NL8102016A - Isoftaalzuurpycolylamidemonohydraat, werkwijze voor de bereiding daarvan en pharmaceutische toepassing. - Google Patents

Description

+ v 4» VO 179^

Titel: Isoftaalzuurpycolylamidemonohydraat, werkwijze voor de ter ei ding daarvan en pharmaceutische toepassing.

De uitvinding heeft betrekking op een nieuw organisch molecule in de monohydraatkristalvorm met een -pEarmaceutische activiteit in het tegengaan van de aggregatie van bloedplaatj es, het tegenwerken van tromboembolische onregelmatigheden in het bloéd, feathet'.“Vertragen 5 van de bloedstolling. De uitvinding heeft ook betrekking op een werkwijze waarmee genoemde kristal 11 jne verbinding kan worden gesynthetiseerd.

Meer in het bijzonder heeft de uitvinding betrekking op N,tff-bis(3-picolyl)-^metho:£yisoft.aalamidemonohydraat, 'een werkwijze 10 voor de bereiding daarvan en op ^farmaceutische preparaten die genoemde verbinding bevatten.

Het is bekend dat N ,U'-bis-(3-picolyl )-H-methoxyisoftaalamide, hierna bij zijn internationale gebruikelijke naam "picotamide" genoemd, een verbinding is-met..een..hoge fibrinolytische en anticoagule-15 rende activiteit.(zie Frans octrooischrift 2.100.850; Chimie Therapeut iaue, 6, 203-7· 1971)s alsmede een goede activiteit als bloed-plaatjes antiaggregeringsmiddel. (zie Amerikaans octrooischrift 3.973.026; Age and Ageing, 7, 2U6, 1978).

Picotamide als beschreven in bovengenoemde publicaties en octrooi-20 schriften is bekend in de watervrije vorm en het smeltpunt ervan als beschreven in Frans octrooischrift 2.100.850 bedraagt1!2k°C met de Kofler bank.

Deze verbinding wordt afdein de bovenvermelde octrooischriffcen beschreven werkwijze gezuiverd uit het ruwe product, dat een groot 25 aantal verontreinigingen bevat, door kristalliseren uit watervrije en apolaire organische oplosmiddelen.

Kristallisatie van het ruwe picotamide als verkregen door de synthese-reactie uit watervrije en apolaire organische oplosmiddelen, zoals benzeen, resulteert in een poedervozmig-product dat onder een 30 microscoop, de eigenschappen van een„vèzelige stof vertoont zoals "voluminous dawn". Genoemd poeder neemt gemakkelijk electrostatische lading op en is betrekkelijk instabiel. Deze eigenschappen zijn bij- 81 0 2 0 1 6

i V

. η

V

- 2 - zonder nadelig vanneer de verbinding wordt bereid voor * farmaceutische toepassing. De geëlectrificeerde deeltjes stoten elkaar af en hebben de neiging te vervluchtigen wanneer ze worden afgewogen en in het toestel worden gebracht voor het bereiden van de verschillende ; fiarma-5 ceutische preparaten, wat resulteert in een wijziging van het deeltjes-gevieht waardoor de bewerkingen voor titerstabilisatie moeilijker worden.

Er is nu gevonden dat door laten reageren van een functioneel derivaat van ^-methoxy-isoftaalzuur met 3-picolylamine en het laten 10. uitkristalliseren van het ruwe product uit een waterige oplossing N,ÏT' -bis-( 3-picolyl)—^-methoxy-isoftaalamide monohydraat wordt verkregen dat een zodanige chemisch-fysische structuur en stabiliteit bezit dat het duidelijk verkiesbaar is boven het bekende watervrije picotamide.

15 Voorts is eveneens verrassendervijze gevonden dat het'aldus ver kregen picotamidemonohydraat actiever en doelmatiger is dan vatervrij picotamide zowel uit een farmacodynamisch oogpunt als in termen van klinische "‘farmacologie.

Het 'doel van de uitvinding is daarom N,N’-bis-(3-picolyl)-U- 20 methoxy-isoftaalamide (C.-H Hi 0_.Hn0 met molecuulgewicht 39^·^· 1ά go ^ j d

De formule ervan is vermeld op :het. formuleblad als formule 1.

