CN1901924B - 用于抑制细菌定居的方法 - Google Patents
用于抑制细菌定居的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1901924B CN1901924B CN2004800275579A CN200480027557A CN1901924B CN 1901924 B CN1901924 B CN 1901924B CN 2004800275579 A CN2004800275579 A CN 2004800275579A CN 200480027557 A CN200480027557 A CN 200480027557A CN 1901924 B CN1901924 B CN 1901924B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hyperimmune
- mucous epithelium
- mucolytic agent
- colostrum
- ovum
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 221
- 208000034309 Bacterial disease carrier Diseases 0.000 title abstract description 66
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title abstract 3
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 claims abstract description 295
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 claims abstract description 269
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 claims abstract description 269
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 claims abstract description 261
- PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N L-N-acetyl-Cysteine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 95
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 claims description 78
- 102000010445 Lactoferrin Human genes 0.000 claims description 76
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 claims description 76
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 claims description 76
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 claims description 76
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 66
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 claims description 52
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 claims description 52
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 31
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 31
- 229960003022 amoxicillin Drugs 0.000 claims description 22
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 claims description 22
- 230000008378 epithelial damage Effects 0.000 claims description 22
- LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N p-Hydroxyampicillin Natural products O=C1N2C(C(O)=O)C(C)(C)SC2C1NC(=O)C(N)C1=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 20
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 claims description 17
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 claims description 14
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 claims description 14
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 8
- 206010019375 Helicobacter infections Diseases 0.000 claims description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 3
- 239000003172 expectorant agent Substances 0.000 abstract description 257
- 229940066491 mucolytics Drugs 0.000 abstract description 257
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 abstract description 80
- 239000008267 milk Substances 0.000 abstract description 80
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 abstract description 80
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 311
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 158
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 158
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 description 158
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 149
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 149
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 118
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 102
- 101000798100 Bos taurus Lactotransferrin Proteins 0.000 description 90
- 229940072440 bovine lactoferrin Drugs 0.000 description 88
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 78
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 75
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 64
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 64
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 59
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 55
- 239000000047 product Substances 0.000 description 51
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 50
- -1 preferably Substances 0.000 description 49
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 44
- 102000003896 Myeloperoxidases Human genes 0.000 description 43
- 108090000235 Myeloperoxidases Proteins 0.000 description 43
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 42
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 34
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 34
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 30
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 25
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 23
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 22
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 22
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 22
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 21
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 20
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 20
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 19
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 18
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 18
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 18
- 210000004203 pyloric antrum Anatomy 0.000 description 18
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 17
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 17
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 16
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 16
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 16
- 241000894007 species Species 0.000 description 16
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 16
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 15
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 14
- 230000008569 process Effects 0.000 description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 14
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 13
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 13
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 13
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 12
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 12
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 12
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 12
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 12
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 12
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 11
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 11
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 11
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 10
- 208000000718 duodenal ulcer Diseases 0.000 description 10
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 10
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 10
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 10
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 9
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 9
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 9
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 9
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 9
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 9
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 9
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 9
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 9
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 9
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 9
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 9
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 9
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 9
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 9
- 230000004044 response Effects 0.000 description 9
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 9
- ZEMPKEQAKRGZGQ-AAKVHIHISA-N 2,3-bis[[(z)-12-hydroxyoctadec-9-enoyl]oxy]propyl (z)-12-hydroxyoctadec-9-enoate Chemical class CCCCCCC(O)C\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC\C=C/CC(O)CCCCCC)COC(=O)CCCCCCC\C=C/CC(O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-AAKVHIHISA-N 0.000 description 8
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 8
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 8
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Natural products OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 8
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 8
- 238000013196 antibiotherapy Methods 0.000 description 8
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 8
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 8
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 8
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 8
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 8
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 8
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 8
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 8
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 8
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 8
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 8
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 8
- 238000001746 injection moulding Methods 0.000 description 8
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 8
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 8
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 8
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 8
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 8
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 8
- 239000004531 microgranule Substances 0.000 description 8
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 8
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 8
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 8
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 8
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 8
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 8
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 7
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 7
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 7
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 7
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 6
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 6
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 6
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 6
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 6
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 6
- 210000001187 pylorus Anatomy 0.000 description 6
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 description 6
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 6
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 6
- 201000001178 Bacterial Pneumonia Diseases 0.000 description 5
- 206010006458 Bronchitis chronic Diseases 0.000 description 5
- 201000003883 Cystic fibrosis Diseases 0.000 description 5
