MX2014014768A - Inhibidores macrociclicos de virus flaviviridae. - Google Patents

Inhibidores macrociclicos de virus flaviviridae.

Info

Publication number
MX2014014768A
MX2014014768A MX2014014768A MX2014014768A MX2014014768A MX 2014014768 A MX2014014768 A MX 2014014768A MX 2014014768 A MX2014014768 A MX 2014014768A MX 2014014768 A MX2014014768 A MX 2014014768A MX 2014014768 A MX2014014768 A MX 2014014768A
Authority
MX
Mexico
Prior art keywords
mmol
compound
mixture
ethyl acetate
solution
Prior art date
Application number
MX2014014768A
Other languages
English (en)
Inventor
Aciro Caroline
Alexandra Steadman Victoria
Neil Pettit Simon
G Poullennec Karine
Lazarides Linos
Kenneth Dean David
Andrew Dunbar Neil
John Highton Adrian
John Keats Andres
Scott Siegel Dustin
Kumar Karki Kapil
James Schrier Adan
Jansa Petr
Mackman Richard
Original Assignee
Gilead Sciences Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Gilead Sciences Inc filed Critical Gilead Sciences Inc
Publication of MX2014014768A publication Critical patent/MX2014014768A/es

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/504—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines forming part of bridged ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/7056—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing five-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/05—Dipeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/55—Protease inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/29—Hepatitis virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/18—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/18—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C07K5/06052—Val-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0606—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing heteroatoms not provided for by C07K5/06086 - C07K5/06139, e.g. Ser, Met, Cys, Thr
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06086—Dipeptides with the first amino acid being basic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/15—Depsipeptides; Derivatives thereof
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Se proporcionan compuestos de la Fórmula (I) (ver Fórmula) y sales y ésteres farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los compuestos, composiciones, y métodos proporcionados son útiles para el tratamiento de infecciones por virus, particularmente infecciones por hepatitis C.

