KR20120022875A - ２'-ｏ-푸코실락토오스의 합성 - Google Patents

Abstract

본 발명은 하기 식을 갖는 삼당류(trisaccharide)의 개선된 합성, 상기 합성에 사용되는 신규한 중간체(intermediate) 및 상기 중간체의 제조에 관한 것이다.

Description

２'-Ｏ-푸코실락토오스의 합성{Synthesis of ２'-Ｏ-fucosyllactose}

본 발명은 삼당류(trisaccharide)의 신규한 합성, 상기 합성에 사용되는 신규한 중간체(intermediate), 및 상기 중간체의 제조에 관한 것이다.

최근 살아있는 유기체 내에서 발생하는 다수의 생물학적 과정에서 그의 역할로 인하여, 분비된 올리고당(secreted oligosaccharide)을 포함하는 복합 탄수화물(complex carbohydrate)의 합성을 위한 상업화 노력이 현저하게 증가하였다. 인유 올리고당(human milk oligosaccharide)과 같은 분비된 올리고당은 영양 및 치료 산업에 있어서 중요한 상업적 표적이 되고 있다. 그러나, 이 올리고당 및 그의 중간체의 합성 및 정제는 과학에 있어서 난제로 남았다. 가장 중요한 인유 올리고당 중 하나는, 모유에서 가장 높은 농도로 발견되는 2'-O-푸코실락토오스(2'-O-fucosyllactose) (α-L-푸코피라노실-(1→2)-β-D-갈락토피라노실-(1→4)-D-글루코오스(α-L-fucopyranosyl-(1→2)-β-D-galactopyranosyl-(1→4)-D-glucose), "2'-FL")이다.

도식 1. 2'-O-푸코실락토오스

프리바이오틱(prebiotic) 효과, 항박테리아 효과, 항바이러스 효과, 면역계 증진 효과, 뇌 발달 증진 효과 등을 포함하나 이에 한정되지 않는, 2'-O-푸코실락토오스의 여러 생물학적 역할들이 제시되어 왔으며, 이러한 효과들은 영양 및 치료 산업에 있어 2'-O-푸코실락토오스를 대규모 생산/분리/정제를 위한 매력적인 타겟으로 만들었다. 2'-O-푸코실락토오스는 화학적 및 효소적 방법에 의해 합성되었으나. 효율적인 정제 및 합성법의 부재로 인해 상업적으로 매력적인 생산 방법은 개발되지 않았다. 현재의 과학적 지식에 따르면, 2'-O-푸코실락토오스는 결정질(crystalline) 삼당류가 아니어서, 고순도 2'-O-푸코실락토오스의 제조에 적합한 대규모/저비용 제조 기술의 개발을 난제로 만든다.

2'-O-푸코실락토오스는 분리(isolation), 화학적 합성, 효소적 합성, 및 생명공학적 방법을 이용한, 4가지의 상이한 접근법에 의해 수득될 수 있다.

문헌에서의 HMO에 대한 최초의 언급은 1950년대에 나타났다. 이 시기에, 복잡한 크로마토그래피 프로토콜을 이용하여 특정한 인유 올리고당이 인유로부터 분리되었다. 그러나, 그와 같은 초기 분리된 샘플의 순도는, 모유 중에 존재하는 다수의 인유 올리고당 이성질체로 인해 상당히 불확실하다. 예를 들면, 인유 중에는 2'-O-푸코실락토오스 및 3-O-푸코실락토오스가 모두 존재하며, 이들의 크로마토그래피 분리는 수십년 후에 달성되었다. 다른 포유동물로부터 유래한 우유도 이 올리고당 중 일부를 또한 함유하나, 인유와 달리 극히 낮은 농도 및 비율로 함유한다는 것이 그 후 밝혀졌다. 이후, 화학적, 효소적 및 생명공학적 방법에 의한 2'-O-푸코실락토오스의 생산에 있어 큰 진전이 이루어졌다. 그러나, 이 방법들 중 대부분은 상업적으로 매력적인 가격 범위로 대량(bulk quantities)의 2'-O-푸코실락토오스를 제공하는, 대규모 생산에 있어 성공적이지 않았다.

2'-O-푸코실락토오스의 효소적 합성은 효소 클로닝(cloning)/돌연변이(mutating) 기술을 이용함으로써 지난 10년간 현저하게 발달하였다. 하나의 특별한 접근법은 푸코시다아제(fucosidase) 효소를 1,2-α-L-푸코신타아제(1,2-α-L-fucosynthase)로 전환(transfer)시켜, 글리코시드 결합(glycosidic linkage)의 합성을 용이하게 하고, 동시에 그의 가수분해를 방지하였다. 불행히도, 1,2-α-L-푸코신타아제는 다량으로 상업적으로 이용가능하지 않았으며, 따라서 지금까지의 제조 기술 개발에 적합하지 않았다. 두 번째 효소적 접근법은 글리코시드간 결합(interglycosidic linkage)의 생성을 위해 α-(1→2)푸코실트랜스퍼라아제(fu cosyltransferase), α-(1→2)-L-갈락토실트랜스퍼라아제(galactosyltransferase)를 사용했다. 이 효소들은 상당히 민감하며, 실제로 대규모 제조에 적합하지 않다. 또한, 이와 같은 효소들은 입수가 거의 불가능한 당 뉴클레오티드형 공여체(sugar nucleotide type donor)를 필요로 하며, 매우 고가이다. 세 번째 효소적 접근법은 α-L-푸코시다아제의 고정화(retaining)를 이용하는 것에 기반하나, 달성되는 선택성 및 수율은 일반적으로 상당히 미소하다.

유전적으로 조작된(genetically engineered) 미생물 또는 포유동물이 2'-O-푸코실락토오스의 합성을 위한 생명공학적 방법에 사용된다. 이와 같은 기술은 전구체의 생합성 및 필요한 글리코실화(glycosylation)를 모두 촉진하는 복합 효소 시스템(complex enzymatic system)을 사용한다. 지금까지, 이와 같은 접근법들은 유전적으로 조작된 유기체의 사용 및 비-천연(non-natural) 올리고당의 잠재적 오염으로 인하여 심각한 규제 승인 장애에 직면했다.

화학적 합성은 지금까지 여전히 2'-O-푸코실락토오스를 생산하는 가장 경제적으로 효율적인 방법이다. 대규모 화학적 합성의 장애는, 즉, 낮은 입체선택성(stereoselectivity), 낮은 전체 수율, 컬럼 크로마토그래피와 같은, 복잡하고 고가인 정제 방법의 사용, 및 식품/치료 제품 개발에 적합하지 않은 유독성 시약의 사용이다.

종래 기술에서, 모든 합성은 필수적인 빌딩 블록(building block)으로서 락토오스 수용체(acceptor) 및 완전히 보호된 L-푸코오스 공여체(fully protected L-fucose donor)를 사용해 왔다. 접근법 간의 차이는 상이한 보호기(protecting group) 전략, 글리코실화 방법, 및 최종 정제 기법과 관련된다. 본 발명자들이 알고 있는 한도에서는, 2'-O-푸코실락토오스의 최초의 화학적 합성은 1981년에 공개되었고 [1], 그때부터 4가지의 추가적인 화학적 [2-5] 및 화학효소(chemoenzymatic) [6] 합성이 공개되었다.

2'-O-푸코실락토오스의 최초의 화학적 합성은 1981년에 K.L. Matta 및 공동작업자(co-worker)들에 의해 공개되었으며 [1], 보호기의 후속적인 제거를 수반하는, 6-O-벤조일화(benzoylated) 락토오스 수용체 및 트리-O-벤질화(benzylated) α-푸코피라노실 브로마이드 공여체를 사용하였다. 상기 합성은 벤질 보호기만을 포함하는 최종 중간체에 도달하기 위해, 중간 단계에서 여러 크로마토그래피 정제 단계를 포함한다. 이 화합물을 크로마토그래피로 분리하고(chromatograph) 정제된 샘플을 메탄올-에테르로부터 이수화물(dihydrate)로서 결정화하였다. 그러나, 이러한 이수화물은 그의 낮은(awkward) 용해성으로 인해 최종 탈보호 (촉매 가수소분해(catalytic hydrogenolysis)) 단계에 있어서 상당히 불편한 것으로 나타났다. 사실, 고도로 희석된 용액은 알코올/물/아세트산의 혼합물 중의 그와 같은 이수화물로부터만 제조될 수 있어, 효율적인 생산 기술의 개발에 사실상 적합하지 않게 한다. 또한, 합성 전체에 걸친 - 이당류 및 삼당류 단계 모두에서의 - 결정질 중간체의 부재는 제조 기술의 개발을 저해한다. 다중 크로마토그래피 분리 및 매우 민감한 퍼-O-벤질화 브로모당(per-O-benzylated bromosugar)의 사용은, 상기 접근법을 기술 개발에 상당히 부적합하게 만든다.

1986년에, Martin-Lomas [2] 및 공동작업자들은 이소프로필리덴-보호된 최종 2'-FL 중간체를 제조하는 2'-O-푸코실락토오스의 합성을 공개하였다. 최종 탈보호 단계는 20% 아세트산 수용액을 사용한 고리형 케탈(cyclic ketal) 가수분해이다. 상기 합성 전략은 다량으로 제조하기 어려운, 매우 희귀한 락토오스 디올(lactose diol) 수용체를 사용한다. 실제로, 전구체 자체는 상기 접근법을 대규모 기술 개발에 있어서 경쟁력이 없게 만든다. 또한, 중간체 분리를 위해 다수의 크로마토그래피 정제가 요구되며, 상기 접근법은, 결정화에 의한 저렴한 정제의 선택을 용이하게 할 수 있는 결정질 중간체를 제공하지 않는다. 최종 탈보호는, L-푸코오스 잔기의 산 불안정성(acid lability)으로 인해 까다로운 단계인, 고리형 케탈 가수분해이다. 상기 고리형 케탈의 가수분해성 절단(hydrolytic cleavage) 조건은 부산물의 생성을 방지하기 위해 상당히 온화(gentle)해야 한다. 그러나, 온화한 가수분해 조건은 반응 혼합물 중 가수분해되지 않은 고리형 케탈의 존재를 야기한다. 따라서, 조(crude) 2'-O-푸코실락토오스 생성물은 추가적인 크로마토그래피 정제를 필요로 한다. 전술된 단점들로 인해, 상기 접근법은 제조 기술 개발에 적합하지 않다.

K.L. Matta 및 공동작업자들은, 최종 2'-FL 중간체의 트리플루오로아세트산(trifluoroacetic acid) 보조 가수분해를 용이하게 하는 보호기 전략을 선택한, 추가적인 2가지 합성 [3, 4]을 공개하였다. 두 합성법 모두 동일한 수용체를 사용하나, 상이한 2-메톡시벤질화 공여체 분자를 사용한다. 하나의 접근법은 IDCP에 의해 활성화된 n-펜테닐 글리코시드(n-pentenyl glycoside)를 사용하며, 두 번째 접근법은 티오글리코시드(thioglycoside) 활성화에 기반한다. IDCP 프로모터와 펜테닐 글리코시드의 사용은 공여체의 제한된 입수가능성(availability) 및 활성화제(activator)의 높은 가격으로 인해, 그 자체로서 생산 기술의 개발을 막는다. 티오글리코시드 활성화의 경우, 푸코실화 단계는 (9:1) 비율의 α/β 혼합물을 제공하고, 원치 않는 β-생성물로부터 원하는 입체이성질체를 분리하기 위해 상당히 어려운 크로마토그래피 정제가 요구된다. 따라서, 이 방법들 중 어느 것도 2'-O-푸코실락토오스의 다중-톤-규모(multi-ton-scale) 생산을 위한 잠재력을 갖지 않는다.

1997년에, H. Hashimoto 및 공동작업자들은 수용체 및 공여체 분자(이소프로필리덴 및 4-메톡시벤질) 모두에, 세륨 암모늄 니트레이트(ceric ammonium nitrate) 처리에 의해 삼당류 중간체에서 제거되는, 산/산화 불안정성(acid/oxidation labile) 보호기를 사용한 합성 전략을 개발하였다 [5]. 상기 접근법은 취급하기 상당히 어렵고, 다량의 세륨 암모늄 염에 의해 오염된, 극성 생성물을 제공한다. 2'-O-푸코실락토오스 및 무기 불순물(inorganic impurity) 모두는 수용성 물질이었고, 따라서 합성의 필수적인 정제 단계로서 O-아세틸화 및 뒤이은 Zemplen 탈보호가 필요했다. 상기 접근법은 커플링 시약(coupling agent)으로서 IDCP의 사용, (고가이고 유독한) CAN을 사용한 p-메톡시벤질 기의 제거, 및 염기 민감성 최종 생성물의 존재 하에서 소듐 메톡시드를 사용한 최종 2'-FL 중간체의 O-탈아세틸화와 같은, 많은 결점들을 갖는다. 일반적으로, 고순도의 2'-O-푸코실락토오스는 환원당(reducing sugar)이 강한 염기로 처리되는 경우에는 생성될 수 없다.

2001년에, L. Lay 및 공동작업자들은 효소적 및 화학적 과정 모두를 이용한 2'-O-푸코실락토오스의 합성을 도입하였다 [6]. 이 접근법에서는, 위치선택적(regioselective) 방식으로 직교(orthogonal) 보호기를 도입(install)하기 위해 효소적 조작을 사용하여 β-벤질락토시드에서 유도된(benzyllactoside derived) 수용체를 합성하였다. 합성 전략의 마지막 부분은, 푸코실화(fucosylation), O-탈아세틸화(O-deacetylation) 및 가수소분해(hydrogenolysis)의 3 단계로 구성된다. 불행히도, 상기 방법은 리파아제 보조 아실화의 비교적 미약한 수율, 유독하고 폭발성을 갖는 히드라진(hydrazine) 유도체의 사용 및 결정질 중간체의 부재로 인해, 상업화 관심을 야기하지 않았다. 합성 전체에 걸친 다중 크로마토그래피 단계는 제조 기술의 개발을 저해했다.

요약하면, 분리 기술은 인유 중에 존재하는 다수의 올리고당으로 인해 2'-O-푸코실락토오스를 포함하는 인유 올리고당을 다량으로 제공할 수 없었다. 또한, 매우 유사한 구조를 갖는 것을 특징으로 하는 레지오이성질체(regioisomer)의 존재가 분리 기술을 더 성공적이지 않도록 만들었다. 효소적 방법은 효소들의 낮은 입수가능성, 당 뉴클레오티드 공여체의 매우 높은 가격, 및 유전적으로 변형된 유기체에서 생산된 효소의 사용에 기인한 규제 문제(regulatory difficulty)들로 어려움을 겪는다. 생명공학 기술에 의한 인유 올리고당의 제조는 여러 비천연 글리코실화 산물의 생성 가능성에 기인한, 막대한 규제상의 장애를 가진다. 지금까지, 2'-O-푸코실락토오스의 합성 목적으로 개발된 모든 화학적 방법들은, 심지어 멀티그램 수준 양의 2'-O-푸코실락토오스의 제조마저도 저해하는 여러 결점들을 갖는다. 화학적 접근법의 가장 심각한 결점은, 저가의 정제 방법을 용이하게 하고, 스케일 업(scale-up) 기회를 증대시키는 결정질 중간체에 대한 계획의 부재이다. 따라서, 2'-O-푸코실락토오스의 생산에 적합한 확고한 합성 방법의 개발에 대한 요구가 증가해 왔다.

본 발명은 2'-O-푸코실락토오스 및 2'-O-푸코실락토오스의 합성을 위한 신규한 중간체의 대규모 제조에 적합한 방법을 제공한다. 본 발명은 신규한 보호된 2'-O-푸코실락토오스 중간체의 O-벤질/치환된 O-벤질 모이어티(moiety)의 가수소분해(hydrogenolysis)의 이용에 기반한다. 또한, 전술된 신규한 O-벤질화/치환된 O-벤질화 2'-O-푸코실락토오스 중간체가 강력한(powerful) 정제 방법을 보조하는, 양호한 결정성(crystalline properties)을 갖는다는 것도 본 발명의 중요한 특성이다. 예를 들면, 2'-O-푸코실락토오스 유도체의 높은 결정성의 실현은, 생성물/중간체 정제를 위한 결정화를 전적으로(entirely) 사용하여, 강력한 제조 과정의 개발을 가능하게 한다. 보다 중요하게는, 본 발명에 의해 제공되는 신규한 2'-O-푸코실락토오스 중간체의 도입은, 스케일 업 옵션(scale-up option)을 위한 최초의 기회를 개시한다. 본 발명 전에는, 저가의 정제 방법의 부재로 인해 일련의 복잡한 반응이 계속적으로 수행되어야 했다. 신규한 결정질 2'-O-푸코실락토오스 중간체는 화학적 단계들의 상호간 분리(separation)를 가능하게 하여, 스케일 업 개발을 위한 실질적 기회를 제공한다. 따라서, 본 발명에 의해 제공되는 신규한 결정질 중간체들은 영양 및 약제 산업을 위한 대량의 고순도 2'-O-푸코실락토오스를 제공하기에 적합한, 최초의 2'-O-푸코실락토오스 제조 기술을 개발할 수 있게 한다.

본 발명의 제1 양태는, 하기 일반식 1을 가지며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₂는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 H인 것인 화합물, 또는 그의 수화물 또는 용매화물이 촉매 가수소분해(catalytic hydrogenolysis)되는 것을 특징으로 하는, 2'-O-푸코실락토오스의 제조를 위한 상기 일반식 1의 화합물의 용도에 관한 것이다.

본 발명의 제2 양태는 일반식 1의 신규한 화합물들을 제공한다. 일반식 1의 화합물들은 촉매 가수소분해에 의해 2'-O-푸코실락토오스로 전환된다.

본 발명의 제3 양태는 하기 일반식 2를 가지며,

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₃는 가수소분해에 의해 제거가능한 기, 아세탈형(acetal type) 기, 실릴(silyl) 기 또는 H이고, R은 알킬이거나 또는 두 개의 제미날(geminal) R-기 및 이들과 결합된 탄소 원자가 C₃-C₆ 시클로알킬 고리를 형성하며, R'은 알킬인 것인 화합물, 그의 수화물 또는 용매화물이 산 촉매화 온화 가수분해(acid catalyzed mild hydrolysis)되는 것을 특징으로 하는, 일반식 1의 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

본 발명의 제4 양태는, 상기 일반식 2의 신규한 화합물들을 제공한다.

본 발명의 제5 양태는, 하기 일반식 3을 가지며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄은 선택적으로 치환된 아실이고, R₅는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 선택적으로 치환된 아실인 것인 화합물, 또는 그의 수화물 또는 용매화물이 탈아실화(deacylation)되는 것을 특징으로 하는, 일반식 1의 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

본 발명의 제6 양태는, 상기 일반식 3의 신규한 화합물을 제공한다.

본 발명의 제7 양태는, 하기 일반식 4를 가지며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 선택적으로 치환된 아실이고, R₆는 가수소분해에 의해 제거가능한 기, 아세탈형 기, 실릴 기 또는 선택적으로 치환된 아실이고, R은 알킬이거나 또는 두 개의 제미날 R-기 및 이들과 결합된 탄소 원자가 C₃-C₆ 시클로알킬 고리를 형성하며, R'은 알킬인 것인 화합물, 그의 수화물 또는 용매화물이 탈아실화되는 것을 특징으로 하는, 일반식 2의 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

본 발명의 제8 양태는, 하기 일반식 4를 가지며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 선택적으로 치환된 아실이고, R₆는 가수소분해에 의해 제거가능한 기, 아세탈형 기, 실릴 기 또는 선택적으로 치환된 아실이고, R은 알킬이거나 또는 두 개의 제미날 R-기 및 이들과 결합된 탄소 원자가 C₃-C₆ 시클로알킬 고리를 형성하며, R'은 알킬인 것인 화합물, 또는 그의 수화물 또는 용매화물이 산 촉매화 온화 가수분해되는 것을 특징으로 하는, 일반식 3의 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

본 발명의 제9 양태는 상기 일반식 4의 화합물을 제공한다.

본 발명의 제10 양태는, R₁ 및 R₄는 앞에서 정의되고, X는 할로겐, -OC(=NH)CCl₃, -O-펜테닐(pentenyl), -OAc, -OBz 또는 -SR₇이고, 상기 R₇은 알킬 또는 선택적으로 치환된 페닐인, 하기 일반식 5의 화합물과:

R, R' 및 R₆가 앞에서 정의된, 하기 일반식 6의 화합물을:

글리코실화(glycosylation) 조건 하에서 반응시키는 것을 특징으로 하는, 상기 일반식 4의 화합물의 합성 방법에 관한 것이다.

본 발명의 제11 양태는 하기 일반식 7의 신규한 화합물로서:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 선택적으로 치환된 아실이고, R₇은 알킬 또는 선택적으로 치환된 페닐이며, 페닐 3,4-디-O-아세틸-2-O-벤질-1-티오-L-푸코피라노시드(fucopyranoside), 메틸 3,4-디-O-아세틸-2-O-벤질-1-티오-L-푸코피라노시드, 에틸 3,4-디-O-아세틸-2-O-벤질-1-티오-L-푸코피라노시드 및 에틸 3,4-디-O-아세틸-2-O-(4-메톡시벤질)-1-티오-L-푸코피라노시드를 제외한 화합물들을 제공한다.

본 발명의 제12 양태는, R₁ 및 R₇이 앞에서 정의된 하기 일반식 8의 화합물이:

아실화제(acylating agent)에 의해 아실화되는 것을 특징으로 하는, 상기 일반식 7의 신규한 화합물들의 제조에 적합한 방법을 제공한다.

본 발명의 제13 양태는 하기 일반식 1을 가지며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₂는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 H인 일반식 1의 화합물, 또는 그의 수화물 또는 용매화물이 촉매 가수소분해되는 것을 특징으로 하는, 2'-O-푸코실락토오스의 제조 방법에 관한 것이다.

