MXPA02011671A - Derivados de acido quinolonacarboxilico. - Google Patents

Abstract

Acido (-)-7-[(7S)-7-amino-5-azaespiro[2.4]heptan-5-il]-6-fluoro-1- [(1R,2S)-2-fluoro-1 -ciclopropil]-1,4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3- quinolina-carboxílico 1HCl 1H2O, y composiciones antibacterianas que contienen este compuesto; el compuesto de la presente invenci3/4 n no solo exhibe excelente actividad antimicrobiana y seguridad, sino que también exhibe notable estabilidad frente a la luz y la humedad, y por tanto es °til como un agente antibacteriano.

Description

DERIVADOS PE ACIDO QUINOLONACARBOXILICO CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a derivados de ácido quinolonacarboxílico ópticamente activos que exhiben alta actividad antibacteriana y seguridad, y que tienen notable estabilidad; y a una composición antibacteriana que contiene dichos derivados.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los derivados de ácido quinolonacarboxílico son una clase conocida de agentes antibacterianos sintéticos. Particularmente, los compuestos de la siguiente fórmula (I) que tienen un grupo 1 ,2-cis-2-halógeno-ciclopropilo sobre el átomo de nitrógeno en la posición 1 del esqueleto de quinolona, exhiben fuerte actividad antibacteriana y seguridad, y así, son conocidos por ser útiles como agentes farmacéuticos (patentes Japonesas Nos. 2714597 y 2917010): (I) en donde R1 es un grupo amino, un grupo metilamino, un grupo hidroxilo, un grupo tiol o un átomo de hidrógeno; y R2 es un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de los siguientes grupos: (en donde R3, R4, R5 y R6 representan cada uno independientemente un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C1-C6, R10 y R11 representan cada uno independientemente un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C1-C6, R12 y R13 representan cada uno independientemente un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C1-C6, o R12 y R13 pueden formar una cadena de polimetileno de 2 a 5 átomos de carbono), o un grupo 3-hidroxipirrolidinilo que puede tener un grupo alquilo de C1-C6; A representa C-X3 o un átomo de nitrógeno; X1 y X2 representan cada uno independientemente un átomo de halógeno; X3 representa un átomo de halógeno, un grupo alquilo de C1-C6, un grupo alcoxi de C1-C6, un grupo trifluorometilo, o un átomo de hidrógeno; y Z representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C1-C6, un grupo alcoxialquilo de C1-C6, un grupo fenilalquilo de alquilo de C1-C6, un grupo fenil , un grupo acetoximetilo, un grupo pivaloiloximetilo, un grupo etoxicarboniloxi, un grupo cloro, un grupo dimetilaminoetilo, un grupo 5-indanilo, un grupo ftalidinilo, un grupo 2-oxo-1 ,3-dioxol-4-ilmetilo 5-sustituido, o un grupo 3-acetoxi-2-oxobutilo; siendo excluido el caso en el cual R2 es un grupo 3-aminopirroIidinilo y R1 y X3 son átomos de hidrógeno. Se ha desarrollado una variedad de agentes antibacterianos sintéticos de fluoroquinolona, para proveer fármacos clínicos para quimioterapia que son efectivos en el tratamiento de una amplia gama de enfermedades infecciosas sistémicas. No obstante, aún existe la demanda de compuestos que exhiban actividad antibacteriana superior, que sean más seguros que los compuestos anteriores y además que estén dotados de estabilidad sobresaliente frente a la luz y la humedad.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN En vista de lo anterior, los presentes inventores, enfocándose sobre los ácidos pirrolidonacarboxíiicos N?-(1 ,2-cis-2-fluoroc¡clopropil)-sustituidos descritos en la patente Japonesa No. 2714597 anteriormente mencionada, han realizado más investigación y han encontrado que un monoclorhidrato monohidratado del compuesto No. 41 descrito en la patente Japonesa No. 2714597 -pero cuya exposición está limitada solamente a la fórmula química de su forma libre, particularmente ácido (-)-7-[(7S)-7-amino-5-azaespiro[2.4]heptan-5-il]-6-fluoiO-1 -[(1 R,2S)-2-fluoro-1 -ciclopropil]-1 ,4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinolinacarboxílico (en adelante referido como el compuesto (1a); el compuesto (1a) corresponde a una forma libre y está representado por la fórmula (1a) que se da más adelanteD, no solo exhibe actividad antibacteriana y seguridad excelentes, sino también estabilidad excepcionalmente buena frente a la luz y la humedad en comparación con otras sales de aducto de ácido, y por lo tanto es útil como agente antibacteriano. La presente invención ha sido lograda en base a estos hallazgos. Por consiguiente, la presente invención provee un compuesto representado por la siguiente fórmula (1): que es monoclorhidrato de ácido (-)-7-[(7S)-7-amino-5-azaespiro[2.4]heptan-5-il]-6-fluoro-1 -[(1 R,2S)-2-fluoro-1 -ciclopropil]-1 ,4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinolinacarboxílico monohidratado (en adelante referido como compuesto (1); el compuesto (1) es un monoclorhidrato monohidratado del compuesto (1a)); y agentes antibacterianos que contienen el compuesto (1). La presente invención también provee un agente antibacteriano que contiene un compuesto representado por la siguiente fórmula (1a), una sal de adición de ácido del mismo, o un hidrato del siguiente compuesto de fórmula (1a), o la sal de aducto de ácido. (1a) La presente invención provee además el uso del compuesto arriba descrito de fórmula (1a), una sal de adición de ácido del mismo, o un hidrato del compuesto de fórmula (1a) o su sal de adición de ácido, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades infecciosas.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La figura 1 muestra un espectro de difracción de rayos X del compuesto (1 ). La figura 2 muestra un espectro de absorción infrarrojo del compuesto (1 ). La figura 3 es una gráfica que muestra el cambio de peso del compuesto (1 ) bajo 5-95% de HR.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Y MODALIDADES PREFERIDAS El compuesto (1a) puede ser producido de un compuesto (2) con alto rendimiento de acuerdo con el siguiente esquema de reacción. Brevemente, un compuesto de amina (3) se hace reaccionar con el compuesto (2) (nota: estos dos compuestos se pueden obtener mediante el método descrito en la patente Japonesa No. 2714597), y el tratamiento del compuesto resultante (1 b) con un solvente prótico produce el compuesto (1a). Por consiguiente, el compuesto (1b) es un intermediario sintético útil en la producción del compuesto (1a). da) (1) Con respecto a las condiciones de reacción bajo las cuales se produce el compuesto (1b) a partir del compuesto (2), por ejemplo, se agita una solución de diclorhidrato de amina (3) y trietilamina en sulfóxido de dimetilo (ordinariamente son suficientes 2 a 3 horas a lo más), a temperatura ambiente, y después se ie agrega el compuesto (2) y se hacen reaccionar a temperatura ambiente durante un tiempo de 10 minutos a varias horas. En esta reacción, en lugar del diclorhidrato de amina (3) se puede usar una base libre correspondiente (3) o una sal de cualquier otro tipo. La sal de cualquier otro tipo puede ser por ejemplo monoclorhidrato, o una mono- o di-sal -aquí, "mono-" y "di-" son ambos con respecto a la amina (3)- de ácido orgánico o inorgánico (diferente de HCl). Alternativamente, la sal puede estar en la forma de un hidrato o un solvato. Los ejemplos del ácido orgánico o inorgánico adecuado para sal de aducto de ácido (diferente de HCl) incluyen ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fluorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido p-toluenosulfónico, ácido metanosulfónico, ácido trifluoroacético, ácido tricloroacético, ácido acético, ácido fórmico, ácido maleico y ácido fumárico. Ejemplos del solvente de reacción además del sulfóxido de dimetilo incluyen N, N-dimetilformamida, N, N-dimetilacetamida y N-metilpirrolidona. En el ejemplo arriba mencionado en donde se usa trietilamina, cuando se emplea una base libre de la amina (3), la cantidad de trietiiamina es preferiblemente un equivalente o más, de preferencia dos equivalentes o más. Cuando se emplea una sal de la amina (3), la cantidad de trietilamina es preferiblemente mayor o igual al total del equivalente requerido para convertir la sal en una base libre y el equivalente requerido para capturar el fluoruro de hidrógeno generado de la reacción. En lugar de trietilamina se puede usar cualquier otra base orgánica o inorgánica tal como 4-(dimetilamino)piridina o carbonato de potasio.