Description

INHIBIDORES MACROCÍCLICOS DE VIRUS FLAVIVIRIDAE CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente solicitud proporciona compuestos novedosos que inhiben virus, composiciones que contienen tales compuestos, y métodos terapéuticos que comprenden la administración de tales compuestos.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los virus de ARN que comprenden la familia Flaviviridae incluyen al menos tres géneros distinguibles que incluyen pestiviruses, flaviviruses , y hepaciviruses (Calisher, et al . , J. Gen. Virol., 1993, 70, 37-43). Mientras que pestiviruses causa muchas enfermedades de los animales económicamente importantes tal como virus de la diarrea viral bovina (BVDV), virus de la peste porcina clásica (CSFV, cólera porcino) y enfermedad de la frontera de oveja (BDV), su importancia en enfermedad humana es menos bien caracterizada (Moennig, V., et al., Adv. Vir. Res.1992, 48, 53-98). Los Flaviviruses son responsables de importantes enfermedades humanas tal como fiebre de dengue y fiebre amarilla mientras que los hepaciviruses causan infecciones del virus de la hepatitis C en humanos. Otras infecciones virales importantes causadas por la familia Flaviviridae incluyen virus de West Nile (WNV por sus siglas en ingles) Virus de la encefalitis japonesa (JEV por sus siglas en ingles), virus de encefalitis transmitido por garrapatas, virus Junjin, encefalitis Murray Vallcy, encefalitis de St Louis, virus de fiebre hemorragica Omsk y virus de Zika.
El virus de la hepatitis C (HCV por sus siglas en ingles) es la causa principal de enfermedad hepática crónica en todo el mundo (Boyer, N. et al. J Hepatol. 32:98-112, 2000) por lo que un enfoque significativo de investigación antiviral actual se dirige hacia el desarrollo de métodos mejorados de tratamiento de infecciones por HCV crónicas en humanos (Di Besceglie, A.M. and Bacon, B. R., Scientific American, Oct.: 80-85, (1999); Gordon, C. P., et al., J. Med. Chem. 2005, 48, 1-20; Maradpour, D., et al., Nat . Rev. Micro. 2007, 5(6), 453-463). Un número de tratamientos de HCV se revisan por Dymock et al. en Antiviral Chemistry & Chemotherapy, 11:2; 79-95 (2000). Las curas virológicas de los pacientes con infección por HCV crónica son difíciles de alcanzar debido a la cantidad prodigiosa de producción de virus diaria en pacientes infectados crónicamente y la alta mutabilidad espontánea de virus HCV (Neumann, et al., Science 1998, 282, 103-7; Fukimoto, et al., Hepatology, 1996, 24, 1351-4; Domingo, et al., Gene 1985, 40, 1-8; Martell, et al., J. Virol . 1992, 66, 3225-9 Actualmente, hay principalmente dos compuestos antivirales, ribavirina, un análogo de nucleósido, e interferón-alfa (a) (IFN), que se usan para el tratamiento de infecciones por HCV crónicas en humanos. La ribavirina sola no es efectiva en reducir niveles de ARN virales, tiene toxicidad significativa, y se conoce para inducir la anemia. La combinación de IFN y ribavirina se ha reportado por ser efectiva en el manejo de la hepatitis C crónica (Scott, L. J., et al. Drugs 2002, 62, 507-556) pero menos de la mitad de los pacientes que recibieron este tratamiento muestran un beneficio persistente. Por lo tanto, hay una necesidad para desarrollar terapias anti-HCV más efectivas.
El sanglifehrin macrociclo y derivados son inmunomoduladores y enlazan ciclofilinas de isomerasa cis/trans de peptidii-propilo (PPIase) de una manera única (WO 97/02285; WO 98/07743; J. Am . Chem . Soc 2003, 125, 3849-3859; J. Org. Chem. 2000, 65, 9255-9260; Angew. Chem . Int . Ed. 1999, 38, 2443-2446). Las ciclofilinas son isomerasas cis/trans de peptidil-prolilo (PPIase) que regulan plegamiento de proteina in vivo e inhiben el virus de la hepatitis C (Lin et al., W02006/138507). Sin embargo, ninguna de las sanglifehrinas o sus derivados ha estado disponible para terapia anti-viral humana. Por lo tanto, hay una continua necesidad para desarrollar sanglifehrinas macrocíclicas con actividad de virus anti -Flaviviridae y particularmente actividad anti-HCV.
SUMARIO DE LA INVENCION En una modalidad, se proporciona un compuesto representado por la Fórmula I: Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisó eros, tautómero, éster o profármaco de los mismos, en donde: es alquileno(C2-C5), alquenileno(C2-C5), alquinileno (C2-C5), -O-alquileno (C2-C4), -O-alquenileno(C2-C4), arileno, aril alquileno (Ci-C2), heterocicloalquileno o heterocicloalquil alquileno (Ci-C2), en donde un átomo de carbono sp3 de D1 se substituye opcionalmente con uno o más alquilo (Ci-C4); A2 es arileno o heteroarileno, en donde A2 se substituye opcionalmente con halo; X1 es -O-, -NH- o -N(alquilo (C1-C4))-; Ria ^ Rib son independientemente H, alquilo (C1-C4), alquenilo (C2-C4) o alquinilo (C2-C4); R2 es H, alquilo (C1-C4), alquenilo (C2-C4) o alquinilo (C2-C4); R3a y R3b son independientemente H o alquilo (Ci-Cg); R4a y R4b son independientemente H, -OH, alcoxi (C1-C4), halo alcoxi (C1-C4) o alquilo (Ci-Ce); R5 es H, alquilo (C1-C4), alquenilo (C2-C4) o alquinilo (C2-C4), o R5 forma una porción cíclica junto con -N(alquilo (Ci~ C4))— de X1 o arileno de A2; y R6 es H o alquilo (C1-C4).
En otra modalidad, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula I r una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos y uno o más portadores farmacéuticamente aceptables o excipientes. En un aspecto de la modalidad, la composición farmacéutica además comprende uno o más agentes terapéuticos adicionales.
En aún otra modalidad, un método para tratar infección viral de Flaviviridae se proporciona que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula I y una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos a un mamífero que necesita del mismo. En un aspecto de la modalidad, el tratamiento resulta en la reducción de la carga o liberación viral de ARN viral en un paciente.
En aún otra modalidad, un método para tratar infección viral Coronaviridae se proporciona que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula I r una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos a un mamífero que necesita del mismo. En un aspecto de la modalidad, el tratamiento resulta en la reducción de la carga o liberación viral de ARN viral en un paciente.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Definiciones A menos que se indique de otra manera, los siguientes términos y frases como se usa en la presente se pretende que tengan los siguientes significados: "Alcanoil" es RC(O)-; "alcanoiloxi" es RC(O)0-; y "alcanoilamino" es RC(O)NR'-; donde R es un grupo alquilo como se define en la presente, y R' es hidrógeno o alquilo.
"Alquenilo" se refiere a un grupo hidrocarbilo recto o ramificado con al menos un sitio de insaturación, esto es, un enlace doble sp2 carbono-carbono. En algunas modalidades, alquenilo es un grupo alquenilo C2-C2o, un grupo alquenilo C2-Cio o un grupo alquenilo C2-C6. Los ejemplos de grupo alquenilo incluyen, pero no se limitan a, vinilo (-CH=CH2), alilo (-CH2CH=CH2), ciclopentenilo (-C5H7), y 5-hexenilo (-CH2CH2CH2CH2CH=CH2).
"Alquenileno" se refiere a una cadena recta o ramificada, insaturada q radical de hidrocarburo cíclico que tiene dos centros radicales monovalentes derivados por la eliminación de dos átomos de hidrógeno de los mismos o dos diferentes átomos de carbono de un alqueno precursor. Por ejemplo, y grupo alquenileno puede tener 2 hasta 20 átomos de carbono, 2 hasta 10 átomos de carbono, o 2 hasta 6 átomos de carbono. Los radicales de alquenileno típicos incluyen, pero no se limitan a, 1,2-etileno (-CH=CH-).
"Alcoxi" es RO- donde R es alquilo, como se define en la presente. Los ejemplos no limitativos de grupos alcoxi incluyen metoxi, etoxi y propoxi.
"Alquilo" se refiere a un grupo hidrocarbilo de cadena recta o ramificada. En una modalidad, alquilo tiene desde 1 hasta 20 átomos de carbono (esto es, alquilo Ci-C2o)· En algunas modalidades, alquilo es un grupo alquilo Ci-Cio o un grupo alquilo Ci~C6. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen, pero no se limitan a, meti-lo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, t-butilo, pentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo y decilo.
"Alquileno" se refiere a un radical de cadena recta.o ramificada, saturado o radical de hidrocarburo cíclico que tiene dos centros radicales monovalentes derivados por la eliminación de dos átomos de hidrógeno de los mismos o dos diferentes átomos de carbono de un alcano precursor. Por ejemplo, un grupo alquileno puede tener 1 hasta 20 átomos de carbono, 1 hasta 10 átomos de carbono, o 1 hasta 6 átomos de carbono. Los ejemplos de radicales de alquileno incluyen, pero no se limitan a, metileno (-CH2-), etileno (-CH2CH2-), propileno (-CH2CH2CH2-) y butileno (-CH2CH2CH2CH2-).
"Alquinilo" se refiere a un hidrocarburo que contiene átomos de carbono -normales, secundarios o terciarios con al menos un sitio de insaturación, esto es, un enlace triple sp, carbono-carbono. Por ejemplo, un grupo alquinilo puede tener 2 hasta 20 átomos de carbono (esto es, alquinilo C2-C2o), 2 hasta 12 átomos de carbono (esto es, alquino C2-Ci2,) o 2 hasta 6 átomos de carbono (esto es, alquinilo C2~C$) . Los ejemplos de grupos alquinilo incluyen, pero no se limitan a, acetilénicos (-CºCH) y propargilo (-CH2CºCH).
"Alquilamino" se refiere a un grupo amino substituido con uno o más grupos alquilo. El "mono(alquil)amino" o "(alquil)amino" es RNH-, y "di (alquil)amino" o "(alquil)2amino" es R2N-, donde cada uno de los grupos R es alquilo como se define en la presente y son lo mismo o diferente. Los ejemplos de grupos alquilamino incluyen, pero no se limitan a, metilamino, etilamino, propilamino, butilamino, dimetilamino, dietilamino y metiletilamno.
"Amino" se refiere a -NH2.
"Alquinileno" se refiere a una cadena recta o ramificada, insaturada o radical de hidrocarburo cíclico que tiene dos centros radicales monovalentes derivados por la eliminación de dos átomos de hidrógeno de los mismos o dos diferentes átomos de carbono de un alquino precursor. Por ejemplo, una grupo alquinileno puede tener 2 hasta 20 átomos de carbono, 2 hasta 10 átomos de carbono, o 2 hasta 6 átomos de carbono. Los Radicales de alquinileno típicos incluyen, pero no se limitan a, acetileno (-CºC-), propargileno (-CH2CºC-), y 4-pentinileno (-CH2CH2CH2CºC-).
"Arilo" se refiere a cualquier anillo de carbono monocíclico o bicíclico de hasta 7 átomos en cada anillo, en donde al menos un anillo es aromático, o un sistema de anillo aromático de 5 hasta 14 átomos de carbono que incluye un grupo aromático carbocíclico fusionado con un grupo cicloalquilo de 5 o 6 miembros. Los ejemplos de grupos arilo incluyen, pero no se limitan a, fenilo, naftilo, tetrahidronaftilo e indanilo.
"Arilalquilo" se refiere a un alquilo como se define en la presente substituido con un radical arilo.
"Arileno" se refiere a un arilo como se definió arriba que tiene dos centros radicales monovalentes derivados por la eliminación de dos átomos de hidrógeno de dos diferentes átomos de carbono de un arilo precursor. Los radicales de arileno típicos incluyen, pero no se limitan a, fenileno, por ejemplo, , y naftileno, "Arilalquileno" se refiere a un arilalquilo como se definió arriba que tiene dos centros radicales monovalentes derivados por la eliminación de un átomo de hidrógeno del radical arilo y el otro hidrógeno eliminado del radical alquilo del grupo.
"Cicloalquilo" se refiere a un grupo hidrocarbilo que contiene al menos una estructura de anillo saturado o parcialmente insaturado, y enlazado por medio de un carbono de anillo. Los grupos de cicloalquilo incluyen anillos de hidrocarburo mono-, bi-, y poli-cíclicos, ya sea fusionado, puenteado, o espiro. En diversas modalidades, se refiere a una porción cíclica C3-C12 saturada o una parcialmente insaturada, ejemplos de los cuales incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, cicloheptilo y ciclooctilo.
"Cicloalquilalquilo" se refiere a una porción de alquilo substituido con un grupo cicloalquilo. Los ejemplos de grupos cicloalquilalquilo incluyen ciclopropilmetilo, ciclobutilmetilo, ciclopentiletilo y ciclohexilmetilo.
"Cicloalquileno" se refiere a un cicloalquilo, como se define en la presente, que tiene dos centros radicales monovalentes derivados por la eliminación de dos átomos de hidrógeno de los mismos o dos diferentes átomos de carbono de un cicloalquilo precursor. Los ejemplos de cicloalquileno incluyen, pero no se limitan a, ciclopropileno, ciclobutileno, ciclopentileno y ciclohexileno.
"Dialquilaminoalquilo" se refiere a una porción alquilo substituida con un grupo dialquilamino, en donde dialquila ino es como se define en la presente.
"Ester" significa cualquier éster de un compuesto en el cual cualquiera de las funciones -COOH de la molécula se reemplaza por una función -C(O)0R, o en el cual cualquiera de las funciones -OH de la molécula se reemplazan con una función -OC(O)R, en la cual la porción R del éster es cualquier grupo que contiene carbono que forma una porción de éster estable, que incluye pero no se limita a alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, arilo, arilalquilo, heterociclilo, heterociclilalquilo y derivados substituidos de los mismos.
"Halo" se refiere a cloro (-C1), bromo (-Br), fluoro (-F) o yodo (-1).
"Haloalcoxi" se refiere a alcoxi, como se define en la presente, substituido con uno o más radicales halo.
"Haloalcoxialquilo" se refiere a una porción alquilo substituido con un qrupo haloalcoxi, como se define en la presente.
"Haloalquilo" se refiere a un grupo alquilo, en el cual uno o más átomos de hidrógeno del grupo alquilo se reemplaza con un átomo de halógeno. Los ejemplos de grupos haloalquilo incluyen, pero no se limitan a, -CF3, -CHF2, -CFH2 y -CH2CF3.
"Heterocicloalquilo" se refiere a un grupo monociclico, biciclico o triciclico saturado o parcialmente insaturado de 2 hasta 14 átomos de carbono en el anillo y, además de átomos de carbono en el anillo, 1 hasta 4 heteroátomos seleccionados de P, N, O y S. El grupo heterociclico se puede enlazar a través de un átomo de carbono o a través de un heteroátomo, y cuando se substituye, el sustituyente se puede enlazar a un átomo de carbono o un heteroátomo. Los ejemplos de heterociclilo incluyen azetidinilo, benzoimidazolilo, benzofuranilo, benzofurazanilo, benzopirazolilo, benzotriazolilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, carbazolilo, carbolinilo, cinnolinilo, furanilo, imidazolilo, indolinilo, indolilo, indolazinilo, indazolilo, isobenzofuranilo, isoindolilo, isoquinolilo, isotiazolilo, isoxazolilo, naftpiridinilo, oxadiazolilo, oxazolilo, oxazolina, isoxazolina, oxetanilo, piranilo, pirazinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridopiridinilo, piridazinilo, piridilo, pirimidilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolilo, quinoxalinilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrothiopiranilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrazolilo, tetrazolopiridilo, tiadiazolilo, tiazolilo, tienilo, triazolilo, azetidinilo, 1,4-dioxanilo, hexahidroazepinilo, piperazinilo, piperidinilo, piridin-2-onilo, pirrolidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, dihidrobenzoimidazolilo, dihidrobenzofuranilo, dihidrobenzothiofenilo, dihidrobenzoxazolilo, dihidrofuranilo, dihidroimidazolilo, dihidroindolilo, dihidroisooxazolilo, dihidroisothiazolilo, dihidrooxadiazolilo, dihidrooxazolilo, dihidropirazinilo, dihidropirazolilo, dihidropiridinilo, dihidropirimidinilo, dihidropirrolilo, dihidroquinolinilo, dihidrotetrazolilo, dihidrotiadiazolilo, dihidrotiazolilo, dihidrotienilo, dihidrotriazolilo, dihidroazetidinilo, metilenodioxibenzoilo, tetrahidrofuranilo y tetrahidrotienilo y N-óxidos de los mismos .
"Heterocicloalquileno" se refiere a un heterocicloalquilo, como se definió arriba, que tiene dos centros radicales monovalentes derivados por la eliminación de dos átomos de hidrógeno de los mismos o dos diferentes átomos de carbono de un grupo heterocicloalquilo precursor.
"Heterocicloalquilalquileno" se refiere a un heterocicloalquilo como se definió arriba que tiene dos centros radicales monovalentes derivados por la eliminación de un átomo de hidrógeno del radical heterocicloalquilo y el otro hidrógeno eliminado del radical alquilo del grupo.
"Heteroarilo" se refiere a un anillo monociclico, biciclico o triciclico que tiene hasta 7 átomos en cada anillo, en donde al menos un anillo es aromático y contiene desde .1 hasta 4 heteroátomos en el anillo seleccionados del grupo que consiste de N, O y S. Los ejemplos no limitativos de heteroarilo incluyen piridilo, tienilo, furanilo, pirimidilo, imidazolilo, piranilo, pirazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, isotiazolilo, oxazolilo, isoxazoilo, pirrolilo, piridazinilo, pirazinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, benzofuranilo, dibenzofuranilo, dibenzotiofenilo, benzotienilo, indolilo, benzotiazolilo, benzooxazolilo, benzimidazolilo, isoindolilo, benzotriazolilo, purinilo, tianaftenilo y pirazinilo. El enlace de heteroarilo puede ocurrir por medio de un anillo aromático, o, si heteroarilo es bicielico o triciclico y uno de los anillos no es aromático o no contiene heteroátomos, a través de un anillo no aromático o un anillo que no contiene heteroátomos. "Heteroarilo" también se entiende que incluye el derivado de N-óxido de cualquier nitrógeno que contiene heteroarilo.
"Heteroarilalquilo" se refiere a un grupo alquilo, como se define en la presente, en el cual un átomo de hidrógeno se ha reemplazado con un grupo heteroarilo.
"Heteroarileno" se refiere a un heteroarilo, como se definió arriba, que tiene dos centros radicales monovalentes derivados por la eliminación de dos átomos de hidrógeno de los mismos o dos diferentes átomos de carbono de un grupo heteroarilo precursor. Los ejemplos no limitativos de grupos heteroarileno son: "Hidroxialcoxi" se refiere a un alcoxi, como se define en la presente, substituido con un grupo hidroxilo (-0H). Un ejemplo de hidroxialcoxi es hidroxietoxi.
"Hidroxyalquilo" se refiere a un grupo alquilo substituido con al menos un grupo hidroxi. Los ejemplos de grupos hidroxialquilo incluyen, pero no se limitan a, hidroximetilo, hidroxietilo, hidroxipropilo e hidroxibutilo.
"Profármaco" se refiere a cualquier compuesto que cuando se administra a un sistema biológico genera la substancia de fármaco, esto es, ingrediente activo, como un resultado de reacciones químicas espontáneas, reacciones químicas catalizadas por enzima, fotolisis, y/o reacciones químicas metabólicas. Un profármaco es por lo tanto un análogo covalentemente modificado o forma latente de un compuesto terapéuticamente efectivo. Los ejemplos no limitativos de profármacos incluyen porciones de éster, porciones de amonio cuaternario, porciones de glicol, y similares.
El término "opcionalmente substituido" se refiere a una porción en donde todos los sustituyentes son hidrógeno o en donde uno o más de los hidrógenos de la porción se reemplazan por sustituyentes sin hidrógeno. Múltiples substituciones en el mismo átomo también se permiten donde eran químicamente factible (por ejemplo, una substitución dioxo para proporcionar -S(O)2-, sustituyentes germinales, anillos cicloalquilo o heterocicloalquilo espiro, etc.). En algunas modalidades, "uno o más" sustituyentes es desde uno hasta tres sustituyentes.
Aceptado en la presente, donde es aplicable, son isómeros permisibles tal como tautómeros, racematos, enantiómeros, diaestereómeros , atropisómeros, isómeros configuracionales de enlaces dobles (E- y/o Z-), cis- y configuraciones trans- en patrones de substitución de anillo, y variantes isotópicas.
"Farmacéuticamente aceptable" significa adecuado para usar en preparaciones farmacéuticas, generalmente consideradas como seguras para tal uso, aprobado oficialmente por una agencia reguladora de un gobierno nacional o estatal para tal uso, o enlistado en la farmacopea de E.U.A. u otra farmacopea generalmente reconocida para usar en animales, y más particularmente en humanos.
"Portador farmacéuticamente aceptable" se refiere a un diluyente, adyuvante, excipiente, o portador, u otro ingrediente que es farmacéuticamente aceptable y con el cual un compuesto de la invención se administra.
"Sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal que puede mejorar la actividad farmacológica deseada. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de adición ácida formadas con ácidos inorgánicos u orgánicos, sales de metal y sales de amina. Los ejemplos de sales de adición ácida formadas con ácidos inorgánicos incluyen sales con ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico y ácido fosfórico. Los ejemplos de sales de adición ácida formadas con ácidos orgánicos tal como ácido acético, ácido propiónico, ácido hexanoico, ácido heptanoico, ácido ciclopentanpropiónico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido succínico, ácido mélico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido o- (4-hidroxi-benzoil)-benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido metansulfónico, ácido etansulfónico, ácido 1,2-etandisulfónico, ácido 2-hidroxietano-sulfónico, ácido bencensulfónico, ácido p-clorobencensulfónico, ácido 2-naftalensulfónico, ácido p-toluensulfónico, ácido canforsulfónico, ácido 4-metil-biciclo [2.2.2]oct-2-enel-carboxílico, ácido gluco-heptónico, ácido 4,4'-metilenobis(3-hidroxi-2-naftoico), ácido 3-fenilpropiónico, ácido trimetil-acético, ácido butilacético terciario, ácido laurilsulfúrico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácidos hidroxi-naftoicos, ácido salicílico, ácido esteárico y ácido mucónico. Los ejemplos de sales de metal incluyen sales con sodio, potasio, calcio, magnesio, aluminio, hierro, y iones de zinc. Los ejemplos de sales de amina incluyen sales con amoniaco y bases nitrogenadas orgánicas suficientemente fuerte para formar sales con ácidos carboxílíeos.
Un compuesto de una fórmula dada (por ejemplo el compuesto de la Fórmula I, que también incluye la Fórmula I-a, I-b, I-c, I-d, I-e o II) se pretende que abarque los compuestos de la descripción, y las sales farmacéuticamente aceptables, estereoisómeros, mezcla de estereoisómeros o tautómeros de tales compuestos. Adicionalmente, ls compuestos de la descripción pueden poseer uno o más centros asimétricos, y se puede producir como una mezcla racé ica o como enantiómeros individuales o diaestereoisómeros. El número de estereoisómeros presente en cualquier compuesto dado de una fórmula dada depende del número de centros asimétricos presentes (existen estereoisómeros 2n posibles donde n es el número de centros asimétricos). Los estereoisómeros individuales se pueden obtener al resolver una mezcla racémica o no racémica de un intermediario en alguna etapa apropiada de la síntesis o por resolución del compuesto por medios convencionales. Los estereoisómeros individuales (que incluyen enantiómeros individuales y diaestereoisómeros) así como mezclas racémicas y no racémicas de estereoisómeros se abarcan dentro del alcance de la presente descripción, todas de las cuales se pretende que se describan por las estructuras de esta especificación a menos que se indique específicamente de otra manera.
"Isómeros" son compuestos diferentes que tienen la misma fórmula molecular. Los isómeros incluyen estereoisómeros, enantiómeros y diaestereómeros.
"Estereoisómeros" son isómeros que difieren únicamente en la forma en que los átomos están configurados en el espacio. Los estereoisómeros incluyen enantiómeros y diaestereómeros.
"Enantiómeros" son un par de estereoisómeros que son imágenes de espejo no superponibles el uno del otro. Una mezcla 1:1 de un par de enantiómeros es una mezcla "racémica". El término "(±)" se usa para designar una mezcla racémica donde sea apropiada.
"Diaestereoisómeros" son estereoisómeros que tienen al menos dos átomos asimétricos, pero que no son imágenes de espejo el uno del otro.
La estereoquímica absoluta se especifica de acuerdo al sistema de Cahn Ingold Prelog R S. Cuando el compuesto es un enantiómero puro la estereoquímica en cada carbono quiral se puede especificar por ya sea R o S. Los compuestos resueltos cuya configuración absoluta se desconoce se designan (+) o (-) dependiendo de la dirección (dextró- o levógiro) que rotan el plano de luz polarizada en la longitud de onda de la línea de sodio D.
Algunos de los compuestos existen como isómeros tautoméricos o "tautómeros". Los isómeros tautoméricos están en equilibrio entre sí. Por ejemplo, la amida que contiene compuestos puede existir en equilibrio con tautómeros de ácido imídico. Sin importar que el tautómero se muestra, y independientemente de la naturaleza del equilibrio entre tautómeros, los compuestos se entienden por uno de experiencia ordinaria en la téenica para comprender ambos amida y tautómeros de ácido imidico. Por lo tanto, la amida que contiene compuestos se entiende para incluir sus tautómeros de ácido imidico. Similarmente, el ácido imidico que contiene compuestos se entiende para incluir sus tautómeros de amida.
Cualquier fórmula o estructura proporcionada en la presente, que incluye la Fórmula I, I-a, I-b, I-c, I-d, I-e o II, también se pretende que represente formas no etiquetadas asi como formas isotópicamente etiquetadas de los compuestos. Un "isótopo" puede tener estructuras representadas por las fórmulas dadas en la presente excepto que uno o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica seleccionada o número de masa. Los ejemplos de isótopos que se pueden incorporar en compuestos de la descripción incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxigeno, fósforo, flúor y cloro, tal como, pero no se limita a 2H (deuterio, D), 3H (tritio), UC, 13C, 14C, 15N, 18F, 31P, 32P, 35S, 36C1 y 125I. Diversos compuestos isotópicamente etiquetados de la presente descripción, por ejemplo aquellos en los que los isótopos radioactivos tal como 3H, 13C y 14C se incorporan. Tales compuestos isotópicamente etiquetados pueden ser útiles en estudios metabólicos, estudios cinéticos de reacción, téenicas de detección o formación de imagen, tal como tomografia de e sión de positrones (PET) o tomografia computarizada de emisión de fotón único (SPECT) que incluyen ensayos de distribución de tejido de substrato o fármaco o en tratamiento radioactivo de pacientes.
La descripción también incluye compuestos de la Fórmula I, I-a, I-b, I-c, I-d, I-e o II en los cuales desde 1 hasta n hidrógenos enlazados a un átomo de carbono se reemplaza(n) por deuterio, en el cual n es el número de hidrógenos en la molécula. Tales compuestos exhiben resistencia incrementada a metabolismo y son por lo tanto útiles para incrementar la vida media de cualquier compuesto de la Fórmula I, I-a, I-b, I-c, I-d, I-e o II cuando se administra a un mamífero. Ver, por ejemplo, Foster, "Deuterium Isotope Effects in Studies of Drug Metabolism", Trends Pharmacol. Sci. 5 (12):524-527 (1984). Tales compuestos se sintetizan por medios bien conocidos en la técnica, por ejemplo al remover materiales de partida en los cuales uno o más hidrógenos se han reemplazado por deuterio.
Los compuestos terapéuticos substituidos o etiquetdos con deuterio de la descripción pueden tener propiedades de DMPK mejoradas (metabolismo de fármacos y farmacocinéticos), con relación a la distribución, metabolismo y excreción (ADME). La substitución con isótopos más pesados tal como deuterio puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas que resultan de estabilidad metabólica mayor, por ejemplo vida media in vivo incrementada, requisitos de dosificación reducidos y/o una mejora en índice terapéutico. Un compuesto etiquetado 18F puede ser útil para estudios PET o SPECT. Los compuestos isotópicamente etiquetados de esta descripción y profármacos de los mismos se pueden preparar generalmente al llevar a cabo los procedimientos descritos en los esquemas o en los ejemplos y preparaciones descritas abajo al substituir un reactivo isotópicamente etiquetado fácilmente disponible por un reactivo isotópicamente no etiquetado. Se entiende que deuterio en este contexto se considera como un sustituyente c en el compuesto de la Fórmula I, I-a, I-b, I-c, I-d, I-e o II.
La concentración de tal isótopo más pesado, específicamente deuterio, se puede definir por un factor de enriquecimiento isotópico. En los compuestos de esta descripción cualquier átomo no específicamente designado como un isótopo particular está destinado a representar cualquier isótopo estable de ese átomo. A menos que se indique de otra manera, cuando una posición se designa específicamente como "H" o "hidrógeno", la posición se entiende que tiene hidrógeno en su composición isotópica de abundancia natural.
En consecuencia, en los compuestos de esta descripción cualquier átomo específicamente designado como un deuterio (D) está destinado a representar deuterio.
"Cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a una cantidad de un compuesto que, cuando se administra a un sujeto para tratar una enfermedad, es suficiente para efectuar el tratamiento para la enfermedad. "Cantidad terapéuticamente efectiva" puede variar dependiendo del compuesto, la enfermedad y su severidad, la edad, el peso, etc. del sujeto a tratarse.
El término "tratamiento", y equivalentes gramaticales de los mismos, cuando se usan en el contexto de tratamiento de una enfermedad, significa retardar o detener la progresión de una enfermedad, o mejorar al menos un síntoma de una enfermedad, más preferiblemente mejorar más de un sintoma de una enfermedad. Por ejemplo, tratamiento de una infección de virus de hepatitis C puede incluir reducir la carga viral HCV en un ser humano infectado con HCV, y/o reducir la severidad de ictericia presente en un ser humano infectado con HCV. Compuestos La presente solicitud proporciona un compuesto representado por la Fórmula I: Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos, en donde A es alquíleno(C2-C5) lquenileno(C2-C5) alquinileno(C2-C5), -O-alquileno(C2-C4), -O-alquenileno(C2-C4), arileno, aril alquíleno(C1-C2), heterocicloalquileno o heterocicloalquil alquíleno(Ci-C2), en donde un átomo de carbono sp3 de A1 se substituye opcionalmente con uno o más alquilo (C1-C4); A2 es arileno o heteroarileno, en donde A2 se substituye opcionalmente con halo; X1 es -O-, -NH- o -N(alquilo(C1-C4))-; Rla y Rlb son independientemente H, alquilo(C1-C4), alquenilo (C2-C4) o alquinilo(C2-C4); R2 es H, alquilo(Cx-C4), alquenilo(C2-C4) o alquinilo(C2- C4); R3a y R3b son independientemente H o alquilo(Ci-Ce); R4a y R4b son independientemente H, -OH, alcoxi(C1-C4) halo alcoxi(C1-C4) o alquilo(Ci-Cg); R5 es H, alquilo(C1-C4), alquenilo(C2-C4) o alquinilo(C2 C4), o R5 forma una porción cíclica junto con -N(alquilo(Ci C4))- de X1 o arileno de A2; y R6 es H o alquilo(Ci-C4).
En ciertas modalidades, se proporciona un compuesto de la Fórmula I: Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable, éster o profármaco de los mismos, en donde: A1 es alquileno{C1-C5) , alquenileno(C2-C5), alquinileno(C2-C5), -O-alquileno(C2-C4), -O-alquenileno(C2-C4), arileno, aril alquileno(Ci~C2), heterocicloalquileno o heterocicloalquil alquileno(Ci~C2), en donde un átomo de carbono sp3 de A1 se substituye opcionalmente con uno o más alquilo (C1-C4); A2 es arileno o heteroarileno, en donde A2 se substituye opcionalmente con halo; X1 es -O-, -NH- or -N(alquilo(Ci~C4))-; Rla y Rlb son independientemente H, alquilo(C1-C4), alquenilo(C2-C4) o alquinilo(C2-C4); R2 es H, alquilo(C1-C4), alquenilo(C2-C4) o alquinilo(C2- C4); R3a y R3b son independientemente H o alquilo(Ci-C8); R4a y R4b son independientemente H, -OH, alcoxi(C1-C4), halo alcoxi(Ci-C4) o alquilo(Ci-C8); R5 es H, alquilo(C1-C4), alquenilo(C2-C4) o alquinilo(C2-C4), o R5 forma una porción cíclica junto con -N(alquilo(Ci-C4))- de X1 o arileno de A2; y R6 es H o alquilo(C1-C4).
En un aspecto de la modalidad, A1 es etileno, propenileno, butenileno, etileno, propileno, butileno, oxipropileno, oxipropenileno, pirazolileno, fenileno o pirimidinileno.
En otro aspecto de la modalidad, A2 es heteroarileno tal como isoquinolinileno, fenileno o halofenileno. En un aspecto, A2 es En otro aspecto de la modalidad, X1 es -O- o -NH-; Rla es H; Rlb es metilo; R2 es iso-propilo; R5 es metilo y R6 es H o metilo.
En otro aspecto de la modalidad, R3a es H o metilo; R3b es H; R4a es H, -OH, metoxi, trifluoroetoxi; y R4b es H.
En otro aspecto de la modalidad, A2 es heteroarileno; A1 es alquileno(C2-C5), alquenileno(C2-C5) o alquinileno(C2-C5), en donde A1 se substituye opcionalmente con uno o más alquilo (C1-C4); R3a es H o alquilo(Ca-C8); y R4a es H, -OH o alcoxi (C1-C4). En otro aspecto de la modalidad, A2 es heteroarileno; A1 es alquileno(C1-C5), alquenileno(C2-C5) o alquinileno (C2-C5), en donde A1 se substituye opcionalmente con uno o más alquilo(C1-C4); R3a es H o alquilo(0c-08); y R4a es H, -OH o alcoxi(C1-C4). Los ejemplos no limitativos de tales compuestos incluyen los siguientes compuestos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. en donde el enlace izquierdo de ligador A1 se enlaza a A2.
En otro aspecto de la modalidad, A2 es arileno; y A1 es alquileno(C2-C5), alquenileno(C2-C5), alqumileno(C2-C5), -0-alquileno (C2-C5) o -0-alquenileno(C2-C4), en donde A1 se substituye opcionalmente con uno o más alquilo(C1-C4); R3a es H o alquilo(C1-C4); y R4a es H, -OH, alcoxi(C1-C4) o halo alcoxi (C1-C4). En otro aspecto de la modalidad, A2 es arileno; y A1 es alquileno(Ci-C5), alquenileno(C2-C5), alquiníleño(C2-C5), -O-alquileno(C2-C5) o -O-alquenileno(C2-C4), en donde A1 se substituye opcionalmente con uno o más alquilo(C1-C4); R3a es H o alquilo(C1-C4); y R4a es H, -OH, alcoxi(C1-C4) o halo alcoxi(C1-C4). Los ejemplos no limitativos de tales compuestos incluyen los siguientes compuestos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
Fórmula (I-b) en donde el enlace izquierdo de ligador A se enlaza a A2.
También se incluyen los siguientes compuestos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
Fórmula (I-c) e donde el enlace izquierdo de ligador A se enlaza a A2.
En otro aspecto de la modalidad, A2 es fenileno; y A1 es pirazolileno, fenileno o pirimidinileno. Los ejemplos no limitativos de tales compuestos incluyen los siguientes compuestos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
Fórmula (I-d) en donde el enlace izquierdo de ligador A se enlaza a A2.
En otro aspecto de la modalidad, A2 es halofenileno; y A1 es -O-alquileno(C2-C5) o -O-alquenileno(C2-C4). Los ejemplos no limitativos de tales compuestos incluyen los siguientes compuestos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
Fórmula (I-e) A' En un aspecto de la modalidad, A1 es alquileno(C2-C5) o alquenileno (C2-C5); R es metilo, o R forma junto con arileno de A2, o R5 forma o junto con N(alquilo(C1-C4))- de X1/ y R6 es H o metilo. En otro aspecto de la modalidad, A1 es alquileno(C1-C5) o alquenileno(C2-C5); R5 es metilo, o R5 forma junto con arileno de A2, o R5 forma junto con -N (alquilo(C1—C4))- de X1; y R6 es H o metilo. Los ejemplos no limitativos de tales compuestos incluyen los siguientes compuestos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos: l - 1 · I En otra modalidad, se proporciona un compuesto de Fórmula II : Fórmula II o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos, en donde: ' - en donde el enlace izquierdo de ligador A1 se enlaza a A R es H, O , ( 1 ) , alquilo(Ci-Cs); y R5 es H o alquilo(C1-C4).
Un experto en la téenica reconocerá que los sustituyentes y otras porciones de los compuestos de las fórmulas genéricas en la presente se deben seleccionar con objeto de proporcionar un compuesto que es suficientemente estable para proporcionar un compuesto farmacéuticamente útil que se puede formular en una composición farmacéutica aceptablemente estable. Los compuestos que tienen tal estabilidad se contemplan como que caen dentro del alcance de la presente invención. Se debe entender por un experto en la técnica que cualquier combinación de las definiciones y sustituyentes descritos arriba no debe resultar en una especie inoperable o compuesto.
Preparación de Compuestos Macrocielicos Un compuesto de la presente invención tal como aquellos de la Fórmula I, I-a, I-b, I-c, I-d, I-e o II se pueden preparar de acuerdo a los esquemas descritos abajo, pero se aprecirá que las modificaciones del proceso ilustrado u otro proceso también se pueden usar. Como se ilustra en el Esquema 1, los compuestos macrociclicos M se sintetizan de los cinco componentes clave A-E al combinarlos juntos en secuencia con el uso apropiado de grupos protectores (PG^PG8) por un experto en la técnica. Las lineas punteadas numberadas 1-5, referida en la presente como Conexión l, Conexión 2, etc., respectivamente, son las 5 conexiones para combinar Componentes A-E. El orden en que las conexiones específicas ocurren, puede variar, y dependen de la elección de grupos protectores y química requerida. En ciertas modalidades, las Conexiones 3, 4 o 5 se usan como la etapa de macrocielización final .
Esquema de reacción 1 PGX = grupo protector como sea necesario Y1 y Y2 son H, alquilo, haluro, triflato, ácido borónico, estanano, etc.
De forma ilustrativa, las Conexiones 1 a través de 5 se pueden realizar como se describe abajo: Las Conexiones 1, 2 y 3 son enlaces amida. Las conexiones se hacen entre el respectivo ácido y amina usando agentes de acoplamiento de péptido estándar (EDC/HOBT, DCC, PyBOP, PyBROP, HATU, HBTU, COMO, etc.) conocidos por un experto en la téenica. Los compañeros de acoplamiento de ácido y amina se combinan con un agente de acoplamiento en un solvente orgánico, por ejemplo, DMF, diclorometano, acetonitrilo, etc., en la presencia de una base, por ejemplo, DIPEA, trietilamina, etc., a TA o temperatura ligeramente elevada. Cuando cualquiera de estas tres etapas se eligen como la etapa de macrociclización final, por ejemplo Conexión 3, entonces las condiciones de macrolactamización se prefieren. Los procedimientos de macrolactamización adecuados incluyen, pero no se limitan a, aquellos encontrados en la siguiente referencia: Davies, J. S. J. Peptide Sci.2003, 9, 471-501.
La Conexión 4 es típicamente un enlace carbono-carbono o un enlace heteroátomo-carbono donde el heteroátomo es O, S o N. Cuando la Conexión 4 es un enlace carbono-carbono, entonces el enlace carbono-carbono estándar que forma procedimientos típicamente que involucran reacciones de acoplamiento cruzado mediado por metal se prefiere. Preferiblemente el enlace carbono-carbono se forma usando un acoplamiento tipo Heck entre un grupo de haluro sp2 y un alqueno terminal, un acoplamiento Suzuki entre un grupo de haluro sp2 y un boronato de vinilo o arilo, o un anillo que cierra la metátesis (RCM) entre dos alquenos. Las reacciones estériles también se pueden realizar entre un estanano de vinilo y un haluro de arilo o vinilo como se describe en Journal of American Chemical Society 2000, 122, 3830 Nicolaou et al. En cada uno de los ejemplos anteriores el grupo de haluro de arilo o vinilo también puede ser un triflato de arilo o vinilo.
Por ejemplo, cuando A2-Y2 en A contiene un alqueno terminal, tal como -CH=CH2, y A1-Y1 en B contiene un alqueno terminal, o CH3-CH=CH- entonces una reacción de metátesis cruzada se realiza. Los dos componentes se mezclan en solvente, por ejemplo, acetonitrilo, tolueno y un catalizador metátesis, por ejemplo, Grubbs I, Grubbs II o Hoyveda-Grubbs I, Hoyveda-Grubbs II se agrega seguido por calentamiento. Si está conexión es el procedimiento final para cerrar el anillo de macrocielico, las condiciones RCM se prefieren (por ejemplo, condiciones más diluidas para evitar la dimerización). Para las condiciones RCM pertinentes y ejemplos ver Journal of American Chemical Society 2003, 125, 3849 Sedrani et al and Journal of American Chemical Society 2000, 122, 3830 Nicolaou et al. Un procedimiento RCM típico incluye calentamiento (ya sea convencionalmente o por microondas) del acíclico precursor en un solvente tal como tolueno, o 1 ,2-dicloroetano, en la presencia de un catalizador RCM, por ejemplo, Grubbs I, Grubbs II o Hoyveda-Grubbs I, Hoyveda-Grubbs II.
Alternativamente, cuando la Conexión 4 se hace por medio de una reacción de acoplamiento Heck, el haluro de vinilo o arilo, o el triflato A y el componente B alqueno se mezclan en un solvente polar, por ejemplo, acetonitrilo, o tolueno en la presencia de un catalizador de Paladio(II), por ejemplo, Paladio(OAc)2, un ligando de fosfina, por ejemplo, Pío-tolueno^ , P(t-butilo)3 , etc., y un base, por ejemplo, trietilamina. La mezcla de reacción se calienta ya sea convencionalmente o en un reactor de microondas.
Alternativamente, cuando la Conexión 4 se hace por medio de una reacción de acoplamiento Suzuki, el haluro de vinilo o arilo, o el triflato A y el boronato de vinilo o arilo B se mezclan en un solvente adecuado, por ejemplo, éter de ciclopentil metilo, tolueno, DMF, DME, etc., en la presencia de un catalizador de Paladio (por ejemplo, Paladio(II)Cl2(p-NMe2Ph)2 y K3PO4 o tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) y una base, tal como carbonato de potasio). La mezcla de reacción se calienta ya sea convencionalmente o en un reactor de microondas. También es posible en tal reacción de acoplamiento para revertir las funcionalidades reactivas en los dos materiales de partida, tal que A es un boronato de arilo o vinilo y B contiene un haluro de vinilo o arilo o triflato .
Alternativamente, la Conexión 4 puede ser un enlace carbono-oxigeno y en este caso la alquilación típica o las condiciones de substitución aromática nucleofílica se puede usar entre un grupo hidroxilo y un haluro de alquilo, o haluro de arilo (o heteroarilo). El reactivo de hidroxilo se mezcla con el haluro de alquilo o heteroarilo (preferiblemente un yoduro o bromuro), en un solvente inerte, por ejemplo, CPME, DMF, THF, etc, en la base de la presencia, por ejemplo, carbonato de cesio, hidróxido de cesio, hidruro de sodio, MaHMDS, etc.; y calienta.
Alternativamente, la Conexión 4 puede ser un enlace carbono-nitrógeno y en este caso alquilación típica, substitución aromática nucleofílica o condiciones Buchwald se pueden usar entre un grupo amina y un haluro de alquilo o haluro de heteroarilo. Por ejemplo, la amina y el haluro de alquilo o heteroarilo se mezclan y calientan en un solvente inerte, por ejemplo, CPME, en la base de la presencia, por ejemplo, carbonato de cesio, hidruro de sodio, etc. Un procedimiento alternativo para la conexión carbono-nitrógeno es para realizar una aminación reductiva entre una amina y un compuesto de carbonilo. Típicamente la amina y aldehido o cetona se mezclan en un solvente inerte, por ejemplo, THF, dioxano y se trata después de un periodo de tiempo con sodio acetoxi borohidruro o agente de reducción alternativo.
La Conexión 5 es típicamente una amida (X1 = -NH o substituido N) , o enlace de ester (X1 = O). Cuando se forma el enlace de amida, los procedimientos de acoplamiento estándar como se describe para Conexiones 1-3 se pueden usar. En algunas modalidades, esta es la etapa final en cerrar el macrociclo. Como tal, los tipos de macrolactamización de los procedimientos de acoplamiento son más efectivos. Los procedimientos de macrolactamización adecuados incluyen, pero no se limitan a, aquellos encontrados en Davies, J. S. J. Peptide Sci . 2003, 9, 471-501.
Cuando se forma el enlace de éster, los reactivos de acoplamiento estándar (por ejemplo, EDC, DCC, PyBOP, HATU, COMO) se pueden usar, o cuando esta es la etapa final en formación del macrociclo, los procedimientos de macrolactonización se prefieren (por ejemplo, Shina, Yamaguchi). Un método ejemplar para la etapa de macrolactonización se puede encontrar en 10urnal of American Chemical Society 2002, 124, 4257 Paquette et al o Chemical Reviews 2006, 106(3), 911-939. Típicamente, el ácido y alcohol se mezclan en un solvente polar, por ejemplo, DMF, acetonitrilo, etc, en la presencia del agente de acoplamiento y una base, por ejemplo, DIPEA, DMAP.
Los siguientes esquemas generales proporcionan ejemplos generales y secuencias para construir el compuesto macrocíclico M de los precursores comunes A-E.
Esquema de reacción 2: Uso de método RCM para Conexión 4 , ¡. i i ¡i. ¡ i i i .
' Los compuestos A-E pueden ser desprotegidos (PG2-PG8) usando condiciones descritas en Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wilcy and Sons, Inc. para proporcionar los Compuestos la-lf.
En muchos casos los grupos protectores óptimos y sus métodos de desprotección son como sigue. Para el Compuesto E, el grupo protector típico PG1 para el ácido es un ester de metilo o tricloroetilo. Los ásteres de metilo y tricloroetilo se pueden eliminar por base, por ejemplo, LiOH en un solvente polar, por ejemplo, THF acuoso, etc. El ester de tricloroetilo también se puede eliminar por tratamiento con zinc y acetato de amonio en un solvente polar, por ejemplo, THF. Típicamente, PG2 y PG4 son grupos inestables ácidos, por ejemplo, BOC, y se desprotegen usando HCl en dioxano, o TMSOTf en dioxano, diclorometano. Típicamente, PG3 y PG5 son grupos éster, eliminados por tratamiento con hidróxido de metal alcalino en THF acuoso o dioxano. Típicamente PG6 es un grupo inestable ácido, por ejemplo, BOC, para una amina y eliminado como se describe para PG2, o un éter de sililo para un grupo hidroxilo, y se puede eliminar por tratamiento con HF.piridina de TBAF en un solvente orgánico, por ejemplo, diclorometano. Típicamente PG8 es un grupo protector de amina, por ejemplo, BOC, y se elimina como se describe para PG2 o un éter de sililo para un grupo hidroxilo, que se puede eliminar como se describe para PG6, o un grupo protector de acetato, que se puede eliminar con un hidróxido de metal alcalino en THF acuoso o dioxano.
El Compuesto lf se acopla luego a ácido la usando las condiciones descritas arriba para la Conexión 1 para producir el compuesto lg. El Compuesto lg se desprotege luego usando condiciones descritas en Greene and Wuts y acopla a le para proporcionar lh usando las condiciones descritas arriba para la Conexión 2. Una secuencia alternativa para generar lh comienza con amina de acoplamiento Ib a ácido le usando condiciones como se describen para la Conexión 2 arriba, para formar li; la desprotección del grupo protector PG3 en li usando condiciones descritas en Greene and Wuts, y finalmente acoplamiento con amina lf usando condiciones descritas para la Conexión 1 arriba forma lh.
Esquema de reacción 3 - , i. ,i 1 i. ¡i. i . ii. i i ii. - i. i i.
M El Compuesto lh se desprotege en PG6 usando condiciones descritas en Greene and Wuts y la amina se acopla luego a Id usando las condiciones descritas arriba para la Conexión 3 para formar lj. El grupo protector PG1 en el Compuesto lj se elimina luego usando condiciones descritas en Greene and Wuts, y el ácido se acopla luego a le usando condiciones descritas para la Conexión 5 para formar el intermediario acielico lk. Una secuencia alternativa a lk es primero la desprotección de PG1 y luego el acoplamiento a le como se describe para la Conexión 5; seguido por la desprotección de PG6 cono se describe en Greene and Wuts, seguido por acoplamiento a Id usando las condiciones descritas para la Conexión 3 para formar lk. El intermediario aciclico lk se somete luego al RCM como se describe arriba para la Conexión 4 para formar el macrociclo M.
Esquema de reacción 4: Conexión 5 de Macrolactamización/Macrolactonización . _ ¡.
. I 2c M El compuesto A se acopla al Compuesto B usando las condiciones descritas arriba para la Conexión 4 para generar 2a. El compuesto 2a se desprotege luego en PG7 como se describe en Greene and Wuts para generar ácido 2b. El ácido 2b se acopla luego al producto desprotegido de lh (preparado de lh por la desprotección de PG6 descrito en Greene and Wuts) para generar el precursor 2c. La desprotección de 2c se lleva a cabo usando condiciones descritas en Greene and Wuts, y luego el producto se cicla usando las condiciones descritas arriba para macrolactamización o macrolactonización en la Conexión 5, para proporcionar el Compuesto M.
Esquema de reacción 5: Conexión 5 de Macrolactamización/Macrolactonización 3a i 3b M El compuesto 2a se desprotege en PG8 como se describe en Greene and Wuts y arriba en la Conexión 5 para generar 3a que se acopla luego, usando condiciones descritas arriba para la Conexión 5, al producto desprotegido de lh (preparado de lh por la desprotección de PG1 descrita en Greene and Wuts) para generar el precursor 3b. La desprotección de 3b se lleva a cabo usando condiciones descritas en Greene and Wuts, y luego cicla usando las condiciones descritas arriba para la macrolactamización o macrolactonización en la Conexión 3, para proporcionar el Compuesto M.
Esquema de reacción 6: Transformación adicional de Compuestos Macrocíclicos M hasta M1-M5 _ M4 alquilado M3 que contiene triazol Por ejemplo, cuando M contiene un C=C como un resultado de RCM, el Compuesto M se mezcla en un solvente tal como etanol, metanol, etc., en la presencia de catalizador de paladio sobre carbono bajo una atmósfera de gas de hidrógeno para proporcionar Compuesto MI reducido. El macrociclo final M de los Esquemas de reacción 4-6 frecuentemente contiene grupos protectores en cadenas laterales que requieren eliminación adicional para generar el compuesto final M. Los grupos protectores en el R4a, R4b, R3a, R3b, A1, A2 y/o X1 se eliminan usando condiciones descritas en Greene and Wuts para generar Compuesto M2. Otra transformación es química de tecleo para producir triazol M3. Esta transformación se realiza por el tratamiento de alquino o azida en M, en solvente (por ejemplo, DMF) con un alquino o azida como es apropiado en la presencia de Cul para formar M3.
El compuesto desprotegido M2 se puede transformar además después de la desprotección a macrociclo adicional M. Por ejemplo, el tratamiento de M2 que contiene un -OH con un haluro de alquilo en la presencia de una base, por ejemplo, 5 carbonato de cesio, en un solvente adecuado, por ejemplo, DMF, acetonitrilo, etc., forma producto alquilado M4. M2 que contiene un grupo de cetona se trata en un solvente adecuado (por ejemplo, DMF, metanol, etc.) con una amina seguido por la adición de acetoxiborohidruro de sodio para formar product 10 de amina M5.
Esquema de reacción 7: Preparación de ácidos o ésteres B Muchos componentes B que contienen un ácido o éster con una terminal alqueno o CH3-CH=C- o grupos de vinil/aril boronato están comercialmente disponibles o se describen en la literatura y se puede usar en los Esquemas de reacción 20 anteriores directamente. Además, los siguientes Esquemas de reacción son ejemplos de métodos que se pueden usar para generar componentes B adicionales.
Esquema de reacción 8: Preparación de ácidos o ásteres B l ' i i — i - ' , i l il , . i , l , i , il , i ii C’ y C2 = alquilo, o cicloalquilo, etc.
PG7 = típicamente, t-Butilo, metilo, o etilo , i , il , l il i l l , . , i ¡. il . . l ' ' ' i. li i l , i l l i , . , l i , l i , l , l l ' ' ' ii. l l i , l il , . , i , . i. l il l , l i . i i . l il , i i .
. , . ¡. . , En el Esquema de reacción 8, parte 1, un ácido protegido se trata con una base de desprotección fuerte, por ejemplo, LDA en un solvente inerte, por ejemplo, THF, a -78°C y HMPA.
Una solución pre-enfriada de dicloroacteileno (preparado por tratamiento de tricloroetano con hidruro de potasio y MeOH (catalítico) en THF) se agrega luego para generar el product de cloro acetileno. Este producto se reduce luego, por ejemplo, por tratamiento con Cu en ácido acético y THF, para generar el alquino, el cual luego se reduce adicionalmente al alqueno, por ejemplo, por tratamiento de una solución alcohólica del alquino con un agente de reducción de paladio envenenado (por ejemplo, Lindlar) en la presencia de gas de hidrógeno. Alternativamente, el alquino se trata con Cp2ZrHCl en diclorometano en la presencia de pinnacolborano para formar el boronato de vinilo.
En el Esquema de reacción 8, parte 2, un beta-ceto éster con substitución alfa se convierte al triflato de vinilo, por ejemplo, por el tratamiento de una solución THF del éster beta-ceto con una base, por ejemplo, LDA, en THF a -78°C, seguido por la adición de PhN(Tf)2. El product de triflato se trata luego con piridina en temperatura elevada para formar el alquino. El alquino se trata luego como se describe arriba en la parte 1 para generar los productos de alqueno o boronato de vinilo.
En el Esquema de reacción 8, parte 3, una reacción de aldol quiral se usa. Un grupo acilo se enlaza primero a un auxiliar quiral, por ejemplo, Evans, Oppolzer sultam (ver JACS 1990, 112, p2767), usando las condiciones de formación de enlace de amida estándar como se describe arriba para la Conexión 1-3. El producto auxiliar Oppolzer se trata con el aldehido de elección, TBDMSOTf y base, por ejemplo, trietilamina, en solvente anhidro, por ejemplo, diclorometano. El auxiliar Evans se trata con base, por ejemplo, LDA, KHMDS, DIPEA, en solvente orgánico, por ejemplo, THF, a -78°C y el aldehido de elección en la presencia de un ácido Lewis, por ejemplo, TiCl4, SnCl4, BF3OEt2. La protección del alcohol resultante de la reacción aldol se realiza como se describe en Greene and Wuts, o alternativamente alquilación con un haluro de alquilo o reactivo de Meerwein, esto es, tratamiento con tetrafluoroborato de trimetiloxonio en un solvente inerte, por ejemplo, diclorometano, se realiza. El auxiliar se elimina luego usando condiciones de eliminación de hidróxido de metal alcalino estándar, por ejemplo, LiOH en THF, o LiOH y peróxido de hidrógeno en THF, para proporcionar el producto de ácidos libres.
En el Esquema de reacción 8, parte 4, un auxiliar Evans es alilado con un haluro de alilo como se describe en Synlett 2002, 12, 2039-2040. El producto se isomeriza luego por tratamiento con RhCl3 en etanol y luego el auxiliar se elimina por base y peróxido, por ejemplo, LiOH y H2O2 en THF/Agua. Alternativamente el auxiliar se elimina directamente por LiOH y H202 en THF/Agua para proporcionar el alqueno terminal.
En el Esquema de reacción 8, parte 5, una reacción Horner Wadsworth Emons se usa en un aldehido (que contiene un alqueno terminal) para generar el éster no saturado alfa-beta, que luego se reduce selectivamente al éster. Por ejemplo, el fosfonato se trata con base, por ejemplo, hidruro de sodio, en THF en temperatura baja, seguido por la adición del aldehido y calentamiento para generar el éster insaturado. El producto se reduce por tratamiento con polvo de magnesio en metanol.
En el Esquema de reacción 8, parte 6, un ácido insaturado alfa-beta se convierte al auxiliar Evans insaturado (ver Organic Letters 2007, 9, pl635) y se trata con un aldehido para generar el producto de alqueno correspondiente. El grupo hidroxilo se protege luego usando métodos descritos en Greene and Wuts y luego el auxiliar se elimina por tratamiento con base y peróxido, por ejemplo, LiOH y H2O2 en THF/Agua. El hidroxilo también se puede alquilar por como se describe arriba para Esquema de reacción 8 aldol, parte 3.
En el Esquema de reacción 8, parte 7, una cetona se transforma por medio de la nitro olefina como se describe en Angew. Chem. Int . Ed. 2006, 45 (46), 7736. La nitro d efina se trata luego con vinil magnesio bromuro en un solvente inerte, por ejemplo, THF, en la presencia de una sal de cobre (I), por ejemplo, Cul y cloururo de trimetilsililo. El producto de nitro alquilo después de la adición del grupo vinilo se convierte luego al ácido por tratamiento con nitrito de sodio y ácido acético en un solvente polar inerte, por ejemplo, DMSO.
Diversos tipos de A están comercialmente disponibles o se describen en la literatura donde X1 es O o NH y Y2 es un haluro o A2-Y2 contienen un alqueno. Los Esquemas de reacción abajo describen métodos generales adicionales para generar A.
Esquema de reacción 9: Preparación de A 1. Cuando Y2 = Halógeno en A Esquema de reacción 9 (cont.): Preparación de A 2. Cuando ?2 = H y A2-Y2 contiene un alqueno en A R5 A3 i- Protección T Y X1H vinilación o 6e A1 Halógeno ¡. reducción de cetona quiral ii. protección PG8 1 Triflación R5-. ,A3 iii vinilación OTf - ^ PGB O 6b Ver parte 1 Y = OH „ 6f A3 es arilo, heteroarilo, o biarilo, etc.
En el Esquema de reacción 9, parte 1 (Y2 es un halógeno en A); el Compuesto 6a de partida es típicamente un compuesto aromático comercialmente disponible, que contiene halógeno Y2 y un grupo Z que se puede transformar en la cetona 6b. Los grupos Z típicos son haluro, ácido, o aldehido, por ejemplo.
Cuando Z es un ácido, 6a se trata con un agente de acoplamiento, por ejemplo, HATU, EDC en la presencia de una base, por ejemplo, DIPEA y la amina einreb (Me-NH-OMe) para formar la amida Weinreb. La amida se trata luego con un nucleófilo, por ejemplo, TMS-CF3 para formar la cetona 6b substituida con CF3 o con un agente Grignard, por ejemplo, MeMgBr en un solvente, por ejemplo, THF, a -78°C para formar la cetona de metilo 6b.
Cuando Z es un halógeno, entonces la conversión inicial, si $e requiere, a un halógeno más reactivo se realiza por tratamiento con Nal y cloruro de acetilo en un solvente inerte, por ejemplo, acetonitrilo. El halógeno se transforma luego a la cetona por una reacción de Stille con un etoxiestanano de vinilo. El haluro se trata en un solvente inerte, por ejemplo, tolueno, con el estanano y un catalizador de paladio (II), por ejemplo, PdCl2(PPh3)2, seguido por tratamiento del producto con HCl 2M para proporcionar cetona 6b. En algunos casos la formación de un reactivo de alquil litio del grupo de haluro se puede realizar por tratamiento con nBuLi a -78°C en THF y luego adición de una amida de N-metoxi-N-metilo para proporcionar la cetona 6b (por ejemplo, N-metoxi-N-metilacetamida proporciona el R5 es cetona de metilo 6b). Un método final para generar la cetona 6b es a través de un grupo de vinilo. El 6a se trata con un viniltrifluoroborato en la presencia de un catalizador de paladio, por ejemplo, PdCl2(dppf) y luego el producto de vinilo se procesa por ozono posteriormente en un solvente polar, por ejemplo, metanol en temperatura baja para dar un aldehido. El aldehido se hace reaccionar luego con un nucleófilo, por ejemplo, TSM-CF3 o un reactivo Grignard, por ejemplo, MeMgBr para proporcionar un producto de alcohol secundario. El alcohol secundario se oxida luego con Peryodinano Dess Martin para dar la cetona deseada 6b o se puede usar como A por si misma.
El alcohol quiral (X1 es O) y amina (X1 es NH) A e generan usando métodos de reducción Quiral en la cetona 6b. El alcohol quiral 6c se forma de 6b usando uno de los numerosos métodos de reducción quiral disponibles en la literatura. Típicamente, dímero de dicloro(p-cumeno)rutenio(II) y (IR,2R)-(-)-N-p-tosil-l,2-difeniletilenodiamina se combinan en agua, y formiato de sodio y 6b se agrega en un solvente soluble en agua tal como tetrahidrofurano. La reacción se agita luego a una temperatura entre ambiente y reflujo para producir 6c donde X1 es O. Alternativamente, una reducción CBS quiral se puede realizar en un solvente inerte, por ejemplo, THF en temperatura baja para proporcionar también el alcohol quiral 6c. La protección del OH en 6c se realiza usando métodos descritos en Greene and Wuts, típicamente un éter TBS o grupo acetilo se usan para proporcionar A (X1 es O).
Alternativamente, para hacer quiral A (X1 es NH), cetona 6b se convierte primero a una imina quiral (R10 es grupo quiral) y luego se reduce usando una variedad de métodos descritos en la literatura. Por ejemplo, una sulfinamida quiral se hace reaccionar con la cetona 6b para proporcionar una sulfínímina quiral 6d, que se reduce luego con un agente de reducción adecuado, típicamente NaBH4, o selectrida, o una reducción de tipo Noyori como se describe para el alcohol quiral anterior, con dí ero de dicloro(p-cumeno)rutenio(II) y (IR,2R)-(-)-AJ-p-tosil-l,2-difeniletilenodiamina. El auxiliar de sulfinamida se elimina luego por tratamiento con ácido mineral, preferiblemente HCl en un solvente adecuado orgánico tal como metanol, para proporcionar 6e donde-X1 es NH. LA protección del grupo NH se puede realizar luego como se describe en Greene and Wuts para generar A (X1 es NH).
En la parte 2 de Esquema de reacción 9, la síntesis del compuesto A donde Y2 es H y A2-Y2 contiene -CH=CH2, un precursor para la metátesis y reacciones de acoplamiento cruzado se ilustra. Los Métodos ejemplares son como sigue.
El compuesto 6c o 6e generado en el Esquema de reacción 9, parte 1 se protege primero opcionalmente en X1 usando un grupo protector adecuado como se describe en Greene and Wuts, y luego un grupo vinilo se introduce por un método de acoplamiento cruzado adecuado sobre el arilo o haluro sp2. Por ejemplo, un acoplamiento mediado por metal de transición con un estanano de vinilo o tetrafluoroborato de vinilo usando un catalizador de paladio adecuado, por ejemplo, PdCl2(dppf)2 o PdCl2(PPh3)2 en un solvente adecuado orgánico, por ejemplo, acetonitrilo, diclorometano, etc., con cualquiera de calentamiento térmico o por microondas para proporcionar alqueno A.
Otro método típico que se puede usar para introducir un grupo de vinil es a partir de la cetona 6b donde Y es OH. Inicialmente, la triflación del alcohol se realiza por tratamiento con Tf20 en la presencia de una base, por ejemplo, piridina. El grupo cetona se reduce luego con una reducción Noyori, o como se describe arriba a través de la sulfonamida, para proporcionar el alcohol quiral o amina. El alcohol quiral o amina se protege luego como se describe en Greene and Wuts, y luego el triflato se hace reaccionar con un reactivo de acoplamiento cruzado de vinilo, por ejemplo, estanano de vinilo en un acoplamiento de Stille, o un viniltrifluoroborato como se describe arriba para introducir el alqueno. Un ejemplo adicional de generación de alqueno usando 6b cetona es por medio de la introducción de un grupo alilo. Por lo tanto, 6b donde Y es OH se trata en un solvente inerte en la presencia de una base adecuada, por ejemplo, carbonato de metal alcalino, preferiblemente carbonato de potasio con bromuro de alilo para formar 6f. El Compuesto 6f es entonces similar a cetona 6b y es por lo tanto capaz de transformarse como se describe arriba en la parte 1 a Compuesto A donde X1 es 0 o NH con grupo protector PG8.
Formulaciones Farmacéuticas Los compuestos de esta invención se formulan con portadores y excipientes convencionales, que se seleccionarán de acuerdo con la práctica ordinaria. Los comprimidos contendrán excipientes, agentes de deslizamiento, rellenos, aglutinantes y similares. Las formulaciones acuosas se preparan en forma estéril, y cuando se pretende para suministro por diferente de la administración oral generalmente será isotónica.
Mientras que es posible para los ingredientes activos a administrarse solos esto puede ser preferible para presentarlos como formulaciones farmacéuticas. Las formulaciones de la invención, tanto para uso veterinario como para uso humano, comprenden al menos un ingrediente activo, junto con uno o más portadores aceptables y opcionalmente otros ingredientes terapéuticos.
Las formulaciones de la presente invención adecuadas para administración oral se pueden presentar como unidades discretas tal como cápsulas, cachés o comprimidos cada uno contiene una cantidad predeterminada del ingrediente activo; como un polvo o gránulos; como una solución o una suspensión en un liquido acuoso o no acuoso; o como una emulsión liquida aceite en agua o una emulsión liquida agua en aceite. El ingrediente activo también se puede administrar como un bolo, electuario o pasta.
La dosis efectiva de un ingrediente activo depende al menos de la naturaleza de la afección que se trata, toxicidad, si el compuesto se está usando profilácticamente (dosis más bajas) o contra una infección viral activa, el método de suministro, y la formulación farmacéutica, y se determinará por el clínico usando estudios de aumento de dosis convencionales. La dosis efectiva se puede esperar que sea desde alrededor de 0.0001 hasta alrededor de 100 mg/kg peso corporal por día; típicamente, desde alrededor de 0.01 hasta alrededor de 10 mg/kg peso corporal por día; más típicamente, desde alrededor de .01 hasta alrededor de 5 mg/kg peso corporal por día; más típicamente, desde alrededor de .05 hasta alrededor de 0.5 mg/kg peso corporal por día. Por ejemplo, la dosis candidato diaria para un adulto humano de aproximadamente 70 kg peso corporal variará desde 1 g hasta 1000 mg, preferiblemente entre 5 mg y 500 mg, y puede tomar la forma de dosis simple o múltiple.
Terapia de Combinación Los compuestos de la presente invención se pueden combinar con uno o más agentes activos. Los ejemplos no limitativos de agentes activos adecuados a combinarse incluyen uno o más interferones, ribavirina o sus análogos, inhibidores de proteasa HCV NS3, inhibidores NS5a, inhibidores de alfa-glucosidasa 1, hepatoprotectores, antagonistas de decarboxilasa de mevalonato, antagonistas del sistema de renina-angiotensina, otros agentes anti-fibróticos, antagonistas de endotelina, inhibidores de nucleósidos o nucleótidos de polimerasa HCV NS5B, inhibidores de no nucleósidos de polimerasa HCV NS5B, inhibidores HCV NS5A, agonistas TLR-7, inhibidores de ciclofillina, inhibidores HCV IRES, potenciadores farmacocinéticos y otros fármacos para tratar HCV; o mezclas de los mismos.
Más específicamente, uno o más compuestos a combinarse son seleccionados del grupo que consiste de 1) interferones, por ejemplo, rIFN-alfa 2b pegilado (PEG-Intron), rIFN-alfa 2a pegilado (Pegasys), rIFN-alfa 2b (Intron A), rIFN-alfa 2a (Roferon-A), interferón alfa (MOR-22, OPC-18, Alfaferona, Alfanative, Multiferon, subalin), interferón alfacon-1 (Infergen), interferón alfa-nl (Wellferoh), interferón alfa-n3 (Alferon), interferón-beta (Avonex, DL-8234), interferón-omega (omega DUROS, Bio ed 510), albinterferón alfa-2b (Albuferon), IFN alfa XL, BLX-883 (Locteron), DA-3021, interferón alfa-2b glicosilado (AVI-005),· PEG-Infergen, interferón lambda PEGilado (PEGilado IL-29), y belerofon; 2) ribavirina y sus análogos, por ejemplo, ribavirina (Rebetol, Copegus), y taribavirina (Virami3); 3) inhibidores de proteasa HCV NS3, por ejemplo, boceprevir (SCH-503034 , SCH-7), telaprevir (VX-950), VX-813, TMC-435 (TMC435350), ABT-450, BI-201335, BI-1230, MK-7009, SCH-900518, VBY-376, VX-500, GS-9256, GS-9451, BMS-790052, BMS-605339, PHX-1766, AS-101, YH-5258, YH5530, YH5531, y ITMN-191 (R-7227); 4) inhibidores alfa-glucosidasa 1, por ejemplo, celgosivir (MX-3253), Miglitol, y UT-231B; 5) hepatoprotectores, por ejemplo, emericasan (IDN-6556), ME-3738, GS-9450 (LB-84451), silibilin, y MitoQ; 6) inhibidores de nucleósidos o nucleótidos de polimerasa HCV NS5B, por ejemplo, R1626, R7128 (R4048), IDX184, IDX-102, PSI-7851, BCX-4678, valopicitabina (NM-283), GS-6620 y MK-0608; 7) inhibidores de no nucleósidos de polimerasa HCV NS5B, por ejemplo, filibuvir (PF-868554), ABT-333, ABT-072, BI-207127, VCH-759, VCH-916, JTK-652, MK-3281, VBY-708, VCH- 222, A848837, ANA-598, GL60667, GL59728, A-63890, A-48773, A-48547, BC-2329, VCH-796 (nesbuvir), GSK625433, BILN-1941, XT1.-2125, y GS-9190; 8) inhibidores HCV NS5A, por ejemplo, AZD-2836 (A- 831), AZD-7295 (A-689), y BMS-790052; 9) agonistas TLR-7, por ejemplo, imiquimod, 852A, GS- 9524, ANA-773, ANA-975, AZD-8848 (DSP-3025), PF-04878691, y SM-360320; 10) inhibidores de ciclofillina, por ejemplo, DEBIO- 025, SCY-635, y NIM811; 11) inhibidores HCV IRES, por ejemplo, MCI-067; 12) potenciadores farmacocinéticos, por ejemplo, BAS- 100, SPI-452, PF-4194477, TMC-41629, GS-9350, GS-9585, y roxitromicina; 13) otros fármacos para tratar HCV, por ejemplo, alfa 1 timosina (Zadaxin), nitazoxanida (Alinea, NTZ), BIVN-401 (virostat), PYN-17 (altirex), KPE02003002, actilon (CPG- 10101), GS-9525 , KRN-7000, civacir, GI-5005, XTL-6865, BIT225, PTX-111, ITX2865, TT-033Í, ANA 971, NOc-205, tarvacin, EHC-18, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065, BMS-650032, BMS-791325, Bavituximab, MDX-1106 (ONO-4538), Oglufanide, FK-788, y VX-497 (merimepodib); 14) antagonistas de decarboxilasa de mevalonato, por ejemplo, estatinas, inhibidores de sintasa HMGCoA (por ejemplo, himeglusin), inhibidores de síntesis de escualeno (por ejemplo, ácido zaragócico); 15) antagonistas del receptor de angiotensina II, por ejemplo, losartan, irbesartan, olmesartan, candesartan, valsarían, telmisartan, eprosartan; 16) inhibidores de la enzima que convierte la angiotensina, por ejemplo, captopril, zofenopril, enalapril, ramipril, quinapril, perindopril, lisinopril, benazepril, fosinopril; 17) otros agentes anti-fibróticos, por ejemplo, amilorida; y 18) antagonistas de endotelina, por ejemplo bosentan y ambrisentan.
En aún otra modalidad, la presente solicitud proporciona una terapia de combinación que comprende una composición de la presente invención y una segunda composición farmacéutica que comprende al menos un agente terapéutico adicional seleccionado del grupo que consiste de compuestos que inhiben la proteasa de HIV, inhibidores de no nucleósidos de HIV de transcriptasa inversa, inhibidores de nucleósidos de HIV de transcriptasa inversa, inhibidores de nucleótidos de HIV de transcriptasa inversa, inhibidores de integrasa de HIV, inhibidores gp41, inhibidores CXCR4, inhibidores gpl20, inhibidores CCR5, interferones, análogos de ribavirina, inhibidores de proteasa NS3, inhibidores NS5a, inhibidores de alfa-glucosidasa 1, inhibidores de ciclofilina, hepatoprotectores, inhibidores de no nucleósidos de HCV, y otros fármacos para tratar HCV, y combinaciones de los mismos.
Más específicamente, uno o más compuestos de la presente invención se pueden combinar con uno o más compuestos seleccionados del grupo que consiste de 1) inhibidores de proteasa de HIV, por ejemplo, amprenavir, atazanavir, fosamprenavir, indinavir, lopinavir, ritonavir, lopinavir + ritonavir, nelfinavir, saquinavir, tipranavir, brecanavir, darunavir, TMC-126, TMC-114, mozenavir (DMP-450), JE-2147 (AG1776), AG1859, DG35, L-756423, RO0334649, KNI-272, DPC-681, DPC-684, y GW640385X, DG17, PPL-100, 2) un inhibidor de no nucleósidos de HIV de transcriptasa inversa, por ejemplo, capravirina, emivirina, delaviridina, efavirenz, nevirapina, (+) calanolida A, etravirina, GW5634, DPC-083, DPC-961, DPC-963, Mb-150, y TMC-120, TMC-278 (rilpivirina), efavirenz, BILR 355 BS, VRX 840773, UK-453,061, RDEA806, 3) un inhibidor de nucleósidos de HIV de transcriptasa inversa, por ejemplo, zidovudina, emtricitabina, didanosina, estavudina, zalcitabina, lamivudina, abacavir, amdoxovir, elvucitabina, alovudina, Mb-210, racivir (±-FTC), D-d4FC, emtricitabina, fosfazida, fozivudina tidoxil, fosalvudina tidoxil, apricitibina (AVX754), amdoxovir, KP-1461, abacavir + lamivudina, abacavir + lamivudina + zidovudina, zidovudina + lamivudina, 4) un inhibidor de nucleótidos de HIV de transcriptasa inversa, por ejemplo, tenofovir, tenofovir fumarato de disoproxilo f emtricitabina, tenofovir disoproxil fumarato + emtricitabina + efavirenz, y adefovir, 5) un inhibidor de integrasa de HIV, por ejemplo, curcumina, derivados de curcumina, ácido chicórico, derivados de ácido chicórico, ácido 3,5-dicafeoilquínico, derivados de ácido 3,5-dicafeoilquinico, ácido aurintricarboxilico, derivados de ácido aurintricarboxilico, éster de fenetilo del ácido cafeico, derivados de éster de fenetilo del ácido cafeico, tirfostina, derivados de tirfostina, quercetina, derivados de quercetina, S-1360, zintevir (AR-177), L-870812, y L-870810, MK-0518 (raltegravir), BMS-707035, MK-2048, BA-011, BMS-538158, GSK364735C, 6) un inhibidor gp41, por ejemplo , enfuvirtida, sifuvirtide, FB006M, TRI-1144, SPC3, DES6, Locus gp41, CovX, y REP 9, 7) un inhibidor CXCR4, por ejemplo , AMD-070, 8) un inhibidor de entrada, por ejemplo, SP01A, TNX-355, 9) un inhibidor gpl20, por ejemplo, BMS-488043 y BlockAide/CR, 10) un G6PD y inhibidor de NADH-oxidasa, por ejemplo, ímmunítín, 10) un inhibidor CCR5, por ejemplo, aplaviroc, vicriviroc, INCB9471, PRO-140, INCB15050, PF-232798, CCR5mAb004, y maraviroc, 11) un interferón, por ejemplo, rIFN-alfa 2b pegilado, rIFN-alfa 2a pegilado, rlFN-alfa 2b, IFN alfa-2b XL, rIFN-alfa 2a, IFN alfa de consenso, infergen, rebif, locteron, AVI-005, PEG-infergen, IFN-beta pegilado, interferón alfa oral, feron, reaferon, intermax alfa, r-IFN-beta, infergen + actimmune, IFN-o ega con DUROS, y albuferon, 12) análogos de ribavirina, por ejemplo, rebetol, copegus, VX-497, y viramidina (taribavirina) 13) inhibidores NS5a, por ejemplo, A-831, A-689 y BMS-790052, 14) inhibidores de polimerasa NS5b, por ejemplo, NM-283, valopicitabina, R1626, PSI-6130 (R1656), IDX184, PSI-7851, HCc-796, BILB 1941, MK-0608, NM-107, R7128, VCH-759, PF-868554, GSK625433, y XTL-2125, 15) inhibidores de proteasa NS3, por ejemplo, SCH-503034 (SCH-7), VX-950 (Telaprevir), ITMN-191, y BILN-2065, 16) inhibidores de alfa-glucosidasa 1, por ejemplo, MX-3253 (celgosivir) y UT-231B, 17) hepatoprotectores, por ejemplo, IDN-6556, ME 3738, MitoQ, y LB-84451, 18) inhibidores de no nucleósidos de HCV, por ejemplo, derivados de benzimidazol, derivados de benzo-1,2,4-tiadiazina, y derivados de fenilalanina, 19) otros fármacos para tratar HCV, por ejemplo, zadaxin, nitazoxanida (alinea), BIVN-401 (virostat), DEBIO-025, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065, bavituximab, oglufanide, PYN-17, KPE02003002, actilon (CPG- 10101), KRN-7000, civacir, GI-5005, ANA-975, XTL-6865, ANA 971, NOc-205, tarvacin, EHC-18, y NIM811, 19) potenciadores farmacocinéticos, por ejemplo, BAS-100, SPI-452, PF-4194477, TMC-41629, GS-9350, GS-9585, y roxitromicina, 20) inhibidores ARNsa H, por ejemplo, ODN-93 y ODN-112, 21) otros agentes anti-HIV, por ejemplo, VGc-1, PA-457 (bevirimat), ampligen, HRG214, citolin, polimun, VGX-410, KD247, AMZ 0026, CYT 99007, A-221 HIV, BAY 50-4798, MDX010 (iplimumab), PBS119, ALG889, y PA-1050040.
En un aspecto especifico de esta modalidad, el agente terapéutico adicional se selecciona de ribavirina, telaprevir, boceprevir y sofosbuvir (GS-7977 (antes PSI-7977)).
Una terapia de combinación descrita en la presente se puede administrar como un régimen simultáneo o secuencial. Cuando se administra secuencialmente, la combinación se puede administrar en dos o más administraciones.
La co-administración de un compuesto de la invención con uno o más de otros agentes activos generalmente se refiere a administración simultánea o secuencial de un compuesto de la invención y uno o más de otros agentes activos, tal que las cantidades terapéuticamente efectivas del compuesto de la invención y uno o más de otros agentes activos ambos se presentan en el cuerpo del paciente.
Método para tratar la infección viral La presente solicitud proporciona un método para tratar una infección viral Flaviviridae que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto descrito en la presente o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautó ero, éster o profármaco de los mismos, a un sujeto humano que necesita del mismo.
También se proporciona un método para tratar una infección viral Coronaviridae que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto descrito en la presente o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos, a un sujeto humano que necesita del mismo.
En una modalidad, el método para inhibir o tratar una enfermedad comprende administrar a un animal una composición que comprende una cantidad efectiva de uno o más compuestos de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos y un portador farmacéuticamente aceptable. La composición a administrarse puede además contener un agente terapéutico secundario como se describe arriba.
Un método de la presente solicitud es particularmente adecuado para uso con humanos, pero se puede usar con otros animales, particularmente mamíferos, tal como, por ejemplo, primates no humanos, animales de compañía, animales de granja, animales de laboratorio, y animales salvajes y de zoológico.
Un método de la presente solicitud es particularmente útil para tratar enfermedades causadas directamente o indirectamente por virus Flaviviridae ya que los compuestos de la presente invención tienen actividad inhibidora contra aquellos virus. En algunas modalidades, por lo tanto, un método de la presente invención se usa en inhibir o tratar enfermedades causadas por un virus de la Hepatitis C. En algunas modalidades, por lo tanto, un método de la presente invención se usa en inhibir o tratar enfermedades causadas por un virus de la Hepatitis B. En un aspecto, tal método se aplica a un paciente con una enfermedad causada por la infección viral tal como fiebre de dengue, fiebre amarilla, hepatitis C, encefalitis Japanesa, enfermedad de la selva Kyasanur, encefalitis del valle de Murray, encefalitis de San Luis, encefalitis transmitida por garrapatas o encefalitis del Nilo Occidental.
En algunas modalidades, una respuesta virológica sostenida se alcanza en alrededor de 12 semanas, en alrededor de 10 semanas, en alrededor de 8 semanas, en alrededor de 6 semanas, o en alrededor de 4 semanas, o en alrededor de 4 meses, o en alrededor de 5 meses, o en alrededor de 6 meses, o en alrededor de 1 año, o en alrededor de 2 años.
Un método de la presente solicitud también es particularmente útil para tratar enfermedades causadas directamente o indirectamente por virus de Coronaviridae ya que los compuestos de la presente invención tienen actividad inhibidora contra aquellos virus. En algunas modalidades, por lo tanto, un método de la presente invención se usa en inhibir o tratar enfermedades causadas por un coronavirus SARS. En un aspecto, tal método se aplica a un paciente con una enfermedad causada por la infección viral tal como síndrome respiratorio agudo severo (SARS), cáncer, inflamación, obesidad, síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), o cirrosis.
En otro aspecto, los compuestos descritos en la presente se pueden usar para tratar cáncer. En aún otro aspecto, los compuestos descritos en la presente se pueden usar por in unomodulación. En algunas modalidades, por lo tanto, un método de la presente invención comprende ajustar una respuesta inmune a un nivel deseado, como en inmunopotenciación, inmunodepresión, o inducción de tolerancia inmunogénica.
En algunas modalidades, el compuesto se administra por alrededor de 12 semanas. En modalidades adicionales, el compuesto se administra por .alrededor de 12 semanas o menos, por alrededor de 10 semanas o menos, por alrededor de 8 semanas o menos, por alrededor de 6 semanas o menos, o por alrededor de 4 semanas o menos. El compuesto se puede administrar una vez al día, dos veces al día, una vez cada dos días, dos veces por semana, tres veces por semana, cuatro veces por semana, o cinco veces por semana.
En otro aspecto, los compuestos descritos en la presente se pueden usar para tratar cáncer. En aún otro aspecto, los compuestos descritos en la presente se pueden usar por inmunomodulación. En algunas modalidades, por lo tanto, un método de la presente invención comprende ajustar una respuesta inmune a un nivel deseado, como en inmunopotenciación, inmunodepresión, o inducción de tolerancia inmunogénica.
EJEMPLOS Los siguientes ejemplos son meramente ilustrativos, y no limitan esta descripción de ninguna manera.
Lista de Abreviaturas y Siglas Abreviatura Significado °C Grados Celsius Ac Acetilo app Aparente Aq Acuoso Boc tert-Butoxicarbonilo Br Amplio Bu Butilo cat Catalítico CBS Corcy Bakshi Shibata CDMT 2-cloro-4 ,6-dimetoxi-l,3,5-triazina cm Centímetro COMU hexafluorofosfato de (l-Ciano-2-etoxi-2 oxoetilidenaminooxi)dimetilamino- orfolino-carbenio CP/Cp Ciclopentilo CPME Ciclopentil metil éter Cy/cHex Ciclohexilo d Doblete DBU 1,8-Diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno DCC N,N '-diciclohexilcarbodiimida DCE Dicloroetano DCM Diclorometano dd Doblete de dobletes ddd Doblete de doblete de doblete ddt Doblete de doblete de triplete DIAD azodicarboxilato de Diisopropilo DIPEA N,N-Diisopropiletilamina DMAP 4-Dimetilaminopiridina DME 1,2-dimetoxietano D F Dimetilformamida DMSO Dimetilsulfoxida dppf 1, V -bis(difenilfosfino)ferroceno dq Doblete de cuarteto dt Doblete de triplete dtd Doblete de triplete de doblete EDC l-Etil-3-(3- dimetilaminopropil )carbodiimida Equiv/eq Equivalentes Et Etilo g Gramos gen. Generación HATU hexafluorofosfato de (Dietilamino) -N,N dimetil (3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin- 3-iloxi)metaniminio HBTU hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol 1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio HMDS Hexametildisilazano HMPA Hexa etilfosforamida HOBT Hidroxibenzotriazol HPLC Cromatograf ia liquida de alta resolución hrs/h Horas Hz Hercios IC50 La concentración inhibidora máxima media Im Imidazol 1-Pr/iPr Isopropilo J Constante de acoplamiento Kg Kilogramo LCMS Cromatografía liquida-espectrometría de masa LDA Diisopropilamida de litio M Molar m Multiplete m/z relación de masa a carga M+ Pico de masa Me Metilo mg Miligramo MHz Megahertz min Minuto mL Mililitro mM Millimolar mm Milímetro mmol Milimol ol Mol Ms Metansulfonilo MW Microondas N Normal nM Nanomolar NMM W-metilmorfolina RMN Resonancia magnética nuclear nPrOH n-propanol o-Tol o-Tolilo Ph Fenilo pTSA Ácido p-Toluensulfónico Py/pyr Piridina PyAOP hexaf luorofosfato de 7-azabenzotriazol-l iloxi)tripirrolidinofosfonio PyBop hexaf luorofosfato de benzotriazol-1-il oxitripirrolidinofosfonio q Cuarteto Fr Factor de retención TA/ta/t.a. Temperatura ambiente s Singlete sat. Saturado t Triplete TBAF fluoruro de Tetra-n-butilammonio TBDMS/TBS tert-Butildimetilsililo TBDPS tert-Butildifenilsililo t-Bu tert-butilo td Triplete de dobletes TEA Trietilamina Tf Trifluoro etansulfonilo TFA ácido trifluoroacético THF Tetrahidrofurano TLC Cromatografía de capa delgada TMEDA Tetrametiletilenodiamina TMS Tri etilsililo Tr/tr Tiempo de retención Ts Tosilo tt Triplete de triplete UV Ultravioleta p. peso d Desplazamiento químico yL Microlitro mM Micromolar mmol Mícromolar Ejemplo 1: (E)-(2R,5S,11S,14S,17R,18R)-18-Hidroxi-14- isopropil-2,11,17-trimetil-3,9,12,15,28-pentaaza- triciclo[21.3.1.1*5,9*]octacosa-1(26),21,23(27),24-tetraeno- 4,10,13,16-tetraona Compuesto la Una solución de 1- ((IR,5S)-10,lO-dimetil-3,3-dioxo- 31ambda*6*-tia-4-aza-triciclo[5.2.1.0*1,5*]dec-4-il)-propan 1-ona (3.95 g, 14.55 mmol) en tolueno (50 mL) se preparó, luego evaporó hasta secarse. Este proceso se repitió y el sólido blanco resultante se disolvió en diclorometano anhidro (16 mL). Una cantidad pequeña de hidruro de calcio se agregó antes de agregar trífluorometansulfonato de tert-butildimetilsililo (3.83 mL, 14.5 mmol) y trietilamina anhidra (2.33 mL, 16.7 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA ("TA") bajo una atmósfera de nitrógeno por 15 horas ("h"). La solución resultante se evaporó para dar una pasta espesa, que se re-disolvió en diclorometano anhidro (15 mL) y agregó gota a gota a una solución agitada de 4-pentenal (2.69 g, 32.0 mmol) y tetracloruro de titanio (1 M en diclorometano, 32 mL, 32 mmol) en diclorometano anhidro (20 L) a -78°C, bajo una atmósfera de nitrógeno. La reacción se agitó a -78°C por 30 minutos ("min") antes de diluir con solución de cloruro de amonio acuoso saturado (100 mL). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 50 mL). El extracto combinado se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó para dar una goma café. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 para dar el compuesto del título (3.09 g, 60%) como una goma incolora. o I Compuesto Ib Una solución de la (12.0 g, 0.034 mol) en diclorometano anhidro (520 mL) se enfrió a 0°C, antes de agregar piridina (5.5 mL, 0.068 mol) luego trifluorometansulfonato de tert-butildimetilsililo (9 mL, 0.039 mol). La mezcla de reacción se agitó a 0 ° por 15 min luego se permitió enfriar a TA y se agitó por 1.5 h adicional. La mezcla de reacción se lavó cón bicarbonato de sodio saturado (400 mL). El lavado acuoso se extrajo nuevamente con diclorometano (200 mL). Las capas orgánicas se combinaron y lavaron con salmuera diluida (200 mL) y ácido clorhídrico 2 M (200 mL). La solución se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó para dar el producto del título (15.29 g, 96%) como un sólido blanco.
Compuesto le Una solución de Ib (15.29 g, 0.0325 mol) en tetrahidrofurano (300 mL) se preparó y una solución acuosa 2 M de hidróxido de litio (120 mL) se agregó. La mezcla agitada se calentó a 60°C por 15 h. La reacción se diluyó con ácido clorhídrico 2 M (250 mL). Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 200 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y evaporaron para dar un sólido de color crema (16.7 g). El sólido se purificó por cromatografía en gel de sílice usando 3:7 acetato de etilo/iso-hexanos para dar el producto del título (7.18 g, 81%) como una goma incolora.
- II Compuesto Id Una solución de ácido (S)-2-tert-butoxicarbonilamino-propiónico (3.28 g, 17.32 mmol) en acetonitrilo (160 mL) se enfrió a 0°C antes de la adición de AJ,N-diisopropiletilamina (12 mL, 69.3 mmol) luego hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (6.57 g, 17.32 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 20 min y una solución de sal del ácido trifluoroacético del áster 2,2,2-tricloroetilo del ácido (S)-hexahidropiridazina-3-carboxílico (preparación descrita en Angew. Chem . Int . Ed. Engl . 1999, 38, 2443, 6.49 g, 17.3 mmol) en acetonitrilo (80 mL) se agregó. La reacción se permitió entibiar a TA y se agitó por 15 h. La mezcla de reacción se evaporó luego se re-disolvió en acetato de etilo (150 mL). La solución se lavó con salmuera (150 mL). La salmuera se extrajo nuevamente con acetato de etilo (50 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, filtraron y evaporaron para dar un aceite oscuro. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 1:1 para dar el compuesto del título (6.88 g, 92%) como una goma incolora. l .
. , - Compuesto le Una solución de Id (6.88 g, 15.9 mol) en diclorometano (200 mL) se preparó y ácido trifluoroacético (50 mL) se agregó. La mezcla de reacción se agitó a TA por 2 h. TLC mostró la reacción a completarse. La solución se evaporó para dar un aceite café. Esto se destiló azeotrópicamente con tolueno (50 L) y el aceite resultante se secó bajo vacío para dar sal del ácido trifluoroacético del éster 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-((S)-2-amino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (7.8 g) como una goma café. Una solución de éster de tert-butilo del ácido ((S)-1- carbamoil-2-metilpropil)-carbámico en acetonitrilo (300 mL) se enfrió a 0°C antes de agregar I\7,I\J-diisopropiletilamina (13.8 mL, 79.7 mmol) y hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (6.33 g, 16.7 mmol). La reacción se agitó a 0°C por 15 min antes de agregar una solución de la sal del ácido trifluoroacético del éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-((S)-2-amino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (ca. 15.9 mmol) en acetonitrilo (85 mL). La reacción se agitó a 0°C por 20 min adicionales luego se permitió enfriar a TA y se agitó por 15 h. La mezcla de reacción se evaporó luego se re-disolvió en acetato de etilo (250 mL). La solución se lavó con agua (150 mL) luego se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó para dar un aceite color rojo. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 7:3 luego iso-hexanos/acetato de etilo 1:1 para dar el compuesto del título (8.2 g, 92%) como un sólido amorfo color naranja pálido.
