JP3390613B2 - ビフィズス因子の活性増強・安定化剤 - Google Patents

ビフィズス因子の活性増強・安定化剤

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Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ビフィズス因子の
活性増殖及び／又は安定化に関する技術に係り、更に詳
細には、本発明はアスコルビン酸及びその脂肪酸エステ
ル又はそれらの塩、次亜硫酸又はそれらの塩、並びに無
水酢酸が保有するビフィズス因子の活性増強並びに安定
化作用に関するものであって、当該物質を単独又はビフ
ィズス因子とともに種々食品等へ添加することによる腸
内フローラの改善やビフィズス菌数計測用の選択培地に
利用されるものである。
【０００２】これまでの母乳栄養児と人工栄養児の腸内
フローラの比較研究から、ビフィズス菌が人の健康に有
用であることが示唆されてきた。現在では、各種消化管
疾病等や老化に伴いビフィズス菌が有意に低下するこ
と、腸内ビフィズス菌の増殖を促進することが発癌抑
制、腸内腐敗の抑制、感染症の防止等に有効であること
が確認されてきている。したがって、腸内のビフィズス
菌を選択的に増殖させることは、健康維持や各種成人病
等の予防・治療の観点から極めて重要であるといえる。
【０００３】また、以上の観点から、近年ビフィズス菌
を添加した食品（発酵乳、ヨーグルト等）が増加してお
り、これらの食品の製造や品質管理の面から、それらの
食品中のビフィズス菌数を特異的に計測できる選択培地
の開発が重要となってきている。
【０００４】
【従来の技術】有用なビフィズス菌を増殖促進せしめる
物質、いわゆるビフィズス因子については、従来よりい
くつかの物質が研究され、報告されている。例えば、母
乳中に含まれるＮ−アセチルグルコサミン（Ｐｒｏｃ．
Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．，９０，２１９
（１９５５））、ペプチド関連物質（Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉ
ｎ．Ｎｕｔｒ．，３２，１４２８（１９７４）、Ａｇｒ
ｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，４８，２１５９（１９８
４））、人参抽出物（日農化誌、５５，４９９（１９８
１）、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，（Ｔｏｋｙ
ｏ）１４，１１９１（１９６６））、糖関連物質（東北
福祉大紀要、１０，３１３（１９８６））等がある。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、これら
ビフィズス菌の増殖促進物質の調製は、いずれも煩雑で
あり、ビフィズス菌のみを選択的に増殖させるという作
用においても必ずしも十分とは言えない点があった。本
発明は、ビフィズス菌のみを選択的且つ迅速に増殖せし
めるビフィズス菌増殖促進組成物及び当該物質を利用し
たビフィズス菌数計測等分析システムを提供することを
目的とするものである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明は、上記した目的
を達成するためになされたものであって、本発明者等
は、ビフィズス菌の増殖を促進する微生物の代謝産物
（ビフィズス因子）の安定化につき鋭意研究を重ねた結
果、ビタミンの一種であるアスコルビン酸及びその脂肪
酸エステル又はそれらの塩、次亜硫酸又はその塩、並び
に無水酢酸がビフィズス因子の活性を増強するとともに
耐熱性を向上させることを見いだした。
【０００７】以下、本発明について詳細に説明する。本
発明者等は、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎ
ｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属細菌が産生するビフィズス因
子の耐熱性を向上させる安定化剤を検索していたとこ
ろ、アスコルビン酸及びその脂肪酸エステル又はそれら
の塩、次亜硫酸又はそれらの塩、並びに無水酢酸が上記
ビフィズス因子の耐熱性を向上させるだけでなく、増殖
促進活性をも著しく増強することを見いだし、本発明を
完成するに至った。また、当該物質は、Ｐｒｏｐｉｏｎ
ｉｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅのほか、更に、Ｂａｃｔｅ
ｒｏｉｄａｃｅａｅ，Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃ
ｅａｅ，Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ，Ｌａｃｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ，Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ，及びＢａｃｉｌｌａ
ｃｅａｅ属細菌が産生するビフィズス因子の活性をも増
強することを見いだして、これらの新知見を総合し、更
に研究の結果、完成されたものである。
【０００８】本発明において使用する物質（本発明物
質）としては、アスコルビン酸、次亜硫酸（ハイドロサ
ルファイト）、及び／又は無水酢酸が挙げられるが、こ
れら遊離の酸のほか、脂肪酸エステルその他各種のエス
テル類、アルカリ（土）金属塩（ナトリウム、カリウ
ム、カルシウム、マグネシウム塩その他）その他の塩類
も自由に使用することができる。
【０００９】これらの本発明物質は、後記するところか
らも明らかなように、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉ
ａｃｅａｅだけでなく多くの腸内細菌が産生するビフィ
ズス因子の活性を著しく増強するため、本発明物質を含
有した組成物は、ビフィズス菌増殖促進組成物として、
医薬タイプ、飲食品タイプ、及び／又は、分析用剤タイ
プのそれぞれの形態で利用することができ、例えば医薬
として直接投与することにより、あるいはまた特定保健
用食品等栄養食品ないし機能性食品として直接投与ない
し摂取することにより、あるいはまた、各種食品（発酵
乳、ヨーグルトその他）に添加しておきこれを摂取する
ことによって、腸内フローラの改善を図ることができ
る。また、ビフィズス菌数計測等アッセイ系にも本発明
の組成物は利用することができる。
【００１０】本発明において、ビフィズス因子とは、化
学物質として単離されたもの、及び微生物由来のものの
すべてを包含するものである。前者の例としては、α−
ナフトキノン及びその誘導体といったα−ナフトキノン
関連化合物が使用される。
【００１１】また、後者の場合、ビフィズス因子はＰｒ
ｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ、Ｂａｃｔｅｒ
ｏｉｄａｃｅａｅ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅ
ａｅ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃ
ｕｓ、Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ、及びＢａｃｉｌｌａｃ
ｅａｅの属する細菌によって産生される化合物である
が、該化合物としては単離精製された純粋な化合物のほ
か、粗製物、含有物も含有され、更にまた、これらの微
生物を培養して得られる微生物菌体、培養液（培養上
清）、培養物、これらの処理物（濃縮物、ペースト化
物、乾燥物、希釈物等）もビフィズス因子に包含され
る。
【００１２】本発明に係わる組成物を医薬組成物として
使用する場合には、本発明物質を種々の形態で投与す
る。その投与形態としては、例えば、錠剤、カプセル
剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等による経口投与をあげ
ることができるが、特に腸溶性カプセル剤が有効であ
る。これらの各種製剤は、常法にしたがって主薬に賦形
剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、溶解補助
剤、懸濁剤、コーティング剤等の医薬の製造技術分野に
おいて通常使用しうる既知の補助剤を用いて製剤化する
ことができる。
【００１３】この製剤をヒトに適用する場合、経口投与
によるのが好ましい。有効成分の治療有効量は治療され
る各患者の年令及び条件によって変動するが、一般に有
効成分をヒト体重１Ｋｇ当たり１日量１．０〜１００ｍ
ｇ経口投与する。本発明物質の内、アスコルビン酸が安
全性に問題がないことは明らかであり、また、無水酢酸
も毒性についての懸念はないし、次亜硫酸もマウスに対
して１日当り１００ｍｇ投与したところ、１０日後にお
いても死亡例が認められず、本発明物質は、いずれも安
全であることが確認された。
【００１４】本発明物質は、経口投与によって所期の目
的を達成しうるので、本発明に係わる組成物は、飲食品
タイプとして使用することができる。そのためには、本
発明物質を各種補助剤や他の飲食品を用いて、ドリン
ク、錠剤、その他各種の飲食品タイプにしたり、飲食品
に直接添加する等、各種の方法を利用することができ