El paso de producción del compuesto (1 a) a partir del compuesto (1b) se puede realizar por ejemplo disolviendo el compuesto (1b) en etanol acuoso, añadiendo trietilamina a la mezcla resultante, seguido por reflujo durante unas pocas horas. El etanol acuoso puede ser reemplazado con otro solvente prótico tal como ¡sopropanol acuoso. Los solventes próticos miscibles con agua son adecuados para este proceso y se prefieren los que pueden disolver por lo menos el compuesto (1 b) cuando se calienta. Es de notar que no necesariamente se agrega trietilamina. El compuesto (1a) también se puede producir de un compuesto (2) en alto rendimiento de acuerdo con el siguiente esquema de reacción. Brevemente, el compuesto de amina (5) se hace reaccionar con el compuesto (2), para obtener así un compuesto carboxílico (7), y después se remueve el grupo protector del grupo amino. (en donde R representa un grupo alcoxicarbonilo, un grupo aralquiloxicarbonilo, un grupo acilo, un grupo alquilo, un grupo aralquilo, un grupo alcoxialquilo (todos estos pueden tener uno o más sustituyentes), o un grupo sililo sustituido). Por lo tanto, los compuestos (6) y (7) son útiles como intermediarios sintéticos en la producción del compuesto (1a). En el compuesto (6), R sirve como un grupo protector para un grupo amino, y es un grupo alcoxicarbonilo que puede tener uno o más sustituyentes, un grupo aralquiloxicarbonilo que puede tener uno o más sustituyentes, un grupo acilo que puede tener uno o más sustituyentes, un grupo alquilo que puede tener uno o más sustituyentes, un grupo aralquilo que puede tener uno o más sustituyentes, un grupo alcoxialquilo que puede tener uno o más sustituyentes, o un grupo sililo sustituido. De estas especies, R es preferiblemente un grupo alcoxicarbonilo, un grupo aralquiloxicarbonilo, un grupo acilo o un grupo sililo, siendo más preferidos alcoxicarbonilo y aralquiloxicarbonilo. Ejemplos específicos del grupo alcoxicarbonilo que puede tener uno o más sustituyentes incluyen un grupo ter-butoxicarbonilo (Boc) y un grupo 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, en donde se prefiere el grupo terbutoxicarbonilo. Ejemplos específicos del aralquiloxicarbonilo que puede tener uno o más sustituyentes incluyen un grupo benciloxicarbonilo, un grupo p-metoxibenciloxicarbonilo y un grupo p-nitrobenciloxicarbonilo, en donde se prefieren el grupo p-metoxibenciloxicarbonilo y el grupo p-nitrobenciloxicarbonilo. Ejemplos específicos del grupo acilo que puede tener uno o más sustituyentes incluyen un grupo acetilo, un grupo metoxiacetilo, un grupo trifluoroacetilo, un grupo cloroacetilo, un grupo pivaloilo, un grupo formilo y un grupo benzoilo. De estas especies se prefiere un grupo trifluoroacetilo, un grupo cloroacetilo, un grupo pivaloilo y un grupo formilo. Ejemplos específicos del grupo alquilo que puede tener uno o más sustituyentes incluyen un grupo ter-butilo. Ejemplos del grupo aralquilo que puede tener uno o más sustituyentes incluyen un grupo bencilo, un grupo p-nitrobencilo, un grupo p-metoxibencilo y un grupo trifenilmetilo, siendo preferidos el grupo p-metoxibencilo y trifenilmetilo. Ejemplos del grupo alcoxialquilo que puede tener uno o más sustituyentes ¡ncluyen un grupo metoximetilo, un grupo ter-butoximetilo, un grupo 2,2,2-tricloroetoximetilo y un grupo tetrahidrofuranilo, siendo preferidos el grupo ter-butoximetilo y el grupo tetrahidrofuranilo. Ejemplos del grupo sililo sustituido incluyen un grupo trimetilsililo, un grupo isopropildimetilsililo, un grupo ter-butildimetilsililo, un grupo tribencilsililo y un grupo ter-butildifenilsililo, siendo preferidos el grupo isopropildimetilsililo y el grupo ter-butildimetilsililo. Sin embargo, R no está limitado solo a las especies arriba mencionadas y cualquier grupo usado ordinariamente para la protección de un grupo amino es adecuado para la presente invención, y los grupos protectores seleccionados del grupo que consiste de grupos alcoxicarbonilo, grupos aralquiloxicarbonilo, grupos acilo, grupos alquilo, grupos aralquilo, grupos alcoxialquilo y grupos sililo, pueden servir como R. Con respecto a las condiciones de reacción bajo las cuales se produce el compuesto (6), por ejemplo, se puede usar una amina (5) para ocasionar una reacción en sulfóxido de dimetilo en presencia de trimetilamina, a temperatura ambiente durante varias horas a un día. La amina (5) puede estar en la forma de una base libre o una sal de un ácido orgánico o inorgánico. Preferiblemente se usa la amina (5) en una cantidad de un equivalente o más. Cuando se usa una base libre de la amina (5), la cantidad requerida de trietilamina es de uno o más equivalentes, de preferencia dos o más equivalentes. Alternativamente, cuando se emplea una sal de la amina (5), la cantidad de trietilamina es preferiblemente mayor o igual al total del equivalente requerido para convertir ia sal en una base libre mas el equivalente requerido para capturar el fluoruro de hidrógeno generado de la reacción. Ejemplos de las sales de amina (5) incluyen sales de ácido orgánico o inorgánico tales como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fluorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido p-toluenosulfónico, ácido metanosulfónico, ácido trifluoroacético, ácido tricloroacético, ácido acético, ácido fórmico, ácido maleico y ácido fumárico. Estas sales pueden estar en la forma de hidratos o solvatos. Ejemplos del solvente de reacción además del sulfóxido de dimetilo incluyen N, N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida y N-metilpirrolidona. En el ejemplo arriba mencionado en donde se usa trietilamina, la trietilamina se puede reemplazar con cualquiera de las bases orgánicas o inorgánicas, tales como 4-(dimetilamino)piridina o carbonato de potasio. La conversión del compuesto (6) al compuesto (7) se puede realizar por ejemplo disolviendo el compuesto (6) en etanol acuoso, agregando trietilamina a la mezcla resultante, seguido por reflujo durante algunas horas. El etanol acuoso puede ser reemplazado con otro solvente protónico tal como ¡sopropanol acuoso. Los solventes próticos miscibles con agua son adecuados para este proceso, y se prefieren los que pueden por lo menos disolver el compuesto (1b) cuando se calienta. Nótese que no necesariamente se agrega trietilamina. En el paso de producción del compuesto (1a) a partir del compuesto (7), las condiciones bajo las cuales se remueve el grupo protector R deben ser consecuentes con las propiedades del grupo protector R. Casos ejemplares típicos son como sigue. Cuando R es un grupo ter-butoxicarbonilo (Boc), la desprotección se puede llevar a cabo mediante tratamiento con un ácido orgánico o inorgánico tal como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fluorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido p-toluenosulfónico, ácido metanosulfónico, ácido trifluoroacético, ácido tricloroacético, ácido acético o ácido fórmico. La temperatura a la cual se lleva a cabo la desprotección se elige convenientemente de la escala de -30 a 100°C, de acuerdo con el tipo y concentración del ácido empleado y con las propiedades del solvente. Se puede efectuar similarmente desprotección para un grupo p-metoxibenciloxicarbonilo, un grupo acetilo, un grupo pivaloilo, un grupo metoxiacetilo, un grupo formilo, un grupo ter-butilo, un grupo metoximetilo, un grupo ter-butoximetilo, un grupo tetrahidrofuranilo, un grupo trimetilsililo, un grupo trifenilmetilo, o de grupos similares, mediante tratamiento con un ácido que se elige adecuadamente de entre ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fluorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido p-toluenosulfónico, ácido metanosulfónico, ácido trifluoroacético y ácido tricloroacético. Un grupo 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo y un grupo 2,2,2-tricloroetoximetilo pueden ser removidos usando una combinación de zinc y un ácido (HCl o ácido acético). La desprotección de un grupo benciloxicarbonilo, un grupo p-metoxibenciloxicarbonilo, un grupo p-nitrobenciloxicarbonilo, un grupo bencilo, un grupo p-nltrobencilo, un grupo p-metoxibencilo o un grupo trifenilmetilo, se puede llevar a cabo mediante reducción catalítica. Los grupos acilo tales como un grupo acetilo, un grupo metoxiacetilo, un grupo trifluoroacetilo, un grupo cloroacetilo, un grupo pivaloilo, un grupo formilo y un grupo benzoilo, se pueden remover mediante tratamiento con un ácido tal como HCl o un álcali tal como NaOH. Los grupos sililo tales como un grupo trimetilsililo, un grupo isopropildimetilsililo, un grupo ter-butildimetilsiiilo, un grupo tribencilsililo y un grupo ter-butildifenilsililo, se pueden remover usando un ácido o iones fluoruro. En este caso, ejemplos del ácido incluyen ácido acético, ácido clorhídrico y ácido fluorhídrico, y se debe elegir un ácido adecuado de acuerdo con las propiedades del grupo sililo. En cuanto a la fuente de los iones fluoruro, se puede usar fluoruro de tetrabutilamonio. Un grupo cloroacetilo se puede remover usando tiourea. Los detalles de las condiciones -bajo las cuales se lleva a cabo la desprotección son ordinarios y no están limitados particularmente. , " Con referencia al compuesto (6), cuando R es un grupo ter- butoxicarbonilo o un grupo similar que puede ser removido por un ácido, el compuesto (1a) se puede obtener mediante tratamiento directo del compuesto (6) con un ácido orgánico o inorgánico tal como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fluorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido p-toluenosulfónico, ácido metanosulfónico, ácido trifluoroacético o ácido tricloroacético. En los dos métodos de producción antes mencionados, el compuesto (1a) se puede obtener en una forma libre o como una sal. Ejemplos de la sal incluyen una sal de un ácido inorgánico u orgánico, tal como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fluorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido p-toluenosulfónico, ácido metanosulfónico, ácido trifluoroacético, ácido tricloroacético, ácido acético, ácido maleico o ácido fumárico; y una sal de un metal alcalino o alcalinotérreo tal como sodio, potasio, calcio o litio. En cualquier caso, que el compuesto (1a) esté en su forma libre o en forma de sal, el compuesto (1a) se puede obtener en la forma de un solvato. Los ejemplos de solvatos incluyen los formados con agua, etanol, propanol, acetonitrilo o acetona; e hidratos que se pueden formar mediante absorción de humedad del aire. El compuesto (2) que se usa en los dos esquemas de reacción antes mencionados para producir el compuesto (1a), se puede preparar mediante la siguiente ruta de reacción.