I ¡ Compuesto lf Una solución de le (10.0 g, 18.5 mmol) en diclorometano anhidro (200 mL) se preparó y trifluorometansulfonato de trimetilsililo (5 mL, 27.75 mmol) se agregó. La mezcla de reacción se agitó a TD por 2 h, luego N,N-diisopropiletilamina (13.2 mL, 75.8 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se evaporó hasta secarse. El residuo se re-disolvió en acetonitrilo (200 mL) y una solución de ácido (2R,3R)-3-(tert-butil-dimetil-silaniloxi)-2-metil-hept-6-enoico (5.04 g, 18.5 mmol) en acetonitrilo (60 mL) se agregó seguido por l-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (5.0 g, 26.4 mmol) y 1-hidroxibenzotriazol (4.4 g, 26.4 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA por 15 h. Esto se evaporó para dar un aceite color amarillo espeso. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice usando 1:1 acetato de etilo / iso-hexanos luego acetato de etilo / iso-hexanos 3:2 para dar el producto del título (8.75 g, 69%) como un sólido blanco.
, Compuesto lg Una solución de (R)-bromo-a-metilbencilamina (1.023 g, 5.112 mmol) en diclorometano (20 mL) se trató posteriormente con trietilamina (720 m??, 5.112 mmol) y dicarbonoate de di- tert-butilo (1.784 g, 8.179 mmol). Después de agitar durante la noche a TA, los volátiles se removieron in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/éter de dietilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (1.552 g, 100%) como un sólido blanco.
. Compuesto lh Una solución de lg (10.26 g, 0.0342 mol.) y tributil(vinil)estaño (32.5 g, 30 mL, 0.103 mol.) en tolueno (175 mL) se purgó con nitrógeno por 30 min antes de la adición de dicloruro de bis (trifenilfosfina)paladio (II) (2.38 g, 0.0034 mol.). La mezcla agitada se calentó a 60°C por 16 h antes de enfriar a TA. La mezcla de reacción se filtró a través de hiflo-supercel luego se evaporó para dar un aceite cólor oscuro. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 19:1 para dar el compuesto del título (6.95 g, 82%) como un aceite color amarillo.
Compuesto li Una solución de lh (6.95 g, 28.1 mmol.) en 1,4-dioxano (30 mL) se preparó y una solución de cloruro de hidrógeno en 1,4 dioxano (4 M, 60 mL) se agregó. La mezcla de reacción se agitó a TA por 2 h luego se evaporó hasta secarse. El sólido resultante se re-disolvió en tolueno y evaporó. El sólido se trituró con éter de dietilo, que se eliminó al decantar. El sólido luego se secó bajo vacío para dar el compuesto del título (4.96 g, 96%) como un sólido color blanco apagado.
, Compuesto lj Una solución de lf (8.75 g 12.75 mmol) en tetrahidrofurano (350 mL) se preparó y polvo zinc (8.44 g,-127.5 mmol) se agregó seguido por una solución acuosa 1 M de acetato de amonio (90 mL, 90 mmol). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente por 16 h luego se filtró a través de hiflo-supercel. La solución se enfrió sobre un baño de hielo antes de la adición de solución de cloruro de amonio acuoso (350 mL). Esto se permitió para re-enfriar antes de acidificar a pH 1 por la adición de ácido clorhídrico 2 M. Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 250 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio se filtraron y evaporaron para dar un sólido color blanco. El sólido se destiló azeotrópicamente con tolueno (3 x 200 mL) luego se secó bajo vacio para dar un sólido color blanco (6.16 g), que se disolvió en acetonitrilo (400 mL) antes de agregar clorohidrato de (R)-1-(3-vinil-fenil)-etilamina (2.34 g, 12.75 mmol) seguido por AAN-diisopropiletilamina (8.9 mL, 51 m ol) y 2- (IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (6.8 g, 17.85 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA por 16 h y luego evaporó para dar una goma café. La goma se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo luego acetona/acetato de etilo 1:4 para dar el compuesto del título (5.51 g, 76%) como un sólido de color crema.
I Compuesto lk Una solución de lj (0.50 g, 0.88 mmol) en diclorometano anhidro (20 mL) se enfrió sobre un baño de hielo, antes de agregar piridina (92 mL, 1.14 mmol) y trifluoro etansulfonato de tert-butildimetilsililo (242 mL, 1.05 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 15 min, luego se permitió enfriar a TA y se agitó por 1 hora. La mezcla de reacción se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo para dar el producto del título (477 mg, 80%) como un sólido blanco.
I Compuesto 11 Una solución de lk (477 mg, 0.7 m ol) en 1,2-dicloroetano (250 mL) se preparó y Hoveyda-Grubbs catalizador de 2da generación (43 mg, 0.07 mmol) se agregó. La mezcla agitada de reacción se calentó a 80°C por 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió a TA antes de agregar gel de sílice. La mezcla se agitó por 10 min luego evaporó y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo para dar el producto del título (198 mg, 43%) como un sólido blanco.
¡ Compuesto 1 Una solución de 11 (198 mg, 0.3 en tetrahidrofurano (20 mL) se enfrió sobre un baño de hielo antes de agregar a solución 1 M de fluoruro de tetrabutilamonio en tetrahidrofurano (1.5 mL, 1.5 mmol). La reacción se permitió entibiar a T? y se agitó por 1 hora. La mezcla de reacción se trató con solución de bicarbonato de sodio acuoso saturado (20 mL) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 mL). El extracto se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando 1:9 acetona / acetato de etilo para dar el producto del título (150 mg, 92%) como un sólido blanco. XH RMN (300 MHz, d6-DMSO) d 0.83 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.85 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.12-1.21 (m, 4H), 1.28 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.36 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.40-1.90 (m, 7H), 1.92-2.08 (m, 1H), 2.19-2.34 (m, 2H), 2.67-2.80 (m, 1H), 3.56-3.65 (m, 1H), 3.99-4.12 (m, 1H), 4.22 (br d, J = 12.2 Hz, 1H), 4.75 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.87-4.99 (m, 1H), 5.12-5.24 (m, 1H), 5.40 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 6.14-6.33 (m, 2H), 7.10-7.35 (m, 5H), 7.88 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.55 (d, J = 8.3 Hz, 1H). LCMS (m/z) 542.3 [M+H], Tr = 1.87 min.
EJEMPLO 2: (E)-(2R,5S,11S,14S,17R,18R)-14-Isopropil-2,11,17- trimetil-18-(2,2,2-trifluoro-etoxi)-3,9,12,15,28-pentaaza- triciclo[21.3.1.1*5,9*]octacosa-1(26),21,23(27),24-tetraeno- 4,10,13,16-tetraona , Compuesto 2 Una solución de hexametildisilazano (235 mL, 1.13 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (4 mL) se enfrió a -10°C antes de agregar una solución 2.5 M de n-butillitio (380 pL, 0.94 m ol). La mezcla agitada se entibió a 0°C por 10 min antes de enfriar a -78°C. Una solución del Compuesto 1 (102 mg, 0.188 mmol) en dimetilformamida anhidra (1.5 mL) y tetrahidrofurano anhidro (1.5 L) se agregó gota a gota durante 2 min seguido por la adición de trifluorometansulfonato de 2,2,2-trifluoroetilo (135 pL, 0.94 mmol). La mezcla de reacción se agitó a -78°C bajo una atmósfera de nitrógeno luego se permitió entibiar gradualmente a TA. La mezcla de reacción se apagó con la adición de una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (15 mL). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (2 x 15 mL). El extracto se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando 1:9 acetona/acetato de etilo para dar una goma incolora (65 mg). La goma se purificó además por cromatografía de fase inversa, usando un cartucho C18 10 g eluido con acetonitrilo / agua 2:3. Las fracciones parcialmente evaporadas se extrajeron con acetato de etilo (2 x 15 mL). El extracto se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó para dar el producto del título (17 mg, 30%) como un sólido blanco.XH RMN (300 MHz, CDCl3) 0.92 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.96 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.32 (d, J - 7.1 Hz, 3H), 1.39 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.50 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.74-1.85 (, 1H), 1.86-2.08 (m, 3H), 2.10-2.40 (m, 3H), 2.57-2.78 (, 2H), 3.19-3.31 (m, 1H), 3.49 (app t, J = 6.7 Hz, 1H), 3.58- 3.79 (m, 4H), 3.81-4.18 (m, 2H), 4.49 ( br d, J = 12.3 Hz, 1H), 5.03-5.17 (m, 1H), 5.32-5.47 (m, 1H), 6.14-6.30 (m, 1H), 6.37-6.72 (, 4H), 7.06-7.30 (m, 4H). LCMS (m/z) 624.3 [M+H], Tr = 2.57 min.
EJEMPLO 3: (2R,5S,11S,14S,17R,18R)-18-Hidroxi-14-isopropil 2,11,17-trimetil-3,9,12,15,28-pentaaza- triciclo [21.3.1.1*5,9*]octacosa-1(26),23(27),24-trieno- 4,10,13,16-tetraona I Compuesto 3 Una solución del Compuesto 1 (100 mg, 0.184 mmol) en metanol (5 mL) se preparó y paladio sobre carbono 10% (5 mg) se agregó. La mezcla agitada se colocó bajo una atmósfera de hidrógeno por 1.5 h. La mezcla de reacción se filtró a través de hiflo-supercel luego a través de un filtro 0.2 mm antes de la evaporación para dar el compuesto del titulo (95 mg, 95%) como un sólido blanco.1H RMN (300 MHz, CDCI3) 0.93 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 0.96 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.32 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.37-2.16 (m, 12H), 1.54 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 2.34-2.46 (m, 1H), 2.52-2.75 (m, 3H), 3.16-3.27 (m, 1H), 3.43-3.62 (, 3H), 3.74 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 3.98-4.06 (, 1H), 4.50 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 5.11-5.36 (m, 2H), 6.39-6.50 (m, 2H), 7.70 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.06-7.28 (m, 4H). LCMS (m/z) 544.3 [M+H], Tr = 1.91 min.
EJEMPLO 4 NaH Compuesto 4a A una suspensión de hidruro de sodio (60% en aceite mineral, 783 mg, 19.6 mmol) en tetrahidrofurano seco a 0°C, bajo nitrógeno se le agregó gota a gota de fosfonoacetato de trietilo (3.38 mL, 19.6 mmol). La suspensión blanca se agitó por 1 h donde se volvió una solución, luego 2,2-dimetil-4-pentenal (2.42 mL, 17.8 mmol) se agregó lentamente y la solución color verde/amarillo resultante se agitó a 0°C y se permitió entibiar a TA. Después de 72 h etanol (1 mL) se agregó a la solución, seguido por agua (100 mL) y los orgánicos se extrajeron con éter de dietilo (2 x 200 L). Los orgánicos combinados se lavaron con agua (200 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar un residuo crudo. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice, usando iso-hexanos (144 mL), luego iso-hexanos/éter de dietilo 50:50 (72 mL), luego éter de dietilo (48 L) para dar el compuesto del título (3.20 g, 99%) co o un aceite.
Compuesto 4b A 4a (3.20 g, 17.5 mmol) en metanol seco a TA, bajo nitrógeno se le agregó lentamente polvo de magnesio (128 g, 52.7 mmol) mientras se monitorea la elevación de la temperatura. Después de que la adición se completo la mezcla se agitó a TA durante la noche. Después de este tiempo, a la reacción se le agregó polvo de magnesio adicional (852 mg, 35.1 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por 2 h. La mezcla se neutralizó de pH 10 hasta pH 7 con ácido clorhídrico 2 M y luego se concentró in vacuo para dar un residuo. El residuo se suspendió en acetato de etilo (300 mL). y agua (500 mL) y las capas se separaron. La fase acuosa luego se re-extrajo con acetato de etilo (200 mL) y los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar el compuesto del título (1.96 g, 61%) como un aceite incoloro. i Compuesto 4c A 4b (2.02 g, 11.0 mmol) en una mezcla de tetrahidrofurano (35 L), metanol (9 mL) y agua (9 mL) a TA, se le agregó litio hídróxído monohidrato (1.38 g, 32.9 mmol) y la mezcla se agitó a TA por 1 h. Después de este tiempo litio hidróxido monohidrato adicional (460 mg, 11.0 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó por 1 h. Después de este tiempo más litio hidróxido monohidrato (460 mg, 11.0 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó por 30 min. La mezcla de reacción luego se concentró in vacuo y el residuo se diluyó con agua (200 mL) y los orgánicos se extrajeron con éter de dietilo (3 x 50 mL). La fase acuosa se acidificó de pH 14 hasta pH 1 con ácido clorhídrico 2 M y los orgánicos se extrajeron con acetato de etilo (3 x 50 mL). Los orgánicos de acetato de etilo combinados luego se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar el producto deseado (1.03 g, 60%) como un aceite.
, , Compuesto 4d Una solución de le (1.06 g, 2.00 mmol) en diclorometano (10 mL) se enfrió en un baño de hielo-agua bajo nitrógeno. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (0.591 mL, 4.00 mmol) se agregó gota a gota, y la solución resultante se agitó por 1.5 h. La reacción se apagó con N,N-diisopropiletilamina (1.4 mL, 8.00 mmol) y la mezcla de reacción se concentró in vacuo para dar éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico un sólido color blanco que se usó sin purificación adicional. A éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)—1—[(S)—2—((S)—2— amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3- carboxílico generado en la etapa previa se le agregó una solución de ácido 4,4-dimetil-hept-6-enoico (343 mg, 2.20 mmol) en acetonitrilo (70 mL). A esta mezcla se le agregó AíW-diisopropiletilamina (1.4 mL, 8.03 mmol) y la reacción se enfrió en un baño de hielo-agua antes de la adición de 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio hexafluorofosfato metanaminio (1.07 g, 2.80 mmol). La solución color amarillo se agitó luego y se permitió entibiar a TA durante la noche. La mezcla de reacción se apagó con ácido clorhídrico 2 M (40 mL) y concentración in vacuo. Al residuo se le agregó agua (200 mL) y los orgánicos se extrajeron con acetato de etilo (3 x 150 mL). Los orgánicos combinados se lavaron luego con salmuera (100 mL) y carbonato ácido de sodio (200 mL). Los orgánicos luego se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar un aceite amarillo crudo (2.27 g). Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 90:10 (300 mL) luego iso-hexanos/acetona 50:50 (300 mL) luego iso-hexanos/acetona 0:100 para dar el compuesto del título (1.10 g, 97%) como un aceite incoloro.
, Compuesto 4e Una solución de 4d (1.10 g, 1.94 mmol) en tetrahidrofurano (40 mL) se preparó y polvo de zinc (2.79 g, 42.6 mmol) se agregó seguido por una solución de acetato de amonio (2.24 g, 29.0 mmol) en agua (10 mL). La mezcla de reacción se agitó a TA por 24 h. El sulfato ácido de potasio acuoso saturado (pH 2, 30 mL) y acetato de etilo (50 mL) se agregaron y la suspensión se filtró a través de hiflo-supercel lavando completamente con acetato de etilo. Las capas se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (250 mL), se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y evaporaron para dar una goma incolora. El residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (3 x 100 mL) para dar el compuesto del titulo (816 mg, 96%) como un sólido blanco.
, Compuesto 4f 4e (439 mg, 1.00 mmol) se suspendió en acetonitrilo (35 mL) y ·clorohidrato de (R)-1-(3-vinil-fenil)-etilamina (202 mg, 1.10 rranol) se agregó seguido por W,Z\J-diisopropiletilamina (700 ml., 5.00 mmol) y la mezcla se enfrió en un baño de hielo-agua antes de la adición de 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio hexafluorofosfato metanaminio (532 mg, 1.40 mmol). La mezcla de reacción se agitó y se permitió entibiar a TA durante 72 h. A la mezcla de reacción se le agregó ácido clorhídrico 2 M (20 mL) y la mezcla se concentró in vacuo para dar un residuo. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 mL) y las capas de acetato de etilo combinadas se lavaron con salmuera seguido por carbonato ácido de sodio (100 mL) luego se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró in vacuo para dar un residuo crudo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 50:50 luego acetato de etilo puro para dar el compuesto del título (402 mg, 71%).
I compuesto 4 A una solución de 4f (402 mg, 0.71 mmol) en 1,2- dicloroetano (210 mL) se le agregó catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (45 mg, 0.07 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 80°C por 1 h. Después de este tiempo la mezcla se permitió enfriar a TA y se concentró in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo a acetato de etilo/acetona 75:25. El producto impuro (240 mg) se colectó el cual se purificó además por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo. Después de la repurificación, el producto (43 mg) se colectó conteniendo menores impurezas. Las impurezas se removieron por medio de trituración de éter de dietilo para dar el compuesto del título (30 mg, 8%) como un sólido blanco. XH RMN (300 MHz, CD3OD) 0.89 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.96 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 1.35 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.50 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.59-1.83 (m, 3H), 1.85-2.00 (m, 3H), 2.09 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 2.15-2.25 (ra, 1H), 2.31-2.44 (, 1H), 2.78 (td, J = 2.7, 12.7 Hz, 1H), 3.40-3.72 (m, 2H), 4.05-4.17 (m, 1H), 4.34 (br d, J = 13.2 Hz, 1H), 5.05 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 5.35 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 6.19-6.32 (m, 1H), 6.37 (d, J = 15.8 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.21-7.29 (m, 2H), 7.37 (d, J = 7.8 Hz, 1H).
LCMS (m/z) 540.3 [M+H], Tr = 2.41 min.
EJEMPLO 5 PdCI2(PPh3)2 Compuesto 5a Una solución de 6-bromo-3-cloro-isoquinolina (8.0 g, 33 mmol) y tributil-(1-etoxivinil)-estaño (14.88 g, 14 mL, 41.2 mmol) en tolueno (100 mL) se desgasificó con nitrógeno por 30 min. dicloruro de Bis(trifenilfosfina)paladio(II) (1.16 g, 1.65 mmol, 5 mol%) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a 60°C por 20 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA, la mezcla se filtró y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de íso-hexanos/acetato de etilo 20:1 hasta 10:1 para proporcionar el compuesto del título (7.1 g, 92%) como un sólido color amarillo.
Compuesto 5b Una solución de 5a (7.1 g, 30 mmol) en 1,4-dioxano (60 mL) y ácido clorhídrico 2 M (30 mL) se agitó a TA por 30 min. La mayoría del solvente se evaporó y el residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y evaporaron. El residuo se trituró con éter 5% en iso-hexanos y el sólido resultante se colectó y se secó para proporcionar el compuesto del titulo (6.0 g, 97%) como un sólido blanco.
II Compuesto 5c Una solución de 5b (1.72 g, 8.3 mmol) en tetrahidrofurano (40 mL) se agitó bajo nitrógeno. El etóxido de titanio (IV) (3.8 g, 3.45 mL, 16.6 mmol, grado de teenología) se agregó seguido por (R)-(+)-2-metil propanosulfinimida (1.11 g, 9.2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 60°C bajo nitrógeno por 18 h. La (R)-(+)-2-metil-propanosulfinimida adicional (190 mg, 1.67 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a 65°C por 2 h adicionales. La mezcla de reacción se enfrió a TA y acetato de etilo y salmuera se agregaron. La suspensión se filtró a través de Celite y la almohadilla filtro se lavó con acetato de etilo. La capa de acetato de etilo se separó, lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 7:3 hasta 3:7 para proporcionar el compuesto del título (2.2 g, 86%) como un sólido color amarillo.
[Ru(p-cimeno)Ch]2 Mallas Moleculares 4A, tert-butóxido de potasio, 2-propanol Compuesto 5d Una mezcla de (1S,2R)-(-)-cis-1-amino-2-indanol (60 mg, 0.4 mmol), dicloro (p-cimeno) rutenio(II) dímero (122 mg, 0.2 m ol) y mallas moleculares 4 Á en polvo (2 g) se suspendió en 2-propanol anhidro (9 mL) y se agitó bajo nitrógeno. La suspensión se calentó a 90°C por 20 min. La mezcla de reacción se enfrió a 40°C y una solución de 5c (1.23 g, 4 mmol) en 2-propanol (28 mL) se agregó seguido por una solución de tert-butóxido de potasio (122 mg, 1.1 mmol) en 2-propanol (10 mL). La mezcla de reacción se agitó por 2 h a 40°C y luego se permitió enfriar. La mezcla se vació directamente sobre un cartucho de gel de sílice y eluido con acetato de etilo para dar, después de la evaporación, el compuesto del título (1.19 g, 96%) como una goma café.
Dioxano Compuesto 5e Una mezcla de 5d ( 0. 66 g, 2.11 mmol) , tributil (vinil) estaño (1. 85 mL, 6.35 mmol) y paladio tetraquis(trifenilfosfina) (488 mg, 0.42 mmol) en 1,4-dioxano (10.5 mL) se tapó en un vial de microondas. La mezcla de reacción se irradió y agitó a 160°C por 40 min en un reactor de microondas. Una segunda reacción se llevó a cabo bajo escala idéntica y condiciones y las mezclas de reacción se combinaron y evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de 1:3 hasta 1:0 acetato de etilo / iso-hexanos para proporcionar el compuesto del título (1 g) como una goma café.1H RMN (300 MHz, CDCl3) d 1.27 (s, 9H), 1.62 (d, J = 7.7 Hz, 3H), 3.53 (br s, 1H), 4.69-4.77 (m, 1H), 5.51 (dd, J = 10.7, 1.3 Hz, 1H), 6.39 (dd, J = 17.4, 1.3 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 17.2, 10.7 Hz, 1H), 7.55-7.58 (m, 2H), 7.75 (s, 1H), 7.95 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 9.20 (s, 1H). LCMS (m/z) 303.0 [M+H], Tr = 1.48 min . i Compuesto 5f 5Q se suspendió en ácido clorhídrico 4 M en 1,4-dioxano (17 mL, 68 mmol) y metanol se agregó (34 L). La mezcla de reacción se agitó por 90 min y luego evaporó. El residuo se pasó a través de un cartucho SCX eluyendo con metanol y luego amoniaco etanólico. La fracción básica se colectó y evaporó para dar el compuesto del titulo (530 mg, 63% sobre 2 etapas) como un sólido color beige.
, Compuesto 5g Una solución de l-((lR,5S)-10,10-dimetil-3,3-dioxo- 31ambda*6*-tia-4-aza-triciclo [5.2.1.0*1,5*]dec-4-il)-propan- 1-ona (6.0 g, 22.1 mmol) en diclorometano anhidro (24 mL) se preparó y trifluororaetansulfonato de tert-butildimetilsililo (5.0 mL, 22.1 mmol) se agregó, seguido por trietilamina anhidra (3.54 mL, 25.4 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA bajo una atmósfera de nitrógeno por 15 h. Esto dio una solución oscura que se evaporó para dar un aceite. El aceite se disolvió en diclorometano anhidro (22 mL) y la solución se agregó gota a gota a una solución de crotonaldehido (3.66 mL, 44.2 mmol) y tetracloruro de titanio (1 M en diclorometano, 44.2 mL, 44.2 mmol) en diclorometano (22 mL) a -78°C bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a - 78°C por 1 hora, antes de la adición de solución de cloruro de amonio (30 mL). La mezcla agitada se permitió entibiar a TA antes de separar las capas. La capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 25 mL). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y evaporaron para dar un aceite café. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 para dar el compuesto del título (6.7 g, 89%) como un sólido incoloro, - Compuesto 5h Una solución de 5g (4.15 g, 12.1 mmol) en diclorometano anhidro (80 mL) se preparó y 1,8-bis(dimetilamino)naftaleno (7.78 g, 36.3 mmol) se agregó seguido por tetrafluoroborato de trimetiloxonio (3.6 g, 24.2 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA por 3 h. La mezcla de reacción se trató con metanol (3 mL) y se agitó por 5 min antes de agregar ácido clorhídrico (2 M, 200 mL) y acetato de etilo (250 mL). La mezcla se filtró para eliminar un sólido insoluble y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 mL). Las capas orgánicas se combinaron y lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y evaporaron para dar el compuesto del título (4.80 g, 100%) como un sólido color café pálido.
, , Compuesto 5i Una solución de hidróxido de litio en agua (2 M, 50 mL, 100 mmol) se agregó a una solución agitada de 5h (4.80 g, 12.1 mmol) en tetrahidrofurano (130 L). La mezcla de reacción se calentó a 60°C por 15 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA, antes de evaporar parcialmente y agregar ácido clorhídrico (2 M, 150 mL). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). El extracto se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó para dar un aceite café (3.5 g). El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/éter de dietilo 1:1 para dar el compuesto del título (1.132 g, 59%) como un aceite incoloro.
. . ,¡- I Compuesto 5j Una solución enfriada (0°C) de áster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (2.174 g, 4.088 mmol) en diclorometano anhidro (50 mL) se trató con trifluorometansulfonato de trimetilsililo (1.2 mL, 6.814 mmol). Después de 1 h a 0°C, la mezcla de reacción se trató con N,N-diisopropiletilamina (2.4 mL, 13.628 mmol) y los volátiles se removieron in vacuo para proporcionar la amina correspondiente como una espuma color amarilla. A esta amina se le agregó 5i (539.0 mg, 3.407 mmol), N,N-diisopropiletílamina (2.4 mL, 13.628 mmol) y acetonitrilo (50 mL). La mezcla de reacción se enfrió a 0°C y se trató con 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (1.814 g, 4.770 mmol). Después de agitar durante la noche a TA la reacción se apagó con ácido clorhídrico 1 M (100 mL). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2x). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato, de etilo 1:0 hasta 1:4 para proporcionar el compuesto del título (2.193 g, 93%) como un sólido color amarillo brillante.
. , Compuesto 5k Una solución de 5j (763.4 mg, 1.335 mmol) en tetrahidrofurano (25 mL) se trató posteriormente con polvo de zinc (1.920 g, 29.365 mmol) y una solución de acetato de amonio (1.543 g, 20.025 mmol) en agua (5 mL). Después de agitar durante la noche la reacción se filtró a través de Celite y se apagó con ácido clorhídrico 2 M. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2x). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El ácido acético residual se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el compuesto del título (566.4 mg, 96%) como un sólido color naranja brillante.
, Compuesto 51 Una solución de 5k (246 mg, 0.6 m ol), diclorohidrato de (R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etilamina (162 mg, 0.6 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (387 mg, 0.52 mL, 3 mmol) en acetonitrilo (20 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. El 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (320 g, 0.84 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a TA por 4 h. El solvente se evaporó. El residuo se diluyó con acetato de etilo y solución de carbonato ácido de sodio saturado. Una cantidad pequeña de metanol (5 mL) se le agregó a la suspensión para dar dos capas claras. La capa orgánica se separó, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando metanol/diclorometano 1:20. El residuo se trituró con éter y el sólido resultante se colectó, se lavó con éter y se secó para proporcionar el compuesto del título (238 mg, 64%) como un sólido color café pálido. l Compuesto 5 Una solución de 51 (91 mg, 0.15 mmol) en tolueno (45 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (10 mg, 0.015 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a reflujo bajo nitrógeno por 2 h. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs adicional (10 mg, 0.015 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a reflujo bajo nitrógeno por 6 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA, gel de sílice se agregó y la mezcla de reacción se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo/acetona 20:1 hasta 5:2. El residuo se trituró con éter y el sólido resultante se colectó, lavó con éter / iso-hexanos (1:1) y se secó para proporcionar el compuesto del título (23 mg, 26%) como un sólido blanco.1H RMN (300 MHz, CDCl3) <?0.99 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.04 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.44 (d, J = 7.4 Hz , 3H) , 1.53 (d, J = 6.9 Hz, 3H) , 1.61 (d, J = 6.9 Hz, 3H) , 1.68-2.20 (m, 5H) , 2.62-2.74 (m, 2H) , 3.35- 3.43 (m, 1H) , 3.44 (s, 3H) , 3.72 (d, J = 12.5 Hz, 1H) , 3.88- 3.92 (m, 2H) , 4.23 (dd, J = 8.9, 6.0 Hz, 1H) , 4.55-4.60 (m, 1H) , 5.30-5.37 (m, 1H) , 5.80-5.90 (m, 1H) , 6.38 (d, J = 8.9 Hz, 1H) , 6.43 (d, J = 7.6 Hz, 1H) , 6.93 (d, J = 16.3 Hz, 1H) , 7.24 (dd, J = 16.3, 8.7 Hz, 1H) , 7.45 (d, J = 8.7 Hz, 1H) , 7.56 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 7.69 (s, 1H) , 7.93 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 9.17 ( s , 1H) . LCMS (m/z) 579.3 [M+H] , Tr = 1.40 min.
EJEMPLO 6 , , I .
Compuesto 6 Una solución de Compuesto 5 (11 mg, 0.019 mmol) en acetato de etilo (10 mL) que contiene paladio sobre carbono 10% (10 mg) se hidrogenó a TA y presión de 3 h. La mezcla de reacción se filtró a través de ayuda de filtro y la almohadilla filtro se lavó con acetato de etilo. El filtrado se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo/acetona 10:1 hasta 2:1. El residuo se trituró con acetato de etilo/éter (1:5) para proporcionar el compuesto del título (2.0 mg, 18%) como un sólido blanco.1H RMN (300 MHz, CDCl3) d 0.93 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.39 (d, J = 6.9 Hz, 3HJ, 1.55-2.70 (m, 8H), 1.95-2.50 (m, 5H), 2.64-2.73 (m, 2H), 2.95-3.08 (m, 2H), 3.35-3.42 (m, 2H), 3.53 (s, 3H), 3.61 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.06-4.11 (, 1H), 4.50-4.57 (m, 1H), 5.25-5.32 (m, 1H), 5.64-5.70 (m, 1H), 6.39 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.47-6.51 (, 1H), 7.21-7.28 (m, 1H), 7.41 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.92 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 9.15 (s, 1H). LCMS (m/z) 581.3 [M+H], Tr = 1.38 min.
EJEMPLO 7 1) PdCI2(PPh3)2, tolueno Compuesto 7a Una mezcla de 7-bromo-2-cloro-quinoxalina (1.46 g, 6.00 mmol) y tributil(1-etoxivinil)estaño (2.71 g, 2.54 mL, 7.50 mmol) en tolueno (21 mL) se desgasificó por 20 min. El dicloruro de Bis(trifenilfosfina)paladio(II) (427 mg, 0.60. mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó bajo nitrógeno y calentó a 80°C por 19 h antes de permitir enfriar. Los volátiles se evaporaron y el residuo se suspendió en 1,4-dioxano (15 mL), ácido clorhídrico acuoso 2 M (15 mL) se agregó y la mezcla de reacción se agitó por 45 min y luego se evaporó para eliminar los volátiles. El residuo se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (2 x) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y evaporaron. El producto se purificó por cromatografía usando gel de sílice alterado con 10% p/p carbonato de potasio eluido usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 9:1 para proporcionar el compuesto del título (836 mg, 56 %) como un sólido color amarillo.
| Compuesto 7b El dicloro (p-cimeno) rutenio(II) dímero (12 mg, 0.019 mmol) y (IR,2R)-(-)-N-p-tosil-1,2-difeniletilenodiamina (17 g, 0.045 mmol) se suspendieron en agua desgasificada (7.5 mL) y la mezcla se desgasificó con nitrógeno por 15 in. La mezcla se agitó a 70°C bajo nitrógeno por 90 min. La mezcla color naranja turbia resultante se permitió enfriar a TA. El sólido 7a (948 mg, 3.78 mmol) seguido por tetrahidrofurano desgasificado (7.5 mL) y formiato de sodio (1.29 g, 18.9 mmol) se agregaron y la mezcla de reacción se desgasificó con nitrógeno por 5 min. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 40°C por 3 h y se permitió enfriar. Esto se diluyó luego con acetato de etilo y la mezcla se lavó con agua (2 x). Los lavados acuosos se extrajeron nuevamente con acetato de etilo y los orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con iso-hexanos/acetato de etilo 2:1 para proporcionar el compuesto del título (814 mg, 85%) como un sólido color púrpura.
- , A una mezcla de 7b (490 mg, 1.94 mmol), N,N-diciclohexilmetilamina (416 mg, 457 mL, 2.13 m ol) y 3-butenoato de tert-butilo (648 mg, 739 pL, 4.56 mmol) en tolueno (19 mL) se le agregó bis (tri-tert-butilfosfina)paladio(0) (41 mg, 0.080 mmol) bajo nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó y calentó bajo reflujo por 5 h luego se permitió enfriar. La mezcla se evaporó y luego se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 hasta 3:2 para proporcionar el compuesto del título (367 mg, 60%) como un aceite color amarillo.
, Compuesto 7d Una solución de le (804 mg, 1.51 mmol) en tetrahidrofurano (37.7 mL) se preparó y polvo de zinc (2.18 g, 33.3 mmol) se agregó seguido por una solución de acetato de amonio (1.75 g, 22.7 mmol) en agua (9.4 mL). La mezcla de reacción se agitó a TA por 72 h. La reacción se filtró a través de hiflo-supercel lavando completamente con acetato de etilo y sulfato ácido de potasio acuoso saturado. La mezcla se trató con ácido clorhídrico 1 M (3 mL) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 L). Las capas orgánicas se combinaron, lavaron con salmuera, se filtraron y evaporaron para dar una goma incolora. El residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (3 x 200 mL) para dar el compuesto del título (605 mg, rendimiento cuantitativo) como un sólido blanco.
, , , Compuesto 7e A una solución agitada de 7d (456 mg, 1.14 m ol) y éster de tert-butilo del ácido (E)—4—[3—((R)-1-hidroxi-etil)- quinoxalin-6-il]-but-3-enoico (358 mg, 1.14 mmol) en diclorometano (22 mL) se le agregó 1-hidroxibenzotriazol que contiene aproximadamente 20% agua (270 mg, 1.60 mmol) seguido por 4-dimetilaminopiridina (139 mg, 1.14 mmol) y clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N' -etilcarbodiimida (306 mg, 1.60 mmol) . La reacción se agitó por 18 h y luego se diluyó con diclorometano, se lavó con solución de cloruro de amonio saturada (2x), se secó sobre sulfato de sodio, se filtró·y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 3:1 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (335 mg, 45 %) como una espuma blanca.
, I , , Compuesto 7 A una solución agitada de 7e (309 mg, 0.444 mmol) en diclorometano (4.5 mL) a 0°C bajo nitrógeno se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (346 mg, 359 pL, 1.56 mmol) y la mezcla de reacción se permitió entibiar a TA sobre 2.5 h. I\J,N-diisopropiletilamina (164 mg, 221 mL, 1.27 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó por 10 min adicionales, se evaporó y luego suspendió en acetonitrilo (45 mL). La mezcla agitada se enfrió a 0°C y 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metana inio (236 mg, 0.622 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (229 mg, 309 pL, 1.77 mmol) se agregaron. Después de 90 min la reacción se apagó con una solución de cloruro de amonio saturada y la mezcla se evaporó para eliminar volátiles orgánicos. El residuo se diluyó con diclorometano y la capa orgánica se separó y lavó con bicarbonato de sodio saturado (2x) y salmuera luego se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de acetato de etilo/acetona 1:0 hasta 9:1. El residuo se purificó además por HPLC preparativa de fase inversa usando acetonitrilo/agua 3:7 para proporcionar el compuesto del titulo (7.6 mg, 3% sobre 2 etapas) como un sólido blanco. XH RMN (300 MHz, CD3OD) d 1.00 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.62 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1. 66-1.75 (m, 2H), 1.77 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.91-2.05 (m, 3H), 2. 72-2.82 (m, 1H), 2.98-3.08 (m, 1H), 3.38-3.41 (m, 1H), 3.78-3.84 (m, 1H), 4.25 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.41 (r d, J = 11.3 Hz, 1H), 5.68 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 6.09 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 6.55-6.63 (m, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.99 (s, 2H), 8.84 (s, 1H). LCMS (m/z) 523.2 [M+H], Tr = 1.75 min.
EJEMPLOS 8 y 9 Reducción Noyori Compuesto 8a El dicloro (p-cimeno) rutenio(II) dímero (3 mg, 0.005 m ol) y (IR,2R)-(-)-N-p-tosil-1,2-difeniletilenodiamina (4.4 mg, 0.012 mmol) se suspendieron en agua desgasificada (2 mL) y la mezcla se desgasificó con nitrógeno por 15 min. La mezcla se agitó a 70°C bajo nitrógeno por 90 min. La solución amarilla resultante se enfrió a TA. 1-(3-Cloro-isoquinolin-6-il)-etanona (206 mg, 1 mmol), formiato de sodio (340 mg, 5 mmol) y tetrahidrofurano desgasificado (1 mL) se agregaron y la mezcla de reacción se desgasificó con nitrógeno por 5 min. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 40°C por 2.5 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 hasta 2:1 para proporcionar el compuesto del título (193 mg, 92%) como un sólido blanco.
Compuesto 8b El 1,4-Dioxano (5 mL) se desgasificó con nitrógeno, 8a (208 mg, 1 mmol), tributil(vinil)estaño (951 mg, 0.9 mL, 3 mol) y dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladío(II) (70 mg, 0.1 mmol) se agregaron y la mezcla de reacción se calentó a 150°C en un reactor de microondas por 1 h. El tributil (vinil)estaño adicional (0.3 mL, 1 mmol) y dicloruro de bis (trifenilfosfina)paladio(II) (70 mg, 0.1 mmol) se agregaron y la mezcla de reacción se calentó a 150°C en un reactor de microondas por 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA y la mezcla se filtró a través de ayuda de filtro y la almohadilla filtro se lavó con acetato de etilo. El filtrado se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 hasta 2:1 seguido por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 3:1 para proporcionar el compuesto del título (100 mg, 50%) como un sólido blanco.
. . Compuesto 8c Una solución de le (10.6 g, 20 mmol) en diclorometano (300 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (6.66 g, 5.4 mL, 30 mmol) se agregó gota a gota y la mezcla de reacción se agitó a 0°C por 1 h. La solución de carbonato ácido de sodio saturado fria (200 mL) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a 0°C por 15 min. La capa orgánica se separó, lavó con solución de carbonato ácido de sodio saturado y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó para proporcionar éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1- [(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxilico (20 mmol), que se usó crudo en la siguiente etapa. Una solución de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (20 mmol) en acetonítrilo (240 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. El ácido (E)-Pent-3-enoico (2.20 g, 2.2 mL, 22 mmol) e hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (3.82 g, 20 mmol, se mojó con un mínimo de 20% en peso de agua) y clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N' -etilcarbodiimida (5.38 g, 28 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a 0°C por 15 min y luego a TA por 20 h. El solvente se evaporó y el residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 3:1 a acetato de etilo puro para proporcionar el compuesto del título (9.0 g, 88%) como un sólido blanco.
. . , Compuesto 8d Una solución de 8c (9.0 g, 17.5 mmol) en tetrahidrofurano (300 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. El polvo de zinc (25.0 g, 385 mmol) se agregó seguido por una solución de acetato de amonio (20.2 g, 263 mmol) en agua (200 mL). La mezcla de reacción se agitó a TA bajo nitrógeno por 18 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y la almohadilla filtro se lavó con agua (100 mL) y acetato de etilo (200 mL). La capa orgánica se separó y el solvente se evaporó hasta ca . 100 mL y la solución se extrajo con agua (100 mL). Las capas acuosas se combinaron, la solución de cloruro de amonio saturada (150 mL) se agregó y la solución se acidificó a pH 1 con ácido clorhídrico acuoso 2 M. La solución se extrajo con acetato de etilo y los extractos orgánicos se combinaron, lavaron con salmuera, secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y evaporaron. El residuo se co-evaporó con tolueno (3 x) para proporcionar ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-3-metil-2-((E)-pent-3-enoilamino)-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (5.7 g, 85%) como un sólido blanco que se usó en la siguiente reacción. Una solución de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-3-metil-2-( (E)-pent-3-enoilamino)-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (5.16 g, 13.5 mmol) en diclorometano (280 mL) y tetrahidrofurano (20 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. El (R)-1-(3-Vinil-isoquinolin-6-il)-etanol (2.69 g, 13.5 mmol) se agregó seguido por clorohidrato N- {3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (3.63 g, 18.9 mmol) y 4- (dimetilamino)pirídina (1.64 g, 13.5 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA por 6 h. El diclorometano (200 mL) se agregó y la solución se lavó con solución de ácido cítrico acuosa (pH 2-3). La capa orgánica se separó, lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 3:1 hasta acetato de etilo puro seguido por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 1:8 para proporcionar el compuesto del título (3.91 g, 51%) como un sólido blanco.
Ejemplo8 Ejemplo 9 Una solución de 8d (1.13 g, 2 nunol) en tolueno (600 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno por 15 min. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (125 mg, 0.2 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a reflujo bajo nitrógeno por 30 min. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs adicional (125 mg, 0.2 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a reflujo por 30 min. La mezcla de reacción se enfrió a TA. La mayoría del solvente se evaporó, gel de sílice se agregó y el solvente se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo/acetona 9:1 hasta 3:2 seguido por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo/metanol 40:1. El residuo se trituró con acetato de etilo/éter (1:4) y el sólido resultante se colectó, lavó con acetato de etilo/éter (1:4) y se secó para proporcionar una mezcla ~10:1 del Compuesto 9 y Compuesto 8, como un sólido color café pálido (245 mg). Una muestra de la mezcla se purificó por HPLC preparativa de fase inversa para proporcionar Compuesto 8 (4 mg) como un sólido blanco.1H RMN (300 MHz, CD3OD) d 1.01 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.02 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.37 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.65 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.70-2.15 (m, 5H), 2.95-3.05 (m, 1H), 3.70-3.76 (m, 1H), 4.03-4.10 (m, 2H), 4.12 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.64 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 6.10-6.20 (m, 2H), 6.98 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 8.05-8.10 (m, 2H), 9.21 (s, 1H). LCMS (/z) 522.3 [M+H], Tr = 1.25 min.
Compuesto 9, CH RMN (300 MHz, CDCI3) d 0.97 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.99 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.53 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.71 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.75-2.70 (m, 6H), 3.20-3.40 (m, 2H), 3.63-3.77 (m, 2H), 4.23-4.29 (m, 1H), 4.53-5.57 (m, 1H), 5.65-5.76 (m, 1H), 6.04 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 6.38-6.53 (m, 3H), 6.72 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.92 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 9.13 (s, 1H). LCMS (m/z) 522.0 [M+H], Tr = 1.40 min.
EJEMPLO 10 .
. Compuesto 10a 10a se preparó de la misma manera como 4d usando ácido 3-butenoico en lugar de ácido 4,4-dimetil-hept-6-enoico en 66% de rendimiento.
Compuesto 10b 10b se preparó de la misma manera como 4e usando éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-but-3-enoilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico en lugar de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(4,4-dimetil-hept-6-enoiloxi)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílic'o en 84% de rendimiento. , compuesto 10c 10c se preparó de la misma manera como 8d usando ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-but-3-enoilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxilico en lugar de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-3-metil-2-((E)-pent-3-enoilamino)butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico en 84% de rendimiento.
Hoveyda-Grubbs Tolueno, reflujo, 3 · Compuesto 9 El compuesto 9 se preparó de la misma manera como Compuesto 5 usando éster de (R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-but-3-enoilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico en lugar de [(R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etil]-amida del ácido (S)-l-{(S)-2-[(S)-2-((E)-(2R,3R)-3-metoxi-2-metil-hex-4-enoilamino)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico en 9% de rendimiento.
, , , I .
Compuesto 10 Una solución de Compuesto 9 (16 mg, 0.03 mmol) en acetato de etilo (5 mL) y tetrahidrofurano (2 mL) que contiene paladio sobre carbono 10% (15 mg) se hidrogenó a TA y presión de 3 h. La·mezcla de reacción se filtró a través de ayuda de filtro y la almohadilla filtro se lavó con acetato de etilo. El filtrado se evaporó y el residuo se trituró con éter (2 x 2 mL) y el sólido resultante se secó para proporcionar el compuesto del titulo (7.6 mg, 48%) como un sólido blanco opaco. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) d 0.90 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.50 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.68 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.60-2.40 (m, 9H), 2.70-3.10 (m, 3H), 3.68-3.75 (m, 1H), 3.90 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.32- 4.37 (m, 1H), 4.44-4.49 (m, 1H), 5.83-5.92 (m, 1H), 6.05-6.11 (m, 2H), 6.33 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.36 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.93 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 9.17 (s, 1H). LCMS (m/z) 524.3 [M+H], Tr = 0.59 in.
EJEMPLOS 11 y 12 . , I .
I , , , , Compuesto lia Compuesto 12b A una solución agitada de le (10.6 g, 20.0 mmol) en diclorometano (400 mL), a 0°C bajo nitrógeno, se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (6.67 g, 5.43 mL, 30.0 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C por 2 h. La N,N-Diisopropiletila ina (10.3 g, 13.9 mL, 80.0 m ol) se agregó y la mezcla se permitió entibiar a temperatura ambiente. Los volátiles se evaporaron y el residuo se suspendió en acetonitrilo (250 mL). La mezcla agitada se enfrió a 0°C bajo un manto de nitrógeno y luego N,N-diisopropiletilamina (10.3 g, 13.9 mL, 80 mmol) y ácido 3-butenoico (1.89 g, 1.86 mL, 4.40 mmol) se agrega, seguido por 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (10.6 g, 28.0 mmol), en porciones. La mezcla de reacción se permitió entibiar a temperatura ambiente y se agitó por 18 h antes de la evaporación. El residuo se diluyó con acetato de etilo y luego se lavó sucesivamente con solución de bicarbonato de sodio saturado, agua, ácido clorhídrico 2 , agua luego salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 1:1 hasta 0:1 para proporcionar una mezcla ~1:1 de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-but-3-enoilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico y éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-((E)-but-2-enoilamino)-3-metil-butirila ino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico como una espuma color naranja (7.23 g, 72%).
A una solución agitada de una mezcla de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-but-3-enoilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico y éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)—1—{(S)—2—[(S)—2—((E)-but-2-enoilamino)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (~1:1, 0.99 g, 2.00 mmol) en tetrahidrofurano (40 mL) se le agregó polvo de zinc (2.86 g, 44.0 mmol) y una solución de acetato de amonio (2.31 g, 30.0 mmol) en agua (25 mL). La mezcla de reacción se permitió entibiar a temperatura ambiente y se agitó por 18 h, luego se diluyó con acetato de etilo y la mezcla se filtró. Del filtrado la capa acuosa se separó y diluyó con una cantidad igual de solución de cloruro de amonio saturada y luego se acidificó a pH 1 con ácido clorhídrico 2 M. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y evaporaron. El residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (3 x) para dar una mezcla de los compuestos del título (~1:1, 466 mg, 63%) como una espuma color amarilla. , i -ll l Compuesto 11 Compuesto 12 Una mezcla de lia y 12b (~1:1, 250 g, 0.68 mmol) en acetonitrilo (20 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. El diclorohidrato de (R)-1-(3-vinil-lsoquinolin-6-il)-etilamina (136 mg, 0.5 mmol) y W,AZ-diisopropiletilamina (323 mg, 0.44 mL, 2.5 mmol) se agregó seguido por 2-(IH-7-azabenzotriazol- 1-il)-1,1,3,3-tetrametíl uronio hexafluorofosfato metanaminio (266 mg, 0.7 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA por 18 h. El solvente se evaporó. El residuo se diluyó con acetato de etilo y la solución se lavó con solución de carbonato ácido de sodio saturado, agua y salmuera. El extracto orgánico se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo a metanol/acetato de etilo 1:5 para proporcionar una mezcla ~1:1 de [(R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etil]-amida del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-but-3-enoilamino-3-metil-butirilamino) -propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico y [(R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il).-etil]-amida del ácido (S)- l-{(S)-2-[(S)-2-((E)-but-2-enoilamino)-3-metil-butirilamino]- propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico como un sólido blanco (153 mg, 56%) que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
Una solución de una mezcla de [(R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etil]-amida de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-but-3-enoilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico y [(R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etil]-amida del ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-((E)-but-2-enoilamino)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílíco (-1:1, 150 mg, 0.27 mmol) en tolueno (70 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (17 mg, 0.027 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a reflujo bajo nitrógeno por 90 min. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs adicional (17 mg, 0.027 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a reflujo bajo nitrógeno por 90 min. La mezcla de reacción se enfrió a TA, gel de sílice se agregó y el solvente se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo hasta acetato de etilo/acetona 1:1. El residuo se purificó además por cromatografía de capa delgada preparativa usando metanol/acetato de etilo 1:4 seguido por cromatografía en gel de sílice usando diclorometano/metanol 20:1 para dar los compuestos del título. El Compuesto 11 (1.3 mg, 1%) como un sólido blanco: 1H RMN (300 MHz, CD3OD) d 1.01 (d, J = 6.7 Hz, 3H) , 1.02 (d, J = 6.7 Hz, 3H) , 1.61 (d, J = 7.1 Hz, 3H) , 1.66 (d, J = 7.1 Hz, 3H) , 1.80-2.05 (m, 5H) , 2.71-2.82 (m, 1H) , 2.99-3.05 (m, 1H) , 3.32-3.43 (m, 1H) , 3.64-3.75 (m, 1H) , 4.27 (d, J = 10.1 Hz, 1H) , 4.40-4.53 (m, 2H) , 5.12 (q, J = 7.1 Hz, 1H) , 5.62 (q, J = 7.1 Hz, 1H) , 6.47-6.56 (m, 1H) , 6.62 (d, J = 15.8 Hz, 1H) , 7.43 (s, 1H) , 7.61 (dd, J = 8.5, 1.6 Hz 1H), 7.74 (s, 1H) , 8.05 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 9.13 (s, 1H) . LCMS (m/z) 521.3 [M+H] , Tr = 0.97 min.
Compuesto 12 (1.7 mg, 1.2%) como un sólido blanco: 1H RMN (300 MHz, CD3OD) ¿ 0.98 (d, J = 6.7 Hz, 3H) , 1.03 (d, J = 6.7 Hz, 3H) , 1.47 (d, J = 7.1 Hz, 3H) , 1.60 (d, J = 6.9 Hz, 3H) , 1.65-2.16 (m, 5H) , 2.81-2.89 (m, 1H) , 3.61-3.69 (m, 1H) , 4.04 (d, J = 6.9 Hz, 1H) , 4.30-4.36 (m, 1H) , 4.75 (d, J = 11.6 Hz, 1H) , 5.23 (q, J = 7.1 Hz, 1H) , 5.90 (q, J = 6.9 Hz, 1H) , 6.36 (d, J = 13.1 Hz, 1H) , 6.92 (d, J = 13.1 Hz, 1H) , 7.65 (d, J = 8.5 Hz 1H) , 7.88 (s, 1H) , 8.05 (d, J = 8.5 Hz 1H) , 8.46 (s, 1H), 9.16 (s, 1H) . LCMS (m/z) 507.2 [M+H], Tr = 0.95 min.
EJEMPLO 13 , Compuesto 13a Una suspensión de clorohidrato de (S)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-2,2,2-trifluoro-etilamina (Asiba Pharmatech, Edison, NJ, USA, 397 mg, 1.16 mmol) en diclorometano (10 mL) se enfrió usando un baño de hielo. La trietilamina (985 mA, 3.48 mmol) se agregó y la reacción se agitó hasta que una solución homogénea se observó. -El bicarbonato de Di-tert-butilo (380 mg, 1.74 mmol) en diclorometano (5 mL) se agregó luego y la reacción se dejó agitar durante la noche. El bicarbonato de Di-tert-butilo (127 mg, 0.58 mmol) se agregó y la reacción se agitó por 6 h adicionales. El bicarbonato de Di-tert-butilo (253 mg, 1.16 mmol) se agregó junto con mallas moleculares 4 Á y la reacción se dejó agitar durante la noche. La reacción se lavó con agua y salmuera y los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas desde 1:0 hasta 7:3 iso-hexanos/acetato de etilo para proporcionar el compuesto del título (343 mg, 73%) como un sólido color naranja.
Compuesto 13b A un matraz de 3 cuellos, equipado con barra agitadora y termómetro, bajo una atmósfera de nitrógeno y que contiene virutas de magnesio (3.02 g, 0.124 mol) se agregó tetrahidrofurano antiidro (105 mL). Un cristal simple de yodo se agregó a la reacción seguido por l-cloro-3-metil-but-2-eno (2 mL, 17.75 m ol). La reacción se agitó por 20 min hasta que todo el color habla dejado la solución. El l-cloro-3-metil-but-2-eno (5.57 mL, 49.45 mmol) se agregó. Un incremento de temperatura gradual se observó hasta que la reacción habla alcanzado reflujo. La reacción se dejó agitar por 1 hora, permitiendo a la reacción regresar a TA. La reacción se tranfirió luego por medio de cánula a un matraz que contiene dióxido de carbono sólido (50 g). La reacción luego se agitó por 2 h. Un baño de hielo de enfriamiento se agregó y la reacción se apagó con ácido clorhídrico 2 M. La mezcla de reacción se extrajo luego con éter de dietilo. Los orgánicos luego se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas desde 1:0 hasta 9:1 iso-hexanos/acetato de etilo para proporcionar el compuesto del título (2.69 g, 35%) como un aceite color amarillo pálido. (300 MHz, CDCI3) <51.35 (s, 6H), 5.10-5.21 (ir, 2H), 6.07 (dd, J = 17.6,10.5 Hz, 1H). , l, Compuesto 13c 13a (343 mg, 0.846 m ol) y 13b (106 mg, 0.931 mmol) se colocaron en un recipiente de microondas y disolvieron en acetonitrilo (3 mL). El acetato de paladio(II) (19 mg, 0.0846 mmol), tri(o-tolil)fosfina (51 mg, 0.169 mmol) y trietilamina (236 må, 1.69 mmol) se agregaron y el recipiente se selló antes de ser irradiado en el microondas por 30 min, usando tiempo de retención fijo, en alta absorción a 100°C. El solvente se eliminó y el residuo se recogió en una mezcla de agua y acetato de etilo. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Los orgánicos combinados luego se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso-hexanos/acetato de etilo desde 1:0 hasta 6:4. El material aislado se sometió a una segunda purificación usando las mismas condiciones para proporcionar el compuesto del titulo (142 mg, 38%) como un aceite color amarillo pálido.
- , I Compuesto 13d El éster de etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-Amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3- 13.6 carboxílico (210 mg, 0.486 mmol) y 13c (142 mg, 0.324 mmol) se disolvieron en N,N-dimetilformamida (5 mL), bajo una atmósfera de nitrógeno, y se enfriaron usando un baño de hielo. 2- (IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (203 mg, 0.535 mmol) y L7,I\J-diisopropiletilamina (423 m?^, 2.43 mmol) se agregaron luego y la reacción se permitió entibiar lentamente a TA y se dejó agitar durante la noche. La reacción se diluyó con agua y extrajo con acetato de etilo. Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso-hexanos/acetato de etilo desde 1:0 hasta 0:1 para proporcionar el producto contaminado con solvente residual. El tolueno se agregó y la solución se concentró para proporcionar el compuesto del título (79 mg, 29%) como un sólido color naranja.
, Compuesto 13e 13d (79 mg, 0.0925 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano (2 mL) y se enfrió usando un baño de hielo El metanol (1 mL) y agua (1 mL) se agregaron luego seguido por litio hidróxido monohidrato (15 mg, 0.37 mmol). La reacción luego se dejó agitar por 1 hora. El ácido clorhídrico 1 M se agregó hasta que la solución fue pH 2. El solvente se eliminó y el sólido resultante se destiló azeotrópicamente secuencialmente con metanol, luego acetonitrilo y finalmente tolueno para proporcionar el compuesto del título (67 mg, 100%) como un sólido color amarillo.
I 3e (66 mg, 0.0916 mmol) se disolvió en ácido clorhídrico 4 M en 1,4-dioxano (2 mL) y se dejó agitar por 30 min. El solvente se eliminó y el sólido resultante se trituró con éter de dietilo y se secó para proporcionar el compuesto del título (50 mg, 83%) como un sólido amarillo pálido.
I .
Compuesto 13 13f (50 mg, 0.0761 mmol) se disolvió en diclorometano (76 L), bajo una atmósfera de nitrógeno y se enfrió usando un baño de hielo. El 2-(IH-7-Azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (58 mg, 0.152 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (53 ml,, 0.304 mmol) se agregaron luego y la reacción se permitió entibiar lentamente a TA y se dejó agitar durante la noche. El solvente se eliminó y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando 7:3 iso-hexanos/acetona. El residuo se re-purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso-hexanos/acetona desde 1:0 hasta 1:1. El residuo se eluyó luego a través de un sistema HPLC equipado con una columna Phenomenex Gemini 10m 110A, 250 x 21.2 m usando un gradiente continuo de acetonitrilo/agua desde 1:4 hasta 1:0 flujo a 20 mL/min para proporcionar el compuesto del título (7 mg, 15%) como un sólido.1H RMN (300 MHz, CDCl3) d 0.86-1.08 (m, 6H), 1.25-1.54 (m, 8H), 1.57-1.81 (m, 5H), 1.88-2.00 (m, 1H), 2.37-2.80 (m, 1H), 3.32-3.65 (m, 1H), 3.69-3.97 (m, 1H), 4.22-4.39 (m, 1H), 4.50-4.68 (m, 1H), 5. 74-6. 05 (m, 2H) , 6.22-6.39 (m, 1H) , 6. 44-6. 54 (m, 1H) , 6. 63-6.76 (m, 1H) , 7.45 (app t, J = 8 . 5 Hz, 1H) , 7. 56 (app t, J = 7 . 6 Hz , 1H) , 7.81 (d, J = 8 .3 Hz, 1H) , 8. 19 ( s, 1H) , 8 .76-9.09 (m, 1H) . LCMS (m/z ) 603. 1 [M+H] , Tr = 2. 59 min .
EJEMPLO 14 Reducción i Compuesto 14a El dicloro (p-cimeno) rutenio(II) dimero (24 mg, 0.040 mmol) y (IR,2R)-(-)-IV-p-tosil-l,2-difeniletilenodiamina (35 mg, 0.096 mmol) se suspendieron en agua desgasificada (16 mL) y la mezcla se desgasificó con nitrógeno por 15 min. La mezcla se agitó a 70°C bajo nitrógeno por 90 min. La mezcla color naranja turbia resultante se permitió enfriar a TA. La 1- (6-bromo-quinolin-3-il)-etanona sólida (preparada como en la WO 2011/063233, 1.92 g, 7.68 mmol) seguido por tetrahidrofurano desgasificado (16 mL) y formiato de sodio (2.72 g, 40 mmol) se agregaron y la mezcla de reacción se desgasificó con nitrógeno por 5 min, tetrahidrofurano desgasificado adicional (5 mL) se agregó y la mezcla se degasificó por otro minuto. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 40°C por 21 h y se permitió enfriar. Esto se diluyó luego con acetato de etilo y la mezcla se lavó con agua luego salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 7:3 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (1.65 g, 85%) como un sólido color café. - l Compuesto 14b A una mezcla de 14a (356 g, 1.41 mmol), diciclohexilmetilamina (275 mg, 301 mL, 1.41 mol) y 3-butenoato de tert-butilo (470 mg, 537 pL, 3.31 mmol) en tolueno (14 mL) se agregó bis (tri -tert butilfosfina)paladio(0) (30 mg, 0.058 mmol) bajo nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó y calentó bajo reflujo por 90 min luego se permitió enfriar. La mezcla se evaporó y luego se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 hasta 2:3 para proporcionar el compuesto del título como un aceite color amarillo (144 mg, 33 %).
, , , Compuesto 14c A una solución agitada de ácido (S)—1—[(S)—2—((S)—2— tert-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxilico (189 mg, 0.473 mmol) y 14b (148 mg, 0.473 mmol) en diclorometano (10 L) se le agregó 1-hidroxibenzotriazol que contiene aproximadamente 20% agua (89 mg, 0.662 mmol) seguido por 4-dimetilaminopiridina (58 mg, 0.473 mmol) luego·clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil)-N' -etilcarbodiimida (127 mg, 0.662 mmol). La reacción se agitó por 62 h y luego se diluyó con diclorometano, se lavó con solución de cloruro de amonio saturada (2 x) y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. Purificado por cromatografia en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 3:1 hasta 2:3 proporcionó el compuesto del título (126 mg, 38%) como una espuma blanca.
, , , , Compuesto 14 A una solución agitada de 14c (126 mg, 0.181 mmol) en diclorometano (1.8 mL) a 0°C bajo nitrógeno se le agregó trifluoro etansulfonato de trimetilsililo (141 mg, 147 pL, 0.635 mmol) y la mezcla de reacción se permitió entibiar a temperatura ambiente durante 1.75 h. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo adicional (20 mg, 21 mL, 0.091 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó por 15 min adicionales antes de la adición de N,N-diisopropiletilamina (164 mg, 221 pL, 1.27 mmol). Después de 10 min adicionales de agitación la mezcla de reacción se evaporó y luego suspendió en acetonitrilo (18.1 mL). La mezcla agitada se enfrió a 0°C y luego 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (96 mg, 0.253 mmol) y N,N-diisopropíletílamina (94 mg, 126 pL, 0.724 mmol) se agregó. Después de 45 min la reacción se apagó con solución de cloruro de amonio saturada (10 mL) y la mezcla se evaporó para eliminar volátiles orgánicos. El residuo se diluyó con diclorometano y la capa acuosa se separó y extrajo con diclorometano. Los extractos orgánicos se lavaron con bicarbonato de sodio saturado, agua y luego salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con acetato de etílo/acetona 9:1 luego por HPLC de fase inversa preparativa usando un gradiente de acetonitrilo/agua 3:7 hasta 1:1 para proporcionar el compuesto del título (6.5 mg, 7% sobre 2 etapas) como un sólido blanco. XH RMN (300 MHz, CD30D) d 1.00 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.03 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.61 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.75 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.91-2.01 (m, 3H), 2.68-2.79 (m, 1H), 3.00 (dd, J = 14.5, 3.6 Hz, 1H), 3.35-3.42 (m, 1H), 3.73-3.82 (m, 1H), 4.29 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.41 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 5.47 (q, J = 7.3 Hz, 1H), 6.15 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 6.30-6.40 (m, 1H), 6.63 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.82 (dd, J = 8.7, 1.5 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.79 (d, J = 1.8 Hz, 1H). LCMS (m/z) 522.2 [M+H], Tr = 1.60 min.
EJEMPLO 15 , Compuesto 15a A una mezcla agitada de ácido 3-bromo-quinolina-6- carboxilico (preparada como en W02011/090935, 1.94 g, 7.70 mmol) en tetrahidrofurano (77 mL) se le agregó 2-cloro-4,6-dimetoxi-1,3,5-triazina (2.03 g, 11.5 mmol) y N-metilmorfolina (2.34 g, 2.54 mL, 23.1 mmol). La mezcla de reacción se agitó por 90 min y luego clorohidrato de N, 0-dimetilhidroxilamina (751 mg, 7.70 mmol) se agregó en una porción. La mezcla de reacción se agitó por 17 h adicionales y clorohidrato N,O-dimetilhidroxilamina adicional (375 mg, 3.85 mmol) se agregó y luego después de 5 h una porción adicional (175 mg, 1.80 mmol). La mezcla de reacción se agitó por una hora adicional y luego se diluyó con dicloro etano, se lavó con agua y luego solución de cloruro de amonio saturada. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 hasta 7:3 para proporcionar el compuesto del título (1.43 g, 66%) como un sólido color blanco apagado.
, Compuesto 15b A una solución agitada de metil magnesio cloruro (3 M en tetrahidrofurano, 4.85 mL, 14.5 mmol) en tetrahidrofurano (10 L) bajo nitrógeno se le agregó una solución de 15a (1.43 g, 4.85 mmol) en tetrahidrofurano (20 mL). La mezcla de reacción se agitó por 1 hora y luego se apagó con solución de cloruro de amonio saturada. La mezcla se diluyó con éter de dietilo y agua, la capa orgánica se separó y lavó con agua adicional y los lavados acuosos combinados se volvieron a extraer con éter de dietilo. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco que se tomó directamente en la siguiente etapa. i Compuesto 15c El dicloro (p-cimeno) rutenio(II) dímero (9 mg, 0.015 mmol) y (IR,2R)-(-)-N-p-tosil-1,2-difeniletilenodiamina (14 mg, 0.037 mmol) se suspendieron en agua desgasificada (9 mL) y la mezcla se desgasificó con nitrógeno por 15 min. La mezcla se agitó a 70°C bajo nitrógeno por 90 min. La mezcla color naranja turbia resultante se permitió enfriar a TA. La 1- (3-bromo-quinolin-6-il)-etanona sólida (771 mg, 3.08 mmol) y formiato de sodio (2.72g, 40 mmol) seguido por tetrahidrofurano desgasificado (4.5 mL) se agregaron y la mezcla de reacción se desgasificó con nitrógeno por 5 min. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 40°C por 3 h y se permitió enfriar. Esto se diluyó luego con acetato de etilo y la mezcla se lavó con agua luego salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 3:2 hasta 1:1 para proporcionar el compuesto del título (616 mg, 79%) como un sólido gris.
, Compuesto 15d A una solución de 15c (560 mg, 2.22 mmol) en tolueno (20 mL) y 1,4-dioxano (5 mL) se le agregó N,N-diciclohexilmetilamina (740 mL, 3.46 mmol) y 3-butenoato de tert-butilo (741 mg, 844 mI<, 5.22 mmol) se agregó bis(tri-tert-butilfosfina)paladio(0) (68 mg, 0.13 mmol) bajo nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó y calentó bajo reflujo por 6 h luego se permitió enfriar. La mezcla se evaporó y luego se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 hasta-0:1 para dar una goma color amarillo. La goma se suspendió en acetato de etilo y se lavó con solución de cloruro de amonio saturada (2 x) seguido por agua luego salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó para proporcionar el compuesto del título (300 mg, 43%) como un aceite color amarillo. , , , l Compuesto 15e A una solución espesa agitada de ácido (S)—1—[(S)—2— ( (S)-2-tert-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxilico (325 mg, 0.812 inmol), 15d (231 mg, 0.738 mmol) y mallas moleculares 4Á en polvo en diclorometano (16 mL) se le agregó clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N' -etilcarbodiimida (198 mg, 1.03 mol), hidrato de 1-hidroxibenzotriazol que contiene aproximadamente 20% agua (174 mg, 1.03 mmol) seguido por 4-dimetilaminopiridina (90 mg, 0.738 mmol). La reacción se agitó bajo nitrógeno por 16 h y luego se filtró y el sólido se lavó con diclorometano. El filtrado se lavó con solución de cloruro de amonio saturada (2 x) y agua, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 1:1 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (307 mg, 60%) como una espuma color amarillo . , l , Compuesto 15 A una solución agitada de 15e (150 mg, 0.216 mmol) en diclorometano (2 mL) a 0°C bajo nitrógeno se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (168 mg, 174 gL, 0.755 mmol) gota a gota y la mezcla de reacción se permitió entibiar a temperatura ambiente durante 2.25 h. N,N-Diisopropiletilamina (195 mg, 263 gL, 1.51 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó por 10 min adicionales, se evaporó y luego suspendió en acetonitrilo (21.6 mL). La mezcla agitada se enfrió a 0°C y luego 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (115 mg, 0.320 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (111 mg, 150 gL, 0.864 mmol) se agregó. Después de 1 h la reacción se apagó con solución de cloruro de amonio saturada y la mezcla se evaporó para eliminar volátiles orgánicos. El residuo se diluyó con diclorometano y la capa orgánica se separó y lavó con cloruro de amonio saturado (2 x) y salmuera luego se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por HPLC de fase inversa preparativa usando un gradiente de acetonitrilo/agua 3:7 hasta 11:9 para proporcionar el compuesto del titulo (4.6 mg, 4% sobre 2 etapas) como un sólido color blanco apagado.1H RMN (300 MHz, CD3OD) d 1.01 ( app t, J = 6.7 Hz, 6H), 1.62 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.70 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.75-1.85 (m, 1H), 1.91-2.05 (m, 3H), 2.70- 2.80 (m, 1H), 2.98-3.06 (m, 1H), 3.36-3.45 (m, 1H), 3.74-3.84 (m, 1H), 4.26 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.42 (br d, J = 12.3 Hz, 1H), 4.72-4.78 (m, 1H), 5.55 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 6.09 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 6.38-6.41 (m, 1H), 6.71 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 8.9, 1.9 Hz, 1H), 7.88-8.01 (m, 3H), 8.86 (d, J = 2.0 Hz, 1H). LCMS (m/z) 522.3 [M+H], Tr = 1.64 min.
EJEMPLO 16 l l I, Compuesto 16a Una mezcla de 7-bromo-2-cloro-quinolina (1.05 g, 4.32 mmol) y tributíl(1-etoxivinil)estaño (1.95 g, 1.83 mL, 5.40 m ol) en tolueno (21 mL) se desgasificó por 20 min. El dicloruro de Bis(trifenilfosfina)paladio(II) (302 g, 0.432 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó bajo nitrógeno y calentó a 80°C por 24 h antes de permitir enfriar. Los volátiles se evaporaron y el residuo se suspendió en 1,4-dioxano (10 mL) y ácido clorhídrico acuoso 2 M (5 mL) se agregó y la mezcla de reacción se agitó por 30 min y luego se evaporó para eliminar los orgánicos. El residuo se diluyó con acetato de etilo y agua y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. El producto se purificó sobre gel de sílice alterado con 10% p/p carbonato de potasio eluyendo usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 9:1 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (422 mg, 48%) como un sólido color amarillo.
Reducción i o OH Compuesto 16b El dicloro(p-cimeno)rutenio(II) dímero (8.5 mg, 0.014 nunol) y (IR,2R)-(-)-N-p-tosil-1,2-difeniletilenodíamina (12.1 mg, 0.033 m ol) se suspendieron en agua desgasificada (5.5 mL) y la mezcla se desgasificó con nitrógeno por 20 min. La mezcla se agitó a 70°C bajo nitrógeno por 90 min. La mezcla color naranja turbia resultante se permitió enfriar a TA. El 16a sólido (571 mg, 2.78 mmol) y formiato de sodio (945 mg, 13.9 mmol) seguido por tetrahidrofurano desgasificado (5.5 mL) se agregaron y la mezcla de reacción se desgasificó con nitrógeno por 5 min. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 40°C por 4 h y se permitió enfriar. Esto se diluyó luego con acetato de etilo y la mezcla se lavó con agua y la capa acuosa se volvió a extraer con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de íso-hexanos/acetato de etilo 4:1 hasta 7:3 para proporcionar el compuesto del titulo (413 mg, 72%) como un sólido color beige.
- I Et3N,nPrOH Compuesto 16c A una mezcla de 16b (360 mg, 1.73 mmol), viniltrifluoroborato de potasio (279 mg, 2.08 mmol) y [1,1'-bis (difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II), complejo con diclorometano (27 mg, 0.033 mmol) en n-propanol seco (27 mL) se agregó trietilamina (175 mg, 241 mL, 1.73 mmol) y el sistema se evacuó y purgó con nitrógeno (3x). La mezcla de reacción se agitó y calentó a reflujo por 3 h antes de que se permitiera enfriar. La mezcla se vació en agua y se extrajo con éter de dietilo (2x) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 7:3 hasta 3:2 para proporcionar el compuesto del título (270 mg, 78%) como un sólido blanco I Compuesto 16d A una mezcla agitada de 16c (100 mg, 0.500 mmol) y ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-but-3-enoilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxilico (203 mg, 0.550 mmol) en diclorometano (10 mL) bajo nitrógeno se le agregó clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N' -etilcarbodiimida (134 mg, Ó.700 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (61 mg, 0.500 mmol). La mezcla de reacción se agitó por 16 h y luego se diluyó con diclorometano, se lavó sucesivamente con solución de ácido cítrico, agua luego salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 1:1 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (103 mg, 38%) como un sólido color café.
- I Compuesto 16 El 16d (60 mg, 0.109 mmol) y catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (20.5 mg, 0.0328 mmol) se suspendió in 1,2-dicloroetano (6 mL) y la mezcse calentó en un reactor de microondas a 100°C por 1 h. La mezcla resultante se combinó con una reacción idéntica llevada a cabo usando (10 mg, 0.0182) del éster de (R)-1-(2-vinil-quinolin-7-il)-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-but-3-enoilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxilico. Los volátiles se evaporaron y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo/acetona 1:0 hasta 4:1 para dar una goma café. Esto se purificó además por cromatografía de capa delgada preparativa usando iso-hexanos/acetato de etilo 1:3 para proporcionar el compuesto del titulo (1.8 mg, 3%) como un sólido blanco.
RMN (300 MHz, CDCl3) d 0.84-1.02 (, 6H), 1.26 ( app s, 3H), 1.67-1.72 (m, 3H), 1.83-1.96 (m, 1H), 2.00-2.08 (m, 1H), 2.63-2.74 (m, 1H), 3.24 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 3.50 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.21 ( app t, J = 10.3 Hz, 1H), 4.53-4.61 (m, 1H), 5.55 (app t, J = 7.3 Hz, 1H), 6.04-6.11 (m, 2H), 6.32 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 6.72-6.80 (m, 1H), 7.29-7.33 (m, 1H), 7.45 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.97-8.02 (, 1H). LCMS (m/z) 552.2 [M+H], Tr = 1.86 min EJEMPLO 17 , Compuesto 17a Bajo argón, una solución de diisopropilamina (2.51 g, 24.8 mmol) en tetrahidrofurano (150 mL) se enfrió en un baño de agua con hielo. Una solución de n-butillitio en hexanos (2.5 M, 9.7 mL, 24 mmol) se agregó gota a gota durante 2 min, y la solución resultante se agitó por 10 min adicionales. La solución luego se enfrió a -78°C en un baño de CO2:acetona, y 2,2-dimetil-3-oxobutanoato de metilo (3.2 g, 22 mmol) se agregó gota a gota durante 30 s. La solución se agitó por 15 min adicionales, y N-fenil-bis (trifluorometansulfonimida) (8.4 g, 23.5 mmol) se agregó como una solución en tetrahidrofurano (20 mL) por medio de cánula durante 5 min, lavando con una porción adicional de tetrahidrofurano (10 mL). La solución resultante se agitó por 10 min y se eliminó del baño frió. Después de agitar 1 h adicional, la mezcla de reacción se concentró in vacuo y diluyó con éter de dietilo (150 mL). La fase orgánica se lavó con hidróxido de sodio acuoso 1 M (1 x 100 mL, 1 x 30 mL), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, y concentró para proporcionar el compuesto del titulo (6.2 g, 100%) como un líquido color ámbar que se usó sin purificación adicional. i Compuesto 17b Una solución de 17a (6.2 g, 22 mmol) en piridina anhidra (11 mL, 140 mmol) se calentó a 70°C. Después de 18.5 h, la temperatura se incrementó a 90°C. Después de agitar por un total de 72 h, la mezcla de reacción se dividió entre una mezcla de éter de dietilo agitada (100 mL) y ácido clorhídrico acuoso 3 M (100 mL). Las fases se separaron, y la capa orgánica se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado (75 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y concentró para proporcionar el compuesto del título (2.7 g, 97%) como un líquido ligeramente café que se usó sin purificación adicional.
Compuesto 17c Bajo argón, bis(ciclopentadienil)circonio cloruro hidruro (290 mg, 1.1 ol) se enfrió en un baño de agua con hielo. Una solución de 17b (1.4 g, 11.1 mmol) y pinacolborano (2.4 mL, 16.5 mmol) en diclorometano (3 L) se agregó por cánula, lavando con una porción adicional de diclorometano (2 mL). La mezcla resultante se eliminó del baño frió y se agitó por 72 h a TA. La reacción luego se diluyó con acetato de etilo (50 mL), se apagó con gota a gota de agua (5 mL), y se diluyó además con agua (50 mL). Las fases orgánicas y acuosas se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (30 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron, y concentraron para proporcionar un residuo crudo que se purificó por cromatografía en gel de sílice (5 hasta 15% acetato de etilo en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (1.6 g, 57%) como un aceite incoloro que se cristalizó en reposo a -15°C.
, Compuesto 17d Una mezcla de 6-bromo-3-cloro-isoquinolina (485 mg, 2.0 mmol), bis(pinacolato)diboro (560 mg, 2.2 m ol), acetato de potasio (392 mg, 4.0 mmol) y [1,1'-bís(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II), complejo con dicloro etano (82 mg, 0.1 mmol) en 1,4-dioxano (4 mL) se calentó a 160°C en un microondas por 1 hora. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y la almohadilla filtro se lavó con acetato de etilo. El filtrado se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de diclorometano a diclorometano/metanol 9:1 para proporcionar el compuesto del titulo (545 mg, 94%).
Compuesto 17e Una solución de 17d (1.74 g, 6.0 mmol) en tetrahidrofurano (45 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. La solución de hidróxido de sodio (2 M, 9 mL, 18 mmol) y peróxido de hidrógeno (30%, 2.5 mL, 24 mmol) se agregaron gota a gota. La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 30 min. Agua (30 mL) se agregó y la solución se acidificó a pH 1 con ácido clorhídrico 2 M. La solución de metabisulfito de sodio (1 M) se agregó y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con agua y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrofóbíca y el filtrado se evaporó para proporcionar el compuesto del título (662 mg, 61%) como un sólido color blanco apagado.
. Compuesto 17f A una solución de 17e (1.25 g, 7.07 mmol) y tributil-(1-etoxi-vinil)-estaño (5.09 g, 4.77 mL, 14.1 m ol) en 1,4-dioxano (15 L) se le agregó dicloruro de bis (trifenilfosfina)paladio(II) (992 mg, 1.41 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 160°C en un microondas por 30 min. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y la almohadilla filtro se lavó con acetato de etilo. El filtrado se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 9:1 hasta 3:1 para proporcionar 3-(1-etoxi-vinil)-isoquínolin-6-ol (670 mg) como una goma que se usó cruda en la siguiente etapa. El 3- (1-Etoxi-vinil)-isoquinolin-6-ol (670 g) se suspendió en 1,4-dioxano (4 mL) y cloruro de hidrógeno 4 M en 1,4-dioxano (8 mL) se le agregó y la mezcla de reacción se agitó a TA por 30 min. El solvente se evaporó para proporcionar el compuesto del título (584 mg, 44% sobre 2 etapas) como un sólido blanco.
Compuesto 17g Una solución de 17f (384 mg, 2.05 mmol) y piridina (0.51 mL, 6.16 mmol) en diclorometano (30 mL) se agitó en un baño de sal-hielo por 5 min. Trifluorometansulfónico anhídrido (0.415 mL, 2.46 mmol) se agregó gota a gota y la mezcla se entibió a TA durante 20 min. El trifluorometansulfónico anhídrido adicional (0.1 mL, 0.6 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a TA por 10 min. La solución de cloruro de amonio saturada se agregó y la mezcla se extrajo con diclorometano. Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 19:1 para proporcionar el compuesto del título (300 mg, 44%) como un sólido blanco.
Compuesto 17h A dicloro (p-cimeno) rutenio (II) dímero (2 mg, 0.003 mmol) en agua (2 mL) a TA se le agregó (IR,2R)-(-)-A-p-tosil-1,2-difeniletilenodiamina (3 mg, 0.008 mmol). El sistema se desgasificó por 15 min y luego se calentó a 70°C por 1.5 h. La reacción se enfrió y una solución de 17g (224 mg, 0.70 mmol) en tetrahidrofurano desgasificado anhidro (1 mL) se agregó seguido por formiato de sodio (237 mg, 3.50 mmol). El sistema se desgasificó por 2 min y luego calentó a 40°C por 1 hora. Después del enfriamiento a TA, se agregó agua y el agua se extrajo con diclorometano (2 x). Las capas orgánicas combinadas se secaron a través de una frita hidrofóbica y concentraron in vacuo. El producto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 1:1 para proporcionar el compuesto del título (220 mg, 97%) como un aceite café.
Compuesto 17i Un matraz de fondo redondo se cargó con 17h (100 mg, 0.31 mmol), éster de metilo del ácido (E)-2,2-dimetil-4- (4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-but-3-enoico (91 mg, 0.36 mmol), cloruro de bis [(diciclohexil)(4-dimetilaminofenil)fosfina]paladio(II) (13 mg, 0.02 mmol), fosfato de potasio tribásico (198 mg, 0.93 mmol) y cloruro de litio (40 mg, 0.93 mmol). El sistema se limpió de un chorro con nitrógeno y ciclopentil metil éter (1 mL) y agua (0.5 mL) se agregaron. La reacción se calentó por 1 hora a 90°C y luego se enfrió a TA. El acetato de etilo se agregó y la solución se lavó con agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y concentró in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 1:2 para dar el compuesto del título (70 mg, 75%) como un aceite color amarillo. i, , Compuesto 17j A 17i (140 mg, 0.47 mmol) en tetrahidrofurano (1 mL), metanol (0.5 mL) y agua (0.5 mL) se le agregó litio hidróxido monohidrato (39 mg, 0.93 mmol) a TA. La reacción se agitó por 3 h y se apagó al agregar ácido clorhídrico acuoso 2 M (0.5 mL). La reacción se concentró in vacuo, seguido por coevaporación de metanol y luego tolueno. El sólido amarillo consiguiente se usó crudo i . , . , ¡ Compuesto 17k A le (250 mg, 0.47 mmol) en diclorometano anhidro (5 mL) a 0°C y bajo una atmósfera de nitrógeno, se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (128 mL, 0.70 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 2 h antes de agregar N,N-diisopropiletilamina (252 ml, 1.41 mmol) y luego se concentró in vacuo, y se co-evaporó con tolueno para proporcionar éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)—1— [ (S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico como un sólido blanco. A 17j (134 mg, 0.47 mmol) en N,N-dimetilformamida anhidra (2 mL) a TA y bajo una atmósfera de nitrógeno se le agregó N,N-diisopropiletilamina (420 ml, 2.35 mmol) y 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (250 mg, 0.66 mmol). La solución se agitó a TA por 3 min antes de agregar una solución de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-l- [(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazín-3-carboxílico en N,N-dimetilformamida anhidra (2 mL). La reacción se agitó por 16 h. La reacción se apagó con agua y extrajo con acetato de etilo (2 x). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, filtraron y concentraron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetona 1:1 para dar el compuesto del título (220 mg, 67% sobre 3 etapas) como un sólido blanco apagado. i i i I Compuesto 17 A 17k (220 mg, 0.31 m ol) en tetrahidrofurano (3 mL), metanol (1.5 mL) y agua (1.5 L) se le agregó litio hidróxido monohidrato (53 mg, 1.26 mmol) a TA. La reacción se agitó por 1.25 h y se apagó al agregar ácido clorhídrico acuoso 2 M (0.64 mL). La reacción se concentró in vacuo, seguido por co evaporación de metanol (2 x) y luego acetonitrilo (6 x). El residuo resultante se disolvió en N,N-dimetilformamida anhidra (4 mL), y se agregó por medio de bomba de jeringa durante 2 h a una suspensión de 2-metil-6-nítrobenzoico anhídrido (271 mg, 0.79 mmol), 4-dimetilaminopiridina (288 mg, 2.36 mmol) y mallas moleculares 4Á en polvo (3 g) en 1,2- dicloroetano (103 mL) a 50°C. Después de la adición la reacción se agitó a 50°C por 3 h, se enfrió a TA y filtró a través de Celite. El filtrado se concentró hasta 1/3 de su volumen, diluido con diclorometano y lavado con agua (2 x). La capa orgánica se secó a través de una frita hidrofóbica y se concentró ín vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetona 1:1 para dar un sólido blanco apagado. El sólido se trituró dos veces con éter de dietilo y se secó al vacío por 16 h para proporcionar el compuesto del título (65 mg, 38% sobre 2 etapas) como un polvo blanco.1H RMN (300 MHz, CDCl3) 0.93 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.99 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.41 (s, 3H), 1.51 (s, 3H), 1.61 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.76 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.76 (m, 1H), 1.78-2.03 (m, 3H), 2.07-2.17 (m, 1H), 2.62-2.76 (m, 1H), 3.62-3.79 (m, 2H), 4.21-4.31 (m, 1H), 4.52-4.62 (m, 1H), 5.82-6.01 (, 1H), 6.13 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 6.27 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 6.30-6.41 (m, 2H), 6.64 (d, J = 16.1 Hz, !1H), 7.53 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.90 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 9.16 (s, 1H). LCMS (m/z) 549.9 [M+H], Tr = 5.21 min.
EJEMPLO 18 , , Compuesto 18 Al Compuesto 17 (40 mg, 0.073 mmol) en acetato de etilo (10 mL) se le agregó paladio sobre carbono 10% (30 mg) a TA.
El sistema se purgó con hidrógeno y se agitó vigorosamente por 16 h. La suspensión se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetona 1:1 para proporcionar Compuesto 18 (8 mg, 20%) como un sólido blanco. XH RMN (300 MHz, CDCl3) 0.92 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.00 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.31 (s, 3H), 1.48 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.64-1.79 (m, 1H), 1.75 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.80-2.12 (m, 5H), 2.45 (td, J = 12.7, 3.6 Hz, 1H), 2.68-2.93 (m, 2H), 3.62-3.78 (m, 2H), 3.86 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.37 ( app t, J = 8.3 Hz, 1H), 4.50-4.61 (m, 1H), 5.87-6.00 (m, 1H), 6.18 (q, J= 6.7 Hz, 1H), 6.38 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.83 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 9.14 (s, 1H). LCMS (m/z) 552.2 [M+H], Tr = 5.11 min.
EJEMPLO 19 , I Compuesto 19a A una solución de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (339 mg, 0.920 iranol) y (R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etanol (183 mg, 0.920 mmol) en diclorometano (4.6 mL) se le agregaron clorohidrato de N- ( 3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (211 mg, 1.10 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (56.2 mg, 0.46 mmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 21 h, la mezcla de reacción se purificó directamente por cromatografía de columna instantánea en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (224 mg, 42%) como un sólido color marrón ligero.
, , ¡ , Compuesto 19b A 19a (800 mg, 1.38 mmol) en diclorometano anhidro (12 mL) a 0°C y bajo una atmósfera de nitrógeno, se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (374 mL, 2.07 iranol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 2 h antes de agregar N,N-diisopropiletilamina (480 ml, 2.75 iranol) y luego se concentró in vacuo para proporcionar un sólido color blanco. Al sólido se le agregó una solución de ácido (E)-(R)-2-etil-pent-3-enoico (188 mg, 1.65 mmol) en acetonitrilo anhidro (12 mL) seguido por N,N-diisopropiletilamina (240 m?, 1.38 mmol) y 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uranio hexafluorofosfato metanaminio (733 mg, 1.93 mmol). La reacción se agitó a TA por 3 h y se concentró in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 1:2 luego 1:5 para dar el compuesto del título (250 mg, 74% sobre 2 etapas) como un aceite amarillo viscoso.
I l Compuesto 19 A 19b (200 mg, 0.34 mmol) en tolueno anhidro (113 mL) a 70°C y bajo una atmósfera de nitrógeno, se le agregó catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (42 mg, 0.07 mol). La reacción se calentó a 120°C por 2 h después de lo cual una cantidad adicional del catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (30 mg, 0.05 mmol) se agregó. Después de 2 h adicionales a 120°C la reacción se enfrió a TA y isocianoacetato de potasio (83 mg) en metanol (2 mL) se agregó. La reacción se agitó por 1 hora, se agregó sílice y luego se concentró in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo/acetona 3:1 para proporcionar un sólido color café.
