbonil-Phe-Ala-t a 76. példában leírt módon, í-(3-dimetil-amino-propil)-3-etilkarbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,13 g nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 24: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,18 g tiszta terméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,26 (d, J=7 Hz, 3H), 4,29 (m, IH), 4,38 (m, IH),
4,48 (m, IH), 4,96 (m, IH).
82. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Gln-nor-C-Sta-izopropilészter [(I) általános képletű vegyület. ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése 2-karboxamido-etil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metílén-csoport, és Z' jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Gln
0,30 g glutamint a 80. példában leírt módon reagáltatunk 0,50 g morfolinil-karbonil-Phe-OSuc-kal. Ily módon 0,37 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
Ή-NMR-spektrum (DM5O-d6), 300 MHz, delta, ppm: 3,43 (m, 4H), 4,15 (m, IH), 4,31 (m, IH).
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Gln-nor-C-Sta-izopropilészter
0,37 g morfolinil-karbonil-Phe-Gln-t a 76. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,24 g nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 9: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,18 g tiszta terméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (DMSO-dó), 300 MHz, delta, ppm: 1,17 (d, J = 7 Hz, 6H), 3,94 (m, IH), 4,8 (m, 2H), 4,25 (m, ÍH), 4,80 (m, IH).
83. példa
Morfolinil-karboml-Phe-Nle-nor-C-Sta-(3-metil-2propanolfészter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése 3-metil-2-propoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés nor-C-Sta-(3-metil-2-propanol)-észter-hidroklorid 100 mg Boc-nor-C-Sta 5 ml 3-metil-2-propanollal készült oldatát vízmentes sósavval telítjük, és az elegyet éjszakán át keverjük. Utána a kapott oldatról az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, ily módon 89 mg nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel a következő reakciólépésben.
Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 1,17 (d, J = 7 Hz, 3H), 4,10 (m, IH), 4,70 (m, IH).
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-(3-metil-2propanolfészter
113 mg, a 63. példában leírt módon kapott morfoli1
HU 207 869 Β nil-karbonil-Phe-Nle-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 89 mg HCl-nor-CSta-(3-metil-2-propanol)-észterrel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 79 mg tiszta terméket kapunk, amely az észtercsoportban levő metilcsoportot hordozó aszimmetriás szénatom szerinti diasztereomerek keveréke.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,13 (d, J = 6 Hz, 3H), 4,15 (m, IH), 4,71 (m,
IH).
84. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-izobutil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése feniícsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izobutoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés nor-Fenil-Sta-izobutil-észter
1,0 g N-tercier-butoxi-karbonil-2(R)-hidroxi3(S)-amino-4-fenil-butinonitril 40 ml izobutil-alkohollal készült oldatát vízmentes sósavval telítjük, és az elegyet 48 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot 100 ml 0,1 normál sósavval hígítjuk. A kapott elegyet negyedórán át keverjük, majd kétszer 100 ml dietil-éterrel mossuk. Ezután a vizes részt meglúgosítjuk, és kétszer 100 ml etil-acetáttal kirázzuk. Az egyesített etil-acetátos részeket magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Ily módon 0,43 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
0,93 (d, J=6 Hz, 3H), 3,34 (m, IH), 3,97 (m, 2H),
4,07 (d, J = 3 Hz, IH).
b) lépés nor-C-Sta-izobutil-észter mg nor-Ph-Sta-OiBu és 190 mg 10%-os csontszenes ródium 5 ml metanollal készült elegyét 36 órán át 3,5x1ο5 Pa nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot feloldjuk 50 ml 0,1 normál sósavban, és az oldatot kétszer 50 ml dietil-étenel mossuk. Ezután a vizes részt meglúgosítjuk, és kétszer 50 ml etil-acetáttal kirázzuk. Az egyesített etil-acetátos részeket magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 74 mg nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
0,92 (d, J=6 Hz, 3H), 4,03 (m, 2H).
c) lépés
Morfolinil-karboml-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-izobutil-észter
113 mg, az 58. példában leírt módon kapott morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-t a 76. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 70 mg nor-C-Sta-OiBuval. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol és 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 127 mg tiszta terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
0,95 (d, J=6 Hz, 3H), 2,13 (s, 3H), 3,95 (m, 2H),
4,43 (m,2H).
85. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-tercier-butil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése feniícsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Zl jelentése tercier-butoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés nor-Fenil-Sta-tercier-butil-észter
A nor-Ph-Sta-OiBu előállítására a 83. példában leírt módon járunk el, és 3,0 g nitrilből és 200 ml tercier-butanolból indulunk ki. A reakcióelegy feldolgozása után 184 mg nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm: (s,
9H), 3,64 (m, IH), 3,83 (d, J=3 Hz, IH).
b) lépés nor-C-Sta-tercier-butil-észter mg nor-Phe-Sta-OtBu-t a 83. példában leírt módon hidrogénezünk, és a reakcióelegy feldolgozása után 64 mg nyersterméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,32 (s, 9H), 3,47 (m, IH), 3,18 (széles, IH).
c) lépés
Morfoliml-karbonll-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-tercier-butil-észter mg, az 58. példában leírt módon kapott morfolinilkarbonil-Phe-S-MeCys-t a 76. példában leírt módon, 1(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 60 mg nor-C-Sta-OtBu-val. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 50 mg tiszta terméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDClj), 300 MHz, delta, ppm:
1,35 (s, 9H), 2,13 (s, 3H), 3,98 (m, IH), 4,30 (m,
IH), 4,57 (m, 2H).
86. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-Nmetil-amid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
HU 207 869 Β
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése N-metil-karboxamido-csoport.]
a) lépés
Boc-nor-C-Sta-N-metil-amid
0,25 g Boc-nor-C-Sta-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 57 mg metil-amin-hidrokloriddal. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 2: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,16 tiszta tennéket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,41 (s, 9H), 2,82 (d, J=5 Hz, 3H), 3,85 (m, IH).
b) lépés nor-C-Sta-N-metil-amid
0,16 g Boc-nor-C-Sta-NHMe-ről a védő'csoportot a 63. példában leírt módon, dioxános sósav-oldattal hasítjuk le. Ily módon 0,13 g nyers sót kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
’H-NMR-spektrum (DMSO~d6), 300 MHz, delta, ppm: 2,62 (s, 3H), 3,97 (d, .1 = 4 Hz, IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-Nmetil-amid mg, az 58. példában leírt módon kapott morfolinil-karboníl-Phe-S-MeCys-t az 58. példában leírt módon, 1 -(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimidhidroklorid jelenlétében kondenzálunk 73 mg HCl-norC-Sta-NHMe-vel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 52 mg terméket kapunk, amely az S-metil-ciszteinben jelen levő aszimmetriacentrum szerinti epimerek keveréke.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), egyik izomer, 300 MHz, delta, ppm: 2,02 (s, 3H)', 2,79 (d, J = 5 Hz, 3H), 4,29 (m, IH), 4,57 (m, 2H).
87. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-Ph-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
Rj jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése fenilcsoport,
W jelentése ct-hidroxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése izopropil-karbonil-csoport.]
a) lépés nor-Fenil-Sta-izopropil-észter
A cím szerinti vegyületet 118 mg nitrilből kiindulva, és az izobutil-észterre a 84. példában leírt módon eljárva állítjuk elő. Az így kapott, 89 mg súlyú nyersterméket további tisztítás nélkül használjuk fel. ’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,26 (d, J=7 Hz, 6H), 3,30 (m, IH), 4,01 (d, J=2
Hz, 1I-I), 5,10 (m, IH).
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-fenil-Staizopropil-észter
0,96 g, az 58. példában leírt módon kapott morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-t a 76. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimidhidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,55 g nor-PhSta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,91 g tiszta terméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,18 (d, J = 7 Hz, 3H), 1,21 (d, J = 7 Hz, 3H), 2,00 (s, 3H), 4,41 (m, 2H), 4,49 (m, IH), 5,00 (m, IH).
88. példa
Morfolinil-karbonil-O-MeTyr-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése p-metoxi-fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Boc-O-MeTyr-metil-észter
7.3 g tercier-butoxi-karbonil-tirozin 100 ml metanollal készült oldatához hozzáadjuk nagy fölöslegben vett diazo-metán 250 ml dietil-éterrel készült oldatát. A reakcióelegyhez 24 óra múlva, majd 48 óra múlva ismét, további diazo-metánt adunk. Összesen 72 óra múlva a reakciót ecetsav hozzáadásával befagyasztjuk, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot 100 ml etilacetáttal hígítjuk. Az oldatot kétszer 50 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, magnéziumszulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként hexán és etil-acetát 9: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 6,4 g tiszta terméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,42 (s, 9H), 3,69 (s, 3H), 3,76 (m, 3H), 4,51 (m,
IH).
b) lépés
0-MeTyr-metil-észter-hidrok.lorid
6.4 g Boc-O-MeTyr-OMe-ről a védőcsoportot a 63. példában leírt módon, dioxános sósav-oldat segítségével hasítjuk le. Ily módon 5,1 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel. ’H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 3,76 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 4,19 (m, IH).
c) lépés
O-MeTyr-metil-észter-izocianát
5,1 g HCl-O-MeTyr-OMe 150 ml toluollal készült szuszpenziójába gáz alakú foszgént vezetünk, és eközben az elegyet lassan forrásig melegítjük. Miután az oldatlan részek teljesen feloldódtak, az így kapott elegyet lehűtjük, és az oldószert csökkentett
HU 207 869 Β nyomáson ledesztilláljuk. Ily módon 7,0 g nyers izocianátot kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,85 (s, 6H), 4,27 (m, IH), 6,89 (d, J=8 Hz, 2H),
7,14 (d, J=8 Hz, 2H).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-O-MeTyr-metil-észter
5,0 g O-Meiyr-OMe-izocianát 150 ml diklór-metánnal készült oldatához 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 2,4 g morfolint. Az elegyet negyedórán át keverjük, majd a kapott oldatról az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot kromatografáljuk, eluensként etil-acetátot használunk. Ily módon 3,6 g tiszta terméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,66 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 4,67 (m, IH), 4,91 (d,
J=8Hz, IH).
e) lépés
Morfolinil-karboml-O-MeTyr
3,6 g morfolinil-karbonil-O-MeTyr-OMe-t az 55. példában leírt módon elhidrolizálunk. Ily módon 3,0 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,78 (s, 3H), 4,61 (m, IH), 6,82 (d, J=8 Hz, 2H),
7,08 (d, J=8 Hz, 2H).
f) lépés
Morfolinil-karbonil-O-MeTyr-Nle-benzil-észter
0,50 g morfolinil-karbonil-O-MeTyr-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,42 g HCl-Nle-OBzl-lel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,77 g tiszta terméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,76 (s,3H), 4,50 (m,2H), 5,13.
g) lépés
Morfolinil-karbonU-O-MeTyr-Nle
0,77 g morfolinil-karbonil-O-MeTyr-Nle-OBzl és 0,38 g 10%-os csontszenes palládium 60 ml etanollal készült elegyét 3 órán át 3,5xl05 Pa nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Ily módon 0,63 g nyers savat kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,72 (s, 3H), 4,44 (m, IH), 4,63 (m, IH). .
h) lépés
Morfolinil-karbonil-O-MeTyr-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter
74, mg morfolinil-karbonil-O-MeTyr-Nle-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 51 mg HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklórmetán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 98 mg tiszta terméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,78 (s, 3H), 4,21 (m, IH), 4,42 (m, 2H), 5,03 (m,
IH).
89. példa
Morfolinil-karbonil-O-MeTyr-S-MeCys-nor-C-Staizopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése p-metoxi-fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z‘ jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-O-MeTyr-S-MeCys-metil-észter
0,25 g morfolinil-karbonil-O-MeTyr-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etilkarbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzáljuk 0,36 g HCl-S-MeCys-OMe-vel. Ily módon 0,32 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,01 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 4,55 (m,
IH), 4,65 (m, IH).
b) lépés
Morfollnil-karbonil-O-MeTyr-S-MeCys
0,32 g morfolinil-karbonil-O-MeCys-OMe-t az 55. példában leírt módon elhidrolizálunk. Ily módon 0,28 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,11 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 4,69 (m, IH), 4,77 (m,
IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-O-M.eTyr-S-MeCys-nor-C-Staizopropil-észter
0,17 g morfolinil-karbonil-O-MeCys-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,10 g HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,18 g tiszta terméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,08 (3, 3H), 3,75 (s, 3H), 4,39 (m, 3H), 5,01 (m,
IH).
90. példa
MorfollnÍl-karbonil-O-MeTyr-Nle-nor-C-Sta-metilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése p-metoxi-fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z‘ jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
100 mg, a 88. példában leírt módon kapott morfolinil-karbonil-Tyr-Nle-t az 58. példában leírt módon, 151
HU 207 869 Β (3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzáljuk 65 mg, az 55. példában leírt módon kapott HCl-nor-C-Sta-OMe-vel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 121 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm: 3,80 (s, 3H), 3,82 (s, 3H), 4,26 (m, IH), 4,45 (m, 2H).
91. példa
Morfolinil-karbonil-O-MeTyr-Nle-nor-C-Sta-Nmetil-amid [(I) általános képletű vegyidet, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése p-metoxi-fenil-csoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése N-metil-karboxamido-csoport.]
132 mg, a 88. példában leírt módon kapott morfolinil-karbonil-O-MeTyr-Wle-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 78 mg, a 86. példában leírt módon kapott HCl-nor-C-Sta-NHMe-vel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 9: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 155 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,79 (d, .T = 5 Hz, 3H), 3,75 (s, 3H), 4,22 (m, IH),
4,30 (m, 2H).