- 201000005702 Pertussis Diseases 0.000 description 5
- 206010034839 Pharyngitis streptococcal Diseases 0.000 description 5
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 5
- 201000009267 bronchiectasis Diseases 0.000 description 5
- 208000007451 chronic bronchitis Diseases 0.000 description 5
- 201000009151 chronic rhinitis Diseases 0.000 description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 5
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 5
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 5
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 5
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 5
- 201000007119 infective endocarditis Diseases 0.000 description 5
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 5
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 5
- 210000003800 pharynx Anatomy 0.000 description 5
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 5
- 208000016765 streptococcal sore throat Diseases 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- 239000002344 surface layer Substances 0.000 description 5
- 208000019206 urinary tract infection Diseases 0.000 description 5
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 4
- CUNWUEBNSZSNRX-RKGWDQTMSA-N (2r,3r,4r,5s)-hexane-1,2,3,4,5,6-hexol;(z)-octadec-9-enoic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O CUNWUEBNSZSNRX-RKGWDQTMSA-N 0.000 description 4
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 4
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 4
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 4
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 4
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000589989 Helicobacter Species 0.000 description 4
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 4
- 206010062049 Lymphocytic infiltration Diseases 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 4
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 4
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 4
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 4
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 4
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 4
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 4
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 4
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 4
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 4
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 4
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 4
- 210000003123 bronchiole Anatomy 0.000 description 4
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 4
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 4
- 239000010495 camellia oil Substances 0.000 description 4
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 4
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 4
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 4
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 4
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 4
- 239000007891 compressed tablet Substances 0.000 description 4
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 4
- ZAKOWWREFLAJOT-UHFFFAOYSA-N d-alpha-Tocopheryl acetate Natural products CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 4
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 4
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 4
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 4
- HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N ethane-1,2-diol;propane-1,2-diol Chemical compound OCCO.CC(O)CO HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 4
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 4
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 4
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 4
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 4
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 4
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 4
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 4
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 4
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 4
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 4
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 4
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 4
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 4
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 4
- 210000000867 larynx Anatomy 0.000 description 4
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 4
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 4
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 4
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 4
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 4
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 4
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 4
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 4
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N metronidazole Chemical compound CC1=NC=C([N+]([O-])=O)N1CCO VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960000282 metronidazole Drugs 0.000 description 4
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 4
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 4
- 239000007932 molded tablet Substances 0.000 description 4
- PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N monothioglycerol Chemical compound OCC(O)CS PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 4
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 4
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 4
- 229940060184 oil ingredients Drugs 0.000 description 4
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 4
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 4
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 4
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 4
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 4
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 4
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 4
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 4
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 4
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 4
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 4
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 4
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 229960005078 sorbitan sesquioleate Drugs 0.000 description 4
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 4
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 4
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 4
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 4
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 4
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 4
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 4
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 4
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 4
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 4
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 4
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 4
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 4
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 4
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 4
- KKMOSYLWYLMHAL-UHFFFAOYSA-N 2-bromo-6-nitroaniline Chemical compound NC1=C(Br)C=CC=C1[N+]([O-])=O KKMOSYLWYLMHAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010006448 Bronchiolitis Diseases 0.000 description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 241000588653 Neisseria Species 0.000 description 3
- 241000588652 Neisseria gonorrhoeae Species 0.000 description 3
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 3
- WERKSKAQRVDLDW-ANOHMWSOSA-N [(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl] (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO WERKSKAQRVDLDW-ANOHMWSOSA-N 0.000 description 3
- 210000002318 cardia Anatomy 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 208000007565 gingivitis Diseases 0.000 description 3
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 3
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 3
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 201000009240 nasopharyngitis Diseases 0.000 description 3
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 3
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 3
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 3
- 238000003375 selectivity assay Methods 0.000 description 3
- 210000004876 tela submucosa Anatomy 0.000 description 3
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000606125 Bacteroides Species 0.000 description 2
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 2
- 241000588832 Bordetella pertussis Species 0.000 description 2
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 2
- 241000589876 Campylobacter Species 0.000 description 2
- 241000589875 Campylobacter jejuni Species 0.000 description 2
- 241000193163 Clostridioides difficile Species 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 2
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 2
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 2
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000606768 Haemophilus influenzae Species 0.000 description 2
- 241001453258 Helicobacter hepaticus Species 0.000 description 2
- 101000798114 Homo sapiens Lactotransferrin Proteins 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 2
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 2
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 2
- 102100038609 Lactoperoxidase Human genes 0.000 description 2
- 108010023244 Lactoperoxidase Proteins 0.000 description 2
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 2
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 2
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 241000206591 Peptococcus Species 0.000 description 2
- 241000191992 Peptostreptococcus Species 0.000 description 2
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 2
- 241000192031 Ruminococcus Species 0.000 description 2
- 241000607762 Shigella flexneri Species 0.000 description 2
- 241000607760 Shigella sonnei Species 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 2
- 241000194019 Streptococcus mutans Species 0.000 description 2
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 2
- 101000798106 Sus scrofa Lactotransferrin Proteins 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000607734 Yersinia <bacteria> Species 0.000 description 2
- 241000607447 Yersinia enterocolitica Species 0.000 description 2
- 229960004308 acetylcysteine Drugs 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 208000023652 chronic gastritis Diseases 0.000 description 2
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 229920006237 degradable polymer Polymers 0.000 description 2
- 229940032049 enterococcus faecalis Drugs 0.000 description 2