En el esquema anterior, para producir el compuesto (2) a partir del compuesto (12), se puede usar un complejo de éter de trifluoruro de boro. Alternativamente, el compuesto (2) se puede obtener sin obtener el compuesto (12) pero tratando el compuesto (11 ) con ácido tetrafluoroborónico como se muestra abajo.

La conversión de! compuesto (1a) al compuesto (1) se puede llevar a cabo, por ejemplo, suspendiendo el compuesto (1a) en un solvente alcohólico tal como 2-propanol o etanol, disolviendo la suspensión mediante la adición de HCl, y subsecuentemente cristalizando de un solvente alcohólico tal como 2,-propanol o etanol. Los compuestos (1a) así obtenidos, sus sales de adición de ácido, o las sales de los compuestos (1a), en particular los compuestos (1) que son monoclorhidratos monohidratados de los compuestos (1a), exhiben actividad antibacteriana más sobresaliente y estabilidad superior frente a la luz y ia humedad que, sin considerar otros compuestos, los compuestos Nos. 9a, 9b, 13b, 18a, 18b, 26bb, 26aa, 26ba, 26ab, 31a, 31b, 34b, 54b, 56b, 52bb, o 85bb que se describen en la patente japonesa No. 2714597 o 2917010, y por lo tanto son útiles como agentes antibacterianos. Las sales de adición de ácido preferidas de los compuestos (1a) aplicables para agentes antibacterianos, son las sales de ácido clorhídrico. Entre los compuestos (1a) mencionados, sus sales de adición de ácido y las sales de los compuestos (1a) o las sales de adición de ácido, se prefieren particularmente los compuestos (1). Los compuestos (1) muy preferidos, esto es, los monoclorhidratos monohidratados de los compuestos (1a), son aquellos que exhiben picos característicos en la cercanía de ángulos de difracción (2T) de 6.9, 10.5, 14.4, 23.1 , 26.9 y 27.8 (°) cuando se someten a difractometría de rayos X en polvo (véase la figura 1)'. Los compuestos (1) que satisfacen las condiciones anteriores no absorben ni desorben humedad bajo condiciones de humedad de 5 a 95% de HR, y por lo tanto tienen excelente estabilidad higroscópica. Los compuestos de la presente invención, que exhiben fuerte actividad antibacteriana y excelente estabilidad frente a la luz y la humedad, f son útiles como composiciones farmacéuticas para el tratamiento de humanos, animales y peces. Cuando los compuestos de la presente invención se usan como composiciones farmacéuticas para humanos, la dosis diaria para un adulto es de 50 mg a 1 g, de preferencia de 100 mg a 300 mg. Cuando los compuestos se administran a animales, la dosis puede variar dependiendo del propósito de la administración (terapéutico o preventivo), la especie y el tamaño del animal a tratar, la naturaleza del patógeno que infectó al animal, y la severidad de la condición patológica. Sin embargo, la dosis diaria es típicamente de 1 mg a 200 mg, de preferencia de 5 mg a 100 mg por kg del peso corporal del animal. Esta dosis se administra una vez al día o 2-4 veces al día dividida. La dosis diaria puede sobrepasar las escalas antes mencionadas. Las composiciones antibacterianas que contienen los compuestos arriba mencionados de la presente invención, se pueden formular en una variedad de formulaciones por medio de cualquier método ordinario según el modo de administración. Ejemplos de la forma peroral de las formulaciones antibacterianas que contienen el compuesto de la presente invención como un ingrediente activo, incluyen tabletas, polvos, granulos, i cápsulas, soluciones, jarabes, elíxires y suspensiones a base de aceite o a base de agua. Las inyecciones pueden contener un estabilizador, un conservador o un agente solubilizante. Por lo tanto, una solución que puede contener cualquiera de estos agentes auxiliares se puede poner en un recipiente, y se puede formular una preparación sólida por ejemplo mediante secado en congelación, produciendo así un producto farmacéutico para preparación in situ. Además, en un solo recipiente puede estar contenida una dosis o una pluralidad de dosis. Cuando la composición de la presente invención se formula en agentes extemos, los ejemplos de los agentes extemos incluyen soluciones, suspensiones, emulsiones, ungüentos, geles, cremas, lociones y aerosoles. Las preparaciones sólidas pueden contener, además del compuesto de la presente invención, aditivos farmacéuticamente aceptables que ¡ncluyen rellenos, agentes incrementadores de volumen, aglutinantes, desintegrantes, aceleradores de disolución, agentes de mojado y lubricantes, según sea necesario. Ejemplos de preparaciones líquidas incluyen soluciones, suspensiones y emulsiones. Las preparaciones líquidas contienen opcionalmente auxiliares de suspensión y emulsionantes como aditivos para las mismas.

EJEMPLOS La presente invención será descrita en más detalle por medio de ejemplos, que no se deben considerar como limitativos de la invención.