92. példa
Morfolinil-karbonil-Tyr-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyűlet, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése p-hidroxi-fenil-csoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Boc-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter
1,1 g Boc-S-MeCys-t a 76. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 1,0 g nor-C-StaOiPr-rel. Ily módon 1,8 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,25 (d, J = 6 Hz, 6H), 1,43 (s, 9H), 2,14 (s, 3H),
4,08 (m, IH), 4,43 (m, IH), 4,98 (m, IH).
b) lépés
S-MeCys-nor-C-Sta-izopropíl-észter-hidroklorid
0,42 g Boc-S-MeCys-nor-C-Sta-OiPr-ről a védőcsoportot a 63. példában leírt módon, dioxános sósavoldat alkalmazásával lehasítjuk. Ily módon 0,38 g nyers sót kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 1,19 (d, J = 6 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 6 Hz, 3H), 2,16 (s, 3H), 3,95 (m, IH), 4,20 (m, IH), 4,83 (m, IH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-O-benzil-Tyr
0,5 g O-benzil-Tyr 20 ml dioxán és 5 ml 2 normál nátrium-hidroxid-oldat elegyével készült oldatához hozzáadunk 0,31 g morfolinil-karbonil-kloridot, és az így kapott elegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Másnap az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot 200 ml vízzel hígítjuk, és az elegyet kétszer 200 ml dietil-éterrel mossuk. Ezután a vizes részt megsavanyítjuk, és kétszer 200 ml kloroformmal kirázzuk. Az egyesített kloroformos részeket magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,18 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,13 (m, IH), 5,04 (s, 2H).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Tyr
0,18 g morfolinil-karbonil-O-benzil-Tyr és 0,18 g 10%-os csontszenes palládium 20 ml metanollal készült elegyét 18 órán át 3,5x105 Pa nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,14 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,04 (m, IH), 6,58 (d, .1 = 8 Hz, 2H), 6,95 (d, J = 8Hz, 2H).
e) lépés
Morfolinil-karbonil-Tyr-S-MeCys-nor-C-Sta-lzopropil-észter
0,13 g morfolinil-karbonil-Tyr-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,27 g HCl-S-MeCys-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 9: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,15 g tiszta terméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,24 (d, J = 6 Hz, 3H), 1,26 (d, J = 6 Hz, 3H), 4,41 (m, 3H), 5,02 (m, IH).
93. példa
Morfolinil-karbonil-o-Tyr-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyidet, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése o-hidroxi-fenil-csoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és ?
Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
HU 207 869 Β
a) lépés tercier-Butoxi-karbonil-o-tirozin
1.1 g o-tirozin, 15 ml tetrahidro-furán és 15 ml
20%-os nátrium-karbonát-oldat elegyéhez hozzáadunk 2,0 g di-tercier-butil-dikarbonátot, és a kapott elegyet 3 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána 30 ml vízzel hígítjuk, megsavanyítjuk, és háromszor 50 ml diklór-metánnal kirázzuk. Az egyesített diklór-metános részeket magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot dietil-éter és hexán elegyéből átkristályosítjuk, ily módon 1,2 g tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 1,32 (s,9H), 4,13 (m, IH).
b) lépés
Boc-O-benzil-o-Tyr-henzü-észter
1.2 g tercier-butoxi-karbonil-o-tirozin, 1,1 ml benzil-bromid, 1,3 g kálium-karbonát és 40 ml aceton elegyét 20 órán át forraljuk. Ezután az elegyhez hozzáadunk további 0,25 ml benzil-bromidot és 0,36 g kálium-karbonátot, és a reakcióelegyet további 2 órán át forraljuk. Ezután lehűtjük, 40 ml vízzel hígítjuk, és háromszor 75 ml etil-acetáttal kirázzuk. Az egyesített szerves részeket háromszor 50 ml vízzel mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1:4 arányú elegyét használjuk. Ily módon 1,25 g tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,38 (s, 9H), 4,58 (m, IH), 5,06 (m, 4H).
c) lépés
O-Benzil-o-Tyr-benzU-észter-hidroklorid
1,25 g Boc-O-benzil-o-Tyr-benzil-észterről a védőcsoportot a 63. példában leírt módon, dioxános sósav-oldat alkalmazásával lehasítjuk. Ily módon 1,1 g nyers sót kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,24 (m, IH), 5,02 (AB, 2H), 5,12 (s, 2H).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-O-benzil-o-Tyr-benzil-észter 1,1 g O-benzil-o-Tyr-benzil-észtert a 88. példában leírt módon, forrásban lévő toluolban foszgénnel kezelünk. Az így kapott nyers izocianátot feloldjuk 15 ml diklór-metánban, az oldatot 0 °C hőmérsékletre hűtjük, és hozzáadunk 0,35 g morfolint. Az oldatot 3 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd etilacetáttal hígítjuk. Az etil-acetátos oldatot 15 ml 0,1 normál sósavval és kétszer 15 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, majd magnéziumszulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként hexán és etil-acetát 2:3 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,60 g tiszta terméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,65 (m, IH), 5,06 (AB, 2H), 5,07 (s, 2H).
e) lépés
Morfolinil-karbonil-O-benzil-o-Tyr
0,60 g morfolinil-karbonil-O-benzil-o-Tyr-benzilészter, 2 g kálium-karbonát, 5 ml víz és 15 ml metanol elegyét 18 órán át forraljuk. Utána az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot 30 ml vízzel hígítjuk, és a vizes oldatot kétszer 25 ml dietil-éterrel mossuk. Ezután a vizes részt megsavanyítjuk, és háromszor 50 ml etilacetáttal kirázzuk. Az egyesített etil-acetátos részeket magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,35 g nyers savat kapunk.
'H-NMR-spektrum (DMSO-dg), 300 MHz, delta, ppm: 4,37 (m, IH), 5,12 (s, 2H).
f) lépés
Morfölinil-karbonil-o-Tyr
0,35 g morfolinil-karbonil-O-benzil-o-Tyr és 0,35 g 10%-os csontszenes palládium 30 ml metanollal készült elegyét 18 órán át 3,5xl05 Pa nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,33 g nyersterméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (DMSO-dg), 300 MHz, delta, ppm: 4,16 (m, IH).
g) lépés
MorfolimÍ-karboniTo-Tyr-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter
0,10 g morfolinil-karbonil-o-Tyr-t a 76. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,12 g S-MeCys-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 9:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,13 g tiszta terméket kapunk, amely a tirozin-rész szerinti izomerek keveréke.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
(egyik izomer): 1,98 (s, 3H), 4,36 (m, 3H), 4,97 (m,
IH).
94. példa
Morfolinil-karbonil-p-ClTyr-S-MeCys-nor-C-Staizopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése p-klór-fenil-csoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,.
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z* jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-p-klór-Tyr
0,5 g p-klór-tirozin 5 ml 2 normál nátrium-hidroxid-oldat és 20 ml dioxán elegyével készült oldatához a 92. példában leírt módon hozzáadunk 0,36 g morfolinil-karbonil-kloridot. Ily módon 0,26 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
HU 207 869 Β 'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,65 (m, IH), 6,97 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,19 (d, J = 8Hz, 2H).
b) lépés
Morfolinil-karbonil-p-ClTyr-S-MeCys-nor-C-Staizopropil-észter mg morfolinil-karbonil-p-CITyr-t a 76. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 82 mg SMeCys-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 118 mg tiszta terméket kapunk, amely a p-klór-tirozin egységben szereplő aszimmetriacentrum szerinti izomerek keveréke. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm;
egyik izomer: 1,97 (s, 3H), 4,37 (m, 3H), 5,96 (m,
IH).
95. példa
2-Morfolinil-3-fenil-propionil-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinilcsoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport].
a) lépés
2-Morfolinil-3-fenil-propionsav-etil-észter
2,0 g 2-bróm-3-fenil-propionsav-etil-észter és 2,8 g morfolin 5 ml dimetil-formamiddal készült oldatát éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána 75 ml 1%-os sósavval hígítjuk, és háromszor 50 ml dietil-éterrel mossuk. Ezután a vizes részt meglúgosítjuk, és háromszor 100 ml etil-acetáttal kirázzuk.
Az egyesített szerves részeket magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 35:65 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,8 g tiszta terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,12 (t, J = 7 Hz, 3H), 3,36 (m, IH), 4,04 (m, 2H).
b) lépés
2-Morfolinil-3-fenil-propionsav
0,65 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott etilészter, 3,7 ml 1 normál nátrium-hidroxid-oldat és 5 ml metanol elegyét 3 órán át forraljuk. Ezután az oldatot vízmentes sósavval megsavanyítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot nagymértékben csökkentett nyomáson alaposan megszárítjuk.
Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm; 3,90 (széles, 4H), 4,15 (m, IH).
c) lépés
2-MorfolÍnil-3-fenil-propionil-Nle-benzil-észter
0,35 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil) -3 -etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,33 g Nle-O-benzil-észterrel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 39: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,45 g terméket kapunk, amely a morfolinil-fenil-propionsav egységben szereplő aszimmetriacentrum szerinti izomerek keveréke.
Ή-NMR-spektrum (egyik izomer, CDC13), 300 MHz, delta, ppm: 3,68 (m, 4H), 4,57 (m, IH), 5,17 (AB, 2H).
d) lépés
2-Morfolinil-3-fenil-propionil-Nle
0,55 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot úgy hasítjuk le, hogy 50 ml metanolban, 0,28 g 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 2 órán át 2,8xl05 Pa nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,41 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 3,74 (m, 4H), 4,38 (m, IH).
e) lépés
2-Morfolinil-3-fenil-propionil-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, 1 -(3-dimetilamino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 43 mg HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklórmetán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 49 mg tiszta terméket, valamint 47 mg, a morfolinil-fenil-propionil-egység szerinti diasztereomert kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,12 (m, IH), 4,39 (m, IH), 5,00 (m, IH).
96. példa
2-(4-Metil-piperaziml)-3-fenil-propionil-Nle-norC-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése 4-metil-piperazinil-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
2-(4-Metil-piperazinil)-3-fenil-propionsav-etil-észter
1,95 g 2-bróm-3-fenil-propionsav-etil-észtert a 95. példában leírt módon 3,05 g N-metil-piperazinnal reagáltatunk. A nyersterméket kromatográfiás módszerrel tisztítjuk, eluensként diklór-metán és metanol 9; 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,30 g tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1.10 (d, J=7 Hz, 3H), 2,26 (s, 3H), 3,37 (m, IH),
4.00 (m,2H).
HU 207 869 Β
b) lépés
2-(4-Metil-piperazinil)-3-feni.l-propionsav
0,56 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott etilészter, 31 ml 1 normál nátrium-hidroxid-oldat és 20 ml etanol elegyét 16 órán át forraljuk. Utána a reakcióelegybe vízmentes, gáz alakú sósavat vezetünk, majd az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot melegen feloldjuk izopropanol és metanol 1:1 arányú elegyében, az oldatot megszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,55 g nyersterméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 2,72 (s, 3H), 3,80 (m, IH).
c) lépés
2-(4-Metil-piperazÍnil)-3-fenil-propionil-Nle-benzil-észter
0,55 g a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,51 g Nle-O-Bzl-lel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,42 g terméket kapunk, amely a metil-piperazinil-fenil-propionil-egység szerinti epimerek keveréke. ’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm: 1,27 (s, 3H), 2,85 (m, IH), 3,26 (m, IH), 4,54 (m, IH).
d) lépés
2-(4-Metil-piperazinil)-3-feml-propioml-Nle
0,42 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 95. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 0,31 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel. ’H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 2,48 (s, 3H), 4,32 (m, IH).
e) lépés
2-(4-Metil-piperazinil)-3-fenU-propionil-Nle-norC-Sta-izopropil-észter mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott tennéket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetilamino-propil) -3 -etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 60 mg HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklórmetán és metanol 9:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon a metil-piperazinil-fenil-propionil-egység szerinti epimereket 30 mg és 33 mg mennyiségben kapjuk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,35 (s, 3H), 4,16 (m, IH), 4,40 (m, IH), 5,01 (m,
IH).
97. példa
2-(3,5-Dioxo-morfoliml)-3-fenil-propionil-Nle-norC-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése 3,5 dioxo-morfolinil-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
2-(3,5 -Dioxo-morfolinil)-3 -fenil-propionsav-benzilészter
0,21 g HCl-Phe-O-benzil-észter és 0,10 ml trietilamin 10 ml diklór-metánnal készült oldatához hozzáadunk 80 mg glikolsav-anhidridet. Az elegyet 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 200 ml etil-acetáttal hígítjuk. A kapott oldatot kétszer 20 ml 0,1 normál sósavval, utána 20 ml vízzel, és végül 20 ml telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,32 g nyersterméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,14 (m, 2H), 4,12 (m, 4H), 4,95 (m, IH), 5,13 (AB, 2H).
Az előző bekezdésben leírt módon kapott nyers sav és 76 mg piridin 5 ml ecetsav-anhidriddel készült oldatát 18 órán át 100 °C hőmérsékleten tartjuk. Utána a reakcióelegyet 100 ml vízre öntjük, és kétszer 100 ml etil-acetáttal kirázzuk. Az egyesített etil-acetátos részeket 20 ml 0,1 normál sósavval, utána 20 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal, és végül 20 ml vízzel mossuk. A szerves részt magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,23 g nyersterméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,18 (2AB, 4H), 5,19 (AB, 2H), 5,53 (m, IH).
b) lépés
2-(3,5-Dioxo-morfolinil)-3-fenil-propionsav
A fenti a) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 95. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 0,15 g nyersterméket kapunk. ’H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,32 (AB, 4H), 5,30 (m, IH).
c) lépés
2-(3,4-Dioxo-morfolinil)-3-fenil-propionil-Nle-benzil-észter
0,15 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,16 g HCl-Nle-O-benzil-észterrel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklórmetán és metanol 4:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,14 g tiszta terméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,18 (AB, 4H), 4,63 (m, IH), 5,16 (AB, 2H).
d) lépés
2-(3,5-Dioxo-morfolinil)-3-fenil-propionil-Nle
0,14 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 95. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 0,12 g nyersterméket kapunk. ’H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,24 (AB, 4H), 4,62 (m, IH), 5,17 (m, IH).
e) lépés
2-(3,5-Dioxo-morfollnil)-3-fenil-propionil-Nle-norC-Sta-izopropil-észter
HU 207 869 Β
0,12 g, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 88 mg tiszta terméket kapunk.
1 H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,18 (m, IH), 4,32 (s, 4H), 4,48 (m, IH), 5,02 (m,
IH).