Esto se purificó además por HPLC preparativa de fase inversa para dar el compuesto del titulo (2.2 mg, 1%) como un sólido blanco. XH RMN (300 MHz, CD3OD) 0.97 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.02 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.11 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 1.64 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.70 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.71-2.06 (m, 7H), 2.66-2.82 (m, 1H), 3.13-3.22 (m, 1H), 3.75-3.85 (m, 1H), 4.30-4.48 (m, 2H), 5.51-5.67 (m, 1H), 6.07 (q, J = 6.3 Hz, 1H), 6.48-6.57 (m, 1H), 6.61 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 8.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 9.15 (s, 1H).. LCMS (m/z) 550.2 [M+H], Tr = 1.67 min. i Compuesto 20a A 19a (390 mg, 0.67 inmol) en diclorometano anhidro (7 mL) a 0°C y bajo una atmósfera de nitrógeno, se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (182 mla, 1.01 m ol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 1 hora antes de apagar con una solución acuosa saturada de carbonato ácido de sodio y extraer con actato de etilo (2 x). Las capas orgánicas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron in vacuo para proporcionar un sólido color blanco. El sólido se disolvió en acetonitrilo anhidro (4 mL) y ácido 2-metil-but-3-enoico (81 mg, 0.81 mmol), clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (184 mg, 0.94 mmol) y monohidrato de 1-hidroxibenzotriazol (103 mg, 0.67 mmol) se agregaron. La reacción se agitó a TA por 16 h y se concentró in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 1:1 luego 1:3 para dar el compuesto del título (259 mg, 69 %) como un aceite viscoso claro.
Compuesto 20 A 20a (250 mg, 0.44 mmol) en tolueno anhidro desgasificado (148 mL) se le agregó 2,6-diclorobenzoquinona (8 mg, 0.04 mol). La mezcla se calentó a 105°C y una solución de catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (83 mg, 0.13 mmol) en tolueno anhidro (20 mL), se agregó por medio de bomba de jeringa durante 2 h. Una cantidad adicional de catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (28 mg) se agregó y la reacción se calentó a reflujo por 1 h. La reacción se enfrió a TA, gel de sílice se agregó y se concentró in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etílo/acetona 1:0 luego 3:1 para proporcionar un aceite. Esto se trituró con éter de dietilo y pocas gotas de acetato de etilo para .proporcionar un sólido color café que se purificó además por TLC preparativa usando acetato de etilo/acetona 5/1 para dar el compuesto del titulo (9 mg, 1%) como un sólido color blanco apagado. XH RMN (300 MHz, CDCl3) 0.97 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.38 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.62 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.70 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.72-1.82 (m, 2H), 1.91-2.01(m, 2H), 2.03-2.12 (m, 1H), 2.62-2.74 (m, 1H), 3.35 (app t, J = 7.4 Hz, 1H), 3.59 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.65-3.77 (m, 1H), 4.26 (app t, J = 8.9 Hz, 1H), 4.51-4.60 (m, 1H), 5.68-5.79 (m, 1H), 6.06 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 6.16 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.27 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.40 (dd, J = 16.0, 7.8 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 8.5, 1.3 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.93 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 9.16 (s, 1H). LCMS (m/z) 536.2 [M+H], Tr = 1.63 in. , Í Compuesto 21a 21a se preparó de la misma manera como 20a reemplazando ácido 2-metil-but-3-enoico con ácido (R)-2-metil-pent-4 enoico (preparado como se describe en Synlett 2002, No 12, 2039-2040, 82 mg, 0.72 mmol), para proporcionar el compuesto del título (280 mg, 67%) como una espuma blanca.
I Compuesto 21 A 21a (250 mg, 0.43 mmol) en tolueno anhidro (144 mL) a TA y bajo una atmósfera de nitrógeno, se le agregó catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (54 mg, 0.09 mmol). La reacción se calentó a 120°C por 2 h después de lo cual una cantidad adicional del catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (25 mg, 0.04 mmol) se agregó. Después de 1 h adicional a 120°C la reacción se enfrió a TA y concentró ín vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo/acetona 1:0 luego 3:1 para proporcionar un sólido color café. Esto se trituró con éter de dietilo/acetato de etilo 3:1 para dar el compuesto del título (50 mg, 22%) como un sólido color blanco apagado. lñ R N (300 MHz, CDCI3) 0.91 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.99 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.29 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.59 (d, J = 6.7 Hz, 3H) , 1. 67 (d, J = 6. 5 Hz, 3H) , 1.70-1.84 ( , 1H) , 1. 92-2. 15 (m, 4H), 2.33-2.48 (m, 1H), 2.63-2.98 (m, 3H), 3.53 (d, J = 12.2 Hz, 1H) , 3. 60-3. 72 ( , 1H) , 4. 42 (dd, J = 6.7, 2.2 Hz 1H) , 4.52-4.61 (m, 1H) , 5.62-5.74 (m, 1H) , 6.11 (q, J = 6.7 Hz, 1H) , 6.16 (q, J = 8.9 Hz, 1H) , 6.42 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 6.53-6.66 (m, 1H) , 6.75 (d, J = 16.1 Hz, 1H) , 7.37 (dd, J = 8.7, 1.0 Hz, 1H) , 7.80-7.96 (m, 3H) , 9.16 (s, 1H) . LCMS (m/z) 550.3 [M+H] , Tr = 1.50 min.
EJEMPLO 22 1) AcCI, Nal, MeCN 2) PdCI2(PPh3)2, dioxano I Compuesto 22a A una solución espesa agitada de 7-bromo-2-cloro-quinolina (8.10 g, 33.4 m ol) y yoduro de sodio (50.0 g, 334 mmol) en acetonitrilo (27 mL) se le agregó lentamente cloruro de acetilo (3.56 L, 50.0 mmol). El matraz se tapó y selló y se calentó a 80°C por 3 h antes de que se permitiera enfriar. La mezcla se trató secuencialmente con solución de carbonato de potasio acuosa 10% p/p (80 mL), solución de sulfito de sodio acuosa 5% p/p (80 mL) y solución de tiosulfato de sodio acuosa saturada (80 L) y la mezcla se extrajo con diclorcmetano (2x). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y evaporaron para dar una 7-bromo-2-yodo-quinolina cruda. A la quinolina se le agregó tributil (1-etoxivinil)estaño (13.6 mL, 40.1 mmol), 1,4-dioxano (67 mL) y dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (2.37 g, 3.34 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 100°C por 5 h antes de permitir enfriar. El ácido clorhídrico acuoso 2 M (67 mL) se agregó y la reacción se agitó por 1 h. La mezcla se filtró y los sólidos se lavaron con acetato de etilo y el filtrado se evaporó para eliminar los orgánicos. El residuo se extrajo con acetato de etilo (3 x) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y evaporaron. El producto se purificó sobre gel de sílice alterado con carbonato de potasio 10% p/p eluyendo con un gradiente de 0 hasta 6% acetato de etilo en iso-hexanos para proporcionar el compuesto del título (5.5 g, 66%) como un sólido blanco.
OH Compuesto 22b El dicloro (p-cimeno) rutenio(II) dímero (61 mg, 0.100 mmol) y (IR,2R)-(-)-W-p-tosil-1,2-difeniletilenodiamina (88 mg, 0.012 mmol) se suspendió en agua desgasificada (40 mL) y la mezcla se desgasificó con nitrógeno por 5 min. La mezcla se agitó a 70°C bajo nitrógeno por 90 min. La mezcla color naranja turbia resultante se permitió enfriar a TA. El 22a (5.00 g, 20 mmol) en tetrahidrofurano desgasificado (40 mL) se agregó seguido por formiato de sodio (6.8 g, 100 mmol) y la mezcla de reacción se desgasificó con nitrógeno por 5 min. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 40°C por 4 h y se permitió enfriar. Esto se diluyó luego con acetato de etilo y agua y la capa orgánica se separó, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de 0% hasta 30% acetato de etilo en iso- exanos para proporcionar el compuesto del título (4.96 g, 98%) como un sólido color blanco apagado.
, Compuesto 22c A una solución de 22b (1.00 g, 3.97 mmol) y trietilamina (1.65 mL, 11.9 mmol) en diclorometano anhidro a 0°C, se le agregó anhídrido acético (0.75 mL, 7.93 mmol) y 4- (dimetilamíno)piridína (24 mg, 0.197 mmol). La mezcla de reacción se agitó y se permitió entibiar a TA. Después de 1.5 h se agregó agua (100 mL) y las capas separadas. La fase acuosa se re-extrajo con diclorometano (2 x 100 mL) y los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar un residuo crudo. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos (66 mL) luego iso-hexanos/acetato de etilo 95:5 (300 mL), luego iso-hexanos/acetato de etilo 9:1 (1066 mL) para dar el compuesto del título (1.16 g, 99%) como un aceite incoloro.
, , , Compuesto 22d A una solución de ácido acético 22c (1.16 g, 3.95 mmol) en acetonitrilo anhidro se le agregó acetato de paladio(II) (89 mg, 0.395 mmol), ácido 2,2-dimetil-but-3-enoico (496 mg, 4.35 mmol), tri(o-tolil)fosfina (241 mg, 0.790 mmol) y trietilamina (1.09 mL, 7.90 mmol) luego la mezcla se calentó en el microondas a 100°C por 20 min. La mezcla de reacción se concentró in vacuo luego se agregó agua (200 mL) y los orgánicos se extrajeron con acetato de etilo (2 x 50 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar un residuo crudo. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 95:5 (300 mL), luego iso-hexanos/acetato de etilo 9:1 (1066 mL) luego iso-hexanos/acetato de etilo 3:1 (1066 mL) para dar el compuesto del título (792 mg, 61%) como un sólido blanco.
, , ¡ Compuesto 22e Una solución de le (1.29 g, 2.42 mmol) en diclorometano (12 mL) se enfrió en un baño de hielo-agua bajo nitrógeno. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (0.715 mL, 4.84 mmol) se agregó gota a gota, y la solución resultante se agitó por 1 h. La reacción se apagó con N,N~ diisopropiletilamina (1.69 mL, 9.68 mmol) y la mezcla de reacción se concentró in vacuo para dar áster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico como un sólido blanco que se usó sin purificación adicional. A una solución de 22d (792 mg, 2.42 mmol) en N,N-dimetilfor amida (10 mL) a 0°C bajo nitrógeno se le agregó N,N-diisopropiletilamina (2.11 mL, 12.1 mmol) y 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (1.01 g, 2.66 mmol). La mezcla resultante se agitó a TA por 15 min luego se re-enfrió a 0°C y áster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)—1—[(S)—2—((S)— 2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin- 3-carboxílico generado en la etapa previa, se agregó como una solución en ALN-dimetilformamida (10.7 mL). La mezcla de reacción luego se permitió enfriar a TA con agitación. Después de 1 h la mezcla se diluyó con acetato de etilo (100 mL) y agua (100 mL). Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (100 mL). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar un residuo crudo. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetona 95:5 (1000 mL) luego iso-hexanos/acetona 9:1 (1 L) luego iso-hexanos/acetona 85:15 (1 L) luego iso-hexanos/acetona 3:1 (1 L) luego iso-hexanos/acetona 7:3 (1 L) para dar el compuesto del título (1.11 g, 62%) como un sólido incoloro. Í .
Compuesto 22f Una solución de 22e (1.11 g, 1.50 mraol) en tetrahidrofurano (14.7 mL) se enfrió en un baño de hielo-agua y metanol (7.4 mL), agua (7.4 mL), y litio hidróxido monohidrato (252 mg, 6.0 mmol) se agregaron luego. La mezcla se agitó por 1 h en el baño de hielo-agua y luego se apagó con ácido clorhídrico 1 M acuoso (6 mL, 6.0 mmol). La solución resultante se concentró in vacuo, y el producto crudo se concentró de etanol (4 x 250 L) luego acetonitrilo (4 x 250 mL) y tolueno (5 x 250 mL). El sólido aislado luego se dejó en el liofilizador durante la noche para proporcionar el compuesto del título (853 mg, rendimiento cuantitativo) como un sólido blanco.
· Compuesto 22 Bajo nitrógeno, 2-metí1-6-nítrobenzoico anhídrido (2.59 g, 7.51 mmol) y 4-(dimetilamino)piridina (1.38 g, 11.3 mmol) se disolvieron en 1,2-dicloroetano (500 mL) y la solución resultante se calentó a 50°C. El ácido seco crudo de la etapa previa, 22f (853 mg, 1.50 mmol) se disolvió en N,N-dimetilformamida (19 mL) y agregó a la mezcla de reacción gota a gota por medio de bomba de jeringa durante 6 h. Después de que la adición se completo, la bomba de jeringa se enjuagó luego con N,N-dimetilformamida adicional (3 mL) y la mezcla de reacción se agitó a 50°C por 40 min. Después de este tiempo la mezcla se concentró para dar un residuo. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos (66 mL), luego iso-hexanos/acetona 4:1 (726 mL), luego iso-hexanos/acetona 7:3 (726 mL) , luego iso-hexanos/acetona 3:2 (726 mL). Esta columna inicial dio producto impuro (1.10 g) que contenia N,LG-dimetilformamida. A esto se le agregó salmuera (200 mL) y los orgánicos se extrajeron con acetato de etilo (2 x 100 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar producto impuro (900 mg) que no contiene AAA/-dimetilformamida· Este residuo se purificó por una segunda cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetona 95:5 (6 L), luego iso-hexanos/acetona 93:7 (1.5 L), luego iso-hexanos/acetona 88:12 (3 L), luego iso-hexanos/acetona 82:16 hasta que todo el producto se eluyo de la columna. Dos lotes del producto deseado en 87% de pureza (lote A) y 77% de pureza (lote B) se aislaron. El lote A se trituró dos veces con éter de dietilo 100% para dar el compuesto del título (241 mg) en aproximadamente 90-95% de pureza. La purificación del Lote B por HPLC de fase inversa preparativa dio el compuesto del título (181 mg) en aproximadamente >95% de pureza. Lote A y B se combinaron para dar el compuesto del título (422 mg, 51%) como un sólido blanco. XH RMN (500 MHz, CD3OD) 0.94 (app t , J = 6.7 Hz, 6H), 1.34 (s, 3H), 1.48 (s, 3H), 1.58 (d, J = 7.3 Hz, 3H), 1.62-1.75 (m, 5H), 1.82-1.91 (m, 1H), 1.92-2.03 (m, 2H), 2.66-2.78 (m, 1H), 3.78 (app d , J = 8.5 Hz, 1H), 4.25-4.33 (m, 1H), 4.34-4.43 (m, 1H) , 5.71 (q, J = 7.3 Hz, 1H) , 5.89 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 16.0 Hz, 1H) , 6.46 (d, J = 16.0 Hz, 1H) , 7.27 (br d, J = 9.8 Hz, 1H) , 7.38 (d, J = 8.6 Hz, 1H) , 7.60 (s, 1H) , 7.75 (ABq, AC¾B = 0.03, JAB = 8.54 Hz, 2H) , 8.18 (d, J = 7.9 Hz, 1H) . LCMS (m/z) 550.1 [M+H] , Tr = 2.24 min.
EJEMPLO 23 I I PdCl2(dppf).CH2ci2 Compuesto 23a Una solución de 6-bromo-3-cloro-isoquinolina (2.0 g, 8.25 mmol) en n-propanol (90 mL) se preparó y viniltrifluoroborato .de potasio (l.ll g, 8.25 mmol) se agregó. La solución se purgó con nitrógeno por 10 min antes de la adición de [1,1'— bis (difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II), complejo con diclorometano (128 mg, 0.157 mmol) y trietilamina (1.15 mL, 8.25 mmol). La mezcla de reacción se purgó luego con nitrógeno por 3 minutos adicionales antes del calentamiento a reflujo por 1 h. La mezcla de reacción luego se permitió enfriar a TA y agua se agregó. Los orgánicos se extrajeron luego con éter de dietilo (3 x 150 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar un residuo crudo. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice, usando iso-hexanos/éter de dietilo 9:1 para dar el compuesto del título (1.26 g, 80%) como un aceite.
Compuesto 23b Una suspensión de 23a (1.24 g, 6.54 mmol) en metanol (125 mL) y diclorometano (125 mL) se enfrió a -78°C. La reacción se purificó con ozono hasta que un color azul persistió (en aproximadamente 15 min), luego el nitrógeno se burbujeó a través de la mezcla de reacción por 15 min para purgar el ozono. La reacción se trató luego con bicarbonato de sodio sólido (549 mg, 6.54 mmol) y sulfuro de dimetilo (1.31 mL, 1.31 mmol). La mezcla se permitió entibiar a TA y después de 3 h la mezcla de reacción se concentró in vacuo. El agua (200 mL) se agregó al residuo y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 200 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar el compuesto del título (1.02 g, 81%) como un aceite.
A en tetrahidrofurano (10 mL) a 0°C se le agregó solución de trimetil (trifluorometil)silano (3.19 mL, 2 M en tetrahidrofurano, 6.38 mmol) seguido por solución de fluoruro de tetrabutilamonio (0.053 mL, 1 M en tetrahidrofurano, 0.053 mmol) y la solución resultante se agitó a 0°C por 1.5 h. La mezcla de reacción luego se permitió enfriar a TA y ácido clorhídrico 2 M (10 mL) se agregó y la mezcla se agitó por 10 min antes de la adición de agua (200 mL). La capa acuosa se extrajo luego con acetato de etilo (3 x 100 mL). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron para dar el compuesto del título (1.30 g, 93%) como un sólido.
Compuesto 23d A una solución de 23c (1.30 g, 4.97 mmol) en diclorometano (14.7 mL) a 0°C se le agregó solución de peryodinano Dess-Martin (14.7 mL, 15% en diclorometano, 6.96 mmol) y la mezcla de reacción se agitó y se permitió entibiar a TA. El metabisulfito de sodio acuoso 1 M (100 mL) se agregó y la mezcla de reacción se agitó por 15 min. A esta mezcla se le agregó solución de bicarbonato de sodio acuoso saturado (100 mL) y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 100 mL). Los orgánicos combinados se lavaron con solución de bicarbonato de sodio acuoso saturado (200 mL) seguido por salmuera (100 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar el compuesto del titulo (1.0 g, 78 %) como un sólido. i i ' , 1 i¡ l l i , Compuesto 23e Una mezcla de 23d (686 mg,· 2.64 mmol), (R)-2-metil-2-propanosulfinamida (400 mg, 3.30 mmol) e isopropóxido de titanio (IV) (1.95 mL, 6.60 mmol) en tetrahidrofurano (27.4 L) se calentó a reflujo por 16 h luego se permitió enfriar a TA. La mezcla de reacción se concentró in vacuo y re-disolvió en éter de dietilo (27.4 L) luego se enfrió a -78°C. A esta mezcla se le agregó solución de L-selectrida® (7.93 mL, 1.0 M en tetrahidrofurano, 7.93 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a -78°C por 1 h. Salmuera (30 mL) se agregó luego y la mezcla se permitió entibiar a TA. Más salmuera (200 mL) y acetato de etilo (300 mL) se agregaron y las capas se separaron. La fase acuosa se re-extrajo con diclorometano (500 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar un residuo crudo. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice, usando elución de gradiente de diclorometano a diclorometano/metanol 99:1 para dar el compuesto del título (553 mg, 57% de rendimiento, 94% d.e.)· i ' .
Compuesto 23f A una solución de 23e (553 mg, 1.52 mmol) en metanol (10 mL) se le agregó solución de ácido clorhídrico 4 M en 1,4-dioxano (1.52 mL, 6.06 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA por 30 min. La solución de ácido clorhídrico 4 M adicional en 1,4-dióxano (1.52 L, 6.06 ol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a TA por 30 min luego se concentró in vacuo para dar el compuesto del título (507 mg, rendimiento cuantitativo).
. Una mezcla de 23f (507 mg, 1.52 mmol) y trietilamina (0.84 L, 6.08 mmol) en diclorometano (20 mL) se agitó a 0°C para dar una solución. Luego una solución de bicarbonato de di-tert-butilo (497 mg, 2.28 mmol) en diclorometano (4 mL) se agregó y la mezcla de reacción se agitó y se permitió entibiar a TA durante 24 h. Agua (200 L) se agregó y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 100 mL), se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró in vacuo para dar un residuo (816 mg). Este residuo se disolvió en diclorometano (20 mL) y se enfrió a 0°C luego trietilamina (0.84 mL, 6.08 mmol) se agregó seguido por una solución de bicarbonato de di-tert-butilo (497 mg, 2.28 mmol) en diclorometano (4 mL) y la mezcla de reacción se agitó y se permitió entibiar a TA durante 72 h. El bicarbonato de di-tert-butilo adicional (162 mg, 0.74 mmol) se agregó y la agitación continuó por 30 min luego agua (100 mL) se agregó y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 50 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar un residuo crudo. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice, usando elución de gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 9:1 hasta iso-hexanos/acetato de etilo 1:1 para dar el compuesto del título (140 mg, 25%) como un aceite.
- I .
Compuesto 23h A una solución de 23g (135 mg, 0.37 mmol) en n-propanol (6 mL) se le agregó viniltrifluoroborato de potasio (55 mg, 0.412 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino) ferroceno]dicloropaladio (II), complejo con diclorometano (5.8 mg, 0.007 mmol) y trietilamina (0.052 mL, 0.37 mmol). La suspensión se evacuó y purgó con nitrógeno 3 veces antes del calentamiento a 100°C por 2 h. Después de este tiempo viniltrifluoroborato de potasio adicional (100 mg, 0.748 mmol) se agregó y el calentamiento continuó a 100°C por 16 h. Después de este tiempo, [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaladio(II) adicional, complejo con dicloro etano (9 mg, 0.011 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó en un reactor de microondas a 150°C por 90 min. Después de este tiempo [1,1'-bis(difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II) adicional, complejo con diclorometano (9 mg, 0.011 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó en un reactor de microondas a 150°C por 10 min. El agua (100 mL) se agregó a la mezcla de reacción y la capa acuosa se extrajo luego con éter de dietilo (2 x 100 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron ín vacuo para dar el compuesto del titulo (132 mg, rendimiento cuantitativo).
I l : . I Compuesto 23i A una solución de 23h (132 mg, 0.37 mmol) en metanol (2 mL) se le agregó ácido clorhídrico 4 M en 1,4-dioxano (0.37 mL, 0.75 mmol) y la mezcla se agitó a TA por 30 min. El ácido clorhídrico 4 M adicional en 1,4-dioxano (3.0 mL, 6.08 mmol) se agregó y continuó la agitación por 2 h luego la mezcla de reacción se concentró in vacuo para dar un residuo. El residuo luego se concentró del éter de dietilo (2 mL), seguido por acetonitrilo (10 mL) y esto se repitió dos veces para dar sal del ácido clorhídrico (S)-2,2,2-trifluoro-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etilamina (108 mg, rendimiento cuantitativo). A una suspensión de sal del ácido clorhídrico (S)-2,2,2-trifluoro-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etilamina (108 mg, 0.374 mmol) en acetonitrilo (-2 L) a 0°C bajo nitrógeno se le agregó ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-but-3-enoilamino-3-metíl-butirílamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (138 mg, 0.37 mmol), clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (100 mg, 0.52 mmol) e hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (63 mg, 20% en p en agua, 0.37 mmol). La suspensión resultante se agitó a 0°C por 15 min antes de la eliminación del baño de hielo-agua y se agitó a TA por 16 h. N,N-Diisopropiletilamina (0.5 mL, 2.87 mmol) se agregó y la solución se agitó a TA por 2.5 h donde ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-but-3-enoilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico adicional (69 mg, 0.19 mmol) se agregó y continuó la agitación. Después de 1 h, clorohidrato de N- {3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida (134 mg, 0.70 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a TA por 1 hora. Después de este tiempo, la mezcla se concentró in vacuo y el residuo diluido con acetato de etilo (60 mL). Agua (50 mL) se agregó y las capas se separaron. La fase acuosa se re-extrajo con acetato de etilo (2 x 10 mL) y los orgánicos combinados se lavaron luego con cloruro de amonio (2 x 50 mL), se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar un residuo crudo. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice, usando elución de gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 9:1 a iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 a iso-hexanos/acetato de etilo 1:1 y finalmente iso-hexanos/acetato de etilo 0:1. Esto dio el compuesto del título (124 mg, 55%). l Compuesto 23 A una solución de 23i (124 mg, 0.21 mmol) en tolueno (69 L) se le agregó catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (13 mg, 0.02 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 115°C por 1.5 h. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs adicional (13 mg, 0.02 mmol) se agregó y el calentamiento continuó a 120°C por 50 min. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs adicional (13 mg, 0.02 mmol) se agregó y el calentamiento continuó a 120°C por 30 min. Después de este tiempo la mezcla se permitió enfriar a TA y se concentró in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo a acetato de etilo/acetona 9:1. El producto impuro (28.3 mg) se colectó el cual se purificó además por TLC preparativa eluyendo con acetato de etilo/acetona 95:5 para proporcionar el compuesto del título (4 mg, 3%) como un sólido blanco. XH RMN (300 MHz, CD3OD) 0.99 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.7Hz, 3H), 1.29-1.39 (m, 1H), 1.69 (d, J = 7.4 Hz, 3H), 1.74-2.01 (m 5H), 2.73 (td, J 12.9, 2.9 Hz, 1H), 2.99-3.11 (, 1H), 3.74-3.83 (m, 1H), 4.26 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.41 (jbr d, J = 13.2 Hz , 1H) , 5.48 (q, J = 7.4 Hz, 1H) , 5.84 (q, J = 8.3 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 6.62-6.71 (m, 1H), 7.47 (s, 1H) , 7.76 (d, J = 8.6 Hz, 1H) , 7.89 (s, 1H) , 8.13 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 9.22 (s, 1H). LCMS (m/z) 575.2 [M+H], Tr = 1.53 min.
EJEMPLO 24 , , , mo , i Compuesto 24a A una solución de (R)-1- (7-bromo-quinolin-2-il)-etanol (295 mg, 1.17 mmol) en acetonitrilo anhidro (12 mL) se le agregaron éster de tert-butilo del ácido but-3-enoico (0.44 mL, 2.75 mmol), bis(tri-tert-butilfosfina)paladio (0) (25 mg, 0.049 mmol) y ¿7 N-diciclohexilmeti-lamina (0.39 mL, 1.83 mmol) luego la mezcla se calentó a reflujo por 2 h. La mezcla de reacción se concentró in vacuo para dar un residuo crudo. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 95:5 para dar el compuesto del título (348 mg, 95%) como un sólido blanco.
, Compuesto 24b A 24a (363 mg, 1.16 mmol) y ácido (S)-1-[(S)-2- ((S)-2- tert-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (505 mg, 1.26 mmol) en diclorometano (20 mL) se le agregó clorohidrato de N- {3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (311 mg, 1.62 mmol) y 4-dimetílaminopíridina (142 mg, 1.16 mmol). La mezcla de reacción se agitó luego a TA por 16 h. A la mezcla se le agregó solución de cloruro de amonio acuoso saturado (100 mL) y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 50 mL). La fase acuosa se lavó además con diclorometano (20 mL) y los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar un residuo crudo. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 (120 L) luego íso-hexanos/acetato de etilo 7:3 (855 mL) luego iso-hexanos/acetato de etilo 3:2 (540 mL) para dar el compuesto del título (357 mg, 44%) como un sólido blanco.
-' Compuesto 24 A una solución de 24b (342 mg, 0.492 mmol) en diclorometano (2.5 mL) a 0°C se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (0.18 mL, 0.96 mmol) y la solución color amarillo pálido se agitó a 0°C por 2.75 h. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo adicional (0.073 mL, 0.45 mmol) se agregó y la agitación continuó por 1.33 h. N,N-Diisopropiletilamina (0.6 L, 3.44 mmol) se agregó y la mezcla se agitó por 10 min luego se concentró in vacuo para dar intermediario éster de (R)-1-[7-( (E)-3-carboxi-propenil)-quinolin-2-il]-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (266 mg, 0.45 mmol). A una solución de éster de (R)-1-[7-((E)-3-carboxi-propenil)-quinolin-2-il]-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (266 mg, 0.45 mmol) en acetonitrilo (50 mL) a 0°C bajo nitrógeno se le agregó N,N-diisopropiletilamina (0.343 mL, 1.971 mmol) y 2- (IH-7-azabenzotriazol-l-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (262 mg, 0.70 mmol). La mezcla se agitó a 0°C y se permitió entibiar a TA durante 16 h. A la mezcla de reacción se le agregó solución de ácido clorhídrico acuoso 2 M (20 mL) y la mezcla se concentró in vacuo. La capa acuosa se extrajo con diclorometano/metanol 9:1 (2 x 100 mL). Los orgánicos combinados se lavaron con solución de carbonato ácido de sodio saturado (2 x 200 mL), luego salmuera (1 x 100 mL), se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron in vacuo para dar un residuo crudo. Esto se purificó por cromatografía en gel de sílice usando elución de gradiente de acetato de etilo/acetona 97:3 hasta acetato de etilo/acetona 94:6. Se colectó 45 mg de producto impuro que se trituró con éter de dietilo para dar el compuesto del título (25.4 mg, 10%) como un sólido amarillo pálido.1H RMN (300 MHz, CD3OD) d 0.99 (d, J = 6.48 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.1Hz, 3H), 1.64 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.66-1.72 (m, 1H), 1.74 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.85-2.08 (, 4H), 2.75 (dd, J = 2.9, 12.9 Hz, 1H), 2.97-3.07 (m, 1H), 3.35-3.40 (m, 1H), 3.79-3.88 (m, 1H), 4.23 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.43 [br d, J = 11.2 Hz, 1H), 5.72 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 5.94 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 16.7 Hz, 1H), 6.55 (dt, J = 4.7, 16.7 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.75 (dd, J = 1.3, 8.7 Hz, 1H), 7.81 (d, J - z, 1H). LCMS (m/z) 522.2 . , . , puesto 25a Una solución fría (-20°C) de (S)-6-bromo-índan-1-ol (1.0462 g, 4.910 m ol, preparada como se describe en la WO 2009/003719) en tetrahidrofurano anhidro (20 mL) se trató posteriormente con trietilamina (2.7 mL, 19.639 mmol) y cloruro de metansulfonilo (760 mL, 9.820 mmol). Después de agitar a -30°C por 2.5 h, una solución de metílamina (2 M en tetrahidrofurano, 25 mL, 50 mmol) se agregó. Después de agitar a TA por 22.5 h la mezcla de reacción se filtró. El sólido blanco se enjuagó con éter de dietilo. El filtrado se evaporó hasta secarse para proporcionar el compuesto del título (1.11 g, rendimiento cuantitativo) como un sólido blanco.
, Compuesto 25b Una solución de 25a (1.11 g, 4.910 mmol) se trató posteriormente con bicarbonato de di-tert-butilo (1.714 g, 7.856 mmol) y trietilamina (690 pL, 4.91 mmol). Después de agitar por 25.5 h, los volátiles se removieron in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 9:1 para proporcionar el compuesto del título (1.4224 g, 89%) como un sólido blanco como una mezcla de rotámeros.
I , Compuesto 25c Una solución de 25b (1.4224 g, 4,363 mmol), [1,1-bis (difenilfosfino)ferroceno] dicloropaladio diclorometano complejo (71.3 g, 0.087 mmol), viniltrifluoroborato de potasio (701.3 mg, 5.236 mmol) y trietilamina (610 mL, 4.363 mmol) en n-propanol anhidro (40 mL) se desgasificó al bombear nitrógeno a través de por 30 min. La suspensión roja luego se calentó a reflujo por 17.5 h. Después del enfriamiento a TA, la mezcla se apagó con agua y la capa acuosa se extrajo con éter de dietilo (2 x). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/éter de dietilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (977.3 mg, 82%) como un sólido blanco como una mezcla de rotámeros.
, I , Compuesto 25d Una solución enfriada (0°C) de 25c (977.3 mg, 3.575 m ol) en diclorometano (20 mL) se trató con ácido trifluoroacético (5 mL). Después de agitar por 30 min a TA los volátiles se removieron ín vacuo y el ácido trifluoroacético residual se destiló azeotrópicamente con tolueno (3 x) para proporcionar la sal de amonio correspondiente como un sólido color rosa. Una solución enfriada (0°C) de sal de amonio crudo, ácido (S)-1-[(S)-2- ((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxilico crudo (3.932 mmol) y N, N-diisopropiletilamina (2.5 mL, 14.300 mmol) en acetonitrilo (60 mL) se trató con 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (1.903 g, 5.005 mmol). Después de agitar por 20 h a TA, la reacción se apagó con ácido clorhídrico (1 M, 100 mL). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 100 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 1:2 para proporcionar el compuesto del titulo en una mezcla que se disolvió en acetato de etilo y se lavó con carbonato de potasio acuoso. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo para proporcionar el compuesto del titulo (798.9 mg, 36%) como un sólido blanco como una mezcla de rotámeros.
, I I Compuesto 25e El compuesto 25e se preparó de la misma manera como 22e usando 25d en lugar de le en 27% de rendimiento como una mezcla de complejo de rotámeros.
I Compuesto 25 Una solución de 25e (238.3 mg, 0.390 m ol) en dicloroetano (100 mL) se trató con catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (48.9 mg, 0.078 mmol). Después de agitar a reflujo por 1.5 h, la reacción se enfrió a TA y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 10 g eluido por gravedad con un gradiente continuo de acetato de etilo/metanol 1:0 hasta 95:5 seguido por TLC preparativa eluido con acetato de etilo/metanol 97:3 (2 eluciones) para proporcionar el compuesto final (10.2 mg, 5%) como un sólido blanco. CH RMN (300 MHz, CD3CN) ¿0.85-0.97 (m, 6H), 1.21-1.35 (, 8H), 1.42-1.62 (m, 3H), 1.64-1.77 (m, 2H), 1.80-1.89 (m, 2H), 2.27-2.38 (m, 2H), 2.52 (dd, J = 7.6, 3.1 Hz, 1H), 2.76 (s, 3H), 2.82-3.06 (m, 2H), 3.27-3.35 (m, 1H), 3.47 (s, 3H), 3.80-3.91 (m, 1H), 4.06 (dd, J = 9.1, 8.2 Hz, 1H), 4.23 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 4.41 (dd, J = 12.9, 3.6 Hz, 1H), 5.44 ( app pentet, J = 8.0 Hz, 1H), 6.10-6.30 (m, 2H), 6.43 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 7.13-7.28 (m, 2H). LCMS (m/z) 582.3 [M+H], Tr = 2.57 min.
EJEMPLO 26 - Compuesto 26a Una solución de (S)-4-bencil-3-((R)-2-metil-pent-4 enoil)-oxazolidin-2-ona (1.65 g, 6.04 mmol, preparada como en Synlett 2002, 12, 2039-2040) en etanol/agua (22 mL, 10:1) se trató con rodio(III) cloruro hidrato (31.6 mg, 0.15 mmol).
Después de agitar a 85°C por 24 h, la mezcla·de reacción se enfrió a TA y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/éter de dietilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (892.7 mg, 54%) como un aceite incoloro. , 6b Una solución enfriada (0°C) de 26a (893 mg, 3.27 mmol) en tetrahidrofurano/agua (30 mL, 2:1) se trató posteriormente con peróxido de hidrógeno (1.7 mL, 16.33 mmol, 30% en agua) e hidrato de hidróxido de litio (274 mg, 6.53 mmol). Después de agitar por 1.5 h a 0°C, la reacción se apagó con metabisulfito de sodio (6.2 g, 32.66 mmol). Después de agitar a TA por 40 min, la mezcla se acidificó con ácido clorhídrico (2 M) y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x). Los orgánicos se combinaron, se filtraron a través de un separator de fase y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 25 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (307.1 mg, 82%) como un aceite incoloro.
I , Compuesto 26c El Compuesto 26c se preparó de la misma manera como éster de tert-butilo del ácido metil-((R)-6-vinil-indan-1-il)-carbámico usando (R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etanol en lugar de éster de tert-butilo del ácido ((R)-6-bromo-indan-l-il)-metil-carbámico en rendimiento cuantitativo. , 1 I Compuesto 26d Una solución de ácido (S)-1-[(5)-2-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxilico (261.2 mg, 0.653 mmol), 26c (108.4 mg, 0.544 m ol) y 4-dimetilaminopiridina (79.7 mg, 0.653 mmol) en diclorometano (10 mL) se trató con clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil)-L -etilcarbodiimida (166.9 mg, 0.870 mxnol). Después de agitar a TA por 17 h, los volátiles se removieron in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 1:4 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (139.6 mg, 44%) como un sólido blanco.
. ; . , Compuesto 26e Una solución enfriada (0°C) de 26d (139.6 mg, 0.240 mmol) en diclorometano anhidro (10 mL) se trató con metansulfonato de trimetilsililo (90 mL, 0.480 mmol). Después de agitar por 1.5 h a 0°C, la reacción se apagó con bicarbonato de sodio saturado. La capa acuosa se extrajo con diclorometano. Los orgánicos se combinaron, se filtraron a través de un separator de fase y los volátiles se removieron in vacuo para proporcionar el intermediario amina. Una solución de esta amina, ácido (E)-(R)-2-metil-pent-3-enoico (32.9 mg, 0.288 mmol) y 1-hidroxibenzotriazol (38.9 g, 0.288 mmol) en acetonitrilo (10 mL) se trató con clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N' -etilcarbodiimida (64.4 mg, 0.336 mmol) . Después de agitar a TA por 17.5 h los volátiles se removieron in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 25 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (69.8 mg, 50%) como un aceite incoloro.
- I I Compuesto 26 Compuesto 26 se preparó de la misma manera como compuesto 25 usando 26e en lugar de metil-((R)-6-vinil-indan- 1-il)-amida del ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-((2R,3R)-3-metoxi- 2-metil-hept-6-enoilamino)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico en 4% de rendimiento. CH RMN (300 MHz, CD3OD) d 0.94-1.00 (m, 6H), 1.47 (d, J = 7.6 Hz, 3H), 1.63 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.67-1.80 (m, 5H), 1.85-2.07 (m, 3H), 2.76 (td, J = 12.1, 3.3 Hz, 1H), 3.79-3.86 (m, 1H), 4.28 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.36-4.46 (m, 1H), 5.73 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 5.93 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 6.32-6.51 (m, 2H), 7.41 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.77-7.85 (m, 2H), 8.21 (d, J = 8.5 Hz, 1H). LCMS (m/z) 536.1 [M+H], Tr = 1.80 m EJEMPLO 27 Compuesto 27a Una solución fría (-78°C) de (R)-4-bencil-3-propionil-oxazolidin-2-ona (3.00 g, 12.9 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (40 mL) se trató con bis(trimetilsilil)amida de potasio (19.3 mL, 19.3 mmol, 1 M en tetrahidrofurano). Después de agitar por 0.45 h a -78°C, la mezcla se trató con bromuro de alilo (5.6 mL, 64.3 mmol). Después de agitar por 2 h a -40°C, la reacción se apagó con ácido clorhídrico 2 M. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mL). Los orgánicos se combinaron, y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Biotage 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 1:1 para proporcionar el compuesto del título (2.73 g, 78%) como un aceite incoloro.
I Compuesto 27b Una solución de 27a (2.73 g, 9.97 mmol) en etanol/agua (22 mL, 10:1) se trató con hidrato de cloruro de rodio(III) (52 mg, 0.25 mmol). Después de agitar a 85°C por 3 h, la mezcla de reacción se enfrió a TA y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Biotage 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (1.76 g, 65%) como un aceite incoloro. i , Compuesto 27c Una solución enfriada (0°C) de 27b (1.76 g, 6.44 mmol) en tetrahidrofurano/agua (60 raL, 2:1) se trató posteriormente con peróxido de hidrógeno (3.3 L, 32.2 mmol, 30% en agua) e hidrato de hidróxido de litio (534 mg, 12.9 mmol). Después de agitar por 2 h a 0°G, la reacción se apagó con etabisulfito de sodio (12.2 g, 64.4 mmol). Después de agitar a TA por 1 h, la mezcla se acidificó con ácido clorhídrico 2 M y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 xlOO mL). Los orgánicos se combinaron, filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Biotage 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (463 mg, 63%) como un aceite incoloro.
. , Compuesto 27d Una solución enfriada (0°C) de éster de (R)-1-(7-vinil-quinolin-2-il)-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2 - tert-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxilico (380 mg, 0.65 mmol) en diclorometano anhidro (10 mL) se trató con metansulfonato de trimetilsililo (237 mL, 1.31 mmol). Después de agitar por 1 h a 0°C, la reacción se apagó con bicarbonato de sodio saturado. La capa acuosa se extrajo con diclorometano. Los orgánicos se separaron y combinaron, los volátiles se removieron in vacuo para proporcionar el intermediario amina (305 mg). Una solución de esta amina, 27c (90 mg, 0.76 mmol) y 1-hidroxibenzotriazol (103 mg, 0.76 mmol) en acetonitrilo (20 mL) se trató con clorohidrato N- (3-dimetilaminopropil)-N’ -etilcarbodiimida (170 mg, 0.89 mmol). Después de agitar a TA por 16 h los volátiles se removieron in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho Biotage 25 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (236 g, 65%) como un aceite incoloro .
I Compuesto 27 El Compuesto 27 se preparó de la misma manera como compuesto 25 usando 27d en lugar de metil-((R)-6-vinil-indan- 1-il)-amida del ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-((2R,3R)-3-metoxi- 2-metil-hept-6-enoilamino)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico en 5% de rendimiento. 1H RMN (300 MHz, CD3OD) d 0.85-1.00 (m, 6H), 1.30 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.58 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.62-1.80 (m, 6H), 1.83-2.07 (m, 3H), 2.70-2.82 (m, 1H), 3.38-3.48 (m, 1H), 3.76-3.84 (m, 1H), 4.20-4.28 (m, 1H), 4.36-4.47 (m, 1H), 5.62-5.74 (m, 1H) . 5.93 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 6.30-6.51 (m, 2H), 7.39 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.70-7.80 (m, 2H), 8.13-8.22 (m, 1H). LCMS (m/z) 536.2 [M+H], Tr = 2.15 min.
EJEMPLO 28 , Compuesto 28a El carbonato de potasio (647 mg, 4.68 mmol) y bicarbonato de di-tert-butilo (716 mg, 3.28 mmol) se agregaron a 2-(3-bromo-fenil)-piperidina (750 mg, 3.12 mmol) en diclorometano (10 mL). Después de agitar durante la noche a TA agua (20 mL) se agregó a la solución. La solución bifásica resultante se separó en fases orgánica y acuosa. La fase acuosa se extrajo nuevamente con diclorometano (20 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron para proporcionar el compuesto del titulo (1.03 g, 97%) como un aceite color amarillo pálido. viniltrifluoroborato de potasio PdCI2(dppf) DCM NEtj, n-PrOH Compuesto 28b A una solución de 28a (1.03 g, 3.03 mmol) y viniltrifluoroborato de potasio (488 mg, 3.64 mmol) en n-propanol (30 mL), bajo una atmósfera de nitrógeno se agregó 1,1'bis (difenilfosfino)ferrocenodicloropaladio(II), aducto de diclorometano (49 g, 0.06 mmol) y trietilamina (306 mg, 422 m?, 3.03 mmol). La reacción se calentó a reflujo y se dejó agitar por 3 h antes de enfriar a TA. La mezcla de reacción se vació en agua y la solución resultante se extrajo con éter de dietilo (3 x 30 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (652 mg, 75%) como un aceite color amarillo pálido.
Compuesto 28c Una solución de (2R, 3R)-1-((lR,5S)-10,10-dimetil-3,3-dioxo-31ambda*6*-tia-4-aza-triciclo[5.2.1.0*1,5*]dec-4-il)-3-hidroxi-2-metil-hept-6-en-l-ona (250 mg, 0.703 irnnol) en diclorometano anhidro (7 mL) se preparó y tetrafluoroborato de trimetiloxonio (208 mg, 1.406 m ol) se agregó. La mezcla de reacción se agitó a TA por 15 h. La mezcla de reacción se trató con metanol (1 mL), luego ácido clorhídrico 2 M (20 mL) y salmuera saturado (20 mL). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 15 mL) y el extracto se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó para dar una goma color amarillo. La goma se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo 4:1 para dar el compuesto del título (223 mg, 86%) como una goma incolora.
Compuesto 28d Una solución de hidróxido de litio 2 M en agua (5 mL, 10 mmol) se agregó a una solución agitada de 28c (223 mg, 0.60 mmol) en tetrahidrofurano (15 mL). La mezcla agitada se calentó a 60°C por 15 h. La mezcla de reacción se evaporó parcialmente antes de agregar ácido clorhídrico 2 M (20 mL). La solución se extrajo con acetato de etilo (3 x 15 mL). El extracto se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y evaporó para dar una goma color amarillo (209 mg). La goma se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso- hexanos/acetato de etilo 3:1 para dar el compuesto del título (68 mg, 66%) como una goma color amarillo.
, , Una solución de éster de 2,2,2-tricíoroetilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-3- metilbutírilamíno)-propionil]-hexahidropiridazina-3- carboxílico (316 mg, 0.59 mmol) en diclorometano anhidro (10 mL) se enfrió a 0°C bajo una atmósfera de nitrógeno antes de agregar trifluorometansulfonato de trimetilsililo (160 må, 0.885 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 2 h antes de agregar N,N-diisopropiletilamina (413 ml, 2.36 mmol) para proporcionar éster de 2,2,2-tricloroetilo del ácido (S)- 1- [(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico. La mezcla se evaporó y el residuo se disolvió con ácido (2R,3R)-3-metoxi-2-metil-hept-6-enoico (162 mg, 0.94 mmol.) en acetonitrilo (13 mL) y clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N' -etilcarbodiimida (250 mg, 1.32 mmol) y 1-hidroxibenzotriazol (220 mg, 1.32 mmol) se agregaron. La reacción se agitó a TA por 15 h luego se evaporó para dar un aceite color amarillo. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo para dar el compuesto del título (425 mg, 77%) como un sólido blanco. , compuesto 28f Una solución de 28e (425 mg, 0.725 mmol) en tetrahidrofurano (20 mL) se preparó y polvo de zinc (0.48 g, 7.25 m ol) se agregó seguido por una solución acuosa de acetato de amonio (1 M, 5 mL, 5 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA por 15 h. La reacción se filtró a través de hiflo-supercel lavando completamente con acetato de etilo. La mezcla se trató con ácido clorhídrico (2 M, 30 mL) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (25 mL). Las capas orgánicas se combinaron, lavaron con salmuera, se filtraron y evaporaron para dar una goma incolora (299 mg) que se usó directamente sin purificación adicional.
. , ¡ Compuesto 28g Una solución de éster de tert-butilo del ácido 2-(3-vinil-fenil)-piperidin-1-carboxílico (650 mg, 2.26 mmol) en diclorometano (15 mL) se enfrió a 0°C, antes de agregar trifluorometansulfonato de trimetilsililo (569 mE, 3.39 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 1 h antes de agregar N,N-diisopropiletilamina (1.6 mL, 5.24 mmol) para proporcionar la 2-(3-vinil-fenil)-piperidina como un sólido color amarillo. El sólido se redisolvió, junto con 28f (900 mg, 1.98 mmol) en acetonitrilo (20 mL). La solución se enfrió a 0°C, antes de agregar 2- (IH-7-azabenzotriazol-l-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (1.05 g, 2.77 mmol) y N,JV-diisopropiletilamina (1.4 L, 7.92 mmol). La mezcla agitada de reacción se permitió entibiar lentamente a TA. Después de 2 h, el solvente se evaporó y el residuo restante se disolvió en acetato de etilo (30 mL) y se lavó con agua (3 x 30 mL). Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron. El residuo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (1.25 g, 100%) como un sólido color amarillo.
II Compuesto 28 A una solución agitada de 28g (1.05 mg, 1.68 mmol) en 1,2-dicloroetano (550 mL) se le agregó catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (105 mg, 0.168 mmol). La solución se calentó a 84°C y se dejó agitar por 2.5 h. El solvente se evaporó y el residuo restante se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso-hexanos/acetato de etilo/acetona 1:0:0 hasta 0:9:1. Este material luego se sometió a una segunda ronda de cromatografía en gel de sílice usando el mismo gradiente para proporcionar un sólido amarillo. Una ronda final de cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo puro y eluyendo puramente por gravedad proporcionó el compuesto del título (175 mg, 18%) co o un sólido blanco como una mezcla de diaestereoisó eros 6:4. CH RMN (300 MHz, CDCl3) d 0.84 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.91-1.01 (m, 6H), 1.24-1.37 (m, 6H), 1.47-2.03 (m, 14H), 2.06 (s, 2H) , 2.14-2.25 ( , 1H) , 2.43-2.77 (m, 4H) , 3.48 (s, 1H), 3.56 (s, 2H), 3.63-3.86 (m, 1H), 4.00 (app t, J 14.7 Hz , 1H) , 4.12-4.17 (m, 1H) , 4.53-4.65 (m, 1H) , 5.45 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 6.27-6.50 (m, 2H), 6.99-7.10 (m, 2H), 7.14-7.22 (m, 1H) , 7.32-7.38 (m, 1H) . LCMS (m/z) 596.4 [M+H] , Tr = 2.51 min.
EJEMPLOS 29 y 30 Compuesto 29 Compuesto 30 El Compuesto 28 (155 mg, 0.26 mol) se disolvió en una mezcla de acetonitrilo/agua 1:1 a una concentración de 7.8 mg/mL. Esta solución se eluyó luego a través de un sistema HPLC de fase inversa equipado con una columna Phenomenex Gemini 10m 110A, 250 x 21.2 mm usando un acetonitrilo/flujo de agua 2:3 isocrático a 20 mL/min. La mezcla se resolvió en los 2 diaestereoisó eros separados. En la concentración cada diaestereoisómero separado proporcionó un sólido color blanco. La estereoquímica de cada isómero no se determinó. Primer isómero eluido, Compuesto 29 (15 mg, 10%).1H RMN (300 MHz, CDCl3) d 0.89-1.05 (m, 8H), 1.20-1.44 (m, 10H), 1.51- 1.79 (m, 3H), 1.83-1.99 (m, 4H), 2.03-2.27 (m, 3H), 2.33-2.67 (m, 3H), 2.76 ( app t, J = 12.3 Hz, 1H), 3.09 (app t, J = 12.3 Hz, 1H), 3.22-3.38 (m, 1H), 3.47 (s, 3H), 3.54-3.62 (m, 1·H), 4.17 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 5.39-5.53 (m, 1H), 6.01 (s, 1H) 6.09-6.23 (m, 1H), 6.30-6.55 (m, 2H), 6.99-7.23 (m, 4H). LCMS (m/z) 596.4 [M+H], Tr = 2.53 min.
Segundo isómero eluido, Compuesto 30 (22 mg, 14%). 1H RMN (300 MHz, CD3CN) 50.98-1.04 (m, 6H), 1.26-1.38 (m, 7H), 1.62-1.80 (m, 5H), 1.83-2.00 (m, 4H), 2.03-2.14 (m, 1H), 2.16-2.25 (m, 2H), 2.36-2.51 (m, 2H), 2.54-2.66 (m, 1H), 2.68-2.82 (m, 1H), 3.03-3.16 (m, 1H), 3.26-3.34 (m, 1H), 3.48 (s, 3H), 3.64-3.73 (m, 1H), 3.76-3.86 (m, 1H), 4.00 (ap t, J = 9.0 Hz, 1H), 4.16 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.55-4.66 (m, 1H), 5.41-5.53 (m, 1H), 5.97-6.06 (m, 1H), 6.10-6.22 (m, 1H), 6.35 (s, 1H), 6.38-6.49 (m, 1H), 7.00-7.11 (m, 2H), 7.14-7.23 (m, 3H) . LCMS (m/z) 596.3 [M+H], Tr = 2.49 min.
EJEMPLO 31 , l ., Compuesto 31a Una solución enfriada (0°C) de (R)-4-bencil-3-[(R)-2- ( (S)-1-hidroxi-etil)-but-3-enoil]-oxazolidin-2-ona (233.6 mg, 0.807 mmol, preparada como se describe en Org. Lett . 2007, 9, 1635-1638) y imidazol (241.7 mg, 3.551 mmol) en N,N-dimetilformamida (2 mL) se trató con cloruro de tert-butildimetilsililo (158.2 mg, 1.049 mmol). Después de agitar por 24 h a TA, la reacción se apagó con cloruro de amonio saturado. La capa acuosa se extrajo con éter de dietilo (2 x 20 mL). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 25 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (294.6 mg, 90%) como un aceite incoloro.
Compuesto 31b Una solución de 31a (294.6 mg, 0.730 mmol), (R)—1—(7— bromo-quinolin-2-il)-etanol (184.0 mg, 0.730 m ol), acetato de paladio(II) (32.8 mg, 0.146 mmol), tri-(o-toluil)fosfina (44.4 mg, 0.146 mmol) en 1,4-dioxano anhidro (10 mL) se trató con N,N-dicilohexilmetilamina (250 mL, 1.168 mmol). Después de agitar a 100°C por 5 h, la reacción se enfrió a TA, se diluyó con diclorometano y bicarbonato de sodio saturado. La capa acuosa se extrajo con diclorometano. Los orgánicos se combinaron, se filtraron a través de un separator de fase y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 25 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 7:3 para proporcionar el compuesto del título (230.8 mg, 55%) como un aceite incoloro.
, Compuesto 31c Una solución enfriada (0°C) de 31b (230.8 mg, 0.401 m ol) en tetrahidrofurano/agua (15 mL, 2:1) se trató posteriormente con peróxido de hidrógeno (30% acuoso, 210 mL, 2.005 mmol) e hidrato de hidróxido de litio (33.7 mg, 0.803 mmol). Después de agitar por 2 h a 0°C, la reacción se apagó con metabisulfito de sodio (765 mg, 4.1 mmol). Después de agitar por 3,5 h a TA los volátiles se removieron in vacuo. La mezcla luego se diluyó con agua y el pH se ajustó con carbonato de potasio. La capa acuosa se lavó con diclorometano (2 x 20 mL) y acidificó con ácido clorhídrico 2 M (pH ~1) luego se extrajo con diclorometano (3 x 30 mL). Todos los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 25 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (69.8 mg, 42%) como un sólido blanco. l . , i Compuesto 31d El Compuesto 31d se preparó de la misma manera como 22e usando 310 en lugar de ácido (E)-4-[2-((R)-1-acetoxí-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-but-3-enoico en 46% de rendimiento.
¡OH, THF luego HCI lacrolactonización de Shiina Compuesto 31 El Compuesto 31 se preparó de la misma manera como el Compuesto 22 usando 31d en lugar de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-l-hidroxi-etil)-quinolin-7-il]-2,2-dimetil-but-3-enoilamino}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico en 10% de rendimiento.1H RMN (300 MHz, CDCI3) d 1.00 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.22-1.44 (m, 4H), 1.64 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.68-1.77 (m, 4H), 1.89-2.08 (m, 3H), 2.71-2.84 (m, 1H), 3.78-3.86 (m, 1H), 4.11 (dd, J = 8.2, 6.2 Hz, 1H), 4.17-4.25 (m, 2H), 4.38-4.47 (m, 1H), 5.68 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 5.94 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.69 (dd, J = 16.5, 5.3 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.76 (dd, J = 8.7, 1.3 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.21 (d, J = 8.5 Hz, 1H). LCMS (m/z) 566.1 [M+H], Tr = 1.65 min.
EJEMPLO 32 Compuesto 32a A una solución enfriada (0°C) de propiolato de etilo (2 mL, 19.735 mmol) en diclorometano (50 mL) se le agregó gota a gota morfolina (1.7 mL, 19.435 mmol). Después de agitar a TA por 1.5 h, los volátiles se removieron in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con diclorometano/metanol. 20:1 para proporcionar el compuesto del título (3.5034 g, 97%) como un aceite incoloro. l I Compuesto 32b Una solución enfriada (0°C) de 4-bromoanilina (2.7 g, 15.7 ol) en agua (30 mL) se trató posteriormente con ácido clorhídrico concentrado .(3.5 mL) y nitrito de sodio (1.3 g, 18.840 mmol). Después de 20 min a 0°C, el ácido clorhídrico concentrado (5.3 mL) y tetrafluoroborato de sodio (6.9 g, 62.847 mmol) se agregaron. Después de 40 min a 0°C, el intermediario diazonio se filtró, se lavó con agua, metanol y éter de dietilo (2.1021 g) y se usó sin purificación adicional. Una solución del diazonio (7.762 mmol) en acetonitrilo (50 L) se trató con 32a (1.6614 g, 8.970 mmol). Después de 1 h a TA, gel de sílice se agregó. Después de agitar a TA por 16 h, los volátiles se removieron in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 100 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 9:1 para proporcionar el compuesto del título (1.9811 g, 85%) como un sólido altamente coloreado y como una mezcla de tautómeros.
. Compuesto 32c Una solución de 32b (1.9811 g, 6.623 mmol) en ácido sulfúrico concentrado (25 mL) se calentó a 100°C por 3 h.
Después del enfriamiento a 0°C, la mezcla se diluyó con agua (150 mL) y un sólido color café se filtró completamente. El filtrado se extrajo con éter de dietilo (2 x 50 mL), diclorometano (2 x 50 mL) y acetato de etilo (50 mL). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo para proporcionar el compuesto del título (1.5094 g, 90%) como un sólido color naranja que se oscureció tras el reposo.
, Compuesto 32d Una solución enfriada (0°C) de 32c (1.5094 g, 5.964 mmol), clorohidrato de N,O-dimetilhidroxílamina (755.9 mg, 7.753 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (4.2 mL, 23.856 mmol) en acetonitrilo (50 mL) se trató con 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (3.175 g, 8.350 mmol). Después de agitar por 6 h a TA, la mezcla se enfrió a 0°C y se apagó con ácido clorhídrico 1 M (60 mL). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 100 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 1:1 para proporcionar el compuesto del título (1.4229 g, 81%) como un sólido color amarillo brillante.
, Compuesto 32 Una solución fría (-78°C) de 32d (1.4229 g, 4.805 mmol) en tetrahidrofurano (50 mL) se trató con cloruro de etilmagnesio (3.2 mL, 9.610 mmol, 3 M en éter de dietilo). Después de 1 h a -78°C y 3 h a 0°C, la reacción se apagó con cloruro de amonio saturado (30 mL). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 100 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (751.5 g, 62%) como un sólido color amarillo.
, Compuesto 32f Una solución de 32e (751.5 mg, 2.993 mmol) en tetrahidrofurano (30 mL) se trató con (S)-(-)-2-metil-CBS-oxazaborolidina (3.6 mL, 3.592 mmol, 1 M en tolueno). Después de 10 min a TA la mezcla se enfrió a -60°C y se trató con complejo de borano-tetrahidrofurano (6 mL, 5.986 mmol, 1 M en tetrahidrofurano). Después de 1.5 h a -55°C hasta -30°C, la reacción se apagó con metanol (20 mL). Después de agitar a TA por 16 h, los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 3:2 para proporcionar el compuesto del título (345.0 mg, 45%) como un sólido color amarillo.
, , Compuesto 32g Una solución de 32f (345.0 mg, 1.363 mmol), acetato de paladio II (61.2 mg, 0.273 mmol), tri-(o-toluil)fosfina (83.1 mg, 0.273 mmol), éster de tert-butilo del ácido 3-butenoico (560 gL, 3.407 mmol) y A,N-diciclohexilmetilamina (470 gL, 2.181 mmol) en 1,4-dioxano anhidro (20 L) se calentó a 100°C por 1.7 h. Después del enfriamiento a TA los volátiles se removieron ín vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 2:3 para proporcionar el compuesto del título (244.1 mg, 57%) como un sólido color amarillo. i , , Compuesto 32h Una solución enfriada (0°C) de le (422.0 mg, 0.793 mmol) en tetrahidrofuran/agua (25 mL, 4:1) se trató con hidrato de hidróxido de litio (67.0 mg, 1.587 m ol). Después de agitar a 0°C por 1.5 h, la reacción se apagó con ácido clorhídrico 1 M (20 mL). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 mL). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo luego tricloroetanol residual se destiló azeotrópicamente completamente con tolueno (3 x) para dar el ácido intermediario como un sólido blanco que luego se combinó con 32g (244.1 mg, 0.793 mmol), 4-dimetilaminopiridina (97.0 mg, 0.793 mmol), clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N' -etilcarbodiimida (243.3 mg, 1.269 mmol) y diclorometano (20 mL). Después de agitar a TA por 16 h, la reacción se apagó con ácido clorhídrico diluido. La capa acuosa se extrajo con diclorometano (30 mL). Los orgánicos se combinaron y filtraron a través de un separator de fase y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de íso-hexano/acetato de etilo 1:0 hasta 1:2 para proporcionar el compuesto del título (164.4 mg, 30% sobre 2 etapas) como un vidrio color amarillo.
, , Compuesto 32 Una solución fría (0°C) de 32h (164.4 mg, 0.236 mmol) en diclorometano anhidro (20 mL) se trató con metansulfonato de trimetilsililo (170 mL, 0.944 mmol). Después de agitar por 1 h a 0°C, la reacción se apagó con A7,N-diisopropiletilamina (330 pL, 1.888 mmol) y los volátiles se removieron in vacuo. Una solución enfriada (0°C) del ácido amino crudo en acetonitrilo (80 mL) se trató posteriormente con N,N-diisopropiletilamina (330 pL, 1.888 mmol) y 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (125.6 mg, 0.330 mmol). Después de agitar a TA por 2.5 h, los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto final (170.7 mg) como una mezcla. HPLC preparativa de fase inversa que se eluyó con un gradiente de agua/acetonitrilo 95:5 hasta 0:100 proporcionó el compuesto del titulo (30.6 mg, 25%) como un sólido blanco. XH RMN (300 MHz, CD3OD) ¿1.00 (d, J= 6.7 Hz, 3H), 1.03 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.61 (d, J = 7.3 Hz, 3H), 1.66-2.07 (m, 8H), 2.68-2.81 (m, 1H), 2.97-3.07 (m, 1H), 3.35-3.47 (m, 1H), 3.76-3.89 (m, 1H), 4.28 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 4.37-4.47 (m, 1H), 4.53-4.67 (m, 1H), 5.52 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 6.36-6.51 (m, 2H), 6.72 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.97 (dd, J = 8.9, 1.6 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.38 (d, J = 8.9 Hz, 1H).
LCMS (m/z) 523.1 [M+H], Tr = 1.65 min.
EJEMPLOS 33 y 34 , Compuesto 33a Una solución enfriada (0°C) de áster de 3-(2,2,2-tricloro-etil) del áster de 1,2-di-tert-butilo del ácido S)-tetrahidro-piridazin-1,2,3-tricarboxilico (5.5297 g, 11 975 m ol) en tetrahidrofuran/metanol (50 mL, 1:1) se trató con tetrabutilamonio fluoruro (23.9 mL, 23.950 m ol, 1 M en tetrahidrofurano). Después de agitar a TA por 24 h, los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se disolvió en éter de dietilo y bicarbonato de sodio saturado. La capa acuosa se extrajo con éter de dietilo (50 L). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 100 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 9:1 donde las fracciones mezcladas se purificaron además por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (3.9765 g, 96%) como un aceite incoloro y como una mezcla de rotámeros.
, Compuesto 33b Una solución fría (-78°C) de 33a (1.4112 g, 4.097 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 mL) se trató con bis (trimetilsilil)amida de litio (6.2 L, 6.146 mmol, 1 M en tetrahidrofurano). Después de agitar por 1.25 h a -78°C, la mezcla se trató con yodometano (640 mL, 10.242·mmol). Después de agitar por 1 h a -78°C, 1 h a 0°C y 1 h a TA, la reacción se apagó con pH 7 solución amortiguadora a 0°C. Lo acuoso se extrajo con diclorometano (2 x 50 mL). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (760.7 mg, 52%) como un aceite incoloro y como una mezcla de rotámeros.
Compuesto 33c Una solución enfriada (0°C) de ácido (S)-2 - tert-butoxicarbonilamino-3-metil-butírico (3.020 g, 13.908 mmol), ácido (S)-2-amino-propiónico metil ester clorohidrato (1.9413 g, 13.908 m ol) y N,N-diisopropiletilamina (17.1 mL, 55.632 mmol) en acetonitrilo (50 mL) se trató con 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (7.403 g, 19.471 mmol). Después de agitar a TA por 6 h, la reacción se apagó con ácido clorhídrico (1 M, 100 mL). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 mL). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 100 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 3:2 para proporcionar el compuesto del título (4.0996 g, 97%) como un sólido blanco.
Compuesto 33d Una solución enfriada (0°C) de 33c (317.0 mg, 1.048 m ol) en tetrahidrofurano/agua (12 mL, 5:1) se trató con « hidrato de hidróxido de litio (88.0 mg, 2.096 mmol). Después de agitar a 0°C por 2.5 h, la reacción se apagó con ácido clorhídrico (1 M, 30 mL). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 30 mL). Los orgánicos se combinaron, filtraron a través de un separator de fase y los volátiles se removieron in vacuo para proporcionar ácido crudo como un sólido blanco.
. . . Compuesto 33 Una solución enfriada (0°C) de 33b (376.0 mg, 1.049 mmol) en diclorometano anhidro (15 mL) se trató con ácido trifluoroacético (5 mL). Después de agitar a 0°C por 30 min y TA por 2 h, ácido trifluoroacético (4 mL) se agregó. Después de 1 h, los volátiles se removieron in vacuo y el ácido trifluoroacético residual se destiló azeotrópicamente completamente con tolueno (3 x) para proporcionar la sal de amonio del ácido bis-trifluoroacético como un sólido color blanco apagado. Una solución enfriada (0°C) de la sal de amono del ácido bis-trifluoroacético y ácido (S)-2-((S)-2-tert-butoxicarbonilam.ino-3-metil-butirilamino)-propiónico crudo como se preparó en la etapa previa en diclorometano anhidro (15 mL) se trató posteriormente con N-metilmorfolina (580 mL, 5.240 mol) y hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il) -N,N,N' ,N'-tetrametiluronio (596.2 mg, 1.572 mmol).
Después de agitar por 19 h a TA, la reacción se apagó con ácido clorhídrico (1 M, 30 mL). Lo acuoso se extrajo con diclorometano (2 x 30 mL). Los orgánicos se combinaron, lavaron con bicarbonato de sodio acuoso saturado y se filtraron a través de un separator de fase. Los volátiles se removieron in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 1:2 para proporcionar el compuesto del título (373.1 mg, 83% sobre 2 etapas) como una espuma blanca y como una mezcla de diaestereoisómeros.
. . Compuesto 33f Una solución enfriada (0°C) de 33e (373.1 mg, 0.871 mmol) en diclorometano anhidro (10 mL) se trató con metansulfonato de trimetilsililo (310 mL, 1.741 mmol). Después de agitar por 1 h a 0°C, la reacción se apagó con N,N-diisopropiletilamina (610 pL, 3.484 mmol) y los volátiles se removieron in vacuo. Una solución enfriada (0°C) de la amina cruda y ácido (E)-(2R,3R)-3-metoxi-2-metil-hex-4-enoico (137.8 mg, 0.871mmol) en acetonitrilo anhidro (15 mL) se trató posteriormente con 2\7,.W-diisopropiletilamina (610 pL, 3.484 mmol) y 2- (IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metana ínío (463.7 mg, 1.219 mmol). Después de agitar a TA por 18 h, la reacción se apagó con ácido clorhídrico (1 M, 30 mL). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 mL). Los orgánicos se combinaron, lavaron con bicarbonato de sodio saturado (20 mL), se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 25 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 1:2 hasta 1:4 para proporcionar el compuesto del titulo (332.2 mg, 81%) como un sólido incoloro y.como una mezcla de diaestereoisómeros. i , , Compuesto 33g El Compuesto 33g se preparó de la misma manera como ester de (R) -l- [ 6- E) -3-tert-butoxicarbonil-propenil ) -cinnolin-3-il]-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2- tert-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico usando 33f y (R)-l-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etanol en lugar de le y éster de tert-butilo del ácido (E)-4-[3-((R)-1-hidroxi-etil)-cinnolin-6-il]-but-3-enoico en 30% de rendimiento sobre 2 etapas. - ll Compuesto 33 Compuesto 34 Una solución de 33g (136.2 mg, 0.214 mmol) en tolueno (70 mL) se desgasificó al bombear N2 gas a lo largo de 20 min. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (27 mg, 0.043 ol) se agregó y la mezcla se calentó a reflujo por 2.5 h. Más del catalizador de.2da generación Hoveyda-Grubbs (20 mg) se agregó y después de agitar a reflujo por 1 h, la mezcla se enfrió a TA, los volátiles se removieron in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 25 g eluido con un gradiente continuo de acetato de etilo/acetona 1:0 hasta 10:1 para proporcionar ambos diaestereoisó eros en mezclas separadas. Ambas mezclas se purificaron por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 10 g eluido por gravedad con un gradiente continuo de acetato de etilo/acetona 1:0 hasta 10:1 para proporcionar el diaestereoisómero más polar (19.7 mg, 15%) como un sólido blanco. El diaestereó ero menos polar se purificó además por TLC preparativa eluido con acetato de etilo (4 eluciones) y TLC preparativa posterior eluido con iso-hexanos/acetona 7:3 (2 eluciones) para proporcionar el compuesto del título (7.6 mg, 6%) como un sólido blanco. La estereoquímica relativa no se asignó.
Diaestereoisómero más polar Compuesto 33: 1H RMN (300 MHz, CDCI3) d 0.83-1.07 (m, 7H), 1.41 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.47 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.50 (s, 3H), 1.70 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.75-1.90 (m, 2H), 1.96-2.15 (m, 3H), 2.64 (dd, J = 7.6, 3.1 Hz, 1H), 2.70-2.84 (m, 1H), 3.42 (s, 3H), 3.90 (dd, J = 8.7, 3.1 Hz, 1H), 4.00 (app t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.10 (s, 1H), 4.58-4.69 (m, 1H), 6.00 (dd, J = 9.4, 7.1 Hz, 1H), 6.22 (q, J = 6.2 Hz, 1H) , 6. 51 (d, J = 9. 8 Hz, 1H) , 6. 93 (s, 1H) , 7.13-7 .23 (m, 1H) , 7. 34-7. 43 (m, 1H) , 7 . 90-7 . 97 (m, 2H) , 8. 47 (s, 1H) . LCMS (m/z ) 594 .3 [M+H] , Tr = 1. 87 min .
Diaestereoisómero menos polar Compuesto 34 : XH RMN (300 MHz, CD3CN) d -0.51- -0.39 (m, 5H), -0.30 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.06 (d, J= 7.1 Hz, 3H), 0.15 (d, J = 6.9 Hz, 3H) , 0.19 (s, 3H), 0.25-0.34 (m, 4H), 0.38-0.45 (m, 1H), 0.81-1.02 (m, 2H), 1.14-1.42 (m, 2H), 2.69 (dd, J = 8.7, 2.9 Hz, 1H), 3.00-3.10 (m, 2H), 3.45 (s, 3H), 4.32 (app pentete, J = 7.1 Hz, 1H), 4.76 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.53 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 5.85 (dd, J = 16.1, 8.9 Hz, 1H), 6.20 (dd, J = 8.5, 1 .6 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.65-6.75 (m, 2H), 6.91 (s, 1H), 7.11 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H). LCMS (m/z) 594.3 [M+H], Tr = 1.83 min.
EJEMPLO 35 , .
Compuesto 35a Una solución enfriada (0°C) de ácido 2-fluoro-5-hidroxi-benzoico (1.0051 g, 6.438 m ol), N,O-dimetilhidroxilamina clorohidrato (1.2560 g, 12.856 mmol) y trietilamina (3.6 mL, 25.752 mmol) en diclorometano (35 mL) se trató con hexafluorofosfato O- (benzotriazol-1-il) -N,N,N' ,N'-tetrametiluronio (3.663 g, 9.658 mmol . Después de agitar a TA por 20 h, la reacción se apagó a 0°C con ácido clorhídrico (2 M, 30 mL). La emulsión se filtró en Celite luego la capa acuosa se extrajo con diclorometano (50 mL). Los orgánicos se combinaron, se filtraron a través de un separator de fase y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de tolueno/éter de dietilo 1:0 hasta 1:2 para proporcionar el compuesto del título (260.5 mg, 20%) como un aceite incoloro.
, Compuesto 35b Una solución de 35a (260.5 mg, 1.308 rnol) en acetona (20 mL) se trató posteriormente con carbonato de potasio (903.8 mg, 6.539 mmol) y alilbromuro (340 mL, 3.924 mrnol). Después de agitar a TA por 24 h, la reacción se apagó con agua (20 mL). La capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 30 mL). Los orgánicos se combinaron, filtraron a través de un separator de fase y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 25 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 3:2 para proporcionar el compuesto del título (289.7 mg, 92%) como un aceite incoloro.
I Compuesto 35c Una solución fría (-78°C) de 35b (289.7 mg, 1.210 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) se trató con cloruro metilmagnesio (810 mL, 2.422 mmol, 3 M en éter de dietilo). Después de 1.25 h a -78°C, 2 h a 0°C y 16 h a TA, cloruro de metilmagnesio (810 pL, 2.422 mmol, 3 M en éter de dietilo) se agregó. Después de 2.5 h a -78°C y 1.2 h a TA, la reacción se apagó con gel de sílice y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 25 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 9:1 para proporcionar el compuesto del título (196.7 mg, 84%) como un aceite incoloro.
, Compuesto 35d Una solución de 35c (196.7 mg, 1.013 mmol) en tetrahidrofurano (15 mL) se trató con (S)-(-)-2-metil-CBS-oxazaborolidina (1.2 mL, 1.215 mmol, 1 M en tolueno). Después de 10 min a TA la mezcla se enfrió a -50°C y trató con complejo de borano tetrahidrofurano (2.1 mL, 2.026 mmol, 1 M en tetrahidrofurano). Después de 1.5 h a -50°C hasta -40°C, la reacción se apagó con metanol (6 mL). Después de agitar a TA por 22 h, los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 25 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del titulo (179.4 mg, 90%) como un sólido blanco.
, Compuesto 35 Una solución enfriada (0°C) de le (1.9973 g, 3.755 mmol) en diclorometano anhidro (40 mL) se trató con trifluorometansulfonato de trimetilsililo (1.4 mL, 7.510 m ol). Después de 30 in a 0°C, la mezcla de reacción se trató con N,-diisopropiletilamina (2.6 mL, 15.020 mmol) y los volátiles se removieron in vacuo para proporcionar la amina correspondiente. Una solución enfriada (0°C) de esta amina, ácido (E)-(2R, 3R)-2- etilhex-6-enoico (428.6 mg, 3.755 mmol, preparado como se describe en Synlett 2002, 12, pp2039-2040) y 27,N-diisopropiletilamina (2.6 L, 15.020 mmol) en acetonitrilo (50 L) se trató con 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-i1)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metana inio (1.999 g, 5.257 mmol). Después de agitar a TA por 20 h, la reacción se apagó con ácido clorhídrico (1 M, 100 mL). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mL). Los orgánicos se combinaron, lavaron con bicarbonato de sodio saturado, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 1:4 para proporcionar el compuesto del título (1.6735 g, 84%) como un espuma café.
. , Compuesto 35f Una solución de 35e (534.7 mg, 1.013 mmol) en tetrahidrofurano (20 mL) se trató posteriormente con polvo de zinc (1.457 g, 22.286 mmol) y una solución de acetato de amonio (1.171 g, 15.195 mmol) en agua (5 mL). Después de agitar a TA por 24 h, la mezcla se filtró a través de Celite. El sólido se enjuagó con bisulfato de potasio saturado y acétate de etilo. El pH del filtrado se ajustó con ácido clorhídrico 2 M luego la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mL). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El ácido acético residual se destiló azeotrópicamente completamente con tolueno (3x) para proporcionar el ácido correspondiente como un sólido blanco. Una solución del ácido crudo, (R)-1-(5-aliloxi-2-fluoro-fenil)-etanol (179.4 mg, 0.914 mol) y 4-dimetilaminopiridina (123.7 mg, 1.013 mmol) en diclorometano (15 mL) se trató con clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil)-W'-etilcarbodiimida (310.8 mg, 1.621 mmol). Después de agitar a TA por 20 h, la reacción se apagó a 0°C con ácido clorhídrico (2 M, 15 L). La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2x). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 1:3 para proporcionar el compuesto del título (310.5 mg, 59% sobre 2 etapas) como un sólido blanco.
I Compuesto 35 Una solución de 35f (310.5 mg, 0.540 mmol) en dicloroetano (180 mL) se trató con catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (67.7 mg, 0.108 mmol). Después de agitar a reflujo por 2 h, la reacción se enfrió a TA y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 0:1 luego usando un cartucho de Isolute 25 g eluido por gravedad con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (109.9 mg) en una mezcla. La purificación por TLC preparativa eluido con iso-hexanos/acetona 3:1 (3 eluciones) seguido por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 25 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetona 1:0 hasta 3:2 proporcionó el compuesto del título (58.7 mg, 20%) como un sólido blanco.1H RMN (300 MHz, CD3CN) ¿0.85-0.97 (m, 6H), 1.17-1.22 (m, 3H), 1.28-1.39 (m, 4H), .44-1.63 (m, 6H), 1.70-1.82 (m, 1H), 1.83-1.92 (m, 1H), 2.30-2.45 (m, 3H), 3.62-3.73 (m, 2H), 3.89 ( app t, J = 8.5 Hz, 1H), 4.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.40-4.60 (m, 2H), 5.32 (app pentete, J = 6.9 Hz, 1H), 5.62-5.74 (m, 1H), 5.77-5.89 (m, 1H), 6.02 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.76-6.85 (m, 2H), 7.01 (app t, J = 9.4 Hz, 1H), 7.19 (br s, 1H). LCMS (m/z) 547.2 [M+H], Tr = 2.39 min.
EJEMPLO 36 , , Compuesto 36 A una solución del Compuesto 35 (44.0 mg, 0.080 mmol) en acetato de etilo (5 mL) se le agregó paladio sobre carbono (10%, 5 mg). La atmósfera se purgó de oxigeno. Después de agitar a TA bajo una atmósfera de hidrógeno por 2.5 h, los volátiles se removieron in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía.en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 20 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetona 1:0 hasta 3:2 seguido por TLC preparativa eluido con iso-hexanos/acetona 3:2 para proporcionar el compuesto final (19.0 mg, 43%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) S 0.85-0.99 (m, 8H), 1.14-1.22 (m, 4H), 1.26-1.42 (m, 4H), 1.48 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 1.52-1.84 (m, 8H), 2.28-2.42 (m, 1H), 3.61-3.72 (m, 1H), 3.75-4.10 (m, 4H), 4.25 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 5.26 (app penteto, J = 7.1 Hz, 1H), 6.02 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 6.34 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.75-6.86 (m, 2H), 6.95- 7.12 (m, 2H). LCMS (m/z) 549.3 [M+H], Tr = 2.54 min.
EJEMPLO 37 : (E) - (2R, 5S , US , 14S , 17R, 18R) -2 , 14-Diisopropil-18- metoxi-11 , 17-dimetil-22-oxa-3 , 9 , 12 , 15 , 28-pentaaza- triciclo [21.3.1.1*5 , 9*] octacosa-1 (27) , 19,23 , 25-tetraeno- 4,10,13,16-tetraona .
Compuesto 37a 37a se preparó de la misma manera como 35b usando 3 hidroxibenzaldehido en lugar de 2-fluoro-5-hidroxi-W-metoxi N-metil-benzamida en 78% de rendimiento. . l l, , . I, .
Compuesto 37b Una suspensión fría (0°C) de 37a (1.36 g, 8.434 mmol) y sulfato de magnesio (5 g) en diclorometano (40 mL) se trató con D-valinol (870.0 mg, 8.434 mmol). Después de agitar a 0°C hasta TA por 23 h, la mezcla se filtró y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se disolvió en diclorometano anhidro (40 mL) y se trató posteriormente con trietilamina (1.3 mL, 9.277 mmol) y una solución de cloruro de trimetilsililo (9.3 mL, 9.277 mmol, 1 M en diclorometano). Después de agitar a TA por 24 h, los volátiles se removieron in vacuo y el residuo se trituró con éter de dietilo / iso-hexano (100 L, 1:1). El sólido blanco se filtró completamente y el filtrado se evaporó hasta secarse para proporcionar el intermediario imina. En un matraz de fondo redondo de 3 cuellos (-40°C) frío, equipado con una linea de nitrógeno y un embudo de adición se introdujo éter de dietilo anhidro (25 mL) y una solución de iso-propillitio (29 mL, 20.242 m ol, 0.7 M en pentano). A esta mezcla, una solución de la imina en éter de dietilo anhidro (25 mL) se agregó gota a gota durante 15 min. Después de agitar a -40°C por 2.5 h, la reacción se apagó con ácido clorhídrico (2 M, 50 mL) y la mezcla se permitió entibiar a TA. La capa acuosa ácida se basificó con Gránulos de NaOH a 0°C y luego se extrajo con éter de dietilo (2 x). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 1:1 para proporcionar el compuesto del título (470.1 mg, 19% sobre 3 etapas) como un aceite incoloro.
, Compuesto 37c Una solución de 37b (470.1 mg, 1.613 mmol) en metanol (10 mL) y metilamina acuosa (3 mL, 40 % en p en agua) se trató con ácido periódico (1.213 g, 5.323 mmol). Después de agitar por 24 h a TA más metilamina acuosa (4 mL, 40% en p en agua) y ácido periódico (1.213 g, 5.323 mmol) se agregaron. Después de agitar por 17 h a TA la mezcla se filtró sobre Celite y el sólido se enjuagó con metanol. Los volátiles se removieron in vacuo y el residuo se dividió entre agua y éter de dietilo. La capa acuosa se extrajo con éter de dietilo, los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 25 g eluido con acetato de etilo para proporcionar el compuesto del título (191.8 mg, 58%) como un aceite color amarillo ligero.
, Compuesto 37d Una solución enfriada (0°C) de ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (324.4 mg, 0.810 mmol), 37c (166.3 mg, 0.810 mmol) y N, N-diisopropiletilamina (560 pL, 3.240 mmol) en acetonitrilo (15 mL) se trató con 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metana inio (431.2 mg, 1.134 mmol). Después de agitar a TA por 20 h, la reacción se apagó con ácido clorhídrico (2 M, 25 mL) a 0°C. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un cartucho de Isolute 50 g eluido con un gradiente continuo de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (230.5 mg, 48%) como un sólido.
. , ~ I Compuesto 37e El Compuesto 37e se preparó de la misma manera como éster de metilo del ácido 1-{(S)-2-[(S)-2-((E)-(2R,3R)-3-metoxi-2-metil-hex-4-enoilamino)-3-metil-butirilamino]-propionil}-3-metil-hexahidro-piridazin-3-carboxílico usando 37d en lugar de éster de metilo del ácido 1—[(S)—2—((S)—2— tert-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-propionil]-3-metil-hexahidro-piridazin-3-carboxílico en 30% de rendimiento sobre 2 etapas.
I I Compuesto 37 El Compuesto 37 se preparó de la misma manera como 25 usando 37e en lugar de metil-((R)-6-vinil-indan-1-il)-amida del ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-((2R,3R)-3-metoxi-2-metil-hept-6-enoilamino)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico en 43% de rendimiento. 1H RMN (300 MHz, dg-DMSO) <50.74-0.91 (m, 12H), 1.15 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.28 (d, J = 7.3 Hz, 3H), 1.40-1.64 (m, 3H), 1.71-1.88 (m, 3H), 1.98 ( app sextet, J = 6.7 Hz, 1H), 2.66-2.75 (m, 2H), 3.38-3.53 (m, 1H), 3.89 (dd, J = 6.7, 2.9 Hz, 1H), 4.10 ( app t, J = 8.9 Hz, 1H), 4.14-4.22 (m, 1H), 4.42 (qd, J = 10.0, 4.2 Hz, 1H), 4.57 (app t, J = 8.2 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 5.23 (app t, J = 7.3 Hz, 1H), 5.69-5.90 (m, 2H), 6.77-6.90 (m, 3H), 7.05 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.16-7.24 (m, 1H), 8.01 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.14 (d, J= 8.5 Hz, 1H). LCMS (m/z) 586.3 [M+H], Tr = 2.34 min.
EJEMPLO 38 , Compuesto 38a A una mezcla de (R)-1-(3-bromo-fenil)-etanol (201 mg, 1.00 mmol), ácido 4-(2-etoxi-2-oxoetoxi)bencenborónico (Acros Organics, 224 mg, 1.00 mmol) en 1,2-dimetoxietano (4 mL) se agregaron carbonato de potasio (276 mg, 2.00 mmol) y agua (1 mL). La mezcla se agitó a TA y tetraquis(trifenilfosfina) paladio(O) (58 mg, 0.05 mmol) se agregó luego la mezcla de reacción se calentó a 100°C en un reactor de microondas por 30 min. La mezcla de reacción luego se diluyó con acetato de etilo y agua. Las capas se separaron y los orgánicos se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso hexanos/acetato de etilo 9:1 hasta 7:3 para proporcionar el compuesto del título (230 mg, 76%) como un aceite.
¡ . Compuesto 38b Una solución de 38a (230 mg, 0.77 mmol) en tetrahidrofurano (4 mL) se agitó a 5°C bajo nitrógeno, una solución de litio hidróxido monohidrato (92 mg, 1.54 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a 5°C por 2 h y luego a TA durante la noche. La solución se acidificó con ácido clorhídrico 2 M y extrajo con acetato de etilo (2 x). Los extractos orgánicos se combinaron, lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio y evaporaron para proporcionar el compuesto del título (175 mg, 84%) como un sólido blanco.
, Compuesto 38c Una solución de le (372 mg, 0.70 mmol) en diclorometano (15 mL) se enfrió en un baño de hielo-agua bajo nitrógeno. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (0.18 mL, 1.05 mmol) se agregó gota a gota, y la solución resultante se agitó por 1 hora. La solución de carbonato ácido de sodio acuosa saturada fría (15 mL) se agregó y la mezcla se agitó a 0°C por 15 min. La capa orgánica se separó, lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y evaporó para proporcionar áster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)—1— [(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]- hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0.70 mmol) gue se usó sin purificación adicional. Una solución de áster de 2,2,2- tricloro-et ilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil- butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxilico (0.70 mmol) en acetonitrilo (15 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. 38b (175 mg, 0.64 mmol) e hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (123 mg, 0.64 mmol, se mojó con un mínimo de 20% en p de agua) se agregaron, seguido por clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (173 mg, 0.90 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA por 2 h. El solvente se evaporó. El residuo se disolvió en acetato de etilo y la solución se lavó con agua (3 x) seguido por salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/ acetato de etilo 1:2 hasta 0:1. El producto se trituró con éter de dietilo y se secó para proporcionar el compuesto del título (367 mg, 83%) como un sólido blanco.
, Compuesto 38d Una solución de 38c (343 mg, 0.50 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. El polvo de zinc (715 mg, 11 mmol) se agregó seguido por una solución de acetato de amonio (578 mg, 7.50 mmol) en agua (5 mL). La mezcla de reacción se agitó a TA bajo nitrógeno por 70 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y la almohadilla filtro se lavó con acetato de etilo y ácido clorhídrico acuoso 2 M. El filtrado se acidificó a pH 2 con ácido clorhídrico acuoso 2 M, cloruro de sodio sólido se agregó para saturar la capa acuosa y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos de acetato de etilo se combinaron, lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio y evaporaron. El residuo se co-evaporó con tolueno (3 x) para proporcionar el compuesto del título (237 mg, 86%) como un polvo blanco.
, Compuesto 38 Una solución de 38d (100 mg, 0.18 mmol) en diclorometano (180 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. 4-Dimetilaminopiridina (33 mg, 0.27 mmol) y clorohidrato de N- ( 3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (104 mg, 0.54 mmol) se agregaron y la mezcla de reacción se agitó a TA por 18 h. El solvente se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 1:2 hasta 0:1 seguido por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de acetato de etilo hasta acetato de etilo/acetona 4:1. El residuo se co-evaporó con diclorometano luego se trituró con éter de dietilo para proporcionar un sólido. El sólido se lavó con éter y se secó para proporcionar el compuesto del título (8 mg, 9%) como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) 0.95 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.96 (d„ J = 6.5 Hz, 3H), 1.39 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.54-1.80 (m, 5H), 1.82-2.10 (m, 3H), 2.52-2.63 (m, 1H), 3.29-3.62 (m, 2H), 4.07 ( app t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.45 (br d, J = 13.6 Hz, 1H), 4.67 (ABq, D<¾B = 0.12, JAB = 16.0 Hz, 2H), 4.88-5.01 (m, 1H), 5.93-6.00 (m, 2H), 6.57 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.15-7.53 (m, 6 H). LCMS (m/z) 537.2 [M+H], Tr = 2.34 min.
EJEMPLO 39 , Compuesto 39a Una solución de fenol de 4-yodo (2.2 g, 10.0 mmol), éster de metilo del ácido (R)-2-hidroxi-propiónico (0.95 mL, 10.0 m ol) y trifenilfosfina (2.62 g, 10.0 mmol) se preparó en tetrahidrofurano (40 mL) . El azodicarboxilato de diisopropilo (2.0 mL.10 mmol) se agregó gota a gota y la reacción se agitó a -5°C por 1 hora y luego a TA por 2 h. El tetrahidrofurano se evaporó y éter de dietilo/iso-hexanos (1:10, 50 mL) se agregó. La mezcla se agitó a TA por 10 min donde un precipitado se formó. El filtrado se decantó y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 20:1 hasta 10:1 para proporcionar el compuesto del título (2.02 g, 66%) como un aceite.
. Compuesto 39b El (R)-1-(3-bromofenil)-etanol (1.0 g, 4.97 m ol), bis(pinacolato)diboro (1.39 g, 5.47 m ol), 1,1'bis(difenilfosfino)ferrocenodicloropaladio(II), aducto de diclorometano (203 mg, 0.249 mmol) y acetato de potasio (976 mg, 9.94 mmol) se disolvieron en 1,4-dioxano (10 mL) y la reacción se calentó a reflujo y se dejó agitar durante 3 días. La reacción se permitió enfriar a TA antes de ser filtrada a través de una almohadilla de Hiflo. La almohadilla luego se lavó con acetato de etilo y los orgánicos combinados luego se concentraron y purificaron por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (936 g, 76%) como un aceite color amarillo pálido.
Compuesto 39c Una solución de 39b (496 mg, 2.00 mmol) y 39a (612 mg, 2.00 mmol) en 1,2-dimetoxietano (4 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. Una solución de carbonato de sodio acuoso 2 M (4 mL) se agregó seguido por tetraquis (trifenilfosfina) paladio(O) (116 mg, 0.1 mol) y la mezcla de reacción se calentó a 80°C por 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió a TA, agua se agregó y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos de acetato de etilo se combinaron, lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio y evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 17:3 hasta 1:1 para proporcionar el compuesto del título (253 mg, 42%) como una goma.
