NL8202064A

NL8202064A - Sulfonaatverbindingen, werkwijze voor de bereiding van deze verbindingen, en antilipemische samenstellingen die deze verbindingen bevatten.

Info

Publication number: NL8202064A
Application number: NL8202064A
Authority: NL
Original assignee: Taiho Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1981-05-22
Filing date: 1982-05-19
Publication date: 1982-12-16
Also published as: KR880002298B1; NL187352B; IT8267661A0; IT1157013B; KR830010060A; GB2101124A; ES513184A0; NL187352C; CA1189082A; DE3219244A1; US4452813A; DE3219244C2; CH649079A5; GB2101124B; AU8367982A; ES8406426A1; AU536817B2; ES522317A0; FR2509297A1; ES8401754A1

Description

4 - _ - . >' *- 823118/vdV/Be

Korte aanduiding: Sulfonaatverbindingen, werkwijze voor de bereiding van deze verbindingen, en antilipe-mische samenstellingen die deze verbindingen bevatten.

De uitvinding heeft betrekking op nieuwe sulfonaatverbindingen, een werkwijze voor de bereiding van deze verbindingen, en antilipemische samenstellingen die deze verbindingen bevatten.

De sulfonaatverbindingen volgens de uitvinding zijn nieuwe, 5 uit de literatuur niet bekende, verbindingen welke kunnen worden weergegeven door formule 1 van het formuleblad waarin een lagere alkylgroep, lagere alkoxygroep of halogeenatoom voorstelt, & een geheel getal van o tot 3 en n 0 of 1 bedraagt, A een rechte of vertakte alkyleengroep met 1 tot 4 koolstofatomen en R2 water-10 stof of een lagere alkylgroep voorstelt,doch, in geval n 0 of 1 bedraagt en A een rechte alkyleengroep is met 1 tot 3 koolstofatomen, geen waterstof.

Voorbeelden van lagere alkylgroepen welke voldoen aan en R2 van de formule 1 zijn rechte of vertakte lagere alkylgroepen 15 met 1 tot 6 koolstofatomen zoals methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, pentyl, hexyl, en dergelijke. Voorbeelden van lagere alkoxy-groepen weergegeven door zijn groepen met 1 tot 4 koolstofatomen zoals methoxy, ethoxy, propyloxy, isopropyloxy, butoxy, en dergelijke. Voorbeelden van halogeenatomen zijn fluor, chloor, 20 broom of iood. De substituent weergegeven door kan aanwezig zijn op elke gwenste plaats van de benzeenring en is niet beperkt tot één substituent doch ook 2 of 3 substituenten kunnen aanwezig zijn.

Voorbeelden van rechte of vertakte alkyleengroepen weer-25 gegeven door A met 1 tot 4 koolstofatomen zijn methyleen, ethyleen, trimethyleen, tetramethyleen, ethylmethyleen, a-methylethyleen, b-methylethyleen, a-ethylmethyleen, propylmethyleen en dergelijke.

De door R2 weergegeven substituent kan aanwezig zijn op elke 8202064

λ V

t - 2 - gewenste plaats van de cyclohexylring. De uitvinding omvat zowel cis- als transisomeren welke aanwezig zijn ten gevolge van de cyclohexylring en de groep Rg.

De nieuwe sulfonaatverbindingen volgens de uitvinding omvat-5 ten verschillende verbindingen zoals bijvoorbeeld die welke samengevat zijn in de onderstaande tabel a.

Tabel a 1-benzeensulfonyloxy-3-(4-isopropylcyclohexyl)~2-propanon, 1-benzeensulfonyloxy-4-methyl-4-cyclohexyl-2-pentanon, 10 1-(4-methylbenzeenfulfonyloxy)-4-methyl-4-cyclohexyl-2-pentanon, 1-(2,4,ó-trimethylbenzeensulfonyloxy)-4-methyl-4-cyclohexyl-2-pentanon, l-benzeensulfonyloxy-3,3-dimethyl-4-cyclohexyl-2-butanon, 1- (4-methylbenzeensulfonyloxy)-3,3-dimethyl-4-cyclohexyl-2-butanon, 15 1-(2,4,6-trimethylbenzeensulfonyloxy)-3,3-dimethyl-4-cyclohexyl- 2- butanon, 1-benzeensulfonyloxy-4-(4-methylcyclohexyl)-2-butanon, 1-(4-methylbenzeensulfonyloxy)-4-(4-methylcyclohexyl)-2-butanon, l-benzeensulfonyloxy-3-methyl-3-(4-methylcyclohexy)-2-butanon, 20 1-(4-methylbenzeensulfonyloxy)-3-methyl-3-(4-methylcyclohexyl)-2-butanon, « 1-benzeensulfonyloxy-3-methyl-3-cyclohexyl-2-butanon, 1-(4-methylbenzeensulfonyloxy)-3-methyl-3-cyclohexyl-2-butanon, l-benzeensulfonyloxy-2-(4-n-propylcyclohexyl)-2-butanon, 25 1-benzeensulfonyloxy-3-(4-ethylcyclohexyl)-2-propanon, 1-benzeensulfonyloxy-4-(4-methylcyclohexyl)-2-pentanon, 1— (2,4,6-trimethylbenzeensulfonyloxy)-2-(4-sec-butylcyclohexyl)- 2- ethanon, l-benzeensulfonyloxy-3-cyclohexylmethyl-2-pentanon, 30 3-cyclohexylmethyl-1-(ethylbenzeensulfonyloxy)-2-pentanon, l-benzeensulfonyloxy-4-cyclohexyl-2-pentanon, 8202064 f li. & - 3 - 1-benzeensulfonyloxy-3-(2-methylcyclohexyl)-2-propanon, 1- benzeensulfonyloxy~3-(4-isopropylcyelohexyl)-2-propanon, 2- benzeensulfonyloxy-1-(4-ethylcyclohexyl)-1-ethanon, 2-benzeensulfonyloxy-1-(4~isopropylcyclohexyl)-1-ethanon, 5 1-(4-isobutylcyclohexyl)-2-(2,4,6-trimethylbenzeensulfonyloxy)- 1- ethanon, 2- benzeensulfonyloxy-1-(4-isobutylcyclohexyl)-1-ethanon, 2-benzeensulfonyloxy-1-(4-sec-butylcyclohexyl)-1-ethanon, en 2-(4-methylbenzeensulfonyloxy)-1~(4-sec-butylcyclohexyl)-1-ethanon.

10 De verbindingen met formule 1 kunnen bijvoorbeeld bereid worden volgens werkwijze A, werkwijze B, of werkwijze C die hierna beschreven zullen worden.

Werkwijze A.

Een verbinding met de formule 2 van het formuleblad 15 waarin η, A en f?2 de bovengenoemde betekenis bezitten, laat men reageren met een verbinding met formule 3 ' waarin en 1 de bovengenoemde betekenis bezitten en m 0, 1 of 2 bedraagt.

De reactie volgens werkwijze A wordt gewoonlijk uitgevoerd in een oplosmiddel dat niet bijzonder beperkt is voor zover het 20 oplosmiddel niet deeL-neemt aan de reactie. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen zijn etherszoals dimethyl ether, diethyl ether, tetrahydrofuran en dioxan, niet-protonische oplosmiddelen zoals acetonitril, chloroform en dichloormethaan, petroleum ether, ligroine en dergelijke. Het oplosmiddel wordt gewoonlijk gebruikt 25 in tenminste tweemaal, bijvoorkeur ongeveer twintig maal, de hoeveelheid van de verbinding met formule 2. De hoeveelheden van de verbinding met formule 2 en van de sulfonzuurverbinding met formule 3 die men gebruikt worden doelmatig bepaald. Gewoonlijk gebruikt men tenminste 1 mol, bij voorkeur 1 tot 1,5 mol van de 30 verbinding met formule 3 per mol van de verbinding met formule 2.. De reactie verloopt met voordeel bij ongeveer -10 tot ongeveer 8202064 r - 4 - 60°C, bij voorkeur bij ongeveer 0°C tot kamertemperatuur.

De als een van de uitgangsverbindingen bij de bovengenoemde werkwijze te gebruiken verbinding met formule 2 'kan gewoonlijk bereid worden uit de bekende verbinding met formule 6 en diazo-5 methaan door de reactie weergegeven op het formuleblad omvattende de omzetting van een verbinding met formule 6 in een verbinding met formule 2 waarin n, en A de bovengenoemde betekenis bezitten.

De reactie van de verbinding met formule 6 met diazomethaan 10 wordt gewoonlijk uitgevoerd in een oplosmiddel. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen zijn ether, zoals dimethyl-ether, diethyl-ether, tetrahydrofuran en dioxan, aprotische oplosmiddelen, zoals acetonitrol, chloroform en dichloormethaan, petroleumether, ligroine, en dergelijke. Het is in het algemeen gunstif om ten-15 minste ongeveer 2 molen diazomethaan per mol van een verbinding met formule 6 te gebruiken. De reactie verloopt met voordeel bij ongeveer -10°C tot kamertemperatuur. Hoewel de volgens de bovengenoemde reactie verkregen verbinding met formule 2 volgens gebruikelijke scheidingsmethoden geïsoleerd kan worden, zoals door 20 chromatografie of herkristalliseren, kan het reactiemengsel in het algemeen als zodanig gebruikt worden voor de reactie volgens werkwijze A zonder isoleren.

- Werkwijze B.

Een verbinding met formule 4 waarin X, η, A en R„ de £ ^ 25 bovengenoemde betekenis bezitten laat men reageren met een metaal- zout van een sulfonzuur met de formule 5 van het formuleblad waarin en Z de bovengenoemde betekenis bezitten.

De werkwijze volgens werkwijze B kan met voordeel uitgevoerd worden in afwezigheid van enig oplosmiddel of in aanwezig-30 heid van een geschikt oplosmiddel dat niet aan de reactie deelneemt. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen zijn lagere alcoholen zoals methanol en ethanol, en polaire oplosmiddelen, zoals 8202064 * ·* - 5 - aceton, acetonitrol, tetrahydrofuran, dioxan en dimethylformamide.

De hoeveelheden van de te gebruiken verbindingen metformule IV en verbindingen met formule 5 worden doelmatig bepaald. Gewoonlijk wordt tenminste 1 mol, bij voorkeur 1 tot 1,5 mol, van de verbin-5 ding met formule 5 per mol van een verbinding met formule 4 gebruikt. De reactietemperatuur, die ook doelmatig bepaald kan worden, is met voordeel kamertemperatuur tot kooktemperatuur van het oplosmiddel. Verschillende metalen zijn geschikt voor de metaalzouten van de verbinding met formule 5. Voorbeelden van 10 voorkeursmetaalzouten zijn zilver, koper, en dergelijke alkali-metalen en aardalkalimetalen.

De verbinding met formule .4, één van de sulfonaatverbin-dingen volgens de onderhavige uitvinding, die gebruikt worden als een van de uitgangsstoffen bij de werkwijze B is een nieuwe 15 verbinding, die bereid kan worden volgens de bekende werkwijze, bij voorbeeld door de reactie weergegeven op het formuleblad omvattende de omzetting van een verbinding met formule 2 in een verbinding met formule 4 "onder toepassing van een reactiemiddel met formule . 7 waarin Rg, A, n en X de bovengenoemde betekenis 20 bezitten.