EJEMPLO DE REFERENCIA 1 3-Dimet¡lamino-2-(3-metoxi-2,4.5-trifluorobenzoil)acrpato de etilo Se agregó a gotas cloruro de tionilo (109.4 ml; 1500 mmoles) a temperatura ambiente a una suspensión que contenía ácido 3-metox¡-2,4,5-trifluorobenzoico (206.1 g; 1000 mmoles), N.N-dimetilformamida (2 ml) y tolueno (2000 ml). "Después de completar la adición, la mezcla de reacción se agitó en un baño de aceite a 60°C durante 16 horas. La mezcla de reacción se enfrió y la solución fría se concentró bajo presión reducida. Se le agregó tolueno al residuo y la mezcla se volvió a concentrar. El procedimiento de adición de tolueno y concentración se repitió dos veces más, para producir así un cloruro de ácido. Se agregaron 3-dimetilaminoacrilato de etilo (171.8 g; 1200 mmoles) y trietilamina (184.0 ml; 1320 mmoles) a tetrahidrofurano seco (1500 mi). A la solución se le agregó a gotas una solución del cloruro de ácido arriba preparado en tetrahidrofurano seco (500 ml) bajo enfriamiento con hielo. Después de completar la adición, la suspensión de reacción se puso en reflujo durante 5 horas, seguido por enfriamiento. La mezcla de reacción fría se concentró bajo presión reducida, y al residuo se le agregó agua (1500 ml) y diclorometano (1500 ml), seguido por agitación. La capa de diclorometano se recolectó y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (1000 ml). La capa combinada de diclorometano se lavó con salmuera (1500 ml) y se secó sobre sulfato de sodio anhidro, seguido por filtración. El filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se sometió a cromatografía de columna en gel de sílice. Se concentraron las fracciones eluidas con n-hexano/acetato de etilo (1 :1), seguido por secado bajo presión reducida, para producir así 270.3 g del compuesto del título como un material cremoso de color blanco amarillento (rendimiento: 81.6%). 1H RMN (400 MHz, CDCIg) d: 1.02 (3H, t, J=7.08 Hz), 2.88 (3H br), 3.32 (3H, br), 4.00 (2H, q, J=7.08 Hz), 7.09-7.13 (1 H, m), 7.83 (1 H, s).

EJEMPLO DE REFERENCIA 2 3-f(1R.2S)-2-fluoro-1-c¡cl?DropHam¡no1-2-(3-metoxi-2.4.5-trifluoroben2?il)- acrilato de etilo Se disolvió 3-dimetilamino-2-(3-metoxi-2,4,5-trifluorobenzoil)-acrilato de etilo (260.5 g; 786.3 mmoles) en diclorometano (2200 ml), y se agregó a la solución p-toluenosulfonato de (1 R,2S)-2-fluoro-1 -ciclopropilamina (223.6 g; 904.2 mmoles). La suspensión resultante se enfrió a -15°C, y se le agregó a gotas una solución de trietilamina (138.6 ml, 994.6 mmoles) en diclorometano (300 ml) durante 40 minutos mientras se agitaba. Después de completar la adición la temperatura se mantuvo durante 1 hora, y después la suspensión se enfrió sobre hielo durante 1 hora, seguido por agitación a temperatura ambiente durante 14 horas. Se agregaron a la mezcla de reacción diclorometano (1000 ml) y agua (2000 ml), y la capa de diclorometano se recolectó. La capa acuosa se extrajo con diclorometano (500 ml), y la capa orgánica combinada se lavó con salmuera saturada (1000 mi), seguido por secado sobre sulfato de sodio anhidro. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró bajo presión reducida para producir así 227.5 g del compuesto del título como un material cremoso amarillo (rendimiento: 97.7%). El producto de reacción era una mezcla de isómeros geométricos (isómeros E y Z). El producto se usó para la siguiente reacción sin purificación ulterior. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d: 0.97, 1.09 (total 3H, cada t, J=7.08 Hz), 1.21-1.37 (2H, m), 2.90-2.99 (1H, m), 4.01 (3H, s), 4.03, 4.06 (total 2H, cada q, J=7.08 Hz), 4.73 (1 H, dm, J=63.72 Hz), 6.86-6.92, 6.98-7.04 (total 1 H, cada m), 8.16, 8.23 (total 1H, cada d,t J=13.67 Hz).

EJEMPLO DÉ REFERENCIA 3 6.7-Difluoro-1-r(1R.2S)-2-fluoro-1-cicloprop¡p-1.4-dihidro-8-nnetoxi-4-oxo- 3-quinolinacarboxilato de etilo El 3-[(1R,2S)-2-fluoro-1-ciclopropilamino]-2-(3-metoxi-2,4,5-trifluorobenzoiI)acrilato de etilo crudo anteriormente sintetizado (276.2 g; 764.5 mmoles) se disolvió en N, N-dimetilformamida seca (2000 mi), y se suspendió carbonato de potasio (317.0 g; 2.293 mmoles) en la solución bajo enfriamiento con hielo, seguido por agitación durante 72 horas a temperatura ambiente. A la mezcla de reacción se le agregó lentamente, a gotas, ácido clorhídrico (2N) a fin de ajustar el pH de la suspensión resultante a aproximadamente 3, mientras se agitaba bajo enfriamiento con hielo. La suspensión se agitó 30 minutos a temperatura ambiente y los cristales precipitados se recogieron por filtración. Los cristales así obtenidos se lavaron secuencialmente con una cantidad en exceso de agua purificada, una pequeña cantidad de etanol frío y una cantidad en exceso de éter dietíüco, seguido por secado bajo presión reducida a 70°C, para producir así 213.4 g del compuesto del título como un polvo blanco (rendimiento: 81.8%). 1H RMN (400 MHz, CDCy d: 1.41 (3H, t, J=7.08 Hz), 1.56-1.68 (2H, m), 3.83-3.88 (1H, m), 4.10 (3H, d, J=2.20 Hz), 4.39 (2H, q, J=7.08 Hz), 4.85 (1 H, dm, J=62.99 Hz), 8.05 (1 H, dd, J=8.55, 10.01 Hz), 8.57 (1 H, d, J=1.22 Hz).

EJEMPLO DE REFERENCIA 4 Acido 6.7-difluoro-1-r( 1 R.2S)-2-flu?ro-1-cicloprop¡p-1.4-dihidro-8-metoxi- 4-oxo-3-auinolinacarboxílico Una mezcla de 6,7-difluoro-1-[(1 R,2S)-2-fluoro-1-ciclopropil]-8-metoxi-1 ,4-dihidro-4-oxoquinol¡na-3-carboxilato de etilo (120.8 g; 354.1 mmoles), ácido acético glacial (210 ml) y ácido clorhídrico concentrado (420 mi), se puso a reflujo durante 6 horas, seguido por enfriamiento. La mezcla de reacción fría se vació en hielo/agua (1500 ml) mientras se agitaba, y la mezcla se agitó 30 minutos más a temperatura ambiente. Los cristales precipitados 1 se recogieron mediante filtración y los cristales se lavaron secuencialmente con una cantidad en exceso de agua purificada, etanol (300 ml) y éter dietílico (500 ml). Los cristales se purificaron mediante recristalización de etanol-acetona (también mediante tratamiento con carbón activado y filtración), seguido por secado bajo presión reducida a 70°C, para producir así 107.0 g del compuesto del título como agujas blancas (rendimiento: 96.5%). 1H RMN (400 MHz, CDCy d: 1.64-1.75 (2H, m), 3.97-4.00 (1H, m), 4.17 (3H, d, J=2.20 Hz), 4.91 (1H, dm, J=63.23 Hz), 8.05 (1H, dd, J=8.55, 10.01 Hz), 8.84 (1H, s), 14.31 (1H, s).

EJEMPLO DE REFERENCIA 5 Quelato de difluoroboro y ácido 6.7-difluoro-1-f(1R.2S)-2-fluoro-1- ciciopropip-1.4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinoíinacarboxílico Se suspendió ácido 6,7-difluoro-1-[(1 R,2S)-2-fluoro-1-cicIopropil]-1 ,4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinoiinacarboxílico (90.30 g; 288.3 mmoles) en éter dietíiico seco (1000 ml), y se le agregó a la suspensión bajo enfriamiento con hielo complejo de trifluoruro de boro/éter dietílico (653 ml), gota a gota. Después de completar la adición, la suspensión de reacción se agitó 24 horas a temperatura ambiente y los cristales precipitados se recogieron por filtración, seguido por lavado con una cantidad en exceso de éter dietílico seco. Los cristales lavados se secaron bajo presión reducida a temperatura ambiente para producir así 96.47 g del compuesto del título como un polvo blanco (92.7%). 1 H RMN (400 MHz, CDCy d: 1.77-1.98 (2H, m), 4.30 (3H, d, J=2.93 Hz), 4.38-4.44 (1 H, m), 5.03 (1H, dm, J=62.50 Hz), 8.17 (1 H, dd, J=8,06, 8.79 Hz), 8.14 (1H, s).

