MXPA04000355A - Derivados de variolina y su uso como agentes antitumorales. - Google Patents

Derivados de variolina y su uso como agentes antitumorales.

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Abstract

Se proveen derivados de variolina de la formula (5), en los que cada uno de los grupos sustituyentes, definidos por X2, R1, R2, R3, R6, R7 y R12 estan seleccionados independientemente del grupo que consiste de H, OH, OR??, SH, SR??, SOR??, SO2R??, NO2, NH2, NHR??, N(R??)2, NHCOR??, HSO2R??, CN, halogeno, =O, C(=O)H, C(=O)R??, carboxialquilo, alquilo de 1 a 12 de carbono, alquenilo de 2 a 12 atomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 atomos de carbono, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromatico sustituido o no sustituido; donde cada uno de los grupos R?? esta seleccionado independientemente del grupo que consiste de H, OH, SH, NO2, NH2, CN, halogeno, =O, C(=O)H, C(=O)CH3, CO2H, CO2CH3, alquilo de 1 a 12 atomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 atomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 atomos de carbono, arilo, aralquilo y heteroaromatico; donde los pares de grupos: R1 y R2, R2, R3 y R12, R12 y R6 o R6 y R7 pueden estar unidos a un sistema anular carbociclico o heterociclico.

Description

DERIVADOS DE VARIOLINA Y SU USO COMO AGENTES ANTITU MORALES La presente invención se refiere a compuestos antitumorales y, en particular, a nuevos análogos antítumorales de compuestos de variolina, que incluyen variolina B y desoxivariolina B.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las variolinas son una clase de alcaloides marinos aislados de la esponja antartica Kirkpatrickia varialosa, que es un espécimen raro y difícil de obtener, siendo un ejemplo típico de dichos alcaloides la variolina B (1). Todas las variolinas contienen un núcleo fundido de pirido[3'.2':4.5]pirrolo[1.2-c]pirimidina, ya sea con un anillo aromático heterocíclico o con un grupo éster fijado en C5> como en la variolina B(1), la variolina D (3) y la desoxivariolina B (4): W Se describen las variolinas como teniendo actividad antitumoral y otras propiedades útiles. La estructura completa de estos compuestos y otros relacionados, está dada por N. B. Perry y coautores, Tetrahedron 1994, 50, 3987-3992, y G. Trimurtulu y coautores, Tetrahedron 1994, 50, 3993-4000. Los estudios de síntesis para los alcaloides de 2-aminopirimidina, las variolinas y las meridianinas, son el asunto de Tetrahedron Lett., 2000, 41, 4777-4780. M. Álvarez y coautores, Tetrahedron Lett. 2001, 42, 315-317, describen una síntesis para la desoxivariolina B, a partir de 7-azaindol. Están descritos los estudios para la síntesis total de las variolinas en Tetrahedron Lett., 2001, 42, 311-313. La primera síntesis total de la variolina B fue descrita por R. J. Anderson y coautores, Tetrahedron Lett., 2001, 42, 8697-8699. Posteriormente P. Molina y coautores, Tetrahedron Lett. 2002, 43, 1005-1007, describen también la síntesis de variolina B, obtenida mediante ciclización en tándem con aza-Wittig/ carbodümlda. WO 0204447, publicada el 17 de enero de 2002, describe un método para preparar variolina B (1) y desoxivariolina B (4) a partir de materiales de partida monoheteroaromáticos simples, y al mismo tiempo proveer nuevos derivados de variolina. WO 0212240, publicada el 14 de febrero de 2002, se refiere a derivados de variolina B.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención está dirigida a compuestos de la fórmula general (5), que tienen el sistema de anillo de pirido pirrólo pirimidina fundido, de los compuestos de variolina: en la que cada uno de los grupos sustituyentes definidos por X2, Ri, R2. R3, Re, R7 y R12. está seleccionado independientemente del grupo que consiste de H, OH, OR', SH, SR\ SOR', S02R\ N02, NH2, NHR', N(R')2, NHCOR', NHS02R', CN, halógeno, =0, C(=0)H, C(=0)R', C02H, C02R\ carboxialquilo, alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 átomos de carbono, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido y no sustituido; donde cada uno de los grupos R' está seleccionado independientemente del grupo que consiste de H, OH, SH, N02, NH2, CN, halógeno, = 0, C(=0)H, C(=0)CH3, C02H, C02CH3) alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 átomos de carbono, arilo, aralquilo y heteroaromático; donde los pares de grupos Ri y R2, R2 y R3, 3 y R12, R12 y R6 ó R6 y R7 pueden estar unidos a un sistema anular carbocíclico o heterocíclico. En un aspecto relacionado, la invención provee compuestos de la fórmula (5a): (5a) en la que cada uno de los grupos sustituyentes definidos por X1; X2, R1 , R2, R3, 4, 5. e y 7 está seleccionado independientemente del grupo que consiste de H, OH, OR', SH, SR\ SOR', SOaR', N02, NH2, NHR', N(R')2, NHCOR', NHS02R', CN, halógeno, =0, C(=0)H, C(=0)R', C02R', carboxialquilo, alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 átomos de carbono, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; donde cada uno de los grupos R' está seleccionado independiente-mente del grupo que consiste de H, OH, SH, N02, NH2, CN, halógeno, =0, C( = 0)H, C(=0)CH3, C02H, C02CH3, alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 átomos de carbono, arilo, aralquilo y heteroaromático; donde los pares de grupos R-i y R2> R4 y Rj o R6 y R7 pueden estar unidos a un sistema anular carbocíclico o heterocíclico. Los susíituyentes halógeno adecuados, en los compuestos de la presente invención, incluyen F, Cl, Br e I. Los grupos alquilo tienen de preferencia de 1 a alrededor de 12 átomos de carbono; más preferible, de 1 a alrededor de 8 átomos de carbono; todavía mejor, de 1 a alrededor de 6 átomos de carbono; y lo que más se prefiere, 1, 2, 3 o 4 átomos de carbono. El metilo, el etilo y el propilo, incluyendo el isopropilo, son los grupos alquilo que son particularmente preferidos en los compuestos de la presente invención. Tal como se usa aquí, el término alquilo, a menos que se modifique de otra manera, se refiere tanto a grupos cíclicos como a grupos no cíclicos, aunque los grupos cíclicos comprenderán por lo menos tres miembros de anillos de carbono. Los grupos alquenilo y alquinilo preferidos en los compuestos de la presente invención tienen una o más ligaduras ¡nsaturadas, y de 2 a alrededor de 12 átomos de carbono; más preferible, de 2 a alrededor de 8 átomos de carbono; todavía más preferible, de 2 a alrededor de 6 átomos de carbono, y lo que más se prefiere, 2, 3 o 4 átomos de carbono. Los términos alquenilo y alquinilo, cuando son usados aquí, se refieren tanto a grupos cíclicos como a no cíclicos; aunque por lo general se da más preferencia a grupos no cíclicos, rectos o ramificados. Los grupos alcoxi preferidos en los compuestos de la presente invención incluyen grupos que tienen una o más ligaduras oxígeno y de 1 a alrededor de 12 átomos de carbono; más preferible, de 1 a alrededor de 8 átomos de carbono; y todavía mejor, de 1 a alrededor de 6 átomos de carbono y, lo que más se prefiere, 1, 2, 3 o 4 átomos de carbono. Los grupos alquiltio preferidos, en los compuestos de la presente invención, tienen una o más ligaduras tioéter y de 1 a alrededor de 12 átomos de carbono, más preferible, de 1 a alrededor de 8 átomos de carbono y, todavía más preferible, de 1 a alrededor de 6 átomos de carbono. Se da preferencia particular a los grupos alquiltio que tienen 1, 2, 3 o 4 átomos de carbono. Los grupos alquilsulfinilo preferidos en los compuestos de la presente invención incluyen aquellos grupos que tienen uno o más grupos sulfóxido (SO) y de 1 a alrededor de 12 átomos de carbono, más preferible, de 1 a alrededor de 8 átomos de carbono y, todavía mejor, de 1 a alrededor de 6 átomos de carbono. Se da preferencia en particular a los grupos alquilsulfinilo que tienen 1 , 2, 3 o 4 átomos de carbono. Los grupos alquilsulfoniio preferidos en los compuestos de la presente invención incluyen aquellos grupos que tienen uno o más grupos sulfonilo (S02) y de 1 a alrededor de 12 átomos de carbono, más preferible, de 1 a alrededor de 8 átomos de carbono y, todavía más preferible, de 1 a alrededor de 6 átomos de carbono. Se prefiere, en particular, los grupos alquilsulfoniio que tienen 1, 2, 3 o 4 átomos de carbono. Los grupos aminoalquilo preferidos incluyen aquellos grupos que tienen uno o más grupos amina primaria, secundaria y/o terciaria, y de 1 a alrededor de 12 átomos de carbono; más preferible, de 1 a alrededor de 8 átomos de carbono; todavía más preferible, de 1 a alrededor de 6 átomos de carbono; más preferible aún, 1, 2, 3 o 4 átomos de carbono. Generalmente se prefieren más los grupos amina secundaria y amina terciaria que las porciones amina primaria. Los grupos carboxialquilo adecuados incluyen grupos alquilo monosustituidos y disustituidos con carboxi. Los grupos carboxi tienen la forma COOR', en especial cuando R' es hidrógeno o alquilo, de preferencia hidrógeno o metilo. Los grupos heterocíclicos adecuados comprenden grupos heteroaromáticos y heteroalicíclicos. Los grupos heteroaromáticos adecuados en los compuestos de la presente invención contienen uno, dos o tres heteroátomos, seleccionados de átomos de N, O ó S; e incluyen, por ejemplo, cumarinilo, incluyendo 8-cumarinilo; quinolinilo, incluyendo 8-quinolinilo; piridilo, pirazinilo, pirimidilo, furilo, pirrolilo, tienilo, tiazolilo, oxazolilo, imidazolilo, indolilo, benzofuranilo y benzotiazol. Los grupos eteroalicíclicos adecuados en los compuestos de la presente invención contienen uno, dos o tres heteroátomos seleccionados de átomos de N, O ó S, e incluyen, por ejemplo, grupos tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, piperidinilo, morfolino y pirrolidinilo. Los grupos arilo carbocíclico adecuados en los compuestos de la presente invención incluyen compuestos de un solo anillo y de varios anillos, incluyendo compuestos de varios anillos que contienen grupos arilo separados y/o fundidos. Los grupos arilo carbocíclico típicos contienen de 1 a 3 anillos separados o fundidos y de 6 a alrededor de 18 átomos de carbono de anillo. Los grupos arilo carbocíclicos preferidos incluyen fenilo, que incluye fenilo sustituido, tal como fenilo 2-sustituido, fenilo 3-sustituido, fenilo 4-sustituido, fenilo 2.3-sustituido, fenilo 2.4-sustituido, fenilo 2.5-sustituido, fenilo 2.6-sustituido, fenilo 3.4-sustituido, fenilo 3.5-sustituido, fenilo 3.6-sustituido, fenilo 2.3.4-sustituido, 2.3.5-sustituido, 2.3.6-sustituido, 2.4.5-sustituido, 2.4.6-sustituido y 3.4.5-sustituido; incluyendo donde uno o más de los sustituyentes de fenilo es un grupo tal como halógeno, ciano, nitro, alcanoílo, sulfinilo, sulfonilo y similares; naftilo, incluyendo 1-naftilo y 2-naftilo; bifenilo; fenantrilo y antracilo. Las referencias en la presente a los grupos R' sustituidos, en los compuestos de la presente invención, se refieren a la porción especificada que puede estar sustituida en una o más posiciones disponibles, con uno o más grupos adecuados, por ejemplo, halógeno, tal como flúor, cloro, bromo y yodo; ciano, hidroxilo, nitro, azido; alcanoílo, tal como un grupo alcanoílo de 1 a 6 átomos de carbono, como acilo y similares; carboxiamido; grupos alquilo, incluyendo aquellos grupos que tienen de 1 a alrededor de 12 átomos de carbono o de 1 a alrededor de 6 átomos de carbono y, más preferible, de 1 a 3 átomos de carbono; grupos alquenilo y alquinilo, incluyendo grupos que tienen una o más ligaduras insaturadas y de 2 a alrededor de 12 átomos de carbono, o de 2 a alrededor de 6 átomos de carbono; grupos alcoxi incluyendo aquellos que tienen una o más ligaduras oxígeno y de 1 a alrededor de 12 átomos de carbono o de 1 a alrededor de 6 átomos de carbono; ariloxi, tal como fenoxi; grupos alquiltio, incluyendo aquellas porciones que tienen una o más ligaduras tioéter y de 1 a alrededor de 12 átomos de carbono o de 1 a alrededor de 6 átomos de carbono; grupos alquilsulfinilo, incluyendo aquellas porciones que tienen una o más ligaduras sulfinilo y de 1 a alrededor de 12 átomos de carbono o de 1 a alrededor de 6 átomos de carbono; grupos alquilsulfonilo, incluyendo aquellas porciones que tienen una o más ligaduras sulfonilo y de 1 a alrededor de 12 átomos de carbono, o de 1 a alrededor de 6 átomos de carbono; grupos aminoalquilo, tales como los grupos que tienen uno o más átomos de N y de 1 a alrededor de 12 átomos de carbono o de 1 a alrededor de 6 átomos de carbono; arilo carbocíclico que tiene 6 o más átomos de carbono, en particular fenilo (por ejemplo, donde R es una porción bifeniio sustituida o no sustituida); y aralquilo, tal como bencilo. De preferencia están excluidos del alcance de la presente invención los compuestos conocidos: Varioiina A, Varioiina B, Varioiina D, N(3')metiltetrahidrovariolina B y desoxivariolina B. Se puede preparar los compuestos de la presente invención de manera sintética, usando la metodología descrita en WO 0204447, donde el esqueleto del núcleo de varioiina está construido de materiales de partida monoheteroaromáticos simples, con base en la siguiente retrosíntesis: í¾) (ib) fto.b) <¾ donde: (»)R»H (bJ »AC Dependiendo de la selección de los materiales de partida monoheteroaromáticos (6) y (7), se puede ampliar fácilmente la metodología para dar acceso a una amplia gama de análogos de varioiina, tal como se ejemplifica aquí. WO 0212240 provee también una guía para la síntesis de compuestos de varioiina. Así pues, la presente invención provee también rutas de síntesis para los compuestos de la presente invención. Las actividades antitumorales de estos compuestos incluyen: leucemia, cáncer del pulmón, cáncer del colon, cáncer renal, cáncer del cuello de la matriz, cáncer de próstata, cáncer de ios ovarios, cáncer pancreático, cáncer endotelial, cáncer de mama, sarcoma y melanoma. Así pues, la presente invención provee un método para tratar cualquier mamífero, principalmente un humano, afectado por cáncer; que comprende administrar al individuo afectado una cantidad eficaz en términos terapéuticos, de un compuesto de la invención, o una composición farmacéutica del mismo. Otra modalidad especialmente preferida de la presente invención está constituida por las composiciones farmacéuticas útiles como agentes antitumorales, que contienen, como ingrediente activo, uno o más compuestos de la invención, así como los procesos para su preparación. Los ejemplos de composiciones farmacéuticas incluyen cualquier sólido (tabletas, pildoras, cápsulas, gránulos, etc.) o líquido (soluciones, suspensiones o emulsiones) con composición adecuada para administración oral, tópica o parenteral. La administración de los compuestos o las composiciones de la presente invención puede ser cualquier método adecuado, tal como una infusión intravenosa, una preparación oral, una preparación intraperitoneal y una preparación intravenosa.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LAS MODALIDADES PREFERIDAS De preferencia R-i es hidrógeno, alquilo o halógeno; más preferible, hidrógeno, metilo o cloro. Alternativamente, R1 forma de preferencia, con R2, un anillo fundido; más preferible, un anillo aromático fundido y, muy preferible, un anillo de benceno fundido. Dicho anillo puede tener sustituyentes, por ejemplo: OR', NR'2 o halógeno; más preferible: hidroxi, alcoxi, amino o halógeno; muy preferible: hidroxi, metoxi, amino, fluoro o cloro. R2 de preferencia es hidrógeno o halógeno; más preferible, hidrógeno, fluoro o cloro. Como se mencionó, alternativamente R-i forma con R2, de preferencia, un anillo fundido. R3 de preferencia es hidrógeno, OR', NR'2 o halógeno; más preferible, hidrógeno, hidroxi, alcoxi, hidroxi protegido, amino, amino protegido o halógeno; muy preferible, hidrógeno, hidroxi, metoxi, benciioxi, amino, metoxibencilamino o cloro. Parece que se obtiene mayor actividad cuando R3 es hidrógeno, seguido por hidroxi, halógeno (cloro), metoxi, amino. Es preferible que R4 sea hidrógeno. Es preferible que R5 sea hidrógeno. Es preferible que R6 sea hidrógeno. Es preferible que R7 sea hidrógeno. De preferencia R-i2 es alquilo, arilo o heteroarilo; más preferible, alquilo, fenilo o heteroarilo con 5 o 6 átomos de anillo y 1 o 2 heteroátomos; muy preferible, isopropilo, fenilo, pirimidinilo, tiofenilo o piridinilo. Los grupos arilo o heteroarilo no están sustituidos o tienen sustituyentes preferidos, seleccionados de OR', especialmente alcoxi, tal como metoxi, o nitro; y cuando es pirimidinilo, pueden tener el sustituyente Xi indicado. Parece que se obtiene mayor actividad cuando R12 es 4-pirimidinilo, como en la fórmula (5a). De preferencia X-¡ es hidrógeno, alquilo, OR', NR'2, SR', SOR', S02 ', carboxialquilo o aralquilo; más preferible: hidrógeno, alquilo, hidroxi, alcoxi, ariloxi, amino, amino protegido, tioalquilo, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo o dicarboxialquilo; muy preferible: hidrógeno, metilo, hidroxi, metoxi, etoxi, benciloxi, fenoxi, amino, metoxibencilamino, tiometilo, metilsulfinilo, metilsulfonilo o dimetilcarboxi etilo. Parece que cuando X! es SR', SOR', S02R', hay elevada selectividad para el cáncer del cuello de la matriz. En las pruebas contra la línea de células Hela, se incrementó la actividad en dos o tres órdenes de magnitud. En particular, X-i es, de preferencia, S-alquilo, SO-alquilo o S02-aIquilo; donde el alquilo usualmente es metilo. De preferencia X2 es NR'2 ó SR'; más preferible, NH2 o tioalquilo, muy preferible, NH2 o tiometilo. Así pues, los compuestos preferidos de la presente invención tienen la fórmula (5) cuando los sustituyentes cumplen con una o más, de preferencia con todas estas definiciones de preferidos, más preferidos o muy preferidos. Son modalidades especialmente preferidas de la presente invención los compuestos similares a variolina, con las estructuras generales (10), (11) y (29): (te> <11) (29) donde cada uno de los grupos sustituyentes definidos por y X2 está seleccionado independientemente del grupo que consiste de H, OH, OR\ SH, SR', SOR', S02R', N02, NH2, NHR', N(R')2, NHCOR', NHS02R', CN, halógeno, =0, C( = 0)H, C( = 0)R', C02H, C02R', carboxialquilo, alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 átomos de carbono, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; pero muy preferiblemente son NH2S e, SOMe ó S02Me, donde R8 está seleccionado del grupo que consiste de H, OH, OR', SH, SR', SOR', S02R\ N02, NH2, NHR', N(R')2, NHCOR', NHS02R', CN, halógeno, =0, C(=0)H, C(=0)R\ C02H, C02R', alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 átomos de carbono, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; pero muy preferiblemente es H, metilo o Cl; donde R9 está seleccionado del grupo que consiste de H, OH, OR', SH, SR', SOR', S02R', N02, NH2, NHR', N(R')2, NHCOR', NHS02R', CN, halógeno, =0, C( = 0)H, C( = 0)R\ C02H, C02R', alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 átomos de carbono, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; pero muy preferiblemente es H o OMe; donde R10 está seleccionado del grupo que consiste de H, OH, OR', SH, SR\ SOR', S02R', N02, NH2, NHR', N(R')2, NHCOR', NHS02R', CN, halógeno, =0, C(=0)H, C(=0)R', C02H, C02R', alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 átomos de carbono, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; pero muy preferiblemente es H, OH, Cl, F, NH2 ó OMe: donde R está seleccionado del grupo que consiste de H, OH, OR', SH, SR', SOR', SOaR\ N02, NH2, NHR', N(R')2> NHCOR', NHS02R\ CN, halógeno, =0, C( = 0)H, C(=0)R\ C02H, C02R\ alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 átomos de carbono, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; pero muy preferiblemente es H, Cl o F; donde R12 está seleccionado del grupo que consiste de H, OH, OR', SH, SR', SOR', S02R', N02> NH2, NHR', N(R')2, NHCOR', NHS02R', CN, halógeno, =0, C( = 0)H, C(=0)R', C02H, C02R', alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 átomos de carbono, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; pero muy preferiblemente es alquilo, arilo sustituido o no sustituido o heteroaromático sustituido o no sustituido; y todavía más preferible es que sea alquilo, fenilo sustituido o no sustituido o tiofenilo sustituido o no sustituido, piridinilo o pirimidinilo; incluyendo los sustituyentes preferidos alcoxi o nitro, especialmente metoxi o nitro, junto con las definiciones permitidas para el grupo donde cada uno de los grupos ' está seleccionado independientemente del grupo que consiste de H, OH, SH, N02, NH2, CN, halógeno, =0, C(=0)H, C(=0)CH3, C02H, C02CH3) alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 átomos de carbono, arilo, aralquilo y heteroaromático. Las modalidades particulares de los compuestos de la fórmula (10) incluyen aquellos en los que uno o más de los sustituyentes son como sigue: es como se definió, incluyendo las opciones preferida, más preferida y muy preferida; X2 es como se definió, incluyendo las opciones preferida, más preferida y muy preferida; R8 es como se definió para Ri, incluyendo las opciones preferida, más preferida y muy preferida; R10 es como se definió para R3, incluyendo las opciones preferida, más preferida y muy preferida; Rn es como se definió para R2, incluyendo las opciones preferida, más preferida y muy preferida.
