MX2011010214A - Sintesis de 2'-o-fucosil-lactosa. - Google Patents

Abstract

La presente invenci6n se refiere a una síntesis mejorada de un trisacárido de la fórmula, a los compuestos intermedios novedosos utilizados en la síntesis y a la preparación de los compuestos intermedios.

Description

SINTESIS DE 2 ' -O-FUCOSIL-LACTOSA Campo de la Invención La presente invención se refiere a una síntesis novedosa de un trisacárido, a compuestos intermedios novedosos utilizados en la síntesis y a la preparación de los compuestos intermedios.

Antecedentes de la Invención En los presentes años se han incrementado significativamente los esfuerzos de comercialización para la síntesis de carbohidratos complejos incluyendo los oligosacáridos secretados debido a sus papeles en numerosos procesos biológicos que ocurren en los organismos vivos. Los oligosacáridos secretados tales como los oligosacáridos de la leche humana (HMOs) están llegando a ser objetivos comerciales importantes para las industrias de la nutrición y terapéutica. Sin embargo, la síntesis y purificación de estos oligosacáridos y sus compuestos intermedios parmaneció como una tarea desafiante para la ciencia. Uno de los oligosacáridos de la leche humana más importantes es la 2' -0-fucosil-lactosa (a-L- (fucopiranosil- (l-2) -ß-D-galactopiranosil- (l- 4) -D-glucosa, "2'-FL") encontrada en la concentración más elevada en la leche de la madre.

Esquema de Reacción 1. La estructura de la 2 ' -O-fucosil-lactosa REF.223892 Varios papeles biológicos de la 2 ' -O-fucosil-lactosa han sido sugeridos incluyendo pero sin estar limitado a sus efectos prebióticos, antibacterianos, antivirales, mejoradores del sistema inmunológico, mejoradores de desarrollo del cerebro, etc., que la hacen un objetivo atractivo para la producción/aislamiento/purificación a gran escala para las industrias nutricionales y terapéuticas. La 2 ' -O-fucosil-lactosa ha sido sintetizada por las metodologías tanto enzimáticas como químicas, pero no se han desarrollado procesos de producción comercialmente atractivos debido a la falta de métodos de purificación y sintéticos eficientes. De acuerdo con el presente conocimiento científico, la 2'-0-fucosil-lactosa no es un trisacárido cristalino lo cual hace al desarrollo de tecnologías de fabricación a escala grande/costo bajo, adecuadas, para la manufactura de la 2'-0-fucosil - lactosa de alta pureza, un tarea desafiante.

Es posible obtener la 2 ' -O-fucosil-lactosa para cuatro métodos diferentes utilizando el aislamiento, la síntesis química, la síntesis enzimática y las metodologías biotecnológicas .

La primera mención de las HMOs en la literatura apareció en los años 1950. En este tiempo, los oligosacáridos de la leche humana específicos fueron aislados de la leche humana utilizando los protocolos cromatográficos sofisticados. Sin embargo, las purezas de tales muestras aisladas inicialmente son más bien inciertas debido al número elevado de isómeros de los oligosacáridos de la leche humana presentes en la leche de la madre. Por ejemplo, la 2'-0-fucosil-lactosa y la 3 ' -O-fucosil-lactosa ambas están presentes en la leche humana y su separación cromatográfica ha sido resuelta décadas más tarde. Posteriormente se ha encontrado que la leche de otros mamíferos también contiene algunos de estos oligosacáridos pero en concentraciones extremadamente bajas y en proporciones diferentes de la leche humana. En años posteriores se ha hecho un progreso enorme en la producción de la 2 ' -O-fucosil-lactosa por medio de metodologías químicas, enzimáticas y biotecnológicas . Sin embargo, la mayoría de estas metodologías no ha tenido éxito en las producciones a gran escala para proporcionar grandes cantidades de la 2 ' -O-fucosil-lactosa en un intervalo de precio comercialmente atractivo.

La síntesis enzimática de la 2 ' -O-fucosil-lactosa se ha desarrollado significativamente en la última década utilizando tecnologías de mutación/clonación enzimáticas. Un método específico ha transferido una enzima de fucosidasa a una 1 , 2 -a-L-fucosintasa que facilita la síntesis de los enlaces glucosídicos y evita la hidrólisis de estos al mismo tiempo. Desafortunadamente, las 1 , 2-a-L-fucosintasas no están disponibles comercialmente en grandes cantidades y por lo tanto hasta la fecha no son adecuadas para desarrollos de tecnología de fabricación. Un segundo método enzimático ha sido el uso de la a- ( l->2 ) fucosiltransferasa , la a-(l->2)-L-galactosiltransferasa para la creación de enlaces interglucosídicos . Estas enzimas son más bien sensibles y realmente no son adecuadas para preparaciones a gran escala. Adicionalmente , tales enzimas requieren donadores del tipo de los nucleótidos del azúcar que difícilmente están disponibles y son extremadamente costosas. Un tercer método enzimático está basado en el uso de oc-L- fucosidasas de retención pero las selectividades y rendimientos logrados usualmente son más bien modestos.

Ya sea los mamíferos o los microorganismos diseñados genéticamente son utilizados en las metodologías biotecnológicas para la síntesis de la 2 ' -O-fucosil-lactosa . Tales tecnologías utilizan sistemas enzimáticos complejos que facilitan tanto la biosíntesis de los precursores como las glucosilaciones requeridas. Hasta la fecha, tales métodos enfrentan severos obstáculos reguladores de la aprobación debido al uso de organismos diseñados genéticamente y las contaminaciones potenciales de los oligosacáridos no naturales .

Las síntesis químicas hasta ahora todavía no han sido la manera más eficiente económicamente para producir la 2 ' -0-fucosil-lactosa . Los obstáculos de la síntesis química a gran escala son por ejemplo estereoselectividades bajas, rendimientos totales bajos, el uso de metodologías de purificación costosas y sofisticadas tales como la cromatografía en columna, y el uso de reactivos tóxicos no adecuados para los desarrollos de productos alimenticios/terapéuticos .

En el arte previo, todas las síntesis han utilizado un aceptor de lactosa y un donador de L-fucosa totalmente protegido como bloques de construcción esenciales. Las diferencias entre los métodos están relacionadas con las diferentes estrategias de los grupos protectores, las metodologías de glucosilación y las políticas de purificación finales. De acuerdo con nuestro mejor conocimiento, la primera síntesis química de la 2 ' -0-fucosil-lactosa fue publicada en 1981 [1] y desde entonces se han publicado cuatro síntesis químicas [2-5] y una quimioenzimática [6] adicionales .

La primera síntesis química de la 2 ' -O-fucosil-lactosa fue publicada por K. L. Matta y colaboradores en 1981 [1] . utilizando el aceptor de lactosa 6 -O-benzoilado y un donador de bromuro de a-fucopiranosilo tri -O-bencilado seguido por la remoción sucesiva de los grupos protectores. La síntesis comprende varias etapas de purificación cromatográficas en las etapas intermedias para alcanzar un compuesto intermedio final que contenga solamente los grupos protectores de bencilo. Este compuesto se sometió a cromatografía y la muestra purificada fue cristalizada a partir del metanol-éter como un dihidrato. Sin embargo, este dihidrato probó que va a ser más bien inconveniente para la etapa de desprotección posterior (hidrogenólisis catalítica) debido a su solubilidad dificultosa. En efecto, las soluciones extremadamente diluidas solamente se pueden hacer a partir de tal dihidrato en las mezclas de alcoholes/agua/ácido acético haciéndolas difícilmente adecuadas para el desarrollo de una tecnología de producción eficiente. Además, la falta de compuestos intermedios cristalinos desde el principio de la síntesis - en las etapas tanto del disacárido como del trisacárido - previene el desarrollo de tecnologías de fabricación. Las separaciones cromatográficas múltiples y el uso de bromoazúcar per-0-bencilado extremadamente sensible hacen al método más bien inadecuado para los desarrollos de la tecnología.

En 1986 M. Martin-Lomas [2] y colaboradores publicaron la síntesis de la 2 ' -O-fucosil-lactosa preparando un compuesto intermedio de 2'-FL final protegido con isopropilideno . La etapa de desprotección final es la hidrólisis del cetal cíclico utilizando el ácido acético acuoso al 20 %. La estrategia sintética es utilizar un aceptor de lactosa diol muy raro, que es difícil de fabricar en grandes cantidades. Realmente, el propio precursor hace al método no competitivo para desarrollos de tecnología a gran escala. Además, son necesarias numerosas purificaciones cromatográficas para aislamientos intermedios y el método no proporciona compuestos intermedios cristalinos, que podrían facilitar opciones económicas de purificación por medio de la cristalización. La desprotección final es una hidrólisis del cetal cíclico que es una etapa delicada debido a la labilidad acida del residuo de L-fucosa. La condición de desdoblamiento hidrolítico del cetal cíclico tiene que ser más bien suave para prevenir las formaciones de subproductos. Sin embargo, la condición de hidrólisis ligera finaliza con la presencia de los cetales cíclicos no hidrolizados en la mezcla de la reacción. Por consiguiente, el producto de 2 ' -0-fucosil -lactosa sin refinar requiere purificaciones cromatográficas adicionales. Debido a las desventajas listadas anteriormente el método no es adecuado para la fabricación de desarrollos tecnológicos .

K.L. Matta y colaboradores publicaron dos síntesis [3, 4] adicionales que eligen una estrategia del grupo protector que. facilita una hidrólisis asistida por el ácido trifluoroacético del compuesto intermedio de 2'-FL final. Ambas síntesis utilizan el mismo aceptor pero diferentes moléculas donadoras 4 -metoxibenciladas . Un método utiliza el n-pentenil glucósido activado por IDCP mientras que el segundo método está basado en la activación del tioglucósido. El uso del pentenil glucósido con el promotor de IDCP previene por sí mismo el desarrollo de tecnologías de producción debido a la disponibilidad limitada del donador y al alto precio del activador. En el caso de la activación del tioglicósido, la etapa de fucosilación proporcionó una mezcla a/ß en la proporción (9:1) y una purificación cromatográfica más bien difícil fue necesaria para separar el estereoisómero deseado del producto ß no deseado. Por consiguiente, ninguna de estas metodologías tienen potenciales para la producción a escala de multi-toneladas de la 2 ' -O-fucosil - lactosa .

En 1997 H. Hashimoto y colaboradores desarrollaron una estrategia de síntesis que utiliza grupos protectores lábiles de oxidación/ácidos sobre las moléculas tanto aceptoras como donadoras ( isopropilideno y 4 -metoxibencilo) que fueron removidas en los compuestos intermedios de trisacáridos por medio del tratamiento de nitrato de amonio cérico [5] . El método proporciona productos polares que son más bien difíciles de manejar y están contaminados por una gran cantidad de sales de amonio céricas. Tanto la 2'-0-fucosil-lactosa como las impurezas inorgánicas fueron substancias solubles en agua, por consiguiente, fue necesaria la O-acetilación seguida por la desprotección de Zemplén como la etapa de purificación esencial de la síntesis. El método tiene numerosas desventajas tales como el uso de IDCP como un reactivo de unión, la remoción de los grupos de p-metoxibencilo que utilizan CAN (costoso y tóxico) y la O-desacetilación del compuesto intermedio de 2'-FL final utilizando metóxido de sodio en la presencia del producto final sensible a la base. En general, la pureza elevada de la 2 ' -O-fucosil-lactosa no puede ser producida cuando los azúcares reductores son tratados son bases fuertes.

En el año 2001 L. Lay y colaboradores introdujeron una síntesis de la 2 ' -O-fucosil-lactosa utilizando procedimientos tanto enzimáticos como químicos [6] . En este método, un aceptor derivado del ß-bencil-lactósido fue sintetizado utilizando manipulaciones enzimáticas para la instalación de grupos protectores ortogonales de una manera regioselectiva . La última parte de la estrategia sintética consiste de tres etapas, la fucosilación, una O-desacetilación y una hidrogenólisis . Desafortunadamente, el método nunca tuvo un interés de comercialización generado debido a rendimientos relativamente modestos de la acilación asistida por lipasa, el uso de derivados de hidrazina tóxicos y explosivos y la falta de compuestos intermedios cristalinos. Las etapas cromatográficas múltiples desde el principio de la síntesis previnieron el desarrollo de tecnologías de fabricación.

En resumen, las tecnologías de aislamiento nunca han sido capaces de proporcionar grandes cantidades de oligosacáridos de la leche humana incluyendo la 2 ' -O-fucosil-lactosa debido al gran número de oligosacáridos presentes en la leche humana. Adicionalmente, la presencia de los regioisómeros caracterizados por las estructuras extremadamente semejantes hicieron además a las tecnologías de separación no exitosas. Las metodologías enzimáticas padecen de la disponibilidad baja de las enzimas, los precios extremadamente elevados de los donadores de nucleótidos del azúcar y las dificultades reguladoras debido al uso de las enzimas producidas en organismos modificados genéticamente. La preparación de los oligosacáridos de la leche humana por medio de biotecnología tiene obstáculos reguladores formidables debido a la formación potencial de varios productos de glucosilación no naturales. Hasta la fecha, todos los métodos químicos desarrollados para la síntesis de la 2 ' -O-fucosil-lactosa tienen varias desventajas que previnieron la preparación de cantidades aún de multigramos de la 2 ' -0-fucosil-lactosa . La desventaja más severa de los métodos químicos es la falta de diseño para los compuestos intermedios cristalinos para facilitar las metodologías de purificación a bajo costo y. para mejorar las oportunidad de escalamiento. Por consiguiente, la demanda para el desarrollo de un método sintético robusto adecuado para la producción de la 2 ' -O-fucosil-lactosa se ha ido incrementando.

La presente invención proporciona una metodología adecuada para la fabricación a gran escala de la 2'-0-fucosil-lactosa y compuestos intermedios novedosos para la síntesis de la 2 ' -O-fucosil-lactosa . La invención está basada en la utilización de la hidrogenólisis de las porciones de 0-bencilo/O-bencilo substituido de los nuevos compuestos intermedios de la 2 ' -O-fucosil-lactosa . Adicionalmente , también, es una característica importante de la presente invención que los nuevos compuestos intermedios de la 2'-0-fucosil-lactosa O-bencilo/0-bencilo substituidos mencionados anteriormente tienen propiedades cristalinas que ayudan a los procesos de purificación poderosos. Por ejemplo, la obtención de propiedades altamente cristalinas de los derivados de 2'-O-fucosil-lactosa permitieron el desarrollo de procedimientos de fabricación poderosos utilizando completamente las cristalizaciones para las purificaciones de los productos/compuestos intermedios. De manera más importante, la introducción de nuevos compuestos intermedios de 2'-0-fucosil-lactosa provistos por la presente invención abre oportunidades muy tempranas para opciones de escalamiento. Antes de la presente invención, las secuencias de reacción complejas tienen que ser efectuadas de una manera continua debido a la falta de opciones de purificación baratas. Los nuevos compuestos intermedios de 2 ' -O-fucosil-lactosa cristalinos permiten la separación de las etapas químicas entre sí proporcionando oportunidades reales para desarrollos de escalamiento. Por consiguiente, los compuestos intermedios novedosos cristalinos provistos por la presente invención son responsables del desarrollo de una tecnología de fabricación de la 2 ' -O-fucosil-lactosa muy temprana, adecuada para dar grandes cantidades de la 2 ' -O-fucosil-lactosa de alta pureza para las industrias la de nutrición y farmacéuticas.

Breve Descripción de la Invención El primer aspecto de la presente invención se refiere al uso de los compuestos de la fórmula general 1 para la preparación de la 2 ' -O-fucosil-lactosa, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 1 - en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis y R2 es un grupo removible por hidrogenólisis o H - o un hidrato o solvato del mismo está sometido a una hidrogenólisis catalítica .

El segundo aspecto de la presente invención proporciona nuevos compuestos de la fórmula general 1. Los compuestos de la fórmula general 1 son convertidos a la 2'-0-fucosil-lactosa por hidrogenólisis catalítica.

El tercer aspecto de la presente invención se refiere a un método para la preparación de los compuestos de la fórmula general 1, caracterizados porque un compuesto de la fórmula general 2 2 - en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis , R3 es un grupo removible por hidrogenólisis, un grupo del tipo del acetal, un grupo sililo o H, R es alquilo o dos grupos R gemínales con el átomo de carbono al cual los mismos están fijados, forman un anillo de cicloalquilo de C3-C6, R' es alquilo o un hidrato o solvato del mismo es sometido a una hidrogenólisis ligera catalizada por un ácido.

El cuarto aspecto de la presente invención proporciona los compuestos novedosos de la fórmula general 2.

El quinto aspecto de la presente invención está relacionado con un método para la preparación de los compuestos de la fórmula general 1, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 3 3 - en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis, R4 es acilo opcionalmente substituido, R5 es un grupo removible por hidrogenólisis o acilo opcionalmente substituido o un hidrato o solvato del mismo es sometido a desacilación .

El sexto aspecto de la presente invención proporciona los compuestos novedosos de la fórmula general 3.

El séptimo aspecto de la presente invención se refiere a un método para la preparación de los compuestos de la fórmula general 2, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 4 4 - en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis, R4 es acilo opcionalmente substituido, R6 es un grupo removible por hidrogenólisis, un grupo del tipo del acetal, un grupo sililo o acilo opcionalmente substituido, R es alquilo o dos grupos R gemínales con el átomo de carbono al cual los mismos están fijados forman un cicloalquilo de C3-C6, R' es alquilo - o un hidrato o solvato del mismo, es desacilado.

El octavo aspecto de la presente invención se refiere a un método para la preparación de los compuestos de la fórmula general 3, caracterizados porque un compuesto de la fórmula general 4 4 - en donde Rx es un grupo removible por hidrogenólisis, ¾ es acilo opcionalmente substituido, ¾ es un grupo removible por hidrogenólisis, un grupo del tipo del acetal, un grupo sililo o acilo opcionalmente substituido, R es alquilo o dos grupos R gemínales con el átomo de carbono al cual los mismos están fijados forman un cicloalquilo de C3- , R' es alquilo - o un hidrato o solvato del mismo es sometido a hidrólisis ligera catalizada por un ácido.

El noveno aspecto de la presente invención proporciona compuestos de la fórmula general 4.

El décimo aspecto de la presente invención está relacionado con un método para la síntesis de un compuesto de la fórmula general 4, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 5 5 - en donde Rx y R4 son como se definieron anteriormente y X es halógeno, -0C (=NH) CC13 , -O-pentenilo , -OAc, -OBz o -SR7, en el cual R7 es alquilo o fenilo substituido opcionalmente - se hace reaccionar con un compuesto de la fórmula general 6 6 R en donde R, R' y R6 son como se definieron anteriormente -bajo una condición de glucosilación.

El onceavo aspecto de la presente invención proporciona compuestos novedosos de la fórmula general 7 7 en donde Ri es un grupo removible por hidrogenól i s i s , R4 es acilo opc ionalment e substituido y R7 es alquilo o fenilo opcionalmente substituido, con la condición de que estén excluidos el 3 , 4 - di -0- acet i 1 - 2 -O -benci 1 - 1 -tio-L- fucopiranósido de fenilo, 3 , 4 -di -0-acet il - 2 -0-benc i 1 - 1 - 1 io- L- fucopiranós ido de metilo, 3,4-di-O-acet i 1 - 2 -0 -bencil - 1 - 1 io- L - fucopiranósido de etilo y 3 , 4 - di -O- ace t il - 2 - 0 - ( 4 -me toxibenc i 1 ) -1-tio-L-fucopiranósido de etilo.

El doceavo aspecto de la presente invención proporciona una metodología adecuada para la preparación de los compuestos novedosos de la fórmula general 7, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 8 H¿0H - en donde Ri y R7 están definidos anteriormente - es acilado por medio de un agente de acilación. .

El treceavo aspecto de la presente invención se refiere a un método para la preparación de la 2 ' -O-fucosil-lactosa, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 1 OH 1 H3C - en donde Rx es un grupo removible por hidrogenólisis y R2 es un grupo removible por hidrogenólisis o H - o un hidrato o solvato del mismo es sometido a una hidrogenólisis catalítica .

Descripción Detallada de la Invención De principio a fin de la presente descripción, el término "alquilo" significa un grupo de hidrocarburos saturados de cadena lineal o ramificada con 1-20 átomos de carbono, preferentemente con 1-6 átomos de carbono, semejantes al metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, i-butilo, s-butilo, t-butilo, n-hexilo, etc. El término "alquilo substituido opcionalmente" está propuesto para que signifique que la cadena de alquilo puede llevar ya sea 1, 2, 3, 4 o 5 substituyentes o puede estar no substituido. Los posibles substituyentes, independientemente entre sí, son seleccionados de halógeno, hidróxilo, alquiloxi opcionalmente substituido, nitro, amino, alquilamino substituido opcionalmente, dialquilamino substituido opcionalmente, acilo opcionalmente substituido, acilamino opcionalmente substituido, carboxilo, alquiloxicarbonilo opcionalmente substituido, carbamoilo, N-alquilcarbamoilo opcionalmente substituido, N, -dialquilcarbamoilo opcionalmente substituido, N-arilcarbamoilo opcionalmente substituido, tiol, alquilsulfañilo opcionalmente substituido, arilo opcionalmente substituido, ariloxi opcionalmente substituido y ariloxicarbonilo opcionalmente substituido. Se enfatiza que el grupo bencilo es considerado como un elemento de alquilos substituidos (es decir fenilmetilo) . Bencilo opcionalmente substituido está propuesto para que signifique fenilo opcionalmente substituido (véase infra) fijado al grupo metilo, tal como 4 -metilbencilo, 3 -fenilbencilo, 4-metoxibencilo, etc.