De verbinding met formule 4 waarin X iood voorstelt, namelijk de verbinding met formule 4,f, kan bij voorbeeld ook bereid worden volgens de reactie weergegeven door de reactie-vergelijking omvattende de omzetting van een verbinding met 25 formule '4* onder toepassing van de verbinding met formule 8 in een verbinding met formule 4" , waarin n, en A de bovenge noemde betekenis bezitten en M, natrium, kalium of een soortgelijk alkalimetaal is.

De reactie van de verbinding met formule II met de verhin-30 ding met formule 7 wordt gewoonlijk uitgevoerd in een oplosmiddel dat niet aan de reactie deelneemt. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen zijn diethylether, dioxan, tetrahydrofuran en 8202064 - 6 - dergelijke ethers.

Gewoonlijk wordt tenminste 1 mol, bijvoorkeur 1 tot 1,5 mol, van de verbinding met formule 7 per mol verbinding met formule 2 gebruikt, De reactietemperatuur bedraagt in het alge-5 meen -20 tot 50°C, bij voorkeur 0°C tot kamertemperatuur.

De reactie van de verbinding met formule '4* met de verbinding met formule 8 wordt gewoonlijk uitgevoerd zonder gebruik te maken van een oplosmiddel of in een oplosmiddel dat niet aan de reactie deelneemt. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen 10 zijn methanol, ethanol, en dergelijke alcoholen, tetrahydrofuran, dioxan en dergelijke polaire oplosmiddelen, aceton en dergelijke. De hoeveelheden van de verbinding met formule 4* en de verbinding met formule ' 8 # die doelmatig bepaald kunnen worden, zijn in het algemeen equimolair om gunstige resultaten te verkrijgen. De 15 reactietemperatuur, die ook doelmatig bepaald kan worden, bedraagt gewoonlijk ongeveer 0°C tot het kookpunt van het oplosmiddel, bij , voorkeur kamertemperatuur tot ongeveer 60°C. De bij een der reacties verkregen verbinding met formule 4 of formule Λ* , kan geïsoleerd worden voor gebruik bij de werkwijze B of ook gebruikt 20 worden in de vorm van het verkregen reactiemengsel zonder isoleren. -Werkwijze C.

Een hydroxyacetylcyclohexaanverbinding met de formule 9., waarin de bovengenoemde betekenis bezit, laat men reageren met benzeensulfonylchloride met de formule 10 'waarin en 1 de boven-25 genoemde betekenis bezitten.

De reactie volgens werkwijze C wordt uitgevoerd in een geschikt oplosmiddel in aanwezigheid van een base die als dihydro-chloreringsmiddel dienst doet. Voorbeelden van geschikte oplosmiddelen zijn die welke niet aan de reactie deelnemen zoals di* 30 chloormethaan, dichloorethaan, chloroform en dergelijke koolwaterstof halogoniden. Voorbeelden van geschikte basen zijn die welke gewoonlijk gebruikt worden als dehydrochloreringsmiddelen^zoals 8202064 ' i a - 7 - pyridine, triethylamine, N,N-diisopropylethylamine, 1,8-diazabi-cyclo(5,4,0)-7-undeceen (D.B.U), enz. De base wordt gewoonlijk gebruikt in een hoeveelheid van 1 tot 1,5 maal de hoeveelheid van de verbinding met formule IQ De hoeveelheden van de hydroxy-5 acetylcyclohexaanverbinding met formule 9 en benzeensulfonylchlo-ride met formule 10zijn niet bijzonder beperkt doch kunnen doelmatig gekozen worden, De verbindingen worden gewoonlijk gebruikt in een verhouding van de eerstgenoemde ten opzichte van de laatstgenoemde van ongeveer 1:1 uitgedrukt in molen, bij voorkeur in 10 een equimoleculaire hoeveelheid. De reactie verloopt doelmatig bij een temperatuur van gewoonlijk ongeveer -10° tot ongeveer 50°C bij voorkeur ongeveer -5 tot ongeveer 5°C.

De hydroxyacetylcyclohexaanverbinding met formule 9, een van de uitgangsverbindingen die gebruikt wordt bij de werkwijze C 15 kan bereid worden door verhitten van de verbinding verkregen volgens werkwijze A en weergegeven door de formule 2" waarin de bovengenoemde betekenis bezit, in een waterige zwavelzuurop-lossing. Hoewel de verbindingen volgens de uitvinding cis en transisomeren omvatten, kunnen de verbindingen met de trans vorm 20 alleen verkregen worden door een verbinding met formule 11, te laten reageren met een natriumalcoholaat in een alcohol om de cis-vorm om te zetten in een trans-vorm met formule ,12, deze verbinding op gebruikelijke wijze te bromeren en de verkregen broomverbinding met formule 13 op gebruikelijke wijze te hydro-25 liseren, bij voorbeeld in mierenzuur. Op deze wijze wordt een·aeetyl-cyclohexaanverbinding met formule 9' verkregen. Deze werkwijze is schematisch weergegeven op het formuleblad in de vorm van het reactieschema omvattende de omzetting van een verbinding met formule 9 in een verbinding met formule 13, die op zijn beurt 30 weer omgezet wordt in de verbinding 12 welke overgaat in een verbinding met formule 9.

De verbinding volgens de uitvinding bereid volgens de 8202064 «· 8 — bovengenoemde werkwijzen A, B of C kan volgens gebruikelijke scheidingsmethoden geïsoleerd worden, zoals door kolomchromato-grafie, herkrisstalliseren of vacuumdestilleren.

De verbindingen volgens de uitvinding oefenen een remmende 5 werking uit op esterasen en op chymotripsine en bezitten een antilipemische werking zodat zij bruikbaar zijn als antilipemische middelen, ontstekingswerende middelen, en immuniteitregelende middelen. De onderhavige uitvinding omvat eveneens antilipemische samenstellingen die bovengenoemde nieuwe sulfonaatverbindingen 10 bevatten.

Hyperlipidemie staat bekend als een risicofactor-welke leidt tot verschillende ziekten van volwassenen zoals arterio-sclerose, cardio- en nefrovasculaire ziekten, diabetes en dergelijke. De geneesmiddelen voor het voorkomen of bestrijden van · 15 hyperlipidemie moeten een grote veiligheid bezitten daar deze geneesmiddelen gedurende langere tijd gebruikt worden in verband met de aard van de ziekte. Er zijn echter verschillende bijverschijnselen gerapporteerd van nicotinezuur en van nicotineverbin-dingen, van dextransulfaat en van clofibraat en van verbindingen 20 daarvan, die opgrote schaal gebruikt v/orden als antilipemische middelen. Nicotinezuur en zijn verbindingen geven namelijk neveneffecten zoals pluritis en huidkleuring ten gevolge van vasodila-tatie, gastrointestinale ziekten, abormaliteiten in de leverfunktie en glucoseintolerantie. Deze geneesmiddelen bezitten bovendien 25 vele neveneffecten aangezien zij toegediend moeten worden in grote doses van tenminste 3gram/dag.

Clofibraat, dat een typisch op grote schaal gebruikt anti-lipemisch middel is, bezit volgens recente onderzoekingen een carcinogene werking als ernstig neveneffect. Hoewel dierproeven 30 of immunulogische onderzoekingen uitgevoerd worden door onderzoekinstituten, zodat uiteindelijke conclusies nog getrokken moeten worden, is clofibraat in verschillende landen Idinisch slechts in 8202064 ι ε « - 9 - bepaalde mate toegelaten. Naast de carcinogene werking veroorzaakt clofibraat een verhoogde sterolenafvoer, die de waarschijnlijkheid van galsteenvorming verhoogt. Dientengevolge schijnt dit geneesmiddel derhalve ook nog een ander neveneffect te bezitten.

5 De antilipemische samenstellingen volgens de uitvinding zijn gekenmerkt doordat zij een betere antilipemische werking bezitten ten opzichte van nicotiriezuur en de verbindingen daarvan, ten opzichte van dextransulfaat en van clofibraat en verbindingen . en kunnen daarvan, zeer lage giftigheid bezitten 'veilig gebruikt/ worden 10 voor een zeer groot aantal toepassingen en een grotere veiligheid waarborgen dan de bekende antilipemische stoffen.

De sulfonaatverbindingen volgens de uitvinding kunnen geformuleerd worden tot farmaceutische preparaten die geschikt zijn voor verschillende wijzen van toediening. Voorbeelden van 15 dergelijke preparaten zijn tabletten, capsules, korreltjes, poeders en vloeistoffen voor orale toediening, en suppositoria voor niet-orale toediening.

Voorbeelden van geschikte excipienten voor het bereiden van tabletten, capsules, korreltjes en poeders zijn lactose, sucrose, 20 zetmeel, talc, magnesiumstearaat, kristallijncellulose, methyl-cellulose, carboxymethylcellulose, clycerine, natriumalginaat en Arabische gom. Bindmiddelen, zoals polyvinylalcohol, polyvinyl-ether, ethylcellulose, Arabische gom, schellak en sucrose, glazuur-middelen, zoals magnesiumstearaat en talc, en gebruikelijke kleur-25 stoffen en desintegratiemiddelen zijn ook geschikt voor dergelijke preparaten. Tabletten kunnen volgens op zichzelf bekende wijze bekleed worden. Geschikte vloeibare preparaten zijn waterige of olieachtige suspensies, oplossingen, siropen, elixers en dergelijke. Dergelijke preparaten kunnen bereid worden volgens gebruikelijke 30 werkwijzen.

Voorbeelden van geschikte basismaterialen voor het bereiden van suppositoria zijn cacaoboter, polyethyleenglycol, lanoline, 8202064 - 10 - vetzuur triglyceriden, witepsol (vet, handelsmerk van Dynamit Nobel A.G. Bondsrepubliek Duitsland) en dergelijke.

De hoeveelheid van de geneesmiddelen volgens de uitvinding kan niet specifiek omschreven worden doch varieert met de symptomen, lichaamsgewicht, leeftijd en dergelijke van de patient. Gewoonlijk wordt het werkzame bestanddeel van dergelijke geneesmiddelen toegediend in een hoeveelheid van ongeveer 50 tot ongeveer 1500 mg/dag voor volwassenen in één keer of in twee tot vier gedeelde doses. De eenheidsdosis zoals een tablet of capsule bevat bij voorkeur ongeveer 10 tot ongeveer 1500 mg van het werkzame bestanddeel.

In tabel 2 zijn typische diazoketonverbindingen met formule 2 weergegeven die geschikt zijn voor het bereiden van de verbindingen volgens de uitvinding. Tabel 3 beschrijft typische chloor-methylketonverbindingen met formule 4' die dezelfde wijze bruikbaar zijn. Tabel 4 toont typische hydroxyacetylcyclohexaanver-bindingen met formule 9. Tabellen c - (1) -(2) tonen typische voorbeelden van sulfonaatverbindingen volgens de uitvinding met de formule 1 van het formuleblad. In de tabellen staat "MS" voor het resultaat van massaspectrometrie (M ) en "H-NMR" voor het resultaat van kernmagnetische resonantieabsorptiespectroscopie {S dpm waarde) bepaald in CDCl^.