. Compuesto 39d Una solución de 39c (250 mg, 0.83 mmol) en tetrahidrofurano (4 mL) se agitó a 5°C bajo nitrógeno. Una solución de litio hidróxido monohidrato (42 mg, 1.00 mmol) en agua (1 mL) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a 5°C por 1 hora. La mezcla de reacción se acidificó hasta pH 3 con ácido clorhídrico acuoso 2 M y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se separaron, lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio y evaporaron para proporcionar el compuesto del titulo (224 mg, 94%) como una espuma blanca.
, Compuesto 39e Una solución de le (478 mg, 0.9 mmol) en diclorometano (15 mL) se enfrió en un baño de hielo-agua bajo nitrógeno. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (0.25 mL, 1.35 mmol) se agregó gota a gota, y la solución resultante se agitó por 1 h. La solución de carbonato ácido de sodio acuosa saturada fria (15 mL) se agregó y la mezcla se agitó a 0°C por 15 min. La capa orgánica se separó, lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y evaporó para proporcionar áster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0.9 mmol) que se usó sin purificación adicional.
Una solución de áster de 2,2,2-tricloro-etilo ácido (S)—1— [(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]- hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0.9 mmol) en acetonitrilo (15 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. 39d (224 mg, 0.78 mmol) e hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (184 mg, 0.96 mmol, se mojó con un mínimo de 20% en p de agua) se agregaron, seguido por clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (225 mg, 1.17 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA por 2 h. El solvente se evaporó. El residuo se disolvió en acetato de etilo y la solución se lavó con agua (3 x) seguido por salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 1:2 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (490 mg, 90%) como una goma.
, Compuesto 39f Una solución de 39e (490 mg, 0.70 mmol) en tetrahidrofurano (15 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. El polvo de zinc (1.00 g, 15.40 mmol) se agregó seguido por una solución de acetato de amonio (810 mg, 10.50 mmol) en agua (8 mL) . La mezcla de reacción se agitó a TA bajo nitrógeno por 24 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y la almohadilla filtro se lavó con acetato de etilo y ácido clorhídrico acuoso 2 M. El filtrado se acidificó a pH 2-3 con ácido clorhídrico acuoso 2 M. El cloruro de sodio sólido se agregó para saturar la capa acuosa y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos de acetato de etilo se combinaron y lavaron con salmuera. Los extractos orgánicos se pasaron a través de una frita hidrofóbica y el filtrado se evaporó. El residuo se co-evaporó con acetato de etilo (3 x) luego tolueno (3 x) para proporcionar el compuesto del título (394 mg, 98%) como un sólido blanco.
, Compuesto 39 Una solución de 39f (100 mg, 0.18 mmol) en diclorometano (180 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno.4-Dimetilaminopiridina dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (138 mg, 0.72 mmol) se agregaron y la mezcla de reacción se agitó a TA por 4 h. El solvente se evaporó. El acetato de etilo se agregó al residuo y la mezcla se lavó con ácido cítrico acuoso (pH 4) y salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio y el solvente se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso- hexanos/acetato de etilo 3:7 hasta 0:1. El residuo se trituró con éter de dietilo/iso-hexanos 1:1 para proporcionar el compuesto del titulo (10 mg, 10%) como un sólido blanco. XH RMN (300 MHz, CD3OD) 0.94 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.51 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.61 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.67 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.72-2.00 (m, 5H), 2.60-2.69 (m, 1H), 3.54-3.63 (m, 1H), 4.13 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.32 (Jbr d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.57-4.66 (m, 2H), 4.78 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 5.92 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.22 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.34-7.61 (m, 5H). LCMS (m/z) 551.2 [M+H], Tr = 2.51 min.
EJEMPLO 40 I Compuesto 40a 40a se preparó de la misma manera como éster de metilo del ácido (S)-2-(4-yodo-fenoxi)-propiónico usando éster de etilo del ácido (S)-2-hidroxi-propiónico en lugar de éster de metilo del ácido (R)-2-hidroxi-propiónico en 28% de rendimiento.
' Compuesto 40b 40b se preparó de la misma manera como éster de metilo del ácido (S)-2-[3'-((R)-1-hidroxi-etil)-bifenil-4-iloxi]-propiónico usando 40a en lugar de éster de metilo del ácido (S)-2-(4-yodo-fenoxi)-propiónico en 54% de rendimiento.
Compuesto 40c 40c se preparó de la misma manera como ácido (S)—2—[3'— ( (R)-1-hidroxi-etil)-bifenil-4-iloxi]-propiónico usando 40b en lugar de éster de metilo del ácido (S)-2-[3'-((R)-1-hidroxi-etil)-bifenil-4-iloxi]-propiónico en 71% de rendimiento.
, - Compuesto 40d 40d se preparó de la misma manera como éster de 2,2,2 tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(S)-2-[3'-((R) 1-hidroxi-etil)-bifenil-4-iloxi]-propionilamino}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico usando 40c en lugar de ácido (S)-2-[3'-((R)-1-hidroxi-etil) bifenil-4-iloxi]-propiónico en 71% de rendimiento.
Compuesto 40e 40e se preparó de la misma manera como ácido ((S)—1— [(S)-2-((S)-2-{(S)-2-[3'-((R)-1-hidroxi-etil)-bifenil-4-iloxi]-propionilamino}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxilico usando 40d en lugar de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)—1—[(S)—2—((S)—2— {(S)-2-[3'-((R)-1-hidroxi-etil)-bifenil-4-iloxi]-propionilamino}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico en 83% de rendimiento.
, Compuesto 40 Una solución de 40e (102 g, 0.18 mmol) en diclorometano (180 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno.4-Dimetilaminopiridina (44 mg, 0.36 mmol) y hexafluorofosfato (7-azabenzotriazol-1-iloxi)tripirrolidinofosfonio (114 mg, 0.22 mmol) se agregaron y la mezcla de reacción se agitó a TA por 4 h. El solvente se evaporó. El acetato de etilo se agregó al residuo y la mezcla se lavó con ácido cítrico acuoso (pH 4) y salmuera. La capa orgánica se separó y se secó sobre sulfato de magnesio y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 3:7 hasta 0:1. El residuo se purificó por HPLC de fase iijversa preparativa para proporcionar el compuesto del título (2.8 mg, 3%) como un sólido blanco.1H RMN (300 MHz, CD3OD) 1.03 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.05 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.25 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.56 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.57 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 1.64-2.10 (m, 5H), 2.75-2.83 (m, 1H), 3.60-3.66 (m, 1H), 4.08 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.32 ( br d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.74 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 5.22 (q, J = 7.3 Hz, 1H), 5.98 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.20-7.25 (m, 1H), 7.39-7.51 (m, 5H). LCMS (m/z) 551.2 [M+H], Tr = 2.27 min.
EJEMPLO 41 i 0H Compuesto 41a Dicloro (p-cimeno) rutenio(II) dímero (31 mg, 0.05 mmol) y (IR,2R)-(-)- -p-tosil-1,2-difeniletilenodiamina (44 mg, 0.12 mmol) se suspendió en agua desgasificada (20 mL) y la mezcla se desgasificó con nitrógeno por 10 min. La mezcla se agitó a 70°C bajo nitrógeno por 90 min. La solución amarilla resultante se enfrió a TA. Una solución de l-(6-bromo-piridin-2-il)-etanona (2.0 mg, 10 mmol) en tetrahidrofurano desgasificado (10 mL) y formiato de sodio (3.4 g, 50 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se desgasificó con nitrógeno por 5 min. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 40°C por 30 min. La mezcla de reacción se enfrió a TA y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron, lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexanos/acetato de etilo 3:1 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (1.78 g, 89%) como un aceite café.
, Compuesto 41b A una mezcla de 41a (101 mg, 0.50 mmol), ácido 4-(2-etoxi-2-oxoetoxi)bencenborónico (112 mg, 0.50 mmol) en 1,2-dimetoxietano (4 mL) se le agregó una solución de carbonato de potasio (138 mg, 1.00 mmol) en agua (1 mL). El Tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (29 mg, 0.025 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a 100°C en un reactor de microondas por 30 in. La mezcla de reacción luego se diluyó con acetato de etilo y agua. El ácido clorhídrico 2 M se agregó para ajustar el pH de la mezcla de reacción a pH 3 y los volátiles se evaporaron. El metanol se agregó al residuo y la mezcla se filtró a través de una frita hidrofóbica. El filtrado se evaporó y el residuo se secó in vacuo para proporcionar el compuesto del título (143 mg, 93%) como un sólido blanco.
, Compuesto 41c Una solución de le (240 mg, 0.45 mmol) en diclorometano (15 mL) se enfrió en un baño de hielo-agua bajo nitrógeno. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (0.12 mL, 0.68 mmol) se agregó gota a gota, y la solución resultante se agitó por 1 h. La solución de carbonato ácido de sodio acuosa saturada fría (15 L) se agregó y la mezcla se agitó a 0°C por 15 min. La capa orgánica se separó, lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio y evaporó para proporcionar éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0.45 mmol) que se usó sin purificación adicional. Una mezcla de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxilico (0.45 mmol), 41b (143 mg, 0.45 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (0.16 L, 0.9 mmol) en acetonitrilo (15 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno.
El hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (108 mg, 0.56 mmol, se mojó con un mínimo de 20% en p de agua) y clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (130 mg, 0.675 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a TA por 4 h. N,N-Dimetilformamida (2 mL) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a TA por 22 h. El clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida adicional (87 mg, 0.45'mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a TA por 6 h. El solvente se evaporó. El residuo se suspendió en una mezcla de acetato de etilo y solución de ácido cítrico acuosa (pH 3) y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron, lavaron con agua seguido por salmuera. La capa orgánica se filtró a través de una frita hidrofóbica y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo para proporcionar el compuesto del título (71 mg, 23%) como un sólido blanco. . i . , ompuesto 41 Una solución de 41c (69 mg, 0.10 mmol) en tetrahidrofurano (2 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno, una solución de litio hidróxido monohidrato (5 mg, 0.12 mmol) en agua (0.5 mL) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a 0°C por 1 h. La solución se acidificó a pH 3 con ácido clorhídrico 2 M y el solvente se evaporó. El residuo se co evaporó con tolueno (3 x) para proporcionar ácido (S)—1—{(S)— 2-[ (S)—2—(2—{4—[6—((R)-1-hidroxi-etil)-piridin-2-il]-fenoxi}-acetilamino)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (58 mg, 0.1 mmol) como un sólido blanco que se usó crudo en la siguiente etapa. Una solución de ácido (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{4-[6-((R)-1-hidroxi-etil)-piridin-2-il]-fenoxi}-acetilamino)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (56 mg, 0.1 mmol) en diclorometano (100 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. 4-Dimetilaminopiridina (49 mg, 0.4 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó por 5 min. Una solución de (7-azabenzotriazol-l-iloxi)tripirrolidinfosfonio hexafluorofosfato (78 mg, 0.15 mmol) en diclorometano (20 mL) se agregó gota a gota durante 5 min y la mezcla de reacción se agitó a TA por 2 h. El solvente se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo. El residuo se purificó por HPLC de fase inversa preparativa para proporcionar el compuesto del título (14 mg, 26%) como un sólido blanco.1H RMN (300 MHz, CD3OD) 0.94 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.36 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.68 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.72-2.05 (m, 5H), 2.65-2.74 (m, 1H), 3.53-3.60 (m, 1H), 4.14 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 4.30-4.38 (m, 1H), 4.66 (ABq, D&B = 0.13, JAB = 15.8 Hz, 2H), 5.07 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 5.87 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.26 (br d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.71-7.78 (m, 2H), 8.06 (d, J = 8.9 Hz, 2H). LCMS (m/z) 538.2 [M+H], Tr = 2.07 min.
EJEMPLO 42 Compuesto 42a 42a se preparó de la misma manera como éster de metilo del ácido (S)-2-[3'-((R)-1-hidroxi-etil)-bifenil-4-iloxi]-propiónico usando éster de metilo del ácido 3-(4-bromo-pirazol-1-il)-propiónico en lugar de éster de metilo del ácido (S)-2-(4-yodo-fenoxi)-propiónico en 28% de rendimiento.
Compuesto 42b 42b se preparó de la misma manera como ácido (S)-2-[3'- ((R)-1-hidroxi-etil)-bifenil-4-iloxí]-propiónico usando 42a en lugar de éster de metilo del ácido (S)—2—[3'—((R)—1— hidroxi-etil)-bifenil-4-iloxi]-propiónico en 96% de rendimiento.
Compuesto 42c 42c se preparó de la misma manera como compuesto éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(S)-2-[3'- ((R)-1-hidroxi-etil)-bifenil-4-iloxi]-propionilamino}-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico usando 42b en lugar de ácido (S)-2-[3'-{(R)-1-hidroxi-etil)-bifenil-4-iloxi]-propiónico en 49% de rendimiento.
. Compuesto 42 Compuesto 42 se preparó de la misma manera como Compuesto 41 usando 42c en lugar de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-l-{(S)-2-[(S)-2-(2-{4-[6-((R)-1-hidroxi-etil)-piridin-2-il]-fenoxi}-acetilamino)-3-metil-butirilamino]-propionil}-hexahidro-piridazin-3-carboxílico en 8% de rendimiento.1H RMN (300 MHz, CD3OD) 0.94 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.37 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.62 (d, J - 6.5 Hz, 3H) , 1.65-2.05 (m, 5H) , 2.61-2.69 (m 1H) , 2.88-3.10 (ra, 2H) , 3.58-3.63 (m, 1H) , 3.90-4.00 (m, 1H) 4.01 (d, J = 8.5 Hz , 1H) , 4.38-4.44 (m, 1H) , 4.58-4.67 (m 1H) , 5.31 (q, J = 7.1 Hz, 1H) , 5.91 (q, J = 6.5 Hz, 1H) , 7.18 ( d, J = 7.6 Hz, 1H) , 7.31 ( app t , J = 7.6 Hz, 1H) , 7.47 (d, J 7.6 Hz , 1H) , 7.58 (s, 1H) , 7.77 (s, 1H) , 7.95 (s, 1H) . LCMS (m/z) 525.2 [M+H] , Tr = 4.51 min Compuesto 43a El carbonato de potasio (663 mg, 4.80 mmol) y tetraquis (trifenilfosfina)paladio (0) (139 mg, 0.12 m ol) se agregaron a una solución de (R)-1- (3-bromofenil)-etanol (483 mg, 2.40 mmol) y ácido 4-(2-metoxi carboniletil)bencenborónico (500 mg, 2.40 mmol) en 1,2-dimetoxietano (5 mL) en un recipiente de microondas 5 mL. El recipiente se selló antes de ser calentado en el microondas por 20 in, usando tiempo de retención fijo, en alta absorción a 100°C. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Hiflo y la almohadilla se lavó con acetato de etilo. Los orgánicos combinados luego se concentraron y el aceite color café resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 3:2 para proporcionar el compuesto del título (416 mg, 61%) como un aceite color amarillo.
. Compuesto 43b 43a (416 mg, 1.46 mmol) se disolvió en una mezcla de tetrahidrofurano (8 mL) y agua (2 mL) y la solución se enfrió usando un baño de hielo. Litio hidróxido monohidrato (175 mg, 2.92 mmol) se agregó y la solución se permitió entibiar lentamente a TA durante la noche. La solución se acidificó usando ácido clorhídrico 2 M y luego se extrajo con diclorometano (2 x 20 mL). Los orgánicos combinados luego se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron para proporcionar el compuesto del título (250 mg, 89%) como un sólido blanco.
, I Compuesto 43c El éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2- ((S)-2-Amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro- piridazin-3-carboxílico (669 mg, 1.55 mmol) y 43b (350 mg 1.29 mmol) se disolvieron en acetonitrilo anhidro (10 mL) se enfriaron usando un baño de hielo. 2- (1H-7 Azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronxo hexafluorofosfato metanaminio (688 g, 1.81 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (899 m]1, 5.16 mmol) se agregaron luego y la reacción se permitió entibiar lentamente- a TA y se dejó agitar durante la noche. El solvente luego se eliminó y el residuo se disolvió en acetato de etilo. La solución luego se lavó con agua (3 x 20 mL) y salmuera (20 mL), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y concentró y el aceite color café resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso-hexanos/acetato de etilo 1:4 hasta 0:1 para proporcionar el compuesto del título (314 mg, 36%) como un sólido blanco.
, Compuesto 43d 43c (314 g, 0.459 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano (10 mL). El polvo de zinc (300 mg, 4.59 mmol) se agregó seguido por acetato de amonio (1 M en agua, 3.21 mL, 3.21 mmol) . La reacción luego se dejó agitar durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Hiflo. La almohadilla luego se lavó con solución de sulfato ácido de potasio y acetato de etilo. La mezcla bifásica se acidificó además usando ácido clorhídrico 2 M hasta que la solución fue aproximadamente pH 1. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron para proporcionar el compuesto del título (212 mg, 84%) como un sólido color amarillo.
, Compuesto 43 43d (100 mg, 0.181 mmol) se disolvió en diclorometano (181 mL), bajo una atmósfera de nitrógeno, clorohidrato de N- (3-Dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (142 mg, 0.724 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (44 mg, 0.362 mmol) se agregaron y la reacción se dejó agitar durante la noche. El solvente se eliminó y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo 100% para proporcionar el compuesto del título (52 mg, 54%) como un sólido blanco. XH RMN (300 MHz, CDCl3) d 0.92 (d, J = 6.7 Hz, 6H), 1.24-1.29 (m, 3H), 1.60-1.68 (m, 5H), 1.85-1.98 (, 2H), 2.37-2.49 (m, 1H), 2.58-2.78 (m, 1H), 2.83-2.93 (m, 1H), 3.16-3.28 (m, 1H), 3.45 (m, 3H), 4.03-4.11 (m, 1H), 4.45-4.54 (m, 1H), 5.06-5.16 (m, 1H), 5.92-6.00 (m, 1H), 6.25 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.22 (s, 2H), 7.39 (app t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.48-7.56 (m, 3H), 7.62 (br s, 1H). LCMS (m/z) 535.3 [M+H], Tr = 2.43 min.
Compuesto 44a El bromoacetato de bencilo (2.07 mL, 13.1 m ol) y trifenilfosfina (3.63 g, 13.8 mol) se disolvieron en tolueno (60 mL) y se dejó agitar durante 3 dias. Un sólido color blanco se colectó por filtración y se lavó con éter de dietilo. Esto proporcionó el compuesto del título (5.86 g, 93% ¡L como un sólido blanco.
I I Compuesto 44b El carboxaldehido de 5-bromo-2-píridina (125 mg, 0.666 mmol) y 44a (655 mg, 1.33 mmol) se disolvieron en diclorometano (5 mL). 1,1,3,3-Tetrametilguanidina (251 mL, 2 mmol) se agregó luego y la reacción se dejó agitar por 3.5 h. La reacción se apagó con solución de cloruro de amonio saturada y las fases se separaron. La fase orgánica luego se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y concentró. El residuo luego se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (186 mg, 88%) como un sólido color amarillo.
Compuesto 44c 44b (186 mg, 0.585 mmol), (R)-1-[3-(4,4,5,5-tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2-il)-fenil]-etanol (145 mg, 0.585 mmol), carbonato de cesio (476 mg, 1.46 mmol) y tetraquis (trifenilfosfina) paladio (0) (66 mg, 0.0585 mmol) se colocaron en un recipiente de microondas. 1,2-Dimetoxietano (2 mL) y agua (0.5 mL) se agregaron y el recipiente se selló. La reacción se calentó en el microondas por 30 min, usando tiempo de retención fijo, en alta absorción a 150°C. La mezcla de reacción se vació sobre agua y la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo. Los orgánicos luego se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron. El residuo luego se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 1:1 para proporcionar el compuesto del título (150 mg, 77%) como una goma color naranja.
Compuesto 44d 44c (150 mg, 0.417 m ol) se disolvió en etanol (5 mL). El hidróxido de paladio(II) (20% sobre carbono, húmedo, 40 mg) se agregó luego seguido por formiato de amonio (132 mg, 2.09 mmol). La reacción se calentó a reflujo y se dejó agitar por 30 min. La reacción se permitió enfriar a TA y luego se filtró a través de una almohadilla de Hiflo. La almohadilla se lavó con etanol y los orgánicos combinados se concentraron para dejar el compuesto del titulo (105 mg, 93%) como una goma color naranja.
,I Compuesto 44e El 44d (105 mg, 0.387 mmol) y éster de 2,2,2-tricloro- etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil- butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (200 mg, 0.464 piimo?) se disolvieron en acetonitrilo (5 mL) y 5 se enfrió usando un baño de hielo.2-(IH-7-Azabenzotriazol-1- il)-1, 1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (206 g, 0.542 mmol) y h/,L?-diisopropiletilamina (270 mL, 1.55 mmol) se agregaron luego y la reacción se permitió entibiar lentamente a TA y se dejó agitar durante la noche. El ^ solvente luego se eliminó y el residuo se disolvió en acetato de etilo. La solución luego se lavó con agua (3 x 20 mL) y salmuera (20 mL), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y concentró y el residuo se purificó .por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas 5 de iso-hexanos/acetato de etilo/acetona 3:1:0 hasta 0:7:3 para proporcionar un sólido color café (110 mg). Esto se purificó además por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de acetato de etilo/acetona 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (100 mg, 38%) como 0 un sólido color amarillo.
. Compuesto 44f 44e (100 mg, 0.146 mmol) se disolvió en una mezcla de tetrahidrofurano (3 mL) y agua (1 mL) y se enfrió usando un baño de hielo. Litio hidróxido monohidrato (6 mg, 0.153 mmol) se agregó y la reacción se agitó por 30 min. La solución se acidificó a pH 1 usando ácido clorhídrico 2 M y evaporó hasta secarse. El residuo luego se purificó por cromatografía C18 usando un gradiente en etapas de acetonitrilo/agua 0:1 hasta 1:4 para proporcionar el compuesto del título (25 mg, 31%) como un sólido blanco.
, Compuesto 44 44f (25 mg, 0.045 mmol) se disolvió en diclorometano (45 L) N- (3-dimetilaminopropil) -N' -etilcarbodiimida clorohidrato (35 mg, 0.148 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (11 g, 0.009 mmol) se agregaron y la reacción se dejó agitar por 4 h. El solvente se eliminó y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de acetato de etilo/acetona 1:0 hasta 3:2 para dejar un sólido color blanco (6 mg). Esto se eluyó luego a través de un sistema HPLC de fase inversa equipado con una columna Phenomenex Gemini 10m 110A, 250 x 21.2 mm usando un acetonitrilo/flujo de agua 2:3 isocrático a 20 mL/min para proporcionar el compuesto del titulo (1.3 mg, 7%) como un sólido blanco. XH RMN (300 MHz, CDCl3) d 0.84-1.00 (m, 7H), 1.10 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.62-1.72 (m, 4H), 1.86-2.08 (, 3H), 2.54-2.71 (m, 2H), 2.90-3.14 (m, 2H), 3.28-3.54 (m, 3H), 3.98 ( app t, J = 9.2 Hz, 1H), 4.43-4.52 (, 1H), 5.07 ( app t, J = 8.0 Hz, 1H), 5.92-6.00 (m, 1H), 6.10 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.37 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.26-7.31 (m, 1H), 7.41-7.59 (m, 3H), 7.75 (dd, J = 8.0, 2.2 Hz, 1H), 8.78 (d, J = 2.4 Hz, 1H). LCMS (m/z) 536.0 [M+H], Tr = 1.47 min.
EJEMPLO 45 Compuesto 45a 6-Bromo-3-piridinacarboxaldehído (500 mg, 2.69 mmol) y bromuro de benciloxicarbonilmetil-trifenil-fosfonio (2.64 g, 5.38 mmol) se disolvieron en diclorometano (15 mL).1,1,3,3-Tetrametilguanidina (1.01 mL, 8.03 mmol) se agregó luego y la reacción se dejó agitar por 3.5 h. La reacción se apagó con solución de cloruro de amonio saturada y las fases se separaron. La fase orgánica luego se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y concentró. El residuo luego se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso-hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (492 mg, 57%) como un sólido blanco.
Compuesto 45b 45a (382 mg, 1.54 mmol), (R)-1-[3-(4,4,5,5-tetrametil- [1,3,2]dioxaborolan-2-il)-fenil]-etanol (490 mg, 1.54 mmol), carbonato de cesio (1.06 g, 3.85 mmol) y tetraquis(trifenilfosfina) paladio(O) (178 mg, 0.154 mmol) se colocaron en un recipiente de microondas.1,2-Dimetoxietano (4 mL) y agua (1 mL) se agregaron y el recipiente se selló. La reacción se calentó en el microondas por 50 min, usando tiempo de retención fijo, en alta absorción a 150°C. La mezcla de reacción se vació sobre agua y la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo. Los orgánicos luego se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron. El residuo luego se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso- hexanos/acetato de etilo 1:0 hasta 1:1 para proporcionar producto impuro. Esto se sometió a una segunda ronda de purificación usando las mismas condiciones para -proporcionar el compuesto del titulo (195 mg, 35%) como un sólido color amarillo.
, Compuesto 45c 45b (195 mg, 0.543 mmol) se disolvió en etanol (5 mL). El hidróxido de paladio(II) (20% sobre carbono, húmedo, 40 mg) se agregó luego seguido por formiato de amonio (172 mg, 2.72 mmol). La reacción se calentó a reflujo y se dejó agitar por 30 min. La reacción se permitió enfriar a TA y luego se filtró a través de una almohadilla de Hiflo. La almohadilla se lavó con etanol y los orgánicos combinados se concentraron para dejar el compuesto del titulo (150 mg, 100%) como un sólido amarillo pálido.
, I Compuesto 45d 45c (150 mg, 0.553 mmol) y éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-bu.tirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (287 mg, 0.664 mmol) se disolvieron en acetonitrilo (5 L) y se enfrió usando un baño de hielo. 2- (IH-7-Azabenzotríazol-1-il)- 1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (294 g, 0.774 mmol) y JV,I7-diisopropiletilamina (385 mL, 2.21 mmol) se agregaron luego y la reacción se permitió entibiar lentamente a TA y se dejó agitar durante la noche. Acetato de etilo luego se vació en la mezcla de reacción. La solución resultante luego se lavó con agua (3 x 20 mL) y salmuera (20 mL), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y concentró y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de iso-hexanos/acetato de etilo/acetona 3:1:0 hasta 0:7:3 para proporcionar un sólido (334 mg). Esto se purificó además por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente en etapas de acetato de etilo/acetona 1:0 hasta 4:1 para proporcionar el compuesto del título (167 mg, 44%) como un sólido.
. Compuesto 45e 45d (160 mg, 0.234 mmol) se disolvió en una mezcla de tetrahidrofurano (4 mL) y agua (1 mL) y se enfrió usando un baño de hielo. Litio hidróxido monohidrato (6 mg, 0.153 mmol) se agregó y la reacción se agitó por 30 nain. La solución se neutralizó usando ácido clorhídrico 2 M y evaporó hasta secarse. El residuo luego se purificó por cromatografía C18 usando un gradiente en etapas de acetonitrilo/agua 0:1 hasta 1:4 para proporcionar el compuesto del titulo (21 g, 16%) como un sólido blanco.
, Compuesto 45 45e (21 mg, 0.0379 ol) se disolvió en diclorometano (38 mL). El clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (29 mg, 0.152 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (9 mg, 0.0758 mmol) se agregaron y la reacción se dejó agitar por 4 h. El solvente se eliminó y el residuo se purificó por cromatograf ia en gel de sílice usando acetato de etilo 100%. El material resultante se eluyó luego a través de un sistema HPLC de fase inversa equipado con una columna Phenomenex Gemini 10m 110A, 250 x 21.2 mm usando un acetonitrilo/flujo de agua 3:7 isocrático a 20 mL/min para proporcionar el compuesto del titulo (1 mg, 5%). 1H RMN (300 MHz, CDCI3) d 0.91 (d, J = 6.5 Hz, 6H), 1.48 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.63-1.72 (m, 7H), 1.81-1.93 (m, 2H), 2.00-2.10 (m, 1H), 2.25-2.38 (m, 1H), 2.54-2.67 (m, 1H), 3.15-3.28 (m, 1H), 3.39-3.59 (m, 2H), 4.03 (app t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.43-4.54 (m, 1H), 5.04-5.16 (m, 1H), 5.80 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 5.94 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 7.22-7.27 (m, 1H), 7.43 (app t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.55-7.57 (m, 1H), 7.69 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.19 (br s, 1H), 8.48 (d, J = 2.2 Hz, 1H). LC S (m/z) 536.2 [M+H], Tr = 1.61 min.
EJEMPLO 46 , , Compuesto 46 Al Compuesto 21 (25 mg, 0.05 m ol) en acetato de etilo (5 mL) a TA se le agregó paladio sobre carbono 10% (20 mg).
El sistema se purgó con hidrógeno y se agitó por 2 h. La reacción se filtró a través de Celite y se concentró in vacuo. El residuo se purificó por TLC preparativa usando acetato de etilo/acetona 5/1 para dar el compuesto del titulo (2.2 mg, 9%) como un sólido blanco.1H RMN (300 MHz, CDCl3) 0.96 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.24 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.52 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.67 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.55-2.14 (m, 10H), 2.53-2.80 (m, 2H), 2.92-3.01 (m, 2H), 3.45-3.67 (m, 1H), 4.14-4.23 (m, 1H), 4.49-4.60 (m, 1H), 5.39-5.51 (m, 1H), 5,96 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.06 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 6.43 (d, J =.8.5 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 8.5, 1.1 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.93 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 9.16 (s, 1H) . LCMS (m/z) = 552.3 [M+H] , Tr = 1.25 min.
EJEMPLO 47 , ¡ Compuesto 47a A una solución de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxilico (320 mg, 0.74 mmol) en diclorometano (8 mL) se le agregó ácido trifluoroacético (2 mL). La reacción se agitó a TA por 105 min y luego se concentró in vacuo. El producto crudo resultante se disolvió en acetato de etilo (75 mL) y se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 40 L), y los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron, y concentraron a un residuo crudo que se usó sin purificación adicional. El residuo de la etapa previa, 1-hidroxibenzotriazol (152 mg, 1.12 mmol) y ácido (S)-2-tert-butoxicarbonilamino-3-hidroxi-propiónico (154 mg, 0.75 mmol) se disolvieron en diclorometano (6 mL). N,N-Díisopropiletilamina (190 mg, 1.5 mmol) se agregó, y la solución resultante se enfrió en un baño de agua con hielo. N- (3-Dimetilaminopropil) -N' - etilcarbodiimida (149 mg, 0.96 mmol) se agregó gota a gota durante 15 s. La reacción se agitó por 18 h, permitiendo el baño de hielo expirar lentamente. La mezcla de reacción luego se diluyó con acetato de etilo (50 mL) y se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado y salmuera. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró, y concentró para proporcionar un residuo crudo que se purificó por cromatografía en gel de sílice (75 hasta 100% acetato de etilo en iso-hexanos) para proporcionar el producto del titulo (211 mg, 55%) como un aceite. l , . - li i i , , - li i Compuesto 47b A una solución de 47a (64 mg, 0.12 mmol) en diclorometano (1 mL) se le agregó 2,4,6-colidina (98 mg, 1.28 mmol). El trifluorometansulfonato de tert-Butildimetilsililo (98 mg, 0.37 mmol)'se agregó gota a gota durante 20 seg. La mezcla de reacción se agitó por 15 h y se apagó con bicarbonato de sodio acuoso saturado (1 mL). La mezcla se diluyó además con acetato de etilo, agua, y ácido clorhídrico acuoso 0.1 N para proporcionar una capa acuosa ácida. Las fases se separaron, y los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y concentraron in vacuo para proporcionar un residuo crudo que se usó sin purificación adicional. El producto crudo se disolvió en tetrahidrofurano (3 mL). El ácido acético (115 mg, 1.9 mmol) se agregó en una porción y la solución resultante se agitó por 3.25 h. La reacción luego se diluyó con acetato de etilo (25 mL) y se lavó con bicarbonato de sodio acuoso saturado (25 mL). Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (25 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (25 mL) y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La mezcla se filtró, y el filtrado se concentró in vacuo para proporcionar amina cruda que se usó sin purificación adicional. La amina cruda se disolvió en N, N-dimetilformamida (1.5 mL). 2,4,6-Colidina (31 mg, 0.26 mmol) y ácido trans-3-pentenoico (15.3 mg, 0.152 mmol) se agregaron, y la solución resultante se enfrió en un baño de agua con hielo. El hexafluorofosfato de (l-Ciano-2-etoxi-2-oxoetilidenaminooxi)dimetilamino-morfolin-carbenio (72.4 mg, 0.169 mmol) se agregó en una porción, y la reacción se agitó por 30 min. La reacción luego se eliminó del baño frió y se entibió a temperatura ambiente. Después de 15 h, la reacción se diluyó con acetato de etilo (3-5 mL), bicarbonato de sodio acuoso saturado (20 L), y salmuera (5 mL). Las fases se separaron, y la capa orgánica se lavó con ácido clorhídrico acuoso 0.1 N (25 mL) y luego salmuera (5 mL). La capa acuosa ácida se extrajo con acetato de etilo (25 mL), y las fases orgánicas combinadas luego se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron, y concentraron. El residuo crudo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (50 hasta 80% acetato de etilo en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (46.9 mg, 62% sobre 3 etapas) como una espuma blanca. . , i .
Compuesto 47c A una solución de 47b (46.9 mg, 0.0761 mmol) en tetrahidrofurano (1.5 mL) se le agregó agua (0.30 mL), acetato de amonio (96 mg, 1.2 mmol), y polvo de zinc (109 mg, 1.7 mmol). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a TA por 17.5 h, tiempo en el cual la temperatura se incrementó hasta 35°C. Después de 25.5 h, polvo de zinc adicional (60 mg, 0.92 mmol) se agregó y la temperatura de reacción se incrementó hasta 45°C. Después de 39.5 h, la mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite lavando con agua y acetato de etilo. La fase acuosa se acidificó con ácido clorhídrico acuoso 2 M (15 mL), y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 mL), y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y concentraron para proporcionar un sólido color blanco (34.9 mg, 95%) que se usó sin purificación adicional. El ácido crudo (0.072 mmol) se disolvió con (R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etanol (17.4 mg, 0.087 mmol) en diclorometano (1.0 mL). 4-Dimetilaminopiridina (13.3 mg, 0.109 mmol*) se agregó seguido por clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (17 mg^ 0.085 mmol). La reacción se agitó por 16.5 h, tiempo en el cual esto se cargó directamente sobre una columna de gel de sílice. Elución con 60 hasta 100% acetato de etilo en iso-hexanos proporciona el compuesto del título (20 mg, 43%) como un residuo amorfo.
. II , Compuesto 47d Una solución de 47c (19.6 mg, 0.0294 mmol) en tolueno (9.4 mL) se roció con argón por 10 min con agitación. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (2.8 mg, 0.0045 m ol) se agregó luego como una solución en tolueno desgasificado (0.45 mL), y la solución resultante se calentó a 105°C. Después de 25 min, una porción adicional de catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (1.4 mg, 0.0022 mmol) se agregó. Después de 10 min adicionales, la reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró in vacuo a ~4.5 mL. La solución se cargó directamente sobre una columna de gel de sílice que se eluyó con 80 hasta 100% acetato de etilo en iso-hexanos para proporcionar el compuesto del título (6.9 mg, 38%) como un sólido amorfo. 'i i í í Compuesto 47 En un vial de polipropileno, 47d (4.7 mg, 0.0075 mmol) se disolvió en tetrahidrofurano (0.90 mL) bajo argón y la solución resultante se enfrió en un baño de agua con hielo. La -HF-piridina (0.10 mL) se agregó gota a gota. Después de 10 min, la reacción se apagó por adición a una mezcla agitada de acetato de etilo (15 mL) y bicarbonato de sodio acuoso saturado (15 mL). Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 30 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron para proporcionar un residuo crudo. En un vial de polipropileno bajo argón, el residuo antes mencionado se disolvió en tetrahidrofurano (0.90 mL) y la solución resultante se enfrió en un baño de agua con hielo.
HF-piridina (0.10 mL) se agregó gota a gota, y la mezcla de reacción se eliminó del baño frió. Después de 45 min, la reacción se trató como se describe arriba para proporcionar un residuo crudo. La purificación por HPLC de fase inversa (5 hasta 100% acetonitrilo en agua, +ácido trifluoroacético 0.1%) proporcionó el compuesto del titulo (1.6 mg, 34%) como un sólido blanco amorfo.1H RMN (400 MHz, CD30D) 9.54 (s, 1H), 8.38 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.87 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.90-6.75 (m, 2H), 6.18 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 5.84-5.74 (m, 1H), 4.71-4.64 (m, 1H), 4.50-4.42 (m, 1H), 3.88-3.81 (m, 2H), 3.78 (dd, J = 11.3, 6.4 Hz, 1H), 3.52 (dd, J = 12.9, 6.2 Hz, 1H), 3.52 (dd, J = 12.9, 6.2 Hz, 1H), 2.81-2.70 (m, 1H), 2.11-2.04 (m, 1H), 1.99-1.91 (m, 1H), 1.85-1.69 (m, 2H), 1.73 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.60 (d, J = 7.1 Hz, 3H). LCMS (m/z) 510.2 [M+H], Tr = 2.19 min.
EJEMPLO 48 , ' , , i Compuesto 48a A una solución de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-((S)-2-tert-butoxicarbonilamíno-propionil)- hexahidro-piridazin-3-carboxílico (320 mg, 0.74 mmol) en diclorometano (8.8 mL) se le agregó ácido trifluoroacético (2.2 mL). La reacción se agitó a TA por 45 min y se concentró in vacuo. El producto crudo resultante se disolvió dos veces en y concentró de tolueno anhidro (10 L). El residuo crudo resultante se usó sin purificación adicional. El residuo crudo (ca. 0.74 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (153.8 mg, 1.1 mmol), y ácido (2S,3R)-2-tert-butoxicarbonilamino-3-hidroxi-butírico (161.2 mg, 0.735 mmol) se disolvieron en diclorometano (4 mL). N,N-Diisopropiletilamina (192 mg, 1.5 mmol) se agregó, y la solución resultante se enfrió en un baño de agua con hielo. IV-.(3-Dimetilaminopropil) -N' -etilcarbodiimida (132 mg, 0.85 mmol) se agregó gota a gota durante 15 s. La reacción se eliminó del baño frío y se agitó por 21.5 h. La mezcla de reacción luego se diluyó con acetato de etilo (50 mL) y se lavó con bicarbonato de sodio acuoso la mitad saturado (30 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró, y concentró para proporcionar un residuo crudo que se purificó por cromatografía en gel de sílice eluyendo con 65 hasta 90% acetato de etilo en iso-hexanos. Las fracciones impuras se purificaron por cromatografía en gel de sílice y se colectaron con el primer producto para proporcionar el compuesto del título (230 mg, 58%). l l i i. , - li ¡ | ¡ . , , , - li i ' Compuesto 48b A una solución de 48a (62.3 mg, 0.12 m ol) en diclorometano (1 mL) se le agregó 2,4,6-colidina (146 mg, 1.21 mmol). El trifluorometansulfonato de tert- Butildimetilsililo (94 mg, 0.36 mmol) se agregó gota a gota durante 20 s. La mezcla de reacción se agitó por 15 h y se apagó con bicarbonato de sodio acuoso saturado (1 mL). La mezcla se diluyó además con acetato de etilo (2 mL) y salmuera (1 mL). Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (4 x 1.5 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y concentraron in vacuo para proporcionar un residuo crudo que se usó sin· purificación adicional. El producto crudo se disolvió en tetrahidrofurano (3 mL). El ácido acético (104 mg, 1.6 mmol) se agregó en una porción y la solución resultante se agitó por 3.5 h. La reacción luego se diluyó con acetato de etilo (30 mL), bicarbonato de sodio acuoso saturado (20 mL) y salmuera (10 mL). Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (20 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La mezcla se filtró, y el filtrado se concentró in vacuo para proporcionar intermediario amina crudo que se usó sin purificación adicional. La amina cruda se disolvió en N,N- imetilfor amida (1.5 mL).2,4,6-Colidina (28 mg, 0.23 inmol) y ácido trans-3-pentenoico (14.3 mg, 0.143 mmol) se agregaron, y la solución resultante se enfrió en un baño de agua con hielo. El hexafluorofosfato (l-Ciano-2-etoxi-2-oxoetilidenaminooxi)dimetilamino-morfolin-carbenio (69 mg, 0.16 mmol) se agregó en una porción, y la reacción se agitó por 30 min. La reacción luego se eliminó del baño frió y entibió a temperatura ambiente. Después de 15 h, la reacción se diluyó con acetato de etilo (25 mL), ácido clorhídrico acuoso 0.1 N (30 mL), y salmuera (5 mL). Las fases se separaron, y la capa acuosa ácida se extrajo con acetato de etilo (25 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con bicarbonato de sodio acuoso saturado (25 mL), con salmuera (5 mL), se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron, y concentraron. El residuo crudo resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice (50 hasta 75% acetato de etilo en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (74 mg, rendimiento cuantitativo durante 3 etapas) como una espuma blanca. i .
. , Compuesto 48c A una solución de 48b (74 mg, 0.117 mol) en tetrahidrofurano (2.3 mL) se le agregó agua (0.47 mL), acetato de amonio (138 mg, 1.8 mmol), y polvo de zinc (164 mg, 2.5 mmol). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a TA por 17.5 h, tiempo en el cual la temperatura se incrementó hasta 35°C. Después de 25.5 h, polvo de zinc adicional (85 mg, 1.3 mmol) se agregó y la temperatura de reacción se incrementó hasta 45°C. Después de 39.5 horas totales, la mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite, lavando con agua y acetato de etilo. La fase acuosa se acidificó con ácido clorhídrico acuoso 2 N (15 mL), y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 mL), y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron, y concentraron para proporcionar un sólido blanco amorfo (50 mg, 86%) que se usó sin purificación adicional. El producto crudo (0.10 mmol) se disolvió junto con (R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etanol (23.9 mg, 0.12 mmol) en diclorometano (1.0 mL).4-Dimetilamínopiridina (15 mg, 0.12 mmol) se agregó seguido por clorohidrato N- {3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (17 mg, 0.019 mmol). La reacción se agitó por 16 h, tiempo en el cual esto se cargó directamente sobre una columna de gel de sílice. La elución con 50 hasta 85, y luego hasta 100% acetato de etilo en iso-hexanos proporcionó el compuesto del título (40 mg, 58%) como un sólido.
- . I i Compuesto 48d Una solución de 48c (26 mg, 0.037 mmol) en tolueno (12 mL) se roció con argón por varios min con agitación. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (3.4 mg, 0.0054 mmol) se agregó luego como una solución en tolueno desgasificado (0.40 mL), y la solución resultante se calentó a 105°C. Después de 20 min, una porción adicional de catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (1.7 mg, 0.0027 mmol) se agregó como una solución en tolueno (0.20 mL). Después de 40 min adicionales, la reacción se enfrió a TA y se concentró in vacuo hasta ~3 mL. La solución se cargó directamente sobre una columna de gel de sílice, que se eluyó con 70 hasta 100% acetato de etilo en íso-hexanos para proporcionar el compuesto del título (10 mg, 42%) como un sólido amorfo. i i i ' Compuesto 48 En un vial de polipropileno bajo atmósfera de argón, 48d (10 mg, 0.016 mol) se disolvió en tetrahidrofurano (900 pL). La HF-piridina (~70% como HF, 100 pL) se agregó gota a gota por medio de jeringa, y la solución resultante se agitó por 130 min. Una alícuota adicional de HF-piridina (100 pL) se agregó luego por medio de jeringa, y la solución resultante se agitó por 80 min adicionales. La mezcla de reacción se apagó por su adición cuidadosa a una mezcla agitada de acetato de etilo (50 mL) y bicarbonato de sodio acuoso saturado (50 mL). Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron, y concentraron para proporcionar un residuo crudo que se purificó por HPLC de fase inversa (C18, 15 hasta 100% acetonitrilo/agua, ácido trifluoroacético 0.1%). Las fracciones impuras de esta corrida se re-purificaron de la misma manera para proporcionar el compuesto del título como la sal del ácido trifluoroacético (5.0 mg, 49%) como un sólido blanco amorfo seguido por liofilización. H RMN (400 MHz, CD3OD) d 9.55 (s, 1H), 8.38 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.87 (dd, J = 8.7, 1.4 Hz, 1H), 6.86-6.75 (m, 2H), 6.15 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.80-5.70 (m, 1H), 4.47 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.45 4.38 (m, 1H), 4.09-4.01 (m, 1H), 3.83-3.78 (m, 1H), 3.55 (dd, J = 13.5, 5.6 Hz, 1H), 3.11 (dd, J = 13.2, 4.7 Hz, 1H), 2.78-2.67 (m, 1H), 2.09-1.99 (m, 1H), 1.96-1.89 (m, 1H), 1.82-1.64 (, 5H), 1.60-1.54 (, 3H), 1.25 (d, J = 6.3 Hz, 3H). LCMS (m/z) 524.6 [M+H], Tr = 2.15 min.
EJEMPLO 49 \ i ¡ Compuesto 49a Una solución de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (865 mg, 2 mmol) en diclorometano (20 mL) se enfrió en un baño de agua con hielo. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (667 mg, 3 mmol) se agregó gota a gota a 0°C bajo argón, y la solución resultante se agitó a TA por 30 min. La mezcla de reacción se evaporó hasta secarse y el residuo crudo resultante se disolvió en acetonitrilo anhidro (25 mL) bajo argón. La mezcla de reacción se agitó a 0°C, sal diciclohexilamina del ácido (S)-4-azido-2-(tert-butoxicarbonilamino)butanoico (936 mg, 2.2 m ol) y N,N-diisopropiletilamina (1034 mg, 8 mmol) se agregaron seguido por 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (1065 mg, 2.8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA por 48 h. El solvente se evaporó, el residuo se disolvió en acetato de etilo (100 mL) y la solución se lavó con solución de agua al 20% de ácido cítrico (2 x 100 mL), agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo + metanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (783 mg, 70%) como un sólido blanco después de evaporación. Rf = 0.40, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1).
, NMe2Ph))2(bis[(diciclohexil)(4- dimetilaminofenil )fosfina]paladio(II)cloruro) 173 mg, 0.21 mmol) y fosfato de potasio tribásico (2.64 g, 12.4 mmol) se disolvieron en ciclopentil metil éter (11.9 mL) y agua (5.1 mL) . La mezcla bifásica resultante se agitó vigorosamente a 90°C por 3.5 h, tiempo en el cual la reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con acetato de etilo (50 mL) y agua (40 mL). Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron, y concentraron para proporcionar un residuo crudo que se purificó por cromatografía en gel de sílice (25 hasta 60% acetato de' etilo en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (1.07 g, 85%) como un aceite color amarillo. 1) LiOH Compuesto 49c A una solución de 49b ( 600 mg, 2 mmol) in tetrahidrofurano (8 mL) se agregó metanol (4 mL), agua (4 mL) e hidróxido de litio (96 mg, 4 mmol). La mezcla resultante se agitó a TA por 10 h y se apagó con 1 M ácido clorhídrico (4.2 mL, 4.2 mmol). La solución resultante se concentró hasta un residuo crudo el cual se co-destiló dos veces con tetrahidrofurano (20 mL), dos veces con acetonitrilo anhidro (20 mL) y dos veces con tolueno anhidro (20 mL). El sólido blanco resultante se secó bajo alto vacío durante la noche y se usó sin purificación adicional (735 mg, rendimiento cuantitativo) . , l l , ¡ , . .
I I Compuesto 49d Una solución de 49a (169 mg, 0.302 mmol) en diclorometano (10 L) se enfrió en un baño de agua con hielo. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (101 mg, 0.455 mmol) se agregó gota a gota a 0°C bajo argón, y la solución resultante se agitó a TA por 30 min. La mezcla de reacción se evaporó hasta secarse y el residuo crudo resultante se disolvió en acetonitrilo anhidro (20 mL) bajo argón. La mezcla de reacción se agitó a 0°C, ácido (E)-4-[6-((R)-1-hidroxi-etil)-isoquinolin-3-il]-2,2-dimetil-but-3-enoico (123 mg, 0.333 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (151 mg, 1.220 ramol) se agregaron seguido por 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (161 mg, 0.423 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA por 2 días. El solvente se evaporó, el residuo se disolvió en acetato de etilo (50 mL) y la solución se lavó con solución de agua al 20% de ácido cítrico (2 x 50 mL), agua (50 mL) y salmuera (50 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% mezcla de acetato de etilo y metanol (4/1) en íso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (198 mg, 90%) como un sólido blanco después de la evaporación. Rf = 0.18, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1).
. . Compuesto 49 A una solución de 49d (170 mg, 0.23 mmol) en tetrahidrofurano (2 mL) se le agregó metanol (1 mL), agua (1 mL) e hidrato de hidróxido de litio (7 mg, 0.28 mmol). La mezcla se agitó por 2 h a temperatura ambiente y se apagó con ácido clorhídrico 1 M acuoso (0.30 mL, 0.30 mmol). La solución resultante se concentró a un residuo crudo que se co-evaporó dos veces con tetrahidrofurano (5 mL), dos veces con acetonitrilo anhidro (5 mL) y dos veces con tolueno anhidro (5 mL). El sólido blanco resultante se secó bajo alto vacío durante la noche y se usó sin purificación adióional (151 mg, rendimiento cuantitativo). En un matraz purgado con argón, secado en horno se colocaron 2-metil-6-nitrobenzoico anhídrido (317 mg, 0.92 mmol), 4-dimetilaminopiridina (337 mg, 2.76 mmol) y 1,2-dicloroetano anhidro (300 mL). La solución resultante se calentó a 50°C, y el ácido seco crudo se agregó gota a gota por jeringa como una solución en N,N-dimetilformamida seca (5 mL) durante 12 h. Una porción adicional de dimetilformamida seca (2x 1 mi) se usó para completar la transferencia cuantitativa. Después de agitar por 2 h adicionales a 50°C, la mezcla de reacción se transfirió a un embudo separador y se lavó con agua (200 mL, 10 mL de salmuera se agregó para soportar la separación). La fase acuosa se extrajo con diclorometano (100 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (100 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se.filtraron y concentraron bajo presión reducida. El'residuo resultante se disolvió en acetato de etilo (250 mL) y se lavó con agua (300 mL, 10 mL de salmuera se agregó para soportar la separación). La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (150 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (200 mL, 10 mL de salmuera se agregó para soportar la separación). La fase acuosa resultante se extrajo con acetato de etilo (150 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (150 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo y metanol mezcla (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (76 mg, 57%) como un sólido blanco después de la evaporación. Rf = 0.51, 10% metanol en diclorometano.1H RMN (400 MHz, CD3OD) d 9.03 (s, 1H), 7.95 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.46 (dd, J = 8.5, 1.6 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 5.95 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.51 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 4.67 (dd, J = 8.6, 6.3 Hz, 1H), 4.29 (m, 1H), 3.68 (dd, J = 11.2, 2.7 Hz, 1H), 3.28 (td, J = 6.8, 3.7 Hz, 2H), 2.67-2.56 (m, 1H), 1.88 (m, 2H), 1.85-1.60 (m, 4H), 1.57 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.54 (d, J = 7.3 Hz, 3H), 1.42 (s, 3H), 1.27 (s, 3H). LCMS (m/z) 557.3 ([M + H], Tr = 3.15 min.
EJEMPLO 50 \ Compuesto 50 En un matraz purgado con argón, secado al horno, el Compuesto 49 (20 mg, 0.034 ol) , yoduro de cobre(I) (1 mg, 0.005 mmol) y ácido propiólico (5 mg, 0.070 mmol) se agregaron. El matraz se selló con septa y repurgó con argón tres veces. N,N-dimetilformamida anhidra (5 mL) se agregó y la mezcla de reacción se repurgó con argón tres veces. Esta mezcla de reacción se calentó a 70°C por 2 días. Después de la evaporación del solvente bajo presión reducida, el residuo crudo se disolvió en acetato de etilo (10 mL) y se filtró a través de Celite y la almohadilla filtro se lavó con acetato de etilo (10 mL). Después de la concentración bajo presión reducida, el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% de mezcla acetato de etilo y metanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (7 mg, 34%) como un sólido blanco. Rf = 0.36, 5% metanol en diclorometano. CH RMN (400 MHz, CD3OD): d 9.05 (s, 1H) , 8.11 (£>r s, 1H), 8.00 ( br s, 1H), 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 1H) , 7.82 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.48 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 5.97 (m, 1H) , 5.56 (m, 1H) , 4. 60 (m, 1H) , 4.29 (m, 1H) , 3. 66 (m 1H), 3.21 (m, 2H), 2.69-2.47 (m, 1H), 1.89 (m, 2H), 1.87-1.55 (m, 4H), 1.53 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.50 (d, J = 7.1 Hz, 3H) 1.40 (s, 3H), 1.28 (s, 3H). LCMS (ra/z) 603.1 [M+H]' Tr = 2.62 min.
EJEMPLO 51 l i i , , , Compuesto 51a Una solución de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (865 mg, 2 mmol) en diclorometano (20 mL) se enfrió en un baño de agua con hielo. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (667 mg, 3 mol) se agregó gota a gota a 0°C bajo argón, y la solución resultante se agitó a TA por 30 min. La mezcla de reacción se evaporó hasta secarse y el residuo crudo resultante se disolvió en acetonitrilo anhidro (25 mL) bajo argón. La mezcla de reacción se agitó a 0°C, ácido (S)-2-(tert-butoxicarbonilamino)pent-4-inoico (469 mg, 2.2 mmol, fuente: Matrix Scientific, Número de Catálogo 041479) y N,N-diisopropíletílamina (1034 mg, 8 mmol) se agregaron seguido por 2- (IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (1065 mg, 2.8 mmol). Mezcla de reacción se agitó a TA por 48 h. El solvente se evaporó, el residuo se disolvió en acetato de etilo (100 mL) y la solución se lavó con solución de agua al 20% de ácido cítrico (2 xlOO mL), agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo y metanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (738 mg, 70%) como un sólido blanco después de evaporación. Rf = 0.30, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1). l : ¡ i . .
Compuesto 51b Una solución de 51a (145 mg, 0.275 mmol) en diclorometano (10 mL) se enfrió en un baño de agua con hielo. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (92 mg, 0.414 mmol) se agregó gota a gota a 0°C bajo argón, y la solución resultante se agitó a TA por 30 min. La mezcla de reacción se evaporó hasta secarse y el residuo crudo resultante se disolvió en acetonítrilo anhidro (20 mL) bajo argón. La mezcla de reacción se agitó a 0°C, ácido (E)-4-[6-((R)-1-hidroxi-etil)-isoquinolin-3-il]-2,2-dimetil-but-3-enoico (112 mg, 0.303 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (137 mg, 1.101 mmol) se agregaron seguido por 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (147 mg, 0.385 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA por 2 4 dias. El solvente se evaporó, el residuo se disolvió en acetato de etilo (50 mL) y la solución se lavó con solución de agua al 20% de ácido cítrico (2 x 50 L), agua (50 L) y salmuera (50 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo y metanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (163 mg, 85%) como un sólido blanco después de evaporación. Rf = 0.29, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1).
. . Compuesto 51 A una solución de 51b (125 mg, 0.18 mmol) en tetrahidrofurano (2 mL) se le agregó metanol (1 mL), agua (1 mL) e hidrato de hidróxido de litio (5.2 mg, 0.22 mmol). La mezcla se agitó por 2 h a temperatura ambiente y se apagó con ácido clorhídrico 1 M acuoso (0.25 mL, 0.25 mmol). La solución resultante se concentró a un residuo crudo que se co-evaporó dos veces con tetrahidrofurano (5 mL), dos veces con acetonitrilo anhidro (5 mL) y dos veces con tolueno anhidro (5 mL). El sólido blanco resultante se secó bajo alto vacío durante la noche y esto se usó sin purificación adicional (113 mg, rendimiento cuantitativo). En un matraz purgado con argón, secado al horno se colocaron 2-metil-6-nitrobenzoico anhídrido (248 mg, 0.72 mmol), 4-dimetilaminopiridina (264 mg, 2.16 mmol) y 1,2-dicloroetano anhidro (200 mL). La solución resultante se calentó a 50°C, y el ácido seco crudo se agregó gota a gota por medio de jeringa como una solución en N,N-dimetilformamida anhidra (5 mL) durante 12 h. Una porción adicional de N,N-dimetilformamida anhidra (2 x 1 mi) se usó para completar la transferencia cuantitativa. Después de agitar por 2 h adicionales a 50°C, la mezcla de reacción se transfirió a un embudo separador y se lavó con agua (200 mL, 10 mL de salmuera se agregó para soportar la separación). La fase acuosa se extrajo con diclorometano (100 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (100 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió en acetato de etilo (250 mL) y se lavó con agua (300 mL, 10 mL de salmuera se agregó para soportar la separación). La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (150 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (200 mL, 10 mL de salmuera se agregó para soportar la separación). La fase acuosa resultante se extrajo con acetato de etilo (150 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (150 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo + metanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (56 g, 57%) como un sólido blanco después de evaporación. Rf = 0.53, 10% metanol en diclorometano.1H RMN (400 MHz, CD3OD) d 9.03 (s, 1H), 7.94 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.52 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 5.95 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.52 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 4.70 (dd, J = 7.7, 6.7 Hz, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.00 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 3.72-3.64 (m, 1H), 2.63 (m, 1H), 2.55-2.40 (m, 2H), 1.91 (s, 1H), 1.88 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 1.64 (m, 1H), 1.57 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.53 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.42 (s, 3H), 1.27 (s, 3H). LCMS (m/z) 546.2 [M+H]' Tr = 3.04 min.
EJEMPLO 52 Compuesto 52 Una solución de Compuesto 51 (10 mg, 0.018 mmol) en una mezcla de acetato de etilo (4 mL) y tetrahidrofurano (4 mL) que contienen paladio sobre carbonato de calcio 5% envenenado con catalizador Lindlar de plomo (10 mg) se hidrogenó a TA y presión de hidrógeno por 3 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y la almohadilla filtro se lavó con tetrahidrofurano (10 mL). El filtrado se evaporó para proporcionar el compuesto del título (10 mg, rendimiento cuantitativo) como un sólido blanco. Rf = 0.19, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1). 1H RMN (400 MHz, CD30D): d 9.04 (s, 1H), 7.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 6.39 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 5.95 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 5.76-5.62 (m, 1H), 5.57 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 5.02 (d, J 17.0 Hz, 1H), 4.96 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.61-4.54 (, 1H) 4.29 (m, 1H), 3.68n (m, 1H), 2.61 (m, 1H), 2.42-2.34 (m, 1H), 2.30-2.20 ( , 1H) , 1. 90 (m, 1H) , 1.81 (m, 1H) , 1. 68-1. 60 (m 2H), 1.57 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.53 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.26 (s, 3H). LCMS (m/z) 548.3 [M+H]' Tr = 2.85 min.
EJEMPLO 53 , l Compuesto 53a A una solución de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (300 mg, 0.69 mmol) en diclorometano (1.84 mL) se le agregó lentamente ácido trifluoroacético (460 mL, 6.00 minol) a 0°C bajo una atmósfera de argón. Después de 3 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se disolvió en N,N-dimetilformamida (3.45 L) y ácido (S)-tert-Butoxicarbonílamino-ciclohexil-acético (195 mg, 0.760 mmol), 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (289 mg, 0.760 mmol), y N,N-diisopropiletilamina (180 pL, 1.04 mmol) se agregaron secuencialmente a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 18 h, la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (300 mL), y la mezcla resultante se lavó con salmuera (4 c 100 L), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (12 g Columna Combíflash HP Gold, gradiente acetato de etilo/iso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del titulo (380 mg, 96%) como un aceite incoloro. l Compuesto 53b A una solución de 53a (220 mg, 0.385 mmol) en diclorometano (1.92 mL) se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (128 mg, 0.587 mmol) a 0°C bajo una atmósfera de argón. Después de 1.5 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se diluyó con acetonitrilo (1.92 mL) y 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (146 mg, 0.385 mmol), Z7,A-diisopropiletilamina (267 mL, 1.54 mmol), y ácido (E)-pent-3-enoico (39.4 pL, 0.385 mmol) se agregaron secuencialmente a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 20 h, la mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (40 mL) y la mezcla resultante se lavó con solución de bicarbonato de sodio acuoso saturado (40 mL) y con salmuera (2 c 40 mL). La capa orgánica se separó, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se purificó por cromatografía de columna instantánea en gel de sílice (12 g Columna Combiflash HP Gold, gradiente acetato de etilo/iso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del título (180 mg, 84%) como un aceite incoloro . Rf = 0.75 (acetato de etilo) I2/mancha de sílice .
Compuesto 53c A una solución de 53b (180 mg, 0.320 mmol) en tetrahidrofurano (5.3 mL) se agregó polvo de zinc (418 mg, 6.40 mmol) seguido por una solución de acetato de amonio (370 mg, 4.80 mmol) en agua (3.5 mL) a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 15 h, la mezcla de reacción se entibió hasta 45°C. Después de 2 h, la mezcla de reacción se permitió enfriar a TA y se filtró a través de una almohadilla de Celite lavando con agua (10 mL) y acetato de etilo (10 mL). Las capas filtradas se dividieron y la capa acuosa se diluyó con salmuera (80 mL) y se acidificó a pH 1 con solución de cloruro de hidrógeno acuoso 12 N. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 c 100 mL), y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentraron bajo presión reducida. El ácido acético residual se eliminó azeotrópicamente por medio de adición de tolueno (5 mL) seguido por concentración bajo presión reducida (3 c) para proporcionar el compuesto del título (74.5 mg, 55%) como un sólido blanco.
. Compuesto 53d . A una solución de 53c (74.5 mg, 0.176 mmol) y (R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etanol (42.1 mg, 0.212 rnmol) en diclorometano (3.5 mL) se agregaron clorohidrato de N- 3-dimetilaminopropil) -N’ -etilcarbodiimida (47.2 mg, 0.246 m ol) y 4-dimetilaminopiridina (11 mg, 88 pmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 18 h, la mezcla de reacción se purificó directamente por cromatografía en gel de sílice (12 g Columna Combiflash HP Gold, gradiente acetato de etilo / iso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del título (67.6 mg, 64%) como un sólido blanco.
Compuesto 53 A una solución de 53d (25 mg, 41 pmol) en tolueno (8.2 mL) se le agregó el catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (2.5 mg, 4.1 pmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón, y la mezcla resultante se calentó a 110°C. Después de 2 h, la mezcla de reacción se apagó con etil vinil éter (300 pL) y la mezcla resultante se permitió enfriar hasta 23°C. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (12 g Columna Combiflash HP Gold, gradiente acetato de etilo / iso-hexanos .0-100%). Las fracciones que contienen el producto deseado se combinaron y se purificaron por HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título (1.7 mg, 7%) como un polvo blanco como una sal del ácido trifluoroacético. Rf = 0.40 (acetato de etilo) UV. XH RMN (400 MHz, CD3OD) d 9.13 (s, 1H), 8.53 (jbr s, 1H), 8.07 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.55 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 6.62 (d, J= 16.3 Hz, 1H), 6.55-6.45 (m, 1H), 6.04 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 5.50 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.40 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 4.33 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 3.78 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.36 ( app dd, J = 14.7, 6.7 Hz, 1H), 2.99 (dd, J = 14.5, 4.9 Hz, 1H), 2.90-2.66 (m, 4H), 2.02-1.83 (m, 4H), 1.82-1.70 (, 3H), 1.68 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.65 (d, J = 7.3 Hz, 3H), 1.33-1.16 (m, 4H), 1.16-0.94 (m, 2H). HPLC Tr = tR (min), 3.091 (Synergi 4u hidro-RP, columna 50 c 4.60 mm 4 micron, 7 min, 2ml/min, 5-100% acetonitrilo / agua, 0.05% ácido trifluoroacético gradiente modificador). LCMS (m/z) 562.3 [M+H], Tr = 2.17 min.
EJEMPLO 54 , , i , Compuesto 54a A una solución de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (300 mg, 0.69 mmol) en diclorometano (1.84 mL) se le agregó lentamente ácido trifluoroacético (460 mL, 6.00 mmol) a 0°C bajo una atmósfera de argón. Después de 2 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se disolvió en N,N-dimetilformamida (3.45 mL) y ácido (S)-2 -tert-Butoxicarbonilamino-3-fenil-propiónico (201 mg, 0.760 mmol), 2- (IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (289 mg, 0.760 mmol), y N,N-diisopropiletilamina (180 pL, 1.04 mmol) se agregaron secuencialmente a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 22 h, la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (300 mL), y la mezcla resultante se lavó con salmuera (3 x 200 mL), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (24 g Columna Combiflash HP Gold, gradiente acetato de etilo/iso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del título (319 mg, 96%) como un aceite incoloro. Rf = 0.75 (acetato de etilo) 12/mancha de sílice. l I — , ¡ Compuesto 54b A una solución de 54a (414 mg, 0.716 mmol) en diclorometano (3.58 mL) se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (238.7 mg, 1.07 mmol) a 0°C bajo una atmósfera de argón. Después de 1 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se diluyó con acetonitrilo (3.58 mL) y 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (272 mg, 0.716 mmol), AAN-diisopropiletilamina (498 mL, 2.86 mmol), y ácido (E)-pent-3-enoico (73.3 pL, 0.716 mmol) se agregaron secuencialmente a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 17 h, la mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (50 mL) y la mezcla resultante se lavó con solución de bicarbonato de sodio acuoso saturado (50 mL). La capa orgánica se separó, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (386 mg, 96%) como sólido blanco.
A una solución de 54b (443 mg, 0.789 m ol) en tetrahidrofurano (13.2 mL) se le agregó polvo de zinc (1.03 g, 15.8 mmol) seguido por una solución de acetato de amonio (912 mg, 11.8 mmol) en agua (8.77 mL) a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 17 h, la mezcla de reacción se entibió hasta 45°C. Después de 2 h, la mezcla de reacción se permitió enfriar a TA y se filtró a través de una almohadilla de Celite lavando con agua (10 mL) y acetato de etilo (10 L), Las capas filtradas se dividieron y la capa acuosa se diluyó con salmuera (20 mL) y se acidificó a pH 2 con solución de cloruro de hidrógeno acuoso 12 N. La capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 c 100 mL), y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentraron bajo presión reducida. El ácido acético residual se eliminó azeotrópicamente por medio de adición de tolueno (5 mL) seguido por concentración bajo presión reducida (3 c) para proporcionar el compuesto del titulo (276.2 mg, 81%) como un sólido blanco.
, Compuesto 54d A una solución de 54c (275 mg, 0.640 rnmol) y (R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etanol (153 mg, 0.770 mmol) en diclorometano (3.2 mL) se le agregaron clorohidrato de N- 3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (172 tng, 0.90 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (39 mg, 32 pmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 23 h, la mezcla de reacción se purificó directamente por cromatografía en gel de sílice (24 g Columna Combiflash HP Gold, grediente acetato de etilo/ iso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del título (203 mg, 52%) como un sólido blanco.
I Compuesto 54 A una solución de 54d (170 mg, 278 pmol) en clorobenceno (56 mL) se le agregó el catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (8.7 mg, 14.0 pmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón, y la mezcla resultante se calentó a 110°C. Después de 3 h, la mezcla de reacción se apagó con etil vinil éter (300 pL) y la mezcla resultante se permitió enfriar hasta 23°C. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (12 g Columna Combiflash HP Gold, gradiente acetato de etilo/iso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del título (18.9 mg, 12%) como un sólido color marrón. Rf = 0.25 (acetato de etilo) UV.1H RMN (400 MHz, CD3OD) d 9.12 (s, 1H), 8.05 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.56 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.32-7.12 (m, 5H), 6.66 (d, J = 16.5 Hz, 1H), 6.48 (dt, J = 12.8, 5.6 Hz, 1H), 6.05 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 5.53 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.73 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 3.80 ( app t, J = 10.2 Hz, 1H), 3.30-3.22 (m, 1H), 3.09 (dd, J = 14.5, 4.9 Hz, 1H), 2.96-2.69 (m, 3H), 2.04-1.87 (m, 2H), 1.82-1.56 (, 2H), 1.68 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.64 (d, J = 6.9 Hz, 3H). HPLC Tr =3.060 min. LCMS (m/z) 570.5 [M+H], Tr = 2.14 min.
EJEMPLO 55 l l , I , , Compuesto 55a A una solución de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-propionil)- hexahidro-piridazin-3-carboxílico (500 mg, 0.1.16 mmol) en diclorometano (5.8 mL) se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (386 mg, 1.74 mmol) a 0°C bajo una atmósfera de argón. Después de 1 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se diluyó con acetonitrilo (5.8 mL) y 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (485 mg, 1.28 mmol), N,N-diisopropiletilamina (302 mL, 1.74 mmol), N-tert-butoxicarbonil-3-(3-piridil)-L-alanina (337 mg, 1.27 mmol) se agregaron secuencialmente a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 20 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida, y el residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (40 g Columna Combiflash HP Gold, gradiente acetato de etilo/iso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del titulo (570 mg, 85%) como aceite color amarillo ligero.
Compuesto 55b A una solución de 55a (570 mg, 0.984 mmol) en diclorometano (5.8 mL) se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (386 mg, 1.74 mmol) a 0°C bajo una atmósfera de argón. Después de 1 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del titulo (478 mg) como aceite color amarillo ligero que se usó sin purificación adicional. i , Compuesto 55c A una solución de 55b (120 mg, 0.250 mmol) en acetonitrilo (1.25 mL) se le agregaron secuencialmente ácido (E)-4-[6-((R)-1-hidroxi-etil)-isoquinolin-3-il]-2,2-dimetil-but-3-enoico (75 mg, 0.25 mmol), 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (95 mg, 0.25 mmol), y N,N-diisopropiletilamina (173 mL, 1.00 mmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón. N,N- Dimetilformamida (100 pL) se agregó luego para promover la solubilidad de los reactivos. Después de 23 h, la mezcla de reacción se diluyó con solución de bicarbonato de sodio acuoso saturado (25 mL) y salmuera (25 mL) y la mezcla resultante se extrajo con diclorometano (2 c 25 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se concentraron bajo presión reducida. El residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (76 mg, 41%) como un sólido incoloro.
Compuesto 55d A una solución de 55c (76 mg, 0.10 mmol) en tetrahidrofurano (0.3 mL) y agua (0.2 mL) se le agregó hidrato de hídróxido de litio (2.4 mg, 0.10 mmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 2 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del título (61 mg, 99%) como un sólido blanco sal de carboxilato de litio.
. · Compuesto 55 A una solución de 55d (61 mg, 0.10 mmol) en diclorometano (50 mL) se le agregaron hexafluorofosfato benzotriazol-1-il-oxitripirrolidinofosfonio (208 mg, 400 pinol) y 4-dimetilaminopiridina (366 mg, 3.00 mmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 17 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (4 g Columna Combiflash HP Gold, gradiente metanol/diclorometano 0-20%) para proporcionar el compuesto del titulo (1.2 mg, 2%) como un sólido incoloro. Rf = 0·.40 (10% metanol en diclorometano) UV. XH RMN (400 MHz, CD3OD) d 9.03 (s, 1H), 8.31 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.27 (dd, J = 4.9, 1.5 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.46 (dd, J = 8.5, 1.5 Hz, 1H), 7.24 (dd, J = 7.9, 4.9 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 6.37 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 5:95 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 5.57 (q, J = 7.3 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.32 (br d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.83 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 3.73-3.65 (m, 1H), 3.00 (dd, J = 14.2, 5.0 Hz, 1H), 2.83 (dd, J = 13.9, 9.7 Hz, 1H), 2.64 (br t, J = 11.2 Hz, 1H), 1.95-1.73 (m, 2H), 1.69-1.59 (m, 1H), 1.57 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.54 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.16 (s, 3H). HPLC Tr = 4.491 in EJEMPLO 56 1 , I . , 1 Compuesto 56a A una solución de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-propionil)- hexahidro-piridazin-3-carboxílico (791 mg, 1.82 mmol) en diclorometano (10.0 mL) se le agregó lentamente trifluorometansulfonato de trimetilsililo (483 mL, 2.73 mmol) a 0°C bajo una atmósfera de argón. Después de 45 min, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se diluyó con diclorometano (10.0 mL) y 2- (IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (761 mg, 2.00 mmol), N,N-diisopropiletilamina (1.26 mL, 7.28 mxnol), y ácido (S)—2— (tert-butoxicarbonilamino)-4-fenilbutanoico (Fluka, 560 mg, 2.00 mmol) se agregaron secuencialmente a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 18 h, la mezcla de reacción sé concentró bajo presión reducida. El residuo se pre-absorbió sobre sílice y se purificó por cromatografía en gel de sílice (40 g Columna Isco Rf Gold, gradiente acetato de etilo/íso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del título (799 mg, 74%) como un aceite incoloro.
, I , i , Compuesto 56b A una solución de 56a (799 mg, 1.34 mmol) en diclorometano (10.0 mL) se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (356 pL, 2.01 mmol) a 0°C bajo una atmósfera de argón. Después de 30 min, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se diluyó con acetonitrilo (6.0 mL) y 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (560 g, 1.47 mmol), N,N-diisopropiletilamina (932 mL, 5.36 mmol), y ácido (E)-pent-3-enoico (150 pL, 1.47 mmol) se agregaron secuencialmente a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 19 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se pre-absorbió sobre sílice y se purificó por cromatografía en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (598 mg, 78%) como un aceite incoloro. i Compuesto 56c A una solución de 56b (167 mg, 0.29 mmol) en tetrahidrofurano (3 mL), metanol (1 mL) y agua (1 mL) se le agregó hidrato de hidróxido de litio (7.6 mg, 0.32 mmol) a 23°C. Después de 15 min, la mezcla de reacción se concentró hasta secarse bajo presión reducida. El residuo se disolvió en agua (25 mL) y se lavó con acetato de etilo. La capa orgánica se extrajo con solución de bicarbonato de sodio acuoso saturado (25 mL). Las capas acuosas combinadas se acidificaron con solución de ácido clorhídrico acuoso 1 M hasta pH ~2 y se extrajo con acetato de etilo (3 c 25 mL), y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, y se concentraron bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del título (129 mg, 100%) como un sólido blanco. 56d A una solución de 56c (129 mg, 0.29 mmol) y (R)-1-(3-vinil-isoquinolin-6-il)-etanol (64 mg, 0.31 mmol) en diclorometano (3.0 mL) se le agregó clorohidrato N- {3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (89 mg, 0.46 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (18 mg, 0.14 mmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 16 h, la mezcla de reacción se purificó directamente por cromatografía en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (87 mg, 48%) como un sólido blanco.
II - l Compuesto 56 A una solución de 56d (84 mg, 0.13 mmol) en clorobeneceno (27 mL) se le agregó el catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (8 mg, 13 mmo?) a 23°C bajo una atmósfera de argón, y la mezcla resultante se calentó a 110°C. Después de 2 h, el catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (7.3 mg, 11 pmol) se agregó bajo argón a 110°C. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (5 mg, 8 mmo?) se le agregó luego en el intervalo de 30 min por tres veces punto en el cual la reacción se completo. La mezcla de reacción se apagó con etil vinil éter (1.0 pL) y la mezcla resultante se permitió enfriar hasta 23°C. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (24 g Columna Isco Rf Gold, gradiente acetato de etilo/iso-hexanos 0-100% por 10 min y luego acetato de etilo 100% por 25 min) para proporcionar el compuesto del título (9.1 mg, 12%) como un sólido color café pálido. Rf = 0.20 (acetato de etilo).1H RMN (400 MHz, CD3OD) d 9.00 (s, 1H), 7.93 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.45 (dd, J = 8.5, 1.5 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.20-7.08 (m, 4H), 7.08-7.00 (m, 1H), 6.55 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 6.40 (ddd, J = 15.9, 7.0, 5.1 Hz, 1H), 5.95 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 5.40 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 8.2, 6.9 Hz, 1H), 4.30 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.70-3.63 (m, 1H), 3.31-3.23 (m, 1H), 2.93 (ddd, J = 14.0, 5.1, 1.6Hz, 1H), 2.69-2.52 (, 3H), 2.01-1.73 (, 4H), 1.71-1.54 (m, 2H), 1.59 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.46 (d, J = 7.3 Hz, 3H). HPLC Tr = 5.108 min. LCMS (m/z) 584.3 [M+H], Tr = 2.12 min.
EJEMPLO 57 Compuesto 57a Una solución de éster de 2,2,2-tricloroetilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-3-metilbutirilamino)-propionil]-hexahidropiridazina-3-carboxílico (1.61 g, 3.03 mmol) en diclorometano (31 mL) se enfrió en un baño de agua con hielo bajo argón. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (1.23 g, 5.5 mmol) se agregó gota a gota, y la solución resultante se agitó por 2 h. La reacción se apagó con W, -diisopropiletilamina (1.2 g, 9.2 mmol) y metanol (8.5 mL). La mezcla se concentró in vacuo y se redisolvió y concentró de tolueno (2 x 25 mL). El residuo crudo resultante que contiene éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (1.05 g) se usó sin purificación adicional.
, I I 1 Compuesto 57b A una solución de éster de metilo del ácido (E)—4—[6— ((R)-1-hidroxi-etil)-isoquinolin-3-il]-2,2-dimetil-but-3-enoico (1.05 g, 3.51 m ol) en tetrahidrofurano (8 mL) se le agregó metanol (4 mL), agua (4 mL), e hidrato de hidróxido de litio (297 mg, 7.08 mmol). La mezcla resultante se agitó por 6 h y se apagó con ácido clorhídrico acuoso 1 (7.2 mL, 7.2 mmol). La solución resultante se concentró a un residuo crudo que se redisolvió y concentró de metanol anhidro (50 mL) seguido por tolueno (50 L). El sólido color amarillo resultante (1.3 g, 100%) ácido (E)-4-[6-((R)-1-hidroxi-etil)-isoquinolin-3-il]-2,2-dimetil-but-3-enoico se usó sin purificación adicional. Una porción de ácido (E)—4—[6—((R)—1— hidroxi-etil)-isoquinolin-3-il]-2,2-dimetil-but-3-enoico crudo (1.05 g, 2.84 mmol) se disolvió en h/,N-dimetilformamida (12 mL) bajo argón. La N,N-diisopropiletilamina (1.85 g, 14.3 mmol) se agregó seguido por 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (1.42 g, 3.73 mmol). La mezcla resultante se agitó por 3 min, tiempo en el cual 57a crudo se agregó como una solución en N,N-dimetilfor amida lavando con N,N-dimetilformamida adicional (2 x 5 L). La reacción se agitó por 40 min y luego se diluyó con acetato de etilo (200 L) y agua (300 mL). Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (200 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (150 mL), y la segunda capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (100 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron, y concentraron. El residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (35 hasta 60% acetona en iso-hexanos, gradiente continuo) para proporcionar el compuesto del título (1.51 g, 71% durante 2 etapas) como un .aceite incoloro. RF 0.5 (50% acetona en iso-hexanos).
¡ Compuesto 57 A una solución de 57b (1.50 g, 2.15 mmol) en tetrahidrofurano (20 mL) se le agregó metanol (10 mL), agua (10 mL), e hidrato de hidróxido de litio (365 mg, 8.7 mmol). La mezcla se agitó por 75 min a temperatura ambiente y luego se apagó con ácido clorhídrico 1 M acuoso (8.8 mL, 8.8 mmol). La solución resultante se concentró in vacuo, y el producto crudo se disolvió dos veces y se concentró de metanol (40 mL) y suspendió y concentró de acetonitrilo (6 x 30 mL) para proporcionar 1.71 g de un sólido incoloro que se usó sin purificación adicional. Bajo argón, 2-metil-6-nitrobenzoico anhídrido (1.85 g, 5.37 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (1.97 g, 16.1 mmol) se disolvieron en 1,2-dicloroetano (700 mL). La solución resultante se calentó a 50°C, y el ácido seco crudo se agregó gota a gota por medio de jeringa como una solución en ALW-dimetilformamida (22 mL) durante 6 h. Un lavado adicional con N,N-dimetilformamida (1.5 mL) se agregó luego de la misma manera durante 15 min. Después de agitar 1.25 h adicional, la mezcla de reacción se concentró a un volumen final de 200 L in vacuo. La solución se lavó con agua (250 mL), y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (150 mL). La fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, y concentró. El residuo resultante se disolvió en acetato de etilo (200 mL) y se lavó con agua (150 mL). La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (150 mL). Los orgánicos combinados se lavaron con agua (100 mL), y la segunda fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (100 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y concentraron. El residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (35 hasta 65% acetona en gradiente continuo iso-hexanos) para proporcionar 445 mg del compuesto del título puro como un sólido blanco amorfo junto con 389 mg de producto impuro. Las fracciones impuras se purificaron por recristalización de acetona:iso-hexanos para proporcionar un 173.5 mg adicional de compuesto del título puro (total: 618.5 mg, 52%). RF 0.5 (50% acetona en iso-hexanos). XH RMN (400 MHz, CD3OD) 59.13 (s, 1H), 8.04 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.55 (dd, J = 8.5, 1.6 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.73-6.34 (m, 2H), 6.03 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.63 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 4.67 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 4.47-4.21 (m, 2H), 3.81-3.73 (m, 1H), 2.76-2.64 (m, 1H), 2.08-1.81 (m, 3H), 1.80-1.58 (m, 8H), 1.51 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 0.98 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 6.7 Hz, 3H). LCMS (m/z) 550.2 [M+H], Tr = 2.74 min.
EJEMPLO 58 o o i. LDA, PhN(Tf)2 i¡. Piridina i ii¡. Cp2ZrHCI pinacolborano Compuesto 58a Una solución de N,N-diisopropilamina (2.51 g, 24.8 mmol) en tetrahidrofurano (150 mL) bajo argón se enfrió en un baño de agua con hielo. Una solución de n-butillitio en hexanos (2.5 M, 9.7 mL, 24 mmol) se agregó gota a gota durante 2 min, y la solución resultante se agitó por 15 minutos adicionales. La solución luego se enfrió a -78°C por medio de CO2(S):baño de acetona, y 1-acetilciclopropancarboxilato de etilo (3.47 g, 22.2 mmol) se agregó gota a gota durante 2 min. La solución se agitó por 20 min adicionales, y N-Fenil-bis (trifluorometansulfonimida) (8.4 g, 23.5 mmol) se agregó como una solución en tetrahidrofurano (24 mL) por medio de cánula durante 5 min, lavando con porciones adicionales de tetrahidrofurano (2 x 5 mL). a solución resultante se eliminó del baño frió. Después de 30 min adicionales, la mezcla de reacción se concentró in vacuo y se diluyó con éter de dietilo (200 L). La fase orgánica se lavó con hidróxido de sodio acuoso 1 M (1 x 100 mL, 1 x 30 mL), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, y concentró para proporcionar 6.6 g de un aceite crudo que se usó sin purificación adicional. Una solución del material crudo de la etapa previa en piridina anhidra (11 mL) se calentó a 90°C. Después de 16.5 h, la mezcla de reacción se diluyó con éter de dietilo (200 mL) y ácido clorhídrico 3 M (100 mL) y las fases se separaron. La fase orgánica se lavó con ácido clorhídrico 3 M (50-mL) e hidróxido de sodio 1 M (50 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y concentró para proporcionar 2.2 g de un líquido crudo que se usó sin purificación adicional. A un recipiente mojado con argón que contiene dicloruro de zirconoceno (410 mg, 1.6 mmol) se le agregó una solución del producto crudo de la etapa previa (2.2 g, ca. 16 mmol) y pinacolborano (3.1 g, 24 mmol) en diclorometano (8 mL). Después de 116 h, la mezcla agitada de reacción se diluyó con acetato de etilo (50 mL) y se apagó por adición gota a gota de agua. La mezcla se diluyó además con agua (50 mL), y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y concentraron a un residuo crudo que se purificó por cromatografía en gel de sílice (5 hasta 20% acetato de etilo en iso-hexanos, gradiente continuo) para proporcionar el compuesto del título (1.26 g, 21% sobre 3 etapas) como un aceite que se cristalizó en reposo a -15°C.
I - , , Compuesto 58b A un matraz de fondo redondo se le agregó (R)—1—(3— cloroisoquinolin-6-il)etanol (204 mg, 0.982 mmol), 58a (314 mg, 1.18 mmol), PdCl2(PCy2(p-NMe2Ph))2 (bis[(diciclohexil)(4-dimetilaminofenil)fosfina] paladio(II) cloruro) (40 mg, 0.049 mmol) y fosfato de potasio tribásico (680 mg, 3.2 mmol). El recipiente se selló con un tapón de septo y se limpió de un chorro con argón. El ciclopentil metil éter (2.8 mL) y agua (1.2 L) se agregaron, y la mezcla bifásica resultante se agitó vigorosamente en un baño de aceite pre-calentado a 90°C. Después de 6.75 h, la reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con acetato de etilo (50 mL) y agua (40 mL). Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (50 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y concentraron para proporcionar un residuo crudo que se purificó por cromatografía en gel de sílice (35 hasta 60% acetato de etilo en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (266 mg, 85%).