본 명세서 전체에 걸쳐서, 용어 "알킬(alkyl)"은 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, i-부틸, s-부틸, t-부틸, n-헥실 등과 같은, 1-20개의 탄소 원자, 바람직하게는 1-6개의 탄소 원자를 갖는, 선형 또는 분지형 사슬 포화 탄화수소 기를 의미한다. 용어 "선택적으로 치환된 알킬(optionally substituted alkyl)"은 알킬 사슬이 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개의 치환기들을 보유하거나 또는 비치환될 수 있는 것을 의미하는 것으로 의도된다. 가능한 치환기들은, 상호 간에 독립적으로, 할로겐, 히드록시, 선택적으로 치환된 알킬옥시, 니트로, 아미노, 선택적으로 치환된 알킬아미노, 선택적으로 치환된 디알킬아미노(dialkylamino), 선택적으로 치환된 아실, 선택적으로 치환된 아실아미노, 카르복실, 선택적으로 치환된 알킬옥시카르보닐, 카르바모일(carbamoyl), 선택적으로 치환된 N-알킬카르바모일, 선택적으로 치환된 N, N-디알킬카르바모일, 선택적으로 치환된 N-아릴카르바모일, 티올(thiol), 선택적으로 치환된 알킬술파닐(alkylsulfanyl), 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아릴옥시 및 선택적으로 치환된 아릴옥시카르보닐로부터 선택된다. 벤질 기는 치환된 알킬 (즉, 페닐메틸)의 구성원으로 간주된다는 것을 강조한다. 선택적으로 치환된 벤질은, 4-메틸벤질, 3-페닐벤질, 4-메톡시벤질 등과 같은, 메틸 기에 결합된 선택적으로 치환된 페닐 (하기를 참조한다)을 의미하는 것으로 의도된다.

본 출원에서, 용어 "아릴(aryl)"은 단독으로 또는 또다른 원자 또는 기에 결합된 경우, 페닐 또는 나프틸과 같은 유사방향족(homoaromatic) 기를 지칭한다. 이 기들이 "선택적으로 치환된" 경우, 이들은 비치환되거나 또는 - 상호 간에 독립적으로 - 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알킬옥시, 할로겐, 니트로, 아미노, 선택적으로 치환된 알킬아미노, 선택적으로 치환된 디알킬아미노, 선택적으로 치환된 아실, 선택적으로 치환된 아실아미노, 카르복실, 선택적으로 치환된 알콕시카르보닐, 카르바모일, 선택적으로 치환된 N-알킬카르바모일, 선택적으로 치환된 N,N-디알킬카르바모일, 티올(thiol), 선택적으로 치환된 알킬술파닐 및 선택적으로 치환된 페닐을 포함한, 1개 , 2개, 3개, 4개, 또는 5개의 기를 가질 수 있다.

본 명세서에서, 용어 "아실(acyl)"은 포르밀(formyl), 아세틸, 프로피오닐(propionyl), 부티릴(butyryl), 피발로일(pivaloyl), 벤조일 등과 같은, R이 H, 알킬 (상기를 참조) 또는 아릴 (상기를 참조)일 수 있는 R"-C(=O)- 기를 의미한다. "선택적으로 치환된 아실(optionally substituted acyl)"의 경우, 상기 알킬 또는 아릴 잔기는 비치환되거나 또는 치환되어 (하기를 참조한다) 클로로아세틸, 트리클로로아세틸, 4-클로로벤조일, 4-니트로벤조일, 4-페닐벤조일, 4-벤즈아미도벤조일(benzamidobenzoyl), 4-(페닐카르바모일)-벤조일 등과 같은 아실 기를 생성할 수 있다. R이 H 또는 알킬을 의미하는 경우, 상기 기는 또는 알카노일(alkanoyl)로 명명될 수 있고, R이 아릴인 경우, 상기 기는 아로일(aroyl)로 명명된다.

용어 "알킬옥시(alkyloxy)" 또는 "알콕시(alkoxy)"는 메톡시, 에톡시, t-부톡시 등과 같은, 산소 원자를 통해 모 분자 모이어티(parent molecular moiety)에 결합된 알킬 기 (상기를 참조)를 의미한다. "선택적으로 치환된 알킬옥시(optionally substituted alkyloxy)" 또는 "선택적으로 치환된 알콕시(optionally substituted alkoxy)"는 비치환될 있거나 또는, 트리플루오로메톡시, 2,2,2-트리클로로에톡시 등과 같은, 앞에서 정의된 바와 같이 알킬 부분(alkyl portion)에서 치환될 수 있는 알콕시 기를 지칭한다.

"C₃-C₆ 시클로알킬(C₃-C₆ cycloalkyl)"은 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 또는 시클로헥실을 의미한다.

"C₁-C₆ 알코올(C₁-C₆ alcohol)"은 메탄올, 에탄올, n-프로판올, i-프로판올, n-부탄올, i-부탄올, s-부탄올, t-부탄올, 아밀알코올(amylalcohol), n-헥산올, 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜 등과 같은, 1 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 히드록시- 또는 디히드록시-알칸(alkane)을 지칭한다.

"할로겐(halogen)"은 플루오로, 클로로, 브로모 또는 요오도를 의미한다.

"아미노(amino)"는 -NH₂ 기를 지칭한다.

"알킬아미노(alkylamino)"는 메틸아미노, 에틸아미노 등과 같은, -NH- 기를 통해 모 분자 모이어티에 결합된 알킬 기 (상기를 참조한다)를 의미한다. "선택적으로 치환된 알킬아미노(optionally substituted alkylamino)"는 비치환될 수 있거나 또는 앞에서 정의된 바와 같이 알킬 부분에서 치환될 수 있는, 알킬아미노 기를 지칭한다.

"디알킬아미노(dialkylamino)"는 디메틸아미노, 디에틸아미노 등과 같은, 질소 원자를 통해 모 분자 모이어티에 결합된, 동일하거나 상이할 수 있는 두 개의 알킬 기(상기를 참조한다)를 의미한다. "선택적으로 치환된 디알킬아미노(optionally substituted dialkylamino)"는 알킬 부분들 중 하나 이상이 비치환될 수 있거나 또는 앞에서 정의된 바와 같이 치환될 수 있는 것인, 디알킬아미노 기를 지칭한다.

"아실아미노(acylamino)"는 아세틸아미노(아세트아미도(acetamido)), 벤조일아미노(벤즈아미도(benzamido)) 등과 같은, -NH- 기를 통해 모 분자 모이어티에 결합된 아실 기(상기를 참조한다)를 지칭한다. "선택적으로 치환된 아실아미노(optionally substituted acylamino)"는 비치환될 수 있거나 또는 앞에서 정의된 바와 같이 아실 부분에서 치환될 수 있는, 아실아미노 기이다.

"카르복시(carboxyl)"는 -COOH 기를 의미한다.

"알킬옥시카르보닐(alkyloxycarbonyl)"은 메톡시카르보닐, t-부톡시카르보닐 등과 같은, -C(=O)-기를 통해 모 분자 모이어티에 결합된 알킬옥시 기(상기를 참조한다)를 의미한다. "선택적으로 치환된 알킬옥시카르보닐(alkyloxycarbonyl)"은 비치환될 수 있거나 또는 벤질옥시카르보닐 등과 같은, 전술된 바와 같이 알킬 부분에서 치환될 수 있는 알킬옥시카르보닐 기이다.

"카르바모일(carbamoyl)"은 H₂N-C(=O)- 기이다.

"N-알킬카르바모일(N-alkylcarbamoyl)"은 N-메틸카르바모일 등과 같은, -HN-C(=O)- 기를 통해 모 분자 모이어티에 결합된 알킬 기(상기를 참조한다)를 의미한다. "선택적으로 치환된 N-알킬카르바모일(optionally substituted N-alkylcarbamoyl)"은 비치환될 수 있거나, 또는 앞에서 정의된 바와 같이 알킬 부분에서 치환될 수 있는 N-알킬카르바모일 기이다.

"N,N-디알킬카르바모일(N,N-dialkylcarbamoyl)"은 N,N-메틸카르바모일 등과 같은, >N-C(=O)- 기를 통해 모 분자 모이어티에 결합된 동일하거나 상이한 두 개의 알킬 기(상기를 참조한다)를 의미한다. "선택적으로 치환된 N,N-디알킬카르바모일(optionally substituted N,N-dialkylcarbamoyl)"은 알킬 부분들 중 하나 이상이 비치환될 수 있거나, 또는 앞에서 정의된 바와 같이 알킬 부분에서 치환될 수 있는 것인 N,N-디알킬카르바모일 기이다.

"N-아릴카르바모일(N-arylcarbamoyl)"은 N-페닐카르바모일 등과 같은, -HN-C(=O)- 기를 통해 모 분자 모이어티에 결합된 아릴 기(상기를 참조한다)이다. "선택적으로 치환된 N-아릴카르바모일(optionally substituted N-arylcarbamoyl)"은 비치환될 수 있거나, 또는 앞에서 정의된 바와 같이 아릴 부분에서 치환될 수 있는 N-아릴카르바모일 기이다.

"티올(thiol)"은 -SH 기를 의미한다

"알킬술파닐(alkylsulfanyl)" 또는 "알킬티오(alkylthio)"는 메틸술파닐(메틸티오), 에틸술파닐(에틸티오) 등과 같은, 황 원자를 통해 모 분자 모이어티에 결합된 알킬 기(상기를 참조한다)를 의미하는 것으로 의도된다. "선택적으로 치환된 알킬술파닐(optionally substituted alkylsulphanyl)"은 비치환될 수 있거나, 또는 앞에서 정의된 바와 같이 알킬 부분에서 치환될 수 있는 알킬술파닐 기를 지칭한다.

"아릴옥시(aryloxy)"는 페녹시, 나프틸옥시 등과 같은, 산소 원자를 통해 모 분자 모이어티에 결합된 아릴 기(상기를 참고한다)를 의미한다. "선택적으로 치환된 아릴옥시(optionally substituted aryloxy)"는 비치환될 수 있거나, 또는 4-메톡시-페녹시, 4-메틸페녹시 등과 같은, 앞에서 정의된 바와 같이 아릴 부분에서 치환될 수 있는 아릴옥시 기를 지칭한다.

"아릴옥시카르보닐(aryloxycarbonyl)"는 페녹시카르보닐 등 같은, -C(-O)- 기를 통해 모 분자 모이어티에 결합된 아릴옥시 기(상기를 참고한다)를 의미한다. "선택적으로 치환된 아릴옥시카르보닐(optionally substituted aryloxycarbonyl)"은 비치환될 수 있거나, 또는 앞에서 정의된 바와 같이 아릴 부분에서 치환될 수 있는 아릴옥시카르보닐 기를 지칭한다.

"아지도(azido)"는 -N₃ 기를 의미한다.

2'-O-푸코실락토오스와 같은 복합 올리고당(complex oliggosaccharide)의 합성은 보호 및 탈보호 전략을 사용한 다단계 합성 경로를 다른다. 올리고당 합성의 다양한 중간체 구조에도 불구하고, 최종 합성 표적은 일반적으로, 배타적인 수용성(exclusive water solubility)를 특징으로 하는 비보호된(unprotected) 올리고당 자체이다. 합성적 제조 방법에서 통상적으로 사용되는 유기 용매는 올리고당 합성의 최종 단계의 반응에 적합하지 않다. 가수소분해는 보호기 화학반응(protecting group chemistry) 중에서, 물이 용매로서 사용될 수 있는 예외를 나타낸다. 가수소분해 자체는 매우 온화한(gentle) 조건 하에서 거의 정량적으로, 올리고당 골격으로부터 O-벤질/치환된 O-벤질 모이어티를 제거하여 부산물 생성을 방지하기에 적합한 강력한 탈보호 과정이다. 또한, 부산물로서 톨루엔 또는 치환된 톨루엔 유도체를 배타적으로 제공하는 반응의 완료를 위해 촉매량의 시약만이 요구된다는 것도 복잡한 합성 경로 내에서 최종 탈보호(deblocking) 과정으로서 가수소분해의 장점이다. 톨루엔 및 치환된 톨루엔 유도체는 모두, 심지어 다중 톤 스케일에서도 증발 및/또는 추출 과정에 의해 수용성 올리고당 생성물로부터 용이하게 제거될 수 있다.

종래에 다수의 퍼-O-벤질화(per-O-benzylated) 올리고당의 제조가 과학 문헌에서 개시되었으나, 이 올리고당 유도체들은 대부분 결정질 고체가 아니었으며, 수화된 유도체의 오일(oil) 또는 시럽(syrup)을 제공하였다. 그러나, 본 발명은 아노머 순도(anomeric purity)의 제어 및/또는 가장 진보된(advanced) 올리고당 중간체 내로의 복수의 O-벤질 모이어티 도입에 의한 비극성 분자 영역(molecular region)의 생성과 같은, 세심한 구조적 설계로 인해 단순한 O-벤질화된 신규 올리고당들이 결정질 고체를 제공하는, 다수의 예들을 제공한다. 한편, 본 발명은 또한, 선택된 치환된 O-벤질 보호기로 수식(decorate)된 올리고당 중간체들의 높은 결정성(crystalline properties)을 활용한다.

높은 결정질 O-벤질화 및/또는 치환된 O-벤질화 올리고당 중간체의 가수소분해를 사용하는 조합은, 잠재적인 올리고당 제조 기술의 기반을 형성한다.

전술된 바와 같이, 다수의 올리고당이 오일 또는 시럽을 제공하며, 제조 정제 기술을 고가의 크로마토그래피로 제한시킨다. 비보호된 올리고당의 높은 수용성 및 낮은 유기 용매 용해성은, 정제 기술의 범위를 고가의 역상 분리(reverse phase separation)로 좁힌다. 본 발명은 처음에, 조 올리고당 혼합물을 결정질 O-벤질화/치환된 O-벤질화 올리고당으로 전환시키고, 두번재 단계에서 저가의 정제 수단으로서 결정화를 이용하고, 및 마지막 단계에서 상기 O-벤질/치환된 O-벤질 보호기를 제거하는 것에 의해, 높은 순도의 비보호된 올리고당을 제조하기 위한 대안적인 저가 정제 프로토콜을 제공한다.

사실, 본 발명은 가수소분해의 매우 유익한 특징들과, O-벤질화/치환된 O-벤질화 올리고당 중간체의 높은 결정성을 조합한다.

본 발명의 제1 양태는, 하기 일반식 1을 가지며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₂는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 H인 것인 화합물, 또는 그의 수화물 또는 용매화물이 촉매 가수소분해되는 것을 특징으로 하는, 2'-O-푸코실락토오스의 제조를 위한 상기 일반식 1의 화합물의 용도에 관한 것이다.

용어 "가수소분해에 의해 제거가능한 기(group removable by hydrogenolysis)"는 산소에 커플링된(coupled) 그의 결합이, 팔라듐(palladium), 레이니 니켈(Raney nickel) 또는 적절한 금속 촉매의 존재 하에서 수소 첨가에 의해 용이하게 해리(split)되어, 보호된 하나 이상의 OH-기를 재생시키는 것인 기를 지칭한다. 보호기의 종류는 당업자에게 잘 알려져 있고, 벤질, 디페닐메틸 (벤즈히드릴), 1-나프틸메틸, 2-나프틸메틸, 벤질옥시메틸, 벤질옥시카르보닐 또는 트리페닐메틸 (트리틸) 기를 포함하나 이에 제한되지 않는, 이들 중 다수가 P.G.M. Wuts 및 T.W. Greene: Protective groups in organic synthesis John Wiley & Sons (2007)에 의해 언급되며, 상기 보호기 모두는 방향족 고리(들) 상에서, 하나 이상의 알킬, 알콕시, 페닐, 아미노, 아실아미노, 알킬아미노, 디알킬아미노, 니트로, 카르복실, 알콕시카르보닐, 카르바모일, N-알킬카르바모일, N,N-디알킬카르바모일, 아지도, 할로겐알킬 또는 할로겐에 의해 선택적으로 치환될 수 있다.

용어 "촉매 가수소분해(catalytic hydrogenolysis)"는 통상적으로 양성자성 용매(protic solvent) 또는 양성자성 용매의 혼합물 중에서 일어나는, 촉매의 존재 하에서 수소를 이용한 환원을 의미하는 것으로 의도된다. 양성자성 용매는 물, 아세트산 또는 C₁-C₆ 알코올로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 하나 이상의 양성자성 용매와, (THF, 디옥산(dioxane), 에틸 아세테이트, 아세톤 등과 같은) 상기 양성자성 용매(들)와 부분적으로 또는 완전히 혼화가능한(miscible) 하나 이상의 적절한 양성자성 유기 용매의 혼합물이 또한 적용될 수 있다. 물, 하나 이상의 C₁-C₆ 알코올, 또는 물과 하나 이상의 C₁-C₆ 알코올의 혼합물이 바람직하게는 용매 시스템으로 사용된다. 또한, 임의의 농도의 탄수화물 유도체를 포함하는 용액 및 사용되는 용매(들)을 사용한 탄수화물 유도체의 현탁액도 적용가능하다. 반응 혼합물을, 반응 종료에 도달할 때까지, 팔라듐, 레이니 니켈 또는 임의의 다른 적절한 금속 촉매, 바람직하게는 탄소상 팔라듐(palladium on charcoal) 또는 팔라듐 블랙(palladium black)과 같은 촉매의 존재 하에, 1-50 bar의 수소 대기에서, 10-100 ℃, 바람직하게는 20-50 ℃의 온도 범위에서 교반한다. 촉매 금속 농도는 일반적으로 탄수화물의 중량 기준으로 0.1 % 내지 10 % 범위이다. 바람직하게는, 촉매 농도는 0.15 % 내지 5 %, 보다 바람직하게는 0.25 % 내지 2.25% 범위이다. 시클로헥센, 시클로헥사디엔, 포름산 또는 암모늄 포르메이트로부터 인 시튜(in situ)로 수소가 생성되는 경우, 수소화 전이(transfer hydrogenation)가 또한 수행될 수 있다. 가수소분해 혼합물의 pH는 바람직하게는 중성이나, 가수소분해의 동태(kinetics)를 개선하기 위해 유기 또는 무기 염기/산 및/또는 염기성 및/또는 산성 이온 교환 수지가 또한 사용될 수 있다. 염기성 물질의 사용은 전구체의 치환된 벤질 모이어티에 할로겐 치환체가 존재하는 경우에 특히 바람직하다. 유기산은 바람직하게는 복수의 벤질 기들이 전구체로부터 제거되어야 하는 경우 공-용매(co-solvent) 또는 첨가제로서 사용된다. 바람직한 유기 염기는 트리에틸아민, 디이소프로필 에틸아민, 암모니아, 암모늄 카르바메이트, 디에틸아민 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 바람직한 유기 산은 포름산, 아세트산, 프로피온산(propionic acid), 클로로아세트산, 디클로로아세트산(dichloroacetic acid), 트리플루오로아세트산(trifluoroacetic acid) 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 상기 제안된 조건들은 스케일-업 과정의 연구 및 2'-FL을 생산하기 위한 산업적 방법의 개발을 가능하게 한다. 또한, 용매(들)의 간단하고, 편리하고, 섬세한 제거가 적용되어, 우수한 수율 및 높은 순도로 2'-FL을 제공할 수 있다.

바람직한 일 구체예에서, 본 발명의 방법에 의해 제조된 2'-O-푸코실락토오스는 냉각 또는 MTBE, 디에틸 에테르, 디이소프로필 에테르 등을 포함하나 이에 제한되지 않는 에테르, 및/또는 C₁-C₆ 알코올의 첨가에 의해 물/유기 용매/수성 용액으로부터 침전시킴으로써, 무정형 고체로서 분리될 수 있다. 대안적으로, 2'-O-푸코실락토오스는 동결 건조(freeze drying) 및 분무 건조(spray drying)에 의해서도 분리될 수 있다.

바람직한 일 구체예에서, 일반식 1을 특징으로 하는 화합물들의 가수소분해는 20-60 ℃의 온도, 1-10 atm의 수소 압력에서, 용매로서 물 또는 물-알코올 혼합물, 촉매로서 2-10 % 탄소상 팔라듐 또는 팔라듐 블랙을 사용하여 중성 조건에서 수행된다. 가수소분해가 종료된 후, 반응 혼합물을 여과하고, 바람직하게는 유기 용매 성분을 제거함으로써 농축시키고, 및 침전, 분무 건조, 동결 건조시켜 무수의 및/또는 수화된 2'-O-푸코실락토오스 (수분 함량 0-20 %)를 제어된 방식으로 생성시킨다.

또다른 바람직한 구체예에서, 일반식 1을 특징으로 하는 화합물들의 가수소분해는 20-60 ℃의 온도, 1-10 atm의 수소 압력에서, 용매로서 물 또는 물-알코올 혼합물, 촉매로서 2-10 %의 탄소상 팔라듐 또는 팔라듐 블랙을 사용하여 중성 조건에서 수행된다. 가수소분해의 종료 후에, 반응 혼합물을 여과시키고, 바람직하게는 농축시켜, 10-95 % 농도의 2'-O-푸코실락토오스를 포함하는 2'-O-푸코실락토오스 수용액/시럽을 생성시킨다.

본 발명의 바람직한 구현(realization)에 따르면, R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질이며, R₂는 H인 일반식 1의 화합물이 가수소분해에 사용된다.

본 발명에 의해 제공되는, 무정형/동결 건조/분무 건조 형태와 같은 2'-O-푸코실락토오스의 고체 형태, 및 수용액/시럽과 같은 2'-O-푸코실락토오스의 액체 형태는 모두, 영아용 조제식(infant formula), 영아용 이유식(infant cereal), 임상 영아용 영양 제품(clinical infant nutritional product) 등을 포함하나 이에 제한되지 않는, 영아 영양학적 용도에 적합한 높은 2'-FL 순도를 갖는다. 일반적으로, 본 발명의 방법에 의해 제조된 2'-O-푸코실락토오스의 고체 및 액체 형태는 모두 영아, 유아(child), 성인(adult) 및 노인(elderly)을 위한 일반적인 영양학적 용도에 적합하다. 본 발명에 의해 제공되는 2'-O-푸코실락토오스의 고체 및 액체 형태 모두는, 식품 첨가제, 식품 보조제(dietary supplement), 소프트 드링크, 과일 주스, 병에 든 생수(bottled water), 와인, 맥주 등과 같은 알코올성 및 비 알코올성 음료의 구성 성분으로도 또한 사용될 수 있다. 본 발명에 의해 제공되는 2'-O-푸코실락토오스의 고체 및 액체 형태는 또한, 박테리아 및 바이러스 감염의 예방, 설사의 방지, 면역계 및 뇌 발달의 증진 등을 포함하나 이에 제한되지 않는, 광범위한 치료 적용 분야에서 치료제로서 사용될 수 있다. 본 발명에 의해 제공되는 2'-O-푸코실락토오스의 고체 및 액체 형태 모두는 또한 가축 동물(domesticated animal)의 감염 질환을 퇴치하는 것을 포함하나, 이에 제한되지 않는 수의학적 적용에서 사용될 수 있다. 본 발명에 의해 제공되는 2'-O-푸코실락토오스는 또한 폴리머(polymeric)/폴리머 보강(polymer mounted) 제품의 제조를 위한 중요한 모노머(monomer)로서 사용되어, 박테리아 및 바이러스를 위한 다가 결합(multivalent binding)을 제공할 수 있다. 본 발명에 의해 제공되는 2'-O-푸코실락토오스는 또한, 추가적인 푸코실화(fucosylation), 추가적인 시알화(sialylation), N-아세틸 락토오스아미닐화(N-acetyl lactosaminylation)/N-아세틸이소락토오스아민화(N-acetylisolactosamination) 등에 의한 코어(core) 구조의 추가적인 신장의, 간단한 구조 변형을 포함하나 이에 제한되지 않는, 화학적 및/또는 효소적 방법을 적용함으로써 다른 인유 올리고당의 제조에 사용될 수 있다.

