FI90346B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten nor-statiini- ja nor-syklostatiinipolypeptidien valmistamiseksi - Google Patents

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten nor-statiini- ja nor-syklostatiinipolypeptidien valmistamiseksi Download PDF

Info

Publication number
FI90346B
FI90346B FI874787A FI874787A FI90346B FI 90346 B FI90346 B FI 90346B FI 874787 A FI874787 A FI 874787A FI 874787 A FI874787 A FI 874787A FI 90346 B FI90346 B FI 90346B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
product
give
sta
mixture
nmr
Prior art date
Application number
FI874787A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI90346C (fi
FI874787A (fi
FI874787A0 (fi
Inventor
Dennis Jay Hoover
Robert Louis Rosati
Ronald Thure Wester
Original Assignee
Pfizer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer filed Critical Pfizer
Publication of FI874787A0 publication Critical patent/FI874787A0/fi
Publication of FI874787A publication Critical patent/FI874787A/fi
Publication of FI90346B publication Critical patent/FI90346B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI90346C publication Critical patent/FI90346C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/14—Angiotensins: Related peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/20—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carbonic acid, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/205—Radicals derived from carbonic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D265/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D265/28—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines
    • C07D265/30—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines not condensed with other rings
    • C07D265/32—1,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines not condensed with other rings with oxygen atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/14—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D295/145—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with the ring nitrogen atoms and the carbon atoms with three bonds to hetero atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0227—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the (partial) peptide sequence -Phe-His-NH-(X)2-C(=0)-, e.g. Renin-inhibitors with n = 2 - 6; for n > 6 see C07K5/06 - C07K5/10
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