8202064 5 * - Π - Ζ < m σ ο cn >οφ< cr η η· σ* 3 Η· ο. 3

Η· CL

3 Η· ΙΩ 3 CQ £Λ ι I I I -+» ο ο — ο ο η—η ο—ο I ο NJ1· ΜΙ F N? ΜΙΓ η JF I I 3 Q—Q W Νί= tof sT & co ι I ro to O Q X x =E * x x ^ co co ο ο ο ο Ο φ T1 i (_« l—i I—* t-* H· *< μ. μ. μ· H* H' (Q 1/1 in Ο (0 Φ Φ Φ H»

Q Q Q Q Q 3 M

o o O O a . tn o

-r· 3* zr ΙΖΓ O

Η· Η- H* «+ ί J ^

μ. μ. μ. Η· Η' Q

(Q (Π (Q tÜ IQ Τ3 _j

Q

U" φ --n Η* , —ι νλ —I 2 co Ο 'O Ο \0 +‘ 10 1x3 ο CO -fa» CO -f»- ^ N3CJJ totoui IO Ui tO IO Ui —» IO Ol x

• · ··· · · ··· ··· I

—»IO _i CO tO UI —1 O ui N5 00 CN IO X

0 o o So o co o o o (Jicoto 3

Pen P · · VI « o· » · · « O

O' CN -1 O ui" · -J'· O' fO" P

01 oi ui co cn o men σ —k en —* “f w Λ Λ 3 "Γ X H1 3 eb 3 3 η· * w ^erw g 3 —' r ^ - 3 H *" - ** w --H» ^ « —» io —» —» —* vj - —1 rf co* co X re x -t _ a3 Γ' X to X '---— — co 3 Oj Q.

Λ _1 -Ό Η- X 3 ~ s s s ^ s- o V—✓ 8202064 - 12 - <_ M IC ο -π ζ < Ο 0 • 3 Ο" Η* 3

CL

Η* 3 <Ω ' ' ' ό ' 1 n ο > ND ΙΕ Η-

ΓΟ 3 I

i ^—* η· 4^ ο -pk· -Ρ* ·Ν

f-j I i-1· I I I

Q O C/i O O O

3 IE I IE IE ju

M \ v \ ND / \ NO

td o o o ο ο ο i

< I I 4 1 I IE _i.IE Q ✓O

O ¢3 CO 300 to CO CO CO JL N3

Hj v_^> CO

3 co O O O O 0 “Π 0». i—* l·-· r-> i—1 H* *< I μ. μ. μ· Η· CO C/) CO (D iD Φ <5 0 H· Q Q Q Q 3 Crt

. O O O O W O

ül 3* 3- 3- 3-0 3· r+ r+ ·+ <+ 3* 0

v. Η· Η· H· Q

(Q CQ CQ O "O1 Q CT 0 H4 —i _> —> ND -4

vQ Ό CO O CO H co ND

4s. -f*. O CO O + < 0 <

O

1-·

UD

0 N3 Ol O ND ND Ol ND ND Ui Μ N3 UI ND ND CTl ' ·«· t · < ··· * · · .·. |

CO CO ND CO —i O CO ND -N ND O ND Q CO ND H

(JlCDs-N- (JiCJiO—> O CO CO OOO p ip O

II II III II II ^D

o /-.o ND^ ONDUD O O ND ^ ·(/) Q· · « · · ’· · · !A **ifl ' '

a. ND·' 'O CO- NI ND ND N O' NO' O

- CN WO O O —‘ OO OO O

~ 3i 2 1 g'c· w=Ta"w 3 era. 3 3-^ 3 3 —' co ^ ^ ^ ^ V-/ —a *

_I _1 —1" -» —> ND —* ND

IE O IE -f* IC NIH CO a ^ W IE'-' IE 3 —' IE—' a—' o* a _» -a re 3 ^ s

Q

a o 8202064 - 13 - z 3 r ~ ? if * ^

T

H* 3 Q.

H* 3

CQ

1 .

I I I I >

=T

φ. —‘ Φ* -—> ' ' -f* r+ | O I Η* 1 O 1

hj 0-0 H· O—O H Q H· O

q ie ie w a: s o 3 CO O co O 3 ND N3

wn:<ö:wo<Q

ND o ND JL o >ΖΠ\. 70

< o h o < g o Q

o IE 3 IC 0003 _1_ 3:

Hl CO ' CO H .J. ^ CD CO

3 3 co CO

H

Q

Ö" ffl o £ ° 2. ^ :o N. μ. l h* ca w m Q EO CD CD H* <

Q O “ Q 3 « O

—7· -r* -Γ O Ij <

μ. r|- H- 3- CD O

C. μ. Η· Q Η* (Q to CO -π CQ^ ND ND ND NO C? ^ o o o Q on 00 00 CO OD ^_+

ND Ui ND ND Ui O ND en O ND ND CH IC

, > . . . ... ..... I

co ND —» Os CO CO CO ND 00 O W CO 5 01 Φ Φ-OCO SO CO VI UlfsOsisD 3 I II 1 II 70 O O ND 0.0^ „ • in · · w " * co CL · · cn -CT-

Os ·* Os CO" Ni" - O ND" O

O CDlO Os O OO σ

—* —1 ~ —j Os —1 O

x-s-r χ "-'•-"IE IE —"·—" IE Η·1

3 w 30-w 3w sx3 ü·"' CO

_J _» _» —t ND —» —"· sO CO X CO JL IE _

X IC —' I

. 'w'" -—· " EL

-o 3 <· ·— a a

Hl

O

CD

8202064 - 14 - -o o ζ < o o • 4 cr H· 3

CL

H· 3

IQ

i I i >

=T

•N o -N

I H· i O W O 70

<->. NO

0 < o

Z O X

CO H CO

w 3 ^ CO co o* ro -η cr

μ. ·-< O

cq w 01 co o !-*·

XJ NO 3 W NO

• · WO

O! Ol 0 3-^ I i =r <d < ai co o o

co co το H

• <

Ol o cb v-'

NO NO " ' Z

0 o z ao co co + O NO ai O NO NO ai z • I · · · · « |

CO CO NO CO NO C3\ CO Z

-N NO Ol NO CO -N CN z 1 ïii το

O

»—·. · M · · W

W CN W ' CN -Ν’" O

- O' ai o o "O —> o Ό '—" —* Z ^ *·""* Z i—1 X 3 X W3CTW .co W' '—» ' ' ' '—' _1 NO —1 O XX ^ X —*'—' „ v—» "· "· O, ·*

CL

TO

3 £ a

Q

H

CL

(D

8202064 - 15 - z < < .j. |j. Η· η· O ra ra

< Η· H· * 4 H

η. er cr l-i. H* 3 3

CL CL

Η* H* 3 3

tü CQ

3 i i i i ra Q Q O —O I + no no χ o > x> i o—o ui x Jf o X X NO 3 I q co i i | 0) -ï* 4»

f ^ X X P

O I M

X o /S X Λ O Q CO pi X x G3— co co \ o ' _1 _l —4 —4 —4 3 O .

O OO —» —» O 3 λ Τ’* o, po co so CO » zei 8- - - S3- ‘® *> co

NO —* NO NO X, X

O 00 O —* +C0 ro co no cn —'

NO NO NO NO -f^· ΝΟΝΟ-?:** —1 NO -N X

··· i i · ·»* ♦«· I

,S0 O —» CO CN O NO CO O 5 J X

O O CO OüiOi O NO O Ui O X

II 1 II II

O fO--> I N3^ O NO »—* O NO ^ • •tfl 0*cn * · a> · * a> O' N O' · co ^ Nico' cn ui- p o ui Ni ui ui ui o ui σ

_ o no G

3 CT -i> >_q ^ 3 3 3 3 s-f CO

Z ^ 3 -. » ^ »—' * ^ —» " NO —» NO —* Cf

Os _» χ üi I 00 _i_ ^ IC—* CO— Xw _l ^ ^3 wX X" _

•w *_✓ ï-L

, -O

3

X

Q

Ω

H

Q.

O

8202064 - 16 - CL O' XT Ω < zz ο oh < » cr o

Η· H

3 CT

ο. η· H· 3 3 a.

a H· 3

/-N ^ «"“‘s CQ

<-+ 1 Η· I ri* j <”ί* 1 HO Η O—Ο Η Ο Η O 3 q^-> QirzcQir on: _ o 30 3 CO O 3 NO 3^ 70 H-

» v tn m ω Ο «Ο NO

co no zz i _ -+5 < — < O < ^ < GO 0

O CO O 3100 H

H HCOH.IC H NO 3 3 3 3 CO 3 NO b Ό 7Γ Crt —* Ό3

Cs —i Cs Η- Ό N1 Ul Os.

i I CO '—* •'“s

Cs —* Ol I O O

Ul NO I Φ*· Ο O —i • co o \ '— a

Ul 3 S Cs 3 λ J

3 NO * 3 0 O

I ui -+>;- 3Γ CO C3 (Q t£2 . £- o -a -n| ui N co cr

NO Ul CO O H

• · · · Θ

Os O VJ NO 3

(O

w ri- m

“ O NO Μ -N 3: O ZÖO

• · · (D

—» cs CO 0“ 3 o Os o Q (0

—> N II _.NJ —. Ni HO

—1 No ONO'-'-s —* NO O —* CD H- • · · · q. · · · · rr* a _1 Cs N ω- —> CN Ό "s] ΦΗ·

CO CO Ο O CO CO -NO 3 H

NO CL

— -, “f· 3 cr •ώ’ £> - - > 3

Q

—* —> CO r-1 CO 3 · ·< —: ---* cq « _» %4 W» Cs —» VJ _J *sj <0 ffl -» NO —* NO O — < _ • -—·. · · · · 0 0 ^ Ul H-CO-N. Ό Ul 3 ·+> ui -n. - o "si no —> a.

ro :z.

-Λ 3 2 ZZ 70 8202064 X < - 17 - en -N CO N3 -.00 er H· 3 <

Cl O H· l-j 3 er CQ H· -r 4*. -fc>- 5 “lil - g- o o . o „ er

m2 S or -1- S

ijT “ er 3

W1 (D

1 1 i 1 +

O—O I o -O O — O O —O I

^x O X X oF O COX o co“ O £ o

W NT " S lof -of Nf $ I

1 M. 1 1 X l· —1 Q er -r — X IC XPo ra _L — -1* N3 r-1

Ol O 7Γ o co o oi en h* "u < -. fo i—* o —1 ch h* —* ij! r H· I 1 O ^ Φ co o en 01 3 ~ Q CO Q -* N3 “ -f o 9- 2.£ï.

•5· ZT ~

—3. i-f“ Q

η. Η· *v3 O

ώ u2 -h en H*

Cfl o_ o

CO CO CO CO CO X X

co o. en co no +0?

co co ·> eo -N

o ό nj o v} NI N j-j CO NI CO —1 -N 5 ... · * fl> en 00 en O co ^

Cfl ¢4- s 8202064 .-18- < "Z. cd

ο Ό CO S| CN O H

• O" H·

CS

Ω.