Las modalidades particulares de los compuestos de la fórmula (11) incluyen aquellos en los que uno o más de los sustituyentes son como sigue: ?? es como se definió, incluyendo las opciones preferida, más preferida y muy preferida; X2 es como se definió, incluyendo las opciones preferida, más preferida y muy preferida; R9 es uno de los sustituyentes permitidos para un anillo de arilo, tales como hidrógeno o alcoxi, de preferencia hidrógeno o metoxi. Las modalidades particulares de los compuestos de la fórmula (29) incluyen aquellos en los que uno o más de los sustituyentes son como sigue: X2 es como se definió; R12 no es pirimidinilo y, de preferencia, es alquilo, arilo o heteroarilo, excepto pirimidinilo; más preferible, alquilo, fenilo o heteroarilo con 5 o 6 átomos de anillo y 1 o 2 heteroátomos; muy preferible, isopropilo, fenilo, tiofenilo o piridinilo. Los grupos arilo o heteroarilo no están sustituidos o tienen los sustituyentes preferidos, seleccionados de OR', especialmente alcoxi, tal como metoxi, o nitro. Los compuestos de las fórmulas generales (10), (11) y (29) pueden ser preparados mediante síntesis, utilizando modificaciones a la metodología descrita en WO 0204447 y WO 0212240.
Algunos de los métodos preferidos para producir los compuestos de la presente invención están descritos más adelante, en los esquemas de reacción que aparecen a continuación, con ejemplos de grupos de sustituyentes típicos. Esos sustituyentes típicos no significan limitaciones para la invención, y se debe entender el proceso en el sentido más general, sin consideración especial para las identidades que están indicadas por medio de códigos de letras. Muchos compuestos activos antitumorales han sido preparados a partir de esos compuestos, y se cree que se pueden formar muchos compuestos más, de conformidad con las enseñanzas de la presente memoria descriptiva. La preparación de los compuestos de la fórmula general (11) está ilustrada a continuación para Rg con el significado de H o de OMe.
La preparación de los compuestos de la fórmula general (10) se ilustra para el caso en que R8 es metilo y R-i0 y Rn son H: 43 44 Se ilustra la preparación de los compuestos de la fórmula general (10) para el caso en que R8 es H o Cl, R10 es H y R1t es F o Cl.
Se ilustra la preparación de los compuestos de la fórmula general (10) para el caso en que R8, R-io y R son H. (9) (4) 51 Para obtener el intermediario clave (8b), ejemplo 17: compuesto 18 en WO 0204447) usando el método conocido, era necesario hacer la reacción entre cloruro de 2-cloronicotinoílo (7b) y yodopirimidina (13) a -100°C. Cuando se trató de escalar de manera ascendente esta reacción, se tuvo que incrementar los tiempos de adición para mantener la temperatura a -95°C dentro de la reacción. Estos tiempos más prolongados incrementaron las reacciones laterales y disminuyeron el rendimiento. A fin de evitar esta temperatura extremadamente baja en la formación de (8b), se desarrolló una nueva ruta para obtener (8b). Así, se convirtió (7b) a la amida de Weinreb (30) correspondiente, la que se hizo reaccionar con el derivado de magnesio de (13) a -5°C, para producir la cetona (31). La transformación de (30) a (8b) se efectuó por medio de dos métodos: a) con el derivado de magnesio de (13) a 0°C, o b) con derivado de litio de (13), bajo las condiciones de Barbier, a -78°C. En ambos métodos se escaló fácilmente la reacción, de manera ascendente, y los rendimientos son mejores que en el método original.
Como un reflejo de este descubrimiento, la presente invención provee un proceso para preparar un intermediario de variolina de la fórmula (8z): en la que hal es un halógeno, y los sustituyentes restantes son como se definió previamente; que comprende hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (31z): (31z) donde los sustituyentes son como se definió previamente, compuesto de la fórmula (13z): <13z) donde los sustituyentes son como se definió previamente. En esta reacción, X† y X2 pueden ser iguales o diferentes y, de preferencia, son ambos -Sme; hal es habitualmente Cl; R' es típicamente H o Ac, y los sustituyentes restantes son ordinariamente H, o como para los compuestos preferidos de la presente invención. El compuesto de la fórmula (31z) es preparado adecuadamente haciendo reaccionar un compuesto de la fórmula (30z): (3te) donde los sustituyentes son como se definió previamente, con un compuesto de la fórmula (13z). El compuesto de la fórmula (13z), empleado para la reacción con el compuesto de la fórmula (30z) puede ser igual a, o diferente de, el compuesto de la fórmula (13z) empleado para que reaccione con el compuesto de la fórmula (31z). Se ¡lustra la preparación de los compuestos de la fórmula general (10) para el caso en que R8 y R-p son H y R10 es OBn: La preparación de los compuestos de la fórmula general (29) está ilustrada para el caso en que 12 es aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido. De tal manera, es posible transformar una variedad de moléculas heteroaromáticas simples, a un número de intermediarios y derivados con actividad terapéutica potencial contra tumores.
Para los compuestos de las fórmulas generales (10) y (11), una variedad de Interconversiones de grupo funcional simples da acceso a una gran variedad de otros derivados con diferentes sustituyentes X,, X2 y R10, tal como se ilustra en lo que viene a continuación. 25 ?? Los ejemplos de las actividades biológicas de los compuestos de la presente invención están incluidos en la tabla I, al final del documento. La presente solicitud reclama la prioridad de una solicitud de patente de la Gran Bretaña. Se ha incorporado expresamente en la presente mediante esta referencia , cualquier descripción, en la memoria descriptiva de esa solicitud de patente de la Gran Bretaña, que no esté contenida en la presente memoria descriptiva . Los proced imientos experimentales y las características fisicoq uímicas de los compuestos son los siguientes: DETALLES EXPERIMENTALES GENERALES A menos que se señale de otra manera, todas las reacciones fueron efectuadas bajo atmósfera de argón, en un recipiente de vidrio previamente secado.
EJEMPLO 1 COMPUESTO (131 (6) (13) Se preparó yodopirimidina (13) siguiendo el procedimiento experimental descrito en la literatura por A. J. Majeed y coautores, Tetrahedron, 1989, 45, 993.
EJEMPLO 2 COMPUESTO (14a¾ MÉTODO A: Se trató a -100°C, una solución de 5.13 g (20.3 mmoles) de 4-yodo-2-metiltiopirimidina (13) en 75 mL de tetrahidrofurano, con 8.1 ml_ (20.3 mmoles, 2.5 M en hexanos, de n-BuLi. Se agitó la mezcla de reacción a -100°C durante 45 min y se trató con una solución de 3.0 g (15.7 mmoles) de 2-cloro-3-quinolincarboxialdehído (12a) en 60 mL de tetrahidrofurano a -100°C, durante 2.5 horas. Se detuvo la reacción con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio; se calentó hasta 23°C y se dividió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. Se cromatografió el producto crudo (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 1:1) para dar 4.0 g (81 por ciento) de (14a) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCl3, 300 MHz) d: 8.45 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.74 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.56 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 4.91 (d, J = 4.2 Hz, 1H, OH), 2.58 (s, 3H). RMN con 13C (CDCI3 75 MHz) d: 172.4, 169.54, 157.9, 149.4, 147.0, 138.0, 133.9, 130.9, 127.9, 127.9, 127.4, 127.2, 113.5, 71.7, 14.2. MS (ESI) m/z 318 (M + 1)+. Rf: 0.12 (hexano:acetato de etilo, 4:1.
MÉTODO B: Se trató a 0°C una solución de 5.1 g (20.3 mmoles) de 4-yodo-2-metiltiopirimidina en 40 mL de tolueno, con 10 mL (20.0 mmoles, 2M en tetrahidrofurano) de i-PrMgCI durante una hora, y se añadió a través de una cánula a una solución de 3.0 g (15.7 mmoles) de 2-cloro-3-qu¡nolincarboxialdehído (12a), en 150 mL de tolueno, a 0°C. Se agitó a 0°C ia mezcla de reacción durante 16 horas; se inactivo con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio; se calentó hasta 23°C y se dividió entre solución acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. Se cromatografió el residuo (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 1:1), para dar 3.5 g (70 por ciento) de (14a) como un sólido amarillo.
EJEMPLO 3 COMPUESTO (14b) Se trató una solución de 3.4 g (13.5 mmoles) de 4-yodo-2-metiltiopirimidina (13) en 60 mL de tetrahidrofurano, a -100°C, con 5.4 mL (13.5 mmoles, 2.5 M en hexano) de n-BuLi, y se agitó a -100°C durante 45 min. Posteriormente se añadió a -100°C una solución de 1.7 g (7.9 mmoles) de 2-cloro-6-metoxi-3-quinolincarboxialdehído (12b) en 35 mL de tetrahidrofurano, y se agitó durante 2.5 horas. Se inactivó la reacción con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, se calentó a 23°C y se dividió entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 3:1) para dar 1.8 g (67 por ciento) de (14b), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.42 (dd, J = 5.1, 1.0 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.86 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.34 (dd, J = 9.3, 2.7 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.20 s amplia 1H), 5.09 (s amplia, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.53 (s amplia, 3H). RMN con 3C (CDCI3, 75 MHz) d: 172.7, 168.4, 158.6, 157.9, 146.6, 143.5, 136.8, 133.6, 129.7, 128.6, 123.9, 113.5, 105.3, 71.2, 55.8, 14.4. MS (ESI) m/z: 370 (M + 23)+. Rf: 0.37 (hexano:acetato de etilo, 1:1).
EJEMPLO 4 COMPUESTO (15a) Se agitó a 23°C, durante 24 horas, una solución de 4.0 g (12.6 mmoles) de (14a) con 7.1 g (18.9 mmoles) de PDC en 50 mL de cloruro de metlleno. Se filtró la mezcla de reacción a través de Cellte, se evaporó y cromatografió (en hexano:acetato de etilo, 4:1) para dar 3.0 g (75 por ciento) de (15a), como un sólido blanco. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) 5: 8.85 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.11 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.88 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.66 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 2.35 (s, 3H). RMN con 13C (CDCI3, 75 MHz) d: 192.7, 173.7, 159.7, 159.3, 148.3, 146.8, 140.6, 132.6, 131.2, 128.8, 128.6, 128.1, 126.1, 113.7, 14.3. MS (ESI) m/z: 280 (M-35) + . Rf: 0.23 (hexano:acetato de etilo, 4:1).
EJEMPLO 5 COMPUESTO (15b) Se trató una solución de 1.8 g (5.2 mmoles) de (14b) en 50 mL de cloruro de metileno, con 2.9 g (7.8 mmoles) de PDC a 23°C durante 48 horas. Se filtró la mezcla de reacción a través de Celite, se concentró y se cromatografió (en hexano:acetato de etilo, 3:1) para dar 1.5 g (82 por ciento) de (15b) como un sólido blanco. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.82 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.97 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.47 (dd, J = 9.3, 2.9 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.34 (s, 3H). RMN con 13C (CDCI3, 75 MHz) d: 1.93.0, 173.7, 159.6, 159.4, 158.9, 144.4, 144.2, 139.2, 131.3, 130.1, 127.3, 125.2, 113.7, 105.9, 55.9, 14.3. MS (ESI) m/z 368 (M + 23)+. Rf: 0.26 (hexano.acetato de etilo, 3:1).
EJEMPLO 6 COMPUESTO (16a) Se trató una solución de 0.50 g (2.0 mmoles) de 4-yodo-2-metiltiopirimidina (13) en 12 mL de tolueno seco, a 0°C, con 1.0 mL (2 mmoles, 2M en tetrahidrofurano) de i-PrMgCI, durante una hora. Se transfirió el arilmagnesio formado, por medio de una cánula, a una solución de 0.32 g (1.0 mmol) de (15a) en 30 mL de tolueno seco a 0°C; se agitó durante 24 minutos, se trató con 2.0 mL de exceso de cloruro de acetilo y se agitó durante la noche a 23°C. Se dividió la mezcla de reacción entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografíó el residuo (hexanoracetato de etilo, de 4:1 a 1:1) para dar 150 mg (15 por ciento) de (16a) como un sólido amarillo.
R N con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.53 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 8.32 (s, 1H), 8.01 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.81-7.77 (m, 2H), 7.58 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 2.36 (s, 6H), 2.30 (s, 3H).
Se trató una solución de 2.1 g (8.3 mmoles, 2.0 equivalentes) de 4-yodo-2-metiltiopirimid ina, en 50 mL de tetrahidrofurano, a -100°C, con 3.3 mL (8.3 mmoles, 2.5 M en hexanos) con n-BuLi, y se agitó a -100°C durante 45 minutos. Posteriormente se añadió lentamente, por medio de una cánula, una solución de 1.4 g (4.1 mmoles) de (15b) en 20 mL de tetrahidrofurano, a -78°C, manteniendo la temperatura a -100°C. Se agitó la mezcla de reacción a -100°C durante tres horas. Se inactivo la reacción con solución acuosa saturada de cloruro de amonio; se calentó hasta 23°C y se dividió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el producto crudo en hexano:acetato de etilo (de 4:1 a 2:1) para dar 1.48 g (76 por ciento) de (16b) como un sólido blanco. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.57 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 7.87 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.43 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 7.36 (dd, J = 9.3, 2.7 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.34 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.47 (s, 6H). RMN con 13C (CDCI3, 75 Hz) d: 172.1, 169.4, 158.7, 158.2, 147.5, 143.1, 138.1, 134.4, 129.7, 127.4, 124.2, 115.3, 105.7, 80.0, 55.9, 14.5. MS (ESI) m/z 494 (M + 23)+. Rf: 0.06 (hexano:acetato de etilo, 4:1).
EJEMPLO 8 COMPUESTO (17a) Se puso al reflujo una mezcla de 680 g (1.40 mmol) de (16a), 2.70 mL (16.9 mmoles) de trietilsilano y 0.23 mL (2.95 mmoles) de ácido trifluoroacético, en 3 mL de dicloroetano, en un tubo sellado, a 80°C, durante 32 horas. Después de enfriar se diluyó el residuo rojo con 50 mL de cloruro de metiieno y se lavó con 50 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y 50 mL de una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. Se secó las capas orgánicas combinadas, sobre sulfato de sodio; se filtró, evaporó y cromatografió (cloruro de metilenoracetato de etilo, de 100:0 a 30:1), para dar 226 mg (41 por ciento) de (17a), como un sólido naranja. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.95 (s, 1H), 8.53 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.09-8.03 (m, 2H), 7.89 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.75 (t, J = 7.2 Hz, 1 H), 7.60 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 2.76 (s, 3H), 2.71 (s, 3H). RMN con 3C (CDCI3, 75 MHz) 5:173.5, 161.0, 157.3, 156.3, 144.8, 143.1, 141.8, 141.0, 128.7, 128.4, 128.0, 126.3, 125.9, 120.0, 112.7, 108.4, 100.1, 15.1, 14.4. MS (ESI) m/z 392 (M + 1)+. Rf: 0.83 (cloruro de metileno:metanol, 96:4).
EJEMPLO 9 COMPUESTO (17b) Se trató una suspensión de 113 mg (0.24 mmol) de (16b) y 37 µ?_ (0.48 mmol) de TFA en 0.5 mL de 1 ,2-dicloroetano, con 0.3 mL (1.9 mmol) de Et3SiH en un tubo sellado, a 10CPC, durante 43 horas. Se enfrió la mezcla de reacción y se dividió entre cloruro de metileno y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el producto crudo en hexanoracetato de etilo (de 4:1 a 2:1) para dar 34 mg (34 por ciento) de (17b), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) 8:8.87 (s, 1H), 8.54 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.42 (dd, J = 9.0, 2.7 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 2.76 (s, 3H), 2.72 (s, 3H). MS (APCI) m/z 420 ( + 1)+. Rf: 0.27 (hexano:acetato de etilo, 4:1).
EJEMPLO 10 COMPUESTO (18a) Se calentó una solución de 15.3 mg (0.039 mmol) de (17a) en una mezcla de 5 mL de 1,4-dioxano y 8 mL de NH4OH al 32 por ciento, en un tubo sellado, a 85°C, durante 16 horas. Se evaporó la mezcla de reacción y se cromatog rafió (cloruro de metileno:metanol, 98:2), para dar 9.3 mg (67 por ciento) de (18a), como un sólido amarillo. RMN con H (CDCI3, 300 MHz) 5:9.02 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.72-7.68 (m, 2H), 7.59 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 5.4 Hz, 1 H), 2.71 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 359 (M + 1) + . Rf: 0.64 (cloruro de met¡leno:metanoi, 6:1).
EJEMPLO 11 COMPUESTO (18b) Se calentó a 90°C, en un tubo sellado, durante 16 horas, una solución de 21.0 mg (0.05 mmol) de (17b) en 25 mL de 1,4-dioxanorhidróxido de amonio al 32 por ciento. Se evaporó la mezcla de reacción y se cromatografió (en cloruro de metileno:metanol, 98:2), para dar 10 mg (52 por ciento) de (18b) como un sólido amarillo.
RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d:8.80 (s, 1H), 8.30 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.52-7.47 (m, 2H), 7.32 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.27 (7.25 (dd, J = 8.7, 2.7 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 3.0 Hz, 1 H), 3.85 (s, 3H), 2.58 (s, 3H). MS (ESI) m/z 389 (M)+.
EJEMPLO 12 COMPUESTO (19a) Se trató a gotas una solución de 26.7 mg (0.068 mmol) de (17a) en 3 ml_ de cloruro de metileno a -30°C, con una solución de 12.5 mg (0.051 mmol, 2.4 equivalentes, 77 por ciento) de mCPBA en 1 mL de cloruro de metileno, y se calentó hasta 0°C durante 30 minutos. Se trató la mezcla de reacción con una solución acuosa saturada de Na2S203 y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se disolvió el producto crudo de reacción en 1 ,4-dioxano:hidróxido de amonio (al 32 por ciento) y se calentó a 80°C en un tubo sellado, durante 16 horas. Se evaporó la mezcla de reacción y se cromatografió (en cloruro de meíileno:metanol, de 98:2 a 94:6) para dar 4.5 mg (20 por ciento) de (19a), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.90 (s, 1H), 8.17 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.64 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.52 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 5.5 Hz, 1H). MS (ESI) m/z 328 (M + 1). Rf: 0.79 (cloruro de metileno:metanol, 6:1).
EJEMPLO 13 COMPUESTO (42) Se trató 2.1 mg (0.006 mmol) de (19a) con HCI en 0.5 mL (3.8 ) de 1,4-dioxano, a 23°C, durante cinco minutos. Se evaporó la mezcla de reacción para dar 2.5 mg (100 por ciento) de (42) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CD3OD, 300 MHz) 5:9.47 (s, 1H), 8.30 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.89 (t, J = 6.9 Hz, 1H),7.79 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.74 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 6.9 Hz, 1H).
S (ESI) m/z 328 (M) + .
EJEMPLO 14 COMPUESTO f 19b) Se trató a -30°C una solución de 18.0 mg (0.04 mmol) de (17b ) en 5 mL de cloruro de metileno, con una solución a 24.7 mg (0.11 mmol, 77 por ciento) de mCPBA en 3 mL de cloruro de metileno. Se calentó hasta 0°C la mezcla de reacción durante 30 minutos y se trató con una solución acuosa saturada de Na2S203. Se dividió la mezcla de reacción entre cloruro de metileno y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (en cloruro de metileno:metanol, 95:5) para dar 2.8 mg (20 por ciento) de (19b) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) 5: 8.81 (s, 1H), 8.13 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.27 (dd, J = 9.3, 2.7 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H).