1 9 O 3 4 6
Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten nor-statiini-ja nor-syklostatiinipolypeptidien valmistamiseksi Tämä keksintö koskee menetelmää uusien nor-statii-5 ni- ja norsyklostatiinipitoisten polypeptidien valmistamiseksi. Yhdisteet ovat käyttökelpoisia ja verenpainetta alentavia aineita.
Proteolyyttistä entsyymiä reniiniä, jonka molekyy-lipaino on noin 40 000, tuottaa ja erittää vereen munuai-10 nen. Sen tiedetään olevan aktiivinen in vivo lohkoen luonnossa esiintyvää plasman glykoproteiinia angioten-sinogeeniä, ihmisen antiotensinogeenin ollessa kyseessä sidoksen kohdalla, joka on leusiini-(10:s) ja väliini-(11) aminohappotähteiden välillä angiotensinogeenin N-15 päätteessä:
Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Val-123456789 10 11
Ile-His-Ser-Glu-12 13 14 15 20
Kiertävän N-päätedekapeptidin (angiotensiini I), jota muodostuu edellä mainitun reniinin lohkaisuvaikutuksen ansiosta, keho pilkkoo sen jälkeen oktapeptidiksi, joka tunnetaan nimellä angiotensiini II. Angiotensiinin II 25 tiedetään olevan voimakas painetta aiheuttava aine, so.
aine, joka pystyy aiheuttamaan merkittävää verenpaineen lisääntymistä ja sen uskotaan toimivan aiheuttamalla verisuonten supistumista ja natriumia pidättävän hormonin aldosteronin irtoamisen lisämunuaisesta. Täten reniini-30 angiotensinogeenisen systeemin on katsottu olevan osallisena aiheuttavana tekijänä tietyissä liikapaineisuuden muodoissa ja verentungosta aiheuttavassa sydämen toimin-nanvaj avuudessa.
Eräs keino lievittää reniini-angiotensinogeenisys-35 teemin toimLnnan haitallisia vaikutuksia on aineen anta- 2 90346 minen, joka pystyy ehkäisemään reniinin angiotensinogee-nilohkaisuvaikutusta. Tunnetaan monia sellaisia aineita, mukaan lukien antireniini-vasta-aineet, pepstatiini- ja luonnossa esiintyvät fosfolipidiyhdisteet. EP-patenttiha-5 kemus nro 45 665 (julkaistu helmikuun 2. päivänä 1982) kuvaa sarjan reniiniä inhiboivia polypeptidijohdannaisia, joiden kaava on
X-Y-Pro-Phe-His-A-B-Z-W
10 jossa X voi olla vety tai aminosuojaryhmä, Y voi puuttua, B on lipofiilinen aminohappotähde, Z on aromaattinen aminohappotähde, W voi olla hydroksyyli ja A voi olla, muun muassa, 15 R1 R2 0
I I II
-nh-ch-ch-ch2-ch-c
OH
Rx:n ja R2:n kummankin ollessa lipofiilinen tai aromaat-20 tinen sivuketju. Tässä julkaistussa patenttihakemuksessa esitettyjen määritelmien mukaisesti ei ole pidetty mahdollisena, että A tai Z voisivat olla statiini tai että B voisi olla lysiini.
EP-patenttihakemus nro 77 028 (julkaistu huhtikuun 25 20. päivänä 1983) paljastaa sarjan reniiniä inhiboivia polypeptidiyhdisteitä, joissa on ei-terminaalinen statiini tai statiinijohdannaistähde. Tähän sarjaan sisällytettyjä ovat yhdisteet, joissa on fenyylialaniini-histidii-ni-statiiniketju.
30 EP-patenttihakemus nro 132 304A paljastaa myös statiinipitoisten polypeptidien käytön reniiniä inhiboivina verenpainetta alentavina aineina ja EP-patenttihakemus 114 993A paljastaa polypeptidejä, jotka sisältävät syklostatiinia, jotka ovat käyttökelpoisia reniiniä inhi-35 hoivina verenpainetta alentavina aineina.
3 903--:6 Tämän keksinnön kohteena on menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava
XM X
? 8 /
II 1 H
O R2 10 tai 15 H U Ξ H =
o r5 OH
joissa kaavoissa Z on R^iY)„-(A)p, jossa R3 on amino, (C^ 4)alkyyliamino, (C^ )alkoksi(C2_4 )alkyleeniamino, karbok-si(C!.4)alkyyli, hydroksi (C2_4 )alkyleeniamino, (C1.3)alkok-20 siC0CH2N( CH3), amino()alkyyli, morfolino, piperidyyli, hydroksipiperidino, 4-oksopiperidino, piperatsino, 4-ok-sopiperidino-etyleeniketaali, 4-(0Χ_3 )alkyylipiperatsino, tiomorfolino, tiomorfolino-l-oksidi, tiomorfolino-1,1-dioksidi, N-CC^)alkoksikarbonyylipiperidyyli, 4-(C1.4)al-25 koksikarbonyylipiperatsino, 3-oksomorfolino, 3,5-diokso- morfolino, hydroksipyridyyli, pyridyyli, (s)-pyrrolid-2-yyli, N-t-butoksikarbonyyli-(s)-pyrrolid-2-yyli, (C^Jal-koksikarbonyyli-( s)-pyrrolid-2-yyli tai 4-(C3.4 )alkanoyy-lipiperatsino; Y on C=0, P(0CH3)=0 tai S02; A on N(CH3), 30 NH tai O; m ja p ovat kumpikin kokonaislukuja 0 tai 1; M on fenyyli, bentsyyli, naftyyli, tienyyli, metoksifenyy-li, hydroksifenyyli, kloorifenyyli tai (C6_7)sykloalkyyli; Q on metyyli tai vety; R2 on (C^Jalkyyli, (C^Jalkyyli-tio(Cj.2)alkyyli, (Cx.3 JalkoksiiCj.j )alkyyli, bentsyylioksi 35 (C^Jalkyyli, bentsyyli, hydroksi()alkyyli, karboksi- (0Χ_2 )alkyyli , guanido( )alkyyli, ( Cj.j )alkyylisulf inyy- . 90346 4 li(Cl.2 )alkyyli, (C1.3)alkyylisulfonyyli(C1.2)alkyyli, 4-bentsyylioksikarbonyyliaminobutyyli, 4-aminobutyyli, imi-datsol-4-yylimetyyli, N-t-butoksikarbonyyli-imidatsol-4-yylimetyyli tai karbamoyyliiCj^ )alkyyli; X on syklohek-5 syyli, i-propyyli tai fenyyli; W on CHniOCO(C1.3)alkyyli-di( )alkyyliamino, CHlII OCO(Cj_3 )alkyylipiperidino, CHIU OH, C=0, CHlII N3, CH-«N3, CH-«NH2, CHIU NH2, C(CH3)IIIOH, C(CH3)-^OH, CHIII OCO(C1.2)alkyyli tai CHlII OCO(Cj.2)alkylee-niC02H; Z1 on CH2OH tai R-S-T, jossa R on C=0, S on O, NH, 10 N(CH3), CH2 tai kemiallinen sidos, joka liittää R:n ja T:n; T on (Cj.5 )alkyyli, hydroksi (C^ )alkyyli, CONHiC^)-alkyyli, vety, tri f luorietyyli, (C6.7 )sykloalkyyli, (C6_7)-sykloalkyylimetyyli, fenyyli, bentsyyli, amino(C2_5)alkyy-li, 0-(C1.2 )alkyyli-hydroksyyliamino, morfolino, 4-(C1.2)-15 alkyylipiperatsino tai omega-di(C1_2)alkyyliamino(C3.5)al-kyyli; L on CH tai N; R5 on imidatsol-4-yylimetyyli tai (C2.5 )alkyyli; ja R5 on (C:.4 )alkoksi tai (C^)alkyyliamino edellyttäen, että kun m on 0 niin p on 0; kun A on 0 niin Y on C=0; kun T on C0NH(C^ )alkyyli niin S on NH, N(CH3) 20 tai CH2; kun T on (C2.5 )alkyyliamino, 0-(C1.2)alkyyli-hyd-roksyyliamino, morfolino tai 4-(C^)alkyylipiperatsino niin S on CH2 tai kemiallinen sidos, joka liittää R:n ja T:n; ja kun Z1 on CHO tai CH2OH niin R3 on morfolino.
Ensisijaisen yhdisteiden ryhmän muodostavat kaavan 25 I mukaiset yhdisteet, joissa Y on C=0, A on NH, Q on vety, X on sykloheksyyli, W on CH''ΌΗ, R on C=0, T on bentsyyli tai (Ci.^alkyyli ja m ja p ovat kumpikin 1. Erityisen ensisijaisia tässä ryhmässä ovat yhdisteet, joissa R3 on morfoliino, M on fenyyli, S on O ja R2 on n-30 propyyli ja T on i-propyyli, jossa R2 on CH3SCH2- ja T on i-propyyli, jossa R2 on n-butyyli ja T on metyyli, jossa R2 on HOCH2 ja T on i-propyyli, jossa R2 on CH30(CH2)2- ja T on i-propyyli, jossa R2 on CH3SCH2- ja T on bentsyyli, jossa R2 on metyyli ja T on i-propyyli, jossa R2 on n-bu-35 tyyli ja T on i-propyyli, jossa R2 on CH3OCH2- ja T on i- 5 90346 propyyli ja jossa R2 on CH3CH2OCH2- ja T on i-propyyli. Erityisen ensisijaisia tässä ryhmässä ovat myös yhdisteet, joissa M on fenyyli, S on O, T on i-propyyli, R2 on CH3SCH2- ja Rj on pyrrolidyyli, 4-pyridyyli, piperatsiino 5 tai 4-hydroksipiperidiino. Erityisen ensisijaisia tässä ryhmässä ovat myös yhdisteet, joissa Ri on morfoliino, M on fenyyli, S on kemiallinen sidos, joka liittää R:n ja T:n ja R2 on n-butyyli ja T on CH2CH(CH3)2 ja jossa R2 on CH3SCH2 ja T on CH2CH(CH3)2. Erityisen ensisijaisia tässä 10 ryhmässä ovat myös yhdisteet, joissa R3 on morfoliino, S on O ja jossa M on 2-tienyyli, R2 on CH3SCH2 ja T on i-propyyli, jossa M on 4-hydroksifenyyli, R2 on CH3SCH2- ja T on i-propyyli ja jossa M on 4-metoksifenyyli, R2 on n-butyyli ja T on metyyli. Erityisen ensisijainen tässä 15 ryhmässä on myös yhdiste, jossa R3 on morfoliino, M on fenyyli, R2 on n-butyyli, S on NH ja T on metyyli.
Ensisijaisen kaavan I mukaisten yhdisteiden ryhmän muodostavat yhdisteet, joissa M on fenyyli, S on kemiallinen sidos, joka liittää R:n ja T:n, T on (C^Jalkyyli 20 ja R on C=0.
Valmistettavia yhdisteitä voidaan myös käyttää nisäkkään liikapaineisuuden hoitamiseksi, jolloin nisäkkäälle annetaan verenpainetta alentava tehoava määrä tässä kuvattuja yhdisteitä ja farmaseuttista koostumusta, 25 joka sisältää näitä yhdisteitä ja kantajaa.
Kuten aikaisemmin on mainittu, keskinnön mukaisen menetelmään sisältyy biologisesti aktiivisten yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistus. Sellaisia suoloja ovat suolat, jotka ovat toksittomia annet-30 tuina annoksina. Koska kuvatut yhdisteet voivat sisältää emäksisiä ryhmiä, happoadditiosuolat ovat mahdollisia. Farmaseuttisesti hyväksyttäviä happoadditiosuoloja ovat esimerkiksi hydrokloridi-, hydrobromidi-, hydrojodidi-, sulfaatti-, vetysulfaatti-, fosfaatti-, hapan fosfaatti-, 35 asetaatti-, laktaatti-, maleaatti-, mesylaatti-, fuma- raatti-, sitraatti-, hapan sitraatti-, tartraatti-, vety-tartraatti-, sukkinaatti-, glukonaatti- ja sakkaraatti- 6 90346 suolat.
Lyhyyden vuoksi yksityisten aminohappojen ja rea-genssien yleisesti hyväksyttyä lyhennettyä nimitystä on käytetty milloin se on mahdollista. Esimerkiksi aminohap-5 po-fenyylialaniinista on käytetty lyhennystä Phe, homose-riinistä Hse, histidiinistä His, lysiinistä Lys ja nor-leusiinista Nle. Aminosuojaryhmästä t-butoksikarbonyyli on käytetty lyhennystä Boc, bentsyylioksikarbonyylistä lyhennystä CBZ ja N-t-butoksikarbonyylistä histidiinin 10 imidatsolissa lyhennystä imBoc. Muita lyhennyksiä ovat: CPBA - klooriperbentsoehappo, DCC - disykloheksyylikarbo-di-imidi, DEC - dimetyyliaminopropyyli-etyylikarbodi-imi-di-HCl, DMF - dimetyyliformamidi, HC1 - kloorivety, HBT - hydrobentsotriatsoli, mesyyli - CH3S02-, Thi - 2-15 tienyylialaniini, Nala - 1-naftyylialaniini, TBDMS - t- butyylidimetyylisilyyli, TEA - trietyyliamiini, S-MeCys - S-metyylikysteiini, S-EtCys - Setyylikysteiini, MgS04 -magnesiumsulfaatti, NaOH - natriumhydroksidi, CH2C12 - me-tyleenikloridi, K2C03 - kaliumkarbonaatti, NaHC03- nat-20 riumvetykarbonaatti, 0-MeTyr - O-metyylityrosiini, O-MeHse - O-metyylihomoseriini jne.
Modifioitu norstatiini ja norsyklostatiini, jonka rakenteessa on yksi hiiliatomi vähemmän, ovat kaavojen
, B
-NH C°- la -NH
30 OH ÖH
mukaisia. Näistä rakenteista on käytetty lyhenteitä nor-
Sta ja vastaavasti nor-C-Sta.
Kaikki luonnon aminohapot, joita on keksinnön mukaisesti valmistetuissa mukaisissa yhdisteissä, ovat L-35 konfiguraation, luonnossa esiintyvän konfiguraation mukaisia ellei toisin ole mainittu.
7 90346 Tämän keksinnön osana pidetään myös kaavojen I ja II mukaisten yhdisteiden valmistusta, joissa nor-Sta ja nor-C-Sta on korvattu nor-Statone'11a ja nor-C-Statone'11a.
5 Tässä kuvatuilla yhdisteillä on verenpainetta alentava vaikutus in vivo nisäkkäillä, ihmiset mukaan lukien. Ainakin oleellinen osa tästä vaikutuksesta on seurausta niiden kyvystä ehkäistä reniinin aiheuttamaa angiotensinogeenin lohkeamista. Vaikkakaan ei haluta py-10 sytellä seuraavan teoreettisen mekanismin rajoittamina, on todennäköistä, että kuvattujen yhdisteiden reniiniä inhiboiva vaikutusmekanismi perustuu niiden selektiiviseen sitoutumiseen (angiotensinogeeniin verrattuna) re-niiniin. Kuvatuilla yhdisteillä on entsyymiä inhiboiva 15 vaikutus, joka on valikoiva reniinin osalta. Alhaisista molekyylipainoistaan johtuen niillä on edulliset liukoi-suusominaisuudet vesipitoisissa väliaineissa, mahdollistaen täten annon suun kautta ja ovat syntetisoitavissa kaupallisesti realistisin kustannuksin. Tämän keksinnön 20 yhdisteet ovat myös käyttökelpoisia verentungoksen aiheuttamaa sydämen toiminnanvajavuutta vastaan.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista se, mitä patenttivaatimuksessa 1 esitetään. Ensisijaisen kemiallisen synteesin peruslähtökohtana on aminohappotäh-25 teen suojaamattoman α-aminoryhmän asylointi aminohapolla, jossa on aktivoitu (asylointitarkoituksiin) karboksyyli-funktio ja sen omaan α-typpeen sitoutunut sopiva suoja-ryhmä, peptidisidoksen muodostamiseksi kahden aminohappotähteen välille, minkä jälkeen seuraa mainitun suojaryh-30 män poisto. Tämä kytkentäsuojauksen poistoperussynteesi suoritetaan toistuvasti polypeptidin rakentamiseksi, lähtemässä tässä selostetusta C-terminaalipäätteestä. Yhdisteiden syntetisointiin käytettäviä aminohappoja on kaupallisesti saatavissa (vapaina happoina, suoloina tai es-35 tereinä jne.) sekä α-aminosuojattuina että a-aminosuojaa-mattomina muotoina.
8 9 0 6 4 6
Valmistettavien yhdisteiden aktiivisuus reniinin angiotensinogeeniä lohkaisevan vaikutuksen inhibiittoreina voidaan määrittää tutkimalla niiden kykyä inhiboida reniinin angiotensinogeeniä lohkaisevaa vaikutusta in 5 vitro.
Tässä kuvattuja yhdisteitä voidaan antaa verenpainetta alentavina aineina joko suun kautta tai parenteraa-lisia antoteitä, edellisen ollessa ensisijainen potilaan kannalta tarkoituksenmukaisuus- ja mukavuussyistä joh-10 tuen. Yleensä näitä verenpainetta alentavia yhdisteitä annetaan tavallisesti suun kautta annoksena, joka on rajoissa noin 0,1 - noin 20 mg kehon painon kiloa kohden päivässä ja 0,1 - noin 5 mg kehon painon kiloa kohden päivässä parenteraalisesti annettaessa; poikkeamia voi 15 ilmetä tarvittaessa, riippuen hoidettavan potilaan tilas ta ja annettavasta tietystä yhdisteestä. Tyypillisesti käsittely aloitetaan alhaisella päivittäisellä annoksella ja lääkäri lisää sitä vain tarvittaessa. Huomattakoon, että näitä yhdisteitä voidaan antaa yhdistelmänä far-20 maseuttisesti hyväksyttävien kantajien kanssa kumpiakin aikaisemmin mainittuja teitä, ja että sellainen anto voidaan suorittaa sekä yhtenä annoksena että useina annoksina .
Kuvattuja uusia yhdisteitä voidaan antaa suun 25 kautta hyvin erilaisina antomuotoina, se on, niitä voidaan formuloida erilaisten farmaseuttisesti hyväksyttävien inerttien kantajien kanssa tableteiksi, kapseleiksi, pastilleiksi, lääkenapeiksi, koviksi makeisiksi, jauheiksi, suihkeiksi, vesisuspensioiksi, eliksiireiksi, siira-30 peiksi ja näiden kaltaisiksi valmisteiksi. Sellaisia kantajia ovat kiinteät laimentimet tai täyteaineet, steriilit vesipitoiset väliaineet ja erilaiset toksittomat orgaaniset liuottimet jne. Lisäksi sellaiset suun kautta annettavat farmaseuttiset seosmuodot voivat olla sopivas-35 ti makeutettuja ja/tai maustettuja erilaisten aineiden « 90346 avulla, jotka ovat sellaisiin tarkoituksiin yleisesti käytettävän tyyppisiä. Yleensä tässä kuvattuja yhdisteitä on sellaisissa suun kautta annettavissa annosmuodoissa konsentraatiorajoissa välillä noin 0,5 - noin 90 paino-% 5 koko yhdistelmän painosta, määrin, jotka riittävät haluttujen annostusyksiköiden saamiseksi.
Seuraavassa taulukossa on esitetty muutamien keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden lC50-arvot, jotka on saatu käyttäen ihmisen plasmaa.
10
Esimerkki ICc^_M
8 2 x 10'9 7 3 x 10’8 5 1 x 10'7 15 12 5 x 1010 17 1 x 10'9 34 5 x 10'9 41 7 x ΙΟ'10 42 5 x 10'9 20 128 8 x 10‘10
Esitetyt IC50-arvot vaihtelevat välillä 0,5 - 100 nM. Kun näitä arvoja verrataan aikaisemmin tunnettuihin julkaisun Chem. Lett. 1985, s. 1041 - 1044, sivulla 1043 25 taulukossa 1 kuvattuihin yhdisteisiin havaitaan, että tämän keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet ovat useita suuruusluokkia tehokkaampia kuin nämä tunnetut yhdisteet. Esim. julkaisun esimerkin 15 yhdisteelle IC50-arvo on 450 nM.
30 Tässä kuvatut yhdisteet ovat myös käyttökelpoisia liikapaineisuuden ja verentungoksesta aiheutuvan sydämen toiminnanvajavuuden diagnisoinnissa.
Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä.
Yleinen koemenetelmä 3!> Suuritehoinen nestekromatografointi (HPLC) suori tettiin seuraavissa olosuhteissa: 214 nm:n ilmaisin.
10 90346 4,6 x 250 mm:n Dupont Zorbax C-8 -kolonni, 1,5 ml/min. TLC-seokset, lyhennettyinä, ovat seuraavat: seos A = etyyliasetaatti-heksaani, vastaavasti mainitussa suhteessa, piidioksidilla; seos B = eetteri-heksaani, vastaavas-5 ti mainitussa suhteessa, piidioksidilla; seos C = HCCl^-EtOH-HOAc 18/2/1 piidioksidilla; seos D = kloroformi-eta-noli-etikkahappo 9:2:1.
Esimerkki 1
BocPheHisnor-C-StaNHCH^ (I, Z=t-butoksikarbonyyli- 10 amino; M=fenyyli; Q=H; R =imidatsol-4-yylimetyyli; 1 Δ W=CH 1 f » OH; Z ^ONHCH^; ja X=sykloheksyyli) A. N-metyyli-(S)-3-t-Boc-amino-4-sykloheksyyli-(R)- 2-hydroksibutyyliamidi_ (S)-3-t-Boc-amino-4-sykloheksyyli-(R)-2-hydroksi-15 voihappoa (100 mg), US-patentti 4 599 198, liuotettiin 0,9 ml:aan tetrahydrofuraania 55 ^ul:n kanssa trietyyli-amiinia ja seosta käsiteltiin -30°C:ssa isobutyylikloori-formiaatin (45 ^ul) kanssa. 1,5 tunnin kuluttua seos jäähdytettiin -60°C:seen ja lisättiin 1,5 ml 1,6-mol. metyyli-20 amiinin tetrahyerofuraaniliuosta ja seos lämmitettiin 25°C:seen. Reaktioseokseen johdettiin kuplina ylimäärin metyyliamiinia, joka reaktioseos laimennettiin sitten 25 ml:11a eetteriä, uutettiin kahdesti kyllästetyllä nat-riumvetykarbonaattiliuoksella, kuivattiin ja haihdutet-25 tiin kuiviin. Kromatografoimalla etyyliasetaatti-heksaa-nien seoksella 2:1 piidioksidilla saatiin 45 mg (42 %) otsikon ainetta värittömänä kiinteänä aineena, Rf 0,16 etyyliasetaatt-heksaanien seoksessa 2:1, piidioksidi ja RP-HPLC, 40/60-seoksessa MeCN-pH 2,1 0,1 mol. fosfaatti, 30 3,32 min.
B. N-Metyyli-(S)-3-amino-4-sykloheksyyli-(R)-2- hydroksibutyyliamidi_
Esimerkin IA tuote (45 mg) liuotettiin 2 ml:aan 4-norm. kloorivedyn dioksaaniliuosta ja sekoitettiin 35 25°C:ssa 1,5 tuntia. Seos konsentroitiin ja haihdutettiin useaan kertaan kuiviin eetterin kanssa, jolloin 11 90346 saatiin 50 mg otsikon ainetta värittömänä kiinteänä aineena, HPLC-retentioaika 3,05 min, 40/60-seoksessa MeCN-pH 7,0 0,1-mol. fosfaatti.
C. BocPheHis(imBoc)nor-C-StaNHCH^ 5 Liuosta, jossa oli esimerkin IB tuotetta (49 mg) 0,5 ml:ssa dikloorimetaania, käsiteltiin 0°C:ssa 30 ^ul:n kanssa trietyyliamiinia, 112 mg:n kanssa yhdistettä BocPheHis(imBoc), US-patentti 4 599 198, 48 mg:n kanssa hydroksibentsotriatsolia ja vastaavasti 46 mg:n kanssa 10 disykloheksyylikarbodi-imidiä ja seosta sekoitettiin 0°C:ssa kuusi tuntia, sitten sen annettiin lämmetä 25° C:seen yön aikana. Seos suodatettiin, sakka pestiin di-kloorimetaanilla ja yhdistetyt suodokset haihdutettiin kuiviin ja liuotettiin etyyliasetaattiin. Muutaman minuutin 15 sekoittamisen jälkeen etyyliasetaattisuspensio suodatettiin ja suodos pestiin 1-norm. natriumhydroksidiliuoksella (kahdesti), kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Kromatografoimalla piidioksidilla, eluoi-malla etanoli-dikloorimetaaniseoksella lisäämällä polaa-20 risuutta asteittain seuraavasti (1 %, 2 %, 4 %, 6 % ja 10 % etanolia) saatiin 57 mg otsikon ainetta värittömänä amorfisena kiinteänä aineena.
D. BocPheHisnor-C-StaNHCHj
Esimerkin IC tuote liuotettiin 1,2 ml:aan etikka-25 happo-vesiseosta 80/20 (til./til.) ja sekoitettiin 12 tuntia 25°C:ssa. Seos hjaihdutettiin kuiviin, haihdutettiin kuiviin kolme kertaa eetterin kanssa ja kahdesti dikloo-rimetaanin kanssa, jolloin saatiin 47 mg tuotetta vaaleanruskeana jauheena.
30 HPLC, 50/50-seoksessa MeCN-pH 2,1 0,1-mol. fos faatti, 3,61 min; 1H NMR, DMSO, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 1,32 (s, 9H, Boc), 2,60 (d, 3H, NCH3), 390, 4,66 ja 7,9 (m, 1H ea), 4,18 (m, 2H), 7,12, 7,7, 8,28 (d, 1H ea), 7,32 (s, 1H), 7,2 - 7,4 (m, aromaattinen).
12 90346
Esimerkki 2
BocPheHisnor-C-StaNHCONHCH2CH2CH2 (If Z=t-butoksi- karbonyyliamino; R9=imidatsol-4-yylimetyyli; M=fe- Δ 1 nyyli; Q=H; W=CHmOH; Z CONHCONHCF^CF^CH-j; ja 5 X=sykloheksyyli) A. N-t-Boc-O-t-butyylidimetyylisilyyli-nor-C- staNHCONHCH2CH2CH3_
Liuosta, jossa oli 415 mg (S)-3-t-Boc-amino-(R)-2-t-butyylidimetyylisilyylioksi-4-sykloheksyylibutyyliami-10 dia (US-patentti 4 599 198) ja 94 ^ul propyyli-isosyanaat-tia 2 ml:ssa tolueenia, lämmitettiin 90 tuntia 100°C:ssa, jäähdytettiin ja kromatografoitiin piidioksidilla seoksella 15 % etyyliasetaatti-heksaani, jolloin saatiin 260 mg otsikon ainetta värittömänä öljyisenä vaahtona, TLC Rf 15 0,49, seos A 1:2.
B. Nor-C-StaNHCONHCH2CH2CH3-hydrokloridi
Esimerkin 2C tuote (255 mg) liuotettiin 25°C:ssa 3 ml:aan vastavalmistettua liuosta, jossa oli 5 % 48-%:isen fluorivetyhapon vesiliuosta asetonitriilissä ja sekoitet-20 tiin kaksi tuntia. Reaktioseokseen lisättiin ylimäärin natriumvetykarbonaattia, yhdessä 20 ml:n kanssa vettä ja seos uutettiin etyyliasetaatilla, joka pestiin sitten vedellä, kuivattiin (magnesiumsulfaatilla) ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 198 mg öljyä. Tämä liuotettiin 25 0°C:ssa 4 ml:aan 4-norm. kloorivedyn dioksaaniliuosta, sekoitettiin 25°C:ssa tunnin ajan, sitten haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 130 mg väritöntä vahamaista kiinteää ainetta. NMR osoitti, että silyyliryhmän lohkeaminen oli epätäydellistä. TLC osoitti siinä olevan kahta tuotet-30 ta, joiden Rf-arvot olivat 0,42 ja 0,07 (seos C) ja siinä oletettiin olevan aminosilyyli-eetteriä ja vastaavasti ami-noalkoholia. Tätä tuotetta käytettiin enempää puhdistamatta seuraavassa vaiheessa.
C. BocPheHis(imBoc)nor-C-StaNHCONHCH2CH2CH3 35 Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmene telmän mukaisesti 119 mg:sta esimerkin 2B tuotetta saatiin 13 90 3 46 97 mg otsikon ainetta värittömänä amorfisena kiinteänä aineena, TLC Rf 0,555, seos C. Ei toivottu vastaava O-si-lyloitu aine (peräisin O-silyyliepäpuhtaudesta esimerkissä 2B) erotettiin kromatografointivaiheen aikana (polaa-5 rittomampi aine, Rf 0,60, seos C) .
D. BocPheHisnor-C-StaNHCONHCH2CH2CH3 Esimerkin 2C tuote (91 mg) liuotettiin 1,5 ml:aan etikkahappo-vesiseosta 80/20 ja sekoitettiin 25°C:ssa kuusi tuntia. SEos haihdutettiin kuiviin, haihdutettiin kui-10 viin eetterin kanssa kolme kertaa ja kuivattiin yön ajan, jolloin saatiin 80 mg tuotetta värittömänä kiinteänä aineena, Rf 0,10 seoksessa C ja sen HPLC-retentioaika oli 2,35 min 70/30-seoksessa MeCN-pH 2,1 0,1-mol. fosfaatti.
NMR, DMSO, 250 MHz, osittainen delta, ppm: 0,86 15 (t, 3H), 1,32 (s, 9H, Boc), 1,47 (q, 2H), 3,14 (q, 2H), 4,06 ja 4,48 (m, 1H ea), 4,17 (m, 2H), 6,83 (s, 1H), 7,10, 7,63, 8,02 (d, 1H ea), 7,15 - 7,35 (m, aromaattinen), 7,35 (s, 1H), 8,28 (m, 1H).
Esimerkki 3 20 Indoli-2-karbonyyliHisnor-C-Sta-metyyliesteri (II,
Rj.=imidatsol-4-yylimetyyli; Rg=OCH3; ja L=CH) A. 4-sykloheksyyli-2-pentin-l-yyli-tetrahydropyran- 1-yyli-eetteri_
Uunikuivattuun 5 litran kolmikaulaiseen pyöreäpoh-25 jäiseen pulloon, joka oli varustettu mekaanisella sekoittajalla, lämpömittarilla, tiputussuppilolla ja typen sisään johtoputkella, pantiin 192 g propargyyli-tetrahydro-pyranyylieetteriä ja 750 ml kuivaa tetrahydrofuraania (Aldrich, gold label). Sekoitettua liuosta pidettiin 30 0°C:ssa kuivajää-asetonihauteessa lisättäessä 45 minuutin aikana 604 ml 2,5-mol. n-butyylilitiumliuosta. Muodostuneeseen tummaan liuokseen lisättiin 20 minuutin kuluessa 5-10°C:ssa liuos, jossa oli sykloheksyylimetyylibromidia heksametyylifosforiamidissa (tislattu vakuumissa kalsium-35 hydridin joukosta) ja sekoittamista jatkettiin neljä tuntia 25°C:ssa. Seos kaadettiin sekoitettuun seokseen, 14 90346 jossa oli 2 litraa jäävettä ja 2 litraa heksaania. Orgaaninen kerros pestiin 2 x 500 ml:11a 1,0-mol. litiumklori-diliuosta, kuivattiin natriumsulfaatilla, haihdutettiin kuiviin ja tislattiin käyttämällä 8":n Vigreux-kolonnia, 5 jolloin saatiin 102 g talteen otettua propargyyli-tetra-hydropyranyyli-eetteriä, kp. 60 - 90°C 3 mm:n vakuumissa, sen jälkeen 151 g otsikon tuotetta, kp. 125 - 130°C 0,5 mm:n vakuumissa, TLC Rf 0,5 seoksessa B 1:4.
B. 4-sykloheksyyli-2-butin-l-oli 10 2 litran kolmikaulaiseen pulloon, joka oli varus tettu mekaanisella sekoittajalla, typen sisäänjohtoputkel-la ja lämpömittarilla, pantiin 140 g esimerkin 3A tuotetta ja 700 ml metanolia. Sekoitettu seos jäähdytettiin 2-3° C:seen ja lisättiin 560 mg p-tolueenisulfonihappoa, minkä 15 jälkeen jäähdytyshaude korvattiin lämminvesihauteella, joka riitti kohottamaan reaktiolämpötilan 30°C:seen. 4,5 tunnin kuluttua lisättiin 5 ml 1-norm. natriumhydroksidiliuos-ta ja suurin osa metanolista poistettiin vakuumissa pyörivässä haihduttimessa. Jäännös liuotettiin 700 ml:aan hek-20 saania ja liuos pestiin 1-norm. natriumhydroksidiliuoksel-la (3 x 100 ml), kuivattiin kaliumkarbonaatilla, suodatettiin, haihdutettiin kuiviin ja tislattiin kaliumkarbonaatin päältä käyttämällä 8":n Vigreux-kolonnia, jolloin saatiin 76 g tuotetta, kp. 90°C 1 mm:n vakuumissa, vaalean-25 keltaisena nesteenä, jossa oli epäpuhtautena 1 % metanolia ja 1 % heksametyylifosforiamidia 1H NMR:n perusteella. Tätä tuotetta käytettiin seuraavassa vaiheessa enempää puhdistamatta. TLC Rf 0,5, seos B 1:1.
Analyysi yhdisteelle ci.0H16O: 30 Laskettu: C 78,90 H 10,59 Saatu: C 78,31 H 10,72 C. Z-4-sykloheksyyli-2-buten-l-oli 500 ml:n Parr1 in pulloon pantiin 35,2 g esimerkin 3B tuotetta, 250 ml tolueenia, 250 mg "Lindlar Catalyst 35 Poison" -valmistetta (Fluka). Liuos huuhdeltiin typellä ja lisättiin 14,08 g Lindlar-katalyyttiä (Aldrich). Seosta is 90346 ravisteltiin 35 psi:n vetypaineessa 45 minuuttia, jonka ajan kuluessa reaktiolämpö lisääntyi spontaanisti noin 45°C:seen. Jäähtynyt suspensio suodatettiin Celiten läpi ja yhdistettiin toisen reaktioseoksen kanssa, joka oli val-5 mistettu samalla tavalla toisesta 35,2 g:n erästä samaa lähtöainetta. Yhdistetty seos konsentroitiin tislaamalla ilmakehän paineessa kalsiumkarbonaatin päältä 12":n Vigreux-kolonnin läpi, sitten pyörivässä haihduttimessa vesisuihkuvakuumissa ja 25°C:ssa, minkä jälkeen seurasi 10 lämmittäminen 80°C:ssa 0,3 mm:n vakuumissa samassa pullossa, joka oli varustettu Vigreux-kolonnilla, kunnes saatiin aikaan kevyt kiehuminen. Jäljelle jäänyt neste, vaaleankeltainen öljy, painoi 77,4 g ja siinä oli epäpuhtautena 1 % metanolia ja 1 % heksametyylifosforiamidia NMR:n pe-15 rusteella. Tämä tuote antoi yhden täplän TLCrssä, Rf 0,4, seos B 1:1 ja NMR:ssä ei näkynyt todettavissa olevaa trans-isomeeriä.
D. 2(S),3(R)-epoksi-4-sykloheksyyli-l-butanoli
Litran kolmikaulaiseen pulloon, joka oli varustet-20 tu lämpömittarilla, mekaanisella sekoittajalla, typen sisään johtoputkella ja jäähdytyshauteella, pantiin 15 g 4 A:n 600 meshin molekyyliseulaa, 400 ml dikloorimetaa-nia ja 7,23 ml (+)-di-isopropyyli-L-tartraattia (Aldrich). Sekoitettu seos jäähdytettiin -5°C:seen ja lisättiin 25 6,75 ml titaanitetraisopropoksidia, sen jälkeen 227 ml 3,0-mol. t-butyylihydroperoksidia tolueenissa (Aldrich), kummankaan aiheuttamatta huomattavaa eksotermisyyttä. Sekoitettuun seokseen lisättiin -20°C:ssa 10 minuutin aikana liuos, jossa oli 70 g esimerkin 3C tuotetta 30 ml:ssa 30 dikloorimetaania siten, että lämpötila ei kohonnut yli noin -20°C:n. Seosta sekoitettiin kuusi tuntia -10°C:ssa, pantiin sitten sekoittamatta jääkaappiin (-10°C) 60 tunniksi. Seosta sekoitettiin jälleen jäähauteessa ja lisättiin 120 ml vettä, sen jälkeen 30 ml 6-norm. natriumhydr-35 oksidiliuosta ja seos kyllästettiin natriumkloridilla. Lisättiin metanolia (50 ml) ja seos suodatettiin, käsiteltiin 16 90346 100 ml:n kanssa 0,1-mol. pH 7-fosfaattipuskuria ja voimakkaan ravistelun jälkeen seoksen annettiin olla paikoillaan, kunnes tapahtui osittaista erottumista. Alempi (orgaaninen) kerros erotettiin ja yläkerros (vesipitoinen) ja kes-5 kikerros (emulsio) uutettiin dikloorimetaanilla (3 x 200 ml). Jäljelle jäänyt emulsio (keskikerros) suodatettiin Celiten läpi, mikä aiheutti sen erottumisen täydellisesti orgaaniseksi kerrokseksi ja vesikerrokseksi. Yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin fosfaattipuskurilla pH 7 (3 x 10 100 ml), vetykarbonaatin vesiliuoksella, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (magnesiumsulfaatti), suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 85 g viskoosista öljyä, joka tislattiin käyttämällä 8":n Vigreux-kolonnia, jolloin saatiin kp. 60 - 122°C:ssa 15 0,5 mm:n vakuumissa 12 g, sitten kp. 122 - 130°C:ssa 0,45
mm:n vakuumissa 51 g otsikon ainetta, TLC Rf 0,20, seos B
2:1.
Analyysi yhdisteelle ciqH18°2:
Laskettu: C 70,55 H 10,66 20 Saatu: C 69,89 H 10,50 E. 2(S),3(R)-epoksi-4-sykloheksyyli-l-butaanihappo 3 g esimerkin 3D tuotetta liuotettiin asetonitrii-liin (30 ml) ja lisättiin peräkkäin 45 ml vettä, 30 ml hiilitetrakloridia, 690 mg ruteniumtrikloridi-trihydraat-25 tia ja 10,0 g perjodihappoa. Lämpötila kohosi asteittain, mutta pidettiin lievästi jäähdyttäen 30 - 35°C:ssa. 1,5 tunnin kuluttua lisättiin 75 ml kyllästettyä suolaliuosta ja 400 ml kloroformia. Orgaaninen kerros erotettiin ja ve-sikerros uutettiin kolme kertaa kloroformilla (400 ml). Yh-30 distetyt orgaaniset kerrokset pestiin 50 ml:11a 2-norm. kloorivetyhappoa, joka oli kyllästetty natriumkloridilla, kuivattiin (magnesiumsulfaatilla), suodatettiin Celiten läpi ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 2,55 g otsikon ainetta purppuranpunaisena kiinteänä aineena, TLC 35 Rf 0,40, seos C, joka käytettiin heti enempää puhdistamatta seuraavassa vaiheessa.
90 346 F. 3(S)-atsido-2(R)-hydroksi-4-sykloheksyylivoi- happo_
Esimerkin 3E tuote (2,65 g) liuotettiin 10 ml:aan absoluuttista etanolia ja lisättiin 25°C:ssa sekoitettuun 5 liuokseen, jossa oli 2,11 g litiumatsidia ja 6,43 ml ti-taanitetraisopropoksidia 180 ml:ssa absoluuttista etanolia. Seosta sekoitettiin 25°C:ssa 20 tuntia, sitten 35°C:ssa viisi tuntia ja 25°C:ssa 14 tuntia, minkä jälkeen se haihdutettiin kuiviin, liuotettiin 250 ml:aan 10 eetteriä ja 75 ml:aan l-%:ista rikkihappoa, sekoitettiin 30 minuuttia ja erotettiin. Saatu orgaaninen kerros pestiin 5-%:isella rikkihapolla (3 x 20 ml), fosfaattipuskurilla pH 7 (kahdesti), kuivattiin (magnesiumsulfaatilla) ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 2,82 g otsikon 15 ainetta vaaleankullanruskeana öljynä, joka muuttui kiinteäksi paikoillaan ollessaan. Aineen TLC Rf oli 0,35 (seos C) ja IR (CHC13) 2 100 cm"1.
G. 3(S)-atsido-2(R)-hydroksi-4-sykloheksyylivoihap- po-metyyliesteri_ 20 Diatsometaania valmistettiin käsittelemällä 4,5 g N 1-nitroso-N-metyyli-N-nitroguanidiinia 75 mlrssa eetteriä 31 ml:n kanssa 6-norm. natriumhydroksidiliuosta 0°C:ssa, minkä jälkeen orgaaninen kerros dekantoitiin erilleen ja kuivattiin lyhyen ajan 5 g:11a kaliumhydroksidia. Tämä 25 liuos pantiin tiputussuppiloon ja lisättiin tiputtamalla sekoitettuun liuokseen, jossa oli 2,82 g esimerkin 3F tuotetta 50 ml:ssa eetteriä 0°C:ssa. 40 minuutin kuluttua lisättiin 20 ml etikkahappoa ja seos uutettiin kyllästetyllä natriumvetykarbonaattiliuoksella (3 x 20 ml), natrium-30 hydroksidiliuoksella (2 x 20 ml), kuivattiin (natriumsul-faatilla), suodatettiin ja kromatografoitiin piidioksidilla eluoimalla etyyliasetaatti-heksaaniseoksella 1:8. Haihduttamalla kuiviin sopivat fraktiot saatiin 2,43 g otsikon ainetta ja TLC Rf oli 0,58, seos A 1:1, IR 35 (CHC13) 2 100 cm-1 /0</£° +10,1, (c = 1,19, CHClj) .
90346 18 H. 3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-sykloheksyylivoihap- pometyyliesteri-hydrokloridi_
Esimerkin 3G tuotetta (2,23 g) ravisteltiin 100 mg:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 15 ml:ssa etanolia ja 0,4 ml:n kans-5 sa etikkahappoa 50 psi:n vetypaineessa 40 minuuttia 25°C:ssa. Seos suodatettiin Celiten läpi, haihdutettiin kuiviin, haihdutettiin yhdessä tolueenin (2 x 10 ml) kanssa, liuotettiin 4 ml:aan 3,4-mol. kloorivedyn dioksaaniliuosta, haihdutettiin kuiviin ja haihdutettiin useaan kertaan yh-10 dessä eetterin kanssa, jolloin kuivaamisen jälkeen saatiin 1,49 g öljyistä, vaaleankeltaista vaahtoa, TLC Rf 0,15 (täplitetty levy altistettiin ammoniakkihöyrylle ennen kehittämistään seoksessa C).
I. Indoli-2-karbonyyliHis-metyyliesteri 15 5,5 g histidiini-metyyliesteri-dihydrokloridia sus- pendoitiin 500 ml:aan dikloorimetaania ja käsiteltiin 0°C:ssa 6,93 ml:n kanssa trietyyliamiinia, sen jälkeen peräkkäin 4,2 g:11a indoli-2-karboksyylihappoa, 5,56 g:11a hydroksibentsotriatsolia ja 5,35 g:lla disykloheksyyli-20 karbodi-imidiä. Seosta sekoitettiin jäähauteessa, jonka annettiin lämmetä yön aikana 25°C:seen. Seos suodatettiin, sakka pestiin dikloorimetaanilla, suodos haihdutettiin kuiviin, jäännös liuotettiin 200 ml:aan kloroformia ja uutettiin 4 x 30 ml :11a 1-norm. natriumhydroksidiliuosta, 25 kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaa-tilla) ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 7,2 g keltaista vaahtoa. Tämä vaahto liuotettiin seokseen, jossa oli 5 ml kloroformia, 20 ml vettä, 25 ml 1-norm. kloo-rivetyhappoa, vesikerros pestiin 5 ml :11a kloroformia ja 30 sitten pH säädettiin arvoon 6 natriumhydroksidiliuoksel-la. Seos haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin, jolloin saatiin 4,3 g vaaleanvihreää kiinteää ainetta, jonka reten-tioaika oli 3,46 min, HPC 35/65-seoksessa MeCN-pH 2,1 0,1-mol. fosfaatti (kokonaisabsorptiosta 85 %), sisältäen 35 vähäisiä epäpuhtauksia kohdilla 2,36 min ja 1,66 min.
19 90 346 TLC Rf seoksessa C oli 0,07. Tätä tuotetta käytettiin seuraavassa vaiheessa enempää puhdistamatta.
J. N-c*- (indoli-2-karbonyyli) -N (im) -t-butoksikarbo- nyyli-L-histidiini_ 5 Neljä ja 3/10 g esimerkin 31 tuotetta liuotettiin 60 ml:aan metanolia ja 20 ml:aan vettä, jäähdytettiin 0°C:seen ja käsiteltiin 7,6 g:n kanssa vedetöntä kalium-karbonaattia. Seoksen oltua tunnin ajan 0°C:ssa ja kaksi tuntia 25°C:ssa, se jäähdytettiin, pH säädettiin arvoon 3 10 6-norm. kloorivetyhapolla, haihdutettiin kuiviin, jäähdytettiin 0°C:seen, pH säädettiin arvoon 10,5 6-norm. nat-riumhydroksidiliuoksella, käsiteltiin 150 ml:n kanssa dioksaania ja 0°C:ssa lisättiin 4,2 ml di-t-butyyli-di- 20 o karbonaattia ((Boc)Δυ). Sitten seosta sekoitettiin 25°C:ssa 15 ja pH pidettiin välillä 9 - 10,5 lisäämällä 6-norm. nat- riumhydroksidiliuosta. 75 minuutin kuluttua lisättiin vie- 20 lä 2 ml yhdistettä (Boc) ja edelleen 15 minuutin kuluttua seos haihdutettiin kuiviin dioksaanin suurimman osan poistamiseksi, lisättiin 100 ml vettä ja saatu liuos pes-20 tiin kolme kertaa eetterillä (25 ml ea). Vesikerros jäähdytettiin jäähauteessa, lisättiin 500 ml etyyliasetaattia ja vesikerroksen pH säädettiin arvoon 1,3 6-norm. kloorivetyhapolla. Orgaaninen kerros erotettiin, vesikerros uutettiin etyyliasetaatilla, orgaaniset kerrokset yhdistet-25 tiin, pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaatilla), suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin kuivauksen jälkeen saatiin 3,1 g otsikon ainetta kuivana keltaisena jauheena, HPLC 50/50-seoksessa MeCN-pH 2,1 0,1-mol. fosfaatti 4,57 min (93 % kokonais- 30 UV-integraatiosta) ja f°i7^ +10,5° (c = 0,88, CHCl^) .
K. Indoli-2-karbonyyliHis(imBoc)nor-C-Sta-metyy- liesteri__
Esimerkin IC tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 500 mg esimerkin 3H tuotetta kytkettiin 35 25 ml:ssa dikloorimetaania 911 mg:n kanssa esimerkin 3J
tuotetta ja saatiin 550 mg otsikon ainetta, TLC Rf 0,58, 20 90 346 seos C. Läsnä oli myös vähäinen osa komponenttia, jonka Rf oli 0,55.
L. Indoli-2-karbonyyliHisnor-C-Sta-metyyliesteri Esimerkin 3K tuotetta (455 mg) sekoitettiin 10 ml:ssa 5 etikkahappo-vesiseosta 5:1 16 tuntia 25°C:ssa, haihdutet tiin kuiviin, haihdutettiin useaan kertaan yhdessä eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 431 mg vaaleankeltaista jauhetta, HPLC 40/60-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 0,1-mol. fosfaatti, antoi arvot 5,53 min (39 %) 10 ja 6,43 (58 %) .
NMR, DMSO, osittainen delta, ppm: 2,94 (m), 3,53 (s, 3H, OCH3), 4,02, 4,18, 4,64 (m), 6,80 (s, 1H), 6,9 - 7,6 (aromaattinen m), 7,0 (t), 7,4 (d), 7,6 (d).
Esimerkki 4 15 BocPheHis(imBoc)nor-C-Sta-metyyliesteri (I, Z=t- butoksikarbonyyliamino; R2=N-t-butoksikarbonyyli-imidatsol-4-yylimetyyli; W=CHitiOH; Q=H; M=fenyy-li; Z1=CC>2CH3; ja X=sykloheksyyli)
Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmene-20 telmän mukaisesti 2,0 g:sta esimerkin 3H tuotetta saatiin 1,8 g otsikon ainetta värittömänä vaahtona, TLC Rf 0,37 seoksessa C, HPLC seoksessa 70/30 MeCN-pH 2,1 0,1-mol.
fosfaatti eluoituen, 5,42 min. Saatiin myös 125 mg polaa-rittomampaa ainetta, Rf 0,43, joka identifioitiin spektraa-25 lisesti edellä identifioidun tuotteen O-BocPheHis(imBoc)-johdannaiseksi. Samoin saatiin myös tämän esimerkin tuotteen ja tämän yhdisteen seosta (500 mg).
NMR, CDCl^, 300 MHz, delta, osittainen: 1,33 ja 1,55 (s, 9H ea, Boc), 2,72 ja 2,94 (m, 1H ea), 3,1 (m, 30 2H), 3,70 (s, 3H OCH3), 4,04, 4,52 ja 4,95 (m, lH ea), 4,28 (m, 2H), 6,68 ja 8,08 (d, 1H ea), 7,05 - 7,30 (m, aromaattinen), 7,88 (s, 1H).
21 , vw , 90346
Esimerkki 5
BocPheHisnor-C-Sta-metyyliesteri (I, Z=t-butoksi- karbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R.=imidatsol-4-1 Δ yylimetyyli; Z =C02CH3; W=CHMiOH; ja X=syklohek-5 syyli)
Esimerkin 4 tuotetta (800 mg) sekoitettiin 14 tuntia 10 ml:ssa etikkahappo-vesiseosta 4:1 25°C:ssa, konsentroitiin, haihdutettiin useita kertoja yhdessä eetterin kanssa, jolloin saatiin 580 mg vaaleankeltaista vaah-10 toa, TLC Rf 0,30 seoksessa D, HPLC seoksessa 50/50 aseto-nitriili-pH 2,1 0,1-mol. fosfaatti, 6,32 min.
NMR, 300 MHz, CDCl^, osittainen, delta, ppm: 1,42 (s, 9H, Boc), 2,9 - 3,1 (m), 3,78 (s, 3H, OCH3), 4,20 ja 4,62 (1H kumpikin), 4,38 (m, 2H), 6,89 (s, 1H), 7,1 - 7,4 15 (m, aromaattinen), 7,78 (m, 2-3H).
Esimerkki 6
BocPheHisnor-C-Statiini-metyyliesteri (Z=(CH^)3~ COCONH; M=fenyyli; Q=H; X=sykloheksyyli; R-=imi- 1 ^ datsol-4-yylimetyyli; W=C=0; ja Z =CH2CH.j) 20 Sekoitettua liuosta, jossa oli 157 mg pyridinium- dikromaattia 10 ml:ssa dikloorimetaania, käsiteltiin 25°C:ssa 107 ^,ul:n kanssa etikkahappoanhydridiä, minkä jälkeen lisättiin yhtenä eränä 250 mg esimerkin 5 tuotetta. 1,5 tunnin kuluttua seos laimennettiin 150 ml:11a 25 dikloorimetaania ja tämä liuos pestiin 2 x 10 ml:11a 1-norm. kloorivetyhappoa, vetykarbonaatin vesiliuoksella, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (natriumsulfaa-tilla) ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 260 mg ruskeaa kiinteää ainetta, TLC Rf 0,2 (suurempi osa) ja 30 0,27 (pienempi osa, noin 5 %), seoksessa D. Näissä TLC- analyyseissä ei ollut todettavissa lainkaan polaarisem-paa esimerkin 5 tuotetta. Polaarittomampi epäpuhtaus voitiin poistaa kromatografoimalla piidioksidilla seoksella 5 % etanoli-etyyliasetaatti, mutta saanto oli heikko; 35 50 mg:sta raakaa ainetta saatiin 7 mg tuotetta, joka oli TLC:n perusteella puhdasta.
22 90346 NMR, 300 MHz, CDCl^, osittainen, delta, ppm: 1,24 (s, Boc), 3,82 (s, OOCH^), 7,0 - 7,5 (m, aromaattinen).
Esimerkki 7
MorfoliinokarbonyyliPheHisnor-C-Sta-metyyliesteri 5 (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=imidatsol-4-yylimetyyli; W=CH*iiOH; Z^CC^CH^; ja X=sykloheksyyli) A. (S)-2-isosyanaatto-3-fenyylipropionihappo-bent-syyliesteri 10 Lombardino'n ym:n menetelmän mukaisesti (J. Med.
Chem. 1964, 7, 97) 18,0 g L-fenyylialaniini-bentsyylieste-ri-hydrokloridia sekoitettiin 150 ml:ssa tolueenia kiehuttaen fosgeeniatmosfäärin suojaamana 1,5 tuntia, jäähdytettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin kiinteää 15 ainetta, joka kiteytettiin uudelleen 120 mlrsta heksaania, jolloin saatiin 16,1 g värittömiä neulasia.
Analyysi yhdisteelle C^H^NO^:
Laskettu: C 72,59 H 5,37 N 4,98 Saatu: C 72,32 H 5,35 N 4,92 20 Sp. 68 - 72°C. [<k!^ -80,4° (c = 1,02, CHC13) . IR (CHCl-j) 2250, 1750 cm-1.
B. MorfoliinokarbonyyliPhe-bentsyyliesteri
Esimerkin 7A tuote liuotettiin 5 ml:aan dikloori- metaania, käsiteltiin 25°C:ssa 930 ^ul:n kanssa morfolii-25 nia ja 30 minuutin kuluttua seos konsentroitiin vahamai-seksi kiinteäksi aineeksi, joka kiteytettiin uudelleen kuumasta heksaani-etyyliasetaattiseoksesta 4:1, jolloin saatiin 1,92 g otsikon ainetta, sp. 87 - 89°C. MS (kemiallinen ionisointi, isobutaani) 369 (MH+, emäspiikki).
30 C. MorfoliinokarbonyyliPhe
Esimerkin 7B tuote (1,85 g) liuotettiin 30 mitään absoluuttista metanolia ja 5 ml:aan etikkahappoa ja ravisteltiin 0,5 g:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä tunnin ajan 53 psi:n paineessa vetyatmosfäärissä. Suspensio suodatettiin, 35 konsentroitiin, haihdutettiin kuiviin kolme kertaa yhdessä 23 90346 lisätyn tolueenin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 1,43 g väritöntä vaahtoa.
D. BocHis(imBoc)nor-C-Sta-metyyliesteri Esimerkin iC tuotteen valmistus- ja puhdistusmene- 5 telmän mukaisesti, paitsi että yhdisteen BocPheHis(imBoc) asemesta käytettiin yhdistettä DiBocHis, 200 mgrsta esimerkin 3H tuotetta saatiin 345 mg suunnilleen suhteessa 1,5:1 seosta, jossa oli otsikon ainetta, Rf 0,38 ja vastaavaa Ο-BocHis(imBoc)johdannaista, Rf vastaavasti 0,50 (TLC 10 piidioksidilla etyyliasetaatissa). Tätä seosta käytettiin erottamatta esimerkissä 3E. Tämä seos voitiin erottaa pre-paratiivisen HPLC:n avulla Zorbax C-8 25 cm x 9,8 mm -ko lonnissa, eluoimalla asetonitriili-vesiseoksella 85/15 nopeudella 6,4 ml/min, toteaminen kohdalla 254 nm. Otsikon 15 aine eluoituu kohdalla 4,76 min ja O-asyloitu johdannainen kohdalla 6,48 min. Kummastakin saatiin tällöin puhtaita näytteitä.
E. BocHisnor-C-Sta-metyyliesteri Esimerkissä 7D saatu seos (895 mg) liuotettiin 20 20 ml:aan metanolia 25°C:ssa ja käsiteltiin 30 mg:n kans sa vedetöntä kaliumkarbonaattia. Tunnin kuluttua seos konsentroitiin ja kuivattiin, jolloin saatiin 604 mg keltaista vaahtoa, jota käytettiin puhdistamatta seuraavassa reaktiossa. HPLC 50/50-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 0,1-mol.
25 fosfaatti osoitti piikit 3,15 min:n ja 1,98 min:n kohdilla suhteessa 2,8:1. 1,98 min:n piikin edellytettiin olevan yhdistettä BocHisOMe, varmennettuna seoksen NMR:n avulla ja seuranneen konversion avulla alla mainituksi tunnetuksi johdannaiseksi.
30 F. Hisnor-C-Sta-metyyliesteri-hydrokloridi
Esimerkin 7E tuote (595 mg) liuotettiin 3,4-norm. kloorivedyn dioksaaniliuokseen 25°C:ssa ja sekoitettiin 30 minuuttia. Seos konsentroitiin ja jäännös kuivattiin vakuumissa, jolloin saatiin 555 mg keltaista kiinteää ainetta, HPLC 5/95-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 0,1- 35 mol. fosfaatti 1,54 min. NMR osoitti otsikon ainetta 24 90345 olevan läsnä ja siinä epäpuhtautena histidiini-metyylies-teri-dihydrokloridia.
G. MorfoliinokarbonyyliPheHisnor-C-Sta-metyylies- teri_ 5 Noudattamalla esimerkin 1C menetelmää, paitsi että yhdisteen BocPheHis(imBoc) asemesta käytettiin esimerkin 7C tuotetta ja että trietyyliamiinia käytettiin 2,2 ekvivalenttia 1,1 ekvivalentin asemesta, 550 mg:sta esimerkin 7F tuotetta saatiin 365 mg vaaleankeltaista amorfista kiin-10 teää ainetta, joka liuotettiin 3 ml:aan metanolia ja käsiteltiin 4 mg:n kanssa vedetöntä kaliumkarbonaattia 25°C:ssa kaksi tuntia ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 355 mg vaaleankeltaista vaahtoa. Tämä liuotettiin 4 ml:aan dikloorimetaania ja sekoitettiin voimakkaasti viisi minuut-15 tia 20 ml:n kanssa 1-norm. kloorivetyhappoa. Kerrokset erotettiin ja vesikerros uutettiin 2 x 20 ml :11a dikloorimetaania. Vesikerrosta käsiteltiin niin riittävän määrän kanssa 2-norm. natriumhydroksidiliuosta, että pH saatiin nostetuksi arvoon 10,5 ja sitten uutettiin 4 x 100 ml:11a 20 dikloorimetaania. Jälkimmäiset dikloorimetaaniuutteet kuivattiin (natriumsulfaatilla) ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 225 mg otsikon ainetta maalarinvalkeana vaahtona, TLC Rf 0,1 seoksessa D, HPLC 2,95 min 50/50-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti (93 % kokonais-25 UV-integraatiosta), vähäistä epäpuhtautta kohdalla 1,94 min (5 % UV-integraatio).
NMR, 300 MHz, CDCl^, osittainen, delta, ppm: 0,7 - 1,4 (m, 6-8H), 1,5 - 1,8 (m, 4-6H), 3,4 - 2,8 (m, ca. 8H), 3,6 (m, 4H), 3,73 (s, 3H, OCH3), 4,08 ja 4,54 (m, 1H), 30 4,30 (m, 2H), 5,2 (m, 1H), 6,82 ja 7,57 (s, 1H ea), 6,97 ja 8,12 (d, 1H ea), 7,1 - 7,35 (m, ca. 6H, aromaattinen).
25 90346
Esimerkki 8
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-metyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; W=CHiilOH; Z*=C02CH3 ja X=syklohek-5 syyli) A. Norleusiini-bentsyyliesteri
Julkaisussa J. Med. Chem. 1986, voi. 30, s. 3575 hahmotellun yleisen menetelmän mukaisesti 15,0 g norleu-siinia (Nle) sekoitettiin 200 ml:n kanssa bentsyylialko-10 holia ja jäähdytettiin 0°C:seen. 15 minuutin aikana lisättiin tiputtamalla tionyylikloridia (25 ml) ja seos lämmitettiin hitaasti 90°C:seen, jolloin kehittyi rajusti SC>2:ta, jota tapahtui noin 50°C:ssa. Kahden tunnin kuluttua 90° C:ssa oltuaan seos jäähdytettiin 0°C:seen ja lisättiin 15 vielä 25 ml tionyylikloridia. Seosta lämmitettiin sitten jälleen 90°C:ssa kaksi tuntia, jäähdytettiin, laimennettiin 1,6 litralla eetteriä ja pidettiin yön ajan 0°C:ssa. Muodostuneet kiteet suodatettiin erilleen, pestiin eetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin 23,1 g kosteaa kiin-20 teää ainetta, joka kiteytettiin uudelleen seoksesta etanoli-eetteri 1:10, käyttämällä 23 ml etanolia. Suodatetun ja kuivatun kiinteän aineen paino oli 17,1 g, TLC Rf 0,25 seoksessa C (täplitetty levy altistettiin ammoniakkihöy-ryille ja kuivattiin ennen eluointia).
25 B. MorfoliinokarbonyyliPheNle-bentsyyliesteri
Noudattamalla esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmää 2,12 g:sta esimerkin 8A tuotetta ja 2,63 g:sta esimerkin 7C tuotetta, saatiin 3,30 g otsikon ainetta värittömänä vaahtona, TLC Rf 0,5 etyyliasetaatis-30 sa piidioksidilla, HPLC-retentioaika 3,27 min. Kokonais-absorptiosta 97 % 25 min seoksessa 70/30 MeCN-pH 2,1 0,1-mol. fosfaatti.
C. MorfoliinokarbonyyliPheNle
Esimerkin 8B tuotetta (3,3 g) ravisteltiin 35 ml:ssa 35 metanolia ja 7 ml:ssa etikkahappoa 1,0 g:n kanssa 10-%:is-ta Pd/C:tä 45 minuutin ajan, suodatettiin Celiten läpi, 90346 26 haihdutettiin kuiviin, haihdutettiin useaan kertaan yhdessä tolueenin ja eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 2,9 g väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,2 seoksessa C.
5 D. MorfoliinikarbonyyliPheNlenor-C-Sta-metyylies- teri_
Noudattamalla esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmää 300 mg:sta esimerkin 3H tuotetta ja 700 mg:sta esimerkin 8C tuotetta saatiin 350 mg haluttua 10 tuotetta vaaleankeltaisena kiinteänä aineena, TLC Rf 0,33 etyyliasetaatissa piidioksidilla, HPLC-retentioaika 6,02 min seoksessa 75/25 MeCN-pH 2,1 0,1-mol. fosfaatti.
NMR (CDCl^), 300 MHz, osittainen, delta: 0,86 (t, 311, J = 6-7 Hz, peittäen kohdan 1-2H, jonka keskus kohdal-15 la 0,9), 1,04 - 1,36 (m, ca. 8H), 1,46 (dd, 2H), 1,46 - 1,90 (m, ca. 10H), 3,0 (dd:n keskus, 1H), 3,05 - 3,38 (m, ca. 5H), 3,58 (m, ca. 4H), 3,74 (s, 3H, OCH3), 4,12 (d, 1H, J = 1 - 2 Hz), 4,20 (q, 1H), 4,32 - 4,50 (m, 2H), 4,92 (d, 1H, J = ca. 8 Hz), 6,48 (d, 1H, J = 9 Hz), 6,54 (d, 20 1H, J = 10 Hz), 7,12 - 7,35 (m, 5H, aromaattinen).
Esimerkki 9
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; W=CH''»OH; Z1=C02CH(CH3)2; ja X=iso-25 propyyli A. N-t-butoksikarbonyyli-(S)-3-amino-(R,S)-2-hydr- oksi-5-metyylikapronitriili_
Boc-Leucinal'ia (119 g) (valmistaja Dibal -H-pel-kistyksen avulla metyyliesteristä Rich'in ym:n menetelmän 30 mukaisesti, J. Med. Chem. 1978, 43, 3624), liuotettiin
500 ml:aan dimetoksietaania ja käsiteltiin 5°C:ssa 63,8 g:n kanssa natriumvetysulfiittia 500 ml:ssa vettä siten, että lämpötila ei kohonnut 10°C:n yläpuolelle. Sekoittamista jatkottiin viisi tuntia 0°C:ssa ja seosta sekoitettiin .V'lV:nsa 48 tuntia. Seos konsentroitiin 350 ml:ksi, lisättiin litra etyyliasetaattia, sen jälkeen 39,5 g KCN
27 90346 100 ml:ssa vettä. 72 tunnin sekoittamisen jälkeen 25°C:ssa kerrokset erotettiin, vesikerros uutettiin 2 x etyyliasetaatilla, yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja 5 haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikon aineita vaaleankeltaisena öljynä 134 g, TLC Rf 0,22 seoksessa A 1:3.
B. N-t-butoksikarbonyyli-(S)-3-amino-(R)-2-t-bu-tyylidimetyylisiloksi-5-metyylikapronitriili
Esimerkin 9A tuote (117 g) liuotettiin 800 ml:aan 10 dimetyyliformamidia ja jäähdytettiin jäähauteessa. Lisättiin peräkkäin imidatsolia (82,2 g) ja 102 g t-butyylidi-metyylikloorisilaania ja seosta sekoitettiin kolme tuntia 25°C:ssa. Seos haihdutettiin kuiviin, lisättiin 500 ml hek-saania ja 500 ml eetteriä ja orgaaninen kerros pestiin 15 kyllästetyllä litiumbromidiliuoksella (3 x 50 ml), 1-norm. kloorivetyhapolla, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 166 g keltaista viskoosista öljyä. Nämä kaksi isomeeriä voidaan erottaa kromatografoimalla kolonnissa, johon pantiin 17 g 20 seosta 1,8 kg:lie piidioksidia, pakattiin ja eluoitiin seoksella eetteri-heksaani 1:25 (10 litraa), sitten 10 litralla seosta 1:22,5, sen jälkeen 10 litralla eetteri-hek-saaniseosta 1:20. Toistamalla tämä menettely saatiin 47,2 g polaarittomampaa isomeeriä värittömänä vahamaisena kiinteä-25 nä aineena, yhdessä 30,6 g:n kanssa polaarisempaa isomeeriä, N-t-butoksikarbonyyli-(S)-3-amino-(S)-2-t-butyylidi-metyylisilyylioksi-5-metyylikapronitriiliä ja 42 g seosta.
C. N-t-butoksikarbonyyli-(S)-3-amino-(R)-2-t-bu-tyylidimetyylisilyylioksi-5-metyyliheksaaniamidi 30 Esimerkin 9B tuote (30 g) liuotettiin 650 ml:aan absoluuttista etanolia ja käsiteltiin 0°C:ssa 144 ml:n kanssa 1-norm. natriumhydroksidiliuosta ja sen jälkeen 290 ml:n kanssa 30-%:ista vetyperoksidin vesiliuosta siten, että lämpötila ei kohonnut 5°C:n yläpuolelle. Seoksen 35 oltua 3,5 tuntia 0°C:ssa sitä lämmitettiin 30°C:ssa 0,5 tuntia, jäähdytettiin 0°C:seen ja käsiteltiin 116 ml:n 28 90346 kanssa 30-%:ista 10 minuutin kuluttua TLC osoitti lähtöaineen kadonneen ja 5°C:n alapuolella lisättiin tiputtamalla 200 ml 20-%:ista natriumsulfaatin vesiliuosta. Seoksen tilavuus pienennettiin vakuumissa 450 ml :11a ja 5 uutettiin etyyliasetaatilla (4 x 250 ml), joka uute pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 36 g öljyä, joka kroma-tografoitiin 800 g:11a piidioksidia eetteri-heksaaniseok-sella 1:1. Hiukan epäpuhtaat fraktiot kromatografoitiin 10 uudelleen samalla seoksella ja näin saatiin kaikkiaan 17,0 g väritöntä tuotetta, Rf 0,2 eetteri-heksaaniseokses-sa 1:1.
D. (S)-3-amino-(R)-2-hydroksi-5-metyyliheksaaniami- di-hydrokloridi_ 15 Esimerkin 9C tuote (16,9 g) liuotettiin 50 ml:aan dioksaania ja käsiteltiin 100 ml:n kanssa 3,4-norm. kloorivedyn dioksaaniliuosta 25°C:ssa. 2,5 tunnin kuluttua seos konsentroitiin, haihdutettiin yhdessä eetterin kanssa kuiviin ja kuivattiin, jolloin saatiin 8,7 g otsikon 20 ainetta värittömänä kiinteänä aineena, HPLC-retentioaika 2,35 min 5/95-seoksessa MeCN-pH 2,1 0,1-mol. fosfaatti.
E. (S)-3-amino-(R)-2-hydroksi-5-metyyliheksaani- happo-hydrokloridi_
Esimerkin 9D tuote (8,7 g) liuotettiin 150 ml:aan 25 6-norm. kloorivetyhappoa ja lämmitettiin 60°C:ssa kaksi tuntia, konsentroitiin ja kuivattiin, jolloin saatiin 10,6 g vaaleankeltaista kiinteää ainetta, HPLC-retentio-aika 5,0 min 5/95-seoksessa MeCN-pH 2,1 0,1-mol. fos faatti.
30 F. i-propyyli-(S)-3-amino-(R)-2-hydroksi-5-metyyli- heksanoaatti-hydrokloridi_
Esimerkin 9E tuote (1,25 g) liuotettiin 2-propano-liin, joka oli kyllästetty kloorivedyllä ja annettiin olla paikoillaan 18 tuntia 25°C:ssa. Seos konsentroitiin, jään-35 nös haihdutettiin kuiviin tolueenin ja eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 1,36 g haluttua tuotetta 29 90346
öljyisenä keltaisena vaahtona. TLC Rf 0,33 seoksessa D
(täplitetty levy altistettiin NH^-höyryille ennen kehittä mistä) .
G. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-Sta-i-propyyli- 5 esteri_ Käyttämällä esimerkin 1C valmistuksessa ja puhdistuksessa käytettyä menetelmää 300 mg:sta esimerkin 9F tuotetta ja 782 mg:sta esimerkin 8C tuotetta saatiin 209 mg tuotetta värittömänä vaahtona, TLC Rf 0,4 etyyliasetaatis-10 sa, HPLC-retentioaika 5,86 min 75/25-seoksessa MeCn-pH 2,1 0,1-mol. fosfaatti.
1H NMR (CDCl^), 300 MHz, osittainen, delta: 0,82 (t, 3H, J = 6 Hz), 0,89 (dd:n keskus, 6H), 1,21 (dd:n keskus, 6H), 1,3 - 1,6 (m, ca. 5H), 1,6 - 2,0 (m, 2-3H), 2,88 -15 3,34 (multipletit, ca. 7H), 3,55 (m, 4-5H), 4,05, 4,20, 4,36 ja 4,46 (m, 1H ea), 4,98 (m, 2H), 6,47 ja 6,56 (m, 1H ea), 7,05 - 7,31 (m, 5H).
Esimerkki 10
MorfoliinokarbonyyliPheLysnor-C-Sta-metyyliesteri 20 (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R9=4-aminobutyyli; X=sykloheksyyli; W=CHm iOH; ja Z ^C^CH^) ja morfoliinokarbonyyliPheLys(E-CBZ)-nor-C-Sta-metyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyli-amino? M=fenyyli; Q=H; R2=0CH2OCONH(CH2); X=syk-25 loheksyyli; W=CH'!iOH; ja Z^CC^CH^) A. BocLys(E-CBZ)nor-C-Sta-metyyliesteri Noudattamalla esimerkin 1C tuotteen yleistä valmistus- ja puhdistusmenetelmää 300 mg:sta esimerkin 3H tuotetta ja 679 mgista yhdistettä BocLys(ECBZ) (Chemalog Co.)
30 saatiin 430 mg tuotetta värittömänä vaahtona, TLC Rf 0,57 etyyliasetaatissa, HPLC 4,83 min 70/30-seoksessa MeCn-pH
2,1 0,1-mol. fosfaatti.
B. Lys(E-CBZ)nor-C-Sta-metyyliesteri-hydrokloridi Esimerkin 10A tuote (400 mg) liuotettiin 5 ml:aan 35 3,4-norm. kloorivetyhapon dioksaaniliuosta 25°C:ssa, se koitettiin 1,5 tuntia, konsentroitiin, haihdutettiin 30 90 346 useaan kertaan yhdessä eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 366 mg tuotetta vaaleankeltaisena vaahtona.
C. MorfoliinokarbonyyliPheLys(E-CBZ)nor-C-Sta-me- tyyliesteri_ 5 Noudattamalla esimerkin 1C tuotteen valmistuksessa ja puhdistuksessa käytettyä menetelmää 360 mg:sta esimerkin 10B tuotetta ja 311 mg:sta esimerkin 7C tuotetta saatiin 180 mg tuotetta värittömänä vaahtona. TLC Rf 0,64 seoksessa D, HPLC 2,85 min 70/39-seoksessa MeCN-pH 2,1 10 0,1-mol. fosfaatti.
1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta: 0,72 - 2,0 (m, ca. 25H), 2,94 (dd:n keskus, 1H), 3,0 - 3,32 (m, ca. 6H), 3,50 (m:n keskus, ca. 4H), 3,68 (s, 3H, OCH^), 5,02 (m, 2H), CH20, 6,52 ja 6,68 (d, 1H ea), 7,08 - 7,48 15 (m, ca. 11H).
D. MOrfoliinokarbonyyliPheLysnor-C-Sta-metyylies- teri-hydrokloridi_
Esimerkin 10C tuote (50 mg) liuotettiin 10 ml:aan metanolia ja 2 ml:aan etikkahappoa ja ravisteltiin 20 mg:n 20 kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 45 minuuttia 25°C:ssa 50 psi:n vetypaineessa. Seos suodatettiin, konsentroitiin ja haihdutettiin ensin yhdessä 3 ml:n kanssa 3,4-norm. kloorivedyn dioksaaniliuosta, sitten eetterin kanssa (3 x) ja kuivattiin, jolloin saatiin 36 mg tuotetta vaaleankeltaisina 25 levyinä, HPLC 4,08 min 40/60-seoksessa MeCN-pH 2,1 0,1- mol. fosfaatti, TLC Rf 0,12 seoksessa D.
1H NMR, 250 MHz, DMSO-dg, osittainen, delta: 0,67 - 1,8 (m, ca. 25H), 2,67 - 3,07 (m, ca. 4H), 3,07 - 3,56 (m), 3,56 (s, 3H, OCH^), 4,07 (ilmeinen d, 1H, J = 3 Hz), 30 4,13 - 4,40 (m, ca. 3H), 6,72 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,10 - 7,4 (m, ca. 5H), 7,62 (d, 1H, J = 9 Hz), 8,08 (d, 1H, J = 8,5 Hz) .
31 SO 346
Esimerkki 11
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-5-aminopentyy- liamidi-hydrokloridi (I, Z=morfoliinokarbonyyliami- no; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; W=CH«>iOH; Z1= 5 CONH(CH2)^NH2; ja X=sykloheksyyli) A. 3-(S)-atsido-2-(R)-hydroksi-4-sykloheksyyli-N-(5-bentsyylioksikarbonyyliaminopentyyXi)amidi Käyttämällä esimerkin 1C tuotteen yleistä synteesejä puhdistusmenetelmää 800 mg:sta 5-(bentsyylioksikarbo-10 nyyliamino)-1-aminopentaania ja 477 mg:sta esimerkin 3F tuotetta saatiin 490 mg otsikon ainetta vaaleankeltaisena siirappina, TLC Rf 0,5 etyyliasetaatissa, IR (CHC1-.) 2 100 -1 cm B. 3-(S)-amino-2-(R)-hydroksi-3-sykloheksyyli-N- 15 (5-bentsyylioksikarbonyyliaminopentyyli)amidi
Esimerkin 11A tuote (410 mg) liuotettiin 5 mlraan metanolia ja käsiteltiin 0°C:ssa 525 mg:n kanssa vedetöntä stannokloridia 5 ml:ssa metanolia minuutin ajan. Seosta sekoitettiin 25°C:ssa 18 tuntia, konsentroitiin, käsi-20 teltiin 3 ml:n kanssa vettä, 3 ml:n kanssa 1-norm. nat-riumhydroksidiliuosta ja uutettiin 200 ml :11a eetteriä. Vesikerros kyllästettiin natriumkloridilla ja uutettiin eetterillä. Eetterikerrokset kuivattiin, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 200 mg öljyistä 25 vaahtoa. Vesikerrokset tehtiin edelleen emäksiseksi
5 ml :11a 1-norm. natriumhydroksidiliuosta ja käsiteltiin 5 g:n kanssa natriumkloridia ja uutettiin 3 x 100 ml:lla etyyliasetaattia, 3 x 100 ml :11a dikloorimetaania ja yhdistetyt orgaaniset kerrokset kuivattiin, suodatettiin ja 30 haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin lisäksi 210 mg vaaleankeltaista vaahtoa. Yhdistetyt kiinteät aineet (410 mg) kromatografoitiin 25 g:11a piidioksidia eluoimal-la 250 ml:n erillä etanoli-dikloorimetaaniseoksia, joissa oli 1 %, 2 %, 4 %, 6 %, 8 % ja 12 % etanolia, jolloin saa-35 tiin 172 mg puhdasta tuotetta värittömänä vaahtona. HPLC
3,39 min 50/50-seoksessa MeCN-pH 2,1 0,1-mol. fosfaatti.