る。このように飲食品タイプとした本発明組成物は、長
期間にわたって摂取することが可能であるので、通常の
飲食品のほか、特定保健用食品、栄養剤、健康食品等と
して市販に供することができる。
【００１５】本発明物質と当該ビフィズス因子の併用
は、ビフィズス菌増殖促進能が非常に高いだけでなく、
選択性及び特異性も極めて高いという特徴を有する。し
かも本発明によれば、抗生物質等の存在により増殖が抑
制されたビフィズス菌でも本発明物質と当該ビフィズス
因子を添加することにより、その増殖能を回復する。し
たがって、本発明物質を単独又は当該ビフィズス因子と
ともにヒトもしくは動物に直接投与し、消化管中のビフ
ィズス菌数を増大せしめる利用法の他に、食品、大腸内
容物ならびに糞便試料等におけるビフィズス菌分析用の
選択培地に当該ビフィズス因子とともに添加利用するこ
とが可能である。
【００１６】すなわち、これまでにビフィズス菌含有試
料中のビフィズス菌数を計測するシステムのひとつとし
て、ビフィズス菌以外の夾雑菌の増殖を抑制する選択剤
を含有する寒天培地を用い、該培地に試料を接種してイ
ンキュベートすることにより、ビフィズス菌のみを特異
的ないし選択的に増殖せしめて、ビフィズス菌の存否や
生菌数を計測する方法が知られている。しかしながら、
選択剤を添加した選択培地では特に高濃度の選択剤を使
用した場合、ビフィズス菌以外の夾雑菌の増殖が抑制さ
れることはもちろんのこと、ビフィズス菌自体の増殖も
抑制されることがあり、正確なビフィズス菌数の把握が
困難であった。
【００１７】これに対し、選択培地に本発明物質及び当
該ビフィズス因子を添加すると、ビフィズス菌の増殖を
特異的に促進しコロニーを形成させることができ、ビフ
ィズス菌数の正確な計測ができるのである。しかもこの
効果は、選択剤として硫酸パロモマイシン、硫酸ネオマ
イシン等の抗生物質のほか、プロピオン酸塩、塩化リチ
ウムその他既知のどのような選択剤を使用しても奏され
るので、本発明物質及び当該ビフィズス因子を添加して
なるビフィズス菌アッセイ用選択培地は広範なアッセイ
用途に有効に利用することができる。このために、本発
明物質、及び必要あれば培地成分、その他必要な試薬を
セットにした分析キットを組み、これを市販に供するこ
とができる。
【００１８】
【実施例】以下、本発明の実施例につき述べる。
【００１９】
【実施例１：各種細菌が産生するビフィズス因子の活性
増強作用】下記するプロピオン酸菌をはじめとするビフ
ィズス因子産生細菌をＴＰＹＧ培地（トリプチケース
（ＢＢＬ）８ｇ、フィトンペプトン（ＢＢＬ）３ｇ、酵
母エキス ５ｇ、Ｌ−システイン塩酸塩 ０．５ｇ、グ
ルコース ２０ｇ、Ｋ2ＨＰＯ4 ２ｇ、ＫＨ2ＰＯ4 ３
ｇ、ＭｇＣｌ2・６Ｈ2Ｏ ０．５ｇ、ＦｅＳＯ4・７Ｈ2
Ｏ １０ｍｇ、精製水１０００ｍｌ、ｐＨ６．５）で３
０℃又は３７℃で２４時間又は７２時間培養した。
【００２０】（ａ）Propionibacterium freudenreichii
ATCC 6207 (30℃, 72時間) （ｂ）Escherichia coli ATCC 9637 (37℃, 24時間) （ｃ）Enterobacter cloacae ATCC 13047 (37℃, 24時
間) （ｄ）Serratia liquefaciens ATCC 27592 (37℃, 24時
間) （ｅ）Bacteroides vulgatus ATCC 8482 (37℃, 24時
間) （ｆ）Enterococcus faecalis ATCC 19433 (37℃,24時
間) （ｇ）Lactococcus lactis subsp. lactis ATCC 19435
(30℃,24時間) （ｈ）Pediococcus halophilus ATCC 33315 (30℃, 24
時間) （ｉ）Bacillus subtilis ATCC 6051 (30℃, 24時間)
【００２１】これら培養液を遠心分離し、培養上清をさ
らに格子０．４５μｍのフィルターでろ過して得たろ液
にアスコルビン酸Ｎａ、次亜硫酸Ｎａ、又は無水酢酸を
０．１％（Ｗ／Ｖ）添加した際の、さらに、１２１℃で
１５分間加熱処理した際のビフィズス菌増殖促進活性を
測定した。なお、対照は本発明物質を添加しない培養ろ
液とし、ビフィズス菌増殖促進活性は以下の方法によっ
て測定した。すなわち、活性測定用培地（トリプチケー
ス（ＢＢＬ）４ｇ、フィトンペプトン（ＢＢＬ）１．５
ｇ、酵母エキス２．５ｇ、Ｌ−システイン塩酸塩０．２
５ｇ、グルコース２０ｇ、Ｋ2ＨＰＯ4 ２ｇ、ＫＨ2Ｐ
Ｏ4 ３ｇ、ＭｇＣｌ2・６Ｈ2Ｏ ０．２５ｇ、ＦｅＳ
Ｏ4・７Ｈ2Ｏ ５ｍｇ、寒天 １５ｇ、精製水１０００
ｍｌ、ｐＨ８．５）を加温溶解し、５０℃にてＢｉｆｉ
ｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｏｎｇｕｍ ＡＴＣＣ １
５７０７を１０5ｃｆｕ／ｍｌとなるように接種し、滅
菌済みシャーレ（直径８．５ｃｍ）に１０ｍｌずつ分注
して寒天平板を作成した。この平板上に試料溶液を染み
込ませ乾燥させたペーパーディスク（直径６ｍｍ、厚さ
０．７ｍｍ）を置き、３７℃で１５時間嫌気培養（ガス
パック法、ＢＢＬ）した際に認められる増殖促進円径を
測定し、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸を標準物質と
して作成した検量線より各試料の活性を算出した。この
際、標準物質１μｇの示す活性を１Ｕｎｉｔと定義し
た。得られた結果を、下記表１に示す。
【００２２】
【表１】
【００２３】表１で示したとおり、アスコルビン酸Ｎａ
を添加することにより、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏ
ｌｉ ＡＴＣＣ ９６３７及びＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕ
ｓｆａｅｃａｌｉｓ ＡＴＣＣ １９４３３以外の各種
供試菌培養ろ液のビフィズス菌増殖促進活性が著しく増
大した。特にＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ｃｌｏａｃａ
ｅ ＡＴＣＣ ９６１、Ｓｅｒｒａｔｉａ ｌｉｑｕｅ
ｆａｃｉｅｎｓ ＡＴＣＣ ２７５９２、Ｂａｃｔｅｒ
ｏｉｄｅｓ ｖｕｌｇａｔｕｓ ＡＴＣＣ８４８２の培
養ろ液のビフィズス菌増殖促進活性は１００倍以上に増
大した。また、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ａ
ＴＣＣ ９６３７及びＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａ
ｅｃａｌｉｓ ＡＴＣＣ １９４３３の培養ろ液も、ア
スコルビン酸Ｎａを添加した後に加熱処理するとビフィ
ズス菌増殖促進活性が著しく増大した。一方、次亜硫酸
Ｎａ又は無水酢酸の添加では、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕ
ｓ ｆａｅｃａｌｉｓ ＡＴＣＣ １９４３３，Ｌａｃ
ｔｏｃｏｃｃｕｓ ｌａｃｔｉｓ ＡＴＣＣ １９４３
５及びＰｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ
ＡＴＣＣ ３３３１５以外の各種供試菌培養ろ液のビ
フィズス菌増殖促進活性が著しく増大した。
【００２４】
【実施例２：アスコルビン酸Ｎａ添加濃度とプロピオン
酸菌培養ろ液のビフィズス菌増殖促進活性】Ｐｒｏｐｉ
ｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｒｅｕｄｅｎｒｅｉｃｈ
ｉｉ ＡＴＣＣ ６２０７株をＴＰＹＧ培地にて３０℃
で３日間培養して得た培養ろ液に、アスコルビン酸Ｎａ
を０．０１〜０．５％（Ｗ／Ｖ）となるように添加し、
１２１℃で１５分間加熱前後のビフィズス菌増殖促進活
性を実施例４と同様の方法で測定した。図１で示したよ
うにビフィズス菌増殖促進活性はアスコルビン酸濃度の
上昇に伴い著しく増大し、０．０４％以上の添加では１
２１で１５分間加熱処理しても活性の低下が認められな
かった。
【００２５】
【実施例３：マウス盲腸内容物のビフィズス菌増殖促進
活性に及ぼすアスコルビン酸の影響】４週齢オスＩＣＲ
マウス２匹ずつに、それぞれＣＭＦ飼料、１０％脱脂粉
乳添加ＣＭＦ飼料、及び１０％プロピオン酸菌発酵粉末
（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｒｅｕｄｅ
ｎｒｅｉｃｈｉｉ ＡＴＣＣ ６２０７株を１０％脱脂
粉乳培地中で３０℃、３日間培養した発酵液を凍結乾燥
したもの）添加ＣＭＦ飼料を３週間連続投与した。３週
間後に各群のマウスを解剖して盲腸を摘出し、４倍量
（Ｗ／Ｗ）の精製水を加えて均質化した溶液につき、
０．１％（Ｗ／Ｖ）アスコルビン酸ナトリウム添加前後
のビフィズス菌増殖促進活性を測定し、盲腸１ｇ当たり
の活性の平均値を算出した。得られた結果を下記表２に
示す。
【００２６】
【表２】
【００２７】表２で示したように、いずれの投与群にお
いても０．１％のアスコルビン酸ナトリウム添加により
盲腸内容物のビフィズス菌増殖促進活性が２〜３倍に増
大した。また、プロピオン酸菌発酵粉末投与群では、盲
腸内容物のビフィズス菌増殖促進活性が他の２群と比較
して１．５〜２倍程度まで増大していた。
【００２８】
