NO149197B - Fremgangsmaate for fremstilling av naeringsmidler inneholdende et antibakterielt system - Google Patents
Fremgangsmaate for fremstilling av naeringsmidler inneholdende et antibakterielt system Download PDFInfo
- Publication number
- NO149197B NO149197B NO800912A NO800912A NO149197B NO 149197 B NO149197 B NO 149197B NO 800912 A NO800912 A NO 800912A NO 800912 A NO800912 A NO 800912A NO 149197 B NO149197 B NO 149197B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- amount
- lactoperoxidase
- thiocyanate
- sodium percarbonate
- sodium
- Prior art date
Links
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 title claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 title description 2
- 108010023244 Lactoperoxidase Proteins 0.000 claims description 20
- 102000045576 Lactoperoxidases Human genes 0.000 claims description 20
- 229940057428 lactoperoxidase Drugs 0.000 claims description 20
- VTIIJXUACCWYHX-UHFFFAOYSA-L disodium;carboxylatooxy carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)OOC([O-])=O VTIIJXUACCWYHX-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 16
- 229940045872 sodium percarbonate Drugs 0.000 claims description 16
- VGTPCRGMBIAPIM-UHFFFAOYSA-M sodium thiocyanate Chemical compound [Na+].[S-]C#N VGTPCRGMBIAPIM-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 16
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 claims description 13
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N hydrogen thiocyanate Natural products SC#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M Thiocyanate anion Chemical compound [S-]C#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 claims description 7
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 7
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 7
- 229920000623 Cellulose acetate phthalate Polymers 0.000 claims description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 2
- 229940078916 carbamide peroxide Drugs 0.000 claims description 2
- 229940081734 cellulose acetate phthalate Drugs 0.000 claims description 2
- AQLJVWUFPCUVLO-UHFFFAOYSA-N urea hydrogen peroxide Chemical compound OO.NC(N)=O AQLJVWUFPCUVLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000011241 protective layer Substances 0.000 claims 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 8
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 8
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 8
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- XDIYNQZUNSSENW-UUBOPVPUSA-N (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O XDIYNQZUNSSENW-UUBOPVPUSA-N 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 3
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 3
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002183 duodenal effect Effects 0.000 description 2
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 2
- WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N pyrogallol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1O WQGWDDDVZFFDIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000019737 Animal fat Nutrition 0.000 description 1
- 208000004300 Atrophic Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 240000006766 Cornus mas Species 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 208000036495 Gastritis atrophic Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 206010022678 Intestinal infections Diseases 0.000 description 1
- 206010023648 Lactase deficiency Diseases 0.000 description 1
- SPAGIJMPHSUYSE-UHFFFAOYSA-N Magnesium peroxide Chemical compound [Mg+2].[O-][O-] SPAGIJMPHSUYSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010025476 Malabsorption Diseases 0.000 description 1
- 208000004155 Malabsorption Syndromes Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 208000012868 Overgrowth Diseases 0.000 description 1
- 208000031845 Pernicious anaemia Diseases 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000021120 animal protein Nutrition 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 235000021152 breakfast Nutrition 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 208000016644 chronic atrophic gastritis Diseases 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 229960004995 magnesium peroxide Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000009589 pathological growth Effects 0.000 description 1
- 210000003800 pharynx Anatomy 0.000 description 1
- -1 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 238000010944 pre-mature reactiony Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 229940079877 pyrogallol Drugs 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- MWNQXXOSWHCCOZ-UHFFFAOYSA-L sodium;oxido carbonate Chemical compound [Na+].[O-]OC([O-])=O MWNQXXOSWHCCOZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000816 toxic dose Toxicity 0.000 description 1
- 210000002438 upper gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y111/00—Oxidoreductases acting on a peroxide as acceptor (1.11)
- C12Y111/01—Peroxidases (1.11.1)
- C12Y111/01017—Glutathione amide-dependent peroxidase (1.11.1.17)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/189—Enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/20—Inorganic substances, e.g. oligoelements
- A23K20/22—Compounds of alkali metals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/20—Inorganic substances, e.g. oligoelements
- A23K20/24—Compounds of alkaline earth metals, e.g. magnesium
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K30/00—Processes specially adapted for preservation of materials in order to produce animal feeding-stuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/06—Enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/44—Oxidoreductases (1)
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Feed For Specific Animals (AREA)
- Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte til fremstilling av næringsmidler omfattende et antibakterielt system som aktiveres i mage- og tarmkanalen.