, ¡ | ~' Compuesto 58c A una solución de 58b (266 mg, 0.854 mmol) en tetrahidrofurano (2 mL) se le agregó metanol (1 mL), agua (1 mL), e hidrato de hidróxido de litio (70.8 mg, 1.69 mmol). La mezcla resultante se agitó por 3 h y luego se apagó con ácido clorhídrico acuoso 1 M (1.8 mL, 1.8 mmol). Los volátiles se removieron ín vacuo, y el sólido resultante se suspendió en tolueno. Los volátiles se removieron in vacuo, y el sólido color amarillo resultante ácido 1-{(E)-2-[6-((R)-1-hidroxi-etil)-isoquinolin-3-il]-vinil}-ciclopropanocarboxílico se usó sin purificación adicional. Una solución de éster de 2,2,2-tricloroetilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-3-metilbutirilamino)-propionil]- hexahidropiridazina-3-carboxílico (486 mg, 0.914 mmol) en diclorometano (9.4 mL) se enfrió en un baño de agua con hielo bajo argón. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (370 mg, 1.7 mmol) se agregó gota a gota, y la solución resultante se agitó por 4 h. La reacción se apagó con N,N-diisopropiletilamina (360 mg, 2.7 mmol) y metanol (2.5 mL). La mezcla se concentró in vacuo y el residuo resultante se redisolvió y concentró de tolueno (2 x 15 mL). La amina cruda resultante se usó sin purificación adicional. A una solución de ácido l-{(E)-2-[6-((R)-1-hidroxi-etil)-isoquinolin-3-il]-vinil}-ciclopropanocarboxílico crudo (ca.0.854 mmol) en N,N-dimetilformamida (3.5 L) bajo argón se le agregó N,N-diisopropiletilamina (560 mg, 4.3 mmol) y 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (427 mg, 1.12 mmol). La mezcla resultante se agitó por 2 min, tiempo en el cual éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico crudo de la etapa previa se agregó como una solución en ,N-dimetilformamida (2.5 mL), lavando con dos porciones adicionales de N,N-dimetilformamida (1.5 mL cada una) . La reacción se agitó por 45 min y se diluyó con acetato de etilo (100 mL) y agua (150 mL). Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (100 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (75 mL), y la segunda capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (75 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron, y concentraron. El residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (35 hasta 60% acetona en iso-hexanos, gradiente continuo) para proporcionar compuesto del título (467 mg, 78% durante 2 etapas) como un aceite incoloro.
. , Compuesto 58 A una solución de 58c (467 mg, 0.67 mmol) en tetrahidrofurano (6 mL) se le agregó metanol (3 mL), agua (3 mL), e hidrato de hidróxido de litio (113 mg, 2.69 ol). La mezcla se agitó por 1.75 h a temperatura ambiente y se apagó con ácido clorhídrico 1 M acuoso (2.8 mL, 2.8 mmol). La solución resultante se concentró in vacuo, y el producto crudo se suspendió y concentró de acetonitrilo (5 x 20 mL) para proporcionar 530 mg de un sólido color amarillo pálido que se usó sin purificación adicional. Bajo argón, 2-metil-6-nitrobenzoico anhídrido (283 mg, 0.82 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (307 mg, 2.51 mmol) se disolvieron en 1,2-dicloroetano (100 mL). La solución resultante se calentó a 50°C, y una porción del ácido seco crudo (260 mg, ca.0.33 mmol) se agregó gota a gota por medio de jeringa como una solución en N,LH-dimetilformamida (3.5 mL) y 1,2-dicloroetano (10 mL) durante 6 h. Un lavado adicional de N,N-dimetilformamida (1 mL) se agregó luego de la misma manera. Después de agitar 1.25 h adicional, la mezcla de reacción se concentró hasta -35 mL in vacuo. La solución se diluyó con acetato de etilo (100 mL) y se lavó con agua (100 mL). La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (75 mL), y las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (50 mL). La segunda fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (50 mL), y los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron. El residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (35 hasta 60 y luego hasta 100% acetona en iso-hexanos ) para proporcionar 101 mg de producto impuro que contiene el compuesto del título. Este material se purificó por cromatografía en gel de sílice (0 hasta 5% metanol en acetato de etilo) seguido por HPLC de fase inversa (5 hasta 100% acetonitrilo/agua + ácido trifluoroacético 0.1%) para proporcionar el compuesto del título como su sal del ácido trifluoroacético (37 mg, 17% durante 2 etapas). Hi RMN (400 MHz, CD3OD) d 9.55 (s, 1H), 8.37 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.85 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 16.4 Hz , 1H), 6.11 (q, J = 6.7 Hz, 1H) , 5.75-5.67 (m, 1H) , 4.46-4.36 (m, 1H) , 4.36-4.28 (m, 1H) , 3.90-3.78 (m, 1H) , 2.80-2.68 (m, 1H) , 2.05-1.86 (m, 3H) , 1.80-1.68 (m, 5H) , 1.66-1.57 (m, 5H) , 1.40-1.30 (m, 1H) , 1.30-1.21 (m, 1H) , 1.03-0.93 (m, 4H) , 0.90 (d, J = 6.7 Hz, 3H) . LCMS (m/z) 548.4 [M+H] , Tr = 2.79 min.
EJEMPLO 59 . l , ..
I Compuesto 59a En un horno de secado, matraz purgado con argón se colocaron hidruro de potasio libre de aceite (de 1740 g de ca . 30% dispersión en aceite mineral, ca . 13 ol), tetrahidrofurano anhidro (10 mL) y hexano (1 mL). El matraz se repurgó con argón y tricloroetileno (900 mL, 1.32 g, 10 mmol) se agregó seguido por metanol seco (10 pL, 7.9 mg, 0.25 mmol). Esta mezcla se agitó a TA por dos h. Después de este tiempo, hexano (10 mL) se agregó y la solución resultante se usó inmediatamente en la etapa posterior. , -78 C hasta 0C Compuesto 59b En un horno de secado, matraz purgado con argón tetrahidrofurano (50 mL) se agregó y la solución se enfrió con un baño de hielo. Una solución 1.8 M de litio diisopropilamida (7.2 mL, 13 mitiol) en tetrahidrofurano/heptano/etilbenceno se agregó. La solución resultante se enfrió a -78°C, y se trató gota a gota con tetrahídro-2H-piran-4-carboxilato de metilo (1.20 mL.1.30 g, 9 mmol) seguido por hexametilfosforamida (1.56 L, 1.61 g, 9 ol). La solución resultante se entibió hasta 0°G, se agitó por 20 min., se enfrió hasta -78°C, y trató gota a gota con solución pre-enfrida (0°C) de 1,2-dicloro-etino ( ca . 10 mmol). La mezcla de reacción se agitó a -78°C por 30 min y luego se permitió enfriar a TA. Después de 4 h a TA, la mezcla de reacción se vació en hielo molido y extrajo con éter de dietilo (200 mL) (5 mL de salmuera se agregó para soportar la separación). La fase orgánica se separó y se lavó con agua (200 mL). Esta fase de agua se extrajo con éter de dietilo (100 ml·). Las fracciones orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron a través de una capa de 2 cm de gel de sílice (capa de gel de sílice se lavó con 50 mL de acetato de etilo), y luego se concentró bajo presión reducida. El producto crudo se sometió a cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-15% acetato de etilo en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (1.22 g, 67%) como un aceite incoloro. Rf = 0.48, 30% acetato de etilo en iso- hexanos, ácido fosfomolíbdico en etanol Compuesto 59c 59b (1.01 g, 5 mmol) y polvo de cobre (1.6 g, 25 mmol) se suspendieron en tetrahidrofurano (100 mL). Ácido acético (15 mL) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a 60°C por 3 h. Después de este tiempo, la mezcla de reacción se vació sobre agua (polvo de cobre se filtró completamente con el uso del papel de filtración) y extrajo con éter de dietilo (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con solución saturada de cloruro de amonio (3 x 50 mL), con solución saturada de bicarbonato de sodio (2 x 50 mL) y con agua (50 mL). Esta fase de agua se extrajo con éter de dietilo (50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron a través de una capa de 2 cm de gel de sílice (capa de gel de sílice se lavó con 50 mL de acetato de etilo), y concentró bajo presión reducida. Después de secar bajo alto vacío por un día, el compuesto del título se aisló (0.84 g, rendimiento cuantitativo) como un aceite incoloro. Rf = 0.37, 30% acetato de etilo en iso-hexanos, ácido fosfomolíbdico en etanol.
DC , t.r. Compuesto 59d En un horno de secado, matraz purgado con argón se colocaron 59c (0.84 g, 5 mmol) y diclorometano (2mL). Esta mezcla se enfrió a 0°C. Pinacolborano (0.96 g, 7.5 mmol) se agregó luego gota a gota por medio de jeringa. Después de que la mezcla se agitó por 1 min., esto se transfirió por una jeringa en otro horno de secado, matraz purgado con argón, inmerso en un baño de hielo y protegido de la luz, que contienen dicloruro de zirconoceno (0.13 g, 0.5 mmol). Una porción adicional de diclorometano (2 mL) se usó para completar la transferencia cuantitativa. Después de esto la mezcla se entibió a temperatura ambiente, esto se agitó en la oscuridad por 72 h para alcanzar la conversión completa. La mezcla dé reacción se diluyó con acetato de etilo (50 mL) y cuidadosamente se apagó con agua (lml). Agua (50 mL) se agregó y las fases orgánicas y acuosas se separaron. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 40 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y evaporaron para proporcionar el residuo crudo que se disolvió en iso-hexanos (50 mL) y extrajo con 5-10% metanol acuoso (3 x 50 mL) y con salmuera (50 mL). La fase de hexano se secó sobre sulfato de magnesio. El compuesto del título se aisló como el compuesto cristalino blanco después de la evaporación (1.42 g, 93%). Rf = 0.38, 30% acetato de etilo en iso-hexanos, vapor de yodo.
- Compuesto 59e En un horno de secado, matraz purgado con argón se colocaron (R)-1-(3-cloro-isoquinolin-6-il)-etanol (0.83 g, 4 mmol), 59d (1.40 g, 4.7 mmol), PdCl2(PCy2(p-NMe2Ph))2 (bis[(diciclohexil)(4-dimetilaminofenil)fosfina] paladio(II) cloruro) (173 mg, 0.21 mmol) y fosfato de potasio tribásico (2.64 g, 12.4 mmol). El matraz se selló con un tapón de septo y se re-purgó con argón. N,N-Dimetilformamida (10 mL) se agregó y, y la mezcla resultante de reacción se agitó vigorosamente en un baño de aceite pre-calentado a 80°C. Después de 2 h, la reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con acetato de etilo (100 mL) y agua (100 mL). Las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mL). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y concentraron para proporcionar un residuo crudo que se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo y etanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del titulo (1.06 g, 78%) como un aceite incoloro después de la evaporación. Rf = 0.48, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1).
. Compuesto 59f A una solución de 59e (1.02 g, 3 mmol) en tetrahidrofurano (8 mL) se le agregó metanol (4 mL), agua (4 mL) e hidrato de hidróxido de litio (0.15 g, 6.3 mmol). La mezcla resultante se agitó a TA por 10 h y se apagó con ácido clorhídrico 1 M (6.5 mL, 6.5 mmol). La solución resultante se concentró a un residuo crudo que se co-evaporó dos veces con tetrahidrofurano (20 mL), dos veces con acetonitrilo anhidro (20 mL) y dos veces con tolueno anhidro (20 L). El sólido blanco resultante se secó bajo alto vacío durante la noche y se usó sin purificación adicional (1.24 g, rendimiento cuantitativo). . l . .
Compuesto 59g Una solución de le (0.53 g, 1 mmol) en diclororaetano (10 mL) se enfrió en un baño de agua con hielo. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (0.69 g, 1.80 mmol) se agregó gota a gota a 0°C bajo argón, y la solución resultante se agitó a TA por 30 min. La mezcla de reacción se evaporó hasta secarse y el residuo crudo resultante se disolvió en acetonitrilo anhidro (12 mL) bajo argón. La mezcla de reacción se agitó a 0°C, 59f (371 g, 0.9 mol) y L/,N-diisopropiletilamina (517 mg, 4 mmol) se agregaron seguido por 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (570 mg, 1.5 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA por 48 h. El solvente se evaporó, el residuo se disolvió en acetato de etilo (50 mL) y la solución se lavó con solución de agua al 20% de ácido cítrico (2 x 50 mL), agua (50 mL) y salmuera (50 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo y metanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (560 mg, 84%) como un sólido blanco después de la evaporación. Rf = 0.13, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1).
. . , Compuesto 59 A una solución de 59g ( 371 mg, 0. 5 mmol) en tetrahidrofurano (8 mL) se le agregó metanol (4 mL), agua (4 mL) e hidrato de hidróxido de litio (36 mg, 1.5 mmol). La mezcla se agitó por 2 h a temperatura ambiente y se apagó con ácido clorhídrico 1 M acuoso (1.6 mL, 1.6 mmol). La solución resultante se concentró hasta un residuo crudo que se coevaporó dos veces con tetrahidrofurano (20 mL), dos veces con acetonitrilo anhidro (20 mL) y dos veces con tolueno anhidro (20 mL). El sólido blanco resultante se secó bajo alto vacío durante la noche y esto se usó sin purificación adicional (365 mg, rendimiento cuantitativo). En horno de secado, matraz purgado con argón se colocaron 2-metil-6-nitrobenzoico anhídrido (258 mg, 0.75 mmol), 4-dimetilaminopiridina (275 mg, 2.25 mmol) y 1,2-dicloroetano anhidro (150 mL). La solución resultante se calentó a 50°C, y el ácido seco crudo se agregó gota a gota por medio de jeringa como una solución en N,W-dimetilformamida seca (10 mL) durante 12 h. Una porción adicional de N,A7-dimetilformamida seca (2 x 5 mL) se usó para completar la transferencia cuantitativa. Después de agitar por 2 h adicionales a 50°C, la mezcla de reacción se transfirió a un embudo separador y se lavó con agua (100 mL, 5 mL de salmuera se agregó para soportar la separación). La fase acuosa se extrajo con diclorometano (50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió en acetato de etilo (100 mL) y se lavó con agua (100 mL, 5 mL de salmuera se agregó para soportar la separación). La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (100 mL, 5 mL de salmuera se agregó para soportar la separación). La fase acuosa resultante se extrajo con acetato de etilo (50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mL) y se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo y metanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (72 mg, 24%) como un sólido blanco después de la evaporación. Rf = 0.42, 10% metanol en diclorometano.1H RMN (400 MHz, CD3OD): d 9.04 (s, 1H), 7.95 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.47 (dd, J = 8.5, 1.5 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.43 (m, 2H), 5.93 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.44-5.36.(m, 1H), 4.33-4.23 (m, 2H), 3.84 (dt, J = 11.6, 4.1 Hz, 1H), 3.76-3.-69 (m, 1H), 3.68-3.61 (m, 2H), 3.48 (m, 1H), 2.65-2.56 (m, 1H), 2.16-2.07 (m, 2H), 2.03-1.93 (m, 1H), 1.91-1.82 (m, 2H), 1.79e (m, 1H), 1.67-1.62 (m, 3H), 1.59 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.51 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 0.90 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.85 (d, J = 6.7 Hz, 3H). LCMS (m/z) 592.3 [M+H]' Tr = 3.12 min.
EJEMPLO 60 : .
Compuesto 60 Una solución de Compuesto 59 (10 mg, 0.017 m ol) en una mezcla de acetato de etilo (4 mL) y tetrahidrofurano (4 mL) que contiene paladio sobre carbono 10% (10 mg) se hidrogenó a TA y a presión atmosférica de hidrógeno por 3 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y la almohadilla filtro se lavó con tetrahidrofurano (10 mL). El filtrado se evaporó para proporcionar el compuesto del titulo (10 mg, rendimiento cuantitativo) como un sólido blanco. Rf = 0.47, 10% metanol en diclorometano. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): d 9.02 (s, 1H), 7.94 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.44 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 6.02 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 5.78-5.71 (m, 1H), 5.24 (m, 1 H), 4.33-4.23 (m, 2H), 3.83-3.61 (, 6H), 3.52 (m, 1H), 2.71-2.66 (m, 1H), 2.43-2.36 (m, 2H), 2.14-2.05 (m, 2H) , 2 . 08-1. 91 (m, 1H) , 1. 90-1. 82 (m, 2H) , 1 . 76 (m, 1H) 1.67- .62 (m, 2H), 1.57 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.54 (d, J = 7.2 Hz , 3H) , 0. 96 (d, J = 6.7 Hz , 3H) , 0. 88 (d, J = 6. 7 Hz , 3H) .
LCMS (/z) 594.3 [M+H]' Tr = 2.72 min EJEMPLO 61 .. i il , Compuesto 61a Una solución de le (1064 g, 2 mmol) en diclorometano (30 mL) se enfrió en un baño de agua con hielo. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (666 mg, 3 mmol) se agregó gota a gota a 0°C bajo argón, y la solución resultante se agitó a TA por 30 min. La mezcla de reacción se evaporó hasta secarse y el residuo crudo resultante se disolvió en acetonitrilo anhidro (25 mL) bajo argón. La mezcla de reacción se agitó a 0°C, ácido hex-5-enoico (251 mg, 2.2 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (1034 mg, 8 mmol) se agregaron seguido por 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (1065 mg, 2.8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA por 48 h. El solvente se evaporó, el residuo se disolvió en acetato de etilo (200 L) y la solución se lavó con solución de agua al 20% de ácido cítrico (2 x 150 mL), agua (150 mL) y salmuera (150 L), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo y etanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (864 mg, 82%) como un sólido blanco 'después de evaporación. Rf = 0.35, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1).
. . Compuesto 61b A una solución de 61a (830 mg, 1.57 mmol) en tetrahidrofurano (40 mL) se le agregaron agua (10 mL) e hidrato de hidróxido de litio (57 mg, 2.38 mmol). La mezcla se agitó por 2 h a temperatura ambiente y luego se filtró a través de una capa de 5 cm de DOWEX D50 x 8 resina en ciclo H+ (en primer lugar resina lavada con agua). La resina se lavó con agua adicional (50 mL). Los filtrados se colectaron, concentraron bajo presión reducida y co-evaporó dos veces con tolueno (10 mL). Después de secar bajo alto vacío por un día, el compuesto del título se aisló (590 mg, 95%) como un sólido blanco. Rf = 0.4, 30% metanol en díclorometano.
, Compuesto 61c En un horno de secado, matraz purgado con argón se agregaron 61b (238 mg, 0.60 mmol) y (R)-1-(3-vinil- isoquinolin-6-il)-etanol (120 mg, 0.6 m ol). El matraz se selló y la mezcla de reacción se repurgó dos veces con argón. El diclorometano anhidro (10 L) se agregó y la mezcla de reacción se repürgó dos veces con argón. El clorohidrato de N- (3-dimetilaminopropil) -N'-etilcarbodiimida (148 mg, 0.77 mmol) se agregó seguido por 4-dimetilaminopiridina (67 mg, 0.55 mmol). La mezcla de reacción se repurgó rápidamente dos veces con argón y se agitó a TA por 12 h. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (100 mL) y la solución se lavó con solución de agua al 20% de ácido cítrico (2 xl50 mL), agua (150 mL) y salmuera (150 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo y metanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (307 mg, 89%) como un sólido blanco después de la evaporación. Rf = 0.29, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1). cat, Hoveyda-Grubbs II tolueno, reflujo Compuesto 61 Una solución de 61c (209 mg, 0.362 minol) en tolueno (150 mL) se agitó a TA bajo argón. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (23 mg, 0.036 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a reflujo bajo argón por 30 min. La mezcla de reacción se enfrió a TA y acetato de etilo (50 mL) se agregó. Esta solución se lavó dos veces con solución acuosa de tris(hidroximetil)fosfina (372 mg, 3 ol en 100 mL de agua), con agua (2 x 50 mL) y con salmuera (50 mL). La fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo y metanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (125 mg, 63%) como un sólido blanco después de evaporación. Rf = 0.25, iso-hexanos/acetato de etilo/ etanol (6/4/1). XH RMN (400 MHz, CD3OD): ¿9.00 (s, 1H), 7.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 6.64 (m, 1H), 6.29 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 5.97 (q, J = 5.9 Hz, 1H), 5.53 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.37-4.18 (m, 2H), 3.65 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 2.65 (t, J = 12.3 Hz, 1H), 2.36- 2.18 (m, 4H), 1.98 (m, 1H), 1.94-1.73 (m, 3H), 1.71-1.57 (m, 3H), 1.55 (d, J = 5.6 Hz, 6H), 0.83 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.78 (d, J= 6.6 Hz, 3H). LCMS (m/z) 550.2 [M+H]' Tr = 2.55 min.
EJEMPLO 62 . .
Compuesto 62 Una solución de Compuesto 61 (10 mg, 0.018 mmol) en una mezcla de acetato de etilo (4 mL) y tetrahidrofurano (4 mL) que contiene paladio sobre carbono 10% (10 mg) se hidrogenó a TA y a presión atmosférica de hidrógeno por 3 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y la almohadilla filtro se lavó con tetrahidrofurano (10 mL). El filtrado se evaporó para proporcionar el compuesto del título (9 mg, 89%) como un sólido blanco.Rf = 0.16, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1). XH RMN (400 MHz, CD3OD) d 9.02 (s, 1H), 7.93 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.44 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.02-5.93 (ra, 1H), 5.39 (, 1H), 4.03 (m, 1H), 3.69 (m, 1H), 2.84 (m, 2H), 2.27 (s, 1H), 2.10 (m, 1H), 1.97 (m, 1H), 1.85 (m, 2H), 1.76 (, 2H), 1.62 (, 4H), 1.54 (d, J = 5.1 Hz, 3H), 1.39 (d, J= 6.6 Hz, 3H), 1.19 (m, 4H), 0.78 (d, J = 5.0 Hz, 3H), 0.73 (d, J = 5.8 Hz, 3H). LCMS (m/z) 552.3 [M+H] ' Tr = 2 . 10 min .
EJEMPLO 63 . i l , . . - Compuesto 63a Una solución de le (1064 mg, 2 mmol) en diclorometano (30 mL) se enfrió en un baño de agua con hielo, trif luorometansulfonato de trimetilsililo (666 mg, 3 m ol) se agregó gota a gota a 0°C bajo argón, y la solución resultante se agitó a TA por 30 min. La mezcla de reacción se evaporó hasta secarse y el residuo crudo resultante se disolvió en acetonitrilo anhidro (25 mL) bajo argón. La mezcla de reacción se agitó a 0°C, ácido hept-6-enoico (281 mg, 2.2 mmol) y N,W-diisopropiletilamina (1034 mg, 8 mmol) se agregaron seguido por 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (1065 mg, 2.8 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a TA por 48 h. El solvente se evaporó, el residuo se disolvió en acetato de etilo (200 mL) y la solución se lavó dos veces con solución de agua al 20% de ácido cítrico (2 x 150 L), agua (150 mL) y salmuera (150 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, filtró y evaporó. El residuo sé purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo + metanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (817 mg, 75%) como un sólido blanco después de evaporación. Rf = 0.37, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1). i .
Compuesto 63b A una solución de 63a (790 mg, 1.46 mmol) en tetrahidrofurano (40 mL) se agregó agua (10 mL) e hidrato de hidróxido de litio (52 mg, 2.19 mmol). La mezcla se agitó por 2 h a temperatura ambiente y luego se filtró a través de una capa de 5 cm de DOWEX D50 x 8 resina en ciclo H+ (en primer lugar resina lavada con agua). La resina se lavó con agua adicional (50 mL). Los filtrados se colectaron, concentraron bajo presión reducida y co-evaporaron dos veces con tolueno (10 mL). Después de secar bajo alto vacío por un día, el compuesto del título se aisló (583 mg, 97%) como un sólido blanco. Rf = 0.4, 30% metanol en diclorometano.
I Compuesto 63c En un horno de secado, matraz purgado con argón se agregaron 63b (276 mg, 0.67 mmol) y (R)-1-(3-vinil- isoquinolin-6-il)-etanol (134 g, 0.67 mmol). El matraz se selló y la mezcla de reacción se repurgó dos veces con argón. El diclorometano anhidro (10 mL) se agregó y la mezcla de reacción se repurgó dos veces con argón. El clorohidrato de N- (3-Dimetilaminopropil) -N’-etilcarbodiimida (168 mg, 0.87 mmol) se agregó seguido por 4-dimetilaminopiridina (75 mg, 0.62 mmol). La mezcla de reacción se repurgó rápidamente dos veces con argón y se agitó a TA por 12 h. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (100 mL) y la solución se lavó con solución de agua al 20% de ácido cítrico (2 xl50 L), agua (150 mL) y salmuera (150 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo y metanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (316 mg, 79%) como un sólido blanco después de la evaporación. Rf = 0.30, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1).
. I , Compuesto 63 Una solución de 63c (255 mg, 0.431 mmol) en tolueno (200 mL) se agitó a TA bajo argón. El catalizador de 2da generación Hoveyda-Grubbs (27 mg, 0.043 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a reflujo bajo argón por 30 rain. La mezcla de reacción se enfrió a TA y acetato de etilo (50 mL) se agregó. Esta solución se lavó dos veces con solución acuosa de tris(hidroximetil)fosfina (372 mg, 3 rnmol en 100 mL de agua), dos veces con agua (50 mL) y con salmuera (50 mL). La fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo y metanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (76 mg, 31%) como un sólido blanco después de la evaporación. Rf = 0.20, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1).LH RMN (400 MHZ, CD30D): í 9.01 (s, 1H), 7.93 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.43 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.55 (m, 1H), 5.95 (m, 1H), 5.43 (m, 1H), 5.23 (m, 3H) 4 . 32 ( m, 1H) , 4 .20 (m, 1H) , 3. 67 (m, 1H) , 2 . 69 (m, 1H) , 2 . 30 (m, 2H), 2.13 (m, 2H), 1.96 (m, 3H), 1.83 (m, 1H), 1.64 ( 3H) , 1. 56 (d, J = 6. 7 Hz , 3H) , 1. 44 (d, J = 7. 4 Hz, 3H) 0.92-0.72 (m, 6H). LCMS (m/z) 564.4 [M+H]' Tr = 2.60 min.
EJEMPLO 64 .
Una solución del Compuesto 63 (15 mg, 0.027 mol) en una mezcla de acetato de etilo (4 mL) y tetrahidrofurano (4 mL) que contiene paladio sobre carbono 10% (10 mg) se hidrogenó a TA y a presión atmosférica de hidrógeno por 3 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y la almohadilla filtro se lavó con tetrahidrofurano (10 mL). El filtrado se evaporó para proporcionar el compuesto del titulo (13 mg, 87%) como un sólido blanco.Rf = 0.11, iso-hexanos/acetato de etilo/metanol (6/4/1). XH RMN (400 MHz, CD30D) <59.02 (s, 1H), 7.95 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.45 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 5.93 (q, J = 6.3 Hz, 1H), 5.20 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.07 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.66 (m, 1H), 2.83 (m, 4H), 2.25 (m, 1H), 2.07 (m, 1H), 1.94 (m, 2H), 1.80e (m, 1H), 1.63 (m, 3H), 1.55 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.51-1.42 (m, 2H), 1.37 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.25 (m, 4H), 0.83 (d, J = 6.7 Hz, 6H). LCMS (/z) 566.3 [M+H], Tr = 2.27 min.
EJEMPLO 65 - , , Compuesto 65a A una solución de (R)-1-(3-cloro-isoquinolin-6-il)-etanol (250 mg, 1.21 mmol), y fosfato de potasio tribásico (770 mg, 3.63 iranol) en ciclopentil metil éter (4.5 mL) y agua (1.5 mL) precalentada a 90°C bajo una atmósfera de argón se agregaron ácido 3-(2-metoxi-2-oxoetil)fenilborónico, éster de pinacol (Combi-Blocks, 387 mg, 1.33 mmol) y (A-caPhos)2PdCl2 (49 mg, 60 pmol). Después de 17 h, la reacción se permitió enfriar hasta 23°C, y se dividió entre diclorometano (50 mL) y solución de bicarbonato de sodio acuoso saturado (50 mL). Las fases se dividieron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (50 mL). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, y se concentraron bajo presión reducida. El residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (24 g Columna Combiflash HP Gold, gradiente acetato de etilo/iso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del título (321 mg, 83%) como un aceite amarillo pálido.
Compuesto 65b A una solución de 65a (320 mg, 1.00 mmol) en tetrahidrofurano (3 mL) y agua (2 mL) se le agregó hidróxido de litio (26 mg, 1.1 mmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 3 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (24 g Columna Combiflash HP Gold, gradiente metanol/diclorometano 0-20%) para proporcionar el compuesto del titulo (64.2 mg, 21%) como un aceite incoloro. Rf = 0.5 (20% metanol en diclorometano) I2/mancha de sílice.
, I . i Compuesto 65c ? una solución de le (104 mg, 0.21 mmol) en diclorometano (1.05 mL) se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (70 mg, 1.07 mmol) a 0°C bajo una atmósfera de argón. Después de 1 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión_reducida. El residuo resultante se diluyó con acetonitrilo (1.05 mL) y 2- (IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (79.8 mg, 0.210 mmol), 77,7-díisopropiletilamina (140 mL, 0.840 mmol), y 65b (64 mg, 0.21 mmol) se agregaron secuencialmente a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 18 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida, y el residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (140 mg, 93%) como un aceite amarillo pálido.
Compuesto 65d ? una solución de 65c (140 mg, 0.195 mmol) en tetrahidrofurano (0.9 mL) y agua (0.3 mL) se le agregó hidrato de hidróxido de litio (4.6 mg, 0.195 mmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 3 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del titulo (131 mg, 99%) como un sólido blanco sal de carboxilato de litio.
I Compuesto 65 ? una solución de hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxitripirrolidinofosfonio (35.3 mg, 68 mmo?) y 4-dimetilaminopiridina (62.3 mg, 510 pmol) en diclorometano (5.7 mL) se le agregó 65d (10 mg, 17 pmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón. Después de 16 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo crudo se purificó por HPLC preparativa (columna Gemini 5u C18110Á, 5-100% acetonitrilo/agua, modificador de ácido trifluoroacético 0.1%) para proporcionar el compuesto del título (6.0 mg, 52%) como un sólido blanco sal del ácido trifluoroacético.1H RMN (400 MHz, CD3OD) d 9.70 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.48 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.97-7.87 (m, 2H), 7.79 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.62 (app t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.21 (q, J = 6.6 Hz, 1H), 5.84-5.71 (m, 1H), 4.45- 4.29 (m, 2H), 3.96 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.75 (dd, J = 11.1, 2.7 Hz, 1H), 3.64 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 2.74 (td, J = 12.8, 3.1 Hz, 1H), 2.13-1.96 (m, 2H), 1.91 (Jbr d, J = 13.0 Hz, 1H), 1.81-1.65 (m, 2H), 1.67 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.62 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.01 (d, J - 6.8 Hz, 3H), 0.94 (d, J = 6.8 Hz, 3?). HPLC Tr = 3.040 min. LCMS (m/z) 572.3 [M+H], Tr = 2.07 min.
EJEMPLO 66 i 87% Compuesto 66a A una solución de 6-cloropiridin-3-amina (5.00 g, 38.8 mmol) en dioxano (194 mL) se le agregó bicarbonato de di-tert-butilo (10.2 g, 46.7 mmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón, y la mezcla resultante se calentó a 100°C. Después de 17 h, la mezcla de reacción se permitió enfriar hasta 23°C, y se diluyó con agua (500 mL). La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (2 c 500 mL), y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se concentraron bajo presión reducida. El residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (120 g Columna Combiflash HP Gold, gradiente acetato de etilo/iso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del título (7.69 g, 87%) como un aceite incoloro. i A una solución de 66a (2.00 0, 8.80 mmol) y tetrametiletilenodiamina (2.70 mL, 18.0 mol) en éter de dietilo (44 mL) se le agregó n-butillitio (2.5 M en hexanos, 7.2 L, 18.0 mmol) a -78°C bajo una atmósfera de argón. Después de 10 in, la mezcla resultante se permitió entibiar hasta -15°C durante un periodo de 50 minutos. La mezcla de reacción se enfrió a -78°C, y N,.W-dimetilformamida (1.9 g, 26 mmol) se agregó por medio de jeringa. Después de 30 min, la mezcla de reacción se apagó con solución de cloruro de amonio acuoso saturado (20 mL) y se permitió entibiar hasta 23°C. La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (2 c 20 mL), y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se concentraron bajo presión reducida. El residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice (120 g Columna Combiflash HP Gold, gradiente acetato de etilo/íso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del título (849 mg, 38%) como aceite incoloro. i Compuesto 66c A una solución de 66b (258 mg, 1.00 mmol) y (E)—4— (diraetilamino)but-3-en-2-ona (452 mg, 4.00 m ol) en 1,4-dioxano (10 mL) se le agregó monohidrato de ácido p-toluenosulfónico (761 mg, 4 mmol) a 23°C bajo una atmósfera de argón y la mezcla resultante se calentó a 80°C. Después de 2 h, la mezcla de reacción se permitió enfriar hasta 23°C y se dividió entre solución de bicarbonato de sodio acuoso saturado (200 mL) y acetato de etilo (200 mL). Las capas se dividieron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (200 mL). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se concentraron bajo presión reducida. El residuo crudo se purificó por cromatografía en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (107 mg, 51%) como un sólido color blanco apagado. i Compuesto 66d El dicloro (p-cimeno) rutenio(II) dímero (5 mg, 8 p ol) y (IR,2R)-(-)-N-p-tosil-1,2-difeniletilenodiamina (7 mg, 19 pmol) se suspendieron en agua desgasificada (6 mL) y la mezcla se desgasificó con argón por 15 min. La mezcla se agitó a 70°C bajo argón por 90 min. La solución amarilla resultante se enfrió a TA.66c (329 mg, 1.56 mmol), formiato de sodio (543 mg, 7.98 mmol) y tetrahidrofurano desgasificado (1 mL) se agregaron y la mezcla de reacción se desgasificó por 10 in. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 40°C por 2.5 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA y se extrajo con acetato de etilo (20 mL). La capa orgánica se separó, lavó con agua (20 L), salmuera (20 mL), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (180 mg, 54%) como un sólido. l I , , Compuesto 66e A una suspensión de fosfato de potasio tribásico (550 mg, 2.59 mmol) en ciclopentil metil éter (4.5 mL) y agua (3 mL) se agregó 66d (180 mg, 0.89 mmol) y calentó a 90°C. A esta temperatura, (A-caPhos)2PdCl2 (35 mg, 43 pmol) se agregó y se agitó por 2 min. Una solución de éster de metilo del ácido (E)-2,2-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-but-3-enoico (286 mg, 1.12 mmol) en ciclopentil metil éter (4.5 mL) se agregó gota a gota y se agitó por 19 h a 90°C. La mezcla de reacción se enfrió a TA, diluida con acetato de etilo (40 mL) y agua (20 L). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 mL). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se concentraron y el residuo crudo resultante se purificó por medio de cromatografía en gel de sílice (24 g Si02 Columna Isco Rf Gold, gradiente acetato de etilo/iso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del título (95 mg, 37%) como un sólido color café pálido.
Compuesto 66f A una solución de 66e (95 mg, 0.32 mmol) en tetrahidrofurano (1.8 mL), metanol (0.6 mL) y agua (0.6 mL) se le agregó hidrato de hidróxido de litio (15 mg, 0.63 mmol) a 23°C. Después de 16 h, la mezcla resultante se concentró bajo presión reducida y solventes residuales se removieron azeotrópicamente por la adición de tolueno (5 mL) seguido por concentración bajo presión reducida (2 *) para proporcionar el compuesto del título. Esto se usó en la amida acoplamiento posterior sin purificación adicional.
, , , Compuesto 66g A una solución de le (212 mg, 0.40 mmol) en diclorometano (3 agregó lentamente trifluorometansulfonato de trimetilsililo (106 mL, 0.60 mmol) a 0°C bajo una atmósfera de argón. Después de 1 h, la mezcla resultante se concentró bajo presión reducida y se usó en la amida acoplamiento posterior sin purificación adicional. A una solución de 66f (90.5 mg, 0.32 mmol) en acetonitrilo (3 mL), 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (180 mg, 0.47 mmol), N,N-diisopropiletilamina (330 pL, 1.90 mmol) y áster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (232 mg, 0.4 mmol) en acetonitrilo (2 mL) se agregaron secuencialmente a 23°C. Después de 16 h, la mezcla resultante se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó directamente por cromatografía en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (201 mg, 91%) como un sólido.
. Compuesto 66h A una solución de 66g (201 mg, 0.29 mmol) en tetrahidrofurano (2 mL), metanol (0.4 mL) y agua (0.4 mL) se le agregó hidrato de hidróxido de litio (14 mg, 0.57 mmol) a 23°C. Después de 40 min, hidrato de hidróxido de litio (14 mg, 0.57 mmol) se agregó a 23°C. Después de 1 h, la mezcla resultante se concentró bajo presión reducida y los solventes residuales se removieron azeotrópicamente por la adición de tolueno (2 mL) seguido por concentración bajo presión reducida (3*) para proporcionar el compuesto del título. Esto se .usó en la macrolactonización posterior sin purificación adicional.
, , Compuesto 66 A 2-metil-6-nitrobenzoico anhídrido (43 mg, 0.12 nunol) y 4-dimetilamínopírídína (48 mh, 0.39 mmol) se le agregó 1,2-dicloroetano (20 mL) bajo atmósfera de nitrógeno y calentó a 50°C. A esta temperatura, 66h (28 mg, 0.049 mmol) en N,N-dimetilformamida (1 mL) se agregó gota a gota por medio de bomba de jeringa durante 6 h. Un lavado adicional de N,N-dimetilformamida (0.5 mL) se agregó luego de la misma manera durante 15 min. Después de agitar 1.25 h adicional, la mezcla de reacción se enfrió a TA. Esto se diluyó con acetato de etilo (20 mL) y se lavó con agua (2 x 10 mL). La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se filtró. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se purificó por HPLC preparativa (columna Gemini 5u C18 110Á, 5-100% acetonitrilo/agua, modificador de ácido trifluoroacético 0.1%) para proporcionar el compuesto del titulo como un polvo blanco sal del ácido trifluoroacético. Esto se lavó con solución saturada de bicarbonato de sodio para eliminar impurezas de ácido formadas de 2-metil-6-nitrobenzoico anhídrido para proporcionar el compuesto del título (1.5 mg, 5%) como un sólido blanco.1H RMN (400 MHz, CD3OD) <59.19 (s, 1H), 8.86 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.67 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.89 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 6.04 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 5.52-5.41 (m, 1H), 4.26 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 4.18 (app t, J = 9.1 Hz, 1H), 3.65 (dd, J = 11.4, 2.8 Hz, 1H), 2.58 (td, J = 12.9, 3.2 Hz, 1H), 1.91-1.75 (m, 3H), 1.68-1.53 (m, 2H), 1.63 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.51 (d, J = 7.3 Hz, 3H), 1.43 (s, 3H), 1.26 (s, 3H), 0.87 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 6.7 Hz, 3H).LCMS (m/z) 551.2 [M+H], Tr = 2.19 min.
EJEMPLO 67 i , Compuesto 67a El 2- (3-bromofenil)-2-metilpropanoato de metilo (Pharmabridge, Doylestown, PA, USA (190 mg, 0.74 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (206 mg, 0.81 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaladio(II), complejo con diclorometano (27 mg, 0.04 mmol) y acetato de potasio (217 mg, 2.22 mmol) se colocaron en un vial de tapón de rosca y limpiaron por chorro con un ciclo de vacio y argón tres veces. El 1,4-dioxano anhidro (4 mL) se agregó bajo argón y la mezcla resultante se calentó a 80°C por 19 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA y se diluyó con acetato de etilo (20 mL). El celite (~1 g) se agregó y filtró a través de una almohadilla de celite. Los solventes se removieron bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del titulo que se usó·directamente en la reacción posterior.
, , Compuesto 67b A una suspensión de fosfato de potasio tribásico (445 mg, 2.10 mmol) en ciclopentil metil éter (2.5 mL) y agua (1.5 mL) se le agregó (R)-1-(3-cloro-isoquinolin-6-il)-etanol (180 mg, 0.89 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 90°C. A esta temperatura, (A-caPhos)2PdCl2 (28 mg, 35 pinol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó por 2 min. Una solución de 67a (225 mg, 0.74 mmol) en ciclopentil metil éter (2.5 mL) se agregó gota a gota y se agitó por 19 h a 90°C. La mezcla de reacción se enfrió a TA, diluido con acetato de etilo (30 mL) y agua (15 mL). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2* 15 mL). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se concentraron y el residuo crudo resultante se purificó por cromatografía de columna de gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (267 mg, cuantitativo) como un sólido color café pálido.
Compuesto 67c A una solución de 67b (244 mg, 0.7 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL), y agua (2.5 mL) se le agregó hidrato de hidróxido de litio (18.5 mg, 0.77 m ol) a 23°C. Después de 48 h, hidrato de hidróxido de litio (17 mg, 0.70 mmol) se agregó a la mezcla de reacción. Después de 24 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y los solventes residuales se removieron azeotrópicamente por la adición de tolueno (5 mL) seguido por concentración bajo presión reducida (2x) para proporcionar el compuesto del titulo. Esto se usó en el acoplamiento amida posterior sin purificación adicional.
, I.
I , , Compuesto 67d A una solución de le (397 mg, 0.75 mmol) en diclorometano (5 mL) se le agregó lentamente trifluorometansulfonato de trimetilsililo (199 mL, 1.12 mmol) a 0°C bajo una atmósfera de argón. Después de 1 h, la mezcla resultante se concentró bajo presión reducida para'dar áster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico como una sal de triflato. Esto se usó en el acoplamiento amida posterior sin purificación adicional. A una solución de 67c (234 mg, 0.7 mmol) en acetonitrilo (7 mL), 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (532 mg, 1.4 mmol), N,N~ diisopropiletilamina (730 pL, 4.2 mmol) y áster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (435 mg, 0.75 mmol) en acetonitrilo (3 mL) se agregaron secuencialmente a 23°C. Después de 16 h, la mezcla resultante se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó directamente por cromatografía en gel de sílice (40 g Si02 Columna Isco Rf Gold, gradiente acetato de etilo/iso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del título (230 mg, 44%) como un sólido. i , .
Compuesto 67e ? una solución de 67d (94 mg, 0.13 mol) en tetrahidrofurano (3 mL), y agua (1 mL) se agregó hidrato de hidróxido de litio (3.1 mg, 0.13 m ol) a 23°C. Después de 48 h, hidrato de hidróxido de litio (17 mg, 0.70 mmol) se agregó a la mezcla de reacción. Después de 1 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y solventes residuales se removieron azeotrópicamente por la adición de tolueno (5 mL) seguido por concentración bajo presión reducida (2*) para proporcionar el compuesto del título. Esto se usó en la macrolactonización posterior sin purificación adicional.
, I - I Compuesto 67 A una suspensión de 67e (78 mg, 0.13 mmol) en dicloro etano (42 L) se le agregó hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxitripirrolidinofosfonio (520 mg, 0.50 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (462 mg, 4.0 m ol) a 23°C. Después de 24 h, el solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se purificó por HPLC preparativa (columna Gemini 5u C18 110Á, 5-100% acetonitrilo/agua, modificador de ácido trifluoroacético 0.1%) para proporcionar el compuesto del titulo (3.2 mg, 4%) como un polvo blanco y como una sal del ácido trifluoroacético. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) d 9.65 (s, 1H) , 8.69 (s, 1H), 8.49 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.44 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.90 (dd, J = 8.7, 1.5 Hz, 1H), 7.83 (d, J . Hz, 1H), .8 (, 7.9 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.69 ( app t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.21 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 5.92-5.84 (m, 1H), 4.41-4.30 (, 2H), 3.75 (dd, J = 14.4, 6.0 Hz, 1H), 2.71 (td, J = 13.0, 3.0 Hz, 1H), 2.06-1.99 (m, 1H), 1.96 (dd, J = 14.2, 7.1 Hz, 1H), 1.93-1.86 (m, 1H), 1.75 (s, 3H), 1.73-1.59 (m, 2H), 1.68 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.63 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.47 (s, 3H), 0.96 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.84 (d, J = 6.7 Hz, 3H). HPLC Tr = 5.319 rr.in. LCMS (m/z) 600.5 [M+H], Tr = 2.71 min.
, , Compuesto 68a A una solución de 6-bromo-3-cloroisoquinolina (Frontier Scientific, 1.594 g, 6.57 mmol) y 2,2-dimetilpropano-l,3-diol (684 mg, 6.57 mmol) en ciclopentil etil éter (20 L) se agregó carbonato de cesio (2.354 g, 7.23 mmol) a 23°C. La mezcla de reacción se calentó a 120°C por 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA, diluido con acetato de etilo (50 mL) y se lavó con agua (30 mL), salmuera (30 L) y la capa orgánica resultante se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (80 g Columna Isco Rf Gold, gradiente acetato de etilo/iso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del título (461 mg, 23%) como un sólido blanco.
Compuesto 68b A una solución de 68a (461 mg, 1.49 mmol) en acetonitrilo (10 mL) y agua (2.5 mL) se le agregó ácido periódico (1.698 g, 7.45 mmol) a 23°C. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0°C y trióxido de cro io (30 mg, 0.298 mmol) se agregó en una porción. Después de 2.5 hora, la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (30 mL) y agua (30 mL) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (30 mL) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentraron bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del titulo que se usó sin purificación (481 mg) , Compuesto 68c A una solución de 68b (481 mg, 1.49 mmol) en acetonitrilo (10 mL)> 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (1.133 g, 2.98 mmol), h/,AG-díísopropiletilamina (1.55 mL, 8.94 mmol) y (S)-metil 2-amino-3-metilbutanoato clorohidrato (749 mg, 4.47 mmol) se agregaron secuencialmente a 23°C. Después de 16 h, la mezcla resultante se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó directamente por cromatografía en gel de sílice (24 g Columna Isco Rf Gold, gradiente acetato de etilo/iso-hexanos 0-100%) para proporcionar el compuesto del título (412 mg, 63% durante 2 etapas) como un aceite café.
I , Compuesto 68d A una suspensión de 68c (412 g, 0.95 mmol) y dicloruro de bis(trifenilfosfina) paladio (II) en tolueno (5 mL) se le agregó tributil(1-etoxivinil)estaño (962 mL, 2.85 mmol) bajo argón a 23°C. La mezcla de reacción se calentó a 50°C. Después de 18 h, agua (1 mL) se agregó a 50°C. Después de 2 h, la mezcla de reacción se enfrió a TA, diluido con acetato de etilo (15 mL) y solución 1 M de fluoruro de potasio (5 mL) se agregó. La mezcla resultante se agitó vigorosamente a 23°C. Después de 2 h, la mezcla se filtró a través de una almohadilla corta de Celite y se lavó con acetato de étilo (10 mL). El filtrado se lavó con agua (15 mL), salmuera (15 mL) , se secó sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentró. Este residuo se disolvió en 1,4-dioxano (8 mL) y ácido clorhídrico acuoso 1 M (1 mL) se agregó a 23°C. Después de 5 min, la mezcla de reacción se apagó con una solución saturada de bicarbonato de sodio (2 mL) y se concentró hasta secarse. El residuo se recogió en acetato de etilo (20 mL) y agua (20 mL) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 c 10 mL) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro y concentraron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (236 mg, 62%) como una goma café.
Compuesto 68e Dicloro (p-cimeno) rutenio(II) dimero (2 mg, 3 pmol) y (IR,2R)-(-)-N-p-tosil-1,2-difeniletilenodiamina (2.6 mg, 7 mitio?) se suspendieron en agua desgasificada (2.5 mL) y la mezcla se desgasificó con argón por 15 in. La mezcla se agitó a 70°C bajo nitrógeno por 90 min. La solución amarilla resultante se enfrió a TA.68d (236 mg, 0.59 mmol), formiato de sodio (200 mg, 2.95 mmol) y tetrahidrofurano desgasificado (1.25 mL) se agregaron y la mezcla de reacción se desgasificó por 10 min. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 40°C por 3.5 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA y se extrajo con acetato de etilo (15 mL). La capa orgánica se separó, se lavó con agua (20 mL), salmuera (20 mL), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título (196 mg, 83%) como un sólido color café pálido.
Compuesto 68f A una solución de 68e (196 mg, 0.487 mmol) en tetrahidrofurano (3 mL), metanol (1 mL) y agua (1 mL) se agregó hidrato de hidróxido de litio (23 mg, 0.97 mol) a 23°C. Después de 16 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se recogió en acetato de etilo (10 mL) y agua (10 mL) y acidificó con solución de ácido clorhídrico acuoso 1 M hasta pH ~2. Las capas resultantes se separaron. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 xlO mL) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentraron bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del titulo que se usó sin purificación.
, I l l I , ¡ , Compuesto 68g Compuesto 68h A una solución de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxilico (270 mg, 0.62 mmol) en diclorometano (5 mL) se le agregó lentamente trifluorometansulfonato de trimetilsililo (165 mL, 0.93 mmol) a 0°C bajo una atmósfera de argón. Después de 1 hora, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para proporcionar la sal de triflato de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S/R)-1-((S)-2-amino-propionil)-hexahidro-piridazin-3-carboxílico como aceite amarillo que se usó sin purificación. Una una solución de 68f (189 mg, 0.49 mmol) en acetonitrilo (7 mL), 2-(IH-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (278 mg, 0.73 mmol), N,AJ-diisopropiletilamina (730 pL, 4.2 mmol) y éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S/R)-1-((S)-2-amino-propionil)-hexahidro-piridazín-3-carboxílico (435 mg, 0.62 mmol) en acetonitrilo (3 mL) se agregaron secuencialmente a 23°C. Después de 16 h, la mezcla resultante se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó directamente por cromatografía en gel de sílice (40 g Si02 Columna Isco Rf Gold, gradiente acetato de etilo/iso-hexanos 0-100%) para proporcionar una mezcla diaestereomérica inseparable de los compuestos del título (43 mg, 13%) como un residuo incoloro.
Compuesto 68i Compuesto 68j A una solución de una mezcla de 68g y 68h (43 mg, 61 pinol) en tetrahidrofurano (4 mL) y agua (2 mL) se le agregó hidrato de hidróxido de litio (3.2 mg, 0.13 mmol) a 23°C. Después de 1 h, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y los solventes residuales se removieron azeotrópicamente por la adición de tolueno (5 mL) seguido por concentración bajo presión reducida (2 *) para proporcionar los compuestos del título como una mezcla. Esto se usó en la macrolactonización posterior sin purificación adicional. LCMS (/z) 572.2 [M+H], Tr = 2.21 min.
, I Compuesto 68 Compuesto 69 A una suspensión de 68i y 68j (34.8 mg, 61 pmol) en diclorometano (20 mL) se le agregó hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxitripirrolidinofosfonio (127 mg, 0.24 m ol) y 4-dimetilaminopiridina (224 mg, 1.83 mmol) a 23°C. Después de 24 h, el solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se purificó por HPLC preparativa (columna Gemini 5u C18 110Á, acetonitrilo/agua 5-100%, modificador de ácido trifluoroacético 0.1%) para proporcionar ambos compuestos (12 mg, 35%) como una mezcla de relación de diaestereómeros. Los diaestereómeros se separaron usando HPLC preparativa Quiral para proporcionar primero elución (Tr = 3.73 min) Compuesto 68 (2.17 mg, 6%) y la segunda elución (Tr = 5.713 min) Compuesto 69 (1.85 mg, 5%). Compuesto 68: 1H RMN (400 MHz , CD30D) d 8.89 (s, 1H), 7.94 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.37 (dd, J = 8.6, 1.5 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.09 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 5.54 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 4.36-4.26 (m, 3H), 4.21 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 3.69 (dd, J = 11.2, 2.6 Hz, 1H), 2.77 (td, J = 12.9, 3.0 Hz, 1H), 2.00-1.84 (m, 2H), 1.83-1.77 (m, 1H), 1.76-1.62 (m, 2H), 1.67 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.47 (d, J = 7.3 Hz, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 0.99 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 6.7 Hz, 3H). HPLC Tr = 5.866 min. LCMS (m/z) 554.2 [M+H], Tr = 2.44 min.
Compuesto 69: 1H RMN (400 MHz, CD30D) d 8.78 (s, 1H), 7.83 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.24 (dd, J = 8.6, 1.6 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.93 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 5.35 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 4.18 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 4.02 - 3.97 (m, 2H), (d, J = 10.0 Hz, 1H), 3.65 (dd, J = 10.8, 2.8 Hz, 1H), 2.71 (td, J = 12.7, 2.8 Hz, 1H), 1.98 - 1.89 (m, 1H), 1.87 - 1.77 (m, 2H), 1.73 - 1.64 (m, 1H), 1.57 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.49 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.13 (s, 3H), 0.89 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.85 (d, J = 6.5 Hz, 3H) HPLC Tr = 5.951 min. LCMS (/z) 555.2 [M+H], Tr = 2.49 min.
EJEMPLO 70 - , Compuesto 70a A 2,7-dibromonaftaleno (1 g, 3.50 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (18 mL), a -78°C y bajo una atmósfera de nitrógeno, se le agregó una solución de n-butillitio (2.5 M en hexanos, 1.5 mL, 3.67 mmol) gota a gota. La reacción se agitó a -78°C por 20 min después de lo cual N- metoxi-JV-metilacetamida (409 mL, 3.85 mmol) se agregó. Después de 15 min, la reacción se entibió a TA y se agitó por 30 min. La reacción se apagó con ácido clorhídrico 2 M y extrajo dos veces con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se secaron a través de una frita hidrofóbica y se concentró in vacuo. El producto se purificó por cromatografía instantánea de sílice (iso-hexanos/acetato de etilo, 7/1) para proporcionar el compuesto del título (650 mg, 75%) como un sólido incoloro. i i o 0H Compuesto 70b A dicloro (p-cimeno) rutenio (II) dímero (8 mg, 0.013 mmol) en agua (5 mL) a TA se le agregó (IR, 2R)-(-) -N-p-tosil-1,2-difeniletilenodiamina (11.5 mg, 0.031 inmol). El sistema se desgasificó por 15 min y luego se calentó a 70°C por 1.5 h. La reacción se enfrió y se agregó una solución de 70a (650 mg, 2.61 mmol) en tetrahidrofurano desgasificado anhidro (2 mL) seguido por formiato de sodio (874 mg, 13.1 mmol). La reacción se calentó a 40°C por 3 h, se enfrió a TA y se extrajo dos veces con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se secaron a través de una frita hidrofóbica y se concentraron in vacuo . El producto se purificó por cromatografía en gel de sílice (iso-hexanos/acetato de etilo, 4/1) para proporcionar el compuesto del título (450 mg, 69%) como un sólido incoloro.
, , , , . . Compuesto 70c 70b (42 mg, 0.17 mmol) se disolvió en acetonitrilo (2 mL) en un vial de microondas, a la mezcla se le agregó ácido 3-butenoico (35 mg, 0.41 mmol), acetato de paladio (II) (4 mg, 0.017 mmol), tri-(o-tolil)fosfina (10 mg, 0.034 mmol) y trietilamina (0.12 mL). El vial se calentó a 120° en el reactor de microondas por 15 mins. La mezcla de reacción luego se filtró, el solvente se evaporó y purificó con cromatografía de columna combi-instantánea (Eluyente metanol/diclorometano 1:3) para proporcionar el compuesto del titulo (35 mg, 81%) como un sólido color amarillo.
, Compuesto 70d 70c (40 mg, 0.08 mmol) se disolvió en N,N~ dimetilformamida (2 mL), a la solución se le agregó 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (36 mg, 0.1 mmol), la mezcla de reacción se agitó a TD por 10 mins. Luego áster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metilbutirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0.18 mmol) en N,N-dimetilformamida (1 mL) se agregó a mezcla de reacción anterior seguido por trietilamina (32 mg, 0.32 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA por 1 h, y luego esto se diluyó con acetato de etilo (20 mL) y se lavó con salmuera. La capa acuosa se extrajo nuevamente con acetato de etilo y el solvente orgánico combinado se evaporó y purificó con cromatografía de columna combi-instantánea (Eluyente metanol/diclorometano 1:10) para proporcionar el compuesto del título (68 mg, 65%) como un sólido color amarillo.
Compuesto 70e 70d (55 mg, 0.08 mmol) se disolvió en la mezcla de tetrahidrofurano (2 mL), metanol (1 mL) y agua (1 mL). A la solución se le agregó hidrato de hidróxido de litio (4 mg, 0.16 mmol). La mezcla de reacción se agitó a TA por 1 h. Diclorometano (10 mL) y agua (10 mL) se agregaron a la mezcla de reacción. El ácido clorhídrico 1 N se agregó a la capa acuosa hasta que pH alcanzó 2, la capa acuosa ácida se extrajo con diclorometano (2 x 10 mL). El solvente orgánico luego se evaporó para proporcionar el compuesto del título (37 mg, 84%) como un sólido blanco.
, Compuesto 70 El 2-Metil-6-nitrobenzoico anhídrido (19 mg, 0.056 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (23 mg, 0.185 mmol) se disolvieron en 1,2-dicloroetano (18 mL) y la solución se calentó a 50°C. A la solución anterior se le agregó 70e (20 mg, 0.037 mmol) en N,N-dimetilformamida (1 mL) por medio de bomba de jeringa en 10 h. La mezcla de reacción se agitó a 50°C por 2 h después de la realización de la adición. El solvente luego se evaporó y el residuo se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (0-100% acetonitrilo/agua) para proporcionar el compuesto del titulo (4 mg, 22%) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) d 7.79-7.72 (m, 3H), 7.52 (dd, J = 1.6, 8 .8 Hz, 1H) , 7. 41 (s, 1H) , 7. 33 (dd, J = 8. 4 , 1. 6 Hz, 1H) 6.48 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 6.31-6.24 (m, 1H), 6.02 (q, J 7 . 6 Hz , 1H) , 4. 64 (d, J = 12. 4 Hz, 1H) , 4 .40 (d, J = 12.8 Hz 1H), 4.30 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 3.78-3.72 (m, 1H), 3.36-3.32 (m, 2 H ) , 2. 99-2. 93 (m, 1H) , 2.77-2.71 (m, 1H) , 1. 99-1. 69 (m, 5H), 1.66 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.58 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 0.99 (d, J = 6.8 Hz , 6H) . LCMS (m/z) 521. 1 [M-H] , Tr = 3. 18 min .
EJEMPLO 71 , Compuesto 71 Compuesto 70 (5 mg, 0.01 mmol) se disolvió en etanol (5 mL) bajo argón, a la solución se le agregó Pd (10% sobre carbono activado, 3 mg). El matraz de reacción se purgó luego y se cargó luego con H2 usando un balón. La reacción se filtró a través de Celite después de 2 h, el filtrado se evaporó bajo presión reducida y purificó por HPLC preparativa de fase inversa (0-100% acetonitrilo/agua) para proporcionar el compuesto del titulo (3.2 mg, 64%) como un polvo blanco. 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) J8.47 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.69-7.62 (m, 3H), 7.31 (s, 1H), 7.24-7.19 (m, 2H), 5.97 (dd, J = 12.8, 6.0 Hz, 1H), 5.62 (pent, J = 7.2 Hz, 1H), 4.76-4.16 (m, 1H), 4.10 ( app t, J = 12.8 Hz, 1H), 4.05-3.69 (m, 1H), 2.85 (br s, 1H), 2.73-2.41 (m, 2H), 2.40-2.37 (m, 1H), 2.10-1.93 (m, 1H), 1.92-1.70 (m, 6H), 1.53 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.49 (d, J = 7.6 Hz, 3H), 0.99 (d, J = 6.8 Hz, 6H) . LCMS (m/z) 523.140 [M+H], Tr = 3.16 min.
EJEMPLO 72 l Compuesto 72 En un horno de secado, matraz purgado con argón Compuesto 49 (10 mg, 0.017 mmol), yoduro de cobre(I) (1 mg, 0.005 mmol) y prop-2-in-1-ol (4 mg, 0.07 mmol) se agregaron. El matraz se selló y repurgó con argón tres veces. N,N-dimetilformamida anhidra (5 mL) se agregó y la mezcla de reacción se repurgó con argón tres veces. Esta mezcla de reacción se agitó a TA por 12 h. Después de la evaporación del solvente bajo presión reducida, el residuo crudo se disolvió en acetato de etilo (10 mL) y se filtró a través de ayuda de filtro y la almohadilla filtro se lavó con acetato de etilo (10 mL). Después de la concentración bajo presión reducida, el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente desde 0-40% acetato de etilo y metanol (4/1) en iso-hexanos) para proporcionar el compuesto del título (10 mg, 93%) como un sólido blanco después de la evaporación. Rf = 0.33, metanol 10% en diclorometano. ¾ RMN (400 MHz, CD3OD) d 9.05 (s, 1H), 7.95 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.40 (d, J = 16.0 Hz, 1H) , 5.95 (m, 1H) , 5.50 (m, 1H) , 4.59-4.53 (m, 3H) , 4.36 (m, 2H) , 4 30 (m, 1H) , 3.68 (m, 1H) , 2.80 (m, 1H) , 2.60 (m, 1H), 2.23 ( , 1H) , 2.14 (m, 1H) , 1.90-1.58 (m, 4H) , 1.57 (d, J = 6.6 Hz , 3H) , 1.55 (d, J = 7.6 Hz, 3H) , 1.41 (s, 3H) , 1.27 (s, 3H) . LCMS (m/z) 633.4 [M+H] , Tr = 2.66 min.
EJEMPLO 73 Compuesto 73a A 3-Nítrometileno-oxetano ( Angew . Chem. Int . Ed. 2006, 45 (46), 7736, 2.5 g, 21.7 ol) en tetrahidrofurano anhidro (40 mL) a TA y bajo una atmósfera de nitrógeno se le agregó yoduro de cobre(I) (413 mg, 2.17 mmol) y clorotrimetilsilano (3.0 mL, 23.9 mmol). La solución amarilla resultante se agitó por 5 min y se enfrió hasta entre -15°C y -11°C con un baño de hielo de metanol. El vinil magnesio bromuro (43.5 mL, 43.5 mmol, 1.0 M en tetrahidrofurano) se agregó lentamente durante 3 h por medio de una bomba de jeringa. Después de la adición la reacción se apagó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, se filtró y extrajo con éter de dietilo (3x). Los orgánicos combinados se secaron a través de una frita hidrofóbica y concentraron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografia en gel de sílice usando éter de dietilo para dar el compuesto del titulo como un aceite color amarillo (2.0 g, 64%).
Compuesto 73b A 73a (600 mg, 4.2 mmol) en dimetilsulfóxido anhidro (13 mL) se le agregó ácido acético (2.4 mL, 42 mmol) y nitrito de sodio (869 mg, 12.6 mmol) y la mezcla calentó a 35°C por 16 h. La reacción se enfrió a TA y diluyó con agua. El pH se ajustó hasta pH 3-4 con ácido clorhídrico acuoso 10% y el producto se extrajo con éter de dietilo (3x) y éter de dietilo / acetato de etilo (1:1). Los orgánicos combinados se secaron a través de una frita hidrofóbica y concentraron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexanos/acetato de etilo (2/1 luego 1/1) para proporcionar ácido impuro. Esto se disolvió en éter de dietilo y extrajo con una solución saturada de sodio carbonato. Lo acuoso se acidificó a pH 2 con ácido clorhídrico concentrado y extrajo con acetato de etilo (3x). Los orgánicos se secaron a través de una frita hidrofóbica y se concentraron in vacuo para dar el compuesto del título como un aceite color amarillo (228 mg, 43%). , i Compuesto 73c A 73b (150 mg, 1.18 mmol) en dioxano anhidro (1 mL), se le agregó éster de (R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etilo del ácido acético (347 mg, 1.18 mmol) seguido por diciclohexilmetilamina (0.76 L, 3.54 mmol), acetato de paladio(II) (53 mg, 0.24 mmol) y Tri(o-tolil) fosfina (72 mg, 0.24 mmol). La mezcla se calentó a 100°C por 1 hora. Una cantidad adicional de acetato de paladio(II) (26 mg, 0.12 mmol) y Tri(o-tolil) fosfina (36 mg, 0.12 mmol) se agregó y el calentamiento continuó a 100°C por 45 min adicionales. La reacción se enfrió a TA y HCl 2M se agregó hasta que pH 3-4 se alcanzó. El producto se extrajo con acetato de etilo (3x) y acetato de etilo/metanol 10% (2x). Los orgánicos combinados se secaron a través de una frita hidrofóbica y concentraron in vacuo para dar el compuesto del título como un aceite café. , . 1 Compuesto 73d Una solución de le (3.01 g, 5.66 mmol) en tetrahidrofuran:metanol (1:1, 60 mL) se agitó a 0°C. El fluoruro de tetra-n-butilamonio (1 M en tetrahidrofurano, 11.3 mL, 11.3 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a T? por 22 h. El solvente se evaporó y el residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano hasta que iso-hexano/acetato de etilo 1:1 proporcionó el compuesto del titulo (2.14 g, 91%) como una espuma blanca.
. , . ¡ , , Compuesto 73e A 73d (365 mg, 0.88 mmol) en diclorometano anhidro (15 mL) a 0°C y bajo una atmósfera de nitrógeno, se le agregó trifluorometansulfonato de trimetilsililo (239 mL, 1.32 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 1 hora antes de agregar N,LZ-diisopropiletilamina (613 pL, 3.52 mmol) y luego se concentró in vacuo, y co-evaporó con tolueno para proporcionar éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)—1— [ (S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico como un sólido blanco. A 73c (300 mg, 0.88 mmol) en acetonitrilo anhidro (9 mL) a 0°C y bajo una atmósfera de nitrógeno se le agregó N,N-diisopropiletilamina (766 pL, 4.4 mmol) y 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (401 mg, 1.06 mmol). La solución se agitó a 0°C por 3 min antes de agregar una solución de éster de 2,2,2-tricloro-etilo del ácido (S)-l- [(S)-2-((S)-2-amino-3- etil-butirila ino)-propionil]- hexahidro-piridazin-3-carboxílico en acetonitrilo anhidro (2 mL). La reacción se entibió a TA se agitó por 2 h. La reacción se apagó con HCl 1M y extrajo con acetato de etilo (3x). Las capas orgánicas combinadas se secaron a través de una frita hidrofóbica y concentraron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo para dar el compuesto del título como un aceite amarillo viscoso (160 mg, 22%, 2 etapas).
. , , . . , Compuesto 73 A 73e (160 mg, 0.25 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) y agua (2 mL) se le agregó litio hidróxido monohidrato (53 mg, 1.25 mmol) a 0°C. La reacción se agitó a 0°C por 2 h y se apagó al agregar ácido clorhídrico acuoso 2M (0.63 mL). La reacción se concentró in vacuo, seguido por co-evaporación de tolueno/metanol (3x) y luego tolueno (3x) y se secó en un alto vacío por 15 min. El residuo resultante se disolvió en tetrahidrofurano anhidro (83 mL) y a TA se le agregó N,N-diisopropiletilamina (223 mE, 1.25 mmol), 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil urom o hexafluorofosfato metanaminío (114 mg, 1.3 m ol) y 4-dimetilaminopiridina (3 mg, 0.03 mmol). La reacción se agitó por 24 h, diluido con acetato de etilo y se lavó con HCl 1M (lx) y salmuera (lx). La capa orgánica se secó a través de una frita hidrofóbica y concentró in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando acetato de etilo/metanol 1:0 luego 20/1 para dar un aceite color amarillo viscoso (52 mg). Esto se purificó además por cromatografía de capa delgada preparativa (acetato de etilo) para proporcionar el compuesto del’título como un sólido blanco que se trituró con éter de dietilo, se filtró y se secó al vacío. (22 mg, 16%, 2 etapas). 1H RMN (300MHz, CDC1-3) 0.96 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.00 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.50 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.69 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.81 - 2.16 (m, 4H), 2.63 - 2.74 (m, 1H), 3.26 - 3.38 (m 1H), 3.70 - 3.83 (m, 1H), 3.98 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 4.28 (t, J = 9.8 Hz, 1H), 4.33 - 4.43 (m, 1H), 4.57 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 4.86 (q, J = 6.7 Hz, 2H), 5.13 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 5.73 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 5.96 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 6.61 - 6.73 (m, 1H), 7.00 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 7.09 - 7.20 (m, 1H), 7.40 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.81 - 7.93 (m, 2H), 8.22 (d, J = 8.7 Hz, 1H). LCMS (m/z) = 564.2 [M+H], Tr = 1.96 min.
EJEMPLO 74 Compuesto 74 El Compuesto 57 (20 mg, 0.036 mmol) se disolvió en metanol (5 L) y agregó cantidad catalítica de Pd 10% sobre carbono. La mezcla de reacción se agitó bajo atmósfera hidrógeno por 2 h. El catalizador se eliminó por filtración y el eluyente se concentró bajo presión reducida. La purificación por HPLC preparativa de fase inversa dio el compuesto del título (8.4 mg, 42% de rendimiento) como un polvo blanco. :H RMN (300 MHz, CD30D): d 9.61 (s, 1H), 8.42 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.89 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.83 ( br s, 1H), 7.29 (d„ J = 8.7 Hz, 1H), 6.27-6.21 (m, 1H), 5.92-5.82 (m, 1H), 3.96-3.5 (m, 4H), 3.28-3.19 (m, 1H), 3.08- 2.98 (m, 1H), 2.30-2.20 (m, 1H), 2.10-1.90 (m, 4H), 1.78-1.72 m, 5H), 1.56-1.51 (m, 6H), 1.21 (s, 3H), 0.89 (d, J = 7.2 Hz, 6H). LCMS (/z): 552.3 [M+H], Tr =1.74 min.
EJEMPLO 75 Compuesto 75a Una solución de acetoacetato de etilo (20 g, 19.4 mL, 0.154 mol) en una mezcla de dioxano (120 mL) y formaldehido acuoso (37% solución en agua, 57.7 mL, 0.77 mol) se agitó a TA. La trietilamina (1.0 M en tetrahidrofurano, 7.7 mL, 7.7 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a 60°C por 20 h y luego se calentó a 100°C por 4 h. La mezcla de reacción se enfrió a TA y se vació en agua (1500 mL). La solución acuosa se lavó con tolueno. La capa acuosa se concentró hasta ~50% del volumen inicial y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron y evaporaron. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexano hasta iso-hexano/acetato de etilo 1:1 seguido por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexano hasta iso-hexano/acetato de etilo 3:2 para proporcionar el compuesto del título (2.33 g, 8%) como un aceite color amarillo.
. Compuesto 75b Una solución de 75a (2.10 g, 11 mmol), 2,2-dimetoxipropano (13.5 mL, 110 mmol) e hidrato de ácido 4-toluenosulfónico (209 mg, 1.1 mmol) en acetona (8 mL) se agitó a TA por 18 h. La solución de carbonato ácido de sodio saturado se agregó y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron, lavaron con agua y salmuera. La capa orgánica se filtró a través de una frita hidrofóbica y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando un gradiente de iso-hexano/acetato de etilo 1:5 hasta 3:7 para proporcionar el compuesto del título (1.88 g, 74%) como un aceite incoloro.
¡ , - Compuesto 75c Una solución de N,W-diisopropiletilamina (0.55 mL, 3.9 mmol) en tetrahidrofurano (20 mL) se agitó a -78°C bajo nitrógeno. El n-Butil litio (1.6 M en hexano, 2.25 mL, 3.6 m ol) se agregó gota a gota y la mezcla de reacción se entibió hasta 0°C. La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 5 min y luego se enfrió hasta -78°C. Una solución de 75b (690 mg, 3.0 mmol) en tetrahidrofurano (3 mL) se agregó gota a gota y la mezcla de reacción se agitó a -78°C por 15 min. Una solución de N-íenil-(bistrifluorometansulfonamida) (1.18 g, 3.3 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) se agregó gota a gota durante 5 min y la mezcla de reacción se agitó a -78°C por 15 min. El baño de enfriamiento se eliminó y la mezcla de reacción se entibió a TA y luego se agitó a TA por 90 min. El solvente se evaporó y éter de dietilo (30 mL) se agregó. La solución se enfrió a 5°C y se lavó con solución de hidróxido de sodio 1 M fría (3 x 30 mL). La capa orgánica se separó, lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y el solvente se evaporó para proporcionar el compuesto del título (960 mg, 88%) como un aceite color amarillo que se usó directamente en la siguiente etapa.
, Compuesto 75d Una solución de 75c (470 mg, 1.3 mmol) y tri-n-butilamina (721 mg, 0.93 mL, 3.9 mmol) en N,N-dimetilformamida (3 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. El dicloruro de Bis(trifenilfosfina)paladio(II) (45 mg, 0.065 mmol) y ácido fórmico (120 mg, 0.1 mL, 2.6 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a 60°C por 90 min. La mezcla de reacción se enfrió a TA y acetato de etilo y agua se agregaron. El extracto orgánico se separó, lavó con agua (x 5), y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrofóbica y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 1:9 para proporcionar el compuesto del título (1.88 g, 74%) como un aceite incoloro. i Compuesto 75e Una solución de 75d (150 mg, 0.7 m ol) en tetrahidrofurano (3 mL) se agitó a 5°C bajo nitrógeno. Una solución de litio hidróxido monohidrato (59 mg, 1.4 mmol) en agua (1 mL) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a 5°C por 30 min y luego a TA por 5 h. El metanol (0.5 mL) se agregó para dar una solución clara y la mezcla de reacción se agitó a TA por 22 h. El solvente se evaporó. Agua (2 mL) se agregó al residuo y la solución se acidificó hasta pH 2 con ácido clorhídrico 2 M. Salmuera se agregó y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera. El extracto orgánico se separó, se lavó con agua (x 5), y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrofóbica y el filtrado se evaporó para proporcionar el compuesto del título (117 mg, 90%) como un aceite incoloro.
, Compuesto 75f Una mezcla de 75e (96 g, 0.5 mmol) y éster de (R)-1-(7-bromo-quinolin-2-il)-etilo del ácido acético (147 mg, 0.5 mmol) en acetonitrilo (4 mL) se agitó a TA. Tri(o-tolil)fosfina (46 mg, 0.15 mmol), acetato de paladio(II) (17 g, 0.075 mmol) y trietilamina (101 mg, 0.14 mL, 1.0 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se calentó en un reactor de microondas a 100°C por 20 min. El solvente se evaporó. Agua y acetato de etilo se agregó y la mezcla se acidificó hasta pH 3-4 con ácido clorhídrico 2 M. La mezcla se extrajo con acetato de etilo y los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrofóbica y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 1:1 hasta acetato de etilo hasta acetato de etilo/metanol 5:1. El residuo se co-evaporó con acetato de etilo y luego dicloro etano y se secó para proporcionar el compuesto del título (134 mg, 67%) como una goma color amarillo.
, , ¡ , Compuesto 75g Una solución de éster de metilo del ácido (S)—1—[(S)—2— ((S)-2-tert-butoxicarbonilamino-3-metil-butirilamino)-propíonil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (150 mg, 0.36 mmol) en diclorometano (5 mL) se agitó a 0°C bajo nitrógeno. El trifluorometansulfonato de trimetilsililo (160 mg, 0.13 mL, 0.72 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a 0°C por 1 hora. N,N-Diisopropiletilamina (186 mg, 0.25 mL, 1.44 mmol) se agregó y el solvente se evaporó para proporcionar ster de metilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0.36 mmol) como un sólido blanco que se usó sin purificación adicional. Una solución de 75f (134 mg, 0.33 mmol) en acetonitrilo se agitó a 0°C bajo nitrógeno. Una solución de éster de metilo del ácido (S)-1-[(S)-2-((S)-2-amino-3-metil-butirilamino)-propionil]-hexahidro-piridazin-3-carboxílico (0.36 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (129 mg, 0.17 mL, 1.0 mmol) en acetonitrilo (5 mL) se agregó seguido por 2- (IH-7-azabenzotriazol-l-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio (175 mg, 0.46 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 0°C por 10 in y luego a TA por 1 hora. El solvente se evaporó y el residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. Los extractos orgánicos se combinaron y lavaron con salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrofóbica y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 1:5 hasta acetato de etilo para proporcionar el compuesto del título (165 mg, 72%) como un sólido color amarillo.
Compuesto 75h Una solución de 75g (35 g, 0.05 mol) en tetrahidrofurano (0.5 L) se agitó a 5°C bajo nitrógeno. Una solución de litio hidróxido onohidrato (8.4 mg, 0.2 mmol) en agua (0.5 mL) se agregó seguido por metanol (0.5 mL) y la mezcla de reacción se agitó a 5°C por 1 hora. El ácido clorhídrico 1 M (0.2 L) se agregó y el solvente se evaporó. El residuo se co-evaporó con metanol/tolueno (1:1, x 2) seguido por tolueno (x 2). El residuo se trituró con éter de dietilo (x 3) y se secó para proporcionar el compuesto del título (0.05 mmol) como un sólido amarillo pálido que se usó crudo en la siguiente reacción.
, , Compuesto 75 Una solución de 2-metil-6-nitrobenzoico anhídrido (86 mg, 0.25 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (46 mg, 0.38 mmol) en 1,2-dicloroetano (16 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. Una malla molecular (400 mg) se agregó y la suspensión se calentó a 50°C. Una solución de 75h crudo (0.05 m ol) en N,N-dimetilformamida (2 mL) se agregó gota a gota durante 4 h y la mezcla de reacción se agitó a 50°C por 1 hora adicional. La mezcla de reacción se enfrió a TA y la mezcla se filtró a través de celite. La almohadilla filtro se lavó con acetato de etilo y el filtrado se evaporó. El residuo se diluyó con acetato de etilo y la solución se lavó con salmuera (x 3). La capa orgánica se separó y evaporó. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrofóbica y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del titulo (4.2 mg, 13%) como un sólido blanco. XH RMN (300 MHz, CD3OD) 1.00 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.47 (s, 3H), 1.63 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.64-1.70 (m, 2H), 1.73 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.85-2.10 (m, 3H), 2.70-2.80 (m, 1H), 3.78-3.87 (, 1H), 3.87 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 4.03-4.07 (m, 1H), 4.26-4.46 (m, 5H), 5.72 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 5.93 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 6.38 (s, 2H), 7.42 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.61 (br s, 1H), 7.78-7.86 (m, 2H), 8.22 (d, J = 8.5 Hz, 1H). LCMS (m/z) 622.2 [M+H], Tr = 2.24 ruin.
EJEMPLO 76 ¡ , l Compuesto 76 Una suspensión de 75h crudo (200 mg, 0.25 mmol) en tetrahidrofurano (100 mL) se agitó a TA bajo nitrógeno. N,N-diisopropiletilamina (161 mg, 0.22 mL, 1.25 mmol) y -4-dimetilaminopiridina (15 mg, 0.125 mmol) se agregó y la suspensión se agitó por 5 min.2- (IH-7-Azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametí1 uronio hexafluorofosfato metanaminio (133 mg, 0.35 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a TA por 2 h. El 2- (IH-7-azabenzotriazol-l-il)-1,1,3,3-tetrametil uronio hexafluorofosfato metanaminio adicional (57 mg, 0.15 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó a TA por 1 hora. El solvente se evaporó y el residuo se diluyó con acetato de etilo y ácido clorhídrico 2 M. La solución orgánica se separó y lavó con agua, solución de carbonato ácido de sodio saturado, y salmuera. La solución orgánica se filtró a través de una frita hidrofóbica y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando iso-hexano/acetato de etilo 7:3 hasta acetato de etilo hasta acetato de etilo/metanol 9:1. El residuo se purificó por HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del titulo (20 mg, 14%) como un sólido blanco.1H RMN (500 MHz, CD3OD) 1.00 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.68 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.73 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.74-2.05 (m, 5H), 2.72-2.80 (m, 1H), 3.70 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.81-4.07 (m, 4H), 4.35-4.47 (m, 3H), 5.77 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 5.92 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 6.43 (s, 2H), 7.40 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.82 (s, 2H), 8.21 (d, J = 8.5 Hz, 1H). LCMS (m/z) 582.2 [M+H], Tr = 1.66 in.
Ejemplos Biológicos: Inhibición de Actividad de Peptidil- Prolil Isomerasa (PPIase) El ensayo PPIase se basó en el procedimiento reportado por Janowski et al. {Anal . Biochem . 1997, 252, 299). La solución amortiguadora de ensayo (1980L de una solución que contiene 35 mM HEPES pH 7.8, 50M DTT, y 0.01% NP40) se preequilibró a 10°C en una cubeta de cuarzo equipada con un agitador superior. A esta solución se le agregó 10L de compuesto en DMSO (concentración final: DMSO 0.5%), seguido por 5L de una solución madre 2M de ciclofilina A (concentración final: 5 nM). La reacción se inició con la adición de 5L de 40 mM del tetrapéptido Succ-AAPF-pNA (concentración final 100M) disuelto en una solución de 0.5M LiCl en trifluoroetanol. Una vez iniciada la reacción, absorbancia del substrato de péptido se controló a 330nm por cinco minutos usando un espectrómetro Beckman Coulter DU800. Las curvas de progreso se ajustaron con un modelo de caída exponencial simple para calcular velocidades. Los valores IC50 se calcularon con un ajuste logístico de cuatro parámetros usando software GraphPad Prism.
Ensayo de Enlace Competitivo A TR-FRET de Ciclofilina La potencia del inhibidor se midió usando un ensayo de enlace competitivo con una lectura de transferencia de energía de resonancia de fluorescencia resuelta en el tiempo. A una solución amortiguadora de reacción que consiste de HEPES 35mM pH 7.8, NaCl lOOmM, 0.01% NP-40 (Pierce), DTT lmM, y DMSO 1% se agregaron los siguientes: 5 nM de ciclofilina A modificada en la terminal N con una etiqueta de afinidad 8><histidina (CypA); 150 nM de ciclosporina A modificada con un ligador enlazado a un fluoróforo Cy5 (CsA-Cy5); anticuerpo anti-(6*His) Eu-etiquetado 1 nM (Perkin-Elmer); y compuesto de prueba en una de diversas concentraciones. El volumen total de la solución de ensayo fue 100L. Después de una incubación de dos horas, el TR-FRET se midió usando un lector de placa Perkin Elmer Envision (excitación a 340nm, emisión medida a 590n y 665nm). La señal se calculó como la relación de la emisión a 665nm a la de 590nm. Un valor IC50 se calculó usando un ajuste logístico de cuatro parámetros.
Cuando se probaron, ciertos compuestos de esta invención se encontraron para inhibir enlace de ciclofilina como se indica en la Tabla 1 a continuación. Los IC50 se presentan como intervalos en donde A es £ 100 nM, B es 101 hasta 1000 nM y C es 1001 hasta 10,000 nM.
Actividad Antiviral La actividad antiviral de un compuesto se puede medir usando protocolos de separación por exclusión estándar: por ejemplo, ensayo de inmunodetección de Flavivirus basado en célula y ensayo de efecto citopático de Flavivirus basado en célula como se describe en Número de Publicación de Patente de E.U.A. US/20130022573, que se incorpora en la presente como referencia en su totalidad.
Un aspecto de la invención se refiere a métodos para inhibir infecciones virales, que comprenden la etapa de tratar una muestra o sujeto que se sospecha que necesita tal inhibición con una composición de la invención. La actividad antiviral de un compuesto de la invención se puede medir usando protocolos de separación por exclusión estándar que se conocen.
La actividad anti-HCV de los compuestos de esta invención se probó en una linea célular Huh-7 de hepatoma humano que alberga un replicón HCV. El ensayo consta las siguientes etapas: Etapa 1 (preparación de conpuesto y dilución en serie) : La dilución en serie se realizó en 100% DMSO en una placa de 384 pozos. Una solución que contiene un compuesto a concentración de 225 veces de la dilución final de partida en concentración en serie se preparó en DMSO 100% y 15 mL se agregó a los pozos pre-especificados en la columna 3 o 13 de una placa de 384 pozos de polipropileno. El resto de la placa de 384 pozos se llenó con 10 pL DMSO 100% excepto por columnas 23 y 24, donde 10 pL de 500 pM un inhibidor de proteasa HCV (ITMN-191) en DMSO 100% se agregó. El inhibidor de proteasa HCV se usó un control de inhibición 100% de replicación HCV. La placa luego se colocó en una estación de trabajo Biomek FX para iniciar la dilución en serie. La dilución en serie se realizó por diez ciclos de dilución de 3 veces desde la columna 3 hasta 12 o desde columna 13 hasta 22.
Etapa 2 (preparación de placa de cultivo celular y adición de compuesto) : A cada pozo de una placa de 384 pozos de polipropileno negro, 90 pL de medio celular que contiene 1600 células de replicón HCV Huh-7 suspendidas se agregó con una estación de trabajo Biotek uFlow. Un volumen de 0.4 pL de la solución de compuesto se transfirió desde la dilución en placa de serie hasta la placa de cultivo celular en una estación de trabajo Biomek FX. La concentración DMSO en la condición de ensayo final fue 0.44%. Las placas se incubaron por 3 dias a 37°C con CO25% y 85% de humedad.
Etapa 3 (detección de citotoxicidad e inhibición de replicación viral) : a) Evaluación de citotoxicidad: El medio en la placa de cultivo celular de 384 pozos se aspiró con un lavador de placa Biotek EL405. Un volumen de 50 mL de una solución que contiene Calcein AM 400 nM en PBS 100% se agregó a cada pozo de la placa con una estación de trabajo Biotek uFlow. La placa se incubó por 30 minutos a TA antes de que la señal de fluorescencia (emisión 490 nm, excitación 520 nm) se midiera con un lector de placa Perkin Elmer Envision. b) Evaluación de inhibición de replicación viral: La solución de calceina-PBS en la placa de cultivo celular de 384 pozos se aspiró con un lavador de placa Biotek EL405. Un volumen de 20 pL de solución amortiguadora de luciferasa Dual-Glo (Promega, Reactivo de Ensayo de Luciferasa Dual-Glo, cat. #E298B) se agregó a cada pozo de la placa con una Estación de trabajo Biotek uFlow. La placa se incubó por 10 minutos a TA. Un volumen de 20 pL de una solución que contiene mezcla 1:100 de substrato Dual-Glo Stop & Glo (Promega, Reactivo de Ensayo de Luciferasa Dual-Glo, cat. #E313B) y solución amortiguadora Dual-Glo Stop & Glo (Promega, Reactivo de Ensayo de Luciferasa Dual-Glo, cat. #E314B) se agregó luego a cada pozo de la placa con una Estación de trabajo Biotek uFlow. La placa se incubó a TA por 10 minutos antes de que la señal de luminiscencia se midió con un lector de placa Perkin Elmer.Envision.
Etapa 4 (cálculo) : El porcentaje de citotoxicidad se determinó por conversión de calceina AM a producto de fluorescencia. La señal de fluorescencia promedio de los pozos de control DMSO se definió como 100% no tóxica. La señal de fluorescencia individual de pozo tratado con compuesto de prueba se dividió por la señal promedio de pozos de control DMSO y luego se multiplicó por 100% para conseguir el porcentaje de viabilidad. El porcentaje de actividad de replicación anti-HCV se determinó por la señal de luminiscencia del pozo de prueba comparado con pozos de controles DMSO. La señal de fondo se determinó por el promedio de señal de luminiscencia de los pozos tratados con inhibidor de proteasa HCV y se restó de la señal de los pozos de prueba asi como los pozos de control DMSO. Después de las diluciones en serie de 3 veces, los valores EC50 y CC50 se calcularon al ajustar el % de inhibición en cada concentración a la siguiente ecuación: % de inhibición = 100%/ [ (EC50/ [I] ) b + 1] donde b es coeficiente de Hill. Ver, para referencia, Hill, A, V., The Possible Effects of the Aggregation of the molecules of Heemoglobin on its Dissociation Curves, J. Physiol. 40: iv-vii. (1910). Valores de inhibición % en una concentración especifica, por ejemplo 2mM, también se puede derivar de la fórmula anterior.
Cuando se prueban, ciertos compuestos de esta invención se encontraron para inhibir replicación viral como se indica en la Tabla 1. Los EC50 se presentan como un % de inhibición.
Tabla 1 Las respuestas farmacológicas y bioquímicas específicas observadas pueden variar de acuerdo a y dependiendo del compuesto activo particular seleccionado o si se presentan portadores farmacéuticos, así como el tipo de formulación y modo de administración empleado, y tales variaciones esperadas o diferencias en los resultados se contemplan de acuerdo con la práctica de la presente invención.
Aunque las modalidades especificas de la presente invención se ilustran en la presente y describen en detalle, la invención no se limita a ello. Las descripciones detalladas anteriores se proporcionan como ejemplo de la presente invención y no debe ser interpretado como constituyente de ninguna limitación de la invención.