EJEMPLO DE REFERENCIA 6 Quelato de difluoroboro v ácido 6.7-difluoro-1-r(1R.2S)-2-fluoro-1- ciclopropil]-1 ,4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinolinacarboxílico (Método de síntesis alternativo) Una mezcla de 6,7-difluoro-1-[(1 R,2S)-2-fluoro-1-ciciopropil]-1 ,4- dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinolinacarboxilato de etilo (260 mg; 0.733 mmoles) y ácido tetrafluorobórico (42%; 15 mi) se agitó en un baño de aceite a 90°C durante 3 horas. La mezcla de reacción se enfrió y se le agregó a la solución una cantidad en exceso de agua purificada. Los cristales que precipitaron se i recogieron por filtración y se lavaron secuencialmente con agua purificada (cantidad en exceso) y éter dietílico (cantidad en exceso). Los cristales se recogieron por filtración y se secó bajo presión reducida a temperatura ambiente para producir así 241 mg del compuesto del título como un polvo blanco (rendimiento: 91.1%). Los datos de 1H RMN del producto de reacción - fueron congruentes con los datos del producto sintetizado de acuerdo con otros métodos de síntesis.

EJEMPLO 1 Acido (-)-7-{f7S)-7-amino-5-azaespirof2.41heptan-5-il}-6-fluoro-1-r(1R.2S)- 2-fluoro-1-cíclopropilT|-1,4-dih8dro-8-metoxi-4-oxo-3-quinolinacarboxílico (Compuesto 1a) Se disolvió diclorhidrato de (7S)-7-amino-5-azaespiro[2.4]heptano (61.4 g; 0.332 moles) en sulfóxido de dimetilo (800 ml), y a la solución resultante se le agregó trietilamina (138 ml; 0.994 moles) bajo una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente, seguido por agitación durante 10 horas. A la mezcla de reacción se le agregó lentamente quelato de difluoroboro y ácido 6,7-difluoro-1-[(1R,2S)-2-fluoro-1-c¡clopropil]-1 ,4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinolinacarboxílico (100 g; 0.276 moles) en forma de polvo, seguido por agitación durante 40 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y se le agregó etanol (90%, 1000 ml) y trietilamina (20 ml), seguido por reflujo durante 2.5 horas. La mezcla de reacción se dejó enfriar y los cristales que precipitaron se recogieron por filtración. Los cristales se lavaron secuencialmente con etanol y éter, seguido por secado bajo presión reducida a 70°C durante 16 horas, para producir así 72.5 g del compuesto del título (como hidrato 0.5), como un polvo amarillo pálido (rendimiento: 61.4%). Los solventes se eliminaron del filtrado bajo presión reducida, y al residuo se le agregó agua (2000 ml). A la mezcla se le agregó una solución acuosa de hidróxido de sodio (3N) a fin de ajustar el valor de pH a 10.0 mientras se agitaba bajo enfriamiento con hielo.

Subsecuentemente se le agregó a la mezcla una solución acuosa de ácido clorhídrico (3N) a fin de ajustar el pH a 7.4, seguido por agitación durante 16 horas a temperatura ambiente. Los cristales que precipitaron se recogieron por filtración, se lavaron con agua y se secaron bajo presión reducida a 70°C para producir así 19.2 g del compuesto del título (como hidrato 0.5) como un polvo amarillo pálido (rendimiento: 33.6%). 1H RMN (400 MHz, 0.1N NaOD) d: 0.53-0.59 (2H, m), 0.62-0.66 (1H, m), 0.78-0.82 (1H, m), 1.38-1.60 (2H, m), 3.07 (1 H, s), 3.39 (1 H, dd, J=3, 26.0 Hz), 3.52 (3H, s), 3.72 (1 H, d, J=10.0 Hz), 3.89-4.00 (2H, m), 1.93 (1 H, dm, J=64.2 Hz), 7.62 (1H, d, J=14.2 Hz), 8.43 (1H, s).

Análisis elemental: sobre la base de C^Q^-jFpN O/O.dHpO Calculado: C 57.97; H 5.35; N 10.14 Encontrado: C 57.97; H 5.31 ; N 10.11 Rotación específica: [a]Q22 -25.5° (C=0.832, NaOH 0.1 N). Punto de fusión= 20°-209°C.

EJEMPLO 2 Monoclorhidrato de ácido (-)-7-{(7S)-7-amino-5-azaespirof2.41heptan-5-il}- 6-fluoro-1-f(1R.2S)-2-fluoro-1-ciclopropip-1.4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3- quinolinacarboxílíco monohidratado (Compuesto 1) En un matraz de gota de 3 litros, se suspendió ácido (-)-7-[(7S)-7-amino-5-azaespiro[2.4]heptan-5-il]-6-fluoro-1 -[(1 R,2S)-2-fIuoro-1 -ciclopropil]-1 ,4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinolinacarboxílico 0.5-hidratado cristalino (61.3 g; 148 mmoles; calculados en base a la forma libre: 60.0 g) en 2-propanol (720 mi). Subsecuentemente se agregó a la suspensión lentamente, a gotas, ácido clorhídrico (5N: 59.2 ml; 296 mmoles) mientras se agitaba bajo enfriamiento con hielo. La mezcla así obtenida se llevó a temperatura ambiente y se le agregó agua destilada (420 ml), seguido por agitación durante 10 minutos. La mezcla se calentó a 60°C en un baño de agua mientras se agitaba. Después la suspensión se tomó en una solución transparente, se le agregó carbón activado (3 g) y se agitó 20 minutos a una temperatura externa de 80°C. El carbón activado se separó por filtración y el filtrado se concentró bajo presión reducida, seguido por concentración hasta sequedad mediante evaporación. EÍ residuo se secó en un baño de agua a 70°C durante 1 hora usando una bomba de vacío, y se le agregó 2-propanol (96%; 1800 ml), seguido por agitación en un baño de agua a 80°C. Después de obtener una solución homogénea (transparente), la solución se agitó a 60°C. Después de un rato empezaron a precipitar cristales cuando la temperatura del baño de agua se llevó a 25°C por aproximadamente 1.5 horas, seguido por agitación lenta durante 20 horas. Los cristales que precipitaron se recogieron por filtración, se lavaron con 2-propanol y se secaron bajo presión reducida a 70°C para producir así 56.3 g del compuesto del título como cristales de color amarillo pálido (rendimiento: 82.7%). - 1H RMN (400 MHz, NaOD 0.1N) d: 0.57-0.70 (3H, m), 0.81-0.85 (1H, m), 1.40-1.64 (2H, m), 3.13 (1H, t, J=4.39 Hz), 3.46 (1 H, dd, J=10.5, 24.6 Hz), 3.60 (3H, s), 3.84 (1 H, dd, J=7.81 , 10.3 Hz), 3.99-4.06 (2H, m), 5.01 (1H, dm, J=64.5 Hz), 7.66 (1H, d, J=14.1 Hz), 8.42 (1H, d, J=1.95 Hz). Análisis elemental: sobre la base de C20H21 F2N3041 -0HCI'H2° Calculado= C 52.24: H 5.26: N 9.14 Encontrado: C 52.15; H 5.25; N 9.07 Rotación específica: [a]D22-165.5° (c=0.990, H2O).

Punto de fusión= 199-208°C.