Det er tidligere kjent at husdyr, spesielt unge dyr, ut-settes for kraftige mage- og tarminfeksjoner som hovedsake-lig beror på infeksjoner av E.coli og forskjellige arter av Salmonella. Hittil kjente metoder for å eliminere disse infeksjoner omfatter enten administrasjon av en terapeutisk mengde antibiotika med risiko for dannelse av antibiotika-resistente bakteriestammer.
Det har nå overraskende vist seg mulig å unngå disse sistnevnte ulemper og å forebygge og/eller eliminere slike bakterieinfeksjoner ved hjelp av foreliggende oppfinnelse som er kjennetegnet ved at man til i og for seg kjente næringsmiddelsammensetninger tilsetter et antibakterielt system inneholdende laktoperoksydase, i en mengde på minst 1 mg/kg næringsmiddel (50-5000 U/kg), tiocyanat i en mengde på minst 16 ppm beregnet som natriumtiocyanat og en fast, vannoppløselig peroksyddonor fra gruppen alkaliperkarbonater, jordalkaliperoksyder og karbamidperoksyd i en mengde på minst 21 ppm beregnet som natriumperkarbonat.
Mengden av tiocyanat velges slik at man oppnår en konsentra-sjon derav på minst 0,1, fortrinnsvis 0,2-0,4 mM, hvorved konsentrasjoner på 0,5-1,0 mM kan være nyttige i visse tilfeller, i fordøyelseskanalen, idet konsentrasjonen ikke bør overskride toksiske konsentrasjoner, (10 mM). Mengden av peroksyddonor velges slik at en ekvimolar mengde ^ 2Q2 oppnås, dvs. at konsentrasjonen av f^C^ som dannes over-skrider minst 0,1, fortrinnsvis 0,2-0,4 mM. Konsentrasjon-
en av ^ 2^ 2 s'ca-'- i nvert tilfelle være mindre enn .4 ganger konsentrasjonen av tiocyanat. Mengden av laktoperoksydase er avhengig av aktiviteten av enzymet, men basert på den antagelse at 1 mg inneholder 50 enheter (U), bør minst 1 mg enzym være tilstede pr. liter fordøyelsessaft.
I en oppløsning er således konsentrasjonen av tiocyanat minst 0,1 mM, fortrinnsvis 0,2-0,4 mM, konsentrasjonen av peroksyddonor slik at konsentrasjonen av H^O^ er 0,1 mM, fortrinnsvis 0,2,0,4 mM, og konsentrasjonen av laktoperoksydase er 1 mg/l (50 U/l). Konsentrasjonen av sistnevnte materiale kan også varieres, men bør være 1-2 mg/l (50-100 U/l). 1 enhet laktoperoksydase er den mengde laktoperoksydase som danner 1 mg pyrogallin fra pyrogallol iløpet av 20 sekunder ved pH 6,0 og 20°C.
Mengden av laktoperoksydase i kumyse (upasteurisert) eller i ultrafiltrert myse kan naturligvis variere. Kumelk inneholder, ifølge litteraturen, laktoperoksydase i en mengde på ca. 30 mg/l, hvorved mengden av laktoperoksydase i menneske-melk ifølge litteraturen er ca. 1/30 av den i kumelk. Laktoperoksydase finnes også i andre kurnelkprodukter
som skummet melkpulver som også kan benyttes.
LD(-q for tiocyanat er 484 mg/kg legemesvekt injisert intra-venøst hos mus og 764 mg/kg legemesvekt administrert oralt hos rotte.
Oppfinnelsen skal beskrives mer detaljert i det nedenstående under henvisning til de angitte eksempler.
Eksempel 1
Et melkeerstatningsmiddel ble fremstilt fra følgende bestand-deler:
21 g natriumperkarbonat
16 g natriumtiocyanat.
Bestanddelene ble grundig sammenblandet i en blandeanordning. Ved bruk tilsettes vann til den tørre blanding inntil man
får en 10% vandig oppløsning (10% tørrblanding).
Mengden av natriumperkarbonat kan i et slikt melkeerstatningsmiddel varieres mellom 210 og 420 ppm og mengden av tiocyanat mellom 160 og 320 ppm, slik at man får Na-perkarbonat: NaSCN =21:16.