Het picotamidemonohydraat volgens de uitvinding is een wit, reukloos bitter smakend kristallijn poeder dat stabiel is aan de lucht en gemakkelijk kristalliseerbaar is uit water met ..een smeltpunt van 25 95-97°C met de Kofler bank.

Kortheidshalve zal de verbinding in het vervolg worden aangeduid met de algemene naam picotamidemonohydraat.

De verbinding volgens de uitvinding verschilt in fysisch chemisch opzicht van de tot dusver welbekende verbinding door een onvoorspel-30 bare en duidelijke verbetering van stabiliteit. Deze verbetering is een gevolg van het feit dat het molecule hydratatiewater · in de mole-cuulstructuür van de verbinding is opgenomen en wel in het kristal-rooster op een goed omschreven plaats waarin het zuurstofatoom van het hydratatiewater duidelijk identificeerbare waterstofbindingen met 35 speciale atomen behorendtot verschillende picotamidemoleouien:. vestigt zoals nader zal worden getoond, onder vorming van een enkel kristal 8102016 - 3 - 4 · van de verbinding met vel omschreven eigenschappen. Deze eigenschappen beïnvloeden op een niet voorspelbare wijze het farmaceutisch gedrag van de nieuwe verbinding en zijn biologische beschikbaarheid in zoogdieren met een snellere absorptie wanneer toegediend aan genoemde klasse van 5 dieren, waaronder de mens.

Het picotamidemonohydraat in de nieuwe kristallijne vorm volgens de uitvinding vermijdt niet slechts op verrassenderwijze de bovenvermelde nadelen van vatervrij picotamide, doch het verschaft op nog -verrassenderwijze een actievere en meer doelmatige verbinding in termen 10 van farmacologisch,nut met het oog op de waargenomen effecten bij-.de toediening aan dieren en menselijke organismen.

Ofschoon tot dusver nog geen goed gefundeerde theoretische verklaring van genoemd experimenteel resultaat kan worden gegeven kan worden aangenomen dat een oplossing in water van de kristallijne verbinding 15 volgens de uitvinding een verschillend mechanisme volgt met betrekking tot een oplossing in water van de bekende watervrije verbinding in de amorfe vorm.

Een verder doel van de uitvinding is een werkwijze voor het bereiden van het nieuwe gehydrateerde molecule.

20 Toorts is een doel van de uitvinding het verschaffen van farma ceutische preparaten die het nieuwe monohydraatmolecule bevatten in de verschillende aanvaardbare farmaceutische vormen, als een actief middel voor de klinische behandeling vantfaromboembolische aandoeningen van het bloed.

25 Als eerder vermeld bedraagt het smeltpunt van het picotamide monohydraat 95-91°0.

In dit verband wordt opgemerkt dat vatervrij picotamide daarentegen een smeltpunt van 12k°C heeft. Dit verschil van de smeltpunten van beide genoemde stoffen is reeds een aanwijzing van verschillende 30 moleculaire structuur wat op een wezenlijk verschil tussen vatervrij picotamide en picotamidemonohydraat wijst.

De uitvinding zal thans nader worden beschreven onder verwijzing naar de tekening waarin: fig. 1 een tridimensionale afbeelding is van picotaraidemono-35 hydraatmolecule, als verkregen uit een rontgenstraalspectrum; 8102016 -1+- ψ t fig* 2 een tridimensionale afbeelding is van het monokristal van picotajnidemonohydraat; fig. 3 in groter. detail hetzelfde monokristal van fig. 2 toont en; 5 fig. U een diagramris dat een rechtstreekse vergelijking geeft van de bloedplaatjes antiaggregeringsactiviteit van picotamidemono-hydraat en vatervrij picotamide.

De structuur van een picotamidemonohydraatkristal wordt behalve door de physische en chemische analyse ook gekenmerkt door het röntgen-10 spectrum van zijn monokristal.

De gegevens van het rontgendiffractiespectrum. die de ruimtelijke positie van de atoomcentra tonen in het nieuwe molecuul in zijn geheel genomen als een dicht ^istabiel en niet-hygróscopisch kristal zijn opge-somd in onderstaande tabel A, waarin de verschillende atomen van het 15 molecuul zijn aangegeven door een chemisch symbool gevolgd door een identificeringsnummer. De ruimtelijke plaatsing en het identificerings-nummer van genoemde atomen kan worden waargenomen in fig. 1, dat de geometrische tridimensionale positie van de atoomcentra afbeeldt als verkregen uit tabel A.