EJEMPLO 15 COMPUESTO (20) Se añadió dos gotas de dimetilformamida a una suspensión de 5.4 mL (10.6 mmoles) de cloruro de oxalilo y 1.69 g (9.8 mmoles) de ácido 2-cloro-6-metilnicotínico en 45 mL de cloruro de metileno. Se agitó la mezcla durante tres horas a 23°C y se evaporo a presión reducida el solvente, para dar 1.8 g (97 por ciento) de un aceite pardo que se usó sin purificación ulterior. RMN con 1H (CDCI3, 330 Hz) d: 8.35 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 2.61 (s, 3H).
EJEMPLO 16 COMPUESTO (21) Se añadió a gotas 11.6 mL (28.8 mmoles, 2.5 en hexano) de n-BuLi, a una solución de 7.16 g (28.4 mmoles) de 4-yodo-2-metiltiopirimidina (13) en 60 mL de tetrahidrofurano a -100°C. Se agitó la solución negra durante 15 minutos a -100°C. Se añadió por medio de una cánula, a -100°C, una solución de 1.8 g (9.47 mmoles) de cloruro de 2-cloro-6-metilnicotinoílo (20) en 10 mL de tetrahidrofurano. Se agitó durante una hora la mezcla de color rojo intenso, a -95°C, y se añadió cuidadosamente 3.4 mL (47.3 mmoles) de cloruro de acetilo. Se agitó durante cuatro horas la mezcla roja, a 23°C, y se añadió 100 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se separó las capas y se extrajo la capa acuosa con 3 x 150 mL de éter dietílico. Se secó las capas orgánicas combinadas, sobre sulfato de sodio; se las filtró y se las concentró a presión reducida. Se cromatografió el residuo rojo (en hexano:acetato de etilo, desde 1:5 hasta 1:1.5), para producir 2.3 g (54 por ciento) de (21), como un sólido de color rojo pálido. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.54 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 7.79 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.49 (s, 6H), 2.27 (s, 3H).
EJEMPLO 17 COMPUESTO (22) Se puso al reflujo una mezcla de 2.3 g (5.1 mmoles) de (21), 6.6 mL (41.1 mmoles) de Et3SiH y 0.83 mL (10.7 mmoles) de ácido trifluoroacétlco, en 10 mL de dicloroetano, en un tubo sellado, durante tres horas. Después de enfriar se filtró el residuo rojo, se lavó con éter dietílico y se vertió en una mezcla de 300 mL de cloruro de metileno y una solución acuosa saturada de 300 mL de bicarbonato de sodio. Se agitó la mezcla parda durante una hora a 23°C y se separó las capas. Se extrajo la capa acuosa con 3 x 200 mL de cloruro de metileno y se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró a presión reducida para dar 1.1 g (61 por ciento) de (22), como un sólido amarillo. R N con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.51 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.79 (s, 3H), 2.71 (s, 3H).
EJEMPLO 18 COMPUESTO 124) Se añadió a gotas una solución de 45 mg (0.18 mmol, 77 por ciento) de mCPBA en 2 mL de cloruro de metileno, previamente secada sobre sulfato de sodio, a una solución enfriada a -30°C de 29.5 mg (0.083 mmol) de (22) en 4 mL de cloruro de metileno. Se agitó durante 15 minutos la solución amarilla a 0°C. Se añadió 5 mL de una solución acuosa saturada de Na2S203 y se lavó con 5 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se extrajo las capas acuosas combinadas con 3 x 10 mL de cloruro de metileno. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. Se vertió el intermediario (23) en un tubo sellado, con 4 mL de 1,4-dioxano y se añadió 14 mL de solución al 32 por ciento de amoniaco. Se calentó la mezcla parda durante 14 horas a 85°C. Se evaporó al vacío la mezcla parda resultante y se añadió 11 mL de cloruro de metileno:metanol (10:1), se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó el solvente a presión reducida. Se purificó el sólido amarillo mediante cromatografía rápida, usando cloruro de metileno:metanol (2 por ciento) a cloruro de met¡leno:metanol (5 por ciento) como eluyente, para dar 4 mg (17 por ciento, dos pasos) de (24), como un sólido amarillo.
RMN con H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.50 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.4 Hz, 1H), 7.46-7.73 (m, 2H), 7.29 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.4 Hz, 1H), 2.68 (s, 3H). MS (ES) m/z: 292 (M + 1 ) + .
EJEMPLO 19 COMPUESTO (44) Se suspendió 30 mg del compuesto (24) en 6 mL de una solución 3.8 N de HCI en 1 ,4-dioxano, a 0°C. Se agitó a 0°C la mezcla de color pardo pálido durante 15 minutos, y se evaporó al vacío. Se añadió 5 mL de cloruro de metileno, se agitó durante un minuto y se volvió a evaporar. Se añadió 5 mL de 1,4-dioxano y se filtró el sólido pardo pálido y se lo lavó con otros 3 mL de 1,4-dioxano para producir 30 mg de (44). RMN con H (CD3OD, 300 Hz) d: 8.84 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 2.79 (s, 3H).
EJEMPLO 20 COMPUESTO (43) Se añadió 4 mL de solución de amoniaco al 32 por ciento a una solución de 11 mg (0.031 mmol) de (22) en 2 mL de 1,4-dioxano. Se calentó la mezcla parda durante 14 horas a 85°C en un tubo sellado. Se evaporó al vacío la mezcla amarilla resultante; se añadió 5 mL de cloruro de metileno y se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó a presión reducida el solvente. Se purificó el sólido amarillo mediante cromatografía rápida usando (cloruro de metileno:metanol, de 1% a 3%) como eluyente, para dar 3 mg (67 por ciento, BRS ) de (43), como un sólido amarillo. R N con 1H (CDCI3, 300 Hz) 5: 8.60 ()d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 2.73 (s, 3H), 2.69 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 323 (M + 1)+.
EJEMPLO 21 COMPUESTO (45) Se trató una solución de 0.76 g (3.0 mmoles) de 4-yodo-2-metiltiopirimidina en 10 mL de tetrahidrofurano seco, a -100°C, con 1.2 mL (3.0 mmoles, 2.5 M en hexanos) de n-BuLi; y se agitó la solución naranja a -100°C durante 20 minutos. Se añadió a gotas una solución de 0.21 g (1.0 mmol) de cloruro de 2,5-dicloronicotinoílo en 5 mL de tetrahidrofurano, a la solución previamente preparada del derivado de organolitio, y se agitó la mezcla de reacción durante tres horas a -100°C. Después e esto se inactivo el producto de reacción crudo con una solución acuosa saturada de 20 mL de cloruro de amonio y se extrajo con 3 x 20 mL de acetato de etilo. Se secó las capas orgánicas combinadas, sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. La cromatografía rápida del residuo (acetato de etilo:hexano, 50:50) produjo 0.11 g (26 por ciento) del correspondiente carbinol. Se añadió una solución de 0.11 g (0.26 mmol) de este carbinol en 10 mL de tetrahidrofurano a una suspensión de 16 mg (0.4 mmol, 60 por ciento) de NaH en 5 mL de tetrahidrofurano. Se agitó la mezcla de color rojo oscuro a 23°C durante 10 minutos. Luego se añadió a gotas 0.071 mL (1.0 mmol) de cloruro de acetilo y se agitó la suspensión amarilla resultante durante 5 horas a 23°C. Se añadió 20 ml_ de solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo la capa acuosa con 3 x 20 mL de cloruro de metileno. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró para producir 0.11 g (90 por ciento, rendimiento total 24 por ciento) de (45), como un aceite pardo que fue usado sin purificación ulterior. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 2.30 (s, 3H), 2.40 (s, 6H), 7.28 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 7.91 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.34 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 5.3 Hz, 2H). MS (ESI) m/z 468 (M)+.
EJEMPLO 22 COMPUESTO (46) Se trató a -100°C una solución de 2.3 g (9.0 mmoles) de 4-yodo-2-metiltiopir¡midina en 10 mL de tetrahidrofurano seco, con 3.6 mL (9.1 mmoles, 2.5 M en hexanos) de n-BuLi, y se agitó la solución naranja a esa temperatura, durante veinte minutos. Se añadió a gotas una solución de 0.69 g (3 mmoles) de cloruro de 2,6- dicloro-5-fluoronicotinoílo en 5 mL de tetrahidrofurano, a la solución previamente preparada del derivado de organolitio, y se agitó la mezcla de reacción durante tres horas a -100°C. Después de esto se inactivo la reacción cruda con 20 mL de una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, y se extrajo con 3 x 20 mL de acetato de etilo. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. La cromatografía rápida del residuo (acetato de etilo:hexano, 50:50) produjo 0.15 g (11 por ciento) del carbinol correspondiente. Se añadió una solución de 0.15 g (0.3 mmol) de este carbinol en 3 mL de tetrahidrofurano, a una suspensión de 20 mg (0.5 mmol, 60 por ciento) de NaH en 2 mL de tetrahidrofurano. Se agitó a 23°C la mezcla de color rojo oscuro, durante 10 minutos. Luego se añadió a gotas 0.10 mL (1.3 mmol) de cloruro de acetilo y se agitó la suspensión amarilla resultante durante 5 horas a 23°C. Se añadió 20 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo la capa acuosa con 3 x 20 mL de cloruro de metileno. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró para dar 0.13 g (83 por ciento; rendimiento total 9%) de (46), como un aceite pardo, que se usó sin purificación ulterior. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 2.31 (s, 3H), 2.42 (s, 6H), 7.27 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 7.81 (d, JH-F = 8.6 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 5.3 Hz, 2H). MS (ESI) m/z: 486 (M)+.
EJEMPLO 23 COMPUESTO (47) Se transfirió una solución de 110 mg (0.23 mmoi) de (45) y 0.04 mL (0.52 mmol) de ácido trifluoroacético en 2 mL de 1,2-d icloroetano, a un tubo de Young, equipado con un septum de hule, que contenía 0.33 mL (2.08 mmoles) de trietilsilano. Bajo un fuerte flujo de argón, se reemplazó el septum con una tapa roscada de Teflón y se calentó el recipiente de reacción sellado a 100°C durante 48 horas. Después de enriar se abrió el recipiente y se diluyó los contenidos con 10 mL de cloruro de metiieno. Se neutralizó la solución con 10 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se separó las capas. Se extrajo repetidas veces la capa acuosa con cloruro de metiieno y se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. Se obtuvo la purificación del material crudo mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, 33 por ciento) para dar una mezcla de dos productos con el mismo f. Se obtuvo 20 mg (20 por ciento) de (47) mediante la adición de 15 mL de éter dietílico y la filtración, como un sólido amarillo.
RMN con H (CDCI3, 300 MHz) d: 2.68 (s, 3H), 2.73 (s, 3H), 7.31 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.54 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.66 (d, J = 2.1 Hz, 1 H). MS (ES!) m/z: 374 ( + 1) + .
EJEMPLO 24 COMPUESTO (48) Se transfirió una solución de 200 mg (0.42 mmol) de (46) y 64 µ?. (0.82 mmol) de ácido trif luoroacético en 2 mL de 1,2-dicloroetano, a un tubo de Young equipado con un septum de hule que contenía 0.52 mL (3.28 mmoles) de trietilsilano. Bajo un flujo fuerte de argón se reemplazó el septum con una tapa roscada de Teflón, y se calentó el recipiente de reacción sellado a 140°C durante 96 horas. Después de enfriar se abrió el recipiente y se diluyó los contenidos con 10 mL de cloruro de metileno. Se neutralizó la solución con 10 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se separó las capas. Se extrajo repetidamente la capa acuosa con cloruro de metileno y se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. Se obtuvo la purificación del material crudo mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, 33 por ciento) para dar una mezcla de dos productos con el mismo Rf. Se obtuvo 26 mg (16 por ciento) de (48) añadiendo 15 mL de éter dietílico y con filtración, como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) 5: 2.67 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 7.25 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 8.47 (d, JH-F = 8.8 Hz, 1H), 8.53 (d, J = 5.4 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 392 (M + 1)+.
EJEMPLO 25 COMPUESTO 49 Se disolvió el compuesto 47 (20 mg, 0.054 mmol) en 5 mL de cloroformo enfriado a -30°C. Se añadió a gotas una solución previamente enfriada (a -30°C) de 19 mg (0.11 mmol, 77 por ciento) de ácido m-cloroperbenzoico en 5 mL de cloruro de metileno, y se agitó a 0°C durante 15 minutos. Se calentó la solución hasta 23°C, se neutralizó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo repetidamente con cloruro de metileno. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró para obtener después el sulfóxido, como un sólido amarillo, que se usó sin purificación ulterior. Se calentó el material oxidado crudo con un exceso de 1 mL de p-metoxibencilamina, a 85°C, durante 15 horas. Se purificó la mezcla de reacción mediante cromatografía rápida (acetato de etilo: hexano, 50:50). Se trató este producto con 0.5 mL de ácido tríflico a 23°C durante tres horas. Se enfrió la mezcla de reacción a 0°C y se trató sucesivamente con 1 mL de MeOH y con 1 mL de hidróxido de amonio acuoso al 32 por ciento. Se separó por filtración el precipitado, se lavó con 5 mL de MeOH y 5 mL de éter dietílico, y se secó para dar 10 mg de (49) como un sólido amarillo (rendimiento total 60 por ciento). RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 6.92 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.64 (d, J = 2.2 Hz, 1H). MS (ESI) m/z 312 (M + 1) + .
EJEMPLO 26 COMPUESTO 50 Se disolvió 26 mg (0.066 mmol) del compuesto (48) en 5 mL de cloroformo y se enfrió a -30°C. Se añadió a gotas una solución previamente enfriada a -30°C, de 23 mg (0.132 mmol) de ácido cloroperbenzoico en 5 mL de cloruro de metileno, y se agitó a 0°C durante 15 minutos. Se calentó la solución hasta 23°C y se extrajo repetidamente con cloruro de metileno. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró para dar el sulfóxido, como un sólido amarillo, que se usó sin purificación ulterior. Se calentó el material oxidado crudo con un exceso de 1 mL de p-metoxibencilamina, a 85°C, durante 15 horas. Se purificó la mezcla de reacción mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, 50:50). Se trató este producto con 0.5 mL de ácido tríflico a 23°C durante tres horas. Se enfrió a 0°C la mezcla de reacción y se trató sucesivamente con 1 mL de metanol y 1 mL de hidróxido de amonio acuoso (al 32 por ciento). Se filtró el precipitado, se lavó con 5 mL de metanol y 5 mL de éter dietílico y se secó para producir 3 mg de (50), como un sólido amarillo (rendimiento total, 14 por ciento). R N con H (CDCI3, 300 MHz) d: 6.86 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.50 (d, JH-F = 9.3 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 329 (M)+.
EJEMPLO 27 COMPUESTO (8b) MÉTODO A Se añadió a gotas 5.0 mL (10.0 mmoles) de una solución 2.0 M de bromuro de i-propilmagnesio en tetrah idrofurano, a una solución de 2.52 g (10.0 mmoles) de 4-yodo-2-metiltiopirimidina (13) en 60 mL de tolueno a 0°C. Se agitó durante una hora la solución parda a 0°C. Se añadió a gotas esta solución a una solución de 1.06 g (4 mmoles) de (31) en 40 mL de tolueno, por medio de una cánula, durante un periodo de 20 minutos. Cuando se completó la adición se agitó la mezcla de reacción durante otros 15 minutos a 0°C y luego se inactivo con 0.99 mL (14.0 mmoles) de cloruro de acetilo. Se separó el baño de hielo y se agitó la suspensión parda resultante durante tres horas a 23°C. Se añadió 100 mL de un solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo la capa acuosa con 3 x 50 mL de acetato de etilo. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. La cromatografía rápida del residuo crudo (acetato de et¡Io:hexano, 50:50) produjo 1.28 g (74 por ciento) de (8b) como un sólido espumoso de color naranja pálido. Se aisló el producto junto con una pequeña cantidad de (32) que se forma como un producto lateral en la reacción. Se usó la mezcla de ambos compuestos en el siguiente paso. 8b: RMN con H (CDC , 300 MHz) 6:8.48 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 8.36 (dd, J = 4.9, 1.9 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 7.8, 1.7 Hz, 1 H), 7.28 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 7.24 (dd, J = 7.8, 4.6 Hz, 1H), 2.36 (s, 6H), 2.28 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 456 (M + 23) + , 434 (M + 1)+. 32 RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.47 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.37 (dd, J = 4.9, 1.9 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 7.8, 4.6 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 2.36 (S, 3H), 2.28 (s, 3H). MÉTODO B: Se añadió a gotas 9 mL (22.6 mmoles, 2.5 M en hexano) de n-BuLi, previamente enfriado a -78°C, a una solución de 3 g (11.3 mmoles) de (31) y 5.71 g (22.6 mmoles) de 4-yodo-2-metiltiopirimidina (13) en 75 mL de tetrahidrofurano, a -78°C. Se agitó la mezcla parda oscura durante 15 minutos a -78°C y se añadió cuidadosamente 3.2 mL (45.3 mmoles) de cloruro de acetilo. Se agitó la suspensión verde oscura a 23°C durante 3.5 horas; se inactivo con 150 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, y se extrajo con 2 x 150 mL de éter dietílico. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró. Se purificó el residuo rojo mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:4 a 100:0) para dar 3 g (61 por ciento) de (8b), como un sólido rojo pálido.
EJEMPLO 28 COMPUESTO (9) Se vertió una mezcla de 1.6 g (3.7 mmoles) de (8b), 0.6 mL (7.74 mmoles) de ácido trifluoroacético y 4.7 mL (29.5 mmoles) de Et3SiH, en un tubo de Young que contenía 8 mL de 1,2-dicloroetano. Se calentó a 90°C el recipiente de reacción durante 24 horas. Después de enfriar se abrió el recipiente y se diluyó los contenidos con 100 mL de cloroformo. Se neutralizó la solución con 100 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, y se separó las capas. Se extrajo repetidamente la capa acuosa, con cloroformo, y se secó sobre sulfato de sodio las capas orgánicas combinadas, se filtró y concentró. Se purificó el residuo rojo oscuro añadiendo 100 mL de éter dietílico, y con filtración del precipitado rojo brillante, para obtener 0.85 g (68 por ciento) de (9).
RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.64 (dd, J = 8.1, 1.7 Hz, 1H), 8.60 (dd, J = 4.6, 1.7 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 8.5, 4.6 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 2.73 (s, 3H), 2.68 (s, 3H).
EJEMPLO 29 DESOXIVARIOL1NA (4) Se añadió a gotas una solución de 98 mg (0.39 mmol, 77 por ciento) de m-CPBA en 4 mL de cloruro de metileno, previamente secada sobre sulfato de sodio, a una solución enfriada a -30°C de 61 mg (0.18 mmol) de (9) en 5 mL de cloruro de metileno. Se agitó durante 15 minutos la solución amarilla a 0°C. Se añadió una solución acuosa saturada de 5 mL de Na2S203 y se lavó la capa orgánica con 5 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se extrajo las capas acuosas combinadas con 3 x 10 mL de cloruro de metileno. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró. Se vertió (28) en un tubo sellado con 4 mL de 1,4-dioxano y se añadió 8 mL de una solución al 32 por ciento de amoniaco. Se calentó la mezcla parda durante 14 horas a 85°C. Se evaporó la mezcla amarilla resultante al vacío y se añadió 11 mL de cloruro de metileno:metanol (10:1), se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó el solvente a presión reducida. Se purificó el sólido amarillo mediante cromatografía rápida en cloruro de metileno:metanol (2 por ciento) a cloruro de metileno:metanol (5 por ciento) como eluyente, para dar 14 mg (29 por ciento) en dos pasos, de desoxivariolina (4), como un sólido amarillo. RMN con 1H (DMSO-ds, 300 MHz) d: 8.92 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 8.45 (dd, J = 4.6, 1.4 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 8.1, 4.6 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 5.4 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 278 (M + 1)+.
EJEMPLO 30 COMPUESTO (51) Se trató 6 mg (0.024 mmol) de desoxivariolina (4) con 2 mL de una solución 5.3 M de HCI en 1,4-dioxano, y se agitó durante dos horas a 23°C. Se filtró la suspensión para dar 3 mg de (51), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CD3OD , 300 MHz) 5:8.99 (dd, J = 8.2, 1.2 Hz, 1H), 8.67 (dd, J = 4.9, 1.2 Hz, 1H), 8.30 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 8.3, 4.9 Hz, 1H), 7.67 (1H, J = 6.9 Hz, 1 H), 7.57 (d, J = 7.1 Hz, 1 H).
EJEMPLO 31 COMPUESTO (30) A una suspensión agitada vigorosamente, de 33.2 g (0.34 mol) de clorhidrato de ?,?-dimetilhidroxilamina en 1.2 L de tetrahidrofurano, se añadió 59 mL (0.426 mol) de trietilamina y se agitó la mezcla de reacción durante 20 minutos a 23°C. Después de esto se añadió 50 g (0.284 mol) de cloruro de 2-cloronicotinoílo (7b) neto, y se agitó la reacción durante la noche a 23°C. Se inactivo la mezcla cruda con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo con 3 x 750 mL de cloruro de metileno. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato e sodio, se filtró y se concentró para dar 49:4 g (87 por ciento) de (30), como un sólido amarillo, que se usó sin purificación ulterior. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 3.39 (s, 3H), 3.48 (s, 3H), 7.29 (dd, J = 7.5, 4.6 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.43 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 201 (M + 1) + .