En la presente solicitud, el término "arilo" , ya sea solo o cuando está fijado a otro átomo o grupo, se refiere a un grupo homoaromát ico tal como fenilo o naftilo. Si estas agrupaciones son "opcionalmente substituidas" , las mismas pueden estar ya sea no substituidas o pueden llevar 1, 2, 3, 4 o 5 grupos incluyendo - independientemente entre sí -alquilo opcionalmente substituido, alquiloxi opcionalmente substituido, halógeno, nitro, amino, alquilamino opcionalmente substituido, dialquilamino opcionalmente substituido, acilo opcionalmente substituido, acilamino opcionalmente substituido, carboxilo, alcoxicarbonilo opcionalmente substituido, carbamoilo, N-alquilcarbamoilo opcionalmente substituido, N, -dialquilcarbamoilo opcionalmente substituido, tiol, alquilsulfañilo opcionalmente substituido y fenilo opcionalmente substituido.

En la presente descripción, el término "acilo" representa un grupo R"-C(=0)-, en donde R" puede ser H, alquilo (véase anteriormente) o arilo (véase anteriormente) , semejantes al formilo, acetilo, propionilo, butirilo, pivaloilo, benzoilo, etc. En el caso de "acilo opcionalmente substituido" , el residuo de alquilo o arilo puede estar ya sea no substituido o puede estar substituido (véase supra) ocasionando grupos acilo tales como cloroacetilo, tricloroacetilo, 4-clorobenzoilo, 4-nitrobenzoilo, 4-fenilbenzoilo, 4 -benzamidobenzoilo, 4 - ( fenilcarbamoil ) -benzoilo, etc. Si R significa H o alquilo, el grupo también es llamado alcanoilo, y si R es arilo, el grupo es llamado aroilo .

El término "alquiloxi" o "alcoxi" significa que un grupo alquilo (véase anteriormente) fijado a la porción molecular original por medio de un átomo de oxígeno, tal como metoxi, etoxi , t-butoxi, etc. "Alquiloxi opcionalmente substituido" o "alcoxi opcionalmente substituido" se refiere a un grupo alquiloxi que puede estar ya sea no substituido o puede estar substituido sobre la porción alquilo- como se definió anteriormente, tal como trifluorometoxi , 2,2,2-tricloroetoxi , etc.

"Cicloalquilo de C3-C5" significa ciclopropilo , ciclobutilo, ciclopentilo o ciclohexilo.

"Alcohol de Ci-C6" se refiere a hidroxi o dihidroxi-alcanos que tienen 1 a 6 átomos de carbono tales como metanol, etanol , n-propanol, i -propanol, n-butanol, i-butanol, s-butanol, t-butanol, alcohol amílico, n-hexanol, etilenglicol , propilenglicol , etc.

"Halógeno" significa fluoro, cloro, bromo o yodo.

"Amino" se refiere a un grupo -NH2.

"Alquilamino" significa un grupo alquilo (véase anteriormente) fijado a la porción molecular original por medio de un grupo -NH- , tal como metilamino, etilamino, etc. "Alquilamino substituido opcionalmente" se refiere a un grupo alquilamino que puede estar ya sea no substituido o puede estar substituido sobre la porción alquilo como se definió anteriormente .

"Dialquilamino" significa dos grupos alquilo (véase anteriormente), ya sea idénticos o unos diferentes, fijados a la porción molecular original a través de un átomo de nitrógeno, tal como dimetilamino, dietilamino, etc. "Dialquilamino substituido opcionalmente"- se refiere a un grupo dialquilamino en donde al menos una de las porciones de alquilo puede estar ya sea no substituida o puede estar substituida como se definió anteriormente.

"Acilamino" se refiere a un grupo acilo (véase anteriormente) fijado a la porción molecular original por medio de un grupo -NH- , tal como acetilamino (acetamido) , benzoilamino (benzamido) , etc. "Acilamino opcionalmente substituido" es un grupo acilamino que puede estar ya sea no substituido o puede estar substituido sobre la porción acilo como se definió anteriormente.

"Carboxilo" denota un grupo -COOH.

"Alquiloxicarbonilo" significa un grupo alquiloxi (véase anteriormente) fijado a la porción molecular original por medio de un grupo -C(=0)-, tal como metoxicarbonilo , t-butoxicarbonilo, etc. "Alquiloxicarbonilo opcionalmente substituido" es un grupo alquiloxicarbonilo que puede estar ya sea no substituido o puede estar substituido sobre la porción alquilo como se definió anteriormente, tal como benciloxicarbonilo, etc.

"Carbamoilo" es un grupo H2N-C(=0)-.

"N-alquilcarbamoilo" significa un grupo alquilo (véase anteriormente) fijado a la porción molecular original por medio de un grupo -HN-C(=0)-, tal como N-metilcarbamoilo, etc. "N-alquilcarbamoilo opcionalmente substituido" es un grupo N-alquilcarbamoilo que puede estar ya sea no substituido o puede estar substituido sobre la porción alquilo como se definió anteriormente. "?,?-dialquilcarbamoilo" significa dos grupos alquilo (véase anteriormente) , ya sea idénticos o unos diferentes, fijados a la porción molecular original por medio de un grupo >N-C(=0)-, tal como N, -metilcarbamoilo, etc. "N, -dialquilcarbamoilo opcionalmente substituido" es un grupo N, -dialquilcarbamoilo en donde al menos una de las porciones alquilo puede estar ya sea no substituida o puede estar substituida como se definió anteriormente.

"N-arilcarbamoilo" es un grupo arilo (véase anteriormente) fijado a la porción molecular original por medio de un grupo -HN-C(=0)-, tal como N- fenilcarbamoilo , etc. "N-arilcarbamoilo opcionalmente substituido" es un grupo N-arilcarbamoilo que puede estar ya sea no substituido o puede estar substituido sobre la porción arilo como se definió anteriormente.

"Tiol" denota un grupo -SH.

"Alquilsulfañilo" o "alquiltio" está propuesto para que signifique un grupo alquilo (véase anteriormente) fijado a la porción molecular original por medio de un átomo de azufre, tal como metilsulfañilo (metiltio) , etilsulfañilo (etiltio) , etc. "Alquilsulfañilo opcionalmente substituido" se refiere a un grupo alquilsulfañilo que puede estar ya sea no substituido o puede estar substituido sobre la porción alquilo como se definió anteriormente.

"Ariloxi" significa un grupo arilo (véase anteriormente) fijado a la porción molecular original por medio de un átomo de oxígeno, tal como fenoxi, naftiloxi, etc. "Ariloxi opcionalmente substituido" se refiere a un grupo ariloxi que puede estar ya sea no substituido o puede estar substituido sobre la porción arilo como se definió anteriormente, tal como 4-metoxi-fenoxi , 4 -metilfenoxi , etc.

"Ariloxicarbonilo" significa un grupo ariolxi (véase anteriormente) fijado a la porción molecular original por medio de un grupo -C(=0)-, tal como fenoxicarbonilo, etc. "Ariloxicarbonilo opcionalmente substituido" es un grupo ariloxicarbonilo que puede estar ya sea sustituido o no sustituido sobre la porción arilo como se definió anteriormente .

"Azido" significa un grupo -N3.

La síntesis de los oligosacáridos complejos tales como la 2 ' -O-fucosil-lactosa sigue rutas sintéticas de etapas múltiples que utilizan estrategias de protección y desprotección. A pesar de las estructuras intermedias diversas de las síntesis de los oligosacáridos, los objetivos sintéticos finales son usualmente los propios oligosacáridos desprotegidos que caracterizan una solubilidad en el agua exclusiva. Los solventes orgánicos utilizados comúnmente en los procesos de fabricación sintéticos no son adecuados para las reacciones de las etapas mucho más posteriores de la síntesis del oligosacárido . La hidrogenólisis representa una excepción entre las técnicas químicas de los grupos protectores, en las cuales el agua puede ser utilizada como un solvente. La propia hidrogenólisis es un proceso de desprotección poderoso adecuado para remover las porciones de 0-bencilo/O-bencilo substituido desde un soporte del oligosacárido de una manera casi cuantitativa bajo condiciones extremadamente suaves que previenen las formaciones de subproductos. También es una ventaja de la hidrogenólisis como un procedimiento de desbloqueo final dentro de una ruta sintética compleja que solamente una cantidad catalítica de los reactivos es requerida para el complemento de la reacción proporcionando exclusivamente tolueno o derivados de tolueno substituidos como los subproductos . Tanto el tolueno como los derivados de tolueno substituidos pueden ser removidos fácilmente aún en escalas de toneladas múltiples a partir de los productos de oligosacáridos solubles en agua por medio de procesos de evaporación y/o extracción.

La preparación de un gran número de oligosacáridos per-O-bencilados ha sido descrita en la literatura científica anterior pero estos derivados de oligosacáridos fueron raramente sólidos cristalinos que proporcionan aceites o jarabes de los derivados hidratados. Sin embargo, la presente invención proporciona numerosos ejemplos de que cuando aún los oligosacáridos novedosos O-bencilados simples proporcionan sólidos cristalinos debido a diseños estructurales cuidadosos tales como el control de las purezas anómericas y/o la creación de regiones moleculares apolares por la introducción de porciones múltiples de O-bencilo en los compuestos intermedios de oligosacáridos más avanzados. Por otra parte, la presente invención también utiliza las propiedades cristalinas superiores de los compuestos intermedios de oligosacáridos equipados con los grupos protectores de O-bencilo substituidos, seleccionados.

La combinación del uso de la hidrogenólisis de los compuestos intermedios de oligosacáridos O-bencilados substituidos y/u O-bencilados altamente cristalinos crea una base principal de las tecnologías de fabricación de los oligosacáridos potenciales.

Como se estableció anteriormente, muchos oligosacáridos proporcionan aceites o jarabes que limitan las tecnologías de purificación de la fabricación a cromatografías costosas. La solubilidad elevada en el agua y la solubilidad baja en el solvente orgánico de los oligosacáridos desprotegidos reduce además los alcances de las tecnologías de la purificación a separaciones de fase inversa de costo elevado. La presente invención proporciona un protocolo de purificación de bajo costo, alternativo, para la preparación de oligosacáridos no protegidos con purezas elevadas por la conversión de las mezclas de oligosacáridos sin refinar en los oligosacáridos O-bencilados/0-bencilados substituidos, cristalinos primero, utilizando la cristalización como una herramienta de purificación de costo bajo en la segunda etapa y remover los grupos protectores de 0-bencilo/O-bencilo substituidos en la etapa final.

En efecto, la presente invención combina las características altamente ventajosas de la hidrogenólisis , y las propiedades altamente cristalinas de los compuestos intermedios de oligosacáridos O-bencilados/0-bencilados substituidos .

El primer aspecto de la presente invención se refiere al uso de los compuestos de la fórmula general 1 para la preparación de la 21 -O-fucosil-lactosa, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 1 - en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis y R2 es un grupo removible por hidrogenólisis o H - o un hidrato o solvato del mismo es sometido a hidrogenólisis catalítica.

El término "un grupo removible por hidrogenólisis" se refiere a grupos cuyo enlace unido al oxígeno se separa fácilmente por la adición de hidrógeno en la presencia de paladio, níquel Raney o un catalizador de metal apropiado que conduce a la regeneración de uno o más grupos OH protegidos. Esta clase de grupos protectores ya es bien conocida por la persona experta en el arte, muchos de ellos son referidos por P. G. M. Wuts y T. W. Greene : Protective groups in organic synthesis John Wiley & Sons (2007) , incluyendo pero sin estar limitado a bencilo, difenilmetilo (benzhidrilo) , 1-naftilmetilo, 2 -naftilmetilo, benciloximetilo, benciloxicarbonilo o grupos de trifenilmetilo (tritilo) , la totalidad de ellos pueden estar substituidos opcionalmente por uno o más de alquilo, alcoxi, fenilo, amino, acilamino, alquilamino, dialquilamino, nitro, carboxilo, alcoxicarbonilo, carbamoilo, N-alquilcarbamoilo, N-N-dialquilcarbamoilo, azido, halógenoalquilo o halógeno sobre el (los) anillo (s) aromático (s) .

El término "hidrogenólisis catalítica" se refiere a la reducción con hidrógeno en la presencia de un catalizador que típicamente se lleva a cabo en un solvente prótico o en una mezcla de solventes próticos. Un solvente prótico puede ser seleccionado del grupo que consiste de agua, ácido acético o alcohol de Ci-C6. La mezcla de uno o más solventes próticos con uno o más solventes orgánicos apróticos apropiados miscibles parcial o totalmente con el (los) solvente (s) prótico(s) (tal como THF, dioxano, acetato de etilo, acetona, etc.) también puede ser aplicada. El agua, uno o más alcoholes de Ci-C6 o una mezcla de agua y uno o más alcoholes de Ci-C6 son utilizados preferentemente como un sistema de solventes. Las soluciones que contienen los derivados de carbohidratos de cualquier concentración y las suspensiones de los derivados de carbohidratos con el (los) solvente (s) utilizados también son aplicables. La mezcla de la reacción se agita a un intervalo de temperatura de 10-100 °C, preferentemente entre 20-50 °C en una atmósfera de hidrógeno de 1-50 bares en la presencia de un catalizador tal como paladio, níquel Raney o cualquier otro catalizador metálico apropiado, preferentemente paladio sobre carbón vegetal o negro de paladio, hasta que se alcanza el complemento de la reacción. Las concentraciones del metal del catalizador generalmente varían desde 0.1 % hasta 10 % basado en el peso del carbohidrato. Preferentemente, las concentraciones del catalizador varían desde 0.15 % hasta 5 %, más preferentemente 0.25 % hasta 2.25 %. La hidrogenación por transferencia también puede ser efectuada, cuando el hidrógeno es generado in situ a partir del ciclohexeno, ciclohexadieno, ácido fórmico o formiato de amonio. El pH de la mezcla de hidrogenólisis es preferentemente neutral pero también se pueden utilizar las bases/ácidos orgánicos o inorgánicos y/o las resinas de intercambio iónico básicas y/o ácidas para mejorar las características cinéticas de la hidrogenólisis . El uso de las substancias básicas es preferido especialmente cuando los substituyentes de halógeno están presentes sobre las porciones de bencilo substituidas de los precursores. El ácido orgánico es utilizado favorablemente como un co-solvente o aditivo en los casos cuando los grupos bencilo múltiples tienen que ser removidos de los precursores. Las bases orgánicas preferidas incluyen pero no están limitadas a trietilamina, diisopropil etilamina, amoniaco, carbamato de amonio, dietilamina, etc. Los ácidos orgánicos preferidos incluyen pero no están limitados a ácido fórmico, ácido acético, ácido propiónico, ácido cloroacético, ácido dicloroacético, ácido trifluoroacético, etc. Las condiciones propuestas permiten estudiar los procedimientos de escalamiento y desarrollar un método industrial para producir la 2'-FL. Además, una remoción simple, . conveniente y delicada del (de los) solvente (s) puede ser aplicada proporcionando la 2 ' -FL con un rendimiento excelente y una pureza elevada.

En una modalidad preferida la 2 ' -O-fucosil-lactosa producida por las metodologías de la presente invención puede ser aislada como un sólido amorfo por la precipitación de las soluciones acuosas/solvente orgánico/agua por enfriamiento o por la adición de éteres incluyendo pero sin estar limitado a MTBE, éter dietílico, éter diisopropílico, etc., y/o alcoholes de Ci-C6. Alternativamente la 21 -O-fucosil-lactosa también puede ser aislada por secado por congelamiento y secado por rociado.

En una modalidad preferida, la hidrogenólisis de los compuestos caracterizados por la fórmula general 1 se lleva a cabo en condiciones neutrales utilizando agua o una mezcla de agua-alcohol como un solvente, paladio sobre carbón vegetal al 2-10 % o negro de paladio como un catalizador en 1-10 atmósferas de presión de hidrógeno a 20-60 °C de temperatura. Después del complemento de la hidrogenólisis, la mezcla de la reacción se filtra y preferentemente se concentra por la remoción de los componentes de los solventes orgánicos y se somete a precipitación, secado por rociado, secado por congelamiento, produciendo la 21 -O-fucosil-lactosa anhidra y/o hidratada (contenido de agua de 0-20 %) de una manera controlada.

En otra modalidad preferida, la hidrogenólisis de los compuestos caracterizados por la fórmula general 1 se lleva a cabo en condiciones neutrales utilizando agua o una mezcla de agua-alcohol como un solvente, paladio sobre carbón vegetal al 2-10 % o negro de paladio como un catalizador en 1-10 atmósferas de presión de hidrógeno a 20-60 °C de temperatura. Después del complemento de la hidrogenólisis, la mezcla de la reacción se filtra- y preferentemente se concentra produciendo las soluciones/j árabes acuosos de 2'-0-fucosil-lactosa con una concentración de la 21 -O-fucosil-lactosa de 10-95 %.

De acuerdo con una modalidad preferida de la invención, un compuesto de la fórmula general 1, en donde Ri es bencilo, 4-metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4-fenilbencilo, 4 -clorobencilo, 4 -metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, 2 , 4 , 6-trimetilbencilo o 2,3,4,5,6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo y R2 es H, es utilizado en la hidrogenólisis .

Ambas formas sólidas de la 2 ' -O-fucosil-lactosa tales como las formas amorfas/secadas por congelamiento/secadas por rociado/y líquidas de la 21 -O-fucosil-lactosa, tales como las soluciones/j árabes acuosos provistos por la presente invención tienen una pureza de 21 -O-FL adecuada para uso nutritivo en infantes incluyendo pero sin estar limitado a fórmulas de leche para infante, cereales para infante, productos nutritivos para infantes, clínicos, etc. En general, las formas tanto sólidas como líquidas de la 21 -O-fucosil-lactosa producidas por las metodologías de la presente invención son adecuadas para uso nutritivo general para infantes, niños porqueños , jovencitos, adultos y ancianos. Las formas tanto sólidas como líquidas de la 2'-0-fucosil-lactosa provistas por la presente invención también pueden ser utilizadas como aditivos para alimentos, suplementos de la dieta, un componente de las bebidas alcohólicas y no alcohólicas tales como bebidas no alcohólicas, jugos de frutas, agua embotellada, vino, cerveza,, etc. Las formas tanto sólidas como líquidas de la 2 ' -O-fucosil-lactosa provistas por la presente invención también pueden ser utilizadas como un agente terapéutico en áreas amplias de aplicación terapéutica incluyendo pero sin estar limitado a la prevención de infecciones bacterianas y virales, para evitar la diarrea, para mejorar el sistema inmunológico y el desarrollo del cerebro, etc. Las formas tanto sólidas como líquidas de la 21 -O-fucosil-lactosa provistas por la presente invención también pueden ser utilizadas en aplicaciones veterinarias incluyendo pero sin estar limitado a la pelea contra las enfermedades infecciosas de los animales domesticados. La 2 ' -O-f cosil-lactosa provista por la presente invención también puede ser utilizada como un monómero crucial para la preparación de productos poliméricos/montados en un polímero que proporcionan una unión multivalente para las bacterias y los virus. La 21 -O-fucósil-lactosa provista por la presente invención también puede ser utilizada para la preparación de otros oligosacáridos de la leche humana por la aplicación de metodologías químicas y/o enzimáticas incluyendo pero sin estar limitadas a modificaciones estructurales simples de la fucosilación adicional, sialilación adicional, la extensión adicional de la estructura del núcleo por medio de la N-acetil lactosaminilación/iV-acetilisolactosaminación, etc.

El segundo aspecto de la presente invención proporciona trisacáridos novedosos caracterizados por la fórmula general 1 - en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis y R2 es un grupo removible por hidrogenólisis o H - o un hidrato o solvato del mismo.

Se enfatiza ampliamente que los derivados novedosos caracterizados por la fórmula 1 pueden ser considerados como entidades químicas únicas tales como ya sea los anómeros a o ß o aún una mezcla anómerica de los isómeros o ß. Los nuevos compuestos intermedios de la 21 -0-fucosil-lactosa de la fórmula general 1 pueden estar caracterizados como sólidos cristalinos, aceites, jarabes, un material amorfo precipitado o productos secados por rociado. Si se trata de productos cristalinos, los compuestos de la fórmula general 1 podrían existir ya sea en formas hidratadas o en formas anhidras por la incorporación de una o varias moléculas de agua en sus estructuras cristalinas. De manera semejante, los compuestos novedosos caracterizados por la fórmula general 1 podrían existir como substancias cristalinas que incorporan ligandos tales como moléculas orgánicas y/o iones en sus estructuras cristalinas .

En una modalidad preferida el trisacárido novedoso está caracterizado por la fórmula general 1 cuando Ri es bencilo, 4-metilbencilo, benciloxicarbonilo, naftilmetilo, 4-fenilbencilo, 4-clorobencilo, 4 -metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, 2 , 4 , 6-trimetilbencilo o 2,3,4,5,6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo y R2 es H.

Los compuestos novedosos de la fórmula general 1 provistos por la presente invención pueden ser utilizados para la preparación de la propia 21 -O-fucosil-lactosa y otros derivados de la 21 -O-fucosil-lactosa utilizando las metodologías químicas/enzimáticas conocidas en el Arte. Los compuestos novedosos de las fórmulas generales 1 también pueden ser utilizados como compuestos intermedios/precursores avanzados para la producción/preparación de numerosos oligosacáridos de la leche humana. Los nuevos compuestos de las fórmulas generales 1 también pueden ser considerados como compuestos intermedios valiosos para la síntesis de los oligosacáridos/glucoconjugados complejos adecuados para uso terapéutico/nutritivo .