8102016

Ruimtelijke coördinaten van picotamidemonohydraat (X-stralen) » -* - 5 -

TABEL A

Maximum =92.52 Minimum = -86.27 Vermenigvuldigd met 167.8829

Projectie^'-*.Atoom Hoogte X/A X'/B Z/C S.O.F. Mole- u cule vatie nummer 1 08 .1895 .6286 .83861 1.0000 1 1.26 2 C38 .I96T .7283 .8919 1.00001 1 .27 3 ci .2670 .5071+ .3663 1.0000 1 .82

Ij. C3 .20^7 .1+937 .6312 1.0000 1 1.60 5 C5 .2299 .1+539 .1+720 1.0000 1 1.½ 6 c6 .29^ .1+562 .20U0 1.0000 1 .75 <7 0j .2161+ .590^· .6832 1.0000 1 1.11 8 C9 .1627 .31+32 .6819 1.0000 1 2.75 9 C10 .2795 .6035 .1+219 1.0000 1 -35 10 H11 .1385 .1+61+2 .8821+ 1.0000 1 2.1+3 11 012 .281+7 t-3716 .1698 1.0000 1 1.24 12 C13 .1665 .1+277 « .73U7 1.0000 1 2.31 13 C1I4. .251+7 .61+1+2 .5815 1.0000 1 .51 1¾ C15 .3600 .1+59^ -.0529 1.0000 1 -11 15 H19 .3326 .5077 .1101 1.0000 1 .21 16 C22 .1082 .3996 1.0097 1.0000 1 3.28 17 027 · .3771 .7056 .11+61 1.0000 0 0.00 18 C221 .1+250 .1+199 .0573 1.0000 1 I.3I+ •jo ΪΓ222 -.0616 .3513 .9680 1.0000 1 2.34 20 C223 .51+22 .3I+76 .2266 1.0000 1 3-1+3 21 N22U .5202 .3510 .0056 1.0000 1 2.31+ 22 C227 .0381+ .3880 .9075 1 .0000 1 2.1+7 23 0228 .0001+ .3683 1.01+98 1.0000 1 2.96 2l+ C229 .I+606 .3861+ -.0822 1.0000 1 I.28 25 C231 -.0875 .357I+ .7563 1.0000 1 1.23 26 C232 .0127 .3932 .6853 1.0000 1 1.33 2T C231+ .1+1+83 .1+11+6 .2819 1-0000 1 2.1+7 28 0235 -.0519 -3732 .60I+2 1.0000 1 .72 29 021+1+ .5071 .3758 .3636 1.0000 1 3.53 30 Q 1 96. .0376 .3935 .5361 1.0000 1 .88 31 Q 2 92. .5361+ .3978 .31+76 1.0000 1 3-1+8 32 Q 3 81+. .2173 .381+7 .1+186 1.0000 1 1-70 33 Q 1+ 81+. .3392 .3922 -.0552 1.0000 1 .51 3^ q 5 83. .3201+ .6259 -3130 1.0000 1 0.00 8102016 - 6 -

Bindingen (waaronder symmetrisch gerelateerde atomen) t1_ 2 .1.IA 3- 5 .1.U0 V 5 1.39 3- 6 1.50 6-11 1.22 lf-12 1.51 8-12 1.23 10-12 l‘.35 1U-15 1.U9 10-16 1Λ8 1U-18 1.5U 20-21 1.31 5 18-2U 1.U0 21-2U 1.39 19-25 1.33 22-26 1.38 20-29 1.36 27-29 1.39 26-30 1.21 20-31 1.08 18-33 1.89 9-3^ 1.31

Het kan in het "bijzonder worden waargenomen dat atoomnummer 17 aangegeven als 027 het hydratatiewater voorstelt, terwijl atoomnummer 8 TQ aangegeven als 09 een zuurstof van de methoxygroep voorstelt, atoomnummer 15 aangegeven als H19 is een stikstof van een amidegroep en atoomnummer 21 aangegeven als N22^ is een stikstofatoom van de pyridinegroep.