Eksempel 2
En elektrolyttblanding ble fremstilt fra følgende bestand-deler :
og 97 g natriumperkarbonat
75 g natriumtiocyanat
5 g laktoperoksydase (50 U/mg)
Elektrolyttblandingen i grundig blandet tilstand anvendes som følger: 25 g oppløses i 1 liter vann og gis i en mengde på ca. 10% av legemsvekten daglig ved etablert dehydratisering, eller for å hindre dehydratisering.
Mengden av natriumperkarbonat kan varieres mellom 970 og 1940 ppm, og mengden av natriumtiocyanat mellom 750 og 1500 ppm, idet mengden av Na-perkarbonat til mengden av NaSCN er 21:16.
Eksempel 3
En velling for småbarn ble fremstilt fra følgende bestand-deler:
og
21 g natriumperkarbonat
16 g natriumtiocyanat.
Bestanddelene ble grundig blandet i en blander. Den tørre velling-blanding ble oppløst i vann med en temperatur på 30-35°C som en 10-15% vandig oppløsning (10-15% tørrstoff)
og gitt i en mengde på ca. 0,2 liter 4-5 ganger daglig.
Mengden av natriumperkarbonat kan vaireres i en slik velling mellom 210 og 420 ppm, og mengden av natriumtiocyanat mellom 160 og 320, hvorved mengdene fortrinnsvis er ekvimolare.
Natriumperkarbonatet benyttet i eksemplene 1-3 er beskyttet mot for tidlig reaksjon ved belegging av et granulat derav med et lag av en polymer som oppløses eller er permeabel i tarmkanalen.
Slike beskyttende polymerer er vokser, celluloseacetat-ftalat og lignende polymerer som oppløses eller er permeable i tarmkanalen. Videre kan det anvendes et dobbeltbelegg dersom en suspensjon før administrasjon skulle gi et alkalisk miljø.
Biologisk effekt
4 reagensrør inneholdende 10 ml myse med et innhold av
21 ppm (0,25 mM) NaSCN, ble inkubert ved 30°C, idet mysen var inokulert med Ps-fluorescens EF 1998. Et rør utgjorde kontrollprøven. Natriumperkarbonat tilsvarende 0,1 mM,
0,2 mM og 0,3 mM, respektivt, med ^ 202 ble tilsatt t^ de
tre andre reagensrørene. Mengden av bakterier ble bestemt ved inokulering, og etter 2 timer inkubasjon. Laktoperoksydase er tilstede i 5 yg/ml. Resultatet er angitt i nedenstående tabell 1.
Som det fremgår fra tabellen, oppnås en meget stor for-bedring i antibakteriell effekt når 0,2 mM t^C^ e^ er mer er tilstede. Allerede tilsetningen av 0,1 mM & 2®2 gir imidlertid en betydelig bakterisid effekt.
Ps.-fluorescens EF 1998 ble inkubert ved 30°C i to reagens-rør 1) og 2), hvor rør 1) inneholdt 1 g kommersielt melkeerstatningsmiddel omfattende 15% ultrafiltrert mysepulver, 57% mysepulver, 8% fett, 16% animalsk protein og 4% vitaminer og mineraler i 10 ml vann, og inneholdt dermed 50 yg laktoperoksydase, idet 27,5 ppm natriumperkarbonat ble tilsatt, og hvor rør 2) inneholder den samme mengde melkeerstatningsmiddel (50 yg laktoperoksydase) og hvorved 21 ppm natriumtiocyanat og 27,5 ppm natriumperkarbonat ble tilsatt.
Mengden av bakterier i de forskjellige reagensrør er angitt i nedenstående tabell 2 hvor resultatene etter 0, 2, 4 og 6 timer er angitt.
Som det fremgår av tabellen, er mengden av bakterier i rør 2) etter 6 timer bare 1/1000 av mengden i rør 1) på samme tid, hvorved ingen eller bare liten vekst har funnet sted i rør 1), men i rør 2) er mikroorganismene drept.
Effekten av det antibakterielle system ble bestemt in vitro. Forskjellige F.-colistammer ble inkubert ved 37°C i en vandig oppløsning av 5 g mysepulver/100 ml, 21 ppm NaSCN og natriumperkarbonat tilsvarende 0,25 mM B.^ >^. Resultatet fra E.coli-drepingen etter 2 timer er angitt i nedenstående tabell 3.