El tercer aspecto de la presente invención se refiere a un método para la preparación de los compuestos de la fórmula general 1, caracterizados porque un compuesto de la fórmula general 2 2 - en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis, R3 es grupo removible por hidrogenólisis, un grupo del tipo del acetal, un grupo de sililo o H, R es alquilo o dos grupos R gemínales con el átomo de carbono al cual los mismos están fijados forman un anillo de cicloalquilo de C3-C6, R1 es alquilo - o un solvato o hidrato del mismo es sometido a hidrólisis ligera catalizada con un ácido.

El término "grupo del tipo del acetal" significa grupos protectores que con el átomo de oxígeno del grupo hidróxilo que va a ser protegido, forman una estructura con dos oxígenos unidos fijados al mismo átomo de carbono caracterizado por la siguiente estructura general: grupo protector del tipo del acetal en donde Ra, ¾ y Rc son grupos unidos al carbono. Esta clase de grupos ya es bien conocido por la persona experta en el arte, muchos de ellos son referidos por P. G. M. uts y T. . Greene : Protecfcive groups in organic synthesis John Wiley & Sons (2007) , incluyendo pero sin estar limitado a metoximetilo , t-butoximetilo, 2-metoxi-etoximetilo, benciloximetilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrofuranilo, 1,4-dioxan-2-ilo, 1-metil-l-metoxietilo, 1-metil-l-fenoxietilo, etc. Los grupos protectores del tipo del acetal son lábiles bajo condiciones ácidas suaves.

El término "grupo sililo" significa un grupo protector que contiene un átomo de silicio unido covalentemente al átomo de oxígeno de un grupo .hidroxi que va a ser protegido (éteres de sililo) . Esta clase de grupos es bien conocida por la persona experta en el arte, muchos de ellos son referidos por P. G. M. Wuts y T. W. Greene: Protective groups in organic synthesis John Wiley & Sons (2007) , incluyendo pero sin estar limitado a trimetilsililo, triisopropilsililo, t-butildimetilsilio, t-butildifenilsililo, etc. Los éteres de sililo son lábiles bajo condiciones ácidas suaves.

El término "hidrólisis ligera catalizada con un ácido" se refiere a una reacción química en la cual el agua reacciona en la presencia del ácido a pH > 2 con otra sustancia que lleva grupo (s) protector (es) lábil (es) ácido (s) para regenerar el(los) grupo(s) funcional (es) protegido (s) .

En el presente contexto los grupos protectores lábiles ácidos pueden ser grupos protectores de los hidróxilos primarios o secundarios (en la forma de acétales acíclicos o éteres de sililo) , sistemas de 1,2-diol (en la forma de acétales cíclicos) o un grupo formilo (en la forma de acétales) . El compuesto de partida puede llevar más de uno de los grupos protectores lábiles ácidos que pueden ser removidos de manera simultánea o consecutiva. Además el compuesto de partida puede contener también grupos protectores de acilo. La persona experta está completamente consciente que los grupos acilo pueden ser desprotegidos solamente por hidrólisis ácida fuerte (pH < 2) . La persona experta es capaz de distinguir cual condición desprotectora afecta los grupos de acetal y/o de sililo mientras que los grupos acilo permanecen intactos. Además, los enlaces interglucosídicos también pueden ser sensibles a los ácidos. La persona experta está totalmente consciente de que los enlaces interglucosídicos pueden ser divididos solamente por hidrólisis ácida fuerte (pH < 2) . La persona experta es capaz de distinguir cual condición desprotectora afecta los grupos de acetal y/o de sililo mientras que los enlaces interglucosídicos permanecen intactos. El agua - la cual tiene que estar presenté en el medio de la reacción como un reactivo - puede servir también como un solvente o un co-solvente. Los solventes próticos o apróticos orgánicos que son estables bajo condiciones ácidas y miscibles parcial o totalmente con agua tales como los alcoholes de Cx-C6, acetona, THF, dioxano, acetato de etilo, MeCN, etc., pueden ser utilizados en una mezcla con agua. Los ácidos utilizados son generalmente ácidos próticos seleccionados desde pero sin estar limitados al ácido acético, ácido trifluoroacético, HCl , ácido fórmico, ácido sulfúrico, ácido perclórico, ácido oxálico, ácido p-toluenosul ónico, ácido bencenosulfónico, resinas de intercambio catiónico, etc., que pueden estar presentes desde una cantidad catalítica hasta un gran exceso. La hidrólisis puede ser llevada a cabo a temperaturas entre 20 °C y la temperatura de reflujo hasta que se alcance el complemento lo cual toma desde aproximadamente 2 horas hasta 3 días dependiendo de la temperatura, la concentración y el pH. Preferentemente, los ácidos orgánicos incluyendo pero no están limitados a las soluciones acuosas del ácido acético, ácido fórmico, ácido cloroacético, ácido oxálico, etc., son utilizados a 40-75 °C. Otra condición preferida es utilizar un alcohol de Ci-C6-acetonitrilo o una mezcla de alcohol de Ci-C6-agua en la presencia de HCl o ácidos sulfónicos tales como el ácido p-toluenosulfónico o el ácido alcanforsulfónico .

Alternativamente, el alcohol de Ci-C6 anhidro incluye pero no está limitado a metanol, etanol, propanol, butanol, etc., también pueden ser utilizados para el desdoblamiento requerido de las porciones de acetal/cetal acíclicas/cíclicas por medio de los procesos de trans-acetilación/trans-cetalización catalizados con un ácido. La cantidad catalítica de cloruro de hidrógeno, ácido sulfúrico, ácido perclórico, ácido p-toluenosulfónico, ácido acético, ácido oxálico, ácido alcanforsulfónico, resinas de intercambio iónico fuertemente ácidas etc., pueden ser utilizadas para estos propósitos a temperaturas de 20 °C hasta la temperatura de reflujo.

En una modalidad preferida, la hidrólisis catalizada ligeramente por un ácido se lleva a cabo en una mezcla de agua y uno o más alcoholes de Ci-C6 en la presencia de un ácido sulfónico, preferentemente en la presencia de un ácido sulfónico, preferentemente en una mezcla de agua-isopropanol en la presencia de ácido p-toluenosulfónico .

En una modalidad preferida, un compuesto caracterizado por la fórmula general 2, en donde Ri es bencilo, 4-metilbencilo, benciloxicarbonilo, naftilmetilo, 4-fenilbencilo, 4 -clorobencilo, 4-metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, 2 , 4 , 6-trimetilbencilo o 2,3,4,5,6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo, R3 es H, y R y R' son metilo, son aplicados.

El cuarto aspecto de la presente invención proporciona nuevos derivados del oligosacárido caracterizados por la fórmula general 2 R O ^OR3 en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis , R3 es un grupo removible por hidrogenólisis, un grupo del tipo del acetal , un grupo sililo o H, R es alquilo o dos grupos R gemínales con el átomo de carbono al cual los mismos están fijados forman un anillo de cicloalquilo de C3-C6, R' es alquilo, o un solvato o hidrato del mismo.

Los compuestos intermedios novedosos de 2'-0-fucosil-lactosa de la fórmula general 2 pueden estar caracterizados como sólidos cristalinos, aceites, jarabes, un material amorfo precipitado o productos secados por rociado. Si se trata de productos cristalinos, los compuestos de la fórmula general 2 podrían existir ya sea en una forma anhidra o en formas cristalinas hidratadas por la incorporación de una o varias moléculas de agua en sus estructuras cristalinas. De manera semejante, los nuevos compuestos caracterizados por la fórmula general 2 podrían existir como substancias cristalinas que incorporan ligandos tales como moléculas orgánicas y/o iones en sus estructuras cristalinas.

En una modalidad preferida, el oligosacárido novedoso está caracterizado por la fórmula general 2 en donde Ri es bencilo, 4-metilbencilo, benciloxicarbonilo, naftilmetilo, 4-fenilbencilo, 4-clorobencilo, 4-metoxibencilo, 3, 4-dimetoxibencilo, 2,4,6-trimetilbencilo o 2, 3,4, 5, 6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo, R3 es H, y R y R1 ambos son metilo.

Los nuevos compuestos de la fórmula general 2 provistos por la presente invención pueden ser utilizados para la preparación de la 2 ' -O-fucosil-lactosa y otros derivados de la 21 -O-fucosil-lactosa utilizando las metodologías químicas/enzimáticas conocidas en el Arte. Los nuevos compuestos de las fórmulas generales 2 también pueden ser utilizados como precursores/compuestos intermedios avanzados para la producción/preparación de numerosos oligosacáridos de la leche humana. Los nuevos compuestos de las fórmulas generales 2 también se pueden considerar como compuestos intermedios valiosos para la síntesis de los oligosacáridos/glucoconjugados complejos adecuados para uso terapéutico/nutritivo.

El quinto aspecto de la presente invención se refiere a un método para la preparación de los compuestos de la fórmula general 1 que comprenden la desacilación de los compuestos de la fórmula general 3 3 en don Rx s un grupo removible por hidrogenólisis , R4 es acilo opcionalmente substituido, R5 es un grupo removible por hidrogenólisis o acilo opcionalmente substituido, o un hidrato o solvato del mismo.

El término "desacilación" significa la remoción de grupos protectores de O-acilo. -Una manera para la desacilación puede ser una desprotección por transesterificación catalizada por una base es decir los grupos protectores de acilo de los hidróxilos son removidos en un solvente de alcohol tal como metanol, etanol, propanol, t-butanol, etc., en la presencia de un alcoholato semejante a NaOMe , NaOEt, KOBu, etc., a 20-100 °C de temperatura. El alcohol y el alcoholato deben ser de características semejantes. El uso de un co-solvente como el tolueno o xileno podría ser benéfico para controlar el tamaño de partícula del producto y para evitar las formaciones de gel . En una modalidad preferida la cantidad catalítica de NaOMe es utilizada en metanol o en una mezcla de metanol -tolueno a 40-60 °C (desacilación de Zemplén) . Una manera adicional para la desacilación puede ser la hidrólisis básica que generalmente significa la hidrólisis catalizada por una base en agua, alcohol o mezclas de agua-solventes orgánicos, en condiciones de la reacción homogéneas o heterogéneas a temperaturas que varían desde 0-100 °C. La base de la elección generalmente es una base fuerte, por ejemplo LiOH, NaOH, KOH, Ba(OH)2/ K2C03, resinas de intercambio iónico básicas, hidróxidos de tetraalquilamonio, etc. Las bases también pueden ser utilizadas en la forma de una solución acuosa. En una modalidad preferida la base es NaOH y el solvente es metanol . Una manera alternativa para la desacilación puede ser la aminólisis (desprotección a base de la transferencia de N-acilo) que significa un tratamiento con amoniaco, hidrazina, hidrazina substituida, etilen diamina o aminas primarias en agua, alcohol o mezclas de solventes orgánicos - agua a 20-120 °C de temperatura. Bajo cualesquiera condiciones para la desacilación mencionadas anteriormente los grupos protectores lábiles ácidos o los enlaces interglucosídicos no son afectados.

De acuerdo con las condiciones más preferidas, un compuesto de la fórmula general 3, en donde Ri está definido como bencilo, 4 -metilbencilo, naftilmetilo , benciloxicarbonilo, 4 - fenilbencilo , 4 -clorobencilo, 4-metoxibencilo , 3 , 4 - dimetoxibencilo , 2 , 4 , 6 - rimet ilbencilo o 2 , 3 , 4 , 5 , 6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4 -metilbencilo , R es benzoilo o 4 - clorobenzoilo y R5 es pivaloilo, benzoilo o 4 -clorobenzoilo, es desacilado en metanol en la presencia de NaOMe o NaOH.

El sexto aspecto de la presente invención proporciona los derivados de ol igosacáridos novedosos caracterizados por la fórmula general 3 3 en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis , R4 es acilo opcionalmente substituido, R5 es un grupo removible por hidrogenólisis o acilo opcionalmente substituido, o un hidrato o solvato del mismo.

Se enfatiza ampliamente que los derivados novedosos caracterizados por la fórmula general 3 pueden ser considerados como entidades químicas únicas tal como los anómeros ya sea á o ß o aún una mezcla anomérica de los isómeros a y ß. Los nuevos compuestos intermedios de 2 ' -0-fucosil - lactosa de la fórmula general 3 pueden ser caracterizados como sólidos cristalinos, aceites, jarabes, un material amorfo precipitado o productos secados por rociado. Si se trata de productos cristalinos, los compuestos de la fórmula general 3 podrían existir ya sea en formas cristalinas anhidras o en formas cristalinas hidratadas por la incorporación de una o varias moléculas de agua en sus estructuras cristalinas. De manera semejante, los nuevos compuestos caracterizados por la fórmula general 3 podrían existir como substancias cristalinas que incorporan los ligandos tales como las moléculas orgánicas y/o iones en sus estructuras cristalinas.

En una modalidad preferida, el nuevo oligosacárido está caracterizado por la fórmula general 3 en donde Ri es definido como bencilo, -metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4-fenilbencilo, 4 -clorobencilo, 4-metoxibencilo, 3 , 4 -dimetoxibencilo, 2 , 4 , 6 - trimet ilbencilo o 2 , 3 , 4 , 5 , 6 -pentametilbencilo , más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo, R4 denota benzoilo opcionalmente substituido por uno o más halógenos y R5 significa alcanoilo o benzoilo opcionalmente substituido por uno o más halógenos. En una modalidad aún más preferida Ri es bencilo o 4 -metilbencilo, R4 es bencilo o 4 -clorobenzoilo y R5 es pivaloilo, benzoilo o 4-clorobenzoilo .

Los nuevos compuestos de la fórmula general 3 provistos por la presente invención pueden ser utilizados para la preparación de la 2 ' -O-fucosil-lactosa y otros derivados de la 2 ' -O-fucosil-lactosa utilizando las metodologías químicas/enzimáticas conocidas en el Arte. Los nuevos compuestos de las fórmulas generales 3 también pueden ser utilizados como precursores/compuestos intermedios avanzados para la producción/preparación de numerosos oligosacáridos de la leche humana. Los nuevos compuestos de las fórmulas generales 3 también se pueden considerar como compuestos intermedios valiosos para la síntesis de los oligosacáridos/glucoconjugados complejos adecuados para uso terapéutico/nutritivo .

El séptimo aspecto de la presente invención se refiere a un método para la preparación de los compuestos de la fórmula general 2 que comprenden la desacilación de los compuestos de la fórmula general 4 4 en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis , R es acilo opcionalmente substituido, R6 es un grupo removible por hidrogenólisis, un grupo del tipo del acetal, un grupo sililo o acilo opcionalmente substituido, R es alquilo o dos grupos R gemínales con el átomo de carbono al cual los mismos están fijados que forman un cicloalquilo de C3-C6, R' es alquilo, o un hidrato o solvato del mismo.

De acuerdo con las condiciones más preferidas, un compuesto de la fórmula 4, en donde Ri está definido como bencilo, -metilbencilo , naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4 - fenilbencilo , 4 -clorobencilo, 4-metoxibencilo , 3 , 4 -dimetoxibencilo, 2 , 4 , 6 - trimetilbencilo o 2 , 3 , 4 , 5 , 6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4 -metilbencilo, R4 es benzoilo o 4- clorobenzoilo , R6 es pivaloilo, benzoilo o 4-clorobenzoilo , y R y R 1 es metilo, es desacilado en metanol en la presencia de NaOMe o NaOH .

El octavo aspecto de la presente invención se refiere a un método para la preparación de los compuestos de la fórmula general 3 3 - en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis , R4 es acilo opcionalmente substituido, R5 es un grupo removible por hidrogenólisis o acilo opcionalmente substituido - que comprende la hidrólisis ligera catalizada por un ácido de los compuestos de la fórmula general 4 4 en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis, R4 e acilo opcionalmente substituido, R6 es un grupo removible po hidrogenólisis, un grupo del tipo del acetal , un grupo silil o acilo opcionalmente substituido, R es alquilo o dos grupo R gemínales con el átomo de carbono al cual los mismos están fijados, forman un cicloalquilo de C3-C6, R' es alquilo, o un hidrato o solvato del mismo.

De acuerdo con una modalidad preferida, un compuesto de la fórmula general 4, en donde Ri está definido como bencilo, 4 -metilbencilo, naftilmetilo , benciloxicarbonilo , 4 - fenilbencilo, 4 -clorobencilo, 4-metoxibencilo , 3 , 4 -dimetoxibencilo , 2 , 4 , 6 - trimetilbencilo o 2 , 3 , 4 , 5 , 6 -pentameti lbenc ilo , más preferentemente bencilo o 4 -meti lbenci lo , R4 es benzoilo o 4-clorobenzoilo , R6 es pivaloilo, benzoilo o 4-clorobenzoi lo , y R y R' es metilo, se hidroliza en acetonitrilo acuoso o en acetona acuosa en la presencia del ácido p-toluenosulfónico o HCl .

El noveno aspecto de la presente invención proporciona nuevos derivados de oligosacáridos caracterizados por la fórmula general 4 R O^OR6 ~ R 9 o R>^r\—¾w^0R' R en donde Rx es un grupo removible por hidrogenólisis , R4 es acilo opcionalmente substituido, R6 es un grupo removible por hidrogenólisis, un grupo del tipo del acetal , un grupo sililo o acilo opcionalmente substituido, R es alquilo o dos grupos R gemínales con el átomo de carbono al cual los mismos están fijados, forman un cicloalquilo de C3-C6, R' es alquilo, o un hidrato o solvato del mismo.

Los nuevos compuestos intermedios de la 2'-0-fucosil-lactosa de la fórmula general 4 pueden estar caracterizados como sólidos cristalinos, aceites, jarabes, un material amorfo precipitado o productos secados por rociado. Si se trata de compuestos cristalinos, los compuestos de la fórmula general 4 podrían existir ya sea en formas cristalinas anhidras o hidratadas por la incorporación de una o varias moléculas de agua en sus estructuras cristalinas. De manera semejante, los nuevos compuestos caracterizados por la fórmula general 4 podrían existir como substancias cristalinas que incorporan los ligandos tales como las moléculas orgánicas y/o los iones en sus estructuras cristalinas .

En una modalidad preferida, el nuevo oligosacário está caracterizado por la fórmula general 4, en donde Rj. está definido como bencilo, 4 -metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4-fenilbencilo, 4 -clorobencilo, 4-metoxibencilo, 3 , 4-dimetoxibencilo, 2 , 4 , 6 -trimetilbencilo o 2 , 3 , 4 , 5 , 6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo, R4 denota benzoilo opcionalmente substituido por uno o más halógenos, R6 significa alcanoilo o benzoilo opcionalmente substituido por uno o más halógenos, y R y R' es metilo. En una modalidad aún más preferida Ri es bencilo o 4-metilbencilo, R4 es benzoilo o 4 -clorobenzoilo y Rs es pivaloilo, benzoilo o 4 -clorobenzoilo .

Los compuestos novedosos de la fórmula general 4 provistos por la presente invención pueden ser utilizados para la preparación de la 2 ' -O- fusil - lactosa y otros derivados de 2 ' -O-fusil-lactosa por el uso de las metodologías químicas/enzimát icas conocidas en el Arte. Los nuevos compuestos de las fórmulas generales 4 también pueden ser utilizados como precursores/compuestos intermedios avanzados para la producción/preparación de numerosos oligosacáridos de la leche humana. Los nuevos compuestos de las fórmulas generales 4 también pueden ser considerados como compuestos intermedios valiosos para la síntesis de oligosacáridos/glucoconjugados complejos adecuados para uso terapéutico/nutritivo .

El décimo aspecto de la presente invención se refiere a un método para la preparación de los compuestos de la fórmula general 4 que comprenden la reacción de unión de un compuesto donador de la fórmula general 5 5 - en donde Ri y R4 son como se definieron anteriormente y X es halógeno, -0C (=NH) CC13 , -O-pentenilo, -OAc, -OBz o -SR7( en la cual R7 es alquilo o fenilo opcionalmente substituido - con un compuesto aceptor de la fórmula general 6 R O ^.0R6 OH ^ -^oRI R en donde R, R' y R6 son como se definieron anteriormente -bajo condiciones de glucosilación.

El término "condiciones de glucosilación" significa en el presente contexto llevar a cabo la reacción en un solvente aprótico o en una mezcla de solventes apróticos en la presencia de un activador para que conduzca al producto glucosilado deseado por el control de la esteoselectividad de la conjugación por medio de la estrategia del grupo protector activo del grupo no próximo, el efecto del solvente, el efecto del haluro, la selección del promotor y el control de la temperatura. En el caso de los carbohidratos se desarrolla un arreglo de activación anomérica para la glucosilación y está disponible para una persona experta en contacto con la química de los carbohidratos sintéticos. Estas metodologías son descritas extensamente por revisiones y manuales, por ejemplo por Demchenko (Ed.) : Handbook of Chemical Glycosylation Wiley (2008) . Con el propósito de hacer más claros los ejemplos, algunas consideraciones generales son mencionadas brevemente de manera posterior dependiendo del grupo X (los grupos protectores de los aceptores y donadores permanecen intactos bajo la glucosilación) .