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 108010037896 heparin-binding hemagglutinin Proteins 0.000 description 2
- 102000050459 human LTF Human genes 0.000 description 2
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 2
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 2
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 2
- 229940057428 lactoperoxidase Drugs 0.000 description 2
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 2
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 2
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 2
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- PNJWIWWMYCMZRO-UHFFFAOYSA-N pent‐4‐en‐2‐one Natural products CC(=O)CC=C PNJWIWWMYCMZRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 230000003578 releasing effect Effects 0.000 description 2
- 229940115939 shigella sonnei Drugs 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 2
- 229940098232 yersinia enterocolitica Drugs 0.000 description 2
- XWRZKLKALVJDDS-REOHCLBHSA-N (2r)-2-(diaminomethylideneamino)-3-sulfanylpropanoic acid Chemical compound NC(N)=N[C@@H](CS)C(O)=O XWRZKLKALVJDDS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- XVAYJUBRRZOANH-UHFFFAOYSA-N 2-(1,3-thiazolidine-3-carbonyl)benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C(=O)N1CSCC1 XVAYJUBRRZOANH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JRBJSXQPQWSCCF-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dimethoxybenzidine Chemical group C1=C(N)C(OC)=CC(C=2C=C(OC)C(N)=CC=2)=C1 JRBJSXQPQWSCCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SUBDBMMJDZJVOS-UHFFFAOYSA-N 5-methoxy-2-{[(4-methoxy-3,5-dimethylpyridin-2-yl)methyl]sulfinyl}-1H-benzimidazole Chemical compound N=1C2=CC(OC)=CC=C2NC=1S(=O)CC1=NC=C(C)C(OC)=C1C SUBDBMMJDZJVOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 229930183010 Amphotericin Natural products 0.000 description 1
- QGGFZZLFKABGNL-UHFFFAOYSA-N Amphotericin A Natural products OC1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C=CC=CC=CC=CCCC=CC=CC(C)C(O)C(C)C(C)OC(=O)CC(O)CC(O)CCC(O)C(O)CC(O)CC(O)(CC(O)C2C(O)=O)OC2C1 QGGFZZLFKABGNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000605909 Fusobacterium Species 0.000 description 1
- 241001503513 Helicobacter bilis Species 0.000 description 1
- 241000590012 Helicobacter muridarum Species 0.000 description 1
- 241000368628 Helicobacter rappini Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 206010028116 Mucosal inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 241000588650 Neisseria meningitidis Species 0.000 description 1
- GBFLZEXEOZUWRN-VKHMYHEASA-N S-carboxymethyl-L-cysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CSCC(O)=O GBFLZEXEOZUWRN-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 241000607764 Shigella dysenteriae Species 0.000 description 1
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 description 1
- 201000005010 Streptococcus pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 108010059993 Vancomycin Proteins 0.000 description 1
- 241000607626 Vibrio cholerae Species 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 208000038016 acute inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006022 acute inflammation Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 229960005174 ambroxol Drugs 0.000 description 1
- JBDGDEWWOUBZPM-XYPYZODXSA-N ambroxol Chemical compound NC1=C(Br)C=C(Br)C=C1CN[C@@H]1CC[C@@H](O)CC1 JBDGDEWWOUBZPM-XYPYZODXSA-N 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940009444 amphotericin Drugs 0.000 description 1
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229910052797 bismuth Inorganic materials 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N bismuth atom Chemical compound [Bi] JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 229960003870 bromhexine Drugs 0.000 description 1
- OJGDCBLYJGHCIH-UHFFFAOYSA-N bromhexine Chemical compound C1CCCCC1N(C)CC1=CC(Br)=CC(Br)=C1N OJGDCBLYJGHCIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940015062 campylobacter jejuni Drugs 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 1
- 229960004399 carbocisteine Drugs 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- SYLKGLMBLAAGSC-QLVMHMETSA-N cefsulodin Chemical compound C1=CC(C(=O)N)=CC=[N+]1CC1=C(C([O-])=O)N2C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](C=3C=CC=CC=3)S(O)(=O)=O)[C@H]2SC1 SYLKGLMBLAAGSC-QLVMHMETSA-N 0.000 description 1
- 229960003202 cefsulodin Drugs 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000009514 concussion Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940093495 ethanethiol Drugs 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000010408 film Substances 0.000 description 1
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 description 1
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 description 1
- 201000006585 gastric adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229940047650 haemophilus influenzae Drugs 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003550 mucous cell Anatomy 0.000 description 1
- 229950009469 nesosteine Drugs 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 229960000381 omeprazole Drugs 0.000 description 1
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 1
- 238000003793 prenatal diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 229940126409 proton pump inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000000612 proton pump inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 229940007046 shigella dysenteriae Drugs 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 229940037645 staphylococcus epidermidis Drugs 0.000 description 1
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 description 1
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N trimethoprim Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(CC=2C(=NC(N)=NC=2)N)=C1 IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001082 trimethoprim Drugs 0.000 description 1
- 229960003165 vancomycin Drugs 0.000 description 1
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N vancomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N 0.000 description 1
- MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N vancomycin Natural products O1C(C(=C2)Cl)=CC=C2C(O)C(C(NC(C2=CC(O)=CC(O)=C2C=2C(O)=CC=C3C=2)C(O)=O)=O)NC(=O)C3NC(=O)C2NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(C)C)NC)C(O)C(C=C3Cl)=CC=C3OC3=CC2=CC1=C3OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1CC(C)(N)C(O)C(C)O1 MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940118696 vibrio cholerae Drugs 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
- A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/20—Milk; Whey; Colostrum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/40—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Virology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oncology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明涉及用于在生物学系统中抑制粘液上皮的细菌定居的方法。所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够抑制细菌定居的成分。
Description
发明领域
本发明涉及用于在生物学系统中抑制粘液上皮的细菌定居的方法和组合物,还涉及用于减轻由粘液上皮的细菌定居引起的感染、炎症、和损伤的方法和组合物。
发明背景
许多疾病和状况与粘膜表面的致病细菌定居和感染有关。诸如胃肠道、口腔、呼吸道、食管、口、泌尿生殖道、和眼等器官和组织的粘膜表面都可以被许多不同类型的致病细菌所定居和感染。例如,幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)对胃粘膜的定居和感染在许多临床表现的发展中发挥关键作用,包括胃炎、胃和十二指肠溃疡、胃部腺癌、粘膜相关淋巴组织淋巴癌、和非溃疡性消化不良。
细菌定居和感染这些粘膜表面的能力涉及许多因素,包括:致病细菌粘附宿主细胞和抵抗物理清除的能力、细菌侵入宿主细胞的能力、细菌抵抗吞噬作用和补体的能力、细菌躲避宿主免疫防御的能力、以及细菌与宿主组织和正常菌群竞争有限营养的能力。
例如,淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrheae)合成不同菌毛,使之粘附多种组织的粘膜表面,包括咽喉、泌尿生殖道、直肠、和眼球结膜。酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)生成粘附素,即与宿主细胞表面特异受体相结合的蛋白质。有些细菌,诸如志贺氏菌菌株,生成激活宿主细胞骨架系统使得细菌能够通过吞噬作用进入细胞的分子。
在幽门螺杆菌感染胃粘膜的情形中,细菌利用多种不同机制来定居和感染胃粘膜下面的胃。首先,幽门螺杆菌定居胃窦,因为该区域的酸性适中。然后,细菌利用它的鞭毛和螺旋外形钻透胃粘液层。再后,生成的粘附素使之与上皮细胞的膜结合脂质和碳水化合物相结合。最后,细菌生成脲酶,促进酸性胃环境的定居。脲酶消化尿素而生成氨和碳酸氢盐,有助于中和胃酸。胃部保护性粘液层的削弱使得胃易受酸和胃蛋白酶破坏作用的影响。
胃粘膜中幽门螺杆菌的存在总是与由嗜中性粒细胞和单核细胞浸润引起的粘膜炎症有关。幽门螺杆菌还生成许多有害的酶,而且它们也有可能牵涉胃粘膜炎症。胃粘膜炎症还可能导致胃的进一步损伤。
用于根除定居和感染粘膜的细菌的治疗通常较为昂贵,缺乏功效,且只有在某些临床状况下是明智的。许多治疗方案还常常是复杂的,产生严重的副作用,且难以让患者遵从。治疗方案常常牵涉多种试剂,包括一种或多种抗生素。例如,目前推荐的用于根除幽门螺杆菌的治疗方法牵涉使用抗生素和质子泵抑制剂的三联治疗方案。同样还不清楚,针对与许多致病细菌定居和感染粘膜有关的疾病和状况,免疫接种是否是现实且有效的预防性治疗方法。
因此,需要抑制粘液上皮的细菌定居和感染的新方法和组合物。
本发明涉及发挥抑制粘液上皮的细菌定居和感染以及相关炎症作用的试剂组合的鉴定。
贯穿本说明书,出于描述本发明各个方面的目的,可以参考其它文件。然而,这并非承认本说明书中引用的任何参考文献构成现有技术。具体而言,应当理解,本文对任何文件的参考并非承认这些文件在任何其它国家形成本领域共同常识的一部分。关于参考文献的讨论是陈述它们的作者所声称的内容,而且申请人保留挑战本文所引用的任何文件的精确性和针对性的权利。
发明概述
本发明提供了用于在生物学系统中抑制粘液上皮的细菌定居的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够抑制细菌定居的成分。
本发明还提供了用于在生物学系统中减轻粘液上皮的细菌感染的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够减轻细菌感染的成分。
本发明还提供了用于在生物学系统中减轻与粘液上皮细菌感染有关的炎症的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够减轻与细菌感染有关的炎症的成分。
本发明还提供了用于在生物学系统中减轻与粘液上皮细菌感染有关的粘液上皮损伤的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤的成分。
本发明还提供了用于在受试者中治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的方法,所述方法包括如下步骤:对受试者施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够在受试者中治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的成分。
本发明还提供了包含粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的组合物。
本发明源自关于初乳抑制与粘液上皮疾病或状况有关的粘液上皮的细菌定居和感染之能力研究。令人惊讶的发现,抑制细菌定居、感染、和相关胃部炎症的能力通过初乳(或初乳成分)与粘液溶解剂的联合而得到了提高。具体而言,发现由幽门螺杆菌引起的定居、感染、和胃部相关炎症可以通过初乳或初乳成分联合粘液溶解剂诸如N-乙酰半胱氨酸的治疗得到抑制或预防。
用于整篇说明书的多个术语具有熟练技术人员充分理解的含义。然而,为了便于理解,现在定义这些术语中的一些。
术语“粘液上皮”在用于整篇说明书时理解为任何上皮细胞集合,包括分泌粘液且生成能够被细菌定居的一层粘液的细胞。
术语“生物学系统”在用于整篇说明书时理解为具有粘液上皮的任何多细胞系统。例如,生物学系统可以是具有粘液上皮的完整器官或组织或其一部分,或者是易受粘液上皮的细菌定居或感染的影响或正在遭受其影响的完整动物或人受试者。
术语“粘液溶解剂”在用于整篇说明书时理解为有能力降低粘液疏水性的任何试剂。如Absolom等,1986,J.Colloid Interface Sci112:599中所述,用于测量疏水性的一种经验证的技术是在将一滴盐水置于标本表面上时测量活组织检查标本的接触角。可以使用测角计来测量接触角,测角计安装了单色光源和用于对组织表面施加小体积盐水的千分尺激活注射器。对组织表面施加小体积盐水(5μl)。将视野中心调至与三相点一致,然后将一条叉丝调至与组织-流体界面一致。二者之间的角度就是接触角,而且它可以由围绕目镜的刻度直接读出。
术语“粘液上皮的定居”在用于整篇说明书时理解为一种或多种细菌在与粘液上皮相连的粘液层下面和/或其中的驻扎。
术语“减轻”和“抑制”在用于整篇说明书时理解为减轻或抑制某个过程的进展,包括该过程的开始、继续、或结束,而且在本发明的内容中,这些术语包括对粘液上皮的细菌定居和感染以及炎症的预防。
术语“粘液上皮的感染”在用于整篇说明书时理解为一种或多种细菌在与粘液上皮相连的粘液层下面和/或其中的存在。
术语“粘液上皮损伤”在用于整篇说明书时理解为由于粘液上皮细菌感染而发生的粘液上皮损伤。这种损伤可以是直接由细菌定居或感染引起的损伤,和/或由粘液上皮细菌感染间接引起的损伤,诸如由于粘液上皮炎症而发生的损伤。
术语“由乳制品衍生的抗细菌剂”在用于整篇说明书时理解为通过本领域已知方法生成的,乳、超免疫乳、初乳、超免疫初乳、或其它乳衍生产品中具有抗细菌活性(或是杀菌的或是抑菌的)的任何成分。这包括由乳、超免疫乳、初乳、或超免疫初乳衍生的一种或多种级分或提取物,或者是乳、超免疫乳、初乳、或超免疫初乳中通常存在的组合物中具有抗细菌活性的任何成分,包括由乳、超免疫乳、初乳、或超免疫初乳充分纯化得到的产品,或是通过重组DNA技术生成的产品。
附图简述
在图1中,板块A显示了用盐水(NaCl)、超免疫牛初乳(HBC)、或牛乳铁蛋白(BLf)治疗的小鼠的胃体中的定居水平。板块B显示了胃窦中的定居水平,而板块C显示了整个胃中的定居水平。各个动物的结果以符号(◆)显示;每个组的平均响应以水平条(-)和数值指示。
在图2中,板块A显示了用水(H2O)、牛乳铁蛋白(BLf)、或牛乳铁蛋白连同N-乙酰半胱氨酸(BLf*)治疗的小鼠的整体定居水平。各个动物的结果以符号(□)显示;每个组的平均响应以水平条(-)和数值指示。板块B显示了过渡区中的定居水平。
在图3中,板块A显示了单独用水(H2O)、单独用N-乙酰半胱氨酸(NAC)、用牛乳铁蛋白胃蛋白酶水解产物(BLc-A)、牛乳铁蛋白酸水解产物(BLc-B)、未免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(NBC*)、超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC*)、牛乳铁蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf*)、牛乳铁蛋白胃蛋白酶水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A*)、牛乳铁蛋白酸水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B*)治疗的小鼠或者用三联疗法(TT)治疗的小鼠的胃体中的定居水平。图B显示了过渡区中的定居水平。各个动物的结果以符号(-)显示;每个组的平均响应以水平条(-)和数值指示。