EJEMPLO 32 COMPUESTO (31) A una solución de 20.3 g (80.5 mmoles) de 4-yodo-2-metiltiopirimidina (13) en tolueno seco, se añadió a gotas, a -4°C, 40.2 mL (80.5 mmoles, 2.0 M en tetrahidrofurano) de i-PrMgCi. Se agitó la suspensión parda pálida formada, a -4°C, durante 45 minutos. Se añadió por medio de una cánula, una solución de 12.9 g (64.4 mmoles) de (30) en 50 mL de tetrahidrofurano, durante 15 minutos, y se agitó a 0°C la mezcla parda oscura resultante, durante una hora. Se detuvo la mezcla de reacción mediante la adición de una solución saturada de 200 mL de cloruro de amonio, y se extrajo con 2 x 200 mL de acetato de etilo. Se secó las capas orgánicas combinadas, sobre sulfato de sodio; se filtró y evaporó para dar 18 g de un sólido pardo. Se trituró el residuo con 40 mL de una mezcla de éter dietílico y hexano (3:1), y se filtró para dar 13.6 g (80 por ciento) de (31) como un sólido pardo pálido. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.82 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.57 (dd, J = 4.2, 1.9 Hz, 1H), 7.89 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.41 (dd, J = 7.6, 4.8 Hz, 1H), 2.38 (s, 3H). RMN con 13C (CDCI3, 300 MHz) d: 198.2, 173.6, 159.6, 158.7, 151.6, 148.5, 139.4, 133.3, 122.3, 113.6, 14.2. MS (ESI) m/z: 288 (M+23)+, 266 (M + 1)+.
EJEMPLO 33 COMPUESTO (33) MÉTODO A: Se trató una solución de 15.6 g (62 mmoles) de 4-yodo-2-metiltiopirimidina (13) en 200 mL de tetrahidrofurano, con 24.8 mL (62 mmoles, 2.5 M en hexanos) de n-BuLi a -100°C. Después de la adición se agitó la mezcla de reacción a -100°C durante 30 minutos y se trató a -110°C con una solución de 3.8 mL (31 mmoles) de carbonato de dietilo en 6 mL de tetrahidrofurano durante 30 minutos. Se calentó la mezcla de reacción hasta -80°C, se inactivo con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se dividió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 3:1) para dar 5.3 g (61 por ciento) de (33), como un sólido amarillo. RMN con H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.78 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 7.53 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 2.50 (s, 6H). RMN con 13C (CDCI3, 75 MHz) d: 190.9, 173.5, 159.5, 159.0, 115.2, 14.4. MS (ESI) m/z: 279 (M + 1) + .
MÉTODO B: Se trató una solución de 50.4 g (200 mmoles) de 4-yodo-2-metiltiopirimidina en 420 ml_ de tolueno, con 100 mL (200 mmol, 2M en tetrahidrofurano) de i-PrMgCI, a -10°C durante dos horas. Se transfirió pirmidina-magnesio, por medio de una cánula, a 72 mL (594.4 mmoles) de EtOCOOEt, a -10°C, y se agitó a 0°C durante 2.5 horas. Se inactivo la mezcla de reacción con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, se calentó hasta 23°C y se dividió entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se trituró el residuo con cloruro de metileno y se filtró. Se evaporó el filtrado y se cromatografió (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 3:1), para dar 13.3 g (48 por ciento) de (33) como un sólido amarillo.
EJEMPLO 34 COMPUESTO (34) Se calentó a 90°C una suspensión de 3.0 g (5.0 mmoles) de 4-benciloxi-2-(1 H)pir¡dona en 18 mL de POCI3 recién destilado, a 90°C, durante 15 horas. Se enfrió la mezcla de reacción y se evaporó. Se vertió el residuo sobre hielo, se trató con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo con cloruro de metileno. Se secó la fase orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró. Se cromatograf ió el residuo obtenido (cloruro de metileno:metanol, 100:1) para dar 2.5 g (75 por ciento) de (34), como un sólido blanco. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.19 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.40 (m, 5H), 6.90 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.80 (dd, J = 5.7, 2.1 Hz, 1H), 5.10 (s, 2H). RMN con 13C (CDCI3> 75 MHz) d: 166.6, 152.8, 150.6, 135.3, 129.0, 128.8, 127.8, 110.6, 110.5, 70.6 MS (ESI) m/z: 219 (M)+. Rf: 0.4 (hexano:acetato de etilo, 4:1).
EJEMPLO 35 COMPUESTO (35) Se trató una solución de 1.5 g (6.8 mmoles) de (34) en 20 ml_ de tetrahidrofurano, a -100°C, con 2.7 ml_ (6.8 mmoles, 2.5 M en hexanos), de n-BuLi; se dejó calentar a -78°C y se mantuvo a esa temperatura durante cuatro horas. Se enfrió la mezcla de reacción a -100°C y se trató, por medio de una cánula, con una solución de 1.9 g (6.8 mmoies) de (33) en 15 mL de tetrahidrofurano, enfriado previamente a -78°C. Se agitó la mezcla de reacción a -78°C durante tres horas, y se calentó a -50°C durante 30 minutos; se volvió a enfriar a -78°C y se trató con cloruro de acetilo, destilado previamente bajo 2.0 mL (28 mmoies) de quinolina; se calentó a 23°C y se agitó durante la noche. Se dividió la mezcla de reacción entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (hexano:acetato de etilo, de 2:1 a 1:1), para dar 2.9 g (78 por ciento) de (35), como un sólido blanco. R N con H (CDCI3, 300 MHz) 5: 8.26 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 7.32-7.26 (m, 4H), 7.08 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 7.02 (dd, J = 6.0, 2.4 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 4.80 (s. 2H), 2.37 (s, 6H), 2.32 (s, 3H). RMN con 13C (CDCI3, 75 MHz) d: 171.5, 168.3, 168.1, 165.8, 156.5, 152.5, 149.9, 133.9, 128.7, 128.0, 122.5, 115.1, 107.8, 84.7, 71.7, 21.7, 14.2.
EJEMPLO 36 COMPUESTO (52) Se anadió una solución de 740 mg (1.37 mmoles) de (35) y 221 µ?_ (2.86 mmoles) de TFA en 3.0 mL de 1 ,2-dicloroetano, bajo Ar, a un tubo de Young, con 1.8 mL (11 mmoles) de Et3SiH. Se cerró el tubo de Young y se calentó a 80°C durante 24 horas. Se disolvió la mezcla de reacción en cloroformo y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. Se cromatografió el residuo (hexano:acetato de etilo, 4:1), para dar 420 mg (69 por ciento) de un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 Hz) d: 8.47 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.39 (m, 5H), 7.35 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 701 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 5.28 (s, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.63 (s, 3H). RMN con 13C (CDCI3, 75 MHz) 5: 171.2, 160.9, 158.9, 155.8, 154.4, 144.7, 143.6, 138.9, 136.3, 135.1, 128.9, 128.9, 128.3, 118.3, 111.2, 108.9, 103.1, 71.2, 15.12, 14.3. Un carbono aromático traslapa. MS (APCI) m/z: 446 (M + 1)+. Rf 0.37 (hexano:acetato de etilo, 2:1).
EJEMPLO 37 COMPUESTO (53) Se trató a -30°C una solución de 1.9 g (4.3 mmoles) de 52 en 50 mL de cloroformo, con una solución de 2.4 g (10.9 mmoles, 77 por ciento) de m-CPBA en 20 mL de cloroformo. Después de la adición se calentó la mezcla de reacción hasta 0°C, se agitó durante 20 minutos y se inactivo con una solución acuosa saturada de Na2S203. Se lavó la capa orgánica con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. Se trató el residuo con 10 mL (76.5 mmoles) de p-metoxibencilamina a 90°C durante 24 horas. Se eliminó por destilación el exceso de p-metoxibencilamina en un aparato Kugelrohr (140°C, 0.5 mm de Hg) y se cromatografió el residuo (hexano:acetato de etilo, de 1:1 a 0:100), para dar 1.5 g (55 por ciento) de (53) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 10.39 (t, J = 5.0, 1H), 8.13 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.44-7.25 (m, 11 H), 6.98 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 6.91-6.89 (m, 5H), 5.47 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 5.25 (s, 2H), 4.85 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 4.62 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.79 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 624 (M)+.
EJEMPLO 38 VARIOLINA B (1) Se agitó a 23°C durante cuatro horas una solución de 204 mg (0.33 mmoles) de (53) en 0.5 mL de TiOH. Se enfrió la mezcla de reacción a 0°C y se trató a gotas con 3 mL de metanol y 4 mL de una solución al 32 por ciento de hidróxido de amonio. Se filtró la mezcla de reacción y se lavó con agua, con metanol y con éter dietílico. Se cromatografió el sólido obtenido (con cloruro de metileno:metanol, de 95:5 a 85:15) para dar 70 mg (72 por ciento) de variolina B (1), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 Hz) d: 8.12 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.03, 6.99 (m, 2H), 6.76 (d, J = 5.4 Hz, 1H).
EJEMPLO 39 COMPUESTO (54) Se trató 19 mg (0.065 mmol) de variolina B con HCI anhidro en 3.0 mL (3.8 M) de 1,4-dioxano, y se lavó con éter dietílico para dar (54) como un sólido naranja. RMN con 1H (CD3OD , 300 MHz) 5: 8.37 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 5.6 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 294 (M + 1)+.
EJEMPLO 40 COMPUESTO (36) Se añadió a gotas 3.2 mL (3.2 mmoles) de una solución 1 M de bromuro de 3-metoxifenilmagnesio en tetrahidrofurano, a una solución de 0.7 g (2.65 mmoles) de (31) en 10 mL de tetrahidrofurano, a 0°C. Se agitó la mezcla parda a 0°C durante dos horas. Se añadió 0.75 mL (10.6 mmoles) de cloruro de acetilo y se agitó la mezcla durante dos horas a 23°C. Se añadió 50 mL de una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se extrajo la capa acuosa con 3 x 40 mL de éter dietílico. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de magnesio, se filtró y se evaporó. Se purificó el residuo naranja mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:3 a 1:1.5) para dar 0.6 g (59 por ciento) de (36), como un aceite incoloro. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.48 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.37 (dd, J = 4.6, 1.7 Hz, 1H), 7.99 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H); 7.28-7.20 (m, 3H), 6.95-6.91 (m, 2H), 6.85-6.81 (m, 1H), 3.77 (e, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.31 (s, 3H).
EJEMPLO 41 COMPUESTO (57) Se vertió en un tubo de Young que contenía 4 mL de 1,2-dicloroetano, una mezcla de 0.38 g (0.91 mmol) de (36), 0.15 mL (1.9 mmol) de ácido trifluoroacético y 1.17 mL (7.3 mmoles) de trietilsilano. Se calentó el recipiente de reacción sellado, a 90°C durante 22 horas. Después de enfriar se abrió el recipiente y se diluyó los contenidos con 50 mL de cloroformo. Se neutralizó la solución con 60 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se separó las capas. Se extrajo repetidamente la capa acuosa con cloroformo y se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. Se purificó el residuo rojo oscuro mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:4 a 1:3) para dar 20 mg (54 por ciento) de (57) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.59 (dd, J = 4.6, 1.7 Hz, 1H), 8.29 (dd, J = 8.2, 1.5 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.48-7.41 (m, 2H), 7.33 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.24-7.16 (m, 2H), 6.94- 6.90 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 2.74 (s, 3H). RMN con 13C (CDCI3, 75 MHz) d: 160.4, 141.7, 136.8, 134.9, 132.8, 130.3, 127.0, 127.0, 126.5, 121.6, 120.2, 114.9, 112.1, 107.2, 55.6, 14.8. MS (ESI) m/z: 344 (M + 23)\ 322 (M + 1)\ EJEMPLO 42 COMPUESTO (62) Se añadió 15 mL de hidróxido de amonio acuoso al 32 por ciento, a una solución de 150 mg (0.46 mmol) de (57) en 10 mL de 1,4-dioxano. Se agitó la mezcla amarilla durante 30 horas, a 90°C, en un tubo sellado. Se evaporó la mezcla amarilla resultante a presión reducida y se purificó el residuo amarillo mediante cromatografía rápida, usando cloruro de metileno:metanol (2 por ciento) a cloruro de metileno:metanol (3 por ciento) como eluyente, para dar 64 mg (65 por ciento BRSM) de (62), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.38 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 8.27 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 7.47-7.38 (m, 3H), 7.27-7.19 (m, 2H), 7.00 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.90 (dd, J = 8.3, 2.5 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H). RMN con 13C (CDCI3, 75 Hz) d: 160.1, 149.3, 142.6, 139.7, 139.6, 135.1, 133.6, 130.0, 126.5, 122.3, 121.1, 119.7, 114.3, 111.5, 103.8, 100.8, 55.3. MS (ESI) m/z: 291 (M + 1)+.
EJEMPLO 43 COMPUESTO (67) Se trató 10 mg (0.03 mmol) del compuesto (62) con 3 mL de una solución 3.5 M de HCI en 1,4-dioxano, durante dos horas, a 23°C. Se evaporó la solución incolora, se lavó con éter dietílico y se filtró para dar 11 mg de (67), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CD3OD, 300 MHz) 5: 8.65 (dd, J = 4.9, 1.5 Hz, 1H), 8.41 (dd, J = 8.1, 1.3 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 8.1, 4.6 Hz, 1H), 7.52 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.24-7.18 (m, 3H), 7.09 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.06 (dd, J = 8.3, 2.4 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H).
EJEMPLO 44 COMPUESTO (37) Se añadió a gotas una solución 1.8 M de 0.58 ml_ (1.04 mmol) de PhLi en ciclohexano:éter, a una solución de 190 mg (0.73 mmol) de (31) en 6 mL de tetrahidrofurano, a -78°C. Se agitó la mezcla rojo oscuro a -78°C durante tres horas. Se añadió 25 mL de una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se extrajo la capa acuosa con 3 x 40 mL de éter dietílico. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de magnesio, se filtró y se evaporó. Se purificó el residuo naranja mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 25 por ciento a 35 por ciento), para dar 0.11 g (44 por ciento) del alcohol, como un aceite amarillo pálido. Se añadió una solución de 94 mg (0.27 mmol) del alcohol en 2 mL de tetrahidrofurano, a una suspensión de 22 mg (0.54 mmol) de NaH al 60 por ciento en 1 mL de tetrahidrofurano. Se agitó la mezcla rojo oscuro a 23°C durante diez minutos. Se añadió a gotas 0.6 mL (8.5 mmoies) de cloruro de acetiio y se agitó la suspensión amarilla resultante durante 5 horas a 23°C. Se añadió 20 mL de solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo la capa acuosa con 3 x 25 mL de cloruro de metileno. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se purificó el residuo pardo mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 25 por ciento a 35 por ciento) para dar 52 mg (50 por ciento, 22 por ciento para dos pasos) de (37), como un aceite incoloro. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) 5:8.49 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.36 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 7.97 (dd, J = 7.9, 1.5 Hz, 1H), 7.35-7.10 (m, 7H), 2.31 (s amplia, 6H). S (ESI) m/z: 408 (M+23) + , 386 (M + 1)+.
EJEMPLO 45 COMPUESTO (58) Se vertió una mezcla de 51 mg (0.13 mmol) de (37), 22 iL (0.28 mmol) de ácido trifluoroacético) y 0.17 mL (1.07 mmol) de trietiisilano, en un tubo de Young que contenía 0.5 mL de 1,2-dicloroetano. Se calentó a 85°C el recipiente de reacción sellado durante 22 horas. Después de enfriar se abrió el recipiente y se diluyó los contenidos con 25 mL de cloroformo. Se neutralizó la solución con 30 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, y se separó las capas. Se extrajo repetidamente con cloroformo la capa acuosa y se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró. Se purificó el residuo rojo oscuro mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:4 a 1:3), para dar 0.19 g (66 por ciento) de (58), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d:8.62 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 8.29 (dd, J = 8.2, 1.6 Hz, 1H), 7.67-7.63 (m, 2H), 7.58 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.57-7.53 (m, 2H), 7.45 (dd, J = 8.1, 4.6 Hz, 1H), 7.42-7.37 (m, 1H), 7.33 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 2.76 (s, 3H). RMN con 13C (CDCI3, 75 MHz) d: 154.3, 141.8, 136.5, 133.3, 129.0, 128.9, 126.6, 121.4, 119.9, 106.9, 14.5. MS (ESI) m/z 292 (M + 1) + .
EJEMPLO 46 COMPUESTO 63 Se añadió 5 mL de hidróxido de amonio acuoso al 32 por ciento, a una solución de 190 mg (0.065 mmol) de (58) en 2 mL de ,4-dioxano. Se agitó la mezcla amarilla durante 24 horas a 90°C en un tubo sellado. Se evaporó la mezcla amarilla resultante a presión reducida y se purificó el residuo amarillo mediante cromatografía rápida, usando cloruro de metüeno:metanol (1 por ciento) a cloruro de metileno:metanol (2 por ciento) como eluyente, para dar 8 mg (98 por ciento BRS ) de (63), como un sólido amarillo. RMN con H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.35 (dd, J = 4.3, 1.4 Hz, 1H), 8.23 (dd, J = 7.9, 1.3 Hz, 1H), 7.62-7.58 (m, 2H), 7.54-7.37 (m, 2H), 7.39 (dd, J = 8.1, 4.4 Hz, 1H), 7.38-7.31 (m, 2H), 6.92 (d, J = 6.6 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 261 ( + 1) + .
EJEMPLO 47 COMPUESTO (38) Se añadió a gotas una solución 2.5 M de 0.83 mL (2.075 mmoles) de n-BuLi en hexano, a una solución de 0.51 g (2.0 mmoles) de 1 -yodo-2-nitrobenceno en 8 mL de tetrahidrofurano a -78°C. Se agitó la mezcla negra a -78°C durante 10 minutos y se añadió por medio de una cánula una solución de 0.45 g (1.7 mmol) de (31) en 8 mL de tetrahidrofurano. Se calentó lentamente la mezcla oscura hasta -40°C durante dos horas. Se añadió 0.36 mL (5.0 mmoles) de cloruro de acetilo y se agitó la mezcla durante dos horas a 23°C. Se añadió 50 mL de solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo la capa acuosa con 2 x 50 mL de éter dietílico. Se secó los extractos orgánicos combinados sobre sulfato de magnesio, se filtró y se evaporó. Se purificó el residuo pardo mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:4 a 1:1) para dar 0.14 g (19 por ciento) de 38, como un aceite pardo pálido. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.52 (d, J = 5.9 Hz, 1H); 8.41 (dd, J = 4.6, 1.7 Hz, 1H), 8.34 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 8.17-8.14 (m, 1H), 8.03 (dd, J = 7.8, 1.7 Hz, 1H), 7.78-7.72 (m, 1H), 7.50 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.31 (dd, J = 8.1, 4.6 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.35 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 453 (M+23)+, 431 ( + 1)+.
EJEMPLO 48 COMPUESTO (59) Se vertió una mezcla de 140 mg (0.32 mmol) de (38), 53 pL (0.58 mmol) de ácido trifiuoroacético y 0.42 mL (2.6 mmol) de trietilsilano en un tubo de Young que contenía 2 mL de 1,2-dicloroetano. Se selló el recipiente de reacción y se calentó a 90°C durante 22 horas. Después de enfriar se abrió el recipiente y se diluyó los contenidos con 100 mL de cloroformo. Se neutralizó la solución con 50 mL de solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se separó las capas. Se extrajo repetidamente la capa acuosa con cloroformo y se secó sobre sulfato de sodio las capas orgánicas combinadas, se filtró y concentró. Se purificó el residuo rojo oscuro mediante cromatografía rápida (acetato de etilorhexano, de 1:4 a 1:3), para dar 72 mg (23 por ciento) de (59), como un sólido naranja. R N con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.65 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 8.50 (t amplia, J = 2.0 Hz, 1H), 8.27 (dd, J = 8.2, 1.5 Hz, 1H), 8.21 (ddd, J = 8.3, 2.4, 1.0 Hz, 1H), 7.97 (dt, J = 7.8, 1.7 Hz, 1H), 7.73-7.67 (m, 2H), 7.50 (dd, J = 8.3, 4.6 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 2.76 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 337 (M + 1)+.