98. példa
2-(3-Oxo-morfoUnil)~3-fenil-propioml-Nle-nor-CSta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése 3-oxo-morfolinil-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
N-Glikoloil-fenil-alanin-benzil-észter
2,23 g, a 96. példában leírt módon, fenil-alaninbenzil-észterből és glikolsav-anhidridből nyert acilezési termék 6,6 ml tetrahidro-furánnal készült oldatához 0 °C hőmérsékleten lassan hozzáadunk 1,1 egyenértéknyi mennyiségű borán-dimetil-szulfid komplexet, és a kapott oldatot 5 órán át keverjük. Utána az elegyhez hozzácsepegtetünk 5 ml vizet, majd 5 ml 0,1 normál sósavat. Ezután az elegyet 150 ml vízre öntjük, megsavanyítjuk, és kétszer 150 ml etil-acetáttal kirázzuk. Az egyesített szerves részeket kétszer 30 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal, majd 30 ml vízzel mossuk, a szerves részt magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 39:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,43 g tiszta terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,99 (AB, 2H), 4,97 (m, IH), 5,15 (AB, 2H).
b) lépés
N-( O-Mezil-glikoloil )-fenil-alanin-benzil-észter
0,41 g, az előző lépésben leírt módon kapott alkohol, 0,41 g trietil-amin és 10 ml diklór-metán elegyéhez 0 °C hőmérsékleten hozzácsepegtetünk 0,11 ml mezil-kloridot, és a kapott oldatot 1 órán át 0 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldatot 200 ml etilacetáttal hígítjuk, 30 ml 0,1 normál sósavval, majd 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, magnéziumszulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,25 g nyers mezilátot kapunk, 1 H-NMR-spektrum CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,92 (s, 3H), 4,29 (m, 2H), 4,92 (m, IH), 5,13 (AB,
2H).
c) lépés
N-(Jód-etoxi-acetii)-fenil-alamn-benzil-észter
0,25 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott mezilát és 0.23 g nátrium-jodid 20 ml acetonnal készült elegyét 6 órán át forraljuk. Utána a reakcióelegyet 100 ml vízre öntjük, és kétszer 100 ml etil-acetáttal kirázzuk. Az egyesített etil-acetátos részeket 50 ml telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 9: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,35 g tiszta jodidot kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,96 (s, 2H), 4,93 (m, IH), 5,11 (AB, 2H).
d) lépés
-(3-Oxo-morfolinil)-3 -fenil-propionsav-benzllészter
0,16 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott jodid 3 ml tetrahidro-furánnal készült oldatához -78 °C hőmérsékleten hozzácsepegtetünk 1,1 egyenértéknyi mennyiségű kálium-bisz-(trimetil-szilil)-amidot, és a kapott oldatot 5 órán át -78 °C hőmérsékleten keverjük. Ezután lassan hozzáadunk 1 ml ammónium-kloridoldatot, majd az egész elegyet 100 ml vízre öntjük. A vizes elegyet megsavanyítjuk, kétszer 100 ml etil-acetáttal kirázzuk, az egyesített etil-acetátos részeket 20 ml telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 9:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 71 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,10 (AB, 2H), 5,19 (AB, 2H), 5,27 (m, IH).
e) lépés
2-(3-Oxo-morfolinil)-3 -fenil-propionsav mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 95. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 70 mg nyers savat kapunk. Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 3,92 (AB, 2H), 5,04 (m, IH).
f) lépés
2-(3-Oxo-morfolinil)-3-fenil-propionil-Nle-benzilészfer mg, a fenti e) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 98 mg Nle-O-benzil-észterrel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 39: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 127 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,14 (s, 2H), 5,54 (m, IH), 5,16 (m, 2H), 5,32 (m,
IH).
g) lépés
2-(3-Oxo-morfolinil)-3-fenil-propioni.l-Nle
127 mg, a fenti e) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 95. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 114 mg nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel. 'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,12 (széles, 2H), 4,52 (széles, IH).
HU 207 869 Β
h) lépés
2-(3-Oxo-morfolinil)-3-fenil-propionil-Nle-nor-CSta-izopropil-észter
114 mg, a fenti g) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetilamino-propil)-3 -etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 92 mg HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklórmetán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 13 mg tiszta terméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,42 (m, 2H), 5,02 (m, 2H).
99. példa
3-Oxo-morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése 3-oxo-morfolinil-karbonil-amino-csoport, Q jelentése hidrogénatom,
M jelentése fenilcsoport,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z‘ jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
3-Oxo-morfolinil-karbonil-Phe-benzil-észter mg, pentánnal mosott nátrium-hidrid 5 ml tetrahidro-furánnal készült szuszpenziójához hozzáadjuk 200 mg 3-oxo-morfolin 10 ml tetrahidro-furánnal készült oldatát, és az elegyet 5 percig szobahőmérsékleten keverjük, majd 0 °C hőmérsékletre hűtjük. Ezen a hőmérsékleten hozzácsepegtetjük 584 mg Phe-OBzl-izocianát 15 ml tetrahidro-furánnal készült oldatát, és az így kapott elegyet 1 órán át 0 °C hőmérsékleten keverjük. Utána a reakcióelegyet 100 ml vízre öntjük, és kétszer 100 ml etil-acetáttal kirázzuk. Az egyesített etil-aeetátos részeket 20 ml 0,1 normál sósavval, majd 20 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és diklór-metán 4:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 132 mg tiszta terméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,24 (s, 2H), 4,82 (m, IH), 5,18 (AB, 2H).
b) lépés
3-Oxo-motfolinil-karbonll-Phe
0,64 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 95. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 0,44 g nyers savat kapunk. ‘H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,22 (s, 2H), 4,51 (m, IH).
c) lépés
3-Oxo-morfolinil-karbonil-Phe-Nle-benzil-észter
0,44 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,41 g norleucin-benzil-észterrel. Ily módon 0,73 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,25 (m, 2H), 4,61 (m, IH), 4,16 (m, 2H).
d) lépés
3-Oxo-moifolinil-karbonil-Phe-Nle
0,72 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 95. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 0,56 g nyersterméket kapunk. ‘H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,19 (m, 2H), 4,65 (m, 2H).
e) lépés
3-Oxo-motfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter
125 mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetilamino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 91 mg HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklórmetán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 73 mg terméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,20 (m, 2H), 4,39 (m, IH), 4,52 (m, IH), 5,01 (m,
IH).
700. példa
Metoxi-etil-amino-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Staizopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése N3-(2-metoxi-etil)-ureido-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
X jelentése ciklohexilcsoport,
R2 jelentése n-butil-csoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport].
a) lépés
Metoxi-etll-amlno-karbonil-Phe-benzil-észter
0,20 g Phe-O-Bzl-izocianát 10 ml diklór-metánnal készült oldatához keverés közben hozzáadunk 59 mg O-metil-etanol-amint, és az oldatot 1 órán át keverjük. Ezután 200 ml dietil-éterrel hígítjuk, a dietil-éteres oldatot 20 ml 0,1 normál sósavval, majd 20 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, magnéziumszulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,20 g nyersterméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,28 (s, 3H), 4,80 (m, IH), 5,11 (m, 2H).
b) lépés
Metoxi-etU-amino-karbonll-Phe
0,20 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott benzil-észter, 0,10 g 10%-os csontszenes palládium és 50 ml metanol elegyét 2 órán át 3,5x1ο5 Pa nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort célkén kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,19 g nyersterméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 3,24 (s, 3H), 4,30 (m, IH).
HU 207 869 Β
c) lépés
Metoxi-etil-amino-karbonil-Phe-Nle-benzil-észter
0,19 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,14 g norleucin-benzil-észterrel. Ily módon 0,23 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,26 (s, 3H), 4,52 (m, 2H), 5,10 (m, 2H).
d) lépés
Metoxi-etil-amino-karbonil-Phe-Nle
0,23 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termék, 0,12 g 10%-os csontszenes palládium és 50 ml etanol elegyét 2 órán át 3?xlO5 Pa nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,16 g nyersterméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (DMSO-dfi), 300 MHz, delta, ppm: 3,21 (s, 3H), 4,10 (m, IH), 4,41 (m, IH).
e) lépés
Metoxi-etil-amino-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Staizopropil-észter
0,17 g, a fenti d) lépésben leírt módon kapott savat az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,13 g, HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,18 g tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,28 (s, 3H), 4,32 (m, IH), 4,45 (m, IH), 4,57 (m,
IH), 5,03 (m, IH).
101. példa
Hidroxi-etil-amino-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Staizopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése N3-(2-hidroxi-etil)-ureido-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom.
R2 jelentése n-butil-csopc t,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z* jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Hidroxi-etil-amino-karbonil-Phe-benzil-észter
0,50 g Phe-OBzl-izocianát 10 ml diklór-metánnal készült oldatához hozzáadunk 0,12 g etanol-amint, és a kapott oldatot 4 órán át keverjük. Utána az elegyet 200 ml etil-acetáttal hígítjuk, az oldatot 20 ml 0,1 normál sósavval, majd 20 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,44 g nyersterméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,79 (m, ÍH), 4,12(m, 2H).
b) lépés tercier-Butil-dimetil-szililoxi-etil-amino-karbonilPhe-benzil-észter
0,44 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott alkohol ml dimetil-formamiddal készült oldatához hozzáadunk 0.24 g tercier-butil-dimetil-szilil-kloridot és 0,22 g imidazolt. 18 órával később az elegyet 150 ml vízre öntjük, és kétszer 150 ml etil-acetáttal kirázzuk. Az egyesített etil-acetátos részeket 30 ml vízzel mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 39:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,50 g tiszta terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDCL), 300 MHz, delta, ppm:
0,89 (s, 9H), 4,98 (m, IH), 5,13 (m, 2H).
c) lépés tercier-Butil-dimetil-szililoxi-etil-amino-karbonilPhe
0,18 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott benzil-észter és 0,09 g 10%-os csontszenes palládium 30 mi metanollal készült elegyét 3 órán át 3,5xl05 Pa nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,13 g nyersterméket kapunk. Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 0,89 (s, 3H), 4,27 (m, IH).
d) lépés tercier-Butil-dimetil-szililoxl-etil-aimno-karbonilPhe-Nle-benzil-észter
0,13 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott savat az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 96 mg norleucin-benzil-észterrel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,10 g tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm:
0,91 (s, 9H), 4,50 (m, 2H), 4,72 (m, IH), 5,11 (s, 2H).
e) lépés tercier-Butil-dimetil-szililoxi-etil-ainino-karbonilPhe-Nle
A fenti d) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 100. példában leírt hidrogénezéssel hasítjuk le, ily módon 78 mg nyersterméket kapunk, iH-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 0,88 (s, 9H), 4,00 (m, IH), 4,37 (m, IH).
f) lépés tercler-Butil-dimetil-szililoxl-etil-amino-karbonilPhe-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter mg, a fenti e) lépésben leírt módon kapott savat az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 45 mg HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. Ily módon 116 mg nyersterméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDCl3), 300 MHz, delta, ppm:
0,86 (s, 9H), 4,38 (m, IH), 4,45 (m, ÍH), 5,02 (m,
IH).
g) lépés
Hidroxi-etil-amino-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Staizopropil-észter
116 mg, a fenti f) lépésében leírt módon kapott termékről a védőcsoportot úgy hasítjuk le, hogy 5 ml tetrahidro-furánban 2 órán át 1,5 egyenértéknyi mennyiségű tetrabutil-ammónium-fluoriddal kezel1
HU 207 869 Β jük. Ezután a reakcióelegyet 200 ml etil-acetáttal hígítjuk, az oldatot 20 ml 0,1 normál sósavval, majd 20 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 9:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 63 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDCl3), 300 MHz, delta, ppm: 4,41 (m, IH), 4,50 (m, IH), 4,74 (m, IH), 5,07 (m, IH).
102. példa
Morfolinil-szulfonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-szulfonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Zl jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-szulfonil-Phe-Nle-benziTészter
0,29 g Phe-Nle-O-Bzl, 0,40 g morfolinil-szulfonilklorid és 0,36 g trietil-amin 10 ml diklór-metánnal készült oldatát 16 órán át főre aljuk. Ezután az elegyhez további morfolinil-szulfonil-kloridot és trietil-amint adunk, és további 8 órán át forraljuk. Ezután az oldatot 50 ml etil-acetáttal hígítjuk, 25 ml 0,1 normál sósavval, majd 25 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk, A maradékot kromatografáljuk, eluensként hexán és etil-acetát 2:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,36 g tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,04 (m, IH), 4,60 (m, IH), 5,15 (m, 2H).
b) lépés
Morfolinil-szulfonil-Phe-Nle
0,36 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 100. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 0,30 g nyersterméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 3,95 (m, IH), 4,10 (m, IH).
c) lépés
Morfolinil-szulfonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropilészter
0,29 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3 -etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,12 g HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A kapott terméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 29:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,29 g tiszta termékhez jutunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,02 (m, IH), 4,41 (m, 2H), 5,06 (m, IH).
103. példa
Morfolinil-metil-foszforil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-P-(OCH3)(O)-amino-csoport, M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-(metil-foszforil)-Phe-Nle-benzil-észter
0,30 g Phe-Nle-OBzl, 0,30 g trietil-amin és 0,44 g foszforsav-monometil-észter-morfolin-klorid 10 ml diklór-metánnal készült oldatát 60 órán át keverjük. Utána az elegyet 50 ml etil-acetáttal hígítjuk, 25 ml, 0,1 normál sósavval, majd 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,18 g terméket kapunk, amely az aszimmetriás foszforatom szerinti izomerek keveréke.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,57 (d, J= 10 Hz, 3H), 4,50 (m, IH), 5,09 (m, 2H).
b) lépés
Morfolinil-(metil-foszforii)-Phe-Nle
A fenti b) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 100. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 0,10 g nyersterméket kapunk. 'H-NMR-spektrvm (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 3,26 (d, J-10 Hz, 3H), 3,96 (m, IH).
c) lépés
Morfolinil-(metil-foszforil)-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter
0,10 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimÍd-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 58 mg HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel.
A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 28 mg tiszta terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,61 (d, J-11 Hz, 3H), 4,44 (m, IH), 4,43 (m, IH),
4,99 (m,lH).
