SE506529C2 - Användning av ett laktoperoxidassystem för framställning av ett läkemedel mot Helicobacter pylori - Google Patents

Description

15 20 25 30 35 506 529 i pyjgri är nästan unik eftersom den sällan korsreagerar serologiskt med andra bakterier. Infektioner med p1|gfi är vanligare i utvecklings- länder än i industriländer, vilket möjligen kan bero pä skillnader i vattenhygien, dä bakterien överlever drygt en vecka i flodvatten.

Sá vitt man vet kan pyjmi endast infektera ventrikelslemhinnan, där den ger upphov till gastrit, vanligen i antrum. pylgfl binder via ett pro- tein till kolhydrater i slemhinnan, såsom glykoproteiner, glykolipider och galaktos.

Bakterien tränger sedan in i slemhinnan genom att den utsöndrar ureas, som bryter ned urinämne till ammoniak och bikarbonat, som neutraliserar saltsyran i magsäc- ken och därmed skyddar bakterien mot alltför làgt pH. Ammoniak är giftigt mot epi- telcellernas vägg och förändrar strukturen pá mucus. Vidare utsöndrar bakterien proteaser och lipaser, som bryter ned proteiner och fetter och skadar mucus. Pa- tientens reaktion pá infektionen ger skador pä kringliggande celler men skadar inte bakterien. Lokala hormonella rubbningar leder till ökad syraproduktion.

Hos nästan alla patienter som lider av ulcus duodeni kan sparas en gastrit inducerad av bakterien. 60-80% av patienterna som lider av ulcus ventriculi är infekterade med pyjgfi, men sambandet är här svagare än vid ulcus duodeni pylgrj infektioner har hittills behandlats med en trippelbehandling omfattande vismut, metronidazol och antingen amoxicillin eller tetracyklin eller en trippelbehandling omfattande en Hg-receptor-blockerare och tvà antibiotika.

Förstnämnda behandling ger dáligt resultat pà grund av flera biverkningar. Den andra behandlingsmetoden ger 60-80% utläkning. Under senare tid har föreslagits en duplexbehandling, varvid man skall använda ett antibiotika, amoxicillin, och en protonpumpshämmare, omeprazol. Å andra sidan föreligger idag en allmän restriktiv hållning till användningen av antibiotika pà grund av möjlig utveckling av antibiotika-resistenta stammar.

Det föreligger därför ett önskemål om alternativa behandlingsformer. 10 15 20 25 30 35 5 566 529 El.i ml. I t..

Det har nu överraskande visat sig möjligt att kunna bekämpa infektioner av figljgg; bagge; mugg genom föreliggande uppfinning som karaktäriseras av, att man använder sig av ett antibakteriellt system bestående av laktoperoxidas, ett tiocyanat, och en peroxiddonator för framställning av en beredning för behandling av infektion förorsakad av pflgfi, Genom föreliggande uppfinning àstadkommes en farmaceutisk beredning vars användning eliminerar risken för tillväxt av resistenta stammar.

Föreliggande uppfinning har testats iL/ijrgi odlingsmedium enligt följande. 25 ml Bru-cella buljong, pH 7,4 + 0,1 ml figyjgfi, stam NCTC 11637 blandades 'i tre kolvar. Bakterierna fick tillväxa i mikroaerofil miljö 48 tim.

Till respektive kolv tillsattes efter dessa 48 hr följande: 1. Kontroll, ingen tillsats 2. Tiocyanat 35 mg/l 3. Laktoperoxidas-glukos-glukosoxidas-tiocyanat. 50 mg/I laktoperoxidas (25 U/m9)š 4,5 g/l glukos; 6,1 mg/l glukosoxidas (200 U/mgl; 35 mg/I tiocyanat.

Följande data erhölls: labell_1 Prgv Q 241im log10 cfu/ml Kontroll 7,3 7,2 2. 8,5 8,3 3. 8,3 0 De erhållna resultaten in vitrg visar att en fullständig avdödning av l_;l._py_lo_g' erhölls mellan 0 och 24 timmar efter tillförsel av systemet.

Systemet har också testats jnlivo pà möss som infekterades med jigyjgfi. Härvid mättes graden av infektion genom att analysera halten av bakterier i faeces.

Systemet tillfördes under 7 dagar och mängden H. pylgri bestämdes under denna 10 15 20 25 30 35 506 529 tid. Resultatet visas nedan som relativ mängd bakterier i faeces. Följande resultat erhölls.