【実施例４】グラニュー糖５０ｇ、コーンスターチと乳
糖の等量混合物１００ｇ、プロピオン酸菌発酵粉末５０
ｇ、Ｌ−アスコルビン酸１００ｇを加えて充分に混合し
た。混合物を１００等分して袋に詰め、１袋３．０ｇの
スティック状ビフィズス因子栄養健康食品を１００袋製
造した。尚、プロピオン酸菌発酵粉末は、Ｐｒｏｐｉｏ
ｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｒｅｕｄｅｎｒｅｉｃｈｉ
ｉ ＡＴＣＣ ６２０７株を１０％（Ｗ／Ｖ）脱脂粉乳
培地で３０℃で７２時間、ｐＨ６．０で中和培養して得
た発酵液を殺菌後に噴霧乾燥したものを用いた。
【００２９】
【発明の効果】本発明に係わるビフィズス因子の活性増
強剤は、プロピオン酸菌をはじめとする多くの腸内細菌
が産生するビフィズス因子の活性を著しく増強するの
で、単独又はビフィズス因子との併用の形で飲食品や経
口投与薬剤としてヒトや動物に直接投与ないし摂取せし
めて、消化管中のビフィズス菌数を増大させるのに極め
て有効である（ただし、無水酢酸は除く）。
【００３０】さらにまた、本発明に係わるビフィズス因
子の活性増強剤は、ビフィズス因子との併用により優れ
たビフィズス菌の増殖促進効果を示すだけでなく、選択
性ないし特異性が強く、他の夾雑菌には増殖促進効果が
認められないため、ビフィズス菌選択用培地にビフィズ
ス因子とともに添加すると、ビフィズス菌のみのコロニ
ーが速やかに形成され、ビフィズス菌の生菌数の計測そ
の他各種アッセイに有利に利用できる。
【図面の簡単な説明】
【図１】アスコルビン酸Ｎａを０．０１〜０．５％（Ｗ
／Ｖ）となるように添加したＰｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ ｆｒｅｕｄｅｎｒｅｉｃｈｉｉ ＡＴＣＣ
６２０７株の培養ろ液、並びにそれらを１２１℃で１５
分間加熱処理した際のビフィズス菌増殖促進活性を示
す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｐ 1/12 Ａ６１Ｐ 1/12 Ｃ１２Ｑ 1/04 Ｃ１２Ｑ 1/04 //(Ｃ１２Ｎ 1/38 Ｃ１２Ｒ 1:01 Ｃ１２Ｒ 1:01） (56)参考文献 特開 平８−217784（ＪＰ，Ａ) 特開 平２−289520（ＪＰ，Ａ) 特開 昭57−71390（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12N 1/00 - 1/38 C12Q 1/06 A23L 1/30 A61K 31/70,33/00,35/00 ＢＩＯＳＩＳ／ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)

Claims (10)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 ビフィズス因子の活性増強・安定化剤で
    あって、ビフィズス因子が、ビフィズス因子産生菌の菌
    体、培養液、培養物、これらの処理物からなる群より選
    ばれる少なくとも１種であり、有効成分が、アスコルビ
    ン酸、次亜硫酸、無水酢酸からなる群より選ばれる少な
    くとも１種であること、を特徴とするビフィズス因子の
    活性増強・安定化剤。
  2. 【請求項２】 該酸が、遊離の酸、エステル、塩からな
    る群より選ばれる少なくとも１種であること、を特徴と
    する請求項１に記載のビフィズス因子の活性増強・安定
    化剤。
  3. 【請求項３】 ビフィズス因子の活性増強・安定化剤で
    あって、ビフィズス因子が、α−ナフトキノン関連化合
    物であり、有効成分が、アスコルビン酸、次亜硫酸、無
    水酢酸からなる群より選ばれる少なくとも１種であるこ
    と、を特徴とするビフィズス因子の活性増強・安定化
    剤。
  4. 【請求項４】 該酸が、遊離の酸、エステル、塩からな
    る群より選ばれる少なくとも１種であること、を特徴と
    する請求項３に記載のビフィズス因子の活性増強・安定
    化剤。
  5. 【請求項５】 ビフィズス因子が、ビフィズス因子産生
    菌の菌体、培養液、培養物、これらの処理物からなる群
    より選ばれる少なくとも１種であるビフィズス因子に対
    し、請求項１又は２に記載のビフィズス因子の活性・増
    強安定化剤（但し、無水酢酸を除く）を該ビフィズス因
    子に対し０．０４％（Ｗ／Ｖ）以上含有してなること、
    を特徴とするビフィズス因子含有医薬品。
  6. 【請求項６】 ビフィズス因子が、α−ナフトキノン関
    連化合物であるビフィズス因子に対し、請求項３又は４