EJEMPLO 49 COMPUESTO (64) Se añadió 6 mL de NH4OH acuoso al 32 por ciento a una solución de 48 mg (0.14 mmol) de (59) en 5 mL de 1,4-dioxano. Se calentó la mezcla amarilla durante 48 horas a 105°C en un tubo sellado. Se evaporó la mezcla parda resultante a presión reducida y se purificó el residuo amarillo mediante cromatografía rápida (cloruro de metileno:metanol, de 1 por ciento a 3 por ciento) para dar 5 mg (12 por ciento) de (64), como un sólido amarillo. RMN con H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.50 (t amplia, J = 1.8 Hz, 1H), 8.39 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 8.22 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 8.19-8.12 (m, 1H), 7.92 (dt, J = 7.6, 1.5 Hz, 1H), 7.69-7.61 (m, 1H), 7.48-7.41 (m, 2H), 6.91 (d, J = 6.8 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 306 (M + 1)+.
EJEMPLO 50 COMPUESTO (39) Se añadió a gotas una solución 2.5 M de 1.4 mL (3.50 mmol) de n-BuLi en hexano, a una solución de 0.37 mL (3.40 mmoles) de 2-yodotiofeno en 12 mL de tetrahidrofurano, a -78°C. Se agitó a -78°C la mezcla roja parda durante 15 minutos y se añadió por medio de una cánula, una solución de 0.75 g (2.83 mmoles) de (31) en tetrahidrofurano. Se agitó a -78°C la mezcla parda durante dos horas. Se añadió 0.6 mL (17.0 mmoles) de cloruro de acetilo y se agitó la mezcla durante dos horas a 23°C. Se añadió 50 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo la capa acuosa con 2 x 50 mL de cloruro de metileno. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró. Se purificó el residuo pardo mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:3 a 1:2) para dar 0.61 g de (39), como un sólido pardo pálido. Se encontró que (39) era ligeramente inestable, y se lo utilizó inmediatamente para el siguiente paso. MS (ESI) m/z: 392 (M + 1)+.
EJEMPLO 51 COMPUESTO (601 Se vertió una mezcla de 610 mg (1.56 mmol) de (39), 0.25 mL (3.27 mmoles) de ácido trifluoroacético y 2 mL (12.4 mmoles) de trietilsilano, en un tubo de Young que contenía 2.5 mL de 1,2-dicloroetano. Se selló el recipiente de reacción y se lo calentó a 90°C durante 16 horas. Después de enfriar se abrió el recipiente y se diluyeron los contenidos con 250 mL de cloruro de metileno. Se neutralizó la solución con 200 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se separó las capas. Se extrajo repetidamente la capa acuosa con cloruro de metileno y se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. Se purificó el residuo rojo oscuro mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano de 1:4 a 1:2) para dar 72 mg (23 por ciento) de (60), como un sólido amarillo. RMN con H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.61 (dd, J = 4.6, 1.7 Hz, 1H), 8.40 (dd, J = 8.3, 1.7 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.51-7.45 (m, 2H), 7.39 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.31-7.29 (m, 1H), 7.22 (dd, J = 5.1, 3.6 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 298 (M + 1)+.
EJEMPLO 52 COMPUESTO (65) Se añadió 2.5 mL de NH4OH acuoso al 32 por ciento a una solución de 13.5 mg (0.045 mmol) de (60) en 1.5 mL de 1,4-dioxano. Se calentó durante 12 horas la mezcla amarilla a 90°C, en un tubo sellado. Se evaporó la mezcla amarilla resultante a presión reducida y se purificó el residuo amarillo mediante cromatografía rápida (cloruro de metileno:metanol, de 2 por ciento a 3 por ciento) para dar 8 mg (67 por ciento) de (65), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.39-8.32 (m, 2H), 7.42 (dd, J = 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 7.19 (dd, J = 5.1, 3.7 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 6.6 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 267 (M + 1) + .
EJEMPLO 53 COMPUESTO (40) Se añadió a gotas una solución 2.5 M de 0.94 mL (2.36 mmoles) de n-BuL¡ en hexano, a una solución de 0.21 mL (2.27 mmoles) de 2-bromopirid ina en 10 mL de tetrahidrofurano, a -78°C. Se agitó a -78°C la mezcla de color pardo-rojo durante 15 minutos, y se añadió, por medio de una cánula, 0.5 g (1.89 mmol) de (31) en tetrahidrofurano. Se agitó la mezcla parda durante una hora a -78°C. Se añadió 0.4 mL (5.67 mmoles) de cloruro de acetilo y se agitó la mezcla durante dos horas a 23°C. Se añadió 50 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo la capa acuosa con 2 x 50 mL de cloruro de metileno. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró. Se purificó el residuo naranja mediante cromatografía rápida (acetato de eti!o:hexano, de 1:3 a 1:1) para dar 0.25 g (35 por ciento) de (4) como un aceite incoloro. RMN con H (CDCI3, 300 Hz) d: 8.49 (dt, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 8.44 (d, J = 5.3, 1H), 8.35 (dd, J = 4.9, 2.0 Hz, 1H), 7.91 (dd, J = 8.1, 2.0 Hz, 1H), 7.71-7.61 (m, 2H), 7.30 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.26-7.15 (m, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.29 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 387 (M + 1)+.
EJEMPLO 54 COMPUESTO (551 Se vertió en un tubo de Young que contenía 2 mL de 1,2-dicloroetano, una mezcla de 250 mg (0.65 mmol) de (4) = , 0.1 mL (1.36 mmol) de ácido trifluoroacético y 0.83 mL (5.18 mmoies) de trieti Isi laño. Se selló el recipiente de reacción y se calentó a 90°C durante 24 horas. Después de enfriar se abrió el recipiente y se diluyó los contenidos con 150 mL de cloruro de metileno. Se neutralizó la solución con 100 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se separó las capas. Se extrajo repetidas veces la capa acuosa con cloruro de metileno y se secó las capas orgánicas combinadas, sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. Se purificó el residuo rojo oscuro mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, de 1:3 a 1:1) para dar 34 mg (19 por ciento) de (55), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.94 (dt, J = 7.1, 1.2 Hz, 1H), 8.64-8.58 (m, 2H), 8.48 (dd, J = 4.6, 1.4 Hz, 1H), 8.46 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 8.3, 4.6 Hz, 1H), 7.40 (m, 2H), 6.85 (td, J = 7.1, 1.3 Hz, 1H), 2.70 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 293 (M + 1)\ EJEMPLO 55 COMPUESTO (56) Se añadió a gotas una solución de 34 mg (0.14 mmoles) de mCPBA al 70 por ciento en 2 mL de cloruro de metileno, previamente secado sobre sulfato de sodio, a una solución de 34 mg (0.12 mmoles) de (55) en 3 mL de cloruro de metileno, a 0°C. Se agitó durante 30 minutos a 0°C la solución amarilla. Se añadió 5 mL de una solución acuosa saturada de Na2S203 y se lavó la capa orgánica con una solución acuosa saturada de 10 mL de bicarbonato de sodio. Se extrajo las capas acuosas combinadas con 3 x 10 mL de cloruro de metileno. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. Se vertió el residuo amarillo en un tubo sellado con 4 mL de 1,4-dioxano y se añadió 8 mL de una solución al 32 por ciento de hidróxido de amonio. Se calentó la mezcla parda durante 14 horas a 85°C. Se evaporó al vacío la mezcla amarilla resultante. Se purificó el sólido amarillo mediante cromatografía rápida (cloruro de metilenormetanol, de 1% a 3%) para dar 6 mg (20 por ciento para dos pasos) de (56), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.94 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 8.64 (dd, J = 8.0, 1.4 Hz, 1H), 8.54 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 8.46 (dd, J = 4.4, 1.5 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 8.3, 4.6 Hz, 1H), 7.36 (ddd, J = 9.3, 6.6, 1.3 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.85 (td, J = 6.8, 1.1 Hz, 1 H). MS (ESI) m/z: 262 (M + 1)+.
EJEMPLO 56 COMPUESTO (41) Se añadió a gotas 0.75 mL (1.5 mmol) de i-PrMgCI 2.0 M en tetrahidrofurano, a una solución de 0.40 g (1.5 mmol) de (31) en 5 mL de tetrahidrofurano, a 0°C, y se agitó la mezcla a 0°C durante tres horas. Se añadió 25 mL de solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se extrajo la capa acuosa con 3 x 25 mL de acetato de etilo. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. Se purificó el residuo mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, 33%) para dar 0.28 g (61 por ciento) de (41) como un aceite transparente. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) 8:0.84 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 2.53 (s, 3H), 3.01 (sept., J = 6.6 Hz, 1H), 5.17 (s, 1H), 7.18 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 7.8, 4.6 Hz, 1H), 8.24 (dd, J = 7.8, 1.7 Hz, 1H), 8.30 (dd, J J = 5.5 Hz, 1 H). MS (ESI) m/z: 258 (M + 1)+.
EJEMPLO 57 COMPUESTO (61) Se transfirió una solución de 0.28 g (0.91 mmol) de (41) y 0.15 mL (2.0 mmoles) de ácido trifluoroacético en 3 mL de 1,2-dicloroetano, a un tubo de Young, equipado con un septum de hule, que contenía 1.28 mL (8 mmoles) de trietilsilano. Bajo un flujo fuerte de argón se reemplazó el septum con una tapa rocada de Teflón; se selló y se calentó el recipiente de reacción a 100°C durante 48 horas. Después de enfriar se abrió el recipiente y se diluyó los contenidos con 20 mL de cloruro de metileno. Se neutralizó la solución con 20 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, y se separó las capas. Se extrajo repetidamente la capa acuosa con cloruro de metileno y se secó las capas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. Se obtuvo la purificación del material crudo mediante cromatografía rápida (acetato de etilo:hexano, 5 por ciento), para dar 176 mg (75 por ciento) de (61), como un aceite amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 1.47 (d, J 2.69 (s, 3H), 3.44 (sept., J = 7.1 Hz, 1H), 7.06 (d, J 7.35 (dd, J = 8.1, 4.6 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 6.6 Hz, 1H) 8.1, 1.5 Hz, 1H), 8.52 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 258, (M + 1)+.
EJEMPLO 58 COMPUESTO (66) Se trató una solución de 146 mg (0.56 mmol) de (61) en 15 mL de 1,4-dioxano, con 30 mL (32 por ciento) de hidróxido de amonio acuoso, en un tubo sellado, a 90°C, durante 24 horas. Se evaporó la mezcla de reacción y se cromatografió (acetato de etilorhexano, 33 por ciento) para dar 50 mg (39 por ciento) de (66), como un sólido amarillo. RMN con H (CDCI3, 300 MHz) d: 1.46 (d, J = 7.1 Hz, 6H), 3.41 (sept., J = 7.1 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.31 (dd, J = 8.1, 4.6 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 227, (M + 1)+.
EJEMPLO 59 COMPUESTO (25) Se añadió 3 mL de una solución al 32 por ciento de hidróxido de amonio, a una solución de 12 mg (0.035 mmol) de (9) en 2 mL de 1,4-dioxano. Se calentó la mezcla parda durante 14 horas a 85°C en un tubo sellado. Se evaporó al vacío la mezcla amarilla resultante, se añadió 5 mL de cloruro de metileno, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó el solvente a presión reducida. Se purificó el sólido amarillo mediante cromatografía rápida (cloruro de metileno:metanol, de 2 por ciento a 3 por ciento) para dar 8 mg (73 por ciento) de (25), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) 5:8.72 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.39 (dd, J = 4.8, 1.6 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 8.1, 4.6 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 2.67 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 309 (M + 1)+.
EJEMPLO 60 COMPUESTO (68) Se trató 0.6 g (1.95 mmol) del compuesto 25 con 45 mL de una solución 5.0 N de HCI en 1,4-dioxano, y se agitó durante veinte horas a 23°C. Se evaporó la suspensión parda, se lavó con 30 mL de éter dietílico, con 30 mL de dioxano, y se filtró para dar 0.65 g de (68), como un sólido naranja. RMN con 1H (CD3OD, 300 MHz) d: 8.89 (dd, J = 8.3, 1.3 Hz, 1H), 8.69 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.68 (m, 1H), 7.89 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 7.8, 4.9 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 7.9 Hz, 1 H), 2.81 (s, 3H).
EJEMPLO 61 COMPUESTOS (69) Y (26) Se añadió 1.5 mL (0.019 mmoles) de cloruro de acetilo a una solución de 6 mg (0.019 mmol) de (25) y 3 mL (0.029 mmol) de trietilamina en 2 mL de tetrahidrof urano. Se agitó a 23°C la solución amarilla durante la noche y se evaporó a presión reducida. Se disolvió el residuo amarillo en 5 mL de cloruro de metileno y se lavó con una solución acuosa saturada de 4 mL de bicarbonato de sodio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó a presión reducida. Se purificó el residuo amarillo mediante cromatografía rápida (cloruro de metileno:metanol, de 0.5 por ciento a 1 por ciento), para dar 2 mg (39 por ciento, BRSM) de (69) y 2.5 mg (47 por ciento BRSM) de (26), como aceites amarillos. (69): RMN con H (CDCI3, 300 MHz) 5:8.77 (dd, J = 8.2, 1.6 Hz, 1H), 8.54 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.52 (dd, J = 4.9, 1.5 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 8.2, 4.6 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.67 (s, 3H). (26): RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.65, J = 8., 1.7 Hz, 1H), 8.58 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.54 (dd, J = 6.1, 1.7 Hz, 1H), 8.39 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.56 (dd, J = 8.2, 4.6 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.42 (s, 6H). MS (ESI) m/z: 415 (M+23) + .
EJEMPLO 62 COMPUESTO (28) Se puso al reflujo durante 14 horas una mezcla de 0.5 mL (4.5 mmoles) de bencilamina y 160 mg (0.45 mmol) de (27) en 2.5 mL de tetrahidrofurano. Se evaporó el solvente y se purificó el residuo amarillo mediante cromatografía rápida (cloruro de metileno:metanol, de 99:1 a 97:3) para dar 90 mg (44 por ciento) de (28), como un aceite amarillo. RMN con H (CDCI3, 300 MHz) d: 10.44 (s amplia, 1H), 8. ,51 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.48-7.28 (m, 12H), 6.99 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 5.81 (s, amplia, 1H), 4.97 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 4.76 (d, J = 5.8 Hz, 2H).
EJEMPLO 63 COMPUESTOS (72) Y (73) Se añadió a gotas una solución al 70 por ciento de 70 mg (0.30 mmol) de mCPBA en 3 mL de cloruro de metileno, previamente secada sobre sulfato de sodio, a una solución de 39 mg (0.13 mmol) de (25) en 7 mL de cloruro de metileno. Se agitó la solución amarilla durante dos horas a 23°C. Se añadió 5 mL de una solución acuosa saturada de Na2S203, y se lavó la capa orgánica con 5 mL de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se extrajo las capas acuosas combinadas con 3 x 20 mL de cloruro de metileno. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. Se purificó el residuo amarillo mediante cromatografía rápida (cloruro de metileno:metanol, de 2 por ciento a 5 por ciento) para dar 15 mg (35 por ciento) de (72) como un aceite amarillo, y 25 mg (58 por ciento) de (73), como un sólido amarillo. (72): RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.86 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 8.74 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.43 (dd, J = 4.6, 1.3 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.54 (dd, J = 8.0, 4.6 Hz, 1H), 3.02 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 325 (M + 1)+. (73): RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.80 (dd, J = 8.1, 1.4 Hz, 1H), 8.71 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.41 (dd, J = 4.8, 1.4 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 8.2, 4.8 Hz, 1H), 3.40 (s, 3H).
EJEMPLO 64 COMPUESTO (70) Se trató una suspensión de 29 mg (0.09 mmoi) de (25) en 0.5 mL de 1 ,2-dicloroetano, con 3 mg de Pd/C al 10 por ciento, 14 µ?_ (0.18 mmoi) de TFA y 110 µ?. (07 mmoi) de Et3SiH, en un tubo sellado, a 100°C, durante 72 horas. Se disolvió la mezcla de reacción con cloruro de metileno:metanol (20:1) y se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (cloruro de metileno:metanol, de 50:1 a 95:5), para recuperar 6.5 mg de (25) y dar 7.5 mg (39 por ciento BRSM) de (70), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3:CD3OD 9:1, 300 MHz) d: 9.02 (s, 1H), 8.60 (dd, J = 8.3, 1.5 Hz, 1H), 8.50 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.29 (dd, J = 4.9, 1.5 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.49-7.43 (m, 2H), 7.38 (dd, J = 8.3, 4.9 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 263 (M + 1) + .
EJEMPLO 65 COMPUESTO (71) Se trató 6.5 mg (0.025 mmol) del compuesto (70) con 1.0 mL de HCI 3.8 M en 1,4-dioxano, durante 15 minutos. Se evaporó la mezcla de reacción y se lavó con éter dietílico; se disolvió en metanol y se evaporó para dar 7.0 mg (94 por ciento) de (71) como un sólido naranja. RMN con 1H (CD3OD, 300 MHz) d: 9.35 (s, 1H), 8.97 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 8.88 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 8.68 (dd, J = 4.9, 1.5 Hz, 1H), 8.27 (dd, J = 6.3, 1.2 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 8.3, 5.1 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 7.3 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 263 (M)+.
EJEMPLO 65 COMPUESTO (74) Se añadió a gotas 0.013 mL (0.11 mmol) de malonato de dimetilo a una suspensión al 60 por ciento de 4.4 mg (0.1 mmol) de NaH en 2.5 mL de tetrahidrofurano, a 23°C. Después de 10 minutos se añadió 4 mg (0.011 mmol) de (73) en una porción, y se agitó ia suspensión amarilla a 23°C durante la noche. Se siguió la reacción mediante TLC y se observó únicamente material de partida. Se dejó al reflujo la mezcla durante tres horas, se enfrió y se neutralizó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se extrajo la capa acuosa con 3 x 10 mL de cloruro de metileno y se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se purificó el residuo amarillo mediante cromatografía rápida (cloruro de metileno:metanol, de 1 por ciento a 3 por ciento) para producir 1.5 mg (35 por ciento) de (74), como un sólido amarillo. RMN con H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.72 (dd, J = 8.2, 1.5 Hz, 1H), 8.69 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.39 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 8.2, 4.7 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 3.85 (s, 6H).
MS (ESI) m/z: 415 (M + 23)+, 393 (M + 1)*.
EJEMPLO 67 COMPUESTO (75) Se añadió a gotas una solución 3 de 0.037 mL de bromuro de metilmagnesio en tetrahidrofurano, a una solución de 25 mg (0.073 mmol) de (73) en 5 mL de tetrahidrofurano, a 0°C. Se agitó la mezcla parda a 0°C durante dos horas, y una hora a 23°C Se añadió 25 mL de una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se extrajo la capa acuosa con 3 x 20 mL de cloruro de metileno. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. Se purificó el residuo naranja mediante cromatografía rápida (cloruro de metilend:metanol, de 1 por ciento a 3 por ciento) para dar 14 mg (69 por ciento) de (75), como un sólido amarillo. R N con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.75 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 8.60 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.39 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 8.1, 5.0 Hz, 1H), (d, J = 5.6 Hz, 1H), 2.81 (s, 3H).
S (ESI) m/z: 277 ( + 1)+.
EJEMPLO 68 COMPUESTO (76) Se añadió una solución de 5.8 mg (0.017 mmoles) de (72) en 2 mL de metanol, a una solución de NaMeO en 2 mL de metanol, a 0°C. Se agitó a 23°C la solución amarilla durante cuatro horas, se neutralizó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se extrajo con 3 x 10 mL de acetato de etilo. Se secó sobre sulfato e sodio las capas orgánicas combinadas, se filtró y evaporó a presión reducida. Se purificó el residuo amarillo mediante cromatografía rápida (cloruro de metileno:metanol, de 1 por ciento a 3 por ciento) para dar 2.6 mg (53 por ciento) de (76) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.78 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.41 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 8.1, 4.6 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 4.14 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 293 (M + 1)+.
EJEMPLO 69 COMPUESTO (81) Se suspendió 30 mg del compuesto (76) en 7 mL de una solución 5.3 N de HCI en 1,4-dioxano. Se agitó la mezcla parda pálida a 23°C durante dos horas y se evaporó al vacío. Se añadió 5 mL de cloruro de metileno, se agitó durante un minuto y se volvió a evaporar. Se añadió 5 mL de 1,4-dioxano y se filtró el sólido pardo pálido y se lavó con otros 3 mL de 1,4-dioxano, para dar 30 mg de (81). RMN con 1H (CD3OD, 300 MHz) d: 8.92 (dd, J = 8.0, 1.1 Hz, 1H), 8.78-8.70 (m, 2H), 8.01 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 8.1, 4.6 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 4.38 (s, 3H).
EJEMPLO 70 COMPUESTO (77) Se añadió 150 mg (0.46 mmol) de (72) en 2 mL de etanol, a una solución de EtONa en 3 mL de etanol, preparado recientemente añadiendo un exceso de Na en etanol, a 0°C. Se agitó la solución amarilla a 23°C durante cinco horas, se inactivo con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se extrajo con 3 x 10 mL de cloroformo. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó a presión reducida. Se purificó el residuo amarillo mediante cromatografía rápida (cloruro de metileno:metanol, de 1 por ciento a 3 por ciento) para dar 96 mg (68 por ciento) de (77), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.74 (dd, J = 8.2, 1.5 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.39 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 8.2, 4.7 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 4.55 (c, J = 7.1 Hz, 2H), 1.52 (t, J = 7.1 Hz, 3H). MS (ESI) m/z: 329 (M+23)\ 307 (M + 1)+.