32 90346 C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta(5-CBZami- nopentyyli)amidi_ Käyttämällä esimerkin 1C tuotteen yleistä valmistus-ja puhdistusmenetelmää, paitsi että trietyyliamiini jätet-5 tiin pois, 165 mg:sta esimerkin 11B tuotetta ja 246 mg:sta esimerkin 8C tuotetta saatiin 212 mg tuotetta vaaleankeltaisena vaahtona, TLC Rf 0,14 etyyliasetaatissa, 0,80 seoksessa D. HPLC (4,8 min) osoitti siinä olevan noin 30 % (UV-absorbanssi) identifioimatonta epäpuhtautta, 5,03 min 10 60/40-seoksessa MeCN-pH 2,1 0,1-mol. fosfaatti.
D. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-(5-amino-pentyyli)amidi-hydrokloridi
Esimerkin 11C tuote (186 mg) liuotettiin 20 ml:aan metanolia ja 4 ml:aan etikkahappoa ja ravisteltiin 60 mg:n 15 kanssa 10-%:ista Pd/C:tä kaksi tuntia 25°C:ssa, suodatettiin Celiten läpi, konsentroitiin, haihdutettiin yhdessä tolueenin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 167 mg vaaleankeltaista kiinteää ainetta, joka haihdutettiin kahdesti kuiviin 3,4-norm. kloorivedyn dioksaaniliuoksen ja 20 eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 150 mg tuotetta vaaleankeltaisena kiinteänä aineena, HPLC 3,72 min 40/60-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 0,1-mol. fosfaatti.
1H NMR (DMSO-dg + 10 % H20:ta), 300 MHz, osittainen, delta: 0,82 (m, ca. 5H), 0,96 - 1,8 (m, ca. 25H), 25 2,7, 3,0, 3,2 ja 3,44 (2-3H-multiplettien keskukset), 3,76 (ilmeinen d, 1H), 4,0 - 4,2 (m, 2H), 4,2 - 4,35 (m, 1-2H), 4,35 - 4,9 (br, 3-4H), 6,7 (m, 1H), 7,06 - 7,4 (m, 5-6H), 7,63 (m, 1H), 7,92 (br, ca. 2H), 8,05 (d, 1H, J = 9 Hz). Esimerkki 12 30 1-formyylipiperatsiinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta- metyyliesteri (I, Z=4-formyylipiperatsiinokarbo-nyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=syklo-heksyyli; W=CHniOH; ja Z^CC^CH^ A. 1-formyylipiperatsiinokarbonyyliPhe-bentsyyli- 35 esteri_______
Esimerkin 7A tuote (3,0 g) liuotettiin 17 ml:aan dikloorimetaania ja käsiteltiin 25°C:ssa 1,7 ml:n kanssa 33 90 346
N-formyylipiperatsiinia, joka aiheutti eksotermisen lämpötilan kohoamisen 40°C:seen. Seoksen oltua 0,5 tuntia 25°C:ssa se konsentroitiin ja kromatografoitiin 100 g:11a piidioksidia eluoimalla 2 litralla etyyliasetaattia ja sen 5 jälkeen 10-%:isella etanoli-etyyliasetaattiseoksella, jolloin saatiin 3,1 g tuotetta, Rf 0,1 etyyliasetaatissa, HPLC
4,56 min 50/50-seoksessa MeCN-pH 2,1 0,1-mol. fosfaatti.
B. 1-formyylipiperatsiinokarbonyyliPhe
Esimerkin 12A tuote (3,0 g) liuotettiin 50 ml:aan 10 metanolia ja 5 ml:aan etikkahappoa ja ravisteltiin 1,0 g:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 50 psi:n vetypaineessa tunnin ajan 25°C:ssa, suodatettiin Celiten läpi, konsentroitiin, haihdutettiin kuiviin yhdessä tolueenin kanssa (3 x) ja kuivattiin, jolloin saatiin 2,31 g otsikon ainetta värit-15 tömänä vaahtona, Rf 0,17 seoksessa D.
C. 1-formyylipiperatsiinokarbonyyliPheNle-bentsyy- liesteri_ Käyttämällä esimerkin 1C tuotteen valmistuksessa ja puhdistuksessa käytettyä yleistä menetelmää 750 mg:sta 20 esimerkin 3H tuotetta ja 1,02 g:sta esimerkin 8A tuotetta saatiin 1,06 g otsikon ainetta värittömänä kiinteänä aineena, TLC Rf 0,65 seoksessa D, HPLC 2,48 min 70/40-seokses-sa MeCN-pH 2,1 fosfaatti.
D. 1-formyylipiperatsiinokarbonyyliPheNle 25 Esimerkin 12C tuote (1,04 g) liuotettiin 30 ml:aan metanolia 3 ml:n kanssa etikkahappoa, ravisteltiin 300 mg:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä tunnin ajan 25°C:ssa 50 psi:n ve-typaineen alaisena, suodatettiin, konsentroitiin, haihdutettiin kuiviin yhdessä tolueenin kanssa (3 x), eetterin 30 kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 870 mg otsikon ainetta maalarinvalkeana vaahtona, TLC Rf 0,5 seoksessa D.
E. 1-formyylipiperatsiinokarbonyyliPheNlenor-C-
Sta-metyyliesteri_ Käyttämällä esimerkin 1C tuotteen valmistamiseen 35 ja puhdistamiseen yleisesti käytettyä menetelmää 200 mg:sta esimerkin 3H tuotetta ja 465 mg:sta esimerkin 12D tuotetta 34 /*> r\ "7 4 9 ϋ ό 6 saatiin 194 mg tuotetta vaaleankeltaisena vaahtona, TLC Rf 0,53 seoksessa D, HPLC 4,50 min 50/50-seoksessa aseto-nitriili-pH 2,1 fosfaatti.
NMR (CDCl^), 300 MHz, osittainen, delta: 0,82 (t, 5 3H, J = 6 Hz, peittäen 0,9 multiplettiä), 1,0 - 1,35 (m, ca. 5Π), 1,44 (dd:n keskus, 2H), 1,44 - 1,9 (m, ca. 9H), 2,98 ja 3,10 (kukin dd:n keskus, 1H ea), 3,10 - 3,57 (m, ca. 8H), 3,57 - 3,72 (m, 3,72 s /OCHj7, totaalinen ca. 5H), 4,13 (d, 1H, J = 3 Hz), 4,21 (q, 1H), 4,39 (q, 1H), 4,49 10 (q, 1H), 5,18, 6,49 ja 6,63 (d, 1H ea, J = 6 Hz), 7,08 - 7,36 (m, 5-6H), 8,0 (s, 1H, N-CHO).
Esimerkki 13
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta (0 -4-piperidii- nobutyryyli)metyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyy- 15 liamino; M=fenyyli; Q=H; R9=n-butyyli; X=syklohek- Δ 1 syyli; W=CH ! < < OCO (CH2) ^-piperidiino; Z ^C^CH^) A. 4-piperidiinobutyryylikloridi-hydrokloridi 4-piperidiinovoihappo-hydrokloridi (750 mg) ja 4 ml tionyylikloridia yhdistettiin ja sekoitettiin kiehuttaen 20 45 minuuttia, konsentroitiin, trituroitiin eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 700 mg vaaleanruskeaa kiinteää ainetta, josta liuotettuna kuivaan metanoliin saatiin Rf-arvo 0,1 seoksessa D, selvästi erilainen kuin läh-töhapon ja ilmeisesti metyyliesterin. Kiinteää ainetta 25 käytettiin enempää puhdistamatta.
B. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta(0-4-piperi- diinobutyryyli-metyyliesteri_
Esimerkin 8D tuote (50 mg) kuivattiin lisäämällä ja poistamalla vakuumissa bentseeniä, liuotettiin 1 ml:aan 30 dikloorimetaania ja käsiteltiin peräkkäin 25°C:ssa 30 ^ul:n kanssa trietyyliamiinia ja 25 mg:n kanssa esimerkin 13A tuotetta. 1,5 tunnin kuluttua lisättiin vielä 15 yul tri-etyyliamiinia ja 22 mg lisää happokloridia ja toisen 2,4 tunnin kuluttua lisättiin 19 ^ul trietyyliamiinia ja 21 mg 35 happokloridia. Edelleen tunnin kuluttua lisättiin 7 ^ul trietyyliamiinia ja 10 mg happokloridia ja 0,5 tuntia 90346 myöhemmin seos laimennettiin dikloorimetaanilla, pestiin vetykarbonaatin vesiliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 75 mg tummanruskeaa öljyä, joka kromatografoitiin heti 3 g:11a piidioksidia 3 % eta-5 nolia sisältävän metyleenikloridin kanssa eluoimalla sitten 100 ml:lla tätä liuotinta ja 100 ml:n erillä etanoli-dikloorimetaaniseoksia, joissa oli 5 %, 7 %, 9 % ja 13 % etanolia. Otsikon aine eluoitui puhtaasti ja sitä saatiin vaaleanruskeana kiinteänä aineena, 25 mg, TLC Rf 0,23 10 seoksessa D, HPLC 5,09 min 60/40-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti.
1H NMR (CDC13), 300 MHz, osittainen, delta; 0,82 (t, 3H, peittäen 1-2H m), 1,04 - 2,0 (m), 2,26 - 2,58 (m), 3,06 (m, 2H), 3,1 - 3,34 (m, 4-6H), 3,57 (m, ca. 4H), 3,70 15 (s, 3H, 0CH3), 4,18 (q, 1H), 4,46 (q, 1H), 4,53 (m, 1-2H), 4,94 (m, lii), 7,1 - 7,3 (m, 5-7H) .
Esimerkki 14
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-N-metyyliamidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; 20 R3=N-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CHtiiOH; conhch3) A. 3(S) -atsido-2(R)-t-butyylidimetyylisilyylioksi- 4-sykloheksyylivoihappo-metyyliesteri_
Esimerkin 3G tuote (0,60 g) liuotettiin 5 ml:aan 25 dimetyyliformamidia ja käsiteltiin 0°C:ssa peräkkäin 422 mg:n kanssa imidatsolia ja 532 mg:n kanssa t-butyyli-dimetyylikloorisilaania. Seoksen oltua 18 tuntia 25°C:ssa sitä käsiteltiin 211 mg:n kanssa imidatsolia ja 255 mg;n kanssa t-butyylidimetyylikloorisilaania ja sekoitettiin 30 tunnin ajan 25°C:ssa. Seos konsentroitiin, jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, uutettiin 1-molaarisella li-tiumkloridin vesiliuoksella, 1-norm. kloorivetyhapolla, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin, suodatettiin, konsentroitiin (jolloin saatiin 900 mg kirkasta öljyä) ja 35 kromatografoitiin 25 g:11a piidioksidia 1 litralla eette- 36 90 3 46 ri-heksaaniseosta 1:75, jolloin saatiin 800 mg puhdasta tuotetta, TLC Rf 0,55 eetteri-heksaaniseoksessa 1:2.
B. 3(S)-atsido-2(R)-t-butyylidimetyylisilyylioksi- 4-sykloheksyylivoihappo-N-metyyliamidi 5 Esimerkin 14A tuote (725 mg) liuotettiin metano- liin ja jäähdytettiin 0°C:seen. Tämä liuos kyllästettiin vedettömällä metyyliamiinilla ja suljettua pulloa sekoitettiin 40°C:ssa viisi tuntia. Liuos konsentroitiin, jäännös haihdutettiin yhdessä eetterin kanssa ja kuivattiin, 10 jolloin saatiin 642 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,18 eetteri-heksaaniseoksessa 1:2.
C. 3(S)-amino-2(R)-t-butyylidimetyylisilyylioksi- 4-sykloheksyylivoihappo-N-metyyliamidi_
Esimerkin 14B tuote (640 mg) liuotettiin 30 ml:aan 15 metanolia ja 3 ml:aan etikkahappoa ja ravisteltiin 200 mg:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 50 psi:n vetypaineessa tunnin ajan 25°C:ssa. Seos suodatettiin Celiten läpi, suodos konsentroitiin ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin. Tämä liuos pestiin natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella, kui-20 vattiin, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 550 mg väritöntä öljyä, jota käytettiin seuraavas-sa vaiheessa puhdistamatta.
D. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta(O-t-butyyli- dimetyylisilyylieetteri)-N-metyyliamidi_ 25 Käyttämällä esimerkin 1C tuotteen valmsituksessa ja puhdistuksessa käytettyä yleistä menetelmää, paitsi että trietyyliamiini jätettiin pois, esimerkin 14C raa'asta tuotteesta (250 mg) ja 358 mg:sta esimerkin 8C tuotetta saatiin 206 mg otsikon aientta vaaleankeltaisena kiinteänä 30 aineena, TLC Rf 0,18 etyyliasetaatissa, Rf 0,7 seoksessa D, HPLC 8,2 min 70/30-seoksessa MeCN-pH 2,1 fosfaatti.
E. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-metyylies- teri_
Esimerkin 14D tuotetta (200 mg) käsiteltiin 3 ml:n 35 kanssa 3-norm. kloorivedyn dioksaaniliuosta 25°C:ssa 30 min, konsentroitiin, haihdutettiin yhdessä eetterin kanssa 90346 (3 x) ja kuivattiin, jolloin saatiin 155 mg vaaleankeltaista kiinteää ainetta, TLC Rf 0,48 seoksessa D, HPLC 4,57 min 50/50-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 1-mol. fosfaatti.
1H NMR, 300 MHz, DMSO-dg, osittainen, delta: 0,82 5 (t, 3H, J = 6 Hz, peittäen m 1-2H), 1,0 - 1,32 (m, ca. 10H), 1,4 - 1,9 (m), 2,54 (d, 3H, J = 6 Hz, NCH3), 2,78 ja 2,96 (dd:n keskukset, 1H ea), 3,06 - 3,28 (m, ca. 4H), 3,42 (m:n keskus, ca. 4H), 3,76 (ilmeinen d, 1H, J = ca. 1 Hz), 4,11 (m, 2H), 4,28 (m, 1H), 6,62, 7,58 ja 7,96 (d, 1H ea), 10 7,06-7,3 (m, 5H).
Esimerkki 15 MOrfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-N-n-butyyliami- di (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CHpmoH; Z^= 15 CONH(CH2)3CH3) A. 3(S)-atsido-2(R)-t-butyylidimetyylisilyylioksi- 4-sykloheksyylivoihappo-N-n-butyyliamidi_
Esimerkin 14A tuote (800 mg) liuotettiin 2 ml:aan metanolia ja 1 ml:aan butyyliamiinia ja sekoitettiin kie-20 huttaen 18 tuntia. Lisättiin butyyliamiinia (1 ml) ja kiehuttamista jatkettiin kaksi tuntia. Seos konsentroitiin ja kromatografoitiin 25 g:lla piidioksidia eluoimalla eetteri-heksaaniseoksella 1:5, jolloin saatiin 500 mg väritöntä vahamaista kiinteää ainetta, TLC Rf 0,1 eetteri-heksaani-25 seoksessa 1:5, yhdessä 240 mg:n kanssa talteenotettua lähtöainetta .
B. 3(S)-amino-2(R)-t-butyylidimetyylisilyylioksi- 4-sykloheksyylivoihappo-N-n-butyyliamidi_
Esimerkin 15A tuote (450 mg) liuotettiin 30 ml:aan 30 metanolia 3 ml:n kanssa etikkahappoa ja ravisteltiin 220 mg:n kanssa Pd/C:tä viisi tuntia. Seos suodatettiin Celiten läpi, suodos konsentroitiin, jäännös haihdutettiin kuiviin yhdessä lisätyn tolueenin kanssa, liuotettiin etyyliasetaattiin, pestiin kolmella erällä vetykarbonaatin vesi-ir> liuosta, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin 38 90346 kuiviin, jolloin saatiin 360 mg väritöntä öljyä, jota käytettiin puhdistamatta seuraavassa vaiheessa.
C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta(O-t-butyyli- dimetyylisilyylieetteri)N-n-butyyliamidi__ 5 Käyttämällä esimerkin 1C tuotteen valmistuksessa ja puhdistuksessa käytettyä yleistä menetelmää, paitsi että trietyyliamiini jätettiin pois, 355 mgrsta esimerkin 15B tuotetta ja 300 mgrsta esimerkin 8C tuotetta saatiin 313 mg tuotetta värittömänä kiinteänä aineena, Rf 0,8 seok-10 sessa D, HPLD 7,5 min 85/15-seoksessa asetonitriili-vesi.
D. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-N-n-butyyli- amidi_
Esimerkin 15C tuote (305 mg) liuotettiin 25°C:ssa 3 mlraan 3,4-norm. kloorivedyn dioksaaniliuosta. 45 minuu-15 tin kuluttua seos konsentroitiin, jäännöstä haihdutettiin kolme kertaa eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 239 mg beigeväristä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,6 seoksessa D, HPLC 10,2 min 50/50-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti.
20 1H NMR, DMSO-dg, 300 MHz, osittainen, delta: 0,9 (tripletit, 6H totaalinen, peittäen 1-2H m), 1,0 - 1,85 (m, ca. 20H), 2,76 (dd:n keskus, 1H), 2,9 - 3,5 (m), 3,74 (ilmeinen d, 1H, J = ca. 1 Hz), 4,14 (m, 2H), 4,27 (m, 1H), 6,60 (d, 1H), 7,05 - 7,3 (m, 5H), 7,58 (t, 1H), 7,98 25 (d, 1H).
Esimerkki 16 MOrfoliinokarbonyyliPheNva-nor-C-Sta-i-propyylies- teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-propyyli; X=sykloheksyyli; W=CH»MOH; ja 30 Z1=C02CH(CH3)2) A. L-norvaliini-metyyliesteri-hydrokloridi
Vedetöntä kloorivetyä johdettiin kuplina 0°C:ssa 15 minuutin ajan suspensioon, jossa oli 2,0 g L-norvalii-nia (Chemical Dynamics) 50 mlrssa vedetöntä metanolia.
35 Saatua liuosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa 18 tuntia. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin vakuumissa 39 90346 valkeaksi kiinteäksi aineeksi, joka kiteytettiin uudelleen etanoli-eetteriseoksesta, jolloin saatiin 2,3 g haluttua metyyliesteriä.
B. N-(morfoliinokarbonyyli)-L-fenyylialaniini-L- 5 fenyylialaniini-L-norvaliini-metyyliesteri
Liuokseen, jossa oli 0,50 g N-(morfoliinokarbonyyli) -L-fenyylialaniinia ja 0,26 g L-norvaliini-metyylies-teriä 10 ml:ssa kuivaa metyleenikloridia, lisättiin 0,22 ml trietyyliamiinia, 0,33 g 1-hydroksibentsotriatsolia ja 10 0,38 g 1-(3-dimetyyliaminopropyyli)-3-etyyli-karbodi-imi- diä. Reaktioseosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa 16 tuntia, minkä jälkeen se laimennettiin 50 ml :11a etyyliasetaattia ja pestiin 0,1-norm. kloorivetyhappoliuoksel-la (2 x 25 ml) ja 0,1-norm. natriumhydroksidiliuoksella 15 (2 x 25 ml). Orgaaninen faasi kuivattiin magnesiumsulfaa tilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 0,62 g raakaa dipeptidiä.
C. N-(morfoliinokarbonyyli)-L-fenyylialaniini-L- norvaliini_ 20 Liuokseen, jossa oli 0,62 g N-(morfoliinokarbonyy li) -L-fenyylialaniini-L-norvaliini-metyyliesteriä 40 ml:ssa metanolia ja 20 ml vettä, lisättiin 1,2 g kaliumkarbonaattia. Saatua seosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa 60 tuntia, minkä jälkeen se konsentroitiin vakuumissa ve-25 siliuokseksi ja pestiin eetterillä (3 x 50 ml). Vesifaasi tehtiin happameksi 10 ml:11a 4-norm. kloorivetyhappoliuos-ta ja uutettiin metyleenikloridilla (3 x 25 ml). Yhdistetyt uutteet kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,46 g raakaa 30 happoa.
D. MorfoliinokarbonyyliPheNva-nor-C-Sta-i-propyy- liesteri_
Liuokseen, jossa oli 0,13 g N-(morfoliinokarbonyyli) -L-fenyylialaniini-L-norvaliinia ja 0,10 g 2(R)-hydr-35 oksi-3(S)-amino-4-sykloheksyylibutaanihappo-2-propyylies-teriä (esimerkki 17A) 5 mlrssa kuivaa metyleenikloridia, 40 90 346 lisättiin 0,055 ml trietyyliamiinia, 0,060 g 1-hydroksi-bentsotriatsolia ja 0,075 g 1-(3-dimetyyliaminopropyyli)- 3-etyylikarbodi-imidiä.
Liuosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa 16 5 tuntia, minkä jälkeen se laimennettiin 40 ml:11a etyyliasetaattia ja pestiin 2 x 25 ml:lla 0,1-norm. kloorivety-happoliuosta ja 2 x 25 ml:11a 0,1-norm. natriumhydroksidi-liuosta. Orgaaninen faasi kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja konsentroitiin vakuumissa. Jäännös kroma-10 tografoitiin silikageelillä (Ci^C^:etanoli 29:1), jolloin saatiin 0,17 g puhdasta peptidiä (77 %).
NMR (300 MHz, CDC13): 0,86 (m, 3H), 1,27 (d, J = 8 Hz, 6H), 4,09 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,51 (m, 1H), 7,25 (m, 5H).
15 Esimerkki 17
MorfoliinokarbonyyliPhe-S-metyyli-Cysnor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli; W=CH > ' f OH; ja Z^CC^CH (CH3) ^ 20 A. 2(R)-hydroksi-3(S)-amino-4-sykloheksyylibutaani- happo, 2-propanoliesteri, hydrokloridi_ Jäissä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli 1,0 g N-t-butyylioksikarbonyyli-2(R)-hydroksi-3(S)-amino-4-sykloheksyylibutaanihappoa 50 ml:ssa 2-propanolia, johdet-25 tiin kuplina kuivaa kloorivetyä 20 minuutin ajan. Liuoksen annettiin lämmetä ympäristön lämpötilaan ja sekoitettiin 16 tuntia. Liuos konsentroitiin vakuumissa ja kuivattiin korkeavakuumissa, jolloin saatiin 0,93 g haluttua amiini-hydrokloridiesteriä.
30 B. S-metyyli-L-kysteiini-metyyliesteri, hydrokloridi_ Jäissä jäähdytetty suspensio, jossa oli 2,5 g S-me-tyyli-L-kysteiiniä (Chemical Dynamics) 25 ml:ssa vedetöntä motanolia, kyllästettiin kuivalla kloorivedyllä, jonka ai-35 kana kaikki aines liukeni. Liuoksen annettiin lämmetä ympäristön lämpötilaan ja sekoitettiin 20 tuntia. Liuos 41 90 346 konsentroitiin vakuumissa keltaiseksi kiinteäksi aineeksi, joka kiteytettiin uudelleen eetteri-etanoliseoksesta, jolloin saatiin 3,0 g (87 %) haluttua metyyliesteri-amiini-hydrokloridia.
5 C. N-(morfoliinokarbonyyli)-L-fenyylialaniini-S-me- tyyli-L-kysteiini-metyyliesteri_
Liuokseen, jossa oli 0,96 g N-(morfoliinokarbonyyli) -L-fenyylialaniinia 3 ja 0,55 g S-metyyli-L-kysteiini-metyyliesteriä 50 ml:ssa kuivaa metyleenikloridia ympä-10 ristön lämpötilassa, lisättiin 0,50 ml trietyyliamiinia, 0,51 g 1-hydroksibentsotriatsolia ja 0,70 g 1-(3-dimetyy-liaminopropyyli)-3-etyylikarbodi-imidi-hydrokloridia. Neljän tunnin sekoittamisen jälkeen liuos laimennettiin 100 ml:lla etyyliasetaattia ja pestiin 2 x 35 ml:lla 0,1-norm. 15 kloorivetyhappoliuosta ja 2 x 35 ml:11a 0,1-norm. natrium-hydroksidiliuosta. Orgaaninen faasi kuivattiin magnesium-sulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 1,15 g haluttua kiinteää dipepti-diä.
20 D. N-(morfoliinokarbonyyli)-L-fenyylialaniini-S- metyyli-L-kysteiini __ Jäissä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli 1,15 g N-(morfoliinokarbonyyli)-L-fenyylialaniini-S-metyyli-L-kysteiini-metyyliesteriä 30 mlrssa vettä ja 60 ml:ssa me-25 tanolia, lisättiin 3,5 g kaliumkarbonaattia. Saatua seosta sekoitettiin 0°C:ssa 15 minuuttia ja ympäristön lämpötilassa neljä tuntia. Liuos konsentroitiin vakuumissa vesiliuokseksi, joka tehtiin happameksi väkevällä kloorive-tyhapolla ja uutettiin 3 x 50 ml:11a metyleenikloridia.
30 Yhdistetyt uutteet kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja konsentroitiin vakuumissa, jolloin saatiin 1,0 g (89 %) raakaa happoa.
E. MorfoliinokarbonyyliPhe-S-metyyli-Cysnor-C-Sta- i-propyyliesteri_ 35 Liuokseen, jossa oli 0,43 g N-(morfoliinokarbonyy li )-l.-1'enyylialaniini-S-metyyli-L-kysteiiniä 5 ja 0,34 g « 90346 2(R)-hydroksi-3(S)-amino-4-sykloheksyylibutaanihappo-2-propanoliesteriä 20 ml:ssa kuivaa metyleenikloridia, lisättiin 0,17 ml trietyyliamiinia, 0,18 g hydroksibentso-triatsolia ja 0,23 1-(3-dimetyyliaminopropyyli)-3-etyy- 5 li-karbodi-imidiä. Liuosta sekoitettiin ympäristön lämpötilassa 16 tuntia, minkä jälkeen se laimennettiin 50 ml:11a etyyliasetaattia ja pestiin 25 ml:11a 0,1-norm. kloorive-tyhappoliuosta ja 25 ml:11a 0,1-norm. natriumhydroksidi-liuosta. Orgaaninen faasi kuivattiin magnesiumsulfaatilla, 10 suodatettiin ja konsentroitiin vakuumissa. Jäännös kroma-tografoitiin silikageelillä (CI^C^:etanoli 29:1), jolloin saatiin 0,42 g puhdasta peptidiä 6 (62 %) .
NME (300 MHz, CDC13): 1,30 (2xd, 6H), 2,13 (s, 3H), 4,49 (m, 3H), 5,07 (m, 1H), 7,25 (m, 5H).
15 Esimerkki 18
Bentsimidatsoli-2-karbonyyliNlenor-C-Sta-metyyli- esteri (II, L=N; R(.=n-butyyli; ja Rg=OCH3) A. Bentsimidatsoli-2-karbonyyli-norleusiini-bent- syyliesteri_ 20 Esimerkin 1C tuotteen valmistusmenetelmän mukaises ti 80 mg:sta bentsimidatsoli-2-karboksyylihappoa ja 110 mg:sta norleusiini-bentsyyliesteri-hydrokloridia (esimerkin 8a tuote) saatiin silikageelillä kromatografoinnin jälkeen etyyliasetaatti-heksaanien seoksella eluoimalla 25 110 mg kiinteää ainetta, joka kiteytettiin uudelleen eet- teriheksaanien seoksesta 1:7, jolloin saatiin 85 mg väritöntä kiinteää ainetta.
B. Bentsimidatsoli-2-karbonyyli-norleusiini
Esimerkin 18A tuote (82 mg) liuotettiin 15 ml:aan 30 metanolia ja 2 ml:aan etikkahappoa ja ravisteltiin 50 mg:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 50 psi:n vetypaineessa 25°C:ssa tunnin ajan, suodatettiin Celiten läpi, konsentroitiin, haihdutettiin kuiviin yhdessä 3 ml:n kanssa lisättyä to-lueenia (5 x) ja kuivattiin, jolloin saatiin 48 mg keller-35 tävää kiinteää ainetta, TLC Rf 0,35 seoksessa C.
43 90 3 46 C. 3(S)-amino-2(R)-t-butyylidimetyylisilyylioksi- 4-sykloheksyylivoihappo-metyyliesteri_ Käyttämällä esimerkin 14B tuotteen valmistusmenetelmää 740 mgjsta esimerkin 18B tuotetta saatiin 500 mg 5 otsikon ainetta keltaisena öljynä.
D. Bentsimidatsoli-2-karbonyyliNlenor-C-Sta-metyy- li-TBDMS-eetteri_
Esimerkin 1C tuotteen valmistusmenetelmän mukaisesti 65 mgrsta esimerkin 18C tuotetta ja 45 mg:sta esimerkin 10 18B tuotetta saatiin 110 mg raakaa tuotetta, joka puhdis tettiin piidioksidilla eluoimalla eetteri-heksaaniseoksel-la, jolloin saatiin 65 mg väritöntä vaahtoa, TLC Rf 0,52 seoksessa A 1:1.
E. Bentsimidatsoli-2-karbonyyliNlenor-C-Sta-metyy- 15 liesteri_
Esimerkin 8D tuote (60 mg) liuotettiin 3 ml:aan 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta. 45 minuutin kuluttua 25°C:ssa oltuaan seos konsentroitiin, jäännös haihdutettiin yhdessä eetterin kanssa kuiviin, liuotettiin etyyli-20 asetaattiin, pestiin natriumhydroksidin vesiliuoksella, kuivattiin, konsentroitiin ja kromatografoitiin piidioksidilla seoksella etyyliasetaatti-heksaani (1:1), jolloin saatiin 27 mg keltaista kiinteää ainetta, joka puhdistettiin preparatiivista HPLC:tä käyttäen (1 cm:n C-8-kolonni), 25 eluoimalla asetonitriili-vesiseoksella 7:3. Tällöin saatiin 10 mg puhdasta ainetta, TLC Rf 0,55 piidioksidilla etyyliasetaatissa, HPLC 3,17 min 70/30-seoksessa asetonit-riili-pH 2,1 fosfaatti.
1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 30 0,83 (t, 3H), 3,80 (s, 3H), 4,10, 4,15, 4,29, 4,57 ja 4,79 (m, 1H ea), 7,25 (m, 2H), 7,33 (m, 2-3H), 7,50, 7,77 ja 8,10 (d, 1H ea).
44 90 346
Esimerkki 19 MOrfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-natriumsuola (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CH'UOH; ja Z^ = 5 C02H)
Esimerkin 8 tuote (25 mg) liuotettiin 0,5 ml:aan dioksaania ja käsiteltiin 25°C:ssa 42 ^ulrn kanssa 1-norm. natriumhydroksidiliuosta. Kolmen tunnin kuluttua seos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin otsikon ainetta vaalean-10 keltaisena kiinteänä aineena (17 mg), HPLC 3,06 min 60/40-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaattipuskuri.
1H NMR, DMSO, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 0,87 (t, 3H), 4,97, 5,07 ja 5,34 (m, 1H ea), 6,66, 7,98 ja 8,10 (d, 1H ea), 7,1 - 7,35 (m, aromaattinen).
15 Esimerkki 20 3-(S)-morfoliinokarbonyyliPheNorleusyyliamino)-2-(R)-hydroksi-4-fenyylibutyramidi (I, Z=morfoliino-karbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X= fenyyli; W=CHM»OH; ja Z1=CONH2) 20 Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmene telmän mukaisesti 148 mg:sta 3(S)-amino-2(R)-hydroksi-4-fenyylibutyramidi-hydrokloridia (US-patentti 4 668 769:n esimerkki ID) ja 251 mgrsta esimerkin 8C tuotetta saatiin 170 mg väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,3 seoksessa C.
25 1H NME, DMSO, 250 MHz, osittainen, delta, ppm: 0,82 (t, 3H), 2,60 (dd, 1H), 2,80 (peittävä dd, 1H), 2,95 (dd, 1H), 3,42 (m, 4H), 3,68 (d, 1H), 4,17 (m, 2H), 4,28 (m, 1H) , 6,61, 7,52 ja 7,91 (d, 1H ea) , 7,05 - 7,35 (m, aromaattinen) .
45 9 0 3 4 6
Esimerkki 21
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-amidi (I, Z= morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CHmi0H; ja Z1=CONH2) 5 A. Boc-nor-C-Sta-amidi-TBDMS-eetteri
Esimerkin 1C tuote, US-patentti 4 668 769 (9,17 g) liuotettiin 200 ml:aan metanolia ja ravisteltiin 1 g:n kanssa 10-%:ista Rh/C:tä 70 tuntia 25°C:ssa ja 30 psi:n vetypaineessa, suodatettiin Celiten läpi ja haihdutettiin 10 kuiviin, jolloin saatiin 8,25 vaaleankeltaista vaahtoa, joka kromatografoitiin 400 g:11a piidioksidia etyyliase-taatti-heksaaniseoksessa (3 litraa seosta 1:3, sitten 2 litraa seosta 100:0), jolloin saatiin 7,2 g tuotetta värittömänä kiteisenä kiinteänä aineena.
15 B. Nor-C-Sta-amidi-hydrokloridi
Esimerkin 21A tuote (6,1 g) liuotettiin 15 ml:aan 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta, sekoitettiin kolme tuntia 25°C:ssa, konsentroitiin ja haihdutettiin kuiviin yhdessä lisätyn eetterin kanssa, jolloin saatiin 3,00 g väritöntä 20 jauhetta, joka suspendoitiin minimimäärään eetteriä, suodatettiin ja kuivattiin, jolloin saatiin 2,70 g väritöntä kiinteää ainetta, sp. 236 - 238°C.
C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-amidi Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmene-25 telmän mukaisesti 150 mg:sta esimerkin 21B tuotetta ja 248 mg:sta esimerkin 8C tuotetta saatiin 169 mg otsikon ainetta värittömänä jauheena, TLC Rf 0,30 seoksessa C.
1H NMR, DMSO, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 0,85 (t, 3H) , 3,44 (m, 4H) , 3,73 (m, 1H), 4,15 (m, 2H) , 4,30 30 (m, 1H), 5,64, 6,64 ja 8,02 (d, 1H), 7,10 - 7,35 (m, aro maattinen) .
46 90346
Esimerkki 22
Bentsimidatsoli-2-karbonyyliHisnor-C-Sta-metyyli-esteri (II, L=N; R^=imidatsol-4-yylimetyyli; R^= och3) 5 A. DiBocHisnor-C-Sta-metyyliesteri, TBDMS-eetteri
Esimerkin 1C tuotteen valmistusmenetelmän mukaisesti 750 mg:sta esimerkin 18C tuotetta ja 1,05 g:sta yhdistettä Boc-His(imBoc) saatiin 1,6 g raakaa tuotetta, joka kromatografoitiin piidioksidilla eluoimalla etyyliasetaat-10 ti-heksaaniseoksella, jolloin saatiin 932 mg otsikon ainetta, TLC Rf 0,31 seoksessa A 1:1.
B. Hisnor-C-Sta-metyyliesteri-dihydrokloridi Esimerkin 22A tuote (400 mg) liuotettiin 2 mlraan dikloorimetaania, jäähdytettiin 0°C:seen ja käsiteltiin 15 3 ml:n kanssa trifluorietikkahappoa. Seoksen oltua 30 mi nuuttia 0°C:ssa ja 80 minuuttia 30°C:ssa, seos konsentroitiin ja haihdutettiin kuiviin yhdessä kolmen erän kanssa lisättyä 4-norm. HCl-dioksaaniliuosta, sitten lisättiin eetteriä ja kuivattiin, jolloin saatiin 210 mg vaalean-20 keltaista kiinteää ainetta.
C. Bentsimidatsoli-2-karbonyyliHisnor-C-Sta-metyy- liesteri_
Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 205 mg:sta esimerkin 22B tuotetta ja 25 93 mg:sta bentsimidatsoli-2-karboksyylihappoa saatiin 27 mg vaaleankeltaista kiinteää ainetta, joka kromatografoitiin jälleen 1 g:11a piidioksidia 6 % etanolia sisältävässä dikloorimetaanissa, jolloin saatiin 12 mg tuotetta, TLC Rf 0,44 seoksessa D, HPLC 6,01 min 60/40-seok-30 sessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti.
1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 3,75 (s, 3H), 4,20 (br, 1H), 3,16 (m), 6,96 (s, 1H).
47 90346
Esimerkki 23 4-metyylipiperatsiinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-N- metyyliamidi (I, Z=4-metyylipiperatsiinokarbonyyli- amino; M=fenyyli; Q=H; R =n-butyyli; X=sykloheksyy- 1 Δ 5 li; W=CHuiOH; ja Z =CONHCH3) A. 4-metyylipiperatsiinokarbonyyliPhe-bentsyylies- teri_
Esimerkin 7A tuote (15,0 g) liuotettiin 100 ml:aan dikloorimetaania ja käsiteltiin 3°C:ssa N-metyylipiperat-10 siinin kanssa. 10 minuutin kuluttua (lämpötila kohosi 20°C:seen) seos konsentroitiin ja jäännös puhdistettiin silikageelillä (eluoimalla seoksella 5 - 11 % etanolia di-kloorimetaanissa), jolloin saatiin 18,1 g vaaleankeltaista Öljyä.
15 B. 4-metyylipiperatsiinokarbonyyliPhe-hydrokloridi
Esimerkin 23A tuote (18 g) liuotettiin 150 ml:aan etikkahappoa ja ravisteltiin 3 g:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 50 psi:n vetypaineessa 45 minuuttia 25°C:ssa, suodatettiin Celiten läpi, konsentroitiin, jäännöstä haihdutettiin li-20 sätyn tolueenin kanssa (2 x), eetterin kanssa (2 x) ja kuivattiin, jolloin saatiin 16,8 g väritöntä hygroskooppista vaahtoa. Tätä haihdutettiin kolme kertaa 30 ml:n kanssa 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta ja kuivattiin, jolloin saatiin 15,9 g värittömiä kiteitä.
25 C. 4-metyylipiperatsiinokarbonyyliPheNle-bentsyy- liesteri_
Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti, paitsi että käytettiin 2,5 ekvivalenttia trietyyliamiinia, 2,00 g:sta norleusiini-bentsyylies-30 teriä (8A) ja 2,54 g:sta esimerkin 23B tuotetta saatiin 2,34 g väritöntä valkeaa vaahtoa, TLC Rf 0,12 seoksessa C.
D. 4-metyylipiperatsiinokarbonyyliPheNle Esimerkin 23C tuote (2,32 g) liuotettiin 20 ml:aan metanoli-etikkahapposeosta 10:1 ja ravisteltiin 500 mg:n 35 kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 50 psi:n vetypaineessa 1,5 tuntia 25°C:ssa, suodatettiin Celiten läpi, haihdutettiin 48 90346 kolme kertaa kuiviin kulloinkin lisätyn tolueenin ja eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 2,15 g väritöntä kiinteää ainetta.
E. 4-metyylipiperatsiinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta- 5 N-metyyliamidi-TBDMS-eetteri_
Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 350 mg:sta esimerkin 23D tuotetta ja 201 mg:sta esimerkin 14C tuotetta saatiin 235 mg väritöntä kiinteää ainetta, HPLC 4,92 min 70/30-seoksessa aseto-10 nitriili-pH 2,1 fosfaatti.
F. 4-metyylipiperatsiinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta- N-metyyliamidi_
Esimerkin 23E tuote (230 mg) liuotettiin 5 ml:aan 4-norm. HCl-dioksaaniliuosta 25°C:ssa. 30 minuutin kulut-15 tua seos konsentroitiin vakuumissa, jäännöstä haihdutettiin useaan kertaan lisätyn eetterin kanssa, kuivattiin, trituroitiin eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 175 mg keltaista kiinteää ainetta, HPLC 3,92 min 40/60-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti, TLC Rf 20 0,08 seoksessa D (jolloin täplitetty levy oli altistettu NH^-höyryille ennen eluointia).
1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 0,90 (t, 3H), 2,59 (d, 3H), 3,82 (m, 1H), 7,00, 7,62 ja 8,08 (d, 1H ea).
25 Esimerkki 24
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-etyyliketoni (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CH»iiOH; ja Z^ = coch2ch3) 30 A. 5(S)-Bocamido-4(R)-bentsyylioksi-6-sykloheksyy- li-3(R,S)-heksanoli_ US-patentin 4 668 769:n esimerkin 5A tuote (700 mg) liuotettiin 5 ml:aan eetteriä ja käsiteltiin 0°C:ssa 1,45 ml:n kanssa 2,8-mol. etyylimagnesiumbromidin eetteriliuos-35 ta. 20 minuutin kuluttua lisättiin toiset 650 ^ul 2,8-mol. etyylimagnesiumbromidiliuosta ja 30 minuutin kuluttua 49 90 346 liuosta käsiteltiin 1 ml:n kanssa kyllästettyä ammonium-kloridin vesiliuosta. Seos laimennettiin eetterillä, uutettiin 1-norm. kloorivetyhapolla, vetykarbonaatilla, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsul-5 faatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 530 mg viskoosia öljyä, TLC Rf 0,4 ja 0,25 (seoksessa A 1:3).
B. 5 (S)-Bocamino-4(R)-bentsyylioksi-6-sykloheksyy- li-3-heksanoni_
Esimerkin 24A tuote (525 mg) liuotettiin 5 ml:aan 10 eetteriä ja käsiteltiin 25°C:ssa 1,0 ml:n kanssa kromihap-poliuosta (Org. Syn. s. 310). Tunnin kuluttua lisättiin eetteriä ja liuos pestiin 1-norm. natriumhydroksidiliuok-sella, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin natrium-sulfaatilla, konsentroitiin ja jäännös puhdistettiin pii-15 dioksidilla eluoimalla eetteri-heksaaniseoksella 1:7, jolloin saatiin 250 mg väritöntä öljyä, TLC Rf 0,6 seoksessa A 1:3.
C. 5(S)-amino-4(R)-bentsyylioksi-6-sykloheksanoni- hydrokloridi_ 20 Esimerkin 24B tuote (245 mg) liuotettiin 3 ml:aan 4-norm. HCl-dioksaaniliuosta, sekoitettiin 45 minuuttia 25°C:ssa, konsentroitiin, jäännöstä haihdutettiin lisätyn eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 190 mg vaaleankeltaista vaahtoa, TLC Rf 0,58 seoksessa c (täplitet-25 ty aine altistettiin NH^-höyryille ennen eluointia levyllä).
D. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-etyyliketo- ni-bentsyylieetteri_
Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 95 mg:sta esimerkin 24D tuotetta ja 30 142 mg:sta esimerkin 8C tuotetta saatiin 133 mg otsikon ainetta värittömänä vaahtona.
E. MorgoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-etyyliketoni
Esimerkin 24D tuote (120 mg) liuotettiin 3 ml:aan metanoli-etikkahapposeosta 2:1 ja ravisteltiin 75 mg:n 35 kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 50 psi:n vetypaineessa 20 tuntia 25°C:ssa, seos suodatettiin Celiten läpi, suodos 50 90 346 konsentroitiin, haihdutettiin 5 x lisätyn tolueenin kanssa, 5 x lisätyn eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 100 mg vaaleanbeigen väristä kiinteää ainetta, HPLC 2,96 min 70/30-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 -pus-5 kuri, TLC Rf 0,3 (etyyliasetaatti, piidioksidi).
1H NMR, CDCl^f 300 MHz, osittainen, delta ppm: 0,88 ja 1,09 (t, 3H ea), 2,47 ja 2,78 (dq, 1H ea), 3,10 (m, 2H), 3,17 ja 3,64 (m, 4H ea), 4,13, 4,16 ja 4,98 (m, 1H ea), 4,52 (m, 2H), 5,17 ja 5,48 (d, 1H ea), 7,1 - 7,35 10 (m, aromaattinen).
Esimerkki 25 MOrfoliinokarbonyyliPheHisnor-C-Sta-metyyliamidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=imidatsol-4-yylimetyyli; X=sykloheksyyli; 15 W=CHMiOH; ja Z1=CONHCH3) A. DiBocHis-bentsyyliesteri
DiBoc-L-histidiini (0,317 mol) liuotettiin 800 mitään kuivaa DMF ja lisättiin 43,9 g vedetöntä kaliumkarbonaattia. Seosta sekoitettiin jäähauteessa ja lisättiin 37,8 ml 20 bentsyylibromidia. Seosta sekoitettiin 0°C:ssa ja annettiin lämmetä yön aikana 25°C:seen, suodatettiin Celiten läpi (pesemällä eetterillä), suodos konsentroitiin, jäännös liuotettiin 700 ml:aan etyyliasetaattia ja tämä liuos pestiin 2 x 200 ml:11a 1-mol. litiumkloridiliuosta ja 2 x 25 4-mol. litiumkloridiliuoksella, 2 x 100 ml:11a 1-norm.
NaOH, vedellä, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin öljyistä kiinteää ainetta. Tätä kiinteää ainetta sekoitettiin voimakkaasti 500 ml:n heksaanierän alla, jol-30 loin muodostui kiteistä massaa, joka jauhettiin huhmaressa pulveriksi ja pestiin 2 x 100 ml:lla heksaania 25°C:ssa suodattimena. Kuivuttuaan kiinteä aine painoi 120,5 g, sp. 99 - 99,5°C, TLC Rf 0,35 seoksessa a 1:1, /θς/° 25 - 6,4 (c = 1,09, CIICl 3) .
51 90 3 46 B. Histidiini-bentsyyliesteri-dihydrokloridi Esimerkin 25A tuote (92 mg) liuotettiin 400 ml:aan kylmää 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta ja saatua suspensiota sekoitettiin 24 tuntia 25°C:ssa. Suurin osa nesteestä 5 dekantoitiin pois ja jäännös konsentroitiin, kuivattiin, pestiin 3 x eetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin otsikon ainetta värittömänä kiinteänä aineena kvantitatiivisin saannoin. /«7° 25 kohosi arvoon +6,4 (c = 2,865, MeOH) 24 tunnin aikana (ilmoitettu, Org. Prep. Proc. Int'1., _ o 10 1970, 255, [oc/ = 6,54 näissä olosuhteissa). Näissä esi merkeissä kuvattu menetelmä on parempi kuin ilmoitettu.
C. MorfoliinokarbonyyliPheHis-bentsyyliesteri Esimerkin 1C tuotteen valmistusmenetelmän mukaisesti 1,37 g:sta esimerkin 7C tuotetta ja 1,21 g:sta esi- 15 merkin 25B tuotetta saatiin 1,8 g keltaista vaahtoa (raakaa) . Tätä ainetta trituroitiin eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 1,68 g vaaleankeltaista vaahtoa (HPLC 2,92 min 50/50-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti) , jota käytettiin enempää puhdistamatta.
20 D. MorfoliinokarbonyyliPheHis(imBoc)-bentsyylies- teri_
Esimerkin 25C tuote (1,68 g) liuotettiin 30 ml:aan dioksaania ja 15 mlraan vettä ja pH säädettiin arvoon 11 1-norm. natriumhydroksidin vesiliuoksella. Lisättiin di-t-25 butyylidikarbonaattia (850 ^ul) ja pH pidettiin lisätyllä natriumhydroksidilla välillä 9 ja 11. 45 minuutin kuluttua lisättiin 450 ^ul di-t-butyylidikarbonaattia (pH pidettiin noin arvossa 10,5) ja kaikkiaan 1,5 tunnin kuluttua pH säädettiin arvoon 5 1-norm. HClrllä ja liuos konsen-30 troitiin osittain ja uutettiin sitten 4 x 100 ml:11a etyyliasetaattia. Nämä uutteet pestiin natriumhydroksidin vesiliuoksella, vetykarbonaatilla, kuivattiin natriumsul-faatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 1,85 g öljyistä vaahtoa, joka puhdistettiin piidioksidilla eluoi-35 maila seoksin, joissa oli etanolia (2 - 8 % etanolia) di-kloorimetaanissa, jolloin saatiin 1,05 g vaaleankeltaista 52 90 346 vaahtoa, HPLC 3,10 min 70/30-seoksessa asetonitriilipusku-ri, TLC Rf 0,13 (etyyliasetaatti, piidioksidi).
E. MorfoliinokarbonyyliPheHis
Esimerkin 25D tuote (500 mg) liuotettiin 25 mitään 5 metanolia ja 2 mitään etikkahappoa ja ravisteltiin 250 mgtn kanssa 10-%:ista Pd/Cttä 50 psitn vetypaineessa 45 minuuttia 25°Ctssa, seos suodatettiin Celiten läpi, suodos konsentroitiin, haihdutettiin lisätyn tolueenin kanssa (3 x), eetterin kanssa (4 x) ja kuivattiin, jolloin saatiin 423 mg 10 väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,3 seoksessa C.
F. MorfoliinokarbonyyliPheHis(imBoc)nor-C-Sta-N- metyyliamidi-TBDMS-eetteri_
Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 140 mg:sta esimerkin 14C tuotetta ja 15 285 mg:sta esimerkin 25D tuotetta saatiin 223 mg väritön tä vaahtoa, HPLC 9,95 min 70/30-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 -puskuri.
G. MorfoliinokarbonyyliPheHisnor-C-Sta-N-metyyli- amidi-TBDMS-eetteri_ 20 Esimerkin 25F tuote (218 mg) liuotettiin 3 ml:aan metanolia 25°C:ssa ja käsiteltiin 10 mg:n kanssa vedetöntä kaliumkarbonaattia. Tunnin kuluttua seos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 193 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,06 seoksessa C.
25 H. MorfoliinokarbonyyliPheHisnor-C-Sta-N-metyyli- amidi-hydrokloridi_
Esimerkin 25G tuote (185 mg) liuotettiin 3 mlraan 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta, sekoitettiin tunnin ajan 25°C:ssa, konsentroitiin ja haihdutettiin kuiviin lisätyn 30 eetterin kanssa, jolloin saatiin 150 mg väritöntä kiinteää ainetta, HPLC 1,83 min 1/1-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti, TLC Rf 0,25 seoksessa D (täplitetty aine altistettiin NH^-höyryille ennen eluointia levyllä).
1H NMR, DMSO, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 35 2,58 (d, 3H), 3,90, 4,12, 4,27 ja 4,58 (m, 1H, ea), 6,87, 53 90 346 7,60, 7,82 ja 8,33 (d, 1H ea), 7,13 - 7,34 (m, aromaattinen), 7,44 ja 9,02 (s, 1H ea).
Esimerkki 26
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-dimetyyliami-5 di (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CHMiOH; ja Z^ = conh(ch3) 2) A. Bocnor-C-Sta-dimetyyliamidi
Esimerkin 1C tuotteen valmistusmenetelmän mukaises-10 ti 350 mg:sta yhdistettä Boc-nor-C-Sta (US-patentin 4 668 769:n esimerkki 1G) ja 170 mgrsta dimetyyliamiini-hydrokloridia saatiin 405 mg raakaa tuotetta, joka puhdistettiin piidioksidilla (etyyliasetaatti-heksaaniseos 1:2), jolloin saatiin 310 mg väritöntä vaahtoa.
15 B. nor-C-Sta-dimetyyliamidi-hydrokloridi
Esimerkin 26B tuote (305 mg) liuotettiin 4 ml:aan HCl:n dioksaaniliuosta, sekoitettiin 18 tuntia, konsentroitiin, haihdutettiin eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 250 mg vaaleankeltaista kiinteää aientta, TLC Rf 20 0,1 seoksessa C.
C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-dimetyyli-amidi_
Esimerkin 1C tuotteen valmistusmenetelmän mukaisesti 245 mg:sta esimerkin 26B tuotetta ja 472 mg:sta esimer-25 kin 8C tuotetta saatiin 325 mg väritöntä vaahtoa, HPLC
5,36 min 50/50-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti.
1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 0,86 (t, 3H), 2,91 ja 3,03 (s, 3H ea), 3,07 (m, 2H), 3,45 ja 3,59 (m, 4H ea), 4,15 (m, 2H), 4,31, 4,36 ja 4,52 (m, 30 1H ea), 5,00, 6,13 ja 6,49 (d, 1H ea), 7,08 - 7,26 (m, aromaattinen).
54 90 346
Esimerkki 27
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-statone-metyylies- teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=C=0; Z^= 5 C02CH3)
Esimerkin 8D tuote (100 mg) liuotettiin 0,4 ml:aan dikloorimetaania ja käsiteltiin 48 ^,ul:n kanssa etikkahap-poanhydridiä ja 141 mg:n kanssa pyridiniumdikromaattia.
45 minuutin kuluttua seos pantiin -20°C:seen jääkaappiin, 10 jossa sitä pidettiin 18 tuntia. Lisättiin etyyliasetaattia ja liuos pestiin 1-norm. HCl-liuoksella, natriumvety-karbonaatin vesiliuoksella, 1-norm. natriumhydroksidilla, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaa-tilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 85 mg vä-15 ritöntä kiinteää ainetta, joka kromatografoitiin piidioksidilla eluoimalla etanoli-dikloorimetaaniseoksella, jolloin saatiin 44 mg otsikon ainetta, TLC Rf 0,28 (etyyliasetaatti piidioksidilla).
1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 20 0,87 (t, 3H), 3,62 (m, 4H), 4,34, 4,51 ja 5,09 (m, 1H ea), 4,94, 6,57 ja 6,77 (d, 1H ea), 7,15 - 7,35 (m, aromaattinen) .
Esimerkki 28 MOrfoliinokarbonyyli-O-MeTyr-Nlenor-C-Sta-etyyli-25 ketoni (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=p-metok- sifenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CH·'lOH; Z1=COCH2CH3) A. Morfoliinokarbonyyli-O-meTyr-Nlenor-C-Sta-etyy- liketoni-bentsyyliesteri_ 30 Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmene telmän mukaisesti 150 mg:sta yhdistettä morfoliinokarbo-nyyli-O-meTyrNle ja 97 mg:sta esimerkin 24D tuotetta saatiin 140 mg väritöntä vaahtoa, TLC Rf 0,38 (etyyliasetaatti, piidioksidi).
55 90346 B. Morfoliinokarbonyyli-O-MeTyrNlenor-C-Sta-etyy- liketoni_
Esimerkin 28A tuote (128 mg) liuotettiin 3 ml:aan metanolia ja 1 ml:aan etikkahappoa ja ravisteltiin 130 mg:n 5 kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 50 psi:n vetypaineessa 18 tuntia 25°C:ssa. Seos suodatettiin Celiten läpi, konsentroitiin ja jäännöstä haihdutettiin lisätyn tolueenin kanssa (5 x) ja eetterin kanssa (5 x), jolloin saatiin kuivauksen jälkeen 115 mg vaaleankeltaista kiinteää ainetta, TLC Rf 0,25 10 (etyyliasetaatti, piidioksidi), HPLC 3,64 min 70/30-seok-sessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti.
1H NMR, CDC13, 300 MHz, osittainen, delta ppm; 0,90 ja 1,11 (t, 3H ea), 2,47 ja 2,79 (dq, 1H ea), 3,04 (m, 2H), 3,29 ja 3,64 (m, 4H ea), 3,80 (s, 3H), 4,13,
15 4,16, 4,25 ja 4,35 (m, 1H, ea), 4,95, 6,28 ja 6,43 (d, 1H
ea), 6,84 ja 7,12 (d, 2H, ea).
Esimerkki 29
MorfoliinokarbonyyliPheNle-2(R,S)-metyyli-nor-C-Sta-metyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; 20 M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=C(CH3)'MOH ja C(CH3)^OH; Z^CC^CH^ A. Metyyli-3(S)-Boc-amino-4-sykloheksyyli-2-okso- 1-metyylitio-l-yylisulfoksidi_
Metyyli-metyylitiometyyli-sulfoksidia (8,2 ml), 25 joka oli 78 mlrssa THF, jäähdytettiin jäähauteessa ja käsiteltiin lisäämällä tiputtamalla 20 minuutin aikana 49 ml 1,6 butyylilitiumia heksaanissa. 45 minuutin kuluttua liuos jäähdytettiin -25°C:seen ja käsiteltiin lisäämällä tiputtamalla liuos, jossa oli Boc-heksahydro-L-fenyyli-30 alaniini-metyyliesteriä 20 ml:ssa THF. Liuoksen oltua 30 minuuttia -25°C:ssa, se haihdutettiin kuiviin vakuumissa ja jäännös liuotettiin 200 ml:aan eetteriä. Tämä liuos pestiin vedellä (4 x 30 ml), kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Vesikerroksiin li-35 sättiin vielä kyllästettyä suolaliuosta ja tämä seos uutettiin etyyliasetaatilla, joka oli kuivattu magnesium- 90346 sulfaatilla. Orgaaniset kerrokset yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin oranssinväristä öljyä, joka kromatografoitiin piidioksidilla (etyyliasetaatti-heksaaniseoksella), jolloin saatiin 6,8 g vaaleankullan-5 ruskeaa vaahtoa, TLC Rf 0,28 seoksessa A 3:1.
B. Boc-nor-C-Sta-metyyliesteri
Esimerkin 29A tuote, 4,25 g, liuotettiin 25 ml:aan metanolia 0°C:ssa ja käsiteltiin 2,86 g:n kanssa jodia. Tunnin sekoittamisen jälkeen 30°C:ssa seos kaadettiin se-10 koitettuun seokseen, jossa oli jäitä, 300 ml 10-%:ista natriumtiosulfaatin vesiliuosta ja 100 ml etyyliasetaattia. Orgaaninen kerros erotettiin ja vesikerros pestiin etyyliasetaatilla (4 x 50 ml). Orgaaniset kerrokset kuivattiin magnesiumsulfaatilla, konsentroitiin ja kromato-15 grafoitiin piidioksidilla (etyyliasetaatti-heksaani), jolloin saatiin 980 mg keltaista kiinteää ainetta, TLC Rf 0,32 (seos C 1:2). Saatiin myös 1,66 g öljyä, TLC Rf 0,45, samassa seoksessa, joka identifioitiin yhdisteeksi 3(S)— t-Boc-amino-4-sykloheksyyli-2-okso-l,1-dismetyylitio-1-20 metoksibutaani.
C. Metyyli-3-Bocamino-4-sykloheksyyli-2(R,S)metyy- li-2-hydroksibutyraatti_
Liuosta, jossa oli 459 mg esimerkin 29B tuotetta,
Rf 0,32, 2 ml:ssa eetteriä 0°C:ssa, käsiteltiin 1,92 ml:n 25 kanssa metyylimagnesiumbromidia 1,9-mol. n-butyylieette-rissä). Seoksen oltua 10 minuuttia 0°C:ssa, lisättiin 1 ml kyllästettyä ammoniumkloridin vesiliuosta. Seos uutettiin eetterillä, joka oli pesty 1-norm. HClrllä, natriumvety-karbonaatin vesiliuoksella ja kyllästetyllä suolaliuok-30 sella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin, konsentroitiin ja jäännös kromatografoitiin piidioksidilla (eetteri-heksaanit), jolloin saatiin 375 mg väritöntä kiinteää ainetta.
57 90346 D. Metyyli-3-amino-4-sykloheksyyli-2(R,S)-metyyli- 2-hydroksibutyraatti-hydrokloridi_
Esimerkin 29C tuote liuotettiin 3 ml:aan 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta ja sekoitettiin 25°C:ssa. 30 minuu-5 tin kuluttua seos konsentroitiin ja haihdutettiin kuiviin eetterin kanssa, jolloin saatiin 275 mg keltaista vaahtoa.
E. MorfoliinokarbonyyliPheNle-2(R,S)-metyylinor-C-
Sta-metyyliesteri_
Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmene-10 telmän mukaisesti 255 mg:sta esimerkin 20E tuotetta ja 375 mg:sta esimerkin 8C tuotetta saatiin 321 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,68 seoksessa C, HPLC 5,24 min (68 %) ja 5,51 min (32 %) 60/40-seoksessa asetonitriili-vesi. Nuo kaksi komponenttia erotettiin puolipreparatii-15 vista HPLCrtä käyttäen (9,8 x 250 mm Zorbax C-8, 6,3 ml/ min, 60/40-seos asetonitriili-vesi, toteaminen 254 nm) noin 20 mg:n injektioin, jolloin saatiin 172 mg vähemmän pidättyvää ainetta ja 97 mg enemmän pidättyvää ainetta värittöminä kiinteinä aineina (HPLC analyyttisessä seokses-20 sa 5,20 minuutin yläpuolella ja vastaavasti 5,53 minuutin yläpuolella, kumpikin homogeenisia (>98 %)).
Vähemmän pidättynyt aine: HPLC, 1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 0,82 (t, 3H), 1,34 (s, 3H), 3,04 ja 3,13 (dd, 1H ea), 3,13 - 3,34 (m), 3,59 (m, 25 4-5H), 3,78 (s, 3H), 4,32 (m, 2H), 4,51 (m, 1H), 5,05 (m, 1H), 6,36 (m, 1H), 7,71 (m, 1H), 7,14 - 7,35 (m, aromaattinen) .
Enemmän pidättynyt aine, HPLC, 1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 0,89 (t, 3H), 1,39 (s, 30 3H), 3,04 (dd, 1H), 3,60 (m, 4H), 3,76 (s, 3H), 3,92, 4,47 ja 4,88 (m, 1H ea), 4,20 - 4,32 (m, 2H), 7,12 - 7,35 (m, aromaattinen).
58 90346
Esimerkki 30
MorfoliinokarbonyyliPheN-oi-MeNlenor-C-Sta-etyyli- ketoni (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=CH3; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CHMiOH; 5 Z1=COCH2CH3) A. N-Boc-N-metyyli-L-norleusiini N-metyyli-L-norleusiinia (1,0 g) (J. Chem. Soc.
1968, s. 930) liuotettiin 11 ml:aan DMF 0°C:ssa ja käsiteltiin 2,1 ml:n kanssa trietyyliamiinia ja sen jälkeen 10 1,74 ml:n kanssa di-t-butyylidikarbonaattia. Seosta se koitettiin 0°C:ssa neljä tuntia ja sitten sen annettiin lämmetä 20°C:seen yön aikana. Seos konsentroitiin, liuotettiin kyllästetyn natriumvetykarbonaatin vesiliuoksen ja etyyliasetaatin seokseen. Vesikerros erotettiin, pestiin 15 etyyliasetaatilla ja tehtiin happameksi HCl:llä etyyliasetaatin läsnä ollessa. Tämä orgaaninen kerros erotettiin ja yhdistettiin edelleen vesikerroksen etyyliasetaat-tiuutteiden kanssa, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 1,17 g keltaista 20 öljyä.
B. N-Boc-N-metyyli-L-norleusiini-bentsyyliesteri
Esimerkin 30A tuote (750 mg) liuotettiin 7,5 ml:aan kuivaa DMF 0°C:ssa ja käsiteltiin 423 mg:n kanssa vedetöntä kaliumkarbonaattia ja 364 ^ul:n kanssa bentsyylibromi-25 dia. Seosta sekoitettiin jäähauteessa jäähdytetyssä pullossa, jonka annettiin lämmetä 20°C:seen yön aikana. Seos laimennettiin eetterillä, suodatettiin Celiten läpi. Suo-dos konsentroitiin ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, joka pestiin 10-%:isella litiumkloridin vesiliuok-30 sella (3 x), 1-norm. natriumhydroksidilla, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 942 mg keltaista öljyä.
C. N-metyyli-L-norleusiini-bentsyyliesteri-hydro- kloridi_ 35 Esimerkin 30B tuote (915 mg) liuotettiin 3,5 ml:aan 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta ja sekoitettiin 25°C:ssa 59 90346 45 minuuttia. Seos konsentroitiin ja näin saatiin 727 mg maalarinvalkeaa jauhetta, TLC Rf 0,55 seoksessa C.
D. MorfoliinokarbonyyliPhe-N-MeNle-bentsyyliesteri
Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmene- 5 telmän mukaisesti 370 mg:sta esimerkin 30C tuotetta ja 378 mgrsta esimerkin 7C tuotetta saatiin 476 mg himmeää öljyä, TLC Rf 0,69 seoksessa C.
E. MorfoliinokarbonyyliPhe-N-MeNle
Esimerkin 30D tuote (468 mg) liuotettiin 10 ml:aan 10 metanolia ja 1 ml:aan etikkahappoa ja ravisteltiin 100 mg:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 25°C:ssa ja 50 psi:n vetypai-neessa tunnin ajan, suodatettiin Celiten läpi, konsentroitiin ja haihdutettiin kuiviin yhdessä tolueenin, sitten eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 365 mg maa-15 larinvalkeaa jauhetta, TLC Rf 0,6 seoksessa D.
F. MorfoliinokarbonyyliPheN-MeNle-nor-C-Sta-etyy- liketoni-bentsyylieetteri_
Esimerkin 1C tuotteen valmistusmenetelmän mukaisesti 78 mg:sta esimerkin 24D tuotetta ja 93 mg:sta esimerkin 20 30E tuotetta saatiin 148 mg maalarinvalkeaa vaahtoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
G. MorfoliinokarbonyyliPhe-N-MeNlenor-C-Sta-etyy- liketoni_
Esimerkin 30F tuote (142 mg) liuotettiin 10 ml:aan 25 metanolia ja 1 ml:aan etikkahappoa ja ravisteltiin 150 mg:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 25°C:ssa ja 50 psi:n vetypainees-sa 20 tuntia, suodatettiin, konsentroitiin, haihdutettiin kuiviin yhdessä tolueenin, sitten eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 120 mg maalarinvalkeaa vaahtoa.
30 Tämä aine kromatografoitiin piidioksidilla (etanoli-di-kloorimetaanigradientein), jolloin saatiin 93 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,48 seoksessa C, HPLC 5,29 min 70/30-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti.
1H NMR, DMSO, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 35 0,80 ja 0,85 (t, 3H ea), 2,91 (s, NCH^), 4,5 ja 4,63 (m, lii en) , 4,59 (m, 2H) , 4,94, 5,39, 5,58, 6,62 ja 8,00 (d, 60 90 3 46 ilmeisesti erilaisten rotameerien NH-resonansseja), 7,15 - 7,38 (m, aromaattinen).
Esimerkki 31
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-metyyliketoni 5 (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CH*»>0H; Z^= coch3) A. 4(S)-Bocamino-3(R)-bentsyylioksi-5-sykloheksyy- li-2-pentanoni_ 10 3(S)-t-butoksikarbonyyliamino-2(R)-bentsyylioksi-4- sykloheksyyli-butyraldehydiä (315 mg) liuotettiin 4 mlraan eetteriä 0°C:ssa ja käsiteltiin 530 ^ul:n kanssa 1,9-mol. metyylimagnesiumbromidin n-butyylieetteriliuosta. 20 minuutin kuluttua lisättiin toiset 530 ^ul Grignard-reagens-15 siä ja 10 minuuttia myöhemmin reaktio sammutettiin kyllästetyllä ammoniumkloridin vesiliuoksella ja uutettiin eetterillä. Eetterikerrokset pestiin 1-norm. HClrllä, nat-riumvetykarbonaatin vesiliuoksella, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin 20 kuiviin, jolloin saatiin 580 mg keltaista öljyä. Tämä aine liuotettiin 5 ml:aan eetteriä ja käsiteltiin 1 ml:n kanssa kromihappoliuosta (Org. Syn. Coll. Voi. 5, s. 310). 30 minuutin kuluttua seos laimennettiin eetterillä ja pestiin 1-norm. natriumhydroksidilla (4x5 ml), kuivattiin mag-25 nesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 250 mg vaaleankeltaista öljyä, joka puhdistettiin si-likageelillä (eetteri-heksaaneilla), jolloin saatiin 125 mg väritöntä öljyä, TLC Rf 0,24 (seos B 1:4).
B. 4(S)-amino-3(R)-bentsyylioksi-5-sykloheksyyli- 30 2-pentanoni-hydrokloridi_
Esimerkin 31A tuote (120 mg) liuotettiin 3 ml:aan 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta ja sekoitettiin 25°C:ssa 1,2 tuntia. Seos konsentroitiin ja jäännös haihdutettiin kuiviin 3 x lisätyn eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin 35 saatiin 100 mg väritöntä vaahtoa, TLC Rf 0,22 (seos C, ei 90 346 täplitetty levy altistettiin ammoniakille ennen eluoin-tia) .
C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-metyylike- toni-bentsyylieetteri_ 5 Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmene telmän mukaisesti 95 mg:sta esimerkin 31B tuotetta ja 150 mg:sta esimerkin 8C tuotetta saatiin 180 mg vaaleankeltaista vaahtoa, TLC Rf 0,30 (etyyliasetaatti, piidioksidi) .
10 D. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-metyyliketoni
Esimerkin 31C tuote (180 mg) liuotettiin 3 ml:aan metanolia ja 1 mlraan etikkahappoa ja ravisteltiin 10-%:isen Pd/C:n (180 mg) kanssa 25°C:ssa ja 50 psi:n vetypaineessa 24 tuntia. Seos suodatettiin, konsentroitiin, haihdutet-
15 tiin kuiviin lisätyn tolueenin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 160 mg väritöntä vaahtoa, joka kromatografoi-tiin piidioksidilla (etanoli-dikloorimetaanigradientein), jolloin saatiin 55 mg väritöntä kiinteää ainetta, HPLC
3,37 min 70/30-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti.
20 1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 0,86 (t, 3H), 2,17 (s, 3H), 3,05 ja 3,09 (dd, 1H ea), 3,24 ja 3,59 (m, 4H ea), 3,89, 4,08, 4,15, 4,47 ja 4,55 (m, 1H ea), 4,92, 6,11 ja 6,48 (d, 1H ea), 7,13 - 7,35 (m, aromaattinen) .
25 Esimerkki 32
MorfoliinokarbonyyliPhe-O-EtSernor-C-Sta-N-metyy-liamidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyy-li; Q=H; R2=C2H,.OCH2; X=sykloheksyyli; W=CHi ι lOH; z1=conhch3) 30 A. MorfoliinokarbonyyliPhe-O-EtSernor-C-Sta-N-me- tyyliamidi-TBDMS-eetteri_
Esimerkin 10 tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 70 mg:sta esimerkin 14C tuotetta ja 75 mgrsta yhdistettä morfoliinokarbonyyliPhe-O-EtSer saa- 35 tiin 50 mg väritöntä kiinteää ainetta.
62 9 0 3 4 6 B. MorfoliinokarbonyyliPhe-O-EtSernor-C-Sta-N-me- tyyliamidi_
Esimerkin 32A tuote (48 mg) liuotettiin 2 ml:aan 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta ja sekoitettiin tunnin ajan 5 25°C:ssa. Seos konsentroitiin ja jäännös haihdutettiin kuiviin eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 40 mg väritöntä kiinteää ainetta, HPLC 3,46 min 50/50-sooksossa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti, TLC Rf 0,28 seoksessa C.
10 1H NMR, DMSO-dg, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 1,12 (t, 3H), 2,57 (d, 3H), 2,81 ja 3,03 (dd, 1H ea), 3,20 (m, 4H), 3,45 (m), 3,78 ja 4,13 (m, 1H ea), 4,35 (m, 2H), 5,74, 6,68, 7,54 ja 8,08 (d, 1H ea), 7,12 - 7,35 (m, aromaattinen).
15 Esimerkki 33
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyylike-toni (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R^n-butyyli; X=sykloheksyyli; W)CHiuOH; ja Z1=C0CH(CH3)2) 20 A. 5(S)-Bocamino-4(R)-bentsyylioksi-6-sykloheksyy- li-2-metyyli-3-heksanoni_ 3(S)-t-butoksikarbonyyliamino-2(R)-bentsyylioksi- 4-sykloheksyylibutyylialdehydiä (400 mg) liuotettiin 3 ml:aan eetteriä 0°C:ssa ja käsiteltiin 1,17 ml:n kanssa 25 isopropyylimagnesiumbromidia (2,0-mol. dietyylieetteris- sä). 20 minuutin kuluttua lisättiin toiset 0,6 ml Grignard-reagenssia ja sen jälkeen viisi minuuttia myöhemmin 1 ml kyllästettyä natriumvetykarbonaatin vesiliuosta, kyllästettyä suolaliuosta, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja 30 haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 350 mg kirkasta öljyä. Tämä aine liuotettiin 2 ml:aan eetteriä ja käsiteltiin 2 ml:n kanssa kromihappoliuosta (Org. Syn. Coll. Voi. V, s. 310) ja 30 minuuttia myöhemmin seos uutettiin eetterillä, joka oli pesty natriumhydroksidin vesiliuoksella, 35 kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 250 mg keltaista ölyä, joka 63 90346 puhdistettiin piidioksidilla (eetteri-heksaaneilla), jolloin saatiin 125 mg vaaleankeltaista öljyä, TLC Rf 0,33 (seoksessa A 1:4).