In tabel A zijn de symbolen X/A, Y/B èn Z/C de ruimtelijke coördinaten van de verschillende atomen.

15 Als kan worden waargenomen uit fig. 1, die de structuur van pxcotaoidemonohydraat toont, is het zuurstofatoom van het hydratatie-' water in het kristalrooster op een duidelijk omschreven plaats gesteld. ten opzichte van het picotamidemolecule.

In fig. 2 kan worden gezien dat de zuurstof van het chydratatie-20 water binnen het monokristal afgebeeld door een rechthoek door water-stofbindingen (aangegeven door een stippellijn) is verbonden aan wel omschreven atomen van verschillende picotamidemoleculen, wélke moleculen in een regelmatig tridimensionaal patroon zijn geplaatst en.goed onderling zijn verbonden door genoemde waterstofbindingen met de hydra-25 tatiezuurstof.

Genoemde binding wordt meer gedetailleerd afgebeeld in fig. 3, waarin men duidelijk ziet dat de zuurstof 027 van het hydratatiewater met waterstofbindingen respectievelijk is verbonden aan: 1) de zuurstof van .=00. van de methoxygroep (0^) van een eerste 30 picotamidemolecule (bindingslengte: 2,81 A°); 2) de stikstof van de amidegroep =NH van een tweede picotamide-molecule geplaatst in het zelfde vlak als het bovenvermelde molecule (lengte van de binding 2,96 A°); 3) de stikstof van de pyridinering (N^^) van een derde picotamide- 35 molecule geplaatst op het onderliggende of bovenliggende vlak met betrekking tot de andere twee gebonden moleculen (binding-lengte 2,80 A°).

81 Q’2 0 1 6 » * - τ -

De aanwezigheid van genoemde drie bindingen geeft een verklaring zowel van de sterkte waarmede het kristallisatiewater zich tussen verschillende picotamidemoleculen onder-vorming van het kristal bevindt en de compactheid van het kristal zelf. Deze congpactheid, verschaft 5 door het moleeulekristallisatiewater, wordt beschouwd deireden van de verbeteringiin biologische beschikbaarheid van de monofiydraatvorm te zijn met betrekking tot de eerder bekende vatervrije vorm, welke verbetering hierna zal blijken uit een farmacologisch oogpunt door vergelijking van absorptietijd, bloedniveauwaarde en·activiteit van beide 10 verbindingen.

Inderdaad was op basis van de beschikbare kennis met het vatervrije picotamidemolecule volgens de stand van de techniek een verbeterd effect als gevolg van de inschuiving van een kristallisatie watermolecule op de compactheid van de ruimtelijke structuur van het picotamide 15 als wel op de biologische beschikbaarheid niet te voorzien.

De elementaire centecimale chemische-analyse heeft ook resultaten verschaft die in overeenstemming zijn met de boven geïllustreerde structuur.

Voor Cg^HgQÏT^O^.HgO (molecuulgewicht 39^Λ) is gevonden: 20 C% 63,37 (theorie 63,9*0; H# 5,72 (theorie 5,62); U# 1^,18 (theorie 1^,20) en zuurstof door verschil).

De werkwijze voor de bereiding van het nieuwe picotamidemonohydraat-molecule volgt voorzover de synthese van de verbinding betreft de reeds bekende werkwijze voor de bereiding van watervrij picotamide.

25 Echter werd na het verkrijgen van het ruwe picotamide volgens de werkwijze gevonden dat door herkristalliseren.van het ruwe product uit een waterig mengsel in tegenstelling tot een watervrij mengsel als bij de bekende werkwijze het kristallijne monohydraatproduct als eerder omschreven wordt verkregen.

30 Onderstaande voorbeelden illustreren de werkwijze voor het berei den van het picotamidemonohydraat uit if-methoxy-isoftaloyldichloride of ander functioneel derivaat van U-methoxy-isoftaalzuur in een omgeving van protonacceptors.