EJEMPLO 71 COMPUESTO (82) Se trató 35 mg (0.11 mmol) del compuesto (77) con 4 mL de una solución 5.3 M de HCI en 1,4-dioxano, y se agitó durante tres horas a 23°C. Se evaporó la suspensión, se lavó con éter dietílico y se filtró para producir 32 mg de (82), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CD3OD, 300 Hz) d: 8.91 (dd, J = 8.2, 1.2 Hz, 1H), 8.77-8.63 (m, 2H), 7.98 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.81 (dd, J = 7.9, 4.8 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.69 (c, J = 7.0 Hz, 2H), 1.54 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
EJEMPLO 72 COMPUESTO (78) Se añadió 116 mg (1.2 mmol) de PhOH a una suspensión de 50 mg (1.2 mmol) de una suspensión al 60 por ciento de NaH en 3 mL de tetrahidrofurano, a 0°C. Se añadió a 0°C una suspensión de 50 mg (0.15 mmol) de (72) en 5 mL de tetrahidrofurano, y se agitó la solución amarilla a 23°C durante 24 horas, se inactivo con 50 mL de una solución acuosa saturada de NaCI y se extrajo con 3 x 50 mL de cloroformo. Se secó las capas orgánicas combinadas sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó a presión reducida. Se purificó el residuo amarillo mediante cromatografía rápida (cloruro de metileno: metanol, de 0.5 por ciento a 1.5 por ciento) para dar 20 mg (53 por ciento BRSM de (78) como un sólido amarillo. RMN con H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.54 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.36 (dd, J = 8.1, 1.3 Hz, 1H), 8.32 (dd, J = 4.6, 1.2 Hz, 1H), 7.54- 7.46 (m, 3H), 7.39 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.40-7.30 (m, 3H), 7.29-7.25 (m, 2H). S (ESI) m/z: 355 (M + 1)+.
EJEMPLO 73 COMPUESTO (79) Se añadió 0.085 mL (0.67 mmol) de alcohol p-metoxiben- cílico a una suspensión de 27 mg (0.67 mmoles) de NaH al 60 por ciento en 1 mL de tetrahidrofurano, a 0°C. Se añadió a 0°C una suspensión de 23 mg (0.06 mmol) de (72) en 2 mL de tetrahidrofurano, y se agitó a 23°C la solución amarilla, durante cinco horas; se inactivo con 10 mL de una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se extrajo con 3 x 10 mL de cloroformo. Se secó sobre sulfato de sodio las capas orgánicas combinadas, se filtró y evaporó a presión reducida. Se purificó el residuo amarillo mediante cromatografía rápida, usando como eluyente cloruro de metileno:metanol (2 por ciento). Se lavó con éter dietílico el residuo amarillo para dar 12 mg (46 por ciento) de (79) como un sólido amarillo. RMN con H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.72 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz, 1H), 8.56 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 8.39 (dd, J = 4.4, 1.6 Hz, 1H), 7.61-7.45 (m, 5H), 7.32 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 5.42 (s amplia, 2H), 3.82 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 399 (M + 1) + .
EJEMPLO 74 COMPUESTO (80) Se disolvió 10 mg (0.025 mmol) del compuesto (79) en 0.5 mL de ácido tríflico puro y se agitó a 23°C durante tres horas. Se enfrió a 0°C el matraz y se añadió a gotas 1 mL de metanol. La adición de 1 mL de hidróxido de amonio acuoso a! 32 por ciento produjo un precipitado amarillo brillante, que se filtró y se lavó con éter para dar 6 mg (78 por ciento) de (80). RMN con H (300 MHz, DMSO-d6) 5: 8.85 (dd, J = 8.5, 1.4 Hz), 8.45 (dd, J = 4.6, 1.5 Hz), 7.85 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 8.1, 4.6 Hz), 6.88 (d, J = 6.8 Hz, 1H). RMN con 13C (75 MHz, DMSO-d6) d: 156.3, 149.8, 145.7, 145.1, 143.1, 140.3, 140.1, 129.1, 121.6, 121.0, 101.3, 101.2, 99.0. MS (ESI) m/z: 279 (M + 1)+.
EJEMPLO 75 COMPUESTO (84) Se agitó a 100°C, en un tubo sellado, durante 48 horas, una solución de 250 mg (0.56 mmol) de (52) en 2 mL de POCI3. Se vertió sobre hielo la mezcla de reacción y se la trató con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio hasta pH 7, y se extrajo con cloroformo. Se secó sobre sulfato de sodio la capa orgánica, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (hexano:acetato de etilo, 4:1) para dar 154 mg (74 por ciento) de (84) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.55 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.46 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.64 (s, 3H). RMN con 13C (CDCI3, 75 MHz) d: 172.2, 160.1, 156.2, 155.0, 141.5, 139.7, 137.7, 135.1, 122.1, 119.0, 107.4, 102.8, 15.2, 14.4. Dos señales cuaternarias se traslapan. MS (ESI) m/z: 374 (M + 1)+.
EJEMPLO 76 COMPUESTO 85 Se agitó a 100°C durante 16 horas una solución de 20 mg (0.053 mmol) de (84) en 0.2 mL de p-metoxibencilamina. Se cromatografio la mezcla de reacción (hexano:acetato de etilo, de 4:1 a 1:1) para dar 29 mg (97 por ciento) de (85) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 11.02 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 9.28 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 8.42 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.31 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 6.91-6.85 (m, 4H), 6.35 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 4.82 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 4.52 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 2.50 (s, 3H). MS (ESI) m/z; 564 ( + 1) + .
EJEMPLO 77 COMPUESTO (86) Se trató una solución de 40 mg (0.071 mmol) de (85) en 5 ml_ de cloruro de metileno, a -30°C, con una solución de 20 mg (0.09 mmol, 1.25 equivalentes) de mCPBA al 77 por ciento en 1 ml_ de cloruro de metileno, se calentó hasta 0°C durante 30 minutos y se inactivo con una solución acuosa saturada de Na2S203. Se lavó cuatro veces la mezcla de reacción con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (cloruro de metileno:metanol 100:3) para dar 26 mg (63 por ciento) de (86) como un sólido amarillo.
RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 11.26 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 10.18 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 8.58 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 7.38 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.02 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 6.82 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.35 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 4.83 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 4.70-4.63 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 2.90 (s, eH). MS (ESI) m/z: 602 (M + 23)+, 580 (M + 1)+.
EJEMPLO 78 COMPUESTO (89) Se trató a -30°C una solución de 14 mg (0.037 mmol) de (84) en 3 mL de cloruro de metileno seco, con una solución de 18 mg (0.08 mmol, 2.2 equivalentes) de mCPBA al 77 por ciento en 2 mL de cloruro de metileno. Se calentó hasta 0°C la solución amarilla, durante 30 minutos, y se trató con una solución acuosa saturada de sulfato de sodio, y se lavó tres veces con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó para dar el bis-sulfóxido crudo, que fue tratado con 0.1 mL (0.76 mmol) de 4- metoxibencilamina a 100°C durante 15 horas. Se cromatografió la mezcla de reacción (con cloruro de metileno:metanol, 98:2) para dar 11 mg (46 por ciento) de (89), como un aceite amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 10.99 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 9.38 (s amplia, 1H), 8.22 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.33 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.08 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.97-6.80 (m, 8H), 6.44 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 4.84 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 4.35 (d, J = 4.5 Hz, 2H), 4.29 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.70 (s, 3H). No se observó una señal NH. MS (ESI) m/z: 653 (M + 1)+.
EJEMPLO 79 COMPUESTO (90) Se trató 10 mg (0.015 mmol) del compuesto (89) con 0.2 mL de ácido tríflico a 23°C durante dos horas. Se enfrió hasta 0CC la mezcla de reacción y se trató con 1 mL de metanol y 1 mL de hidróxido de amonio al 32 por ciento. Se evaporó la mezcla de reacción, se disolvió en metano agua 1:4 y se aplicó a una columna empacada con sílice de fase inversa, con metanol:agua 1:1. Se lavó la columna con metanol:agua 1:4, para retirar las sales y se eluyó 1.5 mg (34 por ciento) de (90) con metanohagua 4:1. El compuesto (90) es insoluble en metano! y se formó su sal trifluoroacética para la determinación de resonancia magnética nuclear. RMN con H (CD3OD más una gota de TFA, 300 MHz) d: 8.28 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.39-7.29 (m, 3H), 6.80 (d, J = 5.6 Hz, 1 H). MS (ESI) m/z 293 (M + 1) + .
EJEMPLO 80 COMPUESTO (91) Se trató 19 mg (0.065 mmol) del compuesto (90) con HCI anhidro en 3 ml_ de 1,4-dioxano (3.8 M) a 23°C durante una hora. Se evaporó la mezcla de reacción y se lavó con éter etílico para dar 20 mg de (91) como un sólido naranja. RMN con 1H (CD3OD, 300 MHz) 5: 8.31 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.41-7.32 (m, 3H), 6.82 (d, J = 5.6 Hz, MS (ESI) m/z: 293 (M)+.
EJEMPLO 81 COMPUESTO (92) Se agitó a 23°C durante dos horas una solución de 29 mg (0.051 mmol) de (85) en 0.2 mL de ácido tríflico. Se enfrió hasta 0°C la mezcla de reacción y se trató con 1 mL de metanol y 1 mL de hidróxido de amonio acuoso al 32 por ciento; se filtró y se lavó con agua, con metanol y con éter dietílico, para dar 10 mg (61 por ciento) de (92), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) 5: 8.63 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.18-7.17 (m, 2H), 6.72 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 2.63 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 324 (M + 1)+.
EJEMPLO 82 COMPUESTO (93) Se trató el compuesto (92) con HCI anhidro en 1 mL de 1,4-dioxano (3.8 M) durante 15 minutos, a 23°C. Se evaporó la mezcla de reacción y se lavó con éter dietílico para dar 10 mg de (93) como un sólido naranja. RMN con 1H (CD3OD, 300 MHz) 5: 8.66 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.21 (s, 2H), 6.74 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 2.64 (s, 3H).
EJEMPLO 83 COMPUESTO (87) Se trató una solución de (86) con una solución de eONa en metanol, preparada a partir de 30 mg (1.3 mmol) de Na en 4 mL de metanol, a 23°C, durante 16 horas. Se evaporó la mezcla de reacción, se disolvió en cloruro de metileno y se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se secó sobre sulfato de sodio la capa orgánica, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (cloruro de metileno:metanol, 100:3) para dar 24 mg (97 por ciento) de (87) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) 5: 11.06 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 9.44 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 8.40 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.31 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.87 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.40 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.84 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 4.47 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.80 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 548 ( + 1)+.
EJEMPLO 84 COMPUESTO (88) Se trató 23 mg (0.04 mmol) del compuesto (87) con 0.2 ml_ de TfOH a 23°C durante 2.5 horas. Se enfrió a 0°C la mezcla de reacción y se trató con 1 mL de metanol y 2 ml_ de hidróxido de amonio al 32 por ciento. Se filtró el sólido amarillo formado, a través de un filtro de Teflón y se lavó con 5 mL de agua, 5 mL de etanol y 5 mL de éter dietílico, para dar 15 mg de (88) como un sólido naranja. Este compuesto es ¡nsoluble en cloroformo y se caracterizó como su sal trifluoroacética. R N con 1H (CDCI3:CD3OD 9:1 más dos gotas de TFA deuterado, 300 MHz) d: 8.56 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.07 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 308 (M + 1)+.
EJEMPLO 85 COMPUESTO (94) Se trató una solución de 100 mg (0.22 mmol) de (52) en 10 mL de 1,4-dioxano, con 20 mL de hidróxido de amonio acuoso al 32 por ciento, en un tubo sellado, a 90°C, durante 24 horas. Se evaporó la mezcla de reacción y se cromatografió (cloruro de metileno:metanol, 97:3) para dar 83 mg (89 por ciento) de (94) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.22 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.38-7.26 (m, 6H), 6.94 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 5.25 (s, 2H) (s, 3H). MS (ESI) m/z: 415 (M + 1)+.
EJEMPLO 86 COMPUESTO (95) Se trató 62 mg (0.15 mmol) del compuesto (94) con 0.3 mL de TiOH, a 23°C, durante una hora. Se trató la mezcla de reacción con 1 mL de metanol, 2 mL de hidróxido de amonio acuoso al 32 por ciento; se filtró y se lavó con 5 mL de agua, 5 mL de metanol y 4 mL de éter dietílico. Se cromatografió el sólido obtenido (cloruro de metileno:metanol, 95:5) para dar 45 mg (92 por ciento) de (95) como un sólido amarillo. RMN con H (CDCI3:CD3OD 9:1, 300 MHz) 5:8.38 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 2.58 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 325 (M + 1) + .
EJEMPLO 87 COMPUESTO (97) Se trató 45 mg (0.14 mmol) del compuesto (95) con 3 mL de una solución 3.8 M de HCl en 1,4-dioxano, durante quince minutos, a 23°C. Se evaporó la mezcla de reacción y se lavó dos veces con éter dietílico para dar 36 mg (71 por ciento) de (97), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3:CD3OD 95:5, 300 MHz) d: 8.71 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 8.37 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H). MS (ESI) M/Z: 325 (M)+.
EJEMPLO 88 COMPUESTO (98) Se trató una mezcla de 65 mg (0.157 mmol) de (94), 6 mg de Pd/C al 10 por ciento y 28 µ?_ (0.36 mmol) de TFA en 1 mL de 1,2-dicloroetano, en un tubo de Young, bajo Ar, con 220 pL (1.4 mmol) de Et3SiH, a 100°C durante 72 horas. Se trató la mezcla de reacción con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, y se extrajo con cloruro de metileno. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (cloruro de metileno:metanol, 98:2) para dar 13 mg (23 por ciento) de (98) como un sólido amarillo pálido. RMN con H (CDCI3, 300 MHz) 5: 9.14 (s, 1H), 8.27 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.67-7.63 (m, 2H), 7.54 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.38 (s, 5H), 6.97 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 5.28 (s, 2H). S (ESI) m/z 369 (M + 1)+.
EJEMPLO 89 COMPUESTO 100 Se trató 11 mg (0.030 mmol) del compuesto (98) con 0.3 mL de TfOH a 23°C durante una hora. Se enfrió a 0°C la mezcla de reacción y se trató con 2 mL de MeOH y 2 mL de NH4OH al 32 por ciento. Se formó un sólido naranja; se separó por filtración, se lavó con agua, con etanol y con éter dietílico, y se trató con TFA para dar 9.0 mg (76 por ciento) de (100). RMN con 1H (CD3OD, 300 MHz) d: 9.30 (s, 1H), 8.88 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 8.40 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 8.34 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 5.6 Hz, 1H). S (ESI) m/z: 279 (M)+.
EJEMPLO 90 COMPUESTO (101) Se trató 35 mg (0.13 mmol) del compuesto (100) con 4 mL de HCI 3.8 en 1,4-dioxano a 0°C durante 10 minutos. Se evaporó la mezcla de reacción, se disolvió en metanol y se evaporó para dar 36 mg (88 por ciento) de (101) como un sólido amarillo. RMN con H (CD3OD, 300 MHz) d: 9.35 (s, 1H), 8.92 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 8.44 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 5.6 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 279 (M)+.
EJEMPLO 91 COMPUESTO 99 Se trató a 0°C una solución de 83 mg (0.20 mmol) de (94) en 10 ml_ de cloruro de metileno, con una solución de 112 mg (0.5 mmol, 2.5 equivalentes) de mCPBA al 77 por ciento, y se calentó a 23°C durante tres horas. Se inactivo la mezcla de reacción con una solución acuosa saturada de Na2S203 y se lavó tres veces con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (cloruro de metileno:metanol, 95:5) para dar 25 mg (28 por ciento) de (99) como un sólido amarillo. RMN con H (CDCI3:CD3OD 95:5, 300 MHz) d: 8.21 (d. J = 5.6 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.31 (s, 5H), 6.98 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 5.21 (s, 2H), 3.24 (s, 3H). MS (ESI) m/z 447 (M + 1) + .
EJEMPLO 92 COMPUESTO (102) Se trató una suspensión de 10 mg (0.022 mmoi) de (99), a 0°C, con una solución de MeONa en metanol, preparada previamente con 15 mg (0.66 mmol) de Na en 1 ml_ de metanol. Se agitó la mezcla de reacción a 23°C durante cinco horas. Luego se dividió entre cloruro de metileno y solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó para dar 5.6 g (64 por ciento) 102 como un sólido amarillo. R N con 1H (CDCI3:CD3OD 95:5, 300 MHz) d: 8.26 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.69(d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.42-7.34 (m, 6H), 6.97 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 5.29 (s, 2H), 4.06 (s, 3H). S (ESI) m/z: 399 ( + 1) + .
EJEMPLO 93 COMPUESTO M031 Se trató una suspensión de 10 mg (0.022 mmol) de (99) a 0°C, con una solución de EtONa en etanol, preparada previamente con 15 mg (0.66 mmol) de Na en 1 mL de etanol, durante seis horas. Se dividió la mezcla de reacción entre cloroformo y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (cloruro de metileno:metanol, 95:5), para dar 8 mg (88 por ciento) de (103) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3:CD3OD 95:5, 300 MHz) d: 8.19 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.27-7.24 (m, 6H), 6.92 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.36 (c, J = 6.8 Hz, 2H), 1.35 (t, J = 6.8 Hz, 3H). MS (ESI) m/z: 413 (M + 1)+.
EJEMPLO 94 COMPUESTO (104) Se trató una suspensión de 18 mg (0.44 mmol) de NaH al 60 por ciento en 2 mL de tetrahidrofurano, con 45 µ?. (0.44 mmol) de alcohol bencílico. Se añadió a gotas una solución de 10 mg (0.022 mmol) de (99) en 3 mL de tetrahidrofurano seco, y se agitó a 23°C durante seis horas. Se dividió la mezcla de reacción entre cloroformo y solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (en cloruro de metileno a cloruro de metileno:metanol 95:5) para dar 9.0 mg (86 por ciento) de (104), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3:CD3OD 95:5, 300 MHz) d: 8.18 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.37-7.19 (m, 12H), 6.92 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 5.40 (s, 2H), 5.20 (s, 2H). MS (ESI) m/z: 475 (M + 1)+.
EJEMPLO 95 COMPUESTO (105) Se agitó a 23°C durante una hora una solución de 4.0 mg (0.01 mmol) de (102) en 0.2 mL de ácido tríflico. Se enfrió a 0°C la mezcla de reacción y se la trató a gotas con 1 mL de metanol y 1 mL de hidróxido de amonio acuoso al 32 por ciento. Se filtró la mezcla de reacción, se lavó con agua, con metanol y con éter dietílico, y se cromatografió (cloruro de metileno:metanoI, 95:5) para dar 1.8 mg (58 por ciento) de (105) como un sólido amarillo. R N con 1H (CDCI3:CD3OD 95:5, 300 Hz) d: 8.26 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.43 (d, j = 6.8 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 309 (M + 1)+.
EJEMPLO 96 COMPUESTO (106) Se agitó a 23°C durante 1.5 horas una solución de 7 mg (0.017 mmol) de (104) en 0.2 mL de ácido tríflico. Se trató la mezcla de reacción a 0°C con 1 mL de metanol y 1 mL de hidróxido de amonio acuoso al 32 por ciento; se filtró y lavó con agua, con etanol y con éter dietílico, para dar 6.6 mg (95 por ciento) de 106, como un sólido naranja. RMN con 1H (CD3OD:CF3C02D 95:5, 300 MHz) d: 8.35 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 8.20 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 5.4 Hz, 1H). S (ESI) m/z: 295 (M + 1)+ EJEMPLO 97 COMPUESTO (96) Se trató a -30°C una solución de 24 mg (0.05 mmol) de (52) en 3 mililitros de cloruro de metiieno, con una solución de 30 miligramos (0.14 mmol) de mCPBA al 77 por ciento en cloruro de metiieno. Se calentó la mezcla de reacción hasta 0°C y se agitó durante treinta minutos. Se lavó la mezcla de reacción con una solución acuosa saturada de Na2S203 y con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se disolvió el compuesto crudo en 6 mililitros de 1,4-dioxano, se trató con 10 mililitros de hidróxido de amonio al 32 por ciento, en un tubo sellado, y se agitó a 100°C durante dieciséis horas. Se evaporó la mezcla de reacción y se cromatografió (en cloruro de metileno:metanol, de 98:2 a 95:5), para dar 6 miligramos (29 por ciento) del compuesto (96), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3:CD3OD 9:1, 300 MHz) d: 8.18 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.30-7.25 (m, 7H), 6.90 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 5.19 (s, 2H). MS (APCI) m/z 384 (M + 1)+. Rf: 0.64 (cloruro de met¡leno:metanol, 6:1).