Los haluros de glucosilo (X significa F, Cl, Br, I) son utilizados frecuentemente en la reacción de glucosilación a causa de su fácil accesibilidad y reactividad satisfactoria. Típicamente, los haluros anoméricos siguen el orden de reactividad F<Cl<Br<I para el desplazamiento nucleofílico . Las reacciones de glucosilación son promovidas generalmente por el ión del metal pesado, principalmente del mercurio o la plata, y los ácidos de Lewis. Los fluoruros de glucosilo pueden ser preparados por el tratamiento de los precursores apropiados tales como los semiacetales , haluros de glucosilo, ásteres de glucosilo y S-glucósidos con reactivos de fluoración tales como HF, AgF, AgBF4 , fluoruro de tetrabutil amonio, trifluoruro de dietilaminoazufre , tosilato de 2-fluoro-l-metilpiridinio, Selectfluor, Deoxo-Fluor, 4-metil (difluoroyodo) benceno, etc.

Los tricloroacetimidatos de glicosilo (X= -0C(NH)CC13) pueden ser preparados fácilmente por la adición de OH anomérico libre a tricloroacetonitrilo bajo catálisis básica orgánica o inorgánica. En una reacción de glucosilación típica, la cantidad catalítica del ácido de Lewis, tal como el triflato de trimetilsililo o BF3-eterato, promueve la unión.

Los acetatos o benzoatos de glucosilo (X representa -OAc o -OBz) en la reacción de glucosilación se someten primero a la activación electrofílica que proporciona un compuesto intermedio reactivo, luego se trata con el aceptor-OH nucleofílico . Los activadores típicos de elección son los ácidos de Bronsted (tales como p-TsOH, HC104, ácido sulfámico) , ácidos de Lewis (tales como ZnCl2, SnCl4, sales de triflato, BF3-eterato, perclorato de tritilo, A1C13, anhídrido tríflico) y sus mezclas.

. Los glucósidos de pentenilo (X significa -0- ( CH2 ) 3 -CH=CH2) como aceptores de glucosilo apropiados pueden ser transglucosilados con los aceptores de glucosilo apropiados en la presencia de un promotor tal como NBS y NIS. Los ácidos próticos o de Lewis (ácido tríflico, triflato de Ag , etc.) pueden mejorar la reacción. Los glucósidos de pentenilo pueden ser preparados con la ayuda de n-pentenol por la glucosilación de Fischer estándar de los semiacetales bajo condiciones ácidas, por la sal de plata (I) promovió la unión de los bromuros de glucosilo (método de Koenigs-Knorr) , o por la glucosilación de los glucósidos de 1-acetilo en la presencia de cloruro de estaño (IV) .

Los tioglucósidos (X denota un grupo alquiltio o un grupo feniltio opcionalmente substituido) puede ser activado por los promotores tiofílicos tales como las sales de mercurio (II) , Br2, I2, NBS, NIS, ácido tríflico, sales de triflato, BF3-eterato, triflato de trimetilsililo, triflato de dimetil-metiltio sulfonio, triflato de fenilselenilo, perclorato de yodonio y dicolidina, yoduro de tetrabutilamonio o mezclas de los mismos, en las reacciones de condensación, preferentemente por Br2, NBS, NIS o ácido tríflico .

En un método preferido, el donador de glicosilo de la elección es un compuesto de la fórmula general 5 5 en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis , R4 es acilo opcionalmente substituido y X es feniltio opcionalmente substituido con uno o más alquilos, más preferentemente Rx es bencilo, 4-metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4-fenilbencilo, -clorobencilo, 4-metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, 2 , 4 , 6-trimetilbencilo o 2,3,4,5,6-pentametilbencilo, R denota benzoilo opcionalmente substituido por uno o más halógenos y X es feniltio no substituido, aún más preferentemente Rx es bencilo o 4-metilbencilo y R4 es benzoilo o 4 -clorobenzoilo .

En un método preferido adicionalmente , el aceptor de glicosilo de la elección es un compuesto de la fórmula general 6, en donde R y R' son metilo, y Rs es pivaloilo, benzoilo o 4-clorobenzoilo.

La reacción de glucosilación se lleva a cabo en solventes apróticos tales como tolueno, THF, DCM, cloroformo, dioxano, acetonitrilo, clorobenceno, dicloruro de etileno, DMSO, DMF, N-metilpirrolidona, etc., o mezclas de los mismos, preferentemente THF, tolueno, DCM o mezclas de los mismos, más preferentemente en una mezcla de THF-DCM a -20-20 °C, preferentemente a -10-0 °C. Para la activación tiofílica se emplean el Br2, NBS o NIS, preferentemente en la presencia de ácido tríflico. Usualmente se utiliza un ligero exceso del donador (1.1-1.2 equivalentes) comparado con el aceptor. El tiempo de la reacción se altera desde 5 minutos hasta 2 horas. Para el apagado de la reacción se emplean generalmente el agua o los alcoholes, preferentemente las soluciones acuosas o alcohólicas de las bases semejantes al amoniaco o la trietil amina, más preferentemente 25 % de hidróxido de amonio .

La síntesis de los aceptores de la fórmula genera 6 se puede llevar a cabo por cualquier manera conocida. El tratamiento de la lactosa con dialcoxi cetal de una cetona simétrica a reflujo en la presencia de un ácido tal como el ácido p-toluenosul ónico proporciona el 2 , 3 : 5 , 6-di-O-alquiliden-4 -O- (3,4 -O-alquiliden-p-D-galactopiranosil) -D-glucosa dialquil acetal . La substitución 6'-0- selectiva del grupo de hidroxilo primario de la lactosa cetónido diol puede ser lograda por ejemplo con reacciones catalizadas con una base incluyendo los Ri-haluros para proporcionar compuestos de la · fórmula general 6 en donde R6 es un grupo removible por hidrogenólisis . Las bases tanto orgánicas como inorgánicas que incluyen pero no están limitadas al hidruro de sodio, terc-butóxido de potasio, hidróxido de potasio, hidróxido de sodio, carbonato de potasio, diisopropil etilamina, 1,8-diazabiciclo [5.4.0] undec-7-eno son adecuadas para catalizar tales procesos de substitución 61 -O- selectivos de la lactosa cetónido diol . Tales reacciones pueden ser efectuadas ya sea en soluciones homogéneas utilizando solventes tales como DMF, THF, dioxano, etc., o en condiciones de alquilación de transferencia en fase acuosa. Preferentemente, el NaH o el terc-butóxido de potasio se utiliza en dioxano o DMF a 20-80 °C. La 6 -O-acilación selectiva puede ser llevada a cabo con agentes de acilación tradicionales semejantes a los haluros de acilo, anhídridos, ésteres activos, etc., en la presencia de piridina, trietilamina , diisopropil etilamina utilizando solventes orgánicos tales como DCM, cloroformo, THF, dioxano, acetonitrilo, etc., o una mezcla de los mismos a -20-80 °C para dar los compuestos de la fórmula general 6 en donde R6 es acilo. La formación de acetal acíclico selectiva de la lactosa cetónido diol sobre la posición 6' puede ser efectuada con por ejemplo metoximetilo, t-butoximetilo, 2-metoxietilo, benciloximetilo, halogenuros del 2-tetrahidrofuranilo, etc., en la presencia de trietilamina, morfolina, diisopropil etilamina, piridina, etc., o por ejemplo con dihidropirano, 1,4-dihidrodioxina, dihidrofurano, 2-metoxipropeno, 2-fenoxipropeno, etc., en la presencia de ácidos en solventes orgánicos tales como DMF, THF, dioxano, acetonitrilo, etc., a 0-60 °C de temperatura para proporcionar los compuestos de la fórmula general 6 en donde R6 es un grupo del tipo del acetal . La reacción de OH-sililación primaria, selectiva, de la lactosa cetónido diol con un cloruro de sililo en la presencia de una base de amino (tal como imidazol, trietilamina, etc.) a temperatura ambiente o con un triflato de sililo con una base de amina impedida (por ejemplo 2 , 6-lutidina) a temperatura baja puede conducir a los compuestos de la fórmula general 6 en donde Rs es sililo.

El onceavo aspecto de la presente invención para proporcionar los compuestos de la. fórmula general 7 que pertenecen a la fórmula general 5 7 en donde Ri es un grupo removible por hidrogenól isis , R4 es acilo y R7 es alquilo o fenilo opcionalmente substituido, con la condición de que el 3,4-di-0-acetil-2-0-bencil-l-tio-L-fucopiranósido de fenilo, 3 , 4 -di -O-acetil -2 -O-bencil- 1-tio-L-fucopiranósido de metilo, 3 , 4-di -0-acetil-2 -O-bencil-l-tio-L-fucopiranósido de etilo y el 3 , 4-di -0-acetil-2 -0- (4-metoxi-bencil) -l-tio-L->fucopiranósido de etilo están excluidos.

Se enfatizó fuertemente que los derivados novedosos caracterizados por la fórmula general 7 pueden ser considerados como entidades químicas únicas tales como ya sea los anómeros o ß o aún una mezcla anomérica de los isómeros a y ß . Los compuestos intermedios de 21 -O-fucosil-lactosa novedosos de la fórmula general 7 pueden estar caracterizados como sólidos cristalinos, aceites, jarabes, un material amorfo precipitado o productos secados por rociado. Si los compuestos cristalinos, de la fórmula general 7 podrían existir ya sea en las formas cristalinas anhidras o hidratadas por la incorporación de una o varias moléculas de agua en sus estructuras cristalinas, que son removidas por los métodos convencionales antes de la glucosilación. De manera semejante, los compuestos novedosos caracterizados por la fórmula general 7 podrían existir como substancias cristalinas que incorporan los ligandos tales como las moléculas orgánicas y/o los iones en sus estructuras cristalinas. Si las moléculas orgánicas son los alcoholes, los mismos son removidos por los métodos convencionales antes de la glucosilación.

En una modalidad preferida, el oligosacárido novedoso está caracterizado por la fórmula general 7 en donde R7 es fenilo opcionalmente substituido con uno o más alquilos y la configuración anomérica es ß, más preferentemente Ri es bencilo, 4-metilbencilo, 1-naftilmetilo, benciloxicarbonilo , 3-fenilbencilo, 4 -clorobencilo, 4-metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo , 2 , 4 , 6 - trimetilbencilo o 2,3,4,5,6-pentametilbencilo, R denota benzoilo opcionalmente substituido por uno o más halógenos y R7 es fenilo no substituido, aún más preferentemente Ri es bencilo o 4-metilbencilo y R4 es benzoilo o 4 -clorobenzoilo .

Los compuestos novedosos de la fórmula general 7 provistos por la presente invención pueden ser utilizados para la preparación de la 2 ' -O-fucosil- lactosa y otros derivados de 2 ' -O-fucosil - lactosa utilizando las metodologías químicas/enzimáticas conocidas en el arte. Los compuestos novedosos de la fórmula general 7 pueden ser utilizados también como precursores/compuestos intermedios avanzados para la producción/preparación de numerosos oligosacáridos de la leche humana. Los compuestos novedosos de la fórmula general 7 pueden también ser considerados como compuestos intermedios valiosos para la síntesis de los oligosacáridos/glucoconjugados complejos adecuados para uso terapéutico/nutritivo .

El doceavo aspecto de la presente invención proporciona una metodología adecuada para la preparación de los compuestos novedosos de la fórmula general 7, caracterizados porque un compuesto de la fórmula general 8 8 - en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis y R7 es alquilo o fenilo opcionalmente substituido - es acilado por medio de un agente de acilación.

El término "agente de acilación" está propuesto para que signifique R -halogenuros , un anhídrido de la fórmula general (R4)20, los derivados activos del ácido carboxílico de la fórmula R4-0H tales como la imidazolida, tioéster, éster de sililo, éster de vinilo, tetrazólido, ortoéster, éster hidroxi-benzotriazolílico, etc., o el ácido carboxílico de la fórmula R4-0H con los reactivos de unión adecuados tales como Me3SiCl, DCC, BOP-CI, TsCl/TEBAC, etc., en donde R4 es acilo opcionalmente substituido como se definió anteriormente. La acilación se puede llevar a cabo en la presencia de piridina, trietilamina , diisopropil etilamina, etc., en solventes orgánicos tales como DCM, cloroformo, THF, dioxano, acetonitrilo, etc., o una mezcla de los mismos a -20-80 °C. Preferentemente, los cloruros de acilo en una mezcla de piridina y DCM son utilizados a 0-20 °C, más preferentemente acilo es benzoilo o 4-clorobenzoilo.

Los compuestos de la fórmula general 8 están fácilmente disponibles por los métodos conocidos en el arte. La L-fucosa es peracetil da luego el tetraacetato de L-fucosa es tiolizado con R7-SH, en donde R7 es como se definió anteriormente, en la presencia, de un ácido de Lewis para dar el 2 , 3 , 4 -tri -O-acetil- 1-tio-p-L- fucopiranósido de fenilo opcionalmente substituido. La remoción de los grupos acetilo se logra bajo las condiciones de Zemplén y el triol resultante es tratado con dimetoxi-propano/ácido para formar el 3 , 4 -acetónido . El grupo OH- libre en la segunda posición es desprotonado entonces con NaH y el alcoholato se hace reaccionar con el Ri-halogenuro en donde Rx es como se definió anteriormente. La remoción del isopropilideno por medio de la hidrólisis ácida produce suavemente los compuestos de la fórmula general 8.

El treceavo aspecto de la presente invención se refiere a un método para la preparación de la 21 -O-fucosil -lactosa, caracterizado por que un compuesto de la fórmula general 1 1 - en donde Rx es un grupo removible por hidrogenólisis y R2 es un grupo removióle por hidrogenólisis o H - o un hidrato o solvato del mismo es sometido a hidrogenólisis catalítica.

En una modalidad preferida la 21 -O-fucosil-lactosa producida por las metodologías de la presente invención puede ser aislada como un sólido amorfo por precipitación a partir de agua/solvente orgánico/soluciones acuosas por enfriamiento o por la adición de éteres incluyendo pero sin estar limitado a MTBE, éter dietílico, éter diisopropílico etc., y/o alcoholes de Ci-C6. Alternativamente, la 21 -O-fucosil-lactosa también puede ser aislada por secado por congelamiento y secado por rociado.

En una modalidad preferida la hidrogenólisis de los compuestos caracterizados por la fórmula general 1 se lleva a cabo en condiciones neutrales utilizando agua o una mezcla de agua-alcohol como un solvente, paladio sobre carbón vegetal al 2-10 % o negro de paladio como un catalizador a 1-10 atmósferas de presión de hidrógeno a 20-60 °C de temperatura. Después del complemento de la hidrogenólisis, la mezcla de la reacción se filtra y preferentemente se concentra por la remoción de los componentes solventes orgánicos y se somete a precipitación, secado por rociado, secado por congelamiento, produciendo la 2 ' -0-fucosil - lactosa anhidra y/o hidratada (contenido de agua del 0-20 %) de una manera controlada .

En otra modalidad preferida la hidrogenólisis de los compuestos caracterizados por la fórmula general 1 se lleva a cabo en condiciones neutrales utilizando agua o una mezcla de agua-alcohol como un solvente, 2-10 % de paladio sobre carbón mineral o negro de paladio como un catalizador en 1-10 atmósferas de presión de hidrógeno a 20-60 °C de temperatura. Después del complemento de la hidrogenólisis, la mezcla de la reacción se filtra y preferentemente se concentra produciendo jarabes/soluciones acuosas de 21 -O-fucosil-lactosa con una concentración de 21 -O-fucosil-lactosa de 10-95 %.

De acuerdo con una modalidad preferida de la invención un compuesto de la fórmula general 1, en donde Ri es bencilo, 4 -met ilbencilo , naft ilmetilo , benciloxicarbonilo, 4 - fenilbencilo , 4 -clorobencilo, 4-metoxibencilo, 3 , 4 -dimetoxibencilo , 2 , 4 , 6 - trimet ilbencilo o 2 , 3 , 4 , 5 , 6 -pentamet ilbencilo , más preferentemente bencilo o 4 -met ilbencilo y R2 es H, es utilizado en la hidrogenólisis .

Otras características de la invención llegarán a ser evidentes en el transcurso de las siguientes descripciones de las modalidades ejemplares que están provistas para ilustración de la invención y no van a ser limitativas de la misma.

Parte Experimental Ejemplo 1 4 -0- (3,4 -O-ciclohexilideno- ß-D-galactopiranosil ) -2 , 3 ; 5 , 6-di -O-ciclohexilideno-D-glucosa dimetil acetal La lactosa (1.15 g) se suspende en ciclohexanona dimetoxi cetal (10 mi) . Se agrega ácido p-toluenosulfónico (45 mg) y la mezcla de la reacción se calienta a 85 °C durante 2 1/2 h. La mezcla es neutralizada entonces por la adición de Et3N, el solvente se concentra in vacuo, el residuo se disuelve en DCM (60 mi) , la fase orgánica se lava con H20 (2x50 mi) y NaHC03 saturado (50 mi) . La purificación adicional se hace por cromatografía por desorción súbita (EtOAc/heptano 6:4) para proporcionar el producto (1.35 g, 64 %) como una espuma blanca. 1U RMN (300 MHz , CDCl3) : d = 4.54 (dd, 1H, J = 6.6, 7.9) , 4.42 (d, 1H, J = 8.3) , 4.35 (m, 1H) , 4.34 (d, 1H, J = 6.6) , 4.26 (dd, 1H, J = 5.3, 8.7) , 4.09 - 3.92 (5H) , 3.87 '(dd,lH, J = 1.3, 7.9) , 3.80 (m, 1H) , 3.65 (m, 1H) , 3.49 (m, 1H) , 3.48 y 3.47 (2s, cada uno 3H) , 1.69 - 1.26 (m, 30H) . 13C RMN (CDC13 , 75 MHz) : d = 110.9, 110.3, 108.9, 107.2, 103.4, 79.0, 77.8, 77.5, 75.6, 75.1, 74.7, 74.4, 73.1, 63.9, 62.4, 57.4, 54.4, 37.8, 36.4, 35.8, 35.4, 34.9, 33.1, 25.2-23.6.

Ej emplo 2 4-0- (6-0-acetil-3,4 -O-ciclohexilideno- ß-D-galactopiranosil ) -2 , 3 : 5 , 6 -di -O-ciclohexilideno-D-glucosa dimetil acetal El compuesto del ejemplo 1 (0.526 g, 0.83 mmol) se disuelve en DCM seco (5 mi) . Se agrega piridina (0.4 mi, 5.0 mmol) y la mezcla se enfría a -30 °C. Se agrega cloruro de acetilo (0.07 mi, 0.98 mmol) disuelto en DCM (0.5 mi) en 10 minutos. La mezcla se agita durante 1 h a -20 °C. Se agrega MeOH (1 mi) y la mezcla se deja que se caliente a temperatura ambiente. Se agrega DCM (20 mi) y la mezcla se lava con H20 (50 mi), HC1 acuoso frío (0.5 M, 30 mi), H20 (30 mi), NaHC03 (30 mi) , luego se seca (Na2S04) , se filtra y se evapora in vacuo. La purificación por cromatografía por desorción súbita (heptano/EtOAc 6:4) produce el producto como una espuma blanca (0.47 g, 85 %) . lK RMN (CDC13 , 300 MHz) d= 4.43-4.26 (6H, no resuelto), 4.17 (1H, dd, J = 7.1, 8.6), 4.13 (1H, dd, J = 1.7, 1.7), 4.09-4.00 (3H, no resuelto), 3.93 (1H, ddd, J = 1.8, 4.6, 7.7), 3.85 (1H, dd, J = 1.5, 7.5), 3.61 (1H, s am . , OH), 3.51 (1H, dd, J = 6.6, 8.3, H-21 ) , 3.42 (6H, s, 2?¾0) , 2.08 (3H, s, CH3CO) , 1.81-1.25 (30 H, no resuelto, ciclohexilo) . 13C RMN (CDCI3 , 75 MHz) d= 170.82 (CO) , 110.9, 110.6, 108.9 (3x(CH3)2C), 105.3, 103.7 (C-l, C-l'), 78.5, 77.6, 77.6, 76.3, 74.7, 74.6, 72.8, 71.5 (C-2, C-3, C-4, C-5, C-2 ' , C-3', C-4 ' , C-5'), 64.3, 63.6 (C-6, C-6 ' ) , 56.1, 53.3 (2xOCH3), 37.7-33.9, 25.1-23.6 (ciclohexilo) .

Ejemplo 3 4-0-(6-0-tritil-3,4 -O-isopropilideno- ß-D-galactopiranosil ) -2 , 3 : 5, 6-di-O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal El 3 ', 4 ' : 2 , 3 : 5 , 6-tri -O-isopropilideno-lactosa dimetil acetal (5.52 g, 10.9 mmol) se disuelve en piridina seca (100 mi) . Se agrega cloruro de tritilo (6.0 g, 21.5 mmol) junto con DMAP (0.30 g) y la mezcla se calienta a 65 °C durante 4 h. La mezcla se evapora in vacuo, se co-evapora con tolueno (3x30 mi) . El residuo se disuelve en EtOAc (50 mi) , se lava con H20 (50 mi) , se seca (Na2S04) , se filtra y se evapora in vacuo. La purificación por cromatografía por desorción súbita (hexano/EtOAc , 8:2, luego 4:6) proporciona el producto como un aceite (3.0 g, 37 %) .