EJEMPLO 3 Quelato de difluoroboro y ácido (-)-7-{(7S)-7-amino-5-azaespiro[2.4]- heptan-5-il>-6-fluoro-1-r(1R.2S)-2-fluoro-1-ciclopropip-1.4-dihidro-8- metox¡-4-oxo-3-quinolinacarboxílico (Compuesto 1b) Se agitaron diclorhidrato de (7S)-7-amino-5-azaespiro[2.4]heptano (615 mg; 3.32 mmoles) y trietilamina (1.40 ml) en sulfóxido de dimetilo (5 ml) durante 20 minutos a temperatura ambiente. Se le agregó quelato de difluoroboro y ácido 6,7-difluoro-1-[(1 R,2S)-2-fluoro-1-ciclopropil]-1,4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinolinacarboxílico (1.00 g; 2.77 mmoles), y la mezcla resultante se agitó 20 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y se le agregó a la misma agua purificada (50 ml). El pH de la mezcla resultante se ajustó a 7.0 con solución acuosa de NaOH 1 N, y la capa acuosa de la mezcla se tomó con cloroformo (100 ml x 5). La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y el solvente se evaporó. El residuo se purificó mediante recristalización de etanol, para producir así 1.14 g del compuesto del título como cristales de color amarillo pálido (rendimiento: 91%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d: 0.55-0.73 (3H, m), 0.82-0.86 (1H, m), 1.50-1.60 (1H, m), 1.66-1.76 (1H, m), 3.25-3.27 (1H, m), 3.45-3.56 (2H, m), 3.69 (3H, s), 4.00-4.03 (1H, m), 4.12-4.15 (1 H, m), 4.19-4.24 (1H, m), 4.95 (1H, dm, J=62.7 Hz), 7.91 (1H, d, J=13.7 Hz), 8.85 (1H, d, J=2.20 Hz).

IR (disco KBr) cm'1: 3396, 3080, 3001, 2941, 2883, 1716, 1631, 1560, 1522, 1441 , 1363, 1331 , 1288, 1257, 1225. Punto de fusión: 194-197°C (con descomposición) Análisis elemental: sobre la base de C2QH2QBF4N3O4'0.25H2O Calculado= C 52.43; H 4.51; N 9.18 Encontrado: C 52.33; H 4.36; N 9.01 Rotación específica: [a]D19 = -29.3° (c=1.03, DMF) EJEMPLO 4 Acido (-)-7-{(7S)-7-amino-5-azaespiro|,2.41heptan-5-il -6-fluoro-1-r(1R.2S)- 2-fluorQ-1-ciclopropip-1.4-d¡hidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinoiinacarboxílico Se disolvió quelato de difluoroboro y ácido (-)-7-[(7S)-7~amino-5-azaespiro[2.4]heptan-5-il]-6-fluoro-1 -[(1 R,2S)-2-fluoro-1 -ciclopropilj-1 ,4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinolinacarboxílico (1.14 g; 2.52 mmoles) en etanol hidratado al 80% (100 ml; preparado mezclando 4 volúmenes de etanol y un volumen de agua). Se le agregó trietilamina (2 ml) y la mezcla resultante se sometió a reflujo durante 3 horas. El solvente se evaporó y el residuo se disolvió mediante la adición de HCl concentrado (5 ml) y HCl 1N (5 ml), seguido por lavado con cloroformo (100 ml x 3). El pH de la solución acida resultante se ajustó a 8.0 en un baño de hielo con solución acuosa de NaOH 10N y solución acuosa de NaOH 1 N, seguido por agitación durante 3 horas a temperatura ambiente (pH después de completar la agitación = 7.5). Los cristales precipitados se recogieron por filtración y se secaron bajo presión reducida, para producir así 980 mg de una forma cruda del compuesto del título como cristales de color amarillo pálido. Los cristales se purificaron mediante recristalización de una mezcla de agua amoniacal al 28% y etanol, que se secaron bajo presión reducida, produciendo 561 mg del compuesto del título como cristales de color blanco amarillento (rendimiento: 55%). 1H RMN (400 MHz, NaOD 0.1 N) d 0.53-0.59 (2H, m), 0.62-0.66 (1 H, m), 0.78-0.82 (1 H, m), 1.38-1.60 (2H, m), 3.07 (1H, s), 3.39 (1 H, dd, J=10.3, 26.0 Hz), 3.52 (3H, s), 3.72 (1 H, d, J=10.0 Hz), 3.89-4.00 (2H, m), 4.93 (1 H, dm, J=64.2 Hz), 7.62 (1 H, d, J=14.2 Hz), 8.43 (1H, s).

EJEMPLO 5 Quelato de difluoroboro v ácido (-)-7-{(7S)-5-aza-7-ter- butoxicarbonilaminoespirof2.41heptan-5-il}-6-fluoro-1-[(1R.2S)-2-fluoro-1- ciclopropip-1.4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-qu8nolinacarboxílico A quelato de difluoroboro y ácido 6,7-difluoro-1-[(1 R,2S)-2-fluoro-1-ciclopiOpil]-1 ,4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinolinacarboxíiico (1.00 g; 2.77 mmoles) en sulfóxido de dimetilo (5 ml), se le agregó (7S)-5-aza-7-ter- butoxicarbonilaminoespiro[2.4]heptano (706 mg; 3.32 mmoles) y trietilamina (927 µl). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y al residuo se le agregó agua purificada (40 ml). Los cristales precipitados se lavaron secuenc?almente con agua purificada y una pequeña cantidad de éter dietílico. Los cristales así lavados se disolvieron en cloroformo (100 ml) y la solución resultante se lavó con agua (50 ml x 2) y salmuera saturada (50 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y el solvente se evaporó. El producto crudo así obtenido se purificó mediante recristalización de una mezcla de n-hexano y etanol, seguido por secado bajo presión reducida, para producir así 1.47 g del compuesto del título como cristales de color amarillo pálido (rendimiento: 96%). 1H RMN (400 MHz, CDCIg) d: 0.69-0.79 (2H, m), 0.83-0.97 (2H, m), 1.43-1.53 (1 H, m), 1.45 (9H, s), 1.68-1.77 (1 H, m), 3.49-3.52 (1 H, m), 3.70 (3H, s), 3.79 (1 H, d, J=11.5 Hz), 3.85 (1 H, s), 4.00-4.03 (1 H, m), 4.16-4.22 (1 H, m), 4.23-4.25 (1H, m), 4.76 (1 H, br, s), 4.96 (1H, dm, J=62.7 Hz), 7.90 (1H, d, J=13.7 Hz), 8.84 (1H, d, J=2.44 Hz).

IR (disco KBr) cm"1: 3450, 3415, 3082, 3001 , 2976, 2935, 2881, 1716, 1631 , 1568, 1525, 1444, 1365, 1331 , 1286, 1257. Punto de fusión: 152-155°C Análisis elemental: sobre la base de Calculado: C 54.27; H 5.10; N 7.59 Encontrado: C 54.12; H 5.13; N 7.41 Rotación específica: [a]D19>7= -23.9° (c=1.00, CHCy EJEMPLO 6 Acido (-)-7-ff7S)-5-aza-7-ter-butoxicarbonilaminoespiro|'2.41heptan-5-il}-ß- fluoro-1-r(1R.2S)-2-fluoro-1-ciclopropin-1.4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3- quinolinacarboxílico Se disolvió quelato de difluoroboro y ácido 7-{(7S)-5-aza-7-ter-butoxicarbonilaminoespiro[2.4]heptan-5-il]-6-fluoro-1-[(1 R,2S)-2-fluoro-1-ciclopropil]-1 ,4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinoIinacarboxílico (1.47 g; 2.66 mmoles) en etanol hidratado al 80% (50ml). Se le agregó trietilamina (2 ml) y la mezcla resultante se sometió a reflujo durante tres horas. El solvente se evaporó bajo presión reducida, y se agregó al residuo solución acuosa de ácido cítrico al 10% (50 ml). La mezcla se extrajo con cloroformo (100 ml x 2). La capa orgánica se lavó con salmuera saturada (50 ml) y después se secó sobre sulfato de sodio, removiendo así el solvente. El residuo se purificó mediante recristalización de una mezcla de n-hexano y cloroformo, seguido por secado bajo presión reducida, para producir así 1.37 g del compuesto del título como cristales de color amarillo pálido (rendimiento cuantitativo). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d: 0.54-0.75 (2H, m), 0.81-0.94 (2H, m), 1.45 (9H, s), 1.49-1.52 (1H, m), 1.54-1.62 (1H, m), 3.37 (1H, d, J=10.5 Hz), 3.62 3H, s), 3.63-3.67 (1 H, m), 3.83-3.90 (3H, m), 4.06-4.10 (1 H, m), 4.76-4.79 (1H, m), 4.85 (1H, dm, J=62.7 Hz), 7.83 (1H, d, J=13.5 Hz), 8.70 (1 H, d, J=2.20 Hz).