B. 5(S)-amino-4(R)-bentsyylioksi-6-sykloheksyyli-2- 5 metyyli-3-heksanoni-hydrokloridi_
Esimerkin 33A tuote (120 mg) liuotettiin 2 ml:aan 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta ja sekoitettiin 1,2 tuntia 25°C:ssa, konsentroitiin ja jäännös haihdutettiin eetterin kanssa kuiviin, jolloin saatiin 95 mg väritöntä kiin-10 teää ainetta, TLC Rf 0,4 seoksessa C (täplitetty levy altistettiin ammoniakille ennen eluointia).
C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-isopropyyli- ketoni-bentsyy1ieetteri_
Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmene-15 telmän mukaisesti 95 mg:sta esimerkin 33B tuotetta ja 136 mgrsta esimerkin 8C tuotetta saatiin 160 mg väritöntä vaahtoa, HPLC 3,56 min 85/15-seoksessa asetonitriili-vesi.
D. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyyli- ketoni_ 20 Esimerkin 33C tuote (155 mg) liuotettiin 3 ml:aan metanolia ja 3 ml:aan etikkahappoa ja ravisteltiin 155 mg:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 18 tuntia 25°C:ssa, suodatettiin Celiten läpi, konsentroitiin, jäännös haihdutettiin kuiviin tolueenin ja eetterin kanssa ja kuivattiin, 25 jolloin saatiin 100 mg vaaleankeltaista kiinteää ainetta, TLC Rf 0,40 (etyyliasetaatti-piidioksidi).
1H NMR, CDCl^, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 0,87 (t, 3H), 1,08 ja 1,12 (d, 3H ea), 3,09 (m, 2H), 3,62 (m, 4H), 4,15 (m, 1H), 4,32 (s, 1H), 4,99, 6,38 ja 6,51 30 (d, 1H ea), 7,15 - 7,37 (m, aromaattinen).
64 90 346
Esimerkki 34
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-butyyliketöni (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CHMiOH; ja 5 Z1=COCH2(CH3) 2) A. 6(S)-Bocamino-5(R)-bentsyylioksi-7-sykloheksyy- li-2-metyyli-4-heksanoni_ 3(S)-t-butoksikarbonyyliamino-2(R)-bentsyylioksi- 4-sykloheksyyli-butyylialdehydiä (1,00 g) liuotettiin 10 10 ml:aan eetteriä 0°C:ssa ja käsiteltiin 1,6 ml:n kanssa 2,0-mol. isobutyylimagnesiumkloridin eetteriliuosta. 30 minuutin kuluttua lisättiin toinen 3 ml:n erä Grignard-reagenssia ja liuos lämmitettiin 25°C:seen, Toisen tunnin kuluttua seos sammutettiin ammoniumkloridin vesiliuoksel-15 la ja uutettiin eetterillä. Eetteriliuos pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 1,02 kirkasta öljyä. Tämä aine liuotettiin 20 ml:aan eetteriä ja käsiteltiin 5 ml:n kanssa kromihappoliuosta (Org. Syn., V, 20 s. 310). Tunnin ajan 0°C:ssa ja 30 minuutin ajan 25°C:ssa sekoittamisen jälkeen seos laimennettiin eetterillä ja pestiin 1-norm. natriumhydroksidilla, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, konsentroitiin ja raaka tuote puhdistettiin piidioksidilla (eetteri-hek-25 saani), jolloin saatiin 440 mg väritöntä öljyä, TLC Rf 0,33 seoksessa B 1:3.
B. 6(S)-amino-5(R)-bentsyylioksi-7-sykloheksyyli- 2-metyyli-4-heksanoni-hydrokloridi_
Esimerkin 34A tuote (430 mg) liuotettiin 3 ml:aan 30 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta ja sekoitettiin 1,2 tuntia 25°C:ssa, konsentroitiin, haihdutettiin kolme kertaa kuiviin eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 325 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,29 seoksessa C (täp-litetty levy altistettiin ammoniakille ennen eluointia).
65 90 346 C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-butyyli- ketöni-bentsyyliester i_
Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 150 mg:sta esimerkin 34B tuotetta ja 5 207 mg:sta esimerkin 8C tuotetta saatiin 280 mg väritöntä vaahtoa.
D. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-butyyli- ketoni_
Esimerkin 34C tuote (300 mg) liuotettiin 10 ml:aan 10 metanoli-etikkahapposeosta 1:1 ja ravisteltiin 300 mg:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 18 tuntia 25°C:ssa ja 50 psi:n vetypaineessa. Seos suodatettiin Celiten läpi, suodokset konsentroitiin ja haihdutettiin kuiviin yhdessä lisätyn tolueenin kanssa ja jäännös kromatografoitiin piidioksi-15 dilla (etanoli-dikloorimetaanigradientein), jolloin saatiin 180 mg väritöntä kiinteää ainetta, HPLC 4,40 min 70/30-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti, TLC Rf 0,31 (etyyliasetaatti-piidioksidi).
1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 0,84 20 (t, 3H), 0,90 ja 0,92 (d, 3H ea), 2,10 (septetti, 1H), 2,38 ja 2,53 (dd, 1H ea), 3,04 (m, 2H), 3,26 ja 3,58 (m, 4H ea), 4,06 (s, 1H), 4,22, 4,52 ja 4,60 (m, 1H ea), 5,26, 6,57 ja 7,00 (d, 1H ea), 7,1 - 7,3 (m, aromaattinen).
Esimerkki 35 25 MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-metoksiamidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CH(i»OH; ja Z^ = conhoch3) A. Boc-nor-C-Sta-metoksiamidi 30 Esimerkin 1C tuotteen valmistusmenetelmän mukaises ti 54 mg:sta metoksiamiini-hydrokloridia ja 98 mg:sta yhdistettä Boc-nor-C-Sta (esimerkin 1G tuote, US-patentti 4 668 769) saatiin 102 mg raakaa tuotetta, joka puhdistettiin piidioksidilla (etyyliasetaatti-heksaaneja), jol-35 loin saatiin 40 mg otsikon ainetta.
66 90 346 B. Nor-C-Sta-metoksiamidi-hvdrokloridi
Esimerkin 35A tuotetta (38 mg) sekoitettiin 2 ml:ssa 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta 25°C:ssa 1,2 tuntia ja haihdutettiin kuiviin värittömäksi kiinteäksi aineeksi, joka 5 postiin kolme kertaa eetterillä, jolloin saatiin 25 mg kiinteää ainetta.
C. MorfoliinikarbonyyliPheNle-N-hydroksisukkiini- imidiesteri_
Esimerkin 8A tuote (1,05 g) liuotettiin 5 ml:aan di-10 metoksietaania ja käsiteltiin 0°C:ssa 350 mg:n kanssa N-hydroksisukkiini-imidiä ja 573 mg:n kanssa disyklohek-syylikarbodi-imidiä ja sekoitettiin yön ajan jäähauteessa, jonka annettiin lämmetä 18°C:seen. Seos suodatettiin, suodatettu kiinteä aine pestiin dimetoksietaanilla, suodokset 15 haihdutettiin kuiviin ja jäännös suspendoitiin etyyliasetaattiin. Etyyliasetaattisuspensio pestiin kyllästetyllä natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 960 mg väritöntä vaahtoa. 20 D. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-metoksiamidi
Esimerkin 35B tuote (23 mg) liuotettiin 0,3 ml:aan dimetoksietaania ja käsiteltiin peräkkäin 25°C:ssa 12 ^,ul:n kanssa trietyyliamiinia ja 42 mg:n kanssa esimerkin 35C tuotetta. Lisättiin vielä dimetoksietaania (200 ^,ul) ja 25 200 ^,ul dikloorimetaania ja seosta sekoitettiin 22 tun tia, liuotettiin 30 ml:aan etyyliasetaattia, pestiin 2 x 1 ml:11a 1-norm. HC1, 2x2 ml :11a kyllästettyä natriumvetykarbonaatin vesiliuosta, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, haihdutettiin kuiviin ja kromatografoitiin piidi-30 oksidilla (etanoli-dikloorimetaanigradientein), jolloin
saatiin 45 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,5 seoksessa C, HPLC 2,84 min 60/40-seoksessa asetonitriili-pH
2,1 fosfaatti.
1H NMR, CDCl^, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 35 0,89 (t, 3H), 3,02 (dd, 1H), 3,14 (m), 3,62 (m, 4H), 3,77 67 90 346 (s, 3H), 4,35, 4,60 ja 5,01 (m, 1H ea), 7,13 - 7,38 (m, aromaattinen), 9,57 (s, 1H).
Esimerkki 36
MorfoliinikarbonyyliPheNlenor-C-Statoli (I, Z= 5 morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R = n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CHιιiOH; ja Z = ch2oh) A. 3(S)-amino-2(R)-bentsyylioksi-4-sykloheksyyli- 1-butanoli_ 10 3(S)-t-butoksikarbonyyliamino-2(R)-bentsyylioksi- 4-sykloheksyyli-l-butanolia (108 mg) (US-patentti 4 668 769), esimerkki 1J, liuotettiin 0,5 ml:aan eetteriä ja jäähdytettiin 0°C:seen. Tähän liuokseen lisättiin ylimäärin kuivaa HC1 ja liuosta sekoitettiin 25°C:ssa kak-15 si tuntia ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 88 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,28 seoksessa A.
B. 3(S)-(morfoliinokarbonyyliPheNleamino)-2(R)-bentsyylioksi-4-sykloheksyyli-l-butanoli
Esimerkin 36A tuote (85 mg) liuotettiin 500 ^ulzaan 20 dimetoksietaania ja käsiteltiin peräkkäin 0°C:ssa 38 ^ul:n kanssa trietyyliamiinia ja 132 mg:n kanssa esimerkin 35C tuotetta. 18 tunnin kuluttua seos haihdutettiin kuiviin ja kromatografoitiin piidioksidilla (etyyliasetaatti-hek-saaneja), jolloin saatiin 139 mg väritöntä kiinteää ainet-25 ta, TLC Rf 0,25 (etyyliasetaatti-piidioksidi).
C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Statoli
Esimerkin 36B tuotetta (80 mg) ja 90 mg 10-%:ista
Pd/C:tä sekoitettiin 5 ml:ssa metanolia ja 5 mltssa etik-kahappoa ja ravisteltiin 48 psi:n vetypaineessa ja 30 25°C:ssa 21 tuntia. Seos haihdutettiin kuiviin ja jäännös kromatografoitiin piidioksidilla (etanoli-dikloorimetaani-gradientein), jolloin saatiin 64 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,5 seoksessa C, HPLC 4,95 min 50/50-seok-sessa asetonitriili-vesi.
35 1H NMR, CDCl^, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 0,9 2 (t, 3!!), 2,94 (dd, 1H) , 3,09 - 3,72 (peittävä m) , 6 8 9 0 3 46 4,12 - 4,37 (m, ca. 3H), 4,79, 6,28 ja 6,93 (d, 1H ea), 7,20 - 7,48 (m, aromaattinen).
Esimerkki 37
MorfoliinokarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-butyy-5 liketoni (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyy- li; Q=H; R2=CH2SCH2; X=sykloheksyyli ; W=CH m iOH; ja z1=coch2ch(ch3)2) A. MorfoliinokarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-bu- tyyliketoni-bentsyylieetteri_ 10 Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmene telmän mukaisesti 120 mg:sta esimerkin 34B tuotetta ja 129 mg:sta yhdistettä Mor-Phe-SMeCys saatiin 114 mg väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,58 seoksessa C.
B. MorfoliinokarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-bu- 15 tyyliketoni__
Esimerkin 37A tuote (95 mg) liuotettiin 1,0 ml:aan muurahaishappoa ja lisättiin 100 mg palladiummustaa (ALFA Co.). Yön ajan sekoittamisen jälkeen seos suodatettiin Celiten läpi, haihdutettiin kuiviin ja jäännös haihdutet-20 tiin kuiviin tolueenin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 97 mg kullanruskeaa öljyä, joka puhdistettiin piidioksidilla (etanoli-dikloorimetaanigradientein), jolloin saatiin 23,5 mg väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,65 seoksessa C, HPLC 3,65 min 70/30-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fos-25 faatti.
1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 0,90 ja 0,92 (d, 3H ea), 2,10 (s, 3H), 2,14 (septetti, 1H), 2,38, 2,56, 2,65, 2,92, 3,00 ja 3,14 (dd, 1H ea), 3,14 - 3,37 (m), 3,60 (m, 4H), 3,97, 4,05 ja 4,65 (m, 1H 30 ea), 4,41 - 4,56 (m, 2H), 6,76 ja 6,86 (d, 1H ea), 7,14 -7,36 (m, aromaattinen).
90346 69
Esimerkki 38
BocPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z= t- (CH3)3COCONH; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2; X= sykloheksyyli; W=CH'i iOH; ja Z^CC^CH (CH3) 2) 5 A. BocPhe-S-MeCys S-metyylikysteiiniä (6,26 g) liuotettiin 65 ml:aan kyllästettyä natriumvetykarbonaatin vesiliuosta 25°C:ssa ja lisättiin 35 ml THF. Tätä liuosta käsiteltiin yhtenä eränä 12,0 g:n kanssa N-t-boc-L-fenyylialaniini-hydroksi-10 sukkiini-imidiesteriä. 30 minuutin kuluttua liuos siirrettiin erotussuppiloon ja pestiin kahdesti etyyliasetaatilla. Lisättiin tuore erä etyyliasetaattia ja pH säädettiin arvoon 1,1 6-norm. HCl:llä. Orgaaninen kerros erotettiin ja vesikerros uutettiin etyyliasetaatilla (4 x). Yh-15 distetyt orgaaniset kerrokset pestiin kahdesti 1-norm.
HCl:llä, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 12,0 g väritöntä vaahtoa.
B. BocPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri 20 Nor-C-Sta-isopropyyliesteriä (1,0 g) liuotettiin 20 ml:aan dikloorimetaania ja käsiteltiin peräkkäin 1,57 g:n (1,0 ekviv.) kanssa esimerkin 38A tuotetta, 945 mg:n (1,5 ekviv.) kanssa hydroksibentsotriatsoli-hydraattia ja 788 mg:n (1,0 ekviv.) kanssa 1-(3-dimetyyliaminopropyyli)-25 3-etyylikarbodi-imidi-hydrokloridia (DEC). Reaktioseosta sekoitettiin jäähauteessa, jonka lämpötilan annettiin kohota yön aikana 18°C:seen. Seos haihdutettiin kuiviin, jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin ja saatu liuos pestiin kahdesti 1-norm. HCl:llä, kahdesti 1-norm. NaOH-30 liuoksella, kerran kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin väritöntä kiinteää ainetta, joka puhdistettiin piidioksidilla (etyyliasetaatti-heksaaneilla), jolloin saatiin 1,85 g otsikon ainetta värittömänä jauheena. 35 TLC Rf 0,60 seoksessa C.
70 90 346 1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 0,94 (m), 1,29 ja 1,30 (d, 3H ea), 13,9 (s, 9H), 2,13 (s, 3H), 2,64, 2,98, 3,03 ja 3,15 (dd, 1H ea), 4,09 (d, 1H), 4,30 - 4,50 (m, 3H), 4,90 (m, 1H), 5,07 (septetti, 1H), 6,66 (m, 5 1H), 6,86 (d, 1H), 7,16 - 7,36 (m, aromaattinen).
Esimerkki 39
Phe-S-MeCysnor-C-Sta-ipropyyliesteri (I, Z=NH2; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2; X=sykloheksyyli; W=CHM;OH; ja Z^COC^CH (CH3) 2> 10 Esimerkin 38B tuote (500 mg) liuotettiin 3 ml:aan 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta ja sekoitettiin 25°C:ssa 40 minuuttia. Seos haihdutettiin kuiviin ja jäännös haihdutettiin kuiviin eetterin kanssa, jolloin saatiin 460 mg maalarinvalkeaa jauhetta, TLC Rf 0,25 seoksessa C (ainet-15 ta käsiteltiin trietyyliamiinin kanssa dikloorimetaanissa ja pantiin sitten TLC-levylle), HPLC 4,05 min 50/50-seok-sessa asetonitriili-pH 2,1 -puskuri.
1H NMR, DMSO, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 1,20 (peittäen d:n, 6H), 2,11 (s, 3H), 2,55, 2,82, 2,93 ja 20 3,18 (dd, 1H ea), 4,01, 4,08, 4,23 ja 4,57 (m, 1H ea), 7,30 (s, aromaattinen), 5,38, 7,96 ja 8,89 (d, 1H ea), 8,18 (br, 3H).
Esimerkki 40 4-pikolinoyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyylieste-25 ri (I, Z=4-pikolinoyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2= CH3SCH2~; X=sykloheksyyli; W=CHi HÖH; ja Z^= co2ch(ch3)2)
Esimerkin 38B tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti, paitsi että lähtöamiinihydrokloridin 30 neutralointiin käytettiin 1,05 ekvivalenttia trietyyli-amiinia (50 ^ul), 200 mg:sta esimerkin 30 tuotetta ja 45 mg:sta pyridiini-4-karboksyyli(pikoliini)happoa saatiin 157 mg väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,52 seoksessa C, HPLC
7,10 min 50/50-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti.
35 1H NMR, DMSO, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 1,18 ja 1,20 (d, 3H ea), 2,09 (s, 3H), 2,60, 2,80 ja 3,14 (dd, 71 90346 1H ea), 4,00, 4,22, 4,49 ja 4,78 (m, 1H ea), 4,87 (septetti; 1H) , 5,35, 7,18 , 8,42 ja 8,90 (d, 1H ea) , 7,26 (t, 2H), 7,37 (d, 2H), 7,67 (d, 2H), 8,70 (d, 2H).
Esimerkki 41 5 4-t-BocpiperatsiinokarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta- i-propyyliesteri (I, Z=4-t-Bocpiperatsiinokarbonyy-liamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=syklohek-syyli; W=CH>mOH; ja Z1=C02CH (CH3) 2) A. 4-t-BocpiperatsiinokarbonyyliPhe-S-MeCys-metyy- 10 liesteri_
Esimerkin 38B tuotteen valmistusmenetelmän mukaisesti 345 mgista S-metyyli-kysteiini-metyyliesteriä ja 500 mg:sta Boc-piperatsiinokarbonyyli-L-fenyylialaniinia saatiin 547 mg väritöntä vaahtoa, jota käytettiin enempää 15 puhdistamatta.
B. 4-t-BocpiperatsiinokarbonyyliPhe-S-MeCys Esimerkin 41A tuote (467 mg) liuotettiin 1 ml:aan dioksaania ja 0,5 ml:aan vettä 0°C;ssa ja käsiteltiin 33 mg;n kanssa litiumhydroksidia. 2,5 tunnin kuluttua seos 20 haihdutettiin kuiviin, jäännös liuotettiin veteen ja saatu liuos uutettiin eetterillä. Etyyliasetaattia lisättiin vesikerrokseen, joka oli säädetty pH-arvoon 1 1-norm. HClillä, uutettiin etyyliasetaatilla (4 x), uutteet pestiin vedellä ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla, jolloin 25 saatiin 417 mg väritöntä kiinteää ainetta.
C. 4-t-BocpiperatsiinokarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-
Sta-i-propyyliesteri_
Esimerkin 36B tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 100 mgista nor-C-Sta-isopropyyliesteriä 30 ja 203 mgista esimerkin 41B tuotetta saatiin 182 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,49 (etyyliasetaatti/pii-dioksidi).
1H NMR, CDClg, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 1,26 ja 1,27 (d, 3H ea), 1,45 (s, 9H), 2,10 (s, 3H), 2,73 35 (dd, 1H), 3,00 (m, 2H), 3,27 ja 3,36 (m, 9H kaikkiaan), 3,77 (d, lii), 4,10 (dd, 1H) , 4,44 (m, 111), 4,81 (d, 1H) , 90346 5,07 (septetti, 1H), 6,84 ja 6,93 (d, 1H ea), 7,18 - 7,39 (m, aromaattinen).
Esimerkki 42
PiperatsiinokarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyy-5 liesteri (I, Z=piperatsiinokarbonyyliamino; M=fenyy- li; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli; W=CH''iOH; ja z1=co2ch(ch3) 2)
Esimerkin 41 tuote (33 mg) liuotettiin 2 ml:aan 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta ja sekoitettiin 25°C:ssa 10 50 minuuttia, haihdutettiin kuiviin ja jäännöstä haihdu tettiin eetterin kanssa, jolloin saatiin 31 mg maalarin-valkeaa jauhetta, TLC Rf 0,2 seoksessa C (täplitetty levy altistettiin ammoniakille ennen eluointia), HPLC 2,98 min 50/50-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti.
15 1H NMR, DMSO, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 1,18 ja 1,20 (d, 3H ea), 2,10 (s, 3H), 4,00 ja 4,21 (m, 1H ea), 4,40 (m, 2H), 4,85 (septetti, 1H), 5,33, 6,90, 7,63 ja 8,22 (d, 1H ea), 7,13 - 7,33 (m, aromaattinen).
Esimerkki 43 20 MorfoliinokarbonyyliheksahydroPhe-S-MeCysnor-C-Sta- i-propyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=sykloheksyyli; Q=H; R2=CH2SCH2; X=sykloheksyyli; W=CH 1 ' ' OH; ja Z^CC^CH (CH3) 2) Δ. Morfoliinokarbonyyliheksahydro-L-fenyylialaniini 25 Esimerkin 7C tuote (4,0 g) liuotettiin 55 ml:aan metanoli-etikkahapposeosta 10:1 ja ravisteltiin 1,0 g:n kanssa 10-%:ista Rh/C:tä 50 psi:n vetypaineessa 25°C:ssa 3,5 tuntia. Seos suodatettiin Celiten läpi, konsentroitiin, haihdutettiin kuiviin eetterin kanssa, jolloin saatiin 30 4,15 g väritöntä vaahtoa, joka puhdistettiin piidioksi dilla (pakattu ja täytetty etyyliasetaatissa, eluoitiin samalla liuottimena ja sen jälkeen etnaoli-dikloorimetaa-nigradientein), jolloin saatiin 704 mg väritöntä vaahtoa, TLC Rf 0,4.
73 90 3 46 B. MorfoliinokarbonyyliheksahydroPhe-hydroksisuk- kiini-imidiesteri_
Esimerkin 43A tuote (500 mg) liuotettiin 5 ml:aan dimetoksietaania ja käsiteltiin peräkkäin 0°C:ssa 283 mg:n 5 kanssa N-hydroksisukkiini-imidiä ja 507 mg:n kanssa disyk-loheksyylikarbodi-imidiä. Reaktioseoksen annettiin lämmetä yön aikana 18°C:seen, suodatettiin, haihdutettiin kuiviin, jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, joka pestiin kahdesti kyllästetyllä natriumvetykarbonaatin vesiliuok-10 sella, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin magnesium-sulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 704 mg väritöntä vaahtoa.
C. MorfoliinokarbonyyliheksahydroPhe-S-MeCys S-metyylikysteiiniä (442 mg) liuotettiin 4,6 ml:aan 15 kyllästettyä natriumvetykarbonaatin vesiliuosta ja lisättiin 2,5 ml THF ja sen jälkeen 890 mg esimerkin 43B tuotetta. 20 minuutin sekoittamisen jälkeen 25°C:ssa seos laimennettiin vedellä, pestiin kahdesti etyyliasetaatilla ja pH säädettiin arvoon 1,1 1-norm. HClrllä etyyliasetaa-20 tin läsnä ollessa. Orgaaninen kerros erotettiin, vesiker-ros uutettiin neljällä erällä etyyliasetaattia, yhdistetyt orgaaniset kerrokset pestiin kahdesti 1-norm. HClrllä, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 796 mg vä-25 ritöntä vaahtoa.
D. MorfoliinokarbonyyliheksahydroPhe-S-MeCysnor-C-
Sta-i-propyyliesteri__
Esimerkin 38B tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 94 mg:sta nor-C-Sta-isopropyyliesteriä 30 ja 170 mg:sta esimerkin 43C tuotetta saatiin 178 mg väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,83 seoksessa C, HPLC 4,16 min 70/30-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti.
1H NMR, CDCl^, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 0,93 (m, 411), 1,26 ja 1,27 (d, 3H ea) , 2,13 (s, 3H) , 2,76 15 ja 3,11 (dd, 1H ea), 3,39 (m, 4H), 3,70 (m, 4H), 4,08 (br, 74 90346 1H), 4,28 (m, 1H), 4,41 (m, 2H), 4,82, 6,83 ja 6,93 (d, 1H ea), 5,04 (septetti, 1H).
Esimerkki 44
BocProPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z = 5 Bocpyrrolidyyli-2-karbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli; W=CH(«'OH; ja Z^= co2ch(ch3)2)
Esimerkin 38B tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti, paitsi että amiini-hydrokloridin neut-10 raloimiseen käytettiin 1,2 ekviv. 71 ^ul trietyyliamiinia, 233 mg:sta esimerkin 39 tuotetta ja 101 mg:sta boc-L-pro-liinia saatiin 237 mg väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,66 seoksessa C.
1H NMR, CDCl^, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 1,27 15 ja 1,29 (d, 3H ea), 1,48 (s, 9H), 2,13 (s, 3H), 2,67 ja 3,04 (dd, 1H ea), 4,44 (m, 1H), 4,62 (m, 2H), 5,07 (septetti, 1H) , 6,42 ja 6,60 (d, 1H, 7,1 - 7,4 (m, aromaattinen) .
Esimerkki 45 20 ProPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri-hydroklo- ridi (I, Z=(s)-2-pyrrolidyylikarbonyyliamino; M= fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2; X=sykloheksyyli; W= CHMfOH; ja Z^CC^CH (CH3) 2)
Esimerkin 44 tuote (124 mg) liuotettiin 3 ml:aan 25 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta ja sekoitettiin 25°C:ssa 40 minuuttia. Seos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 114 mg vaaleankeltaista jauhetta, TLC Rf 0,39 seoksessa C (täplitetty levy altistettiin ammoniakille ennen eluoin-tia) .
30 1H NMR, DMSO, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 1,27 ja 1,29 (d, 3H ea), 2,09 (s, 3H), 2,56 (dd, 1H), 4,00, 4,08, 4,22, 4,47 ja 4,64 (m, 1H ea), 4,85 (septetti, 1H), 5,37, 7,73, 8,41 ja 8,78 (d, 1H ea), 7,13 - 7,33 (m, aro maattinen) .
75 90 346
Esimerkki 46 O-sukkinoyyli-morfoliinokarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyli-amino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2; X=sykloheksyyli; 5 W=CH'«I0C0(CH2)2C02H; ja Z1=C02CH(CH3>2)
Esimerkin 17E tuote (101 mg) liuotettiin 0,8 mitään dikloorimetaania ja käsiteltiin 16 mg:n kanssa sukkiinian-hydridiä ja 13 ^,ul:n kanssa pyridiiniä. 18,5 tunnin sekoittamisen jälkeen 25°C:ssa lisättiin 20 mg dimetyyliami-10 nopyridiiniä. Neljä tuntia myöhemmin lisättiin 40 mg suk-kiinianhydridiä. Edelleen 20 minuutin sekoittamisen jälkeen seos laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin kolme kertaa 1-norm. HCltllä, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, haihdutettiin kuiviin ja 15 kromatografoitiin piidioksidilla eluoimalla ensin etyyliasetaatilla, sitten 4 % etanolia sisältävällä dikloorime-taanilla, jolloin saatiin 59 mg väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,1 (etyyliasetaatti, piidioksidi, HPLC 2,84 min 70/30-seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti.
20 1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 0,94 (m), 1,24 ja 1,27 (d, 3H ea), 2,10 (br, 3H), 2,64 - 3,54 (m), 3,6 (m, 4H), 4,23, 4,53 ja 4,67 (m, 1H ea), 4,96 (br, 1H), 4,98 (septetti, 1H), 5,14 (br, 1H), 6,65 (d, 1H), 7,16 - 7,39 (m, aromaattinen).
25 Esimerkki 47
MorfoliinokarbonyyliPhe-N-MeNlenor-C-Sta-i-propyy-liesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyy-li; Q=CH3; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W= CH'MOH; ja Z1=C02CH (CH3) 2) 30 Esimerkin 38B tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 76 mg:sta nor-C-Sta-isopropyyliesteriä ja 126 mg:sta esimerkin 30E tuotetta saatiin 117 mg väritöntä vaahtoa, TLC Rf 0,68 seoksessa C. Tämän seoksen haluttu tuote eristettiin preparatiivista HPLC:tä käyttäen 35 9,8 x 250 mm:n Zorbax C-8 -kolonnissa, 6,4 ml/min 75/25- seoksessa asetonitriili-vesi, retentioaika 5,62 min, 76 90 346 erottui ei toivotusta inaktiivisesta komponentista kohdalla 6,42 minuuttia. Näin saatiin väritöntä vaahtoa (60 mg), analyyttinen HPLC 4,98 min 75/25-seoksessa asetonitriili-vesi.
5 1H, NMR, CDCl^, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 0,83 (t, 3H), 1,23 ja 1,26 (d, 3H ea), 2,70 (s, 3H), 2,95 ja 3,09 (dd, 1H ea) 3,22 - 3,45 (m, 4H), 3,65 (m, 4H), 4,02 (d, 1H totaalinen), 4,95 (m, 2H), 5,15 ja 7,75 (d, 1H ea), 7,14 - 7,38 (m, aromaattinen).
10 Esimerkki 48
PiperidiinokarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-pro-pyyliesteri (I, Z=piperidiinokarbonyyliamino; M= fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli; W== CHFMOH; ja Z^CC^CH (CH.j) 2) 15 A. PiperidiinokarbonyyliPhe-bentsyyliesteri
Esimerkin 7A tuote (1,74 g) liuotettiin 13 ml:aan dikloorimetaania ja käsiteltiin 0,61 ml:n kanssa piperi-diiniä 0°C:ssa. 15 minuutin kuluttua lisättiin 0,1 ml pi-peridiiniä ja liuos haihdutettiin kuiviin ja jäännös kro-20 matografoitiin piidioksidilla eluoimalla etyyliasetaatti-heksaanien seoksella, jolloin saatiin 1,61 g väritöntä öljyä, TLC Rf 0,36 seoksessa A 1:1.
B. PiperidiinokarbonyyliPhe
Esimerkin 48A tuote (1,6 g) liuotettiin 50 ml:aan 25 metanoli-etikkahapposeosta 10:1 ja ravisteltiin 0,6 g:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 50 psi:n vetypaineessa ja 25°C:ssa 30 minuuttia. Seos suodatettiin Celiten läpi, suodos haihdutettiin kuiviin ja jäännöstä haihdutettiin ensin lisätyn tolueenin kanssa, sitten eetterin kanssa, jolloin saatiin 30 1,17 g väritöntä vaahtoa, TLC Rf 0,50 seoksessa C.
C. Boc-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri Esimerkin 38B tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 900 mg:sta nor-C-Sta-isopropyyliesteriä 1.i 871 mg:stn Bor-S-metyyli-L-kystoiiniä saatiin 1,04 g 35 väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,42 seoksessa A 1:1.
77 90 346 D. S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri-hydrokloridi Esimerkin 48C tuote (1,03 g) liuotettiin 6 mlraan 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta, sekoitettiin 45 minuuttia 25°C:ssa ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 998 mg 5 väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,48 seoksessa C.
E. PiperidiinokarbonyyliPhe-S-meCysnor-C-Sta-i- propyyliesteri__
Esimerkin 38B tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti, paitsi että amiini-hydrokloridin neut-10 raloimiseen käytettiin trietyyliamiinia, 130 mgrsta esimerkin 48D tuotetta ja 90 mgrsta esimerkin 48B tuotetta saatiin 117 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,44 (etyyliasetaatti-piidioksidi).
1H NMR, CDCl^, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 1,27 15 ja 1,29 (d, 3H ea), 2,08 (s, 3H), 2,75, 2,92, 3,13 ja 3,31 (dd, 1H ea), 3,20 (m), 4,11 (s, 2H), 4,33 - 4,58 (m), 4,72 ja 6,90 (d, 1H ea), 5,09 (septetti, 1H), 7,19 - 7,4 (m, aromaattinen).
Esimerkki 49 20 M0rfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-2-hydroksi-i- butyyliketoni (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M= fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli? X=sykloheksyyli; W= CHMfOH; ja Z1=COCH2C (OH) (CH3) 2> A. 6(S)-Bocamino-5(R)-bentsyylioksi-7-sykloheksyy- 25 li-2-metyyli-2-hydroksi~4-heksanoni_ 3(S)-t-butoksikarbonyyliamino-2(R)-bentsyylioksi-4-sykloheksyylibutyylialdehydiä (475 mg) lisättiin -78°C:ssa liuokseen, jossa oli 2,5 ekvivalenttia litiumetyyliasetaat-tia (5 mlrsta THF, 392 ^ulrsta di-isopropyyliamiinia ja 30 1,75 mlrsta 1,6-mol. n-butyylilitiumia heksaanissa 0°Crssa ja sen jälkeen 272 ^ulrsta etyyliasetaattia -78°Crssa), sekoitettiin 10 minuuttia -78°Crssa ja 10 minuuttia 0°Crssa ja sammutettiin ammoniumkloridin vesiliuoksella. Tuotteet eristettiin uuttamalla eetterillä, jolloin saatiin 548 mg 35 isomeerisiä aineita (TLC Rf 0,35 ja 0,28 seoksessa B 1:1). Tämä aine yhdessä 217 mgrn kanssa samaa ainetta, jota oli 78 90346 valmistettu samalla tavalla, mutta erikseen, liuotettiin 8 ml:aan THF ja käsiteltiin 5,9 ml:n kanssa 1,3-mol. me-tyylilitiumin eetteriliuosta 0°C:ssa, sekoitettiin viisi minuuttia ja sammutettiin ammoniumkloridin vesiliuoksella.
5 Uuttamalla eetterillä saatiin kellertävää öljyä (702 mg). TLC Rf 0,2 seoksessa B 1:1. Tämä aine liuotettiin 25 ml:aan asetonia ja käsiteltiin 2 ml:n kanssa kromihappoliuosta (Org. Syn. Coll. Voi. V, s. 310) ja haihdutettiin kuiviin, liuotettiin veteen ja uutettiin uudelleen etyyliasetaa-10 tiliä, joka kuivattiin magnesiumsulfaatilla, haihdutettiin kuiviin ja puhdistettiin piidioksidilla, jolloin saatiin 172 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,34 seoksessa B 1:1.
B. 6(S)-amino-5(R)-bentsyylioksi-7-sykloheksyyli- 15 2-metyyli-2-hydroksi-4-heksanoni-hydrokloridi
Esimerkin 49A tuote (124 mg) liuotettiin 0,5 ml:aan trifluorietikkahappoa 0°C:ssa, sekoitettiin 20 minuuttia, haihdutettiin kuiviin ja jäännöstä haihdutettiin uudelleen tolueenin, eetterin ja 1,1 ekvivalenttia HCl:ää 20 (dioksaanissa) sisältävän eetterin kanssa, jolloin kuivauksen jälkeen saatiin 106 mg kellertävää öljyä.
C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-2-hydroksi- i-butyyliketoni-bentsyylieetteri_
Esimerkin 38B tuotteen valmistus- ja puhdistusmene-25 telmän mukaisesti, paitsi että amiini-hydrokloridin neut-raloimiseksi lisättiin trietyyliamiinia, 104 mg:sta esimerkin 49B tuotetta ja 106 mg:sta esimerkin 8C tuotetta saatiin 60 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,4 (etyy-liasetaatti/piidioksidi).
30 D. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-2-hydroksi- i-butyyliketöni_
Esimerkin 49C tuote (58 mg) liuotettiin 10 ml:aan etikkahappo-metanoliseosta 1:1 ja ravisteltiin 100 mg:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 20 tuntia 25°C:ssa 50 psi:n vety-35 paineessa. Seos suodatettiin Celiten läpi, haihdutettiin kuiviin ja puhdistettiin piidioksidilla etyyliasetaatti- 90346 79 heksaanien seoksessa, jolloin saatiin 20 mg väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,22 (etyyliasetaatti/piidioksidi).
1H NMR, CDCl^, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 0,88 (t, 3H), 1,27 (s, 6H), 2,76 ja 2,87 (d, 1H ea), 3,00 ja 5 3,16 (dd, 1H), 3,26 (m, 4H), 3,63 (m, 4H), 4,16 (br, 1H), 4,23 (m, 1H), 4,51 (m, 2H), 5,00, 6,62 ja 6,73 (d, 1H ea), 7,13 - 7,36 (m, aromaattinen).
Esimerkki 50 4-hydroksipiperidiinokarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-10 Sta-i-propyyliesteri (I, Z=4-hydroksipiperidiino- karbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH2SCH2-; X= sykloheksyyli; W=CHniOH; ja Z1=C02CH (CH-j) 2)
Liuos, jossa oli 150 mg esimerkin 39 tuotetta ja 40 ^ul trietyyliamiinia 0,8 mlrssa dikloorimetaania, li-15 sättiin 0°C:ssa olevaan liuokseen, jossa oli 49 mg karbo-nyylidi-imidatsolia ja 20 mg imidatsolia 0,3 mlrssa dikloorimetaania ja saatua liuosta sekoitettiin tunnin ajan 0°C:ssa. Lisättiin liuos, jossa oli 25 mg 4-hydroksipipe-ridiiniä 0,3 mlrssa dikloorimetaania ja seosta sekoitet-20 tiin 1,5 tuntia 0°C:ssa ja 20°C:ssa 20 tuntia, laimennettiin etyyliasetaatilla ja pestiin 1-norm. HClrllä (2 x), kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, haihdutettiin kuiviin ja puhdistettiin piidioksidilla, jolloin saatiin 26,1 mg väritöntä vaahtoa, TLC Rf 25 0,22 (etyyliasetaatti/piidioksidi), HPLC 3,10 min 60/40- seoksessa asetonitriili-pH 2,1 fosfaatti.
1H NMR, CDCl^, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 1,27 ja 1,29 (d, 3H ea), 2,10 (s, 3H), 2,73 ja 3,30 (dd, 1H ea), 3,03 (m, 3-4H), 3,58 (m, 2H), 3,87 (m, 1H), 4,10 (m, 1H), 30 4,45 (m, 3H), 4,82 (d, 1H), 5,08 (septetti, 1H), 6,91 ja 7,09 (d, 1H ea), 7,19 - 7,40 (m, aromaattinen).
80 .,,, 9 0 3 4 6
Esimerkki 51
Metyyli-3(S)-(BocPheHisamino)-2(S)-atsido-4-syklo-heksyylibutyraatti seoksena 3(R),2(R)-isomeerin kanssa (I, Z=Bocamino; M=fenyyli; Q=H; R2=imidat-5 sol-4-yylimetyyli; X=sykloheksyyli; W=CH-*N3; ja z1=co2ch3) A. Raseeminen metyyli-3(S)-bocamino-4-sykloheksyy- li-2(R)-hydroksibutyraatti__ 10 g seosta, jossa oli 80 % N-t-butoksikarbonyyli-10 (S)-2-amino-(R)-2-hydroksi-4-fenyylibutyronitriiliä ja 20 % vastaavaa 2(S)-isomeeriä (US-patentti 4 668 769), lämmitettiin kiehuttaen 18 tuntia seoksessa, jossa oli 80 ml p-dioksaania, 30 ml vettä ja 30 ml väkevää HC1, haihdutettiin kuiviin, jäännös liuotettiin veteen ja liuos pes-15 tiin kloroformilla (3 x). Vesiliuos jäähdytettiin ja säädettiin pH-arvoon 7,5 HCl:llä. Sakka suodatettiin erilleen, pestiin vedellä, asetonilla, ja kuivattiin, jolloin saatiin 4,10 g vaaleanvihertävää kiinteää ainetta. Tämä a i no liuot ('Itiin 4 0 ml: aan p-dioksaania ja 20 mitään vot-20 tä, liuoksen pH säädettiin arvoon 11 natriumhydroksidilla ja käsiteltiin 5,85 ml:n kanssa di-t-butyylidikarbonaat-tia. pH pidettiin natriumhydroksidilla välillä 9,5 - 11,2 ja 1,5 tunnin kuluttua seos konsentroitiin osittain, jäljelle jäänyt vesiliuos pestiin 3 x eetterillä, tehtiin 25 sitten happameksi pH-arvoon 1,0 etyyliasetaatin läsnä ollessa, erotettiin, uutettiin edelleen etyyliasetaatilla, uutteet kuivattiin natriumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 4,7 g vaaleankeltaista kiinteää ainetta, TLC Rf 0,38 seoksessa C. Tämä aine liuotettiin 30 100 ml:aan metanolia, jossa oli 12 ml etikkahappoa ja ra visteltiin 1,1 g:n kanssa 10-%:ista Rh/C:tä 5,5 tuntia 25°C:ssa ja 58 psi:n vetypaineessa, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 4,58 g keltaista vaahtoa, TLC Rf 0,45 seoksessa C. Tämä aine liuotettiin eet-35 teriin ja käsiteltiin ylimäärin käytetyn diatsometaanin eetteriliuoksen kanssa, sitten etikkahapon kanssa yli- ei 90346 määräisen diatsometaanin poistamiseksi, haihdutettiin kuiviin ja puhdistettiin piidioksidilla (etyyliasetaatti-heksaaneilla), jolloin saatiin 4,3 g vahamaista kiinteää ainetta, TLC Rf 0,5 (seoksessa A 1:1) /«/D 20 olennaisesti 5 nolla (CHC13, C = 1,1).
B. Raseeminen metyyli-3(S)-Bocamino-4-sykloheksyy- li-2(S)-atsidobutyraatti_ 2 g esimerkin 51A tuotetta, 4,16 g trifenyylifos-fiinia ja 12,1 mmoolia typpivetyhappoa (natriumatsidista 10 ja rikkihaposta bentseeni-vesiseoksessa, bentseeni kuivattu natriumsulfaatilla ja titrattu normaalilla emäsliuok-sella) liuotettiin yhteensä 60 mlraan bentseeniä 0°C:ssa ja käsiteltiin 2,49 ml:n kanssa dietyyliatsodikarboksy-laattia. Seosta sekoitettiin 30 minuuttia, suodatettiin, 15 haihdutettiin kuiviin ja puhdistettiin piidioksidilla (eetteri-heksaaneilla), jolloin saatiin 1,02 g vahamaista, maalarinvalkeaa kiinteää ainetta, TLC Rf 0,48 seoksessa A 1:3.
C. Raseeminen metyyli-3(S)-amino-4-sykloheksyyli- 20 2 (S)-atsidobutyraatti-hydrokloridi_
Esimerkin 51B tuote (430 mg) liuotettiin 15 ml:aan 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta, sekoitettiin tunnin ajan 25°C:ssa ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 355 mg maalarinvalkeaa vaahtoa, TLC Rf 0,22 seoksessa C.
25 D. Metyyli-3(S)-(BocPheHis(imBoc)amino)-2(S)-atsi- do-4-sykloheksyylibutyraatti l:l-seoksena 3(R)- 2(R)-isomeerin kanssa_
Esimerkin 1C tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 340 mg:sta esimerkin 51C tuotetta ja 30 710 mg:sta yhdistettä BocPheHis(imBoc) saatiin 620 mg ot sikon aineita, TLC Rf 0,45 ja 0,47 (5 % etanoli-dikloori-metaani)värittömänä vaahtona.
82 90 346 E. Metyyli-3(S)-(BocPheHisamino)-2(S)-arsido-4- sykloheksyylibutyraatti seoksena 3(R),2(R)-iso- meerin kanssa_
Esimerkin 51D tuote (380 mg) liuotettiin 10 mlraan 5 etikkahappo-vesiseosta 5:1, sekoitettiin neljä tuntia 25°C:ssa, konsentroitiin, haihdutettiin kuiviin ensin lisätyn tolueenin kanssa, sitten eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 280 mg vaaleankeltaista vaahtoa.
1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 1,37 10 (s, 9H), 3,76 ja 3,78 (s, suhde noin 1:1, 3H yhteensä), 6,80 (s, 1H), 7,53 ja 7,55 (s, 1:1, 1H yhteensä).
Esimerkki 52
Metyyli-3(S)-(BocPheHisamino)-2(S)-amino-4-syklo-heksyylibutyraatti seoksena 3(R),2(R)-isomeerin 15 kanssa (I, Z=Bocamino; M=fenyyli; Q=H; R2=imidat- sol-4-yylimetyyli; X=sykloheksyyli; W^H-^NH^; ja z1=co2ch3)
Esimerkin 51D tuote (275 mg) liuotettiin 20 ml:aan etanolia, jossa oli 0,5 ml etikkahappoa ja ravisteltiin 20 100 mg:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä kolme tuntia 25°C:ssa ja 50 psi:n vetypaineessa, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 240 mg vaaleanruskeaa kiinteää ainetta, HPLC 5,64 ja 7,01 min 60/40-seoksessa asetonit-riili-pH 2,1 fosfaatti.
25 1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 1,33 ja 1,35 (s, 9H yhteensä), 3,72 (s, 3H yhteensä), 6,78 (s, 1H yhteensä).
83 90 346
Esimerkki 53
Metyyli-3 (S)-(BocPheHisamino)-2(R)-atsido-4-syklo- heksyylibutyraatti seoksena 3(R),2(S)-isomeerin kanssa (I, Z=Bocamino; M=fenyyli; Q=H; R2=imidat-5 sol-4-yylimetyyli; X=sykloheksyyli; W=CHlΠΝ^; ja z1=co2ch3) A. Raseeminen metyyli-3(S)-Bocamino-4-sykloheksyy- li-2(S)-bentsoyylioksibutyraatti_
Liuosta, jossa oli 600 mg esimerkin 51A tuotetta, 10 700 mg bentsoehappoa ja 1,5 g trifenyylifosfiinia 5 mlrssa THF, käsiteltiin 25°C:ssa 0,9 ml:n kanssa dietyyliatsodi-karboksylaattia. 1,5 tunnin kuluttua lisättiin 230 mg bent-soehappoa, 0,5 g trifenyylifosfiinia ja 0,3 ml dietyyliat-sodikarboksylaattia ja kolme tuntia myöhemmin seos jäähdy-15 tettiin 0°C:seen 12 tunnin ajaksi. Seos puhdistettiin piidioksidilla (etyyliasetaatti-heksaaneilla), jolloin saatiin 509 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,41 seoksessa A 1:3.
B. Raseeminen metyyli-3(S)-Bocamino-4-sykloheksyy- 20 li-2 (S)-hydroksibutyraatti_
Esimerkin 53A tuote (550 mg) liuotettiin 5 ml:aan metanolia ja käsiteltiin 25°C:ssa 9 mg:n kanssa kuivaa kaliumkarbonaattia. 1,8 tunnin kuluttua seos konsentroitiin ja jäännös puhdistettiin piidioksidilla, jolloin saatiin 25 326 mg öljyistä vaahtoa, TLC Rf 0,18 seoksessa A 1:3.
C. Raseeminen metyyli-3(S)-Bocamino-4-sykloheksyy- li-2(R)-atsidobutyraatti_
Esimerkin 51B tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 320 mg:sta esimerkin 53B tuotetta saa-30 tiin 280 mg väritöntä vahamaista kiinteää ainetta, TLC Rf 0,50 seoksessa B 1:3.
D. Raseeminen metyyli-3(S)-amino-4-sykloheksyyli- 2(R)-atsidobutyraatti-hydrokloridi_
Esimerkin 51C tuotteen valmistusmenetelmän mukai-35 sesti 260 mg:sta esimerkin 53C tuotetta saatiin 198 mg vaaleankeltaista kiinteää ainetta.
84 90346 E. Metyyli-3(S)-(BocPheHis(imBoc)amino)-2(R)-atsi- do-4-sykloheksyylibutyraatti seoksena 3(R),2(S)-isomeerin kanssa_
Esimerkin 1C tuotteen valmistus ja puhdistusmene-5 tclmän mukaisesti 192 mg:sta esimerkin 53D tuotetta ja 398 mg:sta yhdistettä BocPheHis(imBoc) (US-patentti 4 559 198) saatiin 253 mg vaaleankeltaista vaahtoa, TLC Rf 0,5 (etyyliasetaatti).
F. Metyyli-3(S)-(BocPheHisamino)-2(R)-atsido-4- 10 sykloheksyylibutyraatti seoksena 3(R),2(S)-iso- meerin kanssa_
Esimerkin 53E tuotetta (211 mg) sekoitettiin neljä tuntia 25°C:ssa 12 mlrssa etikkahapon-veden seosta 5:1, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin, jolloin saatiin 210 15 mg vaaleankeltaista vaahtoa, TLC Rf 0,1 seoksessa C.
1H NMR, CDCl^, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 1,30 ja 1,34 (s, suhde 3:2, 9H yhteensä), 3,76 ja 3,81 (s, suhde 3:2, 3H yhteensä), 6,67 ja 6,78 (s, suhde 2:3, 1H yhteensä), 7,52 ja 7,55 (s, suhde 2:3, 1H yhteensä).
20 Esimerkki 54
Metyyli-3(S)-(BocPheHisamino)-2(R)-amino-4-syklo-heksyylibutyraatti seoksena 3(R),2(S)-isomeerin kanssa (I, Z=Bocamino; M=fenyyli; Q=H; R1=imidat-sol-4-yylimetyyli; X=sykloheksyyli; W=CHiπνη^ϊ ja 25 Z1=C02CH3)
Esimerkin 53F tuote (170 mg) liuotettiin 15 ml:aan etanolia ja 0,4 ml:aan etikkahappoa ja ravisteltiin 90 mg:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 1,5 tuntia 25°C:ssa ja 50 psi:n vetypaineessa, suodatettiin, konsentroitiin, haihdutet-30 tiin kuiviin eetterin ja tolueenin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 170 mg vaaleanruskeaa kiinteää ainetta, HPLC 5,17 ja 6,17 min (noin 1:1) 35/65-seoksessa asetonit-riili-pH 2,1 fosfaatti.
1H NMR, DMSO-dg, 300 MHz, osittainen, delta ppm: 35 1,29 (s, 9H), 3,56 ja 3,61 (s, suhde 3:2, 3H yhteensä), 6,80 ja 7,50 (s, 1H ea).
85 90 346
Esimerkki 55
MorfoliinokarbonyyliPheLeunor-C-Sta-metyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH2CH (CH3) 2; X=sykloheksyyli; W=CH'MOH; ja Z^ = 5 C02CH3) A. Nor-C-Sta-metyyliesteri-hydrokloridi
Liuosta, jossa oli 0,15 g Boc-nor-C-Sta-metyylies-teriä 4 ml:ssa 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta, sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Reaktioseos haih-10 dutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 0,15 g valkeaa kiinteää ainetta. Ainetta käytettiin enempää puhdistamatta .
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,65 (s, 3H), 4,17 (m, 1H), 6,47 (d, J = 4 Hz, 1H).
15 B. MorfoliinokarbonyyliPheLeu-metyyliesteri
Liuokseen, jossa oli 0,30 g yhdistettä morfoliino-karbonyyliPhe ja 0,22 g HCl-LeuOMe-yhdistettä 5 ml:ssa vedetöntä CH2CI2, lisättiin peräkkäin 0,12 g TEA, 0,18 g HBT ja 0,24 g DCC. 20 tunnin sekoittamisen jälkeen huoneen 20 lämpötilassa liuos suodatettiin Celiten läpi ja pestiin 2 x 10 ml :11a 0,1-norm. natriumhydroksidia. Orgaaninen faasi kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Jäännös kromatografoitiin Si02:lla (etyyliasetaatti-heksaani 2:1), jolloin saatiin 0,43 g 25 puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,89 (d, J = 7 Hz, 6H), 3,71 (s, 3H), 4,48 (m, 1H), 4,57 (m, 1H), 6,25 (d, J = 7 Hz, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliPheLeu 30 Liuokseen, jossa oli 0,43 g yhdistettä morfoliino- karbonyyliPheLeuOMe 10 ml:ssa metanolia, lisättiin 0,1 g K2CO3 ja saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 24 tuntia. Reaktioseos konsentroitiin vakuumissa tilavuudeltaan 10 m]:ksi ja tehtiin happameksi 1-norm. HCl:llä 35 ja uutettiin 3 x 25 ml:lla Yhdistetyt uutteet kui vattiin MgSO^:11a, suodatettiin ja konsentroitiin, jolloin 86 90 3 46 saatiin raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta .
NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,87 (2d, 6H), 4,45 (m, 1H) , 4,65 (m, 1H), 5,36 (d, J = 7 Hz, 1H) .
5 D. MorfoliinokarbonyyliPheLeunor-C-Sta-metyylies- teri_ MOrfoliinokarbonyyliPheLeu-yhdistettä (96 mg) kon-densoitiin 80 mg:n kanssa yhdistettä nor-C-StaOMe-HCl käyttämällä edellä selostettua DCC-menetelmää. Raaka tuo- 10 te kromatografoitiin Sienillä (C^C^-etanoli 29:1), jolloin saatiin 68 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,85 (2d, 6H), 3,72 (s, 3H), 4,28 (m, 1H), 4,41 (m, 2H).
Esimerkki 56 15 MOrfoliinokarbonyyliPheMetnor-C-Sta-metyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=^H3S^H2^2_; x=sykl°heksyyli? W=CHIiiOH; ja Z^= co2ch3) A. MorfoliinokarbonyyliPheMet-metyyliesteri 20 MorfoliinokarbonyyliPhe (0,30 g) kytkettiin 0,25 g:aan yhdistettä HCl-metioniiniOMe käyttämällä esimerkissä 55 esitettyä DCC-menetelmää. Raaka aine kromatografoitiin SiO^illa (etyyliasetaatti-heksaani 2:1), jolloin saatiin 0,36 g puhdasta dipeptidiä.
25 NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,05 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 4,57 (m, 2H).
B. MorfoliinokarbonyyliPheMet
MorfoliinokarbonyyliPheMet-metyyliesteri (0,36 g) saippuoitiin käyttämällä esimerkin 55 menetelmää, jolloin 30 saatiin 0,3 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta .
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,01 (s, 3H), 2,44 (m, 1H), 4,61 (m, 1H).
8? 90346 C. MorfoliinokarbonyyliPheMetnor-C-Sta-metyylies-teri_
MorfoliinokarbonyyliPheMet (0,10 g) kytkettiin 0,080 g:aan yhdistettä nor-C-StaOMe-HCl (esimerkki 55) 5 käyttämällä DCC:tä (esimerkki 1). Raaka tuote kromatogra-* foitiin Sienillä (CH2Cl2_etanoli, 29:1), jolloin saatiin 50 mg puhdasta tuotetta ja 32 mg epäpuhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,98 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 4,38 (m, 2H), 4,46 (m, 1H).
10 Esimerkki 57
MorfoliinokarbonyyliPhePhenor-C-Sta-metyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=bentsyyli; X=sykloheksyyli? W=CHi»iOH; ja Z^= co2ch3) 15 A. MorfoliinokarbonyyliPhePhe-metyyliesteri
MorfoliinokarbonyyliPhe-yhdiste (0,30 g) konden-soitiin 0,26 g:n kanssa yhdistettä PheOMe-HCl käyttämällä esimerkissä 55 selostettua DCC-menetelmää. Raaka dipepti-di kromatografoitiin Sienillä (etyyliasetaatti-heksaani 20 1:2), jolloin saatiin 0,37 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,65 (s, 3H), 4,49 (m, 1H), 4,78 (m, 1H).
B. MorfoliinokarbonyyliPhePhe
MorfoliinokarbonyyliPhePhe-metyyliesteri (0,37 g) 25 saippuoitiin kuten esimerkissä 55, jolloin saatiin 0,35 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDClg) delta 4,59 (m, 1H), 4,65 (m, 1H), 5,10 (d, J = 8 Hz, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliPhePhenor-C-Sta-metyylies- 30 teri_
MorfoliinokarbonyyliPhePhe (0,10 g) kondensoitiin 0,080 g:n kanssa yhdistettä nor-C-StaOMe-HCl käyttämällä esimerkissä 55 selostettua DCC:tä. Raaka tuote kromatografoitiin Si02:lla (CH2Cl2“etanoli 29:1), jolloin saatiin 35 0,10 puhdasta yhdistettä.
88 90 346 NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,74 (s, 3H), 4,26 (m, 1H), 4,36 (ra, 1H), 4,52 (m, 1H).
Esimerkki 58
MorfoliinokarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-metyylies-5 teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2; X=sykloheksyyli; W=CIHmOH; ja z1=co2ch3) A. MorfoliinokarbonyyliPhe-S-MeCys-metyyliesteri
MorfoliinokarbonyyliPhe (0,96 g) ja S-MeCysOMe-HCl 10 (0,55 g) kytkettiin yhteen käyttämällä vesiliukoista rea- genssia DEC, yhdessä TEA:n ja HBT:n kanssa, kuten esimerkissä 55. Reaktioseos laimennettiin 100 ml:11a etyyliasetaattia, pestiin 2 x 35 ml:11a 0,1-norm. HC1 ja 2 x 35 ml :11a 0,1-norm. NaOH. Orgaaninen faasi kuivattiin 15 MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin vakuu- missa. Raaka tuote (1,15 g) oli riittävän puhdasta käytettäväksi edelleen.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,00 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 4,58 (m, 1H), 4,65 (m, 1H).
20 B. MorfoliinokarbonyyliPhe-S-MeCys
MorfoliinokarbonyyliPhe-S-MeCys-metyyliesteri (1,15 g) saippuoitiin, kuten esimerkissä 55, paitsi että reaktioseosta sekoitettiin aluksi 0°C:ssa 15 minuuttia ja sitten huoneen lämpötilassa. Raakaa tuotetta (1,0 g) käy-25 tettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13), delta 2,03 (s, 3H), 4,63 (m, 1H), 4,77 (m, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliPhe-S-MeCysnor-Sta-metyyli-esteri________ 30 MOrfoliinokarbonyyliPhe-S-MeCys (130 mg) kytkettiin yhdisteeseen nor-C-StaOMe-HCl (69 mg) käyttämällä esimerkissä 55 selostettua DCC-menetelmää. Raaka tuote kromato-grafoitiin Sioilla (CH2Cl2-etanoli 19:1), jolloin saatiin 58 mg puhdasta tuotetta.
35 NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,06 (s, 3H), 3,72 (s, 3H) , 4,40 (m, 2H) .
89 90 346
Esimerkki 59
MorfoliinokarbonyyliPhe-S-EtCysnor-C-Sta-metyylies- teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; X=sykloheksyyli; W=CH' mOH; 5 ja Z1=C02CH3) A. MorfoliinokarbonyyliPhe-S-EtCys-metyyliesteri
MorfoliinokarbonyyliPhe (0,20 g) kytkettiin yhdisteeseen S-EtCysOMe-HCl (0,15 g) käyttämällä DCC:tä esimerkissä 55 selostetulla tavalla. Raaka yhdiste kromatogra- 10 foitiin Sioilla (etyyliasetaatti-heksaani 3:1), jolloin saatiin 0,20 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,16 (t, J = 7 Hz), 2,45 (q, J = 7 Hz, 2H), 3,73 (s, 3H), 4,64 (m, 2H).
B. MorfoliinokarbonyyliPhe-S-EtCys 15 MOrfoliinokarbonyyliPhe-S-EtCys-metyyliesteri (20,0 g) saippuoitiin, kuten esimerkissä 55, jolloin saatiin 0,11 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta .
NMR (300 MHz, CDC13> delta 2,16 (t, J = 7 Hz), 20 2,50 (q, J = 7 Hz, 2H), 4,64 (m, 1H), 4,79 (m, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliPhe-S-EtCysnor-C-Sta-metyy- liesteri_ MOrfoliinokarbonyyliPhe-S-EtCys (0,11 g) kytkettiin yhdisteeseen nor-C-StaOMe-HCl (75 mg) käyttämällä esimer-25 kissä 55 selostettua DCC-menetelmää. Raaka yhdiste puhdistettiin kromatografoimalla Sioilla (CH^^-etanoli 29:1), jolloin saatiin 0,10 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,21 (t, J = 7 Hz, 3H), 2,50 (m, 2H) , 3,75 (s, 3H) , 4,40 (m, 2H) .
90 90 3 46
Esimerkki 60
Mor foliinokarbonyyliPhe-0-/3Sernor-C-Sta-metyylies-teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH2OCH2CgH(.; X=sykloheksyy li ; W=CHMiOH; 5 Z1 = C02CII3) A. MorfoliinokarbonyyliPhe-O-flSer-metyyliesteri MorfoliinokarbonyyliPhe (0,31 g) kytkettiin yhdisteeseen 0-/3Ser0Me-HCl (0,25 g) käyttämällä standardin mukaista esimerkissä 55 selostettua DCC-reaktiota. Raaka 10 yhdiste kromatografoitiin Sioilla (etyyliasetaatti-hek-saani 1:3), jolloin saatiin 0,28 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta (s, 3H), 4,43 (m, 2H), 4,63 (m, 2H).
B. MorfoliinokarbonyyliPhe-0-/3Ser 15 MorfoliinokarbonyyliPhe-0-/JSer-metyyliesteri (0,28 g) saippuoitiin esimerkissä 55 selostetulla tavalla. Raakaa happoa (0,19 g) käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 4,50 (m, 2H) , 4,63 (m, 1H), 4,72 (m, 1H).
20 C. MorfoliinokarbonyyliPhe-0-/?Sernor-C-Sta-metyy- liesteri_
MorfoliinokarbonyyliPhe-0-/>Ser (0,19 g) kytkettiin yhdisteeseen nor-C-StaOMe-HCl (0,14 g) käyttämällä esimerkissä 55 selostettua DCC-menetelmää. Raaka-aine puhdistet- 25 tiin kromatografoimalla Sioilla (CH2Cl2-etanoli 29:1), jolloin saatiin 0,11 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,73 (s, 3H), 4,40 (m, 2H), 4,45 (AB, 2H).
Esimerkki 61 30 MorfoliinokarbonyyliPhe-0-y3Thrnor-C-Sta-metyylies- teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH(CH^)OCH2CgH^; X=sykloheksyyli; W= CHiMOH; ja Z =C02CH3) A. MorfoliinokarbonyyliPhe-0-|/3Thr-metyyliesteri 35 MorfoliinokarbonyyliPhe (0,30 g) ja 0/3Thr0Me-HCl (0,35 g) kytkettiin yhteen käyttämällä standardin mukaista 91 90 3 46 DCC-menetelmää (esimerkki 55). Raakaa ainetta (0,62 g) käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR 8300 MHz, CDC13) delta 1,13 (d, J = 6 Hz, 3H), 3,63 (s, 3H), 4,38 (AB, 2H), 4,53 (m, 1H), 4,64 (m, 1H).
5 B. MorfoliinokarbonyyliOftThr
MorfoliinokarbonyyliPhe-O/SThr-metyyliesteri (0,62 g) saippuoitiin esimerkissä 55 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,41 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta .
10 NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,17 (d, J = 6 Hz), 4,43 (AB, 2H), 4,62 (m, 1H), 4,70 (m, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliPhe-0/3Thrnor-C-Sta-metyyli-esteri_
MorfoliinokarbonyyliPhe-Oy3Thr (99 mg) ja nor-C-15 StaOMe-HCl (44 mg) kytkettiin yhteen käyttämällä standardin mukaista DCC-reaktiota (esimerkki 55). Raaka aine puhdistettiin kromatografoimalla (CH2Cl2-etanoli 29:1), jolloin saatiin 97 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,16 (d, J = 6 Hz, 3H), 20 3,76 (s, 3H) , 4,30 (m, 1H) , 4,41 (m, 1H) , 4,46 (AB, 2H) .
Esimerkki 62
MorfoliinokarbonyyliPheNvanor-C-Sta-metyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-propyyli; X=sykloheksyyli; W=CH«MOH; ja Z^ = 25 C02CH3) A. MorfoliinokarbonyyliPheNva-metyyliesteri
MorfoliinokarbonyyliPhe (0,20 g) ja NvaOMe-HCl (0,10 g) kondensoitiin käyttämällä esimserkissä 55 selostettua DCC-menetelmää. Raaka aine kromatografoitiin Sioilla 30 (etyyliasetaatti-heksaani 4:1), jolloin saatiin 0,22 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,92 (t, J = 7 Hz, 3H), 3,65 (s, 3H), 4,42 (m, 1H), 4,54 (m, 1H).
B. MorfoliinokarbonyyliPheNva 15 MOrfoLiinokarbonyyliPheNva-metyyliesteri (0,22 g) saippuoitiin standardimenetelmän mukaisesti (esimerkki 55), 92 90 Zi6 jolloin saatiin 0,17 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR <300 MHz, CDC13) delta 0,89 (t, J = 7 Hz, 3H), 4,46 (m, 1H), 4,62 (m, 1H).
5 C. MorfoliinokarbonyyliPheNvanor-C-Sta-metyylies- teri _ MOrfoliinokarbonyyliPheNva (0,10 g) ja nor-C-StaOMe-HC1 (0,075 g) kytkettiin yhteen käyttämällä esimerkissä 55 selostettua DCC-menetelmää. Raaka tuote puhdistettiin kro-10 matografoimalla (C^C^-etanoli 29:1), jolloin saatiin 0,12 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,97 (t, J = 7 Hz, 3H), 3,72 (m, 3H), 4,29 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,53 (m, 1H) . Esimerkki 63 15 MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-n-propyyliami- di (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=butyyli; X=sykloheksyyli; W=CH*'»OH; ja Z*= CONH(CH2)2ch3) A. Boc-nor-C-Sta-n-propyyliamidi 20 Liuokseen, jossa oli 100 mg yhdistettä Boc-nor-C-
Sta ja 21 mg n-propyyliamiinia 5 ml:ssa kuivaa C^C^, lisättiin 54 mg HBT:tä ja 70 mg DEC:tä ja saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 20 tuntia. Liuos laimennettiin 200 ml:11a etyyliasetaattia ja pestiin 2 x 25 20 ml:lla H20:ta, 2 x 20 mlrlla 0,1-norm. HC1, 2 x 20 ml:lla 0,1-norm. NaOH. Orgaaninen faasi kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 142 g raakaa amidia, jota käytettiin enempää puhdistamatta .
30 NME (300 MHz, CDC13) delta 0,91 (t, J = 7 Hz, 3H), 1,40 (s, 9H), 3,85 (m, 1H), 4,04 (d, J = 3 Hz, 1H).
B. Nor-C-Sta-n-propyyliamidi-hydrokloridi Seosta, jossa oli 139 mg yhdistettä Boc-nor-C-
StaNHnPr 3 ml:ssa 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta, sekoi-35 tettiin huoneen lämpötilassa kolme tuntia. Liuos haihdu- 93 90346 tettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 96 mg raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-d6) delta 0,85 (t, J= 7 Hz, 3H), 3,06 (m, 2H), 4,03 (d, J = 3 Hz, 1H).
5 C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-n-propyyli- amidi__
MorfoliinokarbonyyliPheNle (135 mg) kytkettiin yhdisteeseen HCl-nor-C-Sta-NHnPr (96 mg) käyttämällä esimerkissä 58 selostettua DEC-menetelmää. Raaka tuote kromato-10 grafoitiin SiC^tlla (CH^C^-metanoli 9:1), jolloin saatiin 113 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13> delta 0,90 (t, J = 7 Hz, 3H), 4,08 (d, J = 7 Hz, 1H), 4,32 (m, 2H), 4,80 (m, 1H). Esimerkki 64 15 MorfoliinokarbonyyliPheNle-nor-C-Sta-i-propyyliami- di (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CH'MOH; Z^= conhch(CH^)2) A. Boc-nor-C-Sta-i-propyyliamidi 20 Isopropyyliamiini (29 mg) kytkettiin yhdisteeseen
Boc-nor-C-Sta (100 mg) käyttämällä esimerkissä 55 selostettua DCC-menetelmää. Raaka aine kromatografoitiin Sioilla (CH2C12 9:1), jolloin saatiin 73 mg puhdasta amidia.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,11 (d, J = 5 Hz, 3H), 25 1,12 (d, J = 5 Hz, 3H), 1,37 (s, 9H), 3,82 (m, 1H), 3,97 (m, 1H), 4,03 (m, 1H).
B. Nor-C-Sta-i-propyyliamidi-hydrokloridi Yhdisteestä Boc-nor-C-StaNHiPr (62 mg) poistettiin suojaus sekoittamalla 2 ml:ssa 4-norm. HCl:n dioksaani-30 liuosta kolme tuntia. Liuos haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 52 mg valkeaa kiinteää ainetta. Raakaa HCl-suolaa käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,10 (m, 6H), 3,92 (m, 1H), 3,98 (m, 1H).
94 90346 C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyyli-amidi_
MorfoliinokarbonyyliPheNle (48 mg) kytkettiin yhdisteeseen HCl-nor-C-Sta-NHiPr (48 mg) käyttämällä esimer-5 kissä 55 selostettua DCC-menetelmää. Raaka aine kromato-grafoitiin SiC^.’lla (CH^C^-metanoli 19:1), jolloin saatiin 60 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,09 (d, J = 6 Hz, 6H), 4,00 (m, 1H) , 4,03 (m, 3H) , 4,33 (m, 2H) .
10 Esimerkki 65
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-butyyliamidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CH''iOH; Z= conhcl^CH (CH^) ^) 15 A. Boc-nor-C-Sta-i-butyyliamidi
Isobutyyliamidi (49 L) kytkettiin yhdisteeseen Boc-nor-C-StaNHiBu (100 mg) käyttämällä esimerkissä 55 selostettua DCC-menetelmää. Raaka aine puhdistettiin kromato-grafoimalla (CH2Cl2-metanoli 9:1), jolloin saatiin 75 mg 20 puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 0,89 (d, J = 6 Hz, 6H) , 1,39 (s, 9H), 3,83 (m, 1H), 4,03 (m, 1H).
B. Nor-C-Sta-i-butyyliamidi-hydrokloridi
Yhdisteestä Boc-nor-C-StaNHiBu (173 mg) poistet- 25 tiin suojaus, kuten esimerkissä 64, jolloin saatiin 170 mg raakaa suolaa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-d,) delta 0,85 (d, J = 6 Hz, o 6H), 2,93 (m, 2H), 4,03 (m, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-butyyli- 30 amidi_
MorfoliinokarbonyyliPheNle (235 mg) kytkettiin yhdisteeseen HCl-nor-C-StaNHiBu (160 mg) käyttämällä DCC-menetelmää (esimerkki 55). Raaka tuote puhdistettiin kro-matografoimalla (CH2Cl2_metanoli 9:1), jolloin saatiin 35 152 mg puhdasta tuotetta.
95 90 346 NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,87 (d, J = 6 Hz, 6H), 4,08 (d, J = 3 Hz, 1H), 4,32 (m, 2H).
Esimerkki 66