Flere av de undersøkte E.-colistammer er bestandige overfor antibiotika. Resultatene indikerer således en høy grad av anvendelsesgyldighet for systemet. Dette fremgår også fra det faktum at systemet har virkning på. gram-positive bakterier.
Det antibakterielle system fremstilt ifølge oppfinnelsen, kan anvendes i næringsmidler eller matvarer for mennesker.
Et melkeerstatningsmiddel inneholdende 45 vekt-% skummet melkepulver (>40 mg LP/kg), 22,5 vekt-% mysepulver, 12,5 vekt-% soyamel, 15,0 vekt-% animalsk fett, 4,5 vekt-% laktose og 0,5 vekt-% vitaminer, ble benyttet i et forsøk mot E.coli 9703. Stammen ble inkubert ved +37°C i en 10% vandig oppløsning av melkeerstatningsmiddel inneholdende 5 yg/ml laktoperoksydase. To forskjellige konsentrasjoner av NaSCN og tre forskjellige konsentrasjoner av ^ 2°2 * ^orm av Na-perkarbonat ble benyttet, slik som vist i tabell 4 nedenfor. ;Som det fremgår fra tabell 4, gir det antibakterielle system en sterk baktericid virkning i begge de undersøkte konsentrasjoner samtidig som det vises at SCN ikke har noen virkning per se, men bakteriell vekst fortsetter når ingen peroksyddonor er tilstede. ;Peroksyddonoren kan også bestå av et alkalimetallpersulfat som under reaksjonen gir hydrogenperoksyd og sulfat. ;Klebanoff, S.J. et al beskriver i Biochim. Biophys. Acta 117 ;(1966) 63-72 "The Peroxidase-Thiocyanate-Hydrogen Peroxide Antimicrobial System". ;For å vise at systemet fremstilt ifølge oppfinnelsen med ;en fast, vannoppløselig peroksyddonor har en bedre effekt enn tidligere kjente LP-SCN -H202-systemer, ble to forsøk gjennomført: A. Medium; En 10% oppløsning av pulver av skummet melk inneholdende 0,5 mM SCN tilsatt som natriumtiocyanat og 2 pg/ml laktoperoksydase. ;Teststamme: E. coli NCTC 9703 ;Antibakteriell test: Oppløsningen av skummet melk ble inkubert på et vannbad ved 3 7°C, og 0,5 mM ^ 2°2' resP* magnesium-peroksyd ble tilsatt. Flasker inneholdende bare mediet ble inkubert som kontroll. 15 minutter etter tilsetning av peroksydet ble testoppløsningene surgjort ved tilsetning av 0,5 mM HC1 til pH 5,0 for å simulere effekten av magesyre. Etter ytterligere 15 minutter ble det uttatt 10 ml prøver
og inokulert med E.coli NCTC 9703 og inkubert ytterligere ved 37°C. Antall overlevende bakterier ble bestemt umiddelbart etter inokulering og etter 2 timers inkubasjon.
Resultater:
Som det fremgår av resultatet hadde antallet bakterier blitt 10-foldig i kontrollprøven, mens det hadde øket med 59% i prøven med H202~tilsetning. I prøven med MgO^ hadde deri-mot antallet bakterier minsket til mindre enn et halvt tusen.
Klébanoff et al diskuterer også tilsetningen av et H2O2-utviklende system slik som glukose-glukoseoksydase-systemet. B. Forsøk ble gjennomført for å sammenligne et slikt system med et system som det i foreliggende oppfinnelse.
Medium; Semisyntetisk medium bestående av 1,0 g NH^Cl, 1,0 g K2HP04, 0,2 g MgS04-7H20, 10 g FeS04-7H20, 10 mg CaCl2,
3,0 g gjærekstrakt (Difco)-og 1000 ml vann, inneholdende dessuten 0,25 mM SCN tilsatt som natriumtiocyanat, 0,5% glukose og 2 ug/ml laktoperoksydase.
Teststamme: E. coli NCTC 9703
Antibakteriell test: Forsøket ble gjennomført i et ana-erobt telt. Mediet ble inokulert med teststammen og en vannholdig oppløsning av natriumperkarbonat tilsatt i en mengde tilsvarende 0,25 mM H_0 , resp. 0,1 U/ml glukoseoksydase ble tilsatt til forskjellige prøver. Umiddel-
bart etter inokuleringen og etter 2 timers inkubasjon ved 37°C ble prøver uttatt og antall overlevende bakterier bestemt.