81 0 2 0 1 6 - 8 -

Bereidingsvoorbeeld U-methoxy-isoftaloyldichloride 100 g (0,1+3 mol) (mol. gew. 233) 100 g (0,1+3 mol) 3-picolylamine (mol.gew. 108) 130 g (1,2 mol) 3 5 triethylamine 120 cm

O

tetrahydrofuran (watervrij) 120 + 200 cm-3

O

3-picolylamine, triethylamine en 120 cm watervrij tetrahydrofuran worden gebracht in een 3 liter-kolf voorzien van refluxkoelerdruppel-trechter en mechanische roerder.

10 l+-methoxyisoftaloyldichloride wordt afzonderlijk opgalostt in 200 cm watervrij tetrahydrofuran.

Deze oplossing wordt door middel van de druppeltrechter langzaam onder roeren toegevoegd aan het mengsel in de kolf. De toevoeging dient te geschieden in anderhalf tot twee uren waarbij de isotherme reactie 15 verloopt als aangegeven door het reactieschema van het formuleblad.

Nadat het dichloride is toegevoegd wordt het reactiemengsel ongeveer..twee uren onder reflux gekookt, langzaam verdund met water tot twee liter en onder roeren gehandhaafd tot afscheiding van een kristal-lijne brei bestaande uit het ruwe picotamide.

20 Deze .brei wordt gewonnen op een afzuigfilter e& in natte toestand

O

gekristalliseerd uit 700-800 cm0 acetonwatermengsel (6 volume aceton + 11 volumes wat er).

Het verkregen product wordt geherkristalliseerd uit water onder verkrijging van picotamidemonohydraat met een smeltpunt van 95-97°C met 25 de Koflerbank.

Uit het bovenstaande volgt dat de werkwijze is gekenmerkt door het feit, dat de herkristallisatie van het ruwe picotamide,als verkregen door de synthesereactie,wordt uitgevoerd door een.waterig·/ oplosmiddel in tegenstelling tot de stand van de techniek waarbij .watervrije apolaire or-30 ganische oplosmiddelen werden gebruikt als benzeen, waardoor een watervrij product werd verkregen.

Farmacologische proeven

Gebleken is dat picotamidemonohydraat een grote activiteit bezit als bloedplaatjes antiaggregeringsmiddel. en fibrinolytisch middel .

8102016 - 9 -

Het vindt daarom toepassing in de klinische farmacologie en menselijke therapie.

Genoemde activiteiten zijn in vivo "beproefd door spectrofotome-trische "bepaling volgens Bom wat de "bloedplaatjes antiaggregerings-- 5 activiteiten "betreft en door de proef van de "bloedstollingslysis in toto volgens Fearaley, voor de fibrinolytische activiteit.

Voorbeeld I

Bloedplaatjes antiaggregeringsactiviteit in vivo op konijnen.

Nieuwzeelandse konijnen die twaalf uren hadden gevast met water 10 ad libitum werden geanaesthetiseerd met een 20%'s ethyloplossing van

O

urethaan intraperitoneaal met een dosis van 0,6 cm /100 g. Het bloed werd afgenomen van de halsslagader.vóór (controle) en anderhalf uur na de intraperitoneale injectie van picotamidemonohydraat in een dosis van 25-50-100 mg/kg. De bloedmonsters waren oncoaguleerbaar gemaakt 15 dooreen 3,8#'s oplossing van natriumcitraat in de volumeverhouding van 9/1 en daarna gecentrifugeerd met 1000 omw./min gedurende 15 minuten voor het verkrijgen van een plaatjesrijk., plasma (PEP). Een deel van genoemd plasma werd daarna gecentrifugeerd met 8000 omw./min. gedurende 10 minuten voor het verkrijgen van een plaatjesarm. plasma (PPP).

20 PP? werd gebruikt voor het op nul. instellen van. een .Bom aggrego- meter en 1 cm3 prp werd in het vat van het meettoestel gebracht. Een plaatjesaggregatie werd geproduceerd door wisselende concentraties van dinatriumadenosinedifosfaat (ADP), afhankelijk van de plaatjes-reactiviteit.

25 De plaatjesantiaggregeringsactiviteit werd berekend als 50%'s ver traging van de aggregeringskromme na behandeling, betrokken op de controle (ID^).

De resultaten worden later besproken.

Voorbeeld II

30 Tijdseffect op de plaatjesaggregering en bloedniveaus bij de hond.

Picotamidemonohydraat in een dosis van 100 mg/kg werd oraal toegediend aan Beagle-honden, Cf, die 18 uren hadden gevast met water ad libitum.