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-N-metyyli-N-i-5 propyyliamidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M= fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W= CHMiOH; ja Z1=CON (CH3) CH) CH3> 2> A. Boc-nor-C-Sta-N-metyyli-N-i-propyyliamidi N-metyyli-N-isopropyyliamiini (44 mg) kytkettiin 10 yhdisteeseen Boc-nor-C-Sta (120 mg) käyttämällä DCC-mene-telmää (esimerkki 55). Raaka tuote kromatografoitiin (CH2Cl2-metanoli 39:1), jolloin saatiin 56 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDCl.^) delta 1,40 (s, 9H) , 2,89 (s, 15 3H), 4,74 (m, 1H).
B. Nor-C-Sta-N-metyyli-N-i-propyyliamidi-hydroklo- ridi_
Yhdisteestä Boc-nor-D-StaN(Me)iPr (56 mg) poistettiin suojaus, kuten esimerkissä 64, jolloin saatiin 52 mg 20 raakaa suolaa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,00 (s, 3H), 4,30 (s, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-N-metyyli- N-i-propyyliamidi_ 25 MorfoliinokarbonyyliPheNle (73 mg) kytkettiin yh disteeseen HCl-nor-C-Sta(Me)iPr (52 mg) käyttämällä DCC-menetelmää, jota on selostettu esimerkissä 55. Raaka aine puhdistettiin kromatografoimalla (CH2Cl2-metanoli 19:1), jolloin saatiin 99 mg puhdasta tuotetta.
30 NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,84 (s, 3H), 4,12 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,53 (m, 1H) .
90 3 46
Esimerkki 67
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-N-metyyli-N- i-butyyliamidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W= 5 CHMiOH; Z^CON (CH3) CH2CH (CH3) ) A. Boc-nor-C-Sta-N-metyyli-N-i-butyyliamidi N-metyyli-N-isobutyyliamiini (56 mg) kytkettiin yhdisteeseen Boc-nor-C-Sta (128 mg) käyttämällä esimerkissä 55 selostettua DCC-menetelmää. Raaka aine kromato-10 grafoitiin (CH2Cl2-metanoli 9:1), jolloin saatiin 130 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,38 (s, 9H), 3,03 (s, 3H), 4,28 (m, 1H).
B. Nor-C-Sta-N-metyyli-N-i-butyyliamidi-hydroklo- 15 ridi_
Yhdisteestä Boc-nor-C-StaN(Me)iBu (123 mg) poistettiin suojaus esimerkissä 55 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 118 mg raakaa suolaa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
20 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,67 (s, 3H) , 4,54 (m, 1H), 4,61 (m, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-N-metyyli- N-i-butyyliamidi__
MorfoliinokarbonyyliPheNle (173 mg) kytkettiin yh-25 disteeseen HCl-nor-C-StaN(Me)iBu (118 mg) käyttämällä esimerkissä 55 selostettua DCC-menetelmää. Raaka aine kroma-tografoitiin (CH2Cl2~metanoli 19:1), jolloin saatiin 184 mg puhdasta ainetta.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 3,04 (s, 3H) , 4,18 (m, 30 lii), 4,36 (m, 1U) , 4,43 (m, 1H) , 4,57 (m, 1H) .
97 90 346
Esimerkki 68
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-n-pentyyliami-di (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli,· X=sykloheksyyli; W=CHfiiOH; ja Z1 = 5 CONH(CH2)4CH3) A. Boc-nor-C-Sta-n-pentyyliamidi N-pentyyliamiini (29 mg) kytkettiin yhdisteeseen Boc-nor-C-Sta (100 mg) käyttämällä esimerkissä 63 selostettua DEC-menetelmää. Raakaa ainetta (128 mg) käytettiin 10 enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDCl3) delta 1,41 (s, 9H), 3,25 (m, 2H), 3,86 (m, 1H), 4,05 (m, 1H).
B. Nor-C-Sta-n-pentyyliamidi-hydrokloridi Yhdisteestä Boc-nor-C-StaNHnPn (128 mg) poistet- 15 tiin suojaus, kuten esimerkissä 63, jolloin saatiin 108 mg raakaa suolaa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,09 (m, 2H), 4,00 (d, J = 4 Hz, 1H) .
C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-n-pentyyli- 20 amidi_
MorfoliinokarbonyyliPheNle (138 mg) kytkettiin yhdisteeseen HCl-nor-C-StaNHnPn (108 mg) käyttämällä esimerkissä 58 selostettua DEC-menetelmää. Raaka aine kromato-grafoitiin (CH2Cl2-metanoli 19:1), jolloin saatiin 140 mg 25 puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,08 (m, 1H), 4,32 (m, 2H) , 4,74 (m, 1H) .
Esimerkki 69
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-N,N-bisetylee-30 nioksiamidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M= fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W= CHtMOH; ja Z1=C0N (CH2CH2) 2<D) A. Boc-nor-Sta-N,N-bisetyleenioksiamidi Morfoliini (43 mg) kytkettiin yhdisteeseen Boc-nor-35 C-Sta (100 mg) käyttämällä standardin mukaista DCC-mene-telmää (esimerkki 55). Raaka aine kromatografoitiin 98 90 3 46 (etyyliasetaatti-heksaani 4:1), jolloin saatiin 134 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13> delta 1,36 (s, 9H), 4,06 (d, J = 5 Hz, 1H), 4,22 (br, 1H).
5 B. Nor-C-Sta-N,N-bisetyleenioksiamidi-hydrokloridi
Yhdisteestä Bocnor-C-StaMr (122 mg) poistettiin suojaus standardin menetelmän mukaisesti (esimerkki 63), jolloin saatiin 125 mg raakaa suolaa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
10 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,34 (d, J = 5 Hz, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-N,N-bisety- leenioksiamidi_
MorfoliinokarbonyyliPheNle (142 mg) kytkettiin yhdisteeseen HCl-nor-C-StaMr (101 mg) käyttämällä standar-15 din mukaista DCC-menetelmää (esimerkki 55). Raaka aine puhdistettiin kromatografoimalla (CH2Cl2~etanoli 19:1), jolloin saatiin 72 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,16 (m, 1H), 4,25 (br, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,48 (m, 1H), 4,97 (m, 1H).
20 Esimerkki 70
MorfoliinoPheNlenor-C-Sta-N,N-bisetyleeni-N'-me-tyyliatsa-amidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CHliiOH; ja Z1=CON(CH2CH2)2N-CH3) 25 A. Bocnor-C-Sta-N,N-bisetyleeni-N'-metyyliatsa- amidi_ 1-metyylipiperatsiini (50 mg) kytkettiin yhdisteeseen Boc-nor-C-Sta (100 mg) käyttämällä tavallista DCC-reaktiota (esimerkki 55). Raaka aine kromatografoitiin 30 (CH2Cl2~etanoli 9:1), jolloin saatiin 118 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 1,36 (s, 9H) , 2,30 (s, 3H), 3,96 (m, 1H), 4,24 (s, 1H).
99 90346 B. Nor-C-Sta-N,N-bisetyleeni-N1-metyyliatsa-amidi- hydrokloridi_
Yhdisteestä Boc-nor-C-StaMePiP (118 mg) poistettiin suojaus käyttämällä tavallisia olosuhteita (esimerkki 63), 5 jolloin saatiin 113 mg raakaa suolaa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,48 (s, 3H), 4,22 (m, 1H), 4,39 (m, 2H).
C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-N,N-bisety- 10 leeni-N *-metyyliatsa-amidi _
MorfoliinokarbonyyliPheNle (133 mg) kytkettiin yhdisteeseen HCl-nor-C-StaMePiP (105 mg) käyttämällä tavallista DCC-reaktiota (esimerkki 55). Raaka aine kromato-grafoitiin (CH2Cl2-etanoli 9:1), jolloin saatiin 110 mg 15 puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,33 (s, 3H), 4,17 (m, 1H), 4,31 (m, 2H), 4,52 (m, 1H).
Esimerkki 71
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyylies-20 teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CH'MOH; ja z1=co2ch(ch3)2) A. Nor-C-Sta-i-propyyliesteri-hydrokloridi
Liuos, jossa oli 100 mg yhdistettä Boc-nor-C-Sta 25 2 mlrssa kuivaa isopropanolia kyllästettiin kuivalla HCl:llä ja saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön ajan. Reaktioseos haihdutettiin kuiviin vakuu-missa, jolloin saatiin 98 mg raakaa suolaa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
30 NMR (300 MHz, DMS0-dg) delta 1,20 (d, J = 6 Hz, 6H), 3,28 (m, 1H), 4,05 (d, J = 5 Hz, 1H), 4,92 (m, 1H).
B. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-isopropyy- liesteri_
MorfoliinokarbonyyliPheNle (142 mg) kytkettiin yh-35 disteeseen HCl-nor-C-StaOiPr (92 mg) käyttämällä tavallista DCC-reaktiota (esimerkki 55). Raaka aine kromatografoi- 100 90 346 tiin (Cf^Cl^-etanoli 9:1), jolloin saatiin 60 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13> delta 1,24 (d, J = 7 Hz, 6H), 4,06 (br, 1H), 4,19 (m, 1H), 4,43 (m, 2H), 5,00 (m, 1H).
5 Esimerkki 72
MorfoliinokarbonyyliPheO-MeSernor-C-Sta-i-propyyli- esteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3OCH2-; X=sykloheksyyli; W=CHiIlOH; ja z1=co2ch(ch3)2) 10 A. MorfoliinokarbonyyliPheOMeSer-metyyliesteri
MorfoliinokarbonyyliPhe (0,5 g) kytkettiin yhdisteeseen DL-O-metyyliseriiniOMe (0,34 g) käyttämällä tavallista DEC-reaktiota, jota on selostettu esimerkissä 58. Raakaa ainetta (0,37 g) käytettiin enempää puhdistamatta. 15 NMR (yksi isomeeri) (300 MHz, CDC13) delta 3,24 (s, 3H), 3,76 (s, 3Η), 4,65 (m, 1Η).
B. MorfoliinokarbonyyliPheO-MeSer
MorfoliinokarbonyyliPheOMSerOMe (0,37 g) saippuoitiin esimerkissä 55 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 20 0,16 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdista matta .
NMR (yksi isomeeri) (300 MHz, CDC13> delta 3,18 (s, 3H), 4,58 (m, 1Η), 4,73 (m, 1Η).
C. MorfoliinokarbonyyliPheO-MeSernor-C-Sta-i-pro- 25 pyyliesteri___
MorfoliinokarbonyyliPheOMeSer (0,15 g) kytkettiin yhdisteeseen HCl-nor-C-StaOiPr (0,10 g) käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 58). Raaka aine kroma-tografoitiin (CH2Cl2-etanoli 29:1), jolloin saatiin 43 mg 30 raakaa tuotetta ja 36 mg seriiniepimeeriä.
NMR (pääisomeeri) (300 MHz, CDC13) delta 3,14 (s, 3H) , 4,13 (m, 2H), 4,45 (m, 2H), 4,96 (m, 2H) .
101 90346
Esimerkki 73
MorfoliinokarbonyyliPheO-EtSernor-C-Sta-i-propyyli- esteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R^CH^Cf^OCi^-; X=sykloheksyyli; W=CHMiOH; 5 ja Z1=C02CH(CH3)2) A. BocO-EtSer
Liuokseen, jossa oli 0,94 g yhdistettä BocSer 66 ml:ssa THF, lisättiin liuos, jossa oli 1,47 g Na-metylaat-tia 2,6 ml:ssa metanolia, sen jälkeen 11,7 g etyylijodi-10 dia. 15 minuutin kuluttua lisättiin vielä lisää Na-mety-laattia (0,49 g) ja etyylijodidia (2 ml) ja reaktioseosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön ajan. Lisättiin vielä Na-metylaattia ja etyylijodidia ja reaktioseosta sekoitettiin vielä kuusi tuntia. Seos haihdutettiin kuiviin 15 vakuumissa, liuotettiin 25 ml:aan H20:ta ja pestiin 2 x 25 ml :11a eetteriä. Vesifaasi tehtiin happameksi väkevällä HC1:1lä ja uutettiin 4 x 25 ml:lla CH2C12- Yhdistetyt uutteet kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa 0,34 g:ksi raakaa tuotetta, jota 20 käytettiin edelleen.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,19 (t, J = 7 Hz, 3H), 1,46 (s, 9H) , 3,53 (q, J = 7 Hz, 2H) , 4,43 (m, 1H) .
B. O-EtSer-metyyliesteri-hydrokloridi
Liuos, jossa oli 0,51 g yhdistettä BocEtSer 25 25 ml:ssa kuivaa metanolia, kyllästettiin kuivalla HClrlla ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 18 tuntia. Liuos haihdutettiin kuiviin vakuumissa ja kiinteä jäännös kiteytettiin uudelleen (etanoli/eetteri), jolloin saatiin 0,31 g puhdasta suolaa.
30 NMR (300 MHz, DMSO-dc) delta 1,10 (t, J = 8 Hz, Ό 3H), 3,48 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 4,28 (m, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliO-EtSer-metyyliesteri
MorfoliinokarbonyyliPhe (0,36 g) kytkettiin yhdisteeseen HCl-OEtSerOMe (0,25 g) käyttämällä tavallista 35 DEC-reaktiota (esimerkki 58). Raaka aine kromatografoi- 9 n ^ 4 6 102 * L " * 0 tiin (CH2Cl2-etanoli 19:1), jolloin saatiin 0,22 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,10 (t, J = 7 Hz, 3H), 3,41 (q, J = 7 Hz, 2H) , 3,73 (s, 3H) , 4,62 (m, 2H) .
5 D. MorfoliinokarbonyyliPheO-EtSer
MorfoliinokarbonyyliPheOEtSerOMe (0,22 g) saippuoitiin esimerkissä 55 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,15 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta .
10 NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,12 (2t, 3H), 4,62 (m, 1H) , 4,72 (m, 1H).
E. MorfoliinokarbonyyliPheO-EtSernor-C-Sta-i-pro- pyyliesteri_ MOrfoliinokarbonyyliPheOEtSer (75 mg) kytkettiin 15 yhdisteeseen HCl-nor-C-StaOiPr (54 mg) käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 58). Raaka aine kromato-grafoitiin (CH2Cl2-etanoli 19:1), jolloin saatiin 50 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 1,12 (t, J = 7 Hz, 3H) , 20 3,44 (q, J = 7 Hz, 2H), 4,30 (m, 1H), 4,43 (m, 2H), 5,04 (m, 1H).
Esimerkki 74
MorfoliinokarbonyyliPhe-tetrametyleeniGlynor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyli-25 amino; M=fenyyli; Q=H; R2=-(CH2)4-; X=sykloheksyy- li; W=CHMi0H; Z1=C02CH(CH3) 2) A. Tetrametyleeniglysiini-metyyliesteri-hydroklo- ridi_
Liuos, jossa oli 2,5 (X-tetrametyleeniGly-yhdistet-30 tä 30 ml:ssa metanolia, kyllästettiin kuivalla HCl:lla ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 60 tuntia. Liuos haihdutettiin kuiviin vakuumissa ja jäännös kiteytettiin uudelleen eetteri-etanoliseoksesta, jolloin saatiin 2,4 g puhdasta tuotetta.
35 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,77 (s, 3H).
103 90 346 B. MorfoliinokarbonyyliPheTMGly-metyyliesteri MorfoliinokarbonyyliPhe (0,50 g) kytkettiin yhdisteeseen HCl-TMGlyOMe (0,36 g) käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 58). Raakaa ainetta (0,48 g) käytet- 5 tiin enempääpuhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,67 (s, 3H), 4,57 (m, 2H), 5,51 (d, J = 6 Hz, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliPheTMGly
MorfoliinokarbonyyliPheTMGlyOMe (0,48 g) saippuoi- 10 tiin esimerkissä 55 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,43 g raakaa happoa, jota käytettiin edelleen enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,39 (m, 2H), 6,55 (d, J = 8 Hz, 1H).
15 D. MorfoliinokarbonyyliPheTMGlynor-C-Sta-i-propyy- liesteri_
MorfoliinokarbonyyliPheTMGly (0,11 g) kytkettiin yhdisteeseen HCl-nor-C-StaOiPr (0,10 g) käyttämällä tavallista DEC-reaktiota, jota on selostettu esimerkissä 58.
20 Raaka aine kromatografoitiin (etyyliasetaatti-heksaani 3:1), jolloin saatiin 70 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 4,21 (m, 1H), 4,47 (m, 1H) , 4,98 (m, 2H).
Esimerkki 75 25 MorfoliinokarbonyyliPhePGlynor-C-Sta-i-propyylies- teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3(CH2>; X=sykloheksyyli; W=CHimOH; ja Z1=C02CH(CH3)2) A. PGly-etyyliesteri 30 Liuosta, jossa oli 10 g GlyOEt-bentsofenoni-imii- niä, 8 g jodipentaania ja 14 g yhdistettä nBu4NH-HSC>4 150 ml:ssa CH2C12 ja 33 ml:ssa 10-%:ista NaOH, sekoitettiin huoneen lämpötilassa 16 tuntia. Orgaaninen faasi erotettiin, kuivattiin MgSO^illa, suodatettiin ja haihdutet- 35 tiin kuiviin vakuumissa. Jäännös liuotettiin 50 ml:aan THF ja 50 ml:aan 0,1-norm. HC1 ja sekoitettiin huoneen 104 90346 lämpötilassa 24 tuntia. Seos konsentroitiin vesiliuokseksi ja pestiin 3 x 50 ml:lla eetteriä. Vesifaasi tehtiin alkaliseksi ja uutettiin 3 x 50 ml :11a CI^C^. Yhdistetyt uutteet kuivattiin MgSO^tlla, suodatettiin ja haihdutet-5 tiin kuiviin. Jäännös kromatografoitiin (etyyliasetaatti-heksaani 1:1), jolloin saatiin 0,51 g puhdasta tuotetta. Vastaavaa HCl-suolaa valmistettiin käsittelemällä edellä saatua amiinia kuivan HCl:n eetteriliuoksen kanssa.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,05 (t, J = 7 Hz, 3H) , 10 1,77 (m, 2H) , 3,97 (m, 1H) , 4,20 (m, 2H) .
B. MorfoliinokarbonyyliPhePGly-etyyliesteri
MorfoliinokarbonyyliPhe (0,40 g) kytkettiin yhdisteeseen HCl-PGlyOEt (0,33 g) käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 58). Raaka aine kromatografoitiin 15 (etyyliasetaatti-heksaani 1:3), jolloin saatiin 0,40 g tuotetta diastereomeerien seoksena kohdalla PGly.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 4,13 (m, 2H) , 4,42 (m, 1H9, 4,57 (m, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliPhePGly 20 MOrfoliinokarbonyyliPhePGlyOEt saippuoitiin esi merkissä 55 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,33 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,43 (m, 2H), 4,72 (m, 1H), 4,93 (m, 1H).
25 D. MorfoliinokarbonyyliPhePGlynor-C-Sta-i-propyy- liesteri_
MorfoliinokarbonyyliPhePGly (0,16 g) kytkettiin yhdisteeseen HCl-nor-C-StaOiPr (0,10 g) käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 58). Raaka aine kromato-30 grafoitiin (etyyliasetaatti-heksaani 1:1), jolloin saatiin 0,11 g haluttua L-tuotetta ja 0,078 g D-isomeeriä.
NMR (pääisomeeri) (300 MHz, CDCl^) delta 2,27 (d, J = 7 Hz, 6H) , 4,25 (m, 1H) , 4,46 (m, 1H) , 4,53 (m, 1H) , 5,03 (m, 2H).
105 90 346
Esimerkki 76
MorfoliinokarbonyyliPheO-MeHsenor-C-Sta-i-propyyli- esteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH30(CH2) 2-; X=sykloheksyyli; W=CH'M0H; 5 ja Z1=C02CH(CH3)2) A. Boc-Q-metyylihomoseriini
Boc-homoseriini (0,51 g) metyloitiin, kuten on selostettu Boc-seriinin osalta esimerkissä 73. Näin saatiin 0,45 g raakaa tuotetta, jota käytettiin edelleen enempää 10 puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,40 (s, 9H), 3,16 (s, 3H), 3,90 (m, 2H).
B. BocO-MeHsenor-C-Sta-i-propyyliesteri
BocOMHser (0,45 g) kytkettiin yhdisteeseen nor-C- 15 StaOiPr (0,5 g) käyttämällä esimerkissä 58 selostettua DEC-menetelmää, paitsi että ei käytetty TEA:ta. Raaka aine kromatografoitiin (etyyliasetaatti-heksaani 1:1), jolloin saatiin 0,52 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,21 (d, J = 7 Hz, 6H), 20 1,38 (s, 9H), 3,27 (s, 3H), 4,19 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,96 (m, 1H).
C. O-MeHsenor-C-Sta-i-propyyliesteri
Yhdisteestä VocOMeHser-nor-C-StaOiPr (0,52 g) poistettiin suojaus käyttämällä tavallisia HCl/dioksaaniolosuh- 25 teitä, joita on selostettu esimerkissä 63. Näin saatiin 0,66 g raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,18 (d, J= 7 Hz, 6H), 3,24 (s, 3H), 4,18 (m, 1H), 4,80 (m, 1H).
30 D. MorfoliinokarbonyyliPheO-MeHsenor-C-Sta-i-pro- pyyliesteri_ MOrfoliinokarbonyyliPhe (0,19 g) kytkettiin yhdisteeseen HCl-OMeHsenor-C-StaOiPr (0,20 g) käyttämällä tavallista esimerkissä 58 selostettua DEC-menetelmää. Raaka 35 aine kromatografoitiin (CH2Cl2-metanoli 29:1), jolloin saatiin 0,31 g puhdasta tuotetta.
106 90 3 46 NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 1,23 (d, J = 7 Hz, 3H) , 1,25 (d, J = 7 Hz, 3H), 3,19 (s, 3H), 4,29 (m, 1H), 4,42 (m, 2H), 5,04 (m, 1H).
Esimerkki 77 5 MorfoliinokarbonyyliPheHsenor-C-Sta-i-propyylies- teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=HO(CH2>2~? X=sykloheksyyli; W=CH'M0H; ja z1=co2ch(ch3)2) A. BocO-bentsyylihomoseriini 10 BocHse (0,51 g) bentsyloitiin, kuten on selostettu
Ser:n osalta esimerkissä 73. Näin saatiin 0,42 g raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,38 (s, 9Η), 4,10 (m, 1Η), 4,45 (AB, 2H).
15 B. BocO-bentsyylihomoseriininor-C-Sta-i-propyylies- teri_
BocO-bentsyyliHse (0,40 g) kytkettiin yhdisteeseen nor-C-StaOiPr (0,50 g) käyttämällä esimerkissä 76 selostettua DEC-reaktiota. Raaka tuote kromatografoitiin (etyy- 20 liasetaatti-heksaani 1:1), jolloin saatiin 0,53 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,22 (d, J = 7 Hz, 6H), 1,40 (s, 9H), 4,10 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,45 (m, 2H), 4,96 (m, 1H).
25 C. O-bentsyylihomoseriininor-C-Sta-i-propyylieste- ri-hydrokloridi_
Yhdisteestä BocO-bentsyyliHse-nor-C-StaOiPr (0,53 g) poistettiin suojaus esimerkissä 76 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,54 g raakaa suolaa, jota käytettiin 30 enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,17 (d, J = 7 Hz, 3H), 1,18 (d, J = Hz, 3H), 4,21 (m, 1H), 4,47 (m, 2H), 4,80 (m, 1H).
107 90 3 46 D. MorfoliinokarbonyyliPheO-bentsyylihomoseriini- nor-C-Sta-i-propyyliesteri_____
MorfoliinokarbonyyliPhe (0,53 g) kytkettiin yhdisteeseen HCl-O-bentsyyliHse-nor-C-StaOiPr (0,54 g) käyttä-5 mällä esimerkissä 76 selostettua DEC-reaktiota. Raaka aine kromatografoitiin (Cl^C^-inetanoli 19:1), jolloin saatiin 0,40 g raakaa tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,24 (d, J = 7 Hz, 3H) , 1,27 (d, J = 7 Hz, 3H), 4,28 (m, 1H), 4,39 (AB, 2H), 4,48 10 (m, 2H) , 5,04 (m, 1H) .
E. MorfoliinokarbonyyliPheHsenor-C-Sta-i-propyyli- esteri___
Seosta, jossa oli 0,39 g yhdistettä morfoliinokar-bonyyliPheO-bentsyyliHse-nor-C-StaOiPr ja 1,0 g 10-%:ista 15 Pd/C:tä 40 mlrssa metanolia, hydrattiin 50 psi:n paineessa seitsemän tuntia. Seos suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa ja jäännös kromatografoitiin (CH2Cl2-me-tanoli 19:1), jolloin saatiin 91 mg puhdasta tuotetta vähäisen reagoimattoman lähtöaineen kanssa.
20 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,17 (d, J = 7 Hz, 3H), 1,19 (d, J = 7 Hz, 3H), 4,29 (m, 2H), 4,47 (m, 1H), 4,83 (m, 1H).
Esimerkki 78
MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCys-oksidinor-C-Sta-i-25 propyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SOCH2-; X=sykloheksyyli; W=CH'>'OH; ja Z1=C02CH(CH3)2)
Liuosta, jossa oli 84 mg yhdistettä morfoliinokar-bonyyliPheSMeCysnor-C-StaOiPr (esimerkki 17) ja 24 mg yh-30 distettä m-CPBA 10 ml:ssa C^C^, sekoitettiin 0°C:ssa 30 minuuttia. Liuos laimennettiin 30 ml :11a etyyliasetaattia ja pestiin 2 x 15 ml :11a 10-%:ista Na2SC>3 ja kerran 15 ml:lla 0,1-norm. NaOH. Orgaaninen faasi kuivattiin MgS04:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin vakuumis-35 sa ja jäännös kromatografoitiin (CH2Cl2~etanoli 17:3), jolloin saatiin 40 mg puhdasta tuotetta.
9 O 34 6 108 NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,29 (d, J = 7 Hz, 6H), 2,78 (s, 3H), 4,37 (m, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,77 (m, 1H), 5,00 (m, 1H) .
Esimerkki 79 5 MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysdioksidinor-C-Sta-i- propyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3S02CH2-; X=sykloheksyyli; W=CII» i i OH; ja Z^CC^CH (CH3> ^
Liuosta, jossa oli 20 mg yhdistettä morfoliinokar-10 bonyyliPheSMeCys-nor-C-StaOiPr (esimerkki 17) ja 16 mg yhdistettä m-CPBA 3 ml:ssa CH2C12, sekoitettiin 0°C:ssa 30 minuuttia. Reaktioseosta käsiteltiin edelleen, kuten esimerkissä 78 ja jäännös kromatografoitiin (CH2Cl2-etanoli 19:1), jolloin saatiin 13 mg puhdasta tuotetta.
15 NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,28 (d, J = 7 Hz, 3H), 1,30 (d, J = 7 Hz, 3H), 3,00 (s, 3H), 4,26 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,85 (m, 1H), 5,06 (m, 1H).
Esimerkki 80
MorfoliinokarbonyyliPheSernor-C-Sta-i-propyylies-20 teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=HOCH2~; X=sykloheksyyli; W=CH»»iOH; ja z1=co2ch(ch3)2) A. MorfoliinokarbonyyliPheO-sukkiini-imidi
Liuokseen, jossa oli 25 g yhdistettä morfoliino- 25 karbonyyliPhe ja 15,5 g N-hydroksisukkiini-imidiä 800 ml:ssa CH2Cl2, lisättiin 19 g DEC:tä. 20 tunnin sekoittamisen jälkeen huoneen lämpötilassa liuos pestiin 2 x 200 ml:lla kyllästettyä NaHC03, kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Näin saa-30 tiin 29 g raakaa tuotetta valkeana kiinteänä aineena.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,78 (m, 4H), 4,81 (d, J = 8 Hz, 1H), 5,09 (m, 1H).
B. MorfoliinokarbonyyliPheSer
Liuos, jossa oli 0,50 g yhdistettä morfoliinokar-35 bonyyliPheOSuc 5 ml:ssa THF, lisättiin liuokseen, jossa oli 0,30 g yhdistettä Ser 10 ml:ssa kyllästettyä NaHCC>3 109 90 346 ja saatua seosta sekoitettiin 15 minuuttia. Reaktioseos laimennettiin 30 mlrlla 0,1-norm. NaOH ja pestiin 3 x 40 mlrlla CH2C12· Vesifaasi tehtiin happamaksi väkevällä HCl:lla ja uutettiin 6 x 75 ml :11a etyyliasetaattia. Yh-5 distetyt uutteet kuivattiin MgSO^slla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,40 g raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,66 (m, 2H), 4,25 (m, 1H), 4,37 (m, 1H).
10 C. MorfoliinokarbonyyliPheSernor-C-Sta-i-propyy- liesteri__
MorfoliinokarbonyyliPheSer (0,39 g) kytkettiin yhdisteeseen nor-C-StaOiPr (0,33 g) käyttämällä esimerkissä 76 selostettua DEC-menetelmää. Raaka aine kromatografoi- 15 tiin (CU2C1^-etanoli 24:1), jolloin saatiin 0,23 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,13 (d, J = 7 Hz, 3H), 1,15 (d, J = 7 Hz, 3H), 3,94 (m, 1H), 4,20 (m, 2H), 4,30 (m, 1H) , 4,88 (m, 1H) , 4,80 (m, 1H) .
20 Esimerkki 81
MorfoliinokarbonyyliPheAlanor-C-Sta-i-propyylies-teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3; X=sykloheksyyli; W=CH!MOH; ja Z1 = co2ch(ch3)2) 25 A. MorfoliinokarbonyyliPheAla
Alaniinin (0,24 g) ja yhdisteen morfoliinokarbonyy-liPheOSuc (0,50 g) annettiin reagoida esimerkissä 80 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,15 g raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
30 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta (d, J = 7 Hz, 3H), 4,20 (m, 1H), 4,32 (m, 1H).
B. MorfoliinokarbonyyliPheAlanor-C-Sta-i-propyyli- esteri_
MorfoliinokarbonyyliPheAla (0,15 g) kytkettiin yh- 35 disteeseen nor-C-StaOiPr (0,13 g) käyttämällä esimerkissä 76 selostettua DEC-menetelmää. Raaka aine kromatografoi- 90346 110 tiin (C^C^-etanoli 24:1), jolloin saatiin 0,18 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,26 (d, J = 7 Hz, 3H), 4,29 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,48 (m, 1H), 4,96 (m, 1H).
5 Esimerkki 82
MorfoliinokarbonyyliPheGlnnor-C-Sta-i-propyylies-teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; 1*2= (CH2) 2CONH2 ? X=sykloheksyyli; W=CH,',OH; ja Z1=C02CH(CH3)2) 10 A. MorfoliinokarbonyyliPheGln
Glutamiinin (0,30 g) annettiin reagoida yhdisteen morfoliinokarbonyyliPheOSuc (0,50 g) kanssa esimerkissä 80 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,37 g raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
15 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,43 (m, 4H), 4,15 (m, 1H), 4,31 (m, 1H).
B. MorfoliinokarbonyyliPheGlnnor-C-Sta-i-propyyli- esteri_
MorfoliinokarbonyyliPheGln (0,37 g) kytkettiin yh-20 disteeseen nor-C-StaOiPr (0,24 g) käyttämällä esimerkissä 76 selostettua DEC-menetelmää. Raaka aine kromatografoltiin (CH2Cl2-etanoli 9:1), jolloin saatiin 0,18 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,17 (d, J = 7Hz, 6H), 25 3,94 (m, 1H), 4,8 (m, 2H), 4,25 (m, 1H), 4,80 (m, 1H).
Esimerkki 83
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-3-metyyli-2-propanoliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli,· W= 30 CHMiOH; Z^CC^CH (CH3) CH (CH3) 2) A. Nor-C-Sta-3-metyyli-2-propanoliesteri-hydroklo- ridi_
Liuos, jossa oli 100 mg yhdistettä Boc-nor-C-Sta 5 ml:ssa 3-metyyli-2-propanolia, kyllästettiin kuivalla 35 HCl:lla ja sekoitettiin yön ajan. Liuos haihdutettiin 111 90346 kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 89 mg raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,17 (d, J = 7 Hz, 3H), 4,10 (m, 1H), 4,70 (m, 1H).
5 B. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-3-metyyli-3- propanoliesteri__
MorfoliinokarbonyyliPheNle (113 mg, esimerkki 63) kytkettiin yhdisteeseen HCl-nor-C-Sta, 3-metyyli-2-propa-noliesteri (89 mg) käyttämällä esimerkissä 58 selostettua 10 tavallista DEC-reaktiota. Raaka tuote kromatografoitiin (CH2Cl2-metanoli 19:1), jolloin saatiin 79 mg puhdasta tuotetta diastereomeerien seoksena kohdalla esteri-metyyli.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,13 (d, J = 6 Hz, 3H), 4,15 (m, 1H), 4,71 (m, 1H).
15 Esimerkki 84
MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-i-butyyli-esteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2“; X=sykloheksyyli; W=CHiitOH; ja z1=ch2ch(ch3)2) 20 A. nor-fenyyliSta-i-butyyliesteri
Liuos, jossa oli N-Boc-2(R)-hydroksi-3(S)-amino-4-fenyylibutaaninitriiliä (1,0 g) 40 mlrssa isobutyylialko-holia, kyllästettiin kuivalla HCl:lla ja sekoitettiin 48 tuntia huoneen lämpötilassa. Liuos haihdutettiin kuiviin 25 ja jäännös laimennettiin 100 ml:11a 0,1-norm. HC1. 15 minuutin sekoittamisen jälkeen liuos pestiin 2 x 100 ml:11a eetteriä. Vesifaasi tehtiin emäksiseksi ja uutettiin 2 x 100 ml:11a etyyliasetaattia. Yhdistetyt uutteet kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin vakuumis-30 sa, jolloin saatiin 0,43 g raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,93 (d, J = 6 Hz, 3H), 3,34 (m, 1H), 3,97 (m, 2H), 4,07 (d, J = 3 Hz, 1H).
B. nor-C-Sta-i-butyyliesteri 35 Seosta, jossa oli 95 mg yhdistettä nor-PhStaOiBu ja 190 mg 10-%:ista Rh/C:tä 5 ml:ssa metanolia, hydrattiin 112 90346 50 psi:n paineessa 36 tuntia. Seos suodatettiin Celiten läpi ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 50 ml:aan 0,1-nomr. HC1 ja pestiin 2 x 50 ml:11a eetteriä. Vesifaasi tehtiin emäksiseksi ja uutettiin 2 x 50 ml:11a 5 etyyliasetaattia. Yhdistetyt uutteet kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 74 mg raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta .
NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,92 (d, J = 6 Hz, 3H), 10 4,03 (m, 2H).
C. MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-i-bu-tyyliesteri_
MorfoliinokarbonyyliPheSMeCys (113 mg, esimerkki 58) kytkettiin yhdisteeseen nor-C-StaOiBu (70 mg) käyttä-15 mällä esimerkissä 76 selostettua DEC-menetelmää. Raaka aine kromatografoitiin (CH2Cl2-metanoli 19:1), jolloin saatiin 127 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,95 (d, J = 6 Hz, 3H), 2,13 (s, 3H) , 3,95 (m, 2H) , 4,43 (m, 2H) .
20 Esimerkki 85
MorfoliinokarbonyyliPheSMe Cysnor-C-Sta-t-butyyli- esteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-? X=sykloheksyyli; W=CH(iiOH; ja z1=co2c(ch3)3) 25 A. nor-fenyyliSta-t-butyyliesteri
Noudatettiin yhdisteen norPhStaOiBu valmistusmenetelmää (esimerkki 83) käyttämällä 3,0 g nitriiliä 200 ml:ssa t-butanolia. Näin saatiin jatkokäsittelyn jälkeen 184 mg raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
30 NMR (300 MHz, CDC13) delta (s, 9H), 3,64 (m, 1H), 3,83 (d, J = 3 Hz, 1H).
B. nor-C-Sta-t-butyyliesteri
Yhdistettä nor-PheStaOtBu (75 mg) hydrattiin, kuten esimerkissä 83, jolloin saatiin 64 mg raakaa tuotetta 35 jatkokäsittelyn jälkeen.
113 90 346 NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,32 (s, 9H), 3,47 (m, 1H) , 3,18 (br, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-t-bu- tyyliesteri_ 5 MOrfoliinokarbonyyliPheSMeCys (97 mg, esimerkki 58) kytkettiin 60 mg:aan yhdistettä nor-C-StaOtBu käyttämällä esimerkissä 76 selostettua DEC-menetelmää. Raaka aine kro-matografoitiin (CH2Cl2“metanoli 19:1), jolloin saatiin 50 mg puhdasta tuotetta.
10 NMR (300 MHz, CDCl3) delta 1,35 (s, 9H), 2,13 (s, 3H), 3,98 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,57 (m, 2H).
Esimerkki 86
MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-N-metyyli- amidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; 15 Q=H; R2=CH3SCH2; X=sykloheksyyli; W=CH,'OH; ja z1=conhch3) A. Boc-nor-Sta-N-metyyliamidi
Boc-nor-C-Sta (0,25 g) kytkettiin 57 mg:aan metyy-liamiini-HCl käyttämällä esimerkissä 55 selostettua taval-20 lista DCC-reaktiota. Raaka aine kromatografoitiin (etyy-liasetaatti-heksaani 2:1), jolloin saatiin 0,16 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,31 (s, 9H), 2,82 (d, J = 5 Hz, 3H), 3,85 (m, 1H).
25 B. nor-C-Sta-N-metyyliamidi
Yhdisteestä Boc-nor-C-StaNHMe (0,16 g) poistettiin suojaus käyttämällä HCl:n dioksaaniliuosta esimerkissä 63 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,13 g raakaa suolaa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
30 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 2,62 (s, 3H), 3,97 (d, J = 4 Hz, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-N-me-tyyliamidi_ MOrfoliinokarbonyyliPheSMeCys (98 mg, esimerkki 58) 35 kytkettiin 73 mg:aan yhdistettä HCl-nor-C-StaNHMe käyttämällä esimerkissä 58 selostettua DEC-menetelmää. Raaka aine 114 90346 kromatografoitiin (CH2Cl2-etanoli 19:1), jolloin saatiin 52 mg tuotetta SMCys-epimeerien seoksena.
NMR (yksi isomeeri) (300 MHz, CDCl^) delta 2,02 (s, 3H) , 2,79 (d, J = 5 Hz, 3H), 4,29 (m, 1H), 4,57 (m, 2H).
5 Esimerkki 87
MorfoliinokarbonyyliPhe-MeCysnor-Ph-Sta-i-propyyli-esteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2; X=fenyyli; W=CH'''OH; ja Z1= co2ch(ch3)2) 10 A. nor-fenyyli-Sta-i-propyyliesteri
Yhdistettä nor-Ph-StaOiPr valmistettiin 118 mg:sta nitriiliä samalla tavalla kuin isobutyyliesteriä (esimerkki 84). Saatiin 89 mg raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
15 NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,26 (d, J = 7 Hz, 6H), 3,30 (m, 1H), 4,01 (d, J = 2 Hz, 1H), 5,10 (m, 1H).
B. MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-fenyyli-Sta-i- propyyliesteri_
MorfoliinokarbonyyliPheSMeCys (0,96 g, esimerkki 58) 20 kytkettiin 0,55 g:aan yhdistettä nor-PhStaOiPr käyttämällä esimerkissä 76 selostettua DEC-menetelmää. Raaka aine kromatografoitiin (CH2Cl2-metanoli 19:1), jolloin saatiin 0,91 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,18 (d, J = 7 Hz, 3H), 25 1,21 (d, J = 7 Hz, 3H), 2,00 (s, 3H), 4,41 (m, 2H), 4,49 (m, 1H) , 5,00 (m, 1H) .
Esimerkki 88
MorfoliinokarbonyyliO-MeTyrNlenor-C-Sta-i-propyy-liesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=p-metok-30 sifenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W= CHMiOH; ja Z1=C02CH (CH3) 2) A. BocO-MeTyr-metyyliesteri
Liuosta, jossa oli 7,3 g yhdistettä BocTyr 100 ml:ssa metanolia, käsiteltiin suuren ylimäärän kanssa 35 diatsometaania 250 ml:ssa eetteriä. Ajankohtina 24 tuntia ja 48 tuntia lisättiin lisää diatsometaania. Kaikkiaan 115 90346 72 tunnin kuluttua reaktio sammutettiin etikkahapolla, haihdutettiin kuiviin, laimennettiin 100 ml:11a etyyliasetaattia ja pestiin 2 x 50 ml:11a kyllästettyä NaHC03· Orgaaninen faasi kuivattiin MgS04:lla, suodatettiin ja 5 haihdutettiin kuiviin. Jäännös kromatografoitiin (hek-saani:etyyliasetaatti 9:1), jolloin saatiin 6,4 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,42 (s, 9H), 3,69 (s, 3H), 3,76 (m, 3H), 4,51 (m, 1H).
10 B. O-MeTyr-metyyliesteri-hydrokloridi
Yhdisteestä Boc-O-MeTyrOme (6,4 g) poistettiin suojaus käyttämällä HCl:n dioksaaniliuosta, kuten on selostettu esimerkissä 63. Näin saatiin 5,1 g raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
15 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,76 (s, 3H), 3,74 (s, 3H), 4,19 (m, 1H).
C. O-MeTyr-metyyliesteri-isosyanaatti
Suspensioon, jossa oli 5,1 g yhdistettä HCl-O-MeTyrOMe 150 ml:ssa tolueenia, johdettiin kuplina fosgee-20 nia lisättäessä lämpötilaa hitaasti kiehumispisteeseen asti. Kaiken aineen liuettua liuos jäähdytettiin ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa 7,0 g:ksi raakaa isosyanaattia.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 3,85 (s, 6H) , 4,27 (m, 1H), 6,89 (d, J= 8 Hz, 2H), 7,14 (d, J = 8 Hz, 2H).
25 D. MorfoliinokarbonyyliO-MeTyr-metyyliesteri
Liuokseen, jossa oli 5,0 g O-MeTyrOMe-isosyanaat-tia 150 ml:ssa CH2CI2 0°C:ssa, lisättiin 2,4 g morfoliinia. 15 minuutin sekoittamisen jälkeen liuos haihdutettiin kuiviin ja jäännös kromatografoitiin (etyyliasetaatti), jol-30 loin saatiin 3,6 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,66 (s, 3H), 3,72 (s, 3H), 4,67 (m, 1H), 4,91 (d, J = 8 Hz, 1H).
E. MorfoliinokarbonyyliO-MeTyr MOrfoliinokarbonyyliO-MeTyrOMe (3,6 g) saippuoi-35 tiin esimerkissä 55 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 3,0 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
116 90 346 NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,78 (s, 3H), 4,61 (m, 1H), 6,82 (d, J = 8 Hz, 2H), d, J = 8 Hz, 2H).
F. Morfoliinokarbonyy1iO-MeTyr-Nle-bentsyyliesteri
MorfoliinokarbonyyliO-MeTyr (0,50 g) kytkettiin 5 0,42 g:aan yhdistettä HCl-NleOBn käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 58)· Raaka aine kromatografoltiin (CH2Cl2_nietanoli 19:1), jolloin saatiin 0,77 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,76 (s, 3H), 4,50 (m, 10 2H), 5,13.
G. MorfoliinokarbonyyliO-MeTyrNle
Seosta, jossa oli 0,77 g yhdistettä morfoliinokar-bonyyliO-MeTyrNleOBn ja 0,38 g 10-%:ista Pd/hiiltä 60 ml:ssa etanolia, hydrattiin 50 psi:n paineessa kolme tuntia. Seos 15 suodatettiin Celiten läpi ja haihdutettiin kuiviin vakuu-missa, jolloin saatiin 0,63 g raakaa happoa.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,72 (s, 3H), 4,44 (m, 1H), 4,63 (m, 1H).
H. MorfoliinokarbonyyliO-MeTyr-Nlenor-C-Sta-i-pro- 20 pyyliesteri_
MorfoliinokarbonyyliO-MeTyrNle (74 mg) kytkettiin 51 mg:aan yhdistettä HCl-nor-C-StaOiPr käyttämällä tavallista esimerkissä 55 selostettua DCC-reaktiota. Raaka aine kromatografoitiin (CH2Cl2-nietanoli 19:1), jolloin saatiin 25 98 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,78 (s, 3H), 4,21 (m, 1H), 4,42 (m, 2H), 5,03 (m, 1H).
Esimerkki 89 MOrfoliinokarbonyyliO-MeTyrS-MeCysnor-C-Sta-i-pro-30 pyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M= p-metoksifenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2~; X=sykloheksyy- li; W=CHiiiOH; ja Z^CX^CH (CH.^) 2> A. MorfoliinokarbonyyliO-MeTyrS-MeCys-metyylies- teri_ 35 MorfoliinokarbonyyliO-MeTyr (0,25 g, esimerkki 36) kytkettiin 0,36 g:aan yhdistettä HCl-S-MeCysOMe käyttämällä 117 90346 esimerkissä 58 selostettua tavallista DEC-reaktiota. Näin saatiin 0,32 g raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,01 (s, 3H), 3,71 (s, 5 3H) , 3,74 (s, 3H), 4,55 (m, 1H), 4,65 (m, 1H) .
B. MorfoliinokarbonyyliO-MeTyrS-MeCys
MorfoliinokarbonyyliO-MeCysOMe (0,32 g) saippuoitiin esimerkissä 55 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,28 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdista- 10 matta.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 2,11 (s, 3H) , 3,78 (s, 3H), 4,69 (m, 1H), 4,77 (m, 1H).
C. MorfoliinokarbonyyliO-MeTyrS-MeCysnor-C-Sta-i- propyyliesteri___ 15 MorfoliinokarbonyyliO-MeCys (0,17 g) kytkettiin 0,10 g:aan yhdistettä HCl-nor-C-StaOiPr käyttämällä esimerkissä 58 selostettua tavallista DEC-reaktiota. Raaka aine kromatografoitiin (CH2cl2~etanoli 19:1), jolloin saatiin 0,18 g puhdasta tuotetta.
20 NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,08 (s, 3H), 3,75 (s, 3H) , 4,39 (m, 3H) , 5,01 (m, 1H) .
Esimerkki 90
MorfoliinokarbonyyliO-MeTyrNlenor-C-Sta-metyylies- teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=p-metoksi- 25 fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W= CHMiOH; ja Z1=C02CH3)
MorfoliinokarbonyyliTyrNle (100 mg, esimerkki 88) kytkettiin 65 mg:aan yhdistettä HCl-nor-C-StaOMe (esimerkki 55) käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 58).
30 Raaka aine kromatografoitiin (CH2Cl2~metanoli 19:1), jolloin saatiin 121 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13> delta 3,80 (s, 3H), 3,82 (s, 3H), 4,26 (m, 1H), 4,45 (m, 2H).
118 90346
Esimerkki 91
MorfoliinokarbonyyliO-MeTyrNlenor-C-Sta-N-metyyli- amidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=p-metok- sifenyyli; Q=H; R0=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W= 1 Δ 5 CH'MOH; ]a Z =CONHCH3)
MorfoliinokarbonyyliO-MeTyrNle (132 mg, esimerkki 88) kytkettiin 78 mg:aan yhdistettä HCl-nor-C-StaNHMe (esimerkki 86) käyttämällä tavallista esimerkissä 55 selostettua DCC-reaktiota. Raaka aine kromatografoitiin (CH^^-10 metanoli 9:1), jolloin saatiin 155 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,79 (d, J = 5 Hz, 3H), 3,75 (s, 3H), 4,22 (m, 1H), 4,30 (m, 2H).
Esimerkki 92
MorfoliinokarbonyyliTyrS-MeCysnor-C-Sta-i-propyy-15 liesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=p-hydr- oksifenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli; W= CHiMOH; ja Z1=C02CH (CH3) 2) A. BocS-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri BocS-MeCys (1,1 g) kytkettiin 1,0 g:aan yhdistet- 20 tä nor-C-StaOiPr käyttämällä esimerkissä 76 selostettua DEC-reaktiota, jolloin saatiin 1,8 g raakaa ainetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,25 (d, J = 6 Hz, 6H) , 1,43 (s, 9H9, 2,14 (s, 3H), 4,08 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 25 4,98 (m, 1H).
B. S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri-hydrokloridi Yhdisteestä BocS-MeCys-nor-C-StaOiPr (0,42 g) poistettiin suojaus käyttämällä esimerkissä 63 selostettua HCl:n dioksaaniliuosta, jolloin saatiin 0,38 g raakaa suo- 30 laa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,19 (d, J = 6 Hz, 3H), 1,20 (d, J = 6 Hz, 3H), 2,16 (s, 3H), 3,95 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,83 (m, 1H).
C. Morfoliinokarbonyyli-O-bentsyyliTyr 35 Liuokseen, jossa oli 0,5 g yhdistettä O-bentsyyli-
Tyr 20 ml:ssa dioksaania ja 5 ml:ssa 2-norm. NaOH, lisät- 119 90346 tiin 0,31 g morfoliinokarbonyylikloridia ja saatua seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön ajan. Liuos haihdutettiin kuiviin ja jäännös laimennettiin 200 mlrlla H20:ta ja pestiin 2 x 200 ml:lla eetteriä. Vesifaasi tehtiin hap-5 pamaksi ja uutettiin 2 x 200 ml :11a CHCl^. Yhdistetyt uutteet kuivattiin MgSO^slla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin 0,18 g:ksi raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-d,) delta 4,13 (m, 1H), 5,04
O
10 (s, 2H) .
D. MorfoliinokarbonyyliTyr
Seosta, jossa oli 0,18 mg yhdistettä morfoliinokar-bonyyliO-bentsyyliTyr ja 0,18 g 10-%:ista Pd/hiiltä 20 ml:ssa metanolia, hydrattiin 50 psi:n paineessa 18 tuntia.
15 Seos suodatettiin Celiten läpi ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,14 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,04 (m, 1H), 6,58 (d, J = 8 Hz, 2H), 6,94 (d, J = 8 Hz, 2H).
20 E. MorfoliinokarbonyyliTyrS-MeCysnor-C-Sta-i-pro- pyyliesteri_
MorfoliinokarbonyyliTyr (0,13 g) kytkettiin 0,27 g:aan yhdistettä HCIS-MeCysnor-C-StaOiPr käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 58). Raaka tuote kroma- 25 tografoitiin CH2Cl2-metanoli 9:1), jolloin saatiin 0,15 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,24 (d, J = 6 Hz, 3H), 1,26 (d, J = 6 Hz, 3H), 4,41 (m, 3H), 5,02 (m, 1H). Esimerkki 93 30 Morfoliinokarbonyyli-o-TyrS-MeCysnor-C-Sta-i-pro- pyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M= o-hydroksifenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyy-li; W=CHiiiOH; ja Z1=C02CH(CH3)2) A. Boc-o-Tyr 35 Seokseen, jossa oli 1,1 g yhdistettä o-Tyr 15 ml:ssa THF ja 15 ml 20-%:ista Na2CC>3, lisättiin 2,0 g yhdistettä 120 90346 B0C2O ja saatua seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa kolme tuntia. Reaktioseos laimennettiin 30 ml :11a IVOtta, tehtiin happamaksi ja uutettiin 3 x 50 ml :11a CI^C^. Yhdistetyt uutteet kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja 5 haihdutettiin kuiviin. Jäännös kiteytettiin uudelleen eetteri-heksaaniseoksesta, jolloin saatiin 1,2 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 1,32 (s, 9H), 4,13 (m, 1H) .
10 B. Boc-O-bentsyyli-o-Tyr-bentsyyliesteri
Seosta, jossa oli 1,2 g yhdistettä Boc-oTyr, 1,1 ml bentsyylibromidia ja 1,3 g I^CO^ 40 ml:ssa asetonia, lämmitettiin kiehuttaen 20 tuntia. Lisättiin lisää reagens-seja (bentsyylibromidia 0,25 ml, I^CO^ 0,36 g) ja lämmit-15 tämistä jatkettiin kaksi tuntia. Jäähtynyt seos laimennettiin 40 ml:lla H20:ta ja uutettiin 3 x 75 ml:lla etyyliasetaattia. Yhdistetyt uutteet pestiin 3 x 50 ml:11a H^Orta, kuivattiin MgS0^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Kromatografointi (heksaani-etyyliasetaatti 20 4: 1). Yhdistetyt uutteet pestiin 3 x 50 ml:lla H^O^a, kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Kromatografoimalla (heksaani-etyyliasetaatti 4:1) saatiin 1,25 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,38 (s, 9H), 4,58 (m, 25 1H) , 5,06 (m, 4H) .
C. O-bentsyyli-o-Tyr-bentsyyliesteri-hydrokloridi
Yhdisteestä BocO-bentsyyli-o-Tyr-bentsyyliesteri (1,25 g) poistettiin suojaus käyttämällä esimerkissä 63 selostettua HCl:n dioksaaniliuosta, jolloin saatiin 1,1 g 30 raakaa suolaa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,24 (m, 1H), 5,02 (AB, 2H) , 5,12 (s, 2H) .
D. MorfoliinokarbonyyliO-bentsyyli-o-Tyr-bentsyy- liesteri_ 35 O-bentsyyli-o-Tyr-bentsyyliesteriä (1,1 g) käsitel tiin fosgeenin kanssa kiehuvassa tolueenissa esimerkissä 121 90346 88 selostetulla tavalla. Raaka isosyanaatti liuotettiin 15 ml:aan CH2C12, jäähdytettiin 0°C:seen ja käsiteltiin 0,35 g:n kanssa morfoliinia. Liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa kolme tuntia, minkä jälkeen se laimennettiin 5 50 ml:lla etyyliasetaattia ja pestiin 15 ml :11a 0,1-norm.
HC1 ja 2 x 15 ml :11a kyllästettyä NaHCO^. Orgaaninen faasi kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kromatografoitiin (heksaani-etyyliase-taatti 2:3), jolloin saatiin 0,60 g puhdasta tuotetta.
10 NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,65 (m, 1H), 5,06 (AB, 2H) , 5,07 (s, 2H) .
E. MorfoliinokarbonyyliO-bentsyyli-o-Tyr
Seosta, jossa oli 0,60 g morfoliinokarbonyyli-O- bentsyyli-o-Tyr-bentsyyliesteriä ja 2 g 5 ml:ssa 15 H20:ta ja 15 ml metanolia, lämmitettiin kiehuttaen 18 tuntia. Liuos haihdutettiin kuiviin ja jäännös laimennettiin 30 ml:lla H20:ta ja pestiin 2 x 25 ml:lla eetteriä. Vesikerros tehtiin happameksi ja uutettiin 3 x 50 ml:11a etyyliasetaattia. Yhdistetyt uutteet kuivattiin MgSO^:lla, 20 suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,35 g raakaa happoa.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,37 (m, 1H), 5,12 (s, 2H).
F. Morfoliinokarbonyyli-o-Tyr 25 Seosta, jossa oli 0,35 g yhdistettä morfoliinokar- bonyyliO-bentsyyli-o-Tyr ja 0,35 g 10-%:ista Pd/hiiltä 30 ml:ssa metanolia, hydrattiin 50 psi:n paineessa 18 tuntia. Seos suodatettiin Celiten läpi ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,33 g raakaa ainetta.
30 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,16 (m, 1H).
G. Morfoliinokarbonyyli-o-TyrS-MeCysnor-C-Sta-i- propyyliesteri_
Morfoliinokarbonyyli-o-Tyr (0,10 g) kytkettiin 0,12 g:aan yhdistettä S-MeCys-npr-C-StaOiPr käyttämällä 35 esimerkissä 76 selostettua DEC-menetelmää. Raaka aine kromatografoitiin (CH2Cl2-metanoli 9:1), jolloin saatiin 122 90 346 0,13 g puhdasta tuotetta seoksena o-Tyr-aseman kohdalta.
NMR (yksi isomeeri) (300 MHz, CDC13) delta 1,98 (s, 3H), 4,36 (m, 3H), 4,97 (m, 1H).
Esimerkki 94 5 Morfoliinokarbonyyli-p-ClPheS-MeCysnor-C-Sta-i- propyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=p-kloorifenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2; X=sykloheksyy-li; W=CH»"OH; Z 1=C02CH (CH3) ) A. Morfoliinokarbonyyli-p-klooriPhe 10 Liuokseen, jossa oli 0,5 g yhdistettä p-klooriPhe 5 ml:ssa 2-norm. NaOH ja 20 ml dioksaania, lisättiin 0,36 g morfoliinikarbonyylikloridia esimerkissä 92 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,26 g raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
15 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,65 (m, 1H), 6,97 (d, J = 8 Hz, 2H) , 7,19 (d, J = 8 Hz, 2H) .
B. Morfoliinokarbonyyli-p-ClPheS-MeCysnor-C-Sta-i- propyyliesteri_
Morfoliinokarbonyyli-p-ClPhe (70 mg) kytkettiin 20 82 mgraan yhdistettä S-MeCysnor-C-StaOiPr käyttämällä esi merkissä 76 selostettua DEC-menetelmää. Raaka aine kroma-tografoitiin (CH2C12:metanoli 19:1), jolloin saatiin 118 mg puhdasta tuotetta isomeerien seoksena p-ClPhe-aseman kohdalta.
25 NMR (yksi isomeeri) (300 MHz, CDC13) delta 1,97 (s, 3H), 4,37 (m, 3H), 5,96 (m, 1H).
Esimerkki 95 2-morfoliino-3-fenyylipropionyyliNlenor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=morfoliino; M=fenyyli; Q=H; 30 R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CH»i»OH; ja Z^= co2ch(ch3)2) A. Etyyli-2-morfoliino-3-fenyylipropionaatti Liuosta, jossa oli 2,0 g etyyli-2-bromi-3-fenyyli-propionaattia ja 2,8 g morfoliinia 5 ml:ssa DMF, sekoitet- 35 tiin yön ajan huoneen lämpötilassa. Seos laimennettiin 75 ml:lla l-%:ista HCl ja pestiin 3 x 50 ml:lla eetteriä.
123 903 4 6
Vesifaasi tehtiin emäksiseksi ja uutettiin 3 x 100 ml:11a etyyliasetaattia. Yhdistetyt uutteet kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kromatogra-foitiin (seoksella 35 % etyyliasetaatti-heksaanissa), jol-5 loin saatiin 0,8 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,12 (t, J = 7 Hz, 3H), 3,36 (m, 1H), 4,04 (m, 2H).
B. 2-morfoliino-3-fenyylipropionihappo
Liuosta, jossa oli 0,65 g esimerkin 95A etyylies- 10 teriä 3,7 ml:ssa 1-norm. NaOH ja 5 ml metanolia, kiehutettiin kolme tuntia. Liuos tehtiin happameksi kuivalla HCl:llä ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kuivattiin perusteellisesti suurvakuumissa.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,90 (br, 4H), 4,15 15 (m, 1H).
C. 2-morfoliino-3-fenyylipropionyyliNle-bentsyyli- esteri_
Esimerkin 95B tuote (0,35 g) kytkettiin 0,33 g:aan NleObentsyyliesteriä käyttämällä esimerkissä 58 selostet-20 tua DEC-menetelmää. Raaka aine kromatografoitiin (CH2CI2-metanoli 39:1), jolloin saatiin 0,45 g tuotetta isomeerien seoksena MPP-aseman kohdalta.
NMR (yksi isomeeri ) (300 MHz, CDCl^) delta 3,68 (m, 4H), 4,57 (m, 1H), 5,17 (AB, 2H).
25 D. 2-morfoliino-3-fenyylipropionyyliNle
Esimerkin 95c tuotteesta (0,55 g) poistettiin suojaus hydraamalla (40 psi) 0,28 g:lla 10-%:ista Pd/hiiltä 50 ml:ssa metanolia kaksi tuntia. Seos suodatettiin Celi-ten läpi ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,41 g 30 raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,74 (m, 4H), 4,38 (m, 1H).
E. 2-morfoliino-3-fenyylipropionyyliNlenor-C-Sta- i-propyyliesteri_ 35 Esimerkin 95D tuote (54 mg) kytkettiin 43 mg:aan yhdistettä IIC1 -nor-C-StaOiPr käyttämällä esimerkissä 58 124 90 3 4 6 selostettua DEC-menetelmää. Raaka aine kromatografoitiin (CH2Cl2-metanoli 19:1), jolloin saatiin 49 mg puhdasta tuotetta ja 47 mg MPP-diastereomeeria.
NMR (300 MHz, CDC13> delta 4,12 (m, 1H), 4,39 (m, 5 1H), 4,39 (m, 1H), 5,00 (m, 1H).
Esimerkki 96 2- (4-metyylipiperatsiino)-3-fenyylipropionyyliNlenor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=-4-metyylipiperatsiino; M=fenyyli; X=sykloheksyyli; Q=H; R2=n-butyyli; W= 10 CHI i I OH; ja Z1=C02CH (CH3) ) A. 2-(4-metyylipiperatsiino)-3-fenyylipropionihap- po-etyyliesteri_
Etyyli-2-bromi-3-fenyylipropionaattia (1,95 g) käsiteltiin 3,05 g:n kanssa N-metyylipiperatsiinia esimer-15 kissa 95 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,30 g puhdasta tuotetta kromatografoinnin jälkeen (CH2Cl2~metanoli 9:1).
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,10 (d, J - 7 Hz, 3H), 2,26 (s, 3H), 3,37 (m, 1H), 4,00 (m, 2H).
20 B. 2-(4-metyylipiperatsiino)-3-fenyylipropionihappo
Seosta, jossa oli 0,56 g esimerkin 96A etyylieste-riä 31 ml:ssa 1-norm. NaOH ja 20 ml etanolia, kiehutettiin 16 tuntia. Seokseen johdettiin kuplina kuivaa HCl:ää ja seos haihdutettiin kuiviin. Jäännös liuotettiin lämpimään 25 iPrOH-metanoliseokseen (1:1) ja suodatettiin ja suodos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,55 g raakaa tuotetta .
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 2,72 (s, 3H), 3,80 (m, 1H) .
30 C. 2-(4-metyylipiperatsiino)-3-fenyylipropionyyli-
Nle-bentsyyliesteri_
Esimerkin 96B tuote (0,55 g) kytkettiin 0,51 g:aan yhdistettä NleOBn käyttämällä esimerkissä 58 selostettua DEC-menetelmää. Raaka aine kromatografoitiin (CH2C12~ 35 metanoli 19:1), jolloin saatiin 0,42 g tuotetta MPPP-epi-meerien seoksena.
125 90346 NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,27 (s, 3H), 2,85 (m, 1H), 3,26 (m, 1H), 4,54 (m, 1H).
D. 2-(4-metyylipiperatsiino)-3-fenyylipropionyyliNle
Esimerkin 96C tuotteesta (0,42 g) poistettiin suo- 5 jaus esimerkissä 95 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,31 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 2,48 (s, 3H), 4,32 (m, UI) .
E. 2-(4-metyylipiperatsiino)-3-fenyylipropionyyli- 10 Nle-nor-C-Sta-i-propyyliesteri_
Esimerkin 96D tuote (76 mg) kytkettiin 60 mg:aan yhdistettä HCl-nor-C-StaOiPr käyttämällä DEC:tä (esimerkki 58). Raaka aine kromatografoitiin (CH2Cl2-metanoli 9:1), jolloin saatiin 30 mg ja 33 mg MPPP-epimeerejä.
15 NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,35 (s, 3H), 4,16 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 5,01 (m, 1H).
Esimerkki 97 2-(3,5-dioksomorfoliino)-3-fenyylipropionyyliNlenor- D-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=3,5-dioksomorfoliino; 20 M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W= CHMiOH; ja Z^CC^CH (CH3) 2) A. 2- (3,5-dioksomorfoliino)-3-fenyylipropionihappo-bentsyyliesteri_
Liuokseen, jossa oli 0,21 g HCl-PheO-bentsyylies-25 teriä ja 0,10 ml TEA:ta 10 ml:ssa CH2C12, lisättiin 80 mg glykolianhydridiä. Liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa kaksi tuntia. Seos laimennettiin 200 ml:lla etyyliasetaattia ja pestiin 2 x 20 ml:lla 0,1-norm. HC1, 20 ml :11a H20 ja 20 ml :11a kyllästettyä suolaliuosta. Orgaa-30 ninen faasi kuivattiin MgS0^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,32 g raakaa tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,14 (m, 2H), 4,12 (m, 4H), 4,95 (m, 1H), 5,13 (AB, 2H).
Liuosta, jossa oli edellä mainittua raakaa happoa 35 ja 76 mg pyridiiniä 5 ml:ssa yhdistettä Ac20, lämmitettiin 100°C:ssa 18 tuntia. Reaktioseos lisättiin 100 ml:aan 126 90 346 H^Otta ja uutettiin 2 x 100 mlrlla etyyliasetaattia. Yhdistetyt uutteet pestiin 20 mlrlla 0,1-norm. HC1, 20 mlrlla 0,1-norm. NaOH ja 20 mlrlla H20. Orgaaninen faasi kuivattiin MgSO^rlla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, 5 jolloin saatiin 0,23 g raakaa tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,18 (2AB, 4H), 5,19 (ΛΒ, 2H), 5,53 (m, 1H).
B. 2-(3,5-dioksomorfoliino)-3-fenyylipropiinihappo
Esimerkin 97A tuotteesta poistettiin suojaus esi- 10 merkissä 95 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,15 g raakaa tuotetta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,32 (AB, 4H), 5,39 (m, 1H) .
C. 2-(3,5-dioksomorfoliino)-3-fenyylipropionyyli- 15 Nle-bentsyyliesteri_
Esimerkin 97B tuote (0,15 g) kytkettiin 0,16 graan HCl-NleObentsyyliesteriä käyttämällä tavallista esimerkissä 58 selostettua DEC-reaktiota. Raaka aine kromatografoi-tiin (CH2Cl2-metanoli 4rl), jolloin saatiin 0,14 g puhdas-20 ta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,18 (AB, 4H), 4,63 (m, 1H) , 5,16 (AB, 2H) .
D. 2-(3,5-dioksomorfoliino)-3-fenyylipropionyyliNle
Esimerkin 97C tuotteesta (0,14 g) poistettiin suo- 25 jaus esimerkissä 95 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,12 g raakaa tuotetta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,24 (AB, 4H), 4,62 (m, 1H), 5,17 (m, 1H).
E. 2-(3,5-dioksomorfoliino)-3-fenyylipropionyyliNle- 30 nor-C-Sta-i-propyyliesteri_
Esimerkin 97D tuote (0,12 g) kytkettiin yhdisteeseen HCl-nor-C-StaOiPr käyttämällä tavallista esimerkissä 58 selostettua DEC-reaktiota. Raaka aine kromatografoi-tiin (CH2Cl2-metanoli 19 rl), jolloin saatiin 88 mg puh-35 dasta tuotetta.
127 90 34 6 NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,18 (m, 1H), 4,32 (s, 4H) , 4,48 (m, 1H) , 5,02 (m, 1H) .
Esimerkki 98 2-(3-oksomorfoliino)-3-fenyylipropionyyliNlenor-C-5 Sta-i-propyyliesteri (I, Z=3-oksomorfoliino; M= fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W= CHMfOH; ja Z 1=C02CH (CH3) 2) A. N-qlykoloyylifenyylialaniini-bentsyyliesteri
Liuokseen, jossa oli 2,23 g PheObentsyyliesterin 10 ja glykolianhydridin välistä asylointituotetta (esimerkki 96) 6,6 ml:ssa THF 0°C:ssa, lisättiin 1,1 ekv. BH3~DMS hitaasti ja saatua liuosta sekoitettiin viisi tuntia. Lisättiin tiputtamalla H20:ta (5 ml) ja sen jälkeen 5 ml 0,1-norm. HC1. Seokseen lisättiin 150 ml H20:ta, tehtiin 15 happameksi ja uutettiin 2 x 150 ml:11a etyyliasetaattia. Yhdistetyt uutteet pestiin 2 x 30 miellä 0,1-norm. NaOH, 30 ml:lla IVOlta. Orgaaninen faasi kuivattiin MgSO^ella, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kromatogra-foitiin (CH2Cl2-metanoli 39:1), jolloin saatiin 0,43 g 20 puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,99 (AB, 2H), 4,97 (m, 1H) , 5,15 (AB, 2H) .
B. N-(O-mesyyliglykolyyli)fenyylialaniini-bentsyy- liesteri_ 25 Liuokseen, jossa oli 0,41 g edellä mainittua alko holia ja 0,41 g TEA 10 ml:ssa CH2C12 0°C:ssa, lisättiin tiputtamalla 0,11 ml mesyylikloridia ja saatua liuosta sekoitettiin 0°C:ssa tunnin ajan. Liuos laimennettiin 200 miellä etyyliasetaattia ja pestiin 30 miellä 0,1-norm.
30 HC1, 0,1-norm. NaOH. Orgaaninen faasi kuivattiin MgSO^ella, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,25 g raakaa mesylaattia.
NMR (300 MHz, CDCl3) delta 2,92 (s, 3H), 4,29 (m, 2H), 4,92 (m, 1H), 5,13 (AB, 2H).
128 90 3 46 C. N-(jodietoksiasetyyli)fenyylialaniini-bentsyyli- esteri_________
Seosta, jossa oli 0,25 g edellä saatua mesylaattia ja 0,23 g NaJ 20 ml:ssa asetonia, kiehutettiin kuusi tuntia.
5 Reaktioseos kaadettiin 100 ml:aan H20:ta ja uutettiin 2 x 100 ml :11a etyyliasetaattia. Yhdistetyt uutteet pestiin 50 ml:11a kyllästettyä suolaliuosta, kuivattiin MgSO^rlla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Raaka aine kroma-tografoitiin (CH2cl2-metanoli 9:1), jolloin saatiin 0,35 g 10 puhdasta jodidia.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,96 (s, 2H), 4,93 (m, 1H), 5,11 (AB, 2H).
