MXPA05004064A - Derivados de alfa-fenil acetanilida que tienen una actividad inhibidora de acil coa colesterol o-acil transferasa y la aplicacion terapeutica de los mismos. - Google Patents

Abstract

La invencion se refiera a novedosos derivados que tienen formula general (I) (ver formula I) en donde R1 representa un grupo amino o hidroxilo, R2 representa hidrogeno o un radical metilo, R3 representa hidrogeno o un atomo de fluor y A representa: grupo a, formula (II) (ver formula II) en donde n representa un entero de 5 a 11, inclusive, R4, R5, que pueden ser identicos o diferentes, representan independientemente uno de otro hidrogeno o un atomo de fluor; grupo b, formula (III) (ver formula III) en donde n, R4, R5, tienen los mismos significados que arriba; la invencion tambien se refiere a las composiciones farmaceuticas que contienen al menos uno de los compuestos antes mencionados por medio de un principio activo y al uso de dichos derivados para la produccion de medicamentos que estan destinados para el tratamiento de hipercolesterolemia o aterosclerosis.

Description

DERIVADOS DE ALFA-FENIL ACETANILIDA QUE TIENEN UNA ACTIVIDAD INHIBIDORA DE ACIL COA COLESTEROL O-ACIL TRANSFERASA Y LA APLICACION TERAPEUTICA DE LOS MISMOS MEMORIA DESCRIPTIVA La presente invención se refiere a novedosos derivados de a-fenil acetanilida, a la preparación de los mismos y a la aplicación terapéutica de los mismos en humanos. También se refiere al uso de estos derivados para elaborar productos medicinales destinados para el tratamiento de hipercolesterolemia y de aterosclerosis. Los compuestos inhibidores de ACAT han sido previamente identificados por el solicitante (patente WO 97/19918). Tiene propiedades antioxidantes y reductores de colesterol en sangre que hacen posible que actúe tanto en la cantidad como en la calidad de lípidos, reduciendo así su potencial aterogénico y sus efectos nocivos a largo plazo en la pared vascular. Sin embargo, esos compuestos tienen una baja biodisponibilidad y una sensibilidad a la oxidación que limita el uso de agentes de formulación responsables de mejorar su biodisponibilidad. Los compuestos que tienen una estructura heterocíclica de una naturaleza de tetrazol han sido descritos por sus propiedades inhibidoras de ACAT y su efecto reductor de colesterol en sangre (WO 93/04052).

El tema de la presente invención se refiere a obtener nuevos derivados que tienen un perfil de actividad comparable con aquéllos descritos por el solicitante (WO 97/19918), con biodisponibilidad incrementada y estabilidad química y metabólica incrementada. Los compuestos de la presente invención corresponden a la fórmula general I: en la cual: - Ri representa un grupo hidroxilo o amino, - R2 representa hidrógeno o un radical metilo, - R3 representa hidrógeno o un átomo de flúor, - A representa un grupo en la cual: - n representa un entero de 5 a 11 , inclusive, ¦ R4 y R5, los cuales pueden ser idénticos o diferentes, representan independientemente uno de otro, hidrógeno o un átomo de flúor en la cual n, R4 y R5 tienen el mismo significado de arriba. • Debido a que los compuestos de fórmula general I tienen uno o más centros asimétricos, la presente invención abarca los diversos estereoisómeros o enantiómeros, y mezclas de los mismos. Estos se pueden obtener a través de métodos convencionales tales como por ejemplo, separación cromatográfica en una columna quiral. • La presente invención también abarca las sales inorgánicas u orgánicas terapéuticamente aceptables de los compuestos de fórmula general I que tienen una función salificable (R-i = amino). Los compuestos de fórmula general I se pueden utilizar para preparar composiciones farmacéuticas o productos medicinales destinados para el tratamiento de enfermedades tales como hipercolesterolemia y aterosclerosis. Los compuestos de la presente invención presentan, de manera inesperada, una actividad reductora de coiesterol en sangre in vivo que es superior a los compuestos previamente descritos.

Síntesis de los compuestos de fórmula I Los compuestos de fórmula general I se pueden obtener mediante tratamiento de una anilina IV, opcionalmente en forma de clorhidrato, con el derivado V, los grupos R-i , R2, R3 y A teniendo el mismo significado de arriba, en presencia de un activador tal como diciclohexilcarbodiimida o yoduro de 2-cloro-1 -metilpridinio y de trietilamina.