Resultater:
Som det fremgår av resultatet hadde antall bakterier i kontrollprøven øket ca. 20 ganger, og i glukose-glukoseoksydase-prøven ca. 10 ganger, mens antallet i prøven med fast peroksyddonor minsket med 99,99%, dvs. fra 1 400 000
til <35 bakterier/ml.
De ovenfor angitte to forsøk viser at den faste, vannoppløse-lige peroksyddonoeren gir systemet en overlegen effekt dels mot ^ 2^ 2 °^ ^- e^- s mot ^C^-utviklende systemer slik som glukose-glukoseoksydase under anaerobe forhold.
Til slutt illustreres et in vivo forsøk med systemet i foreliggende oppfinnelse. Forsøket ble utført på 12 pasienter som led av manglende magesyreproduksjon. Slike personer får ofte en patologisk tilvekst av bakterier i den øvre mage-tarmkanalen, hvilket nødvendiggjør antibakteriell behandling, av og til eller med jevne mellomrom.
Pasientene var 8 kvinner og 4 menn. Den gjennomsnittlige alder var 61 år (31-80). 4/12 pasienter led av perniciøs anemi, og 8/12 pasienter av 'aklorhydrisk atrofisk gastritt. 6/12 pasienter hadde symptomer beroende på mikrobiell over-vekst i den øvre del av mage-tarmkanalen (dyspepsi, diarré, malabsorpsjon).
Eksperimentell metode
Fra fastende pasienter ble det tatt prøver i munn/svelg for mikrobiologisk dyrkning. Deretter ble munn/svelg desinfi-sert med en oppløsning av "Ascoxal". Etter dette ble det innført en steril polyetylenslange via munnen til mågens lengste del (9/12 pasienter) eller til tolvfingertarmens andre del (3/12 pasienter). Deretter ble det uttatt 5-10 ml mage/tolvfingertarmsaft for mikrobiologisk dyrkning.
Behandling
Etter innledende mikrobiologisk undersøkelse av pasientene inntok disse iløpet av tre uker to ganger daglig før måltid (frokost og kveldsmåltid) et pulver bestående av 48 mg Mg02, 8 mg NaSCN, 300 mg sitronsyre og 500 mg laktose utrørt i 100 ml kumelk. Etter avsluttet behandling ble nye bakterio-logiske prøver tatt ifølge det ovenfor angitte.
Statistikk
Bakterieantallet/ml i mage/tolvfingertarmsaft ble uttrykt som log-^Q og sammenlignende antall før og etter behandling ble foretatt ved hjelp av Student's t-test for parede verdier.
Resultater
Før behandling Etter behandling Forskjell Bakterier 7,44 ± 0,19 6,00 ±0,62 p<0,05
Hos to pasienter var antallet bakterier etter behandling lavere enn 10 cfu/ml.
3/6 pasienter med symptomer ble symptomfrie under behandlingen.
Mild diarré opptrådte hos to pasienter som var kjent for å
ha laktasemangel.
Ovenstående viser at foreliggende oppfinnelse også har
effekt in vivo.
Claims (6)
1. Fremgangsmåte for fremstilling av næringsmidler inneholdende et i mage-tarmkanalen aktiverbart antibakterielt system, karakterisert ved at man til i og for seg kjente næringsmiddelsammensetninger tilsetter et antibakterielt system inneholdende laktoperoksydase i en mengde på minst 1 mg/kg (50-5000 U/kg) næringsmiddel, et tiocyanat i en menge på minst 16 ppm beregnet som natriumtiocyanat og en fast vannoppløselig peroksyddonor fra gruppen bestående av alkaliperkarbonater, jordalkaliperoksyder og karbamidperoksyd i en mengde på minst 21 ppm
beregnet som natriumperkarbonat.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at laktoperoksydase inngår i ren form.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at laktoperoksydase inngår i form av et laktoper-oksydaseholdig melkeprodukt.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 1-3, karakterisert ved at den faste vannoppløselige peroksyddonoren utgjøres av natriumperkarbonat.
5. Fremgangsmåte ifølge krav 4, karakterisert ved at natriumperkarbonat i granulær form belegges med et i tarmkanalen oppløselig beskyttende lag.
6. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at det beskyttende lag utgjøres av celluloseacetat-ftalat.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE7603075A SE420793B (sv) | 1976-03-08 | 1976-03-08 | Fodermedel innehallande ett antibakteriellt system |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO800912L NO800912L (no) | 1977-09-09 |
| NO149197B true NO149197B (no) | 1983-11-28 |
| NO149197C NO149197C (no) | 1984-03-07 |
Family
ID=20327247
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO770785A NO143297C (no) | 1976-03-08 | 1977-03-07 | Dyrefor. |
| NO800912A NO149197C (no) | 1976-03-08 | 1980-03-28 | Fremgangsmaate for fremstilling av naeringsmidler inneholdende et antibakterielt system |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO770785A NO143297C (no) | 1976-03-08 | 1977-03-07 | Dyrefor. |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4320116A (no) |
| BE (1) | BE852195A (no) |
| DE (1) | DE2709390A1 (no) |
| DK (1) | DK147311C (no) |
| FI (1) | FI62617C (no) |
| FR (1) | FR2345940A1 (no) |
| GB (1) | GB1546747A (no) |
| IE (1) | IE45119B1 (no) |
| KE (1) | KE3224A (no) |
| LU (1) | LU76904A1 (no) |
| NL (1) | NL7702083A (no) |
| NO (2) | NO143297C (no) |
| SE (1) | SE420793B (no) |
Families Citing this family (39)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2473270A1 (fr) | 1980-01-11 | 1981-07-17 | Interox | Compositions a ingerer par les ruminants |
| EP0050644B1 (en) * | 1980-04-25 | 1985-09-18 | A/S Orthana Kemisk Fabrik | Sterilized, preserved, stable mucine-containing solutions and sterilization method |
| FR2496411A1 (fr) * | 1980-12-22 | 1982-06-25 | Interox | Fourrages ensiles |
| FR2508769B1 (fr) * | 1981-07-02 | 1985-12-13 | Interox | Compositions alimentaires pour porcins et procede pour l'alimentation des porcins |
| US4578265A (en) * | 1981-08-13 | 1986-03-25 | Laclede Professional Products, Inc. | Di-enzymatic dentifrice |
| US4518583A (en) * | 1983-02-22 | 1985-05-21 | Gallina Damian J | Hemorrhoid and anorectal disease treatment method |
| US4514384A (en) * | 1983-03-14 | 1985-04-30 | Gallina Damian J | Hemorrhoid treatment method |
| CA1245554A (en) * | 1983-06-13 | 1988-11-29 | Yoshihide Suwa | Method for inactivating the matagenicity of coffee and pharmaceutical composition therefor |
| LU85479A1 (fr) * | 1984-07-25 | 1986-02-12 | Oleofina Sa | Compositions antibacteriennes de nourriture pour animaux et procede pour les preparer |
| US4617190A (en) * | 1984-08-27 | 1986-10-14 | Laclede Professional Products, Inc. | Enzymatic powder milk |
| FR2600250B1 (fr) * | 1986-06-23 | 1989-11-24 | Bio Serae | Procede pour conditionner une composition antibacterienne et composition antibacterienne conditionnee |
| SE459502B (sv) * | 1986-06-30 | 1989-07-10 | Ewos Ab | Foerfarande foer stabilisering av laktoperoxidas och produkt innehaallande enzymet |
| SE8701839L (sv) * | 1987-05-05 | 1988-11-06 | Ewos Ab | Livs- och fodermedel |
| US4912047A (en) * | 1987-05-15 | 1990-03-27 | Microlife Technics, Inc. | Preventing psychrotrophic bacterial spoilage in raw milk |
| FR2648321B1 (fr) * | 1989-05-12 | 1992-01-17 | Bio Serae Lab | Procede de traitement d'un produit alimentaire non liquide pour assurer sa decontamination microbienne, applications en particulier aux fromages et preparation mere pour la mise en oeuvre dudit traitement |
| GB9002422D0 (en) * | 1990-02-03 | 1990-04-04 | Boots Co Plc | Anti-microbial compositions |
| US5888505A (en) * | 1991-02-21 | 1999-03-30 | Eoe, Inc. | Method for selectively inhibiting the growth of microbes using a haloperoxidase-halide-peroxide system |