D. 2-(3-oksomorfoliino)-3-fenyylipropionihappo- bentsyyliesteri_ 15 Liuokseen, jossa oli 0,16 g edellä saatua jodidia 3 ml:ssa THF -78°C:ssa, lisättiin tiputtamalla 1,1 ekv. yhdistettä KNTNS2 ja saatua liuosta sekoitettiin viisi tuntia -78°C:ssa. Lisättiin hitaasti NH^Cl (1 ml) ja seos kaadettiin 100 ml:aan H20:ta, tehtiin happameksi ja uutet- 20 tiin 2 x 100 ml:11a etyyliasetaattia. Yhdistetyt uutteet pestiin 20 ml:11a kyllästettyä suolaliuosta, kuivattiin MgSO^:11a, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kromatografoitiin (CH2Cl2~metanoli 9:1), jolloin saatiin 71 mg puhdasta tuotetta.
25 NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,10 (AB, 2H), 5,19 (AB, 2H), 5,27 (m, lH).
E. 2-(3-oksomorfoliino)-3-fenyylipropionihappo
Esimerkin 98C tuotteesta (96 mg) poistettiin suojaus esimerkissä 95 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 30 70 mg raakaa happoa.
NMR (300 MHz, DMSO-d,) delta 3,92 (AB, 2H), 5,04
O
(m, lH).
F. 2-(3-oksomorfoliino)-3-fenyylipropionyyliNle- bentsyyliesteri_ 35 Esimerkin 98D tuote (90 mg) kytkettiin 98 mg:aan
NleO-bontsyyliestoriä käyttämällä tavallista esimerkissä 129 90346 58 selostettua DEC-reaktiota. Raaka aine kromatografoltiin (CH2Cl2-metanoli 39:1), jolloin saatiin 127 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,14 (s, 2H), 5,54 (m, 5 1H), 5,16 (m, 2H), 5,32 (m, 1H).
G. 2- (3-oksomorfoliino) -O-fenyylipropionyyliNle
Esimerkin 98E tuotteesta (127 mg) poistettiin suojaus esimerkissä 95 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 114 mg raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
10 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,12 (br, 2H), 4,52 (br, 1H).
H. 2-(3-oksomorfoliino)-3-fenyylipropionyyliNlenor- C-Sta-i-propyyliesteri_
Esimerkin 98F tuote (114 mg) kytkettiin 92 mg:aan 15 yhdistettä HCl-nor-C-Sta-OiPr käyttämällä DEC-reaktiota (esimerkki 58). Raaka aine kromatografoitiin (CH2Cl2-meta-noli 19:1), jolloin saatiin 13 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,42 (m, 2H), 5,02 (m, 2H) .
20 Esimerkki 99 3-oksomorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-pro- pyyliesteri (I, Z=3-oksomorfoliinokarbonyyliamino; Q=H; M=fenyyli; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W= CHinOH; ja Z1=C02CH (CH-j) 2) 25 A. 3-oksomorfoliinokarbonyyliPhe-bentsyyliesteri
Suspensioon, jossa oli 79 mg pentaanilla pestyä NaH 5 ml:ssa THF, lisättiin liuos, jossa oli 200 mg 3-ke-tomorfoliinia 10 ml:ssa THF. Saatua seosta sekoitettiin viisi minuuttia huoneen lämpötilassa ja sitten jäähdytet-30 tiin 0°C:seen. Lisättiin tiputtamalla liuos, jossa oli 584 mg PheOBn-isosyanaattia 15 ml:ssa THF ja saatua liuosta sekoitettiin 0°C:ssa tunnin ajan. Reaktioseos kaadettiin 100 ml:aan H20:ta ja uutettiin 2 x 100 ml:lla etyyliasetaattia. Yhdistetyt uutteet pestiin 20 ml:11a 0,1-35 norm. UC1, 20 ml:ila 0,1-norm. NaOU, kuivattiin MgSO^rlla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Raaka aine kromato- 130 Q n * A < grafoitiin (etyyliasetaatti-CH2Cl2 4:1), jolloin saatiin 132 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,24 (s, 2H), 4,82 (m, 1H), 5,18 (AB, 2H).
5 B. 3-oksomorfoliinokarbonyyliPhe
Esimerkin 99A tuotteesta (0,64 g) poistettiin suojaus esimerkissä 95 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,44 g raakaa happoa.
NMR (300 MHz, DMSO-d,) delta 4,22 (s, 2H), 4,51
O
10 (m, 1H).
C. 3-oksomorfoliinokarbonyyliPheNle-bentsyyliesteri Esimerkin 99B tuote (0,44 g) kytkettiin 0,41 g:aan yhdistettä NleOBn käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 58), jolloin saatiin 0,73 g raakaa ainetta, 15 jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,25 (m, 2H), 4,62 (m, 1H), 4,16 (m, 2H).
D. 3-oksomorfoliinokarbonyyliPheNle
Esimerkin 99C tuotteesta (0,72 g) poistettiin suo-20 jaus esimerkissä 95 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,56 g raakaa ainetta.
NMR (300 MHz, DMS0-dg) delta 4,19 (m, 2H), 4,65 (m, 2H).
E. 3-oksomorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i- 25 propyyliesteri_
Esimerkin 99D tuote (125 mg) kytkettiin 91 mg:aan yhdistettä HCl-nor-C-StaOiPr käyttämällä DEC-reaktiota (esimerkki 58). Raaka aine kromatografoitiin (CH2Cl2-meta-noli 19:1), jolloin saatiin73 mg tuotetta.
30 NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,20 (m, 2H), 4,39 (m, 1H), 4,52 (m, 1H), 5,01 (m, 1H).
131 90 346
Esimerkki 100
MetoksietyyliaminokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-pro- pyyliesteri (I, Z=CH30 (CH2) 2NHCONH; M=fenyyli; Q=H; X=sykloheksyyli; R2=n-butyyli; W=CH''OH; ja Z1 = 5 C02CH(CH3)2) A. MetoksietyyliaminokarbonyyliPhe-bentsyyliesteri
Sekoitettuun liuokseen, jossa oli 0,20 g PheOBn- isosyanaattia 10 ml:ssa CH2C12, lisättiin 59 mg O-Me-eta-noliamiinia ja liuosta sekoitettiin tunnin ajan. Reaktio-10 seos laimennettiin 200 ml:lla eetteriä ja pestiin 20 ml:lla 0,1-norm. HC1 ja 20 ml:lla 0,1-norm. NaOH. Orgaaninen faasi kuivattiin MgSO^rlla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,20 g raakaa tuotetta.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 3,28 (s, 3H) , 4,80 (m, 15 1H), 5,11 (m, 2H).
B. MetoksietyyliaminokarbonyyliPhe
Seosta, jossa oli 0,20 g edellä saatua bentsyyli-esteriä ja 0,10 g 10-%:ista Pd/hiiltä 50 ml:ssa metanolia, hydrattiin 50 psi:n paineessa kaksi tuntia. Seos suodatet-20 tiin Celiten läpi ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,19 g raakaa tuotetta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,24 (s, 3H), 4,30 (m, 1H).
C. MetoksietyyliaminokarbonyyliPheNle-bentsyyliesteri 25 Edellä saatu Phe-johdannainen (0,19 g) kytkettiin 0,14 g:aan yhdistettä NleOBn käyttämällä tavallista DEC-menetelmää (esimerkki 58). Näin saatiin 0,23 g raakaa ainetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,26 (s, 3H), 4,52 (m, 30 2H), 5,10 (m, 2H).
D. MetoksietyyliaminokarbonyyliPheNle
Seosta, jossa oli 0,23 g edellä saatua yhdistettä ja 0,12 g 10-%:ista Pd/hiiltä 50 ml:ssa etanolia, hydrattiin 50 psi:n paineessa kaksi tuntia. Seos suodatettiin 35 ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,16 g raakaa tuotetta.
132 90 346 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,21 (s, 3H), 4,10 (m, 1H), 4,41 (m, 1H).
E. MetoksietyyliaminokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i- propyy lies ter i_____ 5 Edellä saatu happo (0,17 g) kytkettiin 0,13 g:aan yhdistettä HCl-nor-C-Sta-OiPr käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 58). Raaka aine kromatografoitiin (CH2Cl2-metanoli 19:1), jolloin saatiin 0,18 g puhdasta tuotetta.
10 NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,28 (s, 3H), 4,32 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,57 (m, 1H), 5,03 (m, 1H).
Esimerkki 101
HydroksietyyliaminokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-pro- pyyliesteri (I, Z=HO(CHp) NHCONH; M=fenyyli; Q=H; 15 R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CHtlfOH; ja Z = co2ch(ch3)2) A. HydroksietyyliaminokarbonyyliPhe-bentsyyliesteri
Liuokseen, jossa oli 0,50 g PheOBn-isosyanaattia 10 ml:ssa CH2cl2, lisättiin 0,12 g etanoliamiinia ja saa-20 tua liuosta sekoitettiin neljä tuntia. Seos laimennettiin 200 ml:11a etyyliasetaattia ja pestiin 20 ml:11a 0,1-norm. HC1 ja 20 ml :11a 0,1-norm. NaOH. Orgaaninen faasi kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,44 g raakaa tuotetta.
25 NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,79 (m, 1H), 4,12 (m, 2H) .
B. t-butyylidimetyylisilyylioksietyyliaminokarbo- nyyliPhe-bentsyyliesteri_
Liuokseen, jossa oli 0,44 g edellä saatua alkoho-30 lia 10 ml:ssa DMF, lisättiin 0,24 g t-butyylidimetyylisi-lyylikloridia ja 0,22 g imidatsolia. 18 tunnin kuluttua liuos lisättiin 150 ml:aan H20:ta ja uutettiin 2 x 150 ml :11a etyyliasetaattia. Yhdistetyt uutteet pestiin 30 ml:lla H20:ta, kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haih-35 dutettiin kuiviin. Jäännös kromatografoitiin (CH2cl2_ine-tanoli 39:1), jolloin saatiin 0,50 g puhdasta tuotetta.
133 9 O 3 4 6 NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,89 (s, 9H), 4,98 (m, 1H), 5,13 (m, 2H).
C. t-butyylidimetyylisilyylioksietyyliaminokarbo- nyyliPhe_ 5 Seosta, jossa oli edellä saatua bentsyyliesteriä (0,18 g) ja 0,09 g 10-%:ista Pd/hiiltä 30 mlrssa metano-lia, hydrattiin 50 psi:n paineessa kolme tuntia. Seos suodatettiin Celiten läpi ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,13 g raakaa ainetta.
10 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 0,89 (s, 3H), 4,27 (m, 1H) .
D. t-butyylidimetyylisilyylioksietyyliaminokarbo- nyy1iPheNle-bentsyyliesteri_
Edellä saatu happo (0,13 g) kytkettiin 96 mg:aan 15 yhdistettä NleOBn käyttämällä DEC-menetelmää (esimerkki 58). Kromatografoimalla (CH2Cl2~metanoli 19:1) saatiin 0,10 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 0,91 (s, 9H), 4,50 (m, 2H), 4,72 (m, 1H), 5,11 (s, 2H).
20 E. t-butyylidimetyylisilyylioksietyyliaminokarbo- nyyliPheNle_
Edellä saadusta tuotteesta poistettiin suojaus hyd-raamalla esimerkissä 100 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 78 mg raakaa ainetta.
25 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 0,88 (s, 9H), 4,00 (m, 1H), 4,37 (m, 1H).
F. t-butyylidimetyylisilyylioksietyyliaminokarbo-nyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyyliesteri_
Edellä saatu happo (73 mg) kytkettiin 45 mg:aan 30 yhdistettä HCl-nor-C-StaOiPr (DEC, esimerkki 58), jolloin saatiin 116 mg raakaa tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,86 (s, 9H), 4,38 (m, 1H), 4,45 (, 1H), 5,02 (m, 1H).
134 90 34 6 G. IlydroksietyyliaminokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyyliesteri_
Edellä saadusta aineesta (116 mg) poistettiin suojaus käsittelemällä 1,5-ekvivalentin kanssa yhdistettä 5 Bu^NH 5 ml:ssa THF kaksi tuntia. Liuos laimennettiin 200 ml :11a etyyliastaattia ja pestiin 20 ml:11a 0,1-norm. HC1 ja 20 ml :11a 0,1-norm. NaOH. Orgaaninen faasi kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin ja jäännös kromatografoitiin (Ct^C^-metanoli 9:1), jolloin saa-10 tiin 63 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,41 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,74 (m, 1H), 5,07 (m, 1H).
Esimerkki 102
MorfoliinosulfonyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyylies-15 teri (I, Z=morfoliinosulfonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CHM»OH; ja z1=co2ch(ch3) 2) A. MorfoliinosulfonyyliPheNle-bentsyyliesteri
Liuosta, jossa oli 0,29 g yhdistettä PheNleOBn, 20 0,40 g morfoliinosulfonyylikloridia ja 0,36 g TEA 10 ml:ssa CH2cl2, kiehutettiin 16 tuntia. Lisättiin mitatut määrät kahta jälkimmäistä reagenssia ja lämmittämistä jatkettiin kahdeksan tuntia. Liuos laimennettiin 50 ml:11a etyyliasetaattia ja pestiin 25 ml:lla 0,1-norm. HC1 ja 25 ml:lla 25 0,1-norm. NaOH. Orgaaninen faasi kuivattiin MgSO^:lla suo datettiin ja haihdutettiin kuiviin ja jäännös kromatografoitiin (heksaani-etyyliasetaatti 2:1), jolloin saatiin 0,36 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,04 (m, 1H), 4,60 (m, 30 1H), 5,15 (m, 2H).
B. MorfoliinosulfonyyliPheNle
Edellä saadusta aineesta (0,36 g) poistettiin suojaus (esimerkki 100), jolloin saatiin 0,30 g raakaa tuotetta .
35 NMR (300 MHz, DMSO-d,) delta 3,95 (m, 1H), 4,10
O
(m, 1H).
135 90 3 4 6 C. MorfoliinosulfonyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyyli- esteri_______
Esimerkin 102B tuote (0,29 g) kytkettiin 0,12 g:aan yhdistettä HCl-nor-C-StaOiPr käyttämällä DEC:tä (esimerk-5 ki 58). Kromatografoimalla (CH2Cl2~etanoli 29:1) saatiin 0,29 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,02 (m, 1H), 4,41 (m, 2H), 5,06 (m, 1H).
Esimerkki 103 10 MorfoliinometyylifosfiinicoPheNlenor-C-Sta-i-pro- pyyliesteri (I, Z=raorfoliinoP(OCH^)(O)amino; M= fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W= CHiMOH; Z1=C02CH(CH3) 2) A. MorfoliinometyylifosfiinioPheNle-bentsyyliesteri 15 Liuosta, jossa oli 0,30 g yhdistettä PheNleOBn, 0,30 TEA ja 0,44 g morfoliinometyylifosfiinihappokloridia 10 ml:ssa CH2C12, sekoitettiin 60 tuntia. Liuos laimennettiin 50 ml:lla etyyliasetaattia ja pestiin 25 mlrlla 0,1-norm. HC1 ja 0,1-norm. NaOH. Orgaaninen faasi kuivattiin 20 MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös kromatografoitiin (CH2cl2-etanoli 19:1), jolloin saatiin 0,18 g tuotetta isomeerien seoksena fosforin kohdalta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,57 (d, J = 10 Hz, 3H), 4,50 (m, 1H), 5,09 (m, 2H).
25 B. MorfoliinometyylifosfiinioPheNle
Edellä saadusta aineesta poistettiin suojaus esi merkissä 100 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,10 g raakaa ainetta.
NMR (300 MHa, DMSO-dg) delta 3,26 (d, J = 10 Hz, 30 3H), 3,96 (m, 1H).
C. MorfoliinometyylifosfiinioPheNlenor-C-Sta-i- propyyliesteri_
Esimerkin 103B tuote (0,10 g) kytkettiin 58 mg:aan yhdistettä HCl-nor-C-StaOiPr käyttämällä DEC-menetelmää 35 (esimerkki 58). Kromatografoimalla (CH2Cl2~etanoli 19:1) saatiin 28 mg puhdasta ainetta.
136 90346 NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,61 (d, J = 11 Hz, 3H), 4,44 (m, 1H) , 4,43 (m, 1H) , 4,99 (m, 1H) .
Esimerkki 104
TiomorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyyli-5 esteri (I, Z=tiomorfoliinokarbonyyliamino; Q=H; X=sykloheksyyli; W=CHMlOH; Z3=CC>2CH (CH3) 2) A. TiomorfoliinokarbonyyliPhe-bentsyyliesteri Liuokseen, jossa oli 1,0 g PheOBn-isosyanaattia 10 ml:ssa CH2C12 0°C:ssa, lisättiin 0,85 g tiomorfoliinia 10 ja saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 1,5 tuntia. Liuos laimennettiin 50 ml:11a etyyliasetaattia ja pestiin 2 x 25 ml:11a 0,1-norm. HC1. Orgaaninen faasi kuivattiin MgS04:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 1,26 g raakaa tuotetta, jota käytettiin 15 enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,83 (m, 2H), 5,15 (AB, 2H) .
B. TiomorfoliinokarbonyyliPhe
Seosta, jossa oli 1,26 g edellä saatua ainetta ja 20 4,5 g K2C03 15 ml:ssa H20:ta ja 70 ml:ssa metanolia, se koitettiin huoneen lämpötilassa 60 tuntia ja sitten lämmitettiin kiehuttaen 16 tuntia. Seos konsentroitiin vesi-liuokseksi ja pestiin 2 x 50 ml:lla eetteriä. Vesifaasi tehtiin happameksi ja uutettiin 3 x 50 ml :11a CHC12· Yh-25 distetyt uutteet kuivattiin MgSC>4:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,01 (m, 2H), 4,26 (m, 1H).
C. TiomorfoliinokarbonyyliPheNleo-bentsyyliesteri 30 Esimerkin 104B tuote (0,72 g) kytkettiin 0,75 g:aan yhdistettä NleOBn käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 58), jolloin saatiin 1,1 g raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,47 (m, 1H), 4,58 (m, 35 1H), 5,12 (m, 2H).
137 ^ ^ 9 O 3 4 6 D. TiomorfoliinokarbonyyliPheNle
Esimerkin 104C tuotteesta (1,1 g) poistettiin suojaus edellä esimerkissä 104B selostetulla tavalla. Näin saatiin 0,70 g raakaa tuotetta, jota käytettiin jatkossa.
5 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,59 (m, 4H), 4,46 (m, 1H), 4,73 (m, lH).
E. TiomorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-pro- pyyliesteri_
Esimerkin 104D tuote (0,70 g) kytkettiin 0,50 g:aan 10 yhdistettä HCl-nor-C-StaOiPr käyttämällä DEC-reaktiota (esimerkki 58) ja raaka aine kromatografoitiin (CH2CI2-etanoli 29:1), jolloin saatiin 0,65 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 4,28 (m, 1H) , 4,43 (m, 1H) , 4,57 (m, 1H), 5,00 (m, 1H).
15 Esimerkki 105 1-oksotiomorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=tiomorfoliinokarbonyyliamino-sulfoksidi; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=syklo-heksyyli; W=CHinOH; Z1=C02CH (CH3) 2) 20 Liuokseen, jossa oli 0,10 g esimerkin 104E tuotet ta 5 mlrssa CH2CI2 0°C:ssa, lisättiin 35 mg yhdistettä mCPBA ja saatua liuosta sekoitettiin 15 minuuttia. Liuos laimennettiin 20 ml :11a etyyliasetaattia ja pestiin 2 x 20 ml:lla 10-%:ista Na2S03 ja 20 ml:lla 0,1-norm. NaOH.
25 Orgaaninen faasi kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin ja jäännös kromatografoitiin (CF^C^-etanoli 9:1), jolloin saatiin 82 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,29 (m, 1H), 3,38 (m, 1H), 4,59 (m, 1H), 4,94 (m, 1H).
138 9 0 346
Esimerkki 106 1,1-dioksotiomorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=tiomorfoliinokarbonyyliami-nosulfoni; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=syklo-5 heksyyli; W=CHIU0H; ja Z^CC^CH (CH3) 2) A. 1,1-dioksotiomorfoliinokarbonyyliPhe-bentsyyli- esteri__
Liuokseen, jossa oli 0,64 g esimerkin 104A tuotetta 20 ml:ssa CH2C12 0°C:ssa, lisättiin 1,0 g yhdistettä mCPBA 10 ja saatua liuosta sekoitettiin 16 tuntia. Liuos laimennettiin 100 ml :11a etyyliasetaattia ja pestiin 3 x 50 ml:lla 10-%:ista Na2SC>3. Orgaaninen faasi kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Raaka aine kromato-grafoitiin (etyyliasetaatti-heksaani 1:1), jolloin saatiin 15 0,47 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,79 (m, 1H), 5,16 (AB, 2H).
B. 1,1-dioksotiomorfoliinokarbonyyliPhe Esimerkin 106A tuotteesta (0,47 g) poistettiin suo- 20 jaus esimerkissä 100 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,30 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta .
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,05 (m, 1H), 4,60 (m, 1H), 5,15 (AB, 2H).
25 C. 1,1-dioksotiomorfoliinokarbonyyliPheNle-bent- syyliesteri_
Esimerkin 106B tuote (0,30 g) kytkettiin 0,29 g:aan yhdistettä NleOBn käyttämällä esimerkissä 58 selostettua DEC-reaktiota, jolloin saatiin 0,46 g raakaa tuotetta, jo-30 ta käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,50 (m, 2H), 5,12 (AB, 2H) .
D. 1,1-dioksotiomorfoliinokarbonyyliPheNle Esimerkin 106C tuotteesta (0,46 g) poistettiin suo-35 jaus esimerkissä 100 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,36 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
139 90 3 4 6 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,97 (m, 1H), 4,32 (m, 1H).
E. 1,1-dioksotiomorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-
Sta-i-propyyliesteri_ 5 Esimerkin 106D tuote (0,26 g) kytkettiin 0,18 g:aan yhdistettä HCl-nor-C-StaOiPr käyttämällä DEC-reaktiota (esimerkki 58), jolloin saatiin 0,31 g puhdasta tuotetta kromatografoimalla (CH2Cl2-etanoli 19:1) puhdistamisen jälkeen.
10 NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 4,28 (m, 1H) , 4,47 (m, 1H), 4,60 (m, 1H), 5,02 (m, 1H).
Esimerkki 107
MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-bentsyy- liesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyy-15 li; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli; W=CHmiOH; ja Z1=C02CH2CgH5) A. Bocnor-C-Sta-bentsyyliesteri
Bocnor-C-Sta (0,10 g) esteröitiin 0,11 g:lla bent-syylialkoholia käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esi-20 merkki 58) 0,25 ekv. kanssa yhdistettä DMAP. Raaka aine kromatografoitiin (CH2Cl2-metanoli 39:1), jolloin saatiin 0,10 g puhdasta esteriä.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,39 (s, 9H), 4,10 (s, 1H) , 4,13 (s, 1H) , 5,14 (AB, 2H).
25 B. Nor-C-Sta-bentsyyliesteri-hydrokloridi
Esimerkin 107A:n tuotteesta (0,10 g) poistettiin suojaus esimerkissä 63 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 96 mg raakaa suolaa, jota käytettiin enempää puhdistamatta .
30 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,16 (m, 1H), 5,12 (m, 2H).
C. MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-bentsyy-liesteri_
Esimerkin 107B tuote (0,12 g) kytkettiin 84 mg:aan 35 yhdistettä HCl-nor-C-StaOBn käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 58). Raaka aine kromatografoitiin 140 90 34 6 (CH2Cl2-nietanoli 19:1), jolloin saatiin 92 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,08 (s, 3H), 4,40 (m, 3H), 5,14 (AB, 2H).
5 Esimerkki 108
MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-syklohek- syyli-metyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliami- no; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli; W=CHlMOH; ja Z1=CO„CH_C,H1 , ) Δ Δ o 11 10 A. Bocnor-C-Sta-sykloheksyylimetyyliesteri
Bocnor-C-Sta (70 mg) esteröitiin 80 mg:11a syklo-heksyylimetanolia esimerkissä 107 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 40 mg puhdasta ainetta kromatografoinnin (CH2Cl2-metanoli 39:1) jälkeen.
15 NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,35 (s, 9H), 3,39 (d, J = 6 Hz, 1H), 4,08 (m, 1H).
B. nor-C-Sta-sykloheksyylimetyyliesteri-hydroklo- ridi_
Esimerkin 108A tuotteesta (40 mg) poistettiin suo-20 jaus esimerkissä 63 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 37 mg raakaa suolaa.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 3,53 (s, 1H), 4,10 (m, 1H) .
C. MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-syklo- 25 heksyylimetyyliesteri_
MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCys (42 mg) kytkettiin 34 mg:aan esimerkin 108B tuotetta käyttämällä DEC-reaktio-ta (esimerkki 58). Kromatografoimalla (CH2Cl2-metanoli 19:1) saatiin 50 mg puhdasta tuotetta.
30 NMR (300 MHz, CDC13> delta 2,12 (s, 3H), 4,42 (m, 3H).
141 90 3 46
Esimerkki 109 2-(morfoliinokarbonyylioksi)-3-fenyylipropionyyli-Nlenor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=morfoliinokar-bonyylioksi; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=syk-5 loheksyyli; W=CHti«OH; ja Z^CC^CH (CH-j) 2) A. 2-(morfoliinokarbonyylioksi)-3-fenyylipropioni- happo-metyyliesteri_
Liuokseen, jossa oli 0,74 g metyylifenyylilaktaat-tia 10 mlrssa CH2C12, lisättiin 0,60 g morfoliinikarbonyy-10 likloridia ja 1,1 g yhdistettä DMAP ja saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön ajan. Lisättiin vielä 0,60 g morfoliinikarbonyylikloridia ja sekoittamista jatkettiin kaksi päivää. Seos kaadettiin 100 ml:aan H20:ta ja uutettiin 2 x 100 ml:11a etyyliasetaattia. Yhdistetyt 15 uutteet pestiin 20 ml:lla 0,1-norm. HC1 ja 20 mltlla 0,1-norm. NaOH ja kuivattiin MgSO^illa, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 1,24 g raakaa tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,75 (s, 3H), 5,19 (m, lH) .
20 B. 2-(morfoliinokarbonyylioksi)-3-fenyylipropioni- happo_
Esimerkin 109A tuotteesta (1,2 g) poistettiin suojaus esimerkissä 55 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 1,1 g raakaa happoa.
25 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,22 (m, 1H) .
C. 2-(morfoliinokarbonyylioksi)-3-fenyylipropio- nyyliNle-bentsyyliesteri_
Esimerkin 109B tuote (0,12 g) kytkettiin 0,12 g:aan yhdistettä NleOBn käyttämällä esimerkissä 58 selostettua 30 DEC-reaktiota. Näin saatiin 0,20 g raakaa tuotetta, jota käytettiin edelleen.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 4,59 (m, 1H) , 5,14 (AB, 2H), 5,37 (m, 1H).
142 o r -7 a y y O 3 4 6 D. 2-(morfoliinokarbonyylioksi)-3-fenyylipropionyy- liNle_
Esimerkin 109C tuotteesta (0,20 g) poistettiin suojaus esimerkissä 100 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 5 0,16 g raakaa happoa, jota käytettiin edelleen.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,15 (m, 1H), 5,09 (m, 1H).
E. 2-(morfoliinokarbonyylioksi)-3-fenyylipropio- nyyliNlenor-C-Sta-i-propyyliesteri_ 10 Esimerkin 109D tuote (0,15 g) kytkettiin 0,11 g:aan yhdistettä HCl-nor-C-StaOiPr käyttämällä esimerkissä 58 selostettua DEC-menetelmää. Raaka aine kromatografoitiin (CH2Cl2-metanoli 19:1), jolloin saatiin 0,16 g puhdasta tuotetta.
15 NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,22 (m, 1H), 4,41 (m, 1H), 5,02 (m, 1H), 5,28 (m, 1H).
Esimerkki 110 O-asetyyli-morfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyli-20 amino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; W=CH«iiOH; X= sykloheksyyli; ja Z1=C02CH(CH^)2)
Liuokseen, jossa oli 0,10 g esimerkin 17 tuotetta 1 mltssa pyridiiniä, lisättiin 26 mg yhdistettä Ac20 ja saatua liuosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön ajan.
25 Liuos laimennettiin 100 ml:11a etyyliasetaattia ja pestiin 2 x 10 ml:11a 0,1-norm. HC1 ja 2 x 10 ml:lla 0,1-norm. NaOH. Orgaaninen faasi kuivattiin MgSO^:lla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Raaka aine kromatografoitiin (C^C^-metanoli 19:1), jolloin saatiin 90 mg puhdasta 30 tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,16 (s, 6H), 4,37 (m, 1H), 4,52 (m, 2H), 4,88 (d, J = 3 Hz, 1H), 4,96 (m, 1H).
143 90 346
Esimerkki 111
MetyyliaminokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyylies- teri (I, Z=CH3NHCONH; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CHim OH; ja Z1=C02CH(CH3)2) 5 A. MetyleeniaminokarbonyyliPhe-bentsyyliesteri
Liuokseen, jossa oli 0,30 g PheOBn-isosyanaattia 20 ml:ssa CH2cl2, lisättiin 0,51 ml 2,3-mol. MeNH2:n bent-seeniliuosta ja saatua liuosta sekoitettiin neljä tuntia. Liuos laimennettiin 200 ml:11a etyyliasetaattia ja pestiin 10 20 ml:lla 0,1-norm. HC1 ja 20 ml:lla 0,1-norm. NaOH. Or gaaninen faasi kuivattiin MgSO^illa, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 0,30 g raakaa tuotetta, jota käytettiin sellaisenaan.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,69 (d, J = 5 Hz, 3H), 15 4,42 (m, 1H), 4,83 (m, 2H).
B. MetyyliaminokarbonyyliPhe
Esimerkin 111A tuotteesta (0,30 g) poistettiin suojaus esimerkissä 100 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,23 g raakaa happoa, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
20 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 2,62 (s, 3H), 4,33 (m, 1H) .
C. MetyyliaminokarbonyyliPheNle-bentsyyliesteri
Esimerkin 111B tuote (0,23 g) kytkettiin yhdisteeseen NleOBn käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerk- 25 ki 58), jolloin saatiin 0,38 g raakaa ainetta, jota käytettiin edelleen puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,51 (br, 3H), 4,29 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 5,14 (s, 2H).
D. MetyyliaminokarbonyyliPheNle 30 Esimerkin 111C tuotteesta (0,37 g) poistettiin suo jaus esimerkisssä 100 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,29 g raakaa happoa, jota käytettiin puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 2,52 (d, J = 5 Hz, 3H), 4,17 (m, 1H), 4,46 (m, 2H).
G n 7 4 ,<
144 ✓ U G τ O
E. MetyyliaminokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyy-liesteri_
Esimerkin 111D tuote (0,15 g) kytkettiin 0,13 g:aan yhdistettä HCl-nor-C-StaOiPr käyttämällä tavallista DEC-5 reaktiota (esimerkki 58), jolloin saatiin 0,13 g puhdasta tuotetta kromatografoinnin (CH2Cl2-metanoli 9:1) jälkeen.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,77 (d, J= 5 Hz, 3H), 4,34 (m, 2H), 4,47 (m, 1H), 4,74 (m, 1H), 5,01 (m, 1H).
Esimerkki 112 10 MorfoliinokarbonyyliThalaS-meCysnor-C-Sta-i-propyy- liesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=2-tie- nyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli, W=CHmiOH; ja z1=co2ch(ch3)2) A. MorfoliinokarbonyyliThi 15 Liuokseen, jossa oli 100 mg 2-tienyylialaniinia 15 ml:ssa dioksaani-vesiseosta (2:1, til./til.) ja jonka pH oli säädetty arvoon 11 natriumhydroksidilla, lisättiin 96 mg morfoliinosulfonyylikloridia ja reaktioseosta sekoitettiin yön ajan huoneen lämpötilassa. pH säädettiin uudel-20 leen arvoon 11 ja lisättiin vielä 40 mg sulfonyyliklori-dia. Kahden tunnin sekoittamisen jälkeen vesiliuos uutettiin metyleenikloridilla, pH säädettiin noin arvoon 2 ja uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen faasi erotettiin, pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivattiin 25 (Na2SO^). Liuotin poistettiin, jolloin saatiin 66 mg välituotetta.
B. MorfoliinokarbonyyliThiS-MeCysnor-C-Sta-i- propyyliesteri_
Noudattamalla esimerkin 55 yleistä menetelmää 100 30 mg:sta esimerkin 92B tuotetta, 66 mg:sta esimerkin 112A tuotetta, 48 mg:sta DCC:tä, 32 mg:sta HBT:tä ja 20 mg:sta N-metyylimorfoliinia saatiin 168 mg raakaa tuotetta. Kro-matografoimalla silikageelillä saatiin 59 mg puhdasta tuotetta.
35 NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,13 (m, 6H), 2,05 (s, 3H), 3,0 - 3,4 (m, 4H), 3,5 - 3,65 (m, 4H) ja 6,85 - 7,15 (m, 3H) .
145 90 3 46
Esimerkki 113
MorfoliinokarbonyyliNalaS-MeCysnor-C-Sta-i-pro- pyyliesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M= 1-naftyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli; W= 5 CH ! I f OH; ja Z^CC^CH (CH3) 2) A. MorfoliinokarbonyyliNala Käyttämällä esimerkin 112A yleistä menetelmää 420 mg:sta morfoliinosulfonyylikloridia, 500 mg:sta 1-naf-tyylialaniinia, 3 mlrsta 1-norm. natriumhydroksidia ja 10 200 mg:sta natriumvetykarbonaattia saatiin 5 mlrssa tetra- hydrofuraani-vesiseosta 1:1 120 mg haluttua välituotetta.
B. MorfoliinokarbonyyliNalaS-MeCysnor-C-Sta-i- propyyliesteri_ Käyttämällä tavallista kytkentämenetelmää 145 mg:sta 15 esimerkin 93B tuotetta, 131 mgista edellä saatua tuotetta, 82 mgrsta DCC:tä, 55 mg:sta HBT:tä ja 45 ^ul:sta N-metyy-limorfoliinia saatiin 15 ml:ssa metyleenikloridia 253 mg tuotetta, joka kromatografoitiin silikageelillä käyttämällä seosta 1 - 1,5 % metanolia kloroformissa, 83 mg.
20 NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,2 (d, J = 5 Hz, 6H), 2.01 (s, 3H), 3,05 (m, 2H), 3,41 (m, 2H) ja 6,75 - 8,18 (7H, m).
Esimerkki 114
MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-metyylies-25 teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; R?=CH3SCH2-; Q=H; X=sykloheksyyli; W=CH,,,OH; ja
Zi=C02CH3)
Noudattamalla tavallista kytkentävaiheen menetelmää 135 mg:sta S-MeCysnor-C-Sta-metyyliesteri-hydroklori-30 dia, 88,2 mg:sta yhdistettä morfoliinokarbonyyliPhe, 32.1 mg:sta N-metyylimorfoliinia, 42,9 mg:sta HBT:tä ja 65,4 mg:sta DCC:tä saatiin 20 ml:ssa metyleenikloridia tuotetta. Kromatografoimalla silikageelillä käyttämällä kloroformi-metanoliseosta (99:1, til./til.) saatiin 103 35 mg puhdasta tuotetta, joka oli identtistä esimerkissä 58 valmistetun tuotteen kanssa.
146 9 0 3 4 6 NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,1 (s, 3H), (s, 3H), 3,0 - 3,4 (m, 4H), 3,5 - 3,84 (m, 4H) ja 7,3 (s, 5H). Esimerkki 115
MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-N-metyyli-5 amidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; Q=H; M=fe- nyyli; X=sykloheksyyli; W=CHMiOH; ja z1=conhch3)
Esimerkin 114 tuotetta (45 mg) liuotettuna 10 ml:aan metanolia käsiteltiin metyyliamiinin kanssa kyllästymiseen 10 asti ja reaktioseosta varastoitiin huoneen lämpötilassa yön ajan. Liuotin poistettiin ja jäännösträ trituroitiin dietyylieetterin kanssa, 30 mg. Tuote oli identtinen esimerkin 86 tuotteen kanssa.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 2,1 (s, 3H) , 2,65 (s, 15 3H) , 2,85 (d, J = 5 Hz, 2H) ja 7,2 (s, 5H) .
Esimerkki 116
MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-N-trifluo-rietyyliamidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M= fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli; W= 20 CHIMOH; Z1= CONHC^CF^ A. Bocnor-C-Sta-N-trifluorietyyliamidi Käyttämällä yleistä kytkentämenetelmää 33 mg:sta tri fluorietyyliamiinia, hydrokloridina, 75,3 mg:sta yhdistettä Bocnor-C-Sta, 25 mg:sta N-metyylimorfoliinia, 33 25 mg:sta HBT:tä ja 52,5 mg:sta DCC:tä 20 ml:ssa metyleeni-kloridia, saatiin 121 mg haluttua välituotetta vaahtona.
B. nor-C-Sta-N-trifluorietyyliamidi-hydrokloridi Esimerkin 116A tuotteesta poistettiin suojaus käyttämällä HCl-dioksaania (5 ml) huoneen lämpötilassa 90 mi- 30 nuutin kuluessa. Poistamalla liuotin saatiin 87 mg tuotetta .
C. BocS-MeCysnor-C-Sta-N-trifluorietyyliamidi Käyttämällä yleistä kytkentämenetelmää 87 mg:sta esimerkin 116B tuotetta, 58,8 mg:sta yhdistettä BocS-MeCys, 35 25,3 mg:sta N-metyylimorfoliinia, 33,8 mg:sta HBT:tä ja 147 90 346 51,5 mg:sta DCC:tä 20 mlrssa metyleenikloridia, saatiin 146 mg haluttua välituotetta.
D. S-MeCysnor-C-Sta-N-trifluorietyyliamidi-hydro- kloridi__ 5 Esimerkin 116C tuotteesta (146 mg) poistettiin suojaus käyttämällä 5 ml Helillä kyllästettyä dioksaania, 90 minuutin kuluessa huoneen lämpötilassa. Poistamalla liuotin saatiin 121 mg tuotetta.
E. MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-N-tri- 10 fluorietyyliamidi_ Jälleen käyttämällä kytkentämenetelmää 121 mg:sta esimerkin 116D tuotetta, 69,5 mg:sta yhdistettä morfolii-nokarbonyyliPhe, 25,3 mg:sta N-metyylimorfoliinia, 33,8 mg:sta HBTrtä ja 51,5 mg:sta DCC:tä 20 ml:ssa metyleeni-15 kloridia saatiin 123 mg tuotetta. Kromatografoimalla si-likageelillä käyttämällä kloroformi-metanoliseosta (99:1, til./til.) saatiin 57 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 3,1 - 3,5 (m, 4H), 3,5 - 3,8 (m, 4H) ja 7,3 (s, 5H).
20 Esimerkki 117 (2-metoksikarbonyylipyrrolid-l-yyli)karbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=l-(2-metok-sikarbonyylipyrrolidyyli)karbonyyliamino; M=fenyy-li; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli; W=CHιIiOH; 25 ja Z1=C02CH(CH3)2) A. (2-metoksikarbonyylipyrrolid-l-yyli)karbonyyli-
Phe-bentsyyliesteri_
Liuosta, jossa oli 66 mg proliini-metyyliesteri-hydrokloridia 10 ml:ssa CH2C12 ja 70 /Ulissa N,N-di-iso-30 propyylietyyliamiinia, käsiteltiin 112 mg:n kanssa 1-bent-syylioksikarbonyyli-2-fenetyyli-isosyanaattia 0°C:ssa ja reaktioseosta sekoitettiin yön ajan. Jatkokäsittelemällä saatiin 153 mg haluttua välituotetta.
148 90 346 B. (2-metoksikarbonyylipyrrolid-l-yyli)karboksyy- liPhe______ Käyttämällä esimerkin 18B menetelmää esimerkin 117A tuotteesta lohkaistiin bentsyyli, jolloin saatiin 170 mg 5 välituotetta.
C. (2-metoksikarbonyylipyrrolid-l-yyli)karbonyyli-
Phe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri_ Käyttämällä tavallista kytkentämenetelmää esimerkin 92B tuotteesta (174 mg), edellä saadusta välituotteesta 10 (140 mg), 82 mg:sta DCC:tä, 55 mg:sta HBt:tä ja 45 ^ulista N-metyylimorfoliinia 10 ml:ssa CH2CI2, saatiin 230 mg raakaa tuotetta. Kromatografoimalla silikageelillä käyttämällä 1 - 1,5 % metanolia sisältävää kloroformia, saatiin 102 mg tuotetta.
15 NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,21 (6H, m), 2,09 (s, 3H), 2,78 - 2,89 (2H, m), 3,0 - 3,2 (m, 2H), 3,65 (s, 3H) ja 7,12 - 7,32 (m, 5H).
Esimerkki 118 N-metyyli-N-metoksikarbonyylimetyyliaminokarbonyy-20 liPheS-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z= CH3OCOCH2N(CH3)CONH; M=fenyyli; Q=H; i^CHjSO^-; X=sykloheksyyli; W=CH»iiOH; Z^CC^CH (CH3) A. N-(metoksikarbonyylimetyyli)-N-metyyliaminokar- bonyyliPhe-bentsyyliesteri_ 25 Reaktioseosta, jossa oli L-fenyylialaniini-bentsyy- liesteriä (171 mg), 72 mg N-metyyli-N-kloorikarbonyyligly-siini-metyyliesteriä ja 47 ^ul N-metyylimorfoliinia 15 ml:ssa CH2CI2, sekoitettiin 0°C:ssa ja sitten yön ajan huoneen lämpötilassa. Lisättiin 4-dimetyyliaminopyridii-30 niä (10 mg) ja sekoittamista jatkettiin kolme tuntia. Lisättiin vielä karbamyylikloridia (40 mg) ja reaktioseosta sekoitettiin useita päiviä. Liuotin poistettiin ja jäännös kromatografoitiin silikageelillä käyttämällä kloroformia. Puhdas välituote, 105 mg, eristettiin fraktioissa 22 - 30.
149 90 346 B. N-(metoksikarbonyylimetyyli)-N-metyyliaminokar- bonyyliPhe_
Esimerkin 118A tuotteesta lohkaistiin bentsyyli noudattamalla esimerkin 18B yleistä menetelmää, jolloin saa-5 tiin 129 mg raakaa välituotetta.
C. N-metyyli-N-metoksikarbonyylimetyyliaminokarbo- nyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri_ Käyttämällä aikaisemmin selostettua kytkentämene-telmää, 155 mgrsta esimerkin 92B tuotetta, 115 mg:sta edel-10 lä saatua tuotetta, 81 mg:sta DCC:tä, 53 mg:sta HBT:tä ja 43 yul:sta N-metyylimorfoliinia 10 ml:ssa saatiin 251 mg tuotetta. Kromatografoimalla silikageelillä käyttämällä seosta 1 - 2 % metanolia kloroformissa, saatiin 70 mg haluttua tuotetta.
15 NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 1,23 (m, 6H) , 2,03 (s, 3H), 2,9 (s, 3H), 3,65 (s, 3H) ja 7,1 - 7,28 (m, 5H).
Esimerkki 119 N-metyyliN-metoksikarbonyylimetyyliaminokarbonyy- liPheNlenor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=CH3OCOCHN-20 (CH^)CONH; M=fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=syklo- heksyyli; W=CH> ι lOH; ja Z^CC^CH (CH^) A. Nlenor-C-Sta-hydrokloridi Käyttämällä tavallista kytkentämenetelmää yhdisteestä BocNle (78 mg) nor-C-Sta-i-propyyliesteri-hydroklo-25 ridista, 69 mgrsta DCCrtä, 45 mgrsta HBTrtä ja 37 ^ulrsta N-metyylimorfoliinia 10 mlrssa CH2CI2 saatiin 171 mg tuotetta .
Boc poistettiin tuotteesta käsittelemällä 10 mlrn kanssa HClrlla kyllästettyä dioksaania kolmen tunnin ajan. 30 Jatkokäsittelemällä saatiin 155 mg mainittua tuotetta.
B. N-metyyli-N-metoksikarbonyylimetyyliamino-karbo- nyyliPheNlenor-C-Sta-i-propyyliesteri_ Jälleen käyttämällä tavallista kytkentämenetelmää, 101 mgrsta esimerkin 118B tuotetta, 155 mgrsta edellä saa-35 tua tuotetta, 70 mgrsta DCCrtä, 46 mgrsta HBTrtä ja 37 ^ulrsta N-metyylimorfoliinia saatiin 209 tuotetta, joka 150 903 4 6 puhdistettiin kromatografoimalla silikageelillä käyttämällä eluenttina seosta 0,5 - 1 % metanolia kloroformissa, 51 mg.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,85 (t, J = 5 Hz, 3H), 5 1,12 (m, 6H), 2,77 (s, 3H), 3,09 - 3,19 (m, 2H), 3,62 (s, 3H) ja 7,1 - 7,29.
Esimerkki 120
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-N-2-metyylibu-tyyliamidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fe-10 nyyli; Q=H; R-^n-butyyli; X=sykloheksyyli; W= CHIIIOH; ja Z =CONHCH2CH (CH3) ) A. nor-C-Sta-N-2-metyylibutyyliamidi-hydrokloridi Lähtemällä 80,6 mg:sta yhdistettä Boc-nor-C-Sta ja 22,3 mg:sta 2-metyylibutyyliamiinia ja käyttämällä 15 esimerkin 64A DCC-kytkentämenetelmää, poistamalla sen jälkeen suojaus esimerkin 64B menetelmällä, saatiin 87 mg mainittua tuotetta.
B. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-N-2-metyy- libutyyliamidi_ 20 MorfoliinokarbonyyliPheNle (100 mg) kytkettiin yhdisteeseen nor-C-Sta-N-2-metyylibutyyliamidi käyttämällä esimerkin 55 DCC-menetelmää. Raaka aine kromatografoi-tiin silikageelillä (CHCl3-metanoli 99:1) ja 80 x 4 ml:n fraktioiden jälkeen (97,5:2,5) saatiin 80 mg haluttua tuo-25 tetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,8 - 1,05 (m, 6H), 2,5 (d, J = 5 Hz, 2H), 3,0 - 3,4 (m, 4H), 3,4 - 3,84 (m, 4H), 5,35 (d, J = 5 Hz, 1H) ja 7,3 (s, 5H).
151 90346
Esimerkki 121
MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-N-2,2-di-metyyli-3-dimetyyliaminopropyyliamidi (I, Z=morfo-liinokarbonyyliamino; M=fenyyli? Q=H; R2=CH3SCH2~? 5 X=sykloheksyyli; W=CHIlIOH; ja Z1=CONHCH2C(CH3)2~ ch2n(ch3)2) A. nor-C-Sta-N-2,2-dimetyyli-3-dimetyyliaminopro-pyyliamidihydrokloridi Lähtemällä 50 mg:sta yhdistettä Boc-nor-C-Sta ja 10 22 mg:sta N,N,2,2-tetrametyyli-l,3-propaanidiamiinia ja käyttämällä esimerkin 64A DCC-kytkentämenetelmää ja poistamalla sen jälkeen suojaus esimerkin 64B menetelmällä, saatiin 98 mg haluttua välituotetta.
B. S-MeCysnor-C-Sta-2,2-dimetyyli-3-dimetyyliamino- 15 propyyliamidihydrokloridi_ Käyttämällä 98 mg esimerkin 121A tuotetta ja 60 mg yhdistettä Boc-S-MeCys ja suorittamalla sen jälkeen DCC-kytkentämenetelmä ja sen jälkeen Boc-suojauksen poistomenetelmä, saatiin 120 mg tuotetta.
20 C. MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-2,2-di- metyyli-3-dimetyyliaminopropyyliamidi_
Esimerkin 121B tuote (120 mg) ja morfoliinokarbo-nyyliPhe (66 mg) kytkettiin yhteen käyttämällä esimerkin 55 DCC-menetelmää, jolloin saanto oli 116 mg.
25 NMR (300 MHz, CDC13 + CH3OD) delta 0,81 (s, 6H), 1,15 (s, 6H) , 2,0 (s, 3H) , 3,1 - 3,4 (m, 4H) , 3,4 - 3,64 (m, 4H) ja 7,06 - 7,15 (m, 5H).
Esimerkki 122
MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-N-2-piko-30 lyyliamidi (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fe- nyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli; W= CHIIIOH; ja Z^CONHCH^^N) A. nor-D-Sta-N-2-pikolyyliamidi-dihydrokloridi Käyttämällä esimerkin 64A kytkentämenetelmää 35 60,2 mg:sta yhdistettä Boc-nor-C-Sta ja 21,6 mg:sta 2-ami- nomotyylipyridiiniä saatiin 108 mg Bocnor-C-Sta-N-2-piko- 152 90 346 lyyliamidia, josta poistettiin suojaus käyttämällä esimerkin 64B menetelmää, jolloin saatiin 83 mg mainittua välituotetta .
B. S-MeCysnor-C-Sta-N-2-pikolyyliamidi-dihydroklo- 5 ridi_
BocS-MeCys (47 mg) kytkettiin 83 mg:n kanssa edellä saatua tuotetta käyttämällä esimerkin 55 DCC-menetel-mää, jolloin saatiin 126 mg tuotetta, josta poistettiin suojaus kloorivedyllä dioksaanissa, jolloin saatiin 78 mg 10 mainittua tuotetta.
C. MorfoliinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-N-2- pikolyyliamidi_ Jälleen, käyttämällä esimerkin 55 DCC-kytkentäme-netelmää, 78 mg:sta esimerkin 122B tuotetta ja 44,9 mg:sta 15 yhdistettä morfoliinokarbonyyliPhe saatiin 113 mg tuotetta, joka kromatografoitiin silikageelillä käyttämällä eluenttina kloroformi-metanoliseoksia 99:1 - 95:5, 22 mg.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 2,05 (s, 3H) , 2,85 (J = 5 Hz, 2H), 3,0 - 3,4 (m, 4H), 3,4 - 3,7 (m, 4H) ja 20 7,0-7,9 (m, 9H).
Esimerkki 123 3-hydroksipyrid-2-yylikarbonyyliPheS-MeCysnor-C-
Sta-i-propyyliesteri (I, Z=3-hydroksipyrid-2-yyli- karbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X= 25 sykloheksyyli; W=CHUJOH; ja Z1=C02CH (CH3) 2>
Esimerkin 38B tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti, paitsi että amiini-hydrokloridin neut-raloimiseen käytettiin 34 ^ul, 1,2-ekvivalenttia trietyy-liamiinia, 110 mg:sta esimerkin 39 tuotetta ja 28 mg:sta 30 3-hydroksipikoliinihappoa saatiin 78 mg väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,42 etyyliasetaatti-heksaaniseoksessa 2:1.
NMR, CDCl^, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 1,26 ja 1,27 (d, 3H ea), 2,11 (s, 3H), 2,60 ja 2,85 (dd, lii ea) , 3,26 (m, 3H) , 4,09, 4,37, 4,45, 4,79 ja 5,04 (m, 35 1H ea) , 6,5, 6,81 ja 8,49 (d, 1H ea) , 8,08 (m, 1H).
153 90346
Esimerkki 124
MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-sykloheksyyli- metyyliketoni (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M= fenyyli; Q=H; R2=n-butyyli; X=sykloheksyyli; W= 5 CHlIiOH; ja Z1=COCH2C6H11) A. (S)-4-t-butoksikarbonyyliamino-3(R)-bentsyyli- oksi-1,5-disykloheksyyli-2-butanoni_
Liuokseen, jossa oli sykloheksyylimetyylimagnesium-bromidia (saatu 0,78 ml:sta sykloheksyylimetyylibromidia 10 ja 0,14 g:sta magnesiumia 3 mlrssa eetteriä) käsiteltiin 1,00 g:n kanssa 3(S)-t-butoksikarbonyyliamino-2(R)-bent-syylioksi-4-sykloheksyylibutyylialdehydiä (esimerkin 5A tuote, US-patentti 4 668 769) 6 ml:ssa eetteriä 5°C:ssa 2-3 minuuttia. 25 minuutin kuluttua seosta käsiteltiin 15 ammoniumkloridin vesiliuoksen kanssa, uutettiin eetterillä ja pestiin 1-norm. HCl:lla, natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella, kuivattiin, haihdutettiin kuiviin ja puhdistettiin piidioksidilla eluoimalla etyyliasetaatti/heksaa-nien seoksella, jolloin saatiin 278 mg kahden alkoholi-20 isomeerin seosta, TLC Rf-arvot 0,48 ja 0,41 etyyliasetaat-ti/heksaanien seoksessa 1:3. Tämä tuote liuotettiin 5 mlraan eetteri-asetoniseosta 1:2 ja käsiteltiin 0°C:ssa 1 ml:n kanssa kromihappoliuosta (Org. Syn. Coll. Voi V, sivu 310). 15 minuutin kuluttua seos laimennettiin eetterillä 25 ja pestiin NaOH:n vesiliuoksella, kuivattiin ja kromato-grafoitiin piidioksidilla etyyliasetaatti/heksaanien seoksella, jolloin saatiin 201 mg keltaista öljyä, TLC Rf 0,59 etyyliasetaatti/heksaanien seoksessa 1:3.
B. 4(S)-amino-3(R)-bentsyylioksi-1,5-disyklohek- 30 syyli-2-butanoni-hydrokloridi_
Esimerkin 124A tuote (195 mg) liuotettiin 2 ml:aan 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta ja sekoitettiin 25°C:ssa tunnin ajan, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin, jolloin saatiin 165 mg väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,56 seoksessa 35 C (täplitetty levy altistettu NH2:lle ennen eluointia).
154 90 34 6 C. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-sykloheksyy- 1imetyy1iketoni-bentsyyliesteri_
Esimerkin 38B tuotteen yleisen valmistusmenetelmän mukaisesti, paitsi että amiinisuolan neutraloimiseen käy-5 tettiin 1,3 ekvivalenttia trietyyliamiinia, 158 mgrsta esimerkin 124B tuotetta ja 152 mg:sta esimerkin 7C tuotetta saatiin piidioksidilla etyyliasetaatti/heksaaniseoksel-la puhdistamisen jälkeen 228 mg väritöntä vaahtoa, TLC Rf 0,29 seoksessa A 2:1.
10 D. MorfoliinokarbonyyliPheNlenor-C-Sta-sykloheksyy- 1imetyyliketoni_
Esimerkin 124C tuote (220 mg) liuotettiin 20 mlraan metanoli-etikkahapposeosta 1:1 ja ravisteltiin 250 mg:n kanssa 10-%:ista Pd/C:tä 22 tuntia 25°C:ssa ja 50 psi:n 15 vetypaineessa, suodatettiin Supercel'in läpi, haihdutettiin kuiviin, haihdutettiin yhdessä lisätyn tolueenin ja eetterin kanssa ja kuivattiin, jolloin saatiin 179 mg kullanruskeaa vaahtoa, joka kromatografoitiin piidioksidilla etyyliasetaatti-heksaanien seoksessa, jolloin saatiin 20 131 mg väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,44 etyyliasetaatissa.
Ill NMR, CDCl^, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 0,89 (t, 3H), 2,40, 2,53, 3,05 ja 3,12 (dd, 1H ea), 3,28 (m), 3,62 (m, 4H), 4,07 (br, 1H), 4,15 (m, 1H9, 4,52 (m, 2H), 5,00, 6,23 ja 6,51 (d, 1H ea).
25 Esimerkki 125 4-oksopiperidiinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri-etyleeniketaali (I, Z=4-oksopiperi-diinokarbonyyliamino-etyleeniketaali; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli; W=CH» MOH; ja 30 Z1=C02CH (CH3)2)
Esimerkin 50 tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmän mukaisesti 150 mg:sta esimerkin 39 tuotetta ja 32 ^ul:sta 4-piperidoni-etyleeniketaalia saatiin 60 mg väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,30 etyyliasetaatissa, HPLC 35 2,76 ja 3,09 minuuttia (noin 2:1) asetonitriili-vesiseok- sessa 80/20. Pääkomponentti erotettiin puolipreparatiivi- 155 9 0 346 sen käänteisfaasi-HPLC:n avulla 9,8 x 250 mm:n Zorbax C-8-kolonnissa asetonitriili-vesiseoksessa 70/30, jolloin 60 mg:sta seosta saatiin 28 mg aikaisemmin eluoitu-vaa yhdistettä.
5 1H NMR, CDCl^, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 0,92 (m), 1,26 ja 1,28 (d, 3H ea), 2,09 (s, 3H), 2,72, 2,93, 3,08 ja 3,29 (dd, 1H ea), 3,34 (m), 3,92 (s, 4H), 4,10 (br, 1H), 4,35 - 4,53 (m, 3H), 4,87 (d, 1H), 5,06 (septetti, 1H), 6,95 ja 7,11 (d, 1H ea), 7,18 - 7,38 (m, 10 aromaattinen).
Esimerkki 126 N-BocPiperid-4-yylikarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=N-Bocpiperid-4-yylikarbonyy-liamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=syklohek-15 syyli; W=CHi'iOH; Z1=C02CH(CH3)2) Käyttämällä esimerkin 38B tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmää, paitsi että amiini-hydrokloridin neutralointiin käytettiin 1,3 ekvivalenttia trietyyliamii-nia, 230 mg:sta esimerkin 39 tuotetta ja 97 mg:sta N-Boc-20 isonipekotiinihappoa saatiin 241 mg väritöntä jauhetta, TLC Rf 0,49 etyyliasetaatissa.
1H NMR, CDCl^, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 1,28 (d, 6H), 1,46 (s, 9H), 2,14 (s, 3H), 2,62, 2,91, 3,05 ja 3,16 (dd, 1H ea), 2,70 (m), 3,39, 5,98, 6,53 ja 25 6,75 (d, 1H ea), 4,35 ja 4,45 (m, 1H ea), 5,04 (septetti, 1H), 7,13 - 7,37 (m, aromaattinen).
Esimerkki 127
Piperid-4-yylikarbinyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z)piperid-4-yylikarbonyyliami-30 no; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2-; X=sykloheksyyli; W=CHil 1 OH; ja Z1=C02CH(CH3)2)
Esimerkin 126 tuote (175 mg) liuotettiin 4-norm. HCl:n dioksaaniliuokseen 30 minuutiksi 25°C:ssa, haihdutettiin kuiviin ja kuivattiin, jolloin saatiin 157 mg 35 vaaleankeltaista jauhetta, TLC Rf 0,20 seoksessa C (täp-litetty levy altistettiin ammoniakille ennen eluointia).
156 90 3 46 1H NMR, DMSO-dg, 250 MHz, osittainen, delta ppm: 1,28 ja 1,29 (d, 3H ea), 2,09 (s, 3H), 4,00, 4,21 ja 4,45 (m, 1H ea), 4,86 (septetti, 1H), 5,36, 7,69, 8,15 ja 8,30 (d, 1H ea).
5 Esimerkki 128 4-oksopiperidiinokarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z=4-oksopiperidiinokarbonyyli-amino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2~; X=sykloheksyy-li; W=CH' f I OH; ja Z1=C02CH(CH3)2> 10 A. 4-oksopiperidiinokarbonyyliPhe-bentsyyliesteri 4-piperidoni-hydrokloridi (819 mg) liuotettiin 15 ml:aan dikloorimetaania ja käsiteltiin 0°C:ssa 740 ^ul:n kanssa trietyyliamiinia ja 1,50 g:n kanssa esimerkin 7A tuotetta (isosyanaattoPheOBn). 1,5 tunnin kuluttua seos 15 liuotettiin etyyliasetaattiin, pestiin 1-norm. HCltlla (3 x), NaHCO^rn vesiliuoksella, kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin MgSO^illa, haihdutettiin kuiviin, liuotettiin 10 ml:aan kuumaa etyyliasetaatti-heksaanien seosta 2:1, jäähdytettiin ja suodattamalla otettiin talteen 20 0,6 g kiinteää ainetta, TLC Rf 0,53 seoksessa A 1:1. Emä- liuokset kromatografoitiin piidioksidilla etyyliasetaatti-heksaanien seoksella 1:1, jolloin saatiin 322 mg kirkasta öljyä, TLC Rf 0,13 seoksessa A, jonka NMR-spektri oli otsikon rakenteen mukainen.
25 B. 4-oksopiperidiinokarbonyyliPhe
Esimerkin 128A tuote (297 mg) liuotettiin 15 ml:aan etikkahappo-metanoliseosta 1:10 ja ravisteltiin 25°C:ssa ja 50 psi:n vetypaineessa 150 mg:n kanssa 10-%:ista PdC:tä 30 minuuttia, suodatettiin, haihdutettiin kuiviin ja haih-30 dutettiin yhdessä lisätyn tolueenin kanssa, jolloin saatiin 227 mg väritöntä vaahtoa, TLC Rf 0,05 etyyliasetaatissa .
C. 4-oksopiperidiinokarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-
Sta-i-propyyliesteri_ 35 Käyttämällä esimerkin 38B tuotteen valmistus- ja puhdistusmenetelmää, paitsi että amiini-hydrokloridin 157 90 346 neutraloimiseen käytettiin trietyyliamiinia, 100 mgrsta S-MeCysnor-C-Sta-isopropyyliesteri-hydrokloridia (esimerkin 48D tuote) ja 73 mg:sta esimerkin 128B tuotetta saatiin 116 mg väritöntä kiinteää ainetta, TLC Rf 0,29 etyy-5 liasetaatissa.
Esimerkki 129
KarboksibutyylikarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i- propyyliesteri (I, Z=HC>2C (CH2> ^CONH-; M=fenyyli; Q=H; R2=CH3SCH2; X=sykloheksyyli; W=CHiiiOH; ja io z1=co2ch(ch3)2) A. (CH3)3C02C(CH2)^COPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-pro- pyyliesteri__
Heksaanidikarboksyylihappo-mono-tert-butyylieste-ri (0,10 g) kondensoitiin 0,10 g:n kanssa Phe-S-MeCysnor-15 C-Sta-i-propyyliesterihydrokloridia käyttämällä esimerkissä 58 selostettua DEC-reaktiota. Kromatografoimalla Sioilla (metanoli-CH2cl2 1:19) saatiin 95 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 1,41 (s, 9H) , 4,38 (m, 20 2H), 4,62 (m, 1H), 5,01 (m, 1H).
B. KarboksibutyylikarbonyyliPheS-MeCysnor-C-Sta-i- propyyliesteri_
Liuosta, jossa oli 90 mg edellä saatua t-butyyli-esteriä 2 ml:ssa trifluorietikkahappoa ja 2 ml:ssa CH2C12, 25 sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Tavallisen happo-emäsjatkokäsittelyn jälkeen raaka aine puhdistettiin kromatografoimalla (CH2Cl2-metanoli 9:1), jolloin saatiin 52 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,08 (s, 3H), 4,40 (m, 30 2H), 4,73 (m, 1H), 4,97 (m, 1H).
158 9 G346
Esimerkki 130
AminopentyylikarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-pro- pyyliesteri (I, Z=H2N(CH2)^CONH-; M=fenyyli; Q=H; R2=CH2SCH2; X=sykloheksyyli; W=CHi MOH; ja Z^= 5 C02CH(CH3)2) A. BocaminopentyylikarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri____ N-Boc-6-aminoheksaanihappo (59 mg) kytkettiin Phe- S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri-hydrokloridiin (133 mg) 10 käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 58), jolloin saatiin 145 mg raakaa tuotetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,43 (s, 9H), 2,12 (s, 3H), 4,35 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,58 (m, 1H), 4,62 (m, 15 1H), 5,03 (m, 1H).
C. AminopentyylikarbonyyliPhe-S-MeCysnor-C-Sta-i-propyyliesteri_
Liuosta, jossa oli 140 mg esimerkin 130A tuotetta 3 ml:ssa 4-norm. HCl:n dioksaaniliuosta, sekoitettiin 45 20 minuuttia ja haihdutettiin kuiviin. Happo-emäsjatkokäsittelyn jälkeen saatiin 100 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 2,07 (s, 3H) , 4,36 (m, 2H), 4,64 (m, 1H), 4,98 (m, 1H).
Esimerkki 131 25 MorfoliinokarbonyyliPheAspnor-C-Sta-i-propyylies- teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=H02CCH2; X=sykloheksyyli; W=CHii»0H; ja z1=co2ch(ch3)2) A. MorfoliinokarbonyyliPhe-Asp-bentsyyliesteri 30 Aspartiinihappo-/3-bentsyyliesteriä (0,4 g) käsi teltiin morfoliinokarbonyyliPhe-hydroksisukkiini-imidi-esterin kanssa esimerkissä 80 selostetulla tavalla, jolloin saatiin 0,42 g raakaa ainetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
35 NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,34 (m, 1H), 4,61 (m, 1H), 5,10 (s, 2H) .
159 90 3 46 B. MorfoliinokarbonyyliPhe-Asp(O-bentsyyliesteri)- nor-C-Sta-i-propyyliesteri_
Esimerkin 131A tuote (0,29 g) kytkettiin 0,12 g:aan nor-C-Sta-i-propyyliesteriä käyttämällä tavallista DEC-reak-5 tiota (esimerkki 76), jolloin saatiin 0,20 g raakaa ainetta, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, CDCl-j) delta 4,39 (m, 2H) , 4,65 (m, 1H), 5,02 (m, 1H), 5,09 (AB, 2H).
C. MorfoliinokarbonyyliPhe-Aspnor-C-Sta-i-propyy- 10 liesteri_
Liuosta, jossa oli 0,20 g edellä saatua raakaa bent-syyliesteriä ja 0,4 g 10-%:ista Pd/C:tä 30 ml:ssa metano-lia, hydrattiin 45 psi:n paineessa 30 minuuttia. Seos suodatettiin Celiten läpi ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös 15 kromatografoitiin (CHCl^-metanoli-AcOH 23:1:1), jolloin saatiin 81 mg puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) 4,17 (m, 1H), 4,28 (m, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,84 (m, 1H).
Esimerkki 132 20 MorfoliinokarbonyyliPhe-Asnnor-C-Sta-i-propyylies teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=H2^COCH2; X=sykloheksyyli; W=CH»i<OH; ja z1=co2ch(ch3)2) A. MorfoliinokarbonyyliPheAsn 25 Asparagiinia (0,5 g) käsiteltiin 1,0 g:n kanssa morfoliinokarbonyyliPhe-hydroksi-sukkiini-imidiä esimerkissä 80 selostetulla tavalla. Raakaa ainetta (0,80 g) käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 4,10 (m, 1H), 3,34 (m, 30 1H), 4,53 (m, 1H).
• B. MorfoliinokarbonyyliPhe-Asnnor-C-Sta-i-propyy- liesteri_
Edellä saatu tuote (0,18 g) kytkettiin 0,10 g:aan nor-C-Sta-i-propyyliesteriä käyttämällä tavallista DEC-35 reaktiota (esimerkki 76), jolloin saatiin 0,17 g puhdasta tuotetta kromatografoinnin jälkeen (CH2Cl2~metanoli 9:1).
160 90346 NMR (300 MHz, CDC13) delta 4,39 (m, 2H), 4,64 (m, 1H), 5,01 (m, 1H).
Esimerkki 133
MorfoliinokarbonyyliPheValnor-C-Sta-i-propyylies-5 teri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=fenyyli; Q=H; R2=CH(CH3)2; X=sykloheksyyli; W=CHiMOH; ja z1=co2ch(ch3) 2) A. MorfoliinokarbonyyliPheVal
Valiinia (0,40 g) käsiteltiin 0,60 g:n kanssa mor-10 foliinokarbonyyliPhe-hydroksi-sukkiini-imidiesteriä esimerkissä 80 selostetulla tavalla. Raakaa ainetta (0,53 g) käytettiin enempää puhdistamatta.
NMR (300 MHz, DMSO-dg) delta 0,92 (d, J = 7 Hz, 3H), 4ml8 (m, 1H), 4,43 (m, 1H).
15 B. MorfoliinokarbonyyliPheValnor-C-Sta-n-propyyli- esteri_
Edellä saatu tuote (0,17 g) kytkettiin 0,10 g:aan nor-C-Sta-i-propyyliesteriä käyttämällä tavallista DEC-reaktiota (esimerkki 76). Raaka aine kromatografoitiin 20 (CH2Cl2-metanoli 24:1), jolloin saatiin 0,15 g puhdasta tuotetta.
NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,77 (d, J = 6 Hz, 3H), 0,84 (d, J = 7 Hz, 3H), 4,45 (m, 1H), 4,52 (m, 1H), 5,00 (m, 1H).
25 Esimerkki 134
IsovaleryyliPhe-Nlenor-C-Sta-i-propyyliesteri (I, Z= (CH3)2CHCH2CONH; M=fenyyli; Q=H; R2=N-butyyli; X=sykloheksyyli; W=CH>mOH; ja Z^=C02CH (CH3) 2) Käyttämällä edellä mainittua esimerkin 5B kytkentä-30 menetelmää 107 mg:sta yhdistettä isovaleryyliPhe-Nle, 72 mg:sta nor-C-Sta-i-propyyliesteriä, 68 mg:sta HBTrtä ja 57 mg:sta DEC:tä 1 ml:ssa CH2C12 saatiin, Sioilla kroma-tografoinnin jälkeen käytettäessä eluenttina etyyliase-tantti-heksaanien seosta 1:1, 121 mg haluttua tuotetta.
35 NMR (300 MHz, CDC13) delta 0,9 (m, 9H), 1,22 (d, 611), 2,93 - 3,08 (m, 2H) , 4,05 (m, 1H) , 4,19, 4,40, 4,66 161 90 3 46 (m, 1H ea) , 4,98 (septetti, 1H) , 6,09, 6,25, 6,52 (d, lii ea) ja 7,1 - 7,24 (ra, 5H).
Esimerkki 135
MorfoliinokarbonyylihomoPheNlenor-C-Sta-i-propyy-5 liesteri (I, Z=morfoliinokarbonyyliamino; M=bent- syyli; R2=n-butyyli; Q=H; X=sykloheksyyli; Z^= C02CH(CH3)2; ja W=CH' ' * OH) Käyttämällä esimerkin 55 DCC-menetelmää, 138 mg:sta yhdistettä morfoliinokarbonyylihomoPheNle, 95 mg:sta nor-10 C-Sta-i-propyyliesteri-hydrokloridia, 70 mgrsta DCC:tä, 46 mg:sta HBT:tä ja 38 ^ul:sta N-metyylimorfoliinia saatiin, kromatografoinnin jälkeen Sioilla käyttämällä 1 -2 % metanolia sisältävää kloroformia, 62 mg haluttua tuotetta .
15 NMR (300 MHz, CDC13) delta 1,2 (d, 5H), 3,2 (m, 2H), 3,5 (m, 2H) ja 7,2 (s, 5H).