? RMN (CDC13 , 500 MHz) d= 7.45-7.22 (15H, 3xPh) , 4.38 (1H, d, J = 8.5, H-l') , 4.38 (1H, m) , 4.36 (1H, dd, J = 6.5, 7.7) , 4.27 (1H, d, J = 6.1, H-l) , 4.26 (1H, m) , 4.14 (1H, dd, J = 6.4, 8.8) , 4.08 (1H, dd, J = 5.6, 7.1) , 4.00-3.97 (2H, no resuelto) , 3.85 (1H, dd, J = 1.0, 7.6) , 3.817 (1H, ddd, J = 1.8, 5.3, 7.7) , 3.56-3.52 (2H, no resuelto) , 3.25 (1H, dd, J = 5.3, 8.5) , 3.22 (3H, s, CH30) , 3.09 (3H, s, CH30) , 1.52, 1.50, 1.42, 1.34, 1.33, 1.32 (6 x C(CH3)2) . 13C RMN (CDCI3, 75 MHz) d= 143.8, 128.6, 127.7, 127.0 (Ph) , 110.1, 109.8, 108.2 (3x(CH3)2C), 104.5, 103.9 (C-l, C-l') , 86.7 (C(Ph)3), 78.9, 77.9, 77.8, 76.1, 74.3, 74.2, 73.3, 72.5 (C-2, C-3, C-4, C-5, C-2', C-3', C-4 ' , C-5'), 64.5, 62.0 (C-6, C-6'), 55.7, 52.2 (2xOMe) , 28.2, 27.1, 26.3, 26.3, 25.5, 24.2 (6x C(CH3)2) · E emplo 4 4 -O- (6 -O- ivaloil -3 , 4 -O-isopropilideno-p-D-galactopiranosil) -> 2 , 3 : 5 , 6 -di -O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal El 3',4':2,3:5,6-tri -0-isopropilideno-lactosa dimetil acetal (10 g, 19.7 mmol) se disuelve en DCM (80 mi) y piridina (8 mi, 98.9 mmol) y se enfría a 0 °C. Se agrega por goteo cloruro de pivaloilo (8 mi, 39 mmol) y la mezcla se agita durante 20 horas a temperatura ambiente. Se agrega DCM (50 mi) y la mezcla se lava con H20 (80 mi) , HC1 acuoso (1 M, 80 mi) , H20 (80 mi) , NaHC03 saturado (80 mi) , se seca (Na2S04) se filtra, se evapora y se co-evapora con tolueno. El residuo se purifica por cromatografía por desorción súbita (Hexano/EtOAc , 3:2) para dar el producto como una espuma blanca (7.1 g, 61 %) .

*? RMN (CDC13, 300 MHz) d= 4.435 (1H, d, J = 8.2, H-l'), 4.411 (1H, dd, J = 6.0, 7.3, H-2), 4.361 (1H, d, J = 6.03, H-l), 4.312 (1H, dd, J = 6.8, 11.2, H-6'), 4.277 (1H, m) , 4.243 (1H, dd, J = 6.3, 11.1, H-6'), 4.173-4.034 (4H, no resuelto), 3.997 (1H, dd, J = 6.8, 8.8, H-6), 3.950 (1H, ddd, J = 2.2, 6.3, 6.4), 3.905 (1H, dd, J = 1.6, 7.3), 3.547 (1H, dd, J = 7.1, 8.1, H-21), 3.428, 3.416 (6H, 2xOMe), 1.500, 1.479, 1.374, 1.366, 1.318, 1.313 (6x3H, s, 6xC(CH3)2), 1.200 (9H, s, C(CH3)2) . 13C RMN (CDCI3, 75 MHz) d= 178.02 (CO) , 110.11, 110.07, 108.19 (3xC(CH3)2), 104.99 (C-l) , 103.44 (C-l1) , 78.76, 77.79, 77.69, 75.93, 74.93, 74.07(C-2'), 72.99, 64.53 (C-6') , 62.69 (C-6) , 56.20, 53.05 (2xOCH3) , 38.62 (C(CH3)3) , 28.02, 27.13, 27.01 (C(CH3)3) , 26.34, 26.11, 25.55, 24.347 (6xCH3) .

Ejemplo 5 Los compuestos de la fórmula 6 fueren sintetizados de acuerdo con el ejemplo 4 utilizando el agente de acilación apropiado. a) 4 -O- (6 -O- (4 -nitrobenzoilo) -3,4 -O-isopropilideno- -D-galacto iranosil ) -2 , 3 : 5 , 6 -di -O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal Rendimiento: 98 %, aceite XH RMN (CDC13, 300 MHz) : d = 8.30 - 8.23 (m, 4H) , 4.65 (dd, 1H, J = 4.5, 11.8) , 4.58 (dd, 1H, J = 7.3, 11.8), 4.44 (d, 1H, J = 8.3), 4.42 (dd, 1H, J = 6.2, 7.8) , 4.27 (d, 1H, J = 6.1), 4.27 (ddd, 1H, J = 6.7, 6.7, 2.3) , 4.18 (dd, 1H, J = 5.5, 2.2) , 4.16-4.10 (4H) , 4.01 (dd, 1H, J = 6.7, 8.8) , 3.87 (dd, 1H, J = 1.5, 7.8) , 3.79 (s, 1H) , 3.60 (dd, 1H, J = 7.8, 7.8) , 3.36, 3.35 (s, 2x3H) , 1.52, 1.49, 1.36, 1.35, 1.34, 1.33 (s, 6x3H) . 13C RMN (CDC13, 75 MHz) : d = 164.5, 150.6, 135.1, 131.0, 123.5, 110.5, 110.1, 108.3, 105.8, 103.9, 78.9, 77.8, 77.8, 76.6, 75.6, 74.2, 73.3, 71.4, 64.8, 64.7, 56.6, 54.3, 28.1, 27.2, 26.4, 26.3, 25.6, 24.7. b) 4-0-(6-0- (4-fenilbenzoilo) -3,4 -O-isopropilideno-p-D-galactopiranosil ) -2,3:5, 6 -di -O- isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal Rendimiento: 48 %, aceite incoloro XH RMN ( CDCl 3 , 300 MHz) d= 8.14-7.15 (9H, aromático) 4.64 (1H, dd, J = 4.9, 11.6, H-6a' ) , 4.55 (1H, dd , J = 7.1, 11.6, H-6b' ) , 4.48 (1H, dd, J = 5.9, 7.8, H-2) , 4.48 (1H, d, J = 8.1, H-l' ) , 4.27 (1 H, d, J = 6. 1, H-l) , 4.27 (1 H, m) , 4.22 (1 H, dd , J = 5.5, 2.3) , 4.19-4.10 (4H, no resuelto) , 4.02 (1H, dd, J = 6.8, 8.8, H-6b) , 3.91 (1H, dd , J = 1.5, 7.7, H-3) , 3.63 (1H, s, OH) , 3.61 (1H, dd, J = 7.0, 6.9, H-2- ) , 3.35, 3.34 (2x3H, s, OCH3) , 1.54, 1.50, 1.40, 1.37, 1.36, 1.33 (6x3H, s, 6xC(CH3)2) . 13C RMN (CDC13, 75 MHz) d = 166.2 (CO) , 145.9, 139.8, 130.3-125.2 (C aromático) , 110.4, 110.1, 108.3 (3xC(CH3)2), 105.0, 103.7 (C-l, C-l') , 78.9, 77.8, 77.8, 76.4, 75.0, 74.2, 73.4, 71.6 (C-2, C-3, C-4, C-5, C-2 ' , C-3', C-4 ' , C-5') , 64.6, 64.0 (C-6, C-6') , 56.3, 53.2 (2xOCH3) , 28.1, 27.2, 26.4, 26.3, 25.6, 24.5 (6xCH3) . c) 4 -O- ( 6 -O-propionilo-3 , 4 -O-isopropilideno-p-D-galactopiranosil ) -2,3:5, 6 -di -O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal Rendimiento: 81 %, aceite incoloro XH RMN (CDCI3, 300 MHz) : d = 4.42 (dd, 1H, J = 6.2, 7.5), 4.40 (d, 1H, J = 8.2), 4.35 (d, 1H, J = 6.1), 4.32 - 4.24 (3H) , 4.16 - 4.03 (4H) , 3.99 (dd, 1H, J = 6.8, 8.8), 3.93 (ddd, 1H, J = 2.1, 5.2, 7.2), 3.88 (dd, 1H, J = 1.6, 7.5, H-3), 3-54 (dd, 1H, J = 8.0, 8.0, H-2'), 3.41, 3.41 (s, 2x3H) , 2.34 (c, 2H) , 1.49, 1.47, 1.37, 1.36, 1.31, 1.31 (s, 6x3H) , 1.13 (t, 3H) . 13C RMN (CDCI3, 75 MHz) : d = 174.1, 110.3, 110.2, 108.3, 105.0, 103.6, 78.9, 77.9, 77.8, 76.3, 74.9, 74.1, 73.2, 71.4, 64.6, 63.2, 56.1, 53.0, 28.0, 27.3, 27.2, 26.3, 26.2, 25.6, 24.4, 8.95. d) 4 -O- (6 -O- (4 -clorobenzoilo) -3,4 -O-isopropilideno-p-D-galactopiranosil) -2 , 3 : 5 , 6-di -O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal Espuma blanca 1H RMN (CDCI3) : d = 8.10 y 7.42 (2 m, cada uno 2H) , 4.55 (2 ABc, cada uno 1H, J = 4.6, 7.4, 11.7) , 4.45 (d, 1H, J = 8.3) , 4.43 (m, 1H) , 4.27 (d, 1H, J = 5.9) , 4.11 (m, 2H) , 3.37 y 3.34 (2 s, cada uno 3H) , 1.52, 1.48, 1.38, 1.36, 1.36 y 1.34 (6 s, cada uno 3H) . 13C RMN (CDCI3) : d = 165.4, 139.6, 131.2, 128.7, 128.2, 110.4, 110.1, 108.3, 105.2, 103.8, 78.9, 77.8, 77.8, 76.5, 75.2, 74.2, 73.3, 71.5, 64.6, 64.2, 56.4, 53.5, 28.07, 27.2, 26.3, 26.2, 25.6, 24.6. e) 4-0- (6-0- (4 -fenilcarbamoil-benzoilo) -3,4 -O-isopropilideno-ß-D-galactopiranosil ) -2,3:5, 6-di -O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal 1H-RMN (300 MHz, CDCl3) : d = 1.33 (s, 3H) , 1.35 (s, 3H) , 1.37 (s, 3H) , 1.38 (s, 3H) , 1.50 (s, 3H) , 1.53 (s, 3H) , 3.33 (s, 3H) , 3.35 (s, 3H) , 3.58 - 3.64 (m, 1H) , 3.70 (d, 1H, J = 1.1) , 3.89 (dd, 1H, J = 7.7, 1.4) , 4.02 (dd, 1H, J = 8.8, 6.8) , 4.10 - 4.15 (m, 3H) , 4.18 - 4.22 (m, 1H) , 4.26 - 4.30 (m, 2H) , 4.43 - 4.48 (m, 2H) , 4.54 - 4.67 (m, 2H) , 7.17 (t, 1H, J = 7.4) , 7.39 (t, 2H, J = 7.6) , 7.65 (d, 2H, J = 7.6) , 7.94 (d, 3H, J = 8.5) , 8.17 (d, 2H, J = 8.4) . f) 4-0-(6-0-(4- (4 -bromofenilcarbamoil -benzoilo) -3 , 4 -O-isopropilideno^-D-galactopiranosil) -2,3:5,6-di-0-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal 1H-RM (300 MHz , CDCl3) : d = 1.33 (s, 3H) , 1.34 (s, 3H) , 1.36 (s, 3H) , 1.37 (s, 3H),1.49 (s, 3H) , 1.53 (s, 3H) , 3.32 (s, 3H) , 3.35 (s, 3H) , 3.5 (d, 1H, J = 4.5), 3.6 (t, 1H, J= 7.9), 3.86 -3.89 (m, 1H) , 3.98 - 4.04 (m, 1H) , 4.08 - 4.13 (m, 3H) , 4.18 -4.21 (m,lH) , 4.27 - 4.30 (m, 2H) , 4.39 - 4.47 (m, 2H) , 4.57 -4.64 (m, 2H) , 7.48 (d, 2H, J = 8.8), 7.56 (d, 2H, J = 8.8), 7.91 (d, 2H, J = 8.3), 8.01 (s, 1H) , 8.15 (d, 2H, J = 8.3) . g) 4-0-(6-0- (4-benzamidobenzoilo) -3,4 -O-isopropilideno- ß-D-galacto iranosil ) -2,3:5, 6 -di -O- isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : d = 1.33 (s, 3H) , 1.35 (s, 3H) , 1.37 (s, 3H) , 1.39 (s, 3H) , 1.50 (s, 3H) , 1.53 (s, 3H) , 3.33 (s, 3H) , 3.37 (s, 3H) , 3.60 (t, 1H, J = 7.8), 3.89 (dd, 1H, J =7.7, 1.4), 4.01 (dd, 1H, J = 8.7, 6.8), 4.09 - 4.22 (m, 5H) , 4.26 - 4.32 (m, 2H) , 4.46 - 4.64 (m, 4H) , 7.50 - 7.58 (m, 3H) , 7.76 (d, 2H, J = 8.7), 7.88 (d, 2H, J = 7.9), 8.05 (s, 1H) , 8.08 (d, 2H, J = 8.7). 13C-RMN (75 MHz, CDCl3): d = 24.52, 25.63, 26.27, 26.38, 27.21, 28.11, 53.10, 56.34, 63.89, 64.64, 71.59, 73.37, 74.26, 74.99, 76.35, 77.85, 78.93, 103.73, 104.98, 108.27, 110.16, 110.38, 119.14, 125.37, 127.04, 128.90, 131.09, 132.26, 134.42, 142.36, 165.77. h) 4-0- (6-0- (4- (4 -nitrobenzamido) -benzoilo) -3 , 4-0-isopropilideno- ß-D-galactopiranosil ) -2, 3:5, 6-di -O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : d = 1.33 (s, 3H) , 1.34 (s, 3H) , 1.37 (s, 3H) , 1.38 (s, 3H) , 1.49 (s, 3H) , 1.51 (s, 3H) , 3.33 (s, 3H) , 3.37 (s, 3H) , 3.60 (t, 1H, J = 7.8 Hz) , 3.89 (dd, 1H, J1 = 7.7, 1.4 Hz) , 4.01 (dd, 1H, J1 = 8.7, 6.8 Hz) , 4.08 - 4.26 (m, 5H) , 4.26 - 4.37 (m, 2H) , 4,40 - 4.63 (m, 4H) , 7.77 (d, 2H, J = 8.7 Hz) , 8.04 - 8.09 (m, 4H) , 8.31 - 8.34 (m, 3H) . 13C-RMN (75 MHz, CDCl3) : d = 24.47, 25.59, 26.23, 26.34, 27.18, 28.06, 53.09, 56.30, 63.98, 64.59, 71.51, 73.33, 74.27, 74.97, 76.35, 77.78, 77.87, 78.90, 103.67, 105.04, 108.26, 110.15, 110.38, 119.48, 123.98, 125.22, 126.01, 128.15, 128.39, 128.96, 131.08, 139.96, 141.72, 149.81, 163.82, 165.62. i) 4 -O- (6 -O- (3 , 5 -dinitrobenzoilo) -3, 4 -O-isopropilideno-p-D-galactopiranosil ) -2,3:5, 6 -di -O-isopropil ideno-D-glucosa dimetil acetal Rendimiento: 84 %, espuma amarilla tenue 13C R N (CDC13) : 162.57, 148.92 (dos carbonos) , 133.83, 129.80 (dos carbonos) , 122.64, 110.88, 110.37, 108.53, 106.05, 104.19, 79.26, 78.01, 77.82, 77.14, 76.10, 74.38, 73.49, 71.36, 65.71, 64.89, 57.09, 54.77, 28.32, 27.26, 26.55, 26.50, 25.93, 24.84. j ) 4-0- (6-0- (naftalen-3-ilacetilo) - 3,4 -O-isopropilideno^-D-galactopiranosil ) -2,3:5, 6 -di -O- isopro ilideno-D-glucosa dimetil acetal Rendimiento: 89 %, espuma blanca 13C RMN (CDCI3) : 171.48, 133.64, 132.70, 131.47, 128.52, 128.22, 127.88, 127.84, 127.45, 126.46, 126.13, 110.526, 110.50, 108.51, 105.53, 103.93, 79.14, 78.20, 78.07, 76.67, 75.47, 74.38, 73.30, 71.40, 64.84, 63.75, 56.47, 53.72, 41.49, 28.30,. 27.51, 26.64, 26.39, 25.88, 24.66.

Ejemplo 6 4-0- (6-0- (4 -aminobenzoilo) -3,4 -O-isopropil ideno- -D-galactopiranosil ) -2 , 3 : 5 , 6 -di -O- isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal El compuesto de conformidad con el ejemplo 5a (400 mg, 608 pmol) se disuelve en 10 mi de THF y se agrega Pd/C (50 mg) . La suspensión se agita bajo atmósfera de H2 durante tres días hasta que toda la materia prima se consumió (sistema TLC: tolueno-acetona 4:1 y MeOH-DCM al 10 %) . El catalizador se filtra sobre celite, y el residuo se aisla por cromatografía (tolueno-acetona 5:1) como una espuma blanca con un rendimiento del 89 % (341 mg) . 13C RMN (CDC13) : 166.56, 151.12, 132.04 (dos carbonos), 119.51, 114.11 (dos carbonos), 110.55, 110.35, 108.51, 104.98, 103.98, 79.19, 78.07, 78.04, 76.55, 75.12, 74.53, 73.66, 71.94, 64.91, 63.59, 56.47, 53.12, 28.36, 27.44, 26.63, 26.51, 25.90, 24.75.

Ejemplo 7 Tetra-O-acetil -L- fucosa La piridina (295 mi, 3.65 mol) se enfría a 0 °C y se agrega L-Fucosa (100 g, 609 mmol) durante la agitación. Se agrega por goteo Ac20 (287 mi, 3.04 mol) dentro del transcurso de 3 h. La mezcla de la reacción se agita durante 2 h a 0 °C y durante 24 h a temperatura ambiente. Se agrega metanol por goteo (25 mi, 618 mmol) y la mezcla de la reacción se agita durante 30 minutos. Luego se diluye la mezcla de la reacción con tolueno (400 mi) y se lava con agua (3x300 mi) . Las fases acuosas se combinan y se extraen con tolueno (300 mi) . Las fases orgánicas se combinan y se lavan con HCl 1N (3x500 mi) , agua (2x500 mi) y una solución de NaHC03 saturada (300 mi) . La fase orgánica se seca y se concentra a sequedad proporcionando 197 g (98 %) del producto como un jarabe incoloro.

Ejemplo 8 2 , 3 , 4-tri -O-acetil-l-tio-p-L-fucopiranósido de fenilo A una solución del compuesto del ejemplo 7 (196 g, 590 mmol) en tolueno (200 mi) se agrega tiofenol (76 mi, 737 mmol) y la mezcla se enfría a 0 °C. Se agrega por goteo BF3-Et20 (112 mi, 885 mmol) en 60 minutos, luego la mezcla de la reacción se agita durante 3 h a 0 °C, 12 h a 5 °C y 2 h a temperatura ambiente. La mezcla obtenida se lava con agua (500 mi), una mezcla de agua/salmuera (1:1) (700 mi), una mezcla NaOH/salmuera 1N (1:1) (400 mi), una mezcla de agua/salmuera (1:1) (700 mi) y salmuera (300 mi). Las fases orgánicas combinadas y secadas se evaporan a sequedad a 70 °C para dar 224 g del compuesto del título (99 %) .

Ejemplo 9 l-tio- -L-fucopiranósido de fenilo El compuesto del ejemplo 8 (224 g) se disuelve en metanol (500 mi) y se agrega NaOMe (2 g, 37 mmol) . La mezcla de la reacción se agita a 40 °C durante 2 1/2 h. El metanol (250 mi) se retira por destilación y se burbujea C02 a través de la solución restante durante 5 minutos alcanzando un pH = 7. La mezcla de la reacción se evapora y sea agrega acetato de isobutilo (450 mi) . Se evaporan 50 mi del solvente y la mezcla resultante se somete a cristalización dejándola a temperatura ambiente durante 24 h. El sólido cristalino blanco formado se filtra y se lava con el éter terc-butil metílico (200 mi) proporcionando 110 g (73 %) del producto después del secado.

Ejemplo 10 3 , 4 -O-isopropilideno-l-tio-p-L-fucopiranósido de fenilo El compuesto del ejemplo 9 (150 g, 0.58 mol) se convierte en suspensión en 2 , 2-dimetoxipropano (550 mi, 4.5 mol) y se agrega una cantidad catalítica de p-TsOH (1.19 g, 6.2 mmol) . Después de la agitación de la mezcla durante 12 h a temperatura ambiente se agrega lentamente Et3N (6 mi) para neutralizar el ácido.. La solución se evapora a sequedad (174 g) , el residuo se disuelve en éter dietílico (250 mi) y se enfría a 0 °C, luego se agrega por goteo hexano (250 mi) a la mezcla durante agitación vigorosa. La mezcla se mantiene en la nevera (5 °C) durante 2 días y el sólido precipitado blanco se filtra y se lava con hexano (200 mi) para dar 145.48 g del compuesto (85 %) . El licor madre se evapora, el residuo se disuelve en Et20 (25 mi) y se agrega por goteo hexano (25 mi) al mismo para cristalizar 11.51 g de la segunda cosecha. Rendimiento combinado: 91.5 %. P.f.: 81 °C, [a]D = 28.15 (1.03, MeOH) .