| AU652279B2 (en) | 1991-06-11 | 1994-08-18 | Dsm Ip Assets B.V. | Sustained release of hydrogen peroxide |
| US5747078A (en) * | 1991-06-11 | 1998-05-05 | Gist-Brocades, N.V. | Longterm antimicrobial activity obtained by sustained release of hydrogen peroxide |
| US5250299A (en) * | 1991-09-23 | 1993-10-05 | Haarmann & Reimer Corp. | Synergistic antimicrobial compositions |
| JPH07114151A (ja) * | 1993-08-23 | 1995-05-02 | Konica Corp | ハロゲン化銀写真感光材料用固体処理剤 |
| WO1997007777A1 (en) * | 1995-08-15 | 1997-03-06 | Robert Eric Montgomery | Peroxidase-activating oral compositions |
| SE506529C2 (sv) * | 1996-01-23 | 1997-12-22 | Semper Ab | Användning av ett laktoperoxidassystem för framställning av ett läkemedel mot Helicobacter pylori |
| EP1107781A2 (en) | 1998-08-28 | 2001-06-20 | University Of Bath | Treatment of lesions with xanthine oxidoreductase |
| US20040120938A1 (en) * | 1998-08-28 | 2004-06-24 | The University Of Bath | Ingestible compositions comprising antibacterial agents |
| US6342528B1 (en) * | 2000-01-18 | 2002-01-29 | Lynntech, Inc. | Control of microbial populations in the gastrointestinal tract of animals |
| US20030056244A1 (en) * | 2000-05-02 | 2003-03-20 | Ning Huang | Feed additive compositions and methods |
| EP1389903A4 (en) * | 2001-02-14 | 2006-09-06 | Ventria Bioscience | FEED ADDITIVE COMPOSITIONS AND METHODS |
| FR2825373B1 (fr) * | 2001-05-31 | 2004-04-30 | Tmi Europ | Procede de production enzymatique d'un agent de traitement a l'etat fluide |
| US20030207014A1 (en) * | 2002-05-02 | 2003-11-06 | Larose Rene N. | Animal feed and additive for animal feed to control feed borne pathogens |
| US8519008B2 (en) | 2003-01-22 | 2013-08-27 | Purina Animal Nutrition Llc | Method and composition for improving the health of young monogastric mammals |
| US20060289354A1 (en) * | 2005-06-15 | 2006-12-28 | Buckman Laboratories International, Inc. | Method and composition to control the growth of microorganisms in aqueous systems and on substrates |
| US8945540B2 (en) * | 2008-05-09 | 2015-02-03 | Exoxemis, Inc. | Compositions for enhancing the antibacterial activity of myeloperoxidase and methods of use thereof |
| NZ600269A (en) * | 2009-05-20 | 2014-02-28 | Dec Int Nz Ltd | Delivery device for treatment of mastitis |
| CA2839747A1 (en) | 2011-07-11 | 2013-01-17 | Exoxemis, Inc. | Eosinophil peroxidase compositions and methods of their use |
| CN105120681A (zh) * | 2013-05-08 | 2015-12-02 | 诺维信公司 | 动物饲料酶 |
| CN107960557A (zh) * | 2017-12-26 | 2018-04-27 | 马鞍山市五谷禽业专业合作社 | 一种酵母发酵生产制备富硒鸡饲料的方法 |
| US11026966B2 (en) | 2018-05-02 | 2021-06-08 | Purina Animal Nutrition Llc | Animal feed products containing percarbonate and methods of feeding same |
| GB2609445A (en) * | 2021-07-30 | 2023-02-08 | Glasport Bio Ltd | Compositions and methods |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE375224B (no) * | 1973-07-19 | 1975-04-14 | Alfa Laval Ab |
-
1976
- 1976-03-08 SE SE7603075A patent/SE420793B/xx not_active IP Right Cessation
-
1977
- 1977-02-25 NL NL7702083A patent/NL7702083A/xx not_active Application Discontinuation
- 1977-03-04 FI FI770708A patent/FI62617C/fi not_active IP Right Cessation
- 1977-03-04 DE DE19772709390 patent/DE2709390A1/de active Granted
- 1977-03-07 DK DK98977A patent/DK147311C/da not_active IP Right Cessation
- 1977-03-07 NO NO770785A patent/NO143297C/no unknown
- 1977-03-07 FR FR7706664A patent/FR2345940A1/fr active Granted
- 1977-03-07 GB GB9566/77A patent/GB1546747A/en not_active Expired