IêLLeLZ 7 dagar Rel mängd 1.56 0,80 0,74 0,71 * * Bakgrundsnivån för bakterierna är cza 0,7. Detta innebär att systemet gav en väsentlig avdödning.

Ovan har systemet testats mot stam NCTC 11637, men det är uppenbart att andra kliniskt väsentliga stammar också avdödas.

Olika beredningsformer för behandling av infektion av pyjgjj är möjliga såsom rena farmaceutiska beredningar, men också födoämnesprodukter, såsom dieter av olika slag. Av den senare typen kan man tänka sig en vetediet bestående av vetekross, skummjölkspulver, sojamjöl, kalciumkaseinat, fett, fibrer, och emulgeringsmedel försatt med natriumtiocyanat, peroxiddonator, och laktoperoxidas.

Man kan också utnyttja olika mjölkprodukter och till dessa sätta peroxiddonator, liksom man kan utnyttja en kulturmjölk innehållande peroxidproducerande lactobaciller.

Vid dosering av den farmaceutiska beredningen innehållande det antibakteriella systemet bör beredningen innehålla så mycket tiocyanat att koncentrationen därav i mag-tarmkanalen utgör åtminstone 0,1 mM, och mängden fast, vattenlöslig per- oxiddonator eller enzymssystem är så stor att koncentrationen därav ger en väteperoxidkoncentration av åtminstone 0,1 mM. Förhållandet peroxiddonator till tiocyanat är mindre än 4, lämpligen 1-2. Mängden laktoperoxidas (50 U/mg) är sådan att koncentrationen utgör minst 1 mg/l.

Vid framställning av farmaceutiska beredningar innehållande ett antibakteriellt sys- 10 15 20 25 30 35 S 5Û6 529' tem enligt uppfinningen kan de föreligga företrädesvis i form av orala beredningar, såsom tabletter, gelatinkapslar eller pulver. Därvid blandas de valda beståndsde- larna med en fast, pulverformig bärare såsom laktos, sackaros, sorbltol, mannitol, stärkelse, såsom potatisstärkelse, majsstärkelse, amylopektin, cellulosaderivat, eller gelatin, samt med antifriktionsmedel, såsom magnesiumstearat, kalciumstea- rat, polyetylenglykolvaxer och liknande för tablettslagning. Önskar man överdragna tabletter för att underlätta den perorala doseringen kan tabletter beläggans med en polymer som löses i magsaften eller medger diffusion av de aktiva beståndsdelar- na till magsaften. Till polymeren kan sättas färg- och smakämnen.

Vid framställning av gelatlnkapslar (droppformade, slutna, hårda eller mjuka kaps- lar) blandas den aktiva föreningen med en vegetabilisk olja. Kapslarna kan också innehälla granulat av de aktiva beståndsdelarna, i kombination med fasta bärare enligt ovan, såsom laktos, sackaros, sorbitol, mannitol, stärkelse, såsom potatisstär- kelse, majsstärkelse, amylopektin, cellulosaderivat, eller gelatin. Vidare kan granu- latet innehålla sönderfallsmedel för sprängning av de enskilda granulatkornen för uppnående av en snabbare frisättning och därmed upplösning.

Flytande beredningar för oral dosering kan föreligga i form av sirap eller suspen- sioner, t.ex. lösningar innehållande från 0,2 till 20 vikt-% av de beskrivna aktiva ämnena tillsammans med etanol, vatten, glycerol, och propylenglykol. Peroxlddo- natorn tillsättes härvid som en mikroinkapslad produkt för att förhindra frisättning före administreringen.

Framställningen av tabletter följer gängse teknik på omrâdet, vilken teknik är väl- känd för fackmanen liksom framställning av granulat för fyllning av gelatinkapslar.

Den dagliga dosen av det aktiva systemet vid peroral dosering varierar och är av- hångig av adminstrationstypen men som en generell regel är dosen 8-400 mg per dag vad avser natriumtiocyanat och 10-500 mg per dag vad avser natriumperkar- bonat. 10 15 20 25 30 35 506 529 Följande tabell ger en allmän översikt över mängden aktiva komponenter som kan användas i olika beredningsformer.

Tiocyanat 3-50 mg/I Glukos minst 0.5 g/l* Glukosoxidas 2,0-15 mg/l' Laktoperoxidas (25 U/mg) 5-150 mg/I ' glukos-glukosoxidas utgör en peroxiddonator. Glukos skall dock finnas närvarande i sådan mängd att giukosoxidaset kan ge peroxid. 2,0-15 mg/l glukosoxidas motsvarar 5-8,5 mg/l glukos. En fast peroxiddonator kan likaväl tillföras som ger ekvivalent mängd väteperoxid vid reaktion. Vidare kan en stam av en peroxidproducerande Lactobacillus användas för att generera peroxid.