在图4中,板块A显示了单独用水(H2O)、单独用N-乙酰半胱氨酸(NAC)、用牛乳铁蛋白胃蛋白酶水解产物(BLc-A)、牛乳铁蛋白酸水解产物(BLc-B)、未免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(NBC*)、超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC*)、牛乳铁蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf*)、牛乳铁蛋白胃蛋白酶水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A*)、牛乳铁蛋白酸水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B*)治疗的小鼠或者用三联疗法(TT)治疗的小鼠的胃窦中的定居水平。板块B显示了整体考虑的小鼠胃中的定居水平。各个动物的结果以符号(-)显示;每个组的平均响应以水平条(-)和数值指示。
图5显示了用水(H2O)、牛乳铁蛋白(BLf)、或牛乳铁蛋白联合N-乙酰半胱氨酸(BLf*)治疗的小鼠中慢性炎性细胞浸润(慢性胃炎)的整体水平。各个动物的结果以符号(◆)显示;每个组的平均响应以水平条(-)和数值指示。
在图6中,板块A显示了单独用水(H2O)、用超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC)、牛乳铁蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf)、牛乳铁蛋白胃蛋白酶水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A)、或牛乳铁蛋白酸水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B)治疗的小鼠的胃体中的炎性细胞浸润水平。板块B显示了小鼠过渡区中的炎性细胞浸润水平。对于板块A和B,各个动物的结果以符号(X或□)显示;每个组的平均响应以水平条(-)和数值指示。板块C显示了小鼠胃窦中的炎性细胞浸润水平。板块D显示了炎性细胞浸润的综合评分。对于板块C和D,各个动物的结果以符号(○或◆)显示;每个组的平均响应以水平条(-)和数值指示。
图7显示了在用牛乳铁蛋白(BLf)或牛乳铁蛋白联合N-乙酰半胱氨酸(BLf*)治疗的小鼠中检测到的急性胃炎(MPO活性)水平与H2O对照小鼠中的急性胃炎(MPO活性)水平进行的比较。各个动物的结果以符号(□)显示;每个组的平均响应以水平条(-)和数值指示。
图8显示了单独用水(H2O)、用超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC)、牛乳铁蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf)、牛乳铁蛋白胃蛋白酶水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A)、或牛乳铁蛋白酸水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B)治疗的小鼠中的急性胃炎(MPO活性)水平。各个动物的结果以符号(□)显示;每个组的平均响应以水平条(-)和数值指示。
在图9中,板块A显示了依照实施例11中所述多种治疗方案的SS1定居存活计数,而板块B显示了依照实施例11中所述多种治疗方案的胃组织MPO活性。
发明描述
如上所述,在一种形式中,本发明提供了用于在生物学系统中抑制粘液上皮的细菌定居的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够抑制细菌定居的成分。
依照本发明多种形式的粘液上皮可以是已经被细菌定居或感染的任何粘液上皮,或者是能够被细菌定居或感染的任何粘液上皮。优选的是,粘液上皮是动物或人的粘液上皮。最优选的是,粘液上皮是人的粘液上皮。
粘液上皮可以是一种或多种下列器官或组织的一部分:胃,包括胃的贲门、胃底、胃体、胃窦、和幽门;十二指肠;回肠;小肠;大肠;结肠;肠;直肠;食道;口;舌;咽;泌尿生殖道;眼;以及呼吸道,包括鼻腔、口腔、喉、气管、支气管(包括细支气管和肺泡)、和肺。优选的是,粘液上皮是胃的贲门、胃底、胃窦、或幽门中一种或多种的粘液上皮。
粘液上皮可以是与疾病或状况有关的任何粘液上皮,而所述疾病或状况又与粘液上皮的细菌定居或感染有关。在这个方面,与粘液上皮的细菌定居或感染有关的疾病或状况包括:胃部炎症;胃或十二指肠溃疡;胃部腺癌;粘膜相关淋巴组织淋巴癌;非溃疡性消化不良;与白细胞浸润有关的胃部状况;尿道感染;链球菌性咽喉炎;传染性心内膜炎;细菌性肺炎;百日咳;龈炎;急性或慢性支气管炎;(细)支气管扩张;哮喘性支气管炎;支气管哮喘;细支气管炎;囊肿性纤维化;咽喉炎;急性或慢性鼻炎。优选的是,粘液上皮是与下列疾病或状况有关的粘液上皮:胃部炎症、胃或十二指肠溃疡、胃部腺癌、粘膜相关淋巴组织淋巴癌、非溃疡性消化不良、或与淋巴细胞浸润有关的胃部状况。
可能定居或感染依照本发明多种形式的粘液上皮的细菌包括:螺杆菌属(Helicobacter)物种,包括幽门螺杆菌(Helicobacterpylori)、肝螺杆菌(Helicobacter hepaticus)、拉氏螺杆菌(Helicobacter rappini)、小家鼠螺杆菌(Helicobactermuridarum)、Helicobacter bilis;链球菌属(Streptococcus)物种,包括变异链球菌(Streptococcus mutans)、酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)、肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae);肠球菌属(Enterococcus)物种,包括粪肠球菌(Enterococcus faecalis);类杆菌属(Bacteroides)物种;双歧杆菌属(Bifidobacterium)物种;消化球菌属(Peptococcus)物种;消化链球菌属(Peptostreptococcus)物种;瘤胃球菌属(Ruminococcus)物种;梭菌属(Clostridium)物种,包括艰难梭菌(Clostridium difficile);乳杆菌属(Lactobacillus)物种,包括嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus);奈瑟氏菌属(Neisseria)物种,包括淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrhoeae)和脑膜炎奈瑟氏菌(Neisseria meningitides);埃希氏大肠杆菌(Escherichia coli);霍乱弧菌(Vibrio cholerae);志贺氏菌属(Shigella)物种,包括痢疾志贺氏菌(Shigelia dysenteriae)、弗氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、和索氏志贺氏菌(Shigellasonnei);耶尔森氏菌属(Yersinia)物种,包括小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica);铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa);百日咳博德特氏菌(Bordetella pertussis);弯曲杆菌属(Campylobacter)物种,包括空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni);流感嗜血菌(Haemophilus influenzae);葡萄球菌属(Staphylococcus)物种,包括表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。优选的是,可能定居或感染粘液上皮的细菌是螺杆菌属的细菌物种。最优选的是,细菌是幽门螺杆菌。
依照本发明多种形式的生物学系统可以是具有粘液上皮的任何多细胞系统,包括完整器官或组织或其一部分,或者是完整动物或人受试者,它们所具有的粘液上皮能够被细菌定居或感染。
优选的是,生物学系统是人或动物。更优选的是,生物学系统是具有与疾病或状况有关的粘液上皮的人或动物,而所述疾病或状况又是由细菌定居或感染引起的。最优选的是,生物学系统是易受一种或多种下列由粘液上皮的细菌定居或感染引起的疾病或状况影响或实际上正在遭受其影响的人受试者:胃部炎症;胃或十二指肠溃疡;胃部腺癌;粘膜相关淋巴组织淋巴癌;非溃疡性消化不良;与白细胞浸润有关的胃部状况;尿道感染;链球菌性咽喉炎;传染性心内膜炎;细菌性肺炎;百日咳;龈炎;急性或慢性支气管炎;(细)支气管扩张;哮喘性支气管炎;支气管哮喘;细支气管炎;囊肿性纤维化;咽喉炎;急性或慢性鼻炎。
依照本发明多种形式的粘液溶解剂是能够降低粘液疏水性的试剂。如Absolom等,1986,J.Colloid Interface Sci 112:599中所述,用于测量疏水性的一种经确认技术是在将一滴盐水置于标本表面上时测量活组织检查标本的接触角。可以使用测角计来测量接触角,测角计安装了单色光源和用于对组织表面施加小体积盐水的千分尺激活注射器。对组织表面施加小体积盐水(5μl)。将视野中心调至与三相点一致,然后将一条叉丝调至与组织-流体界面一致。二者之间的角度就是接触角,而且它可以由围绕目镜的刻度直接读出。
粘液溶解剂的实例包括N-乙酰半胱氨酸、叔丁基半胱氨酸、半胱氨酸的脂肪酸衍生物、N-鸟嘌呤基-半胱氨酸、乙基半胱氨酸、萘索司坦、氨溴索、DNA酶(Dnase)、碘、Gesolin、2-巯基乙烷磺酸钠、羧甲半胱氨酸和半胱甲酯、以及溴己新。优选的是,粘液溶解剂是N-乙酰半胱氨酸。
因此,在一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中抑制粘液上皮的细菌定居的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的N-乙酰半胱氨酸和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合N-乙酰半胱氨酸时能够抑制细菌定居的成分。
依照本发明多种形式的初乳可以是由哺乳动物分泌的任何初乳,包括人初乳、牛初乳、绵羊初乳、山羊初乳、猪初乳、或马初乳。优选的是,初乳是牛初乳。
可以通过本领域已知的合适方法采集初乳,诸如Davidson等,1989,Lancet 2:709-712中所述。
优选的是,初乳是通过用细菌(或由细菌衍生的抗原)连续免疫哺乳动物而产生的超免疫初乳,其中所述细菌的定居或感染需要抑制、与细菌感染有关的炎症或损伤需要减轻、或与细菌感染有关的疾病或状况需要治疗。用于生产超免疫初乳的合适方法正如Davidson等,1989,Lancet 2:709-712中所述。
例如,为了抑制幽门螺杆菌定居或感染胃肠道,可以使用来自经过幽门螺杆菌接种的母牛的超免疫初乳。
因此,在一种优选形式中,本发明提供了用于抑制幽门螺杆菌定居胃肠道的方法,所述方法包括如下步骤:施用有效量的粘液溶解剂和超免疫初乳。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于抑制幽门螺杆菌定居胃肠道的方法,所述方法包括如下步骤:施用有效量的N-乙酰半胱氨酸和超免疫初乳。
依照本发明多种形式的超免疫乳可以是由哺乳动物分泌的任何超免疫乳,包括人超免疫乳、牛超免疫乳、绵羊超免疫乳、山羊超免疫乳、猪超免疫乳、或马超免疫乳。优选的是,超免疫乳是牛超免疫乳。
应当理解,超免疫乳指由经过相关细菌(或由细菌衍生的抗原)连续免疫的哺乳动物分泌的乳,其中所述细菌的定居或感染需要抑制、与细菌感染有关的炎症或损伤需要减轻、或与细菌感染有关的疾病或状况需要治疗。用于生产超免疫乳的合适方法正如Davidson等,1989,Lancet 2:709-712中所述。
例如,为了抑制幽门螺杆菌定居或感染胃肠道,可以使用来自经过幽门螺杆菌接种的母牛的超免疫乳。
因此,在一种优选形式中,本发明提供了用于抑制幽门螺杆菌定居胃肠道的方法,所述方法包括如下步骤:施用有效量的粘液溶解剂和超免疫乳。
依照本发明多种形式的初乳和/或超免疫乳成分可以是由初乳、超免疫初乳、或超免疫乳衍生的在联合粘液溶解剂时能够发挥抑制相关细菌定居或感染、减轻与相关细菌感染有关的炎症或损伤、或治疗与相关细菌感染有关的疾病或状况的作用的一种或多种成分。应当理解,这种成分包括通过本发明已知方法由初乳、超免疫初乳、或超免疫乳衍生的任何级分或提取物,由初乳、超免疫初乳、或超免疫乳衍生的任何纯化的或半纯化的成分,或者是通过其它手段(包括重组DNA技术)生成的初乳、超免疫初乳、或超免疫乳中通常存在的任何成分,或者是由初乳、超免疫初乳、或超免疫乳衍生的经过进一步处理或修饰(包括这些成分的水解)的任何成分。
优选的是,初乳和/或超免疫乳成分是乳铁蛋白。更优选的是,所述成分指牛乳铁蛋白。在这个方面,还发现乳铁蛋白,即初乳和其它乳制品中的一种成分,在联合粘液溶解剂N-乙酰半胱氨酸使用时显示抑制粘液上皮幽门螺杆菌定居或感染的能力得到提高。
本发明多种形式中的初乳和/或超免疫乳成分还可以是一种或多种针对细菌的特异性或交叉反应性抗体,包括IgG1、IgG2、IgA、IgM、或抗体。
因此,在一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中抑制粘液上皮的细菌定居的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种针对定居粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性抗体。
例如,在抑制幽门螺杆菌定居胃肠道的情况中,可以联合粘液溶解剂施用一种或多种幽门螺杆菌特异性抗体,或者可以联合粘液溶解剂施用一种或多种幽门螺杆菌交叉反应性抗体。
在这个方面,一种或多种特异性或交叉反应性抗体可以存在于其它化合物的混合物中,诸如存在于初乳、超免疫初乳、乳、或超免疫乳中。或者,抗体可以是通过本领域已知方法诸如抗体亲和纯化由诸如血浆、初乳、超免疫初乳、乳、超免疫乳、卵黄、或超免疫卵黄等来源纯化得到的充分纯化形式。
可以通过本领域已知方法通过接种合适细菌或由细菌衍生的一种或多种抗原在人、动物、或鸟中引发抗体。
将要在本发明多种形式中施用的粘液溶解剂的数量和形式没有特别限制,只要它是通常展示有益效果的数量和形式。
将要施用的初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的数量也没有特别限制,只要它是通常展示有益效果的数量和形式。
在这个方面,可以根据具体的粘液溶解剂和初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分、待抑制细菌定居或感染的程度、待减轻粘液上皮炎症或损伤的程度、所定居或感染的组织或器官、待治疗疾病或状况的种类、受试者的年龄和体重、施用频率、或存在的其它活性剂,适当选择粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的剂量。
粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以共施用,或者分开施用(从而达到联合作用的期望部位),而且或是单独使用或是联合其它试剂以提高根除细菌的可能性。在用作附属疗法时,可能可以应用较小剂量。
在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以在适于产生期望效果的任何时间内施用。例如,可以在定居发作前施用,从而预防定居。或者,可以在已经发生或检测到粘液上皮定居的过程中或其后施用。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中预防粘液上皮的细菌定居的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够预防细菌定居的成分。
在人或动物系统中,粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以口服施用,或者通过任何其它合适手段,因此必须考虑粘液溶解剂和初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的通过时间。优选的是,粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的施用是通过口服施用。
对于为了抑制胃肠道粘液上皮定居或感染而口服施用粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分而言,优选的是,粘液溶解剂是N-乙酰半胱氨酸,而初乳是超免疫初乳。例如,为了抑制幽门螺杆菌定居胃肠道,粘液溶解剂优选N-乙酰半胱氨酸,而初乳是来自经过幽门螺杆菌或其抗原免疫的母牛的超免疫初乳。
在本发明的多种形式中,考虑到待施用粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分二者的具体物理和化学特征,粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的施用还可以包括一种或多种可接受添加剂的使用,包括可接受盐、氨基酸、多肽、聚合物、溶剂、缓冲剂、赋形剂、和填充剂。
例如,粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以配制成食品添加剂、水溶液、油性制剂、脂肪乳剂、乳剂、凝胶等形式的多种制剂,而且这些制剂可以以含有常规无毒可接受载体的剂量配方或任何其它方便的剂量形式通过口服、吸附和吸收、局部、直肠、鼻、含服、或阴道施用。
在口服施用的情况中,可以以合适口服制剂的形式施用组合物(例如固体制剂,诸如片剂、胶囊、食品添加剂、颗粒、或粉剂;液体制剂,诸如奶制品、糖浆、乳剂、或悬浮液)。
含有粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的组合物还可以含有防腐剂、稳定剂、分散剂、pH控制剂、或等渗剂。合适防腐剂的实例是甘油、丙二醇、酚、或苯甲醇。合适稳定剂的实例是右旋糖苷、明胶、α-醋酸生育酚、或α-硫代甘油。合适分散剂的实例包括聚氧乙烯(20)、失水山梨糖醇单油酸酯(吐温80)、失水山梨糖醇倍半油酸酯(Span 30)、聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)乙二醇(Pluronic F68)、或聚氧乙烯氢化蓖麻油60。合适的pH控制剂的实例包括氢氯酸、氢氧化钠等等。合适的等渗剂的实例是葡萄糖、D-山梨醇、或D-甘露醇。
在本发明的多种形式中,考虑到所用具体粘液溶解剂和初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的物理和化学特性,粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的施用还可以是含有可接受载体、稀释剂、赋形剂、悬浮剂、润滑剂、佐剂、媒介、投递系统、乳化剂、崩解剂、吸收剂、防腐剂、表面活性剂、着色剂、食用香料、或增甜剂的组合物的形式。
口服施用时,使用常规设备和本领域已知技术,常常将组合物配制成单位剂量形式,诸如液体(包括用于口服或局部施用的长期保存液体配方、水性悬浮液、或溶液)、片剂、扁囊剂、粉剂、微粒、颗粒、咀嚼锭剂、食品添加剂、胶囊、或相似剂量形式。这些配方通常包含液体、固体、或半固体载体。例示性载体包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、矿物油、可可脂、可可油、藻酸盐、黄芪胶、明胶、糖浆、甲基纤维素、聚氧乙烯山梨聚糖单月桂酸酯、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁、诸如此类。
在以片剂施用组合物的情况中,可以通过将活性成分与任选包含的一种或多种辅助成分压缩或注模来生产片剂。可以通过在合适机器中压缩易流形式(诸如粉末或微粒)的活性成分,任选与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、表面活性剂、或分散剂混合,来制备压制片剂。可以通过在合适机器中将用惰性液体稀释剂弄湿的粉状活性成分与合适载体的混合物一起注模来生产模制片剂。
载体还可以包含少量添加剂,诸如提高溶解度、等渗性、和化学稳定性的物质,例如抗氧化剂、缓冲剂、和防腐剂。
在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的施用还可以利用受控释放技术。粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫初乳、超免疫乳(或任何上述各项的一种或多种成分)还可以作为持续释放产品施用。为了进一步提高持续释放效果,可以与额外成分一起配制组合物,诸如植物油(例如大豆油、芝麻油、山茶油、蓖麻油、花生油、菜籽油);中级脂肪酸甘油三酯;脂肪酸酯,诸如油酸乙酯;聚硅氧烷衍生物;或者,水溶性高分子量化合物,诸如透明质酸或其盐(重均分子量:约80,000-2,000,000)、羧甲基纤维素钠(重均分子量:约20,000-400,000)、羟丙基纤维素(2%水溶液的粘性:3-4,000cps)、atherocollagen(重均分子量:约300,000)、聚乙二醇(重均分子量:约400-20,000)、聚环氧乙烷(重均分子量:约100,000-9,000,000)、羟丙基甲基纤维素(1%水溶性的粘性:4-100,000cSt)、甲基纤维素(2%水溶液的粘性:15-8,000cSt)、聚乙烯醇(粘性:2-100cSt)、聚乙烯吡咯烷酮(重均分子量:25,000-1,200,000)。
在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的施用还可以包括其它试剂的施用,包括抗生素和酸抑制剂。
粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分抑制粘液上皮定居能力的测定可以通过本领域已知的合适方法得到确认。例如,抑制定居的程度可以通过直接显现暴露或不暴露于粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的具体粘液上皮样品中的细菌数目来测定。在这种情况中,可以用用于检测目的细菌的特异染色剂(例如幽门螺杆菌的姬姆萨染色)进行染色来显现细菌,例如如《Saunders氏实验室医学和技术字典和百科全书》“Saunders Dictionary and Encyclopedia of LaboratoryMedicine and Technology”(Benington J.L)中所述。
或者,可以通过暴露或不暴露于粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的具体粘液上皮样品中炎性细胞对粘液样品的浸润程度来测定细菌定居,例如如《组织学课本和图集》“Histology a Text and Atlas”(第三版;Ross,M.H.、Rommell,L.J.、Kaye,G.I.,1995,Williams and Wilkins,马里兰州,美国)中所述。
用于测定粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分抑制粘液上皮定居能力的另一种方法是通过使用酶标志物,诸如作为嗜中性粒细胞浸润粘液上皮指标的髓过氧化物酶,例如Krawisz,J.等,1984,Gastroenterology 87:1344-1350中所述。可以通过本领域已知的合适方法获得用于测试的粘液上皮样品,包括粘液上皮的活组织检查。
优选的是,抑制定居的程度是治疗后单位面积的粘液上皮中的平均细菌数目与未治疗受试者的单位面积中的平均细菌数目相比降低了70%或更多。更优选的是,抑制定居的程度是治疗后单位面积的粘液上皮中的平均细菌数目与未治疗受试者的单位面积中的平均细菌数目相比降低了85%或更多。最优选的是,抑制定居的程度是治疗后单位面积的粘液上皮中的平均细菌数目与未治疗受试者的单位面积中的平均细菌数目相比降低了90%或更多。
还发现,乳铁蛋白,即初乳和乳中的抗细菌成分,显示抑制粘液上皮的细菌定居或感染的能力得到提高。例如,乳铁蛋白在联合粘液溶解剂N-乙酰半胱氨酸使用时显示抑制幽门螺杆菌定居粘液上皮的能力得到提高。
因此,在一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中抑制粘液上皮的细菌定居的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和由乳制品衍生的抗细菌剂。