Claims (26)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiendo descrito la presente invención, se considera como novedad, y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de Fórmula I: i Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos, caracterizado porque: A1 es alquileno(C2-C5), alquenileno(C2-C5), alquinileno(C2-C5), -O-alquileno(C2-C4), -O-alquenileno(C2-C4), arileno, aril alquileno(?1-?2), heterocicloalquileno o heterocicloalquil alquileno(Ci-C2), en donde un átomo de carbono sp3 de A1 se substituye opcionalmente con uno o más alquilo (C1-C4); A2 es arileno o heteroarileno, en donde A2 se substituye opcionalmente con halo X1 es -O-, -NH- o -N(alquilo(Ci-C4))-; Rla y Rlb son independientemente H, alquilo (C1-C4), alquenilo(C2-C4) o alquinilo(C2-C4); R2 es H, alquilo(C1-C4), alquenilo(C2-C4) o alquinilo(C2-c4) ; R3a y R3b son independientemente H o alquilo(Ci-C8); R4a y R4b son independientemente H, -OH, alcoxi(C1-C4), halo alcoxi(C1-C4) o alquilo(Ci-C8); R5 es H, alquilo(C1-C4), alquenilo(C2-C4) o alquinilo(C2-C4), o R5 forma una porción cíclica junto con -N(alquilo(Ci-C4))- de X1 o arileno de A2; y R6 es H o alquilo(C1-C4).
2. El compuesto de conformidad con la Reivindicación 1, caracterizado porque A1 es etileno, propenileno, butenileno, etileno, propileno, butileno, oxipropileno, oxipropenileno, pirazolileno, fenileno o pirimidinileno.
3. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque A2 es isoquinolinileno, fenileno o halofenileno.
4. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque X1 es -O- o -NH-; uno de Rla y Rlb es H y el otro es metilo; R2 es iso-propilo; R5 es metilo y R6 es H o metilo.
5. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque R3£ es H o metilo/ R3b es H; R4a es H, -OH, metoxi, trifluoroetoxi; y R4b es H.
6. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque es un compuesto de la Fórmula II: I Fórmula II o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos, en donde: ¾-CH2-CH2-¾ 5-CH=CH-CH2-2- A es etileno, - R3a es H o alquilo (C1-C4); R4a es H, -OH, alcoxi(Ci-C4), halo alcoxi(C1-C4) o alquilo(Ci-C8); y R5 es H o alquilo(C1-C4).
7. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque A es heteroarileno; A1 es alquileno (C2-C5), alquenileno(C2-C5), alquinileno(C2-C5), en donde A1 se substituye opcionalmente con uno o más alquilo(C1-C4); R3a es H o alquilo(0c-08); y R4a es H, -OH o alcoxi(C1-C4).
8. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque es o o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero , éster o profármaco de los mismos.
9. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque A2 es arileno; y A1 es alquileno(C2-C5), alquenileno(C2-C5), alquinileno(C2-C5), -O-alquileno(C2-C5), -O-alquenileno(C2-C4), en donde A1 se substituye opcionalmente con uno o más alquilo (C1-C4); R3a es H o alquilo(C1-C4); y R4a es H, -OH, alcoxi(C1-C4) o halo alcoxi(C1-C4).
10. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque es o o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos.
11. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque A2 es arileno; y A1 es pirazolileno, fenileno o pirimidinileno.
12. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque es I - I _ I o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos.
13. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque A2 es haloarileno; y A1 es -O-alquileno (C2-C5) o -O-alquenileno (C2-C4) .
14. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque es .- I o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos.
15. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque A1 es alquileno (C2-C5) o alquenileno(C2-C5); R5 es metilo, o R5 forma junto con ar e , R forma junto con -N (alquilo (C1-C4) ) - de X1; y R6 es H o metilo .
16. El compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque es - o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos.
17. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de conformidad con cualquier reivindicación precedente o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos y un excipiente farmacéuticamente aceptable .
18. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 17, caracterizada además porque comprende al menos un agente terapéutico adicional seleccionado del grupo que consiste de interferones, ribavirina, inhibidores de proteasa HCV NS3, inhibidores HCV NS5a, inhibidores de núcleosidos o nucleótidos de polimerasa HCV NS5B, inhibidores de no nucleósidos de polimerasa HCV NS5B, y agonistas TLR-7; o una mezcla de los mismos.
19. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque al menos un agente terapéutico de adición es ribavirina, telaprevir, boceprevir o sofosbuvir.
20. Un método para tratar una infección viral Flaviviridae en un paciente humano que necesita del mismo, caracterizado porque comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de conformidad con una de cualesquiera de las reivindicaciones 1-16 o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos.
21. El método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque la infección viral es causada por un virus de la Hepatitis B o un virus de la Hepatitis C.
22. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque la infección viral causa una enfermedad seleccionada del grupo que consiste de fiebre de dengue, fiebre amarilla, hepatitis C, encefalitis Japanesa, enfermedad de la selva Kyasanur, encefalitis del valle de Murray, encefalitis de St. Louis, encefalitis transmitida por garrapatas o encefalitis del Nilo Occidental.
23. Un método para tratar una infección viral Coronaviridae en un paciente humano que necesita del mismo, caracterizado porque comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de conformidad con una de cualesquiera de las reivindicaciones 1-16 o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezclas de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos.
24. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque la infección viral es causada por un coronavirus SARS.
25. El método de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque la infección viral causa una enfermedad seleccionada del grupo que consiste de síndrome respiratorio agudo severo (SARS), cáncer, inflamación, obesidad, síndrome de inmunodeficiencia adquirida (AIDS), o cirrosis.
26. Un método para proporcionar inunomodulación a un paciente humano que necesita del mismo, caracterizado porque comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de conformidad con una de cualesquiera de las reivindicaciones 1-16 o una sal farmacéuticamente aceptable, isótopo, estereoisómero, mezcla de estereoisómeros, tautómero, éster o profármaco de los mismos.
MX2014014768A 2012-06-08 2013-06-07 Inhibidores macrociclicos de virus flaviviridae. MX2014014768A (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261657553P 2012-06-08 2012-06-08
PCT/US2013/044809 WO2013185090A1 (en) 2012-06-08 2013-06-07 Macrocyclic inhibitors of flaviviridae viruses