Laktoperoxidas tillföres som ren produkt, som mjölkpulver, eller som vassleprodukt.

Glukosoxidas framställes oftast genom odling av Aspergillus niger och isolering frán mediet, men ren naturprodukt som honung kan vara ett alternativ. Tiocyanat kan tillföras som salt med natrium eller kalium, men kan också tillföras i naturproduktform sásom grönkál eller annan Brassicaceae växt innehållande tiocyanat.

Natriumperkarbonatgranulat innehållande 10% aktivt syre 100 g Natriumtiocyanat 40 g Laktoperoxidas (50 U/mg) 2 g Polyvinylpyrrolidon 10 g Laktos 50 g Magnesiumstearat 10 g Läktoperoxidaset blandades med laktos och granulerades med användning av en lösning av polyvinylpyrrolidon.

Natriumperkarbonat blandades med natriumtiocyanat och laktoperoxidasgranu- lerna. Magnesiumstearat tillsattes, varefter granulatet tabletterades.

Tabletterna hade en medelvikt av 212 mg och belades med en polymerbeläggning 10 15 20 25 30 35 506 529 för att underlätta administrering, vilken beläggning upplöses i magsaften. r 'n m I Magnesiumperoxid 50 g Natriumtiocyanat 0,8 g Laktoperoxidas (50 U/mg) 0,04 g Polyvinylpyrrolídon 5 g Laktos 100 g Magnesiumstearat 2 g De tre aktiva komponenterna granulerades g se under användning av polyvinyl- pyrrolidon- som granuleringsmedel. Laktos och magnesiumstearat tillsattes varefter blandningen tabletterades. De erhållna tablettema (100 st) med en medelvikt av 155 mg belades med en lösning av polymer som är löslig i magsaft. r in x I Karbamidperoxid 50 g Natriumtiocyanat 20 g Laktoperoxidas (50 U/mg) 1 g Laktos 100 g Stearinsyrapulver 2 g Karbamidperoxiden granulerades under användning av Eudragit S. Laktoperoxi- dasen blandades med laktos och natriumtiocyanat och blandningen granulerades med Eudragit S. De tvà granulaten blandas och kombineras med stearinsyrapulv- ret och slutblandningen tabletteras, varvid erhålles tabletter med en medelvikt av 175 mg. 10 15 20 25 30 35 5 0 6 5 2 9 I Natriumperkarbonat 100 g Mannitol 20 g ll Natriumtiocyanat 40 g Mannitol 20 g lll Laktoperoxidas (50 U/mg) 2 g Mannilol 20 g Granulat framställdes fràn vardera av I, ll och lll ovan med användning av Eudragit S lösning; De kombinerade granulaten blandas med smakgivare, såsom socker, kakao, mikroinkapslad citronarom, eller blandningar därav. Granulalet doseras med doseringssked. Granulatet förpackas i fukttätt material.

Claims (5)

10 15 20 “9 i 506 529 PATENTKRAV

1. Användning av ett antibakteriellt system omfattande laktoperoxidas och en peroxiddonator vid framställning av en beredning för profylaktisk eller terapeutisk behandling "in vivo" av infektion förorsakad av He/ícobacter pylori vid förekomst i magsäck, innefattande bakterien som trängt in i magsäckens slemhinna, vilken beredning är kompletterad med en närvaro av thiocyanat i antibakteriell nivå.

2. Användning av ett antibakteriellt system enligt krav 1, där peroxiddonatorn innefattar glukos och glukosoxidas.

3. Användning av ett antibakteriellt system enligt krav 1, bestående av laktoperoxidas, thiocyanat och en peroxiddonator i form av rena farmaceutiska beredningar eller i form av födoämnen såsom vetediet, olika mjölkprodukter med en tillsats av en peroxiddonator, eller kulturmjölksprodukter innehållande' peroxidproducerande laktobaciller.

4. Användning av ett antibakteriellt system enligt krav 1, bestående av laktoperoxidas, thiocyanat och en peroxiddonator, där peroxiddonatorn förekommer som en mikroinkapslad produkt som är förhindrad att frisättas före administreringen av systemet.

5. Användning av ett antibakteriellt system enligt krav 1, bestående av laktoperoxidas, thiocyanat och en peroxiddonator, där den dagliga dosen för human behandling utgör 8-400 mg per dag vad avser thiocyanatet.