8102016 - 10 -

Bloed werd af genomen vóér (.controle) en 2-4-6-8-10 uren na "behandeling en als functie van de tijd werden ..de plaatjésaggregerings-activiteit (volgens de bovenvermelde methode) alsmede bloedniveaus van het geneesmiddel bepaald.

5 Een bepaling van de bloedniveaus had plaatsgevonden met een UV- spectrofotometer volgens onderstaande methode.

3 5 cm plasma verkregen door centrifugeren met 100 omw./min.

gedurende 10 minuten werden toegevoegd met 2 cm^ geconcentreerd HC1 en gehydroliseerd op een waterbad bij 10O°C gedurende 1 uur. Er werd 3 10 af gekoeld , opgenomen met 2 cm water en gefiltreerd. Het filtraat werd 3 sterk alkalisch gemaakt met ÏÏÏÏ^OH en geëxtraheerd met 30 cm CHCl^.

De over watervrij Ha^SO^ gedroogde chloroformlaag werd geëxtraheerd met 0,1 N HgSO^ en de aldus verkregen zure laag met 0,1 N HgSO^ aangevuld tot 100 cm^ en de spectrofotometer af gelezen op 228 n.m.

15 De resultaten zijn hierna vermeld.

Voorbeeld III

Fibrinolytische activiteit in vivo bij de cavia.

De fibrinolytische activiteit werd bepaald op Italiaanse cavia’s en achtereenvolgens werd picotamidemonohydraat oraal toegediend in een 20 dosis van 100 mg/kg.

De Fearaley methode gemodificeerd als volgt.werd voor deze proef toegepast:

In buisjes gehandhaafd op 0 C werden 1,7 cur fosfaatbuffer o 3 (pH 7,4) en 0,1 cmJ van een.thrombineoplos sing met 50 HIH/em gebracht.

3 . .

25 Ha een toevoeging van 0,2 cm caviabloed in totaal werden de buisjes gehandhaafd op 0°C gedurende 30 minuten om stolling te veroorzaken, daarna op een waterbad bij 3J°C gedurende 30 minuten gehandhaafd om een lyse te veroorzaken. Daarna werd het stolgewicht bepaald.

De fibrinolytische activiteit werd berekend als procentafname van 30 . stollingsgewicht van de behandelde dieren betrokken op het stollings-gewicht van controledieren.

Voorbeeld IV

Plaatjesantiaggregerings- en fibrinolytische activiteit bij de mens.

8102016 - 11 -

Een bevestiging van beide activiteiten in vivo voor picotamide-monohydraat werd verkregen bij gezonde mensen van beide sexen met leeftijd van 35 tot 65 jaar die oraal werden behandeld met een enkele dosis van 12 mg/kg.

5 Het “vertragend .effect van de plaat jesaggregering.wercL-beproefd door gebruik van dinatrium ADP als een antagonist volgens dezelfde methode als in voorbeeld I.

De fibrinolytische activiteit werd geschat door het bepalen van de lysetijd van euglobinen.

10 De verkregen resultaten zijn onder opgesomd.

Resultaten

Uit de resultaten verkregen bij de proef betreffende de antiaggre-geringsactiviteit op bloedplaatjes in vivo bij het konijn (voorbeeld l) d.Gor-"probit"-analyse werd de dosis in staat tot het vertragen van de 15 plaatjesaggregering met 50$ (ID^q) berekend en deze dosis bedroeg 5^,10 - 1,^3 mg/kg.

Een may·?ruimt effect (53,82$) bij de hond (voorbeeld II) werd gevonden op het vierde uur. Het overeenkomstige bloedniveau bedroeg

O

22,6 γ/cm plasma en het correspondeert met een maximumwaarde als 20 getoond in het diagram van fig. b.

De fibrinolytische activiteit bij de cavia (voorbeeld III) beproefd met een dosis van 100 mg/kg oraal bleek 27,83$- te zijn.

Bij de mens (voorbeeld IV) bij een enkele dosis van 12 mg/kg oraal bleek het maximale plaatjes-antiaggregeringseffeet vier uren na de 25 behandeling en het werd bepaald op 81,b%. De maximale fibrinolytische activiteit werd bepaald op- 5^,2$ afname van de lysetijd van euglobinen.