Claims (9)

162 90316
1. H R2 välille.
1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten nor-statiini- ja nor-syklostatiinipolypeptidien valmistami-5 seksi, joilla on kaava M X / Q O ζ Z1 (I) Il -- H 10. r2 tai jTsH
15 Hi UI) o r5 oh joissa kaavoissa Z on R3-(Y)„-(A)p/ jossa Rx on amino, (C14 )alkyyliamino, (0Χ.3 )alkoksi(C2.4 )alkyleeniamino, kar-boksi( Cj.4 )alkyyli, hydroksi(C2_4)alkyleeniamino, (C10)al-20 koksiCOCH2N( CH3), amino ()alkyyli, morfolino, piperidyy-li, hydroksipiperidino, 4-oksopiperidino, piperatsino, 4-oksopiperidino-etyleeniketaali, 4-()alkyylipiperatsi-no, tiomorfolino, tiomorfolino-l-oksidi, tiomorfolino- 1,1-dioksidi, )alkoksikarbonyylipiperidyyli, 4- 25 (CM)alkoksikarbonyylipiperatsino, 3-oksomorfolino, 3,5-dioksomorfolino, hydroksi-pyridyyli, pyridyyli, (s)-pyr-rolid-2-yyli, N-t-butoksikarbonyyli-(s)-pyrrolid-2-yyli, (C1.3)alkoksikarbonyyli-(s)-pyrrolid-2-yyli tai 4-(Cx_4)al-kanoyylipiperatsino; Y on C=0, P(0CH3)=0 tai S02; A on 30 N(CH3), NH tai 0; m ja p ovat kumpikin kokonaislukuja 0 tai 1; M on fenyyli, bentsyyli, naftyyli, tienyyli, me-toksifenyyli, hydroksifenyyli, kloorifenyyli tai (C6_7)-sykloalkyyli; Q on metyyli tai vety; R2 on (C^g )alkyyli, ( CU3 )alkyylitio( 03.2 )alkyyli, ()alkoksi( )alkyyli, 35 bentsyylioksi ( Cx_2 )alkyyli, bentsyyli, hydroksiCC^.j )al- 163 9 0 3 4 6 kyyli, karboksi-()alkyyli, 90311100(02.3 )alkyyli, (C1-3) — alkyylisulfinyyli(C!.;, )alkyyli, (Ci.3 )alkyylisulfonyyli-(C2_2)alkyyli, 4-bentsyylioksikarbonyyliaminobutyyli, 4-' aminobutyyli, imidatsol-4-yylimetyyli, N-t-butoksikarbo- 5 nyyli-imidatsol-4-yylimetyyli tai karbamoyyli()alkyy-li; X on sykloheksyyli, i-propyyli tai fenyyli; W on CHIII OCOiCi.jJalkyylidiiCi.^alkyyliamino, CHHI OCO(C2_3)al-kyylipiperidino, CH|II0H, 0=0, CHIII N3, CH — N3, CH-«NH2, CHIII NH2, C(CH3)||I0H, C(CH3)-^0H, CHIII 0C0(Ci.2)alkyyli tai 10 CH III 000-(C2.2)alkyleeniC02H; Z1 on CH20H tai R-S-T, jossa R on C=0, S on O, NH, N(CH3), CH2 tai kemiallinen sidos, joka liittää R:n ja T:n; T on (C2_5)alkyyli, hydroksi ( C2.4 )alkyyli, CONH(Ci_4 )alkyyli, vety, trif luorietyyli , (C6_7 )sykloalkyyli, (C6.7 )sykloalkyylimetyyli, fenyyli, 15 bentsyyli, amino(C2.5)alkyyli. O-(C2.2)alkyyli-hydroksyy-liamino, morfolino, 4-(C2_2)alkyylipiperatsino tai omega-di(C2.2)alkyyliamino(C3.5)alkyyli; L on CH tai N; R5 on imidatsol-4-yylimetyyli tai (C2.5)alkyyli; ja R6 on (C2_4)-alkoksi tai (03.4)alkyyliamino edellyttäen, että kun m on 20 0 niin p on 0; kun A on 0 niin Y on C=0; kun T on CONH- (Οχ.4 )alkyyli niin S on NH, N(CH3) tai CH2; kun T on (C2_5)alkyyliamino, 0-(C2_2)alkyyli-hydroksyyliamino, morfolino tai 4-(C2_2)alkyylipiperatsino niin S on CH2 tai kemiallinen sidos, joka liittää R:n ja T:n; ja kun Z1 on 25 CH0 tai CH20H niin R3 on morfolino, tunnettu siitä, että muodostetaan amidisidos, C(0)N, dehydratoin-tikytkennän avulla, jolloin reaktioon osallistumattomat toiminnalliset ryhmät voivat olla suojattuja, minkä jälkeen mahdollisesti suoritetaan seuraavat vaiheet, joissa 30 1), poistetaan selektiivisesti suojaryhmät, 2) hapetetaan sulfidiryhmä sulfoksidiksi tai sulfoniksi, 3) hapetetaan W sen ollessa CH |ll OH tai CH*^0H ryhmäksi C=0, 4) asy-loidaan W sen ollessa CH Hl OH ja haluttaessa tuotteesta valmistetaan farmaseuttisesti hyväksyttävä suola. 164
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä kaavan I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että amidisidos muodostetaan osien M X
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä kaavan 10 I mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että amidisidos muodostetaan osien XM X ? S i / 15. ii Ξ ia 2
0 R-> välille. 2
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä kaavan II mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että amidisidos muodostetaan osien • l) R CO.H I . COR. H |ί = ja -
0 Rc OH välille. 5
5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kytkentäreagenssi on 1-hyd-roksibentsotriatsoli ja disykloheksyylikarbodi-imidi.
5. Q O / Z1 A * “vJk A7
6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kytkentäreagenssi on 1-hyd-30 roksibentsotriatsoli ja dimetyyliaminopropyylietyyli-kar-bodi-imidi.
7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mahdollinen sulfidiryhmän hapetusvaihe suoritetaan m-klooriperbentsoehapolla.
165 C 3 'τ 6
8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mahdollinen ryhmän CH ||| OH tai CH-^OH hapetusvaihe suoritetaan pyridium-dikromaatilla ja etikkahappoanhydridillä.
9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mahdollinen ryhmän CH III OH asylointivaihe suoritetaan hapolla ja patenttivaatimuksessa 5 tai 6 mainituilla kytkentäreagensseilla tai happohalogenidilla ja orgaanisella tertiaarisella 10 amiinilla. 166 9 0 3 ' 6
FI874787A 1986-10-31 1987-10-30 Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten nor-statiini- ja nor-syklostatiinipolypeptidien valmistamiseksi FI90346C (fi)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US92544986A 1986-10-31 1986-10-31
US92544986 1986-10-31
US6898287A 1987-07-01 1987-07-01
US6898287 1987-07-01