Ejemplo 11 2 -O-bencil-3 , 4 -O-isopropilideno-l-tio-p-L-fucopiranósido de fenilo El compuesto del ejemplo 10 (157 g, 0.53 mol) se agrega al DMF seco (800 mi) y se enfría a 0 °C. Se agrega NaH (1.2 equivalentes) cuidadosamente en porciones a la solución enfriada y se continúa la agitación durante 1/2 hora a la misma temperatura. Luego se agrega por goteo el bromuro de bencilo (76.3 mi, 0.635 mol) y la temperatura se deja que alcance la temperatura ambiente. La mezcla de la reacción se agita durante 1 hora luego se enfría a 0 °C y se agrega MeOH (60 mi) por goteo. La mezcla resultante se evapora, el residuo se disuelve en CH2C12 (1500 mi) y se lava con agua (3x750 mi) . La fase orgánica se seca (Na2S04) se filtra y se evapora para dar 205.2 g de un jarabe de color amarillo-café (100 %) .

Ejemplo 12 2 -0-bencil-l-tio- -L-fucopiranósido de fenilo A una solución del compuesto del ejemplo 11 (100.0 g, 0.26 mol) en MeOH (300 mi) se agrega ácido acético al 60 % (500 mi) . La mezcla se agita a 80 °C durante cuatro horas luego se evapora. Los solventes restantes son co-evaporados con la ayuda del tolueno (100 mi) . El residuo se disuelve en MeOH (200 mi) bajo calentamiento y la solución se deja que se enfríe a temperatura ambiente. Se precipitan cristales blancos los cuales son filtrados, lavados con metanol frío y se secan. Rendimiento: 50.52 g (56.1 %) . Una primera (15.81 g, 17.5 %) y una segunda cosechas (10.42 g, 11.6 %) del producto pueden ser cristalizadas a partir del licor madre.

P.f. : 105-107 °C, [a] D = -16.93 (1.00, MeOH) .

Ejemplo 13 3 , 4-di-0-benzoil-2 -O-bencil-l-tio-p-L-fucopiranósido de fenilo El compuesto del ejemplo 12 (10 g, 29 mmol) se disuelve en la mezcla de piridina (12 mi, 145 mmol) y DCM (35 mi) . La solución se enfría a 0 °C y se agrega por goteo cloruro de benzoilo (10 mi, 87 mmol) cuando la mezcla llegó a ser una suspensión espesa. La misma se agita a temperatura ambiente durante 3.5 horas luego se evapora, el residuo se disuelve en tolueno (50 mi) , la solución se lava con agua (2x30 mi) , una solución de HCl. 1 N (20 mi) , agua (30 mi) , una solución de NaHC03 saturada (30 mi) y agua : salmuera = 1:1 (40 mi) . La fase orgánica se seca, se evapora y el jarabe amarillo obtenido es cristalizado a partir de MeOH (50 mi) . Los cristales blancos se precipitan, los cuales son filtrados, se lavan con MeOH frío (25 mi) y se secan.

Rendimiento: 14.63 g (91 %) . P.f. : 98-100 °C, [a] D = -112 (1.02, CHC13) .

?. RMN (CDCI3, 300 Hz) : d = 7.98-7.17 (m, 20H) , 5.67-5.65 (m, 1H) , 5.45 (dd, 1H, J = 3.3 Hz, J = 9.6 Hz) , 4.84 - 4.76 (m, 2H) , 4.57 (d, 1H, J = 10.5) , 4.07-3.90 (m, 2H) , 2.15 (s, 3H) , 2.25 (d, 3H, J = 6.3 Hz) . 13C RMN (CDC13 , 75 MHz) : d = 166.1, 165.7, 137.9-128.1, 87.2, 75.6, 75.6, 75.1, 73.7, 72.0, 17.1.

Ejemplo 14 3 , 4-di -0-acetil-2 -O-bencil -1-tio- ß-L- fucopiranósido de fenilo El compuesto del título se obtiene por el método de acuerdo al ejemplo 13 utilizando anhídrido acético como el agente de acilación. Cristales blancos, rendimiento: 88 %, P.f.: 124 °C (EtOH) , [a] D = -14.9 (1.00, CHCl3) .

XH RMN (CDC13) : 7.61-7.58 (m, 2H) , 7.34-7.26 (m, 8H) , 5.25 (dd, 1H) , 5.02 (dd, 1H) , 4.84 y 4.57 (sistema AB) , 4.71 (d, 1H) , 3.79 (cd, 1H) , 3.72 (t, 1H) , 2.15 (s, 3H) , 1.93 (s, 3H) , 1.22 (d, 3H) .

Ejemplo 15 2 -O-bencil -3 , 4 -di -O- (4 -clorobenzoil ) - 1-t??-ß-L- fucopiranósido de fenilo El compuesto del título se obtiene por el método de acuerdo al ejemplo 13 utilizando el cloruro de 4-clorobenzoilo como el agente de acilación. P.f.: 142-144.5 °C.

H RMN (600 MHz, CDCl3) : d = 1.30 d 3H, 3.87 t 1H, 4.01 de 1H, 4.54 y 4.81 ABc 2H, .78 d 1H, 5.28 dd 1H, 5.58 dd 1H, 7.15 m 5H, 7.25 m 2H, 7.37 m 3H, 7.43 m 2H, 7.65 m 2H, 7.69 m 2H, 7.84 m 2H. 13C RMN (150 MHz, CDC13) : d = 16.7, 71.9, 73.3, 74.8, 75.3, 75.4, 87.0, 127.8, 127.9, 128.0, 128.3, 128.7, 128.9, 129.0, 130.9, 131.2, 133.0, 164.5, 164.9.

Ejemplo 16 2-0- (4-metilbencil) -3,4 -O-isopropilideno-l-tio- -L-fucopiranósido de fenilo Se agregan el cloruro de 4 -metilbencilo (60 g, 430 mmol, 1.1 equivalentes), una solución de NaOH al 25 % (120 mi) y TBAHS (4.0 g, 11.7 mmol, 0.03 equivalentes) al compuesto del ejemplo 10. La mezcla se agita a 90 °C durante 3 horas . Después del complemento de la reacción se agrega el MeOH (1.6 mi, 39.0 mmol, 0.1 equivalentes), la mezcla se agita durante 30 minutos y los solventes son removidos a 50 °C. El residuo es utilizado para la siguiente etapa sin purificación adicional. Una muestra pequeña es purificada para caracterización.

XH RMN (CDC13, 300 MHz) : d = 7.55-7.52 (m, 4H) , 7.32-7.26 (m, 5H) , 7.14 (d, 2H, J = 8.2 Hz) , 4.64-4.57 (m, 2H) , 4.22 (t, 1H, J = 5.9 Hz, J = 5.9 Hz) , 4.04 (dd, 1H, J = 2.1 Hz, J = 5.6 Hz) , 3.86-3.79 (m, 1H) , 3.52-3.47 (m, 1H) , 2.34 (s, 3H) , 1.42-1.36 (m, 9H) . 13C RMN (CDC13, 75 MHz) : d = 137.6, 135.1, 134.1, 132.3, 129.2, 129.0, 128.6, 127.6, 109.9, 86.3, 80.1, 78.1, 76.6, 73.6, 72.6, 28.2, 26.7, 21.5, 17.7.

Ejemplo 17 2 -O- (4-metilbencil) -l-tio^-L-fucopiranósido de fenilo Al material sin refinar obtenido en el ejemplo 16 se agregan isopropanol (100 mi) y agua (15 mi) y el pH se ajusta por la adición de una solución de HC1 4 N (4 mi, pH = 3) . Luego se agrega la resina IR 120 (15 g) y la mezcla se agita bajo reflujo durante 1 hora. Después del complemento de la reacción la mezcla de la reacción se filtra a 70 °C y se agrega una mezcla de agua-MeOH-hexano- isopropanol (150 ml/400 ml/150 ml/1.7 1) . El compuesto se somete a cristalización por la adición de cristales de siembra y se deja reposar a 5-10 °C durante varias horas. El sólido cristalino blanco se retira por filtración y se lava con 200 mi de hexano proporcionando 87.7 g (62 %) del compuesto cristalino puro. Después del tratamiento del licor madre también se obtienen 34.2 g del compuesto. Rendimiento total: 121.9 g, (86 %) . P.f . : 146-147 °C.

XH RMN (CDC13 , 300 MHz) : d = 7.56-7.52 (m, 2H) , 7.3-7.24 (m, 5H) , 7.13 (d, 2H, J = 7.9 Hz) , 4.87 (d, 1H, J = 10.8 Hz), 4.63-4.55 (m, 2H) , 3.66-3.49 (m, 4H) , 2.31 (s, 3H) , 1.30 (d, 3H, J = 6.5 Hz) . 13C RMN (CDCI3 , 75 Hz): d = 138.1, 135.3, 134.4, 131.8, 129.5, 129.2, 128.7, 127.6, 87.7, 78.1, 75.4, 75.4, 74.7, 71.9, 21.5.

Ejemplo 18 3 , 4 -di -0-benzoilo-2 -O- (4 -metilbencil ) -l-tio- -L-fucopiranósido de fenilo Se agrega piridina (33.6 mi, 416 mmol , 3 equivalentes) a una mezcla del compuesto de acuerdo con el ejemplo 17 (50 g, 138.7 mmol) en DCM (70 mi) a 0-5 °C. Luego se agrega lentamente cloruro de benzoilo (35.4 mi, 305 mmol, 2.2 equivalentes) (la temperatura no puede alcanzar más de 15 °C) a .la mezcla durante 1 hora. Después de la adición, la mezcla de la reacción se agita durante 2 horas a ta. Luego a 0-5 °C se agrega lentamente MeOH (3 mi, 0.3 equivalentes) y la mezcla de la reacción se agita durante 30 minutos a ta. Nuevamente a 0 °C, se agrega lentamente una solución de HCl 4 M (32 mi) y la mezcla de la reacción se agita durante 30 minutos a ta. Se extrae la fase orgánica, se lava 2 veces con agua (2x30 mi) , se seca, se evapora a 60 °C y se agrega MeOH (200 mi) . La mezcla se evapora entonces parcialmente a 60 °C y el compuesto empieza a cristalizarse: 77.1 (98 %) . P . f . : 81-83 °C.

? RMN (CDC13 , 300 MHz) : d = 7.91-7.19 (m, 15H) , 6.98 (d, 2H, J = 7.9 Hz) , 6.86 (d, 2H, 7.9 Hz), 5.57-5.56 (m, 1H) , 5.35 (dd, 1H, J = 3.3 Hz, J = 9.6 Hz) , 4.75-4.66 (m, 2H) , 4.46 (d, 1H, J = 10.4), 3.99-3.84 (m, 2H) , 2.15 (s, 3H) , 2.25 (d, 3H, J = 6.4 Hz) . 13C RMN (CDCI3, 75 MHz): d = 166.0, 165.7, 137.7, 134.8, 133.6, 133.3, 133.2, 133.2, 133.1, 130.2, 129.9, 129.8, 129.8, 129.3, 129.2, 128.8, 128.5, 128.0, 87.3, 75.5, 75.4, 74.9, 73.7, 72.0, 21.4, 17.0.

Ejemplo 19 3,4-di-O- (4-clorobenzoilo) -2-0- (4-metilbencil ) -l-tio- -L-fucopiranósido de fenilo Partiendo del compuesto del ejemplo 17 (30 g) y utilizando el cloruro de 4-clorobenzoilo (26.7 mi) se obtiene el compuesto del título de acuerdo con la metodología descrita en el ejemplo 18: 50.3 g del jarabe amarillo.

JH RMN (CDC13, 300 MHz) : d = 7.92-7.15 (17H) , 5.50 (m, 1H) , 5.30 (dd, 1H, J = 3.3, 9.6) , 4.71 (d, 1H, J = 9.6), 4.44 (d, 1H, J = 10.8) , 3.94 (m, 1H, J = 0.6, 6), 3.80 (t, 1H, 9.6) , 2.15 (s, 3 H) , 1.23 (d, 1 H, J = 6.3) . 13C RMN (CDCI3, 75 Hz) : d = 165.2, 164.7, 140.2, 139.8, 137.8, 134.7, 133.2-128.0, 87.1, 75.6, 75.4, 74.8, 73.4, 72.2, 21.4, 17.0.

Ejemplo 20 El procedimiento de glucosilación típico conduce a los compuestos de la fórmula general 4.

A una solución enfriada a 0-10 °C del donador (1.1-1-2 equivalentes) y el aceptor (1.0 equivalentes) en DCM-THF 5:1-9:1 (2.5-4 volúmenes) se agrega NBS (1.1-1.2 equivalentes) seguido por ácido tríflico (0.01-0.025 equivalentes) . La mezcla de la reacción se agita durante 15 minutos. Luego se agrega una solución de hidróxido de amonio al 25 % (2 equivalentes) para apagar la reacción. La fase orgánica se separa y se concentra, y el residuo se purifica por cristalización, cromatografía en columna o se utiliza adicionalmente como el producto sin refinar. El rendimiento varía entre 50-87 %. a) O- (2 -O-bencil-3 , 4 -di -0- (4 -clorobenzoilo) -a-L-fucopiranosilo) -(l->2)-0-(6-0- (4 -clorobenzoilo) -3,4-isopropilideno- -D-galactopiranosil) - (l- 4) -2,3:5, 6-di-0-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal donador: el compuesto del ejemplo 15, aceptor: el compuesto del ejemplo 5d Cristales blancos, P.f.: 109.4-111.7 °C.

¾ R N (CDC13) d= 1.15 (d, 3H, J = 5.7 Hz); 1.4 (m, 12H) ; 1.55 (m, 6H) ; 3.35 (s, 3H) ; 3.38 (s, 3H) ; 3.8 (t, 1H, J = 6 Hz) ; 3.95-4.4 (m, 10H) ; 4.5-4.8 (m, 7H) ; 5.55 (m, 1H) ; 4.63-4.7.1 (m, 2H) ; 7.25 (m, 7H) ; 7.4 (m, 4H) ; 7.7 (d, 2H, J=8.6); 7.85 (d, 2H, J=8.6); 8.00 (d, 2 H, J = 9.5). 13C RMN (CDCI3) d= 16.02, 24.62, 26.29, 26.68, 26.72, 27.16, 27.84, 52.64, 56.07, 63.81, 64.59, 64.85, 70.29, 70.71, 72.03, 72.61, 72.78, 73.64, 74.74, 74.84, 76.66, 76.87, 77.32, 79.96, 95.24, 100.84, 105.26, 108.74, 109.84, 110.33, 127.59, 127.78, 127.9, 128.11, 128.16, 128.21, 128.39, 128.62, 128.68, 130.77, 130.96, 137.66, 139.13, 139.46, 139.56, 164.17, 164.90, 165.24. b) 0- (2 -O-bencil-3 , 4-di -O-benzoilo-a-L-fucopiranosilo) - (l->2) -O- (6 -O- (4-clorobenzoilo) -3 , 4-isopropilideno- -D-galactopiranosil ) -(l- 4)-2,3:5,6-di -O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal donador: el compuesto del ejemplo 13, aceptor: el compuesto del ejemplo 5d Espuma blanca JH RMN (300 Hz, CDCl3) : d = 1.18 (d, 3H, J = 6.5 Hz), 1.37 (s, 3H) , 1.39 (s, 3H) , 1.41 (s, 3H) , 1.44 (s, 3H) , 1.56 (s, 6H) , 3.35 (s, 3H) , 3.39 (s, 3H) , 3.81 (dd, 1H, J = 6.6 Hz , J = 7.6 Hz) , 3.97 (d, 1H, J = 4.9 Hz) , 4.07-4.14 (m, 3H) , 4.20-4.25 (m, 3H) , 4.31 (d, 1H, J = 6.2 Hz) , 4.37 (d, 2H, J = 6.2 Hz) , 4.54-4.60 (m, 4H) , 4.69 (d, 2H, J = 10.4 Hz) , 4.76 (d, 1H, J = 7.9 Hz), 5.64 (d, 1H, J = 3.4 Hz) , 5.68-5.73 (m, 2H) , 7.21-7.31 (m, 8H) , 7.41-7.48 (m, 5H) , 7.81 (d, 2H, J = 7.1 Hz) , 7.96 (d, 2H, 8.1 Hz) , 8.01 (d, 2H, J = 8.6 Hz). 13C-RM (75 MHz, CDCl3) : d = 165.88, 165.38, 165.20, 139.58, 137.90, 133.06, 132.73, 131.06, 129.90, 129.75, 129.71, 129.56, 128.73, 128.34, 128.18, 128.10, 127.85, 127.59, 110.41, 109.97, 108.87, 105.39, 101.02, 95.56, 79.99, 76.87, 76.74, 74.96, 74.84, 73.68, 73.12, 72.48, 72.32, 70.78, 70.23, 65.02, 64.88, 63.92, 56.16, 52.66, 27.92, 27.29, 26.84, 26.80, 26.38, 24.78, 16.14. c) O- (2 -O-bencil-3 , 4 -di -O-benzoilo- -L-fucopiranosilo) - (l->2) -O- (6 -O-pivaloilo- 3 , 4 - isopropilideno- ß-D-galactopiranosil) - (l->4) -2, 3 :5, 6-di-O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal donador: el compuesto del ejemplo 13, aceptor: el compuesto del ejemplo 4 Espuma blanca 1H-RMN (300 MHz, CDC13) : d = 1.17 (d, 3H, J = 6.5 Hz) , 1.22 (s, 9H) , 1.36 (s, 3H) , 1.39 (s, 3H) , 1.41 (s, 3H) , 1.42 (s, 3H) , 1.54 (s, 6H) , 3.44 (s, 6H) , 3.77 (dd, 1H, J = 6.6 Hz, J = 8.0 Hz) , 3.90-3.96 (m, 2H) , 4.08-4.15 (m, 3H) , 4.21-4.24 (m, 2H) , 4.27-4.34 (m, 4H) , 4.40 (d, 1H, J = 6.3 Hz) , 4.52-4.59 (m, 2H) , 4.63-4.75 (m, 3H) , 5.62 (d, 1H, J = 3.3 Hz) , 5.67-5.71 (m, 2H) , 7.20-7.31 (m, 8H) , 7.40-7.47 (m, 3H) , 7.78-7.83 (m, 2H) , 7.93-7.97 (m, 2H) . 13C-RMN (75 MHz, CDC13) : d = 177.92, 165.85, 165.17, 137.89, 133.04, 132.70, 129.88, 129.73, 129.68, 129.54, 128.32, 128.15, 128.07, 127.82, 127.55, 110.18, 109.86, 108.82, 105.15, 101.11, 95.45, 79.95, 76.85, 76.75, 74.78, 74.54, 73.31, 73.04, 72.46, 72.20, 70.40, 70.20, 64.97, 64.81, 62.27, 56.04, 52.43, 38.66, 27.92, 27.22, 27.03, 26.82, 26.75, 26.29, 24.82, 16.11. d) O- (2-0- (4-metilbencil) -3, 4 -di -O-benzoilo-a-L-fucopiranosilo) - ( l- 2) -0- (6 -O-pivaloilo-3 , 4 -isopropilideno-ß-D-galactopiranosil ) -(l->4)-2, 3:5,6-di -O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal donador: el compuesto del ejemplo 18, aceptor: el compuesto del ejemplo 4 Espuma blanca *H RMN (CDCI3 , 300 MHz) : d = 7.95 (d, 2H, J= 7.2 Hz), 7.79 (d, 2H, J= 7.2 Hz) , 7.59-7.23 (m, 6H) , 7.15 (d, 2H, J = 7.9 Hz) , 7.00 (d, 2H, 7.8), 5.70-5.63 (m, 3H) , 4.72-3.89 (m, 17H) , 3.70 (1, 1H, J = 7.2 Hz), 3.44 (s, 6H) , 2.27 (s, 3H) , 1.54-1.16 (m, 30H) . 13C RMN (CDC13, 75 MHz) : d = 178.2, 166.13, 165.5, 137.5, 135.1, 133.4, ' 133.0, 130.2, 130.0, 130.0, 129.9, 129.8, 129.1, 128.7, 128.6, 128.6, 128.5, 128.4, 128.3, 110.5, 110.1, 109.1, 105.5, 101.5, 95.8, 80.2, 75.1, 74.9, 73.6, 73.1, 72.8, 72.4, 70.7, 70.5, 65.3, 65.1, 62.6, 56.3, 52.8, 39.0, 28.2, 27.6, 27.3, 27.2, 27.1, 26.6, 25.1, 21.4, 16.4. e) 0- (2-0- (4 -metilbencil) -3 , 4-di -0- (4 -clorobenzoilo) -a-L-fucopiranosilo) - (l->2) -0- (6 -0-pivaloilo-3 , 4-isopropilideno- -D-galactopiranosil) - ( l->4 ) -2 , 3 : 5 , 6 -di -0-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal donador: el compuesto del ejemplo 19, aceptor : el compuesto del ejemplo 4 Espuma blanca ¾ RMN (CDCI3, 300 MHz) : d = 7.97-7.00 (m, 12H) , 5.68-5.58 (m, 3H) , 4.73-3.75 (m, 18H) , 3.45 (s, 6H) , 2.29 (s, 3H) , 1.55-1.16 (m, 30H) . 13C RMN (CDCI3, 75 MHz) : d = 178.2, 165.3, 164.5, 139.9-127.4, 110.5, 110.2, 109.1, 105.5, 101.4, 95.6, 80.3, 75.0, 75.0, 73.7, 73.0, 72.9, 72.3, 70.7, 65.2, 65.0, 62.6, 56.4, 52.8, 52.5, 39.0, 28.2, 27.5, 27.4, 27.1, 26.6, 25.1, 21.4, 16.4. f ) O- (2-0- (4 -metilbencil) -3, 4 -di -O-benzoilo-a-L-fucopiranosilo) - (l->2) -0- (6 -0- (4 -clorobenzoilo) -3,4-isopropilideno^-D-galactopiranosil) - (l- 4) -2,3:5, 6-di-0-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal donador: el compuesto del ejemplo 18, aceptor: el compuesto del ejemplo 5d Espuma blanca *H RMN (CDCI3, 300 MHz) : d = 7.97-6.93 (m, 18H) , 5.64-5.54 (m, 3H) , 4.60-3.70 (m, 18H) , 3.31 (s, 3H) , 3.27 (s, 3H) , 2.22 (s, 3H) , 1.48-1.24 (m, 18H) , 1.11 (d, 3H, J = 6.3 Hz) . 13C RMN (CDCI3, 75 MHz) : d = 165.7, 165.6, 165.5, 139.8-128.0, 110.7, 110.3, 109.1, 105.7, 102.4, 95.9, 80.2, 77.9-70.5, 65.3, 65.1, 64.2, 56.4, 52.9, 28.2, 27.7, 27.3, 27.2, 26.4, 25.1, 21.3, 16.4. g) O- (2-0- (4-metilbencil) -3,4-di-0- (4 -clorobenzoilo) - -L-fucopiranosilo) - (l->2) -O- (6-0- (4 -clorobenzoilo) -3,4-isopropilideno^-D-galactopiranosil) - (l->4) -2,3:5, 6-di-0-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal donador: el compuesto del ejemplo 19, aceptor: el compuesto del ejemplo 5d Espuma blanca XH RMN (CDCI3, 300 MHz): d = 7.95-6.95 (m, 16H) , 5.59-5.50 (m, 3H) , 4.69-3.69 (m, 18H) , 3.31 (s, 3H) , 3.28 (s, 3H) , 2.23 (s, 3H) , 1.55-1.30 (m, 18H) , 1.09 (d, 3H, J = 6.6 Hz) . 13C RMN (CDCI3, 75 MHz): d = 165.6, 165.3, 164.5, 139.9-128.2, 110.7, 110.2, 109.1, 105.7, 101.2, 95.7, 80.3, 77.7-70.6, 65.2, 65.0, 64.2, 56.4, 53.0, 29.2, 28.2, 27.7, 27.1, 26.6, 25.0, 21.4, 16.4. h) O- (2 -O-bencil-3 , 4-di -O-benzoilo- -L-fucopiranosilo) - ( l->2 ) -O- (6 -O-benzoilo-3 , 4 - isopropilideno- ß-D-galactopiranosil ) - (l->4 ) -2 , 3 : 5 , 6-di -O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal donador: el compuesto del ejemplo 13, aceptor: 4-0- (6-0- benzoilo-3 , 4 -O-isopropilideno-p-D-galactopiranosil) -2,3:5,6-di -O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal [1] Jarabe amarillo *H RMN (CDC13 , 600 MHz) : d = 1.17 (3H, d, J=6.5 Hz), 1.36 (3H, s) , 1.37 (3H, s) , 1.38 (3H, s) , 1.42 (3H, s) , 1.53 (3H, s) , 1.54 (3H, s) , 3.33 (3H, s) ; 3.36 (3H, s) , 3.80 (1H, dd, J=7.8, 6.5 Hz) , 3.97 (1H, dd, J=5.8, 1.3 Hz) , 4.06-4.13 (3H, m) , 4.17-4.25 (3H, m) , 4.30 (1H, dd, J=6.1, 6.0 Hz) , 4.34-4.38 (2H, m) , 4.52-4.60 (4H, m) , 4.64 (1H, d, J=12.3 Hz), 4.71 (1H, d, J=12.3 Hz) , 4.75 (1H, d J=8.0 Hz), 5.62 (1H, d J=3.9 Hz) , 5.66 (1H, d, J=3.8 Hz); 5.69 (1H, dd, J=ll.l, 3.8 Hz) , 7.16-7.29 (7H, m) , 7.38-7.48 (5H, m) , 7.54-7.60 (2H, m) , 7.79 (2H, m) , 7.94 (2H, m) ; 8.05 (2H, m) . i ) O- (2 -O-bencil-3 , 4 -di -O- (4 -clorobenzoilo- -L-fucopiranosilo) - (l->2) -O- (6 -O-pivaloilo-3 , 4 -isopropilideno-ß-D-galactopiranosil) -(l->4)-2,3:5,6-di -O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal donador: el compuesto del ejemplo 15, aceptor : el compuesto del ejemplo 4 Espuma blanca XH RMN (CDCI3, 300 MHz) : d = 7.88 - 7.13 (m, 13H) , 5.70 - 5.58 (m, 3H) , 4.75 - 3.75 (m, 18H) , 3.45 (s, 6H) , 2.29 (s, 3H) , 1.55 - 1.16 (m, 30H) . 13C RMN (CDCI3 , 75 MHz) : d = 178.2, 165.3, 164.5, 139.9 -128.0, 110.5, 110.1, 109.1, 105.5, 101.4, 95.6, 74.0, 73.7, 73.1, 72.9, 72.3, 70.7, 65.2, 65.0, 62.6, 56.4, 52.8, 39.0, 28.2, 27.5, 27.3, 27.1, 26.6, 25.1, 16.4.