由乳制品衍生的抗细菌剂是通过本领域已知方法生成的乳、超免疫乳、初乳、超免疫初乳、或任何其它乳衍生产品中具有抗细菌活性(或是杀菌或是抑菌)的任何成分。这包括由乳、超免疫乳、初乳、或超免疫初乳衍生的一种或多种级分或提取物,或者是乳、超免疫乳、初乳、或超免疫初乳中通常存在的组合物中具有抗细菌活性的任何成分,包括由乳、超免疫乳、初乳、或超免疫初乳充分纯化得到的产品,或是通过重组DNA技术生成的产品。
用于测定由乳衍生的试剂的抗细菌特性的合适方法正如Korhonen等,1995,Journal of Applied Bacteriology 78:655-662中所述。
例如,在本发明的多种形式中,由乳制品衍生的抗细菌剂可以是乳铁蛋白、乳过氧化物酶、溶菌酶、或免疫球蛋白,包括IgG1、IgG2、IgA、IgM,或者是乳制品中存在的抗细菌肽或抗细菌糖。
应当理解,在本发明的多种形式中,抗细菌剂还可以衍生自并非由乳衍生的产品。例如,抗细菌剂可以是由超免疫卵黄衍生的IgY抗体(IgG1的等同物)。
优选的是,由乳制品衍生的抗细菌剂指乳铁蛋白。乳铁蛋白可以是牛乳铁蛋白、绵羊乳铁蛋白、山羊乳铁蛋白、猪乳铁蛋白、马乳铁蛋白、或人乳铁蛋白。最优选的是,乳铁蛋白是牛乳铁蛋白。乳铁蛋白可以是通过本领域已知的合适方法由初乳或乳分离得到的半纯化或充分纯化的形式。或者,乳铁蛋白可以是通过在合适表达系统中表达乳铁蛋白基因而生成的重组乳铁蛋白。
因此,在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中抑制粘液上皮的细菌定居的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和乳铁蛋白。
在本发明的多种形式中,乳铁蛋白还可以进行进一步处理以提高其抑制粘液上皮的细菌定居或感染的活性。例如,可以将乳铁蛋白进行蛋白水解消化,从而生成展示提高的抑制定居活性的蛋白质片段或多肽。为了生产这种片段,可以使用蛋白酶诸如胃蛋白酶在酸性条件下消化乳铁蛋白。或者,可以通过酸性pH的热灭活来处理乳铁蛋白,或者可以通过重组方法生成特定的乳铁蛋白片段。
在这个方面,还发现通过牛乳铁蛋白的胃蛋白酶消化或酸性pH热灭活生成的水解牛乳铁蛋白在联合粘液溶解剂诸如N-乙酰半胱氨酸使用时显示提高的抑制粘液上皮幽门螺杆菌定居或感染的活性。
因此,在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中抑制粘液上皮的细菌定居的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和水解乳铁蛋白。
应当理解,关于上文所述粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的施用的相同考虑还将应用于粘液溶解剂和由初乳/乳衍生的抗细菌剂的施用。
本发明这种形式的方法还可包括其它试剂的施用,包括抗生素和酸抑制剂。
优选的是,本发明这种形式的方法还包括抗生素的施用。合适抗生素的实例是阿莫西林。
因此,在另一种形式中,本发明提供了用于在生物学系统中抑制粘液上皮的细菌定居的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂、抗生素、和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够抑制细菌定居的成分。
在这个方面,本发明这种形式的方法还降低了使用抗生素疗法时形成抗生素抗性的可能性。
因此,本发明还提供了用于在生物学系统中减轻细菌形成抗生素抗性的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分。
本发明还提供了用于在生物学系统中减轻粘液上皮细菌感染的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够减轻细菌感染的成分。
粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分减轻粘液上皮感染能力的测定可以通过本领域已知的合适方法得到确认。例如,减轻感染的程度可以通过直接显现暴露或不暴露于粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的具体粘液上皮样品中的细菌数目来测定。在这种情况中,可以用用于检测目的细菌的特异染色剂(例如幽门螺杆菌的姬姆萨染色)进行染色来显现细菌,正如《Saunders氏实验室医学和技术字典和百科全书》“Saunders Dictionary and Encyclopedia of Laboratory Medicineand Technology”(Benington J.L)中所述。
或者,细菌感染可以通过暴露或不暴露于粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的具体粘液上皮样品中炎性细胞对粘液样品的浸润程度来测定,例如如《组织学课本和图集》“Histology a Text and Atlas”(第三版;Ross,M.H.、Rommell,L.J.、Kaye,G.I.,1995,Williams and Wilkins,马里兰州,美国)中所述。
用于测定粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分减轻粘液上皮感染能力的另一种方法是通过使用酶标志物,诸如作为嗜中性粒细胞浸润粘液上皮指标的髓过氧化物酶,例如Krawisz,J.等,1984,Gastroenterology 87:1344-1350中所述。可以通过本领域已知的合适方法获得用于测试的粘液上皮样品,包括粘液上皮的活组织检查。
优选的是,减轻感染的程度是治疗后单位面积的粘液上皮中的平均细菌数目与未治疗受试者的单位面积中的平均细菌数目相比降低了50%或更多。更优选的是,减轻感染的程度是治疗后单位面积的粘液上皮中的平均细菌数目与未治疗受试者的单位面积中的平均细菌数目相比降低了60%或更多。最优选的是,减轻感染的程度是治疗后单位面积的粘液上皮中的平均细菌数目与未治疗受试者的单位面积中的平均细菌数目相比降低了80%或更多。
在一种特别优选的形式中,本发明还提供了用于在生物学系统中减轻粘液上皮的细菌感染的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的N-乙酰半胱氨酸和超免疫初乳。
在另一种优选形式中,本发明还提供了用于在生物学系统中减轻粘液上皮的细菌感染的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和由乳衍生的抗细菌剂。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻粘液上皮细菌感染的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和乳铁蛋白。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻粘液上皮的细菌感染的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和水解乳铁蛋白。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻粘液上皮细菌感染的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种针对感染粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性抗体。
如上所述,在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以在适于产生期望效果的任何时间内施用。例如,可以在粘液上皮感染发作前施用。或者,可以在已经发生或检测到粘液上皮感染的过程中或其后施用。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中预防粘液上皮的细菌感染的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够预防细菌感染的成分。
本发明这种形式的方法还可以包括其它试剂的施用,包括抗生素和酸抑制剂。
优选的是,本发明这种形式的方法还包括抗生素的施用。合适抗生素的实例是阿莫西林。
因此,在另一种形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻粘液上皮的细菌感染的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂、抗生素、和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够抑制细菌感染的成分。
本发明还提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的成分。
粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症能力的测定可以通过本领域已知的合适方法得到确认。例如,炎症的程度可以通过暴露或不暴露于粘液溶解剂和卵或卵成分的具体粘液上皮样品中炎性细胞对粘液样品的浸润程度来测定,正如《组织学课本和图集》“Histology a Textand Atlas”(第三版;Ross,M.H.、Rommell,L.J.、Kaye,G.I.,1995,Williams and Wilkins,马里兰州,美国)中所述。
或者,炎症的程度可以通过使用酶标志物来测定,诸如作为嗜中性粒细胞浸润粘液上皮指标的髓过氧化物酶,例如Krawisz,J.等,1984,Gastroenterology 87:1344-1350中所述。可以通过本领域已知的合适方法获得用于测试的粘液上皮样品,包括粘液上皮的活组织检查。
优选的是,减轻炎症的程度是治疗后粘液上皮组织样品中的髓过氧化物酶活性水平与未治疗受试者的组织样品中的髓过氧化物酶活性相比降低了50%或更多。更优选的是,减轻炎症的程度是治疗后粘液上皮组织样品中的髓过氧化物酶活性水平与未治疗受试者的组织样品中的髓过氧化物酶活性相比降低了65%或更多。
在本发明的多种形式中,与细菌感染有关的粘液上皮炎症可以是任何粘液上皮炎症,所述粘液上皮是一种或多种下列器官或组织的一部分:胃,包括胃的贲门、胃底、胃体、胃窦、和幽门;十二指肠;回肠;小肠;大肠;结肠;肠;直肠;食道;口;舌;咽;泌尿生殖道;眼;以及呼吸道,包括鼻腔、口腔、喉、气管、支气管(包括细支气管和肺泡)、和肺。优选的是,与细菌感染有关的粘液上皮炎症是动物或人的粘液上皮炎症。最优选的是,粘液上皮炎症是人的粘液上皮炎症。
优选的是,与细菌感染有关的粘液上皮炎症是与下列疾病或状况有关的粘液上皮炎症:胃部炎症;胃或十二指肠溃疡;非溃疡性消化不良;与白细胞浸润有关的胃部状况;尿道感染;链球菌性咽喉炎;传染性心内膜炎;细菌性肺炎;百日咳;龈炎;急性或慢性支气管炎;(细)支气管扩张;哮喘性支气管炎;支气管哮喘;细支气管炎;囊肿性纤维化;咽喉炎;急性或慢性鼻炎。优选的是,与细菌感染有关的粘液上皮炎症是与下列疾病或状况有关的粘液上皮炎症:胃部炎症、胃或十二指肠溃疡、非溃疡性消化不良、或与淋巴细胞浸润有关的胃部状况。
在一种优选形式中,本发明还提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和由乳制品衍生的抗细菌剂。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和乳铁蛋白。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和水解乳铁蛋白。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种针对感染粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性抗体。
应当理解,关于上文所述粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分在抑制粘液上皮的细菌定居或感染方面的施用的相同考虑还将应用于粘液溶解剂和由乳制品衍生的抗细菌剂、粘液溶解剂和乳铁蛋白、或粘液溶解剂和水解乳铁蛋白在减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症方面的施用。
如上所述,在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以在适于产生期望效果的任何时间内施用。例如,可以在与粘液上皮细菌感染有关的粘液上皮炎症发作前施用。或者,可以在已经发生或检测到与粘液上皮细菌感染有关的粘液上皮炎症的发作的过程中或其后施用。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中预防与细菌感染有关的粘液上皮炎症的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够预防与细菌感染有关的粘液上皮炎症的成分。
本发明这种形式的方法还可以包括其它试剂的施用,包括抗生素和酸抑制剂。
优选的是,本发明这种形式的方法还包括抗生素的施用。合适抗生素的实例是阿莫西林。
因此,在另一种形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂、抗生素、和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的成分。
在这个方面,本发明这种形式的方法还降低了使用抗生素疗法时形成抗生素抗性的可能性。
本发明还提供了用于在生物学系统中减轻与粘液上皮细菌感染有关的粘液上皮损伤的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤的成分。
粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤能力的测定可以通过本领域已知的合适方法来确认,例如《组织学课本和图集》“Histology a Textand Atlas”(第三版;Ross,M.H.、Rommell,L.J.、Kaye,G.I.,1995,Williams and Wilkins,马里兰州,美国)中所述。例如,损伤的程度可以通过暴露或不暴露于粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的组织样品的组织病理学检查来测定。
在本发明的多种形式中,与细菌感染有关的粘液上皮损伤可以是任何粘液上皮损伤,所述粘液上皮是一种或多种下列器官或组织的一部分:胃肠道;胃,包括胃的贲门、胃底、胃体、胃窦、和幽门;十二指肠;回肠;小肠;大肠;结肠;肠;直肠;食道;口;舌;咽;泌尿生殖道;眼;以及呼吸道,包括鼻腔、口腔、喉、气管、支气管(包括细支气管和肺泡)、和肺。优选的是,与细菌感染有关的粘液上皮损伤是动物或人的粘液上皮损伤。最优选的是,粘液上皮损伤是人的粘液上皮损伤。
优选的是,与细菌感染有关的粘液上皮损伤是与下列疾病或状况有关的粘液上皮损伤:胃部炎症;胃或十二指肠溃疡;非溃疡性消化不良;与白细胞浸润有关的胃部状况;尿道感染;链球菌性咽喉炎;传染性心内膜炎;细菌性肺炎;百日咳;龈炎;急性或慢性支气管炎;(细)支气管扩张;哮喘性支气管炎;支气管哮喘;细支气管炎;囊肿性纤维化;咽喉炎;急性或慢性鼻炎。优选的是,与细菌感染有关的粘液上皮损伤是与下列疾病或状况有关的粘液上皮损伤:胃部炎症、胃或十二指肠溃疡、非溃疡性消化不良、或与淋巴细胞浸润有关的胃部状况。
在一种特别优选的形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻与粘液上皮细菌感染有关的粘液上皮损伤的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的N-乙酰半胱氨酸和超免疫初乳。
在一种优选形式中,本发明还提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和由乳制品衍生的抗细菌剂。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和乳铁蛋白。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和水解乳铁蛋白。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种针对感染粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性抗体。
应当理解,关于上文所述粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分在抑制粘液上皮的细菌定居或感染方面的施用的相同考虑也将应用于粘液溶解剂和由乳制品衍生的抗细菌剂、粘液溶解剂和乳铁蛋白、或粘液溶解剂和水解乳铁蛋白在减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤方面的施用。
如上所述,在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以在适于产生期望效果的任何时间内施用。例如,可以在与粘液上皮细菌感染有关的粘液上皮损伤发作前施用。或者,可以在已经发生或检测到与粘液上皮细菌感染有关的粘液上皮损伤的发作的过程中或其后施用。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中预防与细菌感染有关的粘液上皮损伤的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够预防与细菌感染有关的粘液上皮损伤的成分。
本发明这种形式的方法还可以包括其它试剂的施用,包括抗生素和酸抑制剂。
优选的是,本发明这种形式的方法还包括抗生素的施用。合适抗生素的实例是阿莫西林。
因此,在另一种形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻与粘液上皮的细菌感染有关的粘液上皮损伤的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂、抗生素、和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤的成分。
在这个方面,本发明这种形式的方法还降低了使用抗生素疗法时形成抗生素抗性的可能性。
本发明还提供了用于在受试者中治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的方法,所述方法包括如下步骤:对受试者施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的成分。
在本发明的多种形式中,与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况可以是任何与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况,所述粘液上皮是一种或多种下列器官或组织的一部分:胃肠道;胃,包括胃的贲门、胃底、胃体、胃窦、和幽门;十二指肠;回肠;小肠;大肠;结肠;肠;直肠;食道;口;舌;咽;泌尿生殖道;眼;以及呼吸道,包括鼻腔、喉、气管、支气管(包括细支气管和肺泡)、和肺。优选的是,与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况是与动物或人的粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况。最优选的是,与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况是与人的粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况。
优选的是,与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况是下列疾病或状况之一:胃部炎症;胃或十二指肠溃疡;非溃疡性消化不良;与白细胞浸润有关的胃部状况;尿道感染;链球菌性咽喉炎;传染性心内膜炎;细菌性肺炎;百日咳;龈炎;急性或慢性支气管炎;(细)支气管扩张;哮喘性支气管炎;支气管哮喘;细支气管炎;囊肿性纤维化;咽喉炎;急性或慢性鼻炎。最优选的是,与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况是胃部炎症、胃或十二指肠溃疡、非溃疡性消化不良、或与淋巴细胞浸润有关的胃部状况。
在本发明的多种形式中,受试者可以是易受与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况影响或患有与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的任何动物或人受试者。最优选的是,生物学系统是正在遭受与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的人受试者。
在一种特别优选的形式中,本发明提供了用于在受试者中治疗与粘液上皮的细菌感染有关的疾病或状况的方法,所述方法包括如下步骤:对受试者施用有效量的N-乙酰半胱氨酸和超免疫初乳。
在另一种优选形式中,本发明还提供了用于在受试者中治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的方法,所述方法包括如下步骤:对受试者施用有效量的粘液溶解剂和由乳衍生的抗细菌剂。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在受试者中治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的方法,所述方法包括如下步骤:对受试者施用有效量的粘液溶解剂和乳铁蛋白。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在受试者中治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的方法,所述方法包括如下步骤:对受试者施用有效量的粘液溶解剂和水解乳铁蛋白。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在受试者中治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的方法,所述方法包括如下步骤:对受试者施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种针对感染粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性抗体。
应当理解,关于上文所述粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分在抑制粘液上皮的细菌定居或感染方面的施用的相同考虑还将应用于用于治疗与粘液上皮细菌感染有关疾病或状况的施用。
如上所述,在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以在适于产生期望效果的任何时间内施用。例如,可以在与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况发作前施用。或者,可以在已经发生或检测到与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的发作的过程中或其后施用。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在受试者中预防与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的方法,所述方法包括如下步骤:对受试者施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够预防与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的成分。
在另一种形式中,本发明提供了有效量的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分用于制备治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的药物的用途。
本发明这种形式的方法还可以包括其它试剂的施用,包括抗生素和酸抑制剂。
优选的是,本发明这种形式的方法还包括抗生素的施用。合适抗生素的实例是阿莫西林。
因此,在另一种形式中,本发明提供了用于在受试者中预防和/或治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂、抗生素、和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中在联合粘液溶解剂时能够预防和/或治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病的成分。