- 1977-03-08 BE BE175565A patent/BE852195A/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-03-08 LU LU76904A patent/LU76904A1/xx unknown
- 1977-03-08 IE IE503/77A patent/IE45119B1/en unknown
-
1979
- 1979-09-13 US US06/075,245 patent/US4320116A/en not_active Expired - Lifetime
-
1980
- 1980-03-28 NO NO800912A patent/NO149197C/no unknown
-
1982
- 1982-07-21 KE KE3224A patent/KE3224A/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2345940B1 (no) | 1980-10-17 |
| GB1546747A (en) | 1979-05-31 |
| FR2345940A1 (fr) | 1977-10-28 |
| SE7603075L (sv) | 1977-09-09 |
| DE2709390A1 (de) | 1977-09-15 |
| SE420793B (sv) | 1981-11-02 |
| FI62617C (fi) | 1983-02-10 |
| DK98977A (da) | 1977-09-09 |
| BE852195A (fr) | 1977-09-08 |
| NO143297C (no) | 1981-01-14 |
| FI770708A (no) | 1977-09-09 |
| US4320116A (en) | 1982-03-16 |
| DK147311B (da) | 1984-06-18 |
| NO149197C (no) | 1984-03-07 |
| NO770785L (no) | 1977-09-09 |
| FI62617B (fi) | 1982-10-29 |
| NO143297B (no) | 1980-10-06 |
| LU76904A1 (no) | 1977-07-14 |
| DE2709390C2 (no) | 1989-01-12 |
| IE45119L (en) | 1977-09-08 |
| DK147311C (da) | 1985-01-02 |
| IE45119B1 (en) | 1982-06-30 |
| NO800912L (no) | 1977-09-09 |
| NL7702083A (nl) | 1977-09-12 |
| KE3224A (en) | 1982-09-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO149197B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av naeringsmidler inneholdende et antibakterielt system | |
| EP1007086B1 (en) | Use of lactoperoxidase, a peroxide donor and thiocyanate for the manufacture of a medicament for treating helicobacter pylori infection | |
| Kailasapathy et al. | L. acidophilus and Bifidobacterium spp.-their therapeutic potential and survival in yogurt | |
| RU2234945C2 (ru) | Стабилизатор водного раствора и водосодержащего сырья с самопроизвольно изменяющимися окислительно-восстановительными свойствами | |
| US7927584B2 (en) | Lactic bacteria useful as probiotics | |
| NO315254B1 (no) | Ern¶ringsformuleringer inneholdende Lacto-N-neotetraose | |
| JP3140049B2 (ja) | 病原性腸内細菌をコントロールするための医薬製剤 | |
| Knotek et al. | Pathogenesis, incidence, and possibilities of preventing alimentary nitrate methemoglobinemia in infants | |
| JPH0759516B2 (ja) | 細菌製剤の効果の保持法 | |
| EA012968B1 (ru) | Препарат, содержащий пробиотические бактерии, способы его получения, продукты на его основе, их применение и ростовой субстрат | |
| US5747078A (en) | Longterm antimicrobial activity obtained by sustained release of hydrogen peroxide | |
| EP0518445A1 (en) | Longterm antimicrobial activity obtained by sustained release of hydrogen peroxide | |
| US20020058326A1 (en) | Bifidobacteria and siderophores produced thereby and methods of use | |
| CN101415389A (zh) | 干燥的生物治疗性组合物、其用途以及施用装置和方法 | |
| JP2549638B2 (ja) | ビフイズス菌増殖促進組成物 | |
| JP3173859B2 (ja) | 液状または流動状の食品 | |
| EP0389795B1 (en) | Bioactive lactoferrin derivates | |
| JP4382295B2 (ja) | ウレアーゼ不活性化組成物及び飲食品 | |
| KR20220004865A (ko) | 프로바이오틱스 관련 효소 분비능, 항산화 활성, 담즙산염 분해 활성, 항균 활성이 있고, 유해효소 및 유해대사산물을 생성하지 않는 락토바실러스 브레비스 srcm101607 균주 및 이의 용도 | |
| RU2412604C1 (ru) | Сыворотка молочная, обогащенная лактатами (варианты) | |
| JPS62249931A (ja) | 抗菌性組成物 | |
| EP0063438A1 (en) | Production of powder containing bacteria and product thereof | |
| RU2108724C1 (ru) | Композиция для получения кисломолочного продукта детского питания и способ получения кисломолочного продукта | |
| UA65532C2 (uk) | Дієтична композиція, що абсорбується, для поліпшення біологічного балансу флори кишкового тракту | |
| RU2149008C1 (ru) | Способ получения биопрепарата |