Ejemplo 21 Procedimiento típico para convertir los compuestos de la fórmula general 4 a los compuestos de la fórmula general 3 Método A: una suspensión/solución de un compuesto de la fórmula general 4 en una mezcla de MeC -H20 7:1 (4-8 volúmenes) en la presencia de monohidrato de pTsOH (0.2-0.25 equivalentes) se calienta a 45 °C y se agita durante 7-24 horas. El ácido se neutraliza por trietil amina, los solventes se evaporan y el residuo se cristaliza o se purifica por cromatografía proporcionando los compuestos con un rendimiento de 29-78 %.

Método B: un compuesto de la fórmula general 4 se disuelve en acetona (5-15 volúmenes) y se agrega cc.HCl-agua 1:1 (1-3 volúmenes) a la solución. La misma se agita a 40-60 °C durante 3-6 horas. Se agrega una solución de hidróxido de amonio al 25 % para alcanzar pH = 9. La mezcla de la reacción se diluye con agua y acetato de etilo (cada uno de 5-15 volúmenes) , se extrae y la fase orgánica se evapora para dar el producto final con un rendimiento de 85-95 %. a) O- (2-0- (4-metilbencil) -3, 4 -di -O-benzoilo-a-L-fucopiranosilo) - (l- 2) -0- (6-0- (4-clorobenzoilo) -ß-D-galactopiranosil) - (l->4) -D-glucosa A partir del compuesto del ejemplo 20f, método A, sólido incoloro XH RMN (CDCI3, 300 MHz ) : d = 7.95-6.74 (m, 18H) , 5.67-5.21 (m, 4H) , 4.74-3.07 (m, 17H) , 2.16 (s, 3H) , 1.09-1.06 (m, 3H) . 13C RMN (CDC13( 75 MHz) : d = 166.1, 166-0, 165.8, 139.9-128.0, 101.8, 99.0, 92.4, 78.7 - 60.9, 21.7, 16.3. b) O- (2-0- (4 -metilbencil) -3,4-di-O- (4 -clorobenzoilo) - -L-fucopiranosilo) - (l- 2) -O- (6-0- (4 -clorobenzoilo) -ß-D-galactopiranosil ) - (l->4) -D-glucosa A partir del compuesto del ejemplo 20g, método A, cristales blancos, P.f. : 235-237 °C ( tolueno/acetona) . 1H RMN (CDCI3, 300 MHz) : d = 7.92-6.73 (m, 16H) , 5.60-5.18 (m, 4H) , 4.81-3.08 (m, 17H) , 2.18 (s, 3H) , 1.14-1.02 (m, 3H) . 13C RMN (CDCI3, 75 MHz) : d = 165.8, 165.3, 164.8, 140.2-127.7, 101.8, 96.6, 92.5, 79.3- 60.9, 21.4, 16.2. c) O- (2-0- (4 -metilbencil ) -3, 4-di -O- (4 -clorobenzoilo) - -L-fucopiranosilo) - (l- 2) -0- (6 -O-pivaloilo- -D-galactopiranosil) - (l-»4) -D-glucosa A partir del compuesto del ejemplo 20e, método A, sólido incoloro XH RMN (CDCI3, 300 MHz) : d = 7.90-6.87 (m, 12H) , 5.69-5.30 (m, 4H) , 4.74-3.01 (m, 17H) , 2.27 (s, 3H) , 1.25-1.09 (m, 12H) . 13C RMN (CDCI3, 75 MHz) : d = 178.8, 165.3, 165.2, 140.2-127.9, 101.5, 98.5, 92.4, 78.5- 58.9, 27.5, 21.4, 16.3. d) O- (2-0- (4-metilbencil) -3 , 4 -di -O-benzoilo-a-L-fucopiranosilo) - (l->2) -0- (6 -O-pivaloilo-p-D-galactopiranosil) -(l-4) -D-glucosa A partir del compuesto del ejemplo 20d, método A, sólido incoloro XH RMN (CDC13, 300 MHz) : d = 7.95-6.98 (m, 14H) , 5.86-5.13 (m, 4H) , 4.72-3.00 (m, 17H) , 2.26 (s, 3H) , 1.24-1.07 (m, 12H) . 13C RMN (CDCI3, 75 MHz): d = 178.8, 166.2, 166.0, 138.3-128.5, 101.6, 99.0, 92.3, 78.8-58.9, 27.3, 21.4, 16.3. e) O- (2 -O-bencil-3 , 4-di-O- ( -clorobenzoilo) - -L-fucopiranosilo) - (l->2) -0- (6-0- (4-clorobenzoilo) -ß-D-galactopiranosil ) - (l->4) -D-glucosa A partir del compuesto del ejemplo 20a, método A, cristales blancos.

Mezcla de anómeros a/ß: P.f.: 226-228 °C.

XH RMN (CDCI3) d= 1.15 (d, 3H, J=6.5Hz); 3.15-4.2 (m, 15H) ; 4.4-4.95 (m, 15H) ; 5.12 (d, 0.7H, J=3.9Hz); 5.6 (m, 2H) ; 5.9 (d, 1H, 3.6Hz); 7.25 (m, 7H) ; 7.45 (m, 4H) ; 7.65 (d, 2H, J=8.5Hz); 7.85 (d, 2H, J=8.6Hz); 8.1 (d, 2H, J=8.1Hz). 13C RMN (CDCI3) d= 15.28, 18.49, 60.16, 61.23, 61.65, 66.72, 68.92, 69.27, 69.29, 70.46, 71.39, 71.46, 71.72, 71.76, 72.08, 73.97, 74.00, 74.03, 74.08, 74.45, 75.05, 75.22, 75.30, 75.39, 75.43, 75.88, 91.92, 96.02, 96.92, 96.95, 100.21, 100.25, 128.50, 128.80, 128.91, 137.26, 137.27, 138.82, 140.57, 140.70, 140.93, 166.07, 166.52, 166.86.

Anómero ß: P.f.: 136-141 °C.

XH RMN (CDCI3) d= 1.06 (d, 3H, J=6.6Hz); 3.35 (m, 3H) ; 3.5 (m, 2H) ; 3.7 (m, 1H) ; 3.8-4.2 (m, 7H) ; 4.4-4.7 (m, 6H) ; 5.55 (m, 2H) ; 5.9 (d, 1H, J=3.4Hz); 7.1-7.6 (m, 11H) ; 7.65 (d, 2H, J=8.5Hz); 7.85 (d, 2H, J=8.6Hz); 8.1 (d, 2H, J=8.lHz). 13C RMN (CDCI3) d= 16.30, 61.57, 65.18, 65.99, 66.02, 70.86, 71.70, 72.63, 73.83, 73.89, 74.23, 74.27, 75.83, 75.88, 75.96, 75.99, 76.19, 76.24, 76.66, 78.89, 97.95, 98.01, 102.24, 128.97, 129.30, 129.39, 129.46, 129.75, 129.82, 130.09, 132.08, 132.22, 132.48, 138.82, 140.57, 140.70, 140.93, 166.07, 166.52, 166.86. f) O- (2 -O-bencil-3 , 4 -di -O-benzoilo- -L-fucopiranosilo) - ( 1-^2 ) -O- (6-0- (4 -clorobenzoilo) - ß-D-galactopiranosil ) - ( l->4 ) -D-glucosa A partir del compuesto del ejemplo 20b, método A, sólido incoloro ¦""H-RMN (300 MHz, CDCl3/MeOH 9:1): d = = 1.10 (d, 3H, J = 6.5 Hz) , 1.20 (d, 0.7H, J = 6.6 Hz), 3.37-3.55 (m, 5H) , 3.67-3.93 (m, 6H) , .3.98-4.10 (m, 1H) , 4.25-4.65 (m, 5H) , 5.12 (d, 1H, J = 3.7 Hz) , 5.47-5.64 (m, 3H) , 7.00-7.60 (m, 12H) , 7.71 (d, 2H, J = 7.4 Hz), 7.85 (d, 2H, J = 8.3 Hz) , 7.94-7.98 (m, 3H) . g) O- (2 -O-bencil-3 , 4-di -O-benzoilo-a-L-fucopiranosilo) - (l->2) -O- (6 -O-benzoilo- -D-galactopiranosil) - (l->4 ) -D-glucosa A partir del compuesto del ejemplo 2Oh, método B, jarabe amarillo claro 13C-RMN (150 MHz, DMSO-d6) d= 165.6, 165.5, 164.7, 164.6, 138.0, 133.5, 133.4, 133.3, 131.1, 129.6, 129.4, 129.3, 129.2, 129.1, 128.9, 128.8, 128.7, 128.6, 128.5, 128.1, 128.0, 127.8, 127.7, 127.6, 127.4, 127.3, 103.6, 99.9, 99.4, 95.9, 77.2, 74.8, 74.1, 74.0, 73.9, 73.8, 73.5, 72.4, 72-3, 72.0, 71.1, 70.0, 69.9, 69.7, 69.6, 68.9, 68.8, 63.9, 63.8, 63.7, 56.1, 54.4, 28.9, 15.5. h) O- (2-0-bencil-3,4-di-0- (4 -clorobenzoilo) -a-L-fucopiranosilo) - (l- 2) -0- (6 -O-pivaloilo-p-D-galactopiranosil) -(1^4) -D-glucosa A partir del ejemplo 20i, método A, cristal incoloro, P . f . : 126-128 °C (tolueno-acetona).

XH RMN (MeOD, 300 MHz) : d = 7.85 - 7.18 (m, 13H) , 5.90 - 3.45 (m, 21H) , 1.22 - 1.15 (m, 12H) . 13C RMN (C MeOD, 75 MHz) d = 178.7, 165.4, 165.0, 139.8, 139.8, 137.7, 131.1 - 131.0, 129.0 - 127.9, 101.0, 96.9, 92.6, 75.1 - 74.9, 73.1, 72.7, 71.7, 71.5, 70.6, 70.4, 69.7, 64.9, 63.3, 60.2, 38.7, 29.8, 26.5, 15.2. i) O- (2 -O-bencil-3 , 4 -di -O-benzoilo-a-L-fucopiranosilo) - (l->2) -O- (6 -O-pivaloilo- -D-galactopiranosil) - (l- 4) -D-glucosa A partir del ejemplo 20c, método A RMN (CDC13) d= 1.2 (m, 12H) ; 3.00 (m, 1H) ; 3.10-4.05 (m, 13H) ; 4.07-4.77 (m, 10H) ; 5.4-5.8 (m, 4H) ; 7.15-7.35 (m, 9H) ; 7.35-7.7 (m, 5H) , 7.8 (d, 2H, J=7.9 Hz); 7.9 (d, 2H, J=8.0 Hz) . 13C RMN (CDCI3) d= 16.27, 27.37 , 61.63, 65.41, 65.79, 66.02, 70.82, 70.99, 72.61, 73.23, 73.89, 74.43, 74.57, 75.88, 75.92, 75.96, 76.03, 76.21, 76.24, 76.77, 78.89, 92.38, 96.70, 98.67, 101.56, 128.97, 129.30, 129.39, 129.46, 129.75, 129.82, 130.09, 133.44, 133.49, 133.54, 136.79, 136.95, 166.05, 166.12, 166.17, 166.21, 178.84.

Ejemplo 22 0- (2 -O-bencil- -L-fucopiranosilo) -(l- 2) -0-(3,4-isopropilideno^-D-galactopiranosil ) - (l- 4) - 2, 3:5, 6-di -0-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal El compuesto del ejemplo 20a (1.22 g) se disuelve en una solución preparada a partir de 13 mg de NaOH en 5 mi de MeOH y se agita toda la toche a ta . El NaOH se apaga con hielo seco y el solvente se retira por evaporación. El residuo se disuelve en TB E (10 mi) y se lava con agua (3x4 mi) . El solvente se evapora in vacuo y se agrega iPr20 (6 mi) para obtener una solución clara a partir de la cual se precipita el producto después de la siembra. Los cristales blancos son filtrados, lavados y secados (0.49 g) . El licor madre se concentra y se redisuelve en MeOH, esta solución se lava 3 veces con hexano y se evapora. El residuo se redisuelve entonces en iPr20 y la solución se siembra, el producto se filtra, se lava y se seca (0.16 g) . El rendimiento total es de 0.65 g (83 %) del triol puro. P.f. : 146.8-149 °C.

XH RMN (CDCI3) d= 1.23 (d, 3H, J=6.7Hz) ; 1.28-1.50 (6s, 18H) ; 3.49 (s, 3H) ; 3.51 (s, 3H) ; 3.6-3.75 (m, 4H) ; 3.8 (m, 2H) ; 3.9-4.0 (m, 5H) ; 4.0-4.15 (m, 4H) ; 4.27 (c, 1H, J=5.4Hz) ; 4.36 (d, 1H, 7Hz) ; 4.51-4.57 (m, 2H) ; 4.63 (dd, 1H, J=7.2Hz, J=8Hz) ; 4.78 (d, 1H, J =11.6Hz) , 5.61 (d, 1H, J=3.67Hz) ; 7.25-7.4 (m, 5H) . 13C RMN (CDCI3) d= 16.57, 25.20, 26.69, 26.84, 27.32, 28.13, 54.42, 57.95, 62.58, 65.17, 65.73, 69.36, 71.91, 71.98, 74.13, 74.66, 75.14, 75.53, 77.40, 77.82, 78.10, 80.85, 94.30, 101.63, 107.81, 108.97, 109.92, 110.71, 127.85, 127.98, 128.54, 138.55.

Ejemplo 23 O- (2-0- (4-metilbencil) - -L- fucopiranosilo) - (l- 2) -O- (3,4-isopropilideno^-D-galactopiranosil) - (l- 4) -2,3:5, 6-di-O-isopropilideno-D-glucosa dimetil acetal Se agrega NaOMe 0.5 M (5 mi) a una solución del compuesto del ejemplo 20d (2.51 g, 2.4 mmol) en metanol (10 mi) . La mezcla de la reacción se agita durante 6 h. Después del complemento de la ¦ reacción se agrega hielo seco y la solución se concentra. La cromatografía del residuo proporciona el compuesto deseado (1.15 g, 63 %) como una espuma blanca.

Se aplica el mismo procedimiento partiendo del compuesto del ejemplo 20e (59 %) , a partir del compuesto del ejemplo 20f (71 %) y a partir del compuesto del ejemplo 20g (51 %) .

XH RMN (CDCI3, 300 MHz) : d = 7.20 (d, 2H, J = 7.9 Hz), 7.08 (d, 2H, 7.9 Hz) , 5.54 (d, 1H, J = 3.5 Hz) , 4.67 (d, 1H, J = 11.5 Hz), 4.59 (t, 1H, J = 7.6 Hz) , 4.51 - 4.60 (m, 2H) , 4.32 (d, 1H, J = 6.9 Hz) , 4.26 - 4.20 (m, 1H) , 4.10 - 3.58 (m, 15H) , 3.46 (s, 6H) , 2.29 (s, 3H) , 1.44 -1.17 (m, 21H) . 13C RMN (CDCI3, 75 MHz) : d = 137.6, 135.4, 129.3, 128.2, 110.7, 109.9, 109.0, 107.9, 101.6, 94.3, 80.9, 78.1, 76.1, 75.6, 75.1, 74.7, 74.7, 74.1, 71.9, 71.8, 69.3, 65.7, 65.2, 62.6, 60.6, 58.0, 54.4, 28.1, 27.3, 26.9, 26.8, 26.7, 25.2, 21.4, 16.6, 14.4.

Ejemplo 24 0- (2-0- (4-metilbencil) -a-L- fucopiranosilo) - ( l- 2 ) -0- ( ß-D-galactopiranosil) - (l->4) -D-glucosa Se agrega el ácido p- toluenosulfónico monohidratado (76 mg, 0.4 mmol , 0.15 equivalentes) a una mezcla del compuesto del ejemplo 23 (2.0 g, 2.64 mmol) en iPrOH/H20 (2 mi : 6 mi) . La mezcla de la reacción se agita a 55 °C y 250 mbares . Después de 4 horas la presión se reduce a 90 mbares y la mezcla de la reacción se agita durante otros 15 minutos para remover la totalidad de los solventes orgánicos. La solución acuosa restante se neutraliza con Amberlite IR400 (OH") , la resina se retira por filtración y el filtrado se lava con EtOAc (20 mi) . Las fases se separen y la fase acuosa se seca por congelamiento para dar el compuesto deseado (1.53 g, 98 %) como un sólido incoloro.