104. példa
Tiomorfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése tiomorfolinil-karbonil-amino-csoport,
Q jelentése hidrogénatom,
M jelentése fenilcsoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
HU 207 869 Β
a) lépés
Tttnorfolinil-karbonil-Phe-benzil-észter
1,0 g Phe-OBzI-izocianát 10 ml diklór-metánnal készült oldatához 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 0,85 g tiomorfolint, és a kapott oldatot másfél órán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána 50 ml etil-acetáttal hígítjuk, és kétszer 25 ml 0,1 normál sósavval mossuk. A szerves részt magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 1,26 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
1 H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,83 (m, 2H), 5,15 (AB, 2H).
b) lépés riomorfolinil-karbonil-Phe
1,26 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termék, 4,5 g kálium-karbonát, 15 ml víz és 70 ml metanol elegyét 60 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 16 órán át forraljuk. Ezután a szerves oldószert ledesztilláljuk, és a maradék vizes oldatot kétszer 50 ml dietil-éterrel mossuk. Ezután a vizes részt megsavanyítjuk, és háromszor 50 ml diklór-metánnal kirázzuk.
Az egyesített diklór-metános részeket magnéziumszulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük és az oldószert ledesztilláljuk.
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 3,01 (m, 2H), 4,26 (m, IH).
c) lépés
Tiomorfolinil-karbonil-Phe-Nle-benzil-észter
0,72 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,75 g norleucin-benzil-észterrel. Ily módon 1,1 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,47 (m, IH), 4,58 (m, ÍH), 5,12 (m, 2H).
d) lépés
Tiomorfolinil-karbonil-Phe-Nle
1,1 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a fenti b) lépésben leírt módon lehasítjuk. Ily módon 0,70 g nyersterméket kapunk, amelyet közvetlenül felhasználunk a következő reakciólépésben.
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 3,59 (m, 4H), 4,46 (m, IH), 4,73 (m, IH).
e) lépés
Tiomorfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter
0,70 g, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,50 g HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 29:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,65 g tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,28 (m, IH), 4,43 (m, IH), 4,57 (m, IH), 5,00 (m,
IH).
105. példa ] -Oxo-tiomorfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Staizopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése 1-oxo-tiomorfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
0,10 g, a 104. példa e) lépésében leírt módon kapott terméket 5 ml diklór-metánnal készült oldatához 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 35 mg m-klórperbenzoesavat, és a kapott oldatot negyedórán át keverjük. Utána 20 ml etil-acetáttal hígítjuk, kétszer 20 ml 10%-os nátrium-szulfit-oldattal, majd 20 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 9: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 82 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,29 (m, IH), 3,38 (m, IH), 4,59 (m, IH), 4,94 (m,
IH).
106. példa
1,1 -Dioxo-tio-mofi-oUnil-karbonil-Phe-Nle-nor-CSta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése 1,1-dioxo-tiomorfolinil-karbonil-aminocsoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
1,1 -Dioxo-tiomorfoliníTkarbonil-Phe-benzH-észter
0,64 g, a 104. példa a) lépésében leírt módon kapott termék 20 ml diklór-metánnal készült oldatához 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 1,0 g m-klór-perbenzoesavat, és a kapott oldatot 16 órán át keverjük. Utána az oldatot 100 ml etil-acetáttal hígítjuk, és háromszor 50 ml 10%-os nátrium-szulfit-oldattal mossuk. A szerves részt magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,47 g tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,79 (m, IH), 5,16 (AB, 2H).
b) lépés
1,1 -Dioxo-tiomorfolÍnil-karbonil-Phe
0,47 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 100. példában leírt módon
HU 207 869 Β lehasítjuk. Ily módon 0,30 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel. ’H-NMR-spektrum (DMSO-dg), 300 MHz, delta, ppm: 4,05 (m, ÍH), 4,60 (m, ÍH), 5,15 (AB, 2H).
c) lépés
1,1 -Dioxo-tiomorfolinil-karbonil-Phe-Nle-benzilészter
0,30 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,29 g norleucin-benzil-észterrel. Ily módon 0,46 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,50 (m,2H), 5,12 (AB, 2H).
d) lépés
1,1 -Dioxo-tiomorfolinil-karbonil-Phe-Nle
0,46 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 100. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 0,36 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel. ‘H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 3,97 (m, ÍH), 4,32 (m, ÍH).
e) lépés
1,1-Dloxo-morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Staizopropil-észter
0,26 g, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,18 g HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és etanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,31 g tiszta terméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,28 (m, ÍH), 4,47 (m, ÍH), 4,60 (m, ÍH), 5,02 (m,
ÍH).
107. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Stá-benzil-észter [(I) általános képletű vegyüiet, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Boc-nor-C-Sta-benzil-észter
0,10 g Boc-nor-C-Sta-t az 58. példában leírt, szokásos módszerrel, l-(3-dimetil-araino-propil)-3-etil-karbodiitnid-hidroklorid jelenlétében, továbbá 0,25 egyenértéknyi 4-dimetil-amino-piridin jelenlétében 0,11 g benzil-alkohollal észteresítjük. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 39:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,10 g tiszta észtert kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,39 (s, 9H), 4,10 (s, ÍH), 4,13 (s, 1H), 5,14 (AB,
2Η).
b) lépés nor-C-Sta-benzil-észter-hidroklorid
0,10 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 63. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 96 mg nyers sót kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
’H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,16 (m, ÍH), 5,12 (m, 2H).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-benzil-észter
0,12 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 84 mg HCl-nor-C-Sta-OBzl-lel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklórmetán és metanol 19:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 92 mg tiszta terméket kapunk.
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,08 (s, 3H), 4,40 (m, 3H), 5,14 (AB, 2H).
108. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-ciklohexil-metil-észter [(I) általános képletű vegyüiet, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése ciklohexil-metoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Boc-nor-C-Sta-ciklohexll-metil-észter mg Boc-nor-C-Sta-t a 107. példában leírt módon 80 mg eiklohexil-metanollal észteresítünk.
A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 39:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 40 mg tiszta terméket kapunk. ‘H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,35 (s, 9H), 3,39 (d, J = 6 Hz, ÍH), 4,08 (m, ÍH).
b) lépés nor-C-Sta-ciklohexll-metil-észter-hidroklorid mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 63. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 37 mg nyers sót kapunk. ’H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 3,53 (s, ÍH), 4,10 (m, ÍH).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-clklohexil-metil-észter mg morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-t az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 34 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékkel. A kapott nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19:1 arányú ele61
HU 207 869 Β gyét használjuk. Ily módon 50 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,12 (s, 3H), 4,42 (m, 3H).
109. példa
2-(Morfolinil-karboniloxi)-3-fenil-propionil-Nlenor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karboniloxi-csoport,
M jelentése feniícsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése izopropoxi-karbonll-csoport.]
a) lépés
2-(Morfolinil-karboniloxi)-3-fenil-propionsav-metil-észter
0,74 g fenil-tejsav-metil-észter 10 ml diklór-metánnal készült oldatához hozzáadunk 0,60 g morfolinilkarbonil-kloridot és 1,1 g 4-dimetil-amino-piridint, és az így kapott oldatot éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután hozzáadunk további 0,60 g morfolinil-karbonil-kloridot, és az elegyet további két napig keverjük. Utána 100 ml vízre öntjük, és kétszer 100 ml etil-acetáttal kirázzuk. Az egyesített etil-acetátos részeket 20 ml 0,1 normál sósavval, majd 20 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 1,24 g nyerstemiéket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,75 (s, 3H), 5,19 (m, IH).
b) lépés
2-(Morfolinil-karbonUoxi)-3-fenU-propionsav
1,2 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot az 55, példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 1,1 g nyers savat kapunk. 'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,22 (m, IH).
c) lépés
2-(Morfolinil-karboniloxi)-3-fenil-propionil-Nlebenzil-észter
0,12 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-amino-propil)3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,12 g Nle-OBzl-lel. Az így kapott, 0,20 g súlyú nyersterméket közvetlenül tovább reagáltatjuk. Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,59 (m, IH), 5,14 (AB, 2H), 5,37 (m, IH).
d) lépés
2-(Morfolinil-karboniloxi)-3-fenil-propionil-Nle
0,20 g, a fenti e) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 100. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 0,16 g nyers savat kapunk, amelyet közvetlenül tovább reagáltatunk.
‘H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,15 (m, IH), 5,09 (m, IH).
e) lépés
2-( Morfolinil-karboniloxi)-3 -fenil-propionil-Nlenor-C-Sta-izopropil-észter
0,15 g, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,11 g HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 19: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,16 g nyersterméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,22 (m, IH), 4,41 (m, IH), 5,02 (m, IH), 5,28 (m,
IH).
110. példa
O-Acetil-morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-CSta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése feniícsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
W jelentése a-acetoxi-metilén-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport, és
Z' jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
0,10 g, a 17. példában leírt módon kapott tennék 1 ml piridinnel készült oldatához hozzáadunk 26 mg ecetsav-anhidridet, és a kapott oldatot éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána 100 ml etil-acetáttal hígítjuk, kétszer 10 ml 0,1 normál sósavval, majd kétszer 10 ml 0,1 normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, ezután magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert íedesztilláljuk. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklórmetán és metanol 19: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 90 mg tiszta terméket kapunk, 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,16 (s, 6H), 4,37 (m, IH), 4,52 (m, 2H), 4,88 (d,
J = 3Hz, IH), 4,96 (m, IH).
111. példa
Metil-amino-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése ureido-csoport,
M jelentése feniícsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Metil-amino-karbonil-Phe-benzil-észter
0,30 g Phe-OBzl-izocianát 20 ml diklór-metánnal készült oldatához hozzáadunk 0,51 ml 2,3 mólos, benzolos metil-amin-oldatot, és az így kapott oldatot 4 órán át keverjük. Utána 200 ml etil-acetáttal hígítjuk, az oldatot 20 ml 0,1 normál sósavval, majd 20 ml 0,1
HU 207 869 Β normál nátrium-hidroxid-oldattal mossuk. A szerves részt magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 0,30 g nyersterméket kapunk, amelyet közvetlenül tovább reagáltatunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,69 (d, J=5 Hz, 3H), 4,42 (m, IH), 4,83 (m, 2H).
b) lépés
Metil-amino-karbonil-Phe
0,30 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 100. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 0,23 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel. ’H-NMR-spektrum (DMSO-d^), 300 MHz, delta, ppm: 2,62 (s, 3H), 4,33 (m, IH).
c) lépés
Metil-amino-karbonÍl-Phe-Nle-benzil-észter
0,23 g, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk Nle-OBzl-lel. Ily módon 0,38 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül reagáltatunk tovább.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,51 (széles, 3H), 4,29 (ra, IH), 4,46 (m, IH), 5,14 (s,2H).
d) lépés
MetU-amino-karbonil-Phe-Nle
0,37 g, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot a 100. példában leírt módon lehasítjuk. Ily módon 0,29 g nyers savat kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel. ‘H-NMR-spektrum (DMSO-dg), 300 MHz, delta, ppm: 2,52 (d, J=5 Hz, 3H), 4,17 (m, IH), 4,46 (m,
IH).
e) lépés
Metil-amino-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter
0,15 g, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,13 g HCl-nor-C-Sta-OiPr-rel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 9:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,13 g tiszta terméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,77 (d, J-5 Hz, 3H), 4,34 (m, 2H), 4,47 (ra, IH),
4,74 (m, IH), 5,01 (m, IH).
112. példa
Morfolinti-karbonti-Thala-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter [(Ί) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése 2-tienil-csoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Thala
100 mg 2-tienil-alanin 10 ml dioxán és 5 ml víz elegyével készült, és nátrium-hidroxiddal ph=ll-re beállított oldatához hozzáadunk 96 mg morfolinil-karbonil-kloridot, és az elegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután pH-ját újra 11-re állítjuk, és hozzáadunk további 40 mg morfolinil-karbonil-kloridot. További 2 órás keverés után a vizes oldatot diklórmetánnal mossuk, majd pH-ját körülbelül 2-re állítjuk, és etil-acetáttal kirázzuk. A szerves részt elválasztjuk, telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. Ily módon 66 mg köztiterméket kapunk.
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Thala-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter
Al 55. példában leírt általános módszer szerint eljárva, és 100 mg, a 92. példa b) lépésében leírt módon kapott termékből, 66 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termékből, 48 mg diciklohexil-karbodiimidből, 32 mg hidroxi-benzotriazolból és 20 mg N-metilmorfolinból kiindulva 168 mg nyersterméket kapunk. Ezt a nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, ily módon 59 mg tiszta terméket kapunk.
’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,13 (m, 6H), 2,05 (s, 3H), 3,0-3,4 (4H, m), 3,53,65 (4H, m) és 6,85-7,15 (m, 3H).
113. példa
MorfolinU-karbonil-Nphala-S-MeCys-nor-C-Staizopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése 1-naftil-csoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Moifolinil-karbonil-Nphala
A 112. példa a) lépésében leírt általános módszer szerint eljárva, és 420 mg morfolinil-karbonil-kloridot 3 ml 1 normál nátrium-hidroxid-oldat és 200 mg nátrium-hidrogén-karbonát jelenlétében, 2,5 ml tetrahidrofurán és 2,5 ml víz elegyében 500 mg l-naftil-alaninnal reagáltatva 120 mg kívánt köztiterméket kapunk.
b) lépés
Morfolinti-karbonil-Nphala-S-MeCys~nor-C-Staizopropil-észter
A szokásos kapcsolási módszert alkalmazva, és 145 mg, a 93. példa b) lépésében leírt módon kapott terméket 131 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termékkel 82 mg diciklohexil-karbodiimid, 55 mg hidroxibenzotriazol és 45 μΐ N-metil-morfolin jelenlétében 15 ml diklór-metánban reagáltatva 253 mg terméket kapunk. Ezt a terméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként 1-1,5% metanolt tartalmazó kloroformot használunk. Ily módon 83 mg tennéket kapunk.
HU 207 869 Β 1 H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,2 (d, J=5 Hz, 6H), 2,01 (s, 3H), 3,05 (m, 2H),
3,41 (m, 2H), és 6,75-8,18 (7H, m).
114. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-metilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
Q jelentése hidrogénatom,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése metoxi-karbonil-csoport.]