IR (disco KBr) cm'1: 3448, 3361, 3074, 2976, 2935, 2881, 1734, 1693, 1622, 1512, 1448, 1367, 1325, 1352, 1252. Punto de fusión: 167-169°C Análisis elemental: sobre la base de C25H2gBF2N3?6O.5H2O Calculado: C 58.36; H 5.88; N 8.17 Encontrado: C 58.50; H 5.70; N 8.17 Rotación específica: [a]D19,7 = -95.2° (c=0.930, CHCI3) EJEMPLO 7 Acido (-)-7-{(7S)-7-amino-5-azaespirof2.41heptan-5-il -6-fluoro-1-y(1R.2S)- 2-fluoro-1-cicl?propip-1.4-d¡hidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinolinacarbox?lico ÍD Se disolvió ácido 7-[(7S)-5-aza-7-ter-butoxicarbonilaminoespiro-[2.4]heptan-5-il]-6-fluoro-1 -[(1 R,2S)-2-fluoro-1 -ciclopropil]-1 ,4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinoIinacarboxílico (1.37 g; 2.66 mmoles) mediante la adición de ácido clorhídrico concentrado (5 mi) y HCl 1N (5 ml) sobre hielo. La solución resultante se lavó con cloroformo (100 ml x 3). El pH de la solución acida resultante se ajustó a 11.0 en un baño de hielo con solución acuosa de NaOH 10N. Subsecuentemente, el pH de lá solución básica obtenida se ajustó a 7.4 con HCl concentrado y HCl 1 N, seguido por agitación durante tres horas a temperatura ambiente (pH después de completar la agitación = 7.4). Los cristales precipitados se recogieron por filtración y se secaron bajo presión reducida para producir así 1.01 g de una forma cruda del compuesto del título como cristales de color amarillo pálido. Los cristales se purificaron mediante recristalización de una mezcla de agua amoniacal al 28% y etanol, produciendo 351 mg del compuesto del título como cristales blancos amarillentos (rendimiento: 33%). 1H RMN (400 MHz, NaOD 0.1N) d: 0.53-0.59 (2H, m), 0.62-0.66 (1H, m), 0.78-0.82 (1 H, m), 1.38-1.60 (2H, m), 3.07 (1 H, s), 3.39 (1 H, dd, J=10.3, 26.0 Hz), 3,52 (3H, s), 3.72 (1H, d, J=10.0 Hz), 3.89-4.00 (2H, m), 4.93 (1 H, dm, J=64.2 Hz), 7.62 (1 H, d, J=14.2 Hz), 8.43 (1 H, s).

EJEMPLO DE REFERENCIA 7 Sal de ácido metanosulfónico de ácido -7-f(7S)-7-amino-5-azaespiro- r2.41heptan-5-il}-ß-fluoro-1-r(1R.2S)-2-fluoro-1-ciclopropip-1.4-dihidro-8- metoxi-4-oxo-3-quinolinacarboxílico Se suspendió ácido (-)-7-{(7S)-7-amino-5-azaespiro[2.4]heptan- 5-il}-6-fluoro-1 -[(1 R,2S)-2-fluoro-1 -ciclopropil]-1 ,4-dihidro-8-metoxi-4-oxo-3-quinolinacarboxílico (1a) (2.51 g) en etanol (20 ml). Se le agregó ácido metanosulfónico (1.2 equivalentes), y la mezcla resultante se agitó cinco minutos a temperatura ambiente. Subsecuentemente se le agregó éter dietíiico (80 ml). Los cristales precipitados se lavaron con éter dietílico y se recogieron mediante filtración (2.01 g, 94%). Los cristales crudos obtenidos anteriormente de sal de ácido metanosulfónico (900 mg), se disolvieron en isopropanol caliente (100 ml), y la solución se concentró bajo calentamiento hasta que el volumen de toda la solución se hizo de 40 ml. El concentrado se dejó enfriar a temperatura ambiente y los cristales precipitados se recogieron mediante filtración, seguido por lavado con isopropanol, produciendo así 720 mg del compuesto del título (rendimiento: 80%). 1H RMN (400 MHz, NaOD 0.1N) d: 0.58-0.72 (3H, m), 0.80-0.90 (1H, m), 1.40-1.62 (2H, m), 2.82 (3H, s), 3.10-3.12 (1 H, m), 3.41-3.49 (2H, m), 3.58 (3H, s), 3.81 (1 H, dd, J=2.44, 9.77 Hz), 4.85-4.93, 5.04-5.07 (cada 0.5H, m), 7.65 (1 H, d, J=14.16 Hz), 8.42 (1 H, s).

EJEMPLO DE PRUEBA 1 Confirmación de la morfología de cristal del compuesto (1) (1) La figura 1 muestra los resultados de difractometría de rayos X del compuesto (1) en polvo (por medio de un aparato de difracción de rayos X en polvo X'pert, producto de Philips); y la figura 2 muestra el espectro de IR del compuesto (1) (obtenido usando FT-IR modelo FT-720, producto de NORIBA). El análisis térmico del compuesto (1) reveló que la pérdida de peso fue de 4.2% en peso, que concuerda con el valor teórico (3.9%) del monohidrato. (2) El análisis cuantitativo por el método de Karl Fischer reveló que el contenido de agua del compuesto (1) es de 4.11%, lo que concuerda con el resultado del análisis térmico.

EJEMPLO DE PRUEBA 2 Se investigó la absorción y desorción de humedad del compuesto (1 ) usando muestras que pesaban cada una aproximadamente 10 mg y un analizador de absorción de humedad fabricado por VTl (modelo SGA-100). La medición se realizó a 25°C y la humedad relativa se cambió a la escala de 5% a 95% en intervalos de 5% o 10%. Cuando el cambio de peso de una muestra era de 0.03% o menor en el transcurso de 30 minutos, se consideró que la muestra estaba en un estado de equilibrio, y en esta prueba el tiempo de equilibrio más largo se fijó en 180 minutos. Se determinó el cambio de peso de cada muestra a diferentes humedades relativas. Como resultado, como se muestra en la figura 3, se encontró que el compuesto (1) es estable; ni absorbe ni desorbe humedad dentro de la escala de humedad relativa de 5-95% de HR.

EJEMPLO DE PRUEBA 3 Se prepararon sales de adición de ácido del compuesto (1a) (sal de ácido metanosulfónico, sales de ácido p-toluenosulfónico, sal de ácido cítrico y sal de ácido málico), y se evaluó su estabilidad bajo varios niveles de humedad. Todas las sales probadas mostraron una tendencia hacia la absorción de humedad bajo condiciones de alta humedad. Entretanto, aunque se hicieron intentos de preparar una sal de ácido acético y una sal de ácido láctico del compuesto (1a), no se formó la sal.

EJEMPLO DE PRUEBA 4 Se investigó la solubilidad del compuesto (1) en agua. Se encontró que el compuesto (1) tiene una alta solubilidad en agua; esto es, 100 mg/ml o más.

EJEMPLO DE PRUEBA 5 Se almacenó el compuesto (1) (1.5 mg) durante una semana bajo las siguientes condiciones: (1) en una botella sellada a 70°C; (2) en un estado abierto al aire a 50°C, 75% de HR (NaCI); o (3) irradiación con luz a 100,000 Ix'h (2,500 lxx40h). Subsecuentemente, la cantidad residual del compuesto (1) se determinó cuantitativamente por medio de cromatografía de líquidos. Los resultados son los siguientes: el compuesto (1) permaneció estable, sin sufrir ninguna descomposición, incluso cuando se expuso a irradiación de luz. Además, la estabilidad del compuesto (1) cuando se expuso a la luz fue superior a la del compuesto No. 26bb que se describe en la patente Japonesa No. 2714597.

EJEMPLO DÉ PRUEBA 6 Se usaron ratones Slc:ddY (machos, 3 semanas de edad) en grupos de diez. El compuesto (1) se disolvió en agua destilada para preparar inyecciones, y la solución resultante se administró cisternalmente en un volumen de 5 µg/ratón. A los miembros del grupo en el que se usó el compuesto (1) y ácido bifenilacético en combinación, primero se les administró peroralmente ácido bifenilacético (400 mg/kg) y 30 minutos después de esta administración, se administró cistemalmente el compuesto (1) de una manera similar a la empleada para el uso solo del compuesto (1 ). Los resultados son como sigue: tanto en los casos de administración del compuesto (1) solo como de administración combinada de compuesto (1) y ácido bifenilacético, el compuesto (1) no ocasionó ni espasmo ni muerte, y se probó que tenía toxicidad central muy débil. De esta manera, el compuesto (1) es un compuesto muy seguro. En contraste, la administración del compuesto A comparativo a la misma dosis indujo espasmo en dos de diez ratones. También hubo una muerte entre los diez ratones. Además, en el caso de la administración combinada con ácido bifenilacético como se describió am'ba, hubo cuatro casos de espasmo y dos muertes de los 10 ratones.