在这个方面,本发明这种形式的方法还降低了使用抗生素疗法时形成抗生素抗性的可能性。
本发明还提供了包含粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/超免疫乳成分的组合物。
将要在组合物中使用的粘液溶解剂的数量没有特别限制,只要它是在对受试者施用组合物时通常将展示治疗性效果的数量。
将要在组合物中使用的一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的数量也没有特别限制,只要它是在对受试者施用组合物时通常将展示有益效果的数量。
在这个方面,可以根据所使用的具体粘液溶解剂和初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分、待抑制细菌定居或感染的程度、待减轻粘液上皮炎症的程度、所定居或感染的组织或器官、待治疗疾病或状况的种类、受试者的年龄和体重、施用频率、和存在的其它活性剂,适当选择组合物中使用的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的剂量。
粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以在单一组合物中共施用,或者,作为分开的组合物施用,从而在期望的作用部位发挥联合作用。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于抑制粘液上皮的细菌定居和/或感染的组合物,所述组合物包含粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中能够抑制粘液上皮的细菌定居和/或感染的成分。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的组合物,所述组合物包含粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳中能够治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病的成分。
对于适于为了抑制和/或预防胃肠道粘液上皮定居或感染(或治疗与胃肠道细菌感染有关的疾病或状况)而施用粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的组合物而言,优选的是,组合物中的粘液溶解剂是N-乙酰半胱氨酸,而初乳是超免疫初乳。例如,为了抑制幽门螺杆菌定居胃肠道,组合物优选包含N-乙酰半胱氨酸和来自经过幽门螺杆菌免疫的母牛的超免疫初乳。
考虑到待施用粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的具体物理和化学特征,组合物还可以包含一种或多种可接受添加剂,包括盐、氨基酸、多肽、聚合物、溶剂、缓冲剂、赋形剂、和填充剂。
例如,粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分可以配制成例如水溶液、油性制剂、脂肪乳剂、乳剂、凝胶等形式的多种制剂,而且这些制剂可以通过口服、吸附、吸收、局部、直肠、鼻、含服、阴道、或任何其它方便的剂量形式施用。
在口服施用的情况中,组合物可以是合适口服制剂的形式,包括液体制剂,诸如奶制品、糖浆、乳剂、或悬浮液,或是固体制剂,诸如片剂、胶囊、颗粒、或粉剂。
含有粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的组合物还可以含有防腐剂、稳定剂、分散剂、pH控制剂、或等渗剂。合适防腐剂的实例是甘油、丙二醇、酚、或苯甲醇。合适稳定剂的实例是右旋糖苷、明胶、α-醋酸生育酚、或α-硫代甘油。合适分散剂的实例包括聚氧乙烯(20)、失水山梨糖醇单油酸酯(吐温80)、失水山梨糖醇倍半油酸酯(Span 30)、聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)乙二醇(Pluronic F68)、或聚氧乙烯氢化蓖麻油60。合适的pH控制剂的实例包括氢氯酸、氢氧化钠等等。合适等渗剂的实例是葡萄糖、D-山梨醇、或D-甘露醇。
考虑到所用具体粘液溶解剂和初乳形式的物理和化学特性,组合物还包含可接受载体、稀释剂、赋形剂、悬浮剂、润滑剂、佐剂、媒介、投递系统、乳化剂、崩解剂、吸收剂、防腐剂、表面活性剂、着色剂、食用香料、或增甜剂。
口服施用时,使用常规设备和本领域已知技术,常常将组合物配制成单位剂量形式,诸如液体(包括用于口服或局部施用的长期保存液体配方、水性悬浮液、或溶液)、片剂、扁囊剂、粉剂、微粒、颗粒、咀嚼锭剂、食品添加剂、胶囊、或相似剂量形式。这些配方通常包含液体、固体、或半固体载体。例示性载体包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、矿物油、可可脂、可可油、藻酸盐、黄芪胶、明胶、糖浆、甲基纤维素、聚氧乙烯山梨聚糖单月桂酸酯、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁、诸如此类。
在以片剂施用的情况中,可以通过将活性成分与任选的一种或多种辅助成分压缩或注模来生产片剂。可以通过在合适机器中压缩易流形式(诸如粉末或微粒)的活性成分,任选与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、表面活性剂、或分散剂混合,来制备压制片剂。可以通过在合适机器中将用惰性液体稀释剂弄湿的粉状活性成分与合适载体的混合物一起注模来生产模制片剂。
载体还可以包含少量添加剂,诸如提高溶解度、等渗性、和化学稳定性的物质,例如抗氧化剂、缓冲剂、和防腐剂。
组合物还可以包含容许受控或持续释放粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的试剂。例如,关于试剂的持续释放,可以与额外成分一起配制组合物,诸如植物油(例如大豆油、芝麻油、山茶油、蓖麻油、花生油、菜籽油);中级脂肪酸甘油三酯;脂肪酸酯,诸如油酸乙酯;聚硅氧烷衍生物;或者,水溶性高分子量化合物,诸如透明质酸或其盐(重均分子量:约80,000-2,000,000)、羧甲基纤维素钠(重均分子量:约20,000-400,000)、羟丙基纤维素(2%水溶液的粘性:3-4,000cps)、atherocollagen(重均分子量:约300,000)、聚乙二醇(重均分子量:约400-20,000)、聚环氧乙烷(加权平均分子量:约100,000-9,000,000)、羟丙基甲基纤维素(1%水溶性的粘性:4-100,000cSt)、甲基纤维素(2%水溶液的粘性:15-8,000cSt)、聚乙烯醇(粘性:2-100cSt)、聚乙烯吡咯烷酮(重均分子量:25,000-1,200,000)。
或者,组合物可以将粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分掺入疏水性聚合物基质,用于在一段时间里受控释放。然后可以将组合物注模成固体形式或外用贴片,适于在延长的一段时间里提供有效浓度的粘液溶解剂和初乳而无需频繁重复给药。这种受控释放薄膜在本领域是众所周知的。可以使用的且常常用于此目的的聚合物的其它实例包括可以外用或内用的不可降解的乙烯-乙酸乙烯共聚物和可降解的乳酸-乙醇酸共聚物。某些水凝胶,诸如聚羟基甲基丙烯酸乙酯或聚乙烯醇,也是有用的,但是用于比诸如上文所述其它聚合物释放系统短的释放周期。
载体还可以是固体生物可降解聚合物或具有合适时间释放特征和释放动力学的生物可降解聚合物的混合物。然后可以将组合物注模成固体植物物,适合用于在延长的一段时间里提供有效浓度的粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分而无需频繁重复给药。可以以本领域普通技术人员知道的任何合适方式将粘液溶解剂和/或一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分掺入生物可降解聚合物或聚合物混合物,并且可以与生物可降解聚合物形成均匀基质,或者可以以某种方式封装到聚合物中,或者可以注模成固体植入物。
依照本发明的组合物还可以包含其它试剂,包括抗生素和酸抑制剂。
优选的是,组合物还包含抗生素的施用。合适抗生素的实例是阿莫西林。
在一种特别优选的形式中,本发明提供了包含N-乙酰半胱氨酸和超免疫初乳的组合物。
在另一种优选形式中,本发明还提供了包含粘液溶解剂和由乳制品衍生的抗细菌剂的组合物。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于抑制粘液上皮的细菌定居和/或感染的组合物,所述组合物包含粘液溶解剂和由乳制品衍生的抗细菌剂。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的组合物,所述组合物包含粘液溶解剂和由乳制品衍生的抗细菌剂。
组合物中由乳制品衍生的抗细菌剂可以是由乳、初乳、超免疫初乳、或超免疫乳分离的任何成分或提取物,或者是乳、初乳、超免疫初乳、或超免疫初乳中通常存在的具有抗细菌活性的任何成分。这包括由乳、初乳、超免疫初乳、或超免疫初乳衍生的一种或多种级分或提取物,或者是通过本领域已知方法生产的乳、初乳、超免疫初乳、或超免疫初乳中通常存在的具有抗细菌活性的任何成分(例如充分纯化得到的产品或通过重组DNA技术生产的通常存在的蛋白质)。
优选的是,组合物中由乳制品衍生的抗细菌剂是乳铁蛋白、乳过氧化物酶、溶菌酶、或免疫球蛋白,包括IgG1、IgG2、IgA、IgM,或者是乳制品中存在的抗细菌肽或抗细菌糖。更优选的是,组合物中由乳制品衍生的抗细菌剂是乳铁蛋白。更优选的是,组合物中的乳铁蛋白是牛乳铁蛋白、绵羊乳铁蛋白、猪乳铁蛋白、马乳铁蛋白、或人乳铁蛋白。最优选的是,组合物中的乳铁蛋白是牛乳铁蛋白。组合物中的乳铁蛋白可以是由乳制品分离得到的充分纯化的形式,或者,是通过在合适表达系统中表达乳铁蛋白基因而生成的重组乳铁蛋白。
因此,在另一种优选形式中,本发明还提供了包含粘液溶解剂和乳铁蛋白的组合物。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于抑制粘液上皮的细菌定居和/或感染的组合物,所述组合物包含粘液溶解剂和乳铁蛋白。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的组合物,所述组合物包含粘液溶解剂和乳铁蛋白。
在包含乳铁蛋白的组合物用于抑制和/或预防粘液上皮幽门螺杆菌定居和/或感染、或用于治疗和/或预防与粘液上皮幽门螺杆菌感染有关的疾病或状况的情况中,组合物中存在的粘液溶解剂优选是N-乙酰半胱氨酸。
组合物中存在的乳铁蛋白可以是经过进一步处理以提高其抑制粘液上皮的细菌定居或感染活性的乳铁蛋白。例如,可以将乳铁蛋白进行蛋白水解消化,从而生成在抑制定居方面展示提高的活性的蛋白质片段或多肽。为了生产这种片段,可以使用蛋白酶诸如胃蛋白酶在酸性条件下消化乳铁蛋白,或者通过本领域已知方法进行酸性pH的热灭活。或者,可以通过重组方法生成特定的乳铁蛋白片段。
因此,在另一种优选形式中,本发明还提供了包含粘液溶解剂和水解乳铁蛋白的组合物。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于抑制粘液上皮的细菌定居和/或感染的组合物,所述组合物包含粘液溶解剂和水解乳铁蛋白。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的组合物,所述组合物包括粘液溶解剂和水解乳铁蛋白。
在包含乳铁蛋白的组合物用于抑制和/或预防粘液上皮幽门螺杆菌定居和/或感染、或用于治疗和/或预防与粘液上皮幽门螺杆菌感染有关的疾病或状况的情况中,组合物中存在的粘液溶解剂优选是N-乙酰半胱氨酸。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于抑制粘液上皮的细菌定居和/或感染的组合物,所述组合物包含粘液溶解剂和一种或多种针对定居和/或感染粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性抗体。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的组合物,所述组合物包含粘液溶解剂和一种或多种针对感染粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性抗体。
在包含一种或多种特异性或交叉反应性抗体的组合物用于抑制粘液上皮幽门螺杆菌定居和/或感染、或用于治疗与粘液上皮幽门螺杆菌感染有关的疾病或状况的情况中,粘液溶解剂优选是N-乙酰半胱氨酸。
本发明还提供了用于在生物学系统中抑制粘液上皮的细菌定居的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够抑制细菌定居的成分。
优选的是,卵是通过用细菌(或由细菌衍生的抗原)连续免疫鸟类而产生的超免疫卵,其中所述细菌的定居或感染需要抑制、与细菌感染有关的炎症或损伤需要减轻、或与细菌感染有关的疾病或状况需要治疗。
例如,为了抑制幽门螺杆菌定居或感染胃肠道,可以使用来自经过幽门螺杆菌接种的母鸡的超免疫卵。
因此,在一种优选形式中,本发明提供了用于抑制幽门螺杆菌定居胃肠道的方法,所述方法包括如下步骤:施用有效量的粘液溶解剂和超免疫卵或超免疫卵成分。
在本发明的多种形式中,卵成分可以是由卵衍生的能够在联合粘液溶解剂时发挥抑制相关细菌定居或感染、减轻与相关细菌感染有关的炎症或损伤、或治疗与相关细菌感染有关的疾病或状况的作用的一种或多种成分。应当理解,这种成分包括由卵衍生的任何级分或提取物,包括卵黄。可以通过本领域已知方法生产卵成分,包括重组DNA技术,或者进一步处理或修饰由卵衍生的任何成分。
优选的是,卵成分是卵黄或一种或多种来自卵或卵黄的针对细菌的特异性或交叉反应性抗体,包括IgY抗体。
因此,在一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中抑制粘液上皮的细菌定居的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种针对定居粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性IgY抗体。
例如,在抑制幽门螺杆菌定居胃肠道的情况中,可以联合粘液溶解剂施用一种或多种幽门螺杆菌特异性IgY抗体,或者可以联合粘液溶解剂施用一种或多种幽门螺杆菌交叉反应性IgY抗体。
在这个方面,一种或多种特异性抗体可以存在于其它化合物的混合物中,诸如存在于卵黄或超免疫卵黄中。或者,抗体可以是通过本领域已知方法诸如抗体亲和纯化由卵黄或超免疫卵黄纯化得到的充分纯化形式。
在本发明的多种形式中,将要施用的卵或卵成分的数量也没有特别限制,只要它是通常展示有益效果的数量和形式。
在这个方面,可以根据所用的具体粘液溶解剂和卵或卵成分、待抑制细菌定居或感染的程度、待减轻粘液上皮炎症或损伤的程度、所定居或感染的组织或器官、待治疗疾病或状况的种类、受试者的年龄和体重、施用频率、或存在的其它活性剂,适当选择粘液溶解剂和卵或卵成分的剂量。
粘液溶解剂和卵或卵成分可以共施用,或者分开施用(从而达到联合作用的期望部位),而且或是单独使用或是联合其它试剂以提高根除细菌的可能性。在用作附属疗法时,可能可以应用较小剂量。
在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和卵或卵成分可以在适于产生期望效果的任何时间内施用。例如,可以在定居发作前施用,从而预防定居。或者,可以在已经发生或检测到粘液上皮定居的过程中或其后施用。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中预防粘液上皮的细菌定居的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够预防细菌定居的成分。
在人或动物系统中,粘液溶解剂和卵或卵成分可以口服施用,或者通过任何其它合适手段,因此必须考虑粘液溶解剂和卵或卵成分的通过时间。优选的是,粘液溶解剂和卵或卵成分的施用是通过口服施用。
对于为了抑制胃肠道粘液上皮定居或感染而口服施用粘液溶解剂和卵或卵成分而言,优选的是,粘液溶解剂是N-乙酰半胱氨酸,而卵是超免疫卵。例如,为了抑制幽门螺杆菌定居胃肠道,粘液溶解剂优选N-乙酰半胱氨酸,而卵是来自经过幽门螺杆菌或其抗原免疫的母鸡的超免疫卵。
在本发明的多种形式中,考虑到待施用粘液溶解剂和卵或卵成分的具体物理和化学特征,粘液溶解剂和卵或卵成分的施用还可以包括一种或多种可接受添加剂的使用,包括可接受盐、氨基酸、多肽、聚合物、溶剂、缓冲剂、赋形剂、和填充剂。
例如,粘液溶解剂和卵或卵成分可以配制成食品添加剂、水溶液、油性制剂、脂肪乳剂、乳剂、凝胶等形式的多种制剂,而且这些制剂可以以含有常规无毒可接受载体的剂量配方或任何其它方便的剂量形式通过口服、吸附或吸收、局部、直肠、鼻、含服、或阴道施用。
在口服施用的情况中,可以以合适口服制剂的形式施用组合物,例如固体制剂,诸如片剂、胶囊、食品添加剂、颗粒、或粉剂;液体或半固体制剂,诸如卵黄制品、糖浆、乳剂、或悬浮液。
含有粘液溶解剂和卵或卵成分的组合物还可以含有防腐剂、稳定剂、分散剂、pH控制剂、或等渗剂。合适防腐剂的实例是甘油、丙二醇、酚、或苯甲醇。合适稳定剂的实例是右旋糖苷、明胶、α-醋酸生育酚、或α-硫代甘油。合适分散剂的实例包括聚氧乙烯(20)、山梨聚糖醇单油酸酯(吐温80)、失水山梨糖醇倍半油酸酯(Span 30)、聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)乙二醇(Pluronic F68)、或聚氧乙烯氢化蓖麻油60。合适pH控制剂的实例包括氢氯酸、氢氧化钠、诸如此类。合适等渗剂的实例是葡萄糖、D-山梨醇、或D-甘露醇。
在本发明的多种形式中,考虑到所用具体粘液溶解剂和卵或卵成分的物理和化学特性,粘液溶解剂和卵或卵成分的施用还可以是含有可接受载体、稀释剂、赋形剂、悬浮剂、润滑剂、佐剂、媒介、投递系统、乳化剂、崩解剂、吸收剂、防腐剂、表面活性剂、着色剂、食用香料、或增甜剂的组合物的形式。
口服施用时,使用常规设备和本领域已知技术,常常将组合物配制成单位剂量形式,诸如液体(包括用于口服或局部施用的长期保存液体配方、水性悬浮液、或溶液)、片剂、扁囊剂、粉剂、微粒、颗粒、咀嚼锭剂、食品添加剂、胶囊、或相似剂量形式。这些配方通常包含液体、固体、或半固体载体。例示性载体包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、矿物油、可可脂、可可油、藻酸盐、黄芪胶、明胶、糖浆、甲基纤维素、聚氧乙烯山梨聚糖单月桂酸酯、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁、诸如此类。
在以片剂施用组合物的情况中,可以通过将活性成分与任选包含的一种或多种辅助成分压缩或注模来生产片剂。可以通过在合适机器中压缩易流形式(诸如粉末或微粒)的活性成分,任选与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、表面活性剂、或分散剂混合,来制备压制片剂。可以通过在合适机器中将用惰性液体稀释剂弄湿的粉状活性成分与合适载体的混合物一起注模来生产模制片剂。
载体还可以包含少量添加剂,诸如提高溶解度、等渗性、和化学稳定性的物质,例如抗氧化剂、缓冲剂、和防腐剂。
在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和卵或卵成分的施用还可以利用受控释放技术。粘液溶解剂和卵或卵成分还可以作为持续释放产品施用。为了进一步提高持续释放效果,可以与额外成分一起配制组合物,诸如植物油(例如大豆油、芝麻油、山茶油、蓖麻油、花生油、菜籽油);中级脂肪酸甘油三酯;脂肪酸酯,诸如油酸乙酯;聚硅氧烷衍生物;或者,水溶性高分子量化合物,诸如透明质酸或其盐(重均分子量:约80,000-2,000,000)、羧甲基纤维素钠(重均分子量:约20,000-400,000)、羟丙基纤维素(2%水溶液的粘性:3-4,000cps)、atherocollagen(重均分子量:约300,000)、聚乙二醇(重均分子量:约400-20,000)、聚环氧乙烷(重均分子量:约100,000-9,000,000)、羟丙基甲基纤维素(1%水溶性的粘性:4-100,000cSt)、甲基纤维素(2%水溶液的粘性:15-8,000cSt)、聚乙烯醇(粘性:2-100cSt)、聚乙烯吡咯烷酮(重均分子量:25,000-1,200,000)。
在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和卵或卵成分的施用还可以包括其它试剂的施用,包括抗生素和酸抑制剂。
粘液溶解剂和卵或卵成分抑制粘液上皮定居能力的测定可以通过本领域已知的合适方法得到确认。例如,抑制定居的程度可以通过直接显现暴露或不暴露于粘液溶解剂和卵或卵成分的具体粘液上皮样品中的细菌数目来测定。在这种情况中,可以用用于检测目的细菌的特异染色剂(例如幽门螺杆菌的姬姆萨染色)进行染色来显现细菌,例如《Saunders氏实验室医学和技术字典和百科全书》“SaundersDictionary and Encyclopedia of Laboratory Medicine andTechnology”(Benington J.L)中所述。
或者,可以通过暴露或不暴露于粘液溶解剂和卵或卵成分的具体粘液上皮样品中炎性细胞对粘液样品的浸润程度来测定细菌定居,例如《组织学课本和图集》“Histology a Text and Atlas”(第三版;Ross,M.H.、Rommell,L.J.、Kaye,G.I.,1995,Williams andWilkins,马里兰州,美国)中所述。
用于测定粘液溶解剂和卵或卵成分抑制粘液上皮定居能力的另一种方法是通过使用酶标志物,诸如作为嗜中性粒细胞浸润粘液上皮指标的髓过氧化物酶,例如Krawisz,J.等,1984,Gastroenterology 87:1344-1350中所述。可以通过本领域已知的合适方法获得用于测试的粘液上皮样品,包括粘液上皮的活组织检查。
优选的是,抑制定居的程度是治疗后单位面积的粘液上皮中的平均细菌数目与未治疗受试者的单位面积中的平均细菌数目相比降低了70%或更多。更优选的是,抑制定居的程度是治疗后单位面积的粘液上皮中的平均细菌数目与未治疗受试者的单位面积中的平均细菌数目相比降低了85%或更多。最优选的是,抑制定居的程度是治疗后单位面积的粘液上皮中的平均细菌数目与未治疗受试者的单位面积中的平均细菌数目相比降低了90%或更多。
本发明这种形式的方法还可包括其它试剂的施用,包括抗生素和酸抑制剂。
优选的是,本发明这种形式的方法还包括抗生素的施用。合适抗生素的实例是阿莫西林。
因此,在另一种形式中,本发明提供了用于在生物学系统中抑制粘液上皮的细菌定居的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂、抗生素、和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够抑制细菌定居的成分。
在这个方面,本发明这种形式的方法还降低了使用抗生素疗法时形成抗生素抗性的可能性。
因此,本发明还提供了用于在生物学系统中减轻细菌形成抗生素抗性的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和卵或卵成分。
本发明还提供了用于在生物学系统中减轻粘液上皮细菌感染的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够减轻细菌感染的成分。
粘液溶解剂和卵或卵成分减轻粘液上皮感染能力的测定还可以通过本领域已知的合适方法得到确认。例如,减轻感染的程度可以通过直接显现暴露或不暴露于粘液溶解剂和卵或卵成分的具体粘液上皮样品中的细菌数目来测定。在这种情况中,可以用用于检测目的细菌的特异染色剂(例如幽门螺杆菌的姬姆染色)进行染色来显现细菌,正如《Saunders氏实验室医学和技术字典和百科全书》“SaundersDictionary and Encyclopedia of Laboratory Medicine andTechnology”(Benington J.L)中所述。
或者,可以通过暴露或不暴露于粘液溶解剂和卵或卵成分的具体粘液上皮样品中炎性细胞对粘液样品的浸润程度来测定细菌感染,例如《组织学课本和图集》“Histology a Text and Atlas”(第三版;Ross,M.H.、Rommell,L.J.、Kaye,G.I.,1995,Williams andWilkins,马里兰州,美国)中所述。
用于测定粘液溶解剂和卵或卵成分减轻粘液上皮感染能力的另一种方法是通过使用酶标志物,诸如作为嗜中性粒细胞浸润粘液上皮指标的髓过氧化物酶,例如Krawisz,J.等,1984,Gastroenterology 87:1344-1350中所述。可以由本领域已知的合适方法获得用于测试的粘液上皮样品,包括粘液上皮的活组织检查。