본 발명의 제2 양태는 하기 일반식 1을 갖는 것을 특징으로 하며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₂는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 H인 것인 삼당류, 또는 그의 수화물 또는 용매화물을 제공한다.

일반식 1을 특징으로 하는 신규한 유도체는 α 또는 β 아노머(anomer) 또는 심지어 α 및 β 이성질체의 아노머 혼합물과 같은, 유일한 화학적 엔티티(entity)로 간주될 수 있다는 것이 강조된다. 일반식 1을 갖는 신규한 2'-O-푸코실락토오스 중간체는 결정질 고체, 오일, 시럽, 침전된 무정형 물질 또는 분무 건조된 제품으로서 특징지워질 수 있다. 결정질인 경우, 일반식 1의 화합물은 무수 상태, 또는 그의 결정 구조 내로 하나 또는 여러 개의 물 분자를 혼입시킴으로써 수화된 결정형(crystalline form)으로 존재할 수 있다. 마찬가지로, 일반식 1을 특징으로 하는 신규한 화합물들은, 그의 결정 구조 내에 유기 분자 및/또는 이온과 같은 리간드(ligand)가 혼입된, 결정질 물질로서 존재할 수 있다.

바람직한 일 구체예에서, 상기 신규한 삼당류는 R₁이 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질이며, 상기 R₂는 H인 일반식 1을 갖는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 의해 제공되는 일반식 1의 신규한 화합물은, 당해 기술분야에 공지된 화학적/효소적 방법들을 이용한 2'-O-푸코실락토오스 자체 또는 다른 2'-O-푸코실락토오스 유도체들의 제조에 사용될 수 있다. 일반식 1의 신규한 화합물들은 또한 다수의 인유 올리고당의 생산/제조를 위한 진보된(advanced) 전구체/중간체로서 또한 사용될 수 있다. 일반식 1의 신규한 화합물들은 치료적/영양적 용도에 적합한 복합 올리고당/글리코컨쥬게이트(complex oligosaccharide/glycoconjugate)의 합성을 위한 중요한 중간체들로 또한 간주될 수 있다.

본 발명의 제3 양태는 하기 일반식 2를 가지며,

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₃는 가수소분해에 의해 제거가능한 기, 아세탈형 기, 실릴 기 또는 H이고, R은 알킬이거나 또는 두 개의 제미날 R-기 및 이들과 결합된 탄소 원자가 C₃-C₆ 시클로알킬 고리를 형성하며, R'은 알킬인 것인 화합물, 그의 수화물 또는 용매화물을 산 촉매화 온화 가수분해시키는 것을 특징으로 하는, 일반식 1의 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

용어 "아세탈형 기(acetal type group)"는 보호되는 히드록시 기의 산소 원자와 함께, 동일한 탄소 원자에 결합된, 2개의 단일 결합된 산소를 포함하는 구조를 형성하는 보호기를 의미하며, R_a, R_b 및 R_c는 탄소-결합된 기인, 하기 일반 구조를 특징으로 한다:

이러한 종류의 기들은 당업자에게 잘 알려져 있으며, 메톡시메틸, t-부톡시메틸, 2-메톡시-에톡시메틸, 벤질옥시메틸, 테트라히드로피라닐(tetrahydropyranyl), 테트라히드로푸라닐(tetrahydrofuranyl), 1,4-디옥산-2-ㅇ일(4-dioxan-2-yl), 1-메틸-1-메톡시에틸, 1-메틸-1-페녹시에틸 등을 포함하나 이에 제한되지 않는, 이 기들 중 다수가 P.G.M. Wuts 및 T.W. Greene: Protective groups in organic synthesis John Wiley & Sons (2007)에 의해 언급되어 있다. 아세탈형 보호기들은 온화한 산성 조건 하에서 불안정(labile)하다.

용어 "실릴 기(silyl group)"는 보호되는 히드록시 기의 산소 원자에 공유 결합된 실리콘 원자를 포함하는 보호기 (실릴 에테르(silyl ether)를 의미한다. 이러한 종류의 기들은 당업자에게 잘 알려져 있으며, 트리메틸실릴(trimethylsilyl), 트리이소프로필실릴(triisopropylsilyl), t-부틸디메틸실릴(t-butyldimethylsilyl), t-부틸디페닐실릴(t-butyldiphenylsilyl) 등을 포함하나 이에 제한되지 않는, 이들 중 다수가 P.G.M. Wuts 및T.W. Greene: Protective groups in organic synthesis John Wiley & Sons (2007)에 의해 언급되어 있다. 실릴 에테르는 온화한 산성 조건 하에서 불안정하다.

용어 "산 촉매화 온화 가수분해(acid catalyzed mild hydrolysis)"는 물이 pH > 2의 산의 존재 하에, 산 불안정성 보호기(acid labile protecting group)를 갖는 또다른 물질과 반응하여 보호된 작용기(들)을 재생시키는 화학 반응을 지칭한다. 본 발명에 있어서, 산 불안정성 보호기는 1급(primary) 또는 2급(secondary) 히드록시 (비고리형 아세탈(acyclic acetal) 또는 실릴 에테르의 형태), 1,2-디올 시스템 (고리형 아세탈의 형태) 또는 포름 기 (아세탈의 형태)의 보호기일 수 있다. 출발 화합물은 동시에 또는 순차적으로 제거될 수 있는 하나 이상의 산 불안정성 보호기들을 가질 수 있다. 또한, 상기 출발 화합물은 아실 보호기를 또한 포함할 수 있다. 숙련된 기술자는 아실 기가 강한 산성 가수분해(strong acidic hydrolysis) (pH < 2)에 의해서만 탈보호될 수 있다는 것을 완전히 이해할 것이다. 숙련된 기술자는 어떠한 탈보호 조건이 아실 기는 온전한 상태로 유지하면서 아세탈 및/또는 실릴 기에 영향을 미칠지 구별할 수 있다. 또한, 글리코시드간 결합(interglycosidic linkage)도 산에 민감할 수 있다. 숙련된 기술자는 글리코시드간 결합이 강한 산성 가수분해 (pH < 2)에 의해서만 해리될 수 있다는 것을 완전히 이해할 것이다. 숙련된 기술자는 어떠한 탈보호 조건이 글리코시드간 결합은 온전하게 유지하면서 아세탈 및/또는 실릴 기에 영향을 주는지를 구별할 수 있다. 반응 환경 내에 시약으로서 존재해야 하는 물은 용매 또는 공-용매로서도 기능할 수 있다. 산성 조건 하에서 안정하고, 물과 완전히 또는 부분적으로 혼화가능한, C₁-C₆ 알코올, 아세톤, THF, 디옥산, 에틸 아세테이트, MeCN 등과 같은, 유기 양성자성 또는 비양성자성(aprotic) 용매가 물과 함께 혼합물 내에 사용될 수 있다. 사용되는 산은 일반적으로, 아세트산, 트리플루오로아세트산, HCl, 포름산, 황산, 과염소산(perchloric acid), 옥살산(oxalic acid), p-톨루엔술폰산(p-toluenesulfonic acid), 벤젠술폰산(benzenesulfonic acid), 양이온 교환 수지(cation exchange resin) 등을 포함하나 이에 제한되지 않는 양성자성 산으로, 이 산은 촉매량(catalytic amount)에서부터 과량(large excess)까지 존재할 수 있다. 상기 가수분해는, 온도, 농도 및 pH에 따라 약 2시간 내지 3일이 소요되는, 종료 시점에 도달할 때까지, 20 ℃ 및 환류(relux) 온도 사이에서 수행될 수 있다. 바람직하게는, 아세트산, 포름산, 클로로아세트산, 옥살산 등의 수용액을 포함하나, 이에 제한되지 않는 유기 산들이 40-75 ℃에서 사용된다. 또다른 바람직한 조건은 HCl, 또는 p-톨루엔술폰산 또는 캄포르술폰산(champhorsulfonic acid)과 같은 술폰산의 존재 하에서, C₁-C₆ 알코올-아세토니트릴 또는 C₁-C₆ 알코올-물 혼합물을 사용하는 것이다.

대안적으로, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는 무수 C₁-C₆ 알코올이 산-촉매화 아세탈전이반응(trans-acetalization)/케탈전이반응(trans-ketalization) 과정에 의한 비고리형/고리형 아세탈/케탈 모이어티의 필요적 절단에 또한 사용될 수 있다. 상기 목적으로, 염화수소, 황산, 과염소산, p-톨루엔술폰산, 아세트산, 옥살산, 캄포르술폰산, 강산 이온 교환 수지 등의 촉매량을, 20 ℃의 온도에서 환류와 함께 사용할 수 있다.

바람직한 구체예에서, 산 촉매화 온화 가수분해는 술폰산의 존재 하에 물과 하나 이상의 C₁-C₆ 알코올의 혼합물 중에서, 바람직하게는 p-톨루엔술폰산의 존재 하에 물-이소프로판올 혼합물 중에서 수행된다.

바람직한 구체예에서, R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질이며, 상기 R₃는 H이고, 상기 R 및 R'은 메틸인, 일반식 2를 특징으로 하는 화합물이 적용된다.

본 발명의 제4 양태는 하기 일반식 2를 갖는 것을 특징으로 하며:

식 중에서, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₃는 가수소분해에 의해 제거가능한 기, 아세탈형 기, 실릴 기 또는 H이고, R은 알킬이거나 또는 두 개의 제미날 R-기 및 이들과 결합된 탄소 원자가 C₃-C₆ 시클로알킬 고리를 형성하고, R'은 알킬인, 신규한 올리고당 유도체, 또는 그의 수화물 또는 용매화물을 제공한다.

일반식 2의 신규한 2'-O-푸코실락토오스 중간체는 결정질 고체, 오일, 시럽, 무정형 침전물(precipitated amorphous material) 또는 분무 건조 제품(spray dried product)으로서의 특징을 가질 수 있다. 결정질인 경우, 일반식 2의 화합물은 무수물로 존재하거나, 또는 하나 또는 여러 개의 물 분자를 그의 결정 구조로 혼입(incorporate)시킴으로서 수화된 결정형으로 존재할 수 있다. 마찬가지로, 일반식 2를 특징으로 하는 신규한 화합물은, 그의 결정 구조 내에 유기 분자 및/또는 이온과 같은 리간드가 혼입된, 결정질 물질로서 존재할 수 있다.

바람직한 일 구체예에서, 상기 신규한 올리고당은, R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질이며, 상기 R₃는 H이고, 상기 R 및 R'은 모두 메틸인, 일반식 2를 갖는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 의해 제공되는 일반식 2의 신규한 화합물은 당해 기술분야에 공지된 화학적/효소적 방법을 이용하여 2'-O-푸코실락토오스 및 기타 2'-O-푸코실락토오스 유도체의 제조에 사용될 수 있다. 일반식 2의 신규 화합물들은 또한, 다수의 인유 올리고당의 생산/제조를 위한 진보된 전구체(precursor)/중간체로서도 사용될 수 있다. 일반식 2의 신규 화합물들은 또한 치료학적/영양학적 용도를 위한, 복합 올리고당/글리코컨쥬게이트의 합성을 위한 중요한 중간체로 고려될 수 있다.

본 발명의 제5 양태는 하기 일반식 3을 가지며:

식 중에서, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄은 선택적으로 치환된 아실이고, R₅는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 선택적으로 치환된 아실인 것인 화합물, 또는 그의 수화물 또는 용매화물의 탈아실화를 포함하는, 일반식 1의 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

용어 "탈아실화(deacetylation)"는 O-아실 보호기를 제거하는 것을 의미한다. 탈아실화 방법은 히드록시로부터의 아실 보호기가, 20-100 ℃의 온도에서, NaOMe, NaOEt, KO^tBu 등과 같은 알코올레이트(alcoholate)의 존재 하에, 메탄올, 에탄올, 프로판올, t-부탄올 등과 같은 알코올 용매로부터 제거되는 염기 촉매화 에스테르교환(base catalyzed transesterification) 탈보호일 수 있다. 상기 알코올 및 알코올레이트는 매칭되어야 한다. 생성물의 입자 크기를 조절하고, 겔 형성을 방지하기 위해 톨루엔 또는 자일렌(xylene)과 같은 공-용매의 사용이 유익할 수 있다. 바람직한 구체예에서, 40-60 ℃에서 메탄올 또는 메탄올-톨루엔 혼합물 중에, 촉매량의 NaOMe가 사용된다 (Zemplen 탈아실화). 추가적인 탈아실화 방법은, 일반적으로 0-100 ℃의 다양한 온도에서, 동질(homogenous) 또는 이질의(heterogenous) 반응 조건에서의 물, 알코올 또는 물-유기 용매 혼합물 중 염기 촉매화 가수분해를 의미하는, 염기 가수분해일 수 있다. 선택되는 염기는 일반적으로 강염기, 예를 들면 LiOH, NaOH, KOH, Ba(OH)₂, K₂CO₃, 염기성 이온 교환 수지, 테트라알킬암모늄 히드록시드 등일 수 있다. 상기 염기는 또한 수용액 형태로 사용될 수 있다. 바람직한 구체예에서, 상기 염기는 NaOH이고, 상기 용매는 메탄올이다. 탈아실화를 위한 대안적인 방법은, 20-120 ℃의 온도에서, 물, 알코올 또는 물-유기용매 혼합물 중에서 암모니아, 히드라진(hydrazine), 치환된 히드라진, 에틸렌 디아민 또는 1차 아민의 처리를 의미하는, 아미노분해(aminolysis) (N-아실 전달 기반 탈보호(N-acyl transfer based deprotection))일 수 있다. 상기 언급된 어떠한 탈아실화 조건에서도, 산 불안정성 보호기 또는 글리코시드간 결합은 영향을 받지 않는다.

보다 바람직한 조건에 따르면, R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질로 정의되고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질로 정의되며, 상기 R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, 상기 R₅는 피발로일(pivaloyl), 벤조일 또는 4-클로로벤조일인 것인 일반식 3의 화합물을, NaOMe 또는 NaOH의 존재 하에 메탄올에서 탈아실화시킨다.

본 발명의 제6 양태는 하기 일반식 3을 갖는 것을 특징으로 하며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄은 선택적으로 치환된 아실이고, R₅는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 선택적으로 치환된 아실인, 신규한 올리고당 유도체, 그의 수화물 또는 용매화물을 제공한다.

상기 일반식 3을 갖는 것을 특징으로 하는 신규한 유도체는 α 또는 β 아노머 또는 심지어 α 및 β 이성질체의 아노머 혼합물과 같은, 유일한 화학적 엔티티(chemical entity)로 간주될 수 있다는 것이 강조된다. 일반식 3의 신규한 2'-O-푸코실락토오스 중간체는 결정질 고체, 오일, 시럽, 무정형 침전물 또는 분무 건조 제폼으로서의 특징을 가질 수 있다. 결정질인 경우, 일반식 3의 화합물은 무수물이거나, 또는 하나 또는 여러 개의 물 분자가 그의 결정 구조 내에 혼입된, 수화된 결정형으로 존재할 수 있다. 마찬가지로, 일반식 3을 갖는 것을 특징으로 하는 신규 화합물은 그의 결정 구조 내에 유기 분자 및/또는 이온과 같은 리간드가 혼입된, 결정질 물질로 존재할 수 있다.

바람직한 구체예에서, 상기 신규한 올리고당은, R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질로 정의되고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질로 정의되며, 상기 R₄는 하나 이상의 할로겐으로 선택적으로 치환된, 벤조일을 나타내고, 상기 R₅는 하나 이상의 할로겐으로 선택적으로 치환된 알카노일 또는 벤조일인 것인, 일반식 3을 갖는 것을 특징으로 한다. 훨씬 더 바람직한 구체예에서, 상기 R₁은 벤질 또는 4-메틸벤질이고, 상기 R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, 및 상기 R₅는 피발로일, 벤조일 또는 4-클로로벤질이다.

본 발명에 의해 제공되는 일반식 3의 신규한 화합물은 당해 기술분야에 공지된 화학적/효소적 방법을 이용한 2'-O-푸코실락토오스 및 기타 2'-O-푸코실락토오스 유도체의 제조에 사용될 수 있다. 일반식 3의 신규 화합물들은 또한, 다수의 인유 올리고당의 생산/제조를 위한 진보된 전구체/중간체로서도 사용될 수 있다. 일반식 3의 신규 화합물들은 또한 치료학적/영양학적 용도를 위한, 복합 올리고당/글리코컨쥬게이트의 합성을 위한 중요한 중간체로 고려될 수 있다.

본 발명의 제7 양태는 하기 일반식 4를 가지며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 선택적으로 치환된 아실이고, R₆는 가수소분해에 의해 제거가능한 기, 아세탈형 기, 실릴 기 또는 선택적으로 치환된 아실이고, R은 알킬이거나 또는 두 개의 제미날 R-기 및 이들과 결합된 탄소 원자가 C₃-C₆ 시클로알킬 고리를 형성하고, R'은 알킬인 것인 화합물, 또는 그의 수화물 또는 용매화물을 탈아실화시키는 단계를 포함하는, 일반식 2의 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

보다 바람직한 조건에 따르면, R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질로 정의되고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질로 정의되며, 상기 R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, R₆는 피발로일, 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, 및 상기 R 및 R'은 메틸인, 상기 일반식 4의 화합물을 NaOMe 또는 NaOH의 존재 하에 메탄올 중에서 탈아실화시킨다.

본 발명의 제8 양태는, 하기 일반식 4를 가지며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 선택적으로 치환된 아실이고, R₆는 가수소분해에 의해 제거가능한 기, 아세탈형 기, 실릴 기 또는 선택적으로 치환된 아실이고, R은 알킬이거나 또는 두 개의 제미날 R-기 및 이들과 결합된 탄소 원자가 C₃-C₆ 시클로알킬 고리를 형성하고, R'은 알킬인 화합물 또는 그의 수화물 또는 용매화물을 산 촉매화 온화 가수분해시키는 단계를 포함하는, 하기 일반식 3을 가지며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 선택적으로 치환된 아실이고, R₅는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 선택적으로 치환된 아실인 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

바람직한 구체예에 따르면, R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질로 정의되고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질로 정의되며, 상기 R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, R₆는 피발로일, 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, 및 상기 R 및 R'은 메틸인, 상기 일반식 4의 화합물을 p-톨루엔술폰산 또는 염산의 존재 하에, 수성 아세토니트릴 또는 수성 아세톤 중에서 가수분해시킨다.

본 발명의 제9 양태는, 하기 일반식 4를 갖는 것을 특징으로 하며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 선택적으로 치환된 아실이고, R₆는 가수소분해에 의해 제거가능한 기, 아세탈형 기, 실릴 기 또는 선택적으로 치환된 아실이고, R은 알킬이거나 또는 두 개의 제미날 R-기 및 이들과 결합된 탄소 원자가 C₃-C₆ 시클로알킬 고리를 형성하고, R'은 알킬인 것인, 신규한 올리고당 유도체, 또는 그의 수화물 또는 용매화물을 제공한다.

상기 일반식 4의 신규한 2'-O-푸코실락토오스 중간체는 결정질 고체, 오일, 시럽, 무정형 침전물 또는 분무 건조 제품으로서의 특징을 나타낼 수 있다. 결정질인 경우, 일반식 4의 화합물은 무수물이거나, 또는 그의 결정 구조 내에 하나 또는 여러 개의 물 분자가 혼입된, 수화된 결정형으로 존재할 수 있다. 마찬가지로, 일반식 4을 갖는 것을 특징으로 하는 신규 화합물들은 그의 결정 구조 내에 유기 분자 및/또는 이온과 같은 리간드가 혼입된, 결정질 물질로 존재할 수 있다.

바람직한 일 구체예에서, 상기 신규한 올리고당은, R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질로 정의되고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질로 정의되며, R₄는 하나 이상의 할로겐으로 선택적으로 치환된, 벤조일을 나타내고, R₆는 하나 이상의 할로겐으로 선택적으로 치환된 알카노일 또는 벤조일이고, R 및 R'은 메틸인, 일반식 4를 갖는 것을 특징으로 한다. 훨씬 더 바람직한 구체예에서, 상기 R₁은 벤질 또는 4-메틸벤질이고, 상기 R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, 및 상기 R₆는 피발로일, 벤조일 또는 4-클로로벤질이다.

본 발명에 의해 제공되는 일반식 4의 신규한 화합물은 당해 기술분야에 공지된 화학적/효소적 방법을 이용한 2'-O-푸코실락토오스 및 기타 2'-O-푸코실락토오스 유도체의 제조에 사용될 수 있다. 일반식 4의 신규 화합물들은 또한, 다수의 인유 올리고당의 생산/제조를 위한 진보된 전구체/중간체로서도 사용될 수 있다. 일반식 4의 신규 화합물들은 또한 치료학적/영양학적 용도를 위한, 복합 올리고당/글리코컨쥬게이트의 합성을 위한 중요한 중간체로 간주될 수 있다.