A szokásos kapcsolási módszer szerint járunk el, és 135 mg 8-MeCys-nor-C-Sta-metil-észter-hidrokloridot
32,1 mg N-metil-morfolin, 42,9 mg hidroxi-benzotriazol és 65,4 mg diciklohexil-karbodiimid jelenlétében, 20 ml diklór-metánban 88,2 mg morfolinil-karbonilPhe-vel reagáltatunk. Az így kapott terméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként kloroform és metanol 99:1 térfogatarányú elegyét használjuk. Ily módon 103 mg tiszta terméket kapunk, amely azonos az 58. példában leírt módon kapott termékkel.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,1 (s, 3H), 3,7 (s, 3H), 3,0-3,4 (m, 4H), 3,5-3,84 (m, 4H) és 7,3 (s, 5H).
115. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-Nmetil-amid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
Q jelentése hidrogénatom,
M jelentése fenilcsoport,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése N-metil-karboxamido-csoport.] mg, a 114. példában leírt módon kapott terméket feloldunk 10 ml metanolban, és az elegybe telítésig metil-amint vezetünk. A reakcióelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten tartjuk, majd az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot dietil-éterrel eldörzsöljük. Ily módon 30 mg terméket kapunk, amely azonos a 86. példában leírt módon kapott termékkel.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2.1 (s, 3H), 2,65 (3H, s), 2,85 (d, J = 5 Hz, 2H) és
7.2 (s, 5H).
116. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-C-Sta-N-(trÍfluor-etil)-amid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése ct-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése N-(trifluor-etil)-karboxamido-csoport.]
a) lépés
Boc-nor-C-Sta-N-(trifluor-etil)-amid
Az általános kapcsolási módszer szerint járunk el, és 33 mg trifluor-etil-amin-hidrokloridot és 75,3 mg Boc-nor-C-Sta-t 20 ml diklór-metánban mint oldószerben, 25 mg N-metil-morfolin, 33 mg hidroxi-benzotriazol és 51,5 mg diciklohexil-karbodiimid jelenlétében reagáltatunk, ily módon habos anyag formájában 121 mg kívánt köztiterméket kapunk.
b) lépés nor-C-Sta-N-(trifluor-etil)-amid-hidroklorid
A fenti a) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot úgy hasítjuk le, hogy az anyagot 5 ml dioxános sósav-oldattal másfél órán át szobahőmérsékleten kezeljük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, ily módon 87 mg terméket kapunk.
c) lépés
Boc-S-MeCys-nor-C-Sta-N-(trifluor-etil)-amid
Az általános kapcsolási módszer szerint járunk el, és 87 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket 20 ml diklór-metánban, 25,3 mg N-metil-morfolin, 33,8 mg hidroxi-benzotriazol és 51,5 mg diciklohexilkarbodiimid jelenlétében 58,8 mg Boc-S-MeCys-szel reagáltatjuk. Ily módon 146 mg kívánt köztiterméket kapunk,
d) lépés
S-MeCys-nor-C-Sta-N-(trifluor-etil)-amid-hidroklorid
146 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott termékről a védőcsoportot úgy hasítjuk le, hogy az anyagot másfél órán át szobahőmérsékleten 5 ml telített dioxános sósav-oldattal kezeljük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, ily módon 121 mg terméket kapunk.
e) lépés
Moifolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-N(trifluor-etil)-amid
Ismét a szokásos kapcsolási módszer szerint eljárva, és 121 mg, a fenti d) lépésben leírt módon kapott terméket 20 ml diklór-metánban, 25,3 mg N-metilmorfolin, 33,8 mg hidroxi-benzotriazol és 51,5 mg diciklohexil-karbodiimid jelenlétében 69,5 mg morfolinil-karbonil-Phe-vel reagáltatva 123 mg terméket kapunk. Ezt a terméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként kloroform és metanol 99: 1 térfogatarányú elegyét használjuk. Ily módon 57 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
3,1-3,5 (m, 4H), 3,5-3,8 (m, 4H) és 7,3 (s, 5H).
117. példa (2-Metoxi-karbonil-pirrolidin-l-il)-karbonil-PheS-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése (2-metoxi-karbonil-(s)-pirrolidin-l-il)karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
HU 207 869 Β
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés (2-Metoxi-karbonil-pirrolidm-l-il)-karbonil-Phebenzil-észter mg prolin-metil-észter-hidroklorid és 70 μΐ N,Ndiizopropil-etil-amin 10 ml diklór-metánnal készült oldatához 0 ’C hőmérsékleten hozzáadunk 112 mg 1benziloxi-karbonil-2-fenil-etil-izocianátot, és az elegyet éjszakán át keverjük. A reakcióelegy feldolgozása után 153 mg kívánt köztiterméket kapunk.
b) lépés (2-Metoxi-karbontt-pirrolidin-l-il)-karbonil-Phe
A 18. példa b) lépésében leírt módon eljárva a fenti a) lépésben leírt módon kapott termékről a benzilcsoportot lehasítjuk, ily módon 170 mg köztiterméket kapunk.
c) lépés (2 -Metoxi-karbonil-pirrolidin-1 -il)-karbonil-PheS-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter
A szokásos kapcsolási módszer szerint eljárva, 174 mg, a 92. példa b) lépésében leírt módon kapott terméket 10 ml diklór-metánban 82 mg diciklohexil-karbodiimid, 55 mg hidroxi-benzotriazol és 45 μΐ N-metilmorfolin jelenlétében 140 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékkel kondenzálunk, ily módon 230 mg nyersterméket kapunk. Ezt a nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként 1-1,5% metanolt tartalmazó kloroformot használunk. Ily módon 102 mg terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,21 (6H, m), 2,09 (s, 3H), 2,78-2,89 (2H, m),
3,0-3,2 (2H, m), 3,65 (s, 3H) és 7,12-7,32 (m, 5H).
118. példa
N-Metil-N-(metoxi-karbonil-metilj-amino-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése N3-metil-N3-(metoxi-karbonil-metil)-ureido-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport].
a) lépés
N-(Metoxi-karbonil-metil)-N-metil-amino-karbonil-Phe-benzil-észter
171 mg L-fenil-alanin-benzil-észter, 72 mg N-metil-N-klór-karbonil-glicin-metil-észter és 47 μΐ N-metil-morfolin 15 ml diklór-metánnal készült elegyét 0 °C hőmérsékleten összekeverjük, majd éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Utána hozzáadunk 10 mg 4dimetil-amino-piridint, és az elegyet további 3 órán át keverjük. Ezután további 40 mg karbamoil-kloridot adunk az elegyhez, és további néhány napon át keverjük. Ezután az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként kloroformot használunk. A 22-30. frakcióból 105 mg tiszta köztiterméket kapunk.
b) lépés
N-(Metoxi-karbonil-metil)-N-metil-amino-karbonil-Phe
A fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket a 18. példa b) lépésében leírt általános módszerrel debenzilezzük, ily módon 129 mg nyers köztiterméket kapunk.
c) lépés
N-Metil-N-(metoxi-karbonil-metil)-amino-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter A fent leírt kapcsolási módszer szerint eljárva, és
155 mg, a 92. példa b) lépésében leírt módon kapott terméket 10 ml diklór-metánban 81 mg diciklohexilkarbodiimid, 53 mg hidroxi-benzotriazol és 43 μΐ Nmetil-morfolin jelenlétében 115 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékkel kondenzálva 251 mg terméket kapunk. Ezt a terméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként 1-2% metanolt tartalmazó kloroformot használunk. Ily módon 70 mg kívánt terméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,23 (m, 6H), 2,03 (s, 3H), 2,9 (s, 3H), 3,65 (s, 3H) és 7,1-7,28 (m,5H).
119. példa
N-Metil-N-(metoxi-karbonil-metil)-amino-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése N3-metil-N3-(metoxi-karbonil-metil)-ureido-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Nle-nor-C-Sta-hidroklorid
A szokásos kapcsolási módszer szerint eljárva, és 78 mg Boc-Nle-t 10 ml diklór-metánban 69 mg diciklohexil-karbodiimid, 45 mg hidroxi-benzotriazol és 37 μΐ N-metil-morfolin jelenlétében nor-C-Sta-izopropil-észter-hidrokloriddal kapcsolva 171 mg terméket kapunk.
A kapott termékről a tercier-butoxi-karbonil-csoportot úgy hasítjuk le, hogy az anyagot 3 órán át 10 ml, sósavval telített dioxánnal kezeljük.
A reakcióelegy feldolgozása után 155 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
b) lépés
N-Metil-N-(metoxi-karbonil-metil)-amino-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter
Ismét a szokásos kapcsolási módszer szerint eljárva, és 101 mg, a 118. példa b) lépésében leírt módon kapott terméket 70 mg diciklohexil-karbodiimid, 46 mg hidroxi-benzotriazol és 37 μΐ N-metil-morfolin
HU 207 869 Β jelenlétében 155 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termékkel kondenzálva 209 mg terméket kapunk. Ezt a terméket szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, eluensként 0,5-1% metanolt tartalmazó kloroformot használunk. Ily módon 51 mg terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
0,85 (t, J = 5 Hz, 3H), 1,12 (m, 6H), 2,77 (s, 3H),
3,09-3,19 (m, 2H), 3,62 (s, 3H) és 7,1-7,29.
720. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-N-(2-metilbutilfamid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése N-(2-metil-butil)-karboxamido-csoport.]
a) lépés nor-C-Sta-N-(2-metil-butil)-amid-hidroklorid
80,6 mg Boc-nor-C-Sta-ból és 22,3 mg 2-metil-butil-aminból kiindulva, és ezeket a 64. példa a) lépésében leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálva, majd a kapott vegyületről a védőcsoportot a 64. példa b) lépésében leírt módon lehasítva 87 mg cím szerinti vegyületet kapunk.
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-N-(2-metilbutilfamid
100 mg morfolinil-karbonil-Phe-Nle-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk nor-C-Sta-N-(2-metil-butil)-amiddal. A kapott nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként kloroform és metanol 99: 1 arányú elegyét használjuk. 80 db, egyenként 4 ml térfogatú frakció után (az oldószerek aránya a keverékben: 97,5:2,5) 80 mg kívánt terméket kapunk.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
0,8-1,05 (m, 6H), 2,5 (d, J = 5 Hz, 2H), 3,0-3,4 (m,
4H), 3,4-3,84 (m, 4H), 5,35 (d, J = 5 Hz, IH) és 7,3 (s,5H).
121. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-N(2,2-dimetil-3-dimetil-amino-propil)-amid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése N-(2,2-dimetil-3-dimetil-amino-propil)karboxamido-csoport.] a) lépés nor-C-Sta-N-(2,2-dimetil-3-dimetil-ammo-propil)amid-hidroklorid mg Boc-nor-C-Sta-ból és 22 mg N,N,2,2-tetrametil-l,3-propán-diaminból kiindulva, és a 64. példa a) lépésében leírt módszerrel a kondenzációt diciklohexilkarbodiimid jelenlétében végezve, majd a kapott vegyületről a védőcsoportot a 64. példa b) lépésében leírt módon lehasítva 98 mg kívánt köztiterméket kapunk.
b) lépés
S-MeCys-nor-C-Sta-N-(2,2-dimetil-3-dimetil-amino-propil)-amid-hidroklorid mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket diciklohexil-karbodiimid jelenlétében 60 mg BocS-MeCys-szel kondenzálva, majd a tercier-butoxi-karbonil-csoportot lehasítva 120 mg terméket kapunk.
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-N(2,2-dimetil-3-dimetil-amino-propil)-amid
120 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 66 mg morfolinilkarbonil-Phe-vel. Ily módon 116 mg terméket kapunk. Ή-NMR-spektrum (CDC13+CH3OD), 300 MHz, delta, ppm: 0,81 (s, 6H), 1,15 (s, 6H), 2,0 (s, 3H),
3,1-3,4 (m, 4H), 3,4-3,64 (m, 4H) és 7,06-7,15 (m,
5H).
122. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-N-(2pikolilfamid [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése M-(2-pikolil)-karboxamido-csoport.]
a) lépés nor-C-Sta-N-(2-pikolil)-amid-dilüdroklorid
A 64. példa a) lépésében leírt kapcsolási módszer szerint eljárva, és 60,2 mg Boc-nor-C-Sta-ból és 21,6 mg 2-amino-metil-piridinből kiindulva 108 mg Boc-nor-C-Sta-N-(2-pikolil)-amidot kapunk, amelyről a védőcsoportot a 64. példa b) lépésében leírt módon hasítjuk le, ily módon 83 mg cím szerinti köztiterméket kapunk.
b) lépés
S-MeCys-nor-C-Sta-N-(2-pikolil)-amid-dihidroklorid mg Boc-S-MeCys-t az 55. példában leírt módon, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében kondenzálunk 83 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termékkel. Az így kapott, 126 mg súlyú termékről a védőcsoportot dioxánban sósavval lehasítjuk, ily módon 78 mg cím szerinti terméket kapunk.
c) lépés
Morfolinil-karbonil-S-MeCys-iior-C-Sta-N-(2-pikolilfamid
Ismét az 55. példában leírt, diciklohexil-karbodiimid jelenlétében végzett kapcsolási módszer szerint járunk el, és 78 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott terméket 44,9 mg morfoíinil-karbonil-Phe-vel
HU 207 869 Β kondenzálunk. Az így kapott, 113 mg súlyú terméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként 1%-tól 5%ig növekvő mennyiségű metanolt tartalmazó kloroformot használunk. Ily módon 22 mg terméket kapunk. ’H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,05 (s, 3H), 2,85 (J=5 Hz, 2H), 3,0-3,4 (m, 4H),
3,4-3,7 (m, 4H) és 7,0-7,9 (m, 9H).