¾ RMN (MeOD , 300 MHz) : d = 7.35 (d, 2H, J = 7.9 Hz) , 7.14 (d, 2H, J = 7.9 Hz) , 5.50 (m, 1H) , 5.14 - 3.22 (m, 20H) , 2.30 (s, 3H) , 1.19-1.14 (m, 3H) . 13C RMN -(MeOD, 75 MHz) : d = 138.4, 136.3, 129.9, 129.6, 102.2, 98.5, 76.8, 72.9, 69.7, 67.4, 31.7, 21.3, 16.4.

Ejemplo 25 0- (2 -O-bencil-a-L-fucopiranosilo) -(1-»2) -0-(ß-?-galactopiranosil ) - (l->4) -D-glucosa a) El compuesto del ejemplo 22 (5.0 g, 6.71 mmol) y H20/iPrOH (5:2, 20 mi) se agregan en un recipiente para dar una suspensión blanca. Se agrega p-TsOH-H20 (0.191 g) y la mezcla se calienta a 55 °C (temperatura del agua) a 250 mbares de presión bajo agitación. Después de 4 horas la presión se reduce a 90 mbares (55 °C) y la solución clara se agita adicionalmente bajo una presión reducida durante 20 minutos adicionales para remover la totalidad del solvente orgánico. La mezcla de la reacción se lava con EtOAc (2 x 15 mi) y la fase acuosa se neutraliza con una resina Amberlite IR400 (OH) sobre una columna (cargada con 5.0 gramos de resina) . La columna se enjuaga con agua (8 mi) y la fase acuosa se evapora (50 mbares/45 °C) . El trisacárido sin refinar se disuelve en 2-propanol (25 mi) y se calienta a 70 °C (temperatura del aceite) . La solución clara se enfría lentamente a 4 °C durante 7 horas y se agita toda la noche.

El sólido obtenido se retira pro filtración y se lava con EtOAc frío y pentano para dar 3.41 g (5.90 mmol , 88 %) de cristales blancos.

Pureza del producto (HPLC UV) : 96.4 %. P.f.: 153-156 °C. b) El compuesto del ejemplo 21g (400 mg) se disuelve en MeOH (2 mi) y se agrega una cantidad catalítica de NaOMe a la solución que se agita a temperatura ambiente durante 12 horas. Se agrega la resina de intercambio iónico (H+) , la mezcla se agita durante 3 minutos hasta alcanzar pH = 7 , la resina se retira por filtración y el filtrado se evapora para dar un producto sólido (229 mg, 87 %) . c) Se agrega metanol . (3 mi) al compuesto del ejemplo 2le (1.0 g) , luego se agrega NaOMe sólido (10 mg) . La mezcla se agita a 40 °C durante 10 horas. La mezcla de la reacción se neutraliza con HCl/MeOH. Se agrega carbón vegetal activado (50 mg) y la suspensión se agita durante 30 minutos. El carbón vegetal se retira por filtración, se lava con una porción pequeña de MeOH luego el filtrado claro se diluye con i-BuOH (3 mi) . El MeOH se retira por destilación y un sólido, que se precipita a partir del solvente, es retirado por filtración, se lava con i-BuOH (1.5 mi) y se seca para dar 510 mg (88 %) del sólido blanco. d) El trisacárido del ejemplo 21f se disuelve en una solución de NaOH en metanol y se agita toda la noche a ta. El NaOH se apaga con hielo seco y el solvente se retira por evaporación proporcionando el producto del título como un rendimiento cuantitativo . e) Protocolo de recristalización: el trisacárido obtenido (3.0 g) se disuelve en 2-propanol (22 mi) a 70 °C (temperatura del aceite) y se deja que se enfríe lentamente a TA y se agita toda la noche. Se filtran los cristales blancos y se lavan con EtOAc frío y pentano. Pureza del producto (HPLC UV) : 97.2 %. P.f.: 155-159 °C.

XH RMN (300 Hz, D20) : d = 1.17 (d, 3H, J = 6.6 Hz) , 3.25 (dd, 0.6H, J = 8.1, 9.3 Hz) , 3.35 - 3.91 (m, 14.4 H) , 4.21 (de, IH, J = 3.9, 6.6 Hz) , 4.49 (d, 1H, J = 7.5 Hz) , 4.58 (d, 0.6 H, J" = 8.1 Hz) , 4.63 (d, 1H, J" = 11.4 Hz) , 4.82 (d, 1H, J II.4 Hz), 5.17 (d, 0.4 H, J = 3.6 Hz) , 5.46 (d, 1H, J = 3.6 Hz) , 7.36 - 7.46 (m, 5H) . 13C RMN (75 MHz, D20) : (utilizando acetona como referencia externa d 30.9)) : d 15.9, 60.7, 60.8, 61.8, 67.2, 67.3, 69.4, 69.8, 71.0, 71.9, 72.0, 72.3, 72.6, 74.5, 74.6, 75.0, 75.6, 75.7, 75.9, 75.9, 76.4, 76.5, 92.4, 96.5, 97.5, 100.7, 100.8, 129.0, 129.3, 129.4, 137.8.

Ejemplo 26 2 ' -O-fucosil-lactosa a) A una solución del compuesto del ejemplo 25 (5.0 g) en metanol (50 mi) se agregan 100 mg de paladio sobre carbón vegetal al 10 %. La suspensión se agita bajo atmósfera de hidrógeno a ta durante 8 horas. El catalizador se retira por filtración, se lava con agua y el filtrado se evapora para dar el producto como un sólido blanco amorfo: 4.1 g.

HPLC-MS: ESI+511.2 [M+Na]+, 527.2 [M+K] + ; ESI-487.4 [M-H] " , 523.2 [M+Cl]", 577.3 [M2+H] " .

H RMN (300 MHz , D20) :· d = a-D-glucosa H-1 5.22 d, H-2 3.59 dd, H-3* 3.80 dd, H-4 3.71 dd, H-5 3.91 m, H-6x 3.90 m, H-6y 3.80 m; ß-D-glucosa H-1 4.63 d, H-2 3.29 dd, H-3 3.58 dd, H-4 3.72 dd, H-5 3.47 ddd, H-6x 3.94 dd, H-6y 3.76 dd; D-galactosa H-1 4.52 d, H-2 3.66 dd, H-3 3.88 m, H-4 3.90 m, H-5 3.81 m, H-6x 3.81 m, H-6y 3.74 m; L-fucosa H-1 5.30 d, H-2* 3.80 m, H-3* 3.80 m, H-4 3.82 d, H-5 4.22, 4.25 cd, CH3 1.22 d. 13C RMN (150 MHz, D20) d: -D-glucosa C-1 94.5, C-2 74.0, C-3* 72.3, C-4 77.9, C-5 73.1, C-6 62.7; ß-D-glucosa C-1 98.6, C-2 76.6, C-3 77.0, C-4 78.5, C-5 78.0, C-6 62.9; D-galactosa, C-1 102.9, C-2 79.0, C-3 76.3, C-4 71.9, C-5 74.0, C-6 63.8; L-fucosa C-1 102.0, C-2* 72.41 C-3* 70.9, C-4 74.4, C-5 69.6, CH3 18.0. (* asignaciones intercambiables) b) A una solución del compuesto del ejemplo 25 (2.0 g) en metanol (7 mi) y agua (1 mi) se agregan 200 mg de paladio sobre carbón vegetal al 10 %. La suspensión se agita bajo atmósfera de hidrógeno (5 atmósferas) a 50 °C durante 0.5 horas. El catalizador se retira por filtración sobre un filtro precalentado, se lava con agua caliente y el filtrado se evapora para dar 1.6 g del producto como un sólido blanco amorfo .

LISTA DE REFERENCIAS 1. S.A. Abbas, J. J. Barlow, K. L. Matta, Carbohydr. Res. 1981 , 88, 51-60. 2. A. Fernandez-Mayoralas , . M . Martin-Lomas , Carjohydr. Res. 1986 , 154, 93-101. 3. R. K. Jain, R. D. Locke, K. L. Matta, Carbohydr. Res, 1991 , 212, cl-c3. 4. K.L. Matta, R. K. Jain, R.D. Locke, Patente U.S. 5,438, 124A 19950801. 5. M. Izurai, O. Tsuruta, S. Harayama, H. Hashimoto, J. Org. Chem. 1997 , 62, 992-998. 6. A. Rencurosi, L. Poletti, L. Panza, L. Lay, J". Carbohydr. Chem. 2001 , 20, 761-765.

LISTA DE ABREVIATURAS Ac acetilo Bn bencilo BOP-Cl cloruro bis- (2-oxo-3-oxazolidinil) -fosfónico Bz benzoilo CAN nitrato de amonio cérico DCC N, N ' -diciclohexilcarbodiimida DCM diclorometano DMF dimetilformamida DMSO dimetilsulfóxido ESI ionización por electrorrociado EtOAc acetato de etilo 21 -FL 2' -O-fucosil-lactosa IDCP di ( sim-colidina) erclorato de iodinio Me metilo MeCN acetonitrilo TBE éter metil t-butílico Ph fenilo Piv pivaloilo ta temperatura ambiente TBAB bromuro de tetrabutilamonio TBAHS sulfato ácido de tetrabutilamonio TEBAC cloruro de bencilo y trietilamonio THF tetrahidrofurano TLC cromatografía de capa delgada Tr tritilo Se hace constar que con relación a esta fecha el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (30)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. El uso de compuestos de la fórmula general 1 para la preparación de la 2 ' -O-fucosil-lactosa, particularmente un compuesto de la fórmula general 1 - en donde R es un grupo removible por hidrogenólisis y R2 es un grupo removible por hidrogenólisis o H - o un hidrato o solvato del mismo está sometido a una hidrogenólisis catalítica.

2. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde la hidrogenólisis catalítica se lleva a cabo en agua, en uno o más alcoholes de Ci-C6 o en una mezcla de agua y uno o más alcoholes de Ci-C6, en la presencia de paladio o níquel de Raney, preferentemente en la presencia de paladio sobre carbón vegetal o negro de paladio.

3. El uso de conformidad con las reivindicaciones 1 ó 2, en donde un compuesto de la fórmula general 1, en donde Ri es bencilo, 4 -metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4-fenilbencilo, 4 -clorobencilo, 4-metoxibencilo, 3 , 4 -dimetoxibencilo, 2 , 4 , 6 - trimetilbencilo o 2 , 3 , 4 , 5 , 6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo y R2 es H, es utilizado.

4. Compuestos de la fórmula general 1 HO /OR2 .OH caracterizados porque Rx es un grupo removible por hidrogenólisis , R2 es un grupo removible por hidrogenólisis o H - o un hidrato o solvato del mismo.

5. Los compuestos de conformidad con la reivindicación 4, caracterizados porque Ri es bencilo, 4-metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4 -fenilbencilo, 4-clorobencilo, 4-metoxibencilo, 3 , 4-dimetoxibencilo, 2,4,6-trimetilbencilo o 2 , 3 , 4 , 5 , 6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo y R2 es H.

6. Un método para la preparación de los compuestos de la fórmula general 1, de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 2 2 donde Ri es un grupo removible hidrogenólisis , R3 es un grupo removióle por hidrogenól i s i s , un grupo del tipo del acetal, un grupo sililo o H, R es alquilo o dos grupos R gemínales con el átomo de carbono al cual los mismos están fijados, forman un anillo de cicloalquilo de C3-C6, R' es alquilo - o un hidrato o solvato del mismo es sometido a una hidrogenólisis ligera catalizada por un ácido.

7. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la hidrólisis catalizada ligeramente por un ácido se lleva a cabo en una mezcla de agua y uno o más alcoholes de Cx-C6 en la presencia de un ácido sulfónico, preferentemente en una mezcla de agua - i s opropano 1 en la presencia de ácido p - toluenosul fóni co .

8. El método de conformidad con las reivindicaciones 6 o 7, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 2, en donde Ri es bencilo, 4 -met i lbenc i lo , na f t i lme t i lo , benciloxicarbonilo, 4 - f eni lbenc i lo , 4 - c lorobenc i lo , 4 -metoxibencilo , 3 , - dime t oxibenc i lo , 2,4,6- r ime i 1 benc i 1 o o 2 , 3 , 4 , 5 , 6 - en ame t i lbenc i 1 o , más preferentemente bencilo o 4 -me t i lbenc i lo , R3 es H, y R y R' son metilo, es aplicado.

9. Los compuestos de la fórmula general 2 2 caracterizados porque Rx es un grupo removible por hidrogenólisis , R3 es un grupo removible por hidrogenólisis , un grupo del tipo del acetal, un grupo sililo o H, R es alquilo o dos grupos R gemínales con el átomo de carbono al cual los mismos están fijados forman un anillo de cicloalquilo de C3-C6í R' es alquilo - o un solvato o hidrato del mismo.

10. Los compuestos. de conformidad con la reivindicación 9, caracterizados porque Ri es bencilo, 4-metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4-fenilbencilo, 4 -clorobencilo, 4 -metoxibencilo , 3,4-dimetoxibencilo, 2 , 4 , 6- trimetilbencilo o 2,3,4,5,6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo, R3 es H, y R y R' son metilo.

11. Un método para la preparación de los compuestos de la fórmula general 1 de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque comprende un compuesto de la fórmula general 3 3 - en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis, R4 es acilo opcionalmente substituido, R5 es un grupo removible por hidrogenólisis o acilo opcionalmente substituido - o un hidrato o solvato del mismo es sometido a desacilación.

12. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque comprende un compuesto de la fórmula general 3, en donde Ri está definido como bencilo, 4-metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4-fenilbencilo, 4-clorobencilo, 4-metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo , 2 , 4 , 6-trimetilbencilo o 2,3,4,5,6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo, R4 es benzoilo o 4 -clorobenzoilo y R5 es pivaloilo, benzoilo o 4-clorobenzoilo, es- desacilado en metanol en la presencia de NaOMe o NaOH.

13. Compuestos de la fórmula general 3 3 caracterizados porque Ri es un grupo removible por hidrogenólisis, R4 es acilo opcionalmente substituido, R5 es un grupo removible por hidrogenólisis o acilo opcionalmente substituido - o un hidrato o solvato del mismo.

14. Los compuestos de conformidad con la reivindicación 13, caracterizados porque Ri está definido como bencilo, 4 -metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4-fenilbencilo, 4 -clorobencilo, 4-metoxibencilo, 3 , 4-dimetoxibencilo, 2 , 4 , 6 -triraet ilbencilo o 2 , 3 , 4 , 5 , 6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo, R4 es benzoilo o 4 -clorobenzoilo y R5 es · pivaloilo, benzoilo o 4-clorobenzoilo .

15. Un método para la preparación de un compuesto de la fórmula general 2, de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque comprende un compuesto de la fórmula general 4 4 - en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis , R es acilo opcionalmente substituido, R6 es un grupo removible por hidrogenólisis, un grupo del tipo del acetal, un grupo sililo o acilo opcionalmente substituido, R es alquilo o dos grupos R gemínales con el átomo de carbono al cual los mismos están fijados forman un cicloalquilo de C3-C6, R' es alquilo - o un hidrato o solvato del mismo, es desacilado.

16. El método de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 4 , en donde Rx está definido como bencilo, 4 -metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4-fenilbencilo, 4-clorobencilo, -metoxibencilo, 3 , 4 -dimetoxibencilo, 2,4,6-trimetilbencilo o 2 , 3 , 4 , 5 , 6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo, R es benzoilo o 4-clorobenzoilo, R6 es pivaloilo, benzoilo o 4-clorobenzoilo, y R y R' es metilo, es desacilado en metanol en la presencia de NaOMe o NaOH .

17. Un método para la síntesis de un compuesto de la fórmula general 3, de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque comprende un compuesto de la fórmula general 4 4 - en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis , R4 es acilo opcionalmente substituido, R6 es un grupo removible por hidrogenólisis, un grupo del tipo del acetal, un grupo sililo o acilo opcionalmente substituido, R es alquilo o dos grupos R gemínales con el átomo de carbono al cual los mismos están fijados forman un cicloalquilo de C3-C6, R' es alquilo - o un hidrato o solvato del mismo es sometido a hidrólisis ligera catalizada por un ácido.

18. El método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 4, en donde Ri está definido como bencilo, 4 -metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo , 4 -fenilbencilo, 4-clorobencilo, 4 -metoxibencilo, 3 , 4 -dimetoxibencilo, 2,4,6-trimetilbencilo o 2 , 3 , 4 , 5 , 6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo, R4 es benzoilo o 4-clorobenzoilo, R6 es pivaloilo, benzoilo o 4 -clorobenzoilo, y R y R' es metilo, es aplicado y la hidrólisis ligera catalizada con un ácido se lleva a cabo en acetonitrilo acuoso o en acetona acuosa en la presencia del ácido p-toluenosulfónico o HCl .

19. Compuestos de la fórmula general 4 4 caracterizados porque Ri es un grupo removible por hidrogenólisis , R4 es acilo opcionalmente substituido, R6 es un grupo removible por hidrogenólisis, un grupo del tipo del acetal, un grupo sililo o acilo opcionalmente substituido, R es alquilo o dos grupos R gemínales con el átomo de carbono al cual los mismos están fijados forman un cicloalquilo de C3-C6, R' es alquilo - o un hidrato o solvato del mismo.

20. Los compuestos de conformidad con la reivindicación 19, caracterizados porque Rx está definido como bencilo, 4 -metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4-fenilbencilo, 4 -clorobencilo, 4-metoxibencilo, 3 , 4 -dimetoxibencilo, 2 , 4 , 6 -trimetilbencilo o 2 , 3 , 4 , 5 , 6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo, R4 es benzoilo o 4 -clorobenzoilo, R6 es pivaloilo, benzoilo o 4-clorobenzoilo, y R y R' es metilo.

21. Un método para la síntesis de un compuesto de la fórmula general 4, de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 5 5 - en donde Ri y R son de conformidad con la reivindicación 20 y X es halógeno, -OC (=NH) CC13, -O-pentenilo, -OAc, -OBz o -SR7, en el cual R7 es alquilo o fenilo substituido opcionalmente - se hace reaccionar con un compuesto de la fórmula general 6 R O^OR6 . R OH R ¾ R' R en donde R, R' y R6 son de conformidad con la reivindicación 19 - bajo una condición de glucosilación .

22. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque la reacción de glucosilación se lleva a cabo en THF, tolueno, DCM o mezclas de los mismos, preferentemente en una mezcla de THF-DCM, utilizando bromo o NBS como el promotor, preferentemente NBS con ácido tríflico.

23. El método de conformidad con las reivindicaciones 21 o 22, caracterizado porque un compuesto de la fórmula 5, en donde Rx es bencilo, 4 -metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4-fenilbencilo, 4-clorobencilo, 4 -metoxibencilo, 3 , 4 -dimetoxibencilo, 2,4,6-trimetilbencilo o 2 , 3 , 4 , 5, 6-pentametilbencilo, R es benzoilo o 4 -clorobenzoilo y X es feniltio opcionalmente substituido con uno o más alquilos, se hace reaccionar con un compuesto de la fórmula general 6, en donde R y R' son metilo y R6 es pivaloilo, benzoilo o 4 -clorobenzoilo .

24. Un compuesto de la fórmula general 7 que pertenece a los compuestos de la fórmula general 5 mencionados en la reivindicación 23, 7 caracterizado porque Ri es un grupo removible por hidrogenólisis , R4 es acilo opcionalmente substituido y R7 es alquilo o fenilo opcionalmente substituido, con la condición de que estén excluidos el 3 , 4 -di -0-acetil - 2 -0-bencil-l-tio-L-fucopiranósido de fenilo, 3 , -di -0-acetil- 2 -O-bencil-l-tio-L-fucopiranósido de metilo, 3 , 4-di-0-acetil-2-0-bencil-l-tio-L-fucopiranósido de etilo y 3,4-di-O-acetil-2-0- (4 -metoxibencil ) -1-tio-L-fucopiranósido de etilo .

25. Los compuestos de conformidad con la reivindicación 24, caracterizados porque Ri es bencilo, 4-metilbencilo, 1-naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 3-fenilbencilo, 4-clorobencilo, 4 -metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, 2 , 4 , 6-trimetilbencilo o 2,3,4,5,6-pentametilbencilo, R4 es benzoilo o -clorobenzoilo y R7 es fenilo no substituido.

26. Un método para la síntesis de un compuesto de ia fórmula general 7, de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 8 8 - en donde Rx y R7 están definidos de conformidad con la reivindicación 24 - es acilado por medio de un agente de acilación .

27. El método de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado porque el benzoilo o el cloruro de 4-clorobenzoilo es utilizado como el agente de acilación.

28. Un método para la preparación de la 2'-0-fusil-lactosa, caracterizado porque un compuesto de la fórmula gene - en donde Ri es un grupo removible por hidrogenólisis y R2 es un grupo removible por hidrogenólisis o H - o un hidrato o solvato del mismo, es sometido a una hidrogenólisis catalítica.

29. El método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque la hidrogenólisis catalítica se lleva a. cabo en agua, en uno o más alcoholes de Ci-C6 o en una mezcla de agua y uno o más alcoholes de Ci-C6, en la presencia de paladio o níquel de Raney, preferentemente en la presencia de paladio sobre carbón vegetal o negro de paladio.

30. El método de conformidad con las reivindicaciones 28 o 29, caracterizado porque un compuesto de la fórmula general 1, en donde Rx es bencilo, 4-metilbencilo, naftilmetilo, benciloxicarbonilo, 4-fenilbencilo, 4 -clorobencilo, 4 -metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, 2 , 4 , 6-trimetilbencilo o 2,3,4,5,6-pentametilbencilo, más preferentemente bencilo o 4-metilbencilo y R2 es H, es aplicado.