Publications (1)

Publication Number Publication Date
MX2014014768A true MX2014014768A (es) 2015-05-11

Family

ID=48670106

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MX2014014768A MX2014014768A (es) 2012-06-08 2013-06-07 Inhibidores macrociclicos de virus flaviviridae.

Country Status (21)

Country Link
US (3) US9090653B2 (es)
EP (1) EP2859009B1 (es)
JP (1) JP6209600B2 (es)
KR (1) KR20150040266A (es)
CN (1) CN104662033B (es)
AU (1) AU2013271413B2 (es)
BR (1) BR112014030649A2 (es)
CA (1) CA2875718A1 (es)
EA (1) EA201492205A1 (es)
ES (1) ES2656087T3 (es)
HK (1) HK1210483A1 (es)
IL (1) IL236006A0 (es)
IN (1) IN2014MN02658A (es)
MX (1) MX2014014768A (es)
NO (1) NO2887898T3 (es)
NZ (2) NZ724616A (es)
PL (1) PL2859009T3 (es)
PT (1) PT2859009T (es)
SG (1) SG11201408045UA (es)
SI (1) SI2859009T1 (es)
WO (1) WO2013185090A1 (es)

Families Citing this family (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6209601B2 (ja) 2012-06-08 2017-10-04 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド フラビウイルス科ウイルスの大環状阻害剤
PT2859009T (pt) 2012-06-08 2018-01-18 Gilead Sciences Inc Inibidores macrocíclicos dos vírus flaviviridae
AR091279A1 (es) 2012-06-08 2015-01-21 Gilead Sciences Inc Inhibidores macrociclicos de virus flaviviridae
DK3239143T3 (da) * 2014-12-24 2023-04-11 Lg Chemical Ltd Biarylderivat som gpr120-agonist
JP7381190B2 (ja) 2014-12-26 2023-11-15 エモリー・ユニバーシテイ Ｎ４－ヒドロキシシチジン及び誘導体並びにそれに関連する抗ウイルス用途
HUE038059T2 (hu) 2015-03-04 2018-10-29 Gilead Sciences Inc Toll-like receptor moduláló 4,6-diamino-pirido[3,2-D]pirimidin vegyületek
EP3341373A1 (en) 2015-08-26 2018-07-04 Gilead Sciences, Inc. Deuterated toll-like receptor modulators
CN109562107A (zh) 2016-05-10 2019-04-02 C4医药公司 用于靶蛋白降解的杂环降解决定子体
WO2017197036A1 (en) 2016-05-10 2017-11-16 C4 Therapeutics, Inc. Spirocyclic degronimers for target protein degradation
CN109641874A (zh) 2016-05-10 2019-04-16 C4医药公司 用于靶蛋白降解的c3-碳连接的戊二酰亚胺降解决定子体
BR102017010009A2 (pt) 2016-05-27 2017-12-12 Gilead Sciences, Inc. Compounds for the treatment of hepatitis b virus infection
SG11201809893WA (en) 2016-05-27 2018-12-28 Gilead Sciences Inc Methods for treating hepatitis b virus infections using ns5a, ns5b or ns3 inhibitors
JOP20190024A1 (ar) 2016-08-26 2019-02-19 Gilead Sciences Inc مركبات بيروليزين بها استبدال واستخداماتها
EP3507276B1 (en) 2016-09-02 2021-11-03 Gilead Sciences, Inc. Toll like receptor modulator compounds
WO2018045150A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Gilead Sciences, Inc. 4,6-diamino-pyrido[3,2-d]pyrimidine derivaties as toll like receptor modulators
CN117402852A (zh) 2016-10-14 2024-01-16 精密生物科学公司 对乙肝病毒基因组中的识别序列特异性的工程化大范围核酸酶
TW202402300A (zh) 2017-01-31 2024-01-16 美商基利科學股份有限公司 替諾福韋埃拉酚胺(tenofovir alafenamide)之晶型
JOP20180008A1 (ar) 2017-02-02 2019-01-30 Gilead Sciences Inc مركبات لعلاج إصابة بعدوى فيروس الالتهاب الكبدي b
JOP20180040A1 (ar) 2017-04-20 2019-01-30 Gilead Sciences Inc مثبطات pd-1/pd-l1
AU2018319538B9 (en) 2017-08-22 2021-05-27 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic heterocyclic compounds
CA3082191C (en) 2017-12-07 2021-09-21 Emory University N4-hydroxycytidine and derivatives and anti-viral uses related thereto
US11203610B2 (en) 2017-12-20 2021-12-21 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2′3′ cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the sting adaptor protein
CN111566120B (zh) 2017-12-20 2023-09-29 捷克共和国有机化学与生物化学研究所 活化sting转接蛋白的具有膦酸酯键的3’3’环状二核苷酸
BR112020016466A2 (pt) 2018-02-13 2020-12-15 Gilead Sciences, Inc. Composto, composição farmacêutica, métodos para inibir pd-1, pd-l1 e/ou a interação de pd-1/pd-l1, para tratar câncer e para aprimorar a função de células-t em pacientes com hepatite b crônica (chb), e, kit para tratar ou prevenir câncer ou uma doença ou condição.
CA3091142C (en) 2018-02-26 2023-04-11 Gilead Sciences, Inc. Substituted pyrrolizine compounds and uses thereof
WO2019195181A1 (en) 2018-04-05 2019-10-10 Gilead Sciences, Inc. Antibodies and fragments thereof that bind hepatitis b virus protein x
TW202005654A (zh) 2018-04-06 2020-02-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 ２，２，─環二核苷酸
KR20200140867A (ko) 2018-04-06 2020-12-16 인스티튜트 오브 오가닉 케미스트리 앤드 바이오케미스트리 에이에스 씨알 브이.브이.아이. 3'3'-사이클릭 다이뉴클레오티드
TWI818007B (zh) 2018-04-06 2023-10-11 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 2'3'-環二核苷酸
US11142750B2 (en) 2018-04-12 2021-10-12 Precision Biosciences, Inc. Optimized engineered meganucleases having specificity for a recognition sequence in the Hepatitis B virus genome
US10899735B2 (en) 2018-04-19 2021-01-26 Gilead Sciences, Inc. PD-1/PD-L1 inhibitors
WO2019211799A1 (en) 2018-05-03 2019-11-07 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3'-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide
CN112384283B (zh) 2018-07-06 2023-08-15 吉利德科学公司 治疗性的杂环化合物
AU2019297362B2 (en) 2018-07-06 2022-05-26 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic heterocyclic compounds
CA3103286C (en) 2018-07-13 2023-05-09 Gilead Sciences, Inc. Pd-1/pd-l1 inhibitors
WO2020028097A1 (en) 2018-08-01 2020-02-06 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of (r)-11-(methoxymethyl)-12-(3-methoxypropoxy)-3,3-dimethyl-8-0x0-2,3,8,13b-tetrahydro-1h-pyrido[2,1-a]pyrrolo[1,2-c] phthalazine-7-c arboxylic acid
AU2019366355B2 (en) 2018-10-24 2022-10-13 Gilead Sciences, Inc. PD-1/PD-L1 inhibitors
PE20211655A1 (es) 2018-10-31 2021-08-24 Gilead Sciences Inc Compuestos de 6-azabencimidazol sustituidos como inhibidores de hpk1
TWI721624B (zh) 2018-10-31 2021-03-11 美商基利科學股份有限公司 經取代之6-氮雜苯并咪唑化合物
US11766447B2 (en) 2019-03-07 2023-09-26 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3′3′-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide as sting modulator
US20220152078A1 (en) 2019-03-07 2022-05-19 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof
JP7350872B2 (ja) 2019-03-07 2023-09-26 インスティチュート オブ オーガニック ケミストリー アンド バイオケミストリー エーエスシーアール，ヴイ．ヴイ．アイ． ３’３’－環状ジヌクレオチドおよびそのプロドラッグ
TWI751517B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
TWI751516B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
TWI826690B (zh) 2019-05-23 2023-12-21 美商基利科學股份有限公司 經取代之烯吲哚酮化物及其用途
CA3140708A1 (en) 2019-06-18 2020-12-24 Helen Horton Combination of hepatitis b virus (hbv) vaccines and pyridopyrimidine derivatives
CR20210687A (es) 2019-06-25 2022-03-03 Gilead Sciences Inc PROTEÍNAS DE FUSIÓN FLT3L-Fc Y MÉTODOS DE USO
WO2021011891A1 (en) 2019-07-18 2021-01-21 Gilead Sciences, Inc. Long-acting formulations of tenofovir alafenamide
WO2021034804A1 (en) 2019-08-19 2021-02-25 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical formulations of tenofovir alafenamide
JP7398556B2 (ja) 2019-09-30 2023-12-14 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｈｂｖワクチン及びｈｂｖを治療する方法
CN115894606A (zh) * 2019-11-04 2023-04-04 锐新医药公司 Ras抑制剂
JP2022553859A (ja) * 2019-11-04 2022-12-26 レボリューション メディシンズ インコーポレイテッド Ｒａｓ阻害剤
BR112022008534A2 (pt) 2019-11-04 2022-08-09 Revolution Medicines Inc Compostos, composição farmacêutica, conjugado e métodos para tratar câncer e para tratar um distúrbio relacionado à proteína ras
CN116057068A (zh) 2019-12-06 2023-05-02 精密生物科学公司 对乙型肝炎病毒基因组中的识别序列具有特异性的优化的工程化大范围核酸酶
CN115605493A (zh) 2020-03-20 2023-01-13 吉利德科学公司（Us） 4′-c-取代的-2-卤代-2′-脱氧腺苷核苷的前药及其制备和使用方法
US20220119426A1 (en) 2020-08-07 2022-04-21 Gilead Sciences, Inc. Prodrugs of phosphonamide nucleotide analogues and their pharmaceutical use
US11690915B2 (en) 2020-09-15 2023-07-04 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
TWI815194B (zh) 2020-10-22 2023-09-11 美商基利科學股份有限公司 介白素2-Fc融合蛋白及使用方法
KR20240006683A (ko) 2021-05-13 2024-01-15 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 TLR8 조절 화합물과 항-HBV siRNA 치료제의 조합물
EP4359389A1 (en) 2021-06-23 2024-05-01 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CN117377671A (zh) 2021-06-23 2024-01-09 吉利德科学公司 二酰基甘油激酶调节化合物
CN117355531A (zh) 2021-06-23 2024-01-05 吉利德科学公司 二酰基甘油激酶调节化合物
KR20240005901A (ko) 2021-06-23 2024-01-12 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 디아실글리세롤 키나제 조절 화합물
GB202207348D0 (en) * 2022-05-19 2022-07-06 Cypralis Ltd Macrocyclic compounds and uses thereof

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR006514A1 (es) * 1995-07-04 1999-09-08 Sandoz Ag Un macrolido, sus usos, un proceso para producirlo, un aislado biologicamente puro capaz de producirlo, y una composicion farmaceutica quelo comprende
US6124453A (en) 1995-07-04 2000-09-26 Novartis Ag Macrolides
DE10239042A1 (de) 2002-08-21 2004-03-04 Schering Ag Makrozyclische Pyrimidine, deren Herstellung und Verwendung als Arzneimittel
US20050159345A1 (en) 2002-10-29 2005-07-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Composition for the treatment of infection by Flaviviridae viruses
MX2007015909A (es) 2005-06-16 2008-03-06 Cv Therapeutics Inc Profarmacos de antagonistas del receptor de adenosina a2b.
JP2008546708A (ja) * 2005-06-17 2008-12-25 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト Ｈｃｖにおけるサングリフェリンの使用
EP2011786A1 (en) 2007-07-05 2009-01-07 Laboratorios del Dr. Esteve S.A. Indane-amine derivatives, their preparation and use as medicaments
CL2008003384A1 (es) 2007-11-14 2009-12-11 Enanta Pharm Inc Compuestos derivados de quinoxalina macrocíclica, inhibidores de serina proteasa; composicion farmaceutica que los comprende; y su uso en el tratamiento de la hepatitis c.
JP5309159B2 (ja) 2008-01-09 2013-10-09 コングク ユニバーシティ インダストリアル コーオペレーション コーポレーション バキュロウイルスを利用したワクチン
US20100080770A1 (en) 2008-09-29 2010-04-01 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
RU2016120007A (ru) * 2008-12-23 2018-11-13 Орто-Макнейл-Янссен Фармасьютикалз, Инк Способы и промежуточные соединения для получения макроциклического ингибитора протеазы вируса гепатита c
US9296698B2 (en) 2009-11-23 2016-03-29 Amgen Inc. Amino heteroaryl compounds as beta-secretase modulators and methods of use
SG10201500298PA (en) 2010-01-15 2015-03-30 Gilead Sciences Inc Inhibitors of flaviviridae viruses
US9227971B2 (en) 2010-01-19 2016-01-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Pyrazolo[1,5-a]pyrimidine compounds as mTOR inhibitors
WO2011098808A1 (en) 2010-02-09 2011-08-18 Biotica Technology Limited Sanglifehrin based compounds
GB201008123D0 (en) 2010-05-17 2010-06-30 Biotica Tech Ltd Novel compounds
EP2618665A4 (en) 2010-09-21 2014-08-20 Merck Sharp & Dohme HCV NS3 PROTEASE INHIBITORS
AR084217A1 (es) 2010-12-10 2013-05-02 Gilead Sciences Inc Inhibidores macrociclicos de virus flaviviridae
JP6209601B2 (ja) 2012-06-08 2017-10-04 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド フラビウイルス科ウイルスの大環状阻害剤
PT2859009T (pt) 2012-06-08 2018-01-18 Gilead Sciences Inc Inibidores macrocíclicos dos vírus flaviviridae
AR091279A1 (es) 2012-06-08 2015-01-21 Gilead Sciences Inc Inhibidores macrociclicos de virus flaviviridae

Also Published As

Publication number Publication date
US20150274774A1 (en) 2015-10-01
CA2875718A1 (en) 2013-12-12
WO2013185090A1 (en) 2013-12-12
SG11201408045UA (en) 2015-01-29
EA201492205A1 (ru) 2015-10-30
JP2015525220A (ja) 2015-09-03
US9873716B2 (en) 2018-01-23
IL236006A0 (en) 2015-01-29
US20130344029A1 (en) 2013-12-26
ES2656087T3 (es) 2018-02-23
SI2859009T1 (sl) 2017-12-29
AU2013271413B2 (en) 2017-10-19
NZ703066A (en) 2016-10-28
IN2014MN02658A (es) 2015-08-21
KR20150040266A (ko) 2015-04-14
EP2859009B1 (en) 2017-10-18
NO2887898T3 (es) 2018-06-16
JP6209600B2 (ja) 2017-10-04
PT2859009T (pt) 2018-01-18
AU2013271413A1 (en) 2015-01-22
CN104662033A (zh) 2015-05-27
NZ724616A (en) 2018-06-29
US9090653B2 (en) 2015-07-28
US20170190737A1 (en) 2017-07-06
BR112014030649A2 (pt) 2017-06-27
PL2859009T3 (pl) 2018-03-30
CN104662033B (zh) 2018-10-23
US10246486B2 (en) 2019-04-02
HK1210483A1 (en) 2016-04-22
EP2859009A1 (en) 2015-04-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10246486B2 (en) Macrocyclic inhibitors of flaviviridae viruses
USRE47334E1 (en) Macrocyclic inhibitors of flaviviridae viruses
US10472392B2 (en) Macrocyclic inhibitors of flaviviridae viruses