123. példa
3-Hidroxi-piridin-2-ll-karbonil-Phe-S-MeCys-norC-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése 3-hidroxi-piridin-2-il-karbonil-aminocsoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
A 38. példa b) lépésében leírt módon eljárva, és a kapott terméket ugyanezen példa ugyanezen lépésében leírt módon megtisztítva, azzal az eltéréssel, hogy az amin-hidroklorid semlegesítéséhez 34 μΐ, vagyis 1,2 egyenértéknyi mennyiségű trietil-amint használunk, 110 mg, a 39. példában leírt módon kapott termékből és 28 mg 3-hidroxi-pikolinsavból kiindulva 78 mg színtelen, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,42 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 2:1 arányú elegye). ’H-NMR-spektrura (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,26 és 1,27 (d, 3-3H), 2,11 (s, 3H), 2,60 és 2,85 (dd, 1-1H), 3,26 (m, 3H), 4,09, 4,37, 4,45, 4,79 és
5,03 (m, 1-1H), 6,5, 6,81 és 8,49 (d, 1-1H), 8,08 (m, IH).
124. példa
Morfolinil-karboml-Phe-Nle-nor-C-Sta-ciklohexilmetil-keton [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése ct-hidroxi-metilén-csoport, és Z’ jelentése ciklohexil-acetil-csoport.]
a) lépés (S)-4-tercier-Butoxi-karbonil-amino-3(R)-benziloxi-1,5-diciklohexil-2-butanon
0,78 ml ciklohexil-metil-bromid és 0,14 g magnézium felhasználásával 3 ml dietil-éterben előállított ciklohexil-metil-magnézium-bromid oldatához 5 °C hőmérsékleten, 2-3 perc alatt hozzáadjuk, 1,00 g 3(S)-tercier-butoxi-karbonil-amino2(R)-benziloxi-4-cÍklohexil-butiraldehid [a 4668769 számú amerikai szabadalmi leírás 5. példájának a) pontjában leírt módon előállított vegyület] 6 ml dietil-éterrel készült oldatát. 25 perc múlva az elegyhez vizes ammónium-klorid-oldatot adunk, majd dietil-éterrel kirázzuk. A dietil-éteres részt 1 normál sósavval, majd vizes nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal mossuk, megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, eluensként etil-acetát és hexán elegyét használjuk. Ily módon a két izomer alkohol keverékét kapjuk, súlya: 278 mg.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értékek: 0,48 és 0,41 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1: 3 arányú elegye).
Ezt a terméket feloldjuk dietil-éter és aceton 1:2 arányú elegyében (5 ml), és az oldathoz 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 1 ml krómsav-oldatot (Org. Syn. Coll. Vol., V, 310). 15 perc múlva az elegyet dietil-éterrel hígítjuk, az oldatot vizes nátrium-hidroxid-oldattal mossuk, megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán elegyét használjuk. Ily módon 201 mg sárga színű olajat kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,59 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1:3 arányú elegye).
b) lépés
4(S)-Amino-3(R)-benziloxi-l,5-diciklohexil-2-butanon-hidroklorid
195 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 2 ml 4 normál dioxános sósav-oldatban, és az oldatot 1 órán át 25 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot megszárítjuk. Ily módon 165 mg színtelen, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,56 (futtató elegy: C-rendszer, a futtató lemezeket a minták felcseppentése után ammónia gőzöknek tesszük ki, majd ezután futtatjuk).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-ciklohexilmetil-keton-benzil-észter
A 38. példa b) lépésében leírt általános módszer szerint járunk el, azzal az eltéréssel, hogy az amin-só semlegesítéséhez 1,3 egyenértéknyi mennyiségű trietilamint használunk, és így 158 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből és 152 mg, a 7. példa c) lépésében leírt módon kapott termékből - szilikagélen, etil-acetát és hexán elegye mint eluens alkalmazásával végzett kromatográfiás tisztítás után - 228 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,29 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 2:1 arányú elegye).
d) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Nle-nor-C-Sta-ciklohexilmetil-keton
220 mg, a fenti c) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk 10 ml metanol és 10 ml ecetsav elegyében, és az oldatot 250 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében 22 órán át 25 °C hőmérsékleten, 3,5xlO5 Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort szupercel-rétegen kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, a maradékról toluolt és dietilétert desztillálunk le, majd megszárítjuk. Az így kapott, 179 mg súlyú, borostyánsárga színű, habos anyagot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és
HU 207 869 Β hexán elegyét használjuk. Ily módon 131 mg színtelen, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,44 (futtató oldószer: etil-acetát).
‘H-NMR-spektrum (CDC13), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 0,87 (t, 3H), 2,40, 2,53, 3,05 és 3,12 (dd, 1—IH), 3,28 (m), 3,62 (m, 4H), 4,07 (széles. IH), 4,15 (m, IH), 4,52 (m, 2H), 5,00,6,23 és 6,51 (d, 1—IH).
725. példa
4-Oxo-piperidil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Staizopropil-észter-etilén-ketál [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése 4-oxo-piperidil-karbonil-amino-csoport etilén-ketál formája,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
Az 50. példában leírt módon eljárva, és 150 mg, a
39. példában leírt módon kapott termékből és 32 μΐ 4-piperidon-etilén-ketálból kiindulva 60 mg színtelen, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,30 (futtató oldószer: etil-acetát).
Retenciós ideje a nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás vizsgálatban: 2,76 és 3,09 perc (körülbelül 2: 1 arányban, eluens: acetonitril és víz 80: 20 arányú elegye). A keverék fő összetevőjét félpreparatív fordított fázisú nagyfelbontású folyadék-kromatográfiás módszerrel, egy 9,8x250 mm méretű, Zorbax C-8 kolonnán elkülönítjük (eluens: acetonitril és víz 70:30 arányú elegye). Ily módon 60 mg keverékből 28 mg kisebb retenciós idejű összetevőt kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDCI3), 250 MHz, részleges adatook, delta, ppm: 0,92 (m), 1,26 és 1,28 (d, 3-3H),
2,09 (s, 3H), 2,72, 2,93, 3,08 és 3,29 (dd, 1-1H),
3,34 (m), 3,92 (s, 4H), 4,10 (széles, IH), 4,35-4,53 (m, 3H), 4,87 (d, IH), 5,06 (szeptett, IH), 6,95 és
7,11 (d, 1-1H), 7,18-7,38 (m, aromás).
126. példa
N-Boc-piperidin-4-il-karbonil-Phe-S-MeCys-norC-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése N-tercier-butoxi-karbonil-piperidin-4-ilkarbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z‘ jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
A 38. példa b) lépésében leírt módon járunk el, azzal az eltéréssel, hogy az amin-hidroklorid semlegesítéséhez 1,3 egyenértéknyi mennyiségű trietil-amint használunk, és így 230 mg, a 39. példában leírt módon kapott termékből és 97 mg N-tercier-butoxi-karbonilizonikotinsavból kiindulva 241 mg színtelen, porszerű terméket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,49 (futtató oldószer: etil-acetát).
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,28 (d, 6H), 1,46 (s, 9H), 2,14 (s, 3H), 2,62, 2,91, 3,05 és 3,16 (dd, 1-1H), 2,70 (m), 3,39, 5,98, 6,53 és 6,75 (d, 1-1H), 4,35 és 4,45 (m, 1—1H), 5,04 (szeptett, IH), 7,13-7,37 (m, aromás).
127. példa
Piperidin-4-il-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Staizopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése piperidin-4-il-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
3Y jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
175 mg, a 126. példában leírt módon kapott terméket feloldunk 4 normál dioxános sósav-oldatban, és az oldatot félórán át 25 °C hőmérsékleten tartjuk. Utána az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot megszárítjuk. Ily módon 157 mg halványsárga színű, porszerű anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke: 0,20 (futtató elegy: C-rendszer, a futtató lemezeket a minták felcseppentése után ammónia gázoknak tesszük ki, majd ezután futtatjuk).
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 250 MHz, részleges adatok, delta, ppm: 1,28 és 1,29 (d, 3-3H), 2,09 (s, 3H), 4,00, 4,21 és 4,45 (m, 1-1H), 4,86 (szeptett, IH), 5,36, 7,69, 8,15 és 8,30 (d, 1-1H).
128. példa
4-Oxo-piperidil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Staizopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése 4-oxo-piperidil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
4-Oxo-piperidil-karbonil-Phe-benzil-észter 819 mg 4-piperidon-hidrokloridot feloldunk 15 ml diklór-metánban, és az oldathoz 0 °C hőmérsékleten hozzáadunk 740 μΐ trietil-amint és 1,50 g, a 7. példa a) lépésében leírt módon kapott izocianáto-Phe-OBzl-t. Másfél óra múlva az elegyet feloldjuk etil-acetátban, háromszor 1 normál sósavval, majd vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, és végül telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot etilacetát és hexán 2:1 arányú, forró elegyében (10 ml)
HU 207 869 Β feloldjuk, majd lehűtjük, és a kivált szilárd anyagot kiszűrjük. Ily módon 0,6 g szilárd terméket kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,53 (futtató elegy: etil-acetát és hexán 1:1 arányú elegye).
Az anyalúgban levő anyagot szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 322 mg tiszta olajat kapunk, amelynek ‘H-NMR-spektruma összhangban van a cím szerinti szerkezettel.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,13 (futtató elegy: etil-acetát és hexán elegye).
b) lépés
4-Oxo-piperidil-karbonil-Phe
297 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket feloldunk ecetsav és metanol 1:10 arányú elegyében (15 ml), és az oldatot 150 mg 10%-os csontszenes palládium jelenlétében félórán át 25 °C hőmérsékleten, 3,5xl0s Pa hidrogén nyomáson rázatjuk. Utána a katalizátort kiszűrjük, a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékról toluolt desztillálunk le. Ily módon 227 mg színtelen, habos anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,05 (futtató oldószer: etil-acetát).
c) lépés
4-Oxo-piperidil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Staizopropil-észter
A 38. példa b) lépésében leírt módon eljárva, azzal az eltéréssel, hogy az amin-hidrokloridot trietil-aminnal semlegesítjük, és 100 mg, a 48. példa d) lépésében leírt módon kapott S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter-hidrokloridból és 73 mg, a fenti b) lépésben leírt módon kapott termékből kiindulva 116 mg színtelen, szilárd anyagot kapunk.
Vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke: 0,29 (futtató oldószer: etil-acetát).
129. példa
4-Karboxi-butil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Staizopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése 4-karboxi-butil-karbonil-amino-csoport, M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
4-(tercier-Butoxi-karbonil)-buiil-karbonil-Phe-SMeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter
0,10 g hexán-dikarbonsav-mono-tercier-butil-észtert az 58. példában leírt módon, l-(3-dimetil-aminopropil)-3 -etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,10 g Phe-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter-hidrokloriddal. A terméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként metanol és diklór-metán 1:19 arányú elegyét használjuk. Ily módon 95 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,41 (s, 9H), 4,38 (m, 2H), 4,62 (m, 1Ή), 5,01 (m,
IH). b) lépés
4- Karboxi-butil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Staizopropil-észter mg, az előző bekezdésben leírt módon kapott tercier-butil-észter 2 ml trifluor-ecetsav és 2 ml diklórmetán elegyével készült oldatát 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A szokásos sav-bázis kirázásos feldolgozás után a nyersterméket kromatográfiás módszerrel tisztítjuk, eluensként diklór-metán és metanol 9:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 52 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,08 (s, 3H), 4,40 (m, 2H), 4,73 (m, IH), 4,97 (m,
IH).
130. példa
5- Amino-pentil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-Staizopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése 5-amino-pentil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése metil-tio-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
5-tercier-Butoxi-karbonil-amino-pentil-karbonilPhe-S-MeCys-nor-C-Sta-izopropil-észter mg N-tercier-butoxi-karbonil-6-amino-hexán savat az 58. példában leírt, szokásos módon, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 133 mg Phe-S-MeCys-nor-CSta-izopropil-észter-hidrokloriddal. Az így kapott, 145 mg súlyú nyersterméket további tisztítás nélkül használjuk fel.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,43 (s, 9H), 2,12 (s, 3H), 4,35 (m, IH), 4,43 (m,
IH), 4,58 (m, IH), 4,62 (m, IH), 5,03 (m, IH).
b) lépés
5-Amino-pentil-karbonil-Phe-S-MeCys-nor-C-StaIzopropil-észter
140 mg, a fenti a) lépésben leírt módon kapott termék 3 ml 4 normál, dioxános sósav-oldattal készült oldatát 45 percig keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk. A sav-bázis kirázásos feldolgozás után 100 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
2,07 (s, 3H), 4,36 (m, 2H), 4,64 (m, IH), 4,98 (m,
IH).
131. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Asp-nor-C-Sta-izopropilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
HU 207 869 Β
R2 jelentése karboxi-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Asp-benzil-észter
0,4 g aszparaginsav-P-benzil-észtert a 80. példában leírt módon morfolinil-karbonil-Phe-hidroxi-szukcinimid-észterrel reagáltatunk. Ily módon 0,42 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,34 (m, IH), 4,61 (m, IH), 5,10 (s, 2H).
b) lépés
Morfolinilf<arbonil-Ph,G-Asp(O-benzil-észter)-norC-Sta-izopropil-észter
0,29 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket a 76. példában leírt, szokásos módon, l-(3-dimetilamino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,12 g nor-C-Sta-izopropil-észterrel. Ily módon 0,20 g nyersterméket kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel.
Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,39 (m, 2H), 4,65 (m, IH), 5,02 (m, IH), 5,09 (AB, 2H).
c) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Asp-nor-C-Sta-izopropilészter
0,20 g, az előző bekezdésben leírt módon kapott, nyers benzil-észter, 0,4 g 10%-os csontszenes palládium és 30 ml metanol elegyét félórán át 3,15xlO5 Pa nyomáson hidrogénezzük. Utána a katalizátort celiten kiszűrjük, és a szűrletről az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot kromatografáljuk, eluensként kloroform, metanol és ecetsav 23:1:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 81 mg tiszta terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,17 (m, IH), 4,28 (m, IH), 4,44 (m, IH), 4,84 (m, IH).
132. példa
Morfolinil-karbonil-Phe-Asn-nor-C-Sta-izopropilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol
Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport.
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése karboxamido-metil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Asn
0,5 g aszparagint a 80. példában leírt módon 1,0 g morfolinil-karbonil-Phe-hidroxi-szukcinimid-észterre! reagáltatunk. Az így kapott nyersterméket (súlya: 0,80
g) további tisztítás nélkül használjuk fel.