Las aminas aromáticas IV son comerciales o se pueden obtener a través de métodos de síntesis conocidos para los expertos en la técnica. Los compuestos I para los cuales A representa el grupo II como se definió anteriormente, con R- = OH y R3 = hidrógeno, se pueden obtener a partir del tioéter VI correspondiente (preparado de acuerdo con la patente WO 07/19918) mediante oxidación con oxona en acetona acuosa.

VI Síntesis de los compuestos de fórmula V ? Los compuestos de formula V para los cuales A representa el grupo II como se definió anteriormente y R3 = hidrógeno, se pueden obtener mediante oxidación del éster VII con un perácido tal como ácido m- cloroperbenzoico en diclorometano, seguido de hidrólisis alcalina.

A = II, R3 = H VII Los compuestos VII para los cuales R4 y R5 representan un átomo de flúor, se pueden preparar mediante fluoración de DAST del bromoaldehído VIII y luego reacción del derivado obtenido en el éster tiomandélico IX.

/(CH2)rk. vil B ¿ HO " ???' IX R4, R5 = F ? Los compuestos de fórmula general V para los cuales A representa el grupo II como se definió anteriormente y R3 representa un átomo de flúor, se pueden obtener a partir del éster del derivado V en el cual A = II y R3 = H mediante tratamiento con hidruro de sodio en THF y luego con selectflúor, [bis(tetrafluoroborato) de 1 -clorometil-4-fluoro-1 ,4-diazabiciclo[2.2.2]octano] en D F, seguido de hidrólisis alcalina. v A = II, R3 = F ? Los compuestos de fórmula V para los cuales A representa el grupo III como se definió anteriormente y R3 = hidrógeno, se pueden obtener de acuerdo con métodos conocidos, por ejemplo J. Med. Chem. 1996, 39, 2354-2366. ? Los compuestos de fórmula V para los cuales A representa el grupo III como se definió anteriormente y F¾ = flúor, se pueden obtener a partir del derivado X y tratamiento con una base tal como hidruro de sodio en THF y luego selectflúor en DMF, seguido de hidrólisis alcalina. v A = III, R3 = F ? Los compuestos de fórmula V para los cuales A representa el grupo III como se definió anteriormente, y Ftt y Rs son átomos de flúor, se pueden obtener al tratar el éster XI con el derivado bromado IX en acetonitrilo en presencia de trietilamina, seguido de hidrólisis alcalina.

La invención se puede ilustrar por medio de los ejemplos no limitativos a continuación y que constituyen modalidades ventajosas de los compuestos de la invención.

EJEMPLO 1 ÍS)-2'. 3', 5'-trimetil-4'-hidroxi-a-dodecilsulfonil-a-fenilacetanilida 1 Se agrega una solución de oxona (32.43 g; 0.053 mol) en agua (150 mi), en una porción, a una solución de 2',3',5'-trimetil-4'-hidroxi-dodecilsulfonil-a-fenilacetanilida (23.5 g; 0.05 mol) en acetona. Después de 24 horas a temperatura ambiente con agitación, la solución se filtra, se evapora hasta secar y luego se recoge con acetato de etilo (800 mi), se lava con ácido clorhídrico 0.1 N y con salmuera, y se seca (MgS04). Después de concentración hasta secar, el residuo se recoge con etil éter (100 mi) y se filtra, para dar después de secado, un sólido (21 g). La purificación mediante cromatografía instantánea, llevándose a cabo la elución con una mezcla 90-10 CH2CI2-EtOAc, da, después de eliminación del solvente y secado, el compuesto 1 (13.4 g). Cristales blancos Pf = 1 15°C o = 12.9° (EtOH; c = 0.46) TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf: 0.87 (70-30 CH2CI2-EtOAc) RMN (D SO d6) d: 0.85 (t, 3H); 1.2-1.4 (m, 18H); 1.60 (m, 2H); 1.95 (s, 3H); 2.09 (S, 3H); 2.11 (s, 3H); 2.98-3.25 (m, 2H); 5.42 (s, 1 H); 6.74 (s, 1 H); 7.4-7.5 (m, 3H); 7.6-7.7 (m, 2H), 8.15 (s, 1 H); 9.77 (s, 1 H).

EJEMPLO 2 (S)-2\ 3', 5'-trimetil-4'-hidroxi-a-i12.12-difluoro-dodecilsulfonin-a- fenilacetanilida 2 Se agrega rápidamente una solución de 12-bromo-1-decanol (12.31 g; 0.046 mol) en diclorometano (70 mi) a una solución de clorocromato de plridinio (14.2 g; 0.066 mol) en diclorometano (90 mi). Después de agitación a temperatura ambiente durante 5 horas, la mezcla de reacción se diluye abundantemente con etil éter y se filtra a través de celite. Después de evaporación y purificación en sílice, llevándose a cabo la elución con una mezcla 5-95 EtOAc-éter de petróleo, se obtiene 12-bromo-dodecanal crudo (8.74 g).

El aldehido (8.74 g; 0.033 mol) se recoge en cloruro de metileno (170 mi) y se añade al mismo por goteo trifluoruro de dietilaminosulfuro (DAST) (5.3 mi; 0.04 mol) en cloruro de metilo (120 mi). Después de reacción a temperatura ambiente durante 4 horas, la mezcla se concentra hasta secar y se recoge con acetato de etilo, y se lava con agua y luego con salmuera. Después de secado (MgS04), filtración y evaporación del solvente, se obtiene un aceite obscuro, el cual es purificado mediante cromatografía en sílice. Por medio de elución con éter de petróleo, se obtiene el compuesto 2a (6.18 g). TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.27 (éter de petróleo) Se añade una solución del compuesto 2a (6.18 g; 0.022 mol) en etanol (15 mi) a una solución de ácido (S)-tiomandélico (3.04 g; 0.018 mol) en etanol (70 mi), seguido de bicarbonato de sodio (3.64 g) en agua (70 mi), en pequeñas porciones.

Después de reacción durante 7 horas a reflujo, el etanol es eliminado por evaporación. La solución es posteriormente acidificada (1 N HCI) y luego extraída con acetato de etilo. Después de secado (MgS04), filtración y evaporación hasta secar, se recupera un aceite, el cual es purificado mediante cromatografía instantánea. Por medio de elución con una mezcla 98-2 ChbCb-MeOH, se obtiene el compuesto 2b (4.0 g) después de eliminación del solvente. Pf = 48°C TLC = Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.34 (95-5 CH2CI2-MeOH) c) (S)-2'.3'.5'-trimetil-4'-hidroxi-a-(12.12-difluorododeciltio)-a-fenilacetanilida Se añade trietilamina (1.33 mi) y luego una solución del compuesto 2b (3.8 g; 0.01 moles) en diclorometano (45 mi) y diciclohexilcarbodiimida (2.2 g, 0.01 mol) a una solución de clorhidrato de 2, 3, 5-trimetil-4-aminofenol (1.76 g; 0.0095 mol) en diclorometano (100 mi), se mantiene bajo nitrógeno.

Después de 8 horas a temperatura ambiente con agitación, la diciclohexilurea formada se filtra y el filtrado se concentra hasta secar y luego se recoge con acetato de etilo. Después de lavado con 0/1 N de ácido clorhídrico y con agua, secado (MgS04), y luego evaporación al vacío, se obtiene un sólido rojo el cual es purificado mediante cromatografía instantánea. La elución con una mezcla de EtOAc-éter de petróleo da, después de evaporación del solvente, el compuesto 2c (4.12 g). TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.2 (30-70 EtOAc-éter de petróleo). d) (S)-2\3\5'-trimetil-4'-hidroxi-a-(12.12-difluoro-dodecilsulfonil)-a-fenilacetanilida Este compuesto se prepara de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 1 utilizando en el compuesto 2c obtenido anteriormente. Cristales blancos Pf = 106°C aD25 = +20°C (EtOH; c = 0.310) TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf: 0.46 (30-70 EtOAc-éter de petróleo) RMN (DMSO d6) d: 1.20-1.35 (m, 18H); 1.6 (m, 2H); 1.95 (s, 3H); 2.09 (s, 3H); 2.11 (s, 3H); 2.98-3.25 (m, 2H); 5.42 (s, 1H); 6.03 (t, 1 H); 6.74 (s, 1 H); 7.4-7.5 (m, 3H); 7.6-7.7 (m, 2H); 8.15 (s, 1 H); 9.78 (s, 1 H).

EJEMPLO 3 2', 3'. 5'-trimetil-4'-hidroxi-a-dodecilsulfonil- -fluoro- -fenilacetanilida a) a-dodecilsulfonilfenilacetato de metilo 3a Se agrega lentamente ácido m-cloroperbenzoico (1 1.53 g; 0.05 mol) a una solución de a-dodeciltiofenilacetato de metilo (8.6 g, 0.025 mol) en diclorometano (120 mi). Después de 2 horas a temperatura ambiente con agitación, la mezcla de reacción se filtra y evapora. El residuo obtenido es purificado mediante cromatografía instantánea. La elución con una mezcla de EtOAc-éter de petróleo da, después de evaporación del solvente, el compuesto 3a (7.62 g).

Pf = 59°C TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.45 (20-80 EtOAc-éter de petróleo). b) a-fluoro-a-dodecilsulfonilfenilacetato de metilo 3b Se agrega una solución del compuesto 3a, (7.62 g; 0.02 mol) in THF (200 mi), mientras se mantiene la temperatura por debajo de 7°C, a una suspensión de hidruro de sodio (0.8 g; 0.02 mol) en THF (50 mi), a 0°C bajo nitrógeno. Después de 30 minutos a 0°C y 30 minutos a temperatura ambiente, se agrega DMF (20 mi) y selectflúor (7.07 g; 0.02 mol), y luego la mezcla se mantiene durante 5 horas a temperatura ambiente con agitación. El residuo, obtenido después de evaporación de THF, es recogido con ácido clorhídrico N y extraído con acetato de etilo. Después de lavado con agua y con salmuera y secado (MgSO- , se obtiene un aceite, después de evaporación, aceite el cual es purificado mediante cromatografía instantánea.

La elución con una mezcla de EtOAc-éter de petróleo, da después de eliminación del solvente, el compuesto 3b (6.49 g). TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.37 (10-90 EtOAc-éter de petróleo). c) Acido a-fluoro-a-dodecilsulfonilfenilacético 3c Se agrega hidróxido de sodio 1 N (31.7 mi) a una solución del compuesto 3b (6.49 g; 0.016 mol) en etanol (160 mi). Después de 2 horas a temperatura ambiente, con agitación, el metanol es eliminado por evaporación y el concentrado es acidificado con ácido clorhídrico 1 N y luego extraído con acetato de etilo. Después de secado (MgS04) y evaporación del solvente, se recupera un aceite, el cual es recogido con éter de petróleo. Los cristales formados son eliminados por filtración y secados, para dar el compuesto 3c. TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.3 (85-15 CH2CI2 MeOH). d) 2',3',5'-Tr¡metil-4'-hidrox¡- -dodec¡lsulfonil-a-fIuoro-a-fenilacetanilida 3 Este compuesto se prepara de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 2c utilizando el compuesto 3c obtenido anteriormente en lugar del compuesto 2b. Cristales de cloro blanco mate Pf = 81 °C TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.23 (20-80 EtOAc-éter de petróleo). RMN (DMSO d6) d: 0.85 (t, 3H), 1.19-1.35 (m, 18H); 1.60 (m, 2H); 1.92 (s, 3H); 2.09 (s, 3H); 2.11 (s, 3H); 3.1 -3.30 (m, 2H); 6.65 (s, 1 H); 7.53-7.59 (m, 3H); 7.82-7.84 (m, 2H); 8.21 (s, 1 H); 10.24 (s, 1 H).

EJEMPLO 4 2\3\5'-Trimetil-4'-hidrox¡-<:t-(2-dodecil-2H-5-tetrazol¡n-o.-fen¡lacetanilida 4 -(2H-5-tetrazolil)fenilacetato de etilo 4a Se añaden trimetilsilil azida (22.6 mg; 0.17 mol) y luego óxido de dibutil estaño (2.49 g; 0.01 mol) a una solución de fenilcianoacetato de etilo (17.4 mi, 0.1 mol) en tolueno (225 mi), y la mezcla de reacción se calienta a 85°C durante 6 horas. Después de evaporación del tolueno, el residuo oleoso es recogido con etanol (200 mi) y posteriormente se evapora una vez más. El residuo es recogido con acetato de etilo. La solución se lava con ácido clorhídrico 1 N, con agua, y luego con salmuera, y la solución se seca (Na2S04) y se evapora al vacío, para dar un aceite el cual se cristaliza a partir de etil éter (16 g). Pf = 107-108°C TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.42 (90-10 CH2CI2-MeOH). b) a-(2-dodecil-2H-5-tetrazolil)fenilacetato de etilo 4b Una solución del compuesto 4a (13.9 g; 0.06 mol) de trietilamina (16.7 mi; 0.12 mol), y de bromuro de dodecilo (15.8 mi; 0.066 mol) en acetonitrilo (250 mi) se somete a reflujo durante 20 horas. Después de evaporación del solvente bajo vacío, el residuo es recogido con acetato de etilo y el bromhidrato de trietileno es eliminado por filtración. El filtrado es concentrado y purificado mediante cromatografía instantánea. Por medio de elución con una mezcla 10-90 EtOAc-éter de petróleo, se obtiene el compuesto oleoso 4b (16.5 g) después de eliminación del solvente. TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.24 (5-95 EtOAc-éter de petróleo) c) Acido a-(2-dodec¡l-2H-5-tetrazolil)fenilacético 4c Se añaden pellas de hidróxido de sodio (2 g; 0.05 mol) a una solución del compuesto 4b (10 g; 0.025 mol) en etanol (100 mi), y la mezcla se agita a temperatura ambiente durante 5 horas. Después de concentración hasta secar, el residuo es recogido con agua, acidificado con ácido clorhídrico 1 N y extraído con etil éter. La fase orgánica, lavada con agua, se seca (Na2S04) y concentra bajo vacío, para dar un aceite que se cristaliza a partir de éter de petróleo (8.9 g). Pf = 58°C TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.38 (95-5 CH2CI2-MeOH). d) 2',3',5,-Trimetil-4'-hidroxi- -(2-dodecil-2H-5-tetrazolil)-a-fenilacetanilida 4 Este compuesto se prepara de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 2c utilizando el compuesto 4c obtenido anteriormente en lugar del compuesto 2b. Cristales blancos Pf = 94°C TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.64 (50-50 EtOAc-hexano). RMN (DMSO de) d: 0.84 (t, 3H), 1.21-1.34 (m, 18H); 1.87 (m, 5H); 2.06 (s, 3H); 2.08 (s, 3H); 4.58 (t, 2H); 5.5 (s, 1 H); 6.7 (s, 1 H); 7.25-7.40 (m, 3H); 7.51-7.53 (m, 2H); 8.06 (s, 1 H); 9.60 (s, 1 H).

EJEMPLO 5 í+)-2',3'.5'-Trimetil-4'-hidroxi-a-í2-dodecil-2H-5-tetrazolil)-a- fenilacetanilida 5 El compuesto 4 (23.9 g) es recogido en una cantidad mínima de etanol y sometido a cromatografía en una columna AD de paquete quiral. Por medio de elución con una mezcla 20-80 EtOH-hexano, se obtiene el compuesto 5 (10.9 g) después de evaporación del solvente. Cristales blancos Pf = 105°C ai = 42.3° (EtOH; c= 0.362).

EJEMPLO 6 (+)-2', 3', 5'-Trimetil-4'-hidroxi- -(2-hexil-2H-5-tetrazolil)-a-fenilacetanilida Este compuesto se obtiene de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 4, al reemplazar, en la etapa 4b, el bromuro de dodecilo con bromuro de hexilo, y posteriormente es disuelto de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 5, la elución llevándose a cabo con una mezcla 70-30 hexano-etanol. Cristales blancos Pf = 108°C Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.14 (10-90 EtOAc-éter de petróleo). RMN (DMSO de) d: 0.84 (t, 3H); 1.24 (m, 6H); 1.87 (m, 5H); 7.06 (s, 3H); 2.08 (s, 3H); 4.64 (t, 2H); 5.5 (s, 1 H) 6.7 (s, 1 H); 7.29-7.39 (m, 3H); 7.51—7.53 (m, 2H), 8.05 (s, 1 H); 9.60 (s, 1 H).

EJEMPLO 7 . 5 -Trimetil-4'-hidroxi- - 2-decil-2H-5-tetrazolin- -fenilacetanilida Este compuesto se obtiene de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 4, al reemplazar, en la etapa 4b, el bromuro de dodecilo con bromuro de decilo. Cristales blancos Pf = 87°C TCL: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.71 (80-20 CH2CI2-EtOAc).

EJEMPLO 8 , 5'-Trimetil-4'-hidroxi-a-r(2-(6,6-difluoro-hexin-2H-tetrazolil)-a- fenilacetanilida 8 Este compuesto se obtiene de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 4, al reemplazar, en la etapa 4b, el bromuro de dodecilo con 1-bromo-6,6-difIuorohexano, obtenido de acuerdo con el ejemplo 2a al reemplazar el 12-bromodecanol con 6-bromohexanol. Cristales blancos Pf=120°C Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.53 (70-30 CH2CI2-EtOAc).

RMN (DMSO de) d: 1.26-1.41 (m, 4H); 1.75-1 .90 (m, 4H); 1.92 (s, 3H); 2.06 (s, 3H), 2.08 (s, 3H); 4.65 (t, 7H); 5.52 (s, 1 H); 6.01 (t, 1 H); 6.71 (s, 1 H), 7.30-7.40 (m, 3H); 7.51-7.54 (m, 2H); 8.05 (s, 1 H), 9.60 (s, 1 H).

EJEMPLO 9 (+)-2'. 3', 5'-Trimet'il-4'- idroxi-a-{2-dodecil-2H-5-tetrazolin-a--fluoro-a- fenilacetanilida 9 a) a-(2-dodecil-2H-5-tetrazolil)-a-fluorofenil-acetato de etilo 9a El compuesto 4b (10.65 g; 0.027 mol) en solución en THF (120 mi) se añade por goteo a una suspensión de hidruro de sodio (1.06 g; 0.027 mol) en THF (60 mi) a -8°C bajo nitrógeno. Después de 30 minutos, se añade DMF (25 mi) y selectfiúor (9.61 g; 0.027 mol), y la agitación se mantiene a temperatura ambiente durante 20 horas. El residuo obtenido después de concentración bajo vacío es recogido con etil éter, y lavado con ácido clorhídrico, con agua y con salmuera. Después de secado (Na2S0 ), se obtiene el compuesto oleoso crudo 9a (10.9 g). TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.66 (5-95 EtOAc-éter de petróleo). b) Acido a-(2-dodec¡l-2H-5-tetrazolil)-a-fluorofenilacético 9b Este compuesto se obtiene de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 4c, iniciando a partir del compuesto 9b antes obtenido. TLC= Gel de sílice Merck 60 F254. Rf = 0.45 (85-15 CH2CI2-MeOH). c) Acido (+)-a-(2-Dodecil-2H-5-tetrazol¡IVa-fluorofenílacét¡co 9c Se añaden cloroformiato de isobutilo (13.3 mi; 0.1 mol) y luego N-metilmorfolina (11.5 mi; 0.1 mol) a una solución del compuesto 9b (35 g; 0.09 mol) en diclorometano (300 mi), se mantiene a -10°C. Después de agitación durante 30 minutos, se añade (+) -norefedrina y la mezcla se agita a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla de reacción se lava con agua, con bicarbonato de sodio acuoso y con salmuera, y luego se seca (Na2S04) y concentra bajo vacío. Las amidas diastereoisoméricas así obtenidas se separan mediante cromatografía instantánea. Por medio de elución con una mezcla 20-80 EtOAc-éter de petróleo, la amida menos polar es aislada (14.9 g) y es tratada con ácido clorhídrico concentrado (300 mi) en dioxano (300 mi). Después de agitación a reflujo durante 3 horas, la mezcla se concentra y luego se recoge con diclorometano, y posteriormente se lava con agua, con ácido clorhídrico 1 N y con salmuera. Después de secado ( a2S04) y eliminación del solvente bajo vacío, se obtiene el compuesto 9c. d) (+) -2', 3', 5'-Tr¡metil-4'-h¡droxi-a-í2-dodec¡l-2H-tetrazol¡l)- - fluoro-a-fenilacetanilida 9 Este compuesto se prepara de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 2c utilizando el compuesto 9c obtenido anteriormente en lugar del compuesto 2b. Cristales blancos Pf = 126°C aD25 = 66.1 °C (EtOH; c= 0.31 ) TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.40 (EtOAc). RMN (DMSO d6) d: 0.85 (t, 1 s); 1.23 (m, 18H); 1.90 (m, 2H); 1.92 (s, 3H); 2.08 (s, 3H); 2.1 1 (s, 3H); 4.71 (t, 2H); 6.67 (s, 1 H); 7.48-7.51 (m, 3H); 7.59-7.62 (m, 2H), 8.13 (s, 1 H); 10.17 (s, 1 H).

EJEMPLO 10 , 5'-Trimetil-4'-hidroxi-a-r2-í12, 12-difluoro-dodec¡l)-2H-5-tetrazolil) fluoro-a-fenilacetanilida 10 Este compuesto se prepara de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 4b, al remplazar el bromuro de dodecilo con 1-bromo-12,12-difluorododecano obtenido como se describió en el ejemplo 2a. El compuesto intermediario así obtenido es tratado de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 9a, b, d, para dar el compuesto 10. Cristales blancos. Pf = 96°C TCL: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.44 (30-70 EtOAc-éter de petróleo) RMN (DMSO d6) d: 1.22-1.35 (m, 16H); 1.76-1.78 (m, 2H); 1.79- 1.92 (m; 5H); 2.08 (s, 3H); 2.11 (s, 3H); 4.72 (t, 2H); 6.03 (t, 1 H); 6.67 (s, H); 7.48-7.50 (m, 3H); 7.60-7.62 (m, 2H); 8.13 (s, 1 H); 10.06 (s, 1 H).

EJEMPLO 11 Clorhidrato de 2\ 3'. 5'. 6'-Tetrametil-4'-amino-a-í2-dodecil-2H-5- tetrazolil)- -fluoro- -fenilacetanilida El compuesto 9b (0.80 g; 0.002 mol), obtenido en el ejemplo 9, en solución en THF (5 mi) a 0o C bajo nitrógeno es tratado por goteo con una solución de cloruro de oxalilo (0.2 mi) en THF (5 mi). Después de 4 horas a temperatura ambiente con agitación, la mezcla de reacción se añade por goteo a una solución de düsopropiletilamina (0.42 mi) y de 2, 3, 5, 6-tetrametil-1 ,4-fenilendiamina (0.37 g; 0.0022 mol) en THF, se mantiene bajo nitrógeno. Después de agitación durante 3 horas, la mezcla se concentra bajo vacío, se recoge con acetato de etilo, y se lava con agua y con salmuera. Después de secado (MgS04) y eliminación del solvente bajo vacío, se recupera un aceite, el cual es purificado por cromatografía instantánea, la elución llevándose a cabo con una mezcla 95-5 CH2CI2-EtOAc. El eluyente se concentra bajo vacío, se recoge con acetona (10 mi) y se trata con ácido clorhídrico 3.16 N en isopropanol (0.18 mi) El precipitado formado es eliminado por filtración, lavado con etil éter y secado para dar el compuesto 11 (220 mg). Cristales blancos Pf = 168°C TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.20 (95-5 CH2CI2-EtOAc-éter de petróleo). RMN (DMSO de) d: 0.85 (t, 3H); 1.23 (m, 18H); 1.94 (s, 3H); 1.88-1.92 (m, 2H); 1.99 (s, 3H); 2.05 (s, 3H); 2.07 (s, 3H); 4.73 (t, 2H); 7.49-7.50 (m, 3H); 7.61-7.63 (m, 2H); 10.28 (s, 1 H).

EJEMPLO 12 Clorhidrato de 2'. 3'. 5', 6'-tetrametil-4'-am¡no- -(2-hexil-2H-5-tetrazolil)- - fenilacetanilida 12 Este compuesto se obtiene de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 2c, al remplazar el 2,3,5-trimetilaminofenol con 2,3,5,6-tetrametilfenilendiamina, y el ácido a-(12,12-difluorododeciltio)fenilacético con ácido a-(2-hexil-2H-5-tetrazolil)fenilacét¡co.

Después de salificación con ácido clorhídrico, en isopropanol, se obtiene el compuesto 12 mediante precipitación con etil éter. Cristales blancos Pf = 252°C TLC: Gel de sílice Merck 60 F254 Rf = 0.48 (80-20 CH2CI2-EtOAc). Los compuestos de la invención se sometieron a pruebas farmacológicas que mostraron su ventaja potencial en el tratamiento de hipercolesterolemia y en el tratamiento de enfermedad ateromatosa. Los compuestos fueron estudiados para determinar su efecto inhibidor de ACAT in vitro y efecto reductor de colesterol en sangre en ratas. 1 - Inhibición de ACAT La actividad inhibidora de ACAT (enzima acil COA: colesterol O-acil transferasa) de los compuestos se evalúo in vitro en microsomas de hígado de rata utilizando la técnica de H. Chautan et al. (Analytical Biochemistry, 173, 436-439, 1988). Las actividades, expresadas como 50% de concentraciones inhibidoras (Cl 50) obtenidas con ciertos productos de la invención y eflucimibe (ejemplo 16 de la patente WO 97/19918 presentada por el solicitante) se reportan a manera de ejemplo en el siguiente cuadro I: CUADRO I Compuesto No CI50 (?µ) 1 135 3 48 4 43 5 1 1 9 20 10 28 Eflucimibe 60 2 - Actividad reductora de colesterol en sanqre Ratas macho (160-180g) se sometieron durante 4 días a una dieta hipercolesterolémica de Altromin C 1061 y se trataron en paralelo oralmente con los compuestos en suspensión en una solución de Tween 80 al 2% en agua destilada. En el quinto día, los animales que no están en ayuno son anestesiados con etil éter, y se les extrajo sangre en EDTA a través de la aorta abdominal. La sangre es inmediatamente centrifugada y el plasma se almacena a 4°C Posteriormente el colesterol en plasma es analizado a través del método CHOD-PAP (Boehringer Mannheim Ref. 237574). La dosis efectiva de 50% (DE50) corresponde a la dosis que reduce a la mitad la concentración de colesterol en plasma en comparación con animales control.

CUADRO II Compuesto No. DE50 (mg/kg) 1 0.25 3 0.022 4 0.029 5 0.025 9 0.012 10 0.029 Eflucimide 0.12 Los compuestos de la invención son poderosos agentes reductores de colesterol en sangre e inhibidores de ACAT que pueden ser utilizados en el tratamiento de enfermedades tales como hipercolesterolemia y aterosclerosis. Las composiciones farmacéuticas pueden ser provistas en la forma adecuada para administración oral, parenteral o local, por ejemplo en forma de cápsulas, tabletas, gránulos, cápsulas de gelatina, líquidos, sólidos, jarabes o suspensiones orales y pueden contener los excipientes adecuados. La dosis diaria puede variar de 5 a 1000 mg.

Claims (2)

NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES

1- Un derivado de anilida, caracterizado porque corresponde la fórmula general I: en la cual: Ri representa un grupo hidroxilo o amino, R2 representa nitrógeno o un radical metilo, R3 representa hidrógeno o un átomo de flúor, A representa un grupo en el cual: n representa un entero de 5 a 11 , inclusive, R4 y R5 los cuales pueden ser idénticos o diferentes, representan independientemente uno de otro, hidrógeno o un átomo de flúor en la cual n, R^ y R5 tienen el mismo significado de arriba, en forma de sus diversos estereoisómeros, enantiómeros, y mezclas de los mismos, para los compuestos que tienen uno o más carbonos asimétricos, y en forma de sales ácidas inorgánicas u orgánicas terapéuticamente aceptables para los compuestos salificables. 2.- El compuesto que corresponde a la fórmula general I de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque se selecciona del siguiente grupo: (S^'.S'.S'-trimetiW-hidroxi-a-dodecilsulfonil-a-fenilacetanilida; (S)-2\3\5'-trimetil-4'-h¡drox¡-a-(12,1

2-difluoro-dodecilsulfonil)-a-fenilacetanilida; 2',3',5'-trimetil-4'-hidroxi-a-dodecilsulfonil-a-fluoro- -fenilacetanilida; 2',3',5'-trimetil-4'-hidroxi-a-(2-dodecil-2H-5-tetrazolil)-a-fenilacetanilida; (+)-2',3',5'-trimetil-4'-hidroxi-a-(2-dodecil-2H-5-tetrazolil)- -fenilacetanilida; (+)-2',3',5'-trimetil-4'-hidroxi-a-(2-hexil-2H-5-tetrazolil)-a-fenilacetanilida; 2',3',5'-trimetil-4'-h¡droxi-a-(2-decil-2H-tetrazolil)-a-fenilacetanilida; 2\3\5'-trimetil-4'-hidroxi-a-[(2-(6,6-difluoro-hexil)-2H-tetrazolil]-a-fenilacetanilida; (+)-2,,3',5'-trimetil-4'-hidroxi-a-(2-dodecil-2H-5-tetrazolil)- -fluoro-a-fenilacetanilida; 2',3',5'-trimetil-4,-h¡droxi-a-[2-(12,12-difluoro-dodecil)-2H-5-tetrazolil]-a-fluoro-a-fenilacetanilida; clorhidrato de 2',3',5',6'-tetrametil- 4'-amino-a-(2-dodecil-2H-5-tetrazol¡l)-a-fluoro-a-fen¡lacetanilida; y clorhidrato de 2\3\5\6'-tetrametiM'-amino-a-(2-hexil-2H-5-tetrazolil)-a-fenilacetan¡lida. 3. - Como un producto medicinal, un compuesto de fórmula general I como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 y 2, en particular como un producto medicinal que es útil en el tratamiento de enfermedades tales como hipercolesterolemia o aterosclerosis. 4. - Una composición farmacéutica, caracterizada porque contiene, además de un vehículo farmacéuticamente aceptable, al menos un compuesto de fórmula general I de cualquiera de las reivindicaciones 1 y 2. 5.- El uso de compuestos de fórmula I de cualquiera de las reivindicaciones 1 y 2, para elaborar productos medicinales destinados para el tratamiento de enfermedades tales como hipocolesterolemia o aterosclerosis. RESUMEN DE LA INVENCION La invención se refiere a novedosos derivados que tienen fórmula general (I) en donde Ri representa un grupo amino o hidroxilo, R2 representa hidrógeno o un radical metilo, R3 representa hidrógeno o un átomo de flúor y A representa: grupo a, fórmula (II) en donde n representa un entero de 5 a 11 , inclusive, R4, R5, que pueden ser idénticos o diferentes, representan independientemente uno de otro hidrógeno o un átomo de flúor; grupo b, fórmula (III) en donde n, R4, R5, tienen los mismos significados que arriba; la invención también se refiere a las composiciones farmacéuticas que contienen al menos uno de los compuestos antes mencionados por medio de un principio activo y al uso de dichos derivados para la producción de medicamentos que están destinados para el tratamiento de hipercolesteroiemia o aterosclerosis. 4A/aom*mmf*kra*ecj*gcg* P05/448F