Commentaar op de vergelijkingen

Bij vergelijken van de activiteits- en toxiciteitsresultaten van 30 picotamidemonohydraat met die van watervrij picotamide die zijn beschreven in het Amerikaanse octrooischrift 3.973.026 kan worden gezegd dat belangrijke verschillen in activiteit bestaan en deze verschillen gunstig zijn voor de monohydraatvorm wat zeker onvoorspelbaar was uit 81 0 2 0 1 6

9 V

- 12 - het feit dat slechts een kristallisatiewatermolecule hij de nieuwe verbinding werd ingebracht.

Ter vergelijking werd een proef betreffende het tijdseffect en de bloedniveaus bij de hond oraal uitgevoerd onder dezelfde proef-5 omstandigheden voor het reeds bekende watervrije picotamide teneinde de biologische beschikbaarheid daarvan te beproeven na toediening.

De resultaten van deze proef worden verklaard aan de hand van het diagram van fig. h-, dat voorstelt het tijdseffect op plaatjes-aggregering en op bloedniveaus bij de hond in een dosis van 100 mg/kg 10 per os.

De ordinaat, geeft .de tijd in uren en de abscis de bloedniveaus bepaald in γ/cm^ plasma alsmede de plaatjesantiaggregeringsactiviteit bepaald in procent. De krommen 1 en 1 * stellen de antiaggregerings-activiteit van picotamidemonohydraat respectievelijk watervrij pico-15 -1amide voor en de getrokken lijnen 2 en 2' de bloedniveaus van pico tamidemonohydraat respectievelijk watervrij picotamide.

Uit een beschouwing van de resultaten blijkt duidelijk dat watervrij picotamide een maximale plaatjesantiaggregeringseffèct . .

heeft op het achtste uur, wat gelijk is aan ^9%, terwijl het maximale 20 bloedniveau 19,75 ï/cm bedraagt, wat blijkt op het zesde uur.

Daarentegen vertoont picotamidemonohydraat het maximale plaatjes-aggregeringseffect op het vierde uur en bovendien valt de maximale activiteitspiek in tijd samen met de maximale piek van het blo'edniveau wat een snellere biologische beschikbaarheid aangeeft ten gunste van 25 picotamidemonohydraat in vergelijking met watervrij picotamide.

De resultaten van de met picotamidemonohydraat uitgevoerde farmacologische proeven zijn samengevat in onderstaande tabel B waarin tevens de resultaten van dezelfde proef voor watervrij picotamide zijn vermeld.

8102016 ψ - 13 - TABEL· Β

Proef Parameter Picotamide Watervrij monohydraat picotamide

Plaatjesaggre-gering in vivo 5 (konijn) intra- peritoneaal_IDmg/kg_5^-1_108.2_

Plaatjesaggre- maximum gering in vivo vertraging % (hond) 100 mg/kg van aggregering 53,83 1*8,12 ----- TO per os - max 1 act ivit éiis- - tijd gevonden ke uur 8e uur maximum bloed-niveau γ/cmr 15 in plasma 22,6 19,75 maximum bloed-niveau tijd gevonden be uur 6e uur

Plaatjesaggre- maximum ver- 20 gering hij de traging % van mens na enkele aggregering '81 ,b 70,11 toediening - maximum acti-viteitstijd 25 gevonden Ue uur 8e uur

Acute toxiciteit hij rat en hond per os DL .mg/kg >3,000 >3,000

Een vergelijking van de proefwaarden getoond in tahel B voor de 30 heide moleculen toont dat picotamidemonohydraat een verbeterd farmacologisch effect hezit vergeleken met watervrij picotamide. Een dergelijk onverwachte verbetering lijkt een gevolg te zijn van de verhoogde biologische beschikbaarheid van het nieuwe geneesmiddel in zijn stabiele structuur van monogehydrateerd kristal.

8102016 - 1¾. -

• V

τ

Therapeut is che toepassingen-

Vanwege zijn lage toxiciteit, hoge tolerantie en afwezigheid van ongunstige neveneffecten is picotami demonohydraat bruikbaar in de menselijke therapie voor de "behandeling van verschillende thromboèmbolische 5 aandoeningen, in het "bijzonder cerebrovasculaire aandoeningen, myocarditis infarctio, slagader- en adertrombose, longembolie, algemene arte^io riosclerotische omstandigheden en algemene cardiochirurgie.