'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 4,39 (m, 2H), 4,62 (m, IH), 5,01 (m, IH).
b) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Asn-nor-C-Sta-Ízopropilészter
0,18 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket a 76. példában leírt szokásos módon, 1-(3-dimetilamino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,10 g nor-C-Sta-izopropil-észterrel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 9: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,17 g tiszta terméket kapunk. Ή-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
4,39 (m, 2H), 4,62 (m, 1H), 5,01 (m, IH).
133. példa
Morfoliml-karbontt-Phe-Val-nor-C-Sta-izopropilészter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése izopropilcsoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z' jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
a) lépés
Morfolinil-karbonil-Phe-Val
0,40 g valint a 80. példában leírt módon 0,60 g morfolinil-karbonil-Phe-hidroxi-szukcinimid-észteirel reagáltatunk. Az így kapott, 0,53 g súlyú nyersterméket további tisztítás nélkül használjuk fel. 'H-NMR-spektrum (DMSO-d6), 300 MHz, delta, ppm: 0,92 (d, J = 7 Hz, 3H), 4,18 (m, IH), 4,43 (m,
IH).
b) lépés
Morfot'inil-karbo nil-Phe-Val-nor-C-Sta-izopropilészter
0,17 g, a fenti a) lépésben leírt módon kapott terméket a 76. példában leírt, szokásos módszerrel, l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid jelenlétében kondenzálunk 0,10 g nor-C-Sta-izopropilészterrel. A nyersterméket kromatografáljuk, eluensként diklór-metán és metanol 24: 1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 0,15 g tiszta terméket kapunk. 'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
0,77 (d, J = 6 Hz, 3H), 0,84 (d, J = 7 Hz. 3H), 4,45 (m, IH), 4,52 (m, IH), 5,00 (m, IH).
134. példa
Izovaleril-Phe-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyület, ahol Z jelentése izovaleril-amino-csoport,
M jelentése fenilcsoport,
Q jelentése hidrogénatom,
R2 jelentése n-butil-csoport,
X jelentése ciklohexilcsoport,
W jelentése α-hidroxi-metilén-csoport, és Z1 jelentése izopropoxi-karbonil-csoport.]
Az 5. példa b) lépésében leírt kapcsolási módszert követve, 107 mg izovaleril-Phe-Nle-t 1 ml diklór-metánban mint oldószerben 68 mg hidroxi-benzotriazol és
HU 207 869 Β mg l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimidhidroklorid jelenlétében 72 mg nor-C-Sta-izopropilészterrel kondenzálunk, majd a nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként etil-acetát és hexán 1:1 arányú elegyét használjuk. Ily módon 121 mg kívánt terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm: 0,9 (m, 9H), 1,22 (d, 6H), 2,93-3,08 (m, 2H), 4,05 (m, IH), 4,19, 4,40, 4,66 (m, 1-1H), 4,98 (szeptett, IH), 6,09,6,25,6,52 (d, 1-1H) és 7,1-7,24 (m, 5H).
135. példa
Morfolinil-karbonil-homoPhe-Nle-nor-C-Sta-izopropil-észter [(I) általános képletű vegyűlet, ahol Z jelentése morfolinil-karbonil-amino-csoport,
M jelentése benzilcsoport,
R2 jelentése n-butil-csoport,
Q jelentése hidrogénatom,
X jelentése ciklohexilcsoport,
Z' jelentése izopropoxi-karbonil-csoport, és W jelentése a-hidroxi-metilén-csoport.]
Az 55. példában leírt, diciklohexil-karbodiimidet alkalmazó módszert alkalmazva, 138 mg morfolinilkarbonil-homoPhe-Nle-t 70 mg diciklohexil-karbodiimid, 46 mg hidroxi-benzotriazol és 38 μΐ N-metilmorfolin jelenlétében 95 mg nor-C-Sta-izopropil-észter-hidrokloriddal reagáltatunk. A nyersterméket szilikagélen kromatografáljuk, eluensként 1-2% metanolt tartalmazó kloroformot használunk. Ily módon 62 mg kívánt terméket kapunk.
'H-NMR-spektrum (CDC13), 300 MHz, delta, ppm:
1,2 (d, 5H), 3,2 (m, 2H), 3,5 (m, 2H) és 7,2 (s, 5H).

Claims (11)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Eljárás (I) és (II) általános képletű polipeptidszármazékok és gyógyászatilag elfogadható sóik előállítására, ahol
    Z jelentése -NRR12 általános képletű csoport, ahol
    R hidrogénatom és R'2 hidrogénatom, morfolinoP-(OCH3)O vagy morfolino-szulfonilcsoport, vagy
    R11 és R*2 a szomszédos nitrogénatommal morfolino-, 3-oxo-morfolino-, 3,5-dioxo-morfolino- vagy 4-(1-3 szénatomos alkil)-piperazinocsoportot alkot, vagy
    RI3-CO-NH- általános képletű csoport, ahol R*3 1-6 szénatomos alkil-, 1-4 szénatomos alkoxi-, karboxi-(l-4 szénatomos)-alkil-, amino(1-5 szénatomos)-alkil-, 2-5 szénatomos alkanoil-, morfolino-, 3-oxo-morfolino-, piperazino-, 4-(1-4 szénatomos alkanoil)-piperazino-, 4-(l3 szénatomos alkil)-piperazino-, 4-(1-4 szénatomos alkoxi)-karbonil-piperazino, (S)-pirrolid-2-il-, N-terc-butoxi-karbonil-(S)-pirrolid-2il-, 2-[(l-3 szénatomos alkoxi)-karbonil]-(S)pirrolidin-1-11-, piperidil-, hidroxi-piperidino-, 4-oxo-piperidino-, N-[(l-4 szénatomos alkoxi)karbonil]-piperidil-, tiomorfolino-, tiomorfolino-1oxid-, tiomorfolino-1,1-dioxid-, 4,4-di-(l—4 szénatomos)-alkoxi-piperidino-, piridil- vagy hidroxipiridilcsoport vagy
    R*4 NH-CO-NH- általános képletű csoport, ahol R'41-4 szénatomos alkil-, 1-3 szénatomos alkoxi-(2-4 szénatomos)-alkil- vagy hidroxi-(2-4 szénatomos)-alkilcsoport vagy morfolinokarboniloxicsoport vagy N-[(l—3 szénatomos alkoxi)-karbonil-metil]-N-metilamino-CO-NHcsoport,
    M jelentése fenil-, naftil-, benzil-, tienil-, hidroxi-fenil-, metoxi-fenil-, klór-fenil- vagy ciklohexil-csoport,
    Q jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport,
    R2 jelentése 1-5 szénatomos alkil-, 4-amino-butil-, 4(benziloxi-karbonil-amino)-butilcsoport, 1-3 szénatomos alkil-szulfonil-metil-csoport, 1-3 szénatomos alkil-szulfinil-metilcsoport vagy hidroxi-, karboxi-, 1-3 szénatomos alkoxi-, 1-3 szénatomos alkiltio-metil-, karbamoil- vagy benziloxicsoporttal szubsztituált 1-2 szénatomos alkilcsoport, benzilcsoport, imidazol-4-il-metil- vagy N-terc-butoxikarbonil-imidazol-4-il-metil-csoport,
    X ciklohexil-, fenil- vagy izopropilcsoport,
    W = CHWW OR20 általános képletű csoport, ahol
    R20 hidrogénatom, piperidil-(l—3 szénatomos alkil) karbonil-, karboxi-(l-2 szénatomos alkil)-karbonil- vagy 2-3 szénatomos alkanoilcsoport, vagy
    -CO, -CHWW N3, =CH —N3, -CHWW NH2, -CH —NH2, =C(CH3)WWOH vagy =C(CH3) — OH csoport,
    Z* jelentése -CH2OH csoport, vagy -CONR‘6R17 általános képletű csoport, ahol R'6 hidrogénatom, 1-3 szénatomos alkoxi-, 1-5 szénatomos alkil-, 1-5 szénatomos alkil-karbamoil-, amino-(2-5 szénatomos)-alkil-, pikolil-, ómega-di-(l-2 szénatomos alkil)-amino-(3-5 szénatomos)-alkil- vagy trifluor-etilcsoport, és
    R*7 hidrogénatom vagy metilcsoport vagy
    R16 és R'7 a hozzájuk kapcsolódó nitrogénatommalmorfolinocsoportot alkot, vagy
    -COOR18 általános képletű csoport, ahol
    R*8 hidrogénatom, 1-5 szénatomos alkil-, 6-7 szénatomos cikloalkil-metil- vagy benzilcsoport, vagy
    -COR19 általános képletű csoport, ahol
    R*91-5 szénatomos alkil-, hidroxi-(l-4 szénatomos j-alkil-, 4-(1-2 szénatomos alkil-piperazino)-, vagy 6-7 szénatomos cikloalkil-metilcsoport,
    R5 imidazol-4-il-metil- vagy n-butilcsoport,
    R6 1-4 szénatomos alkoxicsoport, és L -CH= csoport vagy nitrogénatom, azzal jellemezve, hogy az egyes aminosavakat, illetve vegyületeket az (I) és (II) általános képletnek megfelelő sorrendben kondenzáljuk, amelynek során a reakcióban részt nem vevő funkciós csoportok védett állapotban vannak,
    HU 207 869 Β és kívánt esetben (i) a védőcsoportokat szelektíven lehasítjuk, (ii) egy szulfidcsoportot szulfoxiddá vagy szulfonná oxidálunk, (iii) a W helyén α-hidroxi-metiléncsoportot vagy β-hidroxi-metiléncsoportot tartalmazó vegyületeket a W helyén karbonilcsoportot tartalmazó származékká oxidáljuk, (iv) a W helyén α-hidroxi-metiléncsoportot tartalmazó vegyületeket R20 jelentésének megfelelő acilezőszerrel acilezzük, (v) a W helyén α-azido-metiléncsoportot vagy β-azido-metilén-csoportot tartalmazó vegyületeket a W helyén α-amino-metilén-csoportot vagy β-aminometilén-csoportot tartalmazó származékká redukáljuk, (vi) a Z1 helyén -COO(l-5 szénatomos)-alkilcsoportot tartalmazó vegyületeket 1-5 szénatomos alkilaminnal reagáltatva a Z1 helyén -CONR16R17 általános képletű csoportot tartalmazó származékká alakítjuk, ahol R16 1-5 szénatomos alkilcsoport és R17 hidrogénatom, (vii) Z helyén aminocsoportot tartalmazó vegyületeket egy R13-COOH általános képletű sav reakcióképes származékával - ahol R13 a fenti - reagáltatva olyan származékká acilezzük, ahol Z RI3-CO-NHcsoport, és R13 a fenti, és/vagy (viii) egy kapott (I) vagy (II) általános képletű vegyületet gyógyászatilag elfogadható sójává alakítunk. (Elsőbbsége: 1987. 10. 30.)
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (I) és (II) általános képletű polipeptidszármazékok és gyógyászatilag elfogadható sóik előállítására, ahol
    Z jelentése R13-CO-NH- általános képletű csoport, ahol
    R13 terc-butoxi-, N-formil-piperazino- vagy morfolinocsoport,
    M jelentése fenilcsoport,
    Q jelentése hidrogénatom,
    R2 jelentése η-butil-, 4-amino-butil-, 4-(benziloxi-karbonil-amino)-butilcsoport, imidazol-4-il-metilvagy N-terc-butoxi-karbonil-imidazol-4-il-metilcsoport,
    X ciklohexil- vagy izopropilcsoport,
    W =CH\ \ \ \ OR20 általános képletű csoport, ahol R20 hidrogénatom vagy ómega-piperidino-(l-3 szénatomos alkil)-karbonilcsoport,
    Z1 jelentése -CONRl6Ri7 általános képletű csoport, ahol
    R17 hidrogénatom és R16 szénatomos alkil-vagy amino-(2-4 szénatomos)-alkilcsoport, vagy
    -COOR18 általános képletű csoport, ahol R18 1-4 szénatomos alkilcsoport,
    R5 imidazol-4-il-metil vagy n-butilcsoport,
    Rg 1-4 szénatomos alkoxicsoport, és L -CH= csoport, azzal jellemezve, hogy megfelelően szubsztituált kiindulási vegyületeket alkalmazunk.
    (Elsőbbsége: 1986.10. 31.)
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás olyan (I) és (II) általános képletű polipeptidszármazékok és gyógyászatilag elfogadható sóik előállítására, ahol Z jelentése RI3-CO-NH- általános képletű csoport, ahol
    R13 terc-butoxi-, N-formil-piperazino- vagy morfolinocsoport,
    M jelentése fenilcsoport,
    Q jelentése hidrogénatom,
    R2 jelentése 1-4 szénatomos alkil-, 4-amino-butil-, 4benziloxi-karbonil-amino)-butilcsoport, 2-4 szénatomos alkiltio-metilcsoport, imidazol-4-il-metiIvagy N-terc-butoxi-karbonil-ímidazol-4-il-metilcsoport,
    X ciklohexil- vagy izopropilcsoport,
    W =CO vagy =CH\\\\OR20 általános képletű csoport, ahol
    R20 hidrogénatom vagy ómega-piperidino-(l-3 szénatomos alkil)-karbonilcsoport,
    Z1 jelentése -CONRI6R17 általános képletű csoport, ahol
    R17 hidrogénatom és
    R16 1-4 szénatomos alkil- vagy amino-(2-4 szénatomos)-alkilcsoport, vagy
    -COOR18 általános képletű csoport, ahol R18 1-4 szénatomos alkilcsoport,
    R5 imidazol-4-il-metil- vagy n-butilcsoport,
    R6 1-4 szénatomos alkoxicsoport, és L -CH- csoport, azzal jellemezve, hogy megfelelően szubsztituált kiindulási vegyületeket alkalmazunk.
    (Elsőbbsége: 1987. 07. 01.)
  4. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy (III) és (IV) általános képletű vegyületeket kondenzálunk, ahol Z, M, Q, X, W, Z1 és R2 az 1. igénypontban megadott.
    (Elsőbbsége: 1987. 10. 30.)
  5. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzaljellemezve, hogy (V) és (VI) általános képletű vegyületeket kondenzálunk, ahol Z, M, Q, X, W, Z1 és R2 az 1. igénypontban megadott.
    (Elsőbbsége: 1987.07.01.)