H· 4^ 4s. -N ·Ν 3

II I I CQ

O O X O O

0 X O O

X co Ni. X ^ CO X CO 70 en —» i-*

i i ii i J

0 O O 0—0 O-O -4- X X X Ni X Ni X >

Ni Ni Ni X O XO^-p

O-O O O —O UI X UI X 3 I

X _u _i. _i_ X Ni Ni .^s.

co I CO I I I ^ ^

•H

X X X XX π Q

Ni CT

CD l·-·

Ui CD 7\

O O O H· -o I

t—‘ 1— l—· CQ -+

Ül Η· F· 4N H· O · >"N

(si (Ώ CD Nï CD 3 —· 1 Q Q I Ω Cfl Λ -----

Ut O O 4*· 2. O O

co cr 3· co cr ΖΓ O <

r+ <+ <+ Ω --- CD

Η· .F· F· T3 4 CQ (Q CQ O <

-h O

1--

-h CQ

vï

Cfl F· ω o co co CO CO CO CO X*

CJ1 CO Ni CO CN

CO 4^ Ni CO + o* s_-» c/) o T5 er

SI S| S| CN sj H

O ό —* 'O CO CD

• · · * * Ü3

NJ ai CO O! O CQ

(A

Hr

/“S

s 8202064 - 19 - -> -> v -. z: o'

Os Ui -£> CO ,NJ ~‘ .° ö~ H· 3 Q.

H* 3

tQ

I I I Φ» **. f*· _ O Q o ^ -f O το O f,— ^ ht Cn O —1 = 2= ω 4, ^ o-

Ul ” -1-

CO

i i I

ii i i nol Q g kP-S m°“x nF n? > to^ ro zz T zn i o — o o γ jr x ψ ^ ,

H

O

cr ro i—

Ul

fff f 73 I

0 ό O o x xro ^ co1· G?“ ci3" co ei· « 7\ Η·-σ < cn >+ <0 O * 5 o o o cr > £ l·- Μ ® ~ ° su· Η· H* O · co © © © Γί 2.3 0 « KJ o Q 9 01 ,n 1 i O O 2. <8 o CO 4*. 3* =£ -i 5 i ”** . jT. Η* H* © cn tQ ta <Q S-'? α i -a coco co co co co X 12

iU CO ui os Os +,W

4*. Λ. NO NJ Os -°

O

“3

Xj XJ O CN ^ H" so -N VI co υΟ o g • . · * © CO N) co CO ui ta cn <+

/^N

'w/ 8202064 - 20 - γό rohoroNJ—»—»—» < .tk CO ND —» O Ό CO (0 Z H o cr * H· 3

CL

H· 3

(Q

4s» ND -?* χ I Z Z ” I -P* ^"· o Oi O 1 70 O I O O ZC -» N> O ND Z ^ X M Z CO ιοί Ol I I I I I 4^ 0 o o o o > I II x x x x x Ύ ,

ND ND ND ΙΟ ND 31 H

1 111 I /'x Q

er 0 01

^ I

04*. 4^ 4* ND ND ND ND ^ H· I II I II 1 I 70 ^ w O OOOOOOOND-— X ND ND z z z z -z ^ < ^ \ x Z co co co co .

o O O Ol en O O < H Z Z Z Z '2

g CO CO CO CO H

---- - N

o Φ 3 r— !-*·<+ tn CO · —' o o o o o ra

.£*, Ol i— 4^ I— i— i— I— 3 O

fO CO Η· ΟΙ Η· Η* Μ* Μ· (Λ -b

| I (D · O CD (D (DO

X OIO Ol O O 0 Q3“-h CO 'CO O I OO O OQ^< . zr -?*· -- 3* er 3-ΌΜ

OlH* 0\ r+ Η· Η* <+ H· ρ. Η· Η· Η* H* Crt (O (Q CQ IQ IQ o_ ra co CO CO CO CO CO CO O ^

|\3 en—> CO *N| Ol ND + CO

4il 4^0 CO CO-N ’ o

O

oo "s! '"•I Cs C\ N '"J cr co —» SQ OlMD ND 'sj 1-j • ·♦·***♦ φ CO CO NI (Jl CO Ol CO -rk 3

(Q

(Λ <+ s 8202064 - 21 - ίΌ Μ Ν> Ν3 ^ “ < nq zo vnJ Ο Οι Ο Ο •Η CΓ Η* b Γ) Η* 3 <Ω ίΟ S3 . .

» ·* 4s» •Ν -f» * L. Λ

Os Ο Ο ο 2 73 I I ΙΌ Ν) -* Ο Q J--C ι_ι χ χ cn ui γ-· co co I ι I I I > Λ QO «ο no wo α ο 2.

3~ χ α χ _i_3_l ι-* jn 3 / 's. < ,^ν* ω ν.

ο ο οη ο «ο ο ο ο ο ο ο <3 ^ < χ χ η χ χ XXH_uX<-i.-U , ο g CO 3CO CO <CO CO 3CO co oco co. ι H w o ^ g

3 n 3 CT

<

(D

< — ° ^N I—1 o to (0 <+ · H* · os è CO .VI & § rt°

rj\ · O —1 CO 3 O

1 ΟΙ I 1 1 <Λ w O' I CO V4 -¾ o

Nl -* Μ O

(Jl Q “h . Ό

Ol ^ tn H·

W

' O

3- ffl

CO CO CO CO CO -X

O' CN O' O' ΙΌ 2

OS os CO CO .fa. + CO

O

NJ SO O' vj Nl CT

co οι ό co vj — n . . . · · (0 O cji cn O co 3 co in ·+ 8202064 - 22 - z: < o m

co co co co co * H

co NO —* O cr ij.

3 Q.

H· 3

IQ

m x ic x x Jp I-* II I I I > 4^. <-+ »—s .£*· ·+ -?»

O I H I O 14 1 O I

π· o o o—o h· o—O α o h· o «^Ν32ζχωχ3 3 π: w .pc _ 0 WCO O CO O « NO . M 70 < zl x< zc „ o < Q M_j O CO < N> O Ni < ÖC o JX —i i-j w o OH O O H y' \ g_ 3 CO Η . X 3 X HO O 3 0 O 0" w 3 CO ··—' CO 3 3 3 3 ® ^ / v—-CO co co co ^ cn i o zc ^ Η* Ό —» NO NO CQ H· ^

CO Η- Ό ζ * X

• H* * -p* *-v 13 ;jj cji ro en MD <> ï O, 2 1 a i i i no N O CO -N· CO “ o 5 Ό 3- O Ό ^ w £, • <+ · 73 tr

Ui H· Ui O CO

IQ *+> -h

N

w H· ίΛ n 3· Φ co OJ 00 co co 3 3

00 co co O O

o

"U

NJ N CN N N ^ σόι NO CO N ^ w m

O O UI UI ° IQ

(Λ H· 8202064 - 23 - < ζ Φ CO CO CO CO O >1

co XJ Cs Ol · CT

3 Q.

H' 3 (0 4*· 4* 4» i 1 1 __ c O O O z 73 z ze „ze -* co co co , ί—^ II I I > —I 0 cr

(D

Η1 H-" r+4^-—s4i. rf"h .

Η I Hl O I HI I

Ω O — O O O H-O QO 70 3 -r “ 3 en 3 ·—' lO -^s tn CO O w O Q wO —‘ X ZE < X o- < NO <co o co <co o OO's-'H'-' o — .

Η 2Z H CO 3 CO HCO < 3 CO 3 ^ 3, ® WW < - o H*

<0 7K IQ

Η· Ό _t cb π· -N. CO —> XJ Φ NO sO Ul CO 3 '~'s

I « | I U> O

Cn —» XI o O

co i —» £*· -f ^

so Cs Q

O Ό O

-h -h < 0) H* m o 3"

(O

CO CO CO CO O _ CJÏ Ui <Ji co 2 2 NO NO NO 00 ^+C0 o 13

XI XI Os XI C? U

CO CO XI ‘CO ^¾. H

. · · · w O

O o ui CJ1 3 ω ft* 8202064 - 24 - < o

CN Ul >. CO ND —» X H

o cr • H· 3

Cl h“ 3

IQ

ND -N N| N) CO ND -N* NI ND ·> N| ND -N> NJ ND CO

··« · ♦ · · * * t « f * * * ♦

CO Ol CO CO o Ό (JI CO MD Ui CO -S Ui NJ MD O

ND CO 4n OOI ND CO —» ND CN —» -S MD CO O O X

I lil I 1 I , 1 ND ND N| ND ND ND SJ g • ca Cl · · · (a Cl · <a Cl ca ca Cl · -S l*.

4^C0 CN ' ' CN ' ' ' ' ' CN O 70

ND O Ol O . O ND

ND ND ND ND ND ND CO ND ND O'

IC _j_ -—^ IXI -t- -j- X _i_ CS 3 O

g Gw 3 3 3 -3 3 ' O

^ ^ K| -» «H ^1 ^ ^ ^ Ί «,«%«* «I (j «4 (Jl |*^

_i co CN —* Οι —1 Φ- CN —* CO CN —» ND NI X X CO

cc·· zz ze m·· zn** ··· ·—*'—" —-CO Ό ——- ——* mD '— CO MD CO Ό co ' '

'COCO ' ' ' ON ' CO N O Ul O

I I —1 -N* ' ' _i —i ^v —> '' '' · O ND ·" · · · • GO Q_ ·· · -Ω CL · CA CL · · CL CO CN 0-t

CO' ' MD Ol CO' ' CO' ' N| CN' O —* H

Ui O CO O CJi CJi O I G- g_

I co ND I I ND ND I CO ND ND O'-' Tj CT

0 3- ZZ 0 313- O I I * ,» 3 9 • —y · Ü> · ^ ' · L'L' 3 ^ Ni' r—1 CN' ' CN' SI' ' NJ' ' ' ' ' O <- 01 O O O ND Q (Oi

ND —* —* _l Q

/—\ -—v ^ <—v -—s CN _l 3 ^ Η I

3 3 ^ 3 3 X'--' ' ^ £- <« ^ Ή ^ *» Nw/ CD **^s —» w NÏ f « _i Os s-/ CO CO Ό Os ZZ * ^-333 w X O X O X o n }-* cr cd CN CN CN ra 3

N|_» NICO NlfO H (D

• · ·· » * (D 3 CN MD N|CO -N- MD " H- CN CO CO . Os 4S· © 0

O. H

II I §

CN CN CN üD Q

Nj_i NICO NJ CO 0 !- .« ·· · · < vj

Μ Ol ND MD Ui O OM

ND CO —i -N- Ul -S 3 Φ Q.

ra 3 3 8202064 - 25 - <

Zl o NO co N Z H.

. H· 3

CL

H· 3

CD

Ni 4l. NI o ro ΦνΝ OND-^-NJ ND CO fO^N! . . | . · « · ···« ·· ' * ' _

On 4^. CO CO O 4s· CO N] On -£ CO On O CO Ui CO

U1C01S3 —i 00 O"! —* —i Ui -Pn —1 UI O O Ol -Pn I

I 1 I lil ér

Ni NO N| Κ)·^-7Ν =¾

• « CL CL * W CL CL · M CL · ·· * M

Ni ·· - - fO - - - ND - - ΓΟ CO Φ* - ' _ O ND O ON w ς tO CO NN 8 ?i3 3g-33 BTBB TT bBB o ,,, - - - - - ' ' ' f-1

CO

Ni ND CO NOtONlfOOl-i-^ON w

IiNON X · Os X· · J-5, 3 ‘mln "ΟΌ "ΟΌ - CO - - - CO CO ^· 44. co co _ o.

Ni ^-n NO -~n.--n N3 44. r.

• ndcal-n · v> a. * * )5-° ö- -2" ~*X! o. · - CL -e' ' 3* £r 9" ' 3 h ' om' Pmm P" óroto Ü §.

OMM i,;a ?3i .°" ^33 3 ®

On35 . - w co- - N|- O- - Q *- °1" ' g ° °fo ^ cL en ^ ° — ^X 3 ® .

3 , 3 3 w - w 1 - 3 - - - ro “Γ^ _* _i ro 00 —> t\D CJI X ^ IC ND X X w <· ~ 3 ^ w o ' < o H*

tQ

• X o x o - m

CT H-(0 CD

O, On H 3

NJ o "-J N) O O

CO NO co O g

no nq -4 o 5 S

i > * - t\

Q

CD 3 CD Ω

On On < I—1

NI —4 N! Ni O K

• · · · o w

44. CO 'O no D. O

O On CO CO O ^ -¾¾ 8202064 - 26 - < ra ' —4 —t «i 'jXL '™ï vj Cs cji -Jl. CO ND O O" * H ’ 3 Q.

W

3 (3

0 MN nd 4*. xl ND -N XJ ND 4=* X| Μ -N N O M tN O

1 t > ··* · · · · · · » · · · · · ·

co -S» '-0 (ji 4^ “O 4^ -N> CO ΟΜΠ Ό N Οι Ό XI Cn Os Ό X

OOC0 O M Ui 04^0 y>UiUi O j· O —> Ui 00 —> ND -~s XI Μ -N Μ ND -X XI NJ --s^s 3 q_·· » co · * (Λ CL· ··· ».· Q, · co co 7Ό ' ND CO KJ' XJ INS'· - ND 4^ CN ND 4X CN ' —»- ' 4*. Oi -» ISO O O O Ui CO O O _ Ui O'

CO NO ND ND U 0;M O

□r^s^-s -'-'IE''·'' ^ X X ^-n^-s^~s o_ Ό -3- ~L· 2

—* 3 3 -O '-'O 3 '—* s—’ 3^+-3 -3H-3 s~> 3 O

«« *, «***«« * *** ^ ***·*· «·»·** ^ ^ ^ ,-—4 —| _i co Ω ND Ol ND -X ND ND ND XI X ND ND —*> ND ND ND ND 4^ —' O" ii x· x, 3 · ·ω ^->xx, 333 3 ίο‘co m » «. ' ·» Cs' '4s».CO - - · - ' ' Ό Ό ·" · CL· vl ND-JL·. ND ^ N ND-^s'^s -j -N N —‘ ND XI ND •'"'s·"^

• · »4D· «MO.··· ·· -» · !/l Μ O, I

ND Cn —»- O —> ' ' ΌΟ—* Ό-Ν--Ν· —4' " 33 ND—itJiCOOi O CN O O ND ND O 3 -f'

I | ND ! ICOND I I I I, I CO ND ND

o ^ OXCN O X X O '—s Cs O^-sN o X X < '—'

. c/l · s—^ · · —/ w . J] i » Ui · · s—s> Q

O' CO' CO XI' ' Os' CO CN' —> Ό' ' Q

o OCOtOl (Jiocnso o 2 < ND ND OD O-ra

^s nr /—v λ—s .—s «—·. ;x -—s s x ·—s -—-s ra H

3 ^ 3 -O 3 3 —· 3 3 3 3 ^ < «*·,«** ^ ·* »* ^» ** ·* ^ ** ^ o

_* _I ND —» ND ND —» ND —* (O

o csx co =; 31 S s Eg

X X —' X _L· — X'-' X

s-_y ' SV s^> ' sv ' s—<· ' m cr H* ra ra μ 3 x o x o 2. 2 Λ 3 Ο r+ CN Os 3 0 XI o XI ND , , . a. £· CO Ό Λ Λ

vQ Ό Cs -X CO O

ra 3 < o O :— 3 '<

Os CN CL W

XJ —» XI co O O

• · · t 3 CO O -N ND c? UI Os CJ1 UI 0-¾ 8202064 < - 27 - ίο - ο ^ « Γ ί 3 Ο.

Η· 3 <ω MN3C0 ro-f^co ro-^-co ο μ -Ν ν ο Ν) ώ· Ν ··· *·· ··· ··*· ···· ^ ΟΝΟ CJi (J! —» NDOO 00 4^ ΟΟ C0 -Ν "si -X.

ο Ο Ο ϋι Ο Ο 0030 ON3O1C0 ΟΟ^-Ν I

ι ι ι ι - ι ι ι 1 1 3 o Ν3 -ΝΙ ΙΟ Ν1 Ο — — — ΙΟ —— ΙΟ—— 3.

, · · 4 » · W CL Ω_ · Μ · Ω. · W Ω_ 30 0 10 03 ΙΟ* 4=- Ό- - " (O'* CN - ΙΟ" " Ο Ο ΟΙ C0CJ1CQ <31 ΪΟ CO ϋΐ ,Λ "Ο* ΙΟ ΓΟ —» 03 ΙΟ (Ο ΓΟ ΓΟ Ο

— — — — — — XX X —3·^ R

3 σ- 3 XI —3 3 '3 Π -η». - « - - - ' ' ' ' Οι ΓΟ <31 —1 ΙΟ -Ν ΓΟ Μ ΓΟ Ν ' JSK X X 01 X Ο ΓΟ Μ X * -X I * .

ή- 3 Ο Ο-- -X X · · wO'-' —Χ ΙΟ Η ο·? -4 -4 - -Χ-ΟΙΟΙ 'co- - <31 Ό Ο _» - ο ο ο» tr -J -Ν ΙΟ X ι ΙΟ-ΝΙ ίο — — „ (0 -Γ . --- ΟίΟ— · X! · ·ίΛΩ_ Ο.!-· ο· ο ο- · · α. ίο- ο ίο- - Έ - ΙΟ ο COCO- ΙΟ ΙΟ ο 3 οι I ίο ο 1 ΓΟ I I ωΐο _ ^—s Ο ΓΟ —1 _ι_ ΟΝ 1 X -1- (Λ · —."Γ · —' » · —'ν—' Ω

4. rv Ο. 3 '—' Ο- C0 Ο- - Q

ο - - - ο <31 ο Η ΓΟ γο to 9- w

X — 03 _J_ C' ΟΧ "X

—' 3 Χ^ 3 3 < Φ _» —> ΓΟ -J Η NJ 03 X Ο < -γ χ —' X ο “Ο C3 - w Η-* - - <Ω X Ο ρη σ* μ <13 <0 Η 3 ο 2_ 2 Ό 03 m 2- • · <0 <τ 2 § 1. Η.

« ' ' ' (Ω 3 Ο Ω < Η-1 CN Ο <

Ό 03 3 W

. . α. ro Ώ <31 2 WN 3 £ %«✓ 8202064 » - 28 - < o ND ND ND ND ND X 'Ί

NJ CN Οι Φ* OD Ο CT

. η* 3 Ο.

)-· 3 ια ND -Ν XJ ND Φ» Ν Ο ND OD Ο ND CO ND -Ν- Ν ··· ··· »·· ··· ♦·· n ο Ui CO CO UI CO OD CN —» CO CO —* NJUlCO i

—»0001 CN Ό On UI -N- O ND ND O Ol Ό ND X

I I I I I I I X

NJ ^—·ν ND ^ ND NJ ·—> ND NJ ND ' ' ^ ^0 • mü. · 0 Cl Cl * Cl · · * to Cl ND' - Ol" - " ND Ol " Ol Ol CO" " CO 00 O O OD O O C'

_» ND —1 ND CN CN ND ND O

'-"Zen '-'XX X'-'CT' Χχ-χ CiH 3

Cj· o“ N-/ v-> 'w/ er 3 ^ CF 3 CT ^ ^ O

-***«* ·* -» HJ "· j—i

• CO

-_i φ* Os —» φ* On —» Ol -» Ü1 ' -N On —' X. · 3 e» to 33 33 *_» to " —» nq » —i Ό "" "" I O 00

ND *—'.'-n. ND--'^ ND -N ND 4n " --n.'-v ^ Q

< H Q. · Xi α ·· ** -QQ. er

O"" _»- - o on —» On ND"" Q. O

0 O O CO O. Ol · ‘ζ1— 1 ND ND 1 ND ND 1 1 2 ££ ND 3 OXX OXX O'-" o-" O X X oi • '---< V__' * N_/ ---* % (J) * ü> 1 '—* Si sq » -» Ό' - nO" nq ' O" " Ü 1

Ol -Φ* Φ>- * Q

ND ND NI h

^ --«v v-N X --"X O O. ND

3 3 3w3w a —

^ <« ^ «i ^ ^ /*N NV

_ _ "3 < o o o o 2 XX X X 5 NV W ^ N| < «* * X o NV {—*

CQ

• ICO xo xo ΧΠ xo o CN On Ον On ΓΠ

VJ _» NJ —» NJ ND NJ ND njo CTH

·· * · · * ·· * * (D CO

CN NO CN nO Jnno Φ». Ό COO Η 3

CN CO On CO CN Φ*. OnJN Ό Ό Ο CD

"Γ 3 Ο <+

3 Q

Ο. Η· Η α (Ω 3

ΟΝ Ον Ον On CN CD Q

XJ _» NJ__» NJ ND NJ fvj nj —» <*-» . . .· ·· ·· O N< CN CO NJnO U N Ol NJ CO O 3«

Ol-N. NJ ND Ό CO —» CN ND—» CL O

ra 3 8202064 < - 29 - /*.> rj CO ΓΟ N3 ~2L Φ no “ o ό co o g.

H· 3 O.

H· 3

tQ

kj CO O M CO O M CO O Μ M O O NO M Os · ··· «»· ··*· · * * *

00 _* CO CN —* CO CO —* CO CO θ' Ό co CO CO 'O

S o ^ cv O CO O O UilSO^O NO—‘COCO Zf.

1 I II it * Λ L· NON ^ NO N NO N i~ • · CL** £L · · CLCnCflW L t/l · a

Ol -N- - NO -P*· " en -P» ' - ' " ' ' $N- ^ CO -P». CO NO OOI CO ^

Os O* CN CO On NO On CO NO

— ~ m—— π:--'·-' zexinx Ιΐςΐ er .. -r -or - - - - - - - - σ o _> en _i en —* en NO NO -P- NO —; -P*· ,]-* -r-r ~r ~£ rem ..· · m · co oei o-i Ü o o» en —* ^ en ^ ^ ** * .ρ* -P* L Cr — On

I I I

NO -pv NO -P*. NO -P* OM^ OM'-' ^ , ,, .. .. » · w · » en “1 —j θ'» O On O On OCO' N On ' 04 g_

007 o-Pn ocn wom u,^ ^ J

o — o— cc - o-^m -σ I- • in · m · c/> 3 0^ ^ 3 w ^ 3

On - On- NO- - - ' ' ' ' „ 01 O -pN en _ £? .

NO NO NO —^ —1 —* £N S

~m -—m er = Q m om g Λ

3 w 3 ^ = .. w- w- CL NO

- - CD 'w' _» —> NO ^ co no m >.

5 3“ S

2

O

j—J

(Ώ • mo mo mo 0:0 mo m

CN On On On CN O* M

*s| co NCO NCO CO en co en 00 ·* *· * * · · * ’ ÏJ 3

Nco Nco Nco Noen no en ra_ o

Sao 4^ co -p* co en -p*. en -P' ^ 3 (O rr 3 Q CL H·

H

O

(Q 3 (o a

On CN On On On < H*

coco N -Pn NCO CO en coenON

«» , . * · »· ·· 3 en

O On no NO OCO CO -P* NO N O- O

en co NO co no -P*. co O O o 8202064 < - 30 - CO CO CO CO CO CO (!) co N On Ul 4a CO ÜZ 'Ί o cr • H· □ Q_ H* 3

(Q

N3-NS1 O NO 4a N O NO 4a N O M CO O M 00 NO 00 «·» I * · · * · · · ··· #»· · ·

CnCnCO CO CN Ui CO N 4a CN CO CO CN O N CO O CN _»

nOOCJI 4a CO Ό NO nOCJiNONO 4». 4a OO nO CN OO CO O IE

I I II I I I I I

N3 *—n ' ' NO ^ ^ »-—n ·.—n /—v ^ ' » NO N * \ NO N NO N X

♦«O- {rt»»Q.t»WMQ. <n · · « · · ·· ls.

iO> » -> NO ^ - NO Ol - CN 4a NO 4a OO

CO CO NO CO O -fa CO O Ul MM Ό N3M OWNJI Ό NO O' — xx x —3ix iii^ ς"ς" Ω cr '»— n/uw·^ —' —<->—- w σ 3 Nxcr 3 3 3 2 *» ·* ** ^ o sg f—*

_j m \1 _»N0N ΝΟΝΟ· — Ui —»U) —* Cn CO

ZH · » X · · · · OO 31 IE 31 X 31 X

— 4a CO w 4a CO NO CO Ui —n---—

— N OO ' O On 4a 4a -- - - - - H

I I — — Q

NO —» Μ^λ O NO CL NO -fa NO 4a» NO 4a. Cf

• cn cl · μ Q. · · - ·· ·· ·· »>(D

0 ** -* _j *» CN On O On CO On —a On H·1 CO O O O N) 4^ CO O On O CO O- 1 COM I UNO X I i I -O <31 OXX O X X O'-- O'— O'— 3

• w> v-/v> 3 σ’- · in · (Λ · ω I

-J - - CN - - - - CN- N - N- C

CO O O OO O o —

Ό —1 NO NO NO Q NO

'-n ^ xx ·— x —x ^ ^ 3 3 ^— 3 -— 3 w 3 ^ Q.

», * » -» * »» "» n - (D

—' <

__1 \Q Ό NO —* <D

co x x x 29 2 ^ N_X Ν' N--' _j_ <

». ^ - w O

1—*

(Q

• O xo xo xo xo m Π* l·-*

On On On CN On (0 (!) 4a CO 4a. CO -fa NCO NCO H 3 • ·· · # ·* ·· <D (0 N ON ON NCO N 03 “ 3 4^ —i 4a —» 4a. 4a 00 4a CO 0<-i- 3 Q CL H·

I H

Q

ΙΩ 3 (!) O < !-*

On On CN On On O *< 4a CO UI CO 4a COCO COCO 3(0 • ·· ·· * * * · CL w CO NO—» O Ό CO On O CN (0

On NOO Ό On Ul4a CO CN 3 — 8202064 - 31 -

De in de tabellen 2 tot 4 genoemde verbindingen worden bereid volgens de volgende bereidingen.

Bereiding 1.

Men bereidt uit 10 gram N-methyl-nitrosoureum 100 ml. van h h 5 een diazometaan ether oplossing die 2,8 gram diazometaan bevat.

Onder af koelen met ijs wordt 3,0 gram <x.-methyl-j2>~cyclohexylpropionyl chloride druppelsgewijs aan de etheroplossing toegevoegd, waarna men het mengsel 30 minuten roert en de overmaat diazometaan uit het reactiemengsel verwijdert door daor het mengsel bij kamertemperatuur 10 stikstofgas te leiden. Het mengsel wordt afgedestilleerd in vacuum, waarbij men kwantitatief 1-diazo~3-methyl-4-cyclohexyl-2-butanon (verbinding A) in de vorm van een lichtgele olie verkrijgt.

Bereiding 2.

De verbindingen B tot H worden bereid op dezelfde wijze 15 als in bereiding 1.

Bereiding 3.

25 Gram 4-isopropylbenzoezuur wordt gehydrogeneerd in azijnzuur in aanwezigheid van 1,0 gram platinaoxyde van het Adams type bij kamertemperatuur en 100 atmosfeer waarbij men 23,0 gram 20 4-isopropylcyclohexanon-1-carbonzuur verkrijgt met een kookpunt bij 131 tot 134°C bij een druk van 1mm kwikdruk (opbrengst; 88.8$). (H-NMR analyse toont dat de cis-vorm en de trans vorm aanwezig zijn in een hoeveelheid van ongeveer 3:1).

23 Gram 4-isopropyl-cyclohexaan-l-carbonzuur wordt behandeld 25 met thyonylchloride waarbij men 23,0 gram 4-isopropyl-cyclohexanon-1-carbonylchloride verkrijgt met een kookpunt van 140 tot 142°C bij 45 mm kwikdruk, opbrengst 90,1 %.

6,0 Gram 4-isopropylcyclohexanon-1-carbonvl chloride laat men reageren met een overmaat diazometaan waarbij men kwantitatief 30 1-diazo-2-(4-isopropylcyclohexyi)-2-ethanon verkrijgt.

Het 1-diazo-2-(4-isopropylcyclohexyl)-2-ethanon (mengsel van cis-en trans vorm in een verhouding van 3:1) wordt afgescheiden 8202064 -32- en gezuiverd door silica gel kolom chromatografie (ontwikkel oplosmiddel : chloroform) waarbij men 3,5 gram cis-1-diazo-2-(4-isopropylcyclohexyl)-2-ethanon (verbinding 1) verkrijgt in de vorm van een lichtgele olie als eerste fractie en vervolgens 1,2 5 gram trans-l-diazo-2-(4-isopropylcyclohexyl)-2-ethancn (verbinding J).

Bereiding 4.

Verbindingen K tot P, zoals vermeld in tabel b, worden bereid op dezelfde wijze als volgens bereiding 3.

10 Bereiding 5.

15 Gram l-diazo-3-ethyl-4-cyclohexyl-2-butanon (verbinding B) wordt opgelost in 200 ml ether, waarna men de oplossing een overmaat droog chloorwaterstofgas laat absorberen onder afkoelen met ijs en roeren tot ontwikkeling van stikstof stopt. Het reactiemengsel 15 wordt gewassen met water, de etherlaag gedroogd boven watervrij natriumsulfaat. De gedroogde laag wordt gedestilleerd in vacuum ter verwijdering van het oplosmiddel. Men destilleert het residu in vacuum, waarbij men 15,5 gram 1-chloor-3-ethyl-4-cyclohexyl-2-butanon (verbinding 1) verkrijgt met een kookpunt van 103°C/1 mm 20 kwikdruk (opbrengst: 92,8%).

Bereiding 6.

Verbindingen ii tot iv weergegeven in tabel c worden bereid op dezelfde wijze als volgens bereiding 5.

Bereiding 7.

25 12 Gram cis-trans mengsel van l-acetyl-4-isopropylcyclohexaan en natrium methylaat in een hoeveelheid equimolair ten opzichte van het mengsel verhit men 6 uren onder roeren in 150 ml ethanol.

Het reactiemengsel wordt in vacuo gedestilleerd ter verwijdering van het oplosmiddel, aan het residu 50 ml water toegevoegd en de 30 verkregen oplossing onderwerpt men driemaal aan een extractie met 50 ml ether. Het extract wordt gewassen met water, gedroogd boven watervrij natriumsulfaat en vervolgens in vacuum gedestilleerd ter 8202064 -33- verwijdering van het oplosmiddel. Het residu wordt gedestilleerd in vacuum waarbij men 9 gram trans-1-acetyl-4-isopropylcyclohexaan verkrijgt met een kookpunt van 109 tot 113°C bij 18 tot 19 mm kwikdruk.

5 8 Gram verbinding lost men op in 130 ml methanol. Aan de oplossing wordt in één keer 8 gram broom toegevoegd en het mengsel 4 uur geroerd. Het reactiemengsel wordt geneutraliseerd met natrium waterstofcarbonaat en vervolgens gedestilleerd in vacuum ter verwijdering van het oplosmiddel. Ma toevoegen van 30 ml water wordt 10 het residu driemaal geextraheerd met 100 ml ether. Het extract wordt gewassen met water, gedroogd boven watervrij natriumsulfaat en vervolgens in vacuo gedestilleerd ter verwijdering van het oplosmiddel. Het residu wordt gedestilleerd in vacuum, waarbij men 8,5 gram trans-1-(broomacetyl)-4-isopropylcyclohexaan met een 15 kookpunt van 113 tot 115°C bij 2mm kwikdruk verkrijgt.

In 60 ml methanol lost men 4,5 gram kaliumhydroxyde op, voegt aan deze oplossing 6,6 gram ethylformiaat toe onder afkoelen met ijs, en verhit het mengsel 2 uren onder roeren waarna men vervolgens weer afkoelt. De volgens de bovengenoemde reactie ver-20 kregen 10 gram trans-l-(broomacetyl)-4-isopropylcyclohexaan wordt aan het mengsel toegevoegd en het verkregen mengsel tien uren verhit onder roeren. Het oplosmiddel wordt uit het reactiemengsel afgedestilleerd in vacuo, water aan het residu toegevoegd en de oplossing tweemaal geextraheerd met 100 ml ether. Het extract wordt 25 gedroogd boven watervrij natriumsulfaat vervolgens gedestilleerd in vacuo ter verwijdering van het oplosmiddel, en het verkregen residu herkristalliseerd uit petroleumether, waarbij men 6 gram trans-1-(hydroxyacetyl)-4-isopropylcyclohexaan (verbinding, a) met een'smeltpunt van 43 tot 44°C verkrijgt.

30 Bereiding 8.

De verbindingen _b, £ en jd als vermeld in tabel d worden Ct op dezelfde wijze bereid als in bereiding 7.

8202064 - 34 -

Voorbeeld IX

2 Gram 1-diazo-3-methyl-4-cyclohexyl-2-butanon worden opgelost in 50 ml ether, 2,1 gram benzeensulfonzuur monohydraat langzaam aan de-oplossing bij kamertemperatuur toegevoegd, en het 5 mengsel geroerd tot de ontwikkeling van stikstof stopt. Na de reactie wordt de etherlaag gewassen met water, gedroogd boven watervrij natriumsulfaat en gedestilleerd in vacuo ter verijdering van het oplosmiddel. Het verkregen olieachtige product wordt afgescheiden en gezuiverd door kolonvtihromatografie (silica gel, 10 ontwikkelvloeistof: chloroform), waarbij men 2,5 gram 1-benzeen-sulfonyloxy-4-cyclohexyl-3-methyl-2-butanon (verbinding 1) met smeltpunt van 51 tot 52°C (opbrengst: 74,8%) verkrijgt.

Voorbeeld II

Verbindingen 2 tot 4 en 6 worden bereid op dezelfde wijze 15 als in voorbeeld 1.

Voorbeeld III

2,0 Gram 1-diazo-4-cyclohexyl-2-pentanon (verbinding C) wordt opgelost in 50 ml dioxan, aan de oplossing bij kamertemperatuur langzaam 2,3 gram p-methoxybenzeensulfonzuur toegevoegd, en 20 het mengsel geroerd tot de ontwikkeling van stikstof stopt. Het reactiemengsel wordt in vacuo gedestilleerd ter verwijdering van het oplosmiddel, en het residu geextraheerd met 50 ml ether. Het extract wordt gewassen met water, gedroogd boven watervrij natriumsulfaat en vervolgens gedestilleerd in vacuo ter verwijdering van 25 het oplosmiddel. Het verkregen olieachtige product onderwerpt men aan silica gel kolom chromatografie (ontwikkelvloeistof:chloroform) voor de scheiding en zuivering 'waarbij men 2,8 gram 4-cyclohexyl-l-(4-methoxybenzeensulfonyloxy)-2-pentanon (verbinding 10) met een smeltpunt van 52 tot 53°C (opbrengst: 76,7%) verkrijgt.

30 Voorbeeld IV

De verbindingen Π tot 14 worden bereid op de zelfde wijze als in voorbeeld 3.

8202064 t - 35 -

Voorbeeld V.

1,8 Gram 1-diazo-3-(2-methylcyclohexyl)-2-propanon (verbinding F) wordt opgelost in 50 ml tetrahydrofuran, en aan de oplossing wordt langzaam bij kamertemperatuur 2,1 gram benzeensulfon-5 zuur monohydraat toegevoegd, en het mengsel geroerd tot de ontwikkeling van stikstof stopt. Dezelfde werkwijze als in voorbeeld III wordt hierna herhaald ter verkrijging van 2,4 gram 1-benzeen-sulfonyloxy-3-(2-methylcyclohexyl)~2-propanon (verbinding 17) in de vorm van een kleurloze transparante olie (opbrengst: 77,4%).

10 Voorbeeld VX

De verbindingen 18 tot 23 worden bereid op dezelfde wijze als in voorbeeld V.

VoorbeeldVII

2 Gram 1-chloor-3-ethyl-4-cyclohexyl-2-butanon (verbinding 15 1) wordt opgelost in 50 ml aceton, aan de oplossing 1,7 gram natriumiodide toegevoegd en het mengsel 5 uren bij kamertemperatuur geroerd. Na de reactie worden de onoplosbare stoffen afgefiltreerd, het filtraat in vacuo gedestilleerd en het olieachtige produkt opgelost in 50 ml ether. De oplossing wordt gewassen met 20 een waterige hyposulfietoplossing, gedroogd boven watervrij natrium-sulfaat en vervolgens gedestilleerd in vacuo ter verwijdering van het oplosmiddel. Het verkregen olieachtige residu wordt opgelost in 50 ml acetonitril, 2,8 gram zilverbenzeensulfonaat aan de oplossing toegevoegd, en het mengsel 12 uren bij kamertemperatuur 25 geroerd. Het reactiemengsel wordt gefiltreerd om de onoplosbare stoffen te verwijderen, het filtraat geconcentreerd in vacuum, en het concentraat onderworpen aan een extractie met 100 ml chloroform. Het extract wordt gewassen met water, gedroogd boven watervrij natriumsulfaat en vervolgens gedestilleerd in vacuo ter verwijdering 30 van het oplosmiddel. Het verkregen olieachtige product worden onderworpen aan silica^gelxkolom chromatografie (ontwikkelvloeistof: chloroform) voor de scheiding en zuivering waarbij men 2,3 gram 1-benzeensulfonyloxy-4-cyciohexyl-3-ethyl-2-butanon (verbinding 5) 8202064 ί - 36 - in de vorm van een kleurloze transparante olie (opbrengst: 73,5%) verkrijgt*

Voorbee ld VIII

De verbindingen 7 tot 9 worden op dezelfde wijze bereid 5 als in voorbeeld VII«

Voorbeeld IX* 1,8 Gram 1-chloor-3-(4-methyi~cyclohexyi)-2-propanon (verbinding iii) wordt opgelost in 50 ml aceton, aan de oplossing bij kamertemperatuur 1,45 gram natriumiodide toegevoegd en het 10 mengsel 6 uren bij kamertemperatuur geroerd. Vervolgens wordt 2,9 gram zilver p-tolueensulfonaat aan het mengsel toegevoegd en het verkregen mengsel 24 uren bij kamertemperatuur geroerd.

Het reactiemengsel wordt. gefiltreerdisr verwijdering van onoplosbare stoffen, het filtraat geconcentreerd in vacuo en het 15 verkregen olieachtige product onderworpen aan silica gel kolom chromatografie (ontwikkelvloeistof: chloroform) voor de scheiding en zuivering waarbij men 2,3 gram 1-(4-methylcyclohexyl)-3-(p-tolueensulfonyloxy)-2-propanon (verbinding 15) met een smeltpunt van 42 tot 43,5°C (opbrengst; 7A,2%) verkrijgt.

20 Voorbeeld X.

Verbinding 16 wordt bereid op dezelfde wijze als in voorbeeld 9.

Voorbeeld XI.

0,5 Gram trans-diazo-2-(4-isopropylcyclohexyl)-2~eihanon 25 (verbinding J) wordt opgelost in 30 ml ether, aan de oplossing een overmaat benzeensulfonzuur toegevoegd en het mengsel geroerd tot de ontwikkeling van stikstof stopt. Het reactiemengsel wordt gewassen met water, gedroogd boven watervrij natriumsulfaat en vervolgens gedestilleerd in vacuum ter verwijdering van het oplos-30 middel. Het residu wordt onderworpen aan kolom chromatografie (ontwikkelvloeistof: chloroform) waarbij men 0,65 gram trans-2-(benzeensulfonyloxy)-1-(4-isopropylcyclohexyl)-1-ethanon (verbinding 8202064 - 37 - 25) met een smeltpunt van 48 tot 49°C (opbrengst: 77,8%) verkrijgt.

Voorbeeld XII

De verbindingen 24 en 26 tot 38 worden op dezelfde wijze bereid als in voorbeeld Π.

5 Voorbeeld XIII

1,1 Gram trans-1-(hydroxyacetyl)-4-isopropylcyclohexaan (verbinding a) en 1,1 gram benzeensulfonylchloride worden opgelost in 1,5 ml watervrij dichloorethaan, 1 ml triethylamine druppelsgewijs aan de oplossing toegevoegd bij een temperatuur tot 5°C 10 onder afkoelen met ijs, en het mengsel vervolgens 2 uren geroerd bij een temperatuur tot 5°C. Het mengsel wordt uitgegoten in een ijs-zoutzuurmengsel en het verkregen mengsel geextraheerd met 50 ml chloroform. Het extract wordt gewassen met water, gedroogd boven watervrij natriumsulfaat en vervolgens gedestilleerd in 15 vacuo ter verwijdering van het oplosmiddel. Het verkregen olieachti-ge product wordt herkristalliseerd uit petroleumether en de kristallen herkristalliseerd uit ethanol waarbij men 1,5 gram trans-2-(benzeensulfonyloxy)-1-(4-isopropylcyciohexyl)-1-ethanon (verbinding 25) verkrijgt met een smelpunt van 48 tot 49°C (op-20 brengst: 81$),

Voorbeeld XII

De verbindingen 27, 29, 31, 33, 35, .37 en 38 worden bereid op dezelfde wijze als in voorbeeld XIII.

Verbindingen volgens de uitvinding worden onderzocht 25 op farmacologische werking volgens de volgende methoden.

- 1. Esterase remmende werking.

10 micromol methyl butyraat in een 50$ ethanol oplossing wordt als substraat toegevoegd aan een bepaalde hoeveelheid buffer oplossing (pH 8,0) die 0,1 mol triszoutzuur bevat. Aan het mengsel 30 voegt men nog een 50$ ethanoloplossing volgens de uitvinding toe, onmiddellijk gevolgd door de toevoeging van een esteraseoplossing bereid uit een gezuiverde microsomen fractie van de lever van een 8202064 - 38 - rat (ingesteld om 9 micromol methylbu+yraat in 1 uur bij 37°C te hydrolyseren). Het mengsel laat men 60 minuten bij 37°C reageren.

Ma de reactie, wordt aan het mengsel alkalihydroxylamine toegevoegd ter vorming van een hydroxcmzuurverbinding van methyl-5 butyraat, en aan de verbinding een ferri zout toegevoegd. De verkregen rode kleur wordt colorimetrisch bepaald (bij een golflengte van 540 nm) ter bepaling van de hoeveelheid resterend methy.lbuty-raat. De esterase remmende werkingen van de onderhavige verbinding bij tenminste drie concentraties worden uitgezet als ordinaat 10 en de logarithmen van de concentraties als abcis ter verkrijging van een lijn die de 50$ remmende concentratie (IC,.q) geeft.

- 2. Chymotrypsine remmende werking.

Chymotrypsine (0,1 eenheid) dat dienst doet als een enzym-oplossing wordt toegevoegd aan een bepaalde hoeveelheid buffer-15 oplossing (pH 8,0) welke 0,1 mol tris-zoutzuur bevat. Aan het mengsel voegt men een 50$ ethanoloplossing toe van een verbinding volgens de uitvinding. Het mengsel laat men 20 minuten bij 37°C reageren.

Na beëindiging van de reactie, wordt aan het mengsel 10 20 micromol N-acetyl-L-thyrosine (ATEE^dat dienst doet als substraat^ toegevoegd en het verkregen mengsel laat men 30 minuten bij 37°C reageren.

Na beëindiging van de reactie wordt de hoeveelheid resterend ATEE bepaald volgens dezelfde hydroxamzuur*· methode als hierboven 25 beschreven. Het percentage chymotrypsineremming wordt weergegeven door percentage remming = ^ ~ x 100 waarin A de hoeveelheid gehydrolyseerde esters in een geen verbinding volgens de uitvinding bevattend reactiesysteem is, en 30 B de hoeveelheid gehydrolyseerde esters in het reactiesysteem dat verbinding volgens de uitvinding bevat.

8202064 - 39 - -3. Antilipemisch effect.

Zeven weken oude mannelijke Wister-ratten met een gewicht van 200 tot 220 gram worden gebruikt, met in elke groep vijf ratten.

5 De verbinding volgens de uitvinding (ICO mg.) wordt opge lost in 5 ml. olijfolie.

De, de verbinding volgens de uitvinding bevattende, olijfolie wordt oraal toegediend aan de rat in een hoeveelheid van 5 ml/kg. Twee uren daarna, wordt 6 ml. volledig bloed onttrokken 10 aan de neerdalende aorta van de rat onder anesthesie met ether met een injectienaald welke heparine bevat. Het bloed wordt gecentrifugeerd bij 5°C en 3000 omwentelingen per minuut ter verkrijging van een plasma. Het verzamelde plasma wordt gebruikt voor het bepalen van het triglyceride gehalte, onder toepassing van een tri-15 glyceridebepalings-samenstel (handelsmerk MTriglyceride-B Proef

Wako" product van Wako Junyako Co. Ltd., Japan). Olijfolie dat geen verbinding volgens de uitvinding bevat wordt op dezelfde wijze toegediend aan een controle-groep, terwijl bovendien een normale groep aan geen behandeling werd onderworpen. De hoeveelheid tri-20 glyceriden in het plasma wordt ook voor deze groepen bepaald op dezelfde wijze als bij de onderzochte groepen.