본 발명의 제10 양태는, R₁ 및 R₄는 앞에서 정의된 바와 같고, X는 할로겐, -OC(=NH)CCl₃, -O-펜테닐(pentenyl), -OAc, -OBz 또는 -SR₇이고, 상기 R₇은 알킬 또는 선택적으로 치환된 페닐인, 하기 일반식 5의 공여체(donor) 화합물과:

,

R, R' 및 R₆는 앞에서 정의된 바와 같은 것인, 하기 일반식 6의 수용체(acceptor) 화합물을:

글리코실화(glycosylation) 조건 하에서 커플링 반응(coupling reaction)시키는 단계를 포함하는, 일반식 4의 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

용어 "글리코실화 조건(glycosidation condition)"은 본 명세서에 있어서, 비-인접 기 활성 보호기 전략(non-neighbouring group active protecting group strategy), 용매 효과, 할라이드 효과, 프로모터 선택 및 온도 조절에 의해 컨쥬게이션의 입체선택성(stereoselectivity)을 제어함으로써 원하는 글리코실화 생성물을 수득하기 위해, 활성화제(activator)의 존재 하에, 비양성자성 용매(aprotic solvent) 또는 비양성자성 용매들의 혼합물 중에서 반응을 수행하는 것을 의미한다. 탄수화물에 있어서 글리코실화를 위한 일련의 아노머 활성화가 개발되었고, 이는 합성 탄수화물 화학분야에 종사하는 기술자에 의해 이용가능하다. 이러한 방법들은 예를 들면, Demchenko (Ed.): Handbook of Chemical Glycosylation Wiley (2008)에 의한, 검토(review) 및 안내서에서 폭넓게 논의된다. 예시를 위해, X-기에 따른 몇 가지의 일반적인 고려사항이 하기에 간략하게 언급된다 (수용체 및 공여체의 보호기는 글리코실화 반응 하에서 손상되지 않은 상태로 유지된다).

글리코실 할라이드 (X는 F, Cl, Br, I를 의미함)는 그의 용이한 접근성 및 만족스러운 반응성 때문에 글리코실화 반응에서 빈번하게 사용된다. 통상적으로, 아노머 할라이드는 친핵성 치환반응(nucleophilic displacement)에 있어서 F<Cl<Br<I의 반응 순서를 따른다. 글리코실화 반응은 중금속 이온, 주로 수은 또는 은, 및 루이스 산(Lewis acid)에 의해 일반적으로 촉진된다. 글리코실 플루오라이드는 헤미아세탈(hemiacetal), 글리코실 할라이드, 글리코실 에스테르 및 S-글리코시드와 같은 적절한 전구체를, HF, AgF, AgBF₄, 테트라부틸 암모늄 플루오라이드, 디에틸아미노술퍼 트리플루오라이드(diethylaminosulfur trifluoride), 2-플루오로-1-메틸피리디늄 토실레이트(2-fluoro-1-methylpyridinium tosylate), 셀렉트플루오르(Selecfluor), 데옥소-플루오르(Deoxo-Fluor), 4-메틸(디플루오로요오도)벤젠(4-methyl(difluoroiodo)benzene) 등과 같은, 플루오르화 시약(fluorinating reagent)으로 처리함으로써 제조할 수 있다.

글리코실 트리클로로아세트이미데이트(glycosyl trichloroacetimidate)(X= -OC(=NH)CCl₃)는 무기 또는 유기 염기 촉매작용(catalysis) 하에, 유리된(free) 아노머 OH를 트리클로로아세토니트릴에 첨가함으로써 용이하게 제조할 수 있다. 통상적인 글리코시드화 반응에서 트리메틸실릴 트리플레이트 또는 BF₃-에테레이트와 같은 루이스 산의 촉매량은 커플링을 촉진한다.

글리코실화 반응에서, 글리코실 아세테이트 또는 벤조에이트 (X는 -OAc 또는 -OBz를 나타냄)를 처음에 친전자성 활성화(electrophilic activation)시켜 반응성 중간체를 생성시킨 후, 친핵성 -OH 수용체를 처리한다. 통상적으로 선택되는 활성화제는 브뢴스테드 산(Bronsted acid) (예를 들면, p-TsOH, HClO₄, 술팜산(sulfamic acid)), 루이스 산 (예를 들면, ZnCl₂, SnCl₄, 트리플레이트 염, BF₃-에테레이트, 트리틸 퍼클로레이트(trityl perchlorate), AlCl₃, 트리플산 무수물(triflic anhydride)) 및 이들의 혼합물이다.

글리코실 공여체로서 펜테닐 글리코시드 (X는 -O-(CH₂)₃-CH=CH₂를 의미한다)는 NBS 및 NIS와 같은 프로모터의 존재 하에서 적절한 글리코실 수용체를 사용하여 글리코실전이(transglycosylate)될 수 있다. 양성자성 산 또는 루이스 산 (트리플산, Ag-트리플레이트 등)은 반응을 증대시킬 수 있다. 펜테닐 글리코시드는 글리코실 브로마이드의 은(I)염 촉진 커플링 (Koenigs-Knorr법) 또는 주석(tin)(IV) 클로라이드의 존재 하에서 1-아세틸 글리코시드의 글리코실화에 의해, 산성 조건 하에 헤미아세탈의 표준 피셔(Fischer) 글리코실화에 따라, n-펜테놀의 보조를 받아 제조할 수 있다.

티오글리코시드 (X는 알킬티오(alkylthio)- 또는 선택적으로 치환된 페닐티오-기를 나타냄)는 축합 반응에서, 수은(II)염, Br₂, I₂, NBS, NIS, 트리플산, 트리플레이트 염, BF₃-에테레이트, 트리메틸실릴 트리플레이트, 디메틸-메틸티오 술포늄 트리플레이트, 페닐셀레닐 트리플레이트(phenylselenyl triflate), 요오도늄 디콜리딘 퍼클로레이트(iodonium dicollidine perchlorate), 테트라부틸암모늄 요오다이드, 또는 이들의 혼합물과 같은, 친-유황성 프로모터(thiofilic promotor)에 의해, 바람직하게는 Br₂, NBS, NIS 또는 트리플산에 의해 활성화될 수 있다.

바람직한 방법에서, 선택되는 글리코실 공여체는 하기 일반식 5를 가지며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 선택적으로 치환된 아실이고, 및 X는 하나 이상의 알킬로 선택적으로 치환된 페닐티오(phenylthio)이며, 보다 바람직하게는, R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, R₄는 하나 이상의 할로겐으로 선택적으로 치환된, 벤조일을 나타내고, 및 X는 비치환된 페닐티오이며, 훨씬 더 바람직하게는, R₁은 벤질 또는 4-메틸벤질이고, R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일인 것인 화합물이다.

더욱 바람직한 방법에서, 상기 선택되는 글리코실 수용체는, R 및 R'은 메틸이고, R₆는 피발로일, 벤조일 또는 4-클로로벤조일인 일반식 6의 화합물이다.

글리코실화 반응은 -20 내지 20 ℃에서, 바람직하게는 -10 내지 0 ℃에서, 톨루엔, THF, DCM, 클로로포름, 디옥산, 아세토니트릴, 클로로벤젠, 에틸렌 디클로라이드, DMSO, DMF, N-메틸피롤리돈 등 또는 이들의 혼합물과 같은 비양성자성 용매 중에서, 바람직하게는 THF, 톨루엔, DCM 또는 이들의 혼합물, 보다 바람직하게는 THF-DCM 혼합물 중에서 수행된다. 친유황성 활성화(thiophilic activation)를 위해, 바람직하게는 트리플산의 존재 하에서 Br₂, NBS 또는 NIS가 사용된다. 일반적으로 수용체에 비해 공여체의 약간의 과량 (1.1 내지 1.2 당량)이 사용된다. 반응 시간은 5분 내지 2시간에서 변화한다. 반응을 종료(quench)시키기 위해, 반응수(reaction water) 또는 알코올이 일반적으로 사용되며, 바람직하게는 암모니아 또는 트리에틸아민과 같은 염기의 수성 또는 알코올성 용액, 보다 바람직하게는 25% 암모늄 히드록시드가 사용된다.

일반식 6의 수용체의 합성은 공지된 방식으로 수행될 수 있다. p-톨루엔술폰산과 같은 산의 존재 하에 환류와 함께 락토오스를 대칭형 케톤(symmetric ketone)의 디알콕시 케탈로 처리하면 2,3:5,6-디-O-알킬리덴-4-O-(3,4-O-알킬리덴-β-D-갈락토피라노실)-D-글루코오스 디알킬 아세탈이 생성된다. 락토오스 케토니드 디올(lactose ketonide diol)의 1차(primary) 히드록시기의 선택적인 6'-O-치환은 예를 들면, R₁-할라이드를 포함하는 염기 촉매 반응으로 달성되어, R₆가 가수소분해에 의해 제거가능한 기인 일반식 6의 화합물을 생성시킬 수 있다. 소듐 히드라이드(sodium hydride), 포타슘 터트-부톡시드(potassium tert-butoxide), 포타슘 히드록시드(potassium hydroxide), 소듐 히드록시드(sodium hydroxide), 포타슘 카르보네이트(potassium carbonate), 디이소프로필 에틸아민(diisopropyl ethylamine), 1,8-디아자비시클로[5,4,0]운데코-7-엔(1,8-diazabicyclo[5.4.0]undeco-7-ene)을 포함하나, 이에 한정되지 않는 무기 및 유기 염기들이 그와 같은 락토오스 케토니드 디올의 선택적 6'-O-치환 과정을 촉매하기에 적합하다. 그와 같은 반응은 DMF, THF, 디옥산 등과 같은 용매를 사용한 균질한 용액 또는 수상 전이 알킬화(aqueous phase transfer alkylation) 조건에서 수행될 수 있다. 바람직하게는, 20-80 ℃에서, 디옥산 또는 DMF 중 NaH 또는 포타슘 터트-부톡시드가 사용된다. 선택적 6'-O-아실화는 -20 내지 80 ℃에서, DCM, 클로로포름, THF, 디옥산, 아세토니트릴 등, 또는 이들의 혼합물과 같은 유기 용매를 사용하여, 피리딘, 트리에틸아민, 디이소프로필 에틸아민의 존재 하에 아실 할라이드, 무수물, 활성 에스테르 등과 같은 전통적인 아실화제를 사용하여 수행되어, R₆가 아실인 일반식 6의 화합물을 생성할 수 있다. 6'-위치에서 락토오스 아세토니드 디올의 선택적인 비고리형 아세탈 형성은, 0 내지 60 ℃에서, 트리에틸아민, 모르폴린, 이이소프로필 에틸아민, 피리딘 등의 존재 하에, 예를 들면, 메톡시메틸, t-부톡시메틸, 2-메톡시메틸, 벤질옥시메틸, 2-테트라히드로푸라닐 할로게니드(2-tetrahydrofuranyl halogenide) 등을 사용하거나, 또는 DMF, THF, 디옥산, 아세토니트릴 등과 같은 유기 용매 중 산의 존재 하에, 예를 들면 디히드로피란(dihydropyran), 1,4-디히드로디옥신(1,4-dihydrodioxin), 디히드로퓨란(dihydrofuran), 2-메톡시프로펜(2-methoxypropene), 2-페녹시프로펜(2-phenoxypropene) 등을 사용하여 수행되어, R₆가 아세탈형 기인 일반식 6의 화합물을 생성시킬 수 있다. 실온에서 (이미다졸, 트리에틸아민 등과 같은) 아민 염기의 존재 하에 실릴 클로라이드를 사용하거나, 또는 저온에서 장애 아민(hindered amine) 염기 (예를 들면, 2,6-루티딘(lutidine))와 함께 실릴 트리플레이트를 사용한, 락토오스 아세토니드 디올의 선택적인 1차 OH-실릴화(primary OH-silylation) 반응은, R₆가 실릴 기인 일반식 6의 화합물을 생성시킬 수 있다.

본 발명의 제11 양태는, 일반식 5에 속하는, 하기 일반식 7을 가지며:

식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 아실이고, R₇은 알킬 또는 선택적으로 치환된 페닐인 화합물로, 페닐 3,4-디-O-아세틸-2-O-벤질-1-티오-L-푸코피라노시드, 메틸 3,4-디-O-아세틸-2-O-벤질-1-티오-L-푸코피라노시드, 에틸 3,4-디-O-아세틸-2-O-벤질-1-티오-L-푸코피라노시드 및 에틸 3,4-디-O-아세틸-2-O-(4-메톡시-벤질)-1-티오-L-푸코피라노시드를 제외한 것인 화합물을 제공하는 것이다.

상기 일반식 7을 갖는 것을 특징으로 하는 신규한 유도체는 α 또는 β 아노머 또는 심지어 α 및 β 이성질체의 아노머 혼합물과 같은, 유일한 화학적 엔티티로 간주될 수 있다는 것이 강조된다. 일반식 7의 신규한 2'-O-푸코실락토오스 중간체는 결정질 고체, 오일, 시럽, 무정형 침전물 또는 분무 건조 제품으로서의 특징을 가질 수 있다. 결정질인 경우, 일반식 7의 화합물은 무수물이거나, 또는 글리코실화 전에 통상의 방법으로 제거되는, 하나 또는 여러 개의 물 분자를 그의 결정 구조 내에 혼입시킨, 수화된 결정형으로 존재할 수 있다. 마찬가지로, 일반식 7을 갖는 것을 특징으로 하는 신규 화합물은 그의 결정 구조 내에 유기 분자 및/또는 이온과 같은 리간드가 혼입된, 결정질 물질로 존재할 수 있다. 유기 분자가 알코올인 경우, 이들은 글리코실화 전에 통상적인 방법으로 제거된다.

바람직한 일 구체예에서, 상기 신규한 올리고당은 R₇은 하나 이상의 알킬로 선택적으로 치환된 페닐이고, 아노머 입체배치(anomeric configuration)는 β인 일반식 7을 갖는 것을 특징으로 하며, 보다 바람직하게는, R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 1-나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 3-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, 상기 R₄는 하나 이상의 할로겐으로 선택적으로 치환된 벤조일을 나타내고, 및 R₇은 비치환된 페닐이거나, 또는 훨씬 더 바람직하게는, R₁은 벤질 또는 4-메틸벤질이고, 및 R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일인 것인 일반식 7을 갖는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 의해 제공되는 일반식 7의 신규 화합물은 당해 기술분야에 공지된 화학적/효소적 방법을 이용하여 2'-O-푸코실락토오스 및 기타 2'-O-푸코실락토오스 유도체의 제조에 사용될 수 있다. 일반식 7의 신규 화합물들은 또한, 다수의 인유 올리고당의 생산/제조를 위한 진보된 전구체/중간체로서도 사용될 수 있다. 일반식 7의 신규 화합물들은 또한 치료학적/영양학적 용도를 위한, 복합 올리고당/글리코컨쥬게이트의 합성을 위한 중요한 중간체로 고려될 수 있다.

본 발명의 제12 양태는 R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₇은 알킬 또는 선택적으로 치환된 페닐인 하기 일반식 8의 화합물을

아실화제에 의해 아실화시키는 것을 특징으로 하는, 일반식 7의 신규 화합물의 제조에 적합한 방법을 제공한다.

용어 "아실화제(acylating agent)"는 R₄-할로게니드, 알반식 (R₄)₂O의 무수물, 이미다졸리드, 티오에스테르, 실릴 에스테르, 비닐 에스테르, 테트라졸리드, 오르토에스테르(orthoester), 히드록시-벤즈트리아졸릴(hydroxy-benztriazolyl) 에스테르 등과 같은 식 R₄-OH의 카르복시산의 활성 유도체(active derivative), 또는 Me₃SiCl, DCC, BOP-Cl, TsCl/TEBAC 등과 같은 적절한 커플링 시약과 함께 사용되는 식 R₄-OH의 카르복시산을 의미하는 것으로 의도되며, 상기 R₄는 앞에서 정의된 바와 같은, 선택적으로 치환된 아실이다. 아실화는 -20 내지 80 ℃에서, DCM, 클로로포름, THF, 디옥산, 아세토니트릴 등 또는 이들의 혼합물과 같은 유기 용매 중에서, 피리딘, 트리에틸아민, 디이소프로필 에틸아민 등의 존재 하에 수행될 수 있다. 바람직하게는, 0 내지 20 ℃에서, 피리딘과 DCM의 혼합물 중 아실 클로라이드가 사용되며, 보다 바람직하게는, 상기 아실은 벤조일 또는 4-클로로벤조일이다.

일반식 8의 화합물은 당해 기술분야에 공지된 방법에 의해 용이하게 입수가능하다. L-푸코오스를 과아세틸화(peracetylate)시킨 다음, L-푸코오스 테트라아세테이트를 루이스 산의 존재 하에, R₇가 상기 정의된 것인 R₇SH를 사용하여 티올화하여, 선택적으로 치환된 페닐 2,3,4-트리-O-아세틸-1-티오-β-L-푸코피라노시드를 얻는다. 아세틸 기의 제거를 Zemplen 조건 하에서 수행하고, 그로부터 얻은 트리올을 디메톡시-프로판/산으로 처리하여 3,4-아세토니드를 생성시킨다. 그 다음, 2번째 위치(2^nd position)의 유리 OH-기를 NaH를 사용하여 탈수소화(deprotonate)시키고, 알코올레이트를 R₁이 앞에서 정의된 것인, R₁-할로게니드와 반응시킨다. 산성 가수분해에 의해 이소프로필리덴을 제거함으로써 순조롭게 일반식 8의 화합물을 얻는다.

본 발명의 제13 양태는, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₂는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 H인 하기 일반식 1의 화합물:

,

또는 그의 수화물 또는 용매화물을, 촉매 가수소분해시키는 것을 특징으로 하는 2'-O-푸코실락토오스의 제조 방법에 관한 것이다.

바람직한 일 구체예에서, 본 발명의 방법에 의해 생산된 2'-O-푸코실락토오스는 냉각 또는 MTBE, 디에틸 에테르, 디이소프로필 에테르 등을 포함하나 이에 제한되지 않는 에테르, 및/또는 C₁-C₆ 알코올의 첨가에 의해 물/유기 용매/수성 용액으로부터 침전시킴으로써, 무정형 구체로서 분리될 수 있다. 대안적으로, 2'-O-푸코실락토오스는 동결 건조 및 분무 건조에 의해서도 분리될 수 있다.

바람직한 일 구체예에서, 일반식 1을 특징으로 하는 화합물들의 가수소분해는 20-60 ℃의 온도, 1-10 atm의 수소 압력 중에서, 용매로서 물 또는 물-알코올 혼합물, 촉매로서 2-10 % 탄소상 팔라듐 또는 팔라듐 블랙을 사용하여 중성 조건에서 수행된다. 가수소분해가 종료된 후, 반응 혼합물을 여과하고, 바람직하게는 유기 용매 성분을 제거하여 농축시키고, 및 침전, 분무 건조, 동결 건조시켜 무수의 및/또는 수화된 2'-O-푸코실락토오스 (수분 함량 0-20 %)를 제어된 방식으로 생성시킨다.

또다른 바람직한 구체예에서, 일반식 1을 특징으로 하는 화합물들의 가수소분해는 20-60 ℃의 온도, 1-10 atm의 수소 압력에서, 용매로서 물 또는 물-알코올 혼합물, 촉매로서 2-10 % 탄소상 팔라듐 또는 팔라듐 블랙을 사용하여 중성 조건에서 수행된다. 가수소분해의 종료 후에, 반응 혼합물을 여과시키고, 바람직하게는 농축시켜 10-95 % 농도의 2'-O-푸코실락토오스를 포함하는 2'-O-푸코실락토오스 수용액/시럽을 생성시킨다.

본 발명의 바람직한 구현에 따르면, R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질이며, 및 R₂는 H인 일반식 1의 화합물이 가수소분해에 사용된다.

본 발명의 다른 특징들은 하기 예시적 구체예들을 설명하는 과정에서 명백하게 될 것이며, 상기 구체예들을 본 발명의 예시를 위해 제공되고, 그를 제한하지 않는다.

실험

실시예 1

4- O -(3,4- O - 시클로헥실리덴 -β-D- 갈락토피라노실 )-2,3:5,6- di - O - 시클로헥실 리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4- O -(3,4- O - cyclohexylidene -β-D-galactopyranosyl)-2,3:5,6-di- O -cyclohexylidene-D-glucose dimethyl acetal )

락토오스 (1.15 g)를 시클로헥사논 디메톡시 케탈 (10 ml) 중에 현탁시킨다. p-톨루엔술폰산(p-toluenesulfonic acid) (45 mg)을 첨가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 85 ℃까지 가열한다. 그 다음, Et₃N를 첨가하여 상기 혼합물을 중성화시키고, 용매를 진공 중에서(in vacuo) 농축시키고, 잔여물을 DCM (60 mL)에 용해시키고, 유기상(organic phase)을 H₂O (2 X 50 ml) 및 포화 NaHCO₃ (50 ml)로 세척한다. 플래쉬 크로마토그래피(flash chromatography) (EtOAc/헵탄 6:4)에 의해 추가적인 정제를 수행하여, 백색 폼(foam)으로서 생성물 (1.35 g, 64 %)을 수득한다.

¹H NMR (300 MHz, CDCl₃): δ = 4.54 (dd, 1H, J = 6.6, 7.9), 4.42 (d, 1H, J = 8.3), 4.35 (m, 1H), 4.34 (d, 1H, J = 6.6), 4.26 (dd, 1H, J = 5.3, 8.7), 4.09 - 3.92 (5H), 3.87 (dd, 1H, J = 1.3, 7.9), 3.80 (m, 1H), 3.65 (m, 1H), 3.49 (m, 1H), 3.48 및 3.47 (2s, 각각 3H), 1.69 - 1.26 (m, 30H).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ = 110.9, 110.3, 108.9, 107.2, 103.4, 79.0, 77.8, 77.5, 75.6, 75.1, 74.7, 74.4, 73.1, 63.9, 62.4, 57.4, 54.4, 37.8, 36.4, 35.8, 35.4, 34.9, 33.1, 25.2-23.6.

실시예 2

4- O -(6- O -아세틸-3,4- O - 시클로헥실리덴 -β-D- 갈락토피라노실 )-2,3:5,6- di - O -시클로헥실리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4- O -(6- O - acetyl -3,4- O -cyclohexylidene-β-D- galactopyranosyl )-2,3:5,6- di - O - cyclohexylidene -D- glucose dimethyl acetal )

실시예 1의 화합물 (0.526 g, 0.83 mmol)을 건조 DCM (5 ml) 중에 용해시킨다. 피리딘 (0.4 ml, 5.0 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -30 ℃까지 냉각시킨다. DCM (0.5 ml) 중에 용해시킨 아세틸클로라이드 (0.07 ml, 0.98 mmol)를 10분 내에 첨가한다. 혼합물을 -20 ℃에서 1시간 동안 교반한다. MeOH (1 ml)을 첨가하고, 혼합물을 실온까지 가온시킨다. DCM (20 ml)을 첨가하고, 혼합물을 H₂O (50 ml), 차가운 HCl 수용액 (0.5 M, 30 ml), H₂O (30 ml), NaHCO₃ (30 ml)로 세척한 다음, 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과시키고 및 진공 중에서 증발시킨다. 플래쉬 크로마토그래피 (헵탄/EtOAc, 6:4)에 의해 정제하여, 백색 폼으로서 생성물 (0.47 g, 85 %)을 수득한다.

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ: 4.43-4.26 (6H, unresolved), 4.17 (1H, dd, J = 7.1, 8.6), 4.13 (1H, dd, J = 1.7, 1.7), 4.09-4.00 (3H, unresolved), 3.93 (1H, ddd, J = 1.8, 4.6, 7.7), 3.85 (1H, dd, J = 1.5, 7.5), 3.61 (1H, br s, OH), 3.51 (1H, dd, J = 6.6, 8.3, H-2'), 3.42 (6H, s, 2 X CH ₃O), 2.08 (3H, s, CH ₃CO), 1.81-1.25 (30 H, unresolved, 시클로헥실).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ:170.82 (CO), 110.9, 110.6, 108.9 (3 X (CH₃)₂ C), 105.3, 103.7 (C-1, C-1', 78.5, 77.6, 77.6, 76.3, 74.7, 74.6, 72.8, 71.5 (C-2, C-3, C-4, C-5, C-2', C-3', C-4', C-5'), 64.3, 63.6 (C-6, C-6'), 56.1, 53.3 (2 x OCH₃), 37.7-33.9, 25.1-23.6 (시클로헥실).

실시예 3

4- O -(6- O - 트리틸 -3,4- O - 이소프로필리덴 -β-D- 갈락토피라노실 )-2,3:5,6-디- O -이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4- O -(6- O - trityl -3,4- O -isopropylidene-β-D- galactopyranosyl )-2,3:5,6- di - O - isopropylidene -D- glucose dimethyl acetal )

3',4':2,3:5,6-트리-O-이소프로필리덴-락토오스 디메틸 아세탈 (5.52 g, 10.9 mmol)을 건조 피리딘 (100 ml) 중에 용해시킨다. 트리틸 클로라이드 (6.0 g, 21.5 mmol)를 DMAP (0.30 g)와 함께 첨가하고, 혼합물을 4시간 동안 65 ℃까지 가열한다. 상기 혼합물을 진공 중에서 증발시키고, 톨루엔 (3 X 30 mL)과 함께 공동증발(coevaporate)시킨다. 잔여물을 EtOAc (50 ml)에 용해시키고, H₂O (50 ml)로 세척하고, 건조시키고(Na₂SO₄), 여과하고, 진공 중에서 증발시킨다. 플래쉬 크로마토그래피 (헥산/EtOAc, 8:2, 그 다음, 4:6)에 의해 정제하여 오일로서 생성물 (3.0 g, 37 %)을 수득한다.

¹H NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ:7.45-7.22 (15H, 3 X Ph), 4.38 (1H, d, J = 8.5, H-1'), 4.38 (1H, m), 4.36 (1H, dd, J = 6.5, 7.7), 4.27 (1H, d, J = 6.1, H-1), 4.26 (1H, m), 4.14 (1H, dd, J = 6.4, 8.8), 4.08 (1H, dd, J = 5.6, 7.1), 4.00-3.97 (2H, unresolved), 3.85 (1H, dd, J = 1.0, 7.6), 3.817 (1H, ddd, J = 1.8, 5.3, 7.7), 3.56-3.52 (2H, unresolved), 3.25 (1H, dd, J = 5.3, 8.5), 3.22 (3H, s, CH ₃O), 3.09 (3H, s, CH ₃O), 1.52, 1.50, 1.42, 1.34, 1.33, 1.32 (6 X C(CH ₃)₂).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ: 143.8, 128.6, 127.7, 127.0 (Ph), 110.1, 109.8, 108.2 (3 X (CH₃)₂ C), 104.5, 103.9 (C-1, C-1'), 86.7 (C(Ph)₃), 78.9, 77.9, 77.8, 76.1, 74.3, 74.2, 73.3, 72.5 (C-2, C-3, C-4, C-5, C-2', C-3', C-4', C-5'), 64.5, 62.0 (C-6, C-6'), 55.7, 52.2 (2 X OMe), 28.2, 27.1, 26.3, 26.3, 25.5, 24.2 (6 X C(CH₃)₂).

실시예 4

4- O -(6- O - 피발로일 -3,4- O - 이소프로필리덴 -β-D- 갈락토피라노실 )-2,3:5,6-디- O -이 소프로필리 덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4- O -(6- O - pivaloyl -3,4- O -isopropylidene-β-D- galactopyranosyl )-2,3:5,6- di - O - isopropylidene -D- glucose dimethyl acetal )

3',4':2,3:5,6-트리-O-이소프로필리덴 락토오스 디메틸 아세탈 (10 g, 19.7 mmol)을 DCM (80 ml) 및 피리딘 (8 ml, 98.9 mmol) 중에 용해시키고, 0 ℃까지 냉각시켰다. 피발로일 클로라이드 (8 ml, 39 mmol)를 적가(add dropwise)하고, 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. DCM (50 ml)을 첨가하고, 혼합물을 H₂O (80 ml), HCl 수용액 (1M, 80 ml), H₂O (80 ml), 포화 NaHCO₃ (80 ml)로 세척하고, 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 증발시키고, 톨루엔과 함께 공증발시킨다. 잔여물을 플래쉬 크로마토그래피 (헥산/EtOAc, 3:2)에 의해 정제하여, 백색 폼으로서 생성물 (7.1 g, 61 %)을 수득한다.

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ: 4.435 (1H, d, J = 8.2, H-1'), 4.411 (1H, dd, J = 6.0, 7.3, H-2), 4.361 (1H, d, J = 6.03, H-1), 4.312 (1H, dd, J = 6.8, 11.2, H-6'), 4.277 (1H, m), 4.243 (1H, dd, J = 6.3, 11.1, H-6'), 4.173-4.034 (4H, unresolved), 3.997 (1H, dd, J = 6.8, 8.8, H-6), 3.950 (1H, ddd, J = 2.2, 6.3, 6.4), 3.905 (1H, dd, J = 1.6, 7.3), 3.547 (1H, dd, J = 7.1, 8.1, H-2'), 3.428, 3.416 (6H, 2 X OMe), 1.500, 1.479, 1.374, 1.366, 1.318, 1.313 (6 X 3H, s, 6 X C(CH ₃)₂), 1.200 (9H, s, C(CH ₃ )₃).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ: 178.02 (CO), 110.11, 110.07, 108.19 (3 X C(CH₃)₂), 104.99 (C-1), 103.44 (C-1'), 78.76, 77.79, 77.69, 75.93, 74.93, 74.07 (C-2'), 72.99, 64.53 (C-6'), 62.69 (C-6), 56.20, 53.05 (2 X OCH₃), 38.62 (C(CH₃)₃), 28.02, 27.13, 27.01 (C(CH₃)₃), 26.34, 26.11, 25.55, 24.347 (6 X CH₃).

실시예 5

적절한 아실화제를 사용하여 실시예 4에 따라 일반식 6의 화합물들을 합성하였다.

a) 4-O-(6-O-(4-니트로벤조일)-3,4-O-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4-O-(6-O-(4-nitrobenzoyl)-3,4-O-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

수율: 98 %, 오일

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ = 8.30 - 8.23 (m, 4H), 4.65 (dd, 1H, J = 4.5, 11.8), 4.58 (dd, 1H, J = 7.3, 11.8), 4.44 (d, 1H, J = 8.3), 4.42 (dd, 1H, J = 6.2, 7.8), 4.27 (d, 1H, J = 6.1), 4.27 (ddd, 1H, J = 6.7, 6.7, 2.3), 4.18 (dd, 1H, J = 5.5, 2.2), 4.16-4.10 (4H), 4.01 (dd, 1H, J = 6.7, 8.8), 3.87 (dd, 1H, J = 1.5, 7.8), 3.79 (s, 1H), 3.60 (dd, 1H, J = 7.8, 7.8), 3.36, 3.35 (s, 2 X 3H), 1.52, 1.49, 1.36, 1.35, 1.34, 1.33 (s, 6 X 3H).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ = 164.5, 150.6, 135.1, 131.0, 123.5, 110.5, 110.1, 108.3, 105.8, 103.9, 78.9, 77.8, 77.8, 76.6, 75.6, 74.2, 73.3, 71.4, 64.8, 64.7, 56.6, 54.3, 28.1, 27.2, 26.4, 26.3, 25.6, 24.7.

b) 4-O-(6-O-(4-페닐벤조일)-3,4-O-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4-O-(6-O-(4-phenylbenzoyl)-3,4-O-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

수율: 48 %, 무색의 오일

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ: 8.14-7.15 (9H, 방향족(aromatic)) 4.64 (1H, dd, J = 4.9, 11.6, H-6a'), 4.55 (1H, dd, J = 7.1, 11.6, H-6b'), 4.48 (1H, dd, J = 5.9, 7.8, H-2), 4.48 (1H, d, J = 8.1, H-1'), 4.27 (1H, d, J = 6.1, H-1), 4.27 (1H, m), 4.22 (1H, dd, J = 5.5, 2.3), 4.19-4.10 (4H, unresolved), 4.02 (1H, dd, J = 6.8, 8.8, H-6b), 3.91 (1H, dd, J = 1.5, 7.7, H-3), 3.63 (1H, s, OH), 3.61 (1H, dd, J = 7.0, 6.9, H-2'), 3.35, 3.34 (2 X 3H, s, OCH ₃), 1.54, 1.50, 1.40, 1.37, 1.36, 1.33 (6 X 3H, s, 6 X C(CH ₃)₂).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ: 166.2 (CO), 145.9, 139.8, 130.3-125.2 (방향족 C), 110.4, 110.1, 108.3 (3 X C(CH₃)₂), 105.0, 103.7 (C-1, C-1'), 78.9, 77.8, 77.8, 76.4, 75.0, 74.2, 73.4, 71.6 (C-2, C-3, C-4, C-5, C-2', C-3', C-4', C-5'), 64.6, 64.0 (C-6, C-6'), 56.3, 53.2 (2 X OCH₃), 28.1, 27.2, 26.4, 26.3, 25.6, 24.5 (6 X CH₃).

c) 4-O-(6-O-프로피오닐-3,4-O-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4-O-(6-O-propionyl-3,4-O-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

수율: 81 %, 무색의 오일

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ = 4.42 (dd, 1H, J = 6.2, 7.5), 4.40 (d, 1H, J = 8.2), 4.35 (d, 1H, J = 6.1), 4.32 - 4.24 (3H), 4.16 - 4.03 (4H), 3.99 (dd, 1H, J = 6.8, 8.8), 3.93 (ddd, 1H, J = 2.1, 5.2, 7.2), 3.88 (dd, 1H, J = 1.6, 7.5, H-3), 3.54 (dd, 1H, J = 8.0, 8.0, H-2'), 3.41, 3.41 (s, 2 X 3H), 2.34 (q, 2H), 1.49, 1.47, 1.37, 1.36, 1.31, 1.31 (s, 6 X 3H), 1.13 (t, 3H).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ = 174.1, 110.3, 110.2, 108.3, 105.0, 103.6, 78.9, 77.9, 77.8, 76.3, 74.9, 74.1, 73.2, 71.4, 64.6, 63.2, 56.1, 53.0, 28.0, 27.3, 27.2, 26.3, 26.2, 25.6, 24.4, 8.95.

d) 4-O-(6-O-(4-클로로벤조일)-3,4-O-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4-O-(6-O-(4-chlorobenzoyl)-3,4-O-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

백색의 폼

¹H NMR (CDCl₃): δ = 8.10 및 7.42 (2 m, 각각 2H), 4.55 (2 ABq, 각각 1H, J = 4.6, 7.4, 11.7), 4.45 (d, 1H, J = 8.3), 4.43 (m, 1H), 4.27 (d, 1H, J = 5.9), 4.11 (m, 2H), 3.37 및 3.34 (2 s, 각각 3H), 1.52, 1.48, 1.38, 1.36, 1.36 및 1.34 (6 s, 각각 3H).

¹³C NMR (CDCl₃): δ = 165.4, 139.6, 131.2, 128.7, 128.2, 110.4, 110.1, 108.3, 105.2, 103.8, 78.9, 77.8, 77.8, 76.5, 75.2, 74.2, 73.3, 71.5, 64.6, 64.2, 56.4, 53.5, 28.07, 27.2, 26.3, 26.2, 25.6, 24.6.

e) 4-O-(6-O-(4-페닐카르바모일-벤조일)-3,4-O-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4-O-(6-O-(4-phenylcarbamoyl-benzoyl)-3,4-O-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃): δ = 1.33 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.50 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 3.33 (s, 3H), 3.35 (s, 3H), 3.58 - 3.64 (m, 1H), 3.70 (d, 1H, J = 1.1), 3.89 (dd, 1H, J = 7.7, 1.4), 4.02 (dd, 1H, J = 8.8, 6.8), 4.10 - 4.15 (m, 3H), 4.18 - 4.22 (m, 1H), 4.26 - 4.30 (m, 2H), 4.43 - 4.48 (m, 2H), 4.54 - 4.67 (m, 2H), 7.17 (t, 1H, J = 7.4), 7.39 (t, 2H, J = 7.6), 7.65 (d, 2H, J = 7.6), 7.94 (d, 3H, J = 8.5), 8.17 (d, 2H, J = 8.4).

f) 4-O-(6-O-(4-(4-브로모페닐카르바모일)-벤조일)-3,4-O-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 ( 4-O-(6-O-(4-(4-bromophenylcarbamoyl)-benzoyl)-3,4-O-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃): δ = 1.33 (s, 3H), 1.34 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.49 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 3.32 (s, 3H), 3.35 (s, 3H), 3.5 (d, 1H, J = 4.5), 3.6 (t, 1H, J = 7.9), 3.86 - 3.89 (m, 1H), 3.98 - 4.04 (m, 1H), 4.08 - 4.13 (m, 3H), 4.18 - 4.21 (m, 1H), 4.27 - 4.30 (m, 2H), 4.39 - 4.47 (m, 2H), 4.57 - 4.64 (m, 2H), 7.48 (d, 2H, J = 8.8), 7.56 (d, 2H, J = 8.8), 7.91 (d, 2H, J = 8.3), 8.01 (s, 1H), 8.15 (d, 2H, J = 8.3).

g) 4-O-(6-O-(4-벤즈아미도벤조일)-3,4-O-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4-O-(6-O-(4-benzamidobenzoyl)-3,4-O-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃): δ = 1.33 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.50 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 3.33 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 3.60 (t, 1H, J = 7.8), 3.89 (dd, 1H, J =7.7, 1.4), 4.01 (dd, 1H, J = 8.7, 6.8), 4.09 - 4.22 (m, 5H), 4.26 - 4.32 (m, 2H), 4.46 - 4.64 (m, 4H), 7.50 - 7.58 (m, 3H), 7.76 (d, 2H, J = 8.7), 7.88 (d, 2H, J = 7.9), 8.05 (s, 1H), 8.08 (d, 2H, J = 8.7).

¹³C-NMR (75 MHz, CDCl₃): δ = 24.52, 25.63, 26.27, 26.38, 27.21, 28.11, 53.10, 56.34, 63.89, 64.64, 71.59, 73.37, 74.26, 74.99, 76.35, 77.85, 78.93, 103.73, 104.98, 108.27, 110.16, 110.38, 119.14, 125.37, 127.04, 128.90, 131.09, 132.26, 134.42, 142.36, 165.77.

h) 4-O-(6-O-(4-(4-니트로벤즈아미도)-벤조일)-3,4-O-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4-O-(6-O-(4-(4-nitrobenzamido)-benzoyl)-3,4-O-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃): δ = 1.33 (s, 3H), 1.34 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.49 (s, 3H), 1.51 (s, 3H), 3.33 (s, 3H), 3.37 (s, 3H), 3.60 (t, 1H, J = 7.8 Hz), 3.89 (dd, 1H, J¹ =7.7, 1.4 Hz), 4.01 (dd, 1H, J¹ = 8.7, 6.8 Hz), 4.08 - 4.26 (m, 5H), 4.26 - 4.37 (m, 2H), 4.40 - 4.63 (m, 4H), 7.77 (d, 2H, J = 8.7 Hz), 8.04 - 8.09 (m, 4H), 8.31 - 8.34 (m, 3H).

¹³C-NMR (75 MHz, CDCl₃): δ = 24.47, 25.59, 26.23, 26.34, 27.18, 28.06, 53.09, 56.30, 63.98, 64.59, 71.51, 73.33, 74.27, 74.97, 76.35, 77.78, 77.87, 78.90, 103.67, 105.04, 108.26, 110.15, 110.38, 119.48, 123.98, 125.22, 126.01, 128.15, 128.39, 128.96, 131.08, 139.96, 141.72, 149.81, 163.82, 165.62.

i) 4-O-(6-O-(3,5-디니트로벤조일)-3,4-O-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4-O-(6-O-(3,5-dinitrobenzoyl)-3,4-O-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

수율: 84 %, 엷은 황색(pale yellow)의 폼

¹³C NMR (CDCl₃): 162.57, 148.92 (2개의 탄소), 133.83, 129.80 (2개의 탄소), 122.64, 110.88, 110.37, 108.53, 106.05, 104.19, 79.26, 78.01, 77.82, 77.14, 76.10, 74.38, 73.49, 71.36, 65.71, 64.89, 57.09, 54.77, 28.32, 27.26, 26.55, 26.50, 25.93, 24.84.

j) 4-O-(6-O-(나프탈렌-2-일아세틸)-3,4-O-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4-O-(6-O-(naphthalen-2-ylacetyl)-3,4-O-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

수율: 89 %, 백색의 폼

¹³C NMR (CDCl₃): 171.48, 133.64, 132.70, 131.47, 128.52, 128.22, 127.88, 127.84, 127.45, 126.46, 126.13, 110.526, 110.50, 108.51, 105.53, 103.93, 79.14, 78.20, 78.07, 76.67, 75.47, 74.38, 73.30, 71.40, 64.84, 63.75, 56.47, 53.72, 41,49, 28.30, 27.51, 26.64, 26.39, 25.88, 24.66.

실시예 6

4- O -(6- O -(4- 아미노벤조일 )-3,4- O - 이소프로필리덴 -β-D- 갈락토피라노실 )-2,3:5,6-디- O - 이소프로필리덴 -D-글루코오스 디메틸 아세탈 (4- O -(6- O -(4-aminobenzoyl)-3,4- O -isopropylidene-β-D- galactopyranosyl )-2,3:5,6- di - O -isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal )

실시예 5a에 따른 화합물 (400　mg, 608　μmol)을 10　ml의 THF에 용해시키고, Pd/C (50　mg)를 첨가한다. 현탁액을 출발 물질이 소모될 때까지 (TLC 시스템: 톨루엔-아세톤 4:1 및 10% MeOH-DCM), 3일 동안 H₂ 대기 하에서 교반한다. 셀라이트(celite) 상에 촉매를 여과시키고, 크로마토그래피(5:1 톨루엔-아세톤)에 의해 백색 폼으로서의 잔여물을 89% 수율 (341 mg)로 분리한다.

¹³C NMR (CDCl₃): 166.56, 151.12, 132.04 (2개의 탄소), 119.51, 114.11 (two carbons), 110.55, 110.35, 108.51, 104.98, 103.98, 79.19, 78.07, 78.04, 76.55, 75.12, 74.53, 73.66, 71.94, 64.91, 63.59, 56.47, 53.12, 28.36, 27.44, 26.63, 26.51, 25.90, 24.75.

실시예 7

테트라 - O -아세틸-L- 푸코오스 (T etra - O - acetyl -L- fucose )

피리딘 (295 ml, 3.65 mol)을 0 ℃까지 냉각시키고, 교반 중에 L-푸코오스 (100 g, 609 mmol)를 첨가한다. Ac₂O (287 ml, 3.04 mol)를 3시간 내에 적가한다. 반응 혼합물을 0 ℃에서 2시간 동안 교반하고, 실온에서 24시간 동안 교반한다. 메탄올 (25 ml, 618 mmol)을 적가하고, 반응 혼합물을 30분 동안 교반한다. 그 다음, 반응 혼합물을 톨루엔 (400 ml)을 사용하여 희석시키고, 물로 세척한다 (3 x 300 ml). 수상(aqueous phase)을 모아서 톨루엔 (300 ml)으로 추출한다. 유기상을 모으고, 1N HCl (3 x 500 ml), 물 (2 x 500 ml) 및 포화 NaHCO₃ 용액 (300 ml)으로 세척한다. 유기상을 건조시키고, 건조될 때까지 농축시켜 무색의 시럽으로서 197 g (98 %)의 생성물을 수득한다.

실시예 8

페닐 2,3,4-트리- O -아세틸-1- 티오 -β-L- 푸코피라노시드 (P henyl 2,3,4- tri - O -acetyl-1-thio-β-L- fucopyranoside )

톨루엔 (200 ml) 중 실시예 7의 화합물 (196 g, 590 mmol)의 용액에, 티오페놀 (76 ml, 737 mmol)을 첨가하고, 혼합물은 0 ℃까지 냉각시킨다. BF₃ ^.Et₂O (112 ml, 885 mmol)를 60분 내에 적가한 후, 반응 혼합물을 0 ℃에서 3시간, 5 ℃에서 12시간, 및 실온에서 2시간 동안 교반한다. 수득된 혼합물을 물(500 ml), 물/함수(brine) (1:1) 혼합물 (700 ml), 1N NaOH/함수 (1:1) 혼합물 (400 ml), 물/함수(1:1) 혼합물 (700 ml) 및 함수 (300 ml)로 세척한다. 모아서 건조시킨 유기상을, 70 ℃에서 건조 상태까지 증발시켜 표제 화합물 224 g (99 %)을 수득한다.

실시예 9

페닐 1- 티오 -β-L-푸코피라노시드( Phenyl 1- thio -β-L- fucopyranoside )

실시예 8의 화합물 (224 g)을 메탄올 (500 ml)에 용해시키고, NaOMe (2 g, 37 mmol)를 첨가한다. 반응 혼합물을 2시간 동안 40 ℃에서 교반한다. 메탄올 (250 ml)을 증류시켜 제거하고, 5분 동안 나머지 용액을 통해 CO₂를 발생(bubble)시켜 pH 7에 도달하게 한다. 반응 혼합물을 증발시키고, 이소부틸 아세테이트 (450 ml)를 첨가한다. 50 ml의 용매를 증발시키고, 그로부터 얻은 혼합물을 실온에 24시간 동안 정치시켜 결정화시킨다. 생성된 백색의 결정질 고체를 여과시키고, 터트-부틸 메틸 에테르 (200 ml)로 세척하여, 건조 후 110 g (73 %)의 생성물을 수득한다.

실시예 10

페닐 -3,4- O - 이소프로필리덴 -1- 티오 -β-L- 푸코피라노시드 ( Phenyl -3,4- O -isopropilidene-1-thio-β-L- fucopyranoside )

실시예 9의 화합물 (150 g, 0.58 mol)을 2,2-디메톡시프로판 (550 ml, 4.5 mol) 중에 현탁시키고, 촉매량의 p-TsOH (1.19 g, 6.2 mmol)를 첨가한다. 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반한 후에, Et₃N (6 ml)을 서서히 첨가하여 산을 중화시킨다. 용액을 건조 상태 (174 g)까지 증발시키고, 잔여물을 디에틸 에테르 (250 ml)에 용해시키고, 0 ℃까지 냉각시킨 후, 세게 교반하면서 혼합물에 헥산 (250 ml)을 적가한다. 혼합물을 2일 동안 냉장고 (5 ℃)에서 유지하고, 침전된 백색 고체를 여과시켜 헥산 (200 ml)으로 세척하여 145.48 g의 화합물 (85 %)을 수득한다. 모액(mother liquor)을 증발시키고, 잔여물을 Et₂O (25 ml)에 용해시키고, 핵산 (25 ml)을 적가하여 제2 산물(crop) 11,51 g을 결정화시킨다. 합쳐진 수율: 91.5 %. M.p.: 81 ℃, [α]_D = -28.15 (1.03, MeOH).

실시예 11

페닐 2- O -벤질-3,4- O - 이소프로필리덴 -1- 티오 -β-L- 푸코피라노시드 ( Phenyl 2- O -benzyl-3,4- O -isopropilidene-1-thio-β-L- fucopyranoside )

실시예 10의 화합물 (157 g, 0.53 mol)을 건조 DMF (800 ml)에 첨가하고, 0 까지 냉각시킨다. 냉각된 용액에, NaH (1,2 당량)을 조심스럽게 나누어(in portions) 첨가하고, 동일한 온도에서 ½ 시간 동안 교반을 계속한다. 그 다음, 벤질 브로마이드 (76.3 ml, 0.635 mol)를 적가하고, 온도를 실온까지 가온한다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반한 다음, 0 ℃까지 냉각시키고, MeOH (60 ml)를 적가한다. 얻어진 혼합물을 증발시키고, 잔여물을 CH₂Cl₂ (1500 ml) 중에 용해시키고, 물 (3 x 750 ml)로 세척한다. 유기상을 건조시키고 (Na₂SO₄), 여과하고, 증발시켜 황갈색을 띠는 시럽 205.2 g (100 %)을 수득한다.

실시예 12

페닐 2- O -벤질-1- 티오 -β-L- 푸코피라노시드 ( Phenyl 2- O - benzyl -1- thio -β-L- fucopyranoside )

메탄올 (2090 mL) 중 실시예 11의 화합물 (100.0 g, 0.26 mol)의 용액에, 60 % 아세트산 (500 ml)을 첨가한다. 혼합물을 4시간 동안 80 ℃에서 교반한 다음, 증발시킨다. 잔여 용매를 톨루엔 (100 mL)을 이용하여 공-증발시킨다. 잔여물을 가열하면서 MeOH (200 ml)에 용해시키고, 용액을 실온까지 냉각시킨다. 백색 고체 침전물을 여과시키고, 차가운 메탄올로 세척하고, 건조시킨다. 수율: 50.52 g(56,1 %). 모액으로부터 생성물의 제1 산물 (15.81 g, 17.5 %) 및 제2 산물 (10.42 g, 11.6 %)을 결정화시킬 수 있다. M.p.: 105-107 ℃, [α]_D= -16.93 (1.00, CHCl₃).

실시예 13

페닐 3,4-디- O - 벤조일 -2- O -벤질-1- 티오 -β-L- 푸코피라노시드 ( Phenyl 3,4-di- O -benzoyl-2- O -benzyl-1-thio-β-L- fucopyranoside )

실시예 12의 화합물 (10 g, 29 mmol)을 피리딘 (12 ml, 145 mmol)과 DCM (35 ml)의 혼합물에 용해시킨다. 상기 용액을 0 ℃까지 냉각시키고, 혼합물이 농후한(thick) 현탁액이 되었을 때, 벤조일-클로라이드 (10 ml, 87 mmol)를 적가한다. 이를 실온에서 3.5 시간 동안 교반한 후 증발시키고, 잔여물을 톨루엔 (50 ml) 중에 용해시키고, 용액을 물 (2 x 30 ml), 1 N HCl 용액 (20 ml), 물 (30 ml), NaHCO₃ 포화 용액 (30 ml) 및 물:함수=1:1 (40 ml)을 이용하여 세척한다. 유기상을 건조시키고, 증발시킨 후, 얻어진 활색 시럽을 MeOH (50 ml)로부터 결정화한다. 여과시킨 백색 결정 침전을 차가운 MeOH (25 ml)로 세척하고, 건조시킨다. 수율: 14.63 g (91 %). M.p.: 98-100 ℃, [α]_D= -112 (1.02, CHCl₃).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.98-7.17 (m, 20H), 5.67-5.65 (m, 1H), 5.45 (dd, 1H, J= 3.3 Hz, J= 9.6 Hz), 4.84-4.76 (m, 2H), 4.57 (d, 1H, J= 10.5), 4.07-3.90 (m, 2H), 2.15 (s, 3H), 2.25 (d, 3H, J= 6.3 Hz).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 166.1, 165.7, 137.9-128.1, 87.2, 75.6, 75.6, 75.1, 73.7, 72.0, 17.1.

실시예 14

페닐 3,4-디- O -아세틸-2- O -벤질-1- 티오 -β-L- 푸코피라노시드 ( Phenyl 3,4-di- O -acetyl-2- O -benzyl-1-thio-β-L- fucopyranoside )

아실화제로서 아세트산 무수물을 사용하여, 실시예 13에 따른 방법에 의해 표제 화합물을 수득한다. 백색 결정, 수율: 88 %, m.p.: 124 ℃ (EtOH), [α]_D= -14.9 (1.00, CHCl₃).

¹H NMR (CDCl₃): 7.61-7.58 (m, 2H), 7.34-7.26 (m, 8H), 5.25 (dd, 1H), 5.02 (dd, 1H), 4.84 및 4.57 (AB-시스템), 4.71 (d, 1H), 3.79 (qd, 1H), 3.72 (t, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.93 (s, 3H), 1.22 (d, 3H).

실시예 15

페닐 2- O -벤질-3,4-디- O -(4- 클로로벤조일 )-1- 티오 -β-L- 푸코피라노시드 ( Phenyl 2- O - benzyl -3,4- di - O -(4- chlorobenzoyl )-1- thio -β-L- fucopyranoside )

아실화제로서 4-클로로벤조일 클로라이드를 사용하여, 실시예 13에 따른 방법에 의해 표제 화합물을 수득한다. M.p.: 142-144.5 ℃.

¹H NMR (600 MHz, CDCl₃) δ= 1.30 d 3H, 3.87 t 1H, 4.01 dq 1H, 4.54 및 4.81 ABq 2H, 4.78 d 1H, 5.28 dd 1H, 5.58 dd 1H, 7.15 m 5H, 7.25 m 2H, 7.37 m 3H, 7.43 m 2H, 7.65 m 2H, 7.69 m 2H, 7.84 m 2H.

¹³C NMR (150 MHz, CDCl₃) δ= 16.7, 71.9, 73.3, 74.8, 75.3, 75.4, 87.0, 127.8, 127.9, 128.0, 128.3, 128.7, 128.9, 129.0, 130.9, 131.2, 133.0, 164.5, 164.9.

실시예 16

페닐 2- O -(4- 메틸벤질 )-3,4- O - 이소프로필리덴 -1- 티오 -β-L- 푸코피라노시드 ( Phenyl 2- O -(4- methylbenzyl )-3,4- O - isopropylidene -1- thio -β-L- fucopyranoside )

실시예 10의 화합물에 4-메틸벤질 클로라이드 (60 g, 430 mmol, 1.1 당량), 25 % NaOH 용액 (120 ml) 및 TBAHS (4.0 g, 11.7 mmol, 0.03 당량)을 첨가한다. 혼합물을 90 ℃에서 3시간 동안 교반한다. 반응 종료 후에, MeOH (1.6 ml, 39.0 mmol, 0.1 당량)을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하고, 50 ℃에서 용매를 제거한다. 잔여물을, 추가적인 정제 없이 다음 단계에 사용한다. 특성 분석을 위해 소량의 샘플을 정제한다.

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.55-7.52 (m, 4H), 7.32-7.26 (m, 5H), 7.14 (d, 2H, J= 8.2 Hz), 4.64-4.57 (m, 2H), 4.22 (t, 1H, J= 5.9 Hz, J= 5.9 Hz), 4.04 (dd, 1H, J= 2.1 Hz, J= 5.6 Hz), 3.86-3.79 (m, 1H), 3.52-3.47 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 1.42-1.36 (m, 9H).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 137.6, 135.1, 134.1, 132.3, 129.2, 129.0, 128.6, 127.6, 109.9, 86.3, 80.1, 78.1, 76.6, 73.6, 72.6, 28.2, 26.7, 21.5, 17.7.

실시예 17

페닐 2- O -(4- 메틸벤질 )-1- 티오 -β-L- 푸코피라노시드 ( Phenyl 2- O -(4-methylbenzyl)-1-thio-β-L- fucopyranoside )

실시예 16에서 수득한 조(crude) 물질에, 이소프로판올 (100 ml) 및 물 (15 ml)을 첨가하고, 4N HCl 용액 (4 ml, pH = 3)을 첨가하여 pH를 조정한다. 그 다음, IR 120 수지 (15 g)를 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 환류 하에서 교반한다. 반응 종료 후에, 반응 혼합물을 70 ℃에서 여과시키고, 물-MeOH-헥산-이소프로판올 (150 ml /400 ml/150 ml/1.7 l)의 혼합물을 첨가한다. 혼합물에 시딩 결정(seeding crystal)을 첨가하여 결정화시키고, 수 시간 동안 5-10 ℃에서 정치시킨다. 백색 결정질 고체를 여과시키고, 헥산 200 ml로 세척하여 순수한 결정질 화합물 87.7 g (62 %)을 얻는다. 모액 처리 후에, 34.2 g의 화합물을 또한 수득한다. 전체 수율 (overall yield): 121.9 g (86 %). Mp: 146-147 ℃.

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.56-7.52 (m, 2H), 7.3-7.24 (m, 5H), 7.13 (d, 2H, J= 7.9 Hz), 4.87 (d, 1H, J= 10.8 Hz), 4.63-4.55 (m, 2H), 3.66-3.49 (m, 4H), 2.31 (s, 3H), 1.30 (d, 3H, J= 6.5 Hz).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 138.1, 135.3, 134.4, 131.8, 129.5, 129.2, 128.7, 127.6, 87.7, 78.1, 75.4, 75.4, 74.7, 71.9, 21.5.

실시예 18

페닐 3,4-디- O - 벤조일 -2- O -(4- 메틸벤질 )-1- 티오 -β-L- 푸코피라노시드 (Phenyl 3,4- di - O - benzoyl -2- O -(4- methylbenzyl )-1- thio -β-L- fucopyranoside )

0-5 ℃에서, DCM (70 ml) 중 실시예 17에 따른 화합물 (50 g, 138.7 mmol)에 피리딘 (33.6 ml, 416 mmol, 3 당량)을 첨가한다. 그 다음, 샹기 혼합물에 벤조일클로라이드 (35.4 ml, 305 mmol, 2.2 당량)를, 1시간 동안 서서히 첨가한다 (온도는 15 ℃를 초과할 수 없다), 첨가 후에, 반응 혼합물을 rt에서 2시간 동안 교반한다. 그 다음, 0-5 ℃에서 MeOH (3 ml, 0.3 당량)를 서서히 첨가하고, 반응 혼합물을 rt에서 30분 동안 교반한다. 또다시, 0 ℃에서 4M HCl 용액 (32 ml)을 서서히 첨가하고, 반응 혼합물을 rt에서 30분 동안 교반한다. 유기상을 추출하고, 물로 2회 세척하고 (2 x 30 ml), 건조시키고, 60 ℃에서 증발시키고, MeOH (200 ml)를 첨가한다. 그 다음, 혼합물을 60 ℃에서 부분적으로 증발시키고, 화합물이 결정화하기 시작한다: 77.1 g (98 %). Mp: 81-83 ℃.

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.91-7.19 (m, 15H), 6.98 (d, 2H, J= 7.9 Hz), 6.86 (d, 2H, 7.9 Hz), 5.57-5.56 (m, 1H), 5.35 (dd, 1H, J= 3.3 Hz, J= 9.6 Hz), 4.75-4.66 (m, 2H), 4.46 (d, 1H, J= 10.4), 3.99-3.84 (m, 2H), 2.15 (s, 3H), 2.25 (d, 3H, J= 6.4 Hz).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 166.0, 165.7, 137.7, 134.8, 133.6, 133.3, 133.2, 133.2, 133.1, 130.2, 129.9, 129.8, 129.8, 129.3, 129.2, 128.8, 128.5, 128.0, 87.3, 75.5, 75.4, 74.9, 73.7, 72.0, 21.4, 17.0.

실시예 19

페닐 3,4-디- O -(4- 클로로벤조일 )-2- O -(4- 메틸벤질 )-1- 티오 -β-L- 푸코피라노시드 ( Phenyl 3,4- di - O -(4- chlorobenzoyl )-2- O -(4- methylbenzyl )-1- thio -β-L- fucopyranoside )

실시예 17의 화합물 (30 g)을 출발물질로 하여, 4-클로로벤조일 (26.7 ml)을 사용하여 실시예 18에 기술된 방법에 따라 표제 화합물을 수득한다: 50.3 g의 황색 시럽.

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.92-7.15 (17H), 5.50 (m, 1H), 5.30 (dd, 1H, J= 3.3, 9.6), 4.71 (d, 1H, J= 9.6), 4.44 (d, 1H, J= 10.8), 3.94 (m, 1H, J= 0.6, 6), 3.80 (t, 1H, 9.6), 2.15 (s, 3H), 1.23 (d, 1H, J= 6.3).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 165.2, 164.7, 140.2, 139.8, 137.8, 134.7, 133.2-128.0, 87.1, 75.6, 75.4, 74.8, 73.4, 72.2, 21.4, 17.0.

실시예 20

통상적인 글리코실화 방법에 의해 일반식 4의 화합물을 얻는다.

DCM-THF 5:1-9:1 (2.5-4 부피(volume)) 중 공여체 (1.1-1.2 당량) 및 수용체 (1.0 당량)의 0-10 ℃의 냉각된 용액에, NBS (1.1-1.2 당량)을 첨가하고, 뒤이어 트리플산 (0.01-0.025 당량)을 첨가한다. 반응 혼합물을 15분 동안 교반한다. 그 다음, 25 % 암모늄 히드록시드 용액 (2 당량)을 첨가하여 반응을 종료(quench)시킨다. 유기상을 분리 및 농축시키고, 잔여물을 결정화, 컬럼 크로마토그래피에 의해 정제하거나, 또는 조 상태로 추가적으로 사용한다. 수율 범위 50-87 %.

a) O-(2-O-벤질-3,4-디-O-(4-클로로벤조일)-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-(4-클로로벤조일)-3,4-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (O-(2-O-benzyl-3,4-di-O-(4-chlorobenzoyl)-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-(4-chlorobenzoyl)-3,4-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

공여체(donor): 실시예 15의 화합물, 수용체(acceptor): 실시예 5d의 화합물

백색 결정, mp: 109.4-111.7 ℃.

¹H NMR (CDCl₃) δ: 1.15 (d, 3H, J= 5.7 Hz); 1.4 (m, 12H); 1.55 (m, 6H); 3.35 (s, 3H); 3.38 (s, 3H); 3.8 (t, 1H, J= 6 Hz); 3.95-4.4 (m, 10H); 4.5-4.8 (m, 7H); 5.55 (m, 1H); 4.63-4.71 (m, 2H); 7.25 (m, 7H); 7.4 (m, 4H); 7.7 (d, 2H, J=8.6); 7.85 (d, 2H, J=8.6); 8.00 (d, 2H, J= 9.5).

¹³C NMR (CDCl₃) δ: 6.02, 24.62, 26.29, 26.68, 26.72, 27.16, 27.84, 52.64, 56.07, 63.81, 64.59, 64.85, 70.29, 70.71, 72.03, 72.61, 72.78, 73.64, 74.74, 74.84, 76.66, 76.87, 77.32, 79.96, 95.24, 100.84, 105.26, 108.74, 109.84, 110.33, 127.59, 127.78, 127.9, 128.11, 128.16, 128.21, 128.39, 128.62, 128.68, 130.77, 130.96, 137.66, 139.13, 139.46, 139.56, 164.17, 164.90, 165.24.

b) O-(2-O-벤질-3,4-디-O-벤조일-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-(4-클로로벤조일)-3,4-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (O-(2-O-benzyl-3,4-di-O-benzoyl-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-(4-chlorobenzoyl)-3,4-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

공여체: 실시예 13의 화합물, 수용체: 실시예 5d의 화합물

백색의 폼

¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃): δ= 1.18 (d, 3H, J = 6.5 Hz), 1.37 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.41 (s, 3H), 1.44 (s, 3H), 1.56 (s, 6H), 3.35 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 3.81 (dd, 1H, J = 6.6 Hz, J = 7.6 Hz), 3.97 (d, 1H, J = 4.9 Hz), 4.07-4.14 (m, 3H), 4.20-4.25 (m, 3H), 4.31 (d, 1H, J = 6.2 Hz), 4.37 (d, 2H, J = 6.2 Hz), 4.54-4.60 (m, 4H), 4.69 (d, 2H, J = 10.4 Hz), 4.76 (d, 1H, J = 7.9 Hz), 5.64 (d, 1H, J = 3.4 Hz), 5.68-5.73 (m, 2H), 7.21-7.31 (m, 8H), 7.41-7.48 (m, 5H), 7.81 (d, 2H, J = 7.1 Hz), 7.96 (d, 2H, 8.1 Hz), 8.01 (d, 2H, J = 8.6 Hz).

¹³C-NMR (75 MHz, CDCl₃): δ = 165.88, 165.38, 165.20, 139.58, 137.90, 133.06, 132.73, 131.06, 129.90, 129.75, 129.71, 129.56, 128.73, 128.34, 128.18, 128.10, 127.85, 127.59, 110.41, 109.97, 108.87, 105.39, 101.02, 95.56, 79.99, 76.87, 76.74, 74.96, 74.84, 73.68, 73.12, 72.48, 72.32, 70.78, 70.23, 65.02, 64.88, 63.92, 56.16, 52.66, 27.92, 27.29, 26.84, 26.80, 26.38, 24.78, 16.14.

c) O-(2-O-벤질-3,4-디-O-벤조일-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-피발로일-3,4-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (O-(2-O-benzyl-3,4-di-O-benzoyl-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-pivaloyl-3,4-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

공여체: 실시예 13의 화합물, 수용체: 실시예 4의 화합물

백색의 폼

¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃): δ = 1.17 (d, 3H, J = 6.5 Hz), 1.22 (s, 9H), 1.36 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.41 (s, 3H), 1.42 (s, 3H), 1.54 (s, 6H), 3.44 (s, 6H), 3.77 (dd, 1H, J = 6.6 Hz, J = 8.0 Hz), 3.90-3.96 (m, 2H), 4.08-4.15 (m, 3H), 4.21-4.24 (m, 2H), 4.27-4.34 (m, 4H), 4.40 (d, 1H, J = 6.3 Hz), 4.52-4.59 (m, 2H), 4.63-4.75 (m, 3H), 5.62 (d, 1H, J = 3.3 Hz), 5.67-5.71 (m, 2H), 7.20-7.31 (m, 8H), 7.40-7.47 (m, 3H), 7.78-7.83 (m, 2H), 7.93-7.97 (m, 2H).