  6. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy (VII) és (VIII) általános képletű vegyületeket kondenzálunk, ahol L, R5 és Rg az 1. igénypontban megadott.
    (Elsőbbsége: 1987. 10. 07.)
  7. 7. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kondenzálószerként 1-hidroxi-benzotriazolt és diciklohexil-karbodiimidet használunk.
    (Elsőbbsége: 1987. 10. 07.)
  8. 8. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy kondenzálószerként 1-hidroxi-benzotriazolt és 1(dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimidet használunk. (Elsó'bbsége: 1987. 10. 07.)
  9. 9. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a szulfidcsoport oxidációját m-klór-perbenzoesavval végezzük.
    (Elsőbbsége: 1987. 10. 07.)
  10. 10. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az a-hidroxi-metiléncsoport és β-hidroxi-me1
    HU 207 869 Β tiléncsoport oxidációját piridínium-dikromáttal és ecetsavanhidriddel végezzük.
    (Elsőbbsége: 1987.10. 07.)
  11. 11. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az ct-hidroxi-metiléncsoport acilezését ; megfelelősav halogén idjével és egy tercier aminnal vé gezzük.
HU874901A 1986-10-31 1987-10-30 Process for producing nor-statin and nor-cyclostatin containing polypeptides HU207869B (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US92544986A 1986-10-31 1986-10-31
US6898287A 1987-07-01 1987-07-01

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUT45270A HUT45270A (en) 1988-06-28
HU207869B true HU207869B (en) 1993-06-28

Family

ID=26749566

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU874901A HU207869B (en) 1986-10-31 1987-10-30 Process for producing nor-statin and nor-cyclostatin containing polypeptides

Country Status (22)

Country Link
EP (1) EP0266950B1 (hu)
JP (1) JPH07108901B2 (hu)
KR (1) KR910002544B1 (hu)
CN (1) CN1027271C (hu)
AR (1) AR245732A1 (hu)
AU (1) AU585180B2 (hu)
CA (1) CA1310793C (hu)
DE (1) DE3788626T2 (hu)
DK (1) DK568487A (hu)
EG (1) EG18378A (hu)
ES (1) ES2061512T3 (hu)
FI (1) FI90346C (hu)
HU (1) HU207869B (hu)
IE (1) IE61087B1 (hu)
IL (1) IL84270A0 (hu)
MY (1) MY103189A (hu)
NO (1) NO173017C (hu)
NZ (1) NZ222373A (hu)
PH (1) PH25231A (hu)
PL (1) PL151679B1 (hu)
PT (1) PT86024B (hu)
YU (1) YU46819B (hu)

Families Citing this family (51)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5214129A (en) * 1985-01-23 1993-05-25 Abbott Laboratories Peptidylaminodiols
IL81234A (en) * 1986-01-16 1992-09-06 Abbott Lab Peptidylaminodiols,process for their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
WO1988003022A1 (en) * 1986-10-31 1988-05-05 Pfizer Inc. Relatively low molecular weight polypeptides as renin inhibitors
US4977141A (en) * 1987-10-01 1990-12-11 G. D. Searle & Co. Peptidyl α-aminoacyl aminodiol carbamates as anti-hypertensive agents
US4927807A (en) * 1987-10-06 1990-05-22 Abbott Laboratories Glaucoma treatment
JPH02503440A (ja) * 1988-03-03 1990-10-18 イー・アール・スクイブ・アンド・サンズ・インコーポレイテッド １，２‐ヒドロキシホスホネートおよびその誘導体
US5217958A (en) * 1988-03-03 1993-06-08 E. R. Squibb & Sons, Inc. 1,2-hydroxy phosphonates and derivatives thereof
US5736520A (en) * 1988-10-07 1998-04-07 Merrell Pharmaceuticals Inc. Peptidase inhibitors
ZA897514B (en) * 1988-10-07 1990-06-27 Merrell Dow Pharma Novel peptidase inhibitors
EP0376040A3 (en) * 1988-12-27 1990-09-12 American Cyanamid Company N-phosphinyl di-and tripeptides as renin inhibitors
US4965372A (en) * 1989-01-19 1990-10-23 Pfizer Inc. Process and intermediates for isopropyl 3S-amino-2R-hydroxy-alkanoates
WO1990009172A1 (en) * 1989-02-16 1990-08-23 Pfizer Inc. Phosphorus containing renin inhibitors
US5468732A (en) * 1989-02-16 1995-11-21 Pfizer Inc. Phosphorus containing renin inhibitors
US5216013A (en) * 1989-12-04 1993-06-01 G. D. Searle & Co. Aralkyl-N-terminal cycloalkoxy-C terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5231111A (en) * 1989-12-04 1993-07-27 G. D. Searle & Co. Imidazolyl/imidazolylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5180744A (en) * 1989-12-04 1993-01-19 G. D. Searle & Co. Aralkyl-N-terminal amino hydroxy
US5212175A (en) * 1989-12-04 1993-05-18 G. D. Searle & Co. Benzothiophenyl benzothiophenylalkyl-N-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5215996A (en) * 1989-12-04 1993-06-01 G. D. Searle & Co. Naphthyridinyl/naphthyridinylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5217991A (en) * 1989-12-04 1993-06-08 G. D. Searle & Co. Cycloalkyl/cycloalkylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5217988A (en) * 1989-12-04 1993-06-08 G. D. Searle & Co. Indolyl indolylakyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxyβ-amino acid derivatives
US5223532A (en) * 1989-12-04 1993-06-29 G. D. Searle & Co. Chromonyl/chromonylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino derivatives
US5223514A (en) * 1989-12-04 1993-06-29 G. D. Searle & Co. Quinolinyl/quinolinylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5223512A (en) * 1989-12-04 1993-06-29 G. D. Searle & Co. Quinolonyl/quinolonylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5180725A (en) * 1989-12-04 1993-01-19 G. D. Searle & Co. Quinoxalinyl/quinoxaliy; alkyl-N-terminal amino hydroxy
US5175170A (en) * 1989-12-04 1992-12-29 G. D. Searle & Co. β-amino acid derivatives
US5223534A (en) * 1989-12-04 1993-06-29 G. D. Searle & Co. Benzofuuranyl/benofuranylaklyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5179102A (en) * 1989-12-04 1993-01-12 G. D. Searle & Co. Naphthyridinyl/naphthyridinylalkyl-n-terminal anino hydroxy β-amino acid derivatives
IE66574B1 (en) * 1989-12-04 1996-01-24 Searle & Co Heterocyclic acyl aminodiol beta-amino acid derivatives
US5147888A (en) * 1989-12-04 1992-09-15 G. D. Searle & Co. N-terminal indolyy indolylalkylaminodiol β-amino acid derivatives
US5171751A (en) * 1989-12-04 1992-12-15 G. D. Searle & Co. Benzofuran/benzofuranalkyl-N-terminal amino hydroxy
US5175181A (en) * 1989-12-04 1992-12-29 G. D. Searle & Co. Imidazolyl/imidazolylalkyl-N-terminal amino hydroxy
US5210095A (en) * 1989-12-04 1993-05-11 G. D. Searle & Co. Chromonyl/chromonylalkyl-N-terminal amino hydroxy
US5217989A (en) * 1989-12-04 1993-06-08 G. D. Searle & Co. Benothiophenyl/benzothiophenylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
TW209870B (hu) * 1990-01-18 1993-07-21 Pfizer
US5023338A (en) * 1990-03-08 1991-06-11 American Home Products Corporation Renin inhibitors
US5075451A (en) * 1990-03-08 1991-12-24 American Home Products Corporation Pyrrolimidazolones useful as renin inhibitors
US5064965A (en) * 1990-03-08 1991-11-12 American Home Products Corporation Renin inhibitors
US5095119A (en) * 1990-03-08 1992-03-10 American Home Products Corporation Renin inhibitors
US5278161A (en) * 1990-06-28 1994-01-11 Hoffmann-La Roche Inc. Amino acid derivatives useful as renin inhibitors
JPH04243835A (ja) * 1990-08-29 1992-08-31 Pfizer Inc 高眼圧症又は緑内障治療用薬剤組成物及び治療方法
US5442105A (en) * 1991-06-21 1995-08-15 Takasago International Corporation Process for producing cyclohexylbutyric acid derivative
JP2847584B2 (ja) * 1991-06-21 1999-01-20 高砂香料工業株式会社 シクロヘキシル酪酸誘導体及びその製造法
WO1993011799A1 (en) * 1991-12-18 1993-06-24 Pfizer Inc. Soybean protein or hydrolyzates in pharmaceutical compositions to protect bioactive peptides from enzymatic inactivation
US6153592A (en) * 1992-11-09 2000-11-28 Port Systems, Llc Enhancing the bioavailability of proteolytically labile therapeutic agents
US5872101A (en) * 1995-01-06 1999-02-16 Sibia Neurosciences, Inc. Methods of treating neurodegenerative disorders using protease inhibitors
US5804560A (en) * 1995-01-06 1998-09-08 Sibia Neurosciences, Inc. Peptide and peptide analog protease inhibitors
US6107329A (en) * 1995-06-06 2000-08-22 Pfizer, Inc. Substituted n-(indole-2-carbonyl)-glycinamides and derivatives as glycogen phosphorylase inhibitors
WO2000026191A1 (fr) 1998-11-04 2000-05-11 Meiji Seika Kaisha, Ltd. Derives de picolinamide et pesticides contenant ces derives comme ingredient actif
US6117870A (en) * 1998-11-12 2000-09-12 Fujirebio Kabushiki Kaisha Cyclic amide derivatives
US20020002152A1 (en) 2000-04-14 2002-01-03 Craig Richard A. Hydrazide and alkoxyamide angiogenesis inhibitors
UA108742C2 (uk) 2009-09-23 2015-06-10 Фармацевтична композиція для лікування запальних захворювань, опосередкованих mcp-1

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1254699A (en) * 1984-03-12 1989-05-23 Jasjit S. Bindra Renin inhibitors containing statine or derivatives thereof
DE3418491A1 (de) * 1984-05-18 1985-11-21 Merck Patent Gmbh, 6100 Darmstadt Diaminosaeurederivate
EP0190891A3 (en) * 1985-01-31 1988-04-20 Kissei Pharmaceutical Co. Ltd. Novel amino acid derivatives
US4743585A (en) * 1986-11-21 1988-05-10 Warner-Lambert Company Renin inhibitors
NZ222755A (en) * 1986-12-23 1989-11-28 Warner Lambert Co Renin inhibiting acyl peptide derivatives containing two to four amino acid residues, and pharmaceutical compositions

Also Published As

Publication number Publication date
PL151679B1 (en) 1990-09-28
HUT45270A (en) 1988-06-28
YU198087A (en) 1989-02-28
NO874530D0 (no) 1987-10-30
FI90346B (fi) 1993-10-15
FI90346C (fi) 1994-01-25
DK568487A (da) 1988-05-01
CN1027271C (zh) 1995-01-04
KR910002544B1 (ko) 1991-04-23
CN87101499A (zh) 1988-05-11
NZ222373A (en) 1989-09-27
PL268521A1 (en) 1988-09-01
DE3788626D1 (de) 1994-02-10
AU585180B2 (en) 1989-06-08
AR245732A1 (es) 1994-02-28
FI874787A (fi) 1988-05-01
PT86024A (en) 1987-11-01
DK568487D0 (da) 1987-10-30
PT86024B (pt) 1990-07-31
AU8054187A (en) 1988-05-05
IE61087B1 (en) 1994-09-21
EP0266950A3 (en) 1990-04-11
JPH07108901B2 (ja) 1995-11-22
IE872929L (en) 1988-04-30
CA1310793C (en) 1992-11-24
NO173017B (no) 1993-07-05
MY103189A (en) 1993-05-29
DE3788626T2 (de) 1994-04-28
JPH07173134A (ja) 1995-07-11
KR880005152A (ko) 1988-06-28
PH25231A (en) 1991-03-27
IL84270A0 (en) 1988-03-31
EG18378A (en) 1993-04-30
EP0266950A2 (en) 1988-05-11
YU46819B (sh) 1994-06-10
FI874787A0 (fi) 1987-10-30
NO874530L (no) 1988-05-02
ES2061512T3 (es) 1994-12-16
EP0266950B1 (en) 1993-12-29
NO173017C (no) 1993-10-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU207869B (en) Process for producing nor-statin and nor-cyclostatin containing polypeptides
KR890003602B1 (ko) 옥사-및 아자호모사이클로스타틴 폴리펩티드의 제조방법
US4350704A (en) Substituted acyl derivatives of octahydro-1H-indole-2-carboxylic acids
US5095006A (en) Renin inhibitors having all retro-inverted peptide bonds
US5663171A (en) Acyclic compounds promote release of growth hormone
US5691315A (en) Endothelin antagonistic peptide derivatives
US4668769A (en) Oxa- and azahomocyclostatine polypeptides
US5559128A (en) 3-substituted piperidines promote release of growth hormone
US5849866A (en) Peptidase inhibitors
EP0037231A2 (en) Substituted acyl derivatives of octahydro-1H-indole-2-carboxylic acids
WO1989003820A1 (en) Branched backbone renin inhibitors
WO1989007610A1 (en) RENIN INHIBITORS CONTAINING alpha-HETEROATOM AMINO ACIDS
HU204847B (en) Process for producing new peptidase inhibitors
EP0362002A1 (en) HIV protease inhibitors
EP0155809A2 (en) Renin inhibitors containing statine or derivatives thereof
US4814342A (en) Nor-statine and nor-cyclostatine polypeptides
US4818748A (en) Renin inhibitors and aminoacid and aminoaldehyde derivatives
IE902238A1 (en) Tetrapeptide type-b cck receptor ligands
US4425355A (en) Substituted acyl derivatives of chair form of octahydro-1H-indole-2-carboxylic acids
HU204285B (en) Process for producing renin-inhibiting polypeptides of small molecule mass and pharmaceutical compositions containing them
US5114927A (en) Analog of peptidase substrates
US4871842A (en) Piperidine derivatives
US4935405A (en) Nor-statine and nor-cyclostatine polypeptides
US5034376A (en) Nor-statine and nor-cyclostatine polypeptides
US4552866A (en) Use of diamino alcohols as analgesic agents

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee