MXPA04007847A - Metodo para extraer un macrolido de biomateria. - Google Patents

Metodo para extraer un macrolido de biomateria.

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Abstract

Se proporciona un metodo para obtener un macrolido, especialmente tracrolimus a partir de una biomateria.

Description

MÉTODO PARA EXTRAER UN MACRÓLIDO DE BIOMATERIA CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con un método extracción de un macrólido, por ejemplo tacrolimus, desde biomateria . especialmente un caldo de fermentación.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN · Los macrólidos son anillos de lactona de varios miembros que tienen uno o más desoxiazúcares como sustituyentes . Eritromicina , azitromicina, y claritromicina son macrólidos que tienen actividad bacteriostática y/o bactericida.
Tacrolimus (FK 506) es también un antibiótico macrólido que también es un agente inmunosupresor . Más potente que ciclosporina , tacrolimus tiene un efecto inhibidor selectivo sobre los linfocitos T.
Los macrólidos generalmente se obtienen mediante fermentación, aunque se conocen vías sintéticas hacia ellos. El presente método de extracción ofrece varias ventajas comparado con el arte previo. Por ejemplo, el caldo de fermentación completo se puede utilizar como material inicial para el presente método ("método de caldo completo") y el uso de un solvente de extracción hidrófobo deriva en un rendimiento de extracción eficiente, dejando atrás la mayor parte de las impurezas solubles en agua, con la remoción de micelio en un paso. La concentración bajo presión reducida a una temperatura superior a 25°C y a una presión reducida deriva en una velocidad de evaporación alta del solvente sin precipitación o descomposición de tacrolimus. Otras ventajas de la presente invención serán evidentes para el artesano experto.
EXTRACTO DE LA INVENCIÓN En un aspecto, la presente invención se relaciona con un método para obtener un macrólido, especialmente tacrolimus, que incluye el paso de extraer una biomateria que contiene un macrólido con un solvente de extracción hidrófobo, especialmente en donde el solvente de extracción hidrófobo se selecciona del grupo formado por n-butanol, iso-butanol, ésteres lineales y ramificados de C2-C6 del ácido acético o ácido fórmico, cetonas alifáticas lineales o ramificadas de C3-C6, metanos halogenados, etanos halogenados, e hidrocarburos aromáticos que son líquidos a 25 °C y que tienen un punto de ebullición a presión atmosférica inferior a 150 °C, para obtener una solución del macrólido en el solvente de extracción hidrófobo, en donde el pH de la biomateria que se extrae es de 5,5 a 13.
En otro aspecto, la presente invención se relaciona con un método para obtener un macrólido, especialmente tacrolimus, que incluye el paso de extraer una biomateria que contiene un macrólido con un solvente de extracción hidrófobo, especialmente en donde el solvente de extracción hidrófobo se selecciona del grupo formado por n-butanol, iso-butanol, esteres lineales y ramificados de C2-C6 del ácido acético o ácido fórmico, cetonas alifáticas lineales o ramificadas de C3-C6, metanos halogenados, etanos halogenados e hidrocarburos aromáticos que son líquidos a 25°C y que tienen un punto de ebullición a presión atmosférica inferior a 150°C, en donde la extracción es a una temperatura de entre 2°C y 70 °C, especialmente entre 15 °C y 35 °C, para obtener una solución del macrólido en el solvente de extracción hidrófobo.
En otro aspecto, la presente invención se relaciona con un método para obtener un macrólido, especialmente tacrolimus, que incluye el paso de extraer una biomateria que contiene un macrólido con un solvente de extracción hidrófobo, especialmente en donde el solvente de extracción hidrófobo se selecciona del grupo formado por n-butanol, iso-butanol, ésteres lineales y ramificados de C2-C6 del ácido acético o ácido fórmico, cetonas alifáticas lineales o ramificadas de C3-C6, metanos halogenados, etanos halogenados e hidrocarburos aromáticos que son líquidos a 25°C y que tienen un punto de ebullición a presión atmosférica inferior a 150°C, en donde la extracción es a una temperatura de entre 2°C y 70°C, especialmente entre 15°C y 35°C, y a un pH de entre 5,5 y 13, especialmente entre 7,5 y 13, para obtener una solución del macrólido en el solvente de extracción hidrófobo.
En otro aspecto, la presente invención se relaciona con un método para obtener un macrólido, especialmente tacrolimus, que incluye los pasos de extraer una biomateria que contiene un macrólido con un solvente de extracción hidrófobo, especialmente en donde el solvente de extracción hidrófobo se selecciona del grupo formado por n-butanol, iso-butanol, esteres lineales y ramificados de C2-C6 del ácido acético y ácido fórmico, cetonas alifáticas lineales o ramificadas de C3-C6, metanos halogenados, etanos halogenados, e hidrocarburos aromáticos que son líquidos a 25°C y que tienen un punto de ebullición a presión atmosférica inferior a 150°C, en donde la extracción es a una temperatura de entre 2°C y 70°C, especialmente entre 15°C y 35°C y a un pH de entre 5,5 y 13, especialmente entre 7,5 y 13, para obtener una solución del macrólido en el solvente de extracción hidrófobo, concentrar la solución que contiene un macrólido, tratar la solución concentrada mediante cromatografía de columna para obtener al menos una fracción que contiene un macrólido que es una solución que contiene un macrólido y cristalizar el macrólido desde la solución.
En aún otro aspecto, la presente invención se relaciona con un método para obtener un macrólido, especialmente tacrolimus, que incluye los pasos de extraer una biomateria que contiene un macrólido con un solvente de extracción hidrófobo, especialmente en donde el solvente de extracción hidrófobo se selecciona del grupo formado por n-butanol, iso-butanol, ésteres lineales y ramificados de C2-C3 del ácido acético y ácido fórmico, cetonas alifáticas lineales o ramificadas de C3-C6, metanos halogenados, etanos halogenados, e hidrocarburos aromáticos que son líquidos a 25 °C y que tienen un punto de ebullición a presión atmosférica inferior a 150°C, para obtener una solución del macrólido en el solvente de extracción hidrófobo, separar la solución que contiene el macrólido de la biomateria que contiene el macrólido extraída, concentrar la solución que contiene el macrólido separada, tratar la solución concentrada mediante cromatografía de columna para obtener al menos una fracción que contiene el macrólido que es una solución que contiene un macrólido, optativamente concentrar la solución y cristalizar el macrólido desde la solución optativamente concentrada enfriando, especialmente a una temperatura de 20 °C o menos, y aislar el macrólido cristalizado.
En aún otro aspecto, la presente invención se relaciona con un método para obtener un macrólido, especialmente tacrolimus, que incluye los pasos de extraer una biomateria que contiene un macrólido con un solvente de extracción hidrófobo, especialmente en donde el solvente de extracción hidrófobo se selecciona del grupo formado por n-butanol, iso-butanol, esteres lineales y ramificados de C2-C6 del ácido acético y ácido fórmico, cetonas alifáticas lineales o ramificadas de C3-C6, metanos halogenados, etanos halogenados, e hidrocarburos aromáticos que son líquidos a 25 °C y que tienen un punto de ebullición a presión atmosférica inferior a 150°C, para obtener una solución del macrólido en el solvente de extracción hidrófobo, separar la solución que contiene el macrólido de la biomateria que contiene el macrólido, concentrar la solución que contiene el macrólido separada, tratar la solución concentrada mediante cromatografía de columna para obtener al menos una fracción que contiene un macrólido que es una solución que contiene un macrólido, optativamente concentrar la solución y cristalizar el macrólido desde la solución separada optativamente concentrada combinando la solución separada concentrada con un solvente de cristalización que se selecciona de acetonitrilo , metanol, etanol, acetona, éter dietílico, acetato de etilo, los hexanos, los heptanos y agua, y aislar el macrólido cristalizado.
En aún otro aspecto, la presente invención se relaciona con un método de obtener un macrólido, especialmente tacrolimus, que incluye el paso de extraer una biomateria que contiene un macrólido obtenida de un microorganismo que se selecciona de Streptomyces tsukubaensis, Streptomyces hygroscopicus, y Streptomyces lividans, con un solvente de extracción hidrófobo, en donde el solvente de extracción hidrófobo se selecciona del grupo formado por n-butanol, iso-butanol, ésteres lineales y ramificados de C2-C6 del ácido acético y ácido fórmico, cetonas alifáticas lineales o ramificadas de C3-C6, metanos halogenados, etanos halogenados, e hidrocarburos aromáticos que son líquidos a 25°C y que tienen un punto de ebullición a presión atmosférica inferior a 150°C, para obtener una solución del macrólido en el solvente de extracción hidrófobo, en donde el pH de la biomateria extraída es de 5,5 a 13.
En aún otro aspecto, la presente invención se relaciona con un método de obtener tacrolimus de una biomateria que contiene tacrolimus que incluye los pasos de extraer una biomateria que contiene tacrolimus que es un caldo de fermentación completo obtenido mediante la fermentación de un microorganismo que se selecciona del grupo formado por Streptomyces tsukubaensis, Streptomyces hygroscopicus, y Streptomyces lividans con un solvente de extracción hidrófobo que se selecciona del grupo formado por acetato de n-butilo, acetato de iso-butilo, acetato de t-butilo, acetato de etilo, acetato de propilo, etil butil met.il cetona fórmica, diclorometano, cloroformo, tetraclorometano, y tolueno a una temperatura de entre 2°C y 70°C, especialmente entre 15°C y 35°C a un pH de entre 5,5 y 13, especialmente entre 7,5 y 13 para obtener una solución de tacrolimus en el solvente de extracción hidrófobo, separar la solución que contiene tacrolimus de la biomateria que contiene tacrolimus extraída, concentrar la solución que contiene tacrolimus; tratar la solución concentrada mediante cromatografía de columna para obtener al menos una fracción que contiene un macrólido que es una solución que contiene un macrólido, optativamente concentrar la solución, y cristalizar el tacrolimus a partir de la solución separada optativamente concentrada enfriándola o combinándola con un solvente de cristalización que se selecciona de acetonitrilo, metanol, etanol, acetona, éter dietílico, acetato de etilo, los hexanos, los heptanos, y agua, por lo cual se forma un precipitado de tacrolimus cristalizado; y separar tacrolimus.
En aún otra realización, la presente invención se relaciona con un método de obtener tacrolimus a partir de la biomateria que contiene tacrolimus que incluye los pasos de: extraer la biomateria que contiene tacrolimus que es un caldo de fermentación completo mediante la fermentación de un microorganismo que se selecciona del grupo formado por Strepto/nyces tsuJui>aensis, Streptomyces hygroscopicus, y Streptomyces lividans con un acetato de iso-butilo, a una temperatura de entre 2°C y 70°C, especialmente entre 15°C y 35°C, para obtener una solución de tacrolimus en un solvente de acetato de iso-butilo; separar la solución de acetato de iso-butilo que contiene tacrolimus de la biomateria que contiene tacrolimus extraída; concentrar la solución de acetato de iso-butilo que contiene tacrolimus; tratar la solución concentrada mediante cromatografía de columna para obtener al menos una fracción que contiene un macrólido que es una solución que contiene un macrólido, optativamente concentrar la solución, y cristalizar el tacrolimus a partir de la solución separada optativamente concentrada enfriándola a una temperatura de 20 °C o menos, o combinándola con un solvente de cristalización que se selecciona de acetonitrilo, metanol, etanol, acetona, éter dietílico, acetato de etilo, los hexanos, los heptanos, y agua, por lo cual se forma un precipitado de tacrolimus cristalizado; y separar tacrolimus.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN En una realización, la presente invención proporciona un método para obtener un macrólido, preferentemente tacrolimus (también denominado FK 506) , a partir de una biomateria que contiene un macrólido que incluye el paso de extraer el macrólido de la biomateria que contiene un macrólido con un solvente de extracción hidrófobo para obtener una solución del macrólido en el solvente de extracción hidrófobo, a partir del cual se puede obtener el macrólido. En otra realización, la presente invención proporciona un método para obtener un macrólido, preferentemente tacrolimus, a partir de una biomateria que contiene un macrólido extrayendo la biomateria con un solvente de extracción hidrófobo para obtener una solución del macrólido seguido por la concentración de la solución para obtener un concentrado, desde el cual se aisla el macrólido.
La biomateria que contiene el macrólido es una materia obtenida a partir de o a través del uso de un microorganismo que produce el macrólido, por ejemplo una bacteria u hongo que produce un macrólido mediante la fermentación o el cultivo o en forma similar. La fermentación del microorganismo puede llevarse a cabo mediante métodos conocidos para el artesano experto y que se describen por ejemplo, en Surjit S. Sengha, Fermentación, en 10 Enciclopedia Kirk Othmer de Tecnología Química, 361 (Jacqueline I. Kroschwitz, ed, 4a edición, 1993).
La biomateria que contiene un macrólido preferida es una biomateria que contiene tacrolimus, particularmente un caldo de fermentación que puede obtenerse mediante fermentación utilizando un microorganismo que produce tacrolimus, por ejemplo, Streptojri ces tsukujbaensis, cepas nuevas y mutadas de él, Streptojnyces hygroscopicus y Streptomyces lividans, que se describen en las Patentes Estadounidenses números 4.894.366, 5.116.756, 5.624.842, 5.496.727 y 5.622.866.
El micelio y el filtrado obtenidos mediante la filtración del caldo . de fermentación a partir de la fermentación de un microorganismo que produce un macrólido son también una biomateria útil en la práctica de la presente invención. El caldo de fermentación completo, es decir el "caldo completo" a partir de la fermentación de un microorganismo que produce un macrólido, sin filtrar o purificado para separar el micelio, es una biomateria que contiene un macrólido preferida para la práctica de la presente invención. Cuando se utiliza caldo completo, el presente método se puede denominar "método de caldo completo" .
La biomateria que contiene un macrólido se extrae con un solvente de extracción hidrófobo que es un solvente para el macrólido, especialmente tacrolimus, pero que es sólo escasamente soluble en agua a 25°C. Los solventes de extracción hidrófobos preferidos son los esteres lineales y ramificados de C2-C6 del ácido acético o ácido fórmico, por ejemplo, acetato de iso-butilo, cetonas alifáticas lineales o ramificadas de C3-C6, metanos halogenados, por ejemplo dielorómetaño, etanos halogenados, por ejemplo dicloroetano , e hidrocarburos aromáticos que son líquidos a 25 °C y que tienen un punto de ebullición a presión atmosférica inferior a 150°C. Los alcoholes normales y de iso-butilo también pueden utilizarse como el solvente de extracción hidrófobo.
Los solventes de extracción hidrófobos preferidos son acetato de iso-butilo, acetato de n-butilo, acetato de t-butilo, acetato de etilo, acetato de propilo, formato de etilo, butil metil cetona (2-hexanona) , diclorometano , cloroformo, tetraclorometano y tolueno .
Acetato de etilo y acetato de iso-butilo son solventes de extracción hidrófobos particularmente preferidos.
La extracción para formar una solución del macrólido puede realizarse utilizando los métodos y equipos conocidos para el experto en el arte y de rutina por igual. El método y equipo elegidos deben solamente proporcionar la agitación adecuada y permitir la separación de la solución de la biomateria que contiene el macrólido extraída, o la transferencia de la mezcla de extracción a un aparato de separación. La extracción se puede realizar a cualquier temperatura conveniente de entre 2°C y 70 °C. Preferentemente la extracción se realiza a una temperatura de entre 15°C y 35°C. El experto en el arte sabe optimizar el tiempo de extracción según la biomateria que contiene el macrólido, el solvente de extracción hidrófobo, el equipo y las temperaturas utilizadas. Al final de la extracción, la mezcla de extracción incluye una solución del macrólido en el solvente de extracción hidrófobo así como una biomateria que contiene un macrólido extraída residual .
En una realización preferida, la extracción se realiza en una biomateria, por ejemplo un caldo de fermentación, que no se somete primero a ningún tratamiento de purificación, por ejemplo filtración que removería el micelio. En este caso, la extracción se denomina extracción de caldo completó.
La extracción puede realizarse a cualquier pH entre 1 y 13. Preferentemente, la extracción se realiza a un pH entre 5,5 y 13, más preferentemente de entre 7,5 y 13. El pH de la biomateria, í especialmente el caldo de fermentación, se puede ajustar utilizando una base inorgánica adecuada, por ejemplo NH4OH, NaOH, KOH, LiOH, o Ca(OH)2, para mencionar solamente algunas. Los presentes inventores han observado ventajas particulares, especialmente con respecto a la pureza del macrólido, cuando la extracción se lleva a cabo en una biomateria que tiene un pH entre 5,5 y 13. Preferentemente, el pH es un pH alcalino, especialmente un pH de entre 7,5 y 13.
Después . de la extracción, la solución del macrólido en el solvente de extracción hidrófobo se separa de la mezcla de extracción y, en realizaciones preferidas, se concentra para obtener un concentrado. La separación puede lograrse utilizando métodos y equipos conocidos para el experto en el arte y de rutina por igual, por ejemplo decantación, separación en un embudo de separación, y centrifugación utilizando un centrífugo de líquido-líquido.
La solución que contiene el macrólido separada de la biomateria que contiene el macrólido extraída se concentra para obtener un concentrado. La concentración puede ser a presión atmosférica prevaleciente (que el experto en el arte reconoce que varía ligeramente un promedio de 760 mm Hg) , o puede ser a presión reducida, lograda con al ayuda de, por ejemplo, una bomba de vacío o un aspirador de agua. La concentración preferentemente se lleva a cabo a una temperatura de 25 °C. La concentración se realiza hasta que el volumen de la solución que contiene el macrólido se reduce al 0,2% hasta el 2,0% de su volumen inicial, o menos para proporcionar una solución que contiene el macrólido concentrada ("concentrado"). El tacrolimus crudo se puede aislar del concentrado.
En realizaciones preferidas, el concentrado se trata mediante cromatografía de columna sobre una columna de gel de sílice. El método de cromatografía aplicado puede ser el descrito en la Patente Estadounidense 4.894.366, incorporada aquí como referencia en su totalidad.
Para el tratamiento, el concentrado (solución que contiene un macrólido concentrada) se carga en una columna de gel de sílice. Para la carga, el concentrado puede combinarse con- un solvente que es un solvente para el macrólido, por ejemplo acetato de etilo, y suspenderse con gel de sílice. El solvente se remueve de la suspensión para obtener gel de sílice cargado con el macrólido y otras sustancias a partir del concentrado. El gel de sílice cargado se carga en la parte superior de la columna y, si se desea, se pasa un eluyente de carga a través de la columna. La columna luego se eluye con un eluyente .
El eluyente puede ser isocrático, es decir de composición constante, o la composición del eluyente puede variarse durante la elución. Los eluyentes preferidos incluyen mezclas de acetato de etilo y hexano.
Se recogen fracciones para obtener al menos una fracción que contiene el macrolido que es una solución del macrolido en el eluyente. Se pueden combinar varias fracciones que contienen el macrolido con una sola fracción que contiene el- macrolido. La fracción (es) que contiene un macrolido se puede concentrar para obtener una solución concentrada (fracción concentrada) del macrolido, a partir de la cual se puede cristalizar el macrolido.
El macrolido ase cristaliza (precipita) a partir de la solución que contiene el macrolido preferentemente concentrada. El macrolido así cristalizado (precipitado) puede aislarse, por ejemplo, mediante filtración o centrifugación. La cristalización puede efectuarse enfriando la solución que contiene el macrolido, preferentemente a una temperatura de 20 °C o menos. La cristalización también puede efectuarse con la ayuda de un solvente de cristalización que se combina con la solución que contiene el macrolido preferentemente concentrada. En realizaciones preferidas, la combinación luego se mantiene durante un período de retención de 10 a 60 horas a una temperatura de 25°C o menos. El tiempo de retención típico es de 48 horas. Los solventes de cristalización útiles incluyen acetonitrilo, metanol, etanol, acetona, éter dietílico, acetato de etilo, hexanos, heptanos y agua .
En realizaciones particulares, la solución que contiene el macrólido se concentra hasta secarse y el macrólido se obtiene sin nuevo enfriamiento y sin utilizar un solvente de cristalización .
La práctica de la invención se ilustra adicionálmente con los siguientes ejemplos no taxativos.
Ejemplo 1 Un caldo de fermentación (50 mi) se mezcló con 50 mi de acetato de iso-butilo. El pH de la mezcla se ajustó a pH 2 con una solución de ácido sulfúrico diluido. Después de 30 minutos de agitación, las fases se separaron. La fase de acetato de iso-butilo separada (39 mi) se concentró hasta secarse bajo presión reducida a 60 °C. El rendimiento logrado fue el 83%.
Ejemplo 2 Un caldo de fermentación (50 mi) se mezcló con 50 mi de acetato de iso-butilo. Sulfato de magnesio de 250 mg y algunas gotas de una solución de cloruro de dodecil trimetil amonio diluido se agregaron a la mezcla. El pH de la mezcla se ajustó a pH 4 con una solución de ácido sulfúrico diluida. Después de 30 minutos de agitación, las fases se separaron. La fase de acetato de iso-butilo separada (44 mi) se concentró hasta secarse bajo presión reducida a 70 °C. El rendimiento obtenido fue del 88%.
Ej emplo 3 Un caldo de fermentación (50 mi) se mezcló con 50 mi de acetato de iso-butilo. Sulfato de magnesio de 250 mg y algunas gotas de una solución de cloruro de dodecil trimetil amonio diluida se agregaron a la mezcla. El pH de la mezcla se ajustó a pH 8 con una solución de hidróxido de sodio diluida. La combinación se calentó a 35°C-40°C. Las fases se separaron después de 30 minutos de agitación. La fase de acetato de iso-butilo (44 mi) se concentró hasta secarse bajo presión reducida a 82 °C. El rendimiento logrado fue del 94%.
Ejemplo 4 El caldo de fermentación (50 mi) se mezcló con 50 mi de acetato de iso-butilo. Sulfato de magnesio de 250 mg y algunas gotas de una solución de cloruro de dodecil trimetil amonio diluida se agregaron a la mezcla. El pH de la mezcla se ajustó a pH 10 con una solución de hidróxido de sodio diluida. La combinación se enfrió a 15 °C. Las fases se separaron después de 30 minutos de agitación. La fase de acetato de iso-butilo (43 mi) se concentró hasta secarse bajo presión reducida a 55 °C. El rendimiento logrado fue 92%.
Ejemplo 5 El caldo de fermentación (50 mi) se mezcló cón 50 mi de acetato de etilo. Sulfato de magnesio de 250 mg y algunas gotas de una solución de cloruro de dodecil trimetil amonio diluida se agregaron a la mezcla. El pH de la mezcla se ajustó a pH 4 con una solución de ácido sulfúrico diluida. Las fases se separaron después de 30 minutos de agitación. La fase de acetato de etilo separada se concentró hasta secarse bajo presión reducida a 29 °C. El rendimiento logrado fue del 92%.

Claims (30)

l REIVINDICACIONES
1. Un método para obtener un macrólido que comprende el paso de extraer una biomateria que contiene un macrólido con un solvente 5 de extracción hidrófobo para obtener una solución del macrólido en el solvente de extracción hidrófobo, en donde el pH de la biomateria que contiene un macrólido que se extrae es entre 5,5 y 13. 10
2. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el solvente de extracción hidrófobo se selecciona del grupo formado por n-butanol, iso-butanol, esteres lineales y ramificados de C2- C6 del ácido acético o ácido fórmico, cetonas alifáticas lineales o ramificadas de C3-C6, metanos halogenados, etanos halogenados e 15 hidrocarburos aromáticos que son líquidos a 25 °C y que tienen un punto de ebullición a presión atmosférica inferior a 150 °C.
3. El método de acuerdo con la reivindicación 2, en donde el solvente de extracción hidrófobo s selecciona del grupo formado 20 por n-butanol, iso-butanol, acetato de n-butilo, acetato de iso- butilo, acetato de t-butilo, acetato de etilo, acetato de propilo, formato de etilo, acetona, butil metil cetona, metil iso-butil cetona, diclorometano, clororformo, tetraclorometano, diclorometano y tolueno.
4. El método de acuerdo con la reivindicación 3, en donde el solvente de extracción hidrófobo es acetato de etilo, acetato de iso-butilo, ó una mezcla de éstos.
5. El método de acuerdo con la reivindicación 4, en donde el solvente de extracción hidrófobo es acetato de iso-butilo.
6. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la extracción es a una temperatura de entre 2°C y 70°C.
7. El método de acuerdo con la reivindicación 6, en donde la extracción es a una temperatura de entre 15°C y 35°C.
8. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el pH de la biomateria extraída es entre 7,5 y 13.
9. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la biomateria que contiene un macrólido se obtiene de un microorganismo que se selecciona de Streptomyces tsukubaensis, Streptomyces hygroscopícus, y Streptomyces lividans .
10. El método de acuerdo con la reivindicación 9, en donde la biomateria que contiene un macrólido se un caldo de fermentación completo .
11. El método de acuerdo con la reivindicación 10, en donde el macrolido es tacrolimus.
12. El método de acuerdo con la reivindicación 11, en donde el pH de la biomateria es entre 7,5 y 13.
13. El método de acuerdo con la reivindicación 12, en donde el solvente de extracción hidrófobo es acetato de iso-butilo.
14. El método de acuerdo con la reivindicación 1, que además comprende los pasos, después de la extracción, de: separar la solución que contiene el macrolido de la biomateria que contiene el macrolido extraída; concentrar la solución que contiene el macrolido concentrada, cargar la solución que contiene el macrolido concentrada en una columna de gel de sílice y eluir con un eluyente para obtener al menos una fracción que contiene el macrolido que es una solución que contiene el macrolido, cristalizar el macrolido a partir de la solución que contiene el macrolido, y aislar el macrolido cristalizado.
15. El método de acuerdo con la reivindicación 14, en donde la cristalización se realiza concentrando al menos una fracción que contiene el macrólido que es una solución que contiene el macrólido y enfriando la solución concentrada a una temperatura de 25°C o menos.
16. El método de acuerdo con la reivindicación 14, en donde la cristalización se efectúa combinando la solución separada con un solvente de cristalización.
17. El método de acuerdo con la reivindicación 16, en donde el solvente de cristalización se selecciona del grupo formado por acetonitrilo, metanol, etanol, i -propanol, acetona, éter dietílico, acetato de etilo, los hexanos , los heptanos y agua.
18. El método de acuerdo con la reivindicación 17, en donde el solvente de cristalización se selecciona del grupo formado por metanol, etanol, i -propanol y agua.
19. El método de acuerdo con la reivindicación 16, en donde la combinación de la solución separada y el solvente de cristalización se mantiene a una temperatura de 25 °C o menos durante un período de retención de entre 10 y 60 horas.
20. Un método para obtener tacrolimus a partir de una biomateria que contiene tacrolimus que comprende los pasos de: a) extraer una biomateria que contiene tacrolimus que es un caldo de fermentación completo obtenido mediante la fermentación de un microorganismo que se selecciona del grupo formado por Streptomyces tsukubaensis, Streptomyces hygroscopicus y Streptomyces lividans con un solvente de extracción hidrófobo que se selecciona del grupo formado por n-butanol, iso-butanol, acetato de n-etilo, acetato de iso-butilo, acetato de etilo, acetato de propilo, formato de etilo, butil metil cetona, diclorometano , cloroformo, tetraclorometano, dicloroetano, y tolueno para obtener una solución de tacrolimus en el solvente de extracción hidrófobo a una temperatura de entre 2°C y 70 °C y a un pH de entre 5,5 y 13, b) separar la solución que contiene tacrolimus de la biomateria que contiene tacrolimus extraída, c) concentrar la solución que contiene tacrolimus, d) cargar la solución que contiene tacrolimus concentrada en una columna de cromatografía de gel de sílice y eluir la columna con un eluyente para obtener al menos una fracción que contiene tacrolimus que es una solución que contiene tacrolimus, e) cristalizar el tacrolimus a partir de al menos una fracción que contiene tacrolimus, mediante lo cual se forma un precipitado de tacrolimus crisatalizado, y f) separar el tacrolimus cristalizado.
21. El método de acuerdo con la reivindicación 20, en donde el pH del caldo de fermentación completo es entre 7,5 y 13.
22. El método de acuerdo con la reivindicación 20, en donde el solvente de extracción hidrófobo es acetato de iso-butilo.
23. El método de acuerdo con la reivindicación 20, en donde la extracción es a una temperatura de entre 15°C y 30°C.
24. El método de acuerdo con la reivindicación 20, en donde la cristalización se efectúa concentrando al menos una fracción que contiene tacrolimus y enfriando la fracción concentrada a una temperatura de 25°C o menos.
25. El método de acuerdo con la reivindicación 20, en donde la cristalización se efectúa combinando al menos una fracción que contiene tacrolimus con un solvente de cristalización que se selecciona del grupo formado por acetonitrilo , metanol, etanol, acetona, éter dietílico, acetato de etilo, los hexanos, los heptanos y agua.
26. En un proceso para obtener tacrolimus a partir de una biomateria que contiene tacrolimus, el paso de extraer una biomateria que contiene tacrolimus que es caldo de fermentación completo dentro de un solvente de extracción hidrófobo que se selecciona del grupo formado por acetato de n-butilo, acetato de iso-butilo, acetato de t-butilo, acetato de etilo, acetato 'de propilo, formato de etilo, butil metil cetona, diclorometano, cloroformo, tetraclorometano, y tolueno, en donde el pH de la biomateria que contiene tacrolimus es entre 5,5 y 13.
27. Un método de obtener una biomateria que contiene tacrolimus que comprende los pasos de : a) extraer una biomateria que contiene tecrolimus que es un caldo de cultivo completo obtenido mediante la fermentación de un microorganismo que se selecciona del grupo formado por Streptomyces tsukubaensis, Streptomyces hygroscopicus, y Streptomyces lividans con acetato de iso-butilo para obtener una solución de tacrolimus en acetato de iso-butilo a una temperatura de entre 2°C y 70°C, b) separar la solución que contiene tacrolimus a partir de una biomateria que contiene tacrolimus extraída, c) concentrar la solución que contiene tacrolimus, d) cargar la solución que contiene tracolimus concentrada en una columna de cromatografía de gel de sílice y eluir con un eluyente para obtener al menos una fracción que contiene tacrolimus que es una solución que contiene tracrolimus, e) concentrar al menos una fracción que contiene tacrolimus, f) cristalizar el tacrolimus a partir de la fracción concentrada, por lo cual se forma un precipitado de tacrolimus cristalizado, y g) separar el tacrolimus cristalizado.
28. El método de acuerdo con la reivindicación 27, en donde el pH de la biomateria que contiene tacrolimus es de 5,5 a 13.
29. El método de acuerdo con la reivindicación 28, en donde el pH de la biomateria que contiene tacrolimus es de 7,5 a 13.
30. El método de acuerdo con la reivindicación 27, en donde la temperatura de extracción es entre 15°C y 35°C.
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Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7452692B2 (en) * 2002-02-13 2008-11-18 Teva Gyógyszergyár Zártkörüen Müködö Részvénytársaság Method for extracting a macrolide from biomatter
ZA200406350B (en) 2002-02-13 2006-11-29 Teva Gyogyszergyar Reszveny Tarsasag Method for extracting a macrolide from biomatter
TW200504079A (en) * 2003-03-31 2005-02-01 Biogal Gyogyszergyar Crystallization and purification of macrolides
US20060169199A1 (en) * 2003-03-31 2006-08-03 Vilmos Keri Crystallization and purification of macrolides
ATE378345T1 (de) * 2003-07-24 2007-11-15 Teva Gyogyszergyar Zartkoeruee Verfahren zur aufreinigung von makroliden
CA2548297C (en) * 2003-12-05 2011-06-14 Biocon Limited Process for the purification of macrolides
KR100485877B1 (ko) * 2003-12-30 2005-04-28 종근당바이오 주식회사 타크롤리무스를 생산하는 미생물 및 이를 이용한타크롤리무스의 대량 생산방법
CA2562805C (en) 2004-04-12 2014-03-11 Biocon Limited Process for the production of macrolides using a novel strain, streptomyces sp. bicc 7522
CA2580127A1 (en) * 2004-09-10 2006-03-23 Ivax Pharmaceuticals S.R.O. Process for isolation of crystalline tacrolimus
WO2006031661A2 (en) * 2004-09-10 2006-03-23 Ivax Pharmaceuticals S.R.O. Process for isolation of macrolide compounds
JP2007523896A (ja) * 2004-12-01 2007-08-23 テバ ジョジセルジャール ザ−トケルエン ムケド レ−スベニュタ−ルシャシャ−グ アスコマイシンの結晶形態とその調製方法
MX2007005868A (es) * 2004-12-22 2007-07-04 Teva Gyogyszergyar Zartkoeruen Mukoedo Reszvenytarsasag Metodo de purificar tacrolimus.
EP1833835A1 (en) * 2005-01-05 2007-09-19 Teva Gyogyszergyar Zartkoruen Müködö R Szv Nytarsa Amorphous tacrolimus and preparation thereof
CN108384819B (zh) * 2017-02-03 2021-06-25 上海医药工业研究院 一种用于发酵他克莫司的培养基以及发酵方法
CN112390817B (zh) * 2019-08-19 2023-07-07 鲁南制药集团股份有限公司 一种盐析萃取他克莫司发酵液的方法
CN112730704B (zh) * 2021-02-04 2022-08-16 福建省微生物研究所 一种他克莫司软膏有关物质测定的前处理方法
CN115536672B (zh) * 2022-10-12 2024-05-14 国药集团川抗制药有限公司 他克莫司粗品的提取方法和应用

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2121517C3 (de) 1971-04-30 1974-06-27 Leningradskij Nautschno-Issledowatelskij Institut Antibiotikow, Ssr, Leningrad (Sowjetunion) Verfahren zur Gewinnung von Amphoterizin B
US3993749A (en) 1974-04-12 1976-11-23 Ayerst Mckenna And Harrison Ltd. Rapamycin and process of preparation
US4160861A (en) 1977-10-03 1979-07-10 Merck & Co., Inc. Method for the separation of antibiotic macrolides
JPS591694B2 (ja) * 1981-12-28 1984-01-13 三菱瓦斯化学株式会社 ４−ヒドロキシ−２，４，６−トリメチルシクロヘキサ−２，５−ジエン−１−オンの製造法
US4894366A (en) 1984-12-03 1990-01-16 Fujisawa Pharmaceutical Company, Ltd. Tricyclo compounds, a process for their production and a pharmaceutical composition containing the same
CN1020853C (zh) * 1984-12-03 1993-05-26 藤泽药品工业株式会社 含三环化合物或其盐的药物组合物的制备方法
BE1003436A3 (fr) 1988-11-29 1992-03-24 Sandoz Sa Derives cycliques et leurs metabolites, leur preparation et leur utilisation comme medicaments.
JP2639737B2 (ja) 1990-01-23 1997-08-13 寳酒造株式会社 新規ｒ１０６類化合物
JP3067183B2 (ja) 1990-09-18 2000-07-17 藤沢薬品工業株式会社 Ｆｒ９００５０６物質の製造法
US5194378A (en) 1991-01-28 1993-03-16 Merck & Co., Inc. Process for producing fk-506
US5116756A (en) 1991-01-28 1992-05-26 Merck & Co., Inc. Process for producing FK-506
US5494820A (en) * 1991-04-11 1996-02-27 Pfizer Inc. Streptomyces braegensis strain and its cultivation in a process for producing C9 -desoxo-FK-520
US5091389A (en) 1991-04-23 1992-02-25 Merck & Co., Inc. Lipophilic macrolide useful as an immunosuppressant
US5612316A (en) 1992-03-02 1997-03-18 Pfizer Inc. Fluorosugar derivatives of macrolides
JPH07500613A (ja) 1992-03-02 1995-01-19 ファイザー・インコーポレーテッド 免疫抑制剤及び抗真菌剤としてのマクロライドのデソサミノ誘導体
US5264355A (en) 1992-07-02 1993-11-23 Merck & Co., Inc. Methlating enzyme from streptomyces MA6858
UA41884C2 (uk) 1993-11-05 2001-10-15 Амерікан Хоум Продактс Корпорейшн Спосіб відокремлення рапаміцину від кислотних, основних та неполярних нейтральних домішок, присутніх в концентраті екстрактів ферментаційного бульйону або маточних розчинів
US5622866A (en) 1994-06-23 1997-04-22 Merck & Co., Inc. Expression cassettes useful in construction of integrative and replicative expression vectors for Streptomyces
DE4425066A1 (de) * 1994-07-15 1996-01-18 Solvay Fluor & Derivate Anwendungen und Zusammensetzungen mit Difluormethoxy-2,2,2-trifluorethan
GB9618952D0 (en) 1996-09-11 1996-10-23 Sandoz Ltd Process
US5616595A (en) * 1995-06-07 1997-04-01 Abbott Laboratories Process for recovering water insoluble compounds from a fermentation broth
NZ510819A (en) 1998-10-02 2004-03-26 Kosan Biosciences Inc Polyketide synthase enzymes and recombinant DNA constructs therefor
GB9826882D0 (en) 1998-12-07 1999-01-27 Novartis Ag Organic compounds
IL146285A0 (en) 1999-05-25 2002-07-25 Fujisawa Pharmaceutical Co Method for separating analogous organic compounds
TW553946B (en) 1999-09-08 2003-09-21 Fujisawa Pharmaceutical Co Method for separating lactone-containing high-molecular weight compounds
ES2177373B1 (es) 1999-11-26 2003-11-01 Astur Pharma Sa Preparacion de azitromicina en su forma no cristalina
CN1406283A (zh) * 2000-02-24 2003-03-26 拜奥盖尔药厂有限公司 纯化发酵液的方法
ZA200406350B (en) 2002-02-13 2006-11-29 Teva Gyogyszergyar Reszveny Tarsasag Method for extracting a macrolide from biomatter

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AU2003213024A1 (en) 2003-09-04

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