¹³C-NMR (75 MHz, CDCl₃): δ = 177.92, 165.85, 165.17, 137.89, 133.04, 132.70, 129.88, 129.73, 129.68, 129.54, 128.32, 128.15, 128.07, 127.82, 127.55, 110.18, 109.86, 108.82, 105.15, 101.11, 95.45, 79.95, 76.85, 76.75, 74.78, 74.54, 73.31, 73.04, 72.46, 72.20, 70.40, 70.20, 64.97, 64.81, 62.27, 56.04, 52.43, 38.66, 27.92, 27.22, 27.03, 26.82, 26.75, 26.29, 24.82, 16.11.

d) O-(2-O-(4-메틸벤질)-3,4-디-O-벤조일-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-피발로일-3,4-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (O-(2-O-(4-methylbenzyl)-3,4-di-O-benzoyl-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-pivaloyl-3,4-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

공여체: 실시예 18의 화합물, 수용체: 실시예 4의 화합물

백색의 폼

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.95 (d, 2H, J= 7.2 Hz), 7.79 (d, 2H, J= 7.2 Hz), 7.59-7.23 (m, 6H), 7.15 (d, 2H, J= 7.9 Hz), 7.00 (d, 2H, 7.8), 5.70-5.63 (m, 3H), 4.72-3.89 (m, 17H), 3.70 (t, 1H, J= 7.2 Hz), 3.44 (s, 6H), 2.27 (s, 3H), 1.54-1.16 (m, 30H).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 178.2, 166.13, 165.5, 137.5, 135.1, 133.4, 133.0, 130.2, 130.0, 130.0, 129.9, 129.8, 129.1, 128.7, 128.6, 128.6, 128.5, 128.4, 128.3, 110.5, 110.1, 109.1, 105.5, 101.5, 95.8, 80.2, 75.1, 74.9, 73.6, 73.1, 72.8, 72.4, 70.7, 70.5, 65.3, 65.1, 62.6, 56.3, 52.8, 39.0, 28.2, 27.6, 27.3, 27.2, 27.1, 26.6, 25.1, 21.4, 16.4.

e) O-(2-O-(4-메틸벤질)-3,4-디-O-(4-클로로벤조일)-α-L-푸코실피라노실)-(1→2)-O-(6-O-피발로일-3,4-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (O-(2-O-(4-methylbenzyl)-3,4-di-O-(4-chlorobenzoyl)-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-pivaloyl-3,4-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

공여체: 실시예 19의 화합물, 수용체: 실시예 4의 화합물

백색의 폼

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.97-7.00 (m, 12H), 5.68-5.58 (m, 3H), 4.73-3.75 (m, 18H), 3.45 (s, 6H), 2.29 (s, 3H), 1.55-1.16 (m, 30H).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 178.2, 165.3, 164.5, 139.9-127.4, 110.5, 110.2, 109.1, 105.5, 101.4, 95.6, 80.3, 75.0, 75.0, 73.7, 73.0, 72.9, 72.3, 70.7, 65.2, 65.0, 62.6, 56.4, 52.8, 52.5, 39.0, 28.2, 27.5, 27.4, 27.1, 26.6, 25.1, 21.4, 16.4.

f) O-(2-O-(4-메틸벤질)-3,4-디-O-벤조일-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-(4-클로로벤조일)-3,4-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (O-(2-O-(4-methylbenzyl)-3,4-di-O-benzoyl-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-(4-chlorobenzoyl)-3,4-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

공여체: 실시예 18의 화합물, 수용체: 실시예 5d의 화합물

백색의 폼

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.97-6.93 (m, 18H), 5.64-5.54 (m, 3H), 4.60-3.70 (m, 18H), 3.31 (s, 3H), 3.27 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.48-1.24 (m, 18H), 1.11 (d, 3H, J = 6.3 Hz).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 165.7, 165.6, 165.5, 139.8-128.0, 110.7, 110.3, 109.1, 105.7, 102.4, 95.9, 80.2, 77.9-70.5, 65.3, 65.1, 64.2, 56.4, 52.9, 28.2, 27.7, 27.3, 27.2, 26.4, 25.1, 21.3, 16.4.

g) O-(2-O-(4-메틸벤질)-3,4-디-O-(4-클로로벤조일)-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-(4-클로로벤조일)-3,4-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (O-(2-O-(4-methylbenzyl)-3,4-di-O-(4-chlorobenzoyl)-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-(4-chlorobenzoyl)-3,4-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

공여체: 실시예 19의 화합물, 수용체: 실시예 5d의 화합물

백색의 폼

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.95-6.95 (m, 16H), 5.59-5.50 (m, 3H), 4.69-3.69 (m, 18H), 3.31 (s, 3H), 3.28 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 1.55-1.30 (m, 18H), 1.09 (d, 3H, J = 6.6 Hz).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 165.6, 165.3, 164.5, 139.9-128.2, 110.7, 110.2, 109.1, 105.7, 101.2, 95.7, 80.3, 77.7-70.6, 65.2, 65.0, 64.2, 56.4, 53.0, 29.2, 28.2, 27.7, 27.1, 26.6, 25.0, 21.4, 16.4.

h) O-(2-O-벤질-3,4-디-O-벤조일-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-벤조일-3,4-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (O-(2-O-benzyl-3,4-di-O-benzoyl-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-benzoyl-3,4-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

공여체: 실시예 13의 화합물, 수용체: 4-O-(6-O-벤조일-3,4-O-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 ㅇ아아세탈 [1]

황색의 시럽

¹H-NMR (CDCl₃, 600 MHz): δ 1.17 (3H, d, J=6.5 Hz), 1.36 (3H, s), 1.37 (3H, s), 1.38 (3H, s), 1.42 (3H, s), 1.53 (3H, s), 1.54 (3H, s), 3.33 (3H, s); 3.36 (3H, s), 3.80 (1H, dd, J=7.8, 6.5 Hz), 3.97 (1H, dd, J=5.8, 1.3 Hz), 4.06-4.13 (3H, m), 4.17-4.25 (3H, m), 4.30 (1H, dd, J=6.1, 6.0 Hz), 4.34-4.38 (2H, m), 4.52-4.60 (4H, m), 4.64 (1H, d, J=12.3 Hz), 4.71 (1H, d, J=12.3 Hz), 4.75 (1H, d J=8.0 Hz), 5.62 (1H, d J=3.9 Hz), 5.66 (1H, d, J=3.8 Hz); 5.69 (1H, dd, J=11.1, 3.8 Hz), 7.16-7.29 (7H, m), 7.38-7.48 (5H, m), 7.54-7.60 (2H, m), 7.79 (2H, m), 7.94 (2H, m); 8.05 (2H, m).

i) O-(2-O-벤질-3,4-디-O-(4-클로로벤조일-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-피발로일-3,4-이소프로필리덴-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-2,3:5,6-디-O-이소프로필리덴-D-글루코오스 디메틸 아세탈 (O-(2-O-benzyl-3,4-di-O-(4-chlorobenzoyl-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-pivaloyl-3,4-isopropylidene-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-2,3:5,6-di-O-isopropylidene-D-glucose dimethyl acetal)

공여체: 실시예 15의 화합물, 수용체: 실시예 4의 화합물

백색의 폼

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.88-7.13 (m, 13H), 5.70-5.58 (m, 3H), 4.75-3.75 (m, 18H), 3.45 (s, 6H), 2.29 (s, 3H), 1.55-1.16 (m, 30H).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 178.2, 165.3, 164.5, 139.9-128.0, 110.5, 110.1, 109.1, 105.5, 101.4, 95.6, 74.0, 73.7, 73.1, 72.9, 72.3, 70.7, 65.2, 65.0, 62.6, 56.4, 52.8, 39.0, 28.2, 27.5, 27.3, 27.1, 26.6, 25.1, 16.4.

실시예 21

일반식 4의 화합물을 일반식 3의 화합물로 전환시키는 통상적인 방법

방법 A: pTsOH 일수화물 (0.2-0.25 당량)의 존재 하에 혼합물 MeCN-H₂O 7:1 (4-8 부피) 중 일반식 4의 화합물의 현탁액/용액을 45까지 가열하고, 7 내지 24시간 동안 교반한다. 트리에틸아민에 의해 산을 중화시키고, 용매를 증발시키고, 잔여물을 결정화하거나 또는 크로마토그래피에 의해 정제하여 29-78 %의 수율로 화합물을 얻는다.

방법 B: 아세톤 (5-15 부피)에 일반식 4의 화합물을 용해시키고, cc.HCl-물 1:1 (1-3 부피)를 상기 용액에 첨가한다. 용액을 3-6시간 동안 40-60 ℃에서 교반한다. 25 % 암모늄 히드록시드 용액을 첨가하여 pH = 9에 도달하게 한다. 반응 혼합물을 물 및 에틸 아세테이트 (각각, 5-15 부피)로 희석시키고, 추출하고, 및 유기상을 증발시켜 최종 생성물을 85-95 %의 수율로 수득한다.

a) O-(2-O-(4-메틸벤질)-3,4-디-O-벤조일-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-(4-클로로벤조일)-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-D-글루코오스 (O-(2-O-(4-methylbenzyl)-3,4-di-O-benzoyl-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-(4-chlorobenzoyl)-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-D-glucose)

실시예 20f의 화합물로부터, 방법 A를 사용하여, 무색의 고체.

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.95-6.74 (m, 18H), 5.67-5.21 (m, 4H), 4.74-3.07 (m, 17H), 2.16 (s, 3H), 1.09-1.06 (m, 3H).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 166.1, 166.0, 165.8, 139.9-128.0, 101.8, 99.0, 92.4, 78.7-60.9, 21.7, 16.3.

b) O-(2-O-(4-메틸벤질)-3,4-디-O-(4-클로로벤조일)-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-(4-클로로벤조일)-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-D-글루코오스 (O-(2-O-(4-methylbenzyl)-3,4-di-O-(4-chlorobenzoyl)-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-(4-chlorobenzoyl)-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-D-glucose)

실시예 20g의 화합물로부터, 방법 A를 사용하여, 백색의 결정, mp.: 235-237 ℃(톨루엔/아세톤).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.92-6.73 (m, 16H), 5.60-5.18 (m, 4H), 4.81-3.08 (m, 17H), 2.18 (s, 3H), 1.14-1.02 (m, 3H).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 165.8, 165.3, 164.8, 140.2-127.7, 101.8, 96.6, 92.5, 79.3-60.9, 21.4, 16.2.

c) O-(2-O-(4-메틸벤질)-3,4-디-O-(4-클로로벤조일)-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-피발로일-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-D-글루코오스 (O-(2-O-(4-methylbenzyl)-3,4-di-O-(4-chlorobenzoyl)-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-pivaloyl-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-D-glucose)

실시예 20e의 화합물로부터, 방법 A를 사용하여, 무색의 고체.

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.90-6.87 (m, 12H), 5.69-5.30 (m, 4H), 4.74-3.01 (m, 17H), 2.27 (s, 3H), 1.25-1.09 (m, 12H).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 178.8, 165.3, 165.2, 140.2-127.9, 101.5, 98.5, 92.4, 78.5-58.9, 27.5, 21.4, 16.3.

d) O-(2-O-(4-메틸벤질)-3,4-디-O-벤조일-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-피발로일-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-D-글루코오스 (O-(2-O-(4-methylbenzyl)-3,4-di-O-benzoyl-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-pivaloyl-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-D-glucose)

실시예 20d의 화합물로부터, 방법 A를 사용하여, 무색의 고체

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.95-6.98 (m, 14H), 5.86-5.13 (m, 4H), 4.72-3.00 (m, 17H), 2.26 (s, 3H), 1.24-1.07 (m, 12H).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 178.8, 166.2, 166.0, 138.3-128.5, 101.6, 99.0, 92.3, 78.8-58.9, 27.3, 21.4, 16.3.

e) O-(2-O-벤질-3,4-디-O-(4-클로로벤조일)-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-(4-클로로벤조일)-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-D-글루코오스 (O-(2-O-benzyl-3,4-di-O-(4-chlorobenzoyl)-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-(4-chlorobenzoyl)-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-D-glucose)

실시예 20a의 화합물로부터, 방법 A를 사용하여, 백색의 결정.

α/β 아노머의 혼합물: mp. 226-228 ℃.

¹H NMR (CDCl₃) δ= 1.15 (d, 3H, J=6.5Hz); 3.15-4.2 (m, 15H); 4.4-4.95 (m, 15H); 5.12 (d, 0.7H, J=3.9Hz); 5.6 (m, 2H); 5.9 (d, 1H, 3.6Hz); 7.25 (m, 7H); 7.45 (m, 4H); 7.65 (d, 2H, J=8.5Hz); 7.85 (d, 2H, J=8.6Hz); 8.1 (d, 2H, J=8.1Hz).

¹³C NMR (CDCl₃) δ= 15.28, 18.49, 60.16, 61.23, 61.65, 66.72, 68.92, 69.27, 69.29, 70.46, 71.39, 71.46, 71.72, 71.76, 72.08, 73.97, 74.00, 74.03, 74.08, 74.45, 75.05, 75.22, 75.30, 75.39, 75.43, 75.88, 91.92, 96.02, 96.92, 96.95, 100.21, 100.25, 128.50, 128.80, 128.91, 137.26, 137.27, 138.82, 140.57, 140.70, 140.93, 166.07, 166.52, 166.86.

β 아노머: mp. 136-141 ℃.

¹H NMR (CDCl₃) δ= 1.06 (d, 3H, J=6.6Hz); 3.35 (m, 3H); 3.5 (m, 2H); 3.7 (m, 1H); 3.8-4.2 (m, 7H); 4.4-4.7 (m, 6H); 5.55 (m, 2H); 5.9 (d, 1H, J=3.4Hz); 7.1-7.6 (m, 11H); 7.65 (d, 2H, J=8.5Hz); 7.85 (d, 2H, J=8.6Hz); 8.1 (d, 2H, J=8.1Hz).

¹³C NMR (CDCl₃) δ= 16.30, 61.57, 65.18, 65.99, 66.02, 70.86, 71.70, 72.63, 73.83, 73.89, 74.23, 74.27, 75.83, 75.88, 75.96, 75.99, 76.19, 76.24, 76.66, 78.89, 97.95, 98.01, 102.24, 128.97, 129.30, 129.39, 129.46, 129.75, 129.82, 130.09, 132.08, 132.22, 132.48, 138.82, 140.57, 140.70, 140.93, 166.07, 166.52, 166.86.

f) O-(2-O-벤질-3,4-디-O-벤조일-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-(4-클로로벤조일)-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-D-글루코오스 (O-(2-O-benzyl-3,4-di-O-benzoyl-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-(4-chlorobenzoyl)-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-D-glucose)

실시예 20b의 화합물로부터, 방법 A를 사용하여, 무색의 고체.

¹H-NMR (300 MHz, CDCl₃/MeOH 9:1): δ= 1.10 (d, 3H, J = 6.5 Hz), 1.20 (d, 0.7H, J = 6.6 Hz), 3.37-3.55 (m, 5H), 3.67-3.93 (m, 6H), 3.98-4.10 (m, 1H), 4.25-4.65 (m, 5H), 5.12 (d, 1H, J = 3.7 Hz), 5.47-5.64 (m, 3H), 7.00-7.60 (m, 12H), 7.71 (d, 2H, J = 7.4 Hz), 7.85 (d, 2H, J = 8.3 Hz), 7.94-7.98 (m, 3H).

g) O-(2-O-벤질-3,4-디-O-벤조일-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-벤조일-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-D-글루코오스 (O-(2-O-benzyl-3,4-di-O-benzoyl-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-benzoyl-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-D-glucose)

실시예 20h의 화합물로부터, 방법 B를 사용하여, 엷은(light) 황색 시럽.

¹³C-NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ= 165.6, 165.5, 164.7, 164.6, 138.0, 133.5, 133.4, 133.3, 131.1, 129.6, 129.4, 129.3, 129.2, 129.1, 128.9, 128.8, 128.7, 128.6, 128.5, 128.1, 128.0, 127.8, 127.7, 127.6, 127.4, 127.3, 103.6, 99.9, 99.4, 95.9, 77.2, 74.8, 74.1, 74.0, 73.9, 73.8, 73.5, 72.4, 72.3, 72.0, 71.1, 70.0, 69.9, 69.7, 69.6, 68.9, 68.8, 63.9, 63.8, 63.7, 56.1, 54.4, 28.9, 15.5.

h) O-(2-O-벤질-3,4-디-O-(4-클로로벤조일)-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-피발로일-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-D-글루코오스 (O-(2-O-benzyl-3,4-di-O-(4-chlorobenzoyl)-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-pivaloyl-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-D-glucose)

실시예 20i로부터, 방법 A를 사용하여, 무색의 결정, m.p.: 126-128 ℃ (톨루엔-아세톤).

¹H NMR (MeOD, 300 MHz): δ= 7.85-7.18 (m, 13H), 5.90-3.45 (m, 21H), 1.22-1.15 (m, 12H).

¹³C NMR (MeOD, 75 MHz): δ= 178.7, 165.4, 165.0, 139.8, 139.8, 137.7, 131.1-131.0, 129.0-127.9, 101.0, 96.9, 92.6, 75.1-74.9, 73.1, 72.7, 71.7, 71.5, 70.6, 70.4, 69.7, 64.9, 63.3, 60.2, 38.7, 29.8, 26.5, 15.2.

i) O-(2-O-벤질-3,4-디-O-벤조일-α-L-푸코피라노실)-(1→2)-O-(6-O-피발로일-β-D-갈락토피라노실)-(1→4)-D-글루코오스 (O-(2-O-benzyl-3,4-di-O-benzoyl-α-L-fucopyranosyl)-(1→2)-O-(6-O-pivaloyl-β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-D-glucose)

실시예 20c으로부터, 방법 A 사용

¹H NMR (CDCl₃): δ= 1.2 (m, 12H); 3.00 (m, 1H); 3.10-4.05 (m, 13H); 4.07-4.77 (m, 10H); 5.4-5.8 (m, 4H); 7.15-7.35 (m, 9H); 7.35-7.7 (m, 5H), 7.8 (d, 2H, J=7.9 Hz); 7.9 (d, 2H, J=8.0 Hz).

¹³C NMR (CDCl₃): δ= 16.27, 27.37, 61.63, 65.41, 65.79, 66.02, 70.82, 70.99, 72.61, 73.23, 73.89, 74.43, 74.57, 75.88, 75.92, 75.96, 76.03, 76.21, 76.24, 76.77, 78.89, 92.38, 96.70, 98.67, 101.56, 128.97, 129.30, 129.39, 129.46, 129.75, 129.82, 130.09, 133.44, 133.49, 133.54, 136.79, 136.95, 166.05, 166.12, 166.17, 166.21, 178.84.

실시예 22

O -(2- O -벤질-α-L- 푸코피라노실 )-(1→2)- O -(3,4- 이소프로필리덴 -β-D- 갈락토 피라노실)-(1→4)-2,3:5,6-디- O - 이소프로필리덴 -D-글루코오스 디메틸 아세탈 ( O -(2- O -benzyl-α-L- fucopyranosyl )-(1→2)- O -(3,4- isopropylidene -β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-2,3:5,6- di - O - isopropylidene -D- glucose dimethyl acetal )

실시예 20a의 화합물 (1.22 g)을 5 ml의 MeOH 중 13 mg의 NaOH로부터 제조된 용액 중에 용해시키고, rt에서 밤새 교반한다. NaOH를 드라이아이스로 퀀칭시키고, 용매를 증발시킨다. 잔여물을 TBME (10 ml) 중에 용해시키고, 물 (3 x 4 ml)로 세척한다. 용매를 진공 중에서 증발시키고, iPr₂O (6 ml)를 첨가하여 투명한 용액을 얻고, 그로부터 시딩 후 생성물이 침전된다. 백색 결정을 여과시키고, 세척 및 건조시킨다 (0.49 g). 모액을 농축하고, MeOH 중에 재용해시켜, 이 용액을 헥산으로 3회 세척하고 증발시킨다. 그 다음, 잔여물을 iPr₂O에 재용해시키고, 용액을 시딩하고, 생성물을 여과시키고, 세척 및 건조시킨다 (0.16 g). 전체 수율은 순수한 트리올(triol) 0.65 g (83 %)이다. M.p.: 146.8-149 ℃.

¹H NMR (CDCl₃) δ: 1.23 (d, 3H, J=6.7Hz); 1.28-1.50 (6s, 18H); 3.49 (s, 3H); 3.51 (s, 3H); 3.6-3.75 (m, 4H); 3.8 (m, 2H); 3.9-4.0 (m, 5H); 4.0-4.15 (m, 4H); 4.27 (q, 1H, J=5.4Hz); 4.36 (d, 1H, 7Hz); 4.51-4.57 (m, 2H); 4.63 (dd, 1H, J=7.2Hz, J=8Hz); 4.78 (d, 1H, J=11.6Hz), 5.61 (d, 1H, J=3.67Hz); 7.25-7.4 (m, 5H).

¹³C NMR (CDCl₃) δ: 16.57, 25.20, 26.69, 26.84, 27.32, 28.13, 54.42, 57.95, 62.58, 65.17, 65.73, 69.36, 71.91, 71.98, 74.13, 74.66, 75.14, 75.53, 77.40, 77.82, 78.10, 80.85, 94.30, 101.63, 107.81, 108.97, 109.92, 110.71, 127.85, 127.98, 128.54, 138.55.

실시예 23

O -(2- O -(4- 메틸벤질 )-α-L- 푸코피라노실 )-(1→2)- O -(3,4- 이소프로필리덴 -β-D-갈 락토피라노 실)-(1→4)-2,3:5,6-디- O - 이소프로필리덴 -D-글루코오스 디메틸 아세탈 ( O -(2- O -(4- methylbenzyl )-α-L- fucopyranosyl )-(1→2)- O -(3,4- isopropylidene -β-D- galactopyranosyl )-(1→4)-2,3:5,6- di - O - isopropylidene -D- glucose dimethyl acetal )

메탄올 (10 ml) 중 실시예 20d의 화합물 (2.51 g, 2.4 mmol)의 용액에 MeOH (5 ml) 중 0.5M NaOMe를 첨가한다. 반응 혼합물을 6시간 동안 교반한다. 반응이 완료된 후, 드라이아이스를 첨가하고, 용액을 농축시킨다. 잔여물에 대해 크로마토그래피를 수행하여 백색 폼으로서 목적 화합물 (1.15 g, 63 %)을 수득한다.

실시예 20e의 화합물 (59 %), 실시예 20f의 화합물 (71 %) 및 실시예 20g의 화합물 (51 %)을 출발 물질로 하여, 동일한 과정을 적용하였다.

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz): δ= 7.20 (d, 2H, J = 7.9 Hz), 7.08 (d, 2H, 7.9 Hz), 5.54 (d, 1H, J = 3.5 Hz), 4.67 (d, 1H, J = 11.5 Hz), 4.59 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 4.51-4.60 (m, 2H), 4.32 (d, 1H, J = 6.9 Hz), 4.26-4.20 (m, 1H), 4.10-3.58 (m, 15H), 3.46 (s, 6H), 2.29 (s, 3H), 1.44-1.17 (m, 21H).

¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz): δ= 137.6, 135.4, 129.3, 128.2, 110.7, 109.9, 109.0, 107.9, 101.6, 94.3, 80.9, 78.1, 76.1, 75.6, 75.1, 74.7, 74.7, 74.1, 71.9, 71.8, 69.3, 65.7, 65.2, 62.6, 60.6, 58.0, 54.4, 28.1, 27.3, 26.9, 26.8, 26.7, 25.2, 21.4, 16.6, 14.4.