优选的是,减轻感染的程度是治疗后单位面积的粘液上皮中的平均细菌数目与未治疗受试者的单位面积中的平均细菌数目相比降低了50%或更多。更优选的是,减轻感染的程度是治疗后单位面积的粘液上皮中的平均细菌数目与未治疗受试者的单位面积中的平均细菌数目相比降低了60%或更多。最优选的是,减轻感染的程度是治疗后单位面积的粘液上皮中的平均细菌数目与未治疗受试者的单位面积中的平均细菌数目相比降低了80%或更多。
在一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻粘液上皮细菌感染的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种针对感染粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性IgY抗体。
如上所述,在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和卵或卵成分可以在适于产生期望效果的任何时间内施用。例如,可以在粘液上皮感染发作前施用。或者,可以在已经发生或检测到粘液上皮感染的过程中或其后施用。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中预防粘液上皮细菌感染的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够预防细菌感染的成分。
本发明这种形式的方法还可以包括其它试剂的施用,包括抗生素和酸抑制剂。
优选的是,本发明这种形式的方法还包括抗生素的施用。合适抗生素的实例是阿莫西林。
因此,在另一种形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻粘液上皮细菌感染的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂、抗生素、和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够抑制细菌感染的成分。
本发明提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的成分。
粘液溶解剂和卵或卵成分减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症能力的测定可以通过本领域已知的合适方法得到确认。例如,炎症的程度可以通过暴露或不暴露于粘液溶解剂和一种或多种初乳、超免疫乳、或初乳和/或超免疫乳成分的具体粘液上皮样品中炎性细胞对粘液样品的浸润程度来测定,正如《组织学课本和图集》“Histology a Textand Atlas”(第三版;Ross,M.H.、Rommell,L.J.、Kaye,G.I.,1995,Williams and Wilkins,马里兰州,美国)中所述。
或者,炎症的程度可以通过使用酶标志物来测定,诸如作为嗜中性粒细胞浸润粘液上皮指标的髓过氧化物酶,例如Krawisz,J.等,1984,Gastroenterology 87:1344-1350中所述。可以通过本领域已知的合适方法获得用于测试的粘液上皮样品,包括粘液上皮的活组织检查。
优选的是,减轻炎症的程度是治疗后粘液上皮组织样品中的髓过氧化物酶活性水平与未治疗受试者的组织样品中的髓过氧化物酶活性相比降低了50%或更多。更优选的是,减轻炎症的程度是治疗后粘液上皮组织样品中的髓过氧化物酶活性水平与未治疗受试者的组织样品中的髓过氧化物酶活性相比降低了65%或更多。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种针对感染粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性IgY抗体。
如上所述,在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和卵或卵成分可以在适于产生期望效果的任何时间内施用。例如,可以在与粘液上皮细菌感染有关的粘液上皮炎症发作前施用。或者,可以在已经发生或检测到与粘液上皮细菌感染有关的粘液上皮炎症的发作的过程中或其后施用。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中预防与细菌感染有关的粘液上皮炎症的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的成分。
本发明这种形式的方法还可以包括其它试剂的施用,包括抗生素和酸抑制剂。
优选的是,本发明这种形式的方法还包括抗生素的施用。合适抗生素的实例是阿莫西林。
因此,在另一种形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂、抗生素、和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够减轻与细菌感染有关的粘液上皮炎症的成分。
在这个方面,本发明这种形式的方法还降低了使用抗生素疗法时形成抗生素抗性的可能性。
本发明提供了用于在生物学系统中减轻与粘液上皮细菌感染有关的粘液上皮损伤的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤的成分。
粘液溶解剂和卵或卵成分减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤能力的测定可以通过本领域已知的合适方法来确认,例如《组织学课本和图集》“Histology a Text and Atlas”(第三版;Ross,M.H.、Rommell,L.J.、Kaye,G.I.,1995,Williams and Wilkins,马里兰州,美国)中所述。例如,损伤的程度可以通过暴露或不暴露于粘液溶解剂和卵或卵成分的组织样品的组织病理学检查来测定。
在一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂一种或多种针对感染粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性IgY抗体。
如上所述,在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和卵或卵成分可以在适于产生期望效果的任何时间内施用。例如,可以在与粘液上皮细菌感染有关的粘液上皮损伤发作前施用。或者,可以在已经发生或检测到与粘液上皮细菌感染有关的粘液上皮损伤的发作的过程中或其后施用。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在生物学系统中预防与细菌感染有关的粘液上皮损伤的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤的成分。
本发明这种形式的方法还可以包括其它试剂的施用,包括抗生素和酸抑制剂。
优选的是,本发明这种形式的方法还包括抗生素的施用。合适抗生素的实例是阿莫西林。
因此,在另一种形式中,本发明提供了用于在生物学系统中减轻与粘液上皮细菌感染有关的粘液上皮损伤的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂、抗生素、和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够减轻与细菌感染有关的粘液上皮损伤的成分。
在这个方面,本发明这种形式的方法还降低了使用抗生素疗法时形成抗生素抗性的可能性。
本发明本发明提供了用于在受试者中治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的方法,所述方法包括如下步骤:对受试者施用有效量的粘液溶解剂和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的成分。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在受试者中治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的方法,所述方法包括如下步骤:对受试者施用有效量的粘液溶解剂和一种或多种针对感染粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性IgY抗体。
应当理解,关于上文所述粘液溶解剂和卵或卵成分在抑制粘液上皮的细菌定居或感染方面的施用的相同考虑还将应用于用于治疗与粘液上皮细菌感染有关疾病或状况的施用。
如上所述,在本发明的多种形式中,粘液溶解剂和卵或卵成分可以在适于产生期望效果的任何时间内施用。例如,可以与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况在受试者中发作前施用。或者,可以在已经发生或检测到与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的发作的过程中或其后施用。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于在受试者中预防与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的方法,所述方法包括如下步骤:对受试者施用有效量的粘液溶解剂和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够预防与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的成分。
本发明这种形式的方法还可以包括其它试剂的施用,包括抗生素和酸抑制剂。
优选的是,本发明这种形式的方法还包括抗生素的施用。合适抗生素的实例是阿莫西林。
因此,在另一种形式中,本发明提供了用于在受试者中预防和/或治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的方法,所述方法包括如下步骤:对生物学系统施用有效量的粘液溶解剂、抗生素、和卵或卵中在联合粘液溶解剂时能够预防和/或治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病的成分。
在这个方面,本发明这种形式的方法还降低了使用抗生素疗法时形成抗生素抗性的可能性。
本发明还提供了有效量的粘液溶解剂和卵或卵成分用于制备治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的药物的用途。
本发明还提供了包含粘液溶解剂和卵或卵成分的组合物。
将要在组合物中使用的粘液溶解剂的数量没有特别限制,只要它是在对受试者施用组合物时通常将展示治疗效果的数量。
将要在组合物中使用的卵或卵成分的数量也没有特别限制,只要它是在对受试者施用组合物时通常将展示有益效果的数量。
在这个方面,可以根据所使用的具体粘液溶解剂和卵或卵成分、待抑制细菌定居或感染的程度、待减轻粘液上皮炎症的程度、所定居或感染的组织或器官、待治疗疾病或状况的种类、受试者的年龄和体重、施用频率、和存在的其它活性剂,适当选择组合物中使用的粘液溶解剂和卵和卵成分的剂量。
粘液溶解剂和卵或卵成分可以在单一组合物中共施用,或者,作为分开的组合物施用,从而在期望的作用部位发挥联合作用。
在一种优选形式中,本发明提供了用于抑制粘液上皮的细菌定居和/或感染的组合物,所述组合物包含粘液溶解剂和卵或卵中能够预防粘液上皮的细菌定居和/或感染的成分。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的组合物,所述组合物包含粘液溶解剂和卵或卵中能够治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病的成分。
对于适于为了抑制胃肠道粘液上皮定居或感染(或治疗与胃肠道细菌感染有关的疾病或状况)而施用粘液溶解剂和卵或卵成分的组合物而言,优选的是,组合物中的粘液溶解剂是N-乙酰半胱氨酸,而卵是超免疫卵。例如,为了抑制幽门螺杆菌定居胃肠道,组合物优选包含N-乙酰半胱氨酸和来自经过幽门螺杆菌免疫的母鸡的超免疫卵或超免疫卵成分。
考虑到待施用粘液溶解剂和卵或卵成分的具体物理和化学特征,组合物还可以包含一种或多种可接受添加剂,包括盐、氨基酸、多肽、聚合物、溶剂、缓冲剂、赋形剂、和填充剂。
例如,粘液溶解剂和卵或卵成分可以配制成例如水溶液、油性制剂、脂肪乳剂、乳剂、凝胶等形式的多种制剂,而且这些制剂可以通过口服、吸附、吸收、局部、直肠、鼻、含服、阴道、或任何其它方便的剂量形式施用。
在口服施用的情况中,组合物可以是合适口服制剂的形式,包括液体制剂,糖浆、乳剂、或悬浮液,或者是固体制剂,诸如片剂、胶囊、颗粒、或粉剂。
含有粘液溶解剂和卵或卵成分的组合物还可以含有防腐剂、稳定剂、分散剂、pH控制剂、或等渗剂。合适防腐剂的实例是甘油、丙二醇、酚、或苯甲醇。合适稳定剂的实例是右旋糖苷、明胶、α-醋酸生育酚、或α-硫代甘油。合适分散剂的实例包括聚氧乙烯(20)、失水山梨糖醇单油酸酯(吐温80)、失水山梨糖醇倍半油酸酯(Span 30)、聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)乙二醇(Pluronic F68)、或聚氧乙烯氢化蓖麻油60。合适pH控制剂的实例包括氢氯酸、氢氧化钠、诸如此类。合适等渗剂的实例是葡萄糖、D-山梨醇、或D-甘露醇。
考虑到所用具体粘液溶解剂和卵或卵成分的物理和化学特性,组合物还可以是含有可接受载体、稀释剂、赋形剂、悬浮剂、润滑剂、佐剂、媒介、投递系统、乳化剂、崩解剂、吸收剂、防腐剂、表面活性剂、着色剂、食用香料、或增甜剂的组合物的形式。
口服施用时,使用常规设备和本领域已知技术,常常将组合物配制成单位剂量形式,诸如液体(包括用于口服或局部施用的长期保存液体配方、水性悬浮液、或溶液)、片剂、扁囊剂、粉剂、微粒、颗粒、咀嚼锭剂、食品添加剂、胶囊、或相似剂量形式。这些配方通常包含液体、固体、或半固体载体。例示性载体包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、矿物油、可可脂、可可油、藻酸盐、黄芪胶、明胶、糖浆、甲基纤维素、聚氧乙烯山梨聚糖单月桂酸酯、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁、诸如此类。
在以片剂施用的情况中,可以通过将活性成分与任选的一种或多种辅助成分压缩或注模来生产片剂。可以通过在合适机器中压缩易流形式(诸如粉末或微粒)的活性成分,任选与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、表面活性剂、或分散剂混合,来制备压制片剂。可以通过在合适机器中将用惰性液体稀释剂弄湿的粉状活性成分与合适载体的混合物一起注模来生产模制片剂。
载体可以包含少量添加剂,诸如提高溶解度、等渗性、和化学稳定性的物质,例如抗氧化剂、缓冲剂、和防腐剂。
组合物还可以包含容许受控或持续释放粘液溶解剂和卵或卵成分的试剂。例如,关于试剂的持续释放,可以与额外成分一起配制组合物,诸如植物油(例如大豆油、芝麻油、山茶油、蓖麻油、花生油、菜籽油);中级脂肪酸甘油三酯;脂肪酸酯,诸如油酸乙酯;聚硅氧烷衍生物;或者,水溶性高分子量化合物,诸如透明质酸或其盐(加重均分子量:约80,000-2,000,000)、羧甲基纤维素钠(重均分子量:约20,000-400,000)、羟丙基纤维素(2%水溶液的粘性:3-4,000cps)、atherocollagen(重均分子量:约300,000)、聚乙二醇(重均分子量:约400-20,000)、聚环氧乙烷(重均分子量:约100,000-9,000,000)、羟丙基甲基纤维素(1%水溶性的粘性:4-100,000cSt)、甲基纤维素(2%水溶液的粘性:15-8,000cSt)、聚乙烯醇(粘性:2-100cSt)、聚乙烯吡咯烷酮(重均分子量:25,000-1,200,000)。
或者,组合物可以将粘液溶解剂和卵或卵成分掺入疏水性聚合物基质,用于在一段时间里受控释放。然后可以将组合物注模成固体形式,或外用贴片,适于在延长的一段时间里提供有效浓度的粘液溶解剂和卵或卵成分而无需频繁重复给药。这种受控释放薄膜在本领域是众所周知的。可以使用的且常常用于此目的的聚合物的其它实例包括可以外用或内用的不可降解的乙烯-醋酸乙烯共聚物和可降解的乳酸-乙醇酸共聚物。某些水凝胶,诸如聚羟基甲基丙烯酸乙酯或聚乙烯醇,也是有用的,但是用于比诸如上文所述其它聚合物释放系统短的释放周期。
载体还可以是固体生物可降解聚合物或具有合适时间释放特征和释放动力学的生物可降解聚合物的混合物。然后可以将组合物注模成固体植物物,适合用于在延长的一段时间里提供有效浓度的粘液溶解剂和卵或卵成分而无需频繁重复给药。可以以本领域普通技术人员知道的任何合适方式将粘液溶解剂和卵或卵成分掺入生物可降解聚合物或聚合物混合物,并且可以与生物可降解聚合物形成均匀基质,或者可以以某种方式封装到聚合物中,或者可以注模成固体植入物。
依照本发明的组合物还可包含其它试剂,包括抗生素和酸抑制剂。
优选的是,组合物还包含抗生素的施用。合适抗生素的实例是阿莫西林。
在一种优选形式中,本发明提供了用于抑制粘液上皮的细菌定居和/或感染的组合物,所述组合物包含粘液溶解剂和一种或多种针对定居和/或感染粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性IgY抗体。
在另一种优选形式中,本发明提供了用于治疗与粘液上皮细菌感染有关的疾病或状况的组合物,所述组合物包含粘液溶解剂和一种或多种针对感染粘液上皮的细菌的特异性或交叉反应性IgY抗体。
在包含一种或多种特异性或交叉反应性IgY抗体的组合物用于抑制和/或预防粘液上皮幽门螺杆菌定居和/或感染、或用于治疗和/或预防与粘液上皮幽门螺杆菌感染有关的疾病或状况的情况中,组合物中的粘液溶解剂优选是N-乙酰半胱氨酸。
优选实施方案的描述
现在要描述体现上文本发明一般原理的实验。然而,应当理解,下文描述并非是要限制上文描述的一般性。
实施例1:细菌定居的模型
依照Lee等,1997,Gastroenterology 112:1386-1397(将其完整公开收入本文作为参考),给约六周龄的雌性C57BL/6小鼠口服接种幽门螺杆菌悉尼菌株1(SS1)(在0.1ml 0.9%(w/v)氯化钠中投递1.0x10个细菌),并由接种后4周开始在21天里每天两次通过口-胃管饲法进行治疗(下文方案1)。动物饲养在妇幼医院的动物房。给所有动物随意供应鼠粮和水。
方案1:实验设计
治疗(每天两次)
实施例2:治疗
(a)测试样品制备:
将N-乙酰半胱氨酸(NAC;Sigma化学药品公司,圣路易斯,密苏里州)以5%(w/v)的浓度溶于蒸馏水,并储存于4℃直至使用。
通过合并挤奶来制备未免疫牛初乳。将冻干粉以20%(w/v)的浓度溶于蒸馏水,并在使用前储存于-20℃。
将超免疫牛初乳(HBC;合并挤奶,冻干粉)以20%(w/v)的浓度溶于蒸馏水,并在使用前储存于-20℃。
将牛乳铁蛋白(DMV跨国公司,荷兰)以3%(w/v)的浓度溶于蒸馏水,并储存于-20℃直至使用。
通过猪胃蛋白酶对牛乳铁蛋白的蛋白水解消化来制备牛乳铁蛋白水解产物-A(BLc-A)。将牛乳铁蛋白溶液的pH调至pH2.5,并添加猪胃蛋白酶(Sigma)至终浓度3%(w/w底物)。于37℃水解30分钟,然后于80℃加热15分钟终止反应。
通过将牛乳铁蛋白于pH2.5于100℃热灭活5分钟来制备牛乳铁蛋白水解产物-B(BLc-B)。
将牛水解乳铁蛋白溶液冷却至室温,调至最初的pH,过滤(0.45μm)除去任何沉淀,并储存于-20℃直至使用。
(b)治疗方案:
治疗方案显示于表1。
表1:治疗方案
三联疗法包含柠檬酸铋、甲硝哒唑、和四环素(tetracycleine),正如Lee等,1997,Gastroenterology 112:1386-1397中所述,只是柠檬酸铋取代了SUB柠檬酸铋。调整剂量(mg/kg/天)以投递相同数量的铋/天。
实施例3:细菌定居和病理学的评估
通过CO2窒息及后续颈部脱位处死小鼠,并采集胃组织用于组织学检查、细菌培养、和生化分析,正如先前Lee等,1997,Gastroenterology112:1386-1397和Krawisz等,1984,Gastroenterology 87:1344-1350中所述。
简而言之,切除胃,然后沿大弯剪开,并在无菌盐水中漂洗以清除胃内容物。将一半组织在10%中性缓冲福尔马林中固定,在石蜡中包埋,切成5μm切片,并用苏木精和曙红(H&E)染色(用于组织学)或者用May-Grünwald-Giemsa(姬姆萨)染色(用于评估细菌定居)。将剩余组织置于2ml无菌盐水中,称重,并用Ultra-Turrax匀浆器(Janke & Kenkel,德国)匀浆30秒钟。
为了进行细菌培养,对组织匀浆进行连续十倍稀释,且每个稀释度取200μl在螺杆菌选择性琼脂(HSA)上涂布两份,HAS即在含有登特氏补充物(Oxoid有限公司;10mg/L万古霉素、5mg/L甲氧苄啶、5mg/L头孢磺啶、和5mg/L两性霉素)的哥伦比亚血琼脂基质(Oxoid有限公司,贝辛斯托克,英国)中添加灭菌马血(5%v/v)。将平板在设定为95%湿度的10%CO2温箱中于37℃培养5-7天。
髓过氧化物酶(MPO)是在嗜中性粒细胞的颗粒体中发现的胞内酶,因而可以用作组织嗜中性粒细胞浸润的指标。对200μl匀浆样品测量MPO水平。将悬浮液在Mikro桌面离心机(Hettich,德国)中以15,000g离心12分钟,并丢弃上清液。将沉淀重悬于200μl溴化十六碳烷基三甲铵(Sigma)去污剂缓冲液(HTAB)中,旋涡震荡2分钟,并以15,000g离心2分钟。收集上清液,并取50μl加到200μl反应混合液(0.167mg/L邻联二茴香胺O-(dianiside)盐酸盐(Sigma)、0.05%过氧化氢(30%w/v)、和10%磷酸盐缓冲液)中。使用Dynatech MR7000分光光度计(根西岛,海峡群岛)测量450nm吸光度的变化(OD min-1),并如下计算MPO活性:MPO(单位)测量值=ODmin-1/1.13x10-2,其中MPO单位=1μmol H2O2分裂,引起OD变化=1.13x10-2。MPO活性表述成MPO单位每克蛋白质。胃组织匀浆中的蛋白质浓度是使用Bio-Rad蛋白质测定法(Bio-Rad Laboratories Pty有限公司,Hercules,加利福尼亚州)测定的。
实施例4:用超免疫初乳或乳铁蛋白治疗的小鼠中的定居
对姬姆萨染色切片的9-12个连续视野计数接种了幽门螺杆菌的小鼠的胃体、过渡区、和胃窦中的定居水平。
用盐水(NaCl)、超免疫牛初乳(HBC)、或牛乳铁蛋白(BLf)治疗的小鼠的胃体中的定居水平显示于图1a。胃窦中的定居水平显示于图1b。整体考虑的小鼠胃中的定居水平显示于图1c。
可以由这些数据看出,用超免疫初乳或乳铁蛋白治疗的小鼠中的定居水平与单独用盐水治疗的小鼠中的定居水平相比普遍降低了。
实施例5:用乳铁蛋白连同或不连同N-乙酰半胱氨酸治疗的小鼠中的定居
为了评估粘液溶解剂N-乙酰半胱氨酸联合乳铁蛋白对定居的效果,对姬姆萨染色切片的9-12个连续视野计数接种了幽门螺杆菌的小鼠的胃体、过渡区、和胃窦中的定居水平。
用水(H2O)、牛乳铁蛋白(BLf)、或牛乳铁蛋白连同N-乙酰半胱氨酸(BLf*)治疗的小鼠中的整体定居水平显示于图2。
可以看出:与单独使用牛乳铁蛋白的治疗摄生法相比,在牛乳铁蛋白的治疗方案中添加溶液溶解剂N-乙酰半胱氨酸显著降低定居水平。
实施例6:用未免疫初乳、超免疫初乳、乳铁蛋白、或乳铁蛋白水解产物连同N-乙酰半胱氨酸治疗的小鼠中的定居
对姬姆萨染色切片的9-12个连续视野计数接种了幽门螺杆菌的小鼠的胃体、过渡区、和胃窦中的定居水平。
单独用水(H2O)、单独用N-乙酰半胱氨酸(NAC)、用牛乳铁蛋白胃蛋白酶水解产物(BLc-A)、牛乳铁蛋白酸水解产物(BLc-B)、未免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(NBC*)、超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC*)、牛乳铁蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf*)、牛乳铁蛋白胃蛋白酶水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A*)、牛乳铁蛋白酸水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B*)治疗的小鼠或者用三联治疗摄生法(TT)治疗的小鼠的胃体中的定居水平显示于图3a。
过渡区中的定居水平显示于图3b。胃窦中的定居水平显示于图4a。整体考虑的小鼠胃中的定居水平显示于4b。
可以由这些数据看出:单独使用的N-乙酰半胱氨酸对定居水平没有效果。
通过与图1a、1b、和1c中所示数据进行比较,可以看出,N-乙酰半胱氨酸提高了初乳降低定居水平的能力。与未免疫初乳相比,联合N-乙酰半胱氨酸使用超免疫初乳进一步提高了降低定居水平的能力。