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI874787A0 FI874787A0 (fi) 1987-10-30
FI874787A FI874787A (fi) 1988-05-01
FI90346B true FI90346B (fi) 1993-10-15
FI90346C FI90346C (fi) 1994-01-25

Family

ID=26749566

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI874787A FI90346C (fi) 1986-10-31 1987-10-30 Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten nor-statiini- ja nor-syklostatiinipolypeptidien valmistamiseksi

Country Status (22)

Country Link
EP (1) EP0266950B1 (fi)
JP (1) JPH07108901B2 (fi)
KR (1) KR910002544B1 (fi)
CN (1) CN1027271C (fi)
AR (1) AR245732A1 (fi)
AU (1) AU585180B2 (fi)
CA (1) CA1310793C (fi)
DE (1) DE3788626T2 (fi)
DK (1) DK568487A (fi)
EG (1) EG18378A (fi)
ES (1) ES2061512T3 (fi)
FI (1) FI90346C (fi)
HU (1) HU207869B (fi)
IE (1) IE61087B1 (fi)
IL (1) IL84270A0 (fi)
MY (1) MY103189A (fi)
NO (1) NO173017C (fi)
NZ (1) NZ222373A (fi)
PH (1) PH25231A (fi)
PL (1) PL151679B1 (fi)
PT (1) PT86024B (fi)
YU (1) YU46819B (fi)

Families Citing this family (51)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5214129A (en) * 1985-01-23 1993-05-25 Abbott Laboratories Peptidylaminodiols
IL81234A (en) * 1986-01-16 1992-09-06 Abbott Lab Peptidylaminodiols,process for their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
WO1988003022A1 (en) * 1986-10-31 1988-05-05 Pfizer Inc. Relatively low molecular weight polypeptides as renin inhibitors
US4977141A (en) * 1987-10-01 1990-12-11 G. D. Searle & Co. Peptidyl α-aminoacyl aminodiol carbamates as anti-hypertensive agents
US4927807A (en) * 1987-10-06 1990-05-22 Abbott Laboratories Glaucoma treatment
JPH02503440A (ja) * 1988-03-03 1990-10-18 イー・アール・スクイブ・アンド・サンズ・インコーポレイテッド １，２‐ヒドロキシホスホネートおよびその誘導体
US5217958A (en) * 1988-03-03 1993-06-08 E. R. Squibb & Sons, Inc. 1,2-hydroxy phosphonates and derivatives thereof
US5736520A (en) * 1988-10-07 1998-04-07 Merrell Pharmaceuticals Inc. Peptidase inhibitors
ZA897514B (en) * 1988-10-07 1990-06-27 Merrell Dow Pharma Novel peptidase inhibitors
EP0376040A3 (en) * 1988-12-27 1990-09-12 American Cyanamid Company N-phosphinyl di-and tripeptides as renin inhibitors
US4965372A (en) * 1989-01-19 1990-10-23 Pfizer Inc. Process and intermediates for isopropyl 3S-amino-2R-hydroxy-alkanoates
WO1990009172A1 (en) * 1989-02-16 1990-08-23 Pfizer Inc. Phosphorus containing renin inhibitors
US5468732A (en) * 1989-02-16 1995-11-21 Pfizer Inc. Phosphorus containing renin inhibitors
US5216013A (en) * 1989-12-04 1993-06-01 G. D. Searle & Co. Aralkyl-N-terminal cycloalkoxy-C terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5231111A (en) * 1989-12-04 1993-07-27 G. D. Searle & Co. Imidazolyl/imidazolylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5180744A (en) * 1989-12-04 1993-01-19 G. D. Searle & Co. Aralkyl-N-terminal amino hydroxy
US5212175A (en) * 1989-12-04 1993-05-18 G. D. Searle & Co. Benzothiophenyl benzothiophenylalkyl-N-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5215996A (en) * 1989-12-04 1993-06-01 G. D. Searle & Co. Naphthyridinyl/naphthyridinylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5217991A (en) * 1989-12-04 1993-06-08 G. D. Searle & Co. Cycloalkyl/cycloalkylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5217988A (en) * 1989-12-04 1993-06-08 G. D. Searle & Co. Indolyl indolylakyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxyβ-amino acid derivatives
US5223532A (en) * 1989-12-04 1993-06-29 G. D. Searle & Co. Chromonyl/chromonylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino derivatives
US5223514A (en) * 1989-12-04 1993-06-29 G. D. Searle & Co. Quinolinyl/quinolinylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5223512A (en) * 1989-12-04 1993-06-29 G. D. Searle & Co. Quinolonyl/quinolonylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5180725A (en) * 1989-12-04 1993-01-19 G. D. Searle & Co. Quinoxalinyl/quinoxaliy; alkyl-N-terminal amino hydroxy
US5175170A (en) * 1989-12-04 1992-12-29 G. D. Searle & Co. β-amino acid derivatives
US5223534A (en) * 1989-12-04 1993-06-29 G. D. Searle & Co. Benzofuuranyl/benofuranylaklyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
US5179102A (en) * 1989-12-04 1993-01-12 G. D. Searle & Co. Naphthyridinyl/naphthyridinylalkyl-n-terminal anino hydroxy β-amino acid derivatives
IE66574B1 (en) * 1989-12-04 1996-01-24 Searle & Co Heterocyclic acyl aminodiol beta-amino acid derivatives
US5147888A (en) * 1989-12-04 1992-09-15 G. D. Searle & Co. N-terminal indolyy indolylalkylaminodiol β-amino acid derivatives
US5171751A (en) * 1989-12-04 1992-12-15 G. D. Searle & Co. Benzofuran/benzofuranalkyl-N-terminal amino hydroxy
US5175181A (en) * 1989-12-04 1992-12-29 G. D. Searle & Co. Imidazolyl/imidazolylalkyl-N-terminal amino hydroxy
US5210095A (en) * 1989-12-04 1993-05-11 G. D. Searle & Co. Chromonyl/chromonylalkyl-N-terminal amino hydroxy
US5217989A (en) * 1989-12-04 1993-06-08 G. D. Searle & Co. Benothiophenyl/benzothiophenylalkyl-N-terminal cycloalkoxy-C-terminal amino hydroxy β-amino acid derivatives
TW209870B (fi) * 1990-01-18 1993-07-21 Pfizer
US5023338A (en) * 1990-03-08 1991-06-11 American Home Products Corporation Renin inhibitors
US5075451A (en) * 1990-03-08 1991-12-24 American Home Products Corporation Pyrrolimidazolones useful as renin inhibitors
US5064965A (en) * 1990-03-08 1991-11-12 American Home Products Corporation Renin inhibitors
US5095119A (en) * 1990-03-08 1992-03-10 American Home Products Corporation Renin inhibitors
US5278161A (en) * 1990-06-28 1994-01-11 Hoffmann-La Roche Inc. Amino acid derivatives useful as renin inhibitors
JPH04243835A (ja) * 1990-08-29 1992-08-31 Pfizer Inc 高眼圧症又は緑内障治療用薬剤組成物及び治療方法
US5442105A (en) * 1991-06-21 1995-08-15 Takasago International Corporation Process for producing cyclohexylbutyric acid derivative
JP2847584B2 (ja) * 1991-06-21 1999-01-20 高砂香料工業株式会社 シクロヘキシル酪酸誘導体及びその製造法
WO1993011799A1 (en) * 1991-12-18 1993-06-24 Pfizer Inc. Soybean protein or hydrolyzates in pharmaceutical compositions to protect bioactive peptides from enzymatic inactivation
US6153592A (en) * 1992-11-09 2000-11-28 Port Systems, Llc Enhancing the bioavailability of proteolytically labile therapeutic agents
US5872101A (en) * 1995-01-06 1999-02-16 Sibia Neurosciences, Inc. Methods of treating neurodegenerative disorders using protease inhibitors
US5804560A (en) * 1995-01-06 1998-09-08 Sibia Neurosciences, Inc. Peptide and peptide analog protease inhibitors
US6107329A (en) * 1995-06-06 2000-08-22 Pfizer, Inc. Substituted n-(indole-2-carbonyl)-glycinamides and derivatives as glycogen phosphorylase inhibitors
WO2000026191A1 (fr) 1998-11-04 2000-05-11 Meiji Seika Kaisha, Ltd. Derives de picolinamide et pesticides contenant ces derives comme ingredient actif
US6117870A (en) * 1998-11-12 2000-09-12 Fujirebio Kabushiki Kaisha Cyclic amide derivatives
US20020002152A1 (en) 2000-04-14 2002-01-03 Craig Richard A. Hydrazide and alkoxyamide angiogenesis inhibitors
UA108742C2 (uk) 2009-09-23 2015-06-10 Фармацевтична композиція для лікування запальних захворювань, опосередкованих mcp-1

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1254699A (en) * 1984-03-12 1989-05-23 Jasjit S. Bindra Renin inhibitors containing statine or derivatives thereof
DE3418491A1 (de) * 1984-05-18 1985-11-21 Merck Patent Gmbh, 6100 Darmstadt Diaminosaeurederivate
EP0190891A3 (en) * 1985-01-31 1988-04-20 Kissei Pharmaceutical Co. Ltd. Novel amino acid derivatives
US4743585A (en) * 1986-11-21 1988-05-10 Warner-Lambert Company Renin inhibitors
NZ222755A (en) * 1986-12-23 1989-11-28 Warner Lambert Co Renin inhibiting acyl peptide derivatives containing two to four amino acid residues, and pharmaceutical compositions

Also Published As

Publication number Publication date
PL151679B1 (en) 1990-09-28
HUT45270A (en) 1988-06-28
YU198087A (en) 1989-02-28
NO874530D0 (no) 1987-10-30
FI90346C (fi) 1994-01-25
DK568487A (da) 1988-05-01
CN1027271C (zh) 1995-01-04
KR910002544B1 (ko) 1991-04-23
CN87101499A (zh) 1988-05-11
NZ222373A (en) 1989-09-27
PL268521A1 (en) 1988-09-01
DE3788626D1 (de) 1994-02-10
AU585180B2 (en) 1989-06-08
AR245732A1 (es) 1994-02-28
FI874787A (fi) 1988-05-01
PT86024A (en) 1987-11-01
DK568487D0 (da) 1987-10-30
PT86024B (pt) 1990-07-31
AU8054187A (en) 1988-05-05
IE61087B1 (en) 1994-09-21
HU207869B (en) 1993-06-28
EP0266950A3 (en) 1990-04-11
JPH07108901B2 (ja) 1995-11-22
IE872929L (en) 1988-04-30
CA1310793C (en) 1992-11-24
NO173017B (no) 1993-07-05
MY103189A (en) 1993-05-29
DE3788626T2 (de) 1994-04-28
JPH07173134A (ja) 1995-07-11
KR880005152A (ko) 1988-06-28
PH25231A (en) 1991-03-27
IL84270A0 (en) 1988-03-31
EG18378A (en) 1993-04-30
EP0266950A2 (en) 1988-05-11
YU46819B (sh) 1994-06-10
FI874787A0 (fi) 1987-10-30
NO874530L (no) 1988-05-02
ES2061512T3 (es) 1994-12-16
EP0266950B1 (en) 1993-12-29
NO173017C (no) 1993-10-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI90346B (fi) Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten nor-statiini- ja nor-syklostatiinipolypeptidien valmistamiseksi
KR890003602B1 (ko) 옥사-및 아자호모사이클로스타틴 폴리펩티드의 제조방법
US4845079A (en) Peptidylaminodiols
US4814342A (en) Nor-statine and nor-cyclostatine polypeptides
FI86192C (fi) Stereoselektiv foerfarande foer framstaellning av omaettad laktoner.
EP0295294A1 (en) Peptidylaminodiols
IE63602B1 (en) Peptidylaminodiols
CS237311B2 (en) Processing of carboxyalkyldipeptide
EP0135349B1 (en) Condensed seven-membered ring compounds and their production and use
HUT77649A (hu) Kalpain és/vagy katepszin B inhibitor hatású N-acil-4-benzil-5-hidroxi-oxazolidin-származékok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények
EP0417698B1 (de) Aminosäurederivate mit reninhemmenden Eigenschaften, Verfahren zu deren Herstellung, diese enthaltende Mittel und deren Verwendung
EP0405506A1 (en) Tetrapeptide type-B CCK receptor ligands
EP0218688B1 (en) Dihalo-statine substituted renin inhibitors
US4935405A (en) Nor-statine and nor-cyclostatine polypeptides
KR20010023656A (ko) 골 대사성 질환의 치료를 위한 아르기닌 모의체를함유하는 펩타이드, 그의 제조 방법, 및 이를 함유한 약제
US5034376A (en) Nor-statine and nor-cyclostatine polypeptides
Boyd et al. Nonpeptide renin inhibitors with good intraduodenal bioavailability and efficacy in dog
US5238923A (en) Amino-substituted heterocycles as renin inhibitors
JPH0526775B2 (fi)
US5219851A (en) Tetrahydroisoquinoline-type renin inhibiting peptides
US5214129A (en) Peptidylaminodiols
HU204262B (en) Process for producing renin-inhibiting amino-diol derivatives and pharmaceutical compositions containing them
CZ187992A3 (en) Heterocyclic compounds with renin-inhibiting properties, process of their preparation and their use
JPH0285245A (ja) 新規化合物
CA1321676C (en) Homocyclostatine and cyclostatine containing polypeptides as antihypertensive agents

Legal Events

Date Code Title Description
BB Publication of examined application
BB Publication of examined application
MM Patent lapsed
MM Patent lapsed

Owner name: PFIZER INC.