실시예 24

O -(2- O -(4- 메틸벤질 )-α-L- 푸코피라노실 )-(1→2)- O -(β-D- 갈락토피라노실 )-(1→4)-D-글루코오스 ( O -(2- O --(4- methylbenzyl )-α-L- fucopyranosyl )-(1→2)- O -(β-D- galactopyranosyl )-(1→4)-D- glucose )

iPrOH/H₂O (2 ml : 6 ml) 중 실시예 23의 화합물 (2.0 g, 2.64 mmol)의 혼합물에 p-톨루엔술폰산 일수화물 (76 mg, 0.4 mmol, 0.15 당량)을 첨가한다. 반응 ㅎ혼합물을 55 ℃ 및 250 mbar에서 교반한다. 4시간 후, 압력을 90 mbar로 감소시키고, 상기 반응 혼합물을 15분 동안 더 교반하여 모든 유기 용매를 제거한다. 잔여 수용액을 Amberlite IR400 (OH^-)을 사용하여 중화시키고, 수지를 여과시키고, 여과물(filtrate)을 EtOAc (20 ml)로 세척한다. 상을 분리하고, 수상을 동결건조시켜 무색의 고체로서 목적 화합물 (1.53 g, 98 %)을 수득한다.

¹H NMR (MeOD, 300 MHz): δ= 7.35 (d, 2H, J = 7.9 Hz), 7.14 (d, 2H, J = 7.9 Hz), 5.50 (m, 1H), 5.14-3.22 (m, 20H), 2.30 (s, 3H), 1.19-1.14 (m, 3H).

¹³C NMR (MeOD, 75 MHz): δ= 138.4, 136.3, 129.9, 129.6, 102.2, 98.5, 76.8, 72.9, 69.7, 67.4, 31.7, 21.3, 16.4.

실시예 25

O -(2- O -벤질-α-L- 푸코피라노실 )-(1→2)- O -(β-D- 갈락토피라노실 )-(1→4)-D- 글루코오스 ( O -(2- O - benzyl -α-L- fucopyranosyl )-(1→2)- O -(β-D-galactopyranosyl)-(1→4)-D- glucose )

a) 실시예 22의 화합물 (5.0 g, 6.71 mmol) 및 H₂O/iPrOH (5:2, 20 ml)를 플라스크에 첨가하여 백색 현탁액을 얻었으며, p-TsOH? H₂O (0.191 g)를 첨가하고, 혼합물을 교반하면서, 250 mbar에서 55 ℃ (수온)까지 가열한다. 4시간 후에, 90 mbar (55 ℃)까지 감압시키고, 감압 하에 투명한 용액을 20분 동안 더 교반하여 모든 유기 용매를 제거한다. 반응 혼합물을 EtOAc (2 x 15 ml)로 세척하고, 수상을 (5.0 그램의 수지가 적재된) 컬럼에서 Amberlite IR400 (OH) 수지를 사용하여 중화시킨다. 컬럼을 물 (8 mL)로 세척하고, 수상을 증발시킨다 (50 mbar/45 ℃). 조 삼당류(crude trisaccharide)를 2-프로판올 (25 ml)에 용해시키고 70 ℃ (오일 온도)까지 가열한다. 투명한 용액을 7시간에 걸쳐 4 ℃까지 냉각시키고, 밤새 교반한다. 수득된 고체를 여과시키고, 차가운 EtOAc 및 펜탄으로 세척하여 백색 결정 3.41 g (5.90 mmol, 88 %)을 수득한다.

생성물의 순도 (HPLC UV): 96.4 %. Mp: 153-156 ℃.

b) 실시예 21g의 화합물 (400 mg)을 MeOH (2 ml)에 용해시키고, 용액에 촉매량의 NaOMe를 첨가하여, 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 이온 교환 수지(H⁺)를 첨가하고, 혼합물을 3분 동안 교반하여 pH = 7에 도달하게 한다. 수지를 여과시키고, 여과물을 증발시켜 고체 생성물 (229 mg, 87 %)을 수득한다.

c) 실시예 21e의 화합물 (1.0 g)에 메탄올(3 mL)을 첨가한 다음, 고체 NaOMe (10 mg)를 첨가한다. 혼합물을 10시간 동안 40 ℃에서 교반한다. 반응 혼합물을 HCl/MeOH를 사용하여 중화시킨다. 활성탄(activated charcoal) (50 mg)을 첨가하고, 현탁액을 30분 동안 교반한다. 활성탄을 여과시키고, 소량(small portion)의 MeOH로 세척한 다음, 깨끗한 여과물을 i-BuOH (3 ml)를 사용하여 희석시킨다. MeOH를 증류에 의해 제거하고, 용매로부터 침전된 고체를 여과시키고, i-BuOH (1,5 ml)로 세척하고, 건조시켜 백색 고체 510 mg (88 %)를 얻는다.

d) 실시예 21f의 삼당류를 메탄올 중 NaOH의 용액에 용해시키고, rt에서 밤새 교반하였다. NaOH를 드라이아이스로 퀀칭시키고, 용매를 증발시켜 정량적인 수율로 표제 화합물을 수득한다.

e) 재결정화(recrystallization) 프로토콜: 수득된 삼당류 (3.0 g)를 70 ℃ (오일 온도)에서 2-프로판올 (22 ml)에 용해시키고, RT로 서서히 냉각시키고, 밤새 교반한다. 백색 결정을 여과시키고, 차가운 EtOAc 및 펜탄으로 세척한다. 생성물의 순도 (HPLC UV): 97.2 %. Mp: 155-159 ℃.

¹H NMR (300 MHz, D₂O): δ= 1.17 (d, 3H, J = 6.6 Hz), 3.25 (dd, 0.6H, J = 8.1, 9.3 Hz), 3.35-3.91 (m, 14.4 H), 4.21 (dq, 1H, J = 3.9, 6.6 Hz), 4.49 (d, 1H, J = 7.5 Hz), 4.58 (d, 0.6 H, J = 8.1 Hz), 4.63 (d, 1H, J = 11.4 Hz), 4.82 (d, 1H, J = 11.4 Hz), 5.17 (d, 0.4 H, J = 3.6 Hz), 5.46 (d, 1H, J = 3.6 Hz), 7.36-7.46 (m, 5H).

¹³C NMR (75 MHz, D₂O (외부 표준(external reference)으로 아세톤을 사용하여 δ 30.9)): δ= 15.9, 60.7, 60.8, 61.8, 67.2, 67.3, 69.4, 69.8, 71.0, 71.9, 72.0, 72.3, 72.6, 74.5, 74.6, 75.0, 75.6, 75.7, 75.9, 75.9, 76.4, 76.5, 92.4, 96.5, 97.5, 100.7, 100.8, 129.0, 129.3, 129.4, 137.8.

실시예 26

2'- O -푸코실락토오스(2'- O - fucosyllactose )

a) 메탄올 (50 ml) 중의 실시예 25의 화합물 (5.0 g) 용액에, 10 % 탄소상 팔라듐 100 mg을 첨가한다. 현탁액을 8시간 동안, rt에서 수소 대기 하에 교반한다. 촉매를 여과시키고, 물로 세척하고, 여과물을 증발시켜 무정형의 백색 고체로서 생성물을 수득한다: 4.1 g.

HPLC-MS: ESI+ 511.2 [M+Na]⁺, 527.2 [M+K]⁺; ESI-487.4 [M-H]^-, 523.2 [M+Cl]^-, 577.3 [M₂+H]^-.

¹H-NMR (600 MHz, D₂O) δ: α-D-글루코오스 H-1 5.22 d, H-2 3.59 dd, H-3^* 3.80 dd, H-4 3.71 dd, H-5 3.91 m, H-6x 3.90 m, H-6y 3.80 m; β-D-글루코오스 H-1 4.63 d, H-2 3.29 dd, H-3 3.58 dd, H-4 3.72 dd, H-5 3.47 ddd, H-6x 3.94 dd, H-6y 3.76 dd; D-갈락토오스 H-1 4.52 d, H-2 3.66 dd, H-3 3.88 m, H-4 3.90 m, H-5 3.81 m, H-6x 3.81 m, H-6y 3.74 m; L-푸코오스 H-1 5.30 d, H-2^* 3.80 m, H-3^* 3.80 m, H-4 3.82 d, H-5 4.22, 4.25 qd, CH₃ 1.22 d.

¹³C-NMR (150 MHz, D₂O) δ: α-D-글루코오스 C-1 94.5, C-2 74.0, C-3^* 72.3, C-4 77.9, C-5 73.1, C-6 62.7; β-D-글루코오스 C-1 98.6, C-2 76.6, C-3 77.0, C-4 78.5, C-5 78.0, C-6 62.9; D-갈락토오스 C-1 102.9, C-2 79.0, C-3 76.3, C-4 71.9, C-5 74.0, C-6 63.8; L-푸코오스 C-1 102.0, C-2^* 72.4, C-3^* 70.9, C-4 74.4, C-5 69.6, CH₃ 18.0. (* 상호교환가능한 배치(interchangeable assignment))

b) 메탄올 (7 ml) 및 물 (1 ml) 중 실시예 25의 화합물 (2.0 g)의 용액에, 100 mg의 10 % 탄소상 팔라듐을 첨가한다. 현탁액을, 50 ℃에서 수소 대기 (5 atm) 하에 0.5시간 동안 교반한다. 사전가열한 필터 상에서 촉매를 여과시키고, 열수(hot water)로 세척하고, 여과물을 증발시켜 백색의 무정형 고체로서 1.6 g의 생성물을 수득한다.

참고문헌 목록

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3. R.K. Jain, R.D. Locke, K.L. Matta, Carbohydr . Res . 1991, 212, c1-c3.

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6. A. Rencurosi, L. Poletti, L. Panza, L. Lay, J. Carbohydr . Chem . 2001, 20, 761-765.

Ac 아세틸(acetyl)
Bn 벤질(benzyl)
BOP-Cl 비스-(2-옥소-3-옥사졸리디닐)-포스폰산 클로라이드(bis-(2-oxo-3-oxazolidinyl)-phosphonic chloride)
Bz 벤조일(benzoyl)
CAN 세륨 암모늄 니트레이트(ceric ammonium nitrate)
DCC N,N'-디시클로헥실카르보디이미드(N,N'-dicyclohexylcarbodiimide)
DCM 디클로로메탄(dichloromethane)
DMF 디메틸포름아미드(dimethylformamide)
DMSO 디메틸술폭사이드(dimethylsulphoxyde)
ESI 전자분무 이온화(electrospray ionization)
EtOAc 에틸 아세테이트(ethyl acetate)
2'-FL 2'-O-푸코실락토오스(2'-O-fucosyllactose)
IDCP 요오디늄 디(sym-콜리딘) 퍼클로레이트(iodinium di(sym-collidine) perchlorate)
Me 메틸(methyl)
MeCN 아세토니트릴(acetonitrile)
MTBE 메틸 t-부틸 에테르(methyl t-butyl ether)
Ph 페닐(phenyl)
Piv 피발로일(pivaloyl)
rt 실온(room temperature)
TBAB 테트라부틸암모늄 브로마이드(tetrabutylammonium bromide)
TBAHS 테트라부틸암모늄 히드로겐술페이트(tetrabutylammonium hydrogensulphate)
TEBAC 벤질 트리에틸암모늄 클로라이드(benzyl triethylammonium chloride)
THF 테트라히드로퓨란(tetrahydrofuran)
TLC 박층 크로마토그래피(thin layer chromatography)
Tr 트리틸(trityl)

Claims (31)

1. 2'-O-푸코실락토오스(fucosyllactose)의 제조를 위한, 하기 일반식 1을 갖는 화합물의 용도로서,
   

   

   
   식 중, R₁은 가수소분해(hydrogenolysis)에 의해 제거가능한 기이고, R₂는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 H인 일반식 1의 화합물, 또는 그의 수화물 또는 용매화물을 촉매 가수소분해(catalytic hydrogenolysis)시키는 것을 특징으로 하는 용도.
2. 제1항에 있어서, 상기 촉매 가수소분해는 팔라듐 또는 레이니 니켈(Raney nickel)의 존재 하에, 바람직하게는 탄소상 팔라듐(palladium on charcoal) 또는 팔라듐 블랙(palladium black)의 존재 하에, 물, 하나 이상의 C₁-C₆ 알코올, 또는 물과 하나 이상의 C₁-C₆ 알코올의 혼합물 중에서 수행되는 것을 특징으로 하는 용도.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질이며, 상기 R₂는 H인 일반식 1의 화합물이 사용되는 것을 특징으로 하는 용도.
4. R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₂는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 H인, 하기 일반식 1의 화합물, 또는 그의 수화물 또는 용매화물:
   

   

   .
5. 제4항에 있어서, 상기 R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질이며, 상기 R₂는 H인 것인 화합물.
6. 제4항에서 정의된 일반식 1의 화합물의 제조 방법으로서, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₃는 가수소분해에 의해 제거가능한 기, 아세탈형(acetal type) 기, 실릴(silyl) 기 또는 H이고, R은 알킬이거나 또는 두 개의 제미날(geminal) R-기 및 이들과 결합된 탄소 원자가 C₃-C₆ 시클로알킬 고리를 형성하고, R'은 알킬인, 하기 일반식 2의 화합물:
   

   

   ,
   또는 그의 수화물 또는 용매화물을 산 촉매화 온화 가수분해(acid catalyzed mild hydrolysis)시키는 것을 특징으로 하는 방법.
7. 제6항에 있어서, 상기 산 촉매화 온화 가수분해는 술폰산(sulfonic acid)의 존재 하에 물과 하나 이상의 C₁-C₆ 알코올의 혼합물 중에서, 바람직하게는 p-톨루엔술폰산의 존재 하에 물-이소프로판올 혼합물 중에서 수행되는 것을 특징으로 하는 방법.
8. 제6항 또는 제7항에 있어서, 상기 R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질이며, 상기 R₃는 H이고, 상기 R 및 R'은 메틸인, 일반식 2의 화합물이 적용되는 것을 특징으로 하는 방법.
9. R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₃는 가수소분해에 의해 제거가능한 기, 아세탈형 기, 실릴 기 또는 H이고, R은 알킬이거나 또는 두 개의 제미날 R-기 및 이들과 결합된 탄소 원자가 C₃-C₆ 시클로알킬 고리를 형성하고, R'은 알킬인, 하기 일반식 2의 화합물:
   

   

   .
   또는 그의 수화물 또는 용매화물.
10. 제9항에 있어서, 상기 R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질이며, 상기 R₃는 H이고, 상기 R 및 R'은 메틸인 것인 화합물.
11. 제4항에서 정의된 일반식 1의 화합물의 제조 방법으로서, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄은 선택적으로 치환된 아실이고, R₅는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 선택적으로 치환된 아실인, 하기 일반식 3의 화합물:
    

    

    ,
    또는 그의 수화물 또는 용매화물을 탈아실화(deacylation)시키는 것을 특징으로 하는 방법.
12. 제11항에 있어서, 상기 R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질로 정의되고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질로 정의되며, 상기 R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, 상기 R₅는 피발로일(pivaloyl), 벤조일 또는 4-클로로벤조일인 일반식 3의 화합물을, NaOMe 또는 NaOH의 존재 하에, 메탄올 중에서 탈아실화시키는 것을 특징으로 하는 방법.
13. .
14. R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 선택적으로 치환된 아실이고, R₅는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 선택적으로 치환된 아실인, 하기 일반식 3의 화합물:
    

    

    ,
    또는 그의 수화물 또는 용매화물.
15. 제14항에 있어서, 상기 R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질로 정의되고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질로 정의되며, 상기 R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, 상기 R₅는 피발로일, 벤조일 또는 4-클로로벤조일인 것인 화합물.
16. 제9항에 따른 일반식 2의 화합물의 제조 방법으로서, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 선택적으로 치환된 아실이고, R₆는 가수소분해에 의해 제거가능한 기, 아세탈형 기, 실릴 기 또는 선택적으로 치환된 아실이고, R은 알킬이거나 또는 두 개의 제미날 R-기 및 이들과 결합된 탄소 원자가 C₃-C₆ 시클로알킬 고리를 형성하고, R'은 알킬인 하기 일반식 4의 화합물:
    

    

    ,
    또는 그의 수화물 또는 용매화물을 탈아실화시키는 것을 특징으로 하는 방법.
17. 제16항에 있어서, 상기 R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질로 정의되고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질로 정의되며, 상기 R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, R₆는 피발로일, 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, 상기 R 및 R'은 메틸인 일반식 4의 화합물을, NaOMe 또는 NaOH의 존재 하에, 메탄올 중에서 탈아실화시키는 것을 특징으로 하는 방법.
18. 제14항에 따른 일반식 3의 화합물의 합성 방법으로서, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 선택적으로 치환된 아실이고, R₆는 가수소분해에 의해 제거가능한 기, 아세탈형 기, 실릴 기 또는 선택적으로 치환된 아실이고, R은 알킬이거나 또는 두 개의 제미날 R-기 및 이들과 결합된 탄소 원자가 C₃-C₆ 시클로알킬 고리를 형성하고, R'은 알킬인 하기 일반식 4의 화합물:
    

    

    ,
    또는 그의 수화물 또는 용매화물을 산 촉매화 온화 가수분해시키는 것을 특징으로 하는 방법.
19. 제18항에 있어서, 상기 R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질로 정의되고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질로 정의되며, 상기 R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, R₆는 피발로일, 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, 상기 R 및 R'은 메틸인 일반식 4의 화합물이 적용되고, 상기 산 촉매화 온화 가수분해는 p-톨루엔술폰산 또는 HCl의 존재 하에, 수성 아세토니트릴 또는 수성 아세톤 중에서 수행되는 것을 특징으로 하는 방법.
20. R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 선택적으로 치환된 아실이고, R₆는 가수소분해에 의해 제거가능한 기, 아세탈형 기, 실릴 기 또는 선택적으로 치환된 아실이고, R은 알킬이거나 또는 두 개의 제미날 R-기 및 이들과 결합된 탄소 원자가 C₃-C₆ 시클로알킬 고리를 형성하고, R'은 알킬인, 하기 일반식 4의 화합물:
    

    

    ,
    또는 그의 수화물 또는 용매화물.
21. 제20항에 있어서, 상기 R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질로 정의되고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질로 정의되며, 상기 R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, 상기 R₆는 피발로일, 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, 상기 R 및 R'은 메틸인 것인 화합물.
22. 제20항에 따른 일반식 4의 화합물의 합성 방법으로서, R₁ 및 R₄는 제20항에서 정의되고, X는 할로겐, -OC(=NH)CCl₃, -O-펜테닐(pentenyl), -OAc, -OBz 또는 -SR₇이고, 상기 R₇은 알킬 또는 선택적으로 치환된 페닐인, 하기 일반식 5의 화합물과:
    

    

    ,
    R, R' 및 R₆는 제20항에서 정의된, 하기 일반식 6의 화합물을:
    

    

    
    글리코실화(glycosylation) 조건 하에서 반응시키는 것을 특징으로 하는 방법.
23. 제22항에 있어서, 상기 글리코실화 반응은 트리플산(triflic acid)과 함께, 브로민(bromine) 또는 NBS, 바람직하게는 NBS를 프로모터(promoter)로 사용하여 THF, 톨루엔, DCM 또는 이들의 혼합물 중에서, 바람직하게는 THF-DCM 혼합물 중에서 수행되는 것을 특징으로 하는 방법.
24. 제22항 또는 제23항에 있어서, 상기 R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, 상기 R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, 상기 X는 하나 이상의 알킬로 선택적으로 치환된, 페닐티오(phenylthio)인 것인 일반식 5의 화합물과, 상기 R 및 R'은 메틸이고, 상기 R₆는 피발로일, 벤조일 또는 4-클로로벤조일인 것인 일반식 6의 화합물을 반응시키는 것을 특징으로 하는 방법.
25. 제22항에서 언급된 일반식 5의 화합물에 속하는, 하기 일반식 7의 화합물로서:
    

    

    
    식 중, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₄는 선택적으로 치환된 아실이고, R₇은 알킬 또는 선택적으로 치환된 페닐이며, 페닐 3,4-디-O-아세틸-2-O-벤질-1-티오-L-푸코피라노시드(fucopyranoside), 메틸 3,4-디-O-아세틸-2-O-벤질-1-티오-L-푸코피라노시드, 에틸 3,4-디-O-아세틸-2-O-벤질-1-티오-L-푸코피라노시드 및 에틸 3,4-디-O-아세틸-2-O-(4-메톡시벤질)-1-티오-L-푸코피라노시드를 제외한 것인 화합물.
26. 제25항에 있어서, 상기 R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 1-나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 3-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, 상기 R₄는 벤조일 또는 4-클로로벤조일이고, 상기 R₇은 비치환된 페닐인 것인 화합물.
27. 제25항의 일반식 7의 화합물의 합성 방법으로서, R₁ 및 R₇가 제25항에서 정의된 것인 하기 일반식 8의 화합물을, 아실화제(acylating agent)에 의해 아실화시키는 것을 특징으로 하는 방법:
    

    

    .
28. 제27항에 있어서, 벤조일 또는 4-클로로벤조일 클로라이드가 아실화제로 사용되는 것인 방법.
29. 2'-O-푸코실락토오스의 제조 방법으로서, R₁은 가수소분해에 의해 제거가능한 기이고, R₂는 가수소분해에 의해 제거가능한 기 또는 H인 하기 일반식 1의 화합물:
    

    

    ,
    또는 그의 수화물 또는 용매화물을, 촉매 가수소분해시키는 것을 특징으로 하는 방법.
30. 제29항에 있어서, 상기 촉매 가수소분해는 팔라듐 또는 레이니 니켈의 존재 하에, 바람직하게는 탄소상 팔라듐 또는 팔라듐 블랙의 존재 하에, 물, 하나 이상의 C₁-C₆ 알코올, 또는 물과 하나 이상의 C₁-C₆ 알코올의 혼합물 중에서 수행되는 것을 특징으로 하는 방법.
31. 제29항 또는 제30항에 있어서, 상기 R₁은 벤질, 4-메틸벤질, 나프틸메틸, 벤질옥시카르보닐, 4-페닐벤질, 4-클로로벤질, 4-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 2,4,6-트리메틸벤질 또는 2,3,4,5,6-펜타메틸벤질이고, 보다 바람직하게는 벤질 또는 4-메틸벤질이며, 상기 R₂는 H인 것인 일반식 1의 화합물이 적용되는 것을 특징으로 하는 방법.