还可以看出:与单独使用的水解产物相比,N-乙酰半胱氨酸的使用提高了乳铁蛋白水解产物(胃蛋白酶衍生水解产物和酸衍生水解产物二者)降低定居水平的能力。
实施例7:N-乙酰半胱氨酸联合乳铁蛋白对炎症的效果
对胃组织切片中胃体、过渡区、和胃窦的表面层、基底层、粘膜下层、肌肉层、和浆膜层测量接种了幽门螺杆菌的小鼠中的炎性细胞浸润水平。
对切片检查胃的结构变化,并对正常构造、淋巴聚集、囊的变化、特化细胞的损失、和肠组织变化的存在与否进行评估(有:1;无:0)。
对用水(H2O)、牛乳铁蛋白(BLf)、或牛乳铁蛋白联合N-乙酰半胱氨酸(BLf*)治疗的小鼠测定慢性炎性细胞浸润(慢性胃炎)的整体水平。数据显示于图5。
可以看出:与单独使用的乳铁蛋白相比,N-乙酰半胱氨酸的存在在与乳铁蛋白联合使用时降低慢性炎性水平浸润水平。
实施例8:N-乙酰半胱氨酸联合超免疫初乳、乳铁蛋白、或乳铁蛋白水解产物对炎症的效果
对胃组织切片中胃体、过渡区、和胃窦的表面层、基底层、粘膜下层、肌肉层、和浆膜层测量接种了幽门螺杆菌的小鼠中的炎性细胞浸润水平。
测定单独用水(H2O)、用超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC)、牛乳铁蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf)、牛乳铁蛋白胃蛋白酶水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A)、或牛乳铁蛋白酸水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B)治疗的小鼠中的炎性细胞浸润水平。
对切片检查胃的结构变化,并对正常构造、淋巴聚集、囊的变化、特化细胞的损失、和肠组织变化的存在与否进行评估(有:1;无:0)。
数据显示于图6a-6d。可以看出:与H2O对照组相比,所有治疗组中的炎症水平降低了。在检查的其它区域没有观察到炎症活性。
实施例9:用乳铁蛋白或乳铁蛋白联合N-乙酰半胱氨酸治疗的小鼠中的MPO活性
将在用牛乳铁蛋白(BLf)或牛乳铁蛋白联合N-乙酰半胱氨酸(BLf*)治疗的小鼠中检测到的急性胃炎(MPO活性)水平与H2O对照小鼠中的急性胃炎(MPO活性)水平进行比较。数据显示于图7。
可以看出:与单独使用的乳铁蛋白相比,在联合乳铁蛋白使用N-乙酰半胱氨酸时急性胃炎的程度降低了。
实施例10:用超免疫牛初乳、牛乳铁蛋白、或牛乳铁蛋白水解产物联合N-乙酰半胱氨酸治疗的小鼠中的MPO活性
测定单独用水(H2O)、用超免疫牛初乳和N-乙酰半胱氨酸(HBC)、牛乳铁蛋白和N-乙酰半胱氨酸(BLf)、牛乳铁蛋白胃蛋白酶水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-A)、或牛乳铁蛋白酸水解产物和N-乙酰半胱氨酸(BLc-B)治疗的小鼠中的急性胃炎(MPO活性)水平。数据显示于图8。
可以看出:与对照相比,所有治疗组中的急性胃炎的程度降低了。
实施例11:超免疫初乳(HBC)和N-乙酰半胱氨酸(NAC)±阿莫西林对小鼠中幽门螺杆菌集群和相关胃炎的效果与阳性(三联疗法)和阴性(H2O)治疗组的比较
如Lee等,1997,Gastroenterology 112:1386-1397中所述,给约六周龄的雌性C57BL/6小鼠口服接种幽门螺杆菌悉尼菌株1(SS1)(在0.1ml 0.9%(w/v)氯化钠中投递1.0x108个细菌),并由接种后7周开始在14天里每天两次通过口-胃管饲法进行治疗(下文方案2)。动物饲养在妇幼医院的动物房。给所有动物随意供应鼠粮和水。
方案2:实验设计
治疗(每天两次)
测试材料:
N-乙酰半胱氨酸,50mg/ml(NAC;Sigma化学药品公司,圣路易斯,密苏里州)和奥美拉唑,0.83mg/ml(Astra.Zeneca Pty有限公司,新南威尔士,澳大利亚)都是每天新鲜配制的,并储存于4℃直至使用。超免疫牛初乳,185mg/ml(HBC:02AO1,喷干粉)、阿莫西林,312.5mg/ml(Amox;Alphapharm Pty有限公司,QLD,澳大利亚)、和甲硝哒唑,25mg/ml(MTZ;Sigma)储存于-20℃直至需要。阿莫西林在使用前(用HBC或MTZ溶液)十倍稀释。所有试剂都在蒸馏水中配制,但是溶于0.1M碳酸氢钠。
治疗方案:
治疗概述于表2。
表2
*每个时间点(AM和PM)用两种分开的溶液(1和2)治疗小鼠,每种溶液以每只小鼠0.1ml的体积投递。
结果:
存活计数:
由H2O组的18/18只小鼠、用HBC和NAC治疗的17/18只小鼠、用HBC、NAC、和阿莫西林治疗的9/18只小鼠、以及用甲硝哒唑、和阿莫西林治疗的只有1/18只小鼠回收得到SS1。由给予H2O的小鼠与用HBC、NAC、和阿莫西林或是用甲硝哒唑、和阿莫西林治疗的小鼠回收得到的存活细菌数目中存在显著差异(p<0.05)。这两个组还与只用HBC和NAC治疗的动物存在显著差异(p<0.05)。各组之间没有观察到其它差异。结果显示于图9的板块A。
定居(Giemsa染色):
对染色切片的9-12个连续视野计数胃体、过渡区、和胃窦中的定居水平。在胃体中,用BLf、BLc-A、或HBC治疗的小鼠中的定居水平与H2O对照组有显著差异(p<0.05)。用HBC治疗的小鼠还与用BLc-B治疗的小鼠有显著差异(p<0.05)。在过渡区中观察到相同差异;而在胃窦中,用BLf和HBC治疗的小鼠(但不是用BLc治疗的各组)与对照之间存在显著差异(p<0.05)。将不同部位的结果综合在一起,所有治疗组与H2O对照都是有差异的(p<0.05)。
慢性炎症(H&E):
对胃组织切片中胃体、过渡区、和胃窦的表面层、基底层、粘膜下层、肌肉层、和浆膜层测量炎性细胞浸润。在胃粘膜的表面层和基底层中,对治疗组与H2O对照组观察到的炎症水平之间存在一些差异。在表面层中,将胃体、过渡区、和胃窦综合在一起,这只有在用BLf±酸水解治疗的小鼠中是显著的(p<0.05)。在基底层中,对BLf±酸水解组在胃体中得到了相同结果,但是,在这种情况中,将评分综合在一起,H2O对照与所有治疗组之间的差异是显著的(p<0.05)。在检查的其它区域没有观察到炎症活性。整体考虑,与对照小鼠相比,所有治疗组中的慢性炎性细胞响应不够剧烈。这在所有组中都是显著的(p<0.05),除了用经胃蛋白酶消化的BLf治疗的小鼠。
还对切片检查胃的结构变化,并对正常构造、淋巴聚集、囊的变化、特化细胞的损失、和肠组织变化的存在与否进行评估(有:1;无:0),尽管各组之间没有观察到差异。
急性炎症(MPO):
MPO活性(U/mg蛋白质/min);结果显示于图9的板块B。简而言之,在用两种BLf水解产物治疗的小鼠中检测到的MPO水平相对于用H2O治疗的受感染对照小鼠中测量到的水平降低了约60%,而且这是显著的(p<0.05)。与H2O对照小鼠相比,在用BLf和HBC治疗的组中测量到的MPO也分别降低了23%和37%,但是这在统计学上不是显著的。类似的,在用水解BLf治疗的小鼠中检测到的MPO比用HBC治疗的小鼠低约40%,比用BLf治疗的小鼠低约50%,但是这同样不是显著差异。还应当注意,实验的基数(power)(α:0.050)比期望水平0.800低。一般而言,样品的数量越大,则测试的基数越大。因此,为了在特定基数和显著性水平检测治疗组之间的统计学差异,必需使用比此处所用容量更大的组。
最后,应当理解,本文所述本发明方法和组合物的多种修改和变更对于本领域技术人员而言是显而易见的,而且不违背本发明的范围和精神。尽管已经结合具体的优选实施方案描述了本发明,应当理解,所主张的本发明不应当过度限制于这些具体实施方案。实际上,对于染色体异常、产前诊断和胚胎植入前遗传诊断、分子生物学、或相关领域的技术人员而言显而易见的用于执行本发明的所述方式的多种修改意欲属于本发明的范围之内。
Claims (15)
1.下列物质在制备用于在人或动物中抑制胃粘液上皮的幽门螺杆菌定居的药物组合物中的用途:
(a)N-乙酰半胱氨酸、
(b)乳铁蛋白、和
(c)牛初乳和/或牛超免疫乳中的一种或两种。
2.如权利要求1的用途,其中牛初乳是牛超免疫初乳。
3.如权利要求1的用途,其中乳铁蛋白是水解乳铁蛋白。
4.如权利要求1-3任一项的用途,还包括使用抗生素。
5.如权利要求4的用途,其中抗生素是阿莫西林。
6.下列物质在制备用于在人或动物中减轻胃粘液上皮的幽门螺杆菌感染的药物组合物中的用途:
(a)N-乙酰半胱氨酸、
(b)乳铁蛋白、和
(c)牛初乳和/或牛超免疫乳中的一种或两种。
7.如权利要求6的用途,其中牛初乳是牛超免疫初乳。
8.如权利要求6的用途,其中乳铁蛋白是水解乳铁蛋白。
9.如权利要求6-8任一项的用途,还包括使用抗生素。
10.如权利要求9的用途,其中抗生素是阿莫西林。
11.下列物质在制备用于在人或动物中减轻与胃粘液上皮的幽门螺杆菌感染有关的胃粘液上皮损伤的药物组合物中的用途:
(a)N-乙酰半胱氨酸、
(b)乳铁蛋白、和
(c)牛初乳和/或牛超免疫乳中的一种或两种。
12.如权利要求11的用途,其中牛初乳是牛超免疫初乳。
13.如权利要求11的用途,其中乳铁蛋白是水解乳铁蛋白。
14.如权利要求11-13任一项的用途,其中所述方法还包括使用抗生素。
15.如权利要求14的用途,其中抗生素是阿莫西林。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
AU2003904192 | 2003-08-08 | ||
AU2003904192A AU2003904192A0 (en) | 2003-08-11 | 2003-08-11 | Method for inhibiting bacterial colonisation |
PCT/AU2004/001059 WO2005014014A1 (en) | 2003-08-08 | 2004-08-09 | Method for inhibiting bacterial colonisation |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1901924A CN1901924A (zh) | 2007-01-24 |
CN1901924B true CN1901924B (zh) | 2010-04-28 |
Family
ID=32476481
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2004800275579A Expired - Fee Related CN1901924B (zh) | 2003-08-08 | 2004-08-09 | 用于抑制细菌定居的方法 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20070110758A1 (zh) |
EP (1) | EP1670490A4 (zh) |
CN (1) | CN1901924B (zh) |
AU (2) | AU2003904192A0 (zh) |
CA (1) | CA2535098A1 (zh) |
NZ (1) | NZ545192A (zh) |
WO (1) | WO2005014014A1 (zh) |
Families Citing this family (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE19836339B4 (de) * | 1998-08-11 | 2011-12-22 | N.V. Nutricia | Kohlenhydratmischung |
EP1597978A1 (en) | 2004-05-17 | 2005-11-23 | Nutricia N.V. | Synergism of GOS and polyfructose |
US8252769B2 (en) | 2004-06-22 | 2012-08-28 | N. V. Nutricia | Intestinal barrier integrity |
EP1721611A1 (en) * | 2005-04-21 | 2006-11-15 | N.V. Nutricia | Nutritional supplement with oligosaccharides for a category of HIV patients |
EP1723951A1 (en) * | 2005-04-21 | 2006-11-22 | N.V. Nutricia | Nutritional supplement with oligosaccharides for a category of HIV patients |
DK1758469T4 (da) * | 2004-06-22 | 2013-11-04 | Nutricia Nv | Forbedring af barriereintegriteten hos HIV-patienter ved anvendelse af fedtsyrer |
ATE471665T1 (de) * | 2005-04-21 | 2010-07-15 | Nutricia Nv | Nahrungsergänzungsmittel für hiv-patienten |
WO2009096772A1 (en) * | 2008-02-01 | 2009-08-06 | N.V. Nutricia | Composition for stimulating natural killer cell activity |
US8637075B2 (en) | 2008-09-12 | 2014-01-28 | Pharma Gp Aps | Colostrum composition |
FI20115377A (fi) * | 2011-04-18 | 2012-10-19 | Biohit Oyj | Ylempien hengitys- ja ruoansulatuselinten mikrobi-infektioihin liittyvissä tiloissa käytettäväksi tarkoitettuja lääketieteellisiä tuotteita |
US11130800B2 (en) | 2016-05-20 | 2021-09-28 | Novobind Livestock Therapeutics Inc. | Antibodies against microorganisms and uses thereof |
EP3538083B1 (en) * | 2016-11-14 | 2024-07-10 | NeuVision Development LLC | Formulations for the treatment of ocular surface diseases and related methods |
US20210252149A1 (en) * | 2020-02-19 | 2021-08-19 | Anubis Bio Corporation | Composition and Methods for Treating Infectious Agents Using Pathogen-specific Antibodies |
CN113975387B (zh) * | 2021-10-18 | 2024-06-25 | 广西康众洋生物技术有限公司 | 一种抗幽门螺旋杆菌卵黄抗体包埋凝胶颗粒的制备方法 |
WO2024018374A1 (en) | 2022-07-20 | 2024-01-25 | Frimline Private Limited | A pharmaceutical composition providing mucolytic effect |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6468965B1 (en) * | 2002-04-22 | 2002-10-22 | Paul Cutler | Pharmaceutical composition for oral administration of a mixture of chelating agents |
EP1055720B1 (en) * | 1999-05-28 | 2004-08-11 | JOHNSON & JOHNSON CONSUMER COMPANIES, INC. | Compositions for stabilizing oxygen-labile species |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB0012487D0 (en) * | 2000-05-24 | 2000-07-12 | Pfylori Limited | Use of metal compounds to treat gastrointestinal infections |
NZ552316A (en) * | 2006-12-22 | 2009-10-30 | Fonterra Co Operative Group | Dairy product and process |
-
2003
- 2003-08-11 AU AU2003904192A patent/AU2003904192A0/en not_active Abandoned
-
2004
- 2004-08-09 EP EP04761096A patent/EP1670490A4/en not_active Withdrawn
- 2004-08-09 AU AU2004262446A patent/AU2004262446B2/en not_active Ceased
- 2004-08-09 US US10/567,659 patent/US20070110758A1/en not_active Abandoned
- 2004-08-09 CN CN2004800275579A patent/CN1901924B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2004-08-09 WO PCT/AU2004/001059 patent/WO2005014014A1/en active Application Filing
- 2004-08-09 CA CA002535098A patent/CA2535098A1/en not_active Abandoned
- 2004-08-09 NZ NZ545192A patent/NZ545192A/en unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1055720B1 (en) * | 1999-05-28 | 2004-08-11 | JOHNSON & JOHNSON CONSUMER COMPANIES, INC. | Compositions for stabilizing oxygen-labile species |
US6468965B1 (en) * | 2002-04-22 | 2002-10-22 | Paul Cutler | Pharmaceutical composition for oral administration of a mixture of chelating agents |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN1901924A (zh) | 2007-01-24 |
US20070110758A1 (en) | 2007-05-17 |
NZ545192A (en) | 2009-12-24 |
CA2535098A1 (en) | 2005-02-17 |
EP1670490A4 (en) | 2009-08-12 |
WO2005014014A1 (en) | 2005-02-17 |
AU2004262446B2 (en) | 2010-03-04 |
AU2003904192A0 (en) | 2003-08-21 |
EP1670490A1 (en) | 2006-06-21 |
AU2004262446A1 (en) | 2005-02-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11452748B2 (en) | Probiotic formulations and methods for use | |
CN1901924B (zh) | 用于抑制细菌定居的方法 | |
US9750802B2 (en) | Method and system for targeting the microbiome to promote health and treat allergic and inflammatory diseases | |
CN108513544A (zh) | 包含细菌菌株的组合物 | |
Im et al. | Recent advances in Saccharomyces boulardii research | |
CN108513545A (zh) | 包含细菌菌株的组合物 | |
US10653714B2 (en) | Composition and method to enhance expression of human defensin 2 | |
CN108495642A (zh) | 包含细菌菌株的组合物 | |
SE506529C2 (sv) | Användning av ett laktoperoxidassystem för framställning av ett läkemedel mot Helicobacter pylori | |
JP2006519014A (ja) | 乳酸菌からの抗炎症活性 | |
EA017558B1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Е.Mundtii ST4SA, СПОСОБНЫЙ ПРОДУЦИРОВАТЬ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЙ ПЕПТИД ST4SA, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПЕПТИДА ST4SA И ПРИМЕНЕНИЕ ШТАММА БАКТЕРИЙ Е.Mundtii ST4SA И ПЕПТИДА | |
JPH10287585A (ja) | 胃炎、胃潰瘍および十二指腸潰瘍の予防剤並びに治療剤 | |
CN100571715C (zh) | 含有生物活性物质的组合物及其制备和处理方法 | |
MXPA06012070A (es) | Sistema de surtido terapeutico que comprende un compuesto de tipo peg de peso molecular alto. | |
JPH06511237A (ja) | 治療用組成物およびその製造方法 | |
JP2022537178A (ja) | プレボテラ調製物ならびに慢性閉塞性肺疾患(copd)および他の肺状態の治療 | |
Savustyanenko | Mechanisms of action of probiotics based on Bacillus subtilis | |
RU2698099C2 (ru) | Способы и реагенты для предупреждения и/или лечения инфекции | |
JP2001523249A (ja) | 特異的免疫寛容を誘導するための抗原と粘膜結合成分の組合せ | |
CN105435213A (zh) | 利用乳铁蛋白治疗或预防幽门螺旋杆菌感染的方法 | |
Luo et al. | Dietary supplementation of fructo-oligosaccharides alleviates enterotoxigenic E. coli-induced disruption of intestinal epithelium in a weaned piglet model | |
PL188157B1 (pl) | Zastosowanie pozakomórkowych proteinaz | |
WO2004071520A1 (ja) | 免疫機能改善を目的としたビフィズス菌製剤 | |
AU722200B2 (en) | Anti-helicobacter vaccine complex | |
WO2024188199A1 (zh) | 分离的克里斯滕森菌、包含其的组合物及用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
C17 | Cessation of patent right | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20100428 Termination date: 20110809 |