    に記載のビフィズス因子の活性・増強安定化剤（但し、
    無水酢酸を除く）を該ビフィズス因子に対し０．０４％
    （Ｗ／Ｖ）以上含有してなること、を特徴とするビフィ
    ズス因子含有医薬品。
  7. 【請求項７】 ビフィズス因子が、ビフィズス因子産生
    菌の菌体、培養液、培養物、これらの処理物からなる群
    より選ばれる少なくとも１種であるビフィズス因子に対
    し、請求項１又は２に記載のビフィズス因子の活性・増
    強安定化剤（但し、無水酢酸を除く）を該ビフィズス因
    子に対し０．０４％（Ｗ／Ｖ）以上含有してなること、
    を特徴とするビフィズス因子含有飲食品。
  8. 【請求項８】 ビフィズス因子が、α−ナフトキノン関
    連化合物であるビフィズス因子に対し、請求項３又は４
    に記載のビフィズス因子の活性・増強安定化剤（但し、
    無水酢酸を除く）を該ビフィズス因子に対し０．０４％
    （Ｗ／Ｖ）以上含有してなること、を特徴とするビフィ
    ズス因子含有飲食品。
  9. 【請求項９】 ビフィズス因子が、ビフィズス因子産生
    菌の菌体、培養液、培養物、これらの処理物からなる群
    より選ばれる少なくとも１種であるビフィズス因子に対
    し、請求項１又は２に記載のビフィズス因子の活性・増
    強安定化剤を該ビフィズス因子に対し０．０４％（Ｗ／
    Ｖ）以上含有してなること、を特徴とするビフィズス因
    子含有分析用剤。
  10. 【請求項１０】 ビフィズス因子が、α−ナフトキノン
    関連化合物であるビフィズス因子に対し、請求項３又は
    ４に記載のビフィズス因子の活性・増強安定化剤を該ビ
    フィズス因子に対し０．０４％（Ｗ／Ｖ）以上含有して
    なること、を特徴とするビフィズス因子含有分析用剤。
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2000327569A (ja) * 1999-05-20 2000-11-28 Nippon Taanaa Kk 腸内環境改善剤
JP4507065B2 (ja) * 2004-02-12 2010-07-21 明治乳業株式会社 １，４−ジヒドロキシ−２−ナフトエ酸の安定化剤
JP4073922B2 (ja) * 2005-03-18 2008-04-09 明治飼糧株式会社 ビフィズス菌増殖促進成分を含有する飼料組成物とその使用方法
AU2006330421B2 (en) * 2005-12-29 2011-03-24 Hill's Pet Nutrition, Inc. Method for modifying gut flora in animals
EP2128083B1 (en) * 2007-03-28 2018-10-17 Asahi Kasei Kabushiki Kaisha Nitrogenous carbon material and process for producing the same

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2872382A (en) * 1956-12-11 1959-02-03 Thomae Gmbh Dr K Bifidogenic compositions
DD273543A3 (de) * 1987-09-14 1989-11-22 Univ Rostock Verfahren zur herstellung von saeuglings- und diaetnahrungen mit hypoantigener, bifidogener wirkung
JP3121046B2 (ja) * 1991-06-06 2000-12-25 明治乳業株式会社 ビフィズス菌増殖促進物質及びその製造方法
RU2053294C1 (ru) * 1992-09-09 1996-01-27 Государственный научно-исследовательский институт прикладной микробиологии Способ культивирования бифидобактерий
JP3315826B2 (ja) * 1994-04-26 2002-08-19 明治乳業株式会社 ビフィズス菌増殖促進組成物
ES2156163T3 (es) * 1994-06-10 2001-06-16 Kyowa Hakko Kogyo Kk Procedimiento para producir disacaridos y nuevos monosacaridos.

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