Compuesto comparativo A: EJEMPLO DE PRUEBA 7 Se usaron en la prueba grupos de perros beagle jóvenes (machos; 3-4 meses de edad), cada grupo de 3 perros. El compuesto (1) se administró peroralmente a cada perro durante ocho días. Después se examinaron patológicamente diartrosis importantes. Resultados: los miembros de los grupos a los que se administró el compuesto No. 26bb, que se describe en la patente Japonesa No. 2714597, en dosis altas de 14.1 mg/kg o más, mostraron formación de vejigas o erosiones en cartílago artrodial, mientras que en los grupos de administración del compuesto (1) (7.5 mg/kg, 15 mg/kg y 30 mg/kg), no se observó la formación de vejigas ni de erosiones. De esta manera, la toxicidad articular del compuesto (1) es muy débil e insignificante, probando que el compuesto (1 ) es un compuesto muy seguro.

EJEMPLO DE PRUEBA 8 Se usaron en la prueba grupos de ratones Balb/c (hembras; 5 semanas de edad), cada grupo de 5-6 ratones. Después de administrar intravenosamente el compuesto (1) a cada ratón, el ratón se expuso a luz UV de longitud de onda larga (UV-?, 20 J/cm2) durante cuatro horas. Después, se observó visualmente la aurícula durante 96 horas. Subsecuentemente se sacrificó al ratón para examen del tejido. En los grupos en donde se administró el compuesto (1) a 100 mg/kg no se observó anormalidad, ni durante la observación visual ni en el momento del examen de tejido. De esta manera, el compuesto (1) es un compuesto muy seguro, estando libre de fototoxicidad, que se observa frecuentemente con agentes antibacterianos basados en quinolona.

EJEMPLO DE PRUEBA 9 (1) Efecto terapéutico sobre modelo de neumonía de ratón mediante el uso de neumococos de baja sensibilidad a la penicilina Se usaron en la prueba grupos de ratones CBA/J, cada grupo de 5 ratones. Los ratones se infectaron nasalmente con neumococos SPI-13 a 5.3 x106 CPU/ratón. El compuesto (1) se administró subcutáneamente a cada ratón en dosis de 7.5 mg/kg, 15 mg/kg o 30 mg/kg, durante tres días consecutivos a partir del día siguiente a la infección, dos veces al día a un intervalo de 6 horas. Se determinó la eficacia del compuesto (1 ) contando el número de las bacterias intrapulmonares el día después de la administración final. Resultados: a una dosis de 30 mg/kg o 15 mg/kg, el compuesto (1) redujo la cuenta bacteriana por debajo del límite de detección, y a una dosis de 7.5 mg/kg redujo la cuenta bacteriana a aproximadamente la mitad del control. (2) Efecto de prevención de infección en modelo de sepsis de ratón Se usaron en la prueba grupos de ratones Slc:ddY, cada grupo de 7 ratones. Los ratones se inocularon intraperitonealmente con Staphyiococcus aureus resistente a meticilina (MRSA) cepa 7866 (1.07x104 CFU/ratón) o E. coli cepa E77156 (8.08x107 CFU/ratón). El compuesto (1) se dio como una sola inyección en la vena de la cola de cada ratón inmediatamente después de la infección. En base a la cuenta de supervivencia el día 7 después de la infección, se calculó 50% de eficacia usando el método probit, para evaluar con ello la eficacia. Resultados: se encontró que el 50% de eficacia del compuesto (1 ) contra la cepa 7866 MRSA era de 3.34 mg/kg, y se encontró que la misma eficacia contra E. coli cepa E77156 era de 0.57 mg/kg. De los puntos (1) y (2) anteriores, se puede concluir que el compuesto (1) tiene excelentes efectos preventivos y terapéuticos contra diferentes enfermedades infecciosas cuando se prueban in vivo.

EJEMPLO DE PRUEBA 10 (Actividad antibacteriana) Se investigó la actividad antibacteriana comparando el compuesto (1) con los compuestos comparativos B y C (véase más abajo). Esta prueba se realizó de acuerdo con el método recomendado por la Sociedad Japonesa de Quimioterapia. Los resultados de la prueba se muestran en el cuadro 1.

CUADRO 1 Compuesto comparativo B Compuesto comparativo C Los compuestos de la presente invención están dotados de excelente actividad antibacteriana y seguridad, y también son muy estables frente a la luz o humedad, encontrando así utilidad como agentes antibacterianos.

Claims (17)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto representado por la siguiente fórmula (1):

2.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado además porque asume la forma de cristales que exhiben picos característicos en la cercanía de ángulos de difracción (2T) de 6.9, 10.5, 14.4, 23.1, 26.9 y 27.8 (°), cuando se someten a difractometría de rayos X en polvo.

3.- Una composición antibacteriana que contiene un compuesto representado por la siguiente fórmula (1a), (1a) una sal de adición de ácido del compuesto, o un hidrato del compuesto de fórmula (1a) o su sal de adición de ácido.

4.- La composición antibacteriana de conformidad con la reivindicación 3, caracterizada además porque contiene una sal de adición de ácido de un compuesto representado por la fórmula (1a), o un hidrato de la sal de adición de ácido.

5.- La composición antibacteriana de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada además porque la sal de adición de ácido es una sal de ácido clorhídrico.

6.- Una composición antibacteriana que contiene un compuesto representado por la siguiente fórmula (1).

7.- La composición antibacteriana de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada además porque el compuesto de fórmula (1) asume la forma de cristales que exhiben picos característicos en la cercanía de ángulos de difracción (2T) de 6.9, 10.5, 14.4, 23.1 , 26.9 y 27.8 (°), cuando se someten a difractometría de rayos X en polvo.

8.- El uso de un compuesto representado por la siguiente fórmula (1a), una sal de adición de ácido del compuesto, o un hidrato del compuesto de fórmula (1 a) o su sal de adición de ácido, (1a) en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades infecciosas.

9.- El uso que se reclama en la reivindicación 8, en donde se emplea una sal de adición de ácido del compuesto representado por la fórmula (1a), o un hidrato de la sal de adición de ácido.

10.- El uso que se reclama en la reivindicación 9, en donde la sal de adición de ácido es una sal de ácido clorhídrico.

11.- El uso de un compuesto representado por la siguiente fórmula (1), en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades infecciosas.

12.- El uso que se reclama en la reivindicación 11 , en donde el compuesto de fórmula (1 ) asume la forma de cristales que exhiben picos característicos en la cercanía de ángulos de difracción (2T) de 6.9, 10.5, 14.4, 23.1 , 26.9 y 27.8 (°) cuando se someten a difractometría de rayos X en polvo.

13.- Un método de tratamiento de enfermedades infecciosas, caracterizado porque comprende administrar una cantidad efectiva de un compuesto representado por la siguiente fórmula (1a), (1a) una sal de adición de ácido del compuesto, o un hidrato del compuesto de fórmula (1a) o su sal de adición de ácido.

14.- El método que se reclama en la reivindicación 13, en donde se emplea una sal de adición de ácido del compuesto representado por la fórmula (1a), o un hidrato de la sal de adición de ácido.

15.- El método que se reclama en la reivindicación 14, en donde la sal de adición de ácido es una sal de ácido clorhídrico.

16.- Un método de tratamiento de enfermedades infecciosas, caracterizado porque comprende administrar una cantidad efectiva de un compuesto representado por la siguiente fórmula (1 ),

17.- El método que se reclama en la reivindicación 16, en donde el compuesto de fórmula (1) asume la forma de cristales que exhiben picos característicos en la cercanía de ángulos de difracción (2T) de 6.9, 10.5, 14.4, 23.1 , 26.9 y 27.8 (°) cuando se someten a difractometría de rayos X en polvo.