EJEMPLO 98 COMPUESTO (107) Se agitó una solución de 50 mg (0.135 mmol) de (84) en 8 mL de una mezcla de ,4-dioxano:agua (50:50), en un tubo sellado a 100°C, durante 16 horas. Se evaporó la mezcla de reacción y se cromatografio (cloruro de metilenormetanol, 98:2) para dar 40 mg (86 por ciento) de (107) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CD3OD, 300 MHz) d: 8.54 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 2.64 (s, 3H). RMN con 13C (CDCI3, 75 MHz) 5: 172.0, 160.3, 156.1, 149.5, 144.0, 143.1, 139.9, 139.0, 135.0, 122.0, 119.9, 118.6, 101.4, 101.1, 14.3. MS (ESI) m/z: 343 (M + 1) + .
EJEMPLO 99 COMPUESTO (108) Se trató 25 mg (0.073 mmol) del compuesto (107) con mL de HCI anhidro 3.8 N en 1,4 dioxano, durante diez minutos, a 23°C. Se evaporó la mezcla de reacción, se disolvió en metanol y se evaporó para dar 28 mg (100 por ciento) de (108) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CD3OD, 300 MHz) d: 8.75 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.59 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H). S (ESI) m/z: 343 ( )+.
EJEMPLO 100 COMPUESTO (109) Se trató 10 mg (0.029 mmol) del compuesto (107) con eONa en metanol, recién preparado a partir de 30 mg (1.3 mmol) de Na y 4 mL de metanol, a 80°C durante 22 horas. Se evaporó la mezcla de reacción y se dividió entre cloruro de metileno y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se secó sobre sulfato de sodio la capa orgánica, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (cloruro de metileno:metanol, 95:5) para dar 15 mg (53 por ciento) de (109), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.45 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.7 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.4 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 4.10 (s, 3H), 4.04 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 323 (M + 1)+.
EJEMPLO 101 COMPUESTOS (110) Y (111) 110 111 Se trató a -30°C una solución de 50 mg (0.146 mmol) de (107) en 10 mL de cloruro de metileno, con una solución de 82 mg (0.37 mmol) de mCPBA al 77 por ciento en 1 mL de metanol. Se agitó la mezcla de reacción a 23°C durante dos horas, se trató con una solución acuosa saturada de Na2S203 y se dividió entre una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y cloruro de metileno. Se secó sobre sulfato de sodio la capa orgánica, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (cloruro de metileno:metanol, 95:5) para dar 23 mg (44 por ciento) de (110) y 29 mg (53 por ciento) de (111), como sólidos amarillos. (110) : R N con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.84 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.30 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.04 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 381 (M + 23)+, 359 (M + 1)+. (111) : RMN con 1H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.84 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.32 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.562 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 3.43 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 397 (M + 23)+, 375 (M + 1)+.
EJEMPLO 102 COMPUESTO (112) Se trató 29 mg (0.077 mmol) del compuesto 111 con eONa metanólico en metanol, recién preparado a partir de 30 mg (1.3 mmol) de Na y 4 mL de metanol, durante seis horas, a 23°C. Se evaporó la mezcla de reacción y se dividió entre cloruro de metileno y solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se secó sobre sulfato de sodio la capa orgánica, se filtró y evaporó. Se cromatografió el residuo (cloruro de met¡leno:metanol, 95:5) para dar 17 mg (68 por ciento) de (112), como un sólido amarillo. RMN con H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.54 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 4.10 (s, 3H). MS (ESI) m/z: 327 (M + 1)+.
EJEMPLO 103 COMPUESTO (113) Se trató a -30°C una solución de 50 mg (0.14 mmol) de (84) en 10 mL de cloruro de metileno, con una solución de 76 mg (0.34 mmol) de mCPBA al 77 por ciento en 2 mL de cloruro de metileno. Se calentó la mezcla de reacción hasta 0°C y se agitó durante 30 minutos. Se trató la mezcla de reacción con una solución acuosa saturada de Na2S203 y con solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se secó sobre sulfato de sodio la capa orgánica, se filtró y se evaporó. Se disolvió el crudo de reacción en 4 mL de 1,4-dioxano y se trató con 4 mL de NH4OH acuoso al 32 por ciento. Se vertió la mezcla de reacción en un tubo sellado y se agitó a 85°C durante 16 horas. Se evaporó la mezcla de reacción y se cromatografió (cloruro de metileno:metanol, 95:5) para dar 17 mg (40 por ciento) de (113), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3:CD3OD 9:1, 300 MHz) d: 8.17 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 7.36-7.34 (m, 2H), 6.98 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 5.1 Hz, 1H). RMN con 13C (CDCI3:CD3OD 9:1, 75 MHz) d: 162.5, 161.6, 156.9, 149.6, 143.9, 141.8, 140.1, 138.1, 135.0, 121.9, 119.8, 114.0, 101.7, 100.7. MS (ESI) m/z: 312 (M + 1)+.
EJEMPLO 104 COMPUESTO (83) Se trató 12 mg (0.038 mmol) del compuesto 113, con 0.5 mL de HCI anhidro 3.8 N en 1,4-dioxano, durante 10 minutos, a 23°C. Se evaporó la mezcla de reacción, se disolvió en 1 mL de metanol y se evaporó para dar 13.9 mg (95 por ciento) de (83), como un sólido amarillo. RMN con 1H (CD3OD, 300 MHz) d: 8.61 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.37 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.55 (s, 2H), 7.36 (d, J = 6.6 Hz, 1 H). S (ESI) m/z: 312 (M)+.
EJEMPLO 105 COMPUESTO (115) Se calentó en un tubo sellado, durante 16 horas, a 140°C, una mezcla de 5.0 mg (0.016 mmol) de (113), 10 mg (0.038 mmol) de 18-corona-6 y 60 mg (1.2 mmol) de KF seco en 0.5 mL de DIVISO. Se evaporó la mezcla de reacción y se cromatografió (cloruro de metileno:metanol 95:5) para dar 3.5 mg (74 por ciento) de (115) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3:CD3OD 9:1, 300 MHz) d: 8.26 (dd, J = 7.1, 5.4 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 11.0, 5.4 Hz, 1H), 6.94 (dd, J = 5.4, 3.2 Hz, 1H). MS (ESI) m/z: 296 (M + 1)+.
EJEMPLO 106 COMPUESTO (114) Se trató 10 mg (0.032 mmol) del compuesto (113) a 90°C durante 40 horas, con una solución de MeONa en 6 mL de metanoktetrahidrofurano 2:1, preparado mediante la adición de 30 mg (1.3 mmol) de Na a metanol. Se evaporó la mezcla de reacción, se disolvió en cloruro de metileno y se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se secó la capa orgánica sobre sulfato de sodio, se filtró y se evaporó. Se cromatografió el residuo (cloruro de met¡Ieno:metanol 95:5) para dar 4.0 mg (41 por ciento) de (114) como un sólido amarillo. RMN con 1H (CDCI3:CD3OD 9:1, 300 MHz) 5: 8.21 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.32 (s, 2H), 6.96 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H).
MS (ESI) m/z: 308 (M + 1)+.
EJEMPLO 107 COMPUESTO (116) Se trató 1-7 mg (0.006 mmol) del compuesto (114) a 23°C con 0.5 mL de HCI 5 N en 1,4-dioxano durante 20 minutos. Se evaporó la mezcla de reacción, se suspendió en éter dietílico y se evaporó para dar 1.2 mg (57 por ciento) de (116), como un sólido amarillo. RMN con H (CDCI3, 300 MHz) d: 8.57 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.94-7.90 (m, 2H), 7.68 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 4.16 (s, 3H).
BIOANÁLISIS PARA SELECCIÓN ANTITUMORAL La finalidad de estos análisis es interrumpir el desarrollo de un cultivo de células tumorales in vitro por medio de una exhibición continua de las células a la muestra que se va a probar.
L I N EAS E C É LU LAS Nombre No. ATCC Tejido de especie Características P-388 CCL-46 fluido de ascites de ratón Neoplasma linfoide K-562 CCL-243 Leucemia humana eritroleucemia (efusión pleural A-549 CCL-185 Pulmón humano carcinoma pulmonar "NSCL" SK-MEL-28 HTB-72 Melanoma humano Melanoma maligno HT-29 HTB-38 Colon humano adenocarcinoma del colon, LoVo CCL-229 Colon humano adenocarcinoma del colon LoVo-Dox Colon humano adenocarcinoma del colon (MDR) SW620 CCL-228 Colon humano adenocarcinoma del colon (metástasis nodular linfática) DU-145 HTB-81 Próstata humana Carcinoma de la próstata, sin receptores androgénicos.
LNCaP CRL-1740 Próstata humana Adenocarcinoma de la próstata con receptores androgénicos.
SK-BR-3 HTB-30 Mama humana Adenocarcinoma de mama, Her2/neu+ (efusión pleural) CF-7 HTB-22 Mama humana Adenocarcinoma de mama (efusión pleural) MDA-MB-231 HTB-26 Mama humana Adenocarcinoma de mama, Her2/neu+, (efusión pleural) IBROV-1 Ovarios humanos Adenocarcinoma de ovarios IBROV-ET Ovarios humanos Adenocarcimona de ovarios, caracterizado como células resistentes a ET-743 SK-OV-3 HTB-77 Ovarios humanos Adenocarcinoma de ovarios (ascites maligno) OVCAR-3 HTB-161 cuello de matriz humano cardinoma epíteloidal de cuello HeLa CCL-2 Cuello de matriz humano carcinoma epíteloidal de cuello HeLa-APL CCL-3 Cuello de matriz humano Carcinoma, caracterizado como células resistentes a aplidina A-498 HTB-44 Riñon humano Carcinoma renal PANC-1 CRL-1469 Páncreas humano Carcinoma pancreático epíteloidal. HMEC1 Endotelio humano 1°.- Inhibición del desarrollo de células, mediante conteo celular Esta forma de análisis emplea platos múltiples de 24 concavidades, de 16 mm de diámetro (Bergeron, 1984, Schroeder, 1981). Las líneas de células tumorales empleadas son: P-388 (ATCC CCL 46), cultivo en suspensión de un neoplasma linfoide procedente de un ratón DBA/2; A-549 (ATCC CCL 185), cultivo monocapa de un carcinoma de pulmón humano; HT-29 (ATCC HTB-38), cultivo monocapa de un carcinoma de colon humano; MEL-28 (ATCC HTB-72), cultivo monocapa de un melanoma humano, y DU-145 (ATCC THB-81), cultivo monocapa de un carcinoma de próstata humana. Se mantuvo a las células en la fase de crecimiento logarítmica, en medio esencial mínimo de Eagle (EMEM, acrónimo por su designación en inglés: Eagle's Mínimum Essential Médium), con sales equilibradas de Earle, con aminoácidos no esenciales, con 2.0 mM de L-glutamina, sin carbonato de sodio (EMEM/neaa), suplementado con 10% de suero de ternera fetai (FCS, acrónimo por su designación en inglés: Fetal Calf Serum), 10~2 M, bicarbonato de sodio y 0.1 Ul de penicilina G + 0.1 g/L de sulfato de estreptomicina. Para los experimentos, se cosechó las células de cultivos subconfluentes, usando tripsina y se volvió a suspender en medio fresco, antes de extender a placas. Se sembró las células P-388 en concavidades de 16 mm de diámetro, a 1 x 104 células por concavidad, en alícuotas de 1 mide EMEM 5% de FCS que contenían diferentes concentraciones de la muestra que se va a probar. Se sembró una serie separada de cultivos sin fármaco, como control de desarrollo, para asegurarse de que todas las células permanecieran en la fase exponencial de desarrollo. Todas las determinaciones son llevadas a cabo por duplicado. Después de incubar por tres días a 37°C, 5 por ciento de C02 en atmósfera con 98 por ciento de humedad, se determinó una Cl50 aproximada, comparando el desarrollo en las concavidades sin fármaco, con el desarrollo en las concavidades de control. Se sembró células A-549, HT-29, MEL-28 y DU-145 en concavidades de 16 mm de diámetro, a 1 x 104 células por concavidad, en alícuotas de 1 mL de EMEM 5% de FCS, que contenían diferentes concentraciones de la muestra que se va a probar. Se sembró una serie separada de cultivos sin fármaco, como control de desarrollo, para asegurarse de que todas las células permanecieran en la fase exponencial de desarrollo. Se llevan a cabo todas las determinaciones por duplicado. Después de tres días de incubar a 37°C, 5% de C02, en atmósfera con 98 por ciento de humedad, se ti ñ ó las células con 0.1% de violeta cristal. Se determinó la Cl50 aproximada, comparando el desarrollo en las concavidades con fármaco, con el desarrollo en las concavidades de control. Para cuantificar la actividad, después del tiempo de incubación, se trata con tripsina las células y se las cuenta en un contador Coulter ZM. Todas las cuentas (células netas por concavidad) representan el promedio de concavidades duplicadas. % G, es el porcentaje de desarrollo con respecto a los cultivos sin fármaco. Los resultados de estos análisis son usados para generar curvas de dosis-respuesta, de las que se determinan los valores Cl50 más precisos (la concentración de la muestra que produce el 50 por ciento de inhibición en el desarrollo de las células). Los resultados obtenidos pueden predecir la utilidad de un determinado fármaco, como tratamiento potencial contra el cáncer. Para esta técnica se seleccionan los compuestos que muestran valores de CI5o menores que 1 g/mL, para continuar con otros estudios. Los datos de Cl50 permiten predecir que un fármaco no solamente podría ser citostático, sino que también podría tener un potencial, en términos de la reducción del tumor. 2°.- Inhibición del desarrollo de células mediante anáfisis colorimétrico Un análisis de tipo colorimétrico, usando la reacción con sulfo-rodamina B (SRB) ha sido adaptado para la medición cuantitativa del desarrollo celular y de la viabilidad de las células [siguiendo la técnica descrita por Philp Skehan y coautores (1990), New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer drug screening, J. Nati. Cáncer Inst., 82:1107-1112]. Esta forma del análisis emplea microplacas de cultivo de células, de 96 concavidades, de 9 mm de diámetro (Faircloth, 1988; Mosmann, 1983). La mayoría de las líneas de células son obtenidas de la American Type Culture Collection (ATCC), derivadas de diferentes tipos de cáncer humano. Se mantienen las células en RPMl 1640, 10 por ciento de FBS, suplementado con 0.1 g/L de penicilina y 0.1 g/L de sulfato de estreptomicina, y a continuación se las incuba a 37°C, 5 por ciento de C02 y 98 por ciento de humedad. Para los experimentos, se cosechan las células de cultivos subconfluentes, usando tripsina, y se las vuelve a suspender en medio fresco, antes de extenderlas a placas. Se siembran células en placas de microtitulación de 96 concavidades, a 5 x 103 células por concavidad, en alícuotas de 195 pL de medio, y se las deja fijarse a la superficie de la placa, desarrollando en medio libre de fármaco durante 18 horas.