Het percentage hyperlipedemieremming verkregen met een verbinding volgens de uitvinding wordt weergegeven door de vergelijking 25 percentage remming = - x 100 waarin A het triglyceridegehalte van de controlegroep is, B het triglyceridegehalte van de normale groep en C het triglyceridegehalte van de groep die een verbinding volgens de uitvinding ontving.

- 4. Acute giftigheid.

30 Zes weken oude mannelijke Wister-ratten van 180 tot 200 gram worden gebruikt, met vijf ratten per groep. De verbinding volgens de uitvinding wordt gesuspendeerd in een 5^-waterige oplos- 8202064 - 40 - sing van Arabische gom, en de suspensie wordt oraal toegediend aan ratten. Gedurende 1 week na het begin van de proef, worden de ratten elke dag onderzocht op algemene toxiciteitssyndromen, lichaamsgewicht en dood ter bepaling van de LD,.q waarde.

5 De proefresultaten zijn weergegeven in tabel 6 waarin TG

de triglyceride remming aangeeft.

8202064 Γ - 41 - < « _1 _1 __i -1 2 >U^-*OOC0NOOl>UW-J g- g.

• Η· 3 Q.

Η· 3

CQ

ΓΠ ΙΟ X %

O O β- N ω > o 8 I 4V ω -px Xi O - co O ro in NS oo 'Ί O co ω ^ Q

co 3

O M 1—1 O w cn O

H

O

CΓ

^ O CD

—» t-j 3· H* CD *< X 3 3 Os •Sktniss—‘Nscoco—» i —> 'sj Ό Λ 3? 3 o * OO-t^OhO—»—*ω NS CO CO VS O ^ 4 ilQ *< -N- *0 ^ « 3 -¾¾. Η· O---3 1—1 (0 > 3 H CO <+

col cjCN^^jvjxicnOTOiOscnqs Q^'C

—I Ooooco—‘Nsonsosoo M £

-—· O "O

^¾. r+ (0 ^ 3 H* en o 3* VVVVVVvVVVVVVV ^ H. o”

CONSCOCOCONSCOCOCONSCOCOtsSNS

rsooOOOOOQOOOOO (Q + 7

08 880000000000 Vj, H. CO

80000000000 0 00 λ ια — <0 Η· α.

8202064 - 42 - < o hONDNjrOhororOMNJ-J-?--·-*-4 'Z. 2_ 'OCOS|(>Ol>-UN3-'OCONCKai oer • H· 3

CL

H· 3

(Q

m

—» M

o—»N3—»00—‘OCNU1C0OO1—» X <+

##*····*······ CD

—»fN3000VI4^fO0-i=».-i^00-N —‘ H

CO On CO O Q

Ui N3 I <n CN <0

3 I—I

O o t—’ en ^ o <+

'-N o Q

-* 3- CT

l-i ·< (D

X Φ 3 H- ! I CO —‘On —* ΓΟ CJl vO Ui '''J Ό CO \θ 30 Üi^MON^CO^NfON-1^ -j3H- On O Η* H · 3 *< ICQ Ό i*· Crt < 3 . η· <0

O H

3—· —- CD <

—' O

l·-· (O

> Φ 3 H ·+) H* O -h H· i I MUiOOvOnOiNM I >4—*03 MOt—* osOOONOO·^ ro -* en oh·

n r+ XJ

Φ W 3 H· £/>

O

3· V V V V V V VVvVVVVV Λ H· o"

COCOQUtOtOOMUtOMMUN) 3 -h C

oooooooooogooo ω h- w* oooooooogoggoo \ h· <d OOOOOOOOOOOOOO CQ_ —' o H·

CL

8202064 - 43 - <

(O

4 ω Q.u q co a u ω \J CN UI CO fO —‘O OH· • 3 CL H· 3

IQ

m (Λ 4-

00 X <D

Cn On 4^- -f^ O O -1 H

*··#*·♦· —* Q

4s. O On On —» Ui On O O « N ON I o ,

On H

M n 3 0 cr o ai o

MO M

W On

^ O T

—» 4 3* (0

O "< H

X 3 3 <

N3 I I —* —» Φ·· CO 3 O O

N> -N 'O CO CO O -e H· 4· M

. ^ 0 3 4 (O

1 IQ n< ' 4b. T5 «—n Crt 3 VS. H· O w 3 M <5 > 3 (D 4· M -h H·

O -h M

OsOISIUiNOnNJO, Η ®H· ΟνΝΟΓΟΝΟΟν—*NOXl 0-0

4* (O

^ 3 V3. H·

^ W

O 3 . » - (O > V v V v v V V V -o· 4-0 COCJCOOOCOCOCOCO 3 μ c O O O O O O O O t0 4-4- o O O o O O O O >4-0 00003 0 00 ^ IQ.

'— ro H· Q.

8202064 - 44 -

Voorbeelden voor de bereiding van preparaten volgens de uitvinding worden hierna vermeld.

Preparaat voorbeeld 1.

De volgende samenstelling wordt opgenomen in zachte capsules 5 in een hoeveelheid van 500 mg per capsule.

verbinding 25 250 mg.

olijfolie 250 mg.

Preparaat voorbeeld 2.

De volgende samenstelling wordt opgenomen op dezelfde 10 wijze als hierboven in zachte capsules in een hoeveelheid van 500 mg per capsule.

verbinding 8 250 mg.

olijfolie 250 mg.

Preparaat voorbeeld 3.

15 Tabletten die elk 406 mg wegen, worden bereid uit de volgende samenstelling.

verbinding 7 100 mg.

zacht siliciumzuur anhydride 80 mg, kristallijn cellulose 140 mg.

20 lactose 80 mg.

tal k 2 mg.

magnesium stearaat 4 mg.

Preparaat voorbeeld 4.

Tabletten, die elk 406 mg wegen, worden bereid uit de 25 volgende samenstelling op dezelfde wijze als hierboven.

verbinding 37 100 mg.

zacht siliciumzuur anhydride 80 mg.

kristallijn cellulose 140 mg.

lactose 80 mg.

30 talk 2 mg.

magnesium stearaat 4 mg.

8202064 - 45 -

Preparaat voorbeeld 5.

Suppositoria die elk 2000 mg wegen, worden bereid uit de volgende samenstelling, verbinding 33 1000 mg.

5 V'itepsol lv-35 (handelsmerk) 1000 mg.

Preparaat voorbeeld 6.

Suppositoria die elk 2000 mg wegen, worden bereid uit de volgende samenstelling op dezelfde wijze als hierboven.

verbinding 31 1000 mg.

10 Witepsol W-35 1000 mg.

Preparaat voorbeeld 7.

Korreltjes opgenomen in een hoeveelheid van 1000 mg met een omhulling worden bereid uit de volgende samenstelling, verbinding 27 200 mg.

15 · zacht siliciumzuur anhydride 170 mg.

kristallijn cellulose 350 mg.

lactose 270 mg.

magnesium stearaat 10 mg.

Preparaat voorbeeld 8.

20 Korreltjes opgesloten in een hoeveelheid van 1000 mg. in een omhulling worden bereid uit de volgende samenstelling op dezelfde wijze als hierboven.

verbinding 36 200 mg.

zacht siliciumzuur anhydride 170 mg.

25 kristallijn cellulose 350 mg.

lactose 250 mg.

magnesium stearaat 10 mg.

Preparaat voorbeeld 9.

Een elixer in een hoeveelheid van 20 ml in een ampul 30 wordt bereid uit de volgende samenstelling.

verbinding 25 300 mg.

ethanol 0.5 mg.

82 0 2 0 6 4 - 46 - korrelvormige suiker HC0-60 2000 mg.

reukstoffen 0.01 ml.

gezuiverd water aanvullen tot 20 ml.

- conclusies - 8202064

Claims

1. Een sulfonaatverbinding met de formule 1 van het formuleblad waarin een lagere alkylgroep, lagere alkoxygroep of halogeen-atoom is, £· een geheel getal van 0 tot 3, n 0 of 1, A een rechte of vertakte alkyleengroep met 1 tot 4 koolstofatomen en R£ een 5 waterstofatoom of lagere alkylgroep doch, wanneer n gelijk is aan 0 of 1 en A een rechte alkyleengroep is met 1 tot 3 koolstofatomen geen waterstof.

2. Werkwijze voor de bereiding van een sulfonaatverbinding met de formule 1 van het formuleblad waarin een lagere alkylgroep, 10 lagere alkoxygroep of halogeenatoom is, t een geheel getal van 0 tcrt 3, n 0 of 1, A een rechte of vertakte alkyleengroep met 1 tot 4 koolstofatomen en R£ een waterstofatoom of lagere alkylgroep doch, wanneer n 0 of 1 is en A een rechte alkyleengroep met 1 tot 3 koolstofatomen geen waterstof voorstelt, met het kenmerk, 15 dat men een verbinding met formule 2, waarin η, A en R2 de bovengenoemde betekenis bezitten, laat reageren met een verbinding met formule 3 van het formuleblad, waarin en 1 de bovengenoemde betekenis bezitten en m 0,1 of 2 bedraagt.

3. Werkwijze voor de bereiding van een sulfonaatverbinding 20 met de formule 1 van het formuleblad waarin R^ een lagere alkylgroep, lagere alkoxygroep of halogeenatoom voorstelt ,1 een geheel getal van o tot 3, en n 0 of 1 bedraagt, A een rechte of vertakte alkyleengroep met 1 tot 4 koolstofatomen en ïb, een waterstofatoom of lagere alkylgroep doch, wanneer gelijk is aan 0 of 1 en A een 25 rechte alkyleengroep is met 1 tot 3 koolstofatomen, geen waterstof, met het kenmerk, dat men een verbinding met formule. 4 waarin X halogeen en η, A en de bovengenoemde betekenis bezitten, laat reageren met een verbinding met de formule 5 van het formuleblad, waarin en 1 de bovengenoemde betekenis bezitten.

4. Werkwijze voor de bereiding van een sulfonaatverbinding met de algemene formule 1 van het formuleblad waarin een lagere 8202064 - 48 - alkylgroep, lagere alkoxygroep of halogeenatoom is, Rg v/aterstof of lagere alkylgroep en 1 een geheel getal van 0 tot 3 voorstelt, met het kenmerk, dat men een verbinding met de formule 9 waarin de bovengenoemde betekenis bezit, laat reageren met 5 een verbinding met formule |0 waarin en ·£ de bovengenoemde betekenis bezitten.

5. Antilipemische samenstelling, bevattende sulfonaatver- binding met de algemene formule 1 van het formuleblad waarin een lagere alkylgroep, lagere alkoxygroep of halogeenatoom voor-10 stelt, £ een geheel getal is van 0 tot 3, n 0 of 1 bedraagt, A een rechte of vertakte alkyleengroep met 1 tot 4 koolstofatomen en Rg waterstof of lagere alkylgroep voorstelt doch, wanneer n gelijk is aan 0 of 1 en A een rechte alkyleengroep is met 1 tot 3 koolstofatomen geen waterstofatoom voorstelt. 8202064