Voor die toepassing kunnen verschillende farmaceutische vormen worden gebruikt, die 10 - 500 mg actief bestanddeel bevatten waarvan T0 onderstaand voorbeelden volgen: a) oraal: capsules, tabletten, pillen met 10-500 mg, voor een dagelijkse dosering van 50-3000 mg/dag; b) parenteraal: gesteriliseerde endoveneuze injectieflacons met 10-50 mg voor een dagelijkse dosering van 10-200/dag.

15 Het geneesmiddel kan ook rectaal worden toegediend in de vorm van een suppositorium.

Het zal duidelijk zijn dat de farmaceutische preparaten naast het actieve bestanddeel de gebruikelijke farmaceutisch aanvaardbare dragers en toevoegsels mogen bevatten als gebruikelijk is bij farma-20 ceutica. Het zal ook duidelijk zijn dat de toedieningsvormen van het picotamidemonohydraat en de respectieve doseringspatronen kunnen worden gewijzigd afhankelijk van de klinische omstandigheden en ervaring van.......

de artsen.

8102016

Claims (8)

1. N,Nr-bis-(3-picolyl)-^-methoxy-i so ftalamidemonohydraat in kristal lij ne vorm met de formule 1 van het formuleblad met het kenmerk, dat het een smeltpunt van 95-97°C op de Koflerbank bezit en een röntgenstraal-diffractiepatroon van zijn monokristal als vermeld in tabel A.

2. Werkwijze voor het bereiden van N,N*-bisl(3-picolyl)-^-methoxy- •ï vaarbij men een functioneel derivaat van k-methoxy-isoftaalzuur'laat reageren met 3-picolylamine in een watervrij organisch., oplosmiddel, met het kenmerk, dat het reactieproduct wordt neergeslagen met water en het ruwe produkt wordt geherkristalliseerd 10 uit-een waterige oplossing en daarna uit water.

3. Werkwijze volgens conclusie 2 met het kenmerk, dat na het neerslaan van het reactieprodukt met water het produkt wordt gekristalliseerd uit een oplossing van aceton en water ei daarna geherkristalliseerd uit water. k, Farmaceutisch preparaat voor het behandelen van thromboembolische 15 aandoeningen bij zoogdieren, als gevolg van een toename van plaatjes-aggregering en een verhoging van de thrombineactiviteit in het bloed met het kenmerk, dat het als actief bestanddeel een therapeutisch..· doelmatige hoeveelheid Ν,Ν*-bis-(3-picolyl)-isoftaalaraideaonohydraat*. in kristallijne vorm bevat,alsmede farmaceutisch aanvaardbare dragers. 20 5· Preparaat volgens conclusie h. in..de vorm van doseringseenheden met 10-500 mg van het actieve bestanddeel.

6. Farmaceutische preparaat volgens conclusie 5, voor orale toediening bevattend 10-500 mg van het actieve bestanddeel.

7. Farmaceutisch preparaat volgens conclusie 5» voor parenterale 25 toediening bevattend 10-50 mg van het actieve bestanddeel.

8. Aetief middel voor het behandelen van thromboembolische aandoeningen bij zoogdieren ontstaan als gevolg van een verhoogde plaatjes-aggregering en verhoogde thrombine-activiteit in het bloed, bestaande uit N,N1-bis-(3-picolyl) -^-metho:xy-isoft aalamidemónohydraat in kristal- 30 lijne vorm.

9. Actief middel volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat het oraal wordt toegediend in een dosering van 50-3000 mg/dag.

10. Actief middel volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat het paren-teraal wordt toegediend in een dosering van 10-200 mg/dag. 81 0 2 0 1 6 Af V· CO-NH-CH2 Λ U ,η20 CO-Ν Η-CHj-r^^h OCH k J1 J COCl ~ h2n-ch2-^|| _ \β kxAvcod*2 kN>2HCt kyAco-NH-ti^ OCH, W J OCH3 3 3 N A 2 8102016 ® Societa Italo—Britannica L.Manetti-ïï. Roberts & C.