Posteriormente se añaden muestras, en alícuotas de 5 µ!_, que varían desde 10 hasta 10"3 Mg/mL, disueltas en DMSO/EtOH/PBS (0.5:0.5:99). Después de 48 horas de exposición, se mide el efecto antitumoral mediante la metodología SRB: se fijan las células añadiendo 50 pL de ácido tricloroacético (TCA) frío, al 50 por ciento (en peso/volumen), e incubando durante 60 minutos a 4°C. Se lavan las placas con agua desionizada y se secan. Se añade 100 pl_ de solución de SRB (0.4 por ciento en peso/volumen en ácido acético al 1 por ciento), a cada concavidad de microtitulador, y se incuba durante 10 minutos a la temperatura ambiente. Se elimina el SRB no unido y se lava con ácido acético al 1 por ciento. Se secan al aire las placas y se solubiliza la mancha unida con regulador Tris. Se leen las densidades ópticas en un lector automático espectrofotométrico de placas, a una sola longitud de onda de 490 nm. Se calculan los valores para la media ± SD de datos, a partir de concavidades por triplicado. Se pueden calcular algunos parámetros para respuestas celulares: Gl = inhibición de desarrollo; TGI inhibición total de desarrollo (efecto citostático), y LC = muerte de células (efecto citotóxico). Los resultados obtenidos pueden predecir la utilidad de un determinado fármaco como tratamiento potencial contra el cáncer. Para esta técnica se seleccionan los compuestos que muestran valores 1G50 menores que 10 pg/mL para continuar con otros estudios. Los datos IG50 permiten predecir que un fármaco no solamente podría ser citostático, s i no q ue tamb ién pod ría tener potencial, en térm i nos de reducción d e tumor. 44 81 51 82 DU-145 G 50 4.7SE-07 9.28E-07 6.54E-08 7.15E-07 TGI 1.51 E-0.6 2.40E-06 1.48E-07 1.51 E-06 LC50 2.75E-05 3.04 E-07 2.70E-06 2.92E-06 LN-caP G150 3.51 E-07 1.58 E-07 7.37E-08 8.87 E-07 TGI 7.85E-07 2.61 E-07 1.27 E-07 1.57E-06 LC50 .76E-06 2.77 E-06 2.86E-07 2.28E-07 SKOV-3 GI50 2.75E-05 7.97E-07 1.46E-07 9.92E-07 TGI 2.75E-05 8.52E-06 2.15E-06 2.91 E-06 LC50 2.75E-05 3.45E-05 2.86E-05 2.92E-05 IGROV GI50 1.08E-06 2.10E-07 8.51 E-08 9.71 E-07 TGI 6.34E-06 2.70E-06 3.28E-07 1.76E-06 LC50 2.46E-05 2.05E-05 2.12E-06 2.92E-05 IGROV-ET GI50 5.68E-07 8.55E-08 7.48 E-08 8.90E-08 TGI 1.87E-06 2.28E-07 2.25E-07 2.32E-07 LC50 1.72E-05 3.04E-05 1.86E-05 2.92E-05 SK-BR-3 GI50 6.12E-07 8.55E-07 5.91 E-08 5.60E-07 TGI 1.6 E-06 2.26E-06 1.42E-07 1.12E-06 LC50 6.31-06 9.49E-06 5.54E-07 2.26E-06 EL-28 GI50 6.01 E-07 3.13E-07 9.25E-08 3.65E-07 TGI 2.11E-06 7.36E-07 2.69E-07 7.93E-07 LC50 8.95E-06 174E-06 1.37E-06 1.73E-06 H-MEC-1 GI50 .58E-07 1.71 E-07 1.64E-08 3.41 E-07 TGI 3.07E-07 2.62E-07 1.54E-08 7.29E-07 LC50 1.31 E-06 8.58E-07 1.43E-07 1.55E-06 A-549 GI50 9.17E-06 3.04E-05 9.993-08 2.92E-05 TGI 2.75E-05 3.04E-05 3.68E-07 2.92E-05 LC50 2.7TE-05 3.04E-05 4.57E-06 2.92E-05 K562 GI50 4.17E-06 7.91 E-08 3.11 E-06 5.31 E-07 TGI 2.75E-05 3.29E-07 4.03E-07 7.32E-07 64 80 71 113 DU-145 GI50 3.10E-05 1.81E-06 7.50E-07 1.51E-06 TGI 3.28E-05 8.70E-06 2.31E-06 6.26E-06 LC50 3.28E-05 3.59E-05 3.35E-05 3.21E-05 LN-caP GI50 2.84E-06 9.70E-07 5 2?-08 1.57E-06 TGI 7.89E-06 1.65E-06 2.15E-07 2.39E-06 LC50 1.99E-05 2.79E-06 1.82E-06 1.56E-05 S OV-3 GI50 2.23E-05 1.25E-05 1.06E-06 1.37E-06 TGI 3.28E-05 3.45E-05 3.00E-06 5.39E-06 LC50 3.28E-05 3.59E-05 3.35E-05 3.21E-05 25 191» 49 50 llO 111 DÜ-1 5 GI50 5.79E-06 5.33E-05 1.65E-05 2.03E-06 1.94E-06 TGI 2.39E-05 1.38E-05 3.03E-05 8.97E-06 6.40E-06 LC50 2.80E-05 3.21E-05 3.O3E-05 2.79E-05 1.68E-05 LN-caP GI50 2.36E-06 1.26E-06 8.86E-07 1.45E-06 4.30E-06 TGI 8.59E-06 4.30E-05 1.88E-06 4.71E-06 9.26E-06 LC50 2.76E-05 1.95E-05 3.03E-05 1.67E-05 1.99E-05 SKOV-3 GI50 8.28E-06 5.42E-06 1.58E-05 1.19E-05 2.05E-06 TGI 1.89E-05 1.50E-05 3.03E-05 2.79E-05 6.88E-06 LC50 2.80E-05 3. 1E-05 3.03E-05 2.79E-05 2.18E-05 fGROV GÍ50 4.11E-06 4.68E-06 2.03E-05 1.43E-05 3.55E-06 TGI 8.93E-06 1.17E-05 3.03E-05 2.79E-05 9.60E-06 LC50 1.94E-05 2.93E-05 3.03E-05 2.79E-05 2.59E-05 IGROV-ET GI50 3.27E-06 4.23E-06 1.29E-05 1.09E-05 3.87E-06 TGI 8.17E-06 1.20E-05 3.03E-05 2.79E-05 1.10E-05 LC5Ü 2.04E-05 3.21E-05 3.03E-05 2.79E-05 2.67E-05 S -SR-3 GI50 1.89E-06 7.19E-06 1.16E-05 9.20E-Q7 4.35E-06 TGI 8.23E-06 1.86E-05 3.03E-05 1.98E-06 9.69E-06 LC50 2.80E-G5 3,21E-05 3.03E-05 1.16E-05 2.13E-05 MEL-28 GI50 4.92E-G6 6.35E-06 3.03E-05 5.55E-06 1.25E-06 TGI I.65E-05 1.43E-05 3.03E-05 2.79E-05 5.1SE-06 LCSO 2.80E-05 3.21E-05 3.03E-05 2.79E-05 1.57E-05 K-MEC-1 G15Q 4.56E-07 8.01E-06 1.7OE-06 1.08E-09 TGI - 4.59E-06 2.44E-05 1.08E-05 1.53E-08 LC50 8.73E-06 3.03E-05 2.79E-05 6.03E-07 A-549 GI50 4.53E-07 2.11E-06 5,25E-06 1.10E-0S 4.35E-06 TGI 2.80E-05 9. 1E-06 3.03E-05 2.79E-05 1.30E-05 LC50 2.80E-05 3.21E-05 3.03E-05 2.79E-05 2.67E-05 K-562 GI50 8.48E-05 1.39E-05 3.03E-05 9.92E-06 7.26E-06 TGI 1.59E-05 2.77E-05 3.03E-05 2.79E-05 1.59E-05 LC50 2.80E-05 3.21E-05 3.03E-05 2.79E-05 2.67E-05 PAHC-1 GI50 8.87E-06 1.07E-05 3.03E-05 I.45E-05 3.07E-06 TGÍ 2.80E-05 3.21E-05 3.03E-05 2.79E-05 8.70E-06 LC50 2.80E-05 3.21E-05 3.03E-05 2.79E-05 2.46E-05 HT-29 GI5Q L52E-05 1.20E-05 3.03E-05 4.15E-G6 5.34E-06 GI 2.80E-05 3.21E-05 3.03E-05 2.79E-G5 I..66E-05 LC50 2.80E-05 3.21E-05 3.03E-05 2.79E-G5 2.67E-05 LOVO GI50 3.25E-06 2.37E-06 1.2GE-05 1.3SE-06 1.54E-06 TGI 1.97E-05 1.16E-05 3.03E-05 6.21E-06 6.99E-06 LCSO 2.80E-05 3.21E-05 3.03E-05 2.79E-05 2.67E-05 1 109 112 86 87 DU-145 GI50 8.93E-07 1.63E-06 7.16E-07 1.73E-05 1.83E-05 TGI 2.10E-06 3.10E-05 1.72E-06 1.73E-05 1.73E-0S LC50 L99E-05 3.10E-05 3.06E-06 1.73E-05 1.73E-05 LN-CRP GI50 5.39E-08 1.40E-06 8.72E-07 1.73E-05 1.73E-05 TGI 2.1OE-06 4.81E-06 1.51E-06 1.73E-05 1.73E-05 LC50 1.41E-06 3.10E-05 2.62E-06 1.73E-05 L73E-05 S OV-3 GI50 1.21E-06 9.89E-07 1.73E-05 1.73E-05 TGI 3.32E-06 - 2.30E-06 1.73E-05 1.73E-05 LC50 3.41E-05 3.06E-05 1.73E-05 1.73E-05 IGROV GI50 1.14E-06 3.07E-06 1.65E-06 1.73E-05 1.73E-05 TGI 2.90E-06 1.46E-05 7.59E-06 1.73E-05 1.73E-05 LC50 3.41E-05 3.10E-05 3.06E-05 1.73E-05 1.73E-05 IGROV-ET GI50 1.28E-06 7.17E-06 7.65E-06 1.73E-05 1.73E-05 TGI 2.82E-06 2.21E-05 1.91E-05 1.73E-05 1.73E-05 LC50 3. 1E-05 3.10E-05 3.06E-05 1.73E-05 1.73E-05 SK-BR-3 GI50 8.48E-07 1.47E-06 2.01E-06 1.73E-05 1.73E-05 TGI 2.31E-06 5.40E-06 7.13E-06 1.73E-05 1.73E-05 LC50 2.77E-05 3.10E-05 2.78E-05 1.73E-05 1.73E-05 MEL-28 GI50 1.20E-06 L26E-06 3.21E-07 1.73E-05 1.73E-05 60 65 101 JTO-1 5 GI50 3.36E-05 3.75E-05 1.18E-07 G?? 3.36E-05 3.75E-05 1.80E-06 LC50 3.36E-05 3.75E-05 3.03E-05 LN-caP GI50 3,36E-05 1.71E-05 2.24E-08 rGI 3.36E-05 3.75E-05 1.32E-07 LC50 3.36E-05 3.75E-05 4.74E-06 SKOV-3 QI50 3.36E-05 3.75E-05 4.44E-06 rGI 3.36E-05 3.75E-05 1.41E-05 LC50 3.36E-05 3.75E-05 3.39E-05 IGROV 0150 1.08E-05 3.75E-05 3.79E-06 rci 3.36E-05 3.75E-05 1.06E-05 LC50 3.36E-Q5 3.75E-05 2.96E-05 IGROV-ET GI50 3.36E-05 3.75E-05 6.60E-06 G?? 3.36E-05 3.75E-05 2.08E-05 LC50 3.36E-05 3.75E-05 3.39E-05 SK-BR-3 GI50 2.40E-07 1.46E-06 1.28E-07 G?? 9.95E-07 3.75E-05 8.77E-07 LC50 3.36E-06 3.75E-05 1.02E-05 EL-28 GI50 3.36E-05 3.75E-05 5.22E-06 rGI 3.36E-05 3.75E-05 1.07E-05 LC50 3.36E-05 3.75E-05 2.19E-05 H-MBC-X GI50 2.26E-05 1.18E-05 6.77E-09 rGI 3.36E-05 3.75E-05 1.57E-08 LC50 3.36E-05 3.75E-05 4.44E-08 A-549 3150 2.26E-05 2.64E-05 2.39E-06 IX» 3.36E-05 3.75E-05 1.09E-05 LC50 3.36E-05 3.75E-05 3.39E-05 K-S62 GI50 3.36E-05 3.75E-05 5.55E-06 G?? 3.36E-05 3.75E-05 1.79E-05 LC50 3.36E-05 3.75E-05 3.39E-05 PANC-1 GI50 3.36E-05 3.75E-05 1.49E-07 1X31 3.36E-05 3.75E-05 4.88E-06 LC50 3.36E-05 3.75E-05 3.39E-05 HT-29 SI50 3.36E-05 3.75E-05 8.87E-06 G?? 3.36E-05 3.75E-05 2.35E-05 UC50 3.36E-05 3.75E-05 3.39E-05 LOVO GI50 3.36E-05 3.75E-05 3.52E-06 TGl 3.36E-05 3.7SE-05 1.41E-05 LC50 3.36E-05 3.75E-05 3.39E-05 78 19a 77 90 91 DÜ-145 GI50 7.70E-07 3.05E-09 6.30E-07 3.55E-07 3.36E-07 TGI 1.87E-06 7.94E-07 1.68E-06 1.03E-06 1.34E-06 LC50 2.82E-05 3.79E-06 2.78E-05 1.07E-05 2.49E-05 LN-eaP GI50 7.36E-07 6.17E-07 TGI - 2.18E-06 1.35E-06 - - LC50 2.25E-05 2.96E-06 SKOV-3 GI50 7.84E-07 1.14E-06 1.30E-06 4.65E-07 7.00E-07 TGI 1.87E-06 4.67E-06 3.26E-06 1.15E-06 2.12E-06 LC50 2.82E-05 2.18E-05 3.26E-06 1.39E-05 2.49E-05 IGROV GI50 6.21E-07 l,85E-05 1.30E-06 3.39E-Q7 2.41E-07 TGI 1.41E-06 9.56E-06 2.74E-06 6.92E-07 9.73E-07 LC50 4.74E-06 3.05E-05 3.26E-05 I.41E-06 6.02E-06 ISROV-ET GÍ50 1.08E-06 1.4ÍE-06 5.55E-07 1-92E-06 L16E-06 TGI 2.47E-06 4-98E-06 1.61E-06 6.95E-06 Í.98E-06 LC50 1. 3E-06 1.45E-0S 3.26E-05 1.58E-05 2.49E-05 GÍ50 5.28E-0? 4.77E-07 6.43E-07 3.1 ÍE-07 2.52&07 TGÍ 1.15E-06 1.&8E-06 1.34E-0& 6.64E-07 6.45E-07 LC50 2.49E-06 &58E-06 2.79E-06 L42E-0Ó 1.65E-06Í EL-28 G1S0 7.17E-07 L46E-06 3.93E-Ü7 3.97E-07 L80E-Ü7 ¡ a 32 . 5 163 102 74 S- EC-l GI50 9. I9E-06 d 00E-06 TGI - 1.97E-05 - 1.09E-0S - LC5Ü 2.41E-05 1.97E-Ü5 Á-549 GÍ5Ü 5.81B-06 2.41E-05 1.15E-05 2.51E-Ü5 5.35E-06 TGI 9.56E-06 2.41E-C5 2.42E-05 2.52E-05 1.07E-05 LC50 I .S7E-05 2.41E-05 2.42E-05 2.5.IE-05 2. 13E-Q5 GÍ50 5,3óE-G6 2.41E-05 L19E-05 2-5IE-QS 1.22E-06 ??? 9.20E-06 2.41E-05 2.42E-05 S.51E-05 2.55E-Ü5 LC50 1.57E-G5 2. 1E-05 2-42E-05 2,51E-05 i 73 9 9 •ra §2 OI50 - 3..08E-05 - - 7 32E-07 TQI - 3.08E-Q5 - - 3.09E-06 LC50 - 3.08E-05 - - 3.09E-O5 G150 4. 1E-Ü6 3.0&E-05 5.90E-06 1.23S-06 1.76E-06 TGI 1.47E-04 3.08E-05 1.18E-05 6. Í7E-0& 6.03E-06 LC50 .1 47E-04 3.G8E-05 2.95B-05 9.26E -05 2 44E-C5 GI50 2.94E-05 3.Q8E-05 9.I6E-06 9.26E-07 2.04E-0& TGÍ i 47E-04 3.08E-C5 2.57B-05 L54E-05 3.09E-05 LC50 1.47E-04 3.08E-Q5 2.57E-G5 1.54E-04 3.09E-O5 SS 87 $ B4SBC-1 GiSO - 3.11E-05 3.43E-05 3.06E-0S 3.44E-Q5 TGl - 3.11E-05 3.43E-05 3.06E-05 3.44E-Ü5 LC5 - 3.1 1E-05 3. 3E--05 3.06E-Ü5 3.44B-05 A-542 GI50 2. Í7E-06 2.25E-05 3.43E-05 3.06E-05 3.44E-G5 TOJ 6.21E-06 3.1 1E-05 3.43E-05 3.06E-05 3.44E-05 LC50 3.11 £-05 3.11E-05 3.43E-05 3.0&E-05 3.44E-05 S -39 GISO 9.32E-G7 3-11E-05 3.43E-05 3.06E-GS 3.44E-05 TGI 6.21E-06 3.1 1S -05 3.43E-05 3.Q6E-Q5 3.44E-05 LC50 3.1 1 E-Ü5 3? 1E-05 3.43E-05 3.06E-G5 3-44E-05 75 70 79 59 H-SBSG-1 ??50 1.43E-05 1.1915-07 3.84E-Ü5 2.97E-05 TQ1 8.00E-06 3.93E-07 3.84E-05 - 2.97E-0S LC50 3.62E-05 4.00E-Ü6 3.S4E-Ü5 2,97E-05 ñrS49 G-ISÜ 4.20E-Ü5 1.S2E-07 3.84E-G5 2.51 £-05 2.97E-05 TGI 9.45E-G5 5.6GE-07 3.S4E-05 2.5 i £-05 2.97E-05 LC50 2.13E-05 3.35E-Ü6 3.84E-05 2.51E-05 2.97E-0B ; G150 5.79E-06 3.81 E-Ü8 3.84E-05 2.51 E-05 2,97E-0o | TGI 3.62E-05 3.8IE-06 3.84E-05 2.51E-05 2.97E-05 : LC50 3.62E-05 3.S IE-05 3.84E-Q5 2.51E-05 2.97E-0 f LC50 3.456-0? L6ÍB-Ü5 L5ÓE-05 2.36E-05 1.92E-06 w - GJSO 6.03E-08 1. SE-06 7.67E-07 3.08E-06 1-32E-06 ??? 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Antincoplastic and antiherpetic activity of spermidine catecholamide iron chelators. Biochemical and Biophysical Research Communications, 1213); 848-854. Faircloth, G. T., Stewart, D. y Clement, J. J. (1988). A simple screening procedure for the quantitative measurement of cytotoxicity assay, Journal of Tissue and Culture Methods, 11(4); 201-205. Monks, A.; Scudiero, D., Skehan, Ph., Shoemaker, R., Paull, K., Vistica, D., Hose, C, Langley, J.; Cronise, P., Vaigro-Wolf, A., Gray-Goodrich, M., Campbell, H., Mayo, J., Boyd, M. (1991). v Feasibility of a high-flux antícancer drug screen using a diverse panel of cultured human tumor cell Unes. Articles, 83 (11): 757-766. Mosmann, T. (1983). Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival application to prolíferation and cyiotoxicity 5 assays. Journal of Immunological Methods, 35, 53-63. Skehan, P. A. y coautores (1990). New colorimetric cytotoxicity assay for antícancer drug screenig, J. Nati. Cáncer Inst., 82: 1107-1112. 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Claims (1)

  1. REIVINDICACIONES 1.- Un compuesto de la fórmula general (5) en la que cada uno de los grupos sustituyentes definidos por X2, R1f R2, 3, R6, 7 y R12 está seleccionado independientemente del grupo que consiste de H, OH, OR\ SH, SR', SOR', S02R\ N02, NH2, NHR', N(R')2, NHCOR', NHS02R', CN, halógeno, =0, C(=0)H, C(=0)R', C02H, C02R', carboxialquilo, alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo, arilo sustituido o no sustituido, aralquiio sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; donde cada uno de los grupos R' está seleccionado independientemente del grupo que consiste de H, OH, SH, N02, NH2, CN, halógeno, =0, C(=0)H, C(=0)CH3, C02H, C02CH3, alquilo de 1 a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 átomos de carbono, arilo, aralquiio y heteroaromático; donde los pares de grupos R-, y R2, R2 y R3, R3 y R12, R12 y R6 o R6 y R7 pueden estar unidos en un sistema anular carbocíclico o heterocíclico. 2. - Un compuesto de conformidad con ia reivindicación 1, caracterizado además porque R-, es hidrógeno, alquilo o halógeno. 3. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque R-i es hidrógeno, metilo o cloro. 4.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado además porque R¾ forma con R2 un anillo fundido. 5.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado además porque R-i forma con R2 un anillo aromático fundido. 6.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado además porque R forma con R2 un anillo de benceno fundido. 7. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 4, 5 o 6, caracterizado además porque el anillo fundido tiene sustituyentes seleccionados de OR'. 8. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado además porque los sustituyentes del anillo fundido comprenden uno o más de hidroxi o alcoxi. 9. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado además porque los sustituyentes del anillo fundido comprenden uno o más de hidroxi o metoxi. 10. - Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado además porque R2 es hidrógeno o halógeno. 11.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque R2 es hidrógeno, flúor o cloro. 12. - Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado además porque R3 es hidrógeno, OR', NR'2 o halógeno. 13. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado además porque R3 es hidrógeno, hidroxi, alcoxi, hidroxi protegido, amino, amino protegido o halógeno. 14. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado además porque R3 es hidrógeno, hidroxi, metoxi, benciloxi, amino, metoxibencilamino o cloro. 15. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado además porque R3 es hidrógeno. 16. - Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado además porque R6 es hidrógeno. 17. - Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado además porque R7 es hidrógeno. 18. - Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado además porque R12 es alquilo, arilo o heteroarilo. 19. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado además porque R12 es alquilo, fenilo o heteroarilo con 5 o 6 átomos de anillo y 1 o 2 heteroátomos. 20. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado además porque R12 es isopropilo, fenilo, pirimidinilo, tiofenilo o piridinilo. 21. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 18, 19 o 20, caracterizado además porque los grupos arilo o heteroarilo de R12 están no sustituidos o tienen sustituyentes seleccionados de OR' o nitro. 22. - Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 18 a 21, caracterizado porque tiene la fórmula (5a): (5a) en la que X2, R-i, 2> R3, 6 Y R7 son como se definió; y cada uno de X-i, R4 y R5 está seleccionado independientemente del grupo que consiste de H, OH, OR', SH, SR', SOR', S02R\ N02, NH2, NHR', N(R')2, NHCOR', NHS02R', CN, halógeno, =0, C(=0)H, C(=0)R', C02H, C02R', carboxialquilo, alquilo de a 12 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 12 átomos de carbono, alquinilo de 2 a 12 átomos de carbono, arilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido y heteroaromático sustituido o no sustituido; y R' es como se definió. 23.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado además porque R4 es hidrógeno. 24. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 22 o 23, caracterizado además porque R5 es hidrógeno. 25. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 22, 23 o 24, caracterizado además porque X^ es hidrógeno, alquilo, O', NR'2, SR', SOR', S02R', carboxiaiqui lo o aralquilo. 26. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado además porque X† es hidrógeno, alquilo, hidroxi, alcoxi, ariloxi, amino, amino protegido, tioalquilo, alquilsulfinilo, aiquilsulfonilo o dicarboxialquilo. 27.- Un compuesto de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado además porque es hidrógeno, metilo, hidroxi, metoxi, etoxi, benciloxi, fenoxi, amino, metoxibencilamino, tiometilo, metilsulfinilo, metilsulfonilo o dimetilcarboxietilo. 28. -Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado además porque X2 es NR'2 o SR'. 29. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado además porque X2 es NH2 o tioalquilo. 30. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado además porque X2 es NH2 o tiometilo. (1ß> {2S> en la que los grupos sustituyentes son como se definió en cualquiera de las reivindicaciones precedentes. 32. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 31, caracterizado además porque es un compuesto de la fórmula (10) , en la que uno o más de los sustituyentes son como sigue: X-i es hidrógeno, alquilo, hidroxi, alcoxi, ariloxi, amino, amino protegido, tioalquilo, alquilsulfinilo, alquilsuifonilo o dicarboxialquilo; X2 es NH2 o tioalquilo; R8 es hidrógeno, alquilo o halógeno; Río es hidrógeno, hidroxi, alcoxi, hidroxi protegido, amino, amino protegido o halógeno; es hidrógeno o halógeno. 33. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 31, caracterizado además porque es un compuesto de la fórmula (11) , en la que uno o más de los sustituyentes son como sigue: Xi es hidrógeno, alquilo, hidroxi, alcoxi, ariloxi, amino, amino protegido, tioalquilo, alquilsulfinilo, alquilsuifonilo o dicarboxialquilo; X2 es NH2 o tioalquilo; R9 es hidrógeno o alcoxi. 34. - Un compuesto de conformidad con la reivindicación 31, caracterizado además porque es un compuesto de la fórmula (29) en la que uno o más de los sustituyentes son como sigue: X2 es NH2 o tioalquilo; Ri2 no es pirimidinilo y es alquilo, arilo o heteroarilo, que no está sustituido o que tiene sustituyentes seleccionados de OR' o nitro. 35. - Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado además porque es un compuesto numerado, que aparece en la descripción precedente. 36. - Un método para tratar un mamífero afectado por el cáncer, caracterizado porque comprende administrar al individuo afectado una cantidad efectiva en términos terapéuticos, de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, o una composición farmacéutica de él. 37. - Una composición farmacéutica, caracterizada porque contiene un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 35, como un ingrediente activo. 38. - El uso de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 35, en la preparación de un medicamento para uso en el tratamiento del cáncer. 39. - Un proceso para preparar un intermediario de variolina de la fórmula (8z): en la que hal es halógeno y los restantes sustituyentes son como se los definió en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 34; caracterizado porque comprende hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (31z): {312) en la que los sustituyentes son como se definió antes, compuesto de la fórmula (13z): <13z) en la que los sustituyentes son como se definió previamente. 40.- Un proceso de conformidad con la reivindicación 39, caracterizado además porque se prepara el compuesto de la fórmula (31z) haciendo reaccionar un compuesto de la fórmula (30z):
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